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DE LA BATHIE, Guttifères in HUMBERT, Flore de Madagascar et des Comores, 136E famille, Paris, 1950. J.-F. LEROY, XIIe Congrès Int. Bot., Léningrad, 1, 1975, p. 97. A. J. G. H. KOSTERMANS, Additional Notes on Mimosae. The genera Mammea L. and Ochrocarpos Thou. (Planning Bureau, Forestry Service of Indonesia, 1956). J. J. F. E. DE WILDE, Acta Bot. NéerL, 5 (2), 1956, p. 171-178. A. J. G. H. KOSTERMANS, A Monograph of the Asiatic and Pacific species of Mammea L. (Guttiferae) (Forst Research Institute n° 72, Bogor, 1961). R. CAPURON, Adansonia, ser. 2, 7 (4), 1967, p. 488. Paramammea Leroy gen. nov. Frutex v. arbor parva, plerumque habitu unicaulis, macrophylla, cauliflora. Folia persistentia, magna v. magnissima, plerumque apice caulinum disposita, saepe verticillata v. subverticillata. Inflorescentiae 1-florae, fasciculatae. Flores S v. calyce primum clauso, demum in valvas 2 fisso. Flores S monadelphi, antheris basifixis, apice columnae centralis dispositis. Flores 4 gynoecium ex (3—) 4 (-5) carpellis 2-locularibus constans; loculi uniovulati; ovarium stylis 1 v. (3—) 4 (—5) stigmatibus (3—) 4 (-5) insignibus, tubiformibus, apice labiatis v. lobatis, peltatis. Fructus 8-1 spermus; embryo exalbuminosus, cotyledonibus pro parte majore conferruminatis. Type P. megaphylla Leroy. Paramammea megaphylla Leroy sp. nov. distinctissima foliis verticillis 3-4-meris ad apices confertis dispositis, florum; ovario producto laevi, fructus pericarpio laevi. Holotype Paris 24040-SF. R. DE LA MENSBRUGE, La germination et les plantules des essences arborées de la forêt dense humide de la côte-d'Ivoire (C.T.F.T., Nogent-sur-Marne, 1966). G. L. STEBBINS, Flowering Plants (Évolution above the species level, Cambridge, Massachussetts, 1974). Laboratoire de Phytomorphologie de l'E.P.H.E., L. A. n° 218, C.N.R.S., Laboratoire de Phanérogamie, Muséum, 16, rue Buffon, 75005 Paris. PHYSIOLOGIE VÉGÉTALE. — Étude, chez la Giroflée (Cheiranthus cheiri L.) des variations de teneur en proline au cours de la mise à fleurs et de la réversion à l'état végétatif liées, l'une et l'autre, à des conditions de température. Note de Janine Diomaiuto-Bonnand, Camille Hubac et Anne-Marie Le Saint, présentée par M. Lucien Plantefol. La teneur des bourgeons en proline s'accroît rapidement sous l'action du froid, nécessaire à la mise à fleurs et à un déroulement normal de l'organogenèse inflorescentielle. Cet
ad apices confertis dispositis, florum; ovario producto laevi, fructus pericarpio laevi. Holotype Paris 24040-SF. R. DE LA MENSBRUGE, La germination et les plantules des essences arborées de la forêt dense humide de la côte-d'Ivoire (C.T.F.T., Nogent-sur-Marne, 1966). G. L. STEBBINS, Flowering Plants (Évolution above the species level, Cambridge, Massachussetts, 1974). Laboratoire de Phytomorphologie de l'E.P.H.E., L. A. n° 218, C.N.R.S., Laboratoire de Phanérogamie, Muséum, 16, rue Buffon, 75005 Paris. PHYSIOLOGIE VÉGÉTALE. — Étude, chez la Giroflée (Cheiranthus cheiri L.) des variations de teneur en proline au cours de la mise à fleurs et de la réversion à l'état végétatif liées, l'une et l'autre, à des conditions de température. Note de Janine Diomaiuto-Bonnand, Camille Hubac et Anne-Marie Le Saint, présentée par M. Lucien Plantefol. La teneur des bourgeons en proline s'accroît rapidement sous l'action du froid, nécessaire à la mise à fleurs et à un déroulement normal de l'organogenèse inflorescentielle. Cet accroissement est particulièrement important lors du passage à l'état reproducteur; le taux de proline reste ensuite élevé tant que dure la phase reproductrice de la plante maintenue au froid. Un retour à une température moyenne constante, provoque une réversion à l'état végétatif, s'accompagnée d'une baisse de cet acide aminé. Free proline increases rapidly in plants treated by frost (5°) for normal flowering and inflorescential genesis. This