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à l’infection. Par ailleurs, le procédé présente l’inconvénient de ne point égaliser les chances de contamination, alors même qu’on cherche, par un roulement établi dans la place occupée par les animaux, à rendre comparables les conditions du contact dont la valeur se trouve, par surcroît, amoindrie de ce fait que les animaux malades utilisés à titre de contagifères ne sont point comparables quant à leur pouvoir infectant. Enfin, les ressources dont nous disposions ne permettaient point d’entretenir ainsi, durant une année au moins, vingt animaux vaccinés, un nombre égal de témoins et autant de sujets contagifères. L’épreuve selon ce mode fut donc limitée à deux animaux seulement. Il convenait alors de demander aux méthodes du contrôle expérimental ce que nous ne pouvions attendre de l’infection naturelle. Conformément aux désirs du professeur Behring, sept vaccinés et sept témoins de races correspondantes furent éprouvés par l’inoculation sous-cutanée de virus tuberculeux emprunté à diverses lésions bovines. Six vaccinés et six témoins appropriés furent soumis à une inoculation dans la veine jugulaire d’une culture pure d’un bacille bovin isolé, il y a dix ans, par Nocard, du lait d’une vache affectée de tuberculose mammaire et dont la virulence n’a jamais varié depuis cette époque. Deux milligrammes de ces bacilles, prélevés sur une culture de six semaines, suffisent à tuer en trente jours un veau de deux mois. Ce virus d’épreuve fut utilisé chez nos animaux à la dose de 4 milligrammes et demi par tête. Comme virus d’épreuve pour l’inoculation sous-cutanée, on utilisa un mélange de 1/2 centigrammes de ces mêmes bacilles et de 1 gramme de chacun des cinq ganglions tuberculeux recueillis sur cinq bovins différents, à la Villette, par notre distingué collègue, le Dr Moreau. Le tout fut soigneusement broyé et émulsionné dans 1 cc de sérum physiologique et l’inoculation fut pratiquée à raison de 4 cc de l’émulsion par tête sur la face droite de l’encolure. a) Epreuve par cohabitation. — Du 16 juin 1905 au 1er décembre de la même année, soit durant 165 jours, les deux vaccinés 30 et 31 (bretons 1 et 2) et les deux témoins bretons
Deux milligrammes de ces bacilles, prélevés sur une culture de six semaines, suffisent à tuer en trente jours un veau de deux mois. Ce virus d’épreuve fut utilisé chez nos animaux à la dose de 4 milligrammes et demi par tête. Comme virus d’épreuve pour l’inoculation sous-cutanée, on utilisa un mélange de 1/2 centigrammes de ces mêmes bacilles et de 1 gramme de chacun des cinq ganglions tuberculeux recueillis sur cinq bovins différents, à la Villette, par notre distingué collègue, le Dr Moreau. Le tout fut soigneusement broyé et émulsionné dans 1 cc de sérum physiologique et l’inoculation fut pratiquée à raison de 4 cc de l’émulsion par tête sur la face droite de l’encolure. a) Epreuve par cohabitation. — Du 16 juin 1905 au 1er décembre de la même année, soit durant 165 jours, les deux vaccinés 30 et 31 (bretons 1 et 2) et les deux témoins bretons 32 et 33, reconnus indemnes à l’épreuve de la tuberculine, sont placés dans une écurie de très petites dimensions au contact de divers bovins affectés de tuberculose, savoir : 1° du 16 au 25 juin, une vache achetée au marché de la Villette qui meurt à cette dernière date et présente à l’autopsie des lésions massives de tuberculose pulmonaire et pharyngée ouverte; 2° du 3 au 22 juillet, deux des témoins éprouvés par voie veineuse, qui toussent fréquemment, subissent un amaigrissement rapide et succombent le 22 juillet, porteurs de lésions considérables du poumon; 3° du 17 juillet au 2 décembre, un taureau offert par notre dévoué président, M. Lazardeux, en très mauvais état, mais qui ne montra à l’autopsie que des lésions closes du parenchyme pulmonaire; 4° du 27 octobre au 1er décembre, une vache flamande qui est trouvée à l’autopsie, le 2 décembre, porteur de multiples lésions caverneuses spécifiques des deux poumons et de lésions intestinales graves. Un roulement constant a été chaque jour établi, dans les places attribuées aux bêtes de contamination, aux vaccinés et témoins, dans le but d’égaliser pour chacun de ces sujets les chances d’infection. Le 29 novembre, vaccinés et témoins sont soumis à l’épreuve
