jeanflop/post-ocr-correction huggingface dataset:
interfoliaire, ce qui implique une traversée des ostia. L'édification de nodules hémocytaires dans les veines branchiales, qui met en jeu le processus connu d'agglutination (11), représenterait alors un mécanisme de défense : certains matériaux absorbés seraient aussitôt piégés par les hémocytes et soustraits au milieu intérieur. Ainsi immobilisés, les éléments toxiques adsorbés sur les particules resteraient relativement inoffensifs encore que l'obstruction des veines par les nodules traduise un état pathologique. Il n'est pas exclu que celui-ci soit réversible : le rejet de phagocytes par la branchie est possible (12) et a été observé chez Mytilus (11). Les agressions physicochimiques qui
a été observé chez Mytilus (11). Les agressions physicochimiques qui induisent la formation des nodules sont sans doute complexes. Une action sur les cellules ciliées des ostia qui assumeraient mal leur fonction de tri, est peut-être à envisager. Les données globales font apparaître une vaste répartition des métaux dans l'organisme des Bivalves (1). La concentration d'éléments dans les hémocytes déjà décrite pour fer, cuivre et zinc chez Crassostrea (13), explique en partie cette dispersion. Si l'on excepte les amas pigmentaires dont la genèse semble liée à des états parasitaires ou infectieux, les accumulations de métaux sont de deux types. Les
infectieux, les accumulations de métaux sont de deux types. Les premières sont constantes, ne comportent que peu d'éléments, tous physiologiquement importants comme métabolites ou coenzymes. Leur composition n'est pas sous la dépendance directe du milieu. Les autres ne se constituent qu'accidentellement, non dans de véritables organes, mais dans des nodules hémocytaires. Elles comprennent un nombre d'éléments élevé et variable suivant l'environnement. C'est là que se trouvent éventuellement des polluants comme le plomb. L'aspect des inclusions des hémocytes, la persistance de leur réfringence, leur résistance aux protéases, les très fortes teneurs en silicium et aluminium, le rapport même de ces teneurs
en silicium et aluminium, le rapport même de ces teneurs qui est identique à celui des sédiments contenus dans l'intestin, sont autant d'arguments en faveur d'une phagocytose de particules inertes. Certains de leurs caractères les rapprochent des dépôts minéraux intra-pulmonaires constitués lors d'empoussiérage pathologique (14). En revanche, ils les opposent à diverses accumulations naturelles de silicium et d'aluminium étudiées par les mêmes méthodes chez d'autres Invertébrés (15). Nos résultats préliminaires tendent donc à montrer que, au moins une partie des constituants du milieu anormalement stockés chez Cerastoderma, le sont sous une forme inorganique (silico-aluminates, hydroxydes métalliques), ce qui met en
une forme inorganique (silico-aluminates, hydroxydes métalliques), ce qui met en question leur éventuelle assimilation par les prédateurs. Séance du 14 février 1977. G. W. BRYAN, in Marine Pollution, JOHNSTON éd., Academic Press, N.Y., 1976, p. 185-302. R. MARTOJA, A. Y. JEANTET, D. LHONORÉ, M. TRUCHET, J. Microscopic, 22, 1975, p. 441-448. M. TRUCHET, J. Microscopie, 22, 1975, p. 465-474. 4) Les analyses par émission ionique secondaire sont dues à M. Truchet. 5) E. A. MALEK et T. C. CHENG. Medical and Economic Malacology, Academic Press, N.Y., 1974, 398 p. 6) M. JAVILLIER et D. BERTRAND, in Traité de Biochimie générale,
