jeanflop/post-ocr-correction huggingface dataset:
— Position de la cystéine dans la structure primaire de la 3-phosphoglycerate kinase de Levure. Note de Abdellatif Fattoum, Jeanne Feinberg, Gisèle Desvages et Claude Roustan, présentée par M. Jean Roche. Dans le contexte d'une étude consacrée à la localisation des différents groupements caractéristiques de la 3-phosphoglycérate kinase de levure, le positionnement de l'unique cystéine dans la structure primaire de cette enzyme a été étudié. Nous avons pu ainsi montrer que cette cystéine se situerait environ au niveau du centième acide aminé à partir du N-terminal de la protéine. In order to study the location of the single cysteinyl residue
order to study the location of the single cysteinyl residue in the primary structure of yeast 3-phosphoglycerate kinase, cyanogen bromide cleavage has been carried out. Analysis of the two fragments obtained shows that the -SH group is located near position 100. La 3-phosphoglycérate kinase (EC 2.7.2.3) joue un rôle métabolique important en catalysant la formation d'une molécule d'ATP dans le système glycolytique. De plus, la connaissance de sa structure primaire et tertiaire est nécessaire pour mieux comprendre son mécanisme d'action. Actuellement, grâce à l'étude des cristaux de la 3-phosphoglycérate kinase de levure par diffraction des rayons X, seules les cartes
de levure par diffraction des rayons X, seules les cartes de densité électronique à 3,5 Å de résolution sont connues. Pour obtenir les dérivés correspondants d'atomes lourds par la méthode des remplacements isomorphes, Wendel et coll. ont exploité l'existence d'un seul groupement sulfhydryle. Il était intéressant, dans ce contexte, de déterminer la position de ce groupement SH dans la chaîne polypeptidique. La coupure au niveau des méthionines et la caractérisation des quatre peptides isolés nous ont déjà permis de localiser la cystéine dans le fragment N-terminal de la protéine. Ces résultats seront publiés incessamment. Cependant, une localisation plus précise de
résultats seront publiés incessamment. Cependant, une localisation plus précise de ce résidu est obtenue après hydrolyse chimique spécifique de cette enzyme au moyen de l'acide 2-nitro-5-thiocyanobenzoïque. Dans ce travail, nous avons utilisé une enzyme ayant une activité spécifique d'au moins 1 300 unités par mg à 30°C et à pH 7,5. Cette dernière a été obtenue à l'état homogène selon la méthode de Scopes. L'intégrité de la cystéine a tout d'abord été vérifiée sur l'échantillon au moyen du réactif d'Ellman. La conversion de la cystéine en S-cyanocystéine a été réalisée au moyen de l'acide 2-nitro-5-thiocyanobenzoïque dans le Tris acétate 0,2
au moyen de l'acide 2-nitro-5-thiocyanobenzoïque dans le Tris acétate 0,2 M pH 8 en présence de chlorhydrate de guanidine 6 M suivant le protocole décrit par Jacobson et coll. Après dialyse contre acide formique 4 % et lyophilisation, la coupure a été effectuée en incubant le lyophilisat dissout dans un tampon borate 0,1 M, chlorhydrate de guanidine 6 M, pH 9 pendant 48 h à 37°C. Une aliquote du produit formé a été analysée sur gel de polyacrylamide en SDS. On note la présence de trois bandes : A, B et C, correspondant à la protéine native résiduelle, à un
