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d’incubation, fera un trachome léger, marqué par des granulations localisées à l'angle interne. La réaction sera terminée un mois plus tard. Le même magot Be. est réinoculé à l’œil gauche le 21 juin, également avec un virus de quatrième passage, virus évoluant depuis 14 jours. Cette inoculation à l’œil gauche donne un résultat positif. La réaction débute après une incubation de 14 jours, elle augmente devient très nette après un mois; le trachome est encore floride après 2 mois, À la suite d’un traitement énergique, on constate une régression des lésions. À la date du 9 septembre, on note encore la présence de quelques follicules à l’angle interne. Trachome de sixième passage Sur 2 singes inoculés avec le virus de 2 singes différents mais infectés de la même souche, l’un fait une réaction abortive, le second un trachome floride à évolution lente. En voici l’observation: Magot Pe.. Inoculé le 16 octobre 1939, à l’œil droit, avec le virus du singe Be. évoluant depuis 103 jours. Le 8 novembre, pas de lésions. Le 25 novembre, on note l'apparition de nombreux petits follicules à la paupière supérieure et à la paupière inférieure, on fait un curetage pour passage. Le 15 décembre, les follicules sont nombreux aux deux paupières qui sont curetées soigneusement pour un passage à un nouveau singe Ta. qui ne réagira pas. Le 27 novembre, les follicules sont très nombreux à la paupière supérieure et à la paupière inférieure. Le 3 janvier 1940, les lésions sont en régression très nette. Le 16 janvier quelques granulations persistent, elles sont encore nettes pendant les semaines qui suivent, on note leur présence au début du mois de février 1940. Elles existent encore non atténuées le 4 mars et un nouveau curetage est fait pour passage à un nouveau singe Mo. qui ne fera pas de réaction nette. Le 10 mars, un nouveau curetage est fait pour réinoculation du singe Mo. Huit jours plus tard, les follicules persistent. On les observe encore pendant les mois d'avril et mai; au début de juin la cicatrisation est presque terminée, elle est totale à la fin du
follicules sont nombreux aux deux paupières qui sont curetées soigneusement pour un passage à un nouveau singe Ta. qui ne réagira pas. Le 27 novembre, les follicules sont très nombreux à la paupière supérieure et à la paupière inférieure. Le 3 janvier 1940, les lésions sont en régression très nette. Le 16 janvier quelques granulations persistent, elles sont encore nettes pendant les semaines qui suivent, on note leur présence au début du mois de février 1940. Elles existent encore non atténuées le 4 mars et un nouveau curetage est fait pour passage à un nouveau singe Mo. qui ne fera pas de réaction nette. Le 10 mars, un nouveau curetage est fait pour réinoculation du singe Mo. Huit jours plus tard, les follicules persistent. On les observe encore pendant les mois d'avril et mai; au début de juin la cicatrisation est presque terminée, elle est totale à la fin du mois. Le trachome torpide aura duré 277 jours. Aucun des 3 passages n'a donné de réaction typique. Nous n’avons pas noté de différence dans le résultat des inoculations en rapport avec la durée de l’infection de l’animal donneur de virus. Sur les 10 cas positifs que nous avons signalés et qui ont présenté des infections très comparables, nous avions utilisé: une fois un virus datant de 9 jours trois fois un virus datant de 15 jours deux fois ............. un virus datant de 33 jours une fois un virus datant de 58 jours une fois un virus datant de 84 jours une fois .............. un virus datant de 103 jours une fois .............. un virus datant de 120 jours En résumé, si à cause de la réceptivité assez faible du Macaca sylvanus, il n'est pas facile d’entretenir un virus trachomateux sur lui par passages successifs, le fait cependant reste possible si l’on prend soin de faire les passages sur plusieurs animaux. Aucun fait observé par nous ne permet de constater qu’il y ait diminution de virulence par entretien du virus trachomateux sur conjonctive de singe. Pour élucider la question et déterminer, de façon indiscutable, que les réactions interprétées par nous
