藤堂高虎
在豐臣秀吉出兵朝鮮時，佐伯惟定做為大友軍的一員從軍參陣，不料主公大友義統因風聞敵方大軍來襲的消息後自前線逃跑，引起秀吉大怒，文祿2年（1593年），領地被沒收。失去領地的佐伯惟定後來因受到羽柴秀保賞識，將他推薦給筆頭家老藤堂高虎擔任家臣，擔任率領500人的與力，方能維持生計。文祿4年(1595年)，藤堂高虎轉封伊予國宇和島得到7萬石的封地時，佐伯惟定也從高虎處拜領了兩千石的俸祿，與藤堂良勝交替擔任國府城城代。慶長之役時，原本留守板島城，後來渡海參戰。