hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
NMRイメ-ジング及び固体高分解能NMRの物質科学への応用:物性と内部構造変化

申請者らはムライトの生成過程および最終生成物は出発物質の化学組成に強く影響されると考えており、最終生成物と同一組成を持つアルミノシリケ-トをムライト前駆体として提唱し、その焼成過程と最終生成物の構造を27ーAlおよび29ーSi固体高分解能NMRで追跡した。非晶質SiO_2やγーAl_2O_3の混入のない3/2タイプ(3Al_2O_3・2SiO_2)のムライトを生成することが出来た。(J.Am.Cer.Soc.投稿予定)また生成過程において5配位のAlが生成されアンダルサイト様の構造を経由してムライト構造を形成することを明らかにした。(J.Am.Cer.Soc.投稿予定)2/1ムライトと3/2ムライトの構造は空孔の数にちがいがあるだけで、本質的には同じであることも明かとなった。(Chem.Lett.投稿予定)2.粘土鉱物における水の吸着機構の解明:モンモリロナイトおよびベントアイトに吸着された水の存在状態を明らかにするために17ー0と1ーHのNMRを測定した。緩和時間が非常に短いために定量的な検討をするまでには至っていない。測定条件の検討が必要である。3.ゴム成形品中の可塑剤や硬化剤の分布と物性:サ-フェイスコイルをもちいて31ーP核のNMRイメ-ジングを測定した。NR中のTNPおよびTOPを画像化することに挑戦したところ、被写体の形に一様な明画像が得られた。硬化剤の分布を知るためにはより高い空間分解能が必要である。このためには新しいコイルの開発が必要である。1.高分子化合物におけるクラック発生機構の解明:ボリカ-ボネ-トおよびポリチルメタクリレ-トとメタノ-ル、エタノ-ル、DMF、DMSO、アセトン、水との間の相互作用をNMRmicroimagingで視覚化後、クラック発生の時間変化、新たに生じたクラック面と従来の面の溶媒に対する応答性の違い、溶媒の浸透速度、高分子の膨潤速度を求めた。常磁性化合物による速度論的取扱いは、継続して研究中である。2.粘土鉱物における水の吸着機構とIntercaltion:(1)水分含量の少ない試料に関しては^<17>O, ^<23>Na, ^<27>Al, ^<29>Siの固体MAS/NMRにより水吸着に伴う粘土鉱物の状態変化を検討した。(2)モンモリロナイトやベントアイト、サポナイトの層間陽イオンは、他の陽イオンで容易に交換される事を利用して間接的に層間における反応性を検討した。粘土鉱物の表面電荷密度と電荷分布およびそれらに依存して決まる層間の広がりの度合いが層間の分子の挙動を決める重要な因子である事が明かとなった。(Anal.Sci.,7:431ー434(1991))3.非晶質アルミノシリケ-トの焼成過程における構造変化:アルカリ金属イオン(Li^+、Na^+、K^+)の共存下においては、結晶化過程におけるAlの配位状態の変化及び最終生成物の構造に差異のある事が解明された。(J.Am.Cer.Soc.,投稿準備中)Li、NaおよびK核の固体NMRによりアルカリ金属の状態を検討中である。4.アルミノシリケ-トのAlをPに、SiをGeに置換した化合物の合成を終了し、焼成過程の熱測定、粉末X線測定PーおよびAlーNMR測定を終了。ラセミックス生成機構の違いを見出した。(J.Am.Cer.Soc.,投稿準備中)5.AlーEDTA錯体の反応性の研究:本研究の過程で5配位されたAl錯体の存在とAlイオンの周囲の配位子の電荷の対称性は高い事がNMRから示唆された。
吸収性プレートを用いた顎骨欠損部での新しい骨延長法の開発

仮骨延長法を用いたインプラント応用研究の現状把握、情報交換のため国際学会(American Academy of Implant Dentistry)へ参加した。仮骨延長に関するデバイスや術式に関する報告は従来ものの応用に限られていた。これは仮骨延長法自体が技術的に難しく臨床で求められる低侵襲・低リスクの方向性とはかけ離れているためとも考えられた。本研究の方法は従来の仮骨延長法と異なり骨膜を挙上する方法で骨を分割する必要が無く、吸収性プレートを使用するために仮骨延長装置の除去も必要が無いので、技術的に容易で低侵襲な方法である。上記の概念の検討のために従来のチタン製歯槽部仮骨延長装置を使って骨形成の可能性について検討を行い、さらに吸収性プレートを応用した仮骨延長装置を用いて骨形成の比較検討を行った。実験には骨代謝の活発な日本白色家兎を用いて、チタン製およびポリ-L-乳酸(PLLA)製の仮骨延長装置を下顎骨骨膜下に埋入した。7日間の治癒期間の後、1日に0.8mmずつ4mmまで拡大させ、仮骨延長装置拡大終了2週後、4週後に屠殺し、標本を採取した。2週後例ですでにチタン製およびPLLA製の仮骨延長装置と母床骨の間に新生骨様の組織が形成されていた。4週後例ではチタン製およびPLLA製の仮骨延長装置と母床骨の間に形成された新生骨様の組織は成熟し、特にPLLA製の仮骨延長装置を用いたものでは新生骨様組織がより成熟していた。従来の仮骨延長法では骨と骨との間に仮骨を形成させていたが、本研究によって骨と骨膜との間でも仮骨延長が可能であり、さらに仮骨延長装置はチタンおよびPLLAのような吸収性プレートでも仮骨形成が可能であることが示唆された。本年度は、仮骨延長法を用いたインプラント応用研究の現状把握、情報交換のため国内学会(日本口腔インプラント学会)へ参加したが、実験的研究および臨床研究でも従来の仮骨延長法は技術的に難しく、臨床で求められる低侵襲、低リスクの方向とはかけ離れているとの報告も見られた。本研究の方法は骨を分割してその間にできる仮骨を延長させる従来の仮骨延長法と異なり、分割する骨の代わりに薄い吸収性プレートを骨膜下に挿入してこれを徐々に挙上して仮骨を形成させる方法で、技術的には容易である。本年度は、上記の概念の検討のために従来の歯槽部仮骨延長装置を使って骨の増量の可能性について観察を行った。具体的には骨代謝の活発な家兎を用いて、チタン製の仮骨延長装置を下顎骨骨膜下に埋入し、プレートがずれないように骨膜へ縫合固定した。皮質骨は血流が少なく活発な骨形成が期待できないので、皮質骨に骨髄までのアクセス孔をあけてプレート下の骨形成を促し、10日間の治癒期間の後、1日に1mmずつ5mmまで拡大させ、2週後、4週後、12週後に屠殺し、標本を採取した。しかし、創の細菌感染等が認められる個体もあったため、今後吸収性プレートでの本法の応用にあたっては切開法、仮骨延長器の固定法、および抗生剤の投与等の術式の変更が必要と思われた。来年度前半には本年度で採取した標本から脱灰薄切切片を作製し、オステオポンチン、オステオカルシン、I型コラーゲンのmRNAを検出して骨形成にかかわる遺伝子の発現と局在の同定を完了する予定である。さらに本年度の実験結果をふまえ、仮骨延長装置を吸収性プレートに置き換えて検証する。本年度は、仮骨延長法を用いたインプラント応用研究の現状把握、情報交換のため国内学会(日本口腔インプラント学会)へ参加した。仮骨延長に関する報告は限られていたが、仮骨延長法が技術的に難しく臨床で求められる低侵襲・低リスクの方向性とはややかけ離れているためとも考えられた。本年度は、上記の概念の検討のために従来のチタン製歯槽部仮骨延長装置を使って骨の増量の可能性について観察を行った。しかし、前年度と同様に創の細菌感染等が認められる個体もあったため、今後吸収性プレートでの本法の応用にあたっては切開法、仮骨延長器の固定法、および抗生剤の投与等の術式の変更が必要と思われた。骨形成にかかわる遺伝子の発現と局在の同定については個体差があるために、例数を増やして検討する予定である。

