Publication: Magyar Közlöny
Issue: MK-2004-13 (Year: 2004, Number: 13)
Era: 2004-2010
Section: 2. számú melléklet a 6/2004. (II. 10. ) ESZCSM rendelethez
Paragraph Index: 705

2. függelék = HPLC pumpa = Befecskendezõ szelep = Oszlop elõtét oszloppal = Reagens pumpa = T-darab holttérfogat nélkül 5’ = T-darab (Vortex) 6-6’ = Csatlakozó holttérfogat nélkül = „Csomózás” 7’ = Reaktor = Háromnyakú lombik forró vízzel = Melegítõkráter = Hûtõ = Hõcserélõ csõ rozsdamentes acélból 11’ = Hõcserélõ = Látható-UV detektor = PCRS 520 oszlop utáni modul = PCRS 520 utóoszlop modul V. REZORCIN MEGHATÁROZÁSA SAMPONOKBAN ÉS HAJSZESZEKBEN 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a rezorcin samponokban és hajszeszekben történõ gázkromatográfiás meghatározását írja le. A módszer a minta tömegére vonatkoztatva 0,1–2,0% rezorcin meghatározására alkalmas. 2. Meghatározás Az ezzel a módszerrel meghatározott rezorcin tartalmat a minta tömegére vonatkoztatva tömegszázalékban adjuk meg. 3. Alapelv A rezorcint és a belsõ standardként adott 3,5-dihidroxi-toluolt a mintától vékonyrétegkromatográfiával választjuk el. A két vegyületet a vékonyréteg lapról lekaparva és metanollal kivonva izoláljuk. Végül a kivont vegyületeket megszárítjuk, szililezzük és gáz-kromatografáljuk. 4. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 4.1. 25%-os (m/m) sósav 4.2. Metanol 4.3. 96%-os (v/v) etanol 4.4. Készre gyártott szilikagél VRK lapok (mûanyag vagy alumínium) fluoreszcens indikátorral. Hatástalanítsuk a következõk szerint: fújjunk le a közönséges, elõre bevont szilikagél lapokat vízzel, amíg fényessé nem válnak. Hagyjuk szobahõmérsékleten egyhárom órán keresztül száradni. Megjegyzés: A lap hatástalanítása nélkül a rezorcin szilikagélen történõ irreverzibilis abszorpciója miatt veszteség léphet föl. 4.5. Elõhívó oldószer: aceton–kloroform–ecetsav (20:75:5 térfogatarányban). 4.6. Rezorcin standard oldat: oldjunk fel 400 mg rezorcint 100 ml 96%-os etanolban (4.3.) (1 ml 4000 µg rezorcint tartalmaz). 4.7. Belsõ standard oldat: oldjunk fel 400 mg 3,5-dihidroxi-toluolt (DHT) 100 ml 96%-os etanolban (4.3.) (1 ml 4000 µg DHT-t tartalmaz). 4.8. Standard elegy: elegyítsünk 10 ml (4.6.) és 10 ml (4.7.) szerinti oldatot egy 100 ml-es mérõlombikban, töltsük a jelig 96%-os etanollal (4.3.) és keverjük össze (1 ml 400 µg rezorcint és 400 µg DHT-t tartalmaz). 4.9. Szililezõ szerek: 4.9.1. N,O-bis-(trimetil-szilil)-trifluoro-acetamid (BSTFA) 4.9.2. Hexametil-diszilazán (HMDS) 4.9.3. Trimetil-klórszilán (TMCS) 5. Eszközök 5.1. A vékonyréteg-kromatográfia és a gázkromatográfia szokásos felszerelései 5.2. Üvegeszközök 6. Eljárás 6.1. Mintaelõkészítés 6.1.1. Egy 150 ml-es fõzõpohárba a termékbõl mérjünk be annyi vizsgálati mintát (M gramm), amely körülbelül 20–50 mg rezorcint tartalmaz. 6.1.2. Adjunk hozzá sósavat (4.1.), amíg a keverék savassá nem válik (kb. 2–4 ml szükséges) és adjunk hozzá 10 ml (40 mg DHT) belsõ standard oldatot (4.7.) majd keverjük össze. Etanollal (4.3.) mossuk át egy 100 ml-es mérõlombikba, töltsük fel a jelig etanollal és keverjük össze. 