jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
délipidés ne sont pas dénaturés. Ils ont conservé leurs propriétés physiques essentielles, solubilité, précipitabilité réversible par le sulfate d'ammonium, point isoélectrique. De plus on peut faire jouer en sens inverse la concentration alcoolique et le temps de contact entre sérum et éther ; le maximum d'extraction reste le même. Une différence physico-chimique doit donc exister entre les lipides extractibles et ceux qui ne le sont pas. Pour répondre à cette question, il fallait connaître le rôle particulier de l'alcool éthylique ajouté au système (sérum + éther). Nous avons pour cela substitué à ce réactif toute une série de substances organiques et minérales et constaté qu'elles peuvent se répartir en deux groupes bien distincts : 1° — Dans le premier groupe se placent des composés (les cinq premiers alcools acycliques primaires, le cyclohexan, l'acétone) dont l'action est comparable à celle de l'éthanol. Dès que la concentration de chacune d'elles dans le mélange (sérum + éther) dépasse une certaine valeur, il y a déclenchement du phénomène d'extraction. Cette concentration critique ne dépend pas du poids moléculaire mais seulement de la nature de la substance. Le plateau de la courbe d'extraction, au contraire, est le même pour toutes les substances ; il est donc indépendant de la constitution de celles-ci et caractérise uniquement le sérum considéré. Ainsi la quantité de lipides extraite par l'éther faiblement alcoolisé passe par un maximum et décroît ensuite lorsque la concentration alcoolique augmente. Ce maximum reste inchangé si l'on fait varier en sens inverse, entre certaines limites, la concentration alcoolique et le temps. Il est le même avec toute une série de composés chimiques assez différents. Ce maximum délimite donc une catégorie de substances lipoïdiques qui contractent avec les protéides des liaisons tout à fait particulières. Nous avons proposé d'appeler rapport d'extraction le rapport entre le maximum de lipides extraits à froid par l'éther alcoolisé et les lipides totaux obtenus par épuisement alcoolique et éthéré du coagulum lipoprotéidique. 2° — Le second groupe comprend des composés (glycol éthylénique, aldéhydes formique et éthylique, acide sulfurique et soude en solution normale) qui n'ont aucun effet sur l'extraction. Les quantités de
donc indépendant de la constitution de celles-ci et caractérise uniquement le sérum considéré. Ainsi la quantité de lipides extraite par l'éther faiblement alcoolisé passe par un maximum et décroît ensuite lorsque la concentration alcoolique augmente. Ce maximum reste inchangé si l'on fait varier en sens inverse, entre certaines limites, la concentration alcoolique et le temps. Il est le même avec toute une série de composés chimiques assez différents. Ce maximum délimite donc une catégorie de substances lipoïdiques qui contractent avec les protéides des liaisons tout à fait particulières. Nous avons proposé d'appeler rapport d'extraction le rapport entre le maximum de lipides extraits à froid par l'éther alcoolisé et les lipides totaux obtenus par épuisement alcoolique et éthéré du coagulum lipoprotéidique. 2° — Le second groupe comprend des composés (glycol éthylénique, aldéhydes formique et éthylique, acide sulfurique et soude en solution normale) qui n'ont aucun effet sur l'extraction. Les quantités de lipides extraites sont les mêmes qu'en présence d'éther seul. Le phénomène est donc régi par une loi de « Tout ou rien. » Pour les substances du premier groupe, l'extraction s'effectue jusqu'à un terme qui est le même pour toutes ; l'action des substances du deuxième groupe est absolument nulle. Nous nous sommes alors demandés quelles différences déterminaient parmi les substances étudiées deux classes aussi nettement tranchées. L'étude physico-chimique des systèmes (eau-éther-substance) puis (sérum-éther-substance) a établi que les substances du premier groupe sont solubles dans l'éther et diminuent notablement la tension interfaciale sérum-éther. Leur solubilité dans le sérum et leur action sur la solubilité de l'éther dans la phase aqueuse n'interviennent pas. Les substances du deuxième groupe sont insolubles ou peu solubles dans l'éther et leur action dépressive sur l'énergie libre à l'interface sérum-éther est faible. Il est possible de libérer certaines substances lipoïdiques du sérum par l'oléate de soude (CHARONNAT). MACHEBÉUF et TAYEAU pensent que la chaîne polyméthylénique de ce sel s'est solvatée sur les groupements éléiques des protéides à la place des lipides qui ont été ainsi libérés. Nous nous sommes attachés à préciser les conditions dans lesquelles doit se trouver le système (sérum-éther-alcool) pour que la valeur
