hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
サイトメガロウイルス細胞指向性決定因子「ペンタマー」の機能と感染防御誘導能の解析

本年度は、感染効率の亢進と細胞指向性の関係を明らかにするため、細胞指向性に影響を与えたGP131変異を導入したペンタマー蛋白を発現させ、上皮細胞・マクロファージの両指向性を失わせる変異を有するGP131は感染亢進を起こさないこと、特定の変異が感染効率の亢進を更に高めることなどを見出した。また、塩化アンモニウムを用いた細胞内酸性化阻害により、感染亢進がエンドサイトーシス依存であることを明らかにした。現在、ペンタマー構成蛋白の細胞内局在と感染亢進の関係を検討している。ヒトCMV臨床分離株20株のペンタマーをコードする5遺伝子の塩基配列解析を行った結果、gHには多くの多型が存在するが、他の4遺伝子には多型が少ないこと、多型がヒト血清による中和能に影響を与えないことを示した。また、抗ペンタマー抗体により、いずれの分離株の感染も中和することが可能であることを示した。ペンタマーに関連する蛋白の解析、細胞指向性に関する解析、臨床分離株を用いた中和などの解析が、順調に進んだ。一方、ぺンタマーに結合する宿主蛋白の探索は、免疫沈降にタグ抗体を用いる計画を進めたが、タグを付加したGP131では感染効率の亢進をしないという結果から、当初予定より遅れが見られる。先天性サイトメガロウイルス(CMV)感染は新生児300人に1人の頻度で起り、感染児の約3割に神経学的障害などの疾病を起すため、ワクチン開発が求められている。本研究は、近年見出された内皮・上皮細胞及びマクロファージ指向性を決定するペンタマーと呼ばれる蛋白複合体に着目し、その構造と機能、ペンタマーを介した感染に関与する宿主因子、抗ペンタマー抗体による個体レベルでの感染防御を、動物モデルで明らかにすることにより、ワクチンの開発に資することを目的とした。これまでに、小動物で唯一先天性感染を起しヒトCMVと同様なペンタマーをコードするモルモットCMV(GPCMV)について、BAC改変系を用いてペンタマー構成蛋白GP131に変異導入した解析で、GP131の異なる配列が上皮細胞指向性とマクロファージ指向性に関与することを見出した。さらに、GP131とGP133の組合せを発現させた細胞にGPCMVを感染させると感染効率が亢進する現象を見出した。30年度には、GPCMVの上皮細胞への感染はマクロピノサイトーシスに依存するが、感染亢進がエンドサイトーシスの亢進によるものではないことを明らかにした。また、ペンタマー構成蛋白は、単独での発現に比して、特定の組合せでは発現の安定化が見られることを見出した。GPCMVのgBやペンタマー構成蛋白をそれぞれ発現する組換えアデノウイルスの組合せをマウスBALB/c由来上皮細胞やモルモットHartley由来上皮細胞に感染させ、細胞をadjuvantと混合後BALB/cやHartleyを免疫すると、結合抗体は抗原の組合せによらず誘導されたが、ペンタマー発現細胞の免疫でのみ高い中和能を有する抗体が誘導された。GPCMV感染で攻撃した場合、ペンタマー免疫した個体では体重減少の抑制、脾臓重量増加の抑制、臓器におけるウイルス量の減少など、有意な感染防御が見られた。28年度の継続を含め、当初の計画通り研究を行う。特に、個体を用いた感染防御の検討に重点を置く。29年度の継続を含め、当初の計画通り研究を行う。7118円と小額であり、使い切ることを目的として不適切な購入をしなかったため。モルモット個体を用いた感染防御の検討が30年度4月にずれ込んだため。この実験を4月に実施する。29年度に必要試薬を購入するために用いる。
n-調和写像の、多様体の共形幾何構造への応用

共形幾何構造の研究への応用を念頭に,n-調和写像,そして,さらに一般のp-調和写像とその周辺領域についての研究を行った.代表者中内は,分担者河合と共同で,コンパクトリーマン多様体上の,p-ラプラシアンの第1固有値について,下からのいくつかの評価を導いた.特に,Ricci曲率が下から正の数で押さえられている場合のLichnerowicz型の評価式と,非負のRicci曲率をもつ場合のLi-Yau型の評価式が得られた.これらの評価式の証明には,それぞれ違うタイプのBochner-Weitzonbeck型の公式が用いられている.ちなみに,Lichnerowicz型の評価式は,p-調和関数より,もう少し一般的な解のクラスに対して証明されている.分担者河合は,p-調和写像に対する「加藤の不等式」について調べていたが,さらに詳しい研究を行い,p-調和写像特有のいくつかの評価式を導いた.分担者高桑は,非線形楕円型方程式の解の特異点の付近での漸近挙動を調べ,解の1階微分についての評価を得ている.また,Euclid空間の有界領域上の非線形楕円型方程式系の解の一意性をPohozaevの恒等式を用いて証明した.このような様々な側面からの研究のサポートを受け,代表者中内は,n-調和写像についての研究を進め,conformal Killing vetor feldsとの関連性が調べられている.共形幾何構造の研究への応用を念頭に,n-調和写像,そして,さらに一般のp-調和写像とその周辺領域についての研究を行った.代表者中内は,分担者河合と共同で,コンパクトリーマン多様体上の,p-ラプラシアンの第1固有値について,下からのいくつかの評価を導いた.特に,Ricci曲率が下から正の数で押さえられている場合のLichnerowicz型の評価式と,非負のRicci曲率をもつ場合のLi-Yau型の評価式が得られた.これらの評価式の証明には,それぞれ違うタイプのBochner-Weitzonbeck型の公式が用いられている.ちなみに,Lichnerowicz型の評価式は,p-調和関数より,もう少し一般的な解のクラスに対して証明されている.分担者河合は,p-調和写像に対する「加藤の不等式」について調べていたが,さらに詳しい研究を行い,p-調和写像特有のいくつかの評価式を導いた.分担者高桑は,非線形楕円型方程式の解の特異点の付近での漸近挙動を調べ,解の1階微分についての評価を得ている.また,Euclid空間の有界領域上の非線形楕円型方程式系の解の一意性をPohozaevの恒等式を用いて証明した.このような様々な側面からの研究のサポートを受け,代表者中内は,n-調和写像についての研究を進め,conformal Killing vetor feldsとの関連性が調べられている.共形幾何構造の研究に応用を念頭に,本年度は,p-調和写像(特に,n-調和写像)とその周辺領域についての研究を行った.分担者河合は,p-調和写像に対する「加藤の不等式」について深い考察を行い,p=2の場合とそうでない場合の本質的な差違を明らかにした.分担者竹内は,target manifoldsを1次元にした場合,すなわち,p-ラプラシアンについての研究を進め,その固有値に関する結果が得られている.分担者高桑は,微分方程式の観点から,球面上の測度への共形変換群の作用について測度から定まる重心写像の振る舞いを調べ,小さい穴の空いた有界領域において,critical Sobolev exponentをもつ非線形楕円型方程式の境界値問題について,非線型フレッドホルム型定理を示した.分担者加藤は,調和写像と関係する極小曲面(極小写像)について,与えられたfluxとcatenoid endをもつ極小曲面を構成した.分担者内藤は,いくつかの例について,Lie群の観点から考察を試みている.このような様々な側面からの研究のサポートを受け,代表者中内は,p-調和写像についての研究を進め,Killing vetor fieldsとの関係が得られている.また,n-調和写像に対して,共形不変性を本質的に用いるための技術の開発を試み,現在研究継続中である.共形幾何構造の研究に応用を念頭に,p-調和写像(特に,n-調和写像)とその周辺領域についての研究を行った.代表者中内は,分担者河合と共同で,コンパクトリーマン多様体上の第1固有値について,下からのいくつかの評価を導いた.特に,Ricci曲率が下から正の数で押さえられている場合のLichnerowicz型の評価式と,非負のRicci曲率をもつ場合のLi-Yau型の評価式が得られた.これらの評価式の証明には,それぞれ違うタイプのBochner-Weitzonbeck型の公式が用いられている.ちなみに,Lichnerowicz型の評価式は,p-調和関数より,もう少し一般的な解のクラスに対して証明されている.分担者河合は,p-調和写像に対する「加藤の不等式」について調べていたが,さらに詳しい研究を行い,p-調和写像特有のいくつかの評価式を導いた.分担者高桑は,非線形楕円型方程式の解の特異点の付近での漸近挙動を調べ,解の1階微分についての評価を得ている.また,Euclid空間の有界領域上の非線形楕円型方程式系の解の一意性をPohozaevの恒等式を用いて証明した.このような様々な側面からの研究のサポートを受け,代表者中内は,n-調和写像についての研究を進め,conformal Killing vetor fieldsとの関連性が調べられている.
同種の歯根膜細胞移植治療に向けた優れた再生能を有する細胞予測

