jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
(10) rend possible l'estimation du taux de cette hormone sur un grand nombre d'échantillons. Nous avons appliqué cette méthode (11) au dosage de la α-MSH sécrétée par des hypophyses de Grenouille périfusées selon la technique de Lowry (12). Les résultats rapportés ici montrent pour la première fois que la thyrolibérine (TRH) possède une puissante action MRF intrinsèque chez la Grenouille verte. MÉTODES. — Prélèvement des hypophyses. — Les Grenouilles Rana esculenta L. sont maintenues en aquarium à température constante, à l'obscurité continue pendant les 8 jours qui précèdent chaque expérience. Huit lobes neuro-intermédiaires, prélevés sous microscope binoculaire sont placés dans deux béchers en « Teflon » contenant chacun 5 ml d'un milieu de culture pour Amphibien (183 G. Gibco) préalablement saturé par un mélange gazeux 500 CO2-95 O2 (carbogène). Après 15 mn de préincubation à température ambiante, sous un filet de carbogène, le milieu est renouvelé et les hypophyses sont immédiatement transférées dans la cellule de perfusion. Technique de perfusion. — La cellule de perfusion est dérivée de celle utilisée par Beveridge et Shin (13). Elle est constituée d'un tube de verre siliconisé (diamètre intérieur 9 mm) dans lequel peuvent coulisser deux pistons en « Teflon » parcourus suivant leur grand axe d'un cathéter de 1 mm de diamètre. Le piston inférieur est assujetti dans le tube et un disque de papier filtre « Whatmann 3 MM » placé sur la face supérieure du piston. Une première couche de « Bio-Gel P-2 » (5 mm) est déposée dans le tube. Un second disque de papier « 3 MM » est mis en place et les lobes neuro-intermédiaires sont alors disposés en deux couches (quatre hypophyses par couche), comprises entre trois niveaux de gel. Après avoir placé un dernier disque de papier filtre, le piston supérieur est introduit dans le tube et son cathéter est relié à une vanne quatre voies qui permet d'alimenter alternativement la cellule avec diverses solutions. Une pompe péristaltique située en amont de la vanne quatre voies maintient constant le débit du 183 G dans la cellule 0,25 ml/min. Chaque substance test, diluée dans le 183 G,
grand axe d'un cathéter de 1 mm de diamètre. Le piston inférieur est assujetti dans le tube et un disque de papier filtre « Whatmann 3 MM » placé sur la face supérieure du piston. Une première couche de « Bio-Gel P-2 » (5 mm) est déposée dans le tube. Un second disque de papier « 3 MM » est mis en place et les lobes neuro-intermédiaires sont alors disposés en deux couches (quatre hypophyses par couche), comprises entre trois niveaux de gel. Après avoir placé un dernier disque de papier filtre, le piston supérieur est introduit dans le tube et son cathéter est relié à une vanne quatre voies qui permet d'alimenter alternativement la cellule avec diverses solutions. Une pompe péristaltique située en amont de la vanne quatre voies maintient constant le débit du 183 G dans la cellule 0,25 ml/min. Chaque substance test, diluée dans le 183 G, est perfusée pendant 10 mn à des concentrations variant de 10-11 à 10-6 molaire. Entre deux dilutions successives les hypophyses sont perfusées pendant 1 h 30 mn avec le milieu 183 G seul. Une jaquette à circulation d'eau permet de contrôler la température de la chambre de perfusion. Le liquide perfusé est collecté dans des tubes en polystyrène (2 mn pour chaque fraction) et immédiatement congelé. Dosage radio-immunologique. — La α-MSH utilisée comme hormone de référence nous a été généreusement donnée par les Drs Desaulles et Rittel (Laboratoires Ciba). La technique de dosage radio-immunologique de la α-MSH plasmatique du Rat (10) a été appliquée à notre étude après avoir vérifié que l'hormone mélanotrope de la Grenouille verte possède des propriétés immunologiques comparables à celles de la α-MSH synthétique (11). Sur chaque fraction collectée, la α-MSH est dosée en double, à partir de 100 μl, sans extraction préalable (14). La technique du deuxième anticorps est utilisée pour séparer les fractions d'hormones libre et liée à l'immunsérum anti-α-MSH. Les résultats exprimés sont les moyennes (+ SEM) des quantités de α-MSH contenues dans cinq fractions successives. RÉSULTATS. — Spécificité du dosage. — La figure 1 montre que la technique de dosage radio-immunologique utilisée
