Publication: Magyar Közlöny
Issue: MK-2004-13 (Year: 2004, Number: 13)
Era: 2004-2010
Section: 3. számú melléklet a 6/2004. (II. 10.) ESZCSM rendelethez
Paragraph Index: 706

3. számú melléklet a 6/2004. (II. 10.) ESZCSM rendelethez A kozmetikai termékekben lévõ diklór-metán és 1,1,1-triklór-etán mennyiségi meghatározása, a 8-kinolin-ol (8-hidroxi-kinolin) és a bis(8-hidroxi-kinolínium)- szulfát azonosítására és mennyiségi meghatározására, az ammónia mennyiségi meghatározására, a nitrometán azonosítására és mennyiségi meghatározására, a tioglikolsav azonosítására és mennyiségi meghatározására a hajhullámosító, a hajkiegyenesítõ és a szõrtelenítõ termékekben, a hexaklorofén azonosítására és mennyiségi meghatározására, a tozil-klóramid-nátrium (INN) (klóramin-T) azonosítására és mennyiségi meghatározására, az összes fluor fogkrémekben való meghatározására, a szerves higanyvegyületek azonosítására és mennyiségi meghatározására, alkáli- és alkáliföld-szulfidok mennyiségi meghatározására vonatkozó vizsgálati módszerek I. DIKLÓR-METÁN ÉS AZ 1,1,1-TRIKLÓR-ETÁN MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a diklór-metán (metilén-klorid) és az 1,1,1-triklór-etán (metilkloroform) mennyiségi meghatározását írja le az összes olyan kozmetikai termék esetében, amely valószínûsíthetõen tartalmazza ezeket az oldószereket. 2. Fogalommeghatározás A mintának ezzel a módszerrel meghatározott diklór-metán és 1,1,1-triklór-etán tartalmát tömegszázalékban fejezzük ki. 3. Alapelv Gázkromatográfiás módszer kloroformos belsõ standard alkalmazásával. 4. Reagensek Minden vegyszernek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 4.1. Kloroform (CHCl3). 4.2. Szén-tetraklorid (CCl4). 4.3. Diklór-metán (CH2Cl2). 4.4. 1,1,1-triklór-etán (CH3CCl3). 4.5. Aceton. 4.6. Nitrogén. 5. Eszközök 5.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés. 5.2. Gázkromatográf, hõvezetõ detektorral felszerelve. 5.3. Mintavételi palack, 50 és 100 ml közötti (lásd 5.3. mintavételi módszer)1. 5.4. Fecskendõ nyomás alatt lévõ gázhoz, 25 vagy 50 ì l-es (lásd 5 .3. mintavételi módszer)1. HL L 383. szám, 1980.12.31., 27. o. 6. Eljárás 6.1. Nem nyomás alatt lévõ minta: pontosan mérjük be a mintát egy dugóval ellátott Erlenmeyer lombikba. Vezessünk bele belsõ standardként pontosan megmért mennyiségû, a mintában feltételezhetõen megtalálható diklór-metánnal és 1,1,1-triklór-etánnal egyenértékû kloroformot (4.1.). Alaposan keverjük össze. 6.2. Nyomás alatt lévõ minta: alkalmazzuk a mintavételi fejezetben megadott mintavételi módszert, de a következõ finomításokkal: 6.2.1. Miután áttöltöttük a mintát egy mintagyûjtõ palackba (5.3.), vezessünk bele belsõ standardként adott térfogatú kloroformot (4.1.), annyit, amennyi a mintában feltételezhetõen megtalálható diklór-metánnal és/vagy 1,1,1-triklór-etánnal egyenértékû. Alaposan keverjük össze. Öblítsük át a szelep holttérfogatát 0,5 ml szén-tetrakloriddal (4.2.). Szárítás után a különbségbõl határozzuk meg pontosan a belsõ standard által hozzáadott tömeget. 6.2.2. Miután megtöltöttük a fecskendõt a mintával, a fecskendõ szórófejét át kell fúvatni nitrogénnel (4.6.) úgy, hogy ne maradjon semmilyen maradék a kromatográfba történõ fecskendezés elõtt. 6.2.3. Minden egyes minta betöltése után a szelep és a csatlakozóelem felületét meg kell mosni néhányszor acetonnal (4.5.) (szükség esetén injekciós fecskendõ alkalmazásával) és azután alaposan meg kell szárítani nitrogénnel (4.6.). 6.2.4. Minden elemzés esetén alkalmazzunk két különbözõ mintagyûjtõ palackot, és minden palackkal végezzünk öt mérést. 7. Kromatográfiás körülmények 7.1. Elõtét-oszlop Csövezés: rozsdamentes acél. Hossz: 300 mm. Átmérõ: 3 vagy 6 mm. Töltet: ugyanaz az anyag, amit az analitikai oszlop tölteténél alkalmaztak. 7.2. Oszlop Az álló fázis sztirén-divinil-benzén (Chromosorb) hordozón Hallcomid M 18. Az oszlop „R” felbontásának 1,5 vagy annál jobbnak kell lennie: ( ) W W r r d’ R + − = ahol: r1 és r2 = retenciós idõ (percben kifejezve), W1 és W2 = a csúcsoknak a magasság felénél szélessége (milliméterben kifejezve), d’ = papíradagolási sebesség (milliméter/percben kifejezve). 7.3. Példaként a következõ oszlopok a kívánt eredményt adják: Oszlop I. II. Alapanyag: Rozsdamentes acél csõ Rozsdamentes acél csõ Hossz: 350 cm 400 cm Átmérõ: 3 mm 6 mm Hordozó: chromosorb: WAW WAW-DMCS-HP szitaanalízis: 100-120-as mesh 60-80-as mesh Álló fázis: Hallcomid M 18, 10% Hallcomid M 18, 20% A hõmérsékleti körülmények a készülék függvényében változhatnak. A példákban a következõképpen vannak beállítva: Oszlop I. II. Hõmérsékletek: oszlop: 65 °C 75 °C fecskendõ: 150 °C 125 °C detektor: 150 °C 200 °C Vivõgáz: hélium ára mlási seb.: 45 ml/perc 60 ml/perc bemeneti nyomás: 2,5 bar 2 bar Befecskendezés: 15ì l 15ì l 8. Az együtthatók arányossági tényezõje Készítsük el a következõ, pontosan megmért keveréket egy dugóval ellátott Erlenmeyer lombikban: Diklór-metán (4.3.), 30% (m/m). 1,1,1-triklór-etán (4.4.), 35% (m/m). Kloroform (4.1.), 35% (m/m). 9. Számítások 9.1. A „p” anyag, „a” belsõ standardként választott anyaghoz viszonyított arányossági tényezõjének kiszámítása Legyen az elsõ anyag „p”, ahol: kp = a választényezõje, mp = a tömege a keverékben, Ap = a csúcsterülete. Legyen a második anyag „a”, ahol: ka = a választényezõje (az egységgel egyenlõnek választva), Ma = a tömege a keverékben, Aa = a csúcsterülete, akkor: p a a p p A M A m k × × = Példaként a következõ választényezõk kaphatók meg (kloroformra: k = 1): diklór-metán: k1 = 0,78 ± 0,03 1,1,1-triklór-etán: k2 = 1,00 ± 0,03 9.2. A vizsgálati mintában lévõ%-os (m/m) diklór-metán és 1,1,1-triklór-etán tartalom Legyen: ma = a bevezetett kloroform tömege (grammban), Ms = az vizsgálati minta tömege (grammban), Aa = a kloroform csúcsának területe, A1 = a diklór-metán csúcsának területe, A2 = az 1,1,1-triklór-metán csúcsának területe, akkor: % (m/m) CH2Cl2 = s a a M A k A m × × × × % (m/m) CH3CCl3 = s a a M A k A m × × × × 10. Ismételhetõség1 25%-os (m/m) diklór-metán és/vagy 1,1,1-triklór-etán tartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti különbség abszolút értéke nem haladhatja meg a 2,5%-ot (m/m). II. A 8-KINOLINOL ÉS A BIS (8-HIDROXI-KINOLÍN)-SZULFÁT AZONOSÍTÁSA ÉS MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a 8-kinolinolnak és szulfátjának azonosítását és mennyiségi meghatározását írja le. 2. Fogalommeghatározás A mintának ezzel a módszerrel meghatározott 8-kinolinol és a bis(8-hidroxi-kinolin)- szulfát tartalmát a 8-kinolinolra vonatkoztatott tömegszázalékban fejezzük ki. 3. Alapelv 3.1. Azonosítás Azonosítás vékonyréteg kromatográfia alkalmazásával. 3.2. Meghatározás A meghatározást a Fehling oldattal végbement reakció termékeként kapott komplex képzõdésen alapuló spektrofotometriás eljárással végezzük 410 nm-en. 4. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 4.1. 8-kinolinol. 4.2. Benzol. Megjegyzés: Tekintettel a benzol mérgezõ tulajdonságára, használatakor nagy óvatossággal kell eljárni. 4.3. Kloroform. 4.4. Nátrium-hidroxid vizes oldata, 50% (m/m). 4.5. Réz-szulfát pentahidrát. 4.6. Kálium-nátrium-tartarát. 4.7. M sósav. 4.8. 0,5 M kénsav. 4.9. M nátrium-hidroxid oldat. 4.10. Etanol. 4.11. 1-butanol. 4.12. Jégecet. 4.13. 0,1 sósav. 4.14. „Celite 545” vagy annak megfelelõ. ISO 5725 szabvány szerint. 4.15. Összehasonlító oldatok 4.15.1. Mérjünk be 100 mg 8-kinolinolt (4.1.) egy 100 ml-es normál lombikba. Oldjuk fel egy kevés kénsavban (4.8.). Töltsük fel a jelig kénsavval (4.8.). 4.15.2. Mérjünk be 100 mg 8-kinolinolt (4.1.) egy 100 ml-es normál lombikba. Oldjuk fel etanolban (4.10.). Töltsük fel a jelig etanollal (4.10.) és keverjük össze. 4.16. Fehling oldat „A” oldat Mérjünk be 7 g réz-szulfát pentahidrátot (4.5.) egy 100 ml-es normál lombikba. Oldjuk fel egy kevés vízben. Töltsük fel a jelig vízzel és keverjük össze. „B” oldat Mérjünk be 35 g kálium-nátrium-tartarátot (4.6.) egy 100 ml-es normál lombikba. Oldjuk fel 50 ml vízben. Adjunk hozzá 20 ml nátrium-hidroxidot (4.4.). Töltsük fel a jelig vízzel és keverjük össze. Közvetlenül használat elõtt pipettázzunk ki 10 ml „A” oldatot és 10 ml „B” oldatot egy 100 ml-es közönséges lombikba. Töltsük fel a jelig és keverjük össze. 4.17. Eluáló szerek a vékonyréteg kromatográfiához I : 1-butanol (4.11.)/ecetsav (4.12.)/víz (80: 20: 20; v/v/v, (térfogatarány)). II: kloroform (4.13.)/ecetsav (4.12.) (95:5; v/v, (térfogatarány)). 4.18. 2,6-diklór-4-(klórimino)-ciklohexa-2,5-dienon, 1%-os (m/v) etanolos oldata (4.10.). 4.19. Nátrium-karbonát, 1%-os (m/v) vizes oldata. 