présente à l’autopsie des lésions massives de tuberculose pulmonaire et pharyngée ouverte; 2° du 3 au 22 juillet, deux des témoins éprouvés par voie veineuse, qui toussent fréquemment, subissent un amaigrissement rapide et succombent le 22 juillet, porteurs de lésions considérables du poumon; 3° du 17 juillet au 2 décembre, un taureau offert par notre dévoué président, M. Lazardeux, en très mauvais état, mais qui ne montra à l’autopsie que des lésions closes du parenchyme pulmonaire; 4° du 27 octobre au 1er décembre, une vache flamande qui est trouvée à l’autopsie, le 2 décembre, porteur de multiples lésions caverneuses spécifiques des deux poumons et de lésions intestinales graves. Un roulement constant a été chaque jour établi, dans les places attribuées aux bêtes de contamination, aux vaccinés et témoins, dans le but d’égaliser pour chacun de ces sujets les chances d’infection. Le 29 novembre, vaccinés et témoins sont soumis à l’épreuve de la tuberculine. Les témoins donnent une réaction typique, tandis que les vaccinés restent indemnes. Les vaccinés envoyés à Alfort sont placés à nouveau en contact intime avec des tuberculeux. Les témoins sacrifiés sont porteurs de lésions étendues; chez tous deux, l’infection a été réalisée par les voies digestives; elle remonte à plusieurs semaines au moins et ne saurait être due à une contamination par le sujet dont il a été parlé plus haut, en 4°; elle résulte donc du contact avec le premier animal contaminant et un contact de dix jours a suffi à l’assurer. b) Epreuve par inoculation sous-cutanée d’un mélange de divers virus d’origine bovine. — Le 15 juin 1905, on inocule sous la peau, du côté droit de l’encolure, à chacun des 14 animaux indiqués ci-dessous, 4 cc de l’émulsion virulente définie précédemment. On relève, du dixième jour jusqu’au trentième, les températures des animaux éprouvés. Celles-ci sont toujours normales chez tous les animaux vaccinés; nombre de témoins manifestent, au contraire, de fréquentes poussées thermiques. Dès le cinquième jour après l’inoculation, des accidents locaux évoluent chez les vaccinés et les témoins, mais dès le huitième, tandis que la réaction locale des vaccinés se borne à l’apparition d’une
remonte à plusieurs semaines au moins et ne saurait être due à une contamination par le sujet dont il a été parlé plus haut, en 4°; elle résulte donc du contact avec le premier animal contaminant et un contact de dix jours a suffi à l’assurer. b) Epreuve par inoculation sous-cutanée d’un mélange de divers virus d’origine bovine. — Le 15 juin 1905, on inocule sous la peau, du côté droit de l’encolure, à chacun des 14 animaux indiqués ci-dessous, 4 cc de l’émulsion virulente définie précédemment. On relève, du dixième jour jusqu’au trentième, les températures des animaux éprouvés. Celles-ci sont toujours normales chez tous les animaux vaccinés; nombre de témoins manifestent, au contraire, de fréquentes poussées thermiques. Dès le cinquième jour après l’inoculation, des accidents locaux évoluent chez les vaccinés et les témoins, mais dès le huitième, tandis que la réaction locale des vaccinés se borne à l’apparition d’une plaque œdémateuse ou d’un abcès de 3 à 10 centimètres de diamètre, on note