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et dont le taux représente 6,7 p. 100 du poids sec microbien, l'autre extractible en solution alcaline à chaud, de type glycogénique et dont le taux représente 12,3 p. 100 du poids sec. De nombreux facteurs influent sur le métabolisme des polyosides : en particulier la nature de l'aliment carboné, la nature du substrat, le stade et les conditions de développement. La connaissance de la nature et du taux des principaux constituants de la cellule, en moyenne 20 p. 100 de glucides (C6H12O6) n, 30 p. 100 de lipides (C4H62O2) n, 50 p. 100 de protides et de cendres, et les résultats généraux relatifs à la physiologie des polyosides et du lipide, permettent maintenant d'étudier le rendement matériel de croissance. C'est ce qui fera l'objet de prochaines notes. BIBLIOGRAPHIE [1] J.-P. AUBERT. C. R. Acad. Sci., 1949, 229, 477. [2] J.-P. AUBERT et J. MILLET. Ces Annales, 1950, 79, 468. [3] S. DAGLEY et E. A. DAWES. Biochem. J., 1949, 45, 331. [4] W. G. C. FORSYTH et D. M. WEBLEY. Biochem. J., 1949, 44, 455. [5] N. GRELET. Ces Annales, 1946, 72, 153. [6] M. HEIDELBERGER, F. E. KENDALL et H. W. SCHERP. J. Exp. Med., 1936, 64, 559. [7] M. LEMOIGNE. Helv. Chim. Acta, 1946, 26, 1303. [8] M. LEMOIGNE, R. GAVARD, M. CROSON et M. LE TREIS. Ces Annales, 1947, 73, 725. [9] M. LEMOIGNE, N. GRELET, M. CROSON et M. LE TREIS. Bull. Soc. Chim. Biol., 1945, 27, 90. [10] M. LEMOIGNE, G. MILHAUD et M. CROSON. Bull. Soc. Chim. Biol., 1949, 31, 1587. [11] M. LEMOIGNE et N. ROUKHELMAN. Ann. Ferm., 1940, 5, 527. [12] J. MONOD. Recherches sur la croissance des cultures bactériennes. Hermann et Cie, édit., Paris, 1942. [13] S. M. PARTRIDGE. Nature, 1949, 164, 443. [14] M. G. SEVAG. Biochem. Z., 1934, 273, 419. [15] E. F. TERROINE et R. WURMSER. Bull. Soc. Chim. Biol., 1922, 4, 519. [16] S. M. WHIELLER. J. Biol. Chem., 1909, 6, 509. ÉLIMINATION DES GERMES BANAUX DANS LES CRACHATS DESTINÉS À LA CULTURE DU BACILLE DE KOCH. APPLICATIONS ET PERFECTIONNEMENTS par F. TISON. (Sanatorium de Praz-Coutant.)
