jeanflop/post-ocr-correction huggingface dataset:
zone immédiatement environnante (fig. 1). On note par ailleurs que tout le fond du tissu transplanté est entièrement nécrosé. Deuxième série (adénocarcinome mammaire) : Congélation rapide et congélation lente, décongélation très rapide. Conservation : soixante-deux jours à -79°. Les inoculations à l'animal demeurent négatives. Sur les préparations des cultures in vitro, fixées au bout de quatre jours et colorées, on n'observe dans les tissus normaux ou tumoraux qui ont été congelés et décongelés rapidement aucune croissance ni activité vitale. Dans quelques fragments provenant de la tumeur originelle on distingue des noyaux pycnotiques avec vestiges de nucléole sur un fond entièrement
noyaux pycnotiques avec vestiges de nucléole sur un fond entièrement nécrosé. A partir des fragments de tumeurs congelées rapidement et décongelées lentement, on observe, par contre, autour des fragments explantés, quelques signes d'activité enzymatique de digestion du plasma, mais sans manifestation nette de croissance cellulaire. D'une manière générale, nos résultats concordent avec ceux que Passey, Dmochowski et coll. [14, 41, 42], opérant dans des conditions analogues (mais avec congélation d'une durée de six à douze heures), ont obtenus à peu près simultanément, et dont nous avons eu connaissance depuis l'achèvement de notre travail. CONCLUSION. Nos expériences montrent que, si la
de notre travail. CONCLUSION. Nos expériences montrent que, si la congélation à basse température (-79° C), lente ou rapide, suivie de décongélation lente ou rapide, détruit la majeure partie des cellules du tissu normal ou tumoral exposées à ce traitement, elle n'assure néanmoins pas la stérilisation complète du tissu. Nos essais prouvent qu'au bout de cent vingt et un jours de conservation à -79° C après congélation relativement lente, un fragment de tumeur explanté est capable in vitro d'exercer une action enzymatique sur le milieu et de présenter une indiscutable croissance fibroblastique. C'est à cette croissance fibroblastique que nous croyons
croissance fibroblastique. C'est à cette croissance fibroblastique que nous croyons devoir attribuer le résultat positif de l'inoculation à l'animal. En résumé, nos expériences confirment la possibilité de préserver la vie cellulaire à basse température pendant plusieurs mois, dans des conditions où la congélation relativement lente suivie de la décongélation rapide paraît avoir réuni les meilleures conditions pour cette survie partielle. Ces essais sont de nature à rendre improbables les explications attribuant à un virus seul, agissant en l'absence du transfert de cellules vivantes, les résultats d'inoculation de matériel tumoral conservé à basse température, même pendant une durée prolongée. BIBLIOGRAPHIE [1]
à basse température, même pendant une durée prolongée. BIBLIOGRAPHIE [1] C. H. ANDREWES. Brit. Med. J., 14 janvier 1950, 81. [2] G. BARSKI. Ces Annales, 1948, 74, 1. [3] W. A. BARNES et J. FURTH. Am. J. Cane., 1937, 30, 75. [4] H. T. BLUMENTHAL, L. WALSCH et D. GREIFF. Canc. Res., 1950, 10, 205. [5] H. T. BLUMENTHAL et L. WALSCH. Proceed. Soc. exp. Biol. a. Med., 1950, 73, 63. [6] C. BREEDIS et J. FURTH. Science, 1938, 88, 551. [7] C. BREEDIS, W. A. BARNES et J. FURTH. Proceed. Soc. exp. Biol. a. Med., 1937, 36, 220. [8]
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1908, 1, 226. [48] J. P. WEBSTER. Ann. Surg., 1944, 120, 431. [49] WOLFF et ZONDEK. Virchow's Arch., 1925, 154, 1. ÉTUDE QUANTITATIVE DE L'ACTIVITÉ GRANULOPEXIQUE DU SYSTÈME RÉTICULO-ENDOTHÉLIAL PAR L'INJECTION INTRAVEINEUSE D'ENCRE DE CHINE CHEZ LES DIVERSES ESPÈCES ANIMALES I — MÉTHODE DÉTUIDÉ QUANTITATIVE DE L'ACTIVITÉ GRANULOPEXIQUE DU SYSTÈME RÉTICULO-ENDOTHÉLIAL PAR L'INJECTION INTRAVEINEUSE DE PARTICULES DE CARBONE DE DIMENSIONS CONNUES par B.-N. HALPEHN, G. BIOZZI, G. MENÈ et B. BENACERHAF. (Laboratoire de Pathologie expérimentale de la Clinique médicale propédeutique de l'Hôpital Broussais La Charité [M. PASTEUR VALLERY-RADOT], C. N. R. S. et C. N. R. Italien.) Depuis que le