M. JAVILLIER et D. BERTRAND, in Traité de Biochimie générale, M. JAVILLIER et coll. éd., Masson. Paris, 1, (1). 1959, p. 9-97. C) Rapport de l'agence de Bassin Seine-Normandie. 1975. 8) Bulletin du réseau national d'observations. CNEXü. 1975. 1976. 9) R. R. RONKIN, J. Cell. Comp. Physiol., 25, 1950, p. 241-260. 10) P. KORRINGA. Quart. Rev. Biol., 27, 1952, p. 266-308. 11) G. H. DREW. Quart. J. Microscop. Sci., 54, 1910, p. 605-621. 12) V. FRETTER. J. Mar. Biol. Assoc. U.K., 32, 1953, p. 367-374. 13) P. S. GALSTOFF. Fish. Bull. Fish. wildl. Serv. US, 64, 1964, p. 1-480. 14)
Bull. Fish. wildl. Serv. US, 64, 1964, p. 1-480. 14) J. P. BERRY. Thèse de Doctorat en Biologie humaine, Université Paris Val-de-Marne. 1974, 152 p. 15) R. MARTOJA et M. MARTOJA, Comptes rendus, 276, série D. 1973, p. 2951-2954. M. M. Institut de Biologie, 195, rue Saint-Jacques, 75005 Paris; J. L. Equipe associée au CAR.S., if 570, Laboratoire d'Histophysiologie des Insectes, 12, rue Cuvier, 75005 Paris; B. E. Laboratoire d'Évolution des Êtres organisés, 105, boulevard Raspail, 75006 Paris. RADIOBIOLOGIE. — Sur le rôle des cytokinines dans l'activité radiorestauratrice des extraits de levure, des tRNA et d'un extrait particulier d'acides aminés
de levure, des tRNA et d'un extrait particulier d'acides aminés de levure. Note de Michel Riedel, Philippe Barthe, Jacqueline Bayanove et Robert Jonard, présentée par M. Roger Gautheret. Les activités radiorestauratrices des extraits de levure et de certaines fractions isolées telles que les solutions de tRNA ou d'acides aminés, peuvent être dues à la présence dans ces extraits et solutions, de cytokinines naturelles dont certaines ont pu être identifiées. Radio restoring activities of yeast extracts, of some fractional parts such as tRNA or amino acid solutions can be caused by the presence of natural cytokinins. Some of them were identified.
the presence of natural cytokinins. Some of them were identified. Les propriétés radiorestauratrices des extraits de levure [1] [2] [3] de certains tRNA qui en sont issus [4] [5] [6] et de la fraction mononucléotidique des hydrolysats de tRNA [7] sont connues. On sait aussi que les acides aminés préparés à partir des extraits de levure manifestent également une activité radiorestauratrice alors qu'un mélange réalisé à partir des mêmes acides aminés commerciaux n'en présente pas [8]. Or, l'effet radiorestaurateur de certaines cytokinines exogènes [9] [10] [11] et l'existence de cytokinines libres dans les extraits de levures [12] [13] [14] ont
libres dans les extraits de levures [12] [13] [14] ont déjà été signalés. Il nous fallait donc préciser la nature des cytokinines contenues dans nos extraits de levure, puis mettre en évidence le fait que l'activité radiorestauratrice des solutions d'acides aminés isolés de ces extraits est en rapport avec la présence dans celles-ci d'une ou plusieurs cytokinines endogènes. MÉTODES. — 1° Extraction des cytokinines à partir d'extraits de levure les cytokinines sont isolées à partir de 100 g d'extrait de levure « Difco » selon des techniques procédant de celles de Van Staden [9]. L'extrait éthanolique ainsi préparé est divisé
de Van Staden [9]. L'extrait éthanolique ainsi préparé est divisé en 2 parties soumises à 2 chromatographies séparées sur papier W3MM (isopropanol-ammoniaque-eau 10 1 1 v/v). Les 10 bandes égales obtenues par découpage du premier chromatogramme sont utilisées directement pour un premier test biologique. Dans le second chromatogramme, la région comprise entre les Rf 0.65 et 0.8 est découpée et élutée par l'éthanol 80%; cette solution éthanolique concentrée est ensuite déposée sur une colonne de « Sephadex LH20 »; les fractions récoltées par une élustion à l'éthanol 35% [15] sont regroupées et font l'objet d'un second test biologique. Cette technique
