Tryptophansynthasen bei hohen Temperaturen : Charakterisierung der thermostabilen Enzyme aus Thermotoga maritima und Etablierung eines Selektionssystems zur Stabilisierung thermolabiler Enzyme in Thermus thermophilus In der vorliegenden Arbeit wurde die Tryptophan Synthase aus Thermotoga maritima strukturell und funktionell untersucht. Zu diesem Zweck wurden die Operon ständigen Gene tmtrpA und tmtrpB1 sowie das nur in Hyperthermophilen identifizierte nicht Operon ständige Gen tmtrpB2 jeweils einzeln in Escherichia coli exprimiert die Genprodukte gereinigt und charakterisiert. Sowohl tmTrpB1 als auch tmTrpB2 katalysieren die Synthese von Tryptophan bei 80 ʿC mit hoher Effizienz wobei tmTrpB1 einen höheren kcat und tmTrpB2 einen deutlich niedrigeren KM Wert für Indol aufweist. TmTrpB1 jedoch nicht tmTrpB2 bildet mit tmTrpA einen a2b2 Komplex aus in dem sich die beiden Enzyme wechselseitig aktivieren. Die Ergebnisse lassen vermuten dass tmTrpB2 bei den hohen physiologischen Temperaturen von Thermotoga maritima als Indol Rettungsprotein fungiert. Im zweiten Teil der Arbeit wurde ein Selektionssystem etabliert mit dessen Hilfe das thermolabile TrpA Protein aus E. coli (ecTrpA) stabilisiert werden sollte. Zu diesem Zweck wurde ein Thermus thermophilus trpA Defizienzstamm mit einer durch Zufallsmutagenese erstellten ectrpA Genbank transformiert und bei hohen Temperaturen auf Tryptophan freiem Minimalmedium inkubiert. Obwohl Kontrollversuche die Funktionstüchtigkeit des Selektionssystems zeigten kam es zu keinem Koloniewachstum und damit zu keiner Isolierung stabilisierter ecTrpA Varianten.