[7] M. LEMOIGNE. Helv. Chim. Acta, 1946, 26, 1303. [8] M. LEMOIGNE, R. GAVARD, M. CROSON et M. LE TREIS. Ces Annales, 1947, 73, 725. [9] M. LEMOIGNE, N. GRELET, M. CROSON et M. LE TREIS. Bull. Soc. Chim. Biol., 1945, 27, 90. [10] M. LEMOIGNE, G. MILHAUD et M. CROSON. Bull. Soc. Chim. Biol., 1949, 31, 1587. [11] M. LEMOIGNE et N. ROUKHELMAN. Ann. Ferm., 1940, 5, 527. [12] J. MONOD. Recherches sur la croissance des cultures bactériennes. Hermann et Cie, édit., Paris, 1942. [13] S. M. PARTRIDGE. Nature, 1949, 164, 443. [14] M. G. SEVAG. Biochem. Z., 1934, 273, 419. [15] E. F. TERROINE et R. WURMSER. Bull. Soc. Chim. Biol., 1922, 4, 519. [16] S. M. WHIELLER. J. Biol. Chem., 1909, 6, 509. ÉLIMINATION DES GERMES BANAUX DANS LES CRACHATS DESTINÉS À LA CULTURE DU BACILLE DE KOCH. APPLICATIONS ET PERFECTIONNEMENTS par F. TISON. (Sanatorium de Praz-Coutant.) La culture du bacille de Koch à partir de produits non surinfectés (liquides pleuraux, liquides céphalo-rachidiens, etc.), rejoint presque en sensibilité le procédé d'inoculation au cobaye [1]. Dans les crachats, il n'a pas encore été mis au point un procédé d'élimination des germes banaux qui n'altère pas la végétatabilité des bacilles tuberculeux. L'inoculation des produits non modifiés conserve alors un intérêt majeur [2]. La variété des moyens de purification proposés démontre bien qu'il n'en est pas de parfait. Ch. Gernez-Rieux, A. Sevin et C. Chenet [3], dans une revue très complète, posent très judicieusement le problème et préconisent un essai comparatif prolongé sur des cultures nombreuses. C'est évidemment là le seul moyen sûr de choisir le moins mauvais de ces procédés. De nombreux auteurs ont exposé des techniques personnelles. Nous avons déjà montré clairement que l’acide sulfurique était à rejeter [4]. La pénicilline, qui peut être précieuse [5], n’est pas sans action sur le bacille de Koch en présence de Tween 80 [3]. Restait à comparer les méthodes de Goldie [6] avec le carbonate d’ammonium, de Mac Nabb [7] avec l’acide chlorhydrique à 3 p. 100, de Corper et Stoner [8] avec le phosphate trisodique à 10 p. 100 et
bacilles tuberculeux. L'inoculation des produits non modifiés conserve alors un intérêt majeur [2]. La variété des moyens de purification proposés démontre bien qu'il n'en est pas de parfait. Ch. Gernez-Rieux, A. Sevin et C. Chenet [3], dans une revue très complète, posent très judicieusement le problème et préconisent un essai comparatif prolongé sur des cultures nombreuses. C'est évidemment là le seul moyen sûr de choisir le moins mauvais de ces procédés. De nombreux auteurs ont exposé des techniques personnelles. Nous avons déjà montré clairement que l’acide sulfurique était à rejeter [4]. La pénicilline, qui peut être précieuse [5], n’est pas sans action sur le bacille de Koch en présence de Tween 80 [3]. Restait à comparer les méthodes de Goldie [6] avec le carbonate d’ammonium, de Mac Nabb [7] avec l’acide chlorhydrique à 3 p. 100, de Corper et Stoner [8] avec le phosphate trisodique à 10 p. 100 et de Corper et Myer [9] avec l’acide oxalique à 5 p. 100 et enfin une méthode personnelle inspirée de celle de Petroff avec la soude à 4 p. 100 [40]. Une comparaison faite par Van Vranken [11] et portant sur un milieu de culture a été défavorable à l’acide oxalique par rapport au phosphate. Par ailleurs, Corper, en 1946, présente une méthode différente de celle proposée par lui en 1930 avec l’acide oxalique. Avant de commencer une comparaison statistique de longue Société française de Microbiologie, séance du 1er mars 1951. haleine, nous avons voulu analyser les différents facteurs qui interviennent dans ces divers procédés. 1° ÉTUDE DE L’ÉLIMINATION DES GERMES BANAUX. — L’expérience porte sur 3 crachats : A, B, C, respectivement purulent, mucopurulent et muqueux. Ils ont été laissés quarante-huit heures à 20° selon les conditions moyennes d'expédition qui permettent la prolifération microbienne. Cinq méthodes de purification ont été essayées pour chaque crachat : 1° Addition de 3 volumes de soude à 4 p. 100. 2° Addition de 6 volumes de phosphate trisodique à 5 p. 100. 3° Addition de 3 volumes d’acide oxalique à 5 p. 100. 4° Addition de 3 volumes d’acide chlorhydrique à 3 p. 100.
