hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
日本語学習者によるコロケーションの習得過程－概念形成理論を援用して－

本研究の目的は、日本人大学生と日本語学習者が考える多義動詞「とる」のプロトタイプを整理した上で、「多義動詞「とる」の多義性をどの程度理解しているか、類義語との使い分けがどの程度できるか、それは発達過程においてどのように変化するか」について、概念形成理論を援用し明らかにすることである。本年度は、日本語学習者が考える「とる」の「プロトタイプ」、「とる」の複数の語義で形成されるコロケーション及び類義語コロケーションとの使い分けをどのような過程を経て習得していくかを明らかにするため、昨年度に引き続き調査を実施した。田中・深谷(1998)による概念形成理論では、語義の習得は「典型化」(プロトタイプ)、「一般化」(多義性理解)、「差異化」(類義性理解)の3過程を経る。大神(2015)において、「典型化」についてのデータを収集していることから、本研究では「一般化」「差異化」に焦点を当て、次の観点から調査を行った。学習者のレベルが高くなるにつれどのようにコロケーションの意味理解および産出が進むか。→「一般化」(多義的な意味を持つ中心語で形成されるコロケーションを理解しているか)→「差異化」(意味的に関連した表現との使い分けについて理解しているか)11月に華東法政大学において中級・上級合計51名を対象に調査を実施し、調査の結果をデータベース化した。また、「差異化」について分析を行い、分析結果を日本語教育方法研究会にて発表した。平成29年度の研究計画およびその進捗状況は次の通りである。1.<計画>調査対象とする多義語「とる」が中国語ではどのような表現であらわされるか整理する。→中国語の対応語に関して辞書記述を整理した。「とる」と中国語の対応語の意味の相違については平成30年度に整理しまとめる。2.<計画>去年に引き続き、「一般化」「差異化」について中国の大学で調査を実施しデータを整理する。昨年度に作成したデータベースをもとに不備等がないか点検し、必要に応じて調査内容を修正する。→計画通り実施した。平成28年度に使用した調査文の一部に学習者にとって難易度の高い日本語の語が含まれていた。平成28年度は中国人教師に適宜中国語で説明してもらったが、今年度(平成29年度)は調査用紙に振り仮名や中国語訳をつけて調査を行った。調査は華東法政大学において実施し、調査結果をデータベース化した。調査は2年生20名(中級)と3年生31名(上級)を対象に行った。昨年度(平成28年度)の調査と合わせると中級・上級合計126名の調査結果を収集することができた。3.<計画>調査全体の分析を行う。分析においては、1語彙の各意味カテゴリー間、2学習者の成績の上位群・下位群、について比較する。→おおよそ計画通りに実施している。平成29年度はデータ全体の整理・集計を行うとともに、「差異化」(「とる」とその類義語の使い分け)に焦点を当てて統計処理を行った。その結果、1については類義語の使い分けの習得が進んでいる項目と進んでいない項目が混在していることが明らかになった。2については上位群のレベルになると類義語同士の語彙のネットワーク知識が構築され始めることが明らかになった。
形状記憶合金の熱サイクル疲労に関する研究

形状記憶合金(SMA)の代表的なものであるTi-Ni合金の針金(1Φ)を用いて、予歪→加熱(回復)→冷却(変形)→加熱(回復)という形状記憶効果(SME)のサイクルを繰返す実験を行った。実験は、長さ200mmの試片の一端を固定し、他端にワイヤー,プーリを介して負荷応力をかけ、そのままの状態で試片を加熱する方法で行った。加熱は、パルス巾電流を試片に直接流し、パルス巾変調方式によって加熱温度・加熱時間の調節を、コンピュータにより行った。冷却は、装置を水槽内に設置し、水を撹拌することにより常に一定条件でなされるようにした。このように、負荷状態でマルテンサイト相と母相間の変態を繰返えし、その時の試片の変形量を非接触変位計で測定した。変位の挙動は、SMEサイクル初期に大きく変化するが、負荷応力10Kg/【mm^2】の場合N(サイクル数)=100で安定状態になり、負荷応力が大きい程、早いサイクルでそこに達し、試片への永久歪の導入も早い。このことは後述の引張試験の結果からもわかった。疲労後の試片の諸性質を調べるために、疲労を任意のサイクルで中断し、それぞれの試片の引張試験,電気抵抗測定を行った。その結果、負荷応力10Kg/【mm^2】の場合は、N=50ではその応力-歪曲線にまだ超弾性領域を示す第一段階が残り、負荷応力14Kg/【mm^2】ではN=25でこの領域は全く消失することがわかった。温度-電気抵抗の関係を測定した結果、(5゚150°C間を測定)冷却時にのみ大きく現われるR相(中間相)の電気抵抗変化は、Nが大きい程、変化量が小さくなるが、R相の現われる温度には変化がないことがわかった。また、これらの試片の内部構造を調べ、疲労過程の解明を行っている。SMAをロボットのアクチュエータに使用するためには、負荷応力と疲労寿命との関係を調べ、最適条件を見出す必要があるが、これは今後の課題である。
人口減少社会における行政地域システムの構築に向けた基礎的研究

「平成の大合併」の進展や少子高齢化・人口減少などの社会環境の変化に伴い,基礎自治体に関する,行政の(あるいは公共的な)機能とその圏域や空間スケールが大きく変化しつつある。本研究は,このような現状を踏まえ,基礎自治体を取り巻くマルチスケールでの行政・公共的機能とその圏域の関係を整理しモデル化するとともに,その課題を抽出することを目的とするものである。調査に際しては,事例地域を設定し,役場や地域団体等へのヒアリングを実施し,その実態を明らかにするとともに,全国の市区町村を対象としたアンケート調査を実施する。これらの結果をまとめ,現時点での「行政地域システム」の課題抽出を行う。
糖輸送担体の哺乳動物細胞でのソーテイング機構の解明

