hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
遺伝性嚢胞腎マウスにおける腎嚢胞進行過程に関与する変更遺伝子の探求

ヒト多発性嚢胞腎症モデルであるDBA/2FG-pcyコンジェニック系統とC57BL/6FG-pcyコンジェニック系統を用いて、F_1動物およびB・C動物を作製し、生後60日齢にて剖検した。F_1動物では全てC57BL/6-pcy(B6-pcy)タイプと同様の腎組織像を呈した。さらに、F2動物およびBC1動物においても同様の手法において検索し、腎組織像に若干の変更を観察することができた。P世代、F_1およびF_2世代、さらには、BC1およびBC2世代の個々の肝臓は-20°Cデプリーザによる凍結保存を行い、PCRサンプリング用とした。最近Wooらは、野生マウスM.m.cateneusを用いた解析から、pcy遺伝子によって発症する嚢胞腎症の進行を調節する修飾遺伝子Mop-1およびMop-2の存在を示唆した。そこで、先の交配から得られたBC1世代マウスのDNAと、Mop-1とMop-2が存在する、マウス第4と第16番染色体上のマーカーを反応させ、得られたPCR産物のマイクロサテライト多型解析を用いて分析した。結論としては、マウス多発性嚢胞腎症遺伝子であるpcyは、第9番染色体上に位置することを再度確認した。しかし、嚢胞腎症の進行あるいは修飾する遺伝子が、今回検索した第4と第16番染色体上に存在するプライマーとの連鎖は認められなかった(投稿準備中)。研究の最終目標であるpcy遺伝子と有するリコンビナントコンジェニック(RC)系統による解析については、現状兄妹交配F1516代目を順調に経過しており、特集計画立案中。ヒト嚢胞腎症モデルであるDBA/2FG-pcyコンジェニック系統とC57BL/6FG-pcyコンジェニック系統を用いて、F_1を作製し、生後60日齢にて剖検した。F_1動物では全てがC57BL/6-pcy(B6-pcy)ダイプと同様の嚢胞腎像を呈した。また、F_2動物およびBC1動物においても同様の手法において検索し、嚢胞腎像に若干の変異が観察できた。現在、本研究の目的を達成するため、BC2動物より、兄妹交配を開始し、リコンビナントコンジェニック(RC)系統を育成中である。本科学研究費補助金により、本年度にPCR用サーマルサイクラ-を購入することが出来た。本研究に用いたP代、F_1動代、F_2代、BC1代、BC2代の肝臓は全て-20°Cデプフリーザ-に凍結保存したことから、PCRが本格的に作動した時点において、PCRを行い遺伝解析を実施する。本研究の完遂にはさらに45年間を用するが、この研究期間において、嚢胞腎の進行速度を左右する修飾遺伝子の存在を証明することが出来ると確信する。この修飾遺伝子を追求することにおいて、ヒト嚢胞腎症の進行を抑えることにより、治療に大いに貢献すると考える。ヒト多発性嚢胞腎症モデルであるDBA/_2FG-Pcyコンジェニック系統とC57BL/_6FG-Pcyコンジェニック系統を用いて,F_1動物およびB.C動物を作製し,生後60日齢にて剖検した。F_1動物では全てC57BL/_6-Pcy(B_6-Pcy)タイプと同様の腎組織像を呈した。また、F_2動物およびBC1動物においても同様の手法において検索し、腎組織像に若干の変異を観察することができた。P世代、F_1およびF_2世代,さらにBC1世代およびBC2世代の個々の肝臓は,-20°Cデプリーザーによる凍結保存を行い,PCRサンプリング用試料とした。マウス染色体のNo.4とNo.10のプライマーが準備できたので,電気泳動による遺伝解析を実施したところ,NO.14に候補遺伝子が存在する示唆が得られた(投稿準備中)。

他の染色体については,NO.10以外実施していないので不明であるが,今後プライマーを充実させて,実施しているつもりである。本研究の最終目標はpcy遺伝子を有するリコンビナント・コンジェニック系統(RC系統)の育成とそれらを利用して詳しい変更遺伝子の探求にある。したがって,本研究の完遂には更に45年間を必要とするが,途中経過とその結果について公表し,実績を積み上げていく。ヒト多発性嚢胞腎症モデルであるDBA/2FG-pcyコンジェニック系統とC57BL/6FG-pcyコンジェニック系統を用いて、F1動物およびB.C動物を作製し、生後60日齢にて剖検した。F1動物では全てC57BL/6-pcy(B6-pcy)タイプと同様の腎組織像を呈した。さらに、F2動物およびBC1動物においても同様の手法において、検索し、腎組織像に若干の変異を観察することができた。P世代、F1およひF2世代、さらにはBC1およびBC2世代の個々の肝臓は-20°Cデプリーザによる凍結保存を行い、PCRサンプリング用とした。最近Wooらは、野生マウスM.m.castaneusを用いた解析から、pcy遺伝子によって発症する嚢胞腎症の進行を調節する修飾遺伝子MOP-1およびMOP-2の存在を示唆した。そこで先の交配から得られたBC1世代マウスのDNAと、MOP-1とMOP-2が存在する、マウス第4と第16番染色体上のマーカーを反応させ、得られたPCR産物のマイクロサテラィト多型解析を用いて分析した。結論としては、マウス多発性嚢胞腎症遺伝子であるpcyは、第9番染色体上に位置することを再度確認した。しかし、嚢胞腎症の進行あるいは修飾する遺伝子が、今回検索した第4と第16番染色体上に存在するプライマーとの連鎖は認められなかった(投稿準備中)。研究の最終目標であるpcy遺伝子を有するリコービナントコンジェニック(RC)系統による解析については、現在兄妹交配F1516代目を順調に進行している。
慢性腎臓病進行の機序