et C, correspondant à la protéine native résiduelle, à un fragment d'environ 32 000 dalton et à un fragment plus petit d'environ 10 000 dalton (fig. 1). D'après le tracé densitométrique (fig. 1), le rendement de la coupure est estimé à 75 %. Après citraconilation, le mélange est désalifié sur une colonne de "Sephadex G 15" équilibrée avec du bicarbonate d'ammonium 0,1 M. La fraction protéique est lyophilisée et les fragments sont isolés sur une colonne de "Sephadex G 100" (fig. 2). La fraction B correspondant à la partie droite du pic 1 et la fraction C correspondant au pic
du pic 1 et la fraction C correspondant au pic II ont été caractérisées et trouvées homogènes sur gel de polyacrylamide. La fraction C est obtenue avec un rendement de 50 %. La composition en acides aminés de ces deux fractions a été déterminée. Le tableau montre qu'aussi bien par leur taille que par la répartition de leurs différents acides aminés les deux fragments réunis rendent compte de la composition totale en acides aminés de la protéine. D'autre part, la digestion par la carboxypeptidase effectuée sur la protéine native et sur le fragment B a permis dans les deux cas
sur le fragment B a permis dans les deux cas d'identifier une lysine à l'extrémité C-terminale. L'hydrolyse correspondante de la fraction C a, par contre, libéré une valine (tableau). De plus, l'extrémité N-terminale de ce dernier fragment est N-acétylée comme dans le cas de la protéine native. En effet, la méthode de dosage par l'acétate kinase donne dans les deux cas 1,1 résidu acétylé par mole. En conclusion, nous pouvons dire que le fragment C constitue la partie N-terminale de la protéine et le fragment B la partie C-terminale. La coupure étant effectuée spécifiquement au niveau de la cystéine, ce
coupure étant effectuée spécifiquement au niveau de la cystéine, ce résidu se situerait au niveau du centième acide aminé à partir du N-terminal. Séance du 28 mars 1977. T. N. BRYANT, H. C. WATSON et P. L. WENDELL, Nature, 247, 1975, p. 14. P. L. WENDELL, T. N. BRYANT et H. C. WATSON, Nature, 240, 1972, p. 134. R. K. SCOPES, Biochem. J., 122, 1971, p. 89. G. L. ELLMAN, Arch. Biochem. Biophys., 82, 1959, p. 70. G. R. JACOBSON, M. H. SCHAFFER, G. R. STARK et T. C. VANANAM, J. Biol. Chem., 248, 1973, p. 6583. P. H. O'FARRELL,
J. Biol. Chem., 248, 1973, p. 6583. P. H. O'FARRELL, J. Biol. Chem., 250, 1975, p. 4007. I. GIBBONS et R. N. PERHAM, Biochem. J., 116, 1970, p. 843. F. S. MARKLAND, A. D. E. BACHARACH, B. H. WEBER, T. C. O'GRADY, G. C. SAUNDERS et N. UMEMURA, J. Biol. Chem., 250, 1975, p. 1301. S. C. KUO et E. S. YOUNGATHAN, Anal. Biochem., 55, 1973, p. 1. J. OPIENSKA-BLAUTH, M. CHAREZINSKI et H. BERBEC, Anal. Biochem., 6, 1963, p. 69. Laboratoire de Biochimie cellulaire. Collège de France, 11, place Marcellin-Berthelot. 75231 Paris Cedex 05. PHARMACOLOGIE. — Propriétés antibiotiques inattendues
Marcellin-Berthelot. 75231 Paris Cedex 05. PHARMACOLOGIE. — Propriétés antibiotiques inattendues dans le domaine des céphalosphorines. Note de Robert Bucourt, René Heymès, André Lutz, Lucien Pénasse et Jacques Perronnet, présentée par M. Léon Velluz. La présence d'un reste oximé sur le méthylène de la chaîne (2-aminothiazol 4-yl)-acétyle fixée sur l'amine en 7 de l'acide céphalosporanique confère une activité antibactérienne exceptionnelle - principalement vis-à-vis des souches à gram négatif — si la configuration de l'oxime est « syn ». Par contre, à la configuration « anti » correspondent des propriétés antibiotiques faibles. The presence of an oximino group on the methylene of
