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des Insectes sans recourir à des techniques difficiles à mettre en œuvre. Séance du 21 février 1977. M. J. R. Le Berre et A. Louveaux, O.E.P.P. (sous presse). G. Grison, in traité d'Entomologie appliquée à l'agriculture, A. S. Balachowsky, Masson, Paris, n° 2, 1964, p. 640-738. J. R. Le Berre, Comptes rendus, 231, 1950, p. 1096. J. R. Le Berre, Comptes rendus, 234, 1952, p. 1092. J. R. Le Berre, Comptes rendus, 263, série D, 1966, p. 913. M. Arnaux, directeur du laboratoire de Biométrie du C.N.R.A. (I.N.R.A., Versailles) a bien voulu se charger de l'analyse statistique. M. Termier, Ann. Soc. Ent. Fr., Nlle série, 6, (3), 1970, p. 721-732. J. Aubert, J. Microscopie, 8, n° 2, 1969, p. 197-232. M. Termier et G. Lauge, Arch. Zool. Exp., 117, (1), p. 15-28. Université Paris-Sud. Faculté d'Orsay. Laboratoires d'Entomologie et de Zoologie. Bât. 446 et 442, 91405 Orsay. PHYSIOLOGIE DES INSECTES. Incorporation d'uridine tritiée dans les cellules de l'ovaire d'un insecte Homoptère Auchenorrhynche Ulopa reticulata Fab. (Ulopidae). Note de Claude Hamon, présentée par M. Pierre-Paul Grassé. L'incorporation d'uridine tritiée par l'ovaire télotrophique de Ulopa reticulata montre que l'ARN contenu dans l'ooplasme provient de deux sources différentes: les cellules nourricières par la voie des cordons trophiques et le noyau de l'ovocyte. The tritiated Uridine incorporation in the acrotrophic ovary of Ulopa reticulata shows that there are two different organs for the RNA of the ovocyte cytoplasm: the ovocyte nucleus, and the trophic cells (by way of the trophic cords), INTRODUCTION. — Lors d'études précédentes, nous avions noté chez des insectes Homoptères la très forte teneur en ARN des ovocytes en prévitellogenèse et de la chambre et des cordons trophiques: nous avons cherché à préciser l'origine de l'ARN de l'ovocyte en appliquant la technique de l'autoradiographie à l'ovaire télotrophique de U. reticulata. MATÉRIEL ET MÉTHODES. — Les insectes sont prélevés dans la nature et reçoivent une injection (temps t0) de 5 µl d'uridine tritiée soit 5 à 10 µCi pour des activités spécifiques de 5, 10, 18 Ci/mM selon l'uridine utilisée. Les lots d'animaux sont disséqués, 15 mn, 30 mn, 1 h, 4
voie des cordons trophiques et le noyau de l'ovocyte. The tritiated Uridine incorporation in the acrotrophic ovary of Ulopa reticulata shows that there are two different organs for the RNA of the ovocyte cytoplasm: the ovocyte nucleus, and the trophic cells (by way of the trophic cords), INTRODUCTION. — Lors d'études précédentes, nous avions noté chez des insectes Homoptères la très forte teneur en ARN des ovocytes en prévitellogenèse et de la chambre et des cordons trophiques: nous avons cherché à préciser l'origine de l'ARN de l'ovocyte en appliquant la technique de l'autoradiographie à l'ovaire télotrophique de U. reticulata. MATÉRIEL ET MÉTHODES. — Les insectes sont prélevés dans la nature et reçoivent une injection (temps t0) de 5 µl d'uridine tritiée soit 5 à 10 µCi pour des activités spécifiques de 5, 10, 18 Ci/mM selon l'uridine utilisée. Les lots d'animaux sont disséqués, 15 mn, 30 mn, 1 h, 4 h, 6 h, 21 h, 45 h, 80 h, 7 jours après l'injection. Après fixation et inclusion pour l'histologie classique la radioactivité des cellules est mise en évidence par la technique du « Stripping film ». OBSERVATIONS. — 1. Le germarium: quelques trophocytes sont légèrement marqués à t0 + 15 mn. Le marquage gagne ensuite progressivement la totalité des cellules nourricières (t0 + 4 h) tout en devenant plus intense. Les noyaux géants semblent relativement plus actifs que les petits noyaux. Les noyaux pycnotiques ne sont concernés que plus ou moins tardivement et d'une manière très variable. 