jeanflop/post-ocr-correction huggingface dataset:
bientôt une sorte de frange d'où partent des filets. Franges et filets ont des caractères spéciaux suivant les bactéries utilisées et même, dans certains cas, suivant la variété microbienne ensemencée. Il se fait en outre en surface et sur une profondeur d'un centimètre en moyenne, une culture diffuse plus ou moins abondante, qui, avec certains microbes, s'infiltre entre la paroi et le milieu de culture. Il se constitue ainsi une culture en nappe qui descend peu à peu vers le fond du tube. On conçoit qu'étant donnée la très faible résistance opposée par ce milieu à l'extension des colonies, les
résistance opposée par ce milieu à l'extension des colonies, les caractères de celles-ci, dans certains cas au moins, pourront apparaître avec le maximum de netteté au niveau de la frange ou dans les colonies isolées. Par ailleurs la culture en nappe, représentant une culture identique mais en couche extrêmement mince, apportera en diverses circonstances des précisions intéressantes. La densité du milieu est cependant suffisante pour que le tube puisse être agité même assez vivement sans dissocier la frange. On voit seulement celle-ci onduler gracieusement dans le milieu intermédiaire. Caractères spéciaux de cultures de quelques bactéries — À titre d'exemple nous
de cultures de quelques bactéries — À titre d'exemple nous allons examiner les caractères fournis par des streptocoques, des pasteurella et diverses salmonella. a) Voici comment se présentent les cultures de sept souches de streptocoques prises au hasard dans notre collection; ces souches proviennent du cheval, cinq sont d'origine pulmonaire et deux d'origine articulaire. Après quinze heures à 37° les caractères respectifs sont les suivants : Souche L. M. : Frange grêle, finement granuleuse à l'examen à la loupe. Souche B. : Frange très développée, homogène avec des filets. Souche A. : Frange courte, à contours nets et sinueux; à
A. : Frange courte, à contours nets et sinueux; à la loupe elle se montre formée par des colonies non confluentes; quelques-unes sont nettement isolées à l'extrémité inférieure de la frange. Souche P. C. : Culture identique à la précédente. Souche S. : Frange homogène analogue à celle de la souche B. Souche arthrite IV : Frange nettement délimitée, filets très courts. À la loupe les colonies se montrent incomplètement confluentes; celles qui se trouvent à l'extrémité libre de la frange prennent la forme de petits cônes à sommet inférieur, cônes très finement granuleux. Souche arthrite V Frange peu développée,
cônes très finement granuleux. Souche arthrite V Frange peu développée, filets rares et larges; à la loupe aspect finement granuleux, toutefois on voit des éléments floconneux en certains points. Après vingt-quatre heures à l'étuve : Souche L. M. : La frange s'est quelque peu étendue en longueur sans changer de caractères. Souche B. : La frange s'est beaucoup allongée vers le fond du tube, elle devient nuageuse. Souche A. : La frange granuleuse s'entoure d'une culture homogène, moins dense, mais qui reste nettement délimitée. Souche P. C. : Celle-ci par contre ne s'est pas sensiblement modifiée. Souche S. : Continue
contre ne s'est pas sensiblement modifiée. Souche S. : Continue à ressembler à la souche B, frange diffuse, longs filets latéraux et terminaux. Souche arthrite IV : Mêmes caractères, un peu plus développés. Souche arthrite V : Plus diffuse. Après trente-six heures à l'étuve : A ce moment apparaissent généralement les cultures en nappe (mais il faut noter qu'elles peuvent manquer dans certains cas même avec les microbes immobiles). Souche L. M. : Frange encore nette, un peu masquée par la culture en nappe; celle-ci atteint le tiers inférieur du milieu; elle se montre finement granuleuse. Souche B. : La
