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de nous demander si la résistance, totale ou partielle, de certaines cultures pourvues de l'antigène indispensable à divers bactériophages doués d'affinité spécifique pour cet antigène, n'était pas due à la lysogénéité de ces cultures. La lysogénéité en effet, c'est-à-dire la propriété, effective ou potentielle, d'une culture bactérienne de mettre en liberté spontanément dans le milieu un ou plusieurs bactériophages, se rencontre très fréquemment chez de nombreuses espèces. Elle s'accompagne généralement, dans les conditions normales, d'une résistance non seulement aux bactériophages qu'on peut extraire de ces cultures, mais encore aux bactériophages apparentés (Burnet, 1932) [5]. Il importe de faire remarquer que
apparentés (Burnet, 1932) [5]. Il importe de faire remarquer que la non-lysogénéité, caractère négatif, ne peut en aucun cas être prouvée de façon absolue et définitive. La libération d'un bactériophage par une bactérie lysogène est un phénomène purement contingent. Elle dépend des conditions expérimentales et spécialement du milieu nutritif utilisé. Lorsqu'au cours de ce travail nous admettons la non-lysogénéité d'un type de S. paratyphi B, cela signifie simplement qu'entre nos mains, et avec nos méthodes, nous n'avons pas réussi à déceler l'existence d'un bactériophage dans les cultures de ce type. Le but de notre travail a été de déterminer quelle
Le but de notre travail a été de déterminer quelle part revient à la lysogénéité dans la différenciation des cultures de S. paratyphi B en types bactériophagiques d'après la méthode de Felix et Callow. MATÉRIEL ET TECHNIQUES. Nous avons eu à notre disposition, outre les cultures-types de Félix et Callow, toutes les souches de S. paratyphi B reçues par le Centre de lysotypie de l'Institut Pasteur depuis 1948, soit environ 1 500 souches. La lysotypie (1) (Nicolle, Jude et Buttiaux, 1950) [6] de ces cultures avait été pratiquée auparavant par la méthode de Felix et Callow légèrement modifiée. Les types
la méthode de Felix et Callow légèrement modifiée. Les types des cultures provenant des différentes régions de France appartenaient aux types 1 (1,4 p. 100), 3 a (0,35 p. 100), 3 a 1 (1,4 p. 100), 3 b (0,35 p. 100), Beccles (8,8 p. 100), Taunton (43,3 p. 100), Dundee (42,6 p. 100) et au groupe Z (1,5 p. 100). Le type 2 n'a jamais été rencontré. Parmi une centaine de cultures provenant d'Autriche (Nicolle, Jude et Hamon, 1951) [7], en dehors des types cités plus haut, un certain nombre de cultures présentaient des réactions anormales. Ces cultures pouvaient se
de cultures présentaient des réactions anormales. Ces cultures pouvaient se répartir en deux groupes que nous avons étiquetés momentanément 3 b (moins Beccles et Taunton) et 3 a (moins 3 b), en raison de l'absence de réaction avec ces phages. La confirmation officielle de cette manière de voir nous a été donnée par la suite pour le premier de ces types anormaux : le Dr Felix et Miss Callow, à qui nous avons envoyé les cultures du groupe 3 b (moins Beccles et Taunton), les ont reconnus comme appartenant au type B. A. O. R., récemment identifié par eux (2).
