Jabarkan 4.     Biokimia dari Klebsiella

a.      Triple Sugar Iron Agar (TSIA)

TSIA merupakan media yang dapat mengidentifikasi bakteri sesuai dengan karakter spesifik yang ditunjukan oleh bakteri. TSIA mengandung glukosa (0,1%), sukrosa (1%), laktosa (1%), ferosulfat (untuk medeteksi produksi H2S), ekstrak jaringan (substrat pertumbuhan protein), dan indikator pH (fenol merah). Teknik ini menggunakan prinsip fermentasi karbohidrat dan produksi H2S.

Media yang digunakan memiliki dua bagian yaitu slant (miring) dan butt (tusuk/pangkal). Zat dimasukan kedalam tabung reaksi sehingga menghasilkan agar miring dengan bagian pangkal yang dalam dan diinokulasi dengan menusukkan pertumbuhan bakteri kedalam bagian pangkal. Apabila karbohidrat difermentasi dengan atau tanpa produksi gas, pH akan turun yang mengakibatkan medium akan berubah warna yang semula berwarna merah menjadi kuning. Organisme yang tidak memfermentasi karbohidrat akan memproduksi alkalinasi karena pengeluaran amin dari degenerasi asam amino, pH akan meningkat dan medium tetap atau berwarna merah. Sodium tiosulfat yang terdapat dalam menidum direduksi oleh beberapa bakteri menjadi hidrogen sulfida (gas yang tidak berwarna). Hidrogen sulfida akan bereaksi dengan ion ferri memproduksi iron sulfida, presipitat hitam yang tidak larut. Reaksi bakteri Klebsiell sp. pada TSIA yaitu asam/asam berwarna kuning pada bagian pangkal dan miring, dapat terdeteksi gas, dan tidak menghasilkan H2S.