jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
mâles que femelles. Ce même milieu renfermant de l'acide naphtyl-acétique, de la kinétine et du lait de coco détermine au niveau de la gaine cotylédonnaire, notamment, la production de callus. Les tissus établis à partir de ces callus différencient des racines et des bourgeons. Le transfert en terre s'effectue avec succès seulement pour certaines des plantes ainsi obtenues. When endosperm is removed the germination of the Date palm progresses differently according to the medium used for culture. Murashige and Skoog's medium containing indoleacetic acid and 6-benzylaminopurine induces both male and female inflorescences after a few weeks. If this medium is supplemented with naphthaleneacetic acid, kinetin and coconut milk a callus is formed, especially on the cotyledonary sheath. Tissues sub-cultured from this callus can differentiate into roots and buds. Some plants obtained in this manner have been successfully transplanted to earth. La multiplication des diverses variétés de Palmier-dattier s'effectue par l'intermédiaire des rejets que produisent à leur base les plantes adultes. Toutefois la réussite de cette pratique dépend dans un premier temps, lors du "sevrage", de la taille atteinte par le rejet et du développement de son système racinaire adventif. Ce processus, long et aléatoire, est cependant le seul utilisé [(2), e)]. La mise au point de nouvelles méthodes de multiplication végétative de cette monocotylédone arborescente, outre l'intérêt des problèmes fondamentaux à résoudre, offrirait aux producteurs et aux chercheurs un moyen nouveau de propagation recherché pour toute espèce qui présente un intérêt économique. L'application des techniques de culture in vitro nous a déjà permis, dans ce cas, de mettre en évidence quelques-unes des aptitudes morphogénétiques de fragments de plantes issues de germination (4). Dans la présente Note, nous poursuivons l'analyse des potentialités des fragments d'organes en culture qui n'avaient donné lieu jusqu'ici qu'à la formation de callus et de racines. Il convient de souligner que les essais de multiplication végétative à l'aide de cultures de tissus, entrepris sur cette espèce n'ont guère été couronnés de succès et les tentatives menées par Reuveni et coll. (1), aussi bien sur des tissus de jeunes plantes que de plantes adultes n'ont conduit qu'à des
e)]. La mise au point de nouvelles méthodes de multiplication végétative de cette monocotylédone arborescente, outre l'intérêt des problèmes fondamentaux à résoudre, offrirait aux producteurs et aux chercheurs un moyen nouveau de propagation recherché pour toute espèce qui présente un intérêt économique. L'application des techniques de culture in vitro nous a déjà permis, dans ce cas, de mettre en évidence quelques-unes des aptitudes morphogénétiques de fragments de plantes issues de germination (4). Dans la présente Note, nous poursuivons l'analyse des potentialités des fragments d'organes en culture qui n'avaient donné lieu jusqu'ici qu'à la formation de callus et de racines. Il convient de souligner que les essais de multiplication végétative à l'aide de cultures de tissus, entrepris sur cette espèce n'ont guère été couronnés de succès et les tentatives menées par Reuveni et coll. (1), aussi bien sur des tissus de jeunes plantes que de plantes adultes n'ont conduit qu'à des résultats fort limités. En effet, les tissus obtenus par ces chercheurs, également à partir de jeunes plantes, excrètent dans le milieu des substances "brun-jaunâtre" non identifiées qui inhibent le développement ultérieur des callus. Aussi, à la suite des résultats préliminaires que nous avons obtenus, avons-nous poursuivi nos essais toujours sur les tissus de jeunes plantes avant d'aborder ultérieurement les cultures de