hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヒト乳頭腫ウィルスの発癌に関する研究

ヒト乳頭腫ウィルス(human papillomavirus HPV)は、皮膚や粘膜に種々の疾をつくるが一部の悪性腫瘍細胞中にHPV・DNAが存在することから、これらの悪性腫瘍の発生にこのウィルスが関与していると考えられている。HPVは塩基配列の差によって現在58型に分類されているが、悪性腫瘍から検出されるウィルスは特定な型に限られており、疣贅状表皮発育異常症患者から分離された5,7,8,20型などのウィルスと主として子宮頸癌組織からクローニングされた16,18,31,33,35型などのウィルスである。われわれはビオチン標識した各型のHPV・DNAプローブを用い型特異性のあるin situhybridizaton法により尖圭コンジロームと診断した64例の外陰、肛門部の疾患についてHPVの型の検索を行った。その結果6型が61%、11型が22%を占め、2型が1例検出され大部分が良性の疣贅から検出される型であったが、2例からは通学悪性腫瘍から検出される16型が検出されている。疣贅状表皮発育異常症については、39歳男性の患者からクローニングしたHPV5型DNAの7746の全塩基配列を決定した。この結果を米国において別個に行なわれた5型DNAの解析結果と比較すると、9塩基のみに相異がみられたが、他はすべて一致していた。この塩基配列を他の型のHPV・DNAのそれと比較し、5型に特異的と考えられ、初期遺伝子にコードされている蛋白の合成を行い、特異性についての検討を行っている。また疣贅状表皮発育異常症の良性皮疹から抽出した抗原で家兎を免疫し、本症の良性および悪性の腫瘍細胞のみと特異的に反応する組織抗原に対する抗体を作成した。さらに本症患者の悪性腫瘍の腹腔内転移巣から組織培養細胞株を樹立し、この培養細胞中にHPV5型のDNAが存在することを証明している。ヒト乳頭腫ウイルス(human papiLLomavirus,HPV)は、DNA腫瘍ウイルスの一つであり、皮膚や粘膜に種々の症賛を発生させるが、皮膚泌尿器癌、子宮頸癌、喉頭癌などの腫瘍細胞中にHPV-DNAが検出されこれらの悪性腫瘍の発生に何等かの役割をはたしているものと考えられている。またHPVは、その塩基配列の差によって、現在46型に分類されているが、ウイルスの型と臨床病型とはある程度一致する。HPVの発癌に関する研究において、今年度に得られた知見は以下の通りである。1.尖圭コンジローム47例について、各型のDNAプローブを用いて、in situ hybridization法およびSouthern bLot法によるHPVの型の検索を行った。またパラフィン切片を用いた抗乳頭腫ウイルス抗体、PAP法によるウイルス粒子の局在についての検討も行った。その結果HPV陽性率は89%(41/47)であり、68%はHPV-6型であり、32%はHPV-11型であった。悪性腫瘍と関係があると考えられている16,18型のウイルスは1例も検出されなかった。小児の尖圭コンジロームは4例であったが、2例は11型、1例は6型で、1例は未知の型と考えられた。2.下腿の皮膚にみられたボーエン病1例の細胞中に、Southern法でHPV-2型のDNAが存在することを証明した。

3.症賛状表皮発育異常症患者から2種のHPV-DNAをクローニングし、その一つは5型であり、2のDNAの塩基配列をほぼ明らかにした。もう一つは、検索した38の型と一致しなかった。4.CervicaLdyspLasiaの一部に、in situ hybridization法で、HPV-16型のDNAの存在を証明した。5.1型のHPV感染症であるmyrmecia症賛について、HPV-DNAの局在とウイルス粒子の局在との関係を調べ報告した。ヒト乳頭腫ウイルス(human papillomavirus,HPV)は,皮膚や粘膜に種々の疣贅を発生させるが,一部の悪性腫瘍細胞中にHPV・DNAが存在することから,これらの悪性腫瘍の発生にこのウイルスが関与していると考えられている.われわれは外陰部を除く皮膚ボーエン病16例について, DNAの分子間雑種形成法によるHPV・DNAの有無についての検索を行ったが, 4例にHPV・DNAが認められた.そのうち2例は2型であり,他の2例はそれぞれ5型あるいは2型と相同性のあるHPV・DNAであった.また臨床的に尖圭コンジロームと診断された男性43例,女性15例,合計58例の外陰,肛門部の疣贅について,SDS,プロティンアーゼK,フェノールによりDNAを抽出し, dot hybridization法により, HPV・DNAの存在をスクリーニングし,さらに各型のHPV・DNAプローブを用いてSouthen法, in situ hybridization法を行った.その結果, 6型が35例, 11型が13例, 2型および16型がそれぞれ1例に検出され,検出率は86.2%であった.通常,子宮頸癌,外陰部のボーエン病, 60wenoid papulosisから分離されるHPV16型のDNAが良性の尖圭コンジロームから検出されたことは注目に値する.さらにわれわれは39歳,男性の疣贅状表皮発育異常症患者からクローン化したHPV5型DNAの7746の全塩基配列を沢定した.この結果を米国に於いて別個に行われたHPV5型DNAの解析結果と比較すると, 9塩基のみに相違がみられたが,他はすべて一致していた.現在, 2の塩基配列を他の型のHPV・DNAのそれと比較検討し, HPV5型に特異的と考えられ,初期遺伝子にコードされている蛋白の合成を行い,それらの蛋白の特異性についての検討を行っている.ヒト乳頭腫ウイルス(human papillomavirus,HPV)は、皮膚や粘膜に種々の疣贅をつくるが、一部の悪性腫瘍細胞中にHPV・DNAが存在することから、これらの悪性腫瘍の発生にこのウイルスが関与していると考えられている。悪性腫瘍から検出されるウイルスは特定な型に限られており、疣贅状表皮発育異常症患者から分離された5、7、8、20型などのウイルスと、主として子宮頚癌組織からクローニングされた16、18、31、33、35型などのウイルスである。われわれは各型のHPV・DNAプローブを用い、型特異性のあるin situ hybridization法により、臨床的,組織学的に光圭コンジロームと診断した男性48例、女性16例、計64例の外陰、肛門部の疣贅についてHPVの型の検索を行った。その結果、HPV-6型が39例(61%)、HPV-11型が14例(22%)と全体の83%を占め、6型と11型との比は約3:1であった。このほかHPV-2型が1例検出され、大部分は良性のウイルス性疣贅から検出されるウイルスであったが、2例からは通常悪性腫瘍細胞から検出されるHPV-16型のウイルスが検出されている。
EF2ジフタミド残量の生合成と生理機能に関する分子遺伝学的研究

