jeanflop/post-ocr-correction huggingface dataset:
milieu de Sauton qu'après les essais de leur adaptation au ribitol. Bien que très lentement, les extraits de toutes ces Mycobactéries réduisent le NADP en présence du glycérol, du ribitol ou de l'érythritol. Contrary to the tubercle Bacilli (H37Ra, BCG), Mycobacterium phlei has a ribitol-NAD dehydrogenase (that also oxidizes, although to a lesser extent, erythritol and glycerol). This difference is observed with the Bacteria grown on Sauton's medium, as well as after their adaptation to ribitol. The extracts of all these Mycobacteria reduce, NADP in the presence of glycerol, ribitol or erythritol, though very slowly. La ribitol désoxygénase (ribitol :
or erythritol, though very slowly. La ribitol désoxygénase (ribitol : NAD oxydoréductase EC 1.1.1.56) n'a pas été signalée jusqu'à présent chez les Mycobactéries, dont on connaît certaines autres polyol désoxygénases. MÉTHODES. — Les mycobactéries (BCG, H37Ra, M. phlei) sont cultivées, pendant 6 à 12 jours, à la surface du milieu de Sauton (milieu A). Les essais d'adaptation au ribitol de ces bactéries, à l'état proliférant, sont effectués dans ce même milieu privé de glycérol et additionné de ribitol à 1 % (milieu B). Dans certains cas les voiles bactériens obtenus à la surface du milieu de Sauton sont mis (à
à la surface du milieu de Sauton sont mis (à l'état non proliférant) en contact avec le ribitol : le milieu ayant servi à la culture est éliminé et remplacé stérilement par le milieu C (qui correspond au milieu A privié d'asparagine et de glycérol et additionné de ribitol à 0,5 %). Les Bactéries sont ensuite désintégrées par les ultrasons. La ribitol désoxygénase de M. phlei est purifiée par chromatographie (DEAE-cellulose, Sephadex G-200) et par électrophorèse (polyacrylamide-agarose), à + 4°C. L'activité de la ribitol déshydrogénase est mesurée au spectromètre (à 340 nm). La cuvette (trajet optique = 0,5 cm) reçoit
340 nm). La cuvette (trajet optique = 0,5 cm) reçoit : le tampon Tris-HCl 6.10-2 M pH 8,8, MgCl2 5. 10-3 M, p-NAD 5.10-4 M (dans certains cas, NADP 5.10-4 M au lieu de NAD), l'enzyme et, au temps 0, le substrat 0,1 M. Volume final : 1,5 ml. Température : 37°. La cuvette témoin contient ce même mélange réactionnel privé de substrat. Coefficient d'extinction du NAD réduit : 6,22 mM 1 cm'' à 340 nm. Unité d'enzyme : quantité qui catalyse la réduction de 1 millimicromole de NAD+ par minute. Activité spécifique : unités d'enzyme par milligramme de protéines.