fragments d'organes prélevés directement sur les individus adultes constituant les variétés-mères. MÉTÉRIEL ET MÉTHODES. — Des graines de Palmier-dattier (Phoenix dactylifera) var. Deglet Nour, provenant de l'oasis de Kebili, dans le sud Tunisien, sont mises à germer en condition aseptique. Lorsque le développement du pétiole cotylédonnaire atteint environ 3 cm, on élimine l'albumen corné et on transfère l'embryon avec son cotylédon réduit à la gaine et au pétiole sur un milieu nutritif gélosé. Différents milieux ont été utilisés : le milieu de Knop dilué de moitié (6), la solution minérale de Murashige et Skoog (1) et enfin cette même solution additionnée de 15 % de lait de coco et de divers régulateurs de croissance dont la nature et les quantités sont précisées lors de l'exposé des résultats. Dans tous les cas la source de carbone est fournie sous forme
les tissus de jeunes plantes avant d'aborder ultérieurement les cultures de fragments d'organes prélevés directement sur les individus adultes constituant les variétés-mères. MÉTÉRIEL ET MÉTHODES. — Des graines de Palmier-dattier (Phoenix dactylifera) var. Deglet Nour, provenant de l'oasis de Kebili, dans le sud Tunisien, sont mises à germer en condition aseptique. Lorsque le développement du pétiole cotylédonnaire atteint environ 3 cm, on élimine l'albumen corné et on transfère l'embryon avec son cotylédon réduit à la gaine et au pétiole sur un milieu nutritif gélosé. Différents milieux ont été utilisés : le milieu de Knop dilué de moitié (6), la solution minérale de Murashige et Skoog (1) et enfin cette même solution additionnée de 15 % de lait de coco et de divers régulateurs de croissance dont la nature et les quantités sont précisées lors de l'exposé des résultats. Dans tous les cas la source de carbone est fournie sous forme de saccharose (5 °/o) et les milieux sont solidifiés par de l'agar à 0,7 %. Le pH est ajusté à 5,7 avant l'autoclavage. Les cultures sont maintenues dans une enceinte à 28°C et reçoivent un éclairement journalier de 12 h à lOOOOlx au niveau du tube. RÉSULTATS. — La germination normale du Palmier-dattier débute par un allongement important du pétiole cotylédonnaire. Les premières feuilles apparaissent ensuite et émergent par une fente de cet organe. Le système radical comprend une racine principale avec ultérieurement quelques racines latérales insérées à la base de la gaine du cotylédon. Des radicelles prennent naissance également le long de la racine principale (fig. 1). Par rapport à ce processus, le développement des jeunes plantes produites en l'absence de l'albumen corné, s'effectue selon différentes modalités qui dépendent étroitement de la composition du milieu nutritif. Sur un milieu simple, solution minérale de Knop diluée de moitié, additionnée de saccharose, la gemmule perce le pétiole cotylédonnaire alors que la racine ne dépasse guère 2 cm, par la suite le reste du cotylédon, pétiole plus gaine, brunit puis se nécrose (fig. 2). EXPLICATION DE LA PLANCHE Fig. 1. — Portion de jeune Palmier-dattier encore en relation avec l'albumen corné par
normale du Palmier-dattier débute par un allongement important du pétiole cotylédonnaire. Les premières feuilles apparaissent ensuite et émergent par une fente de cet organe. Le système radical comprend une racine principale avec ultérieurement quelques racines latérales insérées à la base de la gaine du cotylédon. Des radicelles prennent naissance également le long de la racine principale (fig. 1). Par rapport à ce processus, le développement des jeunes plantes produites en l'absence de l'albumen corné, s'effectue selon différentes modalités qui dépendent étroitement de la composition du milieu nutritif. Sur un milieu simple, solution minérale de Knop diluée de moitié, additionnée de saccharose, la gemmule perce le pétiole