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été soumis trop hâtivement à l'inoculation d'épreuve. M. Rivolta n'était donc pas autorisé à dire dans ses conclusions que « la méthode de vaccination qu'il a contrôlée était inutile. » Quant aux dangers qu'il lui attribue, comme rien ne prouve que les moutons qui ont reçu dans leurs veines du virus salé étaient vaccinés ; et comme, d'autre part, on peut induire de l'exposé des faits que les quatre derniers moutons vaccinés ont été soumis trop hâtivement à l'inoculation virulente, il n'est nullement équitable d'imputer à la méthode ce qui peut être attribué, très légitimement, à l'inobservation des règles prescrites pour son application. Mais sur les douze moutons qui ont servi aux expériences de M. Rivolta, deux ont péri des suites directes de l'opération de l'injection. Ici encore est-ce la méthode qui doit être mise en cause? Non, évidemment, car ces accidents n'en infirment pas le principe. Mais il faut pratiquer l'opération avec une grande attention pour éviter l'inoculation directe par le tissu cellulaire de la plaie. Sur ce point, les expérimentateurs lyonnais ont insisté avec un soin tout particulier et ont prescrit des règles dont l'observation minutieuse est absolument nécessaire. M. Rivolta paraît s'en être écarté, puisqu'il a eu deux morts sur douze ; mais, encore une fois, cela n'infirme pas la méthode et ne témoigne pas qu'elle soit dangereuse en soi, puisque toutes les fois que le virus est introduit dans le sang, sans inoculation locale, toujours l'injection reste inoffensive et ne se traduit que par des symptômes légers et très éphémères; ce qui n'empêche pas que l'immunité ne soit acquise quand on a bien fait les choses. Ce ne paraît pas être le cas de M. Rivolta. Nous le regrettons pour lui. Nous regrettons que, membre de l'enseignement vétérinaire dans l'École royale supérieure de Pise, il n'ait pas compris ce que cette situation devait lui imposer de réserve et de scrupules à l'égard de ses collègues français dont la découverte incontestable honore notre science et notre profession. MM. Arloing, Cornevin et Thomas ont reproduit dans le Journal de médecine vétérinaire et de zootechnie de l'École de Lyon,
deux morts sur douze ; mais, encore une fois, cela n'infirme pas la méthode et ne témoigne pas qu'elle soit dangereuse en soi, puisque toutes les fois que le virus est introduit dans le sang, sans inoculation locale, toujours l'injection reste inoffensive et ne se traduit que par des symptômes légers et très éphémères; ce qui n'empêche pas que l'immunité ne soit acquise quand on a bien fait les choses. Ce ne paraît pas être le cas de M. Rivolta. Nous le regrettons pour lui. Nous regrettons que, membre de l'enseignement vétérinaire dans l'École royale supérieure de Pise, il n'ait pas compris ce que cette situation devait lui imposer de réserve et de scrupules à l'égard de ses collègues français dont la découverte incontestable honore notre science et notre profession. MM. Arloing, Cornevin et Thomas ont reproduit dans le Journal de médecine vétérinaire et de zootechnie de l'École de Lyon, l'exposé des expériences de M. Rivolta que nous venons d'analyser et l'ont fait suivre de leurs observations critiques. L'intérêt de cette question nous engage à publier leur réponse qu'on trouvera dans le numéro prochain, l'espace nous manquant aujourd'hui. Le Bacille ou microbe de la tuberculose. M. le professeur Koch, de Berlin, vient de faire connaître, dans un article que publie le Berliner Klinische Wochenschrift du 10 avril dernier, les résultats de ses recherches sur l'étiologie de la tuberculose. Cette fois, nous n'avons plus affaire qu'à une œuvre scientifique qui, autant que nous pouvons en juger par les résumés analytiques que publient le Journal d'hygiène et le Journal des connaissances médicales, paraît exempte de tout esprit de dénigrement à l'endroit des auteurs qui ont précédé M. Koch dans la voie où il est aujourd'hui. M. Koch accepte les idées de M. le professeur Villemin, du Val-de-Grâce, sur l'infectiosité de la phthisie ou, autrement dit, sur sa nature contagieuse, et ses recherches actuelles ont pour résultat la complète confirmation de la découverte du savant français, à laquelle elles tendent à donner un plus grand caractère de précision. La question de la contagion de la tuberculose a été, en France et à l'étranger,
