Publication: Magyar Közlöny
Issue: MK-2004-13 (Year: 2004, Number: 13)
Era: 2004-2010
Section: 5. számú melléklet a 6/2004. (II. 10.) ESZCSM rendelethez
Paragraph Index: 710

m) nitrát%(m/ - ezüst × × = , ahol: m = a vizsgálathoz kivett minta (5.1) tömege grammban; és c = a mintaoldatban (5.1) lévõ ezüstkoncentrációja mikrogramm/ milliliterben, a kalibrációs görbe alapján. 7. Megismételhetõség1 4% (m/m) ezüst-nitrát tartalom esetén azonos mintán párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés értéke nem lehet nagyobb mint 0,05% (m/m). II. SZELÉN-DISZULFID AZONOSÍTÁSA ÉS MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA KORPÁSODÁS ELLENI SAMPONOKBAN A. AZONOSÍTÁS 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a szelén-diszulfid szelénként történõ azonosítását írja le korpásodás elleni samponokban. 2. Alapelv A szelént jellemzõ sárgás-narancssárga színe alapján azonosítjuk, amely karbamiddal és kálium-jodiddal való reakciója során alakul ki. 3. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 3.1. Koncentrált salétromsav (d20 = 1,42 g/ml) 3.2. Karbamid 3.3. Kálium-jodid oldat, 10% (m/v)-os; oldjunk fel 10 g kálium-jodidot 100 ml vízben. 4. Eszközök 4.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés 4.2. Roncsoló csõ, 100 ml-es 4.3. Blokkhevítõs roncsoló 4.4. Szûrõpapír (Whatman 42. számú vagy ezzel egyenértékû) vagy egy 0,45 ìm-es membránszûrõ ISO 5725 szabvány szerint. 5. Eljárás 5.1. Körülbelül 1 g, roncsoló csõben (4.2.) lévõ samponhoz adjunk 2,5 ml koncentrált salétromsavat (3.1.) és roncsoljuk 150 oC-on 30 percig a blokkhevítõs roncsolón (4.3.). 5.2. Hígítsuk vízzel 25 ml-re a roncsolt mintát és szûrjük át egy szûrõpapíron vagy egy 0.45 ìm-es membr ánszûrõn (4.4.). 5.3. 2,5 ml szûrlethez adjunk 5 ml vizet, 2,5 g karbamidot (3.2.) és forraljuk fel. Hûtsük le és adjunk hozzá 1 ml kálium-jodid oldatot (3.3.). 5.4. A sárgás-narancssárga szín, ami állás közben gyorsan sötétedik, a szelén jelenlétét jelzi. B. MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁS 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer maximálisan 4,5% (m/m) szelén-diszulfid tartalmú, korpásodás elleni samponokban lévõ szelén-diszulfid szelén formájában történõ meghatározására alkalmas. 2. Alapelv A mintát salétromsavval roncsoljuk, és az eredményül kapott digerátumban a szelént atomabszorpciós spektrometriával határozzuk meg. 3. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 3.1. Koncentrált salétromsav (d20 = 1,42 g/ml) 3.2. Salétromsav oldat, 5%-os (v/v); adjunk 50 ml koncentrált salétromsavat (3.1.) 500 ml fõzõpohárban lévõ vízhez folyamatos keverés mellett. Töltsük át ezt az oldatot egy 1 literes mérõlombikba, és vízzel töltsük fel a jelig. 3.3. Szelén mérõ törzsoldat, 1000 ìg/ml-es, 0 ,5 M-os salétromsav oldatban („SpectrosoL” vagy ezzel egyenértékû) 4. Eszközök 4.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés 4.2. Roncsoló csõ, 100 ml-es 4.3. Blokkhevítõs roncsoló 4.4. Szûrõpapír (Whatman 42-es vagy ezzel egyenértékû) vagy egy 0,45 ìm-es membr ánszûrõ 4.5. Szelén üregkatódos lámpával felszerelt atomabszorpciós spektrométer. 5. Eljárás 5.1 Mintaelõkészítés 5.1.1. Mérjünk be pontosan kb. 0,1 g (m gramm) homogén sampon mintát egy roncsoló csõbe (4.2.). 5.1.2. Adjunk hozzá 5 ml koncentrált salétromsavat (3.1.), és roncsoljuk 150 oC-on egy órán keresztül egy blokkhevítõs roncsolón (4.3.). 5.1.3. Hagyjuk az oldatot lehûlni és hígítsuk fel vízzel 100 ml-re. Szûrjük át egy szûrõpapíron vagy egy 0.45 ìm-es membr ánszûrõn (4.4.), és tartsuk meg a szûrt oldatot a mennyiségi meghatározáshoz. 5.2. Feltételek az atomabszorpciós spektrometriához Láng: levegõ-acetilén Hullámhossz: 196,0 nm Háttér korrekció: van Fûtési körülmények: gyenge; a legnagyobb abszorbancia biztosításához szükség lesz a lángmagasság és a fûtési körülmények optimalizálására. 5.3. Kalibrálás 5.3.1. Egy 100 ml-es mérõlombik sorozatba pipettázzunk be 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 és 5,0 ml szelén mérõ törzsoldatot (3.3.). Töltsük fel mindegyik lombikot a jelig 5%-os (v/v) salétromsav oldattal (3.1.) és keverjük meg. Ezek az oldatok 10, 20, 30, 40 és 50 ìg szel ént tartalmaznak milliliterenként. 5.3.2. Mérjük meg egy 5%-os (v/v) salétromsav oldat (3.2,) abszorbanciáját és a kapott értéket a kalibrációs görbe nulla szelén koncentrációjaként használjuk. Mérjük meg mindegyik szelén kalibráló mérõoldat (5.3.1,) abszorbanciáját. Rajzoljuk meg a kalibrációs görbét, ábrázoljuk az abszorbancia értékeket a szelén-koncentráció függvényében. 5.4. Mennyiségi meghatározás Mérjük meg a mintaoldat (5.1.3) abszorbanciáját. A kalibrációs görbérõl olvassuk le a mintaoldatra kapott abszorbanciához tartozó szelén koncentrációt. 6. Számítás Számítsuk ki a minta szelén-diszulfid tartalmát tömegszázalékban (% m/m) a következõ képlet segítségével: szelén-diszulfid m c 1,812 × × = , ahol: m = a vizsgálati minta (5.1.1) tömege grammban; és c = a mintaoldatban (5.1.3) lévõ szelénkoncentráció mikrogramm/ milliliterben, a kalibrációs görbe alapján. 