hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
難民キャンプにおけるローカリティの生産

公的な生計支援が難民のビジネスに特化した支援である一方、モル難民が自主的に組織したNGOやCBOは共同体全体として現金稼得機会の創出や社会的連帯の強化に重心を置いている点に違いがみられた。一方、ケニアのカクマ難民キャンプに暮らすロピット人とは、特定のインフォーマントに対し、電話とインターネットを通じて、聞き取り調査を行った。このインフォーマントは、2015年に、ロピットの言語、口頭伝承、各モニョモジの歴史の記録と保存を目的としてCBOを立ち上げた人物である。なお、モニョミジとは、南スーダンのイマトン州に居住する複数の民族集団に共通してみられる首長制と年齢体系が組み合わさった土着の政治社会制度を指す。聞き取り調査では、各モニョミジ世代に記憶されている歌と歴史、および首長の系譜に関する情報の収集と整理を行った。また、それと並行して、カクマにおけるロピット難民の教育状況に関するデータ収集と、2018年2月に南スーダンのロピット6集落で行われた世代交代儀礼に関する情報の収集と整理を行った。平成29年度は、ウガンダとケニアに暮らす南スーダン人の生計、コミュニティ活動、南スーダン難民への人道-開発支援に関する調査研究を行った。ウガンダの難民居住地における1ヶ月の臨地調査と、ケニアに暮らす南スーダン人のインフォーマントを通しての情報収集は、概ね順調に行われ、期待通りに研究が進展している。調査結果に関しては、第54回日本アフリカ学会(長野)で口頭発表したほか、『地域研究からみた人道支援』(湖中真哉・太田至・孫暁剛編著)と『国家支配と民衆の力』(宮脇幸生編)にそれぞれ論文を執筆した。また、キリヤンドンゴ難民居住地に暮らす南スーダン難民の「家族」戦略に関しては、ウガンダー日本二国間交流事業オープンパートナーシップ共同研究の国際シンポジウム(東京)で口頭発表し、その研究報告書であるDiversification and Reorganization of 'Family' in Uganda and Kenya: A Cross-Cultural Analysis(Wakana, SHIINO, Soichiro, SHIRAISHI, & Christine M. Mpyangu編)に論文を執筆した。一方、ロピットに関する調査の一部は、第26回日本ナイル・エチオピア学会(富山)で口頭発表したほか、『スワヒリ&アフリカ研究』第29号に論文を執筆した。そのほか、南スーダンの紛争をめぐるマスメディアとフィールドワークによる情報の違いについては、『マスメディアとフィールドワーカー』(椎野若菜、福井幸太郎編)に論文を執筆。そして、南スーダンのロピットにおける土着の製鉄技術に関しては、第9回金属の歴史国際会議(BUMAIX)(韓国、釜山)でポスター発表を行った。さらに、アウトリーチ活動においても、スーダンに関する映像発表を行うなど、積極的な情報発信に努めた。本研究の目的は、ウガンダやケニアなど周辺国に離散した南スーダン難民が、難民キャンプでいかにローカリティを生産し、また、帰属意識を形成しているかを明らかにすることである。
小膵癌を標的とした診断パネルの開発とリキッドバイオプシーによる早期診断法の確立

膵癌の早期診断に有用なバイオマーカーを同定する目的で、当科でアーカイブ化されたホルマリン固定パラフィンブロック検体(FFPE)からStageIA症例を抽出し、遺伝子変異、メチル化DNAの検索を行い、有用性の高いゲノム、エピゲノムバイオマーカーを候補として抽出することを短期的な目標に設定して研究を開始した。FFPEからのDNA抽出は想定された収量が得られたが、シークエンス用のライブラリ量が充分でなく、DNA抽出の条件などを再検討している。リキッドバイオプシーへの応用のため、当科で切除を企図して治療を行った膵癌症例に対して、臨床病期、または切除可能性分類に基づいて層別を行った後、血中cell-free DNA(cfDNA)中のKRAS変異アレルを検出する目的でデジタルPCRを行った。切除境界・切除不能膵癌と切除可能膵癌はcfDNA中のKRAA変異アレル陽性率が低かったが、画像検査上切除可能と診断されても、腹腔洗浄細胞診陽性など、微小転移の存在が疑われる症例にKRAS変異アレル陽性例が多い傾向があった。メチル化DNAについては、FFPE検体から得られたDNA量を有効活用すべく、網羅的解析に先立ち、public databaseを用いて膵癌特異的なメチル化DNAマーカーの絞り込みを行っている。現在は対象症例を小膵癌からStageIA膵癌、切除可能膵癌、などに広げつつ、FFPE検体のシークエンス条件を検討しつつ、cfDNA中の遺伝子変異、メチル化DNA、エクソソーム、など多角的な視点からバイオーマーカーの有用性を検討している。組織からレーザーマイクロダイセクションを用いて腫瘍組織を採取したが、次世代シークエンス(アンプリコンシークエンス)を行うためのライブラリの収量が少なく、解析が困難な状態であり、条件検討を要する。血液試料は順調に集まっており、現在はリキッドバイオプシーで変異遺伝子に候補を絞った解析を行う方針とする。メチル化DNAマーカーの検討については採取されるDNA量をみて、メチル化アレイにもる網羅的検索、またはデータベースから候補遺伝子を抽出する予定である。
静電散布用の多口ホ-ス噴頭の開発研究