哺乳動物促通拡散ヘキソース輸送体には、GLUT1からGLUT5までの5種類のアイソフォームが存在し、いずれも細胞膜を12回貫通し、N末端とC末端は細胞内に存在するトポロジーを有する。これらのアイソフォームは糖輸送特性に違いがあるだけでなく、細胞内での局在も異なっている。また、この分子はインスリンによる糖取り込み機構の担い手であり、糖尿病とも深く関わる。すなわち、GLUT4はインスリンにより細胞膜へ動員されて糖輸送活性の促進に寄与する。我々は、本研究助成を受け、オーストラリアのJames博士の研究グループと、促通拡散ヘキソース輸送体のアイソフォーム間でキメラ輸送体を作製する共同研究を進めた。まず、ラットGLUT5はグルコース輸送活性は有さずフルクトース輸送体であることを示し、さらにGLUT1とGLUT5のキメラ蛋白をCHO細胞に発現させて、細胞での発現部位を免疫組織染色で確認すると共に、グルコースおよびフルクトースの輸送特性を検討し、グルコースおよびフルクトース輸送能に必要な部位の解明を試みた。これらの結果より細胞内ループ部分および膜貫通ドメイン7-12がGLUT1のグルコース輸送能にきわめて重要と考えられる一方、フルクトース輸送能については、GLUT5のC末端細胞内部位をGLUT1で置き換えただけのキメラ輸送体にさえフルクトース輸送能がなく、GLUT5のフルクトース輸送能の構造要求性は他のヘキソストランスポーターに比べて厳格であることが示された(Inukai K et al.Endocrinology 136 : 4850-4857,1995)。インスリンによる糖輸送促進機構についても、研究を進める上での情報交換を大いにすすめた。そのひとつが、脂肪細胞でのGLUT4の細胞膜上へのトランスロケーションを簡便に検出する、membrane sheet assaynの導入である。これについては、オーストラリアのJames研究室での直接の指導が有用であった。この方法を用いて、インスリンによる糖輸送促進機構についての研究も進めた。3T3-L1脂肪細胞にPI3キナーゼの110KDサブユニットを過剰発現させると、インスリン非存在下でも糖輸送活性の著明な上昇がみられ、これはGLUT4の細胞膜へのトランスロケーションを伴っていた。すなわち、インスリンによる糖輸送促進機構でのPI3キナーゼの活性化の重要性が確認された(Katagiri H et al.J Biol Chem 271 : 16987-16990,1996)。一方、dominant negaiveのp85の過剰発現細胞では、インスリン刺激によっても、抗リン酸化チロシン抗体を用いた免疫沈降物のPI3キナーゼ活性はほとんど増加せず、GLUT4の細胞膜へのトランスロケーションも認められず、糖輸送活性への促進効果も著明に抑制された(Katagiri H et al.Am J Physiol in press,1997)。また、細胞内ソーテングに関与する分子として、syntaxin-binding proteinのひとつであるmuSEC1をクローニングした(Katagiri H,et al.J Biol Chem 270 : 4963-4966,1995)が、我々よりやや遅れはしたが、James教授らも同様の分子を異なった方法でクローニングし、J Biol Chemに発表した。以上のように、オーストラリアのJames教授研究室との共同研究は、論文発表のみならず、意見・研究情報の交換、研究方法論の共有と、大きな成果をあげた。

3T3-L1脂肪細胞にPI3キナーゼの110KDサブユニットを過剰発現させると、インスリン非存在下でも糖輸送活性の著明な上昇がみられ、これはGLUT4の細胞膜へのトランスロケーションを伴っていた。すなわち、インスリンによる糖輸送促進機構でのPI3キナーゼの活性化の重要性が確認された(Katagiri H et al.J Biol Chem 271 : 16987-16990,1996)。一方、dominant negaiveのp85の過剰発現細胞では、インスリン刺激によっても、抗リン酸化チロシン抗体を用いた免疫沈降物のPI3キナーゼ活性はほとんど増加せず、GLUT4の細胞膜へのトランスロケーションも認められず、糖輸送活性への促進効果も著明に抑制された(Katagiri H et al.Am J Physiol in press,1997)。また、細胞内ソーテングに関与する分子として、syntaxin-binding proteinのひとつであるmuSEC1をクローニングした(Katagiri H,et al.J Biol Chem 270 : 4963-4966,1995)が、我々よりやや遅れはしたが、James教授らも同様の分子を異なった方法でクローニングし、J Biol Chemに発表した。以上のように、オーストラリアのJames教授研究室との共同研究は、論文発表のみならず、意見・研究情報の交換、研究方法論の共有と、大きな成果をあげた。哺乳動物促通拡散ヘキソース輸送体のアイソフォームであるGLUT5はフルクトース輸送体であり、この輸送能はグルコース輸送の特異的阻害剤であるサイトカラシンBでも阻止されず、サイトカラシンBのGLUT5への結合も認められなかった。GLUT1とGLUT5間でさまざまなキメラ蛋白cDNAを作製しCHO細胞に発現させ、細胞での発現部位を免疫組織染色で確認すると共に、グルコースおよびフルクトースの輸送特性を検討し、グルコースおよびフルクトース輸送能に必要な部位の解明を試みた。これらの結果より細胞内ループ部分および膜貫通ドメイン7-12がGLUT1のグルコース輸送能にきわめて重要と考えられる一方、フルクトース輸送能については、GLUT5のC末端細胞内部位をGLUT1で置き換えただけのキメラ輸送体にさえフルクトース輸送能がなく、GLUT5のフルクトース輸送能の構造要求性は他のヘキソストランスポーターに比べて厳格であることが示された。GLUT5とGLUT1については、極性のある細胞での細胞内局在に違いがあり、細胞内ソーテイング機構についても良いモデルとなる。すなわち、GLUT5はapical側に、GLUT1はbasolateral側に局在し、消化管腔から吸収した糖を血管内に取り込むのに関わっている。そこで、細胞内ソーテイングを決定するモチーフを解明するために、GLUT5とGLUT1の間で様々なキメラを作製し、ヒト消化管上皮細胞のモデルであるCaco-2細胞に発現させ、検討している。preliminaryな結果ではあるが、膜貫通部位6と7の間にある細胞内ループ部分がCaco-2細胞におけるGLUT1とGLUT5のソーテイングの違いを決定しているとの結果を得た。
MTT法による難治性小児白血病の薬剤感受性と臨床効果の検討

平成5年度は、急性非リンパ性白血病再発例のin vitro薬剤感受性を初発例と比較した。また薬剤感受性を基に化学療法を組み立てるindividualized chemosensitivity directed chemotherapyの成績をM1&M2,M4&M5の再発例についてpreliminaryにまとめた。In vitro薬剤感受性は、M1&M2初発25名・再発14名、M4&M5初発17名・再発23名、合計79名95検体についてMTT法で調べた。再発例の治療の中で(1)感受性テストの結果からのみ抗癌剤を選択した群(ICDC)27コースと、(2)薬剤感受性テストを全く参考にせず経験あるいはプロトコルに沿って化学療法を行った群(local hospital protocol,LHP)17コースとで治療成績を検定した。その結果、M4&M5再発例ではVP16,AraCに対する感受性が低下していた(p<0.05)が、M1&M2では同程度であった。ICDC群のCR/PR率は52%,LHP群のCR/PR率は18%でICDC群の方が良好であった(p<0.05)。他の難治性小児白血病たとえば乳児白血病・Ph1陽性白血病、B-ALL,mixed linage ALLについては、検討症例数が少なく抗癌剤感受性の特徴を明らかにするまでには至らなかった。次年度の課題である。臨床使用抗癌剤の評価では、完全寛解(CR)に達した場合のみをin vivo sensitiveとしたが、CRは抗癌剤感受性の他に骨髄幹細胞の予備力にも強く影響されることが分ったので、CRが得られなかった場合どちらが原因かを明らかにする必要があろう。
食物アレルギー発症と皮膚ならびに腸管バリア機能異常との関連の検討

