jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
l'animal sacrifié a été disposé en tubes scellés (sans l'addition de liquide physiologique ou autre), placé en étui de carton et entouré de neige carbonique dans un vase de d'Arsonval pendant une durée supérieure à quatre mois (cent quatre-vingts et un jours). La décongélation s'est faite par passage progressif de −79° à −4° suivi de réchauffement rapide à la température de 37° à l'étuve. Dans la seconde série d'essais, nous avons, concurremment à la méthode précédente, congelé brutalement des tubes renfermant le tissu prélevé par immersion dans un mélange alcool-neige carbonique et, au bout d'un temps supérieur à deux mois (soixante-deux jours), décongelé ce tissu soit très rapidement par immersion directe dans de l'eau chauffée à 37°, soit lentement comme dans la première expérience. CULTURE DES TISSUS. — Les tissus congelés ainsi que les tissus témoins prélevés avant congélation ont été cultivés sur un milieu classique constitué par une partie de sérum ou de plasma de souris et une partie d'extrait embryonnaire de poulet, additionnés d'une partie de liquide de Tyrode. Le milieu a été centrifugé avant utilisation pendant quinze minutes à 5 000 t/m pour éliminer tout débris cellulaire. La culture se fait sur une lame de verre de 20 x 25 mm, avec des anneaux de verre formant des alvéoles à l'intérieur desquels on explante 4 fragments mesurant chacun de 2 à 3 mm2. Les renouvellements du milieu ont eu lieu toutes les quarante-huit heures, les cultures étant incubées dans une étuve à éléments chauffants disposés au-dessus de la culture. Les détails techniques ont été décrits précédemment par l'un de nous (Barski [2]). La durée totale de la culture était de quatre jours au bout desquels les cultures fixées à l'alcool à 96° sur la lamelle qui leur servait de support ont été déshydratées et colorées au bleu de toluidine. RÉSULTATS. — Première série (sarcome) : Congélation lente, décongélation rapide ; durée de la congélation : cent vingt et un jours à -79°. L'observation in vivo par inoculation à un groupe de souris ne montre rien de concluant au bout de quatre semaines. Cependant l'une des souris inoculées
20 x 25 mm, avec des anneaux de verre formant des alvéoles à l'intérieur desquels on explante 4 fragments mesurant chacun de 2 à 3 mm2. Les renouvellements du milieu ont eu lieu toutes les quarante-huit heures, les cultures étant incubées dans une étuve à éléments chauffants disposés au-dessus de la culture. Les détails techniques ont été décrits précédemment par l'un de nous (Barski [2]). La durée totale de la culture était de quatre jours au bout desquels les cultures fixées à l'alcool à 96° sur la lamelle qui leur servait de support ont été déshydratées et colorées au bleu de toluidine. RÉSULTATS. — Première série (sarcome) : Congélation lente, décongélation rapide ; durée de la congélation : cent vingt et un jours à -79°. L'observation in vivo par inoculation à un groupe de souris ne montre rien de concluant au bout de quatre semaines. Cependant l'une des souris inoculées présente finalement, après six semaines, une tumeur de même nature que la tumeur originelle apparue dans le cou, alors que l'animal a été inoculé à l'aisselle du même côté. Sur les préparations des fragments transplantées in vitro et fixées au bout de quatre jours, on aperçoit autour de certains fragments des zones de plasma digéré. Un seul fragment sur 35 transplants présente des zones évidentes de croissance fibroblastique. La croissance est relativement peu abondante, bien qu'elle dépasse nettement le territoire propre du fragment