hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
マイクロ・ナノシステムを用いた生体分子の1分子機能解析と分子間相互作用解析

2.ナノ開口によるタンパク質問相互作用のイメージングナノ開口を用いてエバネッセント場を発生させ,1分子蛍光イメージングを行った。まず,石英ガラス基板に金属薄膜を約100nm蒸着し,これに100nmの開口を開ける。ここにレーザー光を照射すると開口の付近にエバネッセント場が発生する。このエバネッセント場は全反射によって発生する場合よりも励起領域が狭いため,蛍光標識した生体物質が溶液中に数μM存在しても1分子蛍光イメージングが可能である。蛍光色素から発した蛍光が効率よく検出装置に届くように,ナノ開口のガラスに深さ40nmのエッチングを施した。ナノ開口に蛍光標識したシャペロニンGroELを固定し,溶液中に別の蛍光色素で標識したGroESを加え,両者が結合と解離を繰り返す様子をイメージングすることに成功した。1.マイクロシステムによる生体分子の分離・回収生体分子や超分子複合体などの微小な生体物質をガラスチップ内の微小流路に流し、個々の標的分子の蛍光を高感度に検出し、分離・回収できる生体分子ソークーを開発した。まず、試料を含む溶液に、37°Cを境に高温でゲル、低温でゾルと可逆的な相転移を起こす熱感受性ハイドロゲル(メビオールゲル)を加え、生体試料とともに微小流路に流した。単離すべき生体物質を蛍光色素で標識しておき、それらが発する蛍光を光電子増倍管によって検出した。赤外レーザーの局所加熱によって流路にゲルによる栓(ゲルバルブ)を形成させ、ミリ秒の時間分解能で流れを制御した。高速で高感度な分離を行うため、試料溶液を搬送液で挟み込んでシース流とし、試料が通過する範囲を幅3μm、深さ2μm以内とすることにより高開口数の対物レンズを用いて量子ドットの分離を可能にした。さらに、8個の分子ソ一夕ーを並列処理できるように集積化し、分離効率を向上させることに成功した。2.ナノ開口によるタンパク質問相互作用のイメージング生体分子の相互作用(結合・解離)をナノ開口による1分子イメージング法を用いて解析した。石英ガラス基板に金属薄膜を約100nm蒸着し、これに100nmの開口を開け、レーザー光を照射した。開口の付近に発生するエバネッセント場は、全反射によって発生する場合よりも励起領域が狭いため、蛍光標識した生体物質が溶液中に数μM存在しても1分子蛍光イメージングできた。ナノ開口に蛍光標識したシャベロニンGroELを.固定し、溶液中に別の蛍光色素で標識したGroESを加えることにより結合と解離をイメージングすることに成功した。
脳海馬シナプス伝達長期増強におけるシナプス後部細胞骨格の動的機構に関する研

我々はまず生体海馬及び海馬スライス標本を用いてシナプスの可塑的変化によって生じるシナプスの変化を免疫組織化学、及びノーザンブロッティングにより解析した。シナプス前部のマーカーとしてシナプトフィジンをシナプス後部のマーカーとしてドレブリンを用いた。生体にカイニン酸投与後1週間後の海馬においてはCA1領域のシナプトフィジンによる染色性は余り変化がなかったがドレブリンの染色性は顕著に減少すると同時にその分布もシナプス後部の他に樹状突起、細胞体にびまん性に認められるようになった。このことはシナプスの数そのものは余り変化していないが、個々のシナプスに質的な変化が起きていることを示している。また海馬スライス標本を作製し、カイニン酸投与の効果を調べたところやはりシナプトフィジンの分布には変化は認められなかった。ドレブリンはスライス標本中ではもともと生体内のようなシナプス後部への限局は認められず、樹状突起及び細胞体に広くびまんせいに認められることがわかったので、生体内におけるカイニン酸の効果をスライス標本中で解析することはできなかった。海馬スライス標本を用いて、シナプス伝達長期増強を引き起こし、4時間後免疫組織化学により解析を行なった。シナプトフィジンの分布に変化は認められなかった。従ってシナプス前部には形態的な変化は起きていないと考えられた。ドレブリンの分布はシナプス後部以外にも樹状突起、細胞体にびまん性に認められるようになるが、この変化はシナプス伝達長期増強によるものではなくスライス標本としてインキュベートすることにより起きたものであると考えられた。ノーザンブロッティングによる解析により、シナプス伝達長期増強誘導後4時間ではドレブリンのmRNAレベルには変化のないことが解った。
フランスの都市の保全的刷新手法における中間団体の活動に関する研究

特別研究員DC2、2年目の2010年度は、2010年4月1日から7月25日まで、フランス国立社会科学高等研究院において、オギュスタン・ベルク教授に研究指導の委託を行った。また、7月26日から2011年3月31日までは、東京大学先端科学技術研究センターの西村幸夫教授の指導の下、研究を遂行した。まず、2010年4月から7月にかけて、本研究の扱う中間団体の一つである古きパリ委員会(Commission du Vieux Paris、以下CVP)の活動の実態と歴史的記念物制度への影響を明らかにした。具体的には、主にCVP図書館やCVPの考古学的・芸術的目録(Casierarcheologique et artistique)を利用して、歴史的記念物及び都市計画に関連する文献収集を行い、更に1898年から1933年のCVPの議事録Proces verbauxの精読及び分析を行った。CVPのフランスの歴史的記念物制度への都市的視点導入の影響に関する研究成果は、2010年11月の日本都市計画学会第45回学術研究論文発表会において、タイトル「20世紀初頭の古きパリ委員会による歴史的記念物保全への都市的視点の導入に関する研究-考古学的・芸術的目録を対象として-」として口頭発表を行い、審査付き論文として都市計画論文集に採録された。CVPによる歴史的記念物に関する議論と考察は、日本建築学会計画系論文集にタイトル「古きパリ委員会による歴史的記念物に関する議論に関する研究-1898年から1934年を対象として-」として、審査付き論文として2011年3月に採録された。また、以上のCVPに関連した一連の研究成果を踏まえて、東京大学大学院工学系研究科都市工学専攻博士課程において、タイトル「1890年代から1930年代の古きパリ委員会による歴史的環境保全に関する研究-歴史的記念物をめぐる都市的視点の導入と展開-」として学位論文を提出し、審査に合格し、2011年3月24日に学位を取得した。なお、博士論文に関連して、東京大学大学院工学系研究科都市工学専攻より都市工学専攻優秀博士研究賞を受賞した。平成21年度フランス国立特別研究院において、オギュスタン・ベルク教授に研究指導の委託を行った。まず、2009年4月から10月にかけてフランスの行政による中間団体の位置づけに関して文献から明らかにした。本研究の概要に関して、4月に、イギリス・ニューカッスルにて行われたPlanning Research Conference 2009において、また、9月には中国・広州のSixteenth International Seminar on Urban Formにおいて、口頭発表を行った。また、4月にグルノーブルにおいて、遺産と開発アソシアシオンのヒアリング及び資料収集調査を行った。その調査結果に関しては、9月の日本建築学会大会(東北)において、口頭発表を行い、またそれは査読付き論文として都市計画論文集に採録された。更に、11月のオランダ・デルフトにおける4th Conference of International Forum on Urbanismにおいて、ポスターセッションで発表を行った。7月から8月にかけては、日本における中間団体の実態を明らかにした。並行して、10月までの期間で、古きパリ委員会のヒアリング及び文献収集の調査も行い、古きパリ委員会の中間団体としての活動について明らかにした。その成果は、住宅総合研究財団研究論文集に査読付き共著論文として採録が決定している。11月から3月にかけては、パリ市等フランスの行政へのヒアリングを通じて、中間団体に与えられている活動の場とその権限を明らかにした。古きパリ委員会について、パリ市において資料収集を行い、研究結果をまとめ、日本建築学会計画系論文集に査読付き論文タイトル投稿・審査中である。フランスの都市保全について、中間団体の活動という新たな視点を与える萌芽的研究として、大きな成果が挙げられたと考えられる。

