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relativement restreint. Il faut donc nécessairement en conclure que les mitoses de cellules épithéliales préparent la formation des petites cellules thymiques. C'est ce que l'observation vient confirmer, ainsi d'ailleurs que l'expérimentation. Pour ce qui est de l'origine des cellules myoépithéliales, nos observations sur les Amphibiens viennent nous confirmer dans la manière de voir que nous défendons depuis nombre d'années. Ces cellules sont des éléments de la lignée mésodermique, subissant des métamorphoses variées. Les connexions des cellules épithélioïdes jeunes avec des éléments conjonctifs interstitiels ou périvasculaires sont des plus faciles à démontrer. C'est particulièrement aux approches de la métamorphose que les
démontrer. C'est particulièrement aux approches de la métamorphose que les cellules épithéliales et de fort belles myocytes apparaissent dans le thymus. L'étude de l'évolution détaillée de ces éléments sera faite dans notre travail in extenso. Comme nous le disions au début, nous avons fait porter également nos recherches dans le domaine expérimental. Nous résumerons brièvement aujourd'hui les effets de l'hyperalimentation d'une part, de l'inanition absolue de l'autre. Un lot de nos Têtards a été nourri, à partir du 22 mars, exclusivement avec du thymus de Mouton (thymus frais, grossièrement haché et renouvelé tous les jours). Dans ces conditions on obtient
et renouvelé tous les jours). Dans ces conditions on obtient des larves magnifiques, dont la taille dépasse de loin celle des animaux témoins. Je ne vous présenterai aujourd'hui qu'une figure relative à cette série, qui, comme toutes les autres, a été poursuivie jusques et y compris la métamorphose. Comparez le thymus normal du 30 mars au thymus presque contemporain du 1er avril, provenant de Têtards soumis à la suralimentation thymique. La différence de volume saute aux yeux, différence qui est loin d'être proportionnelle à la différence de volume total existant entre les larves. Si maintenant nous examinons au microscope par
entre les larves. Si maintenant nous examinons au microscope par quoi est constituée cette énorme ébauche thymique, nous constatons qu'elle est principalement épithéliale et que les mitoses y sont extrêmement abondantes. Et si maintenant nous suivons l'évolution du thymus de nos larves soumises à la suralimentation thymique, nous constatons que les thymus obtenus sont très volumineux parce que renfermant un nombre énorme de petites cellules thymiques, les éléments myoépithéliales n'étant pas plus abondants, bien au contraire, que dans les thymus normaux. À une volumineuse ébauche épithélioïde a succédé une abondante lignée de petites cellules thymiques. Aucune immigration n'étant constatée, et
lignée de petites cellules thymiques. Aucune immigration n'étant constatée, et le nombre des cellules hassalliennes n'étant pas augmenté, nous sommes, une fois de plus et inéluctablement, amenés à cette conclusion : les petites cellules thymiques sont issues de l'épithélium de l'ébauche thymique. Étudions à présent les thymus des Têtards soumis au jeûne absolu. Sautant les stades intermédiaires qui seront ultérieurement décrits de façon détaillée, examinons un thymus contemporain du précédent. Le thymus du 1er avril, provenant de têtard jeûneur, nous frappe immédiatement par ses proportions très inférieures à celles d'un thymus normal et surtout du thymus de Têtard suralimenté. Un
thymus normal et surtout du thymus de Têtard suralimenté. Un examen attentif nous montre que cette diminution de volume est due à deux facteurs 1° l'arrêt des mitoses des cellules épithéliales 2° la transformation précoce, anticipée, avec pycnose finale des cellules épithéliales des régions périphériques des ébauches thymiques. La figure annexée à ce travail (jeûneur 1er avril) est suggestive à cet égard. Sous l'influence de l'inanition on voit se former prématurément dans les ébauches épithéliales de petites cellules thymiques. L'absence d'immigration ne peut ici plus faire aucun doute. La formation des cellules thymiques est l'évidence même. Vous comprendrez que l'étude