農産物の質をあげ、商品として多量に生産しようとすれば、遺憾ながら農薬による病害虫防除は避けて通るわけにはいかない。ただ地球的立場から農薬使用量をできるだけ減らす努力をしなければならない。農薬の使用量をできるだけ減らしつつ、均一に、対象作物に付着させる有効な方法として、静電散布の応用が着想される。実用化できれば害虫の棲息する作物の葉の裏にも均一に農薬がつき、農薬の使用量を半減できるとして、これまでわが国でも欧米でも農業への応用が試みられてきた。しかし静電気散布はその電源と散布装置が一対で成り立っており、対象となる作物が遠い場合や、圃場が広い場合の移動作業には能力的に、散布範囲としてカバ-することが困難であったため、実用化が阻まれている。この研究では、能率がよいことからわが国の水田防除に広く使われている多口ホ-ス噴頭に、静電散布を応用することを思いついて、基礎的な実験を試みた。すなわち今回は硬質の多口噴頭を使って、13個の一つひとつの噴口へ、静電気を間欠的に伝える方法を考察して、その能力と有効性を試した。中央電極の回転接触ブラシと16個のタ-ミナルを持つ分電機(ディストリビュ-タ)を試作して、各種の組合せの分電を可能にし、複数のグル-プに分けた噴口付近を帯電させた。粉剤の付着率を評価するためには、疑似葉に付着した粉剤をセロテ-プに回収し、光度計によりテ-プの透過率を測定した。一つの噴口からみれば、粉剤の吐き出し量も風量も小さいので、常時静電圧をかける必要はなく、4/16ないし8/16の間欠分電でも静電散布の効果がみられた。有効散布幅10mを越える長い多口ホ-ス噴頭への静電散布の応用にはまだ障壁が予想されるが、軽い絶縁材料や導体のプラスティックの開発が進めば、実用化も有望と考える。多口ホースを設計するに際しては、噴頭入口の条件すなわち送風機の動圧と静圧が与えられなければならない。ただし両圧力は全く独立に与えるわけにはいかない。多口ホース噴頭の全長、直径、穴間隔および吐出し穴径の4変数がきまれば、動圧と静圧の比は送風機の運転状態に関わらずほぼ一定である。このことに着目し、両圧力の比と各種の形状係数の関係を求めた。その算出にあたってフロッピーディスクユニットが大変重宝であった。多口ホース噴頭の内部を流れる平均風速あるいは風量を、噴頭断面の中心動圧の値を使って求めることができるようにした。噴頭内風速分布を鉛直方向、水平方向に分けて、噴頭壁面の開口比と流動状態によって解析した。噴頭の直径を単位長さlとし、壁面からの深さを無次元化してyで表わし、中心風速に対する各点の風速比を指数式で表現した。さらに風速変化の勾配を示す曲率指数を定義し、開口比の関数として実験式を得た。その計算にフロッピーディスクが記憶容量を増すのに有効であった。多口ホース噴頭に静電圧を導くために、DC-DCコンバータを使った静電圧発生装置を試作した。粉剤を散布して粉剤の付着状態を調査した。約7kV以上の静電圧をかけると付着率があがり、とくに作物の葉の裏側への付着がよかった。静電圧や電界電圧を測定するに際しエレクトロメータを使用した。更に多くの作物や栽植条件に適応して、データを集積し、静電散布の効果を確認するとともに、新たな電界荷電方式を検討する。ほとんどの農産物において、その質をあげ、商品として多量に生産しようとすれば、遺憾ながら農薬による病害虫防除は避けて通るわけにはいかない。ただ全地球的立場から農薬使用量をできるだけ減らす努力をしなければならないことは自明である。農薬の使用量をできるだけ減らしつつ、均一に、対象作物に付着させる有効な方法として、機械工業の塗装に実用されている静電散布の応用が着想される。もし実用化できれば害虫の棲息する作物の葉の裏にも均一に農薬がつき、農薬の使用量を半減できるとして、これまでわが国でも欧米でも農業への応用が試みられてきた。しかし静電散布はその電源と散布装置が一対で成り立っており、対象となる作物が遠い場合や、圃場が広い場合の移動作業には能力的に、経済的に、散布範囲としてカバ-することが困難であったため、実用化が阻まれている。この研究では、能率がよいことからわが国の水田防除に広く使われている多口ホ-ス噴頭に、静電散布を応用するにあたり問題となることについて、基礎的な実験を試みた。すなわち多口ホ-ス噴頭には数十個の小さい噴口があるが、その噴口一つひとつに、静電気を伝える方法を考案して、その有効性を試した。また電極の形状についても2種類の方法を比較した。送電回路に導電性のゴムかプラスチックを使うことを考えているが、電気抵抗が小さく、たわみ易い材料を使えば、短い多口ホ-ス噴頭への静電散布の応用は可能である。有効散布幅10mを越える長い噴頭への実用化にはまだ障壁が予想されるが、多口ホ-ス噴頭の一個の噴口から出る粉剤の量や風量は小さいので、静電散布の応用も有望と考える。

農薬の使用量をできるだけ減らしつつ、均一に、対象作物に付着させる有効な方法として、静電散布の応用が着想される。実用化できれば害虫の棲息する作物の葉の裏にも均一に農薬がつき、農薬の使用量を半減できるとして、これまでわが国でも欧米でも農業への応用が試みられてきた。しかし静電気散布はその電源と散布装置が一対で成り立っており、対象となる作物が遠い場合や、圃場が広い場合の移動作業には能力的に、散布範囲としてカバ-することが困難であったため、実用化が阻まれている。この研究では、能率がよいことからわが国の水田防除に広く使われている多口ホ-ス噴頭に、静電散布を応用することを思いついて、基礎的な実験を試みた。すなわち今回は硬質の多口噴頭を使って、13個の一つひとつの噴口へ、静電気を間欠的に伝える方法を考察して、その能力と有効性を試した。中央電極の回転接触ブラシと16個のタ-ミナルを持つ分電機(ディストリビュ-タ)を試作して、各種の組合せの分電を可能にし、複数のグル-プに分けた噴口付近を帯電させた。粉剤の付着率を評価するためには、疑似葉に付着した粉剤をセロテ-プに回収し、光度計によりテ-プの透過率を測定した。一つの噴口からみれば、粉剤の吐き出し量も風量も小さいので、常時静電圧をかける必要はなく、4/16ないし8/16の間欠分電でも静電散布の効果がみられた。有効散布幅10mを越える長い多口ホ-ス噴頭への静電散布の応用にはまだ障壁が予想されるが、軽い絶縁材料や導体のプラスティックの開発が進めば、実用化も有望と考える。
身体化症状を呈する患者に対する看護ケアガイドラインの作成に関する研究