皮膚バリアーの脆弱性と食物アレルギー発症との関連を検証することを目的として、食物アレルギー患者の病態とfilaggrin(FLG)の関連について検討した。対象は、食物アレルギーを疑い、藤田保健衛生大学坂文種報徳会病院と関連施設を受診した、乳幼児116例とした。FLG変異、FLG領域のSNP、copy number variation(CNV)について解析し、臨床所見、検査所見との関連を検索した。その結果、FLG遺伝子promoter領域に存在するSNPと、感作食品数および鶏卵、牛乳の特異的IgE値との関連が認められ、食物感作に及ぼすFLGの関与を示唆する新たなevidenceと考えられた。研究協力施設(藤田保健衛生大学病院、藤田保健衛生大学坂文種報徳会病院、豊橋市民病院、渥美病院、星ヶ丘マタニティ病院、てらだアレルギーこどもクリニックの合計6施設)で、9ヵ月から14ヵ月の乳児116例を蓄積した。得られたDNA検体に対して、日本人で既知のフィラグリン遺伝子の機能喪失型変異8種と日本人で代表的な一塩基多型(SNP)を2種(rs1933064、rs12730241)をTaqMan法で検出した。rs1933064のマイナーアレルの発現が、少ない食物アレルゲンの感作項目数(卵白、牛乳、小麦、大豆、ピーナッツでクラス1以上を感作ありと定義)と関連していることを発見した(P = 0.029)。この関連はアトピー性皮膚炎の有無、機能喪失型変異の有無で補正の後もみられた(P = 0.0055)。rs1933064はフィラグリン遺伝子の上流に存在し、プロモーター活性の調製を介してフィラグリン遺伝子の機能、さらには乳児の食物アレルゲン感作に関連する可能性が示唆された。ここまでの研究成果をAnnals of Allergy, Asthma and Immunologyに報告した。今後は、他のバリア関連遺伝子との関連解析を進める予定である。皮膚バリアーの脆弱性と食物アレルギー発症との関連を検証することを目的として、乳幼児食物アレルギー患者の病態とfilaggrin遺伝子(FLG)の関連について検討した。対象は、食物アレルギーを疑い、藤田保健衛生大学坂文種報徳会病院と関連施設を受診した、生後9ヵ月から14ヵ月の乳幼児116例とした。本研究は当該研究期間の倫理委員会の承認を得て行い、対象の保護者からは、文書による説明と同意を得た。前年度までに、FLG機能喪失変異(日本人で既知の8変異)およびFLG領域のSNPについて、Custom TaqMan SNP Genotyping Assayを用いて解析し、臨床所見、検査所見との関連を検索して、FLG遺伝子promoter領域に存在するSNPと、感作食品数および鶏卵、牛乳のImmnoCAPクラスとの関連が認められた。これらの関連は、FLGの機能喪失変異を有する症例を除いても認められ、本SNPが未知の機能喪失変異、あるいは、発現に影響を与えるpromoter活性と連鎖不平衡にあると考えられ、食物感作に及ぼすFLGの関与を示唆する新たなevidenceと考えられた。本年度は、FLGの機能と食物アレルゲン感作の関連をさらに検討する目的で、同じコホートを対象に、FLG遺伝子のcopy number variation(CNV)について、long PCRを用いて解析したが、アトピー性皮膚炎や食物アレルギー感作との有意な関連は認められなかった。研究協力施設(藤田保健衛生大学病院,藤田保健衛生大学坂文種報徳會病院,豊橋市民病院,渥美病院,星ヶ丘マタニティ病院,てらだアレルギーこどもクリニックの合計6施設)で,これまでに9ヵ月から13ヵ月の乳児96例を蓄積した.得られたDNA検体に対して,日本人で既知のフィラグリン遺伝子の機能喪失型変異(R501X,3321delA,S1695X,Q1701X,S2554X,S2889X,S3296X,K4022Xの8種類)をTaqMan法で検出した.96例中13例(13.5%)で少なくとも1アレル以上のフィラグリン機能喪失型変異を認めた.食物アレルゲンへの感作状況(卵白,牛乳,小麦,大豆,ピーナッツへの感作項目数)とフィラグリン機能喪失型変異の関連を調査したところ,感作が全く見られなかった症例では14例中0例(0%),1項目以上の感作を認めた症例では82例中13例(15.9%)がフィラグリン機能喪失型変異を認めた(Fisher正確検定,p=0.20).フィラグリン機能喪失型変異を有し,先天的に皮膚バリア障害を認めることが食物アレルギー発症に関与している可能性がある.日本人の一般人口においてフィラグリン機能喪失型変異は4%との報告がある.今回,健常成人ボランティア50名に対して解析を行ったところ,5例(10%)でフィラグリン機能喪失型変異を認めた.フィラグリン遺伝子の一塩基多型との関連解析を一部進めている.

引き続き症例の集積,他のバリア関連遺伝子との関連解析が必要である.一定数の症例を確保し、フィラグリン機能喪失型変異、フィラグリンSNPとの関連解析を進めた。これらの結果については一定の成果が得られたため、論文報告した。腸管バリア関連遺伝子との関連を進める必要がある。症例の蓄積が困難であるが,当初予定した藤田保健衛生大学病院,藤田保健衛生大学坂文種報徳會病院以外に,研究協力施設を追加することで,研究期間に見合った症例の蓄積が進められた.予想される最大の関連因子であるフィラグリン機能喪失型変異と食物アレルゲン感作の関連を認める傾向にあり,引き続き症例の蓄積を進めることで新たな知見が得られる可能性がある.ターゲットとする腸管バリア関連遺伝子の探索を進める必要があるが,平成23年度は進めることができていない.腸管バリア関連遺伝子の候補遺伝子検索、蓄積済みの症例について食物アレルギー感作との関連解析を進める。引き続き研究協力施設からの症例集積を行う.フィラグリン機能喪失型変異との関連調査を進めるが,同時に腸管バリア関連遺伝子の候補遺伝子断作を行う.解析に引き続き使用するDNA抽出試薬、PCR試薬、腸管バリア関連遺伝子のTaqManプローブの購入が必要である。解析に引き続き使用するDNA抽出試薬,PCR試薬,フィラグリン機能喪失型変異のTaqManプローブに加えて,新たに検討する腸管バリア関連遺伝子のTaqManプローブの購入が必要である.
アメリカにおける大衆向けロマンス出版事業とその影響に関する文化論的研究

