Carlos I
兩年後，於1547年，皮埃爾被他的對手，西班牙國王卡洛斯一世派人暗殺，儘管這個暗殺行動是由卡洛斯一世所策劃的，保祿三世還是迅速地做出決定，立刻讓皮埃爾的兒子奧塔維奧·法爾內塞繼任公爵，並期望透過新任公爵夫人，卡洛斯一世的私生女，奧塔維奧的妻子瑪格麗特，確保家族的安全。