Saya mau tau Glee dari Dianna Agron

Peran yang paling menonjol yang dilakukan Agron sampai saat ini adalah sebagai Quinn Fabray, cheerleader sekolah tinggi, pada serial Fox Glee. Agron adalah aktor utama terakhir yang dilemparkan, setelah memenangkan peran hanya beberapa hari sebelum pilot mulai syuting. Agron mengatakan dalam sebuah wawancara 2009 yang berkaitan dengan sesi casting nya: "Saya hampir ditebus pada audisi untuk pertunjukan saya sangat gugup.". Dengan penampilannya yang baik dan sehat, Agron pasti melihat bagian, tetapi produsen bertanya-tanya apakah ia muncul terlalu polos. Agron mengatakan dalam sebuah wawancara: "Mereka mengatakan kepada saya untuk datang kembali dengan rambut lurus dan berpakaian seksi Kemudian minggu itu, saya mulai bekerja." Agron mengikuti audisi "Fly Me to the Moon" oleh Frank Sinatra. Produser Glee mengatakan "kami benar-benar beruntung dalam menemukan Agron untuk memerankan Quinn". Quinn digambarkan oleh Agron sebagai musuh Rachel Berry (Lea Michele), dan "mengerikan, gadis paling kejam". Agron mengatakan bahwa bagian favorit dia dari Quinn adalah bahwa "dia pintar. Tapi dia juga manusia, dan melalui eksterior tangguh, dia sering menjadi seorang gadis kecil yang hilang." Quinn pada awalnya dipahami sebagai antagonis cheerleader kepala ratu lebah, keberangkatan dari pengalaman sekolah tinggi Agron yang sebenarnya.

Peran Quinn sebagai kepala cheerleader adalah penting untuk memahami karakternya. Agron mengatakan bahwa dia tidak pernah punya pengalaman bersorak terlebih dahulu sebelum Pilot. "Jika saya telah [sebagai cheerleader], aku akan berakhir di kruk," dia mengatakan kepada majalah Emmy. Peran tersebut membuat Agron dinominasikan untuk Teen Choice Award untuk "Female Breakout Star" pada 2009. Dia dan anggota pemain lainnya dianugerahi Screen Actors Guild Award for Outstanding Performance by an Ensemble in a Comedy Series pada 2010, dan dinominasikan dalam kategori yang sama pada tahun berikutnya. Agron dipuji karena akting dramatis selama adegan konfrontasi dengan orang tua Quinn di "Ballad". Gerrick D. Kennedy, menulis untuk Los Angeles Times, adalah kritik terhadap plot kehamilan Quinn yang sedang berlangsung di episode "Hairography", dan mencatat bahwa dia meringis setiap kali Quinn muncul di layar. Sebaliknya, Bobby Hankinson dari Houston Chronicle menikmati Quinn dalam episode, dan menulis: "Saya suka bahwa dia bisa menjaga dirinya di tepi Mean Girls sementara dia sedih atau gembira seperti saat ia bernyanyi "Papa Don't Preach". Penulis The A.V. Club Todd VanDerWerff menyarankan bahwa dalam musim ketiga reinvensi Quinn bergantung pada fakta produsen tidak lagi tahu bagaimana memanfaatkan Agron. Pada tanggal 23 Juli 2012, dilaporkan bahwa Agron akan lebih jarang muncul di musim keempat Glee. Karakter Agron, Quinn, hanya muncul di tiga episode: "Thanksgiving", "Naked", dan "I Do". Agron kembali dalam musim kelima untuk dua episode spesial: "100" (episode ke-100 Glee) dan "New Directions" (Bagian kedua dari episode ke-100). Pada 18 Maret 2014, Agron menyatakan minatnya kembali untuk episode Glee yang akan datang.

Pada 2012, The Biography Channel menayangkan sebuah dokumenter Glee, dengan Agron diwawancarai bersama dengan castmates lainnya. Ini menunjukkan deskripsi singkat tentang karakter Dianna dan audisi untuk acara itu.