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examiné l'effet de la chloroquine chez les descendants de croisements des Souris C 57 et DBA et des Souris C 57 et SEC. Les résultats sont résumés dans le tableau II. Il en ressort clairement que la mortalité est considérablement réduite chez les descendants de ces croisements par rapport aux souches sensibles. On note, en effet, que pour une dose qui provoque une mortalité chez les Souris DBA de 100 %, celle-ci est de 20 % pour les F 1 (C 57 x DBA). On obtient ce même pourcentage de mortalité (20 %) chez les F 1 (C 57 x SEC) pour des doses qui tuent 50 à 100 % des Souris SEC. Les différences de sensibilité à la chloroquine constatées chez les Souris de diverses souches consanguines élevées dans le même environnement avec le même régime alimentaire et chez les Souris issues de croisements entre ces souches permettent de conclure à un déterminisme génétique des effets de la chloroquine que nous avons décrits. Il conviendra évidemment de préciser le mécanisme moléculaire du déterminisme génétique de la sensibilité à la chloroquine. (*) Séance du 17 janvier 1977. (1) H. E. HOBBS, A. SCORSBY et A. FREEDMAN, Lancet, 2, 1959, p. 478. (2) T. TUSBAKI, Y. TOYOKURA et H. TSUKAGOSHI, J. Med. (Japan), 4, 1965, p. 181. (3) K. KUSUI et M. KAMIDE, Psychiat. Neurol. (Japan), 60, 1958, p. 1220. (4) H. SHIRAKI et M. ODA, Aishin Igaku, 24, 1969, p. 2479. (5) T. TAKASU, A. IGATA et Y. TOYOKURA, Igaku no Ayumi, 72, 1970, p. 539. (6) M. YOSHIOKA et Z. TAMURA. Igaku no Ayumi, 74, 1970, p. 320. (7) T. TSUBAKI, Y. HONMA et M. HOSHI, Lancet, 1, 1971, p. 656. (8) J. TATEISHI, H. IKEDA, A. SAITO, S. KURODA et S. OTSUKI, Neurology, 22, 1972, p. 702. (9) L. BERGGREN et O. HANSSON, Clin. Pharmacol. Therap., 9, 1968, p. 67. Centre de Neurochimie du C.N.R.S., et Institut de Chimie biologique, Faculté de Médecine, 67085 Strasbourg Cedex. BIOLOGIE. — Rupture de la diapause imaginaire des femelles de Tetrix undulata (Sa rob.) (Orthoptère Tetrigidae) par cautérisation de la région de
478. (2) T. TUSBAKI, Y. TOYOKURA et H. TSUKAGOSHI, J. Med. (Japan), 4, 1965, p. 181. (3) K. KUSUI et M. KAMIDE, Psychiat. Neurol. (Japan), 60, 1958, p. 1220. (4) H. SHIRAKI et M. ODA, Aishin Igaku, 24, 1969, p. 2479. (5) T. TAKASU, A. IGATA et Y. TOYOKURA, Igaku no Ayumi, 72, 1970, p. 539. (6) M. YOSHIOKA et Z. TAMURA. Igaku no Ayumi, 74, 1970, p. 320. (7) T. TSUBAKI, Y. HONMA et M. HOSHI, Lancet, 1, 1971, p. 656. (8) J. TATEISHI, H. IKEDA, A. SAITO, S. KURODA et S. OTSUKI, Neurology, 22, 1972, p. 702. (9) L. BERGGREN et O. HANSSON, Clin. Pharmacol. Therap., 9, 1968, p. 67. Centre de Neurochimie du C.N.R.S., et Institut de Chimie biologique, Faculté de Médecine, 67085 Strasbourg Cedex. BIOLOGIE. — Rupture de la diapause imaginaire des femelles de Tetrix undulata (Sa rob.) (Orthoptère Tetrigidae) par cautérisation de la région de la pars intercerebralis. Note (*) de Michel Poras, présentée par M. Pierre-Paul Grassé. La destruction large, par électrocautérisation, de la région de la pars intercerebralis, contrôlée sur coupes colorées à la fuchsine paraldéhyde par l'absence de cellules de type A, entraîne chez une proportion importante de femelles une augmentation de la longueur des ovocytes avec, dans la plupart des cas, dépôt de vitellus jaune ou de vitellus blanc. On peut penser que cet effet est la conséquence de la destruction d'un centre inhibiteur localisé dans la région de la pars intercerebralis qui entraîne la levée de l'inhibition des corps allates. La electrocauterisation of the region of the pars intercerebralis in diapausing females involves the ovocyte development with vitellogenesis and even the lay. It seems this "operation" involves the destruction of the center responsible for the inhibition of the corpus allatum. Nous avons montré antérieurement que la diapause des femelles de Tetrix undulata est la conséquence de l'inactivité de leurs corps allates : celle-ci est le résultat de leur inhibition par un facteur transitant par les nerfs allato-cardiaques, le cerveau étant probablement le siège d'un centre inhibiteur agissant par voie nerveuse. L'existence d'un tel centre inhibiteur, sans avoir jamais été nettement
