jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
calcium libéré donne, avec l’alizarine sulfonate de soude, une laque rouge calcaire. Le réactif ne doit pas colorer le fond. On doit toujours effectuer un contrôle en employant une solution sans glycérophosphame. Nous avons essayé, en outre, de situer les tannins sur la coupe avant le traitement par des photomicrographies en infrarouge en cherchant à utiliser l’absorption connue des tannins dans cette partie du spectre (Bawden). Il semble bien que les cellules riches en tannins soient aussi des cellules douées d’une phosphatase active. Nous nous proposons de lever cette indétermination par l’emploi du glycérophosphate radioactif. La méthode autoradiographique de Bellanger et Leblond permet de situer sur une emulsion photographique, qui recouvre la coupe elle-même, la trace du phosphore marqué — alors qu’une coloration a posteriori des tissus sous-jacents permet de déceler l’emplacement des tannins. BIBLIOGRAPHIE [1] J. MAGROU et P. MANIGAULT. Bull. Path. vég. Eut. Agr., 1948, 27, 63. [2] J. BLASS et P. MANIGAULT. Ces Annales, 1950, 79, 60. [3] J. VON NELLE Phytologist, 1945, 44, 191. [4] GOMORI. J. Lab. Clin. Med., 1950, 35, 802. [5] Michel DURAND. Rev. gén. Bot., 1929, 41, 239. [6] MENTEN, JUNGE et GREEN. Proceed. Soc. exp. Biol. a. Med., 1944, 57, 82. [7] BOURNE. Quart. J. exp. Physiol., 1944, 32, 1. [8] LISON. Bull. histol. appl., 1948, 25, 23. [9] GOMORI. An. N. Y. Acad. Sci., 1950, 50, 968. [10] BELLANGER et LEBLOND. Endocrinol., 1946, 39, 8. SUR LES VARIATIONS SECTORIELLES DES COLONIES DE TORULOPSIS NEOFORMANS par E. DROUHET et Mlle M. COUTEAU. (Institut Pasteur. Service de Mycologie et Physiologie végétale.) L’étude de Legroux et Magrou, en 1920 [1], sur « l’état organisé des colonies bactériennes » marque le point de départ de nombreuses recherches sur les variations des microorganismes. Ces auteurs étudient l’organisation structurale des colonies microbiennes par la technique des coupes histologiques en série, pratiquées transversalement, après fixation. Cette méthode peut servir à l’étude des variations en secteur des colonies géantes de Torulopsis neoformans, levure anaérobie sporée pathogène. A partir de colonies légèrement bombées, blanches, puis jaunâtres, de consistance crémeuse, correspondant au type smooth, et par repiquages successifs sur le
[7] BOURNE. Quart. J. exp. Physiol., 1944, 32, 1. [8] LISON. Bull. histol. appl., 1948, 25, 23. [9] GOMORI. An. N. Y. Acad. Sci., 1950, 50, 968. [10] BELLANGER et LEBLOND. Endocrinol., 1946, 39, 8. SUR LES VARIATIONS SECTORIELLES DES COLONIES DE TORULOPSIS NEOFORMANS par E. DROUHET et Mlle M. COUTEAU. (Institut Pasteur. Service de Mycologie et Physiologie végétale.) L’étude de Legroux et Magrou, en 1920 [1], sur « l’état organisé des colonies bactériennes » marque le point de départ de nombreuses recherches sur les variations des microorganismes. Ces auteurs étudient l’organisation structurale des colonies microbiennes par la technique des coupes histologiques en série, pratiquées transversalement, après fixation. Cette méthode peut servir à l’étude des variations en secteur des colonies géantes de Torulopsis neoformans, levure anaérobie sporée pathogène. A partir de colonies légèrement bombées, blanches, puis jaunâtres, de consistance crémeuse, correspondant au type smooth, et par repiquages successifs sur le milieu maltosé de Sabouraud, on obtient sur des colonies géantes des secteurs du type muqueux, transparents, de consistance visqueuse. A côté de ces formes en secteur, peuvent apparaître des îlots elliptiques dont les grands axes sont orientés suivant les rayons de la colonie. A partir de ces secteurs muqueux, sur le même milieu, on obtient des colonies plus pures qui, après repiquages successifs, ont à leur tour présenté des variations sectorielles du type S. Ce type S est beaucoup plus stable que le type M. Exceptionnellement, la colonie S sur le milieu glucosé de Sabouraud peut se plisser en son