jeanflop/post-ocr-correction huggingface dataset:
de polysaccharide, étaient laissées deux heures à l'étuve et ensuite pendant vingt heures environ à la glacière. Les dilutions (sérum et polysaccharide) ont été faites avec de l'eau physiologique. Tous les essais ont été faits en double. On notait les résultats pour la première fois après deux heures d'étuve, la lecture définitive avait lieu le lendemain. Les résultats étaient évalués comme il suit : ++ précipitation très nette à grands flocons; + précipitation nettement visible; - précipitation à peine visible à l'œil nu ; — absence de réaction. Le titre du sérum était représenté par la dilution maximale du sérum
du sérum était représenté par la dilution maximale du sérum qui provoquait une précipitation évaluée au moins en ++. Le titrage de chaque sérum était toujours accompagné d'un essai parallèle avec le sérum étalon, dont la valeur précipitante avait été déterminée soigneusement d'avance plusieurs fois ; elle était égale à 1/30 pour le sérum étalon de type I et à 1/40 pour celui du type II. Les tableaux I et II représentent les titres de tous les sérums dont nous avons évalué le titre suivant la méthode que nous venons de décrire. LA DÉTERMINATION DE L'AZOTE DANS LE PRÉCIPITÉ SPÉCIFIQUE
de décrire. LA DÉTERMINATION DE L'AZOTE DANS LE PRÉCIPITÉ SPÉCIFIQUE (d'après Heidelberger, Sia et Kendall). La méthode consiste à évaluer par micro-analyse la quantité d'azote contenue dans un précipité qu'on obtient en faisant agir sur un volume donné de sérum non dilué une quantité déterminée de polysaccharide en concentration constante. En voici la technique : On verse dans 2 tubes à essai stériles (l'expérience est faite en double) 0 c. c. 5 de sérum, 1 cent, cube de solution physiologique et 0 c. c. 5 de polysaccharide dilué dans du liquide physiologique dans la proportion de 1 1.000, de sorte
liquide physiologique dans la proportion de 1 1.000, de sorte que le volume total contenu dans chaque tube soit égal à 2 cent, cubes. Les tubes fermés par des bouchons stériles sont soigneusement agités et placés pendant deux heures à l'étuve et ensuite à la glacière. Le lendemain, on centrifuge à froid pendant dix minutes à petite vitesse (1.000 tours par minute) et on enlève complètement le liquide surnageant. Les éprouvettes sont ensuite mises dans de l'eau glacée et le précipité lavé par 2 cent, cubes d'une solution à 1/20.000 de polysaccharide spécifique. On mélange bien le contenu en ayant
de polysaccharide spécifique. On mélange bien le contenu en ayant soin de détacher le culot du fond des tubes. Ceux-ci sont placés pendant une demi-heure à la glacière. Nouvelle centrifugation avec élimination du liquide surnageant. On verse dans chaque tube 0 c. c. 5 d'eau distillée, on agite le liquide jusqu'à ce que le précipité détaché du fond forme une suspension homogène: Il faut ajouter quelques gouttes de NaOH normale ajoutées à ces émulsions pour amener après agitation la dissolution complète du précipité. Les dilutions sont transportées dans des ballons de Kjeldahl pour micro-analyse; la quantité d'azote est évaluée, d'après
de Kjeldahl pour micro-analyse; la quantité d'azote est évaluée, d'après n'importe quelle méthode (nous nous sommes servis de la méthode de Pregl). La quantité d'azote trouvée, multipliée par 20, représente la teneur en protéine spécifique précipitée. Les résultats de nos expériences (21 sérums) sont représentés sur les tableaux I et II 60 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR ÉVALUATION DES AGGLUTININES DANS LES SÉRUMS. La technique de l'agglutination a été celle dont on se sert d'habitude. On versait dans un tube à essai 0 c. c. 5 de chaque dilution; on y introduisait ensuite 0 c. c. 1 d'une culture de dix-huit
