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冷戦初期米国の東アジア広報文化外交―「原子力平和利用映画」に焦点を当てて

いっぽう、非政府主体のかかわりについては、アメリカ議会のヒアリング記録や日米の原子力産業会議などの業界団体の記録をもとに調査を進めた結果、1950年代アメリカの対外経済援助政策と民間投資、そして原子力平和利用キャンペーンが、互いに不可分な関係で結ばれていたことが分かってきた。しかしながら、個々のUSIS映画の製作過程などにおいて企業などの非政府主体がどのような役割を果たしたかという詳細な事実関係については、資料の壁にはばまれてなかなか明らかにすることができななかった。今後も引き続き取り組んで行きたい課題である。最終年度である2014年度は、この科研テーマに関連する研究報告を、カナダ・韓国・インド・日本の4カ国で行ったほか、韓国・高麗大学の学術雑誌に論文を発表した。また締めくくりとして3月には韓国・アメリカ・日本の研究者を愛媛大学に招いてワークショップを開催した。現在は、アメリカの学術誌に論文の投稿を準備中である。アメリカ研究おおむね順調であり、前年度から予定していた学会報告や研究会、また予定していなかった学会報告も行ったいっぽう、論文の執筆は進めたものの投稿が今年度中に間に合わなかったという禍根を残した。第1回研究会の開催、ハワイ大学での研究報告、米国立公文書館およびアイゼンハワー大統領図書館での調査と、いずれも交付申請書に記載した通り順調に進んだ。予定通りに進まなかった部分もあったが(業者を介したリール・フィルムの収集と第2回の研究会開催)、また一方で予定以上に進展した部分や、予定には無かった展開も見られた。例えば論文としての成果公表が予定よりも早く本年度内に実現したこと、また交付申請時には未定であったウェスト・チェスター大学における学会報告、またミネソタ大学、ウィリアム&メアリー大学、メリーランド大学における招待講演、さらに次年度の国際学会報告の申請と採択が挙げられる。また第2回の研究会にかわって、国内外の研究協力者と個別に連絡を取り合い、ワシントンでの研究打合せも行ったため、大きな予定変更は無かったと言って差支えない。総合的に見て、おおむね予定通りに順調に進展したと言える。執筆中の論文をぜひとも早期に完成させ、最終年度である2014年度中に投稿・出版に至るようにする予定である。また、2013年度に収集したデータや各方面からいただいたコメントや助言をもとに、カナダおよび韓国での学会発表と、これをベースとした新たな論文執筆に取り掛かる。1)本年度パネルを申請して採択されたアメリカ外交史学会での研究報告を行う。(2013年6月、米国ヴァージニア州アーリントン)2)アメリカ学会で研究報告を行う。(2013年6月、東京外国語大学)3)海外の査読雑誌(Diplomatic History誌)に論文を投稿する。4)10月に開催される国際政治学会のパネルにコーディネーターとして出席し、その前後に第2回の研究会を開催する。
非直線型キャリアに着目した教職の多様性と多義性に関する研究

本年度は3つのサブテーマを遂行した。第一は,非直線型教員のライフヒストリー分析である。まず平成28年度と平成29年度に実施したライフヒストリー調査におけるインフォーマントのドキュメント資料を用いて,非直線型キャリアを有する教員のライフヒストリー分析を実施した。「アイデンティティ」「発達段階」「ストラテジー」といった概念を実存物として記述することのポストコロニアリズム課題,教師の語る「自己の変容」が社会的文化的文脈,学校現場の組織的制度的文脈に拘束されて意義づけられる<ライフ>であることを明らかにし,日本教育社会学会第70回大会で報告した。他には就学移行期の教師の指導文化に関する調査ドキュメント分析から,教師の仕事や生活のあり方が特別支援教育の観念の広がりから,非連続性よりも「包摂」「成長」を希求する資源化実践という連続性のある指導の文化を創出していることを明らかにした(子ども社会研究第24号)。第二は少数の教員を調査する質的研究の方法と分析枠組みの確立である。第一のサブテーマの分析をさらに発展させ,教師の非直線型キャリアトランジションを探求することにより教員養成や教員研修の規格化と非学問化,実践主義化の問題を明確にできることを明らかにし,解釈学的アプローチとして教師のリアリティ探求の方法と分析枠組みを明らかにした(鄭州大学での報告,教育社会学研究第104集)。第三は,キャリアイメージに関する補完調査として教員志望学生の日台比較調査を実施し,教師の成長に関する言説の受容のあり方を分析した。例えば日本の特色として,教職を強く志望する学生(教職強志望者)は,教師の成長に対して「教職教養」「専門的学習」の必要性を強く感じているが,非教職志望者では社会経験やゲームなどの多様な社会経験の重要性を必要と回答していることなどが明らかになった(中国四国教育学会第70回大会報告)。本年度は三つの研究内容を遂行した。第一は、非直線型キャリアの定義とライフヒストリー研究の分析枠組みの確立である。イギリス・カナダにおける教師のライフヒストリー研究やアメリカの教職キャリアパスの研究、質的調査研究資料を収集し、分析することで、非直線型キャリアの定義と研究対象としての意義を探求し、その成果を日本教育社会学会第68回大会で報告した。とりわけ、教師の「発達の普遍的段階論」の課題を指摘する上で、ドミナントストーリーの異化作用としての研究の意義を明確にした。またインタビュー調査の進展の中で、ライフヒストリーの多様性を担保した学校経営という管理職の仕事のあり方が、ライフヒストリー研究の臨床的可能性(有益性や有用性)を拓きうることを検討した。第二は、非直線型キャリア経験を有するインフォーマントへのインタビュー・分析である。これまでに蓄積している教師のライフヒストリーインタビュー、ドキュメントデータに加え、一般企業から教職への転入者や海外日本人学校の経験を有する研究協力者のインタビューを行った。インタビューのトランスクリプト分析の成果の一部は、HICE2017のカンファレンスや先述した日本教育社会学会で報告を行った。またドキュメントデータ(教育実習生のログ:学習や経験の記録を用いたライフヒストリー分析の可能性)は、JUSTEC2016のパネルディスカッションにて報告した。いずれも、教師の発達が非直線型に進むため、リフレクションを増やしても、学生や他の業種にいる段階では教師としての変化の自覚が持てないことや、教師としての経験の進展に従って、「過去の学習や経験」を肯定的に語る語りが増加することを明らかにした。第三は、大学入学時の学生を対象とした教師キャリアパスイメージに関する自由記述調査を行い、予備分析を行った(150名程度)。当初研究を予定していた非直線型キャリアの定義とライフヒストリー研究の分析枠組みの確立と非直線型キャリア経験を有するインフォーマントへのインタビュー・分析は順調に進んでいる。この二つに関しては、国内学会で1件、国際学会(2件:うち一件はパネルディスカッションへの登壇依頼に基づく招待報告)を行った。とりわけ、教師の「発達の普遍的段階論」の課題を明らかにする上で、教師のライフヒストリー研究は、極めて有効であるという調査方法上の成果を明らかにした。また、教師一人一人のライフヒストリーを尊重した学校経営のあり方が、教師の仕事の満足度と大きく関わっていることがインタビュー過程で明らかになった。このことから、学校経営研究におけるライフヒストリー研究の可能性が拓かれつつあることは、研究に着手した際の予想を超えた成果となっている。このことは、臨床的教育社会学というよりも応用教育社会学と捉えることが、その可能性を高めるという新たな仮説を産出しており、順調に研究が進んでいる。第三の計画内容であった大学入学時の学生を対象とした教師キャリアパスイメージに関する自由記述調査については予備分析を行っているが、調査段階の学習状況に大きく影響を受けている可能性が明らかになった。そこで、調査の適切な時期の見直しや再度テキストマイニングによる分析を実施することを検討する必要が生じている。本研究は、非直線型キャリアに着目したライフヒストリー研究により、教職の多様性と多義性を記述し、直線型成長モデルに基づく教員養成マスターナラティヴの課題を明らかにすることを目的としている。目的を達成するために本研究では、平成29年度、次のサブテーマの研究を遂行した。1)非直線型キャリアの定義とライフヒストリー研究の分析枠組みを確立するため、ナラティブ・インクワイアリーの研究手法の提唱者であるクランディニン教授の研究会および講演会等に参加し、情報収集を行った。その結果、教師の流動的な仕事の有り様を明らかにする上で、「教師ナラティブ」という分析概念を用いることの有効性を明らかにした。

