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agite prudemment pour obtenir un mélange homogène; s'il s'agit de trypanosomes ou de spirochètes, une coloration de 3 à 5 minutes suffit. On termine par un lavage à l'eau courante, on sèche et on examine à l'immersion. RINGENBACH, L. MANCEAUX. Procédé de coloration rapide par la teinture de Giemsa. Bull. Soc. Path. exotique, t. IV, 1911, p. 220. Le procédé de coloration indiqué par l'auteur se rapproche de celui décrit par Giemsa (v. l'analyse ci-dessus). Les préparations, après fixation par l'alcool absolu, sont recouvertes d'une solution colorante préparée ainsi : on verse dans une éprouvette graduée la quantité d'eau distillée nécessaire pour recouvrir les préparations, on ajoute par centimètre cube d'eau distillée une goutte d'un mélange à parties égales d'alcool méthylique et de glycérine pure, puis une goutte du colorant de Giemsa, et on mélange le tout; on laisse colorer 50 minutes environ, on termine par un lavage par jet d'eau distillée et on sèche. Si dans la préparation de la solution colorante on ajoute par centimètre cube d'eau distillée 2 gouttes du mélange alcool méthylique-glycérine, puis 2 gouttes du colorant de Giemsa, la coloration se fait en 25 minutes; en mettant 3 gouttes par centimètre cube, on peut colorer en 12 minutes, etc Mais les colorations lentes, moins brutales, sont meilleures. RINGENBACH. PAUL G. WESTON et JOHN A. KOLMER. — Guinea-pig test of the virulence of diphtheria bacilli (Le cobaye comme animal d'épreuve de la virulence de bacilles diphtériques). Journ. clin. disp., t. VIII, 12 avril 1911, p. 295. Technique suivie à l'hôpital des maladies contagieuses de Philadelphie, dans ses grands traits celle de Rosenau pour la détermination de l'unité antitoxique immunisante légale. Êtant donné un échantillon de bacille rappelant la morphologie du bacille diphtérique, faire un Gram, et si positif, ensemencement sur boîtes de Petri à la gélose-sérum. Une fois obtenue la culture pure, l'ensemencer en bouillon à 1 o/oo de glucose. Cultiver pendant 4 heures. 2. On ne filtre pas et on éprouve la valeur toxique de la culture sur des cobayes de 250 gr., à raison de 1/2 cc. par hectogramme d'animal. Inoculation pratiquée suivant les
en 12 minutes, etc Mais les colorations lentes, moins brutales, sont meilleures. RINGENBACH. PAUL G. WESTON et JOHN A. KOLMER. — Guinea-pig test of the virulence of diphtheria bacilli (Le cobaye comme animal d'épreuve de la virulence de bacilles diphtériques). Journ. clin. disp., t. VIII, 12 avril 1911, p. 295. Technique suivie à l'hôpital des maladies contagieuses de Philadelphie, dans ses grands traits celle de Rosenau pour la détermination de l'unité antitoxique immunisante légale. Êtant donné un échantillon de bacille rappelant la morphologie du bacille diphtérique, faire un Gram, et si positif, ensemencement sur boîtes de Petri à la gélose-sérum. Une fois obtenue la culture pure, l'ensemencer en bouillon à 1 o/oo de glucose. Cultiver pendant 4 heures. 2. On ne filtre pas et on éprouve la valeur toxique de la culture sur des cobayes de 250 gr., à raison de 1/2 cc. par hectogramme d'animal. Inoculation pratiquée suivant les règles minutieuses données par Rosenau. 3. Animaux tenus 5 jours en observation, les premiers signes de toxémie se montrant à la 36e heure. Toute culture, après l'injection de laquelle le cobaye est bien portant aux quatrième et sixième jours, est déclarée virulente. Mais on sait que des paralysies tardives, attribuées aux toxines, peuvent apparaître vers la seconde ou la troisième semaine, et les auteurs ont observé des accidents paralytiques à la fin du second ou du premier septennaire chez des cobayes qui s'étaient remis de leur toxémie des premiers jours. 4. Quand les cobayes succombent dans les six jours après l'injection, l'autopsie peut révéler la présence de bacilles ; pour avoir la certitude qu'ils sont diphtériques, on inocule un deuxième cobaye avec la même dose d'une subculture, mais additionnée de 250 unités antitoxiques, le mélange ayant été exposé une heure à la température de la chambre ; de cette façon l'excès d'antitoxine neutralisera le poison développé dans l'organisme par le bacille. Si ce deuxième cobaye survit à l'injection, nul doute que le premier aura succombé à l'action de bacilles diphtériques virulents. S'il succombe, les germes isolés du malade n'étaient pas de la diphtérie. A. MARIE. V. GRYSEZ et P. WAGON