R. S. et C. N. R. Italien.) Depuis que le système réticulo-endothélial a été défini et caractérisé par les travaux d'Aschoff et Kyono [1], de nombreux travaux ont été entrepris pour en étudier l'activité et la fonction. Pour mettre en évidence l'activité phagique du système réticulo-endothélial, les auteurs ont employé soit des solutions de colorants vitaux [2], soit des suspensions de particules, telles que l'argent colloïdal, le manganèse, l'encre de Chine, etc. [2, 3, 4, 5, 6]. Les méthodes comportant l'injection intraveineuse d'encre de Chine étudient plus particulièrement l'activité granulopexique des cellules du système réticulo-endothélial du lit vasculaire en contact
des cellules du système réticulo-endothélial du lit vasculaire en contact direct avec le sang, les particules de carbone généralement utilisées étant incapables de traverser la paroi des vaisseaux, et n'étant pas éliminées par les émonctoires. Cependant les auteurs ayant eu recours à l'encre de Chine ont injecté des suspensions de particules de carbone dont ils ne connaissaient ni la taille, ni le degré de dispersion. Le sort de l'encre de Chine en fonction de la quantité d'encre injectée n'a jamais fait l'objet d'une étude particulière ; le mode de distribution de l'encre dans les divers organes suivant l'espèce animale n'a
de l'encre dans les divers organes suivant l'espèce animale n'a jamais été abordé sous l'angle quantitatif. Les auteurs se sont contentés d'étudier la distribution du carbone dans les organes par les moyens histologiques, sans déterminer quantitativement ni la vitesse de disparition des particules de carbone du sang, ni leur accumulation dans les organes. C'est précisément en raison de ces variables si multiples, qu'il est impossible de tirer de ces expériences des conclusions valables quant à l'activité réelle du système réticulo-endothélial. Le but de ce travail est d'étudier les effets de l'injection intraveineuse d'une suspension d'encre bien définie en poids et
l'injection intraveineuse d'une suspension d'encre bien définie en poids et quant au degré de dispersion, et d'établir une méthode quantitative qui permette l'exploration fonctionnelle du système réticulo-endothélial ainsi que la définition des limites dans lesquelles cette méthode est valable. Cette technique est basée sur l'étude quantitative de la cinétique de la disparition des particules de carbone de la circulation et de leur distribution dans les organes après l'injection intraveineuse de l'encre de Chine. Dans ce mémoire nous ne relaterons que les résultats obtenus chez deux espèces animales : le Rat et la Souris. ÉTUDE EXPÉRIMENTALE. A. CINÉTIQUE DE LA DISPARITION
et la Souris. ÉTUDE EXPÉRIMENTALE. A. CINÉTIQUE DE LA DISPARITION DES PARTICULES DE CARBONE DE LA CIRCULATION. — a) Chez le Rat. Technique: L'encre de Chine commerciale Pelikan a été employée. L'examen de cette encre au microscope électronique a montré sa dispersion parfaite et la taille homogène de ses particules d'environ 200 A [fig. 1] (1). Cette encre contient 80 mg de carbone par millilitre. Les recherches de Wright [7] ayant montré l'importance du colloïde protecteur dans le maintien de la dispersion parfaite de l'encre in vivo, celle-ci a été diluée dans du sérum physiologique contenant 1 p. 100 de
diluée dans du sérum physiologique contenant 1 p. 100 de gélatine pour une dilution d'encre allant jusqu'à 30 p. 100, et 2 p. 100 de gélatine pour les solutions plus concentrées. Des doses de carbone variables et exprimées en milligramme de carbone pour 100 g d'animal ont été injectées dans la veine caudale du rat. Nous avons employé, pour les doses de 5, 16, 32 mg de carbone pour 100 g, une dilution à 20 p. 100 de notre encre et pour les doses de 48 et 64 mg de carbone par 100 g, une dilution d'encre respectivement à 30
carbone par 100 g, une dilution d'encre respectivement à 30 et 40 p. 100. Pour contrôler la stabilité et la dispersion des particules d'encre en présence du sang, des expériences de contrôle ont été effectuées in vitro ; celles-ci ont montré que dans les limites des concentrations employées les particules restaient en suspension stable soit dans le sérum, soit dans le sang citraté. (1) Nous remercions très vivement M. le Dr Pierre Lépine, chef du Service de Virologie à l'Institut Pasteur, d'avoir bien voulu exécuter cette photo dans son service. Microphotographie au microscope électronique de l'encre de Chine employée. Gross.