minute. Activité spécifique : unités d'enzyme par milligramme de protéines. En qualité de substrat nous avons expérimenté le ribitol, l'érythritol et le glycérol (qui sont, respectivement, des polyols en C5, C4 et C3). Dans le cas du glycérol, la réaction inverse (dihydroxyacétone + NADH -> glycérol + NAD+) est mesurée d'après le procédé décrit par Fossitt et Wood (6). RÉSULTATS. — Le surnageant brut (dialysé) de M. phlei réduit nettement le NAD+ en présence du ribitol, de l'érythritol ou du glycérol; tandis que, dans les mêmes conditions, cette activité est nulle, ou extrêmement faible, pour les surnageants des Bacilles tuberculeux
nulle, ou extrêmement faible, pour les surnageants des Bacilles tuberculeux (H37Ra ou BCG) (tableau). Dans ces derniers cas, l'absence d'activité ne semble pas être due à une interférence secondaire susceptible de masquer la réaction, car l'enzyme de M. phlei ajoutée au mélange réactionnel de H37Ra ou du BCG catalyse normalement la réduction du NAD+ en présence d'un de ces substrats. Ainsi, contrairement à M. phlei, H37Ra et BCG sont dépourvus de ribitol déshydrogénase dépendante de NAD. Ces résultats négatifs (H37Ra et BCG) sont observés aussi bien avec des cultures jeunes (8 à 12 jours) que plus âgées (22 à 30
(8 à 12 jours) que plus âgées (22 à 30 jours). Ils restent également négatifs après les essais d'adaptation de ces cultures, à l'état non proliférant, au ribitol (milieu C). Aucune croissance du BCG et de H37Ra n'est observée sur milieu B (ribitol = source de carbone). A la suite de l'adaptation au ribitol de M. phlei à l'état proliférant (milieu B), l'activité spécifique du surnageant augmente nettement à l'égard du ribitol, de l'érythritol et du glycérol, en présence du NAD (tableau). Nous nous sommes demandés si ces réactions étaient catalysées par des enzymes différentes ou par une seule et
catalysées par des enzymes différentes ou par une seule et même enzyme. Nous avons observé que les activités concernant ces trois substrats n'ont pas été dissociées et que le rapport entre elles n'a pas été modifié au cours des différentes étapes de purification de la ribitol déshydrogénase de M. phlei. Il semble donc qu'il s'agisse là d'une oxydation du ribitol, de l'érythritol et du glycérol par une seule et même déshydrogénase, dépendante de NAD. TABLEAU Oxydation du ribitol, de l'érythritol et du glycérol par les déshydrogénases extraites des Mycobactéries Activité spécifique Substrat Coenzyme M. phlei H37Ra BCG (A) (B) (C)
