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en pharmacie et en chimie, chap. XI, 1967, p. 264, Masson, Paris. Laboratoire d'Immunologie, Faculté de Pharmacie, 34060 Montpellier Cedex; Laboratoire de Physique industrielle, Faculté de Pharmacie, 34060 Montpellier Cedex. GYNÉCOLOGIE. — Variations des stéroides non conjugués dans le liquide amniotique au cours des dernières semaines de la grossesse. Note présentée par M. Robert Debré. Le cortisol, l'oestradiol et la progestérone ont été mesurés dans 172 liquides amniotiques recueillis par amniocentèse au cours des 10 dernières semaines de grossesse, soit au cours de grossesses normales dont l'accouchement a eu lieu à terme, soit au cours de grossesses qui se sont terminées prématurément. Des variations importantes des taux de ces stéroïdes ont été mises en évidence à l'approche de la date de l'accouchement, que celui-ci survienne à terme ou prématurément. Levels of cortisol, estradiol and progesterone were measured in 172 amniotic fluid samples collected by amniocentesis during late pregnancy. An increase in cortisol and estradiol levels was observed three weeks before vaginal delivery of term and premature infants; in both types of delivery, onset of labor was spontaneous. In contrast progesterone levels were only slightly decreased in these cases. INTRODUCTION. — L'initiation de la parturition est accompagnée, dans de nombreuses espèces de Mammifères, de modifications hormonales importantes chez la mère et chez le fœtus [1], [2]. Les glucocorticoides, la progestérone et les œstrogènes paraissent être fortement impliqués dans ce mécanisme et montrent des variations très comparables d'une espèce à l'autre. Dans l'espèce humaine ainsi que chez les autres Primates, les études effectuées à partir du sang maternel ont conduit à des résultats très contradictoires [(4), e]. L'étude de l'unité fœto-placentaire, limitée aux prélèvements de sang du cordon ombilical et de liquide amniotique ont permis de mettre en évidence de larges variations de ces stéroïdes en fin de grossesse [(6), (7), (8)]. Le but de ce travail a été de déterminer les variations du cortisol, de l'œstradiol-17 et de la progestérone dans le liquide amniotique et d'apprécier l'évolution de ces taux à l'approche du déclenchement spontané du travail de l'accouchement, qu'il s'agisse d'un accouchement prématuré ou à terme. MATÉRIEL ET MÉTHODES. —
de Mammifères, de modifications hormonales importantes chez la mère et chez le fœtus [1], [2]. Les glucocorticoides, la progestérone et les œstrogènes paraissent être fortement impliqués dans ce mécanisme et montrent des variations très comparables d'une espèce à l'autre. Dans l'espèce humaine ainsi que chez les autres Primates, les études effectuées à partir du sang maternel ont conduit à des résultats très contradictoires [(4), e]. L'étude de l'unité fœto-placentaire, limitée aux prélèvements de sang du cordon ombilical et de liquide amniotique ont permis de mettre en évidence de larges variations de ces stéroïdes en fin de grossesse [(6), (7), (8)]. Le but de ce travail a été de déterminer les variations du cortisol, de l'œstradiol-17 et de la progestérone dans le liquide amniotique et d'apprécier l'évolution de ces taux à l'approche du déclenchement spontané du travail de l'accouchement, qu'il s'agisse d'un accouchement prématuré ou à terme. MATÉRIEL ET MÉTHODES. — Les échantillons de liquide amniotique ont été obtenus par amniocentèse sus-pubienne au cours de grossesse à haut risque en vue de préciser la maturation fœtale ou de reconnaître une souffrance fœtale. Ils ont été conservés à −20°C jusqu'à leur utilisation. Cette étude concerne : 119 liquides amniotiques correspondant à des grossesses terminées à terme (entre 37 et 41 semaines d'aménorrhée), par un accouchement naturel et spontané, et 53 liquides amniotiques correspondant à des grossesses spontanément terminées