hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
超初期発癌診断用光ファイバ型P450インビボクイックセンサシステムの開発

これが発癌プロセスのinitiationと呼ばれる過程である。これは酵素の発現そのものが癌発症の危険性が高まったことを意味していると理解すれば、酵素の知見は癌診断に利用できる可能性がある。つまり、酵素の動態から癌発症の危険性を診断しようとするものである。この方法は癌を発症前に診断できることから、これが実現できれば画期的診断法となりうる。そこで、平成15年度16年度にわたり、長初期癌診断に利用することを目的に最新の光ファイバセンサ技術を利用して実用性の高い酵素検知システムの開発を進めてきた。その結果、検査に要する時間が短く(quick)、しかも生体に直接適用(in vivo)できる酵素検知システムの開発に成功した。この方法は酵素がその周囲に産生する蛍光物質を励起して蛍光を発生させ、その蛍光強度の時間推移の状況から酵素の活性度を評価しようとするもので、励起光の導入および蛍光を信号として検出系への取り出しに光ファイバを用いることが特徴である。光ファイバは細径で柔軟性の高いプラスチック型のものを利用することにより、生体の任意の部位に容易にアクセスできるが、非侵襲であることが望ましいことから、経皮、あるいは皮膚表面での検知も試みた。その結果、先端より1mm程度前方に最高感度を有する空間領域があることがわかり、皮下2mm程度の深さまでの酵素状態を検知できることがわかった。以上の研究結果により、超初期癌診断は技術的には可能となったことから、今後は診断医療の場に本装置の適用を試みる。
現代スペインにおける聖と俗：戦争犠牲者の記憶と祈念の諸相

本研究は、現代スペイン社会におけるスペイン内戦の犠牲者への祈念のあり方を調査・考察することを目的とした。宗教的な様相と世俗的な様相の交差する記念碑をめぐり、「歴史的記憶法」の適用以降、時の政治がそれらをどう扱い、どのようなコンフリクトがおき、そして人々がどのような反応をみせているかを、マドリードやアラゴンなどでの具体的事例を通じてまとめるとともに、内戦での戦没者とともに独裁者フランコをも埋葬する「戦死者の谷」という施設の在り方を考える特別委員会の動向に注目し、関係者とのインタビューや世論の分析を通じて、スペインにおける集合記憶の現状を提示した。平成25年度は、平成24年度に引き続き、マドリード・コンプルテンセ大学構内に設置された、スペイン内戦で戦った国際旅団義勇兵を顕彰する記念碑に注目し、定点からの継続的なフィールドワークを実施した。一方、この記念碑を撤去させようとする勢力と、現在の場所に維持しようとする勢力との間のコンフリクトは年度内に新たな局面を迎え、法による決定を仰いでいる現状である。年代的にいっても、元義勇兵が他界したというニュースが増えていく中にあって、彼らをいかに記憶するかという忘却されかけた課題に対し、再度社会的議論の焦点があてられている状況にあるといえる。そういったコンフリクトの現状と解決へむけたプロセスについて、2013年の研究ノートに続く続編として、2014年1月発行の学部紀要に研究ノートを掲載した。また、カトリック教会が現在まで保有する内戦関連の記念碑・建造物と世俗的・非宗教的な記念碑との比較を行うことができるよう、双方の記念碑に関する資料収集、フィールドワークを進めた。たとえば、アラゴン自治州内の人口500名ほどの村落で、現在どのように内戦が記念されているのか、オーラル・ヒストリーの手法を援用しながら調査するとともに、記念碑という「記憶の場」が具体的にはどこに設置されるのかを考察した。実際には、当該の村落の犠牲者たちの記念碑設置が、さまざまな理由によって周辺の村落にまで広がっていることが確認できた。市井の人々の内戦の記憶は、時の政治的・社会的状況によって断続的に忘却と回復を繰り返していることが、内戦関連の記念碑の新たな設置や撤去をめぐる攻防によく表れているという実感を得ている。次年度へむけて、学会報告・論文執筆などのより具体的な成果を上げていきたい。平成24年度は、スペイン内戦の記憶を市井の人々がどう回復しようとしているのかを、マドリード・コンプルテンセ大学構内に2011年に設置された国際旅団記念碑をめぐる現状から考察した。スペインへの渡航により、現地研究者との意見交換はもとより、国際旅団関係者が所属する国際旅団友好協会などでの調査を実施した。本記念碑の設置をめぐっては賛成者と反対者が大学当局と行政・司法を巻き込んで係争中である。その現状については2013年5月発行予定の学部紀要に掲載される研究ノートで明らかにした。非宗教的でかつ国籍的にも多元な人々の集団であった国際旅団所属の戦闘員を記念するために近年設置された1記念碑を対象に、その成立をめぐる過程を考察したのであるが、多様な個性をもった人々を単一化して記念(そして追悼)しようとする点で、世俗的な団体の内戦へのオマージュにも、ある意味で宗教的な内戦祈念の形に類似の形態・思考の諸相が存在し、本質的に他者を排除することにつながる恐れがあるという点でいえば、宗教・非宗教的な団体とも共通の問題を抱えているといえる。今期はそのような世俗的・具体的な事例に関する現状把握ができたという点で研究に進歩がみられたと考えている。なお、当初資料提供を見込んでいた人物が急逝されたため、今後資料収集において、方向性を多少変更する必要が出てきた。ご遺族が資料を見せてくださるかどうか現在協力者を通じて交渉中であり、そのアプローチの仕方をも含めて検討しなければならない課題ができたといえる。平成26年度においては、スペイン・マドリードで2014年4月に開催された学会"Congreso Posguerras. 75 Aniversario de la Guerra Civil Espanola(スペイン内戦後70年)"における部会で、"Para quien estan colgadas las lapidas?(誰のためにプレートは掲げられているのか)"という題目の研究報告を行った(なお、使用言語はスペイン語)。またその折には、スペイン内外の研究者との意見交換を行う機会にも恵まれ、知見を深めることができた。なおこの学会報告は共著論文として2015年3月に刊行された。また、2015年3月には、カタルーニャ地方バルセロナ、モンジュイック地区周辺におけるスペイン内戦の死者にささげられたプレート・記念碑に関する調査を行った。また、マドリード大学敷地内にある「国際旅団」記念碑についても継続して調査を行った。このバルセロナ、マドリードでの調査は、スペイン内戦の死者を祀り、平和を祈念する動向には個人的な思考の差があると同時に、地域でのとらえ方に差異があることをあらためて実証する良い機会となった。またマドリード市立雑誌新聞文書館ではもとより、北部のサラマンカにある歴史的記憶資料センター(旧スペイン内戦史料館)にある資料を参照するにあたって、これまでの研究を補完する新たな資料を見つけたことは、特筆するに値する事項である。くわえて、独裁者フランコ将軍やJ.A.プリモ・デ・リベーラが眠る「戦没者の谷」の将来的扱いを提言した特別委員会の委員のひとりであったベネディクト会修道士、H.ラゲール氏にインタビューを行い、大変貴重な知見を得た。