introduisait ensuite 0 c. c. 1 d'une culture de dix-huit heures de nos souches virulentes de pneumocoques (standardisés); le tout était laissé deux heures à l'étuve et ensuite dix-huit à vingt heures à la température du laboratoire. Les résultats ont été évalués de la façon suivante : + + + précipitation intense, liquide surnageant clair: + + agglutination bien visible à l'oeil nu; + agglutination à peine visible à l'oeil nu; — absence de réaction. Le titre agglutinant était représenté par la dilution maxima qui montrait une agglutination évaluée au moins par -|—|-. Les titres des sérums étudiés sont représentés
moins par -|—|-. Les titres des sérums étudiés sont représentés sur les tableaux I et II. DÉTERMINATION DES BACTÉRIOTHÉOPINES DANS LES SÉRUMS. Pour déterminer le pouvoir bactériotrope des sérums, nous avons opéré suivant la méthode de Neufeld et Boenck : des quantités décroissantes de sérums sont additionnées de pneumocoques et de leucocytes et placées un certain temps à l'étuve à 37°. Des frottis colorés sont préparés avec le contenu de chaque tube et on détermine au microscope la dilution maxima qui présente, par comparaison avec le sérum normal, une phagocytose marquée. Voici les détails de l'expérience : Un cobaye de
marquée. Voici les détails de l'expérience : Un cobaye de 300-370 grammes reçoit, en injection intraperitonéale, 10 cent, cubes de bouillon stérile chauffé à 37°. L'animal est tué quinze à dix-huit heures après l'injection; le péritoine est lavé à l'eau physiologique stérile chauffé à 37° et additionnée de citrate de sodium (solution à 0,1 p. 100). L'exsudat aspiré est lavé deux fois avec la solution physiologique et centrifugé à très petite vitesse. Le précipité leucocytaire est émulsionné dans le liquide physiologique, chauffé à 37° et amené à l'opacité d'un test de lecithine diluée à 1 : 3; 0,1 cent, cube
de lecithine diluée à 1 : 3; 0,1 cent, cube de dilutions décroissantes de sérum à titrer est introduit dans des tubes à essai ; on se sert comme contrôle d'un tube avec 0,1 cent, cube de sérum normal en dilution égale à la plus petite dilution du sérum à titrer. On ajoute ensuite 1 goutte de culture de dix-huit heures de pneumocoque TITRAGE DES SÉRUMS ANTIPNEUMOCOCCIQUES 61 homologue au sérum étudié et 2 gouttes de l'émulsion leucocytaire. Les tubes sont bien agités et laissés à l'étuve quarante-cinq minutes. Pendant le premier quart d'heure, on agite plusieurs fois les tubes.
le premier quart d'heure, on agite plusieurs fois les tubes. Après quarantecinq minutes, le liquide surnageant est aspiré d'abord avec une pipette et ensuite avec du papier filtre; on répartit le reste avec une anse en platine sur lame de verre, on fixe les préparations à l'alcool-éther et on les colore au bleu de méthylène dilué. Les lames sont soigneusement étudiées et les résultats notés de la manière suivante : + + + phagocytose très intense : la majorité des leucocytes est bourrée de cocci; des pneumocoques libres se rencontrent par exception. + + phagocytose intense : la majorité des
par exception. + + phagocytose intense : la majorité des leucocytes contient des pneumocoques, mais pas en quantité très grande. Les cocci libres se rencontrent en nombre considérable. + phagocytose à peine marquée : quelques leucocytes contiennent des pneumocoques en petit nombre. La plupart des cocci sont libres en dehors des leucocytes. — absence de phagocytose. Le titre bactériotrope était représenté par la dilution maxima qui provoquait une phagocytose évaluée au moins en -j—|-. Chaque titrage de sérum inconnu était accompagné des tubes de contrôle avec le sérum étalon, dont le titre bactériotrope était préalablement déterminé par des titrages multiples.
