jeanflop/post-ocr-correction huggingface dataset:
dans l’eau de mer artificielle sans K+, ni Ca++ à pH 7,5, les oocytes étaient prêts à l’emploi. Ces divers traitements avaient pour but d’empêcher la maturation spontanée des oocytes. Une partie des oocytes traités ont été fixés à l’alcool-formol-acétique (6 : 3 : 1) enrobés, coupés et colorés soit à l’Unna (vert de méthyle-pyronine), soit par la réaction de Feulgen. Fig. 1. — (a) Différenciation sans clivage après traitement pendant 30 mn par l’ionophore A 23187 et report dans l’eau de mer pendant 18 h 30 mn (Unna, G x 1 200). (b) Réplication de l’ADN dans un œuf
x 1 200). (b) Réplication de l’ADN dans un œuf du même lot (Feulgen, G x 1 200). RÉSULTATS. — Conformément aux résultats de Ikegami et coll. (10), qui ont été publiés pendant que nos recherches étaient en cours et qui ont été effectuées sur une autre espèce de Chétoptère, l’entrée en maturation n’est plus provoquée par l’addition d’un excès de KCl (0,5 M, 10 %) si l’eau de mer est privée de Ca++. Si, au contraire, on active les œufs par KCl suivant le procédé classique et si on les transfère ensuite dans de l’eau de mer acalcique, la
les transfère ensuite dans de l’eau de mer acalcique, la différenciation sans clivage se déroule normalement. L’ionophore A 23187 (0,5 μg/ml) provoque, en quelques minutes, l’entrée en maturation et le soulèvement de la membrane de fécondation : il n’est actif que si des ions Ca++ sont présents dans le milieu; les ions K+ ne jouent aucun rôle visible. Si on reporte des œufs traités par l’ionophore dans de l’eau de mer artificielle (même privée de K+ ou de Ca++), on obtient, outre des clivages anarchiques et précytolytiques, une différenciation sans clivage plus ou moins parfaite (fig. 1 a, b). 2
clivage plus ou moins parfaite (fig. 1 a, b). 2 ng/ml) induit, en quelques heures, la rupture de la vésicule germinative; mais la maturation avorte rapidement, probablement parce que le fuseau de maturation ne se forme pas. Un traitement de 30 mn suffit pour induire, après report dans de l'eau de mer artificielle, l'entrée en maturation de 70 à 100 % des œufs, même si elle est privée de Ca++ et de Mg++ pendant 15-20 h dans la valinomycine (que l'eau de mer contienne ou non des ions K+ et Ca++), il se forme, dans 50-60 % des cas, un
Ca++), il se forme, dans 50-60 % des cas, un volumineux lobopode hyalin, qui peut parfois se séparer complètement de la masse vitelline (fig. 2). Ce lobopode est extrêmement basophile à l'Unna; le noyau, qui est souvent petit et pycnotique, se trouve toujours dans la masse vitelline. Le PHMPS 3.10-4 induit, après un traitement de 1 h environ, une maturation complète et le soulèvement de la membrane de fécondation. Il est toxique en traitement continu (fragmentation de l'œuf, pycnoses). En cas de report dans de l'eau de mer artificielle après 1 h de traitement, il se produit une forte synthèse
1 h de traitement, il se produit une forte synthèse d'ADN et certains œufs se différencient sans clivage (fig. 3 a, b). Il n'y a ni éclosion, ni formation de cils, mais on note une forte activité amiboïde de ces larves multinucléées. Le DTT est paradoxalement moins toxique à la concentration de 10-2 M qu'à celle de 10-1 M; il n'induit la maturation que si on reporte les œufs dans de l'eau de mer artificielle. Ce report a été suivi de cytolyse dans 2 expériences et d'une très belle différenciation sans clivage, avec de nombreuses larves nageantes, dans une troisième
sans clivage, avec de nombreuses larves nageantes, dans une troisième (fig. 4). La colchicine inhibe fortement la différenciation sans clivage; les noyaux, au lieu de migrer vers la périphérie, restent au centre de l'œuf. Elle n'affecte guère la formation de lobopodes hyalins après traitement à la valinomycine. Au contraire, la cytochalasine inhibe cette ségrégation de l'hyaloplasme et du vitellus et ne touche pas profondément la différenciation sans clivage (à part l'apparition de cils). (a) (b) Fig. 3. — (a) Tendance à la différenciation sans clivage (ségrégation du vitellus et de l'hyaloplasme) et expulsion de « mini-cellules » anucléées après traitement