本研究では、身体化症状を呈する患者への心身両面の適切な看護ケアを明らかにし、「身体化症状を呈する患者に対する看護ケアガイドライン」を作成し、評価した。精神科において身体化症状を呈する患者に対して「身体化症状を呈する患者に対する看護ケアガイドライン」を用いた結果、体系的に統一した看護が実施し、身体化症状に対する適応行動の頻度を強化することで退院につなげることが可能となった。本研究は、「精神科・身体科の比較を通して、身体化症状を呈する患者への心身両面の適切な看護ケアを明らかにし、「身体化症状を呈する患者に対する看護ケアガイドライン」を作成すること」を目的としている。平成19年度は、「身体科・精神科において身体化症状を呈する患者の心身両面の病態を整理し、その患者にどのような看護ケアが実施されているかを明らかにする」ことを目的として研究を計画し、当該施設の倫理委員会の承認を得た。結果を以下に述べる。(1)患者の心身の病態を整理する。身体科・精神科において、同意を得られた身体化症状を呈する患者の心身両面の病態を診療記録や看護記録を参照して整理した。その結果、身体化を訴える患者は、主に<精神症状(主にうつ・不安・緊張)に伴う身体症状><身体表現性障害><その他...パーソナリティ障害、詐病など>の3つに大別され、それぞれの症状の訴え方や時期が異なることが明らかになった。(2)(1)で心身の病態を整理した患者に対し、どのような看護ケアが実施されているかを明らかにする。研究対象となった患者の看護にあたっており、同意の得られた看護師23名に研究への協力依頼し、看護ケアの場面を参与観察し、詳細なフィールドノーツに記録し、適宜インタビューを実施した。その結果、看護師は、主に<身体疾患の鑑別のための観察><精神症状の判断><支障のある日常生活行動への援助><つらさの受容><生育歴・環境のアセスメント><感情の言語化の手助け・促し>の看護ケアを実施していることが明らかとなった。今後は、身体化症状を呈する患者の病態のアセスメント方法や、心身の病態に対し、どの看護ケアが適しているか分析を進め、ガイドライン化していく予定である。平成20年度は、特に精神科において身体化症状を呈する患者の心身両面の病態を診療記録や看護記録を参照して整理し、身体科において実施されていた看護と比較した。また、両科の看護師の身体化症状を呈する患者に対する看護経験をインタビューして比較することにより、その共通点と相違点を明らかにし、下記の結果を学会にて発表した。1.両科に共通していた看護:患者の訴える症状が、身体化と診断される以前からその看護を開始している点が特徴的であり、<症状によって不足しているセルフケアを援助する>・<身体症状の裏付けをさがす>・<信頼関係を築く>・<原因不明な身体症状へ対応する>等の看護が共通していた。身体化症状と診断された後は、上記ケアに加え、<背景因子をアセスメントする>・<理解されにくい身体症状のつらさを共感する>・<患者とともに対処方法を検討する>・<身体症状から気をそらす>等の看護がみられた。また、看護師の不全感や陰性感情がケアに影響している点も共通していた。2.両科の相違点:患者の身体化症状の重症度および治療プロセス、普段行っている看護ケア内容の差異により生じていた。精神科においては、身体化症状の疑いが指摘された重症度の高い患者をケアすることが多く、「併発性身体化」ではうつなどの<原因となる精神障害の看護に則り見通しを示す>、「機能性身体化」・や「心気身体化」では精神力動などの精神科看護技術を使って<言語化を促す>・<直面化を促す>などの身体化症状の原因を意識したケアを実施していた。一方、身体科においては、身体疾患によって入院している患者が、初めて身体化症状を訴えるケースと関わることが多く、身体疾患により同じような身体症状を訴える患者の看護経験をいかし、<入院の原因となった身体疾患のケアを通して関わる>・<身体症状へ効果的な対処を取り入れる>等のケアを行っていた。平成21年度は、それぞれを専門としない看護師が心身両面の適切な看護ケアを行うために、上記で明らかにした両科の長所をいかしたガイドラインを作成する予定である。平成21年度は、平成19年度・20年度に精神科・身体科の比較を通して明らかにした心身両面の適切な看護ケアをふまえ、「身体化症状を呈する患者に対する看護ケアガイドライン」を作成し、評価した。「身体化症状を呈する患者に対する看護ケアガイドライン」はアセスメントに応じて看護ケアを選択する下記の内容で構成された。

アセスメントは、<身体化症状の重症度の評価><身体的影響因子><精神的影響因子><心理社会的因子><自律神経症状><発達段階・家族システム><認知行動学的因子(疾病行動・強化刺激・身体化症状に対する認知および対処法)><疼痛行動のパターン><生活及び役割機能障害>で構成されている。看護ケアは、【患者-看護師の信頼関係の構築】【身体化症状により低下したセルフケアの補足】【治療の概要と理論的根拠の提供】【治療の対象となる症状の見直し】【認知行動療法的な関わり】【身体化症状に対する適応行動の頻度の強化】【言語化および直面化の促し】【気分転換の促進】【リラクゼーション】で構成されており、アセスメント結果に応じて組み合わせる内容を選択する。精神科において身体化症状を呈する患者に対して「身体化症状を呈する患者に対する看護ケアガイドライン」を用いた結果、体系的に統一した看護が実施し、身体化症状に対する適応行動の頻度を強化することで退院につなげることが可能となった。
高スピン5配位型ヘムタンパク質の新規設計と合成

分子状酸素を安定に結合する、完全に人工的なヘムタンパク質をつくることを目的とし、構造予測で用いられる3D-ID法を応用して、153アミノ酸残基からなる新規人工グロビンの設計を行った。この人工グロビン(Designed Globin、DG)のアミノ酸配列がコンピューター上、ターゲットとした骨格構造と矛盾がないことをを確かめた後、これをコードする合成遺伝子を大腸菌内で発現させ、目的とするタンパク質を得た。DGは水溶性で、低タンパク質濃度・非変性条件下でモノマーとして存在した。円偏光2色性とX線溶液散乱による構造解析の結果、DGは、天然のアポミオグロビンと同様のヘリックス含量(61%)と分子の外形(回転半径20Å)を示した。さらに、DGは、その回転半径の減少を伴って、1分子あたり1つのヘムを結合した(K_d=0.08μM)。可視光吸収および共鳴ラマンによる分光学的解析の結果、結合ヘムは、酸化型(鉄3価)で2つのヒスチジンが軸配位している低スピン6配位型であることが示された。一方、還元型(鉄2価)は、低スピン6配位型と高スピン5配位型の混合状態にあった。しかし還元型ヘム-DGを酸素と混合すると結合ヘムは速やかに酸化され、ミオグロビンにみられるような安定な酸素化型を検出できなかった。さらに、NMR測定の結果、DGは、天然のタンパク質にみられるような側鎖レベルでの構造の単一性を欠いていることが明らかとなった。以上の結果は、天然タンパク質のアミノ酸配列には、主鎖の骨格構造とともに側鎖構造もコードされており、分子状酸素との結合のような生物学的機能を設計するためには、主鎖構造ばかりでなく側鎖構造を考慮に入れた設計法が必要であることを示す。天然タンパク質の基本的な構造モチーフのひとつである4本ヘリックスバンドルを骨組みとした一連の人工ヘムタンパク質を作成し、それらの酸化還元電位、配位子結合特性および分子状酸素との反応性を調べた。4本ヘリックスバンドルに結合するヘムの種類(protoheme,heme A)を変えると,全体構造の変化(parallel⇔antiparallel)とその構造変化による酸化還元電位の変化が観測された。これらの人工タンパク質では、シトクローム類など天然のヘムタンパク質とは異なり、ヘム鉄の内存性配位子のひとつであるヒスチジン残基が、容易にシアンや一酸化炭素などの外来性の配位子置き変わり、これらの還元型を空気と接触させると、速やかに自動酸化された。これらのことを利用して、天然の還元酵素を使って人工ヘムタンパク質を触媒的に還元し、分子状酸素と反応させることによって、オキシダーゼ様の酸化還元系を構築した。一方、一般的な球状タンパク質の分子設計法の開発に向けて、マッコウクジラミオグロビンの立体構造をターゲットとして選び、天然タンパク質の構造データベースから得られる経験的ポテンシャルエネルギーに基づいて、153アミノ酸からなる人工グロビンの配列設計を行った。得られたアミノ酸配列は、天然配列と25%程度のホモロジーをもち、計算上、分子量18.6kDa、等電点5.8を示した。分子グラフィクスを使って、得られた配列をミオグロビンの立体構造に乗せて3Dモデリング/分子力学計算を行った結果、主鎖原子のr.m.s.差0.12Å以内ではほぼ完全に非結合原子間のぶつかりが除去され、天然のX線結晶構造とほぼ同数の水素結合が検出された。
気管支肺異形成での炎症細胞産生NGALとの関連解析

