hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
地磁気短時間変動のシミュレーション

コア表面上のある緯度における磁場を、経度方向にフーリエ分解し、各成分の西方移動の位相速度を求めたところ、顕著な分散性がみられた。波数5程度の成分は、コア表面直下の帯状流による移流でおおむね説明できたが、低波数成分は、帯状流にさからって停滞する傾向がみられた。これは電磁流体力学的な波動で説明できる可能性がある。実際の地磁気データに対しても同様の解析をおこなうことで、そのような波動を可能ならしめる、コア内の流れや磁場の基本場に関する情報が抽出できるかもしれない。3.熱対流モデルで計算された磁場データが、地磁気ジャークに似た変動をすることを見いだした。ただしジャークの発現頻度は、実際の地磁気のそれよりもかなり低いようである。磁気西方移動の解析では、各フーリエ成分が間欠的なふるまいをすることが見いだされたが、その時間スケールは、ジャーク発現の時間スケールと同程度であり、なんらかの関連性があることが示唆された。大規模数値シミュレーションに関しては、海洋研究開発機構の地球シミュレータセンターでおこなう予定であったが、その共同利用プロジェクト内において計算時間を多く使えなかったことから、当初の計画どおりには進んでいない。しかしながら、これまでのシミュレーション結果や地磁気観測データを解釈するための、より基礎的な研究として、磁気流体波動についての線形解析をおこない、興味深い結果を得ることができた。これは、本研究課題の中の地磁気西方移動を説明する上で、多いに役立つ結果であると考えられる。1.地球磁場の変動を計算機上で再現するためには、そもそもそのような変動を起こす基本場、すなわちコア内部の流れや磁場の空間構造を正しく再現しなければならない。その意味で、今年度おこなった組成対流モデルをもちいた数値実験は、地球コアの基本場を理解する上で、示唆に富む結果をもたらした。これは、今後の研究遂行に向けて、重要な成果であると考えている。2.これまでの地磁気西方移動の解析は、グローバルな磁場のパターンが時間とともにどれだけ移動しているか、という視点でおこなわれ、ただその緯度依存性が議論されているにすぎない。今回わたくしがおこなったようなフーリエ解析は、これまでの地磁気データ解析では(おそらく観測データの質や量の問題もあったであろうが)あまり注目されてこなかった。磁気西方移動を、帯状流による移流とそれにのった電磁流体波動としてとらえ、とくに波の分散性に着目して解析することで、コア内部の帯状流の構造や磁場強度に関する情報を得るという手法は、これまでのコア研究の進展状況に照らしても、新しいアプローチであると考えれられる。次年度の研究計画に、明確な方向性を与えたという点においても重要である。3.地磁気ジャークに関するシミュレーション研究がこれまでほとんどおこなわれていない中で、かならずしも地球のジャークをよく模擬しているとはいいがたいけれども、それと性質の似た現象を数値モデルの中にとらえ、その発生原因について、ある程度の示唆が得られた点は、中間成果としては満足してよいものであると考えている。今年度は、マントル最下部の熱流量不均質や電気伝導度不均質をモデル化した、地球ダイナモの大規模数値シミュレーションをおこなうことを予定する。計算には、海洋研究開発機構の地球シミュレータセンターを利用する。
遺伝子工学によるプロラクチンリセプター遺伝子の検索及び発現機構の解明

ウサギ乳腺に存在するプロラクチンリセプター(以下PRL-R)の同定を行なった.ミクロゾーム分画のPRL-Rを可溶化した後プロラクチンを結合したカラムを用いて精製した.このPRL-Rを抗原として二種類の異なる特異的なモノクローナル抗体(以下MAb)を得た. MAbの持つ高い特異性を利用して, PRL-Rの同定を行なった. PRL-RとMAbとを反応させ得られた免疫複合体をSDS電気泳動により分析した.その結果分子量41,000と77,000の二種類のPRL-Rが検出された.又,移動度が還元剤により変化しないことから,二つのPRL-Rは独立して存在すること, SS結合で他の蛋白質に結合していないこと,がわかった.最初にPRL-RをSDS電気泳動法により分離しニトロセルロース膜に転写した後でMAbで検出したウェスタンブロット法においても結果は同様であった.又,これらのPRL-Rにプロラクチンが結合すると,それぞれの分子量は60,000あるいは99,000に増加した.増加の程度(19,000, 22,000)が,プロラクチンの分子量とほぼ等しいことから,一分子のPRL-Rと一分子のプロラクチンが結合することを示している.泌乳中の乳腺では,分子量41,000のPRL-Rが多く存在していた.次にPRL-Rと結合することに起こるプロラクチンの代謝について明らかにした.培養温度及び時間依存的に結合プロラクチンの代謝が認められた.代謝プロラクチンの特徴は,大きなSSループ内に切れ目を持ち,二つの断片はSS結合により結ばれている.還元剤で処理すると特異的にプロラクチン断片が検出出来た.主な断片は, 19,000, 16,000であり,最も小さい断片は分子量4,500である. 37°C, 16時間の培養後では約25%のプロラクチンにこの現象が認められた.この反応は,トリプシン分解阻害剤により疎多されることから,トリプシン様作用を持つ蛋白質分解酵素により起こるものと考えられた.ウサギ乳腺に存在するプロラクチンリセプター(以下PRL-R)の同定を行なった.ミクロゾーム分画のPRL-Rを可溶化した後プロラクチンを結合したカラムを用いて精製した.このPRL-Rを抗原として二種類の異なる特異的なモノクローナル抗体(以下MAb)を得た. MAbの持つ高い特異性を利用して, PRL-Rの同定を行なった. PRL-RとMAbとを反応させ得られた免疫複合体をSDS電気泳動により分析した.その結果分子量41,000と77,000の二種類のPRL-Rが検出された.又,移動度が還元剤により変化しないことから,二つのPRL-Rは独立して存在すること, SS結合で他の蛋白質に結合していないこと,がわかった.最初にPRL-RをSDS電気泳動法により分離しニトロセルロース膜に転写した後でMAbで検出したウェスタンブロット法においても結果は同様であった.又,これらのPRL-Rにプロラクチンが結合すると,それぞれの分子量は60,000あるいは99,000に増加した.増加の程度(19,000, 22,000)が,プロラクチンの分子量とほぼ等しいことから,一分子のPRL-Rと一分子のプロラクチンが結合することを示している.泌乳中の乳腺では,分子量41,000のPRL-Rが多く存在していた.次にPRL-Rと結合することに起こるプロラクチンの代謝について明らかにした.培養温度及び時間依存的に結合プロラクチンの代謝が認められた.代謝プロラクチンの特徴は,大きなSSループ内に切れ目を持ち,二つの断片はSS結合により結ばれている.還元剤で処理すると特異的にプロラクチン断片が検出出来た.主な断片は, 19,000, 16,000であり,最も小さい断片は分子量4,500である. 37°C, 16時間の培養後では約25%のプロラクチンにこの現象が認められた.この反応は,トリプシン分解阻害剤により疎多されることから,トリプシン様作用を持つ蛋白質分解酵素により起こるものと考えられた.
破骨細胞内シグナル分子,PICK1 制御による骨吸収抑制薬剤の開発