当該テーマについて各種文献を調査・研究した結果、以下のような論文が研究成果として発表された:(1)「すべてはロマンスから始まった:文学史から見たハーレクイン・ロマンス」(ハーレクイン・ロマンスの出版経緯とその文学史的意義を総論としてまとめたもの)。(2)「吸血鬼を「ロマンス」する:ヴァンパイア・ロマンスtwilightについての一考察」(1990年代以降、なぜアメリカで吸血鬼を主人公にしたロマンスが流行したのかを分析したもの)。(3)「シークの時代: 20世紀初頭の「砂漠捕囚ロマンス」」(20世紀初頭のイギリスで、アフリカ北部や中東の砂漠を舞台にしたエキゾチックなロマンスが流行したことの理由を分析したもの)。本年度に関しては1960年代にアメリカで流行したゴシック・ロマンスについて、18世紀イギリスに由来する「ゴシック小説」の伝統や、アメリカ19世紀末の「お針子ロマンス」などとも関連付けながら、その系譜を明らかにすることを研究の主目的としていたが、カリフォルニア大学図書館で発掘した資料などを活用することで、これらの文学ジャンルに通底する「ヒロインによる家の喪失と回復の物語」のテーマを考察出来た他、及び、騒乱の時代特有の社会不安が、これらゴシック系ロマンスの背後にあることなどを結論付けることが出来た。また本年度行った研究も含め、これまで継続的に行ってきた「大衆向けロマンス」に関する研究を元に、『ロマンスの王様ハーレクインの世界』(洋泉社・平成22年4月出版・142150頁)という市販本に、ハーレクイン・ロマンスの出版経緯とその意義について概説を執筆した。さらに関連する事項として、アメリカにおける書籍の流通に関する研究も行い、その成果は論文「アメリカを変えたブッククラブBook-of-the-Month Clubの現在・過去・未来」として、『外国語研究』(愛知教育大学英語研究室)第43号にまとめた。本年度に関しては、まず当初予定していたように1990年代以降の大衆向けロマンスの動向を追い、その中でも特に超能力者をヒーローに据えた「パラノーマル・ロマンス」の流行に注目、ヒロインとヒーローの恋愛劇の中にSF的な、あるいは怪奇小説的な要素を取り入れたロマンスがいかにして登場し、またそれが何故アメリカ社会の中で大衆的な人気を得て行ったのかについて調査と考察を巡らせ、その成果は「吸血鬼を「ロマンスする」:ヴァンパイア・ロマンスtwilightについての一考察」(『外国語研究』(愛知教育大学外国語外国文学研究会)第44号所収)という論文にまとめることが出来た。またこれに加え、1919年に書かれ、20世紀大衆向けロマンスに登場する「ヒーロー像」の形成に大きな影響を与えたと言われるE.M.HullのThe Sheikという作品の分析も並行して行ない、この作品とその背後にある19世紀末(ヴィクトリア朝末期)のイギリスに生じた「女性旅行者」の増加という社会現象とを関連付けた考察を行った。この方面の研究については、「シークの時代:20世紀初頭の砂漠捕囚ロマンス」(『ことばとコミュニケーションのフォーラム』(開拓社刊)所収)と題した論文にまとめ、公表した。なおこれらの研究に関し、ハーバード大学ワイドナー図書館、及びボストン大学ムガール記念図書館で得た資料を活用した。さらに本年度は金城学院大学大学院英文学会からの依頼を受け、大衆向けロマンスの出版史に関する講演を行なうなど、この新しい学問分野に関する啓蒙活動にも積極的に取り組んだ。本年度に関しては、平成21年度か3ヵ年に亘って行ってきた本研究の総まとめとし、アメリカにおける大衆向けロマンス小説の出版史についての研究書の執筆を行なった。その結果、序章「恋は本屋さんで売っている?アメリカ大衆向けロマンス小説とは何か」、第1章「ロマンス小説の起源」、第2章「働く娘にロマンスを:アメリカン・ロマンスとローラ・ジーン・リビー」、第3章「道化師の誕生:ハーレクイン・ロマンスの世界」、第4章「恋はイギリスからやってくる?ミルズ&ブーン社の誕生」、第5章「20世紀初頭の砂漠捕囚ロマンス」、第6章「ロマンス戦争の行方:ハーレクイン対シルエット」、第7章「ハーレクイン対フェミニズム:大衆向けロマンス批評の迷走」、第8章「恥ずかしい読書:大衆向けロマンス小説受容史」、第9章「ヴァンパイア・ロマンスの夜明け21世紀のロマンス小説の形」、終章「大衆向けロマンスは永久に」など、各章の執筆を概ね終了することが出来た。しかし、本書の完成にはなお1、2章分の追加執筆が必要であること、及び、各章のつながりになお一層の推敲が必要であることもあり、研究書執筆を当初の予定通りの期間内に完了することが出来なかった。過去において行なった学会発表や論文発表での感触から、本研究に対する学会での関心と評価は決して低いものではないと自負する溌けに、今後、速やかに執筆を完了し、研究書の出版を行なうことで、当初の目標を達成したいと考えている。

なお、研究書の執筆に関わり、調査不足・資料不足の状況が生じた場合、カリフォルニア大学ロサンゼルス校での資料探索を行うことも視野に入れていたが、勤務校でのスケジュールの関係上、断念せざるを得なかったため、新たな必要資料の購入によって当初の予定に替えた。
ドイツ同時代小説に見る歴史の「残像」