ジフテリア毒素(DT)やシュウドモナス・エルギノーサ外毒素A(PA)は、タンパク質合成のペプチド鎖伸長因子2(EF2)分子のADP-リボシル化ドメインに存在するヒスチジン残基の誘導体であるジフタミド残基をNAD存在下でADP-リボシル化することによりEF2を不活化し、タンパク質合成の阻害をもたらして細胞を死に至らしめる。ジフタミド残基は今のところEF2でのみその存在が確認されている。EF2のジフタミド残基とその近傍のいわゆるADP-リボシル化ドメインのアミノ酸配列は、細胞性粘菌からヒトに至る全ての真核生物と、真核生物型のタンパク質合成系を有することが知られている古細菌においてよく保存されており、この領域はEF2機能の発現・調節において生理的に重要な働きを荷負っているものと推定される。リボソームで合成されたEF2前駆体は、ヒチジン残基がたぶん細胞質で修飾を受けて最終的にジフタミド残基を持つ成熟型EF2分子に変換されるものと考えられる。しかしながら、EF2機能の発現・調節におけるジフタミド残基の働きやジフタミドの生合成はほとんど解明されていない。EF2のジフタミド残基の生理機能と生合成を酵母で分子遺伝学的に解明することを目指して、我々はこれまでにジフテリア毒素A断片(DTA)の誘導発現系を酵母で構築し、その系を利用して優性と劣性の毒素耐性突然変異体を分離し、劣性変異体はさらに4つの相補性群に分れることを明らかにしている。本研究ではEF2遺伝子の発現を連続自動測定する目的で、バクテリアルシフェラーゼ遺伝子のluxAB融合遺伝子を遺伝子発現のリアルタイムレポーターに用いることを検討した。我々は既にバクテリアルフェラーゼ遺伝子が原核生物である藍色細菌では生物時計のリアルタイムモニタリングのための非常に優れたレポーターとなりうることを明らかにしている(記載分献)。酵母のGAL1-10プロモータの下流にluxAB融合遺伝子を連結し、酵母に遺伝子移入した。細胞をガラクトース存在下で培養し、GAL1-10プロモータを活性化することにより、luxAB融合遺伝子が発現して融合ルシフェラーゼが合成され、発光基質n-decanalの存在下で生物発光が観察される筈である。n-decanal飽和条件下でフォトマルで生物発光を測定したところ顕著な発光が観察された。しかしながら、n-decanalを制限したリアルタイムモニタリングの条件下でのCCDカメラによる測定では発光レベルは藍色細菌のレベルの千分の1以下であった。この発光強度ではリアルタイムモニタリングの目的には全く使えなかった。現在、発光強度を改善するために、考えられる種々の原因を検討し、luxAB融合遺伝子の改変を試みている。
パッチクランプ法による細菌細胞のイオン輸送ネットワークの解析

1、パッチクランプ法による活性測定(モデル系の確立)モデル系として選択した大腸菌Na^+-セリン共輸送系SstTについては、発現量がうまく制御できず、有意な活性は得られなかった。大腸菌多剤排出ポンプAcrAB-TolCは巨大プロトプラストにおいてもその活性に外膜成分が必須であることが示唆され、こちらも活性測定できなかった。現在、2でその準備が整いつつある大腸菌多剤排出ポンプMdfAについて系を確立する予定である。2、大量発現プラスミドの構築上記MdfAと黄色ブドウ球菌多剤排出ポンプNorAについて大量発現プラスミドを構築した。その最滴な発現条件を検討した。この中でもMdfAについてが最も進んでいるが、発現量を大幅に上昇させると、巨大プロトプラストの大きさが小さくなってしまい、パッチクランプ法を適用するには難しいという状況になっている。今後、いくつかの条件を検討し、発現量が十分かつ巨大プロトプラストの大きさも十分であるという条件を見出していく。3、機能未知膜タンパク質の遺伝子クローニング多剤排出ポンプについては今年度、計13個の新規遺伝子をさまざまな細菌の染色体DNAからクローニングし、その解析を進めた。特筆すべきはこのうち、実に5種類がABC familyに属するものであるということである。現在まで細菌細胞の多剤排出ポンプのうち、ABC familyに属するものは3種類しか報告されておらず、細菌細胞にはあまりこのfamilyに属するものは存在しないのではないかとも考えられていた。しかし本研究により、今までクローニングをすることが困難であったために見つかっていないだけで、実際に少ないわけではないことが予想された。また大腸菌で発現させても活性が無いものなどもいくつか存在し、それらについても今回いくつかその性質を解析した。この中のいくつかについては、解析の結果、興味深い性質を有しているので、上記2を経てパッチクランプ法による測定を行うことを計画している。一方、多剤排出ポンプ以外についてもイオン輸送ネットワークにおいて重要な役割を担っているNa^+/H^+アンチポーターのクローニングを行い、その性質についても解析した。
ルーマニアのドイツ語話者諸集団のアイデンティティ形成とドイツ古典主義文学受容