milieu; elle se montre finement granuleuse. Souche B. : La frange arrive presque au fond du tube, mêmes caractères. La culture en nappe est très discrète, elle a l'aspect de touches blanchâtres, très légères. Souche A. : La frange est complètement entourée d'une bande homogène, étroite, blanc grisâtre, nuageuse, à bords réguliers. La culture en nappe finement granuleuse atteint le 4/3 inférieur de la hauteur du milieu. Souche P. C. : Frange sans changement. La culture en nappe arrive à la moitié de la hauteur du milieu; son intensité s'accuse dans les parties inférieures dont le bord libre constitue un
dans les parties inférieures dont le bord libre constitue un feston finement granuleux. Souche S. : La frange arrive à un centimètre du fond; elle se termine par des filets multiples et assez longs. La culture en nappe atteint à peu près le même niveau; elle est, elle aussi, délicatement festonnée à son bord libre inférieur. Souche arthrite IV : La frange a encore ses contours très nets. La culture en nappe est très finement granuleuse. Souche arthrite V : La frange arrive maintenant à un centimètre du fond, elle est presque homogène. La culture en nappe est finement granuleuse,
est presque homogène. La culture en nappe est finement granuleuse, mais à la loupe seulement. Ultérieurement : Les souches B et S qui produisent des franges homogènes s'étendant rapidement vers le fond, donnent lieu à des cultures qui diffusent peu à peu dans le milieu. Les autres cultures au contraire conservent longuement leurs caractères propres. La frange est donc l'élément fondamental dans le milieu intermédiaire. Les caractères fournis par la culture en surface et la culture en nappe viennent compléter ceux de la frange. On peut donc distinguer les franges granuleuses, homogènes et granulo-homogènes. Le type granuleux est constitué par
granuleuses, homogènes et granulo-homogènes. Le type granuleux est constitué par des colonies sèches, denses, plus ou moins indépendantes donnant à la frange son aspect spécial. Diverses variétés peuvent être obtenues suivant que les colonies restent nettement séparées ou qu'elles fusionnent plus ou moins; que les colonies sont volumineuses donnant un aspect fortement granuleux ou qu'elles sont fines d'où l'aspect finement granuleux; que les colonies restent nettement délimitées, ou au contraire qu'elles s'allongent verticalement en forme de filets toujours granuleux, coniques ou filamenteux, ou qu'elles émettent des ramifications dans tous les sens; que la frange reste nettement délimitée ou qu'elle s'entoure
sens; que la frange reste nettement délimitée ou qu'elle s'entoure plus ou moins complètement d'une zone de culture moins dense mais encore granuleuse, etc... La culture en nappe le long de la paroi du tube est diversement granuleuse, d'intensité variable et le bord libre est plus ou moins festonné. Le type homogène est caractérisé par une frange d'apparence nuageuse, plus ou moins dense, mais toujours sans granulation, même à la loupe, aussi bien en ce qui concerne la culture au niveau de la piqûre, qu'en ce qui se rapporte aux développements latéraux de cette culture ou aux filets qui partent
développements latéraux de cette culture ou aux filets qui partent de la frange. La culture en nappe, quand elle existe, car dans ce cas elle manque souvent ou elle est extrêmement discrète, se montre également sans la moindre granulation apparente. Le type granulo-homogène comporte une frange granuleuse, mais elle s'entoure peu à peu d'une zone de culture nuageuse, sans granulation. La frange granuleuse peut être plus ou moins large, quelquefois elle est réduite à une très mince bande de colonies développées le long de la piqûre, dans d'autres cas elle est beaucoup plus large. Ici c'est surtout la culture homogène
est beaucoup plus large. Ici c'est surtout la culture homogène périphérique qui offre des caractères spéciaux: elle peut être représentée par des bourgeonnements globuleux se constituant en certains points du pourtour de la frange; ces cultures secondaires peuvent être assez nombreuses pour fusionner et former une bande à contours sineux mais nets; la culture homogène peut être plus diffuse et ressembler alors à une frange homogène avec filets. On peut aussi avoir une frange d'apparence homogène, mais la culture en nappe est granuleuse. Si nous cherchons alors à classer les sept souches étudiées nous obtenons le résultat suivant: Type granuleux:
