Publication: Magyar Közlöny
Issue: MK-2003-42 (Year: 2003, Number: 42)
Era: 1990-2004
Section: 10. számú melléklet a 44/2003. (IV. 26.) FVM rendelethez
Paragraph Index: 1950

3. Reagensek A felhasznált vegyszerek általában analitikai tisztaságúak. Az esetenként megkívánt egyéb minõséget külön jelöljük. 3.1. Kloroform, 0,5–1 tömeg% etanollal stabilizálva (Lásd a „Megjegyzések” 10.2. szakaszát.) 3.2. Metanol, HPLC tisztaságú, a 3.6. szerinti mobil fázis elkészítéséhez 3.3. Aceton 3.4. Acetonitril, HPLC tisztaságú 3.5. Oldószerelegyek: felhasználás elõtt egy nappal készítendõ, vagy az oldószerbõl a levegõt ultrahangos rázatással kell eltávolítani. 3.5.1. Aceton és víz 98:2 arányú elegye 3.5.2. Víz és metanol 80:20 arányú elegye 3.5.3. Víz és aceton 85:15 arányú elegye 3.6. Eluensoldat HPLC-hez Víz, metanol és acetonitril 130:70:40 arányú elegye. Megjegyzés: A rendelkezésre álló HPLC oszlop tulajdonságaitól függõen szükségessé válhat a mobil fázis összetételének változtatása. 3.7. Telített jód oldat: adjunk 2 g jódot 400 ml vízhez. Keverjük legalább 90 percig, majd szûrjük le membrán szûrõn (4.15.) keresztül. A fény okozta bomlás elkerülése végett az oldatot fénytõl védve tartjuk. 3.8. Savval mosott Celite 545, vagy azzal egyenértékû adszorbens. 3.9. Florisil SPE oszlop (Waters-SEP-PAK, vagy azzal egyenértékû). 3.10. C18 SPE oszlop (Waters-SEP-PAK, vagy azzal egyenértékû). 3.11. Inert gáz, pl. nitrogén. 3.12. Aflatoxin Bl standard oldat, 10µg/ml koncentrációjú. Az oldat koncentrációját az alábbiak szerint ellenõrizzük: Vegyük fel az oldat spektrumát 330 és 370 nm között spektrofotométerrel (4.23.). Mérjük az abszorbanciát (A) a maximumhelyen, 363 nm-en. Az aflatoxin B1 oldat koncentrációját az alábbi képlet segítségével számítjuk ki és mikrogramm/ml-ben kapjuk meg: = × × A 13,991 × A 3.12.1 Aflatoxin Bl kloroformos standard törzsoldat Az aflatoxin Bl standard oldat (3.12.) 2,5 ml-ét kvantitatíve vigyük át egy 50 ml-es mérõlombikba és kloroformmal (3.1.) állítsuk jelre az oldat térfogatát. Ezt az oldatot hûvös (4 °C), sötét helyen, jól lezárva és alufóliába csomagolva tároljuk. 3.13. Aflatoxin B1 HPLC kalibráló oldatok Megjegyzés: Az oldatok készítéséhez savval mosott üvegárut (lásd 4. Eszközök) használjunk. 3.13.1. 4 ng/ml-es kalibráló oldat A mérõlombikban lévõ standard törzsoldatot (3.12.1.) alumínium fóliába csomagolva állni hagyjuk addig, míg szobahõmérsékletûre melegszik (néhány órát). A törzsoldat 400 µl-ét (200 ng aflatoxin B1-et) 50 ml-es mérõlombikba visszük át, és inert gáz (3.11.) áramban szárazra pároljuk. Az így nyert maradékot kb. 20 ml víz/aceton elegyben (3.5.3.) oldjuk, víz/aceton elegyel jelig töltjük a lombikot, és jól összerázzuk. 3.13.2. 3 ng/ml-es kalibráló oldat A kalibráló oldat (3.13.1.) 7,5 ml-ét kvantitatíve 10 ml-es mérõlombikba visszük át, jelig töltjük a víz/aceton eleggyel (3.5.3.), és jól összerázzuk. 3.13.3. 2 ng/ml-es kalibráló oldat A kalibráló oldat (3.13.1.) 25 ml-ét kvantitatíve 50 ml-es mérõlombikba visszük át, jelig töltjük a víz/aceton eleggyel (3.5.3.) és jól összekeverjük. Ez az oldat lesz az összehasonlító (referencia) standard is, amelyet a HPLC vizsgálat során ismételten kell a rendszerbe injektálni. 3.13.4. 1 ng/ml-es stabilizáló oldat A kalibráló oldat (3.13.1.) 2,5 ml-ét kvantitatíve 10 ml-es mérõlombikba visszük át, jelig töltjük a víz/aceton eleggyel (3.5.3.), és jól összerázzuk. 3.14. 1 ml kloroformban oldott, 1 µg aflatoxin B1-et, 0,5 µg aflatoxin B2-t, 1 µg aflatoxin G1-et, és 0,5 µg aflatoxin G2-t tartalmazó ampulla. 3.14.1 Kromatográfiás teszt oldat Az ampulla (3.14.) tartalmát vigyük át üvegdugós kémcsõbe vagy csavaros tetõvel ellátott fiolába. Az oldat 40 µl-ét vigyük savval mosott üvegdugós kémcsõbe (4.21.). Inert gáz áramban párologtassuk el a kloroformot, és a maradékot oldjuk újra 10 ml víz/aceton elegyben (3.5.3.). 3.15. A megerõsítõ teszt vegyszerei 3.15.1. Nátriumklorid, telített oldat 3.15.2. Nátriumszulfát, vízmentes, granulált

Source: https://magyarkozlony.hu/hivatalos-lapok/69b88ec8e02037a8d3637eee652ef17e0ba2ad2b/dokumentumok/e4451c379dbc96be3daac423580de092693182bb/letoltes