jeanflop/post-ocr-correction huggingface dataset:
encore à la paroi peuvent rester flottants dans la cavité gastrique. L'examen histologique montre que le transplant a perdu ses structures glandulaires et se transforme en une masse infiltrée de lymphocytes, se soudant au tissu sain voisin sans solution de continuité. Souvent, à sa place, on observe sur la face muqueuse de l'estomac, un creux de couleur rose ou un trou borgne dont les parois sont relativement souples, non calcifiées et d'où émergent des fils de suture non encore éliminés. DISCUSSION. — D'une part, la survie presque normale d'un grand pourcentage d'animaux porteurs de transplant et, d'autre part, l'aspect macroscopique
pourcentage d'animaux porteurs de transplant et, d'autre part, l'aspect macroscopique et microscopique de celui-ci, soulèvent deux problèmes, apparemment contradictoires, mais d'un grand intérêt physiologique : l'un se rapporte au fait que le transplant a été épargné par le suc gastrique, l'autre concerne les réactions immunologiques, peu brutales dans la plupart des cas, évitant à l'animal une péritonite mortelle. En effet, il est étonnant de constater qu'un lambeau de tissu, par le seul fait qu'il couvre d'une façon étanche une brèche gastrique, échappe aux actions du suc digestif, alors qu'un tissu de même nature, avalé ou mis à l'intérieur de l'estomac,
de même nature, avalé ou mis à l'intérieur de l'estomac, subit des assauts immédiats et violents des enzymes gastriques. Ce phénomène, observé antérieurement dans les transplantations duodénales, suppose l'existence d'un processus de protection efficace, provenant soit de l'hôte, soit du transplant lui-même. On peut penser, au premier abord, que l'hôte secrète suffisamment de mucus pour isoler le transplant du milieu nocif ambiant ; mais cette hypothèse, pour être justifiée, devrait réunir deux conditions : d'une part, la secrétion doit être assez élevée pour couvrir en permanence une surface de 1 cm2, ce qui paraît peu probable; d'autre part, l'hôte aurait
cm2, ce qui paraît peu probable; d'autre part, l'hôte aurait la faculté d'identifier le transplant comme une partie de lui-même; mais cette éventualité dépasse la réalité, car les réactions immunologiques non négligeables suscitées par la présence du transplant montrent que l'hôte est loin d'adopter le transplant au point de lui conférer sa protection. En éliminant le rôle de l'hôte, il reste celui du transplant. On peut penser et avec raison, que ce dernier continue à vivre un certain temps et secréter son propre mucus pour se protéger. MacDonald et Ferguson, en greffant un fragment de jéjunum fœtal sous la capsule
en greffant un fragment de jéjunum fœtal sous la capsule rénale de Souris, ont observé que les structures histologiques de la muqueuse ne sont altérées qu'à partir du 9e jour. Par ailleurs, les travaux de Baibekova ont montré, qu'en greffant à la partie fondique de l'estomac d'un Rat, un lambeau jéjunal de ce dernier, conservant encore toute sa vascularisation, non seulement le greffon n'est pas digéré, mais il manifeste son entière vitalité, vérifiée par les examens histologiques. Ces preuves militent en faveur de l'hypothèse selon laquelle le transplant, qu'il soit homologue ou hétérologue, a le pouvoir de se préserver lui-même
homologue ou hétérologue, a le pouvoir de se préserver lui-même des attaques du milieu gastrique de l'hôte, témoignage de sa survie. La vie du transplant est donc indéniable les premiers jours de l'opération; mais elle est cependant provisoire. MacDonald et Ferguson ont déjà noté que, vers le 10e jour, sur le fragment jéjunal greffé, les villosités s'atrophient, les cryptes des glandes de Lieberkuhn s'allongent, la lamina propria s'infiltre de lymphocytes : ce sont autant de manifestations de l'inéluctable phénomène de rejet. Mais le rejet va-t-il jusqu'à la nécrose ? Si les auteurs précités ne l'ont pas signalé, Holmes et coll.
