jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
en évaluant le poids moléculaire et le comportement en présence d’ions Ca++ de la fraction P2 qui semble jouer un rôle privilégié au moment de l'infection. À cet effet des extraits de tissus sains et parasités ont été purifiés sur DEAE-cellulose selon une méthode déjà décrite. Les fractions les plus actives rassemblées puis concentrées en un volume d’environ 1,5 ml sont additionnées de 4 mg de cytochrome C (Cyt. C), 1 mg d'alcool déshydrogène de levure (ADH) et ajoutées à une solution constituée par 0,15 ml de solution saturée de « Blue dextran 2 000 » (BD) complétée par 25 III d’une solution de p-nitrophénol. Ce mélange est déposé au sommet d’une colonne de gel de « Sephadex G 200 » (Ø = 1,8 cm ; H = 85 cm) préalablement équilibrée dans un tampon Tris-HCl 0,025 M, pH = 7,5, KCl 0,1 M. L’élution est effectuée à l’aide de ce même tampon le débit étant réglé à 10 ml/h. L’éluat est recueilli par fractions de 1,7 ml environ. La colonne est étalonnée au moyen des marqueurs suivants : « Blue dextran 2 000 », pyruvate kinase (PK) de muscle de Lapin (PM : 237 000), aldolase (Ald.) de muscle de Lapin (PM 154 000), alcool déshydrogène de levure (PM : 126 000), malate déshydrogène (MDH) de cœur de Porc (PM : 70 000), peroxydase (Perox.) de raifort (PM : 49 000), Cytochrome C de cœur de Cheval (PM 12 400) et p-nitrophénol. « Blue dextran », Cyt. C et p-nitrophénol sont dosés par spectrophotométrie respectivement à 625, 400 et 420 nm. À l’exception de la MDH (DO à 230 nm), les enzymes sont détectées grâce à leur activité catalytique. Fig. 2 Fig. 1. — (A) Filtration sur gel de « Sephadex G 200 » d’un extrait de tissus parasités préalablement purifié (fraction P2 isolée par chromatographie sur DEAE-Cellulose). (B) Activité de la peroxydase P2 en fonction de la concentration en CaCl2. (C) Filtration sur « G 200 » d’un extrait de tissus sains (fraction P2 purifié sur DEAE-Cellulose). (D) Activité des peroxydases P2a et P2b en fonction de la
de Lapin (PM 154 000), alcool déshydrogène de levure (PM : 126 000), malate déshydrogène (MDH) de cœur de Porc (PM : 70 000), peroxydase (Perox.) de raifort (PM : 49 000), Cytochrome C de cœur de Cheval (PM 12 400) et p-nitrophénol. « Blue dextran », Cyt. C et p-nitrophénol sont dosés par spectrophotométrie respectivement à 625, 400 et 420 nm. À l’exception de la MDH (DO à 230 nm), les enzymes sont détectées grâce à leur activité catalytique. Fig. 2 Fig. 1. — (A) Filtration sur gel de « Sephadex G 200 » d’un extrait de tissus parasités préalablement purifié (fraction P2 isolée par chromatographie sur DEAE-Cellulose). (B) Activité de la peroxydase P2 en fonction de la concentration en CaCl2. (C) Filtration sur « G 200 » d’un extrait de tissus sains (fraction P2 purifié sur DEAE-Cellulose). (D) Activité des peroxydases P2a et P2b en fonction de la concentration en ions calcium. Fig. 2. — (A) Détermination du poids moléculaire des peroxydases P2 (tissus parasités), P2a et P2b (tissus sains) par filtration sur « G 200 ». (B) Détermination du poids moléculaire des sous-unités de la peroxydase P2 par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en conditions dissociantes (SDS). Enfin la détermination du PM en conditions dissociantes est effectuée par électrophorèse sur gel de polyacrylamide (7,5 %) en présence de dodécylsulphate de sodium (SDS 0,1 %) selon la méthode de Weber et coll. (5), les échantillons étant préalablement traités durant 2 min à 100° par du SDS et du mercaptoéthanol à 1 %. Les marqueurs utilisés sont le sérum albumine bovine (BSA; PM : 68 000), la pyruvate kinase (PM : 57 000), l’aldolase (PM : 40 000) et le cytochrome C (PM : 12 400). Les résultats que nous avons obtenus sont présentés dans les figures 1 et 2. On remarque que la fraction peroxydasique P2, obtenue par chromatographie sur DEAE-cellulose d’extraits de tissus sains, comporte en fait deux isoenzymes P2a et P2b (fig. 1 C). Cependant un tel diagramme d’élution n’est pas obtenu de façon systématique. En effet le pic P2a peut, d’une expérience à l’autre, soit