糖尿病や腎炎等により腎臓の働きが失われる時、たこ足細胞と呼ばれる独特な細胞が傷害され、それをきっかけに腎臓全体へと傷害が拡大してゆく。腎臓は多種類の細胞から構成されるが、本研究において、たこ足細胞特異的な遺伝子発現変化を網羅的に解析する方法を確立した。また腎傷害時は、腎臓内に血圧を上昇させるホルモンであるアンジオテンシンが増加し、さらに腎傷害を助長させている可能性がある。本研究で、たこ足細胞が傷害されると、アンジオテンシンの元になる蛋白質が尿中へ漏出し、それが腎臓で再吸収されて、アンジオテンシンに変換される事を明らかにした。以上の知見は、慢性腎臟病進行機序の解明に大きな寄与をなすものである。腎臓内Angiotensin IIの産生機序に関して、我々は、肝臓で合成されたagiotensinogenが、糸球体で濾過され、尿細管にmegalinにより再吸収され、Angiotensin IIに変換されるという仮説を抱いている。その検証のために、まず信頼のおけるAngiotensin IIの測定系の確立に努めた。肝臓のangiotensinogenのノックアウトにより、腎臓内レニン活性が著増するが、そのため試験管内でrenin活性が残存し、不安定な測定結果をもたらすと推察された。そこで試験管内reninを不活化するようにAngiotensin IIの抽出方法を改良した。また体全体でangiotensinogenがノックアウトされたマウスの腎臓を用いて、抗体の特異性を検証した。その結果、市販抗体は特異性に問題があり、香川医大で作成された抗体は特異的である事が確認された。このようにして確立されたangiotensin IIの測定系を用いて、現在、肝臓特異的angiotensinogenノックアウトマウス、腎臓特異的ノックアウトマウス、肝腎両ノックアウトマウスの、腎臓内Angiotensin IIの測定を行っている。現在までの結果は、肝臓由来angiotensinogenが腎臓のAngiotensin IIに重要であるという事を示唆している。また、ポドサイト傷害後の糸球体内遺伝子発現の研究に関して、ポドサイト傷害3時間後の糸球体RNAのアレイ実験を行ない、より早期から変動する遺伝子群の検出を行った。腎臓内Angiotensin(A)IIの産生機序を明らかにするために、肝臓または腎臓選択的angiotensinogen(Agt)ノックアウト(KO)マウスの腎臓内AIIを測定した。その結果、腎臓Agt KOマウスの腎臓内AIIは低下せず、肝臓Agt KOマウスの腎臓内AIIは著減している事がわかった。またポドサイト傷害モデルマウスNEP25では、腎臓内のAgtとAIIが増加していた。また、NEP25マウスにポドサイト傷害を誘導した後に、片方の尿管を結紮し閉塞させると、閉塞側腎臓では腎臓内AgtとAIIが低下していた。これらの結果と、以前のmegalin KOマウスの解析から、以下のような事が明らかとなった。1)肝臓は血漿Agtの主要な源である。2)血漿Agtの一部は、正常糸球体で濾過され、近位曲尿細管でmegalinに依存して再吸収される。3)近位直尿細管は、多量のAgt mRNAを合成しているが、これに由来するAgt蛋白質は、直ちに尿中に排泄され、腎臓内に留まらない。4)腎臓内AIIは、肝臓で合成されたAgtに由来する。5)ポドサイトの傷害により濾過バリアが破綻した状態では、Agt蛋白質の尿細管腔への漏出が増加し、腎臓内AIIが増加する。つまり、腎臓内AIIの産生は、レニンのみならず、基質Agtの供給によって調節され、後者は糸球体濾過バリアの健全性に依存している。6)肝臓Agt遺伝子は、血圧の維持や正常腎臓構造の維持に重要であるが、近位直尿細管のAgtはこれらに寄与せずその機能は不明である。ポドサイト傷害により増加した腎臓内AIIは、ネフローゼ症候群時の腎臓でのNa再吸収に関与する可能性があり、また糸球体毛細血管内圧の上昇を介してポドサイト傷害を加速させ、悪循環的に腎傷害を加速させる可能性が考えられる。我々は、肝臓で産生された血漿中のangiotensinogen (Agt)が、糸球体で濾過されて、腎臓内でAngiotensin (A)IIに変換されるのではないかと考えている。今年度は、ポドサイト傷害時に、この仮説を実証した論文を作成した。さらに、腎臓内で転写されるAgtの役割を調べるために、腎Agt KOマウスのRNA arrayを行って、Abca1遺伝子が低下している事を見いだした。

しかし、これはCreによる影響で、Agtは何ら関与していなかった。他に有意に変動する遺伝子は確認されなかったので、腎Agtはこの方法で検出できるほど大きな働きはしていない事が示唆された。次の問題は、糸球体で濾過されたAgtがAIIに変換されるのに、megalinが必要か否かである。このために、尿細管のほとんどのmegalinを欠損するマウスを作成し、ポドサイト傷害を誘導した。Megalin KOにより、免疫染色では尿細管細胞へ再吸収されたAgtは著明に減少したが、Western解析では腎臓Agt蛋白質はかなり残存し、尿細管腔中の円柱にAgtが含まれる可能性が示唆された。AIIの測定は、測定系に特異性の問題が発生し、実施できなかった。一方、もう一つの計画である糸球体内ポドサイト傷害の拡大機序の研究に関しては、2つの技術的進展があった。1つは、Ribotagマウスを利用して、ポドサイトのリボゾーム結合RNAを採取する事が可能になった事である。もう一つは、糸球体細胞を分離する事が可能になった事である。我々は、肝臓で合成されたangiotensinogenが、糸球体で濾過され、尿細管に再吸収され、それが腎臓内angiotensin IIの源泉になるという仮説を抱いている。前年度に、臓器特異的angiotensinogenノックアウトマウスを用いて、蛋白尿がない状態では、腎臓ではなく肝臓のangiotensinogenが腎臓内angiotensin IIに重要である事を証明した。今年度は、蛋白尿が存在する状態での腎臓内angiotensin IIの産生機序を解析した。この状態では、濾過される肝臓由来血漿angiotensinogenが著増するとともに、同時に腎臓内angiotensinogen mRNAの合成が増加するが、後者はまったく腎臓内angiotensin IIに影響を与えず、もっぱら前者によってのみ決定されている事がわかった。また、蛋白尿に加えて、高血圧状態の腎臓内angiotensin II産生の研究を行った。従来は、angiotensin IIにより腎臓内angiotensinogenの転写が亢進し、内因性の腎臓内angiotensin IIが増加すると報告されてきた。我々は、臓器特異的angiotensinogenノックアウトマウスを用いて検証したところ、従来の報告とは異なり、専ら肝臓由来のangiotensinogenが基質として使用されている事がわかった。ポドサイト傷害後の糸球体内遺伝子発現の研究に関して、観察された変動がポドサイト内で起こっているかどうか見るには、新たな技術の導入が不可欠と考え、Ribotagマウスを導入した。1.腎臓内Angiotensin (A)IIの起源:RIAによるAIIの測定に関して、特異性に問題があった。この技術上の問題は、Dr.DJ Campbellの協力を得て解決した。改善した測定法を用い、尿管閉塞により、ポドサイト傷害で誘導される腎内AIIの増加が抑止される事を示し、論文化した。尿細管細胞のmegalinによるAgtの取り込みが、AII産生に関与するかどうかを検証した。蛋白尿がない状態では、megalinは腎内AIIには影響を与えない事を示した。蛋白尿がある状態での評価は、現時点で実験の継続中である。2.糸球体内ポドサイト傷害の拡大機序:RIBOTAGマウスを利用して、ポドサイト特異的RNAを採取した。
核融合炉ブランケットにおけるトリチウム挙動解明

