jeanflop/post-ocr-correction huggingface dataset:
et d'autre part des corrélations entre les structures de la graine également différentes de celles existant chez les espèces antérieurement analysées. Le choix de ce matériel fut guidé par le fait que certains d'entre nous l'utilisent pour d'autres études génétiques (II). MÉTODES ET MÉTÉRIEL. — 1° Matériel. — Cette étude comprend 2 séries d'expériences (a) Lors de la première série, nous avons étudié le comportement de graines obtenues par autofécondation à partir de 21 lignées de Petunia hybrida hort. et de 4 lignées issues respectivement des espèces Petunia parodii Steere, Pétronie inflata R. Fries, Petunia violacea Lindl., Petunia axillaris (Lam)
Pétronie inflata R. Fries, Petunia violacea Lindl., Petunia axillaris (Lam) B.S.P.; parmi celles-ci se trouvent les 2 espèces ancestrales de Petunia hybrida hort. Il est fréquemment admis que ce sont Petunia axillaris et Petunia violacea [(12), (l1)]. (b) Lors de la seconde série, effectuée sur un plus petit nombre de lignées, le début des cultures (du semis au stade rosette) a été réalisé en serres; les plantes ont ensuite été placées dans une salle climatisée à 20°C, en jours longs de 16 h, sous un éclairement de 6 000 lx environ fournis par des tubes fluorescents « Philips couleur 34RS
environ fournis par des tubes fluorescents « Philips couleur 34RS ». Les graines ont été récoltées un mois après la floraison, au début de la déhiscence de chaque capsule et conservées en sachets de papier au laboratoire. 2° Méthodes : nous avons analysé les possibilités de germination des graines entières en effectuant des essais 1, 5, 20 et, dans le cas de P. parodii, 50 semaines après la récolte. Ils ont été réalisés à l'obscurité dans des boîtes de Petri de 60 mm de diamètre sur du papier filtre imbibé de 3 ml d'eau distillée, à 15°C, 25°C et 30°C,
de 3 ml d'eau distillée, à 15°C, 25°C et 30°C, ou d'une solution aqueuse d'acide gibbérellique (GA3) à 1 mg/1 (2,6. 10-6M), à 25°C. L'éventuelle photosensibilité des semences a été mise en évidence en exposant celles-ci soit à un éclairement de rouge clair (RC) pendant 5 mn, soit à un éclairement de RC (5 mn) suivi d'une phase obscure (10 mn) et d'un éclairement de rouge sombre (RS) (10 mn). L'exposition au RC a été effectuée après 16 h d'imbibition préalable des graines sur eau à 25°C et à l'obscurité. Le RC est obtenu à l'aide d'un filtre interférentiel «
Le RC est obtenu à l'aide d'un filtre interférentiel « Balzer filtraflex » (longueur d'onde 0 = 656 nm) et le RS par un filtre de même nature (n = 750 nm). Tous ces essais ont été réalisés avec 4 à 6 lots de 20 graines issus d'une même capsule et les lectures faites après 8 jours, le maximum de germinations possibles étant alors obtenu. La recherche des structures qui pourraient être responsables de l'état dormant s'est effectuée en comparant le comportement des graines entières (G), des embryons entourés de l'« albumen » (E.A) et des embryons isolés (E). Les
l'« albumen » (E.A) et des embryons isolés (E). Les dissections ont été réalisées en lumière verte après 1 h d'imbibition préalable à l'obscurité. Les essais de germination ont eu lieu une semaine après la récolte des graines, à 25°C et à l'obscurité, en conditions aseptiques sur eau (gélosée à 8 % ou non) ou sur milieu nutritif minéral (14) gélosé à 8 % et éventuellement enrichi de l'un, de plusieurs ou de la totalité de ces composés : glucose (30 g/1), aneurine (0,1 mg/1), pyridoxine (0,1 mg/1), acide nicotinique (0,1 mg/1), acide gibbérellique (10 mg/1), hydrolysat de caséine (1
(0,1 mg/1), acide gibbérellique (10 mg/1), hydrolysat de caséine (1 g/1). Les taux de germination sont exprimés en pourcentages d'embryons, isolés ou non, ayant germé après 8 jours de culture. Fig. 1. — Pourcentages de germination obtenus à la récolte avec des embryons entourés de « l'albumen » (E.A) et des graines entières (G) de 3 lignées de Petunia : en blanc, eau, 25°C, obscurité; en pointillé, RC, 16 h. d'imbibition; en noir, RC suivi de RS. 16 h d'imbibition; en hachuré, GA3, 25°C, obscurité. Fig. 2. — Pourcentages de germination obtenus dans différentes conditions avec les graines de 3