chez les témoins d’énormes abcès locaux avec adénites des ganglions pré-scapulaires, atteignant assez régulièrement, au huitième jour du contrôle, la dimension d’un œuf de poule. Le 1er juillet 1905, quinzième jour du contrôle, chez tous les vaccinés, les accidents locaux semblent régresser, alors qu’ils restent stationnaires ou s’aggravent chez les témoins. Bref, après quelques oscillations, l’état comparé des vaccinés et témoins n’est à aucun instant comparable, ces derniers étant très généralement porteurs d’altérations apparentes infiniment plus graves que celles des animaux vaccinés. Le 29 septembre 1905 (167 jours après l’épreuve de contrôle), vaccinés et témoins éprouvés par voie sous-cutanée sont soumis à une épreuve de tuberculine. Des sept vaccinés, trois donnent une réaction complète; chez un on note seulement une hyperthermie passagère de 0,9; les trois autres ne réagissent pas. Le 2 décembre 1905, 170 jours après l’épreuve d’infection, les témoins et vaccinés sont sacrifiés. On recueille aseptiquement, chez tous les animaux dont les ganglions pré-scapulaires voisins du point de l’inoculation d’épreuve sont indemnes en apparence, de gros fragments de ces organes qui seront inoculés à des cobayes. On procède de même pour les ganglions trachéo-bronchiques
vaccinés, les accidents locaux semblent régresser, alors qu’ils restent stationnaires ou s’aggravent chez les témoins. Bref, après quelques oscillations, l’état comparé des vaccinés et témoins n’est à aucun instant comparable, ces derniers étant très généralement porteurs d’altérations apparentes infiniment plus graves que celles des animaux vaccinés. Le 29 septembre 1905 (167 jours après l’épreuve de contrôle), vaccinés et témoins éprouvés par voie sous-cutanée sont soumis à une épreuve de tuberculine. Des sept vaccinés, trois donnent une réaction complète; chez un on note seulement une hyperthermie passagère de 0,9; les trois autres ne réagissent pas. Le 2 décembre 1905, 170 jours après l’épreuve d’infection, les témoins et vaccinés sont sacrifiés. On recueille aseptiquement, chez tous les animaux dont les ganglions pré-scapulaires voisins du point de l’inoculation d’épreuve sont indemnes en apparence, de gros fragments de ces organes qui seront inoculés à des cobayes. On procède de même pour les ganglions trachéo-bronchiques et du médiastin. Le tableau suivant résume les lésions rencontrées à l’autopsie et rend saisissante l’énorme différence des altérations constatées chez les vaccinés et chez les témoins. Nature des altérations relevées. Lésions massives du ganglion pré-scapulaire. Nombre d’animaux ayant présenté les caractères mentionnés ci-contre. 7 Vaccinés. 1 7 Témoins. 7 Lésions insignifiantes du ganglion pré-scapulaire. Ganglions pré-scapulaires indemnes en apparence, mais virulents. Ganglions pulmonaires indemnes en apparence, mais virulents. Ganglions pulmonaires dépourvus de lésions et de virulence. Présentaient tous des lésions massives. Voir plus haut. 2 0 Extension des lésions au poumon. 0 5 En résumé, tandis que chez les sujets témoins l’infection, réalisée par voie sous-cutanée, s’est montrée très grave, chez les vaccinés elle a été extrêmement bénigne, et le seul de ces sujets (charolais no 38) qui se soit montré fort peu résistant avait encore ses ganglions bronchiques indemnes et avirulents, alors que chez tous les témoins ces organes étaient ou bien très altérés (5 cas) ou bien virulents (2 cas). c) Epreuves par inoculation intra-veineuse de 4 milligrammes et demi de bacilles bovins virulents. Le 15 juin 1905, 6 vaccinés et 6 témoins reçoivent dans la jugulaire 4 milligrammes et demi d’un bacille bovin très virulent. Les
