hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
チロシンリン酸化反応に基づく神経機能の解析

神経特異的に発現する新規チロシンキナーゼを、RT-PCR法を併用したdifferential screeningやinsilico screeningで探索した。その結果データベースには登録されているものの解析がまだ殆ど成されていないチロシンキナーゼ候補が見出された。この蛋白質は神経細胞死制御に関わると示唆されているチロシンキナーゼAATYK1と弱い類似性が見られた。我々はこれをBREK (Brain enriched kinase, Byk改め)と命名した。その後ホモロジー検索によりBREK2を同定した。BREK, BREK2発現プラズミドを作成した解析から、これらキナーゼは強いセリン・トレオニン活性をもちかつ弱いながらもチロシンキナーゼ活性をもつdual specificity kinaseであることが分かった。大脳皮質、嗅球で発現し生直後2週間程度はよくリン酸化されていることが分かった。またNGF刺激やホルボールエステル刺激でリン酸化されることを明らかにし、神経突起進展に関わると推定した。脳で発現するLyn, ALKチロシンキナーゼの標的蛋白質を、固相リン酸化法、酵母two-hybrid法により探索し、それぞれBANK等とSNT2を見いだした。BANKはLynとIP3Rを直結させる新規アダプター分子で、BANK/Lyn/IP3R複合体形成がLynによるIP3Rのチロシンリン酸化を誘導し、その結果チャネル活性が上昇することを見いだした。また、細胞癌化シグナルのアッセイ系を使い、ALKチロシンキナーゼがアダプター分子SNT2を用いて下流にシグナルを送っていることを示した。更にALKのリガンドを,模倣するモノクローナル抗体を作成した。またグルタミン酸受容体に会合する分子を見いだした。そのうちのひとつはPTPMEGチロシンホスファターゼであり、視床や海馬で発現し、グルダミン酸受容体のリン酸化状態に影響を与えることから、神経可塑性に関わることが示唆された。神経細胞特異的な新規チロシンキナーゼを探索するために、チロシンキナーゼのコンセンサス配列を元に4セットのオリゴヌクレオチドプライマーのペアーを作成した。今年度は、これを用いて7周令マウスの全脳細胞mRNAから作成したライブラリーcDNAsを鋳型としてPCRを行い、その産物の塩基配列を解析した。その結果、PCR増幅されたcDNAsの多くはFyn,Lyn等既知のチロシンキナーゼをコードするものであり、またMARK等の既知のセリン/トレオニンキナーゼをコードしているものであった。新規には、MAPキナーゼに類似する蛋白質をコードしている遺伝子が同定された。さらに、種々の組織でubiquitousに発現している既知のチロシンキナーゼcDNAsを、クローニング過程で除き、脳特異的チロシンキナーゼ遺伝子をより効率的に探索するために、SSH(Suppression Subtractive Hybridization)法を採用したcDNAライブラリースクリーニングを計画し、pilot実験を進めている。一方、脳で高い発現を示すSrcファミリーキナーゼやErbB2チロシンキナーゼの下流シグナル伝達系を解析するために、Lyn,Fyn,ErbB2蛋白質をバキュロウイルスを用いた系で大量発現させた。これらを用い、脳mRNA由来発現cDNAライブラリーの蛋白質フィルターを、フィルターキナーゼassayによりスクリーニングした。その結果100余りの標的候補蛋白質をコードするcDNAsをクローニングするに至り、現在それらの塩基配列解析を進めている。予備的には極めて神経細胞特異的に発現する遺伝子も見い出されている。

本研究目的は、神経シナプス間シグナル伝達に関わる可能性のあるチロシンキナーゼ、チロシンフォスファターゼ、そしてその標的分子について分子生物学を中心とした機能解析を進めることである。本年度は以下の研究を進めた。1.神経細胞で発現する未解析のチロシンキナーゼ遺伝子を、既存のデータベースをもとにin silicoスクリーニングを行って同定し、Bykと命名した。Bykは1,476アミノ酸残基からなり、2つの膜貫通ドメインを持つ受容体型チロシンキナーゼである可能性が指摘されている。系統樹の上ではチロシンキナーゼに分類されるキナーゼの中で最もセリンキナーゼに近い。Bykはノーザンハイブリダイザーションにより脳に限局して発現する。2.脳で発現の高いチロシンキナーゼLyn、Fynの下流シグナル伝達系解析のために、脳由来発現ライブラリーのフィルターキナーゼ法を用いたスクリーニングによりこれらの基質蛋白質を探索した。10数種類の標的候補蛋白質に対するcDNAを得た。得られたものの内、oligodendrocytesで発現するNOGO蛋白質とBANKについて解析を進めた。BANKはB細胞で高く発現し、抗原受容体からIP3受容体をつなぐ役割をしていることが示唆された。NOGOは神経突起の伸張を阻害する分子として知られており、チロシンリン酸化によって機能が制御されている可能性を探索している。3.NMDA受容体と会合するチロシンフォスファターゼPTPMEGを欠損するマウスを作成するために、PTPMEGゲノム遺伝子を得、ターゲティングベクターを構築した。4.受容体型チロシンキナーゼALKに対するagonisticモノクローナル抗体を作成した。それを用いて、ALKの活性化が神経突起の伸張を促すことを示唆する知見を得た。神経シナプス間シグナル伝達の分子機構の解明を目指し、チロシンリン酸化反応をに基づくシグナル伝達機構について以下の研究を行った。(1)In silicoスクリーニングにより新規チロシン候補遺伝子Byk2を見出し分子クローニングした。Byk2は神経組織特異的に発現していることをノーザンハイブリダイゼーションにより示した。またin situhybridizationによりBANKが嗅球、大脳皮質、海馬で顕著に発現していることを示した。神経細胞分化に伴ってByk2 mRNA発現が上昇することを見出している。(2)固相フィルター上でのキナーゼ反応による発現ライブラリースクリーニングで非受容体型チロシンキナーゼの標的として、B細胞特異的に発現するBANKを見出した。B細胞抗原受容体刺激に伴いBANKはSykキナーゼによりリン酸化されることを、種々のキナーゼを欠損するB細胞を用いて明らかにした。更にリン酸化BANKはN端側、C端側でそれぞれLyn, IP3受容体と会合する。この会合によりIP3受容体の機能が亢進することを示した。
ゼブラフィッシュの網膜特異的atonal遺伝子の機能と発現調節の研究

