text:
PEDP в разтвора на стандартната проба (7.3)
 А2
 =
 площ на пика на PS или PE в разтвора на тестовата проба (7.2)
 Т1
 =
 площ на пика на триптамин в разтвора на стандартната проба (7.3)
 Т2
 =
 площ на пика на триптамин в разтвора на тестовата проба (7.2).
 9. ТОЧНОСТ НА ПРОЦЕДУРАТА
 Забележка: Стойностите за повторяемост бяха изчислени в съответствие с международен стандарт IDF (*).
 9.1. Повторяемост
 Относителното стандартно отклонение на повторяемостта, което изразява варирането на резултатите от независим аналитичен анализ, получени от същия оператор чрез използване на същата апаратура и при същите условия върху същия тестов материал и в кратък период от време, не трябва да надвишава относителната стойност от 2 %. Ако при тези условия са получени две определяния, относителната разлика между двата резултата не трябва да бъде по-голяма от 6 % от средноаритметичната стойност на резултатите.
 9.2. Възпроизводимост
 Ако са направени две определяния от оператори в различни лаборатории чрез използване на различна апаратура, при различни условия за анализа на същия тестов материал, относителната разлика между двата резултата не трябва да бъде по-голяма от 11 % от средноаритметичната стойност на резултатите.
 10. ЗА СПРАВКА
 10.1. Resmini P., Pellegrino L., Hogenboom J.A., Sadini V., Rampilli M., ‘Detection of buttermilk solids in skimmilk powder by HPLC quantification of aminophospholipids’ (Откриване на сухо вещество на мътеница в обезмаслено мляко на прах чрез HPLC-определяне на количеството на аминофосфолипиди). Sci. Tecn. Latt.-Cas., 39,395 (1988).
 Фигура 1
 HPLC-модели на OPA-производни на фосфатидилсерин (PS) и фосфатидилетаноламин (РЕ) в метанолов екстракт от възстановено обезмаслено мляко на прах. Представен е методът на интегриране за пиковете на PS, РЕ и триптамин (вътрешен стандарт)
 Допълнение II
 ОТКРИВАНЕ НА СИРИЩНА СУРОВАТКА В ОБЕЗМАСЛЕНО МЛЯКО НА ПРАХ, ПРЕДНАЗНАЧЕНО ЗА ОБЩЕСТВЕНО СКЛАДИРАНЕ, ЧРЕЗ ОПРЕДЕЛЯНЕТО НА КАЗЕИНОМАКРОПЕПТИДИ ЧРЕЗ ВИСОКОЕФЕКТИВНА ТЕЧНА ХРОМАТОГРАФИЯ (HPLC)
 1. ОБХВАТ И ПРИЛОЖНО ПОЛЕ
 Този метод позволява откриването на сирищна суроватка в обезмаслено мляко на прах, предназначено за публично складиране, чрез определянето на казеиномакропептиди.
 2. ЗА СПРАВКА
 Международен стандарт ISO 707 — Мляко и млечни продукти. Указания за вземане на проби
 3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ
 Съдържанието на сухо вещество на сирищна суроватка се дефинира като процент от масата, както е определено от казеиномакропептидното съдържание чрез описаната процедура.
 4. ПРИНЦИП
 —
 Възстановяване на обезмасленото мляко на прах, отстраняване на мазнините и протеините с трихлорооцетна киселина, последвано от центрофугиране или филтриране.
 —
 Определяне на количеството казеиномакропептиди (CMP) в супернатанта чрез високоефективна течна хроматография (HPLC).
 —
 Оценка на получения резултат за пробите чрез позоваване на стандартните проби, съдържащи обезмаслено мляко на прах със или без прибавяне на известен процент суроватка на прах.
 5. РЕАКТИВИ
 Всички реагенти трябва да бъдат с признато аналитично качество. Използваната вода трябва да е дестилирана или да е с еквивалентна степен на чистота.
 5.1. Разтвор на трихлорооцетна киселина
 240 g трихлорооцетна киселина (CCl3COOH) се разтварят във вода и се долива до 1 000 ml. Разтворът трябва да бъде прозрачен и безцветен.
 5.2. Елуентен разтвор, pH 6,0
 1,74 g дикалиев хидроген фосфат (K2HPO4), 12,37 g калиев дихидроген фосфат (KH2PO4) и 21,41 g натриев сулфат (Na2SO4) се разтварят в около 700 ml вода.


text:
Регулира се, ако е необходимо, до pH 6,0, като се използва разтвор на фосфорна киселина или калиев хидроксид.
 Долива се до 1 000 ml с вода и се хомогенизира.
 Забележка: Съставът на елуента може да се актуализира така, че да съответства със сертификата на стандартите или с препоръките на производителя на пълнежа на колоната.
 Елуентният разтвор се филтрира, преди да се използва, през мембранен филтър с 0,45 μm диаметър на порите.
 5.3. Промиващ разтворител
 Един обем ацетонитрил (CH3CN) се смесва с девет обема вода. Преди да се използва, сместа се филтрира през мембранен филтър с 0,45 μm диаметър на порите.
 Забележка: Може да бъде използван всеки друг промиващ разтворител с бактерициден ефект, който не уврежда ефективността на разделянето в колоната.
 5.4. Стандартни проби
 5.4.1. Обезмаслено мляко на прах, което изпълнява изискванията на настоящия регламент (т.e. [0])
 5.4.2. Същото обезмаслено мляко на прах, подправено с 5 % (m/m) сирищна суроватка на прах със стандартен състав (т.e. [5]).
 6. АПАРАТУРА
 6.1. Аналитична везна
 6.2. Незадължително: центрофуга, която може да достигне центробежна сила от 2 000 g, снабдена със запушени центрофужни епруветки с капацитет около 50 ml
 6.3. Механичен шейкър
 6.4. Магнитна бъркалка
 6.5. Стъклени фунии с диаметър около 7 cm
 6.6. Филтърна хартия, средно филтриране, диаметър около 12,5 cm
 6.7. Стъклено оборудване за филтриране с мембранен филтър с диаметър на порите 0,45 μm
 6.8. Градуирани пипети, които позволяват подаване на 10 ml (ISO 648, клас A, или ISO/R 835), или система, която може да подаде 10,0 ml за две минути
 6.9. Система за подаване, която може да подаде 20,0 ml вода при приблизително 50 °C
 6.10. Термостатна водна баня, регулирана на 25 ± 0,5 °C
 6.11. Оборудване за HPLC, състоящо се от:
 6.11.1.
 Помпа
 6.11.2.
 Инжектор, ръчен или автоматичен, с капацитет от 15 до 30 μl
 6.11.3.
 Две последователно свързани колони TSK 2 000-SW (дължина 30 cm, вътрешен диаметър 0,75 cm) или еквивалентни колони (например единична TSK 2 000-SWxl, единична Agilent Technologies Zorbax GF 250) и предколона (3 cm × 0,3 cm), запълнена с I 125 или материал с еквивалентна ефективност
 6.11.4.
 Термостатична колонна пещ, програмирана на 35 ± 1 °C
 6.11.5.
 UV детектор с променлива дължина на вълните, позволяващ измервания при 205 nm, с чувствителност от 0,008 Å
 6.11.6.
 Интегратор с възможност за интеграция от впадина до впадина
 Забележка: Възможно е да се работи с колони, държани при стайна температура, но тяхната ефективност на разделяне е малко по-ниска. В този случай в рамките на една аналитична серия температурата би следвало да варира с по-малко от ± 5 °C.
 7. ВЗЕМАНЕ НА ПРОБИ
 7.1. Пробите се вземат в съответствие с процедурата, определена в Международен стандарт ISO 707. Държавите членки обаче може да използват друг метод за вземане на проби, при условие че той е в съответствие с принципите на гореупоменатия стандарт.
 7.2. Пробата се съхранява при условия, които изключват всякакво увреждане или промяна на състава.
 8. ПРОЦЕДУРА
 8.1. Подготовка на тестовата проба
 Млякото на прах се прехвърля в съд, снабден с уплътнен капак, и с вместимост, която е около два пъти обема

type: legislation

jurisdiction: EU


text:
на праха. Съдът се затваря веднага. Млечният прах се смесва добре чрез многократно обръщане на съда.
 8.2. Маса на пробата за анализ
 Претеглят се 2,000 ± 0,001 g от пробата за анализ в центрофужна епруветка (6.2) или подходяща запушена колба (50 ml).
 8.3. Отстраняване на мазнината и протеините
 8.3.1. Към тестовата доза се прибавят 20,0 ml топла вода (50 °C). Прахът се разтваря чрез разклащане за пет минути при използването на механичен шейкър (6.3). Епруветката се поставя във водната баня (6.10) и се оставя да се темперира до 25 °C.
 8.3.2. Прибавят се 10,0 ml разтвор на трихлорооцетна киселина (5.1.) с температура около 25 °C за две минути, като същевременно се разбърква енергично с магнитната бъркалка (6.4). Епруветката се поставя във водната баня (6.10) и се оставя за 60 минути.
 8.3.3. Центрофугира се (6.2) в продължение на 10 минути при 2 200 g или се филтрира през хартия (6.6), като се изхвърлят първите 5 ml филтрат.
 8.4. Хроматографски анализ
 8.4.1. От 15 до 30 μl точно измерен супернатант или филтрат (8.3.3) се впръскват в апарат за HPLC (6.11), който работи при дебит 1,0 ml елуентен разтвор (5.2) на минута.
 Забележка 1: Може да се използва и друг дебит в зависимост от вътрешния диаметър на използваните колони или указанията на производителя на колоните.
 Забележка 2: Колоните се изплакват с вода при всяко прекъсване. Елуентният разтвор (5.2) никога не се оставя в тях.
 Преди всяко прекъсване за повече от 24 часа колоните се изплакват с вода, след това се измиват с разтвор (5.3) за най-малко три часа при дебит 0,2 ml на минута.
 8.4.2. Резултатите от хроматографския анализ на тестовата проба [E] се получават под формата на хроматограма, в която всеки пик е показан чрез времето му на задържане RT, както следва:
 Пик II:
 Вторият пик на хроматограмата с RT от около 12,5 минути.
 Пик III:
 Третият пик на хроматограмата, съответстващ на CMP, с RT от 15,5 минути.
 Изборът на колоните може съществено да повлияе на времето на задържане на отделните пикове.
 Интеграторът (6.11.6) автоматично изчислява площта A на всеки пик:
 AII:
 площ на пик II,
 AIII:
 площ на пик III.
 Съществено е да се изследва вида на всяка хроматограма преди количественото тълкуване, за да се открият всякакви отклонения, които се дължат или на неправилното функциониране на апаратурата, или на колоните, или на произхода и естеството на анализираната проба.
 Анализът се повтаря, ако има съмнения.
 8.5. Калибриране
 8.5.1. Процедурата, описана в точки 8.2—8.4.2, се прилага с точност за стандартните проби (5.4).
 Използват се прясно приготвени разтвори, тъй като CMP се разрушават в 8 %-на трихлорооцетна среда. Загубата се оценява на 0,2 % на час при 30 °C.
 8.5.2. Преди хроматографския анализ на пробите колоните се подготвят чрез многократно впръскване на стандартната проба (5.4.2) в разтвора (8.5.1), докато площта и времето на задържане на пика, съответстващ на CMP, станат постоянни.
 8.5.3. Определят се факторите на сигнала R чрез впръскване на същия обем филтрати (8.5.1), какъвто е използван за пробите.
 9. ИЗРАЗЯВАНЕ НА РЕЗУЛТАТИТЕ
 9.1. Метод на изчисление и формули
 9.1.1. Изчисляване на факторите


text:
на сигнала R:
 Пик II:
 RII = 100/(AII[0])
 където:
 RII
 =
 факторите на сигнала на пиковете II,
 AII [0]
 =
 площите на пиковете II на стандартната проба [0], получени в 8.5.3.
 Пик III:
 RIII = W/(AIII[5] – AIII[0])
 където:
 RIII
 =
 Факторът на сигнала на пик III,
 AIII [0] и AIII [5]
 =
 площите на пиковете III на стандартните проби [0] и [5], получени съответно в 8.5.3,
 W
 =
 количеството суроватка в стандартната проба [5], т.e. 5.
 9.1.2. Изчисляване на относителната площ на пиковете в пробата [E]
 SII[E] = RII × AII[E]
 SIII[E] = RIII × AIII[E]
 SIV[E] = RIV × AIV[E]
 където:
 SII [E], SIII [E], SIV [E]
 =
 относителните площи, съответно на пикове II, III и IV на пробата [E],
 AII [E], AIII [E]
 =
 площите съответно на пикове II и III на проба [E], получени в 8.4.2,
 RII, RIII
 =
 факторите на сигнала, изчислени в 9.1.1.
 9.1.3. Изчисляване на относителното време на задържане на пик III на проба [E]:
 RRTIII[E] = (RTIII[E])/(RTIII[5])
 където:
 RRTIII [E]
 =
 относителното време на задържане на пик III на проба [E],
 RTIII [E]
 =
 времето на задържане на пик III на проба [E], получено в 8.4.2,
 RTIII [5]
 =
 времето на задържане на пик III на контролната проба [5], получено в 8.5.3.
 9.1.4. Експериментите показаха, че има линейна връзка между относителното време на задържане на пик III, т.e. RRTIII [E], и процента на прибавена суроватка на прах до 10 %
 —
 RRTIII [E] е < 1,000, когато съдържанието на суроватка е > 5 %,
 —
 RRTIII [E] е ≥ 1,000, когато съдържанието на суроватка е ≤ 5 %.
 Допустимата неопределеност за стойностите на RRTIII е ± 0,002.
 Обикновено стойността на RRTIII [0] се отклонява малко от 1,034. В зависимост от състоянието на колоните стойността може да се доближава до 1,000, но трябва винаги да бъде по-голяма.
 9.2. Изчисляване на процента на сирищна суроватка на прах в пробата:
 W = SIII[E] – [1,3 + (SIII[0] – 0, 9)]
 където:
 W
 =
 процент (m/m) сирищна суроватка в пробата [E];
 SIII [E]
 =
 относителната площ на пик III на тестова проба [E], получена както в 9.1.2;
 1,3
 =
 представлява относителната средна площ на пик III, изразена в грамове сирищна суроватка за 100 g, определена в неподправено обезмаслено мляко на прах от различен произход. Тази цифра бе получена експериментално;
 SIII [0]
 =
 представлява относителната площ на пик III, която е равна на RIII × AIII [0]. Тези стойности са получени съответно в 9.1.1 и в 8.5.3;
 (SIII [0] – 0,9)
 =
 представлява корекцията, която следва да бъде направена спрямо относителната средна площ 1,3, когато SIII [0] не е равно на 0,9. За експеримента относителната средна площ на пик III на контролната проба [0] е 0,9.
 9.3. Точност на процедурата
 9.3.1. Повторяемост
 Разликата между резултатите от две определяния, извършени едновременно или едно след друго от същия анализатор и при използване на същата апаратура върху идентичен тестов материал, не трябва да надвишава 0,2 % m/m.
 9.3.2. Възпроизводимост
 Разликата между два отделни и независими резултата, получени в две различни


