jeanflop/post-ocr-correction huggingface dataset:
vitro sur les synaptosomes du cerveau de Rat quand on conserve intacte la membrane cellulaire. En hypoxie, nous avons observé qu'il y avait une diminution significative de la capture du glucose par le cerveau. Ces résultats sont en accord avec ceux obtenus chez la Gerbil en ischémie cérébrale et sur le cerveau de Chien isolé et perfusé par du sang anoxique. Sur des coupes de cortex cérébral, on constate également une diminution de l'incorporation du glucose 14C dans les macromolécules, quand le milieu de survie est privé d'oxygène. En outre, on sait qu'une augmentation de l'activité cérébrale entraîne une augmentation
on sait qu'une augmentation de l'activité cérébrale entraîne une augmentation de la capture du glucose par le cerveau et, par là même, une augmentation de l'utilisation de ce métabolite. Inversement, il est permis de penser qu'une baisse de la capture du désoxyglucose en hypoxie, comme nous l'avons noté dans notre modèle expérimental, reflète bien une diminution du fonctionnement des cellules nerveuses, ce qui apporte une confirmation à l'une de nos observations antérieures, à savoir la diminution de la curiosité de l'animal. Le Professeur Rapin, Mmes A. Mellix, P. Le Moing et M. J.-M. Vivien nous ont apporté leurs conseils judicieux
et M. J.-M. Vivien nous ont apporté leurs conseils judicieux et leur collaboration technique. (*) Séance du 10 janvier 1977. (1) M. H. DES ROSIERS, C. KENNEDY, C. S. PATLAK, K. D. PETTIGREW et L. SOKOLOFF et M. REIVICH, Neurology, avril 1974, p. 389. (2) G. THOMANN, A. SERVIN, M. BEZANÇON et S. GARCET, J. Pharmacol., 6, 3, 1975, p. 291. (3) L. SOKOLOFF, M. REIVICH, C. S. PATLAK, K. D. PETTIGREW, M. DES ROSIERS et C. KENNEDY, Proc. 5th Meet Amer. Soc. Neurochem., 1974, p. 85. (4) I. DIAMOND et R. A. FISHMAN, Brain Research., 57, 1973, p. 239.
et R. A. FISHMAN, Brain Research., 57, 1973, p. 239. (5) M. SPATZ, I. KLATZO et J. CERVOS-NAVARRO, Pathology of Cerebral Microcirculation, Gruyter, Berlin, 1974, p. 361. (6) M. SPATZ, B. B. MRŠULJA, B. J. MRŠULJA et I. KLATZO, Brain Research., 103, 1976, p. 193. (7) L. R. DREWES, D. D. GILBOE et A. L. BETZ, Arch. Neurol., 29, 1973, p. 385. (8) A. L. BETZ, D. D. GILBOE et L. R. DREWES, Brain Research, 67, 1974, p. 307. (9) A. L. BETZ, D. D. GILBOE et L. R. DREWES, Biochim. Biophys. Acta, 401, 1975, p. 416. (10) S. K.
Biochim. Biophys. Acta, 401, 1975, p. 416. (10) S. K. GHOSH et M. M. COTTEN, Exp. Neurol., 43, 1974, p. 570. (11) F. R. SHARP, J. S. KAVER et M. G. SHEPHERD, Brain Research., 98, 1975, p. 596. (12) F. R. SHARP, Brain Research, 110, 1976, p. 141. Services de Recherche des Laboratoires Joullie, 20 bis, quartier Boieldieu, La Défense, 92800 Puteaux. BACTÉRIOLOGIE. — Essai d'expression du pouvoir bactériolytique spontané global d'une eau. Note de Louis Schwartzbrod, Chantal Finance et Pierre Dixneuf, présentée par M. Pierre Lépine. La mise en œuvre d'une technique de détermination du pouvoir bactériolytique spontané au
œuvre d'une technique de détermination du pouvoir bactériolytique spontané au niveau des eaux superficielles a conduit à proposer un nouveau mode d'expression du pouvoir bactériolytique spontané d'une eau, dénommé PBSG. Ce PBSG permet d'évaluer l'intensité de la bactériolyse spontanée globale d'une eau et aussi de comparer les pouvoirs bactériolytiques spontanés globaux d'échantillons d'eaux différents. The utilization of a technique for the determination of spontaneous bacteriolytic power in surface waters has led us to propose a new way of expressing the spontaneous bacteriolytic power of water: PBSG. PBSG allows us to evaluate the intensity of global spontaneous bacteriolysis and to compare
