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des tables de laboratoire. SOUS-SOL Le sous-sol, surélevé, est relié à l'étage par un escalier intérieur et communique avec l'extérieur par un escalier situé sur la face S. Il comprend les pièces suivantes: Une réserve contenant une grande armoire pour les produits chimiques et un rayonnage ouvert pour la verrerie. Une laverie avec un autoclave et un four à stériliser. Une chambre noire, aménagée pour les travaux photographiques, contient un appareil monté sur un banc d'optique vertical pour la microphotographie (LEITZ) . Un vestiaire avec lavabo, douche et W. C. Deux grandes pièces non encore affectées. Le gaz d'essence fourni par l'appareil générateur du bâtiment principal est amené par un tuyau qui passe en tranchée et débouche au sous-sol. Chacune des canalisations secondaires d'eau et de gaz est munie d'un robinet d'arrêt. LABORATOIRES DE CHIMIE NOUVEAU BATIMENT LABORATOIRE DE PHYSIQUE ARCHIVES DE L'INSTITUT PASTEUR DU MAROC PREMIÈRE PARTIE TRAVAUX DE RECHERCHE RECHERCHES EXPERIMENTALES SUR LE TRACHOME ETUDE LIMITAIRE : LE TRACHOME DU MACACA SYLVANUS * par G. BLANC, R. PAGES et L.A. MARTIN Depuis quelques années, de nombreux travaux sont consacrés au trachome afin d'élucider la nature de l'agent pathogène (rickettsie, virus filtrable ?), de cultiver ce germe sur tissus et aussi de réaliser l'infection expérimentale de différents animaux. Il leur manque parfois d'être étayés par la preuve expérimentale que seule peut fournir la reproduction du trachome chez l'homme ou le singe, par inoculation de tel produit de réaction animal ou tel produit de culture considéré comme trachomateux. En fait, il n'est pas possible, sauf exceptions rares, d'utiliser l'homme pour cette démonstration. Il ne reste comme (*) Ce mémoire développe et complète le travail antérieurement paru sous le même titre : Bull. Acad. Méd. 1939, 122, 299. animal réactif à utiliser que les diverses espèces de singes. Bien des expériences ont été faites en vue d'étudier leur sensibilité au trachome. Elles ont porté sur différentes races et les résultats et conclusions des divers expérimentateurs ne sont pas concordants. En dehors des anthropoïdes, Ch. Nicolle considère le magot (Macaca sylvanus) comme le singe le plus sensible. Julianelle et Harrison étudient surtout
et aussi de réaliser l'infection expérimentale de différents animaux. Il leur manque parfois d'être étayés par la preuve expérimentale que seule peut fournir la reproduction du trachome chez l'homme ou le singe, par inoculation de tel produit de réaction animal ou tel produit de culture considéré comme trachomateux. En fait, il n'est pas possible, sauf exceptions rares, d'utiliser l'homme pour cette démonstration. Il ne reste comme (*) Ce mémoire développe et complète le travail antérieurement paru sous le même titre : Bull. Acad. Méd. 1939, 122, 299. animal réactif à utiliser que les diverses espèces de singes. Bien des expériences ont été faites en vue d'étudier leur sensibilité au trachome. Elles ont porté sur différentes races et les résultats et conclusions des divers expérimentateurs ne sont pas concordants. En dehors des anthropoïdes, Ch. Nicolle considère le magot (Macaca sylvanus) comme le singe le plus sensible. Julianelle et Harrison étudient surtout le trachome du Macacus rhesus, tandis que Stewart (1) considère que le cercopithèque et le babouin donnent le plus haut pourcentage de réactions. En fait, il est moins intéressant peut-être de savoir si telle espèce est plus ou moins sensible qu'une autre, que d'en avoir une pratique suffisante et de bien connaître sa façon de réagir; c'est pourquoi, comme travail liminaire à nos recherches sur le trachome, nous avons voulu déterminer, de façon aussi précise que possible, quelle était la sensibilité à cette infection de l'espèce que nous pouvions nous procurer sur place, au Maroc, le Macaca sylvanus. À cause de sa répartition géographique très limitée : Algérie, Maroc, Gibraltar, et du fait que la capture n'en est pas libre, le magot sert assez rarement d'animal de laboratoire. Ch. Nicolle, A. Cuénod et L. Blaizot (2) les premiers, l'ont utilisé pour les études sur le trachome et ont montré sa réceptivité. Leurs expériences ont porté sur une trentaine d'individus. Le pourcentage de réactions positives consécutives à l'inoculation directe de virus humain n'est donné que pour un petit nombre d'individus, 3 en 1912 avec une réaction, 1 en 1913 avec une réaction. Le passage de magot à magot n'a été tenté