4 et 6 h après l'injection quelques-uns seulement montrent un marquage léger mais plus net pour les moins pycnotiques. Par exception, un noyau fortement pycnotique peut être intensément radioactif. À t0 + 21 h l'incorporation est importante dans certains d'entre eux, nulle dans les autres; plus tard elle intéresse tous les noyaux à chromatine condensée et semble plus dense à leur périphérie. La chambre trophique se marque lentement et progressivement. Faible à t0 + 6 h la radioactivité y est devenue très importante à t0 + 45 h sauf au niveau de la nappe « Feulgen-positive » [3, e], qui en est presque
mn. Le marquage gagne ensuite progressivement la totalité des cellules nourricières (t0 + 4 h) tout en devenant plus intense. Les noyaux géants semblent relativement plus actifs que les petits noyaux. Les noyaux pycnotiques ne sont concernés que plus ou moins tardivement et d'une manière très variable. 4 et 6 h après l'injection quelques-uns seulement montrent un marquage léger mais plus net pour les moins pycnotiques. Par exception, un noyau fortement pycnotique peut être intensément radioactif. À t0 + 21 h l'incorporation est importante dans certains d'entre eux, nulle dans les autres; plus tard elle intéresse tous les noyaux à chromatine condensée et semble plus dense à leur périphérie. La chambre trophique se marque lentement et progressivement. Faible à t0 + 6 h la radioactivité y est devenue très importante à t0 + 45 h sauf au niveau de la nappe « Feulgen-positive » [3, e], qui en est presque exempte. Les cordons trophiques sont d'abord marqués à leur extrémité antérieure pour des temps de contact court. Beaucoup plus tard le marquage est très intense sur toute leur longueur. Les ovocytes en prévitellogenèse de la base du germarium ne sont marqués d'une manière significative qu'à partir de t0 + 4 h. Ce marquage limité au noyau ne s'intensifie ensuite que très lentement. 2. Le chapelet des ovocytes: le noyau des ovocytes en prévitellogenèse montre à t0 + 1 h un marquage léger qui croît ensuite lentement et modérément en s'accentuant au niveau du nucléole et du pourtour du noyau. Le marquage intéresse ensuite tout le cytoplasme mais avec une nette préférence pour la périphérie de l'ovocyte. À t0 + 45 h tout l'ooplasme est fortement radioactif tandis que le noyau ne l'est toujours que faiblement. Le noyau des ovocytes en vitellogenèse est plus nettement marqué que celui des ovocytes sans vitellus. Une couronne de grains l'entoure également à t0 + 21 h. Par ailleurs le marquage du cytoplasme périphérique est très net car il intéresse les espaces demeurés libres entre les globules de vitellus. Plus ceux-ci sont nombreux et gros et la taille de l'ovocyte importante, plus le marquage vers
h. Ce marquage limité au noyau ne s'intensifie ensuite que très lentement. 2. Le chapelet des ovocytes: le noyau des ovocytes en prévitellogenèse montre à t0 + 1 h un marquage léger qui croît ensuite lentement et modérément en s'accentuant au niveau du nucléole et du pourtour du noyau. Le marquage intéresse ensuite tout le cytoplasme mais avec une nette préférence pour la périphérie de l'ovocyte. À t0 + 45 h tout l'ooplasme est fortement radioactif tandis que le noyau ne l'est toujours que faiblement. Le noyau des ovocytes en vitellogenèse est plus nettement marqué que celui des ovocytes sans vitellus. Une couronne de grains l'entoure également à t0 + 21 h. Par ailleurs le marquage du cytoplasme périphérique est très net car il intéresse les espaces demeurés libres entre les globules de vitellus. Plus ceux-ci sont nombreux et gros et la taille de l'ovocyte importante, plus le marquage vers le centre de l'ovocyte est important. Les