これまで教師のキャリアや仕事の研究では、アイデンティティやティーチング・ストラテジー概念が中心に据えられてきたが、それとは異なる研究枠組みの可能性を明らかにしつつある。この分析概念を用いた研究枠組みの実践的応用を中学校でケーススタディを行い、教師の「不安定で不確かな仕事」(非直線型キャリアのプロセス)をナラティブ的再構成により安定化させる取り組みの可能性を第23回台湾教育社会学会で報告した。また「教師ナラティブ」概念を用いた研究枠組みを応用することで、就学前教育と小学校教育の間にある「指導の文化やフィロソフィー」の連続性(ナラティブ的連続性)を明らかにした。幼保小連携で強調される教師の仕事の非連続性ではなく、むしろナラティブの連続性を明らかにしたことは、本研究の分析概念や枠組みの実践的応用を多様なフィールドへと拡張する可能性を拓きつつある。2)非直線型キャリアを辿る調査協力者へのインタビュー(7名)を実施し、ライフヒストリー分析を行った。3)、教師キャリアパスのイメージ調査のアンケート項目のワーディングおよび修正を行い、平成30年度の調査の準備を行った。サブテーマのうち、1と2の非直線型キャリアの研究枠組みや調査分析は、研究計画どおりに進捗している。また非直線型キャリアに関わって、教師のアイデンティティ形成やティーチングストラテジーの従来の研究枠組みと異なり、教師ナラティブという分析概念に着目することで、教師のキャリア発達の新たな視点や教師の指導の連続性などの分析を可能とすることや、教育実践への応用可能性を拓くことなど、研究の方法的可能性がさらに広がりつつあることは、当初の予想を超えた成果に繋がりつつある。しかしながら、教職キャリアイメージ調査については、台湾の大学との比較研究に発展させたため、打ち合わせや内容の検討に時間がかかり、平成30年度に調査時期をずらさなければならなくなった。本年度は3つのサブテーマを遂行した。第一は,非直線型教員のライフヒストリー分析である。まず平成28年度と平成29年度に実施したライフヒストリー調査におけるインフォーマントのドキュメント資料を用いて,非直線型キャリアを有する教員のライフヒストリー分析を実施した。「アイデンティティ」「発達段階」「ストラテジー」といった概念を実存物として記述することのポストコロニアリズム課題,教師の語る「自己の変容」が社会的文化的文脈,学校現場の組織的制度的文脈に拘束されて意義づけられる<ライフ>であることを明らかにし,日本教育社会学会第70回大会で報告した。他には就学移行期の教師の指導文化に関する調査ドキュメント分析から,教師の仕事や生活のあり方が特別支援教育の観念の広がりから,非連続性よりも「包摂」「成長」を希求する資源化実践という連続性のある指導の文化を創出していることを明らかにした(子ども社会研究第24号)。第二は少数の教員を調査する質的研究の方法と分析枠組みの確立である。
可視画像、近・中赤外分光法および蛍光X線分光法による圃場レベル作物情報センシング