The presence of an oximino group on the methylene of the (2-aminothiazol 4-yl)-acetyl side chain bound to the 1-amino cephalosporanic acid affords derivatives with syn or anti configuration. Whereas the anti isomers display low antibiotic activities, the syn isomers possess a surprisingly high efficiency against gram negative bacteria, enhanced by a factor of 10 to 100 as compared with the cephalosporins known at the moment. Toutes les pénicillines et les céphalosporines d’hémisynthèse comportent, au niveau de la chaîne latérale amide, des modifications structurales qui sont introduites par le jeu de l’acylation des acides 6-aminopénicillanique ou 7-aminocéphalosporanique. Les groupements arylacétiques ont
l’acylation des acides 6-aminopénicillanique ou 7-aminocéphalosporanique. Les groupements arylacétiques ont permis le déplacement ou l’élargissement favorable des spectres antibactériens. Une nouvelle amélioration des propriétés antibiotiques, spécialement vis-à-vis des souches à gram négatif, a été réalisée par la suite par substitution en 1 de ces chaînes acétyles. Ainsi a pris naissance une série de composés d’intérêt thérapeutique : L'introduction d'une fonction oximinée en cette position a été décrite récemment en série céphalosporine. Elle conduit à deux groupes d’isomères qui se distinguent d'après la configuration syn ou anti de cette fonction et les produits de la série syn se sont révélés les
les produits de la série syn se sont révélés les plus intéressants. Nous avons pour notre part étudié l’influence de la configuration des fonctions oximinées sur les propriétés antibactériennes de nouveaux dérivés : les acides 7-[(2-(2-aminothiazol 4-yl)-2-(hydroximino ou alcoximino)acetyl)amino]céphalosporaniques 1 (a-e) et 2 (a-e), et leurs sels : Les composés ont été obtenus par action de la thiourée sur divers 4-halogènes 2-(hydroximino ou alcoximino) 3-oxo butanoates d’éthyle. Les conditions opératoires permettent de rendre prépondérante la formation de l’un ou l’autre des isomères, dont les constantes physicochimiques sont nettement différenciées. Après protection de la fonction amine en 2 du cycle thiazole
protection de la fonction amine en 2 du cycle thiazole des copulés 3 ou 4, par exemple par tritylation, puis saponification de l’ester éthylique, l’acide obtenu est « activé » par action d’un chloroforme d’alcoyle ou du dicyclohexylcarbodiimide pour être condensé sur la fonction amine de l’acide 7-amino céphalosporanique d’origine naturelle. La déprotection fournit alors le dérivé cherché, 1 ou 2, suivant que l’on a fixé une chaîne 3 ou 4. La configuration du groupe oximino peut être conservée au cours de ces transformations chimiques. Cela a été vérifié par spectrométrie RMN, d’après le déplacement chimique du proton en 5
spectrométrie RMN, d’après le déplacement chimique du proton en 5 du thiazole. Acide libre (DMSO) Sel de Na+ (D2O) (10-6) (10-6) 1 b 8 = 6,77 7,0 2 b 8 = 7,52 7,55 Les produits obtenus ont des propriétés antibactériennes très différentes selon qu’ils appartiennent à la série 1 ou à la série 2. L’activité des dérivés de configuration anti, 2, reste d’un niveau assez faible ou faible. Celle des dérivés de configuration syn, 1, est étonnamment élevée vis-à-vis des bactéries à gram négatif. Les concentrations minimales inhibitrices sont de 10 à 100 fois inférieures à celles des céphalosporines actuellement