6.1.3. Vigyünk fel 250 µl (6.1.2) oldatot egy deaktivált szilikagél lapra (4.4.) egy 8 cm hosszú, folyamatos egyenes mentén. Ügyeljünk arra, hogy az egyenes minél vékonyabb legyen. 6.1.4. Ugyanígy vigyük fel a standard elegybõl (4.8.) 250 µl-t ugyanarra a lapra (6.1.3.). 6.1.5. Az elõhívást követõ azonosítás egyszerûsítése céljából ugyanazon a lapon vigyünk fel párhuzamosan az alapvonalra két pontban 5-5 µl-t a 4.6. és a 4.7. oldatból. 6.1.6. Kromatografáljuk a lapot a futtatószerrel (4.5.) megtöltött telítetlen kádban, amíg az oldószerfront el nem távolodik az alapvonaltól 12 cm-re, ez általában körülbelül 45 percet vesz igénybe. Szárítsuk meg levegõn a lapot, és állapítsuk meg a rezorcin/DHT zóna helyét rövidhullámú UV fényben (254 nm). A két vegyület Rf értéke nagyjából megegyezik. A sávok sötét külsõ határvonalától két mm-re egy ceruzával rajzoljuk körbe a sávokat. Kaparjuk le ezeket a zónákat, és az egyes sávokat tartalmazó adszorbenst külön-külön 10 ml-es palackokban gyûjtsük. 6.1.7. Vonjuk ki a mintát és a standard elegyet tartalmazó adszorbenst a következõképpen: adjunk hozzá 2 ml metanolt (4.2.), és állandó keverés mellett egy órán keresztül vonjuk ki. Szûrjük a keveréket, majd ismételjük meg a mûveletet 2 ml metanollal 15 percig extrahálva. 6.1.8. Egyesítsük a metanolos kivonatokat és megfelelõ szárítószerrel töltött vákuum exszikkátorban egy éjszakán át szárítva párologtassuk el az oldószert. Semmiképpen ne melegítsük a mintákat. 6.1.9. A maradékkal végezzük el (6.1.8.) a szililezését a 6.1.9.1. vagy pedig a 6.1.9.2. alatt leírt módon. 6.1.9.1. Egy mikrofecskendõvel adjunk hozzá 200 µl BSTFA-t (4.9.1.), és egy zárt edényben hagyjuk állni a keveréket 12 órán keresztül, szobahõmérsékleten. 6.1.9.2. Adjunk hozzá egymás után 200 µl HMDS-t (4.9.2.) és 100 µl TMCS-t (4.9.3.) egy mikrofecskendõvel és egy zárt edényben melegítsük a keveréket 30 percen át 60 °C-on. Hûtsük le a keveréket. 6.2. Gázkromatográfia 6.2.1. Gázkromatográfiás körülmények Az oszlop a következõ megoldást eredményezi: R nem lehet kisebb, mint 1,5, w w ) r (r 2d' = R + − , ahol: r1 és r2 = két csúcs retenciós ideje percben w1 és w2 = ugyanezen csúcsoknak a magasság felénél mért szélessége, mm-ben d' = a diagrampapír sebessége mm/percben Ez a felbontás a következõ beállítások mellett érhetõ el: Oszlop anyaga: rozsdamentes acél hossza: 200 cm belsõ átmérõje: ∼ 3 mm töltete: 10% OV-17 100-120 mesh CHROMOSORB WAW-on Lángionizációs detektor Hõmérsékletek: oszlop: 185 °C (izoterm) detektor: 250 °C injektor: 250 °C Vivõgáz: nitrogén térfogatáram: 45 ml/perc A hidrogén és levegõ térfogatáramának beállításával kapcsolatban kövessük a gyártó utasításait. 6.2.2. Fecskendezzünk a 6.1.9. pont szerint elkészített oldatokból 1–3 µl-t a gázkromatográfba. Minden (6.1.9.) oldatból ötször fecskendezzünk, mérjük az egy anyaghoz tartozó csúcsterületeket, átlagoljuk ezeket és számítsuk ki a csúcsterület arányt, S-t. S = rezorcin csúcsterület / DHT csúcsterület. 