Berlin, vient de faire connaître, dans un article que publie le Berliner Klinische Wochenschrift du 10 avril dernier, les résultats de ses recherches sur l'étiologie de la tuberculose. Cette fois, nous n'avons plus affaire qu'à une œuvre scientifique qui, autant que nous pouvons en juger par les résumés analytiques que publient le Journal d'hygiène et le Journal des connaissances médicales, paraît exempte de tout esprit de dénigrement à l'endroit des auteurs qui ont précédé M. Koch dans la voie où il est aujourd'hui. M. Koch accepte les idées de M. le professeur Villemin, du Val-de-Grâce, sur l'infectiosité de la phthisie ou, autrement dit, sur sa nature contagieuse, et ses recherches actuelles ont pour résultat la complète confirmation de la découverte du savant français, à laquelle elles tendent à donner un plus grand caractère de précision. La question de la contagion de la tuberculose a été, en France et à l'étranger, depuis les premières publications de M. Villemin, l'objet de nombreuses et intéressantes études qui sont tellement démonstratives de la contagiosité de cette maladie que le nombre des esprits récalcitrants à cette idée diminue de jour en jour. Parmi les nôtres, M. Toussaint est un de ceux qui ont le plus contribué à cette démonstration. La série de ses recherches, dont quelques-uns des résultats ont été communiqués à l'Académie des sciences, l'a conduit à reconnaître la transmissibilité de la tuberculose soit par l'inoculation de produits de différents ordres, — matières tuberculeuses, liquides de sécrétion, jus de viandes, etc., etc.; soit par l'ingestion digestive, soit par la cohabitation. M. Toussaint a annoncé avoir réussi également à la transmettre par l'inoculation de liquides de culture; ce qui implique qu'il serait parvenu à isoler l'élément contagieux de la tuberculose, comme on a fait pour les maladies parasitaires. D'après les indications qu'il en a données, cet élément ou ce germe de la contagion tuberculeuse serait de l'ordre des micrococcus, c'est-à-dire immobile, tandis que d'après Klebs, qui s'est appliqué aussi à cette recherche, le proto-organisme, d'où la tuberculose procède, se montrerait sous la forme de monadines, extrêmement ténues, animées de mouvements très-vifs. Voici maintenant M. Koch
contribué à cette démonstration. La série de ses recherches, dont quelques-uns des résultats ont été communiqués à l'Académie des sciences, l'a conduit à reconnaître la transmissibilité de la tuberculose soit par l'inoculation de produits de différents ordres, — matières tuberculeuses, liquides de sécrétion, jus de viandes, etc., etc.; soit par l'ingestion digestive, soit par la cohabitation. M. Toussaint a annoncé avoir réussi également à la transmettre par l'inoculation de liquides de culture; ce qui implique qu'il serait parvenu à isoler l'élément contagieux de la tuberculose, comme on a fait pour les maladies parasitaires. D'après les indications qu'il en a données, cet élément ou ce germe de la contagion tuberculeuse serait de l'ordre des micrococcus, c'est-à-dire immobile, tandis que d'après Klebs, qui s'est appliqué aussi à cette recherche, le proto-organisme, d'où la tuberculose procède, se montrerait sous la forme de monadines, extrêmement ténues, animées de mouvements très-vifs. Voici maintenant M. Koch qui émet une troisième opinion sur la nature de l'élément contagieux de la phthisie ; suivant lui, c'est une bactérie : « Les bactéries de la tuberculose ont une forme un peu spéciale, dit-il. Elles sont