これは仮骨延長法自体が技術的に難しく臨床で求められる低侵襲・低リスクの方向性とはかけ離れているためとも考えられた。本研究の方法は従来の仮骨延長法と異なり骨膜を挙上する方法で骨を分割する必要が無く、吸収性プレートを使用するために仮骨延長装置の除去も必要が無いので、技術的に容易で低侵襲な方法である。上記の概念の検討のために従来のチタン製歯槽部仮骨延長装置を使って骨形成の可能性について検討を行い、さらに吸収性プレートを応用した仮骨延長装置を用いて骨形成の比較検討を行った。実験には骨代謝の活発な日本白色家兎を用いて、チタン製およびポリ-L-乳酸(PLLA)製の仮骨延長装置を下顎骨骨膜下に埋入した。7日間の治癒期間の後、1日に0.8mmずつ4mmまで拡大させ、仮骨延長装置拡大終了2週後、4週後に屠殺し、標本を採取した。2週後例ですでにチタン製およびPLLA製の仮骨延長装置と母床骨の間に新生骨様の組織が形成されていた。4週後例ではチタン製およびPLLA製の仮骨延長装置と母床骨の間に形成された新生骨様の組織は成熟し、特にPLLA製の仮骨延長装置を用いたものでは新生骨様組織がより成熟していた。従来の仮骨延長法では骨と骨との間に仮骨を形成させていたが、本研究によって骨と骨膜との間でも仮骨延長が可能であり、さらに仮骨延長装置はチタンおよびPLLAのような吸収性プレートでも仮骨形成が可能であることが示唆された。
エピゲノム制御を介した糖・脂質代謝関連遺伝子の転写制御機構

1.昨年度の検証により、SREBP-1cとChREBPβは組織によって遺伝子発現量が大きく異なるが、このような発現制御機構には、従来までに知られているようなDNAメチル化を介した転写制御機構ではなく、全く別の転写制御機構が関与する可能性が示された。2.スターチ食、もしくはフルクトース食をマウスに10週間与えて脂肪肝を進行させた後の肝臓における遺伝子発現量を測定した。その結果、スターチ食を摂取させたマウスと比較して、フルクトース食を摂取させたマウスでは肝臓におけるChREBPβの発現量が増大し、これと同調して解糖系・脂質生合成系酵素の発現量が増大した。この時、フルクトース食の摂取により肝臓SREBP-1cのmRNA発現量も増大したが、脂質生合成系酵素の転写反応に直接的に関与する活性型SREBP-1のタンパク質発現量に変化は認められなかった。以上の知見から、フルクトースの過剰摂取などによる脂肪肝の進行には肝臓におけるChREBPβの発現増大が関与する可能性が考えられた。3.アデノウイルス遺伝子導入法を用いて、肝実質細胞、およびマウス個体にChREBPβを過剰発現させた際の肝臓における変化を調べた。その結果、ChREBPβの過剰発現により、肝実質細胞、およびマウス肝臓における解糖系・脂質生合成系酵素の発現量が顕著に増大した。肝実質細胞では通常の培養条件では見られないような脂肪滴の形成と細胞内中性脂肪量の増大が認められ、マウス個体では顕著な脂肪肝の進行が確認された。以上の検証により、ChREBPβの発現増大は肝臓における脂肪蓄積を促進し、脂肪肝を進行させる方向に働くことが実験的に証明された。本研究により、肝臓におけるChREBPβの機能を明らかにしたことで、「糖類の過剰摂取に伴って脂肪肝が進行する分子機構」の一端を示すことができた。26年度が最終年度であるため、記入しない。1.本研究で着目するSREBP1、ChREBPアイソフォームの組織における発現分布を調べたところ、SREBP1aとChREBPαはユビキタスに発現しているのに対し、SREBP1cとChREBPβは組織によって遺伝子発現量が大きく異なることが分かった。このような組織における遺伝子発現量の違いはエピゲノム制御の一つとして知られる「プロモーター領域におけるDNAメチル化」が関与している可能性が考えられる。そこで、各組織におけるSREBP1c、ChREBPβプロモーター領域におけるDNAメチル化量をバイサルファイトシーケンス法により測定した。その結果、いずれの組織においても両遺伝子のプロモーター領域は非メチル化状態にあり、組織におけるDNAメチル化量に違いは認められなかった。上記の実験結果は、SREBP1cとChREBPβは組織によって遺伝子発現量が大きく異なるが、このような発現制御機構には、従来までに知られているようなDNAメチル化を介した転写制御機構ではなく、全く別の転写制御機構が関与する可能性を示唆するものである。2.スターチ食もしくはフルクトース食をマウスに10週間与えて脂肪肝を進行させた後の肝臓における遺伝子発現量を測定した。その結果、スターチ食を摂取させたマウスと比較して、フルクトース食を摂取させたマウスでは肝臓におけるChREBPβの発現量が増大し、これと同調するように解糖系・脂肪合成系酵素の遺伝子発現量が増大していた。この時、フルクトース食の摂取により肝臓SREBP1cのmRNA発現量も増大したが、脂肪合成系酵素の転写反応に直接的に関与する活性型SREBP1のタンパク質発現量に変化は認められなかった。以上のような知見から、フルクトースの過剰摂取などによる脂肪肝の進行には肝臓におけるChREBPβの発現増大が関与する可能性が考えられた。

