jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
embryons tout d’abord perturbés dans leur développement par des FAB anti-F9 peuvent, après lavage, produire non seulement 1 blastocyste, mais même 1 souris. DISCUSSION. — La présence de fragments monovalents d’IgG de Lapin anti-F9 dans les cultures d’embryons, 1° ne perturbe pas la segmentation, 2° empêche la formation du blastocyste en modifiant, semble-t-il, les interactions des blastomères, 3° n’altère pas, pendant quelques heures, les potentialités de ceux-ci qui, débarrassés des FAB, peuvent produire un animal viable. Tout se passe donc comme si le blocage d’un site de surface cellulaire par le fragment monovalent d’IgG empêchait une interaction des blastomères nécessaire à la différenciation du blastocyste. Ce site paraît être spécifique puisque ni les FAB dirigés contre un autre site, ni la Con A monovalente n’exercent cet effet. Des expériences préliminaires indiquent que les FAB de Lapin anti-F9 inhibent aussi la différenciation in vitro des cellules de carcinome embryonnaire isolées de tératocarcinome. Il est donc tentant d’attribuer à l’antigène F9 un rôle primordial dans ces phénomènes de différenciation, notamment celle du blastocyste. Il faut cependant souligner que ces expériences ont été réalisées avec des FAB de Lapin, les FAB de Souris syngéniques n’ayant pas encore été purifiées pour des raisons techniques. Il se peut que les FAB de Lapin contiennent des molécules dirigées non seulement contre l’antigène F9 mais aussi contre d’autres antigènes de surface. Des expériences en cours permettront de préciser ce point. Quoi qu’il en soit, il est clair que certains antigènes de surface cellulaire jouent un rôle important dans la différenciation et le développement de l’embryon. Service de Génétique cellulaire du Collège de France et de l’Institut Pasteur, 25, rue du Docteur-Roux, 75015 Paris. RADIOBIOLOGIE. — Interaction de cellules thymiques et de cellules souches hémopoïétiques. Action favorisante sur la repopulation du thymus irradié. Note de Richard Daculsi, Elisabeth Legrand et Jean-François Duplan, présentée par M. Raymond Latarjet. Chez la Souris irradiée, restaurée par des cellules hémopoïétiques, le thymus est repeuplé plus rapidement par les cellules issues de la moelle osseuse que par celles issues de la rate. L'adjonction de cellules thymiques à l'inoculum restaurateur favorise la repopulation du
Il se peut que les FAB de Lapin contiennent des molécules dirigées non seulement contre l’antigène F9 mais aussi contre d’autres antigènes de surface. Des expériences en cours permettront de préciser ce point. Quoi qu’il en soit, il est clair que certains antigènes de surface cellulaire jouent un rôle important dans la différenciation et le développement de l’embryon. Service de Génétique cellulaire du Collège de France et de l’Institut Pasteur, 25, rue du Docteur-Roux, 75015 Paris. RADIOBIOLOGIE. — Interaction de cellules thymiques et de cellules souches hémopoïétiques. Action favorisante sur la repopulation du thymus irradié. Note de Richard Daculsi, Elisabeth Legrand et Jean-François Duplan, présentée par M. Raymond Latarjet. Chez la Souris irradiée, restaurée par des cellules hémopoïétiques, le thymus est repeuplé plus rapidement par les cellules issues de la moelle osseuse que par celles issues de la rate. L'adjonction de cellules thymiques à l'inoculum restaurateur favorise la repopulation du thymus par les cellules issues de la rate, mais n'a pas d'action sur la repopulation d'origine médullaire. Irradiated mice engrafted with hemopoietic cells, the thymus is repopulated more rapidly by bone marrow-derived than by spleen-derived cells. Admixing thymic cells with the restorative suspension stimulates the thymic repopulation by spleen-derived cells whereas it has no effect on the repopulation by bone marrow-derived cells. Suivant qu'elles proviennent de la moelle