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morts entre le 6e et le 13e jour suivant, malgré l’administration Fig. 1. — Radiographies comparatives des tibias de rats âgés de 60 jours avec de gauche à droite : un os d’un mutant « op » non traité, un os d’un mutant « op » ayant subi une irradiation puis une injection allogénique, un os témoin. d'antibiotique par voie buccale (néomycine + bacitracine 500 mg/1). Il convient de souligner ici que les mutants op/op sont toujours de santé très précaire. Les 3 mutants survivants ont subi une première radiographie 3 semaines après le traitement ; 2 d'entre eux présentaient déjà des signes évidents de résorption et un début de remodelage du squelette osseux. Le succès de la méthode est donc appréciable surtout si l'on tient compte de la fragilité des mutants ainsi que nous venons de le signaler. L'un de ces mutants en voie de guérison a été sacrifié 4 semaines après traitement ; une radiographie d'un de ses tibias, comparée à celle du même os chez un rat mutant non traité et chez un témoin normal, est présentée figure 1. L'autre mutant a reçu une greffe de peau histoincompatible provenant également d'un individu de souche Osborne Mendel; cette greffe cutanée n'a pas été rejetée par le mutant en voie de guérison et se trouvait encore en place plusieurs mois après. Par ailleurs, dans les mois qui ont suivi l'injection de moelle allogénique, l'animal n'a présenté aucun signe de réaction secondaire. Les conclusions qui se dégagent sont donc les suivantes : 1. L'injection de moelle osseuse ne peut avoir de valeur curative chez un mutant op/op non irradié que dans le cas où les donneurs normaux et les receveurs mutants sont histocompatibles (injection isogénique). 2. L'injection allogénique de moelle osseuse ne peut être efficace et aboutir à la guérison du syndrome d'ostéopétrose présenté par un mutant « op » qu'après suppression des défenses immunitaires de ce dernier par une irradiation préalable à dose appropriée. Parmi les perspectives que l'on peut entrevoir, celle de parvenir à isoler de la moelle osseuse ou d'un autre organe hématopoiétique une lignée cellulaire permettant
greffe cutanée n'a pas été rejetée par le mutant en voie de guérison et se trouvait encore en place plusieurs mois après. Par ailleurs, dans les mois qui ont suivi l'injection de moelle allogénique, l'animal n'a présenté aucun signe de réaction secondaire. Les conclusions qui se dégagent sont donc les suivantes : 1. L'injection de moelle osseuse ne peut avoir de valeur curative chez un mutant op/op non irradié que dans le cas où les donneurs normaux et les receveurs mutants sont histocompatibles (injection isogénique). 2. L'injection allogénique de moelle osseuse ne peut être efficace et aboutir à la guérison du syndrome d'ostéopétrose présenté par un mutant « op » qu'après suppression des défenses immunitaires de ce dernier par une irradiation préalable à dose appropriée. Parmi les perspectives que l'on peut entrevoir, celle de parvenir à isoler de la moelle osseuse ou d'un autre organe hématopoiétique une lignée cellulaire permettant d'obtenir le même résultat, est une des plus séduisantes. C'est l'objet de nos recherches actuelles. Séance du 14 mars 1977. Irradiations effectuées dans le Service et grâce à l'obligeance du Professeur G. MATHÉ à Villejuif. R. MOUTIER, H. LAMENDIN et J. BÉRENHOLC. Expér. Animale, 6, 1973. p. 87. K. TOYAMA, R. MOUTIER et H. LAMENDIN. Comptes rendus, 278, Série D, 1974, p. 115. G. MILHAUD, M. L. LABAT, B. GRAFT, M. JUSSER, N. BALMAIN, R. MOUTIER et K. TOYAMA, Comptes rendus, 280, Série D, 1975, p. 2485. Centre de Sélection et d'Elevage d'Animaux de Laboratoire, C.N.R.S., 45045 Orléans Cedex; et Institut de Recherches