hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
低炭素社会のための多様な配送状況に対応可能な二酸化炭素排出量最少経路探索システム

本問題は,最短経路探索問題よりも目的関数の値が訪問順序に大きく依存する.CO2排出量が少なくなるような近隣地点の訪問順を探索すると同時に,CO2総排出量が少なくなるような近隣地点の配送経路の並べ方を探索する必要がある.また,実用化を視野に入れると,実用に耐え得る時間での解探索が求められる.以上の問題の特徴と要求事項を踏まえて,進化計算アルゴリズムの一種である共生進化に基づいて解を探索する手法を提案した.評価実験では,最短経路よりも距離が長く,CO2排出量が少ない配送経路を得ることができた.次に,配送する貨物をいくつかのユニットに分割し,ユニットごとに貨物を別便で配送することでCO2排出量が削減される可能性に着目した.貨物の分割配送を考慮することで,トラックの最大積載量を超える量の貨物配送にも対処が可能となる.配送経路と同時に貨物割当をも決定するようにVRP-MCEを拡張して,CO2排出量最小化配送経路探索・貨物割当問題(Vehicle Routing and Cargo Allocation Problem with Minimum CO2 Emissions; VRCAP-MCE)を定義し,合わせて共生進化に基づく解探索手法を提案した.提案手法における遺伝子の表現方法として,遺伝的アルゴリズムで一般的に使われているパス表現,順序表現,ランダムキー表現を共生進化に適用できるよう変更し,評価実験を行なった結果,パス表現により最も良好な配送経路と貨物割当が得られることがわかった.平成24年度の主目標としては,現場の事情に詳しい物流事業者に対するインタビューを掲げていた.ロジスティクスの専門家2名に加え,輸配送管理システムを開発・販売している企業の社長に対してインタビューを実施し,研究内容を実態に即したものにするための情報を収集することができた.また,第2の目標としていた問題の再定義に関しても,物流事業者の保有するトラックの最大積載量と台数を考慮できるように再定義し,合わせて新しい解探索手法を提案した.これにより,使用するトラックの最大積載量を1種類に固定し,トラックの保有台数を考慮していなかったことに起因する問題を解消することができた.懸案事項としていた空荷走行の際のCO2排出量についても,代替案を提示することができた.着荷主不在と再配達発生の確率の考慮にまでは至らなかったが,実用性を重視した手法の検討が進められたことや,我々の取組みが学会で評価されて論文執筆の依頼を受けたことからも,現在までの達成度はおおむね順調と判断する.平成23年度の主目標としては,本研究の前段階として提案してきた解探索手法の改良を掲げていた.配送先データの前処理の方法,遺伝子の表現方法,適応度関数の定義,進化戦略,各種パラメータの設定などについて検討し,良好な結果を得るための方向性をつかむことができた.
腫瘍血管の病理学的特性-樹脂鋳型走査型電子顕微鏡法による3次元的観察-

19911993年の3年間の一連の研究で、我々は線維腺腫、線維肉腫、乳頭状腺腫、扁平上皮癌、可移植性性器腫瘍の血管系について観察し、それぞれの腫瘍血管の特徴を明かにしてきた。それぞれの腫瘍血管に共通する特徴として、腫瘍動脈の分枝部では血流調節機構であるintra-arterial cushionが存在せず、腫瘍内の動脈は血管壁に退行性の変化が認められることを確認した。平成3年度では、線維腺腫(ラット)、線維肉種(ラット)、7,12dimethy1-benzanthracene誘発ラット乳癌の腫瘍血管の壁構造の変化を、心臓から腫瘍に到達するまでのあらゆる部位の連続組織切片を作成し、腫瘍動脈の血管病変を観察した。その結果、腫瘍から離れた部位の動脈では血管壁構造には変化がなく中膜を構成する平滑筋は層状に豊富に存在するが、腫瘍付近の動脈壁には平滑筋細胞に形質溶解様変化や空胞化などの退行性変化が顕著で、腫瘍内の動脈では中膜の平滑筋細胞層が消失して膠原線維からなる結合組織に置き換えられていることを認めた。このように腫瘍動脈に変性が起きれば動脈本来の血流調節の為の自動収縮能はありえず、『腫瘍への血流あるいは腫瘍内の血流に合理性がなく、独特の血流動態が認められる』という説を、病理組織学的に裏付ける結果となった。今回の腫瘍血管の連続切片法による徹底した観察所見は、従来より我々が行っている樹脂鋳型走査型電子顕微鏡法で得られた所見を裏付けるものでもあった。これらの結果については、Exp.Anim.42(4),593-599,1993,J.Vet.Med.Sci.56(6).1994およびJ.Vet.Med.Sci.57(3).1995に発表した。これまでの一連の研究で、我々は線維腺腫、線維肉腫、乳頭状腺腫、扁平上皮癌、可移植性性器腫瘍の血管系について観察し、それぞれの腫瘍血管の特徴を明らかにしてきた。それぞれの腫瘍血管に共通する特徴として、腫瘍動脈の分枝部では血流調節機構であるintraーarterialcushionが存在せず、腫瘍内の動脈は血管壁に退行性の変化が認められることを確認した。平成3年度では、線維腺腫(ラット)、線維体腫(ラット)、7,12 dimethylーbenzanthracene誘発ラット乳癌の腫瘍血管の壁構造の変化を、心臓から腫瘍に到達するまでのあらゆる部位の連続組織切片を作成し、腫瘍動脈の血管病変を観察した。その結果、腫瘍から離れた部位の動脈では血管壁構造には変化がなく中膜を構成する平滑筋は層状に豊富に存在するが,腫瘍付近の動脈壁には平滑筋細胞に形質溶解様変化や空胞化などの退行性変化が顕著で、腫瘍内の動脈では中膜の平滑筋細胞層が消失して膠原線維からなる結合組織に置き換えられていることを認めた。今回の腫瘍血管の連続切片法による徹底した観察所見は、従来より我々が行っている樹脂鋳型走査型電子顕微鏡法で得られた所見を裏付けるものであもあった。これらの結果については、平成4年度中に獣医学雑誌に紙上発表する予定である。これまでの一連の研究で、我々は線維腺腫、線維肉腫、乳頭状腺腫、扁平上皮癌、可移植性性器腫瘍の血管系について観察し、それぞれの腫瘍血管の特徴を明かにしてきた。