7. Megismételhetõség1 1% (m/m) szelén-diszulfid tartalom esetén azonos mintán, párhuzamos végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés értéke nem haladhatja meg a 0,05%-ot (m/m). III. OLDHATÓ BÁRIUM ÉS OLDHATÓ STRONCIUM MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA PIGMENTEKBEN SÓK VAGY LAKKOK FORMÁJÁBAN A. OLDHATÓ BÁRIUM MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a pigmentekben lévõ oldható bárium sók vagy lakkok formájában történõ extrakciós eljárását és mennyiségi meghatározását írja le. 2. Alapelv A pigmentet meghatározott körülmények között 0,07 M-os sósavval kivonjuk, és az kivonatban lévõ bárium mennyiségét atomabszorpciós spektrometriával határozzuk meg. 3. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 3.1. Abszolút etil-alkohol ISO 5725 szabvány szerint. 3.2. 0,07 M-os sósav oldat 3.3. 0,5 M-os sósav oldat 3.4. 8%-os (m/v) kálium-klorid oldat; oldjunk fel 16 g kálium-kloridot 200 ml 0,07 M-os sósav oldatban (3.2.). 3.5. Bárium mérõoldatok 3.5.1. Bárium mérõ törzsoldat, 1000 ìg/ml, 0,5 M-os sal étromsav oldatban („SpectrosoL” vagy ezzel egyenértékû) 3.5.2. Bárium standard oldat, 200 ìg/ml; pipett ával töltsünk 20 ml bárium mérõ törzsoldatot (3.5.1.) egy 100 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel a jelig 0,07 M-os sósav oldattal (3.2.) és keverjük meg. 4. Eszközök 4.1. Szokásos laboratóriumi felszerelések 4.2. pH-mérõ, ± 0,02 egység pontossággal 4.3. Körkörös rázógép 4.4. 0,45 ìm-es p órusméretû membránszûrõ 4.2. Bárium üregkatódos lámpával felszerelt atomabszorpciós spektrométer. 5. Eljárás 5.1. Mintaelõkészítés 5.1.1. Mérjünk be pontosan kb. 0,5 g (m gramm) pigmentet egy Erlenmeyer lombikba. Azért, hogy a hatékony keveréshez elégséges térfogatot biztosítsunk, 150 ml-nél kisebb térfogatú lombik nem használható. 5.1.2. Pipettával adjunk hozzá 1,0 ml etil-alkoholt, és forgassuk a lombikot, hogy a festék nedvesítése alapos legyen. Egy bürettából adjunk hozzá pontosan olyan mennyiségû 0,07 M-os sósav oldatot (3.2.), amely pontosan 50 milliliter/ gramm savtérfogat/ pigmenttömeg arányt biztosít. Az etil-alkoholt tartalmazó kivonat teljes térfogata legyen „V” ml. Rázzuk össze a lombik tartalmát öt másodpercig, hogy a komponensek tökéletesen összekeveredjenek. 5.1.3. Egy pH-mérõ (4.2.) segítségével mérjük meg a kapott szuszpenzió pH-ját, és ha az 1,5 felett van, adjunk hozzá cseppenként 0,5 M-os sósavat (3.3.) addig, amíg 1,4-1,5-ös tartományba be nem áll. 5.1.4. A lombikot dugóval zárjuk be, és rögtön kezdjük el rázni 60 percen keresztül egy körkörös rázógéppel (4.3.). A rázógépnek akkora sebességen kell mûködnie, hogy hab képzõdjön. Szûrjük át egy 0,45 ìm-es membr ánszûrõn és gyûjtsük össze a szûrletet. Ne centrifugáljuk a kivonatot szûrés elõtt. Pipettával töltsünk 5,0 ml szûrletet egy mérõlombikba; töltsük fel a jelig 0,07 M-os sósav oldattal (3.2.) és keverjük meg. Ezt az oldatot használjuk a stroncium (B. rész) meghatározására is. 5.1.5. Pipettával mérjünk be egy 100 ml-es mérõlombikba 5,0 ml kálium-klorid oldatot (3.4.) és a higított szûrletbõl (5.1.4.) egy várhatóan 3 és 10 ìg b árium/ milliliter közötti koncentrációnak megfelelõ elkülönített részt (WBa ml). (Egy 10 ml-es részletnek elégnek kell lennie egy kezdõponthoz). Töltsük fel 0,07 M-os sósav oldattal (3.2.) és keverjük meg. 5.1.6. Az oldat bárium koncentrációját (5.1.5.) atomabszorpciós spektrometriával határozzuk meg még ugyanazon a napon. 5.2. Feltételek az atomabszorpciós spektrometriához Láng: nitrogénoxid-acetilén Hullámhossz: 553,5 nm Háttér korrekció: nincs Fûtési körülmények: gyenge; a maximális abszorbancia biztosításához szükség lesz a lángmagasság és a fûtési körülmények optimalizálására. 5.3. Kalibrálás 5.3.1. Egy sorozat 100 ml-es mérõlombikba pipettázzunk be 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 és 5,0 ml bárium mérõoldatot (3.5.2.). Mindegyik lombikba pipettázzunk be 5,0 ml kálium-klorid oldatot (3.4.); töltsük fel mindegyik lombikot a jelig 0,07 M sósav oldattal (3.2) és keverjük össze. Ezek az oldatok 2,0; 4,0; 6,0; 8,0 és 10,0 ìg b áriumot tartalmaznak milliliterenként. Hasonlóképpen készítsünk egy vakoldatot, amibõl hiányzik a bárium mérõoldat. 5.3.2. Mérjük meg a vakoldat (5.3.1.) abszorbanciáját és a kapott értéket a kalibrációs görbe nulla bárium koncentrációjaként használjuk. Mérjük meg mindegyik bárium mérõoldat (5.3.1.) abszorbanciáját. Rajzoljuk meg a kalibrációs görbét, ábrázoljuk az abszorbancia értékeket a bárium-koncentráció függvényében. 5.4. Mennyiségi meghatározás Mérjük meg a mintaoldat (5.1.3.) abszorbanciáját. A kalibrációs görbérõl olvassuk le a mintaoldatra kapott abszorbanciához tartozó bárium koncentrációt. 6. Számítás A pigment oldható bárium tartalmát (% m/m) a következõ képlet adja meg: oldható bárium%(m/m) = m 10W V c a B × × , ahol: m = a vizsgálati minta (5.1.1.) tömege grammban; c = a mintaoldatban (5.1.5.) lévõ bárium-koncentráció mikrogramm/ milliliterben, a kalibrációs görbe alapján; V = a kivonat össztérfogata milliliterben (5.1.2.); és WBa = az 5.1.5. pontban kivett kivonat térfogata 7. Megismételhetõség Ennek a módszernek a legjobb becsült megismételhetõsége 0,3% (ISO 5725) 2%-os (m/m) oldható bárium tartalom esetén. 8. Megjegyzések 8.1. Bizonyos körülmények között a bárium abszorbanciája megnõhet kalcium jelenlétében. Ez 5 g/l1 magnézium-ion adagolásával ellensúlyozható. 