centre, prenant l’aspect du type R. L’examen microscopique de suspensions de levures dans de l’encre de Chine montre pour le type S des cellules de 4 à 6 μm de diamètre entourées d’une très mince capsule, ne dépassant pas 1 μm d’épaisseur ; pour le type M, la capsule est énorme, pouvant atteindre 10 μm d’épaisseur ; le type R est caractérisé par l’absence totale de capsules, et par une tendance à la filamentation (fausse mentation). En fonction de divers sucres utilisés comme source carbonée, la consistance crémeuse du type S présente peu de modifications, tandis que la consistance visqueuse
le même milieu, on obtient des colonies plus pures qui, après repiquages successifs, ont à leur tour présenté des variations sectorielles du type S. Ce type S est beaucoup plus stable que le type M. Exceptionnellement, la colonie S sur le milieu glucosé de Sabouraud peut se plisser en son centre, prenant l’aspect du type R. L’examen microscopique de suspensions de levures dans de l’encre de Chine montre pour le type S des cellules de 4 à 6 μm de diamètre entourées d’une très mince capsule, ne dépassant pas 1 μm d’épaisseur ; pour le type M, la capsule est énorme, pouvant atteindre 10 μm d’épaisseur ; le type R est caractérisé par l’absence totale de capsules, et par une tendance à la filamentation (fausse mentation). En fonction de divers sucres utilisés comme source carbonée, la consistance crémeuse du type S présente peu de modifications, tandis que la consistance visqueuse du type M change beaucoup, allant de celle de colonies gommeuses à énorme capsule (sur maltose) à celle de colonies coulantes moins capsulées, sur glucose. Dans l’ordre suivant, les sucres produisent des colonies moins visqueuses et des capsules moins épaisses : maltose, galactose, arabinose, raffinose, saccharose, lévulose, xylose, mannose et glucose. La substance capsulaire, qui influence tant la morphologie des colonies, est constituée de xylose, de mannose et d’un acide urique [2]. L’organisation structurale des colonies mixtes, a été étudiée sur coupes en série, pratiquées transversalement. Avant la fixation, afin d’éviter un décollement des levures, les colonies ont été couvertes d’une couche de gélose ; diverses méthodes de coloration et réactions cytochimiques ont été utilisées pour mettre en évidence sur coupe la capsule, la membrane cellulaire, le cytoplasme et le noyau, ainsi que les structures polyosidiques. Les secteurs S sont formés d’amas de petites cellules très peu capsulées, tassées les unes contre les autres, ce qui explique l’aspect macroscopique opaque et la consistance crémeuse de la colonie S. Les secteurs M sont formés de cellules espacées, entourées de la substance capsulaire, d’où la transparence et la viscosité qui caractérisent macroscopiquement ces secteurs. Les cellules du type S ont une remarquable
glucose. La substance capsulaire, qui influence tant la morphologie des colonies, est constituée de xylose, de mannose et d’un acide urique [2]. L’organisation structurale des colonies mixtes, a été étudiée sur coupes en série, pratiquées transversalement. Avant la fixation, afin d’éviter un décollement des levures, les colonies ont été couvertes d’une couche de gélose ; diverses méthodes de coloration et réactions cytochimiques ont été utilisées pour mettre en évidence sur coupe la capsule, la membrane cellulaire, le cytoplasme et le noyau, ainsi que les structures polyosidiques. Les secteurs S sont formés d’amas de petites cellules très peu capsulées, tassées les unes contre les autres, ce qui explique l’aspect macroscopique opaque et la consistance crémeuse de la colonie S. Les secteurs M sont formés de cellules espacées, entourées de la substance capsulaire, d’où la transparence et la viscosité qui caractérisent macroscopiquement ces secteurs. Les cellules du type S ont une remarquable affinité tinctoriale et leur cytoplasme est intensément coloré par le Gram et le Giemsa, ce qui masque la présence du noyau ; les cellules du