また、以上のCVPに関連した一連の研究成果を踏まえて、東京大学大学院工学系研究科都市工学専攻博士課程において、タイトル「1890年代から1930年代の古きパリ委員会による歴史的環境保全に関する研究-歴史的記念物をめぐる都市的視点の導入と展開-」として学位論文を提出し、審査に合格し、2011年3月24日に学位を取得した。なお、博士論文に関連して、東京大学大学院工学系研究科都市工学専攻より都市工学専攻優秀博士研究賞を受賞した。
パルス高電圧印加による温帯果樹の生育制御に関する基礎的研究

本研究では,モモの枝に高電圧パルスを印加し,生育の効果を実験的に調べた.モモ枝の長さは70mm,電圧値は530kVまで変化させ,パルス電圧のパルス幅は500ns一定とした.7月から翌年1月までの期間でモモ枝に高電圧パルスを印加し,栽培の期間において発芽の様子を観察することによって電圧印加の効果を調べた.モモ枝への投入エネルギーは約510mJ程度であり,2Hzの周波数で印加した.その結果,休眠期間においては,印加により発芽率は下がる傾向にあることが分かった.「気候変動に関する政府間パネル(IPCC)」の報告書において,地球規模での気温の上昇が報告されている。このような気温の上昇は農作物の生育に影響を与えている。特に果樹はその影響を最も強く受ける作物の1つである。特に休眠と覚醒は気温とその期間によって決まるため,開花や結実に直接影響を与える。休眠とは,植物が冬の過酷な環境条件に安全に耐えていくための環境適応現象である。休眠期間中は,たとえ萌芽に適した条件が整っても萌芽しないか,萌芽するまでに長い日数を必要とする。このような休眠を「自発休眠」という。自発休眠を完了するためにはある一定の期間低温に遭遇する必要がある。これを低温要求という。温帯果樹が休眠から覚醒するためには,気象条件がこの低温要求量を満たす必要がある。休眠は,永年性作物のライフサイクルの中でも重要な生理現象の一つである。気候変動によって気温の上昇が起きると,休眠の覚醒が正常に行われず,最終的には開花や結実に影響がでる。本研究では,気候変動に対応して人為的な休眠打破を含めて,温帯果樹の生育制御技術として,パルスパワー技術を適用することを検討した。温帯果樹として桃を選択し,パルスパワーが休眠打破や生育に与える効果を実験的に調べた。その結果,休眠が深くなっていくと時期(7月→9月)では,パルスパワー印加とコントロールとの間で発芽率の差は大きくなっていき,逆に休眠から覚醒していく時期では(11月→翌年1月),パルスパワー印加とコントロールとの間の差は小さくなっていくことが分かった。このような結果になった原因については検討が必要であるが,一因として,パルスパワー印加によって,遺伝子レベルで発芽に適さない条件下にあると判断されたために発芽が抑制された可能性が考えられる。ここで示した結果は,パルスパワー印加による発芽の抑制を示唆するものであった.本研究では,モモの枝に高電圧パルスを印加し,生育の効果を実験的に調べた.モモ枝の長さは70mm,電圧値は530kVまで変化させ,パルス電圧のパルス幅は500ns一定とした.7月から翌年1月までの期間でモモ枝に高電圧パルスを印加し,栽培の期間において発芽の様子を観察することによって電圧印加の効果を調べた.モモ枝への投入エネルギーは約510mJ程度であり,2Hzの周波数で印加した.その結果,休眠期間においては,印加により発芽率は下がる傾向にあることが分かった.本研究では,気候変動に対応して人為的な休眠打破を含めて,温帯果樹の生育制御技術として,パルスパワー技術を適用することを検討している。本研究では,温帯果樹として桃を選択し,パルスパワーが休眠打破や生育に与える効果を実験的に調べることを目的としている。平成24年度は,モモが深い自発的休眠状態になる期間(10月12月)を中心にして,パルスパワー印加効果を時期を変えて実験的に発芽率を調べた。実験試料としてモモ(Prunus Persica,品種:清水白桃)を用いた。枝の葉を除去して枝のみの状態にした後,その枝を7 cmの長さに切断して枝試料とした。電源として,キャパシタとパルストランスを用いたパルスパワー電源を用いた。電極は直径3 mmのステンレス製である。この電極の一端は円形になっている。この電極がアクリルパイプに挿入されている。さらに枝試料をアクリルパイプに挿入し,電極を枝試料の端面に接触させた。印加電圧は5, 10, 15, 20 kVの4条件とした。枝試料は,各印加電圧ごとに10本用いた。実験結果として以下のような結果が得られた。休眠が深くなっていく時期(7月から9月)では,パルスパワー印加とコントロールとの間で発芽率の差は大きくなっていき,逆に休眠から覚醒していく時期では(11月から翌年1月),パルスパワー印加とコントロールとの間の差は小さくなっていくことが分かった。ここで示した結果は,パルスパワー印加による発芽の抑制を示唆するものであり,当初期待していた結果とは逆の結果になった。今後は,印加条件を変えた実験と,遺伝子解析による比較を行う予定である。当初予定していた実験計画はおおむね遂行できた。得られた結果は,当初期待していた結果とは逆の結果になったが,平成25年度には印加条件を検討し,最適な条件を探索すれば期待できる結果が得られるものと推測している。平成24年度に得られた結果は,当初期待していた結果とは逆の結果となった。