迅速かつ簡易的に作物体内の元素やイオンを計測できる現場対応型の作物の栄養診断方法として、非破壊的に複数元素の同時計測が可能な蛍光X線分析と様態の異なる窒素計測が可能な赤外分光法の併用に着目し、様々な環境下で栄養吸収の特性が異なるトマトとイネを栽培した際に誘発される栄養情報の変化に関して、栽培状況の影響や品種間差異について検討した。その結果、葉中元素の分光情報と葉中元素含量関係より、蛍光X線分析による葉中元素含量の把握の可能性が示された。また、トマト葉の蛍光X線・赤外分情報に及ぼす培養液中の組成の影響、およびイネ体の分光測定からは特徴的な品種の特定の可能性が示され、色彩情報と併せて用いる事により農作物の栄養情報を把握の可能性が示された。そこで、簡易的、非破壊的、低コスト等の特徴を持つ作物情報センシング手法として、汎用的なデジタルカメラによる色彩画像解析に着目し、フィールドサーバを中核とした遠隔操作可能な色彩画像の連続モニタリングシステムを構築した。そして、気象情報を付随した色彩情報の定量的なモニタリングを可能とした。そこで、農産物、食品情報の構造化を行い、データ管理、蓄積およびデータ検索機能を持ったデータベースシステム、および、データベースによって提供されているデータから、利用者にとって意味のある情報を取り出すための解析システムからなる「インターネット対応型生物情報解析システムのプロトタイプ構築」を行った。まず,作物の葉を測定対象に実験室レベルで中赤外分光スペクトルと蛍光X線スペクトルを取得するための実験を行った。赤外分光スペクトル測定には,ATRアクセサリーを付属したFT-IRを使用した.IREにはZnSeを用いた。蛍光X線分装置には,島津製作所社製のエネルギー分散型蛍光X線分析装置を用いた。圃場実験用には,今回新たに購入したポータブル型FT-IR (SensIR TECHNOLOGIE社製Travel IR)を用いた。IREには赤外領域に吸収を持たないATR結晶にダイヤモンドを用いた。また,葉色の計測のために色彩画像計測の原器にあたる正しい色彩画像を作成できるシステムを再構築した。試作したシステムはデジタルカメラ、液晶ディスプレイ(ColorEdgeCG18ナナオ社製)、銀塩写真プリンター(PICTROGRAPHY3500富士写真フィルム社製)、計算機部(Power Mac G4 APPLE社製)から成り立っており、カラーマッチングが可能である。画像取得部分は,デジタルカメラと照明用光源から成り立っている。光源には色温度5500K,演色性91のトルーライト蛍光灯を採用した.イオン計測の標準法としてイオンクロマトグラフ法を用い、生体の栄養状態の指標となる陽イオン(K+, Ca2+, Mg2+)および陰イオン(NO3-, PO4-, SO42-)の検量線を作成した。FT-IRと蛍光X線を用いた実験での試料にはモデル葉とトマト葉を用いた.モデル葉は調整したイオン混合溶液(P, K, Ca)をろ紙に滴下し,数時間乾燥させたものと定義した。実験の結果、中赤外分光スペクトルからはタンパク態Nと硝酸態Nが検出可能なこと、蛍光X線スペクトルからは植物体の栄養診断に用いられるP, K, Caなどの陽イオン成分の分析が行えることが判明した。さらに備え付けタイプのFT-IRと携帯用のFT-IRのどちらにおいても十分な計測精度が得られることが確認された。新たに構築した色彩画像解析システムでは、緑領域を含む広い色彩領域でのカラーマッチングがうまく行えることが確認できた。最後に、JAVAアプレット形式での色彩・スペクトル解析ツールのプロトタイプも試作した。迅速かつ簡易的に作物体内の元素やイオンを計測できる現場対応型の作物の栄養診断方法として、非破壊的に複数元素の同時計測が可能な蛍光X線分析と様態の異なる窒素計測が可能な赤外分光法の併用に着目し、植物体の栄養状態の指標となる葉中の必須元素情報の計測方法について検討した。その際、代表的な作物であり、また栄養成分の吸収特性が異なるトマトとイネを対象とした。まず、葉モデルの幾何学的構造の影響を検討することにより、定量的な元素計測が可能となった。

そして、トマト小葉,イネ葉の蛍光X線分光情報と、元素の定量分析の標準法でプラズマ発光分析(ICP)による葉中含量分析値との比較を行ったところ、主要な必須元素に関しては蛍光X線分光計測によって元素含量を定量的に把握可能である事が示された。一方、全反射吸収法を用いた赤外分光計測では、試料の生葉をセンサー部のクリスタルに接触させるための最適荷重を決定することにより,再現性の高い葉中成分の赤外分光情報の取得が可能となった。また、栽培過程におけるトマト樹体の葉の分光計測情報に基づき、栽培環境・条件による樹体内の元素バランス特性の把握を試みた。その結果、栽培過程におけるトマト生葉の分光計測から得られた樹体内の元素バランス情報と、既知の生理特性による元素バランスの傾向が一致し、栽培条件による元素バランスの違いも認められた。さらに、植物体の栄養状態を表す外観情報の1つである色彩情報に着目し、その計測に関わるデバイス間の統一した色彩表現が可能な色彩画像計測システムを構築した。そして、生葉の安定かつ定量的な色彩計測が可能となった。迅速かつ簡易的に作物体内の元素やイオンを計測できる現場対応型の作物の栄養診断方法として、非破壊的に複数元素の同時計測が可能な蛍光X線分析と様態の異なる窒素計測が可能な赤外分光法の併用に着目し、様々な環境下で栄養吸収の特性が異なるトマトとイネを栽培した際に誘発される栄養情報の変化に関して、栽培状況の影響や品種間差異について検討した。その結果、葉中元素の分光情報と葉中元素含量関係より、蛍光X線分析による葉中元素含量の把握の可能性が示された。また、トマト葉の蛍光X線・赤外分情報に及ぼす培養液中の組成の影響、およびイネ体の分光測定からは特徴的な品種の特定の可能性が示され、色彩情報と併せて用いる事により農作物の栄養情報を把握の可能性が示された。そこで、簡易的、非破壊的、低コスト等の特徴を持つ作物情報センシング手法として、汎用的なデジタルカメラによる色彩画像解析に着目し、フィールドサーバを中核とした遠隔操作可能な色彩画像の連続モニタリングシステムを構築した。そして、気象情報を付随した色彩情報の定量的なモニタリングを可能とした。そこで、農産物、食品情報の構造化を行い、データ管理、蓄積およびデータ検索機能を持ったデータベースシステム、および、データベースによって提供されているデータから、利用者にとって意味のある情報を取り出すための解析システムからなる「インターネット対応型生物情報解析システムのプロトタイプ構築」を行った。
ハイスループット型超高感度アミノ酸分析装置の開発とメタボローム解析への応用

