hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
エイズ制圧へ向けての基礎研究 柱3 エイズの血液免疫異常

1.エイズ患者のリンパ装置の変化についてこれを詳細に観察し、1)病変の進行した感染者のリンパ節においてはHIVを多量に保持したFDCがリンパ節外に遊出することがあること、2)エイズリンパ腫においては腫瘍細胞膜に存在する免疫グロブリンを介したシグナル伝達が抑制されていること、3)エイズリンパ腫の発生母池となりうるEBウイルス感染細胞がリンパ腫発症の前にすでに患者リンパ装置に多量に存在している症例がすくなくないことを認めた。2.HIVの外膜糖蛋白gp120は、感染に際して宿主細胞膜蛋白とV3loopで結合する。今回、単球由来細胞のV3BPの特性を検討した。細胞膜蛋白を可溶化し、3種類の異なるウイルスストレイン由来V3loopを用いて作製したアフィニティーカラムで精製すると、33kDa,32kDaの2本のバンドが検出された。本精製蛋白を更にSEC3000を用いて分子ふるいにて精製し、33、32kDaの蛋白は130kDaの分子量を持つことが明かになった。3.HIV感染細胞の致死のモデルと考えられるHIV-env発現細胞株を用いて致死機序について検討した。gp160/CD4複合体はアポートシスを誘導して細胞を死に到らしめるが、そのシグナル伝達にはチロシンキナーゼ、カルモジュリンを介した核内Ca^<2+>の上昇の関与が示唆された。4.エイズ患者におけるCD8を主体とした細胞性免疫応答を、エピトープぺプチドのみを用いて予めあるいは感染後賦活させる方法を検討したところ、ペプチドを結合させた同系の樹状細胞に2,200-3,300radの放射線照射を与え免疫系に認識され易くしたものを静脈投与した場合、僅か一回の実施によって少なくとも6ケ月にわたり、効率よくウイルス特異的なCD8陽性キラーT細胞が賦活されることを動物実験で見いだした。1.エイズ合併悪性リンパ腫の細胞特性:エイズ患者に多発する悪性リンパ腫の細胞内シグナル伝達系を解析し、膜イムノグロブリンに結合して情報の細胞内への伝達を担当する蛋白Mb-1、B29、Lynがエイズ患者に発生する悪性リンパ腫に特異的に低下していることを発見した。これはエイズリンパ腫の一つの顕著な特性と考えられ、その原因となる分子機構の解明を試みている。2.V3ループに結合する蛋白の精製:HIV-1の主な中和エピトープを化学合成し、これを固定したアフィニテイーカラムを用いることにより、HIV高感受性株MOLT-4より33kDと32kDの2本の膜蛋白分画をえた。現在、このえられた蛋白の精製をおこなっている。3.HIVによある細胞死とgp160の関係:HIV-env蛋白の前駆体であるgp160と、そのプロセッシングをうけた産物であるgp120の、CD4内在化および細胞傷害性について検討した結果、gp160のみが上記の効果を持つことを解明した。4.HIVに特異的なキラーT細胞の誘導:ウイルス特異的キラーT細胞が、ウイルスエピトープをあたかもウイルス感染細胞のごとく傷害、排除することに注目し、ペプチドを合成させた細胞を放射線照射ののちに実験動物に系静脈的に投与し、ウイルス特異的キラーT細胞を誘導することに成功した。さらに、そのウイルスペプチドを運搬し、生体の免疫系に記憶させる主な細胞が樹状細胞であることをみいだした。1.AIDS患者に発生する悪性リンパ腫の細胞特性を前年度に引続き研究し、その細胞膜表面にEBウイルスの産生するオンコ蛋白にLMP-1が普遍的に分布していることを認めた。従来LMP-1は一部の腫瘍細胞表面にのみ発現していると考えられていたが、今回の結果より、LMP-2を標的とした治療を考えることが出来るようになった。また別の蛋白であるLMP-1に対する抗体をも作成し、このLMP-2蛋白もリンパ腫細胞に普遍的に存在していることを証明した。2.HIV感染者のリンパ節において、HIVに強く感染した胚中心樹状細胞がリンパ節外に流出することを発見した。このことは本細胞がウイルスの伝播者としての役割を果たしうることを示すと考えられる。3.HIV V3ループに結合する蛋白の精製:HIV高感染株Molt-4より得られたV3グループ結合蛋白を精製し、33KDと32KDの2種の膜蛋白をえており、現在そのアミノ酸配列と生物学的活性を検討中である。4.マウスの脾からえられた樹状細胞をもちいてHIVのウイルス抗原P18に特異的なキラーT細胞の誘導に成功した。引続き、免疫学的に賦活された細胞を同系動物に移入し、このウイルス蛋白由来のペプチドを免疫系に記憶させる細胞種およびその機構を解析中である。5.HIVが産出する蛋白GP160が感染細胞を障害することをこれまで報告してきたが、今回それがアポプトーシスであることを示した。またこの機構の発現時におこるCaイオンの動態を研究中である。

今回、単球由来細胞のV3BPの特性を検討した。細胞膜蛋白を可溶化し、3種類の異なるウイルスストレイン由来V3loopを用いて作製したアフィニティーカラムで精製すると、33kDa,32kDaの2本のバンドが検出された。本精製蛋白を更にSEC3000を用いて分子ふるいにて精製し、33、32kDaの蛋白は130kDaの分子量を持つことが明かになった。3.HIV感染細胞の致死のモデルと考えられるHIV-env発現細胞株を用いて致死機序について検討した。gp160/CD4複合体はアポートシスを誘導して細胞を死に到らしめるが、そのシグナル伝達にはチロシンキナーゼ、カルモジュリンを介した核内Ca^<2+>の上昇の関与が示唆された。4.エイズ患者におけるCD8を主体とした細胞性免疫応答を、エピトープぺプチドのみを用いて予めあるいは感染後賦活させる方法を検討したところ、ペプチドを結合させた同系の樹状細胞に2,200-3,300radの放射線照射を与え免疫系に認識され易くしたものを静脈投与した場合、僅か一回の実施によって少なくとも6ケ月にわたり、効率よくウイルス特異的なCD8陽性キラーT細胞が賦活されることを動物実験で見いだした。
日本敗戦と新しい国境による台湾・沖縄の変容の口述歴史に基づく研究