今後はその原因を十分考察することが必要であるが,おそらく高電圧パルスの印加条件が最適な点から大きくずれていたことが考えられる。印加条件として,電圧値,パルス幅,印加回数がある。得られた発芽率のデータとこれらの条件設定を検討して最適な条件を推測し,その条件の下で,7月からのモモの腋芽の発芽で予備的な実験を試みる。その結果を踏まえて,10月からの休眠打破の実験に取り掛かる予定である。また,同時に遺伝子解析を行い,主にDAM6,DAM5の発現を観測してパルス印加の効果を検討する予定である。次年度は,印加条件の検討結果にもとづいて,パルスパワー電源の設定条件の変更が必要になるため,そのための回路部品などを購入する。遺伝子解析を行うため,そのための試薬,器具,容器などの購入を行う。学会発表のための旅費(1回あるいは2回),打ち合わせ会議(1回あるいは2回)のための旅費を支出する。
市民の科学への参加・支援を加速化するオープンサイエンス・リテラシー教育モデル開発

本研究は,科学に対する関心・関与を持続的に保持しながら,科学へ主体的に参加・支援するための資質・能力・態度の総体を「オープンサイエンス・リテラシー」と定義し,近年の学習科学で国際的に注目が集まる「エンゲージメント理論」を応用して,オープンサイエンス・リテラシーの理論化を行うとともに,オープンサイエンス・リテラシーの教育モデルを開発することを目的としている.エンゲージメント理論を科学教育へ応用することで,市民の科学に対する関心・関与を知的行動につなげるための諸要因を体系的に整理するとともに,市民の科学への主体的な参加・支援を促進する教育モデルの開発を目指している.平成30年度の研究実績については,次の3点であった.(1)オープンサイエンスとしての科学実践に参加・支援を行っている市民の行動・心理のデータを収集した.主として,科学実践に従事する際のコラボレーションに関する会話データを収集した.(2)収集したデータについて量的分析および質的分析を行い,サイエンス・コミュニケーションの観点や学習科学の観点から検討を実施した.これらの分析・検討には,トピックモデルを応用したテキストマイニングの手法を適用した.(3)オープンサイエンス・リテラシー教育の活用できるダイヤローグ型ビデオ教材を開発し,小規模なオープンサイエンスとしての科学実践へ導入し,試行的な評価を行った.平成30年度の研究成果の発表については,研究成果の一部を国際会議(World Conference on Educational Media & Technology + Innovate Learning 2019(EdMedia + Innovate Learning 2019))に投稿し,査読付き発表論文として採択された(発表は次年度の令和元年になる).交付申請書に記載した研究目的は,平成30年度については順調に達成されている.データ収集およびデータ分析も順調であり,教材開発にも試行的に着手できた.研究成果の発表についても,国際会議における審査付き発表論文に採択されることができた.平成31年度以降も,交付申請書に記載の通り,研究を推進する.具体的には,文献資料の収集と国内外の事例に関する実地調査などのほか,市民の科学への主体的な参加・支援を促進する教育モデルの開発,研究実践フィールドにおける実証実験に着手する.研究成果の発表については,国際会議および国内学会における研究発表に加えて,学術論文の作成を行う.本研究は,科学に対する関心・関与を持続的に保持しながら,科学へ主体的に参加・支援するための資質・能力・態度の総体を「オープンサイエンス・リテラシー」と定義し,近年の学習科学で国際的に注目が集まる「エンゲージメント理論」を応用して,オープンサイエンス・リテラシーの理論化を行うとともに,オープンサイエンス・リテラシーの教育モデルを開発することを目的としている.エンゲージメント理論を科学教育へ応用することで,市民の科学に対する関心・関与を知的行動につなげるための諸要因を体系的に整理するとともに,市民の科学への主体的な参加・支援を促進する教育モデルの開発を目指している.平成30年度の研究実績については,次の3点であった.(1)オープンサイエンスとしての科学実践に参加・支援を行っている市民の行動・心理のデータを収集した.主として,科学実践に従事する際のコラボレーションに関する会話データを収集した.(2)収集したデータについて量的分析および質的分析を行い,サイエンス・コミュニケーションの観点や学習科学の観点から検討を実施した.これらの分析・検討には,トピックモデルを応用したテキストマイニングの手法を適用した.(3)オープンサイエンス・リテラシー教育の活用できるダイヤローグ型ビデオ教材を開発し,小規模なオープンサイエンスとしての科学実践へ導入し,試行的な評価を行った.平成30年度の研究成果の発表については,研究成果の一部を国際会議(World Conference on Educational Media & Technology + Innovate Learning 2019(EdMedia + Innovate Learning 2019))に投稿し,査読付き発表論文として採択された(発表は次年度の令和元年になる).交付申請書に記載した研究目的は,平成30年度については順調に達成されている.データ収集およびデータ分析も順調であり,教材開発にも試行的に着手できた.研究成果の発表についても,国際会議における審査付き発表論文に採択されることができた.平成31年度以降も,交付申請書に記載の通り,研究を推進する.具体的には,文献資料の収集と国内外の事例に関する実地調査などのほか,市民の科学への主体的な参加・支援を促進する教育モデルの開発,研究実践フィールドにおける実証実験に着手する.研究成果の発表については,国際会議および国内学会における研究発表に加えて,学術論文の作成を行う.【理由】研究成果発表が投稿されて採択が決定された段階であり,次年度に成果発表のための旅費を支出しなければならない.また,次年度においても文献資料の収集と国内外の事例に関する実地調査やデータベース化を継続的に実施する必要が生じたため.【使用計画】物品費(図書費など),調査旅費,成果発表旅費,その他(国際会議参加費)等に使用する予定である.
ミシシッピ湿地林のハリケーン災害に関する生態学的、生理学的、年輪年代学的研究