Nous nous sommes alors demandés quelles différences déterminaient parmi les substances étudiées deux classes aussi nettement tranchées. L'étude physico-chimique des systèmes (eau-éther-substance) puis (sérum-éther-substance) a établi que les substances du premier groupe sont solubles dans l'éther et diminuent notablement la tension interfaciale sérum-éther. Leur solubilité dans le sérum et leur action sur la solubilité de l'éther dans la phase aqueuse n'interviennent pas. Les substances du deuxième groupe sont insolubles ou peu solubles dans l'éther et leur action dépressive sur l'énergie libre à l'interface sérum-éther est faible. Il est possible de libérer certaines substances lipoïdiques du sérum par l'oléate de soude (CHARONNAT). MACHEBÉUF et TAYEAU pensent que la chaîne polyméthylénique de ce sel s'est solvatée sur les groupements éléiques des protéides à la place des lipides qui ont été ainsi libérés. Nous nous sommes attachés à préciser les conditions dans lesquelles doit se trouver le système (sérum-éther-alcool) pour que la valeur du rapport d'extraction soit toujours identique à elle-même. 1° — Température. La température moyenne doit être de 20° (pratiquement 17° à 23°). L'extractibilité des lipides diminue en effet avec ce facteur. 2° — Concentration en ions hydrogène. L'extractibilité des lipides varie considérablement avec le pH mais peut être considérée comme constante entre 7.0 et 8.5. Le pH du sérum est toujours compris entre ces limites, même dans les cas pathologiques. 3° — Vieillissement du sérum. On doit déterminer le rapport d'extraction en utilisant le sérum frais. Après un certain temps de conservation in vitro (un à trois mois) l'extractibilité des lipides sériques subit une diminution brusque et très importante. Les différences physico-chimiques qui existent entre lipides extractibles et lipides non extractibles justifient suffisamment l'intérêt que nous attachons au rapport d'extraction. Ce paramètre est très constant chez un animal donné même soumis à des saignées répétées, malgré les variations considérables des lipides totaux. Sa valeur moyenne dans « l'état de santé » est de —^— environ. Dans les états pathologiques graves, au contraire, le rapport d'extraction subit une chute considérable. Chez la génisse, au cours de l'infection massive par le virus de la vaccine, il passe de la valeur moyenne 0.64
constante entre 7.0 et 8.5. Le pH du sérum est toujours compris entre ces limites, même dans les cas pathologiques. 3° — Vieillissement du sérum. On doit déterminer le rapport d'extraction en utilisant le sérum frais. Après un certain temps de conservation in vitro (un à trois mois) l'extractibilité des lipides sériques subit une diminution brusque et très importante. Les différences physico-chimiques qui existent entre lipides extractibles et lipides non extractibles justifient suffisamment l'intérêt que nous attachons au rapport d'extraction. Ce paramètre est très constant chez un animal donné même soumis à des saignées répétées, malgré les variations considérables des lipides totaux. Sa valeur moyenne dans « l'état de santé » est de —^— environ. Dans les états pathologiques graves, au contraire, le rapport d'extraction subit une chute considérable. Chez la génisse, au cours de l'infection massive par le virus de la vaccine, il passe de la valeur moyenne 0.64 à la valeur moyenne 0.16 (soit une chute de 4 à 1 ) alors que les protéides totaux varient à peine et que les lipides totaux diminuent seulement dans le rapport de 1 à 0.55 (chiffres établis sur l'ensemble des 17 animaux utilisés). L'étude de la néphrite expérimentale au nitrate d'urine et de la clavelée chez le mouton, de l'anémie infectieuse chez le cheval permet de confirmer la généralité du phénomène. Chaque fois qu'un animal subit une atteinte sévère, le rapport d'extraction diminue considérablement. Cet accroissement de l'énergie de fixation des lipides aux protéides est la caractéristique d'un état pathologique grave. Il est indépendant de la lipidémie ; dans certains cas les lipides totaux augmentent, dans d'autres ils diminuent. Les variations du rapport d'extraction sont très faibles dans les maladies bénignes (infection vaccinale localisée chez le lapin et la génisse, typhus expérimental de l'âne). Au cours des états pathologiques, la constitution des lipides sériques subit aussi des variations qualitatives et quantitatives. L'hypolipidémie est de règle dans la maladie vaccinale, mais la diminution des substances insaponifiables (libres et combinées) est plus rapide que celle des acides gras totaux. Il faut noter également que les substances lipoïdiques extraites à froid au voisinage