本科研の成果としては、台湾における戦中・戦後の社会的変容について、日本人および台湾人による証言に関する11冊の報告集を刊行した。日本人の証言は、戦時中の沖縄から台湾へ疎開経験者、あるいは台湾から沖縄へ引揚者、日本時代の教育者、また台湾人の証言者は、連合国によりBC級戦犯とされた体験者、マラリア撲滅に従事した医師、日本の裁判所勤務者、戒厳令の時期に台湾からの情報を発信し続けたジャーナリストなど多岐に及ぶ。また、本科研と台湾口述歴史研究学会との共催により、2014年8月30・31日の両日、台北の中央研究院台湾史研究所において、オーラルヒストリーに関する研究報告会を開催した。年間、4回の研究会を開催した。その報告者、内容は以下の通りである。台湾と沖縄との交流について取材を重ねてきた『八重山毎日新聞』記者松田良孝氏に「台湾疎開と八重山・沖縄」と題して、戦時中に実施された八重山から台湾への疎開について当事者からの聞き書きを中心に報告していただいた。松田氏が勤務している石垣島の主要な産業であるパイナップル栽培は、戦後、台湾から移住してきた農民により開発されたものであり、研究会では、国境のなかった戦時中の沖縄と台湾との関係、国境が設置された戦後の関係について議論がされた。12月に開かれた研究会では、フィリピンの捕虜収容所にかんする取材をされてきたライターの成田福裕氏に「モンテンルパ刑務所からの戦犯釈放活動を巡って」と題してモンテンルパの捕虜収容所にかんする報告をしていただいた。また1月の研究会では、朝鮮人・台湾人のBC級戦犯、日本軍の捕虜政策について研究をされてきた大阪経済法科大学アジア太平洋研究センター所長の内海愛子氏に「台湾人BC級戦犯について」と題して、台湾人BC級戦犯からの聞き書きについて、当時の台湾の状況を含めて戦犯として過ごさざるをえなかった方の置かれてきた状況について報告していただした。また、植民地台湾の教育史がご専門の埼玉大学名誉教授の新井淑子氏には「台湾人高等女学校卒業者のインタビュー」と題して報告していただいた。報告集としては、上記松田氏の研究会に記録を刊行し、また、台湾教育史研究者の弘谷多喜夫氏が70年代に実施した植民地台湾において初等教育に従事していた教員からの聞き書きの記録を整理して刊行した。さらに研究代表者の栗原純は植民地台湾において裁判官として活躍した黄演渥氏のご子息からの聞き書きを重ね、また、研究分担者の所澤潤・中田敏夫は教育関係者から日本統治当時の聞き書きを行った。科研の公開研究会(研討会)を、2014年8月30日・31日の両日、「口述歴史研究之方法与課題ー帝国支配・脱殖民地及新的国境研討会」・「口述歴史研究の方法と課題ー帝国支配・脱植民地・新たな国境について」と題して中央研究院台湾史研究所(台北市)において開催した。同研究会は、本科研と、台湾口述歴史学会、中央研究院台湾史研究所の共催によるもので、日本からは栗原純・所澤潤を含めて5名が、霧社事件の関係者・台湾人戦犯・台湾人志願兵などからの聞き書きについて報告し、台湾からは4名が、台湾における口述歴史研究の現状、ひまわり運動などに関する報告をした。当日は中央研究院台湾史研究所・国立台湾師範大学・国立台湾大学などの台湾史研究者や台湾史研究を志す100名近い学生、院生の参加があり、活発な議論をすることができた。同シンポジウムの報告・発言はすべて録音した。録音はすでに文字に起こして原稿を作成しており、2015年度の科研の報告集として日本語と中国語の両国語で刊行する計画である。なお、科研の報告集としては、2013年度に実施した研究会の記録をまとめた報告集第11集「ドキュメンタリー執筆のための聞き取り・台湾人戦犯」の他、台湾の教員の体験談をまとめた第12集「顔順裕・黄秀英・廖継思オーラルヒストリー」、日本統治期の裁判所に勤務した公務員からの聞き書きをまとため報告集第13集「魏景宏オーラルヒストリー」、第14集「三吉勝夫オーラルヒストリー」の4冊の報告集を刊行した。本年度は、本科研「日本の敗戦と新しい国境による台湾・沖縄の変容の口述歴史に基づく研究」の最終年度であり、今までの研究成果を報告集としてまとめることに全力を尽くした。報告集は、昨年度までに第1集から第14集が研究会の報告や「オーラルヒストリー集」として刊行されているが、それに続いて、本年度は、「台湾口述歴史研究第15集鈴木れいこオーラルヒストリー」、「台湾口述歴史研究第16集駱文森オーラルヒストリー」、「台湾口述歴史研究第17集陳逸楽オーラルヒストリー」、「台湾口述歴史研究第18集黄伯超オーラルヒストリー」、「台湾口述歴史研究第19集荘徴華ご夫妻オーラルヒストリー」の5冊を刊行した。この5冊の報告集は、台湾に在住した日本人、日本統治時代を体験した台湾人からの聞き取りを編集した報告である。時期的には、日本統治が終了し、国民党による統治が開始される台湾の激動期を日本人、台湾人の立場からお話いただいたことが内容となっている。駱さんは、1972年の日中国交回復にともなう台湾との断交により日本のメディアが台湾から撤収した後、「朝日新聞」の事実上の現地駐在員として台湾の状況を日本に発信し続けた人物である。