text:
лаборатории върху идентичен тестов материал, не трябва да надвишава 0,4 % m/m.
 9.4. Тълкуване
 9.4.1. Приема се, че липсва суроватка, ако относителната площ на пик III, SIII [E], изразена в грамове сирищна суроватка за 100 g продукт, е ≤ 2,0 + (SIII [0] – 0,9),
 където:
 2,0
 е допустимата максимална стойност за относителната площ на пик III, като се вземат предвид относителната средна площ на пик III, т.e. 1,3, неопределеността поради вариациите в състава на обезмасленото мляко на прах и възпроизводимостта на метода (9.3.2),
 (SIII [0] – 0,9)
 е корекцията, която следва да бъде направена, когато площта SIII [0] е различна от 0,9 (вж. 9.2).
 9.4.2. Ако относителната площ на пик III, SIII [E], е > 2,0 + (SIII [0] – 0,9) и относителната площ на пик II, SII [E], ≤ 160, съдържанието на сирищна суроватка се определя, както е посочено в точка 9.2.
 9.4.3. Ако относителната площ на пик III, SIII [E], е > 2,0 + (SIII [0] – 0,9) и относителната площ на пик II, SII [E], ≤ 160, се определя общото съдържание на протеин (P %); след това се изследват графики 1 и 2.
 9.4.3.1. Данните, получени след анализа на пробите на неподправено обезмаслено мляко на прах с високо общо съдържание на протеин, са събрани в графики 1 и 2.
 Непрекъснатата линия представлява линейна регресия, чиито коефициенти са изчислени чрез метода на най-малките квадрати.
 Пунктираната права линия определя горната граница на относителната площ на пик III с вероятност, че няма да се надвишава в 90 % от случаите.
 Уравненията за пунктираните прави линии на графики 1 и 2 са:
 SIII = 0,376 P % – 10,7
 (графика 1),
 SIII = 0,0123 SII [E] + 0,93
 (графика 2),
 където съответно:
 SIII
 е относителната площ на пик III, изчислена или съобразно общото съдържание на протеин, или съобразно относителната площ на пик SII [E],
 P %
 е общото тегловно съдържание на протеин, изразено като процент,
 SII [E]
 е относителната площ на пробата, изчислена в точка 9.1.2.
 Тези уравнения са еквивалентни по стойност на 1,3, посочено в точка 9.2.
 Разликата (T1 и T2) между установената относителна площ SIII [E] и относителната площ SIII се изразява чрез следното: T1 = SIII[E] – [(0,376 P% – 10,7) + (SIII[0] – 0,9)]T2 = SIII[E] – [(0,0123 SII[E] + 0,93) + (SIII[0] – 0,9)].
 Ако T1 и/или T2
 са по-малки или равни на нула, не може да бъде определено присъствието на сирищна суроватка.
 Ако T1 и T2
 са по-големи от нула, има наличие на сирищна суроватка.
 Съдържанието на сирищна суроватка се изчислява по следната формула: W = T2 + 0,91
 където:
 0,91 е разстоянието на вертикалната ос между непрекъснатата и пунктираната прави линии.
 Допълнение III
 ОПРЕДЕЛЯНЕ НА СУХО ВЕЩЕСТВО НА СИРИЩНА СУРОВАТКА В ОБЕЗМАСЛЕНО МЛЯКО НА ПРАХ
 1. ЦЕЛ: ОТКРИВАНЕ НА ПРИБАВЯНЕТО НА СУХО ВЕЩЕСТВО НА СИРИЩНА СУРОВАТКА КЪМ ОБЕЗМАСЛЕНО МЛЯКО НА ПРАХ
 2. ЗА СПРАВКА: МЕЖДУНАРОДЕН СТАНДАРТ ISO 707
 3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ
 Съдържанието на сухо вещество на сирищна суроватка се дефинира като масовата концентрация от казеиномакропептидното съдържание, определена чрез описаната процедура.
 4. ПРИНЦИП
 Пробите се


text:
анализират за казеиномакропептид A с високоефективна течна хроматография с обърнати фази (процедура за HPLC). Оценката на резултата се получава чрез позоваване на стандартни проби, съдържащи обезмаслено мляко на прах със или без известен процент суроватка на прах. Резултатите, които са по-високи от 1 % (m/m), показват наличие на сухо вещество на сирищна суроватка.
 5. РЕАГЕНТИ
 Всички реагенти трябва да бъдат с признато аналитично качество. Използваната вода трябва да е дестилирана или да е с еквивалентна степен на чистота. Ацетонитрилът следва да бъде със спектроскопично качество или с HPLC-качество.
 5.1. Разтвор на трихлорооцетна киселина
 240 g трихлорооцетна киселина (CCl3COOH) се разтварят във вода и се долива до 1 000 ml. Разтворът трябва да бъде прозрачен и безцветен.
 5.2. Елуенти A и Б
 Eлуент A: 150 ml ацетонитрил (CH3CN), 20 ml изопропанол (CH3CHOHCH3) и 1,00 ml трифлуорооцетна киселина (TFA, CF3COOH) се поставят в 1 000 ml измерителна колба. Долива се до 1 000 ml с вода.
 Елуент Б: 550 ml ацетонитрил, 20 ml изопропанол и 1,00 ml TFA се поставят в 1 000 ml измерителна колба. Долива се до 1 000 ml с вода. Елуентният разтвор се филтрира, преди да се използва, през мембранен филтър с 0,45 μm диаметър на порите.
 5.3. Съхранение на колоната
 След анализа колоната се изплаква с елуент Б (чрез градиент) и впоследствие се изплаква с ацетонитрил (чрез градиент за 30 минути). Колоната се съхранява в ацетонитрил.
 5.4. Стандартни проби
 5.4.1. Обезмаслено мляко на прах, което изпълнява изискванията за публично складиране (т. e. [0]).
 5.4.2. Същото обезмаслено мляко на прах, подправено с 5 % (m/m) сирищна суроватка на прах със стандартен състав (т.e. [5]).
 5.4.3. Същото обезмаслено мляко на прах, подправено с 50 % (m/m) сирищна суроватка на прах със стандартен състав (т.e. [50]).
 6. АПАРАТУРА
 6.1. Аналитични везни
 6.2. Незадължително: центрофуга, която може да достигне центробежна сила от 2 200 g, снабдена със запушени центрофужни епруветки с капацитет около 50 ml
 6.3. Механичен шейкър
 6.4. Магнитна бъркалка
 6.5. Стъклени фунии с диаметър около 7 cm
 6.6. Филтърна хартия, средно филтриране, диаметър около 12,5 cm
 6.7. Стъклено оборудване за филтриране с мембранен филтър с диаметър на порите 0,45 μm
 6.8. Градуирани капкомери, които позволяват подаване на 10 ml (ISO 648, клас A, или ISO/R 835), или система, която може да подаде 10,0 ml за две минути.
 6.9. Система за подаване, която може да подаде 20,0 ml вода при приблизително 50 °C
 6.10. Термостатна водна баня, регулирана на 25 ± 0,5 °C
 6.11. Оборудване за HPLC, състоящо се от:
 6.11.1.
 Бинарна помпена система за градиентна работа
 6.11.2.
 Ръчен или автоматичен инжектор с капацитет 100 μl
 6.11.3.
 Колона Agilent Technologies Zorbax 300 SB-C3 (дължина 25 cm, 0,46 cm вътрешен диаметър) или еквивалентна широка кварцова колона с обърната фаза
 6.11.4.
 Термостатична колонна пещ, програмирана на 35 ± 1 °C
 6.11.5.
 UV детектор с променлива дължина на вълните, позволяващ измервания при 210 nm (ако е необходимо, може да бъде използвана по-голяма дължина на вълните до 220 nm), с чувствителност от 0,02 Å
 6.11.6.
 Интегратор с възможност за настройка на интегрирането по обща


text:
базова линия или от впадина до впадина
 Забележка: Използването на колоната при стайна температура е възможно, при условие че стайната температура не се отклонява повече от 1 °C, в противен случай се получава прекалено голямо вариране във времето на задържане на CMPA.
 7. ВЗЕМАНЕ НА ПРОБИ
 7.1. Пробите се вземат в съответствие с процедурата, определена в Международен стандарт ISO 707. Държавите членки обаче може да използват друг метод за вземане на проби, при условие че той е в съответствие с принципите на гореупоменатия стандарт.
 7.2. Пробата се съхранява при условия, които изключват всякакво увреждане или промяна на състава.
 8. ПРОЦЕДУРА
 8.1. Подготовка на тестовата проба
 Млякото на прах се прехвърля в съд, снабден с уплътнен капак, и с вместимост, която е около два пъти обема на праха. Съдът се затваря веднага. Млечният прах се смесва добре чрез многократно обръщане на съда.
 8.2. Маса на пробата за анализ
 Претеглят се 2,00 ± 0,001 g от пробата за анализ в центрофужна епруветка (6.2) или подходяща запушена колба (50 ml).
 Забележка: Когато се анализират смеси, се претегля такова количество от тестовата проба, че обезмаслената част от пробата да съответства на 2,00 g.
 8.3. Отстраняване на мазнината и протеините
 8.3.1. Към тестовата доза се прибавят 20,0 ml топла вода (50 °C). Прахът се разтваря чрез разклащане за пет минути при използването на механичен шейкър (6.3). Епруветката се поставя във водната баня (6.10) и се оставя да се темперира до 25 °C.
 8.3.2. Прибавят се 10,0 ml разтвор на трихлорооцетна киселина с температура около 25 °C (5.1) постоянно за две минути, като същевременно се разбърква енергично с магнитната бъркалка (6.4). Епруветката се поставя във водната баня (6.10) и се оставя за 60 минути.
 8.3.3. Центрофугират се (6.2) 2 200 g в продължение на 10 минути или се филтрират през хартия (6.6), като първите 5 ml филтрат се изхвърлят.
 8.4. Хроматографски анализ
 8.4.1. HPLC-методът с обърната фаза изключва възможността да има фалшиви положителни резултати, дължащи се на наличието на кисела мътеница на прах.
 8.4.2. Преди извършването на HPLC анализа с обърната фаза условията на градиента следва да бъдат оптимизирани. Времето на задържане от 26 ± 2 минути за CMP Α е оптимално за системите с градиент с мъртъв обем от около 6 ml (обем от точката, в която разредителите се събират, до обема на пръстена на инжектора включително). Системите с градиент с по-малък мъртъв обем (напр. 2 ml) следва да използват 22 минути като оптимално време за задържане.
 Вземат се разтвори от стандартните проби (5.4) без и със 50 % сирищна суроватка.
 100 μl супернатант или филтрат (8.3.3) се впръсква в апарата за HPLC, който функционира при условията на тестовия градиент, дадени в таблица 1.
 Таблица 1
 Условия на тестовия градиент за оптимизиране на хроматографията
 Време
 (min)
 Дебит
 (ml/min)
 % A
 % Б
 Крива
 Първоначално
 1,0
 90
 10
 *
 27
 1,0
 60
 40
 линейна
 32
 1,0
 10
 90
 линейна
 37
 1,0
 10
 90
 линейна
 42
 1,0
 90
 10
 линейна
 Сравнението на двете хроматограми следва да разкрива мястото на пика на GMPA.
 Чрез използване на формулата, дадена


text:
по-долу, може да бъде изчислен първоначалният състав на разредителя, който ще се използва за нормалния градиент (вж. 8.4.3): % Б = 10 – 2,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 30 / 27 % Б = 7,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 1,11
 където:
 RTcmpA
 :
 времето на задържане на CMPΑ в тестовия градиент
 10
 :
 първоначалният % Б на тестовия градиент
 2,5
 :
 % Б на половината време минус % Б първоначално в нормалния градиент
 13,5
 :
 половината време на тестовия градиент
 26
 :
 изисквано време на задържане на CMPΑ
 6
 :
 съотношение на наклоните на тестовия и нормалния градиент
 30
 :
 % Б първоначално минус % Б при 27 минути в тестовия градиент
 27
 :
 време на преминаване на тестовия градиент.
 8.4.3. Анализ на разтвори на тестовите проби
 Впръскват се 100 μl точно измерен супернатант или филтрат (8.3.3) в апарата за HPLC, който работи при дебит 1,0 ml елуентен разтвор (5.2) в минута.
 Съставът на елуента в началото на анализа се получава съгласно 8.4.2. Той обичайно е близък до A:Б = 76:24 (5.2). Непосредствено след впръскването се стартира линеен градиент, което води до 5 % по-висок процент на Б след 27 минути. След това се стартира линеен градиент, с който съставът на елуента става 90 % Б за пет минути. Този състав се поддържа пет минути, след което съставът се променя чрез линеен градиент за пет минути към първоначалния състав. В зависимост от вътрешния обем на помпената система следващото впръскване може да бъде направено 15 минути след постигането на първоначалните условия.
 Забележка 1. Времето на задържане на CMPA следва да бъде 26 ± 2 минути. Това може да бъде постигнато чрез вариране на изходните и крайните условия на първия градиент. Разликата обаче в % Б за изходните и крайните условия на първия градиент трябва да остане 5 % Б.
 Забележка 2. Елуентите следва да бъдат дегазирани в достатъчна степен и да се запазят такива. Това е от основна важност за доброто функциониране на помпената система за градиента. Стандартното отклонение за времето на задържане на пика CMPA трябва да бъде по-малко от 0,1 минути (n = 10).
 Забележка 3. Референтната проба [5] трябва да бъде впръсквана на всеки пет проби и използвана за изчисляване на нов фактор на сигнала R (9.1.1).
 8.4.4. Резултатите от хроматографския анализ на тестовата проба (E) се получават под формата на хроматограма, в която пикът CMPA се идентифицира чрез времето си на задържане от около 26 минути.
 Интеграторът (6.11.6) автоматично изчислява височината H на пика CMPA. Във всяка хроматограма следва да се проверява мястото на базовата линия. Анализът или интегрирането трябва да бъдат повторени, ако базовата линия е определена неправилно.
 Забележка: Ако пикът на CMPA е достатъчно отделен от други пикове, следва да се използва базовата линия от впадина до впадина; в противен случай се използват перпендикулярните проекции върху обща базова линия, която би трябвало да започва близо до пика на CMPA (следователно не при t = 0 min!). За стандартния разтвор и за пробите се използва един


