jeanflop/post_ocr_correction2 huggingface dataset:
de première génération présentant des encoches alaires unilatérales ou bilatérales, la proportion d'individus anormaux pouvant atteindre 74,4 p. 100 (7). Pour étendre cette étude et comparer les résultats obtenus, je me suis intéressée à l'expression phénotypique du locus scute de D. melanogaster. Les Drosophiles sauvages proviennent de divers points de l'aire de répartition. Il s'agit de souches françaises (Banyuls E. B., Berry, Champetières, Charolles, Paris, Rennes, Saint-Paul-de-Vence et Villejean 2), japonaises (Fukuoda, Nagasaki, Otanu, Sapporo et Tamashina) et américaine (Oregon R. C.). Toutes sont élevées au laboratoire depuis plusieurs années. Sur 10 868 imagos de souche sauvage, observés 2 jours après l'émergence, 205 présentent une anomalie du nombre des grandes soies thoraciques (119 ont des soies surnuméraires; 86 ont moins de 8 soies). Les soies surnuméraires apparaissent toujours près des sites d'implantation des soies centrodorsales antérieures. Plus courtes et plus grêles que ces dernières, elles se rangent dans la catégorie des « anterior bristles » de Fraser (8). La situation de telles formations cuticulaires corrobore l'opinion de Scowcroft, Green et Latter (9) selon laquelle les soies postérieures ont un développement mieux canalisé que celui des soies antérieures. Les individus à soies surnuméraires sont en majorité des femelles. L'absence de certaines soies thoraciques est constatée tantôt sur le scutum, tantôt sur le scutellum. Aucune trace d'insertion n'est alors visible. Comme dans le cas précédent l'anomalie est plus fréquente chez les femelles que chez les mâles. La souche mutante scute (scG) obtenue à partir de la souche marquée y f cv se après croisement avec la souche Champetières est caractérisée par la présence constante des 4 soies centrodorsales habituelles, le nombre des soies scutellaires variant généralement de 0 à 2 (tableau I). TABLEAU I Distribution du nombre des soies scutellaires de la souche scute Nombre de soies ....... 0 1 2 3 4 TOTAL ...............( 568 187 39 0 0 794 Sexe cS .............. ) 708 56 19 0 0 795 ( 1 589 Les mâles ont en moyenne moins de soies que les femelles (x d = 0,127 ± 0,015; Xr = 0,334 ± 0,020). Les résultats des divers croisements réalisés
soies thoraciques est constatée tantôt sur le scutum, tantôt sur le scutellum. Aucune trace d'insertion n'est alors visible. Comme dans le cas précédent l'anomalie est plus fréquente chez les femelles que chez les mâles. La souche mutante scute (scG) obtenue à partir de la souche marquée y f cv se après croisement avec la souche Champetières est caractérisée par la présence constante des 4 soies centrodorsales habituelles, le nombre des soies scutellaires variant généralement de 0 à 2 (tableau I). TABLEAU I Distribution du nombre des soies scutellaires de la souche scute Nombre de soies ....... 0 1 2 3 4 TOTAL ...............( 568 187 39 0 0 794 Sexe cS .............. ) 708 56 19 0 0 795 ( 1 589 Les mâles ont en moyenne moins de soies que les femelles (x d = 0,127 ± 0,015; Xr = 0,334 ± 0,020). Les résultats des divers croisements réalisés entre les souches sauvages et la souche mutante scg sont présentés dans le tableau II. TABLEAU II Phénotypes des femelles de première génération : résultats des croisements SCG x + (an. : animaux anormaux; gén. général, sans tenir compte du sens du croisement). Phénotypes Croisement Sauvage scute Anormal Total p. 100 an. Total gén. p. 100 ou gén. sco x Banyuls 612 24 636 3,77 -Banyuls x scG 598 18 616 2,92 1 252 3,35 SCG x Berry 744 16 760 2,10 Berry x scG 610 16 626 2,55 1 386 2,31 scG x Champetières.... 697 17 714 2,38 Champetières x scG... 551 7 558 1,25 1 272 1,88 scG x Charolles 826 73 899 8,12 Charolles x scG 556 50 606 8,25 1 505 8,17 SCG x Paris 463 9 472 1,90 Paris x scG 437 10 447 2,23 919 2,07 SCG x Rennes 604 0 604 0,00 Rennes x scG 251 40 291 13,74 895 4,479 SCG x Saint-Paul 449 0 449 0,00 Saint-Paul x scG 332 0 382 0,00 831 0,00 SCG x Villejean 2 279 7 286 2,44 Villejean 2 x scG 452 11 463 2,37 749 2,40 SCG x Oregon 248 0 248 0,00 Oregon