germination obtenus dans différentes conditions avec les graines de 3 lignées de Petunia en fonction du temps de conservation à sec : en blanc, eau, 15°C, obscurité; en pointillé, eau, 25°C, obscurité; en noir, eau, 30°C, obscurité; en hachuré, GA3, 25°C, obscurité. RÉSULTATS. — Les résultats obtenus lors de la première série d'expériences nous ont conduits à retenir 2 lignées de Pétunia hybrida : TLh2 et Tbl-3 ainsi que Pétunia parodii, lignées dont les états de dormance sont bien contrastés : — les graines de TLh2 présentent dans toutes les conditions citées précédemment et tout au long de leur conservation
conditions citées précédemment et tout au long de leur conservation à sec, des taux de germination élevés (85 à 98 %): — les semences de Tbl-3 et P. parodii ont en commun de ne germer à la récolte ni à 25°C, ni à 30°C (fig. 2) et d'avoir leur dormance levée après un apport de GA3 ou de RC (fig. 1). Mais les graines de Tbl-3 germent dès la récolte à 15°C et deviennent progressivement moins dormantes lors de leur conservation à sec (fig. 2), tandis que celles de P. parodii gardent à l'obscurité sur eau, des taux de germination
parodii gardent à l'obscurité sur eau, des taux de germination nuls, même après 50 semaines ; ces pourcentages sont alors supérieurs à 90 en présence de GA3 ou à la lumière. Les dissections nous ont apporté les renseignements suivants : — quelles que soient les conditions de culture utilisées, nous n'avons dans aucun cas obtenu de germinations d'embryons isolés; — en ce qui concerne l'embryon entouré de l'« albumen » (fig. 1), pour TLh2 et Tbl-3, sur eau, à 25°C et à l'obscurité, nous obtenons respectivement des taux de germination de 51 et 29 %, tandis que sur GA3, TLh2,
de 51 et 29 %, tandis que sur GA3, TLh2, Tbl-3 et P. parodii germent avec des pourcentages moyens respectifs de 60, 62 et 49%: — lorsque nous utilisons les graines entières, nous avons les meilleures possibilités germinatives (fig. 1), soit à l'obscurité sur eau (TLh2), soit après un apport de GA3 ou de RC (Tbl-3 et P. parodii). CONCLUSIONS. — La présente étude nous a permis de choisir, à partir de 25 lignées de Petunia, 3 d'entre elles : 1° TLh2, dont les semences sont non dormantes et non sensibles à RS; 2° Tbl-3 et P. parodii qui ne
sensibles à RS; 2° Tbl-3 et P. parodii qui ne peuvent germer à l'obscurité qu'en présence d'un apport de GA3 ou de RC et sont sensibles à RS. Mais ces 2 lignées présentent au niveau de la graine entière des degrés de dormance différents que l'on peut apprécier de 2 manières : — par les possibilités de germination des graines à différentes températures lorsque les essais sont réalisés immédiatement après la récolte; — par leur comportement au cours de la conservation : la dormance de P. parodii apparaît très stable dans le temps alors que celle de Tbl-3 évolue. Les
dans le temps alors que celle de Tbl-3 évolue. Les corrélations existant entre les différentes structures des graines de ces 3 lignées semblent complexes et différentes de celles antérieurement observées chez les espèces d'Avellanita, Triticum, Zea et Lactuca. L'embryon serait dans notre cas « albumen dépendant » et, s'il paraît y avoir chez Tbl-3 une inhibition liée à la présence des enveloppes, ces dernières seraient cependant indispensables à une bonne germination de TLh2 sur eau ou de Tbl-3 et P. parodii après un apport de GA3 ou de RC. Ce matériel nous semble donc intéressant pour tenter d'une part une
matériel nous semble donc intéressant pour tenter d'une part une étude de l'hérédité de la dormance et d'autre part une analyse précise des corrélations pouvant exister entre les différentes parties de la semence selon qu'elle est dormante ou non. Ce travail a été réalisé avec la collaboration technique de Mme J. Touvin. Séance du 21 mars 1977. I. KUGLER, Beitr. Biol. Pflanz., 28, 1951, p. 211. L. P. V. JOHNSON, Canad. J. Res., 13, 1935, p. 367. Y. SUZUKI et N. TAKAHASHI, Plant Cell Physiol., 10, 1969, p. 475. M. J. KASPERBAUER, Physiol. Plant., 21, 1968, p. 1308. F. GFELLER
J. KASPERBAUER, Physiol. Plant., 21, 1968, p. 1308. F. GFELLER et F. SVEJDA, Canadian J. Pl. Sc., 40, 1960, p. 1. P. C. MANGELSDORF, Genetics, 15, 1930, p. 462. M. RIDEAU, J. MONIN, P. DOMMERGUES et A. CORNU, Comptes rendus, 283. série D. 1976, p. 769. D. GLOBERSON, A. KADMAN-ZAHAVI et C. GINZBURG, Ann. Bot. (Lond.), 38, (154), 1974, p. 201. E. DUMAS, Thèse de spécialité, Dijon, 1975. Y. BAILLY, Communication orale. A. CORNU et P. DOMMERGUES, Comptes rendus, 272, série D, 1971, p. 3290. N. J. NATARELLA et K. C. SINK, Jr., J. Hered., 65, 1974, p. 85. M.