type B. A. O. R., récemment identifié par eux (2). Nous ignorons encore si les cultures 3 a (moins 3 b) représentent un type nouveau, ou bien si elles doivent être assimilées à l'un des types déjà créés par ces auteurs. La recherche de la lysogénéité a été faite par l'un ou l'autre des procédés classiques (Nicolle, Grabar et Gibert, 1946) [8]. Lorsqu'une culture a été reconnue lysogène, son phage a été extrait par la méthode suivante : Dans un ballon de Kjeldahl, contenant 10 cm3 de bouillon, on introduit environ 40 ou 50 millions de germes provenant d'une culture
environ 40 ou 50 millions de germes provenant d'une culture de vingt-quatre heures, sur gélose inclinée, de la souche à étudier. Après cinq heures d'agitation mécanique au bain-marie à 37° C, la culture est filtrée sur bougie L3, le filtrat est conservé à la glacière. Il est ensuite éprouvé sur une culture de S. paratyphi B du type 1 (toujours la souche B. 76 du type 1 de Felix et Callow). Pour cela, on ensemence une plaque de gélose (gélose, 1,5 p. 100 ; peptone UCLAF, 2 p. 100 ; NaCl, 0,5 p. 100) avec la souche type 1 et
NaCl, 0,5 p. 100) avec la souche type 1 et on dépose des gouttes du filtrat de place en place sur la surface ensemencée. Après vingt-quatre heures d'étuve, on examine l'emplacement des gouttes, à l'éclairage oblique, au moyen d'une forte loupe. Lorsque la présence de plages est constatée, on procède à l'isolement du bactériophage : on prélève avec le fil de platine un peu de la substance lysée au bord d'une plage bien séparée des autres. Ce matériel est ensuite délayé dans un peu de bouillon et mis cinq heures à l'étuve à 37° ; puis, on filtre et on
à l'étuve à 37° ; puis, on filtre et on répète l'épreuve sur la souche type 1. Après plusieurs isolements de plages, on peut considérer qu'on a obtenu un bactériophage de lignée pure. Les phages extraits des types lysogènes ont été, sans aucune exception, régénérés sur la souche type 1 (B. 76) : nous avons choisi ce type parce qu'il est dépourvu de lysogénéité vis-à-vis des autres types de l'espèce S. paratyphi B et qu'il présente, d'autre part, une sensibilité étendue, non seulement à tous les phages Vi utilisés pour la lysotypie, mais aussi à tous les phages de lysogénéité
la lysotypie, mais aussi à tous les phages de lysogénéité des autres types. Les titrages des bactériophages ainsi régénérés s'opèrent par la méthode dite « à la goutte » (Nicolle, 1949) [9]. La recherche de la gamme de lysosensibilité des cultures de S. paratyphi B se pratique de la manière suivante : 42 carrés numérotés sont tracés à l'encre à marquer le verre (formule de J.-M. Desranleau) sur la face extérieure du fond d'une boîte de gélose. La surface de la gélose est ensemencée avec la culture à étudier. Au centre de chacun des carrés, on dépose à la pipette
centre de chacun des carrés, on dépose à la pipette effilée 1 goutte d'un des phages préparés comme il a été indiqué plus haut. Après vingt-quatre heures d'étuve, les résultats sont notés. Pour simplifier la lecture des tableaux, nous n'avons tenu compte que des actions certaines (+ = action lytique positive, 0 = aucune action visible). Les phages extraits des cultures lysogènes ont été soumis à des épreuves sérologiques. Cinq sérums anti-phages ont été préparés avec les phages extraits de la culture B. 228 du type 2, de Felix et Callow, de la culture B. 1305 du type 3a1 de
Callow, de la culture B. 1305 du type 3a1 de Felix et Callow, de la culture du type Beccles de Felix et Callow, de la culture du type Taunton de Felix et Callow et d'une culture du type Dundee. La préparation des sérums et leur emploi ont été pratiqués suivant les techniques de l'injection unique au lapin et de la neutralisation à la goutte (Nicolle et Ducrest, 1948 [10]. RÉSULTATS EXPÉRIMENTAUX. 1° RECHERCHE DE LA LYSOGÉNÉITÉ DES CULTURES APPARTENANT AUX DIFFÉRENTS TYPES ET DE LA GAMME D'ACTIVITÉ DES PHAGES EXTRAITS DE CES CULTURES (tableau III). — Type 1. — Neuf
DE CES CULTURES (tableau III). — Type 1. — Neuf cultures du type 1 ont été examinées : les 2 souches types (B. 76 et B. 309) de Felix et Callow et 7 autres souches isolées en France Les filtrats se sont montrés dépourvus d'action sur les cultures des différents types. Le type 1 semble donc dépourvu de lysogénéité pour l'espèce S. paratyphi B. Remarquons que Scholtens, 1950 [11] a également constaté l'absence de lysogénéité vis-à-vis des cultures de S. paratyphi B, mais il a obtenu, à partir de cultures du type 1, un phage actif sur la souche 65
