hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ビブリオ属菌の新規なポリアミン生合成酵素群遺伝子のクロ-ニングと解析

1.Nー末端アミノ酸配列の決定と抗体の調製.Vibrio alginolyticusにおけるnorspermidineの生合成に関与する三種の酵素,Lー2,4ーdiaminobutyrate decarboxylase(DABA DC),carboxynorspermidine synthase及びcarboxynorsperimidine decarboxylase(CANS DC)を精製し,それぞれの酵素のNー末端アミノ酸配列を決定した.さらに,精製したDABA DC及びCANSDCに対する抗体を調製した.2.酵素遺伝子のクロ-ニングと大腸菌での発現.陽性クロ-ンの選別は上記の抗体を用いる免疫学的スクリ-ニング法によって行なった.CANSDC抗体と強く反応するクロ-ン1個を得た.このクロ-ン[E.coliHB101(pCDC14)]の粗抽出液中のCANSDC比活性はV.alginolyticusのそれの約3倍であった.更に,Western blotによってV.alginolyticus CANS DC(43500 Da)と一致する蛋白バンドが認められ,E.coliにおいてCANS DCが発現していることが示めされた.本遺伝子をpUC18に逆位に挿入しても,酵素活性は変化しなかったので,promoter領域もcloningされていることが示唆された.欠失プラスミドの分析によって最小断片2kbp(pCDC14ー1)にCANS DC遺伝子が特定された.3.CANSDC遺伝子の塩基配列の決定と解析.pCDC14ー1よりnested deletionプラスミドを作成し,promoter及びterminator領域の塩基配列を決定した.既に決定したMetから始まる20種のアミノ酸配列と完全に一致する塩基配列が同定できた.ー35,ー10のpromoter領域及びSD配列も認められた.3'ー領域の妥当な部分にTAA termination codonとρー非依存性のterminator領域が同定され,CANSDC全遺伝子のクロ-ニングが完了した.DABADCの他細菌における分布.Acinetobacter calcoaceticusよりDABADCを精製し,V.alginolyticus DABADCとNー末端アミノ酸配列,抗原性などを比較し,興味深い差異を明らかにした.1.Nー末端アミノ酸配列の決定と抗体の調製.Vibrio alginolyticusにおけるnorspermidineの生合成に関与する三種の酵素,Lー2,4ーdiaminobutyrate decarboxylase(DABA DC),carboxynorspermidine synthase及びcarboxynorsperimidine decarboxylase(CANS DC)を精製し,それぞれの酵素のNー末端アミノ酸配列を決定した.さらに,精製したDABA DC及びCANSDCに対する抗体を調製した.2.酵素遺伝子のクロ-ニングと大腸菌での発現.陽性クロ-ンの選別は上記の抗体を用いる免疫学的スクリ-ニング法によって行なった.CANSDC抗体と強く反応するクロ-ン1個を得た.このクロ-ン[E.coliHB101(pCDC14)]の粗抽出液中のCANSDC比活性はV.alginolyticusのそれの約3倍であった.更に,Western blotによってV.alginolyticus CANS DC(43500 Da)と一致する蛋白バンドが認められ,E.coliにおいてCANS DCが発現していることが示めされた.本遺伝子をpUC18に逆位に挿入しても,酵素活性は変化しなかったので,promoter領域もcloningされていることが示唆された.欠失プラスミドの分析によって最小断片2kbp(pCDC14ー1)にCANS DC遺伝子が特定された.3.CANSDC遺伝子の塩基配列の決定と解析.pCDC14ー1よりnested deletionプラスミドを作成し,promoter及びterminator領域の塩基配列を決定した.既に決定したMetから始まる20種のアミノ酸配列と完全に一致する塩基配列が同定できた.ー35,ー10のpromoter領域及びSD配列も認められた.3'ー領域の妥当な部分にTAA termination codonとρー非依存性のterminator領域が同定され,CANSDC全遺伝子のクロ-ニングが完了した.DABADCの他細菌における分布.Acinetobacter calcoaceticusよりDABADCを精製し,V.alginolyticus DABADCとNー末端アミノ酸配列,抗原性などを比較し,興味深い差異を明らかにした.1.各酵素蛋白のNーアミノ酸配列の決定:大量精製した各酵素蛋白についてそれぞれのNー末端アミノ酸配列をペプチドシ-クエンサ-を用いて決定した。三種の酵素のうち、carboxynorspermidine decarboxylaseは20残基迄完壁に決定することができ、しかもその配列中にmethionine2残基が認められ、クロ-ン選抜のためにそのオリゴヌクレオシドを用いることが妥当であることが判明した。一方、他の2種の酵素は多縮重のアミノ酸残基が多く認められ、クロ-ン選抜にそれらのオリゴヌクレオシドを用いることは適当でないことが示された。しかしながら、いずれのアミノ酸配列もDNA配列の決定時には有用な情報を与えると考えられた。2.遺伝子ライブラリ-の作成:Vibrio alginolyticus genomic DNAを用いてそのライブラリ-を作成した。約2000の形質転換コロニ-を得ている。3.Lー2,4ーdiaminobutyric acid decarboxylase(DABA DC)抗体の調製とスクリ-ニング:ウサギを用いてDABADCに特異的な抗血清を得た。現在、免疫学的方法を用いてクロ-ンのスクリ-ニングを行なっている。

4.Carboxynorspermidine decarboxylaseのオリゴヌクレオチドの調製とスクリ-ニング:アイソト-プ標識したプロ-ブを用いてクロ-ンのスクリ-ニングを開始した。5.Lー2,4ーdiaminobutyric acid decarboxylaseの他細菌における分布:Vibrio属細菌の他に、Acinetobacter属細菌にも本酵素活性が存在することを発見した。この酵素を精製し、Vibrio属酵素との免疫学的相同性を明らかにすべく検討している。1.組換えDNA選別と酵素遺伝子の大腸菌での発現Carboxynorspermidine decarboxylase(CANS DC)及びLー2,4ーdiaminobutyrate decarboxylase(DABADC)に対する抗体を調製し,ライブラリ-よりイムノスクリ-ニングによって陽性クロ-ンを選別した。CANSDCについては16個の陽性クロ-ンのうち1個(pCDC14)にV.alginolyticusの粗抽出液の約3倍の比活性が認められた。一方,DABADCについては10万コロニ-以上をスクリ-ニングし,57個の陽性クロ-ンを得たが,いずれにも酵素活性は認められなかった。本酵素はサブユニットが11万の4量体で,しかもNー末端アミノ酸がSerであることなどの理由から,酵素活性の発現には何らかの障害があると考えられた。2.CANSDC遺伝子(nspC)のマッピングとサブクロ-ニング本遺伝子は約4kbpのDNA断片中に存在し,PvuII,EcoRI,SalI,SacI,HincIIの切断個所が1個ずつ存在していた。SalI断片をpUC18に逆位に挿入しても、酵素活性の変化は認められず,プロモ-タ-領域もクロ-ニングされていることが明らかとなった。数種の欠失プラスミドを作成し,酵素活性を測定したところ,EcoRIで切り出される最小断片2Kbp(pcDC14ー1)にnspCが存在することが判明した。3.nspCの塩基及びアミノ酸配列の決定と解析pCDC14ー1よりnested欠失プラスミドを作成し,特にpromoter及びterminator領域を重点的にシ-ケンスした。その結果,既に決定したMetから始まる20種のアミノ酸配列に対応する塩基配列が同定できた。また,ー35,ー10のプロモ-タ-領域及びSD配列が認められた。一方,3'ー領域の妥当な部分にTAA terminationコドンとpー非依存在のterminator領域が同定された。以上の結果は,nspCの全領域がクロ-ニングされたことを示している。
サミュエル・ベケットにおける「翻訳行為」-バイリンガリズムとジャンル横断の帰趨