核融合炉固体と液体ブランケットで、定常運転維持に必要な実質TBR>1構築と核融合炉全体のトリチウム漏洩許容率達成のため、B1班では化学工学的立場から、ブランケット中トリチウム掃出、パージガスからの回収実証、流動現象の精密予測をおこない、B2班では材料科学的立場から、ブランケット組成変更に伴うTBRの改善、構造材料の腐食防止策検討、トリチウム透過阻止率を1/1000以下にする。本B3班では上記研究効率化のため、定期的検討会開催とともに、研究遂行支援をおこなった。(1)核融合炉成立のため、核融合炉プラズマコア内で燃料トリチウムを消費しつつ、同量以上のトリチウムをブランケットで安全かつ経済的に製造、回収するとともに、決められた量以下に透過漏洩を抑える必要がある。本特定領域調整班は、現在計画されるITER-TBMの先を見越し先進ブランケット概念について、社会が要求する100万分の1程度のトリチウム漏洩率/発生率比を、経済性を損なうことなく達成することを目標にする。それには、基礎物理・化学現象の把握と解明および、材料工学とプロセス工学の手法による新規プロセス開発が必要であり、大学、研究所のトリチウム専門家からなる計画研究班を構成し、実験・解析的研究を推進し、目標達成する。(2)対象ブランケット材料の研究段階や研究手法にあわせて、それぞれ大学-原子力研究開発機構-核融合研間の共同研究に基づく以下の計画研究班を構成し、研究を遂行中である。・B01班:核融合炉ブランケット材中のトリチウム輸送挙動解明と新規回収プロセス開発の研究・B02班:核融合炉ブランケット材料中のトリチウム-材料相互作用に関する研究核融合炉固体と液体ブランケットで、定常運転維持に必要な実質TBR>1構築と核融合炉全体のトリチウム漏洩許容率達成のため、B1班では化学工学的立場から、ブランケット中トリチウム掃出、パージガスからの回収実証、流動現象の精密予測をおこない、B2班では材料科学的立場から、ブランケット組成変更に伴うTBRの改善、構造材料の腐食防止策検討、トリチウム透過阻止率を1/1000以下にする。核融合炉ブランケットは、プラズマ炉心内で反応する重水素とトリチウムから発生した中性子から、ブランケットに挿入したリチウム増殖材でトリチウム増殖させる他、トリチウムと同時に発生する熱の回収、核反応で生じるγ線防護の重要な役割をはたすべく設計されなければならず、核融合と社会との重要な接点になっている。ブランケット内で発生するごく微量のトリチウムを実効トリチウム増殖率1.05で増殖するためには、発生したトリチウムを99.9%以上の回収率で、金属壁を透過しやすい性質を持つトリチウム透過を通常の1/1000まで減衰させる防止膜の開発など多くの課題を達成して始めて、一ブランケットとしての機能が達成できる。本特定領域「核融合トリチウム」のブランケット研究班では、この目標達成のため、ブランケットートリチウム研究を二つの班に分け、B1班でシステム工学的な観点で、トリチウム移行挙動をマクロな物質収支とミクロな吸着、反応、同位体交換の速度式で解析し、原子炉照射で発生するトリチウム移行挙動の実験結果と比較検討した。特定領域研究初年度は、班内の九大とJAEAのグループによる研究討論会を開催するとともに、ミクロなトリチウムー材料相互作用を検討するB2班との合同検討会を開催し、問題点の抽出、現状技術の共有、目標達成のための新規課題の抽出などの検討をおこなった。B2班での研究項目は、固体リチウム酸化物の酸素不定比性安定化の実験研究、LiやFlibe液体増殖材の東大炉での照射実験によるトリチウム放出挙動実験とトリチウム漏洩阻止膜の実験検討であり、合同検討会で各性能について検討された。さらに、他のA班の炉心トリチウム挙動研究グループおよび、C班の炉外トリチウム挙動研究グループとの共同検討会(10月、2月、3月)を共催し、核融合炉トリチウム移行挙動把握と効果的トリチウム回収についての検討をおこなった。ブランケット内で発生するごく微量のトリチウムを実効トリチウム増殖率1.05で増殖するためには、発生したトリチウムを99.9%以上の回収率で、金属壁を透過しやすい性質を持つトリチウム透過を通常の1/1000まで減衰させる防止膜の開発など多くの課題を達成して始めて、ブランケットとしての機能が達成できる。本特定領域「核融合トリチウム」のブランケット研究班では、この目標達成のため、ブランケット-トリチウム研究を二つの班に分け、B1班でシステム工学的な観点で、トリチウム移行挙動をマクロな物質収支とミクロな吸着、反応、同位体交換の速度式で解析し、原子炉照射で発生するトリチウム移行挙動の実験結果と比較検討した。特定領域研究2年度は、班内の九大とJAEAのグループによる研究討論会を開催するとともに、ミクロなトリチウム-材料相互作用を検討するB2班との合同検討会を開催し、問題点の抽出、現状技術の共有、目標達成のための新規課題の抽出などの検討をおこなった。

B2班での研究項目は、固体リチウム酸化物の酸素不定比性安定化の実験研究、LiやFlibe液体増殖材の東大炉での照射実験によるトリチウム放出挙動実験とトリチウム漏洩阻止膜の実験検討であり、合同検討会で各性能について検討された。さらに、他のA班の炉心トリチウム挙動研究グループおよび、C班の炉外トリチウム挙動研究グループとの共同検討会(10月、2月、3月)を共催し、核融合炉トリチウム移行挙動把握と効果的トリチウム回収についての検討をおこなった。特定領域研究「核融合トリチウム」では核融合炉燃焼維持のため、燃料であるガス状放射性同位体トリチウムの安全かつ確実な取扱・閉込・回収技術確立を達成するため構成されている。特に本研究課題のB班は、ブランケット内で発生するごく微量トリチウムを実効トリチウム増殖率1.05で増殖回収し、発生トリチウムの99.9%以上の回収率、トリチウム透過を通常の1/1000まで減衰させる防止膜の開発を達成することを目標に、ブランケット研究をこなっている。この目標達成のため、ブランケットートリチウム研究を二つの班に分け、B1班でシステム工学的な観点から、トリチウム移行挙動をマクロな物質収支とミクロな吸着、反応、同位体交換の速度式で解析し、原子炉照射で発生するトリチウム移行挙動の実験結果と比較検討した。具体的成果として、固体ブランケット可視化モジュールを製作し、内部状況のミクロ観察に成功し、新規電気化学的方法によるトリチウム高回収に成功した。またF82H構造材やPd-Ag膜のトリチウム透過漏洩率の評価、液体ブランケット(LiやLi_<17>Pb_<83>)流動状態でのトリチウム回収の実証とトリチウム透過漏洩の実験的検証を果たした。B2班では、固体ブランケット燃焼安定化のため酸素不定比性Li_2TiO_3材料の試作実証に成功し、Er_2O_3の液体ブランケット材との共存性がよい高機能トリチウム透過抑制膜の製作と抑制効果実証に成功した。さらにLiやFlibeの構造材料腐食の評価とトリチウム吸着脱離の効果を調べる事に成功し、ミクロ相互作用の解明に成功した。成果は、原子力学会や核融合の国際学会で発表された。2009年度内において、A班プラズマ炉心トリチウム挙動研究グループとC班炉外トリチウム挙動研究グループと合同研究会を2009年度5月透過抑制、8月中間評価、3月若手交流会と的を絞った研究会を共催し、研究のさらなる進展を計った。特定領域「核融合トリチウム」では、定常核融合炉を安全かつ安定に運転するため、燃料トリチウムを150g/GWay(5.6x10^<16>Bq/GWday)回収・精製・貯蔵・注入し、施設からのトリチウム漏洩を国の安全基準を満足するように運転する必要がある.そのため回収率99,9%以上、漏洩阻止率1/1000以下の技術目標達成のため、ブランケット-トリチウム研究をシステム研究領域班B1と材料研究領域B2班で分け、本B3調整班を組織し緊密な関係で研究を実行して来た.現在最も実現性が高く、世界的にもITER-TBMとして集約されるブランケット概念として固体酸化物Li_2TiO_3-水冷却方式、液体金属LiPb-He冷却方式、あるいは液体Flibe-He冷却方式を想定し、各概念で達成が必要な要素研究に集約して実験解析研究をおこなった。
複合現実型視覚刺激が及ぼす触印象に関する研究