Lésions insignifiantes du ganglion pré-scapulaire. Ganglions pré-scapulaires indemnes en apparence, mais virulents. Ganglions pulmonaires indemnes en apparence, mais virulents. Ganglions pulmonaires dépourvus de lésions et de virulence. Présentaient tous des lésions massives. Voir plus haut. 2 0 Extension des lésions au poumon. 0 5 En résumé, tandis que chez les sujets témoins l’infection, réalisée par voie sous-cutanée, s’est montrée très grave, chez les vaccinés elle a été extrêmement bénigne, et le seul de ces sujets (charolais no 38) qui se soit montré fort peu résistant avait encore ses ganglions bronchiques indemnes et avirulents, alors que chez tous les témoins ces organes étaient ou bien très altérés (5 cas) ou bien virulents (2 cas). c) Epreuves par inoculation intra-veineuse de 4 milligrammes et demi de bacilles bovins virulents. Le 15 juin 1905, 6 vaccinés et 6 témoins reçoivent dans la jugulaire 4 milligrammes et demi d’un bacille bovin très virulent. Les relevés de température montrent que les vaccinés supportent admirablement l’épreuve, tandis que les témoins présentent, après 13 ou 15 jours, une réaction fébrile intense. Le quinzième jour après l’épreuve de contrôle, d’énormes différences se manifestent dans l'état clinique des animaux. Alors que jusqu'au 2 décembre, jour du sacrifice de tous les sujets, pas un seul des animaux vaccinés ne manifeste le moindre signe morbide, alors que tous continuent à engraisser, les témoins maigrissent rapidement, leur respiration est courte, accélérée, on compte chez eux de 40 à 50 et parfois 60 mouvements respiratoires à la minute; presque tous toussent violemment. Bref, chez tous évoluent les signes d’une tuberculose pulmonaire à marche rapide. — 426 — L’un d’eux (flandrin 89) meurt dans la nuit 13 au 14 juillet, 29 jours après l’inoculation, et présente à l’autopsie des lésions formidables de tuberculose pulmonaire. Un second témoin (Salers n° 92) succombe le 19 juillet, 34 jours après l’inoculation, porteur des mêmes lésions considérables. Un troisième témoin (Salers n° 94) succombe enfin le 29 juillet, au trente-septième jour du contrôle, et offre les mêmes lésions que ses deux congénères. Chez ces trois animaux, on relève à l’autopsie de la granulie pulmonaire et des hypertrophies ganglionnaires,
les sujets, pas un seul des animaux vaccinés ne manifeste le moindre signe morbide, alors que tous continuent à engraisser, les témoins maigrissent rapidement, leur respiration est courte, accélérée, on compte chez eux de 40 à 50 et parfois 60 mouvements respiratoires à la minute; presque tous toussent violemment. Bref, chez tous évoluent les signes d’une tuberculose pulmonaire à marche rapide. — 426 — L’un d’eux (flandrin 89) meurt dans la nuit 13 au 14 juillet, 29 jours après l’inoculation, et présente à l’autopsie des lésions formidables de tuberculose pulmonaire. Un second témoin (Salers n° 92) succombe le 19 juillet, 34 jours après l’inoculation, porteur des mêmes lésions considérables. Un troisième témoin (Salers n° 94) succombe enfin le 29 juillet, au trente-septième jour du contrôle, et offre les mêmes lésions que ses deux congénères. Chez ces trois animaux, on relève à l’autopsie de la granulie pulmonaire et des hypertrophies ganglionnaires, telles que les ganglions bronchiques atteignent le volume du poing et ceux du médiastin postérieur celui d’une petite betterave. Progressivement, les signes graves relevés chez les trois témoins survivants (nos 90, 91, 93) s’améliorent. Ces sujets sont sacrifiés très maigres, le 2 décembre, soit 168 jours après l’inoculation. Leur autopsie fournit les résultats suivants : Témoin comtois n° 90. — Lésions considérables des deux poumons, innombrables tubercules gris et caséux dans le parenchyme et les ganglions annexes. Nombreux tubercules dans le foie; gros amas de végétations tuberculeuses sur