本研究の目的は、第一次世界大戦後にルーマニアのマイノリティとなったユダヤ系およびドイツ系ドイツ語話者によるドイツ古典主義文学受容を検証し、その受容が彼らのアイデンティティ形成に果たした役割を解明することである。ルーマニアのドイツ語話者の特性は地域ごとに異なり、ブコヴィナではユダヤ系が、トランシルヴァニアではプロテスタントのドイツ系が多く、両者は第二次世界大戦中にホロコーストの被害者と加害者ともなった。両地域のドイツ語話者にとってゲーテとシラーの両詩人は極めて重要な存在であったが、受容におけるニュアンスの相違は大きい。前者にとりゲーテは、普遍的人間性を示す「真のドイツ文化」の象徴であり、ホロコーストのただなかにあっても被害者であるユダヤ系ドイツ語詩人のアイデンティティを支えた一方、後者では一般に、シラーが青年の模範となるべき理想主義者として顕彰された。平成28・29年度に研究計画通りに調査・検討を進め、平成30年度はオーストリア国立図書館での補足調査を経て、研究成果をシンポジウムでの口頭報告および論文として発表した。藤田は10月6日に東京大学で開催されたシンポジウム「東欧文学の多言語的トポス:複数言語使用地域の創作をめぐる求心力と遠心力」において口頭報告「『周縁』と『カノン』ールーマニア領ブコヴィナのユダヤ系ドイツ語詩人たちとゲーテー」を行った。本報告は論文として、平成31年度中に刊行予定の書籍に所収される。鈴木は論文「トランシルヴァニアのシラー祭ー1859年の生誕100年祭・1905年の没後100年祭を中心にー」を発表した。この論文では、1867年以降は二重帝国内のハンガリー王国領となったトランシルヴァニアでのシラー祭が、ハンガリー化の圧力下で、ドイツ民族としてのアイデンティティの紐帯という政治的意義を帯びて盛大に祝われ報道された経緯と背景を明らかにした。両地域のドイツ語話者にとりゲーテとシラーの両詩人は極めて重要な存在であったが、その一方で注目すべきは、受容におけるニュアンスの相違である。前者にとりゲーテは、普遍的人間性を示す「真のドイツ文化」の象徴であり、ホロコーストのただなかにあって、被害者であるユダヤ系ドイツ語詩人のアイデンティティを支えた一方、後者では一般にシラーが青年の模範となるべき理想主義者として顕彰された。平成28年度は、以下1)5)に着手し、平成29年度以降の検証作業の基盤構築を進めた。1)ブコヴィナおよびトランシルヴァニアにおける19世紀中期から両次大戦間期までの教育や文化活動に関わる史(資)料の収集。(ウィーンのオーストリア国立図書館、およびルーマニア・シビウ市のフリードリヒ・トイチュ・ドイツ文化センター内ルーマニア福音主義教会アウクスブルク信仰告白派中央公文書館兼図書館において)。2)両地域で刊行されたドイツ語新聞および文芸誌掲載の記事、評論、作品、並びに劇場の上演プログラムの分析。3)ギムナジウムおよびドイツ語を授業言語とする初等学校に関わる史料の分析。4)ドイツ語新聞やカレンダーに掲載された両詩人に関わる催しもの等の情報分析。5)上記2)4)に関連する、ドイツ話者のアイデンティティをめぐる言説の有無、ある場合はその内容。研究代表者および研究分担者でそれぞれオーストリアおよびルーマニアでの現地調査を行った。シビウでは、著名な作家で牧師、地域の歴史にも大変詳しいエギナルト・シュラットナー師からの聞き取り調査も実現した。また今回訪問はかなわなかったが、ドイツのアウクスブルク大学附置ブコヴィナ研究所とも連絡を取り合い、情報を得ている。古書等で購入可能な資料等も入手しつつある。平成29年度に予定している検証作業の基礎づくりが順調に進んだと言える。両地域のドイツ語話者にとってゲーテとシラーの両詩人は極めて重要な存在であったが、その一方で注目すべきは、受容におけるニュアンスの相違である。前者にとりゲーテは、普遍的人間性を示す「真のドイツ文化」の象徴であり、ホロコーストのただなかにあっても被害者であるユダヤ系ドイツ語詩人のアイデンティティを支えた一方、後者では一般に、シラーが青年の模範となるべき理想主義者として顕彰されたと伝えられている。平成28年度に下記1)5)に着手した後、平成29年度は6)と7)をも接続させ、1)7)を進めた。1)ブコヴィナおよびトランシルヴァニアにおける19世紀中期から両次大戦間期までの教育や文化活動に関する史(資)料の収集。ウィーンのオーストリア国立図書館およびルーマニア・シビウ市のフリードリヒ・トイチュ・ドイツ文化センター内文書館での調査。2)両地域で刊行されたドイツ語新聞および文芸誌掲載の記事、評論、作品、ならびに劇場の上演プログラムなどの調査。

