hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
分裂酵母S.pombeにおけるカルモデュリンの機能解析

camlの条件致死変異株を作製するために、caml遺伝子のCa^<2+>ー結合部位に部位特異的変異を導入した。これら変異株はcamlーT64,cam1F102,cam1ーT137,cam1ー(T64,F102)及びcaml(F102,ーT137)である。これらのうちcamlーT64,cam1F102,cam1ーT137の変異株は増殖能、接合能、胞子形成能において野生株と比べて形態的な相違はなく、またcamlー(T64,F102)変異株は致死であった。一方、camlー(F102,T137)変異株は温度感受性(ts)の形質を示した。このts変異株(cam1^<ts>)の非許容温度条件における最終表現型は一つの決まった形態を示さない。50%の細胞は一核で停止し、35%の細胞は細胞が分離しないか、核が分離せずに非対称にセプタムを形成した。また15%の細胞では2核で停止するか、あるいは染色体が分離した。このことは分裂酵母の細胞周期においてCaMによる制御が複数あることを示唆する。一方、caml^<ts>変異をホモにもつ二倍体株は許容温度条件でも減数分裂の過行が阻害されていることから、CaMが分裂酵母の胞子形成のみならず、減数分裂をも制御する多機能性タンパク質であることが示された。分裂酵母におけるカルモデュリンの細胞内分布を抗カルモデュリン抗体を用いて調べた。野生株においてcaml^+遺伝子産物は細胞周期を通して細胞質にあるが、サイトキネシスにおいてカルモデュリンはFーアクチンと同様に、既に知られているセプタム形成時のパタ-ンと極めて似た局在を示した。このカルモデュリンの局在パタ-ンは制限温度条件で細胞壁物質が規則的に蓄積せず、細胞が2ー4核となって膨らみ、伸長して停止するcdc3変異株では明らかに消失していた。これらの結果からS.pombeの細胞周期制御におけるカルモデュリンの一つの機能がサイトキネシスすなわちセプタム形成と細胞分離にあることが強く示唆される。camlーF116変異株を用いたin vivoにおける変異剤誘起により、胞子形成不能の形質が抑圧されるサブレッサ-変異株(scflー3)を単離し、それら変異株から調製したゲノムDNAのライブラリ-をcamlーF116変異株に導入することにより、scf3をクロ-ン化することが出来た。野生型scf3^+遺伝子をクロ-ン化し、8.5kbのDNA断片の塩基配列の決定を行った結果、その遺伝子には1957アミノ酸(MW 223kD)をコ-ドすると予想されるORFの存在が確認された。ホモロジ-検索の結果、このタンパク質は分子全長にわたりαーヘリックス構造をとりやすく、いわゆるコイルドコイル構造をとるのが特徴であり、ミオシン重鎖、ビメンチンなどの細胞骨格タンパク質と有意なホモロジ-が検出された。また、scf3の遺伝子破壊実験を行った結果、遺伝子破壊株は胞子形成不能の形質を示した。このことから、scf3はS.pombeの胞子皮の構成成分であると予想し、scfー1、scfー2のクロ-ン化とあわせて、さらに解析を進めている。

一方、合成DNAを用いたin vitro siteーdirected mutagenesisにより、camlに点突然変異を導入したプラスミドをcaml^ー(camlー△IV)致死変異株に導入した形質転換体、あるいはゲノムcamlとの人為的置き換えにより変異を導入した突然変異株を作製した。それらの形質を調べた結果、Ca^<2+>ー結合ル-プに変異を導入した変異株のうち、第3、第4ル-プに同時に変異を導入したcamlー(F102,T137)変異株は25°Cでは生育可能であるが37°Cでは増殖不能な高温感受性(ts)変異株であった。caml^<ts>変異株を25°Cから37°Cにシフトしてその最終形態を調べた結果、シフト後すぐに細胞増殖は停止するが、少なくとも一つの形態では停止しないことからCaMの細胞周期制御が複数あると予想している。現在、caml^<ts>変異株の同調培養あるいは既知のcdc変異株との二重変異株を作製し、さらに解析を続けている。cam1の条件致死変異株を作製するために、cam1遺伝子のCa^<2+>ー結合部位に部位特異的変異を導入した。これら変異株はcam1ーT64,cam1F102,cam1ーT137,cam1ー(T64,F102)及びcam1ー(F102,T137)である。これらのうちcam1ーT64,cam1F102,cam1ーT137の変異株は増殖能、接合能、胞子形成能において野生株と比べて形態的な相違はなく、またcam1ー(T64,F102)変異株は致死であった。一方、cam1ー(F102,T137)変異株は温度感受性(ts)の形質を示した。このts変異株(cam1^<ts>)の非許容温度条件における最終表現型は一つの決まった形態を示さない。50%の細胞は一核で停止し、35%の細胞は細胞が分離しないか、核が分離せずに非対称にセプタムを形成した。また15%の細胞では2核で停止するか、あるいは染色体が分離した。このことは分裂酵母の細胞周期においてCaMによる制御が複数あることを示唆する。一方、cam1^<ts>変異をホモにもつ二倍体株は許容温度条件でも減数分裂の進行が阻害されていることから、CaMが分裂酵母の胞子形成のみならず、減数分裂をも制御する多機能性タンパク質であることが示された。分裂酵母におけるカルモデュリンの細胞内分布を抗カルモデュリン抗体を用いて調べた。野生株においてcam1^+遺伝子産物は細胞周期を通して細胞質にあるが、サイトキネシスにおいてカルモデュリンはFーアクチンと同様に、既に知られているセプタム形成時のパタ-ンと極めて似た局在を示した。このカルモデュリンの局在パタ-ンは制限温度条件で細胞壁物質が規則的に蓄積せず、細胞が2ー4核となって膨らみ、伸長して停止するcdc3変異株では明らかに消失していた。これらの結果からS.pombeの細胞周期制御におけるカルモデュリンの一つの機能がサイトキネシスすなわちセプタム形成と細胞分離にあることが強く示唆される。
集団遺伝学に関連した確率過程の極限定理の研究