type M sont moins fortement colorables par les mêmes colorants. Dans le type M, on note en plus l'apparition de grosses cellules de 8 à 10 µm de diamètre, dont le nombre augmente considérablement avec l'âge des colonies. Par la réaction de Feulgen, ces grandes cellules présentent dans un cytoplasme rose un corps légèrement coloré en violet, donc de nature probablement nucléaire. Le colorant de contraste, le vert lumière colore fortement les cellules des secteurs S. Il nous semble intéressant de rapprocher ces résultats préliminaires des observations de Duguid [3] et de Bunting, Robinow et Bunting [4] sur les rapports entre l'élaboration du matériel capsulaire et la mise en évidence des corps nucléaires chez les bactéries. BIBLIOGRAPHIE [1] R. LEGROUX et J. AGROU. Annales de l'Institut Pasteur, 1920, 34, 417. [2] E. DROUHET, G. SEGRETAIN et J.-P. AUBERT. Ces Annales, 1950, 79, 891. [3] J. P. DUGUID. J. Path. Bact., 1948, 60, 265. [4] M. I. BUNTING, C. F. ROBINOW et H. BUNTING. J. Bact., 1949, 58, 114. CONTRIBUTION A L'ÉTUDE DE L'INHIBITION DU VIRUS
10 µm de diamètre, dont le nombre augmente considérablement avec l'âge des colonies. Par la réaction de Feulgen, ces grandes cellules présentent dans un cytoplasme rose un corps légèrement coloré en violet, donc de nature probablement nucléaire. Le colorant de contraste, le vert lumière colore fortement les cellules des secteurs S. Il nous semble intéressant de rapprocher ces résultats préliminaires des observations de Duguid [3] et de Bunting, Robinow et Bunting [4] sur les rapports entre l'élaboration du matériel capsulaire et la mise en évidence des corps nucléaires chez les bactéries. BIBLIOGRAPHIE [1] R. LEGROUX et J. AGROU. Annales de l'Institut Pasteur, 1920, 34, 417. [2] E. DROUHET, G. SEGRETAIN et J.-P. AUBERT. Ces Annales, 1950, 79, 891. [3] J. P. DUGUID. J. Path. Bact., 1948, 60, 265. [4] M. I. BUNTING, C. F. ROBINOW et H. BUNTING. J. Bact., 1949, 58, 114. CONTRIBUTION A L'ÉTUDE DE L'INHIBITION DU VIRUS DE LA MOSAÏQUE DU TABAC PAR DIVERSES SUBSTANCES TANNIQUES. MODE D'ACTION DE CES DERNIÈRES par L. HIRTH. (Institut Pasteur. Service de Mycologie et Physiologie végétale.) De nombreux auteurs se sont préoccupés de la toxicité d'extraits végétaux divers vis-à-vis des bactéries [1], des plantes elles-mêmes [2], ou des virus végétaux. Nous-même [3] avons étudié l'action d'extraits divers de Pelargonium zonale sains et tumoraux sur la croissance de la carotte cultivée in vitro et nous avons cherché à établir les causes de la toxicité de tels extraits. Nous nous sommes demandé si l'étude de l'action éventuelle de ces extraits sur le virus de la Mosaïque du Tabac ne pourrait nous apporter de précieux renseignements. Dès 1925, Duggar et Armstrong [4] montraient que l'activité du virus de la Mosaïque du Tabac était inhibée par des extraits de Phytolacca decandra. Depuis lors, les études se multiplièrent dans cette direction et de nombreux auteurs montrèrent alors que les extraits végétaux les plus divers pouvaient être inhibiteurs dans des conditions d'ailleurs très variées [5, 6, 7], etc. Récemment Manil entreprit une série d'études systématiques sur l'activité des extraits aqueux d'un grand nombre de plantes [8, 9] appartenant aux groupes végétaux les plus divers ; Takahashi [10],
[3] avons étudié l'action d'extraits divers de Pelargonium zonale sains et tumoraux sur la croissance de la carotte cultivée in vitro et nous avons cherché à établir les causes de la toxicité de tels extraits. Nous nous sommes demandé si l'étude de l'action éventuelle de ces extraits sur le virus de la Mosaïque du Tabac ne pourrait nous apporter de précieux renseignements. Dès 1925, Duggar et Armstrong [4] montraient que l'activité du virus de la Mosaïque du Tabac était inhibée par des extraits de Phytolacca decandra. Depuis lors, les études se multiplièrent dans cette direction et de nombreux auteurs montrèrent alors que les extraits végétaux les plus divers pouvaient être inhibiteurs dans des