les auteurs précités ne l'ont pas signalé, Holmes et coll. l'ont rapporté chez les Chiens porteurs d'un greffon constitué par une anse jéjunale de 50 cm et dont toute la vascularisation est rétablie par anastomose avec celle de l'hôte. Chez nos Rats opérés, seulement 10 % de transplantation homologue, 30 % de transplantation hétérologue, ont subi un rejet brutal par nécrose vers les 4e ou 5e jour entraînant une perforation gastrique. Dans tous les cas restants, les Rats vivent normalement, portant sur leur paroi gastrique une lamina propria infiltrée de lymphocytes et solidement soudée au tissu sain avoisinant. L'absence de
lymphocytes et solidement soudée au tissu sain avoisinant. L'absence de nécrose dans la majorité des cas fait supposer que les réactions immunitaires ont été atténuées, contrairement à ce qu'on observe fréquemment au cours des greffes de peau. La différence de destinées d'un transplant de peau et d'un transplant d'estomac, suggère que dans la transplantation d'un lambeau d'estomac, il existe un facteur atténuant le phénomène immunitaire. Comme le transplant de peau est drainé par le système cave et que le transplant d'estomac est branché sur le système porte, il y a lieu de penser que le foie est l'élément modérateur invoqué.
lieu de penser que le foie est l'élément modérateur invoqué. Une telle hypothèse a été prise en considération par plusieurs auteurs. Boeckx et coll. ont comparé les greffes de cœur de Rat faites en dérivation, soit sur le système cave, soit sur le système porte, et ont trouvé que celles branchées sur le système porte présentent une survie double de celles dérivées sur le système cave. Inchley, Paretto et coll. après des expériences in vitro avec des extraits hépatiques, sont parvenus à la conclusion que le foie, probablement par les cellules de Kupffer, présente soit un système de filtre, soit
cellules de Kupffer, présente soit un système de filtre, soit un pouvoir de séquestration des antigènes, conférant ainsi à l'hôte la capacité de neutraliser ou modérer la formation d'anticorps par la rate et le système lymphoïde. Séance du 21 mars 1977. H. LE VAN, Comptes rendus, 282, série L), 1976. p. 1963. H. LE VAN. Comptes rendus. 248. 1959. p. 1855. T. T. MACDONALD et A. FERGUSSON, Gut, 17. 1976, p. 81. E. M. BAIBEKOVA, Bull. Exp. Biol. Med., 77, 1974, p. 183. J. T. HOLMÈS, M. S. KLEIN, S. J. WINAWA et J. G. FORTNER, Gastroenterology, 61, 1971, p.
J. WINAWA et J. G. FORTNER, Gastroenterology, 61, 1971, p. 673. W. BOECKX, H. SOBIE, A. LACQUET, J. GRUVEZ et M. VANDERPUTTE, Transplantation, 19, 1975, p. 145. C. J. INCHLEY, Clin. Exp. Immunol., 5, 1969, p. 173. F. PARONETTO, E. RUBIN et H. POPPER, Lab. Invest., 11, 1962, p. 150. Laboratoire de Physiologie métabolique et Nutrition, Université Pierre-et-Marie-Curie, 9, quai Saint-Bernard, 75005 Paris. ENDOCRINOLOGIE. — Étude par dosage radio-immunologique de l'activité hormonale du tissu interstitiel du testicule de Gobius niger L. en culture organotypique : activité spontanée et stimulation hypophysaire. Note de Jean-Pierre Bonnin, présentée par M. Maurice Fontaine. Après
Note de Jean-Pierre Bonnin, présentée par M. Maurice Fontaine. Après culture du tissu interstitiel, le dosage révèle dans les milieux des taux très faibles de testostérone libre, des taux bien plus élevés de testostérone conjuguée, glucuronides et sulfates. L'association hypophysaire stimule très fortement la sécrétion. Des hypophyses précultivées pendant 12-13 jours ont gardé près de 70 % de leur pouvoir stimulant. After the interstitial tissue was cultivated, the radio-immunoassay revealed in the media very small quantities of free testosterone but much larger quantities of testosterone conjugates as glucuronides and sulfates. Association of pituitaries increases greatly the secretion. 12-13 days precultivated