qui ont présenté des infections très comparables, nous avions utilisé: une fois un virus datant de 9 jours trois fois un virus datant de 15 jours deux fois ............. un virus datant de 33 jours une fois un virus datant de 58 jours une fois un virus datant de 84 jours une fois .............. un virus datant de 103 jours une fois .............. un virus datant de 120 jours En résumé, si à cause de la réceptivité assez faible du Macaca sylvanus, il n'est pas facile d’entretenir un virus trachomateux sur lui par passages successifs, le fait cependant reste possible si l’on prend soin de faire les passages sur plusieurs animaux. Aucun fait observé par nous ne permet de constater qu’il y ait diminution de virulence par entretien du virus trachomateux sur conjonctive de singe. Pour élucider la question et déterminer, de façon indiscutable, que les réactions interprétées par nous comme trachome chez le magot étaient bien du trachome et non modifié, nous avons fait le passage du singe à l’homme. TRANSMISSION EXPÉRIMENTALE DU VIRUS SIMIEN À L’HOMME Le singe Po. est inoculé le 3 février 1939, avec du virus de singe sur la conjonctive de la paupière supérieure droite. Après 17 jours d’incubation, trachome avec follicules. Trente jours plus tard, curetage de la conjonctive et inoculation directe à deux individus indemnes de tout trachome, chacun sur la paupière supérieure de l’œil droit. Tous deux réagissent intensément suivant le type clinique du trachome expérimental noté par tous les auteurs, c’est-à-dire conjonctivite intense sans follicules au début, ptose et œdème de la paupière supérieure. L’un d’eux fera plus tard un pannus au pôle supérieur de la cornée; dans un des cas, il y a contamination spontanée de l’autre œil. Les durées d’incubation sont respectivement de 7 et 15 jours. Chaque semaine, des frottis de la conjonctive infectée de chacun des deux malades sont examinés pour la recherche des corps de Prowazek. Le 15 avril, 24 jours après l’inoculation, on trouve une seule fois une cellule conjonctivale avec un corps de Prowazek. Les examens ultérieurs, chez l’un des malades, restent constamment négatifs.
Après 17 jours d’incubation, trachome avec follicules. Trente jours plus tard, curetage de la conjonctive et inoculation directe à deux individus indemnes de tout trachome, chacun sur la paupière supérieure de l’œil droit. Tous deux réagissent intensément suivant le type clinique du trachome expérimental noté par tous les auteurs, c’est-à-dire conjonctivite intense sans follicules au début, ptose et œdème de la paupière supérieure. L’un d’eux fera plus tard un pannus au pôle supérieur de la cornée; dans un des cas, il y a contamination spontanée de l’autre œil. Les durées d’incubation sont respectivement de 7 et 15 jours. Chaque semaine, des frottis de la conjonctive infectée de chacun des deux malades sont examinés pour la recherche des corps de Prowazek. Le 15 avril, 24 jours après l’inoculation, on trouve une seule fois une cellule conjonctivale avec un corps de Prowazek. Les examens ultérieurs, chez l’un des malades, restent constamment négatifs. Par contre, chez l’autre, le 3 mai, 42 jours après l’inoculation et 27 jours après le début du trachome, on constate une extraordinaire abondance de corps de Prowazek; il y a souvent plusieurs cellules à inclusions dans le même champ microscopique. Plusieurs cellules contiennent deux et même trois corps de Prowazek dans leur protoplasma. Les corps initiaux se détachent très nettement. Parfois, les corps de Prowazek apparaissent engagés sous le noyau et semblent bordés d'une fine membrane. Il est possible que de telles formes soient dues à la pression exercée par le frottis et que des corps qui paraissent intranucléaires soient simplement juxtanucléaires. Huit jours plus tard, les corps de Prowazek ont disparu. Un passage est fait d'homme à singe le 15 avril. L'un des malades, D., a la conjonctive très œdématicée, œdème diffus avec hypertrophie des papilles, grosse congestion de la conjonctive bulbaire, très peu de sécrétion. Ce malade fera une forme plus grave que l'autre. Une seule fois, le jour même du prélèvement, on constate un corps de Prowazek. Un singe est inoculé avec le produit de curetage de la conjonctive et fera 25 jours plus tard, un trachome typique qui sera encore for ride après 5 mois,