時刻tにおける集団の大きさをN(t)=N(t、w_1)とする(2N(t,w_1)遺伝子)。ここで、{N(t,w_1)}_<t=0,1,2,...>は{N_1,N_2}を状態空間とし、推移確率が以下で与えられるマルコフ連鎖とする(1<N_1<N_2)。2つの対立遺伝子A_1とA_2を考え、Z(t,w_1,w_2)を時刻tにおけるA_1遺伝子の個数とする。{N(t,w_1)}_<t=0,1,2,...>が与えられたとき、確率法則がで与えられるランダムな環境下のマルコフ連鎖{Z(t,w_1,w_1)}_<t=0,1,2,...>を個体数の確率的変動を伴うWright-Fisherモデルという。2.有効個体数N_eの具体的な表現を求めた。3.個体数の確率的変動が正(負)のautocorrelatinを持つとき、有効個体数N_eはN_1とN_2の調和平均N_Hより大きく(小さく)、uncorrelatedのときに限り両者は一致する(N_e=N_H。4.有効個体数のq1,q2依存性を明らかにした。5.q1,q2→0またはN_1,N_2→∞なる場合の、有効個体数N_eの漸近的表現を求めた。また、関連した問題として、集団の遺伝的多様性の尺度である平均heterozygosityに着目し、個体数が確率的に変動する場合に、この量がみたす拡散方程式(拡散モデル)に関する解析も行った。P(N(t+1,ωィイD21ィエD2)≠N(t, ωィイD21ィエD2)|N(t, ωィイD21ィエD2) =NィイD2jィエD2) = qィイD2jィエD2,P(N(t+1,ωィイD21ィエD2) = N(t, ωィイD21ィエD2)|N(t, ωィイD21ィエD2) =NィイD2jィエD2) = 1 - qィイD2jィエD2,時刻tにおける集団の大きさをN(t)=N(t、w_1)とする(2N(t,w_1)遺伝子)。集団の大きさ(個体数)が離散時間確率過程{N(t,ω_1)}_<t=0,±1,±2,...>である半数体Wright-Fisherモデルを考える。2つのタイプA_1とA_2が集団に存在するとし、時刻tにおけるA_1,の相対頻度をx(t,ω_1,ω_2)とする。確率過程{x(t,ω_1,ω_2)}_<t【greater than or equal】0>を個体数の確率変動を伴うWight-Fisherモデルという。確率過程{x(t,ω_1,ω_2)}_<t【greater than or equal】0>が集団の大きさを大きくしたとき、集団の大きさに依存する適切な時間尺度の変更の下で、連続時間確率過程、とくに、拡散過程に収束するかが、理論集団遺伝学における重要な問題の一つである。時間尺度の変更の候補としては、tを集団の有効個体数Neで割ったt/(Ne)が考えられるが、まず、Neが{N(t,ω_1)}_<t=0±1±2,...>の確率法則、とくに、自相関の強さにどのように依存するかを明らかにする必要がある。そのために、以下のような簡単な2状態マルコフ連鎖を考え、有効個体数Neの性質を明らかにした。{N(t,ω_1)}_<t=0,±1,±2,...>を{

N_1,N_2}上のマルコフ連鎖で、P(N(t+1,ω_1)≠N(t,ω_1)|N(t,ω_1)=N_i)=q_iとする(i=1,2)。このとき、有効個体数Ne(q_1,q_2)を定義し、その具体的な表現を求めることができる。この表現を用いて、次の結果を得ることができた。N(t,ω_1)の調和平均をN_H(q_1,q_2)とすると、0<q_1+q_2<1のときNe(q_1,q_2)<N_H(q_1,q_2)、q_1+q_2=1のときNe(q_1,q_2)=N_H(q_1,q_2)、q_1+q_2>1のときNe(q_1,q_2)>N_H(q_1,q_2)である。さらに、Ne(q_1,q_2)のq_1,q_2依存性や、集団の大きさが非常に大きくなったときの漸近的性質などについても明らかにした。時刻tにおける集団の大きさをN(t)=N(t,ω_1)とする(2N(t,ω_1)遺伝子)。ここで、{N(t,ω_1)}_<t=0,1,2,...>は{N_1,N_2}を状態空間とし、推移確率が以下で与えられるマルコフ連鎖とする(1<N_1<N_2)。2つの対立遺伝子A_1とA_2を考え、Z(t,ω_1,ω_2)を時刻tにおけるA_1遺伝子の個数とする。{N(t,ω_1)}_<t=0,1,2,...>が与えられたとき、確率法則がで与えられるランダムな環境下のマルコフ連鎖{Z(t,ω_1,ω_2)}_<t=0,1,2,...>を個体数の確率的変動を伴うWright-Fisherモデルという。2.有効個体数N_eの具体的な表現を求めた。3.個体数の確率的変動が正(負)のautocorrelationを持つとき、有効個体数N_eはN_1とN_2の調和平均N_Hより大きく(小さく)、uncorrelatedのときに限り両者は一致する(N_e=N_H)。4.有効個体数のq_1,q_2依存性を明らかにした。5.q_1,q_2→0またはN_1,N_2→∞なる場合の、有効個体数N_eの漸近的表現を求めた。また、関連した問題として、集団の遺伝的多様性の尺度である平均heterozygosityに着目し、個体数が確率的に変動する場合に、この量がみたす拡散方程式(拡散モデル)に関する解析も行った。P(N(t+1,ωィイD21ィエD2)≠N(t, ωィイD21ィエD2)|N(t, ωィイD21ィエD2) =NィイD2jィエD2) = qィイD2jィエD2,P(N(t+1,ωィイD21ィエD2) = N(t, ωィイD21ィエD2)|N(t, ωィイD21ィエD2) =NィイD2jィエD2) = 1 - qィイD2jィエD2,
頭頸部癌転移をリンパ系の発生・再生の視点から解析する