4.20. Etanol (4.10.), 30%-os (v/v) vizes oldata. 4.21. Dinátrium-dihidrogén-etiléndiamin-tetraacetát, 5%-os (m/v) vizes oldata. 4.22. Puffer oldat, pH 7 Mérjünk be 27 g vízmentes kálium-dihidrogén-ortofoszfátot és 70 g dikáliumhidrogén-ortofoszfát trihidrátot egy 1 literes normál lombikba. Töltsük fel a jelig vízzel és keverjük össze. 4.23. Vékonyréteg lapok elõkészítése Készgyártmány, 0,25 mm vastag vékonyréteg lapok (pl. Merck Kieselgel 60 vagy annak megfelelõ). Használat elõtt permetezzünk rá 10 ml reagenst (4.21.) és szárítsuk meg 80 °C-on. 5. Eszközök 5.1. 100 ml-es csiszolatos gömblombik. 5.2. Normál lombikok. 5.3. Osztással ellátott pipetták, 10 és 5 ml-es. 5.4. Hasas pipetták, 20, 15, 10 és 5 ml-es. 5.5. Választótölcsérek, 100, 50 és 25 ml-es. 5.6. Redõs szûrõpapír, 90 mm-es átmérõjû. 5.7. Rotációs bepárló (rotadest). 5.8. Visszafolyós hûtõ csiszolt üveg nyakkal. 5.9. Spektrofotométer. 5.10. 10 mm úthosszú optikai küvetták. 5.11. Fûthetõ keverõ. 5.12. Üveg kromatográfiás oszlop méretei: 160 mm hosszú, 8 mm átmérõjû, szûkülettel az alsó végén, amely üveggyapot dugót tartalmaz, és a felsõ végén egy adaptert a nyomás alá helyezés érdekében. 6. Eljárás 6.1. Azonosítás 6.1.1. Folyékony minták 6.1.1.1. A vizsgálati minta egy részének pH-ját 7,5-re állítjuk és 10 ì l-t cseppentünk az elõkészített szilikagél vékonyréteg lap alapvonalára (4.23.). 6.1.1.2. Az összehasonlító oldatból (4.15.2.) 10 és 30 ì l-t cseppentünk az alapvonal két további pontjára, és ezután a lapot megfuttatjuk a két elõhívószer (4.17.) egyikével. 6.1.1.3. Az oldószerfront 150 mm-t elõrehaladása után, a lapot 110 °C-on szárítjuk (15 peren keresztül). UV lámpa alatt (366 nm) a 8-kinolinol csepp sárgán fluoreszkál. 6.1.1.4. Permetezzük le a lapot nátrium-karbonát oldattal (4.19.). Szárítsuk meg majd permetezzük le 2,6-diklór-4-(klórimino)-ciklohexa-2,5-dienon oldattal (4.18.). A 8-kinolinol kék folt formájában válik láthatóvá. 6.1.2. Szilárd minták vagy krémek 6.1.2.1. Homogenizáljunk el 1g mintát 5 ml, 7 pH értékû puffer oldatban (4.22.). Ezután 10 ml kloroformmal (4.3.) együtt tegyük be egy rázótölcsérbe és rázzuk össze. A kloroformos réteg elválasztódása után a vizes rétegen még kétszer megismételjük a kivonást 10-10 ml kloroformmal (4.3.). Pároljuk az összeöntött és leszûrt kloroform kivonatokat majdnem szárazra egy 100 ml-es gömblombikban (5.1.) a rotációs bepárló berendezésben (5.7.). Oldjuk fel a maradékot 2 ml kloroformban (4.3.) és cseppentsünk 10 és 30 ì l-t az így kapott oldatból egy szilikagél vékonyréteg lapra (4.23.) a 6.1.1.1. pontban leírtaknak megfelelõen. 6.1.2.2. Tegyünk 10 és 30 ì l-t a standard oldatból (4.15.2.) a lapra és folytassuk a 6.1.1.2.- 6.1.1.4 pontokban leírtaknak megfelelõen 6.2. Mennyiségi meghatározás 6.2.1. Folyékony minták 6.2.1.1. Tegyünk 5 g mintát egy 100 ml-es gömblombikba. Adjunk hozzá 1 ml kénsav oldatot (4.8.) és párologtassuk a keveréket alacsony nyomáson 50 °C-on majdnem szárazra. 6.2.1.2. Oldjuk fel ezt a maradékot 20 ml meleg vízben. Tegyük át egy 100 ml-es normál lombikba. Mossuk át három alkalommal 20 ml vízzel. Töltsük fel 100 ml-re vízzel és keverjük össze. 6.2.1.3. Pipettázzunk ki 5 ml-t ebbõl az oldatból egy 50 ml-es választótölcsérbe (5.5.). Adjunk hozzá 10 ml Fehling oldatot (4.16.). Végezzünk kivonást a kapott 8-kinolinol réz-komplexre [oxin réz (ISO)] három alkalommal 8 ml kloroform segítségével (4.3.). 6.2.1.4. Szûrjük le és gyûjtsük össze a kloroformos rétegeket egy 25 ml-es normál lombikba (5.2.). Töltsük fel a jelig kloroformmal (4.3.) és rázzuk össze. Mérjük meg a sárga oldat optikai sûrûségét kloroformmal szemben 410 nm-en. 6.2.2. Szilárd minták vagy krémek 6.2.2.1. Mérjünk be 0,500 g mintát egy 100 ml-es gömblombikba (5.1.). Adjunk hozzá 30 ml benzolt (4.2.) és 20 ml sósavat (4.7.). Forraljuk a lombik tartalmát visszafolyós hûtõ alatt, keverés mellett, 30 percig. 6.2.2.2. Vigyük át a lombik tartalmát egy 100 ml-es választótölcsérbe (5.5.). Mossuk át 5 ml 1 N HCl (4.7.) segítségével. Vigyük át a vizes fázist egy gömblombikba (5.1.) és mossuk a benzolos fázist 5 ml sósavval (4.7.). 6.2.2.3. Olyan emulziók esetében, amelyek meggátolják a további kezelést keverjük össze a minta 0,500 g-ját 2 g Celite 545-tel (4.14.), hogy szabadon szóródó port kapjunk. Vigyük be a keveréket kis adagokban egy üveg kromatográfiás oszlopba (5.12.). Minden hozzáadás után nyomkodjuk le az oszlop tartalmát. Amint a keverék teljes mennyisége bekerült az oszlopba, eluáljunk sósavval, olyan módon, hogy 10 perc alatt kb. 10 ml eluált oldatot nyerjünk (szükség esetén ez az elució történhet enyhe nitrogén túlnyomás alatt). Az elució alatt biztosítani kell, hogy az oszlop töltete fölött folyamatosan legyen valamennyi sósav. Az eluált oldat elsõ 10 ml-ét további kezelésnek vetjük alá a 6.2.2.4. pont szerint. 6.2.2.4. Párologtassuk az összegyûjtött vizes fázisokat (6.2.2.2.) vagy az eluált oldatot (6.2.2.3.) majdnem szárazra a rotációs bepárló berendezésben, csökkentett nyomáson. 6.2.2.5. Oldjuk fel a maradékot 6 ml nátrium-hidroxid oldatban (4.9.). Adjunk hozzá 20 ml Fehling oldatot (4.16.) és vigyük át a lombik tartalmát egy 50 ml-es választótölcsérbe (5.5.). Mossuk át a lombikot 8 ml kloroformmal (4.3.). Rázzuk meg és szûrjük le a kloroformos fázist egy 50 ml-es általános lombikba (5.2.). 6.2.2.6. Ismételjük meg a kivonást háromszor 8 ml kloroformmal (4.3.). Szûrjük le a kloroformos fázisokat és gyûjtsük azokat össze az 50 ml-es lombikban. Töltsük fel a jelig kloroformmal (4.3.) és rázzuk össze. Mérjük meg a sárga oldat optikai sûrûségét kloroformmal (4.3.) szemben 410 nm-en. 7. Standard görbe 3 ml 30%-os vizes etanolt (4.20.) tartalmazó négy 100 ml-es gömblombikba (5.1.) pipettázzunk 5, 10, 15 és 20 ml-es részleteket a összehasonlító oldatból (4.15.1.), amely megfelel 5, 10, 15 és 20 mg 8-kinolinolnak. Járjunk el a 6.2.1. pontban leírtak szerint. 8. Számítás 8.1. Folyékony minták 8-kinolinol tartalom [tömegszázalékban (m/m)] = m a × ahol: a = a 8-kinolinol milligrammjai a standard görbén (7), m = a vizsgálati minta (6.2.1.1.) tömege (mg-ban kifejezve). 8.2. Szilárd minták vagy krémek 8-kinolinol tartalom [tömegszázalékban (m/m)] = m 2a × ahol: a = a 8-kinolinol milligrammjai a standard görbén (7), m = a vizsgálati minta (6.2.2.1.) tömege (mg-ban kifejezve). 9. Ismételhetõség1 Kb. 0,3%-os 8-kinolinol tartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés abszolút értéke nem haladhatja meg a 0,02%-ot. ISO 5725 szabvány szerint. III. AMMÓNIA MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a kozmetikai termékekben lévõ szabad ammónia meghatározását írja le. 2. Fogalommeghatározás A mintának ezzel a módszerrel meghatározott ammónia-tartalmát az ammónia tömegszázalékában fejezzük ki. 3. Alapelv Bárium-klorid oldatot adunk a kozmetikai termék vizsgálandó részletéhez, amelyet vizes metanolos közegben hígítunk fel. Az esetlegesen képzõdõ összes csapadékot leszûrjük vagy kicentrifugáljuk. Ezzel az eljárással elkerülhetõ a vízgõzdesztillálás során fellépõ ammóniaveszteség egyes ammóniumsók esetében, mint pl. a karbonát és a hidrogén-karbonát, valamint a zsírsavak sói, kivéve az ammónium-acetát. Az ammóniát vízgõzdesztillálással vonjuk ki a szûrletbõl vagy a felülúszóból és potenciometriás vagy más titrálással határozzuk meg. 4. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 4.1. Metanol. 4.2. Bárium-klorid dihidrát, 25%-os (m/v) oldat. 4.3. Ortobórsav, 4%-os (m/v) oldat. 4.4. Kénsav, 0,25 M mérõoldat. 4.5. Habzásgátló folyadék. 4.6. Nátrium-hidroxid, 0,5 M mérõoldat. 4.7. Indikátor, szükség esetén: keverjünk össze 5 ml 0,1% (m/v) etanolos metil-vörös oldatot 2 ml 0,1% (m/v) vizes metilén-kék oldattal. 5. Eszközök 5.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés. 5.2. Centrifuga lezárt 100 ml-es üvegekkel. 5.3. Vízgõzdesztilláló berendezés. 5.4. Potenciométer. 5.5. Üvegelektród és dihigany-diklorid (kalomel) viszonyító elektród. 6. Eljárás 6.1. Mérjünk be egy 100 ml-es normál lombikba 1 mg-os pontossággal legfeljebb 150 mg ammóniának felelõ tömegû (m) mintát. 6.2. Adjunk hozzá 10 ml vizet, 10 ml metanolt (4.1.) és 10 ml bárium-klorid oldatot (4.2.). Töltsük fel 100 ml-re metanollal (4.1.). 6.3. Keverjük össze és tegyük éjszakára hûtõszekrénybe (5 °C). 6.4. Ezután szûrjük le vagy centrifugáljuk 10 percig zárt csövekben a még mindig hideg oldatot úgy, hogy tiszta szûrletet vagy felülúszót kapjunk. 6.5. Pipettázzunk 40 ml-t ebbõl a tiszta oldatból a vízgõzdesztilláló felszerelésbe (5.3.), tegyünk hozzá 0,5 ml habzásgátló folyadékot (4.5.), ha szükséges. 