本研究により、肝臓におけるChREBPβの機能を明らかにしたことで、「糖類の過剰摂取に伴って脂肪肝が進行する分子機構」の一端を示すことができた。26年度が最終年度であるため、記入しない。「SREBP1、ChREBPアイソフォームの組織分布にエピゲノム制御が関与するか」という点についてはDNAメチル化は関与しないという明確な解答を得ることができたため。加えて、フルクトース誘導性脂肪肝の進行に肝臓ChREBPβの発現増大が関与するという、脂肪肝進行メカニズムの分子実体を解明する手がかりを得ることに成功したため。これまでに得てきた研究成果は、肝臓におけるChREBPβの発現が脂肪肝の進行に関与することを強く示唆するものではあるが、「どのような分子機構でフルクトースの摂取によりChREBPβの発現が増大するのか」「フルクトース誘導性脂肪肝の進行において肝臓のChREBPβの発現増大がどの程度のウエイトを占めるか」については依然として十分な結論が得られていない。今後は、アデノウイルスを用いた強発現実験、shRNAを用いた遺伝子ノックダウン実験を軸に、肝臓におけるChREBPβの機能の解析を進めていく予定である。
伝統的舞踊の動作単元の分業と記号化の試み

1。伝統的舞踊のうち、技法の「型」や作品構成の「様式」がきまっているものについて、動作特性を指標に共通の単元化と分類をこころみた。そのさい、Labanotation、Benesh notationの譜記法をとりいれ、記述の普遍性をはかっている。2。記録・保存のための記号化と、分析のための記号化を峻別することにした。理由は、空間的なものと時間的なものを同時にみたす舞踊の記号化は、困難だということによる。3。演舞様式のきまっているもの、たとえば「能」の舞囃子やバレエのヴァリアシオンにおける「型」の連鎖を対象に、連鎖の推移を確率過程とみなし、エソロジーで用いられている行動連鎖の解析手法の一つ、単純マルコフ過程の分析法を適用した。4。結果から、舞踊の時間的形態の推多分析に有効だという見通しをえた。5。ある「型」がその直前の「型」とどう関連するかの単純マルコフ過程にくわえ、現在、2つ前、3つ前の「型」との関連をみるため、多重マルコフ過程の分析の可能性をさぐっている。1。2。3。4。5。
光音響分光法(PAS)による金属の腐食及びめっきのその場測定

光音響分光法(PAS)は、従来液体中の微量物質の検出などの目的で使用されていたが、近年、我々のグル-プによって本法が固液界面のin situ観測が可能になることが見い出された。当該年度においては以下のようなことを試みた。(1)本法を走査型に改良し、ニッケルの電析過程における表面の2次元的なラフネスの変化をin situに追跡することができた。また、電析表面をSTMによりex situな状態で観測し、PASの結果と比較検討した。(2)同法をアルミニウム合金の孔食表面の評価法として用い、その孔食の進行度や有機系孔食抑制剤の効果を評価することに成功した。(3)プリント配線基板の作製工程で用いられるベ-クライト基板上銅箔への銅めっき過程に本法を適用し、そのめっき皮膜のラフネスと厚さの変化を同時にかつ、in situな状態で評価することができることを明らかにし、本法が実際のプリント配線基板の生産ラインに組み込み可能であることを示した。(4)同法をNiーB系の無電解めっき過程に適用し、そのラフネスや厚さがin situに評価できることを見いだすとともに、初期のめっきのcovering rateや応力割れを検出することに成功し、従来、究極の夢とされていた無電解めっき過程のin situ観測に新機軸を開いた。(5)銀電極上への鉛のアンダ-ポテンシャル析出過程にPASを適用し、単原子レベルの吸着である同過程を完全にモニタ-することができた。これは本法が非常に高感度な測定法であることを裏付けるものである。以上5つのテ-マに対しその成果は全て研究論文、学会発表の形で報告済みである。
社会的時間割引の抑制に関わる死の想像の神経基盤の検討

本研究は将来の死を想像することが、時間割引(時間経過に伴い個人で獲得する報酬の主観的価値が減衰する現象)と社会的時間割引(時間経過に伴い集団で獲得する報酬の主観的価値が減衰する現象)に及ぼす影響を明らかにすることを目的としている。とりわけ、機能的磁気共鳴画像法(functional magnetic resonance imaging: fMRI)により、将来の自分自身の死が関連する出来事を想像している際の神経活動を測定し、それらの神経活動と社会的時間割引率の関連を検討する。今年度は、将来の自分自身の死が関連する出来事を想像している際の神経活動と配偶者の死が関連する出来事を想像している際の神経活動の違いを検討した。また、昨年度に実施したfMRI実験(実験参加者に自身の余命に関連する刺激を呈示し、それを参照しながら従来の時間割引、そして社会的時間割引を測定する課題)のデータ解析を実施した。とりわけ後者に関しては、昨年度までのデータ解析によって、実験参加者が短い余命を参照し、意思決定を下す際に下頭頂小葉の活動が高いことが確認されていたため、この脳領域を中心に脳領域間結合解析を進めた。また、時間割引および社会的時間割引への余命参照効果の個人差を脳画像データから予測可能かどうかについて検討を進めた。本研究で得られた解析結果については、学会・研究会などで報告する予定である。さらに、最終的な研究成果については海外の学術雑誌で報告する予定である。本研究は将来の死を想像することが、社会的時間割引(時間経過に伴い集団で獲得する報酬の主観的価値が減衰する現象)に及ぼす影響を明らかにすることを目的としている。今年度の研究では、行動実験によるデータの収集とともに、脳画像データの取得に着手している。行動データの分析結果から、死関連の出来事を想像することは、従来の時間割引(時間経過に伴い個人で獲得する報酬の主観的価値が減衰する現象)を増加させる一方で、社会的時間割引への影響は少ないことが確認された。したがって、これらの結果は、将来の自分自身の死を想像することは、時間軸上の価値を修飾する作用を持つが、その修飾作用が個人だけの報酬の場合と集団の報酬の場合とで異なることを示唆する。脳機能画像データの取得は来年度も引き続き行い、データ取得完了後に解析を実施する。特に、自分自身の未来の死を想像するプロセスと、その想像した内容を意思決定に反映するプロセスを画像解析により検討することで、死を想像することがどのようにわれわれの時間軸上の価値観を左右するのかを明らかにする予定である。なお、本研究で得られたデータについては、学会・研究会等で報告する予定であり、最終的な研究成果については海外の学術雑誌で報告する予定である。現在までに画像データの取得が順調に進んでおり、来年度以降もデータ取得を継続して行う予定である。データ取得が完了次第、解析に力を入れて進めていく予定である。3年間の研究期間内に、一定の研究成果を得ることが見込める状況にある。本研究は将来の死を想像することが、社会的時間割引(時間経過に伴い、他者が獲得する報酬に対する主観的価値が減衰する現象)に及ぼす影響を明らかにすることを目的としている。とりわけ、機能的磁気共鳴画像法(functional magnetic resonance imaging: fMRI)により、将来の自分自身の死が関連するものを想像し、意思決定を下す際の神経活動を測定し、それらの神経活動と社会的時間割引の関連を検討する。今年度の研究では、実験参加者に余命に関連する刺激を呈示し、それを参照しながら従来の時間割引(時間経過に伴い、自己が獲得する報酬に対する主観的価値が減衰する現象)、そして社会的時間割引を測定する課題を実施した。その結果、いずれの課題においても余命情報として短い余命に関するものが呈示された場合に割引率が大きくなることが確認された。しかしながら、その効果は従来の時間割引において生じやすく、社会的時間割引においては生じにくいことが確認された。また、画像データ解析からは、短い余命を参照し、意思決定を下す際に下頭頂小葉の活動が高いことも確認された。加えて、上記の時間割引・社会的時間割引への効果に関してこの領域の活動が関与していることも明らかになった。本研究で得られたデータについては、学会・研究会などで報告する予定であり、最終的な研究成果については海外の学術雑誌で報告する予定である。今年度は画像データの取得が非常にスムーズに行うことができ、解析を行う上で十分なデータを取得することが出来た。来年度は解析を中心に力を入れて進めていく予定である。また3年間の研究期間内に、一定の研究成果を得ることが見込める状況にある。

