意大利战争
在十五年的时间里，由于查理忙于同法国和奥斯曼帝国作战，联盟没有受到任何挑战。奥斯曼-哈布斯堡战争从1526年持续到了1571年。1535年，查理成功征服突尼斯。弗朗索瓦一世为抵抗哈布斯堡王朝，同苏莱曼大帝结盟，形成了法国-奥斯曼帝国联盟。1535年至1538年在法国和神圣罗马帝国间展开的意大利战争由1538年的尼斯和约完结。在这段时间里查理同法国的最后一次战争——1542年至1544年意大利战争没有分出胜负，以克雷皮和约完结。