jeanflop/post-ocr-correction huggingface dataset:
calciques à une concentration supérieure à 10-3 M (fig. 1 D), tandis que celle de la péroxydase P2a est faiblement dépendante du calcium (fig. 1 D); encore peut-on penser qu'il s'agit dans ce dernier cas d'un artefact dû à une légère contamination de la fraction P2b (fig. 1 C). L'ensemble de ces informations nous conduit à penser que la péroxydase P2 indécelable dans les tissus sains est spécifique des tissus parasités. Dans l'état actuel de nos connaissances il est impossible de préciser si la synthèse de cette enzyme doit être attribuée à l'hôte ou au parasite. Il convient néanmoins de
attribuée à l'hôte ou au parasite. Il convient néanmoins de rappeler d'une part que, in vitro, le L. lignosus ne libère pas de péroxydase alors qu'il excrète des laccases et, d'autre part, que l'augmentation de l'activité péroxydasique est un phénomène général chez les végétaux subissant une agression d'origine virale, bactérienne ou fongique. Aussi, bien qu'aucun argument décisif ne puisse être avancé, on peut estimer que la péroxydase P2 des tissus parasités est synthétisée par l'Hévéa. Enfin, si le rôle de cette péroxydase ne peut, pour l'instant, être précisé, on ne peut cependant exclure, à la lumière de certaines données acquises
peut cependant exclure, à la lumière de certaines données acquises sur des systèmes hôte-parasite différents (1), une éventuelle participation de cette enzyme aux réactions de défense de l'hôte. (*) Séance du 8 décembre 1976. (1) J. P. GEIGER, Physiol. vég., 13, (2), 1975, p. 307. (2) T. K. KIRK, Ann. Rev. Phytopathology, 9, 1971, p. 185. (3) J. P. GEIGER, D. NANDRIS et M. GOUJON, Physiol. vég., 14, (2), 1976, p. 271. (4) P. ANDREWS, Biochem. J., 91, 1964, p. 222. (1) K. WEBER, J. R. PRINGLE et M. OSBORN in Methods in Enzymology, XXVI, S. P. COLOWICK et N.
in Methods in Enzymology, XXVI, S. P. COLOWICK et N. O. KAPLAN, éd., Academic Press, 1972, p. 3. (6) H. A. STAFFORD et S. BRAVINDER-BREE, Plant. Physiol., 49, 1972, p. 950. (1) T. OHGUCHI et Y. ASADA, Physiol. Pl. Path., 5, 1975, p. 183. Laboratoire de Phytopathologie de l'O R S T O M Centre d'Adiopodoumé, B.P. n° V.51, Abidjan, Côte-d'Ivoire ; et Laboratoire de Morphologie expérimentale, associé au C.N.R.S., Faculté des Sciences, 91405 Orsay. MYCOLOGIE. — Sensibilité inégale de diverses espèces et souches d'Hyménomycètes parasites à la 5-fluorocytosine. Note (*) de René Morquer, Correspondant de l'Académie, et Annick Touvet.