appliquées au domaine de la Santé (Département Biologie), Université d'Orléans, 45045 Orléans Cedex. BIOLOGIE EXPÉRIMENTALE. — Activité mitotique dans l'épithélium des glandes de l'intestin grêle du Rat après électrothermocoagulation de la région tubéro-infundibulaire de l'hypothalamus et résection simultanée de la glande pinéale. Note de Mauro Bindoni, Stefania Stanzani, Antonio Bava et Natalino Belluardo, présentée par M. Étienne Wolff. On a effectué en même temps chez le Rat la destruction du tissu de la région tubéro-infundibulaire par électrothermocoagulation et la pinéalectomie. Après cette double intervention l'activité mitotique dans l'épithélium des glandes de l'intestin grêle a montré, par rapport
R. MOUTIER et H. LAMENDIN. Comptes rendus, 278, Série D, 1974, p. 115. G. MILHAUD, M. L. LABAT, B. GRAFT, M. JUSSER, N. BALMAIN, R. MOUTIER et K. TOYAMA, Comptes rendus, 280, Série D, 1975, p. 2485. Centre de Sélection et d'Elevage d'Animaux de Laboratoire, C.N.R.S., 45045 Orléans Cedex; et Institut de Recherches appliquées au domaine de la Santé (Département Biologie), Université d'Orléans, 45045 Orléans Cedex. BIOLOGIE EXPÉRIMENTALE. — Activité mitotique dans l'épithélium des glandes de l'intestin grêle du Rat après électrothermocoagulation de la région tubéro-infundibulaire de l'hypothalamus et résection simultanée de la glande pinéale. Note de Mauro Bindoni, Stefania Stanzani, Antonio Bava et Natalino Belluardo, présentée par M. Étienne Wolff. On a effectué en même temps chez le Rat la destruction du tissu de la région tubéro-infundibulaire par électrothermocoagulation et la pinéalectomie. Après cette double intervention l'activité mitotique dans l'épithélium des glandes de l'intestin grêle a montré, par rapport aux témoins, une augmentation qui a été supérieure à la somme des effets produits par chaque intervention. Radio-frequency lesions of the tubero-infundibular region of the hypothalamus and simultaneous pinealectomy are performed in Rats. The double operation is followed by a significant increase of mitotic rate in the small intestine glandular epithelium. This increase is higher than the addition of the effects that are caused by each operation. Au cours de recherches antérieures, on a démontré que, chez le Rat, l'enlèvement chirurgical de la glande pinéale [(2), e), e)], ou la destruction par électrothermocoagulation de la région tubéro-infundibulaire de l'hypothalamus [(5), (6)] est suivie d'une augmentation significative, du point de vue statistique, de l'activité mitotique de l'épithélium des glandes de l'intestin grêle. Les présentes recherches ont été effectuées pour étudier les effets sur la multiplication cellulaire de l'exclusion simultanée des deux structures. TABLEAU 1 Volume de tissu électrothermocoagulé de la région tubéro-infundibulaire de l'hypothalamus et activité mitotique de l'épithélium des glandes de l'intestin grêle C.I. F.O. Pi. R.T.I. d.c. R.T.I. d.p. R.T.I. d.c. R.T.I. d.p. Volume de tissu détruit (mm3) de mitoses 2,10 2,06 2,68 3,00 2,62 4,33 2,91 ±0,05 ±0,05 ±0,05 ±0,13 0,06 ±0,22 ±0,17 Valeur moyenne ± S.E. Le
epithelium. This increase is higher than the addition of the effects that are caused by each operation. Au cours de recherches antérieures, on a démontré que, chez le Rat, l'enlèvement chirurgical de la glande pinéale [(2), e), e)], ou la destruction par électrothermocoagulation de la région tubéro-infundibulaire de l'hypothalamus [(5), (6)] est suivie d'une augmentation significative, du point de vue statistique, de l'activité mitotique de l'épithélium des glandes de l'intestin grêle. Les présentes recherches ont été effectuées pour étudier les effets sur la multiplication cellulaire de l'exclusion simultanée des deux