Enfin la détermination du PM en conditions dissociantes est effectuée par électrophorèse sur gel de polyacrylamide (7,5 %) en présence de dodécylsulphate de sodium (SDS 0,1 %) selon la méthode de Weber et coll. (5), les échantillons étant préalablement traités durant 2 min à 100° par du SDS et du mercaptoéthanol à 1 %. Les marqueurs utilisés sont le sérum albumine bovine (BSA; PM : 68 000), la pyruvate kinase (PM : 57 000), l’aldolase (PM : 40 000) et le cytochrome C (PM : 12 400). Les résultats que nous avons obtenus sont présentés dans les figures 1 et 2. On remarque que la fraction peroxydasique P2, obtenue par chromatographie sur DEAE-cellulose d’extraits de tissus sains, comporte en fait deux isoenzymes P2a et P2b (fig. 1 C). Cependant un tel diagramme d’élution n’est pas obtenu de façon systématique. En effet le pic P2a peut, d’une expérience à l’autre, soit faire complètement défaut, soit se réduire à un simple épaulement. Ces variations sont peut-être liées au génome des pivots car les porte-greffes, issus de fécondations illégitimes, ne sont pas génétiquement identiques, peut-être aussi proviennent-elles de différences dans l'état physiologique des tissus résultant du temps écoulé entre l'abattage et le prélèvement ou encore d'effets secondaires de l'infection par le L. lignosus. Ce qu'il convient en tous cas de noter c'est que la fraction P2 purifiée à partir des tissus parasités est toujours éluée sur « G 200 » en un pic unique (fig. 1 A). La filtration sur « G 200 » permet d'estimer le poids moléculaire des péroxydases P2 (tissus parasités), P2a et P2h (tissus sains) respectivement à environ 128 000, 108 000 et 51 000 (il s'agit de PM apparents pouvant différer des PM réels (4), (6)). Malgré une certaine imprécision inhérente à la technique utilisée les poids moléculaires des enzymes P2 et P2b paraissent significativement différents puisque les expériences de co-chromatographie révèlent que la première est éluée légèrement avant l'alcool déshydrogénase, la seconde légèrement après cette même enzyme (fig. 1 A et 1 C). Nous avons également essayé de savoir si la péroxydase P2 pouvait être constituée de
ou encore d'effets secondaires de l'infection par le L. lignosus. Ce qu'il convient en tous cas de noter c'est que la fraction P2 purifiée à partir des tissus parasités est toujours éluée sur « G 200 » en un pic unique (fig. 1 A). La filtration sur « G 200 » permet d'estimer le poids moléculaire des péroxydases P2 (tissus parasités), P2a et P2h (tissus sains) respectivement à environ 128 000, 108 000 et 51 000 (il s'agit de PM apparents pouvant différer des PM réels (4), (6)). Malgré une certaine imprécision inhérente à la technique utilisée les poids moléculaires des enzymes P2 et P2b paraissent significativement différents puisque les expériences de co-chromatographie révèlent que la première est éluée légèrement avant l'alcool déshydrogénase, la seconde légèrement après cette même enzyme (fig. 1 A et 1 C). Nous avons également essayé de savoir si la péroxydase P2 pouvait être constituée de sous-unités de même poids moléculaire que l'enzyme P2b. L'électrophorèse en conditions dissociantes montre que l'enzyme P2, extraite des tissus parasités est composée de deux sous-unités vraisemblablement identiques (la coloration au bleu de Coomassie ne permet de révéler qu'une seule bande, quoique relativement diffuse) ayant un poids moléculaire voisin de 61 000 (fig. 2 B). Il en résulte que l'enzyme native serait de type A2 et que la sous-unité diffère très vraisemblablement de la protéine P2b de poids moléculaire relativement plus faible. Enfin une autre différence entre les trois péroxydases réside dans l'effet du calcium sur leur activité catalytique. L'activité de l'enzyme P2 des tissus parasités est totalement indépendante de ces ions (fig. 1 B). En revanche, la vitesse de réaction de l'enzyme P2b (tissus sains) n'est maximale qu'en présence d'ions calciques à une concentration supérieure à 10-3 M (fig. 1 D), tandis que celle de la péroxydase P2a est faiblement dépendante du calcium (fig. 1 D); encore peut-on penser qu'il s'agit dans ce dernier cas d'un artefact dû à une légère contamination de la fraction P2b (fig. 1 C). L'ensemble de ces informations nous conduit à penser que la péroxydase P2 indécelable dans les tissus sains est spécifique des tissus