10 à 100 fois inférieures à celles des céphalosporines actuellement en usage ou en cours d’expérimentation et pour lesquelles des données biologiques ont été publiées. Il s’agit là d’un résultat très significatif qui traduit vraisemblablement un phénomène nouveau. H. O'CALLAGHAN, R. B. SYKES, D. M. RYAN, R. D. FOORD et P. W. MUGGLETON, J. Antibiotics, 29, n° 1, 1976, p. 29. Centre de Recherches Roussel UCL, 102, route de Noisy, 93230 Romainville. MICROBIOLOGIE. Étude des bactériophages de Rhizobium meliloti. Note de Michel Werquin, Mohamed Tahar Ben Brahim et Draga Krsmanovic-Simic, présentée par M. Jacques Tréfouël. Parmi les bactériophages de notre
présentée par M. Jacques Tréfouël. Parmi les bactériophages de notre collection, sept d’entre-eux, capables de lyser Rhizobium meliloti en milieu liquide en l’absence de Ca2+ ou Mg2+ sont étudiés. L’ensemble de leurs propriétés les différencie nettement des phages incapables de lyser Rhizobium meliloti dans les mêmes conditions. Among the bacteriophages in our collection, seven are studied which can lyse Rhizobium meliloti in a liquid medium in the absence of Ca2+ or Mg2+. The total of their properties clearly differentiates them from phages which are unable to lyser Rhizobium meliloti under identical conditions. Nous avons isolé de nombreux phages de Rhizobium
identical conditions. Nous avons isolé de nombreux phages de Rhizobium meliloti des terres du Nord de la France et dans une note antérieure, nous avons étudié et classé selon leur morphologie et leur spécificité d’hôte certains de ceux-ci présentant la particularité de ne pouvoir lyser les bactéries en milieu liquide en absence d’ions Ca2+ ou Mg2+. En effet, les phages provoquant la lyse bactérienne dans tous les cas en milieu liquide n’avaient pu être examinés au microscope électronique du fait de la fragilité de leurs structures. Dans ce travail, nous avons tenté de caractériser ces bactériophages en nous basant sur
avons tenté de caractériser ces bactériophages en nous basant sur leur inhibition par les sérums antiphages, leur spécificité d’hôte et leur degré de dépendance pour les ions Ca2+ et Mg2+ pour lyser le Rhizobium en milieu liquide. MATÉRIEL ET MÉTHODES : — Souches bactériennes — Ce sont celles décrites précédemment (2). — Bactériophages — Trois souches appartenant aux trois premiers groupes de la classification de Bradley (3) étudiées dans la Note antérieure ont servi de référence. Il s’agit des souches CM1 (Groupe A), NM1 (Groupe B) et MM1 (Groupe C), capables de lyser Rhizobium meliloti en l’absence de Ca2+ ou
capables de lyser Rhizobium meliloti en l’absence de Ca2+ ou Mg2+, seulement en milieu gélosé (Lyse en milieu solide = phages L.S.). Les sept souches pouvant lyser en milieu liquide en l’absence de Ca2+ ou Mg2+ (Lyse en milieu liquide = phages L.L.) sont les suivantes : 04, D5t, D6, a, D7, D9, D1 et D12. Les stocks de phages sont obtenus selon la méthode d’Adams (4) et titrent 109 à 101 particules infectieuses par millilitre. Préparation des sérums anti-phages – Ceux-ci sont obtenus par injections successives à des lapins de 1 ml de suspension de phages additionnée du même
de 1 ml de suspension de phages additionnée du même volume d’adjuvant complet de Freund. Le pouvoir inhibiteur du sérum est donné en valeur de K (4), constante d’inhibition correspondant à : – D P K = 2, 3 – log ~ (D étant la dilution du sérum ; t, le temps de contact avec la suspension de phages ; P0 et P le nombre de phages infectieux avant et après action du sérum). – Lyse en milieu liquide en présence d’ions Ca2+ et Mg2+ – Les Rhizobium en phase exponentielle de croissance en milieu RC e) sont dilués au