また、黄伯超さんは台北帝国大学医学部・台湾大学医学部を経て、戦後、台湾の児童の栄養改善、医学部教育の充実に尽力された医学会の重鎮である。また荘徴華さんは、マラリアの専門家として活躍し、1965年にWHO(世界保健機関)により台湾におけるマラリアは完全に撲滅されたと宣言されるに至った功労者である。聞き書きに応じていただいた方のなかにはすでに亡くなられた方もあり、これらの報告は大変貴重なものとなっている。本科研の成果としては、台湾における戦中・戦後の社会的変容について、日本人および台湾人による証言に関する11冊の報告集を刊行した。日本人の証言は、戦時中の沖縄から台湾へ疎開経験者、あるいは台湾から沖縄へ引揚者、日本時代の教育者、また台湾人の証言者は、連合国によりBC級戦犯とされた体験者、マラリア撲滅に従事した医師、日本の裁判所勤務者、戒厳令の時期に台湾からの情報を発信し続けたジャーナリストなど多岐に及ぶ。また、本科研と台湾口述歴史研究学会との共催により、2014年8月30・31日の両日、台北の中央研究院台湾史研究所において、オーラルヒストリーに関する研究報告会を開催した。本科研の申請時以来、計画していた台湾の口述歴史学会などとの共催による研究会を二日にわたり、台北の中央研究院台湾史研究所において開催することができた。この研究会には台湾口述学会の理事長や台湾史研究所口述歴史室所属の研究者の他、院生などを中心に100名近い若い研究者の参加があった。また、会場には聞き書きの対象としてご協力していただいた80歳代・90歳代の植民地時期を体験されてきた世代の方も出席されて交流した。この研究集会における報告、議論の記録を日本語・中国語で刊行すべく、原稿を作成した。また、昨年度の研究会の記録、本科研のメンバーによる聞き書きの成果をまとめた報告集を4冊刊行することができた。27年度が最終年度であるため、記入しない。台湾近現代史2015年度は本科研の最終年度となるため、従来の活動を編修して報告集を刊行する計画である。そのなかには、2014年8月に台北の中央研究院台湾史研究所で開催した研究集会の日本語と中国語による原稿、2015年度の研究会の記録の他に、今までに聞き書きを記録してきた原稿が含まれる。これらの原稿を編修し、より多く報告集として刊行することを計画している。また、日本統治時期、とくに戦時下における文献資料、公文書などは保存されているものが限られており、また、未公開のものもあるので、そのような文献資料の空白を埋めることを意図して、当時を知る方からの聞き書き、口述の記録をできるだけ多く今のうちに残しておくことが必要な作業となる。日本語世代の方からの聞き書きについて、教育史、総督府関係者及びその家族などからの聞き書きは今年度も継続的に実施できたこと。本科研との同様の問題関心、取材・研究を共通にする方からの報告を中心とする研究会を4回実施し、その報告集も刊行できたこと。とくに、八重山現地と台湾において長年にわたり取材を重ねてきた松田良孝氏の報告を受け、植民地時代の台湾・沖縄について人の交流について具体的な成果を得たこと。本科研が開始される以前において、長年にわたり、そのご専門分野である教育あるいは皇民化、捕虜政策についてそれぞれ聞き書きをされてきた先行研究者の方からその成果を得て、今後の活動に資することができたこと。研究会に台湾からの留学生など、若い研究者の参加が多くあり、聞き書きを通じて歴史を研究していく方法論、体験などを引き継ぎ、次世代の研究者の養成に貢献しつつあるのではないかと思われること。以上のことより、おおむね順調に研究は進められてきたのではないかと判断できると思われる。
新しい非線形光学材料の設計と開発

1.縮合多環芳香族炭化水素のうち,アセンおよび枝分かれのないフェン類に対するPPP分子軌道法計算の新しいパラメーターNew-γの値をabsolute hardness ηを用いて見積もると,電子スペクトル計算の高精度化が達成できることが明らかとなった.この際,縮合多環系の縮合様式を,aromatic sextet rexonancesystem(ASRS)とaromatic sextet alternantsystem(ASAS)という新しい概念で区別して取り扱うことが有効である。2.枝分かれを含む縮合多環系はの適用:この系では,分子中の最大アセン部分に着目する方法が有効で,単にこの部分構造における縮環数を数えるだけで,パラメーターNew-γの値の見積もりが可能であることを明らかにした.そして,この領域を,spectroactive ASRSと呼ぶことを提案した.4.鎖状共役系への適応.中性ポリエン,メロシアニン,ポリエニル陽イオン,シアニン,オキソノール類に対するNew-γの値の見積もり方について検討した.ベンジリデンアニリン類(X-C_6H_4(p)-N=C-C_6H_4(p)-Y)の分子構造をab initio法で最適化し,分子の非平面性と非線形性の相関について検討した.結晶中での分子配列制御に有用な新しい水素結合系を開発するため,二置換アミドによる1次元的な水素結合系の構築,アンモニウムスルホネート塩を用いた2次元シート構造の構築を目指し,結晶作成と構造解析を行った.前者では,N-(9'-アントリル)-9-アンドラアミトについて積層カラム構造を得た.また,後者では,構成単位を変化させた5種の塩の結晶構造を確認したが,統一された水素結合様式は見られなかった.そこで,多点的に2次元,3次元に構造を規制するような系の開発を検討している.1.縮合多環芳香族炭化水素のうち,アセンおよび枝分かれのないフェン類に対するPPP分子軌道法計算の新しいパラメーターNew-γの値をabsolute hardness ηを用いて見積もると,電子スペクトル計算の高精度化が達成できることが明らかとなった.この際,縮合多環系の縮合様式を,aromatic sextet rexonancesystem(ASRS)とaromatic sextet alternantsystem(ASAS)という新しい概念で区別して取り扱うことが有効である。2.枝分かれを含む縮合多環系はの適用:この系では,分子中の最大アセン部分に着目する方法が有効で,単にこの部分構造における縮環数を数えるだけで,パラメーターNew-γの値の見積もりが可能であることを明らかにした.そして,この領域を,spectroactive ASRSと呼ぶことを提案した.4.鎖状共役系への適応.中性ポリエン,メロシアニン,ポリエニル陽イオン,シアニン,オキソノール類に対するNew-γの値の見積もり方について検討した.ベンジリデンアニリン類(X-C_6H_4(p)-N=C-C_6H_4(p)-Y)の分子構造をab initio法で最適化し,分子の非平面性と非線形性の相関について検討した.結晶中での分子配列制御に有用な新しい水素結合系を開発するため,二置換アミドによる1次元的な水素結合系の構築,アンモニウムスルホネート塩を用いた2次元シート構造の構築を目指し,結晶作成と構造解析を行った.前者では,N-(9'-アントリル)-9-アンドラアミトについて積層カラム構造を得た.また,後者では,構成単位を変化させた5種の塩の結晶構造を確認したが,統一された水素結合様式は見られなかった.そこで,多点的に2次元,3次元に構造を規制するような系の開発を検討している.
実践的電子移動駆動型有機合成反応の開拓