それぞれの腫瘍血管に共通する特徴として、腫瘍動脈の分枝部では血流調節機構であるintra-arterialcushionが存在せず、腫瘍内の動脈は血管壁に退行性の変化が認められることを確認した。平成4年度では、線維腺腫(ラット)、線維肉腫(ラット)、7,12dimethyl-benzanthracene誘発ラット乳癌の腫瘍血管の壁構造の変化を、心臓から腫瘍に到達するまでのあらゆる部位の連続組織切片を作成し、腫瘍動脈の血管病変を観察した。その結果、腫瘍から離れた部位の動脈では血管壁構造には変化がなく中膜を構成する平滑節は層状に豊富に存在するが、腫瘍付近の動脈壁には平滑筋細胞に形質溶解様変化や空胞化などの退行性変化が顕著で、腫瘍内の動脈では中膜の平滑筋細胞層が消失して膠原線維からなる結合組織に置き換えられていることを認めた。このように腫瘍動脈に変性が起きれば動脈本来の血流調節の為の自動収縮能はありえず、『腫瘍への血流あるいは腫瘍内の血流に合理性がなく、独特の血流動態が認められる』という説を、病理組織学的に裏付ける結果となった。今回の腫瘍血管の連続切片法による徹底した観察所見は、従来より我々が行っている樹脂鋳型走査型電子顕微鏡法で得られた所見を裏付けるものでもあった。これらの結果については、「実験動物」に投稿中である。19911993年の3年間、我々は線維腺腫、線維肉腫、乳頭状腺腫、扁平上皮癌、可移植性性器腫瘍の血管系について観察し、それぞれの腫瘍血管の特徴を明らかにしてきた。それぞれの腫瘍血管に共通する特徴として、腫瘍動脈の分枝部では血流調節機構であるintra-arterial-cushionが存在せず、腫瘍内の動脈は血管壁に退行性の変化が認められることを確認した。また、線維腺腫(ラット)、線維肉腫(ラット)、7,12 dimethyl-benzanth-racene誘発ラット乳癌の腫瘍血管の壁構造の変化を、心臓から腫瘍に到達するまでのあらゆる部位の連続組織切片を作成し、腫瘍動脈の血管病変を観察した。その結果、腫瘍から離れた部位の動脈では血管壁構造には変化がなく中膜を構成する平滑筋は層状に豊富に存在するが、腫瘍付近の動脈壁には平滑筋細胞に形質溶解様変化や空胞化などの退行性変化が顕著で、腫瘍内の動脈では中膜の平滑筋細胞層が消失して膠原線維からなる結合組織に置き換えられていることを認めた。腫瘍血管の連続切片法による徹底した観察所見は、従来より我々が行っている樹脂鋳型走査型電子顕微鏡法で得られた所見を裏付けるものであった。
インドネシアの服飾に見るグローバル化とアイデンティティ

平成30年度はこれまでの研究成果を整理することで、成果提示を行なった。国際シンポジウム「ムスリム女性のヴェールをめぐる学際研究」での発表では、これまでの文献研究とフィールドワークの成果を活用し、インドネシアにおける特にムスリムファッションの時代ごとの変遷を整理した。現在の状況については、調査の結果明らかになったイスラーム的な「正しさ」を主張しながらも、ファッションとのバランスをとる事例を活用した発表を行なった。平成30年8月9月には、シンガポールおよびインドネシア(バリ州、西ジャワ州、中部ジャワ州)において、現地調査を実施した。研究期間全体を通じて、ムスリムファッションとインドネシアの国民アイデンティティとも関わるバティックについて、(1)作り手、(2)売り手、(3)買い手、(4)情報、に焦点を当てながら多角的に分析をしてきたが、今回の調査はこのうち(1)作り手、(2)売り手に焦点をあてたものである。特にバティックに焦点を当てた調査を中心に実施した。シンガポールでは、(2)売り手に関する調査を中心とし、インドネシアから入ったバティックが、どのように売られており、どのようなイメージを持つものとなっているか店舗で聞き取り調査を行い、同時にムスリムファッションを商う店舗での調査を行った。インドネシアバリ州では、バティックのワークショップに参加することで、(1)作り手への聞き取り調査を行ない、(2)売り手についても、お土産として売られるバティックの実態調査を行なった。西ジャワ州では、州の特徴を生かして創造されたバティックの実態を調査し、同時にムスリムファッションの売られ方について調べた。中部ジャワ州においては、バティックの作り手への聞き取り調査を行ない、ムスリムファッションについての聞き取りも行なった。また、研究機関を訪れて現地研究者との意見交換、文献収集を実施した。本研究の特徴は、インドネシアのバティックとムスリムファッションのグローバルな展開について、実証的な研究を行なうことである。中心となる調査地は、インドネシア中部ジャワ州であり、これまでの調査においても同地を中心としてきた。その一方で課題となってきたのが、これまでの聞き取り調査では情報を得てきたインドネシアのバティックの海外展開の実態、インドネシアのそれ以外の地域の状況を調べることであった。平成30年度の調査では、シンガポールにおける調査を実施することで、インドネシアのバティックの状況、さらにムスリムファッションについても調べることができた。また、バリ州と西ジャワ州の調査においては、インドネシア国内での違いについて考えるための資料を得た。これまでの調査においても、インドネシアの服飾に関して、(1)作り手、(2)売り手に関する調査は実施してきたが、それを他地域の状況を調べることで補強することが可能となった。ただし、現地調査については、平成29年度8月に急遽中止せざるを得なくなった、マレーシアにおける調査が未実施である。この調査については、今年度に実施予定である。研究成果とりまとめの年となりため、これまでの研究成果をまとめながら、現地調査における補足調査も併せて実施する。インドネシアの服飾について、時代ごとに変遷を整理する研究を子なうことで、これまでのバティックやムスリムファッションの位置づけを、より明確にする計画である。成果提示としては、インドネシアで服飾に関するシンポジウムでの研究発表を実施予定である。研究対象としている地域において、研究成果についての助言等を受けることは、今後の研究においても非常に重要かつ有益なことであると考える。現地調査については、8月9月にかけて計画しており、その中で平成29年度に急遽中止せざるを得なくなったマレーシアでの現地調査も、実施予定である。インドネシアのバティックのグローバル展開について、平成30年度のシンガポールの事例に加えて、(1)作り手、(2)売り手に焦点をあてた調査を行なう。また、マレーシアは、インドネシアと同様に、ムスリムファッションについてユニークな展開をみせている国であるため、この点についても調査を実施する予定である。インドネシアでも補足調査を行ない、中部ジャワ州において、これまでの調査の補足を実施する。また、バリ島においては、再び布に関するワークショップが実施予定であり、これに参加することで、インドネシアの服飾文化について考察を深めることを計画している。研究開始の年であるため、研究の枠組みをさらに明確化するため、服飾、グローバル化、イスラームに関する文献調査と資料収集を実施した。また、インドネシアからのファッションの発信の現状、さらに作り手を中心とした調査のために、インドネシアにおいて約3週間の現地調査を実施した。ジャカルタ首都特別州、ジョグジャカルタ特別州、中部ジャワ州スラカルタ地方において調査を行なった。ジャカルタ首都特別州においては、布の売り方と種類に焦点をあて、とくにバティックの現状についてのデータを収集し、地域ごとの特徴を入れたバティックが新たに開発されていることが明らかになった。さらにバティックの服飾デザイナーを対象とした、インタビュー調査も行なった。ジョグジャカルタ特別州においては、天然染料を使ったバティック工房を対象に調査を行なった。中部ジャワ州スラカルタ地方においては、作り手に焦点をあてた調査を実施し、バティックの街であるラウェアン地区の工房を中心とした調査を行なった。同時にインドネシアを代表するムスリム・ファッションデザイナー、さらに仕立て屋を対象とした聞き取り調査を行なった。現地調査中には、ジャカルタのインドネシア科学院、ジョグジャカルタのサナタダルマ大学、インドネシア・イスラーム大学、中部ジャワ州スラカルタにあるムハマディア大学スラカルタ校に所属する現地の研究者も訪問し、情報収取と議論を積極的に実施した。インドネシアにおける関連書籍の資料収集もあわせて実施した。バティックとムスリム・ファッションについて、それぞれ現地調査に基づいたデータ収集が進み、文献調査も順調に行われている。インドネシアにおける現地調査の成果を活用しながら、バティックとムスリム・ファッションについて、以下の2本の論文を書き上げた。「インドネシアにおけるバティック布の現状とアイデンティティ」