structures. TABLEAU 1 Volume de tissu électrothermocoagulé de la région tubéro-infundibulaire de l'hypothalamus et activité mitotique de l'épithélium des glandes de l'intestin grêle C.I. F.O. Pi. R.T.I. d.c. R.T.I. d.p. R.T.I. d.c. R.T.I. d.p. Volume de tissu détruit (mm3) de mitoses 2,10 2,06 2,68 3,00 2,62 4,33 2,91 ±0,05 ±0,05 ±0,05 ±0,13 0,06 ±0,22 ±0,17 Valeur moyenne ± S.E. Le chiffre entre parenthèses représente le nombre d'animaux pour chaque groupe. C.I., contrôles intacts; T.O., témoins opérés; Pi., pinéalectomie; R.T.I. d.c., région tubéro-infundibulaire destruction complète; R.T.I. d.p., région tubéro-infundibulaire destruction partielle; R.T.I. d.c. + Pi., région tubéro-infundibulaire destruction complète + pinéalectomie; R.T.I. d.p. + Pi., région tubéro-infundibulaire destruction partielle + pinéalectomie. MATÉRIEL ET MÉTHODES. — On a employé 47 Rats albinos mâles, de souche Wistar, poids initial de 350-400 g. La technique que nous avons employée pour l'électrothermocoagulation des noyaux de l'hypothalamus et pour la numération des mitoses est la même que celle rapportée dans un travail précédent (6). La pinéalectomie a été effectuée en saisissant la glande par des pointes de pinces à horloger, au niveau de sa connexion vasculo-méningée avec la paroi inférieure de la confluence des sinus veineux. Nous avons employé comme contrôles soit des Rats intacts (témoins intacts), soit des Rats qui ont été soumis à une opération simulée (témoins opérés). Les Rats opérés ont été sacrifiés avec les témoins intacts 3 semaines après l'intervention. Le sacrifice a été effectué pour tous les Rats à la même heure et après 12 h de jeûne. RÉSULTATS. — L'activité mitotique dans les glandes de l'intestin grêle s'est révélée approximativement
MATÉRIEL ET MÉTHODES. — On a employé 47 Rats albinos mâles, de souche Wistar, poids initial de 350-400 g. La technique que nous avons employée pour l'électrothermocoagulation des noyaux de l'hypothalamus et pour la numération des mitoses est la même que celle rapportée dans un travail précédent (6). La pinéalectomie a été effectuée en saisissant la glande par des pointes de pinces à horloger, au niveau de sa connexion vasculo-méningée avec la paroi inférieure de la confluence des sinus veineux. Nous avons employé comme contrôles soit des Rats intacts (témoins intacts), soit des Rats qui ont été soumis à une opération simulée (témoins opérés). Les Rats opérés ont été sacrifiés avec les témoins intacts 3 semaines après l'intervention. Le sacrifice a été effectué pour tous les Rats à la même heure et après 12 h de jeûne. RÉSULTATS. — L'activité mitotique dans les glandes de l'intestin grêle s'est révélée approximativement la même dans les deux groupes de contrôle, témoins intacts et témoins opérés. En conséquence les données obtenues dans les autres groupes ont été comparées aux valeurs des témoins opérés. Chez les Rats seulement pinéalectomisés, le nombre moyen des mitoses par tubule glandulaire est de 2,68 ± 0,05 avec une augmentation de 30. 09 ", par rapport aux témoins opérés (P < 0,001 ). Chez les Rats avec une destruction totale de la région tubéro-infundibulaire, la lésion a presque constamment débordé dans une petite zone de l'hypothalamus antérieur, postérieur et latéral. Chez les Rats dans lesquels on a effectué seulement la destruction du tissu de la région tubéro-infundibulaire, le nombre moyen des mitoses par tubule a été de 3 ± 0,13, avec une augmentation de 45,63 % par rapport aux témoins opérés (P < 0,001). Chez les Rats dans lesquels la destruction complète de la région tubéro-infundibulaire a été associée à la pinealectomie, le nombre moyen des mitoses par tubule glandulaire a atteint la valeur de 4,33 ± 0,22 avec une augmentation de 110,10 % par rapport aux témoins opérés (P < 0,001). Dans les animaux avec une destruction partielle du tissu de la région tubéro-infundibulaire, l'activité mitotique a montré