bien connaître sa façon de réagir; c'est pourquoi, comme travail liminaire à nos recherches sur le trachome, nous avons voulu déterminer, de façon aussi précise que possible, quelle était la sensibilité à cette infection de l'espèce que nous pouvions nous procurer sur place, au Maroc, le Macaca sylvanus. À cause de sa répartition géographique très limitée : Algérie, Maroc, Gibraltar, et du fait que la capture n'en est pas libre, le magot sert assez rarement d'animal de laboratoire. Ch. Nicolle, A. Cuénod et L. Blaizot (2) les premiers, l'ont utilisé pour les études sur le trachome et ont montré sa réceptivité. Leurs expériences ont porté sur une trentaine d'individus. Le pourcentage de réactions positives consécutives à l'inoculation directe de virus humain n'est donné que pour un petit nombre d'individus, 3 en 1912 avec une réaction, 1 en 1913 avec une réaction. Le passage de magot à magot n'a été tenté qu'une fois et avec succès. Plus tard, Stewart (3) a refait quelques expériences sur cette même espèce. Il a inoculé 2 individus en 1912 avec 1 succès et 9 en 1933 avec 2 succès. Les recherches que nous poursuivons depuis trois ans nous ont permis de confirmer les travaux des auteurs précédents, en ce qui concerne la sensibilité du magot. Nous avons pu éga (1) STEWART F.H. Ann. Rep. Giza Mem. opht. Labor. 1938, 12, 5. NICOLLE Ch., CUENOD A. et BLAIZOT L. Arch. Inst. Pasteur Tunis 1913, 11, 157. NICOLLE Ch. et CUENOD A. Arch. Inst. Pasteur Afrique du Nord 1921, 1, 149. STEWART F.H., Ann. Rep., Giza Mem. Ophth. Labor. 1932, 7, 124 et 1933, 8, 121. ÉLAN préciser quelques points qui avaient peu retenu l'attention de nos devanciers. Ce sont ces faits que nous présentons ici, ils sont basés sur 70 expériences faites sur 40 macaques. MATÉRIEL D'INOCULATION Pour les passages de trachome humain au singe, nous prélevons le matériel virulent par grattage de la conjonctive d'un ou de plusieurs malades et quelquefois, par excision d'un lambeau de muqueuse. Le produit ainsi recueilli est, soit immédiatement utilisé pour l'inoculation du singe, soit conservé au froid pendant 24
auteurs précédents, en ce qui concerne la sensibilité du magot. Nous avons pu éga (1) STEWART F.H. Ann. Rep. Giza Mem. opht. Labor. 1938, 12, 5. NICOLLE Ch., CUENOD A. et BLAIZOT L. Arch. Inst. Pasteur Tunis 1913, 11, 157. NICOLLE Ch. et CUENOD A. Arch. Inst. Pasteur Afrique du Nord 1921, 1, 149. STEWART F.H., Ann. Rep., Giza Mem. Ophth. Labor. 1932, 7, 124 et 1933, 8, 121. ÉLAN préciser quelques points qui avaient peu retenu l'attention de nos devanciers. Ce sont ces faits que nous présentons ici, ils sont basés sur 70 expériences faites sur 40 macaques. MATÉRIEL D'INOCULATION Pour les passages de trachome humain au singe, nous prélevons le matériel virulent par grattage de la conjonctive d'un ou de plusieurs malades et quelquefois, par excision d'un lambeau de muqueuse. Le produit ainsi recueilli est, soit immédiatement utilisé pour l'inoculation du singe, soit conservé au froid pendant 24 heures. Cette dernière technique est celle que nous avons suivie au début de nos expériences, par nécessité, car le prélèvement était fait à Rabat et utilisé à Casablanca. Depuis, nous n'employons presque exclusivement que du matériel qui vient d'être recueilli sur le malade. Nous avons renoncé à broyer en eau physiologique le produit virulent et l'inoculons directement à la curette, sur la conjonctive du singe, préalablement scarifiée légèrement. Trois fois, nous