000 (fig. 2 B). Il en résulte que l'enzyme native serait de type A2 et que la sous-unité diffère très vraisemblablement de la protéine P2b de poids moléculaire relativement plus faible. Enfin une autre différence entre les trois péroxydases réside dans l'effet du calcium sur leur activité catalytique. L'activité de l'enzyme P2 des tissus parasités est totalement indépendante de ces ions (fig. 1 B). En revanche, la vitesse de réaction de l'enzyme P2b (tissus sains) n'est maximale qu'en présence d'ions calciques à une concentration supérieure à 10-3 M (fig. 1 D), tandis que celle de la péroxydase P2a est faiblement dépendante du calcium (fig. 1 D); encore peut-on penser qu'il s'agit dans ce dernier cas d'un artefact dû à une légère contamination de la fraction P2b (fig. 1 C). L'ensemble de ces informations nous conduit à penser que la péroxydase P2 indécelable dans les tissus sains est spécifique des tissus parasités. Dans l'état actuel de nos connaissances il est impossible de préciser si la synthèse de cette enzyme doit être attribuée à l'hôte ou au parasite. Il convient néanmoins de rappeler d'une part que, in vitro, le L. lignosus ne libère pas de péroxydase alors qu'il excrète des laccases et, d'autre part, que l'augmentation de l'activité péroxydasique est un phénomène général chez les végétaux subissant une agression d'origine virale, bactérienne ou fongique. Aussi, bien qu'aucun argument décisif ne puisse être avancé, on peut estimer que la péroxydase P2 des tissus parasités est synthétisée par l'Hévéa. Enfin, si le rôle de cette péroxydase ne peut, pour l'instant, être précisé, on ne peut cependant exclure, à la lumière de certaines données acquises sur des systèmes hôte-parasite différents (1), une éventuelle participation de cette enzyme aux réactions de défense de l'hôte. (*) Séance du 8 décembre 1976. (1) J. P. GEIGER, Physiol. vég., 13, (2), 1975, p. 307. (2) T. K. KIRK, Ann. Rev. Phytopathology, 9, 1971, p. 185. (3) J. P. GEIGER, D. NANDRIS et M. GOUJON, Physiol. vég., 14, (2), 1976, p. 271. (4) P. ANDREWS, Biochem. J., 91, 1964, p. 222. (1) K. WEBER, J. R. PRINGLE et M. OSBORN
d'autre part, que l'augmentation de l'activité péroxydasique est un phénomène général chez les végétaux subissant une agression d'origine virale, bactérienne ou fongique. Aussi, bien qu'aucun argument décisif ne puisse être avancé, on peut estimer que la péroxydase P2 des tissus parasités est synthétisée par l'Hévéa. Enfin, si le rôle de cette péroxydase ne peut, pour l'instant, être précisé, on ne peut cependant exclure, à la lumière de certaines données acquises sur des systèmes hôte-parasite différents (1), une éventuelle participation de cette enzyme aux réactions de défense de l'hôte. (*) Séance du 8 décembre 1976. (1) J. P. GEIGER, Physiol. vég., 13, (2), 1975, p. 307. (2) T. K. KIRK, Ann. Rev. Phytopathology, 9, 1971, p. 185. (3) J. P. GEIGER, D. NANDRIS et M. GOUJON, Physiol. vég., 14, (2), 1976, p. 271. (4) P. ANDREWS, Biochem. J., 91, 1964, p. 222. (1) K. WEBER, J. R. PRINGLE et M. OSBORN in Methods in Enzymology, XXVI, S. P. COLOWICK et N. O. KAPLAN, éd., Academic Press, 1972, p. 3. (6) H. A. STAFFORD et S. BRAVINDER-BREE, Plant. Physiol., 49, 1972, p. 950. (1) T. OHGUCHI et Y. ASADA, Physiol. Pl. Path., 5, 1975, p. 183. Laboratoire de Phytopathologie de l'O R S T O M Centre d'Adiopodoumé, B.P. n° V.51, Abidjan, Côte-d'Ivoire ; et Laboratoire de Morphologie expérimentale, associé au C.N.R.S., Faculté des Sciences, 91405 Orsay. MYCOLOGIE. — Sensibilité inégale de diverses espèces et souches d'Hyménomycètes parasites à la 5-fluorocytosine. Note (*) de René Morquer, Correspondant de l'Académie, et Annick Touvet. Certaines espèces d'Hyménomycètes sont très sensibles