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S. FRGACIC-CALA, Z. KNIEWALD et S. MILKOVIC, J. Steroid Biochem., 6, 1974, p. 1329-1332. O. H. V. JENSEN et E. R. DE SOMBRE, Ann. Rev. Biochem., 41, 1972, p. 203-230. E. MILGROM et E. E. BAULIEU, Biochim. Biophys. Acta, 194, 1969, p. 602-605. C. COCHET et E. M. CHAMBAZ, Biochim. Biophys. Acta, 362, 1974, p. 37-47. G. SCATCHARD, Ann. N. Y. Acad. Sci., 51, 1949, p. 660-672. B. S. KATZENELLENBOGEN et J. GORSKI, in Biochemical Actions of Hormones, G. LITWACK, éd., Academic Press, New York, III, 1975, p. 187-243. Laboratoire d’Hormonologie, C.E.R.M.O., Université scientifique et médicale, B.P. n° 53, Centre de Tri, 38041 Grenoble Cedex. ENDOCRINOLOGIE. — Stimulation par l’ACTH de la synthèse protéique de cellules surrénaliennes en culture. Absence d’effet de l’AMP cyclique. Note de Alice Dazord, Dominique Gallet et José M. Saez, présentée par M. Robert Debré. Dans des cellules surrénaliennes tumorales de Souris, l’ACTH exerce une stimulation de l’incorporation de 14C-leucine dans les protéines. Cette stimulation, statistiquement significative par rapport aux contrôles, est de l’ordre de 20 %. En revanche, l’AMP cyclique n’exerce aucune action. ACTH stimulates the incorporation of 14C-leucine into proteins of adrenal tumor cells in culture. This stimulation though about 20 % over controls is statistically significant. Cyclic AMP did not reproduce the stimulation observed with ACTH. Les données concernant le rôle de l’ACTH sur la synthèse protéique surrénalienne sont contradictoires. S’il est clair que l’action stéroïdogénique de l’ACTH nécessite une synthèse protéique puisqu'elle est bloquée par la cycloheximide, en revanche l’effet stimulant de l’ACTH sur cette synthèse reste mal élucidé. Il est généralement admis que l’ACTH in vivo augmente la croissance des cellules surrénaliennes et donc la synthèse protéique. In vitro, au contraire, les résultats obtenus sont divergents : certains auteurs trouvent une inhibition de la synthèse protéique en présence d’ACTH. D’autres ne la retrouvent pas. L’obtention de résultats contradictoires in vitro peut avoir des causes d’ordre méthodologique : la plupart des travaux ont été faits sur des tranches surrénaliennes qui sont un modèle très insuffisant pour éprouver un effet à long terme. MÉTHODES. — Nos études ont été effectuées sur des cellules
is statistically significant. Cyclic AMP did not reproduce the stimulation observed with ACTH. Les données concernant le rôle de l’ACTH sur la synthèse protéique surrénalienne sont contradictoires. S’il est clair que l’action stéroïdogénique de l’ACTH nécessite une synthèse protéique puisqu'elle est bloquée par la cycloheximide, en revanche l’effet stimulant de l’ACTH sur cette synthèse reste mal élucidé. Il est généralement admis que l’ACTH in vivo augmente la croissance des cellules surrénaliennes et donc la synthèse protéique. In vitro, au contraire, les résultats obtenus sont divergents : certains auteurs trouvent une inhibition de la synthèse protéique en présence d’ACTH. D’autres ne la retrouvent pas. L’obtention de résultats contradictoires in vitro peut avoir des causes d’ordre méthodologique : la plupart des travaux ont été faits sur des tranches surrénaliennes qui sont un modèle très insuffisant pour éprouver un effet à long terme. MÉTHODES. — Nos études ont été