この記録については、ラゲール氏の確認を経て公開する予定である。本研究の最終年度にあたる2015年度は、マドリードのカルロス3世大学で2015年10月末に開催された「ある戦争のイメージ:1936-39年のスペインにおけるポスター・写真・映画」国際大会において報告を行った。とくにこの大会への参加を通じて、現代スペインにおける表象イメージ研究の気鋭の研究者たちと知り合い、国際的なネットワークを広げることができたことは、今後も研究を深め、進めるうえで大きな励みとなった。マドリードにおいては「歴史的記憶法」の適用をめぐり、今なお残存するフランコ体制を称揚する記念碑等を撤去しようとする政治勢力とその維持を試みる政治勢力とのあいだのコンフリクトが起きている。たとえば、この間にマドリードにある私営の墓地からフランコ体制を称揚するものだという理由でプレートが撤去されたが、その直後に教会側のクレームで元の位置にもどされる、など、状況は混乱している。また、共和国陣営を表象する国際旅団記念碑は、まさに政治的闘争の矢面にたち、落書きなどが後を絶たない状況にある。現場での緊張状態をうけてか、マドリード・コンプルテンセ大学に設置された国際旅団記念碑を維持するのか、もしくは撤去するのかをめぐっていまだ議論が継続し、膠着状態にある。2015年度は、このようなスペイン内戦における犠牲者の記憶をめぐる攻防について、学会での報告はもとより、本研究機関を通じておこなってきた経過観察・インタビュー等をまとめる作業に従事した。フランコの霊廟である「戦没者の谷」をどうするのかという議論・処置が帰結点を見出していない現状からいっても、現代スペインが内戦と独裁の記憶をいかに次世代に継承するかという問いにいまだ明確な答えを見出していない状況にあることが、本研究を推進するうえで明らかになった。今後も事項の推移を見守り、将来的には日本等のケースとの比較研究に活かしたいと考える。本研究は、現代スペイン社会におけるスペイン内戦の犠牲者への祈念のあり方を調査・考察することを目的とした。宗教的な様相と世俗的な様相の交差する記念碑をめぐり、「歴史的記憶法」の適用以降、時の政治がそれらをどう扱い、どのようなコンフリクトがおき、そして人々がどのような反応をみせているかを、マドリードやアラゴンなどでの具体的事例を通じてまとめるとともに、内戦での戦没者とともに独裁者フランコをも埋葬する「戦死者の谷」という施設の在り方を考える特別委員会の動向に注目し、関係者とのインタビューや世論の分析を通じて、スペインにおける集合記憶の現状を提示した。2015年3月にカタルーニャでの現地調査にくわえ、関係者へのインタビューなどの一時延期となっていた活動を行うことができた。これによって、これまでのマドリードやアラゴンでの事例研究に加え、カタルーニャでの記念碑保存をめぐる事例を収集できた。これらの資料に基づき、比較を行いつつ、平成27年度には成果を文章化することが可能であると考える。
海馬の疼痛記憶形成異常仮説による舌痛症モデル動物の構築と解析

舌痛症が疼痛の記憶形成異常であるという仮説を動物モデル上で表現するため、1)マウスにCFAを注入し、IDO-1の海馬での局在を免疫染色で調べ、長期持続疼痛の記憶の形成を検討したが今回の条件では確認できなかった。2)子宮内エレクトロポレーションによるCRISPR/Cas9のゲノム編集でβアクチンを体性感覚野の皮質第2/3層に発現させる事が可能であることを確認した。3)パッチクランプによるニューロン活動の差異を測定し、ノックインマウス(R704C)の急性海馬スライスと分散神経培養でのneuroligin2ノックダウンで異常が認められた。以上より疼痛の閾値に変化が起こる可能性が示された。本研究は、舌痛症などの原因不明の疼痛が海馬の疼痛の記憶の形成異常であるという仮説を立て、シナプスに変異のある遺伝子改変マウスを利用して、疼痛刺激のシグナルの異常を海馬で調べることによって、舌痛症のメカニズムの基礎を解明することを目的としている。平成27年度は以下のような実験を行った。1)疼痛モデルの制作:疼痛時に発現する疼痛記憶を免疫組織化学的に確認するモデルを製作するために、マウスの下肢のフットパッドにComplete Freund Adjuvant (CFA)を0.1mlと対照群にPBSを等量注入し、IDO-1の海馬での発現を調べる実験モデルの制作を開始し、疼痛の刺激や時期、免疫染色との条件検討を行った。2)遺伝子改変マウスの選択と制作:シナプスの成熟異常遺伝子改変モデルマウスのターゲットとして、neuroligin-2を選択し、shRNAの子宮内エレクトロポレーションを行い解析の対象を制作した。胎児の側脳室にneuroligin-2特異的なshRNAの配列を含むプラスミドベクターを、pCAG-EGFPプラスミドベクターとともにエレクトロポレーションを行い、脳室周辺の分裂期の神経芽細胞に導入し、EGFPのシグナルを指標に選択した。3)急性海馬スライスに対するパッチクランプによる遺伝子改変モデルマウスニューロンの活動の差異を測定:遺伝子導入個体について、急性海馬スライス切片を作成し、neuroligin-2 shRNA導入錐体ニューロンを識別し、パッチクランプを行った。また、テトロドトキシン非存在下で電気刺激により誘発される抑制性シナプス応答(IPSC)を解析した結果、neuroligin-2 shRNA導入ニューロンではIPSCの振幅の低下が見られた。これらのことから、neuroligin-2遺伝子の発現抑制により、抑制性シナプス機能が低下していると推測された。動物モデルに対する組織学的探索については、条件設定が難しく、本年度中に完了しなかったが、基礎的なマウスについてはneuroligin-2をターゲットにして子宮内エレクトロポレーションによって、neuroligin-2 shRNAを導入してモデルを作ることによって、海馬スライスでのパッチクランプの基礎的な解析は順調にすすんだため、進度としては、おおむね順調と考えられる。平成28年度は以下のような実験を行った。1)疼痛モデルの制作:前年度に続き疼痛時に発現する疼痛記憶を免疫組織化学的に確認するモデルを製作するために、マウスの下肢のフットパッドにComplete Freund Adjuvant (CFA)を0.1mlと対照群にPBSを等量注入し、IDO-1の海馬での発現を免疫染色で大脳前頭断切片上で局在を調べ、疼痛の記憶の形成を確認した。2)遺伝子改変マウスの制作:CRISPR/Cas9によるゲノム編集を子宮内エレクトロポレーションで行えるための準備をした。胎児の側脳室にβアクチン特異的なsgRNAの配列を含むプラスミドベクターを、pCAG-EGFPプラスミドベクターとともにエレクトロポレーションを行い、EGFP-のシグナルを指標に選択し、βアクチンを体性感覚野の皮質第2/3層の錐体ニューロンに発現させる事が可能であることを確認した。3)急性海馬スライスに対するパッチクランプによる遺伝子改変モデルマウスニューロンの活動の差異を測定: neuroligin3の704番目のアルギニンをシステインに置換したノックインマウス(R704C)について、脳の海馬スライスで細胞外記録をとり、R704Cではfield EPSPが低下していることを確認した。また、選択的セロトニン再取り込み阻害薬(SSRI)のフルオキセチン投与でfield EPSPの低下が回復したが、オキシトシン添加ではこの効果がみられなかった。field EPSPは、興奮性のグルタミン作動性シナプス伝達を反映しているため、痛みの中枢への伝達経路で異常が起きていることから、大脳皮質体性感覚野で疼痛の閾値に変化が起こる可能性を検証するモデルとして使えることを確認した。