minces. Leur longueur n'atteint pas plus du quart du diamètre d'un globule du sang. Elles ressemblent beaucoup à celles de la lèpre, sauf qu'elles sont plus minces. Leurs deux bouts sont effilés. Le bacille de la lèpre ne se colore pas par la vésuvine. » Voici quelle méthode a suivie M. Koch pour cultiver ce microbe. C'est la méthode par la gélatine, à laquelle j'ai fait allusion dans ma Chronique de mars : « On prend du sérum du sang de bœuf et de mouton, aussi pur que possible, dont on remplit des flacons qu'on fait bouillir pendant une heure, à la température de 58 degrés, six jours de suite. On stérilise ainsi le plus souvent le sérum employé. Puis on chauffe, pendant plusieurs heures de suite, à 65 degrés, jusqu'à ce que le sérum se coagule en masse. Le sérum, ainsi traité devient jaune ambré; il est transparent et un peu opalescent, de la consistance de la gelée. En le maintenant plusieurs jours
Elles ressemblent beaucoup à celles de la lèpre, sauf qu'elles sont plus minces. Leurs deux bouts sont effilés. Le bacille de la lèpre ne se colore pas par la vésuvine. » Voici quelle méthode a suivie M. Koch pour cultiver ce microbe. C'est la méthode par la gélatine, à laquelle j'ai fait allusion dans ma Chronique de mars : « On prend du sérum du sang de bœuf et de mouton, aussi pur que possible, dont on remplit des flacons qu'on fait bouillir pendant une heure, à la température de 58 degrés, six jours de suite. On stérilise ainsi le plus souvent le sérum employé. Puis on chauffe, pendant plusieurs heures de suite, à 65 degrés, jusqu'à ce que le sérum se coagule en masse. Le sérum, ainsi traité devient jaune ambré; il est transparent et un peu opalescent, de la consistance de la gelée. En le maintenant plusieurs jours dans l'étuve, il ne donne naissance à aucun développement de bactéries. Si on chauffait, par mégarde, jusqu'à 75 degrés, ou pendant trop longtemps, le liquide deviendrait trouble et opaque. Pour cultiver les bactéries, on laisse cette gélatine de sérum se coaguler dans des vases plats, contenant une surface suffisante, dans des verres de montre, par exemple. On prend alors avec précaution de petites masses tuberculeuses du poumon d'animaux, ou des particules de ganglions lymphatiques, et on les place sur la gélatine. Puis, le vase ainsi ensemencé est mis dans une étuve chauffée entre 37 et 38° C. Les bactéries, placées dans de semblables conditions, ne doivent pas se multiplier avant une semaine. Si le contraire arrivait, cela prouverait que la culture n'est pas bonne et qu'il s'y est mêlé des bactéries de putréfaction. C'est vers le dixième jour que la multiplication des bactéries de tuberculose manifeste à l'œil nu par de petits points de couleur grise ou jaunâtre. Avec un grossissement de 30 à 40 diamètres, on reconnaît déjà la présence des colonies de bactéries, vers la fin de la première semaine. Au bout de quelques semaines, l'accroissement de ces colonies arrive à son maximum et s'arrête. Pour continuer la
des verres de montre, par exemple. On prend alors avec précaution de petites masses tuberculeuses du poumon d'animaux, ou des particules de ganglions lymphatiques, et on les place sur la gélatine. Puis, le vase ainsi ensemencé est mis dans une étuve chauffée entre 37 et 38° C. Les bactéries, placées dans de semblables conditions, ne doivent pas se multiplier avant une semaine. Si le contraire arrivait, cela prouverait que la culture n'est pas bonne et qu'il s'y est mêlé des bactéries de putréfaction. C'est vers le dixième jour que la multiplication des bactéries de tuberculose manifeste à l'œil nu par de petits points de couleur grise ou jaunâtre. Avec un grossissement de 30 à 40 diamètres, on reconnaît déjà la présence des colonies de bactéries, vers la fin de la première semaine. Au bout de quelques semaines, l'accroissement de ces colonies arrive à son maximum et s'arrête. Pour continuer la culture et pour l'activer, on transplante des bactéries dans un