cotylédonnaire alors que la racine ne dépasse guère 2 cm, par la suite le reste du cotylédon, pétiole plus gaine, brunit puis se nécrose (fig. 2). EXPLICATION DE LA PLANCHE Fig. 1. — Portion de jeune Palmier-dattier encore en relation avec l'albumen corné par l'intermédiaire du cotylédon (G x 0,5). Fig. 2. — Jeune plante développée en l'absence d'albumen sur la solution minérale de Knop diluée au demi (Gx 1). Fig. 3. — Jeune plante développée en l'absence d'albumen sur la solution minérale de Murashige et Skoog (G x 1). Fig. 4. — Jeune plante développée dans les mêmes conditions que la figure 3 mais en présence de ANA (10 -6) de kinétine (10 -7) (Gx 1). Fig. 5. — Jeune plante mâle en fleur, développée sur le milieu de Murashige et Skoog additionné de AIA (10 -6) et BAP (10 -7) (G xl). Fig. 6. — Colonies tissulaires dérivant d'un callus produit par la gaine cotylédonnaire; germination obtenue en l'absence d'albumen sur milieu Murashige et Skoog + ANA (10 -6) kinétine (10 -7) et lait de coco (15 %) (Gxl). Fig. 7. — Colonie tissulaire de même origine que la précédente ne produisant que des racines (G xl). Fig. 8. Colonies tissulaires de la même origine que la précédente produisant bourgeons et racines (G x 1). Fig. 9. — Deux jeunes plantes de Palmier-dattier issues des colonies précédentes transférées en terre avec succès (G x 0,3). a c, albumen corné; f. feuille; g
plante développée dans les mêmes conditions que la figure 3 mais en présence de ANA (10 -6) de kinétine (10 -7) (Gx 1). Fig. 5. — Jeune plante mâle en fleur, développée sur le milieu de Murashige et Skoog additionné de AIA (10 -6) et BAP (10 -7) (G xl). Fig. 6. — Colonies tissulaires dérivant d'un callus produit par la gaine cotylédonnaire; germination obtenue en l'absence d'albumen sur milieu Murashige et Skoog + ANA (10 -6) kinétine (10 -7) et lait de coco (15 %) (Gxl). Fig. 7. — Colonie tissulaire de même origine que la précédente ne produisant que des racines (G xl). Fig. 8. Colonies tissulaires de la même origine que la précédente produisant bourgeons et racines (G x 1). Fig. 9. — Deux jeunes plantes de Palmier-dattier issues des colonies précédentes transférées en terre avec succès (G x 0,3). a c, albumen corné; f. feuille; g c, gaine cotylédonnaire; inf, inflorescence; r, racine principale. PLANCHE 1 SAIDA AMMAR Lorsque la solution minérale est plus complexe, (Murashige et Skoog), pétiole et gaine se maintiennent et ont tendance parfois à verdir. Des bourgeouls discrètes apparaissent également en surface (fig. 3). L'addition de régulateur de croissance modifie notablement l'évolution de la jeune plante. En présence d'acide naphtylacétique (ANA) : 10-6 et de kinétine : 10-1, la gaine du cotylédon s'épaissit considérablement et produit dans de nombreux cas des calles accompagnés parfois d'un système racinaire adventif très important (fig. 4). Avec l'utilisation d'un autre couple de régulateurs de croissance, acide indolylacétique : 10-1, 6-benzylaminopurine 10-7, le résultat peut être tout à fait surprenant car le bourgeon terminal, après avoir émis une ou deux feuilles, a donné naissance dans quelques cas à une inflorescence (fig. 5). Dans ces conditions, il convient de souligner que la floraison, mâle ou femelle, a mis un terme à l'évolution de la jeune plante. Nous ne sommes cependant pas en mesure, à l'heure actuelle, d'affirmer qu'il s'agit d'une floraison terminale, intéressant donc le méristème caulinaire primaire. Enfin, lorsque la solution de Murashige et Skoog est additionnée de lait de coco (15 %) en plus de l'ANA