本年度は初年度の成果を引き継ぎサミュエル・ベケットの作品における「翻訳行為」の解明に取り組んだ。その結果、ベケット作品では英・仏語間の「翻訳行為」が小説・ラジオ・テレビといったジャンル間の横断へと展開され、それが特に後期ベケット作品におけるテキスト生成の原動力となっていることを解明した。年度の前半には1960年代に書かれた散文作品(『事の次第』と『死んだ頭』など)と1950年代以降に執筆・制作されたラジオ・テレビ作品における感覚の表現を比較分析し、表象不可能性を表現する「撞着語法」の使用が、散文作品とメディア作品、あるいは言語と表象との境界として、両者間の翻訳を構造化していることを論証した。その成果は学術論文'Oxymoronic Perception and the Experience of Genre:Samuel Beckett's Ghost Trio,.but the clouds.and Beyond'としてまとめられた。本論はJournal of Beckett Studiesに掲載されることとなった。また、本年度7月には初年度の成果を世に問うため、二つの国際学会でベケットの初期小説についての発表をおこなった、イギリス比較文学会主催の国際学会では、「フォリー」という言葉の使用に、また国際アイルランド学会では「書く行為」のトポスとしてのノートブックの表象に注目し、ベケット作品を英仏語で比較分析した。その結果「翻訳行為」と「書く行為」との連関性を論証し、これらの行為の自己生成性の内実と構造を解明した。年度の後半は、これらの成果を踏まえて、1980年代以降に書かれた散文と演劇作品を分析し、この時代の作品が「バイリンガリズム」と「ジャンル横断性」とが結晶する地点を示していること、さらにこの地点は既成の文学ジャンルの境界を超えるような、いわば散文でも演劇でもない「書くこと」の自己生成(generis)性を表象するような新たな文学ジャンルを提示していることを論証した。以上の研究成果は一つの論考にまとめられた。本年度はサミュエル・ベケット作品における「翻訳行為」の概念の抽出に取り組んだ。まずベケットの批評作品やインタヴューの踏査を通して、ベケット作品における「言語への問い」を「思考によって使用される道具としての言語」(1940年代)から、「思考を事後的に構造化する言語使用」(1950年代)を経て、「言語使用それ自体の根拠自体を問うこと」(1960年代)に至る過程として解明した。さらにこの前提を念頭におき、ベケットの初期の小説三部作の英・仏語版の徹底的な比較研究を行った。そのその結果、ベケット作品における「翻訳行為」が文法レベル、意味レベル、形象レベルの関連のうちに構造的に問題化されていることを明らかにした。シンポジウムOrder and Disorderでの口頭発表"Dis-ordering the Order in Translation : Reading Samuel Beckett's Molloy"では文法と意味レベルの関係に注目し、言語使用における意味伝達の曖昧さが「道具としての言語」を解体する過程を分析した。国際学会Borderless Beckettでの口頭発表""Marker of Borders and Give of Language : A Study of the Figure fBirds"はベケット作品における二言語間の翻訳の不可能性が、「オウム」によって媒介されていることを論じ、もって「翻訳行為」の地平が単に意味の伝達を目的とするだけでなく、そのような意味生成を条件づける意味生成以前の場をも含むことを明らかにし、「言語使用それ自体の根拠を問う」引き金になっていることを示した。2006年6月にはサミュエル・ベケット・アーカイヴ(英国・レディング大学)に赴き、1950年・60年代に書かれた演劇作品、散文作品の草稿を踏査・収集した。その結果、ベケット作品における「翻訳行為」の解明が次年度の研究課題である「ジャンル」問題と切り離しがたいことが確認された。その洞察の一部は、早稲田大学演劇センター紀要に寄稿された投稿論文"The Idea of "Game"and "Play" in Samuel Beckett's Theatre: From Waiting for Godot to Play"にまとめられた。

年度の後半は、これらの成果を踏まえて、1980年代以降に書かれた散文と演劇作品を分析し、この時代の作品が「バイリンガリズム」と「ジャンル横断性」とが結晶する地点を示していること、さらにこの地点は既成の文学ジャンルの境界を超えるような、いわば散文でも演劇でもない「書くこと」の自己生成(generis)性を表象するような新たな文学ジャンルを提示していることを論証した。以上の研究成果は一つの論考にまとめられた。
アンチセンス鎖の分子機能解析