今後はシナプスの成熟異常遺伝子改変モデルマウスのターゲットとして、neuroligin-2を選択し、shRNAの子宮内エレクトロポレーションを行い解析の対象となる遺伝子改変マウスを絞り、現在、進度のやや遅れている、動物の疼痛のモデルの組織学的解析を継続するとともに、海馬スライスでのパッチクランプの基礎的な解析を継続していく。また、予定されていた行動解析については、基礎的解析の進行状況によっては変更も視野に検討する。口腔外科学
神経毒性を有する覚醒剤由来新規代謝物及び類縁体の構造活性相関

我々は既にエタノール摂取時のアンフェタミン代謝物の中から脳内新規代謝物としてテトラヒドロイソキノリン(TIQ)型縮合閉環体である(3S)-1,3-ジメチルTIQを見いだし、そのものが神経毒性を有していることを明らかにしている。今回1位メチル基の立体化学を考慮して両ジアステレオマーの合成を行なった。これら化合物を用いて脳内代謝物の立体化学を検討した結果、(1S,3S)体の方が(1R,3S)体より大量に生成していることが明らかとなった。次にこれらジアステレオマー間の神経毒性の比較を行なった結果、自発的運動量に関してはラット脳内の主代謝物である(1S,3S)体の方が強いことが明らかとなった。更にTIQ類においてメチル基の位置及び数の差が、神経毒性に与える影響を検討する目的で種々のメチル置換TIQ類の合成を行なった。それらの化合物群の構造毒性相関を行なった結果、1位にメチル基が存在すると自発的運動量は増加する傾向が認められた。またメチル基の数が多いほど急性毒性が強く、このことは化合物の脂溶性と相関すると考えられた。運動の協調性に関する検討を行なった結果、1,3,3-TriMe体及び1,1DiMe体が一番協調性の低下が著しく、3,3DiMe体、1,3DiMe体、1Me体の順で毒性の減弱が認められた。以上各TIQ誘導体に関して毒性を評価し、メチル基の有無、置換位置、立体配置の違いにより毒性が大きく変動することを明らかにした。
日本産キムラグモ類の分子系統地理学的研究

(1)九州におけるサンプリングこれまでに調査が十分でなかった九州各地において採集を行い,キムラグモ類の分布域のほぼ全域からのサンプルをそろえることができた.その過程で,それまで生息していないと思われていた高標高地(950m)における生息を確認した.一方で,宮崎県日向市の耳川流域においては生息を確認することができず,分布の空白域が存在する可能性を知り得た.ミトコンドリアCOI遺伝子による解析では,南西諸島から九州南部にかけての範囲では,狭い地域ごとに細かく系統が分化していることが判明した.その反面,九州の中北部では同一の系統が比較的広い範囲に分布〓ており,この地域では最近になって急速な分布拡大が生じたことが示唆された.キムラグモ類各系統の分岐はたいへん深く,キムラグモ類の歴史がきわめて古いらしいことが明らかになった.しかしそのために,キムラグモ類全体の系統関係について推定するにはCOIの進化速度は速すぎるものと思われた.他分類群の先行研究においてCOIよりも進化速度が遅いことが示されていたCytBについての解析の結果,キムラグモにおいてはむしろCOIよりも進化速度が速いことが示され,このグループの解析には不向きであることがわかった.大系統の推定に利用されることの多い核遺伝子の18SrRNAに関しては,キムラグモ類においてはほとんど変異がなく,解析に向かないことがわかった.18Sよりも進化速度の速いとされる28SrRNA遺伝子については,アラインメントの困難さやインデルの多さなどが危惧されたが,予想に反してそのようなことはなく,また,進化速度も適度であったので,キムラグモ類の属レベルの系統の解析に向いているらしいことがわかった.今後はこの遺伝子によって,これまでに採集した多数の標本による系統解析を行っていきたいと考えている.(1)九州におけるサンプリングこれまでに調査が十分でなかった九州各地において採集を行い,キムラグモ類の分布域のほぼ全域からのサンプルをそろえることができた.その過程で,それまで生息していないと思われていた高標高地(950m)における生息を確認した.一方で,宮崎県日向市の耳川流域においては生息を確認することができず,分布の空白域が存在する可能性を知り得た.ミトコンドリアCOI遺伝子による解析では,南西諸島から九州南部にかけての範囲では,狭い地域ごとに細かく系統が分化していることが判明した.その反面,九州の中北部では同一の系統が比較的広い範囲に分布〓ており,この地域では最近になって急速な分布拡大が生じたことが示唆された.キムラグモ類各系統の分岐はたいへん深く,キムラグモ類の歴史がきわめて古いらしいことが明らかになった.しかしそのために,キムラグモ類全体の系統関係について推定するにはCOIの進化速度は速すぎるものと思われた.他分類群の先行研究においてCOIよりも進化速度が遅いことが示されていたCytBについての解析の結果,キムラグモにおいてはむしろCOIよりも進化速度が速いことが示され,このグループの解析には不向きであることがわかった.大系統の推定に利用されることの多い核遺伝子の18SrRNAに関しては,キムラグモ類においてはほとんど変異がなく,解析に向かないことがわかった.18Sよりも進化速度の速いとされる28SrRNA遺伝子については,アラインメントの困難さやインデルの多さなどが危惧されたが,予想に反してそのようなことはなく,また,進化速度も適度であったので,キムラグモ類の属レベルの系統の解析に向いているらしいことがわかった.今後はこの遺伝子によって,これまでに採集した多数の標本による系統解析を行っていきたいと考えている.
マウス乳癌ウイルスの挿入による生じた変異型Notch1の白血病誘導における機能