la face antérieure du diaphragme. Témoin comtois n° 91. — Lésions identiques à celles du témoin 90. Témoin salers n° 93. — Lésions identiques à celles des deux précédents, sauf en ce qui concerne le foie, qui est indemne. L’épreuve par inoculation intra-veineuse s’est donc montrée d’une extrême gravité, puisqu’elle a provoque chez tous les témoins d’énormes lésions tuberculeuses, rapidement mortelles pour la moitié d’entre eux. Et cependant, ainsi qu’il a été dit précédemment, tous les sujets vaccinés du même lot n’ont jamais cessé de présenter toutes les apparences de la santé. Les vaccinés sont sacrifiés le 2 décembre 1905, soit 168 jours après l’inoculation de contrôle. Ils sont soumis à une
fournit les résultats suivants : Témoin comtois n° 90. — Lésions considérables des deux poumons, innombrables tubercules gris et caséux dans le parenchyme et les ganglions annexes. Nombreux tubercules dans le foie; gros amas de végétations tuberculeuses sur la face antérieure du diaphragme. Témoin comtois n° 91. — Lésions identiques à celles du témoin 90. Témoin salers n° 93. — Lésions identiques à celles des deux précédents, sauf en ce qui concerne le foie, qui est indemne. L’épreuve par inoculation intra-veineuse s’est donc montrée d’une extrême gravité, puisqu’elle a provoque chez tous les témoins d’énormes lésions tuberculeuses, rapidement mortelles pour la moitié d’entre eux. Et cependant, ainsi qu’il a été dit précédemment, tous les sujets vaccinés du même lot n’ont jamais cessé de présenter toutes les apparences de la santé. Les vaccinés sont sacrifiés le 2 décembre 1905, soit 168 jours après l’inoculation de contrôle. Ils sont soumis à une autopsie minutieuse et l’on fait des prélèvements de fragments de ganglions pour les inoculer au cobaye. Il résulte de l’autopsie que, sur 6 vaccinés éprouvés par la voie veineuse, 4 sont trouvés à l’autopsie absolument indemnes de tuberculose et 2 présentent des lésions très légères des ganglions annexes du poumon; tandis que des 6 témoins, éprouvés de la même façon, 3 meurent de tuberculose en 29, 34 et 37 jours, et 3 offrent, lors du sacrifice, des lésions massives de tuberculose pulmonaire. Les résultats positifs de l’inoculation au cobaye des ganglions indemnes du poumon des vaccinés indiquent que la résorption des bacilles virulents de l’épreuve est lente à s’effectuer, fait vraiment peu surprenant, si l’on se rappelle que les sujets neufs ne résorbent qu’en de longs mois — et tout en réagissant à la tuberculine durant ce temps — les bacilles tuberculeux tués qu’on leur inocule dans les veines, et que la résorption des bacilles presque avirulents du vaccin nécessite, elle aussi, de longues semaines. D’ailleurs, les ganglions indemnes qui recèlent des bacilles virulents semblent pauvres en microbes, puisqu’il est nécessaire d’inoculer de volumineux fragments ganglionnaires pour mettre la virulence en évidence et que tous les cobayes inoculés avec une
tandis que des 6 témoins, éprouvés de la même façon, 3 meurent de tuberculose en 29, 34 et 37 jours, et 3 offrent, lors du sacrifice, des lésions massives de tuberculose pulmonaire. Les résultats positifs de l’inoculation au cobaye des ganglions indemnes du poumon des vaccinés indiquent que la résorption des bacilles virulents de l’épreuve est lente à s’effectuer, fait vraiment peu surprenant, si l’on se rappelle que les sujets neufs ne résorbent qu’en de longs mois — et tout en réagissant à la tuberculine durant ce temps — les bacilles tuberculeux tués qu’on leur inocule dans les veines, et que la résorption des bacilles presque avirulents du vaccin nécessite, elle aussi, de longues semaines. D’ailleurs, les ganglions indemnes qui recèlent des bacilles virulents semblent pauvres en microbes, puisqu’il est