100 an. Total gén. p. 100 ou gén. sco x Banyuls 612 24 636 3,77 -Banyuls x scG 598 18 616 2,92 1 252 3,35 SCG x Berry 744 16 760 2,10 Berry x scG 610 16 626 2,55 1 386 2,31 scG x Champetières.... 697 17 714 2,38 Champetières x scG... 551 7 558 1,25 1 272 1,88 scG x Charolles 826 73 899 8,12 Charolles x scG 556 50 606 8,25 1 505 8,17 SCG x Paris 463 9 472 1,90 Paris x scG 437 10 447 2,23 919 2,07 SCG x Rennes 604 0 604 0,00 Rennes x scG 251 40 291 13,74 895 4,479 SCG x Saint-Paul 449 0 449 0,00 Saint-Paul x scG 332 0 382 0,00 831 0,00 SCG x Villejean 2 279 7 286 2,44 Villejean 2 x scG 452 11 463 2,37 749 2,40 SCG x Oregon 248 0 248 0,00 Oregon x scG 251 0 251 0,00 scG x Fukuoda 585 10 595 1,70 Fukuoda x scG 363 1 364 0,27 959 1,14 SCG x Nagasaki 328 3 331 0,90 Nagasaki x SCG 500 0 500 0,00 831 0,95 SCG x Otaku 201 0 201 0,00 Otaku x scG 684 4 688 0,58 889 0,29 scG x Sapporo 163 4 167 2,39 Sapporo x SCG 202 7 209 3,35 376 2,93 SCG x Tamashina 394 0 394 0,00 Tamashina x scG 515 0 515 0,00 Nous avons dans ce travail étudié les liaisons de sérotonine sur divers extraits de cerveau de Bovin, recherché la distribution subcellulaire des sites correspondants et étudié au niveau des sites observés les interrelations existant entre 5-HT et LSD. Des cerveaux de Bovin prélevés 20 à 30 min après la mort de l'animal ont été disséqués, et diverses régions prélevées (en général le striatum), et homogénéisées dans du saccharose 0,32 M à 0°C à l'aide d'un appareil de Potter. L'homogénat a été centrifugé à 1 000 g pendant 5 min, le surnageant ainsi obtenu centrifugé ensuite à 17 000 g pendant 20 min pour obtenir une fraction mitochondriale brute. Deux types de techniques ont été alors utilisées
688 0,58 889 0,29 scG x Sapporo 163 4 167 2,39 Sapporo x SCG 202 7 209 3,35 376 2,93 SCG x Tamashina 394 0 394 0,00 Tamashina x scG 515 0 515 0,00 Nous avons dans ce travail étudié les liaisons de sérotonine sur divers extraits de cerveau de Bovin, recherché la distribution subcellulaire des sites correspondants et étudié au niveau des sites observés les interrelations existant entre 5-HT et LSD. Des cerveaux de Bovin prélevés 20 à 30 min après la mort de l'animal ont été disséqués, et diverses régions prélevées (en général le striatum), et homogénéisées dans du saccharose 0,32 M à 0°C à l'aide d'un appareil de Potter. L'homogénat a été centrifugé à 1 000 g pendant 5 min, le surnageant ainsi obtenu centrifugé ensuite à 17 000 g pendant 20 min pour obtenir une fraction mitochondriale brute. Deux types de techniques ont été alors utilisées selon les cas (a) celle décrite par Whittaker et coll. (1964) qui permet après lyse de la fraction mitochondriale brute et son fractionnement sur gradient discontinu de saccharose, l'obtention de fractions diverses caractérisées par leur enrichissement relatif en vésicules, en membranes microsomales, en membranes synaptosomales ou en mitochondries; (b) celle décrite par Cotman et Matthews (1971) qui permet de préparer une fraction de membranes synaptosomales purifiées à partir de synaptosomes séparés sur gradient discontinu de Ficoll, fraction qui est ensuite lysée puis subfractionnée sur un gradient discontinu de sucrose. Les essais de liaison ont été réalisés en incubant les échantillons dans un milieu tamponné à pH 7,4 en présence de concentrations variées de 5-HT tritiée. La séparation de la radioactivité fixée de la radioactivité libre a été réalisée par ultrafiltration sous vide. La fixation réversible a été déterminée en retranchant des valeurs ainsi obtenues celle de la radioactivité restée sur le filtre après addition préalable d'une concentration élevée de 5-HT non radioactive au milieu d'incubation. La radioactivité restée sur le filtre était mesurée par scintillation liquide. La mesure des quantités de protéines était réalisée par la méthode de Lowry et coll. (1951). RÉSULTATS. — Sur des extraits bruts de cerveau