巨大ハリケーンがミシシッピ湿地林にもたらした災害の実態解明を目的とし、森林破壊・衰退の広域観測、樹木の成長・更新の調査、および樹木の生理的特性の解析を行った。この結果、衛星画像より、直接、間接被害地域、急速な回復地域を推定した。また年輪年代学的解析によりハリケーン後の樹木の急激な成長減退を認めた。さらに侵入種ナンキンハゼは耐水、耐塩性とも、在来種に拮抗することをわかり、植生改変の可能性を示唆した。2005年に来襲した巨大ハリケーンは、ミシシッピ河口湿地林に大災害をもたらした。この生態的な破壊と後遺症の正確な診断のため、広域観測、森林破壊・衰退、植生の更新に関する現地調査、および樹木のストレス応答など生理的特性に関する基礎データ収集を行った。本計画では、以下の4課題についての研究を行った。・課題1:画像解析法によるミシシッピ氾濫原に生じた生態的被害と後遺症の広域調査ハリケーン来襲直前、直後、および1年後のニューオリンズ市を中心としたミシシッピ州、ルイジアナ州のLANDSATデータを購入し、植生被害の程度と回復状況、塩集積の状況等を解析した。また2007年9月および2008年23月に被災地の現地調査を行い、衛星画像データと照合した。これらの結果は2008年も引き続き解析中である。・課題2:氾濫原の森林における被害、後遺症、および衰退の生態学的現地調査2007年9月および2008年23月に被災地の現地調査を行い、ニューオリンズ郊外を中心に湿地林の被害と後遺症の広域調査を行った。・課題3:ヌマスギ生残木樹幹に残る過去のハリケーン来襲の影響の年輪年代学的解析課題2の調査と平行して被災地に100mx50mの生態調査プロットを設定し、ヌマスギおよびヌマミズキ各30本、計60本を選定して成長錐により合計120本のコアサンプルを採取した。これは現在解析中である。・課題4:高塩濃度冠水がヌマスギ林の更新と幼稚樹の生育に及ぼす影響の実験的解析ヌマスギの冠水耐性と耐塩性を調べるため、若木を用いて生理的なモデル実験を行い、光合成や蒸散、植物体内のイオン分析などを行った。成果は2008年3月、日本生態学会、および日本森林学会で発表した。また成果の一部はWetlands誌に投稿中である。・課題1:画像解析法によるミシシッピ氾濫原に生じた生態的被害と後遺症の広域調査2005年8月にアメリカ合衆国南部に甚大な被害をもたらしたハリケーン・カトリーナを研究事例として、衛星画像と航空機LiDARデータ・航空写真を用いて,広範囲に広がる森林の被害状況と回復過程を効率的に把握することを目的として解析を行った。この結果,ハリケーン被災直前と直後のNDVIの差分を取ることで風倒や先折れによると予想される直接被害地域を推定することができた。また、被災直後3時期の衛尾画像から植物活性度を表すNDVIと地表面の水分量を表すLSWIを用いることで,塩水が長時間鱗帯し植生に影響を与えたと予想される間接被害地域を推定することができた。さらに,森林範囲で切り取った画像で被災後2年間のNDVIの増加量を求めることで草本による急速な回復地域を推定することが出来た。これらの解析手法を用いることで効率的に森林被害地域と再生状況を把握できた。この結果は,2009年3月の第120回日本森林学会大会(京都大学)で発表した。・課題3:ヌマスギ生残木樹幹に残る過去のハリケーン来製の影響の年輪年代学的解析被災地に100mx50mの生態調査プロットから採取したヌマスギおよびヌマミズキ各30本、計60本のコアサンプルを解析した。この結果、ハリケーン後の急激な成長減退を認めた。・課題4:高塩濃度冠水がヌマスギ林の更新と幼稚樹の生育に及ぼす影響の実験的解析ヌマスギの冠水耐性と耐塩性を調浸るため、在来種のヌマスギ、侵入種のナンキンハゼ、センダン若木を用いて生理的なモデル実験を行い、光合成や蒸散、植物体内のイオン分析などを行った。この結果、ナンキンハゼは耐水性、耐塩性とも、ヌマスギに拮抗することがわかった。これらの成果は2009年3月、第56回日本生態学会大会(岩手県立大学)、および第120回日本森林学会大会(京都大学)で発表した。また成果の一部はLandscape and Ecological Englneering誌、New Forests誌に印刷中である。
江戸～大正期の常磐津節演奏家研究

(1)江戸大正期の常磐津節演奏家情報の整備と公開のために、町田嘉章によるメモの翻刻と公開を行っている(来春に完了予定)。(2)常磐津英寿氏へのインタビューを継続的に行った。(3)(2)の中で明らかとなった、常磐津林中使用の浄瑠璃本(盛岡市先人記念館所蔵)の基礎調査を行い、『常磐津林中の音楽活動の軌跡-盛岡市先人記念館所蔵林中本を手掛かりに』(有明双書第1シリーズ、武久出版、2013年3月)として出版した。【研究実績の具体的内容】1.町田嘉章による未公開メモの清書コピー、『常磐津太夫芸歴列伝』『常磐津家元伝記』『三弦手列伝』(以下「三資料」)全文のワープロ入力を完了した。2.三資料の情報源の追跡調査として、「吉原細見」の名寄に記載された男芸者のデータ入力を行い、常磐津姓の者の抽出作業を行った。3.2.と三資料、芝居番附等の照合に着手した。4.3.の過程で、複数の演奏者について、吉原の男芸者と歌舞伎芝居を兼業していた可能性が非常に高いとの確信を得た。5.4.に該当する演奏者の中でも、常磐津節演奏家研究上、重要な演奏家である三代目常磐津造酒(みき)太夫について(社)東洋音楽学会第61回大会で口頭発表した(「芝居の演奏家と吉原の男芸者の兼業-三代目常磐津造酒太夫を中心に-」)。6.明治から大正期の常磐津節演奏家に関する聞き取り調査として、常磐津節界の重鎮である常磐津英寿(重要無形文化財保持者、人間国宝)に3回(計約6時間)のインタビューを行い、木挽町派(常磐津文字兵衛家)と明治時代の名人・常磐津林中の係わりについて重要な証言を得ているほか、英寿が所蔵していた林中直筆の貴重な浄瑠璃本100点あまりが盛岡市先人記念館に寄贈されたことを確認し、先方の担当者を紹介して頂いた(今年三月の震災で予定が遅れているが、次年度に調査報告予定)。【意義・重要性】1.三資料を起点とした常磐津節演奏家研究は、傍証資料が膨大なため簡単には進まないが、すでに三代目造酒太夫をはじめ、複数の演奏家の新たな局面を明らかにしつつあり、今後の常磐津節研究および、江戸時代の三味線音楽演奏者の音楽活動の在り方に一石を投じることが期待される。2.明治時代以降の常磐津節研究がほとんど進んでいない状況下で、英寿の証言は非常に重く、成果が期待される。林中の浄瑠璃本調査はもちろん、英寿への聞き取り調査も続行予定である。【研究実績の具体的内容】1.町田嘉章による『常磐津太夫芸歴列伝』『常磐津家元伝記』『三弦手列伝』(以下「三資料」)を「吉原細見」の男芸者名寄せのデータと照合・検証開始。2.三資料の翻刻および1.の照合結果を公表するための一覧表データ作成に着手。3.2.について、『常磐津太夫芸歴列伝』の明治期以前を対象として所属機関紀要に公表。なお『常磐津太夫芸歴列伝』の明治期以降および『常磐津家元伝記』と『三弦手列伝』は平成24年度公表予定で執筆に着手。4.常磐津節界の重鎮である常磐津英寿(重要無形文化財保持者、人間国宝)へのインタビューを前年度から継続し、常磐津林中との係わりおよび、その後の常磐津界、歌舞伎界についての証言を得て、録画・録音により記録中、順次文字起こし開始。5.英寿が所蔵していた林中直筆の貴重な浄瑠璃本(以下、林中本)100点あまりが盛岡市先人記念館に寄贈された件について調査を開始、林中本のデジタルカメラによる撮影と、書誌データの記録に着手。6.5.の経過を、(社)東洋音楽学会第62回大会で口頭発表(「常磐津林中の自筆浄瑠璃本調査報告-盛岡市先人記念館所蔵本を中心に-」)。【意義・重要性】1.三資料を起点とした常磐津節演奏家研究を、翻刻および「吉原細見」男芸者の名寄せとの照合を軸に、公表開始。2.明治時代以降の常磐津節研究がほとんど進んでいない状況下で、これまで全く知られていなかった林中本の存在を明らかにし、本人による朱書により、歌舞伎以外の場所での常磐津節演奏実態や、演奏に際しての抜き差しや演出、音楽上の情報(旋律型名や息継ぎ、語り分け等)を知る重要な手がかりとして提起。同系の林中本の可能性のある浄瑠璃本について追加調査予定。