8.2 Az atomabszorpciós lángspektrometria mellett megengedett az induktív kapcsolású plazma – emissziós optikai spektrometria használata. B. OLDHATÓ STRONCIUM MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a festékekben lévõ oldható stroncium extrakciós eljárását és sók vagy lakkok formájában történõ mennyiségi meghatározását írja le. „A magnézium módosító anyagként viselkedik a bárium lángemissziós atomabszorpciós spektrometriával történõ meghatározásánál” Jerrow, M. et.al. Analytical Proceedings, 1991, 28,40. 2. Alapelv A mintát meghatározott körülmények között 0,07 M-os sósavval kivonjuk, és a kivonatban lévõ stroncium mennyiségét atomabszorpciós spektrometriával határozzuk meg. 3. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 3.1. Abszolút etil-alkohol 3.2. 0,07 M-os sósav oldat 3.3. 8%-os (m/v) kálium-klorid oldat: oldjunk fel 16 g kálium-kloridot 200 ml 0,07 M-os sósav oldatban (3.2.). 3.4. Stroncium mérõoldatok 3.4.1. Stroncium mérõ törzsoldat, 1000 ìg/ml, 0 ,5 M-os salétromsav oldatban („SpectrosoL” vagy ezzel egyenértékû) 3.4.2. Stroncium mérõoldat, 100 ìg/ml: pipett ával töltsünk 10 ml stroncium mérõ törzsoldatot (3.4.1.) egy 100 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel a jelig 0,07 M-os sósav oldattal (3.2.) és keverjük össze. 4. Eszközök 4.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés 4.2. 0,45 ìm-es p órusméretû membránszûrõ 4.3. Stroncium vájtkatódos lámpával felszerelt atomabszorpciós spektrométer. 5. Eljárás 5.1. Mintaelõkészítés Az A.5.1.4. pontban elkészített oldatot használjuk az oldott stroncium tartalom mennyiségi meghatározására. 5.1.1. Pipettával mérjünk be egy 100 ml-es mérõlombikba 5,0 ml kálium-klorid oldatot (3.4.) és a higított szûrletbõl (A.5.1.4.) egy várhatóan 2 és 5 ìg stroncium/ milliliter k özötti koncentrációjú leválasztott részt (W ml). (Egy 25 ml-es részletnek elégnek kell lennie a kezdõponthoz). Töltsük fel 0,07 M sósav oldattal (3.2.) és keverjük össze. 5.1.2. Az oldat stroncium koncentrációját (5.1.5.) atomabszorpciós spektrometriával határozzuk meg még ugyanazon a napon. 5.2. Feltételek az atomabszorpciós spektrometriához Láng: nitrogénoxid-acetilén Hullámhossz: 460,7 nm Háttér korrekció: nincs Fûtési körülmények: gyenge; a legnagyobb abszorbancia biztosításához szükség lesz a lángmagasság és a fûtési körülmények optimalizálására. 5.3. Kalibrálás 5.3.1. Egy sorozat 100 ml-es mérõlombikba pipettázzunk be 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 és 5,0 ml stroncium mérõoldatot (3.5.2.). Mindegyik lombikba pipettázzunk bele 5,0 ml káliumklorid oldatot (3.3.); töltsük fel mindegyik lombikot a jelig 0,07 M sósav oldattal (3.2.) és keverjük meg. Ezek az oldatok 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 és 5,0 ìg stronciumot tartalmaznak milliliterenként. Hasonlóképpen készítsünk a vakpróba oldatot, amibõl hiányzik a stroncium mérõoldat. 5.3.2. Mérjük meg egy vakpróba oldat (5.3.1.) abszorbanciáját, és a kapott értéket a kalibrációs görbe nulla stroncium koncentrációjaként használjuk. Mérjük meg mindegyik stroncium mérõoldat (5.3.1.) abszorbanciáját. Rajzoljuk meg a kalibrációs görbét, ábrázoljuk az abszorbancia értékeket a stroncium-koncentráció függvényében. 5.4. Mennyiségi meghatározás Mérjük meg a mintaoldat (5.1.3.) abszorbanciáját. A kalibrációs görbérõl olvassuk le a mintaoldatra kapott abszorbanciához tartozó stroncium koncentrációt. 6. Számítás A pigment oldható stroncium tartalmát (% m/m) a következõ képlet adja meg: m 10W v c %(m/m) stroncium oldható Sr × × = , ahol: m = a vizsgálathoz kivett minta (A.5.1.1.) tömege grammban; c = a mintaoldatban (5.1.1.) lévõ stroncium-koncentráció mikrogramm/ milliliterben, a kalibrációs görbe alapján; V = a kivonat térfogata milliliterben (A.5.1.2.); és WSr = az 5.1.1. pontban kivett kivonat térfogata 7. Megismételhetõség Ennek a módszernek 0,09% a legjobb becsült megismételhetõsége (ISO 5725) 0,6%-os (m/m) oldható stroncium tartalom esetén. 8. Megjegyzés Az atomabszorpciós lángspektrometria mellett megengedett az induktív kapcsolású plazma – emissziós optikai spektrometria használata. IV. BENZIL-ALKOHOL AZONOSÍTÁSA ÉS MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA KOZMETIKAI TERMÉKEKBEN A. AZONOSÍTÁS 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a kozmetikai termékekben lévõ benzil-alkohol azonosítását írja le. 2. Alapelv A benzil-alkoholt szilikagél lemezeken végrehajtott vékonyréteg-kromatográfia segítségével azonosítjuk. 3. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 3.1. Benzil-alkohol 3.2. Kloroform 3.3. Abszolút etil-alkohol 3.4. n-Pentán 3.5. Futtató oldat: dietil-éter 3.6. Benzil-alkohol mérõoldat: mérjünk be 0,1 g benzil-alkoholt (3.1.) egy 100 ml-es mérõlombikba, töltsük fel jelig etil-alkohollal (3.3.) és keverjük össze. 3.7. Vékonyréteg kromatográfiás üveglemezek, 100 × 200 mm-es vagy 200 × 200 mm-es, 0,25 mm vastag szilikagél 60 F254 réteggel bevonva. 3.8. Elõhívószer: 12-molibdén-foszforsav, 10% (m/v) etil-alkoholban (3.3.) 4. Eszközök 4.1. Normál vékonyréteg kromatográfiás készülék 4.2. Kromatográfiás kád, kétcsatornás kamrával, külsõ méretei kb. 80 mm × 230 mm × 240 mm 4.3. Kromatográfiás papír: Whatman vagy ezzel egyenértékû 4.4. Ultraibolya lámpa, hullámhossz 254 nm. 5. Eljárás 5.1. Mintaelõkészítés Mérjünk be 1,0 g-ot az vizsgálni kívánt termékbõl egy 10 ml-es mérõlombikba. Adjunk hozzá 3 ml kloroformot (3.2.) és rázzuk erõsen addig, amíg a termék teljesen feloldódik. Töltsük fel jelig etil-alkohollal (3.3.) és rázzuk erõsen addig, míg egy tiszta vagy csaknem tiszta oldatot kapunk. 