l'hyaloplasme) et expulsion de « mini-cellules » anucléées après traitement pendant 1 h dans le PHMPS 3. 10-4 M et report dans l'eau de mer pendant 17 h (Unna, G x 300). (b) Gros noyau riche en ADN dans un œuf du même lot (Feulgen, G x 1 200). DISCUSSION. — Nos expériences confirment l'importance des ions Ca++ pour l'entrée en maturation des oocytes de Chétopyge. Mais elles montrent aussi que la différenciation sans clivage et la synthèse d'ADN qui l'accompagne ne nécessitent pas la présence d'ions Ca++ dans le milieu. L'emploi de l'ionophore A 23187 confirme la nécessité du
milieu. L'emploi de l'ionophore A 23187 confirme la nécessité du Ca++ pour l'entrée en maturation; il peut induire, après report, la différenciation sans clivage; mais sa toxicité le rend inférieur au KCl. En raison de l'efficacité du KCl pour induire la différenciation sans clivage, il est surprenant, à première vue, que la valinomycine ne la produise jamais. Cette inefficacité est très probablement due au fait que la maturation provoquée par la valinomycine est rapidement abortive. Il en va, d'ailleurs, de même chez le Xénope : un traitement des oocytes par la valinomycine en l'absence d'ions K+ provoque la rupture de
la valinomycine en l'absence d'ions K+ provoque la rupture de la vésicule germinative sans qu'elle soit suivie de l'édification d'un fuseau méiotique (travail en préparation). À la longue, la valinomycine produit une curieuse ségrégation entre l'hyaloplasme et le vitellus; elle devrait permettre d'obtenir facilement des fragments nucléés et anucléés d'œufs de Chétopyge. Fig. 4. — Œuf traité par le DTT 10-2 M pendant 1 h et reporté dans l'eau de mer pendant 17 h gros noyau et noyaux secondaires riches en ADN, typiques de la différenciation sans clivage (Feulgen, G x 1 200). Les effets du PHMPS et du DTT
x 1 200). Les effets du PHMPS et du DTT ressemblent beaucoup plus à ceux qu'ils exercent sur les oocytes de Xénope qu'à ceux qui ont été observés dans le cas des oocytes d'Étoile de mer. Un blocage de certains groupes -SH de la surface cellulaire semble favorable à l'entrée en maturation, alors que la réduction des ponts disulfures n'a guère d'autres effets que la cytolyse à plus ou moins longue échéance. Enfin, les expériences faites avec la colchicine et la cytochalasine indiquent que les microtubules (notamment ceux qui constituent les monasters) doivent jouer un rôle important dans la différenciation
les monasters) doivent jouer un rôle important dans la différenciation sans clivage, alors que les microfilaments seraient principalement en cause lors de la ségrégation de l'hyaloplasme et du vitellus dans les œufs traités par la valinomycine. 67, rue des Chevaux, 1640 Rhode St. Genèse, Brabant, Belgique. Note de Georges Strudel, Robert Meiniel et Gérard Gateau, présentée par M. Étienne Wolff. L'observation par la méthode de Falck et Owman de cordes d'embryons de Poulet de 3 jours d'incubation, traités à 48 h, soit par du sulfate de nicotine, soit par du carbachol montre un accroissement de la fluorescence. L'injection de L-Dopa
carbachol montre un accroissement de la fluorescence. L'injection de L-Dopa ou de NA augmente très nettement la teneur en amines fluorigènes. L'addition d'atropine ou de propranolol ou encore de réserpine diminue très fortement ou supprime la fluorescence. Ces observations permettent d'admettre qu'il existe une relation de cause à effet entre l'administration des cholinergiques et la teneur en amines fluorigènes des cordes. The investigation of 3 day old notochords by the fluorescence method of Falck and Owman showed an increase of the fluorescence after treatment of the chick embryos at 48 hrs of incubation, with nicotine sulfate or carbachol. The addition