Notch蛋白質は分子量300kDaの受容体型膜蛋白質で、リガンドであるDelta蛋白質を発現する細胞との機械的接触を介して情報伝達を行い、様々な細胞の発生や分化の過程での細胞運命決定に働いている。マウス乳癌ウイルスのLTR変異株により、BALB/cマウスに誘導されたT細胞性白血病細胞では、その約30%の検体においてNotch 1遺伝子の極めて限られた領域にプロウイルスの挿入が生じており、その結果、主に細胞内ドメインよりなる分子量100kDaの欠損型Notch 1蛋白質が高発現していた。またBALB/cに自然発症した乳癌においてもRetrotransposon,IAPの5'LTR-gag部分がNotch 4遺伝子の膜貫通部分をコードする領域に挿入され、IAPのGagとNotch 4の細胞内ドメインよりなる融合蛋白質が発現している例が発見された。恒常的活性化型であるこれらの欠損Notch蛋白質が伝達する細胞分化抑制シグナルがこれらの白血病や乳癌の誘導に重要な役割を果たしている事が明らかとなり、またNotch遺伝子群の細胞腫瘍化における作用点と作用機序は共通性が高い事も示唆された。これらのNotchシグナル伝達異常による発がんの分子機序を解析することを通じて、哺乳動物のNotch遺伝子群のシグナル伝達経路の解明と正常細胞におけるNotchの標的遺伝子の同定を行う事が期待された。Notch 4遺伝子変異の結果を、J.Virol.(73,6,1999,in press)に発表した。更にDBA2マウスに自然発症したT細胞性白血病より樹立された培養細胞株DL-3においては、マウス白血病ウイルス(MuLV)のプロウイルスの挿入により欠損型Notch 1蛋白質が生じ、Notch 1の標的遺伝子であるHES-1転写亢進が起きている事が判明した。この結果は現在投稿中である。Notch蛋白質は分子量300kDaの受容体型膜蛋白質で、細胞間の接触を介する情報伝達により様々な細胞の運命決定に働いている。その細胞外部分にはEGFリピートそして細胞質側には転写因子RBP-Jκの結合領域やAnkyrinリピートが存在する。マウスでは4種類のNotch遺伝子が知られている。我々はマウス乳癌ウイルス(MMTV)のLTRのU3部分に規則的欠失(約300塩基対)をもつ変異株は、白血病原性ウルイスへと変化しT細胞性白血病細胞の誘導することを報告した。今回このマウス乳癌ウイルスのLTR変異株によりBALB/cマウスに誘導されたT細胞性白血病細胞では、その約30%の検体においてNotch1遺伝子の極めて限られた領域にプロウイルスの挿入が生じており、その結果主に細胞内ドメインよりなる分子量100kDaの欠損型Notch1蛋白質が高発現していることを発見した。従ってMMTVプロウイルスの挿入により生じた変異型のNotch1遺伝子が癌遺伝子として働いている事が明らかになった。またはBALB/cに自然発症した乳癌においてもRctrotransposon,IAPの5′LTR-gag部分がNotch4遺伝子の膜貫通部位をコードする領域に挿入され、細胞内ドメインよりなる欠損型Notch4蛋白質が発現している例を発見した。これらの主に細胞質側部分からなるNotch蛋白質は恒常的活性化型であると考えられ、この欠損Notch蛋白質が伝達する細胞分化抑制シグナルがこれらの白血病や乳癌の誘導に重要な役割を果たしている事が推測された。またNotch遺伝子群の細胞腫瘍化における作用点と作用機序は共通性が高い事も示唆された。

Notch蛋白質は分子量300kDaの受容体型膜蛋白質で、リガンドであるDelta蛋白質を発現する細胞との機械的接触を介して情報伝達を行い、様々な細胞の発生や分化の過程での細胞運命決定に働いている。マウス乳癌ウイルスのLTR変異株により、BALB/cマウスに誘導されたT細胞性白血病細胞では、その約30%の検体においてNotch1遺伝子の極めて限られた領域にプロウイルスの挿入が生じており、その結果、主に細胞内ドメインよりなる分子量100kDaの欠損型Notch1蛋白質が高発現していた。またBAUB/cに自然発症した乳癌においてもRetrotransposon,IAPの5′LTR-gag部分がNotch4遺伝子の膜貫通部分をコードする領域に挿入され、IAPのGagとNotch4の細胞内ドメインよりなる融合蛋白質が発現していたている例が発見された。恒常的活性化型であるこれらの欠損Notch蛋白質が伝達する細胞分化抑制シグナルがこれらの白血病や乳癌の誘導に重要な役割を果たしている事が明らかとなり、またNotch遺伝子群の細胞腫瘍化における作用点と作用機序は共通性が高い事も示唆された。これらのNotchシグナル伝達異常による発がんの分子機序を解析することを通じて、哺乳動物のNotch遺伝子群のシグナル伝達経路の解明と正常細胞におけるNotchの標的遺伝子の同定を行う事が期待された。N0tch4遺伝子変異の結果を、J.Virol.(1999 in press)に発表した。
山田寺式軒瓦の総合的研究

山田寺式軒瓦は重圏文縁単弁蓮華文軒丸瓦と重弧文軒平瓦から構成され、奈良県山田寺が標式であり、起源である。山田寺と同じく640年代に建設中の百済大寺(現吉備池廃寺)の軒瓦は重圏文縁単弁蓮華文軒丸瓦と型押し忍冬文軒平瓦から構成され、近年前者は百済大寺式軒丸瓦と仮称されている。従来、船橋廃寺式→百済大寺式→山田寺式という軒丸瓦の型式変化が考えられてきた。しかし、百済大寺と山田寺の創建年代はほとんど差がなく、しがたって軒丸瓦の型式差を時間差に置くことはできない。佐川は両型式の根本的差が、蓮弁の弁端表現にあると考える。百済大寺式は弁端を尖らせ、山田寺式は横断面を「へ」の字形にする。百済大寺式も山田寺式も仏像光背や台座の意匠にその起源が求められるが、山田寺式の場合は、とくに法隆寺釈迦像頭光、大阪府野中寺弥勒菩薩半跏像台座、韓国(百済)陵寺大香炉の単弁に酷似する。渡来系仏師の深い関与があったことはまちがいない。以上の成果に基づくならば、列島内に分布する従来山田寺式軒丸瓦と総称されてきたものについても、弁端表現の差によって分離して、検討する必要がある。例えば中国・四国地方に分布する少なからぬ例が、百済大寺式・系となろう。さらに山田寺出土軒丸瓦の研究によって、山田寺式軒丸瓦が列島内に波及する契機は、7世紀中葉と7世紀末8世紀初の2回あったことも明らかにされた。1本年度の研究目的:東北・関東地方に分布する山田寺式(系)軒瓦の調査と研究2本年度の資料調査(1)東北地方:宮城県名生館遺跡、大蓮寺窯跡、郡山廃寺出土瓦を中心に、東北地方7世紀末8世紀初の軒瓦全般の調査を実施し、写真、調書などによる資料化とその整理を行う。(2)関東地方:伽藍配置が明瞭な群馬県上植木廃寺と千葉県龍角寺跡を中心に、関東地方7世紀後半の軒瓦全般の調査を実施し、写真,調書などによる資料化とその整理を行う。3本年度の調査研究の成果(1)東北地方:宮城県名生館跡、大蓮寺窯跡、福島県麓山廃寺の軒丸瓦は、外縁に重圏文を欠くが、山田寺系軒瓦とするだけの文様上の特徴をもっている。平板化した弁は山田寺軒丸瓦F種に類似するので、7世紀末に近い年代が推定される。これらには重弧文軒平瓦を伴う。郡山廃寺の軒丸瓦は弁が立体化し、前三者とやや趣を異にするが、山田寺系軒丸瓦の範疇でとらえられよう。これには重弧文軒丸瓦を伴わない。なお、郡山廃寺の調査中に新型式の山田寺系軒丸瓦を発見した。多賀城跡の軒丸瓦のモデルとなった郡山廃寺例を8世紀初とする従来の見解に賛成だが、名生館などの前三者を郡山廃寺にやや遅れるとする従来の見解は支持できない。(2)関東地方:上植木廃寺では4種の山田寺式軒丸瓦が知られており、今回の調査でそれらが金堂、回廊、塔、講堂に対応しうること、文様と技法の型式学的検討からそれらが堂塔の建設の時期差を示すことを明らかにした。龍角寺ではl種の軒丸瓦の范型を使用し続け、笵傷の進行段階が堂塔の造営過程に対応すると予想される。