de la jeune plante. En présence d'acide naphtylacétique (ANA) : 10-6 et de kinétine : 10-1, la gaine du cotylédon s'épaissit considérablement et produit dans de nombreux cas des calles accompagnés parfois d'un système racinaire adventif très important (fig. 4). Avec l'utilisation d'un autre couple de régulateurs de croissance, acide indolylacétique : 10-1, 6-benzylaminopurine 10-7, le résultat peut être tout à fait surprenant car le bourgeon terminal, après avoir émis une ou deux feuilles, a donné naissance dans quelques cas à une inflorescence (fig. 5). Dans ces conditions, il convient de souligner que la floraison, mâle ou femelle, a mis un terme à l'évolution de la jeune plante. Nous ne sommes cependant pas en mesure, à l'heure actuelle, d'affirmer qu'il s'agit d'une floraison terminale, intéressant donc le méristème caulinaire primaire. Enfin, lorsque la solution de Murashige et Skoog est additionnée de lait de coco (15 %) en plus de l'ANA (10-6) et de la kinétine (10-7), les réactions de la gaine cotylédonnaire se trouvent accentuées. En effet, accompagnés ou non d'une rhizogenèse, des calles se forment, constitués par une importante masse de tissu peu compact. Dans la plupart des cas, les calles une fois repiquées brunissent et ne se développent guère. Cependant pour l'un d'entre eux, le brunissement a été peu marqué et la croissance importante (fig. 6). Il a pu être fragmenté et repiqué sur le même milieu. Une certaine diversité de comportement de ces cultures a pu être distinguée : certaines ne produisent que des racines mais d'une manière exubérante (fig. 7), d'autres, en même temps qu'une rhizogenèse discrète, différencient des bourgeons dont les premières feuilles sont malformées, les suivantes étant tout à fait typiques (fig. 8). Il est possible, lorsque les bourgeons néoformés possèdent dans leur prolongement quelques racines, de transférer l'ensemble en terre (fig. 9) et d'obtenir sa reprise. Lorsque l'enracinement n'est pas encore amorcé ou bien lorsque racines et bourgeons sont associés par un fragment de calle les essais de transfert en terre échouent en général. CONCLUSION. — Les résultats que nous avons obtenus montrent que la multiplication végétative de jeunes Palmiers-dattiers est réalisable à
guère. Cependant pour l'un d'entre eux, le brunissement a été peu marqué et la croissance importante (fig. 6). Il a pu être fragmenté et repiqué sur le même milieu. Une certaine diversité de comportement de ces cultures a pu être distinguée : certaines ne produisent que des racines mais d'une manière exubérante (fig. 7), d'autres, en même temps qu'une rhizogenèse discrète, différencient des bourgeons dont les premières feuilles sont malformées, les suivantes étant tout à fait typiques (fig. 8). Il est possible, lorsque les bourgeons néoformés possèdent dans leur prolongement quelques racines, de transférer l'ensemble en terre (fig. 9) et d'obtenir sa reprise. Lorsque l'enracinement n'est pas encore amorcé ou bien lorsque racines et bourgeons sont associés par un fragment de calle les essais de transfert en terre échouent en général. CONCLUSION. — Les résultats que nous avons obtenus montrent que la multiplication végétative de jeunes Palmiers-dattiers est réalisable à l'aide de cultures de tissus. Il convient de souligner en outre que nous avons obtenu ces néoformations à partir de tissus prélevés sur des organes provenant de plantes de semis, donc d'un matériel génétiquement différent de l'arbre-mère. Par ailleurs, nous ne pouvons évidemment pas encore dire si, ce faisant, nous n'avons pas introduit une variabilité génétique parmi cette descendance pourtant végétative. Cependant, les conditions qui permettent cette multiplication nous servent de référence pour les essais en cours sur des fragments d'organes pris sur des plantes adultes. En effet, nous tentons d'aboutir à ce que Rabechault et Martin ont réalisé sur le Palmier à huile à l'aide de cultures de tissus foliaires (8). Enfin, les premiers résultats enregistrés sur la floraison in vitro de ce Palmier permettent peut-être d'ouvrir une voie d'étude intéressante sur le déterminisme de la néoténie. (*) Séance du 28 février 1977. (1) Ce travail a été réalisé dans le cadre du programme « Biologie des Plantes utiles de Tunisie » associant la Faculté des Sciences de Tunis au Laboratoire de Morphologie végétale expérimentale (Pr Nozeran) de l'Université de Paris-Sud. Centre d'Orsay. (2) G. TOUTAIN, Al Awamia, 20, 1966, p. 125-130. (3) J. BULIT et M. GIRARD, 2e