text:
и същ тип интегриране, а при обща базова линия се проверява нейната съгласуваност за пробите и стандартния разтвор.
 Съществено е да се изследва видът на всяка хроматограма преди количественото тълкуване, за да се открият всякакви отклонения, които се дължат или на неправилното функциониране на апаратурата, или на колоната, или на произхода и естеството на анализираната проба. Анализът се повтаря, ако има съмнения.
 8.5. Калибриране
 8.5.1. Процедурата, описана в точки 8.2—8.4.4, се прилага с точност за стандартните проби (5.4.1—5.4.2). Използват се прясно приготвени разтвори, тъй като CMP се разрушават в 8 %-на трихлорооцетна среда при стайна температура. При 4 °C разтворът остава стабилен за 24 часа. В случай на дълги аналитични серии е желателно в автоматичния инжектор да се използва охладена подложка за проби.
 Забележка: 8.4.2. може да бъде пропусната, ако % Б при първоначалните условия е известен от предходни анализи.
 Хроматограмата на референтната проба [5] следва да е аналогична с представеното на фигура 1. На тази фигура пикът на CMPA се предхожда от два малки пика. Важно е да се получи подобно разделяне.
 8.5.2. Преди хроматографския анализ на пробите се впръскват 100 μl стандартна проба без сирищна суроватка [0] (5.4.1).
 Хроматограмата не следва да показва пик във времето на задържане на пика CMPA.
 8.5.3. Определят се факторите на сигнала R чрез впръскване на същия обем от филтрата (8.5.1), какъвто е използван за пробите.
 9. ИЗРАЗЯВАНЕ НА РЕЗУЛТАТИТЕ
 9.1. Метод на изчисление и формули
 9.1.1. Изчисляване на фактора на сигнала R:
 Пик на CMPA: R = W/H
 където:
 R
 =
 фактор на сигнала на пика на CMPA
 H
 =
 височина на пика на CMPA
 W
 =
 количество суроватка в стандартната проба [5].
 9.2. Изчисляване на процента на сирищна суроватка на прах в пробата
 W(E) = R × H(E)
 където:
 W(E)
 =
 процент (m/m) сирищна суроватка в пробата (E),
 R
 =
 фактор на сигнала на пика на CMPA (9.1.1)
 H(E)
 =
 височина на пика на CMPA на пробата (E)
 Ако W(E) надвишава 1 % и разликата между времето на задържане и това на стандартната проба [5] е по-малка от 0,2 минути, тогава има наличие на сухо вещество на сирищна суроватка.
 9.3. Точност на процедурата
 9.3.1. Повторяемост
 Разликата между резултатите от две определяния, извършени едновременно или едно след друго от същия анализатор и при използване на същата апаратура върху идентичен тестов материал, не трябва да надвишава 0,2 % m/m.
 9.3.2. Възпроизводимост
 Не е определена.
 9.3.3. Линейност
 От 0 до 16 % сирищна суроватка трябва да даде линейна зависимост с коефициент на корелация > 0,99.
 9.4. Тълкуване
 Границата от 1 % включва неопределеността, свързана с възпроизводимостта.
 Фигура 1
 Ni—4.6 стандарт
 (*)
 Международен IDF стандарт 135B/1991 Мляко и млечни продукти. Характеристики за точност на аналитичните методи. Описание на процедурата за съвместни изследвания.“
 3)
 Добавят се следните приложения:
 „
 ПРИЛОЖЕНИЕ VI
 Методи за анализ на масло за частно складиране
 Параметър
 Метод
 Масленост (6)
 ISO 17189 или ISO 3727 част 3
 Вода
 ISO 3727, част 1
 Сух безмаслен остатък (с изключение на сол)
 ISO 3727, част 2
 Сол
 ISO 15648
 ПРИЛОЖЕНИЕ VII
 Методи за анализ на обезмаслено


text:
мляко на прах за частно складиране
 Параметър
 Метод
 Мазнина
 ISO 1736
 Белтък
 ISO 8968, част 1
 Вода
 ISO 5537
 ПРИЛОЖЕНИЕ VIII
 Методи за анализ на сирена за частно складиране
 1.
 Методът за анализ, определен в допълнението, се използва, за да се гарантира, че сирене, което е произведено изключително от овче мляко, козе мляко или биволско мляко, или смес от овче, козе и биволско мляко, не съдържа казеин от краве мляко.
 Счита се, че е налице казеин от краве мляко, ако съдържанието на казеин от краве мляко в анализираната проба е равно или е по-голямо от съдържанието в референтната проба, съдържаща 1 % краве мляко, както е описано в допълнението.
 2.
 Методите за откриване на казеин от краве мляко в сирената, посочени в параграф 1, могат да бъдат използвани, при условие че:
 а)
 границата на откриване е максимум 0,5 %, и
 б)
 няма фалшиви положителни резултати, и
 в)
 казеинът от краве мляко може да се открие посредством необходимата чувствителност, дори и след дълги периоди на узряване, които могат да възникват при обичайни търговски условия.
 Ако някое от горните изисквания не е спазено, следва да се използват методите, определени в допълнението.
 Допълнение
 МЕТОД ЗА ОТКРИВАНЕ НА КРАВЕ МЛЯКО И КАЗЕИНАТИ В СИРЕНА ОТ ОВЧЕ МЛЯКО, КОЗЕ МЛЯКО ИЛИ БИВОЛСКО МЛЯКО, ИЛИ СМЕСИ ОТ ОВЧЕ, КОЗЕ И БИВОЛСКО МЛЯКО
 1. ОБХВАТ
 Откриване на краве мляко и казеинати в сирена, произведени от овче мляко, козе мляко, биволско мляко, или смеси от овче, козе и биволско мляко, чрез изоелектрическо фокусиране на γ-казеини след плазминолиза.
 2. ПРИЛОЖНО ПОЛЕ
 Методът е подходящ за чувствително и специфично откриване на натурално и топлинно обработвано краве мляко и казеинати в пресни и узрели сирена, произведени от овче мляко, козе мляко, биволско мляко, или смеси от овче, козе и биволско мляко. Той не е подходящ за откриване на подправяне на мляко и сирене чрез топлинно обработени концентрати на суроватъчен протеин от краве мляко.
 3. ПРИНЦИП НА МЕТОДА
 3.1. Изолиране на казеини от сирене и от референтните проби.
 3.2. Разтваряне на изолираните казеини и разграждане чрез плазмин (EC.3.4.21.7).
 3.3. Изоелектрическо фокусиране на обработени с плазмин казеини в присъствието на уреа и оцветяване на протеините.
 3.4. Оценка на оцветените γ3 и γ2-ивици на казеин (доказателство за краве мляко) чрез сравняване на получените от пробата ивици с тези, които са получени в същия гел от референтните проби, съдържащи 0 % и 1 % краве мляко.
 4. РЕАГЕНТИ
 Ако не е посочено друго, трябва да бъдат използвани химикали с аналитично качество. Водата трябва да е двойно дестилирана или с еквивалента степен на чистота.
 Забележка: Указанията по-долу се прилагат за лаборатория, която е подготвила полиакриламидни гелове, съдържащи уреа, с размери 265 × 125 × 0,25 mm. Когато се използват други размери и типове гел, може да е необходимо коригиране на условията за отделяне.
 Изоелектрическо фокусиране
 4.1. Реагенти за получаване на полиакриламидни гелове, съдържащи уреа
 4.1.1. Основен разтвор на гел
 Разтварят се:
 4,85 g акриламид
 0,15 g N, N′-метиленбисакриламид (BIS)
 48,05 g уреа
 15,00 g глицерин (87 % w/w)
 във вода, допълва се до 100 ml и


text:
се съхранява в бутилка от кафяво стъкло в хладилник.
 Забележка: Вместо цитираните определени дози невротоксични акриламиди може да се използва готов разтвор акриламид/BIS, наличен в търговската мрежа. Когато такъв разтвор съдържа 30 % w/v акриламид и 0,8 % w/v BIS, вместо определените дози за сместа трябва да бъде използван обем от 16,2 ml. Годността на основния разтвор е максимум 10 дни; ако неговата проводимост е повече от 5 μS, той се дейонизира чрез разклащане с 2 g Амберлит MB-3 за 30 минути, след това се филтрира през мембрана от 0,45 μm.
 4.1.2. Разтвор на гел
 Приготвя се разтвор на гел чрез смесване на добавките и амфолити (*) с основния разтвор на гел (виж 4.1.1).
 9,0 ml основен разтвор
 24 mg β-аланин
 500 μl амфолит pH 3,5—9,5
 250 μl амфолит pH 5—7
 250 μl амфолит pH 6—8
 Разтворът на гел се смесва и се дегазира за две до три минути в ултразвукова баня или във вакуум.
 Забележка: Разтворът на гел се приготвя непосредствено преди изливането му (вж. 6.2).
 4.1.3. Катализаторни разтвори
 4.1.3.1. N, N, N′ N′ — тетраметилетилендиамин (Temed)
 4.1.3.2. 40 % w/v амониев персулфат (PER):
 800 mg PER се разтварят във вода и се долива до 2 ml
 Забележка: Винаги се използва прясно приготвен разтвор на PER.
 4.2. Контактна течност
 Керосин или течен парафин
 4.3. Aноден разтвор
 5,77 g фосфорна киселина (85 % w/w) се разтваря във вода и се разрежда до 100 ml.
 4.4. Катоден разтвор
 2,00 g натриев хидроксид се разтваря във вода и се разрежда до 100 ml с вода.
 Подготовка на пробите
 4.5. Реагенти за изолиране на протеин
 4.5.1. Разредена оцетна киселина (25,0 ml ледена оцетна киселина с добавена вода до 100 ml)
 4.5.2. Дихлорометан
 4.5.3. Ацетон
 4.6. Буфер за разтваряне на протеин
 Разтварят се:
 5,75 g глицерин (87 % w/w)
 24,03 g уреа
 250 mg дитиотрейтол
 във вода и се долива до 50 ml.
 Забележка: Съхранява се в хладилник, максимална годност — една седмица.
 4.7. Реагенти за разграждане на казеини чрез плазмин
 4.7.1. Буфер — амониев карбонат
 0,2 mol/l разтвор на амониев бикарбонат (1,58 g/100 ml вода), съдържащ 0,05 mol/l етилендиаминтетраоцетна киселина (EDTA, 1,46 g/100 ml), се титрува с 0,2 mol/l разтвор на амониев кaрбонат (1,92 g/100 ml вода), съдържащ 0,05 mol/l EDTA, до pH 8.
 4.7.2. Говежди плазмин (EC. 3.4.21.7) с активност най-малко 5 U/ml
 4.7.3. Разтвор на ε-аминокапронова киселина за инхибиране на ензими
 2,624 g ε-аминокапронова киселина (6 амино-n-хексанова киселина) се разтварят в 100 ml 40 % (v/v) етанол.
 4.8. Стандартни проби
 4.8.1. Сертифицирани референтни стандартни проби от смес от подсирени овче и козе обезмаслено мляко, съдържащи 0 % и 1 % краве мляко, могат да се намерят от Института за референтни материали и метрология на Комисията, B-2440 Гил, Белгия.
 4.8.2. Подготовка на вътрешни лабораторни стандартни проби от подсирено биволско мляко, съдържащо 0 % и 1 % краве мляко
 Обезмасленото мляко се приготвя чрез центрофугиране на сурово непакетирано биволско или краве мляко при 37 °C (2 500 g, 20 минути). След бързо охлаждане на съда и съдържанието му до 6—8 °C, горният слой


