jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
un peu inférieure à celle qui avait été constatée, avant le traitement par la terre à foulon. Le poids sec de ce filtrat fut réduit de 0 gr. 148 à 0 gr. 140 par centimètre cube et la valeur Sorenson fut alors de 5,06. Pour purifier le produit obtenu, les auteurs se servirent de l'hydrosol d'oxyde ferrique, cette substance ayant déjà été employée par le Dr Kerr pour purifier des préparations d'invertase. Ce sol de fer est un absorbant de choix et qui peut être contrôlé en faisant varier le pH de la solution à laquelle il est ajouté. Ces expériences montrèrent qu'à un pH égal à 4,7, le sol ferrique précipita une quantité considérable de substances du filtrat obtenu après traitement avec la terre à foulon, mais on constata une petite diminution de l'activité du « bios ». Quand le pH du filtrat de cette précipitation fut égal exactement à 5,3, et quand ce filtrat fut traité par un excès de sol ferrique (4 fois son volume), il se forma un second précipité, le filtrat restant fut dépourvu de toute activité du « bios ». La méthode utilisée est la suivante. On ajoute de l'acide chlorhydrique au filtrat obtenu après le traitement par la terre à foulon jusqu'à obtention d'une valeur Sorenson égale à-4,7, L'addition d'un volume égal de sol ferrique produit un précipité qui est rejeté, tandis qu'on porte le pH du filtrat, obtenu dans ces conditions, à 5,3 en y ajoutant une solution de soude. On ajoute alors à cette liqueur 4 fois son volume de sol ferrique ; le précipité formé est filtré et entraîne le « bios ». On sépare le « bios » du précipité de sol ferrique en employant le procédé suivant ; le précipité humide est vivement dissous dans de l'acide sulfurique à 30 % et la solution de suite additionnée d'eau acidifiée à 5 %. On ajoute alors de la baryte, jusqu'à ce que la solution devienne alcaline au tournesol, en ayant soin que, pendant cette opération, la solution soit maintenue à une température de 5° environ. Le fer est ainsi
après le traitement par la terre à foulon jusqu'à obtention d'une valeur Sorenson égale à-4,7, L'addition d'un volume égal de sol ferrique produit un précipité qui est rejeté, tandis qu'on porte le pH du filtrat, obtenu dans ces conditions, à 5,3 en y ajoutant une solution de soude. On ajoute alors à cette liqueur 4 fois son volume de sol ferrique ; le précipité formé est filtré et entraîne le « bios ». On sépare le « bios » du précipité de sol ferrique en employant le procédé suivant ; le précipité humide est vivement dissous dans de l'acide sulfurique à 30 % et la solution de suite additionnée d'eau acidifiée à 5 %. On ajoute alors de la baryte, jusqu'à ce que la solution devienne alcaline au tournesol, en ayant soin que, pendant cette opération, la solution soit maintenue à une température de 5° environ. Le fer est ainsi précipité sous forme d'oxyde et le baryum sous forme de sulfate. L'acide sulfurique précipite quantitativement l'excès de baryte. La solution résiduelle reste claire et légèrement jaunâtre ; son pH est de 6 environ ; elle contient le « bios », mais pas encore à l'état pur. Par évaporation au bain de vapeur, la solution jaune donne un complexe soluble dans l'alcool à 50 %. Après cette dissolution, l'alcool est évaporé, il reste une solution aqueuse que l'on concentre par évaporation en un sirop de miel jaune. L'addition d'alcool absolu à ce sirop précipite un produit hygroscopique qui est filtré, lavé à l'éther et séché dans un dessiccateur à vide et à acide sulfurique. Ce produit difficile à sécher absorbe facilement de l'eau, dès qu'il est exposé à l'air. Il reste instable et a, au bout d'un certain temps, une odeur semblable à celle des amines. En solution, il donne la réaction rouge « ninhydrin » et est précipité par l'acide phosphotungstique, Il se dissout vivement dans l'alcool à 50 %, mais est moins soluble dans des concentrations plus fortes. Il est d'un goût nettement amer. Les auteurs fractionnèrent ce complexe. Le complexe fut chauffé dans l'alcool à 95 %, il