(3)まとめ:龍角寺の軒丸瓦は蘇我倉山田石川麻呂創建期である640年代製作の山田寺軒丸瓦D種に類似するので、それに近い時期、上植木廃寺では弁がやや平板化する、麓山廃寺、名生館、大蓮寺窯跡では重圏文を欠く、郡山廃寺では弁が変形するので、天武朝山田寺再造営期以後の7世紀末8世紀初の製作と推定される。(1)中部・東海地方(1)愛知県尾張元興寺の軒平瓦には、山田寺式軒丸瓦と組む軒平瓦の重弧文の変容である簾状文が多く見られる。これは昨年度調査した群馬県上植木廃寺の軒平瓦の主文様のひとつであり、東山道を経由しての軒瓦情報の伝播を示している。(2)尾張元興寺で同上軒平瓦と組む軒丸瓦の丸瓦接合技法が、片ほぞ形加工である点も重要である。(2)東北・関東地方(1)宮城県古川市伏見廃寺出土の奈良県法輪寺同笵軒丸瓦について:法輪寺創建軒丸瓦は船橋廃寺式に属し、これは山田寺式軒丸瓦の祖型である奈良県吉備池廃寺(百済大寺候補)の軒丸瓦(仮称百済大寺式)のさらに祖型である。同笵関係は確定できたが、これが確実に伏見廃寺採集という保証がないことが、関係者の証言で明らかになった。(2)千葉県龍角寺の山田寺式軒瓦の丸瓦接合技法は、片ほぞ形加工である可能性が低く、創建年代についてはなお再検討の余地がある。(3)近畿地方奈良県飛鳥藤原地区(1)山田寺出土の山田寺式軒丸瓦の研究で、片ほぞ形加工が660年代まで存続し、楔形加工に変化することが判明している。しかし、7世紀後半の当該地区他寺院の山田寺式軒丸瓦の場合、丸瓦先端はすべて未加工であるので、造瓦組織は関与しない文様だけの受容であることが判明した。同時に、山田寺の創建期の片ほぞ形加工は、飛鳥寺「星組軒丸瓦」および斑鳩寺「弁端点珠軒丸瓦」の造瓦組織に元来あった技法を継承したものか否かについても、今後検討を要する。(2)同上調査時に奈良国立文化財研究所で開催された「第3回古瓦研究会」に出席し、「船橋廃寺式軒丸瓦」と「(仮称)百済大寺式軒丸瓦」の時空分布について検討し、あわせて「山田寺式軒丸」との型式概念との区分について議論した。1.平成12年度の研究目的:中国地方・四国地方・九州地方に分布する山田寺式(系)軒瓦の調査と研究2.平成12年度の資料調査:(1)中国地方では岡山県関戸廃寺・五反廃寺、広島県横見廃寺・明官寺廃寺、(2)四国地方では香川県妙音寺、(3)九州地方では福岡県上岩田廃寺の瓦調査を実施し、写真撮影や調書作成による記録と資料化を行う。3.平成12年度の調査研究成果:(1)中国地方の横見廃寺例と明官寺廃寺例は弁端がそり気味で、弁の輪郭線をもたず、子葉に火焔文を伴うが、関戸廃寺例は弁端が丸みをもち、輪郭線をもち、子葉が火焔文を伴わない、という相違を見せる。これに対して製作技法は、ともに瓦当外縁上半を丸瓦広端部が代行するという特徴をもち、これは6世紀末に日本に伝播した製作技法と異なり、新たに朝鮮半島から伝播したものである。渡来(系)工人が畿内の山田寺式軒丸瓦の文様を受容しつつ製作した可能性が高い。(2)四国地方の妙音寺例は軒丸瓦の外縁の重圏文が外側から2本目が太く、これは奈良県山田寺例と共通する重要な特徴である。垂木先瓦が方形である点は奈良県山田寺と異なる。(3)九州地方の上岩田廃寺例は外縁に二重圏文をめぐらす以外に山田寺式軒丸瓦との類似性は乏しい。しかも、製作技法は縦置き型一本造り、竹状模骨痕を有する行基式丸瓦を接合し、広端部は片ほぞ形に削るという特異なものである。ただし、垂木先瓦と鬼瓦は蓮弁の弁端が尖る山田寺式軒瓦類似の特徴をもつ。なお、福岡県上白水遺跡と塔原廃寺の軒丸瓦は外縁が重圏文をめぐらすが、複子葉であり、山田寺式軒瓦との距離はあるものの、今後山田寺式軒丸瓦の概念規定を再検討する中で、それらの位置づけも考えていきたい。(1)陸奥国の山田寺式軒瓦の補足調査を行い、従来群馬県上植木廃寺との関連を考えてきたが、埼玉県方面の軒瓦により類似する文様が存在することが明らかとなった。(2)西日本の山田寺式軒瓦の補足調査を行い、阿波国立善寺廃寺、土佐国秦泉寺廃寺に関連資料があることが判明したが、弁端と子葉の点で山田寺式とは別概念を設定する方が良い。
第一次世界大戦がフランス演劇に及ぼした影響に関する研究