globules eux-mêmes commencent à devenir radioactifs vers t0 + 21 h. D'autre part, on note dès + 1 h, une concentration de grains entre les cellules folliculaires et l'ooplasme des gros ovocytes non chorionnés. Lorsque le chorion est présent cette concentration existe entre celui-ci et le vitellus mais seulement à t0 + 45 h. 3. Les cellules folliculaires. — Le marquage apparaît à leur niveau plus tôt (t0 + 15 mn) si les ovocytes sont de grande taille. CORRECTION ### L'ensemble de ces données pourrait être attribué à une différence de rythme alimentaire si les pesées ne suggéraient le contraire: la prise de poids est beaucoup plus forte chez les Insectes élevés en courte photopériode que chez les autres. Il semble possible de considérer que les métabolites suivent deux types de destinées: chez les animaux orientés vers la diapause, ils sont stockés comme réserve, chez les autres, ils servent au vol. CONCLUSION. — Cette expérience permet de conclure que la capacité de dispersion des Doryphores est en relation étroite avec un destin orienté vers la diapause ou vers son absence. En outre, la méthode utilisée, très reproductible, permet une évaluation assez satisfaisante de
celui-ci et le vitellus mais seulement à t0 + 45 h. 3. Les cellules folliculaires. — Le marquage apparaît à leur niveau plus tôt (t0 + 15 mn) si les ovocytes sont de grande taille. CORRECTION ### L'ensemble de ces données pourrait être attribué à une différence de rythme alimentaire si les pesées ne suggéraient le contraire: la prise de poids est beaucoup plus forte chez les Insectes élevés en courte photopériode que chez les autres. Il semble possible de considérer que les métabolites suivent deux types de destinées: chez les animaux orientés vers la diapause, ils sont stockés comme réserve, chez les autres, ils servent au vol. CONCLUSION. — Cette expérience permet de conclure que la capacité de dispersion des Doryphores est en relation étroite avec un destin orienté vers la diapause ou vers son absence. En outre, la méthode utilisée, très reproductible, permet une évaluation assez satisfaisante de l'état physiologique des Insectes sans recourir à des techniques difficiles à mettre en œuvre. Séance du 21 février 1977. M. J. R. Le Berre et A. Louveaux, O.E.P.P. (sous presse). G. Grison, in traité d'Entomologie appliquée à l'agriculture, A. S. Balachowsky, Masson, Paris, n° 2, 1964, p. 640-738. J. R. Le Berre, Comptes rendus, 231, 1950, p. 1096. J. R. Le Berre, Comptes rendus, 234, 1952, p. 1092. J. R. Le Berre, Comptes Il intéresse toutes les cellules folliculeuses de ceux-ci à to + 1 h et toutes les cellules folliculeuses à to + 4 h. Il est plus intense si l'ovocyte contient du vitellus. Il est plus important sur le ou les nucléoles surtout à to + 45 h quand l'ovocyte est en début de prévitellogenèse. EXPLICATION DE LA PLANCHE Fig. 1. — Le germarium 1 heure après l'injection : toutes les cellules autres que celles à noyau pycnorique sont légèrement marquées ; la chambre trophique et sa masse Feulgen-positive ne le sont pas. Fig. 2. — La chambre trophique 21 h après l'injection elle est très nettement radioactive; le matériel Feulgen-positif l'est peu et irrégulièrement. Fig. 3. 7 jours après l'injection deux ovocytes en phase de prévitellogenèse, l'un