des cellules thymiques est l'évidence même. Vous comprendrez que l'étude détaillée de toutes nos séries d'embryons (série normale, série sénile soumise au jeûne, série thymique, série thyroïdienne, série ganglionnaire) représente un travail de très longue haleine et dont l'exposé des résultats dépasserait de loin le cadre de cette communication. Nous vous voulons vous montrer, et les préparations que vous aurez bientôt sous les yeux vous confirmeront sans doute dans cette idée, que c'est bien à tort que l'on a admis, bien à la hâte il faut t'avouer, la théorie de l'envahissement lymphocytaire des ébauches thymiques. Les quelques arguments que je
l'envahissement lymphocytaire des ébauches thymiques. Les quelques arguments que je vous ai présentés, les faits d'observation que je vous ai exposés, vous auront, j'espère, convaincus que la petite cellule thymique est un élément spécial, propre au thymus, formé sur place, et non un lymphocyte banal. Pouvons-nous, à l'heure qu'il est, et en nous basant sur les résultats de nos expériences, émettre quelques idées au sujet des fonctions probables du thymus? Toutes les observations faites jusqu'à présent sur le thymus ont montré que cet organe était particulièrement sensible aux fluctuations de la nutrition. Le jeune réalisé expérimentalement, ou résultant des variations
la nutrition. Le jeune réalisé expérimentalement, ou résultant des variations saisonnières (hibernation) pour certaines espèces, produit régulièrement l'atrophie du thymus. La suralimentation, au contraire, amène un développement parfois considérable de la glande. Au point de vue histologique on constate que les variations de volume de l'organe correspondent exactement à des variations de nombre de petites cellules thymiques. Les petites cellules thymiques sont seules constantes dans tous les thymus de Vertébrés toutes les autres formations intrathymiques (corps de Hassall, cellules épithéliales, cellules myoides, cellules ciliées, kystes, etc.) sont inconstantes, variables d'espèce à espèce, souvent inexistantes, apparaissant secondairement au cours de l'évolution
à espèce, souvent inexistantes, apparaissant secondairement au cours de l'évolution histogénétique. La petite cellule thymique représente donc, comme nous le défendons depuis plusieurs années, le seul élément fondamental, caractéristique de la fonction thymique et indispensable à cette fonction. Or, comment se comporte cette petite cellule? Son cytoplasme, réduit d'ailleurs à une fort maigre bordure périmétabole, paraît ne pas être le siège de phénomènes sécrétoires bien actifs. Toute l'activité cellulaire paraît s'être concentrée dans le noyau. Le noyau réagit aux modifications nutritives, tantôt en se divisant avec une remarquable intensité lorsque l'alimentation vient apporter à l'organisme des substances riches en produits
l'alimentation vient apporter à l'organisme des substances riches en produits nutritifs, tantôt en cessant tout phénomène de multiplication et en s'acheminant vers la désintégration pycnotique lorsque l'inanition fait sentir ses effets. Qu'avons-nous observé chez nos larves de Grenouilles? Les larves alimentées avec une nourriture très riche en protéine (thymus) développent un thymus énorme, conservant longtemps son caractère épithélial. Les larves soumises à l'inanition suspendent au contraire la multiplication de leurs cellules thymiques souches, pour les transformer rapidement en petites cellules à noyaux prépycnotiques et bientôt complètement pycnotiques. Des expériences analogues ont été réalisées dans notre laboratoire sur des Grenouilles adultes
ont été réalisées dans notre laboratoire sur des Grenouilles adultes prises après le jeûne hivernal, puis soumises soit à des alimentations exclusives, soit à l'inanition complète, soit à des alternatives de jeûne et d'alimentation. Les résultats obtenus, qui seront publiés ultérieurement, viennent en bien des points se superposer à ceux obtenus à la suite de nos études histogénétiques. Toutes nos recherches nous amènent à considérer l'appareil thymique comme un organe glandulaire très spécial, ne donnant pas lieu à un produit de sécrétion au sens propre du mot, mais agissant plutôt à la façon des organes adipeux ou du foie glycogènement,