(1)トロロックスを用いるアミノ酸の定量22種類のアミノ酸について、トロロックスと過塩素酸リチウムを含むジメチルスルポキシド中で電解すると、アミノ酸の濃度に依存した酸化前置波が出現すること確認した。この波高の計測によりアミノ酸の定量が可能であることを明らかにした。(2)塩基物質の電気化学検出のための2流路系HPLCシステムの構築とその応用トロロックスの電解酸化を活用してアミノ酸を検出するため、ポストカラム形式の2流路系HPLCシステムを設計した。システム作成の手始めとして、トロロックスと同様なクロマン環を有するトコフェロールを使って、分離カラムとトコフェロール試薬の2流路系から成るHPLCシステムを作製した。電気化学検出用電解セルでは、溶出液がウォールジェット型で作用電極表面にあたるような薄層電解セルを作製した。この電解セルを主要部として組込み、電気化学検出器と電極を接続して検出部を作製した。構築したシステムの作動を確認するために塩基物質のクロルジアゼポキシドを対象として定量分析を行った。(3)メタボローム解析のための前処理方法の検討メタボローム解析は、生体内における全代謝産物を同定および定量し、ゲノム機能と対応させることを目的とする。従って、生体試料から目的とする代謝産物を効率的に抽出する前処理方法が望まれる。血液中における薬物や漢方薬の代謝産物の同定及び定量を行うために必要な前処理方法を確立することができた。(4)キャピラリーLCによる高性能分離定量法の開発メタボローム解析を行うためには、高感度な分析法の開発が必須であり、その実現にはキャピラリーカラムを用いた電気化学検出CLCが有用であると考えた。高感度・高精度定量法のための改良を重ねた結果、アトモル(10^<18>mol)レベルの定量が可能であることが分った。(1)トロロックスを用いるアミノ酸の定量3種の塩基性アミノ酸、2種の酸性アミノ酸、17種の中性アミノ酸について、トロロックスと過塩素酸リチウムを含むジメチルスルホキシド中で電解すると、それぞれのボルタモグラム上に酸化前置波が生じた。酸化前置波の波高はそれぞれのアミノ酸の濃度に比例した。この波高の計測によりアミノ酸の定量が可能であった。ボルタンメトリーによる定量の条件を選択するために、酸化前置波への溶媒の影響、試薬量、支持電解質の種類などを検討し、定量に最適な測定条件を定めた。(2)塩基物質の電気化学検出のための2流路系HPLCシステムの作製(1)のボルタンメトリーによる検討により、アミノ酸は塩基としてトロロックスの酸化を促進して酸化前置波を生じると考えられた。酸化前置波を用いて塩基物質を検出するには、ポストカラム形式の2流路系HPLCシステムが適切である。そこで、システム作成の手始めとして、トロロックスと同様なクロマン環を有するトコフェロールを使って、分離カラムとトコフェロール試薬の2流路系から成るHPLCシステムを作製した。電気化学検出用電解セルでは、まず、作用電極として、グラッシーカーボン電極を用い、溶出液がウォールジェット型で作用電極表面にあたるような薄層電解セルを作製した。この電解セルを主要部として組込み、設備備品として購入した電気化学検出器と電極を接続して検出部を作製し、HPLCシステムに組み込んだ。(3)キャピラリーHPLCによる高感度分離定量2流路系HPLCシステムは、設備備品として購入したインテリジェントマイクロポンプ、キャピラリーカラム、電気化学検出部等で構築したが、本年度はキャピラリーカラムを用いた高感度・高精度分離定量のために改良を重ねた。1流路系として評価したところ、fmolレベルの定量が可能であることが分った。(1)塩基物質の電気化学検出のための2流路系HPLCシステムの構築とその応用アミノ酸をトロロックスと過塩素酸リチウムを含む

ジメチルスルホキシド中で電解すると、ボルタモグラム上に酸化前置波が生じ、その波高はそれぞれのアミノ酸の濃度に比例することが分かった。この原理を活用してアミノ酸を検出するため、ポストカラム形式の2流路系HPLCシステムを設計した。構築したシステムの作動を確認するために塩基物質のクロルジアゼポキシドを対象として定量分析を行った。(2)メタボローム解析のための前処理方法の検討メタボローム解析は、生体内における全代謝産物を同定および定量し、ゲノム機能と対応させることを目的とする。従って、生体試料から目的とする代謝産物を効率的に抽出し、高感度に分析する方法が望まれている。本年度は、血液中におけるトログリタゾン、バイカリン、バイカレインの代謝産物の同定及び定量するために必要な前処理方法とそれらの分析法を確立することができた。(3)キャピラリーLCによる高感度分離定量の開発メタボローム解析を行うためには、高感度な分析法の開発が必須であり、その実現にはキャピラリーカラムを用いた電気化学検出LCが有用であると考えた。高感度・高精度定量法のための改良を重ねた結果、アトモル(10^<-18>mol)レベルの定量が可能であることが分った。
リンパ腫自然発症マウスにおける宿主因子の研究

研究目的SL/Kh系マウスは、共同研究者である日合がSL系マウスから分離した近交系マウスで、生後6ヶ月までにPre B lymphomaをほぼ100%に自然発症する。また前リンパ腫期の骨髄内ではリンパ腫と表現型の類似したPre B細胞のポリクローナルな増殖が見られ、B細胞系に先天的な異常があることを示している。本系のリンパ腫発症には内在性ウイルスの存在とその発現が重要であることがわかっているが、そのウイルス発癌の正確な機構はまだ明かになっていない。これまでに最も良く研究された自然発症リンパ腫のモデルはAKRマウスであるが、この系においても内在性ウイルスの関与が明らかになっているものの、リンパ腫発症に関与する宿主病型決定因子の同定はなされていない。今回の研究は、(1)これに関与する内在性ウイルスの役割(2)その病型決定に預かる宿主要因の同定を目的としている。さらに(2)については、その遺伝的変異の分子機構にまでせまり、ウイルス発癌以外の系やヒトのリンパ腫の感受性決定因子をも同定する。結果および考察今回の交配実験により次の事を明らかにした。1 SL/Khマウスのリンパ腫発症には内在性ウイルスゲノムEmv-11(Akv-1)の存在とその発現が前提となる。2 SL/KhマウスのH2にlinkした優性遺伝子Esl-1,染色体4番Mup-1 locus近傍に存在する劣性遺伝子foc-1によりそれぞれlymphoblasticlymphoma,follicular centercell lymphomaへの病型決定がなされる。
統合失調症の大脳皮質における機能的結合性についての総合的脳画像研究

統合失調症の大脳皮質領域間の機能的結合性を、脳波および脳磁図によって評価した。初発未治療の患者では、皮質全体の脳波の同調性に低下が認められ、特に前頭部皮質と他領域との同調性の違いが目立った。薬物療法による症状改善は、同調性の改善と相関していた。長期の薬物療法を受けた統合失調症患者の脳磁図の解析では、同期性が高い領域が多く、抗精神病薬により領域間の同期性が高まっている可能性が考えられた。その結果、統合失調症患者のPANSS-Eの平均は、陽性症状13、陰性症状19、解体症状7、興奮症状6、抑うつ不安症状13、その他の症状16であった。これらの統合失調症患者では、CANTABによる認知機能検査において、健常者に比べ、反応時間が長く、迅速視覚情報処理の精度が低く、セットシフト課題・空間作業記憶課題・視覚対連合記憶課題におけるエラーが多い傾向が認められた。また言語性対連合記憶課題でも、統合失調症患者は即時及び遅延再生ともに、正解数が低い傾向が認められた。これは、統合失調症患者では、運動調節、視覚情報処理、作業記憶、学習などの広汎な認知機能に低下が認められることを示しており、今後の研究で例数を増やすことで、脳磁図による皮質領域間の同期性との相関関係を調べるための基礎データとして意義あるものである。その結果、統合失調症患者のPANSS-Eの平均は、陽性症状16、陰性症状17、解体症状8、興奮症状7、抑うつ不安症状8、その他の症状20であった。統合失調症患者は、健常者に比べ、視覚学習課題、問題解決課題における成績が有意に低く(p<0.01)、処理速度、空間作業記憶の成績が低い傾向が認められた(p<0.1)。一方で、動作速度、注意持続力、言語学習では健常者との間で差はなかった。また、一部の患者(8名)と健常者(9名)における脳磁図の予備的解析を行い、健常者では低周波数帯域(13-30Hz)における領域間の同期性が主に右半球に認められるのに対して、患者では領域間の同期性が両側の大脳半球間でも多く認められた。以上は、統合失調症患者では、視覚学習課題、問題解決、処理速度、作業記憶、学習などの広汎な認知機能に低下が認められること、低周波数帯域では両側半球間の相互作用が亢進していることを示し、今後すべての症例を用いた脳磁図データの解析で確認されれば、病態生理の解明において意義あるものである。24年度が最終年度であるため、記入しない。
ボルネオ島河川急流域にみられるボルネオハヤセガエル属の種分化について