戦後と同時代のドイツ文学で過去との取り組み方が質的に異なるのを明らかにするべく、1)時系列による編年体形式に変わって同一の空間に複数の時代を併存させるクロノトポスの技法が、現代では、バフチンが論じた小説にばかりではなく、詩においても認められること、2)伝記的自伝的な真実性を基準とするのではなく、歴史的事実と虚構を織り交ぜるオートフィクションの手法が顕著であること、3)絶対的な公準としていた過去から目を逸らさないという戦後ドイツ文学の道義的要請を徹底的に放棄して現在にフォーカスする傾向が強まっていることに注目し、H・ミュラー、W・ヒルビッヒ、K・レッグラらを研究し、その成果を国際学会で発表した。まずは21世紀のドイツ小説の特徴をつかむために、隔月で研究会を開催した。なかでも注目される作家としてポップ文学の騎手ヤン・ブラント、虚構的自伝(オトフィクシオン)の名手フェリシタス・ホッペ、そして移民文学に新風を吹き込むシビュレ・レヴィッチャロフとアンナ・キムらの小説を取りあげ、担当者を決めて発表報告と集中討議を行った。ドイツで生まれ育った移民二世の文学作品を例として、文体や作品構成の独自性やユーモアや諷刺などの新しい処理の仕方に注目しながら、先行世代の移民文学との違いが大きな焦点となった。さらに同時代文学に関するドイツにおける先行研究を批判的に受容するために、空襲小説やアルツハイマー小説などについて論じるウルリーケ・フェッダー(フンボルト大学)、ポップ小説の大家モーリッツ・バスラー(ミュンスター大学)、同時代文学における虚構と現実の枠を問うウーヴェ・ヴィルト(ジーゲン大学)、自伝の虚構性を論じるマルティナ・ヴァーグナー=エーゲルハーフ(ミュンスター大学)らの研究書を参照することで、問題意識を深めることができた。成果発表としては、年二回開催のドイツ現代文学ゼミナールで研究協力者複数名が口頭発表をした。研究代表者は4月にパリ・ソルボンヌ大学主催の「ヨーゼフ・ヴィンクラー=シンポジウム」で彼の旅行記のもつオトフィクシオン性について口頭発表した。9月にはベルリンに研究出張をしてウルリーケ・フェッダー教授と研究打ち合わせを行い、3月には同氏を招聘して開催した日本独文学会第56回文化ゼミナールの開催責任者を務めて、国際研究者交流を推進した。研究成果としてはさらに、研究代表者が編纂した『ゼロ年代の小説記憶の歴史化と今をつかめ』(日本独文学会研究叢書93)を刊行した。同書には連携研究者のほか、研究協力者が複数寄稿した。これによって研究成果をひろく社会に還元することができた。ドイツ同時代小説に見る歴史の「残像」を取り上げる本研究で、2014年度は、証言としての文学、つまり自伝的な語り口についての考察に最大の力点を置くことになった。当初の計画では、時代の生き証人が鬼籍に入るなかで、直接的な戦争体験、ホロコースト体験をもたいない第二第三世代がドキュメンタリー要素に虚構を織り交ぜて作品化し、戦後文学的なモラルの束縛から自由になる様相を具体的な作品に即して見ていくつもりであったが、そもそも自伝的な語りにはつねに虚構性がつきまとうのではないか、という問題に直面することになったのである。研究代表者は自伝ならびにオトフィクション研究の権威マルティナ・ヴァーグナー=エーゲルハーフ教授と1年間にわたって共同研究を進め、1月にミュンスター大学を訪問して意見交換をした上で、3月にはドイツ学術交流会(DAAD)後援、日本独文学会主催の蓼科文化ゼミナールに招聘した。ゼミナールでは、国内各地のドイツ文学研究者が集まり、総勢50人の規模で様々な視点から活発な議論がなされ、すでに戦後文学(ハントケ、ベルンハルト、グラス、フリッシュ、ヴァイス、ヴォルフら)の自伝的文学のなかにフィクション性が強く刻印されていることが理解できたし、フランスの作家ドゥブロフスキーが提起したものの概念規定が曖昧なままであった「オトフィクション」という概念が、内外の最新の理論的考察を読み解くなかで、広い射程を持つことが明らかになった。本研究のテーマである歴史の「残像」を考える上でも、同概念は大変に有益なので、この概念を今後の核の一つに据えることになるだろう。同時に研究成果の国際的な発信にも努め、特に韓国のソラクシンポジウムでの発表ではヘルタ・ミュラーの秘密警察小説『狙われたキツネ』や収容所小説『息のブランコ』に見られるオートフィクション性に着目し、ドイツ、韓国の研究者たちと活発な議論を行なった。今年度も21世紀のドイツ小説の特徴をつかむために、レオポルト・シュレンドルフ訪問講師(慶応大学)と共同で大学院生やポスドクをメンバーとして定期的に研究会を開催した。本年度は計画通り、いわゆる戦後文学との差別化に重点を置き、ポップ文学の新風を吹き込んだクリスティアン・クラハト、SFやポルノなど通俗性を取り込むクレメンス・J・ゼッツら若手中堅のほか、ヴァルター・カッパハー、ペーター・ハントケ、エーリヒ・フリート、コンラート・バイアーなどオーストリアの作家を中心に選書し、担当者を決めて発表と集中討議を行った。リアリズム偏重のドイツ文学の本流とは一味違ったオーストリア文学のなかに21世紀文学に通じる遊戯性などが読み取れた。ゲーテインスティチュートとの連携も強め、招聘作家の朗読会で司会を務めたり、ワークショップを共催したりして、同時代作家や批評家たちとの意見交換をはかった(J・ロトマン、W・パテルノ、J.ゼッツ)。

ドイツの研究者との学術交流も強化し、2015年6月にはロストック大学でウーヴェ・ヨーンゾンとドイツ現代文学に関するワークショップを、10月には早稲田大学にロストックの研究者を招いて第二回ワークショップを開催した。2016年3月にはトリーア大学とのワークショップ(早稲田大学)に参加し、ドイツ現代詩人による俳句の実践について研究発表した。このほかの成果発表として研究代表者は、5月にウィーン文芸協会で日本における現代オーストリア文学の受容について招聘講演をし、8月に開催された国際ゲルマ二スト会議(上海)でヘルタ・ミュラー、9月にフンボルトフォーラム(北京)でグリュンバイン、10月の日本独文学会(鹿児島)でランゲ=ミュラーについて口頭発表した。論文として、アイヒンガーとヘルタ・ミュラーを論じた独文論文とヴィンクラーのオートフィクションを論じた独文論文を発表した。同時代文学作品を隔月で読みこなす一方で、20世紀ドイツ文学のリアリズム偏重傾向との差別化を図るために、主としてオーストリアの言語遊戯性を重視した文学傾向の発掘することに務めた。この点では当初計画通りに研究課題は間違いなく進捗している。当初の計画以上に進展していると判断した理由は、当初計画で謳った国際学術交流の推進が想定以上に進んだからである。5月にウィーンで招聘講演、6月にロストックでワークショップ、8月に上海で国際学会、9月に北京で招聘基調講演、10月にロストック大学ヘルビッヒ教授を招いて国際シンポジウム、11月で台湾で招聘講演、12月にギリシアで国際学会、3月に東京で国際ワークショップがあって、内外の研究者に対して研究成果を示すことができた。発表後の質疑応答やレセプションでのディスカッションによって、問題意識を拡大することができたのが大きな成果である。三年目を迎えた本年度は、ドイツ現代文学における過去との取り組みの変質を見ていくにあたり、二つの観点から集中的に取り組んだ。第一の柱は、長大な編年体形式で時代を時系列に記述するのではなく、特的の空間の中に呼び込んで集中的に描写する「クロノトポス」的な手法である。バフチンに由来し、エーケやエメリヒらの研究者によって、現代文学解読のツールに活用されているこの概念をアスマンの「想起の空間」と絡めて援用することで、転換期の東ドイツ文学(ヒルビヒ、グリュンバイン)に顕著に見られる「ゴミ山」の表象を分析して、これが正史から排除された者たちの救出というベンヤミン的な救済の批評に通じるとともに、美学的にはコラージュやアッサンブラージュといったアヴァンギャルドの技法を体現していることを明らかにすることができた。その成果は2016年8月に韓国で開催されたアジアゲルマニスト会議にてドイツ語により研究発表した。このクロノトポスと関連して、文学と建築の関わりを問う日本独文学会秋季大会(2016年10月、関西大学)のシンポジウム(ドイツ語)に登壇し、グラスやヒルビヒら現代文学における「地下室」の表象をドストエフスキー以来の伝統のなかにおいて問い直す試みもした。第二の柱は、伝記や自伝に敢えて虚構を混ぜ込んで事実性と虚構性の遊戯のなかに過去を巻き込む「オートフィクション」の諸相である。これについてシュレンドルフ講師(慶應大学)と共同研究を進めた。同講師の音頭によって、2016年5月の日本独文学会春季大会では、招聘したヤン・ジン教授(上海外国語大学)も加わって、オートフィクションの今を問うシンポジウムを開催した。
窒素ドープCr-Ge-Teの界面伝導制御と新規接触抵抗相変化メモリの創成