de vapeur, la solution jaune donne un complexe soluble dans l'alcool à 50 %. Après cette dissolution, l'alcool est évaporé, il reste une solution aqueuse que l'on concentre par évaporation en un sirop de miel jaune. L'addition d'alcool absolu à ce sirop précipite un produit hygroscopique qui est filtré, lavé à l'éther et séché dans un dessiccateur à vide et à acide sulfurique. Ce produit difficile à sécher absorbe facilement de l'eau, dès qu'il est exposé à l'air. Il reste instable et a, au bout d'un certain temps, une odeur semblable à celle des amines. En solution, il donne la réaction rouge « ninhydrin » et est précipité par l'acide phosphotungstique, Il se dissout vivement dans l'alcool à 50 %, mais est moins soluble dans des concentrations plus fortes. Il est d'un goût nettement amer. Les auteurs fractionnèrent ce complexe. Le complexe fut chauffé dans l'alcool à 95 %, il se ramollit d'abord à l'état de cire, puis, après un chauffage prolongé, se scinda en deux fractions. L'une d'elles était visqueuse et resta au fond du récipient, elle ne révéla aucune activité du « bios ». L'autre fraction fut dissoute dans l'alcool chaud à 95 %. Cette fraction contient du « bios ». Enfin les auteurs séparèrent le « bios » de la solution chaude d'alcool. Ou bien la solution d'alcool chaud fut lentement refroidie, il se forma un mélange de globules de tailles différentes ; ou bien l'alcool refroidi laissa précipiter un produit en cristaux orthorhombiques. Bien que la fraction visqueuse du complexe soit insoluble dans l'alcool, à n'importe quelle concentration, le complexe lui-même est beaucoup plus soluble dans l'alcool froid à 95 % que dans l'alcool chaud ; le produit cristallin formé étant presque insoluble dans l'alcool froid à 95 %, il fut donc possible de fractionner le complexe par un traitement à l'alcool. Après trois cristallisations successives de la solution alcoolique, les propriétés de la fraction cristalline devinrent inaltérables. Ce fut de beaucoup la fraction la plus active au point de vue physiologique, et cette activité ne diminua pas, par unité de poids, à la suite de
« bios ». Enfin les auteurs séparèrent le « bios » de la solution chaude d'alcool. Ou bien la solution d'alcool chaud fut lentement refroidie, il se forma un mélange de globules de tailles différentes ; ou bien l'alcool refroidi laissa précipiter un produit en cristaux orthorhombiques. Bien que la fraction visqueuse du complexe soit insoluble dans l'alcool, à n'importe quelle concentration, le complexe lui-même est beaucoup plus soluble dans l'alcool froid à 95 % que dans l'alcool chaud ; le produit cristallin formé étant presque insoluble dans l'alcool froid à 95 %, il fut donc possible de fractionner le complexe par un traitement à l'alcool. Après trois cristallisations successives de la solution alcoolique, les propriétés de la fraction cristalline devinrent inaltérables. Ce fut de beaucoup la fraction la plus active au point de vue physiologique, et cette activité ne diminua pas, par unité de poids, à la suite de cristallisations successives. L'activité du « bios » dans le complexe était très inférieure à la moitié de celle de la fraction cristallisée ; pratiquement, cette activité n'existait pas dans la fraction visqueuse, mais il faut noter qu'aucune purification de cette gomme ne fut tentée. Le produit du « bios » cristallin obtenu par cette méthode pesait 70 mgr. pour un poids initial de 3 kg. de levure de bière, ou, en d'autres termes, il représentait environ 0,03 % du poids sec de l'autolysat. Les auteurs ont recueilli un poids proportionnel de cette substance en opérant avec de la levure bouillie additionnée de 0,04 % d'acide acétique, selon la méthode d'Osborne et Wakeman ; ils ont aussi isolé le même produit de la levure Fleischmann, d'un extrait de farine de luzerne bouillie et d'un extrait, aqueux de blé. II. Propriétés chimiques et physiques du produit cristallin. — Les auteurs étudièrent d'abord les globules obtenus par évaporation de la solution alcoolique. Leur point de fusion fut constant à 223°; le même point de fusion fut aussi trouvé pour les cristaux orthorhombiques. Sous le microscope pétrographique, les globules révélèrent la croix de Malte, caractéristique de la diffraction et leur teinte uniforme fut une