本研究の目的は有機合成に実用的に使える実践的な電子移動駆動型反応を開発し,有機合成に応用することである。今まで開発してきたカチオンプール法を更に発展させたカチオンフロー法を開拓した。この方法では,低温電解酸化で発生させたカチオンを蓄えるのではなく、フローラインですぐに求核剤と反応させるというものである。このフロー型電解ではシステムをマイクロにすることにより効率的な冷却ができ、また滞留時間も短くできることから、より不安定なカチオンに対しても適応できると期待される。また、発生させたカチオンをフロー系の中に設置した赤外分光分析装置で直接モニターできる方法も開発した。さらに、この「カチオンフロー法」を用いたシリアルなコンビナトリアル合成法も開発した。この方法は、フロー系を利用して、カチオンに対して次々と異なる求核剤を反応させて、対応する組み合わせの生成物を得るものである。さらに、カチオン前駆体を変えることによって別の組み合わせの生成物を得ることができる。「カチオンフロー法」はコンビナトリアル化学の実践的な新手法をもたらすものといえる。本研究の目的は有機合成に実用的に使える実践的な電子移動駆動型反応を開発し、有機合成に応用することである。本年度は、低温電解酸化により発生させた炭素カチオンを一旦プールし、それに各種の炭素求核剤を反応させるという新しい炭素-炭素結合形成法を開拓した。炭素カチオンは一般に不安定であり、通常は求核剤存在下に炭素カチオンを発生させ、すぐに求核剤と反応させるという方法が用いられている。通常の電解酸化による炭素カチオンの発生の場合でも同様である。しかし、このような方法では、炭素カチオンの前駆体よりも酸化されやすい求核剤を用いることはできず、実際多くの炭素求核剤は使えない。しかし、カチオンプ-ル法はこの問題を根本的に解決するもので、炭素求核剤を用いた炭素-炭素結合形成を効率よく一段階で行うことができる。具体的にはカルバメートの低温電解酸化によりイミニウムカチオンを発生させ、これをプールした後、アリルシラン、芳香族化合物などの炭素求核剤を反応させることにより、対応する生成物が収率よく得られることを明らかにした。この「カチオンプール法」により、C-H結合を酸化してC-C結合を一段階で効率よく形成する新しい分子変換法を確立することができ、この方法は新しい形式の実践的電子移動駆動型反応として従来型有機合成に広く利用できる。また、低温電解酸化で得られた炭素カチオンプールを自動合成装置により分割し、それを各種炭素求核剤と反応させるコンビナトリアルパラレル自動合成にも適用できることを明らかにした。本研究では、低温電解酸化により発生させた炭素カチオンを一旦プールし、それに各種の炭素求核剤を反応させるという新しい炭素-炭素結合形成法を開拓した。しかし、カチオンプール法はこの問題を根本的に解決するもので、炭素求核剤を用いた炭素-炭素結合形成を効率よく一段階で行うことができる。昨年度はカルバメートの低温電解酸化によりイミニウムカチオンを発生させ、これをプールした後、アリルシラン、芳香族化合物などの炭素求核剤を反応させることにより、対応する生成物が収率よく得られることを明らかにした。本年度はグリニヤール反応剤や有機アルミニウム、有機亜鉛などの有機金属反応剤との反応に成功した。この成果により「カチオンプール法」の適用範囲が格段に広まった。カチオンプール法は新しい形式の実践的電子移動駆動型反応として有機合成に広く利用できると期待される。本年度は、今まで開発してきたカチオンプール法をさらに発展させたカチオンフロー法を開拓した。

このフロー型電解ではシステムをマイクロにすることにより効率的な冷却ができ、また滞留時間も短くできることから、より不安定なカチオンに対しても適応できると期待される。また、発生させたカチオンをフロー系の中に設置した赤外分光分析装置で直接モニターできる方法も開発した。さらに、この「カチオンフロー法」を用いたシリアルなコンビナトリアル合成法も開発した。この方法は、フロー系を利用して、カチオンに対して次々と異なる求核剤を反応させて、対応する組み合わせの生成物を得るものである。さらに、カチオン前駆体を変えることによって別の組み合わせの生成物を得ることができる。「カチオンフロー法」はコンビナトリアル化学の実践的な新手法をもたらすものといえる。
マウス胎仔皮膚再生モデルを用いた皮溝、皮丘の形成メカニズムの探求

皮溝、皮丘のパターンは"きめ"あるいは皮膚の質感と呼ばれているもののひとつで、体の部位によって違う。本研究は多くの形成外科領域に関係する皮溝、皮丘のパターンの形成メカニズムについては研究を行うことを目的としている。皮膚が完全に再生するマウス胎仔創傷治癒のモデルを用いて、胎生13日の胎仔創傷治癒と胎生14日の胎仔創傷治癒を比べ、皮溝、皮丘のパターンの形成メカニズムの探求を行っている。sonic hedgehog, indian hedgehog, desert hedgehog, gli-1,-2,-3, smoothened,elastin, fibrillin, fiburinについての発現を免疫組織学的に検討した。その結果、sonic hedgehogは胎生13日の創傷治癒では発現は認められなかったが、胎生14日以降の創傷治癒では過剰発現していた。sonichedgehogの下流のgli-1,-2,-3,smoothenedはいずれの場合も発現していて、sonic hedgehogの発現の有無が皮溝、皮丘の形成をコントロールしている可能性があった。Genechipによる解析では、胎生13日と14日の創傷治癒過程で発現差異のある物質は数多く観察されたが、発生の段階による違いによるものがほとんどであった。エラスチン関連物質では、胎生13日と14日の創傷治癒での発現の差は見られなかった。その他の胎生13日の創傷治癒過程で発現していて、胎生14日の創傷治癒で発現していない物質として、Igals9,cluなど12遺伝子が、逆に胎生14日の創傷治癒過程で発現していて、胎生13日の創傷治癒で発言していない物質としてHba-x, Lrp-1など9遺伝子が見つかった。これらはreal time RTPCRで定量的に確認され、また免疫染色により創辺縁での発現が確認された。sonic hedgehog, indian hedgehog, desert hedgehog, gli-1,-2,-3, smoothened, elastin,fibrillin, fiburinについての発現を免疫組織学的に検討した。sonichedgehogの下流のgli-1,-2,-3, smoothenedはいずれの場合も発現していて、sonic hedgehogの発現の有無が皮溝、皮丘の形成をコントロールしている可能性があった。

皮膚が完全に再生するマウス胎仔創傷治癒のモデルを用いて、胎生13日の胎仔創傷治癒と胎生14日の胎仔創傷治癒を比べ、皮溝、皮丘のパターンの形成メカニズムの探求を行っている。sonic hedgehog, indian hedgehog, desert hedgehog, gli-1,-2,-3, smoothened, elastin, fibrillin, fiburinについての発現を免疫組織学的に検討した。その結果、sonic hedgehogは胎生13日の創傷治癒では発現は認められなかったが、胎生14日以降の創傷治癒では過剰発現していた。sonichedgehogの下流のgli-1,-2,-3,smoothenedはいずれの場合も発現していて、sonic hedgehogの発現の有無が皮溝、皮丘の形成をコントロールしている可能性があった。Genechipによる解析では、胎生13日と14日の創傷治癒過程で発現差異のある物質は数多く観察されたが、発生の段階による違いによるものがほとんどであった。エラスチン関連物質では、胎生13日と14日の創傷治癒での発現の差は見られなかった。その他の胎生13日の創傷治癒過程で発現していて、胎生14日の創傷治癒で発現していない物質として、Igals9,cluなど12遺伝子が、逆に胎生14日の創傷治癒過程で発現していて、胎生13日の創傷治癒で発言していない物質としてHba-x,Lrp-1など9遺伝子が見つかった。これらはreal time RTPCRで定量的に確認され、また免疫染色により創辺縁での発現が確認された。
カーネル法と制御ポリシーを用いた中長期的投資戦略最適化

