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frais qui peut faire choisir l'une ou l'autre. La thérapeutique peut être considérée comme mise au point. On peut espérer que dans quelques années le rachitisme sera une maladie à peu près inconnue, à l'exception de quelques cas rares inaccessibles à l'actinothérapie, et ayant probablement une autre genèse d'ordre purement endocrinien. Il faut désormais développer la prophylaxie du rachitisme sur une grande échelle et ce devrait être le devoir des municipalités. Vu la négligence et l'incompréhension du grand public, on ne pourra à cet effet faire usage de médicaments. Par contre le lait frais irradié paraît convenir à cet usage, employé par exemple par addition à 10% au lait habituel de l'enfant. Le procédé est économique : une prophylaxie suffisante est obtenue avec une dépense de 30 à 50 pfennig par enfant et par jour durant les mois d'hiver. Par cette méthode, la thérapeutique est aussi moins onéreuse, un traitement intensif revient par jour de 3 à 5 pfennig à 3 marks. Il ne peut être question de ce procédé d'irradiation du lait que lorsqu'on peut le faire dans des centres d'où le lait est réparti. Si cela est impossible il faut s'adresser aux préparations. Le lait irradié a sur les préparations irradiées, cet avantage, répétons-le encore, que le lait étant pris à l'état frais on ne peut redouter qu'un dépôt prolongé lui fasse perdre ses propriétés antirachitiques. En ce qui concerne la dose, les résultats thérapeutiques sur les enfants ont été obtenus en employant 300 à 500 cc de lait irradié. Peut-être une quantité inférieure pourrait-elle suffire. Pour évaluer la puissance antirachitique, on peut, en dehors de l'observation sur l'enfant, utiliser l'expérimentation sur le rat. Ceux-ci sont rendus rachitiques par un mélange nutritif défini, par exemple celui de Steenbock, en 4 et 6 semaines. On leur donne alors, outre ce mélange, une quantité journalière déterminée de lait irradié. Tandis que le lait non irradié, même à la dose de 1 à 2 cm r.c. produit aucun effet, le lait irradié guérit le rachitisme du rat même à la dose de 0,03 Clll, c'est-à-dire avec environ 3 mg de matière
les préparations irradiées, cet avantage, répétons-le encore, que le lait étant pris à l'état frais on ne peut redouter qu'un dépôt prolongé lui fasse perdre ses propriétés antirachitiques. En ce qui concerne la dose, les résultats thérapeutiques sur les enfants ont été obtenus en employant 300 à 500 cc de lait irradié. Peut-être une quantité inférieure pourrait-elle suffire. Pour évaluer la puissance antirachitique, on peut, en dehors de l'observation sur l'enfant, utiliser l'expérimentation sur le rat. Ceux-ci sont rendus rachitiques par un mélange nutritif défini, par exemple celui de Steenbock, en 4 et 6 semaines. On leur donne alors, outre ce mélange, une quantité journalière déterminée de lait irradié. Tandis que le lait non irradié, même à la dose de 1 à 2 cm r.c. produit aucun effet, le lait irradié guérit le rachitisme du rat même à la dose de 0,03 Clll, c'est-à-dire avec environ 3 mg de matière sèche, ce qui prouve qu'un tel lait est un merveilleux porteur de principes antirachitiques. Si on donne à l'enfant une quantité 20000 fois supérieure à celle qui convient au rat, on peut considérer comme dose minimale 50 gr. de lait. Quelques grammes importent peu, le lait étant la nourriture par excellence de l'enfant. La question d'une dose excessive peut, par contre, être posée. L'auteur, dans une étude antérieure, a cherché s'il existait pour la vitamine de croissance une hypervitaminose. En donnant la « Harris-Yeast Vitamine », préparation concentrée à base de levure, on réussit avec 15 ou 20 fois la quantité nécessaire à la croissance à obtenir une hyperplasie du thymus ; celui-ci atteint 50 à 70 % de plus que sa grandeur normale, cet état peut être considéré comme une hypervitaminose. Par analogie avec ce fait, on peut croire à l'existence d'une dose excessive de vitamine D, ce qui est à craindre avec les préparations concentrées comme le « vigantol ». Il faut donc conseiller la prudence à ce sujet, d'autant plus qu'avec une dose plus forte on n'obtient pas une guérison plus rapide. Le laps de temps de 4 à 6 semaines ne peut être réduit par une