evaluate the intensity of global spontaneous bacteriolysis and to compare the global spontaneous bacteriolytic powers of different water samples. La découverte par Stolp et Petzold (4) en 1962, de Bdellovibrio bacteriovorus, bactérie microprédatrice, ainsi que la mise en évidence, par Guélin et col. W), en d'autres microorganismes parasites de bactéries pathogènes, permettent actuellement de confirmer le rôle de l'antagonisme bactérien dans certains processus d'autoépuration des eaux naturelles. Notre étude a eu pour but de tenter de déterminer l'activité des facteurs antagonistes dans la disparition ou la diminution du nombre de bactéries et de quantifier le phénomène de bactériolyse spontanée. Le
bactéries et de quantifier le phénomène de bactériolyse spontanée. Le principe de la recherche de l'évaluation du pouvoir bactériolytique spontané d'un échantillon d'eau consiste à mettre en présence d'une suspension titrée de germes-tests, en l'occurrence Escherichia coli, d'une part, de l'eau à analyser, d'autre part des dilutions au 1/10 et au 1/100 de cette même eau. Les mélanges obtenus sont titrés immédiatement puis incubés à l'étuve à 33°C. Ils sont ensuite titrés tous les 2 jours pour déterminer le nombre de germes-tests survivants. Parallèlement, un témoin germes-tests, ne contenant pas d'eau analysée, est toujours effectué et traité de la même
d'eau analysée, est toujours effectué et traité de la même façon (1). Nous pouvons ainsi dresser des tableaux de résultats, montrant, pour un échantillon d'eau donné, le nombre d'Escherichia coli survivants, exprimé en nombre de germes par millilitre, en fonction du jour de titrage et du taux de dilution du tube considéré. Sont également intégrés dans ces tableaux les résultats concernant le témoin (tableau I). TABLEAU 1 Temps Milieu analysé 0 jour 2 jours 4 jours 6 jours Témoin 9,5.107 1,4.108 1.108 1,9.108 Eau non diluée 1,1.108 1.108 3,3.107 1,6.105 Eau diluée au 1/10 1,3.108 1,3.108 6,2.105 8.104 Eau diluée
Eau diluée au 1/10 1,3.108 1,3.108 6,2.105 8.104 Eau diluée au 1 1 100 1,1.108 2,2.108 1,5.108 9,6.106 A la lecture des différentes publications portant sur ce problème, nous avons pu constater que l'intensité de la bactériolyse spontanée était exprimée jusqu'à ce jour à l'aide de courbes de survie d'Escherichia coli dans l'eau analysée. Ces courbes représentent la densité d'Escherichia coli en fonction du temps, cette densité étant exprimée, soit en nombre de bactéries par millilitre, soit en densité optique des suspensions Escherichia coli préparées dans l'eau à analyser. Ce mode de représentation nous a paru peu explicite parce qu'il
mode de représentation nous a paru peu explicite parce qu'il rend malaisé la comparaison des résultats obtenus à partir de beaucoup d'échantillons. Ainsi, il est difficile d'envisager la comparaison d'un grand nombre de courbes les unes par rapport aux autres. C'est pourquoi nous avons proposé un nouveau mode d'expression des résultats en utilisant une technique de calcul global standardisée : le pouvoir bactériolytique spontané global ou PBSG, qui permet la comparaison des résultats avec une très grande facilité même si ceux-ci sont très nombreux. Pour ce faire, nous avons exprimé les résultats bruts en pourcentages de disparition d'Escherichia coli après
les résultats bruts en pourcentages de disparition d'Escherichia coli après 2, 4 et 6 jours d'incubation de la manière suivante. De façon à se placer sur un plan général, nous représentons les différentes valeurs rassemblées dans les tableaux de résultats par une lettre affectée de 1 ou 2 indices V1 désigne le nombre de germes présents au jour i dans le tube contenant l'échantillon au taux de dilution 1/10 (tableau II). De manière analogue, Tj représente le nombre de germes présents au jour j dans le tube témoin (tableau II). TABLEAU II Temps Milieu analysé 0 jour 2 jours 4
TABLEAU II Temps Milieu analysé 0 jour 2 jours 4 jours 6 jours Témoin T0 T2 T4 T6 Eau non diluée V0 V2 V4 V6 Eau diluée au 1/10 v10 V2 10 V4 10 V6 10 Eau diluée au 1/100 v100 Vj00 V6 V6100 C'est ainsi qu'on déterminera tout d'abord la quantité d'Escherichia coli disparue en faisant la différence puis le pourcentage de disparition F-, défini par Nous pouvons ainsi dresser des tableaux où sont rassemblés les pourcentages de disparition d'Escherichia coli après 2, 4 et 6 jours d'incubation (tableau III). TABLEAU III Disparition (%) Milieu analysé 2 jours 4
