hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
コチニンを指標とした女子学生の受動喫煙の実態と口腔への影響に関する継続的調査

喫煙、受動喫煙と口腔内所見との関連を解明するために、喫煙、受動喫煙に対する認識と口腔内所見との関係を検討した。2014年、2015年および2016年4月時に喫煙、受動喫煙、加濃式社会的ニコチン依存度(Kano Test Social Nicotine dependence、KTSND)に関する質問票と口腔内写真撮影を行い、2014年11月時に喫煙、受動喫煙に関する質問票、尿・唾液中コチニン濃度測定をすべて行った103名(18.2 ±0.8歳)を対象とした。なお、本研究は、愛知学院大学歯学部倫理委員会(承認番号411)の承認を得て行った。その結果、喫煙者は、2年生時まではいなかったが、3年生時、2名となった。受動喫煙は、3年間で、ほぼ横ばい状況であった。尿中コチニン濃度で受動喫煙ありと判定した9名の内、歯肉メラニン色素沈着がみられたのは3名であった。一方、喫煙者2名の歯肉メラニン色素沈着は、みられなかった。次に、上下顎前歯部唇側の乳頭歯肉と辺縁歯肉の炎症の有無の合計を歯数で割ったPM指数は、学年が進むに伴い低下した(p < 0.01)。その理由は、歯科衛生教育の成果と考えた。しかし、受動喫煙の有無別PM指数には、有意な差異はなかった。非喫煙者のKTSND得点は、2014年に比べ2016年でやや高くなった。受動喫煙の有無別KTSND得点は、2014年と2015年に差異はなかったが、2016年は、なし群の方が低い傾向となった(p < 0.10)。電子タバコと無煙タバコを認識している者は、増加した。以上の継続的調査研究から、喫煙や受動喫煙と歯肉のメラニン色素沈着との明確な関連は見出せなかったが、喫煙以外の因子も含めた包括的な評価が必要であると考えた。若年女性の喫煙や受動喫煙の現状を把握するため、女子大学生に対して尿・唾液中コチニンを指標とした喫煙と受動喫煙の判定およびタバコに対する意識調査を行い、さらに、歯肉・口唇のメラニン色素沈着と歯肉炎の有無との関係を評価した。対象は、2009年4月と同年11月に質問票調査を行い、唾液・尿中コチニン濃度を測定した学生111名(18.1 ±0.3歳、1820歳)である。タバコに対する意識は、加濃式社会的ニコチン依存度(KTSND)で評価し、口腔内写真にて歯肉・口唇メラニン色素沈着と歯肉炎の判定を行った。その結果、喫煙者は4月および11月の質問票によると1名であったが、尿中コチニン濃度から推定した喫煙者は5名(4.5%)で、尿・唾液中コチニン濃度の測定は喫煙者の検出に有効であった。次に、非喫煙者の前日および前々日の受動喫煙と尿・唾液中コチニン濃度を検討すると、自己申告による前々日受動喫煙状況では、尿中コチニン濃度は受動喫煙ありの方が高い傾向で、唾液中コチニン濃度では有意に高かった。歯肉メラニン色素沈着は自己申告による受動喫煙状況とは必ずしも一致せず、メラニン色素沈着に影響する他の因子についても検討する必要性が示唆された。そして、KTSND得点は、喫煙者の方が非喫煙者よりも、歯肉メラニン色素沈着がみられる者の方が、かつ歯肉炎指数(GI)が高い方が高いことから、歯肉の状態とKTSND得点の関連性がみられた。したがって、バイオマーカーとしての尿中コチニン測定は、喫煙や受動喫煙に関する指標として有効であった。本研究では、コチニン濃度とメラニン色素沈着との関連性はみられなかった。歯科衛生士をめざす学生に対する喫煙や受動喫煙についての教育とそれに伴う意識改革は、今後歯科衛生士による禁煙指導が期待されていく中で、必要不可欠なものである。本研究結果は、尿・唾液中のコチニン量で判定した喫煙や受動喫煙と口唇、歯肉メラニン色素沈着との関連性というたいへん興味深い内容であり、日本歯科衛生学会で報告した段階である。口呼吸とう蝕や歯周病との関連を解明する一助として,歯科衛生士をめざす学生の口呼吸とそれに関連する要因,関連する疾患や症状と歯周病との関連を検討した.歯科衛生学科学生101名(20.6 ±2.6歳,2045歳)を対象に,2015年入学時と,同年11月に喫煙に関する質問票調査と尿・唾液中コチニン濃度測定,2017年時,喫煙と,口呼吸に関する質問票調査,さらに撮影した口腔内写真から歯周病,口呼吸に関連する評価を行った.その結果,対象者に喫煙者はいなかったが,30名に歯肉メラニン色素沈着がみられた.その内,27名は受動喫煙がなく,歯肉メラニン色素沈着は受動喫煙以外の因子が考えられた.口呼吸自覚者はおよそ4割に対し,上下口唇比から判定した口呼吸者は9割を超え,無自覚の口呼吸を判定するために,上下口唇比は,有用な指標となる可能性が示唆された.また,対象者にう蝕や処置歯を有する者は少なく,今後は白濁や着色も含めて判定する必要性も考えられた.口呼吸自覚者は,覚醒時の開口・口唇にしまりがない自覚者(P < 0.01),上顎前突(出っ歯)・歯の着色・鼻閉の自覚者(P < 0.05)がより多かった.

