jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
culture en nappe finement granuleuse: souche S. Nous arrivons ainsi à différencier très facilement ces sept souches, dans leur état actuel. Nous nous empressons d'ajouter que nous n'affirmons nullement qu'il s'agit là dans tous les cas de streptocoques différents, le milieu intermédiaire se prêtant admirablement en maintes circonstances, à la différenciation des souches R, S et intermédiaires. Si les types granuleux et granulo-homogènes permettent facilement les différenciations d'espèces et même de variétés microbiennes, il n'en est plus de même avec le type homogène. Si en effet on ensemence par piqûre le milieu intermédiaire avec des pasteurelle, ou des salmonelle immobiles (b. pullorum, b. gallinarum), on ne constate pas de différences suffisamment nettes pour permettre de différencier ces bactéries. Les franges homogènes ont des caractères qui varient peu; la longueur des filets est fonction d'ailleurs de la position du tube, de la composition du milieu qui varie quelque peu avec les bouillons de viande, de la direction de la piqûre, etc. La seule différenciation précise que l'on puisse faire ici est entre les microbes mobiles, qui diffusent rapidement dans la masse du milieu, et les microbes immobiles qui constituent des franges nettes. On différenciera ainsi sans difficulté les pasteurelle des paratyphiques; il en est de même du b. pullorum et du b. gallinarum d'une part et des paratyphiques d'autre part. Il est possible toutefois que le milieu intermédiaire devienne utilisable dans ces conditions si on lui ajoute des substances partiellement empêchantes, limitant les cultures et permettant ainsi l'obtention de caractères spéciaux si faciles à discerner dans ce milieu. Nous nous proposons de faire des recherches dans cette voie. Applications diverses du milieu intermédiaire. — a) On peut faire appel utilement à ce milieu pour la différenciation de certaines bactéries ou de certaines variétés microbiennes dans les conditions que nous venons d'indiquer. b) On peut l'utiliser également pour rechercher les variétés S, R et intermédiaires d'un même microbe, les caractères distinctifs apparaissant ici avec une grande netteté. On peut aussi se proposer d'isoler ces variétés après ensemencements de dilutions convenables. c) Nous utilisons fréquemment le milieu intermédiaire pour le contrôle rapide et
il en est de même du b. pullorum et du b. gallinarum d'une part et des paratyphiques d'autre part. Il est possible toutefois que le milieu intermédiaire devienne utilisable dans ces conditions si on lui ajoute des substances partiellement empêchantes, limitant les cultures et permettant ainsi l'obtention de caractères spéciaux si faciles à discerner dans ce milieu. Nous nous proposons de faire des recherches dans cette voie. Applications diverses du milieu intermédiaire. — a) On peut faire appel utilement à ce milieu pour la différenciation de certaines bactéries ou de certaines variétés microbiennes dans les conditions que nous venons d'indiquer. b) On peut l'utiliser également pour rechercher les variétés S, R et intermédiaires d'un même microbe, les caractères distinctifs apparaissant ici avec une grande netteté. On peut aussi se proposer d'isoler ces variétés après ensemencements de dilutions convenables. c) Nous utilisons fréquemment le milieu intermédiaire pour le contrôle rapide et approximatif des stérilisations de cultures de microbes immobiles. Il a l'avantage, sur le bouillon, de donner des indications concernant la quantité approximative de germes restés vivants, sur la gélose couchée, de constituer un milieu plus favorable pour la culture des microbes dont la vitalité se trouve quelque peu amoindrie et qui se développent plus facilement à l'abri de l'air. Le contrôle quantitatif ainsi est approximatif car souvent les colonies s'allongent vers le fond du tube et la numération devient difficile; le contrôle qualitatif par contre en maintes circonstances apporte des indications utiles sur l'action qu'a eu l'agent physique ou chimique mis en œuvre sur le microbe utilisé. d) Nous avons pu cultiver en milieu intermédiaire certains microbes se développant mal en bouillon ou sur gélose. Nous avons pu conserver, par exemple, longuement ainsi un streptocoque dont les cultures devenaient très difficiles dans les milieux courants. e) Cette culture à l'abri de l'air permet également de conserver non seulement la vitalité mais aussi la virulence et les pouvoirs antigènes de certaines bactéries fragiles, les pasteurelle par exemple. f) Il est possible de suivre facilement la lyse spontanée de certains microbes et de conserver plus longuement certaines endotoxines sensibles à l'action de