perfusé est collecté dans des tubes en polystyrène (2 mn pour chaque fraction) et immédiatement congelé. Dosage radio-immunologique. — La α-MSH utilisée comme hormone de référence nous a été généreusement donnée par les Drs Desaulles et Rittel (Laboratoires Ciba). La technique de dosage radio-immunologique de la α-MSH plasmatique du Rat (10) a été appliquée à notre étude après avoir vérifié que l'hormone mélanotrope de la Grenouille verte possède des propriétés immunologiques comparables à celles de la α-MSH synthétique (11). Sur chaque fraction collectée, la α-MSH est dosée en double, à partir de 100 μl, sans extraction préalable (14). La technique du deuxième anticorps est utilisée pour séparer les fractions d'hormones libre et liée à l'immunsérum anti-α-MSH. Les résultats exprimés sont les moyennes (+ SEM) des quantités de α-MSH contenues dans cinq fractions successives. RÉSULTATS. — Spécificité du dosage. — La figure 1 montre que la technique de dosage radio-immunologique utilisée dans ce travail est extrêmement spécifique. Aucune réaction croisée n'a été observée avec la TRH, le MIF, la somatostatine (GIF) ou la lutrépine (LH-RH) synthétiques. Parmi les polypeptides apparentés à la α-MSH, seul le fragment 1-16 de la molécule de ACTH induit un déplacement du complexe α-MSH marquée-anticorps. Effets de la température sur les taux de sécrétion de α-MSH. — Trois expériences indépendantes ont été réalisées pour étudier les effets des variations de température sur la libération de α-MSH in vitro. Les résultats de l'une de ces expériences sont schématisés dans la figure 2. Le taux de sécrétion de α-MSH est directement lié à la température de perfusion. Le temps de latence de la réponse des hypophyses à une variation de température de 5°C est de 10 mn. Les taux extrêmes observés pour des températures de 5 et 30°C sont respectivement de 34,5 ± 0,78 et de 184,8 ± 4,69 pg. mn-1, hypophyse. La température choisie pour toutes les autres expériences est de 28°C. Effets de la TRH. — Les quatre neuropeptides hypothalamiques dont la synthèse est réalisée à ce jour ont été étudiés pour leur action sur la libération de la α-MSH in vitro (tableau). Le tripeptide Pro-Leu-Gly (MIF3),
la température sur les taux de sécrétion de α-MSH. — Trois expériences indépendantes ont été réalisées pour étudier les effets des variations de température sur la libération de α-MSH in vitro. Les résultats de l'une de ces expériences sont schématisés dans la figure 2. Le taux de sécrétion de α-MSH est directement lié à la température de perfusion. Le temps de latence de la réponse des hypophyses à une variation de température de 5°C est de 10 mn. Les taux extrêmes observés pour des températures de 5 et 30°C sont respectivement de 34,5 ± 0,78 et de 184,8 ± 4,69 pg. mn-1, hypophyse. La température choisie pour toutes les autres expériences est de 28°C. Effets de la TRH. — Les quatre neuropeptides hypothalamiques dont la synthèse est réalisée à ce jour ont été étudiés pour leur action sur la libération de la α-MSH in vitro (tableau). Le tripeptide Pro-Leu-Gly (MIF3), aux doses 10-10, 10-8 et 10-6 molaire ne modifie aucunement le taux de sécrétion de la α-MSH. Le GIF et la LH-RH, utilisés aux mêmes doses, n'ont aucun effet sur la libération de la α-MSH par les lobes intermédiaires en périfusion. Par contre, le tripeptide Pyro-Glu-His-Pro-NH2 (TRH) provoque une forte libération de α-MSH, directement proportionnelle aux concentrations de TRH dans le milieu de périfusion. La concentration qui induit une réponse égale à la moitié de la réponse maximale (ED50) est 10-9 molaire. La réponse maximale est obtenue avec une solution de TRH 10-7 M. Les taux maximaux de α-MSH libérée sont observés entre 7 et 11 mn après le début de la périfusion. La durée d'action de la TRH est très brève : les hypophyses recouvrent un taux de sécrétion normal 30 mn après la fin de la perfusion avec la TRH. DISCUSSION. — Le système de périfusion présente plusieurs avantages sur les techniques usuelles d'étude des glandes in vitro : ce système mime parfaitement la situation anatomo-physiologique de l'axe hypothalamo-hypophysaire; il permet d'incuber des organes avec les substances à éprouver, pendant de courtes périodes; il évite que les cellules ne restent en contact prolongé avec leur propre produit de