spécifique Substrat Coenzyme M. phlei H37Ra BCG (A) (B) (C) (A) (C) (A) (C) Ribitol NAD 61 135 59 0 0 0 0 Erythritol NAD 51 118 48 0 0 0 0 Glycérol NAD 34 78 35 0 0-0,01 0 0-0,02 Ribitol NADP 3 0,68 3 0,16 0,14 0,11 0,17 Erythritol NADP 3 0,77 3 0,18 0,20 0,08 0,20 Glycérol NADP 3 0,94 2 0,42 0,38 0.25 0,31 (A) milieu de Sauton; (B) milieu au ribitol (l'état proliférant); (C) milieu au ribitol (l'état non proliférant). Nous avons étudié certaines propriétés de la ribitol déshydrogénase de M. phlei. Le P.M., évalué
de la ribitol déshydrogénase de M. phlei. Le P.M., évalué par filtration sur gel de « Sephadex G-200 », est de 108 000. En présence du glycérol, le pH optimal (réduction de NAD+) est de 8,8 (activité spécifique = 0,552); en présence de dihydroxyacétone (réaction inverse, oxydation de NADH) le pH optimal est de 6,3 (activité spécifique = 2,76). A pH 8 (Tris) et à 28°, la constante d'équilibre (Keq) [dihydroxyacétone] [NADH]/[glycérol] [NAD] = 199.10-6. La constante d'équilibre correspondante est de 199.10-5 pour le ribitol et de 197.10-6 pour l'érythritol. Km est de 12.10-3 M (ribitol), 1,2. 10-1 M (érythritol),
Km est de 12.10-3 M (ribitol), 1,2. 10-1 M (érythritol), 6,6. 10-1 M (glycérol). Rappelons que pour la ribitol déshydrogénase de Aerobacter aerogenes, le Km (ribitol) est de 2,6. 10-3 M (6). En présence de l'enzyme de M. phlei, l'énergie d'activation apparente est de 14,6 (ribitol), de 15,3 (érythritol) et de 10,6 (glycérol) kcal/mole. La réduction du NAD+ , en présence du ribitol, de l'érythritol ou du glycérol, est totalement abolie par le p-chloromercuribenzoate 10-1 M et l'acide monoiodoacétique, l'iodoacétamide, N-éthylmaléimide (5.103 M). L'hydrazide de l'acide isonicotinique (INH) 5. 10-5 M est sans effet. Notons, par ailleurs, que les Bacilles
M est sans effet. Notons, par ailleurs, que les Bacilles tuberculeux (H37Ra, BCG) — qui sont dépourvus de la ribitol déshydrogénase dépendante de NAD — réduisent faiblement le NADP en présence du glycérol, de l'érythritol ou du ribitol; l'oxydation du glycérol étant environ deux fois plus rapide (tableau). Chez H37Ra, une telle oxydation du glycérol a été attribuée à une glycérol déshydrogénase dépendante de NADP (8). (*) Séance du 4 avril 1977. (1) M. SZYMONA et M. PIETRUSIEWICZ, Acta Microbiol. Pol., 18, 1969, p. 145. (2) O. SZYMONA, M. PIETRUSIEWICZ et M. SZYMONA, Acta Biochim. Pol., 15, 1968, p. 79.