décrite par Cotman et Matthews (1971) qui permet de préparer une fraction de membranes synaptosomales purifiées à partir de synaptosomes séparés sur gradient discontinu de Ficoll, fraction qui est ensuite lysée puis subfractionnée sur un gradient discontinu de sucrose. Les essais de liaison ont été réalisés en incubant les échantillons dans un milieu tamponné à pH 7,4 en présence de concentrations variées de 5-HT tritiée. La séparation de la radioactivité fixée de la radioactivité libre a été réalisée par ultrafiltration sous vide. La fixation réversible a été déterminée en retranchant des valeurs ainsi obtenues celle de la radioactivité restée sur le filtre après addition préalable d'une concentration élevée de 5-HT non radioactive au milieu d'incubation. La radioactivité restée sur le filtre était mesurée par scintillation liquide. La mesure des quantités de protéines était réalisée par la méthode de Lowry et coll. (1951). RÉSULTATS. — Sur des extraits bruts de cerveau de Bovin (surnageant 1 000 g de l'homogénat ou fraction mitochondriale brute) la 5-HT se fixe selon une progression dont l'analyse par représentation graphique de Scatchard ou de Lineweaver-Burk indique l'existence de deux types de sites de liaison; l'un correspond à une affinité relativement faible caractérisée par un coefficient de dissociation KD = 1 à 2. 10-8 M, le second que nous avons précédemment décrit chez le Rat (Fillion et coll., 1976) correspond à une affinité élevée (KD = 1 à 2. 10-9 M). La fixation observée dans ces préparations brutes met en jeu une majorité de sites de liaison de faible affinité. L'étude des courbes de fixation de la 5-HT sur diverses sous-fractions de ces extraits de cerveau indique : (a) que les sites de fixation observés sont membranaires. En effet, le pourcentage de liaison réversible par la 5-HT par rapport à la liaison totale augmente parallèlement à l'enrichissement des diverses sous-fractions en structures membranaires. Ce rapport est de 20 % dans l'homogénat brut, de 30 % dans la fraction mitochondriale brute lysée et atteint 40 % dans la fraction microsomale. Il diminue par contre dans les fractions non membranaires, notamment celles enrichies en vésicules (moins de 15%) ou
dissociation KD = 1 à 2. 10-8 M, le second que nous avons précédemment décrit chez le Rat (Fillion et coll., 1976) correspond à une affinité élevée (KD = 1 à 2. 10-9 M). La fixation observée dans ces préparations brutes met en jeu une majorité de sites de liaison de faible affinité. L'étude des courbes de fixation de la 5-HT sur diverses sous-fractions de ces extraits de cerveau indique : (a) que les sites de fixation observés sont membranaires. En effet, le pourcentage de liaison réversible par la 5-HT par rapport à la liaison totale augmente parallèlement à l'enrichissement des diverses sous-fractions en structures membranaires. Ce rapport est de 20 % dans l'homogénat brut, de 30 % dans la fraction mitochondriale brute lysée et atteint 40 % dans la fraction microsomale. Il diminue par contre dans les fractions non membranaires, notamment celles enrichies en vésicules (moins de 15%) ou en mitochondries (10%) ce qui montre qu'il s'agit ni de sites de mise en réserve, ni d'enzymes du type monoamine oxydase. L'intégrité de la molécule de ligand après sa fixation a été démontrée par chromatographie. (b) que la proportion de sites de fixation correspondant à des sites de liaison de haute affinité croît avec l'enrichissement des fractions en membranes synaptosomales. Elle atteint une valeur proche des 100% dans la fraction de membranes synaptosomales purifiées; la capacité de liaison correspondante est alors de 0,4 à 0,5 pmole de 5-HT par milligramme de protéine. Ces résultats indiquent que la fixation de haute affinité de la 5-HT (KD = 1 à 2. 