augmentation de 30. 09 ", par rapport aux témoins opérés (P < 0,001 ). Chez les Rats avec une destruction totale de la région tubéro-infundibulaire, la lésion a presque constamment débordé dans une petite zone de l'hypothalamus antérieur, postérieur et latéral. Chez les Rats dans lesquels on a effectué seulement la destruction du tissu de la région tubéro-infundibulaire, le nombre moyen des mitoses par tubule a été de 3 ± 0,13, avec une augmentation de 45,63 % par rapport aux témoins opérés (P < 0,001). Chez les Rats dans lesquels la destruction complète de la région tubéro-infundibulaire a été associée à la pinealectomie, le nombre moyen des mitoses par tubule glandulaire a atteint la valeur de 4,33 ± 0,22 avec une augmentation de 110,10 % par rapport aux témoins opérés (P < 0,001). Dans les animaux avec une destruction partielle du tissu de la région tubéro-infundibulaire, l'activité mitotique a montré une augmentation moins importante, par rapport aux témoins opérés, que celle observée dans les Rats avec destruction complète. Cela s'est produit soit chez les Rats qui n'ont subi qu'une lésion dans l'hypothalamus, soit chez ceux qui ont été soumis à une double intervention. La comparaison entre la quantité du tissu détruit et l'augmentation de l'activité mitotique a donné des résultats qui n'ont pas été toujours univoques à cause de la localisation différente des lésions. En outre on peut toujours observer une bande plus ou moins étendue d'infiltration cellulaire et de prolifération névroglique autour du tissu électrothermocoagulé. Cette bande vraisemblablement augmente, de façon variable selon les cas, le volume de tissu exclu du point de vue fonctionnel. L'adénohypophyse des Rats avec des lésions étendues de la région tubéro-infundibulaire a montré des altérations cellulaires régressives et des zones de nécrose. DISCUSSION. — Les problèmes qui concernent les effets sur la multiplication cellulaire après destruction du tissu de la région tubéro-infundibulaire ont été discutés dans un travail précédent (6). Quant à l'action inhibitrice de la glande pinéale sur la multiplication cellulaire, elle ne peut être que de nature humorale. En effet, dans cette glande, il n'y a pas de neurones et par conséquent
détruit et l'augmentation de l'activité mitotique a donné des résultats qui n'ont pas été toujours univoques à cause de la localisation différente des lésions. En outre on peut toujours observer une bande plus ou moins étendue d'infiltration cellulaire et de prolifération névroglique autour du tissu électrothermocoagulé. Cette bande vraisemblablement augmente, de façon variable selon les cas, le volume de tissu exclu du point de vue fonctionnel. L'adénohypophyse des Rats avec des lésions étendues de la région tubéro-infundibulaire a montré des altérations cellulaires régressives et des zones de nécrose. DISCUSSION. — Les problèmes qui concernent les effets sur la multiplication cellulaire après destruction du tissu de la région tubéro-infundibulaire ont été discutés dans un travail précédent (6). Quant à l'action inhibitrice de la glande pinéale sur la multiplication cellulaire, elle ne peut être que de nature humorale. En effet, dans cette glande, il n'y a pas de neurones et par conséquent pas de fibres efférentes, même s'il s'agit d'une structure qui dérive du tissu nerveux. Nous rappelons en outre qu'il a été possible d'extraire de la glande pinéale de Mouton et de purifier en partie une substance capable d'inhiber complètement la multiplication in vitro de quelques souches cellulaires