Publication: Magyar Közlöny
Issue: MK-2002-108 (Year: 2002, Number: 108)
Era: 1990-2004
Section: a 68/2002. (VIII. 15.) FVM rendelethez
Paragraph Index: 299

2. Vírus izolálás egyidejûleg végzett szerológiai vírus azonosítással 2.1. Minták kiválasztása II. 1.1. pont szerint. 2.2. Halminták feldolgozása és szállítása I. 1.3. pont szerint. 2.3. Kiegészítõ diagnosztikai anyag vétele I. 1.4. pont szerint. 2.4. A szervek homogenizálása I. 2.2. pont szerint. 2.5. A homogenizátum centrifugálása A homogenizátumot hûtött centrifugában 2—5 ˚C-on 2000—4000 g-vel 15 percig centrifugálják, a felülúszót összegyûjtik és 4 órán át 15 ˚C-on antibiotikummal (pl. gentamicin 1 mg/ml) kezelik, vagy kis fehérje megkötõ képességû membránszûrõn szûrik. 2.6. A felülúszó kezelése diagnosztikai antiszérummal Az antibiotikummal kezelt vagy membránon megszûrt szerv szuszpenziót 1:10 és 1:1000 arányban tápoldatban hígítják és egyenlõ mennyiségeket elkevernek az I. 4.2. pontban felsorolt reagensekkel, majd 60 percig 15 ˚C-on inkubálják a keverékeket. 2.7. Szövettenyészet és tápoldat I. 3.1. pont szerint. 2002/108. szám 2.8. A szövettenyészetek leoltása Minden vírus-szérum keverékbõl (II. 2.6. pont alapján) szövettenyészet vonalanként legalább két szövettenyészetet 50 µl mintával leoltanak. 2.9. A szövettenyészetek inkubálása I. 3.1. pont szerint. 2.10. Mikroszkópos vizsgálat A leoltott szövettenyészeteket naponta megvizsgálják citopatogén hatás jelenlétére 40—150× nagyítással. Ha valamelyik felhasznált antiszérum megakadályozta a citopatogén hatást, akkor ennek megfelelõen a vírus azonosítottnak tekinthetõ. Ha a citopatogén hatást egyetlen antiszérum sem akadályozza meg, az I. 4. pont szerint vírus azonosítási eljárásokat kell elvégezni. 2.11. Továbboltás Ha 7—10 nap alatt nem alakul ki citopatogén hatás, továbboltást kell alkalmazni a felülúszóval beoltott tápoldattal (II. 2.6. pont) az I. 3.5. pont szerint.

Source: https://magyarkozlony.hu/hivatalos-lapok/d5d58498e1ab7841b427cb4caa66f7af7beea701/dokumentumok/6238aa8868606e1794f1b737427f72033d8f51a4/letoltes