et M. SZYMONA, Acta Biochim. Pol., 15, 1968, p. 79. (3) T. KIMURA et T. SASAKAWA, J. Biochem., Tokyo, 44, 1957, p. 859. (4) F. G. WINDER et P. J. BRENNAN, J. Bacteriol., 92, 1966, p. 1846. (5) A. ANDREJEW, M.-T. ORFANELLI et J. DESBORDES, Ann. Microbiol., Institut Pasteur, 125 A, 1974, p. 323. (6) D. D. FOSSITT et W. A. WOOD, In Meth. Enzymol., 9, 1966, p. 180. (7) M. INDIRA et T. RAMAKRISHNAN, Biology and Biochemistry of microorganisms, (Golden Jubilee Symp. Indian Inst. Sc., Abstracts, Bangalore, India, 1959, p. 26). (8) D. S. GOLDMAN, J. Bacteriol., 86, 1963,
p. 26). (8) D. S. GOLDMAN, J. Bacteriol., 86, 1963, p. 30. École pratique des Hautes Études et C.N.R.S., Laboratoire de Physiopathologie microbienne, 5 ter, rue d'Alésia, 75014 Paris. Une différence très nette, portant sur deux fractions protéiniques, est mise en évidence entre la forme bisexuée et la forme parthénogénétique et justifie leur séparation taxonomique en deux espèces. Disc-electrophoresis are carried out from homogenates of Polyxenus lagurus. An obvious difference concerning two protein fractions is noted between the bisexual form and the parthenogenetic one; on this basis two species can be differentiated. Outre la différence de coloration, Schomann a mis
be differentiated. Outre la différence de coloration, Schomann a mis en évidence l'amixie entre les formes bisexuée et parthénogénétique de Polyxenus lagurus. Dans des publications précédentes, l'un de nous a recherché l'existence de caractères morphologiques permettant d'identifier les deux sortes de femelles dont la coloration a pu être altérée par la conservation dans l'alcool. Compte tenu de la variabilité de la taille de certaines populations bisexuées en fonction de leur origine géographique, plusieurs caractères distinctifs ont pu être mis en évidence sur des échantillons importants : nombre plus faible de sensilles grêles sur le 6e article antennaire et présence pratiquement
sensilles grêles sur le 6e article antennaire et présence pratiquement constante de 12 sensilles sur les bras des palpes gnathochilariaux chez la forme parthénogénétique (ce nombre variant de 13 à 20 chez les exemplaires bisexués étudiés). Depuis, Enghoff a réfuté la validité de ces caractères d'après l'étude de 27 lots, attribués aux deux formes, provenant du Danemark et du sud de la Suède. L'apport fourni par des caractéristiques biochimiques peut contribuer à lever cette apparente contradiction, et tout particulièrement le protéinogramme en gel de polyacrylamide de broyats d'animaux, la très petite taille de Polyxenus (2 à 3 mm) ne permettant
petite taille de Polyxenus (2 à 3 mm) ne permettant pas de prélever de l'hémolymphe en quantité suffisante. Les résultats de cette expérimentation et les conclusions auxquelles ils conduisent font l'objet de cette Note. MÉTÉRIEL ET MÉTHODES. — Les individus de la forme bisexuée proviennent de la région parisienne (Sucy-en-Brie et Boissy-Saint-Léger). Il s'agit d'adultes et d'individus à 12 paires de pattes des deux sexes. Les femelles parthénogénétiques viennent de la Lorraine (Vézelise) et de la Nièvre (Cuzy), adultes et individus à 12 paires de pattes. Des lots de 25 ou 30 individus identiques entre eux sont broyés à l'aide
ou 30 individus identiques entre eux sont broyés à l'aide d'un broyeur du type « Thomas » dans 400 p.1 d'une solution de saccharose 0,25 M contenant 1 % de « Triton X-100 ». Un prélèvement de 100 jxl est déposé pour l'électrophorèse en gel de polyacrylamide à 7 %, conduite selon la technique de Davis. Le tampon est à pH 8,3, l'intensité reste inférieure à 5 m A par gel, la migration dure 70 mn environ à 4°C. Le front de migration est repéré par le bleu de bromophénol et les gels sont coupés à hauteur du front à
et les gels sont coupés à hauteur du front à la fin de la migration pour pouvoir déterminer ensuite la mobilité des différentes fractions protéiques révélées par l'amidoschwarz. RÉSULTATS. Sur un fond difficile à décolorer complètement en raison de la présence vraisemblable de lipoprotéines abondantes, on peut distinguer aisément une quinzaine de fractions (fig. A et B). Celles-ci sont désignées par des lettres a, b, c en fonction de leur mobilité décroissante, les bandes voisines étant regroupées sous la même lettre mais distinguées par un indice : al, a2... Les bandes qui paraissent propres à chacune des formes sont désignées