口腔扁平上皮癌細胞株と線維芽細胞NHDFの共培養で、Notchファミリーで有意な発現上昇を示すのはNotch3だった。分離解析をするとNotch3発現はNHDFに依り、癌はJAG1を発現していた。扁平上皮癌細胞株にはNotch3誘導陽性株と陰性株があり、陽性株はvivo増殖能の高い活動性がある。Notch3誘導性癌細胞とNHDF, HUVEC共培養をおこなうと、脈管形成が促進された。臨床例では悪性度が高く血管新生の多い症例ほどCAFにNotch3発現が高い傾向だった。口腔扁平上皮癌は周囲間質にCAFを誘導して有利な環境を作り出すだけでなく、脈管新生を促し転移に有利な環境を形成する可能性がある。癌浸潤の過程で、周囲の間葉組織や炎症細胞の誘導は重要な因子である。以前はこれらの因子は癌浸潤を抑制するものだけと考えられていたが、最近CAF(cancer associated fibroblasts)に代表されるように積極的に浸潤を助長する細胞群があることもわかってきた。また癌浸潤と脈管新生は密接な関連があり、脈管の発生・分化に関係する因子は重要である。我々は以前からその中のひとつとしてNotchシグナルに注目している。Notchはリガンド・受容体とも膜タンパクで、隣接する細胞同士でしかシグナル伝達が起こらないあ特異なシグナルだが、組織・器官の増殖・分化のさまざまな場面で機能している。我々は幾つかのヒト口腔扁平上皮癌の培養株を用いて、マウス間葉系幹細胞(ST-2)に対してNotchシグナル系の誘導の有無を調べた。その結果Notch3の発現が特異的に上昇することを見いだし、さらにそれが間葉細胞(マウス)由来であることを解明した(mRNAレベルとタンパクレベルの両方)。Notch3はヒトでは脈管形成に重要な役割を担うことが知られており、例えば先天性脳卒中症候群CADASIL(Cerebral Autosomal Dominant Arteriopathy with Subcortical Infarct and Leukoencephalopathy)の原因遺伝子である。またリンパ管形成についても重要な役割が知られているので、この遺伝子に注目して解析をおこなっている。またBoyden chamberを用いた実験からがん細胞によるST-2のNotch3誘導には直接の接触が不可欠であることがわかった。現在がん細胞と間葉細胞の仲介因子の解析を進めていて、Wntシグナルなど発生でNotchと関連するシグナルを探索している。合わせてCADASIL型の遺伝子変異を持つNotch3を導入して、その影響も検討している。前年度の研究からヒト口腔扁平上皮癌細胞株7株でマウス間質幹細胞株のひとつST-2に対してNotch3誘導能が高いのは、HO1N1、HSC-4であることが判明した。これらの細胞でヒトの間葉細胞に対して同様な効果があるかどうかヒト骨髄由来間質幹細胞(hMSC)を用いて解析をおこなったところ、同様なNotch3誘導能があった。この誘導に関してwntシグナルの関与を考えさせる予備結果が出たが、詳細な解析ではそれが否定され他の経路を考えることにした。口腔癌手術症例の解析からNotch3誘導能が周辺に対して高い扁平上皮癌ほど脈管侵襲が高いことを考えて、このNotch3誘導の際の脈管形成因子の発現を調べた。その結果HO1N1に関してはhMSCに対してのVEGF発現をみると、VEGFCが有意に低下した。一方VEGFR3発現は有意に増加した。それに対してHO1N1は共培養の有無にかかわらずVEGF3発現はほぼ一定だった。さらにhMSCに替えてヒト皮下線維芽細胞(NHDF)を用いて同様な解析をおこなったところ、NHDFでのVEGFCの発現は有意に低下したもののVEGFR3の発現上昇は見られなかった。しかしそれと別にVEGFAの発現低下とVEGFR1の発現上昇がNHDFで見られた。VEGFとその受容体の組み合わせで、VEGFCとVEGFR3の組み合わせはリンパ管新生に、VEGFAとVEGFR1は血管新生に対して特に効果があることが知られている。CAF(cancer associated fibroblasts)を構成する2つの間質細胞因子は脈管新生について違う役割があるのかもしれない。今年度は間質細胞と口腔扁平上皮癌の培養株を用いた共培養系に焦点を当てて、脈管形成との関係を解析した。間質細胞としてNHDFを用い、口腔扁平上皮癌細胞株として、HO1N1とHSC4を用いた。共培養をおこなった4日間おこなった後RNA抽出をして、realtime法で発現変化を解析した。HO1N1との共培養では、転写因子Hif1alphaの顕著な増加を示したがVEGF受容体の3種類(VEGFR1,2,3)についてはVEGFR3のみ増加傾向を示した。HSC4に関してもHif1alphaは顕著な増加を示したが、VEGF受容体に関してはVEGFR1のみ対照と比べて有意な増加を示した。RNA発現変化ではHif1alphaからみて脈管誘導能初期化の可能性があるが、実際の血管新生に必要な受容体についての影響は軽度なものといえる。しかしこの共培養について免疫細胞染色をおこなったところ、HO1N1では癌細胞のmassに近傍部でVEGFR3の特異的な上昇が見られた(HSC4は解析中)。癌細胞から出る因子は培養系全体ではなく、局所的な作用に留まる可能性があり、そのためRNA抽出のようなバルク解析でははっきりした傾向が出ない可能性がある。癌細胞が発現するNotchやEphのような細胞膜シグナル因子、及び分泌型でもwnt, hedgehogのようなparacrine的作用を持つ因子についてその影響の解析を進めている。

投稿中の論文について補足実験を求められており、その実験については概ね期待される結果が出てきている。ヒト症例を解析すると増殖・転移能が高い悪性度の高い症例ほど周囲のCAFにNotch3発現が高い傾向が有意に存在した。これまでの結果を考察すると、ヒト口腔扁平上皮癌は周囲の間質に影響して、CAFの誘導をおこなうことが想定できる。HO1-N-1とNHDF,さらにヒト内皮細胞HUVECの3重共培養をおこなうと、HUVEC由来の脈管形成が有意に促進された。この結果はNotch3 siRNAを用いる実験で有意に抑制され、Notch3に依存するシグナルで誘導される結果と考えられた。この結果を考察するとヒト口腔扁平上皮癌は、周囲間質にCAFを誘導してその増殖に有利な環境を作り出すだけでなく、脈管新生を促して増殖または転移に有利な環境を形成しているという仮説を立てられる。現在症例を解析して、vivoでも同じ仮説で増殖能や転移能を説明できるか検証中である。この仮説が事実とすると、脈管新生で内皮細胞と周皮細胞の挙動にNotch3のシグナルが重要な影響を与えていることが考えられる。HO1-N-1は自身がNotchリガンドのひとつとして知られるJAG1(Jaggedファミリーのひとつ)を強く発現しているが、JaggedはNotch受容体修飾因子のFringeの存在有無によって受容体活性化が異なることが知られている。現在Fringeファミリーが扁平上皮癌増殖・転移の実験系あるいは症例において、どのような発現変化をおこなうかを解析中である。口腔扁平上皮癌細胞株と線維芽細胞NHDFの共培養で、Notchファミリーで有意な発現上昇を示すのはNotch3だった。分離解析をするとNotch3発現はNHDFに依り、癌はJAG1を発現していた。扁平上皮癌細胞株にはNotch3誘導陽性株と陰性株があり、陽性株はvivo増殖能の高い活動性がある。Notch3誘導性癌細胞とNHDF, HUVEC共培養をおこなうと、脈管形成が促進された。臨床例では悪性度が高く血管新生の多い症例ほどCAFにNotch3発現が高い傾向だった。口腔扁平上皮癌は周囲間質にCAFを誘導して有利な環境を作り出すだけでなく、脈管新生を促し転移に有利な環境を形成する可能性がある。癌細胞株と間質細胞の共培養で見られる間質細胞のVEGF発現低下と対応した受容体発現上昇の逆相関は一見矛盾した動態に見える。しかし間質細胞でのVEGF発現抑制により、相対的に癌細胞に向かってのVEGF分布の濃度勾配が形成される可能性がある。つまり脈管新生が癌胞巣に向けて極性を起こす可能性があることになる。Notch3発現誘導とVEGFシグナルの関係ははっきりしないことが多い。最近の論文では核内転写因子のひとつHifがNotch3を含むNotch群、およびVEGF群を制御していると報告されている。
再付着層における高密度プラズマ中の原子分子素過程の影響