d'urine et de la clavelée chez le mouton, de l'anémie infectieuse chez le cheval permet de confirmer la généralité du phénomène. Chaque fois qu'un animal subit une atteinte sévère, le rapport d'extraction diminue considérablement. Cet accroissement de l'énergie de fixation des lipides aux protéides est la caractéristique d'un état pathologique grave. Il est indépendant de la lipidémie ; dans certains cas les lipides totaux augmentent, dans d'autres ils diminuent. Les variations du rapport d'extraction sont très faibles dans les maladies bénignes (infection vaccinale localisée chez le lapin et la génisse, typhus expérimental de l'âne). Au cours des états pathologiques, la constitution des lipides sériques subit aussi des variations qualitatives et quantitatives. L'hypolipidémie est de règle dans la maladie vaccinale, mais la diminution des substances insaponifiables (libres et combinées) est plus rapide que celle des acides gras totaux. Il faut noter également que les substances lipoïdiques extraites à froid au voisinage du maximum d’extraction sont plus riches en insaponifiable que celles qui restent liées aux protéides dans ces conditions. De grandes différences d’état physico-chimique existent entre les lipides du lait et du sérum, malgré une certaine analogie des courbes d’extraction. Nous pensons qu’il n’y a pas de cénapses lipoprotéidiques dans le lait. On peut cependant envisager l’existence d’un système lipidique autonome, construit sur le schéma des systèmes lipoprotéidiques, mais moins bien stabilisé vis-à-vis de l’eau par suite de l’insuffisance numérique des groupements polaires hydrophiles. Cette hypothèse rend bien compte des faits mais doit être étayée par des recherches ultérieures. Une analyse plus complète du phénomène d’extraction comportait l’examen comparatif de l’extractibilité des lipides liés aux deux grands groupes de protéides que sépare le sulfate d’ammonium à demi-saturation. Les recherches des auteurs qui avaient abordé ce problème portaient sur des protéides dénaturés par la chaleur ou la dessication. Nous avons pu établir que, dans le système lipoglobulinique, l’union des lipides avec les protéides non dénaturés est beaucoup plus énergique que dans le système lipoalbuminique. Ces constatations permettent de coordonner et d’interpréter d’autres résultats : la diminution concomitante du rapport d’extraction et de l’index albuminique au cours des états pathologiques. L’extractibilité des lipides
lait. On peut cependant envisager l’existence d’un système lipidique autonome, construit sur le schéma des systèmes lipoprotéidiques, mais moins bien stabilisé vis-à-vis de l’eau par suite de l’insuffisance numérique des groupements polaires hydrophiles. Cette hypothèse rend bien compte des faits mais doit être étayée par des recherches ultérieures. Une analyse plus complète du phénomène d’extraction comportait l’examen comparatif de l’extractibilité des lipides liés aux deux grands groupes de protéides que sépare le sulfate d’ammonium à demi-saturation. Les recherches des auteurs qui avaient abordé ce problème portaient sur des protéides dénaturés par la chaleur ou la dessication. Nous avons pu établir que, dans le système lipoglobulinique, l’union des lipides avec les protéides non dénaturés est beaucoup plus énergique que dans le système lipoalbuminique. Ces constatations permettent de coordonner et d’interpréter d’autres résultats : la diminution concomitante du rapport d’extraction et de l’index albuminique au cours des états pathologiques. L’extractibilité des lipides globuliniques étant beaucoup plus faible que celle des lipides albuminiques, l’augmentation des globulines par rapport aux albumines doit se traduire par la diminution du rapport d’extraction que l’on observe effectivement. Le vieillissement du sérum est également marqué par une diminution de l’index albuminique et par une chute brusque du rapport d’extraction. Nous avons montré que le facteur concentration en ions hydrogène influe profondément sur l’extractibilité des lipides sériques. Celle-ci, maxima au voisinage de la neutralité, diminue par acidification. Dans la zone alcaline, elle diminue également lorsque le pH dépasse la valeur 9, atteint très rapidement un minimum vers 10 et augmente à nouveau au-dessus de 12. La diminution de l’extractibilité paraît être en rapport avec l’hydratation des micelles et l’accroissement de la zone aqueuse périmicellaire imperméable aux solvants des graisses, surtout du côté alcalin du point isoélectrique moyen des protéides sériques. Lorsque le milieu devient très alcalin, les forces électrostatiques dues à l’ionisation, qui tendent à déformer les micelles, arrivent finalement à les faire éclater. L’augmentation très rapide de la viscosité du sérum en milieu alcalin est une preuve du gonflement et de l’hydratation des micelles. Ces modifications de l’extractibilité sous l’influence du pH ne sont pas réversibles. CHAPITRE II