avons inoculé directement un lambeau de muqueuse oculaire, par greffe, en incisant la conjonctive de la paupière supérieure du singe et en introduisant directement le lambeau de conjonctive humaine par cette boutonnière, sans suture. Pour les passages de singe à singe, nous avons toujours inoculé directement le produit virulent prélevé à la curette, sur la conjonctive de la paupière supérieure droite ou gauche, après l'avoir légèrement scarifiée au vaccinostyle ou avec le bord tranchant de la curette. Pour le passage de singe à homme, la technique est la même que pour le passage du singe au singe. Le prélèvement est fait au singe à la curette et c'est cette curette elle-même qui est frottée sur la conjonctive palpébrale humaine en érodant très légèrement la muqueuse. TRACHOME EXPÉRIMENTAL Quelques jours
physiologique le produit virulent et l'inoculons directement à la curette, sur la conjonctive du singe, préalablement scarifiée légèrement. Trois fois, nous avons inoculé directement un lambeau de muqueuse oculaire, par greffe, en incisant la conjonctive de la paupière supérieure du singe et en introduisant directement le lambeau de conjonctive humaine par cette boutonnière, sans suture. Pour les passages de singe à singe, nous avons toujours inoculé directement le produit virulent prélevé à la curette, sur la conjonctive de la paupière supérieure droite ou gauche, après l'avoir légèrement scarifiée au vaccinostyle ou avec le bord tranchant de la curette. Pour le passage de singe à homme, la technique est la même que pour le passage du singe au singe. Le prélèvement est fait au singe à la curette et c'est cette curette elle-même qui est frottée sur la conjonctive palpébrale humaine en érodant très légèrement la muqueuse. TRACHOME EXPÉRIMENTAL Quelques jours après l'inoculation, la conjonctive est congestionnée, épaissie. Cette réaction, quelquefois, est la seule signature de l'inoculation et n'est pas suivie de formation folliculaire. Bien que ces formes atypiques soient probablement trachomateuses, ainsi que nous avons pu le constater une fois en obtenant un passage positif de singe à singe en partant d'une telle lésion abortive, nous avons en raison de l'absence de signes spécifiques, considéré dans notre relevé, de tels cas comme négatifs. Lorsque la maladie évolue, on voit apparaître au bout de 10 à 15 jours, quelquefois trois semaines après l'inoculation, des follicules, d'abord, en général, à l'angle interne, puis à l'angle externe et dans les cas florides sur toute la conjonctive tarsienne. La vascularisation de la conjonctive devient très marquée, les follicules se sclérosent et sont le siège de petites hémorragies interstitielles lorsque l'on retourne la paupière. La cicatrisation se fait lentement; pendant des semaines, il reste quelques éléments encore nettement perceptibles. La durée de la maladie ne dépasse pas, en général, six mois. Il est d'ailleurs assez difficile de préciser la fin de la réaction car plusieurs semaines après la disparition des follicules, il reste des lésions cicatricielles qui n'ont plus les caractères spécifiques du trachome. Nous
partant d'une telle lésion abortive, nous avons en raison de l'absence de signes spécifiques, considéré dans notre relevé, de tels cas comme négatifs. Lorsque la maladie évolue, on voit apparaître au bout de 10 à 15 jours, quelquefois trois semaines après l'inoculation, des follicules, d'abord, en général, à l'angle interne, puis à l'angle externe et dans les cas florides sur toute la conjonctive tarsienne. La vascularisation de la conjonctive devient très marquée, les follicules se sclérosent et sont le siège de petites hémorragies interstitielles lorsque l'on retourne la paupière. La cicatrisation se fait lentement; pendant des semaines, il reste quelques éléments encore nettement perceptibles. La durée de la maladie ne dépasse pas, en général, six mois. Il est d'ailleurs assez difficile de préciser la fin de la réaction car plusieurs semaines après la disparition