プラズマに面した材料においては、プラズマ粒子が衝突することによる材料の損耗(エロージョン)が問題となる。プラズマ中に飛び出した材料原子ないし分子はプラズマにおいて主に電子と衝突することにより解離、電離する。電離されたイオンは再び材料表面に蓄積することが考えられる(再付着)。この損耗ー再付着量を正しく評価することは、材料の寿命の点からも重要である。しかし、再付着プロセスの正しい評価はまだ行われていない。そのためには壁近傍の境界プラズマ中における損耗粒子の挙動を正しく記述しなければならない。このことを明らかにするために、まず高密度プラズマを生成する装置(MAP)を作った。水素(H_2)、アルゴン(Ar)プラズマが可能であり、温度は数eVであるが、密度は10^<19>m^<-3>まで可能であり、材料への入射フラックスは10^<23>m^<-2>s^<-1>と大きい。当装置の特性を明らかにした後、黒鉛材料を用いて、損耗再付着実験を行った。また、境界プラズマ中における黒鉛原子のイオン化と再付着(付着係数を1.0とする)を考えたモデルによる計算結果とも比較した。その結果、Arプラズマの場合比較的良い両者の一致をみたが、水素プラズマでは、1桁位の差があった。これは、水素プラズマの場合には化学スパッタリングの寄与が重要であり、炭化水素の解離、イオン化過程も取り込まなくてはいけないとともに、イオン化炭化水素の付着率を正しく評価しなくてはいけないことによると考えられた。この研究を更に進めるために、境界プラズマ中での炭素、炭化水素の発光測定システムを付置し、これによって境界プラズマ中での原子、分子挙動を詳しく研究できる見通しが得られた。
ローカル・リソースの集束による地域主義的まちづくり手法の展開

本研究では、都市が市場のみに翻弄されず、限られたローカル・リソースを集束することでリスクを分散し、持続的な地域主義のまちづくりを行うことができるシステムを明らかにすることを目的とし、方法論を構築するためのスタディを行った。大都市、地方都市の両方にまたがった対象地域内でのアクション・スタディでは、実地のまちづくり主体との連携を行い、行政、専門家、住民の新しい集束のかたちを構築することを目指して、調査研究を行うことによって、まちづくり手法の方法論を明らかにすることができた。本研究では、都市が市場のみに翻弄されず、限られたローカル・リソースを集束することでリスクを分散し、持続的な地域主義のまちづくりを行うことができるシステムを明らかにすることを目的とする。本研究でローカル・リソースとは、次のようなものを含むと定義する。第一にローカルの資金(官民)、第二にローカルの人材(属人的な記憶や技術を含む)、第三にローカル的空間資源である。これらの三つのリソースを地域内でバランスよく束ね、持続的なまちづくりを担保するための方法論を構築する。本年度は、まず論の全体像を明確にするために、リソースを活用したまちづくり事例を集積し、評価軸を策定して分析した。これは、共著である「まちづくり市民事業」および、まちづくりの専門誌である季刊まちづくりで「地域マネジメントを支える資金調達手法とマネジメント圏域の形成」の論として発表した。また、これらの分析を更に深めるために、シアトル市のPublic Development Authority、及びニューヨークの事例調査を行った。調査結果は、共著内で発表した。さらに、具体的な地域に入り、事例のアクション・スタディを行った。金沢市・高岡市において、地方中心市街地内での限定されたリソースの実態についての調査を行い、また、中野区での大規模公共事業に伴う資本流入とまちづくりにおいて、まちづくりの実践へ参加し、調査を行った。これらの背景の異なるまちづくりを比較することによって、評価軸をさらに強化させ、論として構築していくことで、リソースを束ねたまちづくりの展開の方法論を明確にしていく。本年度は、具体的な地域に入り、事例のアクション・スタディを行った。金沢市、高岡市において、地方中心市街地内での限定されたリソースの実態についての調査を行ったことは論文にまとめて発表した。また、中野区での大規模公共事業に伴う資本流入とまちづくりにおいて、まちづくりのアクション・スタディを行った。さらに、論の部分では富山市の事例を調査した成果を論文として発表し、台湾でも現地協力者の支援のもと、ローカル・リソースの集束方法における調査を行った。また、もう一つの論として、復興基金というまちづくり面からの資金の手法について調査し、成果を発表した。これらの背景の異なるまちづくりを、アクション・リサーチと論の両軸から分析、比較することによって、リソースを束ねたまちづくりの展開の方法論を構築していく。2012年度は、最終年度として、ローカル・リソースを集束することで、リスクを分散し、持続的に地域主義的なまちづくりを行うことができる方法論を構築するためのスタディを行った。その中で、特にアクション・スタディとして、大規模な都市計画事業に直面したまちづくりの現場における支援を行い、従来の方法論を補完するためのローカル・ルールの策定への活動と、主体連携の実態を明らかにした。このアクション・スタディでは、実地のまちづくり主体との連携を行い、行政、専門家、住民の新しい集束のかたちを構築することを目指して、調査研究を行うことができた。また、金沢においてもアクション・スタディとして、空洞化した中心部におけるまちづくりのあり方を専門家と議論し、ローカル・リソースの活用へとつなげた。また、アメリカから専門家招致をおこない、理論家における議論の仕上げをおこなった。その中では、ジェントリフィケーションに面した地域でのまちづくりのあり方についてのキーワードを明らかにし、日本における議論へと昇華させることができた。また、東アジアにおける近年活発な住民が主体となった特徴的な地域まちづくりにおけるローカル・リソースの集束実態についての調査と分析を行い、これまでの研究蓄積と一体としてとりまとめることができた。2010年の成果は論文にまとめて発表したこと、2011年はアクション・リサーチ活動を定期的に行うことができたことから。24年度が最終年度であるため、記入しない。

今後のアクション・リサーチの展開と理論について戦略的に行っていく必要がある。また、海外事例について調査成果をしっかりとまとめていき、日本の示唆としたい。24年度が最終年度であるため、記入しない。
ケアの経営：Business for Society型ビジネスの意義と現状の研究