hrs of incubation, with nicotine sulfate or carbachol. The addition of norepinephrine or L-Dopa emphasized the formaldehyde induced fluorescence. The simultaneous treatment with a cholinergic agent and atropine, propranolol or reserpine decreased or suppressed the fluorescence. These results demonstrate the existence of a relationship between the treatment with a cholinergic agent and the amount of chordal biogenic amines. Dans une série de publications nous avons montré que des agents cholinergiques injectés à des embryons de Poulet de 40 à 48 h d'incubation, provoquent des anomalies morphogénétiques se traduisant chez les embryons âgés par des malformations vertébrales. La première anomalie se
embryons âgés par des malformations vertébrales. La première anomalie se manifeste, quelques heures après l'injection, par une déformation torsadée de la chorde cervicale. Cette anomalie semble être à l'origine des autres malformations. Nous avons montré que l'action des cholinergiques est inhibée par des antagonistes des cholinergiques et par des ligands des récepteurs cholinergiques. Elle est également inhibée par des bloquants des récepteurs adrénergiques ou par des agents provoquant la déplétion des amines biogènes. Or, en 1972, Kirby et Gilmore ont démontré à l'aide de la méthode d'histofluorescence de Falck et Owman, la présence de catécholamines dans les cordes d'embryons de
Owman, la présence de catécholamines dans les cordes d'embryons de Poulet de 3 à 5 jours. Dans cette Note, nous rapportons les observations réalisées à l'aide de la méthode de Falck et Owman, des variations de la teneur en amines fluorigènes cordales d'embryons soumis : 1° à une injection de sulfate de nicotine ou de carbachol ; 2° à des injections simultanées d'un agent cholinergique et d'un antagoniste cholinergique ou d'un antagoniste adrénergique ou encore de réserpine. Parallèlement à ces recherches, nous avons procédé à des analyses biochimiques qualitatives et quantitatives des amines biogènes de cordes d'embryons normaux et d'embryons
quantitatives des amines biogènes de cordes d'embryons normaux et d'embryons traités par du sulfate de nicotine. Les résultats de ces analyses, relatés dans une Note présentée à la même séance, apportent une base biochimique à des observations décrites dans la présente Note. MÉTHODES. — Les expériences ont été réalisées avec des embryons de Poulet de race Leghorn blanche. La recherche des amines fluorigènes est effectuée selon la méthode de Falck en tenant compte des observations faites par Kirby notamment du fait que la chorde peut fonctionner comme une « pompe » à amines et capter les amines exogènes. Les amines
» à amines et capter les amines exogènes. Les amines fluorigènes sont recherchées sur des coupes de différents types d'embryons : (a) des coupes d'embryons témoins; (b) des coupes d'embryons traités, soit avec 1,7 mg de sulfate de nicotine, soit avec 1 mg de chlorure de carbamylcholine; (c ) des coupes d'embryons traités à la fois par un cholinergique et par 4 mg d'atropine ou par 0,5 mg de propranolol ou encore par 2 mg de réserpine [agent de déplétion des catécholamines et des indolamines]; (d) des coupes d'embryons des types (a), (b) et (c ) traités à 70 h
types (a), (b) et (c ) traités à 70 h par un précurseur aminergique. Tous les produits utilisés sont administrés, soit sous la forme de solution aqueuse injectée dans le sac vitellin, soit sous forme d'une suspension aqueuse déposée sur le blastoderme. Tous les œufs sont ouverts à 48 h. Les œufs témoins sont refermés et remis en incubation. Les œufs expérimentaux sont refermés après traitement et remis également en incubation. À 70 h, les œufs destinés à recevoir un précurseur aminergique reçoivent une dose de 2 mg de L-DOPA ou de noradrénaline (NA), déposée en suspension aqueuse sur le
ou de noradrénaline (NA), déposée en suspension aqueuse sur le blastoderme. À 72 h, tous les embryons sont sacrifiés. La congélation des embryons se fait à l'azote liquide, la lyophilisation est effectuée pendant 24 h à —40°C et le traitement aux vapeurs de paraformaldéhyde se fait pendant 2 h à +80°C. L'inclusion à la paraffine est effectuée sous vide et les blocs sont débités en coupes de 5 g. L'observation microscopique est faite en lumière ultraviolette à l'aide d'un microscope « Leitz » équipé des filtres BG 12 et K 530. RÉSULTATS. — Dans les coupes d'embryons témoins, nous n'avons