la longueur des ovocytes avec, dans la plupart des cas, dépôt de vitellus jaune ou de vitellus blanc. On peut penser que cet effet est la conséquence de la destruction d'un centre inhibiteur localisé dans la région de la pars intercerebralis qui entraîne la levée de l'inhibition des corps allates. La electrocauterisation of the region of the pars intercerebralis in diapausing females involves the ovocyte development with vitellogenesis and even the lay. It seems this "operation" involves the destruction of the center responsible for the inhibition of the corpus allatum. Nous avons montré antérieurement que la diapause des femelles de Tetrix undulata est la conséquence de l'inactivité de leurs corps allates : celle-ci est le résultat de leur inhibition par un facteur transitant par les nerfs allato-cardiaques, le cerveau étant probablement le siège d'un centre inhibiteur agissant par voie nerveuse. L'existence d'un tel centre inhibiteur, sans avoir jamais été nettement mise en évidence, a été suggérée par divers auteurs : — pour A. S. Johansson (4) chez Oncopeltus faciatus, « le centre responsable de l'inhibition des corps allates est partiellement situé dans le cerveau, probablement dans la pars intercerebralis »; — de même J. C. Baehr (5) chez Rhodnius prolixus, suggère l'existence d'un centre inhibiteur cérébral ; — de même chez Leucophaea maderae N. de Bessé (6) a établi que « l'activité des corps allates est probablement la conséquence de la suppression d'un centre inhibiteur cérébral situé dans la région proche de la pars intercerebralis » ; — enfin, J. Boulétreau-Merle (1) chez Drosophila melanogaster suggère également l'existence d'un centre inhibiteur dans la région de la pars intercerebralis. Si un centre inhibiteur existe chez les femelles en diapause de Tetrix undulata, sa destruction doit en supprimer les effets; c'est pourquoi nous nous proposons d'étudier les effets de la destruction de la région de la pars intercerebralis. MÉTHODE. — Les Insectes en diapause provenant d'un élevage larvaire dense à 30° sous photopériode décroissant progressivement de 16-8 h à 12-12 h. Au moment de la mue imaginale les femelles sont maintenues sous la photopériode de 12-12 h soit à la température de
suggère l'existence d'un centre inhibiteur cérébral ; — de même chez Leucophaea maderae N. de Bessé (6) a établi que « l'activité des corps allates est probablement la conséquence de la suppression d'un centre inhibiteur cérébral situé dans la région proche de la pars intercerebralis » ; — enfin, J. Boulétreau-Merle (1) chez Drosophila melanogaster suggère également l'existence d'un centre inhibiteur dans la région de la pars intercerebralis. Si un centre inhibiteur existe chez les femelles en diapause de Tetrix undulata, sa destruction doit en supprimer les effets; c'est pourquoi nous nous proposons d'étudier les effets de la destruction de la région de la pars intercerebralis. MÉTHODE. — Les Insectes en diapause provenant d'un élevage larvaire dense à 30° sous photopériode décroissant progressivement de 16-8 h à 12-12 h. Au moment de la mue imaginale les femelles sont maintenues sous la photopériode de 12-12 h soit à la température de 30° ou à la thermopériode de 25-20°. L'intervention est réalisée sur des femelles non anesthésiées, immobilisées verticalement. Un volet cuticulaire est découpé au-dessus du cerveau (voir fig.). Le corps gras est enlevé à la pince et l'excès éventuel d'hémolymphe aspiré grâce à une trompe à vide. La cautérisation est effectuée avec un filament de platine de 40 u de diamètre et relié au porte électrode d'un thermocautère. L'opération terminée, le volet cuticulaire est remis en place; la coagulation rapide de l'hémolymphe assure sa fixation. Trois lots de