また、昨年度に実施したfMRI実験(実験参加者に自身の余命に関連する刺激を呈示し、それを参照しながら従来の時間割引、そして社会的時間割引を測定する課題)のデータ解析を実施した。とりわけ後者に関しては、昨年度までのデータ解析によって、実験参加者が短い余命を参照し、意思決定を下す際に下頭頂小葉の活動が高いことが確認されていたため、この脳領域を中心に脳領域間結合解析を進めた。また、時間割引および社会的時間割引への余命参照効果の個人差を脳画像データから予測可能かどうかについて検討を進めた。本研究で得られた解析結果については、学会・研究会などで報告する予定である。さらに、最終的な研究成果については海外の学術雑誌で報告する予定である。来年度にはデータ取得を完了し、本格的に解析を進めていく予定である。特に、将来の自分自身の死の想像に関わる神経基盤を特定するとともに、それらの神経活動が集団報酬の意思決定を修飾するプロセスの検討を進めていく。また、研究の進捗状況に応じて、集団の種類(e.g.,親しい他者で構成される集団、血縁者で構成される集団)によって、死を想像する影響が異なるかどうかについても検討を進める。来年度は本格的に解析を進めていく予定である。とりわけ、単一脳領域の活動だけでなく、複数の脳領域を対象に脳領域間の機能的結合解析などを進めることで、死を想像している際の脳機能について統合的にアプローチする。当初の予定よりも脳機能画像データの取得に時間がかかり、解析に用いるパソコンの購入を次年度に見送ったため、次年度使用額が生じた。
超対称標準模型の拡張の現象論の理論的研究

素粒子理論における標準模型は重力と標準模型のエネルギースケールの間の階層性の問題を持つが、近年それに対する試みとして高次元理論の枠組における解決の可能性が議論されている。一方この枠組では標準模型の物質場は3次元面に拘束されていることが期待されている。我々は面に拘束されている物質場と拘束されていないゲージ場のカルザ・クライン(KK)モードの相互作用について考察をした。面を作るダイナミクスを無視しデルタ関数的に面を導入した場合物質場と全てのゲージ場のKKモードは同じ強さで結合するが、面を作るダイナミクスを考慮し厚さを導入すると、面の厚さの逆数以上の質量を持つKKモードとの結合は指数関数的に落ちることを示した。またRandollとSundrumは5次元重力においてテンションを持った面があるとき指数関数的なメトリックが導かれ、それが階層性の解になることを示した。我々はこのメトリック上に面に拘束されないフェルミオン、ゲージ場、ヒッグス場を導入し標準模型を構成できることを示した。さらに超対称標準模型のフレーバーの問題を重いスクォーク、スレプトンで解決するというアイデアに対し考察をした。超対称標準模型は標準模型を越える理論として注目されている.この理論においてレプトンの世代数の保存は自動的でなく,その結果標準模型では存在しないμ+eγ等の事象が予言される.久野は超対称模型におけるレプトンの世代数を保存しない事象の理論的研究を行った.SuperKAMIOKANDE等によって出された実験結果はニュートリノの質量の存在とそれによる,ニュートリノの振動を示唆しており,そのデータを使い超対称模型のレプトンの世代数を保存しない事象の解析を行い,将来の実験でそれらを観測される可能性がある事を示した。
高エネルギー電子線と高分子材料の相互作用に関する研究