Le Berre, Comptes rendus, 231, 1950, p. 1096. J. R. Le Berre, Comptes rendus, 234, 1952, p. 1092. J. R. Le Berre, Comptes Il intéresse toutes les cellules folliculeuses de ceux-ci à to + 1 h et toutes les cellules folliculeuses à to + 4 h. Il est plus intense si l'ovocyte contient du vitellus. Il est plus important sur le ou les nucléoles surtout à to + 45 h quand l'ovocyte est en début de prévitellogenèse. EXPLICATION DE LA PLANCHE Fig. 1. — Le germarium 1 heure après l'injection : toutes les cellules autres que celles à noyau pycnorique sont légèrement marquées ; la chambre trophique et sa masse Feulgen-positive ne le sont pas. Fig. 2. — La chambre trophique 21 h après l'injection elle est très nettement radioactive; le matériel Feulgen-positif l'est peu et irrégulièrement. Fig. 3. 7 jours après l'injection deux ovocytes en phase de prévitellogenèse, l'un d'eux avec son cordon trophique ooplasme et cordon sont très fortement marqués. Fig. 4. — Ovocyte en début de phase de prévitellogenèse 1 heure après l'injection le noyau est légèrement radioactif, mais non le cytoplasme. Fig. 5. — Ovocyte en phase de prévitellogenèse 21 heures après l'injection : noyau et cytoplasme sont nettement marqués, le premier relativement plus que le second. Fig. 6. — Ovocyte en phase de prévitellogenèse 7 jours après l'injection : le cytoplasme est très fortement radioactif tandis que, en comparaison, le noyau l'est relativement peu. Fig. 7. — Cellules folliculeuses d'un ovocyte à vitellus 1 heure après l'injection la radioactivité y est intense alors qu'elle est nulle dans l'ovocyte. Fig. 8. — Cellules folliculeuses d'un ovocyte en phase de vitellogenèse 21 heures après l'injection la radioactivité est très intense dans ces cellules et beaucoup plus faible au niveau de l'ooplasme. Fig. 9. — Cellules folliculeuses d'un ovocyte riche en vitellus 21 heures après l'injection la radioactivité est importante dans ces cellules et nette au niveau du cytoplasme périphérique de l'ovocyte. Fig. 10. — Ovocyte riche en vitellus 7 jours après l'injection : la radioactivité est localisée au niveau des cellules folliculeuses et du matériel qui existe
cytoplasme sont nettement marqués, le premier relativement plus que le second. Fig. 6. — Ovocyte en phase de prévitellogenèse 7 jours après l'injection : le cytoplasme est très fortement radioactif tandis que, en comparaison, le noyau l'est relativement peu. Fig. 7. — Cellules folliculeuses d'un ovocyte à vitellus 1 heure après l'injection la radioactivité y est intense alors qu'elle est nulle dans l'ovocyte. Fig. 8. — Cellules folliculeuses d'un ovocyte en phase de vitellogenèse 21 heures après l'injection la radioactivité est très intense dans ces cellules et beaucoup plus faible au niveau de l'ooplasme. Fig. 9. — Cellules folliculeuses d'un ovocyte riche en vitellus 21 heures après l'injection la radioactivité est importante dans ces cellules et nette au niveau du cytoplasme périphérique de l'ovocyte. Fig. 10. — Ovocyte riche en vitellus 7 jours après l'injection : la radioactivité est localisée au niveau des cellules folliculeuses et du matériel qui existe entre les gros grains de vitellus de l'ovocyte. c.t., cellule trophique; n.py., noyau pycnotique; m.F + , masse Feulgen-positive; ch.t., chambre trophique; co.t., cordon trophique; ov., ovocyte; c.f., cellule folliculeuse. PLANCHE 1 CLAUDE HAMON DISCUSSION. — Chez U. reticulata le noyau de l'ovocyte contribue à l'enrichissement de l'ooplasme en ARN. Cette fourniture semble être de même importance que celle décrite chez Pyrrhocoris apterus (8), mais plus abondante peut-être que chez la notonecte (7). Cet insecte diffère donc de Rhodnius prolixus e), Tetrodontophora bielanensis (6), Dysdercus intermedius (10) chez lesquels le noyau de l'ovocyte est considéré comme ne fournissant pas d'ARN à l'ooplasme. Chez U. reticulata, ce sont les cellules folliculeuses qui incorporent le plus précocement l'uridine. La concentration de radioactivité que l'on observe à la périphérie des ovocytes provient sans doute d'une accumulation d'ARN venu du noyau de ceux-ci; il est en effet fort peu probable qu'il s'agisse là d'une contribution de l'épithélium folliculeux contrairement à ce qui est supposé exister chez R. prolixus e) et la notonecte C). Chez U. reticulata, le marquage s'intensifie progressivement au niveau de la chambre trophique et gagne toute la longueur des cordons. Mais, comme l'ooplasme est devenu aussi radioactif, il est impossible de