par rapport au phosphate. Par ailleurs, Corper, en 1946, présente une méthode différente de celle proposée par lui en 1930 avec l’acide oxalique. Avant de commencer une comparaison statistique de longue Société française de Microbiologie, séance du 1er mars 1951. haleine, nous avons voulu analyser les différents facteurs qui interviennent dans ces divers procédés. 1° ÉTUDE DE L’ÉLIMINATION DES GERMES BANAUX. — L’expérience porte sur 3 crachats : A, B, C, respectivement purulent, mucopurulent et muqueux. Ils ont été laissés quarante-huit heures à 20° selon les conditions moyennes d'expédition qui permettent la prolifération microbienne. Cinq méthodes de purification ont été essayées pour chaque crachat : 1° Addition de 3 volumes de soude à 4 p. 100. 2° Addition de 6 volumes de phosphate trisodique à 5 p. 100. 3° Addition de 3 volumes d’acide oxalique à 5 p. 100. 4° Addition de 3 volumes d’acide chlorhydrique à 3 p. 100. 5° Addition de 10 volumes de carbonate d’ammonium à 2,5 pour 100. Ces 15 préparations ont été mélangées soigneusement en vase stérile. Des prélèvements ont alors été faits et après lavage-décantation ensemencés sur gélose nutritive (tous tubes semblables de la même série de fabrication). Ces prélèvements ont été faits après zéro heure (témoin), dix minutes, vingt minutes, trente minutes, une heure, deux heures, trois heures, quatre heures, six heures, douze heures. Le nombre des colonies a été noté après trois jours d’étuve pour chacune des 150 cultures ainsi obtenues. Le tableau 1 montre bien la rapidité plus ou moins grande de l’élimination des germes banaux. La surface en noir représente l’intensité de la culture. TABLEAU 1. — Survie des germes banaux à 20° C. T )0m 20m.30m Mm 2 h 3h 4 h. 6h )2h 1 A soor ; 4 ¡. B 'o".:::/g ..0 C. 20 rn PHOSPHATE A lIIIiIIII. rtuiotr/cATto/v OfMMOA/tr PLUS 3 ACIDE FLUIOIf/CATIOM OXAl.IQUC B NUL/.£ S 3 vol. IIlOR/QU£ B 8IIIII.l FLUIDIFICATION fiiUlLt CARBONATE HM FLUIDIFICATION APG £ S 6 MtUXtl 2,5 /OvDI c La qualité de la fluidification du produit a été également notée car l’homogénéisation a une grande importance. Le carbonate d’ammonium donne une
zéro heure (témoin), dix minutes, vingt minutes, trente minutes, une heure, deux heures, trois heures, quatre heures, six heures, douze heures. Le nombre des colonies a été noté après trois jours d’étuve pour chacune des 150 cultures ainsi obtenues. Le tableau 1 montre bien la rapidité plus ou moins grande de l’élimination des germes banaux. La surface en noir représente l’intensité de la culture. TABLEAU 1. — Survie des germes banaux à 20° C. T )0m 20m.30m Mm 2 h 3h 4 h. 6h )2h 1 A soor ; 4 ¡. B 'o".:::/g ..0 C. 20 rn PHOSPHATE A lIIIiIIII. rtuiotr/cATto/v OfMMOA/tr PLUS 3 ACIDE FLUIOIf/CATIOM OXAl.IQUC B NUL/.£ S 3 vol. IIlOR/QU£ B 8IIIII.l FLUIDIFICATION fiiUlLt CARBONATE HM FLUIDIFICATION APG £ S 6 MtUXtl 2,5 /OvDI c La qualité de la fluidification du produit a été également notée car l’homogénéisation a une grande importance. Le carbonate d’ammonium donne une fluidification médiocre et une mauvaise élimination des germes banaux après vingt-quatre heures. L’acide oxalique donne une fluidification nulle, ce qui ralentit la purification des produits purulents. La soude, le phosphate, l’acide chlorhydrique permettent une purification rapide, mais l’acide ne donne pas de fluidification. Ces trois produits ont cependant été retenus pour la suite de l’expérimentation. 2° ÉTUDE DE LA SURVIE DU BACILLE DE KOCH. — Comme Gernez-Rieux le fait remarquer, un essai sur des produits paucibacillaires est seul valable. Cela est difficile au point de vue technique. Nous avons voulu avoir une notion comparative en partant d’une émulsion de bacilles de Koch, en culture, à leur premier passage. Une suspension bien homogène a été obtenue à partir de 3 souches humaines mélangées. Après partage, chaque tiers a été additionné, comme plus haut, de : 1° 3 volumes de soude à 4 p. 100 ; 20 6 volumes de phosphate à 10 p. 100 ; 30 3 volumes d’acide chlorhydrique à 3 p. 100. Des prélèvements ont été faits à certains intervalles et ont été lavés par centrifugation puis émulsionnés dans une solution tampon et enfin ensemencés sur trois tubes de Löwenstein-Jensen (tous tubes semblables de la même série de fabrication).