n'avons pas introduit une variabilité génétique parmi cette descendance pourtant végétative. Cependant, les conditions qui permettent cette multiplication nous servent de référence pour les essais en cours sur des fragments d'organes pris sur des plantes adultes. En effet, nous tentons d'aboutir à ce que Rabechault et Martin ont réalisé sur le Palmier à huile à l'aide de cultures de tissus foliaires (8). Enfin, les premiers résultats enregistrés sur la floraison in vitro de ce Palmier permettent peut-être d'ouvrir une voie d'étude intéressante sur le déterminisme de la néoténie. (*) Séance du 28 février 1977. (1) Ce travail a été réalisé dans le cadre du programme « Biologie des Plantes utiles de Tunisie » associant la Faculté des Sciences de Tunis au Laboratoire de Morphologie végétale expérimentale (Pr Nozeran) de l'Université de Paris-Sud. Centre d'Orsay. (2) G. TOUTAIN, Al Awamia, 20, 1966, p. 125-130. (3) J. BULIT et M. GIRARD, 2e Conférence Technique F.A.O. sur l'Amélioration de la production et du ramassage des dattes, 1965, 5 p. (4) A. BENBADIS et S. AMMAR, XIX Congrès International de Botanique, Leningrad, 1975. (5) O. REUVENI, Y. ADATO et H. LILIEN-KIPNIS, 4th Ann. Date Growers' Inst., 1972, p. 17-24. (6) R. J. GAUTHERET, La culture des tissus végétaux, techniques et réalisation, 1959, Masson, Paris. (7) T. MURASHIGE et F. SKOOG. Physiol. Plant.. 15, 1962, D. 473-497. (8) H. RABECHAULT et J. P. MARTIN, Comptes rendus, 283, série D, 1976, p. 1735. Laboratoire de Biologie végétale. Faculté des Sciences, Campus Universitaire, Tunis, Tunisie. REPRODUCTION VÉGÉTALE. — Répartition de la callose et des composés pectiques dans la paroi du gamète femelle d'une Gymnosperme, Sciadopitys verticillata. Note (*) de Marcel Gianordoli, présentée par M. Roger Buvat. Deux structures juxtaposées constituent la paroi; d'une part, les champs de ponctuations primaires pourvus d'une lamelle moyenne et de granules callosiques; d'autre part, un réseau d'épaississements et de digitations uniformément riches en pectines. Cette structure en mosaïque, la répartition des pectines, la présence de callose sont des faits nouveaux; leur signification fonctionnelle est discutée. The cell wall is constituted by two justoposed structures: primary pit fields with a middle lamella and
culture des tissus végétaux, techniques et réalisation, 1959, Masson, Paris. (7) T. MURASHIGE et F. SKOOG. Physiol. Plant.. 15, 1962, D. 473-497. (8) H. RABECHAULT et J. P. MARTIN, Comptes rendus, 283, série D, 1976, p. 1735. Laboratoire de Biologie végétale. Faculté des Sciences, Campus Universitaire, Tunis, Tunisie. REPRODUCTION VÉGÉTALE. — Répartition de la callose et des composés pectiques dans la paroi du gamète femelle d'une Gymnosperme, Sciadopitys verticillata. Note (*) de Marcel Gianordoli, présentée par M. Roger Buvat. Deux structures juxtaposées constituent la paroi; d'une part, les champs de ponctuations primaires pourvus d'une lamelle moyenne et de granules callosiques; d'autre part, un réseau d'épaississements et de digitations uniformément riches en pectines. Cette structure en mosaïque, la répartition des pectines, la présence de callose sont des faits nouveaux; leur signification fonctionnelle est discutée. The cell wall is constituted by two justoposed structures: primary pit fields with a middle lamella and callose granules, on the one hand, and, on