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est nécessaire: de trop fortes réactions dans toute l'échelle des mélanges obligent à reprendre l'opération avec un virus plus dilué; des réactions trop faibles, à employer un virus plus concentré ou à diminuer encore la proportion de sérum; une différence trop accentuée entre les réactions fournies par deux mélanges voisins, l'une au-dessus, l'autre au-dessous de la réaction optima, conduit naturellement à effectuer un titrage plus précis dans un cadre restreint. Ce sont là questions de détail, faciles à résoudre dans la pratique. Nous avons voulu savoir si un mélange virus + sérum, titré par le procédé de Blanc et Martin, doit être considéré comme un vaccin « sensibilisé ». Pour cela, nous avons fait l'expérience suivante : Un mélange titré virus claveleux + sérum anticlaveleux a été inoculé dans le derme d'un même mouton à divers moments et en des points différents: au point 1, immédiatement après sa préparation; au point 2, après cinq minutes; au point 3, après quinze minutes; au point 4, après une demi-heure; au point 5, après une heure; au point 6, après sept heures; au point 7, après 24 heures. Parallèlement, était inoculé de l'autre côté du thorax, un mélange, dans les mêmes proportions de virus claveleux et de sérum normal de mouton: au point 8, au moment même de la préparation; au point 9, après 24 heures. Enfin, au point 10, on inoculait, sous la peau, une dose décuple de la dose habituelle, c'est-à-dire 2 cc au lieu de 0 cc, 2, du mélange vaccinant. (1) BLANC G. et MARTIN L.A. Recherches expérimentales sur la clavelée et la vaccination anticlaveleuse. Arch. Inst. Pasteur Maroc 1937, 1, 721. Voici les résultats constatés sept jours plus tard : l'inoculation du point 1 (mélange vaccinant inoculé dès sa préparation) et celle du point 8 (mélange témoin) ont provoqué l'apparition de belles pustules claveleuses, la première légèrement moins forte que la seconde. Les inoculations des points 2, 3 et 4, c'est-à-dire les inoculations du mélange titré virus - sérum, pratiquées 5 à 30 minutes après sa préparation, ont donné lieu à des réactions à peu près semblables avec
virus claveleux et de sérum normal de mouton: au point 8, au moment même de la préparation; au point 9, après 24 heures. Enfin, au point 10, on inoculait, sous la peau, une dose décuple de la dose habituelle, c'est-à-dire 2 cc au lieu de 0 cc, 2, du mélange vaccinant. (1) BLANC G. et MARTIN L.A. Recherches expérimentales sur la clavelée et la vaccination anticlaveleuse. Arch. Inst. Pasteur Maroc 1937, 1, 721. Voici les résultats constatés sept jours plus tard : l'inoculation du point 1 (mélange vaccinant inoculé dès sa préparation) et celle du point 8 (mélange témoin) ont provoqué l'apparition de belles pustules claveleuses, la première légèrement moins forte que la seconde. Les inoculations des points 2, 3 et 4, c'est-à-dire les inoculations du mélange titré virus - sérum, pratiquées 5 à 30 minutes après sa préparation, ont donné lieu à des réactions à peu près semblables avec formation de pustules analogues à celle du point 1. La réaction observée au point 5 (inoculation du mélange vaccinant 1 heure après sa préparation) s'est terminée, elle aussi, par une pustule, dont les dimensions étaient toutefois moins importantes que celles des points précédents. L'inoculation 6 (mélange vaccinant inoculé 7 heures après sa préparation) a produit une réaction nettement plus faible qui n'a pas abouti à la pustule. L'inoculation 7, pratiquée au bout de 24 heures, n'a donné lieu qu'à une petite papule. L'inoculation 9 (mélange témoin après 24 heures) a provoqué la formation d'une belle pustule un peu moins étendue que celle du point 8 (une inoculation claveleuse pratiquée 24 heures après une première donne lieu à une réaction un peu moins intense, cela rentre dans le cadre des observations de Pourquier). Si l'on considère que, généralement, un mélange convenable renferme 9 parties de virus (pulpe claveleuse diluée, par exemple à 1 p. 100) et 1 partie de sérum plus ou moins dilué (à 1/2, 1/4 ou même 1/8), on voit combien ce procédé d'immunisation est loin de la séro-clavelisation employée autrefois par A. Borrel (1). Ayant constaté le pouvoir préventif du sérum anticlaveleux qu'il avait réussi à obtenir, Borrel