à la 5-FC, inhibitrice de la conidiogenèse et de la rhizomorphogenèse; d'autres présentent une croissance mycélienne résistante. Les souches activement conidifères de Fomes annosus sont plus vulnérables à l'antibiotique que les souches paucispores et leurs mitoses sont perturbées. Importants differences sont observées entre espèces d'Hyménomycètes parasites sur les arbres de forêt as to sensibilité à la 5-fluorocytosine. Conidiogenèse et rhizomorphogenèse de plusieurs espèces sont inhibées par faibles doses de cet antibiotique. D'autres espèces, comme Fomes annosus, sont beaucoup plus résistantes par rapport à leur mycelium en croissance; néanmoins les souches activement sporifères sont plus
S T O M Centre d'Adiopodoumé, B.P. n° V.51, Abidjan, Côte-d'Ivoire ; et Laboratoire de Morphologie expérimentale, associé au C.N.R.S., Faculté des Sciences, 91405 Orsay. MYCOLOGIE. — Sensibilité inégale de diverses espèces et souches d'Hyménomycètes parasites à la 5-fluorocytosine. Note (*) de René Morquer, Correspondant de l'Académie, et Annick Touvet. Certaines espèces d'Hyménomycètes sont très sensibles à la 5-FC, inhibitrice de la conidiogenèse et de la rhizomorphogenèse; d'autres présentent une croissance mycélienne résistante. Les souches activement conidifères de Fomes annosus sont plus vulnérables à l'antibiotique que les souches paucispores et leurs mitoses sont perturbées. Importants differences sont observées entre espèces d'Hyménomycètes parasites sur les arbres de forêt as to sensibilité à la 5-fluorocytosine. Conidiogenèse et rhizomorphogenèse de plusieurs espèces sont inhibées par faibles doses de cet antibiotique. D'autres espèces, comme Fomes annosus, sont beaucoup plus résistantes par rapport à leur mycelium en croissance; néanmoins les souches activement sporifères sont plus sensibles que les souches paucispores; leurs propriétés cinétiques sont perturbées par ce composé. Les antibiotiques dérivés de la fluoropyrimidine furent élaborés au cours de recherches sur les antimétabolites des bases puriques et pyrimidiques. Grünberg (1963) a établi que la fluorocytosine, atoxique chez les Mammifères, était antifongique contre Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Aspergillus fumigatus et quelques blastomycoses (1). Shadomy (2) établissait que la cytosine et les peptones inactiveraient la 5-FC (5-fluorocytosine) dans son action sur le Cryptococcus neoformans comme parasite de l'Homme. Cet antagonisme serait dû à une désaminase qui libérerait la 5-fluorouracile (3), (4). Chez Saccharomyces cerevisiae, l'incorporation de 5-fluorouracile dans les RNA ribosomal et de transfert déterminerait une inhibition de la croissance et une diminution de la teneur en RNA des cellules-levures (5). D'après Drouhet (6), Aspergillus fumigatus et A. nidulans présenteraient des souches résistantes jusqu'à 100 µg, A. flavus à plus de 100 µg. Mucor corymbifer et Absidia italiana, Histoplasma et Coccidioides immitis exigeraient aussi de fortes concentrations de 5-FC, ce qui la rend inapplicable. La 5-FC est également inefficace contre Scopulariopsis brevicaulis (7). L'incorporation du 5-fluorouracile au RNA s'effectuerait sous l'action enzymatique d'une pyrophosphorylase. L'activité acceptrice des aminoacides serait perturbée ainsi que la biosynthèse de RNA et
neoformans, Aspergillus fumigatus et quelques blastomycoses (1). Shadomy (2) établissait que la cytosine et les peptones inactiveraient la 5-FC (5-fluorocytosine) dans son action sur le Cryptococcus neoformans comme parasite de l'Homme. Cet antagonisme serait dû à une désaminase qui libérerait la 5-fluorouracile (3), (4). Chez Saccharomyces cerevisiae, l'incorporation de 5-fluorouracile dans les RNA ribosomal et de transfert déterminerait une inhibition de la croissance et une diminution de la teneur en RNA des cellules-levures (5). D'après Drouhet (6), Aspergillus fumigatus et A. nidulans présenteraient des souches résistantes jusqu'à 100 µg, A. flavus à plus de 100 µg. Mucor corymbifer et Absidia italiana, Histoplasma et Coccidioides