du type 1, un phage actif sur la souche 65 de Salmonella dublin (3). Type 2. — Nous n'avons pu examiner que les deux cultures types de Felix et Callow (B. 228 et B. 300). Ces deux cultures élaborent un phage qui s'est montré actif sur toutes les souches de S. paratyphi B, à l'exception des deux cultures du type 2. Le type 2 est donc lysogène et son phage possède une gamme d'activité très étendue. Ce phage est déterminant pour le type (4). Type 3a. — Trois cultures de ce type ont été utilisées, dont les deux souches types
ce type ont été utilisées, dont les deux souches types (B. 62 et B. 365). Les filtrats étaient dépourvus d'activité lytique sur les souches des différents types de S. paratyphi B. Le type 3a ne serait pas lysogène pour l'espèce S. paratyphi B ; nos résultats sont en désaccord sur ce point avec ceux de Scholtens, qui admet que la souche type 3a (B. 365) élabore le même phage que la souche type 3a1 (B. 1305). Cependant, il considère l'autre souche type 3a (B. 62) comme non lysogène. Type 3a (moins 3b) [type provisoire]. — Nous ne possédons pas de
(moins 3b) [type provisoire]. — Nous ne possédons pas de souches types. Six cultures de ce type ont été examinées ; leurs filtrats contiennent toujours un bactériophage actif sur les cultures des types 1, 3a, 3b et B. A. O. R. identique à notre type provisoire 3b (moins Beccles et Taunton). Donc, à l'opposé du type 3a, le type 3a (moins 3b) est toujours lysogène. Cette lysogénéité constante et les résistances qu'elle détermine vis-à-vis de certains phages types nous font penser que les cultures répondant à ce schéma composent un type nettement distinct du type 3a. Nous ignorons encore si
type nettement distinct du type 3a. Nous ignorons encore si ce type correspond à l'un des derniers types admis par le « Central Enteric Reference Laboratory » de Londres. Type 3a1. Les 2 souches types (B. 624 et B. 1305) et 6 autres cultures de ce type ont été étudiées. Trois cultures, dont la souche (3) Nous avons eu l'occasion de reproduire l'expérience de R. Th. Scholtens avec sa souche n° 65 de S. Dublin. Les 4 échantillons de S. paratyphi B, Type 1, que nous avons examinés se sont montrés lysogènes vis-à-vis de cette souche. Nous prions le Dr
montrés lysogènes vis-à-vis de cette souche. Nous prions le Dr Scholtens de bien vouloir agréer nos remerciements pour son envoi. (4) Voir dans la discussion du deuxième mémoire la définition des termes : phage déterminant et phage indifférent. TABLEAU III. PHAGES EXTRAITS DES TYPES ALTI TYPE (SOUCHES) 3 TYPE (SOUCHES) 3 TYPE (SOUCHES) 3^3 (3) B AO R. Beccles Taunton Dundee et 1 (9) 0 + 0 + + (4) 0 + + + + + 1 (9) 0 4-0 + + + 0 + + + + + 2 (2) 0 0 0 0 0 + 0 + 0
(2) 0 0 0 0 0 + 0 + 0 0 + + 3 a (3) 0 + 0 + + + 0 + + + + + 3 ajb 0 + 00 0 0 0 + + 0 0 + 3al B 1305 (5) 0 + 0 0 0 + 0 + 0 + + + 3al B 624 (3) 0 + 0 0 0 0 0 + '? 0 0 0 + —3 b (5) 0 + 0 + + + 0 + + + + | + 3 6 (moins Beccles et Taunton) B A.O.R.(il), 0 +
3 6 (moins Beccles et Taunton) B A.O.R.(il), 0 + 0 + + + 0 0 0 + + + Beccles (25) 0 + 0 0 0 + 0 + 0 + + + .----0 L t —— .-------* Taunton (62) 0 + 0 0 0 0 0 0 0 ou + 0 0 + —— Dundee (83) 0 + 0 0 0 0 0 0 0 0 0 + +, action lytique positive. 0, aucune action visible. Les chiffres gras entre parenthèses indiquent le nombre des cultures utilisées. Exemple : « Phages Taunton (10) » signifie que les pliages
: « Phages Taunton (10) » signifie que les pliages extraits de 10 cultures du type Taunton ont été étudiés. « Dundee (83) » signifie que 83 échantillons du type Dundee ont été éprouvés. Les phages extraits des cultures du type B. 624, ont donné des filtrats et des phages actifs sur les souches des types 1, 2, 3 a, 3 a 1 (souche B. 1305 et 4 autres du même type), 3 b, Beccles, Taunton, Dundee et B. A. 0. R. Cinq cultures, dont la souche type B. 1305, fournissent des filtrats et des phages actifs sur les souches
fournissent des filtrats et des phages actifs sur les souches des types 1, 3 a, 3 b et B. A. 0. R. Le type 3 a 1 est donc lysogène, mais il montre une double lysogénéité. Nous verrons plus loin, au paragraphe consacré à la sérologie, que certaines souches de ce type, les plus fréquentes (groupe de la souche type B. 624), possèdent 2 phages : un phage principal commun à toutes les souches de ce type et un phage secondaire, actif sur 1, 2, 3 a, 3 a 1 (B. 1305), 3 b, Beccles, Taunton, Dundee et B. A.