qui se développent plus facilement à l'abri de l'air. Le contrôle quantitatif ainsi est approximatif car souvent les colonies s'allongent vers le fond du tube et la numération devient difficile; le contrôle qualitatif par contre en maintes circonstances apporte des indications utiles sur l'action qu'a eu l'agent physique ou chimique mis en œuvre sur le microbe utilisé. d) Nous avons pu cultiver en milieu intermédiaire certains microbes se développant mal en bouillon ou sur gélose. Nous avons pu conserver, par exemple, longuement ainsi un streptocoque dont les cultures devenaient très difficiles dans les milieux courants. e) Cette culture à l'abri de l'air permet également de conserver non seulement la vitalité mais aussi la virulence et les pouvoirs antigènes de certaines bactéries fragiles, les pasteurelle par exemple. f) Il est possible de suivre facilement la lyse spontanée de certains microbes et de conserver plus longuement certaines endotoxines sensibles à l'action de l'air. g) La possibilité d'aspirer le milieu en pipettes et d'examiner entre lame et lamelle permet de suivre facilement les modifications de la morphologie des microbes utilisés. Le fait de pouvoir mettre ces cultures en pipettes scellées donne la possibilité de conserver plus longuement encore la vitalité et la virulence. Les avantages que l'on trouve à pouvoir injecter ces cultures peuvent être faciles à prévoir : microbes plus difficilement accessibles à l'action phagocytaire, cultures encore possibles in vivo permettant l'élaboration plus grande de toxine. h) Si les cultures sont stérilisées, on dispose ainsi de vaccins un peu plus lentement résorbables, comme cela ressort des recherches de Ramon. i) Si au milieu intermédiaire on ajoute maintenant différentes substances : sucre, sang, sérum, bile... dont l'incorporation est extrêmement facile même à froid, on lui confère d'autres avantages encore. C'est ainsi que nous utilisons couramment ce milieu pour la culture d'un microbe anaérobie : le bacille tétanique. Nous ajoutons pour cela 1 p. 100 de glucose; le milieu à base de bouillon de veau est très récemment préparé, il est chauffé pendant une demi-heure à 100° et brusquement ramené à 40° environ. Le matériel ensemencé est réparti dans la masse du milieu en
Les avantages que l'on trouve à pouvoir injecter ces cultures peuvent être faciles à prévoir : microbes plus difficilement accessibles à l'action phagocytaire, cultures encore possibles in vivo permettant l'élaboration plus grande de toxine. h) Si les cultures sont stérilisées, on dispose ainsi de vaccins un peu plus lentement résorbables, comme cela ressort des recherches de Ramon. i) Si au milieu intermédiaire on ajoute maintenant différentes substances : sucre, sang, sérum, bile... dont l'incorporation est extrêmement facile même à froid, on lui confère d'autres avantages encore. C'est ainsi que nous utilisons couramment ce milieu pour la culture d'un microbe anaérobie : le bacille tétanique. Nous ajoutons pour cela 1 p. 100 de glucose; le milieu à base de bouillon de veau est très récemment préparé, il est chauffé pendant une demi-heure à 100° et brusquement ramené à 40° environ. Le matériel ensemencé est réparti dans la masse du milieu en roulant le tube entre les mains. On plonge celui-ci ensuite dans l'eau froide (sinon il se produit une floculation de la gélose au fond du tube). On opère ainsi comme avec le bouillon glucosé pour les cultures de passage avant l'ensemencement définitif pour la production de la toxine suivant la méthode de H. L. Wilcox. Les cultures du bacille de Nicolaïer sont ainsi plus faciles qu'en bouillon glucosé, ce bacille trouvant encore là une certaine anaérobiose, ce qui d'ailleurs ne l'empêche nullement de cultiver fort bien ensuite après trois passages dans les grands flacons de bouillon glucosé au contact de l'air. On obtient de cette façon des toxines actives à 1/20.000, à 1/30.000 et même plus si l'on utilise les procédés que nous avons fait connaître avec E. Mutermilch et Mlle Salamon concernant la protection des toxines. L'anaérobiose est d'ailleurs suffisante en l'absence de glucose pour obtenir des cultures de bacilles tétaniques, même par piqûre; mais évidemment ces cultures sont moins belles. Dans le milieu intermédiaire glucosé on voit apparaître les premières colonies vers la douzième heure; elles se multiplient rapidement, sans fusionner complètement cependant. Mais le second repiquage fait vers le troisième jour donne rapidement des cultures homogènes très
