喺接下來獨立嘅步驟（區別於氧化磷酸化嘅重要步驟）中，通過磷酸甘油酸激酶嘅作用，將1,3-二磷酸甘油酸分子上嘅高能磷酸基團轉移到腺苷二磷酸上，生成3-磷酸甘油酸。