cristallin obtenu par cette méthode pesait 70 mgr. pour un poids initial de 3 kg. de levure de bière, ou, en d'autres termes, il représentait environ 0,03 % du poids sec de l'autolysat. Les auteurs ont recueilli un poids proportionnel de cette substance en opérant avec de la levure bouillie additionnée de 0,04 % d'acide acétique, selon la méthode d'Osborne et Wakeman ; ils ont aussi isolé le même produit de la levure Fleischmann, d'un extrait de farine de luzerne bouillie et d'un extrait, aqueux de blé. II. Propriétés chimiques et physiques du produit cristallin. — Les auteurs étudièrent d'abord les globules obtenus par évaporation de la solution alcoolique. Leur point de fusion fut constant à 223°; le même point de fusion fut aussi trouvé pour les cristaux orthorhombiques. Sous le microscope pétrographique, les globules révélèrent la croix de Malte, caractéristique de la diffraction et leur teinte uniforme fut une preuve évidente de leur homogénéité. Les indices de réfraction furent établis entre 1,52 et 1,53. La détermination chimique du carbone, de l'hydrogène et de l'azote, faite par la méthode de Dumas donna les résultats suivants : C = 43,29; H = 8,31 et N = 10,7. Ces chiffres correspondent à la formule théorique C5H11N03, en admettant ces variations possibles de l'hydrogène. La substance ne contient ni soufre, ni phosphore, ni halogènes, ni cendres. La formule ci-dessus a un poids moléculaire égal à 133. Les déterminations basées sur l'élévation du point d'ébullition de l'alcool (Méthode de McCoy) donnèrent les résultats suivants : 132, 128, 115. Les cristaux sont légèrement amers, solubles dans l'eau et dans les solutions acides et alcalines. Ils sont solubles dans l'alcool froid à des concentrations inférieures à 80 % et deviennent presque insolubles dans l'alcool froid à 95 %. Ces solubilités expliquent d'une part la controverse qu'il y eut entre Fulmer et les auteurs, et justifient aussi l'usage de l'alcool à 80 % qu'ont fait Willaman et Olsen, au lieu de l'alcool à 95 %, pour libérer le sucre de leur milieu de culture de « bios » impur. Les cristaux sont insolubles dans l'éther et dans
la formule théorique C5H11N03, en admettant ces variations possibles de l'hydrogène. La substance ne contient ni soufre, ni phosphore, ni halogènes, ni cendres. La formule ci-dessus a un poids moléculaire égal à 133. Les déterminations basées sur l'élévation du point d'ébullition de l'alcool (Méthode de McCoy) donnèrent les résultats suivants : 132, 128, 115. Les cristaux sont légèrement amers, solubles dans l'eau et dans les solutions acides et alcalines. Ils sont solubles dans l'alcool froid à des concentrations inférieures à 80 % et deviennent presque insolubles dans l'alcool froid à 95 %. Ces solubilités expliquent d'une part la controverse qu'il y eut entre Fulmer et les auteurs, et justifient aussi l'usage de l'alcool à 80 % qu'ont fait Willaman et Olsen, au lieu de l'alcool à 95 %, pour libérer le sucre de leur milieu de culture de « bios » impur. Les cristaux sont insolubles dans l'éther et dans l'acétone absolu, mais une trace d'eau ajoutée à ce dernier réactif le rend un excellent solvant. La substance chauffée dans un tube à vide (la pression étant de 1 X 10-6 mm.) donna un produit sublimé. Ce sublimé détaché des parois du tube se liquide