Perkembangan kanon Perjanjian Lama
tradisi Masoretik saat ini, kendati St. Hieronimus menganggapnya terdapat dalam Yesaya 11:1. Para penulis Perjanjian Baru, ketika mengutip kitab-kitab suci Yahudi, atau ketika menyebut Yesus melakukannya, dengan bebas menggunakan terjemahan Yunani, sehingga mengisyaratkan bahwa Yesus, para Rasul-Nya, dan pengikut-pengikut mereka menganggapnya dapat diandalkan.
Dalam Gereja perdana, anggapan bahwa Septuaginta (LXX) diterjemahkan oleh orang-orang Yahudi sebelum zaman Kristus, dan bahwa di beberapa tempat tertentu Septuaginta lebih memberikan suatu penafsiran kristologis daripada teks-teks Ibrani abad ke-2, digunakan sebagai bukti bahwa orang-orang Yahudi telah mengubah teks Ibrani dengan suatu cara tertentu sehingga
membuatnya kurang kristologis. Sebagai contoh, tulisan St. Ireneus tentang: Septuaginta dengan jelas menuliskan bahwa seorang "perawan" () yang akan mengandung. Sedangkan teks Ibraninya, menurut Ireneus, pada waktu itu ditafsirkan oleh Theodotion dan Akwila (keduanya adalah proselit dari agama Yahudi) sebagai seorang "perempuan muda" yang akan mengandung. Menurut
Ireneus, kaum Ebionit menggunakan hal ini untuk mengklaim bahwa Yusuf adalah ayah biologis Yesus. Dari sudut pandangnya hal tersebut murni ajaran sesat, difasilitasi oleh perubahan-perubahan anti Kristen (di kemudian hari) terhadap kitab suci dalam bahasa Ibrani, sebagaimana terlihat pada bukti yang termuat dalam Septuaginta yang lebih dahulu ada, sebelum adanya Kekristenan.
Ketika Hieronimus melakukan revisi terjemahan-terjemahan Latin Kuno (Vetus Latina) dari Septuaginta, ia membandingkan Septuaginta dengan teks-teks Ibrani yang tersedia belakangan. Ia tidak mengikuti tradisi gereja dan menerjemahkan sebagian besar Perjanjian Lama Vulgata dari teks Ibrani, bukannya Yunani. Pilihannya itu dikritik oleh Agustinus, yang hidup sezaman
dengannya; banyak kritikan lain berasal dari mereka yang menganggap Hieronimus sebagai seorang pemalsu. Di satu sisi ia menganggap teks-teks Ibrani lebih unggul untuk mengoreksi Septuaginta baik dengan alasan teologis maupun filologis; di sisi lain, dalam konteks tuduhan bidah terhadapnya, Hieronimus mengakui teks Septuaginta juga.
Gereja Ortodoks Timur masih lebih suka menggunakan LXX sebagai dasar penerjemahan Perjanjian Lama ke dalam bahasa-bahasa lain. Selain itu, Ortodoks Timur juga menggunakan LXX tanpa diterjemahkan sama sekali pada Gereja dimana bahasa liturgisnya adalah Yunani, misalnya dalam Gereja Ortodoks Konstantinopel, Gereja Yunani, dan Gereja Siprus.
Terjemahan-terjemahan kritis dari Perjanjian Lama, jika Teks Masoret digunakan sebagai dasar penerjemahan, tetap menggunakan Septuaginta- serta versi-versi lainnya- sebagai rujukan untuk merekonstruksi makna dari teks Ibrani yang tidak jelas, korup, atau membingungkan. Sebagai contoh, Kata Pengantar Alkitab Yerusalem Baru menuliskan, "Hanya jika [Teks Masoret]
ini menyajikan kesulitan-kesulitan tak teratasi tanpa memiliki perbaikan atau versi lainnya, seperti..., LXX digunakan." Kata Pengantar Penerjemah dari New International Version menuliskan: "Para penerjemah menelusuri versi-versi awal yang lebih penting (termasuk) Septuaginta... Bacaan-bacaan dari versi-versi ini adakalanya diikuti jika MT tampak meragukan..."
Referensi paling awal seputar kanon Kristen kemungkinan adalah Daftar Bryennios yang ditemukan oleh Philotheos Bryennios dalam Kodeks Hierosolymitanus di perpustakaan biara Gereja Makam Kudus pada tahun 1873. Daftar tersebut ditulis dalam bahasa Yunani Koine (dengan transkripsi dari bahasa Ibrani dan/atau Aramaik), dan pada tahun 1950 Jean-Paul Audet menyatakan tarikhnya abad ke-1 atau ke-2. Audet mendaftar 27 kitab darinya:
"Yesus Nave" adalah nama lama dari Kitab Yosua. "2 kitab Esdras" dapat berarti 1 Esdras dan Ezra-Nehemia sebagaimana dalam Septuaginta, atau Ezra dan Nehemia sebagaimana dalam Vulgata. Menurut Albert Sundberg, angka 27 merupakan jumlah kitab yang tidak lazim dan tidak diketahui dalam daftar-daftar kitab Yahudi; dan R.T. Beckwith menegaskan
bahwa daftar Bryennios "mencampur para Nabi dan Hagiografa secara bersama-sama tanpa pandang bulu, maka tentunya ini berasal dari penulis Kristen, bukan Yahudi, dan karena penggunaan Aramaik terus berlanjut selama berabad-abad dalam gereja Palestina, tidak ada alasan untuk membuat tarikh yang sedemikian awal (abad ke-1 atau ke-2 M)."
