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en grammes en grammes Du 1er mai 1934 au 30 avril 1935. 0,1480 0,00203 1,51 Cette proportion de soufre, équivalant à environ 2 milligr. 5 de soufre par litre, paraît, au premier abord, très petite. Elle est cependant loin d'être négligeable au point de vue agricole : on peut calculer, en effet, que si elle était complètement absorbée, elle suffirait à couvrir les besoins en souvre des récoltes de nos principales plantes cultivées. La question se pose de savoir si dans certaines régions agricoles la proportion de soufre atmosphérique n'est pas inférieure à celle trouvée dans l'eau de pluie de Grignon. Comme il s'agirait alors de proportions très petites, de l'ordre de grandeur des erreurs d'expériences de la plupart des méthodes d'analyse employées jusqu'ici, il faudrait évidemment tenir compte des observations que j'ai présentées plus haut pour obtenir une réponse précise à cette question. BIBLIOGRAPHIE [1] C. R. Acad. Agric., 21, 1935, p. 775. [2] Redistillée sous le vide de la trompe à eau dans un appareil de verre. [3] Les évaporations ont été faites dans une partie du laboratoire où n'était dégagée aucune vapeur sulfurique. [4] C'est une cause d'erreur identique que j'ai signalée en 1907, à propos de l'analyse du caoutchouc. Caoutchouc et Gutta-percha, 4, 1907, p. 1201. [5] BERTRAND (Gab.) et SILBERSTEIN (L.). Ces Annales, 50, 1933, p. 344. [6] BERTRAND (Gab.) et SILBERSTEIN (L.). Bull. Soc. chim., (4), 41, 1927, p. 950 et 47, 1929, p. 95. [7] Il va de soi que l'eau et les réactifs doivent être tout à fait purs; ceux qui ont été utilisés dans les expériences décrites ici ne donnaient, aux doses et dans les conditions énumérées, aucun précipité par le chlorure de baryum. [8] La section transversale du cylindre collecteur étant de 135 centiares. [9] En se servant en particulier des résultats obtenus par BERTRAND (Gab.) et SILBERSTEIN (L.). Bull. Soc. chim. (4), 47, 1930, p. 99, et par BERTRAND (Gab.) et GHITESCU (V.), Complet rendus, 199, 1934, p. 1219. L'EAU LOURDE A-ELLE UNE ACTION SUR LES BACTÉRIES? Par R. DUJARRIC DE LA RIVIÈRE et ETIENNE ROUX. Dès que l'eau
l'analyse du caoutchouc. Caoutchouc et Gutta-percha, 4, 1907, p. 1201. [5] BERTRAND (Gab.) et SILBERSTEIN (L.). Ces Annales, 50, 1933, p. 344. [6] BERTRAND (Gab.) et SILBERSTEIN (L.). Bull. Soc. chim., (4), 41, 1927, p. 950 et 47, 1929, p. 95. [7] Il va de soi que l'eau et les réactifs doivent être tout à fait purs; ceux qui ont été utilisés dans les expériences décrites ici ne donnaient, aux doses et dans les conditions énumérées, aucun précipité par le chlorure de baryum. [8] La section transversale du cylindre collecteur étant de 135 centiares. [9] En se servant en particulier des résultats obtenus par BERTRAND (Gab.) et SILBERSTEIN (L.). Bull. Soc. chim. (4), 47, 1930, p. 99, et par BERTRAND (Gab.) et GHITESCU (V.), Complet rendus, 199, 1934, p. 1219. L'EAU LOURDE A-ELLE UNE ACTION SUR LES BACTÉRIES? Par R. DUJARRIC DE LA RIVIÈRE et ETIENNE ROUX. Dès que l'eau lourde (oxyde de deuterium) fut découverte, on chercha si elle était douée de propriétés biologiques spéciales. Certains auteurs lui reconnurent une action favorisante sur la culture de quelques organismes; d'autres, au contraire, les plus nombreux, lui trouvèrent des propriétés abiotiques. À la dilution de 1 p. 2.000, l'eau lourde favoriserait la poussée des Oscillaires, des moisissures parasites des Planaires (E. J. Larson), de la levure Saccharomyces cerevisiae (0. W. Richards); à 0,47 p. 100, elle a une action favorable sur la culture de l'Aspergillus (Samuel L. Meyer); à 0,54 p. 100 elle diminuerait l'action bactéricide du nitrate d'argent vis-à-vis de B. pyocyaneus, et surtout de B. coli (G. Lockemann et H. Leumig). Des travaux, déjà nombreux, établissent que l'eau lourde gêne ou empêche la culture de nombreux organismes. Gilbert N. Lewis (2) montra, en 1933, que l'eau lourde gêne ou inhibe, suivant la concentration, la germination des graines de tabac (Nicotiana tabacum var. purpurea). David L. Macht et Mary E. Davis constatèrent aussi une légère action inhibitrice de l'eau lourde sur les graines de lupin. D'après T. Cunliffe Barnes, les filaments de Spirogyra (Spirogyra nitida) maintenus dans l'eau lourde diluée à 1/2000 perdent leur mobilité et ne se divisent plus.
