Jabarkan Kajian metabolomik terhadap kapuh dari Kepuh

Untuk saat ini kajian metabolomik yang telah dilakukan terhadap biji kepuh, nerupa uji senyawa antiradikal bebas pada minyak daging biji kepuh. Secara umum biji kepuh mengandung beberapa jenis asam lemak. Dari daging bijinya mengandung asam sterkulat, asam oleat, asal linoleate, asam palmitat, asam miristat, serta asam lemak jenuh lainnya. Analisi minyak tumbuhan ini dapat menggunakan cara spektroskopi yang paling bermanfaat untuk identifikasi asam lemak adalah  spektoskopi massa. sedangkan gabungan spektroskopi massa adalah cara analisis yang paling baik untuk asam lemak berantai Panjang. Berdasarkan uji pendahuluan ekstrak n-heksana dan ekstrak etanol daging biji kepuh diketahui mengandung senyawa triterpenoid. Kemudian, menggunakan pereaksi Willstater juga menunjukan adanya flavonoid. Hasil pengocokan kedua ekstrak dengan air menunjukan pembentukan busa yang merupakan rekasi saponin. Selain itu, terkandung pula n-heksana dan ekstrak etanol daging biji kepuh mengandung minyak relatif tinggi.

Dilakukan uji pendahuluan untuk mengatahui aktivitas antijamur, antibakteri, uji toksisitas, dan anti radikal bebas terhadap ekstrak n-heksana dan ekstrak etanol menunjukan bahwa ekstrak n-heksana tidak memberikan aktivitas antijamur dan hanya memberikan zona hambat 1 mm pada ekstrak etanol. Pada uji aktivitas antibakteri, tidak memberikan zona hambat pada n-heksana dan etanol, uji toksisitas terhadap larva udang Artemia salina. Diperoleh harga LC50 untuk ekstrak n-heksana daging biji kepuh adalah 380,198 dan untuk ekstrak etanol daging diperoleh LC50 dengan nilai 13,904 ppm. tetapi berdasarkan paper yang dirujuk, hasil ini diragukan akibat adanya minyak yang terkandung dalam ekstrak n-heksana dan ekstrak etanol daging biji kepuh yang menutupi lapisan air sehingga larva udang Artemia salina. Kekurangan oksigen dan menybabkan kematian. Sedangkan untuk uji aktivitas antiradikal bebas, pada ekstrak n-heksana daging biji kepuh diperoleh hasil setelah 5 menit perendaman yaitu 22,74% dan persen peredaman setelah 1 jam sebesar 36, 55%. Pada ekstrak etanol daging biji kepuh diperoleh aktivita peredaman radikal bebas dengan persen peredaman setelah 5 menit sebesar 55,07% dan persen peredaman setelah 1 jam 85,05%. Pada penelitian ini dilakukan untuk mengetahui komponen senyawa dalam minyak daging biji kepuh yang aktif antiradikal bebas serta mengetahui konsentrasi bebas serta mengetahui komponen senyawa dalam minyak daging biji kepuh secara kualitatif maupun kuantitatif dengan kromatografi gas dan spektrometri massa(GC-MS).

Data percobaan tadi diperoleh menggunakan analisis kualitatif dengan kromatografi Gas-spektrometri Massa, sebanyak 1µL minyak ekstrak etanol daging biji peuh diencerkan dengan etanol pada labu ukur 10 mL. minyak dari ekstrak etanol yang sudah diencerkan kemudian dianalisis dengan GC-MS. Spektrum massa yang diperoleh dibandingkan dengan spektrum pembanding yang telah terprogram pada aat GC-MS. Kemudian analisis kuantitatif dengan GC-MS, dengan cara serbuk asam palmitat ditimbang sebanyak 0,1 gram kemudian dilarutkan dengan kloroform dalam labu ukur 10 ml sampai tanda batas, sehingga konsentrasinya menjadi 1 ppm. penentuan sektrum standar dilakukan dengan cara menginjeksikan larutan standar 1 ppm ke alat GC sebanyak 1 µL. catat waktu retensi dan luas areanya. sebanyak 1 µL minyak dari ekstrak etanol daging biji kepuh diencerkan dengan etanol pada labu ukur 10 mL. sebanyak 0,1 mL larutan standar 100 ppm, kemudian dimasukan ke dalam labu ukur 10 ml. selanjutnya ditambahkan minyak ekstraksi etanol yang sudah diencerkan sampai tanda batas. Penetuan spektrum minyak ekstrak etanol  yang telah ditambahkan standar ke alat GC sebanyak 1,0 µL. catat waktu retensi dan luas areanya. selanjutnya kadar senyawa standar yang ada dalam sampel dihitung secara kuantitatif, sehingga diperoleh konsentrasi relatif senyawa-senyawa yang ada dalam minyaka ekstrak etanol daging biji kepuh.

Minyak ekstrak n-heksan dan minyak ektrak etanol yang diperoleh diuji aktivitas antiradikal bebasnya dengan tahap-tahap yaitu, sebanyak 0,08 gram sampel yang diperoleh diencerkan dengan metanol pada labu ukur 10 µL sehingga kadarnya 8000 ppm. kristal DPPH ditimbang seberat 0,0004 gram untuk dilarutkan dalam metanol dengan menggunakan labu ukur 10 mL sehjingga kadarnya 0,004%(b/v). Larutan blanko yang digunakan adalah metanol. Pencatatan dilakukan terhadap absorbansi pada Panjang gelombabng 497 nm, 517 nm, dan 537 nm untuk DPPH. Sejumlah 1 mL sampel yang telah diencerkan dimasukkan kedalam kuvet lalu ditambahkan kedalam 2mL larutan DPPH 0,004%. Campuran tersebut kemudian diaduk rata dengan menggunakan pipet. Larutan blanko pada sampe adalah metanol. Pada menit ke-5 dan ke-60 setelah reaksi berlangsung, dilakukan pencatatan absorbansi pada Panjang gelombang 497, 517, dan 537 nm.

Kemudian diperoleh kesimpulan berupa, Minyak dari etanol daging biji kepuh berpotensi sebagai agen antiradikal bebas dengan persentase peredaman pada menit ke-5 sebesar 55,07% dan pada menit ke-60 sebesar 85,05%. Dan hasil analisis kualitatif dan kuantitatif dengan GC-MS menunjukan bahwa ekstrak etanol minyak daging biji kepuh diduga mengandung 8 komponen mayor berupa:metil palmitat, asam palmitat, etil palmitat, etil okta deka, metal nonadeka, etil stereatm pentadeka diena, dan etoksi metoksi oktadeka.