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était centrifugé durant quinze minutes à 6 000 g. Les jus utilisés bruts étaient employés tels quels. Pour la purification, nous avons employé la méthode suivante qui nous a été aimablement indiquée par G. Segretain. Le jus préalablement centrifugé est additionné d'un volume de phosphate disodique à 15 g/litre. On laisse reposer une demi-heure, on centrifugue longuement à 6 000 g. Le surnageant est récupéré et on lui ajoute 1/3 de volume de S04(NH4)2 saturé ; il se forme un fin précipité blanchâtre. On centrifuge à fond ; le surnageant est éliminé et le précipité est dissous dans 6 cm3
est éliminé et le précipité est dissous dans 6 cm3 d'eau bidistillée, puis on ajoute 2 cm3 de S04(NH4)2 saturé ; on centrifuge de nouveau et on redissout le précipité de la même façon que précédemment. Ces opérations sont recommencées jusqu'à ce que le surnageant soit clair. Quand ce résultat est obtenu, le précipité est repris par 15 cm3 d'eau bidistillée et mis à dialyser pendant vingt-quatre heures contre de l'eau bidistillée. (2) Voici le détail d'une mesure effectuée : 1 cm3 de jus de Tabac mosaïqué est additionné de 1 cm3 de chacun des extraits à étudier. Le témoin
1 cm3 de chacun des extraits à étudier. Le témoin est obtenu en ajoutant 1 cm3 d'eau bidistillée à 1 cm3 de jus de Tabac. Les pH sont ajustés à 5. Le contact est maintenu pendant quinze minutes à la température du laboratoire. Les feuilles de N. glutinosa sont inoculées : la moitié droite avec le virus témoin, la moitié gauche avec l'essai. Plusieurs plantes sont inoculées pour un même essai et les feuilles sont choisies de telle façon que les extraits à tester occupent toutes les positions en tenant compte de la disposition des feuilles sur N. glutinosa. 48
compte de la disposition des feuilles sur N. glutinosa. 48 47 (1) Les chiffres donnés sont des moyennes de trois mesures; il en est de même pour tous les autres tableaux. (2) La notation suivante a été employée au cours de cet exposé : Pz 0, Pelargonium zonale sain; Pz t, tumeur de Pelargonium zonale (Crown gall). Les extraits employés dans ce premier essai présentaient une nette réaction aux sels de fer et l'évaluation de la teneur en acide géraniquinique nous a donné les résultats suivants : Pz 0, 0,027 p. 100 ; Pz t, 0,036 p. 100. Après distillation
p. 100 ; Pz t, 0,036 p. 100. Après distillation au demi-volumen, les extraits sont ramenés à leur volume initial par de l'eau bidistillée. La deuxième série d'essai, exécutée avec du virus purifié, a donné les résultats suivants : NOMBRE DE LÉSIONS NATURE DE L'EXTRAIT par demi-feuille Témoins Virus + extraits. Pz 0 non distillé. 47 16 Pz 0 distillé. 31 2 Pz t non distillé 37 38 Pz t distillé. 28 27 Les extraits employés contenaient respectivement : Pz 0, 0,038 p. 100 ; Pz t, 0,041 p. 100 d'acide géraniquinique. Il ressort des chiffres précédents que l'extrait de
d'acide géraniquinique. Il ressort des chiffres précédents que l'extrait de Pelargonium sain non distillé présente une toxicité nette vis-à-vis du virus et, en tout cas, parfaitement constante au cours des essais que nous avons effectués. Le Pelargonium sain distillé semble présenter une toxicité très sensiblement moins forte que celle de l'extrait non distillé. Quant aux extraits tumoraux, ils semblent dépourvus d'activité. Ce résultat est assez facilement interprétable ; l'extrait non distillé de Pz 0 contient des essences dont la toxicité s'avère ainsi manifeste. Les 3 autres extraits n'en contiennent pas. Mais il ne faut pas oublier que tous nos extraits
Mais il ne faut pas oublier que tous nos extraits contiennent également des tannins et que l'action toxique de ceux-ci est connue depuis longtemps [13, 14] ; aussi avons-nous cherché à établir le degré de toxicité de ceux-ci et leur responsabilité éventuelle dans l'inhibition du virus par nos extraits végétaux. II. — INHIBITION DU VIRUS DE LA MOSAÏQUE DU TABAC PAR LES TANNINS. A. COMPARAISON DE LA TOXICITÉ DE L'ACIDE TANNIQUE ET DE L'ACIDE GÉRANIQUINIQUE. — Nous avons alors entrepris de comparer l'activité de l'acide tannique pur à l'éther du commerce avec l'acide géraniquinique que nous avons extrait et purifié