III). TABLEAU III Disparition (%) Milieu analysé 2 jours 4 jours 6 jours Eau non diluée 38 71 99 Eau diluée au 1/10 32 99 99 Eau diluée au 1/100 0 0 95 A partir de ces résultats exprimés en pourcentages de disparition nous pouvons déterminer le pouvoir bactériolytique spontané global. Nous partons du fait que l'intérêt principal de l'introduction de différentes dilutions réside essentiellement en l'augmentation de la précision due à une meilleure approche du résultat « le plus significatif » : par exemple dans le tableau III, au jour i = 2, pour un taux de dilution au
jour i = 2, pour un taux de dilution au 1/10, on obtient un pourcentage de disparition non nul, alors que ce pourcentage devient nul à la dilution au 1/100. La dilution au 1/10 est la dilution la plus grande permettant d'apprécier une disparition : on peut l'appeler « dilution caractéristique ». Il est également justifié d'affirmer que plus la dilution caractéristique est grande, plus le bactériolyse spontanée de l'eau est importante. Nous dirons donc que le pouvoir bactériolytique spontané global d'une eau au jour j « PBSGj », est un nombre proportionnel à Fj et à dj. Plus précisément
un nombre proportionnel à Fj et à dj. Plus précisément nous dirons que pji, pourcentage de disparition au jour j. dji, dilution caractéristique. Pratiquement, la détermination de PBSGj revient donc à considérer le pji de la dilution caractéristique, cette dernière étant la plus grande dilution présentant encore un pourcentage de disparition non nul. Ainsi, pour l'exemple précédemment considéré, nous obtenons le tableau de résultats suivant (tableau IV). TABLEAU IV Disparition (%) Milieu analysé 2 jours 4 jours 6 jours Eau non diluée 38 71 99 Eau diluée au 1/10 32 99 99 Eau diluée au 1/100 0 0 95 PBSGj
99 99 Eau diluée au 1/100 0 0 95 PBSGj 32 99 950 Les résultats peuvent donc s'exprimer pour chaque échantillon d'eau par 3 valeurs PBSG1 : 32, PBSG2 : 99, PBSG3 : 950. Nous définissons donc un nombre qui permet de répérer, sur une échelle variant de 0 à 999, l'intensité de la bactériolyse spontanée d'une eau et ainsi de comparer entre eux des pouvoirs bactériolytiques spontanés globaux d'échantillons d'eaux différents. Ainsi, un pouvoir bactériolytique spontané, qui est classiquement représenté par des courbes difficilement comparables les unes aux autres ou bien par des tableaux de nombres ou de pourcentages
ou bien par des tableaux de nombres ou de pourcentages difficilement déchiffrables, est exprimé d'une manière globale et sans faire état des dilutions utilisées sous forme de 3 nombres, représentant le pouvoir bactériolytique spontané global en fonction du temps (soit après 2,4 et 6 jours). Parmi les 3 types de PBSG, PBSG1, PBSG2 ou PBSG3, c'est cependant l'étude du PBSG6 qui permet les meilleures interprétations. Par ailleurs, le PBSG2 n'est pas négligeable, car il permet d'apprécier la rapidité du phénomène de bactériolyse. Cette notion de PBSG permet de quantifier sous une forme simple et claire l'intensité du pouvoir bactériolytique d'une
une forme simple et claire l'intensité du pouvoir bactériolytique d'une eau et donc d'avoir un aperçu global de la bactériolyse spontanée dans cette eau. Séance du 10 janvier 1977. A. GUÉLIN et D. LAMBLIN, Bull. Acad. nat. Méd., 150, 1966, p. 526-532. A. GUÉLIN, P. LÉPINE, D. LAMBLIN et J. SISMAN, Comptes rendus, 266, série D, 1968, p. 2508. C. FINANCE, Contribution à l'étude de la bactériolyse spontanée dans les rivières Moselle et Meurthe (Thèse, Faculté des Sciences pharmaceutiques et biologiques, Nancy, 1976). H. STOLP et H. PETZOLD, Phytopathologische Zeitschrift, 45, 1962, p. 364-390. L. S. et C. F. Laboratoire