(*) de René Morquer, Correspondant de l'Académie, et Annick Touvet. Certaines espèces d'Hyménomycètes sont très sensibles à la 5-FC, inhibitrice de la conidiogenèse et de la rhizomorphogenèse; d'autres présentent une croissance mycélienne résistante. Les souches activement conidifères de Fomes annosus sont plus vulnérables à l'antibiotique que les souches paucispores et leurs mitoses sont perturbées. Importants differences sont observées entre espèces d'Hyménomycètes parasites sur les arbres de forêt as to sensibilité à la 5-fluorocytosine. Conidiogenèse et rhizomorphogenèse de plusieurs espèces sont inhibées par faibles doses de cet antibiotique. D'autres espèces, comme Fomes annosus, sont beaucoup plus résistantes par rapport à leur
Fomes annosus, sont beaucoup plus résistantes par rapport à leur mycelium en croissance; néanmoins les souches activement sporifères sont plus sensibles que les souches paucispores; leurs propriétés cinétiques sont perturbées par ce composé. Les antibiotiques dérivés de la fluoropyrimidine furent élaborés au cours de recherches sur les antimétabolites des bases puriques et pyrimidiques. Grünberg (1963) a établi que la fluorocytosine, atoxique chez les Mammifères, était antifongique contre Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Aspergillus fumigatus et quelques blastomycoses (1). Shadomy (2) établissait que la cytosine et les peptones inactiveraient la 5-FC (5-fluorocytosine) dans son action sur le Cryptococcus neoformans comme parasite de
dans son action sur le Cryptococcus neoformans comme parasite de l'Homme. Cet antagonisme serait dû à une désaminase qui libérerait la 5-fluorouracile (3), (4). Chez Saccharomyces cerevisiae, l'incorporation de 5-fluorouracile dans les RNA ribosomal et de transfert déterminerait une inhibition de la croissance et une diminution de la teneur en RNA des cellules-levures (5). D'après Drouhet (6), Aspergillus fumigatus et A. nidulans présenteraient des souches résistantes jusqu'à 100 µg, A. flavus à plus de 100 µg. Mucor corymbifer et Absidia italiana, Histoplasma et Coccidioides immitis exigeraient aussi de fortes concentrations de 5-FC, ce qui la rend inapplicable. La 5-FC est
de 5-FC, ce qui la rend inapplicable. La 5-FC est également inefficace contre Scopulariopsis brevicaulis (7). L'incorporation du 5-fluorouracile au RNA s'effectuerait sous l'action enzymatique d'une pyrophosphorylase. L'activité acceptrice des aminoacides serait perturbée ainsi que la biosynthèse de RNA et des protéines selon Annable. On a pu séparer par chromatographie les aminoacyl tRNA glycyl-lysyl et phénylalanyl-t-RNA. D'après Polak et Scholer, la 5-FC, la cytosine et l'adénine seraient transportées par la même perméase, ce qui expliquerait l'effet antagoniste de l'adénosine sur l'inhibition par la 5-FC chez la levure sauvage. Il existerait une perméase différente pour l'uridine et l'uracile, mais ils ont
une perméase différente pour l'uridine et l'uracile, mais ils ont observé l'absence d'antagonisme par la thymine et la thymidine. Chez les Candida, Drouhet et coll. ont pu préciser divers types de résistance et de fonctionnement des perméases et un effet rétroinhibiteur du substrat sur ce système. Ils ont montré que la paroi cytoplasmique des souches sensibles présentait au microscope électronique une couche granuleuse solubilisée par la trypsine, donc protéinique conditionnant la sensibilitisation, puisque sa disparition fait réapparaître la résistance à la 5-FC. Cette conception est à rapprocher de celle qui attribue à certaines protéines un accroissement de perméabilité de la
attribue à certaines protéines un accroissement de perméabilité de la membrane phospholipidique. Les constituants protéiniques de la membrane cytoplasmique sont les moins bien connus. Les Hyménomycètes lignicoles parasites sont-ils également sensibles aux antibiotiques fluorés ? 10 mg % ml de 5-FC ralentissent la végétation mycélienne, raccourcie, clairsemée, aranéeuse chez Merisma sulfureus. La fongistase est réalisée au 15e jour à 25 mg % ml; le Champignon ne produit plus de conidies: 50 mg % ml sont nettement fongicides. Fomes hartigii est presque aussi sensible que M. sulfureus, la croissance étant nettement retardée à 50 mg % ml; les filaments n'atteignent que