分裂酵母において減数分裂に特異的なスプライシングが数多くの遺伝子において報告されている(Averbeck et al., Mol Cell, 18:491, 2005; Wilhelm et al., Nature, 453:1239, 2008)。一方、Mei4は減数分裂の進行と胞子形成において中心的な役割を果たす転写因子である(Horie et al., Mol Cell Biol 18:2118, 1998) (Murakami-Tonami et al., Proc Natl Acad Sci USA 104:14688, 2007)。申請者は、東京大学の白髭博士との共同研究により、イントロンの差を検出できる感度の高い方法を用いてMei4のターゲットを解析している。このタイリングアレイの実験から、Mei4の新しいターゲットや多くのアンチセンス鎖の発現を見出している。また、減数分裂に特異的にスプライシングされる遺伝子の9割以上にアンチセンス鎖の転写産物は体細胞分裂や減数分裂を通じて大きな変化はみられないが、減数分裂時に少し現象している遺伝子も存在していた。このアンチセンス鎖の機能については、未解明である。しかし、研究途中で別のグループからこれとほぼ同様の内容の研究が発表された(Chen et al., PLos One, 2012, e29917)。そのため、実験計画を見直しを迫られた。そして、アンチセンス鎖の発現が確認されたspo6について解析を行ったが、顕著な表現型が得られなかった。26年度が最終年度であるため、記入しない。最近のゲノム解析からタンパク質をコードしている領域のみならず、その他の大部分のDNAは転写されていることが明らかになってきた。一方、予想以上に少ない遺伝子から多様なタンパク質が選択的スプライシングにより生成される。しかし、多く生物において選択的スプライシングがどのように制御されているかはあまり明らかにされていない。減数分裂特異的なフォークヘッド型転写因子であるMei4は、第一減数分裂の開始、遺伝子組み換えや胞子形成に必要である。Mei4は減数分裂中期に転写される遺伝子のほとんどを制御しているマスター転写因子として知られている。最近、Mei4が細胞周期制御の中心的な役割を果たすCdc2の活性化因子であるCdc25の遺伝子の転写を直接誘導することで、第一減数分裂の開始を制御していることを明らかにした。また、新たなMei4が制御している因子を同定するために、Mei4を破壊した株を用いてタイリングアレー解析を行った。この実験では同調的に減数分裂を誘導するために、温度感受性pat1変異株を用いて行った。すると、多くの遺伝子にアンチセンス鎖の転写産物が存在していた。そこで、この遺伝子を調べたところ、そのほとんどが減数分裂に特異的にスプライシングされるMei4のターゲットであった。このアンチセンス鎖の役割を解明するために、アンチセンス鎖の発現のみを抑えるようにプロモーターを置換して、解析中である。Mei4が発現制御している減数分裂特異的遺伝子の発現調節に減数分裂に特異的なスプライシング制御が知られている。ゲノム全体でMei4に依存して発現制御される遺伝子のmRNAを調べた結果、アンチセンス鎖の転写産物が存在していた。この研究をさらに進展させるため、アンチセンス鎖の機能解析を行う。
大気・海洋を中心とした生物地球化学的循環の解明：元素同位体および化学種の利用

【太平洋上のエアロゾル中にに含まれる微量金属元素の分布】本年度は北太平洋に加えて、西部、赤道および南部太平洋、南極海にて採取した粒径を7分画したエアロゾル中の微量金属元素濃度とそれらの粒径分布を明らかにした。その結果、どの海域でも陸域と類似した粒径分布が得られた。また、微量金属弦の空間分布においては西部太平洋上で最も高い微量金属元素濃度を観測した。この海域では陸域を起源とする空気塊と外洋からの空気塊の両方の試料採取に成功しているが、これらの試料中の微量金属元素濃度を比較すると元素によっては1桁以上高い濃度を検出した。これらのことから、海洋エアロゾル中の微量金属元素は陸域の影響を強く受けていることが明らかとなった。【エアロゾル中のNaの化学種解析】海洋エアロゾル中の主成分である塩化ナトリウム(NaCl)は大気中で酸などと反応し、大気中に塩素を放出することが知られている。これらの反応はエアロゾルの化学的特性を変化させるだけでなく、対流圏オゾンの消失に寄与する。そこで本研究では海洋エアロゾル中のNaの化学種解析を行い、その変質過程の解明に挑んだ。その結果、粗大粒子ではNaClのみであったが、海塩粒子からわずかに塩素が放出されていることが明らかとなった。この際に放出された塩素はオゾン消失などに寄与する活性塩素であり、海塩粒子が重要な放出源となる可能性が示唆された。一方で、微細粒子ではNaClに加えて硫酸ナトリウムやNaの有機塩が含まれていた。特にNaの有機塩は粒子表面に濃集しており、界面活性を持つことが予想される。界面活性を持つ物質の表面濃集は粒子と水蒸気との親和性を低下させ、雲形成に影響を及ぼす可能性がある。このように、海洋エアロゾル中のNaClの競う均一反応や雲形成に影響を与える可能性が示唆された。28年度が最終年度であるため、記入しない。<海洋エアロゾル中の鉛同位体比とその起源>:西部北太平洋においては偏西風の影響を受け、東アジアの人為的活動と類似した鉛同位体比が、東部北太平洋においてはカナダの人為起源物質やアラスカの土壌などと類似した鉛同位体比が検出された。このように海洋大気中の鉛は最も近い陸域の影響が大きいことが明らかとなった。また、ベンガル湾の試料においても北太平洋と同様に、最も近い陸源のエアロゾルの寄与が大きかった。このように海洋大気において、鉛同位体比は有用な大気流動トレーサーとして利用できることが明らかとなった。さらに、西部北太平洋上のエアロゾル中の鉛同位体比と、先行研究で示されている同地域の表層海水中の鉛同位体比も類似していた。このように鉛同位体比は大気流動トレーサーとしてのみでなく、表層海水への人為起源物質の沈着まで追跡できる可能性が高い。<粒径分画エアロゾル中のホウ素同位体比>:大気流動トレーサーとしての利用可能性が見出されているホウ素同位体比だが、鉛同位体と異なり、輸送中の物理的、化学的反応により同位体比が変化する可能性がある。しかし、これに関する考慮は先行研究において、一切行われていない。2013年に採取した各月のエアロゾル中のホウ素同位体比を測定した結果、1年を通して、微細粒子のホウ素同位体比が粗大粒子のそれより低いことが明らかとなった。また、元素濃度比から予想されるホウ素の排出源とエアロゾル中の同位体比に差があることも分かった(特に粗大粒子に含まれる海水由来のエアロゾル)。このことからエアロゾルの輸送中にホウ素同位体比が変化していることが示唆され、大気流動トレーサーとして用いる際には、この変動にも考慮した慎重な取り扱いが必要となる。本年度は南半球外洋にて採取した海塩粒子中のナトリウムの化学種解析を中心に実験を行った。粗大粒子のナトリウム化学種は塩化ナトリウムのみで構成されていた。しかし、粗大粒子中の塩素とナトリウムのモル濃度比をイオンクロマトグラフィーで測定した結果、塩素/ナトリウム比は海水中の1.17を下回っていることが明らかとなった。これは大気中において海塩粒子とヒドロキシルラジカル(OHラジカル)が反応することによって、活性塩素化学種である塩素分子(Cl2)が大気中に放出されたことが原因だと考えられる。このように、大気中においてOHラジカルと海塩粒子が反応したと考えられる直接的な証拠を化学種解析と濃度定量から得られることが明らかとなった。一方で、微細粒子においては塩化ナトリウムのほかにナトリウムの有機錯体が存在していることが明らかとなった。近年、粒径が1 μm以下の海塩粒子への有機物の濃集が着目されており、大気化学反応が有機物の濃集の一因を担っている可能性が示唆された。ナトリウムの有機錯体が存在している試料の塩素/ナトリウム比は1を大きく下回っており、塩化ナトリウム以外のナトリウム化学種の存在を示している結果とも整合的であった。本研究ではさらにナトリウムと結合している有機錯体を明らかにするために、同じ試料に対して走査型透過X線顕微鏡を用いて、炭素の官能基の化学種解析を行った。その結果、主要な炭素の官能基はカルボキシル基(ーCOOH)であることが分かった。来年度はこれら有機錯体の起源を明確にし、海塩粒子と有機物の化学反応過程に着目する必要がある。