regroupées et font l'objet d'un second test biologique. Cette technique permet une meilleure séparation des deux cytokinines à Rf voisins la zeatine (Z) et son riboside (ZR). 2° Extraction des cytokinines à partir d'une solution d'acides aminés de levure la préparation du mélange d'acides aminés est réalisée à partir de 50 g d'extraits de levure selon la technique de Pawlak et Pion [20] modifiée par Cuq [10]. Le résidu obtenu est repris par 6 ml d'eau et cette solution est ajustée à pH 8. Les cytokinines sont extraites par le n-butanol saturé d'eau. Les phases butaniques réduites à sec sous
n-butanol saturé d'eau. Les phases butaniques réduites à sec sous vide à 40°C, sont reprises par l'éthanol 80% puis chromatographiées sur W3MM dans le mélange acétate d'éthyle-acide formique-eau 60 5 35 v/v (chromatogramme noté « phase butanique 1 »). De la phase aqueuse restante après une hydrolyse alcaline, on extrait à nouveau les cytokinines par le n-butanol. Cette phase butanique réduite à sec à 40°C, puis reprise par l'éthanol 80 est également chromatographiée (chromatogramme noté « phase butanique 2 »). La dernière fraction aqueuse restante est refroidie (-5°C), centrifugée après précipitation des sels, et le surnageant est ensuite chromatographié (chromatogramme
précipitation des sels, et le surnageant est ensuite chromatographié (chromatogramme noté « phase aqueuse »). 30 Tests biologiques l'étude préliminaire utilise comme test la production en présence de cytokinines, de phycocyanines par les plantules d'Amaranthus caudatus [(22), (23)]. Les autres tests sont tous réalisés selon la méthode de Linsmaier et Skoog [24]. Les élusats des divers chromatogrammes sont incorporés dans les milieux de culture gélosés (0,8 %) et glucosés (3 0,;> contenant les solutions minérales de Linsmaier et Skoog et de l'acide naphtalène acétique (0,52 mg/1). Des tissus normaux de Tabac Wisconsin 38 sont ensuite ensemencés sur les milieux contenant
Tabac Wisconsin 38 sont ensuite ensemencés sur les milieux contenant ou non les cytokinines à identifier, et leur croissance évaluée après un mois, permet d'estimer la teneur en cytokinine du milieu. Des milieux additionnés ou non de différentes concentrations en kinétine servent de témoins de référence. RÉSULTATS. — Un test « Amantelle » préliminaire nous a permis de contrôler de manière approximative l'activité cytokinique des extraits de levure [18] jug de kinétine et des tRNA de levure partiellement hydrolysés [40] |Lig de kinétine. 1. Activité cytokinique des extraits de levure « Difco ». — Les résultats obtenus au moyen du
« Difco ». — Les résultats obtenus au moyen du test Tabac W 38 sont résumés dans les deux histogrammes des figures 1 et 2. Chaque pic correspond à l'accroissement des colonies tissulaires de Tabac dans des milieux contenant les élusats chromatographiques correspondant à des Rf connus. L'examen du premier histogramme (fig. 1) permet la mise en évidence de deux groupes de cytokinines : d'une part, au niveau des Rf compris entre 0,1 et 0,3, un premier groupe renfermant des substances à activités cytokiniques non identifiées, d'autre part un second groupe comprenant un mélange de zéatine et de zéatine riboside