commerce avec l'acide géraniquinique que nous avons extrait et purifié nous-même [3]. La purification de l'acide géraniquinique que nous avons effectuée ne nous permet pas d'affirmer que notre produit est absolument pur. Freudenberg [15] indique, en effet, que chaque tannin doit être purifié par des méthodes qui lui sont particulières. L'acide géraniquinique n'ayant pas fait l'objet, à notre connaissance, d'étude systématique, nous avons employé une méthode voisine de celle qui sert à préparer l'acide tannique du commerce. Le corps obtenu dans ces conditions a l'aspect de paillettes brun rouge. Il est facilement soluble dans l'eau (surtout à chaud), sa solubilité
est facilement soluble dans l'eau (surtout à chaud), sa solubilité est même plus grande que celle de l'acide tannique. Le pH d'une solution d'acide tannique à 1 p. 100 est de 3,8 ; celui d'une solution d'acide géraniquinique à 1 p. 100 de 3,3. Dans tous nos essais, les pH des diverses solutions tanniques ont été ramenés à 5. Les résultats de nos mesures sont résumés par les chiffres suivants ; ils ont été effectués avec du virus purifié. NOMBRE DE LÉSIONS PAR DEMI-FEUILLE Témoins Virus + solution tannique 1 p. 100 56 1 0,5 p. 100 51 12 Concentration
p. 100 56 1 0,5 p. 100 51 12 Concentration 0,25 p. 100. 55 40 en acide 0,1 p. 100 77 73 tannique. 0,05 p. 100.. 83 85 0,025 p. 100. 65 68 0,01 p. 100.. 67 66 Concentration 1 p. 100 30 2 en acide 0,5 p. 100 46 30 géraniquinique. 0,25 p. 100.. 31 30 (3) Nous avons employé la méthode indiquée dans un précédent mémoire [12] en y apportant quelques modifications. Les poudres ont toujours été laissées vingt-quatre heures au contact du mélange extracteur ; l'extraction n'a pas eu lieu à chaud, afin d'éviter l'oxydation des tannins.
pas eu lieu à chaud, afin d'éviter l'oxydation des tannins. Toutes les distillations ont été opérées dans le vide à 26°. Le produit séché est redissout dans un mélange acétone-eau CH/9 30 p. 100) filtré, évaporé dans le vide, puis repris par l'eau bouillante, filtré et évaporé de nouveau dans le vide. Les produits ainsi obtenus ne contiennent pas d'azote. Il ressort de ce tableau que : 1° Aux fortes concentrations, l'acide tannique et l'acide géraniquinique semblent avoir une toxicité comparable. 2° Aux concentrations plus faibles, l'acide tannique se montre plus toxique que l'acide géraniquinique, qui se montre inactif à
plus toxique que l'acide géraniquinique, qui se montre inactif à 1/4 concentration de 0,25 p. 100, alors que l'acide tannique cesse toute action nocive à la concentration de 0,05 p. 100. 3° Nous voyons également que les concentrations de nos extraits en acide géraniquinique sont très sensiblement inférieures aux pourcentages toxiques de ce même acide. Il semble donc vraisemblable que la toxicité de PzO non distillé soit due surtout aux essences. Quant à la toxicité, légère d'ailleurs, de PzO distillé, elle pourrait être due à une substance, du reste inconnue, dont nous avions laissé prévoir l'existence dans nos travaux précédents,
dont nous avions laissé prévoir l'existence dans nos travaux précédents, quoiqu'elle se manifeste avec sensiblement moins de netteté dans le cas présent que vis-à-vis des cultures de carotte. Ces résultats nous ayant permis de constater à la fois la toxicité des tannins et aussi le fait que cette toxicité ne semblait pas égale pour tous, nous nous sommes demandé à quelles causes pourrait être imputée cette toxicité. B. ETUDE COMPARATIVE DE LA TOXICITÉ DE L'ACIDE TANNIQUE ET DE L'ACIDE GALLIQUE. — L'acide tannique à l'éther et l'acide géraniquinique appartiennent à la catégorie des tannins galliques (ils donnent une coloration bleue
la catégorie des tannins galliques (ils donnent une coloration bleue avec les sels de Fer) ; ils donnent, en effet, à l'hydrolyse de l'acide gallique et des hexoses. Nous avons songé alors que la toxicité des composés tanniques étudiés était peut-être due à l'acide gallique. Nous avons donc entrepris de comparer l'inhibition du virus de la Mosaïque du Tabac provoquée, d'une part, par l'acide tannique et, d'autre part, par l'acide gallique. Les essais ont été effectués à pH 5 dans les conditions habituelles avec du virus non purifié [4]. [1] La Justice. [2] Les Déclarations. [3] J. G. [4] M.