effectuées sur des cellules surrénaliennes tumorales de Souris initialement clonées par Buonassissi et coll. Les cultures se font dans une étuve à CO2, dans du milieu HAM F 10, enrichi avec 15 % de sérum de Cheval et 5 % de sérum fœtal de Veau. L’incorporation de 14C-leucine est faite avec une concentration de 14C-leucine de 0,5 µCi/ml, dans du milieu HAM F 10 contenant 0,2 % de sérum fœtal de Veau. La concentration finale de leucine dans le milieu est de 0,2 mM. Tous les points expérimentaux sont déterminés en triple. L’incorporation est arrêtée par aspiration du milieu et par l’addition immédiate de 1 ml de désoxycholate de sodium 0,4 % NaOH 0,1 M. Les cellules ainsi reprises sont « soniquées » 15 s à 4°C, précipitées par un volume égal de TCA 20 %, lavées à 2 reprises par du TCA 10 %, puis de l’éthanol, redissoutes dans 1 ml de désoxycholate 0,4 %, NaOH 0,1 M 1 h à 37°C afin d’assurer l’hydrolyse des tRNA, précipitées par un volume égal de TCA 20 % et enfin redissoutes dans du désoxycholate 0,4 %, NaOH 0,1 M. Une prise aliquot est utilisée pour compter la radioactivité, une autre pour mesurer les protéines selon
14C-leucine de 0,5 µCi/ml, dans du milieu HAM F 10 contenant 0,2 % de sérum fœtal de Veau. La concentration finale de leucine dans le milieu est de 0,2 mM. Tous les points expérimentaux sont déterminés en triple. L’incorporation est arrêtée par aspiration du milieu et par l’addition immédiate de 1 ml de désoxycholate de sodium 0,4 % NaOH 0,1 M. Les cellules ainsi reprises sont « soniquées » 15 s à 4°C, précipitées par un volume égal de TCA 20 %, lavées à 2 reprises par du TCA 10 %, puis de l’éthanol, redissoutes dans 1 ml de désoxycholate 0,4 %, NaOH 0,1 M 1 h à 37°C afin d’assurer l’hydrolyse des tRNA, précipitées par un volume égal de TCA 20 % et enfin redissoutes dans du désoxycholate 0,4 %, NaOH 0,1 M. Une prise aliquot est utilisée pour compter la radioactivité, une autre pour mesurer les protéines selon la méthode de Lowry. La 20 α-OH progestérone a été mesurée par dosage radio-immunologique (anticorps de G. E. Abraham : n° S-1556 # 5). RÉSULTATS. — 1. Étude cinétique. — La figure montre que l’ACTH exerce une stimulation sur la synthèse protéique qui est maximale à 7 h. Cette expérience a été répétée à 2 reprises. 2. Cette stimulation étant faible, de l’ordre de 20 à 30 %, nous avons vérifié qu’elle était constante et significative. Le tableau 1 montre le résultat de 7 expériences où les cellules surrénaliennes ont incubé avec de la 14C-leucine pendant 7 h avec et sans ACTH. Dans ces 7 expériences, l’ACTH a été additionnée au milieu sous forme de tétracosactide (R) « Synacthène ») immédiatement contenant 10 mg de mannitol pour 250 µg de (R) 24 tétracosactide. Mais nous avons vérifié que le mannitol à 0,1 mg/ml n’affecte pas la synthèse protéique et que de l’ACTH, -24 pure qui nous a été fournie par les laboratoires Ciba exerce un effet stimulant comparable au tétracosactide. De plus, nous avons vérifié que la cycloheximide à 5 µg/ml entraînait au bout de 7 h une inhibition complète de cette synthèse protéique. TABLEAU 1 Stimulation de l'incorporation de