text:
мазнина се отстранява напълно. За подготовката на 1 %-на стандартна проба към 495 ml биволско обезмаслено мляко се добавя 5,00 ml краве обезмаслено мляко в 1 l бехерова чаша и се постига pH 6,4 чрез прибавяне на разредена млечна киселина (10 % w/v). Температурата се довежда до 35 °C и се прибавят 100 μl телешко сирище (активност 1: 10 000, около 3 000 U/ml), разклаща се за 1 минута и бехеровата чаша се оставя покрита с алуминиево фолио при 35 °C за един час, за да може съдържанието да се съсири. След образуването на съсирека цялото подсирено мляко се суши чрез сублимиране без предварително хомогенизиране или отцеждане на суроватката. След сушенето чрез сублимиране то се смила ситно на хомогенен прах. За подготовката на 0 %-ната стандартна проба се извършва същата процедура с използване на натурално биволско обезмаслено мляко. Стандартните проби трябва да бъдат съхранявани при – 20 °C.
 Забележка: Препоръчително е да се проверява чистотата на биволското мляко чрез изоелектрическо фокусиране на третираните с плазмин казеини преди подготовката на стандартните проби.
 Реагенти за оцветяване на протеин
 4.9. Фиксатор
 150 g трихлорооцетна киселина се разтварят във вода и се долива до 1 000 ml.
 4.10. Обезцветяващ разтвор
 500 ml метанол и 200 ml ледена оцетна киселина се разреждат до 2 000 ml с дестилирана вода.
 Забележка: Всеки ден се приготвя пресен обезцветяващ разтвор; той може да бъде приготвен чрез смесване на равни обеми основни разтвори на 50 % (v/v) метанол и 20 % (v/v) ледена оцетна киселина.
 4.11. Оцветяващи разтвори
 4.11.1. Оцветяващ разтвор (основен разтвор 1)
 3,0 g Coomassie Brilliant Blue G-250 (C.I. 42655) се разтваря в 1 000 ml 90 % (v/v) метанол, като се използва магнитна бъркалка (приблизително 45 минути), филтрира се през два нагънати филтъра със средна скорост.
 4.11.2. Оцветяващ разтвор (основен разтвор 2)
 5,0 g меден сулфат пентахидрат се разтваря в 1 000 ml 20 % (v/v) оцетна киселина.
 4.11.3. Оцветяващ разтвор (работен разтвор)
 Смесват се по 125 ml от всеки от основните разтвори (4.11.1, 4.11.2) непосредствено преди оцветяването.
 Забележка: Оцветяващият разтвор следва да бъде приготвен в деня, в който се използва.
 5. ОБОРУДВАНЕ
 5.1. Стъклени плочи (265 × 125 × 4 mm); каучукова ролка (ширина 15 cm); нивелирна маса
 5.2. Лист носител на гел (265 × 125 mm)
 5.3. Покривен лист (280 × 125 mm). По двете му дължини отстрани се поставя самозалепваща лента (280 × 6 × 0,25 mm) (вж. фигура 1)
 5.4. Камера за електрофокусиране с охлаждаща плоча (напр. 265 × 125 mm) и подходящо електрическо захранване (≥ 2,5 kV) или автоматично устройство за електрофореза
 5.5. Криостат с циркулация, термостатно контролиран на 12 ± 0,5 °C
 5.6. Центрофуга, регулируема за 3 000g
 5.7. Електродни ленти (с дължина ≥ 265 mm)
 5.8. Пластмасови флакони за капене на анодните и катодните разтвори
 5.9. Апликатори за проби (10 × 5 mm, вискозна филтърна хартия или филтърна хартия с ниска абсорбция на протеин)
 5.10. Съдове от неръждаема стомана или от стъкло за оцветяване и обезцветяване (напр. 280 × 150 mm таблички за инструменти)
 5.12. Регулируем хомогенизатор (с диаметър


text:
на оста 10 mm), от 8 000 до 20 000 об./мин.
 5.13. Магнитна бъркалка
 5.14. Ултразвукова баня
 5.15. Апарат за залепване на листовете
 5.16. 25 μl микро-капкомери
 5.17. Вакуумен концентратор или сушилня чрез сублимиране
 5.18. Термостатично контролирана водна баня, регулируема за 35 и за 40 ± 1 °C с възможност за разбъркване
 5.19. Денсиметър, четящ при λ = 634 nm
 6. ПРОЦЕДУРА
 6.1. Подготовка на пробите
 6.1.1. Изолиране на казеини
 Количество, еквивалентно на 5 g сухо вещество сирене, или референтните стандартни проби се претеглят в 100 ml центрофужна епруветка, прибавя се 60 ml дестилирана вода и се хомогенизира с хомогенизатор (от 8 000 до 10 000 об./мин). Регулира се до pH 4,6 с разредена оцетна киселина (4.5.1) и се центрофугира (5 минути, 3 000 g). Мазнината и суроватката се отделят, утайката се хомогенизира при 20 000 об./мин в 40 ml дестилирана вода, регулирана до pH 4,5 с разредена оцетна киселина (4.5.1), добавят се 20 ml дихлорометан (4.5.2), отново се хомогенизира и се центрофугира (5 минути, 3 000 g). Казеиновият слой, който се намира между водната и органичната фази (вж. фигура 2), се отстранява със шпатула и двете фази се отделят. Казеинът се хомогенизира отново в 40 ml дестилирана вода (виж по-горе) и 20 ml дихлорометан (4.5.2) и се центрофугира. Тази процедура се повтаря, докато двете фази на екстракцията останат безцветни (от два до три пъти). Утайката от протеин се хомогенизира с 50 ml ацетон (4.5.3) и се филтрира през нагъната филтърна хартия със средна скорост. Утайката върху филтъра се измива с две отделни части от 25 ml ацетон и се оставя да се изсуши на въздух или в струя азот, след което се стрива на фин прах в хаван.
 Забележка: Сухият изолиран казеин следва да бъде съхраняван при – 20 °C.
 6.1.2. Разграждане чрез плазмин на β-казеини за интензифициране на γ-казеини
 25 mg изолирани казеини (6.1.1) се разпръскват в 0,5 ml буфер с амониев карбонат (4.7.1) и се хомогенизират за 20 минути, например чрез обработка с ултразвук. Подгрява се до 40 °C и се добавя 10 μl плазмин (4.7.2), смесва се и се инкубира за един час при 40 °C с непрекъснато разклащане. За да се инхибира ензимът, се добавя 20 μl разтвор на ε-аминокапронова киселина (4.7.3), след това се добавят 200 mg твърда уреа и 2 mg дитиотрейтол.
 Забележка: За да се получи по-голяма симетрия на фокусираните казеинови ивици е препоръчително разтворът да се изсуши чрез сублимиране след добавянето на ε-аминокапронова киселина, като след това утайките се разредят в 0,5 ml буфер за разтваряне на протеин (4.6).
 6.2. Приготвяне на полиакриламидни гелове, съдържащи уреа
 С помощта на няколко капки вода листът носител на гел (5.2) се разстила върху стъклена плоча (5.1), като излизащата навън вода се отстранява с хартиена салфетка. По същия начин покривният лист (5.3) с ограничители (0,25 mm) се разстила върху друга стъклена плоча. Плочата се поставя хоризонтално върху нивелирна маса.
 Към приготвения и с отстранен въздух разтвор на гел (4.1.2) се добавят 10 μl Temed (4.1.3.1), разклаща се и се добавят 10 μl разтвор на PER


text:
(4.1.3.2), внимателно се смесва и веднага се излива равномерно в центъра на покривния лист. Единият край на плочата с носителя на гела (с листа надолу) се поставя върху плочата с покривния лист и плочата се сваля бавно надолу, така че между листовете да се образува и разстеле равномерно филм от гел, без да се образуват мехурчета (фигура 3). Плочата с носителя на гела се оставя внимателно да легне напълно с помощта на тънка шпатула и върху нея се поставят още три стъклени плочи за тежест. След завършването на полимеризацията (около 60 минути) полимеризираният гел върху плочата носител на гела и върху покривния лист се изважда чрез разделяне на стъклените плочи. Обратната страна на листа носител се почиства внимателно, за да се отстранят остатъците от гела и уреата. „Гел-сандвичът“ се навива и залепва на тръбичка и се съхранява в хладилник (максимум шест седмици).
 Забележка: Покривният лист с ограничителите може да бъде използван повторно. Полиакриламидният гел може да бъде нарязан на по-малки части, което е препоръчително, когато има няколко проби или ако се използва автоматично устройство за електрофореза (два гела, с размер 4,5 × 5 сm).
 6.3. Изоелектрическо фокусиране
 Охлаждащият термостат се настройва на 12 °C. Обратната страна на листа носител на гел се избърсва с керосин, след това в центъра на охлаждащия блок се капват няколко капки керосин (4.2.). След това „гел-сандвичът“ се разстила върху него със страната на носителя надолу, като се внимава да не се образуват мехурчета. Излишният керосин се избърсва и покривният лист се отстранява. Електродните ленти се напояват с електродните разтвори (4.3, 4.4), изрязват се до дължината на гела и се поставят на предвидените места (разстояние на електродите 9,5 cm).
 Условия за изоелектрическо фокусиране:
 6.3.1. Размер на гела 265 × 125 × 0,25 mm
 Стъпка
 Време
 (min.)
 Електрическо напрежение
 (V)
 Електрически ток
 (mA)
 Мощност
 (W)
 Волт-часове
 (Vh)
 1.
 Предварително фокусиране
 30
 максимум
 2 500
 максимум
 15
 постоянна 4
 ок. 300
 2.
 Фокусиране на пробата (7)
 60
 максимум
 2 500
 максимум
 15
 постоянна 4
 ок. 1 000
 3.
 Окончателно фокусиране
 60
 максимум
 2 500
 максимум
 5
 максимум
 20
 ок. 3 000
 40
 максимум
 2 500
 максимум
 6
 максимум
 20
 ок. 3 000
 30
 максимум
 2 500
 максимум
 7
 максимум
 25
 ок. 3 000
 Забележка: Ако плътността или ширината на геловете се променят, стойностите за електрически ток и мощност следва да се адаптират по подходящ начин (напр. удвояване на стойностите за електрически ток и за мощност, ако се използва гел с размери 265 × 125 × 0,5 mm).
 6.3.2. Пример за програмиране на автоматично устройство за електрофореза (2 гела с размери 5,0 × 4,5 cm); електродите без ленти се поставят направо върху гела
 Стъпка
 Електрическо напрежение
 Електрически ток
 Мощност
 Температура
 Волт-часове
 1.
 Предварително фокусиране
 1 000 V
 10,0 mA
 3,5 W
 8 °C
 85 Vh
 2.
 Фокусиране на пробата
 250 V
 5,0 mA
 2,5 W
 8 °C
 30 Vh
 3.
 Фокусиране
 1 200 V
 10,0 mA
 3,5 W
 8 °C
 80 Vh
 4.
 Фокусиране
 1 500 V
 5,0 mA
 7,0 W
 8 °C
 570 Vh
 В стъпка 2 апликаторът


text:
на пробата се поставя на 0 Vh.
 В стъпка 2 апликаторът на пробата се отстранява при 30 Vh.
 6.4. Оцветяване на протеин
 6.4.1. Фиксиране на протеин
 Електродните ленти се отстраняват веднага след изключване на захранването и гелът незабавно се поставя в съд за оцветяване/обезцветяване, пълен с 200 ml фиксатор (4.9); оставя се за 15 минути, като непрекъснато се разклаща.
 6.4.2. Измиване и оцветяване на плочата с гел
 Фиксаторът се отцежда внимателно и плочата с гел се измива два пъти за по 30 секунди, всеки път със 100 ml обезцветяващ разтвор (4.10). Обезцветяващият разтвор се излива и съдът се пълни с 250 ml оцветяващ разтвор (4.11.3); оставя се да се оцвети за 45 минути с леко разклащане.
 6.4.3. Обезцветяване на плочата с гел
 Оцветяващият разтвор се излива, плочата с гел се измива два пъти, като всеки път се използва по 100 ml обезцветяващ разтвор (4.10), след това се разклаща с 200 ml обезцветяващ разтвор за 15 минути и обезцветяването се повтаря най-малко два или три пъти, докато основата стане чиста и безцветна. След това плочата с гел се изплаква с дестилирана вода (2 × 2 минути) и се изсушава на въздух (от 2 до 3 часа) или със сешоар (от 10 до 15 минути).
 Забележка 1: Фиксирането, измиването, оцветяването и обезцветяването се извършват при 20 °C. Да не се използват високи температури.
 Забележка 2: Ако се предпочита по-чувствително сребърно оцветяване (напр. кит за сребърно оцветяване, протеин, Pharmacia Biotech, код No 17-1150-01), пробите от казеин, третирани с плазмин, следва да бъдат разредени до 5 mg/ml.
 7. ОЦЕНКА
 Оценяването се извършва чрез сравняване на ивиците на протеините в непознатата проба с референтни проби върху същия гел. Откриването на краве мляко в сирена, произведени от овче мляко, козе мляко, биволско мляко, или смеси от овче, козе и биволско мляко, се извършва чрез γ3- и γ2-казеини, чийто обхват на изоелектрически точки е между pH 6,5 и pH 7,5 (фигури 4 a и б, фигура 5). Границата на откриване е по-ниска от 0,5 %.
 7.1. Визуална оценка
 За визуална оценка на количеството краве мляко се препоръчва да се адаптират концентрациите на пробите и стандартите за получаване на същото ниво на интензивност на овчи, кози и/или биволски γ2- и γ3-казеини (виж „γ2 E,G,B“ и „γ3 E,G,B“ на фигури 4 a и б и фигура 5). След това количеството на кравето мляко (по-малко от, равно на или по-голямо от 1 %) в непознатата проба може да бъде оценявано директно чрез сравняване на интензитета на крави γ3- и γ2-казеини (виж „γ3 C“ и „γ2 C“ на фигури 4 a и б и фигура 5) с тези на 0 % и 1 % референтни стандарти (овчи, кози) или вътрешнолабораторни стандарти (биволски).
 7.2. Денсиметрична оценка
 Ако е приложимо, за определянето на съотношението на площта на пика на крави спрямо овчи, кози и/или биволски γ2- и γ3-казеини (вж. фигура 5) се използва денсиметър (5.19). Тази стойност се сравнява със съотношението на площта на пика на γ2- и γ3-казеини от 1 % референтния стандарт (овчи, кози) или вътрешнолабораторен стандарт (биволски), анализирани върху същия