autre vase renfermant de la gélatine. Les bacilles tuberculeux peuvent être cultivées dans d'autres liquides, dans du bouillon ou de la peptone, mais la culture ne réussit pas aussi bien. » Telle est la méthode de culture sur la gélatine que M. Koch a inventée et qu'il préconise. Voici, maintenant, un procédé particulier de préparation des pièces tuberculeuses, à l'aide duquel il parvient à mettre les bactéries en pleine évidence dans les lésions. « On fait un liquide tinctorial composé de 200 centimètres cubes d'eau additionné de 1 centimètre cube d'une solution alcoolique concentrée de violet de méthyle, et 2 centimètres cubes d'une solution de 10 pour 100 de potasse caustique. Cette mixture doit rester limpide plusieurs jours pour être bonne. On y place pendant vingt ou vingt-quatre heures les coupes et les objets à examiner. On peut abréger le séjour des coupes dans la solution, en la faisant chauffer pendant une heure à 40° C. La coupe étant placée sur la lame du porte-objet, on la recouvre de la lamelle sur laquelle on a versé, au préalable, une goutte de solution aqueuse concentrée de vésuvine. Cette dernière doit être
que M. Koch a inventée et qu'il préconise. Voici, maintenant, un procédé particulier de préparation des pièces tuberculeuses, à l'aide duquel il parvient à mettre les bactéries en pleine évidence dans les lésions. « On fait un liquide tinctorial composé de 200 centimètres cubes d'eau additionné de 1 centimètre cube d'une solution alcoolique concentrée de violet de méthyle, et 2 centimètres cubes d'une solution de 10 pour 100 de potasse caustique. Cette mixture doit rester limpide plusieurs jours pour être bonne. On y place pendant vingt ou vingt-quatre heures les coupes et les objets à examiner. On peut abréger le séjour des coupes dans la solution, en la faisant chauffer pendant une heure à 40° C. La coupe étant placée sur la lame du porte-objet, on la recouvre de la lamelle sur laquelle on a versé, au préalable, une goutte de solution aqueuse concentrée de vésuvine. Cette dernière doit être filtrée chaque fois qu'on s'en sert. La préparation ainsi recouverte paraît complètement brune. À l'examen microscopique tout est brun, à l'exception des bactéries tuberculeuses qui, seules, restent colorées en beau bleu. Les bactéries de toutes les maladies examinées par ce procédé ont toutes pris, à l'exception de celles de la lèpre, la coloration brune de la vésuvine. La coloration bleue des bactéries tuberculeuses est tellement tranchée qu'on les distingue, avec beaucoup de facilité, parmi les autres micro-organismes colorés en brun. Les coupes des tubercules doivent être éclaircies par l'essence de girofle. Les bacilles tuberculeux se colorient par les autres couleurs d'aniline et non par la vésuvine. Partout où le processus tuberculeux est à son début et en voie de développement actif, on trouve ces bactéries en grande quantité. Elles forment alors des groupes ou petits amas; quand le processus est presque terminé, elles disparaissent. S'il y a des cellules géantes dans le tissu tuberculeux, elles contiennent le plus souvent ces bactéries spéciales; quelquefois, cependant, les cellules géantes n'en renferment pas. Tout porte à penser que ce sont les bactéries qui sont la cause de la formation des cellules géantes. Les bactéries peuvent être vues dans ces cellules, même sans être