d’extraction. Nous avons montré que le facteur concentration en ions hydrogène influe profondément sur l’extractibilité des lipides sériques. Celle-ci, maxima au voisinage de la neutralité, diminue par acidification. Dans la zone alcaline, elle diminue également lorsque le pH dépasse la valeur 9, atteint très rapidement un minimum vers 10 et augmente à nouveau au-dessus de 12. La diminution de l’extractibilité paraît être en rapport avec l’hydratation des micelles et l’accroissement de la zone aqueuse périmicellaire imperméable aux solvants des graisses, surtout du côté alcalin du point isoélectrique moyen des protéides sériques. Lorsque le milieu devient très alcalin, les forces électrostatiques dues à l’ionisation, qui tendent à déformer les micelles, arrivent finalement à les faire éclater. L’augmentation très rapide de la viscosité du sérum en milieu alcalin est une preuve du gonflement et de l’hydratation des micelles. Ces modifications de l’extractibilité sous l’influence du pH ne sont pas réversibles. CHAPITRE II CONCLUSIONS GÉNÉRALES Comment peut-on concevoir le fonctionnement du système lipoprotéidique du sérum sanguin ? Les lipides sériques peuvent être classés d’après l’énergie de leurs liaisons avec les protéides en trois catégories bien distinctes : 1 ° — Les lipides extractibles par l’éther pur ou alcoolisé à des taux inférieurs à la concentration critique. Ils ne sont pas à l’état libre car le sérum est optiquement vide. Ils sont engagés, soit dans des cénapses lipoprotéidiques, soit dans des cénapses lipo-lipidiques. L’étude particulière de ces lipides, qui représentent 1 à 5 % des lipides totaux, n’a jamais été entreprise. / 2° — Les lipides extractibles par l’éther pour la concentration optima en alcool (les lipides extraits par l’éther seul étant englobés dans cette catégorie). Les cénapses, que l’extraction de ces lipides a partiellement délipidées, ont gardé leurs propriétés physiques essentielles et n’ont pas subi de dénaturation appréciable. 3° — Les lipides non extractibles par l’éther alcoolisé à froid. Leur libération exige la dénaturation complète des cénapses lipoprotéidiques (action prolongée de l’alcool puis de l’éther à l’ébullition). La stabilité des lipides dans les cénapses lipoprotéidiques est mesurée par l’équilibre qui s’établit entre ces deux catégories de lipides. Nous avons montré l’intérêt qui s’attache
la concentration critique. Ils ne sont pas à l’état libre car le sérum est optiquement vide. Ils sont engagés, soit dans des cénapses lipoprotéidiques, soit dans des cénapses lipo-lipidiques. L’étude particulière de ces lipides, qui représentent 1 à 5 % des lipides totaux, n’a jamais été entreprise. / 2° — Les lipides extractibles par l’éther pour la concentration optima en alcool (les lipides extraits par l’éther seul étant englobés dans cette catégorie). Les cénapses, que l’extraction de ces lipides a partiellement délipidées, ont gardé leurs propriétés physiques essentielles et n’ont pas subi de dénaturation appréciable. 3° — Les lipides non extractibles par l’éther alcoolisé à froid. Leur libération exige la dénaturation complète des cénapses lipoprotéidiques (action prolongée de l’alcool puis de l’éther à l’ébullition). La stabilité des lipides dans les cénapses lipoprotéidiques est mesurée par l’équilibre qui s’établit entre ces deux catégories de lipides. Nous avons montré l’intérêt qui s’attache à la connaissance de cet équilibre. On peut dire avec beaucoup de certitude qu’une valeur du rapport d’extraction supérieure à 0.60 caractérise l’état de santé ; inférieure à 0.20 elle est un indice de maladie grave. Ces chiffres sont indépendants des variations souvent considérables de la lipidémie. Le rapport d’extraction diminue également par conservation du sérum in vitro. Aucune variation du pH compatible avec la vie ne peut expliquer cette diminution de l’extractibilité des lipides au cours des états pathologiques. La définition des grandes fractions protéidiques est basée sur l’existence d’une discontinuité de la courbe de précipitation fractionnée par le sulfate d’ammonium. Les globulines sont précipitées par ce sel à demi-saturation, les albumines à saturation complète. L’équilibre qui s’établit entre ces deux catégories de protéides est mesuré par l’index albuminique, rapport des albumines aux globulines. Celui-ci diminue dans tous les processus que nous avons réunis sous le terme de vieillissement (physiologique et physique) : âge, maladie, vieillissement in vitro, alcalinisation. Des paliers thermodynamiques très nets permettent ainsi de définir plusieurs catégories de lipides et de protéides, mais il n’existe pas entre chacune d’elles de différence chimique qualitative appréciable. Les lipides extractibles et non extractibles diffèrent un peu par leur teneur
