jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
protéines normales contenues dans les jus. La nouvelle technique d'extraction et de purification partielle nous ayant servi à l'obtention de nouveaux immunsérums peut donc se résumer comme suit : on prélève de jeunes rameaux de Dahlias, au stade de développement où l'on détache habituellement les boutures destinées à multiplier la plante ; ces rameaux peuvent être choisis au sein d'une variété quelconque ; il suffit qu'ils présentent des symptômes de vein clearing accentués. On les broie alors dans un broyeur à hélice en présence d'une solution de bisulfite de sodium à 5 p. 100 et de cyanure de potassium à 0,1 p. 1 000. La quantité de solution doit être approximativement égale à celle du jus extractible. Le liquide obtenu après broyage est passé sur une étamine puis chauffé au bain-marie. Dès que la température de 60° est atteinte, on refroidit et l'on centrifuge à 5 000 tours pour éliminer le précipité formé contenant les chloroplastes et des protéines dénaturées. Le liquide surnageant doit être parfaitement incolore et limpide, toute coloration brunâtre indiquant une réaction d'oxydation irrémédiable. On refroidit alors le liquide à + 8° et l'on procède à un relargage à sulfate d'ammonium (300 g par litre). Le précipité est rassemblé au bout d'une heure par centrifugation à 5 000 t/m. Après avoir éliminé le liquide surnageant, on reprend ce précipité dans un faible volume d'eau. La partie insoluble est éliminée par centrifugation. Ce liquide, injecté au lapin, fournit de bons immunsérums présentant une forte réaction antivirus et réagissant très peu avec les protéines normales du Dahlia. La microséroréaction sur lame est immédiate en présence d'un extrait partiellement purifié et nécessite une incubation de quinze minutes avec un jus brut extrait d'une feuille de plante infectée. Pour le diagnostic pratique, on a intérêt à extraire les jus d'organes présumés infectés, par broyage en présence de solution nicotinée réductrice. Les jus de plantes malades, soumis au chauffage préalable à 60°, réagissent aussi fortement que les témoins non chauffés, bien qu'une partie importante des protéines soit éliminée. De plus, un lapin inoculé avec un jus extrait comme il a été indiqué
est rassemblé au bout d'une heure par centrifugation à 5 000 t/m. Après avoir éliminé le liquide surnageant, on reprend ce précipité dans un faible volume d'eau. La partie insoluble est éliminée par centrifugation. Ce liquide, injecté au lapin, fournit de bons immunsérums présentant une forte réaction antivirus et réagissant très peu avec les protéines normales du Dahlia. La microséroréaction sur lame est immédiate en présence d'un extrait partiellement purifié et nécessite une incubation de quinze minutes avec un jus brut extrait d'une feuille de plante infectée. Pour le diagnostic pratique, on a intérêt à extraire les jus d'organes présumés infectés, par broyage en présence de solution nicotinée réductrice. Les jus de plantes malades, soumis au chauffage préalable à 60°, réagissent aussi fortement que les témoins non chauffés, bien qu'une partie importante des protéines soit éliminée. De plus, un lapin inoculé avec un jus extrait comme il a été indiqué plus haut, mais non purifié, a fourni un immunsérum présentant une forte réaction antiprotéine normale et une faible réaction antivirus. L'ensemble des faits relatés montre que les tissus infectés renferment une substance antigénique spécifique qu'il est possible de débarrasser de la majeure partie des protéines normales par chauffage des jus suivi de relargage au sulfate d'ammonium. Restait à montrer que cette substance antigénique représente le virus lui-même. A cet effet, nous avons inoculé 10 jeunes Dahlias issus de semis avec des jus purifiés. L'inoculation était réalisée par friction sur une feuille préalablement saupoudrée de carborundum. Quatre semaines plus tard, les symptômes typiques de la maladie apparaissaient sur les 10 plantes. De plus, les jus extraits de ces plantes réagissaient alors fortement en présence de l'immunsérum obtenu à partir de la préparation qui avait servi à les inoculer. Par conséquent, en même temps que l'on purifie et que l'on concentre l'antigène spécifique, on concentre également le virus. Celui-ci, qui n'est pas inoculable mécaniquement à partir d'un jus brut, le devient si l'on utilise une préparation purifiée. L'identité de l'antigène spécifique et du virus paraît donc hautement probable. Nos essais démontrent, en outre, que l'échec des transmissions mécaniques du virus observé jusqu'à