lèpre, la coloration brune de la vésuvine. La coloration bleue des bactéries tuberculeuses est tellement tranchée qu'on les distingue, avec beaucoup de facilité, parmi les autres micro-organismes colorés en brun. Les coupes des tubercules doivent être éclaircies par l'essence de girofle. Les bacilles tuberculeux se colorient par les autres couleurs d'aniline et non par la vésuvine. Partout où le processus tuberculeux est à son début et en voie de développement actif, on trouve ces bactéries en grande quantité. Elles forment alors des groupes ou petits amas; quand le processus est presque terminé, elles disparaissent. S'il y a des cellules géantes dans le tissu tuberculeux, elles contiennent le plus souvent ces bactéries spéciales; quelquefois, cependant, les cellules géantes n'en renferment pas. Tout porte à penser que ce sont les bactéries qui sont la cause de la formation des cellules géantes. Les bactéries peuvent être vues dans ces cellules, même sans être colorées. M. Koch a vu les bactéries, dans onze autopsies de tuberculose miliaire, dans les nodules tuberculeux du poumon, de la rate, des reins et du foie, de même que dans les produits de la méningite tuberculeuse et de la tuberculose intestinale. Douze cas de bronchite et de pneumonie casseuse lui ont donné les mêmes résultats. La quantité des bactéries est surtout prodigieuse dans les cavernes. Les masses casseuses qui forment le contenu des cavernes sont presque totalement formées de bactéries. Dans les grandes cavernes les bactéries spéciales sont mêlées à une grande quantité de micro-organismes variés. M. Koch a constaté l'existence des mêmes éléments, deux fois sur trois, dans les cellules géantes des ganglions scrofuleux et dans les cellules géantes des fongosités articulaires de quatre cas de tumeurs blanches. Chez les animaux, mêmes résultats dans dix cas de phthise avec des noyaux calcaires du poumon, avec des tubercules du péritoine et, une fois, du péricarde. Une glande cervicale caséeuse d'un porc contenait aussi des bacilles. Chez un coq mort avec des tubercules de la moelle osseuse, des intestins, du l'oie et du poumon, même constatation. Trois singes tuberculeux ont présenté, dans tous les organes, des tubercules contenant des bacilli.
lui ont donné les mêmes résultats. La quantité des bactéries est surtout prodigieuse dans les cavernes. Les masses casseuses qui forment le contenu des cavernes sont presque totalement formées de bactéries. Dans les grandes cavernes les bactéries spéciales sont mêlées à une grande quantité de micro-organismes variés. M. Koch a constaté l'existence des mêmes éléments, deux fois sur trois, dans les cellules géantes des ganglions scrofuleux et dans les cellules géantes des fongosités articulaires de quatre cas de tumeurs blanches. Chez les animaux, mêmes résultats dans dix cas de phthise avec des noyaux calcaires du poumon, avec des tubercules du péritoine et, une fois, du péricarde. Une glande cervicale caséeuse d'un porc contenait aussi des bacilles. Chez un coq mort avec des tubercules de la moelle osseuse, des intestins, du l'oie et du poumon, même constatation. Trois singes tuberculeux ont présenté, dans tous les organes, des tubercules contenant des bacilli. Sur neuf cobayes et sept lapins devenus spontanément tuberculeux, mêmes micro-organismes dans les nodules tuberculeux. Spontanément veut dire dans la phrase qui précède : sans avoir été inoculés, car M. Koch déclare que la tuberculose spontanée est d'une extrême rareté chez les cobayes ; mais il dit l'avoir vu se développer spontanément chez des cobayes placés, pendant trois ou quatre mois, en contact avec des cobayes infectés, au préalable, par inoculation. M. Toussaint a constaté de son côté et déjà signalé des faits de contagion par cohabitation. Chez les cobayes devenus tuberculeux par les rapports de contact, M. Koch a constaté que les ganglions lymphatiques des bronches étaient tuberculeux, volumineux et que les poumons présentaient, avec des tubercules, des foyers tuberculeux ramollis, en débris à leur centre. Les poumons ressemblaient à ceux de la tuberculose humaine contenant des cavernes. Les organes contenus dans la cavité abdominale étaient atteints à un moindre degré. La lésion des glandes bronchiques et le début de la maladie par les organes de la respiration attestent évidemment, dit M. Koch, que la tuberculose spontanée du cobaye est une maladie d'inhalation, consécutive à l'entrée des particules infectieuses par les voies aériennes. Ce mode d'infection est très lent.