a été répétée à 2 reprises. 2. Cette stimulation étant faible, de l’ordre de 20 à 30 %, nous avons vérifié qu’elle était constante et significative. Le tableau 1 montre le résultat de 7 expériences où les cellules surrénaliennes ont incubé avec de la 14C-leucine pendant 7 h avec et sans ACTH. Dans ces 7 expériences, l’ACTH a été additionnée au milieu sous forme de tétracosactide (R) « Synacthène ») immédiatement contenant 10 mg de mannitol pour 250 µg de (R) 24 tétracosactide. Mais nous avons vérifié que le mannitol à 0,1 mg/ml n’affecte pas la synthèse protéique et que de l’ACTH, -24 pure qui nous a été fournie par les laboratoires Ciba exerce un effet stimulant comparable au tétracosactide. De plus, nous avons vérifié que la cycloheximide à 5 µg/ml entraînait au bout de 7 h une inhibition complète de cette synthèse protéique. TABLEAU 1 Stimulation de l'incorporation de 14C-leucine dans les protéines surrénaliennes après 7 h d’incubation en présence et en absence d’ACTH 10-6 M 14C-leucine 20 α OH-progestérone (c.p.m.) incorporés/mg de protéine) produite en 7 h Expérience moyenne de 3 échantillons + 1 DS Pourcentage de (pg/Jlg de protéines) stimulation — — stimulation n° Contrôle ACTH 10-6 M (%) Contrôle ACTH 10-6 M 1 1071 ± 29 1 237 ± 10 (***) 15,5 76 330 2 943 ± 47 1 197 ± 59 (**) 27 50 300 3 1 372 ± 17 1 727 ± 38 (****) 26 50 620 4 1 568 ± 51 1 857 ± 80 (*) 18,5 20 233 5 1 922 ± 84 2 307 ± 7 (*) 20 37 430 6 1 215 ± 43 1 485 ± 20 (****) 22 20 345 7 1 041 ± 30 1 312 ± 21 (****) 26 71 437 (*) différence significative, p < 0,05; (**) p < 0,02; (***) p < 0,01; (****) p < 0,001. En revanche, il nous a été difficile d'obtenir une stimulation nette en présence de doses plus physiologiques d'ACTH de l'ordre de 10-8 M. Nous avons émis l'hypothèse que cette absence de stimulation était due à une dégradation
M (%) Contrôle ACTH 10-6 M 1 1071 ± 29 1 237 ± 10 (***) 15,5 76 330 2 943 ± 47 1 197 ± 59 (**) 27 50 300 3 1 372 ± 17 1 727 ± 38 (****) 26 50 620 4 1 568 ± 51 1 857 ± 80 (*) 18,5 20 233 5 1 922 ± 84 2 307 ± 7 (*) 20 37 430 6 1 215 ± 43 1 485 ± 20 (****) 22 20 345 7 1 041 ± 30 1 312 ± 21 (****) 26 71 437 (*) différence significative, p < 0,05; (**) p < 0,02; (***) p < 0,01; (****) p < 0,001. En revanche, il nous a été difficile d'obtenir une stimulation nette en présence de doses plus physiologiques d'ACTH de l'ordre de 10-8 M. Nous avons émis l'hypothèse que cette absence de stimulation était due à une dégradation de la molécule d'ACTH dont nous avions montré qu'elle était importante dans la surrénale. À l'appui de cette hypothèse, le fait que : — après 7 h d'incubation l'ACTH à une concentration de 10-6 M exerce sur la stéroïdogenèse une stimulation 30 à 50 % plus importante qu'à 10-8 M; — que d'autre part, si l'on ajoute toutes les 2 h de l'ACTH dans le milieu d'incubation, la stimulation sur la synthèse protéique est nette même avec des concentrations finales d'ACTH de l'ordre de 10-8 M (tableau II). TABLEAU II Stimulation de l'incorporation de 14C-leucine dans les protéines surrénaliennes après 7 h d'incubation 14C-leucine 20 µl OH progestérone (c.p.m. incorporés/mg de protéine) (pg/mg de protéines) ACTH ACTH ACTH ACTH Contrôle 10-6 M (a) 10-8 M (b) Contrôle 10-6 M (°) 10-8 M (b) 1615 ± 46 1 828 ± 59 (*) 1 804 ± 51 (*) 30 414 401 20 III d'ACTH 10-4 M (a) et 20 III d'ACTH 10-6 M (b) sont ajoutés toutes les 2 h aux cellules incubant en présence de 14C-leucine dans 2 ml de milieu. (*) différence significative, p < 0,05 par rapport aux contrôles. TABLEAU III Incorporation de 14C-leucine dans les protéines surrénaliennes pendant