excellence de l'enfant. La question d'une dose excessive peut, par contre, être posée. L'auteur, dans une étude antérieure, a cherché s'il existait pour la vitamine de croissance une hypervitaminose. En donnant la « Harris-Yeast Vitamine », préparation concentrée à base de levure, on réussit avec 15 ou 20 fois la quantité nécessaire à la croissance à obtenir une hyperplasie du thymus ; celui-ci atteint 50 à 70 % de plus que sa grandeur normale, cet état peut être considéré comme une hypervitaminose. Par analogie avec ce fait, on peut croire à l'existence d'une dose excessive de vitamine D, ce qui est à craindre avec les préparations concentrées comme le « vigantol ». Il faut donc conseiller la prudence à ce sujet, d'autant plus qu'avec une dose plus forte on n'obtient pas une guérison plus rapide. Le laps de temps de 4 à 6 semaines ne peut être réduit par une dose supérieure à la dose maxima ; l'effet curatif ne peut dépasser un optimum. La dose optima de lait irradié est de 500 cc. Ainsi que Reyher l'a établi, les produits d'oxydation qui prennent naissance lors de l'irradiation du lait en présence d'oxygène détruisent les vitamines B et C ; et il faut compter sur la possibilité de production de principes toxiques. Le danger est évité par la méthode décrite plus haut d'irradiation en atmosphère d'acide carbonique, c'est-à-dire privée d'oxygène. Dans les nombreuses expériences poursuivies aussi bien sur les enfants que sur les animaux, aucun accident n'est survenu du fait de l'absorption de lait irradié ; on ne peut craindre aucun ennui en employant une quantité convenable de ce produit. Le rachitisme est un mal populaire au vrai sens du mot ; 60 % des jeunes enfants en souffrent. Son danger ne se trouve pas seulement dans les déformations graves du squelette, mais bien plus dans les atteintes générales qu'il porte à l'organisme. Aussi les rachitiques sont-ils très peu résistants aux maladies infectieuses de toutes sortes : rougeole, pneumonie, coqueluche, etc., ils y succombent très souvent. Le grand danger de la pneumonie ou de la rougeole se trouve conjuré quand
et il faut compter sur la possibilité de production de principes toxiques. Le danger est évité par la méthode décrite plus haut d'irradiation en atmosphère d'acide carbonique, c'est-à-dire privée d'oxygène. Dans les nombreuses expériences poursuivies aussi bien sur les enfants que sur les animaux, aucun accident n'est survenu du fait de l'absorption de lait irradié ; on ne peut craindre aucun ennui en employant une quantité convenable de ce produit. Le rachitisme est un mal populaire au vrai sens du mot ; 60 % des jeunes enfants en souffrent. Son danger ne se trouve pas seulement dans les déformations graves du squelette, mais bien plus dans les atteintes générales qu'il porte à l'organisme. Aussi les rachitiques sont-ils très peu résistants aux maladies infectieuses de toutes sortes : rougeole, pneumonie, coqueluche, etc., ils y succombent très souvent. Le grand danger de la pneumonie ou de la rougeole se trouve conjuré quand on peut éviter ou guérir le rachitisme. Ayant en main les armes pour le combattre, il est du devoir de la médecine d'étendre non seulement la thérapeutique du rachitisme, mais encore sur une vaste échelle la prophylaxie de cette maladie. Sciences biologiques. L'Azote basique des extraits végétaux, par Hubert BRADFORD VICKERY (Plant Physiology, juillet 1927, vol. 11). — La détermination de la proportion d'azote engagé dans les extraits végétaux à l'état de bases azotées simples, est un problème d'une grande importance. Bien que, actuellement, on ne fasse que pressentir la destinée physiologique de beaucoup de ces substances, on ne peut douter qu'elles jouent un rôle important dans le métabolisme. — Si on pouvait les connaître complètement et être fixé sur leurs propriétés, il est probable que beaucoup de questions encore obscures s'éclairciraient. Il est utile de distinguer, parmi ces bases simplifiées, celles qui ont un rapport direct avec les acides aminés qui constituent les protéines et les autres bases, préexistantes dans les plantes. L'arginine (I), la lysine (II) et, à un moindre degré, l'histidine (III) sont des constituants bien connus des extraits végétaux, Arginine Lysine Histidine Les méthodes employées pour isoler ces trois substances dans les produits de l'hydrolyse des
