トルデシリャス条約
スペインは自身の帝国の領土としている地域に集落が建設されたことを見逃さなかった。ブエノスアイレスのスペイン当局は1494年のトルデシリャス条約によりコロニア・ド・サンティシモ・サクラメント地域はスペイン領であると抗議、ポルトガルの撤退を要求した。ポルトガルはトルデシリャス条約がラプラタ川東岸のポルトガル帰属を定めたとして撤退を拒否した。実際にはこの条約はラプラタ川東岸をポルトガル領とは定めておらず、スペインとポルトガルの認識が食い違った理由は国境線の測定の誤りだった。サクラメントは建設から数か月後にスペインに占領されたが、1683年にポルトガルに返還された。スペイン継承戦争中の1704年、スペイン軍は再び攻撃を仕掛けてサクラメントを占領、ユトレヒト条約が締結された後の1716年にようやくポルトガルに返還した。