脊椎動物の網膜における神経細胞分化の誘導機構を明らかにする目的で、ゼブラフィッシュのatonal遺伝子であるath5に着目して研究をおこなった。ath5遺伝子はbasichelix-loop-helixをもつ転写因子をコードし、網膜での神経細胞において特異的に発現する。ath5発現細胞は、すべての種類の網膜神経細胞に分化することから、その発現は、網膜での神経細胞分化を表わしている。我々は、ath5の発現を指標に、その誘導のメカニズムに関して研究を行った。ath5の発現は、網膜の鼻側領域から始まり、耳側に向けて、波のように広がっていく。このことは、脊椎動物の綱膜においても、神経細胞分化は一部の領域から局所的に始まり、全体へ向かって進んでいくことを示している。我々の行った組織の除去実験や移植実験から、網膜鼻側でのath5の発現は、鼻側領域に隣接する眼柄領域からのシグナルで開始されることが明らかになった。また、綱膜耳側でのath5の発現は、鼻側の発現の有無に依存することから、ath5発現を誘導するシグナルが隣の領域に作用して、神経細胞分化を開始させるとともに、ath5発現誘導シグナルをおこすメカニズムが存在することを示唆している。このリレー機構によって、ath5の発現は鼻側から鼻側へ伝搬すると考えられる。このような神経細胞分化の伝搬機構は、ショウジョウバエの眼においても観察され、分子機構としてHedgehog(Hh)が中心的なシグナル分子として働いていることが明らかになっている。我々の研究は、分化の伝搬に関して、脊椎動物とショウジョウバエの間での相同性を示唆している。脊椎動物の網膜における神経細胞分化の誘導機構を明らかにするために、ゼブラフィッシュのatonal遺伝子に着目して研究をおこなった。この遺伝子はbasic helix-loop-helixをもつ転写因子をコードし、その発現は網膜特異的である。さらに、脊索前板を除くと、atonalの発現は消失し、網膜神経細胞分化は誘導されない。今年度は、脊索前板が網膜と直接相互作用しatona1の発現を誘導するのか明らかにするために、発現がおこる7時間前に眼杯を脊索前板から切り離し、培養したところ、atonalの発現は正常どおり観察された。このことは、脊索前板は直接眼杯へ作用するのではなく、別の組織の形成を介するリレー機構によってatonal発現を誘導する可能性を示唆する。Atonal発現は眼柄に接する網膜鼻側から始まること、眼柄の形成は脊索前板に依存することから、眼柄領域はその候補を考えられた。この可能性を検討するために、レーザー処理で、網膜と眼柄の境界を除去する実験を行った。その結果、この手術をした眼ではatonalの発現はおこないことが明らかになった。また、眼柄を移植すると、異所的に、atonal発現が誘導されることから、眼柄と網膜の相互作用によって、神経細胞分化が開始されることが示唆される。次に、この分子機構を明らかにする目的で、atonal遺伝子のエンハンサー領域の同定を行い、転写部位の5'と3'側の両方に網膜での発現を担う領域が存在することを明らかにした。また、突然変異単離にも用いる目的で、atonal遺伝子のエンハンサーを用いて網膜神経細胞でGFPを発現するトランスジェニック系統も作製した。我々は、平成11年度から、ath5の発現を指標に、その誘導のメカニズムに関して研究を行った。

このことは、脊椎動物の網膜においても、神経細胞分化は一部の領域から局所的に始まり、全体へ向かって進んでいくことを示している。我々の行った組織の除去実験や移植実験から、網膜鼻側でのath5の発現は、鼻側領域に隣接する眼柄領域からのシグナルで開始されることが明らかになった。また、網膜耳側でのath5の発現は、鼻側の発現の有無に依存することから、ath5発現を誘導するシグナルが隣の領域に作用して、神経細胞分化を開始させるとともに、ath5発現誘導シグナルをおこすメカニズムが存在することを示唆している。このリレー機構によって、ath5の発現は鼻側から耳側へ伝搬すると考えられる。このような神経細胞分化の伝搬機構は、ショウジョウバエの眼においても観察され、分子機構としてHedgehog(Hh)が中心的なシグナル分子として働いていることが明らかになっている。我々の研究は、分化の伝搬に関して、脊椎動物とショウジョウバエの間での相同性を示唆している。
帝国モデルと主権国家モデルの理論的-歴史的比較考察:超国家的連邦制の学際的研究

旧帝国の超ドイツ的性格は、ドイツの国家形成を外部に対し開放的に、内部に対し重層的に規定した点、ヴェストファーレン条約は、人的な封建団体という旧帝国の伝統的権利を再確認した点が、中世・近世期から明らかになった。他方で、旧帝国の崩壊に伴い、個別国家に取り入れられた主権国家モデルは、教会財産を没収する世俗化の過程を通じ、帝国の封建団体的性格を清算する意義を持った点、第二帝政の崩壊に伴い、連邦国家という帝国モデルの欠陥が自覚され、単一主権国家への国制改革が議論された一方で、ワイマール憲法では連邦制的構造が基本的に維持された点が、近現代期から明らかになった。本研究では、重層的な意思決定システムを取る帝国モデルと、最終決定主体が一元的に明確化した主権国家モデルという二つのモデルを理念型として設定する。そして、中世から近世を経て、近代・現代に至るドイツ史の中で、それぞれのモメントがいかなる組合せで現れるか、いかに両者の結合が変遷していくかを理論的-歴史的に比較考察し、主権国家中心の見方と異なる新たなヨーロッパ史理解、更に超国家的連邦秩序の解明に資することを研究課題とする。田口止樹は、15世紀の公会議と帝国国制に関する文献・史料を収集し、研究状况と関連史料を把握した上で、14世紀帝国国制論との比較を通じ、15世紀の展開方向を見定めるよう努めた。山本文彦は、ヴェストファーレン条約のうちオスナブリュック条約の和訳作業を進め、ヴェストファーレン条約の近年の研究動向につき調査した。また本条約に規定された内容がどう実行されたか、幾つかの事例に当たり検討した。権左武志は、19世紀初期ドイツにおける主権国家創立が、世俗化の課題に対し持った歴史的意義を、ヘーゲルの1830年度歴史哲学講義筆記録を資料として解明し、成果公表の準備を進めた。守矢健一は、2007年夏にフランクフルト大学マックスプランク研究所に短期滞在し、19世紀ドイツにおける法学(Rechtswissenschaft)の意味変化を追跡した上で、ドイツ史研究会で研究成果を報告した。遠藤泰弘は、第二帝政創立期ドイツの連邦国家構想について、ギールケの連邦国家論を軸として多角的分析を加えた。そして、研究成果を単著で公刊するとともに、国内外の学会で報告し、国内外の多様な分野の研究者と意見交換した。今野元は、ヴァイマール国制成立史研究の基盤をなすヴェーバーの政治活動を分析し、単著刊行と論文執筆によりヴェーバー研究の基礎固めを行った。更に、ヴァイマール憲法制定国民議会の議事録や内務大臣プロイスの秩序構想につき理解を深めた。林知更は、19世紀からワイマール期までのドイツ憲法史・憲法学史について、統治構造と学問状况の関連に留意しつつ研究を進めた。特に議会の位置づけの変遷が持った理論的意義について、日本の問題状况と対照させる論文を執筆した。田口正樹は、15世紀の帝国国制の特徴と変化について、裁判制度の改革をめぐる議論と裁判実務からアプローチするべく、日独で資料収集を行うとともに、14世紀の帝国国制を論じた文献について、教会との関係に留意し分析を試みた。山本文彦は、1648年のヴェストファーレン条約の歴史的意義を検討した。これまでの研究動向を整理するとともに、条約の条文内容および受容の歴史を考察し、研究成果をドイツ史研究会で報告した。権左武志は、1830年度のヘーゲル歴史哲学講義を資料とし、帝国崩壊後の主権国家創立が世俗化の課題において持った歴史的意義を解明し、日本ヘーゲル学会主催の国際シンポジウムで研究成果を報告した。また東大駒場の相関社会科学研究会と共催で、国際シンポに招聘したアンゲールン教授の講演会「ヘーゲル法哲学における主体的自由の権利」を開催した。守矢健一は、ドイツの法学が19世紀後半に技術化を強めるのと軌を一に、古典ローマ法の記憶も技術化する傾向にあるとの仮説を立て、19世紀のドイツ法学のテクストを分析した。遠藤泰弘は、ギールケとラーバントの連邦国家論に関する研究を法制史学会で報告するとともに、ワイマール共和国憲法を起草したプロイスの国家論をギールケと比較する研究を政治思想学会で報告した。今野元は、ヴァイマール共和国制の成立を、マックス・ヴェーバーとプロィスとの思惑の交錯という観点から描写するべく、ベルリン・コブレンツ・ミュンヘンで史料収集活動を行った。林知更は、ワイマール期憲法学の連邦国家論が、憲法学の方法論的刷新との関係でいかなる意義を持つか、戦後憲法学との関係に留意しつつ研究を進め、研究成果をドイツ史研究会で報告した。田口正樹は、Lupold von Bebenburg(ca.1300-1363)の帝国論を取り上げ、7月のドイツ史研究会で報告した。