à 223° et possède l'activité du « bios ». La solution aqueuse des cristaux ne précipite pas par l'acide phosphotungstique, elle donne ni la réaction « ninhydrine », ni la réaction de l'huile de moutarde ; jusqu'ici ce n'est pas une amine primaire. Chauffés dans un tube, les cristaux donnent la réaction de l'éclat de bois de pin rouge et le distillat, obtenu après traitement avec de la chaux, donne aussi cette réaction. Les cristaux sont inactifs au point de vue optique, ils n'ont pas d'action réductrice sur la liqueur de Fehling, et l'ébullition prolongée dans de l'acide chlorhydrique ne les transforme pas en substance réductrice. La réaction de l'éclat de bois de pin a suggéré l'idée que la constitution chimique de ces cristaux renfermait un noyau azoté, peut-être du pyrrol. Mais le distillat, provenant du traitement à la chaux, montre un point d'ébullition constant à 96°. Ceci fait plutôt penser à la présence d'un
du « bios ». La solution aqueuse des cristaux ne précipite pas par l'acide phosphotungstique, elle donne ni la réaction « ninhydrine », ni la réaction de l'huile de moutarde ; jusqu'ici ce n'est pas une amine primaire. Chauffés dans un tube, les cristaux donnent la réaction de l'éclat de bois de pin rouge et le distillat, obtenu après traitement avec de la chaux, donne aussi cette réaction. Les cristaux sont inactifs au point de vue optique, ils n'ont pas d'action réductrice sur la liqueur de Fehling, et l'ébullition prolongée dans de l'acide chlorhydrique ne les transforme pas en substance réductrice. La réaction de l'éclat de bois de pin a suggéré l'idée que la constitution chimique de ces cristaux renfermait un noyau azoté, peut-être du pyrrol. Mais le distillat, provenant du traitement à la chaux, montre un point d'ébullition constant à 96°. Ceci fait plutôt penser à la présence d'un noyau de pyrroline (le pyrrol bout à 131°, la pyrroline à 91° et la pyrrolidine à 88°), mais on ne peut encore savoir si un tel noyau existe dans le composé ou s'il est produit par la distillation à la chaux. Le noyau pyrroline indiquerait une amine secondaire. Un autre produit fut obtenu avec du chlorure de sulfo-benzyle. Ce produit précipite en solution acide et en solution alcaline. Il donne à 91° des cristaux liquides qui fondent à 119°. Puisque la réaction de l'huile de moutarde, révélant une amine primaire, fut négative, les auteurs, en présence de ce résultat, ont imaginé qu'il y avait eu, peut-être, rupture du noyau pyrroline, et formation du nouveau produit qui serait une amine primaire ; mais comme la substance contient probablement un groupe de carboxyle, les observateurs ne peuvent assurer que cette réaction et l'attitude du nouveau produit vis-à-vis des solutions acides et alcalines ne soient pas dus au remplacement d'un hydrogène amine par un hydrogène carboxyle avec base. La similitude de la formule constitutionnelle et les propriétés précédemment indiquées engagèrent les auteurs à rechercher les rapports de cette substance avec l'oxyproline de Fischer (C5H9N03). Ils recommencèrent donc le travail de ce savant qui
produit fut obtenu avec du chlorure de sulfo-benzyle. Ce produit précipite en solution acide et en solution alcaline. Il donne à 91° des cristaux liquides qui fondent à 119°. Puisque la réaction de l'huile de moutarde, révélant une amine primaire, fut négative, les auteurs, en présence de ce résultat, ont imaginé qu'il y avait eu, peut-être, rupture du noyau pyrroline, et formation du nouveau produit qui serait une amine primaire ; mais comme la substance contient probablement un groupe de carboxyle, les observateurs ne peuvent assurer que cette réaction et l'attitude du nouveau produit vis-à-vis des solutions acides et alcalines ne soient pas dus au remplacement d'un hydrogène amine par un hydrogène carboxyle avec base. La similitude de la formule constitutionnelle et les propriétés