des follicules, il reste des lésions cicatricielles qui n'ont plus les caractères spécifiques du trachome. Nous n'avons jamais observé, comme Ch. Nicolle et Cuénod, que le retournement des paupières de l'animal, voire même le grattage de la conjonctive, aient une action empêchante sur l'évolution de l'infection. Certains de nos animaux, curetés à trois reprises, ont continué à présenter un trachome floride sans régression des lésions. Il est de règle générale que l'infection passe de la paupière supérieure à l'inférieure. Une seule fois, nous avons observé le passage de l'infection d'un œil à l'autre. Variations de la sensibilité du singe Par primo inoculation avec du virus humain, nous avons obtenu sur 19 singes, 4 fois un résultat léger donc douteux, 8 fois un résultat positif et 7 fois un résultat négatif. Les réinoculations faites avec du virus humain aux singes n'ayant pas réagi une première fois, nous ont donné : 1 résultat douteux et 7 résultats négatifs. Autant qu'il soit permis de tirer une conclusion de résultats expérimentaux négatifs, on peut supposer, comme l'a fait Julianelle, que certains animaux ont une résistance plus grande que d'autres à l'infection. Il ne semble pas que l'on puisse incriminer le pouvoir infectant du produit inoculé, puisqu'il arrive qu'avec le même prélèvement un singe s'infecte et qu'un autre ne s'infecte pas,
est de règle générale que l'infection passe de la paupière supérieure à l'inférieure. Une seule fois, nous avons observé le passage de l'infection d'un œil à l'autre. Variations de la sensibilité du singe Par primo inoculation avec du virus humain, nous avons obtenu sur 19 singes, 4 fois un résultat léger donc douteux, 8 fois un résultat positif et 7 fois un résultat négatif. Les réinoculations faites avec du virus humain aux singes n'ayant pas réagi une première fois, nous ont donné : 1 résultat douteux et 7 résultats négatifs. Autant qu'il soit permis de tirer une conclusion de résultats expérimentaux négatifs, on peut supposer, comme l'a fait Julianelle, que certains animaux ont une résistance plus grande que d'autres à l'infection. Il ne semble pas que l'on puisse incriminer le pouvoir infectant du produit inoculé, puisqu'il arrive qu'avec le même prélèvement un singe s'infecte et qu'un autre ne s'infecte pas, et manifeste ultérieurement la même résistance à de nouvelles inoculations. TRACHOME DE PASSAGE Les auteurs qui ont étudié le trachome expérimental du singe ont, en général, peu cherché à entretenir le virus par passage de singe à singe. Nicolle, Cuénod et Blaizot signalent qu'ils ont obtenu une fois un passage de chimpanzé à macaque, une fois de macaque à chimpanzé et enfin une fois de macaque à macaque. Julianelle, inoculant à des singes neufs du virus prélevé sur 4 singes (Macacus rhesus) infectés depuis 2 semaines à 6 mois, conclut, de 32 expériences, dont 11 positives, que l'incubation est de 12 à 27 jours et que la guérison se fait généralement vite; dans 2 cas, cependant, il y eut infection plus marquée durant 3 à 5 mois. Les follicules sont peu nombreux. En résumé, le trachome passé de singe à singe se caractérise par une incubation plus longue, une infection plus modérée et de durée plus courte. Julianelle n'a réussi qu'exceptionnellement un troisième passage, jamais un quatrième. Nous n'avons pas observé une telle diminution de virulence par passages successifs de singe à singe. Trachome de deuxième passage Sur 5 inoculations pratiquées avec différents virus, 3 ont été positives avec incubation