increase is particularly important during the acquisition of the reproductive conditions; then proline remains constant all the time the plants are at 5°C. Return to an average temperature causes the plants to return to a vegetative state and proline decreases. Il a été précédemment montré que le maintien au froid (2 ou 5°C) était nécessaire à la mise à fleurs de la Giroflée et à un déroulement normal de l'organogenèse inflorescentielle. Un retour de la plante, en cours de floraison, à des températures moyennes constantes (22 ou 24°C) aboutit à un retour à l'état végétatif : le méristème apical, après avoir produit des feuilles, puis des fleurs, produit à nouveau des feuilles et si les conditions de température sont maintenues, un axe végétatif s'édifie dans le prolongement de l'axe inflorescentiel (fig. 1). Il nous
proline increases rapidly in plants treated by frost (5°) for normal flowering and inflorescential genesis. This increase is particularly important during the acquisition of the reproductive conditions; then proline remains constant all the time the plants are at 5°C. Return to an average temperature causes the plants to return to a vegetative state and proline decreases. Il a été précédemment montré que le maintien au froid (2 ou 5°C) était nécessaire à la mise à fleurs de la Giroflée et à un déroulement normal de l'organogenèse inflorescentielle. Un retour de la plante, en cours de floraison, à des températures moyennes constantes (22 ou 24°C) aboutit à un retour à l'état végétatif : le méristème apical, après avoir produit des feuilles, puis des fleurs, produit à nouveau des feuilles et si les conditions de température sont maintenues, un axe végétatif s'édifie dans le prolongement de l'axe inflorescentiel (fig. 1). Il nous a paru intéressant d'étudier le métabolisme des acides aminés libres, notamment la proline, au cours des transformations successives du méristème apical provoquées par des variations de température. On connaît en effet les modifications importantes du métabolisme de la proline sous l'action de divers facteurs : action du froid [résistance au gel (8), vernalisation (9), CO)]; action de la sécheresse [résistance à la dessiccation (4), C)]; ainsi qu'au cours de certaines phases de la vie de la plante, telle la mise à fleurs, qu'elle soit ou non provoquée par le froid (1), (2) et (3). MÉTHODES. — Les pieds de Giroflée (variété Roi des Feux) sont cultivés dans les salles conditionnées du Phytotron de Gif-sur-Yvette dans les conditions de culture et d'éclairage déjà décrites (4). L'humidité relative de l'air est de 70 %. Durant toute la durée de l'expérience, les plantes sont maintenues sous une même photopériode de 16 h, seules des modifications de température sont apportées : 1° le déroulement de la phase végétative, à partir du semis, s'accomplit à 22°C ; 2° lorsqu'une soixantaine de feuilles ont été formées sur l'axe principal, la plante est placée à 5°C où s'effectuent la mise à fleurs et une partie de la
gel (8), vernalisation (9), CO)]; action de la sécheresse [résistance à la dessiccation (4), C)]; ainsi qu'au cours de certaines phases de la vie de la plante, telle la mise à fleurs, qu'elle soit ou non provoquée par le froid (1), (2) et (3). MÉTHODES. — Les pieds de Giroflée (variété Roi des Feux) sont cultivés dans les salles conditionnées du Phytotron de Gif-sur-Yvette dans les conditions de culture et d'éclairage déjà décrites (4). L'humidité relative de l'air est de 70 %. Durant toute la durée de l'expérience, les plantes sont maintenues sous une même photopériode de 16 h, seules des modifications de température sont apportées : 1° le déroulement de la phase végétative, à partir du semis, s'accomplit à 22°C ; 2° lorsqu'une soixantaine de feuilles ont été formées sur l'axe principal, la plante est placée à 5°C où s'effectuent la mise à fleurs et une partie de la phase reproductrice; 3° lorsque les inflorescences (inflorescence