avant la 37e semaine d'aménorrhée, ayant donc abouti à la naissance d'enfants prématurés. Tous les enfants ont subi une expertise pédiatrique permettant d'affirmer leur terme maturatif. Ces accouchements prématurés n'étaient pas liés à une cause mécanique (béance isthmique). La détermination des taux de cortisol a utilisé une méthode de radiocompétition protéique (9), et celle des taux de progestérone et d'œstradiol-17 un méthode radio-immunologique utilisant des anticorps spécifiques (R 3865 antiprogestérone, et R 3340 antiœstradiol) (10). Chaque dosage a été effectué en trois exemplaires dans le même échantillon de liquide amniotique. RÉSULTATS. — Lorsque l'accouchement a lieu à terme, on observe une augmentation très nette des taux de cortisol et d'œstradiol-17 dans les 6 semaines qui précèdent le déclenchement du travail. Les valeurs les plus
grossesses terminées à terme (entre 37 et 41 semaines d'aménorrhée), par un accouchement naturel et spontané, et 53 liquides amniotiques correspondant à des grossesses spontanément terminées avant la 37e semaine d'aménorrhée, ayant donc abouti à la naissance d'enfants prématurés. Tous les enfants ont subi une expertise pédiatrique permettant d'affirmer leur terme maturatif. Ces accouchements prématurés n'étaient pas liés à une cause mécanique (béance isthmique). La détermination des taux de cortisol a utilisé une méthode de radiocompétition protéique (9), et celle des taux de progestérone et d'œstradiol-17 un méthode radio-immunologique utilisant des anticorps spécifiques (R 3865 antiprogestérone, et R 3340 antiœstradiol) (10). Chaque dosage a été effectué en trois exemplaires dans le même échantillon de liquide amniotique. RÉSULTATS. — Lorsque l'accouchement a lieu à terme, on observe une augmentation très nette des taux de cortisol et d'œstradiol-17 dans les 6 semaines qui précèdent le déclenchement du travail. Les valeurs les plus élevées se situent le jour de l'accouchement. Le taux est alors trois fois celui observé 50 jours avant pour le cortisol. Le facteur d'augmentation des taux d'œstradiol est de dix. La concentration de progestérone diminue régulièrement, mais de façon peu prononcée, et une assez grande dispersion des valeurs peut être observée (fig.). Variations des stéroïdes du liquide amniotique dans les semaines qui précèdent l'accouchement. La partie droite de ce diagramme concerne les accouchements à terme, et la partie gauche les accouchements prématurés. Le jour 0 est le jour de la naissance. Les valeurs moyennes sont représentées avec les erreurs-type. Le nombre d'échantillons utilisés chaque semaine pour le calcul des moyennes est figuré entre parenthèses. Une évolution comparable se produit en cas de prématurité. Les valeurs obtenues le jour de la naissance sont différentes de celles correspondant à des liquides amniotiques recueillis au même âge gestationnel lorsque les grossesses ont poursuivi leur évolution jusqu'au terme physiologique (tableau). TABLEAU Comparaison des taux de stéroides du liquide amniotique selon qu'il a été recueilli au cours de la 36e semaine d'aménorrhée en cas de grossesses allant jusqu'à leur terme physiologique, ou le jour même d'un accouchement prématuré Grossesses normales Accouchements prématurés 36e semaine jour
observée (fig.). Variations des stéroïdes du liquide amniotique dans les semaines qui précèdent l'accouchement. La partie droite de ce diagramme concerne les accouchements à terme, et la partie gauche les accouchements prématurés. Le jour 0 est le jour de la naissance. Les valeurs moyennes sont représentées avec les erreurs-type. Le nombre d'échantillons utilisés chaque semaine pour le calcul des moyennes est figuré entre parenthèses. Une évolution comparable se produit en cas de prématurité. Les valeurs obtenues le jour de la naissance sont différentes de celles correspondant à des liquides amniotiques recueillis au même âge