彼がドイツの支配者を他の王国の国主と同様にとらえる姿勢を見せつつも、他方でその実質的支配領域にイタリア王国を算入し、皇帝独自の法的権限を承認している点を確認し。山本文彦は、1648年のヴェストファーレン条約のミュンスター条約に関する作業を行った。ミュンスター条約とオスナブリュック条約の規定上の重複部分と相違部分を確認し、こうした重複および相違が生まれた原因を交渉のプロセスの史料を利用しながら検証した。守矢健一は、19世紀私法学においてローマの共和政期に対する関心が希薄化し、帝政期に関心が集中していく過程を、クンツェのテクスートに即して紹介した。また日本におけるドイツ近代法史の戦後学問史をまとめ、研究の土台を歴史的に省察した。遠藤泰弘は、ギールケとその弟子プロイスの連邦国家論に関する昨年度までの研究を総括し、邦語で発表した。また2月のドイツ史研究会で、第二帝政期の連邦国家論に関する最近の研究動向を紹介した。今野元は、昨年度のドイツ出張を踏まえて、マックス・ヴェーバーとプロイスの連邦制論への取り組みを比較する研究のとりまとめに集中した。成果は7月のドイツ史研究会で報告し、学会誌に投稿し受理された。権左武志は、昨年3月の国際シンポジウム報告を日独両言語で公表する凖備を進めるとともに、ヘーケル歴史哲学講義に関する従来の研究成果を一書にまとめて公刊した。またワイマール共和国末期における連邦制の問題を取り上げ、2月のドイツ史研究会で報告するとともに、3月にボッフム大学、デュッセルドルフ州立文書館、バーゼル大学で資料収集と情報交換を行った。林知更は、連邦制的な国家思想にとり現代な論点である、ヨーロッパ統合をめぐる近年ドイツの議論を概観・分析する作業を行い、カイザーライヒ期およびワイマール期以来の連邦国家論との関係を検討した上で、成果を比較法学会総会で報告した。田口正樹は、15世紀教会法学者ペーター・フォン・アンドラウの帝国論を取り上げ、その特徴を分析した。14世紀ルーボルト・フォン・ベーベンブルクの帝国論と比較し、教皇権寄りの主張と皇帝権の高評価の両立、帝国のドイツ的性格増大、ドイツ貴族の意義強調とイタリアとのつながりを確認した。山本文彦は、1648年ヴェストファーレン条約の同時代独訳を検討し、これまで議論の対象となってきた主権、領邦高権、同盟権の同時代的理解を考察した。これは、神聖ローマ帝国国制の同時代的理解や帝国の連邦制的実態の解明につながる。守矢健一は、9月までフランクフルト大学法学部でサヴィニー慣習法論を研究した。サヴィニーの慣習法論は、法の全体から実体民事法を切り取り、《脱政治的な》体系を構築したサヴィニー法学で枢要な地位を占める。ドイツ語論文をサヴィニー雑誌に公刊する。遠藤泰弘は、ギールケとその弟子プロイスの政治秩序構想に関する昨年度までの研究を総括し、法制史学会近畿部会とドイツ史研究会で報告した。成果は『ジュリスト』邦語論文と共著の独語論文としてまとめたほか、プロイスの政治構想に関する論文を執筆中である。今野元は、昨年度に入稿した論文が、査読付学会誌に掲載された。更に本論文の副産物として、ヴァイマールのドイツ国民議会における連邦制の論議を概観した小論を執筆し、2月にドイツ史研究会で発表した。権左武志は、昨年度の海外出張で収集した資料を分析し、ワイマール末期におけるカール・シュミットの連邦制論議が、体制転換と第三帝国創立に果たした歴史的意義を解明した上で、2月にドイツ史研究会で報告し、成果公表の準備を進めた。
高解像度衛星データを用いた作物生産性の高頻度観測に関する研究

