jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
25 mm de long est prélevé à 5 mm du sommet de la première feuille de chaque jeune plante et les fragments sont regroupés par lots sujets ou témoins. Le matériel ainsi obtenu est fixé par immersion dans l'azote liquide, puis lyophilisé et conservé sous azote. Les plastides sont isolés en milieu apolaire (9) à partir d'environ 1 g (Blé) ou 3 g (Spirodèle) de matériel lyophilisé. PROTOCOLE ET CARACTÉRISTIQUES DU DOSAGE. — Pour l'extraction des nucléotides pyridiniques, l'échantillon de tissus lyophilisés (20 mg environ) ou de plastides isolés est congelé par l'azote liquide, dans un broyeur de Potter, en présence de 1 ml de solution à 0,2 N de soude (dosage des formes réduites) ou d'acide chlorhydrique (dosage des formes oxydées). Il est décongelé au bain-marie bouillant pendant 2 mn pour permettre le broyage des tissus et la destruction des formes oxydées en milieu alcalin, ou des formes réduites en milieu acide. Il est refroidi de nouveau brusquement (9) et centrifugé après ajustement du pH à 7,8. Le dosage de chaque forme de nucléotide pyridinique dans l'extrait constitué par le surnageant est effectué par oxydo-réduction enzymatique cyclique : chaque molécule de la forme de coenzyme à doser subit une alternance de réductions par un système spécifique (glucose-6-phosphate et glucose-6-phosphate-déshydrogénase pour le NADP; éthanol et alcool déshydrogénase pour le NAD) et d'oxydations par un transporteur d'électrons intermédiaire (PES). Ce dernier cède à son tour les électrons à l'accepteur final (BT), utilisé comme réactif photométrique en raison de l'accroissement de densité optique à 570 nm qui résulte de sa réduction en formazan, et qui permet de suivre la réaction au spectrophotomètre. Pour chacune des 4 formes, 4 mesures de vitesse initiale de variation de la densité optique à 570 nm sont effectuées avec les milieux réactionnels dont la composition est indiquée dans le tableau I. Les vitesses initiales de variation de DO (b, t, v, s) obtenues respectivement avec les milieux B, T, V, S permettent le calcul des valeurs a = v-b, r = t-b et d = s-b, Si le milieu réactionnel contient R picomoles de forme à doser
alternance de réductions par un système spécifique (glucose-6-phosphate et glucose-6-phosphate-déshydrogénase pour le NADP; éthanol et alcool déshydrogénase pour le NAD) et d'oxydations par un transporteur d'électrons intermédiaire (PES). Ce dernier cède à son tour les électrons à l'accepteur final (BT), utilisé comme réactif photométrique en raison de l'accroissement de densité optique à 570 nm qui résulte de sa réduction en formazan, et qui permet de suivre la réaction au spectrophotomètre. Pour chacune des 4 formes, 4 mesures de vitesse initiale de variation de la densité optique à 570 nm sont effectuées avec les milieux réactionnels dont la composition est indiquée dans le tableau I. Les vitesses initiales de variation de DO (b, t, v, s) obtenues respectivement avec les milieux B, T, V, S permettent le calcul des valeurs a = v-b, r = t-b et d = s-b, Si le milieu réactionnel contient R picomoles de forme à doser provenant de la solution témoin, la quantité de nucléotide contenue dans le volume d'extrait qui a été introduit TABLEAU I Composition des milieux réactionnels utilisés pour le dosage des formes réduites ou oxydées du NADP et du NAD (volumes en millilitres). Composants B T V S du réactionnel NADP NAD NADP NAD NADP NAD NADP NAD G6P 0,1 0,1 0,1 0,1 Éthanol 0,1 0,1 0,1 0,1 EDTA 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 BT 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Tampon 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 PES 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Extrait *, y, *, Y, Témoin x2 y 2 x2 Y2 Eau 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 — X2 -h -XI -YI — -(XI + X2) — (y2 + Y2) G6PDH 0,1 0,1 0,1 0,1 ADH ............ 0,1 0,1 0,1 0,1 B, milieu de référence (blanc). S, milieu avec extrait et témoin interne. T, milieu témoin (avec témoin interne sans extrait). V, milieu avec extrait sans témoin interne. Concentration des solutions composantes G6P, 5 nmoles/ml; éthanol, 40 % v/v; EDTA, 10 nmoles/ml; BT, 0,5 μmoles/ml; tampon Bicine pH 7,8, 120 nmoles/ml; PES, 2 gmoles/mI, témoin,