C. SINK, Jr., J. Hered., 65, 1974, p. 85. M. C. FERGUSON et A. M. OTTLEY, Amer. J. Botany, 19, 1932, p. 385. J. MONIN, Thèse doctorat d'État, Sciences naturelles, Dijon, 1968. Laboratoire de Biochimie générale; J. M. : Laboratoire de Physiologie végétale; Faculté des Sciences de la Vie de l'Université de Dijon; A. C. et P. D. : Laboratoire de Mutagenèse de l'INRA, 21000 Dijon. PATHOLOGIE VÉGÉTALE. — Induction d'une résistance à la fusariose par augmentation du contenu phénolique chez Lycopersicum esculentum. Note de Antoine Carrasco, Gérard Marigo et Alain M. Boudet, présentée par M. Roger Gautheret. L'apport de
Alain M. Boudet, présentée par M. Roger Gautheret. L'apport de quinate de potassium à de jeunes plants de Tomate, détermine une stimulation importante de leur teneur en composés phénoliques, et augmente leur résistance à la fusariose. Ces deux types de réponses sont également obtenus avec la phénylalanine, précurseur direct du métabolisme phénolique, alors que d'autres composés sans relation avec celui-ci, n'ont pas d'action. Ces observations démontrent l'intervention des composés phénoliques dans la résistance à une infection par Fusarium oxysporum chez la Tomate et suggèrent de nouvelles possibilités de lutte contre les infections fongiques. Feeding potassium quinate to young Tomato plants
les infections fongiques. Feeding potassium quinate to young Tomato plants increases both their phenolic content and their resistance to Fusarium oxysporum. The same results are obtained with phenylalanine, which is a precursor of phenolic metabolism, but other compounds not related to polyphenol synthesis have no effect. These results show the involvement of phenolic compounds in a resistance mechanism, and suggest new possibilities of treatment against infection. INTRODUCTION. — De nombreux résultats ont conduit à attribuer aux composés phénoliques un rôle dans la protection des plantes vis-à-vis des infections fongiques. Peu de recherches cependant ont considéré l'incidence, sur la résistance des
de recherches cependant ont considéré l'incidence, sur la résistance des végétaux, d'une augmentation provoquée du contenu phénolique. Celle-ci a pu être obtenue dans certains cas par apport de polyphénols [1], [2], [3] mais en général les conditions retenues apparaissent peu physiologiques. Chez Lycopersicum esculentum, l'apport d'acide quinique au niveau du système radiculaire [4] détermine une stimulation importante du taux des polyphénols naturels du végétal. En retenant ce modèle d'étude nous avons examiné les répercussions d'un tel traitement sur la résistance des plants de Tomate à une infection par Fusarium oxysporum. MATÉRIEL. TECHNIQUES EXPÉRIMENTALES. — Mode de culture. — Les plantules
MATÉRIEL. TECHNIQUES EXPÉRIMENTALES. — Mode de culture. — Les plantules de L. esculentum Mill. variété Marmande, retenues pour leur grande sensibilité au F. oxysporum [5] sont obtenues en salle conditionnée [6]. La souche de F. oxysporum f sp. lycopersici (Sacc) Snyder et Hansen est entretenue sur milieu solide et l'inoculum, utilisé lors des infections, produit sur milieu nutritif liquide [7]. Traitements des plants par l'acide quinique. — Au stade deux feuilles développées les bacs portant les plantules à traiter sont quotidiennement mis au contact d'une solution de quinate de potassium (pH 5,5) pendant 10 h, 3 jours consécutifs. Parallèlement, les
(pH 5,5) pendant 10 h, 3 jours consécutifs. Parallèlement, les plants témoins sont traités par l'eau distillée. Extraction et dosage des composés phénoliques. — L'extraction et le dosage des phénylsolubles ont été réalisés selon Marigo [8]. Les résultats sont exprimés en microgrammes d'acide chlorogénique. Infection artificielle des plants de Tomate. — Après 3 jours de traitement, les plantules sont prélevées, les racines lavées et leurs extrémités excisées [9], [10]. Le système radiculaire est ensuite plongé pendant 2 h dans une suspension de conidies dont la concentration par millilitre varie entre 8.106 et 10.106. Le repiquage sur sable des plants s'effectue
