jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
23°C: c'est donc le seuil de l'inhibition rhizomorphique, celui du mycélium est situé à 800 mg % ml (tableau 1). Fomes annosus: c'est le plus résistant des Hyménomycètes lignicoles aux antibiotiques (actidione, amphotéricine B) (Tableau II: souches allemande et américaine). Pour les deux souches, la source ammoniacale détermine une croissance plus lente que la peptone pepsique. Par contre la source d'azote ammoniacale accélère la conidiogénèse de 72 h et permet la germination des conidies de 2e génération. Dans son ensemble, sur NH4 le mycélium reste moins dense que sur peptone. En fin de culture il s'affaisse et devient gélatineux translucide. Dans tous les cas, la souche américaine est pulvérulente: conidies beaucoup plus nombreuses que dans la souche allemande. 800 mg % ml de 5-FC limitent la croissance de cette dernière, au-delà du 90e jour de culture et proportionnellement au témoin, suivant la nature de la source azotée. NH4 reporte la conidiogenèse du 17e au 23e jour. 800 mg % ml de 5-FC sont parfaitement fongicides pour la souche américaine quelle que soit la source azotée; néanmoins sur peptone le mycélium d'ensemencement, avant de se lyser, provoque la formation d'une auréole opaque visible jusqu'au 15e jour. TABLEAU 1 Action de la 5-FC sur la croissance mycélienne et la rhizomorphogenèse de Clitocybe mellea. Peptone NH4 Jours NH4 mm de culture sans FC 50 mg 5-FC 800 mg 5-FC 50 mg 5-FC 800 mg 5-FC 14 D = 7 D = 16 x 12 D = 11 x 8 lente, courte H = 0,5 H = 0,5 3 colonies 16 D = 8 x 8 D = 18 x 15 D = 12 x 10 très léger mycélium H = 1 H = 1 H = 1 démarrage localisé sur croissance l'explantat mycélienne retard de croissance 19 D = 10 x 9 D = 22 x 18 D = 14 x 11 D = 12 x 8 mycélium H = 1 H = 1 H = 1 H = 0 ou localisé sur végétation mycélium l'explantat basse immergé retard de croissance 22 D = 14 x 10 D = 23 x 20 D
5-FC sur la croissance mycélienne et la rhizomorphogenèse de Clitocybe mellea. Peptone NH4 Jours NH4 mm de culture sans FC 50 mg 5-FC 800 mg 5-FC 50 mg 5-FC 800 mg 5-FC 14 D = 7 D = 16 x 12 D = 11 x 8 lente, courte H = 0,5 H = 0,5 3 colonies 16 D = 8 x 8 D = 18 x 15 D = 12 x 10 très léger mycélium H = 1 H = 1 H = 1 démarrage localisé sur croissance l'explantat mycélienne retard de croissance 19 D = 10 x 9 D = 22 x 18 D = 14 x 11 D = 12 x 8 mycélium H = 1 H = 1 H = 1 H = 0 ou localisé sur végétation mycélium l'explantat basse immergé retard de croissance 22 D = 14 x 10 D = 23 x 20 D = 16 x 12 D = 13 x 9 mycélium H = 1 H = 1 H = 1 H = 0 localisé sur ébauche Rh 0 Rh 0 Rh l'explantat retard de croissance 26 Rh = 1 à 2 0 Rh 30 ............. D = 18 H = 4 4 Rh 3 à 5 35 ............. Rh = 4 à 7 D = 35 x 30 D = 24 x 22 D = 16 x 13 D = 8 x 8 0 Rh 0 Rh 0 Rh H = 1 à 2 0 Rh Les mesures sont exprimées en millimètres; Rh. rhizomorphe. Étude de la germination des conidies de Fomes annosus sur milieu peptoné en chambre humide à 22°C. 24e heure : les conidies de la souche allemande ont gonflé, atteignant 6 à 8 µm de diamètre. Les 3/4 ont émis un tube germinatif de 40 à 80 µm de long dans le témoin sans antibiotique. En présence de 50 mg de 5-FC, on n'observe que 3 germinations en moyenne. Les autres conidies subissent un gonflement moyen de 10 µm. Les tubes germinatifs émis mesurent 4-20 µm, affectant un retard de croissance par rapport au milieu témoin sans 5-FC.