2018年度は、組織に埋め込まれた倫理的価値観をもってステイクホルダーに対応するという人間中心の、関係性や互酬性を重視する「ケアの倫理」を基盤としたマネジメントについて、特に、地方創生活動分野でソーシャル・イノベーションに成功している地域で活躍するソーシャル・アントレプレナー(社会起業家)の活動を中心に考察した。さらに、この社会起業家たちの活動によって、「コミュニティ・キャピタル」という、地方創生が効率的かつ成功裏に導かれる人的ネットワーク(関係性)が構築されることを示した。また、地方創生活動におけるコミュニティ・キャピタルの存在と、「効率」や「公正」という倫理的尺度との関係性について考察した。加えて、ケアの倫理に基づいた事業を通じて、新たな事業や製品を創出している企業の事例研究を行い、アクター・ネットワーク理論(ANT)などの理論面からの考察を行った。結果として、CSR(企業の社会的責任)やCSV(共通価値の創造)等とは異なるサステナブルなビジネスモデルの存在や、社会における企業の役割の変化、日本人的価値観や感覚が企業経営に生かされる経営戦略の存在の可能性、その日本的モデルが、グローバルなビジネスモデルとしての適応する可能性について示唆を得た。さらに、今年度の研究からは、地域の社会的イノベーションの成功事例を検討することによって、人間(ユーザー)中心の思考方法である、「デザイン思考」が果たす役割の重要性を指摘した。つまり、デザイン思考の発想により、地域の課題の見方を再検討し、また、住民(ユーザー)が豊かで幸せな生活を送れる環境を整備することの重要性を明らかにした。なお、これらの研究成果は、国際学会などでの報告を中心に発表した。本研究では、企業が「他者を倫理的に扱う」ことの重要性を「ケアの倫理」の視点から考察し、企業が「社会のためのビジネス(B4S)」の原則から逸脱することなく、企業の社会における役割を果たし、かつ、企業として利益を創出するためにはどのような要因が必要であるのかを明らかにしようとしている。今年度は、B4S型ビジネスとして社会的企業の事例を取り上げ、特に、地方創生活動に携わる社会的企業の社会における役割を考察した。また、サステナブルな企業経営を実践し、かつ、経済的利益の創出を実現している企業へのインタビュー調査により、一般的なCSR経営(企業の社会的責任経営)とは異なる、新たなビジネスモデルの存在を明らかにするべく、今年度、研究を行った。さらに、本研究では、B4S型ビジネスを、働く人々の視点から考察することを計画しているが、本件についても、すでに、インタビュー調査を進めており、来年度、学会報告や論文の形で成果発表を行いたい。今後の研究については、Business for Society型ビジネスの一例として、まず、これまで研究してきた地方創生の成功事例において、創生プロジェクトに関わる人々のフロー体験とその成果との関係について検討する。また、仕事でフローを創出するマネジメントおよび要因について探る。さらに、「コミュニティ・キャピタル」の存在とフロー体験との関係についても考察する。次に、グローバル戦略に基づいて急激に業績を伸ばしている企業において、その成功要因のひとつが、働く人々(従業員)の楽しさや成長感、達成感のようなフロー体験であるという仮説のもと、従業員へのインタビュー調査を実施し、仮説を検証する予定である。また、人材の育成および人的資源戦略の視点から、フロー体験とケアの倫理との関係を考察する。また、仕事における人の成長と成果を、複線径路・等至性アプローチなどの理論を活用して分析する。さらに、CSRやCSVとは異なる、ケアの倫理に基づいたサステナブルな企業経営の事例を検討し、なぜ、現在のようなビジネススタイルをとるようになったのか、その転機となったと考えられる出来事における意思決定の際の倫理性と、そこから生まれた新しいプロジェクトと成功の要因と考えられる「巻き込む力」、およびそれらの活動をビジネスにつなげるために必要となる要因について考察する。当初、本研究では、企業へのアンケート調査を計画していたが、個別企業へのインタビュー調査を複数回する機会に恵まれ、また、個別企業での従業員へのアンケート調査をすることは難しい状況であるため、企業へのインタビュー調査を中心に事例研究を行っていく予定である。ただし、サステナブルな事業活動を行う企業が、その倫理性をビジネスにつなげるための要因を明らかにするため、ある企業の商品のコアなファンへのアンケート調査の実施を計画している。国内外のソーシャル・エンタープライズ(SE)の活動やCSRに関するインタビュー調査などを通じて、Business for Society (B4S)型ビジネスの事例研究を行った。その中で、日本の「地方創生」において、SEを率いる社会起業家の役割や、ソーシャル・イノベーションの成功に影響を及ぼすと想定される、西口敏宏・辻田素子が提唱する「コミュニティ・キャピタル」の意義について論文を発表した。また、台日韓の研究者の共同研究プロジェクトにおいて、地方創生に携わる日本のSEに関する研究報告を行った。さらに、B4S型ビジネスを実施するには事業に携わる人々一人ひとりの倫理性が問われと考えられるが、グローバルなビジネス社会で必要とされる経営倫理的思考や行動力を育成する機会が、日本の教育の現場に十分に存在していない問題について考察した。海外におけるB4S型ビジネスの事例調査としては、常石造船株式会社の海外拠点のフィリピン・セブ島にTSUNEISHIHEAVYINDUSTRIESを訪問し、インタビュー調査を実施した。また、セブ島に暮らすジャウ族を支援する社会起業家を訪ね、支援の現場を視察した。この調査からは、ケアの倫理と貨幣が介在しない形での活動やものやサービスの動きが作り出す新しい資本主義の創造、および生活の質(Good Life)の根底にある倫理性についての気づきを得た。