本研究課題では高分子材料への高エネルギー電子線照射を実験と数値計算で検討を行った.新しい手法として感温液晶マイクロカプセル法を電子線照射実験に適用し,試料内の温度分布の可視化と定量化を行った.また一方ではこの実験の理論解析モデルを構築し,モンテカルロ法に基づいたシミュレーションコードを開発した.これらの実験結果とシミュレーション結果を比較することが行え.それらの結果が比較的良い一致を示すことがわかった.本研究課題では高分子材料への高エネルギー電子線照射を実験と数値計算で検討を行った.新しい手法として感温液晶マイクロカプセル法を電子線照射実験に適用し,試料内の温度分布の可視化と定量化を行った.また一方ではこの実験の理論解析モデルを構築し,モンテカルロ法に基づいたシミュレーションコードを開発した.これらの実験結果とシミュレーション結果を比較することが行え.それらの結果が比較的良い一致を示すことがわかった.本年度は電子線照射実験時のエネルギー吸収分布に関して定量化を行うための手がかりとして,非接触・非侵襲でリアルタイムに対象とする資料の内部温度分布を可視化が可能である,感温液晶マイクロカプセル(MTLC)による方法を検討した.具体的には温度の定量化手法の開発を行った.そのために非圧縮デジタル画像を取得できるCCDカメラシステムを導入し可視化画像の劣化の低減を試み,温度分布を定量化するのに十分な画質の画像を得ることが出来た.また定量化において,温度をパラメータとするMTLCの発色特性をRGB色空間上の軌跡として表示し,温度と色を1対1対応させる校正手法を開発し,温度定量化の精度を高めた.この手法は測定の入射光,観測するためのカメラの仕様に係わらず使用できるので,MTLCを用いた温度定量化手法をより実用的にできるという点で意義がある.また上記の定量化手法を利用し高エネルギー電子線照射時の透明エポキシ試料内の電子線による温度上昇分布の測定を行った.入射電子の加速エネルギーに関して1MeV,1.5MeV,2.0MeVの3条件で実験を行った.その結果PEA法(パルス静電応力法)により得られる粒子蓄積位置よりも浅い位置に温度上昇のピーク位置があり,入射電子線により運動エネルギーが照射材料に付与される位置が粒子蓄積位置よりも比較的浅いことがわかった.また今回の加速エネルギーの条件で,粒子蓄積位置と温度が最大値を取る位置の比を取ると,電子の加速エネルギーに係わらず,ほぼ一定の値(0.3)になることが分かった.この結果を物理的に説明するために,次年度に向けて相対論的な効果を取り入れた粒子シミュレーションコードの開発に着手した.本年度は,感温液晶マイクロカプセル(MTLC)による温度可視化データの定量化の改善と電子線照射時の物質中での電子と高分子材料の相互作用を扱うシミュレーションコードの開発を行った.MTLC法では温度上昇と電子線による被照射材料へのエネルギー吸収を関連づけることを目的にしている.このためMTLCにより可視化された温度分布を精度よく定量化する必要がある.前年度までは非圧縮デジタル画像を取得する事による画質の改善と,定量化においては温度をパラメータとするMTLCの発色特性をRGB色空間上の軌跡として表示し,温度と色を1対1対応させる校正手法を開発し,温度定量化の精度を高めた.しかしこの手法では照明用電源の不安定性に起因する入射光強度の変化,また試料中に分散させるMTLC濃度の不確かさにより,定量化された温度に不確実性が生じる問題点があった.本年度はこれらの不確かさにより生じる色空間中の曲面を利用した温度定量化補償法を開発し,その手法がロバストな定量化手法であることを実証した.さらに今年度は高エネルギー電子と被照射材料との相互作用モデルを検討し,相対論的な効果を取り入れた粒子シミュレーションコードの開発を行った.今年度はこの粒子コードを用いて,実験の条件を考慮した予備的なシミュレーションを行った.この予備的な検討の結果,1.OMeV,1.5eV,2.OeVの電子の加速エネルギーの条件において,シミュレーションによる電子の蓄積位置と実験においてPEA法(パルス静電応力法)で測定した実験結果にある程度の一致性が確認された.またシミュレーションによる反跳電子の蓄積位置とMTLC測定により得られた温度上昇が最大になる位置に関してその表面からの深さがほぼ一致するような結果が得られた.本年度は,前年度の予備的検討に基づき引き続き高分子材料と高エネルギー粒子線の相互作用に関する荷電粒子,電磁界,物質内のエネルギー輸送に関する練成シミュレーションコードの開発を行った.また実際の電子線照射実験を開発したシミュレーションコードを用いて計算機で再現を行うことを検討した.さらに電子線照射以外の陽子線照射とそれに伴う材料内での陽子の振る舞いを検討した.これにより,絶縁材料に荷電粒子が入射した時の材料への影響をより幅広く検討できるシミュレーションコードへの発展が期待できる.さらに前年度考案した感温液晶マイクロカプセルに関する精度の良い色温度校正法を利用して,電子線照射実験における熱輸送に関して実験によるデータを収集し,実験データから材料内の熱輸送に関して定量的な評価と熱輸送についてのメカニズムについてそのモデルを構築した.前年度に引き続き電界強度のマイクロ化された液晶カプセルによる電界分布の検出可能性を検討したまた,シミュレーション結果,測定結果を比較し,電子線の材料内での蓄積のメカニズム,電子線照射による材料内の熱輸送メカニズムに関する考察を行った.その結果入射の1次粒子は主に電荷の蓄積に寄与し,1次粒子による反跳粒子は主に熱の輸送に寄与していることが予測された.この結果は絶縁体内に相対論的エネルギーを持つ電子が入射した時の物理過程に関して新たな知見を与える重要なものであると考えられる
ホイッグ・リベラリズムとバイロンの研究

ホイッグを中心としたイギリス政治体制とByronの関係を明らかにした。ホイッグには進歩的であるが、同時に体制擁護的側面があることを突き止め、Byronにも同様な政治的特性があることを示した。The Giaour、The Bride of Abydos、The Corsair等の初期東方物語詩群、The Islandという後期の詩、三つの政治演説等を分析して、彼のラディカリズムは必ず貴族的な保守主義によって抑制されていることを明らかにした。1バイロンを取り巻くホイッグ党を中心としたイギリス政治体制について研究した。穏健派リーダーCharles James Foxの著作を研究し、同党が「人民の友」、「平和主義」、「自由主義」を政治的理念として標榜していることがわかった。Byronの盟友John Cam Hobhouseの政治的パンフレットも研究した。彼がアメリカ革命をその起源を名誉革命に求めつつ賞讃しながらも、民衆への普通選挙権付与を拒絶するという矛盾的態度を示していることがわかった。急進派のホイッグたちFrancis Burdett、John Cartwright、Thomas Erskineらも人民の権利拡大を目指した革命の達成には消極的であることがわかった。このような民衆の友であるが、民衆を信用しない傾向がByronにもあることが、彼の国会処女演説や手紙や言行録の中でも確認された。つまり、ホイッグ・リベラリズムとは民主主義と貴族主義の融合を特徴とし、民衆への保護と支配願望を同時に満たす本質的に矛盾を孕んだ政治的イデオロギーなのであった。2ロマン派のオリエント作品に見られる政治性とByronのそれを比較検討した。James Morier、Samuel Rogers、Walter Savage Landor、Thomas Moore、Robert Southey、Bulwer-Lyttonらの作品とByronの詩を比較研究する中で、バイロンが彼らよりも遙かにコスモポリタニズムに貫かれたオリエント観をもっていることがわかった。Byronはオリエントを舞台とした革命詩においてコスモポリタンな視点を保持しつつも、一貫して革命を頓挫させ続けている。このことにより、彼が民主革命を求めつつも貴族支配の維持を求めるホイッグ・リベラリズムの潮流の中にいることが明確になった。1.ホイッグを中心としたイギリス政治体制について研究を進めた。穏健派リーダーCharles James Foxの著作を研究する中で、彼が政治理念として「人民の友」、「平和主義」、「自由主義」を掲げていることが判明した。ただ、彼には矛盾があった。彼はアイルランドにおけるカトリック教徒解放には、民主主義的態度を示している。しかし、彼は結局、同国にイングランドと同等の政治的地位を与えることには反対している。Byronの国会演説を分析し、彼がFoxと同じ立場をアイルランドに対して取っていることが判明した。Byronと比べ、John Cam Hobhouseは急進的な政治的立場を維持している。同じことは、Francis Burdett、John Cartwright、Thomas Erskineにも言える。彼らはホイッグと同じ主張を唱えつつ、具体的な民主的改革を進めている。Byronがイタリア革命やギリシア解放という大規模な民主化運動に関わりつつ、ホイッグの急進派より貴族的であることは興味深い。2.Byronの詩のホイッグ・リベラリズム的傾向について、The Islandを取り上げて研究した。大英帝国の軍艦、Bounty号における反乱の実態とByronのそれへの反応を検討した。反乱後の裁判、乗組員たちの証言、Bligh艦長の著作等から、帝国主義とリベラリズムのぶつかり合いがその事件の背後にあったことが判明した。Byronはこの詩で帝国主義を批判しつつも、その批判的態度をロマン的かつ内省的傾向の導入により弛めている。ホイッグ・リベラリズムは貴族主義と民主主義の融合を特徴とし、特に支配階級にとって弱者たる民衆への保護義務と支配願望を同時に満たすものである。ByronのThe Islandでも、そのホイッグ・リベラリズムの特徴があることを論文にした。ホイッグを中心としたイギリス政治体制について研究を進めた。摂政政治時代にホイッグを牛耳ったCharles James Foxが紳士的な政治理念である「人民の友」、「平和主義」、「自由主義」を掲げつつも、アイルランドがイングランドと同等の経済的な立場に立つことに反対していることがわかった。Byronの3回の国会演説を分析し、彼が基本的にFoxと同じ政治的姿勢を取っていることがわかった。彼のフレーム・ブレーカーに対する擁護は温情主義にすぎず、カトリック教徒解放の訴えは具体的方策を謳ったものではない。演説全体が美辞麗句を並べた、弱者に対する保護を訴えた内容にすぎない。つまり、騎士道的な弱者保護の姿勢が彼の政治姿勢の根底にあることがわかってきた。Byronと比較して、彼の政治的指南役であるHolland卿の方が、カトリック教徒解放に関してはより急進的である。また、Byronの盟友John Cam Hobhouseは一貫して国会改革という、具体的にイギリス政治体制を変える政策を訴えている。Hobhouseの友人たちであるFrancis Burdett、John Cartwright、Thomas Erskineらも国会改革の要求では一致している。彼らは基盤としてはホイッグと同じ主張を唱えつつも、具体的な民主的改革では一歩先んじている急進派なのだ。