femelles subissent la destruction de la pars intercerebralis : soit 2 semaines, soit 2 mois après la mue imaginale pour les femelles élevées à 30° et 1 mois après la mue imaginale pour les femelles élevées à 25-20°. Différents témoins sont réalisés : des témoins non opérés et des témoins opérés subissant les mêmes interventions dans les conditions 30° et 25-20°. Chez Tetrix, du fait du faible espace d'accès au cerveau entre les antennes et les ocelles, il est possible que l'un de ces organes ou son nerf soit lésé lorsque l'on découpe le volet cuticulaire. Aussi des témoins supplémentaires sont réalisés : femelles subissant la section d'un nerf antennaire, femelles subissant la
avec un filament de platine de 40 u de diamètre et relié au porte électrode d'un thermocautère. L'opération terminée, le volet cuticulaire est remis en place; la coagulation rapide de l'hémolymphe assure sa fixation. Trois lots de femelles subissent la destruction de la pars intercerebralis : soit 2 semaines, soit 2 mois après la mue imaginale pour les femelles élevées à 30° et 1 mois après la mue imaginale pour les femelles élevées à 25-20°. Différents témoins sont réalisés : des témoins non opérés et des témoins opérés subissant les mêmes interventions dans les conditions 30° et 25-20°. Chez Tetrix, du fait du faible espace d'accès au cerveau entre les antennes et les ocelles, il est possible que l'un de ces organes ou son nerf soit lésé lorsque l'on découpe le volet cuticulaire. Aussi des témoins supplémentaires sont réalisés : femelles subissant la section d'un nerf antennaire, femelles subissant la section du nerf ocellaire médian, femelles subissant la section d'un ou de deux nerfs ocellaires frontaux. Vue de face de la tête de la femelle de Tetrix undulata, après ouverture du volet cuticulaire. Les répercussions de la parsectomie sont observées au niveau des ovaires après 2 semaines à 30° ou 1 mois à 25-20°. Les ovarioles sont prélevés, observés dans du liquide physiologique et la longueur de cinq ovocytes par femelle mesurée sous le microscope. La présence de vitellus jaune ou blanc, de corps de résorption et la secrétion dans les oviductes sont notées. Les femelles sont classées en deux groupes : les femelles présentant un développement des ovocytes (c'est-à-dire du vitellus jaune ou blanc ou un corps de résorption) et les femelles ne présentant pas de développement des ovocytes (c'est-à-dire sans ni vitellus ni corps de résorption). La destruction de la pars intercerebralis est contrôlée in situ au moment de la dissection des femelles mais surtout sur coupes histologiques colorées à la fuchsine paraldéhyde (8). Résultats. — Les résultats sont consignés dans le tableau ci-joint. La mortalité est nulle dans les différents lots expérimentaux ou témoins sauf un. Elle peut être considérée comme exceptionnelle. Les témoins non opérés ne
1 mois à 25-20°. Les ovarioles sont prélevés, observés dans du liquide physiologique et la longueur de cinq ovocytes par femelle mesurée sous le microscope. La présence de vitellus jaune ou blanc, de corps de résorption et la secrétion dans les oviductes sont notées. Les femelles sont classées en deux groupes : les femelles présentant un développement des ovocytes (c'est-à-dire du vitellus jaune ou blanc ou un corps de résorption) et les femelles ne présentant pas de développement des ovocytes (c'est-à-dire sans ni vitellus ni corps de résorption). La destruction de la pars intercerebralis est contrôlée in situ au moment de la dissection des femelles mais surtout sur coupes histologiques colorées à la fuchsine paraldéhyde (8). Résultats. — Les résultats sont consignés dans le tableau ci-joint. La mortalité est nulle dans les différents lots expérimentaux ou témoins sauf un. Elle peut être considérée comme exceptionnelle. Les témoins non opérés ne présentent aucun signe de vitellogenèse et de développement des ovocytes, et ne présentent pas de secrétion dans les oviductes. Il en est de même