本研究では,日本国内の農地生態系において,作物の生育状況や炭素吸収量を異種センサによる高解像度衛星データを用いて高頻度で広域評価することを目的に,地上観測データ,高解像度衛星データ,低解像度衛星データを用いて検証を行った。その結果,地上観測データ,高解像度衛星データ,低解像度衛星データによる観測値は,センサーによる依存性や誤差要因が認められ,それらの関係を定量的に把握することにより,異種センサによる複合的な観測が可能となった。さらに,これらの結果から,高解像度衛星データによる総一次生産量の広域推定の高精度化が可能となった。日本国内の農地生態系において,作物の生育状況や炭素吸収量を異種センサによる高解像度衛星データを用いて高頻度で広域評価することを目的とする。本年度は,地上観測から得られた連続分光反射率データとその地点での異種センサによる高解像度衛星データの観測値を比較して,センサ特性や観測結果の一貫性について検討した。4種類の異なるセンサ(WorldView-2,GeoEye,RapidEye,ALOS/AVNIR-2)により取得された茨城県の真瀬サイト(水田)における高解像度衛星データを9シーン収集した。これらのデータから算出した分光植生指数(Normalized Difference Vegetation Index, NDVI)と反射率を,地上観測データと比較して精度検証を行った。その結果,高解像度衛星データのデジタルナンバーや放射量から算出したNDVIは80-90%程度の誤差があることが明らかとなった。一方,高解像度衛星データに対して大気補正を行うことで,NDVIの誤差は20-30%程度に低減した。また,地上観測と高解像度衛星データからの分光反射率は大気補正を行うことで概ね一致することが明らかとなった。本研究では,3種類の大気補正手法(QUAC,6S,FLAASH)を使用したが,FLAASHと比較するとQUACと6Sの精度が高かった。以上の結果から,異種センサによる高解像度衛星データを用いた場合でも,大気補正を行うことにより地上観測での反射率や植生指数を精度良く再現可能であり,異種光学衛星センサから得られる複数の高解像度衛星データを一体的に用いることが可能であることが明らかとなった。本年度は,地上観測から得られた総一次生産量(Gross Primary Production, GPP),連続分光反射率,気象データを用いて,高解像度衛星データからGPPを推定するためのモデルを検討した。さらに,有効性が確認されたモデルを用いて異種センサによる高解像度衛星データからGPPを推定する場合の一貫性について検討した。初めに,茨城県つくば市の水田サイトにおけるGPPを,地上観測の分光反射率から算出したNDVI (Normalized Difference Vegetation Index), GRVI (Green-Red Vegetation Index), EVI (Enhanced Vegetation Index), SAVI (Soil-Adjusted Vegetation Index)の4種類の植生指数と,気温と全天日射量の気象条件を組み合わせて推定した結果,GRVIと全天日射量を用いることにより精度よくGPPを推定することが可能であった。2010年から2012年のデータで検証したところ,観測年による誤差は少なく85%以上の精度で推定可能であった。これらの手法をこれまでに取得した異種センサの高解像度衛星画像14シーンに適用した結果,地上観測のGPPを精度良く推定することが可能であり,さらに周辺の水田のGPPの空間変動を提示することが可能となった。さらに,海外の水田サイトの高解像度衛星データでも同様の推定を行い,GPPの時空間変動を提示することが可能となった。本年度は,主に異種センサによる高解像度衛星データから農地生態系の総一次生産量(Gross Primary Production, GPP)を推定することを目的とした。当初予定していた水田における高解像度衛星を用いたGPP推定手法の検討について,複数年の高解像度画像および,複数の観測サイトでの検証を実施しており,現在のところ本研究課題はおおむね順調に進んでいると判断した。次に,これらの違いの要因を特定するために高解像度衛星データをMODISの地上解像度にシミュレーションして比較した結果,全体的にMODISによるNDVIの方が大きくなる傾向が認められた。高解像度衛星データとMODISのNDVIは線形の関係が得られ,その回帰式の傾きと切片はMODISのセンサ天頂角に大きく依存していることが明らかとなった。そのため,MODISのセンサ天頂角を用いてMODISのNDVIの補正を行ったところ精度の向上が確認できた。以上の結果から,MODISによるNDVIの観測値はセンサ天頂角に依存して変化することが明らかとなった。これは,センサの天頂角に依存するBRDFが観測値に影響していると考えられる。本研究で提案した補正法を用いることで,より精度が高いMODISの観測結果が使用でき,さらにこれまで使用できなかったデータを利用することが可能となった。

本年度は,主に異種センサによる高解像度衛星データを使用する場合のセンサ特性や観測結果の一貫性についての検討を目的とした。当初予定していた異種センサの高解像度衛星データと地上観測データは順調に収集でき,センサ特性や観測結果の一貫性についての検証を達成しており,現在のところ本研究課題はおおむね順調に進んでいると判断した。本年度までに検証が完了した高解像度衛星による総一次生産量(Gross Primary Production, GPP)の推定手法を低解像度衛星データに適応して,高解像度衛星データと低解像度衛星データの結果を複合的に比較する。これにより,低解像度衛星データによるミクセル状態の観測の精度評価を行い,高解像度衛星データによる高頻度観測を行う場合の低解像度衛星データの補完的な利用に関する検討を行う。具体的には,(1)低解像度衛星であるMODISデータからGPPの広域推定を行う。(2)高解像度衛星とMODISの結果を比較しミクセル割合による推定値の変化について検討する。リモートセンシングこれまでに提案されている様々な作物生産性の広域評価手法を異種センサによる高解像度衛星データに対して実行し,作物生産性の広域評価の検討を行う。特に,総一時生産量(Gross Primary Production, GPP)の推定に関して異種センサによる高解像度衛星データを用いて行った場合の精度評価を行う。具体的には,(1)地上観測から得られたGPP,気象,分光反射率データ等を用いて,高解像度衛星データからGPPを推定するモデルを検討する。(2)上記で有効性が確認された手法を用いて異種センサによる高解像度衛星データからGPPを推定する場合の一貫性について検討する。
機能性ネオ糖脂質クラスターを利用した神経幹細胞の幹細胞性制御

糖脂質は細胞膜上でクラスターを形成し、糖鎖-タンパク質間および糖鎖-糖鎖間相互作用を介して、細胞間コミュニケーションなど様々な生命現象に関与している。私たちは、糖鎖生物学、有機合成化学、構造生物学による融合研究を実施する一環として、人工設計した糖鎖化合物を開発し、細胞機能を制御することを試行した。本研究では、細胞膜上の糖鎖クラスターをモデルとし、神経細胞の分化に関わる糖鎖を応用したネオ糖脂質を合成することに成功した。このようにして作出したネオ糖脂質クラスターの生理活性を評価した結果、ネオ糖脂質が神経幹細胞に対して特異的に細胞死を誘導することを見出した。本研究では、糖鎖生物学、有機合成化学、構造生物学による融合研究を実施することにより、人工設計した機能性糖鎖化合物の開発を目指している。平成26年度は、幹細胞性の維持に関与するLewisX糖鎖構造(Galβ1,4(Fucα1,3)GlcNAc)をグライコトープとして含む機能性ネオ糖脂質を調製した。LewisX糖鎖構造を化学合成した後、これを柔軟なスペーサーを介して脂質と連結しすることでネオ糖脂質を合成することに成功した。さらに、調製した試料を用いることで、Lewis X構造を提示するネオ糖脂質のクラスターを創生することができた。また、安定同位体標識を施した糖脂質の調製法を確立し、固体NMR法による精密解析を実現する基盤を整えた。細胞表面を覆う糖鎖は、細胞間のコミュニケーションをはじめ、様々な生命現象において不可欠な存在である。本研究では、細胞膜上の糖鎖クラスターをモデルとし、人工設計に基づく機能性糖脂質(ネオ糖脂質)クラスターの創生に取り組んできた。平成27年度は、神経細胞の分化に関わる糖鎖構造を応用したネオ糖脂質クラスターについて、その生理活性評価を行った。Lewis X糖鎖[Galβ1-4(Fucα1-3)GlcNAc-]は、神経細胞において分化前の細胞に特異的に発現している。機能発現のためのグライコトープとしてLewis X糖鎖を含むネオ糖脂質クラスターと細胞との相互作用を評価した結果、ネオ糖脂質が神経幹細胞に対して特異的な細胞死を誘導することを見出した。また、合成したネオ糖脂質を応用した糖鎖アフィニティカラムを作成し、Lewis X糖鎖を特異的に認識するタンパク質を調査した。これに加え、人工超分子とのハイブリッドによって、神経細胞膜上の糖鎖構造を均一かつ簡便にクラスター化することに成功した。得られた超分子糖鎖クラスターを用いて、膜結合性タンパク質であるアミロイドβやαシヌクレインとのNMR相互作用解析を実施することができた。さらに、糖鎖ー糖鎖相互作用を介して糖鎖クラスターが高次集積化することを見出した。本研究で対象としているような多分枝構造を示す糖鎖の化学合成には多段会の反応が必要であるが、効率的に目的糖鎖を調製する方法を確立することができた。こうして得られたネオ糖脂質を用いて、カルシウムイオン依存的に生じる糖鎖-糖鎖間相互作用の評価や、細胞レベルでの生物活性についての探査を行っている。生命分子科学従来よりもいっそう生体膜に近い組成の機能的糖脂質膜や、ネオ糖鎖を組み込んだ人工クラスターを構築し、安定同位体標識を活用した溶液および固体NMR解析を実施する。これにより、糖鎖とタンパク質、糖鎖-糖鎖の相互作用の物理化学的実体の解明に迫る。さらに、こうした人工糖脂質クラスターを活用して、細胞機能(特に神経系の細胞の分化)を制御する分子メカニズムの解明に取り組むことを計画している。安定同位体標識化合物のなどの高価な試薬の購入が次年度持ち越してしまい、次年度使用額が生じてしまった。前年度購入できていない安定同位体化合物の購入などに充てる予定である。
染色堅牢度判定において測色値から求める物理的評価の確立