retardée à 50 mg % ml; les filaments n'atteignent que 50 à 100 µm de long au 7e jour; ils deviennent sinueux et l'on observe au 14e jour des coagulations cytoplasmiques. Les chlamydospores apparaissent au 33e jour et la fongistase est réelle. 200 mg % ml sont nettement fongicides. Ungulina marginata n° 274 est aussi sensible que le précédent: fongistase à partir du 7e jour avec formation d'une auréole opaque de 37 mm de diamètre, en présence de 50 mg de 5-FC. 100 mg % ml sont fongicides et générateurs d'une auréole. Stereum spadiceum marque un retard de croissance au
d'une auréole. Stereum spadiceum marque un retard de croissance au 14e jour à 400 mg de 5-FC. Les hyphes forment des rameaux hélicoïdaux ou tordus en vrille (signe évident d'intoxication) et les extrémités offrent de courts renflements. Certains filaments variqueux sont fortement vacuolisés et montrent des coagulations cytoplasmiques. La végétation mycélienne se poursuit encore lentement au 33e jour, la colonie ne dépassant pas un diamètre de 12 x 15 mm avec 1 mm de hauteur et les hyphes rampantes aranéeuses s'observent encore dans une vingtaine de colonies. On n'observe plus de formation de spores à 800 mg % ml. Odontia
de formation de spores à 800 mg % ml. Odontia bicolor nettement moins sensible que le précédent, s'accroît d'abord faiblement en présence de 5-FC à 400 mg % ml; la pénétration de l'antibiotique est pourtant plus lente que chez les espèces précédentes puisqu'au 2e jour les hyphes mesurent jusqu'à 350 µm avec un diamètre normal de 2 à 2,5 µm. L'auréole périphérique opaque est nette. La croissance ralentie atteint 12-17 mm de diamètre avec 1 mm de hauteur au bout de 31 jours en présence de 400 mg de 5-FC et 8-10 mm à la concentration de 800 mg %
et 8-10 mm à la concentration de 800 mg % ml qui est fongistatique. Clitocybe mellea: à 400 mg % ml, la croissance mycélienne des hyphes ondulées sinueuses est ralentie; elle atteint seulement 500 µm de longueur au 7e jour, et se limite à 1 mm de haut sur le fragment d'ensemencement. Au 31e jour la colonie mycélienne cotonneuse, d'un blanc jaunâtre, mesure 20 x 16 mm avec une hauteur de 1.5 mm. Au 45e jour: 31 x 37 x 1-2 mm de haut. Elle marque à 800 mg une fongistase sans apparition de rhizomorphe. Il était intéressant de savoir
fongistase sans apparition de rhizomorphe. Il était intéressant de savoir si l'émission des rhizomorphes qui conditionne l'attaque des arbres par le Clitocybe mellea était inhibée à plus faible concentration. Nous avons entrepris des cultures à 50 et 10 mg % ml de 5-FC. À 10 mg % ml il ne s'est formé aucun rhizomorphe au bout de 18 jours à 23°C: c'est donc le seuil de l'inhibition rhizomorphique, celui du mycélium est situé à 800 mg % ml (tableau 1). Fomes annosus: c'est le plus résistant des Hyménomycètes lignicoles aux antibiotiques (actidione, amphotéricine B) (Tableau II: souches allemande et américaine).
antibiotiques (actidione, amphotéricine B) (Tableau II: souches allemande et américaine). Pour les deux souches, la source ammoniacale détermine une croissance plus lente que la peptone pepsique. Par contre la source d'azote ammoniacale accélère la conidiogénèse de 72 h et permet la germination des conidies de 2e génération. Dans son ensemble, sur NH4 le mycélium reste moins dense que sur peptone. En fin de culture il s'affaisse et devient gélatineux translucide. Dans tous les cas, la souche américaine est pulvérulente: conidies beaucoup plus nombreuses que dans la souche allemande. 800 mg % ml de 5-FC limitent la croissance de cette dernière,