text:
гел.
 Забележка: Методът функционира задоволително, ако има ясен положителен сигнал за двата крави γ2- и γ3-казеина в 1 % референтния стандарт, но не и в 0 % референтния стандарт. Ако няма, процедурата се оптимизира, като точно се спазват детайлите на метода.
 Пробата се оценява като положителна, ако двата крави γ2- и γ3-казеина или съответните съотношения на площта на пиковете са равни или по-големи от нивото на 1 % референтен стандарт.
 8. ЗА СПРАВКА
 Addeo F., Moio L., Chianese L., Stingo C., Resmini P., Berner I, Krause I., Di Luccia A., Bocca A.: Use of plasmin to increase the sensitivity of the detection of bovine milk in ovine and/or caprine cheese by gel isoelectric focusing of γ2-caseins. (Използване на плазмин за увеличаване на чувствителността на откриване на краве мляко в овче и/или козе сирене с изоелектрическо фокусиране с гел на γ2-казеини). Milchwissenschaft 45, 708-711 (1990 г.).
 Addeo F., Nicolai M.A., Chianese L., Moio L., Spagna Musso S., Bocca A., Del Giovine L.: A control method to detect bovine milk in ewe and water buffalo cheese using immunoblotting (Контролен метод за откриване на краве мляко в овче и биволско сирене чрез използване на имуноблотинг). Milchwissenschaft 50, 83-85 (1995 г.).
 Krause I., Berner I, Klostermeyer H.: Sensitive detection of cow milk in ewe and goat milk and cheese by carrier ampholyte — and carrier ampholyte/immobilized pH gradient — isoelectric focusing of γ-caseins using plasmin as signal amplifier (Чувствително откриване на краве мляко в овче и козе мляко и сирене чрез амфолит-носител и амфолит-носител/неутрализиран pH градиент — изоелектрическо фокусиране на γ-казеини с помощта на плазмин като индикаторен фермент) в: Electrophoresis-Forum 89 (B. J. Radola, ed.), стр 389—393, Bode-Verlag, München (1989 г.).
 Krause Ι., Belitz H.-D., Kaiser K.-P.: Nachweis von Kuhmilch in Schaf and Ziegenmilch bzw. -käse durch isoelektrische Fokussierung in harnstoffhaltigen Polyacrylamidgelen (Откриване на краве мляко в овче и козе мляко и сирене чрез изоелектрическо фокусиране в полиакриламидни гелове, съдържащи уреа). Z. Lebensm. Unters. Forsch. 174, 195-199 (1982).
 Radola B.J.: Ultrathin-layer isoelectric focusing in 50-100 μm polyacrylamide gels on silanised glass plates or polyester films (Изоелектрическо фокусиране със свръхтънък слой в 50-100 μm полиакриламидни гелове върху силанизирани стъклени съдове или полиестерни филми). Electrophoresis 1, 43-56 (1980 г.).
 Фигура 1
 Схематично представяне на покривния лист
 Фигура 2
 Слой казеин между водната и органичната фази след центрофугиране
 Фигура 3
 Техника на захлупване за изливане на свръхтънки полиакриламидни гелове
 a = разделителна лента (0,25 mm); b = покривен лист (5.3); c, e = стъклени плочи (5.1); d = разтвор на гел (4.1.2); f = лист носител на гел (5.2)
 Фигура 4a
 Изоелектрическо фокусиране на третирани с плазмин казеини от сирене, произведено от овче и от козе мляко и съдържащо различни количества краве мляко
 % CM = процент краве мляко, C = краве, E = овче, G = козе
 Показана е горната половина на гел IEF.
 Фигура 4б
 Изоелектрическо фокусиране на третирани с плазмин казеини от сирене, произведено от смеси от овче, козе и биволско мляко и съдържащо различни количества краве мляко
 % CM = процент краве мляко;


text:
1 + = проба, съдържаща 1 % краве мляко и прибавен чист крави казеин в средата на пътеката. C = краве, E = овче, G = козе, B = биволско
 Показано е общото разстояние на разделяне на гела IEF.
 Фигура 5
 Поредица денситограми на стандартните проби (STD) и пробите сирене, произведено от смес от овче и козе мляко, след изоелектрическо фокусиране
 a,b = стандартни проби, съдържащи 0 и 1 % краве мляко; c-g = проби сирене, съдържащи 0, 1, 2, 3 и 7 % краве мляко. C = краве, E = овче, G = козе.
 Сканирана е горната половина от гела IEF при λ = 634 nm.
 ПРИЛОЖЕНИЕ IX
 Оценка на анализите
 1. Осигуряване на качеството
 Анализите се извършват от лаборатории, определени в съответствие с член 12 от Регламент (ЕО) No 882/2004 (**), или определени от компетентните органи на държавата членка.
 2. Вземане на проби и оспорвания на резултатите от анализите
 1.
 Вземането на проби трябва да се извършва съгласно съответната правна уредба за разглеждания продукт. Ако не са изрично предвидени разпоредби относно вземането на проби, се прилагат разпоредбите, определени в стандарта ISO 707 — Мляко и млечни продукти. Указания за вземане на проби.
 2.
 Лабораторните отчети за резултатите от анализа трябва да съдържат достатъчно информация, за да може да се извърши оценка на резултатите в съответствие с допълнението.
 3.
 За анализите, които се изискват съгласно правилата на Съюза, трябва да бъдат вземани двойни проби.
 4.
 Ако възникне спор във връзка с резултатите, разплащателната агенция трябва да изисква необходимият анализ на съответния продукт да бъде проведен отново, като разходите се поемат от губещата страна.
 Горепосоченият анализ се извършва, при условие че са налични запечатани дублиращи проби от продукта, които се съхраняват по подходящ начин от компетентния орган. В рамките на 7 работни дни от съобщаването на резултатите от първия анализ производителят изпраща искане до разплащателната агенция за извършване на анализ. Разплащателната агенция извършва анализа в рамките на 21 работни дни след получаване на искането.
 5.
 Резултатът от повторния анализ е окончателен.
 6.
 Ако производителят може да докаже в рамките на пет работни дни от вземането на пробата, че процедурата по вземането на пробата не е извършена коректно, вземането на пробата трябва да бъде повторено, когато това е възможно. Ако вземането на пробата не може да бъде повторено, партидата трябва да бъде приета.
 Допълнение
 Оценка на съответствието на дадена партида със законно установените гранични стойности
 1. Принцип
 В случаите, в които законодателството относно публичната интервенция и помощта за частно складиране предвижда подробни процедури за вземане на проби, се следват тези процедури. Във всички останали случаи се използва проба от най-малко три единични проби, взети на случаен принцип от партидата, подлежаща на контрол. Възможно е подготвянето на съставна проба. Полученият резултат се сравнява със законно установените гранични стойности чрез изчисляване на 95 % доверителен интервал като 2 х стандартно отклонение, където съответното стандартно отклонение зависи от това дали: 1. методът е валидиран посредством международно сътрудничество със стойности за σr и σR, или 2. в случай на вътрешно валидиране, е била изчислена вътрешната


text:
възпроизводимост. Този доверителен интервал в такъв случай ще се равнява на неопределеността на резултата при измерването.
 2. Методът е валидиран посредством международно сътрудничество
 В такъв случай стандартното отклонение на повторяемостта σr и стандартното отклонение на възпроизводимостта σR са установени и лабораторията може да докаже, че се спазват работните характеристики на валидирания метод.
 Изчислява се средноаритметичната стойност на n пъти повторените измервания.
 Изчислява се разширената неопределеност (k = 2) за с формулата
 Ако крайният резултат x от измерването се изчислява с използването на формула от вида:, x = y
 1 + y
 2, x = y
 1 – y
 2, x = y
 1 · y
 2 или x = y
 1/y
 2, трябва да се спазват обичайните процедури за съчетаване на стандартни отклонения в подобни случаи.
 Партидата се преценява като несъответстваща с горната законно установена гранична стойност UL, ако
 ;
 в противен случай се преценява като съответстваща на UL.
 Партидата се преценява като несъответстваща с долната законно установена гранична стойност LL, ако
 ;
 в противен случай се преценява като съответстваща на LL.
 3. Вътрешно валидиране с изчисляване на стандартното отклонение на вътрешната възпроизводимост
 В случаите, когато се използват методи, непосочени в настоящия регламент, и не са били въведени измервания за точност, се извършва вътрешно валидиране. Във формулите за изчисляване на разширената неопределеност U се използват стандартното отклонение на вътрешната повторяемост σir и стандартното отклонение на вътрешната възпроизводимост σi
 R
 вместо съответно σr и σ
 R
 .
 Правилата, които трябва да се следват, за да се установи спазването на законно установените гранични стойности, са посочени в точка 1. Ако обаче партидата се прецени като несъответстваща със законно установената гранична стойност, измерванията се повтарят с метода, посочен в настоящия регламент, и резултатът се оценява съгласно точка 1.
 (*)
 Продуктите Ampholine® pH 3,5—9,5 (Pharmacia), както и Resolyte® pH 5—7, съответно pH 6—8 (BDH, Merck), се оказват особено подходящи за получаване на исканото отделяне на γ-казеини.
 (**)
 Регламент (ЕО) No 882/2004 г. на Европейския парламент и на Съвета от 29 април 2004 г. относно официалния контрол, провеждан с цел осигуряване на проверка на съответствието със законодателството в областта на фуражите и храните и правилата за опазване здравето на животните и хуманното отношение към животните (ОВ L 165, 30.4.2004 г., стр. 1).
 “
 (1) Методът, който ще бъде използван, се одобрява от разплащателната агенция.
 (2) Анализите на обгорели частички може да се извършват систематично. Те обаче се извършват винаги, когато не се провеждат сензорни проверки.
 (3) Методът, който ще бъде използван, се одобрява от разплащателната агенция (един или двата метода).
 (4) Методът, който ще бъде използван, се одобрява от разплащателната агенция.
 (5) Сензорни проверки се извършват, когато това се счита за необходимо след анализ на риска, одобрен от разплащателната агенция.
 (6) Методът, който ще бъде използван, се одобрява от разплащателната агенция.
 (7) Поставяне на пробата: след предварителното фокусиране (стъпка 1) върху апликаторите на проби (10 × 5 mm) се капват 18 μl от пробата и от стандартните разтвори, поставят се върху гела на разстояние 1 mm един от друг и на 5 mm надлъжно от


text:
 20.6.2017
 BG
 Официален вестник на Европейския съюз
 L 156/22
 РЕГЛАМЕНТ ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ (ЕС) 2017/1086 НА КОМИСИЯТА
 от 19 юни 2017 година
 за изменение на Регламент (ЕО) No 634/2007 по отношение на характеристиката на селенометионина, получен от Saccharomyces cerevisiae NCYC R397
 (текст от значение за ЕИП)
 ЕВРОПЕЙСКАТА КОМИСИЯ,
 като взе предвид Договора за функционирането на Европейския съюз,
 като взе предвид Регламент (ЕО) No 1831/2003 на Европейския парламент и на Съвета от 22 септември 2003 г. относно добавки за използване при храненето на животните (1), и по-специално член 13, параграф 2 от него,
 като има предвид, че:
 (1)
 С Регламент (ЕО) No 634/2007 на Комисията (2), изменен с Регламент за изпълнение (ЕС) No 427/2013 на Комисията (3) се разрешава селенометионинът, получен от Saccharomyces cerevisiae NCYC R397, като фуражна добавка.
 (2)
 Комисията получи заявление, в което се иска изменение на условията на разрешителното по отношение на характеристиката на фуражната добавка. Въпросното заявление беше придружено от съответни данни в подкрепа на искането за промяна. Комисията препрати посоченото заявление до Европейския орган за безопасност на храните („Органът“). Заявителят първоначално поиска включването на съдържанието на селеноцистеин в характеристиката на добавката, но накрая оттегли тази промяна; следователно заявлението се отнася единствено до увеличение на максималното съдържание на селен във валидното понастоящем разрешение за добавката.
 (3)
 В становището си от 20 октомври 2016 г. (4) Органът заключи, че заявеното изменение няма да окаже влияние върху безопасността и ефикасността на продукта, като припомни риска за безопасността на ползвателите на продукта. В действащия понастоящем акт за разрешаване се съдържа разпоредба за справяне по подходящ начин с този риск.
 (4)
 Оценката на изменения препарат показва, че той отговаря на условията за разрешаване, определени в член 5 от Регламент (ЕО) No 1831/2003.
 (5)
 Поради това Регламент (ЕО) No 634/2007 следва да бъде съответно изменен.
 (6)
 Мерките, предвидени в настоящия регламент, са в съответствие със становището на Постоянния комитет по растенията, животните, храните и фуражите,
 ПРИЕ НАСТОЯЩИЯ РЕГЛАМЕНТ:
 Член 1
 Изменение на Регламент (ЕО) No 634/2007
 В четвъртата колона от приложението към Регламент (ЕО) No 634/2007, текстът между заглавието „Характеристика на добавката“ и заглавието „Аналитичен метод“ се заменя със следното:
 „Органичен селен, предимно селенометионин (63 %), със съдържание на селен между 2 000 и 3 500 mg Se/kg (97—99 % органичен селен)“.
 Член 2
 Влизане в сила
 Настоящият регламент влиза в сила на двадесетия ден след деня на публикуването му в Официален вестник на Европейския съюз.
 Настоящият регламент е задължителен в своята цялост и се прилага пряко във всички държави членки.
 Съставено в Брюксел на 19 юни 2017 година.
 За Комисията
 Председател
 Jean-Claude JUNCKER
 (1) ОВ L 268, 18.10.2003 г., стр. 29.
 (2) Регламент (ЕО) No 634/2007 на Комисията от 7 юни 2007 г. относно разрешителното за селенометионин, произведен от Saccharomyces cerevisiae NCYC R397 като фуражна добавка (ОВ L 146, 8.6.2007 г., стр. 14).
 (3) Регламент за изпълнение (ЕС) No 427/2013 на Комисията от 8 май 2013 г. за разрешаването на селенометионин, получен от Saccharomyces cerevisiae NCYC R646, като фуражна добавка за всички животински видове и за изменение на регламенти (ЕО) No