précédemment indiquées engagèrent les auteurs à rechercher les rapports de cette substance avec l'oxyproline de Fischer (C5H9N03). Ils recommencèrent donc le travail de ce savant qui isola ce produit de la gélatine. L'oxyproline ainsi obtenue commence à se décomposer à la température de fusion du « bios » des auteurs, mais elle est active, au point de vue optique et inactive, au point de vue physiologique. D'autre part, la réduction du produit des auteurs par l'acide iodhydrique donne une substance comparable à la proline, en ce qui concerne le point de fusion et le pourcentage de la teneur en azote. Une autre coïncidence frappante, qui est ou n'est pas significative, est la similitude de la formule des auteurs avec celle du nouvel acide aminé de J. H. Mueller. Sa formule est C5H11NOS2, celle des auteurs est C5H11N03. Une étude de ces deux produits est actuellement en cours. Le caractère amphotérique du produit étudié a été vraisemblablement établi par son attitude vis-à-vis des absorbants et par des expériences électriques. Le caractère de bios du produit, — Pour essayer l'activité physiologique du produit, les auteurs employèrent le procédé de Funk et Dubin, le milieu de culture de Fulmer, Nelson et Shenvood, ainsi que la solution Nageli déjà utilisée dans un premier travail. Le sucre du milieu fut purifié par recristallisation dans de l'alcool à 80 %. Deux types
iodhydrique donne une substance comparable à la proline, en ce qui concerne le point de fusion et le pourcentage de la teneur en azote. Une autre coïncidence frappante, qui est ou n'est pas significative, est la similitude de la formule des auteurs avec celle du nouvel acide aminé de J. H. Mueller. Sa formule est C5H11NOS2, celle des auteurs est C5H11N03. Une étude de ces deux produits est actuellement en cours. Le caractère amphotérique du produit étudié a été vraisemblablement établi par son attitude vis-à-vis des absorbants et par des expériences électriques. Le caractère de bios du produit, — Pour essayer l'activité physiologique du produit, les auteurs employèrent le procédé de Funk et Dubin, le milieu de culture de Fulmer, Nelson et Shenvood, ainsi que la solution Nageli déjà utilisée dans un premier travail. Le sucre du milieu fut purifié par recristallisation dans de l'alcool à 80 %. Deux types de cellules de levure furent utilisés, celles qui ne poussèrent exclusivement qu'au fond du tube du milieu et celles qui ne se développèrent qu'à la partie supérieure du tube. Les besoins en « bios » de ces deux types de cellules sont très différents, les premières étant beaucoup plus influencées par l'introduction du produit étudié dans le milieu de culture que les secondes. Les courbes montrent que des doses minimes (0,005-0,025 mg.) par cc. de milieu de culture accélèrent la croissance des cellules. Ces excitations ont été obtenues avec les deux types de levure et avec les deux milieux. Cependant ces expériences n'ont pas été absolument uniformes. Les variations ne changent en rien la conclusion générale, qui est la suivante : le produit étudié possède, à des doses minimes, une action stimulante ; mais les résultats variés, qui furent obtenus, montrent la nécessité d'étudier le mécanisme de la levure, afin de savoir si elle peut être considérée comme un instrument quantitatif suffisant. Les propriétés stimulantes de la croissance ne sont pas diminuées lorsque le produit est sublimé. Des préparations de levure de bière, de levure de boulanger et de farine de luzerne témoignèrent toutes d'une activité physiologique similaire. Toutefois il
