Ferdinand Magellan
斐迪南·麥哲倫為西班牙國王效力進行環航地球冒險時，於1521年3月6日發現關島。但至1565年1月26日米格尔·洛佩斯·德莱加斯皮將軍才主張對關島的主權。1565年至1815年間，關島和北馬里亞納群島為西班牙於菲律賓東方僅有的停泊點，關島為马尼拉邮船的重要中繼站，該郵船營運阿卡普尔科至马尼拉航線。。由於1670年7月23日至1695年7月間間歇性戰爭，以及1671年和1693年颱風侵襲，1688年爆發天花疫情，造成查莫洛人數量由50,000減少到5,000。多恩·馬里亞諾·陶比斯（Don Mariano Tobias）於1771年9月15日就任關島總督後，開始進行農業改革，向原住民提供土地，鼓勵發展，自馬尼拉引進鹿及水牛，自阿卡普爾科引進驢和騾子，建設棉花廠及鹽田。拿破崙戰爭後，許多西班牙西半球殖民地獨立，關島經濟重心由墨西哥轉向菲律賓。1856年爆發天花疫情，造成3,644名關島人死亡，因而允許加羅林人及日本人於馬里亞納群島定居。