développer spontanément chez des cobayes placés, pendant trois ou quatre mois, en contact avec des cobayes infectés, au préalable, par inoculation. M. Toussaint a constaté de son côté et déjà signalé des faits de contagion par cohabitation. Chez les cobayes devenus tuberculeux par les rapports de contact, M. Koch a constaté que les ganglions lymphatiques des bronches étaient tuberculeux, volumineux et que les poumons présentaient, avec des tubercules, des foyers tuberculeux ramollis, en débris à leur centre. Les poumons ressemblaient à ceux de la tuberculose humaine contenant des cavernes. Les organes contenus dans la cavité abdominale étaient atteints à un moindre degré. La lésion des glandes bronchiques et le début de la maladie par les organes de la respiration attestent évidemment, dit M. Koch, que la tuberculose spontanée du cobaye est une maladie d'inhalation, consécutive à l'entrée des particules infectieuses par les voies aériennes. Ce mode d'infection est très lent. La tuberculose causée par l'inoculation présente, au contraire, une marche plus rapide et toute différente. En inoculant, par exemple, la région inguinale, non loin des ganglions lymphatiques de l'aine, ceux-ci se tuméfient bientôt, ce qui prouve la réussite de l'inoculation ; la marche des lésions est plus rapide, parce que la qualité de la matière inoculée est bien supérieure à celle qui entre par hasard et à faible dose par les voies respiratoires. L'autopsie des animaux inoculés à l'aine montre la prédominance des lésions de la rate et du foie, relativement à celles du poumon. C'est ainsi que M. Koch a pu distinguer la tuberculose dite spontanée du cobaye, de celle qui est consécutive à l'inoculation. Ce mode d'investigation et d'interprétation des faits autopsiques est le même, on le voit, que celui qui a été suivi pour le charbon bactéridien et sur lequel M. Colin d'une part, M. Pasteur, de son côté, et M. Toussaint, du sien, ont appelé respectivement l'attention. Dans les inoculations, M. Koch a remarqué que la piqûre ne montrait aucune trace d'un travail pathologique pendant les huit premiers jours : — fait qui concorde avec la lenteur du développement de la bactérie sur le lit de
la qualité de la matière inoculée est bien supérieure à celle qui entre par hasard et à faible dose par les voies respiratoires. L'autopsie des animaux inoculés à l'aine montre la prédominance des lésions de la rate et du foie, relativement à celles du poumon. C'est ainsi que M. Koch a pu distinguer la tuberculose dite spontanée du cobaye, de celle qui est consécutive à l'inoculation. Ce mode d'investigation et d'interprétation des faits autopsiques est le même, on le voit, que celui qui a été suivi pour le charbon bactéridien et sur lequel M. Colin d'une part, M. Pasteur, de son côté, et M. Toussaint, du sien, ont appelé respectivement l'attention. Dans les inoculations, M. Koch a remarqué que la piqûre ne montrait aucune trace d'un travail pathologique pendant les huit premiers jours : — fait qui concorde avec la lenteur du développement de la bactérie sur le lit de gélatine où on l'a ensemencée. — Au bout de ce temps, un petit nodule arrondi quelquefois, mais plus souvent aplati et étalé, apparaît au niveau de la piqûre. Après quinze jours, les ganglions lymphatiques atteignent le volume d'un pois. Alors les animaux commencent à maigrir, ce qui indique l'envahissement des organes. Ils meurent au bout de quatre ou six semaines. Le foie et la rate sont plus altérés que les poumons, lorsque l'inoculation a été faite dans la région inguinale. Comme preuve du rôle des bactéries dans la tuberculose, M. Koch rapporte que des inoculations avec des ganglions strumeux et des fongosités de l'articulation du genou, dans lesquelles il n'y avait pas de bactéries, sont restées sans résultats. Que l'inoculation des tubercules desséchés d'un singe ou conservés dans l'alcool n'a pas donné de tubercules aux animaux sur lesquels elle a été pratiquée. Tandis que lorsque l'inoculation réussit, les tubercules inoculés contiennent toujours des bactéries semblables à celles que l'on obtient par une culture artificielle. M. Koch termine son Mémoire par une série d'expériences positives, dont le résumé suivant, que nous empruntons au Journal d'hygiène donnera une idée : La première série d'expériences a porté sur six cochons d'Inde; quatre ont