Publication: Magyar Közlöny
Issue: MK-2011-37 (Year: 2011, Number: 37)
Era: contemporary
Section: „33. melléklet a 152/2009. (XI. 12.) FVM rendelethez
Paragraph Index: 1014

7. A vizsgálat menete 7.1. A zsírsav-metilészterek elõállítása. Kb. 400 mg olaj- vagy zsírmintából az MSZ ISO 5509 szerint zsírsavmetilészter oldatot állítunk elõ, amely kb. 50 mg/ml zsírsavmetilésztert tartalmaz hexánban oldva. 7.2. Vékonyréteg-kromatográfia. 7.2.1. A rétegek elõállítása. 60 g szilikagélt (4.5.) és 120 ml ezüst-nitrát oldatot (4.7.) egy 500 ml-es gömblombikba mérünk és homogén szuszpenzió elõállítása céljából egy percig rázzuk. A szuszpenziót a szokásos módon kb. 0,5 mm rétegvastagságban a lemezre felvisszük. A mennyiség 5 db 200 mm × 200 mm-es lemez befedésére elegendõ. A lemezeket levegõn megszárítjuk (a legjobb kb. 30 percig sötétben végezni); utána kb. 2 óra 30 percig 100 °C-on szárítószekrényben szárítjuk, aktiváljuk. Az aktiválás után a lemezeket amilyen gyorsan csak lehet, használjuk fel, ha szükséges sötétben kell azokat tárolni és felhasználás elõtt újból aktiválni. Megjegyzés: 110 °C-os egyórás aktiválás elegendõ, amennyiben a lemezek színe eközben nem sötétedik meg. Amennyiben az oldalhatást el akarjuk kerülni, úgy minden lemezre az oldalaktól és a felsõ széltõl 10 mm távolságra, a rétegre egy vonalat karcoljunk, mielõtt a lemezt használnánk. 7.2.2. A metilészter felvitele. Felvivõeszközzel (5.2.5.) a mintából elõállított metilészter oldatból (7.1.) 50 l-t felviszünk a rétegre kb. 50 mm-es vonalban, legalább 40 mm-re az oldalaktól és 10 mm-re a lemez alsó szélétõl. Ezután felviszünk 100 l-t a mintából elõállított metilészter oldatot (7.1.) és az erukasav-metilészter oldatot (4.8.) 1:1 arányú keverékébõl. A lemez fényérzékenysége miatt az oldatok felvitelénél különös figyelemmel kell eljárni. A metilészter felvitele után a lemez alsó szélét dietil-éterbe meríthetjük addig, amíg az éterfront kb. 5 mm-rel a startvonal fölé emelkedik. Ezáltal a metilészter egy szûk csíkban koncentrálódik. Megjegyzés: felvihetünk még 50 l erukasav-metilészteroldatot (4.8.) a lemezre abból a célból, hogy kifejlesztés után az erukasav-metilésztert tartalmazó zónában az azonosítást megkönnyítsük (lásd: az ábrát). 7.2.3. A kromatogram kifejlesztése A megfelelõ futtatószert (4.10.) a futtatókádba öntjük úgy, hogy magassága 5 mm legyen, és a fedõt rátéve egy fagyasztószekrénybe tesszük (5.2.1.), amelynek hõmérséklete mínusz 25 °C, vagy ehhez közel álló hõfokú. Bizonyos esetben célszerû lehet a futtatókád kibélelése, pl. szûrõpapírral (kb. két óra múlva alkalmas a kromatogram kifejlesztésére). A lemezt óvatosan a futtatókádba állítjuk és hagyjuk a folyadékot kb. a lemez magasságának feléig, kétharmadáig felfutni. A lemez kivétele után az oldószert a lemezrõl gyenge nitrogénárammal elpárologtatjuk. Ezután a lemezt újra a futtatókádba tesszük, és hagyjuk a folyadékot a lemez felsõ széléig felfutni. Végül a lemezt újra kivesszük, és a fent leírtak szerint nitrogénárammal megszárítjuk, majd 2,7-diklór-fluoreszcein oldattal (4.11.) lepermetezzük. UV-fényben lehet meghatározni a minta erukasav-metilészter zónáját, összehasonlítva az erukasav-metilésztert tartalmazó minta intenzívebb zónájával (lásd: az ábrát). 7.2.4. A metilészter-frakció elkülönítése. A minta erukasavmetilésztert tartalmazó zónáját a lemezrõl teljes mennyiségben lekaparjuk,és egy 50 ml-es lombikba tesszük. Az erukasav-metilészter feletti és alatti szilikagélt, amely az összes többi zsírsavmetilészter frakciót tartalmazza, a lemezrõl hasonlóan lekaparjuk és egy másik 50 ml-es lombikba tesszük. Mindegyik lombikba 1,0 ml tetrakozánsav-metilésztert tartalmazó standard oldatot (4.9.) és 10 ml dietil-étert mérünk (4.3.). Összekeverjük és mindkét lombik tartalmát egyenként egy-egy kb. 1 g szilikagélt (4.6.) tartalmazó oszlopra, vagy üveg szûrõtölcsérre (5.2.4.) visszük. Az észtert háromszor-négyszer 10 ml dietil-éterrel eluáljuk. Az eluátumokat kis lombikba gyûjtjük, gyenge nitrogénáramban az oldószer nagy részét óvatosan, kis részletekben elpárologtatjuk és azután kúpos végû üvegcsékbe átvisszük. A maradék oldószert nitrogénáramban elpárologtatjuk, a metil-észter az üvegcse aljában koncentrálódik. Végül a metilésztert kb. 25–50 l hexánban feloldjuk. (4.4.) 7.3. Gázkromatográfia 7.3.1. Az MSZ ISO 5508 szerint leírt módszer alapján 1–2 l metilészteroldatot befecskendezünk.

Source: https://magyarkozlony.hu/hivatalos-lapok/544d2741340785ae3ac7214d6f8198a531a4d2e3/dokumentumok/57403ed108a7e6980bb4715779d47cc25fda68a4/letoltes