530. RÉSULTATS. — Dans les coupes d'embryons témoins, nous n'avons décelé qu'une très faible fluorescence verdâtre n'affectant que quelques cellules chordales et uniquement dans la région cervicale (fig. 1). Sur des coupes d'embryons témoins traités, soit par la L-DOPA, soit par la NA, une fluorescence plus prononcée est décelable tout le long de la chorde, avec toutefois une intensité plus accusée dans la région cervicale (fig. 2). Les coupes d'embryons traités par le sulfate de nicotine possèdent une fluorescence verte assez intense s'étendant sur toute la longueur de la chorde avec un maximum dans la région cervicale. EXPLICATION DE LA
avec un maximum dans la région cervicale. EXPLICATION DE LA PLANCHE Fig. 1. — Coupe de la chorde d'un embryon témoin de 3 jours. Sans injection de précurseur aminergique. Faible fluorescence verdâtre n'affectant que quelques cellules (G x 120). Fig. 2. — Coupe d'une chorde d'un embryon témoin de 3 jours traité à 70 h par une injection de NA. Forte fluorescence occupant un grand nombre de cellules chordales. Remarquez la fluorescence de la partie ventrale du tube nerveux (G x 120). Fig. 3. — Coupe d'une chorde d'un embryon de 3 jours, traité à 48 h par 1,7 mg
de 3 jours, traité à 48 h par 1,7 mg de sulfate de nicotine et à 70 h par 2 mg de NA. Forte fluorescence couvrant totalement la surface chordale. La partie ventrale du tube nerveux est également fluorescente (G x 50). Fig. 4. — Coupe d'une chorde d'un embryon de 3 jours, traité à 48 h par 1 mg de carbachol et à 70 h par 2 mg de NA. Très forte fluorescence n'affectant pas tous les compartiments cellulaires (G x 190). Fig. 5. — Coupe d'un embryon de 3 jours, traité à 48 h par 1 mg de
3 jours, traité à 48 h par 1 mg de carbachol et par 4 mg d'atropine et à 70 h par 2 mg de NA. La fluorescence des cellules chordales a pratiquement disparu mais il subsiste une forte fluorescence périchordale et autour d'une partie du bord ventral du tube nerveux (G x 120). Fig. 6. — Coupe de la chorde d'un embryon de 3 jours traité à 48 h par 1 mg de carbachol et par 2 mg de réserpine et à 70 h par 2 mg de NA. Forte diminution de la fluorescence des cellules chordales mais persistance d'une
diminution de la fluorescence des cellules chordales mais persistance d'une fluorescence périchordale intense (G x 120). Les coupes d'embryons traités à la fois par le sulfate de nicotine et avec un précurseur aminergique font apparaître une vive fluorescence vert-jaune couvrant la totalité des coupes (fig. 3). Cette fluorescence existe tout le long de la chorde mais présente néanmoins un gradient céphalo-caudal avec un maximum d'intensité dans la région cervicale. La fluorescence des chordes d'embryons traités par le chlorure de carbamylcholine présente dans l'ensemble les mêmes images que les chordes d'embryons traités par le sulfate de nicotine. Les images des chordes
traités par le sulfate de nicotine. Les images des chordes d'embryons traités par la carbamylcholine et par un précurseur aminergique font toutefois ressortir une différence importante. Toute la surface des chordes (fig. 4) n'est pas fluorescente. En plus des lacunes chordales, il y a des compartiments cellulaires dépourvus de fluorescence aminergique. Il est important de noter que chez tous les embryons traités par la L-DOPA ou la NA apparaît une faible fluorescence à la base du tube nerveux affectant la forme d'une lunule (fig. 2, 3 et 4). Parfois la fluorescence décrit un fin liseré à la limite inférieure du
fluorescence décrit un fin liseré à la limite inférieure du tube nerveux. Le traitement simultané par un cholinergique et par l'atropine ou par le propranolol (bloquant l'adrénergique) et également par la réserpine, diminue considérablement sinon totalement la fluorescence des cellules chordales. Seule une très faible fluorescence verte subsiste à leur niveau (fig. 5 et 6). Une forte fluorescence jaune persiste à la limite externe de la chorde. Cette fluorescence est localisée dans le matériel extracellulaire périchordal qui, à ce niveau, est très condensé et forme ce qu'on appelle communément la gaine chordale. La fluorescence induite à la base du tube