the second hand, a net-like structure formed by thickening and digitations, both uniformly rich in pectins. This mosaic structure, the distribution of pectic compounds, and the presence of callose are new data: the functional role of these structures is discussed. La paroi de l'oosphère de nombreuses Persmaphytes et Gymnospermes possède un réseau d'épaississements délimitant des mailles polygonales d'abord assimilées à des cribles phloémiens; mais une fine paroi, riche en plasmodesmes y est présente (1). La découverte de callose dans la paroi de l'oosphère de Sciadopitys verticillata, au cours de l'étude de la fécondation, nous incita à préciser la structure et la composition chimique de cette paroi. Ces données permettent d'envisager les échanges métaboliques du zygote dont l'étude in vitro est encore techniquement impossible. MÉTÉRIEL ET TECHNIQUES. — Les observations sont effectuées 48 h avant et après la fécondation. Microscopie photonique : fixateurs : A.F.A.; Helly, formol calcium, coupes à la paraffine ou à congélation. Microscopie électronique : polysaccharides totaux : fixateurs glutaraldéhyde post-osmié, méthode de Thiéry et contrôle en remplaçant l’oxydation périodique par un bain de peroxyde d’hydrogène. Pectines : techniques aux hydroxamates ferriques [Albersheim et al.]. Extraction enzymatique des pectines sur
de l'oosphère de nombreuses Persmaphytes et Gymnospermes possède un réseau d'épaississements délimitant des mailles polygonales d'abord assimilées à des cribles phloémiens; mais une fine paroi, riche en plasmodesmes y est présente (1). La découverte de callose dans la paroi de l'oosphère de Sciadopitys verticillata, au cours de l'étude de la fécondation, nous incita à préciser la structure et la composition chimique de cette paroi. Ces données permettent d'envisager les échanges métaboliques du zygote dont l'étude in vitro est encore techniquement impossible. MÉTÉRIEL ET TECHNIQUES. — Les observations sont effectuées 48 h avant et après la fécondation. Microscopie photonique : fixateurs : A.F.A.; Helly, formol calcium, coupes à la paraffine ou à congélation. Microscopie électronique : polysaccharides totaux : fixateurs glutaraldéhyde post-osmié, méthode de Thiéry et contrôle en remplaçant l’oxydation périodique par un bain de peroxyde d’hydrogène. Pectines : techniques aux hydroxamates ferriques [Albersheim et al.]. Extraction enzymatique des pectines sur blocs [Dashek et Rosen]. Le réseau d’épaississements (60 % de la surface du gamète femelle) délimite des champs de ponctuations primaires polygonaux de tailles variées (40 % de la surface) où sont exclusivement localisés les plasmodesmes (planche I, fig. 1, 2, 3). Le réseau d’épaississements de 3 à 5 µm d’épaisseur porte, vers l’intérieur de l’oosphère, des digitations intracytoplasmiques (5 à 8 µm) (planche I, fig. 1, 2, 7). Épaississements et digitations résultent d’une sécrétion polysaccharidique provenant du progamète femelle (planche I, fig. 6); elle débute un mois avant la fécondation pour les épaississements, et seulement dix jours avant cette dernière pour les digitations. Réseau et digitations réagissent positivement à l’acide périodique-Schiff ainsi qu’aux colorants signalétiques de la cellulose (ClZn + H2SO4), dont la présence est confirmée par la coloration au chloroiodure de zinc (planche I, fig. 4) après hydrolyse chimique des composés pectiques et des hémicelluloses et par la biréfringence au microscope polarisant. La coloration spécifique des pectines, de même que celle des polysaccharides acides, s’observe sur l’ensemble des épaississements pariétaux sans localisation linéaire correspondant à une lamelle moyenne. Réseau et digitations sont uniformément denses aux électrons sur les coupes contrastées par le KMnO4, l’Acétate d’Uranyl-citrate de Plomb ainsi