平成19年度は、これまで蓄積したデータをまとめ、必要な部分を補完する研究を行った。前年度までに採集した標本に加え、平成19年7月に野外調査を行って採集された標本を用い、遺伝的・形態的な解析を行った。また前年に引き続き、マレーシアのKinabalu Parkに所蔵されている標本に関して、一週間ほど標本計測のためだけに現地に滞在して、詳細な計測を行った。その結果を多変量解析的な手法を用いて解析したところ、これまで検出することができなかった種間差を検出したり、基準標本の分類学的な帰属を議論したりすることが可能になった。また、これまでミトコンドリアDNAのみに基づいて議論を行ってきたが、これにはいくつかの問題点が存在するため、核DNAマーカーの開発を試みた。その結果、これまで両生類で系統解析に用いられたことのない領域を含む4つの核DNA領域の解析に成功した。以上の研究の結果の一部は、報文として公表され、また現在核DNAとミトコンドリアDNAの持つ情報の違いに着目した論文を準備中である。その他の結果は、学位論文の形で完成されているが、その内容に関しては今後順次一般誌に投稿してゆく必要がある。学位論文は、4種の新種の報告を含む、ボルネオハヤセガエル属の系統分類学的研究であり、これまできわめて混乱状態にあった幼生と成体との対応付けや、分布・生息域などの情報に関して多くの新しい知見を盛り込んでいる。また、幼生の生息環境や成体の音声などについても引き続きデータを収集した。その結果はまだ公表するには至っていないが、特に音声に関して、解析機器を改良した結果、これまで単一の音声だと思われていた繁殖音に種間差の存在することを示唆する結果が得られ、今後の情報の蓄積により、分類学的形質として音声を用いることができるようになるかもしれない。本年度は主乏して、対象動物であるボルネオハヤセガエル属の分類学的問題を解決することを目的とした研究を行った。前年度までに採集した標本に加え、2005年8月と2006年3月に野外調査を行って採集された標本を用い、遺伝的・形態的な解析を行った。さらにアメリカ合衆国のField Museum of Natural Historyと、マレーシアのUniversity Malaysia Sabah、Kinabalu Parkに収蔵されている標本に関しても、貸借、あるいは現地で計測するなどして、情報を蓄積した。特に幼生標本に関しては、発生段階を考慮して、従来より精度の高い方法を模索し、その一部を日本動物学会において発表した。その結果として、この属と近縁属との系統学的関係がある程度明らかになり、論文として発表する機会を得たが、肝心の種レベルでの分類学的研究に関しては、新たな情報が多く加えられたために、論文としてまとめる段階まで至ることができなかった。例えば、これまで良種であると考えていたある種には、遺伝的・形態的に大きな地理変異が存在することがわかった(日本爬虫両棲類学会で発表)。また別の種には、遺伝的・形態的に異なる2系統が含まれると考えていたが、8月の調査で、これらとは遺伝的に異なる第3の系統が得られた。これらの分類学的問題を解決するためには、より詳細な形態学的解析を行う必要がある。また、次年度以降の研究内容の予備的な調査として、今年度は成体の音声と、幼生の生息環境の情報収集にも努めた。平成18年度もその前年に引き続き、対象生物であるボルネオハヤセガエル属の分類学的問題を解決することを目的とした研究を行った。前年度までに採集した標本に加え、平成18年11月に野外調査を行って採集された標本を用い、遺伝的・形態的な解析を行った。またマレーシアのKinabalu Parkに所蔵されている標本に関して、現地で詳細な計測を行うなどしてデータの蓄積を図った。さらに、大阪自然史博物館に所蔵されている標本を借用して計測を行う一方、液浸標本からDNAを抽出する試みを行った。その結果として、平成18年度中には本属の分類学的問題を扱った論文が1編受理された。この論文中では最終的な分類学的措置までは踏み込めなかったものの、Meristogenys amoropalamusなどの種に関して、隠蔽種の存在を示唆するデータを盛り込むことができた。この隠蔽種の問題に関係して、サバ大学から借用した幼生標本に関する報文を現在投稿中であり、また大阪自然史博物館に基準標本シリーズが収蔵されているため、この標本からDNA抽出を試みたところ、パラタイプ標本に関してDNAの増幅に成功した。また、先述の論文においては、これまで混乱状態にあった本属の幼生と成体の対応関係を整理し、4つの既知種と1つの未知種の幼生について比較的詳細な形態的記述をすることができた。その結果、これまで様々な先行研究によって発表されてきた本属の幼生の形態に関する記述には、我々の見地から見て支持できるものと支持できないものがあることがわかった。さらに平成17年度と同様、18年度も幼生の生息環境や成体の音声などについてデータを収集した。特に成体の音声に関してはこれまで音声が録音されていなかったいくつかの種に関して録音に成功した。

その結果を多変量解析的な手法を用いて解析したところ、これまで検出することができなかった種間差を検出したり、基準標本の分類学的な帰属を議論したりすることが可能になった。また、これまでミトコンドリアDNAのみに基づいて議論を行ってきたが、これにはいくつかの問題点が存在するため、核DNAマーカーの開発を試みた。その結果、これまで両生類で系統解析に用いられたことのない領域を含む4つの核DNA領域の解析に成功した。以上の研究の結果の一部は、報文として公表され、また現在核DNAとミトコンドリアDNAの持つ情報の違いに着目した論文を準備中である。その他の結果は、学位論文の形で完成されているが、その内容に関しては今後順次一般誌に投稿してゆく必要がある。学位論文は、4種の新種の報告を含む、ボルネオハヤセガエル属の系統分類学的研究であり、これまできわめて混乱状態にあった幼生と成体との対応付けや、分布・生息域などの情報に関して多くの新しい知見を盛り込んでいる。また、幼生の生息環境や成体の音声などについても引き続きデータを収集した。その結果はまだ公表するには至っていないが、特に音声に関して、解析機器を改良した結果、これまで単一の音声だと思われていた繁殖音に種間差の存在することを示唆する結果が得られ、今後の情報の蓄積により、分類学的形質として音声を用いることができるようになるかもしれない。
領域大気モデルを用いた降水過程と陸面水文過程の相互作用に関する研究