aux toxines, peuvent apparaître vers la seconde ou la troisième semaine, et les auteurs ont observé des accidents paralytiques à la fin du second ou du premier septennaire chez des cobayes qui s'étaient remis de leur toxémie des premiers jours. 4. Quand les cobayes succombent dans les six jours après l'injection, l'autopsie peut révéler la présence de bacilles ; pour avoir la certitude qu'ils sont diphtériques, on inocule un deuxième cobaye avec la même dose d'une subculture, mais additionnée de 250 unités antitoxiques, le mélange ayant été exposé une heure à la température de la chambre ; de cette façon l'excès d'antitoxine neutralisera le poison développé dans l'organisme par le bacille. Si ce deuxième cobaye survit à l'injection, nul doute que le premier aura succombé à l'action de bacilles diphtériques virulents. S'il succombe, les germes isolés du malade n'étaient pas de la diphtérie. A. MARIE. V. GRYSEZ et P. WAGON (Institut Pasteur de Lille). — Diagnostic rétrospectif de la peste effectué sur les organes putréfiés par la méthode de déviation du complément. C. R. Soc. Biologie, t. LXX, 29 avril 1911, p. 647. Les auteurs montrent qu'il est possible par la méthode de déviation du complément de reconnaître pesteux un rat dont les organes sont déjà putréfiés. Ils ont observé la réaction de fixation avec du foie conservé dans l'eau salée à 8,5 p. 1000 depuis plus d'un mois, et conservé dans la glycérine pure depuis 18 jours. M. LEGER. H. CONRADI. — Zur bakteriologischen Typhusdiagnose (Diagnostic bactériologique de la f. typhoïde). Centralbl. f. Bakter., /., Origin., t. LVI ; 12 nov. 1910 ; p. 394. Le auteur prouve, avec des citations bibliographiques à l'appui, que l'on attribue à tort à Kayser le procédé d'ensemencement du sang dans la bile, alors que ce procédé avait été déjà décrit par lui en 1904, puis, sous une forme modifiée, au commencement de 1906. B. Morphologie et physiologie des microbes. G. BERTRAND et M. JAVILLIER. — Influence combinée du zinc et du manganèse sur le développement de l'Aspergillus niger. C. R. Acad. Sciences, t. CLII, p. 900, mars 1911. L'addition de petites quantités
rat dont les organes sont déjà putréfiés. Ils ont observé la réaction de fixation avec du foie conservé dans l'eau salée à 8,5 p. 1000 depuis plus d'un mois, et conservé dans la glycérine pure depuis 18 jours. M. LEGER. H. CONRADI. — Zur bakteriologischen Typhusdiagnose (Diagnostic bactériologique de la f. typhoïde). Centralbl. f. Bakter., /., Origin., t. LVI ; 12 nov. 1910 ; p. 394. Le auteur prouve, avec des citations bibliographiques à l'appui, que l'on attribue à tort à Kayser le procédé d'ensemencement du sang dans la bile, alors que ce procédé avait été déjà décrit par lui en 1904, puis, sous une forme modifiée, au commencement de 1906. B. Morphologie et physiologie des microbes. G. BERTRAND et M. JAVILLIER. — Influence combinée du zinc et du manganèse sur le développement de l'Aspergillus niger. C. R. Acad. Sciences, t. CLII, p. 900, mars 1911. L'addition de petites quantités de Zn et de Mn au liquide de culture de l'Aspergillus niger permettent d'obtenir des récoltes supérieures en poids à celles que fournit le même milieu dépourvu de ces éléments ; ces métaux paraissant intervenir dans le fonctionnement chimique de la cellule comme réactifs catalytiques, il était à supposer que Zn et Mn, introduits dans les liquides nutritifs, non plus séparément, mais