(B. 1305), 3 b, Beccles, Taunton, Dundee et B. A. 0. R., qui manque dans le second groupe de souches (groupe de la souche type B. 1305). Ce phage secondaire est toujours le même chez les souches qui le possèdent. Seul le phage principal commande l'appartenance au type (phage déterminant). Le second phage est donc dit indifférent. Notons que Scholtens a également signalé l'hétérogénéité de ce type sous le rapport des propriétés lysogènes. Type 3 b. — Les 2 souches types de Félix et Callow (B. 87 et B. 656) et 3 autres cultures ont été étudiées. Les filtrats n'ont
et 3 autres cultures ont été étudiées. Les filtrats n'ont montré aucune action sur les souches types. Le type 3 b peut être considéré comme non lysogène vis-à-vis de l'espèce S. paratyphi B. Ces résultats sont en accord avec ceux de Scholtens. Type 3 b (moins Beccles et Taunton) [désignation provisoire ; Nous ne possédons pas de souches types. Onze cultures provenant toutes d'Autriche avaient donné à la lysotypie un schéma rappelant celui du type 3 6, mais sans réaction avec les phages Beccles et Taunton. D'autre part, les souches de ce genre étaient toutes lysogènes. Elles contenaient un phage
de ce genre étaient toutes lysogènes. Elles contenaient un phage unique, le même pour toutes. Nous étions dès lors autorisés à les considérer comme formant un type autonome. Le phage de ces 11 cultures montre une gamme d'activité très étendue : types 1, 2, 3 a (moins 3 b), 3 a 1 (B. 1305), 3 b, Beccles. Ces cultures ont été adressées au Dr Félix. Celui-ci les a identifiées comme appartenant au nouveau type B. A. 0. R. Les réactions lytiques anormales présentées à la lysotypie par ces cultures nous avaient déjà clairement montré que celles-ci étaient nettement différentes de
avaient déjà clairement montré que celles-ci étaient nettement différentes de celles du type 3 b, et qu'il convenait de créer pour elles un type distinct. Type Beccles. — La souche type de Félix et Callow et 3 autres cultures essayées sur 214 cultures des divers types ont donné des filtrats actifs sur les cultures des types 1, 3 a et 3 b. Le type Beccles est lysogène, on verra plus loin que la sérologie nous a permis d'isoler 2 bactériophages dans les filtrats de quelques souches du type Beccles. Type Taunton. — La souche type de Félix et Callow et
Taunton. — La souche type de Félix et Callow et 9 autres cultures essayées sur 214 cultures ont permis d'obtenir des filtrats et des phages actifs sur les cultures des types 1, 3 a, 3 b et Beccles. La sérologie et la préparation de types artificiels au moyen des phages isolés nous ont montré que les cultures du type Taunton contenaient toujours 2 bactériophages. Contrairement au type 3 a 1, dont le phage secondaire ne joue aucun rôle dans l'appartenance au type, les 2 phages du type Taunton sont déterminants (voir notre second mémoire). Type Dundee. — Nous n'avons pas
(voir notre second mémoire). Type Dundee. — Nous n'avons pas eu de culture type. Treize cultures de souches provenant de diverses régions de France ont été essayées sur 214 souches de types divers. Tous les filtrats et les phages extraits de ces cultures agissent sur les types 1, 2, 3 a, 3 a 1 (B. 1305), 3 b, B. A. O. R. et Beccles. La sérologie et la préparation de types artificiels ont mis en évidence la présence de 2 phages, tous deux déterminants. Groupe Z. — Nous n'avons pu examiner que 2 souches de ce groupe. Elles sont toutes
examiner que 2 souches de ce groupe. Elles sont toutes les deux lysogènes et le phage de l'une agit sur les souches du type Dundee. ÉTUDE SÉROLOGIQUE DES PHAGES DE LYSOGÉNÉITÉ EXTRAITS DES DIFFÉRENTS TYPES BACTÉRIOPHAGIQUES DE « S. PARATYPHI » B. — Phages du type 2. Nous avons dû limiter cette étude sérologique aux 2 souches types de Felix et Callow, puisque le Centre de lysotypie n'a reçu aucune souche de ce type. Les phages des souches B. 228 et B. 300 ne semblent pas apparentés sérologiquement, malgré la similitude de leur gamme d'activité. Les bactériophages isolés de ces