本年度行ったナトリウムの化学種解析および主要イオン濃度の定量結果から、粗大粒子において海塩粒子とヒドロキシルラジカルが反応している痕跡を得られた点は重要な結果だと考えられる。また、微細粒子においても主要なナトリウム化学種として有機錯体が存在していることが明らかとなった。これらのナトリウム化学種および反応過程の痕跡をフィールド観測から得た研究例は決して多くはなく、本研究で用いたX線吸収微細構造法による化学種解析からこのような結果を得た研究は他にない。そのため、ナトリウムの化学反応過程の理解と言う点では当初の計画以上に進展があったと言える。一方で、海水中の鉛の分離・濃縮法に関してはまだ完成に至っておらず、この点に関しては少し遅れがでているのが現状である。また、得られた研究成果の論文報告も随時行う必要があると考えている。このような理由を踏まえて、今年度の本研究課題の進捗状況はおおむね順調に進展していると評価した。【太平洋上のエアロゾル中にに含まれる微量金属元素の分布】本年度は北太平洋に加えて、西部、赤道および南部太平洋、南極海にて採取した粒径を7分画したエアロゾル中の微量金属元素濃度とそれらの粒径分布を明らかにした。その結果、どの海域でも陸域と類似した粒径分布が得られた。また、微量金属弦の空間分布においては西部太平洋上で最も高い微量金属元素濃度を観測した。この海域では陸域を起源とする空気塊と外洋からの空気塊の両方の試料採取に成功しているが、これらの試料中の微量金属元素濃度を比較すると元素によっては1桁以上高い濃度を検出した。これらのことから、海洋エアロゾル中の微量金属元素は陸域の影響を強く受けていることが明らかとなった。【エアロゾル中のNaの化学種解析】海洋エアロゾル中の主成分である塩化ナトリウム(NaCl)は大気中で酸などと反応し、大気中に塩素を放出することが知られている。これらの反応はエアロゾルの化学的特性を変化させるだけでなく、対流圏オゾンの消失に寄与する。そこで本研究では海洋エアロゾル中のNaの化学種解析を行い、その変質過程の解明に挑んだ。その結果、粗大粒子ではNaClのみであったが、海塩粒子からわずかに塩素が放出されていることが明らかとなった。この際に放出された塩素はオゾン消失などに寄与する活性塩素であり、海塩粒子が重要な放出源となる可能性が示唆された。一方で、微細粒子ではNaClに加えて硫酸ナトリウムやNaの有機塩が含まれていた。特にNaの有機塩は粒子表面に濃集しており、界面活性を持つことが予想される。界面活性を持つ物質の表面濃集は粒子と水蒸気との親和性を低下させ、雲形成に影響を及ぼす可能性がある。このように、海洋エアロゾル中のNaClの競う均一反応や雲形成に影響を与える可能性が示唆された。今年度の計画は(1)海洋エアロゾル中鉛同位体比測定および(2)東広島市における粒径分画エアロゾル中のホウ素同位体比測定であった。(1)に関しては、海洋大気試料中の鉛同位体比測定はすべて終え、北太平洋およびベンガル湾における鉛の起源に関する議論が行うことができた。(2)に関しては、1年分の粒径分画した試料からホウ素同位体比を明らかにすることで、これまで考慮されてこなかった、大気中におけるホウ素同位体比の分別が生じていることを明らかにした。このように当初の計画通り、試料の分析および議論が遂行できた。
新しいエンドトキシン測定法による敗血症の評価

Endotoxin Laser Scattering Photometry(ESP)が比濁時間分析法(従来法)より高感度にエンドトキシン(Et)を測定できる可能性が示唆された。ESPが従来法より有意にSeptic shockおよびSepsisの診断能が高く、細菌感染診断として一般的に使用される試薬の一つであるプロカルシトテストと同等での予測能力であった。Septic shockにてEt吸着療法を行った患者では、ESP測定値の低下にともなって臨床症状が改善した。また、Et吸着筒前後で、Et低下も確認された。PMX施行患者でのEAAよりESPが患者状態を良く反映する可能性が明らかとなった。臨床研究1:敗血症患者でのESPの測定【目的】Sepsis患者で新しいエンドトキシン測定法としてEndotoxin Laser Scattering photometry(ESP)による血中エンドトキシン値の測定を行い、患者の病態、患者重症度、細菌感染状況による評価と比較検討を行う。【研究成果】敗血症症例でのESP法と循環動態の変動について症例報告を投稿し受理掲載された。Sepsis患者の検体収集が順調に進んでおり、目標症例数に達した。従来の比濁時間分析法では測定できていなかったエンドトキシンをESPでは測定できていることが判明した。Septic shockおよびSepsisの状態ではESPが比濁時間分析法より有意に診断効率が良いことが判明した。臨床研究2:敗血症性ショック症例でのESPとEAAの評価【目的】Septic shockを来した症例で経時的にESPとEAAを測定しESPによる血中エンドトキシン値の推移と臨床症状の改善、エンドトキシン吸着療法(PMX)のカラム前後でのエンドトキシン吸着状況を評価、PMXを必要とする患者のエンドトキシンレベルをESPとEAAを対比して評価する。【研究成果】Septic shockの患者での検体収集も目標の約半数程度を集積することができている。Septic shockの患者で、ESPで測定したエンドトキシンの低下と伴に臨床症状が改善することを観察し、症例報告として投稿し受理掲載された。PMXのカラム前後でのエンドトキシン値の推移も症例報告として投稿し受理掲載された。EAAとESP法の比較についても症例報告を学会にて行う予定である。現在、保険適応として臨床で使用されている比濁時間分析法では正確に患者の状態を評価できていないことが明らかになりつつあり、臨床的に意義が高い研究であると考える。【研究成果】敗血症症例でのESP法と循環動態の変動について40症例について解析を行い、敗血症におけるESP法の診断意義を検討した。Septic shockおよびSepsisの状態ではESPが比濁時間分析法より有意に診断効率が良いこと、また、現在、細菌感染の補助診断として用いられているプロカルシトニンテストと同等であることが判明した。その内容を英文雑誌に投稿し受理掲載された。【研究成果】Septic shockにてエンドトキシンの吸着療法を行った患者では、ESP法で測定したエンドトキシン値の低下にともなって臨床症状が改善することを観察した。また、エンドトキシン吸着筒の前後で、エンドトキシン低下が確認された。PMXを必要とする患者でのEAAとESP法の比較についても症例報告を学会報告し、その内容を日本語論文にて投稿し受理され、掲載予定である。【研究成果】Sepsis患者の検体収集が順調に進んでおり、目標症例数の約半数まで達している。