Prowazek dans leur protoplasma. Les corps initiaux se détachent très nettement. Parfois, les corps de Prowazek apparaissent engagés sous le noyau et semblent bordés d'une fine membrane. Il est possible que de telles formes soient dues à la pression exercée par le frottis et que des corps qui paraissent intranucléaires soient simplement juxtanucléaires. Huit jours plus tard, les corps de Prowazek ont disparu. Un passage est fait d'homme à singe le 15 avril. L'un des malades, D., a la conjonctive très œdématicée, œdème diffus avec hypertrophie des papilles, grosse congestion de la conjonctive bulbaire, très peu de sécrétion. Ce malade fera une forme plus grave que l'autre. Une seule fois, le jour même du prélèvement, on constate un corps de Prowazek. Un singe est inoculé avec le produit de curetage de la conjonctive et fera 25 jours plus tard, un trachome typique qui sera encore for ride après 5 mois, au moment de la mort de l'animal. L'autre malade, T., a la conjonctive œdématiée; on note de l'hypertrophie papillaire miliaire à la paupière supérieure. L'inflammation est diffuse et s'étend également à la cornea et à la conjonctive palpebrale inférieure. Pas de granulations nettes. Le frottis de la conjonctive permet de déceler un corps de Prowazek et 18 jours plus tard, on note cette floraison de corps de Prowazek que nous avons signalée. Le singe inoculé avec le produit de curetage de la conjonctive de T. ne réagira pas. AUTRES VOIES D'INOCULATION Des inoculations par voie sous-cutanée, intra-musculaire, intratesticulaire et même intracérébrale ne nous ont rien donné et cependant, par voie intracérébrale, nous avons inoculé 3 deux singes le produit de grattage de cinq autres magots ayant un trachome floride, certifié pour l'un par un passage positif à l'homme. La température prise pendant un mois est restée normale. IMMUNITÉ Quelques expériences seulement, à cause de la pénurie d'animaux guéris, nous ont permis de vérifier, ce qu'avaient vu Ch. Nicolle et ses continuateurs, que le trachome du singe ne lui laisse pas d'immunité. Un animal ayant reçu un très grand nombre d'inoculations par voie sous-cutanée ou intramusculaire de virus trachomateux, s'est montré
déceler un corps de Prowazek et 18 jours plus tard, on note cette floraison de corps de Prowazek que nous avons signalée. Le singe inoculé avec le produit de curetage de la conjonctive de T. ne réagira pas. AUTRES VOIES D'INOCULATION Des inoculations par voie sous-cutanée, intra-musculaire, intratesticulaire et même intracérébrale ne nous ont rien donné et cependant, par voie intracérébrale, nous avons inoculé 3 deux singes le produit de grattage de cinq autres magots ayant un trachome floride, certifié pour l'un par un passage positif à l'homme. La température prise pendant un mois est restée normale. IMMUNITÉ Quelques expériences seulement, à cause de la pénurie d'animaux guéris, nous ont permis de vérifier, ce qu'avaient vu Ch. Nicolle et ses continuateurs, que le trachome du singe ne lui laisse pas d'immunité. Un animal ayant reçu un très grand nombre d'inoculations par voie sous-cutanée ou intramusculaire de virus trachomateux, s'est montré parfaitement réceptif à une inoculation par voie conjonctivale. Ajoutons enfin que quatre de nos singes qui firent un trachome floride avaient été inoculés précédemment avec des viruses de fièvre boutonneuse, de fièvre pourprée, de typhus murin ou de typhus épidémique. EXAMEN MICROSCOPIQUE Tous nos examens, qu'ils