pour les différents lots de témoins opérés. Dans tous les cas les ovocytes sont de taille comparable. Après destruction par électrocautérisation de la région de la pars intercerebralis on note un développement des ovocytes chez un nombre de femelles sensiblement le même : qu'elles soient élevées à 30° ou à 25-20°, ou que l'opération ait lieu 2 semaines ou 2 mois après la mue imaginale. Pour ces trois lots expérimentaux 64,9 % de femelles, en moyenne, présentent un développement des ovocytes. Parmi les femelles présentant un développement des ovocytes, 89,6 % ont du vitellus jaune et 10,4 % du vitellus blanc, ceci se traduit par une augmentation importante de la longueur des ovocytes. Chez les femelles à vitellus jaune, la ponte n'est obtenue que chez trois femelles, deux autres étaient prêtes à pondre (ovocytes dans les oviductes, perforation du sable) soit, en tout, 19,1 %. TABLEAU Pourcentage des femelles en vitellogenèse et longueur des ovocytes (Q) (1) n (d) (e) Témoins non opérés à 30° 15 0 0,41 Témoins opérés à 30° 19 0 0,44 Témoins
pars intercerebralis on note un développement des ovocytes chez un nombre de femelles sensiblement le même : qu'elles soient élevées à 30° ou à 25-20°, ou que l'opération ait lieu 2 semaines ou 2 mois après la mue imaginale. Pour ces trois lots expérimentaux 64,9 % de femelles, en moyenne, présentent un développement des ovocytes. Parmi les femelles présentant un développement des ovocytes, 89,6 % ont du vitellus jaune et 10,4 % du vitellus blanc, ceci se traduit par une augmentation importante de la longueur des ovocytes. Chez les femelles à vitellus jaune, la ponte n'est obtenue que chez trois femelles, deux autres étaient prêtes à pondre (ovocytes dans les oviductes, perforation du sable) soit, en tout, 19,1 %. TABLEAU Pourcentage des femelles en vitellogenèse et longueur des ovocytes (Q) (1) n (d) (e) Témoins non opérés à 30° 15 0 0,41 Témoins opérés à 30° 19 0 0,44 Témoins section d'un nerf antennaire à 30° 12 0 0 Témoins section d'un ou deux nerfs ocellaires frontaux à 30°.... 12 0 0 Témoins section du nerf ocellaire médian à 30° 7 0 0 Témoins opérés à 25-20° 11 0 0,42 Femelles Parsectomisées à 2 semaines à 30° 20 0 75,0 1,40 0,49 Femelles Parsectomisées à 2 mois à 30° 14 0 57,1 1,06 0,49 Femelles Parsectomisées à 1 mois à 25-20° 11 9,0 60.0 1,15 0,52 (") Nombre de femelles. (b) Pourcentage de mortalité. n Pourcentage de femelles en vitellogenèse. ( ) Longueur des ovocytes chez les femelles en vitellogenèse (mm). ( ) Longueur des ovocytes chez les femelles non en vitellogenèse (mm). Chez 15,4 % des femelles, la vitellogenèse s'est arrêtée précocement et l'on observe à la base des ovarioles un corps de résorption rouge orangé. Enfin, chez trois femelles (11,5 %) les ovocytes sont volumineux mais ne contiennent que très peu de vitellus jaune. Dans la plupart des cas où il y a développement des ovocytes on peut également noter la présence de sécrétion dans les oviductes. CONCLUSIONS. — Nous avons montré, par ailleurs, que la diapause imaginaire chez les femelles de Tetrix undulata est la conséquence de
1,40 0,49 Femelles Parsectomisées à 2 mois à 30° 14 0 57,1 1,06 0,49 Femelles Parsectomisées à 1 mois à 25-20° 11 9,0 60.0 1,15 0,52 (") Nombre de femelles. (b) Pourcentage de mortalité. n Pourcentage de femelles en vitellogenèse. ( ) Longueur des ovocytes chez les femelles en vitellogenèse (mm). ( ) Longueur des ovocytes chez les femelles non en vitellogenèse (mm). Chez 15,4 % des femelles, la vitellogenèse s'est arrêtée précocement et l'on observe à la base des ovarioles un corps de résorption rouge orangé. Enfin, chez trois femelles (11,5 %) les ovocytes sont volumineux mais ne contiennent que très peu de vitellus jaune. Dans la plupart des cas où il y a développement des ovocytes on peut également noter la présence de sécrétion dans les oviductes. CONCLUSIONS. — Nous avons montré, par ailleurs, que la diapause imaginaire chez les femelles de Tetrix undulata est