本研究では、中長期的な資金運用を想定し、非線形の制御関数を利用して計画期間の途中でのリバランス(投資の組み変え)を動的に決定する問題に取り組んだ。本研究では、非線形データ解析の手法であるカーネル法を利用して問題を求解可能な形式(凸2次最適化問題)として定式化した。また、固有値分解に基づく次元縮約によって問題サイズを縮小する方法も提案し、計算実験によって提案投資戦略の運用成績と問題サイズ縮小法の有効性を検証した。ポートフォリオ最適化問題とは「低リスク」と「高リターン」を目標として、各金融資産への投資決定を行う問題である。本研究では、中長期的な資金運用を想定し、計画期間の途中でのリバランス(投資の組み替え)を含めて投資決定を行う「多期間ポートフォリオ最適化問題」に取り組んだ。本研究では、多期間ポートフォリオ最適化のための基本的なモデルである「シミュレーション型多期間確率計画モデル」に対して「投資決定を表す関数」である制御ポリシーを導入することで、資産価格変化に対応して動的にリバランスを繰り返していく最適化モデルを定式化した。しかしながら、このモデルは制御ポリシー(関数)の最適化問題となるために求解は困難である。そこで本研究では、非線形データ解析のための手法であるカーネル法を利用して、求解が比較的容易な凸2次最適化問題に問題を変形した。さらに、大規模な問題を解くことを想定して、L1ノルム正則化と呼ばれる手法を用いて最終的に提案モデルは線形最適化問題として定式化した。本研究では実データからパラメータを推定し、ベクトル自己回帰モデルによって資産価格変動のシナリオを多数発生させて運用成績を検証した。検証の結果、「基本のシミュレーション型モデルと比較して、制御ポリシー最適化モデルの運用成績が優れていること」、「非線形関数の制御ポリシーを利用することで、特に高リターンの重視の場合に運用成績を改善できること」などが分かった。本研究は多期間ポートフォリオ最適化をベースにして、制御理論と機械学習理論を融合させた研究であると言える。また、実用的には、機関投資家や個人投資家が本研究の成果を活用できるのはもちろんのこと、長期的に安定した資金運用が求められている年金の運用などでも本研究で提案する手法は有用だと考える。ポートフォリオ最適化問題とは各金融資産への投資決定を行なう問題であり、「低リスク」かつ「高リターン」の資金運用を実現することが目標となる。本研究では、中長期的な資金運用を想定し、計画期間の途中でのリバランス(投資の組み替え)を含めて投資決定を行う多期間ポートフォリオ最適化問題に取り組んだ。平成23年度は非線形の制御関数を利用してリバランスを行なう多期間ポートフォリオ最適化モデルを定式化し、非線形データ解析の手法であるカーネル法を利用して凸2次最適化問題に帰着した。計算実験の結果、提案モデルは良好な運用成績を得られる可能性があることを確認したが、「小規模の問題であっても計算のために長い時間を要する」「過去データに過剰に適合してしまい事後的な運用成績が大きく悪化する」という問題点があった。そこで平成24年度は、固有値分解を利用した次元縮約によって問題サイズを縮小する方法を提案した。この方法では、情報量を維持しながら計算負荷を減少させることができ、ノイズ除去効果によって過剰適合を抑える効果も期待できる。提案手法の有効性を検証するために米国市場の株価データを用いた計算実験を実施した。計算実験の結果、提案する問題サイズ縮小法は計算時間の削減、メモリ不足の回避に有用であることを検証し、さらに事後的な運用成績を向上させる効果があることも確認できた。本研究は金融工学分野の多期間ポートフォリオ最適化問題に対して制御理論と機械学習理論を応用した分野横断型の融合研究である。また、本研究の成果は、機関投資家や個人投資家が活用できるのはもちろんのこと、長期的に安定した資金運用が求められている年金の運用などでも本研究で提案する手法は有用だと考える。カーネル法を利用した側御ポリシーによるポートフォリオ最適化モデルの構築に成功し、数値実験によってその有効性までも検証できたことは当初の計画以上である。しかしながら、大規模な最適化問題を扱うためにはまだ求解アルゴリズムを改良する必要があり、これらを考慮しておおむね順調だと評価する。24年度が最終年度であるため、記入しない。これまでの研究成果によって、提案モデルの有効性をある程度検証することができた。しかしながら、実用化を想定すれば、より詳細な数値実験を行って提案モデルの特徴と有用性を検証していく必要がある。また、提案モデルの運用成績が優れていることは検証できたが、大規模な最適化問題を扱うためにはまだ求解アルゴリズムを改良する必要がある。カーネル法を用いた機械学習手法では分解法などの効率的な計算アルゴリズムが利用されており、これらを参考にして、大規模な投資決定問題を実用時間で安定して計算できるような解法の構築を目指す。
フレカイニドの血中濃度におよぼす加齢、CYP2D6遺伝子多型および併用薬の影響

【研究目的】抗不整脈薬フレカイニド(FL)は、血中濃度の個人差が大きく、その原因として年齢、薬物代謝酵素CYP2D6の遺伝子多型、性別が関連していることが知られている。また、このFLの代謝におよぼすCYP2D6遺伝子多型の影響は加齢に伴い強く現れるため、高齢者においては、FL投与設計のためのCYP2D6遺伝子多型情報の臨床的意義が若壮年者と比較してより大きいと推測される。本研究では、FL服用患者を対象として、血中FL濃度およびCYP2D6遺伝子型に基づいて母集団薬物動態(PPK)解析を行い、高齢者と若壮年者におけるCYP2D6遺伝子多型情報の臨床的意義の違いを定量的に明らかにする。【研究方法】上室性不整脈の治療のためにFLを服用している146名の患者(男性115名、女性31名、年齢61±12歳、体重66±11kg)を対象とした。母集団解析プログラムにはWinNonMix(Version 2.0)を用い、定常状態における血中FL濃度217測定点を1コンパートメントモデルで解析した。クリアランス(CL)に影響をおよぼす因子として、体重、年齢、性別、AST、ALT、喫煙、推算糸球体ろ過率(eGFR)およびCYP2D6遺伝子型を検討した。【研究成果】血中FL濃度のPPK解析から、体重、eGFR、年齢および性別が、CLの影響因子であることが判明した。加齢に伴うCLの低下はCYP2D6遺伝子型によって異なり、CYP2D6酵素活性が低い遺伝子型の患者では加齢に伴うFLのCLの低下が顕著であることが明らかとなった。高齢者におけるFLの用量設定ではCYP2D6遺伝子多型解析も有用と考えられた。
ソーシャル・サポートの労働ストレス緩和および増悪効果の両面性に関する基礎的研究