principale et inflorescences axillaires) ont produit chacune une trentaine de jeunes boutons, ébauches et primordiums floraux, la plante est replacée à 22°C. Dans chacune de ces conditions, des pieds témoins sont maintenus, demeurant végétatifs à 22°C, continuant à fleurir à 5°C. En vue d'une étude biochimique des acides aminés libres, à l'aide de l'autoanalyseur « Technicon ». selon la technique déjà exposée (6), des prélèvements de bourgeons apicaux, végétatifs et reproducteurs, sont effectués aux principaux stades. La hauteur de la tige, sous le méristème est de 0,5 cm. Sur les bourgeons végétatifs, les feuilles dont la longueur dépasse 1 cm sont enlevées; le nombre total de jeunes ébauches et primordiums foliaires entourant le méristème apical est alors de 15 à 20. Sur les bourgeons reproducteurs les ébauches florales dont la taille dépasse 1 mm sont enlevées; le nombre total de jeunes ébauches et primordiums floraux est alors également de 15 à 20. Chaque dosage porte sur un prélèvement de 5 à 8 bourgeons. Les expériences ont été répétées 3 fois, sur 3 lots provenant de semis différents. Des bourgeons, parvenus au même stade de développement, sont à chaque fois prélevés en vue d'une
d'une étude biochimique des acides aminés libres, à l'aide de l'autoanalyseur « Technicon ». selon la technique déjà exposée (6), des prélèvements de bourgeons apicaux, végétatifs et reproducteurs, sont effectués aux principaux stades. La hauteur de la tige, sous le méristème est de 0,5 cm. Sur les bourgeons végétatifs, les feuilles dont la longueur dépasse 1 cm sont enlevées; le nombre total de jeunes ébauches et primordiums foliaires entourant le méristème apical est alors de 15 à 20. Sur les bourgeons reproducteurs les ébauches florales dont la taille dépasse 1 mm sont enlevées; le nombre total de jeunes ébauches et primordiums floraux est alors également de 15 à 20. Chaque dosage porte sur un prélèvement de 5 à 8 bourgeons. Les expériences ont été répétées 3 fois, sur 3 lots provenant de semis différents. Des bourgeons, parvenus au même stade de développement, sont à chaque fois prélevés en vue d'une étude histologique selon les procédés classiques. RÉSULTATS. — L'examen des chromatogrammes montre que parmi les acides aminés libres, seule la proline présente des variations importantes. Les résultats sont exprimés en pourcentage de micromole de proline par rapport à la totalité des acides aminés. L'étude de l'histogramme ci-contre montre les faits suivants : (a) Mise à fleurs à 5°C, après déroulement de la phase végétative à 22°C. L'étude des teneurs en proline dans le bourgeon met en évidence une augmentation de cet acide aminé, lorsque la plante est placée au froid, bien avant la transformation du méristème végétatif en méristème reproducteur. En effet, déjà vers le 9e jour de froid, une augmentation de la teneur en proline est observée alors que le méristème est encore typiquement végétatif (fig. 3 : méristème encore végétatif après 16 jours de froid). Cependant c'est au moment du passage à l'état reproducteur (fig. 4 et 5), après 4 ou 5 semaines de froid, que cette augmentation est la plus importante. La teneur en proline baisse ensuite légèrement, puis se maintient tout au long de la phase reproductrice, qui se poursuit si la plante est maintenue à 5°C (fig. 6). (b) Réversion à l'état végétatif après retour