Neutrophil gelatinaseーassociated lipocalin(NGAL)などの炎症性蛋白と気管支肺異形成(BPD)との関連について解析した。在胎31週未満のBPD発症群16名と非発症群20名で比較検討したところ、早産児の出生時血中NGAL値はBPD発症の予測因子となる可能性が示唆された。また胸部CTで評価したBPD重症度と、周産期情報、出生後の炎症サイトカンとの関連についてBPD発症群73名で検討したところ、BPDの重症度には、SGAおよび日齢28までのCRP値や好中球数が関連している可能性が考えられた。早産児・低出生体重児の呼吸器合併症である気管支肺形成は、肺の未熟性と感染や炎症が病因と考えられる。しかしながら、肺の局所や血液中の炎症細胞である好中球やマクロファージが、肺組織を破壊し病態の進行に関わる分子機序は充分に解明されていない。本研究では蛋白分解酵素と自然免疫応答に関連すると考えられる、Neutrophil gelatinase-associated lipocalin(NGAL)に着目し、血清と肺胞洗浄液の発現と気管支肺形成との関連を調査するものである。当該年度は、九州大学病院総合周産期母子医療センターに入院した合計86名の新生児に関して解析した結果を報告した。引き続き、症例を集積している。早産児・低出生体重児の呼吸器合併症である気管支肺異形成は、肺の未熟性と感染と炎症が病因と考えられる。しかしながら、肺の局所や血液中の炎症細胞である好中球やマクロファージが、肺組織を破壊し病態の進行に関わる分子機序は十分に解明されていない。本研究では蛋白分解酵素と自然免疫応答に関連すると考えられる、Neutrophil gelatinaseーassociated lipocalin(NGAL)に着目し、血清中および肺胞洗浄液中濃度と気管支肺異形成との関連を調査するものである。初年度は九州大学病院総合周産期母子医療センターに入院した合計86名の新生児に関して解析し報告した。気管支肺異形成の発症と出生時の血清中NGAL濃度には有意な関連が見出され、出生時の血清NGAL濃度により気管支肺異形成の発症が予測できる可能性が示唆された。当該年度は、初年度で得られた知見を確認するために、さらに多数症例で解析することを目標に症例を集積中である。また、NGALだけでなくIL-6やIL-8など他の炎症性サイトカインとの関連も検討する予定である。血清だけでなく、肺胞洗浄液中のNGAL濃度との関連を検討するために、気管挿管症例において肺胞洗浄液検体を集積している。また、気管支肺異形成の発症早期または発症後の血清NGAL値を検討するために、日齢14および日齢28における血清を集積している。さらに、所属研究機関で考案した肺コンピュータ断層撮影を用いた気管支肺異形成重症度スコアシステム(論文発表済み)を用いて、気管支肺異形成の重症度とNGALとの関連を解析予定である。早産児・低出生体重児の重症な合併症の一つである気管支肺異形成は、肺の未熟性と感染や炎症が病因として考えられている。本研究では蛋白分解酵素と自然免疫応答に関連すると考えられるNeutrophil gelatinase-associated lipocalin(NGAL)やその他サイトカインと気管支肺異形成との関連について検討した。九州大学病院総合周産期母子医療センターに入院した合計86名の極低出生新生児について解析したところ、気管支肺異形成の発症と出生時の血清中NGAL濃度に有意な関連を認め、出生時の血清NGAL濃度により気管支肺異形成の発症が予測できる可能性が示唆された。さらに、肺コンピューター断層撮影を用いた気管支肺異形成重症度スコアシステム(論文発表済み)を用いて、気管支肺異形成の重症度と血清サイトカイン値(マイクロビーズ法で測定)を検討したところ、単変量解析で重症度と日齢14と28の好中球数とCRP、重回帰解析で重症度と日齢0の好中球数、日齢14のIL-8が有意な関連を認めた。初年度、当該年度に当センターに入院した早産児において、気管支肺異形成例、非発症例の入院時、生後2週間、日齢28、退院前の血清を冷凍保存している。また気管支肺異形成を発症し臨床上必要と考えられた児では、退院前に肺コンピュータ断層撮影を行っている。新生児症例を集積し、保存血清を用いてneuro@hil gelatinase-associated lipocalinをELIZA法で測定する予定である。IL-6などの炎症性サイトカインに関しては、マイクロビーズ法を用いて測定する予定である。当該年度に気管支肺異形成を発症した児は5名だった。

入院時、生後2週間、日齢28、退院前の血清を冷凍保存している。また、当センターに入院した早産児の血清も同様に保存している。現在症例を集積中で、検体が集まり次第順次解析予定である。目標症例数まで引き続き症例の集積を行う。その後NGALおよびMMP-9、炎症性サイトカインを測定し、その解析結果によっては、臍帯血からビーズ法を用いて好中球、単球、赤芽球を分離し、LPS等で刺激培養した後のNGAL発現およびサイトカイン発現をmRNAおよび蛋白質レベルで解析する。現在症例を集積中である。統計解析な目標症例数まで引き続き症例の集積を行う。その後NGALおよびMMP-9を測定し、その解析結果によっては、臍帯血からビーズ法を用いて好中球、単球、赤芽球を分離し、LPS等で刺激培養した後のNGAL発現およびサイトカイン発現をmRNAおよび蛋白質レベルで解析する。
運動不振学生の「つまずき」経験と「知覚-運動」能力に関する研究