間葉系幹細胞(MSC)の移植は組織再生療法の有効な手段として注目を集めている。研究者らは間葉系幹細胞(MSC)の特徴をもつ歯根膜由来組織幹細胞の同種移植が拒絶反応を生じることなく歯周組織再生を顕著に促すことをこれまでに見いだし、現在はヒト臨床への応用へ向けた研究が進行中である。同種移植を臨床応用する際には、より再生能の高い細胞を移植に用いることで、より良い治療効果が期待される。その際、どのような細胞を選別すべきかを移植前に決定する必要があると考えられる。近年、分化能や細胞サイズ、細胞形態などにより、骨髄由来MSCの選別が可能となってきているが、歯根膜由来MSCでは不明である。そこで本研究では歯根膜由来MSCを用いて、より再生能が高い細胞を移植前に予測し選別することが可能か否かを明らかにすること、またその選別を迅速に行う事を目的とした。本年度はヘルシードナー由来のヒト歯根膜由来MSCのプライマリーカルチャーを昨年度から継続して行い、細胞の性質について比較検討を行った。異なるドナー由来のMSCによりコロニーフォーミングアッイ(CFA)、アルカリフォスファターゼ(ALP)活性、分化能(骨分化誘導・脂肪分化誘導)の違いがより明確になった。また細胞形態のイメージングも行い、骨分化誘導を行った細胞と行わなかった細胞形態の違いを明らかとした。これらの結果から同種移植に使用するドナーをあらかじめ選別し、分化能を予測しうると考えられた。培養環境の整備が進み、ヒト歯根膜由来MSCの培養をn数を増やして行うことができた。また細胞の性質の違いも順調に明らかとなっているが、性質によるグループ分けまでは至っていないため、今後の課題となっている。ヒト歯根膜由来MSCの性質の違いについて、細胞のサイズ、サイトカイン解析、免疫調節機能解析など含めてさらに詳細に解析した後に、グループ分けを行う。また細胞形態のイメージング技術を用いた再生能の予測により従来の分化誘導試験に要する時間の迅速化を試みる。研究者らは間葉系幹細胞(MSC)の特徴をもつ歯根膜由来組織幹細胞の同種移植が拒絶反応を生じることなく歯周組織再生を顕著に促すことをこれまでに見いだしている。そこで本研究では歯根膜由来MSCを用いて、より再生能が高い細胞を移植前に予測し選別することが可能か否かを明らかにすることを目的とした。平成29年度はヘルシードナー由来のヒト歯根膜由来MSCのプライマリーカルチャーを行い、細胞の性質について比較検討を行った。その結果、異なるドナー由来のMSCによりコロニーフォーミングアッイ(CFA)、アルカリフォスファターゼ(ALP)活性、分化能(骨分化誘導・脂肪分化誘導)に違いがあることが明らかとなった。また一方で、将来的に歯周組織欠損部の移植に用いるためのヒト歯根膜細胞シートの作成も行なった。その結果、細胞シート作成に要する時間に、用いた細胞により違いが認められた。これらの結果からも同種移植に使用するドナーをあらかじめ選別することが重要であると考えられた。平成29年度に予定していたドナーによる細胞の性質の違いは明らかとなったが、その結果を用いた細胞の再生能を予測するためのグループ分けまでは達成することができなかった。ヒト歯根膜由来MSCの性質の違いをさらに詳細に解析した後に、グループ分けを行う。また細胞形態のイメージング技術を用いた再生能の予測を行う。

ヒト歯根膜由来MSCの性質の違いについて、細胞のサイズ、サイトカイン解析、免疫調節機能解析など含めてさらに詳細に解析した後に、グループ分けを行う。また細胞形態のイメージング技術を用いた再生能の予測により従来の分化誘導試験に要する時間の迅速化を試みる。歯根膜細胞培養および分化誘導試験に使用するための培地や試薬を購入する培養環境が整った事で、研究を効率的に行うことができたため、使用経費を削減することができた。次年度使用額については、今後も継続して行う予定の細胞形態イメージング試薬が高額なため、こちらの購入に使用する。
端ウェイト加群を用いた量子アフィン代数の有限次元既約加群の研究