Byronがイタリア革命やギリシア解放という大規模な民主化運動に関わりつつも、具体的な政治改革には二の足を踏んでいることは、彼が結局はEdmund Burke的な騎士道精神に固執しているのではないかというところまで研究を進めた。ホイッグを中心としたイギリス政治体制について研究を進めた。Byronをめぐる個々の政治家について彼らの政治的特性を明確化した。すなわちHolland男爵、Charles James Fox、John Cam Hobhouseについては比較的穏健であるが、Francis Burdett、John Cartwright、Thomas Erskineらは一貫して急進性を保っていることがわかった。ホイッグには進歩的でありながら、体制擁護的な政治的特性があることが突き止められた。これはByron自身にも当てはまる政治的特性であった。Byronの政治的活動については、彼の三つの国会演説を周辺的政治事情と絡めて研究した。“Frame Work Bill Speech"、“Roman Catholic ClaimsSpeech"、“Presentation of Major Cartwright's Petition"というByronの演説を研究し、彼の政治的特性は急進的であるように見えて、本質的には保守的であることがわかった。“Frame Work Bill Speech"では、Byronは真摯にNottinghamのframe breakersを救おうとするが、肝心なところで彼らを擁護する力を抜いてしまう。彼は実際、穏健な体制擁護的発言しかしていない。その発言の根幹は、紡織機破壊者たちは暴徒だがイングランドの役に立つという部分にある。援助金を出して彼らを懐柔すべきという論理は、貧民を保護する貴族的発想にすぎない。“Roman Catholic ClaimsSpeech"は明確に、このByronの急進性と保守性が綯い交ぜになった政治的特性を伝えている。彼はカトリック教徒を憐れむが、具体的解放政策には論及しないのだ。教育や礼拝という面で、彼は彼らに自由を与えようとする。ただし、彼の演説は政治的権利については言及せず、彼らは国の役に立つ存在だという打算的姿勢で締め括られる。最後のMajor Cartwright擁護は、Byronのミスで国会の審議事項にさえ取り上げられなかった。Byronの国会演説の特性を解明し得たが、彼の騎士道精神までは掘り下げられなかった。
Allelic imbalanceによる行動表現型のゲノム拘束性と可塑性の検証

本研究は、『遺伝要因』を父・母由来別のゲノム情報として分別し、生育過程における『環境要因』を介して学習行動において脳部位特異的にいかに表象されているかを遺伝子発現レベルで明らかにすることを目指し研究を進めてきた。この目的のために、種特異的な囀りパターンを学習によって獲得する鳴禽類ソングバードの異種間ハイブリッド個体を用い、音声発声学習過程における発声行動表現型と脳内遺伝子発現に着目した研究を進めた。その結果、種特異的SNPsを同定し、脳内で種特異的な発現制御を受ける遺伝子群を明らかにした。本研究目的は、『遺伝要因』を父・母由来別のゲノム情報として分別し、生育過程における『環境要因』を介して学習行動において脳部位特異的にいかに表象されているかを遺伝子発現レベルで明らかにすることである。本研究では、種特異的な囀りパターンを学習によって獲得する鳴禽類ソングバードの異種間ハイブリッド個体を用い、音声発声学習過程における発声行動表現型(音声発達変化・学習戦略・固定化した発声パターン)に着目した研究を進めている。当該年度においては、以下の2点に関して研究が進捗している。I)脳内発現遺伝子群の種特異的SNPsの抽出のためのRNA-seq:Zebra finchとOwl finch各5個体分の全脳mRNAを個体別にアダプターを付加し、Zebra finchとOwl finchでそれぞれ1レーン分のRNA-seqを実施した。本研究では、種特異的な囀りパターンを学習によって獲得する鳴禽類ソングバードの異種間ハイブリッド個体を用い、音声発声学習過程における発声行動表現型(音声発達変化・学習戦略・固定化した発声パターン)に着目する。これと同時に発声学習・生成のために特化した脳内ソングシステムに発現している遺伝子群が、父母アレルのどちらに由来するかゲノムワイドに測定することを行っている。当該年度において、以下の点において研究が進捗した。(1)次世代ゲノムシークエンス解析において、ゲノム機能情報研究グループの瀬々潤博士との共同研究でAllelic imbalance制御を受けている種特異的発現遺伝子の同定が進んだ。特にこの解析過程においては、発声学習・生成に関わる脳部位特異性にも注意を払い、候補遺伝子群の同定を進めた。現在までに総数で300遺伝子以上の候補遺伝子まで絞込みができている。(2)新規に独自開発した発声行動解析法により、ハイブリッド個体の発声学習発達を詳細に解析できることが可能とった。その結果、当初の予想よりも非常に早い発達初期段階から個体差がある学習バイアスが存在することが明らかになりつつある。特に学習バイアスは構成音素の音響特性に強く関連していることが分かった。この目的のために、種特異的な囀りパターンを学習によって獲得する鳴禽類ソングバードの異種間ハイブリッド個体を用い、音声発声学習過程における発声行動表現型(音声発達変化・学習戦略・固定化した発声パターン)に着目した研究を進めてきた。これまでの研究成果は大きく次の3点である。1.脳内発現遺伝子群の種特異的SNPsの抽出のためのRNA-seq:Zebra finchとOwl finch各5個体分の全脳mRNAを個体別にアダプターを付加し、Zebra finchとOwl finchでそれぞれ1レーン分のRNA-seqを実施した。その後の次世代シークエンス解析によって、種特異的SNPsの同定を行った。2. Hybrid個体から脳部位特異的遺伝子発現情報を得るためのRNA-seq:Owl finch/Zebra finch hybrid個体(各5個体分)より発声学習・生成に重要な神経核であるHVC、RA部位から得たmRNA抽出・増幅したサンプルを、個体別にアダプターを付加し、神経核HVC、RA領域でのRNA-seqを実施した。その結果、種特異的遺伝子発現制御を受ける遺伝子群の同定に成功した。3.ソングバード・ハイブリッド個体の発声学習発達行動の詳細な解析の結果、学習初期の段階で音響特性の出力にすでに大きな個体差が存在することを発見した。次世代ゲノムシークエンス解析において、ゲノム機能情報研究グループの瀬々潤博士との共同研究でAllelic imbalance制御を受けている種特異的発現遺伝子の同定が進んだ。行動神経生物学今後の研究の推進方策としては、(1)次世代シークエンス解析で得られてきた候補遺伝子群の脳内の発現パターン・レベルの検証実験の施行(2)発達初期の学習バイアスによる発声学習発達への影響を行動実験でさらに検証していく。新学術領域ゲノム支援(東京大学菅野・鈴木研究室)