4 Rh 3 à 5 35 ............. Rh = 4 à 7 D = 35 x 30 D = 24 x 22 D = 16 x 13 D = 8 x 8 0 Rh 0 Rh 0 Rh H = 1 à 2 0 Rh Les mesures sont exprimées en millimètres; Rh. rhizomorphe. Étude de la germination des conidies de Fomes annosus sur milieu peptoné en chambre humide à 22°C. 24e heure : les conidies de la souche allemande ont gonflé, atteignant 6 à 8 µm de diamètre. Les 3/4 ont émis un tube germinatif de 40 à 80 µm de long dans le témoin sans antibiotique. En présence de 50 mg de 5-FC, on n'observe que 3 germinations en moyenne. Les autres conidies subissent un gonflement moyen de 10 µm. Les tubes germinatifs émis mesurent 4-20 µm, affectant un retard de croissance par rapport au milieu témoin sans 5-FC. A 800 mg on n'observe que 2 à 3 conidies gonflées dans chaque goutte suspendue. 44e heure : chez le témoin sans 5-FC, le mycélium ramifié mesure 260 µm de long en moyenne et 2-2,5 µm de largeur. A 50 mg % ml de 5-FC, le mycélium est ondulé sous l'action du toxique, non ramifié et de 60 µm de long. 800 mg de 5-FC permettent le gonflement de 26 conidies et une germination de 10 µm à la 44e heure pour la souche allemande. La souche américaine émet dans le même temps des germes de 100 µm de long et 3 µm de largeur. La souche allemande est toujours moins sensible que l'américaine à l'addition de ces doses d'antibiotiques. Au bout de 66 h, à 50 mg, on n'observe plus qu'une seule germination d'origine conidienne de 5 µm de long x 1 de large et aucune germination dans la souche américaine au contact de 800 mg % ml de 5-FC. TABLEAU II Comparaison entre les souches allemande et américaine d'Ungulina annosa Témoin sans 5-FC 800 mg de 5-FC Souche allemande Souche américaine Souche allemande Souche américaine Jours de culture Peptone NH4 Peptone NH4 Peptone NH4 Peptone NH4 6 D
l'action du toxique, non ramifié et de 60 µm de long. 800 mg de 5-FC permettent le gonflement de 26 conidies et une germination de 10 µm à la 44e heure pour la souche allemande. La souche américaine émet dans le même temps des germes de 100 µm de long et 3 µm de largeur. La souche allemande est toujours moins sensible que l'américaine à l'addition de ces doses d'antibiotiques. Au bout de 66 h, à 50 mg, on n'observe plus qu'une seule germination d'origine conidienne de 5 µm de long x 1 de large et aucune germination dans la souche américaine au contact de 800 mg % ml de 5-FC. TABLEAU II Comparaison entre les souches allemande et américaine d'Ungulina annosa Témoin sans 5-FC 800 mg de 5-FC Souche allemande Souche américaine Souche allemande Souche américaine Jours de culture Peptone NH4 Peptone NH4 Peptone NH4 Peptone NH4 6 D = 26 x 17 0 m D = 25 x 15 D = 14 x 8 D = 18 x 12 D = 6 x 4 auréole 0 m H = 8 H = 1-2 H = 1-2 H = 4-5 H = 2-3 de 14 x 8 m flocons m plat retard m retard m 0 m 8 D = 32 x 25 D = 12 x 9 D = 48 x 38 D = 16 x 21 D = 30 x 21 D = 12 x 9 auréole 0 m H = 8-9 H = 1 H = 1 H = 1-2 H = 2-3 H = 2 de 16 x 17 0 m 12 D = 43 x 34 D = 18 x 15 D = 105 x 90 D = 28 x 25 D = 52 x 32 D = 15 x 14 auréole 0 m H = 3-5 H = 3 H = 1 H = 1-2 H = 3 H = 3 de 19 x 20 m ras mèches m mèches m m initial croissance affaissé rapide 15 D = 50 x 43 D = 20 x 16 D = 145 x 120 D