après sa préparation) a produit une réaction nettement plus faible qui n'a pas abouti à la pustule. L'inoculation 7, pratiquée au bout de 24 heures, n'a donné lieu qu'à une petite papule. L'inoculation 9 (mélange témoin après 24 heures) a provoqué la formation d'une belle pustule un peu moins étendue que celle du point 8 (une inoculation claveleuse pratiquée 24 heures après une première donne lieu à une réaction un peu moins intense, cela rentre dans le cadre des observations de Pourquier). Si l'on considère que, généralement, un mélange convenable renferme 9 parties de virus (pulpe claveleuse diluée, par exemple à 1 p. 100) et 1 partie de sérum plus ou moins dilué (à 1/2, 1/4 ou même 1/8), on voit combien ce procédé d'immunisation est loin de la séro-clavelisation employée autrefois par A. Borrel (1). Ayant constaté le pouvoir préventif du sérum anticlaveleux qu'il avait réussi à obtenir, Borrel avait associé la sérothérapie préventive à la clavelisation dans le but de conférer aux animaux une immunité active durable. Après avoir appliqué cette méthode double par injections séparées, il avait cherché à simplifier l'opération en inoculant un mélange de virus et de sérum. Tout d'abord, il mélangea 1 cc de claveau à 9 cc de sérum anticlaveleux et injecta 0 cc, 1 du mélange. De fortes pustules et des généralisations étant apparues, la proportion de sérum fut portée à 100 fois la quantité du virus. Malgré cela, il obtint encore de grosses pustules suivies de généralisation. C'est que l'inoculation était pratiquée dès la préparation du mélange. Le sérum n'avait pas le temps d'exercer son action sur le virus et chacun des éléments réunis agissait comme s'il avait été injecté séparément. Chefik Kolayli et Nicolaki Mavridès (1), avaient essayé, dans un but économique, de remplacer le virus sensibilisé préparé selon la méthode connue, par un mélange de sérum et de virus. Le virus était dilué « en prenant en considération la durée du transport », puis on ajoutait sur le lieu d'utilisation, 1/10 de sérum anticlaveleux et le mélange pouvait être injecté 2 à 3 heures plus tard. Les résultats s'étaient
claveau à 9 cc de sérum anticlaveleux et injecta 0 cc, 1 du mélange. De fortes pustules et des généralisations étant apparues, la proportion de sérum fut portée à 100 fois la quantité du virus. Malgré cela, il obtint encore de grosses pustules suivies de généralisation. C'est que l'inoculation était pratiquée dès la préparation du mélange. Le sérum n'avait pas le temps d'exercer son action sur le virus et chacun des éléments réunis agissait comme s'il avait été injecté séparément. Chefik Kolayli et Nicolaki Mavridès (1), avaient essayé, dans un but économique, de remplacer le virus sensibilisé préparé selon la méthode connue, par un mélange de sérum et de virus. Le virus était dilué « en prenant en considération la durée du transport », puis on ajoutait sur le lieu d'utilisation, 1/10 de sérum anticlaveleux et le mélange pouvait être injecté 2 à 3 heures plus tard. Les résultats s'étaient montrés encourageants, mais le mode de préparation du mélange manquait de précision. Les résultats de l'expérience que nous venons de rapporter montrent que les effets de l'inoculation d'un mélange virus + sérum sont très différents suivant que le complexe est utilisé au moment même de sa préparation ou un certain temps après celle-ci. Quand l'action du sérum anticlaveleux sur le virus n'a pu encore s'exercer, la faible quantité de sérum contenue dans le mélange est à peu près sans influence sur l'évolution des lésions qui résultent de l'inoculation. Si, au contraire, un délai suffisant entre la préparation du mélange et son emploi a permis au sérum d'agir sur le virus, celui-ci a perdu en partie ses propriétés pathogènes et le mélange inoculé se comporte comme un vaccin. Ce qui, surtout, caractérise le vaccin anticlaveleux sensibilisé, c'est le peu d'influence de la quantité inoculée sur le résultat de l'inoculation (2). Or, dans l'expérience dont nous venons de parler, l'injection de 10 doses de mélange vaccinant n'a pas provoqué de lésion locale apparente. Elle avait été pratiquée, il est vrai, sur un animal qui, la veille, avait reçu du virus claveleux. Compte tenu de ce fait, il n'en reste pas moins que