— que d'autre part, si l'on ajoute toutes les 2 h de l'ACTH dans le milieu d'incubation, la stimulation sur la synthèse protéique est nette même avec des concentrations finales d'ACTH de l'ordre de 10-8 M (tableau II). TABLEAU II Stimulation de l'incorporation de 14C-leucine dans les protéines surrénaliennes après 7 h d'incubation 14C-leucine 20 µl OH progestérone (c.p.m. incorporés/mg de protéine) (pg/mg de protéines) ACTH ACTH ACTH ACTH Contrôle 10-6 M (a) 10-8 M (b) Contrôle 10-6 M (°) 10-8 M (b) 1615 ± 46 1 828 ± 59 (*) 1 804 ± 51 (*) 30 414 401 20 III d'ACTH 10-4 M (a) et 20 III d'ACTH 10-6 M (b) sont ajoutés toutes les 2 h aux cellules incubant en présence de 14C-leucine dans 2 ml de milieu. (*) différence significative, p < 0,05 par rapport aux contrôles. TABLEAU III Incorporation de 14C-leucine dans les protéines surrénaliennes pendant 7 h en présence de dibutyryl cyclic AMP, d'AMP cyclique et de Mix (3-isobutyl 1 méthylxanthin) 14C-leucine Expérience (c.p.m. incorporés n° mg de protéine) 1 Contrôle 1 568 ± 50 dbcAMP 1 mM 1 607 ± 47 (*) ACTH 10-6 M 1 857 ± 80 (**) Contrôle 1 739 ± 62 Mix 0,1 mM 1 613 ± 68 (*) dbcAMP 1 mM 63 8 • + Mix 0,1 mM 1 827 ± 63 ( ) dbcAMP 1 mM 1 646 ± 36 (*) + Mix 0,1 mM ACTH 10-6 M 2 451 ± 160 (***) (*) non significatif. (***) différence significative par rapport aux contrôles, p < 0,02. que cet effet ne passe pas par l'AMP cyclique. Des concentrations de dibutyryl cAMP de l'ordre de 1 mM (qui produisent une augmentation de la stéroïdogenèse du même ordre que l'ACTH à une concentration de 10-6 M) sont sans effet. L'adjonction de Mix (3-isobutyl 1 méthylxanthin) qui protège l'AMP cyclique de la dégradation par les phosphodiestérases n'entraîne aucun effet supplémentaire. DISCUSSION. — Tous les effets de l'ACTH décrits jusqu'à présent semblaient s'exercer par l'intermédiaire de l'AMP cyclique. En revanche, l'effet stimulant de l'ACTH que nous venons de décrire sur l'incorporation de 14C-leucine
62 Mix 0,1 mM 1 613 ± 68 (*) dbcAMP 1 mM 63 8 • + Mix 0,1 mM 1 827 ± 63 ( ) dbcAMP 1 mM 1 646 ± 36 (*) + Mix 0,1 mM ACTH 10-6 M 2 451 ± 160 (***) (*) non significatif. (***) différence significative par rapport aux contrôles, p < 0,02. que cet effet ne passe pas par l'AMP cyclique. Des concentrations de dibutyryl cAMP de l'ordre de 1 mM (qui produisent une augmentation de la stéroïdogenèse du même ordre que l'ACTH à une concentration de 10-6 M) sont sans effet. L'adjonction de Mix (3-isobutyl 1 méthylxanthin) qui protège l'AMP cyclique de la dégradation par les phosphodiestérases n'entraîne aucun effet supplémentaire. DISCUSSION. — Tous les effets de l'ACTH décrits jusqu'à présent semblaient s'exercer par l'intermédiaire de l'AMP cyclique. En revanche, l'effet stimulant de l'ACTH que nous venons de décrire sur l'incorporation de 14C-leucine dans les protéines surrénaliennes est, lui, indépendant du système adénylate cyclase. Contrairement aux résultats obtenus initialement, il apparaît de plus en plus à l'heure actuelle que les facteurs qui contrôlent la croissance cellulaire — qu'il s'agisse d'hormones polypeptidiques ou de facteurs de croissance variés comme le NGF (nervous growth factor), le FGF (fibroblast growth factor) ou l'EGF (epidermal growth factor) le font indépendamment des nucléotides cycliques (12). Dans ces conditions, l'action stéroïdogénique de l'ACTH