また,口呼吸自覚者に舌の圧痕は少なかった(P < 0.01).歯肉炎症を示すPM指数は,口呼吸自覚者の方が高く,特に下顎において炎症が多い傾向(P < 0.10)で,歯肉メラニン色素沈着のある者の方が上下顎で高い傾向にあり(P < 0.10),特に下顎ではより高かった(P < 0.05).すなわち,口呼吸と歯肉炎ならびに歯肉メラニン色素沈着は,特に下顎前歯部において関連があると思われた.以上のことから,口呼吸は歯周組織だけでなく,口腔以外にも影響を及ぼすため,歯科衛生士として,口腔内所見だけでなく,喫煙歴や生活習慣および習癖に関しても留意する必要性が示唆された.バイオマーカーとしての尿中コチニン測定は,喫煙や受動喫煙に関する指標として有効であったが,唾液中のコチニンは,受動喫煙の評価は,困難であった.今後,再検討して進める予定である.喫煙、受動喫煙と口腔内所見との関連を解明するために、喫煙、受動喫煙に対する認識と口腔内所見との関係を検討した。2014年、2015年および2016年4月時に喫煙、受動喫煙、加濃式社会的ニコチン依存度(Kano Test Social Nicotine dependence、KTSND)に関する質問票と口腔内写真撮影を行い、2014年11月時に喫煙、受動喫煙に関する質問票、尿・唾液中コチニン濃度測定をすべて行った103名(18.2 ±0.8歳)を対象とした。なお、本研究は、愛知学院大学歯学部倫理委員会(承認番号411)の承認を得て行った。その結果、喫煙者は、2年生時まではいなかったが、3年生時、2名となった。受動喫煙は、3年間で、ほぼ横ばい状況であった。尿中コチニン濃度で受動喫煙ありと判定した9名の内、歯肉メラニン色素沈着がみられたのは3名であった。一方、喫煙者2名の歯肉メラニン色素沈着は、みられなかった。次に、上下顎前歯部唇側の乳頭歯肉と辺縁歯肉の炎症の有無の合計を歯数で割ったPM指数は、学年が進むに伴い低下した(p < 0.01)。その理由は、歯科衛生教育の成果と考えた。しかし、受動喫煙の有無別PM指数には、有意な差異はなかった。非喫煙者のKTSND得点は、2014年に比べ2016年でやや高くなった。受動喫煙の有無別KTSND得点は、2014年と2015年に差異はなかったが、2016年は、なし群の方が低い傾向となった(p < 0.10)。電子タバコと無煙タバコを認識している者は、増加した。以上の継続的調査研究から、喫煙や受動喫煙と歯肉のメラニン色素沈着との明確な関連は見出せなかったが、喫煙以外の因子も含めた包括的な評価が必要であると考えた。本年度と同様に、入学する学生対象者や2年生、3年生のデータを増やしていく。また、1年後となる2年生時、2年後となる3年生時のデータも蓄積させていく。対象者の増えた段階で、再解析を行い、検討を進めていく。本年度と同様に,入学する学生対象者や2年生,3年生のデータを増やしていく.また,1年後となる2年生時,2年後となる3年生時のデータも蓄積させていく.対象者の増えた段階で,再解析を行い,検討を進めていく.対象者が、研究計画時に想定した人数よりも少なくなり、バイオマーカーの測定にかかる費用が減少したこと、予定していた学会での発表が、間に合わなかったことによる旅費の減少などが、次年度使用額が生じた理由である。サンプル数が,想定した数よりも少なく,その測定費用などが残った.今年度は,予定通り,調査研究を進めると同時に,いままでの成果を国際学会で報告する予定である.今年度の対象者に対しても、予定通りの調査を実施し、学会発表や論文投稿により、経費を使用する予定である。
大気環境センシングネットワークの研究

大気環境センシングネットワークの実現に向けて,以下に挙げる成果を得た.1.ガスセンサシステム半導体式ガスセンサを用いて,大気中のNO_2濃度とO_3濃度を測定できるシステムを作製した,ガスセンサ応答を補正するため,システムに温度センサと湿度センサを組み込んだ.作製したガスセンサシステムを用いて,大気中のNO_2濃度とO_3濃度の長期測定を行った結果,大気中のNO_2とO_3濃度を精度良く測定することができた.しかし,NO_2センサ応答が徐々にドリフトしていくことが分かった.また,NO_2センサはO_3にも応答してしまうことが分かった.そこで,NO_2センサ応答からNO_2濃度を計算する感度補正式に新しくO_3の干渉を考慮した項を加え,補正式とO_3センサで測定したO_3濃度を用いてO_3の干渉を取り除くことができた.2.センサネットワークガスセンサは,小型で安価であるという利点がある一方で,経時変化やドリフトなどの問題がある.ネットワークを構成した際,数多くのガスセンサを定期点検するには膨大な時間と労力がかかる.この問題を改善する方法として,センサシステムがネットワークにつながっていることに着目し,ガスセンサシステムの自動較正や診断に利用する手法について検討した.同じガス濃度を複数の異なるセンサシステムや大気環境測定局で測定している場合に,互いの測定値を比較しセンサシステムの較正を行う方法を提案し,実験とシミュレーションにより,較正方法の有効性を示した.本研究では,大気汚染物質の発生や移動の様子を観測するため,大気環境測定点を高密度化しリアルタイムで処理し測定するネットワークシステム(GASDAS, gas distribution analyzing system)の実現を目指す.本年度は,大気汚染物質として二酸化窒素(NO_2)とオゾン(O_3)を取り上げ,半導体式ガスセンサを用いた安価で小型なNO_2測定器とO_3測定器の作製を行った.ガスセンサを単独で用いた時は,温度湿度の変動やガスセンサの経年変化など問題がある.ガスセンサに加えて温度センサや湿度センサを用いた信号処理によってこれらの問題に取り組み,ガスセンサ応答をNO_2濃度とO_3濃度に換算するための較正式をそれぞれ求めた.作製した測定器とNO_Xアナライザ,O_3アナライザを同じ場所に配置し2週間の大気環境測定を行った.測定器による測定値とアナライザによる測定値を比較した結果,測定器は測定誤差10ppbで精度良く測定することが出来た.また,ネットワークシステムを構築した際,数多くのガスセンサを個々に点検するには膨大な時間と手間がかかる.そこで,ネットワークを測定器の自動較正に利用することを提案した.NO_2測定器を近隣の各地方自治体が設置した4測定局の速報値を用いて自動較正する方法を検討した.4測定局の1年分の速報値を調査した結果,月に数時間だけNO_2濃度が低くなる気象条件を見出した.この時,4測定局のNO_2速報値がすべて10ppb以下となり,ガスセンサの出力を4測定局の平均値にあわせる較正を行った.NO_2測定器とNO_xアナライザによる測定値を比較した結果,測定開始2ヵ月後の測定誤差は40ppbであったが,較正を行うことで測定誤差は10ppbとなり精度良く測定できることが分かった.次年度では,測定器の長期安定性の検討を行い,その後,測定器を用いて多点大気環境測定を行う.大気環境センシングネットワークの実現に向けて,以下に挙げる成果を得た.1.ガスセンサシステム半導体式ガスセンサを用いて,大気中のNO_2濃度とO_3濃度を測定できるシステムを作製した,ガスセンサ応答を補正するため,システムに温度センサと湿度センサを組み込んだ.作製したガスセンサシステムを用いて,大気中のNO_2濃度とO_3濃度の長期測定を行った結果,大気中のNO_2とO_3濃度を精度良く測定することができた.しかし,NO_2センサ応答が徐々にドリフトしていくことが分かった.また,NO_2センサはO_3にも応答してしまうことが分かった.そこで,NO_2センサ応答からNO_2濃度を計算する感度補正式に新しくO_3の干渉を考慮した項を加え,補正式とO_3センサで測定したO_3濃度を用いてO_3の干渉を取り除くことができた.2.センサネットワークガスセンサは,小型で安価であるという利点がある一方で,経時変化やドリフトなどの問題がある.ネットワークを構成した際,数多くのガスセンサを定期点検するには膨大な時間と労力がかかる.この問題を改善する方法として,センサシステムがネットワークにつながっていることに着目し,ガスセンサシステムの自動較正や診断に利用する手法について検討した.同じガス濃度を複数の異なるセンサシステムや大気環境測定局で測定している場合に,互いの測定値を比較しセンサシステムの較正を行う方法を提案し,実験とシミュレーションにより,較正方法の有効性を示した.