染色堅牢度は、グレースケールを用いて視感によって評価されているが、個人による誤差を避けることができない。視感評価に代わる計測評価が望まれ、いくつか提案されているが世界共通のものとなっていない。そこで、視感評価と計測評価の関係を、汚染、変退色、退色に分けて検討した。その結果、以下のことが見出された。1.汚染においては、計測評価式から得られる等級曲線を色空間中に引き、その等級曲線の媒介として視感等級値と比較し、それぞれの計測評価式の特長を明らかにした。2.色の濃さを用いて汚染評価を検討すると、色立体中の空間距離の考え方で表示出来る可能性を見出した。3.変退色の試料においては、CIE94(1:1)色差値が他の計測値よりも視感評価値と高い相関を示した。4.CIE94(1:1)の色差式を用い、変退色用グレースケールの等級値に対応した等色差ラインを色立体中に描くことにより、色立体中での変体退色用グレースケールの適用の仕方を大まかに知ることができた。5.変色をほとんど伴わない退色試料においては、Nc^#値とSEK等級値が視感評価値と高い相関を示した。6.退色においては、染色堅牢度値が、変色においては色差値が視感評価値との対応がよかった。さらに、国による視感評価値の違いを、日本、タイ、香港で、同じ試料を用いて2本のグレースケールを用いた視感評価実験を行い検討した。その結果、明らかに国による違いが見出された。グレースケールによる視感評価では、個人だけでなく国による違いも避けられないので、インターネットショップが発達してきた今日、世界共通の評価値が必要となる。それには、従来の視感評価に代わり計測評価が求められるが、これまでの研究成果より、汚染、変退色、退色とそれぞれの計測評価値の導き出し方の方向性を見出すことができた。染色堅牢度判定における汚染評価は、汚染用グレースケールを対照として視感判定することがJISで規定されているが、視感判定では、個人による誤差が避けられない。そこで、条件が異なったいくつかの視感実験を行い、その結果と汚染用グレースケール、汚染用カラースケール(134委員会作製)とを比較し、そのばらつき程度を調べた。個人、個人はもちろんのこと、視感実験条件によってもかなりのばらつきが見られ、視感評価値として一定の値を見出すことはできない。近年、測色値に基づいた計測評価値が望まれており、ISO式をはじめ、寺主、佐藤によるNs式、Fs式が提案されている。ISO式は、ドイツ提案のSSG式、イギリス提案のSSR式の折衷案としてまとめられたものであり、Ns式は、汚染用グレースケールをマンセル値から理論的に解析して導き出されたもので、CIELAB値からでも算出できる。Fs式は、Ns式を寺主とは異なった方法でCIELAB値から求めるようにした式である。上記の視感評価値と計測評価値を比較すると、ISO式は、色相による評価の違いが加味されておらず、Yellow近辺でずれる傾向にあった。Ns式、Fs式は、色相による評価の違いを加味しており、有彩色では、かなりの一致が見られたが、無彩色近辺ではずれる傾向にあった。視感評価値もかなりのばらつきが見られ、計測評価値もそれぞれ長所、欠点があるので、測色機器が発達してきた今日、汚染用グレースケールに頼るのではなく、色知覚の視点に立って汚染評価すべきではないかと考えた。

明るい-暗い、濃い-淡いなどの色彩感情は、ある点からの楕円方程式で表すことができることを見出したので、この基本式を汚染評価に適用することを考え、色立体に色の濃さラインを引いた。そのラインは視感評価値とも良好な対応が見られたので、汚染用グレースケールに頼らず、色の濃さラインから汚染評価ができるのではないかと考えている。染色堅牢度における汚染評価は、、汚染用グレースケールを用いた視感評価では、評価にばらつきがあり客観的な等級値を見出すことは不可能である。また、提案されている計測評価値もそれぞれ性質が異っており、最適な評価値を選ぶことは難しい。そこで、その導き出し方が重要ではないかと考え、色の濃さラインによる等級値表示を提案した。それが視感と良好に対応するか検証するために、細かく段落ちした試料を作製し、汚染用グレースケールの等級値と一致した試料対を選ばせるという方法で、視感等級値ラインを引くことを試みている。それによって、色の濃さラインとの比較が可能ではないかと考えている。変退色評価については、染色布の色が種々であるが、視感評価基準は中色の灰色で作られた変退色用グレースケール1本しかなく、視感評価のばらつきは大きい。計測化を試みるにあたり、退色だけでなく日光堅牢度など変色を伴う色変化に対して、変退色用グレースケールの明度変化を視感はどのように適応させているのか検討していく必要性がある。そこで、マンセル表色系において48基準点を選び、その基準色から色相、明度、彩度のそれぞれの方向変化した試料を作成し、変退色用グレースケールを対照基準として視感評価させ、三方向性とグレースケール等級値との関係を調べた。染色堅牢度評価において、国際間の相違を知るため、同じ試料を用いてタイと共同で視感評価実験を行った。汚染に対しては大きな違いは見られなかったものの、等級値が1級に近づくと日本が厳しく、逆に、5級に近づくとタイのほうが厳しく評価する傾向にあった。また、変退色においては、いずれの基準色においても、日本のほうが厳しく評価した。現在、香港において、同じ試料を用いて視感評価されており、その結果が得られると三国の比較が可能となり、国による傾向がより詳しく見ることができると考えている。グレースケールを用いた染色堅牢度判定において、国が違えば視感評価にどのような差異が見られるのかについて、タイと共同研究を行い共通点、相違点を見出したが、香港と共同実験をすることによって、日本、タイ、香港の視感評価の違いを明らかにすることができた。汚染評価においては、ほとんどの試料において香港が最も厳しく評価した。退色においては、日本が最も厳しく評価し、次いで香港、タイの順となった。3国を比較すると、明らかに国による傾向が見られ、いずれが正しいとは言えないが、染色堅牢度判定をグレースケールを基準として視感評価を行なうと、個人だけでなく、国によってもその評価基準が異なることが明らかにできた。色立体中において系統的に50の基準点を選び、その点から6方向に変化する変退色評価試料を作成し、変退色用グレースケールを対照基準とした視感評価実験を行い、計測評価値と比較検討した。その結果、染色堅牢度値より色差値の方が視感評価値との相関が優れていた。色差値のなかでも、CIE94(1:1)の色差値が、色相の影響があまり見られず、いずれの変化方向に対しても視感評価値と高い相関係数が得られた。そこで、そのCIE94(1:1)を色立体中に展開することによって、色立体中での変退色用グレースケールの適用の仕方を大まかに見出すことができた。
サルコペニア予防を目指した時間運動学に基づく運動プログラムの開発と効果検証