6.6. Desztilláljuk és gyûjtsünk 200 ml desztillátumot egy 250 ml-es fõzõpohárba, amely 10 ml kénsavas mérõoldatot (4.4.) és 0,1 ml indikátort (4.7.) tartalmaz. 6.7. Titráljuk vissza a felesleges savat nátrium-hidroxid mérõoldattal (4.6.). 6.8. Megjegyzés: Potenciometriás meghatározáshoz gyûjtsünk össze ml desztillátumot egy 250 ml-es fõzõpohárba, amely 25 ml ortobórsav oldatot (4.3.) tartalmaz és titráljunk kénsavmérõvel (4.4.), miközben felvesszük a se mlegesítési görbét. 7. Számítások 7.1. Számítás visszatitrálás esetén Legyen: V1 = a felhasznált nátrium-hidroxid oldat (4.6.) térfogata (milliliterben), T1 = az aktuális molaritása (4.6.), T2 = a kénsav oldat (4.4.) aktuális molaritási tényezõje, m = a kivett vizsgálati minta (6.1.) tömege (milligrammban), ekkor: ammónia% (m/m) = ( ) ( ) m T V 20T m 0,4 T V 10T × − = × × − 7.2. Számítás közvetlen potenciometriás titrálás esetén Legyen: V2 = a felhasznált kénsav oldat (4.4.) térfogata (milliliterben), T2 = az aktuális molaritása (4.4.), m = a kivett vizsgálati minta (6.1.) tömege (milligrammban), ekkor: ammónia% (m/m) = m T 4250V m 0,4 T V = × × × 8. Ismételhetõség1 Kb. 6%-os ammónia tartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés abszolút értéke nem haladhatja meg a 0,6%-ot. IV. NITRO-METÁN AZONOSÍTÁSA ÉS MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer legfeljebb kb. 0,3% nitro-metán tartalom esetén alkalmas az azonosításra és a meghatározásra, olyan kozmetikai termékek esetében, amelyek aeroszolos flakonba vannak csomagolva. 2. Fogalommeghatározás A mintának ezzel a módszerrel meghatározott nitro-metán tartalmát a nitro-metán tömegszázalékában fejezzük ki az aeroszolos flakon teljes tartalmához képest. 3. Alapelv A nitro-metánt színreakcióval azonosítjuk. A nitro-metánt gázkromatográfiával határozzuk meg belsõ mérõoldat hozzáadása után. ISO 5725 szabvány szerint. 4. Azonosítás 4.1. Reagensek Minden vegyszernek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 4.1.1. Nátrium-hidroxid, 0,5 M oldat. 4.1.2. Folin reagens Oldjunk fel 0,1 g nátrium-3,4-dihidro-3,4-dioxonaftalin-1-szulfonátot vízben, és hígítsuk fel 100 ml-re. 4.2. Eljárás A minta 1 ml-éhez adjunk 10 ml 4.1.1 és 1 ml 4.1.2. pontban szereplõ anyagot. Lila elszínezõdés jelzi a nitro-metán jelenlétét. 5. Meghatározás 5.1. Reagensek Minden vegyszernek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 5.1.1. Kloroform (belsõ standard 1). 5.1.2. 2,4-dimetil-heptán (belsõ standard 2). 5.1.3. Etanol, 95%. 5.1.4. Nitro-metán. 5.15. Kloroform mérõoldat Egy mérlegelt 25 ml-es mérõlombikba tegyünk kb. 650 mg kloroformot (5.1.1.). Pontosan mérjük le ismét a lombikot és a tartalmát. Töltsük fel 25 ml-re 95%-os etanollal (5.1.3.). Mérjük le és számítsuk ki ennek az oldatnak a tömegszázalékos kloroform tartalmát. 5.1.6. 2,4-dimetil-heptán mérõoldat Hasonlóan készítsük el, mint a kloroform összehasonlító oldatot, de 270 mg 2,4-dimetil-heptánt (5.1.2.) mérjünk be a 25 ml-es mérõlombikba. 5.2. Eszközök 5.2.1. Gázkromatográf, lángionizáció mérésére alkalmas detektorral. 5.2.2. Aeroszol minták vételezésére alkalmas eszközök (mintavételi palack, mikrofecskendõ, csatlakozó stb.), amint azt a 1980. december 22-i 80/1335/EGK bizottsági irányelv1 a mellékletének II. fejezete részletesen leírja. 5.2.3. Szokásos laboratóriumi felszerelés. 5.3. Eljárás 5.3.1. A minta elõkészítése Egy lemért 100 ml-es mintavételi palackba, amelyet a fent e mlített irányelv II. fejezetének 5.4. pontjában leírt eljárásnak megfelelõen gázmentesítettük vagy kiszívattunk, tegyünk kb. 5 ml-t valamelyik belsõ standardbõl (5.1.5. vagy 5.1.6.). Használjunk 10 vagy 20 ml-es üvegfecskendõt, tû nélkül, amely megfelel a csatlakozóelemnek a Bizottság fent e mlített irányelve II. fejezetének (5) bekezdésében leírt technikának. Ugyanezzel a technikával vigyünk be a palackba kb. 50 g mintát az aeroszolos flakon tartalmából. Mérjük le ismét a tömegét a bevitt minta mennyiségének meghatározásához. Keverjük jól össze. Fecskendezzünk be 10 ì l-t a megadott mikrofecskendõ (5 .2.2.) alkalmazásával. Végezzünk öt befecskendezést. HL L 383. szám, 1980.12.31., 27. o. 5.3.2. A mérõoldat elõkészítése Pontosan mérjünk be kb. 500 mg nitro-metánt (5.1.4.) és vagy 500 mg kloroformot (5.1.1.) vagy 210 mg 2,4-dimetil-heptánt (5.1.2.) egy 50 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel a jelig 95%-os etanollal (5.1.3.). Keverjük jól össze. Tegyünk 5 ml-t ebbõl az oldatból egy 20 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel a jelig 95%-os etanollal (5.1.3.). Fecskendezzünk be 10 ì l-t a megadott mikrofecskendõ (5 .2.2.) alkalmazásával. Végezzünk öt befecskendezést. 5.3.3. Gázkromatográfiás körülmények 5.3.3.1. Oszlop Az oszlop két részbõl áll, az elsõ didecil-ftalátot tartalmaz Gas Chrom Q tölteten, a második Ucon 50 HB 280 X-et Gas Chrom Q tölteten. Az így elkészített összetett oszlop felbontásának eredménye „R” 1,5 vagy annál jobbnak kell lennie: ( ) W W r r d’ R + − = legyen: r1 és r2 = retenciós idõ (percben), W1 és W2 = a csúcsoknak a magasság felénél mért szélessége (milliméterben), d’ = a papíradagolás sebessége (milliméter/percben). Példaként a következõ két rész a kívánt eredményt hozza: „A” oszlop Alapanyag: rozsdamentes acél Hossz: 1,5 m Átmérõ: 3 mm Töltet: 20% didecil-ftalát, Gas Chrom Q-n (100-120 mesh). „B” oszlop Alapanyag: rozsdamentes acél Hossz: 1,5 m Átmérõ: 3 mm Töltet: 20% Ucon 50 HB 280X, Gas Chrom Q-n (100-120 szemcseméret). 5.3.3.2. Detektor: A megfelelõ érzékenységû beállítás a lángionizációs detektor elektrométere számára 8 × 10–10 A. 5.3.3.3. Hõmérsékleti körülmények A következõ értékek bizonyultak alkalmasnak: Befecskendezés: 150 °C, Detektor: 150 °C, Oszlop: 50 °C és 80 °C között az egyes oszlopok és eszközök típusától függõen. 5.3.3.4. Alkalmas gázellátás Vivõgáz: nitrogén. Nyomás: 2,1 bar. Ára mlási sebesség: 40 ml/perc. Detektor ellátás: a detektor gyártójának meghatározása szerint. 6. Számítások 6.1. A nitro-metán arányossági tényezõjének kiszámítása az alkalmazott belsõ standardhoz viszonyítva Ha „n” jelenti a nitro-metánt: legyen: kn = a választényezõje, m’n = a tömege (grammban) a keverékben, S’n = a csúcsterülete. Ha „c” jelenti a belsõ standardot, a kloroformot vagy a 2,4-dimetil-heptánt: legyen: m’c = a tömege (grammban) a keverékben, S’c = a csúcsterülete, akkor: n c c n n S’ S’ m’ m’ k × = (kn a felszerelés függvénye). 6.2. A mintában lévõ nitro-metán koncentrációja Ha „n” jelenti a nitro-metánt: Legyen: kn = a arányossági tényezõ, Sn = a csúcsterülete, Ha „c” jelenti a belsõ standardot, a kloroformot vagy a 2,4-dimetil-heptánt: Legyen: mc = a tömege (grammban) a keverékben, Sc = a csúcsterülete, M = a bevitt aeroszol tömege (grammban), akkor a nitro-metán%-os (m/m) aránya a mintában: S S k M m c n n c × × × 7. Ismételhetõség1 Kb. 0,3%-os (m/m) nitro-metán tartalom esetén azonos mintán párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés abszolút értéke nem haladhatja meg a 0,03%-ot (m/m). V. TIOGLIKOLSAV AZONOSÍTÁSA ÉS MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA HAJHULLÁMOSÍTÓ-, HAJKIEGYENESÍTÕ- ÉS SZÕRTELENÍTÕ SZEREKBEN 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a tioglikolsav (merkapto-ecetsav) azonosítását és mennyiségi meghatározását írja le hajhullámosító, hajkiegyenesítõ- és szõrtelenítõ szerekben, amelyekben más redukáló szerek is jelen lehetnek. ISO 5725 szabvány szerint. 2. Fogalommeghatározás A mintának ezzel a módszerrel meghatározott tioglikolsav tartalmát a tioglikolsav tömegszázalékában fejezzük ki. 3. Alapelv A tioglikolsavat színreakcióval és vékonyréteg kromatográfiával azonosítjuk, és mennyiségét jodometriásan vagy gázkromatográfiával határozzuk meg. 4. Azonosítás 4.1. Azonosítás színreakcióval 4.1.1. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 4.1.1.1. Ólom-di(acetát) papír. 4.1.1.2. Sósav oldat (egy térfogat tömény sósav és egy térfogat víz). 4.1.2. Eljárás 4.1.2.1. Tioglikolsav azonosítása az ólom-di(acetáttal) létrejövõ színreakció segítségével Helyezzük a vizsgálati minta egy cseppjét ólom-di(acetát) papírra (4.1.1.1.). Ha élénk sárga szín jelenik meg, akkor valószínû a tioglikolsav jelenléte. Érzékenység 0,5%. 4.1.2.2. A szervetlen szulfidok jellemzése savanyításra keletkezõ hidrogén-szulfid képzõdése alapján Helyezzük a minta néhány milligrammját egy vizsgálati kémcsõbe. Adjunk hozzá 2 ml desztillált vizet és 1 ml sósavat (4.1.1.2.). Hidrogén-szulfid fejlõdik, amit jellegzetes szaga alapján észlelni lehet, és fekete ólom-szulfid csapadék válik ki az ólom-di(acetát) papíron (4.1.1.1.). Érzékenység 50 ppm. 4.1.2.3. A szulfitok jellemzése savanyításra keletkezõ kén-dioxid képzõdése alapján Járjunk el a 4.1.2.2. pontban leírtak szerint. Forraljuk fel. A fejlõdõ kén-dioxidot a szaga és a pl. permanganát ionokon megfigyelhetõ redukáló tulajdonsága alapján észlelni lehet. 