nécessaire d’inoculer de volumineux fragments ganglionnaires pour mettre la virulence en évidence et que tous les cobayes inoculés avec une même émulsion ganglionnaire ne contractent pas infailliblement la tuberculose. III. — De la durée de l’immunité. — Dans le but d’apprécier la durée de l’immunité conférée par la vaccination antituberculeuse, 6 de nos 20 vaccinés ont été conservés. Les animaux seront soumis ultérieurement à diverses épreuves d’infection. Conclusions. — Il nous paraît indispensable, avant de tirer une conclusion quelconque des expériences qui viennent d’être rapportées, d’attirer l’attention sur l’exceptionnelle gravité des épreuves de contrôle mises en œuvre pour la recherche de l’immunité conférée et sur une expérience que nous avons pu réaliser sur le degré de la résistance conférée par une première atteinte guérie de tuberculose. Parmi les animaux acquis en vue de l’expérience de Melun, se trouva une génisse bretonne qui ne put être utilisée, car elle réagit très nettement à l’épreuve de tuberculine pratiquée avant toute intervention, le 5 décembre 1904. Ce sujet fut toutefois conservé, mais isolé dans une étable spéciale. Soumis plus tard à de nouvelles épreuves de tuberculine, il cesse de réagir, tandis que sa croissance est normale; on devait donc le considérer comme guéri. Il fut décidé que ce sujet, manifestement guéri d’une atteinte bénigne de tuberculose, serait soumis, exactement dans les mêmes conditions
nous paraît indispensable, avant de tirer une conclusion quelconque des expériences qui viennent d’être rapportées, d’attirer l’attention sur l’exceptionnelle gravité des épreuves de contrôle mises en œuvre pour la recherche de l’immunité conférée et sur une expérience que nous avons pu réaliser sur le degré de la résistance conférée par une première atteinte guérie de tuberculose. Parmi les animaux acquis en vue de l’expérience de Melun, se trouva une génisse bretonne qui ne put être utilisée, car elle réagit très nettement à l’épreuve de tuberculine pratiquée avant toute intervention, le 5 décembre 1904. Ce sujet fut toutefois conservé, mais isolé dans une étable spéciale. Soumis plus tard à de nouvelles épreuves de tuberculine, il cesse de réagir, tandis que sa croissance est normale; on devait donc le considérer comme guéri. Il fut décidé que ce sujet, manifestement guéri d’une atteinte bénigne de tuberculose, serait soumis, exactement dans les mêmes conditions que les animaux vaccinés d’après la méthode de M. von Behring, à une épreuve d’infection par voie veineuse, laquelle est réalisée le 15 juin 1905. Une assez vive réaction thermique s’observe à la suite de l’intervention, toutefois l’état de l’animal reste satisfaisant; l’engraissement est normal, le sujet se comporte ainsi que les vaccinés éprouvés de même façon. On le soumet, le 17 octobre, à une épreuve de tuberculine, qui donne une forte réaction. Cinq jours plus tard, on sacrifie le sujet, qui ne présente à l’autopsie aucune lésion viscérale. Seuls, les ganglions annexes du poumon et l’un des préscapulaires présentent quelques tubercules calcifiés. Ces ganglions se montrent infectants pour le cobaye. On trouve dans deux ganglions mésentériques deux très petites perles calcaires, très dures, arrondies, qui représentent vraisemblablement la lésion initiale, guérie depuis, qui provoquait la réaction à la tuberculine constatée à l’arrivée de l’animal. Cette expérience établit donc ce point important qu’une première atteinte bénigne de tuberculose, qui guérit, confère à l’organisme une résistance marquée, mais non absolue, à une réinfection grave. C’est, en somme, cette même constatation qui a été faite sur nos animaux vaccinés, puis éprouvés par voie veineuse. Encore faut-il remarquer que ces sujets se sont