suivi de relargage au sulfate d'ammonium. Restait à montrer que cette substance antigénique représente le virus lui-même. A cet effet, nous avons inoculé 10 jeunes Dahlias issus de semis avec des jus purifiés. L'inoculation était réalisée par friction sur une feuille préalablement saupoudrée de carborundum. Quatre semaines plus tard, les symptômes typiques de la maladie apparaissaient sur les 10 plantes. De plus, les jus extraits de ces plantes réagissaient alors fortement en présence de l'immunsérum obtenu à partir de la préparation qui avait servi à les inoculer. Par conséquent, en même temps que l'on purifie et que l'on concentre l'antigène spécifique, on concentre également le virus. Celui-ci, qui n'est pas inoculable mécaniquement à partir d'un jus brut, le devient si l'on utilise une préparation purifiée. L'identité de l'antigène spécifique et du virus paraît donc hautement probable. Nos essais démontrent, en outre, que l'échec des transmissions mécaniques du virus observé jusqu'à présent de Dahlia à Dahlia est essentiellement dû à la présence, dans les jus, d'agents dénaturants libérés, au cours du broyage, en même temps que le virus. P. Brierley et F. F. Smith [2] ont d'ailleurs montré très récemment qu'un très faible pourcentage de transmissions mécaniques peut être obtenu de Dahlia à Dahlia et qu'un haut pourcentage de transmissions est possible sur Zinnia elegans et Verbesina encelioides, ce qui, estimons-nous, est vraisemblablement en rapport avec l'absence d'inhibiteurs chez ces plantes et peut-être aussi avec une teneur en virus plus élevée. Ces hôtes nouvellement découverts par les chercheurs américains constitueront, nous semble-t-il, un matériel de choix beaucoup plus favorable que le Dahlia à l'étude approfondie du virus et à la fabrication des sérums. BIBLIOGRAPHIE [1] P. CORNUET, C. MARTIN et P. LIMASSET. C. R. Acad. Sci., 1950, 231, 913. [2] P. BRIERLEY et F. F. SMITH. Plant disease reporter, 1950, 34, 363. ÉTUDE DE L'AMYLOLYSE BACTÉRIENNE DANS LE SOL PAR LA MÉTHODE DE LA COLONNE DE TERRE AMIDONNÉE par A.-R. PRÉVOT et J. POCHON. (Institut Pasteur, Services des Anaérobies et de Microbiologie du sol.) Nous ne possédions pas de technique satisfaisante pour étudier la fonction amylolytique microbienne dans le sol. Il
Dahlia à Dahlia et qu'un haut pourcentage de transmissions est possible sur Zinnia elegans et Verbesina encelioides, ce qui, estimons-nous, est vraisemblablement en rapport avec l'absence d'inhibiteurs chez ces plantes et peut-être aussi avec une teneur en virus plus élevée. Ces hôtes nouvellement découverts par les chercheurs américains constitueront, nous semble-t-il, un matériel de choix beaucoup plus favorable que le Dahlia à l'étude approfondie du virus et à la fabrication des sérums. BIBLIOGRAPHIE [1] P. CORNUET, C. MARTIN et P. LIMASSET. C. R. Acad. Sci., 1950, 231, 913. [2] P. BRIERLEY et F. F. SMITH. Plant disease reporter, 1950, 34, 363. ÉTUDE DE L'AMYLOLYSE BACTÉRIENNE DANS LE SOL PAR LA MÉTHODE DE LA COLONNE DE TERRE AMIDONNÉE par A.