視覚的な複合現実感(Mixed Reality; MR)技術を利用し,物体の表面に実際の物体の外観とは異なるCG画像を重畳描画することで,触力覚にどのような影響を及ぼすのか研究を行った.具体的には,研究代表者らが発見した,「Shape-COG Illusion」および「Dent-Softness Illusion」という,視覚刺激が触力覚感覚に影響を与える錯覚現象について,どのような条件下で発生するのかや,これらの現象の絶対閾・弁別閾などを実験により明した.視覚的な複合現実感(Mixed Reality; MR)技術を利用し,物体の表面に実際の物体の外観とは異なるCG画像を重畳描画することで,触力覚にどのような影響を及ぼすのか研究を行った.具体的には,研究代表者らが発見した,「Shape-COG Illusion」および「Dent-Softness Illusion」という,視覚刺激が触力覚感覚に影響を与える錯覚現象について,どのような条件下で発生するのかや,これらの現象の絶対閾・弁別閾などを実験により明した.●研究項目(A):重心位置知覚の錯覚現象(Shape-COG Illusion)に関する課題に関して(1)実物体に明らかに異なる形状のCG画像を重畳描画することで,重心知覚にどのような影響を与えるか系統的な実験を行った.その結果,CG画像の形状によっては,重心位置の知覚に錯覚現象(Shape-COG Illusion)が生じることが確認した.(2)様々な重さの錘を利用し,実物体の重さを変化させた場合の影響について実験・分析を行った.その結果,実物体が重くなるほど,MR型視覚刺激による重心知覚への影響は大きくなることが分かった.(3)仮想物体の体積の違いによって起こるSize-Weight IllusionがShape-COG Illusionに与える影響を調べるために,同一の重さの実物体に対して体積の異なる仮想物体を重畳描画し,その際に知覚された重心位置を観察した.その結果,仮想物体の体積の変化もMR型視覚刺激を提示した際の重心知覚に影響を与えることが分かった.(1)MR環境における実物体の外観の変化が,硬さ知覚に与える影響について実験を行った.その結果,提示するCGアニメーションを変えることで,硬さ知覚に錯覚現象(Dent-Softness Illusion)が生じることが確認できた.(2)MR型視覚刺激を変化させた際の硬さ知覚の弁別閾や,実物体の硬さよりも視覚刺激の方が優位に影響する場合があることを確認した.●研究項目(A):重心位置知覚の錯覚現象(Shape-COG Illusion)に関する課題に関して人は対象を見ることで,対象への触り方,対象の動かし方そのものを無意識に変化させている.そこで,「Shape-COG Illusion」が起こる場合,起こらない場合で,人がどの様に腕を動かしているのか確認した.具体的には,体験者の前腕に加速度センサ,筋電位センサを装着させ,Shape-COG Illusionが起こる場合,起こらない場合それぞれについて,対象をふる動作を計測したが,加速度,筋電位に顕著な違いは見られなかった.一方,剛体の実物体に対して,重畳描画する仮想物体を剛体ではなく可動物体(具体的には,容器の中に水が入っている様子を模したCG映像,実物体の揺れに同期して水が揺れる)として実験してみたところ,同じ実物体を振っているにも関わらず,仮想物体が可動の場合の方が,物体をより軽く知覚するという現象を発見した.この現象についても,体験者の前腕に加速度センサと筋電位センサを取り付け,計測を行ったところ,こちらは可動物体のCGを重畳描画する場合と,剛体のCGを重畳描画する場合で,加速度と筋電位の関係に違いが見られた.「Dent-Softness Illusion」が起こる場合,起こらない場合それぞれで,人の手・指の動きを計測したが,動き自体に顕著な違いは見られなかった.●研究項目(A):重心位置知覚の錯覚現象(Shape-COG Illusion)に関する課題に関して1.様々な長さ,重さを有する棒状の実物体に対して,重畳描画するCG画像の長さを様々に変化させることで,重心知覚にどのような影響を与えるかをより詳細に実験した.その結果,単純な外観の仮想物体であってもShape-COG Illusionが発生すること,実物体よりも仮想物体が長い場合,仮想物体が遠くなるにつれ,知覚される重心位置も遠くなるが,更に仮想物体が長くなると,その変化量は徐々に小さくなり,知覚される重心位置の変化は収束すること,実物体よりも仮想物体が短い場合,仮想物体が短くなるにつれ,知覚される重心位置が近くなるが,更に仮想物体が短くなると,その変化量は徐々に小さくなった後,知覚される重心位置は実物体の重心位置に近づくことが分かった.2. VR環境下でもShape-COG Illusionが発生することを確認した.1. MR環境における実物体の外観の変化が,硬さ知覚に与える影響について実験を行った.物体を押し込む体の部位を,これまでは指だけで行っていたのに対して,掌全体や腕で押し込んだ場合に,Dent-Softness Illusionがどのように変化するかを確認し,その絶対閾・弁別閾を測定することで押し込む部位による影響と傾向を確認した.その結果,指で押し込んだ場合がもっとも影響が大きく,掌全体,腕と徐々に影響が小さくなることを確認した.