Microphotographie au microscope électronique de l'encre de Chine employée. Gross. : X 55 000. (Service des virus de l’Institut Pasteur.) Forcé le sac palpébral on bute contre le maxillaire que tapisse le plexus veineux ophtalmique, on voit alors le sang monter dans la pipette par capillarité. Ce procédé permet de faire de nombreux prélèvements à des temps précis ; il est parfaitement bien supporté par l’animal. Le sang prélevé est mis dans 2 ml de solution de carbonate de soude à 1 p. 1000 et les dosages de carbone ont été effectués à l’aide de l’électrophotomètre de Meunier en lumière
été effectués à l’aide de l’électrophotomètre de Meunier en lumière rouge. La teneur en carbone du sang est déterminée par comparaison avec une courbe d’étalonnage. Les doses suivantes de carbone ont été injectées : 8, 16, 32, 48, 64 mg par 100 g de poids de l’animal. Les prélèvements de sang ont été effectués : deux, quatre, six, dix, vingt, trente-cinq, cinquante minutes après l’injection de l’encre. 474 rats blancs de poids variant de 110 à 140 g ont été utilisés pour ces essais. Résultats. — Les animaux ont parfaitement bien supporté les injections d’encre de Chine et n’ont présenté
bien supporté les injections d’encre de Chine et n’ont présenté aucun trouble immédiat, à l’exception de la dose de 64 mg par 100 g qui a causé un état de choc passager, avec des tremblements généralisés de l’animal. Les taux sanguins de carbone, en fonction du temps et de la dose d’encre injectée, sont rapportés comme moyennes arithmétiques des résultats obtenus pour chaque dose sur la figure 4. Pour les doses de 8 et 16 mg de carbone par 100 g, un petit nombre d’animaux seulement présentent des valeurs éloignées de la moyenne ; chez ces animaux l’autopsie a révélé
de la moyenne ; chez ces animaux l’autopsie a révélé toujours des organes (foie et rate) dont le poids ne correspondait pas à leur taille. On déduit de la figure 4, qu’avec la dose de 8 mg par 100 g, la disparition du carbone de la circulation se fait d’une manière lente et progressive. La courbe affecte une forme parabolique régulière. Avec la dose de 16 mg par 100 g, la courbe de disparition des particules de carbone du sang est sensiblement parallèle à la précédente, mais décalée dans sa hauteur et l’encre demeure plus longtemps dans la circulation. Cependant,
hauteur et l’encre demeure plus longtemps dans la circulation. Cependant, l’allure de la courbe change totalement lorsqu’on injecte une dose double de la précédente, c’est-à-dire 32 mg par 100 g. La cinétique de la disparition de l’encre de Chine s’accélère considérablement et l’épuration du sang se fait à une cadence beaucoup plus rapide qu’avec la dose inférieure. Cette accélération de la disparition de l’encre de Chine de la circulation s’accroît encore avec les doses supérieures : 48 et 64 mg par 100 g. Avec la dose de 64 mg par 100 g par exemple, on ne trouve dans le sang,
100 g par exemple, on ne trouve dans le sang, dix minutes après l’injection, que 0,45 mg de carbone par millilitre alors qu’au même moment le taux sanguin après une injection de 16 mg de carbone par 100 g (c’est-à-dire une dose quatre fois inférieure) est de 1,12 mg de carbone par millilitre. On voit ainsi que la cinétique de la disparition du carbone de la circulation revêt chez le rat une allure tout à fait particulière et apparemment paradoxale : plus la quantité de carbone injectée est élevée, plus rapidement se fait son épuration sanguine. Nous trouverons plus loin
rapidement se fait son épuration sanguine. Nous trouverons plus loin l’explication de ce comportement inattendu. b) Chez la Souris. — Technique : Nous avons employé, chez cette espèce animale, les mêmes méthodes que chez le rat. Les doses de carbone injectées ont été respectivement : 8, 16, 24, 32, 48 et 64 mg de carbone par 100 g de poids de l’animal. Ces doses correspondent à celles employées chez le rat. L’encre a été diluée dans du sérum physiologique contenant 1 p. 100 de gélatine, soit à 1/10 pour la dose de 8 mg par 100 g, soit à 1/5
dose de 8 mg par 100 g, soit à 1/5 pour les doses supérieures. L’étude a été faite sur 150 souris dont le poids variait entre 15 et 25 g. Résultats. — Les animaux ont parfaitement bien supporté les injections d’encre de Chine et n’ont présenté aucun trouble immédiat, à l’exception des doses de 48 et 64 mg par 100 g qui ont causé les mêmes troubles que chez le rat. Chez cette espèce animale également, les doses d’encre supérieures à 24 mg par 100 g, bien que supportées sans trouble immédiat, déterminent une mortalité voisine de 100 p. 100