中間解析では、従来の比濁時間分析法では測定できていなかったエンドトキシンをESPでは測定できていることが判明した。Septic shockをの状態ではESPが比濁時間分析法より有意に診断効率が良いことが判明した。症例数を増加し、最終の論文報告を行う予定である。臨床研究2:敗血症性ショック症例でのESPとEAAの評価【目的】Septic shockを来した症例で経時的にESPとEAAを測定しESPによる血中エンドトキシン値の推移と臨床症状の改善、エンドトキシン吸着療法(PMX)のカラム前後でのエンドトキシン吸着状況を評価、PMXを必要とする患者のエンドトキシンレベルをESPとEAAを対比して評価する。【研究成果】Septic shockの患者での検体収集も目標の約半数程度を集積することができている。Septic shockの患者で、ESPで測定したエンドトキシンの低下と伴に臨床症状が改善することを観察した。PMXのカラム前後でのエンドトキシン値の推移は、比濁時間分析法では測定限界以下であったが、ESPではエンドトキシンの低下を明らかにすることが可能であり症例報告を行った。Septic shockの患者の評価として有用であることが示された。現在、保険適応として臨床で使用されている比濁時間分析法では正確に患者の状態を評価できていないことが明らかになりつつあり、臨床的に意義が高い研究であると考える。臨床研究1は目標症例数に達し、論文作成を終了して投稿中である。臨床研究2でもESP法の症例蓄積は目標症例数にほぼ達しており、学会報告、論文発表を行う予定である。おおむね順調に研究は進展していると考えている。Septic shockの症例でのEAAの測定データの集積が若干遅れているが、少数例での検討ではあるが、敗血症の評価としてはESP法の方が有用である可能性が示唆されている。臨床研究1および臨床研究2ともに目標症例数の約半数までデータ集積が達成しており、中間解析でも研究の目的とされる結果が出ており、おおむね順調に研究は進展していると考えている。Septic shockの症例でのEAAの測定データの集積が若干遅れているのが、次年度の課題である。臨床研究1と臨床研究2ともに国内・国外の学会で成果報告を行う。臨床研究1は英文論文の投稿進める。臨床研究2のSeptic shockの症例報告は論文として投稿する。敗血症でのEAAの複数症例でのデータを解析し英文論文として投稿する。臨床研究1および臨床研究2ともに症例を蓄積していき、集計されたデータを元に解析を行い、国内・国外の学会で成果報告を行う。同時に英文論文の投稿準備を進めて行く。
スティグマの感情が社会福祉に及ぼす影響

今回の研究は、上記テーマの中でも精神障害者とその家族に焦点があてられて実施された。わが国における保健・医療・福祉の制度やサービスは、精神障害をもって生活している人々やその家族にとって十分なものにはなっていないと思われる。その理由のひとつとして、精神障害を背負って生活している人々やその家族が社会的に負い目や肩身の狭い思い(Stigmaの感情)にとらわれ、自己主張も十分できないまま社会生活を送ってきたということが、精神障害者への社会福祉の充実を阻み、保健・医療の制度やサービスの発展を遅らせ、その利用を妨げてきたのではないかと考えられる。そこで本研究では、精神障害者本人907人(内訳として入院患者656人、外来患者251人)、その家族601人を対象にStigmaの感情について調査し、その結果についてまとめようとするものである。この種の調査は、われわれ研究者が知る限りにおいては、わが国始初めてのものと思われ、外国でも類例のないものと思われる。調査の中味として、例えば「今までの社会生活で肩身の狭い思いをされたことがありますか」という質問に対して『よくある』『ときどきある』と答えた精神障害者はそれぞれ、20.2%、28.8%と合わせると49.0%となる。その内訳として入院患者はそれぞれ、20.3%、27.3%、外来患者は19.9%、32.7%であった。家族の反応は16.8%、37.3%と合わせると54.1%であった。こうした数字をもとに、報告書をまとめ、研究の成果について記載したい。本研究の前段階として1989年に実施した小規模な予備調査を集計して、その結果を分析し、「社会福祉にまつわるスティグマの感情に関する予備調査と考察(その2)」と題してソ-シヤルワ-ク研究(通巻66号)に発表した。この研究は1987年に実施した壮年層を対象とする調査結果と比較検討するため、若年層を対象として行ったもので、いくつかの興味ある傾向を知ることができた。関係図書文献についても、入手したものに目を通しているところであり、外国におけるスティグマ研究の新しい動向を知ることができた。本年は意識調査実施にむけての準備段階として、調査対象としていかなる対象が適当であるかの選定作業を行った。まず、精神薄弱者の家族、身体障害者とその家族、精神障害者とその家族などが調査対象と考えられたが、なかでもスティグマの感情が最も濃厚であろうと推測される精神障害者とその家族を対象として選ぶことを検討した。兵庫県下の精神病院関係者と数度にわたる協議の結果、県下精神病院協会の協力を得て、10の精神病院において調査を実施する方向がかたまり、各病院との間で具体的な調査方法について調整を行った。なお、テ-マの性貭上、プライバシ-や人権問題に細心の注意を払い、慎重に対処する必要があるため予想外の時間を要した。具体的な協議内容としては調査票の設計、調査方法・経費の支出方法などである。現時点では調査票の設計、印刷も終わり、協力病院との打合せに従事しているところである。県下に散在する協力病院歴訪して、医師、看護婦、ソ-シヤルワ-カ-等と協議を重ねている。本年度は、昨年度の計画概要に基づき、遅れている調査の実施とそのデータ処理に時間がついやされた。調査の概要は下記の通りである。*調査目的精神障害とその家族がもつStigmaの感情について*調査対象1.入院中の精神障害者2.外来通院中の精神障害者3.入院中の精神障害者の家族*調査対象15民間精神病院機関と数1民間診療所*調査期間平成4年5月7月*調査方法1.入院中の患者ー患者の自発性により院内にて実施2.外来の患者ー外来で診察の待ち時間に実施3.入院の家族ー各病院で郵送法により実施*回収率
特異ファイバーの分類に基づく多値関数データの特徴解析と可視化