% ml de 5-FC limitent la croissance de cette dernière, au-delà du 90e jour de culture et proportionnellement au témoin, suivant la nature de la source azotée. NH4 reporte la conidiogenèse du 17e au 23e jour. 800 mg % ml de 5-FC sont parfaitement fongicides pour la souche américaine quelle que soit la source azotée; néanmoins sur peptone le mycélium d'ensemencement, avant de se lyser, provoque la formation d'une auréole opaque visible jusqu'au 15e jour. TABLEAU 1 Action de la 5-FC sur la croissance mycélienne et la rhizomorphogenèse de Clitocybe mellea. Peptone NH4 Jours NH4 mm de culture sans FC
mellea. Peptone NH4 Jours NH4 mm de culture sans FC 50 mg 5-FC 800 mg 5-FC 50 mg 5-FC 800 mg 5-FC 14 D = 7 D = 16 x 12 D = 11 x 8 lente, courte H = 0,5 H = 0,5 3 colonies 16 D = 8 x 8 D = 18 x 15 D = 12 x 10 très léger mycélium H = 1 H = 1 H = 1 démarrage localisé sur croissance l'explantat mycélienne retard de croissance 19 D = 10 x 9 D = 22 x 18 D = 14 x 11 D
= 22 x 18 D = 14 x 11 D = 12 x 8 mycélium H = 1 H = 1 H = 1 H = 0 ou localisé sur végétation mycélium l'explantat basse immergé retard de croissance 22 D = 14 x 10 D = 23 x 20 D = 16 x 12 D = 13 x 9 mycélium H = 1 H = 1 H = 1 H = 0 localisé sur ébauche Rh 0 Rh 0 Rh l'explantat retard de croissance 26 Rh = 1 à 2 0 Rh 30 ............. D = 18 H = 4
0 Rh 30 ............. D = 18 H = 4 4 Rh 3 à 5 35 ............. Rh = 4 à 7 D = 35 x 30 D = 24 x 22 D = 16 x 13 D = 8 x 8 0 Rh 0 Rh 0 Rh H = 1 à 2 0 Rh Les mesures sont exprimées en millimètres; Rh. rhizomorphe. Étude de la germination des conidies de Fomes annosus sur milieu peptoné en chambre humide à 22°C. 24e heure : les conidies de la souche allemande ont gonflé, atteignant 6 à 8 µm de diamètre. Les 3/4
gonflé, atteignant 6 à 8 µm de diamètre. Les 3/4 ont émis un tube germinatif de 40 à 80 µm de long dans le témoin sans antibiotique. En présence de 50 mg de 5-FC, on n'observe que 3 germinations en moyenne. Les autres conidies subissent un gonflement moyen de 10 µm. Les tubes germinatifs émis mesurent 4-20 µm, affectant un retard de croissance par rapport au milieu témoin sans 5-FC. A 800 mg on n'observe que 2 à 3 conidies gonflées dans chaque goutte suspendue. 44e heure : chez le témoin sans 5-FC, le mycélium ramifié mesure 260 µm de
témoin sans 5-FC, le mycélium ramifié mesure 260 µm de long en moyenne et 2-2,5 µm de largeur. A 50 mg % ml de 5-FC, le mycélium est ondulé sous l'action du toxique, non ramifié et de 60 µm de long. 800 mg de 5-FC permettent le gonflement de 26 conidies et une germination de 10 µm à la 44e heure pour la souche allemande. La souche américaine émet dans le même temps des germes de 100 µm de long et 3 µm de largeur. La souche allemande est toujours moins sensible que l'américaine à l'addition de ces doses d'antibiotiques.
moins sensible que l'américaine à l'addition de ces doses d'antibiotiques. Au bout de 66 h, à 50 mg, on n'observe plus qu'une seule germination d'origine conidienne de 5 µm de long x 1 de large et aucune germination dans la souche américaine au contact de 800 mg % ml de 5-FC. TABLEAU II Comparaison entre les souches allemande et américaine d'Ungulina annosa Témoin sans 5-FC 800 mg de 5-FC Souche allemande Souche américaine Souche allemande Souche américaine Jours de culture Peptone NH4 Peptone NH4 Peptone NH4 Peptone NH4 6 D = 26 x 17 0 m D = 25 x
= 26 x 17 0 m D = 25 x 15 D = 14 x 8 D = 18 x 12 D = 6 x 4 auréole 0 m H = 8 H = 1-2 H = 1-2 H = 4-5 H = 2-3 de 14 x 8 m flocons m plat retard m retard m 0 m 8 D = 32 x 25 D = 12 x 9 D = 48 x 38 D = 16 x 21 D = 30 x 21 D = 12 x 9 auréole 0 m H = 8-9 H = 1 H =
0 m H = 8-9 H = 1 H = 1 H = 1-2 H = 2-3 H = 2 de 16 x 17 0 m 12 D = 43 x 34 D = 18 x 15 D = 105 x 90 D = 28 x 25 D = 52 x 32 D = 15 x 14 auréole 0 m H = 3-5 H = 3 H = 1 H = 1-2 H = 3 H = 3 de 19 x 20 m ras mèches m mèches m m initial croissance affaissé rapide 15 D = 50 x 43 D