4.2. Azonosítás vékonyréteg kromatográfiával 4.2.1. Reagensek Minden reagensek analitikai tisztaságúnak kell lennie, kivéve, ha egyéb elõírás van feltüntetve. 4.2.1.1. Tioglikolsav, legalább 98%-os tisztaságú, jodometriával megvizsgálva. 4.2.1.2. 2,2’-ditio-di(ecetsav), legalább 99%-os tisztaságú, jodometriával megvizsgálva. 4.2.1.3. Tiolaktánsav, legalább 95%-os tisztaságú, jodometriával megvizsgálva. 4.2.1.4. 3-merkapto-propánsav, legalább 98%-os tisztaságú, jodometriával megvizsgálva. 4.2.1.5. 1-tioglicerin, legalább 98%-os tisztaságú, jodometriával megvizsgálva. 4.2.1.6. Vékonyréteg lapok, szilikagél, készgyártmány kiszerelésben, 0,25 mm vastag. 4.2.1.7. Vékonyréteg lapok, alumínium-oxid, Merck F 254 E vagy ezzel azonos. 4.2.1.8. Sósav, tömény d = 1,19 g/ml. 4.2.1.9. Etil-acetát. 4.2.1.10. Kloroform. 4.2.1.11. Diizopropil-éter. 4.2.1.12. Szén-tetraklorid. 4.2.1.13. Jégecet. 4.2.1.14. Kálium-jodid, 1%-os (m/v) vizes oldat. 4.2.1.15. Platina-tetraklorid, 0,1%-os (m/v), vizes oldat. 4.2.1.16. Oldószerek 4.2.1.16.1. Etil-acetát (4.2.1.9.), kloroform (4.2.1.10.), diizopropil-éter (4.2.1.11.), ecetsav (4.2.1.13.) (20:20:10:10, térfogatarányban). 4.2.1.16.2. Kloroform (4.2.1.10.), ecetsav (4.2.1.13.) (90:20, térfogatarányban). 4.2.1.17. Detektálószer 4.2.1.17.1. Használat elõtt közvetlenül keverjünk össze egyenlõ térfogatokat a (4.2.1.14.) és a (4.2.1.15.) oldatból. 4.2.1.17.2. Bróm oldat, 5% (m/v): Oldjunk fel 5 g brómot 100 ml szén-tetrakloridban (4.2.1.12.). 4.2.1.17.3. Fluoreszcein oldat, 0,1% (m/v): Oldjunk fel 100 mg fluoreszceint 100 ml 95%-os etanolban. 4.2.1.17.4. Hexaammónium-heptamolibdát, 10%-os (m/v), vízben feloldva. 4.2.1.18. Összehasonlító oldatok 4.2.1.18.1. Tioglikolsav (4.2.1.1.), 0,4%-os (m/v) vizes oldata. 4.2.1.18.2. 2,2’-ditio-di(ecet)sav (4.2.1.2.), 0,4%-os (m/v) vizes oldata. 4.2.1.18.3. 2-merkapto-propánsav (4.2.1.3.), 0,4%-os (m/v) vizes oldata. 4.2.1.18.4. 3-merkapto-propánsav (4.2.1.4.), 0,4%-os (m/v) vizes oldata. 4.2.1.18.5. 3-merkapto-1,2-propándiol (4.2.1.5.), 0,4%-os (m/v) vizes oldata. 4.2.2. Eszközök Szokásos laboratóriumi felszerelés vékonyréteg kromatográfiához. 4.2.3. Eljárás 4.2.3.1. A vizsgálati minták kezelése Savasítsuk meg a vizsgálati mintát pH 1-re néhány csepp sósavval (4.2.1.8.) és szûrjük le, ha szükséges. Egyes esetekben érdemes lehet a mintát felhígítani. Ha így járunk el, a sósavas savasítást a hígítás elõtt végezzük el. 4.2.3.2. Kioldás Helyezzünk a lapra 1 ì l mintaoldatot (4 .2.3.1.) és egy-egy ml-t mind az öt összehasonlító oldatból (4.2.1.18.). Szárítsuk meg óvatosan gyenge nitrogénáram alatt és oldjuk ki a lapot a 4.2.1.16.1 vagy a 4.2.1.16.2. pontban felsorolt oldattal. Szárítsuk meg a lapokat amilyen gyorsan csak lehet, a tiolok oxidálódásának lehetõ legkisebbre való csökkentése érdekében. 4.2.3.3. Detektálás Permetezzük be a lapot a három reagens egyikével (4.2.1.17.1., 4.2.1.17.3. vagy 4.2.1.17.4.). Ha a lapot a (4.2.1.17.3.) reagenssel permeteztük be, akkor kezeljük azt tovább telített brómgõzzel, amíg a foltok láthatóvá nem válnak. A (4.2.1.17.4.) permetezõ-reagenssel való detektálás csak akkor lehet kielégítõ, ha a vékonyréteg szárításának idõtartama nem haladta meg a 30 percet. 4.2.3.4. Kiértékelés Hasonlítsuk össze az Rf értékeket és az összehasonlító oldatok színét a standardokéval. Az alább megadott átlagos Rf értékek csupán támpontként szolgálnak az összehasonlításhoz. Azok a következõktõl függenek: – a vékonyréteg aktiválási állapota a kromatográfia idõpontjában, – a kromatográfiás kád hõmérséklete. Példa a szilikagél vékonyrétegen kapott Rf értékekhez: Oldószer 4.2.1.16.1. 4.2.1.16.2. Tioglikolsav 0,25 0,80 2-merkapto-propánsav 0,40 0,95 2,2’-ditio-di(ecet)sav 0,00 0,35 3-merkapto-propánsav 0,45 0,95 3-merkapto-1,2-propándiol 0,45 0,35 5. Mennyiségi meghatározás A meghatározást mindig a jodometriás eljárással kell kezdeni. 5.1. Jodometria 5.2.1. Alapelv A meghatározás az „-SH” csoport jódos oxidálásán alapul, savas közegben az alábbi egyenletnek megfelelõen: 2 HOOC-CH2SH + I2  (HOOC-CH2-S)2 + 2I– + 2 H+ 5.1.2. Reagensek Jódos mérõoldat 0,1N, 5.1.3. Eszközök Szokásos laboratóriumi felszerelés. 5.1.4. Eljárás Pontosan mérjünk be egy 0,5 és 1 g közötti mennyiséget a mintából egy 150 ml-es dugóval ellátott Erlenmeyer lombikba, amely 50 ml desztillált vizet tartalmaz. Adjunk hozzá 5 ml sósavat (4.1.1.2.) (az oldat pH-ja 0 körül legyen) és titráljuk jód 0,1N oldattal (5.1.2.), amíg a sárga szín megjelenik. Alkalmazzunk indikátort (pl. keményítõoldatot vagy szén-tetrakloridot) igény szerint. 5.1.5. Számítás A tioglikolsav tartalmat a következõ képlet segítségével lehet kiszámítani: % (m/m) = m 0,92n m n = × × × × ahol: m = a kivett vizsgálati minta tömege (grammban), n = a felhasznált jód 0,1 oldat (5.1.2.) térfogata. 5.1.6. Megjegyzések Ha a kiszámított eredmény szerint a tioglikolsav töménysége az engedélyezett legnagyobb koncentráció 0,1%-a vagy ennél kevesebb, akkor nincs értelme további meghatározásokat végrehajtani. Ha az eredmény egyenlõ vagy nagyobb mint a megengedett legnagyobb koncentráció, és az azonosítás több redukálószer jelenlétét mutatta ki, akkor szükséges a gázkromatográfiás meghatározás végrehajtása. 5.2. Gázkromatográfia 5.2.1. Alapelv A tioglikosavat elválasztjuk a hordozóanyagtól kadmium-di(acetát) oldattal történõ kicsapatás segítségével. Diazometános metilálás után, amelyet helyben vagy elõre készítünk el dietil-éteres oldatban, a tioglikosav metil-származékát gáz/folyadékkromatográfiával mérjük, metil-oktanoát belsõ standard alkalmazása mellett. 5.2.2. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 5.2.2.1. Tioglikosav, 98%. 5.2.2.2. Sósav, d = 1,19 g/ ml. 5.2.2.3. Metanol. 5.2.2.4. Kadmium-di(acetát) dihidrát, 10%-os (m/v) vizes oldata. 5.2.2.5. Metil-oktanoát, 2%-os (m/v) metanolos oldata. 5.2.2.6. Acetát puffer oldat, 5 pH Nátrium-acetát trihidrát, 77 g. Jégecet, 27,5 g. Ioncserélt víz egy liter végsõ térfogat eléréséig. 5.2.2.7. Sósav, 3 M oldat metanolban (5.2.2.3.), frissen készített. 5.2.2.8. N-metil-3-nitro-1-nitrozo-guanidin. 5.2.2.9. Nátrium-hidroxid, 5 M oldat. 5.2.2.10.Jód, 0,05 M standard oldat. 5.2.2.11.Dietil-éter. 5.2.2.12.Diazo-metán oldat N-metil-N-nitrozo-toluol-4-szulfonamidból készítve (Fieser, Reagents for Organic Synthesis,Wiley kiadó, 1967). A kapott oldat kb. 1,5 g diazo-metánt tartalmaz 100 ml dietil-éterben. Mivel a diazometán mérgezõ és nagyon bomlékony gáz, minden kísérletet hatékony elszívófülke alatt kell végezni és kerülni kell a csiszolatos üvegeszközök alkalmazását (különleges eszközök állnak rendelkezésre ebbõl a célból). 5.2.3. Eszközök 5.2.3.1. Szokásos laboratóriumi berendezés. 5.2.3.2. Eszközök a diazo-metán elõállítására a helyben történõ metiláláshoz (lásd Fales, H.M., Jaouni, T.M. and Babashak, J.F., Analyt. Chem. 1973, 45, 2302). 5.2.3.3. Eszközök a diazo-metán a Fieser szerinti elõzetes elkészítéséhez. 5.2.4. A minta elõkészítése Pontosan mérjünk be egy 50 ml-es centrifugacsõbe annyi mennyiségû mintát, hogy várhatóan 50-70 mg tioglikosavat kapjunk. Savasítsuk meg egy pár csepp tömény sósavval (5.2.2.2.), hogy kb. pH 3 oldatot kapjunk. Adjunk hozzá 5 ml ioncserélt vizet és 10 ml acetát puffer oldatot (5.2.2.6.). Ellenõrizzük pH papírral, hogy a pH értéke 5 körül legyen. Ezután adjunk hozzá 5 ml kadmium-di(acetát) oldatot (5.2.2.4.). Várjunk 10 percet, majd centrifugáljuk legalább 15 percig 4000 g érték mellett. Távolítsuk el a felülúszó folyadékot, amely tartalmazhat oldhatatlan zsírt (krém termékek esetében). Ezt a zsírt nem szabad összetéveszteni a tiolokkal, amelyek tömörítetten gyûlnek össze a csõ alján. Ellenõrizzük, hogy nem történik csapadékkiválás, amikor a felülúszóhoz néhány csepp kadmium-di(acetát) oldatot (5.2.2.4.) adunk. Ha a korábbi meghatározás kimutatta, hogy nincsenek további redukáló anyagok a tiolokon kívül, jodometriásan ellenõrizzük, hogy a felülúszó folyadékban lévõ tiolok mennyisége nem haladja-e meg az eredeti mennyiség 6-8%-át. Tegyünk 10 ml metanolt (5.2.2.3.) a csapadékot tartalmazó centrifugacsõbe és óvatosan oszlassuk el a csapadékot keverõ segítségével. Centrifugáljuk ismét legalább 15 percig 4000 g mellett. Öntsük el a felülúszót és ellenõrizzük annak tiolmentességét. Mossuk a csapadékot még egyszer ugyanezzel az eljárással. Még mindig ugyanazt a centrifugacsövet használva, adjunk hozzá: – 2 ml metil-oktanoát oldatot (5.2.2.5.), – 5 ml metanolos sósavat (5.2.2.7.). Oldjuk fel teljesen a tiolokat (egy kevés oldhatatlan csapadék megmaradhat a hordozóanyagból). Ez az oldat az „S” oldat. Ennek az oldatnak egy részletén jodometriásan ellenõrizzük, hogy a tioltartalom legalább 90%-a annak, amit korábban az 5.1. pontban kaptunk. 