本年度の研究では、高い耐熱性を有し、アモルファス/結晶相接触抵抗変化に伴う可逆的なデバイス抵抗変化を示す新規相変化材料:NドープCr2Ge2Te6(NCrGT)について、その高速相変化メカニズムと接触抵抗差の電極依存性を解明する。さらに、NCrGT三次元スタック構造の実現に向けては、セレクタの導入が必要である。それに対し、p型NCrGT半導体とn型半導体を接合する事でダイオードを形成し、革新的なセレクタ/メモリハイブリッド構造の構築を目指す。ハイブリッド構造の実現は、次世代NVMのブレイクスルーとして、超高集積・超大容量化はもとより人工知能分野への応用も大いに期待できる。
肺サルコイドーシス症の分子免疫学的解析

サルコイドーシスは地域特異的に患者が発生することが知られ、日本におけるサルコイドーシスは欧米と異なり肺サルコイドーシス患者が多い。また、肺サルコイドーシス患者の肺胞洗浄液(BALF)中にCD4+T細胞が著明に増加する事はよく知られている。しかしながら、いまだ本症の原因は不明である。申請者らはCD11b+T細胞,CD28+T細胞は臓器特異的分布することを明らかにした。この研究の過程に、肺サルコイドーシス患者の肺胞洗浄液(BALA)中のT細胞は膜表面抗原CD3,CD11b,CD28抗原が著明に減少している事を見いだした(J. Immunol.,151,2237-2246,1993)。このBALF中のT細胞はmRNAレベルでT helper type1(Th1)タイプ主体のサイトカインを強く発現していた。(米国胸部学会の招待シンポジウムにて、平成5年5月サンフランシスコにて発表)。そして、肺サルコイドーシス患者の病変部(BALF、眼房水)から樹立したT細胞クローンはIL-4意外のTh1タイプ主体の様々なサイトカインを未刺激下で多量に産生する事をクローンレベルで証明した。一方、患者病変部の肺胞マクロファージはCD28抗原のリガンドのB7(CD80),B70(CD86)抗原をHLA-DR抗原とともに強く発現していた。それ故、病変部の活性化T細胞が産生するサイトカインがサルコイドーシスの病因と関与し、このサイトカイン産生はCD28抗原とリガンドのB7(CD80),B70(CD86)抗原を介する副シグナル(second signal)によって増強されていることが示唆された(Clin. Exp. Immunol.,102,399-406,1995)。よって、本研究は当初の目的(肺サルコイドーシス症の分子免疫学的解析)の成果を達成したと考える。申請者らはCD11b+T細胞,CD28+T細胞は臓器特異的分布することを明らかにした(J.lmmunol.,151,2237-2246,1993)。この研究の過程に、肺サルコイドーシス患者の肺胞洗浄液(BALF)中のT細胞は膜表面抗原CD3,CD11b,CD28抗原が著明に減少している事を見いだした。この膜表現型のT細胞は同一患者または正常人の末梢血に存在せず、その上このBALF中のT細胞はmRNAレベルでT helper typel(Thl)タイプのサイトカインを主体に強く発現していた。また、患者の末梢血、BALF、眼房水から樹立したCD4+T細胞クローンはIL-4以外のサイトカイン(IL-1α,IL-2,IL-6,IL-10,TNF-α,IFN-γ)を多量に産生しており、これらのT細胞がサルコイドーシスの病因と関与していることが示唆された(主論文投稿中)。これらの研究成果にもとずき"サルコイドーシス症に特有の抗原刺激が病変部T細胞の異常増殖を誘導し結節形成を引き起こす"との作業仮説をたてた。具体的に今年度は以下のことを行った。(1)全身性に病変部を形成したサルコイドーシス患者より眼房水,BALFを採取し、これらよりT細胞クローンを樹立した。(2)肺サルコイドーシス患者のBALFより肺胞マクロファージを新鮮分離し、新鮮分離した患者肺胞マクロファージ上の抗原をacid solutionにて分離した。これを分子量、HPLCにて分画した。

(3)多数のサルコイドーシス患者末梢血よりEBV-transformed B cellを樹立した。来年度は、これらT細胞クローンとautoまたはalloの肺胞マクロファージとの反応を検討する。即ち、混合培養上清中のサイトカイン及びT細胞のDNA合成を測定する。これら病変部T細胞が特定の抗原を認識しているならばCD4+T細胞はIFN-γ,TNF-α,IL-2等のサイトカインを産生し、DNA合成も増加するはずである。acid solutionにて分離した患者肺胞マクロファージ上の抗原(ペプチド)を、このシステムを用いて病変部T細胞が認識している抗原の同定を目標とする。申請者らはCD11b+T細胞, CD28+T細胞は臓器特異的分布することを明らかにした。この研究の過程に、肺サルコイドーシス患者の肺胞洗浄液(BALF)中のT細胞は膜表面抗原CD3, CD11b, CD28抗原が著明に減少している事を見いだした(J. Immunol., 151, 2237-2246, 1993)。このBALF中のT細胞はmRNAレベルでT helpertype 1 (Th1)タイプ主体のサイトカインを強く発現していた。(米国胸部学会の招待シンポジウムにて、平成5年年5月サンフランスシスコにて発表)。そして、肺サルコイドーシス患者の病変部(BALF、眼房水)から樹立したT細胞クローンはIL-4以外のTh1タイプ主体の様々なサイトカインを未刺激下で多量に産生する事をクローンレベルで証明した。一方、患者病変部の肺胞マクロファージはCD28抗原のリガンドのB7 (CD80), B70 (CD86)抗原をHLA-DR抗原とともに強く発現していた。それ故、病変部の活性化T細胞が産生するサイトカインがサルコイドーシスの病因と関与し、このサイトカイン産生はCD28抗原とリガンドのB7 (CD80), B70 (CD86)抗原を介する副シグナル(second signal)によって増強されていることが示唆された(Clin. Exp. Immunol., 102, 399-405, 1995)。
無線センサネットワークのためのディペンダブル省電力通信プロトコル開発