et que'elle commence à s'étendre dans la zone immédiatement environnante (fig. 1). On note par ailleurs que tout le fond du tissu transplanté est entièrement nécrosé. Deuxième série (adénocarcinome mammaire) : Congélation rapide et congélation lente, décongélation très rapide. Conservation : soixante-deux jours à -79°. Les inoculations à l'animal demeurent négatives. Sur les préparations des cultures in vitro, fixées au bout de quatre jours et colorées, on n'observe dans les tissus normaux ou tumoraux qui ont été congelés et décongelés rapidement aucune croissance ni activité vitale. Dans quelques fragments provenant de la tumeur originelle on distingue des noyaux pycnotiques avec vestiges de nucléole sur un fond entièrement nécrosé. A partir des fragments de tumeurs congelées rapidement et
des zones de plasma digéré. Un seul fragment sur 35 transplants présente des zones évidentes de croissance fibroblastique. La croissance est relativement peu abondante, bien qu'elle dépasse nettement le territoire propre du fragment et que'elle commence à s'étendre dans la zone immédiatement environnante (fig. 1). On note par ailleurs que tout le fond du tissu transplanté est entièrement nécrosé. Deuxième série (adénocarcinome mammaire) : Congélation rapide et congélation lente, décongélation très rapide. Conservation : soixante-deux jours à -79°. Les inoculations à l'animal demeurent négatives. Sur les préparations des cultures in vitro, fixées au bout de quatre jours et colorées, on n'observe dans les tissus normaux ou tumoraux qui ont été congelés et décongelés rapidement aucune croissance ni activité vitale. Dans quelques fragments provenant de la tumeur originelle on distingue des noyaux pycnotiques avec vestiges de nucléole sur un fond entièrement nécrosé. A partir des fragments de tumeurs congelées rapidement et décongelées lentement, on observe, par contre, autour des fragments explantés, quelques signes d'activité enzymatique de digestion du plasma, mais sans manifestation nette de croissance cellulaire. D'une manière générale, nos résultats concordent avec ceux que Passey, Dmochowski et coll. [14, 41, 42], opérant dans des conditions analogues (mais avec congélation d'une durée de six à douze heures), ont obtenus à peu près simultanément, et dont nous avons eu connaissance depuis l'achèvement de notre travail. CONCLUSION. Nos expériences montrent que, si la congélation à basse température (-79° C), lente ou rapide, suivie de décongélation lente ou rapide, détruit la majeure partie des cellules du tissu normal ou tumoral exposées à ce traitement, elle n'assure néanmoins pas la stérilisation complète du tissu. Nos essais prouvent qu'au bout de cent vingt et un jours de conservation à -79° C après congélation relativement lente, un fragment de tumeur explanté est capable in vitro d'exercer une action enzymatique sur le milieu et de présenter une indiscutable croissance fibroblastique. C'est à cette croissance fibroblastique que nous croyons devoir attribuer le résultat positif de l'inoculation à l'animal. En résumé, nos expériences confirment la possibilité de préserver la vie cellulaire à basse température pendant plusieurs mois, dans des conditions