le titre bactériotrope était préalablement déterminé par des titrages multiples. RÉSULTATS DES EXPÉRIENCES. Les tableaux I et II montrent les valeurs quantitatives des différents anticorps contenus dans nos sérums. Sur ces tableaux, les sérums sont disposés suivant leurs titres préventifs décroissants. Le titre des anticorps est représenté par la quantité d'anticorps contenue dans 1 cent, cube de sérum. Comme il ressort de ces tableaux, les quantités d'anticorps dans les sérums augmentent lorsque leurs titres préventifs montrent que plus le pouvoir prophylactique est grand, plus les valeurs des autres anticorps augmentent, et plus il diminue, plus les autres valeurs sont petites
et plus il diminue, plus les autres valeurs sont petites et même nulles. C'est ainsi que plusieurs sérums du type II, dont le pouvoir prophylactique était nul, étaient également dénués de toute action agglutinante, précipitante et bactériotrope. Or, une question se pose : est-il possible de juger, d'après ces derniers titres, du pouvoir préventif d'un sérum ou, autrement dit, l'augmentation des titres des anticorps est-elle en raison directe du pouvoir préventif? Pour répondre à cette question, il serait peut-être plus commode d'évaluer les différents titres des anticorps en unités préventives, en comparant les données que nous avons obtenues dans l'étude
en comparant les données que nous avons obtenues dans l'étude de nos sérums et celle des sérums étalons. Pour déterminer ces valeurs, on peut s'adresser à la formule suivante : L.r - Lv - 1 - f dans laquelle : U.r = quantité d'unités préventives dans 1 cent, cube de sérum à étudier. U,= quantité d'unités préventives dans 1 cent, cube de sérum étalon. Tx = titre d'anticorps donné dans 1 cent, cube de sérum à étudier. T,= titre d'anticorps donné dans 1 cent, cube de sérum étalon. Pour notre sérum étalon du type 1 (série 493), les éléments de
sérum étalon du type 1 (série 493), les éléments de cette formule ont les valeurs que voici : U = 300, T. précipit. = 30. T. azote spécif. =0,324, T. agglut. = 150 et T. bactériotrope = 50. Pour le sérum étalon du type II (série 9), ces valeurs sont : U=100, T. précipit. = 50, T. azote spécif. = 0,336, T. agglut =160 et T. bactériotrope = 80. En présence de ces données et des titres des anticorps dans un sérum à étudier, on peut, à l'aide de cette formule, évaluer la quantité d'unités préventives de tout sérum. Nous
formule, évaluer la quantité d'unités préventives de tout sérum. Nous avons mis dans le tableau III les titres prophylactiques de nos sérums évalués d'une part par l'épreuve de protection chez les souris, d'autre part, par la recherche des anticorps et la substitution des données trouvées dans la formule citée plus haut. En examinant ce tableau, on constate que les titres préventifs, trouvés in vivo, accusent une concordance presque parfaite avec ceux déterminés in vitro par la méthode de précipitation avec le polysaccharide spécifique. La concordance est presque absolue dans les sérums du type I. Les titres des trois sérums du
sérums du type I. Les titres des trois sérums du type II, à pouvoir préventif assez grand, présentent également une concordance satisfaisante. Moins bons sont les résultats obtenus dans les recherches comparatives du titre préventif in vivo et par le dosage d'azote dans les précipités. Il en est de même du titre préventif calculé d'après les titres agglutinant et bactériotrope. Donc, dans l'immunisation du cheval, l'augmentation des précipitines spécifiques est en raison directe de l'augmentation du pouvoir protecteur tandis que le titre des anticorps agglutinants et bactériotropes ne monte que parallèlement au titre préventif. Or, l'évaluation de l'effet curatif d'un
parallèlement au titre préventif. Or, l'évaluation de l'effet curatif d'un sérum étant basée sur son pouvoir protecteur, la quantité d'agglutinines et de bactériotropines contenues dans le sérum ne peut pas servir pour juger de son efficacité. Le tableau IV est une représentation graphique des résultats que nous avons obtenus. Le dessin n° 1 montre la courbe des titres préventifs des sérums du type I, obtenus par titrage in vivo; les autres représentent les courbes des titres préventifs de ces mêmes sérums calculés d'après les données des réactions immunobiologiques. Il est facile de constater que la première courbe concorde en tous