groupe comprenant un mélange de zéatine et de zéatine riboside non séparées pour les Rf compris entre 0,6 et 0,8. L'examen du second histogramme (fig. 2) nous a permis, dans cette zone de Rf compris entre 0,6 et 0,8 de séparer les activités cytokiniques de ces deux dernières substances. En effet, deux pics séparés correspondent alors à la présence de zéatine riboside (fraction IV) et de zéatine (fraction VI) (19). Notons ici que la présence de 2iP et de 2iPA n'a pas été détectée dans l'histogramme de manière certaine. 2. Les activités cytokiniques du mélange d'acides aminés séparés de la
Les activités cytokiniques du mélange d'acides aminés séparés de la levure. — Les histogrammes des figures 3,4 et 5 résumant les résultats obtenus nous indiquent qu'aucune activité cytokinique significative n'est décelable dans les extraits des phases butanoliques 1 et 2 (fig. 3 et 4). Par contre, une activité cytokinique est décelable dans la fraction phase aqueuse. Elle correspond à des activités faibles au niveau de la zéatine et de son riboside, mais surtout à celles plus importantes au niveau des 2iP et 2iPA. DISCUSSION ET CONCLUSIONS. — Les activités détectées dans les extraits de levure mettent en évidence la présence
dans les extraits de levure mettent en évidence la présence d'un groupe de cytokinines non identifiées dont les Rf sont compris entre 0,1 et 0,2 à côté de cytokinines identifiables telles que la zéatine et son riboside. Dans les mélanges d'acides aminés de levure, ces activités peuvent être dues à des cytokinines identifiables telles que la zéatine, la 2iP et leurs ribosides qui contamineraient la solution d'acides aminés, des cytokinines étant retenues par la résine IRA 410, puis précipitées sous forme de picrates; soit encore à des substances à activité cytokinique du type N-(9-β-D ribofuranosyl) purine-6-yl carbamoyl) glycine ou threonine
cytokinique du type N-(9-β-D ribofuranosyl) purine-6-yl carbamoyl) glycine ou threonine que Hall et puis Schweizer et coll. (26) ont identifiées à partir de tRNA de levure. Ces interprétations pourraient aussi s'appliquer, à notre avis, aux observations de Van Staden (27) sur les propriétés qu'aurait la phénylalanine, d'induire les divisions cellulaires des calluses de Soja. Si on sait que de nombreuses substances à activité cytokinique sont des radiorestaurateurs efficaces vis-à-vis des tissus tumoraux et normaux (28), ces premiers résultats nous permettent de supposer qu'une part importante des activités radiorestauratrices des extraits de levure et de leurs fractions séparées, tRNA et mélange
de levure et de leurs fractions séparées, tRNA et mélange d'acides aminés, serait due à leur richesse en cytokinines. (*) Séance du 7 février 1977. (1) R. JONARD, Comptes rendus, 251, 1960, p. 588. (2) R. JONARD, R. MARIE, B. LAIGNELET et B. FOULETIER, Extrait du Congrès national de la Société savante, Toulouse, 1971, Sect. Sci., IV, p. 547-555. (3) B. LAIGNELET, B. FOULETIER et R. JONARD, Comptes rendus, 271, série D, 1970, p. 1884. (4) R. JONARD et D. RAVELOMANANA, Comptes rendus, 278, série D, 1974, p. 389. (5) R. JONARD et D. RAVELOMANANA, Comptes rendus, 280, série D,
R. JONARD et D. RAVELOMANANA, Comptes rendus, 280, série D, 1975, p. 803. (6) J. BAYONOVE, J. N. MARIEN, D. RAVELOMANANA, A. SOLER et R. JONARD, Radiation Botany, 15, 1975, p. 349-362. (7) B. FOULETIER, T. BRUN, R. JONARD et P. PEREAU-LEROY, Comptes rendus, 274, série D, 1972, p. 1315. (8) D. RAVELOMANANA, H. OHLENBUSH et R. JONARD, Comptes rendus, 280, série D, 1975, p. 1047. (9) R. JONARD et J. BAYONOVE (en préparation). (10) R. JONARD et A. SOLER, Comptes rendus, 277, série D, 1973, p. 1305. (11) G. V. IL'INA et N. N. KUZNETSOVA, Fiziologiya Rastenii, 22, n°