運動技能の指導・学習場面では,他者と同じように練習を行ってもなかなか技能の向上が認められない学習者が見受けられる。このような学習者は,「運動不振」と呼ばれるが,その改善策については十分な知見が得られていない。そこで,運動不振を呈する学生の体育授業における「つまずき」経験,視覚的能力及び体力を調べた結果,以下のことが明らかとなった。1)運動不振学生の「つまずき」経験として,短距離走が苦手,走→跳の系列的動作が苦手,ボール投げが苦手,ボールの軌道が予測できない,恐怖心がある,等のことが挙げられた。2)運動不振学生は,眼と手の協応動作等の視覚的能力が低い。3)運動不振学生は,50m走や上体起こし等の体力が低い。本研究は,運動不振学生(運動が苦手な学生)の体育授業における「つまずき」経験を調査し,運動課題の観点から運動不振の原因を明らかにすることを目的とした。運動不振学生9名をインフォーマントとして面接調査を行った。運動不振の判定には,「大学生版運動不振尺度」(古田,2008)を用いた。面接は半構造化面接法で行い,陸上運動,器械運動,水泳運動,ボール運動,武道,表現運動等の各領域における「つまずき」経験について質問した。研究成果の1例としてMさんについての調査結果を報告する。Mさんは19歳の国立大学文系の小柄な女子学生で,小学校から現在まで音楽系のクラブに所属している。習慣的に行う身体活動は大学の授業(スポーツ実技)のみで,それ以外に定期的にスポーツ等をすることはない。体育やスポーツをするのは小学校低学年の頃から嫌いである。その理由は,足が遅いために運動会の短距離走でビリになることがあり,それが嫌で体育やスポーツが嫌いになったとのことであった。「つまずき」経験として挙げられた主なものは次の通りであった。1)陸上運動の短距離走においては,幼少期から遅かったため無力感が形成され,走ること自体に対して消極的になっている。2)水泳運動の平泳ぎにおいては,足の動作及び手と足のコンビネーションをどのようにするかイメージできない。3)ボール運動においては,各種目に共通してボールの飛来やバウンドにおけるコースや落下地点の予測が困難なため,ゲーム展開についていけない。4)剣道の面打ちにおいては0防具の装着により動きが制限され,竹刀をうまく振り上げることができない。現在のところ,運動不振の原因やその解決法はほとんど明らかとなっていない。上記のような事例研究を蓄積することにより,運動不振学生の「つまずき」の原因解明と解決法の考案に貢献できると考えられる。運動技能の教授・学習場面においては,他者と同じように練習を行っても,なかなか技能の向上が認められない学習者が見受けられる。このような学習者は「運動不振」と呼ばれる。運動不振を呈する者が運動を苦手とする理由として,知覚-意思決定-運動実行という一連の情報処理プロセスのどこかに問題(ボトルネック)があることが考えられる。そこで,本年度は,情報処理プロセスの最初である視覚的知覚の段階に着目し,運動不振学生の視覚的能力の水準を検討した。被験者は,運動不振学生17人(全て女性)であった。運動不振の判定には,大学生版運動不振尺度(古田,2008)を用いた。視覚的能力として,(1)静止視力,(2)KVA動体視力,(3)DVA動体視力,(4)コントラスト感度,(5)眼球運動,(6)深視力,(7)瞬間視,(8)目と手の協応動作,(9)視野角の9項目をそれぞれ専用の機器を用いて測定した。測定結果を,真下(2002)の視覚的能力の評価基準を適用して5段階(5高い1低い)で評価した。その結果,1又は2の低い評価だった者は,17人中,静止視力で10人,KVA動体視力で14人,コントラスト感度で7人,眼球運動で11人,深視力で11人,目と手の協応動作で17人,瞬間視で2人であった。DVA動体視力と視野角については評価基準が適用できなかった。このように,運動不振学生においては,コントラスト感度と瞬間視を除き,視覚的能力において標準以下を示す者が多い傾向が明らかとなった。意思決定及び運動実行段階におけるボトルネックの可能性については未検討であるが,知覚段階の情報処理がパフォーマンスを制限している可能性が示唆された。

運動不振を呈する者が運動を苦手とする理由として,知覚-意思決定-運動実行という一連の情報処理プロセスのどこかに問題(ボトルネック)があることが考えられる。そこで,今回は情報処理プロセスの最後である運動実行の段階に着目し,運動不振学生の体力の水準を検討した。被験者は,運動不振学生13人及び非運動不振学生15人であった。被験者は全て女性であった。運動不振の判定には,大学生版運動不振尺度(古田,2008)を用いた。体力として,(1)上体起こし,(2)斜め懸垂,(3)20mシャトルラン,(4)50m走の4項目を測定した。対応のないt検定を用いて運動不振学生と非運動不振学生の間で,体力の4項目において違いがあるか分析した結果,全ての項目において非運動不振学生の方が有意に優れていた。前年度の研究によって,運動不振学生は非運動不振学生と比べて,眼と手の協応動作や眼球運動等の視覚的能力が低いことが明らかとなっている。これは,知覚段階にボトルネックがあることを示唆している。しかし,今回の結果において,運動不振学生は,運動実行段階の能力と考えられる体力も低かったことから,知覚段階だけではなく運動実行段階においてもボトルネックが存在することが示唆された。このため,運動不振を改善するためには,単一の能力ではなく視覚的能力や体力等の能力を総合的に向上させることが必要であると考えられる。
グラフのスペクトル幾何と古典および量子酔歩の挙動の相関の解明