-R. PRÉVOT et J. POCHON. (Institut Pasteur, Services des Anaérobies et de Microbiologie du sol.) Nous ne possédions pas de technique satisfaisante pour étudier la fonction amylolytique microbienne dans le sol. Il était cependant nécessaire de pouvoir, d'une part, apprécier dans un sol donné la densité des amylolytiques, leur répartition en familles, genres et espèces et les associations de ceux-ci avec les autres bactéries ; d'autre part, dégager les lois déterminant cette fonction naturelle : influence de la température, du pH, du rH, du tassement, du degré hygrométrique et d'autres facteurs. Aussi avons-nous essayé de mettre au point une technique permettant à la fois le recensement des bactéries amylolytiques d'un sol et l'expérimentation concernant la fonction amylolytique tellurique. Nous nous sommes inspirés, pour cela, de la technique de la colonne de terre munie d'une bande de papier permettant l'étude de la fonction cellulolytique du sol, technique mise au point par Pochon et Tchan [1]. Il nous a suffi de substituer, à la bande de papier interposée entre la terre et le récipient cylindrique, une bande d'amidon de largeur semblable constituée par du pain azyme de 0,5 mm d'épaisseur environ. En réalité, le pain azyme n'est pas de l'amidon pur. Il contient de l'azote protéique en faible proportion, et des sels ; mais ces impuretés ne se sont pas montrées gênantes pour le but que nous voulions atteindre. Le maniement de la colonne
rH, du tassement, du degré hygrométrique et d'autres facteurs. Aussi avons-nous essayé de mettre au point une technique permettant à la fois le recensement des bactéries amylolytiques d'un sol et l'expérimentation concernant la fonction amylolytique tellurique. Nous nous sommes inspirés, pour cela, de la technique de la colonne de terre munie d'une bande de papier permettant l'étude de la fonction cellulolytique du sol, technique mise au point par Pochon et Tchan [1]. Il nous a suffi de substituer, à la bande de papier interposée entre la terre et le récipient cylindrique, une bande d'amidon de largeur semblable constituée par du pain azyme de 0,5 mm d'épaisseur environ. En réalité, le pain azyme n'est pas de l'amidon pur. Il contient de l'azote protéique en faible proportion, et des sels ; mais ces impuretés ne se sont pas montrées gênantes pour le but que nous voulions atteindre. Le maniement de la colonne de terre amidonnée est semblable à celui de la colonne de terre à la cellulose. Dans un tube de verre vertical de 40 cm de long et de 3 cm de diamètre, fermé en bas par un bouchon de caoutchouc et bouché en haut au coton, on introduit une bande de pain azyme contre la paroi et on remplit le récipient de la terre qu'on veut étudier. On place les tubes aux températures voulues, de 18 à 37°, après avoir réalisé le degré hygrométrique voulu et le tassement voulu. Dans les jours qui suivent apparaissent des plages d'attaque sur le pain azyme qui modifient la structure et la couleur de celui-ci et qui produisent plus ou moins rapidement des plages d'amylolyse. On vide alors le tube, et on prélève les colonies en vue d'isoler les espèces. Le nombre des plages d'amylolyse, leur rapidité d'installation, leur diversité donnent une image qualitative et quantitative du pouvoir amylolytique de l'échantillon de terre employé. Résultats. — Nous n'avons encore réalisé que très peu d'expériences avec cette technique, car l'étude complète d'un seul tube demande plusieurs mois. Mais dès maintenant, nous pouvons déjà fixer quelques lois déterminant cette fonction pédologique. Toutes nos expériences ont été
de pain azyme contre la paroi et on remplit le récipient de la terre qu'on veut étudier. On place les tubes aux températures voulues, de 18 à 37°, après avoir réalisé le degré hygrométrique voulu et le tassement voulu. Dans les jours qui suivent apparaissent des plages d'attaque sur le pain azyme qui modifient la structure et la couleur de celui-ci et qui produisent plus ou moins rapidement des plages d'amylolyse. On vide alors le tube, et on prélève les colonies en vue d'isoler les espèces. Le nombre des plages d'amylolyse, leur rapidité d'installation, leur diversité donnent une image qualitative et quantitative du pouvoir amylolytique de l'échantillon de terre employé. Résultats. — Nous n'avons encore réalisé que très peu d'expériences avec cette technique, car l'étude complète d'un seul tube demande plusieurs mois. Mais dès maintenant, nous pouvons déjà fixer quelques lois déterminant cette fonction pédologique. Toutes nos expériences