本研究では、量子アフィン代数と呼ばれる無限次元代数上の有限次元加群に関して、特に古典極限に着目して研究を行った。ここで古典極限とは、量子アフィン代数の加群に対しある種の特殊化の操作を行うことで得られるアフィンリー代数上の加群のことである。本研究の成果として、極小アフィン化と呼ばれる既約加群のある種のクラスに対し、その古典極限の構造を詳細に調べることができた。またテンソル積と古典極限をとる操作の非可換性に関する研究も行った。minimal affinizationは量子アフィン代数の有限次元既約加群の中の比較的大きなクラスであり、Kirillov-Reshetikhin加群やA型のevaluation加群のような重要な既約加群を含むものである。またminimal affinizationは全てprimeと呼ばれる特別な性質を有している。prime加群はクラスター代数と量子アフィン代数の有限次元加群との関係を記述する上で欠かせない対象であり、その意味でもminimal affinizationの重要性はより高まっているといってよい。研究代表者は古典型の場合のminimal affinizationについて、次数付き極限を用いることでその構造について詳細な研究を行った。ここでいう次数付き極限とは、古典極限を少し変形することで次数構造を付加した加群のことである。その結果として、古典型のminimal affinizationの次数付き極限に対しその定義関係式を決定するとともに、拡大Demazure加群と呼ばれる全く異なる加群と同型であることを証明した。この結果の帰結として、Demazure作用素と呼ばれる差分作用素を用いた指標の表示、結晶基底を用いた組み合わせ論的な重複度の表示、Jacobi-Trudi公式と呼ばれる指標公式の証明、最高ウェイトを極限に飛ばしたときの指標公式の簡明な表示、などの結果を得た。これまで量子アフィン代数の有限次元既約加群に対し、その指標公式はごく限られてものにしか与えられていなかった。そのため、古典型のminimal affinizationの場合にごくわずかな例外を除いて指標をすべて決定した上の結果は、非常に意義のあるものであると考えている。本年度は主に以下の二つの研究を行った。minimal affinizationは量子アフィン代数の有限次元表現の重要な族であり、近年多くの研究がなされている。昨年度は古典型のminimal affinizationについて研究を行ったが、本年度はそれらの結果の拡張としてG2型のminimal affinizationについて研究を行った。具体的には、G2型のminimal affinizationに対しその古典極限を調べ、それらの定義関係式を決定した。またその関係式を用いることで、有限型部分代数に制限したときの重複度の不等式による明示的な公式を得ることができた。(2) A型のfusion積の研究量子アフィン代数の有限次元表現のテンソル積の古典極限は、それぞれの表現の古典極限のテンソル積とは一致せず、多くの場合fusion積と呼ばれる特別な構成によって得られる加群となることが知られている。そのためこのfusion積を調べることは量子アフィン代数の有限次元表現を調べる上で重要な問題である。本研究では、A型で最高ウェイトが与えられた基本ウェイトの何倍かであるような既約表現に対し、それらのfusion積の定義関係式を決定した。この結果の帰結として、fusion積の間に全射が存在するための必要条件が得られた。これは既約加群の指標に関して知られていたSchur正値性と呼ばれる性質をカレント代数を用いて再構成した結果とみなすこともでき、その意味でも重要な結果であると考えている。これらの研究成果は現在投稿中である。古典極限は量子ループ代数の有限次元加群において、パラメータqを1に特殊化することで得られるループ代数の加群である。今年度は任意の型で、Kirillov-Reshetikhin加群と呼ばれる量子ループ代数の特別な単純加群に対し、そのテンソル積の古典極限がそれぞれのKirillov-Reshetikhin加群の古典極限のfusion積と同型となることを示した。この結果は、多くの研究者により予想され、いくつかの特別な場合には証明も与えられていた。しかし上に述べた一般的な設定で証明を与えることが出来たのは、非常に意義のある結果であると考えている。またこの証明の過程で、Kirillov-Reshetikhin加群の古典極限のfusion積に関し、その定義関係式を完全に決定することが出来た。この結果は昨年度A型の場合に行った研究の任意の型への拡張であり、Kirillov-Reshetikhn加群が満たすSchur正値性と呼ばれる性質の、表現論的意味づけを与えるものであるとみなすことも出来る。またこの結果から、Kirillov-Reshetikhin加群の古典極限のfusion積が、Chari-Venkatesh加群と呼ばれる既知の加群の特別なものとなることも証明される。このようにこの結果自体、様々な研究成果と結びつくものであり、その意味で意義のある結果であると考えている。上で述べた研究成果は既に論文としてまとめており、現在投稿中である。

量子アフィン代数の有限次元表現については、古典極限を調べるという手法が非常に有効であったため、研究代表者が当初考えていた以上の進展が得られた。またfusion積を調べる、という新たな視点が得られたことも本研究において重要な進展であろう。。一方で、端ウェイト加群との関係については今のところ不明な点が多い。これらを鑑みて、"おおむね順調に進展している"という自己評価としたい。数学端ウェイト加群とこれまで得られた結果との関係についてより深く考察を行っていくことが重要である。その際に、端ウェイト加群の古典極限を調べることが役に立つであろうと期待される。量子アフィン代数の有限次元既約加群について、minimal affinizationという比較的大きなクラスについてその構造を調べることが出来た。これは大きな成果であり、おおむね順調に進展しているといってよい。ただ、端ウェイト加群との関係はあまりはっきりとはしておらず、今後の課題といえる。おおむね計画通りに使用されているが、研究発表のための旅費の一部を先方が負担してくれたため次年度使用額が生じた。端ウェイト加群についても次数付き極限を定義することが出来る。今後は上に述べた結果と端ウェイト加群の次数付き極限との関係に着目をして研究を進めていきたいと考えている。旅費、および書籍などの購入に充てる予定である。
ラシュバ系における量子スピン輸送現象