3)ギムナジウムおよびドイツ語を授業言語とする初等学校に関わる史料の分析。4)両詩人に関わる催し物などの情報分析。5)上記2)4)に関連する、ドイツ語話者のアイデンティティをめぐる言説。6)両地域のドイツ語話者集団と施政者(ウィーン、ブダペスト、グカレスト各政府)との関係からの1)5)の検証7)両詩人のルーマニアおよびドイツでの受容史の比較。研究代表者がオーストリアおよびルーマニアで現地調査を行った。シビウでは、平成28年度に引き続き、著名な作家で牧師のエギナルト・シュラットナー師やルーマニア・アカデミーで活躍されたグードルン・イトゥ博士のご協力をいただき、シラー作品の上演史に関わる情報収集も可能となった。アウクスブルク大学附置ブコヴィナ研究所からの情報提供も受けている。研究分担者は平成30年度第1学期、研究に専念できる状況となったため、さらなる研究推進の環境が整った。現在は資料と情報の整理を進めている途上であり、成果発表の準備は順調に進んでいる。本研究の目的は、第一次世界大戦後にルーマニアのマイノリティとなったユダヤ系およびドイツ系ドイツ語話者によるドイツ古典主義文学受容を検証し、その受容が彼らのアイデンティティ形成に果たした役割を解明することである。ルーマニアのドイツ語話者の特性は地域ごとに異なり、ブコヴィナではユダヤ系が、トランシルヴァニアではプロテスタントのドイツ系が多く、両者は第二次世界大戦中にホロコーストの被害者と加害者ともなった。両地域のドイツ語話者にとってゲーテとシラーの両詩人は極めて重要な存在であったが、受容におけるニュアンスの相違は大きい。前者にとりゲーテは、普遍的人間性を示す「真のドイツ文化」の象徴であり、ホロコーストのただなかにあっても被害者であるユダヤ系ドイツ語詩人のアイデンティティを支えた一方、後者では一般に、シラーが青年の模範となるべき理想主義者として顕彰された。平成28・29年度に研究計画通りに調査・検討を進め、平成30年度はオーストリア国立図書館での補足調査を経て、研究成果をシンポジウムでの口頭報告および論文として発表した。藤田は10月6日に東京大学で開催されたシンポジウム「東欧文学の多言語的トポス:複数言語使用地域の創作をめぐる求心力と遠心力」において口頭報告「『周縁』と『カノン』ールーマニア領ブコヴィナのユダヤ系ドイツ語詩人たちとゲーテー」を行った。本報告は論文として、平成31年度中に刊行予定の書籍に所収される。鈴木は論文「トランシルヴァニアのシラー祭ー1859年の生誕100年祭・1905年の没後100年祭を中心にー」を発表した。この論文では、1867年以降は二重帝国内のハンガリー王国領となったトランシルヴァニアでのシラー祭が、ハンガリー化の圧力下で、ドイツ民族としてのアイデンティティの紐帯という政治的意義を帯びて盛大に祝われ報道された経緯と背景を明らかにした。平成28年度に着手した上記1)5)をさらに進め、同時に以下の作業を接続させる。
高性能超微細放熱フィンの精密加工技術の開発とフィンの応用展開