exponentielle de croissance en milieu RC e) sont dilués au demi sous un volume de 4 ml dans le même milieu contenant soit du CaCl2 4 x 10-4 M soit du MgCl2 5 X 10-4 M. Les phages sont ajoutés sous un volume de 0,1 ml. Après 18 heures d’incubation à 30°C les densités optiques sont lues à 600 nm sous une épaisseur de 1 cm. TABLEAU I Antisérums Bactériophages – – – – CMi NM, MM, ( CM, 180 0 0 Phages L.S NM, 0 246 0 ( MM, 0 0 38 Phages L. L (D4 7,6 1,7 0
0 0 38 Phages L. L (D4 7,6 1,7 0 (D 5' 0 0 0 (D 6 0 0 0 (D 7 0 0 0 (D 9 4,5 0 0 (D 11 0 0 0 (D 12 10 8,5 0 RÉSULTATS : Dans le tableau I, sont comparées les valeurs de la constante d’inhibition K des sérums obtenus à partir des phages L.S, vis-à-vis de ces mêmes phages et des virions L.L. Les 3 sérums antiphages CMi5 NM! et MM! possèdent une constante d’inhibition K élevée pour les phages correspondants. Ceci traduit une inhibition supérieure à 90 % et une
Ceci traduit une inhibition supérieure à 90 % et une grande spécificité. Par contre, l’inhibition des phages L.L par les sérums antiphages L.S est nulle ou très faible. La propriété de ces phages de lyser en milieu liquide sans apport de Ca2+ ou Mg2+ est donc un caractère distinctif important. TABLEAU II Souches de Rhizobium meliloti Bactériophages L.L MsNI M9S MnS (*) M12S M13S M 14S MIsS 04 + + + (D 51 + + (D6 + + + + + + + 07 + + + + + + + (D 9 + ± + + + + +
+ (D 9 + ± + + + + + (D 11 + ± + + + + + (D 12 + + + + + + + (*) Les différents bactériophages L.L sont multipliés sur la souche M15S. Ces trois sérums ne permettant aucune distinction entre les sept phages L.L, nous avons essayé de les classer selon différents critères. 1° La spécificité d’hôte (tableau II) : le comportement des phages L.L vis-à-vis des souches de notre collection permet de grouper d’une part les phages O 6, 0 7 et 0 12, d’autre part les phages 09 et O 11
0 12, d’autre part les phages 09 et O 11 et enfin les phages (D 4 et (D 5. 2° Réaction avec les sérums antiphages L.L : pour vérifier la réalité des groupes déterminés précédemment, nous avons utilisé les sérums anti-phages obtenus par injection des phages O 4, (D 6, (D 9 et (D 12. Les résultats sont consignés dans le tableau III. TABLEAU III Antisérums Bactériophages 04 06 (D 9 012 (D 4 57 71 100 104 ' 05' 1 (D 5 t 78 100 118 100 (D 6 79 104 124 90 66 103 131 91 09 157
79 104 124 90 66 103 131 91 09 157 135 195 109 (D 11 80 71 154 83 (D 0 12 + + + + + + 109 78 166 61 (*) Bactériophages isolés du même échantillon de terre. On constate que les valeurs de la constante K sont très proches les unes des autres; les sérums obtenus à partir de ces 4 phages sont donc peu spécifiques des différents phages de ce groupe. Les phages 05', 06 et 07 semblent sérologiquement proches et le phage 09 différent des autres. On peut remarquer que les phages 04 et O
autres. On peut remarquer que les phages 04 et O 12 sont moins inhibés par leur propre sérum que par ceux correspondant aux autres phages. Ce phénomène a déjà été signalé pour d’autres phages de Rhizobium [(6), C] et il peut faire douter de la validité des résultats de l’inhibition phagique pour cette classe de phages L.L. TABLEAU IV Milieu RC Bactériophages Sans Ca2+ ni Mg2+ Avec CaH Avec Mg" + 04 + + + ± + + + 06 ++ ++ + + + + ++ + + + + + + (D 12 + + + + +
+ + + (D 12 + + + + + + 3) Exigence en ions Ca2+ et Mg2+ pour la lyse en milieu liquide. Les résultats du tableau IV permettent de constater que l’activité lytique des phages L.L varie selon la composition du milieu en ions Ca2+ et Mg2 + . La lyse bactérienne est activée par Ca2+ et inhibée par Mg2+ pour les phages 04, 0 5' et 09. Elle est favorisée par Ca2 + ou Mg2 + pour le phage O 11 et indifférente à la présence de ces ions pour les phages 06 et 07. Enfin, le