facile de constater que la première courbe concorde en tous points avec la deuxième. Les trois dernières courbes, tout en montrant, dans leur allure générale, une certaine concordance s'éloignent notablement de la courbe n° 1. Les résultats de nos expériences ont montré que la détermination du titre précipitant par rapport aux polysaccharides spécifiques peut servir de méthode de titrage commode des sérums antipneumococciques, la réaction de précipitation classique (détermination de la dilution maxima) étant de plus préférable au dosage de l'azote spécifique dans le précipité; cette dernière méthode étant beaucoup plus compliquée et moins précise. La réaction de précipitation telle
plus compliquée et moins précise. La réaction de précipitation telle que nous venons de l'exposer, peut remplacer avantageusement le titrage plus coûteux et plus compliqué du pouvoir antimicrobien chez la souris, au moins dans les titrages préalables des saignées d'épreuve. RÉACTION DE PRÉCIPITATION AVEC LE POLYSACCHARIDE OBTENU PAR MÉTHODE SIMPLIFIÉE. Les résultats que nous avons obtenus dans nos expériences nous ont incités à rechercher une méthode plus simple pour préparer le polysaccharide spécifique; les difficultés auxquelles on se heurte dans sa préparation pouvant présenter un obstacle sérieux dans l'évaluation du pouvoir curatif des sérums antipneumocoques par précipitation. Les recherches comparatives
pouvoir curatif des sérums antipneumocoques par précipitation. Les recherches comparatives que nous avons poursuivies dans cette direction ont permis d'établir que le polysaccharide préparé d'une façon plus simple et plus rapide d'après les indications de Zozaya, Boyer et Clark, peut remplacer avec avantage celui de Avery et Heidelberger. TECHNIQUE SIMPLIFIÉE POUR PRÉPARATION DU POLYSACCHARIDE SPÉCIFIQUE (d'après Zozaya, Boyer et Clark). — Une culture de pneumocoques sur bouillon phosphaté, âgée de huit jours, est évaporée jusqu'au 1/15 de son volume initial. Cette solution est refroidie et précipitée par de l'acide trichloracétique cristallisé en quantité correspondant à 5 p. 100 du volume
cristallisé en quantité correspondant à 5 p. 100 du volume total. Ce précipité est rejeté après centrifugation immédiate; le liquide surnageant, translucide, d'un brun foncé, est additionné d'alcool en quantité égale à 1,5 de son volume. Le précipité obtenu contient le polysaccharide. Celui-ci est dissout dans l'eau et purifié par nouvelle précipitation à l'alcool. Enfin une dernière précipitation est produite par de l'acétone. Le polysaccharide du type I ainsi préparé ne cédait à celui préparé par la méthode de Avery et Heidelberger ni par la quantité d'azote, ni par son titre précipitant; cependant son rendement était quatre fois plus considérable.
titre précipitant; cependant son rendement était quatre fois plus considérable. L'évaluation du titre des sérums du type I par comparaison avec les titres précipitants obtenus avec le produit préparé d'après la méthode de Heidelberger, Sia et Kendall a montré une concordance parfaite. CONCLUSIONS. 1° La standardisation biologique des sérums antipneumococciques des types I et II par l'épreuve de protection chez la souris est très coûteuse et compliquée; 2° L'étude comparative des valeurs de différents anticorps, contenus dans les sérums antipneumococciques des types I et II en vue d'un titrage in vitro de ces sérums a permis de constater que :
vitro de ces sérums a permis de constater que : a) La quantité de précipitines spécifiques dans un sérum antipneumococcique (par rapport aux polysaccharides) est en raison directe de son titre prophylactique; la quantité d'agglutinines et de bactériotropines, tout en augmentant lorsque s'élève le pouvoir préventif, ne lui est cependant pas directement proportionnelle. b) La détermination du titre précipitant est une méthode commode, sûre et peu coûteuse de titrage des sérums antipneumococciques, elle est surtout à recommander dans les évaluations préalables. c) La méthode classique (détermination de la dilution maximale) donne des résultats plus précis que le dosage de l'azote