H25年度の支援を受け、次世代シークエンサーHiSeq2000によるトータル4レーン分のRNA-seqを実施でき、当初の計画より大幅なシークエンス情報を入手できた。今後の研究の推進方策としては、1)当該年度で得られたDNAシークエンス情報をもとに、種特異的なSNP情報の抽出とハイブリッド個体の脳部位特異的に発現制御を受けている転写産物の対立遺伝子不均衡度の算出と行う。2)ハイブリッド個体の発声行動発達と学習に獲得した発声パターンの個体差に着眼し、遺伝要因と環境要因による発声学習・生成による影響を検証する。
選択的自己多血小板血漿の関節内注射による変形性関節症疼痛緩和機序の解明

自己多血小板血漿(PRP)の関節内注射による疼痛抑制効果の作用機序を明らかにし、最適なPRP組成を、細胞生物学的、分子生物学的アプローチを用いて明らかにすることを本研究の主たる目的とする。モノヨード酢酸(MIA)の膝関節内注射によるラット膝疼痛モデルを用い、3種類に分類したPRPを関節内に投与することで研究期間内に以下の項目を検討し最適なPRP組成を明らかにする。(1)各種PRPをMIA関節炎モデルラットに関節内注射して疼痛抑制効果を確認する。(2)各種PRP関節内注射による疼痛抑制効果を急性期膝関節内組織から解明する。(3) PRPの疼痛抑制におけるメカニズムを解明する。
新規自然免疫活性化機構関連分子の神経障害痛発症メカニズムにおける役割の解明

自然免疫系細胞と似た機能を持つミクログリアは末梢神経損傷後の脊髄で活性化し神経障害性痛発症に関与する。自然免疫活性化には、パターン認識受容体の役割が重要である。近年ITAM(Immunoreceptor tyrosine-based activation motif)関連受容体と呼ばれる新たなパターン認識受容体が報告されたが、神経障害性痛における役割は不明である。ITAM受容体には細胞のダメージから後に続く炎症反応をトリガーするものがある。これらの受容体のノックアウトマウスを用いて、神経障害性痛モデルを調べた結果、ITAM受容体の中には神経障害性痛発症に関与するものがあることが明らかとなった。本研究では、神経障害性痛発症メカニズムにおける新規自然免疫活性化受容体(IT闇受容体)の役割を調べるために、様々なIT闇受容体関連分子のノックアウト(KO)マウスを用いて実験を行っている。24年度の計画では、まずKOマウスを用いて神経障害性痛モデルを作製し、痙痛関連行動の評価を行うことであった。通常このモデルでは術側にアロディニアが誘発されるが、DAP12KOやCARD9KOマウスでは、アロディニアが両側性に誘発された。このような現象はミラーイメージペインと呼ばれる。したがってこれらのマウスを解析することでミラーイメージペインのメカニズムの一端を解明できる可能性がある。また、MincleKOやFcRγKOマウスでは反対に、アロディニアが誘発されないという結果を得た。これはこれらの分子がアロディニアの発症に必要であることを示唆しており、これらのマウスを解析することで、アロディニア発症のメカニズムの一端を明らかにすることができる可能性がある。また、近年の報告では脊髄のミクログリアやアストロサイトがアロディニア発症に重要であることが示されているので、これらの細胞を免疫組織化学法で染色し観察した。その結果、少なくともDAP12KOやCARD9KOマウスでは、野生型マウスと比較してミクログリアの細胞数に有意な違いは見られなかったが、染色像に違いがみられた。アストロサイトは細胞数に関しては検討中だが、染色像に違いがみられている。これらの違いの原因を検討することでミラーイメージペインのメカニズムが解明されるかもしれない。また、:MincleKOやFcRγKOマウスに関して、現在脊髄のグリア細胞の解析を行っている。驚いたことにミクログリアは野生型と同様に増殖しているようである。このことはミクログリアの増殖とは独立したアロディニア発症メカニズムの存在を示唆しており興味深い。神経障害性痛発症メカニズムにおける脊髄グリア細胞の役割が近年急速に明らかとなってきている。新規な自然免疫活性化機構に関わる受容体であるITAM受容体がグリア細胞に発現して、損傷自己細胞からのシグナル(デンジャーシグナル)を認識とすると、新たな神経障害性痛発症メカニズムとなるかもしれない。しかし、これらの受容体の神経障害痛発症メカニズムにおける役割は分かっていない。本研究ではこの仮説を検証すべく、これらの受容体の神経障害痛発症メカニズムにおける役割を明らかにする。昨年度までに、様々なITAM受容体ノックアウトマウスを用いて神経障害性痛モデルを作製し疼痛関連行動を評価してきた。また、異常が見られた系統に関して、免疫組織化学染色などによりグリア細胞の活性化等を調べている。本年度は、免疫組織化学染色により得られたデータの定量化を進めてきた。また、リアルタイムPCRマシンを購入し、遺伝子発現を調べている。野生型マウスとITAM受容体KOマウスを用い、神経損傷前後での比較を行っている。これまでに神経損傷による発現変化が報告されている遺伝子について、ノックアウトによる影響がないか調べている。これまでにいくつかの遺伝子で野生型と異なった結果を得ている。これらの結果はITAM受容体シグナル下流でどのような遺伝子が動き、さらにそれが疼痛へつながるかを知るために重要である。これらのITAM受容体を発現する細胞を同定することは重要であるが、免疫組織化学法に適した抗体の入手が困難なため、まだ、同定にいたっていない。しかし、ITAM受容体のひとつに関しては、GFPノックインマウスを用いて発現細胞の同定を行った。また、リアルタイムPCRでmRNA発現が神経損傷後に増加することが分かった。その他、リガンドの検索をGFPレポーター細胞を用いて引き続き行っている。近年末梢神経障害後に脊髄グリア細胞の活性化が起こることが解明され、神経障害性痛発症メカニズムにおけるグリア細胞の役割について、多くの研究が行われている。ミクログリアは神経障害性痛発症初期段階に、アストロサイトは慢性期に関与すると考えられるようになっている。脊髄後角のミクログリア活性化による疼痛の研究は多くなされているが、どのようにしてミクログリアが活性化されるのかについては、まだ不明な点も多い。我々はこのミクログリアの活性化におけるITAM(Immunoreceptor tyrosine-based activation motif)受容体ファミリーの役割について研究を行っている。