à la façon des organes adipeux ou du foie glycogènement, en fixant certaines substances puis en les distribuant à l'organisme suivant les fluctuations de la nutrition générale. L'étude microscopique du thymus dénotant la prépondérance évidente des phénomènes nucléaires sur les phénomènes cytoplasmiques, nous amène à formuler l'hypothèse suivante: l'appareil thymique a pour fonction de régler, tout au moins partiellement, le métabolisme des substances complexes caractéristiques du noyau (nucleine, chromatine) fixant ces substances sous une forme figurée (petites cellules thymiques) lorsque l'organisme en est abondamment pourvu, mettant au contraire ces substances en liberté, sous une forme encore inconnue (forme figurée: migration
en liberté, sous une forme encore inconnue (forme figurée: migration des petites cellules; forme dissoute pycnose et karyolyse des petites cellules), lorsque de la chromatine vient à être nécessaire inanition, phénomènes de croissance, formation des produits sexuels, hématopoiese, leucocytose inflammatoire, etc. Cette manière de voir pourrait être, à notre avis, féconde, particulièrement le jour où les progrès de la chimie physiologique nous auront définitivement précisés les phases du métabolisme des substances nucléiniques. N'êtes-vous pas de cet avis? DISCUSSION M. Pensa trouve fort intéressantes les recherches de M. Dustin et déclare être tout à fait d'accord avec lui pour ce qui
être tout à fait d'accord avec lui pour ce qui concerne l'origine des petites cellules du thymus d'après l'ébauche épithéliale de ce dernier. À propos de ce qu'on appelle les éléments myo-épithélioïdes, il croit qu'ils ne sont pas tous de même nature et qu'une partie d'entre eux doit avoir une autre origine que celle décrite par M. Dustin. M. Pensa croit que les éléments myoïdes dérivent des myotomes céphaliques, qui ont dans les premières phases du développement des rapports très étroits avec l'ebauche du thymus. M. Pensa ne croit pas que la dérivation d'éléments myoïdes des myotomes céphaliques exclut la
que la dérivation d'éléments myoïdes des myotomes céphaliques exclut la possibilité que ces éléments subissent, comme M. Dustin l'aurait constaté, des modifications de nature expérimentale. D'un autre côté, il n'a jamais pu se convaincre, par des recherches personnelles, de l'existence de véritables formes de transition entre les cellules épithéliales et les éléments myoïdes. M. Regaud: Le fait de la morphologie des petites cellules thymiques avec les lymphocytes a beaucoup pesé dans l'histoire histogénétique du thymus. Cependant il n'est nullement certain que les petites cellules thymiques soient des lymphocytes du sang. Je crois, avec M. Dustin, qu'il est préférable de laisser
Je crois, avec M. Dustin, qu'il est préférable de laisser de côté cet argument, dans la question controversée de l'origine et de la signification des petites cellules thymiques. Le nœud de la question est bien la pénétration ou la non-pénétration, dans l'ébauche épithéliale du thymus, de cellules mésodermiques destinées à fournir les petites cellules. M. Dustin apporte une constatation négative, au point de vue de l'origine mésodermique des petites cellules, et cette constatation me semble avoir la plus grande importance. Aucun des faits que nous avons observés, M. Crémieu et moi, en étudiant l'involution rétrograde du thymus, ne s'oppose à
moi, en étudiant l'involution rétrograde du thymus, ne s'oppose à la théorie de l'origine épithéliale des petites cellules. Il n'en est pas de même au sujet de l'origine des cellules hassalliennes. Tous les faits que nous avons observés sont nettement, catégoriquement démonstratifs de l'origine et de la signification épithéliales des cellules hassalliennes aucune de nos observations ne peut être interprétée, croyons-nous, en faveur de l'origine et de la signification conjonctive de ces cellules. L'absence de mitoses dans les cellules hassalliennes caractéristiques n'est pas un argument contre leur origine épithéliale. Il est certain que les cellules des corpuscules de Hassall dérivent,