5.2 Vékonyréteg kromatográfia 5.2.1. Töltsük fel a kromatográfiás kádat (4.2.) n-pentánnal (3.4.) a következõképpen: vonjuk be a hátsó csatorna melletti kamrafalat a kromatográfiás papírral (4.3.) biztosítva, hogy a papír alsó széle a csatornában legyen. Töltsünk 25 ml n-pentánt (3.4) a hátsó csatornába olyan módon, hogy a kromatográfiás papír exponált felületére öntjük az oldószert. Azonnal tegyük vissza a fedelet és hagyjuk a kádat állni 15 percig. 5.2.2. Vigyünk fel 10 ìl mintaoldatot (5 .1.) és 10 ìl benzil-alkohol m érõoldatot (3.6.) a vékonyréteg kromatográfiás lemez (3.7.) alapvonalának megfelelõ pontjaira. Hagyjuk megszáradni. 5.2.3. Pipettázzunk 10 ml dietil-étert (3.5.) a kád elején lévõ csatornába, és közvetlenül ezután tegyük a lemezt (5.2.2.) ugyanebbe a csatornába. Gyorsan tegyük vissza a kád fedelét, és futtassuk a folyadékot a lemezen 150 mm távolságig. Vegyük ki a lemezt a kromatográfiás tartályból, és hagyjuk megszáradni szobahõmérsékleten. 5.2.4. Vizsgáljuk meg a lemezt (5.2.3.) ultraibolya lámpa alatt, és jelöljük be a lila foltokat. Permetezzük be a lemezt az elõhívószerrel (3.8.), és azután melegítsük 120 °C-on mintegy 15 percen keresztül. A benzil-alkohol sötétkék foltként jelenik meg. 5.2.5. Számítsuk ki az Rf értéket, amit a benzil-alkohol mérõoldattal kapunk. Egy ugyanolyan Rf értékkel rendelkezõ, a mintaoldatból kapott sötétkék folt benzil-alkohol jelenlétét jelzi. Detektálási határérték: 0,1 ìg benzil-alkohol. B. MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁS 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a kozmetikai termékekben lévõ benzil-alkohol meghatározását írja le. 2. Meghatározás Az e módszerrel meghatározott benzil-alkohol mennyiségét tömegszázalékban (% m/m) fejezzük ki. 3. Alapelv A mintát metil-alkohollal vonjuk ki, és a kivonatban található benzil-alkohol mennyiségét nagynyomású folyadék-kromatográfiával (HPLC) határozzuk meg. 4. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie és alkalmasnak HPLC-re, ahol ez szükséges. 4.1. Metilalkohol 4.2. 4-Etoxi-fenol 4.3. Benzil-alkohol 4.4. Mozgó fázis: metil-alkohol (4.1.) / víz (45:55; v/v) 4.5. Benzil-alkohol törzsoldat: mérjünk be pontossággal körülbelül 0,1 g benzil-alkoholt (4.3) egy 100 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel a jelig metil-alkohollal (4.1.) és keverjük össze. 4.6. Belsõ standard oldat: mérjünk be nagy pontossággal mintegy 0,1 g 4-etoxifenolt (4.2.) egy 1 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel a jelig metil-alkohollal (4.1) és keverjük össze. 4.7. Standard oldatok: egy sorozat 25 ml-es mérõlombikba pipettázzunk benzil-alkohol törzsoldatot (4.5.) és belsõ standard oldatot (4.6.) az alábbi táblázatban megadott mennyiségekben. Töltsük fel a jelig metil-alkohollal és keverjük össze. Benzil-alkohol koncentráció 3-etoxi-fenol koncentráció Standard oldat hozzáadott ml (4.5.) ì m/ml* hozzáadott ml (4.6.) ìm/ml * I II III IV V 0,5 1,0 2,0 3,0 5,0 2,0 2,0 2,0 2,0 2,0 * Ezek az értékek példaként szerepelnek, és olyan standard oldatok koncentrációinak felelnek meg, amelyeket benzil-alkohol (4.5.) és 4-etoxi-fenol (4.6.) oldatok felhasználásával készítettünk, amelyek pontosan 0,1% (m/v) benzil-alkoholt és pontosan 0,1% (m/v) 4-etoxifenolt tartalmaznak. 5. Eszközök 5.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés 5.2. Nagynyomású kromatográfiás berendezés változtatható hullámhosszú ultraibolya detektorral és 10 ìl-es befecskendez õ hurok. 5.3. Analitikai oszlop: 250 mm × 4,6 mm rozsdamentes acél oszlop 5 ìm-es Spherisorb ODS vagy ezzel egyenértékû töltettel ellátva. 5.4. Vízfürdõ 5.5. Ultrahangos fürdõ 5.6. Centrifuga 5.7. Centrifugacsövek, 15 ml kapacitással 6. Eljárás 6.1. Mintaelõkészítés Mérjünk be nagy pontossággal mintegy 0,1 g (m gramm) mintát egy centrifugacsõbe (5.7.) és adjunk hozzá 5 ml metil-alkoholt (4.1.). 6.1.2. Melegítsük vízfürdõn (5.4.) 10 percig 50 °C-ot tartva, azután tegyük a csövet ultrahangos fürdõbe (5.5.), amíg a minta teljesen feloldódik. 6.1.3. Hûtsük le, azután centrifugáljuk 3500 percenkénti fordulatszám mellett öt percig. 6.1.4. A felülúszó folyadékot töltsük át egy 25 ml-es mérõlombikba. 6.1.5. Újra vonjuk ki a mintát további 5 ml metil-alkohollal (4.1.). Egyesítsük a kivonatokat egy 25 ml-es mérõlombikban. 6.1.6. Pipettázzunk 2,0 ml belsõ standard oldatot (4.6.) egy 25 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel jelig metil-alkohollal (4.1.) és keverjük össze. Ezt az oldatot használjuk a 6.4 pontban leírt vizsgálat meghatározási szakaszában. 6.2. Kromatográfia 6.2.1. Szereljük össze a nagynyomású kromatográfiás berendezést (5.2.) a szokásos módon. A mozgó fázis (4.4.) áramlási sebességét állítsuk 2,0 ml/ perc értékre. 6.2.2. Az UV detektor (5.2.) hullámhosszát állítsuk 210 nm-re. 6.3. Kalibrálás 6.3.1 Minden standard oldatból (4.7.) fecskendezzünk 10 ìl-t, és mérjük meg a benzil-alkohol területeket és a 4-etoxi-fenol csúcsokat. 6.3.2 Minden standard oldatra (4.7.) számítsuk ki a benzil-alkoholnak a 4-etoxi-fenolhoz viszonyított csúcsterületek arányát. Vigyük fel ezeket az arányokat a kalibrációs görbe ordinátájára, a hozzátartozó benzil-alkohol koncentrációkat pedig az abszcisszára ìg/milliliterben. 