降水過程と陸面過程の相互作用の理解を目的として,領域大気モデルによる現実の降水イベントの再現実験を行なった.1998年7月23日の夕刻から深夜に東シベリアYakutsk付近のGAME-Siberiaタイガ班観測地点(Spaskaya-Pad)において観測された強い雷雨を例に取った.これは,例年に比較して少雨乾燥傾向にあったこの年の東シベリアの夏季において,この付近では最大の降水イベントであった.モデルは,CSU-RAMS(Pielke et al.1992)を適宜変更して用いた.初期値,境界値にはECMWF客観解析値を用いた.3重グリッドネスティングを用い,外側,中間,内側の領域をそれぞれ一辺2000km,420km,84kmの正方形とし,グリッドの解像度をそれぞれ50km,10km,2kmとした.第1,第2グリッドにはKuoタイプの積雲対流スキームと雲微物理スキームを併用し,個々の積雲を直接表現する第3グリッドには雲微物理スキームのみを用いた.陸面水文過程は差し当たって単純に湿潤度を一様の値に固定した.計算は7月21日00Zを初期値とし,84時間行なった.昨年度の成果では,23日朝の層状雲の通過に伴う霧雨は良く再現されたが,夕方からの雷雨は第1,第2グリッドではタイミングが早すぎ,第3グリッドでは全く再現されなかった.今年度は,第1,第2グリッドの積雲対流スキームをオフにし,かつ地表の湿潤度をさまざまに変化させた実験を行なった.この結果,第3グリッドで現実的なタイミングで雷雨を再現することに成功した.これにより,現在の積雲対流スキームに問題があり,早すぎる対流が夕方には大気を安定させてしまうことが示唆された.また,地表の湿潤度を変化させることにより雷雨の場所とタイミングが変化した.これにより,朝方に降った霧雨が地表を濡らした効果が,夕方の雷雨に影響を与えていることが示唆された.降水過程と陸面過程の相互作用の理解を目的として,領域大気モデルによる現実の降水イベントの再現実娠を行なった.1998年7月23日の夕刻から深夜に東シベリアYakutsk付近のGAMF-Siberiaタイガ班観測地点(Spaskaya-Pad)において観測された強い雷雨を例に取った.これは,例年に比較して少雨乾燥傾向にあったこの年の東シベリアの夏季において,この付近アは最大の降水イベントであった.モデルは,CSU-RAMS(Pielke ea al.1992)を適宜変更して用いた。初期値,境界値にはECMWF客観解析値を用いた.3重グリッドネステイングを用い,外側,中間,内側の領域をそれぞれ一辺2000km,420km,84kmの正方形とし,グリッドの解像度をそれぞれ50km,10km,2kmとした.第1,第2グリッドにはKuOタイプの積雲対流スキームと雲微物理スキームを併用し,個々の積雲を直接表現する第3グリッドには雲微物理スキームのみを用いた.陸面水文過程は差し当たって単純に湿潤度を一様の値(0.4)に固定した.計算は7月21日00Zを初期値とし,84時間行なった.計算の結果,23日朝の層状雲の通過に伴う霧雨が,各グリッドで良く再現された.現実には,この後昼間に晴れ間があり,次第に曇りだした後に雷雨が発生したのは夕方19時ごろであった.しかし,モデルでは,第1グリッドと第2グリッドで層状雲の通過直後の昼頃から積雲対流スキームによる降水が始まり,夕方まで降り続いた.逆に第3グリッドでは,この後計算終了まで降水は生じず,雷雨を直接シミュレートすることができなかった.この結果は積雲対流を開始させる局所的な上昇流の再現に問題があることを示唆するものと考えられる.局所的な上昇流の発生と陸面の空間的非一様性の関係に注目してさらに実験を行なう.降水過程と陸面過程の相互作用の理解を目的として,領域大気モデルによる現実の降水イベントの再現実験を行なった.1998年7月23日の夕刻から深夜に東シベリアYakutsk付近のGAME-Siberiaタイガ班観測地点(Spaskaya-Pad)において観測された強い雷雨を例に取った.これは,例年に比較して少雨乾燥傾向にあったこの年の東シベリアの夏季において,この付近では最大の降水イベントであった.モデルは,CSU-RAMS(Pielke et al.1992)を適宜変更して用いた.初期値,境界値にはECMWF客観解析値を用いた.3重グリッドネスティングを用い,外側,中間,内側の領域をそれぞれ一辺2000km,420km,84kmの正方形とし,グリッドの解像度をそれぞれ50km,10km,2kmとした.第1,第2グリッドにはKuoタイプの積雲対流スキームと雲微物理スキームを併用し,個々の積雲を直接表現する第3グリッドには雲微物理スキームのみを用いた.陸面水文過程は差し当たって単純に湿潤度を一様の値に固定した.

計算は7月21日00Zを初期値とし,84時間行なった.昨年度の成果では,23日朝の層状雲の通過に伴う霧雨は良く再現されたが,夕方からの雷雨は第1,第2グリッドではタイミングが早すぎ,第3グリッドでは全く再現されなかった.今年度は,第1,第2グリッドの積雲対流スキームをオフにし,かつ地表の湿潤度をさまざまに変化させた実験を行なった.この結果,第3グリッドで現実的なタイミングで雷雨を再現することに成功した.これにより,現在の積雲対流スキームに問題があり,早すぎる対流が夕方には大気を安定させてしまうことが示唆された.また,地表の湿潤度を変化させることにより雷雨の場所とタイミングが変化した.これにより,朝方に降った霧雨が地表を濡らした効果が,夕方の雷雨に影響を与えていることが示唆された.
腎尿細管特異的ナトリウムトランスポーターの発現調節の機序についての検討