ITAM受容体はToll like receptorのようなパターン認識受容体で、自然免疫系の細胞に多く発現していることが最近分かってきた。その中には損傷自己を認識する分子も含まれており、神経損傷後に活性化する可能性があると考えられる。初年度から種々のITAM受容体KOを用いて神経障害性痛の研究モデルである脊髄神経損傷術を行い、行動学的にその関与を調べた。複数のITAM受容体ファミリー分子のKOマウス系統において行動に変化が見られた。このことから、これらの分子がミクログリアやアストロサイトの活性化に影響を与えるかどうかを調べるなどの研究を昨年度までに行ってきた。本年度は遺伝子発現レベルにおける変化を調べるために主にリアルタイムPCRによる解析を行った。その結果、ある種のITAM受容体は脊髄神経損傷後、ミクログリアの増殖と同様に増加することが明らかとなった。また、別の分子に関してはGFPレポーターマウスを用いて後根神経節での発現を確認していたが、mRNA発現のタイムコースを調べたところ、早期に発現していることが明らかとなった。これらの結果から、神経障害性痛発症メカニズムには複数のITAM受容体ファミリー分子が、異なった段階で関与することが明らかとなった。26年度が最終年度であるため、記入しない。疼痛学26年度が最終年度であるため、記入しない。24年度に計画していたノックアウトマウスを用いた神経障害痛モデルの痔痛関連行動解析を行った。その結果、ITAM受容体の種類によって表現型が異なるという興味深い結果を得た。また、脊髄後角のミクログリアやアストロサイトの染色を行った。その結果、いずれの系統においてもこれらの細胞の活性化が見られた。25年度に計画していたこれら受容体を発現する細胞タイプの同定や、内因性のリガンド検索も開始した。これまでに、様々なITAM受容体ノックアウトマウスに神経障害性痛モデルを適用した。多くの場合、ノックアウトによる表現型が得られた。現象としてはITAM受容体の神経障害性痛発症メカニズムへの関与が示唆されている。この点については、おおむね順調である。これまでにグリア細胞の染色などを行い、メカニズムの解明を行っているが、免疫組織化学法に使用可能なITAM受容体の抗体が入手困難なことや代替手段であるin situハイブリダイゼーション法が手技的に難易度が高いため、残念ながらITAM受容体発現細胞同定するにいたっていない。この点に関しては、やや遅れていると考えられる。しかし、GFPノックインマウスが作成された系統については細胞の同定を行った。そういった意味では系統により達成度の違いが見られ、この系統に関してはおおむね順調である。昨年度リアルタイムPCRマシンを購入し、遺伝子発現の解析をスタートさせている。
ミトコンドリヤDNAを遺伝的標識とした魚類人工種苗放流効果判定の研究

1.先にジゴギシゲニンELISA法で標識したシロサケ・ミトコンドリヤDNAをプローブとするサザンハイブリタリゼーション法により、50100mg程度の筋肉などの組織でDNAの切断型分析を可能にした。2.さらに一般に変異生が高いことで知られるミトコンドリヤDNA(mtDNA)のDループ領域をPCR法で増幅することに成功した。これによって1mg以下の組織を使って切断型分析が可能になって、0.8mg程度の卵やふ化直後の仔魚のDNA型分析ができるようになったばかりでなく、DNAの抽出を始めとする全分析過程が簡易、短時間で行えるようになり、多数個体の分析を必要とする集団分析がきわめて容易になった。3.多摩川、江戸川、相模川、北上川に遡上した稚アユはmtDNA全ゲノムを5種類の6塩基対認制限酵素で切断した型でも、Dループを5種類の4塩基対認酵素で切断した型分析でも、遺伝子型組成に統計的有意差はなく、これらは湘南港で採集した標本群とも有意差がなく、河川に遡上して来る海産アユは海を通じて互いにある程度混合し、河川集団間の遺伝的分化は小さいとが示された。しかし一方これらの河川の集団はいずれも琵琶湖産アユとは全mtDNAおよびDループの型組成も統計的に有意に異なっていた。これらの河川には毎年遡上アユの10倍以上の湖産アユが放流されている。これらが河川で繁殖すれば遺伝的組成は1代で湖産のそれに近くなると数値的に期待されるから、湖産アユは河川では繁殖していないことが重ねて明瞭になった。4.Dループ領域内の集団内、集団間の変異量は全mtDNA領域の3.4倍、3.7倍もあり、集団研究および遺伝的標識としてDループ領域のPCRによる増幅と4塩基対切断による型分析が有用であることを示した。琵琶湖と6河川に溯上する約600尾のミトコンドリヤDNAを分離し,9種類の6塩基対識別制限酵素で切断して泳動した結果,26種類のゲノム型があり,型間で0.22.8%塩基が置換していた.どの集団でも特に河川ではゲノム型Gー1が多いが琵琶湖では河川には少ないG25の合計が50%ほどで,河川と琵琶湖の集団の間には明らかな差があることが示された50年以上にわたりその場で繁殖し,溯上してくるアユの810倍量程度の琵琶湖産アユを放流している信農川では,mtDNAのゲノム型の頻度からみて,琵琶湖はほとんど繁殖に加わっていないと判定された.これは,近年琵琶湖産が放流されている物部川,伊尾木川でも同様で一方,三陸の河川では一部湖産が生殖に参加して残っていることが示された.湖産,人工継代飼育アユ,地元産が放流されている信農川の産卵場にはこれが一様に混合したとき期待される頻度での9月中,下旬,10月中旬ともにGSIが大きいアユが集まり,遅い時期でも湖産が産卵に参加する可能性が示され,湖産の繁殖への参加の問題はふ化稚魚から海中生活までの間に追跡がしぼられた.浦佐のヤナで9月と10月に捕獲されたアユは一方が琵琶湖主体,他は人工継代アユが主体であることがmtDNA,アイソザイムいずれでも一致して示され,成群構造があることが示唆された.人工継代アユ系統は天然より著しく変異性が低く,特にmtDNAでは単型化と特定の遺伝子型への固定による特徴化が明らかに示されることが判明した.