加えて、B4S型ビジネスであると考えられ、またソーシャル・エンタープライズのひとつである「協同組合」のうち、スペインのモンドラゴン協同組合をとりあげ、日本の地域への導入の可能性を検討した。その他、平成31年度には、ケアの経営におけるフロー体験としての仕事の意義を研究する予定であるが、平成29年度には、この「フロー体験」と、「働き方改革」及びホスピタリティ・マネジメントの関連性について報告を行った。平成29年度は、国内外のソーシャル・エンタープライズ(SE)および社会起業家、また、営利企業のCSRなど、Business for Society(B4S)型ビジネスの調査を行い、研究論文や学会報告などの形で発表を行った。しかし、まだ、B4S型ビジネスの特徴を十分に抽出し類型化するところまでは至っていない。また、平成31年度に予定している、B4S型ビジネスの実践例としてのSEにおける労働を「フロー理論」を中心に考察し、ケアの経営におけるフロー体験としての仕事の意義を明らかにする研究についても、平成29年度において着手している。2018年度は、組織に埋め込まれた倫理的価値観をもってステイクホルダーに対応するという人間中心の、関係性や互酬性を重視する「ケアの倫理」を基盤としたマネジメントについて、特に、地方創生活動分野でソーシャル・イノベーションに成功している地域で活躍するソーシャル・アントレプレナー(社会起業家)の活動を中心に考察した。さらに、この社会起業家たちの活動によって、「コミュニティ・キャピタル」という、地方創生が効率的かつ成功裏に導かれる人的ネットワーク(関係性)が構築されることを示した。また、地方創生活動におけるコミュニティ・キャピタルの存在と、「効率」や「公正」という倫理的尺度との関係性について考察した。加えて、ケアの倫理に基づいた事業を通じて、新たな事業や製品を創出している企業の事例研究を行い、アクター・ネットワーク理論(ANT)などの理論面からの考察を行った。結果として、CSR(企業の社会的責任)やCSV(共通価値の創造)等とは異なるサステナブルなビジネスモデルの存在や、社会における企業の役割の変化、日本人的価値観や感覚が企業経営に生かされる経営戦略の存在の可能性、その日本的モデルが、グローバルなビジネスモデルとしての適応する可能性について示唆を得た。さらに、今年度の研究からは、地域の社会的イノベーションの成功事例を検討することによって、人間(ユーザー)中心の思考方法である、「デザイン思考」が果たす役割の重要性を指摘した。つまり、デザイン思考の発想により、地域の課題の見方を再検討し、また、住民(ユーザー)が豊かで幸せな生活を送れる環境を整備することの重要性を明らかにした。なお、これらの研究成果は、国際学会などでの報告を中心に発表した。
泉鏡花著書の書誌的研究

本年度も、昨年度に引き続き各図書館の蔵書を調査し、書誌データの蓄積を行い、鏡花単行本の書誌的特徴について通時的・共時的考察を行った。特に鏡花研究の第一人者である、上智大学名誉教授村松定孝氏蔵本から、『冠弥左衛門』初版(明治二九年九月三十日)の他、初刊本『相合傘』再版・『遊里集』八版・『友染集』四版等これまで知られていなかったものを確認・調査した。本年度購入した図書についていえば、例えば『昭和新集』・『辰巳巷談』(昭和二三年二月)の函の異装版を確認した。また、大正期以降、重版において、印刷所が複数に亙ったため、同じ版数でも発行年が相違するものがいくつか存在することがわかった(例;『遊里集』・『粧蝶集』・『友染集』等)。さらに、定価の訂正が多く、初版であっても貼紙訂正・ゴム印訂正・貼紙の上からゴム印訂正などが見られることが確認されたが、これは、各地に売れ残った本が時間経過と共に定価の訂正を受けたためと推定される。また、『誓之巻』(明治三九年一月、日高有倫堂)所収「誓之巻」末尾の、本作初出の発行社博文館に対する謝辞、『鏡花集』第二巻所収「高野聖」末尾の、単行本『高野聖』の版元佐久良書房に対する謝辞は、各々『鏡花全集』未収録であり、かつ、当時の版権のありようを考える際に重要である。鏡花本を多く出版している春陽堂が、関東大震災によって紙型を焼失したため、漱石本同様『湯島詣』(大正一三年一月改版)・『通夜物語』(大正一三年六月改版)・『婦系図』(大正一三年六月改版)等も「改版」され、新たに活字を組み直して再刊されたことも判明した。以上のように、出版・印刷面における鏡花本の歴史的変遷、同時代との係わり、流通のありようの一端か明らかになり、新しい知見が多く得られた。本年度は、泉鏡花の著書について、関西・関東を中心とした図書館の蔵書を閲覧し、書誌事項をノートする基礎作業を行った。対象となった図書館は、高知市教育委員会図書館、佐川町立図書館、天理図書館、光華女子大学図書館、大阪府立中央図書館、大阪府立中之島図書館、大阪女子大学附属図書館、昭和女子大学近代文庫、東京都立中央図書館、神奈川近代文学館、東京大学総合図書館、国立国会図書館、山梨大学附属図書館、などである。これらの図書館において、鏡花の単行本について、殆ど全ての書誌事項を確認できた。それらについて、初版本のみならず、重版・異版・再刊本・特装版や、函・袋・カバーまどにつて、新たな知見を得たものも少なくない。一斑を示せば、『愛府』六版本、春陽堂版『泉鏡花集』真珠入り特装版、『鴛鴦帳』再版に二種あり、大正七年十月二十日刊本には著者の印なく、いわゆる海賊版らしいこと、『鏡花小品』『春宵読本』カバー(なお、『春宵読本』奥付にはすべて改ざん個所のあることを発見した)、『黒百合』・『三枚続』・『風流線』正続・『照宵狂言』袋、『遊行車』再刊本、『日本橋』春陽堂刊本、などである。また、これらに蔵されない著書については、図書費から購入したものがある。例えば、『誓の巻』『無憂樹』再刊本、『愛艸集』函付再版・四版、『遊里集』函付四版、『鏡花双紙』函付初版、『由縁文庫』函付六版、『参宮日記』初版、『湯島詣』七版、『続風流線』三版、などである。鏡花本で函付のものは比較的珍しい。また、以上の重版は、それぞれが貴重なものである。いずれも保存状態がよく、美的な鏡花軸珍本の装丁をよく伝えている。以上、本年度の研究成果から、新しい発見に関わる点を中心に概要を示した。

また、『誓之巻』(明治三九年一月、日高有倫堂)所収「誓之巻」末尾の、本作初出の発行社博文館に対する謝辞、『鏡花集』第二巻所収「高野聖」末尾の、単行本『高野聖』の版元佐久良書房に対する謝辞は、各々『鏡花全集』未収録であり、かつ、当時の版権のありようを考える際に重要である。鏡花本を多く出版している春陽堂が、関東大震災によって紙型を焼失したため、漱石本同様『湯島詣』(大正一三年一月改版)・『通夜物語』(大正一三年六月改版)・『婦系図』(大正一三年六月改版)等も「改版」され、新たに活字を組み直して再刊されたことも判明した。以上のように、出版・印刷面における鏡花本の歴史的変遷、同時代との係わり、流通のありようの一端か明らかになり、新しい知見が多く得られた。
経済開発と資源の重層的ガバナンスに関する人類学的研究－エチオピアの事例から