45, 1962, p. 364-390. L. S. et C. F. Laboratoire de Bactériologie et Virologie, Faculté des Sciences pharmaceutiques et biologiques, Université de Nancy 1, 5, rue Albert-Lebrun, 54000 Nancy; P. D. : Laboratoire de Mathématiques appliquées, Faculté des Sciences pharmaceutiques et biologiques, Université de Nancy 1, 5, rue Albert-Lebrun, 54000 Nancy. VIROLOGIE. — Dégradation par la phytohémagglutinine de l'état antiviral induit par l'interféron. Note de Alain Pauloin, Françoise Chany-Fournier, Loïs Epstein et Charles Chany, présentée par M. Jean Bernard. La phytohémagglutinine forme M ou P dégrade l'état antiviral préétabli dans les cellules L 929 traitées par l'interféron murin. Le rôle
les cellules L 929 traitées par l'interféron murin. Le rôle de la membrane cellulaire dans le maintien de l'état antiviral par l'interféron et dans sa dégradation par la PHA est discuté. Phytohemagglutinin (PHA M and P forms), when added to L 929 cells previously treated by murine interferon, degrades the antiviral state and restores virus sensitivity in the cells. This degradation depends on the amount of the lectin, the contact period with the cell and the presence of PHA membrane receptors. The importance of membrane configuration not only in the induction but also in the maintenance of the antiviral state
induction but also in the maintenance of the antiviral state is discussed. INTRODUCTION. — Des travaux récents ont montré que certaines lectines végétales possèdent des propriétés d'un grand intérêt biologique. La phytohémagglutinine (PHA) extraite de Phaseolus vulgaris peut agglutiner des érythrocytes humains (1), des leucocytes humains (2), stimuler des lymphocytes pour induire des mitoses (3) et enfin, se lier sélectivement à certains types de carbohydrates (4) et à des membranes cellulaires (5). Dans le cas de l'interféron, le prétraitement des cellules par la PHA bloque l'action antivirale de l'interféron. Cette action inhibitrice pourrait être attribuée à la liaison spécifique de
action inhibitrice pourrait être attribuée à la liaison spécifique de la lectine avec les sites de fixation cellulaire de l'interféron (6). Par ailleurs, l'interféron malgré son affinité pour certaines lectines (7) ne se complexe pas ou peu avec la PHA (8). Nous montrons dans le présent travail que la PHA peut dégrader l'état antiviral induit par l'interféron après son établissement. En effet, lorsqu'elle est ajoutée 5 h après l'interféron, une restauration presque complète de la sensibilité des cellules au virus est obtenue, comparable à son état précédent l'induction. DÉGRADATION DE L'ÉTAT ANTIVIRAL PAR ADDITION DE PHA. — Protocole expérimental. —
L'ÉTAT ANTIVIRAL PAR ADDITION DE PHA. — Protocole expérimental. — Des cellules murines L 929 (105 cellules/ml/tube) sont incubées à 37°C en présence de 300-400 unités d'interféron murin de référence, pendant 5 h (temps nécessaire à l'induction de l'état antiviral dans la cellule). L'interféron est ensuite éliminé et les cellules traitées par la PHA. La PHA utilisée est un extrait brut de Phaseolus vulgaris formé M de Gibco dont l'activité hémagglutinante mesurée en présence de globules rouges humains O+ est de 1 024 unités. Après une période d'incubation de 18 à 20 h à 37°C, la PHA est éliminée et
à 20 h à 37°C, la PHA est éliminée et les cellules infectées par le virus E.M.C. à la multiplicité d'infection de 2. L'effet antiviral de l'interféron est mesuré après 2 cycles de réplication virale, par titrage du rendement infectieux exprimé en unités formant plaque (UFP). RÉSULTATS. L'étude de la relation effet-dose entre l'activité de la PHA et le rendement infectieux du virus E.M.C., en présence d'une dose fixe d'interféron souris (400 U réf.) est présentée dans la figure 1. Dans les cellules traitées par l'interféron pendant 5 h la réplication du virus E.M.C. est inhibée d'environ 300 fois. L'addition
réplication du virus E.M.C. est inhibée d'environ 300 fois. L'addition de PHA à la seconde heure après l'interféron entraîne la dégradation de l'état antiviral dans les 18 h suivantes. Le taux d'inhibition varie linéairement en proportion de la dose de lectine appliquée à la cellule. Pour la dose de PHA la plus élevée (256 U HA) la restauration de la sensibilité cellulaire au virus E.M.C. est presque totale. Dans les cellules témoins, non traitées par l'interféron, les différentes doses de PHA n'affectent pratiquement pas la réplication virale. CINÉTIQUE DE L'ACTION DE LA PHA SUR L'ÉTAT DE RÉSISTANCE ANTIVIRALE. — Nous