(『島根県立大学短期大学部松江キャンパス研究紀要』54号掲載)、「インドネシアのムスリム・ファッションと『正しさ』への意識」(本論文は、2016年度発行予定の『イスラームに基づく経済活動・行為成果論集』に掲載される予定である)。前年度に実施した服飾、グローバル化、イスラームに関する文献調査をさらに進展させ、研究の枠組みを明確化させた。また、これまでの研究成果を、2つの口頭発表および1つの論文にまとめて提示した。総合文化講座・島根県立大短期大学部松江キャンパス公開講座において、7月13日に「インドネシアの今を衣服から知る」と題する講演を行ない、バティック布をめぐる現状についての研究成果を、一般向けに提示した。11月には東京・浅草において実施された「ハラールエキスポ2016」のフィールド調査を実施し、日本および東南アジアのムスリム・ファッションの現状について、データ収集を行なった。また、東京外国語大学アジア・アフリカ・言語文化研究所において12月10日に実施された、シンポジウム「トランスカルチャー状況下における顔・身体学の構築」において、「多様なムスリム・ヴェールが伝えるものーインドネシアの事例から」と題する報告を行ない、ムスリム・ファッションに関する研究成果を提示した。平成27度にインドネシアにおいて実施した調査データを活用しながら、研究を継続し、論文(Increased Interest in Islamic Clothes and Its “Correctness" in Indonesia)にまとめている。さらに、口頭発表では、一般向けの公開講座で「インドネシアの今を衣服から知る」、シンポジウムで「多様なムスリム・ヴェールが伝えるものーインドネシアの事例から」という題で発表を行ない、成果提示を行なっている。また、東京・浅草で実施されたハラールエキスポにおいて、ムスリムファッションに関する調査を実施し、データを収集するなど、フィールドワークも継続的に実施している。また、文献調査についても、順調に進展している。平成29年度は、インドネシアのヴェールとムスリムファッションに関する研究・現地調査を中心に行った。これまでの研究成果については、平成29年度に出版された本Islam and Cultural Diversity in Southeast Asia-Vol.2-に掲載の論文で提示した。この論文では、ムスリムファッションについて、イスラームの信仰面からの「正しさ」に関心が集まる現象について考察した。
アンチセンスプローブを用いた生きた細胞のｍＲＮＡイメージング

本研究では、線形アンチセンスプローブを用いたmRNAのイメージングにより翻訳調節や分解の解析を目指した。まず、生細胞内でプローブが優れた結合カイネティクスを有することを発見し、ストレスを受けた際に内在性mRNAが速やかにストレス顆粒へ局在化する過程を観察した。続いて、任意のmRNAに対するプローブ開発を行った。まず、mRNAの予測二次構造を参考にして設計したプローブに対し、細胞内拡散に着目してmRNAとの結合を定量的に評価した結果、標的mRNAと結合しうる複数のプローブを得た。さらに、プローブの結合率や解離定数を定量化し、内在性GAPDH mRNAのイメージングと発現量の定量解析を行った。本研究では、これまでに開発した線形アンチセンスプローブを用いた生細胞内mRNAイメージング法を応用して、細胞質におけるmRNAを介したダイナミックな翻訳活性調節や分解といった細胞機能に重要な現象の解析を行うことを目指している。昨年度までに生細胞内における線形アンチセンスプローブの細胞内におけるハイブリダイゼーションの特性を分析し、優れた結合カイネティクスを有することを見出した。さらに、その特性を活かして、細胞がストレスを受けた際に速やかに局在やダイナミクスを変化させる現象の観察に応用した。本年度は、本法のmRNAイメージング法としての一般性を確立するため、任意のmRNAを標的としたプローブ開発を行った。まず、グリセルアルデヒド3-リン酸脱水素酵素(GAPDH)のmRNAを標的として、その予測二次構造を参考にしてプローブ配列の設計を行った。次いで、結合を評価するため、プローブが内在性GAPDH mRNAとの結合により見かけ分子量が著しく増大してブラウン運動が遅くなることを細胞内定量的拡散解析法により解析した。この結果、実際に標的mRNAとの結合が確認されているアンチセンスプローブがmRNAとの結合により有意に拡散が遅くなることに加えて、GAPDH mRNAを標的とした候補プローブのうち数種類のプローブが結合している結果を得た。さらに、設計・評価したGAPDH mRNAアンチセンスプローブを用いて、内在性GAPDH mRNAのイメージング、および蛍光相関分光法(FCS)を用いた発現量の定量的解析を行った。本研究では、線形アンチセンスプローブを用いた生細胞内mRNAイメージング法を確立して、細胞質におけるmRNAを介したダイナミックな翻訳活性調節や分解といった細胞機能に重要な現象の解析を行うことを目指している。まず、生細胞内における線形アンチセンスプローブの細胞内におけるハイブリダイゼーションの特性を分析し、mRNAとの結合、解離の反応速度定数(konやkoff)や解離定数(Kd)を算出した。さらに、その特性を活かして、細胞がストレスを受けた際に直接内在性mRNAを蛍光イメージングすることにより、速やかにストレス顆粒(SG)へ局在化する過程の観察に成功した。また、任意のmRNAを標的としたプローブ開発を目指し、GAPDH mRNAを標的とした候補プローブを設計した。プローブ結合を定量的に評価するため、プローブが内在性mRNAとの結合により見かけ分子量が著しく増大して拡散が遅くなることに着目して、アンチセンスプローブの状態を高感度蛍光顕微鏡を用いた細胞内拡散の定量的解析法により詳細に解析した。このうち10種類以上のプローブが内在性mRNAと結合している結果を得た。さらに、mRNAとの親和性の高いプローブを用いて、COS7細胞の内在性GAPDH mRNAのイメージング、および蛍光相関分光法(FCS)を用いた発現量の定量的解析を行った。最後に、本法をsiRNAにより選択的mRNA分解を誘導した際のmRNA発現量の実時間追跡へと応用し、RNA分解の実時間解析に成功した。本研究では、代表者がこれまでに開発したアンチセンスプローブを用いた生細胞内mRNAイメージング法を、細胞質におけるmRNAを介したダイナミックな翻訳活性調節機構の解析へと応用する。しかし、実際の生細胞内で種々の制御下にあるmRNAの振る舞いを記述するには、細胞内におけるプローブのキャラクタリゼーションや一般性の確立など実用性の課題がある。そこで、本年度は生細胞内におけるアンチセンスプローブの基礎特性を分析し、RNA研究の基盤技術としての確立に取り組んだ。まず、アンチセンスプローブの細胞内における結合カイネティクスを検証した。プローブを生細胞内にマイクロインジェクション法により導入し、2種プローブのmRNAとの結合に伴うFRETを追跡することによりプローブとmRNAとの結合、解離の結合速度定数や解離定数を算出した。この結果、アンチセンスプローブは細胞内において、およそ1分という短時間で結合することが分かった。これはアンチセンスプローブを用いることにより、分オーダーで起こるmRNAの迅速な発現量、局在変化を追跡できる事を示している。次に、検討したアンチセンスプローブの特性を活かし、迅速なmRNA局在変化のモニタリングへと応用した。ストレス環境にある細胞において、翻訳中のmRNAがストレス