ont été faites avec un lot de terre arable prélevée dans un sol humique de jardin (à flanc de coteau de la hauteur des Gatines, à Verrière-le-Buisson, lieudit « Les Justices »). Première expérience. — Dans la première expérience nous avons utilisé de la terre non tassée et au degré hygrométrique du prélèvement lui-même, la température d'incubation étant celle du laboratoire (environ 18°). De nombreuses plages d'amylolyse apparurent. La transplantation de ces colonies sur milieu solide pour isolement a montré que toutes appartenaient aux aérobies stricts ou facultatifs. Aucun anaérobie ne fut isolé. Dans ce tube non tassé et peu humide, aucun amylolytique vrai, mais seulement des bactéries accessoirement et faiblement amylolytiques. Deuxième expérience. — Dans un deuxième tube nous avons introduit de la terre légèrement tassée et très humidifiée. L'amylolyse se produisit plus rapidement, mais ici encore, le repiquage des colonies n'a fourni que des aérobies et des anaérobies facultatifs accessoirement et faiblement amylolytiques. Troisième expérience. — Dans un troisième tube nous avons mis de la terre très tassée et saturée d'eau et nous l'avons placé à 33°. Cette fois le repiquage des plages d'amylolyse a fourni de nombreux anaérobies stricts. Ceux-ci appartenaient à deux groupes physiologiques. 1° Des Clostridium poussant
prélèvement lui-même, la température d'incubation étant celle du laboratoire (environ 18°). De nombreuses plages d'amylolyse apparurent. La transplantation de ces colonies sur milieu solide pour isolement a montré que toutes appartenaient aux aérobies stricts ou facultatifs. Aucun anaérobie ne fut isolé. Dans ce tube non tassé et peu humide, aucun amylolytique vrai, mais seulement des bactéries accessoirement et faiblement amylolytiques. Deuxième expérience. — Dans un deuxième tube nous avons introduit de la terre légèrement tassée et très humidifiée. L'amylolyse se produisit plus rapidement, mais ici encore, le repiquage des colonies n'a fourni que des aérobies et des anaérobies facultatifs accessoirement et faiblement amylolytiques. Troisième expérience. — Dans un troisième tube nous avons mis de la terre très tassée et saturée d'eau et nous l'avons placé à 33°. Cette fois le repiquage des plages d'amylolyse a fourni de nombreux anaérobies stricts. Ceux-ci appartenaient à deux groupes physiologiques. 1° Des Clostridium poussant bien sur les milieux habituels, fermentant de nombreux glucides dont l'amidon. Parmi eux nous avons surtout remarqué la fréquence de Cl. butyricum et de Cl. pseudofallax (aucun d'eux n'était pathogène) et plus rarement de W. perfringens (très légèrement pathogène). 2° Des Clostridium ne poussant pas du tout sur milieux habituels et poussant exclusivement sur bouillie d'amidon naturel : bouillie de pomme de terre, de marron d'Inde, de banane, de blé, etc. Parmi eux prédominait une espèce nouvelle : Clostridium amylolyticum que l'un de nous a décrit avec R. Saissac [2]. Conclusions. — 1° La colonne de terre amidonnée permet d'étudier qualitativement et quantitativement la fonction amylolytique bactérienne des sols. 2° En terre non tassée et peu humide ou en terre peu tassée et humide, l'amylolyse est réalisée exclusivement par des aérobies et des anaérobies facultatifs accessoirement amylolytiques. 3° En terre tassée et submergée à 33°, l'amylolyse est réalisée surtout par les anaérobies stricts, appartenant soit au groupe des Clostridium poussant en milieux habituels, soit au groupe des Clostridium poussant exclusivement sur bouillie d'amidon naturel. Parmi eux a été isolé Cl. amylolyticum Prévot et Saissac, n. sp. 4° Il semble donc que le rôle des anaérobies stricts dans la destruction naturelle