平成30年度の研究計画は、平成29年度より引き続き高齢者を対象にした長期運動介入を行い、サンプル数を確保することが第一目的であった。そのうえで、時計遺伝子多型や生理的マーカーとの関係を調べる予定であった。さらに平成30年度は、それ以外のフィールドも活用し、高齢者のサンプル数を増やしデータの精度も向上させる予定であった。成果として、第一に、「運動の朝型夜型嗜好性」を簡便に評価・スコア化できる質問紙を世界で初めて開発し、国際誌に発表した。その結果、運動の朝型夜型嗜好性は「身体的健康」、「心理的充足感」、「運動実践への障害」の3因子で構成されることが示された。この質問紙については、すでに外国の研究者から翻訳の依頼も舞い込んでおり、世界的な発展が期待される。第二に、複数の高齢者フィールドにおいて、朝型夜型タイプと骨格筋および生活習慣病リスク因子との関係を調査した。島根県のフィールドでは、地域高齢者の朝型夜型嗜好性(質問紙にて)と、医学データとの関連を横断的に調査した。そのほか、岡山県のフィールドでは地域中高齢者に対するランダム化比較試験による運動介入を行った。運動介入の対象者では、体内時計を司る時計遺伝子多型の測定も実施した。時計遺伝子多型については、介入研究がH30年度末に終了したため、報告書執筆時点では詳細な統計解析には至っていない。今後、朝型夜型嗜好性および時計遺伝子多型が、骨格筋量およびサルコペニア予防にどのように関係するのか、詳細な分析を予定している。本研究の目的は,朝/夜型の高齢者の運動時間帯とサルコペニア予防効果との関係を調査することであった.平成28年度の研究実施計画は,第一の計画は,運動時間帯の好みを判定するために,「運動時間帯嗜好性質問紙」を開発することであった.中高齢者男女約200名を対象に,好み(運動時間帯嗜好性),客観指標(活動量計),生活習慣(起床時刻・就寝時刻,食事時刻,間食の有無など)などのデータの相互関係より,「運動時間帯の好み」を判定できる質問紙を開発した.第二の計画は,高齢者が実施・継続可能な,朝・夕それぞれの運動プログラム立案であった.この立案の基礎的データとして,若年者を対象に,朝および夕方に体力測定を行い,個々人の朝型夜型生活リズムとの関係を分析した.第三の計画は,時計遺伝子多型の測定系の確立であった.この計画は現在共同研究者と協議中であるが,すでにほぼ確立している.追加採択であったが,研究自体はすでに進めていたため特に遅れは生じなかった.「運動時間帯嗜好性質問紙」のデータ収集および解析はほぼ終了している.また,高齢者が実施可能な運動プログラムも検討を進めている.平成29年度以降の実験で測定すべき時計遺伝子多型の測定系もほぼ確立することができた.平成29年度の研究実施計画は、高齢者を対象にした長期運動介入を行い、質問紙、時計遺伝子多型などより、朝型夜型嗜好性と運動プログラム実行可能性との関連を調べる予定であった。第一に、平成29年度に、地域高齢者を対象に長期運動介入を行い、介入前後に血液検査を行い、併せて日内リズム(起床時刻、就寝時刻、食事時間帯など)、身体組成(骨格筋量および体脂肪率)、食事摂取量、身体活動量などを測定した。その結果、特に朝型嗜好性と各種マーカーとの間に有意な関係性を見出すことができた。本研究の成果は複数の学会で発表した。第二に、「運動時間帯の好み」を判定できる質問紙は、若年者対象の質問紙についてはすでに開発が終了した。現在投稿準備中である。今後は他の年齢層・別の対象者でも妥当性があるかどうかを検討する予定である。平成29年度は、血液検体のサンプル数がやや不足したために、遺伝子解析を含むいくつかの解析は次年度に持ち越しとなった。しかしながら、それ以外のデータには特に不備がなく、平成30年度中には終了する予定である。

今後、朝型夜型嗜好性および時計遺伝子多型が、骨格筋量およびサルコペニア予防にどのように関係するのか、詳細な分析を予定している。平成29年度は当初の予定通り,高齢者を対象にした長期運動介入を行い,質問紙,時計遺伝子多型などより,朝型夜型嗜好性と運動プログラム実行可能性との関連を調べる予定である.平成30年度は、実験条件を修正したうえで高齢者を対象にした長期運動介入を行い、さらに詳細なデータ取得および分析を行う。そのうえで、時計遺伝子多型や生理的マーカーとの関係を調べる予定である。さらに平成30年度は、それ以外のフィールドも活用し、高齢者のサンプル数を増やしデータの精度も向上させる予定である。追加採択であったため,すでに採択以前に他の研究費で研究を進めており,当初の計画より低額で実験を進めることができた.平成29年度に解析予定であった遺伝子解析のサンプル数がやや不足したために、遺伝子解析を含むいくつかの解析は次年度に持ち越しとなったことが理由である。平成29年度に実施する長期運動介入における検査費などに用いる.
リゾープス菌を用いた玄米の栄養改善(フィターゼの利用)