第一次世界大戦中のフランスにおいて書かれ、また上演された戯曲の調査を行うことにより、以下が明らかになった。(1)戦争プロパガンダにおいて演劇の占める位置の凋落;言葉を主体とした演劇は近代戦争を表象できないことが明らかになった。(2)戦争プロパガンダ劇においては、現実の総力戦と同様に、女性や子供という表象も「動員」された。(3)戦争プロパガンダ劇におけるフランスの特異性;伝統的に言葉の表現力に重きを置くフランス演劇では、あたかも言葉の持つ呪術的な力によって敵を屈服させ、自らの文化的な威信を高めるような詩劇が盛んに上演された。以上の知見により、第一次大戦は現代演劇の重要な転回点であることが明らかとなった。またこれらの考察は、戦争プロパガンダにおける女性や子供の位置、あるいは戦争を「表象」するとは何かという問題について、新たな考察を迫るものである。第一次世界大戦を文化史的な文脈で捉えるという試み、すなわちこの戦争が人々の集合的な心性にどのような影響を及ぼし、結果として当時の文化がどのように変化したのかを探ろうとする研究は、2008年が第一次大戦終結から90周年を迎えたこともあって、改めて関心を集めた分野である。しかしそれを演劇との関連において論じた研究はまだ少ない。それでもイギリスについては、Heinz Kosok, The Theatre of War : The First World War in British and Irish Drama (Palgrave Macmillan, 2007)のような著作が現れているが、フランスについてはほぼ皆無である。今回の助成により、研究代表者は二度にわたってフランス国立図書館(Bibliotheque Nationale de France)で資料調査を行い、現在ではほぼ完全に忘れられている第一次大戦中に発表および(または)上演された、同大戦を主題とした戯曲を多数閲覧することができた。その結果、対独戦に従事した英仏両国の間でも、それを演劇として表象する方法にはかなりの相違があることがわかった。より具体的には、イギリスと比べてフランスでは、日本で「母物」と言われるような、母と子の情愛を戦争と結びつけた戯曲が多く見られる(ただしこの中にはフランス語でmarraineと呼ばれる、前線の兵士と文通する「代母」が含まれる)。これをどのように解釈すべきであろうか。恐らくそこにはカトリック信仰に基づいた当時のフランス社会のあり方が、演劇に反映されていると考えられる。同様に、コルネイユ、ラシーヌ以来の「言葉の演劇」(台詞回しの美しさを追求した演劇)を重んじた国として、あたかも言霊の力によって敵を調伏することを意図したかのような芝居も多々見られた。今年度以降は、こうした調査結果に基づいて、第一次世界大戦がフランス演劇においてどのように表象され、それが当時の人々のどのような心性を反映しているかについて、学会発表および論文執筆を通じて研究成果を公開していく予定である。(1)一次資料の収集フランス国立図書館(BnF)で平成22年8月および平成23年3月の二回にわたり、今回の研究に関する資料収集を行った。その結果、第一次大戦中のフランス演劇における女性の表象と当時の国家総動員体制との関係、当局による演劇の検閲の実態、メロドラマによる戦争の表象とその限界、詩的な演劇の上演がいわば国家による呪術的な悪魔払いのような機能を担っていたことなど、単に個別の劇作品に関する情報だけでなく、それらに共通する数多くの興味深い視点が得られた。(2)学会発表ならびに論文の投稿まず今回の研究に関する概論的な研究成果を報告するために、平成22年8月までに論文1本(「戦争と演劇に関する試論:第一次世界大戦とフランス演劇」)を執筆し、学会発表1件(戦争と異文化-第一次世界大戦とフランス演劇-)を行った。その後、より具体的かつ個別的な問題について論じるために論文1件(戦争とメロドラマ-第一次大戦下のフランス演劇における女性の表象-)を発表した。上記のように、平成22年度の本研究は概ね順調に進行したと判断している。(1)一次資料の収集前年度から継続してフランス国立図書館で第一次大戦中に書かれた戦争に関する戯曲の資料収集を行った。これらの戯曲のうち、特に注目に値するものとして、韻文で書かれた戦争プロパガンダ劇の重要性ならびに戯曲において女性や子供がどのように表象されているかという問題が明らかとなった。前者については、フランス独自の現象と言えるものであり、言葉によって敵に対する自らの文化的優越性を示そうとする象徴的な行為である。しかし同時にそれは、戦争の過酷な現実に直面すると、破綻せざるを得ない試みだった。

結果としてこうした言語表現を重視したプロパガンダ劇の破綻が、戦争後に出現した前衛劇につながる側面があることがわかった。後者については、戦争中に女性や子供が実際に動員されただけでなく、演劇のような表象の場においても彼らがプロパガンダのために利用されていた実態が明らかになった。しかし舞台上における子供や女性の表象は戦後になると「解放」され、「恐るべき子どもたち」や「自立した女性」というイメージに結びつくことが示唆されている。(2)学会発表ならびに論文の投稿上記のような知見に基づいて、日本フランス語フランス文学会でこの時代の戦争戯曲に関する発表をフランス語で行い、一定の評価を得た。その結果、発表論文は学会誌に掲載することが認められた。
息こらえ潜水者の行動と生理学的側面から見た安全システムの提案

本研究では国内においても減少傾向にある息こらえ潜水にて漁業を営む海女・海士および一流の競技者を含む息こらえ競技ダイバーの潜水時における行動と生理学的なデータを収集・分析することにより、息こらえ潜水が身体に及ぼす影響を検討した。データの取得には小型データロガー(EPI社製)を海士・海女に装着し、操業中の潜水深度、潜水時間および海面休憩時間などを1秒間隔で計測した。さらに、ウェアラブルカメラ(GoPro社製)を海士・海女に装着し、操業の様子を記録した。加えて、質問紙法による健康状態の調査を行った。本調査の対象者における神経系DCI発症リスクは、高いレベルにはないことが推察された。潜水漁業者の潜水障害や健康被害のリスクを把握し、より安全な操業を提案するための資料収集を目的とした。操業実態を把握するために、国内の異なる2地域(三重県国崎、石川県舳倉島)の潜水漁業者を対象に、操業時間、潜水回数、水深、潜水時間および水面休憩時間、三次元の加速度、GPSによる位置情報、カメラによる映像資料を収集した。また、潜水漁業者の健康状態を把握するために国崎の海女に質問紙調査を実施した。潜水漁業者の操業実態を調査したところ、操業時間には地域差があり、組合や漁協により定められていた。潜水回数では、国崎の海女が多く、同地域内のカチドとフナドではカチドの方が多く潜水していた。また、水深について同地域内のカチドとフナドを比べるとフナドの方が深く潜水していた。潜水時間を1とした場合の水面休憩時間との比では舳倉島カチド(0.52)、舳倉島フナド(0.73)、国崎フナド(0.73)が1を下回り、DCIのリスクが高いと考えた。潜水作業を行う水深を考慮すると減圧症のリスクが最も高いと考えられるのは舳倉島フナドであった。潜水漁業者の位置情報のデータを地図上にプロットしたところ、カチドはフナドに比べ広範囲にわたって潜水していた。また、ウェアラブルカメラを装着することにより、操業中の様子を潜水漁業者の目線で撮影することに成功した。国崎の海女を対象に健康状態に関する調査を実施し、操業中の症状、普段の症状、および両者の関連を検討した。潜水漁業者の多くが潜水に関する正しい知識を持たないまま経験的に潜水を行っており、潜水障害や健康被害を引き起こしている可能性があることが示唆された。本調査結果の一部は、「DIVING PATTERNS OF BREATH-HOLDDIVERS」と題して12th International Symposium on Maritime Healthにおいて国際学会発表を実施した。本研究では潜水漁業者の作業の実態を明らかにするとともに、潜水漁業が行われている地域での新しい資源管理や環境保護の方法を提示するための資料の収集を目的とした。調査を実施するために、潜水作業者にとりつけてもらうためのデータロガーを開発した。データロガーはEPI社製で、水圧、塩分濃度、水温、加速度およびGPSからの位置情報を得ることが出来るものである。千葉県南房総市白浜町のアマに協力を得て、協力者が実際に漁を行う際に水温・水深・加速度・GPSの記録が可能なデータロガー及び小型ビデオカメラを装着してもらうことにより潜水中のデータおよび潜水漁業者の視点からの映像データを収集した。計116回の潜水時間・水深・インターバルのデータを収集した。フナド(船からの潜水作業者)とカチド(陸からの潜水作業者)のデータでは潜水回数においてフナドの方が少なく、平均潜水時間・平均インターバル・平均水深がフナドの方が大きいという結果が見られた。カメラによるデータでは海中の様子や作業の実態が分かる操業者の視点からの映像データが得られた。本調査ではアマ自身に機器を装着してもらうことで、潜水時間、水深、インターバル時間等のデータ、アマ視点の映像資料やGPSを用いて行動範囲をプロッティングすることができた。また、カメラによる映像とデータロガーのデータをリンクさせることでどの地点でどのような行動をし、漁獲物がどの地点で獲れたかを記録することができた。異なる操業方法を行っているアマには、それぞれの潜水特性が見られた。また、潜水特性において先行研究と比較して地域差が見られ、この潜水特性は身体特性や経験によっても異なると推察された。本調査結果は、平成25年6月に開催される国際学会International Symposium of Maritime Health(Brest,France)において発表を予定している。潜水漁業者を対象として、海洋における潜水操業実態の計測を実施した。潜水操業実態の計測には、神奈川県葉山町の海士3名の協力を得た。潜水漁業者は漁場まで船で移動し、潜行・浮上ともに足ひれなどを用いて自力で行う方法で漁業を実施した。