La Justice. [2] Les Déclarations. [3] J. G. [4] M. F. [5] G. G. [6] La Presse. [7] La Liberty. [8] Action Française. [9] Liberté de l'Esprit. [10] L'Humanité. [11] L'Aurore. [12] La Croix. [13] Le Sillon. [14] La Terreur. [15] La Semaine Catholique. [16] La Feuille des Inquisiteurs. [17] La Patrie. [18] Le Progrès. [19] La France. [20] Le Petit Journal. [21] Le Journal. [22] Le Matin. [23] L'Echo de Paris. Les chiffres ci-dessous résument les résultats obtenus : NOMBRE DE LÉSIONS PAR DEMI-FEUILLE Témoins Virus + SOLUTION tannique Concentration (2 p. 100) en acide tannique. 204 9 en
Concentration (2 p. 100) en acide tannique. 204 9 en acide tannique. 1 p. 100 163 65 Concentration (2 p. 100) en acide gallique. 190 188 en acide gallique. 1 p. 100 158 151 De l'examen de ces chiffres, deux choses ressortent avec netteté : 1° L'acide gallique n'est pas toxique, ce qui d'ailleurs n'est pas surprenant ; en effet, l'acide gallique est connu comme pouvant être un aliment pour les végétaux et, d'autre part, les travaux de True et Hunkel et ceux de Chrysostom tendaient à démontrer que l'acide gallique n'était pas toxique pour les racines de Lupinus albus.
gallique n'était pas toxique pour les racines de Lupinus albus. 2° La comparaison des résultats obtenus fait ressortir qu'en apparence, l'acide tannique est moins toxique dans la deuxième série d'expériences que dans la première. Ce résultat nous a permis de faire une remarque : la contradiction n'est qu'apparente ; elle signifie seulement qu'il n'est pas indifférent, quand on étudie l'action inhibitrice d'extraits végétaux ou de substances définies, d'employer un virus purifié ou non. En effet, comme chacun sait, les tannins et les alcaloïdes forment des complexes insolubles ; quand effectivement on estime à l'œil l'intensité du précipité qui se forme
on estime à l'œil l'intensité du précipité qui se forme au moment de l'adjonction du tannin au jus contenant le virus, on voit qu'il est beaucoup plus intense avec le jus brut qu'avec le jus purifié : une partie appréciable du tannin se combine avec la nicotine et est ainsi soustraite au milieu. Il n'est donc nullement indifférent, comme on le fait trop souvent en étudiant les extraits végétaux, d'employer du jus purifié ou non de Tabac virosé : l'effet inhibiteur d'un extrait peut être masqué par une combinaison préférentielle de l'élément toxique avec certaines substances des jus de Tabac.