suivants : (a) Mise à fleurs à 5°C, après déroulement de la phase végétative à 22°C. L'étude des teneurs en proline dans le bourgeon met en évidence une augmentation de cet acide aminé, lorsque la plante est placée au froid, bien avant la transformation du méristème végétatif en méristème reproducteur. En effet, déjà vers le 9e jour de froid, une augmentation de la teneur en proline est observée alors que le méristème est encore typiquement végétatif (fig. 3 : méristème encore végétatif après 16 jours de froid). Cependant c'est au moment du passage à l'état reproducteur (fig. 4 et 5), après 4 ou 5 semaines de froid, que cette augmentation est la plus importante. La teneur en proline baisse ensuite légèrement, puis se maintient tout au long de la phase reproductrice, qui se poursuit si la plante est maintenue à 5°C (fig. 6). (b) Réversion à l'état végétatif après retour de la plante à 22°C. La teneur en proline baisse dans les bourgeons reproducteurs de plantes replacées à 22°C, devenant inférieure à celle des pieds témoins végétatifs demeurés à 22°C. Cette baisse est rapide, elle est observée déjà vers le 9e jour, bien avant la naissance des premières feuilles, qui n'apparaissent qu'après 3 à 4 semaines de séjour à 22°C : [après 3 semaines à 22°C, production de fleurs pourvues de bractées (fig. 7) précédant l'apparition des feuilles (fig. 8)]. Variations de la teneur en proline au cours de la mise à fleurs à 5°C, puis de la réversion à l'état végétatif par retour à 22°C. plantes mises à fleurs à 5°C et ayant subi la réversion à 22°C ; témoins restés végétatifs à 22°C; A, 9 jours à 5°C, méristème encore végétatif; B, 16 jours à 5°C, méristème encore végétatif; C et D, 4 et 5 semaines à 5°C, passage à l'état reproducteur; E, 14 semaines à 5°C, inflorescence avant allongement; F, à partir de 16 semaines à 5°C, inflorescence en cours d'allongement; A’, B’, après 9 jours et 16 jours à 22°C, état encore reproducteur; C’, 4 semaines à 22°C, début de réversion; D’, 25 semaines à 22°C,
n'apparaissent qu'après 3 à 4 semaines de séjour à 22°C : [après 3 semaines à 22°C, production de fleurs pourvues de bractées (fig. 7) précédant l'apparition des feuilles (fig. 8)]. Variations de la teneur en proline au cours de la mise à fleurs à 5°C, puis de la réversion à l'état végétatif par retour à 22°C. plantes mises à fleurs à 5°C et ayant subi la réversion à 22°C ; témoins restés végétatifs à 22°C; A, 9 jours à 5°C, méristème encore végétatif; B, 16 jours à 5°C, méristème encore végétatif; C et D, 4 et 5 semaines à 5°C, passage à l'état reproducteur; E, 14 semaines à 5°C, inflorescence avant allongement; F, à partir de 16 semaines à 5°C, inflorescence en cours d'allongement; A’, B’, après 9 jours et 16 jours à 22°C, état encore reproducteur; C’, 4 semaines à 22°C, début de réversion; D’, 25 semaines à 22°C, réversion avancée. CONCLUSIONS. — Le séjour au froid (5°C) au cours duquel s'effectue la mise à fleurs de la plante, s'accompagne, au niveau du bourgeon apical, d'une importante augmentation de la teneur en proline. Cette augmentation est décelable bien avant le passage à l'état reproducteur; toutefois c'est au moment précis de ce passage que la hausse observée est la plus importante. La teneur en proline baisse ensuite légèrement, mais reste élevée tant que dure la phase reproductrice de la plante maintenue au froid. Un retour à une température moyenne constante (22°C), provoque une réversion à l'état végétatif, s'accompagnée d'une diminution de teneur en proline ; cette baisse est décelable bien avant la naissance des premières feuilles. On sait qu'indépendamment de la mise à fleurs, le froid provoque une accumulation de proline chez les plantes résistantes au gel (1). D'autre part, chez certaines plantes, la mise à fleurs sans froid s'accompagne également d'une augmentation de proline [(9), (12), (3) et (4)]. Reste donc à préciser, chez la Giroflée, si l'accumulation de proline observée est due uniquement au froid ou s'il y a action cumulative avec celle de la mise à fleurs, comme semble l'indiquer la hausse brusque du taux de proline