ミトコンドリアDNAの塩基配列から見た現代九州日本人

九州地方の現代人のミトコンドリアDNAの変異を調べる目的で、佐賀県在住者111名から血液のサンプルを採集し、通常の培養細胞や血液サンプルからDNAを抽出する方法を用いて、PCR法のテンプレートとするDNAを抽出・精製した。この精製DNAををとにミトコンドリアDNAのV-Regionと呼ばれる領域を増幅した。この領域には通常9塩基分の配列の繰り返しが存在するが、アジアの人類集団の中には繰り返しが無く9塩基分だけ配列が短くなっている個体が存在することが知られている。増幅したPCR産物を3%のアガロースゲルに泳動して佐賀県の集団におけるこの欠損の比率を調べた。95体のサンプルについて調査した結果、9塩基の欠損を持つ個体は13体であった(欠損率13.7%)。9塩基の欠損はアジアの集団でも南方集団を特徴づける遺伝子であると考えており、従来の報告では現代日本人は約20%の変異を持つとされている。今回の結果はそれより低い値となったが、文献によれば現代の朝鮮集団の欠損率は約8%で日本人より低く、両者の中間の値となっている。弥生時代より北部九州地方は大陸,特に朝鮮半島とのヒトの交流が密な地域であると考えられており、ミトコンドリアの遺伝子の頻度が両者の中間を示したのは、このことの影響が現代まで続いている可能性があることを示唆している。現在、同じミトコンドリアDNAのD-ループ領域から500塩基対程度を増幅するプライマーを設計して、得られたテンプレートDNAに対してPCR法を用いたDNA増幅を行っている。そしてこの領域の塩基配列を決定して、更に詳細な解析を行っている最中である。
半導体中不純物の3D構造制御と低損失・高効率デバイスの開発

半導体のシリコン(Si)、シリコンカーバイド(SiC)、III-V族化合物半導体、層状物質半導体の硫化モリブデン(MoS2)等の活性サイトになる不純物の構造を光電子ホログラフィー等の本領域の評価手法を用いて明らかにし、デバイス高性能化のプロセス技術を提案することを目的としている。Si中にドープした不純物の砒素(As)では、前年度に光電子ホログラフィー法により三種類の異なる化学結合状態を持つAs原子のそれぞれの三次元的な原子配列構造を決めることに成功したのを受け、今年度は熱処理条件の異なる状況での構造解析と電気的活性化との関係で知見を得た。具体的には熱的非平衡度の高いフラッシュランプアニール(FLA)法を用いて活性化し、その後長時間アニールで状況が変化する様子を捉えた。FLAでは長時間アニールとは異なる構造のAsクラスターの形成が示唆され、また、FLAプロセス後の長時間アニールで活性状態から不活性状態に遷移する際にも特定のクラスター構造に変化することがわかった。SiCでは、MOSデバイスに重要なSiCと酸化膜界面に窒素(N)原子を導入して界面の電気的特性を向上させるプロセス技術において、N原子の置換位置を光電子ホログラフィー法で明らかにし、結晶面方位との関係も含めて、界面特性を向上させるプロセスの機構の理解が進んだ。MoS2の薄膜の特性制御の研究では、高純度スパッタ法の成膜技術を進化させた。光電子分光スペクトルに現れる微細構造の解析検討を進めた結果、フォノンと価電子帯との特徴的な相互作用が新たに見出され、さらにこれが膜中に含まれる酸化Moに起因することが明らかになった。これらの微視的な知見を取り込みながら成膜の高品質化が進み、集積型の電界効果トランジスタの動作にも成功した。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。半導体デバイスの将来の更なる高性能化に必要な高濃度不純物の高い活性化率を得る技術は重要である。Siをはじめとする各種半導体中のドープされた不純物の原子レベルの配置やクラスター構造について原子ホログラフィーの手法を用いてそれらの三次元(3D)構造を観測することを目的として初年度の研究を進めた。まず、シリコン(Si)中に高濃度ドープされた不純物のボロン(B)に対し、大型放射光施設Spring-8のBL25SUビームラインにおいてエネルギー分解能の高い新たな分析システムを用いて2次元の光電子回折を測定した。Bの構造の違いを反映する約1eVの光電子スペクトルの化学シフトが充分識別できる状態で、結晶SiからのSi 2p光電子回折が明瞭に得られた。同時に測定したBからのB 1s光電子の回折像も取得でき、何らかの構造に帰因すると考えられる光電子強度の角度依存性が確認できた。現在、解析方法の検討を進めており、今後、B原子周りの具体的な構造の知見を得ることが期待できる。光電子ホログラフィーと合わせて、不純物の電気的活性化と不純物の3D構造の対応関係を明確にするため、ごく表面付近の不純物の活性化を評価する手法の開発も進めた。ホール効果測定で高感度・高精度にキャリア濃度を測定できる環境を整えたとともに、角度分解光電子分光法で価電子帯の分散の評価からキャリアが空乏化するごく表面の活性不純物の濃度プロファイルを推定する手法もほぼ確立できた。Si以外では、二硫化モリブデン(MoS2)の層状物質の電気伝導制御性と不純物サイトの関係を明らかにする研究を進めた。今年度は、高純度のMoS2薄膜をスパッタ法および化学気相成長法で形成する技術の開発にウェイトを置き、基板表面状態の最適化、S欠損の制御法について知見を得て、移動度の向上を達成し、高品質成膜の目標に確実に近づいてきている。半導体のシリコン(Si)、窒化ガリウム(GaN)、層状物質半導体の硫化モリブデン(MoS2)等の活性サイトになる不純物の構造を光電子ホログラフィー等の本領域の評価手法を用いて明らかにし、デバイス高性能化のプロセス技術を提案することを目的としている。Si中では、高濃度ドープした不純物のヒ素(As)に対して、放射光施設SPring-8の軟X線ビームの励起を用いてAs原子の内殻(As 3d)光電子回折像を得ることに成功した。Si中には、3つの異なる化学結合状態が化学シフトとして観測され、それぞれの結合エネルギーを持つAsからの光電子をエネルギー分解して対応するAsからの光電子回折像を抽出できた。最も結合エネルギーの高いAsでは、Siの単結晶で得られる回折像と同一の特徴を持つ回折像が得られ、このAsがSi結晶の格子位置を置換する位置に存在することを直接示唆する結果となった。また、最も結合エネルギーの低いAsでは、明確な回折像は現れず、こちらのAsはランダムな構造を持ってSi中に存在すると推測された。GaN中の不純物の評価の研究においては、既存の分子線エピタキシー装置にGaNのエピタキシャル成長のための窒素ラジカル源等を整備し、エピタキシャル成長による評価試料作製の準備が整った。MoS2に対しては、不純物制御の第一段階として自然混入の不純物を排除して高純度・高特性の薄膜をスパッタ法で作製することを進めた。その結果、残留不純物を約2桁低減し、電子移動度を約3倍高めることができた。一方、領域内の共同研究により結晶グレインの大きさの評価も進めた。

