Publication: Magyar Közlöny
Issue: MK-2002-108 (Year: 2002, Number: 108)
Era: 1990-2004
Section: a 68/2002. (VIII. 15.) FVM rendelethez
Paragraph Index: 308

6. A program hivatalos elismeréséhez nem fordulhatnak elõ VHS vagy IHN esetek, vagy nem mutathatják ki a kórokozókat (sem klinikai fertõzés nem lehet, sem vírus izolálás). IV. A szövettenyészetek fogékonyságát ellenõrzõ titrálási eljárás Legalább két VHS és egy IHN vírus izolátumot kell használni. Az izolátumoknak az EU-ban elõforduló nagy vírus csoportokba tartozónak kell lennie. Pl. egy VHS vírus izolátum édesvízi pisztráng patogén izolátuma és egy tengeri patogén izolátum egy IHN pisztráng patogén vírus törzs Európából. A tagországok jól ismert izolátumait kell használni. Referencia izolátumok hozzáférhetõk az EU halbetegség referencia laboratóriumából. Alacsony szövettenyészet passzázs számú vírus izolátumokat palackokban BF—2 vagy RTG—2 sejteken (VHS vírus) és EPC vagy FHM sejteken (IHN vírus) szaporítanak. Legalább 10% szérumot tartalmazó tápoldatot kell alkalmazni. A leoltásnál alacsony fertõzési multiplicitást (MOI < 1) kell alkalmazni. A teljes citopatogén hatás kialakulásakor a tápoldat centrifugálásával (2000 g, 15 perc) kapott felülúszót 0,45 µm membránszûrõn szûrik és fagyasztócsövekbe osztják. A vírust —80 ˚C-on tárolják. A lefagyasztás után egy héttel, három fagyasztócsõ ismétlésben minden vírust felolvasztanak hideg vízben és megtitrálják a megfelelõ szövettenyészeteken. Legalább hathavonta, vagy ha gyanítják, hogy a szövettenyészet fogékonysága csökkent, minden vírus izolátumot felolvasztanak és titrálnak. A titrálási eljárást részletesen le kell írni, és minden alkalommal ugyanazt a módszert kell alkalmazni. A végpont hígítási titráláshoz kell tartoznia minden hígítási lépés hatszori ismétlésének. A titereket a korábban kapott titerekkel kell összehasonlítani. Ha a három vírus izolátum valamelyikének titere 2-es logaritmussal vagy jobban csökken a kezdeti titerhez képest, a szövettenyészetet nem szabad a továbbiakban használni az ellenõrzés céljára. Ha más szövettenyészeteket tartanak a laboratóriumban, minden szövetvonalat egyenkét meg kell vizsgálni. Az eredményeket legalább 10 évig meg kell õrizni. 2002/108. szám B) Pontyfélék tavaszi viraemiájának kimutatására szolgáló mintavételi eljárás I. A halállomány minõsítése céljából

Source: https://magyarkozlony.hu/hivatalos-lapok/d5d58498e1ab7841b427cb4caa66f7af7beea701/dokumentumok/6238aa8868606e1794f1b737427f72033d8f51a4/letoltes