本年度は、前年度の後半から大阪市内のホワイト・カラー従業員を対象に実施した調査結果をコンピュータに入力のうえ、データベースを作成し、信号検出分析法(Signal Detection Analysis)(SDA)を用いて解析した。本研究の目的はソーシャル・サポートの労働ストレス緩和効果を"Sensitivity hypothesis"の立場から検証することである。具体的には、対象集団の全体規模でストレスの緩和効果が発生するのではなく、特定のストレッサーにマッチした特定のソーシャル・サポート要因を持った者の間でのみストレスの緩和効果が発生すると考えられる。また、Sensitivity hypothesisによれば、理論的には、ストレッサーとソーシャル・サポートの組み合わせ如何によって、ストレスの緩和効果のみならず、ストレッサーの影響を増悪させることもありうる。そこで、SDAを解析方法として用い、ホワイト・カラー労働者を対象に、可能な限り数多くのストレッサー、ストレス反応、ソーシャル・サポートの組み合わせを取り上げ、ソーシャル・サポートの労働ストレス緩和効果を検討した。その結果、以下の点が明らかになった。(1)ソーシャル・サポート要因とストレッサーのミスマッチはストレス緩和効果を生じない。(2)ある種のソーシャル・サポートはストレスの影響を、緩和とは逆に、増悪させる。(3)同一のソーシャル・サポートがストレッサーや他の要因の組み合わせ次第で緩和と増悪効果の両面性を有する。本研究によって得られた知見は、従来のソーシャル・サポートを肯定的に捉えるスタンスとは異なり、知見自体が非常に有益であると思われる。また、本知見は学術的価値のみならず、ストレス・リダクションの介入や健康教育等の実際上の価値が大きいと思われる。本研究では、ソーシャル・サポートの労働ストレス緩和効果の評価に関し、従来にない新しい方法論に基づき、ソーシャル・サポートの緩和効果と増悪効果の両方の可能性を評価することを目的としている。具体的には、方法論としては信号検出分析法(Signal Detection Analysis)を用いて、あらゆるストレッサーとソーシャル・サポート要因の組み合わせを検討し、以下の点を検討することを目的としている。(2)(1)の場合のミスマッチに関連する要因(例、婚姻状況、性格特性、職制)を明らかにする。(3)ある種のソーシャル・サポートはストレスの影響を、緩和とは逆に、増悪させる。(4)(3)の場合の増悪効果に関連する要因(例、婚姻状況、性格特性、職制)を明らかにする。(5)同一のソーシャル・サポートがストレッサーや他の要因の組み合わせ次第で緩和と増悪効果の両面性を有する可能性を検討する。平成14年度は関連文献のレビューを行い、主に、労働ストレス、ストレス反応、ソーシャル・サポートによるストレスの緩和もしくは増悪効果に関する知見を集約した。その結果を基に、関連する可能性のある項目を網羅した質問票を作成し、約100名程度を対象にパイロット・スタディを行なった。更に、質問票を確定した後、調査実施手順に従い、大阪府下のホワイト・カラー従業員を対象に、調査を実施した。現在、調査票を回収し、コンピュータに入力中である。この作業が終了し次第、このデータを基に、SDAを用いて仮説の検証を実施する予定である。また、平成14年度は、ミシガン大学の社会学研究所で実施されたデータを基に、ストレス反応の指標として、SDS、GHQといった精神的健康度に限定せず、間接的な指標(アルコール消費量)に着目し、ソーシャル・サポートによるストレスの緩和もしくは増悪効果を検討した。その結果、ソーシャル・サポートの種類とストレッサーの組み合わせによって、緩和と増悪効果の両面性を有する可能性が明らかになった。

具体的には、対象集団の全体規模でストレスの緩和効果が発生するのではなく、特定のストレッサーにマッチした特定のソーシャル・サポート要因を持った者の間でのみストレスの緩和効果が発生すると考えられる。また、Sensitivity hypothesisによれば、理論的には、ストレッサーとソーシャル・サポートの組み合わせ如何によって、ストレスの緩和効果のみならず、ストレッサーの影響を増悪させることもありうる。そこで、SDAを解析方法として用い、ホワイト・カラー労働者を対象に、可能な限り数多くのストレッサー、ストレス反応、ソーシャル・サポートの組み合わせを取り上げ、ソーシャル・サポートの労働ストレス緩和効果を検討した。その結果、以下の点が明らかになった。(1)ソーシャル・サポート要因とストレッサーのミスマッチはストレス緩和効果を生じない。(2)ある種のソーシャル・サポートはストレスの影響を、緩和とは逆に、増悪させる。(3)同一のソーシャル・サポートがストレッサーや他の要因の組み合わせ次第で緩和と増悪効果の両面性を有する。本研究によって得られた知見は、従来のソーシャル・サポートを肯定的に捉えるスタンスとは異なり、知見自体が非常に有益であると思われる。また、本知見は学術的価値のみならず、ストレス・リダクションの介入や健康教育等の実際上の価値が大きいと思われる。
腹膜透析関連腹膜炎、特に真菌感染の腹膜に与える影響と、補体活性制御系の関与