et poussant exclusivement sur bouillie d'amidon naturel : bouillie de pomme de terre, de marron d'Inde, de banane, de blé, etc. Parmi eux prédominait une espèce nouvelle : Clostridium amylolyticum que l'un de nous a décrit avec R. Saissac [2]. Conclusions. — 1° La colonne de terre amidonnée permet d'étudier qualitativement et quantitativement la fonction amylolytique bactérienne des sols. 2° En terre non tassée et peu humide ou en terre peu tassée et humide, l'amylolyse est réalisée exclusivement par des aérobies et des anaérobies facultatifs accessoirement amylolytiques. 3° En terre tassée et submergée à 33°, l'amylolyse est réalisée surtout par les anaérobies stricts, appartenant soit au groupe des Clostridium poussant en milieux habituels, soit au groupe des Clostridium poussant exclusivement sur bouillie d'amidon naturel. Parmi eux a été isolé Cl. amylolyticum Prévot et Saissac, n. sp. 4° Il semble donc que le rôle des anaérobies stricts dans la destruction naturelle de l'amidon au niveau du sol soit limité à des conditions climatiques et pédologiques bien déterminées ; ces conditions sont difficilement et épisodiquement réalisables dans les sols septentrionaux, mais par contre très fréquemment rencontrées dans les sols équatoriaux. BIBLIOGRAPHIE [1] Karzon et Bang. J. Exp. Med. 1945, 82, 207. [2] Cordier et Clavieras. Ann. Inst. Pasteur 1949, 76, 341. [3] Lush. J. Path. Bact. 1937, 44, 551. [4] Beach. Am. J. Hyg. 1924, 4, 477. [5] Howitt, Bishop et Kissling. Br. J. Exp. Path. 1936, 17, 50. [6] Hirst. J. Path. Bact. 1938, 46, 271. [7] Mac Clelland et Hare. J. Infect. Dis. 1939, 64, 309. [8] E. B. Lyons et alii. J. Immunol. 1950, 65, 159. On emploie une dilution de 10-5 de liquide chorioallantoïdien qui contient cette souche et on inocule 0,05 ml dans le liquide chorio-allantoïdien à des œufs de dix à douze jours d'incubation. L'œuf est tué au bout de trente-six à quarante-quatre heures : on se sert de l'œuf entier pour la préparation du vaccin. On y ajoute de l'hydroxyde d'aluminium et du formol à 4 p. 1000. Contrôlé sur l'œuf, il n'est plus pathogène. Employé à titre expérimental, dans des foyers contaminés ou non,
Cordier et Clavieras. Ann. Inst. Pasteur 1949, 76, 341. [3] Lush. J. Path. Bact. 1937, 44, 551. [4] Beach. Am. J. Hyg. 1924, 4, 477. [5] Howitt, Bishop et Kissling. Br. J. Exp. Path. 1936, 17, 50. [6] Hirst. J. Path. Bact. 1938, 46, 271. [7] Mac Clelland et Hare. J. Infect. Dis. 1939, 64, 309. [8] E. B. Lyons et alii. J. Immunol. 1950, 65, 159. On emploie une dilution de 10-5 de liquide chorioallantoïdien qui contient cette souche et on inocule 0,05 ml dans le liquide chorio-allantoïdien à des œufs de dix à douze jours d'incubation. L'œuf est tué au bout de trente-six à quarante-quatre heures : on se sert de l'œuf entier pour la préparation du vaccin. On y ajoute de l'hydroxyde d'aluminium et du formol à 4 p. 1000. Contrôlé sur l'œuf, il n'est plus pathogène. Employé à titre expérimental, dans des foyers contaminés ou non, aucun accident n'a pu être constaté sur 6 000 volailles inoculées. On pratique une seule inoculation de 2 ml chez la poule : la même dose nous a servi à rechercher les anticorps à des intervalles différents après la vaccination. Epreuve de l'hémagglutination. — La souche « Var » 1949 est titrée en présence d'hématies de poule à 0,5 p. 100 [9]. Le dernier tube dans lequel les hématies sont agglutinées avec netteté nous donne le taux d'hémagglutination du virus, le témoin hématies étant négatif. Pour l'épreuve d'hémagglutino-inhibition, on choisit toujours un liquide chorio-allantoïdien qui n'ait pas un taux d'hémagglutination trop élevé. On choisit une dilution quatre fois plus concentrée et on en dispose 0,25 ml par tube. Le sérum est dilué à 1/10, 1/20, 1/40, etc., dans 0,50 ml de sérum physiologique. On ajoute ensuite un volume égal d'hématies de poule à 0,5 p. 100 [10]. On lit la réaction à la température du laboratoire entre trente-cinq et quarante-cinq minutes. Epreuve de neutralisation du virus. — Les sérums à essayer sont inactivés à 560 pendant trente minutes. Nous avons employé le sérum non dilué, mélangé à parties égales avec différentes dilutions du virus : 10-3, 10-4, 10-5, etc. Le