10-9 M) pourrait intéresser exclusivement des sites localisés sur les membranes des terminaisons neuronales sérotonergiques alors que les sites correspondant à l'affinité plus faible (KD = 1 à 2. 10-8 M) seraient localisés sur des membranes microsomales. D'autres interprétations ne sont pas à exclure (par exemple celle faisant intervenir des états conformationnels différents du même site localisé sur des préparations différentes). La fixation de LSD étudiée sur ces mêmes types de préparation met en jeu deux types de sites sur des fractions brutes de cerveau (Kd = 3 à 4. 10-9
haute affinité croît avec l'enrichissement des fractions en membranes synaptosomales. Elle atteint une valeur proche des 100% dans la fraction de membranes synaptosomales purifiées; la capacité de liaison correspondante est alors de 0,4 à 0,5 pmole de 5-HT par milligramme de protéine. Ces résultats indiquent que la fixation de haute affinité de la 5-HT (KD = 1 à 2. 10-9 M) pourrait intéresser exclusivement des sites localisés sur les membranes des terminaisons neuronales sérotonergiques alors que les sites correspondant à l'affinité plus faible (KD = 1 à 2. 10-8 M) seraient localisés sur des membranes microsomales. D'autres interprétations ne sont pas à exclure (par exemple celle faisant intervenir des états conformationnels différents du même site localisé sur des préparations différentes). La fixation de LSD étudiée sur ces mêmes types de préparation met en jeu deux types de sites sur des fractions brutes de cerveau (Kd = 3 à 4. 10-9 M et KD = 2 à 3. 10-8 M). Sur des fractions enrichies en membranes synaptosomales ou des fractions de membranes synaptosomales purifiées la fixation de LSD s'effectue sur un type de site de liaison de haute affinité (KD = 3 à 4. 10-9 M). Les interactions entre LSD et 5-HT ont été étudiées sur des fractions de membranes purifiées. Les sites de liaison de haute affinité pour le LSD et les sites de liaison de haute affinité pour la 5-HT ne semblent pas être identiques ; aucune inhibition de type compétitif entre 5-HT et LSD n'a en effet été observée sur ces préparations. Par contre, sur des préparations brutes, des inhibitions de type compétitif ont été observées, elles intéressaient les liaisons de faible affinité (microsomales) de la 5-HT. En conclusion, il semble bien que deux types de sites de liaison membranaires existent pour la 5-HT, qu'ils sont bien distincts puisque localisés sur deux types de fractions et que la liaison de haute affinité de la 5-HT sur les sites synaptosomaux ne semble pas en relation directe avec celle du LSD. Une telle relation directe peut cependant exister au niveau des sites sérotonergiques microsomaux. L'hypothèse de l'existence d'un seul site
5-HT ont été étudiées sur des fractions de membranes purifiées. Les sites de liaison de haute affinité pour le LSD et les sites de liaison de haute affinité pour la 5-HT ne semblent pas être identiques ; aucune inhibition de type compétitif entre 5-HT et LSD n'a en effet été observée sur ces préparations. Par contre, sur des préparations brutes, des inhibitions de type compétitif ont été observées, elles intéressaient les liaisons de faible affinité (microsomales) de la 5-HT. En conclusion, il semble bien que deux types de sites de liaison membranaires existent pour la 5-HT, qu'ils sont bien distincts puisque localisés sur deux types de fractions et que la liaison de haute affinité de la 5-HT sur les sites synaptosomaux ne semble pas en relation directe avec celle du LSD. Une telle relation directe peut cependant exister au niveau des sites sérotonergiques microsomaux. L'hypothèse de l'existence