durée de six à douze heures), ont obtenus à peu près simultanément, et dont nous avons eu connaissance depuis l'achèvement de notre travail. CONCLUSION. Nos expériences montrent que, si la congélation à basse température (-79° C), lente ou rapide, suivie de décongélation lente ou rapide, détruit la majeure partie des cellules du tissu normal ou tumoral exposées à ce traitement, elle n'assure néanmoins pas la stérilisation complète du tissu. Nos essais prouvent qu'au bout de cent vingt et un jours de conservation à -79° C après congélation relativement lente, un fragment de tumeur explanté est capable in vitro d'exercer une action enzymatique sur le milieu et de présenter une indiscutable croissance fibroblastique. C'est à cette croissance fibroblastique que nous croyons devoir attribuer le résultat positif de l'inoculation à l'animal. En résumé, nos expériences confirment la possibilité de préserver la vie cellulaire à basse température pendant plusieurs mois, dans des conditions où la congélation relativement lente suivie de la décongélation rapide paraît avoir réuni les meilleures conditions pour cette survie partielle. Ces essais sont de nature à rendre improbables les explications attribuant à un virus seul, agissant en l'absence du transfert de cellules vivantes, les résultats d'inoculation de matériel tumoral conservé à basse température, même pendant une durée prolongée. BIBLIOGRAPHIE [1] C. H. ANDREWES. Brit. Med. J., 14 janvier 1950, 81. [2] G. BARSKI. Ces Annales, 1948, 74, 1. [3] W. A. BARNES et J. FURTH. Am. J. Cane., 1937, 30, 75. [4] H. T. BLUMENTHAL, L. WALSCH et D. GREIFF. Canc. Res., 1950, 10, 205. [5] H. T. BLUMENTHAL et L. WALSCH. Proceed. Soc. exp. Biol. a. Med., 1950, 73, 63. [6] C. BREEDIS et J. FURTH. Science, 1938, 88, 551. [7] C. BREEDIS, W. A. BARNES et J. FURTH. Proceed. Soc. exp. Biol. a. Med., 1937, 36, 220. [8] C. BREEDIS. J. exp. Med., 1942, 76, 221. [9] R. BRIGGS et L. JUND. Anat. Rec., 1944, 89, 75. [10] L. BUCCIANTE. Arch. exp. Zellforsch., 1931, 11, 397. [11] W. CRAMER. Imper. Cancer Res. Found., 1930, 9, 21. [12] J. CRAIGIE. Brit. J. Canc., 1949, 3, 268. [13] J. CRAIGIE.
à basse température, même pendant une durée prolongée. BIBLIOGRAPHIE [1] C. H. ANDREWES. Brit. Med. J., 14 janvier 1950, 81. [2] G. BARSKI. Ces Annales, 1948, 74, 1. [3] W. A. BARNES et J. FURTH. Am. J. Cane., 1937, 30, 75. [4] H. T. BLUMENTHAL, L. WALSCH et D. GREIFF. Canc. Res., 1950, 10, 205. [5] H. T. BLUMENTHAL et L. WALSCH. Proceed. Soc. exp. Biol. a. Med., 1950, 73, 63. [6] C. BREEDIS et J. FURTH. Science, 1938, 88, 551. [7] C. BREEDIS, W. A. BARNES et J. FURTH. Proceed. Soc. exp. Biol. a. Med., 1937, 36, 220. [8] C. BREEDIS. J. exp. Med., 1942, 76, 221. [9] R. BRIGGS et L. JUND. Anat. Rec., 1944, 89, 75. [10] L. BUCCIANTE. Arch. exp. Zellforsch., 1931, 11, 397. [11] W. CRAMER. Imper. Cancer Res. Found., 1930, 9, 21. [12] J. CRAIGIE. Brit. J. Canc., 1949, 3, 268. [13] J. CRAIGIE. Brit. Med. J., 31 décembre 1949, 1485. [14] L. DMOCHOWSKI et A. MILLARD. Brit. Med. J., 18 novembre 1950, 1136. [15] W. R. EARLE et J. W. THOMPSON. Publ. Health Rep., 1931, 45, 2678. [16] P. EHRLICH. Zeitschr. Krebsforsch., 1907, 5, 65. [17] A. FISCHER. Arch. exp. Zellforsch., 1926, 2, 303. [18] A. FISCHER. Tissue Cult., 1925. W. Heinemann, London. [19] J. FURTH. J. exp. Med., 1935, 61, 423. [20] H. R. GAYLORD. J. Infect., Dis., 1908, 5, 443. [21] W. E. GYE. Brit. Med. J., 26 mars 1949, 511. [22] W. E. GYE, A. BEGG, I. MANN et J. CRAIGIE. Brit. J. Canc., 1949, 3, 259. [23] D. HETHERINGTON et J. S. CRAIG. J. Cell. Comp. Phys., 1939, 14, 197. [24] F. JAHNEL. Klin. Wochenschr., 1938, 17, 1273. [25] J. KLINKE. Zeitschr. Krebsforsch., 1937, 46, 436. [26] J. KLINKE. Klin. Wochenschr., 1940, 19, 585. [27] J. KLINKE. Growth, 1939, 3, 169. [28] W. KOOSE et H. LEMMEL. Brunsw. Beitr., 1927, 141, 489. [29] L. KREYBERG et O. HANSSEN. Scand. J. Clin. Labor. Invest., 1950, 2. [30] N. C. LAKE. Lancet, 1917, 2, 557. [31] R. A. LAMBERT. Proceed. N. Y. Path. Soc., 1912, 12, 113. [32] R. A. LAMBERT.
