Enrique Estuardo
Bothwell se divorció de su esposa, tras ser acusado de adulterio con la criada Bessie Crawford, el 7 de mayo de 1567, tres meses después de la muerte del segundo marido de María, Enrique Estuardo, Lord Darnley. Bothwell era uno de los acusados del asesinato de Lord Darnley. William Drury relató a William Cecil, Ministro de Asuntos Exteriores de la Reina Isabel I de Inglaterra, que "la opinión de la gente" era que María se casaría con Bothwell.