est certain que les cellules des corpuscules de Hassall dérivent, par une longue et lente transformation, des cellules du stroma cortical, c'est-à-dire qu'elles ne sont pas reconnaissables dans les éléments corticaux en division karyokinétique. Faisant il est possible que M. Dustin et ses contradicteurs aient également raison, à propos de l'origine des cellules hassalliennes. Sous ce nom générique, H. Dustin désigne, en effet, des éléments très différents chez les Vertébrés inférieurs et chez les Mammifères. Il est possible que les cellules myoïdes des Amphibiens et des Oiseaux et les cellules des corpuscules de Hassall des Mammifères et des Oiseaux ne
des corpuscules de Hassall des Mammifères et des Oiseaux ne soient point homologues. S'il en est ainsi, il n'y aurait rien d'étonnant à ce que les cellules myoïdes soient d'origine conjonctive, et que les cellules des corpuscules de Hassall proviennent du reticulum épithélial. Quoique nous n'ayons pas le moyen de le démontrer actuellement, M. Crémieu et moi nous sommes favorables à une hypothèse d'après laquelle, chez les Mammifères, les éléments épithéliaux du thymus donneraient naissance à la fois aux petites cellules et aux cellules hassalliennes. Je rappellerai enfin que, sans refuser un caractère de plausibilité à l'hypothèse physiologique d'après laquelle
refuser un caractère de plausibilité à l'hypothèse physiologique d'après laquelle le thymus servirait à accumuler, mettre en réserve et libérer de la chromatine nucléaire, nous pensons, M. Crémieu et moi, que les petites cellules thymiques sont destinées à être mises en liberté et à sortir du thymus. M. Loewenthal. L'origine épithéliale des cellules thymiques fut défendue déjà plus anciennement par Retterer. Cette manière de voir rend difficile à comprendre les phénomènes régressifs si fréquents qu'on observe dans les corpuscules de Hassall qui, eux, certainement renferment des cellules dont les caractères épithéliaux seraient difficiles à mettre en doute. Et, d'autre part,
épithéliaux seraient difficiles à mettre en doute. Et, d'autre part, l'origine lymphocytaire des cellules thymiques est encore parfaitement conciliable avec l'hypothèse de la sécrétion interne des cellules thymiques. M. Dustin et M. Regaud. Jusqu'à présent nous n'ayons rien publié concernant le thymus des Mammifères, voulant acquérir d'abord des certitudes formelles concernant le thymus des formes inférieures. À propos des cellules myo-épithélioïdes, leur origine nous paraît définitivement démontrée par 1° leur structure et leur aspect morphologique 2° nos expériences de greffes thymiques; 3° nos expériences de cultures thymiques. Les petites cellules thymiques sont très certainement différentes des cellules lymphoides (recherches microchimiques
thymiques sont très certainement différentes des cellules lymphoides (recherches microchimiques de Bany). À propos de l'origine commune des cellules hassalliennes et des petites cellules, on peut objecter la différence du mode de division cinétique pour les dernières, amitoses pour les premières. La sortie des petites cellules hors du thymus – quoique non démontrée de façon formelle – n'est pas en désaccord avec la fonction chromopexique ou chromotypique que nous supposons. À M. Pensa. L'origine myotomiale des cellules myoïdes est peu conciliable avec les variations saisonnières du nombre de ces cellules. L'existence de transition entre cellules épithéliales et cellules myoides est
L'existence de transition entre cellules épithéliales et cellules myoides est pour nous d'une évidence absolue. À M. Lowenthal. Pour M. Retterer, les cellules provenant de l'ébauche épithéliale seraient de vrais lymphocytes. Quant à la régression des cellules de la série hassallienne, nous en avons déjà fourni l'explication dans nos travaux antérieurs. SUR L'HISTOGENESE DE LA VÉSICULE OMBILICALE DU LAPIN Par A. BRANCA J'ai commencé cette année l'examen de la vésicule ombilicale du Lapin. Cette étude d'histogenèse est inachevée les stades initiaux et les stades ultimes de l'évolution me font encore défaut. Aussi me bornerai-je à résumer brièvement ici les faits