パソコンのCPUなどをより効果的に冷却できる新型熱拡散デバイスの開発を目的とし,そのデバイス内部に構築するマイクロ溝から成る毛細管構造体のための精密加工技術の開発を行った.その結果,マイクロ溝の形状は溝幅330μm,溝深さ700μmとした格子状の流量がきわめて高いこと,加工時に発生するバリをメタルソーを特殊形状とすることで解消できることを明らかにした.最終的に薄型熱拡散デバイスに組み込み,性能評価を行って所期の性能を有することを確認した.パソコンのCPUなどをより効果的に冷却できる新型熱拡散デバイスの開発を目的とし,そのデバイス内部に構築するマイクロ溝から成る毛細管構造体のための精密加工技術の開発を行った.その結果,マイクロ溝の形状は溝幅330μm,溝深さ700μmとした格子状の流量がきわめて高いこと,加工時に発生するバリをメタルソーを特殊形状とすることで解消できることを明らかにした.最終的に薄型熱拡散デバイスに組み込み,性能評価を行って所期の性能を有することを確認した.ノートパソコンに代表される電子機器の性能は年々向上し、新たな機能を盛り込んだ機種が多く開発されている。一方で小型化やユニークなデザインへの要求はこれまで以上に高まっており、結果として機器内部に蓄積される熱量は膨大なものとなっている。本研究は、電子機器の熱対策としてボディを構成する筐体にマイクロメーターオーダーの超微細放熱フィン(微細柱も含む)を形成し、筐体から放熱を積極的に行わせて内部に蓄積した熱を高い効率で除去できるシステムを開発することを目的としている。そのため、筐体そのものに微細な溝とフィンで構成される超微細放熱フィンを超硬製メタルソーを用いて微細加工する技術を開発し、高い性能を有する放熱板をを作り上げた。結果の要約は以下のとおりである。1.メタルソーの厚みが150ミクロンであるため、微細溝の最小幅は150ミクロンとなったが、130mm角の平板の放熱性能は所期の性能が得られることを確かめた。2.溝深さを100500ミクロンとして空気に対する放熱性能を調べたが、放熱性能は微細溝形状(溝幅,溝深さ)に強く依存しないことが明らかとなり、溝深さは300ミクロンで十分であることがわかった。3.新たに作動媒体を流体としたベーパーチャンバー付き薄型ヒートパイプへの適用に取り組み、微細溝間を流れる流体が持つ毛細管力が流体の循環を無動力で行えることがわかり、熱特性を含めてヒートパイプへの応用展開に精力的に取り組むことができた。4,最適形状は次年度の大きな課題として残っているが、毛細管力を強く引き出せる因子として、溝断面形状(幅、深さ)、壁面の粗さ、親水性処理、バリ発生の抑制が今後の重要な課題であることを明らかにすることができた。5.130mm角の純銅薄板への微細溝加工を行い、作動液の循環、熱特性を評価できるシステムを構築した。パソコンのCPUなどをより効果的に冷却できる新型熱拡散デバイスの開発を目的として,そのデバイス内部に構築するマイクロ溝から成る毛細管構造体のための精密加工技術の開発を行った.マイクロ溝に求められる形状パラメータには,溝幅,深さおよびピッチがあり,これらを□m単位で精密に加工する必要があるため,ダイシングマシンを使用した.加工条件は加工精度,バリの発生,切削抵抗値,加工効率について検討し,送り速度2mm/s,回転数40,000rpm,ブレード切削方式はダウンカットを選定した.また,加工ブレードは刃数80枚の超硬K10製のメタルソーを選定した.毛細管構造体の持つ流体駆動能力の評価には,CCDカメラ(HAS-220)を使用した.CCDカメラを用いて毛細管構造体上の2mm×2mmの領域を撮影し,毎回同じ位置からポンプによって蒸留水を0.001mL/sで滴下させた.それによって蒸留水の速度を計測し,毛細管構造体が駆動可能な流量を評価した.これらのマイクロ溝の形状は平行型と格子状を検討したが,校舎に優れた性能が確認できた,しかし,大きなバリの発生が確認されたため,メタルソーの両側面に5゚傾斜をつけ,側面に切りくずの高い排出性と高い切削性を有するバックテーパーブレードにより優れた結果が得られた.最終的にエッチングにより発生したバリをほぼ除去することに成功した.溝深さを400□mに一定とし,溝幅のみを変化させた場合,溝幅330□mに流量Qの極大値が観察された.また,溝幅を330□mと一定にし,溝深さのみを変化させた場合,700□mに流量Qの極大値が確認できた.これらの最適なパラメータを持つ毛細管構造体(150mm角,溝加工本数1170本)を熱拡散デバイスに組み込み,現在熱研究室で最終性能を評価している.
滑膜線維芽細胞、軟骨細胞におけるカルパインの発現

カルパインは一般に細胞内で機能するプロテアーゼであると考えられているが、近年m-カルパインが関節液中や関節軟骨組織で細胞外に存在し、アグリカンの分解に関与していることが証明された。本研究では、ヒト軟骨器官培養あるいは培養軟骨細胞においてculture medium中に経時的にm-カルパインが認められるようになった。このm-カルパインの細胞外への出現に対する非ステロイド抗炎症剤(以下NSAIDs)の影響を検討した。ヒト軟骨器官培養系では、loxoprofen-SRS(loxoprofenの活性体)の添加により、未添加の場合と比べてmedium中のm-カルパイン量が減少した。軟骨細胞様細胞HCS 2/8培養系を用いた検討では、NSAIDs単独の添加では細胞内外のm-カルパインの発現に変化を認めなかった。炎症性サイトカインとして用いたTNFαを添加すると細胞内のm-カルパインは減少し、逆にmedium中のm-カルパインは増加した。TNFαによって引き起こされた現象すなわちmedium中でのm-カルパインの増加および細胞内での減少は、aspirin, diclofenac, loxoprofen-SRSおよびNS398によって阻害される傾向を認めた(10μM100μM)。以上の結果から、炎症性サイトカインであるTNFαの刺激によって軟骨細胞から細胞外へのm-カルパイン分泌が促進され、またその分泌がNSAIDsによって阻害される可能性が示された。この結果はNSAIDsが、マトリックス分解酵素であるm-カルパインの細胞外での発現を抑制することにより、軟骨を保護する働きをもつことを示唆している。軟骨細胞培養系において、軟骨基質分解酵素であるm-calpainの細胞内での発現および細胞外への分泌を検討した。軟骨細胞単層培養系(ヒトchondrocytic cell line)を用いて、(1)NSAIDs単独、(2)炎症性サイトカインであるTNF-α単独、(3)TNF-αおよびNSAIDsの両者を添加し、細胞内のm-calpainの発現およびmedium中への分泌を調べた。NSAIDsはアスピリン、ジクロフェナク、ロキソプロフェンの3種類を使用した。細胞内m-calpainの発現はWesternblottingおよびZymographyを用いて、細胞外の発現は、mediumをDAEA-celluloseを用いたクロマトグラフィーにより精製しWestern blottingを用いて検出した。NSAIDs単独の添加により細胞内外のm-calpainの発現に変化を認めなかった。TNF-αの添加により細胞内のm-calpainの発現は減少し、代わりに細胞外(medium中)のm-calpainが増加する傾向を認めた。(効果は2448時間において濃度、時間依存的であった。)TNFαの刺激による細胞外へのm-calpainの分泌は、NSAIDsの添加により阻害された。炎症性サイトカインであるTNFαの存在下にて、軟骨細胞から細胞外へのm-calpain分泌が促進され、またその分泌がNSAIDsによって阻害されることが示唆された。ヒト軟骨器官培養系では、loxoprofen-SRS (loxoprofenの活性体)の添加により、未添加の場合と比べてmedium中のm-カルパイン量が減少した。軟骨細胞様細胞HCS2/8培養系を用いた検討では、NSAIDs単独の添加では細胞内外のm-カルパインの発現に変化を認めなかった。