1江戸大正期の常磐津節演奏家情報の整備と公開の柱として、前年度に引き続き、町田嘉章によるメモの翻刻・公開を、「常磐津節演奏家研究報告ー町田史料の翻刻と検証2ー」(有明教育芸術短期大学紀要第4号、2013年3月)として行なった。この公開については、字数制限により平成23年度に完結することができなかったので、引き続き続編を来年度の同紀要にて公開する予定である(これで完結予定)。2前年度に引き続き、常磐津英寿氏へのインタビューを続行し、録画と録音による記録を継続した。この調査については、さらに続けていく必要と意義を痛感しており、新たに平成25年度より3年間にわたって行う科学研究費助成事業(基盤研究C)「江戸昭和期の常磐津節演奏家に関する基盤研究」でも継続的に行い、同時に公表に向けての検討も行う予定である。32のインタビューをきっかけに明らかになった、明治期の名人と称される常磐津林中使用の浄瑠璃本(常磐津英寿氏より盛岡市先人記念館に寄贈)については、すでにその存在と意義を表明してきたが(東洋音楽学会第62回大会口頭研究発表「常磐津林中自筆浄瑠璃本調査報告ー盛岡市先人記念館所蔵本を中心にー」2011年)、その後の補足調査を経て、『常磐津林中の音楽活動の軌跡ー盛岡市先人記念館所蔵林中本を手掛かりに』(有明双書第1シリーズ、武久出版、2013年3月)として出版した。4別途計画していた、常磐津保存会刊行の演奏家年鑑への協力を通した研究成果反映については、研究代表者の担当部分が、次年度に持ち越されたため、次年度以降に取り組む予定である。三資料の検証と公開については、翻刻と一覧表という二重構造での公開方針としたため、紙数の都合等もあり、一度に公開することは難しく、平成24年度も継続して行うこととなった。一方で、英寿へのインタビューを端緒に「常磐津林中自筆本」という新たな資料群の存在が明らかとなり、当初予定していなかった新しい視点からの演奏家研究の可能性が開けている。24年度が最終年度であるため、記入しない。三資料の検証については、翻刻の公開および吉原の男芸者名寄せとの照合を主軸に、所属機関の紀要上で公表していく。一方で、三資料でも情報の不足している明治期の演奏家情報を補足するものとして、林中の自筆浄瑠璃本を起点とした、当時の演奏家および演奏情報を整理・検証し、新たな方向性を示したい。
高純度β-TCPコーティングに関する研究

生体に有害なバナジウムを含まない新しい人工素材用チタン合金として、先に開発したT1-5Al-3Mo-4Zr α-β型新チタン合金を用い、直径3mm長さ10mmの円筒形のテストピースを作製した(コントロール群)。この表面にHydoxy apatiteコーティングを施したもの(HA群)。β-TCPコーティングを施したもの(β-TCP群)。をそれぞれ作製した。これらを成熟ビ-グル犬大腿骨骨幹部中央に作製した骨孔にtrans corticalに挿入した。術後2,4,8,12週で屠殺し、大腿骨を摘出、包埋した後50-80μmの切片を作製し次の2項目につき観察した。1)Contact microradiographyを撮影し、テストピース周囲の骨新生、テストピースへの骨の接触及びfibrous tissueの介在の有無につき検索した。2)SEMにより、骨とインプラントの界面を観察した。結果:2週、4週のコントロール群では、インプラント表面の一部に骨が直接接する所見を認めたものの、インプラント周囲における骨新生は緩徐であり多くの部位ではインプラントと新生骨の間にfibrous tissueの介在を認めた。これに対しHA,β-TCP群では、術後2週からインプラント周囲で旺盛な骨新生を認め、厚いosteoidと胞体の豊富なosteoblastが多く認められ、活発なbone formationが示唆された。インプラント表面に直接接する骨の面積も経時的に増加し、4週ではHA群、β-TCP群ともに、インプラント表面の半分以上をしめるに至っていた。コントロール群にみられたようなfibrous tissueの介在は明らかに少なかった。しかし、HA群,β-TCP群の間で骨新生の程度や、骨に接するインプラントの面積には明らかな差は認められなかった。現在、8週、12週の動物を屠殺、標本作製にあたっており、これらについても同様の検索を行い、とくにこれらの時期においては、SEMを用いて骨-インプラント間のHA,β-TCPコーティングについて、コーティングの溶解、剥離、厚さの変化などにつき観察し、HA,β-TCP群の差の有無につき検討していく。をそれぞれ作製した。
心筋膜イオン輸送系の研究