donne des résultats plus précis que le dosage de l'azote dans le précipité spécifique. d) Dans le titrage des sérums antipneumococciques par précipitation on peut employer avec avantage le polysaccharide préparé d'après la méthode simple et rapide de Zozaya, Boyer et Clark. TITRAGE DES SÉRUMS ANTIPNEUMOCOCCIAQUES BIBLIOGRAPHIE 1. Avery, Chickering, Cole et Dochez. Monogr. Rockefeller Inst. med. Res., n° 7, 1917. 2. Felton. J. of Infect. Dis., 43, 1928, p. 531. 3. Felton. J. of Immunol. 21, 1931, p. 341. 4. Parish. J. of Pathol. a. Bacteriol., 33, 1930, p. 729. 5. Trevan. J. of Pathol. a. Bacteriol., 33, 1930,
729. 5. Trevan. J. of Pathol. a. Bacteriol., 33, 1930, p. 733. 6. Bear et Clapp. J. of Immunol, 23, 1932, p. 91. 7. Smith. J. of Pathol. a. Bacteriol., 35, 1932, p. 509. 8. Friedlander, Sobotka et Banziotf. J. exp. Med., 47, 1938, p. 79. 9. Heidelberger et Avery. J. of exp. Med., 38, 1933, p. 73. 10. Zozaya, Boyer et Clark. J. of exp. Med., 52, 1930, p. 471. 11. Heidelberger, Sia et Kendall. J. of exp. Med., 52, 1930, p. 477. 12. R. Blox. J. of Immunol, 25, 1933, p. 149. ANALYSE DES RÉCEPTEURS DU VIBRION CHOLERIQUE
25, 1933, p. 149. ANALYSE DES RÉCEPTEURS DU VIBRION CHOLERIQUE ET DU VIBRION EL TOR Par R.-TH. SCHOLIENS. (Institut d'Hygiène Tropica de Leyden. Directeur : professeur P. C. FLUX.) La méthode de l'analyse des récepteurs, inaugurée par Weil et Félix, à propos de leurs recherches sur les souches Proteus X, Xs, X19 a apporté beaucoup de lumière dans plusieurs questions sérologiques. On peut dire que l'antigène d'un microbe est de nature complexe, si celui-ci stimule l'organisme animal à former des anticorps qualitativement différents, par exemple deux agglutinines de nature différente. Les souches Proteus XII stimulent l'organisme animal à former deux
Les souches Proteus XII stimulent l'organisme animal à former deux agglutinines, l'une spécifique et agglutinant les souches XH en petits flocons, l'autre agglutinant ces souches en grands flocons et non spécifique. La preuve de la différence qualitative de ces agglutinines est donnée par des expériences d'absorption. Comme l'ont démontré Weil et Félix, on peut en absorbant avec une émulsion de bacilles de la forme XO faire baisser le titre pour la forme XO, tandis que le titre pour la forme XH reste à peu près identique. Or, le pouvoir agglutinant de ce sérum ne peut pas être lié à la
de ce sérum ne peut pas être lié à la même agglutinine; après absorption avec une souche XO, il reste une fraction dans le sérum qui n'a pas d'affinité pour la forme XO, mais qui agglutine la forme XH. Généralement, on peut dire que lorsque l'on peut enlever d'un sérum, en absorbant avec une certaine souche, le pouvoir agglutinant pour quelques souches, tandis que pour d'autres souches le titre n'est pas influencé, les pouvoirs agglutinants ne peuvent pas être liés à la même agglutinine. Après les résultats obtenus avec les souches Proteus, ce fut d'abord dans le groupe des Salmonella
souches Proteus, ce fut d'abord dans le groupe des Salmonella que la méthode de l'analyse des récepteurs trouva son application. Plusieurs auteurs comme Shousha et Balteanu se sont prononcés pour la présence d'un récepteur thermostable dans le groupe des vibrions, tandis que d'autres, comme Brustearts, le niaient. On peut démontrer l'absence d'un récepteur thermolabile en démontrant un même abaissement de titre après l'absorption par deux émulsions de même densité, l'une chauffée et l'autre non chauffée, en déterminant le titre du sérum avec des émulsions de vibrions non chauffées. J'ai travaillé avec les souches suivantes : Ch.130 et Ch.129, isolées à
avec les souches suivantes : Ch.130 et Ch.129, isolées à Batavia en 1927; Ch. 43 et Ch.11, isolées à Batavia par Flu en 1914; R.A.K. et T.U.F., isolées en Irak; ElTor A, qui donna naissance à la question El Tor en 1905, isolée par Gotlschlich, et les souches El Tor 6 et El Tor 47 rough et smooth, isolées par Doorenbos en 1930. J'absorbais les agglutinines d'un sérum préparé avec Ch.130 par deux émulsions de R.A.K. de même densité, l'une chauffée et l'autre non chauffée. Le titre fut déterminé avec R.A.K. et El Tor 47 rough. Le résultat est donné