現状ではまだグレインサイズは原子ホログラフィーの適用には充分な大きさではないことがわかり、グレインサイズの拡大にも取り組んでいるところである。Si中の不純物からの光電子回折像が得られたことは、本研究課題の主要な目標をほぼ達成できたと言え、明確な進展と言える。この研究は、当初よりSi中の不純物としてはBを対象に行ってきた。しかし、Bの場合、その光電子スペクトルが母材結晶のSiのプラズモンロスピークとエネルギー上で重なる状況があり、そのために、Bからの光電子の回折をSiによる回折から分離して真のBからの回折像を得るのに予想以上の困難があった。それに対し、この問題を回避できるAsに観測対象を切り替えたことにより、今回の成果を得ることができた。なお、Bの場合のデータ処理法の検討は、今後、Asに対するより精度の高い議論とホログラフィーによる可視可に対しても有用な知見となるはずである。GaN、MoS2に関しては、明確な成果を得るに至っていないが、その準備研究として開始し、その範囲でそれぞれ一定の進展を得ることができた。半導体のシリコン(Si)、窒化ガリウム(GaN)、層状物質半導体の二硫化モリブデン(MoS2)等の活性サイトになる不純物の構造を光電子ホログラフィー等の本領域の評価手法を用いて明らかにし、デバイス高性能化のプロセス技術を提案することを目的としている。Si中にドープした不純物の砒素(As)では、As原子からの光電子ホログラフィーの測定実験に成功し、原子配列の再生像を得た。Asは、三種類の異なる化学結合状態を持つ状態で存在し、それぞれの状態を識別して構造解析を進めた。領域内の理論班との連携を通して、シミュレーションによる検討を進め、結合エネルギーの高い方から、それぞれSi結晶の格子置換位置の電気的に活性なAs、As原子が複数集まるクラスター構造をとって不活性化したAs、およびSiとAsの混合状態で局所的に結晶性が乱れた非晶質に近い構造をとる不活性化したAsであることを推測できた。本計画研究の目標の中で非常に重要な成果となり、現在、論文投稿中である。GaN中の不純物の評価の研究においては、分子線エピタキシーでドーピング条件の異なる評価試料を作製する準備を進めたとともに、既存のMO-CVD法によるエピタキシャル基板を用いてp型層のマグネシウム(Mg)不純物の軟X線光電子分光の予備実験を行い、ホログラフィー実験が可能である見通しを得た。MoS2の薄膜の特性制御の研究では、高純度スパッタ法の成膜に硫黄蒸気雰囲気、H2S雰囲気、還元性雰囲気での熱処理を組み合わせることで高純度化および硫黄欠損の補償によって結晶性を顕著に向上できた。その結果、光電子によるバンド分散評価が可能となり、結晶性とその特徴を捉えることにも成功した。Si中のAsでホログラフィー解析から原子配列像の再生まで成功したのは大きな成果である。原子配列像の上では、特定の近接サイトで像が消失する、あるいは像が線上に分散する等の新しい構造的特徴を見出し、それをもとにAsのクラスター構造に関する議論も進めた。時期的には当初の予定より時間的に遅くなった面はあるが、成果としては確実に進展している。領域内の理論班との連携による理論計算、シミュレーションも開始している。並行して進めているGaNやMoS2に関しては、本領域の手法を適用して直接新しい知見を得るにはまだしばらく時間がかかりそうである。しかし、それらを実現する予備実験は進んでいる。
思春期に文化間移動を行った中国帰国者のアイデンティティに関する追跡研究

本研究の目的は思春期に中国から来日した中国帰国者の来日約25年後のアイデンティティをインタビューを通じてさぐるというものである.1年目の平成21年度には4人のインフォーマント全員にインタビューを行い、その結果をすべて書き起こし、データとしてまとめた.また、参考文献の収集も行った。2年目である平成22年度は引き続き参考文献収集を行うと同時に、4人のインフォーマントのうち2名が自らの人生を振り返って書いてみたいと申し出ていたので、執筆を依頼した。そして、書かれたものは、研究の考察を行う際のデータに加えた。インタビューの結果とインフォーマントにより執筆されたものから、来日後約25年が経過しているが、中国と日本の狭間に立たされて揺れるアイデンティティを持つことがわかった。また、今回得られたデータから、4人のインフォーマントの中で比較的安定したアイデンティティを持つと思われていたものが、実はそうではないこともわかった.さらに、近年国際化が進んでいると思われがちな日本社会にはまだまだ異質なものを受け入れなけという風潮が根強く残っていることも浮き彫りになった。来日、10年、18年目、そして、今回の24年目と3回にわたって同じインフォーマントにインタビューを行ってきたが、このような長きにわたって、行われたアイデンティティをさぐる追跡研究はほかにみられないので、貴重なデータが得られたと思っている。2010年11月には多言語・多文化社会研究全国フォーラム(第4回)で研究成果を発表する機会に恵まれた。2011年2月にはすべての得られたデータを収めたデータベース的な報告書を作成した。その報告書をもとに研究論文を執筆し、2011年度には学会誌等に発表していきたいと思っている。交付申請書に記載した平成21年度の計画項目はすべて実施することができた。つまり、参考文献の収集、インタビューの項目作成と実施、関連学会、研究会への出席、アドバイスを求めるなどのことができた。最も重要な作業であるインタビューも無事に終えることができた。インタビューはすべて書き起こした。まだ、詳しい考察は行っていないのではっきりしたことはわからないが、前回の6年前の調査からインフォーマントらのアイデンティティに大きい変化があったことがわかった。4人のインフォーマントの来日は1985年で、当時、11歳14歳であった。その後、1995年、2003年と2回にわたりインタビューを行い、いずれの調査においてもそのアイデンティティに大きい変化が見ちれた。そして、今回のインタビューは来日後、24年目である。インタビュー前は、はたして前回の調査からの6年間の間に変化が見られるのか多少心配ではあったが、予想以上の変化に驚いている。2年目である平成22年度にはしっかりとした考察を行い、その成果を学会等での発表、または学会誌などへの投稿という形で伝えることができればと考えている。さらに、インタビューを続けているうちに、インフォーマントの中に、インタビューを受けるばかりではなく自分の心の変化を自分自身で書きたいというものがあらわれた。そこで、執筆依頼をすることにした。書きたいと言ったインフォーマントは非常に忙しく、執筆のためのまとまった時間がとれないとも考えられるが、インタビューからは得られない貴重なアイデンティティについての記述が得られるのではないかと期待している。