長期腹膜透析(PD)により、PD患者の中皮細胞の膜補体制御因子が影響を受けていることを明らかにした。また、PD関連腹膜炎排液中の補体活性化産物による、原因菌の予想や腹膜炎(その後の腹膜傷害を含む)の予後予測ためバイオマーカーへの応用について検討し、感染性腹膜炎患者のPD排液中sC5b-9濃度測定が役立つ可能性を示した。また、真菌感染後の被嚢性腹膜硬化症(EPS)発症機序解明のために、新たな実験動物モデルを開発し、C5aをターゲットとした抗補体療法の可能性を示した。1.腹膜透析(PD)患者のPD排液から作成した中皮細胞初代培養細胞を用いて、長期PDが中皮細胞上の補体制御因子(CReg)の発現を介して、腹腔内の補体系の影響について明らかにするために、経年的にFACSによる解析を進めている。現時時点で、15症例でPD導入後から3年目までの腹膜中皮細胞のCRegの発現の変化を終えている。これまでの結果では、特に導入後から、1年目を経過した時点で、一部のCRegの発現に影響を受けていることが観察できている。現在は、得られた現象が確実なものであるのかどうかを検証するために症例数を増やしている。さらにPDのどの要素がヒト中皮細胞のCRegの発現に影響をもたらすのか、検索を行っているが、現在施行中のFACSを用いた系では、多数の要素を同時に検証することができないため、ヒト中皮細胞のcell lineを用いて、同時に多数の刺激実験を行う系の整備を行っている。本研究により、現在のPD液が補体制御系に与える機序の解明が進むものと考える。2. PD関連腹膜炎の排液中の補体活性化産物の測定により、原因菌の予想や膜炎(その後の腹膜傷害を含む)の予後を考慮するためのバイオマーカーとしての利用について検討を、現在もn数を増やし検討を継続中である。これまでのところでは、腹膜炎経過中にPD継続の有無を求められるDay5を中心に、特に判断のむずかしい培養陰性例に焦点を当てて検討中である。3.真菌感染後発症する非嚢性腹膜硬化症(EPS)機序解明のために、Zymosanを用いた腸管腹膜炎モデル作成と臨床上問題となる臓側腹膜の評価方法を確立した(2015年ヨーロッパ補体学会(Uppsala)で発表)。本モデルへの補体の関与としてC5aの関与について明らかにし、かつ、腹膜傷害のコントロールのためにC5aに関連する治療介入についての検討を行ってる。概要1については、時間経過に伴う実験結果の解析のために、研究を継続中である。これまでのところ、腹膜透析導入時から経過を追っていくと腹膜中皮細胞上の膜補体制御因子の発現が影響を受けている可能性を明らかにしている。本研究目的の一部として、長期の時間経過を加味した観察データが必要なため、このあとも、経時的にサンプル収集を行い、解析を行っていく。概要2については、研究の継続と共に、成果の一部を論文化する作業を進めている。概要3については、成果の一部を昨年夏に発表し、現在、追加実験を進めている。このため、本年度の成果を自己判断すると、おおむね順調と判断する。検査開始時と2年後では、CD46、CD55の発現の増強、CD59の発現の低下することがわかったが、現時点ではn=17と少ないため、継続して解析を進める。また、PD治療による腹膜へのCReg発現の影響を網羅的検討は、中皮細胞初代培養細胞では難しいため、cell lineによるmulti plateを用いた同時に多因子の影響判定が可能な実験系の確立を進めている。本研究により、現在のPD液が生体の恒常性維持に対する補体系に与える影響の解明につながると考える。2. PD関連腹膜炎排液中の補体活性化産物による、原因菌の予想や腹膜炎(その後の腹膜傷害を含む)の予後予測ためバイオマーカーへの応用について検討し、一部として感染性腹膜炎中のsC5b-9濃度の計測が培養陰性の腹膜炎予後に役立つ可能性について論文化した。現在も、n数を増やし検討を行うためにサンプルの収集・測定を継続中である。3.真菌感染後の被嚢性腹膜硬化症(EPS)発症機序解明のために、MGO前処置によるZymosanを用いた腸管が一塊となる腹膜炎モデル作成と臨床上問題となる臓側腹膜の評価方法を確立した。更に本モデルへの補体関与としてC5a関与を明らかにし、C5a拮抗剤(AcPepA)によるEPS進展への抑制効果について、国際学会への発表を行った(国際補体ワークショップと国際血液浄化学会(2016年9月))。現在、遺伝性血管性浮腫の治療薬として臨床応用されている抗補体薬の一つC1インヒビターや、C5aの間接的抑制効果も期待できるリコモジュリン等、臨床応用の可能性を考慮した抑制実験を継続中である。概要1については、これまでに明らかにした結果について報告してきたが、さらに1年2年に渡る時間経過に伴う実験結果の解析のために、研究を継続中である。

これまでに、腹膜透析導入時から経過を追うにつれ腹膜中皮細胞上の膜補体制御因子の発現が影響を受けている可能性を明らかにするためのサンプルサイズを増やすために採取・解析を継続している。引き続き、経時的にサンプル収集を行い、解析を行っていく。概要2については、成果の一部については論文発表を行い、さらにサンプルサイズを増やし、その後の腹膜への影響も考慮して測定・解析を継続していく。概要3について、昨年についで、C5aを治療のターゲットとしての治療実験を進め、その成果を国際学会で報告した。現在、成果の一部を論文化するための準備を進めている。また、現在ヒトに応用されている抗補体薬による腹膜傷害の改善効果についても検討を継続している。1.腹膜透析(PD)患者のPD排液から作成した中皮細胞初代培養細胞を用いて、長期PDが中皮細胞上の補体制御因子(CReg)の発現を介した、腹腔内の補体系の影響について明らかにするために、経年的変化の解析を進めている。検査開始時と2年後で、CD46、CD55、CD59の発現の増加傾向の再現性をとるため、症例数を増やした。また、PD液採取時のPD排液上清を用いてsC5b-9変化を観察。PD治療による腹膜へのCReg発現の影響を網羅的検討は、中皮細胞初代培養細胞では難しいため、cell lineによるmulti plateを用いた同時に多因子の影響判定が可能な実験系の確立を進めている。本研究により、現在のPD液が生体の恒常性維持に対する補体系に与える影響の解明につながると考える。2. PD関連腹膜炎排液中の補体活性化産物による、原因菌の予想や腹膜炎(その後の腹膜傷害を含む)の予後予測ためバイオマーカーへの応用について検討し、一部として感染性腹膜炎中のsC5b-9濃度の計測が培養陰性の腹膜炎予後に役立つ可能性について論文化した。現在も、n数を増やしての検討を継続しており、さらに海外との共同研究を展開中である。3.真菌感染後の被嚢性腹膜硬化症(EPS)発症機序解明のために、MGO前処置によるZymosanを用いた腸管が一塊となる腹膜炎モデル作成と臨床上問題となる臓側腹膜の評価方法を確立し、C5a拮抗剤(AcPepA)によるEPS進展への抑制効果について、国際学会への発表を行った後に、現在投稿中である。長期腹膜透析(PD)により、PD患者の中皮細胞の膜補体制御因子が影響を受けていることを明らかにした。また、PD関連腹膜炎排液中の補体活性化産物による、原因菌の予想や腹膜炎(その後の腹膜傷害を含む)の予後予測ためバイオマーカーへの応用について検討し、感染性腹膜炎患者のPD排液中sC5b-9濃度測定が役立つ可能性を示した。また、真菌感染後の被嚢性腹膜硬化症(EPS)発症機序解明のために、新たな実験動物モデルを開発し、C5aをターゲットとした抗補体療法の可能性を示した。腹膜透析が与える、腹膜での補体系の働きの異常を明らかにし、補体から見た腹膜傷害の機序の解明を行う。今後、抗補体療法という新たな介入により、腹膜傷害の予防・治療の可能性を模索行うため、in vivoとin vitroの研究を本研究を進める。今後も、腹膜透析に限らず、日本の補体研究の中心となるべく、研究を遂行しいく。・今後の推進方策これまでと同様に、腹膜透析が与える腹膜での補体系の働きの異常を明らかにし、補体から見た腹膜傷害の機序の解明を目的とする。将来の目標として、抗補体療法という新たな介入により、腹膜傷害の予防・治療の可能性を模索していくため、in vivoとin vitroの両面で研究を進めていく。
海洋表層の炭酸ガス吸収能評価のための栄養塩類鉛直微細分布計測