R.A.K. et El Tor 47 rough. Le résultat est donné dans le tableau I. TABLEAU I. — Sujet Ch. 130 titré avec R.A.K. et El Tor 47 rough, avant et après absorption avec R.A.K. DILUTIONS TITRE AVEC 1/100 1/200 1/1,600 1/3,900 1,6 400 1/12,800 Sérum Ch. 130 avant toute absorption : El Tor 47 rough. + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + R.A.K. + + + + + + + + + + + Sérum Ch. 130 après
+ + + + + + Sérum Ch. 130 après absorption par une émulsion de R.A.K. non chauffée : El Tor 47 rough. + ++ + ++++ + + + + + + + R.A.K. + + Sérum Ch. 130 après absorption avec une émulsion de R.A.K. chauffée à 100° pendant deux heures : El Tor 47 rough. + ++ + + +++ ++ + R.A.K. — — — — — Les émulsions, chauffée et non chauffée, ont produit le même effet. Seulement l'antithèse entre la disparition presque complète du pouvoir agglutinant pour R.A.K. et le changement comparativement minime du
pouvoir agglutinant pour R.A.K. et le changement comparativement minime du titre pour El Tor 47 rough était inexplicable. Le titre pour R.A.K. s'était abaissé plus de quinze fois et pour El Tor 47 rough deux fois au plus. Cela était inexplicable en acceptant la présence d'une seule agglutinine homogène dans le sérum Ch. 130 qui agglutinerait les souches Ch. 130 et R.A.K. quantitativement différemment. Or, dans ce cas, si par absorption d'une partie de cette agglutinine homogène, le titre pour R.A.K. s'abaisse plus de quinze fois, le titre pour El Tor 47 rough s'abaisserait proportionnellement, ou à peu près jusqu'à
Tor 47 rough s'abaisserait proportionnellement, ou à peu près jusqu'à 1/800. Pour mieux démontrer l'influence minime de l'absorption avec R.A.K. sur le titre de sérum Ch. 130 pour El Tor 47 rough, j'ai ajouté au liquide obtenu après la première absorption avec R.A.K. encore une fois la même émulsion de R.A.K. en quantité égale et j'ai centrifugé après un séjour d'une heure à l'étuve. Le résultat de la détermination du titre avec la souche El Tor 47 rough était conforme à celui du tableau I aussi bien qu'après un troisième contact avec l'émulsion de R.A.K. Du liquide obtenu après absorption
contact avec l'émulsion de R.A.K. Du liquide obtenu après absorption avec R.A.K., il était facile d'absorber toutes les agglutinines avec la souche El Tor 47 rough. Dans le sérum Ch. 130, il existe donc une fraction d'agglutinine qui agglutine El Tor 47 rough, mais n'a pas d'affinité pour R.A.K. Cette fraction n'agglutine pas R.A.K. et ne peut pas être absorbée par R.A.K. Maintenant, il faut examiner si le comportement de la souche El Tor 47 rough envers le sérum Ch. 130 avant et après l'absorption avec R.A.K. est aussi une propriété d'autres souches. En même temps, il sera nécessaire de
propriété d'autres souches. En même temps, il sera nécessaire de s'assurer par une détermination plus exacte s'il y a abaissement de titre pour la souche El Tor 47 rough après absorption avec R.A.K. Dans ce but le sérum Ch. 130 était titré avec les souches et aux dilutions données dans le tableau II et III. Dans le tableau II, on voit déjà les vibrions classés dans deux groupes, l'un agglutiné jusqu'à 1/20,000, l'autre agglutiné jusqu'à 1/12,000 comme R.A.K. Après absorption avec R.A.K., les différences s'accentuent, le titre pour l'un des groupes s'abaisse fort peu, tandis que le pouvoir agglutinant pour
groupes s'abaisse fort peu, tandis que le pouvoir agglutinant pour l'autre des groupes disparaît à peu près tout à fait. TABLEAU II. — Sérum Ch. 130 titré avec les souches indiquées avant toute absorption. DILUTIONS TITRE AVEC 1/100 1/200 1/400 1/800 1,6 400 1/12,800 El Tor 47 smooth. + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + El Tor 47 rough. + + + + + + + + + + + + + + + + + Ch-130 +
+ + + + + + + + Ch-130 + + + + + + + + + + + Ch-129 + + + + + + + + + + + T-IVF. + + + + + + + + + + + El Tor A' + + + + + + + + + + Dans un deuxième et troisième contact avec R.A.K., le titre ne s'abaisse plus du tout. C'est la preuve que cette fraction d'agglutinine n'a pas d'affinité pour R.A.K., de ce fait, ces agglutinines diffèrent qualitativement de celles qui ont été absorbées par R.A.K. Ces