顆粒(SG)と呼ばれる細胞質の一時的な構造体に蓄積する現象を実時間でイメージング追跡した。また、SG形成と内における内在性mRNAの振る舞いを詳しく解析するために、アンチセンスプローブを用いて可視化された内在性mRNA(c-fos mRNA、poly(A)+ mRNA)の運動性を定量的イメージング解析により検討した。その結果、内在性mRNAはSG内において抑留されていることが分かった。本検討は、SGはmRNAの翻訳抑制としての機能を有することを示した。昨年度は、迅速なmRNA局在変化の実時間追跡を優先させて検討したが、本年度はアンチセンスプローブ設計についてその設計法と評価法を考案、実践した。さらに、プローブとmRNAの結合を拡散の変化から検出する原理に関して、その信頼性や拡張性を検討するために、プローブのハイブリダイゼーションを定量的に解析し、細胞内において有用であることを確認した。当初、平成23年度はアンチセンスプローブの細胞内における結合カイネティクスの検証に加えて、任意のmRNAに対するアンチセンスプローブ設計のための標的配列の選択に関する検討を予定していた。しかしアンチセンスプローブが優れた結合カイネティクスを有していたため、迅速なmRNA局在変化のモニタリングの検討を優先した。今後は、これまでに開発してきた線形アンチセンスプローブによる内在性mRNAイメージングおよび定量解析法の有用性を確認するために、既存のRNA標識法では追跡不可能であった現象の解明へと応用する。具体的には、生細胞内での内在性mRNAの分解反応などを計画している。任意のmRNAを標的としたプローブを開発するため、グリセルアルデヒド3-リン酸脱水素酵素(GAPDH)のmRNAを標的にしたアンチセンスプローブを開発する。プローブの標的配列を選択するため、GAPDH mRNAの翻訳配列のRNA二次構造を参考にしてアンチセンスプローブを設計する。標的と相補的な配列を持つ蛍光(Cy3)標識アンチセンスプローブを受託合成により調製し、生細胞内において内在性GAPDH mRNAとの結合能を蛍光相関分光法(FCS)や蛍光褪色後回復法(FRAP)により評価する。細胞アッセイに用いる細胞培養や生化学消耗品に加え、新たに導入するアンチセンスプローブの調製に充てる予定である。新規mRNAに対する有効なアンチセンスプローブの開発に必要な消耗品類の購入に充てる予定である。
日本企業の対ヨーロッパ直接投資と総合商社の役割に関する経済地理学的研究

ほぼ当初計画通り、以下のように研究を実施した。1総合商社の海外投資に関する2次資料・文献の収集および分析内外の公刊図書・資料、商社業界誌、各商社の年次レポート・有価証券報告書・社史、日本貿易会およびジェトロ発行の資料を収集した。これまでの整理分析の結果、総合商社をオ-ガナイザーとする“日本型"海外投資の特徴が明らかになった。しかしながらヨーロッパに焦点を当てた資料は十分でなく今後とも収集に努める必要がある。2事業所リスト・データベースの作成および分析収集した公刊資料・社内資料に基づき、1962年・72年・82年・87年・92年の5カ年について、9大総合商社の世界中の関係事業所リストを作成した。その数は膨大で、合計1万箇所をこえるが、研究補助者を任用してコンピュータへの入力処理をほぼ完了した。これまでの分析の結果、9大商社の従業員配置は世界経済の地域的動向に密接に関係していることが解明された。3インタビュー調査2次資料では解読困難な現場動向を明らかにするため、9大商社各社および日本貿易会、ジェトロなどにおいてインタビュー調査を実施した。会談内容はテープに録音し、のちに研究補助者を任用し文書化した。大手商社は各社ともEU市場統合に対応して対ヨーロッパ戦略を再編しつつあり、従来の各国別の展開からヨーロッパ全体を見渡す地域統括会社へと組織を変更したことなどが明らかになった。総合商社の事業は経済動向を常に先取りする形で展開してきており、したがって今後も現場の情報収集に努める必要がある。
新規リゾリン脂質アシル転移酵素の生化学的、生物学的解析