pour la suite de l’expérimentation. 2° ÉTUDE DE LA SURVIE DU BACILLE DE KOCH. — Comme Gernez-Rieux le fait remarquer, un essai sur des produits paucibacillaires est seul valable. Cela est difficile au point de vue technique. Nous avons voulu avoir une notion comparative en partant d’une émulsion de bacilles de Koch, en culture, à leur premier passage. Une suspension bien homogène a été obtenue à partir de 3 souches humaines mélangées. Après partage, chaque tiers a été additionné, comme plus haut, de : 1° 3 volumes de soude à 4 p. 100 ; 20 6 volumes de phosphate à 10 p. 100 ; 30 3 volumes d’acide chlorhydrique à 3 p. 100. Des prélèvements ont été faits à certains intervalles et ont été lavés par centrifugation puis émulsionnés dans une solution tampon et enfin ensemencés sur trois tubes de Löwenstein-Jensen (tous tubes semblables de la même série de fabrication). Des ensemencements ont été ainsi faits après un contact de zéro heure (témoin), deux, six, douze, vingt-quatre, quarante-huit et soixante-douze heures à 20° C. Le tableau II, établi selon le même principe que le précédent, montre bien la durée de survie du bacille. TABLEAU Il. — Survie du bacille de Koch à 20° C. T2H6H 12h 24h 48h 72h 1 1 11 SOUDE À 2 4 .3 vol. 3 PHOSPHATE 2 3 WÊÊÊÊÊmm 3 1 ACIDE — cHiORHYDRIQut 2 Il est à noter qu’entre le témoin et deux heures, la chute est semblable pour les trois méthodes. Il semble qu’il y ait environ un tiers de bacilles sensibles et mal protégés (bacilles jeunes peut-être ?). Le parallélisme entre les trois cultures pour chaque essai est satisfaisant pour l’esprit. Il est possible de faire un rapport entre le temps nécessaire pour éliminer les germes banaux et le temps limite de survie des bacilles tuberculeux. On obtient ainsi un coefficient assez éloquent : 1° Pour la soude à 4 p. 100, épuration dix minutes ; survie du B. K., douze heures, soit coefficient 72 ; 2° Pour le phosphate à 10 p. 100, épuration deux heures ; survie du B. K., quarante-huit
Koch à 20° C. T2H6H 12h 24h 48h 72h 1 1 11 SOUDE À 2 4 .3 vol. 3 PHOSPHATE 2 3 WÊÊÊÊÊmm 3 1 ACIDE — cHiORHYDRIQut 2 Il est à noter qu’entre le témoin et deux heures, la chute est semblable pour les trois méthodes. Il semble qu’il y ait environ un tiers de bacilles sensibles et mal protégés (bacilles jeunes peut-être ?). Le parallélisme entre les trois cultures pour chaque essai est satisfaisant pour l’esprit. Il est possible de faire un rapport entre le temps nécessaire pour éliminer les germes banaux et le temps limite de survie des bacilles tuberculeux. On obtient ainsi un coefficient assez éloquent : 1° Pour la soude à 4 p. 100, épuration dix minutes ; survie du B. K., douze heures, soit coefficient 72 ; 2° Pour le phosphate à 10 p. 100, épuration deux heures ; survie du B. K., quarante-huit heures, soit coefficient 24 ; 3° Pour HCI à 3 p. 100, épuration vingt minutes ; survie du B. K., douze heures, soit coefficient 72 ; Le coefficient de sécurité est aussi important pour 3 que pour 1. Mais la qualité de fluidification fait nettement préférer la soude. 