bandes qui paraissent propres à chacune des formes sont désignées par une lettre particulière : S, P, ... Dans le cas présent ce sont les fractions les plus mobiles (RM^0,5) qui offrent le plus d'intérêt. L'examen comparatif des protéinogrammes permet en effet de constater l'existence d'une fraction particulière à la forme bisexuée, la fraction S (fig. A) de mobilité 0,63 dans nos conditions expérimentales. Dans cette zone, la forme parthénogénétique présente (fig. B) deux fines bandes Px et P2, l'une moins mobile, l'autre plus mobile que S, nettement plus discrètes que celle-ci (p2 étant plus marquée que Pl). Dans la
que celle-ci (p2 étant plus marquée que Pl). Dans la zone de mobilité 0,50, la fraction D est homogène chez la forme bisexuée, elle n'est pas homogène (Dl et D2) et moins intense chez la forme parthénogénétique. Protéinogrammes de Polyxenus lagurus : A, femelle de la forme bisexuée; B, femelle parthénogénétique; la flèche ♦ indique le sens de la migration. Enfin, l'aspect du protéinogramme en gel de polyacrylamide est identique chez les mâles et les femelles de la forme bisexuée; dans chacune des deux formes, il ne montre pas de différences entre adultes et subadultes (individus à 12 paires de
différences entre adultes et subadultes (individus à 12 paires de pattes) et chez les deux formes il reste inchangé au cours de l'année (électrophorèses en mars-avril, mai-juin et décembre). DISCUSSION ET CONCLUSION. — Chez les individus des deux sexes de la forme bisexuée, il existe d'une part une fraction protéique S, de mobilité 0,63,qui n'a pas son équivalent dans la forme parthénogénétique, d'autre part une fraction D, homogène, de mobilité 0,5, représentée dans la forme parthénogénétique par deux fractions Dl et D2 de mobilité légèrement différente, donc de nature différente. À l'inverse, les fractions protéiques P1 et P2 de la
À l'inverse, les fractions protéiques P1 et P2 de la forme parthénogénétique, qui se situent dans la zone de mobilité de S, n'existent pas chez les individus de la forme sexuée. Ces caractéristiques, stables dans le temps et existant déjà chez les individus subadultes, répondent donc à la catégorie des caractères de détermination invariants tels qu'ils sont définis par Vachon. Ces invariants de nature biochimique, s'ajoutent aux caractéristiques morphologiques coloration, nombre de sensilles — et biologiques amixie, développement postembryonnaire — propres à chacune des formes de Polyxenus lagurus. Ces critères réunis permettent de considérer tous les individus parthénogénétiques et bisexués
réunis permettent de considérer tous les individus parthénogénétiques et bisexués comme appartenant à 2 espèces distinctes; mais, avant de les nommer, il faut déterminer laquelle des deux formes correspond à celle décrite par Linné sous le nom spécifique lagurus. Séance du 18 avril 1977. (1 ) K. SCHOMANN. Zool. Jb. Syst.. 84, 1956, p. 195-256. (2) M. NGUYEN DUY-JACQUEMIN. Bull. Mus. nat. Hist. nat., Paris, n° 259, Zool., 181, 1974, p. 1585-1609. (3) M. NGUYEN DUY-JACQUEMIN, Bull. Mus. nat. Hist. nat., Paris, n° 356, Zool., 249, 1976, p. 105-118. (4) H. ENGHOFF. in Ent. Meddr.. 44, 1976, p. 161-183. (5)
H. ENGHOFF. in Ent. Meddr.. 44, 1976, p. 161-183. (5) B. DAVIS, Ann. N.Y. Acad. Sci., 121, 1964, p. 404-427. (6) M. VACHON, Bull. Mus. nat. Hist. nat., Paris, Zool. 104, 3e sér., 1973, p. 857-958. Laboratoire de Zoologie (Arthropodes), Muséum national d'Histoire naturelle, 61, rue de Buffon, 75005 Paris. MICROBIOLOGIE. — Bacillus thuringiensis var. pakistani : nouvelle sous-espèce correspondant au sérotype 13. Note de Huguette de Barjac, Véronique Cosmao-Dumanoir, Rafi Shaik et Gabriel Viviani, présentée par M. Jacques Tréfouël. Une nouvelle sous-espèce de B. thuringiensis est décrite sur la base d'un nouvel antigène flagellaire H13 et d'un certain nombre
base d'un nouvel antigène flagellaire H13 et d'un certain nombre de critères biochimiques. Le nom de pakistani est proposé pour cette variété qui a été isolée d'insectes du Pakistan. A new subspecies of B. thuringiensis is described on the basis of a new flagellar antigen: H13 and of several differential biochemical characters. The name pakistani is proposed for this variety which has been isolated from insects in Pakistan. Au cours d'études menées sur 176 souches de Bacillus, isolées par l'un de nous, d'insectes du Pakistan, nous avons à l'Institut Pasteur identifié seize souches « cristallifères », typiques de l'espèce B.