潜水深度、潜水時間および海面休憩時間を計測するために、小型データロガー(EPI社製)を海士・海女に装着し、潜水深度、潜水時間および海面休憩時間を1秒間隔で計測した。潜水深度は圧力センサーによって計測し、計測誤差は15cm以内であった。小型データロガーの装着には、ウエイトベルトを用いて腰に装着する方法、あるいはデータロガーを背部に取り付けられるよう加工したベストを装着する方法のいずれかを用いた。なお、小型データロガーは円柱(縦104mm、径68mm)の形状であり、重量は約500gであった。海洋における特殊な重労働である「海女・海士漁」について、潜水操業実態と健康状態から、いくつかの安全面に関する検証、ならびに改善策の提案を行った。潜水操業実態に関する安全性の検証について、本稿では特に神経系DCIに言及した。本調査で対象とした地域の海士・海女は、神経系DCI発症の危険が高まると考えられる“一歩手前"の状況で、うまく操業を行っていると考えられた。健康状態に関しては、操業実態の映像記録も参考として考えると、腰痛、膝痛の遠因となっているものがウエットスーツ着用に伴う鉛玉の装着や足ひれの使用と推察された。潜水操業実態および健康状態から推察した海士・海女潜水の安全性および改善策,藤本浩一、千足耕一、山川紘.海洋人間学雑誌, 3(Suppl):36-44, 2015.スポーツ科学潜水競技者(フリーダイバー)を対象とした調査を計画していたが、天候の不順等で調査を実施できなかった。潜水漁業者を対象とした調査は、症例数を増やすと同時に、対象とする漁獲物の違いについても考慮する必要があると考えられる。データの収集に用いるデータロガーの作成について、スペックの交渉等を含め、納期が若干遅くなり、その影響も受けて、機器のテストおよび漁業現場でのデータ収集の交渉が後ろ倒しとなってしまった。また、当初データの収集を予定していた石川県の漁場の漁期が終了となったことから他地域の現場でのデータ収集を依頼することとなったことも影響している。海女・海士の漁期はそれぞれの地域で異なっていることからも、次年度は複数の地域を対象としたデータの収集を行う予定としている。本年度は最終年度でもあることから、これまでに収集したデータと今年度に収集予定のデータを総合的に考察していくことを目標とする。また、前年度実施できなかった潜水競技者を対象としたデータ収集を実施し、息こらえ潜水者の潜水中の実態を把握し、安全な潜水方法を提案する。得られた結果はweb上でも公開することとする。今後はデータ収集のために必要なデータロガーの台数を増やして、データ収集を促進させる予定としている。また、本年度に協力を得た千葉県および同県他地域の漁協、他県の漁協に所属する海女・海士を対象としてデータの収集を進めることとする。これらから得られたデータを年内に処理し、学会にて発表するとともに研究論文を作成する。また、必要に応じてHP上にて成果を公表するものとする。天候不順等で調査の実施ができなかった部分が生じた。潜水競技者を対象としたフィールドでの調査及び実験室でのデータ収集を計画している(2014年7月:沖縄ほか)本年度は、現在までの達成度に記載した通り、やや進捗状況は遅れている。
モノリス型混合作用吸着材料の開発とタンパク質・ペプチド精製プロセスへの応用

前年度に開発したポリメチルメタクリレート多孔質材料にサブミクロンサイズのヒドロキシアパタイト粒子を組み込んだ複合モノリスの改良と分離条件の検討を行った。湿式法にて合成したヒドロキシアパタイト粒子のポリメチルメタクリレート製多孔質材料への複合化量を増加させようとしたが,複合多孔質材料の調製時のポリメチルメタクリレート溶液へ合成した湿潤状態のヒドロキシアパタイト粒子の添加量を増やすと溶液中の水分量が多くなり,相分離法による多孔質材料の作製が困難なことが分かった。一方,合成したヒドロキシアパタイト粒子を乾燥させるとポリメチルメタクリレート溶液中の分散性が低下した。超音波による分散など,種々検討した結果,湿潤状態のヒドロキシアパタイト粒子を乾燥前に界面活性剤溶液に懸濁し,濾過で回収後に乾燥させるとポリメチルメタクリレート溶液での分散が可能となり,複合化量を増やした複合モノリスを作製できることが示された。複合化されている状況は材料を割断して得られた断面を走査型電子顕微鏡によって観察することにより確認した。作製した複合モノリスを円盤状に加工後,特注ホルダーに装着し,牛血清アルブミン(BSA)と牛γ-グロブリン(BGG)をモデルタンパク質として用いたタンパク質の吸着実験を行った。緩衝液中のリン酸濃度を前年度に主として行った10 mMから20 mMに高めて吸着を行うとBSAとBGGの混合タンパク質溶液からBGGが選択的に吸着され,さらにリン酸濃度を400 mMに高めると吸着したBGGが溶出できることが示された。複合モノリスへのヒドロキシアパタイト粒子の複合化量を増加させる方法を開発し,混合タンパク質の分離が可能なことを示せたから。複合モノリスの改良と吸脱着条件の検討を行い,タンパク質・ペプチドのモノリスクロマトグラフィーを行う。ポリメチルメタクリレート多孔質材料にサブミクロンサイズのヒドロキシアパタイト粒子を組み込んだ複合モノリスを作製した。ポリメチルメタクリレート多孔質材料はエタノール-水-混合溶媒を用いた熱誘起相分離法にて作製した。ポリメチルメタクリレートの多孔質構造の制御は溶媒中の水分濃度や冷却温度などを変化させて行った。湿式法にて合成したヒドロキシアパタイト粒子の,ポリメチルメタクリレート溶液への分散方法について検討を行った結果,ポリメチルメタクリレート多孔質材料にヒドロキシアパタイト粒子を複合化することができた。複合化されたことは,材料断面の走査型電子顕微鏡観察ならびにフーリエ変換赤外分光分析にて確認した。この複合モノリスはポリメチルメタクリレートの疎水的な相互作用とヒドロキシアパタイトの静電的な相互作用を併せ持つ混合作用吸着材料として利用可能と考えられる。作製した複合モノリスを円盤状に加工後,特注して製作したホルダーに装着することにより,タンパク質の吸着実験を行った。モデルタンパク質として牛血清アルブミン(BSA)と牛γ-グロブリン(BGG)を用いた。BGGはモノクローナル抗体などの免疫抗体のモデルである。BSAとBGGを10 mMのリン酸緩衝液中に溶解したタンパク質溶液を複合モノリスに透過させたところ,BGGが優先して吸着された。複合モノリス中の未吸着成分を洗浄除去後,400 mMのリン酸緩衝液を透過したところ,BSAとBGGが溶出されたことが,電気泳動法(SDS-PAGE)にて確認された。サブミクロンサイズのヒドロキシアパタイト粒子を組み込んだPMMA多孔質モノリスを作製することができ,タンパク質の吸脱着実験も開始できたから。タンパク質の吸脱着実験を進めてモノリスクロマトグラフィーとしての操作条件の最適化,並びに作製条件の最適化を行う。
ヒト胃癌と前癌病変におけるアポトーシスの分子病理学的意義と関連遺伝子の解析