ces ions pour les phages 06 et 07. Enfin, le O 12 ne lyse pas Rhizobium en milieu additionné de Mg2 + et est indifférent à la présence d’ions Ca2 +. CONCLUSION : Parmi les bactériophages de Rhizobium meliloti que nous avons isolés, nous avons différencié deux grandes classes qui se caractérisent nettement l’une de l’autre. D’une part, ceux qui lysent Rhizobium meliloti en absence de Ca2+ et Mg2+ seulement en milieu gélosé; ils ont une structure relativement stable et répondent spécifiquement aux sérums leur correspondant. D’autre part, ceux qui lysent Rhizobium meliloti en milieu liquide en absence de Ca2+
lysent Rhizobium meliloti en milieu liquide en absence de Ca2+ ou Mg2+ ont des structures plus fragiles et aucune communauté antigénique avec les sérums des phages de la première classe. Au sein de ce groupe il n’a pas été possible de classer les bactériophages selon les critères choisis. (*) Séance du 21 février 1977. (1) Ce travail a bénéficié de l’aide de la Communauté Économique Européenne (contrat n° 454). 2) D. KRSMANOVIC-SIMIC et M. WERQUIN, C. R. Acad. Sc. Paris., 276, Série D, 1973, p. 2745. (3) D. E. BRADLEY, Bact. Rev., 31, 1967, p. 230. (4) M. H. ADAMS,
Bact. Rev., 31, 1967, p. 230. (4) M. H. ADAMS, The Bacteriophages, N. Y. Intersc., 1959. (5) J. M. DELATTRE, Thèse de Docteur Ingénieur, n° 121, Université des Sciences et Techniques de Lille 1, 1971. (6) R. STANIEWSKI, M. KOWALSKI, E. GOGACZ et F. SOKOLOWSKA, Acta Microbiol. Pol., 11, 1962, p. 245. (7) G. J. ATKINS, J. Virol., 12, 1973, p. 149. Laboratoire de Microbiologie, Université des Sciences et Techniques de Lille, B.P. 36, 59650 Villeneuve d'Ascq. VIROLOGIE. Relations entre l'ultrastructure de différents phages et des conjugués protéine-phage avec leur neutralisation spécifique. Note de Michèle German, Albert German et Marie-Joseph
neutralisation spécifique. Note de Michèle German, Albert German et Marie-Joseph Danse, présentée par M. Pierre Lépine. Reprenant notre technique de sensibilisation des phages par fixation d'un antigène protéique par l'intermédiaire d'un agent de fixation, et de leur inactivation par les anticorps antiprotéiques correspondant, nous avons réalisé des études comparées de phages présentant des morphologies caudales différentes. Nous rapportons ici les résultats concernant l'observation ultramicroscopique des quatre phages utilisés, l'efficacité et le rendement de leur sensibilisation, et la possibilité de leur neutralisation respective. Back to our technique of phage sensitization by protein fixation with the aid of coupling reagents, and of
protein fixation with the aid of coupling reagents, and of their inactivation by the specific anti-protein antibodies, comparative studies were made on phages having a morphologically different tail. Here we report the results concerning the ultramicroscopic observation of four phages, the efficiency and the rate of their sensitization, and the possibility of their respective neutralization. La fixation d'antigènes sur le phage T4 du colibacille et la neutralisation de l'activité lytique de ces phages sur la culture du germe par l'anticorps spécifique et l'antigène fixé, a été proposée simultanément par Haimovich et Sela [1-2] et par Makela [3]. Nous l'avons appliquée