【ティグライ州】眞城は2018年4月の首相交代の影響を調査した。ティグライ州は1991年の現EPRDF政権下で目覚ましい経済発展を遂げており、今回の調査では工業化に注目した。首相交代ならびにティグライ人民解放戦線(TPLF)の影響力の衰退に伴い、ティグライ資本のエチオピアの他州からの引き上げなど興味深い事例も明らかとなった。また、ティグライ州と隣接するエリトリアと20年ぶりに国交が回復し、国境が再開された影響についても調査した。【アムハラ州】児玉は主に先行研究によりつつ、エチオピアにおける花卉生産と稲作、および国際市場についての理解を深めた。【アディスアベバ】西は国家と国民との交渉過程において、開発とガバナンスに関わる秩序がどのように形成されるのかという問題について、人類学分野の研究レビューをおこなった。またアディスアベバにおいて、与党の権力基盤の変動が民族自治制の実施に与える影響に関する現地調査をおこなった。利根川は、公立小学校2校でインタビュー調査を中心とするフィールド調査を実施し、アディスアベバにおける障害児の教育の現状を明らかにすることを試みた。【オロミア州】田川はボラナ県で約1か月間、アジスアベバで約2週間、政府機関を対象に調査を行った。【南部諸民族州】藤本は、水力発電用のギベ第四ダムの建設現場を、コンタ側から訪れることを試みたが、許可が得られず、訪れることはできなかった。ただし初めて訪れたコイシャとツァーラで短期間ながら調査を実施し、この地域の栽培植物の分布を明らかにした。宮脇は、ウォイト川河畔に農牧民ツァマコと農耕民コンソの共同作業によって新たに作られた耕作地を訪れ、その概要を把握した。佐川は、エチオピア西南部のダサネッチにおいて、政府が進める大規模開発政策とフードセキュリティ政策により、住民の資源利用がどのように変容しているかの予備的な調査を実施した。研究代表者および分担者8人のうち7人は、当初の計画通り調査地をおとずれ、予備的な調査を行った。またそれにより、今後の調査計画を、当初よりもより具体的な形で構想できるようになっている。また残る一人も、先行研究を分析することにより、調査テーマについてより明確なビジョンを得ている。【ティグライ州】眞城は、エチオピアにおける政治や経済の変動を継続して分析しつつ、ティグライ州の経済発展に政党が及ぼした影響について掘り下げて検討する。【アムハラ州】児玉は、国際市場におけるエチオピアの花卉産業および稲作について、日本国内でもヒアリングなどを行うのと同時に、現地調査を通してその実態を理解し、輸出/現金作物である花やコメの生産が、社会にどのように影響をあたえているのかを分析する予定である。利根川は、アムハラ州における初等教育の障害児の教育状況を調査することを計画している。アディスアベバとの比較を行い、国際的な「インクルーシブ教育」とエチオピアにおける「インクルーシブ教育」の違いを明らかにしていく。【アジスアベバ】西は国家と国民との交渉過程および開発とガバナンスに関わる秩序形成に関する論文を執筆する。またエチオピアにおいて、与党の権力基盤の変動が民族自治制および保健セクター開発の実施に与える影響に関する現地調査をおこなう。【オロミア州】現在ボラナ県ではヤベロ周辺において、大学の設立、インフラ整備からNGOによる協同組合支援まで多様な開発が進められている。田川はそれらの全体的な把握とその方向性、および開発プロセスの調査を行う。【南部諸民族州】藤本は、農耕民マロの現地調査を実施したいと考えている。領域の周辺部で行われているギベ第四ダムの建設状況および地域への影響を把握するとともに、リセトルメント(再定住)プロジェクトについても継続調査を実施する。宮脇は、ウォイト川河畔の耕作地の形成過程について、インタビュー調査を通じて明らかにする予定である。佐川はオモ川河口のダサネッチにおいて、資源利用の実態調査をするために、過去10年間で人びとにとって重要な生業となった漁労に注目したい。具体的には、人びとが湖や川へのアクセスをどのように管理しているのかに焦点をあてる【ティグライ州】眞城は2018年4月の首相交代の影響を調査した。【南部諸民族州】

藤本は、水力発電用のギベ第四ダムの建設現場を、コンタ側から訪れることを試みたが、許可が得られず、訪れることはできなかった。ただし初めて訪れたコイシャとツァーラで短期間ながら調査を実施し、この地域の栽培植物の分布を明らかにした。宮脇は、ウォイト川河畔に農牧民ツァマコと農耕民コンソの共同作業によって新たに作られた耕作地を訪れ、その概要を把握した。佐川は、エチオピア西南部のダサネッチにおいて、政府が進める大規模開発政策とフードセキュリティ政策により、住民の資源利用がどのように変容しているかの予備的な調査を実施した。研究代表者および分担者8人のうち7人は、当初の計画通り調査地をおとずれ、予備的な調査を行った。またそれにより、今後の調査計画を、当初よりもより具体的な形で構想できるようになっている。また残る一人も、先行研究を分析することにより、調査テーマについてより明確なビジョンを得ている。【ティグライ州】眞城は、エチオピアにおける政治や経済の変動を継続して分析しつつ、ティグライ州の経済発展に政党が及ぼした影響について掘り下げて検討する。【アムハラ州】児玉は、国際市場におけるエチオピアの花卉産業および稲作について、日本国内でもヒアリングなどを行うのと同時に、現地調査を通してその実態を理解し、輸出/現金作物である花やコメの生産が、社会にどのように影響をあたえているのかを分析する予定である。利根川は、アムハラ州における初等教育の障害児の教育状況を調査することを計画している。アディスアベバとの比較を行い、国際的な「インクルーシブ教育」とエチオピアにおける「インクルーシブ教育」の違いを明らかにしていく。【アジスアベバ】西は国家と国民との交渉過程および開発とガバナンスに関わる秩序形成に関する論文を執筆する。またエチオピアにおいて、与党の権力基盤の変動が民族自治制および保健セクター開発の実施に与える影響に関する現地調査をおこなう。【オロミア州】現在ボラナ県ではヤベロ周辺において、大学の設立、インフラ整備からNGOによる協同組合支援まで多様な開発が進められている。田川はそれらの全体的な把握とその方向性、および開発プロセスの調査を行う。【南部諸民族州】藤本は、農耕民マロの現地調査を実施したいと考えている。領域の周辺部で行われているギベ第四ダムの建設状況および地域への影響を把握するとともに、リセトルメント(再定住)プロジェクトについても継続調査を実施する。宮脇は、ウォイト川河畔の耕作地の形成過程について、インタビュー調査を通じて明らかにする予定である。佐川はオモ川河口のダサネッチにおいて、資源利用の実態調査をするために、過去10年間で人びとにとって重要な生業となった漁労に注目したい。具体的には、人びとが湖や川へのアクセスをどのように管理しているのかに焦点をあてる
大脳サイトメガロウイルス感染による血液脳関門破綻の新たな機序の解明と治療法の探索