Association of pituitaries increases greatly the secretion. 12-13 days precultivated pituitaries retain close to 70 % of their stimulating potency. Le tissu glandulaire qui borde la masse séminale du testicule des Gobiidés, Poissons Téléostéens, déjà assimilé à un tissu interstitiel, avait vu son rôle se préciser grâce à des études histochimiques et ultra-structurales. D'autres travaux ont montré l'apparition de stéroïdes libres et conjugués dans des incubats de testicules entiers. Nous-mêmes avons pratiqué chez Gobius niger la séparation de ce tissu d'avec la masse séminale et sa culture isolée, sa stimulation en culture par des hypophyses, et ainsi apprécié de façon
en culture par des hypophyses, et ainsi apprécié de façon qualitative la persistance d'un pouvoir stimulant dans des hypophyses précultivées seules pendant 3 semaines. Afin de réaliser un test quantitatif, nous avons choisi de doser la testostérone libérée dans les milieux de culture. MATÉRIEL ET MÉTHODES. — A. Cultures. — Les prélèvements ont été pratiqués aux mois de juin et juillet en période de reproduction avancée, sur des Poissons mûrs pesant entre 14 et 24 g. 1° Série A : Quelques Gobius S ont fourni chacun 3 explants : explant témoin cultivé pendant 64 h, explant associé à l'hypophyse du
témoin cultivé pendant 64 h, explant associé à l'hypophyse du même donneur et cultivé pendant 24 h, explant associé à l'hypophyse d'un autre donneur et cultivé pendant 64 h. Chaque explant repose sur un fragment de lens-paper à la surface d'un milieu liquide (1,3 ml) constitué d'hydrolysat de lactalbumine (5 '/.), d'extrait de levure (1 °/3 et de sérum de Poulet (20 %). 2° Séries B, C, D : 3 séries d'hypophyses de Gobius ont été cultivées sur milieu gélosé comprenant 12,5 % d'extrait d'embryon de Poulet de 6-7 jours et 12,5 % de sérum de Poulain, pendant 12 ou
et 12,5 % de sérum de Poulain, pendant 12 ou 13 jours. De nouveaux Poissons ont fourni alors chacun 3 explants de tissu interstitiel et une hypophyse témoin. L'ensemble est réparti en explant témoin, explant associé à une hypophyse précultivée, explant associé à l'hypophyse témoin, et cultivé pendant 70 à 72 h suivant la technique décrite pour la série A. Avant tout repiquage ou mise en parabiose, les hypophyses sont soigneusement lavées. B. Recherche de la testostérone. — Outre les milieux comportant les explants, chaque série comprend 2 à 3 milieux blancs de référence incubés de la même façon. 1°
milieux blancs de référence incubés de la même façon. 1° Testostérone libre : chaque milieu et le lens-paper, additionnés d'un traceur de 3 H-testostérone pour le calcul du taux de récupération, sont extraits 2 fois par 4 volumes d'éther qui après lavage est évaporé sous azote. L'extrait sec est purifié sur « Sephadex LH 20 » dans un système benzène-éthanol (95/5) selon Leymarie et coll. (8). L'éluat total est évaporé puis soumis au dosage. 2° Testostérone conjuguée : série A : chaque reliquat aqueux reçoit un traceur de glycuronide de 3 H-testostérone pour le calcul du taux de récupération, 100
3 H-testostérone pour le calcul du taux de récupération, 100 ng de EDTA. 100 unités de pénicilline, 100 µg de streptomycine, 20 UI de β-glycuronidase bactérienne. Ces milieux sont incubés à pH 6,5 et à 37° pendant 20 h, puis les stéroides libérées sont extraits par l'éther et traités comme précédemment : cette fraction comprend les glycuronides de testostérone. Les reliquats aqueux sont repris, portés à pH 1 par H2SO4 et additionnés de 20 % de NaCl, et extraits 2 fois par 1 volume d'acétate d'éthyle. Celui-ci est incubé à 37° pendant 20 h pour la solvolyse des sulfates. Neutralisé