immitis exigeraient aussi de fortes concentrations de 5-FC, ce qui la rend inapplicable. La 5-FC est également inefficace contre Scopulariopsis brevicaulis (7). L'incorporation du 5-fluorouracile au RNA s'effectuerait sous l'action enzymatique d'une pyrophosphorylase. L'activité acceptrice des aminoacides serait perturbée ainsi que la biosynthèse de RNA et des protéines selon Annable. On a pu séparer par chromatographie les aminoacyl tRNA glycyl-lysyl et phénylalanyl-t-RNA. D'après Polak et Scholer, la 5-FC, la cytosine et l'adénine seraient transportées par la même perméase, ce qui expliquerait l'effet antagoniste de l'adénosine sur l'inhibition par la 5-FC chez la levure sauvage. Il existerait une perméase différente pour l'uridine et l'uracile, mais ils ont observé l'absence d'antagonisme par la thymine et la thymidine. Chez les Candida, Drouhet et coll. ont pu préciser divers types de résistance et de fonctionnement des perméases et un effet rétroinhibiteur du substrat sur ce système. Ils ont montré que la paroi cytoplasmique des souches sensibles présentait au microscope électronique une couche granuleuse solubilisée par la trypsine, donc protéinique conditionnant la sensibilitisation, puisque sa disparition fait réapparaître la résistance à la 5-FC. Cette conception est à rapprocher de celle qui attribue à certaines protéines un accroissement de perméabilité de la membrane phospholipidique. Les constituants protéiniques de la membrane cytoplasmique sont les moins bien connus. Les Hyménomycètes lignicoles parasites sont-ils également sensibles aux antibiotiques fluorés ? 10 mg % ml de 5-FC ralentissent la végétation mycélienne, raccourcie, clairsemée, aranéeuse chez Merisma sulfureus. La fongistase est réalisée au 15e jour à 25
une perméase différente pour l'uridine et l'uracile, mais ils ont observé l'absence d'antagonisme par la thymine et la thymidine. Chez les Candida, Drouhet et coll. ont pu préciser divers types de résistance et de fonctionnement des perméases et un effet rétroinhibiteur du substrat sur ce système. Ils ont montré que la paroi cytoplasmique des souches sensibles présentait au microscope électronique une couche granuleuse solubilisée par la trypsine, donc protéinique conditionnant la sensibilitisation, puisque sa disparition fait réapparaître la résistance à la 5-FC. Cette conception est à rapprocher de celle qui attribue à certaines protéines un accroissement de perméabilité de la membrane phospholipidique. Les constituants protéiniques de la membrane cytoplasmique sont les moins bien connus. Les Hyménomycètes lignicoles parasites sont-ils également sensibles aux antibiotiques fluorés ? 10 mg % ml de 5-FC ralentissent la végétation mycélienne, raccourcie, clairsemée, aranéeuse chez Merisma sulfureus. La fongistase est réalisée au 15e jour à 25 mg % ml; le Champignon ne produit plus de conidies: 50 mg % ml sont nettement fongicides. Fomes hartigii est presque aussi sensible que M. sulfureus, la croissance étant nettement retardée à 50 mg % ml; les filaments n'atteignent que 50 à 100 µm de long au 7e jour; ils deviennent sinueux et l'on observe au 14e jour des coagulations cytoplasmiques. Les chlamydospores apparaissent au 33e jour et la fongistase est réelle. 200 mg % ml sont nettement fongicides. Ungulina marginata n° 274 est aussi sensible que le précédent: fongistase à partir du 7e jour avec formation d'une auréole opaque de 37 mm de diamètre, en présence de 50 mg de 5-FC. 100 mg % ml sont fongicides et générateurs d'une auréole. Stereum spadiceum marque un retard de croissance au 14e jour à 400 mg de 5-FC. Les hyphes forment des rameaux hélicoïdaux ou tordus en vrille (signe évident d'intoxication) et les extrémités offrent de courts renflements. Certains filaments variqueux sont fortement vacuolisés et montrent des coagulations cytoplasmiques. La végétation mycélienne se poursuit encore lentement au 33e jour, la colonie ne dépassant pas un diamètre de 12 x 15 mm avec 1 mm de hauteur et les hyphes rampantes aranéeuses