303. [18] A. FISCHER. Tissue Cult., 1925. W. Heinemann, London. [19] J. FURTH. J. exp. Med., 1935, 61, 423. [20] H. R. GAYLORD. J. Infect., Dis., 1908, 5, 443. [21] W. E. GYE. Brit. Med. J., 26 mars 1949, 511. [22] W. E. GYE, A. BEGG, I. MANN et J. CRAIGIE. Brit. J. Canc., 1949, 3, 259. [23] D. HETHERINGTON et J. S. CRAIG. J. Cell. Comp. Phys., 1939, 14, 197. [24] F. JAHNEL. Klin. Wochenschr., 1938, 17, 1273. [25] J. KLINKE. Zeitschr. Krebsforsch., 1937, 46, 436. [26] J. KLINKE. Klin. Wochenschr., 1940, 19, 585. [27] J. KLINKE. Growth, 1939, 3, 169. [28] W. KOOSE et H. LEMMEL. Brunsw. Beitr., 1927, 141, 489. [29] L. KREYBERG et O. HANSSEN. Scand. J. Clin. Labor. Invest., 1950, 2. [30] N. C. LAKE. Lancet, 1917, 2, 557. [31] R. A. LAMBERT. Proceed. N. Y. Path. Soc., 1912, 12, 113. [32] R. A. LAMBERT. J. exp. Med., 1913, 18, 406. [33] B. J. LUYET et E. L. HODAPP. Proceed. Soc. exp. Biol. a. Med., 1938, 39, 433. [34] I. MANN. Brit. Med. J., 30 juillet 1949, 251. [35] I. MANN. Brit. Med. J., 30 juillet 1949, 253. [36] I. MANN. Brit. J. Cane., 1949, 3, 255. [37] I. MANN et W. J. DUNN. Brit. Med. J., 30 juillet 1949, 511. [38] L. MICHAELIS. Med. Klin., 1905, 1, 203. [39] G. B. MIDER et J. J. MORTON. Am. J. Cane., 1939, 35, 502. [40] J. K. MOEN. J. exp. Med., 1935, 61, 247. [41] R. D. PASSEY, L. DMOCHOWSKI, I. LASNITZKI et A. MILLARD. Brit. Med. J., 18 novembre 1950, 1134. [42] R. D. PASSEY et L. DMOCHOWSKI. Brit. Med. J., 18 novembre 1950, 1129. [43] G. POLGE, A. O. SMITH et A. S. PARKER. Nature, 1949, 164, 666. [44] K. K. SANFORD, W. R. EARLE et G. D. LIKELY. J. Nat. Cane. Inst., 1948, 9, 229. [45] G. SIMONIN. C. R. Soc. Biol., 1931, 107, 1029. [46] G. D. SNELL et A. M. CLOUDMAN. Cane. Res., 1943, 3, 396. [47] C. E. WALKER. Lancet, 1908, 1, 226. [48] J. P. WEBSTER. Ann. Surg., 1944,
3, 255. [37] I. MANN et W. J. DUNN. Brit. Med. J., 30 juillet 1949, 511. [38] L. MICHAELIS. Med. Klin., 1905, 1, 203. [39] G. B. MIDER et J. J. MORTON. Am. J. Cane., 1939, 35, 502. [40] J. K. MOEN. J. exp. Med., 1935, 61, 247. [41] R. D. PASSEY, L. DMOCHOWSKI, I. LASNITZKI et A. MILLARD. Brit. Med. J., 18 novembre 1950, 1134. [42] R. D. PASSEY et L. DMOCHOWSKI. Brit. Med. J., 18 novembre 1950, 1129. [43] G. POLGE, A. O. SMITH et A. S. PARKER. Nature, 1949, 164, 666. [44] K. K. SANFORD, W. R. EARLE et G. D. LIKELY. J. Nat. Cane. Inst., 1948, 9, 229. [45] G. SIMONIN. C. R. Soc. Biol., 1931, 107, 1029. [46] G. D. SNELL et A. M. CLOUDMAN. Cane. Res., 1943, 3, 396. [47] C. E. WALKER. Lancet, 1908, 1, 226. [48] J. P. WEBSTER. Ann. Surg., 1944, 120, 431. [49] WOLFF et ZONDEK. Virchow's Arch., 1925, 154, 1. ÉTUDE QUANTITATIVE DE L'ACTIVITÉ GRANULOPEXIQUE DU SYSTÈME RÉTICULO-ENDOTHÉLIAL PAR L'INJECTION INTRAVEINEUSE D'ENCRE DE CHINE CHEZ LES DIVERSES ESPÈCES ANIMALES I — MÉTHODE DÉTUIDÉ QUANTITATIVE DE L'ACTIVITÉ GRANULOPEXIQUE DU SYSTÈME RÉTICULO-ENDOTHÉLIAL PAR L'INJECTION INTRAVEINEUSE DE PARTICULES DE CARBONE DE DIMENSIONS CONNUES par B.