(1)玄米テンペの調製:玄米を酢酸バッファーpH5.0に2時間浸漬したのち120°C、20分間オートクレーヴで滅菌する。50゚60°Cまで放冷後リゾープスオリゼの胞子粉末を加えて混合し、35°Cで7時間、次いで31°Cで3日間、表面が薄く白い菌糸で覆われるまで培養して玄米テンペを調製し、凍結又は凍結乾燥して以下の実験に用いた。(2)玄米テンペの調理:玄米テンペの調理法としてはオカラテンペと同様にそのまま油で揚げるか、ミンチ状でハンバーグ等に混ぜて用いる調理法が最も適していた。(3)フィチン酸の定量:玄米中及び玄米テンペ中のフィチン酸をLattaら(1988)の方法で定量した結果、玄米中に4.38%存在したものが玄米テンペ中では0.38%に減少しており、リゾープス菌が強力なフィターゼを産生していることを示しており、玄米食の欠点であった反栄養因子フィチン酸の除去に有効であることが示された。(4)玄米テンペからのフィターゼの分離精製とその性質:玄米テンペからアセトンパウダーを調製し、粗酵素液を抽出し、DEAE-トヨパールによるイオン交換クロマトグラフィーを行い、今回購入したマイクロプレートリーダーを用いて各画分のフィターゼ活性を測定し、活性画分について更にTSK-GEL G-3000SWXLを用いたゲル瀘過、BAKERBOND-HIPによる疎水性相互作用クロマトグラフィーによる精製を行なった。その結果本酵素は分子量約10KD、至適PH5.5、至適温度55°Cであった。目下玄米以外のフィチン酸含量の高い穀類、豆類のフィチン酸除去のための前処理用フィターゼを大量生産するために、オカラテンペからの酵素標品の調製を手がけている。
地域通貨の発生・流通・維持メカニズムとその経済的効果に関する理論的研究

本研究は,地域通貨の発生・流通・維持に関する以下の2つの課題からなる.第1の課題は,地域通貨の成立と維持のための必要条件を明らかにする数理的モデルの構築である.第2の課題は,地域通貨が地域経済システムに対してもちうる機能とメカニズムを理論的に整理し,その特性を明らかにすることである.この目的を達成するために,まず,地域通貨の実態を調査・整理し,次に,本研究で構築する数理モデルと関連の深い確率的ネットワーク成長モデルに関する研究の包括的レビューとそれに基づいた考察を行なった.その結果,Internet上でのfile size分布やweb pageの規模分布が冪分布/対数正規分布に従うことを説明する最近のネットワーク成長モデルの多くは,数理的に本質的な部分では,Simon modelと(ほぼ)同じ構造といえることが判った.また,冪分布と対数正規分布の各々を生成するモデルは,独立したものではなく,両者にはある関係があることや,観測時刻のランダムネスから冪乗則を説明するモデルがreal option/optimalstopping問題と関連した構造を持つことを明らかにした.これらの考察の後,地域通貨を介した財の交換過程に関する経済主体の意思決定問題(本研究で構築する確率動学モデルの状態推移確率を決定するサブ・モデル)をオプション・モデルとして記述し,その計算法を開発した.数値実験の結果,対象集団内の個人間交流関係を表す"social network"の構造が,地域通貨普及のcritical factorになりうることが判った.より具体的には,social network構造に"small world性"がある場合,地域通貨が普及状態となる確率が有意に高く,また,状態収束も速いことが示された.本研究は,地域通貨の発生・流通・維持に関する以下の2つの課題からなる.第1の課題は,地域通貨の成立と維持のための必要条件を明らかにする理論(数理的モデル)の構築である.第2の課題は,地域通貨が地域経済システムに対してもちうる機能とそのメカニズムを理論的に整理し,経済厚生改善特性を明らかにすることである.この目的を達成するために,平成16年度は,まず,地域通貨の実態に関するweb公開情報をもとに調査し,それをweb pageにまとめ,次に,第一の課題に関連する研究を実施した.より具体的には,まず,本研究で構築する数理モデルと関連の深い確率的ネットワーク成長モデルに関する研究の包括的レビューとそれに基づいた考察を行なった.その結果,Internet上でのfile size分布やweb pageの規模(link数)分布が冪分布/対数正規分布に従うことを説明する最近のネットワーク成長モデルの多くは,数理的に本質的な部分では,Simon modelと(ほぼ)同じ構造といえることが判った.また,冪分布と対数正規分布の各々を生成するモデルは,独立したものではなく,両者にはある関係があることを明らかにした.さらに,観測時刻のランダムネスから冪乗則を説明するモデルが,real option/optimalstopping問題と関連した構造を持つことを明らかにした.これらの考察の後,地域通貨を介した財の交換過程に関する経済主体の(不確実性下での)意思決定問題(本研究で構築する確率動学モデルの状態推移確率を決定するサブ・モデル)をオプション・モデルとして記述し,その計算法を開発した.このモデルに基づく地域通貨の流通・維持特性の詳細については,平成17年度の研究で明らかにする予定である.本研究は,地域通貨の発生・流通・維持に関する以下の2つの課題からなる.第1の課題は,地域通貨の成立と維持のための必要条件を明らかにする数理的モデルの構築である.第2の課題は,地域通貨が地域経済システムに対してもちうる機能とメカニズムを理論的に整理し,その特性を明らかにすることである.この目的を達成するために,まず,地域通貨の実態を調査・整理し,次に,本研究で構築する数理モデルと関連の深い確率的ネットワーク成長モデルに関する研究の包括的レビューとそれに基づいた考察を行なった.その結果,Internet上でのfile size分布やweb pageの規模分布が冪分布/対数正規分布に従うことを説明する最近のネットワーク成長モデルの多くは,数理的に本質的な部分では,Simon modelと(ほぼ)同じ構造といえることが判った.また,冪分布と対数正規分布の各々を生成するモデルは,独立したものではなく,両者にはある関係があることや,観測時刻のランダムネスから冪乗則を説明するモデルがreal option/optimalstopping問題と関連した構造を持つことを明らかにした.これらの考察の後,地域通貨を介した財の交換過程に関する経済主体の意思決定問題(本研究で構築する確率動学モデルの状態推移確率を決定するサブ・モデル)をオプション・モデルとして記述し,その計算法を開発した.数値実験の結果,対象集団内の個人間交流関係を表す"social network"の構造が,地域通貨普及のcritical factorになりうることが判った.より具体的には,social network構造に"small world性"がある場合,地域通貨が普及状態となる確率が有意に高く,また,状態収束も速いことが示された.
レーザーの歯科保存領域への応用