本研究は,多値関数のサンプルデータの特徴抽出および可視化手法として,多値関数の逆像であるファイバーのトポロジー変化の追跡と,そのトポロジー変化に対応する特異ファイバーのトポロジー型の分類に関する計算アルゴリズムを整備した.特に関数f: R3→R2さらにはファイバーが点に縮退してしまうf:R2→R2の場合において,ファイバー追跡のための計算アルゴリズムを実装した.そして,この実装したアリゴリズムを基礎に,数学者が特定の多値関数の微分トポロジーを解析できる可視化システム構築,複数のスカラ属性値を用いた3次元形状検索,多値フィールド地理情報の対話的可視化などの問題に応用した.本研究は,多値関数のサンプルデータの特徴抽出および可視化手法として,多値関数の逆像であるファイバーのトポロジー変化の追跡と,そのトポロジー変化に対応する特異ファイバーのトポロジー型の分類に関する計算アルゴリズムを整備した.特に関数f: R3→R2さらにはファイバーが点に縮退してしまうf:R2→R2の場合において,ファイバー追跡のための計算アルゴリズムを実装した.そして,この実装したアリゴリズムを基礎に,数学者が特定の多値関数の微分トポロジーを解析できる可視化システム構築,複数のスカラ属性値を用いた3次元形状検索,多値フィールド地理情報の対話的可視化などの問題に応用した.本研究は,n次元空間からm次元空間への写像である,多値関数f: Rn →Rmのサンプルデータが与えられたときに,そのデータの大局的な特徴を微分トポロジーを用いて解析し,可視化を行う手法の開発を行う.具体的には,多値関数において各関数値の逆像の共通部分として定義されるファイバーを追跡し,そのトポロジーの変化が生じる特異ファイバーを抽出するアルゴリズムを構築する.本研究は,次の5つのステップから構成される.A)ファイバーのトポロジー変化を表すグラフ構造の抽出,B)特異ファイバーのトポロジー型の抽出,C)特異ファイバーのトポロジー型を用いた実多値関数データ可視化,D)複数の次元をもつデータへの対応,E)提案手法の検証・評価.平成25年度は,関数R3 →R2の離散サンプルデータに対象を限定して,本研究の技術的なチャレンジの中心である3つのステップA),B),C)について取り組んだ.実際この3つのステップに関しては,英国リーヅ大のHamish Carr博士と共同研究により,Joint contournetを直接データから抽出することで,ほぼ解決できることがわかった.具体的には,R3の空間に四面体分割を施し,各四面体を値域R2を構成するスクリーン上に投影をする.その際,R3の構成要素である各四面体にIDを振り,スクリーン上の各画素にどの四面体IDが描かれているかの同定を行う.その後,R3の四面体分割を構成する各四面体の隣接関係を参照して,関数値の逆像の変化をグラフ構造であるJoint contournetとして抽出を行う.この操作は,ラスタ化処理と呼ばれるものであるが,本研究課題においては,このラスタ化処理を介したJoint contournetの構築により3つのステップに直接対応することができた.本研究の目的は,多値関数f: Rn →Rmのサンプルデータが与えられたときに,そのデータの大局的な特徴を微分トポロジーを用いて解析し,可視化を行う手法の開発を行うことである.具体的には,多値関数において各関数値の逆像の共通部分として定義されるファイバーを追跡し,トポロジー変化が生じる特異ファイバーを抽出・解析するアルゴリズムを構築した.本研究の技術的な課題は,A)ファイバーのトポロジー変化の追跡,B)特異ファイバーのトポロジー型の抽出,C)実多値関数データ特徴解析および可視化の実現の3つに集約される.課題A)に関しては,近年定式化が整備されたJoint contournetを積極的に活用し,多値関数の値の変化に応じたファイバーのトポロジー変化を追跡する手法を実装し,その変化を可視化する手法を定式化した.特に,トポロジー変化を,フレームバッファにデータをラスタ化することで,比較的高速なファイバー追跡を可能とした.課題B)に関しては,各多値関数値に対応するファイバーの連結成分数を,定義域内と定義域境界においてそれぞれJoint contour netを計算することで追跡し,結果として7つの型の特異ファイバーを同定することに成功した.そして数理的可視化のために,複数の解析関数として定義される多値関数のファイバーを可視化したり,さらには退化した特異ファイバーを非退化に変換するインタフェースを実装し,数理科学者にその効果を検証してもらった.課題C)に関しては,いくつかの実データに対しファイバーの追跡を行うことで,本手法がデータの解析や可視化用途に適用できることを確認した.具体的には,2003年アメリカで発生したハリケーンイザベルや,福島第一原発付近の放射能レベルの分布と他の属性値との関係の可視化,さらには形状検索手法へ応用し,想定されている結果を得た.可視化学予定されている5つのステップのうち半分以上を消化しており,今後複数の次元における多値関数データの可視化が対応できれば,概ね全体を達成できたことになるため.研究成果の投稿論文も現在進めており,今年度内には論文が採択される可能性が高く,成果の対外発信についてもある程度進められていると考えられる.今後は,先に記した通り,複数の次元における多値関数データの可視化について,研究を進めていく予定である.

具体的には,いままで取り組んできた関数R3 →R2の場合に加えて,R2 →R2の場合,R3 →R3の場合についても実装を進めたい.さらに,定義域が一般的な次元である場合を含むRn →R2やRn →R3の場合についても検討を進めていきたい.値域の次元が一般的な場合は,技術的な困難が予想されるためここでは研究対象としては含めないが,今後の拡張を睨んだ考察については進めていきたいと考えている.もう一つは,一般的な関数離散サンプルデータの解析,可視化に限定せず,Joint contournetをデータの特徴を表すキーととらえた,データ検索の道筋についても検討を加える.具体的には,画像や形状に対して,特徴量を表す2つ以上の関数を導入して各コンテンツを特徴付け,そこからJoint contournetを計算して,コンテンツ検索に用いる手法を考えていきたい.当初計画通り,2年間の研究計画として,1年目がほぼ予算案通り執行を進めることができた.そのため,2年目も使用できる予算がある状況で,今後残りの研究課題について進めていく予定である.全体の5つのステップのうちの,最後の2つのステップについて中心に取り組んでいくための予算として利用する.物品費としては,最終的な計算結果をまとめるために必要な計算機環境の整備,旅費については英国リーズ大における研究打合せと,学会出席のための費用を計上している.これに加えて,必要に応じて謝金・人件費やその他の経費などの使用を計画している.
変異体マウスによる造血幹細胞の動態と機能の解析