7. Számítás A mintában a rezorcin koncentrációját tömegszázalékban (% m/m) a következõ képlet fejezi ki: rezorcin% = egyveleg standard minta S S M 4 × , ahol: M = vizsgálati minta tömege grammban (6.1.1) Sminta = a 6.2.2. alapján számított, a mintaoldatra vonatkozó átlag csúcsterület arány, Sstandard elegy = a 6.2.2. alapján számított, a standard elegyre vonatkozó átlag csúcsterület arány. 8. Ismételhetõség1 0,5% körüli rezorcin tartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás eredményei közötti különbség abszolút érték nem haladhatja meg a 0,025%-ot. ISO 5725 szabvány szerint. VI. METANOL MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA ETANOLRA VAGY PROPÁN-2-OLRA VONATKOZTATVA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer metanol gázkromatográfiás meghatározását írja le valamennyi kozmetikai termékfajtában (ideértve az aeroszolokat is). A módszerrel 0-10% koncentrációk határozhatók meg. 2. Meghatározás A módszerrel meghatározott metanol tartalmat etanolra vagy propán-2-olra vonatkoztatva tömegszázalékban adjuk meg. 3. Alapelv A meghatározás gázkromatográfiával történik. 4. Reagensek Használjunk analitikai minõségû reagenseket. 4.1. Metanol 4.2. Abszolút etanol 4.3. Propán-2-ol 4.4. Vízzel alkoholmentesített kloroform 5. Eszközök 5.1. Gázkromatográf: hõvezetési detektor aeroszol mintákra, lángionizációs detektor nem aeroszol mintákra. 5.2. 100 ml-es mérõlombikok 5.3. 2 ml-es, 20 ml-es, és 0-1 ml-es tartományú pipetták 5.4. 0-100 µl-es és 0-5 µl-es mikrofecskendõk és (csak aeroszol minták adagolására) különleges gázzáró fecskendõ tolattyúval (lásd a mintavételi eljárásról szóló 5. ábrát1) 6. Eljárás 6.1. Mintaelõkészítés 6.1.1. Az aeroszol készítményeket az 1980. december 22-i 80/1335/EGK1 bizottsági irányelv mellékletének II. fejezete alapján mintázzuk, majd gázkromatográfiásan vizsgáljuk a 6.2.1. pontban leírt körülményeknek megfelelõen. 6.1.2. Az említett II. fejezetnek megfelelõen mintavételezett nem aeroszol termékeket vízzel 1–2%-os etanol vagy propán-2-ol tartalomra hígítjuk, majd gázkromatográfiásan vizsgáljuk a 6.2.2 pontban leírt körülményeknek megfelelõen. 6.2. Gázkromatográfia 6.2.1. Aeroszol minták esetén hõvezetési detektort használunk. 6.2.1.1. Az oszlop töltete 10% Hallcomid M18, 100-200 mesh CHROMOSORB WAW hordozón. 6.2.1.2. Az oszlop a következõ megoldást eredményezi: R nem lehet kisebb, mint 1,5, R = 2 d r d r w w ' ' − + , HL L 383. szám, 1980.12.31., 27.o. ahol: r1 és r2 = két csúcs retenciós ideje percben w1 és w2 = ugyanezen csúcsoknak a magasság felénél mért szélessége, mm-ben d' = a papírdiagram sebessége mm/percben 6.2.1.3. Ez a felbontás az alábbi beállítások mellett érhetõ el: Oszlop anyaga: rozsdamenetes acél hossza: 3,5 m belsõ átmérõje: 3 mm Hõvezetési detektor híd árama: 150 mA vivõgáz: Hélium nyomás: 2,5 bar térfogatáram: 45 ml/perc Hõmérsékletek: injektor: 150 °C detektor: 150 °C oszlop: 65 °C A csúcsterület mérés pontossága elektronikus integrálással javítható. 6.2.2. Nem aeroszol minták 6.2.2.1. Az oszlop Chromosorb 105 vagy Porapak QS töltetû, és a lángionizációs detektrot használjuk. 