défaut. Aussi me bornerai-je à résumer brièvement ici les faits que j'ai eu l'occasion d'observer. À. Sur les embryons du dixième jour, la paroi de la vésicule est très mince, bien que d'épaisseur fort mélagie. Des vaisseaux, de taille très variable, font saillie sur sa face externe, sur sa face interne ou même à la fois sur ses deux faces. L'endoderme vitellin est formé d'une assise de cellules polyédriques qui sont notablement plus basses au niveau des travées vasculaires que dans les mailles circonscrites par ces travées. Le pôle basal de ces éléments s'implante sur une mince lamelle conjonctive leur
de ces éléments s'implante sur une mince lamelle conjonctive leur pôle apical, encadré par les bandelettes de fermeture, dessine un feston convexe que surmonte une bordure striée des plus basses (1). Le noyau occupe la base ou la partie moyenne de la cellule. La base de la cellule, généralement claire (2), est occupée par une, deux ou trois vacuoles volumineuses. La zone supra-nucléaire est semée de grains de taille variable et de forme généralement arrondie. Ces grains, après fixation par les liquides picriques, se colorent en rose après l'action de l'hématoxyline-éosine après l'usage de l'hématoxyline ferrique, ces grains sont noirs
l'hématoxyline-éosine après l'usage de l'hématoxyline ferrique, ces grains sont noirs ou roses certains d'entre eux montrent une partie centrale volumineuse, teinte en rose, et une zone corticale, colorée en noir. Cette zone est fréquemment réduite à une coupule ou à quelques fines granulations. Les fixations par le Muller formolé dessinent, au-dessus du noyau, une série de vacuoles qu'occupent, sans les remplir, les grains de sécrétion colorés en noir par l'hématoxyline de Heidenhain. Ces grains sont encore peu nombreux. Au pôle apical de la cellule, il reste d'ailleurs, immédiatement au-dessous de la bordure striée, une lamelle étroite de protoplasma, qui demeure
la bordure striée, une lamelle étroite de protoplasma, qui demeure constamment dépourvue d'enclaves. Enfin, les pièces fixées par les méthodes mitochondriales montrent une série de filaments très longs, très grêles et d'égal calibre. Ces filaments, généralement onduleux, sont assez tassés les uns contre les autres; ils sont orientés parallèlement au grand axe cellulaire. Ce sont là des chondriocontes ils occupent toute l'étendue du cytoplasme, même la région où s'élaborent les grains de sécrétion, et persistent sur les éléments en voie de division, au pourtour de la figure caryocinétique. D. La vésicule s'est épaissie sur les embryons du quinzième jour les
vésicule s'est épaissie sur les embryons du quinzième jour les cellules endodermiques ont conservé la même structure elles sont toutefois plus hautes les grains de sécrétion sont notablement plus gros et plus nombreux le chondriome, en revanche, n'a pas varié d'aspect. C. Au dix-septième jour, on observe deux particularités nouvelles. Des grains de sécrétion s'élaborent fréquemment dans le pôle basal de la cellule. D'autre part, sur une de mes pièces, dont la fixation d'ailleurs n'est pas aussi rigoureuse que je l'aurais désiré (3), le cytoplasme est parcouru par des canalicules de Holmgren. D. Au vingtième jour, l'endoderme ombilical a grandi,
de Holmgren. D. Au vingtième jour, l'endoderme ombilical a grandi, mais son accroissement est inégal, si bien que le revêtement du sac vitellin semble formé d'une série de groupes cellulaires juxtaposés. Chaque groupe simule un éventail où les cellules sont d'autant plus basses qu'elles sont plus voisines de la périphérie du floccule et d'autant plus hautes qu'elles sont plus voisines du centre de ce même floccule. C'est là l'amorce d'un dispositif qui va progressivement s'accentuer. E. Au vingt-deuxième jour, en effet, ces floccules ont pris un énorme développement, si bien que la vésicule se montre, par endroits, hérissée de végétations