stabilisées en lignée continue, à la dose de 10 μg/ml de milieu de culture (7). L'influence de la glande pinéale sur la multiplication cellulaire peut s'exercer même en l'absence de l'hypophyse. Cela a été démontré par les expériences dans lesquelles chez le même animal on a effectué l'extirpation simultanée des deux glandes (4, 5). Nos recherches ont démontré que l'exclusion contemporaine de la glande pinéale et de tout le tissu de la région tubéro-infundibulaire a produit une augmentation de l'activité mitotique dans l'épithélium des glandes de l'intestin grêle. Cette augmentation a été supérieure à la somme des effets produits par chaque intervention. On a donc obtenu un renforcement de l'activité mitotique. On sait que plusieurs facteurs humoraux, hormonaux et de différente nature, exercent une action stimulatrice ou bien inhibitrice sur la multiplication cellulaire de l'épithélium de l'appareil digestif (9, 10, 11). Nos recherches ont démontré que pour la multiplication cellulaire dans les glandes
continue, à la dose de 10 μg/ml de milieu de culture (7). L'influence de la glande pinéale sur la multiplication cellulaire peut s'exercer même en l'absence de l'hypophyse. Cela a été démontré par les expériences dans lesquelles chez le même animal on a effectué l'extirpation simultanée des deux glandes (4, 5). Nos recherches ont démontré que l'exclusion contemporaine de la glande pinéale et de tout le tissu de la région tubéro-infundibulaire a produit une augmentation de l'activité mitotique dans l'épithélium des glandes de l'intestin grêle. Cette augmentation a été supérieure à la somme des effets produits par chaque intervention. On a donc obtenu un renforcement de l'activité mitotique. On sait que plusieurs facteurs humoraux, hormonaux et de différente nature, exercent une action stimulatrice ou bien inhibitrice sur la multiplication cellulaire de l'épithélium de l'appareil digestif (9, 10, 11). Nos recherches ont démontré que pour la multiplication cellulaire dans les glandes de l'intestin grêle il existe aussi un contrôle inhibiteur exercé par des structures nerveuses de l'encéphale. (*) Séance du 17 janvier 1977. (1) Le travail expérimental décrit dans cette note a été exécuté par un financement du Consiglio Nazionale delle Ricerche (Italie). (2) M. BINDONI et A. CAMBRIA, Boll. Soc. It. Biol. Sper., 42, 1966, p. 1985. (3) M. BINDONI et A. CAMBRIA, Arch. Sc. Biol., 52, 1968, p. 271. (4) M. BINDONI, Arch. Sc. Biol., 55, 1971, p. 3. (5) M. BINDONI, A. BAVA et S. STANZANI, I.R.C.S. Internat. Res. Commun. System., 1, 1973, p. 16. (6) M. BINDONI, A. BAVA, S. STANZANI, C. CAMPIONE et I. NICOTRA, 284, série D, 1977, p. 1565. (7) M. BINDONI, M. JUTISZ et G. RIBOT, Biochim. et Biophys. Acta, 437, 1976, p. 577. (8) M. BINDONI et S. STANZANI, Boll. Soc. It. Biol. Sper., 47, 1971, p. 583. (9) A. R. IMONDI, M. E. BALIS et M. LIPKIN, Exp. Molecular Pathol., 9, 1968, p. 339. (11) M. LIPKIN, Physiol. Rev., 53, 1973, p. 891. (11) G. BRUGAL et J. PELMONT, Cell Tissue Kinet., 8, 1975, p. 171. Istituto di Fisiologia umana dell'Università di Catania Viale Andrea Doria, 6, 95125 Catania, Italia. En
It. Biol. Sper., 42, 1966, p. 1985. (3) M. BINDONI et A. CAMBRIA, Arch. Sc. Biol., 52, 1968, p. 271. (4) M. BINDONI, Arch. Sc. Biol., 55, 1971, p. 3. (5) M. BINDONI, A. BAVA et S. STANZANI, I.R.C.S. Internat. Res. Commun. System., 1, 1973, p. 16. (6) M. BINDONI, A. BAVA, S. STANZANI, C. CAMPIONE et I. NICOTRA, 284, série D, 1977, p. 1565. (7) M. BINDONI, M. JUTISZ et G. RIBOT, Biochim. et Biophys. Acta, 437, 1976, p. 577. (8) M. BINDONI et S. STANZANI, Boll. Soc. It. Biol. Sper., 47, 1971, p. 583. (9) A. R. IMONDI, M. E. BALIS et M. LIPKIN, Exp. Molecular Pathol., 9, 1968, p. 