libération de α-MSH, directement proportionnelle aux concentrations de TRH dans le milieu de périfusion. La concentration qui induit une réponse égale à la moitié de la réponse maximale (ED50) est 10-9 molaire. La réponse maximale est obtenue avec une solution de TRH 10-7 M. Les taux maximaux de α-MSH libérée sont observés entre 7 et 11 mn après le début de la périfusion. La durée d'action de la TRH est très brève : les hypophyses recouvrent un taux de sécrétion normal 30 mn après la fin de la perfusion avec la TRH. DISCUSSION. — Le système de périfusion présente plusieurs avantages sur les techniques usuelles d'étude des glandes in vitro : ce système mime parfaitement la situation anatomo-physiologique de l'axe hypothalamo-hypophysaire; il permet d'incuber des organes avec les substances à éprouver, pendant de courtes périodes; il évite que les cellules ne restent en contact prolongé avec leur propre produit de sécrétion et ne subissent, de ce fait, une rétroaction négative directe (feed-back court). Il est donc parfaitement adapté à l'étude de la sécrétion de α-MSH qui est auto-inhibée pendant les incubations statiques. Bien que de nombreux travaux militent en faveur d'un double système de contrôle de la fonction mélanotrope par l'intermédiaire de deux facteurs hypothalamiques distincts (MRF et MIF), les premiers résultats concernant l'isolation et la caractérisation de ces facteurs n'ont pu être confirmés. Il semble, d'après diverses expériences réalisées in vivo et selon nos résultats in vitro que le tripeptide Pro-Leu-Gly ne présente pas les propriétés MIF que lui avaient attribuées d'autres auteurs. Nous avons montré que, parmi les facteurs physiques susceptibles de modifier directement la fonction mélanotrope, le froid inhibe de façon réversible la sécrétion de α-MSH. Ces résultats sont en accord avec ceux obtenus chez d'autres Anoures. Ils montrent que les cellules hypophysaires répondent directement aux variations thermiques en l'absence du système nerveux central. Effets des variations de température sur le taux de libération de α-MSH par les lobes neuro-intermédiaires de Grenouilles maintenus en périfusion. L'histogramme supérieur représente les variations thermiques. L'histogramme inférieur représente la moyenne (±SEM) des taux de α-MSH sécrétés dans cinq fractions consécutives. Les
l'intermédiaire de deux facteurs hypothalamiques distincts (MRF et MIF), les premiers résultats concernant l'isolation et la caractérisation de ces facteurs n'ont pu être confirmés. Il semble, d'après diverses expériences réalisées in vivo et selon nos résultats in vitro que le tripeptide Pro-Leu-Gly ne présente pas les propriétés MIF que lui avaient attribuées d'autres auteurs. Nous avons montré que, parmi les facteurs physiques susceptibles de modifier directement la fonction mélanotrope, le froid inhibe de façon réversible la sécrétion de α-MSH. Ces résultats sont en accord avec ceux obtenus chez d'autres Anoures. Ils montrent que les cellules hypophysaires répondent directement aux variations thermiques en l'absence du système nerveux central. Effets des variations de température sur le taux de libération de α-MSH par les lobes neuro-intermédiaires de Grenouilles maintenus en périfusion. L'histogramme supérieur représente les variations thermiques. L'histogramme inférieur représente la moyenne (±SEM) des taux de α-MSH sécrétés dans cinq fractions consécutives. Les résultats rapportés ici montrent pour la première fois que la TRH provoque une importante décharge de α-MSH in vitro. Or les techniques de dosages biologique (utilisant l'hypophyse du Rat comme effecteur) et radio-immunologique ont montré que l'hypothalamus de la Grenouille contient d'importantes quantités de TRH. Cependant, le rôle de ce peptide, qui ne stimule pas la sécrétion de TSH chez les Anoures, restait obscur. De plus, les doses de TRH susceptibles d'être libérées par l'hypothalamus de Grenouille sont nettement supérieures à celles qui, dans notre système, induisent la libération de α-MSH (10 à 10-8 M). Le contrôle de la sécrétion mélanotrope pourrait donc être l'une des fonctions de la TRH chez les Anoures. Selon une étude récente, la TRH serait également responsable du contrôle de la sécrétion de prolactine. Une étude phylogénétique permettrait probablement d'expliquer l'évolution du rôle du tripeptide Pyro-Glu-His-Pro chez les Vertébrés. Séance du 24 janvier 1977. Travail réalisé avec l'aide de la D.G.R.S.T.-DATAR (contrat n° 73 7 1853). M. E. HAUHALY et J. T. BACARRA. Amer, Zool 15. 1975. p. 81. M. E. CELIS, S. TALEISNIK et R. WALTER. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 68. 1971. p. 1428. R. M. G. NAIR, A. J. KASTIN et A.