骨のリモデリングにおいて重要な役割を担う破骨細胞を制御する新たな技術の開発は,補綴歯科治療で問題となる不要な骨吸収を抑制するための新たな治療法に結びつく可能性がある。これまでに我々は,神経細胞株PC12を用いた実験により,カルシニューリンBと結合してNFAT活性を制御する分子としてPICK1を同定している。本研究で我々は,PICK1が破骨細胞前駆細胞においてもカルシニューリンと結合しており,カルシニューリン-NFATシグナルを介して分化を制御していることを明らかにした。本研究成果によって,PICK1が新たな骨吸収抑制法の標的分子となり得る可能性が示唆された。抜歯、歯周病等に起因する歯槽骨吸収を抑制する技術の開発は、補綴歯科治療の良好な予後のために非常に重要な課題である。本研究の目的は、破骨細胞分化に重要な役割をするカルシニューリン/NFATc1を中心とした分化制御機構の詳細を解析し、破骨細胞の機能を制御することによって骨吸収を抑制するための新たな技術に結びつけることである。本年度は、これまでに我々がカルシニューリンと結合する分子として見出したPICK1が、マウス骨髄細胞由来破骨細胞内においても発現しており、そのタンパク質発現量は、M-CSFおよびRANKL処置により誘導した細胞分化に伴って増加することを明らかにした。また、マウス骨髄細胞由来破骨細胞におけるカルシニューリンBとPICK1の結合を確認する目的で免疫沈降実験を行った結果、これらの分子が細胞内で結合することを確認した。さらに、破骨細胞分化に重要な役割をするNFAT活性を指標としたルシフェラーゼレポーターRAW264破骨前駆細胞株を用い、レンチウイルスを用いた遺伝子導入によって、ドキシサイクリン存在下でPICK1を過剰発現するRAW264破骨前駆細胞株を作製した。現在、この細胞をドキシサイクリン存在下で培養し、過剰発現したPICK1分子がRANKL刺激によって誘導されるNFAT活性に及ぼす影響をルシフェラーゼアッセイによって検討している。今後、この細胞を用いて、PICK1が破骨細胞分化に及ぼす影響を、TRAP染色、RT-PCRおよびウエスタンブロットにより確認していく予定である。前年度までには、我々がカルシニューリンと結合する分子として見出したPICK1が、マウス骨髄細胞由来破骨細胞内においても発現しており、そのタンパク質発現量は、M-CSFおよびRANKL処置により誘導した細胞分化に伴って増加することを明らかにしている。本年度は、破骨細胞分化に重要な役割をするNFAT活性を指標としたルシフェラーゼレポーターRAW264破骨前駆細胞株を用い、レンチウイルスを用いた遺伝子導入によって、ドキシサイクリン存在下でPICK1を過剰発現するRAW264破骨前駆細胞株を作製した。この細胞をドキシサイクリン存在下で培養し、過剰発現したPICK1分子がRANKL刺激によって誘導されるNFAT活性に及ぼす影響をルシフェラーゼアッセイによって検討した。さらに、この細胞を用いて、PICK1が破骨細胞分化に及ぼす影響を、TRAP染色、RT-PCRおよびウエスタンブロットにより検討することで、PICK1が破骨細胞の分化に促進的に作用していることを明らかにしている。これまでに我々がカルシニューリンと結合する分子として見出したPICK1が、マウス骨髄細胞由来破骨細胞内においても発現しており、そのタンパク質発現量は、M-CSFおよびRANKL処置により誘導した細胞分化に伴って増加することを明らかにした。

さらに、破骨細胞分化に重要な役割をするNFAT活性を指標としたルシフェラーゼレポーターRAW264破骨前駆細胞株を用い、レンチウイルスを用いた遺伝子導入によって、ドキシサイクリン存在下でPICK1を過剰発現するRAW264破骨前駆細胞株を作製した。さらにこの細胞をドキシサイクリン存在下で培養し、過剰発現したPICK1分子がRANKL刺激によって誘導されるNFAT活性に及ぼす影響をルシフェラーゼアッセイによって検討した。また、この細胞を用いて、PICK1が破骨細胞分化に及ぼす影響を、TRAP染色、RT-PCRにより確認した。当初の予定どおり23年度中にPICK1が破骨細胞分化に及ぼす影響を、TRAP染色、RT-PCRおよびウエスタンブロットにより検討することで、PICK1が破骨細胞の分化に促進的に作用していることを明らかにしているため、当研究はおおむね順調に進展している。24年度が最終年度であるため、記入しない。in vivoで臨床応用の可能性を探るために、マウスで用いるペプチド徐放化システムを確立する予定である。またin vivoで骨組織へのペプチドの有効性および至適な徐放条件(濃度、期間)を、組織学的に検討する予定である。
IgA腎症患者の口蓋扁桃におけるToll-likeレセプター発現の検討