NADP NAD NADP NAD NADP NAD G6P 0,1 0,1 0,1 0,1 Éthanol 0,1 0,1 0,1 0,1 EDTA 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 BT 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Tampon 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 PES 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Extrait *, y, *, Y, Témoin x2 y 2 x2 Y2 Eau 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 — X2 -h -XI -YI — -(XI + X2) — (y2 + Y2) G6PDH 0,1 0,1 0,1 0,1 ADH ............ 0,1 0,1 0,1 0,1 B, milieu de référence (blanc). S, milieu avec extrait et témoin interne. T, milieu témoin (avec témoin interne sans extrait). V, milieu avec extrait sans témoin interne. Concentration des solutions composantes G6P, 5 nmoles/ml; éthanol, 40 % v/v; EDTA, 10 nmoles/ml; BT, 0,5 μmoles/ml; tampon Bicine pH 7,8, 120 nmoles/ml; PES, 2 gmoles/mI, témoin, solution 10-6 M de la forme à doser; G6PDH, 20 u/ml; ADH, 300 u/ml. X2 et Y2 varient de 50 à 100 III selon la teneur présumée de l'extrait végétal. En pratique, les milieux sont obtenus à partir de solutions mères préparées à l'avance et l'enzyme ne leur est ajoutée qu'au dernier moment (Lechevallier et coll., 1977). TABLEAU II Teneurs en nucléotides pyridiniques réduits et oxydés mesurées après lyophilisation dans les feuilles de Blé et les frondes de Spirodèle [en pmoles/ml -) d'extrait (A) ou en pmoles/mg -) de matière sèche (F, H)]. A F H -----dosé m s v e m s v m s v NADP réduit 178 7 3,9 ± 0,9 316 28 9,0 35 4,4 12,4 NADP oxydé 1 095 23 2,0 ± 2,1 153 25 16,0 245 14,5 5,9 NAD réduit 159 6 3,6 ± 7,9 34 2,6 8,0 33 4,1 12,2 NAD oxydé ......... 469 9 1,9 ± 3,7 353 46 13,0 152 10,6 7,0 A, reproductibilité des mesures effectuées sur un extrait (16 fractions aliquotes de même volume d'un extrait de frondes de Spirodèle). e, écart maximal relatif, en pourcentage de la moyenne des mesures. F, dosages portant sur 6 lots homologues de
qu'au dernier moment (Lechevallier et coll., 1977). TABLEAU II Teneurs en nucléotides pyridiniques réduits et oxydés mesurées après lyophilisation dans les feuilles de Blé et les frondes de Spirodèle [en pmoles/ml -) d'extrait (A) ou en pmoles/mg -) de matière sèche (F, H)]. A F H -----dosé m s v e m s v m s v NADP réduit 178 7 3,9 ± 0,9 316 28 9,0 35 4,4 12,4 NADP oxydé 1 095 23 2,0 ± 2,1 153 25 16,0 245 14,5 5,9 NAD réduit 159 6 3,6 ± 7,9 34 2,6 8,0 33 4,1 12,2 NAD oxydé ......... 469 9 1,9 ± 3,7 353 46 13,0 152 10,6 7,0 A, reproductibilité des mesures effectuées sur un extrait (16 fractions aliquotes de même volume d'un extrait de frondes de Spirodèle). e, écart maximal relatif, en pourcentage de la moyenne des mesures. F, dosages portant sur 6 lots homologues de fragments de premières feuilles de Blé d'une même culture. H, dosages portant sur 6 lots homologues de frondes de Spirodèle constitués par prélèvement au hasard dans une même culture. m, moyenne des mesures. s, écart-type des mesures. v, coefficient de variation en %. dans la cuve de réaction est donnée, après correction d'inhibition (10), par la formule : A picomoles = [a/(d--a)] R. Le pourcentage d'inhibition peut être évalué en utilisant la relation 1 % = 100 [1 —(d—a)/r]. Dans les conditions de nos expériences, le seuil de dosage correspond pour chaque forme à une quantité de 10-10 moles dans l'échantillon végétal. Le tableau II montre que la reproductibilité des mesures sur un même échantillon végétal est meilleure que ± 5 %, et indique la variabilité des teneurs mesurées dans les tissus de Blé et de Spirodèle. L'influence de diverses conditions de culture (obscurité, lumière rouge de faible puissance, dichlorophényl-diméthylurée) sur le contenu en nucléotides pyridiniques des tissus et des plastes de ces deux espèces a pu être étudiée et fera l'objet d'une publication prochaine. (*) Séance du 14 février 1977. (2) Publié avec la collaboration de Mlle A. Garcia. (3) K. LENDZIAN et J. A. BASSHAM, Biochim. Biophys. Acta,