sept souches étudiées nous obtenons le résultat suivant: Type granuleux: Colonies non confluentes, frange fortement granuleuse: souche P. C. Colonies faiblement confluentes, certaines diffusent quelque peu dans le milieu: souche arthrite IV. Colonies irrégulièrement fusionnées, finement granuleuse: souche L. M. Type homogène: Frange et nappe sans aucune granulation: souche B. Type granulo-homogène: Frange granuleuse, culture secondaire homogène formant une bande périphérique: souche A. Frange granuleuse, culture secondaire homogène diffusant largement vers le fond du tube: souche arthrite V. Frange homogène, culture en nappe finement granuleuse: souche S. Nous arrivons ainsi à différencier très facilement ces sept souches, dans leur état
à différencier très facilement ces sept souches, dans leur état actuel. Nous nous empressons d'ajouter que nous n'affirmons nullement qu'il s'agit là dans tous les cas de streptocoques différents, le milieu intermédiaire se prêtant admirablement en maintes circonstances, à la différenciation des souches R, S et intermédiaires. Si les types granuleux et granulo-homogènes permettent facilement les différenciations d'espèces et même de variétés microbiennes, il n'en est plus de même avec le type homogène. Si en effet on ensemence par piqûre le milieu intermédiaire avec des pasteurelle, ou des salmonelle immobiles (b. pullorum, b. gallinarum), on ne constate pas de différences
(b. pullorum, b. gallinarum), on ne constate pas de différences suffisamment nettes pour permettre de différencier ces bactéries. Les franges homogènes ont des caractères qui varient peu; la longueur des filets est fonction d'ailleurs de la position du tube, de la composition du milieu qui varie quelque peu avec les bouillons de viande, de la direction de la piqûre, etc. La seule différenciation précise que l'on puisse faire ici est entre les microbes mobiles, qui diffusent rapidement dans la masse du milieu, et les microbes immobiles qui constituent des franges nettes. On différenciera ainsi sans difficulté les pasteurelle des paratyphiques;
nettes. On différenciera ainsi sans difficulté les pasteurelle des paratyphiques; il en est de même du b. pullorum et du b. gallinarum d'une part et des paratyphiques d'autre part. Il est possible toutefois que le milieu intermédiaire devienne utilisable dans ces conditions si on lui ajoute des substances partiellement empêchantes, limitant les cultures et permettant ainsi l'obtention de caractères spéciaux si faciles à discerner dans ce milieu. Nous nous proposons de faire des recherches dans cette voie. Applications diverses du milieu intermédiaire. — a) On peut faire appel utilement à ce milieu pour la différenciation de certaines bactéries ou de
ce milieu pour la différenciation de certaines bactéries ou de certaines variétés microbiennes dans les conditions que nous venons d'indiquer. b) On peut l'utiliser également pour rechercher les variétés S, R et intermédiaires d'un même microbe, les caractères distinctifs apparaissant ici avec une grande netteté. On peut aussi se proposer d'isoler ces variétés après ensemencements de dilutions convenables. c) Nous utilisons fréquemment le milieu intermédiaire pour le contrôle rapide et approximatif des stérilisations de cultures de microbes immobiles. Il a l'avantage, sur le bouillon, de donner des indications concernant la quantité approximative de germes restés vivants, sur la gélose couchée,