8.106 et 10.106. Le repiquage sur sable des plants s'effectue immédiatement après. Les bacs sont recouverts d'un cache protecteur pendant 24 h et placés dans les conditions de culture normale. Les premiers symptômes apparaissent 6 à 8 jours après l'infection. Ils se manifestent par la chute des feuilles cotylédonaires et le flétrissement des premières feuilles; la plante meurt généralement dans les jours qui suivent. Appréciation du degré d'infection. — Deux critères ont été retenus : la croissance des plants exprimée en pour-cent de la hauteur initiale au début du traitement et le nombre d'individus restés sains en fonction du temps.
et le nombre d'individus restés sains en fonction du temps. L'état pathologique de la culture dans son ensemble a été quantifié par référence à l'échelle de Davis [11]. RÉSULTATS. — À la suite des observations de Marigo et Boudet [2] nous avons cherché à obtenir une stimulation du « pool » phénolique sans modification significative de la croissance des plants. Ces deux exigences nous ont amené à comparer les répercussions, sur le contenu phénolique et la croissance, d'un traitement de courte durée (3 jours) par des solutions de quinate de potassium à différentes concentrations (tableau 1). TABLEAU 1 Contenu phénolique
potassium à différentes concentrations (tableau 1). TABLEAU 1 Contenu phénolique de plants témoins (T) et traités (E) par le quinate de potassium (QAK) à différentes concentrations. Répercussions du traitement sur la croissance : les différentes déterminations portent sur des lots de 20 plantules (le temps 0 correspond au début du traitement). Phénylsolubles totaux Croissance des plants (µg/g de mat.) frais) (pour cent de la hauteur initiale) Traitements 3 jours 3 jours 15 jours T H2O 267,7 130 ± 5 385 ± 10 E2 QAK 10 -2 M 278,5 129,5 ± 3 380 ± 8 E2 QAK 2.10 2 M 385,5
3 380 ± 8 E2 QAK 2.10 2 M 385,5 127,5 ± 3 390 ± 11 E2 QAK 4.10 2 M 573 121,5 ± 2 400 ± 9 L'apport d'acide quinique à la concentration de 4.10 -2 M, qui a été retenue pour les expériences ultérieures, conduit à une forte stimulation des teneurs en polyphénols, sans modifier de façon significative le développement ultérieur des plants. Effet du traitement quinate sur la résistance de la plante à l'infection. — Pendant les 15 premiers jours suivant l'infection les plants traités infectés (QAinf) ont un comportement comparable à celui des témoins non infectés
ont un comportement comparable à celui des témoins non infectés (T H2O); à l'inverse, les plants témoins soumis à l'attaque du parasite (Tinf) présentent une croissance très faible puis nulle (fig. 1) liée à l'installation du pathogène. L'apport de quinate de potassium empêche ainsi toute expression de la fusariose durant cette période (fig. 2). Cependant, passé ce délai, se manifestent les premiers symptômes infectieux; le traitement ne provoque donc seulement qu'un retard dans l'apparition de la maladie. Confirmation de l'intervention spécifique des polyphénols dans la résistance. — En utilisant l'acide quinique comme source de carbone pour le mycélium nous avons,
quinique comme source de carbone pour le mycélium nous avons, en premier lieu, vérifié la non-toxicité de ce composé vis-à-vis du pathogène. Il semble donc que ce précurseur ne puisse être impliqué directement. Par la suite, nous avons examiné, après apport de différents substrats organiques (acide citrique, inositol, phénylalanine), les répercussions sur le contenu phénolique et la résistance (tableau II). Seuls les traitements par des précurseurs directs (QAK, phe.) conduisent à une stimulation du « pool » phénolique et déterminent parallèlement une résistance des plants à l'infection. TABLEAU II Spécificité d'intervention de l'acide quinique (QAK) et de la phénylalanine (phe.)