37° pendant 20 h pour la solvolyse des sulfates. Neutralisé et évaporé, l'extrait est purifié et dosé comme précédemment : le résultat donne la teneur en sulfate de testostérone. Séries B, C, D les conjugués totaux sont extraits 2 fois par 1 volume d'acétate d'éthyle, après ajustage des milieux à pH 1 par H2SO4 et addition de 20 % de NaCl. Le solvant est incubé à 37° pendant 20 h pour la solvolyse des sulfates, puis neutralisé et évaporé. Le résidu sec est couvert par 1 ml de tampon acétate à pH 5,0 contenant 100 µg de EDTA, 100 unités
à pH 5,0 contenant 100 µg de EDTA, 100 unités de pénicilline, 100 µg de streptomycine, 0,5 µg d'acide mercurothiolique, 100 unités de sulfatase et 1 000 unités de β-glycuronidase d'Helix pomatia. Ces milieux, ajustés à pH 5,1, sont incubés à 37° pendant 43 à 48 h, puis extraits par l'éther après incorporation de 3 H-testostérone pour suivre le déroulement de l'extraction. Après purification et dosage, le résultat donne la teneur en testostérone conjuguée totale. Dans chaque série, 2 milieux blancs supplémentaires, additionnés au départ d'un standard de glycuronide de 3 H-testostérone, servent de référence pour calculer la récupération du
3 H-testostérone, servent de référence pour calculer la récupération du stéroide à partir de la forme conjuguée. C. Dosage radio-immunologique. — Il met en jeu un traceur de [³H], [⁴H], [⁵H], [⁶H] 3 H-testostérone et un immunsérum dirigé contre la testostérone (9). Le taux de déplacement du traceur est calculé par comptage de la fraction liée après séparation de la fraction libre par le charbon dextran. La zone de lecture efficace de la courbe standard se situe entre 20 et 300 pg, pour une gamme étalon étagée de 0 à 500 pg. L'éluat total de colonne, évaporé, est concentré dans
500 pg. L'éluat total de colonne, évaporé, est concentré dans 300 µl de tampon phosphate pH 7 gélatiné dont 70 µl serviront au calcul du taux de récupération, et le restant dilué ou non fournira 2 aliquotes de 100 µl pour le dosage. La limite de sensibilité maximale est alors égale à 60 pg par milieu. Pour le seul cas de la testostérone libre de la série A, la reprise de l'éluat par 800 µl de tampon porte la limite de sensibilité à 160 pg par milieu. RÉSULTATS. — Réunis dans le tableau ils portent sur 73 milieux et 158
dans le tableau ils portent sur 73 milieux et 158 dosages. Les quantités de testostérone libre sont très faibles, proches des valeurs fournies par les blancs. Les explants témoins montrent des quantités significativement plus faibles que les explants soumis à stimulation hypophysaire. Parmi ces derniers, les deux groupes (hypophyses témoins, hypophyses précultivées) n'offrent pas de différence significative. Par contre, la testostérone conjuguée apparaît en quantités importantes sous forme de glycuronides et sulfates, ces derniers étant prédominants. La quantité de testostérone conjuguée est fortement augmentée par la stimulation hypophysaire, et elle est fonction de la durée de la stimulation. Les hypophyses
est fonction de la durée de la stimulation. Les hypophyses précultivées pendant 12 ou 13 jours exercent encore un effet stimulant important, plus faible toutefois que celui des hypophyses témoins, et égal à 68,63 % de ce dernier. TABLEAU Quantités de testostérone présentes dans les milieux de culture Testostérone conjuguée (µg) Nombre Testostérone libre (µg) Glycuronides Sulfates (b) Témoins (64 h) 4 < sensibilité 226,5 + 20,29 147,75 + 14,56 p < 0,02 p < 0,01 Hypophyse (24 h) 4 < sensibilité 427,75 ± 57,59 1 912,75 ± 180,21 p < 0,01 p < 0,05 Hypophyse (64 h) 4 <
< 0,01 p < 0,05 Hypophyse (64 h) 4 < sensibilité 722,5 + 101,71 2 635,0 ± 229,93 Blancs 2 — Très < 60 Très < 60 Témoins 18 78,43 ± 2,67 396,42 ± 41,38 p < 0,01 < 0,001 Hypophyse précultivée 18 92,61 + 2,85 3 632,51 + 500,42 p < 0,3 N.S. < 0,001 Hypophyse témoin 18 98,69 ± 5,75 5 292,66 ± 732,43 Blancs 7 92,51 ±3,76 Très < 60 (Moyennes ± erreurs standard, exprimées en picogrammes par milieu, après corrections pour la dilution et pour le taux de récupération. (b) Sans correction pour la récupération. DISCUSSION.