2. VR環境下でもDent-Softness Illusionが発生することを確認した.前年度に,剛体の実物体に対して,重畳描画する仮想物体を剛体ではなく可動物体(具体的には,容器の中に水が入っている様子を模したCG映像,実物体の揺れに同期して水が揺れる)として実験してみたところ,同じ実物体を振っているにも関わらず,仮想物体が可動の場合の方が,物体をより軽く知覚するという現象を発見したが,仮想物体の内部に固体の球を提示した場合にも同様の結果が観察された.また,実物体の内部に実際に水を封入した場合についても実験を行ったところ,実際に水が入っている場合についても,重畳描画する仮想物体の運動状態によって,物体の重さが違うように感じることを確認した.これまで指先を対象に「Dent-Softness Illusion」の検証を行ってきたが,腕や足など,他の部位に提示した場合についても解析を行った.その結果,指ほど顕著ではないものの,同現象が腕や足でも起こることを確認した.3.研究項目(C):技術展示用アプリケーションの制作各研究課題で得られた知見を多くの人に体験・理解してもらうため,でもシステムを実装し,Asia Haptic 2014,日本バーチャルリアリティ学会大会などで展示を行った.26年度が最終年度であるため、記入しない。ヒューマンインタフェース,複合現実感26年度が最終年度であるため、記入しない。研究項目(A)(B)ともに,交付申請書に記載した実験を実施し,錯覚現象の発生条件の確認を行った.よって順調に進展していると考える.研究項目(A)について,当初予定していた実験に加えて,仮想物体として剛体ではなく,可動物体を表示する実験を実施し,興味深い知見が得られたため.研究項目(A)(B)ともに,引き続き交付申請書に記載した実験を実施し,錯覚現象の発生条件の確認を行った.よって順調に進展していると考える.引き続き,「Shape-COG Illusion」に影響すると考えられるその他の要因を各種変化させた場合に,この錯覚現象が発生するのかを確認する.また,VR環境下でも同現象が発生するか確認する.物体を押し込む体の部位を,これまでは指だけで行っていたのに対して,掌全体や腕のように変化させた場合に,「Dent-Softness Illusion」がどのように変化するかを確認し,その絶対閾・弁別閾を測定することで押し込む部位による影響と傾向を確認する.また,VR環境下でも同現象が発生するか確認する.重心位置が可動な場合の検証:これまでの実験では,対象物を剛体として実験を行ってきたが,本年度は仮想物体のみ内部を可動な物体とし,実物体と仮想物体の異なる運動状態が,力覚を通して実物体の運動近くにどのような影響を及ぼすのか検証する.指先以外の部位での検証:これまで指先を対象に「Dent-Softness Illusion」の検証を行ってきたが,腕や足など,他の部位に提示した場合についても解析を行う.人は対象を見ることで,対象への触り方,対象の動かし方そのものを無意識に変化させている.そこで,「Shape-COG Illusion」が起こる場合,起こらない場合で,人がどの様に腕を動かしているのかを計測し,物体の振り方に違いがあるか解析を行う.同様に,「Dent-Softness Illusion」が起こる場合,起こらない場合それぞれで,人がどの様に手・指を動かしているのかを計測し,物体の押し方,力の入れ方に違いがあるか解析を行う.
TRPチャネルをターゲットとする天然物リガンドのマルチモーダル活性化機構

TRPチャネルは細胞内外の環境変化を感知して細胞内シグナルに変換する分子センサーとして働くため、様々な創薬ターゲットとして期待されている。ヒトには27種類ものTRPチャネル種が存在するが、それらが別々に、異なる刺激に対して応答するため、様々な疾患発症治療の鍵因子となっている。電子顕微鏡解析と計算に基づく単粒子解析法を主な解析技術として、TRPチャネルと天然物リガンドの複合体構造解析を推進した。結合動態の詳細な可視化を行い、多彩な天然物リガンドに応答するTRPチャネルのマルチシグナル活性化機構の解明研究を行った。領域内の上杉らのグループと協力して、ワサビ成分の受容体であるTRPA1受容体について共同研究を遂行し、負染色電子顕微鏡画像から得られたTRPA1の構造に対し、TRPA1に特異的に作用する新規リガンドの結合可視化を行った。電子顕微鏡解析から得られた結合ドメインは、生化学実験の結果ともよく一致しており、両データを合わせることで結果の信憑性を高めることができた。成果をJACS誌に報告した。またNMRを主たる解析手法として用いている高橋らのグループとの領域内共同研究では、界面活性剤に可溶化した1回膜貫通型タンパク質C99と可溶化された脂質2重膜をMSPが取り囲んで安定化させたNLPの電顕解析を行った。結果を日本薬学会で報告した。これらの領域内連携を通じて、新しい研究分野の開拓に努めた。分子ラベリング技術の開発では、電子顕微鏡解析には金粒子ラベル法が一般に用いられるが、特異抗体Fabや小分子化されたアビジン分子を用いて、画像処理上で結合した小分子を提示する方法の検討を行った。また本技術の普及を目的に広く研究者が目を通す科学雑誌に概説を記し、さらに新たに本分野を目指す研究者を対象に、英文での入門書の執筆を行った。27年度が最終年度であるため、記入しない。電子顕微鏡解析と計算に基づく単粒子解析法を主な解析技術として、TRPチャネルと天然物リガンドの複合体構造解析を推進する。結合動態の詳細な可視化を行い、多彩な天然物リガンドに応答するTRPチャネルのマルチシグナル活性化機構の解明を目指している。負染色電子顕微鏡画像から再構成したTRPA1の構造に対し、TRPA1に特異的に作用する新規リガンドの結合可視化を行った(領域研究者との共同研究)。TRPA1チャネルは他にもわさび成分のアリルイソチオシアネートや、カフェイン、プロスタグランジンJ2、分子状酸素、赤外線、17度以下の低温刺激など様々な刺激に応じて開口する。これら多彩な刺激がどのような機構で同一のチャネルを活性化させるかの理解を目指し、マルチシグナル活性化機構を探る。また細胞内の活性酸素受容に働くことが明らかになりつつあるTRPM2チャンネルに関しても解析を進めており。STEM顕微鏡を用いた複合体分子量の絶対量定量やクライオ試料からの構造解析を行った。電子顕微鏡解析には金粒子ラベル法が一般に用いられるが、特異抗体Fabや小分子化されたアビジン分子を用いて、画像処理上で結合した小分子を提示する方法も検討し、他の膜蛋白質複合体の解析にも用いた。更に本技術を脂質二重膜を介したタンパク質輸送に働く、Secトランスロコン複合体の解析に用いて、その構成因子であるSecDF膜タンパク質のペプチド膜に伴って起こる構造変化を分子レベルで示し、論文化した(J Struct Funct Genomics, 5, 117, 2014)。また本技術の普及を目的に広く研究者が目を通す科学雑誌に概説を記した(実験医学、32,540,2014)。

また本技術の普及を目的に広く研究者が目を通す科学雑誌に概説を記し、さらに新たに本分野を目指す研究者を対象に、英文での入門書の執筆を行った。当初ターゲットとしてたTRPA1のみならず、細胞内の活性酸素受容に働くことが明らかになりつつあるTRPM2の分子構造解析も進んでおり、論文化を進めている。また領域内共同研究を通じて、新規アゴニストの結合様態を分子レベルで示すことにも成功し、計画に対しておおむね順調に進んでいる。27年度が最終年度であるため、記入しない。TRPA1とTRPM2に対しては、構造解析を更に進めることによりより高分解能の構造を導き出す。またリガンド結合の可視化に関しては、抗体、タグ、金粒子標識を活用して、更に多くの種類のリガンド結合の可視化を試み、普遍的な技術としての確立を図る。領域内の他の研究者との協力を引き続き推進し、電子顕微鏡技術の更なる拡充を図る。
T細胞におけるHIVの遺伝子発現制御因子の研究

