Publication: Magyar Közlöny
Issue: MK-2004-13 (Year: 2004, Number: 13)
Era: 2004-2010
Section: 2. számú melléklet a 6/2004. (II. 10. ) ESZCSM rendelethez
Paragraph Index: 702

b) 0,2% felett van, akár címkézett akár címkézetlen termékben, akkor az alábbi, 5. pontban meghatározott eljárást kell alkalmazni. 5. Mennyiségi meghatározás formaldehid-donorok jelenlétében 5.1. Alapelv A különálló formaldehidet sárga lutidin származékká alakítjuk 2,4-pentán-dionos reakció segítségével egy oszlopkimenethez illeszthetõ reaktorban és a keletkezõ származék abszorbanciáját 420 nm-en megmérjük. 5.2. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak, a víznek pedig ioncseréltnek kell lennie. 5.2.1. HPLC tisztaságú vagy azzal megegyezõ minõségû víz; 5.2.2. Vízmentes ammónium-acetát; 5.2.3. Tömény ecetsav; 5.2.4. 2,4-pentándion (4 C-on tartva); 5.2.5. Vízmentes dinátrium-foszfát; 5.2.6. 85%-os ortofoszforsav (d = 1,7); 5.2.7. HPLC minõségû metanol; 5.2.8. Diklór-metán; 5.2.9. 37-40%-os (w/v) formaldehid; 5.2.10. Nátrium-hidroxid, 1 M; 5.2.11. Sósav, 1 M; ISO 5725 szabvány szerint. 5.2.12. Sósav, 0,002 M; 5.2.13. Frissen készített keményítõ oldat, amely megfelel az Európai gyógyszerkönyvnek (lásd 4.2.8. pont); 5.2.14. Jód mérõoldat, 0,05 M; 5.2.15. Nátrium-tioszulfát mérõoldat, 0,1 M; 5.2.16. Mozgó fázis: Dinátrium-foszfát (5.2.5.) vizes oldata, 0,006 M, ortofoszforsavval (5.2.6.) pH 2,1 értékre beállított; 5.1.17. Oszlop utáni reagens: Oldjunk fel egy 1000 ml-es mérõlombikban: – 62,5 g ammónium-acetátot (5.2.2.), – 7,5 ml ecetsavat (5.2.3.), – 5 ml 2,4-pentán-diont (5.2.4.). Töltsük fel 1000 ml-re vízzel (5.2.1.). Ezt a reagenst tartsuk távol a fénytõl. Eltarthatóság 25 oC-on legfeljebb 3 nap. Az oldat színe nem változhat meg; 5.2.18. Standard formaldehid: törzsoldat Öntsünk 10 g formaldehidet (5.2.9.) egy 1000 ml-es mérõlombikba és töltsük fel 1000 ml-re vízzel. Állapítsuk meg ennek az oldatnak az erõsségét a következõképpen: Vegyünk ki 5,00 ml-t; adjunk hozzá 25,00 ml jód mérõoldatot (5.2.14.) és 10 ml nátriumhidroxid oldatot (5.2.10.). Hagyjuk állni öt percig. Savanyítsuk meg 11,00 ml HCl oldattal (5.2.11.) és határozzuk meg a jód mérõoldat feleslegét nátrium-tioszulfát oldattal (5.2.15.) titrálva, használjunk keményítõ oldat (5.2.13.) indikátorként. 1 ml jód oldat (5.2.14.) megfelel 1,5 mg formaldehidnek; 5.2.19. Standard formaldehid: hígított oldat Hígítsuk fel a törzsoldatot kezdeti erõsségéhez képest 1/100 arányban a mozgó fázissal. Ennek az oldatnak 1 ml-e kb. 37 mg formaldehidet tartalmaz. Számítsuk ki a pontos tartalmat. 5.3. Eszközök 5.3.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés; 5.3.2. Ingadozásmentes HPLC pumpa; 5.3.3. Alacsony nyomású ingadozásmentes pumpa a reagens számára (vagy egy második HPLC pumpa); 5.3.4. Befecskendezõ szelep 10 ìl-es hurokkal; 5.3.5. Oszlopkimenethez illeszthetõ reaktor a következõ összetevõkkel: – egy 1 literes háromnyakú lombik, – egy melegítõkráter 1 literes lombikhoz, – két Vigreux oszlop, legalább 10 lappal, kettõ léghûtéses, – 1,6 mm-es rozsdamentes acélcsõ (a hõcseréléshez) – belsõ átmérõ 0,23 mm, hossz = 400 mm, – 1,6 mm-es tefloncsõ – belsõ átmérõ, 0,30 mm, hossz = 5 m (csomózás) lásd 1. függelék), – egy T-darab, holttérfogat nélkül (Valco vagy azzal egyenértékû), – három csatlakozó holttérfogat nélkül Vagy: egy Applied Biosystems PCRS 520 oszlop utáni modul, vagy azzal egyenértékû, 1 ml-es reaktorral felszerelve; 5.3.6. Membránszûrõ, 0,45 ìm-es pórusmérettel; 5.3.7. SEP-PAKR C18 vagy azzal egyenértékû töltet; 5.3.8. Használatra kész oszlopok: – Bischoff hypersil RP 18 (NC típus, C 25,46 1805 hivatkozás) (5 ìm, hossz = 250 mm, belsõ átmérõ = 4,6 mm), – vagy Doupont, Zorbax ODS (5 ìm, hossz = 250 mm, belsõ átmérõ = 4,6 mm), – vagy Phase SEP, spherisorb ODS 2 (5 ìm, hossz = 250 mm, belsõ átmérõ = 4,6 mm). 5.3.9. Elõoszlop Bischoff K1 hypersil RP 18 (K1 G 6301 1805 hivatkozás) (5 ìm, hossz = 10 mm, vagy ezzel egyenértékû). 5.3.10. Az oszlop és az elõoszlop Ecotube-rendszer segítségével van összekötve (A 15020508 Bischoff hivatkozás) vagy ezzel egyenértékû. 