de chimpanzé à macaque, une fois de macaque à chimpanzé et enfin une fois de macaque à macaque. Julianelle, inoculant à des singes neufs du virus prélevé sur 4 singes (Macacus rhesus) infectés depuis 2 semaines à 6 mois, conclut, de 32 expériences, dont 11 positives, que l'incubation est de 12 à 27 jours et que la guérison se fait généralement vite; dans 2 cas, cependant, il y eut infection plus marquée durant 3 à 5 mois. Les follicules sont peu nombreux. En résumé, le trachome passé de singe à singe se caractérise par une incubation plus longue, une infection plus modérée et de durée plus courte. Julianelle n'a réussi qu'exceptionnellement un troisième passage, jamais un quatrième. Nous n'avons pas observé une telle diminution de virulence par passages successifs de singe à singe. Trachome de deuxième passage Sur 5 inoculations pratiquées avec différents virus, 3 ont été positives avec incubation de 7 à 15 jours; dans un cas la maladie a duré plus de 7 mois; dans l'autre, la cicatrisation est presque faite après 6 mois, mais, au bout d'un an, on observe encore des lésions cicatricielles. Enfin, dans le troisième cas, l'animal est mort 335 jours après le début de la maladie ayant encore des granulations bien marquées. Voici les observations de ces trois cas positifs. Magot Th.. Inoculé à l’œil droit le 5 janvier 1938, avec un virus de singe évoluant depuis 33 jours. Incubation : 7 jours; au quatorzième jour, pas de lésions caractéristiques; le vingtième jour : quelques granulations. Au trente-cinquième jour : trachome floride. L'animal est examiné environ tous les 7 jours. On note : 3 mars réaction floride 16 mars réaction floride 23 mars réaction floride 30 mars réaction floride 5 avril réaction floride 25 avril réaction floride 4 mai réaction floride 11 mai réaction floride, cureté 18 mai réaction floride 1 juin réaction floride 8 juin réaction encore très nette, quelques follicules sont hémorragiques. 15 juin cureté 22 juin réaction toujours très forte 29 juin réaction toujours très forte 6 juillet lésions en légère régression 13 juillet lésions en régression 21 juillet lésions
de la maladie ayant encore des granulations bien marquées. Voici les observations de ces trois cas positifs. Magot Th.. Inoculé à l’œil droit le 5 janvier 1938, avec un virus de singe évoluant depuis 33 jours. Incubation : 7 jours; au quatorzième jour, pas de lésions caractéristiques; le vingtième jour : quelques granulations. Au trente-cinquième jour : trachome floride. L'animal est examiné environ tous les 7 jours. On note : 3 mars réaction floride 16 mars réaction floride 23 mars réaction floride 30 mars réaction floride 5 avril réaction floride 25 avril réaction floride 4 mai réaction floride 11 mai réaction floride, cureté 18 mai réaction floride 1 juin réaction floride 8 juin réaction encore très nette, quelques follicules sont hémorragiques. 15 juin cureté 22 juin réaction toujours très forte 29 juin réaction toujours très forte 6 juillet lésions en légère régression 13 juillet lésions en régression 21 juillet lésions encore nettes 2 août follicules encore nombreux 10 août follicules en diminution. L’examen est arrêté à cette date; l’animal meurt le 12 octobre 1938. Magot Ca.. Inoculé le 5 janvier 1938, à l’œil gauche, avec le produit de curetage de son œil droit qui présente un trachome datant de 33 jours. L’infection débute au septième jour; le quatorzième jour, la réaction est nette. Les observations régulièrement notées sont les suivantes : 3 mars 2 mois après l’inoculation; trachome floride 16 mars trachome floride 23 mars trachome floride 30 mars trachome floride 5 avril trachome floride 25 avril trachome floride 4 mai trachome floride 11 mai trachome floride, cureté 18 mai trachome floride 1 juin réaction en régression forte 8 juin cicatrisation avancée 22 juin même état 29 juin même état 6 juillet même état 13 juillet même état mais guérison incomplète 21 juillet lésions cicatrisées 2 août il ne reste que des lésions cicatricielles 10 août il ne reste que des lésions cicatricielles 12 octobre il y a encore des lésions cicatricielles 19 octobre il y a encore des lésions cicatricielles Examen arrêté. Magot Po.. Inoculé à l’œil droit, le 3 février 1939, avec un mélange de deux virus de