quantité approximative de germes restés vivants, sur la gélose couchée, de constituer un milieu plus favorable pour la culture des microbes dont la vitalité se trouve quelque peu amoindrie et qui se développent plus facilement à l'abri de l'air. Le contrôle quantitatif ainsi est approximatif car souvent les colonies s'allongent vers le fond du tube et la numération devient difficile; le contrôle qualitatif par contre en maintes circonstances apporte des indications utiles sur l'action qu'a eu l'agent physique ou chimique mis en œuvre sur le microbe utilisé. d) Nous avons pu cultiver en milieu intermédiaire certains microbes se développant mal
pu cultiver en milieu intermédiaire certains microbes se développant mal en bouillon ou sur gélose. Nous avons pu conserver, par exemple, longuement ainsi un streptocoque dont les cultures devenaient très difficiles dans les milieux courants. e) Cette culture à l'abri de l'air permet également de conserver non seulement la vitalité mais aussi la virulence et les pouvoirs antigènes de certaines bactéries fragiles, les pasteurelle par exemple. f) Il est possible de suivre facilement la lyse spontanée de certains microbes et de conserver plus longuement certaines endotoxines sensibles à l'action de l'air. g) La possibilité d'aspirer le milieu en pipettes et
l'air. g) La possibilité d'aspirer le milieu en pipettes et d'examiner entre lame et lamelle permet de suivre facilement les modifications de la morphologie des microbes utilisés. Le fait de pouvoir mettre ces cultures en pipettes scellées donne la possibilité de conserver plus longuement encore la vitalité et la virulence. Les avantages que l'on trouve à pouvoir injecter ces cultures peuvent être faciles à prévoir : microbes plus difficilement accessibles à l'action phagocytaire, cultures encore possibles in vivo permettant l'élaboration plus grande de toxine. h) Si les cultures sont stérilisées, on dispose ainsi de vaccins un peu plus lentement résorbables,
on dispose ainsi de vaccins un peu plus lentement résorbables, comme cela ressort des recherches de Ramon. i) Si au milieu intermédiaire on ajoute maintenant différentes substances : sucre, sang, sérum, bile... dont l'incorporation est extrêmement facile même à froid, on lui confère d'autres avantages encore. C'est ainsi que nous utilisons couramment ce milieu pour la culture d'un microbe anaérobie : le bacille tétanique. Nous ajoutons pour cela 1 p. 100 de glucose; le milieu à base de bouillon de veau est très récemment préparé, il est chauffé pendant une demi-heure à 100° et brusquement ramené à 40° environ. Le
demi-heure à 100° et brusquement ramené à 40° environ. Le matériel ensemencé est réparti dans la masse du milieu en roulant le tube entre les mains. On plonge celui-ci ensuite dans l'eau froide (sinon il se produit une floculation de la gélose au fond du tube). On opère ainsi comme avec le bouillon glucosé pour les cultures de passage avant l'ensemencement définitif pour la production de la toxine suivant la méthode de H. L. Wilcox. Les cultures du bacille de Nicolaïer sont ainsi plus faciles qu'en bouillon glucosé, ce bacille trouvant encore là une certaine anaérobiose, ce qui d'ailleurs ne
trouvant encore là une certaine anaérobiose, ce qui d'ailleurs ne l'empêche nullement de cultiver fort bien ensuite après trois passages dans les grands flacons de bouillon glucosé au contact de l'air. On obtient de cette façon des toxines actives à 1/20.000, à 1/30.000 et même plus si l'on utilise les procédés que nous avons fait connaître avec E. Mutermilch et Mlle Salamon concernant la protection des toxines. L'anaérobiose est d'ailleurs suffisante en l'absence de glucose pour obtenir des cultures de bacilles tétaniques, même par piqûre; mais évidemment ces cultures sont moins belles. Dans le milieu intermédiaire glucosé on voit apparaître
moins belles. Dans le milieu intermédiaire glucosé on voit apparaître les premières colonies vers la douzième heure; elles se multiplient rapidement, sans fusionner complètement cependant. Mais le second repiquage fait vers le troisième jour donne rapidement des cultures homogènes très belles. Conclusion.— Le milieu intermédiaire est donc un milieu très simple, préparé sans technique spéciale, qui présente cependant des avantages très particuliers le rendant utile en maintes circonstances. Nous l'employons couramment depuis sept années. Les services qu'il nous rend nous ont incité à le faire connaître plus complètement. Le milieu intermédiaire mérite à notre avis d'être utilisé dans les laboratoires