5.2.5. Metilálás A metilálást vagy a folyamat során helyben (5.2.5.1.), vagy elõre elkészített diazometánnal (5.2.5.2.) végezzük. 5.2.5.1. Helyben történõ metilálás A metiláló eszközökbe (5.2.3.2.), ami 1 ml étert (5.2.2.11.) tartalmaz tegyünk 50 ì l „S” oldatot és metiláljunk az (5.2.3.2.) módszer szerint, kb. 300 mg N-metil-3-nitro-1-nitrozo-guanidin (5.2.2.8.) felhasználásával. 15 perc után (az éteres oldatnak sárga színûnek kell lennie a diazo-metán felesleg jelenléte miatt) tegyük a mintaoldatot egy 2 ml-es üvegcsébe, amelyiknek légmentes dugója van. Tegyük éjszakára hûtõszekrénybe. Metiláljunk két mintát párhuzamosan. 5.2.5.2. Metilálás elõre elkészített diazo-metán oldattal Tegyünk egy 5 ml-es, dugóval ellátott lombikba 1 ml diazo-metán oldatot (5.2.2.12.) és 50 ì l „S” oldatot. Tegyük éjszakára hûtõszekrénybe. 5.2.6. A standard elkészítése Készítsünk el egy ismert erõsségû standard tioglikosav oldatot (5.2.2.1.), ami kb. 60 mg tiszta tioglikosavat (5.2.2.1.) tartalmaz 2 ml-ben. Ez az „E” oldat. Csapassunk ki, mérjünk és metiláljunk az 5.2.4. és az 5.2.5. pont szerinti eljárásnak megfelelõen. 5.2.7. Gázkromatográfiás körülmények 5.2.7.1. Oszlop Típus: rozsdamentes acél Hossz: 2 m Átmérõ: 3 mm 5.2.7.2. Töltet 20% didecil-ftalát, kromoszorb, WAW 80-100 mesh szemcseméret. 5.2.7.3. Detektor Lángionizációs. Megfelelõ érzékenységû beállítás a lángionizációs detektor elektrométere számára a 8 × 10-10 A. 5.2.7.4. Gázellátás Vivõgáz: nitrogén. nyomás: 2,2 bar. áramlási sebesség: 35 ml/perc. Segédgáz: hidrogén. nyomás: 1,8 bar. áramlási sebesség: 15 ml/perc. Detektor ellátás: a detektor gyártójának elõírásai szerint. 5.2.7.5. Hõmérsékleti körülmények Befecskendezési hely: 200 °C, Detektor: 200 °C, Oszlop: 90 °C. 5.2.7.6. A papíradagolás sebessége 5 mm/perc. 5.2.7.7. Befecskendezett mennyiség 3 ì l. Végezzünk öt befecskendezést. 5.2.7.8. A kromatográfia körülményei útmutatás céljából vannak megadva. Ezek lehetõvé teszik, hogy az oszlop „R” felbontása 1,5 vagy annál jobbat eredményezzen, ahol: ( ) W W r r d’ R + − = legyen: r1 és r2 = retenciós idõ (percben), W1 és W2 = a csúcsoknak a magasság felénél mért szélessége (milliméterben), d’ = a papíradagolás sebessége (milliméter/percben kifejezve). Ajánlott, hogy a kromatográfia befejezésekor a hõmérsékletet 10 °C/perc sebességgel 90 °C-ról 150 °C-ra növeljük annak érdekében, hogy a következõ méréseket esetlegesen zavaró vegyületeket eltávolítsuk. 5.2.8.. Számítások 5.2.8.1. A arányossági tényezõ a tioglikosav esetében Ezt a metil-oktanoátra vonatkoztatva számítjuk ki a standard keverék alapján. legyen: t = tioglikosavat kt = az arányossági tényezõje, m’t = a tömege (milligrammban) a keverékben, S’t = a csúcsterülete. c = metil-oktanoát legyen: m’c = a tömege a keverékben (milligrammban), S’c = a csúcsterülete, akkor: t c c t t S’ S’ m’ m’ k × = Ez a tényezõ az alkalmazott eszközöktõl függõen változik. 5.2.8.2. A mintában lévõ tioglikosav koncentrációja legyen: t = tioglikosavat: kt = az arányossági tényezõje, St = a csúcsterülete. c = metil-oktanoátot legyen: mc = „c” tömege a keverékben (milligrammban), Sc = a csúcsterülete, M = a kezdeti vizsgálati minta tömege (milligrammban), akkor: S S k M m c t t c × × × 6. Ismételhetõség1 8%-os (m/m) tioglikosav tartalom esetén azonos mintán párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés abszolút értéke nem haladhatja meg a 0,8%-ot (m/m). VI. HEXAKLOROFÉN AZONOSÍTÁSA ÉS MEGHATÁROZÁSA A. AZONOSÍTÁS 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer minden kozmetikai termék esetében alkalmazható. 2. Alapelv A mintában lévõ hexaklorofént etil-acetáttal kivonjuk és vékonyréteg kromatográfiával azonosítjuk. 3. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 3.1. Kénsav, 4 M oldat. 3.2. Celite AW. 3.3. Etil-acetát. 3.4. Oldószer: benzol, ami 1% (v/v) jégecetet tartalmaz. 3.5. I. elõhívószer: Rhodamine B oldat: oldjunk fel 100 mg Rhodamine B-t 150 ml dietil-éter, 70 ml abszolút etanol és 16 ml víz keverékében. 3.6. II. elõhívószer: 2,6-dibróm-4-(klórimino)-2,5-ciklohexadienon oldat: oldjunk fel 2,6-dibróm-4- (klórimino)-2,5-ciklohexadienont 100 ml metanolban (naponta frissen készítsük). Nátrium-karbonát oldat: oldjunk fel 10g nátrium-karbonátot 100 ml ioncserélt vízben. 3.7. Összehasonlító oldat: Készítsünk hexaklorofén, 0,05%-os (m/v) etil-acetátos oldatból. 4. Eszközök 4.1. Kiesel gél 254 TLC lapok, 200x200 mm (vagy ezzel egyenértékû). 4.2. Szokásos TLC berendezés. 4.3. Hõsszabályozós fürdõ 26 °C-ra beállítva a kromatográfiás kád számára. ISO 5725 szabvány szerint. 5. A vizsgálati minta elõkészítése 5.1. Alaposan keverjünk össze 1 g homogenizált mintát 1 Celite AW-vel (3.2.) és 1 ml kénsavval (3.1.). 5.2. Szárítsuk 100 °C-on, két órán keresztül. 5.3. Hûtsük le és finoman törjük porrá a megszáradt maradékot. 5.4. Végezzünk két kivonást, 10 ml etil-acetáttal (3.3.) mindkét alkalommal, centrifugáljuk minden kivonás után és egyesítsük az etil-acetátos rétegeket. 5.5. Párologtassuk el 60 °C-on. 5.6. Oldjuk fel a maradékot 2 ml etil-acetátban (3.3.). 6. Eljárás 6.1. Vigyünk fel 2 ì l-t a vizsgálati mintaoldatból (5.6.) és 2 ì l-t az összehasonlító oldatból (3.7.) egy TLC lapra (4.1.). 6.2. Telítsük a kádat (4.3.) az oldószerrel (3.4.). 6.3. Tegyük a TLC lapot a kádba és futtassuk 150 mm magasságig. 6.4. Távolítsuk el a TLC lapot és szárítsuk meg egy szellõztetett kemencében kb. 105 °C-os hõmérsékleten. 6.5. Kimutatás A hexaklorofén cseppeket a vékonyrétegen a 6.5.1. vagy 6.5.2.pont szerint lehet kimutatni. 6.5.1. Permetezzük az I. elõhívószert (3.5.) a lapra. 30 perc után vizsgáljuk meg a lapot UV fény alatt 254 mm-en. 6.5.2. Permetezzük a II. elõhívószer 2,6-dibróm-4-(klórimino)-2,5-ciklohexadienon oldatát (3.6.) a lapra. Ezután szórjunk a lapra nátrium-karbonát oldatot (3.6.). 10 perc után, napfény mellett, szobahõmérsékleten szárítva vizsgáljuk meg a lapot. 7. Az eredmények értelmezése 7.1. I. elõhívószer (3.5.): A hexaklorofén kékes foltként jelenik meg egy sárga-narancssárga fluoreszcens háttéren, kb. 0,5 Rf értékkel. 7.2. II. elõhívószer (3.6.): A hexaklorofén égszínkék-türkizkék színû foltként jelenik meg fehér háttéren, kb. 0,5 Rf értékkel. B. MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁS 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer minden kozmetikai termék esetében alkalmazható. 2. Fogalommeghatározás A mintának ezzel a módszerrel meghatározott hexaklorofén tartalmát a hexaklorofén tömegszázalékában fejezzük ki. 3. Alapelv A hexaklorofén mennyiségi meghatározása, metilszármazékká alakítása után gázkromatográfiával történik elektronbefogásos detektor segítségével. 4. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 4.1. Etil-acetát. 4.2. N-metil-N-nitrozo-p-toluol-szulfonamid (diazald). 4.3. Dietil-éter. 4.4. Metanol. 4.5. 2-(2-etoxi-etoxi)-etanol (karbitol). 4.6. Hangyasav. 4.7. Kálium-hidroxid, 50%-os (m/m) vizes oldat (naponta frissen készítsük). 4.8. Hexán a spektroszkópiához. 4.9. Brómklorofén (1. számú standard). 4.10. 4,4’,6,6’-tetraklór-2,2’-tiodifenol (2. számú standard). 4.11. 2,4,4’-triklór-2-hidroxi-difenil-éter (3. számú standard). 4.12. Aceton. 4.13. 4 M kénsav. 4.14. Celite AW. 4.15. Hangyasav etil-acetátos, 10%-os (v/v) oldata. 4.16. Hexaklorofén. 5. Eszközök 5.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés. 5.2. Diazo-metán készítésére alkalmas mini eszközök (Analyt. Chem., 1973, 45, 2302-3,). 5.3. Gázkromatográf, 63 Ni forrásból származó elektronbefogásos detektorral felszerelve. 6. Eljárás 6.1. A hitelesíõ oldat elõkészítése A standardot úgy kell kiválasztani, hogy az ne zavarja a vizsgálati termék hordozóanyagában lévõ egyik összetevõt se. Általában az 1. számú standard (4.9.) a legalkalmasabb. 6.1.1. Pontosan mérjünk be kb. 50 mg-ot az 1. (4.9.), a 2. (4.10.) vagy a 3. (4.11.) számú standardból és 50 mg hexaklorofént (4.16.) egy 100 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel a jelig etil-acetáttal (4.1.) (A oldat). Hígítsuk fel az A oldat 10 ml-ét 100 ml-re etilacetáttal (4.1.) (B oldat). 