無線センサネットワークは、河川氾濫や森林火災の監視など幅広い応用が考えられている。センサネットワークは、長時間に渡って情報収集をより確実に行うことが求められる。本研究では、消費電力について考慮しながら情報転送において信頼性の高い通信プロトコル実現にむけたブロードキャスト方式、適応変調方式、データ収集経路構築方式を提案し、シミュレーションならびに実証実験により、提案方式の有効性を検証した。実証実験システムの構築と瓦礫などの通信環境の悪い状况においても通信可能なディペンダブルな経路制御プロトコルの開発と、センスネットワークシミュレータの構築をおこなうことが本研究の目的である。本年度は、予備的な年度に位置づけられ、下記の検討をおこなった。まず、実証実験システムの構築と瓦礫などの通信環境の悪い状况での実験をおこなうために、無線ノートGnuRadioを予備的に2台導入し、その動作検証をおこなった。また、実装予定のフラッディング時に受信電力の小さいブロードキャストパケットを破棄し、不安定な経路が形成さなることを防ぐ経路構築方式について、予備実験としてシミュレーションによる性能評価をおこない、その有効性を検証した。上記と並行して、仮想テストベッドのためのネットワークシミュレータScenargieを導入し、動作検証をおこなうとともに、シミュレーションコードのクラフ構造の分析をおこなった。なおScenargieは、障害物などの影響を考慮した電波伝搬計算を高速に実行できるため、本研究の目的に合致している。またノード故障やリンク障害に対応するための経路制御技術に関する基礎検討として、R. Bhandari, "Survivable Networks," Kluwer, 1999に記述されているディスジョイントパス計算アルゴリズムならびに関連アルゴリズムについて調査をおこなった。これらの取り組みの結果、目的達成のための準備を十分におこようことができた。ディペンダブルなセンサネットワークを実現するための基盤技術として、適応変調方式、送信電力制御方式、高信頼ブロードキャスト方式の検討をおこなった。適応変調方式については、フェード区間範囲推定をおこなう方式を提案し、セットアップの完了したテストベッド基盤ネットワークシミュレータScenargie上にARF(Auto Rate Fallback),CARA(Collision Aware Rate Adaptation),AMARF(Adaptive Multi-rate Auto Rate Fallback)とあわせて実装し、比較実験をおこない、提案方式の有効性を確認した。送信電力制御方式としては、受信SINRを均質化する送信電力制御をおこなうことで、通信スループットを改善できることを確認した。高信頼ブロードキャストについては、レーム受信強度に応じてブロードキャスト実行遅延を制御する手法(DISCOUNT-SJ方式)を提案し、シミュレーションにより配信率を保ちつつ配信遅延と制御オーバヘッドを削減できることを明らかにした。また、高信頼性を実現するために、TDP(Total Dominant Pruning)アルゴリズムをベースに再配信ノードを限定し、かつパッシブACKを利用することでわずかな制御オーバヘッドの増加だけでメッセージ配信率を改善できることを明らかにした。本研究では、ディペンダブルセンサネットワーク通信プロトコルを開発し、実証実験とシミュレーションによる両アプローチによる性能評価により、その有効性を検証することを目的としている。本年度は、スマートメータや災害時の情報収集への応用が考えられている定期収集型マルチホップ無線センサネットワークを対象として、ディスジョイントパス構築アルゴリズム、および、任意組合せ型ネットワークコーディングによるパス構築アルゴリズムをシミュレーションテストベッドならびに実機端末上に実装し、情報収集率特性の評価を行った。これにより、シングルパス型定期収集型センサネットワークに比べて、ノード故障に対する高い信頼性を実現できることを明らかにした。特に、任意組合せ型ネットワークコーディングパス構築アルゴリズムは、オーバヘッドが小さく、システム寿命への影響を押さえつつ、耐障害性を高めることができることを明らかにした。また、あわせてディペンダブルセンサノード技術の要素技術として、分割型SRAM(Static Random Access Memory)技術の論文発表を行った。分割型SRAMは、実装が容易なSRAMを分割し,必要に応じてメモリセルブロックをオンにすることで、リーク電流を削減する。これにより大容量メモリをもつセンサノードであっても低消費電力化を図ることが可能である。シミュレーション実験により、システム寿命を改善できることをシミュレーション実験により明らかにした。
ヒト褐色脂肪組織活性の遺伝学研究

褐色脂肪組織はヒトの重要な熱産生装置の一つと考えられている。斉藤らは、静脈注射したフッ素放射性同位体標識グルコースの動態を、陽電子放出断層撮影(PET-CT)で観察することにより、成人でも寒冷刺激により褐色脂肪組織が活性化すること、さらに、適切な寒冷刺激を加えても褐色脂肪組織の活性を示さない者が日本人成人には相当数存在することを見出した。このような褐色脂肪組織活性の個人差の一部は遺伝的に決定されている可能性があり、1型非共役タンパク質遺伝子や3型βアドレナリン受容体遺伝子の一塩基多型(SNP)の関与が報告されているが、その全体像は未だ解明されていない。本課題では、FDGとPET-CTによる褐色脂肪組織活性の測定を実施した被験者(北海道在住の成人男女)を対象に、Axiomジャポニカアレイを用いたゲノムワイドSNPタイピングおよびインピュテーション法による全ゲノムレベルでの多型遺伝型情報の復元を実施し、褐色脂肪活性の個人差と関連するゲノム領域を探索した。現在までに、約190名における約270万座位のSNP遺伝型データを蓄積している。これらデータを用いた予備的なゲノムワイド関連解析では、1番染色体短腕と12番染色体短腕に存在する座位にゲノムワイド関連解析における有意水準(P<5E-8)をクリアしたSNPを検出している。さらに、新たに96検体についてAxiomジャポニカアレイを用いたゲノムワイドSNP遺伝型情報判定が完了しており、インピュテーション実施後のデータにゲノムワイド関連解析を実施する予定である。当初の予定通り、全ゲノムSNP解析に供するサンプル数が増加できた。現在は、追加の96検体についてゲノムワイドSNP遺伝型情報を取得、インピュテーション解析を実施している。また、2018年末から2019年にかけて新たに取得した検体を含めた約60検体分のゲノムワイドSNP遺伝型情報を取得する予定である。前年度までに得られたデータと統合して関連解析を実施し、褐色脂肪活性の有無に関連する座位の同定を目指す。検出された座位については、寒冷暴露実験・生活習慣病コホートなどを用いて周辺形質との関連を検証する予定である。
骨・肝・脂肪の臓器連関の視点からみた糖尿病性骨粗鬆症における組織因子の役割の解明