サイトメガロウイルス(CMV)は胎内感染によって小頭症などの重篤な中枢神経障害を引き起こす。ダウン症に匹敵する大きな先天異常である。成人になるまで約60%90%の人がCMVに感染するが、健常者では重篤な症状を呈することは少ない。しかし近年、抗CMV抗体高値を示す高齢者優位に認知症発症率の高さが指摘されるようになり注目を集めている。申請者はマウスモデルを使ってCMV大脳感染機序を解明してきた。2015年にはCMV感染による血液脳関門(BBB)破綻現象をin vivoで初めて観察しAm J Pathol誌に発表した。その中でBBB破綻がCMV中枢神経障害の重要な病理機序であることを示した。本申請ではCMV慢性持続感染がBBB脆弱性に影響を及ぼし認知症発症に関わるとの仮説をたてた。今回はCMV感染によるBBB破綻機序の分子学的解析と認知症を含めたCMV誘発性神経疾患の予防・治療法につなげることを目的とする。今回の申請ではCMVによるBBBの破綻機序をより詳しく検索する予定であった。今年度もin vitro BBBモデルを利用したCMV感染BBB破綻機序の解析を計画していた。当初はBBB再構成モデルとなるマウスBBBキットを提供会社から購入できる予定であったが、開発が遅れ購入することができなかった。現在は正確な実験を保証するためのウイルス微粒子のカウント法について開発中であり、微量液滴を用いたCMV粒子のカウントや観察を試みている。またマウス感染脳に対して経時的な脳血管壁の立体構造変化を走査型電子顕微鏡(ナノスーツ法)での観察を試みている。今回の申請ではCMVによるBBBの破綻機序をより詳しく検索するために、今年度もin vitro BBBモデルを利用したCMV感染BBB破綻機序の解析を計画していた。当初BBB再構成モデルであるマウスBBBキットが提供会社から購入できる予定であったが、会社の開発が遅れており購入することができなかった。マウスサイトメガロウイルスはマウスの細胞でしか感染増殖しないため、他の動物種では代用することができない。また予算申請書で書いたヒトiPS細胞を使用し、同一細胞由来のBBBを3次元的にin vitroで再現することが成功したとの情報も現時点での実現性が難しいことが最近話題となった。慢性CMV感染モデルマウスにおけるBBB脆弱性の検討をするために慢性感染モデルの作成を試みている。その中で来年度はCyclophilin A(CyPA) knockout mouseを使用する計画である。今年度はCyPA knockout mouseのホモの作成がうまくいかず、こちらも進捗が滞っている状態である。これらの現状を踏まえ現在は正確な実験を保証するためのウイルス微粒子のカウント法についても開発中であり、微量液滴を用いたCMV粒子のカウントや観察を試みている。当初BBB再構成モデルであるマウスBBBキットが提供会社から購入できる予定であったが、会社の開発が遅れており購入することができていない。今後もin vitroのマウスBBBモデルの購入は難しいと考えられる。そのため実施期間においてin vivoの実験を中心として実験モデルの再構築を現在策定中である。CyPAのknockout mouseのbreedingによるホモ作成がうまくいかない可能性も想定し、今後はマウスサイトメガロウイルスが血管内腔に付着・侵入・BBBの構造変化が現れるまでの経時的変化を、凍結切片やパラフィン切片を用いたナノスーツ法の観察をしていく予定である。ナノスーツ法とは高真空下でも生命を保護できる「生体適合性プラズマ重合膜」で、生きたまま、濡れたままの状態で生物の高解像度な電子顕微鏡観察することができる。このナノスーツ法を利用することで新たな知見を得られることが期待される。今年度はin vitroBBBモデルを利用したCMV感染BBB破綻機序の解析を計画していた。

現在は正確な実験を保証するためのウイルス微粒子のカウント法について開発中であり、微量液滴を用いたCMV粒子のカウントや観察を試みている。またマウス感染脳に対して経時的な脳血管壁の立体構造変化を走査型電子顕微鏡(ナノスーツ法)での観察を試みている。今回の申請ではCMVによるBBBの破綻機序をより詳しく検索するために、今年度はin vitro BBBモデルを利用したCMV感染BBB破綻機序の解析を計画していた。当初BBB再構成モデルであるマウスBBBキットが提供会社から購入できる予定であったが、会社の開発が遅れており購入することができなかった。マウスサイトメガロウイルスはマウスの細胞でしか感染増殖しないため、他の動物種では代用することができない。また予算申請書で書いたヒトiPS細胞を使用し、同一細胞由来のBBBを3次元的にin vitroで再現することが成功したとの情報も現時点での実現性が難しいことが最近話題となった。慢性CMV感染モデルマウスにおけるBBB脆弱性の検討をするために慢性感染モデルの作成を試みている。その中で来年度はCyclophilin A(CyPA) knockout mouseを使用する計画である。今年度はCyPA knockout mouseのホモの作成がうまくいかず、こちらも進捗が滞っている状態である。これらの現状を踏まえ現在は正確な実験を保証するためのウイルス微粒子のカウント法についても開発中であり、微量液滴を用いたCMV粒子のカウントや観察を試みている。サイトメガロウイルス(CMV)は胎内感染によって小頭症などの重篤な中枢神経障害を引き起こす。ダウン症に匹敵する大きな先天異常である。成人になるまで約60%90%の人がCMVに感染するが、健常者では重篤な症状を呈することは少ない。しかし近年、抗CMV抗体高値を示す高齢者優位に認知症発症率の高さが指摘されるようになり注目を集めている。申請者はマウスモデルを使ってCMV大脳感染機序を解明してきた。2015年にはCMV感染による血液脳関門(BBB)破綻現象をin vivoで初めて観察しAm J Pathol誌に発表した。その中でBBB破綻がCMV中枢神経障害の重要な病理機序であることを示した。本申請ではCMV慢性持続感染がBBB脆弱性に影響を及ぼし認知症発症に関わるとの仮説をたてた。今回はCMV感染によるBBB破綻機序の分子学的解析と認知症を含めたCMV誘発性神経疾患の予防・治療法につなげることを目的とする。今回の申請ではCMVによるBBBの破綻機序をより詳しく検索する予定であった。今年度もin vitro BBBモデルを利用したCMV感染BBB破綻機序の解析を計画していた。当初はBBB再構成モデルとなるマウスBBBキットを提供会社から購入できる予定であったが、開発が遅れ購入することができなかった。