m plat retard m retard m 0 m 8 D = 32 x 25 D = 12 x 9 D = 48 x 38 D = 16 x 21 D = 30 x 21 D = 12 x 9 auréole 0 m H = 8-9 H = 1 H = 1 H = 1-2 H = 2-3 H = 2 de 16 x 17 0 m 12 D = 43 x 34 D = 18 x 15 D = 105 x 90 D = 28 x 25 D = 52 x 32 D = 15 x 14 auréole 0 m H = 3-5 H = 3 H = 1 H = 1-2 H = 3 H = 3 de 19 x 20 m ras mèches m mèches m m initial croissance affaissé rapide 15 D = 50 x 43 D = 20 x 16 D = 145 x 120 D = 30 x 35 D = 61 x 36 D = 25 x 24 auréole 0 m H = 3-4 H = 4-5 H = 1 H = 1 H = 3 H = 1-2 opaque col immer col immer de 17 x 20 17 D = 57 x 46 col origine c D = 170 x 120 D = 38 x 32 D = 63 x 40 D = 36 x 29 0 m 0 m commence 6 col H = 3 H = 2 confluer de 2-7 1 col 2re 25 x 10 de 12 20 D = 65 x 56 D = 180 x 120 surface D = 43 x 38 D = 66 x 47 D = 52 x 44 0 m 0 m plis au col recouverte qq H = 1 H = 3-5 H = 3 revers coalescentes germinations c 14 col de 2-10 23 D = 72 x 65 D = 200 x 120 D = 210 x 120 D = 50 x 49 D = 69 x 54 D = 70 x 49 0 m 0 m H = 3-4 H = 4-5 nappe 20 col H = 4-6 H = 3
col origine c D = 170 x 120 D = 38 x 32 D = 63 x 40 D = 36 x 29 0 m 0 m commence 6 col H = 3 H = 2 confluer de 2-7 1 col 2re 25 x 10 de 12 20 D = 65 x 56 D = 180 x 120 surface D = 43 x 38 D = 66 x 47 D = 52 x 44 0 m 0 m plis au col recouverte qq H = 1 H = 3-5 H = 3 revers coalescentes germinations c 14 col de 2-10 23 D = 72 x 65 D = 200 x 120 D = 210 x 120 D = 50 x 49 D = 69 x 54 D = 70 x 49 0 m 0 m H = 3-4 H = 4-5 nappe 20 col H = 4-6 H = 3 qq petites uniforme de 13-3 col 2re col dispersées sporulée origine c immergées 7-9 près goulot 90 .................. D= 180x120 cm aérien H = 3-5 m abondant D = 110 x 100 D = 115 x 97 milieu milieu H = 3-4 m abondant m cotonneux translucide H = 1-2 m gélatineux fongicide fongicide m aérien gélatineux pulvérulent flottant m superficiel cireux blanc cotonneux flottant chamois sur sur liquide non aérien flottant neus sur tte sur liquide tte surface cultural, + cireux strié dans milieu surface culture cultural culture pulvérulent croissance culture traverse (nombre c) que souche ralentie croissance la gélose allemande ralentie Toutes les mesures sont en millimètres; D, diamètre; H, hauteur; c, conidies; col, colonies; m, mycélium, mycélienne; immer, immergé; 2re, secondaire. L'observation de souches d'Ungulina annosa d'origines diverses et très inégalement productives de conidies suggère l'hypothèse suivante : la 5-FC par son atome de fluor en position 5 sur le noyau pyrimidine, bloque les mitoses. Or la forme conidienne Oedocephalum purinuclee est beaucoup plus abondante dans la souche américaine que dans la souche allemande. La souche américaine subit une fongistase dès le 8e jour tandis que la souche allemande paucisporée continue à s'accroître jusqu'au 23e jour en
m gélatineux fongicide fongicide m aérien gélatineux pulvérulent flottant m superficiel cireux blanc cotonneux flottant chamois sur sur liquide non aérien flottant neus sur tte sur liquide tte surface cultural, + cireux strié dans milieu surface culture cultural culture pulvérulent croissance culture traverse (nombre c) que souche ralentie croissance la gélose allemande ralentie Toutes les mesures sont en millimètres; D, diamètre; H, hauteur; c, conidies; col, colonies; m, mycélium, mycélienne; immer, immergé; 2re, secondaire. L'observation de souches d'Ungulina annosa d'origines diverses et très inégalement productives de conidies suggère l'hypothèse suivante : la 5-FC par son atome de fluor en position 5 sur le noyau pyrimidine, bloque les mitoses. Or la forme conidienne Oedocephalum purinuclee est beaucoup plus abondante dans la souche américaine que dans la souche allemande. La souche américaine subit une fongistase dès le 8e jour tandis que la souche allemande paucisporée continue à s'accroître jusqu'au 23e jour en présence de 800 mg de 5-FC. Étude cytologique des préparations fixées par 1h chaleur et montées dans le lactophénol : A. 1° Une culture de 1 mois (sur Carotte) de la souche américaine 11667 (forme Oedocephalum) a produit des conidies de 1-3 Il de diamètre visibles au microscope en contraste de phase (G x 1875). À ce témoin, nous avons comparé une culture en chambre humide âgée de 7 mois. issue de germinations conidiennes présentant les mêmes caractères morphologiques. 