taux de récupération. (b) Sans correction pour la récupération. DISCUSSION. — L'éventualité d'une interférence de la dihydrotestostérone ne peut être exclue, car les techniques utilisées ne permettent pas de la séparer de la testostérone, et ce stéroide croise avec tout immunsérum anti-testostérone. Les taux de réactions croisées avec la 11-hydroxy et la 11-céto-testostérone, signalées chez les Téléostéens, sont égaux à 0,68% et 2,94%; l'intervention de ces hormones est donc peu probable sauf si elles existent dans le milieu en quantités telles qu'elles inhibent de façon importante la liaison du traceur. La testostérone libre est très faible, les valeurs différant peu
La testostérone libre est très faible, les valeurs différant peu de celles des blancs; les valeurs de ces derniers sont dues sans aucun doute à la présence de testostérone dans le sérum utilisé pour la culture (des résidus de solvant ou de « Sephadex » n'induisent que des « effets de blanc » négligeables). La métabolisation de celle-ci par les explants expliquerait que les valeurs des témoins soient plus faibles que celles des blancs (p < 0,01), alors qu'une meilleure production de testostérone endogène par les explants soumis à stimulation viendrait compenser ou surpasser cette disparition. La quasi-totalité de la
viendrait compenser ou surpasser cette disparition. La quasi-totalité de la testostérone se retrouve sous forme conjuguée. Des incubations de testicules entiers de Gobius paganellus avaient montré l'apparition de stéroides libres et conjugués. Nous précisons ici que ces formes hormonales sont produites par la masse glandulaire homologuée à un tissu interstitiel, toute contamination par du tissu de la masse séminale restant négligeable. Ce tissu nous paraît homogène : des catégories cellulaires différentes sont-elles responsables de tel ou tel processus ? La signification de ces conjugués nous échappe; nous recherchons si ces formes, signalées chez certains Téléostéens, existent chez Gobius de façon
formes, signalées chez certains Téléostéens, existent chez Gobius de façon constante ou à un moment donné du cycle génital. La formation de ces stéroides conjugués est sensible à la stimulation hypophysaire. Nous cherchons à préciser si cette stimulation est purement gonadotrope ou si un autre facteur, par exemple prolactinien, joue un rôle. Nous tentons de connaître le point d'attaque de la stimulation : agit-elle au niveau de la stéroidogenèse seule ou intervient-elle aussi sur les processus de la conjugaison ? Quoi qu'il en soit, les résultats confirment que ce pouvoir stimulant persiste à un niveau important dans des hypophyses déconnectées
stimulant persiste à un niveau important dans des hypophyses déconnectées et isolées depuis 12 à 13 jours : ils quantifient ce pouvoir stimulant. Nous pensons qu'un tel modèle nous permettra d'étudier de façon précise les interactions régissant les relations hypophyso-génitales. * Séance du 21 mars 1977. J. H. VIVIEN, Travaux Stat. Zool. Wimereux, 13, 1939, p. 713. H. STANLEY, G. CHIEFFI et V. BOTTE, Z. Zellforsch., 65, 1965, p. 350. L. COLOMBO et P. BURIGHEL, Cell. Tiss. Res., 154, 1974, p. 39. L. COLOMBO, C. LUPO DI PRISCO et G. BINDER, Gen. Comp. Endocrinol., 15, 1970, p. 404. J.-P. BONNIN,
BINDER, Gen. Comp. Endocrinol., 15, 1970, p. 404. J.-P. BONNIN, C. R. SOC. Biol., 169, 1975, p. 548. J.-P. BONNIN, C. R. Soc. Biol., 169, 1975, p. 920. P. LEYMARIE, N. STRAIS, et R. SHO[ i FR. PATLI. Biol. 22. 1974. p. 877. Le Dr R. V. Short du Medical Research Council d'Edimbourg nous a fourni l'immunsérum et le Pr R. Canivenc de l'Université de Bordeaux a mis le matériel de son laboratoire à notre disposition. R. ARAI et B. TAMAOKI, Gen. Comp. Endocrinol., 8, 1967, p. 305. D. R. IDLER et H. C. MACNAB, Can. J. Biochem., 45, 1967,
IDLER et H. C. MACNAB, Can. J. Biochem., 45, 1967, p. 581. D. GRAJCER et D. R. IDLER, Can. J. Biochem. Physiol., 39, 1961, p. 1585. Laboratoire d'Anatomie comparée, Institut de Biologie animale, Université de Bordeaux 1, 33405 Talence Cedex. ENDOCRINOLOGIE DES INVERTÉBRÉS. Cytochrome P-450 et hydroxylation de l'ecdysone en ecdystérone chez Locusta migratoria in vitro. Note de René Feyereisen, transmise par M. Pierre Joly. Des suspensions microsomales de corps gras et de tubes de Malpighi de Locusta sont capables d'hydroxyler l'ecdysone en ecdystérone. Cette réaction nécessite O2 et le NADPH et est inhibée par le CO. L'ecdysone donne un