本研究に於ては,心筋細胞の収縮,弛緩の調節に関るCa^<2+>, Na^+,及びH^+の細胞内動態を明らかにするため,心筋細胞から形質膜と筋小胞体膜を分離しそれぞれのイオンの輸送系の作用について膜レベルで検討すること,さらには,輸送系を膜から分離精製してその機能的性質を調べることを試みた. 1.心筋細胞形質膜Na^+/H^+交換系の研究:ウシ心室筋を用いて高純度形質膜標品を調製し,膜小胞内外のpHに依存した. ^<22>Naのとりこみと膜小胞内外のNa^+濃度勾配に依存したH^+輸送を測定し,アミロライド感受性のNa^+/H^+交換活性が存在することを確認した.ついで,内因性のプロティンキナーゼを介した膜蛋白質のりん酸化がNa^+/H^+交換活性を増大させることを見い出した.現在関与するキナーゼのタイプの同定を行っている.又,形質膜をコール酸で可溶化し, Na^+/H^+交換活性を人ユリピッド膜小胞に再構成することが出来た.2.心筋形質膜Naポンプの精製:心筋Naポンプの分子種の検討を蛋白質レベルで行うため,小実験動物心筋に適用出来る心筋Naポンプの精製法を開発した.この方法はchapsで膜を可溶化した場合, Na^+(0.2M)が共存する場合としない場合で, NaポンプATPaseの溶解度が大きく異なることを利用するもので,ラット心筋(1g)に適用した場合,比活性が480±57μmol/mg/hr, SDS電気泳動上の純度が約50%の標品が得られた.この標品のATPaseは, ovabainに対して,高親和性を示す分画(20%)と低親和性を示すもの(80%)から成っていた.3.心筋小胞体Caポンプの反応機構の研究:GTPを基質とした場合の心筋小胞体Caポンプの反応機構を詳細に調べた.その結果,反応の部分反応の速度定数は, ATPの場合とかなり異なっており,とくにりん酸化酵素生成反応が著しく遅いことが明らかとなった.しかし反応機構自体は,これまでの報告とは異なり, ATPと類似していることがわかった.本研究に於ては,心筋細胞の収縮,弛緩の調節に関るCa^<2+>, Na^+,及びH^+の細胞内動態を明らかにするため,心筋細胞から形質膜と筋小胞体膜を分離しそれぞれのイオンの輸送系の作用について膜レベルで検討すること,さらには,輸送系を膜から分離精製してその機能的性質を調べることを試みた. 1.心筋細胞形質膜Na^+/H^+交換系の研究:ウシ心室筋を用いて高純度形質膜標品を調製し,膜小胞内外のpHに依存した. ^<22>Naのとりこみと膜小胞内外のNa^+濃度勾配に依存したH^+輸送を測定し,アミロライド感受性のNa^+/H^+交換活性が存在することを確認した.ついで,内因性のプロティンキナーゼを介した膜蛋白質のりん酸化がNa^+/H^+交換活性を増大させることを見い出した.現在関与するキナーゼのタイプの同定を行っている.又,形質膜をコール酸で可溶化し, Na^+/H^+交換活性を人ユリピッド膜小胞に再構成することが出来た.2.心筋形質膜Naポンプの精製:心筋Naポンプの分子種の検討を蛋白質レベルで行うため,小実験動物心筋に適用出来る心筋Naポンプの精製法を開発した.この方法はchapsで膜を可溶化した場合, Na^+(0.2M)が共存する場合としない場合で, NaポンプATPaseの溶解度が大きく異なることを利用するもので,ラット心筋(1g)に適用した場合,比活性が480±57μmol/mg/hr, SDS電気泳動上の純度が約50%の標品が得られた.この標品のATPaseは, ovabainに対して,高親和性を示す分画(20%)と低親和性を示すもの(80%)から成っていた.3.心筋小胞体Caポンプの反応機構の研究:GTPを基質とした場合の心筋小胞体Caポンプの反応機構を詳細に調べた.その結果,反応の部分反応の速度定数は, ATPの場合とかなり異なっており,とくにりん酸化酵素生成反応が著しく遅いことが明らかとなった.しかし反応機構自体は,これまでの報告とは異なり, ATPと類似していることがわかった.これまでの研究によってウシ心室筋から高純度形質膜標品を調製し得たので今年度は、1)この膜系のイオン輸送系の調節機構を調べるための準備としてinside-out小胞分画を膜標品から分離する試みと2)【Na^+】/【Ca^(2+)】および【Na^+】/【H^+】交換系をデタージェントによって膜から溶出し、これらを人工膜小胞にとりこみその輸送活性を再構成する試みを行った。後者の操作は、特異的なマーカーが存在しないこれら輸送系の実体の分離精製には不可欠である。

1)我々の形質膜標品は、約50%がright side out,20-25%がinside out,残りが膜フラグメントであったが、種々の条件下での密度勾配遠心、レクチン等を用いたアフィニティクロマトグラフィー,イオン交換樹脂処理等を行ってもinside out小胞の割合は1.5倍程度増加したのみであった。2)【Na^+】/【Ca^(2+)】及び【Na^+】/【H^+】交換活性は、コール酸又はTriton X-100いずれを用いても形質膜から溶出され、リピッドとしてアゾレクチンを用いると人工膜小胞にこれらの輸送系の活性が再構成された。1.2%コール酸で可溶化、凍結融解したのちコール酸を除いて得た再構成膜標品の【Na^+】/【Ca^(2+)】及び【Na^+】/【H^+】交換活性は、天然膜標品のそれぞれ34倍及び6倍という高値を示した。又、膜をアゾレクチン存在下1.4%triton X-100で部分可溶化し、可溶化画分からtritonを除いて得た再構成膜標品の場合には、活性は、それぞれ9倍及び8倍に増大した。なお、いずれの再構成法を用いても蛋白質の回収率は約20%であり、コール酸を用いた場合の【Na^+】/【Ca^(2+)】交換活性の増大は、蛋白質回収率を考慮すると異常に大きいと伝える。従って再構成操作によって【Na^+】/【Ca^(2+)】交換系が大きく活性化されたか、又は、天然膜中には、この交換系の活性抑制因子があり、これが再構成操作中に失なわれたのかいずれかであろうと結論された。3)以上のほか、天然膜標品【Na^+】/【H^+】交換系の反応動力学的性質及びこれに及ぼす種々の薬剤の効果について検討を行った。
大臼歯間変異の解析によるヒトと大型類人猿の進化史の解明

今年度は引き続き現生類人猿の上顎大臼歯間の形態変異の解析を進めた。当初は食性の若干異なるゴリラが他の種とは異なる大臼歯間変異を持つと予想していた。だが各種・各大臼歯の平均形状間の変化の仕方を詳しく調べていくと、概ね現生類人猿は漸次的な変化を示すのに対し、ヒトでは第1大臼歯から見た第2大臼歯と第3大臼歯の変化の仕方が大きく異なっていた。ヒト化の過程で広く類人猿に共有されていた変化パターンから外れて新しくヒト特有のパターンを獲得したことが示唆される。このことに関する論文を執筆中で近日中に投稿予定である。さらに本研究では大量のCTデータから大臼歯のエナメル象牙境を抽出する必要があるが、その過程を自動化し作業の効率化ならびに時間短縮を図るために、ディープラーニングを用いた新しいセグメンテーション方法の確立を目指す試みも開始した。また今年度は新しくトルコでの化石発掘調査に参加し、新しい化石の取得に向けた足がかりを得た。アフリカ類人猿の共通祖先を探すため我々がケニアで発掘している後期中新世の地層とほぼ同時代の化石サイトがトルコにはいくつもあり、格好の比較資料となりうる。また上記の上顎大臼歯の研究においても重要なテーマとなっているヒト化過程における形態的な変化を探る上で重要な更新世のサイトも確認できた。今後は2つの時代を対象として本格的に発掘に移りたいと考えている。またケニアにおいても引き続き調査に参加しケニア国立博物館での資料調査、ならびに作業も行った。概ね順調に進んでいる。今年度は少なくとも一つの論文を投稿、受理させるとともに、もう一つ方法論についての短報を一報投稿したいと考えている。さらに海外での発掘調査地の選定も概ね終わり、新しい資料獲得に向けた準備も整いつつある。現生種を用いた比較研究については資料も揃いあとは作業を進めていくだけである。化石についてはどのように形態情報を抽出するのかが課題となっていたが、新しいセグメンテーション方法の開発に目処がついたことで、これについても分析を進めていくことができる。本研究は、霊長類化石資料の中でもっとも豊富であり現生種と化石種の類縁関係を推定する鍵となっている大臼歯の形態解析を行う。今年度は、後に化石種の系統関係を推定するためのベースとなる現生類人猿資料のCTスキャンを行い、できる限り多くの3次元モデルを得ることが大きな目標であった。予定通り、チューリッヒ大学所蔵の現生大型類人猿コレクションから、当該大学研究室の協力のもとCTスキャンを行い3次元データを得た。当初予定していた現生大型類人猿だけでなく、テナガザル資料も得ることができたため資料調査は十分に成果を上げることができた。さらに国内外の博物館所蔵(京都大学総合博物館、国立科学博物館、東京大学総合研究博物館、クリーブランド自然史博物館、ライデン大学博物館、王立中央アフリカ博物館)で既に撮影済みのコンピュータ断層(CT)データの3次元再構成も終了した。得られた上顎大臼歯122本を資料として形態地図法を用いて解析を行なった。その結果、類人猿は全体として共通する大臼歯間変異を持っており、食性の違いはあるものの、それが大臼歯形態に大きく寄与しているわけではないことが示唆された。大臼歯間変異から、共通の発生基盤を持ちつつも、それぞれが種固有の発生様式を持ち、特にヒトは他の類人猿よりも特殊化の程度が大きいことが示された。これらの結果をまとめた投稿論文を作成中である。また、新規の化石資料を追加するため、ケニア共和国、ジョージア共和国において中新世類人猿サイトでの発掘調査に参加した。共に新たな類人猿資料を得ることはできなかったが、次年度以降の調査地の見通しを得ることができた。予定通りの現生類人猿のCTデータを得ることができ、解析も終えることができた。計画ではすでに論文は投稿済みのはずであったが、現時点ではまだ執筆中である。とはいえ次年度初頭には投稿可能であり、概ね計画は予定通りに進行している。

