чрез високоефективна течна хроматография (HPLC), с откриване чрез ултравиолетова спектрофотометрия при различни дължини на вълните и чрез спектрофлуорометрия.
 4. Реактиви
 Реактивите трябва да са с аналитична чистота. Използваната вода трябва да е дестилирана или да е с еквивалентна степен на чистота. За предпочитане е да се използва микро-филтрирана вода със съпротивление 18,2 M Ω.cm.
 4.1. 96 об. % алкохол
 4.2. Метанол с качество за HPLC (разтворител Б)
 4.3. Оцетна киселина, разредена до 0,5 об % (разтворител А)
 4.4. Мобилни фази: (само като пример)
 Разтворител А (0,5 % оцетна киселина) и разтворител Б (чист метанол) се филтрират през мембрана (порьозност 0,45 μm). При необходимост се дегазират в ултразвукова вана.
 4.5. Референтни стандарти с минимална чистота 99 %: фурфурол, 5-хидроксиметилфурфурол, 5-метилфурфурол, ванилин, сирингалдехид, кониферил алдехид, синапалдехид, галова киселина, елагинова киселина, ванилинова киселина, сирингова киселина и скополетин
 4.6. Референтен разтвор: Стандартните вещества се разтварят в 50 об. % воден разтвор на алкохол. Крайните концентрации в референтния разтвор следва да бъдат от порядъка на:
 фурфурол: 5 mg/l; 5-хидроксиметилфурфурол: 10 mg/l; 5-метилфурфурол: 2 mg/l; ванилин: 5 mg/l; сирингалдехид: 10 mg/l; кониферил алдехид: 5 mg/l; синапалдехид: 5 mg/l; галова киселина: 10 mg/l; елагинова киселина: 10 mg/l; ванилинова киселина: 5 mg/l; сирингова киселина: 5 mg/l; скополетин: 0,5 mg/l.
 5. Апаратура
 Стандартно лабораторно оборудване
 5.1. Високоефективен течен хроматограф, който може да функционира в бинарно градиентен режим и е оборудван със:
 5.1.1.
 спектрофотометричен детектор, с който може да се извършват измервания при дължини на вълните от 260 до 340 nm. За предпочитане е обаче да се използва детектор за множество дължини на вълните, например с диодна матрица, за да се потвърди чистотата на пиковете;
 5.1.2.
 спектрофлуориметричен детектор — дължина на вълната за възбуждане: 354 nm, дължина на вълната за емитиране: 446 nm (за определяне на следи от скополетин; който обаче може да се открива и чрез спектрофотометрия при 313 nm);
 5.1.3.
 устройство за инжектиране, с което може да се въвеждат проби за изпитване от 10 или 20 μl (например);
 5.1.4.
 колона за високоефективна течна хроматография от тип RP C18, максимален размер на частиците 5 μm.
 5.2. Спринцовки за HPLC.
 5.3. Устройство за мембранна филтрация на малки количества.
 5.4. Изчислителен интегратор или записващо устройство, чиято ефективност на работа е съвместима с цялата апаратура, и по-специално трябва да има няколко канала за получаване на данни.
 6. Процедура
 6.1. Подготовка на разтвора за инжектиране
 Референтният разтвор и спиртната напитка се филтрират при необходимост през мембрана с максимален диаметър на порите 0,45 μm.
 6.2. Условия за хроматографията: Анализът се извършва при температура на околната среда и с помощта на оборудването, описано в 5.1, а подвижните фази (4.4) се използват с дебит от около 0,6 ml в минута съгласно следния градиент (само като пример):
 Време: 0 минути 50 минути 70 минути 90 минути
 Разтворител А (вода-киселина): 100 % 60 % 100 % 100 %
 Разтворител Б (метанол): 0 % 40 % 0 % 0 %
 Следва да се отбележи, че в някои случаи този градиент следва да бъде променен, за да се избегне коелуиране.
 6.3. Определяне
 6.3.1. Референтните стандарти се инжектират поотделно, а след