de l'élément toxique avec certaines substances des jus de Tabac. Intéressé par ces résultats, nous nous sommes alors demandé s'il ne serait pas possible d'établir un rapport entre la toxicité des tannins et leur constitution chimique. C. ÉTUDE DU POUVOIR INHIBITEUR DE QUELQUES TANNINS GALLIQUES ET PYROCATÉCHIQUES. — D'après Meunier et Jamet, on peut classer les tannins en tannins galliques faiblement polymérisés et en tannins pyrogalliques fortement polymérisés ; nous nous sommes alors attachés à comparer entre eux ces deux groupes de tannins. Ayant déjà étudié l'acide géraniatannique, nous nous sommes adressés aux tannins du Thé comme nouvelle substance gallique
sommes adressés aux tannins du Thé comme nouvelle substance gallique et à ceux de l'Aubépine et du Marronnier d'Inde comme tannins pyrocatéchiques. Tous trois ont été extraits et purifiés par le procédé indiqué plus haut. Le tannin du Thé a un aspect semblable à celui de l'acide géraniatannique ; quant aux tannins pyrocatéchiques, ils se présentent sous une forme pulvérulente, légère, et de couleur grise ou brune. Le tannin du Thé donne à chaud des solutions brunes, limpides, mais par refroidissement, il se forme un précipité extrêmement abondant dont une bonne partie adhère fortement au récipient qui contient la solution
bonne partie adhère fortement au récipient qui contient la solution : le tannin du Thé est donc peu soluble à froid. Une solution à 1 p. 100 de ce tannin a un pH de 4. Le tannin du Marronnier et de l'Aubépine apparaissent comme relativement solubles. À chaud, les solutions sont limpides, à froid, il se forme un léger trouble comparable pour les deux substances envisagées et beaucoup moins intense que pour le Thé. Le pH de la solution de tannin du Marronnier à 1 p. 100 est de 4,7 ; celle de l'Aubépine est de 4,5. Nous avons alors
; celle de l'Aubépine est de 4,5. Nous avons alors étudié la toxicité de ces trois nouveaux tannins par le procédé habituel avec des solutions ramenées à pH 5 et en présence de virus purifié. Les chiffres ci-dessous résument les résultats obtenus : NOMBRE DE LÉSIONS PAR DEMI-FEUILLE Témoins Virus + solution tannique Tannin du Thé à 1 p. 100 54 30 Tannin du Thé à 0,5 p. 100. 65 36 Tannin du Marronnier à 1 p. 100. 65 45 Tannin du Marronnier à 0,5 p. 100. 70 60 Tannin de l'Aubépine à 1 p. 100 70 45 Tannin de
de l'Aubépine à 1 p. 100 70 45 Tannin de l'Aubépine à 0,5 p. 100. 74 60 Acide tannique à 1 p. 100 61 1 Acide tannique à 0,5 p. 100 42 5 De l'étude des chiffres précédents, nous tirons les conclusions suivantes : a) L'acide tannique est beaucoup plus toxique que les autres tannins étudiés ; b) Par comparaison, l'acide géraniatannique, quoique moins toxique que l'acide tannique, l'est plus que ceux du Marronnier, de l'Aubépine et du Thé ; c) Les tannins du Thé, du Marronnier et de l'Aubépine présentent des toxicités à peu près similaires et relativement assez
présentent des toxicités à peu près similaires et relativement assez faibles, quoique nettes. Il est à remarquer d'ailleurs que le tannin du Thé présente une toxicité à peu près égale aux concentrations de 1 p. 100 et de 0,5 p. 100. Ceci peut s'expliquer par la faible solubilité du tannin du Thé à froid. Il est alors à cette concentration de 0,5 p. 100 plus toxique que les tannins pyrocatéchiques. En résumé, compte tenu de la faible solubilité du tannin du Thé, et pour les substances que nous avons étudiées, les tannins pyrocatéchiques nous apparaissent comme moins toxiques que les
les tannins pyrocatéchiques nous apparaissent comme moins toxiques que les tannins galliques. Ceci est d'ailleurs en accord avec d'autres observations : c'est ainsi que si l'on éprouve des difficultés ou des impossibilités à cultiver in vitro les tissus de Chêne ou de Pelargonium, et si les tannins de ces deux végétaux se montrent toxiques, les observations de Morel ont montré que les tannins de l'Aubépine n'entraînent en rien la croissance des tissus de cette plante cultivée in vitro. L'étude de ce phénomène général, quoique varié dans ses manifestations, qu'est l'inhibition du virus de la Mosaïque du Tabac par les tannins,