la poussée des Oscillaires, des moisissures parasites des Planaires (E. J. Larson), de la levure Saccharomyces cerevisiae (0. W. Richards); à 0,47 p. 100, elle a une action favorable sur la culture de l'Aspergillus (Samuel L. Meyer); à 0,54 p. 100 elle diminuerait l'action bactéricide du nitrate d'argent vis-à-vis de B. pyocyaneus, et surtout de B. coli (G. Lockemann et H. Leumig). Des travaux, déjà nombreux, établissent que l'eau lourde gêne ou empêche la culture de nombreux organismes. Gilbert N. Lewis (2) montra, en 1933, que l'eau lourde gêne ou inhibe, suivant la concentration, la germination des graines de tabac (Nicotiana tabacum var. purpurea). David L. Macht et Mary E. Davis constatèrent aussi une légère action inhibitrice de l'eau lourde sur les graines de lupin. D'après T. Cunliffe Barnes, les filaments de Spirogyra (Spirogyra nitida) maintenus dans l'eau lourde diluée à 1/2000 perdent leur mobilité et ne se divisent plus. E. Wellford Taylor et E. Newton Harley ont montré, qu'à partir d'une concentration à 45 p. 100, l'eau lourde inhibe la ACTION DE L'EAU LOURDE SUR LES BACTÉRIES H La respiration des levures. Dans l'eau lourde à 98 p. 100 l'intensité respiratoire est diminuée de moitié. De même, la respiration et la luminescence des bactéries lumineuses marines sont très diminuées par l'eau lourde à une forte concentration. H. S. Taylor, W. W. Swingle, H. Eyring et A. H. Frost ont établi que l'eau lourde à 92 p. 100 est toxique pour certains organismes : têtards, planaires, paramécies, mais que ceux-ci peuvent vivre dans l'eau lourde à 30 p. 100 comme dans l'eau ordinaire. Récemment, MM. L. Plantefol et G. Champetier ont publié de très intéressantes études sur la germination du pollen et sur les phénomènes de reviviscence dans l'eau lourde. Le choix du pollen (dans le cas particulier celui de Narcissus papyraceus) était heureux ; c'est un matériel très sensible puisqu'il germe dans l'eau pure. Dans les dilutions d'eau lourde de 57 à 18 p. 100, le pollen germe. Le développement des tubes polliniques est toujours plus considérable à 18 p. 100 que dans l'eau ordinaire; à 57 p. 100,
et la luminescence des bactéries lumineuses marines sont très diminuées par l'eau lourde à une forte concentration. H. S. Taylor, W. W. Swingle, H. Eyring et A. H. Frost ont établi que l'eau lourde à 92 p. 100 est toxique pour certains organismes : têtards, planaires, paramécies, mais que ceux-ci peuvent vivre dans l'eau lourde à 30 p. 100 comme dans l'eau ordinaire. Récemment, MM. L. Plantefol et G. Champetier ont publié de très intéressantes études sur la germination du pollen et sur les phénomènes de reviviscence dans l'eau lourde. Le choix du pollen (dans le cas particulier celui de Narcissus papyraceus) était heureux ; c'est un matériel très sensible puisqu'il germe dans l'eau pure. Dans les dilutions d'eau lourde de 57 à 18 p. 100, le pollen germe. Le développement des tubes polliniques est toujours plus considérable à 18 p. 100 que dans l'eau ordinaire; à 57 p. 100, il y a, suivant les lots de pollen, diminution nette ou amélioration. L. Plantefol et G. Champetier ont vu que l'eau lourde à 98 p. 100 n'empêche pas les phénomènes de reviviscence qu'ils ont tentés sur des Tardigrades (Macrobiotus macronyx) et sur les Rotifères (Rotifer vulgaris et Philodina roseola). Ces résultats sont en opposition avec ceux obtenus par Harvey qui avait constaté que Philodina roseola mourait en six à douze heures dans l'eau dense à 97 p. 100. Nous avons paru intéressant de rechercher si l'eau lourde a une action favorable ou défavorable sur la culture des bactéries. Nous avons étudié à ce point de vue deux échantillons d'eau lourde, l'un à faible, l'autre à forte concentration. I. — Eau lourde à faible concentration. Nous avons utilisé pour ces expériences de l'eau lourde (oxyde de deuterium) à 0,46 mol. p. 100. Nous avons pratiqué avec cet échantillon des essais in vitro et des expériences in vivo. A. — EXPÉRIENCES in vitro. 1. Analyse bactériologique. — Nous avons tout d'abord cherché, par les procédés habituels, la présence de bactéries dans cet échantillon d'eau lourde. Nous n'avons trouvé ni Bacterium coli, ni bactéries putrides. Sur plaques de gélatine, les colonies microbiennes étaient