diminue également par conservation du sérum in vitro. Aucune variation du pH compatible avec la vie ne peut expliquer cette diminution de l’extractibilité des lipides au cours des états pathologiques. La définition des grandes fractions protéidiques est basée sur l’existence d’une discontinuité de la courbe de précipitation fractionnée par le sulfate d’ammonium. Les globulines sont précipitées par ce sel à demi-saturation, les albumines à saturation complète. L’équilibre qui s’établit entre ces deux catégories de protéides est mesuré par l’index albuminique, rapport des albumines aux globulines. Celui-ci diminue dans tous les processus que nous avons réunis sous le terme de vieillissement (physiologique et physique) : âge, maladie, vieillissement in vitro, alcalinisation. Des paliers thermodynamiques très nets permettent ainsi de définir plusieurs catégories de lipides et de protéides, mais il n’existe pas entre chacune d’elles de différence chimique qualitative appréciable. Les lipides extractibles et non extractibles diffèrent un peu par leur teneur en acides gras, en insaponifiable, en phosphore, mais il n’y a aucune substance lipoïdique qui fasse partie exclusive de l’une de ces catégories. Quant aux albumines et aux globulines, ni leur composition élémentaire, ni leur teneur en acides aminés, ni leur index aminique ne constitue entre elles de différences bien nettes. Il est certain que leurs propriétés physiques (solubilité, poids moléculaire, point isoionique) confèrent aux globulines et aux albumines une certaine individualité ; il faut ajouter que les lipides extractibles sont liés en majeure partie aux albumines et les lipides inextractibles aux globulines. Ce sont donc des systèmes physiques ; ils ne nous paraissent pas avoir une valeur chimique réelle. Il est très important de noter que les paramètres qui définissent l’équilibre micellaire du système lipoprotéidique, le rapport d’extraction pour les lipides, l’index albuminique pour les protéides, ne sont pas indépendants. Ils varient dans le même sens sous l’influence du vieillissement physiologique et physique. Le vieillissement se traduit donc par une diminution de l’extractibilité des lipides et une augmentation de la précipitabilité des protéides. Si l'on remarque de plus que le poids moléculaire des globulines est double de celui des albumines, on est conduit à penser que cette évolution lente,
nettes. Il est certain que leurs propriétés physiques (solubilité, poids moléculaire, point isoionique) confèrent aux globulines et aux albumines une certaine individualité ; il faut ajouter que les lipides extractibles sont liés en majeure partie aux albumines et les lipides inextractibles aux globulines. Ce sont donc des systèmes physiques ; ils ne nous paraissent pas avoir une valeur chimique réelle. Il est très important de noter que les paramètres qui définissent l’équilibre micellaire du système lipoprotéidique, le rapport d’extraction pour les lipides, l’index albuminique pour les protéides, ne sont pas indépendants. Ils varient dans le même sens sous l’influence du vieillissement physiologique et physique. Le vieillissement se traduit donc par une diminution de l’extractibilité des lipides et une augmentation de la précipitabilité des protéides. Si l'on remarque de plus que le poids moléculaire des globulines est double de celui des albumines, on est conduit à penser que cette évolution lente, variable, mais irréversible que constitue le vieillissement se traduit dans le sérum par la transformation système lipoalbuminique en système lipoglobulinique. Cette réaction, essentiellement quantique, se traduirait par la condensation de deux granules albuminiques en un granule globulinique, les lipides albuminiques extractibles devenant des lipides globuliniques inextractibles. Ce schéma mécanique un peu succinct rend compte des variations souvent très rapides du rapport d'extraction et de l'index albuminique. Nous ne savons malheureusement pas si le changement de précipitabilité des protéides s'accompagne toujours d'une transformation chimique réelle. Un fait demeure certain : l'évolution des protéides est inséparable de celle des lipides et l'état physiologique de l'organisme dépend essentiellement d'un équilibre entre les différentes catégories de lipides et de protéides que nous avons énumérées. Cet équilibre est mesuré par l'index albuminique et le rapport d'extraction. Le système lipoprotéidique du sérum, avec son double caractère de stabilité et de mobilité apparaît donc comme essentiellement représentatif des activités de la matière vivante. TABLE DES MATIÈRES INTRODUCTION PREMIÈRE PARTIE TECHNIQUES CHAPITRE I. GÉNÉRALITÉS SUR LA PRÉPARATION DU SERUM 7 Rapports du sérum avec le sang 7 Mode d'obtention du sérum 8 Conditions de prélèvement du sang 9 Technique employée pour la préparation du sérum 10 Enoncé de