ensemble, permettraient d'obtenir des récoltes encore plus abondantes qu'avec chacun d'eux. Les expériences des auteurs confirment pleinement cette hypothèse. Les poids de récolte sont toujours plus grands avec addition simultanée des deux métaux. Si le poids de récolte des témoins est représenté par 100, on obtient au plus avec Zn 240 et avec Mn 170 ; avec les deux métaux ensemble la récolte s'élève jusqu'à 284. L'influence combinée se fait sentir avantageusement non seulement aux doses que les expériences antérieures (voir ce Bull., t. VI, p. 164, 1908, et t. IX, 1911) ont fait reconnaître comme les plus favorables pour chaque métal, mais encore à toutes les doses inférieures à ces doses optimales. H. AGULHOX, G. BERTRAND et M. JAVILLIER. — Influence du zinc et du manganèse sur la composition minérale de l'Aspergillus niger. C. R. Acad. Sciences,
Zn et Mn, introduits dans les liquides nutritifs, non plus séparément, mais ensemble, permettraient d'obtenir des récoltes encore plus abondantes qu'avec chacun d'eux. Les expériences des auteurs confirment pleinement cette hypothèse. Les poids de récolte sont toujours plus grands avec addition simultanée des deux métaux. Si le poids de récolte des témoins est représenté par 100, on obtient au plus avec Zn 240 et avec Mn 170 ; avec les deux métaux ensemble la récolte s'élève jusqu'à 284. L'influence combinée se fait sentir avantageusement non seulement aux doses que les expériences antérieures (voir ce Bull., t. VI, p. 164, 1908, et t. IX, 1911) ont fait reconnaître comme les plus favorables pour chaque métal, mais encore à toutes les doses inférieures à ces doses optimales. H. AGULHOX, G. BERTRAND et M. JAVILLIER. — Influence du zinc et du manganèse sur la composition minérale de l'Aspergillus niger. C. R. Acad. Sciences, t. CLII, mai 1911, pp 1337-1340, Les auteurs, en étudiant la fixation des deux métaux, trouvent que le manganèse s'accumule en proportion plus élevée lorsqu'il est associé au zinc que lorsqu'il est isolé, au moins lorsqu'il s'agit de doses assez petites. On sait que le zinc seul ou le manganèse seul suffisent à accroître la minéralisation totale de la plante ; la quantité de cendres est encore augmentée lorsqu'on fait intervenir à la fois les deux éléments. En dehors de leur intérêt pratique, ces expériences montrent que le zinc et le manganèse ne sont pas de simples excitants énergétiques du protoplasma ; ils ne peuvent être que des éléments actifs, des intermédiaires indispensables aux transformations chimiques qui s'accomplissent dans la cellule. P. THOMAS. ALFRED GUILLEMARD. — Nouvelle conception de l'anaérobiose. Culture des bactéries anaérobies à l'air libre en présence du fer. C. R. Soc. Biol., t. LXX, 1911, p. 685. D'après ses recherches antérieures, l'auteur pense que l'oxygène libre est toxique pour les microbes anaérobies, parce que ceux-ci l'absorbent fortement, d'où résulte une perturbation des échanges osmotiques. On peut cultiver les microbes anaérobies (b. du tétanos, vibrion septique, etc.) dans des tubes simplement bouchés à l'ouate et renfermant 8 à
seul suffisent à accroître la minéralisation totale de la plante ; la quantité de cendres est encore augmentée lorsqu'on fait intervenir à la fois les deux éléments. En dehors de leur intérêt pratique, ces expériences montrent que le zinc et le manganèse ne sont pas de simples excitants énergétiques du protoplasma ; ils ne peuvent être que des éléments actifs, des intermédiaires indispensables aux transformations chimiques qui s'accomplissent dans la cellule. P. THOMAS. ALFRED GUILLEMARD. — Nouvelle conception de l'anaérobiose. Culture des bactéries anaérobies à l'air libre en présence du fer. C. R. Soc. Biol., t. LXX, 1911, p. 685. D'après ses recherches antérieures, l'auteur pense que l'oxygène libre est toxique pour les microbes anaérobies, parce que ceux-ci l'absorbent fortement, d'où résulte une perturbation des échanges