deviennent sinueux et l'on observe au 14e jour des coagulations cytoplasmiques. Les chlamydospores apparaissent au 33e jour et la fongistase est réelle. 200 mg % ml sont nettement fongicides. Ungulina marginata n° 274 est aussi sensible que le précédent: fongistase à partir du 7e jour avec formation d'une auréole opaque de 37 mm de diamètre, en présence de 50 mg de 5-FC. 100 mg % ml sont fongicides et générateurs d'une auréole. Stereum spadiceum marque un retard de croissance au 14e jour à 400 mg de 5-FC. Les hyphes forment des rameaux hélicoïdaux ou tordus en vrille (signe évident d'intoxication) et les extrémités offrent de courts renflements. Certains filaments variqueux sont fortement vacuolisés et montrent des coagulations cytoplasmiques. La végétation mycélienne se poursuit encore lentement au 33e jour, la colonie ne dépassant pas un diamètre de 12 x 15 mm avec 1 mm de hauteur et les hyphes rampantes aranéeuses s'observent encore dans une vingtaine de colonies. On n'observe plus de formation de spores à 800 mg % ml. Odontia bicolor nettement moins sensible que le précédent, s'accroît d'abord faiblement en présence de 5-FC à 400 mg % ml; la pénétration de l'antibiotique est pourtant plus lente que chez les espèces précédentes puisqu'au 2e jour les hyphes mesurent jusqu'à 350 µm avec un diamètre normal de 2 à 2,5 µm. L'auréole périphérique opaque est nette. La croissance ralentie atteint 12-17 mm de diamètre avec 1 mm de hauteur au bout de 31 jours en présence de 400 mg de 5-FC et 8-10 mm à la concentration de 800 mg % ml qui est fongistatique. Clitocybe mellea: à 400 mg % ml, la croissance mycélienne des hyphes ondulées sinueuses est ralentie; elle atteint seulement 500 µm de longueur au 7e jour, et se limite à 1 mm de haut sur le fragment d'ensemencement. Au 31e jour la colonie mycélienne cotonneuse, d'un blanc jaunâtre, mesure 20 x 16 mm avec une hauteur de 1.5 mm. Au 45e jour: 31 x 37 x 1-2 mm de haut. Elle marque à 800 mg une fongistase sans apparition de rhizomorphe. Il était intéressant de savoir
espèces précédentes puisqu'au 2e jour les hyphes mesurent jusqu'à 350 µm avec un diamètre normal de 2 à 2,5 µm. L'auréole périphérique opaque est nette. La croissance ralentie atteint 12-17 mm de diamètre avec 1 mm de hauteur au bout de 31 jours en présence de 400 mg de 5-FC et 8-10 mm à la concentration de 800 mg % ml qui est fongistatique. Clitocybe mellea: à 400 mg % ml, la croissance mycélienne des hyphes ondulées sinueuses est ralentie; elle atteint seulement 500 µm de longueur au 7e jour, et se limite à 1 mm de haut sur le fragment d'ensemencement. Au 31e jour la colonie mycélienne cotonneuse, d'un blanc jaunâtre, mesure 20 x 16 mm avec une hauteur de 1.5 mm. Au 45e jour: 31 x 37 x 1-2 mm de haut. Elle marque à 800 mg une fongistase sans apparition de rhizomorphe. Il était intéressant de savoir si l'émission des rhizomorphes qui conditionne l'attaque des arbres par le Clitocybe mellea était inhibée à plus faible concentration. Nous avons entrepris des cultures à 50 et 10 mg % ml de 5-FC. À 10 mg % ml il ne s'est formé aucun rhizomorphe au bout de 18 jours à 23°C: c'est donc le seuil de l'inhibition rhizomorphique, celui du mycélium est situé à 800 mg % ml (tableau 1). Fomes annosus: c'est le plus résistant des Hyménomycètes lignicoles aux antibiotiques (actidione, amphotéricine B) (Tableau II: souches allemande et américaine). Pour les deux souches, la source ammoniacale détermine une croissance plus lente que la peptone pepsique. Par contre la source d'azote ammoniacale accélère la conidiogénèse de 72 h et permet la germination des conidies de 2e génération. Dans son ensemble, sur NH4 le mycélium reste moins dense que sur peptone. En fin de culture il s'affaisse et devient gélatineux translucide. Dans tous les cas, la souche américaine est pulvérulente: conidies beaucoup plus nombreuses que dans la souche allemande. 800 mg % ml de 5-FC limitent la croissance de cette dernière, au-delà du 90e jour de culture et proportionnellement au témoin, suivant la nature de la source azotée. NH4 reporte la