20 À 50 mg % ml de 5-FC nous avons observé les noyaux dans des conidies de 2,3 Il; par contre ceux-ci manquent dans les petites conidies de 1-1,5 On remarque de plus une myriade de petites conidies réduites à leur noyau. 3° À 800 mg % ml de 5-FC les conidies sont plus exiguës qu'à 50 mg % ml, presque punctiformes mesurant 0.25 à 1 Il de diamètre. On observe de plus des groupes de 4 conidies de 1-3 Il (celles de 3 Il contiennent un noyau, celles de 1 Il n'en renferment pas). B. Au contraire la souche allemande, plus faiblement conidifère que l'américaine se montre moins sensible à l'action frénatrice de la 5-FC. 1° Témoin : les conidies
de phase (G x 1875). À ce témoin, nous avons comparé une culture en chambre humide âgée de 7 mois. issue de germinations conidiennes présentant les mêmes caractères morphologiques. 20 À 50 mg % ml de 5-FC nous avons observé les noyaux dans des conidies de 2,3 Il; par contre ceux-ci manquent dans les petites conidies de 1-1,5 On remarque de plus une myriade de petites conidies réduites à leur noyau. 3° À 800 mg % ml de 5-FC les conidies sont plus exiguës qu'à 50 mg % ml, presque punctiformes mesurant 0.25 à 1 Il de diamètre. On observe de plus des groupes de 4 conidies de 1-3 Il (celles de 3 Il contiennent un noyau, celles de 1 Il n'en renferment pas). B. Au contraire la souche allemande, plus faiblement conidifère que l'américaine se montre moins sensible à l'action frénatrice de la 5-FC. 1° Témoin : les conidies de 1-3 Il contiennent un noyau; celles de 1-1.5 Il qui n'ont pas encore atteint leur taille adulte, et le mycélium renferment des noyaux normaux de 0,5 Il. 2° L'addition de 50 mg % ml de 5-FC provoque la formation de noyaux miniaturisés d'un diamètre inférieur à 0.5 Il ; beaucoup de conidies restaient exiguës arrêtées dans leur croissance. 3° À 800 mg % ml la majorité des conidies ne germent pas. 1/6 donne des germes courts anuculés. Cependant quelques conidies germées sont polynucléées ; elles renferment alors 8-10 noyaux et accidentellement 17 noyaux. Il est donc démontré que la 5-FC perturbe la division cellulaire des diverses souches de Hyménomycètes. En résumé, les Hyménomycètes soumis à l'action de la 5-FC se classent dans l'ordre suivant sous le rapport de leurs fonctions. A. Croissance mycélienne : (a) espèces très sensibles : Merisma sulfureus dont la fongistase est réalisée à 25 mg % ml de cet antibiotique et la fongicidité à 50 mg % ml. Ungulina marginata marque la fongistase à 50 mg % ml et la fongicidité à 100 mg % ml. Fomes hartigii montre la fongistase à 50 mg % ml et la fongicidité à 200 mg % ml ;
beaucoup de conidies restaient exiguës arrêtées dans leur croissance. 3° À 800 mg % ml la majorité des conidies ne germent pas. 1/6 donne des germes courts anuculés. Cependant quelques conidies germées sont polynucléées ; elles renferment alors 8-10 noyaux et accidentellement 17 noyaux. Il est donc démontré que la 5-FC perturbe la division cellulaire des diverses souches de Hyménomycètes. En résumé, les Hyménomycètes soumis à l'action de la 5-FC se classent dans l'ordre suivant sous le rapport de leurs fonctions. A. Croissance mycélienne : (a) espèces très sensibles : Merisma sulfureus dont la fongistase est réalisée à 25 mg % ml de cet antibiotique et la fongicidité à 50 mg % ml. Ungulina marginata marque la fongistase à 50 mg % ml et la fongicidité à 100 mg % ml. Fomes hartigii montre la fongistase à 50 mg % ml et la fongicidité à 200 mg % ml ; (b) espèces moyennement sensibles : Stereum spadiceum. 