text:
 16.1.2013
 BG
 Официален вестник на Европейския съюз
 L 11/12
 РЕГЛАМЕНТ ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ (ЕС) No 23/2013 НА КОМИСИЯТА
 от 15 януари 2013 година
 за установяване на стандартни стойности при внос с цел определяне на входната цена на някои плодове и зеленчуци
 ЕВРОПЕЙСКАТА КОМИСИЯ,
 като взе предвид Договора за функционирането на Европейския съюз,
 като взе предвид Регламент (ЕО) No 1234/2007 на Съвета от 22 октомври 2007 г. за установяване на обща организация на селскостопанските пазари и относно специфични разпоредби за някои земеделски продукти (Общ регламент за ООП) (1),
 като взе предвид Регламент за изпълнение (ЕС) No 543/2011 на Комисията от 7 юни 2011 г. за определяне на подробни правила за прилагането на Регламент (ЕО) No 1234/2007 на Съвета по отношение на секторите на плодовете и зеленчуците и на преработените плодове и зеленчуци (2), и по-специално член 136, параграф 1 от него,
 като има предвид, че:
 (1)
 В изпълнение на резултатите от Уругвайския кръг на многостранните търговски преговори в Регламент за изпълнение (ЕС) No 543/2011 са посочени критериите, по които Комисията определя стандартните стойности при внос от трети държави за продуктите и периодите, посочени в приложение XVI, част A от същия регламент.
 (2)
 Стандартната стойност при внос се изчислява за всеки работен ден съгласно член 136, параграф 1 от Регламент за изпълнение (ЕС) No 543/2011, като се вземат под внимание променливите данни за всеки ден. В резултат на това настоящият регламент следва да влезе в сила в деня на публикуването му в Официален вестник на Европейския съюз,
 ПРИЕ НАСТОЯЩИЯ РЕГЛАМЕНТ:
 Член 1
 Стандартните стойности при внос, посочени в член 136 от Регламент за изпълнение (ЕС) No 543/2011, са определени в приложението към настоящия регламент.
 Член 2
 Настоящият регламент влиза в сила в деня на публикуването му в Официален вестник на Европейския съюз.
 Настоящият регламент е задължителен в своята цялост и се прилага пряко във всички държави-членки.
 Съставено в Брюксел на 15 януари 2013 година.
 За Комисията, от името на председателя,
 José Manuel SILVA RODRÍGUEZ
 Генерален директор на генерална дирекция „Земеделие и развитие на селските райони“
 (1) ОВ L 299, 16.11.2007 г., стр. 1.
 (2) ОВ L 157, 15.6.2011 г., стр. 1.
 ПРИЛОЖЕНИЕ
 Стандартни стойности при внос за определяне на входната цена на някои плодове и зеленчуци
 (EUR/100 kg)
 Код по КН
 Код на третa държавa (1)
 Стандартна стойност при внос
 0702 00 00
 MA
 62,1
 TN
 102,6
 TR
 130,0
 ZZ
 98,2
 0707 00 05
 EG
 194,1
 TR
 130,5
 ZZ
 162,3
 0709 91 00
 EG
 158,2
 ZZ
 158,2
 0709 93 10
 MA
 104,4
 TR
 132,7
 ZZ
 118,6
 0805 10 20
 EG
 54,9
 MA
 59,8
 TR
 63,5
 ZA
 103,6
 ZZ
 70,5
 0805 20 10
 IL
 162,4
 MA
 95,8
 ZZ
 129,1
 0805 20 30, 0805 20 50, 0805 20 70, 0805 20 90
 IL
 113,9
 KR
 140,9
 TR
 94,1
 ZZ
 116,3
 0805 50 10
 TR
 76,9
 ZZ
 76,9
 0808 10 80
 BA
 47,0
 CN
 99,8
 MK
 38,5
 US
 183,6
 ZZ
 92,2
 0808 30 90
 CN
 65,3
 US
 134,8
 ZZ
 100,1
 (1) Номенклатура на държавите, определена с Регламент (ЕО) No 1833/2006 на Комисията (ОВ L 354,


text:
 6.3.2010
 BG
 Официален вестник на Европейския съюз
 L 56/7
 РЕГЛАМЕНТ (ЕС) No 192/2010 НА КОМИСИЯТА
 от 5 март 2010 година
 за определяне на вносните мита, приложими за полубланширан или бланширан ориз от 6 март 2010 година
 ЕВРОПЕЙСКАТА КОМИСИЯ,
 като взе предвид Договора за функционирането на Европейския съюз,
 като взе предвид Регламент (ЕО) No 1234/2007 на Съвета от 22 октомври 2007 г. за установяване на обща организация на селскостопанските пазари и относно специфични разпоредби за някои земеделски продукти („Общ регламент за ООП“) (1), и по-специално член 139 от него,
 като има предвид, че:
 (1)
 Въз основа на данните, предадени от компетентните органи, Комисията установи, че за периода от 1 септември 2009 г. до 28 февруари 2010 г. са издадени лицензии за внос на 207 074 тона полубланширан или бланширан ориз с код по КН 1006 30. Следователно вносното мито за полубланширан или бланширан ориз с код по КН 1006 30 следва да бъде изменено.
 (2)
 Определянето на приложимото мито следва да се извърши в срок от 10 дни след края на горепосочения период, поради което е уместно настоящият регламент да влезе в сила незабавно,
 ПРИЕ НАСТОЯЩИЯ РЕГЛАМЕНТ:
 Член 1
 Вносното мито, приложимо за полубланширан или бланширан ориз с код по КН 1006 30, възлиза на 175 EUR за тон.
 Член 2
 Настоящият регламент влиза в сила в деня на публикуването му в Официален вестник на Европейския съюз.
 Настоящият регламент е задължителен в своята цялост и се прилага пряко във всички държави-членки.
 Съставено в Брюксел на 5 март 2010 година.
 За Комисията, от името на председателя,
 Jean-Luc DEMARTY
 Генерален директор на Генерална дирекция „Земеделие и развитие на селските райони“
 (1) ОВ L 299, 16.11.2007 г., стр. 1.


text:
 28.1.2020
 BG
 Официален вестник на Европейския съюз
 LI 22/1
 РЕГЛАМЕНТ ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ (ЕС) 2020/119 НА СЪВЕТА
 от 28 януари 2020 година
 за прилагане на Регламент (ЕС) No 269/2014 относно ограничителни мерки по отношение на действия, подкопаващи или застрашаващи териториалната цялост, суверенитета и независимостта на Украйна
 СЪВЕТЪТ НА ЕВРОПЕЙСКИЯ СЪЮЗ,
 като взе предвид Договора за функционирането на Европейския съюз,
 като взе предвид Регламент (ЕС) No 269/2014 на Съвета от 17 март 2014 г. относно ограничителни мерки по отношение на действия, подкопаващи или застрашаващи териториалната цялост, суверенитета и независимостта на Украйна (1), и по-специално член 14, параграф 1 от него,
 като взе предвид предложението на върховния представител на Съюза по въпросите на външните работи и политиката на сигурност,
 като има предвид, че:
 (1)
 На 17 март 2014 г. Съветът прие Регламент (ЕС) No 269/2014.
 (2)
 Предвид организираните на 8 септември 2019 г. от Руската федерация т.нар. „местни избори“ в незаконно анексираните Автономна република Крим и град Севастопол в Украйна, Съветът счита, че седем лица следва да бъдат добавени в съдържащия се в приложение I към Регламент (ЕС) No 269/2014 списък на физическите и юридическите лица, образуванията и органите, за които се прилагат ограничителни мерки.
 (3)
 Поради това приложение I към Регламент (ЕС) No 269/2014 следва да бъде съответно изменено,
 ПРИЕ НАСТОЯЩИЯ РЕГЛАМЕНТ:
 Член 1
 Лицата, изброени в приложението към настоящия регламент, се добавят в списъка, съдържащ се в приложение I към Регламент (ЕС) No 269/2014.
 Член 2
 Настоящият регламент влиза в сила в деня на публикуването му в Официален вестник на Европейския съюз.
 Настоящият регламент е задължителен в своята цялост и се прилага пряко във всички държави членки.
 Съставено в Брюксел на 28 януари 2020 година.
 За Съвета
 Председател
 A. METELKO-ZGOMBIĆ
 (1) ОВ L 78, 17.3.2014 г., стр. 6.
 ПРИЛОЖЕНИЕ
 В списъка на лицата, съдържащ се в приложение I към Регламент (ЕС) No 269/2014, се добавят посочените по-долу лица:
 Име
 Идентифицираща информация
 Основания
 Дата на вписване
 „184.
 Sergei Andreevich DANILENKO (Сергей Андреевич ДАНИЛЕНКО)
 Пол: мъжки
 Дата на раждане: 14.3.1960 г.
 Място на раждане: Краснодар (бивш СССР)
 Председател на избирателната комисия на Севастопол. В това си качество той участва в организирането на местните избори в незаконно анексирания град Севастопол на 8 септември 2019 г., като по този начин активно подкрепя действия и провежда политика, които подкопават или застрашават териториалната цялост, суверенитета и независимостта на Украйна.
 28.1.2020 г.
 185.
 Lidia Aleksandrovna BASOVA (Лидия Александровна БАСОВА) /
 Lidiya Oleksandrivna BASOVA (Лiдiя Олександрiвна БАСОВА)
 Пол: женски
 Дата на раждане: 1972 г.
 Място на раждане: неизвестно
 Заместник-председател на избирателната комисия на Севастопол. В това си качество тя участва в организирането на местните избори в незаконно анексирания град Севастопол на 8 септември 2019 г., като по този начин активно подкрепя действия и провежда политика, които подкопават или застрашават териториалната цялост, суверенитета и независимостта на Украйна.
 28.1.2020 г.
 186.
 Ekaterina Eduardovna PYRKOVA (Екатерина Эдуардовна ПЫРКОВА) /
 Kateryna Eduardivna PYRKOVA (Катерина Едуардiвна ПИРКОВА)
 Пол: женски
 Дата на раждане: 22.8.1967 г.
 Място на раждане: Севастопол (бивш СССР)
 Секретар на избирателната комисия на Севастопол. В това си качество тя участва в


text:
организирането на местните избори в незаконно анексирания град Севастопол на 8 септември 2019 г. и по този начин активно подкрепя действия и провежда политика, които подкопават или застрашават териториалната цялост, суверенитета и независимостта на Украйна..
 28.1.2020 г.
 187.
 Ekaterina Borisovna ALTABAEVA (Екатерина Борисовна АЛТАБАЕВА) /
 Kateryna Borysivna ALTABAEVA (Катерина Борисiвна АЛТАБАЄВА)
 Пол: женски
 Дата на раждане: 27.5.1956 г.
 Място на раждане: Углич (бивш СССР)
 Член на Съвета на федерацията на Руската федерация от незаконно анексирания град Севастопол. Като поема и изпълнява посочената длъжност, тя работи за по-нататъшната интеграция на незаконно анексирания град Севастопол в Руската федерация, като по този начин активно подкрепя действия и провежда политика, които подкопават или застрашават териториалната цялост, суверенитета и независимостта на Украйна.
 28.1.2020 г.
 188.
 Yuriy Mikhailovich GOTSANYUK / Yuriy Mikhailovich GOTSANIUK (Юрий Михайлович ГОЦАНЮК) /
 Iurii Mykhailovych HOTSANIUK (Юрiй Михайлович ГОЦАНЮК)
 Пол: мъжки
 Дата на раждане: 18.7.1966 г.
 Място на раждане: Новая Деревня / Новое Село (бивш СССР)
 Министър-председател на т.нар. „Република Крим“. Като поема и изпълнява посочената длъжност, той работи за по-нататъшната интеграция на т.нар. „Република Крим“ в Руската федерация, като по този начин активно подкрепя действия и провежда политика, които подкопават или застрашават териториалната цялост, суверенитета и независимостта на Украйна.
 28.1.2020 г.
 189.
 Vladimir Vladimirovich NEMTSEV (Владимир Владимирович НЕМЦЕВ) /
 Volodymyr Volodymyrovych NEMTSEV (Володимир Володимирович НЄМЦЕВ)
 Пол: мъжки
 Дата на раждане: 15.11.1971 г.
 Място на раждане: Севастопол (бивш СССР)
 Председател на т.нар. „Законодателно събрание“ на незаконно анексирания град Севастопол. Като поема и изпълнява посочената длъжност, той работи за по-нататъшната интеграция на незаконно анексирания град Севастопол в Руската федерация, като по този начин активно подкрепя действия и провежда политика, които подкопават или застрашават териториалната цялост, суверенитета и независимостта на Украйна.
 28.1.2020 г.
 190.
 Mikhail Vladimirovich RAZVOZHAEV (Михаил Владимирович РАЗВОЖАЕВ) /
 Mykhailo Volodymyrovich RAZVOZHAEV (Михайло Володимирович РАЗВОЖАЄВ)
 Пол: мъжки
 Дата на раждане: 30.12.1980 г.
 Място на раждане: Красноярск (бивш СССР)
 Т.нар. „изпълняващ длъжността губернатор“ на незаконно анексирания град Севастопол. Като поема и изпълнява посочената длъжност, той работи за по-нататъшната интеграция на незаконно анексирания град Севастопол в Руската федерация, като по този начин активно подкрепя действия и провежда политика, които подкопават или застрашават териториалната цялост, суверенитета и независимостта на Украйна.
 28.1.2020 г.“