du virus de la Mosaïque du Tabac par les tannins, nous a conduit à nous demander quel pouvait être le mécanisme d'action de ces derniers. III. — ÉTUDE DES CAUSES DE L'ACTION INHIBITRICE EXERCÉE PAR LES TANNINS SUR LE VIRUS DE LA MOSAÏQUE DU TABAC. L'on sait que l'action toxique des tannins a été souvent interprétée comme le résultat soit de leur action anti-oxygène, soit de leurs propriétés tannantes. Beaucoup de tannins forment, en effet, des complexes imputrescibles avec les protéines. Or, il est difficile d'admettre que les propriétés anti-oxygène des tannins puissent être rendues responsables de l'inhibition du virus
des tannins puissent être rendues responsables de l'inhibition du virus de la Mosaïque du Tabac. Il est plus vraisemblable de penser qu'il s'agit d'une association complexe entre le tannin et cette nucléoprotéine anormale qu'est le virus de la Mosaïque du Tabac. Nous sommes alors partis de l'idée que l'inhibition du virus était due à la combinaison entre ces substances acides que sont les tannins et la protéine spécifique présente dans le virus : la partie nucléique du virus ne serait pas affectée par la présence du tannin. Pour étayer cette hypothèse, nous avons donc entrepris les expériences suivantes : a)
hypothèse, nous avons donc entrepris les expériences suivantes : a) Une solution d'acide tannique à 1 p. 100 est additionnée volume à volume d'une solution d'acide ribonucléique de levure purifié. Nous avons fait varier les pH entre 2 et 9, et nous n'avons jamais obtenu de précipité ; au fur et à mesure que le pH s'élève, la coloration de la solution passe de jaune clair au rouge orangé et au brun, colorations que l'on obtient en élevant le pH d'une simple solution d'acide tannique. Tout porte donc à croire qu'aucune combinaison, ou tout au moins qu'aucun complexe insoluble ne
qu'aucune combinaison, ou tout au moins qu'aucun complexe insoluble ne se forme entre acide nucléique et tannin. b) Par contre, si nous faisons les mêmes expériences avec une solution de sérumalbumine de cheval purifiée à la concentration de 1 p. 100, nous constatons la formation d'un abondant précipité en présence d'acide tannique à 1 p. 100 : ce précipité est particulièrement net à pH 4,2. Le liquide est alors d'un blanc crémieux très caractéristique. Si l'on élève le pH de la solution par adjonction de soude N/5, nous voyons qu'à pH 7,4 la solution n'est plus que très légèrement trouble
pH 7,4 la solution n'est plus que très légèrement trouble et qu'elle a pris une coloration tirant sur le violet analogue à celle des solutions d'acide tannique pur à ce pH. A pH 8,2, toute trace de précipité a disparu et la coloration s'est encore accentuée. A pH 9,8 la solution, toujours parfaitement limpide, tire sur le brun foncé. Nous avons ainsi confirmé les vues de Danielsson [21] qui estimait qu'aux pH élevés (9,4), la solution tannin-protéine contenait les deux constituants libres et conservant chacun leur propriété particulière. Nous avons alors pensé que si les tannins agissaient en formant un
alors pensé que si les tannins agissaient en formant un complexe, uniquement avec la protéine du virus, la valeur du pH devait avoir une action fondamentale sur l'inhibition du virus : aux pH bas, l'inhibition devait être plus complète qu'aux pH élevés, où, si nos vues étaient justifiées, le virus devait récupérer sa virulence. Certes, le problème se complique du fait que les diverses souches du virus de la Mosaïque ne supportent pas avec autant d'aisance les unes que les autres les élévations de pH. C'est ainsi que pour Best [22] la majeure partie du virus de la mosaïque est
[22] la majeure partie du virus de la mosaïque est inhibée entre pH 8 et 8,9. Bawden et Pirie [23] trouvèrent qu'une inhibition très sensible ne se manifestait guère qu'à pH 10,5 ; ils trouvèrent même à pH 9,3 une curieuse exaltation de la virulence. Tenant compte de tous ces faits, nous avons conçu une expérience qui constitue le point de départ d'un travail actuellement en cours et destiné à préciser, si possible, dans ses détails le mode d'action des tannins sur les virus. Quatre solutions ont été ainsi préparées : 1 cm3 d'une solution d'acide tannique à 1 p.