ヘテロ元素系における軌道相互作用の研究

本年度は,実施計画のテーマを遂行するかたわら,以下にのべるヘテロ元素系の軌道相互作用に関係する生物有機化学関連テーマをとりあげ,論文にまとめた.1)カルボニル還元の面選択性に関する理論モデルの構築.この問題に関しては,従来さまざまな説が提出されているが(Felkin-Anh Model,Cieplak Modelなど),多くの問題点が残されている.この反応の面選択性の本質がLUMOのエクステリア領域における広がりにあると仮定し,カルボニル面の上下で別々にその広がりを定量的に評価するプログラムを作成して計算したところ,ほとんど例外なく実験事実を説明することができJ.Am.Chem.Soc.に再投稿中.2)16族元素が関与する弱い相互作用の研究.X...H-Y(X=O,S,Se,Te;Y=O,C)系の水素結合,およびSe...Nの非結合性相互作用の性質について分光学的検討を行った.OHと高周期16族元素との水素結合は,意外にもOH...Oより少し弱い程度であった.この研究のなかでC-H...Se水素結合を初めて見い出し,水素結合に軌道相互作用が重要であることが判明した(速報としてJ.Am.Chem.Soc.に近々掲載予定).Se...N非結合性相互作用についても,軌道相互作用が重要であることがわかり,本論文としてJ.Am.Chem.Soc.に投稿中.3)グルタチオンペルオキシダーゼ作用機構のモデル研究グルタチオンペルオキシダーゼは活性酸素の還元無毒化触媒を行う極めて重要な酵素であり,活性中心にセレン原子を含み,窒素原子がその周囲に近接している.この近接窒素の役割を活性中心を模倣するモデル化合物を設計合成し,その触媒機構と近接窒素の役割を明らかにした.Se...N非結合性相互作用において,軌道相互作用が重要であることがわかり,本論文としてJ.Am.Chem.Soc.に近々掲載予定である.本年度は,実施計画のテーマを遂行するかたわら,以下にのべるヘテロ元素系の軌道相互作用に関係する生物有機化学関連テーマをとりあげ,論文にまとめた.1)カルボニル還元の面選択性に関する理論モデルの構築.この問題に関しては,従来さまざまな説が提出されているが(Felkin-Anh Model,Cieplak Modelなど),多くの問題点が残されている.この反応の面選択性の本質がLUMOのエクステリア領域における広がりにあると仮定し,カルボニル面の上下で別々にその広がりを定量的に評価するプログラムを作成して計算したところ,ほとんど例外なく実験事実を説明することができJ.Am.Chem.Soc.に再投稿中.2)16族元素が関与する弱い相互作用の研究.X...H-Y(X=O,S,Se,Te;Y=O,C)系の水素結合,およびSe...Nの非結合性相互作用の性質について分光学的検討を行った.OHと高周期16族元素との水素結合は,意外にもOH...Oより少し弱い程度であった.この研究のなかでC-H...Se水素結合を初めて見い出し,水素結合に軌道相互作用が重要であることが判明した(速報としてJ.Am.Chem.Soc.に近々掲載予定).Se...N非結合性相互作用についても,軌道相互作用が重要であることがわかり,本論文としてJ.Am.Chem.Soc.に投稿中.3)グルタチオンペルオキシダーゼ作用機構のモデル研究グルタチオンペルオキシダーゼは活性酸素の還元無毒化触媒を行う極めて重要な酵素であり,活性中心にセレン原子を含み,窒素原子がその周囲に近接している.この近接窒素の役割を活性中心を模倣するモデル化合物を設計合成し,その触媒機構と近接窒素の役割を明らかにした.Se...N非結合性相互作用において,軌道相互作用が重要であることがわかり,本論文としてJ.Am.Chem.Soc.に近々掲載予定である.本研究では、ヘテロ元素系における軌道相互作用機構について,実験と理論の両面から第二周期元素系における軌道相互作用との相違点を明かにし,新しい有機化学概念を構築する。具体的には、ケイ素,ゲルマニウム、スズ,硫黄,セレン,テルルの6元素を中心に、これらの官能基が示す性質を,適当なモデル系を用いて定量的に評価する。本年度はエポキシシランの2分子求核置換反応の位置選択性の異常性について、分子軌道法及びエクステリア電子密度解析による理論研究を中心に研究を進めるかたわら、これらの研究に必要なコンピュ-タ-プログラムを作成した。アルキル置換エポキシドのSn2反応は,置換基のない炭素(Cー1)で選択的に起こるが,エポキシシランでは,置換基の立体障害に拘らず,Cー1で起こることが知られている。これは,有機化学で良く知られている「Sn2反応は立体障害に敏感である」という基礎概念に反する実験事実であり,フロンティア軌道論では説明不可能な現象として有名である。この現象を解明するため、分子表面(van der Waals面)の外部の最低空軌道(LUMO)の波動関数の広がり(エクステリア電子密度;エクステリアとはvan der Waals球によって近似的に分けられる分子の外側を意味する)を高精度の非経験的分子軌道法で計算したところ,この特異な位置選択性の本質が,ケイ素官能基が関与する軌道相互作用にあることが判明した。これは,化学反応の初期過程において,反応物質間の,分子表面からしみだした波動関数の重なりが重要であることを,はじめて裏付けた例である。

この研究をすすめる傍ら、世界初の試みとして、エクステリア電子密度を3次元空間分割し、反応の遷移状態と立体選択性との関連を明かにするためのプログラム、および精度の高いスレ-タ-軌道を用いた軌道相互作用を定量的に解析するためのプログラム、の2つの開発をすすめている。本研究では、ヘテロ元素系における軌道相互作用機構について、実験と理論の両面から第二周期元素系における軌道相互作用との相違点を明かにし、新しい有機化学概念を構築する。具体的には、ケイ素、ゲルマニウム、スズ、硫黄、セレン、テルルの6元素を中心に、これらの官能基が示す性質を、適当なモデル系を用いて定量的に評価する。本年度は環式ケトンのヒドリド還元における面選択性について、分子軌道法及びエクステリアフロンティア電子広がりモデルを新たに構築し、理論研究を中心に研究を進めるかたわら、これらの研究に必要なコンピュータープログラムを作成した。シクロヘキサノンの還元はアキシャル攻撃が圧倒的に優先することが知られている。この選択性については、これまで種々のモデルが提出されているが、今回、分子表面(van der Waals面)の外部の最低空軌道(LUMO)の波動関数の広がりによって定量的に解釈できることがわかったので、このモデル(エクステリアフロンティア電子広がりモデル)をさまざまなヘテロ原子置換シクロヘキサノン系に適用してみた。