生体膜はグリセロリン脂質からなる。そのグリセロリン脂質の中には、生理活性を持つ血小板活性化因子(PAF)なども存在する。グリセロリン脂質は一度ホスホリパーゼによって脂肪酸が切り出され、再びリゾリン脂質アシル転移酵素によって再アシル化して生合成される。この経路は、1950年代にランズ回路と名付けられた。それから約50年を経て、ようやくリゾリン脂質アシル転移酵素が複数同定され、我々も6種類同定に成功している。中にはPAFを生合成するリゾホスファチジルコリンアシル転移酵素(LPCAT)2も含まれた。LPCAT2は主にマクロファージに発現しリポポリサッカライド(LPS)刺激で活性化されることがわかった。本研究で、その活性化メカニズムはリン酸化によることがわかった。PAF生合成メカニズムに一端が解明されたことにより、新たな創薬へとつながるだろう。生体膜グリセロリン脂質を生合成するリゾリン脂質アシル転移酵素をターゲットとして研究を進めている。本年度は主に3つの成果を報告した。1.新規にリゾホスファチジン酸アシル転移酵素3(LPAAT3)を同定した。LPAAT3は精巣に発現し、週齢依存的に上昇した。また、アラキドン酸をリン脂質に貯蔵する活性が強かった。2.肺に発現し、呼吸に必須な肺サーファクタント脂質を合成するリゾホスファチジルコリンアシル転移酵素1(LPCAT1)の解析を行った。肺サーファクタントは肺胞の表面張力を下げる。その約80%がリン脂質であり、主にsn-1位もsn-2位も飽和脂肪酸であるdi-saturated PC(DSPC)からなる。マウスLPCAT1は生化学的な解析からDSPCを合成することがわかっていた。さらに今回、ヒトLPCAT1もマウスと同様の活性を持つことがわかった。米国のグループからヒトLPCAT1はDSPCを合成できないという報告が出ていたが、酵素活性測定方法に問題が有り、我々はヒトLPCAT1もDSPCを合成できることを見つけた。さらに、遺伝子データーベースより、各動物種のLPCAT1を調べると、肺又はその相同器官を持つ生き物にはLPCAT1が存在することがわかった。肺とLPCAT1は呼吸機能を獲得するために、同じように進化してきたと推測できた。3.リゾリン脂質アシル転移酵素の新規ファミリーであるmembrane bound o-acyltransferase(MBOAT)ファミリーを既に報告している。しかし、これまで酵素活性に必要なMBOATモチーフの情報は少なかった。我々は詳細な点変異解析を行い、MBOATモチーフA-Dを見つけた。これらの情報は酵素活性メカニズムの解明につながり、阻害剤の開発へ有効な情報となる。そこから、生体膜リン脂質生合成メカニズムの解明へと発展させられる。血小板活性化因子(PAF)はリン脂質であり、強力な生理活性脂質である。その生合成酵素はリゾPAFアセチル転移酵素であり、私達は現在まで、その酵素として恒常型のリゾホスファチジルコリンアシル転移酵素(LPCAT)1と誘導型のLPCTA2を報告した。マクロファージ系細胞株RAW264.7細胞にLPCAT1とLPCAT2を過剰発現させて、リポポリサッカライド(LPS)で30分間刺激するとLPCAT2のみが活性化され、LPCATIは変動しなかった。これまで、その活性化メカニズムは不明であった。今回、このRAW264.7細胞をLPSで刺激し、タンパク質画分を回収した。その試料をphos-tag SDS PAGEにより解析した。phos-tag SDS PAGEはリン酸化タンパク質の泳動度を変化させてSDS-PAGE上バンドをシフトさせるものである。その結果、LPCAT2にバンドシフトが認められ、LPCAT2がリン酸化されていることがわかった。LC-MSやアミノ酸点変異解析によりその部位がSer34であると判明した。また、リン酸化に至る経路を調べるため、TAK1阻害剤、p38MAPキナーゼ阻害剤、MK2阻害剤やMK2-siRNAなどで細胞を処理し、LPCTA2のリン酸化を調べた。LPCAT2はLPS刺激後MK2を介してリン酸化され活性を上昇させることも分かった。活性化型LPCAT2が明らかになり、PAF産生メカニズムがより詳細に解明された。
ソフトナノスペース中へのクリーンエネルギー気体高密度貯蔵

単層カーボンナノチューブ(SWCNT)、単層カーボンナノホーン(SWCNH)、ナノ細孔性配位高分子(MOF)の壁の柔らかさの特徴とそれら物質のナノ構造へのクリーンエネルギー貯蔵について研究した。上記物質以外のナノ細孔性カーボンも含めて超臨界水素吸着性を総合すると、室温での吸着量は1wt.%以下であるが、77K程度になると10wt.%程度のナノ構造炭素があること、吸着水素の密度は20Kでの液体水素密度に近いものもあることを明らかにした。硝酸と硫酸の混酸処理によりSWCNTのバンドル構造を制御すると0.7nm以下のウルトラミクロ孔が増え、水素吸着量がほぼ2倍にまで増加することを見出した。SWCNTについてはアルコールを吸着すると、チューブの同心方向の振動(RBM)が大きな影響をうけラマンバンドが高波数側にずれること、分子吸着がその振動に与える圧力効果は約1万気圧相当であることを発見した。モデルケースとして窒素分子の場合にナノスケールの曲率の符号が単分子層吸着構造にどのような影響を与えるかを検討し、曲率が負である内側チューブ表面上の窒素単分子層は、曲率が正である外側チューブ上の単分子層よりも長距離秩序性が優れていることを明らかにした。SWCNHのナノ細孔が電荷貯蔵能力に優れており、構造制御の仕方によってはスパーキャパシターとして有望であることが分かった。また、水素と重水素は古典的には同じ大きさであるが、分子量が小さいために低温では量子的振る舞いにより、重い重水素のほうが小さくなる。このために、40K程度では重水素の吸着量が5倍程度大きくなるMOFを見出し、その理論的根拠も示した。MOFについて2段階ゲート吸着を示す化合物を発見した。構造がソフトな有機・無機ハイブリッド錯体結晶の合成、超臨界水を用いた新しいナノ細孔体創製法の開発、高温度熱処理によるナノ細孔性カーボンの細孔構造修飾、単層で壁構造のソフトなシングルワォールカーボンナノホーンの表面酸化処理を行い、超臨界メタンおよび水素等に対する新しい候補吸着剤を準備した。それらについて77Kにおける高分解能窒素吸着測定、X線回折測定、ラマン分光測定等によるキャラクタリゼーションを進めた。一方ではステンレススプリングを用い、新しい変位量検出装置を備えた高圧気体吸着装置の開発と、低温からの正確なX線回折測定が可能なように、4KからのX線回折用クライオスタットの設計・開発を実施した。このようにソフトナノスペース中での超臨界気体吸着研究の大筋は計画通りに進展している。一方、シングルウオールカーボンナノホーンのような一部のソフトナノスペース系については低温と室温における水素吸着、室温でのメタン吸着実験を進めた。これらの一部については研究論文としてまとめられた。更に、カーボン系のナノスペースについてはX線吸収法を用いて、スペース中へのイオン溶液の濃縮効果を検討し、脱水和現象を見出した。また、水がカーボンナノスペース中に入る現象についても、X線小角散乱と分子シミュレーションから、水分子クラスター成長原理を明らかにできた。この水クラスターは超臨界水素とメタンのナノスペース中への濃縮に役立つ可能性もあるために重要であることが明らかとなった。単層カーボンナノホーン(SWNH),単層カーボンナノチューブ(SWNT)、活性炭素繊維(ACF),銅有機錯体結晶を用いて、ナノ空間の特殊な分子場の解明と水素、メタンなどクリーンエネルギーである気体の吸着特性を検討した。SWNHについては、位置の不確定性に基づき、軽い水素は重い重水素分子よりも小さく、単層壁のナノスケールの窓の透過性が悪いために、吸着量が10%以上も小さいことを見出した。この選択的水素・銃水素分子吸着性を実験と統計力学シミュレーションの両面から明らかにした。また、水蒸気あるいはCO_2などの電荷移動の可能性がある気体吸着とSWNHの電子伝導性を検討した。