résultats sont en opposition avec ceux obtenus par Harvey qui avait constaté que Philodina roseola mourait en six à douze heures dans l'eau dense à 97 p. 100. Nous avons paru intéressant de rechercher si l'eau lourde a une action favorable ou défavorable sur la culture des bactéries. Nous avons étudié à ce point de vue deux échantillons d'eau lourde, l'un à faible, l'autre à forte concentration. I. — Eau lourde à faible concentration. Nous avons utilisé pour ces expériences de l'eau lourde (oxyde de deuterium) à 0,46 mol. p. 100. Nous avons pratiqué avec cet échantillon des essais in vitro et des expériences in vivo. A. — EXPÉRIENCES in vitro. 1. Analyse bactériologique. — Nous avons tout d'abord cherché, par les procédés habituels, la présence de bactéries dans cet échantillon d'eau lourde. Nous n'avons trouvé ni Bacterium coli, ni bactéries putrides. Sur plaques de gélatine, les colonies microbiennes étaient nombreuses, mais provenaient de trois espèces seulement : du pneumobacille, une sarcine jaune non liquéfiante et quelques colonies d'une sarcine blanche liquéfiante. L'eau n'ayant pas été transportée dans les conditions de température nécessaires pour éviter la multiplication des germes, cette analyse prouve seulement que certaines espèces bactériennes — peu nombreuses dans ce cas particulier — peuvent vivre pendant un temps assez long dans l'eau lourde — à 0,46 mol. p. 100. B. — RECHERCHE DE L'ACTION FAVORISANTE. Pour cette étude, nous avons préparé, dans des milieux de culture appropriés, deux séries de cultures : de B. coli, B. d'Eberth et paratyphiques, B. dysentérique, méningocoque, pneumocoque, streptocoque, B. perfringens. Les unes étaient additionnées de quantités progressivement croissantes d'eau lourde (de 1 goutte à 2 cent, cubes pour 5 cent, cubes de milieu de culture liquide), les autres ne recevaient pas d'eau lourde. Nous avons examiné les cultures d'heure en heure pour noter la série où la culture apparaîtrait en premier lieu. Nous avons aussi noté, par différence d'opacité, l'intensité de culture au bout de vingt-quatre heures. Nous avons vu que jamais la culture n'était favorisée par l'eau lourde, mais qu'au contraire, dans quelques cas, son développement était nettement entravé, comme nous
dans ce cas particulier — peuvent vivre pendant un temps assez long dans l'eau lourde — à 0,46 mol. p. 100. B. — RECHERCHE DE L'ACTION FAVORISANTE. Pour cette étude, nous avons préparé, dans des milieux de culture appropriés, deux séries de cultures : de B. coli, B. d'Eberth et paratyphiques, B. dysentérique, méningocoque, pneumocoque, streptocoque, B. perfringens. Les unes étaient additionnées de quantités progressivement croissantes d'eau lourde (de 1 goutte à 2 cent, cubes pour 5 cent, cubes de milieu de culture liquide), les autres ne recevaient pas d'eau lourde. Nous avons examiné les cultures d'heure en heure pour noter la série où la culture apparaîtrait en premier lieu. Nous avons aussi noté, par différence d'opacité, l'intensité de culture au bout de vingt-quatre heures. Nous avons vu que jamais la culture n'était favorisée par l'eau lourde, mais qu'au contraire, dans quelques cas, son développement était nettement entravé, comme nous allons maintenant l'indiquer. C. — RECHERCHE DU POUVOIR EMPÊCHANT. Nous avons cherché à préciser pendant combien de temps diverses bactéries (parmi les plus répandues) sont capables de survivre dans l'eau lourde. Nous avons employé la technique habituelle des