ラシュバ型バンド構造を持つ極性半導体BiTeBrにおいて、結晶の空間反転対称性の破れに起因する電流の非相反性を検出することに成功した。観測された非相反電荷輸送現象は極性構造に特有の磁場・電流方位選択則を見たし、シグナルのキャリア数依存性や温度依存性から微視的機構を明らかにした。また、非相反電荷輸送現象をカイラリティーを持つ物質に拡張し、特にWS2カイラルナノチューブの電界誘起超伝導相において巨大な超伝導電流の非相反伝導効果が生じることを発見した。結晶カイラリティーの超伝導への影響を初めて実証すると同時に、非相反超伝導現象が特徴的な形状による量子干渉効果の影響を受けることも見出した。極性半導体BiTeBrにおいて、ラシュバ型スピン分裂バンドに起因する、非相反電荷輸送現象を発見した。具体的には、層状化合物であるBiTeBrをスコッチテープ法によって劈開・微細デバイス化し、単一極性ドメインと考えられる数マイクロメートル程度の大きさの試料における電気抵抗・ホール効果を測定すると同時に、ロックイン測定の第二次高調波成分を測定することで、抵抗の電流依存成分を検出することに成功した。観測された第二次高調波シグナルは、極性方向と磁場、電流がそれぞれ垂直な方向に位置する配置でのみ有限となり、電流と磁場が平行な配置では電流依存した優位な抵抗差は見られないこと、非相反シグナルは磁場や電流に線形に増大し、それらの方位に依存することを明らかにした。また、非相反電荷輸送現象の符号は試料の極性方向に依存して反転すると考えられるが、実際、BiTeBrにおける非相反電荷輸送現象のシグナルの符号はデバイス依存すること、極性ドメインの大きさが小さく、マルチドメインであると考えられるBiTeI試料では観測されなかったことから、観測された電流依存磁気抵抗効果が極性ドメインの向きとそれに対応した特異なバンド構造を反映していることが強く示唆された。これらの振る舞いは、極性物質特有の非相反電荷輸送特性であり、3次元極性物質における非相反電荷輸送としては初めての報告である。また、理論グループとの共同研究により、観測された非相反電荷輸送シグナルはラシュバ型スピン分裂バンドの磁場印可による変形を考慮したモデルで定量的に解析・解釈することができた。BiTeBrにおける非相反電荷輸送シグナルは、現在までに報告されている非磁性体界面や掌性を持つ3次元系に比べて大きく、結晶対称性の破れに起因した巨大整流作用への指針を得たと言える。本研究では、非磁性体、特に極性半導体BiTeXにおいて、ラシュバ型スピン分裂バンドに起因する新規量子スピン輸送現象を開拓することで、省エネルギースピントロニクス確立に向けた、非磁性体スピントロニクスの基礎学理構築を目的としていた。本年度は、極性半導体BiTeBrにおいて、ラシュバ型スピン分裂バンドに起因した電流の非相反輸送現象という新規輸送現象を観測することに成功した。これは、スピン分裂バンドを用いた整流作用と捉えられ、スピン軌道相互作用を用いた電流の新たな制御性を開拓したという点で、上述目的は十分に達成できたと考えられる。加えて、理論グループとの共同研究により、観測した現象の定量的な解析・解釈が可能となった。これは当初予想していた結晶対称性からの現象論的理解を超える進展であり、電流の制御性を向上させる上での重要な物質の設計指針が得られたという点で極めて重要な結果である。昨年度に観測に成功した、極性半導体BiTeBrにおける非相反電荷輸送現象(結晶の空間反転対称性の破れを反映して、ある特定の方向に磁場・電流を印加する場合、電流の正負の向きによって抵抗の値が異なる整流性が発現する現象)の研究を進め、様々なキャリア数を持つ試料で再現性を検証し、シグナルのキャリア数依存性や温依存性がラシュバ型バンド構造を仮定した単純なモデルで定量的に説明可能であることを見出した。得られた極性半導体における整流性の新原理の知見を論文としてまとめて出版した。さらに、電流の非相反応答現象を極性半導体に限らず、空間反転対称性の破れたカイラルナノチューブへ拡張し、特にWS2カイラルナノチューブの電界誘起超伝導相において巨大な非相反電荷輸送現象が観測できることを発見した。上述極性半導体の場合とは異なり、カイラルナノチューブでは電流と磁場をどちらもチューブ軸方向へ印加した場合に電流の符号に対応した抵抗の差異が期待される。極性半導体BiTeBrにおける測定と同様、ロックイン測定の第二次高調波成分を測定することで、磁場印加下で有限の抵抗を示す超伝導相において、巨大な非相反超伝導応答を観測した。これは超伝導電流の非相反性の初めての報告であり、空間反転対称性の破れた超伝導体の機能性開拓を促す結果であると同時に、結晶対称性の破れに起因した巨大整流作用への新しい指針を得たと言える。また、WS2カイラルナノチューブの電界誘起超伝導相において、ロックイン測定の第一・第二次高調波成分のいずれにも、円筒構造に起因した特徴的な抵抗の量子振動現象が観測された。この結果は非相反超伝導電流が量子干渉効果の影響を受けることを示しており、今後、発見した超伝導の非相反現象の微視的起源を明らかにする重要な知見となり得る。観測された非相反電荷

輸送現象は極性構造に特有の磁場・電流方位選択則を見たし、シグナルのキャリア数依存性や温度依存性から微視的機構を明らかにした。また、非相反電荷輸送現象をカイラリティーを持つ物質に拡張し、特にWS2カイラルナノチューブの電界誘起超伝導相において巨大な超伝導電流の非相反伝導効果が生じることを発見した。結晶カイラリティーの超伝導への影響を初めて実証すると同時に、非相反超伝導現象が特徴的な形状による量子干渉効果の影響を受けることも見出した。発見した極性半導体における非相反電荷輸送現象研究を推進する。特に、非相反電荷輸送シグナルの最適化・制御性向上を目指して、イオン液体を用いた電気二重層トランジスタデバイスを作製し、単一デバイスにおけるキャリア数制御を行い、シグナルのキャリア数依存性を調べる。また、非相反電荷輸送現象とスピン流との関係性を明らかにするために、磁性電極を用いたスピン流の直接観測やスピン注入応答を調べ、非相反電荷輸送シグナルとの符号の対応性や大きさの相関等を議論し、極性半導体におけるスピン流物理確立を目指す。さらに、対象物質をBiTeXだけに限らず、類似の極性を持つ物質である、酸化物SrTiO3界面や遷移金属ダイカルコゲナイドMoTe2、掌性を持つ遷移金属ダイカルコゲナイドナノチューブ等にまで広げ、非相反電荷輸送現象が普遍的な現象であることを実証するとともに、常伝導相のみならず、超伝導相における非相反電荷輸送現象といった新規輸送現象観測も試みる。加えて、非極性・極性構造相転移を起こす物質において、非相反電荷輸送現象の逆効果である、電流による極性ドメイン制御研究にも取り組む。28年度が最終年度であるため、記入しない。固体物理学28年度が最終年度であるため、記入しない。
ラットリングを示す充填スクッテルダイト化合物の磁性と超伝導