intermédiaire mérite à notre avis d'être utilisé dans les laboratoires de bactériologie aussi couramment que le sont les milieux solides et les milieux liquides dont il procède. Les travaux qui sont à la base des méthodes de vaccination et de sérothérapie anticlaveleuses ont été effectués à l'Institut Pasteur (Borrel) et dans sa filiale algérienne (Bridré et Boquet, Donatien et Lestoquard). L'Institut Pasteur d'Algérie a dû, depuis sa création, assurer l'immunisation des moutons algériens exportés en France au nombre de plusieurs centaines de mille chaque année. L'étude du virus claveleux est donc constamment à l'ordre du jour à Alger. Quand on
donc constamment à l'ordre du jour à Alger. Quand on fait une étude d'ensemble de cette question, on est frappé par la discordance des résultats obtenus par divers expérimentateurs qui, cependant, paraissent opérer dans des conditions identiques. Nous pensons que la cause de ces divergences peut être élucidée. Lorsqu'on expérimente sur la clavelée, deux facteurs primordiaux entrent en jeu : le sujet réceptif qui est le plus souvent le mouton et le virus claveleux. Vis-à-vis de la clavelée les moutons de divers pays, de diverses races, offrent des sensibilités très différentes : d'après Nocard, les moutons bretons sont réfractaires. On
différentes : d'après Nocard, les moutons bretons sont réfractaires. On sait, d'autre part, que les moutons nord-africains offrent une résistance marquée. Enfin, les moutons de certaines races françaises, dans les régions où la maladie est enzootique, les moutons Caussenards de l'Hérault par exemple, sont extrêmement sensibles. Certaines divergences proviennent de ce que tels expérimentateurs ont utilisé des moutons naturellement résistants et tels autres des moutons très réceptifs. Avec le même virus, les premiers n'obtiennent que des réactions locales sans gravité, les seconds, au contraire, des maladies graves avec généralisation. C'est pourquoi, dans les pays où la clavelée est enzootique, en
pourquoi, dans les pays où la clavelée est enzootique, en raison de l'existence d'un certain nombre de sujets résistants, il est nécessaire de répéter les expériences avant de conclure. Il arrive souvent d'opérer plusieurs fois de suite sur des lots de moutons réfractaires et les résultats se trouvent ainsi complètement faussés. Le coût de ces essais en réduit parfois le nombre et c'est pourtant le nombre qui permet d'accorder une valeur définitive aux conclusions énoncées. Mais, à notre avis, les divergences les plus fréquentes sont dues à la nature du virus claveleux lui-même. Tous les auteurs sont d'accord sur l'unicité
virus claveleux lui-même. Tous les auteurs sont d'accord sur l'unicité spécifique des viruses claveleux. Mais il s'en faut que leur virulence soit toujours d'égalie intensité. Nous verrons comment varie cette virulence au cours de l'évolution d'un virus claveleux entretenu au laboratoire. Cette question est capitale pour l'histoire naturelle du virus et c'est elle qui constituera le principal chapitre de ce rapport. Si deux auteurs expérimentent sans avoir, au préalable, titré exactement la virulence de leurs viruses, il n'est pas étonnant qu'ils obtiennent des résultats différents et même opposés. Définition. — Le virus claveleux est un ultravirus ou inframicrobe qui provoque
Le virus claveleux est un ultravirus ou inframicrobe qui provoque chez le mouton une maladie de type variolique, la clavelée. La maladie se caractérise par une éruption pustuleuse sur la peau et sur diverses muqueuses et par des nodules qui siègent dans divers organes tels que les poumons et les reins. C'est dans le derme cutané que le virus se développe. L'épiderme n'est atteint que secondairement. Cette propriété, jointe à la possibilité de coloniser dans le poumon, montre l'affinité du virus claveleux pour le mésoderme. Siège du virus. — Dans la maladie naturelle le virus est trouvé en abondance au