gestationnel lorsque les grossesses ont poursuivi leur évolution jusqu'au terme physiologique (tableau). TABLEAU Comparaison des taux de stéroides du liquide amniotique selon qu'il a été recueilli au cours de la 36e semaine d'aménorrhée en cas de grossesses allant jusqu'à leur terme physiologique, ou le jour même d'un accouchement prématuré Grossesses normales Accouchements prématurés 36e semaine jour de la naissance Moyenne Valeurs extrêmes Moyenne Valeurs extrêmes (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml) Cortisol 17 12-22 32,7 17-60 Estradiol 0,60 0,40-1,10 2,01 0,98-3,20 Progestérone 27,5 18-41 20,6 9,5-30,5 DISCUSSION. — Ces résultats témoignent de grandes variations des stéroïdes non conjugués produits au niveau de l'unité fœto-placentaire, dans l'espèce humaine. Ces variations sont liées à l'évolution des dernières semaines de la grossesse, et donc vraisemblablement à la maturation fœtale et au déclenchement du travail d'accouchement. Un autre argument en faveur de cette assertion est apporté par le niveau du cortisol dans le sang du cordon ombilical (Il). Cependant, l'origine, la régulation et le rôle de ces stéroïdes demeurent inconnus. L'œstradiol et la progestérone proviennent, à l'évidence, de l'unité fœto-placentaire (12). Le cortisol du liquide amniotique pourrait être d'origine purement fœtale (13). (*) Séance du 3 janvier 1977. (1) Travail subventionné par l'I.N.S.E.R.M., ATP 23.75.46, et la Faculté de Médecine de Créteil. (2) C. A. BEDFORD, J. R. CHALLIS, F. A. HARRISON et R. B. HEAP, J. Reprod. Fert., Suppl. 16, 1972, p. 1-23. (3) G. C. LIGGINS, Endocrine Factors in Labour, Cambridge University Press, 1973, p. 119-139. (4) A. C. TURNBULL, A. P. F. FLINT, J. Y. JEREMY, P. T. PATTERN,
variations sont liées à l'évolution des dernières semaines de la grossesse, et donc vraisemblablement à la maturation fœtale et au déclenchement du travail d'accouchement. Un autre argument en faveur de cette assertion est apporté par le niveau du cortisol dans le sang du cordon ombilical (Il). Cependant, l'origine, la régulation et le rôle de ces stéroïdes demeurent inconnus. L'œstradiol et la progestérone proviennent, à l'évidence, de l'unité fœto-placentaire (12). Le cortisol du liquide amniotique pourrait être d'origine purement fœtale (13). (*) Séance du 3 janvier 1977. (1) Travail subventionné par l'I.N.S.E.R.M., ATP 23.75.46, et la Faculté de Médecine de Créteil. (2) C. A. BEDFORD, J. R. CHALLIS, F. A. HARRISON et R. B. HEAP, J. Reprod. Fert., Suppl. 16, 1972, p. 1-23. (3) G. C. LIGGINS, Endocrine Factors in Labour, Cambridge University Press, 1973, p. 119-139. (4) A. C. TURNBULL, A. P. F. FLINT, J. Y. JEREMY, P. T. PATTERN, M. J. N. C. KEIRSE et A. B. M. ANDERSON, The Lancet, 26 janvier 1974, p. 101-104. (5) S. BATA, L. P. BENGTSSON, H. GRUNDSELL et N. O. SJÖBERG, J. Clin. Endocr. and Metab., 42, 1976, p. 1041-1047. (6) J. P. GAUTRAY, A. JOLIVET, N. DHEM, J. P. VIELH et G. TAJCHNER, Avortement et parturition provoqués, Masson, Paris 1974, p. 227-236. (7) B. E. P. MURPHY, J. PATRICK et R. L. DENTON, J. Clin. Endocr. and Metab., 40, 1975, p. 164-167. (8) EV. YOUNG LAI, S. B. EFFER et C. PELLETIER, Amer. J. Obst. and Gynec., 111, 1971, p. 833-839. (9) A. JOLIVET, Annales d'Endocrinologie, 35, 1974, p. 223-229. (10) Roussel-Uclaf. Romainville, France. (11) B. E. P. MURPHY, Amer. J. Obst. and Gynec., 115, 1973, p. 521-525. (12) E. DIXZFALUSY, Fed. Proceedings, 23, 1964, p. 791-798. (13) B. E. P. MURPHY, Vth International Congress of Endocrinology, Hamburg, 1976. Obstétrique et Gynécologie, Centre hospitalier et universitaire de Créteil, 6, rue du Général-Sarrail, 94000 Créteil. PATHOLOGIE EXPÉRIMENTALE. — Variations de la contraction hydrothermique de la peau du Rat en fonction de l'âge des animaux. Note (*) de Jean-Claude Allain, Suzanne Bazin, Mady Le Lous et Albert Delaunay, présentée par M. Jacques Tréfouël.