Cette fourniture semble être de même importance que celle décrite chez Pyrrhocoris apterus (8), mais plus abondante peut-être que chez la notonecte (7). Cet insecte diffère donc de Rhodnius prolixus e), Tetrodontophora bielanensis (6), Dysdercus intermedius (10) chez lesquels le noyau de l'ovocyte est considéré comme ne fournissant pas d'ARN à l'ooplasme. Chez U. reticulata, ce sont les cellules folliculeuses qui incorporent le plus précocement l'uridine. La concentration de radioactivité que l'on observe à la périphérie des ovocytes provient sans doute d'une accumulation d'ARN venu du noyau de ceux-ci; il est en effet fort peu probable qu'il s'agisse là d'une contribution de l'épithélium folliculeux contrairement à ce qui est supposé exister chez R. prolixus e) et la notonecte C). Chez U. reticulata, le marquage s'intensifie progressivement au niveau de la chambre trophique et gagne toute la longueur des cordons. Mais, comme l'ooplasme est devenu aussi radioactif, il est impossible de déterminer quelle est la quantité d'ARN fournie par le tissu trophique. Par ailleurs, les gros globules de vitellus sont relativement moins marqués que les espaces demeurés libres entre eux et dont certains renferment de petits globules. Les grains de vitellus semblent ne contenir qu'une faible quantité d'ARN nouvellement synthétisé. Chez U. reticulata, deux sources doivent contribuer à l'enrichissement de l'ooplasme en ARN. C'est apparemment le noyau de l'ovocyte qui fournit les premiers apports. D'abord limités à l'environnement immédiat du noyau, ceux-ci se retrouvent ensuite dans l'ensemble du cytoplasme et pourraient se concentrer momentanément à la périphérie de l'ovocyte. La contribution des cellules trophiques est beaucoup plus tardive. Elle doit gagner d'abord la chambre nourricière puis migrer par le cordon trophique jusqu'à la cellule germinale. L'essentiel de l'ARN des cordons est constitué par des ribosomes (4) produits donc très vraisemblablement par le tissu nourricier. Celui-ci incorpore le précurseur avec un certain retard par rapport à l'ovocyte. On peut supposer que l'ARN synthétisé très rapidement par ce dernier correspond à des molécules de faible poids moléculaire qui migrent immédiatement. Chez D. intermedius e), l'analyse biochimique a montré qu'une partie importante de la fraction légère de l'ARN de l'ovaire est contenue dans les
U. reticulata, deux sources doivent contribuer à l'enrichissement de l'ooplasme en ARN. C'est apparemment le noyau de l'ovocyte qui fournit les premiers apports. D'abord limités à l'environnement immédiat du noyau, ceux-ci se retrouvent ensuite dans l'ensemble du cytoplasme et pourraient se concentrer momentanément à la périphérie de l'ovocyte. La contribution des cellules trophiques est beaucoup plus tardive. Elle doit gagner d'abord la chambre nourricière puis migrer par le cordon trophique jusqu'à la cellule germinale. L'essentiel de l'ARN des cordons est constitué par des ribosomes (4) produits donc très vraisemblablement par le tissu nourricier. Celui-ci incorpore le précurseur avec un certain retard par rapport à l'ovocyte. On peut supposer que l'ARN synthétisé très rapidement par ce dernier correspond à des molécules de faible poids moléculaire qui migrent immédiatement. Chez D. intermedius e), l'analyse biochimique a montré qu'une partie importante de la fraction légère de l'ARN de l'ovaire est contenue