la maladie naturelle le virus est trouvé en abondance au niveau des pustules éruptives ou des transsudats apparaissant sur la peau des malades. Le liquide contenu dans les pustules est appelé claveau. Les termes de claveau et de virus claveleux sont souvent employés l'un pour l'autre. Toutes les lésions spécifiques des organes profonds (poumons, reins, muqueuse digestive) renferment du virus. Dans la clavelée expérimentale le sang est virulent, ce qui explique la présence du virus dans les centres nerveux et dans les muscles où il est particulièrement abondant. Balozet a trouvé du virus dans les muscles et dans le nerf
trouvé du virus dans les muscles et dans le nerf en l'absence de sang. Ce même auteur a pu cultiver le virus dans le testicule en créant une orchite spécifique expérimentale. Enfin Borrel, inoculant du claveau récent et stérile dans le péritoine de l'agneau nouveau-né, détermine en quelques jours une réaction spécifique très intense, particulièrement développée au niveau de l'épiploon. Morphologie. — Bosc avait vu dans de grandes cellules contenues dans le claveau de grosses inclusions qu'il croyait être des sporozoaires et dont il faisait l'agent causal de la maladie. Borrel a retrouvé ces mêmes inclusions, qui ne sont que
Borrel a retrouvé ces mêmes inclusions, qui ne sont que des produits de dégénération cellulaires, dans les cellules endothéliales de l'épiploon de l'agneau nouveau-né soumis à une inoculation intrapéritonéale. Ces mêmes inclusions se retrouvent dans les leucocytes mononucléaires de la lymphe claveleuse. Colorées par la méthode de Romanowsky elles sont fortement éosinophiles et contiennent des granulations rondes ou des bâtonnets colorées en violet foncé. La substance éosinophile peut se retrouver en dehors des cellules et peut se résoudre en une infinité de granulations qui rappellent les granulations que le même auteur avait décrites dans l'acné varioliforme en 1904-1906 et dans
auteur avait décrites dans l'acné varioliforme en 1904-1906 et dans la vaccine en 1925. Dès 1903 et en 1909, Borrel, soumettant des dilutions claveleuses centrifugées à la méthode de Löffler (surcoloration par la fuchsine phéniquée après mordançage), voit un nombre immense de très fines granulations de 0 p. 25 isolées ou groupées en diplocoque ou en chaînette et les considère comme les agents pathogènes de la clavelée. Isolement du virus claveleux. C'est Borrel qui, suivant en cela la doctrine pastorienne, obtint, le premier, le virus claveleux à l'état de pureté par sa méthode de filtration du virus. Le premier principe
par sa méthode de filtration du virus. Le premier principe à observer pour isoler un virus claveleux est d'opérer sur un malade arrivé à la période d'éruption. On évitera ainsi les souillures qui résultent de l'ouverture des pustules. Il faut ensuite prélever les parties enflammées du derme et de l'hypoderme par la face interne de la peau (procédé Brémond) dont un volet est soulevé aseptiquement. Si la récolte est abondante et contient une assez grande quantité de lymphe, on peut inoculer l'agneau destiné à produire le virus simultanément dans le derme et sous la peau. Si on ne dispose que
derme et sous la peau. Si on ne dispose que d'une petite quantité de lymphe, on peut augmenter le matériel virulent en faisant quelques passages par la voie intradermique. Si, enfin, la pulpe recueillie est sèche, on la fait macérer dans de l'eau glycérinée pendant quelques jours et on opère avec le liquide de macération comme on le fait avec la lymphe claveleuse. Si, en cours d'isolement, le virus est contaminé par des bactéries pathogènes telles que le microbe de Preisz-Nocard, le pyobacille, des microcoques ou des staphylocoques pyogènes, on s'en débarrasse par filtration. Si c'est le germe de l'agalaxie