croissance affaissé rapide 15 D = 50 x 43 D = 20 x 16 D = 145 x 120 D = 30 x 35 D = 61 x 36 D = 25 x 24 auréole 0 m H = 3-4 H = 4-5 H = 1 H = 1 H = 3 H = 1-2 opaque col immer col immer de 17 x 20 17 D = 57 x 46 col origine c D = 170 x 120 D = 38 x 32 D = 63 x 40 D = 36 x 29 0 m 0 m commence 6 col
36 x 29 0 m 0 m commence 6 col H = 3 H = 2 confluer de 2-7 1 col 2re 25 x 10 de 12 20 D = 65 x 56 D = 180 x 120 surface D = 43 x 38 D = 66 x 47 D = 52 x 44 0 m 0 m plis au col recouverte qq H = 1 H = 3-5 H = 3 revers coalescentes germinations c 14 col de 2-10 23 D = 72 x 65 D = 200 x 120 D = 210 x 120 D = 50 x
120 D = 210 x 120 D = 50 x 49 D = 69 x 54 D = 70 x 49 0 m 0 m H = 3-4 H = 4-5 nappe 20 col H = 4-6 H = 3 qq petites uniforme de 13-3 col 2re col dispersées sporulée origine c immergées 7-9 près goulot 90 .................. D= 180x120 cm aérien H = 3-5 m abondant D = 110 x 100 D = 115 x 97 milieu milieu H = 3-4 m abondant m cotonneux translucide H = 1-2 m gélatineux fongicide fongicide m aérien gélatineux pulvérulent flottant m
m gélatineux fongicide fongicide m aérien gélatineux pulvérulent flottant m superficiel cireux blanc cotonneux flottant chamois sur sur liquide non aérien flottant neus sur tte sur liquide tte surface cultural, + cireux strié dans milieu surface culture cultural culture pulvérulent croissance culture traverse (nombre c) que souche ralentie croissance la gélose allemande ralentie Toutes les mesures sont en millimètres; D, diamètre; H, hauteur; c, conidies; col, colonies; m, mycélium, mycélienne; immer, immergé; 2re, secondaire. L'observation de souches d'Ungulina annosa d'origines diverses et très inégalement productives de conidies suggère l'hypothèse suivante : la 5-FC par son atome de fluor en position
: la 5-FC par son atome de fluor en position 5 sur le noyau pyrimidine, bloque les mitoses. Or la forme conidienne Oedocephalum purinuclee est beaucoup plus abondante dans la souche américaine que dans la souche allemande. La souche américaine subit une fongistase dès le 8e jour tandis que la souche allemande paucisporée continue à s'accroître jusqu'au 23e jour en présence de 800 mg de 5-FC. Étude cytologique des préparations fixées par 1h chaleur et montées dans le lactophénol : A. 1° Une culture de 1 mois (sur Carotte) de la souche américaine 11667 (forme Oedocephalum) a produit des conidies
la souche américaine 11667 (forme Oedocephalum) a produit des conidies de 1-3 Il de diamètre visibles au microscope en contraste de phase (G x 1875). À ce témoin, nous avons comparé une culture en chambre humide âgée de 7 mois. issue de germinations conidiennes présentant les mêmes caractères morphologiques. 20 À 50 mg % ml de 5-FC nous avons observé les noyaux dans des conidies de 2,3 Il; par contre ceux-ci manquent dans les petites conidies de 1-1,5 On remarque de plus une myriade de petites conidies réduites à leur noyau. 3° À 800 mg % ml de 5-FC les
noyau. 3° À 800 mg % ml de 5-FC les conidies sont plus exiguës qu'à 50 mg % ml, presque punctiformes mesurant 0.25 à 1 Il de diamètre. On observe de plus des groupes de 4 conidies de 1-3 Il (celles de 3 Il contiennent un noyau, celles de 1 Il n'en renferment pas). B. Au contraire la souche allemande, plus faiblement conidifère que l'américaine se montre moins sensible à l'action frénatrice de la 5-FC. 1° Témoin : les conidies de 1-3 Il contiennent un noyau; celles de 1-1.5 Il qui n'ont pas encore atteint leur taille adulte, et le
qui n'ont pas encore atteint leur taille adulte, et le mycélium renferment des noyaux normaux de 0,5 Il. 2° L'addition de 50 mg % ml de 5-FC provoque la formation de noyaux miniaturisés d'un diamètre inférieur à 0.5 Il ; beaucoup de conidies restaient exiguës arrêtées dans leur croissance. 3° À 800 mg % ml la majorité des conidies ne germent pas. 1/6 donne des germes courts anuculés. Cependant quelques conidies germées sont polynucléées ; elles renferment alors 8-10 noyaux et accidentellement 17 noyaux. Il est donc démontré que la 5-FC perturbe la division cellulaire des diverses souches de Hyménomycètes.