6.1.2. Pontosan mérjünk be kb. 50 mg-ot az 1. (4.9.), a 2. (4.10.) vagy a 3. (4.11.) számú standardból egy 100 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel a jelig etil-acetáttal (4.1.) (C oldat). 6.2. A minta elõkészítése1 Pontosan mérjünk be 1 g-ot a homogenizált mintából és keverjük alaposan össze 1 ml kénsavval (4.13.), 15 ml acetonnal (4.12.) és 8 g Celite AW-vel (4.14.). Szárítsuk a keveréket levegõn 30 percig gõzfürdõre téve, azután szárítsuk másfél órán keresztül szellõztetett kemencében. Hûtsük le, finoman törjük porrá a maradékot és tegyük át egy üveg oszlopba. Oldjuk etil-acetáttal (4.1.) és gyûjtsünk össze 100 ml-t. Adjunk hozzá 2 ml belsõ standardot (C oldat) (6.1.2.). 6.3. A minta metilálása Hûtsük az összes reagenst és a készüléket 0 és 4 °C között két órán keresztül. A diazo-metán készülék külsõ rekeszébe tegyünk 1,2 ml-t a 6.2. pont szerint kapott oldatból, és 0,1 ml metanolt (4.4.). Tegyünk kb. 200 mg diazaldot (4.2.) a középsõ A terméktípusok széles skálája miatt, amelyekben hexaklorofén lehet jelen, fontos, hogy ezzel az eljárással elõször ellenõrizzük a hexaklorofén kinyerhetõségét a mintából, az eredmények felvétele elõtt. Ha a kinyerhetõség alacsony, akkor változtatásokat kell bevezetni, mint pl. az oldószer kicserélése (benzol az etil-acetát helyett) stb., az érintett felek egyetértésével. tárolóba, adjunk hozzá 1 ml karbitolt (4.5.) és 1 ml dietil-étert (4.3.), és oldjuk fel. Szereljük össze a készüléket majd félig eresszük egy 0 °C-os fürdõbe és fecskendõ segítségével tegyünk 1 ml lehûtött kálium-hidroxid oldatot (4.7.) a középsõ tárolóba. A diazo-metán hatására sárga szín képzõdik, ami megmarad. Ha a sárga szín nem marad meg, ismételjük meg a metilálást további 200 mg diazald (4.2.) hozzáadásával1. A készüléket vegyük ki a fürdõbõl 15 perc után, és szobahõmérsékleten hagyjuk lezárva 12 órára. Ezt követõen nyissuk ki a készüléket, reagáltassuk el a diazo-metán felesleget néhány csepp 10%-os (v/v) etil-acetátos hangyasav oldattal (4.15.) és tegyük át a szerves oldatot egy 25 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel jelig hexánnal (4.8.). Fecskendezzünk be 1,5 ì l-t ebbõl az oldatból a kromatográfba. 6.4. A standard metilálása Hûtsük az összes reagenst és a készüléket 0 és 4 °C között két órán keresztül. A diazo-metán készülék külsõ rekeszébe tegyük a következõket: 0,2 ml B oldat (6.1.1.), 1 ml etil-acetát (4.1.), 0,1 ml metanol (4.4.). Hajtsuk végre a metilálást a 6.3. szerint. Fecskendezzünk be 1,5 ì l-t a l étrejött oldatból a kromatográfba. 7. Gázkromatográfia Az oszlop felbontásával „R” 1,5 vagy annál nagyobb kell, hogy legyen, ahol: ( ) W W r r d’ R + − = legyen: r1 és r2 = retenciós idõk (percben), W1 és W2 = a csúcsoknak a magasság félénél mért szélessége (milliméterben), d’ = a papíradagoló-sebesség (milliméter/percben kifejezve). Példaként a következõ kromatográfiás körülmények a kívánt eredményt adják: Oszlop: rozsdamentes acél Hossz: 1,7 m Átmérõ: 3 mm Hordozó: kromoszorb: WAW szitaanalízis: 80-100 mesh. Álló fázis: 10% OV 17. Hõmérsékletek: oszlop: 280 °C, befecskendezési: 280 °C, detektor: 280 °C. Vivõgáz: oxigénmentes nitrogén. Nyomás: 2,3 bar. Áramlási sebesség: 30 ml/perc. Ennek a sárga elszínezõdésnek a fennmaradása jelzi a diazo-metán felesleg jelenlétét, ami szükséges a minta teljes metilálásának biztosításához. 8. Számítás 8.1. A hexaklorofén arányossági tényezõje Ezt a választott standardhoz viszonyítva számíthatjuk ki a standard keverékre vonatkoztatva: Legyen: h = a hexaklorofén, kh = az arányossági tényezõje, m’h = a tömege a keverékben (grammban), A’h = a csúcsterülete, s = a választott standard, m’s = a tömege a keverékben (grammban), A’s = a csúcsterülete, akkor: h s s h h A’ A’ m’ m’ k × = 8.2. A mintában lévõ hexaklorofén koncentrációja Legyen: h = a hexaklorofén, kh = az arányossági tényezõje, An = a csúcsterülete, s = a választott standard, ms = a tömege a keverékben (grammban), Ac = a csúcsterülete, M = a felhasznált vizsgálati minta tömege (grammban), akkor a hexaklorofén%-os (m/m) aránya a mintában: s h h s A M A k m × × × × 9. Ismételhetõség1 0,1%-os (m/m) nitro-metán tartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés abszolút értéke nem haladhatja meg a 0,005%-ot (m/m). VII. TOZIL-KLÓRAMID-NÁTRIUM (INN) (KLÓRAMIN-T) MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a tozil-klóramid-nátrium (klóramin-T) vékonyréteg kromatográfiás mennyiségi meghatározását írja le kozmetikai termékekben. ISO 5725 szabvány szerint. 2. Fogalommeghatározás A mintának ezzel a módszerrel meghatározott klóramin-T tartalmát tömegszázalékban (m/m) fejezzük ki. 3. Alapelv A klóramin-T-t sósavas forralással teljesen elhidrolizáljuk 4-toluol-szulfonamiddá. A képzõdött 4-toluol-szulfonamidot mennyiségét foto-denzitometriásan vékonyréteg kromatográfiával határozzuk meg. 4. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 4.1. Tozil-kóramid-nátrium (klóramin-T). 4.2. 4-toluol-szulfonamid standard oldata: 50 mg 4-toluol-szulfonamid 100 ml etanolban (4.5.). 4.3. Sósav, 37%-os (m/m), d = 1,18 g/ ml. 4.4. Dietil-éter. 4.5. Etanol, 96% (v/v). 4.6. Elõhívó oldat. 4.6.1. 1-butanol/etanol (4.5.)/víz (40: 4: 9; v/v/v), vagy 4.6.2. Kloroform/aceton (6:4; v/v). 4.7. Elõkészített vékonyréteg lapok, szilikagél 60, fluoreszcens indikátor nélkül. 4.8. Kálium-permanganát. 4.9. Sósav, 15% (m/m). 4.10. Permetezõ-reagens: 2-toluidin, 1%-os (m/v) etanolos (4.5.) oldat. 5. Eszközök 5.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés. 5.2. Szokásos vékonyréteg kromatográfiás berendezés. 5.3. Foto-denzitométer. 6. Eljárás 6.1. Hidrolízis 6.1.1. Pontosan mérjünk be egy 50 ml-es gömblombikba kb. 1g mintát (m). Adjunk hozzá 5 ml vizet és 5 ml sósavat (4.3.) majd forraljuk egy órán keresztül, visszafolyós hûtõ alkalmazásával. A forró szuszpenziót azonnal tegyük át vízzel egy 50 ml-es mérõlombikba. Hagyjuk lehûlni és töltsük fel a jelig vízzel. Centrifugáljuk legalább 3000-es fordulatszámon (rpm) öt percig majd eresszük át a felülúszó folyadékot egy szûrõn. 6.2. Kivonás 6.2.1. Vegyünk ki 30 ml-t a szûrletbõl és végezzünk három kivonást 15 ml dietil-éterrel (4.4.). Szükség esetén szárítsuk meg az éteres fázisokat majd gyûjtsük össze egy 50 ml-es mérõlombikba, és töltsük fel a jelig dietil-éterrel (4.4.). 6.2.2. Vegyünk ki 25 ml-t a szárított éteres kivonatból és nitrogénáramban párologtassuk szárazra. Oldjuk fel újra a maradékot 1 ml etanolban (4.5.). 6.3. Vékonyréteg kromatográfia 6.3.1. Cseppentsünk 20 ì l-t az etanolos maradékból (6.2.) egy vékonyréteg kromatográfiás lapra (4.7.). Ugyanekkor és ugyanilyen módon, tegyünk 8, 12, 16 és 20 ì l-t a 4-toluol-szulfonamid standard oldatból a lapra. 6.3.2. Ezután hagyjuk kifejlõdni kb. 150 mm-re a elõhívó oldószerben (4.6.1. vagy 4.6.2.). 6.3.3. Az elõhívó oldószer teljes elpárologtatása után tegyük a lapot 2-3 percre klórgõz atmoszférába, amelyet 100 ml sósav (4.9.) kb. 2 g kálium-permanganátra (4.8.) öntésével egy zárt edényben hozunk létre. Távolítsuk el a klórfelesleget, a lap öt percen keresztüli 100 °C-os hevítésével. Ezután permetezzük be a lapot a (4.10.) reagenssel. 6.4. Mérés Nagyjából egy óra után mérjük meg a lila foltokat a foto-denzitométerrel 525 nm-en. 6.5. A standard görbék felrajzolása Ábrázoljuk a legnagyobb csúcsértékeket, amelyeket a 4-toluol-szulfonamid cseppek (azaz 4, 6, 8, 10 ì g cseppenként) esetében állapítottunk meg a 4-toluol-szulfonamid megfelelõ mennyiségeivel szemben. 7. Megjegyzés A módszert 0,1 vagy 0,2%-os (m/v) klóramin-T oldat (4.1.) alkalmazásával lehet ellenõrizni, amit a mintával (6.) azonos módon kezelünk. 8. Számítás A minta klóramin-T tartalmát tömegszázalékban kifejezve a következõ módon lehet kiszámítani: % (m/m) tozil-kóramid-nátrium = m a 1,33 × × ahol: 1,33 = a 4-toluol-szulfonamid/ klóramin-T átszámítási tényezõ, a = a 4-toluol-szulfonamid mennyisége ( ì g-ban) a mintában a standard görbe leolvasása alapján, m = a kivett minta tömege (grammban). 9. Ismételhetõség1 Kb. 0,2%-os (m/m) klóramin-T tartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés abszolút értéke nem haladhatja meg a 0,03%-ot (m/m). VIII. FLUOR MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA FOGKRÉMEKBEN 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a fogkrémekben található teljes fluor tartalom mennyiségi meghatározására készült. A módszer legfeljebb 0,25% fluortartalom esetén alkalmazható. 2. Fogalommeghatározás A mintának ezzel a módszerrel meghatározott fluortartalmát tömegszázalékban fejezzük ki. ISO 5725 szabvány szerint. 