1.口蓋扁桃におけるTLR発現の検討対象は腎生検にて確定診断され、扁桃摘出術を受けたIgA腎症患者および非IgA腎症患者(慢性扁桃炎、扁桃肥大)である。これまでに手術的に得られた口蓋扁桃が凍結保存されており、これらを用いて実験を行う。なお、患者からこれらの扁桃組織に関して手術前に採取組織の研究使用に対する同意書を得ている。まず、扁桃組織からmRNAを抽出し、RT-PCR法にて遺伝子レベルでのTLR2,3,4,5,9の発現をリアルタイムPCRにて定量した。TLR3においてIgA腎症では慢性扁桃炎に比べて有意に発現が少なかったが、他のTLRでは両者の間に優位な差は見られなかった。TLR9は他のTLRに比べて有意にその発現が多く認められた。2.リガンド刺激による扁桃単核細胞におけるIgA、サイトカインの産生についてTLRに対するリガンドを用いて扁桃単核細胞を刺激する。各種TLRのリガンドとしてインフルエンザ菌外膜抗原とマイコプラズマのリポペプチド、G(+)菌のペプチドグリカン、G(-)菌のLPS、細菌の鞭毛のフラジェリン、CpG DNAやウイルスのdsRNAを用いる。扁桃単核細胞は、手術的に得られた扁桃を機械的に破砕しメッシュで処理した後にFicoll-Hypaqueを用いて単核細胞を遠心分離して得られる。分離した細胞をリガンドと共にRPMIで培養した後、上清中のIgA、IgA産生に関与するサイトカイン(IL-10,TGF-β,IFN-γ)をELISAを用いて測定した。まず、IgAやサイトカイン産生についてインフルエンザ菌外膜抗原単独刺激を行った。IgA腎症患者の扁桃細胞は、IgAおよびIL-10、TGF-βの産生が非IgA腎症患者の扁桃細胞よりも有意に増加していた。3.TLRを介したリガンド刺激におけるIgA産生亢進に関するシグナル伝達機序の検討リガンド刺激によりTLRのシグナル伝達経路であるTRAFおよびNF-κBの活性化をウェスタンブロット法にて検討した。また、TLRへのリガンドの結合によりJNKの活性化が知られており、MAPキナーゼを介したシグナル伝達系としてp38、JNK、ERK5のリン酸化について免疫沈降法にて確認した。1.口蓋扁桃におけるTLR発現の検討対象は腎生検にて確定診断され、扇桃摘出術を受けたIgA腎症患者および非IgA腎症患者(慢性扁桃炎、扁桃肥大)である。扁桃細胞におけるTLR発現の検討の結果より、TLR3とTLR9の発現に差が見られたことから、CpG DNAやウイルスのdsRNAを用いて扁桃細胞のTLRを刺激しIgAおよびサイトカインの発現を検討する予定である。

各種TLRのリガンドとしてインフルエンザ菌外膜抗原とマイコプラズマのリポペプチド、G(+)菌のペプチドグリカン、G(-)菌のLPS、細菌の鞭毛のフラジェリン、CpG DNAやウイルスのdsRNAを用いる。扁桃単核細胞は、手術的に得られた扁桃を機械的に破砕しメッシュで処理した後にFicoll-Hypaqueを用いて単核細胞を遠心分離して得られる。分離した細胞をリガンドと共にRPMIで培養した後、上清中のIgA、IgA産生に関与するサイトカイン(IL-10,TGF-β,IFN-γ)をELISAを用いて測定した。まず、IgAやサイトカイン産生についてインフルエンザ菌外膜抗原単独刺激を行った。IgA腎症患者の扁桃細胞は、IgAおよびIL-10、TGF-βの産生が非IgA腎症患者の扁桃細胞よりも有意に増加していた。3.TLRを介したリガンド刺激におけるIgA産生亢進に関するシグナル伝達機序の検討リガンド刺激によりTLRのシグナル伝達経路であるTRAFおよびNF-κBの活性化をウェスタンブロット法にて検討した。また、TLRへのリガンドの結合によりJNKの活性化が知られており、MAPキナーゼを介したシグナル伝達系としてp38、JNK、ERK5のリン酸化について免疫沈降法にて確認した。
説話文学の受容と変容の研究

本年度の研究課題遂行状況はほぼ計画の通りである。具体的な成果として、論文「『今昔物語集』非仏法部の形成ー巻十「震旦付国史」を中心にー」(『国語と国文学』第91巻第4号、平成26年4月1日掲載)を執筆した。研究課題の中心的テーマとなる、院政期の説話集『今昔物語集』について、本作品の特徴とも言われている非仏法部を取り上げた。『今昔物語集』は仏伝から始まり、作品の半分以上が仏法説話で占められており、代表的な仏教文学と言われている。しかし、本作品が最も特徴的である点は、そのように仏法を中心的テーマとしているにも関わらず、仏法とは関わらない説話をほぼ同量抱えている点にある。この所謂丁非仏法部」は仏法部に比べ、構成や巻の意図が非常に錯綜しており、従来も多様な解釈が提示されてきた。本論文では、震旦部の非仏法部である巻十「国史」を中心として、中国正史からの影響や、それによる構成・配列の様相を明らかにした。また、その結果、天竺部や本朝部の非仏法部についても、震旦部からの影響のもとで構成され、説話が位置づけられている点を明らかにした。本論文は、『今昔物語集』という作品が、先行文献をどのように解釈し、構成し直し、作品を造り上げたのかという、作品生成の枠組みを提示したものである。この論文では、個々の作品における説話受容の手法を明らかにすると同時に、現在未踏査のまま残されている当該分野の資料も紹介しており、本年度における課題を果たしたものと考えている。(抄録なし)本年度の研究課題遂行状況はほぼ計画の通りである。具体的な成果として、論文1「『今昔物語集』の求める事実性」(『説話文学研究』第47号、平成24年7月30日掲載)、論文2「『長谷寺験記』論」(『国語国文』第81巻第9号、平成24年9月25日掲載)、論文3「『今昔物語集』恐怖表現の諸相と意義」(『中世文学』第58号、平成25年6月掲載予定)を執筆した。論文1では、院政期の説話集である『今昔物語集』について、説話の事実性を保証するための具体的手法と特徴、そしてその意味を明らかにした。その際、『今昔物語集』に集録された個々の説話とその出典作品を比較分析し、『今昔物語集』の特有表現や作品独自の手法を提示した。同じように『今昔物語集』に関する論文3では、当該作品にておいて特徴的と言われている恐怖表現を取り上げ、この表現が秀逸な表現描写にとどまらず、作品生成において根本的な意義を持つ存在であることを明らかにした。『今昔物語集』編者のあまりに強烈な興味ゆえに、物語展開や巻構成・全体構成意図と矛盾した恐怖表現が存在することを明らかにし、作品生成過程を考えるにあたって恐怖表現の再検討を提言したものである。加えて、『長谷寺験記』を取り上げた論文2では、『今昔物語集』や『大日本国法華経験記』といった先行説話集をいかに改変し受容していったのか、その具体的様相を明らかにした。口承文芸として捉えられてきた当該作品において、出典変容の営みが口承によるものではなく、統一された目的のために編者が意図的に行った改変であることを示したものである、これらの論文では、個々の作品における説話受容の手法を明らかにすると同時に、現在未踏査のまま残されている当該分野の資料も紹介しており、本年度における課題を果たしたものと考えている。申請者の研究は、『今昔物語集』全31巻を、依拠資料や同類話と比較分析する作業を通して、説話の受容と変容の実態を明らかにすることを目的としている。