de ce passage que la hausse observée est la plus importante. La teneur en proline baisse ensuite légèrement, mais reste élevée tant que dure la phase reproductrice de la plante maintenue au froid. Un retour à une température moyenne constante (22°C), provoque une réversion à l'état végétatif, s'accompagnée d'une diminution de teneur en proline ; cette baisse est décelable bien avant la naissance des premières feuilles. On sait qu'indépendamment de la mise à fleurs, le froid provoque une accumulation de proline chez les plantes résistantes au gel (1). D'autre part, chez certaines plantes, la mise à fleurs sans froid s'accompagne également d'une augmentation de proline [(9), (12), (3) et (4)]. Reste donc à préciser, chez la Giroflée, si l'accumulation de proline observée est due uniquement au froid ou s'il y a action cumulative avec celle de la mise à fleurs, comme semble l'indiquer la hausse brusque du taux de proline au moment de la transformation du méristème végétatif en méristème reproducteur (11). Séance du 7 février 1977. Avec la collaboration technique de J. Ferran. N. M. BARNETT et A. W. NAYLOR, Plant Physiol., 41, n° 7, 1966, p. 1222-1230. A. BOUNIOLS et J. MARGARA, Comptes rendus, 273, série D, 1971, p. 1104. J. DIOMAIUTO-BONNAND, Comptes rendus, 274, série D, 1972, p. 372. J. DIOMAIUTO-BONNAND, Comptes rendus, 280, série D, 1975, p. 1365. C. HUBAC, D. GUERRIER et J. FERRAN, Oecol. Plant., IV, 1969, p. 325-346. C. HUBAC, D. GUERRIER, Oecol. Plant., VII, n° 2, 1972, p. 147-165. A.-M. LE SAINT, Thèse de Doctorat d'État, Paris, 1966, Rev. Gén. Bot., 863, p. 161-239. Z. M. SHVEDSKAYA et A. S. KRUZHILIN, Fiziol. Rastenii, 13, 1966, p. 850-858. E. J. TRIONE, J. L. YOUNG et M. YAMAMOTO, Phytochemistry, 6, 1967, p. 85-91. J. C. VALLÉE, Thèse de Doctorat, Dijon, 1973. J. C. VALLÉE, E. PERDRIZET et C. MARTIN, Comptes rendus, 264, série D. 1967. D. 1024. C3) Notons que dans la nature, la mise à fleurs s'effectue vers la fin du mois de Novembre; les fleurs se forment ensuite durant tout l'hiver; l'organogenèse reproductrice s'effectue donc en même temps que la plante résiste
p. 1104. J. DIOMAIUTO-BONNAND, Comptes rendus, 274, série D, 1972, p. 372. J. DIOMAIUTO-BONNAND, Comptes rendus, 280, série D, 1975, p. 1365. C. HUBAC, D. GUERRIER et J. FERRAN, Oecol. Plant., IV, 1969, p. 325-346. C. HUBAC, D. GUERRIER, Oecol. Plant., VII, n° 2, 1972, p. 147-165. A.-M. LE SAINT, Thèse de Doctorat d'État, Paris, 1966, Rev. Gén. Bot., 863, p. 161-239. Z. M. SHVEDSKAYA et A. S. KRUZHILIN, Fiziol. Rastenii, 13, 1966, p. 850-858. E. J. TRIONE, J. L. YOUNG et M. YAMAMOTO, Phytochemistry, 6, 1967, p. 85-91. J. C. VALLÉE, Thèse de Doctorat, Dijon, 1973. J. C. VALLÉE, E. PERDRIZET et C. MARTIN, Comptes rendus, 264, série D. 1967. D. 1024. C3) Notons que dans la nature, la mise à fleurs s'effectue vers la fin du mois de Novembre; les fleurs se forment ensuite durant tout l'hiver; l'organogenèse reproductrice s'effectue donc en même temps que la plante résiste au gel. J. D.-B.: Laboratoire de Botanique, 24, rue Lhomond, 75005 Paris; C. H.: Laboratoire du Phytotron, C.N.R.S., 91190 Gif-sur-Yvette; A.-M. L. S.: Laboratoire de Physiologie végétale appliquée, Université Pierre-et-Marie-Curie, Tour 53, 4, place Jussieu, 75230 Paris Cedex 05. PHYSIOLOGIE VÉGÉTALE. — Sur le microdosage séparé des nucléotides pyridiniques réduits et oxydés dans les feuilles et les plastides de Blé et de Spirodèle. Note de Jacqueline Vermeersch, René Monéger et Daniel Lechevallier, présentée par M. Maurice-Marie Janot. Le dosage significatif du NAD ou du NADP réduits ou oxydés en quantités très faibles dans les échantillons végétaux (10-10 moles) est réalisé par une méthode qui fait appel à la lyophilisation préalable du matériel, à son broyage à chaud après congélation sans étape de réchauffement intermédiaire, et à l'analyse par oxydo-réduction enzymatique cyclique avec emploi du bleu de thiazolyl et extension de l'utilisation de phénazine éthosulfate au dosage du NADP. The estimation of significant but minute amounts (10-10 moles) of reduced or oxidized NADP or NAD in plant samples is achieved by a method including previous freeze-drying, grinding in hot conditions without intermediary heating step, and enzymic cycling analysis using thiazolyl blue, and phenazine ethosulfate for NADP as well as for NAD.