après correction d'inhibition (10), par la formule : A picomoles = [a/(d--a)] R. Le pourcentage d'inhibition peut être évalué en utilisant la relation 1 % = 100 [1 —(d—a)/r]. Dans les conditions de nos expériences, le seuil de dosage correspond pour chaque forme à une quantité de 10-10 moles dans l'échantillon végétal. Le tableau II montre que la reproductibilité des mesures sur un même échantillon végétal est meilleure que ± 5 %, et indique la variabilité des teneurs mesurées dans les tissus de Blé et de Spirodèle. L'influence de diverses conditions de culture (obscurité, lumière rouge de faible puissance, dichlorophényl-diméthylurée) sur le contenu en nucléotides pyridiniques des tissus et des plastes de ces deux espèces a pu être étudiée et fera l'objet d'une publication prochaine. (*) Séance du 14 février 1977. (2) Publié avec la collaboration de Mlle A. Garcia. (3) K. LENDZIAN et J. A. BASSHAM, Biochim. Biophys. Acta, 396, 1975, p. 260-275. (4) M. L. CHAMPIGNY, Physiol. vég., 14, 1976, p. 607-628. (5) H. BEEVERS, Plant Physiol., 54, 1974, p. 437-442. (6) C. RICHARD, Diplôme d'Études approfondies, 1974, Université Paris VI, 87 p. (7) G. E. GLOCK et P. MACLEAN, Biochem. J., 61, 1955, p. 381-387. (8) J. VERMEERSCH, Diplôme d'Études supérieures, 1976, Université Paris VI, 83 p. (9) A. PIRSON et F. SEIDEL, Planta, 38, 1950, p. 431-473. (10) D. LECHEVALLIER, J VERMEERSCH et R. MONÉGER, Physiol. vég., 15, 1977, p. 63-93. (11) R. MONÉGER, J. VERMEERSCH, D. LECHEVALLIER et C. RICHARD, Physiol. veg., 15, 1977, p. 29-62. Laboratoire de Régulations métaboliques et Différenciation des Plastes, Institut de Biologie végétale, Université Paris VI, Tour 53, 4, place Jussieu, 75230 Paris Cedex 05. PHYTOPATHOLOGIE. — Réactions biochimiques des fruits isolés de Lycopersicum esculentum Mill., infectés expérimentalement par le Phytophthora nicotianae var. parasitica. Note (*) de Bernard Trique, présentée par M. Roger Heim. L'inoculation, sous asepsie, du P. nicotianae var. parasitica (Dast.) Waterh. dans le parenchyme des baies de Tomate entraîne une production de substances antifongiques quantitativement dépendante de la variété éprouvée. La réponse à l'infection est d'autant plus vive que le diamètre de la baie est réduit et
VERMEERSCH, Diplôme d'Études supérieures, 1976, Université Paris VI, 83 p. (9) A. PIRSON et F. SEIDEL, Planta, 38, 1950, p. 431-473. (10) D. LECHEVALLIER, J VERMEERSCH et R. MONÉGER, Physiol. vég., 15, 1977, p. 63-93. (11) R. MONÉGER, J. VERMEERSCH, D. LECHEVALLIER et C. RICHARD, Physiol. veg., 15, 1977, p. 29-62. Laboratoire de Régulations métaboliques et Différenciation des Plastes, Institut de Biologie végétale, Université Paris VI, Tour 53, 4, place Jussieu, 75230 Paris Cedex 05. PHYTOPATHOLOGIE. — Réactions biochimiques des fruits isolés de Lycopersicum esculentum Mill., infectés expérimentalement par le Phytophthora nicotianae var. parasitica. Note (*) de Bernard Trique, présentée par M. Roger Heim. L'inoculation, sous asepsie, du P. nicotianae var. parasitica (Dast.) Waterh. dans le parenchyme des baies de Tomate entraîne une production de substances antifongiques quantitativement dépendante de la variété éprouvée. La réponse à l'infection est d'autant plus vive que le diamètre de la baie est réduit et son contenu en lycopène bas. Antifungal substances are produced by Tomato berries when P. nicotianae is aseptically inoculated in their central parenchymatous tissue. Production yields quantitatively depend on the tested variety but, at each maturity level, reach a peak value towards 48 hrs after inoculation. Smallest size and lowest lycopene content are directly related with highest yields. By the time the climacteric maximum is