text:
 26.7.2017
 BG
 Официален вестник на Европейския съюз
 L 194/39
 РЕГЛАМЕНТ ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ (ЕС) 2017/1381 НА КОМИСИЯТА
 от 25 юли 2017 година
 за подновяване на одобрението на бродифакум като активно вещество за употреба в биоциди от продуктов тип 14
 (текст от значение за ЕИП)
 ЕВРОПЕЙСКАТА КОМИСИЯ,
 като взе предвид Договора за функционирането на Европейския съюз,
 като взе предвид Регламент (ЕС) No 528/2012 на Европейския парламент и на Съвета от 22 май 2012 г. относно предоставянето на пазара и употребата на биоциди (1), и по-специално член 14, параграф 4, буква а) от него,
 като има предвид, че:
 (1)
 Активното вещество бродифакум е одобрено за употреба в биоциди от продуктов тип 14 като родентицид съгласно Регламент (ЕС) No 528/2012.
 (2)
 В съответствие с член 13, параграф 1 от Регламент (ЕС) No 528/2012 бяха подадени две заявления до Европейската агенция по химикали („Агенцията“) за подновяване на одобрението на активното вещество. Посочените заявления бяха подложени на оценка от компетентните органи на Нидерландия и Италия в качеството им на оценяващи компетентни органи.
 (3)
 На 26 март 2016 г. оценяващият компетентен орган на Нидерландия представи своята препоръка на Агенцията за подновяване на одобрението на бродифакум, като включи и оцененото от Италия заявление.
 (4)
 Становището на Агенцията бе изготвено на 16 юни 2016 г. от Комитета по биоцидите (2), като бяха взети предвид заключенията на оценяващия компетентен орган.
 (5)
 Съгласно това становище бродифакум отговаря на критериите на Регламент (ЕО) No 1272/2008 на Европейския парламент и на Съвета (3) да бъде класифицирано като токсично вещество за репродукцията от категория 1A. Веществото също така отговаря на критериите на Регламент (ЕО) No 1907/2006 на Европейския парламент и на Съвета (4) за много устойчиви, биоакумулиращи и токсични вещества. Следователно бродифакум отговаря на критериите за изключване, посочени в член 5, параграф 1, букви в) и д) от Регламент (ЕС) No 528/2012.
 (6)
 Освен това употребата на продукти, които съдържат бродифакум, поражда опасения във връзка със случаи на първично и вторично отравяне, дори когато са приложени ограничителни мерки за управление на риска, и следователно бродифакум отговаря и на критерия да бъде кандидат за замяна в съответствие с член 10, параграф 1, буква д) от Регламент (ЕС) No 528/2012.
 (7)
 Съгласно член 12 от Регламент (ЕС) No 528/2012 одобрението на активни вещества, които отговарят на критериите за изключване, може да бъде подновено само когато поне едно от условията за дерогация, посочени в член 5, параграф 2 от същия регламент, продължава да е изпълнено.
 (8)
 В съответствие с член 10, параграф 3 от Регламент (ЕС) No 528/2012 Агенцията организира обществена консултация, за да събере необходимата информация относно бродифакум, включително относно наличните заместители.
 (9)
 Комисията също така проведе специална обществена консултация, за да събере информация относно това дали са изпълнени условията за дерогация, посочени в член 5, параграф 2 от Регламент (ЕС) No 528/2012. Комисията оповести публично получената по време на тази консултация информация.
 (10)
 Информацията, получена по време на двете посочени по-горе обществени консултации, както и информацията относно наличието на алтернативи на родентициди с антикоагулантно действие, включени в приложение 1 към доклада на Комисията относно


text:
мерките за намаляване на риска за родентициди с антикоагулантно действие (5), бяха обсъдени с държавите членки в рамките на Постоянния комитет по биоцидите.
 (11)
 Гризачите могат да пренасят патогени, които са причинител на много зоонози, които могат да представляват сериозна заплаха за здравето на хората или на животните. Нехимичните методи за контрол или превантивните методи за борба с гризачите, като например механичните и електрическите капани или капаните с лепило, може да не са достатъчно ефективни и може да повдигнат допълнителни въпроси относно това дали са хуманни, както и дали причиняват ненужно страдание на гризачите. Алтернативните активни вещества, одобрени за употреба като родентициди, може да не са подходящи за всички категории потребители или да не са ефикасни за всички видове гризачи. Тъй като за провеждането на ефективна борба с гризачите не може да се разчита само на тези нехимични или превантивни методи, се счита, че за провеждането на подходяща борба с гризачите бродифакумът има съществена допълваща посочените алтернативи функция. В резултат на това бродифакумът би се употребявал за предотвратяване или контролиране на сериозните заплахи, които гризачите представляват за здравето на хората или на животните. Следователно условието, посочено в член 5, параграф 2, буква б) от Регламент (ЕС) No 528/2012, е изпълнено.
 (12)
 Понастоящем при борбата с гризачите се разчита до голяма степен на употребата на родентициди с антикоагулантно действие, неодобряването на които би могло да доведе до недостатъчно резултатна борба с гризачите. Това може не само да доведе до значително отрицателно въздействие върху здравето на човека и на животните или върху околната среда, но също така би засегнало начина, по който обществото възприема своята безопасност по отношение на експозицията на гризачи или сигурността на редица икономически дейности, потенциално уязвими от гризачите, в резултат на което да настъпят някои икономически и социални последици. От друга страна, рисковете за здравето на хората и животните или за околната среда, които произтичат от употребата на продукти, съдържащи бродифакум, могат да бъдат намалени, ако тези продукти се употребяват в съответствие с определени спецификации и условия. Следователно неодобряването на бродифакум като активно вещество би имало несъразмерно голямо отрицателно въздействие върху обществото в сравнение с мащаба на рисковете, произтичащи от употребата на веществото. Следователно условието, посочено в член 5, параграф 2, буква в) от Регламент (ЕС) No 528/2012, е изпълнено.
 (13)
 Поради това е целесъобразно да се поднови одобрението на бродифакум за употреба в биоциди от продуктов тип 14 при спазване на определени спецификации и условия.
 (14)
 Бродифакум е кандидат за замяна в съответствие с член 10, параграф 1, букви а) и д) от Регламент (ЕС) No 528/2012 и поради това следва да се приложи срокът за подновяване на одобрението, определен в член 10, параграф 4 от посочения регламент.
 (15)
 Тъй като разглеждането на заявленията за подновяване на одобрението на флокумафен, бродифакум и варфарин за употреба в биоциди от продуктов тип 14 вече е приключено, Решение за изпълнение (ЕС) 2016/135 на Комисията (6) се отменя с Регламент за изпълнение (ЕС) 2017/1376 (7).
 (16)
 Мерките, предвидени в настоящия регламент, са в съответствие със становището на Постоянния комитет по биоцидите,


text:
ПРИЕ НАСТОЯЩИЯ РЕГЛАМЕНТ:
 Член 1
 Одобрението на бродифакум като активно вещество за употреба в биоциди от продуктов тип 14 се подновява при спазване на спецификациите и условията, посочени в приложението.
 Член 2
 Настоящият регламент влиза в сила на двадесетия ден след деня на публикуването му в Официален вестник на Европейския съюз.
 Настоящият регламент е задължителен в своята цялост и се прилага пряко във всички държави членки.
 Съставено в Брюксел на 25 юли 2017 година.
 За Комисията
 Председател
 Jean-Claude JUNCKER
 (1) ОВ L 167, 27.6.2012 г., стр. 1.
 (2) https://echa.europa.eu/regulations/biocidal-products-regulation/approval-of-active-substances/bpc-opinions-on-active-substance-approval
 (3) Регламент (ЕО) No 1272/2008 на Европейския парламент и на Съвета от 16 декември 2008 г. относно класифицирането, етикетирането и опаковането на вещества и смеси, за изменение и за отмяна на директиви 67/548/ЕИО и 1999/45/ЕО и за изменение на Регламент (ЕО) No 1907/2006 (ОВ L 353, 31.12.2008 г., стр. 1).
 (4) Регламент (ЕО) No 1907/2006 на Европейския парламент и на Съвета от 18 декември 2006 г. относно регистрацията, оценката, разрешаването и ограничаването на химикали (REACH), за създаване на Европейска агенция по химикали, за изменение на Директива 1999/45/ЕО и за отмяна на Регламент (ЕИО) No 793/93 на Съвета и Регламент (ЕО) No 1488/94 на Комисията, както и на Директива 76/769/ЕИО на Съвета и директиви 91/155/ЕИО, 93/67/ЕИО, 93/105/ЕО и 2000/21/ЕО на Комисията (ОВ L 396, 30.12.2006 г., стр. 1).
 (5) Мерки за намаляване на риска за родентициди с антикоалулантно действие — окончателен доклад. Европейска комисия (2014 г.), Брюксел, Белгия. стр. 100 и сл., ISBN 978-92-79-44992-5.
 (6) Решение за изпълнение (ЕС) 2016/135 на Комисията от 29 януари 2016 г. за отлагане на датата на изтичане на одобрението на флокумафен, бродифакум и варфарин за използване в биоциди за продуктов тип 14 (ОВ L 25, 2.2.2016 г., стр. 65).
 (7) Регламент за изпълнение (ЕС) 2017/1376 на Комисията от 25 юли 2017 г. за подновяване на одобрението на веществото варфарин като активно вещество за употреба в биоциди от продуктов тип 14 (вж. страница 9 от настоящия брой на Официален вестник).
 ПРИЛОЖЕНИЕ
 Общоприето наименование
 Наименование по IUPAC
 Идентификационни номера
 Минимална степен на чистота на активното вещество (1)
 Дата на изтичане на одобрението
 Продуктов тип
 Специални условия
 Бродифакум
 Наименование по IUPAC:
 3-[(1RS,3RS;1RS,3SR)-3-(4′-бромобифенил-4-ил)-1,2,3,4-тетрахидро-1-нафтил]-4-хидроксикумарин
 Номер на ЕО: 259-980-5
 CAS No: 56073-10-0
 950 g/kg
 30 юни 2024 г.
 14
 Бродифакумът се счита за кандидат за замяна в съответствие с член 10, параграф 1, букви а) и д) от Регламент (ЕС) No 528/2012.
 Разрешенията за биоциди се издават, ако са изпълнени следните общи условия:
 1)
 При оценката на продукта се обръща особено внимание на експозициите, рисковете и ефикасността, които са свързани с всякакви видове употреба, обхванати от заявление за издаване на разрешение, но не са разгледани в оценката (на равнището на Съюза) на риска от употребата на активното вещество. Освен това, съгласно точка 10 от приложение VI към Регламент (ЕС) No 528/2012, оценката на продукта трябва да включва оценка дали могат да бъдат изпълнени условията на член 5, параграф 2 от Регламент (ЕС) No 528/2012.
 2)
 Продуктите се разрешават за употреба в държавите членки единствено при изпълнение на поне едно от условията, посочени


text:
в член 5, параграф 2 от Регламент (ЕС) No 528/2012.
 3)
 Номиналната концентрация на бродифакум в продуктите не трябва да надвишава 50 mg/kg.
 4)
 Продуктите съдържат отблъскващ агент и оцветител.
 5)
 Не се разрешава употребата на продуктите под формата на прах за посипване.
 6)
 Продуктите под формата на контактни препарати, различни от прах за посипване, се разрешават само за употреба от обучени професионалисти в затворени помещения, които не са достъпни за деца или за нецелеви животни.
 7)
 Разрешават се само готови за употреба продукти.
 8)
 Първичната и вторичната експозиция на хора, нецелеви животни и на околната среда са сведени до минимум чрез спазване и прилагане на всички подходящи мерки за намаляване на риска. Тези мерки включват например ограничението за професионална употреба или употреба от обучени професионалисти, когато това е възможно, както и установяването на допълнителни специални условия за всяка категория потребители.
 9)
 Труповете и неизядените примамки се унищожават в съответствие с местните изисквания. Методът на унищожаване се описва конкретно в кратката характеристика на продукта в националното разрешение и се отбелязва върху етикета на продукта.
 В допълнение към общите условия разрешенията за биоциди, които да се употребяват от широката общественост, се издават, ако са изпълнени следните условия:
 1)
 Продуктите се разрешават само за употреба в защитени срещу неумело използване дератизационни кутии.
 2)
 Продуктите се доставят само със следните максимални количества примамки за опаковка:
 а)
 За продукти само срещу мишки:
 i)
 За примамки под формата на зърна, пелети или паста: 50 g.
 ii)
 За примамки под формата на парафиново блокче: 100 g.
 б)
 За продукти само срещу плъхове или срещу мишки и плъхове:
 i)
 За примамки под формата на зърна, пелети или паста: 150 g.
 ii)
 За примамки под формата на парафиново блокче: 300 g.
 3)
 Продуктите срещу Rattus norvegicus и Rattus rattus се разрешават само за употреба на закрито или във и около сгради.
 4)
 Продуктите срещу Mus musculus се разрешават само за употреба на закрито.
 5)
 Не се разрешава употребата на продуктите при постоянно или импулсно залагане на примамки.
 6)
 Лицата, които предлагат продуктите на пазара, гарантират, че продуктите са придружени от информация относно рисковете, свързани с родентициди с антикоагулантно действие като цяло, както и относно мерките за ограничаване на употребата им до необходимия минимум и подходящи предпазни мерки, които трябва да се предприемат.
 7)
 Продукти под формата на примамки в насипно състояние, като например на зърна или пелети, се разрешават само за употреба във формулировки, които се доставят в пликове или други опаковки, за да се намали експозицията на хората и околната среда.
 В допълнение към общите условия разрешенията за биоциди, които да се употребяват от професионалисти, се издават, ако са изпълнени следните условия:
 1)
 Не се разрешава употребата на продукти в отпадъчни води, открити пространства или депа за отпадъци.
 2)
 Не се разрешава употребата на продуктите при постоянно или импулсно залагане на примамки.
 3)
 Продуктите се разрешават само за употреба в защитени срещу неумело използване дератизационни кутии.
 4)
 Лицата, които предлагат на пазара продукти за професионалните потребители, гарантират, че тези продукти не се доставят на широката общественост.
 В


text:
допълнение към общите условия разрешенията за биоциди, които да се употребяват от обучени професионалисти, се издават, ако са изпълнени следните условия:
 1)
 Продуктите може да се разрешават за употреба в отпадъчни води, открити пространства или депа за отпадъци.
 2)
 Продуктите може да се разрешават за употреба в покрити и защитени места за примамки, при условие че те осигуряват същото ниво на защита за нецелевите видове и хората като това на защитените срещу неумело използване дератизационни кутии.
 3)
 Продуктите може да се разрешават за употреба при импулсно залагане на примамки.
 4)
 Не се разрешава употребата на продуктите при постоянно залагане на примамки.
 5)
 Лицата, които предлагат на пазара продукти за обучени професионални потребители, гарантират, че продуктите не се доставят на лица, които не са обучени професионалисти.
 (1) Посочената в тази графа чистота е минималната степен на чистота на оцененото активно вещество. Активното вещество в пуснатия на пазара продукт може да бъде със същата или различна чистота, ако е доказана техническата му равностойност с оцененото активно вещество.