400 mg % ml marque la fongistase. 800 mg % ml, la fongicidité. La toxicité au voisinage de la fongistase est marquée par la sinuosité et la torsion en vrille des hyphes de Stereum spadiceum et de Fomes hartigii; (c) espèces résistantes : Clitocybe mellea dont la fongistase est voisine de 400 mg % ml et le seuil de fongicidité supérieur à 800 mg % ml. Odontia bicolor, où la fongistase n'est réalisée qu'à 400 mg % ml au 31e jour; 800 mg % ml étant insuffisants pour déterminer la fongicidité; (d) espèces réfractaires à la 5-FC : Fomes annosus : 800 mg ml retardent seulement la croissance mycélienne jusqu'au 44e jour sans perturber la progression de la souche allemande; beaucoup plus sensible, la souche américaine est tuée dès le 8e jour. B. Conidiogenèse : cette fonction est inhibée chez Merisma sulfureus dès 25 mg % ml de 5-FC. à 400 mg % ml pour Stereum spadiceum. Parmi les diverses souches d'Ungulina annosa, certaines plus abondamment conidifères sont bloquées dans leur croissance par la 5-FC, tandis que les souches peu conidifères poursuivent leur développement pendant un temps beaucoup plus long (23 jours). C.
Clitocybe mellea dont la fongistase est voisine de 400 mg % ml et le seuil de fongicidité supérieur à 800 mg % ml. Odontia bicolor, où la fongistase n'est réalisée qu'à 400 mg % ml au 31e jour; 800 mg % ml étant insuffisants pour déterminer la fongicidité; (d) espèces réfractaires à la 5-FC : Fomes annosus : 800 mg ml retardent seulement la croissance mycélienne jusqu'au 44e jour sans perturber la progression de la souche allemande; beaucoup plus sensible, la souche américaine est tuée dès le 8e jour. B. Conidiogenèse : cette fonction est inhibée chez Merisma sulfureus dès 25 mg % ml de 5-FC. à 400 mg % ml pour Stereum spadiceum. Parmi les diverses souches d'Ungulina annosa, certaines plus abondamment conidifères sont bloquées dans leur croissance par la 5-FC, tandis que les souches peu conidifères poursuivent leur développement pendant un temps beaucoup plus long (23 jours). C. La rhizomorphogenèse est inhibée pour Clitocybe mellea, à 10 mg % ml. Nous poursuivons l'étude des divers stades de ce blocage au microscope électronique. CONCLUSIONS. — La rhizomorphogenèse et la conidiogenèse sont les fonctions les plus sensibles aux faibles doses de 5-FC. Les mitoses des souches activement conidifères sont plus fortement perturbées que celles des souches paucispores. Séance du 14 février 1977. E. DROUHET. Mod. treat., 7. (3). 1970. p. 539-564. S. SHADOMY. Appl. mycol., 17, 1969. p. 871-877. J. H. GIEGE, J. HEINRICH, H. WEIL et J. P. EBEL. Biochim. Biophys. Acta, 174. 1969. p. 43-52. J. H. GIEGE, J. HEINRICH, H. WEIL et J. P. EBEL. Biochim. Biophys. Acta, 174. 1969. p. 53-70. J. H. GIEGE et J. H. WEIL, Bull. Soc. Chim. Biol., 52, n° 2, 1970, p. 135-144. J. H. GIEGE et J. P. EBEL, Biochim. Biophys. Acta, 161. 1968. p. 125. L. KURES, A. SCHWERTZ et L. PERCEBOIS. Bull. Soc. Fr. Myc. méd., 4. 1975, p. 167. T. A. MAHVI, L. S. HEERE, S. S. SPICER et M. ANNABLE, Comp. Ren. V° Congrès Soc. Int. de Myc. humaine et animale, 5-10 juillet 1971. p. 283-284. A. M. POLAK et H. J. SCHOLER. Bull. Soc. Fr.