d'intervention de l'acide quinique (QAK) et de la phénylalanine (phe.) sur la stimulation du pool phénolique et la résistance à la fusariose. (Les déterminations en phénols totaux ont été effectuées avant l'infection) Résistance observée (*) Phénols totaux • — » — . Traitements (ng/g de mat. frais) a b T H2O.. 214 0 0 QAK 4.10 2 M 565 100 79 Phe. 10 -2 M 590 100 94 Inositol 4.10 -2 M 192,5 0 0 Citrate de K. 4. 10 -2 M 214 0 0 (*) Le degré de résistance est apprécié selon la méthode de Davis (1967), (a) :
est apprécié selon la méthode de Davis (1967), (a) : 12 jours, (b) 17 jours après l'infection. DISCUSSION. — Ce travail apporte différents arguments permettant d'associer chez L. esculentum l'augmentation du « pool » phénolique et la résistance au Fusarium. En effet, celle-ci est obtenue chaque fois que l'on stimule la production des polyphénols après apport de précurseurs. Ces éléments représentent donc une nouvelle confirmation de l'intervention des composés phénoliques dans les mécanismes de défense des végétaux aux attaques fongiques. Fig. 1. — Croissance des plants témoins, sains (TH2O), infectés (T inf) et des plants traités par le quinate puis
(T inf) et des plants traités par le quinate puis infectés (QAinf). Après traitement par le catéchol, un résultat comparable se rapportant au même système hôte-parasite est décrit par Retig et Chet (4). Cependant, il est difficile de discerner si l'augmentation du degré de résistance est due au composé apporté ou à ses produits de transformation. Dans notre étude, le précurseur utilisé, l'acide quinique n'exerce par lui-même aucune action fongitoxique; il est naturellement présent en quantités importantes chez les végétaux (10) et existe, chez la Tomate, sous formes libre et combinée (2). Enfin, il est apporté au niveau du système
combinée (2). Enfin, il est apporté au niveau du système radiculaire de jeunes plants, cultivés sur leur support d'origine. Cet ensemble de conditions contribue au caractère physiologique du traitement qui ne détermine aucun traumatisme du végétal. Matta et coll. (2) ont comparé, lors de l'attaque par le Fusarium, le contenu phénolique de variétés de Tomates sensibles ou résistantes. La production de polyphénols s'avère dès le début de l'infection plus importante dans le cas de la variété résistante; il semble donc que le traitement envisagé dans cette étude simule chez une plante sensible, les réponses observées au niveau du métabolisme phénolique
plante sensible, les réponses observées au niveau du métabolisme phénolique pour des individus résistants. Fig. 2. — Évolution de la maladie pour des plants témoins infectés (Tinf). Les plants traités par le quinate de potassium puis infectés (QAinf) ne présentent aucun symptôme pour la période envisagée. Nous nous proposons par des traitements répétés au cours de l'infection, d'accroître à plus long terme la résistance vis-à-vis du pathogène, ce qui pourrait présenter un intérêt pratique dans la lutte contre la fusariose. Par ailleurs, seront abordées des études visant à élucider la nature des mécanismes impliqués. (*) Séance du 8 décembre 1976.