s'exercerait bien par l'intermédiaire du système adénylate-cyclase, mais son rôle trophique pourrait en être indépendant. Unité de Recherches sur le Contrôle Hormonal des Activités Cellulaires, INSERM, U 162, Hôpital Debrousse, 29, rue Sœur-Bouvier, 69322 Lyon Cedex 1. ENDOCRINOLOGIE. — Stimulation de la sécrétion de LH et de FSH et augmentation du poids testiculaire à la naissance, chez le Rat (1) Note (1) de Jacques Roffi, Philippe Corbier et Bernard Kerdelhué, présentée par M. Maurice Fontaine. Les évolutions des concentrations sériques en LH et FSH et du poids testiculaire ont été enregistrées chez le Rat nouveau-né avant, pendant et jusqu'à 24 h après la naissance. On constate une brusque augmentation transitoire de la sécrétion de LH et de FSH au moment de la naissance. Le poids des
le FGF (fibroblast growth factor) ou l'EGF (epidermal growth factor) le font indépendamment des nucléotides cycliques (12). Dans ces conditions, l'action stéroïdogénique de l'ACTH s'exercerait bien par l'intermédiaire du système adénylate-cyclase, mais son rôle trophique pourrait en être indépendant. Unité de Recherches sur le Contrôle Hormonal des Activités Cellulaires, INSERM, U 162, Hôpital Debrousse, 29, rue Sœur-Bouvier, 69322 Lyon Cedex 1. ENDOCRINOLOGIE. — Stimulation de la sécrétion de LH et de FSH et augmentation du poids testiculaire à la naissance, chez le Rat (1) Note (1) de Jacques Roffi, Philippe Corbier et Bernard Kerdelhué, présentée par M. Maurice Fontaine. Les évolutions des concentrations sériques en LH et FSH et du poids testiculaire ont été enregistrées chez le Rat nouveau-né avant, pendant et jusqu'à 24 h après la naissance. On constate une brusque augmentation transitoire de la sécrétion de LH et de FSH au moment de la naissance. Le poids des testicules s'élève rapidement entre 2 et 4 h. The evolutions of serum LH and FSH concentrations and of testicular weight have been measured in the newborn Rat before, during and up to 24 hrs. after birth. A sudden and transient increase of LH and FSH is observed at birth. The testicular weight rises rapidly between 2 and 4 hrs. Des recherches antérieures ont montré que les médullosurrénales et les corticosurrénales du Rat sont stimulées, au moment de la naissance. Au cours du présent travail, nous avons recherché les signes d'une éventuelle stimulation des testicules du Rat nouveau-né, en enregistrant parallèlement l'évolution du poids de ces glandes et des taux sériques de LH et de FSH. MATÉRIEL ET MÉTHODES. — Les expériences sont réalisées sur des Rats de souche Sherman. Les conditions de reproduction et les modalités de datation de la gestation sont identiques à celles définies par Jost et Picon. La parturition survient le plus souvent pendant la journée du 22e jour de gestation. Seuls ont été retenus pour les dosages hormonaux les animaux nés dans la journée du 22e jour, entre 12 h et 20 h. Les prélèvements ont été faits aux stades suivants : — 21 jours 8