conditions d'ailleurs très variées [5, 6, 7], etc. Récemment Manil entreprit une série d'études systématiques sur l'activité des extraits aqueux d'un grand nombre de plantes [8, 9] appartenant aux groupes végétaux les plus divers ; Takahashi [10], B. Kassanis, Kleczkowski [11] parvinrent même à isoler, purifier et identifier la ou les substances inhibitrices étudiées. C'est en nous inspirant de ces méthodes et de ces résultats que nous avons entrepris nos travaux sur les extraits aqueux de Pelargonium zonale, et ceci afin de préciser les recherches précédemment entreprises [3]. I. — ÉTUDE DE L'ACTION D'EXTRAITS DE P. zonale SUR LE VIRUS DE LA MOSAÏQUE DU TABAC. MÉTÉOROLOGIE ET MÉTHODE. a) Les extraits de Pelargonium zonale comprennent des extraits de tiges saines, des extraits de tumeurs (crown-gall), des extraits distillés de tiges saines et de tumeurs. Ils ont été faits suivant la technique générale indiquée dans notre précédent mémoire [3]. Après ajustage des pH des divers extraits à 4,9-5,0, leur teneur en acide géranylphénylpropanique a été évaluée en employant la technique que nous avons mise au point [12] en collaboration avec B. Rybak. b) Le virus de la Mosaïque du Tabac que nous avons utilisé provenait d'une souche de l'Institut Pasteur et était utilisé sous forme de jus extrait de tabacs inoculés depuis quinze à vingt jours environ. Dans cette première série d'essais, nous avons employé des jus bruts et des jus purifiés (1). c) L'activité du virus a
[3]. I. — ÉTUDE DE L'ACTION D'EXTRAITS DE P. zonale SUR LE VIRUS DE LA MOSAÏQUE DU TABAC. MÉTÉOROLOGIE ET MÉTHODE. a) Les extraits de Pelargonium zonale comprennent des extraits de tiges saines, des extraits de tumeurs (crown-gall), des extraits distillés de tiges saines et de tumeurs. Ils ont été faits suivant la technique générale indiquée dans notre précédent mémoire [3]. Après ajustage des pH des divers extraits à 4,9-5,0, leur teneur en acide géranylphénylpropanique a été évaluée en employant la technique que nous avons mise au point [12] en collaboration avec B. Rybak. b) Le virus de la Mosaïque du Tabac que nous avons utilisé provenait d'une souche de l'Institut Pasteur et était utilisé sous forme de jus extrait de tabacs inoculés depuis quinze à vingt jours environ. Dans cette première série d'essais, nous avons employé des jus bruts et des jus purifiés (1). c) L'activité du virus a été mesurée à l'aide du test des lésions locales obtenues sur Nicotiana glutinosa (2). RÉSULTATS. Dans la première série de résultats que nous indiquons ci-dessous, nous avons utilisé un jus de tabac non purifié. (1) 15 g de feuilles fraîches de Tabac mosaïqué étaient broyées au mortier. Le jus récolté était centrifugé durant quinze minutes à 6 000 g. Les jus utilisés bruts étaient employés tels quels. Pour la purification, nous avons employé la méthode suivante qui nous a été aimablement indiquée par G. Segretain. Le jus préalablement centrifugé est additionné d'un volume de phosphate disodique à 15 g/litre. On laisse reposer une demi-heure, on centrifugue longuement à 6 000 g. Le surnageant est récupéré et on lui ajoute 1/3 de volume de S04(NH4)2 saturé ; il se forme un fin précipité blanchâtre. On centrifuge à fond ; le surnageant est éliminé et le précipité est dissous dans 6 cm3 d'eau bidistillée, puis on ajoute 2 cm3 de S04(NH4)2 saturé ; on centrifuge de nouveau et on redissout le précipité de la même façon que précédemment. Ces opérations sont recommencées jusqu'à ce que le surnageant soit clair. Quand ce résultat est obtenu, le précipité est repris par 15 cm3 d'eau