またグラフ上のより一般の量子酔歩に注目した研究も行った.グラフ上の量子酔歩の中でGrover walkは単純酔歩と関連したコイン作用素とflip-flopというシフト作用素の積を基本作用素としてもつが,コイン作用素はそのままにシフト作用素をグラフの幾何に基くmoving-shiftに置きかえると当然のように量子酔歩のスペクトル構造は変化する.その変化はサイクルの選び方などに依存することを計算機実験から確認し,さらにその仕組みについて部分的な結果が得られた.そこではシフト作用素をmoving-shiftにした量子酔歩は,シフト作用素がflip-flopでコイン作用素が摂動されたものと見直すことから判別作用素(いわば一般化された酔歩)を用いてスペクトル構造を導くことが鍵となっている.より厳密かつ一般的な発展はこれからの課題にしても今後の礎となったという意味で大きな実績といえよう.さらには,以前受けていた科研費からの継続として田中幹大氏(甲南女子大学)らと,学生を対象とした単語間の結び付きの連想実験を行い,脳内辞書(mental lexicon)ネットワーク構造の解析を行った.実際の脳内辞書はランダムグラフや複雑系ネットワークとの親密性が高い動的ネットワークであり,ここでは学んだ単語群に複雑系ネットワークでいうハブの存在を確認することができた.今後に向けてまだ段階を重ねる必要があるが,他分野への応用に向けた第一歩の成果と自負している.グラフ上の古典および量子酔歩のスペクトル構造とグラフの幾何構造の理論的体系の構築のためには,まず多くの具体例を調べることも重要となっている.当初は手計算では困難な具体例の計算を,まず数値計算による実験,ただしより優れた計算機による本格的実行の下準備としての予備実験を手持ちの非力なPCで行うことも予定に組みこんでいた.しかし,研究実績の概要に記述したように,量子酔歩の解析や応用に関する研究に多くの時間を割くことになったため計算機による実験に割く時間が極端に減少してしまった.その意味では,計算機実験準備および実装に関してはいささかの遅れがあることは否定できない.ただ,一方で小さな計算機実験から一般的な理論構築に想像以上にすんなりと移行できた課題もあり,しかもそれが予想以上の進展を見せたことも事実である.まとめてみると,計算機実験はあくまでも理論構築のための具体例の取得であることに対して,一方理論面の発展は一定の成果があったことを考慮にいれると,全体的には概ね順調に達成されていると判断する.来年度においては,今年度の研究を基に古典および量子酔歩の時間発展やスペクトル構造とグラフの幾何的・組合せ的性質との支配関係をより明白にすることを目標とする.例えば典型的な量子酔歩の時間発展作用素はユニタリなコイン作用素とシフト作用素の積で表されるが,とくに酔歩から誘導されるコイン作用素と,グラフの幾何から誘導されるmoving-shiftで誘導されるシフト作用素から得られる時間発展作用素のスペクトル構造の特徴付けをまず第一の課題としておく.特殊なグラフの族に関しては,計算機実験から動機づけにより「スペクトル写像定理」の背後に潜む構造とグラフの幾何構造を結びつけられたので,その特徴付けを維持する一般的幾何構造もしくは注目する幾何構造の変化によるスペクトル構造の変化を明らかにしていきたい.そのためにも従来から研究対象としているグラフ上の離散作用素のスペクトル集合の構成や状態密度函数の挙動などに,グラフの幾何の影響度合いをより詳細に解析していく必要がある.そこで解析接続したグリーン函数の挙動,固有値のみならず共鳴状態(レゾナンス)の特徴付けなどを進展させることを意図しながら,いままで未解決な双曲的無限グラフのスペクトルの決定やグラフに潜む曲率の炙り出しなどでの進展も図るつもりだ.そこではおそらく計算機実験の助力が必要になり,今年度はいささか遅れた感のある計算機実験下準備も遂行できるだろう.総合的には,推進方策の基本は今年度と変わらず,まずは目的達成といえる結果を引き出すためにも多様な分野の研究者との密なる交流を図る.つまり可能な限り各種の研究集会に参加・講演することで新たなアイディアの取得や励起の可能性をより高めていくつもりである.さらに必要に応じて,若手研究者や異分野研究者を招聘した小さな研究会や勉強会を開催して,互いに刺激を与えながら次のフェイズに移行しようと考えている.またグラフ上のより一般の量子酔歩に注目した研究も行った.グラフ上の量子酔歩の中でGrover walkは単純酔歩と関連したコイン作用素とflip-flopというシフト作用素の積を基本作用素としてもつが,コイン作用素はそのままにシフト作用素をグラフの幾何に基くmoving-shiftに置きかえると当然のように量子酔歩のスペクトル構造は変化する.その変化はサイクルの選び方などに依存することを計算機実験から確認し,さらにその仕組みについて部分的な結果が得られた.そこではシフト作用素をmoving-shiftにした量子酔歩は,シフト作用素がflip-flopでコイン作用素が摂動されたものと見直すことから判別作用素(いわば一般化された酔歩)を用いてスペクトル構造を導くことが鍵となっている.より厳密かつ一般的な発展はこれからの課題にしても今後の礎となったという意味で大きな実績といえよう.さらには,以前受けていた科研費からの継続として田中幹大氏(甲南女子大学)らと,学生を対象とした単語間の結び付きの連想実験を行い,脳内辞書(mental lexicon)ネットワーク構造の解析を行った.実際の脳内辞書はランダムグラフや複雑系ネットワークとの親密性が高い動的ネットワークであり,ここでは学んだ単語群に複雑系ネットワークでいうハブの存在を確認することができた.

今後に向けてまだ段階を重ねる必要があるが,他分野への応用に向けた第一歩の成果と自負している.グラフ上の古典および量子酔歩のスペクトル構造とグラフの幾何構造の理論的体系の構築のためには,まず多くの具体例を調べることも重要となっている.当初は手計算では困難な具体例の計算を,まず数値計算による実験,ただしより優れた計算機による本格的実行の下準備としての予備実験を手持ちの非力なPCで行うことも予定に組みこんでいた.しかし,研究実績の概要に記述したように,量子酔歩の解析や応用に関する研究に多くの時間を割くことになったため計算機による実験に割く時間が極端に減少してしまった.その意味では,計算機実験準備および実装に関してはいささかの遅れがあることは否定できない.ただ,一方で小さな計算機実験から一般的な理論構築に想像以上にすんなりと移行できた課題もあり,しかもそれが予想以上の進展を見せたことも事実である.まとめてみると,計算機実験はあくまでも理論構築のための具体例の取得であることに対して,一方理論面の発展は一定の成果があったことを考慮にいれると,全体的には概ね順調に達成されていると判断する.来年度においては,今年度の研究を基に古典および量子酔歩の時間発展やスペクトル構造とグラフの幾何的・組合せ的性質との支配関係をより明白にすることを目標とする.例えば典型的な量子酔歩の時間発展作用素はユニタリなコイン作用素とシフト作用素の積で表されるが,とくに酔歩から誘導されるコイン作用素と,グラフの幾何から誘導されるmoving-shiftで誘導されるシフト作用素から得られる時間発展作用素のスペクトル構造の特徴付けをまず第一の課題としておく.特殊なグラフの族に関しては,計算機実験から動機づけにより「スペクトル写像定理」の背後に潜む構造とグラフの幾何構造を結びつけられたので,その特徴付けを維持する一般的幾何構造もしくは注目する幾何構造の変化によるスペクトル構造の変化を明らかにしていきたい.そのためにも従来から研究対象としているグラフ上の離散作用素のスペクトル集合の構成や状態密度函数の挙動などに,グラフの幾何の影響度合いをより詳細に解析していく必要がある.そこで解析接続したグリーン函数の挙動,固有値のみならず共鳴状態(レゾナンス)の特徴付けなどを進展させることを意図しながら,いままで未解決な双曲的無限グラフのスペクトルの決定やグラフに潜む曲率の炙り出しなどでの進展も図るつもりだ.そこではおそらく計算機実験の助力が必要になり,今年度はいささか遅れた感のある計算機実験下準備も遂行できるだろう.総合的には,推進方策の基本は今年度と変わらず,まずは目的達成といえる結果を引き出すためにも多様な分野の研究者との密なる交流を図る.つまり可能な限り各種の研究集会に参加・講演することで新たなアイディアの取得や励起の可能性をより高めていくつもりである.さらに必要に応じて,若手研究者や異分野研究者を招聘した小さな研究会や勉強会を開催して,互いに刺激を与えながら次のフェイズに移行しようと考えている.<理由
後天的に獲得されたDNAマーカーによる親子鑑定への応用