osseuse (MO), de la rate ou du sang, les cellules souches hématopoïétiques (CS) pluripotentielles, diffèrent tant par leur aptitude à la prolifération que par l'orientation préférentielle de leur différenciation [(1), (2)]. En étudiant la cinétique de repopulation du thymus chez des Souris irradiées greffées avec des CS soit médullaires, soit spléniques, on a montré sans équivoque que le thymus était repeuplé plus rapidement après la greffe des premières qu'après celle des secondes [e), (4)]. Par ailleurs, en comparant l'efficacité restauratrice des CS médullaires et spléniques, on a constaté que les cellules thymiques (CT) ajoutées aux suspensions de rate, influençaient défavorablement la survie des Souris e), alors qu'elles n'avaient pas d'effet sur l'efficacité des suspensions de MO. Ce résultat pouvait indiquer que les CT orientaient préférentiellement la différenciation des cellules spléniques vers la
whereas it has no effect on the repopulation by bone marrow-derived cells. Suivant qu'elles proviennent de la moelle osseuse (MO), de la rate ou du sang, les cellules souches hématopoïétiques (CS) pluripotentielles, diffèrent tant par leur aptitude à la prolifération que par l'orientation préférentielle de leur différenciation [(1), (2)]. En étudiant la cinétique de repopulation du thymus chez des Souris irradiées greffées avec des CS soit médullaires, soit spléniques, on a montré sans équivoque que le thymus était repeuplé plus rapidement après la greffe des premières qu'après celle des secondes [e), (4)]. Par ailleurs, en comparant l'efficacité restauratrice des CS médullaires et spléniques, on a constaté que les cellules thymiques (CT) ajoutées aux suspensions de rate, influençaient défavorablement la survie des Souris e), alors qu'elles n'avaient pas d'effet sur l'efficacité des suspensions de MO. Ce résultat pouvait indiquer que les CT orientaient préférentiellement la différenciation des cellules spléniques vers la lignée lymphoïde aux dépens des lignées érythro-myéloïdes directement impliquées dans la survie à court terme. Le but des présentes expériences est de rechercher quelle action ont les suspensions de CT sur la repopulation du thymus chez des Souris irradiées, restaurées par des CS provenant soit de la MO, soit de la rate. Ceci suppose, d'une part de faire la discrimination entre la prolifération des cellules thymiques survivantes et la repopulation par des cellules issues des CS greffées, d'autre part de reconnaître par la présence de l'antigène thêta, l'appartement des cellules à la lignée T. MÉTODES. — On a utilisé des Souris mâles et femelles des lignées AKR (AK), C3H (C3) ainsi que leurs hybrides (C3H x AKR)F1 (C3AKF1). Les lignées AK et C3 sont partiellement histocompatibles comme porteuses du même allèle H2k. En revanche les cellules thymiques AK possèdent l'allotype Thy 1-1 alors que celles de C3 portent l'allotype Thy 1-2; l'allotype hybride étant Thy 1-1/1-2. Des Souris mâles C3 âgées de 70 à 80 jours sont irradiées en totalité avec une dose de rayons X de 837 rads (225 kV, 1 mA, CDA 1,2 mmCu) à raison de 85 rad/min. Les animaux sont subdivisés en 4 groupes de 16
la rate. Ceci suppose, d'une part de faire la discrimination entre la prolifération des cellules thymiques survivantes et la repopulation par des cellules issues des CS greffées, d'autre part de reconnaître par la présence de l'antigène thêta, l'appartement des cellules à la lignée T. MÉTODES. — On a utilisé des Souris mâles et femelles des lignées AKR (AK), C3H (C3) ainsi que leurs hybrides (C3H x AKR)F1 (C3AKF1). Les lignées AK et C3 sont partiellement histocompatibles comme porteuses du même allèle H2k. En revanche les cellules thymiques AK possèdent l'allotype Thy 1-1 alors que celles de C3 portent l'allotype Thy 1-2; l'allotype hybride étant Thy 1-1/1-2. Des Souris mâles C3 âgées de 70 à 80 jours sont irradiées en totalité avec une dose de rayons X de 