aient été faits tout à fait au début de l'infection ou à toutes les périodes du trachome, en pleine évolution, ne nous ont jamais montré de corps de Prowazek. Ce fait est en accord avec celui que signalent la plupart des observateurs. Julianelle donne la liste de 431 singes autres qu'anthropoïdes, inoculés de trachome. Une seule fois, les corps de Prowazek auraient été trouvés par Bertarelli et Cecchetto (1), sur un M. cynomolgus. Par ailleurs, Solovief (2), dans son étude sur l'histologie du trachome expérimental, donne une figure assez imprécise (pl. 1, fig. 6), dont la légende porte « cellules épithéliales d'un magot présentant des corpuscules de Prowazek ». Aucune indication dans le texte ne précise quand et combien de fois l'auteur a observé ces formes. RÉSUMÉ ET CONCLUSIONS 1°) Le magot du Maroc (Macaca sylvanus) peut être expérimentalement infecté de trachome. 2°) Sa sensibilité, bien que restreinte, est suffisante pour que soit justifié
à fait au début de l'infection ou à toutes les périodes du trachome, en pleine évolution, ne nous ont jamais montré de corps de Prowazek. Ce fait est en accord avec celui que signalent la plupart des observateurs. Julianelle donne la liste de 431 singes autres qu'anthropoïdes, inoculés de trachome. Une seule fois, les corps de Prowazek auraient été trouvés par Bertarelli et Cecchetto (1), sur un M. cynomolgus. Par ailleurs, Solovief (2), dans son étude sur l'histologie du trachome expérimental, donne une figure assez imprécise (pl. 1, fig. 6), dont la légende porte « cellules épithéliales d'un magot présentant des corpuscules de Prowazek ». Aucune indication dans le texte ne précise quand et combien de fois l'auteur a observé ces formes. RÉSUMÉ ET CONCLUSIONS 1°) Le magot du Maroc (Macaca sylvanus) peut être expérimentalement infecté de trachome. 2°) Sa sensibilité, bien que restreinte, est suffisante pour que soit justifié l'emploi de cet animal comme réactif au virus trachomateux. 3°) L'entretien du virus par passage d'animal à animal est possible, au moins jusqu'au sixième passage. 4°) Le virus ne perd rien de sa virulence au cours des passages et peut être transmis à l'homme et, de nouveau, de l'homme au singe. L'infection humaine a le type de conjonctivite aiguë déjà signalé par d'autres expérimentateurs. L'apparition des corpuscules de Prowazek se fait entre le vingtième et le trentième jour. 5°) Bien que les corps de Prowazek aient l'aspect de parasites, le fait qu'on ne les rencontre pas chez les magots atteints de trachome, incite à faire toute réserve sur leur rôle d'agent pathogène du trachome. (1) BERTARELLI E. et CECCHETTO E. Zbl. Bakt. Orig. 1909, 50, 36. (2) SOLOVIEF P. Arch. Inst. Pasteur Afrique du Nord 1921, 1, 412. LEGENDE DES PLANCHES Microphotographies de frottis de conjonctive d'homme infecté par inoculation de trachome de magot PLANCHE II 1 2 4. Cellules épithéliales contenant des corps initiaux. En 2 on remarque trois « corps » dans la même cellule 3 5 6. Les corps initiaux paraissent intra ou infranucléaires. En 6 la « membrane » d'un de ces corps est visible sous
singe. L'infection humaine a le type de conjonctivite aiguë déjà signalé par d'autres expérimentateurs. L'apparition des corpuscules de Prowazek se fait entre le vingtième et le trentième jour. 5°) Bien que les corps de Prowazek aient l'aspect de parasites, le fait qu'on ne les rencontre pas chez les magots atteints de trachome, incite à faire toute réserve sur leur rôle d'agent pathogène du trachome. (1) BERTARELLI E. et CECCHETTO E. Zbl. Bakt. Orig. 1909, 50, 36. (2) SOLOVIEF P. Arch. Inst. Pasteur Afrique du Nord 1921, 1, 412. LEGENDE DES PLANCHES Microphotographies de frottis de conjonctive d'homme infecté par inoculation de trachome de magot PLANCHE II 1 2 4. Cellules épithéliales contenant des corps initiaux. En 2 on remarque trois « corps » dans la même cellule 3 5 6. Les corps initiaux paraissent intra ou infranucléaires. En 6 la « membrane » d'un de ces corps est visible sous le noyau PLANCHE