6.4 Mennyiségi meghatározás 6.4.1 Fecskendezzünk be 10 ìl mintaoldatot (6.1.6.), és mérjük meg a ben zil-alkohol és a 4-etoxi-fenol csúcsterületeit. Számítsuk ki a benzil-alkohol és a 4-etoxi-fenol csúcsterületek arányát. Ismételjük meg ezt a folyamatot további 10 ìl-es mintaoldat részletekben, amíg ellentmondásmentes eredményeket kapunk. 6.4.2 A kalibrációs görbérõl (6.3.2.) olvassuk le a benzil-alkohol / 4-etoxifenol csúcsterülethez tartozó benzil-alkohol koncentrációt. 7. Számítás Számítsuk ki a minta benzil-alkohol tartalmát tömegszázalékban a következõ képlet segítségével: m c (m/m) % alkohol - benzil × = , ahol: m = a vizsgálati minta (6.1.1.) tömege grammban; és c = a mintaoldatban (6.1.6.) lévõ benzil-alkohol-koncentráció mikrogramm/ milliliterben, a kalibrációs görbe alapján. 8. Megismételhetõség1 1% (m/m) benzil-alkohol-tartalom esetén azonos a mintán, párhuzamos végzett két mennyiségi meghatározás eredménye közötti eltérés értéke nem haladhatja meg a 0,10%-ot. ISO 5725 szabvány szerint. V. CIRKÓNIUM AZONOSÍTÁSA ÉS CIRKÓNIUM, ALUMINIUM ÉS KLÓR MENNYISÉGI MEGHATÁROZÁSA NEM-AEROSZOL IZZADÁSGÁTLÓKBAN A módszer öt lépést tartalmaz: A. Cirkónium azonosítása B. Cirkónium meghatározása C. Alumínium meghatározása D. Klór meghatározása E. Az alumínium atomok cirkónium atomokhoz viszonyított aránya, valamint az alumínium és cirkónium atomok klór atomokhoz viszonyított arányának számítása A. CIRKÓNIUM AZONOSÍTÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a nem-aeroszol izzadásgátló kozmetikai termékekben lévõ cirkónium azonosítását írja le. Nem történt kísérlet olyan módszer leírására, amely az alumíniumcirkónium-klorid komplex [AlxZr(OH),Cl,.nH2O] azonosítására alkalmas. 2. Alapelv A cirkóniumot jellemzõ, vörös-lila csapadéka alapján azonosítjuk, amely alizarin-vörös S oldattal képzõdik erõsen savas környezetben. 3. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 3.1. Koncentrált sósav (d20 = 1,18 g/ml) 3.2. Alizarin-vörös S (CL 58005) oldat: alizarin-szulfonát 2%-os (m/v) vizes oldata. 4. Eszközök 4.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés 5. Eljárás 5.1. Körülbelül 1 g-nyi, vizsgálati csõben lévõ mintához adjunk 2 ml vizet. Dugóval zárjuk le és rázzuk fel. 5.2. Adjunk hozzá néhány csepp alizarin-vörös S oldatot (3.2.), majd 2 ml koncentrált sósavat (3.1.). Dugóval zárjuk le és rázzuk össze. 5.3. Hagyjuk állni kb. két percig. 5.4. Vörös-ibolya színû felülúszó folyadék és csapadék a cirkónium jelenlétét jelzi. B. CIRKÓNIUM MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer nem-aeroszol izzadásgátlókban lévõ cirkóniumnak alumínium-cirkóniumklorid-hidroxid komplexekben történõ meghatározására alkalmas legfeljebb 7,5% (m/m) cirkónium-koncentrációig. 2. Alapelv A cirkóniumot savas körülmények között kivonjuk a termékbõl, és atomabszorpciós lángspektrometriával határozzuk meg. 3. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 3.1. Koncentrált sósav (d20 = 1,18 g/ml) 3.2. 10%-os (v/v) sósav oldat: adjunk 100 ml koncentrált sósavat (3.1.) 500 ml vízhez egy fõzõpohárban, folyamatos keverés mellett. Töltsük át ezt az oldatot egy 1 literes mérõlombikba és töltsük fel a jelig vízzel. 3.3. Cirkónium standard törzsoldat, 1000 ìg/ml-es, 0 ,5 M-os sósav oldatban („SpectrosoL” vagy ezzel megegyezõ) 3.4. Alumínium-klorid (hidratált) [AlCl3.6H2O] reagens: oldjunk fel 22,6 g alumínium-kloridhexahidrátot 250 ml 10%-os (v/v) sósav oldatban (3.2.). 3.5. Ammónium-klorid reagens: oldjunk fel 5,0 g ammónium-kloridot 250 ml 10%-os (v/v) sósav oldatban (3.2.). 4. Eszközök 4.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés 4.2. Fõzõlap mágneses keverõvel 4.3. Szûrõpapír (Whatman. 41. számú vagy ezzel megegyezõ) 4.4. Cirkónium üregkatódos lámpával felszerelt atomabszorpciós spektrométer. 5. Eljárás 5.1. Mintaelõkészítés 5.1.1. Mérjünk be pontosan kb. 0,1 g (m gramm) homogén mintát a termékbõl egy 150 ml-es fõzõpohárba. Adjunk hozzá 40 ml vizet és 10 ml koncentrált sósavat (3.1.). 5.1.2. Tegyük fel a fõzõpoharat a mágneses keverõvel ellátott fõzõlapra (4.2.). Indítsuk el a keverést, és forrásig melegítsük. A gyors száradás megelõzése érdekében tegyünk egy óraüveget a fõzõpohár tetejére. Forraljuk öt percig, vegyük le a fõzõpoharat a fõzõpoharat és hûtsük le szobahõmérsékletre. 5.1.3. A szûrõpapír (4.3.) felhasználásával szûrjük le a fõzõpohár tartalmát egy 100 ml-es mérõlombikba. Öblítsük ki a fõzõpoharat kétszer 10 ml-nyi vízzel, és szûrés után öntsük a szûrletet a lombikba. Töltsük fel a jelig vízzel és keverjük meg. Ezt az oldatot használjuk az alumínium (C. rész) meghatározására is. 5.1.4. Pipettázzunk 20,00 ml mintaoldatot (5.1.3), 5,00 ml alumínium-klorid reagenst (3.4.) és 5,00 ml ammónium-klorid reagenst (3.5.) egy 50 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel a jelig 10%-os (v/v) sósav oldattal (3.2.) és keverjük meg. 5.2. Feltételek az atomabszorpciós spektrometriához Láng: nitrogénoxid-acetilén Hullámhossz: 360,1 nm Háttér korrekció: nincs Fûtési körülmények: dús; a maximális abszorbancia biztosításához szükség lesz a lángmagasság és a fûtési körülmények optimalizálására. 