VICKERY (Plant Physiology, juillet 1927, vol. 11). — La détermination de la proportion d'azote engagé dans les extraits végétaux à l'état de bases azotées simples, est un problème d'une grande importance. Bien que, actuellement, on ne fasse que pressentir la destinée physiologique de beaucoup de ces substances, on ne peut douter qu'elles jouent un rôle important dans le métabolisme. — Si on pouvait les connaître complètement et être fixé sur leurs propriétés, il est probable que beaucoup de questions encore obscures s'éclairciraient. Il est utile de distinguer, parmi ces bases simplifiées, celles qui ont un rapport direct avec les acides aminés qui constituent les protéines et les autres bases, préexistantes dans les plantes. L'arginine (I), la lysine (II) et, à un moindre degré, l'histidine (III) sont des constituants bien connus des extraits végétaux, Arginine Lysine Histidine Les méthodes employées pour isoler ces trois substances dans les produits de l'hydrolyse des protéines ne sont que grossièrement quantitatives. Les principes généraux sur lesquels sont basées ces méthodes sont appliquables à l'étude des extraits végétaux. Les bétaïnes (IV, V) sont rattachées aux acides aminés des protéines, depuis qu'elles sont considérées comme des produits méthylés de ces substances, Bétaine (Substance type, dérivée du glycocholal). Stachydrine (Bétaine de la proline). Adenine "Elles sont assez répandues dans les plantes et contiennent une proportion assez considérable de l'azote basique total de l'extrait. Malheureusement, il n'existe pas de bonne méthode de séparation susceptible de s'appliquer aux individus de ce groupe. Il existe, il est vrai, un réactif précipitant général, le chlorure mercurique en solution acétique, mais la séparation des bétaïnes individuelles qui peuvent se trouver dans un même extrait, est surtout une affaire de cristallisation fractionnée de sels convenables. En dehors de ces bases pouvant être considérées comme reliées aux protéines, il y a au moins deux autres types distincts de substances qu'on rencontre habituellement dans les extraits végétaux. Ce sont, d'une part, les purines faiblement basiques et, d'autre part, les bases relativement fortes, telles que la choline (VII) et la triméthylamine (VIII), Choline Triméthylamine (Base libre analogue à l'ammoniac, NH3) Les purines sont intimement liées à l'acide
Stachydrine (Bétaine de la proline). Adenine "Elles sont assez répandues dans les plantes et contiennent une proportion assez considérable de l'azote basique total de l'extrait. Malheureusement, il n'existe pas de bonne méthode de séparation susceptible de s'appliquer aux individus de ce groupe. Il existe, il est vrai, un réactif précipitant général, le chlorure mercurique en solution acétique, mais la séparation des bétaïnes individuelles qui peuvent se trouver dans un même extrait, est surtout une affaire de cristallisation fractionnée de sels convenables. En dehors de ces bases pouvant être considérées comme reliées aux protéines, il y a au moins deux autres types distincts de substances qu'on rencontre habituellement dans les extraits végétaux. Ce sont, d'une part, les purines faiblement basiques et, d'autre part, les bases relativement fortes, telles que la choline (VII) et la triméthylamine (VIII), Choline Triméthylamine (Base libre analogue à l'ammoniac, NH3) Les purines sont intimement liées à l'acide nucléique dont on suppose la présence dans le noyau de la cellule, tandis que la choline se rattache aux graisses phosphorées et peut avoir d'autres affiliations encore