подходящ съд. Смесва се с 90,0 ml разтвор на перхлорна киселина, хомогенизира се в продължение на две минути със смесител, както е описано в точка 5, буква б), и след това се филтрира.
 Така полученият екстракт може да се съхранява най-малко 7 дни при температура между приблизително 2 °C и 6 °C;
 б)
 парна дестилация:
 50,0 ml от получения в съответствие с буква а) екстракт се поставя в апарат за парна дестилация, както е описано в точка 5, буква д). За по-късна проверка на алкализирането на екстракта се добавят няколко капки разтвор на фенолфталеин. След добавяне на няколко капки силиконов антиразпенващ агент, към екстракта се добавят 6,5 ml разтвор на натриев хидроксид и парната дестилация започва незабавно.
 Парната дестилация се регулира така, че около 100 ml дестилат се прави за 10 минути. Дестилационната отвеждаща епруветка е потопена в приемник със 100 ml разтвор на борна киселина, към който се добавят от 3 до 5 капки от индикаторния разтвор. Точно след 10 минути дестилацията е завършена. Изходящата дестилационна тръба се отстранява от приемника и се измива с вода. Летливите бази, съдържащи се в разтвора в приемника, се отчитат чрез титруване със стандартен разтвор на солна киселина.
 Стойността на pH на крайната точка трябва да бъде 5,0 ± 0,1;
 в)
 титруване:
 изискват се дублиращи анализи. Прилаганият метод е правилен, ако разликата между дубликатите е не по-голяма от 2 mg/100 g;
 г)
 празна проба:
 извършва се изследване с празна проба, както е описано в буква б). Вместо екстракта се използва 50,0 ml разтвор на перхлорна киселина.
 7. Изчисляване на концентрацията на TVB-N
 Чрез титруване на разтвора в приемника със стандартен разтвор на солна киселина концентрацията на TVB-N се изчислява, като се използва следната формула:
 където:
 V1
 =
 обем от 0,01 mol стандартен разтвор на солна киселина в ml за пробата;
 V0
 =
 обем от 0,01 mol стандартен разтвор на солна киселина в ml за празната проба;
 М
 =
 маса на пробата в g.
 Освен това се изисква следното:
 а)
 повторен анализ. Прилаганият метод е правилен, ако разликата между дубликатите е не по-голяма от 2 mg/100 g;
 б)
 проверка на оборудването. Оборудването се проверява посредством дестилиращи разтвори на NH4Cl, равни на 50 mg TVB-N/100 g;
 в)
 стандартни отклонения. Изчисляват се стандартното отклонение за повторяемостта Sr = 1,20 mg/100 g и стандартното отклонение на възпроизводимостта SR = 2,50 mg/100 g.
 Г. Апрат за парна дестилация на TVB-N
 Екстракт от проба
 Тръба за инсталиране на пара
 Дестилационна тръба
 Парогенератор
 Колба
 (борна киселина)
 Край на кандензатор
 Студена вода
 Охладител
 (1) Регламент (ЕО) No 2406/96 на Съвета от 26 ноември 1996 г. относно определяне на общите стандарти за търговия с някои рибни продукти. ОВ L 334, 23.12.1996 г., стр. 1.
 