30 MÉTHODE PROPOSÉE. — Fluidification en mélangeant (au mortier si nécessaire) 2 cm3 de crachats environ avec 6 cm3 de soude à 4 p. 100. Verser dans un tube à centrifuger stérile, couvert de 75 cm3 au moins. On évitera ainsi par la suite toute souillure par les particules non touchées par la soude qui pourraient subsister sur les parois du mortier. Laisser, selon purulence et fraîcheur, vingt à trente minutes à l'étuve à 37°. Ce laps de temps est toujours suffisant si on prend la précaution d'agiter de temps à autre. Ajouter alors 50 cm3 de solution stérile contenant 4,5 cm3 d'acide sulfurique par litre. Centrifuger trois quarts d'heure à une heure à 3 000 tours pour obtenir un culot presque sec. L'émulsionner avec 3 cm3 de solution tampon. Soit : Phosphate monopotassique. 1 Phosphate bipotassique. 2 Glycérine 5 Eau distillée. 500 Répartir sur six tubes de L'ovenstein-Jensen fraîchement préparés [10].
PROPOSÉE. — Fluidification en mélangeant (au mortier si nécessaire) 2 cm3 de crachats environ avec 6 cm3 de soude à 4 p. 100. Verser dans un tube à centrifuger stérile, couvert de 75 cm3 au moins. On évitera ainsi par la suite toute souillure par les particules non touchées par la soude qui pourraient subsister sur les parois du mortier. Laisser, selon purulence et fraîcheur, vingt à trente minutes à l'étuve à 37°. Ce laps de temps est toujours suffisant si on prend la précaution d'agiter de temps à autre. Ajouter alors 50 cm3 de solution stérile contenant 4,5 cm3 d'acide sulfurique par litre. Centrifuger trois quarts d'heure à une heure à 3 000 tours pour obtenir un culot presque sec. L'émulsionner avec 3 cm3 de solution tampon. Soit : Phosphate monopotassique. 1 Phosphate bipotassique. 2 Glycérine 5 Eau distillée. 500 Répartir sur six tubes de L'ovenstein-Jensen fraîchement préparés [10]. 4° RÉSULTATS. — Dans un but diagnostique, 1 139 cultures ont été pratiquées selon ces principes, au laboratoire central des Villages Sanatoriums, à partir de crachats recueillis directement ou par tubages gastriques. 6 478 tubes ont été ensemencés. Il s'agit de tubes de milieu de L'ovenstein-Jensen fraîchement préparés au laboratoire. 76 tubes ont été souillés par une flore indésirable, souillure qui n'a eu de conséquence que pour 4 cultures dont tous les tubes étaient souillés. Dans les autres cas, 1 tube sur 6 était contaminé et la lecture restait sur les 5 autres. 558 cultures ont été positives. 5° CONCLUSIONS. Ces résultats sont encourageants. Il n'en reste pas moins vrai que la culture du bacille de Koch reste susceptible de subir de gros perfectionnements dans le but de lui faire rejoindre, en sensibilité, l'inoculation au cobaye. Les suggestions de Gernez-Rieux, Sevin et Chenet seront, à ce point de vue, très fructueuses. BIBLIOGRAPHIE [1] F. TISON. Sem. Hôp. Paris, 1949, 9, 389. [2] F. TISON. Ces Annales, 1947, 73, 1024. [3] Ch. GERNEZ-RIEUX et coll. Ann. Inst. Pasteur Lille, 1949, 2, 27. [4] F. TISON. Ces Annales, 1947, 73, 186. [5] F. TISON. Ces Annales, 1947, 73, 407. [6] GOLDIE, Proceed.