6.2.2.2. Az oszlop a következõ megoldást eredményezi: R nem lehet kisebb mint 1,5, R = 2 d r d r w w ' ' − + , ahol: r1 és r2 = két csúcs retenciós ideje percben w1 és w2 = ugyanezen csúcsoknak a magasság felénél mért szélessége, mm-ben d' = a papírdiagram sebessége mm/percben 6.2.2.3. Ez a felbontás az alábbi beállítások mellett érhetõ el: Oszlop anyaga: rozsdamentes acél hossza 2 m belsõ átmérõje: 3 mm Elektrométer érzékenysége: 8 x 10-10 A Gázok: vivõgáz: Nitrogén nyomás 2,1 bar térfogatáram: 40 ml/perc Detektor gázok nyomás: 1,5 bar térfogatáram: 20 ml/perc Hõmérsékletek: injektor 150 °C detektor: 230 °C oszlop 120 - 130 °C 7. Kalibrációs görbe 7.1. A 6.2.1. szakasz szerinti gázkromatográfiás eljárás végrehajtása (Hallcomid M18 oszlop) esetén készítsük el az alábbi táblázatban felsorolt standard elegyeket. A készítés során a komponenseket pipettával adjuk az elegyhez, de a pontos bemérést úgy határozzuk meg, hogy mindenegyes hozzáadást követõen lemérjük a pipettát vagy a lombikot. Relatív tartalom (m/m%) Metanol (ml) Etanol vagy propán-2-ol (ml) Kloroformmal töltve körülbelül 2,5% 0,5 100 ml-re körülbelül 5,0% 1,0 100 ml-re körülbelül 7,5% 1,5 100 ml-re körülbelül 10,0% 2,0 100 ml-re Injektáljunk 2-3 µl-t a gázkromatográfra a 6.2.1. szerinti körülmények beállítása mellett. Számítsuk ki valamennyi elegyre a (metanol/etanol) vagy a (metanol/propán-2-ol) csúcsterület arányt. Ábrázoljuk a standard görbét következõket feltüntetve: X-tengely: % metanol etanolra vagy propán-2-olra vonatkoztatva, Y-tengely: (metanol/etanol) vagy (metanol/propán-2-ol) csúcsterület arány. 7.2. A 6.2.2. pontban leírt gázkromatográfiás eljárás végrehajtása (Porapak QS vagy Chromosorb 105) esetén készítsük el az alábbi táblázatban felsorolt standard elegyeket. A készítés során a komponenseket pipettával vagy mikrofecskendõvel adjuk az elegyhez, de a pontos mennyiséget minden esetben úgy határozzuk meg, hogy a hozzáadást követõen lemérjük a pipettát vagy a lombikot. Relatív tartalom (m/m%) Metanol (µl) Etanol vagy propán-2-ol (ml) Hozzáadott víz térfogata körülbelül 2,5% 100 ml körülbelül 5,0% 100 ml körülbelül 7,5% 100 ml körülbelül 10,0% 100 ml Injektáljunk 2-3 µl-t a gázkromatográfra a 6.2.2. pontban írt körülmények beállítása mellett. Számítsuk ki valamennyi elegyre a (metanol/etanol) vagy a (metanol/propán-2-ol) csúcsterület arányt. Ábrázoljuk a standard görbén a következõket feltüntetve: X-tengely: % metanol etanolra vagy propán-2-olra vonatkoztatva, Y-tengely: (metanol/etanol) vagy (metanol/propán-2-ol) csúcsterület arány. 7.3. A standard kalibrációs görbének lineárisnak kell lennie. 8. Megismételhetõség1 A termék etanolra vagy propán-2-olra vonatkoztatott 5% körüli metanol tartalma esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás eredményei közötti különbség nem haladhatja meg a 2,5%-ot. (A 82/434 EGK irányelv és a módosítására kiadott 90/207/EGK irányelv alapján) ISO 5725 szabvány szerint.

Source: https://magyarkozlony.hu/hivatalos-lapok/53f83b22112ddee3ba432e293c5a4a07160629ad/dokumentumok/1147f0c2e2ee62fd0d72848b53190fba47bc78de/letoltes