identifié seize souches « cristallifères », typiques de l'espèce B. thuringiensis. Le sérotype 4 a, 4 b est le plus souvent représenté avec les biotypes sotto et dendrolimus qui totalisent douze souches, isolées à partir de Bombyx mori ou de Carpocapsa pomonella. Deux autres souches, isolées à partir de B. mori ou de Tryporhyza insertatis, appartiennent au sérotype 3 a, 3 b, sous-espèce kurstaki. Enfin, les deux dernières souches (nos 94 et 150) nous ont permis de mettre en évidence un nouvel antigène H13 qui vient ajouter un autre sérotype aux douze précédemment décrits. Ces deux souches sont isolées à
aux douze précédemment décrits. Ces deux souches sont isolées à partir de C. pomonella ou de Pectinophora gossypiella. Morphologiquement, leurs cellules sont caractérisées par la présence de cristaux, ou inclusions parasporales, effilés, très pointus. Libérés dans le milieu de culture, ces cristaux apparaissent souvent accolés par deux et semblent parfois rester liés à la spore (fig. 1 et 2). Leur pouvoir pathogène, en association avec les spores, a pu être vérifié sur Pieris brassicae e). Les deux souches en question forment un voile en culture sur bouillon nutritif. Leurs colonies sur gélose nutritive sont de type R. Il n'y a
sur gélose nutritive sont de type R. Il n'y a pas production de pigment, ni sur gélose-tyrosine, ni sur Pomme de terre. Du point de vue des caractères biochimiques, les deux souches étudiées produisent de l'acétyl-méthyl-carbinol et une lécithinase ou phospholipase C. Elles acidifient lentement, au bout de 10 jours environ, les milieux spéciaux à base de salicine. En présence de saccharose, la formation d'acide est beaucoup plus rapide, prenant de 4 à 5 jours. Cellobiose et amidon sont également vite attaqués. Par contre, il n'y a pas production d'acide à partir du mannose. Le virage de l'esculine est fort,
à partir du mannose. Le virage de l'esculine est fort, ainsi que le pouvoir protéolytique sur gélose-gélatine, gélose-caséine et lait tournesolé. Il n'y a pas production d'uréase, ni de déoxyribonucléotidase, mais il y a production d'arginine-dihydrolase, comme de ribonucléotidase, de tween-estérase et, faiblement, de chitinase. D'après les tests biochimiques (3) et les tests biologiques sur Anagasta kuhniella (4) et Mamestra brassicae e), l'exotoxine thermostable n'est pas formée. Les autres caractères biochimiques sont identiques à ceux déjà décrits pour l'ensemble des B. thuringiensis (6)]. Du point de vue sérologique, les suspensions flagellaires des nouvelles souches étudiées n'agglutinent avec aucun des sérums
flagellaires des nouvelles souches étudiées n'agglutinent avec aucun des sérums anti-B. thuringiensis déjà connus. Aussi, avons-nous préparé des anticorps vis-à-vis de ces deux souches qui agglutinent alors, en système homologue, au taux de 1/25 600. Nous avons vérifié que ces sérums, à leur tour, n'agglutinaient aucune des suspensions H des 12 principaux sérotypes de B. thuringiensis connus. Nous sommes donc en présence d'un nouvel antigène flagellaire : l'antigène H13. Sur la base de cet antigène et des caractères physiologiques précédemment décrits, nous pouvons donc individualiser une nouvelle sous-espèce de B. thuringiensis correspondant au sérotype 13. Pour cette sous-espèce, le nom
thuringiensis correspondant au sérotype 13. Pour cette sous-espèce, le nom de pakistani est proposé en relation avec ses origines. La souche-type est la première étudiée : n° 94 qui devient la souche n° 13-1 de notre collection du Centre international de Référence pour B. thuringiensis. (*) Séance du 28 mars 1977. (1) H. DE BARJAC et A. BONNEFOI, Entomophaga, 18, 1973, p. 5. (1) A. BURGERJON (non publié). (2) H. DE BARJAC et M.-M. LECADET, Comptes rendus, 282, série D, 1976, p. 2119. (4) L. CHARMOILLE, B. VINCENT, Ph. D'OULTREMONT, J. J. DEBACQ et P. PRUNET, Phytiatrie-Phytopharmacie, 13, 1974, p.