充填スクッテルダイト化合物Pr_Nd_xOs_4Sb_ (x=0.45, 0.25, 1.0)の純良単結晶を育し,弾性定数C11の周波数依存性(34MHz245MHz)の精密測定を行った.PrOs_4Sb_(x =0)で観測される単一の超音波分散は希釈系に於いても観測され,Nd濃度xの増加に伴い徐々に高温側にシフトする結果が得られた.一方で,x=0.45の試料では極低温T=0.25Kにおいて弾性定数C11が極小をとる,これはPrイオンが超伝導に寄与しているにも関わらずNdイオンの結晶場基底状態の縮退が解けていること示す結果である.さらに,終端物質x=1.0のNdOs_4Sb_について,強磁相内(2T≤H≤10T, T≤1K)の領域に於いて磁場に鈍感な弾性定数のソフト化が存在することを初めて明らかにした.これらの結果はLaOs_4Sb_, PrOs_4Sb_と同様に,NdOs_4Sb_に於いてもオフセンタートンネリングが極低温で存在することを示しており,本系の重い電子状態の発現機構に縮退したオフセンター自由度が関与していることを強く示唆する.充填スクッテルダイト化合物Pr_Nd_xOs_4Sb_ (x=0.45, 0.25, 1.0)の純良単結晶を育し,弾性定数C11の周波数依存性(34MHz245MHz)の精密測定を行った.PrOs_4Sb_(x =0)で観測される単一の超音波分散は希釈系に於いても観測され,Nd濃度xの増加に伴い徐々に高温側にシフトする結果が得られた.一方で,x=0.45の試料では極低温T=0.25Kにおいて弾性定数C11が極小をとる,これはPrイオンが超伝導に寄与しているにも関わらずNdイオンの結晶場基底状態の縮退が解けていること示す結果である.さらに,終端物質x=1.0のNdOs_4Sb_について,強磁相内(2T≤H≤10T, T≤1K)の領域に於いて磁場に鈍感な弾性定数のソフト化が存在することを初めて明らかにした.これらの結果はLaOs_4Sb_, PrOs_4Sb_と同様に,NdOs_4Sb_に於いてもオフセンタートンネリングが極低温で存在することを示しており,本系の重い電子状態の発現機構に縮退したオフセンター自由度が関与していることを強く示唆する.重い電子超伝導を示すPrOs_4Sb_<12>と強磁性物質NdOs_4Sb_<12>を母物質とする充填スクッテルダイト化合物Pr_<1-x>Nd_xOs_4Sb_<12>について,超音波による弾性定数および超音波吸収係数の精密測定を行ったNd濃度xを変えた系統的な実験により、局所電荷ゆらぎと磁気ゆらぎが拮抗した領域の磁性共存超伝導の量子臨界現象と、その発現機構に対する軌道自由度並びにオフセンター自由度(ラットリング・トンネリング)の寄与を電子-フォノン相互作用の観点から研究する。X=0.25の超音波測定は北海道大学で立ち上げた装置を用いて行った。さらに、x=0.45の試料は1K以下の温度領域で磁性と超伝導の競合による興味深い物性を示すため、新潟大学自然科学研究科教授後藤輝孝氏の希釈冷凍機を用いて極低温・強磁場における超音波測定を行った。その結果、ラットリング変数が母物質x=0とx=1の中間値を示すことが明らかとなった。また、極低温T=0.25Kにおいて弾性定数が極小をとり、基底状態の縮退が解けていることを示唆する結果を得た。これらの成果を元に8月にブラジル(ブジオス)で行われた強相関電子系国際会議(SCES 2008)においてポスター発表を行い、2009年にPhysica Bからプロシーディングス論文が発表される。一方、ラットリングを示す可能性のある類似物質を探索するために米国カリフォルニア大サンディエゴ校のProf. M. Brian Maple, Ryan E. Baumbach、ポーランド科学アカデミーのProf. Dr. Zygmunt HenkieとDr. Tomasz Cichorekと口頭および電子メールで連絡調整を行い、砒素系充填スクッテルダイトRRu_4As_<12>(R=La, Ce, Pr)の国際共同研究を開始した。充填スクッテルダイト化合物Pr_<1-x>Nd_xOs_4Sb_<12>(x=0.45,0.25,1.0)の純良単結晶を育成し、弾性定数C_11の周波数依存性の精密測定を行った。PrOs_4Sb_<12>(x=0)で観測される単一の超音波分散はNd濃度xの増加に伴い徐々に高温側にシフトする結果が得られた。

当初は、中間濃度のラットリング変数は終端物質x=0とx=1の中間値を示すと解釈していたが、新潟大の根本祐一准教授によるPr_<1-x>La_xOs_4Sb_<12>の研究結果と相補的に考察した結果、それぞれの内包希土類イオン同士の相互作用は非常に弱く、内包イオンの質量と伝導電子との混成強度によって決まるラットリング変数でほぼ独立に振動していることを示唆する結果が得られており、それとの類推から本研究結果についてもPrとNdの母物質で得られたラットリング変数で非常に近接した二段の超音波分散を仮定しても中間濃度のブロードな超音波分散が再現できることがわかった。一方、x=0.45の試料では極低温T=0.25Kにおいて弾性定数が極小をとり、基底状態の縮退が解けていることを強く示唆する結果を得た。これらの成果を元にPhysica Bから論文が発表された。さらに、終端物質x=1.0のNdOs_4Sb_<12>についても、強磁相内(2T〓H〓10T,T〓1K)の領域に於いて磁場に鈍感な弾性定数のソフト化が存在することを初めて明らかにした。この結果はLaOs_4Sb_<12>,PrOs_4Sb_<12>と同様に、NdOs_4Sb_<12>に於いても縮退したオフセンター自由度が極低温で存在することを示しており、本系の重い電子状態の発現機構にオフセンタートンネリングが関与していることを強く示唆する。ポーランドとの国際共同研究でLaRu_4As_<12>の超音波測定を行い、ラットリングを検証したが超音波分散は観測されなかった。
嫌気環境からの細菌捕食性微小鞭毛虫の分離・培養とその生理・生態学的研究