trouble immédiat, déterminent une mortalité voisine de 100 p. 100 dans les vingt-quatre heures qui suivent l’injection. La cinétique de la disparition du carbone de la circulation chez la souris après l’injection intraveineuse de doses croissantes d’encre de Chine est schématisée par les courbes réunies dans la figure 5. Ainsi, par l’injection de doses croissantes de carbone, non seulement on en élève les taux sanguins, mais on augmente considérablement la durée de présence de l’encre dans la circulation. À cet égard, on note chez la souris une différence importante dans la modalité de l'épuration sanguine entre les doses allant de
la modalité de l'épuration sanguine entre les doses allant de 8 à 32 mg par 100 g et pour les doses supérieures à 32 mg par 100 g. FIG. 5. — Cinétique de l'épuration sanguine des particules de carbone de 100 Å, injectées par voie veineuse chez la Souris, en fonction de la dose injectée. En ordonnées : taux sanguins de carbone en mg/ml. En abscisses : temps en minutes. Ainsi, avec la dose de 8 mg par 100 g, le taux sanguin de carbone atteint, deux minutes après l'injection, 0,54 mg par millilitre. Avec cette dose l'encre a pratiquement
0,54 mg par millilitre. Avec cette dose l'encre a pratiquement disparu de la circulation vingt minutes après son injection. Avec la dose de 16 mg par 100 g le taux sanguin s'élève, deux minutes après l'injection, à un chiffre de 1,50 mg par millilitre et l'encre n'a disparu de la circulation qu'après cinquante minutes environ. Pour les doses de 24 et 32 mg par 100 g les courbes de carbonémie sont sensiblement parallèles aux précédentes, bien que décalées dans leur hauteur. Mais l'allure de la courbe de l'épuration sanguine change lorsqu'on injecte une dose de carbone de 48 mg par
lorsqu'on injecte une dose de carbone de 48 mg par 100 g. Avec cette dose on observe une accélération de l'épuration qui a pour conséquence une chute de la carbonémie plus rapide qu'avec la dose inférieure. Le même phénomène s'observe avec la dose de 64 mg par 100 g. Ainsi le phénomène d'accélération de l'épuration sanguine, du fait de l'injection des doses élevées de carbone, que nous avons décrit chez le rat, peut également s'observer chez la souris. Cependant ce phénomène n'est provoqué, chez la souris, qu'avec des doses plus que doubles de celles nécessaires pour l'obtenir chez le rat.
que doubles de celles nécessaires pour l'obtenir chez le rat. En outre, le comportement à cet égard de la souris est caractérisé par une grande irrégularité d'un animal à l'autre. Non seulement le phénomène de l'accélération de l'épuration sanguine chez cette espèce animale est beaucoup plus atténué que chez le rat, mais il est aussi beaucoup plus irrégulier ; même aux doses qui le déclenchent, certains animaux accusent le phénomène d'accélération de l'épuration, alors que d'autres ne le présentent pas. Cette irrégularité de la réponse de la souris contraste avec le comportement très homogène du rat. B. DISTRIBUTION DU CARBONÉ
le comportement très homogène du rat. B. DISTRIBUTION DU CARBONÉ DANS LES ORGANS. L'étude de la répartition de l'encre de Chine dans les organes nous a paru être un corollaire indispensable pour compléter la connaissance du sort des particules de carbone lors de leur disparition de la circulation. Technique : La distribution dans l'organisme de l'animal de l'encre de Chine injectée a été étudiée quantitativement par la récupération pondérale du carbone dans les organes suivants : foie, rate, poumons, reins. Cette détermination a été faite avec les mêmes doses d'encre employées pour l'étude de la cinétique de la disparition des
employées pour l'étude de la cinétique de la disparition des particules de carbone du sang. Les animaux n'ont été sacrifiés, en vue de ces investigations, que lorsque, l'encre a complètement disparu de la circulation. Chez l'animal saigné à blanc par section des carotides, l'organe prélevé est soigneusement pesé et introduit dans une solution de lessive de soude à raison de 10 ml par gramme d'organe frais. On ajoute ensuite 15 ml d'alcool à 95° pour chaque gramme d'organe. Le tout est porté à l'ébullition pendant quinze minutes. À ce moment, l'hydrolyse de l'organe doit être complète. On obtient ainsi deux
l'hydrolyse de l'organe doit être complète. On obtient ainsi deux couches superposées : l'inférieure qui contient l'encre de Chine ; la supérieure, alcoolique, colorée par les pigments et ne contenant pas de trace de carbone. Après refroidissement on prélève par aspiration la couche supérieure. On ajoute alors 5 ml d'alcool à 95° par gramme d'organe. On refait bouillir dix minutes et on élimine l'alcool comme précédemment. Cette dernière opération est répétée quatre fois. On ajoute alors à la solution contenant l'encre de Chine 15 ml d'eau distillée par gramme d'organe et de l'acide chlorhydrique concentré jusqu'à un pH d'environ 1.