inconnues, Dans ce travail, il n'a pas été tenu compte d'un groupe de bases végétales complexe et important au point de vue économique, celui des alcaloïdes ; ceux-ci ne semblent pas être aussi largement répandus que les bases plus simples et d'ailleurs, la chimie des alcaloïdes possède une technique propre très différente de celle que demande l'étude des bases simples. Tout d'abord, le fait que ces types de substances peuvent être considérés comme des composants probables d'un extrait végétal particulier, n'exclut aucunement d'autres possibilités. Ce que l'on sait de leur présence chez les plantes, vient simplement de ce qu'elles ont, pour la plupart, des propriétés qui les rendent faciles à isoler et à identifier. Mais on doit s'attendre à ce qu'une étude plus approfondie puisse révéler la présence d'autres substances basiques, qui, tout en étant connues comme des possibilités chimiques ou comme échantillons de collection, n'ont pas encore été découvertes dans la nature. Le problème de la recherche des bases des extraits végétaux se réduit, étant donné le but que nous nous proposons,
celui des alcaloïdes ; ceux-ci ne semblent pas être aussi largement répandus que les bases plus simples et d'ailleurs, la chimie des alcaloïdes possède une technique propre très différente de celle que demande l'étude des bases simples. Tout d'abord, le fait que ces types de substances peuvent être considérés comme des composants probables d'un extrait végétal particulier, n'exclut aucunement d'autres possibilités. Ce que l'on sait de leur présence chez les plantes, vient simplement de ce qu'elles ont, pour la plupart, des propriétés qui les rendent faciles à isoler et à identifier. Mais on doit s'attendre à ce qu'une étude plus approfondie puisse révéler la présence d'autres substances basiques, qui, tout en étant connues comme des possibilités chimiques ou comme échantillons de collection, n'ont pas encore été découvertes dans la nature. Le problème de la recherche des bases des extraits végétaux se réduit, étant donné le but que nous nous proposons, à celui du choix des réactifs convenables. Ce choix est strictement limité par deux conditions d'ordre général : premièrement, le réactif ne doit pas introduire d'azote, et deuxièmement, il doit pouvoir être manipulé sans aucun risque d'altération pour les autres matières organiques de la solution. Ces conditions ne peuvent pas toujours être remplies ; en fait, il est rare que l'on puisse manipuler des réactifs en ayant l'assurance que les autres composants de la solution ne subissent, par suite de leur action, aucun changement. Le jugement et l'expérience doivent jouer une part prépondérante, pour l'étude particulière de chaque extrait. Les prescriptions générales sont, actuellement, d'une rigueur douteuse et peuvent avoir de graves inconvénients. L'acide phosphotungstique est employé depuis longtemps comme réactif précipitant des bases en général, et, en ce qui concerne le mélange des acides aminés qu'on obtient par hydrolyse des protéines, son action est bien définie. Avec les extraits végétaux cependant, beaucoup de circonstances concourent à faire d'un dosage d'azote précipité par ce réactif, une mesure incertaine de l'azote basique total. On peut, pour illustrer cette affirmation, décrire des expériences, faites avec des extraits de luzerne et de levure. L'auteur préparait l'extrait de luzerne en imbibant d'éther la substance
toujours être remplies ; en fait, il est rare que l'on puisse manipuler des réactifs en ayant l'assurance que les autres composants de la solution ne subissent, par suite de leur action, aucun changement. Le jugement et l'expérience doivent jouer une part prépondérante, pour l'étude particulière de chaque extrait. Les prescriptions générales sont, actuellement, d'une rigueur douteuse et peuvent avoir de graves inconvénients. L'acide phosphotungstique est employé depuis longtemps comme réactif précipitant des bases en général, et, en ce qui concerne le mélange des acides aminés qu'on obtient par hydrolyse des protéines, son action est bien