V. IL'INA et N. N. KUZNETSOVA, Fiziologiya Rastenii, 22, n° 2, 1975, p. 394-400. (12) J. VAN STADEN, Physiol. Plant., 30, 1974, p. 182-184. (13) F. SKOOG, D. J. ARMSTRONG, J. D. CHERAYIL, A. E. HAMPEL et R. M. BOCK, Science, 154, 1966, p. 1354-1356. (14) A. KOVOOR et C. RUCH, Comptes rendus, 259, 1964, p. 3352. (15) D. KLAMBT et A. KOVOOR, Physiologia Plantarum, 22, 1969, p. 453-457. (16) S. M. HECHT, N. J. LEONARD, J. OCCOLOWITZ, W. J. BURROWS, D. J. ARMSTRONG, F. SKOOG, R. M. BOCK, I. GILLAM et G. M. TENER, Biochem. and bioph. research Comm.,
GILLAM et G. M. TENER, Biochem. and bioph. research Comm., 35, n° 2, 1969, p. 205-209. (17) D. J. ARMSTRONG, F. SKOOG, L. H. KIRKEGAARD, A. E. HAMPEL, R. M. BOCK, I. GILLAM et G. M. TENER, Proc. Nat. Acad. Sci. US, 63, 1969, p. 504-511. (18) M. GIANNATTASIO, G. JEANNIN et A. KOVOOR, Physiologia Plantarum, 22, 1969, p. 458-461. (19) D. J. ARMSTRONG, W. J. BURROWS, P. K. EVANS et F. SKOOG, Biochimie and Biophysica Research Communications. 37, n° 3, 1969, p. 451-456. PAWLAK et PION. Proc. 7th Internat. Congr. Nutrit., Hamburg. 4. 1966. A. L. Cru. Thèse. Montpellier.
Congr. Nutrit., Hamburg. 4. 1966. A. L. Cru. Thèse. Montpellier. 1973, 85 p. C. BIGOT, Comptes rendus, 266, série D, 1968, p. 349. N. L. BIDDINGTON et T. H. THOMAS, Planta, Berlin, 11, 1973, p. 183-186. E. M. LINSMAIER et F. SKOOG, Physiol. Plant., 18, 1965, p. 100-127. R. H. HALL, Biochem., 3, 1964, p. 769. M. P. SCHWEIZER, K. MCGRATH et L. BACZYNSKYJ, Bioch. Bioph. Reserach Comm.. 40, 1970, p. 1046-1053. J. VAN STADEN et S. E. DREWÈS, Physiol. Plant., 32, 1974, p. 347-352. R. JONARD et J. BAYONOVE, Comptes rendus, 283, série D, 1976, p. 431. R. JONARD
Comptes rendus, 283, série D, 1976, p. 431. R. JONARD et J. BAYONOVE, Comptes rendus, 283, série D, 1976, p. 275. Université des Sciences et Techniques du Languedoc, Laboratoire d'Histophysiologie et Radiobiologie végétales, Place Eugène-Bataillon, 34060 Montpellier Cedex. P. B. Laboratoire de Physiologie végétale, U.E.R.S.E.N., Parc Vairy, 06034 Nice Cedex. BIOCHIMIE. — Identification du groupement glutamique essentiel de la 3-phosphoglycérate kinase de levure. Note de Gisèle Desvages, Claude Roustan, Annie Brevet et Louise-Anne Pradel, présentée par M. Jean Roche. Dans le contexte d'une étude consacrée à la modification des résidus essentiels à l'activité de la 3-phosphoglycérate kinase de levure, nous
essentiels à l'activité de la 3-phosphoglycérate kinase de levure, nous avons pu isoler et identifier un résidu glutamique dont la modification au moyen de la réaction couplée carbodiimide-nitrotyrosine. entraîne une inactivation totale de l'enzyme. The incorporation of nitrotyrosine into 3-phosphoglycerate kinase activated by carbodiimide results in the chemical modification of a single essential residue. After total proteolytic digestion, isolation of the dipeptide Glu-NO2 Tyr by immuno-affinity chromatography indicates the implication of a glutamyl residue. It is interesting to point out the applicability of the method described for the purification of peptides containing carboxyl residues. Les carbodiimides sont connus comme étant