その際に、依拠資料や同類話の資料収集が当面の課題であったが、滋賀・京都・大阪への資料調査により、ある程度の目的は達成できたものと思われる。ただし、社会情勢の問題で予定していた中国への資料調査が実行できなかったため、その作業は平成25年度に振り替えて行う予定である。現在収集した資料を使い説話受容の実態を解明する作業は、『今昔物語集』『長谷寺験記』の二作品で実行できているため、おおむね順調に進展していると言える。平成24年度の研究活動に引き続き、『今昔物語集』の依拠資料や同類話資料を収集する活動を継続して行う。社会情勢の問題で平成24年度に実行できなかった中国への資料調査を、集録説話に登場する土地のフィールドワークも含めて行う予定である。また、収集した資料を『今昔物語集』各話と比較分析し、説話の受容と変容の実態を明らかにする研究を推進する。この点については、平成24年度では「事実性の保証」と「恐怖の表現描写」という二観点から分析を試みたが、今後は「欠字の意味」と「話末評語の付加」という観点から研究を推進する予定である。加えて、『今昔物語集』と数多くの同文的同話を抱える『世継物語』においても比較分析を行い、説話受容の違いを明らかにする予定である。(抄録なし)
末梢神経端側縫合における軸索再生のメカニズム

端側神経縫合の神経再生のメカニズム解明のため、我々独自の実験モデルを作成しラットにて実験を行った。神経端側縫合の神経再生のメカニズムは未だ不明であるが、それには大きく3通りの考え方があると思われる。損傷された神経線維の一部が側方へ再生する説、神経線維の枝が誘導され枝分かれをする説そして枝わかれから経時的に独立した神経支配へと変化していく説の3つである。それらの鑑別のため、供与神経が完全に無損傷な状態での端側神経接合法を考案し、その神経再生を評価を行った。また、Neural tracerであるDiIを使用して端側神経縫合部の直接的な観察を行った。実験方法は、ウイスター系ラットを用い、坐骨神経を採取、左右正中神経間に交叉神経移植を行った。右正中神経縫合時に端側縫合を用いるが、縫合を受ける右正中神経(供与神経)が完全に無損傷な群を作成した。I群:移植神経を2分割し供与神経を挟み込む無損傷群。II群:移植神経を側神経に筋膜で巻き付ける無損傷群。III群:側神経の上膜開窓及び部分切断を行った端側縫合群。神経縫合後30日、60日後に活動電位及び筋電図を測定し神経再生の有無を確認した。さらに端側縫合部を採取し、供与神経近位部にDiIの結晶を貼付。37度のインキュベーター内にて約3週措片を作成、共焦点レーザー顕微鏡にて観察を行った。実験結果は、供与神経の完全無損傷群を含め全ての群において神経再生を認められた。端側縫合部の観察では、DiIが、供与神経近位部から端側縫合部を越え移植神経にまで達しており、III群では供与神経から再生神経力近位部を発芽している様子を観察することが出来た。供与神経が完全に無損傷なI、II群でも神経再生が得られたこと、端側縫合部の直接的観察で供与神経からのを観察し得たことにより、端側神経縫合では移植神経に神経線維の枝が誘導されて神経再生が起こるものと思われた。本年度はWistar系ラットを中心とした実験モデルの確立と各種条件の神経の端側縫合を行い、光顕的分析と筋電図学的な分析を行った。ラットの坐骨神経を採取し左右正中神経間で交叉神経移植を行うこととし、移植神経を右正中神経に端側縫合し、左正中神経には端々縫合を行った。その際、右正中神経の開窓法によって3群に分けた。第1群:側神経の開窓・神経線維部分切断群として右正中神経の神経周膜上膜に切開を加え開窓を行った。切開を神経横断面の1/5ほど切り込む様に入れ、神経線維が部分的に切断された状態とし、開窓部より切断された神経線維が膨隆し、はみだした状態となるようにした。以上の開窓操作後に端側縫合を行った。第2群:側神経の開窓・神経線維非切断群として右正中神経の神経周膜上膜に切開を加え開窓を行い、その際に、神経線維に極力損傷を加えない様に神経の長軸に沿って縦切開をおき神経上膜周膜を左右に展開し開窓を行った。神経線維が損傷されることなく開窓部に神経線維が露出した状態を作成した。

第3群:側神経非開窓群として右正中神経の神経周膜上膜には切開を加えず開窓せずにそのまま端側縫合した。第4群として端側縫合は行わずに右正中神経の中枢側と左正中神経の末梢側にそれぞれ端々縫合の形で神経移植を行った。移植90日後に神経再生の評価を行った。その結果、誘発筋電図と光顕所見によって、すべてのグループすなわち第4群・第1群はもとより第2群・第3群において神経の再生が確認された。また、すべての端側縫合モデルで再支配された左前腕の屈筋は移植神経刺激により収縮したが右正中神経が元来支配していた右前腕屈筋は収縮しなかった。そのため端側縫合において神経は再生されるものの、神経再生の際に縫合部において神経が側枝をだしている可能性は少なく、そのメカニズムについて今後解明を続けることとしている。また、神経端側縫合を臨床に応用する前段階として、成犬の舌下神経を用いた端側モデルの検討をはじめた。端側縫合の有用性及びその神経再生のメカニズムについて検討するため、ラットを使用して我々独自の実験モデルを作成し、実験を行った。神経端側縫合の神経再生のメカニズムは未だ不明であるが、それには大きく3つの考え方がある。損傷された神経線維の一部が側方へ再生する説、神経線維が枝分かれをする説そして枝分かれから経時的に独立した神経支配へと変化していく説の3つである。そこで、それらの鑑別のため完全に無損傷な状態での端側縫合法を考案し、その神経再生の評価を行った。実験方法は、ウィスター系ラット雄300gを用い、坐骨神経を約40mm採取、右正中神経から左正中神経に交叉神経移植を行った。右正中神経縫合時に端側縫合を用いるが、縫合を受ける右正中神経に無損傷な群をつくった。I群:移植神経を二分割し側神経を挟み込む完全無損傷群。II群:移植神経を側神経に筋膜で巻き付ける完全無損傷群。III群:側神経の上膜開窓及び部分切断を行った上での端側縫合群。これら3群に分け、神経縫合後60日後に活動電位及び筋電図を測定し神経再生の有無を確認した。また神経組織を採取し光顕所見を比較、再生神経線維数のカウント及び再生神経横断面短径の測定を行い検討した。実験結果は、側神経に無損傷な端側縫合を行った群を含む全ての群に神経再生が認められた。また、移植神経を刺激した際、左右両方の筋肉の収縮が見られ、端側縫合部で再生神経と側神経の交通が存在すると考えられた。神経線維数及び横断面短径については、神経接合法により有意差が認められ、無損傷群(I、II群)に比べ上膜開窓群(III群)の神経再生の程度が良好であると思われた。また、成犬の舌下神経を用いた端側縫合についても評価を行っている。側神経の完全に無損傷な第I、II群でも神経再生が得られた為、端側神経縫合の神経再生のメカニズムは、縫合の際に損傷された神経が側方に伸びるのではなく、移植神経に神経線維の枝が誘導されて起こる可能性が高いと示唆された。端側神経縫合の神経再生のメカニズム解明のため、我々独自の実験モデルを作成しラットにて実験を行った。神経端側縫合の神経再生のメカニズムは未だ不明であるが、それには大きく3通りの考え方があると思われる。損傷された神経線維の一部が側方へ再生する説、神経線維の枝が誘導され枝分かれをする説そして枝わかれから経時的に独立した神経支配へと変化していく説の3つである。それらの鑑別のため、供与神経が完全に無損傷な状態での端側神経接合法を考案し、その神経再生を評価を行った。また、Neural tracerであるDiIを使用して端側神経縫合部の直接的な観察を行った。実験方法は、ウイスター系ラットを用い、坐骨神経を採取、左右正中神経間に交叉神経移植を行った。右正中神経縫合時に端側縫合を用いるが、縫合を受ける右正中神経(供与神経)が完全に無損傷な群を作成した。
タンデムトラップを用いる液滴からの多成分単一粒子触媒の合成と反応性評価