造血機構は近年研究が進み、造血幹細胞についても細胞側受容体c-kitとそのリガンドstem cell factorの関与が明確になってきた。しかし、他の因子の研究は不十分であり、造血幹細胞増殖機構の全体像解明は今後の課題である。常染色体劣性変異体wastedマウスは、生後3週令に達した後、神経系や免疫系,造血系の異常,体重増加停止など,多様な臨床症状をわずか1週間で急激に呈し、死亡する(Shultz et al., 1982)。申請者は、上記の臨床症状が、生後22日令以降の日令に依存して、組織特異的に生ずることを見いだした(Tezuka et al., 1986; Inoue et al., 1986)。特に骨髄細胞の放射線感受性の変化は、赤血球産生系に特異的であり、前駆細胞CFU-Eに発現していた(Tezuka, 1990)。これらの変化の一因として,造血幹細胞の異常が予測された。申請者は,今年度の研究において、研究実施計画に沿って実験を進め,脾コロニー形成法を用いて,造血系器官である骨髄と脾臓における2種類の造血幹細胞day8-CFU-S,day12-CFU-Sの動態を解析した。動物は,実験群を変異体wastedマウス,対照群を同腹正常個体とし,毛生の遺伝子マーカーにより両者を区別した。動物の日令は,生後12日令より27日令まで3日間隔とした。その結果,骨髄・脾臓の両造血器官においてともに,上記の両幹細胞の数的な異常が,上記の臨床症状が発現する22日令よりはるか前の12日令より発現しており,しかもこの異常が27日令まで持続していることがわかった。ここに幹細胞の数的な異常とは,対照群動物における円滑な幹細胞数の増加に比較して,実験群では変動を3日毎に繰り返していたということであった。このことは、wasted遺伝子の作用点が,少なくとも造血幹細胞の増殖に関与する部分を含むことを強く示唆するものであり,当初の研究目的の要点は達成された。今後は,造血前駆細胞の動態解析を含め,次年度以降に予定している造血幹細胞の数的異常の実態解明と合わせて,変異体wastedマウスの造血系細胞の変化の全体像を把握したい。
ペプチドの点鼻投与と運動療法を用いた肥満解消の新戦略

抗肥満ペプチドは摂食やエネルギー代謝亢進があるが、このペプチドと運動を活用して肥満動物に抗肥満作用を活用した報告はない。本研究では、抗肥満ペプチドの点鼻投与法を動物実験で確立した。さらに抗肥満ペプチド点鼻投与と走行運動により、摂食抑制とエネルギー代謝亢進作用を詳細に検討した結果、摂食量や体重減少を得られた。この抗肥満ペプチドと運動療法をヒトへ臨床応用すれば、画期的な抗肥満療法の開発ができると示唆される。我々は、抗肥満ペプチドであるニューロペプチドW(NPW)を用い、簡易的で痛みの伴わないNPWの点鼻投与と運動を組み合わせた効率的な肥満解消を狙っている。本年度は、その基盤研究として、NPWの抗肥満の作用機序を明らかにするることを主とし、マウスを用い、まずNPW点鼻投与での摂食量行動等を測定し、体重と摂食量の減少を確認した。さらに、NPW投与による摂食抑制経路の脳内ニューロンネットワークの詳細を解析するため、既に明らかにされている弓状核のニューロペプチドYやPOMCを介した系以外の存在を調べた。その結果、室傍核でのNPWニューロンとCRHニューロンの神経相関を光顕および電顕的に明らかにし、NPW投与における室傍核のc-Fos発現を観察し、そのターゲットはCRHニューロンであり、バソプレッシンやオキシトシンでないことが明らかになった。さらにCRHアンタゴニストの前投与により、NPW投与による摂食抑制作用はキャンセルされたことから、NPW摂食抑制の経路に室傍核のCRHニューロンを介した系も存在することが明らかになった。このことからNPWは摂食調節の他に、ストレスにも関与していることが示唆された。さらに、NPWの抗肥満作用は食餌誘発性肥満マウスであるDIOマウスにおいても確認することができた。また、NPW点鼻投与による抗肥満効果を血液検査により調べたところ、血糖値等の低下が見られた。NPW投与による末梢臓器の糖の取り込み部位については、骨格筋での取り込みがみられたが、臓器については現在実験中であり、今後、継続して実験を進めている。これらのNPWの抗肥満作用の実験結果は、国内および国外の学会で発表しており、NPWは抗肥満ペプチドとして認識されるようになった。さらにNPWの生理作用や脳内における機能形態解析については英文総説やチェプターなどで報告した。我々は、抗肥満ペプチド(ニューロペプチドW(NPW)、ガラニン様ペプチド(GALP) )を用いて、点鼻投与と運動を併用し、摂食抑制や体重減少、さらにはエネルギー代謝亢進による肥満解消を試みている。我々は、過去2年間でNPWの摂食抑制作用の機序の一つにCRHニューロンを介した系の存在を生理的実験および形態学的解析らかにしてきた。本年度は、NPWのCRHニューロンを介した抗肥満作用の作用機序の解析を行った。その結果、RT-PCR解析でNPWを添加すると、GPR7がダウンレギュレートし、一方ではCRHのmRNA量が増加していることを確認した。ささらにCRHを発現する細胞株のN44細胞を用い、CellKeysystemによるシグナル伝達の解析を行った結果、細胞の誘電性分光レスポンスのパターンがGi系で活性化していることが分かった。さらにGi、Gs、Gqの阻害剤を前処理しててNPWを添加したところ、Gi系阻害剤PTXによってCDSレスポンスの変化が濃度依存的に阻害されたことから、NPWによるシグナル伝達にはGi系が関与していることが推測された。さらにNPW投与後に自発運動を行うとNPWの摂食抑制作用は見られなくなることが明らかになった。抗肥満ペプチドと運動の併用で抗肥満を狙うには抗肥満ペプチドの種類の検討も必要であることが示唆された。さらに、マウスのGALP投与による酸素消費量、発熱量及び呼吸商を調べたところ、非運動群では、GALP投与直後に脂質代謝が亢進し、暗期中では糖代謝が亢進した。自発運動群は、GALP投与により、運動量に対応せず酸素消費量及び発熱量が上昇して体重が減少した。さらに運動群は、GALP投与で肝臓、骨格筋の代謝関連酵素のPEPCK及びSREBP-1のmRNA発現量の減少を認めた。この結果、GALP投与による糖新生の抑制及び脂肪酸合成の抑制の関与が示唆された。抗肥満ペプチドであるニューロペプチドW(NPW)やガラニン様ペプチド(GALP)はエネルギー代謝亢進や体重減少作用があり、生活習慣病予防に有効活用が期待される。ところが、その抗肥満作用については、脳室内投与や静脈投与の実験によるものでヒトへの応用は難しい。しかし、抗肥満ペプチドを利用し、運動療法と併用して活用できれば、より効果的なメタボリック改善の成果が得られると考える。そこで、我々は、抗肥満ペプチドをヒトに応用するため、動物を用い、非侵襲的で、かつ簡易的なNPW点鼻投与法を研究し、ヒトへの応用に向けた基盤研究を行い効率的で効果のある肥満解消法の確立を目指す。