III 1 2 3 4 5. Divers aspects de corps initiaux dans les cellules épithéliales PLANCHE IV 1 2. Corps initiaux vus à un plus fort grossissement. En 1 l'écrasement de la cellule a dispersé les éléments du corps initial dans le protoplasma TOME II PLANCHE II PLANCHE III TOME II TOME II PLANCHE IV L'ANEMIE INFECTIEUSE DES EQUIDES * I. RECHERCHES SUR L'INCUBATION ET LE PREMIER ACCES THERMIQUE AU COURS DE LA MALADIE EXPERIMENTALE par L. A. MARTIN L'étude expérimentale de l'anémie infectieuse des équidés, infection contagieuse bien individualisée par Carré et Vallée (1), dès 1904, se heurte à de nombreuses difficultés, les unes d'ordre biologique, les autres, malheureusement non dédaignables, d'ordre financier. Parmi les premières, nous rangerons : 1° La réceptivité des seuls équidés à l'infection expérimentale. Tous les résultats annoncés, principalement par les auteurs allemands, relatifs à l'infection des petits animaux de laboratoire sont restés sans confirmation. 2° Chez les espèces sensibles (cheval, âne), l'absence d'une durée d'incubation fixe, l'existence d'infections inapparentes de très longue durée, l'absence d'immunité vraie, l'absence de moyens diagnostiques spécifiques, l'absence de moyens de traitement. Les raisons financières sont moins prohibitives en Afrique du Nord où l'emploi de petits ânes,
PLANCHE III TOME II TOME II PLANCHE IV L'ANEMIE INFECTIEUSE DES EQUIDES * I. RECHERCHES SUR L'INCUBATION ET LE PREMIER ACCES THERMIQUE AU COURS DE LA MALADIE EXPERIMENTALE par L. A. MARTIN L'étude expérimentale de l'anémie infectieuse des équidés, infection contagieuse bien individualisée par Carré et Vallée (1), dès 1904, se heurte à de nombreuses difficultés, les unes d'ordre biologique, les autres, malheureusement non dédaignables, d'ordre financier. Parmi les premières, nous rangerons : 1° La réceptivité des seuls équidés à l'infection expérimentale. Tous les résultats annoncés, principalement par les auteurs allemands, relatifs à l'infection des petits animaux de laboratoire sont restés sans confirmation. 2° Chez les espèces sensibles (cheval, âne), l'absence d'une durée d'incubation fixe, l'existence d'infections inapparentes de très longue durée, l'absence d'immunité vraie, l'absence de moyens diagnostiques spécifiques, l'absence de moyens de traitement. Les raisons financières sont moins prohibitives en Afrique du Nord où l'emploi de petits ânes, parfaitement sensibles au virus et d'un prix accessible, permet une expérimentation plus large que dans la plupart des laboratoires européens. (*) Ce mémoire groupe et développe en 4 parties l'ensemble des recherches poursuivies par nous sur ce sujet, recherches dont certains résultats ont été publiés antérieurement, sous une forme succincte : Ann. Inst. Pasteur 1939, 62, 595. Maroc Médical 1939, 19, 81. C. R. Acad. Sci. 1939, 208, 677. CARRÉ H. et VALLÉE H. Rev. gén. Méd. vét. 1906, 8, 593 et 1907, 9, 113. Origine du virus. Notre virus provient d'un cheval de l'armée dont l'histoire pathologique connue est la suivante : Jument de race française appartenant au 64e Régiment d'artillerie d'Afrique. Entrée à l'infirmerie vétérinaire militaire de Meknès le 8 juillet 1935. Le premier accès se termine le 10 juillet. Malgré divers traitements énergiques, un second accès a lieu du 24 au 29 juillet, un troisième du 5 août au 8 août, un quatrième du 15 août au 20 août. L'animal est saigné le 20 août, à la fin de son quatrième accès. Le sérum recueilli (40 cc) nous est adressé et, dès sa réception, est inoculé dans la veine d'un âne neuf : Ane 6 qui réagit