la conséquence de l’inhibition de leurs corps allates par un facteur transitant par les nerfs allato-cardiaques; la section de ces nerfs entraîne la levée de cette inhibition et permet l’activité des corps allates et la vitellogenèse. Nous montrons que la destruction par électrocautérisation de la région de la pars intercerebralis entraîne également le développement des ovocytes, le dépôt de vitellus, voire la ponte chez les femelles en diapause. Il semble donc que cette intervention entraîne la destruction du centre responsable de l’inhibition des corps allates. La région de la pars intercerebralis est probablement le siège d’un centre inhibiteur agissant sur les corps allates par la voie des nerfs allato-cardiaques. Séance du 31 janvier 1977. M. PORAS, Comptes rendus, 281, série D, 1975, p. 551. M. PORAS. Comptes rendus, 281, série D, 1975, p. 663. M. PORAS, Comptes rendus, série D, 1977, p. 1301. A. S. JOHANSSON, Nytt. Mag. Zool., 7, 1958, p. 3-132. J. C. BAEHR, J. Insect. Physiol., 19, 1973, p. 1041-1055. N. DE BESSE, Comptes rendus, 280, série D, 1975, p. 729. J. BOULETREAU-MERLE, J. Insect. Physiol., 22, 1976, p. 933-940. R. MARTOJA et M. MARTOJA, Masson, Paris, 1967. Laboratoire de Biologie animale C, Université Pierre-et-Marie-Curie, 12, rue Cuvier, 75005 Paris.
développement des ovocytes, le dépôt de vitellus, voire la ponte chez les femelles en diapause. Il semble donc que cette intervention entraîne la destruction du centre responsable de l’inhibition des corps allates. La région de la pars intercerebralis est probablement le siège d’un centre inhibiteur agissant sur les corps allates par la voie des nerfs allato-cardiaques. Séance du 31 janvier 1977. M. PORAS, Comptes rendus, 281, série D, 1975, p. 551. M. PORAS. Comptes rendus, 281, série D, 1975, p. 663. M. PORAS, Comptes rendus, série D, 1977, p. 1301. A. S. JOHANSSON, Nytt. Mag. Zool., 7, 1958, p. 3-132. J. C. BAEHR, J. Insect. Physiol., 19, 1973, p. 1041-1055. N. DE BESSE, Comptes rendus, 280, série D, 1975, p. 729. J. BOULETREAU-MERLE, J. Insect. Physiol., 22, 1976, p. 933-940. R. MARTOJA et M. MARTOJA, Masson, Paris, 1967. Laboratoire de Biologie animale C, Université Pierre-et-Marie-Curie, 12, rue Cuvier, 75005 Paris. BIOLOGIE EXPÉRIMENTALE. — Perte du pouvoir de restauration des ébauches de la patte imaginale de Tenebrio molitor (Insecte Coléoptère) et acquisition des déterminations imaginales au cours du dernier stade larvaire. Note de Jean-Jacques Lenoir-Rousseaux, présentée par M. Étienne Wolff. Pendant l’organogenèse des articles imaginaux, chez la prénymphe, la perte du pouvoir de restauration des articles amputés est une propriété intrinsèque des tissus ainsi que le montre l’implantation dans une larve de dernier âge. L’acquisition de déterminations imaginales est contemporaine de la perte du pouvoir de restauration comme le révèle l’implantation dans une jeune larve. In the pharate pupa, during the organogenesis of imaginal articles, the restoration power of excised articles is a specific property of tissues as grafting in last larval instar shows. The establishment of imaginal determinations is contemporaneous with the loss of the restoration power as is shown by grafting in a young larva. Le pouvoir de restauration de la patte imaginale de Tenebrio molitor décroît chez la larve de dernier âge au cours de la période prénymphale et plus particulièrement pendant la phase d’organogenèse des articles imaginaux [1, 2]. La disparition du pouvoir de restauration durant les 3 ou 4 jours précédant la nymphose pourrait être liée
