Katherine dari Aragon
Tahun 1520, keponakan Katherine Karl V, Kaisar Romawi Suci, melakukan kunjungan kenegaraan ke Inggris, dan ia mendesak Henry memasuki aliansi dengan Karl daripada dengan Perancis. Segera setelah kepergiannya, ia menemani Henry ke Perancis untuk merayakan kunjungan yang diselenggarakan oleh François I, yang disebut Camp du Drap d'Or. Dalam waktu dua tahun, perang diumumkan melawan Perancis dan Kaisar sekali
lagi diterima di Inggris. Saat itu juga dilakukan perencanaan untuk mempertunangkan Karl dengan putri Katherine, Mary.
Tahun 1525, Henry VIII tergila-gila oleh Anne Boleyn, seorang dayang Permaisuri Katherine yang berusia sembilan tahun lebih muda dari Henry. Henry mulai mengejarnya; Katherine pada saat itu sudah tidak dapat memberinya keturunan lagi. Henry mulai percaya bahwa pernikahannya dikutuk dan mencari konfirmasi dari Alkitab, yang ditafsirkan bahwa jika seorang pria menikahi istri saudaranya,
maka pasangan tersebut tidak akan memiliki keturunan. Meskipun pernikahan Katherine dengan Arthur belum disempurnakan (dan Katherine bersumpah mati bahwa ia masih perawan ketika menikah dengan Henry), penafsiran Henry atas Alkitab mengartikan bahwa pernikahan mereka adalah dosa di mata Tuhan. Masalah ini menjadi topik yang panas di dalam upaya Henry untuk mendapat izin dari Paus untuk membatalan pernikahan dengan Katherine.
Ada kemungkinan bahwa gagasan pembatalan itu telah diajukan oleh Henry lebih awal, dan sangat mungkin bahwa hal itu didorong oleh keinginannya untuk memiliki seorang putra. Sebelum ayahanda Henry dimahkotai, Inggris dilanda oleh perang sipil antar keluarga bangsawan dalam upaya perebutan takhta, dan Henry mungkin ingin menghindari ketidakpastian yang sama atas suksesi.
Segera menjadi salah satu objek yang menyerap keinginan Henry untuk mendukung pembatalan itu. Katherine menolak ketika disarankan kepadanya untuk diam-diam pensiun ke sebuah biara, ia menyatakan, "Tuhan tidak pernah memanggil saya ke sebuah biara. Saya adalah istri Raja yang sejati dan sah". Henry mengatur bandingnya ke Tahta Suci, bertindak secara mandiri dari Kardinal Thomas
Wolsey yang tidak dia beritahu rencananya. William Knight, sekretaris Raja dikirim menghadap Paus untuk menuntut pembatalan pernikahan Henry dan Katherine, dengan alasan bahwa pengeluaran bulla Paus Yulius II yang berisikan izin memperbolehkan pernikahan antara Katherine dan Henry di masa lalu diperoleh dengan alasan yang salah.
Paus yang bertakhta pada saat itu, Paus Klemens VII, merupakan tahanan dari keponakan Katherine, Karl V, Kaisar Romawi Suci, setelah jatuhnya Roma pada bulan Mei 1527, Knight memiliki kesulitan mendapatkan akses. Pada akhirnya, utusan Henry harus kembali tanpa hasil. Henry sekarang tidak punya pilihan selain menempatkan masalah besar ini ke tangan Thomas Wolsey, dan Wolsey berupaya sebisanya untuk mengamankan keputusan yang menguntungkan Henry.
Setelah kembali ke Dover dari suatu pertemuan dengan François I, Raja Perancis di Calais, Henry menikahi Anne Boleyn di dalam sebuah upacara rahasia. Beberapa sumber berspekulasi bahwa Anne telah hamil pada saat itu (dan Henry tidak ingin mengambil risiko memiliki anak haram karena lahir sebelum menikah), namun yang lain bersaksi bahwa Anne (yang telah melihat saudarinya Mary Boleyn dijadikan
sebagai gundik raja dan kemudian dicampakkan sewenang-wenang) menolak untuk tidur dengan Henry sampai mereka resmi menikah. Henry membela keabsahan ikatan mereka dengan menunjukkan bahwa Katherine sebelumnya telah menikah. Jika ia dan Arthur telah menyempurnakan pernikahan mereka (istilah untuk pasangan yang telah berhubungan intim), Henry oleh hukum kanon memiliki hak untuk menikah lagi.