et Sela [1-2] et par Makela [3]. Nous l'avons appliquée au phage T2 d'E. coli et à l'étude des anticorps antilysozyme [4-5]. Cherchant à expliquer ce phénomène de neutralisation, nous avons choisi quatre phages à ADN bicaténaire, de morphologies différentes, que nous avons traités avec cette même technique. CHOIX ET ÉTUDE MORPHOLOGIQUE DES PHAGES. — L'étude morphologique a été réalisée sur des culots de suspensions purifiées et concentrées de phages, après coloration négative au phosphotungstate d'ammonium pH 7,2, saccharose à 2 % (w/v) [6] et observation en microscopie électronique. Ces aspects sont résumés dans le tableau n° 1. Les suspensions
aspects sont résumés dans le tableau n° 1. Les suspensions de bactériophages sont préparées en eau peptonée : culture de 18 h sur les germes sensibles. Elles présentent des titres assez élevés et constants en moyenne de 109 phages par millilitre. Les plages de lyse en gélose double-couche sont bien caractéristiques de chaque phage. Les phages 7G et T2 donnent des plages arrondies, très nettes, pour le phage 7G régulières, petites de l'ordre du millimètre de diamètre. La culture est plus granuleuse pour le colibacille que pour le Staphylocoque, et le contour des plages, moins bien délimité. Il n'y a
le contour des plages, moins bien délimité. Il n'y a pas de culture secondaire dans ces plages qui restent stationnaires (fig. 6, a = 7G, b = T2). Le phage P22 donne des plages volumineuses, bien rondes, de 2 à 4 mm de diamètre, bien nettes. Très vite dans le centre des plages apparaissent des cultures secondaires, et dès la 12e h à 37°, les plages ont un aspect en couronne. Ceci est lié au caractère tempéré du phage P22 qui ne lyse pas toutes les bactéries mais en lysogénise certaines, qui se développent dans la plage de lyse (fig.
certaines, qui se développent dans la plage de lyse (fig. 5 c). Enfin, le phage T5 du colibacille donne des plages de dimensions très variables (2 à 8 mm de diamètre), arrondies mais à bords non nets. Les dénombrements de phages T5 en gélose double-couche sont très aisés pour les suspensions phagiques peu riches, sinon la confluence des plages gêne la lecture, puis les plages évoluent vers l'envahissement progressif par le germe. PRÉPARATION DE PHAGES SENSIBLISÉS AU LYSOZYME. Comme nous l'avons déjà décrit pour les phages 7G et T2 [4], nous avons fixé du lysozyme d'œuf sur ces phages, par
nous avons fixé du lysozyme d'œuf sur ces phages, par l'intermédiaire d'un agent de fixation, afin de leur faire acquérir la spécificité antigénique « lysozyme d'œuf » : — 0,1 ml de suspension de phages titrant environ 109 phages par ml. — 0,1 ml de solution stérile de lysozyme à 40 mg par ml en tampon phosphate sodique 0,05 M-pH 6,8, gelatiné à 20 mg par litre. — 0,025 ml de glutaraldéhyde à 1 % en eau distillée (phage Glut.). Parallèlement nous avons traité les phages par le tolylène-2,4-diisocyanate (TDIC), à raison de 0,03 ml de TDIC à 0,5 %
à raison de 0,03 ml de TDIC à 0,5 % dans le dioxane, pour les mêmes quantités et concentrations en phages et en lysozyme à fixer. TABLEAU 1 Morphologie comparée des phages P22, T5, T2 et 7G. Groupe (Bradley) et Phage Hôte famille (ICTV) Caractéristiques morphologiques P22 Salmonella CI Tête icosaédrique régulière (60 nm) tempéré typhimurium Pedoviridae Queue sessile, non contractile (fig. 1) Plaque basale à 6 crampons T5 Escherichia Bi Tête icosaédrique régulière (20 nm) (fig. 2) coli Styloviridae Queue longue (200 nm) flexible, non contractile Disque subterminal à 4 fibres pliantes T2 Escherichia A2 Tête icosaédrique allongée (110