339. (11) M. LIPKIN, Physiol. Rev., 53, 1973, p. 891. (11) G. BRUGAL et J. PELMONT, Cell Tissue Kinet., 8, 1975, p. 171. Istituto di Fisiologia umana dell'Università di Catania Viale Andrea Doria, 6, 95125 Catania, Italia. En décembre 1975, des blocs granitiques ont été prélevés lors de dragages effectués à 4 000 mètres de fond, par le N.O. « LE SUROÏT » au pied de la marge continentale armoricaine (48°N-12°W) C). Certains de ces fragments granitiques sont recouverts par des croûtes ferromanganésifères ayant jusqu'à 12 centimètres d'épaisseur. Nous présentons ici les premiers résultats de l'étude de l'un de ces revêtements. 1. DESCRIPTION DU FRAGMENT DE GRANITE ENCROÛTÉ CH 67-DR 10. L'échantillon peut être subdivisé en trois zones successives (pl. 1, fig. 1) : — une partie interne, la roche, granodiorite altérée qui constitue le « nucleus », — une couche ferromanganésifère massive (pl. I, fig. 2). — une zone externe formée par l'alternance irrégulière de lits de foraminifères et de lits ferromanganésifères (pl. I, fig. 1 et 3). Les limites entre ces différents niveaux sont bien tranchées. II. ÉTUDE DÉTAILLÉE DES DIFFÉRENTES ZONES DE L'ENCROÛTEMENT. La roche résulte de l'altération d'une granodiorite hercynienne (détermination en cours). La couche ferromanganésifère massive, épaisse d'environ 15 millimètres, est constituée, d'après l'observation en microscopie optique, par une masse homogène et isotrope (pl. I, fig. 1 et 2). Seule la partie la plus externe permet de distinguer des formes columnaires (pl. 1,
Nous présentons ici les premiers résultats de l'étude de l'un de ces revêtements. 1. DESCRIPTION DU FRAGMENT DE GRANITE ENCROÛTÉ CH 67-DR 10. L'échantillon peut être subdivisé en trois zones successives (pl. 1, fig. 1) : — une partie interne, la roche, granodiorite altérée qui constitue le « nucleus », — une couche ferromanganésifère massive (pl. I, fig. 2). — une zone externe formée par l'alternance irrégulière de lits de foraminifères et de lits ferromanganésifères (pl. I, fig. 1 et 3). Les limites entre ces différents niveaux sont bien tranchées. II. ÉTUDE DÉTAILLÉE DES DIFFÉRENTES ZONES DE L'ENCROÛTEMENT. La roche résulte de l'altération d'une granodiorite hercynienne (détermination en cours). La couche ferromanganésifère massive, épaisse d'environ 15 millimètres, est constituée, d'après l'observation en microscopie optique, par une masse homogène et isotrope (pl. I, fig. 1 et 2). Seule la partie la plus externe permet de distinguer des formes columnaires (pl. 1, fig. 2). Cependant, au microscope électronique à balayage (pl. 1, fig. 4) il apparaît que l'ensemble de cette couche est faite de la superposition et de la juxtaposition de structures constituées chacune par l'empilement de fines lamelles. Ces structures, en « bouffées de pipes », appelées également « colloforme » ou en « choux-fleurs » par divers auteurs [(3) à (5)] sont interprétées par Monty (6) comme des structures stromatolithiques. Disposées radialement autour du « nucleus », elles se reliées sous forme de « bouffées » étroitement jointives. Quelques fragments, d'origine détritique ou biologique, sont décelables dans la partie supérieure de l'encroûtement. Le diamètre maximal de la « bouffée » ne dépasse jamais le demi-millimètre et sa convexité, régulière et subsphérique, est dirigée de façon centrifuge (pl. 1, fig. 4 et 5). L'épaisseur de chaque lamine varie entre 2 et 5 µm sur la périphérie et 20 à 40 µm sur le sommet de la convexité. Le passage entre la dernière série de « bouffées » de l'empilement ferromanganésifère et la première couche de foraminifères est brutal. La géométrie de ce contact indique que les premiers foraminifères s'installent entre les « bouffées », ce qui traduit la colonisation rapide d'une