安価で入手の容易な物質を組み合わせて高性能触媒を作り出すことを目的として,酸化物担持触媒の合成と反応性評価を単一微粒子の状態で行うことのできる装置を開発した。タンデムイオントラップ装置を開発し,混合トラップで液滴混合によって単一粒子触媒を合成し,反応トラップに搬送した後に反応気体下の加熱と温度測定を行った。ラマンスペクトルから,触媒微粒子の生成を確認し,サーモグラフィーカメラの測定により温度測定を行うことができた。本研究の目的は、安価で入手の容易な物質を組み合わせて高性能触媒を作り出すことである。このため、多成分の金属を含む酸化物担持触媒の単一粒子の合成と反応性評価を、触媒組成を変化させながら行う。具体的には、混合トラップ、反応トラップからなるタンデムイオントラップ装置を開発し、混合トラップで液滴混合によって単一粒子触媒を合成し、反応トラップに搬送した後に反応気体下の加熱と温度測定を行う。平成26年度は,液滴混合トラップの設計・製作およびトラップ微粒子の加熱,冷却過程における温度の観測を行った。液滴混合トラップの設計・製作では,4つの液滴ノズルを配置することのできる4重極トラップを設計・製作した。トラップは厚さ12 mmの円盤型電極(リング電極)とその両側面を挟むエンドキャップ電極により構成した。リング電極に4つの液滴ノズルを配置し、トラップ内部に微粒子構成成分の溶液を送りこめるようにした。液滴混合トラップに2つの液滴ノズルを配置し,それぞれから生成する液滴を衝突により混合し,トラップした。2つの液滴にそれぞれ正,負の電荷を付与した。その際,片方の電荷を多くし,液滴衝突による電荷中和の後でも電荷が残るようにした。リング電極の電圧をパルス状に変化させ,タイミングを制御して液滴を生成させることによって,2つの液滴に異なる極性の電荷を付与した。トラップ微粒子の加熱,冷却過程における温度観測では,反応トラップを用いてKCl微粒子をトラップし,CO2レーザーによる加熱を行った。レーザー照射を瞬間的に打ち切り,サーモグラフィーカメラで放射を観測することによって粒子の温度を測定した。サーモグラフィーカメラのシャッタータイミングを遅らせて温度測定を行うことにより,CO2レーザー照射後の冷却過程を観測することができた。本研究の目的は,安価で入手の容易な物質を組み合わせて高性能触媒を作り出すことである。このため,多成分の金属を含む酸化物担持触媒の単一粒子の合成と反応性評価を,触媒組成を変化させながら行う。具体的には,混合トラップ,反応トラップからなるタンデムイオントラップ装置を開発し,混合トラップで液滴混合によって単一粒子触媒を合成し,反応トラップに搬送した後に反応気体下の加熱と温度測定を行う。平成27年度は,液滴混合トラップと反応トラップの接合と粒子のトラップ間搬送,およびラマン分光法の適用による液滴混合の確認を行った。液滴混合トラップに粒子をトラップし,エンドキャップ電極に3kVの高電圧パルスを印可することによって反応トラップへ搬送した。このとき,高電圧パルスの印可時間が50 ms以上必要であることがわかった。高電圧パルスについては,高電圧アンプを購入して自作した電源によって発生させた。トラップした液滴および微粒子はCCDカメラによる顕微観測を行っているが,液滴が混合したかどうかは画像観測のみでは判断できない。そのため,トラップ粒子の電荷測定とラマンスペクトル測定を行った。トラップ粒子の荷電測定では,エンドキャップ電極間に直流の電圧を印可し,トラップ粒子の変位から電荷量を見積もった。混合前の液滴の電荷を合わせた電荷が混合後の液滴から観測されたため,液滴の混合が確認できた。一方,より直接的な確認として,混合液滴から生成した粒子のラマンスペクトルの測定を行った。硫酸ナトリウム水溶液と炭酸ナトリウム水溶液の液滴から生成した粒子をトラップし,ラマンスペクトルを観測した。混合前の液滴から生成した粒子からはそれぞれ硫酸イオンおよび炭酸イオンの信号が得られ,混合液滴から生成した粒子からはその双方が観測された。このことから,液滴の混合が進行していることが確認できた。平成27年度の目標であった液滴混合トラップと反応トラップの接合と粒子のトラップ間搬送,およびラマン分光法の適用による液滴混合の確認が実現できたため。平成28年度は,反応トラップ内でのCO2レーザー加熱焼成による粒子合成,塩化金酸・塩化チタン水溶液からの金担持触媒単一粒子の合成,単一粒子触媒によるCO酸化反応のサーモグラフィーカメラによる観測を行った。反応トラップ内でのレーザー加熱焼成による粒子合成は,粒子のラマンスペクトルを観測することによって確認した。確認のため,炭酸水素カリウムからの炭酸カリウムの合成を行った。その結果,焼成の進行をラマンスペクトルの変化として観測できた。この技術を応用し,金担持触媒の単一微粒子を合成した。塩化金酸,4塩化チタンの混合水溶液を液滴としてトラップした。この液滴にCO2レーザーを照射し,金担持触媒単一微粒子を合成した。ラマンスペクトルは4塩化チタンのブロードなスペクトルから4つの鋭いピークをもつ酸化チタンのスペクトルへと変化し,酸化チタンの生成を確認した。