3. Alapelv A meghatározást gázkromatográfiával végezzük. A fluortartalmú vegyületekbõl származó fluort savas közegben, klór-trietil-szilánnal (TECS) való közvetlen reakcióval trietil-fluor-szilánná (TEFS) alakítjuk át, és egyidejûleg xilolt tartalmazó ciklohexánnal, mint belsõ standarddal vonjunk ki. 4. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 4.1. Nátrium-fluorid, 120 °C-on tömegállandóságig szárított. 4.2. Kétszer desztillált vagy azzal megegyezõ minõségû víz. 4.3. Sósav, d = 1,19 g/ml. 4.4. Ciklohexán (CH). 4.5. Xilol, amelynek nincs a kromatogramban az oldószercsúcs elõtt csúcsa, ha a mintáéval (6.1.) azonos körülmények között kromatografálják. Szükség esetén desztillációval tisztítsuk (5.8.). 4.6. Klór-trietil-szilán (TECS Merck vagy azzal megegyezõ). 4.7. Fluor standard oldatok 4.7.1. Törzsoldat, 0,25 mg F–/ ml. Mérjünk be pontosan 138,1 mg nátrium-fluoridot (4.1.) és oldjuk fel vízben (4.2.). Veszteség nélkül vigyük át az oldatot egy 250 ml-es mérõlombikba (5.5.). Hígítsuk fel a jelig vízzel (4.2.) és keverjük össze. 4.7.2. Hígított törzsoldat, 0,05 mg F–/ ml. Vigyünk át pipettával 20 ml-t a törzsoldatból (4.7.1.) egy 100 ml-es mérõlombikba (5.5.). Hígítsuk fel a jelig vízzel és keverjük össze. 4.8. Belsõ standard oldat Keverjünk össze 1 ml ciklohexánt (4.4.) és 5 ml xilolt (4.5.). 4.9. Klór-trietil-szilán/belsõ standard oldat Vigyünk át pipettával (5.7.) 0,6 ml-t a TECS-bõl (4.6.) és 0,12 ml-t a belsõ standard oldatból (4.8.) egy 10 ml-es mérõlombikba. Hígítsuk fel a jelig xilollal (4.5.) és keverjük össze. Naponta frissen készítsük. 4.10. Perklórsav, 70% (m/v). 4.11. Perklórsav, 20% (m/v), vízben (4.2.). 5. Eszközök 5.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés. 5.2. Gázkromatográf, láng-ionizáció mérésére alkalmas detektorral felszerelve. 5.3. Vortex forgó keverõ vagy azzal egyenértékû. 5.4. Bühler kémcsõrázó, SMB1 típusú vagy azzal egyenértékû. 5.5. Mérõlombikok, 100 és 250 ml-es, polipropilénbõl készített. 5.6. Centrifugacsövek (üveg); 20 ml-es teflonnal bélelt csavaros kupakkal, Sovirel 611- 56-os típus vagy azzal megegyezõ. Tisztítsuk meg a csöveket és a csavaros kupakokat néhány órás perklórsavas (4.11.) áztatással, amelyet öt, egymást követõ vizes (4.2.) öblítés, és végül 100 °C-os szárítás követ. 5.7. Pipetták, amelyek 50-200 ì l t érfogatra beállíthatók, egyszer használatos mûanyag pipettaheggyel. 5.8. Desztillációs berendezés, három golyós Schneider oszloppal vagy egy annak megegyezõ Vigreux oszloppal felszerelve. 6. Eljárás 6.1. Minta elemzés 6.1.1. Válasszunk ki egy bontatlan fogkrémes tubust, nyissuk fel és távolítsuk el a teljes tartalmat. Tegyük ezt bele egy mûanyag tartályba, keverjük össze alaposan és tároljuk olyan körülmények között, hogy az állagát megõrizze. 6.1.2. Mérjünk be pontosan 150 mg (m) mintát egy centrifugacsõbe (5.6.), adjunk hozzá 5 ml vizet (4.2.) és homogenizáljuk (5.3.). 6.1.3. Adjunk hozzá 1 ml xilolt (4.5.). 6.1.4. Adjunk hozzá cseppenként 5 ml sósavat (4.3.) és homogenizáljuk (5.3.). 6.1.5. Adjunk hozzá pipettával 0,5 ml klór-trietil-szilán/belsõ standard oldatot (4.9.) a centrifugacsõben (5.6.). 6.1.6. Zárjuk le a csövet csavaros kupakkal (5.6.) és keverjük alaposan 45 percen keresztül egy kémcsõrázógépben (5.4.), amelyet percenkénti 150-es ütemre állítottunk. 6.1.7. Centrifugáljuk 10 percet olyan sebességen, hogy a fázisok tisztán elváljanak egymástól, vegyük le a csõ tetejét, nyerjük ki a szerves réteget és fecskendezzünk be a szerves fázisból 3 ì l-t a gázkromatográfiás oszlopba (5.2.). Megjegyzés: Kb. 20 percet vesz igénybe az összes összetevõ kioldása. 6.1.8. Ismételjük meg a befecskendezést, számítsuk ki az átlagos csúcsterület-arányt (ATEFS/ACH) és olvassuk le az ehhez tartozó fluormennyiséget [milligrammban ( m )] a standard görbérõl (6.3.). 6.1.9. Számítsuk ki a minta összes fluortartalmát a fluor tömegszázalékában a 7. pontban megadott módon. 6.2.. Kromatográfiás körülmények 6.2.1. Oszlop: rozsdamentes acél. Hossz: 1,8 mm. Átmérõ: 3 mm. Hordozó: Gaschrom Q 80-100-as mesh. Alló fázis: szilikon olaj DC 200 vagy azzal megegyezõ: 20%. Kondicionáljuk az oszlopot egy éjszakán keresztül 100 °C-on, a vivõgáz sebesség 25 ml nitrogén percenként. Ezt ismételjük minden éjszaka. Minden negyedik vagy ötödik befecskendezés után újrakondicionáljuk az oszlopot 30 perces 100 °C-os melegítéssel. Hõmérsékletek: oszlop: 70 °C fecskendõ: 150 °C detektor: 250 °C Vivõgáz: nitrogén 35 ml percenként 6.3. Standard görbe 6.3.1. Tegyünk pipettával egy hat centrifugacsõbõl (5.6.) álló sorozatba rendre 0, 1, 2, 3, 4 és 5 ml hígított fluorid standard oldatot (4.7.2.). Egészítsük ki minden csõ tartalmát 5 ml-re vízzel (4.2.). 6.3.2. Járjunk el a 6.1.3.–6.1.6. pont között leírtak alapján, a 6.1.6. pontot is beleértve. 6.3.3. Fecskendezzünk be 3 ì l-t a szerves fázisból a gázkromatográfiás oszlopba (5.2.). 6.3.4. Ismételjük meg a befecskendezést és számítsuk ki az átlagos csúcsterület-arányt (ATEFS/ACH). 6.3.5. Ábrázoljuk a standard görbét a standard oldatokban (6.3.1.) lévõ fluor tömegének (milligrammban) és a 6.3.4. szerint mért csúcsterület-aránynak (ATEFS/ACH) az összefüggésével. Kössük össze az ábra pontjait a regressziós analízis segítségével kapott legjobban illeszkedõ egyenessel. 7. Számítás A minta összes fluortartalmának koncentrációját (a fluor tömegszázalékában) (% (m/m) F) a következõképpen adhatjuk meg: % F = % m m1 × ahol: m = az vizsgálati minta (milligrammban) (6.1.2.), m1 = a standard görbérõl (6.1.8.) leolvasott a fluor mennyisége (milligrammban) 8. Ismételhetõség1 0,15%-os (m/m) fluortartalom esetén azonos mintán párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés abszolút értéke nem haladhatja meg a 0,012%-ot (m/m). IX. SZERVES HIGANYVEGYÜLETEK AZONOSÍTÁSA ÉS MEGHATÁROZÁSA Cél és alkalmazási terület Az alább leírt módszer azoknak a szerves higanyszármazékok azonosítására és mennyiségi meghatározására alkalmazható, amelyeket a szemen használatos kozmetikai termékben tartósítóként használnak fel. Ez a módszer a tiomersalra (INN) (nátrium-2-(etil-higany-tio)-benzoát) és a fenil-higanyra, valamint ezek sóira alkalmazható. A. AZONOSÍTÁS 1. Alapelv A szerves higanyvegyületeket ditizonáttal komplexáljuk. A ditizonát széntetrakloridos kivonása után, szilikagél vékonyréteg kromatográfiát végzünk. A ditizonát foltok narancssárga színnel jelennek meg. 2. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 2.1. Kénsav, 25% (v/v). 2.2. 1,5-difenil-3-tiokarbazon (ditizon): 0,8 mg 100 ml szén-tetrakloridban (2.4.). 2.3. Nitrogén. 2.4. Szén-tetraklorid. 2.5. Elõhívó oldószer: hexán/aceton, 90:10 (v/v). 2.6. Standard oldat, 0,001%-os, vízben a következõkbõl: nátrium-2-(etil-higany-tio)-benzoát, etil-higany-klorid vagy metil-higany-klorid, ISO 5725 szabvány szerint. fenil-higany-nitrát vagy fenil-higany-acetát, higany-diklorid vagy higany-di(acetát). 2.7. Készgyártmány szilikagél lapok (pl. Merck 5721 vagy azzal egyenértékû). 2.8. Nátrium-klorid. 3. Eszközök 3.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés. 3.2. Szokásos TLC berendezés. 3.3. Fázis-elválasztó szûrõ. 4. Eljárás 4.1. Kivonás 4.1.1. Hígítsunk fel 1 g mintát egy centrifugacsõben 20 ml desztillált vízzel titrálva. Érjük el a legnagyobb diszpergálódást egy 60 °C-ra fel melegített vízfürdõben. Adjunk hozzá 4 g nátrium-kloridot (2.8.). Rázzuk össze. Hagyjuk lehûlni. 4.1.2. Centrifugáljuk legalább 20 percig 4500 fordulat/percen, a szilárd fázis nagy részének a leválasztása céljából. Szûrjük bele egy választótölcsérbe és adjunk hozzá 0,25 ml kénsav oldatot (2.1.). 4.1.3. Végezzünk néhány kivonást 2 vagy 3 ml ditizon oldattal (2.2.), amíg az utolsó szerves fázis zöld marad. 4.1.4. Szûrjük le az összes szerves fázist egymás után egy fázis-elválasztó szûrõn (3.3.) keresztül. 4.1.5. Pároljuk szárazra nitrogénáram alatt (2.3.). 4.1.6. Oldjuk fel 0,5 ml szén-tetrakloriddal (2.4.). Alkalmazzuk ezt az oldatot azonnal, a 4.2.1. pontban leírtaknak megfelelõen. 4.2. Elválasztás és azonosítás 4.2.1. Tegyünk 50 ì l-t a 4.1.6. szerint kapott szén-tetrakloridos oldatból a szilikagél lapra (2.7.). Ezzel párhuzamosan kezeljünk 10 ml standard oldatot is (2.6.) a 4.1. pont szerint és vigyünk fel 50 ì l-t a 4.1.6. szerint kapott oldatból ugyanarra a lapra. 