TNFαによって引き起こされた現象すなわちmedium中でのm-カルパインの増加および細胞内での減少は、aspirin, diclofenac, loxoprofen-SRSおよびNS398によって阻害される傾向を認めた(10μM100μM)。以上の結果から、炎症性サイトカインであるTNFαの刺激によって軟骨細胞から細胞外へのm-カルパイン分泌が促進され、またその分泌がNSAIDsによって阻害される可能性が示された。この結果はNSAIDsが、マトリックス分解酵素であるm-カルパインの細胞外での発現を抑制することにより、軟骨を保護する働きをもつことを示唆している。
ポリパラダ環状化合物の合成、構造および反応

本研究では、2個以上のパラジウム原子が環骨格の構成要素となる環状有機パラジウム錯体を合成し、それらの構造特性と新規反応パターンを見出して、将来の画期的分子変換法を開発するための手がかりを得ることを目的とする。本年度はペリレンの連続するC=C結合とPd-Pd結合が組み合わさったはしご状の骨格を持つ環状のサンドイッチ錯体の合成と構造決定を行った。合成は、ペリレン存在下、ゼロ価パラジウムの2原子と、置換活性1価Pd-Pd2核錯体とを自己集合的に反応させて4核パラジウム錯体を得た。X線結晶解説によって確定した錯体の分子構造は、2分子のペリレンのπ平面が互いに平行な配置で直線状Pd-Pd-Pd-Pd骨格をサンドイッチ状に挟み込むきわめて特異なものである。この錯体における連続した配位結合はあまり強固なものではなく、種々の条件下で反応したり分解したりする。例えば直鎖状ポリエンである1,8-ジフェニルオクタテトラエンとの反応では、ペリレンの遊離が起こり、同時にオクタテトラエン-Pd4核サンドイッチ錯体の収率のよい生成が観測された。ここで生成した複合体も形式上、Pd4核骨格を含む12員環構造を取っている。またペリレンサンドイッチ錯体と環状ポリエンであるシクロオクタテトラエンとの反応では、1分子のペリレンだけがシクロオクタテトラエンによって置換され混合サンドイッチ錯体ができることが判明した。さらにペリレンに代わるその他の多環式芳香族化合物(ナフタセン、アントラセンなど)が作るサンドイッチ錯体の合成に成功した。本研究では、Pd-Pd結合が環骨格内に含まれる有機パラジウム錯体を合成し、それらの新規反応パターンを見出して、将来の画期的分子変換法を開発するための手がかりを得ることを目的とする。本年度はブタジエンとPd-Pd結合が組み合わさった6員環ジパラダサイクル化合物の合成と反応、ならびにテトラエンとPd-Pd-Pd骨格が組み合わさった11員環トリパラダサイクル化合物の合成と構造決定を行った。まず6員環ジパラダサイクル化合物として、ヒドロキシ基がPd-Pd結合に架橋配位する化合物をビスブタジエンーPd_2サンドイッチ錯体と苛性ソーダとの反応で得ることができた。6員環構造をX線構造解析で確認した。このときヒドロキシ基の水素原子は、結晶に取り込まれたテドラヒドロフランと強い水素結合で結ばれていることを見いだした。この錯体の架橋ヒドロキシ基は、メタノール、フェノール、アニリン、ベンゼンチオールなどの活性プロトンを持つ基質と容易に反応し、対応するメトキシ、フェノキシ、アニリド、チオラート架橋を有する6員環ジパラダサイクル化合物を与えた。温度変化NMRスペクトルを利用して、これらの架橋基のうちアニリド、チオラート基が比較的剛直な構造を持つことが判明した。つぎに11員環のトリパラダサイクル化合物については、フェニル基とp-t-ブチルフェニル基を両端に持つテトラエンと3原子のPdを溶液中で自己集合的な手法で合成した。この場合、テトラエン2分子が配位に関与してサンドイッチ構造をとることを、X線構造解析で確認した。これら2種類の錯体どうしでテトラエンを交換する反応を加熱条件下で検討したが、自由配位子がないとほとんど交換が起こらないこと、可視光を照射すると交換が著しく加速されることなどを見いだした。
非極性溶媒中での接触イオン対生成ダイナミックス