またケニアにおいても引き続き調査に参加しケニア国立博物館での資料調査、ならびに作業も行った。概ね順調に進んでいる。今年度は少なくとも一つの論文を投稿、受理させるとともに、もう一つ方法論についての短報を一報投稿したいと考えている。さらに海外での発掘調査地の選定も概ね終わり、新しい資料獲得に向けた準備も整いつつある。今年度に解析した現生種データにアフリカの中新世類人猿化石を加えて解析する。新たにケニア国立博物館で化石標本のCT撮影を行う予定である。また前年度に引き続きケニア共和国での発掘調査へ参加予定であり、調査許可が得られればトルコ共和国における発掘調査にも参加し、新たな化石資料の収集に努める。現生種を用いた比較研究については資料も揃いあとは作業を進めていくだけである。化石についてはどのように形態情報を抽出するのかが課題となっていたが、新しいセグメンテーション方法の開発に目処がついたことで、これについても分析を進めていくことができる。3次元データ解析のためのソフトウェア購入代金が当初よりも安くなっていたため。また渡航費についてもCT撮影を先方に依頼することができたため予定通り消化することができなかった。次年度は新たにヨーロッパで化石資料等のCT撮影の機会が得られる予定であるためそちらに資金を当てることを計画している。フィンランドに長期滞在し研究を進めることとなったため日本国内旅費として計上していた経費を使用しなかった。次年度はトルコ、ならびにスペインとヨーロッパ内での発掘調査に参加する予定なのでその経費としたい。
スキルム型有効力の拡張と変形中性子過剰核への応用

まず、陽子ドリップ線から「実験的に観測された中性子過剰核のフロンティア」にわたる広い領域(Z【less than or equal】82)を対象に、偶々核731個の基底状態および変形共存状態を平均場近似で計算した。既存のスキルム型有効力のうち、アイソ・スピン依存性が最良と言われるSIIIを用い、変形、スキン、ハロ-の扱いに適した3次元メッシュ表現を採用した。大量の計算機アウトプットを整理・保存するために大容量のハード・ディスク記録装置を購入し活用した。結果として得られた質量は実験値と良く一致し、また、陽子・中性子スキンの厚さや変形度なども計算された。これらの諸量は、コンピュータ・ファイルとして公開し、ネットワークで利用可能にする対相関相互作用が図式的に定数行列要素で表される場合に、その強度を、平滑化した準位密度のもとで経験式Δ=12MeV/√<A>を再現するように決定した。準位密度を平滑化するにあたって、一般的に用いられるshell smearingの方法では連続スペクトルからの寄与のために結果がwell-definedではないが、Thomas-Fermi近似による準位密度を用いることで問題は解決された。また、本研究では、スキルム力の対相関特性も調べた。特に、対相関のカットオフへの依存性を詳しく分析した。スキルム力は、相互作用する2核子間の移行運動量の増加とともに、引力から斥力に変わるが、斥力的な部分も対相関を助長することを示した。カットオフは、相互作用が引力から斥力に変わる運動量の付近に設定することが望ましいと論じた。また、スキルム力にアイソベクター密度依存項と密度の2乗に依存する項を導入することが、その対相関特性の改善に有効であると期待される。
フラッシュADCを用いた多チャンネル解析装置の開発

本研究では、多チャンネルのアナログ情報を時間的に多重化し、単一のデジタル変換器を用いて処理することについての、基礎的な開発研究を行った。こういった処理方法が、特に必要となる応用として、!CCDカメラから出力される画像情報を、数十万個の画素(チャンネル)からの多重化情報とみなすことで、フラッシュADCにより順次デジタル変換していくもの、シリコンマイクロストリップ検出器の、最大数千チャンネルにものぼるストリップからのアナログ情報を、前置増幅・多重化を行うLSIを使って読み出し、単一のフラッシュADCによって処理することを考える。前者については、高速のコンパレータと1024の奥行きを持つ高速FIFOメモリーからなるプロトタイプ回路を、CAMAC規格のモヂュ-ルとして製作した。これを使うことにより、シンチレーションファイバー束の断面につながれたCCDカメラからの情報をリアルタイムに処理し、宇宙線の飛跡をとらえることに成功した。後者については、前置増幅、時分割多重化のできるVLSI(MX-3)をシリコン検出器の読み出し電極(ストリップ)にとりつけ、パーソナルコンピュータのバスに直結されたフラッシュADCにより、高速の信号処理をさせることで、最大毎秒2560以上のアナログ信号を処理することができた。尚これらのデータ処理には、備品として購入された、パーソナルコンピュータ一式が使用された。以上の、プロトタイピングに基づく検討により、以下の諸点が明らかとなった。1)多重化を活用した、アナログ信号処理は、極めて有効である。これにより、信号の伝送系、処理系の大幅な簡素化が図れる。2)多重化された信号の伝送系には、さらに最適化が必要である。3)スパーシフィケーションの機能を内蔵した専用ADCの開発が必要である。これは、高速の汎用バス(たとえばVMEなど)のモヂュ-ルとして現実されるのが望ましい。
ヒトXPA蛋白質のRPA,及び損傷DNAとの複合体の立体構造解析