(1)アポトーシス細胞(ア細胞)は正常胃粘膜では稀であるが、腸上皮化生では散見された。腺腫30病変では軽度異型群より高度異型群でア細胞の分布密度が高かった。腺腫と癌腫が存在していた15症例でア細胞の比率を比較すると、前者では4.9±2.1、後者では3.9±1.1であり、前者で高かった(P<0.05)。他方、増殖活性は後者で比率が高かった。(2)p53遺伝子変異胃癌と野生型p53遺伝子を示す胃癌を各々15例抽出し、ア細胞の分布密度を比較すると、前者では4.9±1.2、後者では3.8±1.4であった(P<0.05)。(3)リンパ球浸潤を伴うEBウイルス関連胃癌17例では他のいかなる組織型の胃癌よりもアポトーシス細胞の分布密度が有意に低かった(P<0.05)。(4)胃癌患者(10症例)に制癌剤である5FUを500mg/日、術前7日間静注したところ、胃癌細胞のアポトーシスは、非投与群(10症例)に比較して有意に増加した。(1)ヒト胃癌胃癌培養細胞株に5FUを1mM添加すると、野生型p53遺伝子を有するMKN-74、MKN-45ではアポトーシスが生じ、p21/waf1およびBax蛋白の発現が亢進した。他方、変異型p53を有するMKN-28とp53欠失KATO-IIIではアポトーシスが誘発されなかった。(2)ヒト胃癌培養細胞株6株では種々の程度にFAS抗原が発現していることが確認された。発現レベルは野生型p53遺伝子を有するMKN-74とMKN-45で高かった。抗FAS抗体(1000ng/ml)添加によるアポトーシス誘発はFAS抗原発現量と相関していた。(3)タキソ-ル(1μM)は細胞をG2/M期に停止させ、その後にアポトーシスを誘発することがヒト胃癌培養細胞株で示されたが、p53遺伝子変異とは関連がなかった。以上、in vivoおよびin vitroの検討からヒト胃癌細胞におけるアポトーシス誘発には様々が経路が存在し、情報伝達の一部はp53蛋白が関与していることを明らかにした。平成7年度は切除胃癌標本を用い、主としてin vivoにおけるアポトーシスの発現と意義を解析した。結果は以下のように要約される。1)正常胃粘膜では極めて稀にアポトーシス細胞が見いだされた。腸上皮化生では腺底部でTUNELシグナル陽性のアポトーシス細胞が見いだされたが、分布密度は完全型よりも不完全型腸上皮化生腺管で高かった。腺腫30病変では多数のアポトーシス細胞が比較的、瀰慢性に分布していたが、軽度異型群より、高度異型群で分布密度が高かった。

また、腺腫と癌腫が同時に存在していた15症例でアポトーシス細胞の比率を比較すると、前者では4.9±2.1、後者では3.9±1.1であり、前者で有意に高かった(P<0.05)。他方、増殖活性をKi-67陽性細胞は後者で比率が高かった。腺腫におけるアポトーシス発現の意義として、次の2点が示唆された;(1)腺腫ではDNA障害細胞に対を排除する機構が存在、(2)腺腫がより高い増殖活性を獲得するために不要な細胞を排除(投稿中)。2)p53遺伝子変異を有する胃癌と野生型p53遺伝子を示す胃癌を各々15例抽出し、アポトーシス細胞の分布密度を検討した。p53遺伝子変異はPCR-SSCP法で確認した。アポトーシス細胞の分布密度は前者で4.9±1.2、後者では3.8±1.4であり、有意差があった(P<0.05)。他方、野生型p53遺伝子で誘導されるp21蛋白の発現に差はなかった。胃癌細胞におけるアポトーシスの一部はp53蛋白を介した細胞周期依存性である(投稿中)。3)リンパ球浸潤を伴うEBウイルス関連胃癌を17例収集して、アポトーシス細胞を検討した。かかる胃癌では他のいかなる組織型の胃癌よりもアポトーシス細胞の分布密度が有意に低かった(P<0.05)。4)in vitroの実験系を確立する目的で、ヒト胃癌培養細胞8株におけるFAS抗原、Bcl-2蛋白、ICE遺伝子について検討し、種々の程度に発現していることを確認した。平成8年度は切除胃癌標本を用いたin vivoの検討に加え、ヒト胃癌培養細胞株におけるアポトーシス誘発因子とその意義を解析した。結果は以下のように要約される。1.胃癌患者(10症例)に制癌剤である5FUを500mg/日、術前7日間静注したところ、切除標本における胃癌細胞のアポトーシスは、非投与群(10症例)に比較して有意に増加した。2.ヒト胃癌胃癌培養細胞株に5FUを1mM添加したところ、野生型p53遺伝子を有するMKN-74、MKN-45ではアポトーシスが生じ、この過程でp21/waf1およびBax蛋白の発現が亢進した。他方、変異型p53を有するMKN-28とp53遺伝子が欠失したKATO-IIIではアポトーシスが誘発されなかった。従って、5-FUによるアポトーシス誘発の過程においてはp53蛋白が関与していることが示された。3.ヒト胃癌培養細胞株6株では種々の程度にFAS抗原が発現していることがフローサイトメトリーとウエスタンブロット法で確認された。発現レベルは野生型p53遺伝子を有するMKN-74とMKN-45で高かったが、KATO-III(完全欠失)でも見いだされた。抗FAS抗体(100ng/ml)添加によるアポトーシス誘発はFAS抗原発現量と相関していた。4.タキソ-ル(1μM)は細胞をG2/M期に停止させ、その後にアポトーシスを誘発することがヒト胃癌培養細胞株で示された。しかしながら、アポトーシス誘発率とp53遺伝子変異とは関連がなかった。なお、エタノール(5%あるいは10%)や温熱(44°C)でアポトーシス誘発を試みているが、p53遺伝子変異との関連は明かでない。以上、in vivoおよびin vitroの検討からヒト胃癌細胞におけるアポトーシス誘発には様々な経路が存在し、情報伝達の一部はp53蛋白が関与していることを明らかにした。