méthode de H. L. Wilcox. Les cultures du bacille de Nicolaïer sont ainsi plus faciles qu'en bouillon glucosé, ce bacille trouvant encore là une certaine anaérobiose, ce qui d'ailleurs ne l'empêche nullement de cultiver fort bien ensuite après trois passages dans les grands flacons de bouillon glucosé au contact de l'air. On obtient de cette façon des toxines actives à 1/20.000, à 1/30.000 et même plus si l'on utilise les procédés que nous avons fait connaître avec E. Mutermilch et Mlle Salamon concernant la protection des toxines. L'anaérobiose est d'ailleurs suffisante en l'absence de glucose pour obtenir des cultures de bacilles tétaniques, même par piqûre; mais évidemment ces cultures sont moins belles. Dans le milieu intermédiaire glucosé on voit apparaître les premières colonies vers la douzième heure; elles se multiplient rapidement, sans fusionner complètement cependant. Mais le second repiquage fait vers le troisième jour donne rapidement des cultures homogènes très belles. Conclusion.— Le milieu intermédiaire est donc un milieu très simple, préparé sans technique spéciale, qui présente cependant des avantages très particuliers le rendant utile en maintes circonstances. Nous l'employons couramment depuis sept années. Les services qu'il nous rend nous ont incité à le faire connaître plus complètement. Le milieu intermédiaire mérite à notre avis d'être utilisé dans les laboratoires de bactériologie aussi couramment que le sont les milieux solides et les milieux liquides dont il procède. Les travaux qui sont à la base des méthodes de vaccination et de sérothérapie anticlaveleuses ont été effectués à l'Institut Pasteur (Borrel) et dans sa filiale algérienne (Bridré et Boquet, Donatien et Lestoquard). L'Institut Pasteur d'Algérie a dû, depuis sa création, assurer l'immunisation des moutons algériens exportés en France au nombre de plusieurs centaines de mille chaque année. L'étude du virus claveleux est donc constamment à l'ordre du jour à Alger. Quand on fait une étude d'ensemble de cette question, on est frappé par la discordance des résultats obtenus par divers expérimentateurs qui, cependant, paraissent opérer dans des conditions identiques. Nous pensons que la cause de ces divergences peut être élucidée. Lorsqu'on expérimente sur la clavelée, deux facteurs primordiaux entrent en jeu :
intermédiaire mérite à notre avis d'être utilisé dans les laboratoires de bactériologie aussi couramment que le sont les milieux solides et les milieux liquides dont il procède. Les travaux qui sont à la base des méthodes de vaccination et de sérothérapie anticlaveleuses ont été effectués à l'Institut Pasteur (Borrel) et dans sa filiale algérienne (Bridré et Boquet, Donatien et Lestoquard). L'Institut Pasteur d'Algérie a dû, depuis sa création, assurer l'immunisation des moutons algériens exportés en France au nombre de plusieurs centaines de mille chaque année. L'étude du virus claveleux est donc constamment à l'ordre du jour à Alger. Quand on fait une étude d'ensemble de cette question, on est frappé par la discordance des résultats obtenus par divers expérimentateurs qui, cependant, paraissent opérer dans des conditions identiques. Nous pensons que la cause de ces divergences peut être élucidée. Lorsqu'on expérimente sur la clavelée, deux facteurs primordiaux entrent en jeu : le sujet réceptif qui est le plus souvent le mouton et le virus claveleux. Vis-à-vis de la clavelée les moutons de divers pays, de diverses races, offrent des sensibilités très différentes : d'après Nocard, les moutons bretons sont réfractaires. On sait, d'autre part, que les moutons nord-africains offrent une résistance marquée. Enfin, les moutons de certaines races françaises, dans les régions où la maladie est enzootique, les moutons Caussenards de l'Hérault par exemple, sont extrêmement sensibles. Certaines divergences proviennent de ce que tels expérimentateurs ont utilisé des moutons naturellement résistants et tels autres des moutons très réceptifs. Avec le même virus, les premiers n'obtiennent que des réactions locales sans gravité, les seconds, au contraire, des maladies graves avec généralisation. C'est pourquoi, dans les pays où la clavelée est enzootique, en raison de l'existence d'un certain nombre de sujets résistants, il est nécessaire de répéter les expériences avant de conclure. Il arrive souvent d'opérer plusieurs fois de suite sur des lots de moutons réfractaires et les résultats se trouvent ainsi complètement faussés. Le coût de ces essais en réduit parfois le nombre et c'est pourtant le nombre qui permet d'accorder une valeur définitive aux conclusions énoncées. Mais, à notre avis, les