définie. Avec les extraits végétaux cependant, beaucoup de circonstances concourent à faire d'un dosage d'azote précipité par ce réactif, une mesure incertaine de l'azote basique total. On peut, pour illustrer cette affirmation, décrire des expériences, faites avec des extraits de luzerne et de levure. L'auteur préparait l'extrait de luzerne en imbibant d'éther la substance végétale (feuilles et tiges) et en passant à la presse hydraulique. Le jus recueilli était rapidement chauffé à 81° C pour détruire les enzymes et les protéines coagulées, filtré et concentré, on ajoutait alors de l'alcool de manière à obtenir une concentration finale de 50 % en volume. Le précipité ainsi obtenu était repris, et le filtrat concentré. Cette solution ne contenait pas de protéines en quantité appréciable. On la dénomme dans la suite du Mémoire « filtrat de luzerne ». Pour séparer les phosphates ainsi que les acides organiques qui forment des sels de baryum insolubles, on ajoute un excès d’hydroxyde de baryum et on sépare par filtration le précipité obtenu ; de l'alcool est alors ajouté au filtrat à volume égal et un second précipité peut ainsi être recueilli. Le premier précipité contient de l'acide phosphorique et de l'acide citrique, mais peu d’azote, tandis que dans le second on trouve de l'acide malique et de l'acide malonique avec des composés azotés atteignant près de 14 % de l'azote total de l'extrait privé de protéines. Le filtrat provenant de ces précipités peut être débarrassé des réactifs et traité par l'acétate mercureux, le carbonate de sodium et l'alcool (réactif de
ainsi obtenu était repris, et le filtrat concentré. Cette solution ne contenait pas de protéines en quantité appréciable. On la dénomme dans la suite du Mémoire « filtrat de luzerne ». Pour séparer les phosphates ainsi que les acides organiques qui forment des sels de baryum insolubles, on ajoute un excès d’hydroxyde de baryum et on sépare par filtration le précipité obtenu ; de l'alcool est alors ajouté au filtrat à volume égal et un second précipité peut ainsi être recueilli. Le premier précipité contient de l'acide phosphorique et de l'acide citrique, mais peu d’azote, tandis que dans le second on trouve de l'acide malique et de l'acide malonique avec des composés azotés atteignant près de 14 % de l'azote total de l'extrait privé de protéines. Le filtrat provenant de ces précipités peut être débarrassé des réactifs et traité par l'acétate mercureux, le carbonate de sodium et l'alcool (réactif de Neuberg 1, 3, 4) procédé par lequel on précipite très complètement les acides aminés, les purines et les bases contenant un groupe aminé, mais non les bases méthylées. Ce précipité fut décomposé par l’hydrogène sulfuré et la solution obtenue fut supposée contenir la plus grande partie des acides aminés et des bases, à l'exception des bétaines et des autres bases méthylées qu'on trouve dans le jus de luzerne. Pour séparer les substances basiques, on ajoute de l’acide phosphotungstique suivant le procédé habituel, puis le précipité est décomposé en broyant en 3 fois avec de l’hydroxyde de baryum, d'abord à froid et, pour finir, à la température d’ébullition. Le cinquième extrait ne paraît contenir que des traces de matière organique. Le filtrat du précipité obtenu par l’acide phosphotungstique est traité par un excès d’hydroxyde de baryum pour séparer l’acide phosphotungstique et l’acide sulfurique, puis on lave abondamment le précipité. Finalement l’excès d’hydroxyde de baryum est exactement séparé des deux fractions par l’acide sulfurique. C'est le procédé employé habituellement pour séparer les bases des substances non basiques. Les résultats obtenus sont réunis dans le tableau 1. TABLEAU I. RÉPARTITION DE L’AZOTE EXTRAIT PAR L’ACIDE PHOSPHOTUNGSTIQUE D’UNE FRACTION DE FILTRAT DE LUZERNE. Proportion