本研究では,RFLPsやVNTRを使った従来のDNAマーカーに対し,ヒトの中で後天的に再構築されかつ多型を示すようなDNAマーカーを見いだすことを主目的とした.また,ヒトにおけるこのDNAマーカーの生成機序や,親子および一卵性双生児における個人識別での有用性を明らかにすることを試みた.平成5年度では,免疫グロブリン遺伝子のV,DおよびJ領域にまたがるcomplementarity-determining regions 3(CDR3領域)を後天的に再構築されるDNAマーカーと考えたが,免疫グロブリン遺伝子を発現しているB細胞の寿命のため,この遺伝子を後天的DNAマーカーとすることはできなかった.平成6年度では,ヒトが獲得するDNAマーカーとして、ヒトに不顕性感染するEBウイルス遺伝子を考えた.ヒトの末梢血DNA98例からBamW領域のプライマーを用いてPCR法を行いEBウイルスDNAを検出したところ,90例(92%)にEBウイルス遺伝子を証明することができた。このように,EBウイルス遺伝子をターゲットにすることにより,ヒトが後天的に獲得し,しかもヒトDNAと区別可能なDNAが存在することを明らかにできた.平成7年度では,ヒトの末梢血DNAから,ウイスル遺伝子内の数種の反復配列構造をそれぞれsemi-nested PCR法により増幅し,サザンブロット法を使うことによって,これらの部位がEBウイルスの不顕性感染中に変異を起こすかどうか検討した.この結果,選択した5種の反復配列領域のうち2つにおいて,EBウイルスの長期感染中にウイルス遺伝子の反復配列領域が変異を起こしていることが明らかになった.この変異のパターンは,各個人によって異なっていたため,EBウイルスの反復配列領域を後天的DNAマーカーとして考えることができるものと思われた.しかし,同一人において,不顕性感染しているEBウイルスは単一のstrainなのかどうか,あるいはヒトの一生を通じて常に同じstrainのウイルスを持ち続けているのか,そしてまた,そのウイルスはヒトの一生を通じてマーカーとなるような不変な部分をもちうるのかなど不明な点もあり,これらは今後の検討課題である.本研究では,RFLPsやVNTRを使った従来のDNAマーカーに対し,ヒトの中で後天的に再構築されかつ多型を示すようなDNAマーカーを見いだすことを主目的とした.また,ヒトにおけるこのDNAマーカーの生成機序や,親子および一卵性双生児における個人識別での有用性を明らかにすることを試みた.平成5年度では,免疫グロブリン遺伝子のV,DおよびJ領域にまたがるcomplementarity-determining regions 3(CDR3領域)を後天的に再構築されるDNAマーカーと考えたが,免疫グロブリン遺伝子を発現しているB細胞の寿命のため,この遺伝子を後天的DNAマーカーとすることはできなかった.平成6年度では,ヒトが獲得するDNAマーカーとして、ヒトに不顕性感染するEBウイルス遺伝子を考えた.ヒトの末梢血DNA98例からBamW領域のプライマーを用いてPCR法を行いEBウイルスDNAを検出したところ,90例(92%)にEBウイルス遺伝子を証明することができた。このように,EBウイルス遺伝子をターゲットにすることにより,ヒトが後天的に獲得し,しかもヒトDNAと区別可能なDNAが存在することを明らかにできた.平成7年度では,ヒトの末梢血DNAから,ウイスル遺伝子内の数種の反復配列構造をそれぞれsemi-nested PCR法により増幅し,サザンブロット法を使うことによって,これらの部位がEBウイルスの不顕性感染中に変異を起こすかどうか検討した.この結果,選択した5種の反復配列領域のうち2つにおいて,EBウイルスの長期感染中にウイルス遺伝子の反復配列領域が変異を起こしていることが明らかになった.この変異のパターンは,各個人によって異なっていたため,EBウイルスの反復配列領域を後天的DNAマーカーとして考えることができるものと思われた.しかし,同一人において,不顕性感染しているEBウイルスは単一のstrainなのかどうか,あるいはヒトの一生を通じて常に同じstrainのウイルスを持ち続けているのか,そしてまた,そのウイルスはヒトの一生を通じてマーカーとなるような不変な部分をもちうるのかなど不明な点もあり,これらは今後の検討課題である.平成5年度は、後天的にヒトDNA中に再構築されるDNAを探す目的で、正常なヒトの血液および組織中のEpstein-Barr(EB)ウイルスゲノムの検索を行った。EBウイルスのBamW領域のプライマーを使ったPCR法で、正常なヒトのリンパ球から分離したDNAから、EBウイルスゲノムを証明することができた。また、EBER領域のプライマーを使ったRT-PCR法でより高感度にEBウイルスを検出することができ、ほぼ100%のヒトの末梢血DNAからEBウイルスゲノムを検出することができた。さらに、手術によって摘出されたEBウイルスに無関係な疾患の扁桃組織を使って、in situ hybridization法でEBウイルスの局在を調べた。その結果、扁桃組織の主要部分であるBリンパ球中にはEBウイルスは検出されず上皮細胞内に存在することがわかった。これらの成績より、正常ヒトリンパ球および上皮細胞内にはEBウイルスが存在し、これらのウイルスは血清中の高い抗EBウイルス抗体価にもかかわらず、持続的に感染していると推測された。このEBウイルスがどのような状態で細胞内に存在するのかを、LMP1、EBNA1、EBNA2、EBER1およびEBER2などの領域をプローブとしたmRNAに対するin situ hybridization法により明らかにし、この持続感染しているEBウイルスゲノムが後天的なDNAマーカーとして有用かどうかを次年度以降で明らかにする。昨年度までは,ヒトDNA中に存在する後天的DNAマーカーの存在を検討してきたが,平成6年度では,この後天的DNAマーカーとして,外来因子であるEBウイルスに的を絞った.EB