電子供与性の水蒸気とCO_2を吸着すると、可逆吸着にも拘らずnタイプの電気伝導性変化を生ずることを見出した。その理由が吸着時に単層の壁がひずむことに関係している可能性を見出した。SWNTについては、触媒金属を除去する条件を検討し、不純物金属量を1wt.%以下に抑えた試料を調製し、SWNHと同様な選択的水素・銃水素分子吸着性を見出した。また、SWNHの圧縮条件を変えながら、ナノ細孔を制御してメタンの吸着量を飛躍的に増大させた。ACFとSWNHについては、疎水性ナノ空間物質として、水分子のクラスター形成のあり方を、統計力学シミュレーション、その場小角X線散乱(SAXS)などから検討した。その結果、スリットナノ空間では、0.6nmの水クラスターを生ずると、疎水性のナノ空間でも十分に安定化できることを示した。また、吸着量の温度依存性から、クラスターの熱的安定性が315Kを境に急変することを、SAXSの揺動強度変化から示した。銅有機錯体結晶については、メタン吸着能の温度依存性を調べ、ゲート圧力と温度との関係から、メタンを取り込んだ包接化合物の生成を推定した。また、吸着特性が圧力とともに二段階で吸着現象が進行する化合物の探索に成功した。以上の成果のうちの一部は論文として公表中である。ナノ空間物質として主として単層カーボンナノホーン(SWNH)、Cuピリジル錯体、ゼオライトを用い、ナノ空間容量と構造制御を行い、その構造決定を実施した。それらの構造決定されたナノ空間を利用して、水素およびメタンの吸着特性を検討した。SWNHについては1nm以下のナノ窓の創製条件の決定とその発生メカニズムを示した。その試料を用いて20Kから77Kにおける水素と重水素の吸着特性を測定し、水素の吸着量が小さいことを明らかにし、その機構を不確定性による量子効果を考慮した分子シミュレーションから示した。Cuピリジル錯体については、メタン吸着の温度変化を測定し、その吸着機構が錯体結晶へのメタン取り込みによるクラスレート生成によるものであることを、熱力学的に示した。この原理は他のナノ細孔性錯体についても適用可能である。このクラスレート生成時に結晶格子大きく変動することをX解回折から明らかにした。孔子歪を伴う吸着現象を複数のナノ細孔性錯体で見出した。また、ナノ空間への分子アクセスが、水素あるいはメタンの貯蔵機能上も重要であるために、メソ細孔の付与が大事である。そのために分子吸着時にわずかな格子の歪みが発生するとみられているゼオライト(ZSM-5,NaA, NaY)にカーボンアエロジェル、アエロジェルのメソ細孔を鋳型として、メソ細孔を付与することに成功した。疎水性のカーボンナノ空間中に水蒸気が吸着されるメカニズムを、その場X線小角散乱法とグランドカノニカルモンテカルロ法によって、水クラスターの成長として理解できることを示した。単層カーボンナノチューブおよび二層カーボンナノチューブについては細孔構造をあきらかにし、精密なX線回折結果からバンドル構造をも決定して、グランドモンテカルロ法による水素吸着のシミュレーションを実施、実測の吸着等温線と比較した。
ヒト免疫細胞の発生分化に関する分子生物学的研究

(1)ヒト胎児肝より、未分化型リンパ球表面マーカー(CD2,CD19)を有し、胚型TCR遺伝子および胚型Ig遺伝子構造をもち、かつRAG遺伝子を発現していないクローン化リンパ球前駆細胞株(FL8.2.4.4)を樹立した。(2)FL8.2.4.4細胞とマウス骨髄由来ストローマ細胞株PA-6の共培養の実験系を用いて、(1)PA-6との共培養のみではFL8.2.4.4にRAGの発現は誘導されないこと、(2)種々の混合サイトカイン(IL-2,IL-3,IL-6,IL-7,GM-CSF,SCF)存在下で培養すると、FL8.2.4.4細胞に12時間以内にRAGの発現が誘導されること、(3)個々のサイトカインについては、IL-3,IL-6,IL-7がRAGの発現誘導に関与し、これらのサイトカインの間に相乗効果が認められること、(4)RAGの発現誘導にFL8.2.4.4細胞とPA-6接着が必須であること、(5)FL8.2.4.4細胞をパラホルムアルデヒドで固定したPA-6細胞と共培養してもFL8.2.4.4にRAGの発現が誘導されることを明らかにした。(3)ヒトゲノムライブラリーから、RAG-1cDNAを用いてRAG-1ゲノム遺伝子をクローニングし、その構造を解析した。その結果、(1)RAG-1は約4kbのイントロンをはさむ2つのエクソンからなること、(2)RAG-1はTdT遺伝子やmb-1遺伝子と同様のnon-TATA遺伝子構造であること、(3)複数(少なくとも4箇所)の転写開始点を持つこと、(4)塩基配列が決定されたプロモーター領域(580bp)に、Ets-1,Lyf-1,Ig-enhancer box,GATA,NF-IL6などの転写調節蛋白の結合配列が存在することを明らかにした。ゲルシフト法等により、どのような転写因子がどの領域に決定するかを現在明らかにしつつある。
遺伝子数増大に耐える高精度遺伝子制御ネットワーク推定法の提案

次世代シーケンサ技術の発展に伴い、様々な生命現象における超多数の遺伝子発現量のデータを時系列に取得することが容易になってきた。この技術発展により、遺伝子間の制御関係、遺伝子制御ネットワークを同定することで、対象とした生命現象をシステムレベルで明らかにすることが期待されている。しかし、既存の方法論の多くは本来は関係ない制御関係も全て考慮した自由度の高すぎるモデルを用いて推定するため、大多数の遺伝子における遺伝子制御ネットワークを高精度に推定できない。そこで一部の支配的な遺伝子の制御関係のみを考慮する新規アルゴリズムを構築し、この問題を解決する遺伝子制御ネットワーク推定アルゴリズムを構築する。
パルスESRを用いた三重項・ラジカル対のスピンダイナミクスの研究

本研究では以下のような研究成果が得られた。1.装置:自作のフーリエ変換ESR(FT-ESR)およびスピンエコー(FT-ESE)装置を完成させた。cw時間分解ESRの結果と比較すると1)スペクトル感度、2)時間分解能、3)スペクトル分解能の点で1桁ほどFT-ESRの方が優れていることがわかった。共振器は、従来の空洞共振器と自作のループギャップ共振器の両方を試したが、ギャップの大きさを工夫すれば後者の方が感度・時間分解能の点で勝っていた。2.光誘起電子移動反応:ポルフィリン(ZnTPP)-キノン(BQ,DQ)系(1)FT-ESR信号の時間変化を用いて、cw時間分解ESRでは観測できなかったレーザー照射後200ns以下の反応初期過程と10μs以後のラジカルの二次反応(逆電子移動反応)過程を追跡することができた。3つの指数関数によるシミュレーションからスピンおよび反応ダイナミクスの時定数が求められた。(2)通常のFT-ESRではdead time(150ns程度)のため観測できなかった、スペクトルのブロードなポルフィリンカチオンのスペクトルを電子スピンエコー(ESE)法とサンプルの重水素化法の2つの方法で初めて観測することに成功した。これによって反応に関与する3つの中間体、アニオン、カチオン、イオン対のすべてがESRで観測された。(3)イオン対信号は、FT-ESR法ではラジカルのスペクトルの上に分散成分として観測されるが、本研究で信号の吸収成分と分散成分を正確に分離する方法を確立した。これによってイオン対の動的挙動をイオンと分散して観測することができ、その生成・消滅の速度定数が得られた。
次世代向け韓国語電子教科書の開発とその有効性の検証による韓国語教育環境の確立