NADPH et est inhibée par le CO. L'ecdysone donne un spectre de différence de type 1 avec ces microsomes contenant du cytochrome P-450. Un cytochrome P-450 est donc impliqué dans l'hydroxylation de l'ecdysone en ecdystérone. Microsomes from locust fat body and Malpighian tubules convert ecdysone to ecdysterone. This reaction is O2 and NADPH dependent and is inhibited by carbon monoxide. Ecdysone produces a type I spectral change when added to microsomes which contain cytochrome P-450. It is concluded that a cytochrome P-450 species is responsible for ecdysone hydroxylation. La conversion de l'ecdysone (2|3,3(3, 14a, 22R, 25-pentahydroxy-5|3-cholest-7-ène-6-one, α-ecdysone) en ecdystérone (20-hydroxyecdysone,
de l'ecdysone (2|3,3(3, 14a, 22R, 25-pentahydroxy-5|3-cholest-7-ène-6-one, α-ecdysone) en ecdystérone (20-hydroxyecdysone, β-ecdysone) in vivo a été démontrée par King et Siddall chez Calliphora vicina en 1969. Toutes les études effectuées depuis ont confirmé que les Insectes convertissent l'ecdysone en ecdystérone in vivo. De plus, il a été démontré que les glandes prothoraciques qui sécrètent l'ecdysone sont incapables de l'hydroxyler en ecdystérone, mais que cette conversion a lieu dans divers autres tissus. Ainsi chez Locusta migratoria, le corps gras et les tubes de Malpighi sont les organes où l'on observe la plus forte conversion de l'ecdysone en ecdystérone in vitro. Nous nous
forte conversion de l'ecdysone en ecdystérone in vitro. Nous nous sommes penchés sur la localisation subcellulaire de cette hydroxylation, ainsi que sur son mécanisme. Cette Note présente quelques données qui indiquent le rôle probable d'un cytochrome P-450 en tant qu'oxydase terminale du système enzymatique responsable de l'hydroxylation en C20 de l'ecdysone. Des précisions concernant la localisation microsomale de ce système, l'identification définitive du produit de la réaction (ecdystérone), ainsi que divers paramètres de l'activité enzymatique font l'objet d'un autre travail. TABLEAU Conversion de l'ecdysone en ecdystérone par la fraction « microsomale » des tubes de Malpighi de Locusta migratoria Conditions
microsomale » des tubes de Malpighi de Locusta migratoria Conditions Activité relative suspension microsomale, 1 ml 5 mg protéines, 0,5 mM NADPH 100 % microsomes portés à 100°C, 5 mn 0. % -NADPH < 2 % -NADPH, + 0,5 mM NADH < 2 % + 0.5 mM NADH . 119 % O2 remplacé par N2 26 % mélange O2 + CO 1/1 81,3 % CO barboté 1 mn 52 % L'incubation est faite à 30°C pendant 20 mn en présence de 0,01 mM d'ecdysone tritiée. La cinétique de la réaction est linéaire pendant au moins 30 mn. Moyennes de deux
est linéaire pendant au moins 30 mn. Moyennes de deux déterminations. Les tissus (corps gras ou tubes de Malpighi) sont prélevés à froid (4°C) sur 30-40 animaux du dernier tiers du stade V. Ils sont rincés puis homogénéisés dans un tampon Na-K-phosphate 200 mM. pH 7.4 à l'aide d'un homogénéisateur « Tellon »-cercle. L'homogénéité est soumise à une centrifugation différentielle (1 000 g. 10 min; 10 000 g. 10 min; 100 000 g. 60 min. Le culot 100 000 g est repris par le même tampon ajouté de MgCl2 (2,5 mM) et de sérum albumine bovine (1 mg/ml) pour donner
mM) et de sérum albumine bovine (1 mg/ml) pour donner une suspension « microsomale » à environ 5 mg/ml de protéines microsomales. Une partie aliquotée de la suspension « microsomale » est incubée à 30°C pendant 20 min en présence de NADPH (0,5 mM) et d'ecdysone tritiée (0,01 mM) purifiée auparavant sur couche mince. La réaction est arrêtée par addition de méthanol. Le substrat et le produit de la réaction sont extraits au méthanol et séparés sur couche mince de silice (0,25 mm) par deux développements dans le système de solvants chloroforme-méthanol 80/20 v/v. Le produit de la réaction coïncide
solvants chloroforme-méthanol 80/20 v/v. Le produit de la réaction coïncide avec l'ecdystérone de référence et a été identifié comme étant l'ecdystérone (1). Les spectres de différence ont été enregistrés à l'aide d'un spectrophotomètre « Cary 118c » à 18°C. RÉSULTATS. — 1. Conditions de la réaction enzymatique. Les suspensions « microsomales » de corps gras et de tubes de Malpighi de Locusta sont capables d'effectuer la conversion de l'ecdysone en ecdystérone. Cette conversion nécessite non seulement la présence et l'intégrité de ces microsomes, mais encore la présence d'un cofacteur, le NADPH. Comme l'indique le tableau, le NADH n'est pas capable