testicular weight rises rapidly between 2 and 4 hrs. Des recherches antérieures ont montré que les médullosurrénales et les corticosurrénales du Rat sont stimulées, au moment de la naissance. Au cours du présent travail, nous avons recherché les signes d'une éventuelle stimulation des testicules du Rat nouveau-né, en enregistrant parallèlement l'évolution du poids de ces glandes et des taux sériques de LH et de FSH. MATÉRIEL ET MÉTHODES. — Les expériences sont réalisées sur des Rats de souche Sherman. Les conditions de reproduction et les modalités de datation de la gestation sont identiques à celles définies par Jost et Picon. La parturition survient le plus souvent pendant la journée du 22e jour de gestation. Seuls ont été retenus pour les dosages hormonaux les animaux nés dans la journée du 22e jour, entre 12 h et 20 h. Les prélèvements ont été faits aux stades suivants : — 21 jours 8 h : fœtus prélevés par césarienne, après sacrifice de la mère, le 22e jour, entre 9 h et 11 h ; — 0 h in utero : fœtus prélevés par césarienne, après sacrifice de la mère, dès la mise-bas du premier nouveau-né; — 0 h ex utero : nouveau-nés prélevés 15 mn à 1 h après leur naissance. Puis les nouveau-nés ont été prélevés 2, 4, 6, 12 et 24 h après leur naissance. Au stade choisi, les fœtus ou les nouveau-nés mâles d'une même portée sont pesés. Le sang est recueilli après décapitation et les testicules sont aussitôt prélevés, disséqués et pesés par paires, avec une précision de ±0,1 mg. Dans certains cas, les testicules sont conservés à −30°, en vue du dosage des protéines, suivant la méthode de Lowry. Le sang est conservé à 4°, pendant 24 h, puis le sérum est prélevé après centrifugation. Les échantillons sont conservés à 30', jusqu'au moment du dosage de LH et de FSH. RÉSULTATS. — 1. Évolution du poids des testicules (tableau I et fig.). — Entre 21 jours 8 h et la parturition (0 h ex utero), le poids absolu des testicules augmente de 12 % (p < 0,001). Ce
15 mn à 1 h après leur naissance. Puis les nouveau-nés ont été prélevés 2, 4, 6, 12 et 24 h après leur naissance. Au stade choisi, les fœtus ou les nouveau-nés mâles d'une même portée sont pesés. Le sang est recueilli après décapitation et les testicules sont aussitôt prélevés, disséqués et pesés par paires, avec une précision de ±0,1 mg. Dans certains cas, les testicules sont conservés à −30°, en vue du dosage des protéines, suivant la méthode de Lowry. Le sang est conservé à 4°, pendant 24 h, puis le sérum est prélevé après centrifugation. Les échantillons sont conservés à 30', jusqu'au moment du dosage de LH et de FSH. RÉSULTATS. — 1. Évolution du poids des testicules (tableau I et fig.). — Entre 21 jours 8 h et la parturition (0 h ex utero), le poids absolu des testicules augmente de 12 % (p < 0,001). Ce poids ne change pas de façon significative 2 h après la naissance. Par contre, le poids des testicules s'élève brusquement de 14,6%, entre 2 et 4 h (p < 0,001), puis s'abaisse de 6 % à 6 h (p = 0,05) et s'élève à 12 et 24 h. Si l'on exprime le poids des testicules par rapport au poids corporel (poids relatif), on constate une augmentation statistiquement significative entre 0 et 4 h ( + 8 %, p < 0,01). TABLEAU I Évolution du poids des testicules du Rat, pendant la période périnatale Poids des 2 testicules Nombre Nombre Milligrammes Milligrammes par 100 g Age d'animaux de portées par paire de poids corporel Foetus 21 jours 8 h 35 8 3,83 ± 0,06 75,63 + 1,30 0 h ex utero 50 11 4,30 + 0,08 78,32 + 1,30 2 h 45 9 4,24 + 0,07 80,99 ± 1,64 4 h 32 7 4,86 + 0,10 84,88 + 1,56 6 h 32 7 4,57 + 0.10 81,35 + 1,78 12 h 36 9 5,19 + 0,12 81,08 + 1,61 24 h 59 13 5,84 + 0.11 95,96 +1,44 Les résultats représentent les valeurs moyennes, suivies de l'erreur standard de la moyenne.