反応トラップにCOとO2の混合気体または窒素を導入し,触媒微粒子へのCO2レーザー照射による温度変化をサーモグラフィーカメラにより観測した。その結果,COとO2の混合気体の中では窒素下よりも高温になっていた。これは,COの酸化反応による反応熱によって触媒微粒子が加熱されたことによると考えられる。本研究により,静電トラップを利用して単一粒子触媒を合成し,その反応性を短時間に観測する技術が完成した。この技術によって触媒開発のリードタイムの減少が期待できる。安価で入手の容易な物質を組み合わせて高性能触媒を作り出すことを目的として,酸化物担持触媒の合成と反応性評価を単一微粒子の状態で行うことのできる装置を開発した。タンデムイオントラップ装置を開発し,混合トラップで液滴混合によって単一粒子触媒を合成し,反応トラップに搬送した後に反応気体下の加熱と温度測定を行った。ラマンスペクトルから,触媒微粒子の生成を確認し,サーモグラフィーカメラの測定により温度測定を行うことができた。平成26年度の目標であった液滴混合トラップの設計・製作が実現し,トラップ性能の確認および液滴混合を伴う液滴トラップにも成功したため。触媒微粒子を液滴混合トラップで生成させ,反応トラップに搬送する。反応トラップにおいて反応気体(COとO2の混合気体)中で触媒微粒子にCO2レーザーを照射し,微粒子の温度を計測する。具体的には以下の項目を進める。(1)液滴混合トラップによる触媒粒子調製:触媒活性を持つ粒子を液滴混合トラップ中に合成する。具体的にはTiO2担持Au触媒の合成を目指す。(2)液滴混合トラップから反応トラップへの微粒子の搬送:液滴混合トラップから反応トラップへと触媒微粒子を搬送する。(3)開発装置による反応性評価:反応トラップ内でCO2レーザーによる触媒粒子を反応気体存在下で加熱する。サーモグラフィーカメラによる反応熱測定により反応性を評価する。液滴混合トラップで,単体であるTiO2の量が一定で,触媒本体であるAu濃度の異なる微粒子を作成する。その微粒子の反応性が,Auの量の増加によって増加することを確かめる。(4)触媒金属塑性の網羅的探索:触媒微粒子にさまざまな金属元素を導入し,元素組成と触媒性能との関係を網羅的に明らかにする。その結果として,高い反応性を持つ触媒を作り出す。物理化学液滴混合トラップと反応トラップを接合する。(1)液滴混合トラップによる微粒子調製:液滴混合トラップと反応トラップを接合した上で,液滴混合トラップの微粒子調製性能が十分に発揮されていることを確認する。
パルス列剰余数演算回路に基づくVLSI向きディジタル信号処理システムの高信頼化

1.自己検査機能を有するパルス列剰余数演算回路の個別ICによる構成法の検討。VLSI化の前段階として、TTLICを用いて詳細な回路設計を行い、且つ、実際に試作を行って設計の検証をした。その結果、自己検査機能を有するパルス列剰余数演算回路が22個のTTLICで構成できることが明らかとなった。2.雑音実験。設計された自己検査パルス列剰余数演算回路が、現実の雑音環境において、所要の誤り検出能力を発揮できるか否かは、重大な関心事である。そこで、標準雑音発生器(ノイズシュミレータ)を購入し、前記の試作回路に、実際に高電圧雑音を印加することにより、誤り発生・検出実験を行った。その結果、本設計の前提としている、単一雑音印加の条件下では、発生した誤りが完全に検出できることが明らかとなった。3.フォールトトレラントディジタルフィルタの試作。自己検査パルス列剰余数演算回路を用いて、非冗長桁2,冗長桁1を有する2次巡回型フォールトトレラントディジタルフィルタの試作を行い、誤り検出・訂正機能を含む総合動作の確認を行った。この結果、本ディジタルフィルタが23個の自己検査パルス列剰余数演算回路で構成できることが明らかとなった。4.自己検査パルス列剰余数演算回路のVLSI向き構成法の検討。前記のTTLを用いた回路を、まず、CMOSを用いる回路に修正し、且つ、本回路の動作を、電子回路解析プログラムSPICEを用いて解析した。5.VLSIのレイアウト設計用CADプログラムの作成。上記回路のレイアウト設計を効率的に行うことのできるよう、カラー図形を、描画,訂正,複写,保存,印刷できるCADプログラムの作成を行った。6.以上の成果を、電子通信学会の研究会などで発表した。更に、同学会論文誌に投稿し、現在査読中である。2.雑音実験。
九州北部地方における地域言語の動態に関する研究