嫌気環境には細菌捕食性の微少鞭毛虫が生息することが知られているものの、その生理・生態に関する知見は限られている。そこで本研究では、嫌気環境に生息する微少鞭毛虫の生理・生態を明らかにすることを目的として、本年度は前年度に分離培養に成功した通性嫌気性・細菌捕食性の微少鞭毛虫株の同定と生理学的特徴の解析を行った。遺伝子情報を用いた分子同定と、電子顕微鏡を用いた微細構造観察の結果、本分離株はStramenopiles生物群のPlacididea綱に属することが明らかとなった。また、既知のPlacididea綱の鞭毛虫とはその微細構造が一致しなかったこと、特徴的な微細構造があることから、新属新種であるという結論に達した。Placididea綱はStramenopiles生物群の進化を考える上で重要な系統学的位置にあり、本分離株の情報は分類学的、進化学的に重要であると考えられる。本分離株の基本的な性状として水温と塩分の増殖可能な範囲を調べたところ、水月湖の水温と塩分のとる範囲をほぼカバーしていることが明らかとなった。さらに、本株の増殖と細菌捕食活性を速度論的に解析したところ、好気、嫌気条件いずれにおいても、増殖速度と細菌捕食速度は餌となる細菌の密度に依存していることが明らかとなった。好気条件に比べて、嫌気条件では増殖と捕食活性は低くなったが、これは嫌気条件ではエネルギー代謝効率が低下するためであると考えられた。これらの本分離株の生理学的特徴から、本株は水月湖において幅広く分布し、細菌捕食者として機能していると推定された。26年度が最終年度であるため、記入しない。嫌気環境は普遍的に存在し、嫌気環境の生態系を明らかにすることは非常に重要である。嫌気環境の生態系に関する研究は、これまで細菌の働きに関するものが多く、真核生物に関する研究は遅れていた。これまでの研究で、嫌気環境には鞭毛を持った微小な真核生物(微小鞭毛虫)が存在し、それが細菌を捕食していることを明らかとした。嫌気環境の生態系の理解を深めるためにはこの微小鞭毛虫の働きを解明する必要がある。そこで本研究では、その生理・生態学的知見を得るために、水月湖の嫌気水塊より嫌気性微小鞭毛虫の分離とその生理学的性質の解明を目指した。平成25年度は、水月湖の嫌気的な水塊より2株、底泥より1株の嫌気性微小鞭毛虫の分離培養に成功した。3株の18SrRNA遺伝子の系統学的解析を行った結果、3株はStramenopiles(嫌気水塊由来)、Amoebozoa(嫌気水塊由来)、Parabasalia(底泥由来)に属することが明らかとなった。このうち、Stramenopilesに属する株については微細構造を決定し、新属新種として現在記載するために論文を執筆中である。嫌気性の鞭毛虫に関する記載論文は少なく、貴重な知見であるといえる。Stramenopilesに属する株は通性嫌気性、AmoebozoaおよびParabasaliaに属する2株は偏性嫌気性であった。このうち、Stramenopilesに属する株について、その細菌捕食と増殖速度の動力学的性質を明らかにすることに成功した。このような知見はこれまでに例がなく、鞭毛虫の嫌気環境下における生態の解明において重要な知見である。平成25年度は3株の鞭毛虫の分離培養に成功し、そのうち1株にういてその詳細な生理学的性質を明らかにすることができた。これは研究計画で予定した内容と合致する。平成25年度では鞭毛虫の分離培養とその生理について明らかにすることができた。

26年度は得られた分離株の代謝メカニズムを明らかにすることを目的とする。分離株は発酵や水素発生型の嫌気的なエネルギー代謝を行っていることが考えられる。そこで考えられる代謝産物(水素・有機酸など)の有無を調べる手法と、関連する遺伝子の探索という二つの手法を用いることを予定している。
水理学・水工学における教育効果向上のための教育用ソフトシステムの総合的研究

第一年度(昭和62年度)は、主に流体力学や海岸工学の基礎的問題に関して、理論解の与える数式に具体的数値条件を、パソコン・キーボードから任意に与え、それに応じ、計算がパソコン上で行われ、結果をグラフィックスとしてCRT上に表示するプログラムを作成・整備した。いわば、初心者向けのプログラムである。第二年度(昭和64年度)においては、流れの場の美しさと複雑さを理解させることも目的の一つにし、より高度な内容について計算プログラムの開発とグラフィックスの整備を行った。したがって、初心者向けのものとは異なり、プログラムのアルゴリズムの理解よりは、計算結果を楽しみ、流体現象に親しませることに重点を置き、プログラム言語も初心者向けのBASICよりは、FORMATION、Pascal、Cなどに依ることとした。作成したプログラムを内容別に分類すれば、次のようになる。(1)流体現象の解析を行う高度なプログラム:任意形状の2次元および3次元場の流れ場の流速・密度(温度)・濃度分布を一般座標系(boundary-fitted grid)により計算する汎用性の高いプログラムを開発し、山脈を越える流れ:大気-植生-土壌圏の環境の計算を行った。また、離散渦系法による乱流場の計算を行った。(2)計算結果の表示に関するプログラム:いかに秀れた計算がなされても、それをわかり易く視覚表示できなければ、単なる数値のデータの山に過ぎない。そこで、計算結果をCRT上に表示するための3次元データのバード・アイ表示法;流線と流跡線の作図法;国土数値情報を利用したプログラムの教育効果の判定は、昭和63年8月の土木学会水工学研修会の講義の一つとして行い、一応の評価を得た。本年度は初年度であるので,まず全員が会合し,本研究の目的,既作成分についての検討,水理学,河川工学,海岸工学,水文学,流体力学の各分担分野の取上げるべき課題と構成について検討した.その結果,コンピューター・グラフィックスによる教育の利点として,正確な表示,縦横比を変えて誇張した表示,色彩による線・面区別を利用すること,プログラムの工夫によりアニメ化を量ること,学習者がパラメーターを自由にインプットし,現象の特性を理解し易くすることなどに留意することとした.流体力学としては,実質加速度の意味,水槽よりの自由噴流によるトリチェリーの定理およびベルヌーイの定理,渦と渦度,翼形回りの完全流体の流れ,流線・流跡線・流脈線の違い,円柱または球のまわりの完全流体解,ストークス解,オセーン解の違い,平板上の境界層のブラジウス解の求め方,境界層の発達,円管内流の抵抗則(層流,遷移流,乱流)についてのプログラムを作成した.水理学では,開水路の水面形を計算し図化するプログラムを作成した.具体的には河道の河床勾配や水路幅,流量,基準点の水位をインプットして初期値問題として水面形を算出することにより,常流と射流の相違や,それと河道条件との関係が理解できる内容とした.海岸工学としては,水の波の力学の基礎を理解させるための題材を選ぶという方針のもとに,具体的には,水の波のもとでの水粒子の運動軌跡やそれに伴う質量の輸送の発生を理解させるためのプログラム,波群の伝播をアニメ化することにより波の位相速度と群速度の違いを理解させるプログラム,及び海岸地形をインプットして波の屈析を計算し,波の変形を理解させるためのプログラムを作成した.第一年度(昭和62年度)は、主に流体力学や海岸工学の基礎的問題に関して、理論解の与える数式に具体的数値条件を、パソコン、キーボードから任意に与え、それに応じ、計算がパソコン上で行われ、結果をグラフィックスとしてCRT上に表示するプログラムを作成・整備した。