et oxydés dans les feuilles et les plastides de Blé et de Spirodèle. Note de Jacqueline Vermeersch, René Monéger et Daniel Lechevallier, présentée par M. Maurice-Marie Janot. Le dosage significatif du NAD ou du NADP réduits ou oxydés en quantités très faibles dans les échantillons végétaux (10-10 moles) est réalisé par une méthode qui fait appel à la lyophilisation préalable du matériel, à son broyage à chaud après congélation sans étape de réchauffement intermédiaire, et à l'analyse par oxydo-réduction enzymatique cyclique avec emploi du bleu de thiazolyl et extension de l'utilisation de phénazine éthosulfate au dosage du NADP. The estimation of significant but minute amounts (10-10 moles) of reduced or oxidized NADP or NAD in plant samples is achieved by a method including previous freeze-drying, grinding in hot conditions without intermediary heating step, and enzymic cycling analysis using thiazolyl blue, and phenazine ethosulfate for NADP as well as for NAD. ADH, alcool déshydrogénase; BT, bleu de thiazolyl [bromure de 3-(4,5-diméthyl-2-thiazolyl)-2,5-diphényl tétrazolium]; EDTA, acide éthylène diamine tétra-acétique; G6P, glucose-6-phosphate; G6PDH, glucose-6-phosphate déshydrogénase; PES, éthosulfate de phénazine. INTRODUCTION. — En dehors des résultats relatifs aux mécanismes photosynthétiques [(Z), (3)], les données concernant les fonctions régulatrices des nucléotides pyridiniques chez les végétaux sont encore très limitées (4). Cette situation résulte vraisemblablement en partie des difficultés que rencontre souvent l'application aux tissus végétaux des méthodes d'analyse des nucléotides pyridiniques mises au point pour les tissus animaux (1). surtout lorsqu'il s'agit d'extraire et de doser séparément les quantités parfois infimes de NADP et de NAD réduits et oxydés présentes dans de petits échantillons de tissus chlorophylliens ou de fractions et sous-fractions cellulaires. En particulier, avec ces matériels, des phénomènes d'inhibition affectent fréquemment les réactions enzymatiques utilisées pour accroître la sensibilité par oxydo-réduction cyclique (6), perturbant la proportionnalité normalement observée, pour des domaines de concentration très inférieurs aux Km (2, 10-6 M en NADP et 7. 10-5 M en NAD), entre les teneurs en coenzyme et les réponses obtenues. Il a donc paru opportun d'aménager une méthode permettant, au moyen d'appareillages courants dans les laboratoires de Biologie végétale, la réalisation de tels dosages (1) dans de
encore très limitées (4). Cette situation résulte vraisemblablement en partie des difficultés que rencontre souvent l'application aux tissus végétaux des méthodes d'analyse des nucléotides pyridiniques mises au point pour les tissus animaux (1). surtout lorsqu'il s'agit d'extraire et de doser séparément les quantités parfois infimes de NADP et de NAD réduits et oxydés présentes dans de petits échantillons de tissus chlorophylliens ou de fractions et sous-fractions cellulaires. En particulier, avec ces matériels, des phénomènes d'inhibition affectent fréquemment les réactions enzymatiques utilisées pour accroître la sensibilité par oxydo-réduction cyclique (6), perturbant la proportionnalité normalement observée, pour des domaines de concentration très inférieurs aux Km (2, 10-6 M en NADP et 7. 10-5 M en NAD), entre les teneurs en coenzyme et les réponses obtenues. Il a donc paru opportun d'aménager une méthode permettant, au moyen d'appareillages courants dans les laboratoires de Biologie végétale, la réalisation de tels dosages (1) dans de bonnes conditions de spécificité, de sensibilité et de fiabilité. MÉTÉRIEL VÉGÉTAL. — Les Spirodèles sont cultivées pendant un mois (avec repiquage après 15 jours) sur milieu de Pirson et Seidel (8) additionné de saccharose 0,03 M. Le Blé est cultivé pendant 7 jours sur vermiculite saturée d'eau. Un fragment de 25 mm de long est prélevé à 5 mm du sommet de la première feuille de chaque jeune plante et les fragments sont regroupés par lots sujets ou témoins. Le matériel ainsi obtenu est fixé par immersion dans l'azote liquide, puis lyophilisé et conservé sous azote. Les plastides sont isolés en milieu apolaire (9) à partir d'environ 1 g (Blé) ou 3 g (Spirodèle) de matériel lyophilisé. PROTOCOLE ET CARACTÉRISTIQUES DU DOSAGE. — Pour l'extraction des nucléotides pyridiniques, l'échantillon de tissus lyophilisés (20 mg environ) ou de plastides isolés est congelé par l'azote liquide, dans un broyeur de Potter, en présence de 1 ml de solution à 0,2 N de soude (dosage des formes réduites) ou d'acide chlorhydrique (dosage des formes oxydées). Il est décongelé au bain-marie bouillant pendant 2 mn pour permettre le broyage des tissus et la destruction des formes oxydées en milieu alcalin, ou des formes réduites