Pada tanggal 23 Mei 1533, Cranmer, duduk di pengadilan khusus yang diadakan di Dunstable Priory untuk memutuskan keabsahan pernikahan Henry dengan Katherine, menyatakan bahwa pernikahan tersebut tidak sah meskipun Katherine bersaksi bahwa ia dan Arthur tidak pernah melakukan hubungan badan selama masa pernikahan mereka yang singkat. Di sisi lain, Cranmer menyatakan bahwa pernikahan Henry dan Anne sah lima hari kemudian, pada tanggal 28 Mei 1533.
Sampai akhir hayatnya, Katherine merujuk dirinya sendiri sebagai satu-satunya istri Henry dan Permaisuri Inggris yang sah, dan para pelayannya terus memanggilnya dengan gelar tersebut. Henry menolak status Katherine sebagai permaisuri dan menyebutnya "Putri Wales Janda", mengindikasikan bahwa dia hanya berstatus sebagai janda Pangeran Arthur.
Katherine diasingkan ke kastil The More pada musim dingin tahun 1531/32. Tahun 1535 ia dipindahkan ke Kastil Kimbolton. Di sana ia mengurung dirinya sendiri di dalam sebuah ruangan (yang hanya ditinggalkan untuk menghadiri misa), hanya mengenakan pakaian Silisium Ordo Santo Fransiskus dan puasa terus menerus. Meski sesekali ia diizinkan untuk menerima pengunjung, ia dilarang untuk
melihat putrinya, Mary. Mereka juga dilarang untuk saling berkirim surat, tetapi para pendukung mereka diam-diam mengantarkan surat-surat di antara keduanya. Henry menawarkan baik kepada Katherine dan Mary izin untuk bertemu dan mengunjungi satu sama lain jika mereka mengakui Anne Boleyn sebagai permaisuri. Namun tawaran itu ditolak oleh keduanya.
Pada akhir Desember 1535, ketika ia merasa ajalnya mendekat, Katherine membuat surat wasiat dan menulis kepada keponakannya, Karl V, Kaisar Romawi Suci, yang memintanya untuk melindungi putrinya. Katherine meninggal di Kastil Kimbolton pada tanggal 1536. Keesokan harinya, berita kematiannya sampai di telinga raja. Pada saat itu terdapat rumor bahwa ia telah diracuni diduga oleh Gregory di
Casale. Menurut penulis kronik Edward Hall, Anne Boleyn mengenakan pakaian berwarna kuning untuk berkabung, yang dapat ditafsirkan dengan berbagai cara; Polydore Vergil menafsirkan bahwa ini berarti Anne tidak berkabung. Chapuys melaporkan bahwa Raja Henry yang berpakaian kuning, merayakan berita tersebut dan membuat acara besar untuk dirinya dan anak perempuan Anne, Elizabeth, untuk orang-orang di
istananya. Hal ini dipandang sebagai tindakan yang tidak menyenangkan dan vulgar oleh banyak orang. Teori lain adalah berpakaian kuning adalah untuk menghormati Katherine yang konon warna kuning adalah warna berkabung untuk bangsa Spanyol. Tentu saja di kemudian hari dilaporkan bahwa Henry dan Anne baik secara individu maupun secara pribadi menangisi kematiannya. Pada hari pemakaman Katherine,
Anne Boleyn keguguran seorang putra. Desas-desus kemudian beredar bahwa Katherine telah diracuni oleh Anne atau Henry, atau keduanya, karena Anne mengancam akan membunuh Katherine dan Mary pada beberapa kesempatan. Kabar itu muncul setelah pembalseman jenazah Katherine, diketahui bahwa terdapat warna hitam di jantungnya yang kemungkinan disebabkan oleh racun. Ahli medis modern sepakat bahwa perubahan warna
jantungnya bukan karena racun melainkan disebabkan oleh kanker, penyakit yang tidak dipahami pada saat itu.
Katherine dimakamkan di Katedral Peterborough dengan format upacara yang diadakan sebagaimana untuk memakamkan Putri Wales, bukan untuk seorang permaisuri. Henry tidak menghadiri pemakamannya dan melarang Mary untuk menghadirinya pula. Di kemudian hari, anak perempuan Henry dan Katherine, Mary, naik takhta sebagai Ratu Inggris.