長光路キャピラリーフローセル(LWCC=Liquid waveguide capillary flow cell)と空気分節型連続フロー分析システムを組み合わせた高感度吸光光度分析システムを開発した。まず、この方法によるリン酸塩の分析について基礎的な検討を行った。光路長2mのセルを用いたシステムで、検出限界は2.8nMであった。ケイ酸、ヒ酸塩の影響について検討した結果、ヒ酸塩の影響は無視できず、ヒ酸還元試薬の添加が必要と判断された。本学研究練習船「海鷹丸」および「神鷹丸」に乗船し、表層における水柱構造と栄養塩類の鉛直微細分布の観測を行った。成層海域の海水試料については、リン酸塩は上記の高感度分析法、硝酸塩(+亜硝酸塩)は化学発光法による分析を行った。表層の混合層レベルの濃度から栄養塩濃度が深度と共に上昇しはじめる深度(濃度躍層の上端)を硝酸塩とリン酸塩で比較したところ、リン酸塩の方が約515m程浅くなる例が観測された。一方、混合層内ではリン酸塩濃度の方が相対的に浅層での濃度減少が大きくなるケースが見られた。2003年12月に南極海で海鷹丸により同様の高密度鉛直分布の観測を行った。このときの栄養塩分析は通常の自動比色分析法を用いた。この観測でも、濃度躍層の上端や混合層内の濃度勾配など、リン酸塩と硝酸塩の挙動の違いについて亜熱帯海域と同様な特徴が観測された。これらは海洋の有光層での窒素・リンの挙動は一般的な現象である可能性が高いと判断された。なお、長光路キャピラリーフローセルを用いた高感度比色分析法については、最終的にリン酸塩、硝酸塩(+亜硝酸塩)、アンモニウム塩濃度の3項目の測定が可能となり、航走中の栄養塩類の高感度連続モニターや、亜熱帯外洋水の船上インキュベーション実験などにも適用可能であることが示された。今年度は、海洋表層の栄養塩類の比色分析を高感度化するための基礎的検討を行った。光路長2mのキャピラリーフローセル(LWCC=Liquid waveguide capillary flow cell)を導入した。このフローセルは水よりも屈折率の小さい特殊なテフロンで作られたキャピラリーであり、光をセルから漏らさずにキャピラリーの物理的長さとほぼ同じ有効光路長を得ることが出来る。このセルと可視光源とCCD分光検出器を組み合わせて、高感度比色分析のための吸光度の計測システムを構成した。安定した吸光度シグナルを得るためのサンプル導入法、セルの洗浄法等の検討を行った後、まずモリブデンブルー法によるリン酸塩の分析を検討した。通常モリブデンブルー法で用いられる吸収波長(880nm)では、水自体の光吸収が大きすぎて吸光度の測定が不可能であった。.そこで発色色素の第2のピークである708nmを用いることとし、この波長における妨害物質の影響等を検討した。さらに標準試料を用いて濃度と吸光度の直線性を確認し、最終的には0100nMの濃度範囲でほぼ実用に耐える検量線を得ることが出来た。硝酸塩等のいわゆるnMレベルの高感度分析と同等の感度・精度を得ることが出来たので、本学練習船航海において相模湾で表面海水を採取し、室内で1ケ月以上の光照射培養を行って栄養塩を枯渇させた海水を準備して、濃度測定の検討を行った。

これらの海水では、検量線法によって520nMに相当する発色がみられた。絶対値の算出には、これらの値に占める発色ブランクについての検討が必要だが、リン酸塩(SRP)の高感度分析法を開発できたことで、次年度に計画している洋上での硝酸塩・リン酸塩の同時鉛直微細分布計測が可能となった。昨年度に基礎的検討を行った長光路キャピラリーフローセル(LWCC=Liquid waveguide capillary flow cell)を用いた高感度比色分析法について,安定した吸光度計測を行うための試料導入方法やブランク値の検討を継続した。また昨年度来検討しているリン酸塩(SRP)濃度の測定に加えて,硝酸塩(+亜硝酸塩)濃度の測定への適用について検討した。その結果,硝酸塩についても化学発光検出器を用いた高感度分析と同程度の感度で分析可能であることが確かめられた。リン酸塩および硝酸塩の双方について,本研究の長光路キャピラリーフローセルを用いた比色分析法によって亜熱帯成層海域表層の濃度レベルにおける高感度分析が実用可能と判断できた。この結果を踏まえて,より実用的な自動分析システムである空気分節型連続フロー比色分析システム(いわゆるオートアナライザー)との組み合わせについて検討した。連続フロー比色分析システムからキャピラリーフローセルに試料を導入する部分について試作・検討し,実際にオートアナライザーと組み合わせた高感度分析システムを構築した。これらの高感度分析システムの検討と平行して,今年度実施された東京水産大学研究練習船の航海のうち,以下の航程に乗船した。これらの航海ではCTD-オクトパスシステムによる海洋観測を実施すると共に,硝酸塩・リン酸塩の同時鉛直微細分布計測のための試料海水を採取した。1)7月12日19日,海鷹丸(東京長崎間),2)12月3日11日,海鷹丸(東京バンコク),3)3月10日17日,神鷹丸,(パラオ東京)。昨年度までの本学研究練習船の航海で採取した亜熱帯海域の海水試料について、高感度分析によるリン酸塩および硝酸塩の鉛直微細分布を測定した。リン酸塩については本研究で開発した長光路キャピラリーフローセル(LWCC=Liquid waveguide capillary flow cell)と空気分節型連続フロー比色分析システム(いわゆるオートアナライザー)を組み合わせたシステムによって定量した。また硝酸塩(+亜硝酸塩)については化学発光法による分析を行った。この結果2.55m間隔の高密度な採水によるリン酸塩および硝酸塩の微細分布を、はじめて同時に計測したデータを得ることができた。表層の混合層レベルの濃度から栄養塩濃度が深度と共に上昇しはじめる深度(濃度躍層の上端)を硝酸塩(+亜硝酸塩)とリン酸塩で比較したところ、リン酸塩の方が約515m程浅くなる例が見いだされた。昨年12月に南極海で同様の高密度採水を実施した結果でも、リン酸塩の方が硝酸塩より濃度躍層の上端が浅くなる結果が得られた。従ってこの現象は海洋の有光層での一般的な現象である可能性が高く、海洋表層における生元素循環を理解する上で極めて重要な発見であると考えている。なお、長光路キャピラリーフローセルを用いた高感度比色分析法については、最終的にリン酸塩(SRP)、硝酸塩(+亜硝酸塩)、アンモニウム塩濃度の3項目の測定が可能となった。これらの高感度分析は鉛直微細分布の計測だけでなく、航走中の栄養塩類の高感度連続モニターや、亜熱帯外洋水の船上インキュベーション実験などにも適用できた。これらの成果について、2003年9月の日本海洋学会秋季大会(長崎大学)で2件の研究発表を行った。