したがって、初心者向けのものとは異なり、プログラムのアルゴリズムの理解よりは、計算結果を楽しみ、流体現象に親しませることに重点を置き、プログラム言語も初心者向けのBASICよりは、FORMATION,Pascal,Cなどに依ることとした。作成したプログラムを内容別に分類すれば、次のようになる。(1)流体現象の解析を行う高度なプログラム:任意形状の2次元および3次元場の流れ場の流速・密度(温度)・濃度分布を一般座標系(boundary-fitted grid)により計算する汎用性の高いプログラムを開発し、山脈を越える流れ;大気-植生-土壌圏の環境の計算を行った。また、離散渦糸法による乱流場の計算を行った。(2)計算結果の表示に関するプログラム:いかに秀れた計算がなされても、それをわかり易く視覚表示できなければ、単なる数値のデータの山に過ぎない。そこで、計算結果をCRT上に表示するための3次元データのバード・アイ表示法;流線と流跡線の作図法;国土数値情報を利用した地形情報システム、地形特性の解析の開発を行った。こうして作成したプログラムの教育効果の判定は、昭和63年8月の土木学会水工学研修会の講義の一つとして行い、一応の評価を得た。
酸化物薄膜電極を用いた高性能イオンセンシングデバイスの構築

酸化物薄膜電極の合成法:(1)アセチルアセトナト錯体-PVA法、有機金属カルボン酸法により、ペロブスカイト型酸化物薄膜を500-600°Cの低温合成できることがわかった。(2)電析法によりNiO,NIOOH,IrOx酸化物等を合成できることがわかった。電流検出型リン酸イオンセンサ:(1)LaCoO_3薄膜電極を合成し、リン酸イオン(H_2OP_4^-,HPO_4^<2->)に対する電極検出型センサの検討を行ったところ、リン酸イオンを含む溶液中で高いアノード電極触媒活性を示し、しかもその電流値はリン酸イオン濃度に依存することがわかった。また、そのアノード電流変化を用いれば、電流検出型リン酸イオンセンサを構築できることがわかった。エレクトロクロミズム型イオンセンサ:遷移金属系酸化物(Co_3O_4,NiO等)をゾル-ゲル法や電析法を用いてITO付き基板上に作製した酸化物薄膜電極が、リン酸イオンを含む溶液中でエレクトロクロミズムを示し、しかもその透過率変化がリン酸イオン濃度の対数に比例して変化することを見出した。Co_3O_4系電極は、1.0x10^<-6>1.0x10^<-2>MのHPO_4^<2->に対して光学変化を示し、応答時間も約50秒と良好なリン酸イオン応答を示すことを見出した。また、本素子は、NO_3^-やCl^-などに対する選択性も高く、全く新しいタイプのオプティカルリン酸イオンセンサとなることを見出した。
藻場から磯焼け域への移行帯における無節サンゴモの種レベルの分布特性の解明