本研究は韓国語学習者のために電子教科書を開発し、韓国語学習環境の改善を目的とした。申請者は、3年間の研究で以下の成果を得ている。(1)電子教科書はスマートデバイスで運用できるので、ユビキタス性が高い。本研究では、スマートデバイスに基本搭載されている各種センサーを用いて、通信インフラと学習管理サーバ不要の学習支援ツールを開発した。(2)授業内で試験的に開発した電子教科書を使用後、申請者は様々な項目について従来型との比較調査実験を行い、本研究の妥当性を明らかにした。(3)申請者は、中級者用の手書き学習を初め、実践的な学習項目を強化した電子教材も開発し、授業内での実践活用も行った。平成24年度の研究成果は研究会発表5回と査読付き論文2本で、その内容を以下に説明する。1.研究会発表:正規の韓国語授業中で、開発したタブレット用の韓国語電子教科書を実践的に利活用(4月8月)する実験を行った。実験に参加した学生を対象に、アンケート調査を行い、その結果を統計的手法で分析し、開発したタブレット用の韓国語電子教科書による教育的効果を検証した。これらは1韓国語の検定試験対策用のモバイル学習教材の開発とその評価分析(教育システム情報学会第5回研究会)、2韓国語学習におけるモバイル端末用の電子教科書の実践活用とその評価分析(情報処理学会コンピュータと教育研究会)、3韓国語教育におけるタブレット端末用の教材開発とその評価について(教育システム情報学会全国大会ワークショップ2)のタイトルで発表された。また、ネットワーク環境と学習管理サーバが不要である、学習システムを試作し、その動作を確認した。これらは4モバイル世代向けの実践的韓国語学習支援システムの構築(映像情報メディア学会次年大会)、55AndroidとBluetoothを用いた韓国語学習支援システムの提案(教育システム情報学会第5回研究会)のタイトルで発表された。2.査読付き論文:多様な学習者に対して、手書きに重点を置いた韓国語教材の評価を行い、その結果を統計的手法で分析的に考察を行った(韓国語学習における手書き電子教材の効果的な活用に関する考察ー異なる学習背景を持つ大学生学習者に対するアンケート評価よりー、コンピュータ&エデュケーション)。また、次世代向けのタブレットの教育的な有効性を明らかにするために、実際の講義中で実践活用を行い、その結果を統計的手法で分析を行った(タブレットPCを用いた基礎韓国語の電子教科書の実践活用に関する考察、コンピュータ&エデュケーション)。本研究は、韓国語学習者のために、電子教科書を開発し、韓国語学習環境の改善を目的とした。本研究と直接対比すべき従来のe-ラーニングは、対面授業のビデオ収録やボタン操作の単純な問題を追加した程度であり、学習意欲維持と高度な内容に到達するまでの継続学習が困難であった。これらの問題点を打開するために、3年間の本研究では以下のような成果を得ている。1電子教科書に適した新指導・学習モデルの提案:電子教科書はスマートデバイスで運用できるので、ユビキタス性が高い。本研究では、スマートデバイスに基本搭載されているBluetoothとSQLiteを用いて、通信インフラと学習管理サーバ不要の学習支援ツールを開発した。これにより、対面授業内はもちろん、授業外の学修時にも同一端末を用いて学習ができる、新たな学習モデルを提案し、その有効性も実践活用により検証した。2手書きによる初級電子教科書の開発と評価:試験的に、正規授業内で開発した電子教科書を主教材として使用後、申請者は様々な項目について従来型との比較調査実験を行い、本研究の妥当性を明らかにし、その内容を中級電子教科書に反映した。また、1で提案した学習システムを用いて、音声や学生の理解度も即時に把握できた。3中級電子教科書の開発:申請者は、中級者用(ハングル検定34級程度)の手書き学習はもちろん、作文、会話などの実践的な学習項目を強化した電子教材を開発し、実践活用も行った。しかし、上級者用(ハングル検定1級および2級))は高度な学習内容と参考になる書籍も少なかったので、電子教科書への適用は難しかった。これについては、今後継続して研究を行う予定である。最後に、本研究は、直接的には韓国語学習を題材にしてはいるが、新しい知識とその運用技術とを学習者に伝える方法は他の学習領域にも汎用化可能なものであると考えられる。平成23年度に計画した研究は、東日本大震災の影響で学内施設や研究基盤の正常化が約1か月程度遅れてスタートしたが、幸い当初の研究計画には大きな影響は生じなかった。平成23年度の研究実績(査読付き論文3本、研究会発表1本、講演1回)の概要を時系列に以下に示す。1.Android OSとタブレットPCを基盤とする電子教科書を試作し、その内容を情報科学技術フォーラム(9月、函館)FITで発表(タイトル:タブレットPCによる次世代向け韓国語電子教材の開発)を行った。