ウイルスはヘルペスウイルス属の一種で,初感染後,ヒトの体内で不顕性感染を起こすことが知られている.我々は,in situ hybridization法を用いて,EBウイルスがB細胞に感染していることを明らかにした.今回,EBウイルスの検出には,ヒトの末梢血DNAを用いたPCR法を使用し,増幅領域としてEBウイルスのBamW領域を選んだ.ヒト末梢血DNA98検体を検査したところ,90例(92%)にEBウイルスDNAを証明することができた.また,EBウイルスDNAの陽性例を年齢別に見ると,最年少で11ケ月,最年長で93歳であったが,EBウイルスDNAはすべての年齢層にわたってほぼ均等な割合で検出することができた.同一人における継時的検索では,このEBウイルスDNAは8年の経過においても消失しておらず,その強さにも変化がなかった.このように,EBウイルスDNAをターゲットにすることにより,ヒトDNA中には後天的に獲得し,しかもヒトDNAと区別可能なDNAが存在することを明らかにできた.これにより,平成6年度までのヒトDNA中の後天的DNAマーカーの存在を検索するという目標は完全に達成することができた.また,EBウイルスはゲノム内部にリピート構造を有し,この部位が持続感染している間に一部変異することを確認した.平成7年度では,このEBウイルスゲノム内部のリピート構造の多型性が親子鑑定や個人識別に応用可能かどうか検討していく.昨年度までに,健常人に不顕性感染しているEpstein-Barr(EB)ウイルス遺伝子がヒトの後天的なDNAマーカーとなりうる可能性を示した.EBウイルスの塩基配列を調べると,ウイルス遺伝子内には数種の反復配列構造が存在していることがわかる.これらの反復配列構造は,法医学で使用しているミニサテライトやマイクロサテライトなどのDNAマーカーのように,異変が起こりやすい部位ではないかと推測できる.そこで,平成7年度では,ヒトの末梢血DNAからこれらの反復配列領域をそれぞれsemi-nested PCR法により増幅し,サザンブロット法を使うことによって,これらの部位がEBウイルスの不顕性感染中に異変を起こすかどうか検討した.この結果,今回選択した5種の反復配列領域のうち2種において,ヒト末梢血DNAのPCR増幅産物の電気泳動像が数本のバンドとなり,EBウイルスの長期感染中にウイルス遺伝子の反復配列領域が変異を起こしているものと推測された.そして,この変異のパターンが各個人によって異なっていたため,EBウイルスの反復配列領域を後天的DNAマーカーとして考えることができると思われた.しかし,同一人において,不顕性感染しているEBウイルスは単一のstrainなのかどうか,あるいはヒトの一生を通じて常に同じstrainのウイルスを持ち続けているのか,
心筋梗塞感受性分子の網羅的プロテオーム、ゲノム解析による疾患発症機構の解明

心筋梗塞(MI)感受性分子BRAPに結合するタンパク質の同定を網羅的に進め、さらにその分子群をコードする遺伝子領域についてSNP関連解析を試行した。BRAP結合タンパクとしてはIKK-signalosomeを構成する分子群等、炎症や細胞増殖に強く関連する分子を同定するとともに、さらにこれら結合分子の中でE3 ubiquitin ligase様の分子をコードする遺伝子領域のSNPがまたMIと強い関連を示すことを発見した。心筋梗塞(MI)関連分子BRAPに結合する分子の探索をさらに進めると同時に、結合が確認できた分子群のそれぞれをコードする遺伝子を含むゲノム領域においてタグ一塩基多型(タグSNP;連鎖不平衡の関係により選択した代表SNP)を選択し、MIのケース・コントロール関連解析を施行した。一次スクリーニングとしてMI患者由来および一般人由来DNAそれぞれ約1,000例についてタイピング、統計解析を行い、有意なSNPについては再検証としてさらに独立のケース・コントロールサンプルをタイピングして解析を行った。ここで再現性がとれたSNPについてはさらに異なるサンプルセットを用いたタイピング、統計解析を行うという計3ステップの関連解析によりその確実性を追求した。その結果、新規結合分子をコードする遺伝子内に存在するSNPはすべてのサンプルセットにおいてカイ二乗検定でのP値が0.01未満を示し、全体を合計するとさらにMIと強い関連を統計学的に示した。この分子は細胞内に存在し、機能としては炎症関連分子の安定性等に関係することがわかっている。BRAPのタンパク構造にはE3ユビキチンライゲースドメインがあり、これはプロテアソーム系を介したタンパク分解に関係すると考えられることから、この分子とBRAPが相互作用することにより炎症関連分子の分解や安定性等に関係している可能性が示唆される。今回発見したMI関連分子のどのような機能(あるいは発現)変化がMIに関連するのかは責任SNP(遺伝子機能や発現等に影響を与えるSNP)を詳細なSNP探索やその連鎖不平衡解析等により今後同定する必要があるが、今年度の研究によりMI関連分子BRAPとタンパク機能的に関係がある分子がまた遺伝学的にMI感受性であることが発見され、このカスケードの疾患発症、進展における重要性が示唆された。心筋梗塞(MI)感受性分BRAPに結合するタンパクを同定し、さらにそのタンパクをコードする遺伝子領域のゲノム疫学的解析からMI感受性を示す遺伝子の同定を進めてきた。これまでにBRAPと結合することを新規に同定したタンパク(仮称;BRAPBP)をコードする遺伝子領域の一塩基多型(SNP)を用いた関連解析により統計学的に有意差を示すマーカーSNPを同定していた。本年度の研究においてはそのBRAPBP遺伝子を含む連鎖不平衡(LD)領域の詳細なSNP遺伝的地図(LDマッピング)の作成を行い、原因SNPの同定を進めてきた。約200kbにわたるBRAPBP遺伝子を含むLD領域をダイレクトシークエンス法により数十人のMI患者由来DNAを再シークエンスしSNPの同定を行った。ここで同定したSNPの中でマイナーアレル頻度が0.05(5%)以上のSNPについてLD解析により代表SNPを選抜し、MI、一般集団由来DNAについてタイピング行い、さらに関連解析を試行した。その結果、マーカーSNPよりもMIと強い関連を示すSNPは存在せず、マーカーSNPと同じ挙動を示す(完全なLDにある)SNPは他に16個存在しており、合計17個のSNPの中のいずれかあるいはいくつかがMI感受性の原因になることを突き止めた。これら17個はすべてアミノ酸変化を伴わないSNPであり、現在これらのSNPのBRAPBP遺伝子の転写や分解に与える影響を解析中である。このBRAPBPもまたIKK-signalosomeに関連した分子であることが知られており、炎症がMI発症に強く関わることをさらに裏付ける結果となった。また、これまでに同定したMI感受性SNPを組み合わせることによりそのオッズ比は30を超えることから、これらのSNPによるMIの予知、予防を目的とした遺伝子検査が可能になると考えられる。新規BRAP結合分子をコードする遺伝子内のSNPがまた遺伝学的に心筋梗塞感受性であることを発見しており、疾患の発症、進展にこの分子カスケード分子の質的、量的な変化が確実に関連していると考えることができるため。24年度が最終年度であるため、記入しない。新規MI感受性SNPゲノム領域のSNP探索やそのケース・コントロール関連解析、連鎖不平衡(LD)解析を詳細に行い、統計学的に最も有意なSNPおよびそれとLDにあるSNPを割り出し、SNPの機能解析を進め、どのSNPが遺伝子の機能にどのように影響を与えているかを確認するとともに、この分子の発現あるいは機能変化により炎症の程度等がどのように変化するか等、培養血管平滑筋細胞等を用いてさらに精査していく。