平成29年度は九州内外各地の方言敬語に関する資料収集や臨地調査を重ねつつ、長崎街道グロットグラム調査の結果の全容を把握するために、計量的な分析を行うことに努めた。亜洲大学校(大韓民国、水原市)で開催された「日韓次世代学術フォーラム第14回大会」における研究発表(口頭発表)では、2015年に実施した長崎街道グロットグラム調査の結果を利用して、九州北部地方における方言区画の見直しを計量的におこなうため、林の数量化III類を活用し、基準や特徴について語彙・文法・敬語法の項目別に考察することを試みた。また、話者を老年層(50代以上)と若年層(40代以下)に分けて林の数量化III類を適用し、その結果を比較した。その結果、肥筑方言域として特徴が共通している福岡県・佐賀県・長崎県の各地点で、語彙・文法に関しては共通語化の現象がみられるものの、世代を問わず1960年代頃から提唱されてきた方言区画を維持していることがあきらかとなった。その一方、敬語法に関しては、語彙・文法項目でみられた従来型の方言区画に従った分布をみせることはなく、この結果は老年層でも若年層でも共通していた。さらに、敬語法の結果をみると、若年層においても共通語化の現象がみられず、老年層で使用される方言敬語形式が若年層にも引き継がれていることがあきらかとなった。統計解析に基づく方言区画の提案を当該地域においておこなった結果、従来提唱されてきた区画と異なった様相を明らかにすることができた点で、新規性が認められる内容となった。この研究内容については、研究発表をおこなった学会でも高く評価された。この学会で発表した内容は、「日韓次世代学術フォーラム」の学会誌である『次世代人文社会研究』に投稿し、厳正な査読を経て、査読論文としての掲載が認められた。今年度は長崎街道グロットグラム調査のデータを統計的に解析し、データの全容を把握することが目標であったが、その中で従来定説とされてきた方言区画を再考する形で新規性をもった研究成果を報告、論文化することができた。膨大なデータの処理を行い、語彙・文法・敬語法の項目別かつ若年層・老年層の世代別に当該データを統計的に解析することができ、結果として従来提唱されてきた方言区画の見直しに繋がる結果を得られたことは重要な進展があったものと評価することができる。また、GISを活用した言語地図作成の試みも継続してきた点で、安定的に研究を推進することができていると考える。さらに筑豊地区を中心に継続的なフィールドワークおよび談話資料の収集に取り組むことができており、全体的におおむね順調に進展していると言える。今後はこれまでに収集した方言資料およびデータを整理し、報告していく必要がある。長崎街道グロットグラム調査の結果について、敬語法に関する分析と、統計的解析による全容把握を達成することができたため、次なる段階として語彙・文法項目に関する分析を展開する。語彙項目については先行研究において指摘される特徴を整理し、これらと比較することを通じて経年変化に関する考察を行っていく。必要に応じて検証のための調査を重ね、多面的な考察を志したい。文法項目については、調査対象地域の特徴を浮き彫りにするため、記述的な分析が必要となることが予想される。今後は地理的な視点以外に記述的分析を取り入れる試みが重要となるため、学会発表のみならず学界識者との積極的な意見交換を行っていきたい。初年度は、資料収集や臨地調査を重ねながら、長崎街道グロットグラム調査の結果の中でも特にシャル敬語(待遇表現)の使用に関する調査結果の分析に努めた。まず、飯塚市を中心とした調査地点において調査結果の報告ならびに追調査の依頼を進めつつ、地域の方言資料の収集をおこなった。収集した資料や長崎街道グロットグラム調査の結果をまとめ、2016年度変異理論研究会において研究発表(口頭発表)を行い、小倉から長崎にかけて行われるシャル敬語の分布の実態を地域差と世代差の観点から分析した。この発表時に得られたご教示を参考に、鹿島・大浦を地点にシャル敬語の運用に関する補填調査を企画した。鹿島市役所や太良町役場大浦支所の協力を得て、アンケート調査並びに談話資料の収集が実現した。鹿島では4世代の話者6名の方々にアンケート調査と談話資料収集に関するご協力を賜り、大浦では4名の方々について談話収集を中心に言語データを収集した。さらにシャル敬語の動態に関する研究を深化させるべく、日本方言研究会第103回研究発表会において研究発表(口頭発表)を行った。上述した変異理論研究会での発表内容からさらに踏み込んだ分析を行い、敬語運用の現状に地域差と世代差が存在していることを指摘した。さらに、主語に「猫」や「雨」を置いた場合にもシャル敬語が行われ得ることを示したうえで、新たな運用方法が拡大する可能性があることを示唆した。以上2件の発表内容をもとに、日本方言研究会の学会誌である『方言の研究』第3号掲載を目指し、論文を執筆・投稿した。この論文では、発表中に指摘したシャル敬語の特徴や動向に関する分析に加え、分析における地域の枠組みをより細やかにしたことにで、シャル敬語の運用を巡る特徴が小倉から佐賀において共通している様子を明らかにすることができた。論文投稿の結果として、『方言の研究』第3号への採用が決定(査読有)した。初年度は仮説設定および検証のための臨地調査を重ねることで、調査対象地域における待遇表現の実態に迫ることができた。

長崎街道上の地域におこなわれる待遇表現のひとつ「シャル敬語」に着目し、長崎街道上の分布地域を明らかにした上で、先行研究では明らかにされてこなかったシャル敬語の運用面における地域差を指摘することができた。また佐賀県鹿島市と太良町大浦地区において臨地調査を実施したことによって、この敬語運用の共通性が有明海沿岸地域に展開している様子を明らかにした。この調査結果から、シャル敬語が分布する地域におけるシャル敬語の体系上の役割について考察し、今後、その現状がさらに変化していく可能性にも言及した。この研究成果は日本方言研究会の学会誌に投稿し、査読付き論文として採用された。研究目的の一つであった待遇表現の体系把握の観点を以て調査を展開し、分析したことによって、運用面の枠組みを明らかにすることができ、査読付き論文の採用という目標を達成することができた。待遇表現に関する目標がおおむね達成されたと言える。また、言語地図化の確立を目指し、膨大な言語データを用いたGISやRによる言語地図の作成にも取り組んだ。報告者が所属する研究機関のGISの専門家に教示を仰ぎ、地域言語の動態に関するテーマで国外における研究発表をこなし、言語地図作成に関する新たな技術を身に着けることができた。平成29年度は九州内外各地の方言敬語に関する資料収集や臨地調査を重ねつつ、長崎街道グロットグラム調査の結果の全容を把握するために、計量的な分析を行うことに努めた。亜洲大学校(大韓民国、水原市)で開催された「日韓次世代学術フォーラム第14回大会」における研究発表(口頭発表)では、2015年に実施した長崎街道グロットグラム調査の結果を利用して、九州北部地方における方言区画の見直しを計量的におこなうため、林の数量化III類を活用し、基準や特徴について語彙・文法・敬語法の項目別に考察することを試みた。また、話者を老年層(50代以上)と若年層(40代以下)に分けて林の数量化III類を適用し、その結果を比較した。その結果、肥筑方言域として特徴が共通している福岡県・佐賀県・長崎県の各地点で、語彙・文法に関しては共通語化の現象がみられるものの、世代を問わず1960年代頃から提唱されてきた方言区画を維持していることがあきらかとなった。その一方、敬語法に関しては、語彙・文法項目でみられた従来型の方言区画に従った分布をみせることはなく、この結果は老年層でも若年層でも共通していた。さらに、敬語法の結果をみると、若年層においても共通語化の現象がみられず、老年層で使用される方言敬語形式が若年層にも引き継がれていることがあきらかとなった。統計解析に基づく方言区画の提案を当該地域においておこなった結果、従来提唱されてきた区画と異なった様相を明らかにすることができた点で、新規性が認められる内容となった。この研究内容については、研究発表をおこなった学会でも高く評価された。この学会で発表した内容は、「日韓次世代学術フォーラム」の学会誌である『次世代人文社会研究』に投稿し、厳正な査読を経て、査読論文としての掲載が認められた。今年度は長崎街道グロットグラム調査のデータを統計的に解析し、データの全容を把握することが目標であったが、その中で従来定説とされてきた方言区画を再考する形で新規性をもった研究成果を報告、論文化することができた。
糖尿病犬における運動療法の有用性の検討