dans les plaquettes vitellines. Chez U. reticulata, les ovocytes en fin de vitellogenèse et pourvus d'un chorion montrent une radioactivité limitée aux cellules folliculeuses pour des temps de contact inférieurs à 21 h. Le chorion constitue donc bien, apparemment, un obstacle à la pénétration du matériel tritié. Le marquage observé dans l'ooplasme pour des temps plus longs (45 h...) correspond vraisemblablement à une incorporation du précurseur antérieure au dépôt du chorion. Un aspect un peu particulier du problème concerne les cellules trophiques à noyau « en dégénérescence ». Il semble acquis qu'elles incorporent de l'uridine 3H avec cependant des variations notables. Cette activité de synthèse certaine permet de dire qu'elles ne sont pas inactives alors que leur devenir pourrait laisser à penser le contraire. Cependant, à quel moment s'est effectuée la synthèse observée? En effet, celle-ci reste faible et n'apparaît que plusieurs heures après l'injection du produit marqué. Ceci peut être justifié par l'opposition à la pénétration du précurseur offerte par le matériel pycnotique compact. Mais on peut penser également que l'incorporation d'uridine a eu lieu quand le noyau était encore « normal », le matériel synthétisé pendant ce temps ne pouvant plus sortir du noyau quand celui-ci condense sa chromatine. Enfin,
pour des temps plus longs (45 h...) correspond vraisemblablement à une incorporation du précurseur antérieure au dépôt du chorion. Un aspect un peu particulier du problème concerne les cellules trophiques à noyau « en dégénérescence ». Il semble acquis qu'elles incorporent de l'uridine 3H avec cependant des variations notables. Cette activité de synthèse certaine permet de dire qu'elles ne sont pas inactives alors que leur devenir pourrait laisser à penser le contraire. Cependant, à quel moment s'est effectuée la synthèse observée? En effet, celle-ci reste faible et n'apparaît que plusieurs heures après l'injection du produit marqué. Ceci peut être justifié par l'opposition à la pénétration du précurseur offerte par le matériel pycnotique compact. Mais on peut penser également que l'incorporation d'uridine a eu lieu quand le noyau était encore « normal », le matériel synthétisé pendant ce temps ne pouvant plus sortir du noyau quand celui-ci condense sa chromatine. Enfin, en ce qui concerne les symboles, on a observé le curseur. C'était déjà le cas pour la thymidine (5) : parvenus en ce cas en phase de repos. Sacre du 1er février 1977. i~ ~, [texte_manquant] M. F. HAMON, SOC. Se. Bretagnes. O. Q. HAMON, Comptable [texte_manquant] ENDOCRINOLOGIE. Présence de contacts neurosensoriels et de synapses d'un type nouveau dans l'épiphyse du Lézard des murailles (Lacerta muralis, Laurenti). Note de André Petit et Berthe Vivien-Roels, transmis par M. Marc Herlant. Les contacts synaptiques neurosensoriels entre photorécepteurs et cellules ganglionnaires sont assez nombreux pour constituer un argument supplémentaire en faveur d'une fonction photosensorielle de l'épiphyse. Un nouveau type de synapse entre photorécepteurs rudimentaires sécrétoires et cellules ganglionnaires montre une relation directe de cellules à caractères hautement sécrétoires avec le système nerveux central. The neurosensory synapses between photoreceptor cells and nerve ganglion cells are numerous enough to constitute an additional argument for a photosensitive function of the pineal gland. A new type of synapse, observed between the secretory rudimentary photoreceptor cells and nerve ganglion cells presents a direct relation from cells showing an active secretory function to the central nervous system. L'épiphyse de Lacerta possède une fonction sécrétoire très nette et une activité