5.3. Kalibrálás 5.3.1. Egy 50 ml-es mérõlombik sorozatba pipettázzunk be 5,00; 10,00; 15,00; 20,00 és 25,00 ml cirkónium standard törzsoldatot (3.3.). Mindegyik mérõlombikba pipettázzunk be 5,00 ml alumínium-klorid reagenst (3.4.) és 5,00 ml ammónium-klorid reagenst (3.5.) Töltsük fel mindegyik lombikot a jelig 10%-os (v/v) sósav oldattal (3.2.) és keverjük meg. Ezek az oldatok 100, 200, 300, 400 és 500 ìg cirk óniumt tartalmaznak milliliterenként. Hasonlóképpen készítsünk el egy vakpróba oldatot is, amelybõl kihagyjuk a cirkónium standard oldatot. 5.3.2. Mérjük meg a vakpróba oldat (5.3.1.) abszorbanciáját, és a kapott értéket a kalibrációs görbe nulla cirkónium koncentrációjaként használjuk. Mérjük meg mindegyik cirkónium kalibráló standard oldat (5.3.1.) abszorbanciáját. Rajzoljuk meg a kalibrációs görbét, ábrázoljuk az abszorbancia értékeket a cirkónium-koncentráció függvényében. 5.4. Meghatározás Mérjük meg a mintaoldat (5.1.4.) abszorbanciáját. A kalibrációs görbérõl olvassuk le a mintaoldatra kapott abszorbanciához tartozó cirkónium koncentrációt. 6. Számítás Számítsuk ki a minta cirkónium tartalmát tömegszázalékban (% m/m) a következõ képlet használatával: m c (m/m) cirkónium% × = , ahol: m = a vizsgálathoz kivett minta (5.1.1.) tömege grammban; és c = a mintaoldatban (5.1.) lévõ cirkónium-koncentráció mikrogramm/milliliterben, a kalibrációs görbealapján. 7. Megismételhetõség 1 3,00% (m/m) cirkónium-tartalom esetén azonos mintán, párhuzamos végzett két mennyiségi meghatározása közötti különbség értéke nem haladhatja meg a 0,10%-ot (m/m). 8. Megjegyzés A atomabszorpciós lángspektrometria mellett megengedett az induktív kapcsolású plazma–emissziós optikai spektrometria használata. C. ALUMÍNIUM MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer nem-aeroszol izzadásgátlókban található alumínium-cirkónium-kloridhidroxid komplexekben lévõ lévõ alumínium meghatározására alkalmas legfeljebb 12% (m/m) alumínium-koncentrációig. 2. Alapelv Az alumíniumot savas körülmények között kivonjuk a termékbõl, és atomabszorpciós lángspektrometriával határozzuk meg. 3. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 3.1. Koncentrált sósav (d20 = 1,18 g/ml) ISO 5725 szabvány szerint. 3.2. 1%-os (v/v) sósav oldat: adjunk 10 ml koncentrált sósavat (3.1.) 500 ml vízhez egy fõzõpohárban, folyamatos keverés mellett. Töltsük át ezt az oldatot egy 1-literes mérõlombikba és töltsük fel a jelig vízzel. 3.3. Alumínium mérõ törzsoldat, 1000 ìg/ml-es, 0,5 M-os sal étromsav oldatban („SpectrosoL” vagy ezzel megegyezõ) 3.4. Kálium-klorid reagens: oldjunk fel 10,0 g kálium-kloridot 250 ml 10%-os (v/v) sósav oldatban (3.2.). 4. Eszközök 4.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés 4.2. Alumínium üregkatódos lámpával felszerelt atomabszorpciós spektrométer. 5. Eljárás 5.1. Mintaelõkészítés A B.5.1.3. pontban elkészített oldatot használjuk az alumíniumtartalom meghatározására. 5.1.1. Pipettázzunk 5,00 ml mintaoldatot (5.1.3.) és 10,00 ml kálium-klorid reagenst (3.4.) egy 100 ml-es mérõlombikba. Töltsük fel jelig 1%-os (v/v) sósav oldattal (3.2.), és keverjük meg. 5.2. Feltételek az atomabszorpciós spektrometriához Láng: nitrogénoxid-acetilén Hullámhossz: 309,3 nm Háttér korrekció: nincs Fûtési körülmények: dús; a legnagyobb abszorbancia biztosításához szükség lesz a lángmagasság és a fûtési körülmények optimalizálására. 5.3. Kalibrálás 5.3.1. Egy 100 ml-es mérõlombi sorozatba pipettázzunk be 1,00; 2,00; 3,00; 4,00 és 5,00 ml alumínium mérõ törzsoldatot (3.3.). Mindegyik mérõlombikba pipettázzunk be 10,00 ml kálium-klorid reagenst, (3.4.) és töltsük fel mindegyik lombikot a jelig 1%-os (v/v) sósav oldattal (3.2.) és keverjük meg. Ezek az oldatok 10, 20, 30, 40 és 50 ìg alum íniumot tartalmaznak milliliterenként. Hasonlóképpen készítsünk el egy vakpróba oldatot is, amelybõl kihagyjuk az alumínium mérõoldatot. 5.3.2. Mérjük meg a vakoldat (5.3.1.) abszorbanciáját, és a kapott értéket a kalibrációs görbe nulla alumínium koncentrációjaként használjuk. Mérjük meg mindegyik alumínium kalibráló mérõoldat abszorbanciáját. Rajzoljuk meg a kalibrációs görbét az abszorbancia értékeknek az alumínium-koncentráció függvényében való ábrázolásával. 5.4. Meghatározás Mérjük meg a mintaoldat (5.1.1.) abszorbanciáját. A kalibrációs görbérõl olvassuk le a mintaoldatra kapott abszorbanciához tartozó alumínium koncentrációt. 6. Számítás Számítsuk ki a minta alumínium tartalmát tömegszázalékban (%m/m) a következõ képlet segítségével: m c (m/m) alumínium% × = , ahol: m = a vizsgálati minta (B.5.1.1.) tömege grammban; és c = a mintaoldatban (5.1.1.) lévõ alumínium-koncentráció mikrogramm/ milliliterben, a kalibrációs görbe alapján. 7. Megismételhetõség1 3,5% (m/m) alumínium-tartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás eredménye közötti eltérés értéke nem haladhatja meg a 0,10%-ot (m/m). 8. Megjegyzés Az atomabszorpciós lángspektrometria mellett megengedett az induktív kapcsolású plazma - emissziós optikai spektrometria használata. D. KLÓR MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a nem-aeroszol izzadásgátlókban lévõ alumínium-cirkónium-kloridhidroxid komplexekben klorid ionok formájában jelenlévõ klór meghatározására alkalmas. 2. Alalpelv A termékben lévõ klorid iont potenciometrikus titrálással határozzuk meg ezüst-nitrát mérõoldatra vonatkoztatva. 3. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie. 3.1. Koncentrált salétromsav (d20 = 1,42 g/ml) 3.2. 