similitude de leur gamme d'activité. Les bactériophages isolés de ces souches types ne sont pas neutralisés par les sérums préparés avec les phages des types 3 a 1, Beccles, Taunton, Dundee et 3 a [moins 3 b] (6). Inversement, le sérum préparé avec le phage 2 provenant de la souche B. 300 ne donne lieu à aucune neutralisation avec les phages extraits des types 3 a 1, Beccles, Taunton, Dundee et B. A. O. R. Les phages extraits du type 2 forment donc un groupe sérologique distinct de celui des phages extraits de tous les autres types. Le sérum anti-type
phages extraits de tous les autres types. Le sérum anti-type 2 neutralise très légèrement les phages extraits des cultures 3 a (moins 3 b) [5 p. 100 des corpuscules à la dilution à 1 p. 100]. Phage du type provisoire 3 a (moins 3 b). — L'étude sérologique des phages extraits des cultures 3 a (moins 3 b) a montré qu'ils forment la transition entre les phages extraits des cultures (6) Il ne nous a pas été encore possible de préparer un sérum avec le phage des types B. A. O. R. Nous y reviendrons ultérieurement. du type 2 et
O. R. Nous y reviendrons ultérieurement. du type 2 et le groupe des bactériophages primaires extraits des types 3 a 1, Beccles, Taunton et Dundee. Groupe des phages uniques ou primaires, facilement isolables des types 3 a (moins 3 b), 3 a 1, Beccles et Taunton. — La sérologie ne permet pas de différencier ces divers bactériophages entre eux. Leur taux de neutralisation croisée très voisin confirme de façon évidente leur étroite parenté. A titre d'exemple, par rapport à un sérum donné de ce groupe, l'étude sérologique donne les résultats suivants : TAUX DE NEUTRALISATION par le sérum obtenu avec
suivants : TAUX DE NEUTRALISATION par le sérum obtenu avec le phage extrait du type Taunton Phage unique extrait du type 3 a (moins 3 b). 60 p. 100 au 1/5 000. Phage primaire extrait du type 3 a 1 50 p. 100 au 1/5 000. Phage primaire extrait du type Beccles 20 p. 100 au 1/5 000. Premier phage extrait du type Taunton. 50 p. 100 au 1/5 000. Premier phage extrait du type Dundee 40 p. 100 au 1/2 000. La technique de neutralisation que nous avons employée s'est donc montrée incapable de confirmer les différences très nettes
s'est donc montrée incapable de confirmer les différences très nettes révélées par l'étude de la gamme d'activité et par la préparation des types artificiels. Il devrait être possible de la rendre plus efficace. Notons cependant que Scholtens a rencontré les mêmes difficultés, puisqu'il considère tous ces phages comme identiques. D'autre part, l'étude sérologique a mis en évidence un deuxième phage dans les cultures des types Beccles, Taunton et certaines cultures du type 3 a 1 (B. 624 de Felix et Callow). Ce second phage a pu être isolé à partir des plaques formées malgré l'action du sérum spécifique obtenu avec
des plaques formées malgré l'action du sérum spécifique obtenu avec le premier phage purifié. Le filtrat régénéré, mais non purifié, de certaines cultures a été soumis à l'action neutralisante d'un sérum. Deuxième phage 3 a 1 extrait du groupe B. 624. — Alors que dans certains cas (phages extraits du type 3 a 1 (B. 1305), le filtrat régénéré d'une culture de ce type subissait une neutralisation totale avec une dilution au 1/100 d'un sérum préparé au moyen d'un bactériophage du groupe 3 a 1 (B. 1305) rigoureusement purifié, pour certains filtrats régénérés du groupe 3 a 1 (B. 624),
certains filtrats régénérés du groupe 3 a 1 (B. 624), on obtenait exceptionnellement une neutralisation partielle avec la même dilution de sérum. Les plaques apparues malgré le sérum étaient manifestement produites par un second phage résistant à l'action neutralisante. Ce second phage, facilement isolable à partir de ces plaques, présentait, en outre, une gamme d'activité différente. La présence de ce second phage dans les cultures du groupe 3 a 1 (B. 624) explique les discordances observées dans la gamme d'activité des filtrats des cultures de ce groupe par rapport à ceux du groupe 3 a 1 (B. 1305). Deuxième phage