J. J. DEBACQ et P. PRUNET, Phytiatrie-Phytopharmacie, 13, 1974, p. 223. (5) H. DE BARJAC et A. BONNEFOI, Entomophaga, 7, 1962, p. 5. (6) A. BONNEFOI et H. DE BARJAC, Entomophaga, 8, 1963, p. 223. Service de Lutte biologique contre les Insectes, Institut Pasteur, 25, rue du Docteur-Roux, 75015 Paris. MICROBIOLOGIE. — Transfert du pouvoir pathogène d'une souche virulente de listeria à une souche non virulente. Note de Michel Cormier, présentée par M. Pierre Lépine. Le transfert du pouvoir pathogène d'une souche de Listeria monocytogenes pathogène à une souche non pathogène a été réalisé en additionnant un filtrat de culture
pathogène a été réalisé en additionnant un filtrat de culture de la souche virulente à une culture en phase de croissance de la souche non virulente. The pathogenicity of a virulent strain of Listeria monocytogenes was transferred to an avirulent strain by mixing the filtered culture of the pathogenic strain with an exponentially growing avirulent strain. L'isolement de souches de Listeria monocytogenes à partir de produits pathologiques humains divers est fréquent, ces souches sont généralement pathogènes pour la Souris. Des recherches systématiques de portage intestinal de L. monocytogenes chez des individus non infectés nous ont permis d'isoler des souches possédant
individus non infectés nous ont permis d'isoler des souches possédant les caractères morphologiques, culturaux et biochimiques de Listeria, mais se distinguant des souches isolées de produits pathologiques par l'absence de pouvoir hémolytique pour les hématies de Lapin et de pouvoir pathogène pour la Souris. Nous avons tenté de transférer l'un et l'autre de ces caractères d'une souche pathogène à une souche non pathogène. MATÉRIEL ET MÉTHODE. — Description des souches utilisées. — Nous n'avons pu réaliser de transfert qu'entre souches de même sérotype. La nécessité de les distinguer nous a amené à employer pour la souche non pathogène un mutant
amené à employer pour la souche non pathogène un mutant résistant à la streptomycine obtenu en recourant à la technique du gradient de Zybalsky. Deux souches de L. monocytogenes de serotype 1 ont été utilisées : Souche A : isolée d'une hémoculture, hémolytique, pathogène pour la Souris, sensible à la streptomycine. Souche B : isolée par coproculture chez un individu sain, non hémolytique, non pathogène pour la Souris. Le mutant résistant à la streptomycine de cette souche est dénommé souche B.R. Les filtrats de cultures à 28° de la souche A, dilués au 1/50, forment des plages de lyse sur
A, dilués au 1/50, forment des plages de lyse sur des cultures de la souche B.R. Les filtrats de la souche B.R., préparés dans les mêmes conditions, n'ont pas d'activité lytique sur la souche A. Détermination du pouvoir pathogène pour la Souris. — Le pouvoir pathogène a été déterminé par inoculation par voie intrapéritonéale à des lots de 4 Souris (Balb/C Inro) de 0,5 ml d'une culture de 24 h en bouillon et des dilutions de 10-1 à 10-4. Les numérations de Bactéries ont été effectuées par ensemencement sur gélose des dilutions 10-6 et 10-8. L'inoculation de 109 bactéries de
des dilutions 10-6 et 10-8. L'inoculation de 109 bactéries de la souche B.R. ne provoque pas la mort des Souris, tandis que celle de 105 bactéries de la souche A tue toutes les Souris, et que 2. 10³ bactéries provoquent la mort de 2 Souris sur 4. Détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI) de la streptomycine. — Elle a été déterminée par la méthode de dilution en milieu liquide et par celle de l'antibiogramme en milieu solide. TECHNIQUE. — 250 ml d'une culture de 14 h à 37°C de la souche A de L. monocytogenes (pathogène, sensible à la
la souche A de L. monocytogenes (pathogène, sensible à la streptomycine) sont traités selon la méthode préconisée par Krzywy pour l'enrichissement des suspensions de bactériophages puis filtrés sur filtre Millipore 0,22 μm. L'inocuité du filtrat est démontrée par l'inoculation de 0,5 ml par voie intrapéritonéale à la Souris. Son caractère abactérien est vérifié par l'ensemencement de 0,2 ml sur gélose et 0,5 ml en bouillon trypticase Soja. 0,5 ml du filtrat ainsi obtenu sont additionnés à 2,5 ml d'une culture de 6 h (37°C) de la souche L. monocytogenes B.R. (non pathogène, résistante à la streptomycine). Après avoir été placé