osmotiques. On peut cultiver les microbes anaérobies (b. du tétanos, vibrion septique, etc.) dans des tubes simplement bouchés à l'ouate et renfermant 8 à 10 cc. de milieu, en ajoutant aux milieux de culture une substance capable de se combiner avec l'oxygène, en formant un ion indifférent pour la membrane cellulaire. Cette substance a été le citrate ferreux. Formule du milieu : eau 1.000 cc., peptone Chapoteaut 20 gr., glucose 10 gr., citrate d'ammonium 6 gr., sulfate ferreux cristallisé 3 gr., on peut d'ailleurs obtenir les mêmes résultats avec 10 fois moins de sulfate ferreux. Il faut que le fer soit uni à une substance organique (acide citrique) ; il est nécessaire en outre d'employer la solution nutritive fraîchement préparée. E. SACQUÉPÉE. J. BIELECKI. — Sur le rôle des matières minérales dans la formation de la protéase charbonneuse. C. R. Acad. Sciences, t. CLII, juin 1911, pp. 1875-1877. La bactéridie charbonneuse se développe dans des solutions d'asparagine dans l'eau pure, à condition de faire un ensemencement suffisamment large; une goutte de culture donne un développement dans 10 cc. de solution d'asparagine, mais n'en donne pas si on ensemence dans 100 cc. La quantité minimale de sels qu'on apporte avec la semence est donc nécessaire. En ajoutant aux cultures en asparagine différents sels minéraux, l'auteur a vu que les sels de calcium augmentent beaucoup le
6 gr., sulfate ferreux cristallisé 3 gr., on peut d'ailleurs obtenir les mêmes résultats avec 10 fois moins de sulfate ferreux. Il faut que le fer soit uni à une substance organique (acide citrique) ; il est nécessaire en outre d'employer la solution nutritive fraîchement préparée. E. SACQUÉPÉE. J. BIELECKI. — Sur le rôle des matières minérales dans la formation de la protéase charbonneuse. C. R. Acad. Sciences, t. CLII, juin 1911, pp. 1875-1877. La bactéridie charbonneuse se développe dans des solutions d'asparagine dans l'eau pure, à condition de faire un ensemencement suffisamment large; une goutte de culture donne un développement dans 10 cc. de solution d'asparagine, mais n'en donne pas si on ensemence dans 100 cc. La quantité minimale de sels qu'on apporte avec la semence est donc nécessaire. En ajoutant aux cultures en asparagine différents sels minéraux, l'auteur a vu que les sels de calcium augmentent beaucoup le pouvoir de liquéfier la gélatine, les sels de potassium, sodium, ammonium et magnésium diminuant un peu ce pouvoir. Le phénomène est inverse si on étudie l'action digestive de la bactéridie sur une émulsion d'albumine. C'est sur la formation de la protéase que se produit l'action des sels. P. THOMAS. L. MERCIER (Nancy). — Bactéries des Invertébrés. II. La « glande à concrétions » de Cyclostoma elegans Drap. Note préléminaire. Bull. Soc. France-Belgique, t. XLIV, 1911, pp. 15-25, fig. in texte. La « glande à concrétions » des Cyclostomes (petits mollusques terrestres) est constituée par une masse de tissu conjonctif, renfermant de nombreuses concrétions qui flottent au milieu d'une bouillie de bacilles. Ceux-ci sont immobiles. Ils ont une longueur de 3 à 4 µ, et sont souvent arqués. Ils ne prennent pas le Gram et ne sont pas acido-résistants. Leur présence est constante chez Cyclostoma elegans de France et chez C. costulatum d'Algérie. Les concrétions sont sphériques, de 0 mm. 2 à 0 mm. 5 de diamètre ; elles ont une texture en couches concentriques. L'analyse de ces concrétions montre qu'elles sont constituées par de l'acide urique pour la plus grande part, associée à très peu d'hypoxanthine et un peu plus