repiquages, pratiqués au bout de temps variables de contact de l'émulsion microbienne avec la substance à l'étude. Dans des tubes, contenant chacun 5 cent, cubes d'eau lourde, nous mettions 1 goutte d'une culture de vingt-quatre heures, en bouillon, ou d'une émulsion de culture sur gélose du germe choisi. Des repiquages, sur milieux appropriés, étaient pratiqués au bout de : cinq, dix, quinze, trente minutes, — une, cinq, dix, vingt-quatre heures, — puis tous les jours pendant vingt jours. Nous avons fait des essais comparatifs avec de l'eau distillée et avec de l'eau de source. Voici quelques résultats obtenus : MICROBES EAU DISTILLÉE EAU DE SOURCE EAU LOURDE B. du colon + 20e jour. + 20e jour. — 15e jour. B. Friedlander + 20e jour. + 20e jour. + 20e jour. B. typhique — 10e jour. + 20e jour. — 10e jour. B. paratyphique A . . . . -10e jour. -20e jour. — 15e jour. B. paratyphique B . . . .
avec la substance à l'étude. Dans des tubes, contenant chacun 5 cent, cubes d'eau lourde, nous mettions 1 goutte d'une culture de vingt-quatre heures, en bouillon, ou d'une émulsion de culture sur gélose du germe choisi. Des repiquages, sur milieux appropriés, étaient pratiqués au bout de : cinq, dix, quinze, trente minutes, — une, cinq, dix, vingt-quatre heures, — puis tous les jours pendant vingt jours. Nous avons fait des essais comparatifs avec de l'eau distillée et avec de l'eau de source. Voici quelques résultats obtenus : MICROBES EAU DISTILLÉE EAU DE SOURCE EAU LOURDE B. du colon + 20e jour. + 20e jour. — 15e jour. B. Friedlander + 20e jour. + 20e jour. + 20e jour. B. typhique — 10e jour. + 20e jour. — 10e jour. B. paratyphique A . . . . -10e jour. -20e jour. — 15e jour. B. paratyphique B . . . . — 8 à 24 heures. -20e jour. — 15e jour. B. Shiga — 3e jour. — 15e jour. — 5e jour. Proteus vulgaris . . . . + 20e jour. -20e jour. + 20e jour. Staphylocoque +20e jour. + 20e jour. — 5e jour. Streptocoque — 5 heures. 15e jour. — 5e jour. Méningocoque — 5 minutes. — 10 minutes. — 5 minutes. B. diphtérique — 1 heure. — 12 jours. — 3e jour. B. perfringens — 3 jours. — 20 jours. — 3e jour. + veut dire culture au repiquage; —, pas de culture. Sauf pour le Proteus et le B. Friedlander, les bactéries examinées ont vécu sensiblement moins longtemps dans l'eau lourde que dans l'eau de source. Pour un même microbe, le temps de survie a été souvent intermédiaire entre celui noté pour l'eau distillée et celui trouvé pour l'eau de source. Si on étudie comparativement l'action des rayons ultraviolets sur des émulsions bactériennes faites respectivement dans l'eau lourde, l'eau distillée et l'eau de source, on constate que c'est dans l'eau lourde que certains microbes, méningocoque, B. du côlon, streptocoque, sont le plus rapidement détruits. L'échantillon d'eau lourde que nous avons examiné, ne contenait pas de bactériophage, mais
— 5e jour. Méningocoque — 5 minutes. — 10 minutes. — 5 minutes. B. diphtérique — 1 heure. — 12 jours. — 3e jour. B. perfringens — 3 jours. — 20 jours. — 3e jour. + veut dire culture au repiquage; —, pas de culture. Sauf pour le Proteus et le B. Friedlander, les bactéries examinées ont vécu sensiblement moins longtemps dans l'eau lourde que dans l'eau de source. Pour un même microbe, le temps de survie a été souvent intermédiaire entre celui noté pour l'eau distillée et celui trouvé pour l'eau de source. Si on étudie comparativement l'action des rayons ultraviolets sur des émulsions bactériennes faites respectivement dans l'eau lourde, l'eau distillée et l'eau de source, on constate que c'est dans l'eau lourde que certains microbes, méningocoque, B. du côlon, streptocoque, sont le plus rapidement détruits. L'échantillon d'eau lourde que nous avons examiné, ne contenait pas de bactériophage, mais n'empêchait pas l'action d'un bactériophage antishiga que nous avions préparé. Ce même échantillon d'eau lourde