temps après celle-ci. Quand l'action du sérum anticlaveleux sur le virus n'a pu encore s'exercer, la faible quantité de sérum contenue dans le mélange est à peu près sans influence sur l'évolution des lésions qui résultent de l'inoculation. Si, au contraire, un délai suffisant entre la préparation du mélange et son emploi a permis au sérum d'agir sur le virus, celui-ci a perdu en partie ses propriétés pathogènes et le mélange inoculé se comporte comme un vaccin. Ce qui, surtout, caractérise le vaccin anticlaveleux sensibilisé, c'est le peu d'influence de la quantité inoculée sur le résultat de l'inoculation (2). Or, dans l'expérience dont nous venons de parler, l'injection de 10 doses de mélange vaccinant n'a pas provoqué de lésion locale apparente. Elle avait été pratiquée, il est vrai, sur un animal qui, la veille, avait reçu du virus claveleux. Compte tenu de ce fait, il n'en reste pas moins que le virus avait été considérablement atténué puisque, d'une part, l'inoculation d'une dose dans le derme 24 heures après la préparation du mélange vaccinant, a produit une simple papule et que l'inoculation de 10 doses sous la peau est restée sans effet appréciable, alors que l'inoculation de mélange témoin pratiquée au même moment a provoqué la formation d'une pustule. Il semble bien résulter de ces constatations qu'un mélange virus + sérum, titré par le procédé de Blanc et Martin, constitue un bon vaccin anticlaveleux et se comporte comme un virus sensibilisé. Nous n'avons pas, jusqu'à présent, comparé expérimentalement l'action d'un vaccin obtenu par mélange à celle d'un vaccin sensibilisé préparé avec les mêmes éléments par le procédé habituel. Le vaccin sensibilisé classique a été éprouvé sur 35 millions d'ovins de races variées: son efficacité, pas plus que la sécurité qu'il présente, ne sont discutées. Le vaccin préparé par mélange titré appliqué, à ce jour (1), à l'immunisation de plus de 1.500.000 moutons marocains et croisés a donné toute satisfaction. Du point de vue économique, il offre un certain intérêt, puisque sa préparation n'exige qu'une faible quantité de sérum anticlaveleux. L'avenir dira s'il est susceptible d'une application générale. Note des auteurs. Dans
même moment a provoqué la formation d'une pustule. Il semble bien résulter de ces constatations qu'un mélange virus + sérum, titré par le procédé de Blanc et Martin, constitue un bon vaccin anticlaveleux et se comporte comme un virus sensibilisé. Nous n'avons pas, jusqu'à présent, comparé expérimentalement l'action d'un vaccin obtenu par mélange à celle d'un vaccin sensibilisé préparé avec les mêmes éléments par le procédé habituel. Le vaccin sensibilisé classique a été éprouvé sur 35 millions d'ovins de races variées: son efficacité, pas plus que la sécurité qu'il présente, ne sont discutées. Le vaccin préparé par mélange titré appliqué, à ce jour (1), à l'immunisation de plus de 1.500.000 moutons marocains et croisés a donné toute satisfaction. Du point de vue économique, il offre un certain intérêt, puisque sa préparation n'exige qu'une faible quantité de sérum anticlaveleux. L'avenir dira s'il est susceptible d'une application générale. Note des auteurs. Dans un travail récent (Annales de l'Institut Pasteur, avril 1939, p. 447), N. Stamatin, cherchant à expliquer le pouvoir neutralisant du sérum immun à l'égard des virus filtrants, envisage les deux hypothèses suivantes : 1° celle