et de l'acide chlorhydrique concentré jusqu'à un pH d'environ 1. L'encre s'agglutine et tombe au fond. On centrifuge, on rejette le liquide surnageant et on lave avec de l'eau acidulée. On rejette le surnageant et on reprend par le même volume d'alcool, puis deux fois par le même volume d'acétone. On sèche à l'étuve à 100° jusqu'à poids constant et on obtient par pesée, après tarage préalable du tube, la quantité de carbone dans l'organe. Pour contrôler l'exactitude de notre technique, nous avons réalisé une vingtaine d'essais in vitro, en ajoutant à l'organe des quantités connues d'encre de Chine et
ajoutant à l'organe des quantités connues d'encre de Chine et en les soumettant aux mêmes opérations. Dans tous ces essais, nous avons retrouvé 98 à 100 p. 100 du carbone additionné. Chez le rat, les dosages ont été faits individuellement pour chaque animal. L'étude a porté sur 30 rats, soit 6 rats par dose. Chez la souris, les taux de carbone trouvés dans les organes étant trop petits pour permettre un dosage pondéral avec les organes d'un seul animal, nous avons fait ces déterminations sur les organes de trois animaux mêlés ensemble. Parallèlement, on a étudié chez les animaux l'aspect
mêlés ensemble. Parallèlement, on a étudié chez les animaux l'aspect histologique des organes afin d'établir la topographie cellulaire de la distribution du carbone. Le foie, la rate, les poumons et les reins ont été ainsi examinés histologiquement. Résultats : Les résultats obtenus chez le rat sont présentés dans les figures 6 et 7. Avec une dose d'encre de 8 à 16 mg de carbone par 100 g, seuls la rate et le foie (et la moelle osseuse dont la teneur en carbone n'a pas pu être précisée en raison des difficultés pratiques) accumulent les granules de carbone. Le foie et
difficultés pratiques) accumulent les granules de carbone. Le foie et la rate se partagent à eux deux environ 90 p. 100 de l'encre injectée. Avec la dose de 32 mg par 100 g la rate ne peut plus, dans ces conditions expérimentales, accroître son pouvoir granulopexique ; elle atteint le taux maximum qui se situe aux environs de 2 à 3 mg par gramme. Le foie augmente sa capacité d'absorption mais non pas proportionnellement à la quantité de carbone injectée. Le poumon, qui ne contenait pas de quantité dosable de carbone pour les doses précédentes, retient avec cette dose une
carbone pour les doses précédentes, retient avec cette dose une quantité de carbone sensiblement égale à celle de la rate. Pour la dose de 48 mg de carbone p. 100 g, le taux splénique demeure stationnaire, alors que le foie tend à accroître son coefficient de granulopexie. Le poumon apparaît, cette fois, comme étant l'organe le plus riche en carbone si on évalue celui-ci par gramme d'organe frais. Au dernier stade, qui correspond à la dose de 64 mg de carbone pour 100 g, la rate et le foie semblent avoir atteint leur plafond de granulopexie alors que la participation
avoir atteint leur plafond de granulopexie alors que la participation du poumon s'accroît considérablement jusqu'à atteindre une dose énorme de 21 mg par gramme d'organe frais. A cette dose considérable, on trouve également une petite quantité de carbone (moins de 1 mg par gramme) dans le rein. Les résultats obtenus chez la souris diffèrent de ceux du rat, comme on peut le voir d'après les figures 8 et 9. Si nous considérons la répartition de l'encre de Chine dans les organes de cet animal, nous constatons qu'avec la dose de 16 mg de carbone p. 100 g, le foie et