その結果、環の立体配座が還元の面選択性を支配しているという意外な事実が判明した。すなわち、LUMOの歪み(カルボニル面上下の軌道の広がりの差)が6員環の微妙な形に支配され、この歪みが面選択性を支配していることがわかった。これは活性化エネルギーの低い化学反応では、反応物質の、分子表面からしみだした波動関数の重なりが面選択性に重要であること示している。本年度は、この研究をすすめる傍ら、エクステリア電子密度を3次元空間分割し、反応の遷移状態と立体選択性との関連を明かにするためのプログラム、および精度の高いスレーター軌道を用いた軌道相互作用を定量的に解析するためのプログラム、の2つの開発を完成させ、研究に利用している。本年度は,実施計画のテーマを遂行するかたわら,以下にのべるヘテロ元素系の軌道相互作用に関係する生物有機化学関連テーマをとりあげ,論文にまとめた.1)カルボニル還元の面選択性に関する理論モデルの構築.この問題に関しては,従来さまざまな説が提出されているが(Felkin-Anh Model,Cieplak Modelなど),多くの問題点が残されている.この反応の面選択性の本質がLUMOのエクステリア領域における広がりにあると仮定し,カルボニル面の上下で別々にその広がりを定量的に評価するプログラムを作成して計算したところ,ほとんど例外なく実験事実を説明することができJ.Am.Chem.Soc.に再投稿中.2)16族元素が関与する弱い相互作用の研究.X...H-Y(X=O,S,Se,Te;Y=O,C)系の水素結合,およびSe...Nの非結合性相互作用の性質について分光学的検討を行った.OHと高周期16族元素との水素結合は,意外にもOH...Oより少し弱い程度であった.
植物性エストロゲン様物質が霊長類の神経内分泌機構に及ぼす影響

いわゆる「環境ホルモン」、内分泌撹乱物質による生殖能力や次世代への影響は、人類を含めた数多くの生物の存続を危ぶむ問題であり、基礎的な研究の必要性が高まっている。これらの原因として考えられているものは主に人工の化学物質であるが、これ以外にも約20種類の植物由来のエストロジェン様物質(Phytoestrogen)がその作用を持つといわれている。本研究は、内分泌撹乱物質の影響が強く現れると考えられる胎児期、乳児期に着目し、遺伝学的にヒトに最も近いサルを用いて、これらの植物由来のエストロジェン様物質が、サル胎児、成長期や性成熟過程へ及ぼす影響等、生殖内分泌系に及ぼす影響を、発生生物学的、内分泌学的、行動学的に調べ、ヒトへの影響を推察することを目的とする。本年度は、正常性周期をもつカニクイザルに植物由来のエストロジェン様物質の一種であるダイゼインを1ヶ月間連続投与した。これらのサルにおいて、投与前、投与中、投与後、経時的に採尿をおこない、ステロイドホルモンの代謝産物である尿中estoronestrone conjugate(E1C), pregnandiol glucuronide(PdG)および尿中follicle stimulating hormone(FSH)について酵素免疫測定法を用いて測定し、性周期の変化およびホルモン量の変化を調べた。また、月経周期および量についても観察を行った。その結果、生殖関連ホルモン動態の変化や月経周期の遅延、卵胞期の延長、LHサージの抑制等が観察された。これらにより、ダイゼイン投与後、これらのサルは言わば発情持続状態となり、排卵が抑制されることが示唆された。これとは別に非妊娠カニクイザル5頭にジェニステイン5mgを月経初日から30日間経口投与し、尿中E1C, PdG, FSHを酵素免疫測定法により測定した。その結果、ジェニステイン投与により、カニクイザルの性周期が延長すること、とくに黄体期が延長することが分かった。これらの結果は、サルにおける内分泌攪乱物質の性周期や胎児への関与をについて興味深い展開であると考えられる。まもなくジェニステインを投与した妊娠ザルが出産を迎えることから、その新生児を用いて行動学的、分子生理学的な解析を進めたい。
ボンドエンジニアリングによる「ぬれ層の物理」構築

量子論的アプローチにより,GaAs(001)上のInA-(2×3)ぬれ層を中心に,成長条件である温度,分子線圧力を考慮した,表面構造ならびに吸着・脱離を含む成長過程について検討した。その結果,従来安定と考えられていたぬれ層表面構造である(2x3)表面は成長条件下で不安定であること,(2x3)表面上ではInAs成長は進行しないことを明らかにした。これは,In原子の吸着によって生じる,表面での大きなひずみに起因すると考えられる。このひずみを緩和するために,ダイマー欠損を有する(4x3)表面が出現し,In-Asダイマー形成,Asダイマー脱離を繰り返すことで成長が進行することを見いだした。今年度は,格子不整合InAs(001)/GaAs(001)系におけるInAs(001)ぬれ層表面の内,InAs成長に伴う(n×3)表面から(2×4)表面への変化に焦点を絞って理論検討を行った。研究実績の概要は以下の通りである。・InAs(001)-(n×3)ぬれ層表面での吸着・脱離:InAs成長に不可欠なIn原子吸着をn=2, 4, 6, 8の表面上で温度とIn分子線圧力の関数として検討を行った。その結果,成長条件下でAsダイマー欠損が存在しない(2×3)表面にはIn原子は吸着し得ないこと,Asダイマー欠損を有する(n×3)表面構造(n=4, 6, 8)上でのみIn原子が吸着することを明らかにした。これは実際の成長過程においては平成24年度に明らかにしたAsダイマー欠損を有する(6×3)および(8×3)が安定であることを支持する結果である。・InAs(001)-(n×3)表面から(2×4)表面への変化を解明するために,さらなるIn原子およびAs分子の吸着・脱離を温度とInならびにAs分子線圧力の関数として検討を行った。計算結果は,Asダイマー欠損を有する(n×3)表面構造(n=4, 6, 8)上でさえもさらなるIn原子の吸着は困難であること,As表面ダイマーがIn-Asダイマーに変化することでInAs成長を継続することを明らかにした。以上の結果は,前年度明らかにしたAsダイマー欠損を有する(n×3)表面構造の出現のみならず,In原子取り込みにおいても通常の格子整合系の成長過程と異なる「ぬれ層固有の現象」が存在することを示唆するものと考えられる。今年度は,格子不整合InAs/GaAs(001)系におけるInAs(001)ぬれ層表面の内,特に詳細が不明な(nx3)表面に焦点を絞って理論検討を行った。