初年度は、LowTFマウス(TF発現が正常の1-2%に減弱しているマウス)を用いて、in vivoにおける糖尿病における糖代謝異常、骨代謝異常へのTFの関与を明らかにするための実験を行った。まず、8-10週齢の野生マウス(C57BL/6)にストレプトゾトシン(STZ)を200 mg/kgの用量で単回腹腔内投与して1型糖尿病を誘発した。対照群には同用量のPBSを腹腔内投与した。糖尿病化の確認4週後に、脛骨・筋肉を採取してリアルタイムPCRによるTF発現の定量を行った。また、屠殺前に脛骨の定量CT解析を行い、海綿骨と皮質骨の骨密度定量を行った。結果、糖尿病発症マウスは対照マウスに比べ、4週間の体重増加率が有意に低値であった。骨密度は、皮質骨密度には有意な変化は認めなかったが、海綿骨密度は糖尿病化マウスが対照マウスに比べ有意に低く、糖尿病性骨粗鬆症の誘発が確認できた。また、脛骨や筋組織におけるTF遺伝子発現量は、糖尿病誘発により増加することが確認された。次に、骨損傷後の骨修復過程にTF欠損状態がおよぼす影響を調べる目的で、LowTFマウスおよび野生型マウスの片側大腿骨にドリルにて径0.5 mmの骨欠損孔を作成し、経時的にCT撮影を行い、その欠損孔サイズを定量化した。結果、LowTFマウスの骨修復は野生型マウスより早期に完了することが観察され、TF欠損状態が骨修復機転に促進的に働く可能性が示唆された。しかし、同様の実験を糖尿病化させたマウスを用いて行ったところ、LowTFマウスの方が骨修復が遅延するという逆の傾向が認められた。なお、定常状態での骨密度においては、LowTFと野生型マウス間で有意差は認めなかった。初年度に本研究の基盤となるin vivo実験を基礎データが得られた。今後はこのデータを元に、主に培養細胞等を用いたin vitro実験にて機序の解析に進む予定である。糖尿病下・非糖尿病下にてLowTFマウスと野生型マウスの間で観察された骨修復回復過程の相違について、個体数を増やして再現実験を行うことにより実験結果の確認を行うとともに、その分子機序についての検討を進める。具体的には、骨組織サンプルを用いて、免疫組織化学および分子生物学的解析を用いた骨芽細胞分化・増殖能解析、破骨細胞形成・骨吸収関連遺伝子評価、軟骨・血管形成関連分子の解析、脂肪・凝固線溶関連分子の評価などを行うとともに、血中骨代謝マーカー(CTX、骨型ALP、オステオカルシン)の評価を行う。さらには、Low TFマウス由来の初代培養細胞やTFを過剰発現あるいはノックダウンさせたマウス細胞株を用いて、TFが骨芽細胞系、破骨細胞系、脂肪細胞、肝細胞、骨格筋細胞に及ぼす作用のメカニズムを、凝固線溶系を介する機序と介さない機序の両者の視点から、さらに網羅的遺伝子解析を用いて、TFが作用することにより誘導されるシグナルを探索する。骨芽細胞系としては、新生仔マウス頭蓋骨由来初代培養骨芽細胞、BMP-2添加骨髄細胞培養系、間葉系幹細胞、あるいはマウス骨芽細胞株(MC3T3-E1細胞)や間質細胞株(ST2, 10T1/2細胞)を、破骨細胞系の検討として、初代培養骨髄細胞、およびマウスマクロファージ様破骨前駆細胞株(Raw264.7細胞)を使用する予定である。

今後はこのデータを元に、主に培養細胞等を用いたin vitro実験にて機序の解析に進む予定である。糖尿病下・非糖尿病下にてLowTFマウスと野生型マウスの間で観察された骨修復回復過程の相違について、個体数を増やして再現実験を行うことにより実験結果の確認を行うとともに、その分子機序についての検討を進める。具体的には、骨組織サンプルを用いて、免疫組織化学および分子生物学的解析を用いた骨芽細胞分化・増殖能解析、破骨細胞形成・骨吸収関連遺伝子評価、軟骨・血管形成関連分子の解析、脂肪・凝固線溶関連分子の評価などを行うとともに、血中骨代謝マーカー(CTX、骨型ALP、オステオカルシン)の評価を行う。さらには、Low TFマウス由来の初代培養細胞やTFを過剰発現あるいはノックダウンさせたマウス細胞株を用いて、TFが骨芽細胞系、破骨細胞系、脂肪細胞、肝細胞、骨格筋細胞に及ぼす作用のメカニズムを、凝固線溶系を介する機序と介さない機序の両者の視点から、さらに網羅的遺伝子解析を用いて、TFが作用することにより誘導されるシグナルを探索する。骨芽細胞系としては、新生仔マウス頭蓋骨由来初代培養骨芽細胞、BMP-2添加骨髄細胞培養系、間葉系幹細胞、あるいはマウス骨芽細胞株(MC3T3-E1細胞)や間質細胞株(ST2, 10T1/2細胞)を、破骨細胞系の検討として、初代培養骨髄細胞、およびマウスマクロファージ様破骨前駆細胞株(Raw264.7細胞)を使用する予定である。
生理活性物質産生腸内フローラによる疾病の予防と治療

1.ヒト由来ラクトフェリン遺伝子を大腸菌-BacteroidesのシャトルベクターpVAL-1に導入して得られたプラスミドpVLFKを用いてBacteroides uniformis BU1001株を形質転換することでラクトフェリン産生B. uniformis TCTK101株を作製した。900bpのラクトフェリンDNAプローブを用いたノーザンハイブリダイザーションによって2.2kbのラクトフェリンmRNAが合成されていることを確認した。2.B. uniformis TCTK101株においてラクトフェリンタンパク質は外膜に局在していた。3.B. uniformis TCTK101株の一夜培養液をF344ラットに飲料水として摂取させたところ、ベクター対照株であるB. uniformis TCTK11株投与群と比べて脾臓単核細胞のYAC-1細胞に対する細胞障害活性が有意に上昇した。プロバイオティクスの応用として、新世代機能性食品素材の創製を目的とし、抗発癌物質を産生する腸内菌を遺伝子工学的手法を用いて作製し、腸管に定着させることで大腸前癌病変aberrant crypt foci(ACF)形成が抑制されるかどうかを検討し、以下の点を明らかにした。1.土壌細菌Erwinia uredovora由来のリコペン生合成遺伝子を大腸菌-BacteroidesのシャトルベクターpVAL-1に導入して得られたプラスミドpVEIBを、大腸菌HB101株に形質転換することでリコペン産生大腸菌HB101(pVEIB)株を作製した。3.ヒト由来ラクトフェリン遺伝子をpVAL-1に導入して得られたプラスミドpVLFKを、Bacteroides uniformis BU1001株に形質転換することでB.uniformis BU1001(pVEIB)株を作製した。900bpのラクトフェリンDNAプローブを用いたノーザンブロットによって2.2kbのラクトフェリンmRNAを、またウサギ抗ヒトラクトフェリン抗体を用いたウエスタンブロットによって80kDaのラクトフェリンタンパク質が合成されていることを確認した。
病院ビッグデータ活用による費用対効果に優れた感染対策新規指標の作成及び実証

多剤耐性菌による感染症は世界的脅威である。毎年多くのアウトブレイクが生じ、患者の予後並びに医療経済上多大なる影響を与え、適切な感染対策の推進が重要である。また、薬剤耐性(AMR)対策アクションプランの根幹ともいえる抗菌薬適正使用は各施設で推進されているが、費用対効果についての検討は十分ではない。本研究は当院の医療ビッグデータを元に、多剤耐性菌伝播のリスク因子の確立、抗菌薬適正使用・耐性菌への感染対策に関する医療経済的解析を行い、最終的には費用対効果に優れた新たな感染対策指標の作成及び実証を行うことを目的とする。