reached, the rate of phytoalexin synthesis is falling. Les hypocotyles des plantules de L. esculentum résistent aux attaques de divers Phytophthora en accumulant des phytoalexines [(2), (3)]. Cette réponse au parasitisme persiste dans le feuillage jusqu'à la maturation des baies (4). Les informations sur la production de phytoalexines dans les fruits étant peu nombreuses, nous avons recherché si la baie isolée de Tomate était susceptible de fournir une réaction de défense analogue. MÉTHODE. — Une préculture mycélienne (3) du parasite est, après lavages, broyée brièvement à l'« Ultra-Turrax » dans une solution physiologique stérile à 4°C. Les fruits sont désinfectés en surface et placés sous hotte stérile. L'injection du broyat (ou d'eau stérile pour les témoins) s'effectue lentement, du côté du pédoncule, à raison d'une piqûre par loge, à l'aide d'une seringue hypodermique « Brunswick ».
content are directly related with highest yields. By the time the climacteric maximum is reached, the rate of phytoalexin synthesis is falling. Les hypocotyles des plantules de L. esculentum résistent aux attaques de divers Phytophthora en accumulant des phytoalexines [(2), (3)]. Cette réponse au parasitisme persiste dans le feuillage jusqu'à la maturation des baies (4). Les informations sur la production de phytoalexines dans les fruits étant peu nombreuses, nous avons recherché si la baie isolée de Tomate était susceptible de fournir une réaction de défense analogue. MÉTHODE. — Une préculture mycélienne (3) du parasite est, après lavages, broyée brièvement à l'« Ultra-Turrax » dans une solution physiologique stérile à 4°C. Les fruits sont désinfectés en surface et placés sous hotte stérile. L'injection du broyat (ou d'eau stérile pour les témoins) s'effectue lentement, du côté du pédoncule, à raison d'une piqûre par loge, à l'aide d'une seringue hypodermique « Brunswick ». Le volume injecté représente 2 % de celui du fruit. La blessure épidermique immédiatement obturée à la paraffine, les baies sont incubées à 23°C, sous lumière continue, pendant une durée variable. La fraction extractible à l'éther diéthylique est centrifugée (15 000 g, 1 h) et une partie aliquotée du surnageant, évaporée à sec, est reprise par le mélange éluant éther de pétrole : éther diéthylique (95 : 5, v/v) pour être chromatographiée sur colonne (SiO2, 200-400 mesh). La résurgence est enregistrée par une cellule à flux continu à 254 nm. L'intégration de la surface des pics correspondant aux fractions contenant les phytoalexines permet, après transformation exponentielle, de comparer, en valeur relative, les intensités de réponse rapportées à une même masse de fruits frais. RÉSULTATS. Selon leur âge physiologique, les fruits sont classés de A à F (3) d’après leur contenu décroissant en chlorophylle a (stades A, B et C), puis croissant en lycopène (stades D, E et F). Les variétés de Tomate éprouvées sont d’une part, « Montfavet H 63-5 » et « Roma V. F. » qui se montrent les plus sensibles au P. nicotianae et de l’autre, « Clairvil » et « Saint-Pierre » plus résistantes. Dans nos
évaporée à sec, est reprise par le mélange éluant éther de pétrole : éther diéthylique (95 : 5, v/v) pour être chromatographiée sur colonne (SiO2, 200-400 mesh). La résurgence est enregistrée par une cellule à flux continu à 254 nm. L'intégration de la surface des pics correspondant aux fractions contenant les phytoalexines permet, après transformation exponentielle, de comparer, en valeur relative, les intensités de réponse rapportées à une même masse de fruits frais. RÉSULTATS. Selon leur âge physiologique, les fruits sont classés de A à F (3) d’après leur contenu décroissant en chlorophylle a (stades A, B et C), puis croissant en lycopène (stades D, E et F). Les variétés de Tomate éprouvées sont d’une part, « Montfavet H 63-5 » et « Roma V. F. » qui se montrent les plus sensibles au P. nicotianae et de l’autre, « Clairvil » et « Saint-Pierre » plus résistantes. Dans