de F. M. Burnet et C. H. Andrews d'après laquelle les particules des virus, sous l'action des anticorps, deviendraient plus sensibles aux facteurs de la lyse et de la phagocytose. Il s'agirait d'une modification du corpuscule virulent d'ordre plutôt physique que biologique. (1) KOLAYLI C. et MAVRIDEs N. Vaccination par la méthode du claveau sérumisé. Rec. Méd. vét. 1934, 110, 669. (2) BRIDRÉ J. et BOQUET A. Loc. cit. 20 l'autre, selon laquelle les anticorps exerceraient leur action sur les cellules réceptives en les rendant réfractaires. Cette dernière hypothèse paraît plus plausible à notre confrère roumain qui n'exclut pas toutefois « la possibilité d'une modification de la particule virulente elle-même ». L'expérience rapportée dans la note ci-dessus qui montre des résultats très différents suivant l'inoculation d'un mélange titré virus + sérum, selon que cette inoculation est faite immédiatement après la préparation du mélange ou un certain temps plus tard, va nettement à l'encontre de la seconde hypothèse. En effet, la quantité de sérum injectée en
l'action des anticorps, deviendraient plus sensibles aux facteurs de la lyse et de la phagocytose. Il s'agirait d'une modification du corpuscule virulent d'ordre plutôt physique que biologique. (1) KOLAYLI C. et MAVRIDEs N. Vaccination par la méthode du claveau sérumisé. Rec. Méd. vét. 1934, 110, 669. (2) BRIDRÉ J. et BOQUET A. Loc. cit. 20 l'autre, selon laquelle les anticorps exerceraient leur action sur les cellules réceptives en les rendant réfractaires. Cette dernière hypothèse paraît plus plausible à notre confrère roumain qui n'exclut pas toutefois « la possibilité d'une modification de la particule virulente elle-même ». L'expérience rapportée dans la note ci-dessus qui montre des résultats très différents suivant l'inoculation d'un mélange titré virus + sérum, selon que cette inoculation est faite immédiatement après la préparation du mélange ou un certain temps plus tard, va nettement à l'encontre de la seconde hypothèse. En effet, la quantité de sérum injectée en même temps que le virus étant la même dans les deux cas, on ne comprendrait pas pourquoi l'action de ce sérum sur les cellules réceptives s'exercerait dans le cas d'inoculation tardive et non dans le cas d'inoculation immédiate. Puisque le mélange virus + sérum inoculé extemporanément provoque l'apparition d'une pustule claveleuse semblable à celle qui est obtenue par l'inoculation de virus sans sérum, alors qu'après un certain temps de préparation, le même mélange ne donne plus qu'une lésion plus ou moins réduite, c'est donc que pendant le délai qui s'écoule entre la préparation du mélange et son inoculation, le virus subit une modification. S'agit-il d'une faible adsorption des anticorps par le virus ou d'une transformation réelle des éléments virulents ?... Quoiqu'il en soit, il semble indiscutable qu'une action directe est exercée sur le virus par les anticorps du sérum. En conséquence, entre les deux hypothèses envisagées celle de F. M. Burnet et C. H. Andrews est regardée par nous comme la plus vraisemblable. DEUXIÈME PARTIE NOTES DE PARASITOLOGIE MAROCAINE * LA BILHARZIOSE BOVINE AU MAROC * par G. BLANC ET C. DESPORTES La bilharziose bovine, à Schistosoma bovis, existe aux Indes, dans les Etats Malais, en Indochine ; en Europe,
claveleuse semblable à celle qui est obtenue par l'inoculation de virus sans sérum, alors qu'après un certain temps de préparation, le même mélange ne donne plus qu'une lésion plus ou moins réduite, c'est donc que pendant le délai qui s'écoule entre la préparation du mélange et son inoculation, le virus subit une modification. S'agit-il d'une faible adsorption des anticorps par le virus ou d'une transformation réelle des éléments virulents ?... Quoiqu'il en soit, il semble indiscutable qu'une action directe est exercée sur le virus par les anticorps du sérum. En conséquence, entre les deux hypothèses envisagées celle de F. M. Burnet et C. H. Andrews est regardée