4.2.2. Tegyük a lapot az oldószerbe (2.5.) és hagyjuk, hogy ez utóbbi 150 mm magasra fusson. A szerves higanyvegyületek színes folt formájában jelennek meg, amelyek színe állandó, feltéve, hogy a lapot közvetlenül az oldószer elpárolgása után üveglappal lefedtük. Példaként, a következõ Rf értékeket lehet kapni: Rf Szín Thiomersal 0,33 Narancs Etil-higany-klorid 0,29 Narancs Metil-higany-klorid 0,29 Narancs Fenil-higany és sói 0,21 Narancs Higany-diklorid 0,10 Narancs Higany-di(acetát) 0,10 Narancs 1,5-difenil-3-tiokarbazon 0,09 Rózsaszín B. MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁS 1. Fogalommeghatározás Az ezzel a módszerrel meghatározott szerves higanyvegyület tartalmat a mintában lévõ higany tömegszázalékában (m/m) fejezzük ki. 2. Alapelv A módszer a jelen lévõ teljes higanymennyiség mérésén alapszik. Ezért szükséges, hogy elõször megbizonyosodjunk arról, hogy nincs jelen szervetlen higany és arról, hogy azonosítottuk a mintában lévõ szerves higanyszármazékokat. Ásványosítás után a higanyt felszabadítjuk és lángmentes atomabszorpcióval mérjük. 3. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 3.1. Tömény salétromsav, d = 1,41 g/ml. 3.2. Tömény kénsav, d = 1,84 g/ml. 3.3. Kétszer-desztillált (bidesztillált) víz. 3.4. Kálium-permanganát, 7%-os (m/v) oldat. 3.5. Hidroxil-ammónium-klorid, 1,5%-os (m/v) oldat. 3.6. Dikálium-peroxi-diszulfát, 5%-os (m/v) oldat. 3.7. Ón-diklorid, 10%-os (m/v) oldat. 3.8. Tömény sósav, d = 1,18 g/ml. 3.9. Palládium-dikloriddal impregnált üveggyapot, 1% (m/m). 4. Eszközök 4.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés. 4.2. Berendezés a higany lángmentes atomabszorpciós meghatározására (hideg gõz technika), beleértve a szükséges üvegeszközöket. A mérõcella úthossza legalább 100 mm legyen. 5. Eljárás Tartsunk be minden szükséges óvintézkedést a higany nyomok elemzésénél. 5.1. Lebontás 5.1.1. Pontosan mérjünk be 150 mg mintát (m). Adjunk hozzá 10 ml salétromsavat (3.1.) és hagyjuk a feltáródást elõrehaladni három órán keresztül 55 °C-os vízfürdõben, egy légmentesen lezárt lombikban, rendszeres idõközönként rázzuk meg. Ezzel egy idõben hajtsunk végre vakpróbát. 5.1.2. Lehûlés után adjunk hozzá 10 ml kénsavat (3.2.) és tegyük vissza az 55 °C-os vízfürdõbe 30 percre. 5.1.3. Tegyük a lombikot jégfürdõbe és óvatosan adjunk hozzá 20 ml vizet (3.3.). 5.1.4. 2 ml-es adagokban adjunk hozzá 7%-os kálium-permanganát oldatot (3.4.), amíg az oldat színe megmarad. Tegyük vissza az 55 °C-os vízfürdõbe további 15 percre. 5.1.5. Adjunk hozzá 4 ml dikálium-peroxi-diszulfát oldatot (3.6.). Tegyük vissza ismét az 55 °C-os vízfürdõbe további 30 percre. 5.1.6. Hagyjuk lehûlni és vigyük át a lombik tartalmát egy 100 ml-es normál lombikba. Öblítsük át a lombikot 5 ml hidroxil-ammónium-kloriddal (3.5.) és azután öblítsük még ki 4-szer 10 ml vízzel (3.3.). Az oldatnak teljesen színtelenné kell válnia. Töltsük fel a jelig vízzel (3.3.). 5.2. Mennyiségi meghatározás 5.2.1. Tegyünk a vizsgálati oldatból (5.1.6.) az üvegedénybe (4.2.)10 ml-t a hideg- gõzös higany meghatározásához. Hígítsuk fel 100 ml vízzel (3.3.) és ezután adjunk hozzá 5 ml kénsavat (3.2.), illetve 5 ml ón-diklorid oldatot (3.7.). Keverjük össze minden hozzáadás után. Várjunk 30 másodpercet, hogy az összes ionos higany fém állapotúvá redukálódhasson és olvassuk le a kapott értéket. Legyen n a leolvasott érték. 5.2.2. Tegyünk egy kevés palládium-dikloriddal impregnált üveggyapotot (3.9.) a higanyredukáló edény és a mérõcella (4.2.) közé. Ismételjük meg az 5.2.1. eljárást és jegyzzük fel a leolvasott értéket. Ha a leolvasott érték nem nulla, akkor az ásványosítás nem volt teljes, és az elemzést meg kell ismételni. 6. Számítás Legyen: m = a vizsgálati minta tömege (grammban), n = a készülékrõl leolvasott higany mennyisége (ì g-ban). A higany mennyiségét a higany tömegszázalékában kifejezve a következõ képlet segítségével számíthatjuk ki: % higany = m n 7. Megjegyzések 7.1. Az ásványosítás javításához szükséges lehet elõzetesen hígított mintából kiindulni. 7.2. Ha feltételezhetõ, hogy az alapanyag higanyt abszorbeál, akkor a standard hozzáadások módszerével kell a mennyiségi meghatározást elvégezni. 8. Ismételhetõség1 0,007%-os higany tartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés abszolút értéke nem haladhatja meg a 0,00035%-ot. X. ALKÁLI ÉS ALKÁLIFÖLD SZULFIDOK MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a kozmetikai termékekben lévõ szulfidok mennyiségi meghatározását írja le. Tiolok vagy más redukáló szerek (beleértve a szulfitokat) jelenléte nem zavaró. 2. Fogalommeghatározás Az ezzel a módszerrel meghatározott szulfidtartalmat a kén tömegszázalékban fejezzük ki. 3. Alapelv A közeg savasítása után a hidrogén-szulfidot nitrogénáramban elvezetjük és kadmium-szulfid formájában megkötjük. Az utóbbit leszûrjük és átöblítjük, majd jodometriásan mérjük. ISO 5725 szabvány szerint. 4. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 4.1. Tömény sósav, d = 1,19 g/ml. 4.2. Nátrium-tioszufát, 0,1 N standard oldat. 4.3. Jód, 0,1 N standard oldat. 4.4. Dinátrium-szulfid. 4.5. Kadmium-di(acetát). 4.6. Tömény ammónia, d = 0,90 g/ml. 4.7. Kadmium-di(acetát) ammóniás oldata: oldjunk fel 10 g kadmium-di(acetátot) (4.5.) kb. 50 ml vízben. Adjunk hozzá ammóniát (4.6.) amíg a csapadék újra feloldódik (azaz kb. 20 ml-t). Töltsük fel a 100 ml-es jelig vízzel. 4.8. Nitrogén. 4.9. M ammónia oldat. 5. Eszközök 5.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés. 5.2. Három 100 ml-es a szabványnak megfelelõ csiszolatos gömblombik.. 5.3. Két 150 ml-es csiszolt-üveg nyakú Erlenmeyer lombik, amely fel van szerelve egy bemerülõ csövet és az elvezetendõ gáz oldalsó kivezetésére szánt csövet tartalmazó eszközzel. 5.4. Egy hosszú szárú tölcsér. 6. Eljárás 6.1. A szulfidok elvezetése 6.1.1. Vegyünk egy bontatlan csomagolású vizsgálati mintát. Pontosan mérjünk be a mintából az Erlenmeyer lombikba (5.2.) legfeljebb 30 mg szulfidionnak megfelelõ mennyiséget (m) (grammban kifejezve). Adjunk hozzá 60 ml vizet és két csepp habzásgátló folyadékot. 6.1.2. Vigyünk át 50 ml oldatot (4.7.) mindkét Erlenmeyer lombikba (5.3.). 6.1.3. Szereljünk fel egy csepegtetõ tölcsért, valamint szereljük fel a bemerülõ csövet és a kivezetõ csövet az Erlenmeyer lombikra (5.2.). Csatlakoztassuk a kivezetõ csövet a PVC csõvel sorba kötött lombikokra (5.3.). Megjegyzés: Az elvezetõ készüléknek meg kell felelnie a következõ szivárgásmentességi vizsgálatnak: a vizsgálati körülmények modellezéséhez helyettesítsük a vizsgálati terméket 10 ml szulfid oldattal (a 4.4.-bõl készítve), amely „X mg” szulfidot tartalmaz (jodometriásan meghatározva). Legyen „Y” a szulfid milligrammjainak száma, amelyet ennek a mûveletnek a végén kapunk. „X” és az „Y” mennyisége közötti különbség nem haladhatja meg a 3%-ot. 6.1.4. Hajtsunk át 15 percen keresztül nitrogént (4.8.), két buborék/másodperc sebességgel az Erlenmeyer lombikban (5.2.) található levegõ kihajtása céljából. 6.1.5. Melegítsük fel a Erlenmeyer lombikot 85 ± 5 °C-ra. 6.1.6. Állítsuk le a nitrogénáramot (4.8.) és adjunk hozzá cseppenként 40 ml sósavat (4.1.). 6.1.7. Indítsuk el ismét a nitrogénáramot (4.8.), amikor már majdnem az összes sav lecsepegett úgy, hogy hagyjunk meg egy kevés folyadékot a hidrogén-szulfid elszivárgásának megakadályozása érdekében. 6.1.8. Szüntessük meg a melegítést 30 perc után. Hagyjuk a lombikot (5.2.) lehûlni és folytassuk a nitrogén (4.8.) átáramoltatását legalább másfél óráig. 6.2. Titrálás 6.2.1. Szûrjük le a kadmium-szulfidot egy hosszú szárú szûrõn (5.4.). 6.2.2. Mossuk át az Erlenmeyer lombikokat (5.3.) elõször ammónia oldattal (4.9.) és öntsük a szûrõre. Ezután mossuk desztillált vízzel és használjuk fel a vizet a szûrõn maradt csapadék mosására. 6.2.3. Fejezzük be a csapadék mosását 100 ml vízzel. 6.2.4. Tegyük a szûrõpapírt az elsõ Erlenmeyer lombikba, amelyik a csapadékot tartalmazta. Adjunk hozzá 25 ml (n1) jódoldatot (4.3.), kb. 20 ml sósavat (4.1.) és 50 ml desztillált vizet. 6.2.5. Határozzuk meg a jódfelesleget nátrium-tioszulfát oldattal (n2) (4.2.). 7. Számítás A minta szulfidtartalma a kén tömegszázalékában kifejezve a következõ képlet segítségével számítható ki: % kén = ( ) m x n x n − ahol: n1 = a felhasznált standard jódoldat (4.3.) mennyisége (milliliterben), x1 = ennek az oldatnak a molaritása, n2 = a felhasznált standard nátrium-tioszulfát oldat (4.2.) száma (milliliterben), x2 = ennek az oldatnak a molaritása, m = a vizsgálati minta tömege (grammban). 8. Ismételhetõség1 2%-os (m/m) szulfidtartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett mennyiségi meghatározás közötti eltérés abszolút értéke nem haladhatja meg a 0,2%-ot (m/m). (A 83/514/EGK irányelv alapján) ISO 5725 szabvány szerint.

Source: https://magyarkozlony.hu/hivatalos-lapok/53f83b22112ddee3ba432e293c5a4a07160629ad/dokumentumok/1147f0c2e2ee62fd0d72848b53190fba47bc78de/letoltes