: 1 cm3 d'une solution d'acide tannique à 1 p. 100 est additionné de 1 cm3 de virus purifié comme il a été indiqué, puis les pH sont ajustés respectivement à 4,9, 7, 7,9, 8,9. Deux lots de Nicotiana glutinosa ont été inoculés, le premier comportant, sur la partie gauche des feuilles, les solutions aux divers pH, la partie droite étant frictionnée avec le jus provenant de l'addition de 1 cm3 d'eau bidistillée à 1 cm3 de virus purifié (pH 6,4) ; le deuxième lot a eu comme témoin, sur la partie droite des feuilles, la solution au pH 4,9
la partie droite des feuilles, la solution au pH 4,9 (qui, comme nous l'avons vu, devait avoir perdu sa virulence), la partie gauche a été inoculée avec les solutions aux trois autres pH. Les chiffres suivants résument les résultats obtenus. NOMBRE DE LÉSIONS PAR DEMI-FEUILLE Témoins Virus + sol. tannique (Virus + sol. tannique pH 4,9) pH auxquels (7,0) sont ajustés < 7,9 1 5 les solutions. 8,9. 1 8 Les résultats de ces premiers essais ne peuvent donner lieu à des affirmations d'une netteté absolue ; cependant, il semble ressortir que, d'une façon générale, l'acide tannique en présence de
ressortir que, d'une façon générale, l'acide tannique en présence de virus à pH 4,9 est sensiblement plus toxique que lorsqu'il est employé à des pH plus élevés, ce qui tend à confirmer nos vues ; il apparaît également deux choses : a) Une tendance qui aura besoin d'être confirmée : l'activité du virus croît avec le pH de la solution tannin-virus. Cette croissance est d'ailleurs assez légère ; elle apparaît cependant comme nette, surtout dans le 1er essai. b) Le virus ne récupère pas, et d'assez loin, son activité totale. Ce phénomène peut d'ailleurs s'expliquer et fera l'objet de précisions
Ce phénomène peut d'ailleurs s'expliquer et fera l'objet de précisions ultérieures. A pH 7, les travaux déjà signalés de Best et de Bawden [22, 23] tendent à faire penser que la virulence devrait être égale à celle du témoin, mais à ce pH la dissociation du complexe virus-tannin n'est pas complète et il subsiste donc certainement une inhibition due à l'acide tannique. Aux pH plus élevés, la disparition de l'action du tannin est compensée par l'action des ions OH-. Nous sommes donc en présence de deux actions qui interfèrent en sens opposé et qu'il sera bon de dissocier. DISCUSSION. De
sens opposé et qu'il sera bon de dissocier. DISCUSSION. De l'ensemble de ce travail, il ressort : 1° Que l'action inhibitrice qu'exercent les extraits végétaux peut être due aux causes les plus variées, que les essences, les tannins, les substances protéiques, etc., interviennent et qu'en conséquence les modes d'action de ces substances sont fort différents les uns des autres. Il convient donc, dans une étude systématique de multiples extraits végétaux, de s'attacher à connaître autant que possible les éléments constitutifs importants de l'extrait. Il est même possible, sinon probable, que l'action de certaines substances (comme les tannins) puisse masquer l'activité
l'action de certaines substances (comme les tannins) puisse masquer l'activité d'autres substances présentes dans les extraits et dont l'action passe alors inaperçue. 2° L'étude de l'inhibition du virus de la Mosaïque du Tabac par divers tannins nous a montré que l'action toxique de ceux-ci n'était pas, dans le cas présent, due à une action anti-oxygène, mais à la formation d'un complexe tannin-nucléoprotéine. Il est intéressant, d'ailleurs, de remarquer que Lutz signale également la puissante action anti-oxygène de l'acide gallique ; mais celui-ci s'est montré parfaitement inactif sur le virus de la Mosaïque. Sans vouloir minimiser l'importance des propriétés anti-oxygène des
la Mosaïque. Sans vouloir minimiser l'importance des propriétés anti-oxygène des tannins, il est permis de penser que ceux-ci ont d'autres modes d'action ; il est d'ailleurs bon de rappeler que ceux qui se sont montrés peu toxiques pour le virus, le sont également peu pour les tissus végétaux cultivés in vitro. Cette dernière remarque nous incite à penser que la mesure du degré d'inhibition du virus de la Mosaïque par les tannins peut représenter une méthode commode, simple et relativement précise d'évaluation de la nocivité de ces derniers. D'autre part, elle représente le point de départ d'une recherche des raisons
elle représente le point de départ d'une recherche des raisons des différences de toxicité observées pour les divers tannins étudiés. Dans cet ordre d'idées, nous avons déjà montré que la présence d'acide gallique dans la molécule d'acide tannique n'était pas responsable de la toxicité de ce dernier ; il est évident que la structure moléculaire du tannin doit intervenir dans son pouvoir toxique : peut-être notre méthode d'étude nous permettra-t-elle d'apporter une contribution à l'étude de la structure des divers tannins et à éclaircir les relations existant entre cette structure et leur toxicité. 3° La dernière partie de ce mémoire