gaine chordale. La fluorescence induite à la base du tube nerveux par les précurseurs aminergiques persiste également. Nous ne pouvons expliquer la localisation de cette fluorescence, ni sa persistance après le traitement par les antagonistes ou par la réserpine. Nous ne pensons pas qu'elle soit due à la présence d'un aminergique incomplètement pompé par la chorde ni à une autofluorescence de l'un des produits employés. Les contrôles effectués pour rechercher des phénomènes d'autofluorescence ont tous été négatifs. CONCLUSIONS. — Cette étude apporte d'abord une confirmation des résultats obtenus par Kirby (6) et, en plus, elle montre que l'injection de certains
(6) et, en plus, elle montre que l'injection de certains cholinergiques a pour conséquence une augmentation de la fluorescence chordale. Après l'injection le nombre de cellules fluorescentes est nettement plus élevé que chez les témoins. Il est difficile de tirer des conclusions d'après la couleur de la fluorescence sur la nature des amines fluorigènes présentes dans les chordes. L'instabilité de la fluorescence sous les rayons ultraviolets, l'absence d'autofluorescence des substances employées, et la disparition de la fluorescence des cellules chordales après le traitement par des antagonistes ou par la réserpine, apportent des arguments supplémentaires en faveur de la présence d'amines
apportent des arguments supplémentaires en faveur de la présence d'amines biogènes dans les cellules chordales d'embryons de Poulet de 3 jours. Les mêmes faits parlent en faveur de l'accroissement des amines biogènes chordales provoqué par certains agents cholinergiques et également en faveur de la variation de leur concentration sous l'effet d'antagonistes ou d'agents provoquant leur déplétion. Dans une Note, présentée à la même séance, nous apportons (8) une base biochimique qualitative et quantitative à certains résultats présentés dans cette Note. (*) Séance du 20 décembre 1976. (1) G. STRUDEL, Comptes rendus, 272, série D, 1971, p. 673. (2) G. STRUDEL
rendus, 272, série D, 1971, p. 673. (2) G. STRUDEL et G. GATEAU, Comptes rendus, 272, série D, 1971, p. 2480. (3) G. STRUDEL et G. GATEAU, Comptes rendus. 284. série D, 1977, p. 469. (4) G. GATEAU, Diplôme de l'École pratique des Hautes Études, 1977. (5) G. STRUDEL et G. GATEAU, Comptes rendus, 277, série D, 1977 (à paraître). (6) M. L. KIRBY et S. A. GILMORE, Anat. Rec., 173, 1972, p. 469-478. (7) B. FALCK et C. OWMAN, Acta Univ. Lund., 2. 1965. p. 1-23. (8) G. STRUDEL, M. RECASENS et P. MANDEL, Comptes rendus, 284, série D,
M. RECASENS et P. MANDEL, Comptes rendus, 284, série D, 1977, p. 967. (9) L. S. GOODMAN et A. GILMAN, dans The Pharmacological Basis of Therapeutics, McMillan, 1975, p. 557-562. Laboratoire d'Embryologie expérimentale, Ecole Pratique des Hautes Études, Institut d'Embryologie, Collège de France et C.N.R.S., 49 bis, avenue de la Belle Gabrielle 94130 Nogent-sur-Marne et Laboratoire de Biologie animale, Université de Clermont-Ferrand, E. R. A., C.N.R.S. n° 408, B.P. n° 45, 63170 Aubière. ÉCOLOGIE. — Considérations sur l'écosystème karstique. Note (*) de Raymond Rouch, présentée par M. Albert Vandel. Le concept d'écosystème karstique est établi à partir de ses deux
concept d'écosystème karstique est établi à partir de ses deux composantes, l'une physique, l'autre biologique. Le système karstique, d'un point de vue physique, constitue une entité parfaitement définie par ses caractéristiques topographiques et hydrogéologiques. La mise en évidence d'une communauté animale au sein d'un tel ensemble, celui du Baget (Ariège), prouve qu'à l'unité physique de ce bassin versant correspond une unité sur le plan écologique. Ainsi doit-on considérer le système karstique comme l'unité fonctionnelle de base en matière d'écologie, c'est-à-dire comme l'écosystème karstique. The karstic ecosystem concept is actualized from its two components, the one physical and the other biological.