MERCIER (Nancy). — Bactéries des Invertébrés. II. La « glande à concrétions » de Cyclostoma elegans Drap. Note préléminaire. Bull. Soc. France-Belgique, t. XLIV, 1911, pp. 15-25, fig. in texte. La « glande à concrétions » des Cyclostomes (petits mollusques terrestres) est constituée par une masse de tissu conjonctif, renfermant de nombreuses concrétions qui flottent au milieu d'une bouillie de bacilles. Ceux-ci sont immobiles. Ils ont une longueur de 3 à 4 µ, et sont souvent arqués. Ils ne prennent pas le Gram et ne sont pas acido-résistants. Leur présence est constante chez Cyclostoma elegans de France et chez C. costulatum d'Algérie. Les concrétions sont sphériques, de 0 mm. 2 à 0 mm. 5 de diamètre ; elles ont une texture en couches concentriques. L'analyse de ces concrétions montre qu'elles sont constituées par de l'acide urique pour la plus grande part, associée à très peu d'hypoxanthine et un peu plus de xanthine. Les concrétions se développent au sein d'une vacuole creusée dans le cytoplasme des jeunes cellules conjonctives, tandis que les bacilles envahissent le cytoplasme lui-même et s'y multiplient, ne respectant que le noyau, de sorte que dans le tissu âgé les concrétions semblent contenues dans une purée bacillaire. Ce tissu est suivant les individus et les époques de l'année plus ou moins attaqué par les amibocytes qui englobent les bacilles et morcellent les concrétions. E. CHATTON. Biologie générale. J. LOEB et H. WASTENEYS. — Weitere Bemerkungen über den Zusammenhang zwischen Oxydationsgroße und Cytolyse der Seeigeleier (Nouvelles remarques sur la relation entre l'importance des oxydations et la cytolyse des œufs d'oursin), Biochem. Zeitsch., t. XXXI, 23 févr. 1911, p. 168. L'a montré (v. ce Bull., t. IX, p. 347) que la consommation d'O n'est pas augmentée pendant la cytolyse des œufs d'Arbacia. C'est à quoi que Warburg lui reproche d'employer des œufs qui ne sont cytolyés que dans la proportion de 20 %, pour lesquels par suite la consommation d'O ne pourrait être accrue. En effet, la cytolyse de des œufs est lente, et n'atteint que 20 % au bout d'une heure ; mais elle est complète après quelques heures.
tissu est suivant les individus et les époques de l'année plus ou moins attaqué par les amibocytes qui englobent les bacilles et morcellent les concrétions. E. CHATTON. Biologie générale. J. LOEB et H. WASTENEYS. — Weitere Bemerkungen über den Zusammenhang zwischen Oxydationsgroße und Cytolyse der Seeigeleier (Nouvelles remarques sur la relation entre l'importance des oxydations et la cytolyse des œufs d'oursin), Biochem. Zeitsch., t. XXXI, 23 févr. 1911, p. 168. L'a montré (v. ce Bull., t. IX, p. 347) que la consommation d'O n'est pas augmentée pendant la cytolyse des œufs d'Arbacia. C'est à quoi que Warburg lui reproche d'employer des œufs qui ne sont cytolyés que dans la proportion de 20 %, pour lesquels par suite la consommation d'O ne pourrait être accrue. En effet, la cytolyse de des œufs est lente, et n'atteint que 20 % au bout d'une heure ; mais elle est complète après quelques heures. G. ABT. J. LOEB (avec la collab. de H. WASTENEYS). — Die Entgiftung von Kaliumsalzen durch Natriumsalze (La neutralisation de la toxicité des sels de potassium par les sels de sodium). Biochem. Zeitsch., t. XXXI, 22 mars 1911, pp. 450-471. L'eau de mer contient une certaine proportion de NaCl, KCl, CaCl2, MgCl2 ; si l'on met un poisson, qui a la propriété de ne pas être affecté par les variations de pression osmotique du milieu, le Fundulus, dans des solutions contenant l'un de ces sels à la même concentration que dans l'eau de mer, le poisson meurt en quelques jours dans NaCl, dans KC1 il survit dans CaCl2 et MgCl2 ; les sels de potassium et de sodium se neutralisent donc réciproquement dans l'eau de mer. Dans le sérum, ils existent à peu près dans le même rapport de concentration, et le même fait se produit. La neutralisation a lieu pour un rapport fixe entre les deux sels, que l'on peut appeler le coefficient de neutralisation. Pour KCl neutralisé par NaCl, ce coefficient, à peu près constant pour les diverses concentrations en KCl, est k = 0,5. Si l'on augmente au-delà la quantité de KCl ; CNaCl 17 le poisson