fortement perturbées que celles des souches paucispores. Séance du 14 février 1977. E. DROUHET. Mod. treat., 7. (3). 1970. p. 539-564. S. SHADOMY. Appl. mycol., 17, 1969. p. 871-877. J. H. GIEGE, J. HEINRICH, H. WEIL et J. P. EBEL. Biochim. Biophys. Acta, 174. 1969. p. 43-52. J. H. GIEGE, J. HEINRICH, H. WEIL et J. P. EBEL. Biochim. Biophys. Acta, 174. 1969. p. 53-70. J. H. GIEGE et J. H. WEIL, Bull. Soc. Chim. Biol., 52, n° 2, 1970, p. 135-144. J. H. GIEGE et J. P. EBEL, Biochim. Biophys. Acta, 161. 1968. p. 125. L. KURES, A. SCHWERTZ et L. PERCEBOIS. Bull. Soc. Fr. Myc. méd., 4. 1975, p. 167. T. A. MAHVI, L. S. HEERE, S. S. SPICER et M. ANNABLE, Comp. Ren. V° Congrès Soc. Int. de Myc. humaine et animale, 5-10 juillet 1971. p. 283-284. A. M. POLAK et H. J. SCHOLER. Bull. Soc. Fr. Myc. méd., 3, n° 1. 1974, p. 17-21. E. DROUHET, L. MERCIER-SOUCY et S. MONTPLAISIR. Bull. Soc. Fr. Myc. Méd., 3, n° 1, 1974, p. 9-16. E. DROUHET, L. MERCIER-SOUCY et S. MONTPLAISIR. Comptes rendus, 278. série D, 1974, p. 715. D. PAPAHASSIOPOLIS in G. B. ANSELL, R. M. C. DAWSON et J. N. HAWTHORN, Form and Function of Phospholipids, 1973. R. MORQUER et A. TOUVET. Comptes rendus. 280. série D, 1975, p. 2541. Laboratoire de Cryptogamie, Université Paul-Sabatier, 118. route de Narbonne, 31077 Toulouse Cedex. PHYSIOLOGIE VÉGÉTALE. — Mise en évidence d'ARN polyadénylés dans des suspensions cellulaires de Silene alba. Note de Serge Rambour, Jacques Vasseur et Jean Dubois, présentée par M. Roger Gautheret. La chromatographie sur poly U "Sepharose" d'ARN extrait d'une suspension cellulaire de Silene alba dans la phase exponentielle de croissance, permet l'isolement de molécules polyadénylées. La taille des séquences poly (A) est évaluée à environ 130 nucléotides. AMP rich RNAs occur during the exponential phase of the growth cycle of Silene alba cells in batch suspension culture. The poly (A) sequence isolated after ribonuclease A and T1 digestion, has a mean size of approximately 130 nucleotides. L'étude de l'évolution des acides nucléiques de suspensions cellulaires
DAWSON et J. N. HAWTHORN, Form and Function of Phospholipids, 1973. R. MORQUER et A. TOUVET. Comptes rendus. 280. série D, 1975, p. 2541. Laboratoire de Cryptogamie, Université Paul-Sabatier, 118. route de Narbonne, 31077 Toulouse Cedex. PHYSIOLOGIE VÉGÉTALE. — Mise en évidence d'ARN polyadénylés dans des suspensions cellulaires de Silene alba. Note de Serge Rambour, Jacques Vasseur et Jean Dubois, présentée par M. Roger Gautheret. La chromatographie sur poly U "Sepharose" d'ARN extrait d'une suspension cellulaire de Silene alba dans la phase exponentielle de croissance, permet l'isolement de molécules polyadénylées. La taille des séquences poly (A) est évaluée à environ 130 nucléotides. AMP rich RNAs occur during the exponential phase of the growth cycle of Silene alba cells in batch suspension culture. The poly (A) sequence isolated after ribonuclease A and T1 digestion, has a mean size of approximately 130 nucleotides. L'étude de l'évolution des acides nucléiques de suspensions cellulaires du Silene alba (Miller) E.H.L. Krause, lors d'un cycle de croissance nous avait amenés à émettre l'hypothèse d'une synthèse d'ARN