アニリン(ANI)、ジメチルアニリン(DMA)、ジエチルアニリン(DEA)はベンゼン溶媒中では励起三重項状態に対応する誘電吸収信号が得られるが、CCl_4溶媒中ではいずれも極性の非常に大きな中間体の生成が観測され、接触イオン対生成であるとみなされた。ベンゼン溶媒中にアニリン誘導体とCCl_4を含む系でも接触イオン対生成が観測されたが、その生成機構はANIとその他では若干異なる。すなわち、いずれの場合もCCl_4と基底状態で弱い錯合体を形成しているものが励起された場合にイオン対生成に導くが、DMAとDEAではさらにもう一分子が結合してより安定なイオン対生成に導く反応の存在が示された。CCl_4以外のハロゲン化合物の存在下では、イオン対生成の効率が、CCl_4>>C_6H_5I,>>C_2H_5I>>C_6H_5Br>C_2H_5Brとなり、気相電子付着反応との相関性が確認された。一方、TMPDと構造が類似するがイオン化エネルギーがやや高いとされているジメチル-、ジエチル-、トリメチル-パラフェニレンジアミン類について、CCl_4溶媒中で接触イオン対生成を確認した。いずれも生成機構は上記アニリンの場合と類似することが分かった。またどの場合も生成するイオン対の双極子モーメントは約10D以上であることが示された。TMPDとTMBに対して光吸収によるレーザーフラッシュホトリシス法を用いた実験を行い、マイクロ波誘電吸収測定で提唱された接触イオン対生成過程の存在を確かめてみた。その結果、ベンゼン溶媒、CCl_4溶媒中で観測される励起三重項状態の生成・消滅とカチオンの生成に対する吸収スペクトルと過渡吸収信号は、提唱されたイオン対生成機構を支持することが示された。
βー1,3ーグルカンの高次構造に着目したVCD・合成・免疫学研究

海藻やキノコに含まれるβ-1,3-グルカンは免疫賦活剤や抗がん剤として臨床に用いられているものの、その特異な三重らせん高次構造のために詳細な分子作用機序は不明である。本研究では、(1)VCD(赤外領域円二色性)を用いた糖鎖高次構造解析法の確立、(2)β-1,3-グルカンフラグメントの有機合成および各フラグメントの三重らせん形成能の検討、(3)得られた三重らせんフラグメントの高次構造と免疫活性化能の相関検討、を行う。本研究の達成により今後、NMRや共結晶を用いたβ-1,3-グルカンとその標的タンパク質との詳細な相互作用の解析を行うことも可能となり、より生理活性の高いβ-1,3-グルカン誘導体の開発、ならびに新規デリバリー法開発に資すると期待される。β-1,3-グルカン研究における問題点として、多糖の高次構造を解析する有効な手法が確立されていないことが挙げられる。そこで本研究ではまず、VCDによる多糖の高次構造解析法の開発に着手した。カードラン、シゾフィランなどのβ-1,3-グルカンのVCDを各種条件下で測定したところ、VCDが多糖の高次構造解析に有効であるという予備的知見を得た。これは、VCDを多糖の高次構造解析に用いた初の研究例であり、本手法が多糖全般の高次構造理解の深化に資すると期待される。また、β-1,3-グルカンフラグメントの効率的新規合成法の開発に着手した。本研究では、G1cβ1→3G1cβ1→[G1cβ1→3]G1cのような分岐度0.33の4糖ユニットをまず合成し、これをベースに8糖、16糖、24糖などの合成を検討している。平成22年度では、基本となる4糖ユニットの合成に着手し、各種反応条件を最適化してきた。今後、これらのユニットを結合させる各種グリコシデーション法を検討し、合成を達成し、VCD研究ならびに免疫賦活活性試験に供したいと考えている。
常染色体優性遺伝性パーキンソン病における新規原因遺伝子単離に向けた遺伝子解析