5-FC perturbe la division cellulaire des diverses souches de Hyménomycètes. En résumé, les Hyménomycètes soumis à l'action de la 5-FC se classent dans l'ordre suivant sous le rapport de leurs fonctions. A. Croissance mycélienne : (a) espèces très sensibles : Merisma sulfureus dont la fongistase est réalisée à 25 mg % ml de cet antibiotique et la fongicidité à 50 mg % ml. Ungulina marginata marque la fongistase à 50 mg % ml et la fongicidité à 100 mg % ml. Fomes hartigii montre la fongistase à 50 mg % ml et la fongicidité à 200 mg % ml ;
ml et la fongicidité à 200 mg % ml ; (b) espèces moyennement sensibles : Stereum spadiceum. 400 mg % ml marque la fongistase. 800 mg % ml, la fongicidité. La toxicité au voisinage de la fongistase est marquée par la sinuosité et la torsion en vrille des hyphes de Stereum spadiceum et de Fomes hartigii; (c) espèces résistantes : Clitocybe mellea dont la fongistase est voisine de 400 mg % ml et le seuil de fongicidité supérieur à 800 mg % ml. Odontia bicolor, où la fongistase n'est réalisée qu'à 400 mg % ml au 31e jour; 800 mg
qu'à 400 mg % ml au 31e jour; 800 mg % ml étant insuffisants pour déterminer la fongicidité; (d) espèces réfractaires à la 5-FC : Fomes annosus : 800 mg ml retardent seulement la croissance mycélienne jusqu'au 44e jour sans perturber la progression de la souche allemande; beaucoup plus sensible, la souche américaine est tuée dès le 8e jour. B. Conidiogenèse : cette fonction est inhibée chez Merisma sulfureus dès 25 mg % ml de 5-FC. à 400 mg % ml pour Stereum spadiceum. Parmi les diverses souches d'Ungulina annosa, certaines plus abondamment conidifères sont bloquées dans leur croissance par
certaines plus abondamment conidifères sont bloquées dans leur croissance par la 5-FC, tandis que les souches peu conidifères poursuivent leur développement pendant un temps beaucoup plus long (23 jours). C. La rhizomorphogenèse est inhibée pour Clitocybe mellea, à 10 mg % ml. Nous poursuivons l'étude des divers stades de ce blocage au microscope électronique. CONCLUSIONS. — La rhizomorphogenèse et la conidiogenèse sont les fonctions les plus sensibles aux faibles doses de 5-FC. Les mitoses des souches activement conidifères sont plus fortement perturbées que celles des souches paucispores. Séance du 14 février 1977. E. DROUHET. Mod. treat., 7. (3). 1970. p.