polyadénylés [ARN poly (A)] (.). Ce type d'ARN a été mis en évidence dans divers organes végétaux [e) a e)] et tout récemment dans des suspensions cellulaires d'Acer (6). Par ailleurs, une méthode d'extraction séquentielle aux pH 7,6 et 9 appliquée aux végétaux, a montré qu'une part importante de l'ARN se retrouve dans le système tampon voisin de la neutralité et que les deux populations moléculaires isolées renferment des ARN poly (A) dont la longueur de la séquence adénylique est identique (1). Aussi, afin de vérifier la validité de notre hypothèse, avons-nous dans un premier temps procédé à une extraction à pH 7,6. MÉTHODES. — Les cellules âgées de 12 jours, dont les caractéristiques de la croissance ont été décrites précédemment (8) sont ensemencées dans 200 ml de milieu de Lescure et cultivées pendant 3 jours à 25°C en lumière continue (500 lx au niveau des flacons). Après une filtration rapide, 15 g de cellules sont remis en suspension dans 5 ml de milieu auxquels on ajoute aseptiquement 50 µCi d'adénosine "Cg (à 48 mCi/mmole). Après 2 h d'incubation, les
ailleurs, une méthode d'extraction séquentielle aux pH 7,6 et 9 appliquée aux végétaux, a montré qu'une part importante de l'ARN se retrouve dans le système tampon voisin de la neutralité et que les deux populations moléculaires isolées renferment des ARN poly (A) dont la longueur de la séquence adénylique est identique (1). Aussi, afin de vérifier la validité de notre hypothèse, avons-nous dans un premier temps procédé à une extraction à pH 7,6. MÉTHODES. — Les cellules âgées de 12 jours, dont les caractéristiques de la croissance ont été décrites précédemment (8) sont ensemencées dans 200 ml de milieu de Lescure et cultivées pendant 3 jours à 25°C en lumière continue (500 lx au niveau des flacons). Après une filtration rapide, 15 g de cellules sont remis en suspension dans 5 ml de milieu auxquels on ajoute aseptiquement 50 µCi d'adénosine "Cg (à 48 mCi/mmole). Après 2 h d'incubation, les cellules sont rinçées, congelées dans de l'azote liquide et broyées dans un mortier jusqu'à obtention d'une poudre fine. L'extraction des ARNs s'effectue à 4°C en présence de phénol, de métacrésol et de lauryl sulfate de sodium [(9), CO)]. Après précipitation par de l'éthanol absolu froid, en présence d'acétate de sodium, les acides nucléiques sont dissous dans une solution tamponnée de Tris HCl 10 mM à pH 7,6 contenant 10 mM d'EDTA puis précipités de nouveau. Ces opérations de dissolution-précipitation effectuées à froid, sont renouvelées jusqu'à ce que la radioactivité d'une partie aliquote précipitée à 0°C par de l'acide trichloracétique amené à la concentration finale de 5 %, demeure constante. Les acides nucléiques, dissous dans une solution tampon pH 7,2 de Tris HCl 20 mM, NaCl 10 mM et d'acétate de Mg 5 mM sont alors traités par la désoxyribonucléase I (Boehringer, Mannheim, 15469) (5 µg pour 100 µg d'acide nucléique) à 4°C pendant 45 mn. Les solutions d'ARN (5 mg, A.S. : 56130) ainsi obtenues sont déprotéinisées par un mélange à volume égal de phénol et de chloroforme et fractionnées par chromatographie d'affinité sur une microcolonne (diamètre 5 mm) de "Sepharose" poly (U). RÉSULTATS. — La figure 1 montre qu'il