peptides containing carboxyl residues. Les carbodiimides sont connus comme étant de bons réactifs pour la modification spécifique des fonctions carboxyliques dans les protéines; ils activent ces fonctions en permettant l'incorporation d'un nucléophile. Au cours de travaux antérieurs portant sur l'étude de la topologie du site actif de diverses kinases du système glycolytique, notamment la 3-phosphoglycérate kinase et l'hexokinase, nous avions déjà utilisé avec succès ce type de réactif (3), (4), (5). Dans le cas de la 3-phosphoglycérate kinase de levure, en faisant réagir la glycine ethyl ester en présence de carbodiimide, un groupement carboxylique essentiel peut être modifié au centre
carbodiimide, un groupement carboxylique essentiel peut être modifié au centre actif de cette enzyme; de plus, ainsi modifiée et complètement inactivée, la 3-phosphoglycérate kinase continue à fixer normalement ses substrats. Ces résultats nous ont amenés à attribuer un rôle catalytique à ce groupement essentiel. Cependant, la nature exacte de l'acide aminé touché (acide aspartique ou acide glutamique) restait à déterminer. Les résultats présentés ici montrent que ce groupement essentiel est un résidu d'acide glutamique. De plus, la méthode de chromatographie par immunoaffinité que nous avons utilisée est applicable plus généralement pour l'isolement de peptides contenant des groupements carboxyles. La 3-phosphoglycérate
pour l'isolement de peptides contenant des groupements carboxyles. La 3-phosphoglycérate kinase de levure que nous avons utilisée est préparée selon la méthode de Scopes (6); son activité spécifique est d'au moins 1 300 unités par milligramme à 30°C et à pH 7,5. Le processus d'inactivation par le l-cyclohexyl-3 (-2-morpholino ethyl) carbodiimide méthyl-toluène sulfonate (CMC) et la nitrotyrosine ethyl ester a tout d'abord été étudié. La figure 1 montre que le CMC (0,1 M) produit une faible inactivation de l'enzyme, que la nitrotyrosine ethyl ester n'a pas d'effet sur l'activité tandis que la combinaison de ces 2 réactifs augmente fortement la
que la combinaison de ces 2 réactifs augmente fortement la vitesse d'inactivation. Ces résultats suggèrent une incorporation spécifique de la nitrotyrosine sur le groupement carboxylique essentiel de la 3-phosphoglycérate kinase d'une façon analogue à celle obtenue précédemment avec la glycine éthyl ester (2). La quantité de tyrosine nitrée incorporée sur des échantillons diversement inactivés a été déterminée sur analyseur d'acides aminés (Technicon, type TSM 1), après hydrolyse acide totale; les résultats obtenus reportés sur la figure 2 montrent qu'il existe une relation linéaire entre la perte d'activité et l'incorporation du nucléophile et qu'à une mole de tyrosine nitrée fixée par
nucléophile et qu'à une mole de tyrosine nitrée fixée par mole d'enzyme, correspond une inactivation totale. Fig. 1. — Inactivation de la 3-phosphoglycérate kinase de levure par le CMC. Tampon phosphate 0,1 M, pH 6,1, température 17°C. Concentration en enzyme 0,05 mmole/ml. (A) Concentration en ester éthylique de la nitrotyrosine 0,03 mmole/ml. (x) Concentration en CMC 0,1 mmole/ml. (0) Concentration en CMC 0,1 mmole/ml et en ester éthylique de la nitrotyrosine 0,03 mmole/ml. Fig. 2. — Effet de l'incorporation de la nitrotyrosine sur l'activité de la 3-phosphoglycerate kinase. Ensuite, la nature chimique du résidu modifié a été déterminée sur une