1、DNA、RPA70と相互作用する部位の決定核磁気共鳴の化学シフト摂動実験法により、ヒト遺伝子修復系蛋白質XPAの中央ドメインが、RPAの単鎖DNA結合ドメイン(RPA70_<181-422>)、あるいは、cisplatinによる損傷24-mer二本鎖DNAと結合する部位を同定した。その結果、亜鉛含有サブドメインはRPA70_<181-422>と相互作用し、C末側サブドメインのくぼみはDNAと相互作用することが分かった。従来より、転写因子などのzinc-fingerと核酸が相互作用する例が多く見い出されているが、XPAの亜鉛含有サブドメインは、蛋白質と相互作用する数少ない例の一つである。亜鉛含有サブドメインが負に帯電していることからも、DNAと静電的に反発しあうと推測できる。一方、DNAと相互作用するC末側サブドメインのくぼみは、ほぼDNAの直径と同じ大きさをもち、表面が正に帯電していることから、当結果と矛盾しないといえる。2、運動性の解析アミド^<15>N核の磁化の緩和時間の測定と解析から、XPA中央ドメインの分子全体および分子内部の運動性を解析した。その結果、分子全体の溶液内での回転拡散には異方性が存在することが分かった(回転拡散テンソルの主値の比率が1.38)。構造決定された分子座標の慣性テンソルの異方性は回転拡散テンソルの異方性とよく一致した。その異方性も考慮した内部運動の解析からC末側サブドメインのくぼみ領域が非常に柔軟であることが分かった。このくぼみの柔軟性は、XPA蛋白質が構造の異なるさまざまなDNA損傷に適応して結合し、それらを認識するために必要であると考察される。
小型・正常大の血小板を有する先天性血小板減少症の原因遺伝子と分子病態に関する研究

小児期の血小板減少症には、特発性血小板減少性紫斑病(以下ITP)に加えて、遺伝子変異を原因とする先天性血小板減少症がある。本研究では、研究代表者のこれまでのWiskott-Aldrich症候群に関する研究成果を基盤として、小型および正常大の血小板を有する慢性かつ難治性ITPおよび家族歴を有する血小板減少症症例を解析対象とし、先天性血小板減少症の既知遺伝子の迅速な遺伝子診断系を確立した。また、エクソーム解析により、本邦3症例においてMECOM遺伝子異常による新規病型を発見し、世界に先駆けて論文報告を行った。更に全体を通して遺伝子診断結果を主治医へ報告し、臨床への迅速な還元を行った。小児期の血小板減少症は免疫性血小板減少症(Immune thrombocytopenia:ITP)の他に先天性血小板減少症が存在するが、本邦では包括的な小型および正常大の血小板を有する先天性血小板減少症の臨床的および遺伝学的解析は行われていない。本研究では、家族歴あり、幼少時から認められる血小板減少、ITP治療に反応が乏しい点などから先天性血小板減少症が疑われる症例を蓄積し、その臨床的および遺伝学的解析を行っている。その結果、これまでの解析症例のうち37.5%において先天性血小板減少症の確定診断ができ、WASP異常症(Wiskott-Aldrich症候群、X連鎖性血小板減少症)、RUNX1遺伝子変異を伴う急性骨髄性白血病を伴う家族性血小板減少症(FPD/AML)、ANKRD26遺伝子異常を伴う常染色体優性遺伝性血小板減少症(THC2)において遺伝子変異を同定し、解析可能な症例では全例で生殖細胞系列の変異と診断した。臨床的検討では、遺伝子変異を認めない群と比較して、発症年齢はWASおよびFPD/AML群でより低年齢であること、血小板数はWAS群で低い傾向であること、出血症状はWASおよびFDP/AML群で強い傾向があることを抽出した。FPD/AMLとTHC2症例の血清トロンボポエチン(TPO)測定を行ったところ、健常コントロールと比較し全例において有意に血清TPO値は上昇し、ITPとの鑑別に有用であった。骨髄像ではRUNX1およびANKRD26遺伝子異常と巨核球形態異常の相関が明確となった。小型および正常大の血小板を有する先天性血小板減少症において、不要なITPの治療を避けられること、また血液悪性疾患合併の可能性のあるFPD/AMLやTHC2を注意深く経過観察できることから、その確定診断法の確立は有用であると考えられた。小児期に発症する小型・正常大の血小板を伴う遺伝性血小板減少症は、免疫性血小板減少症(Immune thrombocytopenia:ITP)との鑑別に重要な疾患である。昨年度は、本邦における遺伝性血小板減少症症例の蓄積とその臨床的および遺伝学的解析を行った。今年度は、これらの蓄積症例約30症例の解析結果をもとに、本邦における既知遺伝子変異を伴う遺伝性血小板減少症症例の遺伝子変異、臨床像の特徴、診断のバイオマーカーを解析し、Pediatr Blood Cancerに英文論文として報告した。また、各種学会報告を行い社会に発信した。次に、既知の遺伝子に変異を認めない症例から、エクソーム解析により新規原因遺伝子EVI-1の変異例を発見し、その臨床的および遺伝学的解析を行った。橈骨尺骨癒合を伴う遺伝性血小板減少症の原因遺伝子としては、これまでHOXA11遺伝子が知られていたが、HOXA11遺伝子変異を認めない橈骨尺骨癒合を伴う遺伝子血小板減少症の本邦3症例において、EVI-1遺伝子の同じドメインにヘテロのミスセンス変異を同定した。機能的解析から、この変異によりEVI-1遺伝子による転写活性が有意に変化すること、AP-1およびTGF-beta関連の転写調節に異常をきたすことを報告した。EVI-1遺伝子変異による遺伝性血小板減少症の発見は世界的にも先駆的であり、Am J Hum Genetに報告済である。昨年度の解析結果を論文報告したこと、および既知の遺伝子に変異を認めない症例から、エクソーム解析により新規原因遺伝子EVI-1の変異例を発見し、その臨床的および遺伝学的解析結果をインパクトファクター10以上の科学誌に報告した。当初の計画である既知遺伝子に変異のない症例検体から得られた結果であり、その成果は論文受理や学会でのPlenary sessionに採択されるなどの成果が得られているため。小児期に発症する遺伝性血小板減少症は免疫性血小板減少症(Immune Thrombocytopenia; ITP)との鑑別に重要であり、適切な治療法選択のために鑑別診断が必要な疾患である。昨年度まで、本邦における遺伝性血小板減少症を疑う症例の蓄積を行い、その臨床的および遺伝学的解析を行ってきた。その結果として、WAS異常症、RUNX1異常症、ANKRD26異常症の症例を遺伝子変異を同定して確定診断し、臨床に還元してきた。更に、橈骨尺骨癒合を伴う遺伝性血小板減少症の新規原因遺伝子としてEVI-1遺伝子異常を発見し、同じ機能ドメインに変異を有する本邦3症例の解析結果を英文論文として報告した。今年度は、引き続き本邦における遺伝性血小板減少症疑い症例を全国から解析依頼があったため、小型・正常大の血小板を有する遺伝性血小板減少症の遺伝子解析を継続して行った。その結果、新規にWAS異常症、RUNX