Tリンパ球細胞に潜伏感染しているHIVの転写がある種の刺激により活性化されると、ウイルス産生、AIDS発症に至る。したがってこの転写誘導に関与する転写因子を解析し、メカニズムを理解することはAIDS発症を抑制するために有用であると考えられている。転写因子のうちもっとも重要なものはHIVエンハンサーに結合するNF-kBであり、その活性はTPAなどにより促進される。私達はHIVエンハンサーに結合する別の転写因子をcDNAクローニングにより同定し、HIV-EPと名付けた。HIV-EP遺伝子ファミリーは1,2,3,の3つのメンバーから成り、いずれもメタルフィンガー構造を含む約250kDの蛋白質である。現在までのところHIV-EPが明らかに転写活性化能を持つ知見は得られておらず、HIV-EPはNF-kBと拮抗するリプレッサーである可能性が示唆される。
南アフリカにおける新憲法への移行過程の研究

この研究は:南アフリカ共和国の1993年に制定された暫定憲法から、1996年に制定された現在の新憲法までの憲法事情の研究であった。南アフリカ共和国は1994年4月に暫定憲法にもとづいて、制憲議会の総選挙が行われた。この選挙は南アフリカで、アフリカ人を含む全人種による初めての選挙であった。そして結果はネルソンマンデラが大統領となり、アフリカ人主導の新憲法制定の作業が始まることとなった。暫定憲法の制定にあっても民主南ア会議(CODESA)に、さらにこの会議を引きついだ複数政党会議に、政府、政党、団体が参加して、人種協調の憲法制定に努力した。この暫定憲法制定のときの精神は制憲議会において新憲法草案づくりの過程においても引きつがれた。1999年にはこの新憲法のもとで初めての総選挙と大統領選挙が行われることになっている。この選挙が南アフリカの21世紀に向けての発展の始まりとなるかどうかは、政治経済の安定とともに、アパルトヘイト体制時代の徹底した解消をその内容とした、新憲法体制の安定と確立が最重要の課題であろう。本研究はこのような将来の南アフリカの状況も考慮に入れながら、暫定憲法制定から新憲法制定までの体制移行の過程について研究したものであった。本年度の研究は、1994年に行われた総選挙後、成立した制憲議会を中心とした、憲法草案づくりの経過について考承した。その中で1995年11月に中間報告的に議会が発表した、憲法草案について、1994年の暫定憲法と比較しながら、その分析を行った。憲法草案は14章182カ条で構成されており、まだ随所にoptionがあり、流動的な条項も多い。しかし暫定憲法から継承されている部分も多く、大筋では新憲法の骨組みがきまった草案ということができる。制憲議会の総選挙でANCが単独で憲法制定のできる議席数に達していなかったので、1983年の白人政権下の憲法の影響をうけた暫定憲法を大巾に修正する草案づくりが難しいということであろう。このように大きな変革はないが、考えてみると、そのことが南アフリカの今後の人種協調社会を建設していくには、ある程度貢献することになるのではないかとも考えられる。それでも、現実の南アの社会は、アフリカ人失業率がきわめて高かく、折角変楊した総選挙のときのアフリカ人の新時代への期待が、失望に変わることになると、新憲法の制定にも大きな障害となりかねないのである。本年度はこのような南アの政治・社会の動向をみながら、草案の分析を行ってきた。本年度は、昨年四月に発足した新国会に中に設置された憲法草案作成の各種委員会によって憲法草案が完成し、新国会に提出され、11月に可決した。ところが憲法裁判所が部分的に無効の判決をしたため、再度国会で審議がなされて、12月に再提出可決された。最終的には1997年2月の国会において正式に大統領により報告され、公布される。この一連の憲法制定の経過を追跡するのが本年度の研究の主たる作業であった。そして、さらに作成された草案の内容と最終的に承認された新憲法の内容との比較検討も重要な作業であった。それに加えて、草案作成作業にあたった、国会内に設置された国会議員で構成する各種委員会の活動状況をみることも研究の対象であった。この研究には国会で発行されてきたconstitutional talkという新聞がきわめて参考となった。本研究の初年度は1994年に行われた総選挙後に成立した制憲議会を中心とした憲法草案づくりの経過について考察した。その中で1995年11月に中間報告的に議会が発表した憲法草案について、1994年の暫定憲法と比較しながら、その分析を行った。憲法草案は14章182ヶ条で構成されており、まだ随所にoptionがあり、流動的な条項も多かった。しかし暫定憲法から継承されている部分も多く、大筋は新憲法の骨組みがきまった草案ということができる。第二年度に入ってからの研究は、中間報告として議会が発表した草案が1996年11月に正式の憲法として議会によって可決されて、1997年2月に公布されるまでの経過について考察した。

この手続中に重要であったことは11月に議会が可決後、憲法裁判所が部分的に無効判決をしたことであった。このため再度国会で審議がなされ、12月に再提出可決された。最終的には、1997年2月の国会において正式に大統領により報告され、公布された。このような一連の憲法制定の経過を追跡するのが、この2年間の研究の主たる作業であった。第三年度には、このような作業に関連して、草案作成にあたった国会内に設置された国会議員で構成する各種委員会の活動状況を分析した。そしてさらに、新憲法が実際に制定されてから以降、マンデラ大統領のもとで、人種協調社会を建設するための新憲法の役割、効果について考察をすすめた。
ナラ類集団枯死被害に関与する養菌性キクイムシとその共生菌の分子生物学的研究

病原菌の形態および遺伝的差異:基準種5菌株と各被害地から収集した菌株の形態学的・遺伝学的特徴を検討した。基準種の分生胞子の大きさは1.8-3.1×3.3-8.1μm、21菌株では1.4-5.4×3.0-10.3μmであった。リボソームDNAの5.8S領域を含むITS2領域(以下、5.8S-ITS2領域)、28S領域のD1/D2領域の遺伝解析を行い、被害地から収集された菌株の形態的、遺伝的特徴は、基準種と極めて類似しており、本被害地の被害木から優占的に検出される菌は同一種であると考えられた。DNA解析に供試するRaffaelea quercivora菌株を増やして、核リボソームDNAのITS領域のRFLP解析を継続した結果、日本各地で発生している本被害には、R.quercivoraが関与していることが遺伝的に示唆された。ブナ科樹種間の感受性の差異:感受性の異なるブナ科4樹種に対しR.quercivoraを接種し、菌糸の動態と防御反応を比較した。その結果、樹種間で感受性に差異が存在した。樹種間の感受性の差異は、変色域の接線方向への拡大と非通水域の形成範囲と強い相関があった。カシナガの遺伝的性質の地域間差異:和歌山県産のカシノナガキクイムシについて、形態的特異性を定量的に明らかにした。そして、和歌山と京都の個体群間における交配実験を行い、異なる個体群間の組合せでも、相互に交配相手として受容できるが、同じ個体群間の組合せよりも繁殖成績は悪く、卵が艀化したことを示した。形態的特異性が認められる和歌山県産のカシノナガキクイムシと京都個体群との交配実験を行い、成虫の体サイズと坑道形成が繁殖成功に与える影響を検討した。ナラ類集団枯損被害地域1府15県から分離されたRaffaelea quercivora 90菌株の同一性を明らかにするため,簡易な解析手法を検討した。まず培地上での菌糸成長速度,菌糸伸長量,菌叢タイプの形態的特徴を比較し,地域間での違いを検討した。その結果,日本海側の被害地域から分離された菌株の菌糸伸長量は,紀伊半島地域のものより有意に速く,菌叢タイプも多様であることが明らかになった。このことは,R.quercivoraの多様な生育特性,地域間の種間変異や種内変異が存在する可能性を示唆するものと考えられた。各地域でカシノナガキクイムシの被害木を採集し,羽化した成虫の形態的変異を調べた。京都府および和歌山県産については,丸太および人工飼料を用いた飼育を行い,両地域の雌雄を交換した場合の繁殖可能性も検討した。また,比較のため,カシノナガキクイムシと同所的に生息する近縁種のヨシブエナガキクイムシに関しても,人工飼育を試みた。さらに,カシノナガキクイムシと類似した被害や生態を示す,甲虫類の調査や実験を行った。Raffaelea quercivoraの基準種5菌株(MAFF410918、MAFF410919、MAFF410920、MAFF410921、MAFF410922)とナラ類集団枯死被害が発生した各被害地から収集した21菌株の形態学的・遺伝学的特徴を検討した。基準種の分生胞子の大きさは1.8-3.1×3.3-8.1□m、21菌株では1.4-5.4×3.0-10.3□mであった。