des bases, à l'exception des bétaines et des autres bases méthylées qu'on trouve dans le jus de luzerne. Pour séparer les substances basiques, on ajoute de l’acide phosphotungstique suivant le procédé habituel, puis le précipité est décomposé en broyant en 3 fois avec de l’hydroxyde de baryum, d'abord à froid et, pour finir, à la température d’ébullition. Le cinquième extrait ne paraît contenir que des traces de matière organique. Le filtrat du précipité obtenu par l’acide phosphotungstique est traité par un excès d’hydroxyde de baryum pour séparer l’acide phosphotungstique et l’acide sulfurique, puis on lave abondamment le précipité. Finalement l’excès d’hydroxyde de baryum est exactement séparé des deux fractions par l’acide sulfurique. C'est le procédé employé habituellement pour séparer les bases des substances non basiques. Les résultats obtenus sont réunis dans le tableau 1. TABLEAU I. RÉPARTITION DE L’AZOTE EXTRAIT PAR L’ACIDE PHOSPHOTUNGSTIQUE D’UNE FRACTION DE FILTRAT DE LUZERNE. Proportion FRACTION Poids % de luzerne Azote total de la solution 28 gr, 5% 51,9 Azote ammoniacal de la solution 1,54 — Azote total de la fraction base 10,81 19,6 Azote ammoniacal de la fraction base ... 0,32 — Azote dans le phosphotungstate de Ba et SO4 (fraction base) 2,57 4,56 Azote total du filtrat provenant des bases .... 12,46 22,6 Azote ammoniacal du filtrat des bases 0,24 — Azote dans le phosphotungstate de Baryum et SO4 (filtrat des bases) 1,40 — Azote total retrouvé 23,97 42,19 Azote perdu dans le phosphotungstate et le BaSO4 9,7 7,1 Azote ammoniacal perdu (1) 0,95 — Azote non compté ............. 0,38 — Devant ces résultats, on doit se demander quels sont les chiffres qui représentent l’azote basique ? Est-ce l’azote de la fraction basique s’élevant à 19,6 % de l’azote total du filtrat de luzerne, ou doit-on ajouter à cet azote celui qui ne peut être séparé du précipité de phosphotungstate et de sulfate, et dont la quantité est de 4,56 % en plus de l’azote original. Un cas encore plus équivoque s’observe lors de l’examen de l’extrait de levure. Le précipité obtenu avec l’acétate mercureux et le carbonate de soude est divisé en
Azote total du filtrat provenant des bases .... 12,46 22,6 Azote ammoniacal du filtrat des bases 0,24 — Azote dans le phosphotungstate de Baryum et SO4 (filtrat des bases) 1,40 — Azote total retrouvé 23,97 42,19 Azote perdu dans le phosphotungstate et le BaSO4 9,7 7,1 Azote ammoniacal perdu (1) 0,95 — Azote non compté ............. 0,38 — Devant ces résultats, on doit se demander quels sont les chiffres qui représentent l’azote basique ? Est-ce l’azote de la fraction basique s’élevant à 19,6 % de l’azote total du filtrat de luzerne, ou doit-on ajouter à cet azote celui qui ne peut être séparé du précipité de phosphotungstate et de sulfate, et dont la quantité est de 4,56 % en plus de l’azote original. Un cas encore plus équivoque s’observe lors de l’examen de l’extrait de levure. Le précipité obtenu avec l’acétate mercureux et le carbonate de soude est divisé en deux parties dont l’une est soluble dans l’acide sulfurique, et l’autre insoluble. Cette dernière partie contenait 33 gr. 4 d’azote, dont 13 gr. 84 se trouvèrent dans la fraction basique, tandis que 6 gr. 65 seulement étaient retenus par le phosphotungstate et le sulfate de baryum: Dans ce cas, doit-on considérer que la quantité d’azote basique de cette fraction est de 13 gr. 84 ou qu’elle est de 20 gr. 49, soit 31,8 % de l’azote original de l’extrait de levure ? L’explication du problème posé fut en partie donnée par l’examen du précipité de phosphotungstate de baryum. Après avoir bouilli pendant une heure avec de l’acide chlorhydrique concentré, il fut dilué et filtré. On réussit à extraire ainsi près d’un quart de l’azote. Les extraits chauds laissaient déposer, en se refroidissant, du chlorure de baryum, et comme ils contenaient beaucoup d’acide phosphotungstique libre, la petite quantité de bases organiques qui restait se déposait à l’état de phosphotungstates. Ceux-ci étaient séparés du chlorure de baryum par extraction par l’acétone. On obtenait ainsi plus d’un gramme d’azote semblant appartenir à des substances basiques, et plus de 2 grammes d’azote semblant appartenir à de simples acides monoaminés. Les substances basiques ne furent