保存修復領域における研究では、千田らはCO_2レーザー照射により象牙質、エナメル質の耐酸性が増す可能性を示し、石丸らはレーザー照射した象牙質とコンポジットの接着界面の変化から、接着強さに及ぼすレーザー照射の影響を検討し、田村らはトンネル窩洞の辺縁漏洩をメルコックス・ローダミン法により検討し、富士谷らはEr : YAG及びCO_2レーザーで処理した象牙質には破壊されたコラーゲン線維を含む無構造層が形成されており、レジンの接着性が阻害される可能性を示唆し、川浪らはNd : YAGレーザー照射とフッ素塗布を根面象牙質に行い、そのフッ素分布、耐酸性、細菌付着性および表面硬度への影響を検討し、池見らはCO_2レーザーとフッ化物と併用することによりエナメル質の耐酸生が向上すると示唆し、そして川上らはインレー窩洞形成に用いる新たなチゼル型チップの試作に成功した。歯内療法領域における研究では、小林らはレーザー麻酔による無痛治療の可能性を示し、中村らはレーザーの、特に根尖部の歯質に対する透過性について検討を加え、レーザーの透過性に対する応用の可能性を示し、子田はEr : YAGレーザーによる歯質の蒸散を走査型共焦点顕微鏡を用いて三次元的に観察し、そして竹田はNd : YAGレーザーによる根管内の滅菌効果について検討した。歯周治療への応用については、野口らは歯周治療にレーザーを用いた場合の歯髄の反応を検討した。渡辺らは歯周治療後にみられる象牙質知覚過敏症にEr : YAGレーザー照射が有効であると示唆した。宮澤らはEr : YAGレーザーの歯肉創傷治癒および歯周組織再生の有効性を示した。保存修復領域では、千田はリン酸カルシウム塩を象牙質へ溶着させ象牙細管の封鎖を積極的に行う方法を検討した。石丸はレーザー照射した象牙質とコンポジットの接着界面の変化から、接着強さに対する影響を検討した。田村は、Er:YAGレーザーを使用し、トンネル窩洞の辺縁漏洩をメルコックス・ローダミン法により検討した。冨士谷は、象牙質接着に対するスメア層に着目しレーザー処理象牙質に対する接着システムの開発を検討した。稲井は、レーザー治療による臨床成績について短期経過をまとめ予後が良好であったことを確認している。加藤、池見は象牙質に対するフッ素塗布とレーザーの併用の効果について検討し同様な結果を得た。歯内療法領域への応用については、竹田が根管内の温度変化及び照射に伴う形態学的変化の検討を行った。山口は、Nd:YAGレーザーによる歯髄への疼痛緩和および麻酔効果について検討した。中村は、レーザーの感染歯質に対する透過性につき検討を加えその有用性について考察した。子田は、歯質の蒸散形態の観察を走査型共焦点レーザー顕微鏡により観察した。歯周治療への応用については、野口は、歯周治療時におけるレーザーによる歯髄の影響について検討した。渡辺は、レーザー照射に対する骨組織の反応性および治癒過程について光顕および電顕により解析した。宮澤は、ラットを用い電気メスおよびEr:YAGレーザーを用い切創の形成を行い、術後所定期間経過後同部位の組織切片を作成し歯肉創傷治癒および歯周組織再生に関する基礎的研究を行った。保存修復領域において、千田は昨年度に引き続き象牙質強化を目的としフッ化物併用法についての効果を検討した。検討した。石丸はレーザーによる窩洞形成への影響につき接着強さの測定および辺縁漏洩試験により検討した。田村は、昨年より継続しトンネル窩洞の辺縁漏洩をメルコックス・ローダミン法により検討した。冨士谷は、Er:YAGおよびCO_2レーザーを用いレーザー処理象牙質の性状変化について検討した。稲井は、Er:YAGレーザー照射象牙質面における耐酸性についての評価を行った。

池見は試作光沢計を用いレーザーフッ素作用歯質の対耐酸性の評価を行った。歯内療法領域への応用については、竹田が試作根管内照射用チップにより象牙質の形態学検討を行った。小林はレーザー麻酔による無痛治療に関し検討を加えた。中村は、レーザーの歯質に対する透過性について特に根尖部や歯質に対し検討を加えた。子田は、走査型共焦点レーザー顕微鏡を用い歯質の蒸散形態の三次元的な観察を行った。歯周治療への応用については、野口がNd:YAGレーザーのポケット内照射後の歯髄への影響につき検討した。渡辺は、新しいレーザープローブの開発を行いその有用性につき検討した。加藤、根面象牙質の耐酸性及ぼすNd:YAFGレーザー照射とフッ素の併用につき園有用性を確認したは、Er:YAGレーザーを用い歯肉創傷治癒および歯周組織再生に関する基礎的研究を行った。保存修復領域では、千田はC02レーザーをリン酸カルシウム塩を用いて象牙質を強化する試みについて検討した。石丸はEr-YAGレーザーを照射した後の歯髄反応について観察した。田村は昨年より継続しトンネル窩洞の辺縁漏洩をメルコックス・ローダミン法により検討した。富士谷はEr-YAG及びC02レーザー処理象牙質は破壊されたコラーゲン繊維を含む無構造な層が形成されており、レジンの接着性を阻害する可能性を示唆した。川浪はNd-YAGレーザー照射とフッ素塗布を根面象牙質に応用した場合の表面形態、フッ素分布、耐酸性、細菌付着性および表面高度への影響を検討した。池見はC02レーザーとフッ化物と併用することで効果的にエナメル質の耐酸生を向上させると示唆した。川上はインレー窩洞形成に用いる新たなチゼル型チップの試作に成功した。歯内療法領域では、小林は半導体レーザー照射における連続波と断続波による疼痛緩和効果の違いについて検索を行った。中村は昨年に引き続き、レーザーの歯質に対する透過性について特に根尖部や歯質に対し検討を加えた。子田はEr-YAGレーザーによる歯質蒸散形態を走査型共焦点顕微鏡を用いて三次元的に観察した。竹田はNd-YAGレーザーで根管内照射後、細菌培養検査を行い検討を加えた。歯周治療への応用については、野口は薬物の局所投与の効果はレーザーのポケット内照射を併用することによって長期に維持することを明らかにした。渡辺は歯周治療後の象牙質知覚過敏症に対するEr-YAGレーザーの応用について検討を行った。宮澤は昨年に引き続きEr-YAGレーザーを用い歯肉創傷治癒および歯周組織再生に関する基礎的研究を行った。
セマウル運動に関する史的研究

この研究計画は,当初2年計画で申請したものであるが,単年度でかつ大幅に減額されて認められたため,資料蒐集が十分に行なえず,かなりの軌道修正をせざるをえなかった。すなわち,韓国のセマウル運動の全体像を明らかにするという当初の目標を変更して,次の2点を中心とする概括的作業を行ない,以下のようなことを確認した。1.セマウル運動と工業化政策との関係(1)セマウル運動は,農産物の安定した供給構造をつくりあげ,食糧輸入型貿易構造から脱却するという形で工業化の基盤整備に一役買ったが,労働力多投下型の農業経営の改善などによって工業化に伴う労働力需要(それは質的に変化した)に応えるという課題を担った。(2)購買力の微弱な農業社会から安定した国内市場を持つ工業化社会に変容させる過程は,工業化社会に対応する農村の創出過程でもあり,離農や農工格差是正策に特別の政策的配慮が必要とされた。2.セマウル運動が次第に精神作興運動的性格を強め,「セマウム運動」化せしめられたことの歴史的意味(1)韓国の工業化は軍事政権による集権的性格の強いものであったがセマウル運動も国家主導型の集権的運動であった。この運動の集権的性格は,従来ともすれば軍事政権の体質的なものと認識されがちであった。しかし,歴史的に見ると,むしろその時々の国民の動向と密接に関連させて模索された国民統制策に起因しているところが大きい。(2)そうした政治過程から生まれた「工業化ナショナリズム」は,権力的社会の中で対抗する政治勢力が相互補完的に形成したものとみなすことができ,汎国民的で強固な性格を持っている。