G. TAJCHNER, Avortement et parturition provoqués, Masson, Paris 1974, p. 227-236. (7) B. E. P. MURPHY, J. PATRICK et R. L. DENTON, J. Clin. Endocr. and Metab., 40, 1975, p. 164-167. (8) EV. YOUNG LAI, S. B. EFFER et C. PELLETIER, Amer. J. Obst. and Gynec., 111, 1971, p. 833-839. (9) A. JOLIVET, Annales d'Endocrinologie, 35, 1974, p. 223-229. (10) Roussel-Uclaf. Romainville, France. (11) B. E. P. MURPHY, Amer. J. Obst. and Gynec., 115, 1973, p. 521-525. (12) E. DIXZFALUSY, Fed. Proceedings, 23, 1964, p. 791-798. (13) B. E. P. MURPHY, Vth International Congress of Endocrinology, Hamburg, 1976. Obstétrique et Gynécologie, Centre hospitalier et universitaire de Créteil, 6, rue du Général-Sarrail, 94000 Créteil. PATHOLOGIE EXPÉRIMENTALE. — Variations de la contraction hydrothermique de la peau du Rat en fonction de l'âge des animaux. Note (*) de Jean-Claude Allain, Suzanne Bazin, Mady Le Lous et Albert Delaunay, présentée par M. Jacques Tréfouël. La thermocontraction du collagène provoque, dans la peau du Rat, un état de tension dont les caractéristiques varient en fonction de l'âge de l'animal. La température où se produit la tension maximale diminue de la naissance à l'âge de 1 mois puis elle remonte très lentement. Aux températures supérieures à celle de la tension maximale, une relaxation très rapide se produit pour la peau des animaux en croissance et des adultes non encore sénescents. Les variations de tension observées apparaissent en rapport avec les modifications que l'âge fait subir aux liaisons intermoléculaires du collagène. The tension developed in Rat skin by hydrothermal shrinkage is modified with ageing of the animals: the temperature of maximum tension decreases from birth to 1 month, then very slowly increases with age. At higher temperatures than that of maximum tension a relaxation occurs very rapidly in young Rats and in not yet senescent adult skins. These modifications appeared to be related to those of the nature of the intermolecular collagen cross-links with ageing. Le collagène polymérique (constituant des fibrilles visibles au microscope) possède la propriété inhabituelle pour un corps chimique de se contracter quand il est soumis, en milieu aqueux, à une élévation de température.