76 tubes ont été souillés par une flore indésirable, souillure qui n'a eu de conséquence que pour 4 cultures dont tous les tubes étaient souillés. Dans les autres cas, 1 tube sur 6 était contaminé et la lecture restait sur les 5 autres. 558 cultures ont été positives. 5° CONCLUSIONS. Ces résultats sont encourageants. Il n'en reste pas moins vrai que la culture du bacille de Koch reste susceptible de subir de gros perfectionnements dans le but de lui faire rejoindre, en sensibilité, l'inoculation au cobaye. Les suggestions de Gernez-Rieux, Sevin et Chenet seront, à ce point de vue, très fructueuses. BIBLIOGRAPHIE [1] F. TISON. Sem. Hôp. Paris, 1949, 9, 389. [2] F. TISON. Ces Annales, 1947, 73, 1024. [3] Ch. GERNEZ-RIEUX et coll. Ann. Inst. Pasteur Lille, 1949, 2, 27. [4] F. TISON. Ces Annales, 1947, 73, 186. [5] F. TISON. Ces Annales, 1947, 73, 407. [6] GOLDIE, Proceed. Soc. exp. Biol. a. Med., 1947, 65, 210. [7] MAC NABB. Am. J. Publ. Health., 1936, 26, 619. [8] CORPER et STONER. J. Lab. a. Clin. Méd., 1946, 31, 1364. [9] CORPER et MYERS. J. Lab. a. Clin. Med., 1930, 15, 348. [10] F. TISON. Ces Annales, 1949, 77, 313. [11] VAN VRANKEN. Am. Rev. Tub., 1947, 55, 374. SOCIÉTÉ FRANÇAISE DE MICROBIOLOGIE (Institut Pasteur, 25, rue du Docteur-Roux, Paris, 75015.) Séance du 5 Avril 1951. Présidence de M. GASTINEL PRÉSENTATION D'OUVRAGES M. Lépine : J'ai l'honneur d'offrir à notre Société, au nom du Professeur Pasteur Vallery-Radot, 4 volumes où celui-ci a patiemment réuni et annoté la correspondance de Pasteur (*) . L'intérêt de cette publication attendue depuis longtemps n'échappera à personne : aussi bien du point de vue de l'histoire que de celui de la science, la lecture de cette correspondance est d'un passionnant intérêt. Elle s'échelonne, en effet, sur toute la vie du fondateur de la Microbiologie. Le premier volume réunit les lettres de jeunesse, nous montre Pasteur d'abord élève au Collège de Besançon puis étudiant à l'Ecole Normale, ensuite agrégé-préparateur dans le laboratoire de Balard, et enfin professeur à la Faculté de Strasbourg. Nous y retrouvons les
[11] VAN VRANKEN. Am. Rev. Tub., 1947, 55, 374. SOCIÉTÉ FRANÇAISE DE MICROBIOLOGIE (Institut Pasteur, 25, rue du Docteur-Roux, Paris, 75015.) Séance du 5 Avril 1951. Présidence de M. GASTINEL PRÉSENTATION D'OUVRAGES M. Lépine : J'ai l'honneur d'offrir à notre Société, au nom du Professeur Pasteur Vallery-Radot, 4 volumes où celui-ci a patiemment réuni et annoté la correspondance de Pasteur (*) . L'intérêt de cette publication attendue depuis longtemps n'échappera à personne : aussi bien du point de vue de l'histoire que de celui de la science, la lecture de cette correspondance est d'un passionnant intérêt. Elle s'échelonne, en effet, sur toute la vie du fondateur de la Microbiologie. Le premier volume réunit les lettres de jeunesse, nous montre Pasteur d'abord élève au Collège de Besançon puis étudiant à l'Ecole Normale, ensuite agrégé-préparateur dans le laboratoire de Balard, et enfin professeur à la Faculté de Strasbourg. Nous y retrouvons les enthousiasmes du lycéen, nous y voyons poindre la vocation scientifique de Pasteur et nous partageons avec lui l'ardeur fébrile des premiers travaux qui culmine avec la découverte des relations entre la forme cristalline, la composition chimique et la polarisation rotatoire. Le