février 1977. E. DROUHET. Mod. treat., 7. (3). 1970. p. 539-564. S. SHADOMY. Appl. mycol., 17, 1969. p. 871-877. J. H. GIEGE, J. HEINRICH, H. WEIL et J. P. EBEL. Biochim. Biophys. Acta, 174. 1969. p. 43-52. J. H. GIEGE, J. HEINRICH, H. WEIL et J. P. EBEL. Biochim. Biophys. Acta, 174. 1969. p. 53-70. J. H. GIEGE et J. H. WEIL, Bull. Soc. Chim. Biol., 52, n° 2, 1970, p. 135-144. J. H. GIEGE et J. P. EBEL, Biochim. Biophys. Acta, 161. 1968. p. 125. L. KURES, A. SCHWERTZ et L. PERCEBOIS. Bull. Soc. Fr. Myc. méd., 4. 1975,
et L. PERCEBOIS. Bull. Soc. Fr. Myc. méd., 4. 1975, p. 167. T. A. MAHVI, L. S. HEERE, S. S. SPICER et M. ANNABLE, Comp. Ren. V° Congrès Soc. Int. de Myc. humaine et animale, 5-10 juillet 1971. p. 283-284. A. M. POLAK et H. J. SCHOLER. Bull. Soc. Fr. Myc. méd., 3, n° 1. 1974, p. 17-21. E. DROUHET, L. MERCIER-SOUCY et S. MONTPLAISIR. Bull. Soc. Fr. Myc. Méd., 3, n° 1, 1974, p. 9-16. E. DROUHET, L. MERCIER-SOUCY et S. MONTPLAISIR. Comptes rendus, 278. série D, 1974, p. 715. D. PAPAHASSIOPOLIS in G. B. ANSELL, R. M. C.
715. D. PAPAHASSIOPOLIS in G. B. ANSELL, R. M. C. DAWSON et J. N. HAWTHORN, Form and Function of Phospholipids, 1973. R. MORQUER et A. TOUVET. Comptes rendus. 280. série D, 1975, p. 2541. Laboratoire de Cryptogamie, Université Paul-Sabatier, 118. route de Narbonne, 31077 Toulouse Cedex. PHYSIOLOGIE VÉGÉTALE. — Mise en évidence d'ARN polyadénylés dans des suspensions cellulaires de Silene alba. Note de Serge Rambour, Jacques Vasseur et Jean Dubois, présentée par M. Roger Gautheret. La chromatographie sur poly U "Sepharose" d'ARN extrait d'une suspension cellulaire de Silene alba dans la phase exponentielle de croissance, permet l'isolement de molécules polyadénylées.
la phase exponentielle de croissance, permet l'isolement de molécules polyadénylées. La taille des séquences poly (A) est évaluée à environ 130 nucléotides. AMP rich RNAs occur during the exponential phase of the growth cycle of Silene alba cells in batch suspension culture. The poly (A) sequence isolated after ribonuclease A and T1 digestion, has a mean size of approximately 130 nucleotides. L'étude de l'évolution des acides nucléiques de suspensions cellulaires du Silene alba (Miller) E.H.L. Krause, lors d'un cycle de croissance nous avait amenés à émettre l'hypothèse d'une synthèse d'ARN polyadénylés [ARN poly (A)] (.). Ce type d'ARN a été
polyadénylés [ARN poly (A)] (.). Ce type d'ARN a été mis en évidence dans divers organes végétaux [e) a e)] et tout récemment dans des suspensions cellulaires d'Acer (6). Par ailleurs, une méthode d'extraction séquentielle aux pH 7,6 et 9 appliquée aux végétaux, a montré qu'une part importante de l'ARN se retrouve dans le système tampon voisin de la neutralité et que les deux populations moléculaires isolées renferment des ARN poly (A) dont la longueur de la séquence adénylique est identique (1). Aussi, afin de vérifier la validité de notre hypothèse, avons-nous dans un premier temps procédé à une extraction
hypothèse, avons-nous dans un premier temps procédé à une extraction à pH 7,6. MÉTHODES. — Les cellules âgées de 12 jours, dont les caractéristiques de la croissance ont été décrites précédemment (8) sont ensemencées dans 200 ml de milieu de Lescure et cultivées pendant 3 jours à 25°C en lumière continue (500 lx au niveau des flacons). Après une filtration rapide, 15 g de cellules sont remis en suspension dans 5 ml de milieu auxquels on ajoute aseptiquement 50 µCi d'adénosine "Cg (à 48 mCi/mmole). Après 2 h d'incubation, les cellules sont rinçées, congelées dans de l'azote liquide et broyées