peptide, qui ne stimule pas la sécrétion de TSH chez les Anoures, restait obscur. De plus, les doses de TRH susceptibles d'être libérées par l'hypothalamus de Grenouille sont nettement supérieures à celles qui, dans notre système, induisent la libération de α-MSH (10 à 10-8 M). Le contrôle de la sécrétion mélanotrope pourrait donc être l'une des fonctions de la TRH chez les Anoures. Selon une étude récente, la TRH serait également responsable du contrôle de la sécrétion de prolactine. Une étude phylogénétique permettrait probablement d'expliquer l'évolution du rôle du tripeptide Pyro-Glu-His-Pro chez les Vertébrés. Séance du 24 janvier 1977. Travail réalisé avec l'aide de la D.G.R.S.T.-DATAR (contrat n° 73 7 1853). M. E. HAUHALY et J. T. BACARRA. Amer, Zool 15. 1975. p. 81. M. E. CELIS, S. TALEISNIK et R. WALTER. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 68. 1971. p. 1428. R. M. G. NAIR, A. J. KASTIN et A. V. SCHALLY. Biochem, Biophys. Res. Commun. 43. 1971. p. 1376. V. F. THORNTON et L. I. GESCHWIND. Gen. Comp. Endocrinol., 26. 1975, p. 346. A. J. THODY, S. SHUSTER, N. A. PLUMMER, W. BOGIE, R. J. LEIGH, S. K. GOOLAMALI et A. G. SMITH, J. Clin. Endocrinol, Metab., 38. 1974, p. 491. M. DONNADIEU, M. F. LAURENT, J. P. LUTON, H. BRICAIRE, F. GIRARD et M. BINOUX. J. Clin. Endocrinol. Metab., 42. 1976, p. 1145. F. J. H. TILDERS et A. H. MULDER, J. Endocrinol., 64. 1975. p. 63. M. E. CELIS, S. TALEISNIK et R. WALTER, Biochem, Biophys, Res. Commun., 45. 1971, p. 564. R. USATEGUI, C. OLIVER, H. VAUDRY, G. LOMBARDI, I. ROZENBERG et A. M. MOURRE, Endocrinology, 98, 1976, p. 189. H. VAUDRY, C. OLIVER, R. USATEGUI, M. C. TROCHARD, F. LEBOULENGER, W. DUPONT et R. VAILLANT, Comptes rendus, 283, série D, 1976, p. 1655. P. J. LOWRY, J. Endocrinol., 62, 1974, p. 163. R. C. BEVERIDGE et S. H. SHIN, Proc. Can. Fed. Biol. Soc., 19, 1975, p. 373. Les anticorps utilisés pour cette étude nous ont été généreusement fournis par le Dr C. Oliver, Southwestern Medical School, 5323 Harry Hines Bld, Dallas, Texas. La P-LPH
p. 491. M. DONNADIEU, M. F. LAURENT, J. P. LUTON, H. BRICAIRE, F. GIRARD et M. BINOUX. J. Clin. Endocrinol. Metab., 42. 1976, p. 1145. F. J. H. TILDERS et A. H. MULDER, J. Endocrinol., 64. 1975. p. 63. M. E. CELIS, S. TALEISNIK et R. WALTER, Biochem, Biophys, Res. Commun., 45. 1971, p. 564. R. USATEGUI, C. OLIVER, H. VAUDRY, G. LOMBARDI, I. ROZENBERG et A. M. MOURRE, Endocrinology, 98, 1976, p. 189. H. VAUDRY, C. OLIVER, R. USATEGUI, M. C. TROCHARD, F. LEBOULENGER, W. DUPONT et R. VAILLANT, Comptes rendus, 283, série D, 1976, p. 1655. P. J. LOWRY, J. Endocrinol., 62, 1974, p. 163. R. C. BEVERIDGE et S. H. SHIN, Proc. Can. Fed. Biol. Soc., 19, 1975, p. 373. Les anticorps utilisés pour cette étude nous ont été généreusement fournis par le Dr C. Oliver, Southwestern Medical School, 5323 Harry Hines Bld, Dallas, Texas. La P-LPH est un don du Dr M. Chrétien, Montréal, Canada. Les tripeptides Pyro-Glu-His-Pro (TRH) et Pro-Leu-Gly (MIF) nous ont été gracieusement donnés par les laboratoires « Hoffmann Laroche », Bâle, Suisse. F. C. ITURRIZA, Gen. Comp. Endocrinol., 20, 1973, p. 168. S. TALEISNIK et M. E. TOMATIS, Endocrinology, 81, 1967, p. 819. C. R. HOPKINS, Tiss. Cell., 2, 1970, p. 83. M. E. HADLEY et A. BOWER, Gen. Comp. Endocrinol., 28, 1976, p. 118. A. TAUROG, C. OLIVER, R. L. ESKAY, J. C. PORTER et J. M. McKENZIE, Gen. Comp. Endocrinol., 24, 1974, p. 267. A. G. GONA et C. GONA, Gen. Comp. Endocrinol., 24, 1974, p. 223. F. VAN DE SANDE et M. R. ASPESLAGH, Gen. Comp. Endocrinol., 23, 1974, p. 355. G. K. CLEMONS, S. M. RUSSEL et C. S. NICOLL, 14th Intern. Congr. Endocrinol., 1976, Abstr. n° 699. Laboratoire d'Endocrinologie, Faculté des Sciences de Rouen, 76130 Mont-Saint-Aignan. NEUROCHIMIE. — Identification de catécholamines et de sérotonine dans les chordes d'embryons de Poulet. Note de Georges Strudel, Max Recasens et Paul Mandel, présentée par M. Étienne Wolff. Des amines neurotransmetteurs, noradrénaline, dopamine et sérotonine, ont été isolées de la chorde d'embryon de Poulet. Des agents cholinergiques produisent les changements importants