marquée. Enfin, les moutons de certaines races françaises, dans les régions où la maladie est enzootique, les moutons Caussenards de l'Hérault par exemple, sont extrêmement sensibles. Certaines divergences proviennent de ce que tels expérimentateurs ont utilisé des moutons naturellement résistants et tels autres des moutons très réceptifs. Avec le même virus, les premiers n'obtiennent que des réactions locales sans gravité, les seconds, au contraire, des maladies graves avec généralisation. C'est pourquoi, dans les pays où la clavelée est enzootique, en raison de l'existence d'un certain nombre de sujets résistants, il est nécessaire de répéter les expériences avant de conclure. Il arrive souvent d'opérer plusieurs fois de suite sur des lots de moutons réfractaires et les résultats se trouvent ainsi complètement faussés. Le coût de ces essais en réduit parfois le nombre et c'est pourtant le nombre qui permet d'accorder une valeur définitive aux conclusions énoncées. Mais, à notre avis, les divergences les plus fréquentes sont dues à la nature du virus claveleux lui-même. Tous les auteurs sont d'accord sur l'unicité spécifique des viruses claveleux. Mais il s'en faut que leur virulence soit toujours d'égalie intensité. Nous verrons comment varie cette virulence au cours de l'évolution d'un virus claveleux entretenu au laboratoire. Cette question est capitale pour l'histoire naturelle du virus et c'est elle qui constituera le principal chapitre de ce rapport. Si deux auteurs expérimentent sans avoir, au préalable, titré exactement la virulence de leurs viruses, il n'est pas étonnant qu'ils obtiennent des résultats différents et même opposés. Définition. — Le virus claveleux est un ultravirus ou inframicrobe qui provoque chez le mouton une maladie de type variolique, la clavelée. La maladie se caractérise par une éruption pustuleuse sur la peau et sur diverses muqueuses et par des nodules qui siègent dans divers organes tels que les poumons et les reins. C'est dans le derme cutané que le virus se développe. L'épiderme n'est atteint que secondairement. Cette propriété, jointe à la possibilité de coloniser dans le poumon, montre l'affinité du virus claveleux pour le mésoderme. Siège du virus. — Dans la maladie naturelle le virus est trouvé en abondance au
laboratoire. Cette question est capitale pour l'histoire naturelle du virus et c'est elle qui constituera le principal chapitre de ce rapport. Si deux auteurs expérimentent sans avoir, au préalable, titré exactement la virulence de leurs viruses, il n'est pas étonnant qu'ils obtiennent des résultats différents et même opposés. Définition. — Le virus claveleux est un ultravirus ou inframicrobe qui provoque chez le mouton une maladie de type variolique, la clavelée. La maladie se caractérise par une éruption pustuleuse sur la peau et sur diverses muqueuses et par des nodules qui siègent dans divers organes tels que les poumons et les reins. C'est dans le derme cutané que le virus se développe. L'épiderme n'est atteint que secondairement. Cette propriété, jointe à la possibilité de coloniser dans le poumon, montre l'affinité du virus claveleux pour le mésoderme. Siège du virus. — Dans la maladie naturelle le virus est trouvé en abondance au niveau des pustules éruptives ou des transsudats apparaissant sur la peau des malades. Le liquide contenu dans les pustules est appelé claveau. Les termes de claveau et de virus claveleux sont souvent employés l'un pour l'autre. Toutes les lésions spécifiques des organes profonds (poumons, reins, muqueuse digestive) renferment du virus. Dans la clavelée expérimentale le sang est virulent, ce qui explique la présence du virus dans les centres nerveux et dans les muscles où il est particulièrement abondant. Balozet a trouvé du virus dans les muscles et dans le nerf en l'absence de sang. Ce même auteur a pu cultiver le virus dans le testicule en créant une orchite spécifique expérimentale. Enfin Borrel, inoculant du claveau récent et stérile dans le péritoine de l'agneau nouveau-né, détermine en quelques jours une réaction spécifique très intense, particulièrement développée au niveau de l'épiploon. Morphologie. — Bosc avait vu dans de grandes cellules contenues dans le claveau de grosses inclusions qu'il croyait être des sporozoaires et dont il faisait l'agent causal de la maladie. Borrel a retrouvé ces mêmes inclusions, qui ne sont que des produits de dégénération cellulaires, dans les cellules endothéliales de l'épiploon de l'agneau nouveau-né soumis à une inoculation intrapéritonéale. Ces