second volume est celui de l'étape décisive du passage de Pasteur des études de cristallographie pure à celles des fermentations. C'est la correspondance de Pasteur, administrateur puis directeur de laboratoire à l'Ecole Normale, qui forme l'essentiel du volume : lettres aux premiers élèves, comme Raulin, aux maîtres comme Jean-Baptiste Dumas ou aux collègues comme Sainte-Claire-Deville, lettres aussi aux puissants du jour, comme le Maréchal Vaillant ou l'Empereur, dont l'appui est indispensable à Pasteur pour obtenir les crédits nécessaires à la poursuite des recherches. A travers toutes ces lettres, si variées de ton, nous voyons l'œuvre de Pasteur prendre son ampleur définitive. Les troisième et quatrième volumes correspondent à l'étape des maladies virulentes, depuis les virus-vaccins du choléra des poules et du charbon, jusqu'à la vaccination contre la rage. Avec eux, c'est (*) PASTEUR, Correspondance, réunie et annotée par Pasteur Vallery-Radot. Flammarion, éditeur, 26, rue Racine, Paris-6e, 1951. toute la fresque de la naissance et du développement de la microbiologie
de Pasteur des études de cristallographie pure à celles des fermentations. C'est la correspondance de Pasteur, administrateur puis directeur de laboratoire à l'Ecole Normale, qui forme l'essentiel du volume : lettres aux premiers élèves, comme Raulin, aux maîtres comme Jean-Baptiste Dumas ou aux collègues comme Sainte-Claire-Deville, lettres aussi aux puissants du jour, comme le Maréchal Vaillant ou l'Empereur, dont l'appui est indispensable à Pasteur pour obtenir les crédits nécessaires à la poursuite des recherches. A travers toutes ces lettres, si variées de ton, nous voyons l'œuvre de Pasteur prendre son ampleur définitive. Les troisième et quatrième volumes correspondent à l'étape des maladies virulentes, depuis les virus-vaccins du choléra des poules et du charbon, jusqu'à la vaccination contre la rage. Avec eux, c'est (*) PASTEUR, Correspondance, réunie et annotée par Pasteur Vallery-Radot. Flammarion, éditeur, 26, rue Racine, Paris-6e, 1951. toute la fresque de la naissance et du développement de la microbiologie qui défile. Chaque lettre, ou presque, complète ou éclaire de la façon la plus intéressante la monumentale série de mémoires et de travaux que la publication antérieure des Œuvres de Pasteur, véritable pierre angulaire de la microbiologie, a rendus accessibles à tous. Les dernières lettres sont celles du Directeur de l'Institut Pasteur, du savant au faîte de la gloire, du Maître qui transmet le flambeau à ses disciples, du grand-père aussi. Car, et ce n'est pas là l'un des moindres charmes de cette correspondance, tout au long de la vie de Pasteur on retrouve, étroitement associé à ses soucis quotidiens, à ses problèmes scientifiques, l'amour de la famille et du foyer : lettres à son père et à ses sœurs, plus tard lettres à Mme Pasteur, à ses enfants, enfin à ses petits-enfants, qui nous apportent le témoignage intime de l'homme et la résonance affective des événements dans sa vie. A cet égard, la correspondance de Pasteur est un document profondément humain en même temps qu'elle nous apporte des renseignements de premier ordre sur l'évolution de la pensée scientifique de Pasteur ; les lettres à Chappuis, contemporaines des premières découvertes et de l'épanouissement du génie, sont, de ce point de