CaCl2, MgCl2 ; si l'on met un poisson, qui a la propriété de ne pas être affecté par les variations de pression osmotique du milieu, le Fundulus, dans des solutions contenant l'un de ces sels à la même concentration que dans l'eau de mer, le poisson meurt en quelques jours dans NaCl, dans KC1 il survit dans CaCl2 et MgCl2 ; les sels de potassium et de sodium se neutralisent donc réciproquement dans l'eau de mer. Dans le sérum, ils existent à peu près dans le même rapport de concentration, et le même fait se produit. La neutralisation a lieu pour un rapport fixe entre les deux sels, que l'on peut appeler le coefficient de neutralisation. Pour KCl neutralisé par NaCl, ce coefficient, à peu près constant pour les diverses concentrations en KCl, est k = 0,5. Si l'on augmente au-delà la quantité de KCl ; CNaCl 17 le poisson est tué par le potassium. Il y a d'autre part une concentration en potassium pour laquelle aucune dose de NaCl ne supprime l'action toxique; lorsqu'on approche de cette limite, le coefficient de neutralisation s'abaisse à 1/16 et 1/15. La neutralisation est produite par l'ion de même charge. Car si l'on remplace NaCl par un sel divalent à cation commun, Na2SO4 il faut pour neutraliser la même quantité de K juste la moitié moins de molécules de ce sel. Si c'est K2SO4 qu'on remplace par K2SO4 la toxicité est double pour le même nombre de molécules de sel. Il est vraisemblable que K et Na entrent en relation avec un anion appartenant au poisson, et existant en quantité limitée. Si plus de 1/17 de cet anion se combine au potassium, l'intoxication se produit. La présence de NaCl en proportion convenable limite donc la fixation de KCl à la dose inoffensive. G. ABT. J. LOEB. — Die Erhöhung der Giftwirkung von KCl durch niedrige Konzentration von NaCl (L'augmentation de la toxicité de KCl par une faible concentration en NaCl). Biochem. Zeitsch., t. XXXII, 21 avril 1911, pp. 155-163. Alors que le chlorure de sodium neutralise la toxicité du chlorure de potassium pour
remplace NaCl par un sel divalent à cation commun, Na2SO4 il faut pour neutraliser la même quantité de K juste la moitié moins de molécules de ce sel. Si c'est K2SO4 qu'on remplace par K2SO4 la toxicité est double pour le même nombre de molécules de sel. Il est vraisemblable que K et Na entrent en relation avec un anion appartenant au poisson, et existant en quantité limitée. Si plus de 1/17 de cet anion se combine au potassium, l'intoxication se produit. La présence de NaCl en proportion convenable limite donc la fixation de KCl à la dose inoffensive. G. ABT. J. LOEB. — Die Erhöhung der Giftwirkung von KCl durch niedrige Konzentration von NaCl (L'augmentation de la toxicité de KCl par une faible concentration en NaCl). Biochem. Zeitsch., t. XXXII, 21 avril 1911, pp. 155-163. Alors que le chlorure de sodium neutralise la toxicité du chlorure de potassium pour le Fundulus lorsque la proportion des deux sels est d'environ 17 mol. de NaCl pour 1 de KCl, il l'exalte au contraire lorsque la proportion devient inférieure à 8 à 10 mol. de NaCl pour 1 de KCl. Le fait s'observe pour des doses très variables de KCl ; la toxicité des solutions pures de NaCl de même concentration est d'ailleurs nulle. L'emploi comparé de Na2SO4 au lieu de NaCl montre que l'action sensibilisante est due aux ions Na. G. ABT. J. LUEB (avec la collaboration de H. WASTENEYS). Sur la neutralisation des sels de potassium par ceux de calcium et des autres métaux alcalinotéréux. Biochemische Zeitschrift, t. XXXII, 8 mai 1911, pp. 308-322. Le chlorure de calcium est très peu toxique pour le Fondulius, qui vit sans inconvénients dans des solutions pures de ce sel assez concentrées (N/20). Comme NaCl, CaCl2 a la propriété de neutraliser la toxicité très élevée de KCl, et il agit déjà à doses beaucoup plus faibles. Tandis que pour NaCl, il faut 17 molécules pour en neutraliser une de KCl, pour CaCl2, il suffit de 1/30 de molécule. Dans certains cas, la limite est beaucoup plus faible, jusqu'à 1/300. Les écarts entre les doses