837 rads (225 kV, 1 mA, CDA 1,2 mmCu) à raison de 85 rad/min. Les animaux sont subdivisés en 4 groupes de 16 souris chacun. Dans les 3 h qui suivent leur irradiation les divers groupes reçoivent par voie intraveineuse une injection restauratrice composée de MO seule (1,5 à 1,6.106 cellules) ou additionnée de CT (107), soit de rate seule (1,5 à 1,6.107 cellules) ou additionnée de CT (10'). Les cellules restauratrices spléniques ou médullaires ainsi que les CT proviennent de Souris mâles ou femelles C3AKF1 âgées de 40 à 50 jours. Les suspensions sont préparées dans du liquide de Tyrode; les éléments nucléés sont dénombrés dans un hémocytomètre de Burker et leur viabilité contrôlée par le test au bleu trypan. Pour déterminer l'origine des cellules qui repeuplent le thymus on a utilisé deux antisérums : un sérum de Lapin anticerveau de Souris (LACS) préparé suivant Golub (1), et un sérum C3 anti-AK (1), cytotoxique pour Thy 1-1. Le sérum LACS permet le dénombrement de toutes les cellules porteuses de l'antigène thêta, alors que le sérum anti-Thy 1-1 n'est cytotoxique que pour les cellules T issues du donneur C3AKF1. Les tests cytotoxiques sont conduits suivant la technique de Gorer et O'Gorman (9). Des études préliminaires ont permis de fixer à 1/32 la dilution optimale des deux antisérums. Le complément de Cobaye est utilisé
ou médullaires ainsi que les CT proviennent de Souris mâles ou femelles C3AKF1 âgées de 40 à 50 jours. Les suspensions sont préparées dans du liquide de Tyrode; les éléments nucléés sont dénombrés dans un hémocytomètre de Burker et leur viabilité contrôlée par le test au bleu trypan. Pour déterminer l'origine des cellules qui repeuplent le thymus on a utilisé deux antisérums : un sérum de Lapin anticerveau de Souris (LACS) préparé suivant Golub (1), et un sérum C3 anti-AK (1), cytotoxique pour Thy 1-1. Le sérum LACS permet le dénombrement de toutes les cellules porteuses de l'antigène thêta, alors que le sérum anti-Thy 1-1 n'est cytotoxique que pour les cellules T issues du donneur C3AKF1. Les tests cytotoxiques sont conduits suivant la technique de Gorer et O'Gorman (9). Des études préliminaires ont permis de fixer à 1/32 la dilution optimale des deux antisérums. Le complément de Cobaye est utilisé après dilution au 1/10 dans du liquide de Tyrode. Repopulation du thymus après irradiation. L'indice de stimulation correspond au rapport entre le nombre absolu de cellules T (Thy 1-1) après restauration par des cellules spléniques ou médullaires additionnées de cellules thymiques (rate ou MO + CT) et le nombre absolu de cellules T après restauration par MO ou rate seules. Dans chacun des groupes, les Souris sont sacrifiées 14, 20, 24 et 30 jours après l'irradiation. Les thymus sont prélevés, pesés et mis en suspension dans du liquide de Tyrode; leurs cellules sont dénombrées et soumises aux tests de cytotoxicité. Les résultats peuvent ainsi être exprimés en nombre absolu de cellules thymiques d'origine exogène (Thy 1-1/1-2) décelées par l'action du sérum anti-Thy 1-1. L'action des CT ajoutées aux cellules restauratrices est évaluée par le rapport entre la moyenne du nombre absolu de cellules T exogènes présentes dans les groupes où la MO ou la rate étaient additionnées de CT et celle des groupes qui reçoivaient MO ou rate seules. L'indice de stimulation correspond donc à la valeur des rapports (MO + CT)/MO et (R + CT)/R. RÉSULTATS ET DISCUSSION. — L'utilisation de donneurs hybrides (MO, rate et CT) élimine l'intervention