celle de la tension maximale, une relaxation très rapide se produit pour la peau des animaux en croissance et des adultes non encore sénescents. Les variations de tension observées apparaissent en rapport avec les modifications que l'âge fait subir aux liaisons intermoléculaires du collagène. The tension developed in Rat skin by hydrothermal shrinkage is modified with ageing of the animals: the temperature of maximum tension decreases from birth to 1 month, then very slowly increases with age. At higher temperatures than that of maximum tension a relaxation occurs very rapidly in young Rats and in not yet senescent adult skins. These modifications appeared to be related to those of the nature of the intermolecular collagen cross-links with ageing. Le collagène polymérique (constituant des fibrilles visibles au microscope) possède la propriété inhabituelle pour un corps chimique de se contracter quand il est soumis, en milieu aqueux, à une élévation de température. Ce phénomène est connu depuis longtemps (1). Il peut être aisément constaté sur du collagène isolé ou encore sur des tissus riches en collagène (tendon, peau, etc.). Il est en rapport avec une transformation moléculaire (2). Par retour de la température à la normale, quand la transformation moléculaire n'a pas entraîné une dénaturation trop profonde du collagène, il y a également retour, pour celui-ci, aux dimensions primitives. Il a été démontré que contraction et relaxation du collagène ne sont pas modifiées par les autres constituants également présents dans le tissu étudié (5). Pour avoir soumis, en milieu aqueux, différents fragments de peau de Rat à une élévation régulièrement croissante de la température ambiante, nous avons été conduits à remarquer que les fragments, après avoir atteint leur état de contraction maximale, autrement dit après avoir subi un état de tension maximale, se relachaient, en fonction de leur origine, plus ou moins rapidement et plus ou moins complètement. Étant donné que pareil relâchement pouvait tenir à une rupture des liaisons intermoléculaires (pontiques) qui maintiennent les molécules de collagène associées dans les polymères, nous nous sommes demandés si la mesure de la tension en cause n'était pas capable à elle seule de fournir
entraîné une dénaturation trop profonde du collagène, il y a également retour, pour celui-ci, aux dimensions primitives. Il a été démontré que contraction et relaxation du collagène ne sont pas modifiées par les autres constituants également présents dans le tissu étudié (5). Pour avoir soumis, en milieu aqueux, différents fragments de peau de Rat à une élévation régulièrement croissante de la température ambiante, nous avons été conduits à remarquer que les fragments, après avoir atteint leur état de contraction maximale, autrement dit après avoir subi un état de tension maximale, se relachaient, en fonction de leur origine, plus ou moins rapidement et plus ou moins complètement. Étant donné que pareil relâchement pouvait tenir à une rupture des liaisons intermoléculaires (pontiques) qui maintiennent les molécules de collagène associées dans les polymères, nous nous sommes demandés si la mesure de la tension en cause n'était pas capable à elle seule de fournir des indications utiles sur la nature des liaisons intermoléculaires dans le collagène du tissu examiné. Pour le savoir, nous avons déterminé, dans un premier temps, d'une part les températures coïncidant avec la tension maximale et, d'autre part, la thermostabilité de cette tension sur des échantillons de peau de Rat différents par l'âge des animaux qui les avaient fournis. Puis, dans un second temps, nous avons rapproché les données recueillies des observations faites, chez le Rat, sur les modifications survenues, en fonction de l'âge, dans les liaisons intermoléculaires du collagène. MATÉRIEL ET MÉTHODES. — 1. Tissus examinés. — Peaux de Rat Wistar femelles. Animaux d'âge croissant (de la naissance jusqu'à 18 mois). Peaux d'embryons de Rat de 18 jours. Des fragments de 1 cm x 1,8 cm étaient découpés, à l'emporte-pièce, sur la peau dorsale. Chez les embryons, c'est la peau dorsale toute entière qui était prélevée. 2. Appareil de mesure. Les fragments de tissus étaient placés entre deux pinces reliées par des tenseurs mécaniques à un capteur électronique de pression, lui-même en liaison avec un enregistreur galvanométrique. Cela fait, l’ensemble tissu et pinces était plongé dans un bain d’eau physiologique maintenu à 37°C. Au bout de 5 mn d’immersion, la