d'un seul site sérotonergique sous deux conformations différentes ne doit cependant pas être totalement écartée dans la mesure où le type de préparation membranaire pourrait favoriser l'une ou l'autre des conformations. Séance du 10 janvier 1977. V. P. WHITTAKER, I. A. MICHAELSON et R. J. A. KIRKLAND, Biochem. J., 90, 1964, p. 293-305. C. W. COTMAN et D. A. MATTHEWS, Biochem. Biophys. Acta., 249, 1971, p. 380-394. O. H. LOWRY, H. J. ROSEBROUGH, A. L. FARR et R. J. RANDALL, J. Biol. Chem., 193, 1951, p. 265-275. G. FILLION, M. P. FILLION, C. SPIRAKIS, J. M. BAHERS et J. JACOB, Life Sciences, 18, 1976, p. 65-74. Institut Pasteur, Service de Pharmacologie et Toxicologie, 28, rue du Docteur-Roux, 75724 Paris Cedex 15. TOXICOLOGIE. — Étude expérimentale chez le Rat de la réduction de l'oxycarbonémie provoquée par la fumée de cigarette, au moyen d'inhalations d'oxygène à la pression atmosphérique. Note de Léon Le Bouffant, Camille Izard, Henriette Daniel, Jean-Pierre Henin, Jean-Charles Martin et Pierre Payen, présentée par M. René Truhaut. L'exposition d'animaux à de la fumée de cigarette entraîne une augmentation rapide du taux d'oxyde de carbone dans le sang, qui empêche de réaliser des inhalations intensives. Un appareillage simple est décrit, qui permet d'exposer
C. W. COTMAN et D. A. MATTHEWS, Biochem. Biophys. Acta., 249, 1971, p. 380-394. O. H. LOWRY, H. J. ROSEBROUGH, A. L. FARR et R. J. RANDALL, J. Biol. Chem., 193, 1951, p. 265-275. G. FILLION, M. P. FILLION, C. SPIRAKIS, J. M. BAHERS et J. JACOB, Life Sciences, 18, 1976, p. 65-74. Institut Pasteur, Service de Pharmacologie et Toxicologie, 28, rue du Docteur-Roux, 75724 Paris Cedex 15. TOXICOLOGIE. — Étude expérimentale chez le Rat de la réduction de l'oxycarbonémie provoquée par la fumée de cigarette, au moyen d'inhalations d'oxygène à la pression atmosphérique. Note de Léon Le Bouffant, Camille Izard, Henriette Daniel, Jean-Pierre Henin, Jean-Charles Martin et Pierre Payen, présentée par M. René Truhaut. L'exposition d'animaux à de la fumée de cigarette entraîne une augmentation rapide du taux d'oxyde de carbone dans le sang, qui empêche de réaliser des inhalations intensives. Un appareillage simple est décrit, qui permet d'exposer des Rats à des inhalations alternées de fumée de cigarettes et d'oxygène afin de réduire l'oxycarbonémie. Cette méthode, qui permet d'augmenter très fortement la dose quotidienne de fumée, n'a cependant pas conduit à l'obtention de tumeurs pulmonaires chez le Rat dans les conditions expérimentales adoptées. When animals are exposed to cigarette smoke, the concentration of carbon monoxide in blood is rapidly increased, so that intensive inhalation tests cannot be carried out. A simple apparatus is described to expose Rats alternatively to cigarette smoke and to oxygen in order to reduce the concentration of carbon monoxide in the blood. This method makes it possible to increase the daily administration of smoke considerably; nevertheless, under such conditions, lung tumors were not observed. Dans l'étude de l'action de la fumée de cigarettes sur le poumon des animaux, la possibilité de réaliser des inhalations massives de fumée est rapidement limitée par une augmentation importante du taux d'oxyde de carbone dans le sang. Avec la machine (type Hamburg II) la plus couramment utilisée, une exposition de 10 mn entraîne chez le Hamster la formation de carboxyhémoglobine au taux de 24 %. Nous avons observé dans les mêmes conditions chez le Rat une augmentation rapide de