糖尿病犬に運動療法を実施し、その後の血液代謝産物、血糖コントロールマーカーに変化が認められるかを検討した。また骨格筋のバイオプシーを行い遺伝子発現量にどのような影響を及ぼすのかを検討した。空腹時血糖値は4週間の継続運動前後で有意な違いは認められなかったが、二週間の血糖コントロールマーカーである、糖化アルブミンは有意に低下した。インスリンシグナリングおよび糖代謝に関連する遺伝子であるインスリンレセプター基質(IRS)-1および2の発現量は運動前後で有意な違いは認められなかった。今後はさらに頭数を増やし、運動における糖代謝の変化のメカニズムを検討する必要がある。平成24年度は前年度に行った健常犬での運動療法の方法を応用し実際に糖尿病犬に運動療法を行い、血漿代謝産物の測定および骨格筋のバイオプシーを行い、各種遺伝子のmRNA発現を検討した。インスリンは犬の糖尿病において一般的に使用される中間作用型のNPHインスリンを用いた。結果として血糖値の日内変動においては、運動前(0week)と比較して、運動後1、2、3、4週間で有意な変動は認められなかったものの、低下傾向を示した。空腹時の血液生化学検査においては、グルコース、中性脂肪およびコレステロールでは運動前後において有意な変動は認められなかった。NEFAでは、有意な低下が認められ、0weekが0.70mEq/Lに対し、3週間後では0.35mEq/Lと有意に低下した。ASTにおいては、運動開始前後で有意な変動は認められなかった。クレアチニンキナーゼでは、有意な低下が認められ、0weekが175IU/Lであったのに対し、運動開始3週間後では137 IU/Lと有意な低下が認められた。乳酸脱水素酵素においても、有意な低下が認められた。血糖コントロールマーカーである糖化アルブミンGA(%)においては、有意な低下が認められ、controlが27.2%に対し運動開始3週間後では25.2%、4週間後では24.7%であった。体重においては、運動開始前後で変動は認められなかった。本研究より、インスリン依存性糖尿病犬に対し、長期間の運動を行なうことで、GAおよびNEFAの低下をもたらすことがわかった。よって、糖尿病犬において運動療法を行なうことによって、血糖コントロールの改善が期待でき、糖尿病管理において有用であることが示唆された。本実験では、健常犬(n=4)に対する運動実施前の糖摂取が糖脂質代謝に及ぼす影響を検討した。運動は経口糖負荷試験開始30分後の血中グルコースおよびインスリン濃度が高値を示す時間帯で行った。結果より、血中グルコースおよびインスリン濃度共に高値を示す時間帯での運動実施は、筋への糖取り込み作用とインスリン作用とが合わさり、血中グルコース濃度の急激な低下を引き起こすことが示唆された。また、絶食時の運動は脂肪分解を亢進することがわかった。次に実際に糖尿病犬に運動療法を実施し、その後の血液代謝産物、血糖コントロールマーカーに変化が認められるかを検討した。また遊離脂肪酸も運動後有意に低下した。インスリンシグナリングおよび糖代謝に関連する遺伝子であるインスリンレセプター基質(IRS)-1および2、およびその下流にあるインスリンシグナリングに関係するタンパク質の発現量、は運動前後で有意な違いは認められなかった。本研究結果より、糖尿病犬における運動療法は血糖コントロールを良化させることがわかったが、そのメカニズムは筋肉における糖取り込みが上昇したといえる証拠は得られなかった。平成23年度は正常犬における長期の運動療法の影響の検討を行った。その理由として糖尿病犬における運動療法の影響を確認する前に、まず低血糖などのリスクが少ない、正常犬において運動を継続的に行い以下のパラメーターへの影響を確認した。測定項目は血漿代謝産物およびサイトカインの定量を行い、クレアチニンキナーゼや乳酸脱水素酵素において運動後に変動が認められた。次に静脈内糖負荷試験によるインスリン抵抗性の評価を行った。しかしながら、運動前後で血糖値およびインスリンの推移に有意な変動は認められなかった。また、人工膵臓装置を用いた正常血糖クランプ法によるインスリン抵抗性の評価も行った。運動後に有意なインスリン感受性の増加が認められた。運動前後で全身麻酔により骨格筋を採取し、各種遺伝子のmRNA発現量の解析を行った。AMPK、Glut 4およびインスリンシグナリング遺伝子(IRS-1, IRS-2, PI3-Kinase)のmRNAの発現量をリアルタイムPCR法で測定し、AMPKおよびGlut4のmRNA量に有意な変動が認められた。

この結果からトレッドミルを用いた最適な運動方法および運動量および回数を検討し、糖尿病犬における運動療法へ発展させていく予定である。24年度の実績より、糖尿病犬において運動療法が血糖コントロールマーカーである糖化アルブミンを低下させ、血糖コントロールを改善する可能性が示された。したがって、研究当初の目的である運動療法の糖尿病犬に対する有用性が一部証明されたと考えられるため。平成23年度の研究の目的は、正常犬において運動療法を行い、様々なパラメーターを測定することにより、糖尿病犬における運動療法の基準を作成することであり、その目標は達成できたと考えられるため。今後はさらに詳細にトレッドミルなどを用いて運動療法を行っていく必要があると考える。また運動強度を変えることにより、血糖コントロールにどのような変化をもたらすかを検討する必要がある。平成24年度以降の計画では平成23年度の成果をもとに、実際に糖尿病犬に運動療法を行い、血漿代謝産物の測定と静脈内糖負荷試験の評価、人工膵臓装置を用いた正常血糖クランプ法によるインスリン抵抗性の評価および骨格筋のバイオプシーを行い、各種遺伝子のmRNA発現を検討する。長期の運動療法を行っている間はインスリン投与量、食事量は変更しない。インスリンは犬の糖尿病において一般的に使用される中間作用型のNPHインスリンを用いる。次年度は23年度および24年度と同様に、実験試薬や測定キットの購入や、学会発表のための旅費および本研究結果の投稿のための費用に充てる予定である。人工膵臓の消耗品、リアルタイムPCRを行うための試薬およびインスリン測定のための、ELISAキットの購入に充てられる。また情報収集のための学会参加や学会発表のための旅費にも充てられる。