est titrée en présence d'hématies de poule à 0,5 p. 100 [9]. Le dernier tube dans lequel les hématies sont agglutinées avec netteté nous donne le taux d'hémagglutination du virus, le témoin hématies étant négatif. Pour l'épreuve d'hémagglutino-inhibition, on choisit toujours un liquide chorio-allantoïdien qui n'ait pas un taux d'hémagglutination trop élevé. On choisit une dilution quatre fois plus concentrée et on en dispose 0,25 ml par tube. Le sérum est dilué à 1/10, 1/20, 1/40, etc., dans 0,50 ml de sérum physiologique. On ajoute ensuite un volume égal d'hématies de poule à 0,5 p. 100 [10]. On lit la réaction à la température du laboratoire entre trente-cinq et quarante-cinq minutes. Epreuve de neutralisation du virus. — Les sérums à essayer sont inactivés à 560 pendant trente minutes. Nous avons employé le sérum non dilué, mélangé à parties égales avec différentes dilutions du virus : 10-3, 10-4, 10-5, etc. Le mélange est laissé en contact de quinze à trente minutes à la température du laboratoire. Chaque dilution du virus est inoculée sur 4 œufs dans le liquide chorio-allantoïdien à la dose de 0,1 ml. L'index de neutralisation est donné par la différence entre le titre du virus de contrôle dans l'eau physiologique, ou sérum inactivé, et le titre du virus en présence de sérum immun. Le chiffre obtenu est celui de l'index L50 du virus neutralisé. La dose Lo p. 100 a été calculée d'après la méthode de Reed et Muench [11]. Expérimentation. — Dans la maladie de Newcastle, les anticorps peuvent être dosés par la technique d'hémagglutino-inhibition ou la neutralisation du virus par le sérum spécifique. On arrive par ces deux tests à mettre en évidence les anticorps en circulation, de même que l'moment de leur apparition, le taux maximum et leur disparition. Nous avons étudié avec ces deux tests les anticorps sur deux sujets pendant cent trente-quatre jours. Nous avons vacciné un lot de 4 poules de même âge et même race avec une seule piqûre intramusculaire de 2 ml du vaccin décrit ci-dessus. Les poules ont été saignées avant la vaccination, puis cinq, douze, trente-sept, soixante et
l'eau physiologique, ou sérum inactivé, et le titre du virus en présence de sérum immun. Le chiffre obtenu est celui de l'index L50 du virus neutralisé. La dose Lo p. 100 a été calculée d'après la méthode de Reed et Muench [11]. Expérimentation. — Dans la maladie de Newcastle, les anticorps peuvent être dosés par la technique d'hémagglutino-inhibition ou la neutralisation du virus par le sérum spécifique. On arrive par ces deux tests à mettre en évidence les anticorps en circulation, de même que l'moment de leur apparition, le taux maximum et leur disparition. Nous avons étudié avec ces deux tests les anticorps sur deux sujets pendant cent trente-quatre jours. Nous avons vacciné un lot de 4 poules de même âge et même race avec une seule piqûre intramusculaire de 2 ml du vaccin décrit ci-dessus. Les poules ont été saignées avant la vaccination, puis cinq, douze, trente-sept, soixante et onze, quatre-vingt-treize et cent trente-quatre jours après celle-ci. Avec les sérums récoltés et gardés à + 4° nous avons pratiqué les deux épreuves : hémagglutination et neutralisation de la même souche « Var » 1949 dans les mêmes conditions expérimentales pour tous les sérums. Nous avons pu suivre ces 4 poules pendant soixante et onze jours ; entre le soixante et onzième et le quatre-vingt-treizième jour nous avons perdu 2 poules par coccidiose, et d'autres parasitoses. Ces 2 poules ont été saignées régulièrement avant de mourir. Le titre de l'hémagglutination se trouvait à ce moment-là à 0 par comparaison avec les 2 autres poules qui conservaient un titre entre 1/80 et 1/160 et qui ont été suivies jusqu'au cent trente-quatrième jour. Si on trace la courbe de l'hémagglutino-inhibition, on remarque que l'apparition des anticorps dans la circulation débute le cinquième jour pour arriver vers le douzième jour à un taux entre 40 et 160 et pour atteindre son maximum entre le trente-septième et le soixante et onzième jour avec un taux de 1/320. Après cette période, la courbe commence à descendre pour indiquer au cent trente-quatrième jour 1/80 (fig. 1). En ce qui concerne le test de neutralisation, le sérum