nos conditions artificielles, la production de phytoalexines la plus vive s’observe pour tous les cultivars au terme de 48 h d’incubation et lors des stades A, B ou C selon les lots. Pour une même variété, les valeurs relatives obtenues s’abaisinent progressivement lorsque le rougissement du fruit s’accentue (tableau I). Ce sont donc les fruits les plus verts qui réagissent de la façon la plus intense puisqu’aux stades E et F, les concentrations en inhibitines ne sont plus que de 38 à 54 % de leurs maximums respectifs alors même que le parenchyme très gélifié favorise le processus d’inoculation et, sans doute, la progression du parasite. TABLEAU I Production des phytoalexines chez divers cultivars de Lycopersicum esculentum (selon le degré de maturation du fruit infecté) Stades (a) Cultivars A B C D E F Montfavet H 63-5 94 (a) 85 100 84 n.d. 54 Roma V.F 100 90 96 61 67 40,5 Saint-Pierre 92 100 95 n.d. 73 47 Clairvil 100 n.d. 92 69 55 38 (a) stades notés d’après Edwards et Reuter (3). (b) production exprimée en pourcentage de la valeur maximale atteinte pour la série. n.d. non déterminé. Chez « Saint-Pierre » et « Clairvil », les valeurs maximales
sont donc les fruits les plus verts qui réagissent de la façon la plus intense puisqu’aux stades E et F, les concentrations en inhibitines ne sont plus que de 38 à 54 % de leurs maximums respectifs alors même que le parenchyme très gélifié favorise le processus d’inoculation et, sans doute, la progression du parasite. TABLEAU I Production des phytoalexines chez divers cultivars de Lycopersicum esculentum (selon le degré de maturation du fruit infecté) Stades (a) Cultivars A B C D E F Montfavet H 63-5 94 (a) 85 100 84 n.d. 54 Roma V.F 100 90 96 61 67 40,5 Saint-Pierre 92 100 95 n.d. 73 47 Clairvil 100 n.d. 92 69 55 38 (a) stades notés d’après Edwards et Reuter (3). (b) production exprimée en pourcentage de la valeur maximale atteinte pour la série. n.d. non déterminé. Chez « Saint-Pierre » et « Clairvil », les valeurs maximales absolues sont 2 à 3 fois plus élevées que pour « Roma V. F. », les minimales se trouvant chez « Montfavet H 63-5 ». Toutes autres conditions étant égales, nous constatons que l’intensité relative de l’induction des phytoalexines, rapportée à une masse constante de fruits frais, décroît lorsque le calibre augmente (tableau II). Une corrélation négative lie le diamètre équatorial moyen de la baie à la vigueur de la réaction de défense. TABLEAU II Production des phytoalexines chez le cv. « Saint-Pierre » (selon les calibres de fruits, au stade E) Taille du fruit I II de la réponse < 40 36 100 (fl) 40-45 43 82,5 > 45 47 64,5 I. classe de calibre exprimée en millimètres. II. moyenne, exprimée en millimètres, des diamètres équatoriaux du lot. (fl) production relative au maximum observé dans la série. Enfin, nous avons contrôlé, par chromatographie sur couche mince, que les substances majeures contenues dans la fraction renfermant les phytoalexines étaient absentes de l’inoculum, ne préexistaient pas dans les fruits présumés sains, n’apparaissaient pas dans les témoins et qu’elles différaient de l’atomatine et de la rishitine (11). DISCUSSION ET CONCLUSIONS. — Le métabolisme d’un fruit isolé se distingue de celui des autres
calibre augmente (tableau II). Une corrélation négative lie le diamètre équatorial moyen de la baie à la vigueur de la réaction de défense. TABLEAU II Production des phytoalexines chez le cv. « Saint-Pierre » (selon les calibres de fruits, au stade E) Taille du fruit I II de la réponse < 40 36 100 (fl) 40-45 43 82,5 > 45 47 64,5 I. classe de calibre exprimée en millimètres. II. moyenne, exprimée en millimètres, des diamètres équatoriaux du lot. (fl) production relative au maximum observé dans la série. Enfin, nous avons contrôlé, par chromatographie sur couche mince, que les substances majeures contenues dans la fraction renfermant les phytoalexines étaient absentes de l’inoculum, ne préexistaient pas dans les fruits