its two components, the one physical and the other biological. From a physical point of view, a karstic system forms a unit perfectly defined through its own topographic and hydrogeological characteristics. The faunal community which has been recently assessed in Baget (Ariège) demonstrates that the physical unity of this system balances with the ecological one. Therefore, the karstic system, should be now considered as the basic functional unity in ecology, i.e. as the karstic ecosystem. Les recherches écologiques sur le domaine souterrain karstique se sont fondées pendant longtemps sur les observations réalisées dans les grottes. C'est ainsi que, selon l'usage
observations réalisées dans les grottes. C'est ainsi que, selon l'usage établi en limnologie, le milieu aquatique était divisé en mares plus ou moins temporaires (les gours), rivières et lacs souterrains. La démonstration que l'habitat des formes souterraines ne se limite pas à ces pièces d'eau conduisit à substituer à la notion de grotte celle d'aquifère karstique. L'adoption d'une telle approche permettait notamment de placer les grottes et leurs habitats dans un ensemble cohérent où l'on distingue deux zones superposées : la zone d'infiltration, située au-dessus du niveau piézométrique, est le siège d'écoulements verticaux grâce auxquels espèces hypogées et épigées transitent
siège d'écoulements verticaux grâce auxquels espèces hypogées et épigées transitent à travers la masse des calcaires, peuplant au passage les collections d'eau des cavités où elles peuvent, en fonction des conditions locales, constituer des populations de type souvent particulier. La zone noyée est caractérisée par des écoulements horizontaux; en raison des difficultés d'accès qu'elle présente, celle-ci n'a que fort rarement fait l'objet d'investigations suivies. Le filtrage intensif des résurgences karstiques a largement contribué à montrer qu'il s'agissait là d'une partie du karst richement peuplée sur le plan qualitatif. Par cette méthode en effet, toute une série de formes, généralement inconnues
méthode en effet, toute une série de formes, généralement inconnues dans la zone d'infiltration, y ont été recensées. Ainsi était-il prouvé que le biotope des formes souterraines englobe la totalité de l'aquifère karstique et que les cavités accessibles à l'Homme ne fournissent qu'une image partielle et fréquemment ponctuelle du peuplement souterrain. Au point de vue quantitatif, la mise en évidence de l'expulsion massive de certains groupes, tels que les Copépodes qui, pendant les crues, sont entraînés à raison de plusieurs centaines de milliers d'individus, infirmait la prétendue pauvreté faunistique du karst et conduisait à envisager l'existence d'une unité fonctionnelle de
karst et conduisait à envisager l'existence d'une unité fonctionnelle de base en matière d'écologie souterraine. Dans le même temps où les écologistes faisaient appel à des concepts nouveaux rendant compte des données quantitatives s'étendant sur plusieurs années, les hydrogéologues proposaient une vision nouvelle de l'aquifère karstique, fondée également sur une approche globale. Ainsi est née la notion de système karstique, ensemble au niveau duquel les écoulements souterrains de type karstique s'organisent pour constituer une unité de drainage. Un bassin versant lui correspond en surface; il englobe souvent des terrains imperméables non karstifiés dont les eaux de ruissellement viendront se perdre