平成14年度は13年度に続き腎尿細管のNaトランスポーターの発現機序とその生理的意義についての研究を続け以下の点を明らかにした。1.尿細管ヘンレループ上行脚太部に局在する腎特異的Naトランスポーター(BSC : bumetanide sensitive cotransporter)は発現量の変化により、Na再吸収を調節し、それが尿濃縮に影響することを平成13年度の研究で明らかにした(Kideny Int. 60:672-679,2001)。そこで、平成14年度ではリチウム中毒による腎性尿崩症モデルラットを解析し、このBSCの発現変化は病態に大きく影響するとともに、この膜蛋白発現の知見に基づき、新たな薬理効果もしくは薬物療法の検討が可能であることを証明した(Kideny Int. 63:165・171,2003)。以上の結果から、腎尿細管においてヘンレループ上行脚ではBSCにより再吸収されたNaは水の再吸収に、その遠位のチャンネルによるNaの再吸収はNa自体の調節を介して、結果的に血中Na濃度や血圧の調節に利用される可能性が判明した。平成13年度は以下の点において研究を終了し、論文報告を行った。腎尿細管ナトリウムトランスポーター(Bumetanide sensitive cotransporter : BSC)の発現調節は尿の最大能力を発揮するための必要条件であることの証明:我々はすでに、脱水負荷による最大尿濃縮時にはBSCの発現増加が認められることは証明しているが(Kidney Int 54 : 877-888,1998)、BSCの発現障害と尿濃縮との関連の証明はされていなかった。そこで正常腎、一側腎摘出後の残存腎(片腎)、腎移植後の移植腎において脱水負荷前後における生理変化と腎の組織像、BSC発現を観察した。その結果、移植腎では腎虚血時間を最小限度に留め、同種ラットでの移植であったため、片腎と同様に組織学的に代償性肥大を示し、腎糸球体、尿細管ともに病理的変化が認められなかった。さらに、正常腎と比較して、片腎と移植腎ともに機能代償のためと考えられるBSCの増加が認められた。しかし、脱水負荷により、尿尿の最大濃縮が必要な条件下では正常腎、片腎ともにBSCの発現を増加させ尿の最大濃縮を達成したが、移植腎ではBSCの増加の反応がなく、尿濃縮も不完全であった。従って、尿の最大濃縮にはBSCの発現増加が必須条件であることが判明した。平成14年度は13年度に引き続き腎尿細管のNaトランスポーターを中心に、腎におけるNa再吸収の機序と生理的意義についての研究を続け以下の点を明らかにした。そこで、平成14年度ではリチウム中毒による腎性尿崩症モデルラットを解析し、このBSCの発現変化は病態に大きく影響するとともに、この膜蛋白発現の知見に基づき、新たな薬理効果もしくは薬物療法の検討が可能であることを証明した(Kideny Int. 63:165-171,2003)。
ヒドラの散在神経系における神経回路網の形成と維持の分子機構

ヒドラは、動物界で最も単純な神経系・散在神経系を持ち、脳や神経節の分化が見られず、体全体に神経網を形成している。最近、神経ペプチドの抗血清および単一クローン抗体を用いた蛍光染色法により、この神経網を全載標本で正確に、かつ詳細に観察することが可能になった。また、ヒドラの神経細胞は、位置環境に依存して神経ペプチドの発現を切り替えたり、異なった神経細胞タイプ間の変換をする能力を持ち、神経系の動的側面を顕著に示すことも申請者らによって判明した。又、申請者は、頭部再生中の神経網の形成過程と出芽中の頭部神経網の形成過程について、形態形成異常の突然変異体とそのキメラを用いて検討し、その結果、神経網形成は、環境の上皮細胞に支配されることを、明確に示すことができた。本研究では、散在神経系における神経回路網の形成と維持の機構を理解するため、神経網の形成と維持における神経細胞(前駆細胞も含む)と上皮細胞の相互作用の分子機構について検討した。その結果以下のことが判明した。1、ヒドラの神経網における各神経部分集合の一定の空間分布を規定している上皮細胞の分子メカニズムは何か。この点を形態形成能力の勾配に異常を示す各種突然変異体と上皮細胞が野生株由来で神経細胞が突然変異株由来のキメラ、また、その逆の組み合わせのキメラなどを用いて検討した結果、形態形成能力の勾配が神経網の空間分布の決定に重要な働きをしていることが判明した。2、細胞の外部情報を受け入れる機構の一つであるprotein kinase Cを介したトランスダクション機構が、ヒドラの神経回路網の形成と維持に重要な働きをしていることが、C kinase系の2nd messengerであるDAG(diacylglycerol)の処理実験によって明らかになった。3、現在、本研究室では、神経細胞を全然含まない上皮ヒドラを維持・増殖している。この上皮ヒドラに神経細胞の前駆細胞である幹細胞を導入し、神経網の形成の様子を各部位、各神経部分集合について比較検討した。その結果、触手と口丘では全く異なった神経網形成の機構が働いてモザイク状の神経網の維持に寄与していることが判明した。
活性酸素センサー分子とそのシグナル伝達機構