・InAs(001)-(2x4)ぬれ層表面構造:基板表面であるGaAs(001)-c(4x4)α上に1.2-1.4分子層のInAsを供給することで,ぬれ層の終状態としてInAs(001)-(2x4)表面が出現することが実験的に知られている。この(2x4)表面構造の詳細を温度とAs分子線圧力の関数として検討し,一般的な成長温度700-750 Kにおいて2個のAsダイマーから成る(2x4)α2表面が安定であることを明らかにした。・成長過程でのInAs(001)ぬれ層表面構造:上記の結果に基づき,InAs供給に伴う表面構造変化について検討を行った。その結果,GaAs(001)-c(4x4)α表面に0.63分子層のInAsを供給することでInAs(001)-(2x3)表面へ,さらに0.71分子層の供給により(2x4)α2表面へと変化することを見いだした。すなわち終状態としての(2x4)α2表面は計1.34分子層の供給により出形成される。これは,1.2-1.4分子層という実験結果と定量的に一致する。ただその過程において,0.19分子層相当のAs脱離が生じることが重要である。・InAs(001)-(nx3)ぬれ層表面構造:上記のAs脱離と表面構造の関係を解明するために,(2x3)表面を含む(nx3)表面(n=2, 4, 6, 8)の相対的安定性について温度とAs分子線圧力の関数として検討を行った。その結果,成長条件下では一部の表面Asダイマーが脱離した(6x3),(8x3)表面が安定であることを明らかにした。これは(2x3)表面を欠損ダイマーを含む(nx3)表面とするSTM観察と一致する結果である。前年度に格子不整合InAs/GaAs(001)系における

従来の(2x3)表面上にはIn吸着ひいてはInAs成長が起こりえないことを指摘するとともに,Asダイマー欠損を有する(nx3)表面(n=4, 6, 8)が安定かつIn-Asダイマー形成を通してInAs成長が進行する可能性を明らかにした。この知見に基づき今年度は,InAs(001)-(2x3)ぬれ層表面での成長過程を中心に検討を行った。研究実績の概要は以下の通りである。(1)安定な表面は電子計数モデル(ECM)が成立するAsダイマー欠損を含む(8×3)表面と考えられ,そのAsダイマー欠損領域にIn原子が優先的に吸着する。(2) Asダイマー欠損領域に吸着したIn原子は引き続くAs原子の吸着によりIn-Asダイマーを形成する。(3)その後,In-Asダイマーに隣接するAsダイマーの脱離が生じ,再び(2)と(3)の過程が繰り返されることで,最終的に(8×3)表面は1つのダイマー欠損と3つのIn-Asダイマーから成る(4×3)表面に変化する。(4) (4×3)表面ではAsダイマー欠損領域が存在することでIn原子は吸着するが,その結果生じるひずみを緩和するために,さらに隣接するAsダイマーが脱離して行く。以上の結果から,GaAs上のInAs(001)ぬれ層表面における成長は,InAs層形成に伴う大きなひずみを緩和するように,表面原子配列そのものをその都度変化させながら進行していると結論づけることができる。またGaAs上のInAs量子ドット核分布が,(n×3)ぬれ層領域と(2×4)ぬれ層領域の分布と密接な関係があることが実験的に報告されており,(4×3)表面から(2×4)表面へ変化して行く過程でのひずみ緩和と表面原子再配列の解明が量子ドット形成を考える上で重要と考えられる。工学本研究では,InAs/GaAs(001)系を対象にその「ぬれ層」に注目し,量子ドット形成に至るぬれ層固有の現象を解明することを目的としている。平成24年度には始状態であるGaAs(001)-(4×4)α表面から中間状態であるInAs(001)-(n×3)ぬれ層表面までの変化を検討し,Asダイマー欠損を有する(n×3)表面が安定であるということを見いだした。引き続く平成25年度は,InAs成長に伴う(n×3)ぬれ層表面から(2×4)ぬれ層表面への変化について検討し,In取り込みが格子整合系での成長過程と異なり表面AsダイマーがIn-Asダイマーに変化することで進行することを明らかにした。これらの相次ぐ新たな発見は,本研究の狙いとする,格子不整合系での「ぬれ層固有の現象」そのものであることに加えて,平成26年度に検討予定であるぬれ層表面でのInAs量子ドット形成過程検討の基盤となるものであり,本研究の順調な進展を示すものである。本研究では,InAs/GaAs(001)系を対象にその「ぬれ層」に注目し,表面構造変化を基板温度,分子線圧力のみならず,膜厚の関数として検討することで,ぬれ層表面形成,その後の界面転位形成,ひずみ緩和後の表面でのナノ構造形成との関連も含めて系統的な検討を行うことを目的としている。今年度は膜厚に対応するInAs分子層厚の増加に伴い出現する安定なInAsぬれ層表面構造を,基板温度,分子線圧力の関数として決定してきた。その結果,始状態であるGaAs(001)-c(4x4)α構造からInAs(001)-(nx3)構造を経由してInAs(001)-(2x4)α2構造が出現することを明らかにした。さらに,その過程においてAs脱離が生じており,(2x3)表面を含む(nx3)表面の安定化に重要な役割を果たしていることを見いだした。これらの知見は,次年度以降検討予定である,ぬれ層表面上のIn原子,As分子の吸着・脱離検討の基盤となるものであり,本研究の順調な進展を示すものと判断できる。
栄養源認識と有性生殖開始をつなぐシグナル伝達経路の解析

本研究では、栄養源認識と有性生殖開始をつなぐシグナル伝達経路の分子機構の解明を目標として、分裂酵母を用いて、真核生物に広く保存されたTORキナーゼ経路の解析を進めている。本研究で、TORC1が有性生殖開始に関わる転写因子Ste11をリン酸化することを見出したので、平成29年度はこれをまとめて論文に発表した。また、平成28年度に引き続き、tor2変異株と同様に栄養源が豊富な環境でも有性生殖を開始してしまうhmt (hyper mating and temperature sensitive)変異株の解析を行った。hmt変異株の原因遺伝子の多くがtRNA関連因子だったことから、窒素源枯渇時のシグナル伝達経路にtRNAが重要な役割を担っている可能性を考えて、研究を進めた。平成28年度に、tRNA前駆体の発現量が窒素源枯渇30分後に大きく減少することを見出したので、平成29年度は、さらに詳細にtRNA前駆体の発現量の変化を調べた。その結果、窒素源枯渇後短時間でtRNA前駆体の発現量が減少しだすこと、さらに、窒素源を再添加すると、速やかに窒素源枯渇前の発現量に戻ることが確認できた。また、hmt変異株でも、tRNA前駆体の発現量が減少していた。さらに、Tor2とtRNA前駆体の遺伝学的な上下関係を調べた。