5%-os (v/v) salétromsav oldat: adjunk 25 ml koncentrált salétromsavat (3.1.) 250 ml vízhez egy fõzõpohárban, folyamatos keverés mellett. Töltsük át ezt az oldatot egy 500 ml-es mérõlombikba és töltsük fel a jelig vízzel. 3.3. Aceton 3.4. 0,1 M-os ezüst-nitrát oldat („AnalaR” vagy ezzel egyenértékû) 4. Eszközök 4.1. Szokásos laboratóriumi felszerelések 4.2. Mágneses keverõvel ellátott fõzõlap 4.3 Ezüst elektród 4.4. Kalomel referencia elektród 4.5. Potenciometrikus titrálásra alkalmas pH/milivolt mérõ 5. Eljárás 5.1 Mintaelõkészítés 5.1.1. Mérjünk be pontosan kb. 1,0 g-ot (m gramm) a termék homogén mintájából egy 250 ml-es fõzõpohárba. Adjunk hozzá 80 ml vizet és 20 ml 5%-os (v/v) salétromsav (3.2.) oldatot. 5.1.2. Tegyük a fõzõpoharat a mágneses keverõvel ellátott fõzõlapra (4.2.). Indítsuk el a keverést, és melegítsük forrásig. A gyors kiszáradás elkerülése érdekében tegyünk egy óraüveget a fõzõpohár tetejére. Forraljuk öt percen keresztül, aztán vegyük le a fõzõpoharat a fõzõlapról és hûtsük le szobahõmérsékletûre. ISO 5725 szabvány szerint. 5.1.3. Adjunk hozzá 10 ml acetont (3.3.), merítsük az elektródokat az oldat felszíne alá, és indítsuk meg a keverést. Titráljuk potenciometriásan 0,1 M-os ezüst-nitráttal (3.4.), és rajzoljuk fel a differenciálgörbét a végpont („V” ml) meghatározásához. 6. Számítás Számítsuk ki a minta klór tartalmát tömegszázalékban (%m/m) a következõ képlet segítségével: m V 0,3545 (m/m) % klór × = , ahol: m = a vizsgálati minta (5.1.1.) tömege grammban; és V = a titrálás végpontjában a 0,1 M-os ezüst-nitrát térfogata milliliterben (5.1.3.) 7. Megismételhetõség1 4% (m/m) klór-tartalom esetén azonos mintán, párhuzamos végzett két mennyiségi meghatározás közötti eltérés értéke nem haladhatja meg a 0,10%-ot (m/m). E. AZ ALUMÍNIUM ATOMOK CIRKÓNIUM ATOMOKHOZ ÉS AZ ALUMÍNIUM ÉS CIRKÓNIUM ATOMOK KLÓRATOMOKHOZ VISZONYÍTOTT ARÁNYÁNAK SZÁMÍTÁSA 1. Az alumínium atomok cirkónium atomokhoz viszonyított arányának számítása Az Al : Zr arányt a következõ képlettel számítjuk ki: 26,98 (m/m) % Zr 91,22 (m/m) % Al arány Zr : Al × × = 2. Az alumínium és cirkónium atomok klóratomokhoz viszonyított arányának számítása Az (Al + Zr) : Cl arányt a következõ képlettel számítjuk ki: 35,45 (m/m) Cl% 91,22 (m/m) Zr% 26,98 (m/m) Al% arány Cl : Zr) (Al + = + VI. HEXAMIDIN, DIBRÓM-HEXAMIDIN, DIBRÓM-PROPAMIDIN ÉS KLÓR-HEXIDIN AZONOSÍTÁSA ÉS MEGHATÁROZÁSA 1. Cél és alkalmazási terület Ez a módszer a következõ vegyületek minõségi és mennyiségi meghatározását írja le: – hexamidin és sói, beleértve az izotianátot és a 4-hidroxi-benzoátot, – dibróm-hexamidin és sói, beleértve az izotianátot, – dibróm-propamidin és sói, beleértve az izotianátot, – klór-hexidin-diacetát, -diglikonát és -dihidro-klorid kozmetikai termékekben. ISO 5725 szabvány szerint. 2. Fogalommeghatározás Az e módszerrel meghatározott hexamidin, dibróm-hexamidin, dibróm-propamidin és klór-hexidin koncentrációkat tömegszázalékban (% m/m) fejezzük ki. 3. Alapelv Az azonosítást és meghatározást nagynyomású, fordított fázisú ionpár-folyadékkromatográfiával (HPLC) határozzuk meg, amit ultraibolya spektrofotometriás detektálás követ. A hexamidint, dibróm-hexamidint, dibróm-propamidint és klór-hexidint a kromatográfiás oszlopon mért retenciós idejük alapján azonosítjuk. 4. Reagensek Minden reagensnek analitikai tisztaságúnak kell lennie és HPLC-hez megfelelõnek. 4.1. Metil-alkohol 4.2. 1-heptánszulfonsav nátriumsója, monohidrát 4.3. Ecetsav (jégecet), (d20 = 1,05 g/ml) 4.4. Nátrium-klorid 4.5. Mozgó fázisok 4.5.1. I. oldószer: 0,005 M-os 1-heptán-szulfonsav nátrium sója monohidrát (4.2.) metilalkoholban (4.1.), pH 3,5 értékre beállítva jégecettel (4.3.). 4.5.2. II. oldószer: 0,005 M-os 1-heptán-szulfonsav nátrium sója monohidrát (4.2.) vízben pH 3,5 értékre beállítva jégecettel (4.3.). Megjegyzés: Ha szükséges a csúcsok alakjának javítása, a mozgó fázist módosítani lehet, és a következõképpen lehet elkészíteni: – I. oldószer: oldjunk fel 5,84 g nátrium-kloridot (4.4.) és 1,1013 g 1-heptánszulfonsav nátriumsó monohidrátot (4.2.) 100 ml vízben. Adjunk hozzá 900 ml metil-alkoholt (4.1.), és a pH-t jégecettel állítsuk be 3,5 értékre. – II. oldószer: oldjunk fel 5,84 g nátrium-kloridot (4.4,) és 1.1013 g 1-heptánszulfonsav nátriumsó monohidrátot (4.2.) 1 liter vízben, és a pH-t jégecettel állítsuk be 3,5 értékre. 4.6. Hexamidin diizotianát [C20H26N4O2 2C2H6O4S] 4.7. Dibróm-hexamidin diizotianát [C20H24Br2N4O2 2C2H6O4S] 4.8. Dibróm-propamidin diizotianát [C17H18Br2N4O2 2C2H6O4S] 4.9. Klór-hexidin diacetát [C22H30Cl2N10 2C2H4O2] 4.10. Referencia oldatok: készítsünk 0,05%-os (m/v) oldatokat a négy tartósítószer (4.6-4.9.) mindegyikébõl az I. oldószer segítségével. 4.11. 3,4,4`-triklór-karbanilid (triklokarbán) 4.12. 4,4`-Diklór-3-(trifluormetil)karbanilid (halokarbán) 5. Eszközök 5.1. Szokásos laboratóriumi felszerelés 5.2. Nagynyomású folyadék-kromatográfia változtatható hullámhosszú ultraibolya detektorral 5.3. Analitikai oszlop: 30 cm hosszú, 4 mm belsõ átmérõjû rozsdamentes acél oszlop ì-Bondapack C 18 10 ìm-es vagy ezzel megegyez õ töltetû. 5.4. Ultrahangos fürdõ 6. Azonosítás 6.1. Mintaelõkészítés Mérjünk be körülbelül 0,5 g mintát egy 10 ml-es mérõlombikba és töltsük fel a jelig az I. oldószerrel (4.5.1.). Tegyük be a mérõlombikot az ultrahangos fürdõbe (5.4.) 