リボソームDNAの5.8S領域を含むITS2領域(以下、5.8S-ITS2領域)、28S領域のD1/D2領域の遺伝解析を行い,基準種の5.8S-ITS2領域は182bp, D1/D2領域は517bpの塩基配列を解読した。基準種間の相同性は5.8S-ITS2領域が100%、D1/D2領域が98.9%であった。基準種と各被害地から収集した21菌株の5.8S-ITS2領域の相同性は98.9%から100%、D1/D2領域は99.6%から100%であった。以上より、被害地から収集された菌株の形態的、遺伝的特徴は、基準種と極めて類似しており、本被害地の被害木から優占的に検出される菌は同一種であると考えられた。和歌山県産のカシノナガキクイムシについて、形態的特異性を定量的に明らかにした。そして、和歌山と京都の個体群間における交配実験を行い、異なる個体群間の組合せでも、相互に交配相手として受容できるが、同じ個体群間の組合せよりも繁殖成績は悪く、卵が孵化したことを示した。さらに、カシノナガキクイムシの種特性を把握するための一助として、他種のキクイムシ(静岡県産、愛知県産、京都府産、沖縄産)に関しても、繁殖様式や成育温度特性などの解明を試みた。感受性の異なるブナ科4樹種に対しRaffaelea quercivoraを接種し,菌糸の動態と防御反応を比較した.その結果,菌糸の伸展はいずれの樹種も接種710日後にその速度が落ちた.スベリンの呈色反応は,アラカシで接種3日後に見られ10日後に顕著になったが,ミズナラは14日後まで部分的であった.スベリンとリグニンが堆積した組織より外側では,菌糸は観察されなかった.感受性の差異に関与する非通水域の拡大は接種14日以内であることから,菌糸は非通水域が拡大する期間に伸展し,組織内にスベリンやリグニンが堆積することによって停止すると考えられた.DNA解析に供試するRaffaelea quercivora菌株を新たに58菌株増やして、ナラ類集団枯死被害の発生する異なる地域から分離された病原菌の核リボソームDNAのITS領域のRFLP解析を継続した結果、これまでに本種の識別に有効と示唆された3種類の制限酵素(Afa I、Alu I、Bcn I)によって、いずれの菌株も過去のデータと同一のバンドパターンを示すことが明らかとなった。このことから、日本各地で発生している本被害には、R.quercivoraが関与していることが遺伝的に示唆された。また、それらの種内変異と地域間差異を明らかにするため、核rDNAのIGS領域を対象としたDNA解析方法を検討した。形態的特異性が認められる和歌山県産のカシノナガキクイムシと京都個体群との交配実験を行い、成虫の体サイズと坑道形成が繁殖成功に与える影響を検討した。また、養菌性キクイムシを生け捕りするための新しいトラップを開発し、北海道から沖縄県までの約20地点で重要な害虫ハンノキキクイムシの採集を行い、その遺伝的構造を解析し(mtDNAのCytochrome oxidase subunit I(CO I)領域を対象)、系統は大きく2クレードに大別され、北海道と本州以南で遺伝的な分化が大きいことが明らかになった。
現生の岩石穿孔性二枚貝類の貝殻形態と穿孔痕に関する生痕学的研究

1調査地および調査方法茨城県・千葉県・神奈川県の計12に及ぶ関東沿岸の岩石海岸に出向き、波打ち際を踏査し、穿孔貝を含むレキのサンプリングを行った。その後、持ち帰った資料から各種印象材の適性を確認しながら穿孔痕の雌型(cast)を作成し、貝殻形態と穿孔痕との対応関係を検討した。2調査結果(1)穿孔対象となっている硬質基層の種類岩石としては、古生界中新統の各種堆積岩や火山岩・深成岩が対象となっていた。具体的には、砂岩石灰岩、シルト岩、白色凝灰岩、安山岩、玄武岩、蛇紋岩である。一方、生物硬質基層としては、イワガキなどカキ類・ウミギクガイの貝殻、サンゴ骨格が対象となっていた。(2)確認できた岩石穿孔性二枚貝類と2次的な居住貝類カモメガイ(Rタイプ、Pタイプ、各成貝・稚貝)、ニオガイ(成貝)、ニオガイモドキ(稚貝・成貝)ヨコヤマスズガイ(稚貝・成貝)、モモガイ(成貝・稚貝)、マツカゼガイ(成貝、以下同じ)、ヤエウメノハナガイ、シオツガイ、ツクエガイが確認できた。トマヤガイなど穿孔性されていない二枚貝類が、二次的に居住しているケースが多数みられた。また、1次的な穿孔主の貝殻が残されている状態でその内側に2番目、さらに3番目の居住貝までがみられることもあった。そして、従来穿孔貝とされているヤエウメノハナガイやマツカゼガイが他種の穿孔痕に入ることがある。この2種以外の穿孔貝はそのようなことはなかった。今回、真鶴町の磯においてRタイプのカモメガイの生貝(稚貝成貝)は安山岩や軽石層由来のレキどちらからも発見できなかった。この貝の穿孔方法は依然課題のままである。(3)穿孔痕の形態穿孔痕の全体的な形態は、貝の種類ごとに異なり、貝殻の形態や穿孔方法に対応した特徴があることが確認できた。貝の種類によっては、稚貝と成貝では異なるケースもみられた。また、穿孔痕内部、特に底部に残された同心円状の擦痕bioglyphsなどの有無も観察できた。a.カモメガイ・ニオガイ・ヨコヤマスズガイ等は、大きさに違いはあるものの全体的にナス型、ないしイチジク型をしている。ただし、Rタイプのカモメガイ稚貝は成貝とは異なる貝殻形態を示し、小型の球形である。b.ニオガイモドキは、細長い棍棒状、大きく屈曲する。c.ヤエウメノハナガイは、厚みのある円盤形、周囲に縦溝がある。d.イシマテガイは、細長い砲弾型をしていて、石灰質内壁を持つ。3今回の研究の意義と主な成果、今後の課題今回の調査から、穿孔主の保存されていない穿孔痕からでも穿孔主をほぼ特定できることがつかめ、この関係は化石の場合でも応用できる見通しがついた。一方、穿孔痕内壁にみられる黒色を呈した汚れの成因は、解明できなかった。今回の研究の副次的成果として、千葉県の磯には、現生と化石、両方の穿孔痕を併せ持つレキの存在が明らかとなったので、さらに調査を継続し、学会発表までこぎつけたい。