819. C. R. HOPKINS, Tiss. Cell., 2, 1970, p. 83. M. E. HADLEY et A. BOWER, Gen. Comp. Endocrinol., 28, 1976, p. 118. A. TAUROG, C. OLIVER, R. L. ESKAY, J. C. PORTER et J. M. McKENZIE, Gen. Comp. Endocrinol., 24, 1974, p. 267. A. G. GONA et C. GONA, Gen. Comp. Endocrinol., 24, 1974, p. 223. F. VAN DE SANDE et M. R. ASPESLAGH, Gen. Comp. Endocrinol., 23, 1974, p. 355. G. K. CLEMONS, S. M. RUSSEL et C. S. NICOLL, 14th Intern. Congr. Endocrinol., 1976, Abstr. n° 699. Laboratoire d'Endocrinologie, Faculté des Sciences de Rouen, 76130 Mont-Saint-Aignan. NEUROCHIMIE. — Identification de catécholamines et de sérotonine dans les chordes d'embryons de Poulet. Note de Georges Strudel, Max Recasens et Paul Mandel, présentée par M. Étienne Wolff. Des amines neurotransmetteurs, noradrénaline, dopamine et sérotonine, ont été isolées de la chorde d'embryon de Poulet. Des agents cholinergiques produisent les changements importants dans le profil de répartition de ces amines et d'un de leurs métabolites. L'ensemble des données prouve la présence à un stade très précoce de la vie embryonnaire (2e, 3e jour) d'amines biogènes et de récepteurs cholinergiques. The neurotransmitter amines, norepinephrine, dopamine and serotonine have been isolated from Chick notochords. Cholinergic agents produce important modifications in the amount of these amines and of one of their metabolites. The results demonstrate the presence, at a very early stage of development, between the second and the third day of incubation, of biogenic amines and cholinergic receptors. L'un de nous, M. Strudel, a montré dans une série de travaux, l'importance du rôle morphogène de la chorde dans le développement des organes axiaux de l'embryon de Poulet [1], [2]. Ses résultats ont été confirmés et étendus à d'autres groupes de Vertébrés par une série de laboratoires [3], [4], [5]. En 1971, Strudel, puis Strudel et Gateau [6], [7] ont montré que les malformations du squelette cervical axial provoquées par l'injection dans le sac vitellin de sulfate de nicotine (malformations décrites pour la première fois par W. Landauer [8] en 1960) proviennent de déformations méandriformes de la chorde cervicale survenant quelques heures après l'injection. Plus
Cholinergic agents produce important modifications in the amount of these amines and of one of their metabolites. The results demonstrate the presence, at a very early stage of development, between the second and the third day of incubation, of biogenic amines and cholinergic receptors. L'un de nous, M. Strudel, a montré dans une série de travaux, l'importance du rôle morphogène de la chorde dans le développement des organes axiaux de l'embryon de Poulet [1], [2]. Ses résultats ont été confirmés et étendus à d'autres groupes de Vertébrés par une série de laboratoires [3], [4], [5]. En 1971, Strudel, puis Strudel et Gateau [6], [7] ont montré que les malformations du squelette cervical axial provoquées par l'injection dans le sac vitellin de sulfate de nicotine (malformations décrites pour la première fois par W. Landauer [8] en 1960) proviennent de déformations méandriformes de la chorde cervicale survenant quelques