par l'âge des animaux qui les avaient fournis. Puis, dans un second temps, nous avons rapproché les données recueillies des observations faites, chez le Rat, sur les modifications survenues, en fonction de l'âge, dans les liaisons intermoléculaires du collagène. MATÉRIEL ET MÉTHODES. — 1. Tissus examinés. — Peaux de Rat Wistar femelles. Animaux d'âge croissant (de la naissance jusqu'à 18 mois). Peaux d'embryons de Rat de 18 jours. Des fragments de 1 cm x 1,8 cm étaient découpés, à l'emporte-pièce, sur la peau dorsale. Chez les embryons, c'est la peau dorsale toute entière qui était prélevée. 2. Appareil de mesure. Les fragments de tissus étaient placés entre deux pinces reliées par des tenseurs mécaniques à un capteur électronique de pression, lui-même en liaison avec un enregistreur galvanométrique. Cela fait, l’ensemble tissu et pinces était plongé dans un bain d’eau physiologique maintenu à 37°C. Au bout de 5 mn d’immersion, la température était élevée régulièrement de 1°15 par minute (jusqu’à 100°C) au moyen de résistances chauffantes connectées avec un thermostat. Ce thermostat était commandé par un thermomètre à contact, l’index mobile étant régulièrement entraîné par un moteur électrique. 3. Enregistrement. — Ont été enregistrées simultanément, entre 37°C et 100°C, la température du bain et — exprimée en millivolts — la tension ayant pris place dans le fragment de tissu examiné. Les caractéristiques de l'appareil étaient telles que 1 mv = 1,2 g-poids. RÉSULTATS ET DISCUSSION. — 1. Un état de tension est apparu dans tous les fragments de tissus examinés à partir d’une température voisine de 60°C. 2. L'intensité de la tension (maximale) a augmenté progressivement avec l’âge de l’animal à partir de 3 semaines. 3. De tels résultats sont en accord avec ceux obtenus par les différents auteurs qui ont travaillé sur la peau et le tendon : Verzar, Rigby, Rasmussen et coll. 4. La température à laquelle a été atteinte la tension maximale fut de 89°C pour la peau embryonnaire, de 95°C pour la peau de nouveau-né. De la naissance à l’âge de 1 mois, la tension maximale coïncide avec une température décroissante : au plus bas, elle est
du bain et — exprimée en millivolts — la tension ayant pris place dans le fragment de tissu examiné. Les caractéristiques de l'appareil étaient telles que 1 mv = 1,2 g-poids. RÉSULTATS ET DISCUSSION. — 1. Un état de tension est apparu dans tous les fragments de tissus examinés à partir d’une température voisine de 60°C. 2. L'intensité de la tension (maximale) a augmenté progressivement avec l’âge de l’animal à partir de 3 semaines. 3. De tels résultats sont en accord avec ceux obtenus par les différents auteurs qui ont travaillé sur la peau et le tendon : Verzar, Rigby, Rasmussen et coll. 4. La température à laquelle a été atteinte la tension maximale fut de 89°C pour la peau embryonnaire, de 95°C pour la peau de nouveau-né. De la naissance à l’âge de 1 mois, la tension maximale coïncide avec une température décroissante : au plus bas, elle est de 67°C. Au-delà de 1 mois, la tension maximale est observée à une température qui augmente très progressivement avec l’âge pour atteindre 80°C à 18 mois. 5. Quand est dépassée la température de tension maximale, trois éventualités peuvent se produire : (a) il y a maintien de la tension maximale jusqu’à près de 100°C; c’est ce qui se passe avec la peau de nouveau-né; (b) il y a décroissance progressive de la tension mais le minimum reste relativement élevé; c’est ce que l’on constate pour la peau d’animaux âgés de 1 à 3 semaines ou de plus de 1 an; (c) dans les deux cas précédents, on serait en droit de parler de thermostabilité. En revanche, c’est de thermolabilité qu’il s’agit quand sont en cause des peaux d’animaux âgés de 1 mois à 1 an. La tension décroit très rapidement pour atteindre finalement un minimum très bas. 6. À la lumière de tous ces faits, il ressort que la tension qui prend place dans un fragment de peau étudié comme nous l’avons dit connaît de larges variations en fonction de l’âge des animaux qui ont fourni le tissu. En particulier, la thermostabilité de la tension apparaît maximale chez le nouveau-né,