-N. HALPEHN, G. BIOZZI, G. MENÈ et B. BENACERHAF. (Laboratoire de Pathologie expérimentale de la Clinique médicale propédeutique de l'Hôpital Broussais La Charité [M. PASTEUR VALLERY-RADOT], C. N. R. S. et C. N. R. Italien.) Depuis que le système réticulo-endothélial a été défini et caractérisé par les travaux d'Aschoff et Kyono [1], de nombreux travaux ont été entrepris pour en étudier l'activité et la fonction. Pour mettre en évidence l'activité phagique du système réticulo-endothélial, les auteurs ont employé soit des solutions de colorants vitaux [2], soit des suspensions de particules, telles que l'argent colloïdal, le manganèse, l'encre de Chine, etc. [2, 3, 4, 5, 6]. Les méthodes comportant l'injection intraveineuse d'encre de Chine étudient plus particulièrement l'activité granulopexique des cellules du système réticulo-endothélial du lit vasculaire en contact direct avec le sang, les particules de carbone généralement utilisées étant incapables de traverser la paroi des vaisseaux, et n'étant
CONNUES par B.-N. HALPEHN, G. BIOZZI, G. MENÈ et B. BENACERHAF. (Laboratoire de Pathologie expérimentale de la Clinique médicale propédeutique de l'Hôpital Broussais La Charité [M. PASTEUR VALLERY-RADOT], C. N. R. S. et C. N. R. Italien.) Depuis que le système réticulo-endothélial a été défini et caractérisé par les travaux d'Aschoff et Kyono [1], de nombreux travaux ont été entrepris pour en étudier l'activité et la fonction. Pour mettre en évidence l'activité phagique du système réticulo-endothélial, les auteurs ont employé soit des solutions de colorants vitaux [2], soit des suspensions de particules, telles que l'argent colloïdal, le manganèse, l'encre de Chine, etc. [2, 3, 4, 5, 6]. Les méthodes comportant l'injection intraveineuse d'encre de Chine étudient plus particulièrement l'activité granulopexique des cellules du système réticulo-endothélial du lit vasculaire en contact direct avec le sang, les particules de carbone généralement utilisées étant incapables de traverser la paroi des vaisseaux, et n'étant pas éliminées par les émonctoires. Cependant les auteurs ayant eu recours à l'encre de Chine ont injecté des suspensions de particules de carbone dont ils ne connaissaient ni la taille, ni le degré de dispersion. Le sort de l'encre de Chine en fonction de la quantité d'encre injectée n'a jamais fait l'objet d'une étude particulière ; le mode de distribution de l'encre dans les divers organes suivant l'espèce animale n'a jamais été abordé sous l'angle quantitatif. Les auteurs se sont contentés d'étudier la distribution du carbone dans les organes par les moyens histologiques, sans déterminer quantitativement ni la vitesse de disparition des particules de carbone du sang, ni leur accumulation dans les organes. C'est précisément en raison de ces variables si multiples, qu'il est impossible de tirer de ces expériences des conclusions valables quant à l'activité réelle du système réticulo-endothélial. Le but de ce travail est d'étudier les effets de l'injection intraveineuse d'une suspension d'encre bien définie en poids et quant au degré de dispersion, et d'établir une méthode quantitative qui permette l'exploration fonctionnelle du système réticulo-endothélial ainsi que la définition des limites dans lesquelles cette méthode est valable. Cette technique est basée sur l'étude quantitative de la cinétique de