DE LA PHA SUR L'ÉTAT DE RÉSISTANCE ANTIVIRALE. — Nous avons cherché à déterminer le temps de contact nécessaire entre cellule et PHA pour obtenir la restauration de l'état initial de la cellule. Les cellules sont, comme précédemment, incubées avec 400 unités d'interféron pendant 5 h puis traitées par 256 U HA de PHA durant les intervalles de temps de : 1, 3, 6, 9 et 19 h. Après chaque période d'incubation, la PHA est éliminée et les cellules infectées aussitôt par le virus E.M.C. Les rendements viraux obtenus à chaque étape sont résumés dans la figure 2. Dans les
chaque étape sont résumés dans la figure 2. Dans les cellules traitées uniquement par l'interféron, l'état antiviral continue à augmenter de façon linéaire en fonction du temps, malgré l'élimination de l'interféron. Au contraire, dans les cellules traitées successivement par l'interféron et par la PHA-M, la pente de la droite s'inverse et l'état antiviral diminue au fur et à mesure de la durée de contact avec la lectine. Les préparations de phytohémagglutinine peuvent, selon le mode d'extraction, contenir plusieurs fractions hétérogènes (8). Une solution de PHA purifiée (PHA-P Difco) a donc été essayée. La PHA-P dégrade comme la PHA-M l'état antiviral
été essayée. La PHA-P dégrade comme la PHA-M l'état antiviral induit par l'interféron (expériences non publiées). DISCUSSION. — Les résultats ici présentés illustrent le rôle déterminant joué par la membrane cellulaire, non seulement dans l'induction, mais également dans le maintien de l'état antiviral. En effet, dans l'établissement de l'état antiviral par l'interféron, on peut distinguer deux étapes : la fixation de l'interféron sur les sites membranaires de la cellule puis l'activation spécifique du site récepteur instaurant dans la cellule l'état antiviral. L'addition de PHA à des cellules préalablement traitées par l'interféron dégrade l'état antiviral et restaure dans la cellule un
l'interféron dégrade l'état antiviral et restaure dans la cellule un métabolisme normal. Cette restauration ad integrum de la sensibilité cellulaire au virus dépend de la quantité de lectine, du temps de contact avec la cellule et de la présence de récepteurs membranaires à la PHA. Deux éventualités peuvent être envisagées pour expliquer le mécanisme de dégradation de l'état antiviral par la PHA. 1. La PHA induirait ou stimulerait la synthèse intracellulaire de facteurs inhibiteurs de l'état antiviral précédemment évoqués lors d'une étude sur la régulation de la résistance antivirale (9). Il est connu en effet que dans les lymphocytes la
Il est connu en effet que dans les lymphocytes la PHA stimule l'ensemble du métabolisme cellulaire (3). 2. La PHA se fixerait sur la membrane cellulaire. Dans un premier temps, l'interféron pourrait stabiliser dans un « état actif » les différents antigènes membranaires pour permettre l'expression de l'état antiviral. L'addition de PHA, qui présente une grande affinité pour les gangliosides, constituant le site de fixation de l'interféron (10) désorganiserait cet « état actif » en déplaçant l'interféron ou en provoquant un changement conformationnel de la surface cellulaire. Ceci suggère qu'une certaine configuration des constituants de la membrane gouvernée par l'interféron
certaine configuration des constituants de la membrane gouvernée par l'interféron est nécessaire au maintien de l'état antiviral. L'action conjuguée de ces mécanismes pourrait également expliquer l'effet biologique observé. Séance du 10 janvier 1977. (1) K. LANDSTEINER et H. RAUBITSHEK, Zentralbl. Bacteriol. Parasitenkd. Infecktionskr., 45, 1908, p. 660. (2) P. C. NOWELL, Cancer Res., 20, 1960, p. 426-466. (3) T. WEBER, C. T. NORDMAN et R. GRASBECK, Scand. J. Haematol., 4, 1967, p. 77-80. (4) H. Lis et N. SHARON, Ann. Rev. Biochem., 42, 1973, p. 541-574. (5) G. Dupuis, Canad. J. Biochem., 54, 1976, p. 717-728. F. BESANÇON et H.