était centrifugé durant quinze minutes à 6 000 g. Les jus utilisés bruts étaient employés tels quels. Pour la purification, nous avons employé la méthode suivante qui nous a été aimablement indiquée par G. Segretain. Le jus préalablement centrifugé est additionné d'un volume de phosphate disodique à 15 g/litre. On laisse reposer une demi-heure, on centrifugue longuement à 6 000 g. Le surnageant est récupéré et on lui ajoute 1/3 de volume de S04(NH4)2 saturé ; il se forme un fin précipité blanchâtre. On centrifuge à fond ; le surnageant est éliminé et le précipité est dissous dans 6 cm3 d'eau bidistillée, puis on ajoute 2 cm3 de S04(NH4)2 saturé ; on centrifuge de nouveau et on redissout le précipité de la même façon que précédemment. Ces opérations sont recommencées jusqu'à ce que le surnageant soit clair. Quand ce résultat est obtenu, le précipité est repris par 15 cm3 d'eau bidistillée et mis à dialyser pendant vingt-quatre heures contre de l'eau bidistillée. (2) Voici le détail d'une mesure effectuée : 1 cm3 de jus de Tabac mosaïqué est additionné de 1 cm3 de chacun des extraits à étudier. Le témoin est obtenu en ajoutant 1 cm3 d'eau bidistillée à 1 cm3 de jus de Tabac. Les pH sont ajustés à 5. Le contact est maintenu pendant quinze minutes à la température du laboratoire. Les feuilles de N. glutinosa sont inoculées : la moitié droite avec le virus témoin, la moitié gauche avec l'essai. Plusieurs plantes sont inoculées pour un même essai et les feuilles sont choisies de telle façon que les extraits à tester occupent toutes les positions en tenant compte de la disposition des feuilles sur N. glutinosa. 48 47 (1) Les chiffres donnés sont des moyennes de trois mesures; il en est de même pour tous les autres tableaux. (2) La notation suivante a été employée au cours de cet exposé : Pz 0, Pelargonium zonale sain; Pz t, tumeur de Pelargonium zonale (Crown gall). Les extraits employés dans ce premier essai présentaient une nette réaction aux sels de fer et l'évaluation de la teneur en acide géraniquinique
cm3 de jus de Tabac. Les pH sont ajustés à 5. Le contact est maintenu pendant quinze minutes à la température du laboratoire. Les feuilles de N. glutinosa sont inoculées : la moitié droite avec le virus témoin, la moitié gauche avec l'essai. Plusieurs plantes sont inoculées pour un même essai et les feuilles sont choisies de telle façon que les extraits à tester occupent toutes les positions en tenant compte de la disposition des feuilles sur N. glutinosa. 48 47 (1) Les chiffres donnés sont des moyennes de trois mesures; il en est de même pour tous les autres tableaux. (2) La notation suivante a été employée au cours de cet exposé : Pz 0, Pelargonium zonale sain; Pz t, tumeur de Pelargonium zonale (Crown gall). Les extraits employés dans ce premier essai présentaient une nette réaction aux sels de fer et l'évaluation de la teneur en acide géraniquinique nous a donné les résultats suivants : Pz 0, 0,027 p. 100 ; Pz t, 0,036 p. 100. Après distillation au demi-volumen, les extraits sont ramenés à leur volume initial par de l'eau bidistillée. La deuxième série d'essai, exécutée avec du virus purifié, a donné les résultats suivants : NOMBRE DE LÉSIONS NATURE DE L'EXTRAIT par demi-feuille Témoins Virus + extraits. Pz 0 non distillé. 47 16 Pz 0 distillé. 31 2 Pz t non distillé 37 38 Pz t distillé. 28 27 Les extraits employés contenaient respectivement : Pz 0, 0,038 p. 100 ; Pz t, 0,041 p. 100 d'acide géraniquinique. Il ressort des chiffres précédents que l'extrait de Pelargonium sain non distillé présente une toxicité nette vis-à-vis du virus et, en tout cas, parfaitement constante au cours des essais que nous avons effectués. Le Pelargonium sain distillé semble présenter une toxicité très sensiblement moins forte que celle de l'extrait non distillé. Quant aux extraits tumoraux, ils semblent dépourvus d'activité. Ce résultat est assez facilement interprétable ; l'extrait non distillé de Pz 0 contient des essences dont la toxicité s'avère ainsi manifeste. Les 3 autres extraits n'en contiennent pas. Mais il ne faut pas oublier que tous nos extraits