5.3.11. Szereljük össze a készüléket (5.3.5.) a 2. függelék diagramján bemutatottak szerint. A befecskendezõ érték utáni csatlakozásokat a lehetõ legrövidebbre kell méretezni. Ebben az esetben a reaktor kivezetése és a detektor bevezetése közötti rozsdamentes acélcsõ a keverék mérés elõtti hûtése céljából van elhelyezve, és a hõmérséklet a detektorban ismeretlen, de állandó; 5.3.12. UV látható detektor; 5.3.13. Adatrögzítõ; 5.3.14. Centrifuga; 5.3.15. Ultrahangos fürdõ; 5.3.16. Rotációs keverõ (vortex vagy azzal egyenértékû) 5.4. Eljárás 5.4.1. Kalibrációs görbe Ezt a görbét a hígított standard formaldehid oldat koncentrációjának függvényében felrajzolt csúcsmagasságok adják meg. Készítsük el a mérõoldatokat, a standard formaldehid oldatnak (5.2.19.) a mozgó fázissal (5.2.16.) történõ hígításával: – 1,00 ml oldat (5.2.19.) hígítva 20,00 ml-re (kb. 185 ìg/100 ml), – 2,00 ml oldat (5.2.19.) hígítva 20,00 ml-re (kb. 370 ìg/100 ml), – 5,00 ml oldat (5.2.19.) hígítva 25,00 ml-re (kb. 740 ìg/100 ml), – 5,00 ml oldat (5.2.19.) hígítva 20,00 ml-re (kb. 925 ìg/100 ml), A mérõoldatokat tartsuk laboratóriumi hõmérsékleten egy órán keresztül, és frissen készítsük el. A kalibrációs görbe linearitása az 1,00 és 15,00 ìg/ml k özötti koncentráció-tartományban megfelelõ. 5.4.2. Mintaelõkészítés 5.4.2.1. Emulziók (krémek, alapozók, szemkihúzók) Mérjünk be egy dugóval ellátott 100 ml-es lombikba 0,001 g-os pontossággal 100 ìg formaldehidnek megfelelõ mennyiséget (grammban) a vizsgálati mintából. Adjunk hozzá pontosan bemért 20,00 ml diklór-metánt (5.2.8.) és 20,00 ml sósavat (5.2.12.). Keverjük össze a rotációs keverõ (5.3.16.) és az ultrahangos fürdõ (5.2.15.) segítségével. Válasszuk el a két fázist centrifugálással (3000 g két percig). Eközben mossuk át a töltetet (5.3.7.) 2 ml metanollal (5.2.7.), majd kondicionáljuk 5 ml vízzel (5.2.1.). Hajtsunk át 4 ml-t a kivonat vizes fázisából a kondicionált tölteten, öntsük el az elsõ 2 ml-t és tegyük el az azt követõ részletet. 5.4.2.2. Arc- és testápolók, samponok Mérjünk be egy dugóval ellátott 100 ml-es lombikba 0,001 g-os pontossággal egy 500 ìg formaldehidnek megfelelõ mennyiséget (grammban) a vizsgálati mintából. Töltsük fel 100 ml-re a mozgó fázissal (5.2.16.). Szûrjük le az oldatot szûrõn (5.3.6.) keresztül és fecskendezzük be vagy vezessük át egy olyan tölteten (5.3.7.), amelyet elõzetesen a fenti módon (5.4.2.1.) kondicionáltunk. Minden oldatot közvetlenül az elkészítése után be kell fecskendezni. 5.4.3. Kromatográfiás körülmények – A mozgó fázis átfolyási sebessége: 1ml/perc, – A reagens átfolyási sebessége: 0,5 ml/perc, – A detektor kimenetén a teljes átfolyási sebesség: 1,5 ml/perc, – Befecskendezett térfogat: 10 ìl, – Oldási hõmérséklet: nehéz elválasztások esetén merítsük az oszlopot olvadó jeges fürdõbe: várjuk meg amíg a hõmérséklet állandósul (15–20 perc). – Az oszlop utáni reakció hõmérséklete: 100 °C, – Detektálás: 420 nm-en. Megjegyzés: A teljes kromatográfiás rendszert és az utó-oszlopot is használat után át kell mosni vízzel (5.2.1.). Ha a rendszert két napnál hosszabb ideig nem használják, akkor az átmosás után metanolos (5.2.7.) mosást is alkalmazni kell. Újrakondicionálás elõtt a rendszeren vizet kell átnyomni az átkristályosodás elkerülése érdekében. 5.5. Számítás Emulziók esetében (5.4.2.1.): Formaldehid-tartalom%-ban (m/m,) m C m C -6 − ⋅ = ⋅ ⋅ Arc- és testápolók, samponok esetében (5.4.2.2.): Formaldehid-tartalom: m C m C -6 − ⋅ = ⋅ ⋅ ahol: m = a vizsgálati minta tömege g-ban (5.4.2.1.), C = formaldehid koncentráció ìg/100ml-ben a kalibrációs görbérõl leolvasva (5.4.1.). 5.6. Ismételhetõség1 0,05%-os formaldehid-tartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti különbség nem haladhatja meg a 0,001%-ot. 0,2%-os formaldehid-tartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés nem haladhatja meg a 0,005%-ot. ISO 5725 szabvány szerint.

Source: https://magyarkozlony.hu/hivatalos-lapok/53f83b22112ddee3ba432e293c5a4a07160629ad/dokumentumok/1147f0c2e2ee62fd0d72848b53190fba47bc78de/letoltes