近年,黒潮流域で藻場の衰退や磯焼け域の拡大が報告されている。磯焼け域を代表する海藻の無節サンゴモについて,藻場から磯焼け域に分布する種の分類学的定義および藻場の環境変化に伴う出現種を明確にするため研究を行った。瀬戸内海西部から高知県南西岸および周辺海域から日本新産種2種を含む11属21種と多数の未同定種を確認した。とくに,ヒライボ,ミナミイシモは両種のタイプ標本やタイプ産地の標本の検討により,それぞれの種がさらに2種に分類できた。調査地において熱帯性の無節サンゴモは熱帯性ホンダワラ類が確認された海域より南の海域で確認された。これは無節サンゴモの成長と分散の遅さによると思われる。藻場から磯焼け域へにかけての無節サンゴモの出現種と分布域を調査するため,標本採集を行った。採集地点は,藻場が豊かに繁る海域として,伊予灘に面した,周防大島(山口県)の南岸,山口県平生町,藻場から磯焼け域への移行帯として,豊後水道の愛媛県伊方町,八幡浜市,宇和島市,磯焼け域として,高知県大月町を選んだ。さらに,日本の温帯に分布する岩石付着性の無節サンゴモのうち,日本で記載された7種の基準産地が集中する神奈川県三浦市と,1種の基準産地である千葉県鴨川市において,日本で記載された種の採集を行った。藻場から磯焼け域へにかけて優占的に見られた種について,パラフィン包埋による組織の形態観察を行い,種同定を行った。さらに,基準産地の標本を含む,同定済み標本の24種28サンプルについて,DNA抽出を行い,無節サンゴモ類の系統解析でよく利用される葉緑体コードのpsbAの配列を決定し,サンゴモ目全体について系統解析を行い,遺伝的な種のまとまりを確認した。西日本の藻場から磯焼け域に分布する無節サンゴモのうち,ヒライボLithophyllum okamuraeなどのイシモ属を中心に形態と遺伝子データの調査を進めた。ヒライボは突起を持つ無節サンゴモで,日本沿岸に広く分布し,海藻藻場の生態調査においても調査対象種とされている。これまで採集したヒライボ様の突起を持つ,タイプ産地の神奈川県と西日本のサンプルについて,種判別の遺伝子マーカーである葉緑体psbAを比較したところ,数種に相当することが明らかになった。しかし,それぞれの種と採集地域の対応は見られなかった。ただし,これらの種は,同様な突起を持ち,生殖器官のサイズ等に違いのある,主に南西諸島に分布するミナミイシモL. kotschyanumとは別種であった。ヒライボとミナミイシモ(タイプ産地は紅海)は,インドー太平洋域から広く報告があるほか,同海域で複数の品種が記載されている。ミナミイシモとインド洋に分布するミナミイシモとヒライボの品種のタイプ標本について,平成27年に核のLSU部分配列が公表された。LSUは進化速度が遅く,種判別のマーカーには適していないが,これらのタイプ標本とこれまでに採集した日本産のヒライボとミナミイシモを比較したところ,いずれも合致しなかった。さらに,太平洋で記載されたミナミイシモとヒライボの品種のタイプ標本をノルウェーの博物館から借用し,同領域の配列を比較したところ,これらも日本産種とは合致しなかった。ヒライボのタイプ標本はすでにフランスとイタリアの研究者が解析を始めていたため,共同研究として,ヒライボ・ミナミイシモ様の種の系統分類学的研究を進めることにした。タイプ産地(高知県室戸岬)での採集は,天候にも恵まれて,予定通り行えた。日本が基準産地の10種の標本は全て入手でき,西日本の藻場から磯焼け域に多く分布するヒライボなどのイシモ属について研究を進められた。しかし,DNA抽出法の再検討や,ヒライボやミナミイシモの品種のタイプ標本を収蔵しているノルウェーの博物館との連絡や国際共同研究のためのやり取りに時間がかかったため,観察や実験にやや遅れが出た。ヒライボLithophyllum okamuraeは,日本で2つの品種f. okamuraeとf. angularisが記載されている。この両品種のタイプ種からの配列決定を行ったところ,f. okamuraeではLSUの部分配列のみ決定でき,f. angularisでは,psbAとLSUが決定できた。いずれの配列も日本のタイプ産地の標本の配列と一致し,両品種に種レベルの遺伝的変異が認められた。さらに,両品種を区別可能な形態も見つかったため,それぞれ別種が適当と確認できた。ミナミイシモL. kotschyanumは,分子系統解析によると日本では2種に相当することが分かったが,これまで記載された品種のタイプ標本のLSU配列とは一致しなかった。推定種1種は,L. kaiseriのisolectotypeとpsbA,rbcL配列が一致し,現段階ではこの種と同定した。他1種は,形態でも区別できたため,新種と確認した。昨年度までに調査した瀬戸内海西部から高知県南西岸までの16地点のサンプルについて,葉緑体のpsbAのDNA配列を決定し,これらと,昨年度までに決定した日本のタイプ産地や他の地域の配列を合わせて系統解析を行った。その結果,調査した西日本の温帯域で日本新産種2種を含む11属21種と,多くの未同定種の存在を確認した。豊後水道では,近年,宇和島市沿岸で温帯性藻場が衰退し,熱帯性のホンダワラ類が確認された。

さらに南の愛南町以南では,高被度のサンゴ群集が特徴的な磯焼け域が見られた。しかし,おもに南西諸島に分布する無節サンゴモは,愛南町以南から出現した。これらの無節サンゴモは本州太平洋岸中・南部でも確認されている上,宇和島市沿岸も生育可能な水温範囲にあるが,他の海藻類に比べて成長が非常に遅く,分散も遅いため,近年,藻場の衰退が進んだこの海域では確認できなかったと考えられる。近年,黒潮流域で藻場の衰退や磯焼け域の拡大が報告されている。磯焼け域を代表する海藻の無節サンゴモについて,藻場から磯焼け域に分布する種の分類学的定義および藻場の環境変化に伴う出現種を明確にするため研究を行った。瀬戸内海西部から高知県南西岸および周辺海域から日本新産種2種を含む11属21種と多数の未同定種を確認した。とくに,ヒライボ,ミナミイシモは両種のタイプ標本やタイプ産地の標本の検討により,それぞれの種がさらに2種に分類できた。調査地において熱帯性の無節サンゴモは熱帯性ホンダワラ類が確認された海域より南の海域で確認された。これは無節サンゴモの成長と分散の遅さによると思われる。標本採集は天候に恵まれ,予定通り行えた。また,一部の標本の形態観察を進め,種の同定済みの標本について,DNA抽出と葉緑体コードのpsbAの塩基配列決定を行うことができた。そして,この配列をもとに系統解析ができた。平成28年度は,ヒライボのタイプ標本と日本産サンプルについて,LSU,psbAおよびミトコンドリアCOIのDNA塩基配列の比較と形態の精査を行って,ヒライボを再定義し,類似した未記載種の新種記載を検討する。ヒライボ様の種以外についても,西日本に分布するサンプルの形態観察とpsbA,COI配列の決定を進める。これに加えて,西日本の温帯域に分布する岩石付着性の無節サンゴモの種のうち,日本が基準産地の10種について,これらの形態やpsbA,COI配列を西日本産サンプルと比較し,西日本に分布する種の定義や分布域を明らかにする。海藻類の系統分類・生理生態平成27年度は,標本採集のほか,形態観察と分子系統解析による,種の定義の検討を行う。標本採集は,昨年度に引き続き,日本で記載された温帯に分布する岩石付着性の無節サンゴモの種の基準産地で行う。今年度は,2種の基準産地である和歌山県潮岬において行う。これによって,西日本に分布する種の日本の基準産地すべてを網羅したことになる。そして,平成27年度までにサンプリングした標本について,優占種以外もパラフィン包埋による組織の形態観察を行い,種同定を行う。無節サンゴモの出現種を明らかにするとともに,無節サンゴモと藻場の環境について整理する。さらに,遺伝子マーカーpsbAと,簡易な種判別に用いられるミトコンドリアコードのCOIや核コードのSSUの配列も必要に応じて決定し,psbAとともに推定した系統関係を考慮して,現在の分類体系に沿って定義し直す。一部の標本からのDNA抽出に問題があったので,抽出キットの変更など検討を行った。さらに,ヒライボやミナミイシモの品種のタイプ標本を収蔵しているノルウェーの博物館との連絡や国際共同研究のためのやり取りに時間がかかった。そのため,特に遺伝子実験が遅れたため。購入予定物品の割引等により,2000円程差額ができた。