par nous comme la plus vraisemblable. DEUXIÈME PARTIE NOTES DE PARASITOLOGIE MAROCAINE * LA BILHARZIOSE BOVINE AU MAROC * par G. BLANC ET C. DESPORTES La bilharziose bovine, à Schistosoma bovis, existe aux Indes, dans les Etats Malais, en Indochine ; en Europe, elle a été signalée en Sicile, en Sardaigne, en Corse, où Brumpt (1) qui a trouvé ce parasite, a fait connaître son cycle évolutif chez Bullinus contortus et décrit la cercaire. En Afrique, elle est connue d'Egypte, d'Afrique orientale et méridionale ainsi que de l'Ouganda ; Ch. Anderson et F. Gobert (2) l'observent en Tunisie, à Gafsa, et infectent la souris avec des cercaires provenant de Bullinus contortus. Il était à prévoir que Schistosoma bovis se rencontrerait aussi au Maroc, dans les régions où la bilharziose humaine est répandue et où doivent se rencontrer les mollusques indispensables à l'évolution du parasite. Une rapide enquête nous a permis de confirmer nos présomptions. Le 24 septembre, l'un de nous récolte 18 Bullinus contortus sur les Sparganium d'une petite mare, à 15 kms au nord de Si Allal Tazi, entre les douars Meknasset et Tebaudat ; il constate la présence, chez deux mollusques, de furcocercaires dépourvues de pharynx. Le 25 septembre, il récolte 180 bullins dans la grande merdje de Sidi Mohamed ben Mansour, et les trouve parasités de la même cercaire. Le pourcentage de mollusques infectés n'a pas été établi. Dans ces régions, une enquête menée sur plus de 300 enfants ne
Gobert (2) l'observent en Tunisie, à Gafsa, et infectent la souris avec des cercaires provenant de Bullinus contortus. Il était à prévoir que Schistosoma bovis se rencontrerait aussi au Maroc, dans les régions où la bilharziose humaine est répandue et où doivent se rencontrer les mollusques indispensables à l'évolution du parasite. Une rapide enquête nous a permis de confirmer nos présomptions. Le 24 septembre, l'un de nous récolte 18 Bullinus contortus sur les Sparganium d'une petite mare, à 15 kms au nord de Si Allal Tazi, entre les douars Meknasset et Tebaudat ; il constate la présence, chez deux mollusques, de furcocercaires dépourvues de pharynx. Le 25 septembre, il récolte 180 bullins dans la grande merdje de Sidi Mohamed ben Mansour, et les trouve parasités de la même cercaire. Le pourcentage de mollusques infectés n'a pas été établi. Dans ces régions, une enquête menée sur plus de 300 enfants ne permet pas de trouver de bilharziose humaine et nous pensons qu'il peut s'agir, chez les mollusques infectés, de Schistosoma bovis. Le 9 octobre, trois bovins adultes sont examinés au souk de Lalla Mimouna (20 kms au nord de Souk el Arba du Gharb) ; l'un d'eux montre, dans les vaisseaux mésentériques, de nombreux Schistosoma bovis et dans la panse un grand nombre de Paramphistomum 1 cervi (dont la cercaire se rencontre, comme on sait, chez Bullinus contortus). Un examen rapide de différents viscères provenant de l'animal parasité, rate, poumons, cœur, rein, et même foie, ne montre aucun Schistosoma. Il n'est pas impossible, d'ailleurs, que le foie provienne d'un autre animal. Dans l'intestin, il y a de nombreux œufs qui servent à des expériences d'infestation de Bullinus. Le 14 octobre, 10 bovins sont examinés à Souk el Arba du Gharb. Trois sont parasités, l'un provient de Mechra bel Ksiri, un autre de Kénitra et le troisième de Karia ben Aouda. Le 21 octobre, six animaux sont examinés : deux provenant de Karia ben Aouda, sont trouvés parasités ainsi qu'un troisième provenant de la région de Souk el Arba. Le 29 octobre, nous faisons une rapide enquête aux abattoirs de Casablanca. Nous