présumés sains, n’apparaissaient pas dans les témoins et qu’elles différaient de l’atomatine et de la rishitine (11). DISCUSSION ET CONCLUSIONS. — Le métabolisme d’un fruit isolé se distingue de celui des autres parties aériennes du plant qui le portait. Toutefois, une similitude importante se remarque entre les résultats d’infections, soit de fruits, soit de plantes entières, en ce qui concerne la présence d’inhibitines chez des hôtes tels que le Solanum melongena (19), le Capsicum frutescens (6), le Phaseolus vulgaris (2), diverses Légumineuses tropicales (13) ou encore le L. esculentum inoculé par le Verticillium albo-atrum (17). De plus, le traumatisme infligé au matériel est susceptible à lui seul de perturber l’évolution de la maturation (5) et en particulier, le métabolisme des composés phénoliques ainsi que l’ont démontré Fleuriet et Macheix chez la Tomate de variété cerasiforme (6). Or ces composés eux-mêmes influent sur la synthèse de l’éthylène (10), la maturation est accélérée par les blessures. Nos contrôles prouvent que ces phénomènes n’interfèrent pas qualitativement sur la production des phytoalexines même s’ils peuvent en modifier le rythme. Nos conditions proches de la température optimale de maturation sont marquées notamment par une élévation du quotient respiratoire au pic climactérique et par une production d’éthylène multipliée par 30 (1). Les organes végétaux isolés, en survie, d’origines différentes mais doués d’une crise climactérique, présentent une évolution physiologique similaire avec un affaiblissement progressif de leur cohésion tissulaire. La
tropicales (13) ou encore le L. esculentum inoculé par le Verticillium albo-atrum (17). De plus, le traumatisme infligé au matériel est susceptible à lui seul de perturber l’évolution de la maturation (5) et en particulier, le métabolisme des composés phénoliques ainsi que l’ont démontré Fleuriet et Macheix chez la Tomate de variété cerasiforme (6). Or ces composés eux-mêmes influent sur la synthèse de l’éthylène (10), la maturation est accélérée par les blessures. Nos contrôles prouvent que ces phénomènes n’interfèrent pas qualitativement sur la production des phytoalexines même s’ils peuvent en modifier le rythme. Nos conditions proches de la température optimale de maturation sont marquées notamment par une élévation du quotient respiratoire au pic climactérique et par une production d’éthylène multipliée par 30 (1). Les organes végétaux isolés, en survie, d’origines différentes mais doués d’une crise climactérique, présentent une évolution physiologique similaire avec un affaiblissement progressif de leur cohésion tissulaire. La conjonction de plusieurs facteurs entraîne soit une perte de résistance qui singularisera le parasitisme latent comme chez le Pirus malus (7), soit au contraire un gain relatif pour notre modèle d’interaction. En effet, dans les conditions naturelles, ce sont les tomates vertes qui se montrent les plus sensibles au P. parasitica (buck eye rot) comme le démontrent Sharma et coll. (11). Nos observations d’une plus forte concentration de phytoalexines chez les cultivars les plus résistants au P. nicotianae plaident en faveur d’un rôle positif de ces substances dans la réaction de défense mais sont paradoxales vis-à-vis de l’évolution de cette résistance puisque les stades post-climactériques sont les moins productifs. Dans le système L. esculentum-V. albo-atrum, selon Pegg et coll. (9), les symptômes apparaissent proportionnels à la distribution du parasite et à l’intensité de sa colonisation. De même, nous pouvons supposer que le développement du P. nicotianae s’effectue plus rapidement dans les fruits des 3 premiers stades et que nous mesurons ensuite une réponse modulée par la quantité de mycélium in situ et par la qualité du cultivar. Nous supprimons l’obligation naturelle pour le mycélium de franchir l’épiderme et le péricarpe, sièges de différentes barrières comme le soulignent Verhoeff et Lieh