2.「IT技術と外国語教育」というテーマで、従来でのe-ラーニングの問題点が改善できる一つの方法を提案した。なお、今後の電子教科書のあり方や活用および展望について、コンピュータ利用教育学会外国語教育研究部会(10月、東京)で講演を行った。3.電子教科書の特徴の一つである手書き文字認識の基礎技術に関する論文が、電子情報通信学会論文誌(タイトル:ディジタル円上の特定16か所におけるローカル極)に掲載された。4.タブレットPCだけではなく、よりモバイル学習が期待できるAndroidの携帯電話で動作するハングル能力検定対策用の学習アプリを開発し、その内容がコンピュータ利用教育学会春季研究会(3月、東京)の論文誌(タイトル:ハングル能力検定試験(5級)の学習アプリの開発ーAndroidスマートフォンを用いてー)に掲載された。5.異なる韓国語習熟度の被験者を対象に、手書き学習に関するアンケート調査を行い、その有効的な活用について分析を行った。この内容に関する論文がコンピュータ&エデュケーション会誌に(タイトル:韓国語学習における手書き電子教材の効果的な活用に関する考察ー異なる学習背景を持つ大学生学習者に対するアンケート評価よりー)掲載される予定である。平成24年度に計画した研究目標は、初級者向け電子教科書の評価と中・上級者向け電子教科書の試作であった。初級者向け電子教科書の評価の方法は、正規の韓国語講義の受講者にタブレット端末を貸し出して(2012年4月から10月まで)、電子教科書による実践活用を行った。その後、受講者からアンケート調査(電子教科書と従来教材との比較など)を行い、得られた結果を統計的手法で分析を行った。その結果、初級者向け電子教科書は初めて韓国語を学ぶ学生に、発音や手書きなどに効果的であったことが明らかになった。また、授業外の学習時間でも利活用できたことも確認した。従って、受講者は初級者向け電子教科書の利活用に十分に満足したといえる。これらの研究成果は3回の研究会発表と2本の論文としてまとめた。一方、初級者向け電子教科書の評価から課題もみられた。電子教科書の内容は従来の教科書内容に基づいて制作されたので、付加学習(模擬試験、学習記録)をマネジメントする機能はなかった。その機能を実現するために、モバイル端末に基本装着しているBluetooth通信を用いて自律分散型無線ネットワークを試みた。この試みはネットワーク環境と学習管理サーバがない通常の講義室でも学習マネジメントできることを目指した。試作した中・上級向け電子教科書にもこの機能を組み込んだ。試作はハングル能力検定試験の対策用で、4,5級を対象に簡単な評価も実施した。これらの研究成果は2回の研究会発表としてまとめた。また、中級用電子教科書には、多様なマルチメディアコンテンツを学習内容に応じて配置した。平成23年度に計画した研究目標は、1.新しい指導・学習モデルの考案と2.初級者向け電子教科書の作製であった。研究目標
ナメクジウオの形態的・遺伝的多様性と種分化-日本個体群を中心に

本研究で2年間に使用した標本は、自ら採集または協力者から入手した以下のものである:ナメクジウオBranchiostoma belcheriの伊勢湾湾口部(遠州灘)、紀伊半島五ケ所湾、瀬戸内海(西淡町)、九州天草、チンタオ、およびシャーメン(アモイ)の各地産標本;B.malayanumのタイ国バンコク湾とプーケット産標本;オナガナメクジウオ(外群として使用)の沖縄県黒島産標本;カタナメクジウオ(同)の台湾南湾産標本。さらに大西洋産のB.lanceoltumとB.floridaeについてはDDBJからデータを入手した。(1)遠州灘、瀬戸内海および天草の各個体群のアロザイム分析の結果、調査した17のうち5遺伝子座において、各個体群間の対立遺伝子頻度に統計的有意差が認められたが、全遺伝子座をまとめた時のFst値が非常に小さいことから、個体群間にはかなりの遺伝的交流があることが推測された。(2)冒頭にあげたすべての個体群に対する、ミトコンドリアゲノム上のチトクロムC酸化酵素サブユニットI(COI)と16SリボソームRNAの遺伝子の塩基配列データと形態形質の解析から、おもに以下のことが判った。(a)形態からみると日本国内とチンタオのナメクジウオは酷似する一方、両者はシャーメンのものとは明瞭な差異が認められた。ところが、分子的にはこれら3個体群間に有意な差が全く検出されなかった。(b)COIのデータを用いて、Branchiostoma属のアジア産種と大西洋産種との遺伝距離は0.222と計算された。この値は、哺乳類のサル目とネズミ目の間で同様に計算して得られた値(0.278)にほぼ匹敵する。ここから、アジア産種と大西洋産種が分化したのは、今から約1億1000万年前と推算された。本年度は、伊勢湾湾口部、瀬戸内海、および九州天草周辺から、いずれも多数のナメクジウオ標本を入手することが出来た。特に、後2者については生きたまま入手できたので、水槽飼育をこころみた。扱いやすさを考慮して底砂のかわりにガラスビーズを敷き、適宜餌を与えたところ、すでに半年以上生存している。ただし、飼育開始時には生殖期に入っていたが、その後生殖腺が急速に縮小したため、地域個体群間の交配実験はできなかった。これら3個体群についてはすでにアロザイム分析による集団遺伝学的解析が終了している。その結果、以下のことが判明した。(1)調べた17遺伝子座のうち、5遺伝子座は1つの対立遺伝子で固定されていた。(2)残り12遺伝子座では複数の対立遺伝子がみられたが、多型遺伝子座は9であった。(3)5遺伝子座において、各個体群間の対立遺伝子頻度に統計的有意差が認められたが、全遺伝子座をまとめた時のFst値が非常に小さいことから、個体群間にはかなりの遺伝的交流があることが推測された。(4)Fis値は0よりも有意に大きかった。これは、個体群内のヘテロ接合体率の低下を意味するが、上記(3)などからみて有効な集団サイズの縮小によるものとは考えにくい。ミトコンドリアDNAを用いた解析は現在進行中である。上記のアロザイム分析の結果とあわせて、まもなく論文としてまとめられる見込みである。タイ国のバンコク湾とプーケットにおいて、1999年11月末から12月はじめまで、当初計画どおりの野外調査を行った。最大限の採集努力にもかかわらず、残念ながらナメクジウオは採集できなかった。

そのかわり、Branchiostoma malayanum Webbという、日本には生息しない近縁種を多数採集することに成功した。データの比較により、日本のナメクジウオ個体群の集団遺伝学的特性が明かになることが期待される。本年度は、中国北部のチンタオと南部のシャーメン(アモイ)から、ナメクジウオBranchiostoma belcheri Grayの標本を多数入手することに成功した。これらと昨年度採集した日本国内の数ヶ所のナメクジウオ、およびタイ国沿岸産Branchiostoma malayanum Webbを分析試料として、ミトコンドリアゲノム上のいくつかの遺伝子の塩基配列を決定した。それを形態的解析の結果と総合することにより、ナメクジウオの種分化や系統について重要な知見をえることができた。その一部は、2000年11月22日23日に鹿児島大学で開催された国際ワークショップで発表し(別項11参照)、正式の論文もまもなく国際誌に投稿される。ミトコンドリアゲノムにあるチトクロムC酸化酵素サブユニットIと16SリボソームRNAの遺伝子と形態形質の解析から得られた知見の概要は、つぎの通りである:(1)形態からみると日本国内とチンタオのナメクジウオは酷似するが、両者はシャーメンのものとは明瞭な差異があるが、分子集団遺伝学的には意外にも、これら3者間に有意な差が検出されなかった。(2)ヨーロッパ産のB.lanceolatum(Pallas)と北米大西洋岸産のB.floridae Hubbsの当該遺伝子の塩基配列データをジーンバンクから入手し、上記アジア産の2種と比較したところ、形態(筋節数)においてはB.malayanumが他の3種とかけ離れている一方、分子においてはアジア産2種と大西洋産2種との間に最大のギャップが認められた。(3)チトクロムC酸化酵素サブユニットIの塩基配列データから、アジア産種と大西洋産種との遺伝距離は0.222と計算された。この値は、哺乳類のサル目とネズミ目の間で同様に計算して得られた値(0.278)にほぼ匹敵する。ここから、アジア産種と大西洋産種が分化したのは、今から約1億1000万年前と推算された。