fait l'objet d'une étude particulière ; le mode de distribution de l'encre dans les divers organes suivant l'espèce animale n'a jamais été abordé sous l'angle quantitatif. Les auteurs se sont contentés d'étudier la distribution du carbone dans les organes par les moyens histologiques, sans déterminer quantitativement ni la vitesse de disparition des particules de carbone du sang, ni leur accumulation dans les organes. C'est précisément en raison de ces variables si multiples, qu'il est impossible de tirer de ces expériences des conclusions valables quant à l'activité réelle du système réticulo-endothélial. Le but de ce travail est d'étudier les effets de l'injection intraveineuse d'une suspension d'encre bien définie en poids et quant au degré de dispersion, et d'établir une méthode quantitative qui permette l'exploration fonctionnelle du système réticulo-endothélial ainsi que la définition des limites dans lesquelles cette méthode est valable. Cette technique est basée sur l'étude quantitative de la cinétique de la disparition des particules de carbone de la circulation et de leur distribution dans les organes après l'injection intraveineuse de l'encre de Chine. Dans ce mémoire nous ne relaterons que les résultats obtenus chez deux espèces animales : le Rat et la Souris. ÉTUDE EXPÉRIMENTALE. A. CINÉTIQUE DE LA DISPARITION DES PARTICULES DE CARBONE DE LA CIRCULATION. — a) Chez le Rat. Technique: L'encre de Chine commerciale Pelikan a été employée. L'examen de cette encre au microscope électronique a montré sa dispersion parfaite et la taille homogène de ses particules d'environ 200 A [fig. 1] (1). Cette encre contient 80 mg de carbone par millilitre. Les recherches de Wright [7] ayant montré l'importance du colloïde protecteur dans le maintien de la dispersion parfaite de l'encre in vivo, celle-ci a été diluée dans du sérum physiologique contenant 1 p. 100 de gélatine pour une dilution d'encre allant jusqu'à 30 p. 100, et 2 p. 100 de gélatine pour les solutions plus concentrées. Des doses de carbone variables et exprimées en milligramme de carbone pour 100 g d'animal ont été injectées dans la veine caudale du rat. Nous avons employé, pour les doses de 5, 16, 32 mg de carbone pour 100
DES PARTICULES DE CARBONE DE LA CIRCULATION. — a) Chez le Rat. Technique: L'encre de Chine commerciale Pelikan a été employée. L'examen de cette encre au microscope électronique a montré sa dispersion parfaite et la taille homogène de ses particules d'environ 200 A [fig. 1] (1). Cette encre contient 80 mg de carbone par millilitre. Les recherches de Wright [7] ayant montré l'importance du colloïde protecteur dans le maintien de la dispersion parfaite de l'encre in vivo, celle-ci a été diluée dans du sérum physiologique contenant 1 p. 100 de gélatine pour une dilution d'encre allant jusqu'à 30 p. 100, et 2 p. 100 de gélatine pour les solutions plus concentrées. Des doses de carbone variables et exprimées en milligramme de carbone pour 100 g d'animal ont été injectées dans la veine caudale du rat. Nous avons employé, pour les doses de 5, 16, 32 mg de carbone pour 100 g, une dilution à 20 p. 100 de notre encre et pour