(3)穿孔痕の形態穿孔痕の全体的な形態は、貝の種類ごとに異なり、貝殻の形態や穿孔方法に対応した特徴があることが確認できた。貝の種類によっては、稚貝と成貝では異なるケースもみられた。また、穿孔痕内部、特に底部に残された同心円状の擦痕bioglyphsなどの有無も観察できた。a.カモメガイ・ニオガイ・ヨコヤマスズガイ等は、大きさに違いはあるものの全体的にナス型、ないしイチジク型をしている。ただし、Rタイプのカモメガイ稚貝は成貝とは異なる貝殻形態を示し、小型の球形である。b.ニオガイモドキは、細長い棍棒状、大きく屈曲する。c.ヤエウメノハナガイは、厚みのある円盤形、周囲に縦溝がある。d.イシマテガイは、細長い砲弾型をしていて、石灰質内壁を持つ。3今回の研究の意義と主な成果、今後の課題今回の調査から、穿孔主の保存されていない穿孔痕からでも穿孔主をほぼ特定できることがつかめ、この関係は化石の場合でも応用できる見通しがついた。一方、穿孔痕内壁にみられる黒色を呈した汚れの成因は、解明できなかった。今回の研究の副次的成果として、千葉県の磯には、現生と化石、両方の穿孔痕を併せ持つレキの存在が明らかとなったので、さらに調査を継続し、学会発表までこぎつけたい。
「朝鮮資料」による中・近世日本語の再現

「朝鮮資料」の本文中には日本語をハングルあるいは朝鮮字音で記した箇所が多いため、朝鮮語との対照分析を通して中世から近世にかけての文法・音韻・語彙の変遷について記述した。また新資料の発掘にも努め、日本語と朝鮮語の研究資料に資するものとして、対馬の朝鮮語学習書『朝鮮語訳』、日本語通訳官・朝鮮語通事の問答集『惜陰談』、建仁寺両足院所蔵の対朝鮮外交資料などを学界に公表し、その内容を細かく分析した。本研究においては、早稲田大学服部文庫所蔵の『朝鮮語訳』について言語学的検討を行った。まずハングル表記に対する仮名転写表記を分析してから対応表を作成し、おもに母音表記の特徴を調べた。特に二重母音表記の中で、エ段で表記された例に注目した。その様相は語頭よりは非語頭に多く、意味的形態素より文法的形態素でよく現れている。二重母音に対するエ段表記は単母音化を反映する表記として認められるので、『朝鮮語訳』が成立した18世紀初期に語頭と非語頭において単母音化が起きていたと言える。また建仁寺碩学僧が作成した唱和集を分析し、その内容を通じて、碩学僧は宗教活動や外交活動のほか、文芸活動にも積極的に取り組んでいたことを確認した。唱和集は碩学僧と朝鮮通信使による文化交流の重要な一面を示すものである。両足院所蔵の詩集三編『朝鮮国三使詩集』『鮮人贈答詩』『朝鮮人紀行』を分析した結果、日朝外交の場において漢詩唱和は、主に日朝知識人の親交の手段として活用されたことが分かった。漢字文化圏の教養人に近づこうとしていた碩学僧は朝鮮通信使の漢詩を写して学習に活用していた。その過程で相手国の言語(口訣・ハングル)について関心を示すようになっていた。一方朝鮮通信使一行は、和語を韓国字音、あるいはハングルで表そうとした。これらの記録は相手国の言語を学習した根跡と見なせる。つまり、両国の知識人が互いの言語を理解しようと努力し、さらに固有語による意思疎通を図っていたと理解できる。本年度においては、まず薩摩苗代川朝鮮通事の手による『惜陰談』(1803年1854成立か)について調べた。『惜陰談』は倭館を背景に実際起こった事件を素材にして、日本通事が質問して朝鮮訳官が答える形式で構成されている。本書は『贅言試集』などの日本語問答集を朝鮮語に翻訳したもので、外交実務の内容はもちろん、私的交流の様子を観察することが可能である。学習書として『惜陰談』の役割は、まず朝鮮語を日本語に翻訳した結果を『贅言試集』の原文と対照する方式の翻訳練習書として、また朝鮮と関わる情報を収集する状況を備えた会話練習書として使われたと考えられる。これらの目的から本書は倭館に居住した朝鮮語通事、あるいは派遣予定の通事のために作成されたものと推定される。『惜陰談』は当初、対馬島の学習書として使われたが、後に薩摩苗代川に伝わり、現地の朝鮮通事によって再度写された。このように苗代川においても朝鮮語学習が盛んに行われたため、現在、苗代川を出自とする朝鮮語学習書は京都大学(20種28冊)と沈寿官家(8種17冊)に多数伝わる。しかし今まで苗代川朝鮮語学習書の系統に関しては不明な点が多く、いわゆる苗代川本は正確に分類されているとは言いにくい。本研究では筆写者の家門と出身に着目してこの問題にせまり、現地調査の際に入手した家系図と書写記の人名を根拠に、学習書の主な筆写者は苗代川朝鮮通事を歴任した朴家の二家、寿悦家と平覚家であることを確認した。なお苗代川における同一書名の学習書に違う内容が含まれる現象については、当時の朝鮮通事教育は主に家門別に行われためと解釈した。例えば沈寿官家所蔵本『交隣須知』の二本、文政本と天保本の場合、天保本は京都大学所蔵本と同様「平覚系」に、文政本は「寿悦系」に分類されるが、両者の間には日本語・朝鮮語の記述内容はもちろん、部門立てなどの形式面における相違点が多数確認される。「朝鮮資料」は原文と対訳文の関係が互いに影響を受けている相互依存的なものであること、また「朝鮮資料」の日本語と朝鮮語の中には、それぞれの言語の変遷に対応するための措置が頻繁になされていることが分かった。例えば「朝鮮資料」の否定文を一例に挙げると、朝鮮語の否定素(NEG)が用言の後に来ることが極めて多いことが分かる。当時朝鮮語の否定文には、NEGが用言の前に現れる短形と、NEGが用言の後に現れる長形が共存しており、朝鮮国内文献内での出現比率はそれぞれ半分ずつ占めている。当時日本語の否定文は専らNEGが用言の後に現れることから考えると、以上の様相は、対訳文(朝鮮語)が原文(日本語)の影響を受けた結果と判断される。