Dans la clavelée expérimentale le sang est virulent, ce qui explique la présence du virus dans les centres nerveux et dans les muscles où il est particulièrement abondant. Balozet a trouvé du virus dans les muscles et dans le nerf en l'absence de sang. Ce même auteur a pu cultiver le virus dans le testicule en créant une orchite spécifique expérimentale. Enfin Borrel, inoculant du claveau récent et stérile dans le péritoine de l'agneau nouveau-né, détermine en quelques jours une réaction spécifique très intense, particulièrement développée au niveau de l'épiploon. Morphologie. — Bosc avait vu dans de grandes cellules contenues dans le claveau de grosses inclusions qu'il croyait être des sporozoaires et dont il faisait l'agent causal de la maladie. Borrel a retrouvé ces mêmes inclusions, qui ne sont que des produits de dégénération cellulaires, dans les cellules endothéliales de l'épiploon de l'agneau nouveau-né soumis à une inoculation intrapéritonéale. Ces mêmes inclusions se retrouvent dans les leucocytes mononucléaires de la lymphe claveleuse. Colorées par la méthode de Romanowsky elles sont fortement éosinophiles et contiennent des granulations rondes ou des bâtonnets colorées en violet foncé. La substance éosinophile peut se retrouver en dehors des cellules et peut se résoudre en une infinité de granulations qui rappellent les granulations que le même auteur avait décrites dans l'acné varioliforme en 1904-1906 et dans la vaccine en 1925. Dès 1903 et en 1909, Borrel, soumettant des dilutions claveleuses centrifugées à la méthode de Löffler (surcoloration par la fuchsine phéniquée après mordançage), voit un nombre immense de très fines granulations de 0 p. 25 isolées ou groupées en diplocoque ou en chaînette et les considère comme les agents pathogènes de la clavelée. Isolement du virus claveleux. C'est Borrel qui, suivant en cela la doctrine pastorienne, obtint, le premier, le virus claveleux à l'état de pureté par sa méthode de filtration du virus. Le premier principe à observer pour isoler un virus claveleux est d'opérer sur un malade arrivé à la période d'éruption. On évitera ainsi les souillures qui résultent de l'ouverture des pustules. Il faut ensuite prélever les parties enflammées du derme et de l'hypoderme
infinité de granulations qui rappellent les granulations que le même auteur avait décrites dans l'acné varioliforme en 1904-1906 et dans la vaccine en 1925. Dès 1903 et en 1909, Borrel, soumettant des dilutions claveleuses centrifugées à la méthode de Löffler (surcoloration par la fuchsine phéniquée après mordançage), voit un nombre immense de très fines granulations de 0 p. 25 isolées ou groupées en diplocoque ou en chaînette et les considère comme les agents pathogènes de la clavelée. Isolement du virus claveleux. C'est Borrel qui, suivant en cela la doctrine pastorienne, obtint, le premier, le virus claveleux à l'état de pureté par sa méthode de filtration du virus. Le premier principe à observer pour isoler un virus claveleux est d'opérer sur un malade arrivé à la période d'éruption. On évitera ainsi les souillures qui résultent de l'ouverture des pustules. Il faut ensuite prélever les parties enflammées du derme et de l'hypoderme par la face interne de la peau (procédé Brémond) dont un volet est soulevé aseptiquement. Si la récolte est abondante et contient une assez grande quantité de lymphe, on peut inoculer l'agneau destiné à produire le virus simultanément dans le derme et sous la peau. Si on ne dispose que d'une petite quantité de lymphe, on peut augmenter le matériel virulent en faisant quelques passages par la voie intradermique. Si, enfin, la pulpe recueillie est sèche, on la fait macérer dans de l'eau glycérinée pendant quelques jours et on opère avec le liquide de macération comme on le fait avec la lymphe claveleuse. Si, en cours d'isolement, le virus est contaminé par des bactéries pathogènes telles que le microbe de Preisz-Nocard, le pyobacille, des microcoques ou des staphylocoques pyogènes, on s'en débarrasse par filtration. Si c'est le germe de l'agalaxie qui est en cause, il suffit de chauffer le claveau contaminé à 52-53° pendant dix minutes. De 1926 à 1932 nous avons isolé 6 virus claveleux dont nous poursuivons l'étude expérimentale. Voici la technique détaillée de leur isolement. 1° Le virus D fut isolé au cours d'une enzootie légère sévissant dans une bergerie de Draria aux environs d'Alger en automne