de cellules T après restauration par MO ou rate seules. Dans chacun des groupes, les Souris sont sacrifiées 14, 20, 24 et 30 jours après l'irradiation. Les thymus sont prélevés, pesés et mis en suspension dans du liquide de Tyrode; leurs cellules sont dénombrées et soumises aux tests de cytotoxicité. Les résultats peuvent ainsi être exprimés en nombre absolu de cellules thymiques d'origine exogène (Thy 1-1/1-2) décelées par l'action du sérum anti-Thy 1-1. L'action des CT ajoutées aux cellules restauratrices est évaluée par le rapport entre la moyenne du nombre absolu de cellules T exogènes présentes dans les groupes où la MO ou la rate étaient additionnées de CT et celle des groupes qui reçoivaient MO ou rate seules. L'indice de stimulation correspond donc à la valeur des rapports (MO + CT)/MO et (R + CT)/R. RÉSULTATS ET DISCUSSION. — L'utilisation de donneurs hybrides (MO, rate et CT) élimine l'intervention possible d'une réaction de greffe contre l'hôte. Pour évaluer l'ensemble des cellules T, on a préféré un sérum LACS au lot de sérum de Souris anti-Thy 1-2 qui était en notre possession et dont la toxicité vis-à-vis des cellules C3AKF1 avait plusieurs fois parue sujette à caution. Les résultats représentent les valeurs moyennes de deux séries expérimentales (8 souris par point). A partir du 24e jour le nombre total de cellules présentes dans les thymus est sensiblement égal dans les quatre groupes expérimentaux, mais les fluctuations sont plus importantes aux 14e et 20e jours, et les valeurs les plus élevées ne proviennent pas nécessairement des souris qui ont reçu des CT. CHEMIN Toutefois, à ces deux dates (14e et 20e jour), chez les animaux injectés avec un mélange de rate et de CT, le nombre absolu des cellules Thy 1.2 est toujours nettement supérieur à celui trouvé chez les Souris restaurées avec de la rate seule. Les indices de stimulation (fig.) atteignent respectivement 3,9 et 2,2 aux 14e et 20e jours, ils deviennent voisins de l'unité (1,1 et 1,6) aux 24e et 30e jours. L'exo-régénération thymique n'est pas modifiée chez les animaux restaurés avec de la MO additionnée de CT
les valeurs moyennes de deux séries expérimentales (8 souris par point). A partir du 24e jour le nombre total de cellules présentes dans les thymus est sensiblement égal dans les quatre groupes expérimentaux, mais les fluctuations sont plus importantes aux 14e et 20e jours, et les valeurs les plus élevées ne proviennent pas nécessairement des souris qui ont reçu des CT. CHEMIN Toutefois, à ces deux dates (14e et 20e jour), chez les animaux injectés avec un mélange de rate et de CT, le nombre absolu des cellules Thy 1.2 est toujours nettement supérieur à celui trouvé chez les Souris restaurées avec de la rate seule. Les indices de stimulation (fig.) atteignent respectivement 3,9 et 2,2 aux 14e et 20e jours, ils deviennent voisins de l'unité (1,1 et 1,6) aux 24e et 30e jours. L'exo-régénération thymique n'est pas modifiée chez les animaux restaurés avec de la MO additionnée de CT ; l'indice de stimulation varie entre 0,6 et 1,2 et n'est jamais significativement différent de 1. L'action favorisante des CT sur l'exo-répulation du thymus à partir des cellules dérivées des CS spléniques, paraît devoir être rattachée au fait que la rate produit moins de précurseurs thymiques, ou les produit moins vite [C), (4)]. Les données cinétiques manquent pour choisir entre ces deux possibilités. Il semble toutefois exclu que la cinétique de réplication des CFU spléniques, qui est connue pour être plus lente que celle de la MO, soit seule en cause [d'autant plus que l'adjonction de CT ne la corrige pas. On a en outre montré (10) que les CT ne participent pas directement à la repopulation du thymus; elles agiraient soit en accélérant le recrutement des précurseurs thymiques à partir des CS spléniques, soit en stimulant leur multiplication et leur maturation. Dans l'un et l'autre cas, on est conduit à faire l'hypothèse que la population des CS spléniques est marquée par un défaut de différenciation vers la lignée des cellules T. On peut ainsi concevoir que si cette différenciation s'effectue normalement à partir du compartiment des CS médullaires, l'intervention avec les CT peut se produire sans modification apparente de