pouvoir de restauration des articles amputés est une propriété intrinsèque des tissus ainsi que le montre l’implantation dans une larve de dernier âge. L’acquisition de déterminations imaginales est contemporaine de la perte du pouvoir de restauration comme le révèle l’implantation dans une jeune larve. In the pharate pupa, during the organogenesis of imaginal articles, the restoration power of excised articles is a specific property of tissues as grafting in last larval instar shows. The establishment of imaginal determinations is contemporaneous with the loss of the restoration power as is shown by grafting in a young larva. Le pouvoir de restauration de la patte imaginale de Tenebrio molitor décroît chez la larve de dernier âge au cours de la période prénymphale et plus particulièrement pendant la phase d’organogenèse des articles imaginaux [1, 2]. La disparition du pouvoir de restauration durant les 3 ou 4 jours précédant la nymphose pourrait être liée à l’échéance de l’exuviation nymphale. La période prénymphale correspond en effet à des modifications importantes dans la physiologie de l’insecte qui se manifesteront au cours des étapes de sa métamorphose. Les expériences de ligature [3, 4], et de culture in vitro [5], ont déjà fait ressortir l’importance de cette période prénymphale pour l’évolution ultérieure de l’animal. Mais la perte du pouvoir de restauration pourrait être aussi une propriété intrinsèque des tissus, liée à l’acquisition des déterminations nymphales ou imaginales. C’est ce problème que nous avons étudié expérimentalement. TABLEAU I Transplantation du tibia-tarse (observation après exuviation larvaire) Nombre Caractères nymphaux Caractères imaginaires Ébauches intactes Soies blanches Rostres Stade observées Cuticule 1 Cuticule 1 Griffes 1 0 7 7 6 0 1 0 0 1 1 5 4 5 5 9 2 0 1 2 9 5 3 9 21 12 6 (*) Nombre moyen de soies par pièce pourvue de soies. (**) Rostres du tibia. TECHNIQUES. — Les animaux sont maintenus au laboratoire à 26°C et dans 60 % d’humidité relative. Les ébauches sont prélevées sur des prénymphes datées selon la méthode de Stellwaag-Kittler [3]. Les ébauches disséquées dans le milieu utilisé pour la culture in vitro [5] sont implantées dans
prénymphale pour l’évolution ultérieure de l’animal. Mais la perte du pouvoir de restauration pourrait être aussi une propriété intrinsèque des tissus, liée à l’acquisition des déterminations nymphales ou imaginales. C’est ce problème que nous avons étudié expérimentalement. TABLEAU I Transplantation du tibia-tarse (observation après exuviation larvaire) Nombre Caractères nymphaux Caractères imaginaires Ébauches intactes Soies blanches Rostres Stade observées Cuticule 1 Cuticule 1 Griffes 1 0 7 7 6 0 1 0 0 1 1 5 4 5 5 9 2 0 1 2 9 5 3 9 21 12 6 (*) Nombre moyen de soies par pièce pourvue de soies. (**) Rostres du tibia. TECHNIQUES. — Les animaux sont maintenus au laboratoire à 26°C et dans 60 % d’humidité relative. Les ébauches sont prélevées sur des prénymphes datées selon la méthode de Stellwaag-Kittler [3]. Les ébauches disséquées dans le milieu utilisé pour la culture in vitro [5] sont implantées dans la cavité abdominale de jeunes larves ou de larves de dernier stade, anesthésiées au CO2. Les pièces sont identifiées après dissection pratiquée après l’exuviation larvaire ou imaginale de l’hôte. Les pièces sont éclaircies à la potasse, colorées ou non au noir de chlorazol puis montées dans l’alcool polyvinylique [6]. Afin de déterminer le caractère larvaire, nymphal ou adulte des structures obtenues, nous avons utilisé 3 critères : l’aspect de la cuticule; la forme des soies; la présence ou l’absence de différenciations morphologiques spécifiquement imaginales (les rostres du tibia et la paire de griffes distales). RÉSULTATS. — 1. Implantation de l’ensemble des ébauches du tibia et du tarse dans une jeune larve (tableau I). — Les ébauches présomptives du tibia et du tarse imaginaire sont prélevées aux stades 10, 11 et 12 de la prénymphe. Les implants survivent in vivo entre 9 et 22 jours avant l’exuviation larvaire de l’hôte. Les ébauches se retournent en doigt de gant isolant une cavité délimitée par les sécrétions cuticulaires. Les résultats montrent que dans le cas d’ébauches explantées au stade 10 l’aspect de la cuticule obtenue est de type nymphal. Par contre dans le cas d’ébauches plus âgées, la cuticule présente à la fois