J. Biochem., 54, 1976, p. 717-728. F. BESANÇON et H. ANKEL, Comptes rendus, 283, série D, 1976, p. 1807. M. F. BOURGEADE et F. BESANÇON, Comptes rendus, 277, série D, 1973, p. 2833. D. A. RIGAS et E. E. OSGOOD, J. Biol. Chem., 22, 1955, p. 607-615. C. CHANY, F. FOURNIER et S. ROUSSET, Nature, 12, 1971, p. 113-114. F. BESANÇON, H. ANKEL et S. BASU, Nature, 259, 1976, p. 576-578. Institut national de la Santé et de la Recherche médicale, Unité 43, hôpital Saint-Vincent-de-Paul, 74, avenue Denfert-Rochereau, 75014 Paris; University of California, School of Medicine, Cancer Research Institute, Department
University of California, School of Medicine, Cancer Research Institute, Department of Pediatrics, San Francisco, Cal, U.S.A. IMMUNOLOGIE. — Titrage de l'activité hémolytique du complément humain après diffusion radiale. Note de Evelyne Bourret, Madeleine Bastide, Jean-Marie Bastide et Lucette Bardet, présentée par M. André-Romain Prévot. Une méthode de dosage du complément humain après diffusion dans un gel renfermant des hématies sensibilisées permet d'évaluer de façon très satisfaisante l'activité hémolytique de ce complément. L'analyse des résultats par la méthode des moindres carrés a permis de constater qu'il existe une relation linéaire entre l'aire d'hémolyse et le logarithme de la concentration. The hemolytic
l'aire d'hémolyse et le logarithme de la concentration. The hemolytic activity of human complement is evaluated after diffusion in agarose containing sensitized erythrocytes. The results show a linear relation between hemolysis area and logarithm of concentration. L'intérêt suscité actuellement par le système complémentaire humain fait considérer de façon plus approfondie les méthodes de dosages de ce complexe globulinique. Elles peuvent se répartir en deux groupes : — les méthodes faisant appel à l'activité hémolytique du complément sur des globules rouges sensibilisés par l'anticorps hémolytique qui permettent d'évaluer l'activité réelle du complément ; — les méthodes basées sur l'immunoprécipitation des protéines
complément ; — les méthodes basées sur l'immunoprécipitation des protéines du système complémentaire par leur antisérum, surtout utilisées pour doser les fractions du complément, qui dosent seulement la protéine sans refléter son activité enzymatique. Notre choix s'est donc porté sur une méthode appartenant à la première catégorie. Les méthodes qui se basent sur le phénomène hémolytique se lisent dans la zone de 50 % d'hémolyse afin d'augmenter la sensibilité de lecture; la technique de Kabat et Mayer se rattachent à ce principe. En 1974, Hiramoto propose un dosage hémolytique du complément de cobaye réalisé après immunodiffusion du complément dans une
complément de cobaye réalisé après immunodiffusion du complément dans une suspension en gel d'hématies sensibilisées et non en tubes comme les techniques précédentes. Nous avons appliqué cette méthode au complément humain, et nous avons été amenés à étudier et à modifier les paramètres établis par Hiramoto; ceci nous a permis de mettre au point une nouvelle méthode applicable au sérum humain, de manipulation facile et de lecture très précise. PROTOCOLE EXPÉRIMENTAL. — Toutes les manipulations sont effectuées en milieu tampon véronal sodique de Mayer. La suspension d'hématies de Mouton lavées jusqu'à obtention d'un surnageant limpide, est ajustée à une concentration
jusqu'à obtention d'un surnageant limpide, est ajustée à une concentration globulaire de 0,85.109 cellules par millilitre. On réalise un mélange à parties égales de cette suspension et d'une dilution au 1/100 d'un sérum hémolytique antihématies de Mouton préparé sur Lapin. Cette suspension est ajoutée extemporanément à une solution d'agarose, équilibrée à 55°C, de concentration finale égale à 10 g/1. On découpe à l'emporte pièce des puits régulièrement répartis dans le gel solidifié. Deux séries de neuf dilutions, de raison géométrique 0,75 correspondant respectivement au sérum étalon et au sérum échantillon, sont déposées dans la même boîte. Le sérum étalon dosé