vite [C), (4)]. Les données cinétiques manquent pour choisir entre ces deux possibilités. Il semble toutefois exclu que la cinétique de réplication des CFU spléniques, qui est connue pour être plus lente que celle de la MO, soit seule en cause [d'autant plus que l'adjonction de CT ne la corrige pas. On a en outre montré (10) que les CT ne participent pas directement à la repopulation du thymus; elles agiraient soit en accélérant le recrutement des précurseurs thymiques à partir des CS spléniques, soit en stimulant leur multiplication et leur maturation. Dans l'un et l'autre cas, on est conduit à faire l'hypothèse que la population des CS spléniques est marquée par un défaut de différenciation vers la lignée des cellules T. On peut ainsi concevoir que si cette différenciation s'effectue normalement à partir du compartiment des CS médullaires, l'intervention avec les CT peut se produire sans modification apparente de la cinétique de repopulation du thymus. En effet, la corticale de cet organe se repeuple à partir d'un très faible nombre de précurseurs []; son exo-régénération devrait donc être plus sensible à un défaut de différenciation et de maturation qu'à un déficit relatif de type quantitatif. On savait déjà que les CT pouvaient stimuler la production des lymphocytes B [11] par interactions cellulaires, et favoriser l'hématopoïèse dans certaines combinaisons hybrides [13]. Les résultats précédents s'inscrivent dans cette même ligne d'effets stimulants. Il est toutefois impossible de savoir s'il s'agit d'un aspect particulier d'une des précédentes interactions ou d'un phénomène différent. Séance du 28 mars 1977. J. F. DUPLAN, E. LEGRAND et B. GUILLEMAIN, Nouv. Rev. Franc. Hémat. Il. 1971. p. 821. N. S. WOLF et J. J. TRENTIN, J. Exp. Med., 127. 1968. p. 205. J. F. KADISH et R. S. BACH, J. Exp. Med., 143, 1976, p. 1082. S. MURAMATSU, P. MONNOT et J. F. DUPLAN, Exp. Hemat., 4, 1976, p. 188. M. C. DEBONS et J. F. DUPLAN, C. R. Soc. Biol. 168, 1974, p. 489. J. E. TILL et E. A. MCCULLOCH, Radiat. Res., 14, 1961, p. 213. E. S. GOLUB, Cell. Immunol., 2. 1971. p. 353.
les CT pouvaient stimuler la production des lymphocytes B [11] par interactions cellulaires, et favoriser l'hématopoïèse dans certaines combinaisons hybrides [13]. Les résultats précédents s'inscrivent dans cette même ligne d'effets stimulants. Il est toutefois impossible de savoir s'il s'agit d'un aspect particulier d'une des précédentes interactions ou d'un phénomène différent. Séance du 28 mars 1977. J. F. DUPLAN, E. LEGRAND et B. GUILLEMAIN, Nouv. Rev. Franc. Hémat. Il. 1971. p. 821. N. S. WOLF et J. J. TRENTIN, J. Exp. Med., 127. 1968. p. 205. J. F. KADISH et R. S. BACH, J. Exp. Med., 143, 1976, p. 1082. S. MURAMATSU, P. MONNOT et J. F. DUPLAN, Exp. Hemat., 4, 1976, p. 188. M. C. DEBONS et J. F. DUPLAN, C. R. Soc. Biol. 168, 1974, p. 489. J. E. TILL et E. A. MCCULLOCH, Radiat. Res., 14, 1961, p. 213. E. S. GOLUB, Cell. Immunol., 2. 1971. p. 353. A. E. REIF et J. M. V. ALLEN, J. Exp. Med., 120, 1964, p. 413. P. A. UORER et P. O'GORAN, Transplant. Bull., 3, 1956, p. 142. E. LEGRAND, M. C. KRESSMANN et J. F. DUPLAN, Int. J. Cancer, 15, 1975, p. 572. V. J. WALLIS, E. LEUCHARS, S. CHWALINSKI et A. J. S. DAVIES, Transplantation, 19, 1975, p. 2. H. N. CLAMAN, E. A. CHAPERON et R. F. TRIPLETT, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 122, 1966, p. 1167. L. L. PRITCHARD, S. G. SHINPOCK et J. W. GOODMAN, Exp. Hemat., 3. 1975, p. 94. Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, Unité 117, Fondation Bergonié, 180, rue de Saint-Genès, 33076 Bordeaux Cedex. L'hydrolyse a été réalisée en présence de HC1 6 N à 110°C pendant 20 h. TABLEAU 1 Teneur en acides aminés Numéros Température en °C Déminéralisation en μM g 1 Non chauffé Oui 2 111 2 (a) 200° Oui 2 100 3 (b) 290° Oui 39.3 4 (b) 290° Non 130,1 5 (c) 300° Oui 15.4 6 (c) 300° Non 44,5 7 (d) 340° Oui 0 8 (d) 340° Non 17.7 9 (e) 400° Oui 0 10 (e) 400° Non 1,25 RÉSULTATS ET DISCUSSION.