10 percre. Szûrjük vagy centrifugáljuk le az oldatot. Gyûjtsük össze a szûrletet vagy a felülúszó részt a kromatografáláshoz. 6.2. Kromatográfia 6.2.1. A mozgó fázis gradiense Idõ (perc) I. oldószer (% v/v) (4.5.1.) II. oldószer (% v/v) (4.5.2.) 6.2.2. Állítsuk be a mozgó fázis (6.2.1.) áramlási sebességét 1,5 ml/min értékre, az oszlop hõmérsékletét pedig 35 C-ra. 6.2.3. Állítsuk a detektor hullámhosszát 264 nm-re 6.2.4. Fecskendezzünk be 10 ìl-t mindegyik referencia oldatb ól (4 .10.), és vegyük fel a kromatogramokat. 6.2.5. Fecskendezzünk be 10 ìl-t a mintaoldatb ól (6.1), és vegyük fel ennek kromatogramját. 6.3. Azonosítsuk, hogy hexamidin, dibróm-hexamidin, dibróm-propamidin vagy klór-hexidin ott van-e úgy, hogy a 6.2.5. pontban rögzített csúcs(ok) retenciós idejét(idõit) hasonlítsuk össze a 6.2.4. pontban rögzített referencia oldatokéval. 7. Mennyiségi meghatározás 7.1. Standard oldatok elkészítése. Belsõ standard oldatként egy olyan tartósítószert (4.6-4.9.) használjuk, amely nincs a mintában. Ha ez nem lehetséges, triklókarbán (4.11.) vagy halokarbán (4.12.) használható. 7.1.1. A 6.3. pontban azonosított tartósítószer 0,05%-os (m/v) törzsoldata az I. oldószerben (4.5.1.). 7.1.2. A belsõ standardként választott tartósítószer 0,05%-os (m/v) törzsoldata az I. oldószerben (4.5.1.). 7.1.3. Mindegyik azonosított tartósítószerhez készítsünk négy standard oldatot úgy, hogy egy 10 ml-es mérõlombik sorozatba betöltünk az alábbi táblázatban megadott mennyiségû törzsoldatot az azonosított tartósítószerbõl (7.1.1.) és megfelelõ mennyiségû törzsoldatot a belsõ standardból (7.1.2.). Töltsük fel a lombikokat a jelig az I. oldószerrel (4.5.1.), és keverjük meg õket. Belsõ standard törzsoldat Azonosított tartósítószer törzsoldata Standard oldat hozzáadott ml (7.1.2.) hozzáadott ml (7.1.1.) ìg/ml * I II III IV 1.0 1.0 1.0 1.0 0.5 1.0 1.5 2.0 * Ezek az értékek példaként szerepelnek, és azonosított tartósítószerek olyan standard oldatokban lévõ koncentrációinak felelnek meg, amelyek pontosan 0,05% azonosított tartósítószer tartalmazó standard törzsoldatból készülnek. 7.2. Mintaelõkészítés 7.2.1. Mérjünk be nagy pontossággal kb. 0,5 g (p gramm) mintát egy 10 ml-es mérõlombikba, adjunk hozzá 1,0 ml-t a belsõ standard oldatból (7.1.2.) és 6 ml oldószert (4.5.1.), majd keverjük össze. 7.2.2. Tegyük be a lombikot az ultrahangos fürdõbe (5.4.) 10 percre. Töltsük fel a jelig az I. oldószerrel és keverjük meg. Centrifugáljuk le vagy szûrjük át egy hajtogatott szûrõpapíron. Gyûjtsük össze a szûrletet vagy a felülúszó részt (amit a konkrét eset határoz meg) a kromatografáláshoz. 7.3. Kromatográfia 7.3.1. Állítsuk be a mozgó fázis gradiensét, áramlási sebességét, az oszlop hõmérsékletét és a detektor hullámhosszát a HPLC készüléken (5.2.) olyan értékekre, mint amilyenekre az azonosítás szakaszában (6.2.1-6.2.3.) szükség volt. 7.3.2. Fecskendezzünk 10 ìl mintaoldatot (7 .2.2.), és mérjük meg a csúcsterületeket. Ismételjük meg ezt a folyamatot további 10 ìl-es mintaoldat r észletekkel addig, amíg ellentmondásmentes eredményeket kapunk. Számítsuk ki az elemezni kívánt vegyület csúcsának területe és a belsõ standard csúcsának területe közötti arányát. 7.4. Kalibrálás 7.4.1. Fecskendezzünk be minden standard oldatból (7.1.3) 10 ìl-t és mérjük meg a csúcsterületeket. 7.4.2. Számítsuk ki minden standard oldatra (7.1.3.) a hexamidin, dibróm-hexamidin, dibrómpropamidin vagy klór-hexidin csúcsok területének és a belsõ standard csúcs területének arányát. Vigyük fel a kalibrációs görbe ordinátájára ezeket az arányokat, míg a belsõ standard oldatokban lévõ azonosított tartósítószerek megfelelõ koncentrációit, mikrogramm/milliliter értékben, az abszcisszára. 7.4.3. A kalibrációs görbérõl (7.4.2.) olvassuk le az azonosított tartósítószer 7.3.2. pontban számított csúcsterület aránynak megfelelõ koncentrációját. 8. Számítás Számítsuk ki a minta hexamidin, dibróm-hexamidin, dibróm-propamidin vagy klórhexidin tartalmát tömegszázalékban a következõ képlet segítségével: MW MW p c (m/m) % × × = , ahol: p = a vizsgálati minta (7.2.1.) tömege grammban; c = a mintaoldatban lévõ tartósítószer koncentráció mikrogramm/milliliterben, a kalibrációs görbe alapján; MW1 = a jelen lévõ tartósítószer alapformájának molekulasúlya; és MW2 = a megfelelõ só (lásd a 10. pont) molekulasúlya. 9. Megismételhetõség1 0,1% (m/m) hexamidin-, dibróm-hexamidin-, dibróm-propamidin- vagy klór-hexidintartalom esetén azonos mintán, párhuzamosan végzett két mennyiségi meghatározás közötti különbség értéke nem haladhatja meg a 0,005%-ot. ISO 5725 szabvány szerint. 10. A képlet szerinti súlyok táblázata Hexamidin C20H26N4O2 354,45 Hexamidin diizotianát C20H26N4O2 2C2H6O4S 606,72 Hexamidin di-p-hidroxi-benzoát C20H26N4O2 2C2H6O4 630,71 Dibróm-hexamidin C20H24Br2N4O2 512,24 Dibróm-hexamidin diizotianát C20H24Br2N4O2 2C2H6O4S 764,51 Dibróm-propamidin C17H18Br2N4O2 470,18 Dibróm-propamidin diizotianát C17H18Br2N4 O2 2C2H6O4S 722,43 Klór-hexidin C22H30Cl2N10 505,45 Klór-hexidin diacetát C22H30Cl2N10 2C2H4O2 625,56 Klór-hexidin diglukonát C22H30Cl2N10 2C6H12O2 897,76 Klór-hexidin dihidroklorid C22H30Cl2N10 2HCl 578,37 (A 93/73/EGK irányelv alapján)

Source: https://magyarkozlony.hu/hivatalos-lapok/53f83b22112ddee3ba432e293c5a4a07160629ad/dokumentumok/1147f0c2e2ee62fd0d72848b53190fba47bc78de/letoltes