s'est montré hémolytique pour les globules rouges d'homme ou de mouton au même titre que l'eau distillée. Une eau physiologique, salée à 9 p. 1.000 que nous avons préparée avec de l'eau lourde, possédait vis-à-vis des globules les mêmes propriétés que l'eau physiologique ordinaire. Nous avons complété ces expériences in vitro par des expériences in vivo. D. — EXPÉRIENCES « IN vivo ». Nous avons tout d'abord déterminé la toxicité de l'échantillon d'eau lourde sur lequel devaient porter nos expériences. Des essais de toxicité ont déjà été pratiqués par divers auteurs. Lewis n'a pas réussi à tuer la souris en lui faisant absorber de l'eau lourde; même à dose élevée, il n'a observé que quelques signes légers d'intoxication. Macht et Davis ont pu injecter à la souris, par voie intraveineuse, de l'eau lourde à 1 p. 200, sans provoquer aucun accident. On sait que récemment M. Klaus Hansen, professeur de Pharmacologie à Oslo, a pu absorber, sans ressentir aucun malaise, 10 grammes d'eau lourde à concentration élevée. Dans nos expériences, des lapins de 3 kilogrammes à 3 kilogr. 500, ont pu en supporter 5 cent,
des globules les mêmes propriétés que l'eau physiologique ordinaire. Nous avons complété ces expériences in vitro par des expériences in vivo. D. — EXPÉRIENCES « IN vivo ». Nous avons tout d'abord déterminé la toxicité de l'échantillon d'eau lourde sur lequel devaient porter nos expériences. Des essais de toxicité ont déjà été pratiqués par divers auteurs. Lewis n'a pas réussi à tuer la souris en lui faisant absorber de l'eau lourde; même à dose élevée, il n'a observé que quelques signes légers d'intoxication. Macht et Davis ont pu injecter à la souris, par voie intraveineuse, de l'eau lourde à 1 p. 200, sans provoquer aucun accident. On sait que récemment M. Klaus Hansen, professeur de Pharmacologie à Oslo, a pu absorber, sans ressentir aucun malaise, 10 grammes d'eau lourde à concentration élevée. Dans nos expériences, des lapins de 3 kilogrammes à 3 kilogr. 500, ont pu en supporter 5 cent, cubes par voie intraveineuse ou intrapéritonéale et 8 cent, cubes par voie sous-cutanée. Ces doses étaient sensiblement supérieures à celles qui nous étaient nécessaires pour préparer des émulsions microbiennes déterminant des infections mortelles. Nous avons injecté à des lapins et à des cobayes des émulsions de B. paratyphique B en faisant varier les conditions de l'expérience. Un groupe recevait une émulsion de bacilles dans la veine, dans le péritoine ou sous la peau et, une heure après, une injection intraveineuse ou sous-cutanée de 2 à 3 cent, cubes d'eau lourde; — un autre groupe recevait d'abord de l'eau lourde et, une heure après, l'émulsion microbienne; — à un dernier groupe, on injectait un mélange d'eau lourde et de bacilles qui avaient été maintenus, pendant une heure, à l'étuve à 37°. Dans aucun cas, nous n'avons noté de protection contre le B. paratyphique. Au contraire, les animaux ayant reçu de l'eau lourde et des microbes (particulièrement par voie intraveineuse), mouraient avant les témoins qui n'avaient reçu que des microbes (ou que de l'eau lourde). Nous avons pratiqué les mêmes essais avec des toxines diphtérique et tétanique. Nous n'avons noté ni protection contre ces toxines, ni accroissement de leur activité. II. —