et A. J. S. DAVIES, Transplantation, 19, 1975, p. 2. H. N. CLAMAN, E. A. CHAPERON et R. F. TRIPLETT, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 122, 1966, p. 1167. L. L. PRITCHARD, S. G. SHINPOCK et J. W. GOODMAN, Exp. Hemat., 3. 1975, p. 94. Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, Unité 117, Fondation Bergonié, 180, rue de Saint-Genès, 33076 Bordeaux Cedex. L'hydrolyse a été réalisée en présence de HC1 6 N à 110°C pendant 20 h. TABLEAU 1 Teneur en acides aminés Numéros Température en °C Déminéralisation en μM g 1 Non chauffé Oui 2 111 2 (a) 200° Oui 2 100 3 (b) 290° Oui 39.3 4 (b) 290° Non 130,1 5 (c) 300° Oui 15.4 6 (c) 300° Non 44,5 7 (d) 340° Oui 0 8 (d) 340° Non 17.7 9 (e) 400° Oui 0 10 (e) 400° Non 1,25 RÉSULTATS ET DISCUSSION. — Le thermogramme de l'os (Les ordonnées représentent les différences de température (l'échelle n'est pas indiquée car la tension délivrée par les thermocouples n'est pas une fonction linéaire de la température).) (tracé 5, en traits interrompus, fig. 1) comporte trois pics successifs : 60, 290 et 400°C. Pour interpréter ces phénomènes nous avons déterminé la composition en acides aminés d'une série d'échantillons d'os chauffés dans l'analyseur thermique et prélevés après avoir interrompu le chauffage au point voulu (voir tableau I). La composition en acides aminés est donnée dans le tableau II, la première colonne correspond aux valeurs calculées d'après Eastoe e), en adoptant le pourcentage publié par Kuboki et coll. e): 20 % de collagène insoluble dans l'os frais; les traces non mesurables sont figurées par le signe +. La lecture de ce tableau permet l'interprétation suivante du thermogramme de l'os frais : 1. Le premier pic, endothermique, n'est pas lié à une modification de la composition en acides aminés; il correspond sans doute à une déshydratation du collagène et de l'apatite. 2. Le deuxième pic, exothermique correspond à un ensemble de phénomènes : rupture de la liaison peptidique et combustion de certains a.a. Ces deux processus sont graduels ainsi,
phénomènes nous avons déterminé la composition en acides aminés d'une série d'échantillons d'os chauffés dans l'analyseur thermique et prélevés après avoir interrompu le chauffage au point voulu (voir tableau I). La composition en acides aminés est donnée dans le tableau II, la première colonne correspond aux valeurs calculées d'après Eastoe e), en adoptant le pourcentage publié par Kuboki et coll. e): 20 % de collagène insoluble dans l'os frais; les traces non mesurables sont figurées par le signe +. La lecture de ce tableau permet l'interprétation suivante du thermogramme de l'os frais : 1. Le premier pic, endothermique, n'est pas lié à une modification de la composition en acides aminés; il correspond sans doute à une déshydratation du collagène et de l'apatite. 2. Le deuxième pic, exothermique correspond à un ensemble de phénomènes : rupture de la liaison peptidique et combustion de certains a.a. Ces deux processus sont graduels ainsi, à 300°C il ne reste ni Hypro ni Pro et, à 340°C toutes les liaisons peptidiques sont coupées et il ne subsiste que quelques a.a. libres. 3. Le troisième pic, exothermique, présente une intensité nettement plus faible. Le fait qu'à 400°C il ne reste plus que des traces d'a.a. libres, les mêmes d'ailleurs qu'à 340°C montre qu'il ne peut être dû qu'à des produits résiduels provenant de la thermolyse d'acides aminés. Nos résultats sont en accord avec ceux qui ont été obtenus par Lim (4), avec une technique similaire, l'analyse thermogravimétrique. TABLEAU II Teneur en micromoles par gramme d'os 290°C 300°C 340°C 400°C Eastoe 1 et 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Hypro 216 210 0 0 0 0 0 0 0 0 Asp 106,8 100 1 6 0,5 2,5 0 0,6 0 + Thr 42,2 43 0,4 2 + 1.0 0 + 0 + Ser 81 82 1,4 3 0,5 1,5 0 + 0 + Glu 162,4 155 1,6 21 0,5 8,2 0 2,5 0 + Pro 254,4 250 2 4 0 0 0 0 0 0 Gly 674 685 18 60 7,6 24,3 0 12,9 0 1,25 Ala 235 230 5 12 3,2 4,0 0