Jelaskan Prosedur Isolasi Mikroba dari Inokulasi Mikroorganisme

Untuk mengadakan isolasi mikrob dari suatu media dapat digunakan beberapa perangkat prosedur antara lain sebagai berikut:

Metode taburan (pour plate method) atau cara penuangan. Penggunaan media padat dalam teknik isolasi bakteri dalam kultur murni merupakan suatu prosedur yang sederhana. Metode taburan ini, suspensi bakteri dalam cairan dicampur dengan “agar” yang sudah dileburkan pada suhu kira-kira 500C. Kemudian agarnya dituangkan ke dalam piring petri, dibiarkan mendingin supaya membeku dan diinkubasikan. Bakteri akan tumbuh membentuk koloni di bawah atau di atas permukaan agar. Koloni ini diambil 1 ose (1 loop) dan disuspensikan lagi pada media dalam piring petri yang steril dan cara ini dilakukan sampai beberapa kali, sehingga pada satu piring petri hanya terdapat satu jenis mikroba.

Metode sebaran (spread plate method) atau cara pengenceran. Bakteri anaerob yang lebih peka terhadap oksigen, lebih cocok menggunakan metode biakan kocok pengenceran. Sebuah tabung berisi agar cair lagi dingin diinokulasikan dan dicampurkan, kira-kira sepersepuluh dari isinya dipindahkan ke tabung kedua, lalu dicampurkan dan digunakan untuk menginokulasikan tabung ketiga dengan cara yang sama. Setelah 6-10 kali dipersiapkan pengenceran yang berturut-turut, tabung itu dengan cepat didinginkan dan ditutup rapat dengan menuangkan selapis minyak dan paraffin yang steril pada permukaannya, jadi mencegah masuknya udara pada gumpalan agar.

Metode goresan (streak plate method) atau cara penggesekan. Cara gores pada umumnya merupakan metode semai yang paling umum digunakan. Dawai bengkok yang steril dicelupkan ke dalam suspensi organisme yang diencerkan, lalu dibuat serangkaian goresan sejajar yang tidak saling menutupi di atas permukaan agar yang telah padat pada inokulum menjadi makin encer dengan setiap goresan, sehingga goresan pertama menghasilkan pertumbuhan yang rapat, koloni yang terisolasi dengan baik tumbuh di sepanjang garis yang lebih kemudian digoreskan.