les doses de 48 et 64 mg de carbone par 100 g, une dilution d'encre respectivement à 30 et 40 p. 100. Pour contrôler la stabilité et la dispersion des particules d'encre en présence du sang, des expériences de contrôle ont été effectuées in vitro ; celles-ci ont montré que dans les limites des concentrations employées les particules restaient en suspension stable soit dans le sérum, soit dans le sang citraté. (1) Nous remercions très vivement M. le Dr Pierre Lépine, chef du Service de Virologie à l'Institut Pasteur, d'avoir bien voulu exécuter cette photo dans son service. Microphotographie au microscope électronique de l'encre de Chine employée. Gross. : X 55 000. (Service des virus de l’Institut Pasteur.) Forcé le sac palpébral on bute contre le maxillaire que tapisse le plexus veineux ophtalmique, on voit alors le sang monter dans la pipette par capillarité. Ce procédé permet de faire de nombreux prélèvements à des temps précis ; il est parfaitement bien supporté par l’animal. Le sang prélevé est mis dans 2 ml de solution de carbonate de soude à 1 p. 1000 et les dosages de carbone ont
de contrôle ont été effectuées in vitro ; celles-ci ont montré que dans les limites des concentrations employées les particules restaient en suspension stable soit dans le sérum, soit dans le sang citraté. (1) Nous remercions très vivement M. le Dr Pierre Lépine, chef du Service de Virologie à l'Institut Pasteur, d'avoir bien voulu exécuter cette photo dans son service. Microphotographie au microscope électronique de l'encre de Chine employée. Gross. : X 55 000. (Service des virus de l’Institut Pasteur.) Forcé le sac palpébral on bute contre le maxillaire que tapisse le plexus veineux ophtalmique, on voit alors le sang monter dans la pipette par capillarité. Ce procédé permet de faire de nombreux prélèvements à des temps précis ; il est parfaitement bien supporté par l’animal. Le sang prélevé est mis dans 2 ml de solution de carbonate de soude à 1 p. 1000 et les dosages de carbone ont été effectués à l’aide de l’électrophotomètre de Meunier en lumière rouge. La teneur en carbone du sang est déterminée par comparaison avec une courbe d’étalonnage. Les doses suivantes de carbone ont été injectées : 8, 16, 32, 48, 64 mg par 100 g de poids de l’animal. Les prélèvements de sang ont été effectués : deux, quatre, six, dix, vingt, trente-cinq, cinquante minutes après l’injection de l’encre. 474 rats blancs de poids variant de 110 à 140 g ont été utilisés pour ces essais. Résultats. — Les animaux ont parfaitement bien supporté les injections d’encre de Chine et n’ont présenté aucun trouble immédiat, à l’exception de la dose de 64 mg par 100 g qui a causé un état de choc passager, avec des tremblements généralisés de l’animal. Les taux sanguins de carbone, en fonction du temps et de la dose d’encre injectée, sont rapportés comme moyennes arithmétiques des résultats obtenus pour chaque dose sur la figure 4. Pour les doses de 8 et 16 mg de carbone par 100 g, un petit nombre d’animaux seulement présentent des valeurs éloignées de la moyenne ; chez ces animaux l’autopsie a révélé toujours des organes (foie et rate) dont le poids ne