par l'introduction du produit étudié dans le milieu de culture que les secondes. Les courbes montrent que des doses minimes (0,005-0,025 mg.) par cc. de milieu de culture accélèrent la croissance des cellules. Ces excitations ont été obtenues avec les deux types de levure et avec les deux milieux. Cependant ces expériences n'ont pas été absolument uniformes. Les variations ne changent en rien la conclusion générale, qui est la suivante : le produit étudié possède, à des doses minimes, une action stimulante ; mais les résultats variés, qui furent obtenus, montrent la nécessité d'étudier le mécanisme de la levure, afin de savoir si elle peut être considérée comme un instrument quantitatif suffisant. Les propriétés stimulantes de la croissance ne sont pas diminuées lorsque le produit est sublimé. Des préparations de levure de bière, de levure de boulanger et de farine de luzerne témoignèrent toutes d'une activité physiologique similaire. Toutefois il est probable qu'une décomposition lente du produit se fait au bout d'un certain temps, ce qui lui fait perdre un peu de son activité. IV. Les rapports existant entre la vitamine B et le bios envisagés par d'autres physiologistes. — C'est Wilder qui, dans un article de 1901, suggéra, le premier, l'idée de désigner sous le nom de « bios » le constituant inconnu des extraits de plantes qui stimule la croissance de la levure. En 1914, Bottomley inventa le mot « auximones » pour décrire les facteurs de croissance des plantes. Ce fut Williams, qui, le premier suggéra l'idée que le « bios » était une vitamine et c'est lui qui introduisit le terme de Wilder chez les physiologistes étudiant ce facteur. Dans un article de 1919, Williams montra que certains extraits connus pour être riches en vitamine B, stimulaient toujours la croissance de la levure et inversement des extraits dépourvus de vitamine B ne possédaient pas la propriété en question. Il préconisa donc l'emploi de la levure pour mesurer la teneur en vitamine B, en supposant que le « bios » et la vitamine B étaient identiques et il ébaucha une méthode d'expérience. Le travail de Williams a
premier, l'idée de désigner sous le nom de « bios » le constituant inconnu des extraits de plantes qui stimule la croissance de la levure. En 1914, Bottomley inventa le mot « auximones » pour décrire les facteurs de croissance des plantes. Ce fut Williams, qui, le premier suggéra l'idée que le « bios » était une vitamine et c'est lui qui introduisit le terme de Wilder chez les physiologistes étudiant ce facteur. Dans un article de 1919, Williams montra que certains extraits connus pour être riches en vitamine B, stimulaient toujours la croissance de la levure et inversement des extraits dépourvus de vitamine B ne possédaient pas la propriété en question. Il préconisa donc l'emploi de la levure pour mesurer la teneur en vitamine B, en supposant que le « bios » et la vitamine B étaient identiques et il ébaucha une méthode d'expérience. Le travail de Williams a été très critiqué par de nombreux travailleurs. En 1921, les auteurs, s'exprimèrent sur cette étude, dans les termes suivants : « L'ensemble des résultats obtenus donne l'impression que l'expérience dans son état actuel, ne peut être considérée comme une mesure quantitative de la teneur en vitamine B... Tant qu'un milieu basal, fournissant un optimum de tous les facteurs, sauf de la vitamine B, ne sera pas déterminé, la méthode d'expérience n'aura pas une grande valeur pour évaluer la véritable teneur en vitamine B. » La nécessité du « bios » pour la croissance de la levure fut d'abord entrevue sérieusement par Fulmer et ses collaborateurs et par McDonald et McDoull. La critique de ce dernier travail par Fulmer, est la suivante : « Ces auteurs arrivèrent à la conclusion que le « bios » n'est pas « un constituant nécessaire du milieu pour la croissance de la levure, « mais il fait partie du groupe des stimulants de cette croissance. Si cette « hypothèse est vraie, le « bios » ne peut être considéré comme étant analogue à une vitamine, puisque les vitamines sont absolument nécessaires à la croissance des animaux et n'agissent pas simplement comme des facteurs accélérant la