text:
 5.10.2016
 BG
 Официален вестник на Европейския съюз
 L 270/3
 РЕГЛАМЕНТ ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ (ЕС) 2016/1767 НА КОМИСИЯТА
 от 27 септември 2016 година
 за вписване на наименование в регистъра на защитените наименования за произход и защитените географски указания [Paška janjetina (ЗНП)]
 ЕВРОПЕЙСКАТА КОМИСИЯ,
 като взе предвид Договора за функционирането на Европейския съюз,
 като взе предвид Регламент (ЕС) No 1151/2012 на Европейския парламент и на Съвета от 21 ноември 2012 г. относно схемите за качество на селскостопанските продукти и храни (1), и по-специално член 52, параграф 2 от него,
 като има предвид, че:
 (1)
 В съответствие с член 50, параграф 2, буква а) от Регламент (ЕС) No 1151/2012 заявлението за регистрация на наименованието „Paška janjetina“, подадено от Хърватия, бе публикувано в Официален вестник на Европейския съюз
 (2).
 (2)
 Тъй като Комисията не получи никакви възражения по член 51 от Регламент (ЕС) No 1151/2012, наименованието „Paška janjetina“ следва да се регистрира,
 ПРИЕ НАСТОЯЩИЯ РЕГЛАМЕНТ:
 Член 1
 Регистрира се наименованието „Paška janjetina“ (ЗНП).
 Наименованието по първа алинея се използва за идентифициране на продукт от клас 1.1. Прясно месо (и карантия) от приложение XI към Регламент за изпълнение (ЕС) No 668/2014 на Комисията (3).
 Член 2
 Настоящият регламент влиза в сила на двадесетия ден след деня на публикуването му в Официален вестник на Европейския съюз.
 Настоящият регламент е задължителен в своята цялост и се прилага пряко във всички държави членки.
 Съставено в Брюксел на 27 септември 2016 година.
 За Комисията,
 от името на председателя,
 Phil HOGAN
 Член на Комисията
 (1) ОВ L 343, 14.12.2012 г., стр. 1.
 (2) ОВ C 185, 24.5.2016 г., стр. 11.
 (3) Регламент за изпълнение (ЕС) No 668/2014 на Комисията от 13 юни 2014 г. за определяне на правила за прилагането на Регламент (ЕС) No 1151/2012 на Европейския парламент и на Съвета относно схемите за качество на селскостопанските продукти и храни (ОВ L 179, 19.6.2014 г., стр. 36).


text:
 30.6.2016
 BG
 Официален вестник на Европейския съюз
 L 173/42
 РЕГЛАМЕНТ ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ (ЕС) 2016/1053 НА КОМИСИЯТА
 от 28 юни 2016 година
 за изменение на Регламент (ЕО) No 1484/95 по отношение на определянето на представителните цени в секторите на птичето месо и яйцата и за яйчния албумин
 ЕВРОПЕЙСКАТА КОМИСИЯ,
 като взе предвид Договора за функционирането на Европейския съюз,
 като взе предвид Регламент (ЕС) No 1308/2013 на Европейския парламент и на Съвета от 17 декември 2013 г. за установяване на обща организация на пазарите на селскостопански продукти и за отмяна на регламенти (ЕИО) No 922/72, (ЕИО) No 234/79, (ЕО) No 1037/2001 и (ЕО) No 1234/2007 на Съвета (1), и по-специално член 183, буква б) от него,
 като взе предвид Регламент (ЕС) No 510/2014 на Европейския парламент и на Съвета от 16 април 2014 г. за определяне на търговския режим, приложим за някои стоки, получени от преработката на селскостопански продукти, и за отмяна на регламенти (ЕО) No 1216/2009 и (ЕО) No 614/2009 на Съвета (2), и по-специално член 5, параграф 6, буква а) от него,
 като има предвид, че:
 (1)
 С Регламент (ЕО) No 1484/95 на Комисията (3) се определят правилата за прилагане на системата на допълнителни вносни мита и представителните цени в секторите на птичето месо и яйцата и за яйчния албумин.
 (2)
 Редовната проверка на данните, на които се основава определянето на представителните цени за продуктите от секторите на птичето месо и яйцата, както и за яйчния албумин, показва, че се налага да бъдат променени представителните цени при внос на някои продукти, като се има предвид разликата в цените в зависимост от произхода.
 (3)
 Регламент (ЕО) No 1484/95 следва да бъде съответно изменен.
 (4)
 С оглед на необходимостта да се осигури възможно най-бързото прилагане на тази мярка след предоставянето на актуализираните данни, настоящият регламент следва да влезе в сила в деня на публикуването му,
 ПРИЕ НАСТОЯЩИЯ РЕГЛАМЕНТ:
 Член 1
 Приложение I към Регламент (ЕО) No 1484/95 се заменя с текста в приложението към настоящия регламент.
 Член 2
 Настоящия регламент влиза в сила в деня на публикуването му в Официален вестник на Европейския съюз.
 Настоящият регламент е задължителен в своята цялост и се прилага пряко във всички държави членки.
 Съставено в Брюксел на 28 юни 2016 година.
 За Комисията,
 от името на председателя,
 Jerzy PLEWA
 Генерален директор на генерална дирекция „Земеделие и развитие на селските райони“
 (1) ОВ L 347, 20.12.2013 г., стр. 671.
 (2) ОВ L 150, 20.5.2014 г., стр. 1.
 (3) Регламент (ЕО) No 1484/95 на Комисията от 28 юни 1995 г. относно определяне на подробни правила за прилагане на системата на допълнителни вносни мита и относно фиксиране на представителни цени в секторите птиче месо и яйца и за яйчен албумин, и за отмяна на Регламент No 163/67/ЕИО (ОВ L 145, 29.6.1995 г., стр. 47).
 ПРИЛОЖЕНИЕ
 „ПРИЛОЖЕНИЕ I
 Код по КН
 Описание на стоките
 Представителна цена
 (ЕUR/100 kg)
 Гаранция, посочена в член 3
 (ЕUR/100 kg)
 Произход (1)
 0207 12 10
 Неразфасовани замразени „пилета 70 %“
 122,1
 0
 AR
 0207 12 90
 Неразфасовани замразени „пилета 65 %“
 136,1
 0
 AR


text:
162,5
 0
 BR
 0207 14 10
 Обезкостени замразени разфасовки от петли или кокошки
 273,1
 8
 AR
 177,5
 41
 BR
 280,4
 6
 CL
 224,4
 23
 TH
 0207 27 10
 Обезкостени замразени разфасовки от пуйки
 341,3
 0
 BR
 308,1
 0
 CL
 0408 91 80
 Яйца без черупки, сушени
 390,3
 0
 AR
 1602 32 11
 Приготвени храни от петли или кокошки без топлинна обработка
 189,5
 30
 BR
 (1) Номенклатура на държавите съгласно Регламент (ЕС) No 1106/2012 на Комисията от 27 ноември 2012 г. за прилагане на Регламент (ЕО) No 471/2009 на Европейския парламент и на Съвета относно статистиката на Общността за външната търговия с трети страни по отношение на актуализиране на номенклатурата на държавите и териториите (ОВ L 328, 28.11.2012 г., стр. 7). Код „ZZ“ означава „друг произход“.“


text:
 12.12.2019
 BG
 Официален вестник на Европейския съюз
 L 321/114
 РЕГЛАМЕНТ ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ (ЕС) 2019/2128 НА КОМИСИЯТА
 от 12 ноември 2019 година
 за установяване на образеца на официален сертификат и правилата за издаване на официални сертификати за стоки, доставяни на плавателни съдове, които напускат територията на Съюза, и предназначени за зареждане на кораба или за консумация от екипажа и пътниците, или стоки, доставяни във военни бази на НАТО или на Съединените щати
 (текст от значение за ЕИП)
 ЕВРОПЕЙСКАТА КОМИСИЯ,
 като взе предвид Договора за функционирането на Европейския съюз,
 като взе предвид Регламент (ЕС) 2017/625 на Европейския парламент и на Съвета от 15 март 2017 г. относно официалния контрол и другите официални дейности, извършвани с цел да се гарантира прилагането на законодателството в областта на храните и фуражите, правилата относно здравеопазването на животните и хуманното отношение към тях, здравето на растенията и продуктите за растителна защита, за изменение на регламенти (ЕО) No 999/2001, (ЕО) No 396/2005, (ЕО) No 1069/2009, (ЕО) No 1107/2009, (ЕС) No 1151/2012, (ЕС) No 652/2014, (ЕС) 2016/429 и (ЕС) 2016/2031 на Европейския парламент и на Съвета, регламенти (ЕО) No 1/2005 и (ЕО) No 1099/2009 на Съвета и директиви 98/58/ЕО, 1999/74/ЕО, 2007/43/ЕО, 2008/119/ЕО и 2008/120/ЕО на Съвета, и за отмяна на регламенти (ЕО) No 854/2004 и (ЕО) No 882/2004 на Европейския парламент и на Съвета, директиви 89/608/ЕИО, 89/662/ЕИО, 90/425/ЕИО, 91/496/ЕИО, 96/23/ЕО, 96/93/ЕО и 97/78/ЕО на Съвета и Решение 92/438/ЕИО на Съвета (Регламент относно официалния контрол) (1), и по-специално член 77, параграф 3, буква а) и параграф 90, букви а) и е) от него,
 като има предвид, че:
 (1)
 С Регламент (ЕС) 2017/625 се установяват правилата, които компетентните органи на държавите членки трябва да спазват при извършването на официален контрол на животни и стоки, въвеждани в Съюза, с цел проверка на съответствието със законодателството на Съюза в областта на агрохранителната верига.
 (2)
 С Делегиран регламент (ЕС) 2019/2124 на Комисията (2) се определят правила за извършването на официален контрол на пратки с продукти от животински произход, зародишни продукти, странични животински продукти, и производни продукти, сено и слама и съставни продукти от трети държави, съхранявани в складове на територията на Съюза и предназначени да бъдат доставени във военна база на НАТО или САЩ, разположена на територията на Съюза или на трета държава, или предназначени да бъдат доставени на плавателен съд, който напуска територията на Съюза, за зареждане на кораба или за консумация от екипажа и пасажерите.
 (3)
 В Делегиран регламент (ЕС) 2019/2124 се предвижда по-специално че тези пратки с продукти от животински произход, зародишни продукти, странични животински продукти, производни продукти, сено и слама и съставни продукти трябва при напускането на склада да бъдат придружени от официален сертификат.
 (4)
 В Делегиран регламент (ЕС) 2019/2124 се предвижда също така, че пратките с продукти от животински произход, зародишни продукти, странични животински продукти, производни продукти, сено и слама и съставни продукти от трети държави, предназначени за плавателен съд, който напуска територията на Съюза, трябва при транспортирането им от граничния контролен пункт до кораба да бъдат придружени от официален сертификат.
 (5)
 От съображения за яснота и последователност


text:
е целесъобразно да бъде установен единен образец на официален сертификат за пратки с продукти от животински произход, зародишни продукти, странични животински продукти, производни продукти, сено и слама и съставни продукти от трети държави, предназначени да бъдат доставени на плавателни съдове, които напускат територията на Съюза, за зареждане на кораба или за консумация от екипажа и пътниците, или предназначени да бъдат доставени във военни бази на НАТО или САЩ, разположени на територията на Съюза или в трета държава.
 (6)
 Често съдържанието на пратките се определя в складовете. Тези пратки могат да се състоят от стоки, получени от няколко пратки с различен произход или категории на продуктите. С цел да се намали административната тежест, за стоките в новосъздадената пратка следва да се използва единен официален сертификат. Следва да се осигури проследимост на стоките, като в официалното удостоверение се посочи номерът на Единния здравен документ за въвеждане (ЕЗДВ), който придружава първоначалните пратки, от които са получени стоките.
 (7)
 Официалните сертификати могат да бъдат издавани от компетентните органи на хартиен носител или в електронен формат. Поради това е целесъобразно да бъдат установени изисквания по отношение на издаването на официалния сертификат и за двата случая.
 (8)
 В интерес на постигането на съгласуваност правилата, приложими за издаването на електронни сертификати и за използването на електронен подпис за официалните сертификати, предвидени в Регламент за изпълнение (ЕС) 2019/1715 на Комисията (3), следва да се прилагат и за образеца на официален сертификат, установен в настоящия регламент.
 (9)
 Образците на сертификати са включени в електронната система TRACES, създадена с Решение 2003/623/ЕО на Комисията (4) и Решение No 2004/292/ЕО на Комисията (5), с цел да бъдат улеснени и ускорени административните процедури при границите на Съюза и в митническите складове, както и да се даде възможност за обмен на електронни съобщения между участващите страни. Форматът на образеца на официален сертификат, определен в настоящия регламент, както и бележките относно неговото попълване, следва да бъдат съответно адаптирани към системата TRACES.
 (10)
 В съответствие с член 133, параграф 4 от Регламент (ЕС) 2017/625 системата TRACES трябва да бъде интегрирана в системата за управление на информацията относно официалния контрол (IMSOC). Поради това образецът на официален сертификат, установен в настоящия регламент, следва бъде пригоден към системата IMSOC.
 (11)
 Регламент (ЕС) 2017/625 се прилага от 14 декември 2019 г. Затова правилата, определени в настоящия регламент, следва също да се прилагат от тази дата.
 (12)
 Мерките, предвидени в настоящия регламент, са в съответствие със становището на Постоянния комитет по растенията, животните, храните и фуражите,
 ПРИЕ НАСТОЯЩИЯ РЕГЛАМЕНТ:
 Член 1
 Определение
 За целите на настоящия регламент се прилага определението за „склад“, установено в член 2, параграф 3 от Делегиран регламент (ЕС) 2019/20191007-016 на Комисията.
 Член 2
 Образец на официален сертификат
 1. За целите на член 21, параграф 1 и член 29, буква в) от Делегиран регламент (ЕС) 2019/2124 на Комисията образецът на официалния сертификат, посочен в част I от приложението към настоящия регламент, се използва за официалното сертифициране на пратки с продукти от животински произход, зародишни продукти, странични животински продукти, производни продукти, сено и слама и съставни продукти, които се