: Ann. Inst. Pasteur 1939, 62, 595. Maroc Médical 1939, 19, 81. C. R. Acad. Sci. 1939, 208, 677. CARRÉ H. et VALLÉE H. Rev. gén. Méd. vét. 1906, 8, 593 et 1907, 9, 113. Origine du virus. Notre virus provient d'un cheval de l'armée dont l'histoire pathologique connue est la suivante : Jument de race française appartenant au 64e Régiment d'artillerie d'Afrique. Entrée à l'infirmerie vétérinaire militaire de Meknès le 8 juillet 1935. Le premier accès se termine le 10 juillet. Malgré divers traitements énergiques, un second accès a lieu du 24 au 29 juillet, un troisième du 5 août au 8 août, un quatrième du 15 août au 20 août. L'animal est saigné le 20 août, à la fin de son quatrième accès. Le sérum recueilli (40 cc) nous est adressé et, dès sa réception, est inoculé dans la veine d'un âne neuf : Ane 6 qui réagit très violemment après 13 jours d'incubation. Indices hématologiques Ane 6 : INDICE VITESSE , ,fITTT^ , VOLUMÉTRIQUE DE CHUTE HÉMATIES Avant l'inoculation ...... 35 0,43 8.400.000 5e jour de l'accès ....... 1 18 1 0,80 1 3.940.000 il De nombreux passages effectués par la suite confirmèrent la nature du virus. Sensibilité de l'âne. La sensibilité de l'âne au virus de l'anémie infectieuse a été montrée par Carré et Vallée et reconnue par tous les expérimentateurs qui utilisèrent cet animal. Mohler, Cilli, Marcato, Commission japonaise, Theiler et Kehoe, de Kock, Balozet. Nous ne reviendrons donc pas sur la démonstration de cette sensibilité, nous contentant de signaler à l'attention des expérimentateurs que certains sujets peuvent se montrer rigoureusement réfractaires à l'infection. Expérience. L'âne 16 (dépliant 1) est depuis longtemps au laboratoire où il a servi à des expériences d'un tout autre ordre. Sa courbe de température biquotidienne nous est connue depuis plus d'un an, lorsqu'est pratiquée la première inoculation, le 26 décembre 1937, à l'aide d'un sérum présumé virulent; aucune réaction, ni thermique, ni hématologique. Une première épreuve est faite le 24 janvier 1938, par inoculation intraveineuse d'un sérum sûrement virulent. Aucune réaction. Un témoin de cette première épreuve, âne 22 (dépliant
Sensibilité de l'âne. La sensibilité de l'âne au virus de l'anémie infectieuse a été montrée par Carré et Vallée et reconnue par tous les expérimentateurs qui utilisèrent cet animal. Mohler, Cilli, Marcato, Commission japonaise, Theiler et Kehoe, de Kock, Balozet. Nous ne reviendrons donc pas sur la démonstration de cette sensibilité, nous contentant de signaler à l'attention des expérimentateurs que certains sujets peuvent se montrer rigoureusement réfractaires à l'infection. Expérience. L'âne 16 (dépliant 1) est depuis longtemps au laboratoire où il a servi à des expériences d'un tout autre ordre. Sa courbe de température biquotidienne nous est connue depuis plus d'un an, lorsqu'est pratiquée la première inoculation, le 26 décembre 1937, à l'aide d'un sérum présumé virulent; aucune réaction, ni thermique, ni hématologique. Une première épreuve est faite le 24 janvier 1938, par inoculation intraveineuse d'un sérum sûrement virulent. Aucune réaction. Un témoin de cette première épreuve, âne 22 (dépliant 2), réagit fortement après 10 jours d'incubation. Une seconde épreuve pratiquée le 23 février 1938, avec un autre sérum virulent est à nouveau négative. Un témoin de cette seconde épreuve, l'âne 28 (dépliant 2) réagit fortement après 7 jours d'incubation. Quarante cinq jours après cette seconde épreuve, 20 cc de sérum prélevé à l'âne 16 sont inoculés à l'âne 45 (dépliant 2) qui ne fait aucune réaction. Cet âne, éprouvé 48 jours plus tard, réagira fortement après 12 jours d'incubation. Une troisième épreuve est enfin pratiquée sur l'âne 16, le 23 juillet 1938. Il ne réagit pas. Un âne témoin : âne 58 (dépliant 2) réagit fortement, après 10 jours d'incubation. DURÉE DE L'INCUBATION Un des premiers obstacles auxquels se heurte l'expérimentateur qui étudie le pouvoir pathogène du virus de l'anémie infectieuse des équidés, est le manque de fixité dans la durée de la période d'incubation. L'incubation apparente, période dont la fin est marquée par la première élévation thermique, semble n'obeir à aucune règle précise. Les données numériques relevées dans la littérature, sont des plus diverses. Nous les résumons dans le tableau ci-joint et donnons plus loin les opinions des auteurs cités. NOMBRE MAXIMUM MINIMUM D'OBSERVATIONS Nagao (1) 2 jours