まず本年度は「NPWの抗肥満作用を中枢および末梢より明らかにする」ことを目的とし、以下の実験研究を行い、次の成果を得た。(1)マウスにNPWの脳室内投与法を行い、抗肥満作用を検討したところ、投与後2時間までの摂食増加がみられるものの、24時間後では、摂食、飲水、体重の減少が確認された。また点鼻投与においても同様の傾向がみられた。これらの結果からNPWの抗肥満作用が明らかになった。(2) NPW投与による脳内のニューロンネットワークを解析したところ、NPWは摂食促進作用をもつNPYニューロンと摂食抑制作用をもつPOMCニューロンと神経相関を持つ他に、CRHニューロンとも神経相関をもつことが確認されNPWニューロンは脳内において密なニューロンネットワークを構築していることが明らかになった。(3) NPW投与によるエネルギー代謝亢進作用を確認したところ、体温、酸素消費量の増加傾向が確認され、現在、その作用機序の詳細を検討中である。(4) NPW投与による末梢臓器の糖の取り込み部位については現在進行中である。以上の研究成果(13)については学会やシンポジウム、また総説などで発表を行った。本年度は、実験計画の1つに、抗肥満ペプチドであるNPW点鼻投与の新規DDS(ドラックデリバリーシステム)開発に向けた基礎データを得るため、NPW投与による血液脳関門(BBB)の透過性を調べるへ報告する予定であった。しかし、実験協力者が海外の研究者であるため、他の実験計画に比べるとスムーズな実験遂行が出来ず、本年中に有効な成果報告までには至らなかった。有効なデータが得られなかったその他の原因として、NPWは暗期と明期、さらに長期と短期において摂食調節作用が異なるため、NPW投与のタイミングを検討する必要が考えられた。また、点鼻投与のスキルも影響することが考えられるため、投与法をの確立が重要であると考えられる。今後は実験協力者が、短期出張する予定であり、その際にミーティングを行ってもらい、手法の確認をすように計画を立てる。引き続き、BBBの透過性の評価実験を平行して進め遂行する予定である。今年度は「NPWの抗肥満作用を中枢および末梢より明らかにする」ことをめざし、以下の4つの計画を立てけ、実験を行った。(1)(4)までのそれぞれの実験結果と評価を行う。(1) NPW投与における摂食および体重抑制作用を明らかにする:ラット脳室内投与によりNPWの抗肥満作用が確実に確認されたことから、(1)については計画通りであり、おおむね順調であったと評価する。(2) NPW投与による脳内のニューロンネットワークを解析する:NPWニューロンとその他の摂食調節ニューロン(NPY, POMC, CRH)との神経相関が明らかになった。また脳室内投与におけるc-fosの発現部位を確認できたことから、(2)については、当初の計画よりも進行したと評価する。(3) NPW投与によるエネルギー代謝亢進作用を明らかにする:NPW投与での体温、酸素消費量の上昇傾向がみられたものの、作用機序については不明な点もあり、現在、再度測定中でありることから、(3)についてはやや遅れていると評価する。(4) NPW投与による末梢臓器の糖の取り込み部位について明らかにする:現在進行中の為、糖の取り込み部位が明らかにされていないことから(4)については遅れていると評価する。
生物ナノ構造の精密転写による新規ナノ光学デバイスの製作

本研究では、重合の際に体積変化を生じないような新規透明高分子を開発し、ソフトリソグラフィ法によって生物が有するナノメートル構造を精密パターン転写することにより、新規な光デバイス作製分野に利用できるような基盤技術を開発することを目的とする。成形加工等において体積変化を生じさせないような、新規レプリカ高分子を用いる。シアナートエステルは3量化反応により重合し、重合が進むにつれて体積収縮→体積膨張するという特性を有する樹脂であり、予め部分重合させたシアナートエステル樹脂をソフトリソグラフィに用い、重合過程で膨張と収縮がキャンセルされ、重合後に体積変化がゼロとなる特長を有する樹脂を実現することができる。昨年度は、シアナート樹脂モノマーを合成・熱硬化させることにより、樹脂材料としての特性を評価し、本樹脂は重合により200°C以上の耐熱性を有するため、実際のデバイス応用にも向いていることを見いだした。本年度はさらに透明性を高めるため、シアナート樹脂のC-H結合の一部をC-F結合に置換したフッ素化シアナート樹脂を用いてポリシアヌレートを合成した。また、ソフトリソグラフィ技術の一種であるマイクロトランスファモールディングを用いて、パターン作製を行った。転写評価の基礎実験として、光導波路パターンをオリジナルマスタとし、それにナノ形成用に調整したシリコーン樹脂をコートして樹脂にパターンを転写したものをスタンパとする。スタンパを用いて光硬化性樹脂に光重合させながらスタンパパターンを転写することにより、光導波路のレプリカを簡便に作製することが出来た。本研究で得られた材料およびレプリカ作製法の成果は、今後のナノ光学デバイスへ作製への応用に展開できる。成形加工において体積変化を生じさせないような、新規レプリカ高分子を用いる。シアナート樹脂モノマーを合成し、熱硬化させることにより、樹脂材料としての耐熱性・透明性・屈折率分散を測定した。本樹脂は重合により200°C以上の耐熱性有するため、実際のデバイス応用にも向いている。また、ソフトリソグラフィ技術の一種であるマイクロトランスファモールディングを用いて、光導波路パターン作製を行った。転写評価の基礎実験として、μmオーダーの光導波路パターンをオリジナルマスタとし、それにナノ形成用に強度を調整したシリコーン樹脂をコートして樹脂にパターンを転写したものをスタンパとする。スタンパを用いて光硬化性樹脂に光重合させながらスタンパパターンを転写することにより、光導波路を簡便に作製することが出来た。また、そのパターン転写はμmオーダーより精密であった。