heures après l'injection. Plus récemment, Strudel et Gateau [9] ont montré que toutes ces déformations chordales et squelettiques peuvent être obtenues par l'injection de substances cholinergiques. Des antagonistes de ces substances ou des ligands des récepteurs cholinergiques inhibent l'action des agents cholinergiques sur la chorde et préservent les embryons traités des déformations axiales. Il apparaît donc légitime d'admettre que les substances cholinergiques employées perturbent des mécanismes de contrôle de la croissance des organes axiaux. En 1972, Kirby et Gilmore [10], se référant à des travaux de Buznikov [11], relatifs au rôle attribué à des neurohormones dans le développement de jeunes embryons encore dépourvus de système nerveux, ont démontré par la méthode d'histofluorescence de Falck et Owman [12], la présence transitoire de catécholamines dans la chorde de l'embryon de Poulet de 3 à 4 jours. On pouvait se demander si les injections de sulfate de nicotine, effectuées avant la différenciation complète des systèmes nerveux, n'influaient pas sur la biosynthèse et le stockage des catécholamines chordales. Pour éclaircir ce problème, Strudel, Meiniel et Gateau [13] ont entrepris une étude par la même méthode d'histofluorescence de Falck et Owman [11]. Dans le travail exposé ci-dessous, nous apportons une base chimique qualitative et quantitative aux phénomènes observés. MÉTHODES.
apparaît donc légitime d'admettre que les substances cholinergiques employées perturbent des mécanismes de contrôle de la croissance des organes axiaux. En 1972, Kirby et Gilmore [10], se référant à des travaux de Buznikov [11], relatifs au rôle attribué à des neurohormones dans le développement de jeunes embryons encore dépourvus de système nerveux, ont démontré par la méthode d'histofluorescence de Falck et Owman [12], la présence transitoire de catécholamines dans la chorde de l'embryon de Poulet de 3 à 4 jours. On pouvait se demander si les injections de sulfate de nicotine, effectuées avant la différenciation complète des systèmes nerveux, n'influaient pas sur la biosynthèse et le stockage des catécholamines chordales. Pour éclaircir ce problème, Strudel, Meiniel et Gateau [13] ont entrepris une étude par la même méthode d'histofluorescence de Falck et Owman [11]. Dans le travail exposé ci-dessous, nous apportons une base chimique qualitative et quantitative aux phénomènes observés. MÉTHODES. — Des œufs de Poule de race blanche sont incubés pendant 48 h à 38.5°C. Tous les œufs sont alors ouverts par une fenêtre découpée dans la coquille après prélèvement de 5 à 6 ml d'albumine. Les œufs témoins sont refermés et remis en incubation. Les œufs expérimentaux reçoivent dans le sac vitellin une injection de 0,02 ml d'une solution aqueuse de sulfate de nicotine contenant 1,7 mg d'alcaloïde. Les embryons sont tous sacrifiés entre 72 et 84 h. Les chordes sont isolées microchirurgicalement et stockées dans l'azote liquide. 548 chordes d'embryons témoins et 408 chordes d'embryons traités par le sulfate de nicotine ont été soumises aux analyses chimiques. Les amines biogènes des chordes d'embryons ont été dosées par dansylation avec le chlorure de Dansyl radioactif CI4 suivant notre méthode basée sur le principe de Seller et Wiechmann [14]. Après homogénéisation des chordes dans un mélange, éthanol, eau HCl 0,05 N (74 V/10 V/16 V) et centrifugation à 10 000 g, le surnageant auquel l'on ajoute des amines tritiées comme standards internes, est lyophilisé. Le lyophilisat est alors dansylé par du chlorure de Dansyl CI4 en présence de tampon carbonate pH 9,2 pendant 2 h et demi à l'obscurité. Une