jours. L’infection débute au septième jour; le quatorzième jour, la réaction est nette. Les observations régulièrement notées sont les suivantes : 3 mars 2 mois après l’inoculation; trachome floride 16 mars trachome floride 23 mars trachome floride 30 mars trachome floride 5 avril trachome floride 25 avril trachome floride 4 mai trachome floride 11 mai trachome floride, cureté 18 mai trachome floride 1 juin réaction en régression forte 8 juin cicatrisation avancée 22 juin même état 29 juin même état 6 juillet même état 13 juillet même état mais guérison incomplète 21 juillet lésions cicatrisées 2 août il ne reste que des lésions cicatricielles 10 août il ne reste que des lésions cicatricielles 12 octobre il y a encore des lésions cicatricielles 19 octobre il y a encore des lésions cicatricielles Examen arrêté. Magot Po.. Inoculé à l’œil droit, le 3 février 1939, avec un mélange de deux virus de singes. L’un des animaux a un trachome datant de 58 jours et l’autre de 44. Début des lésions le 20 février, après 17 jours d’incubation. 1 mars réaction floride, cureté 22 mars réaction floride, cureté 10 mai la réaction est encore floride 17 mai même état, nouveau curetage 17 mai 8 novembre : le trachome se maintient, nullement altéré par les curetages successifs. La réaction de l’animal est encore floride. L'animal meurt le 21 janvier, ayant encore des granulations bien marquées. Le 5 juillet, le trachome est toujours floride, la conjonctive est curetée à nouveau, la réaction reste très belle. Un troisième curetage est fait le 9 août. Le 8 novembre, 6 mois après l'inoculation, la réaction reste très marquée, il y a de nombreux follicules sur la conjonctive de la paupière supérieure et de la paupière inférieure. Le 25 novembre, les lésions de l'œil droit presque cicatrisées. L'animal meurt le 2 décembre. Trachome de cinquième passage Sur 3 inoculations pratiquées avec différents viruses, une a donné un résultat positif, sur un singe neuf; une autre un résultat positif mais très léger, sur un singe ayant un trachome de l'autre œil et la troisième un résultat douteux sur un singe
8 novembre : le trachome se maintient, nullement altéré par les curetages successifs. La réaction de l’animal est encore floride. L'animal meurt le 21 janvier, ayant encore des granulations bien marquées. Le 5 juillet, le trachome est toujours floride, la conjonctive est curetée à nouveau, la réaction reste très belle. Un troisième curetage est fait le 9 août. Le 8 novembre, 6 mois après l'inoculation, la réaction reste très marquée, il y a de nombreux follicules sur la conjonctive de la paupière supérieure et de la paupière inférieure. Le 25 novembre, les lésions de l'œil droit presque cicatrisées. L'animal meurt le 2 décembre. Trachome de cinquième passage Sur 3 inoculations pratiquées avec différents viruses, une a donné un résultat positif, sur un singe neuf; une autre un résultat positif mais très léger, sur un singe ayant un trachome de l'autre œil et la troisième un résultat douteux sur un singe ayant encore une réaction de trachome à l'autre œil. Voici l'observation du cas nettement positif; TABLEAU DES PASSAGES D'UN VIRUS DE TRACHOME SUR LE MAGOT Magot Be.. Inoculé le 7 juin 1939 à l’œil droit avec un virus de singe évoluant depuis 20 jours. Le singe Be. après un mois d’incubation, fera un trachome léger, marqué par des granulations localisées à l'angle interne. La réaction sera terminée un mois plus tard. Le même magot Be. est réinoculé à l’œil gauche le 21 juin, également avec un virus de quatrième passage, virus évoluant depuis 14 jours. Cette inoculation à l’œil gauche donne un résultat positif. La réaction débute après une incubation de 14 jours, elle augmente devient très nette après un mois; le trachome est encore floride après 2 mois, À la suite d’un traitement énergique, on constate une régression des lésions. À la date du 9 septembre, on note encore la présence de quelques follicules à l’angle interne. Trachome de sixième passage Sur 2 singes inoculés avec le virus de 2 singes différents mais infectés de la même souche, l’un fait une réaction abortive, le second un trachome floride à évolution lente. En voici l’observation: Magot Pe.. Inoculé le 16