mésentériques, de nombreux Schistosoma bovis et dans la panse un grand nombre de Paramphistomum 1 cervi (dont la cercaire se rencontre, comme on sait, chez Bullinus contortus). Un examen rapide de différents viscères provenant de l'animal parasité, rate, poumons, cœur, rein, et même foie, ne montre aucun Schistosoma. Il n'est pas impossible, d'ailleurs, que le foie provienne d'un autre animal. Dans l'intestin, il y a de nombreux œufs qui servent à des expériences d'infestation de Bullinus. Le 14 octobre, 10 bovins sont examinés à Souk el Arba du Gharb. Trois sont parasités, l'un provient de Mechra bel Ksiri, un autre de Kénitra et le troisième de Karia ben Aouda. Le 21 octobre, six animaux sont examinés : deux provenant de Karia ben Aouda, sont trouvés parasités ainsi qu'un troisième provenant de la région de Souk el Arba. Le 29 octobre, nous faisons une rapide enquête aux abattoirs de Casablanca. Nous trouvons deux bovins, provenant de la région du Gharb, parasités par Schistosoma bovis tandis que douze animaux venant de la région des Doukkala sont indemnes. Nous trouvons aussi un animal parasité sur deux provenant de Settat, région où, cependant, la bilharziose humaine n'a pas été rencontrée. Ce fait nous incite à compléter notre enquête par l'examen de bovins abattus à Settat et provenant de la région. Le 3 octobre, sur 16 animaux examinés, aucun n'est porteur de Schistosoma, pas plus d'ailleurs que de Paramphistomum. D'après le vétérinaire sanitaire de. Settat (Dr Genty) le fait d'avoir trouvé aux abattoirs de Casablanca, en provenance de Settat, un bœuf parasité, tiendrait à ce qu'un certain nombre d'animaux venant du Gharb ont été envoyés à Settat à la suite de la fermeture de la frontière du Maroc espagnol et ce serait un de ces animaux qui aurait été vendu à Casablanca comme venant de Settat, mais, en fait, originaire du Gharb. Le 2 novembre, nous avons poursuivi nos recherches sur la bilharziose bovine à Marrakech, Dix-sept bovins examinés à l'abattoir de cette ville, nous ont fourni sept cas de parasitisme par Schistosoma bovis (vaisseaux mésentériques). Il faut considérer ce pourcentage comme élevé car, en
à compléter notre enquête par l'examen de bovins abattus à Settat et provenant de la région. Le 3 octobre, sur 16 animaux examinés, aucun n'est porteur de Schistosoma, pas plus d'ailleurs que de Paramphistomum. D'après le vétérinaire sanitaire de. Settat (Dr Genty) le fait d'avoir trouvé aux abattoirs de Casablanca, en provenance de Settat, un bœuf parasité, tiendrait à ce qu'un certain nombre d'animaux venant du Gharb ont été envoyés à Settat à la suite de la fermeture de la frontière du Maroc espagnol et ce serait un de ces animaux qui aurait été vendu à Casablanca comme venant de Settat, mais, en fait, originaire du Gharb. Le 2 novembre, nous avons poursuivi nos recherches sur la bilharziose bovine à Marrakech, Dix-sept bovins examinés à l'abattoir de cette ville, nous ont fourni sept cas de parasitisme par Schistosoma bovis (vaisseaux mésentériques). Il faut considérer ce pourcentage comme élevé car, en réalité, les animaux à Marrakech proviennent d'une zone pouvant s'étendre à 100 kms, alors que le foyer de bilharziose humaine de Marrakech est très limité. Plusieurs animaux étaient également fortement parasités par le Paramphistomum cervi. La découverte de ce foyer de Marrakech confirme l'hypothèse faite par M. Baltazard en 1932 (1). De cette rapide prospection, il ressort, comme nous l'avions supposé et comme Brumpt, dès 1930, en avait émis l'hypothèse, que la bilharziose bovine existe au Maroc. Elle se rencontre dans les principaux foyers de bilharziose humaine. Il y aura lieu d'étendre l'enquête à toutes les régions du Maroc et particulièrement dans les foyers de bilharziose humaine à l'extrême sud, et d'établir quelle est la proportion des cercaires de Schistosoma haematobium et Schistosoma bovis que l'on rencontre chez les bullins parasités. Il reste également à établir si le bullin est le seul mollusque susceptible de servir d'hôte intermédiaire à Schistosoma bovis, et cela particulièrement dans la région du Gharb. (1) BALTAZARD M. Arch. Inst. Pasteur Maroc 1932, 1, 29 OBSERVATIONS STATISTIQUES ET MYCOLOGIQUES SUR LES TEIGNES HUMAINES AU MAROC par M. LANGERON Au Maroc français, les teignes humaines n'ont pas encore fait l'objet d'une étude systématique. Au cours d'une mission,