tor2変異株にtRNA前駆体を過剰発現してもtor2変異株の接合亢進の表現型は抑圧されなかったのに対し、hmt変異株に活性化型tor2を過剰発現すると、接合亢進の表現型が抑圧された。また、hmt変異株にtRNA前駆体を過剰発現すると、部分的にではあるが接合亢進の表現型が抑圧されることもわかった。以上の結果より、窒素源に応答して有性生殖開始を制御するTORC1の活性調節においてtRNA前駆体が重要な働きをしていることが明らかになったので、これらを論文にまとめて発表した。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。これまでの研究で、TORの変異株(tor2変異株)と同様に栄養源が豊富な環境でも有性生殖を開始してしまう変異株を複数取得していた。これらの変異株をhmt (hyper mating and temperature sensitive)変異株と名付けて解析を行った。hmt変異株でTOR複合体1 (TORC1)経路の活性化状態を見るために、TORC1依存的にリン酸化されるAtg13とPsk1のリン酸化状態を調べたところ、hmt10以外のhmt変異株では、Atg13とPsk1のリン酸化が低下していた。hmt変異株であるアスパラギニルtRNA合成酵素変異株(hmt1)、プロリルtRNA合成酵素変異株(hmt3)、RNAポリメラーゼIIIサブユニットrpc34変異株(hmt7)にtor2を過剰発現させると、制限温度下における接合率が著しく低下した。また、アスパラギニルtRNA合成酵素などの複数のアミノアシルtRNA合成酵素がTORC1と結合していることも確認した。hmt変異株の原因遺伝子の多くがtRNA関連因子だったことから、窒素源枯渇時のシグナル伝達経路にtRNA自体が重要な役割を担っている可能性が出てきた。窒素源枯渇時にtRNAの量に変化が起きているか検討するために定量RT-PCRを行ったところ、アスパラギンtRNAなどのtRNAで窒素源枯渇時の発現量が低下していた。これまでに、TORC1が有性生殖開始に関わる転写因子Ste11をリン酸化することを確認していた。in vitrokinase assayにより、TORC1のSte11によるリン酸化部位を決定した。申請書に記載したアミノアシルtRNA合成酵素とTORC1との関係を検討する解析、栄養源枯渇時のtRNA量の変化の観察、TORC1の新規標的因子Ste11の解析に関しては、ほぼ計画通りに推進することができた。hmt10以外のhmt変異株では、TORC1の活性状態が低下していることが明らかになった。このことから、hmt10以外のhmt変異株の原因遺伝子として特定されたtRNA関連因子は、TORC1経路の上流に存在し、TORC1の活性化に関与していると考えられた。hmt変異株にtor2を過剰発現させると、接合率が低下したことから、遺伝学的にもこれらの因子がTORC1経路の上流に存在する可能性が示唆された。栄養源枯渇時のtRNA量の変化に関しては、定量RT-PCRにより半数以上のtRNAで発現量が低下しているという興味深い結果が得られた。またtRNA配列を多コピーベクターにクローニングすることができた。TORC1の新規標的因子Ste11は、TORC1によって2カ所リン酸化されることが明らかとなった。この部位をアラニンに置換した非リン酸化型の分裂酵母変異株を作製し、現在表現型の観察を進めている。転写因子Ste11以外のTORC1の新規標的の候補となる因子群の組換えタンパク質については、現在作製途中である。また、TORC1構成因子の組換えタンパク質についても作製途中である。TORC1によるSte11のリン酸化部位を決定する解析が順調に進んだため、今年度はそちらを優先して行った。

本研究では、栄養源認識と有性生殖開始をつなぐシグナル伝達経路の分子機構の解明を目標として、分裂酵母を用いて、真核生物に広く保存されたTORキナーゼ経路の解析を進めている。これまでに、有性生殖開始に関わる転写因子Ste11が、Tor2キナーゼによって2カ所リン酸化されることを明らかにしている。この部位をアラニン置換した非リン酸化型の分裂酵母変異株を作製し、Ste11の局在や接合率を野生型株と比較したが、大きな差異は見つからなかった。これまでの研究で、Tor2キナーゼの変異株と同様に、栄養源が豊富な環境でも有性生殖を開始してしまう変異株を複数取得していた。これらの変異株をhmt (hyper mating and temperature sensitive)変異株と名付けて解析を行っている。hmt変異株の原因遺伝子の多くがtRNA関連因子だったことから、窒素源枯渇時のシグナル伝達経路にtRNA自体が重要な役割を担っている可能性が出てきた。窒素源枯渇時にtRNAの量に変化が起きているか検討するために、いくつかのtRNAの発現量の変化をノザンブロットにより調べたところ、tRNAの前駆体の発現量が、窒素源枯渇後に大きく減少していることがわかった。さらに、窒素源枯渇時のtRNA前駆体量の減少におけるTor2キナーゼの関与を検討するため、窒素源枯渇時でも活性の低下が見られない活性化型tor2変異体株を用いて観察を行った。その結果、活性化型tor2変異体株でも野生型株と同様に、窒素源枯渇時のtRNA前駆体の発現量の減少が見られることが明らかとなった。よって、この現象がTor2の上流で起きていることが強く示唆される。さらに、前駆体tRNAを過剰発現した分裂酵母細胞では、窒素源枯渇時のTor2キナーゼの不活性化が阻害されており、有性生殖開始も抑圧されていることがわかった。本年度は、第二子出産による産休、育児休暇取得、また復帰後も授乳に通いながら実験を行っているために、全ての実験を計画通りに進めることができなかった。Ste11がTor2キナーゼによるリン酸化によってどのような制御を受けているのか、非リン酸化型の表現型の観察からは明らかにすることができなかった。また、Ste11以外の新規標的因子の探索、および、Tor2キナーゼから構成されるTOR複合体1(TORC1)活性を持つ最小単位の複合体の構築等に関しての実験は、当初の計画通りには進めることができなかった。tRNAとTOR経路の解析に関しては、tRNA前駆体が窒素源認識機構の一員としてTORC1の上流で働いているという当初想定していなかった結果が得られたので、現在これらの結果をまとめた論文の投稿にむけて作業を進めている。本研究で、TORC1が有性生殖開始に関わる転写因子Ste11をリン酸化することを見出したので、平成29年度はこれをまとめて論文に発表した。また、平成28年度に引き続き、tor2変異株と同様に栄養源が豊富な環境でも有性生殖を開始してしまうhmt (hyper mating and temperature sensitive)変異株の解析を行った。