DE LÉSIONS NATURE DE L'EXTRAIT par demi-feuille Témoins Virus + extraits. Pz 0 non distillé. 47 16 Pz 0 distillé. 31 2 Pz t non distillé 37 38 Pz t distillé. 28 27 Les extraits employés contenaient respectivement : Pz 0, 0,038 p. 100 ; Pz t, 0,041 p. 100 d'acide géraniquinique. Il ressort des chiffres précédents que l'extrait de Pelargonium sain non distillé présente une toxicité nette vis-à-vis du virus et, en tout cas, parfaitement constante au cours des essais que nous avons effectués. Le Pelargonium sain distillé semble présenter une toxicité très sensiblement moins forte que celle de l'extrait non distillé. Quant aux extraits tumoraux, ils semblent dépourvus d'activité. Ce résultat est assez facilement interprétable ; l'extrait non distillé de Pz 0 contient des essences dont la toxicité s'avère ainsi manifeste. Les 3 autres extraits n'en contiennent pas. Mais il ne faut pas oublier que tous nos extraits contiennent également des tannins et que l'action toxique de ceux-ci est connue depuis longtemps [13, 14] ; aussi avons-nous cherché à établir le degré de toxicité de ceux-ci et leur responsabilité éventuelle dans l'inhibition du virus par nos extraits végétaux. II. — INHIBITION DU VIRUS DE LA MOSAÏQUE DU TABAC PAR LES TANNINS. A. COMPARAISON DE LA TOXICITÉ DE L'ACIDE TANNIQUE ET DE L'ACIDE GÉRANIQUINIQUE. — Nous avons alors entrepris de comparer l'activité de l'acide tannique pur à l'éther du commerce avec l'acide géraniquinique que nous avons extrait et purifié nous-même [3]. La purification de l'acide géraniquinique que nous avons effectuée ne nous permet pas d'affirmer que notre produit est absolument pur. Freudenberg [15] indique, en effet, que chaque tannin doit être purifié par des méthodes qui lui sont particulières. L'acide géraniquinique n'ayant pas fait l'objet, à notre connaissance, d'étude systématique, nous avons employé une méthode voisine de celle qui sert à préparer l'acide tannique du commerce. Le corps obtenu dans ces conditions a l'aspect de paillettes brun rouge. Il est facilement soluble dans l'eau (surtout à chaud), sa solubilité est même plus grande que celle de l'acide tannique. Le pH d'une solution d'acide tannique à 1 p. 100 est
PAR LES TANNINS. A. COMPARAISON DE LA TOXICITÉ DE L'ACIDE TANNIQUE ET DE L'ACIDE GÉRANIQUINIQUE. — Nous avons alors entrepris de comparer l'activité de l'acide tannique pur à l'éther du commerce avec l'acide géraniquinique que nous avons extrait et purifié nous-même [3]. La purification de l'acide géraniquinique que nous avons effectuée ne nous permet pas d'affirmer que notre produit est absolument pur. Freudenberg [15] indique, en effet, que chaque tannin doit être purifié par des méthodes qui lui sont particulières. L'acide géraniquinique n'ayant pas fait l'objet, à notre connaissance, d'étude systématique, nous avons employé une méthode voisine de celle qui sert à préparer l'acide tannique du commerce. Le corps obtenu dans ces conditions a l'aspect de paillettes brun rouge. Il est facilement soluble dans l'eau (surtout à chaud), sa solubilité est même plus grande que celle de l'acide tannique. Le pH d'une solution d'acide tannique à 1 p. 100 est de 3,8 ; celui d'une solution d'acide géraniquinique à 1 p. 100 de 3,3. Dans tous nos essais, les pH des diverses solutions tanniques ont été ramenés à 5. Les résultats de nos mesures sont résumés par les chiffres suivants ; ils ont été effectués avec du virus purifié. NOMBRE DE LÉSIONS PAR DEMI-FEUILLE Témoins Virus + solution tannique 1 p. 100 56 1 0,5 p. 100 51 12 Concentration 0,25 p. 100. 55 40 en acide 0,1 p. 100 77 73 tannique. 0,05 p. 100.. 83 85 0,025 p. 100. 65 68 0,01 p. 100.. 67 66 Concentration 1 p. 100 30 2 en acide 0,5 p. 100 46 30 géraniquinique. 0,25 p. 100.. 31 30 (3) Nous avons employé la méthode indiquée dans un précédent mémoire [12] en y apportant quelques modifications. Les poudres ont toujours été laissées vingt-quatre heures au contact du mélange extracteur ; l'extraction n'a pas eu lieu à chaud, afin d'éviter l'oxydation des tannins. Toutes les distillations ont été opérées dans le vide à 26°. Le produit séché est redissout dans un mélange acétone-eau CH/9 30 p. 100) filtré, évaporé dans le vide, puis repris par l'eau bouillante, filtré et évaporé de nouveau dans