Marsion dari Sinope merupakan seorang pemimpin Kristen pertama dalam catatan sejarah (meski kemudian dipandang sesat) yang mengusulkan dan mengutarakan suatu kanon Kristen yang unik (140 M). Ia secara eksplisit menolak Perjanjian Lama dan mengajukan Perjanjian Baru versinya agar menjadi kanon Kristen. Ireneus menuliskan tentang dirinya:
Everett Ferguson, dalam "The Canon Debate" bab 18, membuat catatan: "[Wolfram] Kinzim mengemukakan bahwa Marsion adalah orang yang biasa menyebut Alkitabnya "testamentum" [bahasa Latin untuk "testament", perjanjian]". Dalam bab yang sama, Ferguson juga mengatakan bahwa Tertullian mengkritik Marsion mengenai penamaan kitab-kitab dalam daftarnya. Menurut "Catholic Encyclopedia", kaum Marsionit "kemungkinan adalah musuh paling berbahaya yang pernah dikenal Kekristenan".
Para akademisi lainnya mengemukakan bahwa Melito dari Sardis yang pada mulanya menciptakan istilah "Perjanjian Lama", yang mana dikaitkan dengan Supersesionisme.
Daftar kitab-kitab Perjanjian Lama pertama yang dihimpun oleh suatu sumber Kekristenan dicatat oleh Eusebius, seorang sejarawan abad ke-4. Eusebius mendeskripsikan koleksi dari seorang uskup pada abad ke-2, Melito dari Sardis. Daftarnya Melito, bertarikh 170, hasil dari perjalanan ke Tanah Suci (kemungkinan perpustakaan terkenal di Kaisarea Maritima) untuk menentukan baik urutan maupun
penomoran kitab-kitab dalam Alkitab Ibrani, tampaknya bukan untuk mengikuti urutan kitab-kitab yang disajikan dalam Septuaginta. Daftar Melito, sebagaimana dikuti oleh Eusebius, adalah:
Menurut Archibald Alexander, daftar Melito dianggap oleh banyak kalangan memasukkan Kitab Kebijaksanaan, yang mana merupakan bagian dari Deuterokanon, tetapi diperdebatkan oleh kalangan lainnya. Kitab Ester tidak tampak dalam daftar tersebut.
Eusebius juga mencatat 22 kitab kanonik orang-orang Ibrani yang diberikan oleh Origen dari Aleksandria:
Daftarnya Origen tidak termasuk Dua Belas Nabi Kecil, tampaknya bukan suatu kesengajaan; tetapi memasukkan Surat Nabi Yeremia (mungkin merujuk Barukh sebagai lampiran Yeremia) dan Makabe, yang mana terdapat perdebatan terkait apakah ia menganggap Makabe kanonik atau tidak.
Pada tahun 331, Kaisar Konstantinus I menugaskan Eusebius untuk mengirimkan 50 Alkitab untuk Gereja Konstantinopel. Athanasius ("Apol. Const. 4") mencatat para ahli kitab dari Aleksandria sedang mempersiapkan Alkitab-Alkitab untuk Kaisar Konstans pada sekitar tahun 340. Hanya sedikit hal lainnya yang diketahui, kendati ada banyak spekulasi seputar hal tersebut. Sebagai contoh, ada
dugaan bahwa hal ini mungkin mendorong adanya pendaftaran kanon, dan bahwa Kodeks Vaticanus dan Kodeks Sinaiticus merupakan beberapa contoh dari Alkitab-Alkitab ini. Kodeks-kodeks tersebut nyaris merupakan versi lengkap dari Septuaginta; Vaticanus hanya kekurangan 1-3 Makabe dan Sinaiticus tidak mencakup 2-3 Makabe, 1 Esdras, Barukh, dan Surat Nabi Yeremia.
Bersama dengan Peshitta dan Kodeks Alexandrinus, Kodek Vaticanus dan Sinaiticus merupakan Alkitab-Alkitab Kristen paling awal yang masih ada hingga sekarang. Tidak ditemukan bukti dalam kanon-kanon Konsili Nicea Pertama mengenai adanya suatu penetapan kanon Alkitab; namun Hieronimus (347-420), dalam "Prologue to Judith", mengklaim bahwa Kitab Yudit "ditetapkan oleh Konsili Nicea untuk dimasukkan dalam keseluruhan Kitab Suci".