faisant varier les conditions de l'expérience. Un groupe recevait une émulsion de bacilles dans la veine, dans le péritoine ou sous la peau et, une heure après, une injection intraveineuse ou sous-cutanée de 2 à 3 cent, cubes d'eau lourde; — un autre groupe recevait d'abord de l'eau lourde et, une heure après, l'émulsion microbienne; — à un dernier groupe, on injectait un mélange d'eau lourde et de bacilles qui avaient été maintenus, pendant une heure, à l'étuve à 37°. Dans aucun cas, nous n'avons noté de protection contre le B. paratyphique. Au contraire, les animaux ayant reçu de l'eau lourde et des microbes (particulièrement par voie intraveineuse), mouraient avant les témoins qui n'avaient reçu que des microbes (ou que de l'eau lourde). Nous avons pratiqué les mêmes essais avec des toxines diphtérique et tétanique. Nous n'avons noté ni protection contre ces toxines, ni accroissement de leur activité. II. — Eau lourde à forte concentration. Le deuxième échantillon était constitué par de l'eau lourde (1) à 99 grammes p. 100 grammes (d. = 1.1050). A. Cet échantillon d'eau lourde, prélevé et conservé dans de bonnes conditions, s'est montré stérile. Semé sur divers milieux : bouillon, gélose ordinaire, gélose-ascite, gélose-sang, milieu de Dorset, gélatine, gélose Veillon (pour cultures anaérobies), il n'a donné lieu à aucune culture, même après dix jours de séjour à l'étuve à 37°. B. Des expériences pratiquées dans les mêmes conditions que précédemment ont montré que cette eau lourde n'avait aucune propriété favorisante sur les cultures microbiennes. C. Nous avons recherché si cet échantillon d'eau lourde (1) Provenant de la « Norsk Hydro-Elektrisk Kvaelstofaktieselskab Oslo. ACTION DE L'EAU LOURDE SUR LES BACTÉRIES 15 avait des propriétés bactéricides et nous avons, pour cela, utilisé la technique des repiquages successifs que nous avons exposée plus haut. Cette fois encore, des essais comparatifs ont été pratiqués avec l'eau distillée et l'eau ordinaire (préalablement stérilisée par filtre à la bougie L3). Nos essais ont porté sur les mêmes souches de microbes que dans l'essai précédent, mais nous avons plus particulièrement étudié le moment du « départ » des cultures. Afin de ne
de Dorset, gélatine, gélose Veillon (pour cultures anaérobies), il n'a donné lieu à aucune culture, même après dix jours de séjour à l'étuve à 37°. B. Des expériences pratiquées dans les mêmes conditions que précédemment ont montré que cette eau lourde n'avait aucune propriété favorisante sur les cultures microbiennes. C. Nous avons recherché si cet échantillon d'eau lourde (1) Provenant de la « Norsk Hydro-Elektrisk Kvaelstofaktieselskab Oslo. ACTION DE L'EAU LOURDE SUR LES BACTÉRIES 15 avait des propriétés bactéricides et nous avons, pour cela, utilisé la technique des repiquages successifs que nous avons exposée plus haut. Cette fois encore, des essais comparatifs ont été pratiqués avec l'eau distillée et l'eau ordinaire (préalablement stérilisée par filtre à la bougie L3). Nos essais ont porté sur les mêmes souches de microbes que dans l'essai précédent, mais nous avons plus particulièrement étudié le moment du « départ » des cultures. Afin de ne pas abaisser le titre de l'eau lourde en expérience, à laquelle nous ajoutions les émulsions microbiennes, nous avons fait ces émulsions en eau lourde du même titre. Le contact avec l'eau lourde, même prolongé pendant vingt-quatre heures, n'a pas détruit les microbes. Il est à noter, cependant, que l'addition d'eau lourde gêne le développement du streptocoque qui finit par pousser, mais dont le développement subit un retard très net. Au bout de huit, dix, douze heures à l'étuve à 37° (1), — alors que les microbes ayant été en contact avec l'eau distillée ou l'eau ordinaire poussent déjà très nettement dans un milieu liquide approprié — il n'y a aucune trace de culture dans les tubes contenant les streptocoques qui ont subi l'action de l'eau lourde. L'addition d'eau lourde n'a modifié en rien le pouvoir pathogène des microbes que nous avons examinés. C'est ainsi que les cobayes inoculés avec un mélange de bacille diphtérique et d'eau lourde meurent dans les délais ordinaires et avec les lésions caractéristiques de l'intoxication diphtérique. On peut donc conclure de ces recherches : 1° Les deux échantillons d'eau lourde que nous avons examinés, qui étaient d'origines différentes et de concentrations diverses (l'une faible et l'autre