아라곤 왕국
왕세자인 오빠 후안(1478–1497)이 막시밀리안 1세의 딸인 마르게리타(1480-1530)와 결혼후 6개월만에 사망했으며 장녀인 언니 이사벨 역시 미겔 왕자를 낳다가 1498년에 사망하였다. 언니 이사벨이 낳은 조카 미겔 역시 얼마 지나지 않아 죽어버린다. 이로써, 후아나는 카스티야-레온 연합 왕국과 아라곤 왕국, 나폴리 왕국, 시칠리아 왕국, 멕시코, 페루, 카리브 제도의 상속자가 된다.