exprime le poids des testicules par rapport au poids corporel (poids relatif), on constate une augmentation statistiquement significative entre 0 et 4 h ( + 8 %, p < 0,01). TABLEAU I Évolution du poids des testicules du Rat, pendant la période périnatale Poids des 2 testicules Nombre Nombre Milligrammes Milligrammes par 100 g Age d'animaux de portées par paire de poids corporel Foetus 21 jours 8 h 35 8 3,83 ± 0,06 75,63 + 1,30 0 h ex utero 50 11 4,30 + 0,08 78,32 + 1,30 2 h 45 9 4,24 + 0,07 80,99 ± 1,64 4 h 32 7 4,86 + 0,10 84,88 + 1,56 6 h 32 7 4,57 + 0.10 81,35 + 1,78 12 h 36 9 5,19 + 0,12 81,08 + 1,61 24 h 59 13 5,84 + 0.11 95,96 +1,44 Les résultats représentent les valeurs moyennes, suivies de l'erreur standard de la moyenne. Évolution des taux de LH et de FSH sériques et du poids des testicules au cours de la période périnatale, chez le Rat. Pour étudier l'influence de la naissance sur la croissance testiculaire au cours des heures postnatales, nous avons comparé le poids des testicules d'animaux nés dans la journée du 23e jour de gestation et prélevés à 0 h à celui d'animaux nés dans la journée du 22e jour et prélevés à 24 h. Les deux lots d'animaux avaient donc le même âge conceptionnel. Néanmoins, le poids testiculaire des animaux nés depuis 24 h est statistiquement plus élevé (5,84 ± 0,11 mg, 59 cas) que celui des animaux prélevés à 0 h (5,05 + 0,13 mg, 30 cas, p < 0,001). La naissance a donc pour effet d'accélérer l'accroissement de poids des testicules. Il en est de même pour les poids relatifs (95,96 + 1,44 et 85,46 ± 1,89 mg/100 g de poids corporel, p < 0,001). Enfin, la quantité de protéines testiculaires ne varie pas significativement, pour tous les stades étudiés de 0 à 6 h (472,9 ± 6,0 µg/paire, 21 à 41 cas, selon les stades) et s'élève seulement de façon significative à 12 h (525,0 ±
du 23e jour de gestation et prélevés à 0 h à celui d'animaux nés dans la journée du 22e jour et prélevés à 24 h. Les deux lots d'animaux avaient donc le même âge conceptionnel. Néanmoins, le poids testiculaire des animaux nés depuis 24 h est statistiquement plus élevé (5,84 ± 0,11 mg, 59 cas) que celui des animaux prélevés à 0 h (5,05 + 0,13 mg, 30 cas, p < 0,001). La naissance a donc pour effet d'accélérer l'accroissement de poids des testicules. Il en est de même pour les poids relatifs (95,96 + 1,44 et 85,46 ± 1,89 mg/100 g de poids corporel, p < 0,001). Enfin, la quantité de protéines testiculaires ne varie pas significativement, pour tous les stades étudiés de 0 à 6 h (472,9 ± 6,0 µg/paire, 21 à 41 cas, selon les stades) et s'élève seulement de façon significative à 12 h (525,0 ± 12,4 µg/paire, p < 0,001, 35 cas). 2. Évolution des taux des gonadotropines sériques (tableau II et fig.). — On peut immédiatement remarquer que le taux de LH est quadruplé entre les stades de 0 h in utero et 0 h ex utero et reste élevé à 2 h. À 6 h, ce taux est revenu à sa valeur de 0 h in utero. À 12 h, la valeur moyenne de ce taux s'abaisse au niveau le plus bas enregistré et. 80 45,4 ± 5,3 Oh in utero 14 3 0,60 40,0 + 2,5 0 h ex utero 26 5 2,50 63,0 ± 6,2 2 h 23 4 2,80 44,0 ± 3,8 6 h 19 4 0,60 ± 0,30 44,7 + 6,7 12 h 28 7 0,20 ± 0,02 40,4 ± 4,2 24 h 37 7 0,64 ± 0,20 48,4 ± 4,0 Les concentrations sont exprimées en ng/ml de sérum, en termes 1° d'une préparation de laboratoire de LH de Rat (1,4 x NIH-LH-S); 2° de la FSH-S,-I fournie par le NIAMD. Les résultats représentent les taux moyens, suivis de l'erreur standard de la moyenne. Le mélange des sérums d'une même portée a constitué un échantillon, sauf pour les dosages