nature des mécanismes impliqués. (*) Séance du 8 décembre 1976. (1) T. KOSUGE, Ann. Rev. Phytopathol., 7, 1969, p. 195-222. (2) D. S. KIRKHAN, Nature, 1954, p. 690-691. (3) A. W. FELDMAN et R. W. HANKS, Phytochem., 10, (4), 1971, p. 701-709. (4) N. RETIG et I. CHET, Physiol. Plant. Pathol., 4, 1974, p. 469-475. (1) G. MARIGO et A. M. BOUDET, Physiol. Plant., 34, 1975, p. 51-55. (6) C. M. MESSIAEN et P. MAS, Ann. Phytopathol., 1, (3), 1969, p. 401-426. (7) H. LATERROT, Phytopathol., médit., 11, 1972, p. 154-158. (8) G. MARIGO, Analysis, 2, 1973, p. 106-110. (9)
154-158. (8) G. MARIGO, Analysis, 2, 1973, p. 106-110. (9) H. DAVIS Phytopathol., 57. (3). 1967. P. 311-314. (10) A. M. BOUDET, Thèse Doct. Sc., Toulouse, 1972. (11) A. FUCHS et F. W. DE VRIES, Neth. J. Plant Pathol., 75, 1968, p. 186-192. (12) A. MATTA, I. GENTILE et I. GIAI, Ann. Phytopathol., 1, 1969, numéro hors série. Centre de Physiologie végétale, Laboratoire associé n° 241, « Adaptations physiologiques chez les Végétaux », Université Paul-Sabatier, 118, route de Narbonne, 31077 Toulouse Cedex. NEUROANATOMIE. — Projections des noyaux réticulaires bulbaires et des noyaux du raphé sur les lobules VI et VII
des noyaux du raphé sur les lobules VI et VII du cortex cérébelleux chez le Chat. Note de Cesira Batini, Jocelyne Corvisier, Olivier Hardy et Dora Jassik-Gerschenfeld, présentée par M. Alfred Fessard. Par des injections de peroxydase localisées au lobule VI ou au lobule VII du cervelet, on montre, chez le Chat, une hétérogénéité des projections sur le cortex vermien dit « visuo-acoustique ». Les afférences originaires des noyaux réticulaires bulbaires latéral et paramédian se projettent essentiellement sur le lobule VI et les afférences issues des noyaux du raphé sur le lobule VII. Injections of horseradish peroxidase were made in
le lobule VII. Injections of horseradish peroxidase were made in lobules VI and VII of the cerebellar vermis (in the Cat). Serial frontal sections of the brain stem reveal that the lateral reticular and paramedian nuclei were essentially projected onto lobule VI, and the projections from the raphe nuclei onto lobule VII. Le cortex vermien postérieur, classiquement considéré comme l'aire cérébelleuse de projection des influx visuels et acoustiques, est une région relativement grande comprenant, suivant la classification morphologique de Larsell, le lobule VI et le lobule VII. Ses fibres afférentes sont de 2 sortes, comme pour l'ensemble du cortex cérébelleux,
sont de 2 sortes, comme pour l'ensemble du cortex cérébelleux, les fibres grimpantes et les fibres moussues. Les connexions que ces fibres forment entre le tronc cérébral et le vermis postérieur ont été étudiées depuis longtemps par les méthodes de dégénérescence orthograde et rétrograde. Mais l'utilisation des traceurs de type peroxydase du Raifort à transport rétrograde permet, à condition de limiter le site d'injection, une identification plus précise des corps cellulaires à l'origine des systèmes afférents. Dans cette étude, la peroxydase a été utilisée en vue de déterminer si les structures du tronc cérébral à l'origine des projections vers le
structures du tronc cérébral à l'origine des projections vers le lobule VI et le lobule VII sont ou non les mêmes. 4 chats adultes ont été utilisés chez lesquels on a pratiqué, sous profonde anesthésie au pentobarbital, des injections multiples bilatérales (3 à 10 points) de peroxydase dans les folia superficiels du lobule VI (2 cas) et du lobule VII (2 cas). En chaque point, un maximum de 0,1 fil de solution (diluée à 30 ou 50 % dans du liquide de Ringer ou dans de l'eau distillée) était déposé à l'aide d'une microseringue de 1 fil ou d'une micropipette
à l'aide d'une microseringue de 1 fil ou d'une micropipette de 50 fim de diamètre. Après un délai de 24 h permettant le transport rétrograde de l'enzyme vers le corps cellulaire, l'animal était perfusé, le liquide de fixation, la préparation de l'encéphale et la réaction histochimique se faisant suivant la technique déjà décrite. Les cellules marquées du tronc cérébral sont recherchées sur des coupes frontales et l'extension des sites d'injection est contrôlée sur des coupes sagittales du cervelet. Il s'agit de s'assurer que l'enzyme n'a pas atteint par diffusion la zone des noyaux intracérébelleux qui reçoivent également des afférences du