(1)本研究では活性酸素センサー分子PRLとその標的分子のMg2+トランスポーターMagEx/CNNMに関する研究を進めている。CNNMと協調して細胞内や個体でのMg2+レベル調節に重要な働きをしているTRPM6を腎臓で特異的に欠損させたマウスの作成を進めており、表現型解析に十分な数のマウスを作出することに成功した。また線虫でのCNNM変異体で寿命が短縮すると共に活性酸素の量が変化していることが示唆されていたので、異なる原理の活性酸素プローブを用いてその検証を行った。その結果、腸細胞の中で特異的に活性酸素が増加していることを明らかにできた。さらにこの変異体線虫を抗酸化剤として汎用されるNアセチルシステインで処理すると、野生型の線虫と同程度まで寿命を回復させることもできた。これらの研究成果からCNNMの機能異常が腸での活性酸素産生や寿命短縮に重要であることが明確に示された。(2)本研究開始当初より我々は、活性酸素センサーのひとつであるPP5-KLHDC10システムの応答機構および生理的意義の解明に注力してきたが、併せて、長年研究を続けている活性酸素応答性のリン酸化酵素であるASK1の解析も行い、ASK1が過酸化脂質の蓄積に応答して活性化することを新たに見出した。また、細胞内の過酸化脂質の蓄積はフェロトーシスという種類の細胞死を導くことが知られているが、その制御メカニズムの多くは未解明であったため、ASK1がフェロトーシスの新たな制御因子ではないかと仮説を立て、さらに解析を進めた。その結果、複数のフェロトーシス誘導モデルにおいてASK1が関与することを見出した。フェロトーシスが深く関与することが知られている虚血性疾患モデルにおいて、ASK1の関与がすでに報告されていることを鑑みると、ASK1を介したフェロトーシスの制御が新たな疾患治療戦略として期待される。本研究では、活性酸素の直接の酸化標的となる活性酸素センサー分子に着目して、細胞の活性酸素応答を分子レベルで明らかにすることを目的としており、センサー分子PRLやKLHDC10-PP5の酸化に始まる分子応答機序や、その下流で起こるCNNMによるMg2+輸送やASK1による細胞死などに関する解析を進めている。29年度およびその繰越金を利用した研究によって、交付申請書に記した研究計画の重要な部分をほぼ実施することができただけでなく、CNNM変異による腸細胞特異的な活性酸素増加の確認や、ASK1のフェロトーシスへの関与およびマウスモデルでの重要性の検証など当初予想していなかった重要な研究成果が得られた。特に生体内での局所的な活性酸素増加は、本新学術領域研究全体のテーマ「酸素リモデリング」の追究に合致している。今後これらの発見をベースにさらなる発展が期待できる成果であり、その基礎となる重要な発見と位置付けられる。これらの理由から、29年度およびその繰越金を利用した研究はおおむね順調に進展していると判断した。順調に進展した上記の研究成果を受けて、基本的には申請時の大まかな方向に沿って、さらに発展させてゆく形で今後の研究を進めて行くことを計画している。またそれと共に、新規に見出したCNNM変異体線虫での部位特異的な活性酸素増加やASK1のフェロトーシスにおける役割などの重要な成果については、それを明確にしてゆくための研究計画を追加したり、よりフォーカスを強めた内容になっている。本研究の所期の目的である「細胞の活性酸素応答を分子レベルで明らかにする」に合致しており、これらの研究計画を実施することでさらに大きな発展が期待できる。(1)活性酸素センサー分子PRLの結合標的CNNM/MagExが上皮細胞の基側部に局在する分子機構を明らかにするため、培養系の上皮細胞MDCKを用いて各種変異体の局在解析や関連因子のノックダウン解析などを行った。その結果、CNNM4/MagEx4のC末端部に存在するいくつかのLLモチーフにAP-1複合体が結合して基側部に運んでいることを明らかにした。また、腎臓の遠位尿細管に発現するCNNM2/MagEx2のヘテロ欠損マウスでの血圧異常を確認していたので、血圧制御に重要な因子群の発現解析を行ったが、特に顕著な変化は見られなかった。このマウスの腎臓で網羅的な遺伝子発現解析などを行ったところ、Mg2+輸送に重要なTRPM6などいくつかの興味深い因子の発現が大きく変化していることを見つけた。またこの発現変化は培養細胞系でCNNM/MagExをノックダウンした際にも確認され、しかもそれが活性酸素応答性であることも明らかとなった。(2)主にTNFα大量投与による全身炎症モデルにおけるKLHDC10の生理機能解析を中心に研究を進めた。その結果、KLHDC10欠損マウスにおいてはTNFα大量投与後、炎症性サイトカインの1つIL-6量の低下が認められた。一方、ネクロプトーシスの程度の指標となる各種組織障害性マーカー(ALT, LDH)や、ネクロプトーシスを起こした細胞から放出されるDAMPsマーカーの1つであるミトコンドリアDNAの量等には、KLHDC10欠損マウスにおいては野生型マウスと比較して顕著な差は認められなかった。さらに、in vitroにおけるTNFα誘導性ネクロプトーシスモデルにおいても、KLHDC10欠損によってネクロプトーシスに大きな差は認められなかった。以上の結果は、KLHDC10がネクロプトーシス以降の過程に関与している可能性が高いことを示唆するものと考えている。(1)活性酸素

センサー分子PRLとその標的分子CNNM/MagExの結合が細胞の状態に応じて変化している可能性を調べたところ、細胞内Mg2+濃度が非常に重要であることを見つけた。また、そのときPRLのリン酸化状態が変化していることを示す実験結果も得られた。DOCAや食塩の投与による高血圧モデルマウス実験系で、CNNM2/MagEx2の遺伝子欠損によって明確に血圧が減少することを明らかにした。また、Six2プロモーターを利用したCreの発現により腎臓特異的なCNNM2の遺伝子欠損も行い、腎臓におけるCNNM2の機能がマグネシウム恒常性や血圧の調節に重要であることも明らかにした。TRPM6遺伝子欠損マウスの作成に関しては、注入したES細胞に由来する組換え遺伝子を有するマウスの存在を確認できた。高食塩刺激で血圧上昇が報告されているDahl SSラットに実際に高食塩を与え、その血圧の変化についての経時的モニターも実施した。(2)TNFα大量投与による全身性炎症モデルに対してKLHDC10欠損マウスが抵抗性を示すという表現型の分子基盤を探るべく、細胞系を用いた実験系を中心に解析を行った。全身性炎症の一次的反応として、細胞死を起こした細胞からDAMPsをはじめとする各種液性因子が放出される。このDAMPsに炎症性細胞が応答して、各種サイトカインを放出する結果、過剰な炎症応答が惹起されることが広く知られている。siRNAによる発現抑制系による検討の結果、KLHDC10の発現抑制による炎症性サイトカインの発現誘導抑制は観察されなかった。しかしながらKLHDC10の発現抑制によって、炎症細胞の細胞死が亢進するということを新たに見出した。この結果は、KLHDC10欠損マウスにおいては、炎症細胞の細胞死が亢進することによって過剰な炎症応答から免れていることを想起させる。本研究では、活性酸素の直接の酸化標的となる活性酸素センサー分子に着目して、細胞の活性酸素応答を分子レベルで明らかにすることを目的としており、センサー分子PRLやKLHDC10-PP5の酸化に始まる分子応答機序や、その下流で起こるMg2+輸送や細胞死などに関する解析を進める。27年度においては、交付申請書に具体的に記した研究計画をほぼ実施することができた。PRLとCNNMの結合の制御におけるMg2+の重要性や過剰な炎症応答を回避する新規の機構、など当初予想していなかった研究成果が得られた。今後これらの発見をベースに本研究のさらなる発展が期待でき、その基礎となる重要な発見と位置付けられる。これらの理由から、27年度はおおむね順調に進展していると判断した。活性酸素センサー分子PRLとその標的分子CNNM/MagExの結合が細胞内Mg2+で調節される分子機序を調べたところ、PRLのレドックス応答性Cysがリン酸化されていることが分かった。リン酸化PRLはCNNMと結合しないので、このMg2+応答性のCysリン酸化はPRL/CNNMの結合調節に働いていると考えられる。TRPM6-KOマウスの作成を引き続き進め、TRPM6遺伝子をホモ欠損すると致死となることが分かった。これは文献的に予想された結果だったが、Six2-Creマウスとの交配により腎臓特異的KOへ進め、目的のマウスが生育することを確認できた。