cigarette smoke, the concentration of carbon monoxide in blood is rapidly increased, so that intensive inhalation tests cannot be carried out. A simple apparatus is described to expose Rats alternatively to cigarette smoke and to oxygen in order to reduce the concentration of carbon monoxide in the blood. This method makes it possible to increase the daily administration of smoke considerably; nevertheless, under such conditions, lung tumors were not observed. Dans l'étude de l'action de la fumée de cigarettes sur le poumon des animaux, la possibilité de réaliser des inhalations massives de fumée est rapidement limitée par une augmentation importante du taux d'oxyde de carbone dans le sang. Avec la machine (type Hamburg II) la plus couramment utilisée, une exposition de 10 mn entraîne chez le Hamster la formation de carboxyhémoglobine au taux de 24 %. Nous avons observé dans les mêmes conditions chez le Rat une augmentation rapide de l'oxycarbonémie, la quantité moyenne de CO étant de 6 ml pour 100 ml de sang, ce qui correspond à 30 % de carboxyhémoglobine, avec des valeurs maximales proches de 8 ml. Afin de réduire l'effet toxique de l'oxyde de carbone, divers auteurs ont laissé un intervalle de 3 h entre deux séances d'inhalation de fumée, ce laps de temps étant suffisant pour que le taux de COHb descende à une valeur de l'ordre de 8 %. Cette façon de procéder permet de porter à trois le nombre de séances d'inhalation de fumée par jour. Une autre possibilité consiste à faire inhaler alternativement de la fumée pendant 27 s et de l'air pur pendant 33 s. Nous avons nous-mêmes essayé de doubler le nombre de séances d'inhalation de fumée en laissant les Rats pendant 10 mn à l'air pur entre deux séances. Dans ces conditions, le taux d'oxyde de carbone dans le sang atteint dès la deuxième séance de fumée des valeurs très élevées, à la limite de la dose léthale. En conséquence, nous avons cherché à provoquer une détoxication plus rapide de l'oxyde de carbone en procédant à des inhalations d'oxygène à la pression atmosphérique. DESCRIPTION DE L'APPAREILLAGE. — La
deux séances d'inhalation de fumée, ce laps de temps étant suffisant pour que le taux de COHb descende à une valeur de l'ordre de 8 %. Cette façon de procéder permet de porter à trois le nombre de séances d'inhalation de fumée par jour. Une autre possibilité consiste à faire inhaler alternativement de la fumée pendant 27 s et de l'air pur pendant 33 s. Nous avons nous-mêmes essayé de doubler le nombre de séances d'inhalation de fumée en laissant les Rats pendant 10 mn à l'air pur entre deux séances. Dans ces conditions, le taux d'oxyde de carbone dans le sang atteint dès la deuxième séance de fumée des valeurs très élevées, à la limite de la dose léthale. En conséquence, nous avons cherché à provoquer une détoxication plus rapide de l'oxyde de carbone en procédant à des inhalations d'oxygène à la pression atmosphérique. DESCRIPTION DE L'APPAREILLAGE. — La machine utilisée pour réaliser des inhalations de fumée est du type Hamburg II. Le schéma de l'appareillage servant à soumettre les Rats à l'oxygène est représenté sur la figure. Ce dispositif permet de laisser les Rats en place dans leur récipient individuel. L'orifice d'évacuation de la fumée, située à l'origine sur le couvercle de la chambre d'inhalation est supprimé et remplacé par un orifice latéral (A), raccordé à une tubulure d'évacuation (B). Cette disposition permet d'adapter un raccord SVL 22 « Sovirel » (C) à montage et démontage rapides entre la chambre d'inhalation (D) et le bloc distributeur de fumée (E). A la fin de l'inhalation de fumée, la machine n'est pas arrêtée, de manière à maintenir une circulation d'air dans la chambre, et les animaux sont laissés en place dans leur container. Afin d'éviter la présence de corps incandescents à proximité de l'oxygène, les mégots sont retirés des porte-cigarettes. Après avoir ouvert le circuit d'oxygène et réglé le débit à 10 1/min à l'aide d'un détendeur débitmètre 0-30 1/min (F) branché sur une bouteille (G) la chambre d'inhalation est déconnectée du distributeur de fumée et tirée vers l'avant pour permettre le raccordement à la tubulure d'arrivée du gaz (H).