que la vésicule se montre, par endroits, hérissée de végétations lamelliformes qui font saillie dans sa cavité. Chacune de ces végétations a pour axe une cloison conjonctivo-vasculaire infiltrée de nombreux leucocytes. Cette cloison, issue du mésoderme vésiculaire, donne implantation à l'épithélium qui, à ce stade, est remarquable par sa grande hauteur, par son étroitesse et par la saillie que forme le pôle apical de chacun des éléments de l'endoderme vitellin. Notons encore qu'aucune différence fondamentale de structure ne différencie les éléments sécréteurs de la vésicule, chez les embryons de Lapin du dixième au vingt-deuxième jour. Et sur chaque les grains
du dixième au vingt-deuxième jour. Et sur chaque les grains de secrétion sont assez rares. Laboratoire des travaux pratiques d'histologie de la Faculté de Médecine de Paris. LA « FIXATION FROIDE » SES AVANTAGES EN TECHNIQUE HISTOLOGIQUE Par A. POLICARD Dans ses leçons sur les phénomènes de la vie communs aux animaux et aux végétaux, Cl. Bernard a créé l'expression et étudié l'état de vie cessé. La vie manifestée dépend de certaines conditions essentielles. Si l'une d'elles manque, la vie est suspendue ou même arrêtée. Parmi ces conditions, une des plus fondamentales est la chaleur. Il suffit d'abaisser autour d'un
plus fondamentales est la chaleur. Il suffit d'abaisser autour d'un être simple ou d'un tissu la température ambiante pour mettre cet être ou ce tissu en état de mort. Ces phénomènes, de connaissance élémentaire aujourd'hui, ont fait l'objet depuis longtemps d'applications pratiques. Citons par exemple leur utilisation en bactériologie pour la conservation des virus, en biologie générale pour la conservation des pièces destinées à la greffe; il suffit de rappeler les intéressantes applications du cold shock d'Alexis Carrel. Nous avons tenté l'application de ces données à la nation histologique. Incidemment, certains auteurs, et en particulier Borrel (1) (à propos de
certains auteurs, et en particulier Borrel (1) (à propos de son liquide chromo-acéto-osmique), Bethe et les histologistes qui instituèrent des variantes de la méthode d'Ehrlich, avaient signalé que certaines opérations techniques donnaient de meilleurs résultats à froid qu'à la température ambiante. Nous apportons aujourd'hui une série de faits et de considérations qui démontrent l'intérêt d'opérer toujours la fixation à basse température et d'adopter la méthode générale de la fixation froide. BASES THÉORIQUES DE LA MÉTHODE Pour donner un exposé clair des bases théoriques de la méthode que nous proposons, nous allons envisager successivement et dans leur ordre chronologique les phénomènes
allons envisager successivement et dans leur ordre chronologique les phénomènes qui se passent successivement dans les couches les plus périphériques de la pièce parfaitement fraîche et au centre de celle-ci, après son immersion dans le réactif fixateur, que nous supposerons être ici un coagulateur salin, mélange bichromate ou osmique par exemple. Nous ne préjugerons quoi que ce soit de la nature intime de la fixation. A. Aussitôt après l'immersion, il se passe entre les couches périphériques de la pièce et le fixateur une sorte de conflit. En particulier, il se produit une contraction brusque non seulement des organes contractiles, mais
produit une contraction brusque non seulement des organes contractiles, mais même de tout protoplasma. C'est un fait que les zoologistes connaissent bien. Cette contraction brusque et intense peut être l'origine de ruptures, d'altérations de l'architecture cellulaire. Pour combattre cette contractilité, les zoologistes ont l'habitude d'anesthésier les animaux avec du chlorate, de la cocaïne, du chloroforme, de la nicotine ou de la fumée de tabac, etc. C'est là une pratique bien connue. Récemment, Rubenthaler (1) a eu l'idée d'expliquer et de combattre d'une façon analogue les altérations dues à la fixation des tissus des Vertébrés. Mais nous pensons que, dans ce