ceux du groupe 3 a 1 (B. 1305). Deuxième phage du type Beccles. — Nous avons constaté également, par l'étude sérologique, la présence d'un second phage dans les cultures du type Beccles. L'obtention de ce phage à partir des filtrats n'a pu être réalisée qu'exceptionnellement dans les conditions de nos expériences. Deuxième phage du type Taunton. — La neutralisation partielle par le sérum préparé avec un phage purifié extrait du type Taunton a révélé également la présence d'un second phage. Le second phage du type Taunton possède une individualité propre. La sérologie n'a permis de l'assimiler à aucun des autres
La sérologie n'a permis de l'assimiler à aucun des autres phages déterminants isolables directement à partir des filtrats : les sérums préparés avec les phages extraits des types 2, 3 a 1, Beccles, Taunton et Dundee ne produisent aucune neutralisation du second phage extrait du type Taunton. Nous nous proposons de chercher ultérieurement s'il peut être identifié à l'un des seconds phages des autres types. La sérologie des phages extraits du type Taunton montre que les filtrats utilisés dans le tableau 1 ne contiennent presque toujours que le premier phage. L'isolement des 2 bactériophages ou du second exclusivement a été
L'isolement des 2 bactériophages ou du second exclusivement a été exceptionnel dans les conditions opératoires que nous avons adoptées. Sur 20 filtrats d'origine très variable, préparés en vue de la sérologie, 2 seulement contenaient le second phage à l'état pur. Il s'agissait de 2 S. paratyphi B du type Taunton originaires du département du Bas-Rhin. Ce second phage, malgré les difficultés pour l'obtenir, existe chez toutes les souches du type Taunton, car la préparation des types artificiels nous a montré que le second phage était déterminant pour l'appartenance au type, au même titre que le premier phage. Phages extraits du
au même titre que le premier phage. Phages extraits du type Dundee. Les taux de neutralisation de 20 filtrats de cultures appartenant au type Dundee varient entre 1/7 et 1/10 d'une part, et 1/50 et 1/60 d'autre part, suivant qu'on utilise pour le titrage du bactériophage traité par le sérum neutralisant la culture type 1 (44231) ou la culture type 1 (B. 76). Les taux de neutralisation croisée permettent, dans le cas du type Dundee, une discrimination relativement facile du premier phage déterminant (facilement isolable) de ce type, d'avec ceux qui ont été isolés des autres types ; le bactériophage
qui ont été isolés des autres types ; le bactériophage déterminant l'appartenance au type 3 a 1 s'est montré le plus apparenté, avec un taux de neutralisation de 5 p. 100 à la dilution à 1/5 000. L'étude sérologique confirme donc les déductions déjà tirées de l'examen de la gamme d'activité : les bactériophages isolés des différentes cultures du type Dundee sont très voisins, sinon identiques. L'étude de sérologie prouve, d'autre part, la présence d'un second bactériophage dans les cultures du type Dundee par la neutralisation partielle, avec le sérum au 1/100, du matériel de lysogénéité isolé de certaines souches.
au 1/100, du matériel de lysogénéité isolé de certaines souches. Comme pour les cultures des types Beccles et Taunton, la difficulté de l'isolement de ce deuxième phage laisse toute sa valeur à la méthode d'identification du premier phage déterminant par sa gamme d'activité. La sérologie montre, en effet, par la neutralisation totale de ces phages Dundee aux dilutions à 1/100, 1/500 et 1/1 000 du sérum, que les cultures du type Dundee libèrent presque toujours exclusivement leur premier phage déterminant dans les conditions d'isolement précitées. La méthode sérologique établit la proche parenté des phages primaires extraits des cultures du type
proche parenté des phages primaires extraits des cultures du type Dundee avec les phages primaires extraits des types Beccles et Taunton. Phage du type B. A. O. R. — Nous n'avons obtenu aucune neutralisation de ce phage par les sérums préparés avec les phages précédents. Le phage du type B. A. O. R. est sérologiquement distinct des autres phages étudiés. DISCUSSION. 1° Caractère constant de l'état lysogène ou de l'état non lysogène suivant le type. Nos résultats montrent clairement que certains types, les plus nombreux, sont toujours lysogènes (types officiels 2, 3 a 1, B. A. O. R., Beccles, Taunton,