nature chimique du résidu modifié a été déterminée sur une enzyme inactivée à 80 %. Pour ce faire, l'échantillon a été soumis à une protéolyse totale; ainsi, après carboxyméthylation de l'enzyme [(7), (8)] une digestion trypsinique (pH 8,5, 38°C, E/S= 1/100 pendant 3 h) est effectuée. La réaction est prolongée toute la nuit après addition d'une même quantité de trypsine; la protéolyse est poursuivie par action de la pronase (E/S= 1/10, pH 7,6, 20 h à 37°C), enfin, elle est achevée par l'aminopeptidase M en utilisant une égale quantité d'enzyme et de substrat. L'isolement du peptide contenant la nitrotyrosine est
et de substrat. L'isolement du peptide contenant la nitrotyrosine est réalisé par immunoaffinité, sur colonne de sépharose couplée à des anticorps spécifiques de la nitrotyrosine (9). Fig. 3. — Isolement du peptide à nitrotyrosine. 0,5 gramme (20 mg) d'un hydrolysat protéolytique total de l'enzyme modifiée sont appliquées sur une colonne (1 x 4 cm) de sépharose couplée aux anticorps spécifiques de la nitrotyrosine (25 mg). La colonne est lavée avec du bicarbonate d'ammonium 0,1 M, puis le peptide à nitrotyrosine est élué avec l'ammoniaque 4 M. (0) Lectures de l'absorption à 280 nm et (8) à 380 nm. Le profil
à 280 nm et (8) à 380 nm. Le profil d'élution de cette colonne est présenté sur la figure 3, la purification de la fraction nitrée est achevée par électrophorèse sur papier à pH 6,5 dans le solvant pyridine-acide acétique-eau (25/1 224, v/v/v) sous un champ électrique de 70 V/cm. L'hydrolyse acide totale de ce produit purifié libère 2 acides aminés : 1,0 Glu, 0,9 Tyr et le même échantillon non hydrolysé donne sur l'analyseur d'acides aminés un large pic au niveau de la valine avec un coefficient de ninhydrine de 0,65 par rapport à l'acide glutamique. Ce composé correspond
de 0,65 par rapport à l'acide glutamique. Ce composé correspond au dipeptide Glu-N02 Tyr que nous avons pu obtenir avec un excellent rendement (45 %). En conclusion, l'incorporation de la tyrosine nitrée dans la 3-phosphoglycérate kinase de levure dont le résidu carboxylique essentiel est activé par le carbodiimide, entraîne la modification chimique d'un seul résidu par mole d'enzyme, modification qui conduit à une perte totale de l'activité enzymatique. L'isolement du dipeptide Glu-N02 Tyr par immuno-chromatographie permet de conclure à l'implication d'un groupement glutamique dans l'activité de la 3-phosphoglycérate kinase. La localisation de ce résidu dans la structure primaire fera l'objet
localisation de ce résidu dans la structure primaire fera l'objet d'une prochaine publication, cette méthode nous ayant permis d'isoler les fragments contenant ce résidu marqué et obtenus après coupure au bromure de cyanogène ou après hydrolyse trypsique. Séance du 14 février 1977. D. G. HOARE et D. E. KOSHLAND Jr., J. Biol. Chem., 242, 1967, p. 2447. A. BREVET, C. ROUSTAN, G. DESVAGES, L.-A. PRADEL, N. V. THOAI, Europ. J. Biochem., 39, 1973, p. 141. D. B. PHO, C. ROUSTAN, G. DESVAGES, L.-A. PRADEL, N. V. THOAI, FEBS Letters, 45, 1974, p. 114. D. B. PHO, C. ROUSTAN, A. NGUYEN
1974, p. 114. D. B. PHO, C. ROUSTAN, A. NGUYEN THI TOT, L.-A. PRADEL, 1977, soumis à publication. R. K. SCOPES, Biochem. J., 122, 1971, p. 89. A. FATTOUM, R. KASSAB, L.-A. PRADEL, Biochem. Biophys. Acta, 405, 1975, p. 325. C. ROUSTAN, A. FATTOUM, L.-A. PRADEL, Biochemistry, 15, 1976, p. 2172. M. HELMAN, D. GIVOL, Biochem. J., 125, 1971, p. 971. Laboratoire de Biochimie cellulaire, Collège de France, place Marcelin-Berthelot, 75231 Paris Cedex 05. PHARMACOLOGIE. — Action de la toxine II isolée de l'Anémone de mer (Anemonia sulcata) sur l'iléon isolé de Cobaye (1). Note (*) de France Tazieff-Depierre, Marc