パーキンソン病(PD)の原因、病態解明には遺伝性PDの研究が大変重要であるが,未だ常染色体優性遺伝性PD(ADPD)の殆どの家系で変異が同定されていない.本研究では, PDの発症機序を解明することを目的として,新規原因遺伝子の同定を目指し, ADPDの遺伝子解析を行った.結果として, SNCA, LRRK2, SCA2, VPS35, GBAなどの遺伝子において多数の変異を同定し, ADPDの一部の発症要因を同定することができた.また, 3年間で遺伝子バンクのADPDの家系収集は300家系を超え,研究基盤を強固にしつつ新規候補遺伝子を複数絞り込むことができた.パーキンソン病(PD)の原因、病態解明には遺伝性PDの研究が大変重要であるが,未だ常染色体優性遺伝性PD(ADPD)の殆どの家系で変異が同定されていない.本研究では, PDの発症機序を解明することを目的として,新規原因遺伝子の同定を目指し, ADPDの遺伝子解析を行った.結果として, SNCA, LRRK2, SCA2, VPS35, GBAなどの遺伝子において多数の変異を同定し, ADPDの一部の発症要因を同定することができた.また, 3年間で遺伝子バンクのADPDの家系収集は300家系を超え,研究基盤を強固にしつつ新規候補遺伝子を複数絞り込むことができた.常染色体優性遺伝性PD(ADPD)の原因遺伝子としてSNCAとLRRK2などが同定されているが,既知変異頻度は5-10%くらいで,殆どの家系で変異が同定されていず,いまだADPDの全体像は不明である.一方,ADPDにおいて常染色体劣性遺伝性PD(ARPD)の原因遺伝子のヘテロ接合体変異が見つかっており,ADPDにおいてもARPDの原因遺伝子の解析を進め,発症への関与を検討する必要がある.本研究課題では,網羅的に既知遺伝子の変異解析を行い,ADPD180家系をより均一な家系群に分類し,既知遺伝子変異のない家系から新規原因遺伝子変異を同定することを目的としている.本年度は,新規家系の集積を行うとともに遺伝子バンクの構築を進め,ADPDの家系収集は200家系を超えることができた.並行して既知変異の有無をscreeningし,家系の純化を行った.その過程において,SNCAの解析を進める中で新たにSNCAの重複変異家系を見出し,解析結果を臨床像とともに現在論文投稿中である.またLRRK2の解析を進め,北アフリカやヨーロッパで頻度の高いG2019S変異をトルコ人と日本人でも認め,それらの祖先が共通であることを報告した.さらにDJ-1変異の解析を進め,ヘテロ変異も含め今のところ日本人には存在しないか非常に稀であることを明らかにした.さらには,ゲノムワイドの関連解析から感受性遺伝子を4つ同定,報告でき,新規遺伝子座としてPARK16として報告した.すなわち,それら遺伝子群の意義をさらに検討していくという,新たな成果を生むための手掛かりを得た.これら以外のものも含め本年度の6本の論文発表の仕事だけでなく,基盤となる対象と解析結果を蓄積してきていることで,さらに新規原因遺伝子の同定に向けた解析が継続してきている.常染色体優性遺伝性PD(ADPD)の原因遺伝子としてSNCAとLRRK2などが同定されているが,既知変異頻度は5-10%くらいで,殆どの家系で変異が同定されていず,いまだADPDの全体像は不明である.一方,ADPDにおいて常染色体劣性遺伝性PD(ARPD)の原因遺伝子のヘテロ接合体変異が見つかっており,ADPDにおいてもARPDの原因遺伝子の解析を進め,発症への関与を検討する必要がある.本研究課題では,網羅的に既知遺伝子の変異解析を行い,ADPD180家系をより均一な家系群に分類し,既知遺伝子変異のない家系から新規原因遺伝子変異を同定することを目的としている.本年度は,新規家系の集積を行うとともに遺伝子バンクの構築を進め,ADPDの家系収集は250家系を超えることができた.本遺伝子バンク症例につき既知変異の有無をscreeningし,多型情報も含め遺伝子バンクにおける解析結果をデータバンク化するとともに,家系の純化を行った.Parkin, ATP13A2, PLA2G6などのARPDの原因遺伝子の解析も並行して行った.その過程における特に大きな成果として,SNCAの解析を進める中で新たに世界で4番目のSNCA新規点変異家系を見出すことができ,解析結果を臨床像,PET所見とともに現在論文作成中である.また,SNCA3重複変異家系をアジアで初めて見出し,論文報告した.LRRK2の解析も並行して進め,北アフリカやヨーロッパで頻度の高いG2019S変異をトルコ人と日本人でも認め,それらの祖先が共通であることを報告した.さらに世界中のこの変異患者のハプロタイプを比較解析し,LRRK2変異の起源,PDの歴史,民族移動の歴史をさらに人類遺伝学的観点から探索し,論文を発表した.さらにADPDの新規原因遺伝子として報告されたGIGYF2変異の解析を進め,今のところ日本人を中心とする我々の症例には存在しないことを明らかにし論文報告した.これら以外のものも含め本年度の10本の論文発表の仕事だけでなく,基盤となる対象と解析結果を蓄積してきていることで,さらに新規原因遺伝子の同定に向けた解析が継続してきている.常染色体優性遺伝性PD(ADPD)の原因遺伝子としてSNCAとLRRKなどが同定されているが,既知変異頻度は5-10%くらいで,殆どの家系で変異が同定されていず,いまだADPDの全体像は不明である.

本研究課題では,既知遺伝子の網羅的変異解析を行い,ADPD180家系をより均一な家系群に分類し,既知遺伝子変異のない家系から新規原因遺伝子変異を同定することを目的として研究を開始した.本年度は,新規家系の収集とともに遺伝子バンクの構築を進めADPDは400家系超を集積することができ,既知変異の有無を解析し,多型情報も含め解析結果をデータバンク化するとともに,家系の純化を行った.PARKシリーズの遺伝子群について,MLPA法を用いて遺伝子量の異常および頻度の高い点変異につき一度にscreeningする体制を整え,解析を継続した.その過程において,SNCAの点変異および重複変異例を同定し,LRRK2の新規変異を複数同定した.新規感受性遺伝子変異についても同定でき,解析を進めている.SCA2の解析も進めADPDの約2%に変異を認めることを明らかにし,今後のscreeningの継続の必要性を示すことができた.新規VPS35遺伝子についても日本人初の変異陽性例を同定した.さらには,世界で9家系のみの報告と極めて稀なPerry症候群の家系をADPD症例の解析から複数同定することができた.またそれら原因遺伝子の機能解析を並行して進めた.一方,ADPDにおいて常染色体劣性遺伝性PD(ARPD)の原因遺伝子のヘテロ接合体変異が見つかっており,parkin,ATP13A2,PLA2G6などのARPDの原因遺伝子の解析も継続し,複数のvariantを同定した.また,ゴーシェ病の原因遺伝子であるGBA変異陽性のパーキンソニズムの日本人家系を多数見出し,臨床像の評価も行い論文を作成した.これら以外のものも含め本年度の10本の論文発表だけでなく,基盤となる対象と解析結果を蓄積してきていることで,新規家系の連鎖解析など,さらに新規原因遺伝子の単離に向けた研究を推進できた.その結果,原因遺伝子の単離は現実的な段階に入ってきた.
甘味タンパク質の機能発現に関する構造生物学的解析

甘味タンパク質ソーマチンの高分泌発現系の構築、分解能1.1ÅのソーマチンIの構造を決定した。ソーマチンIIの構造解析に初めて成功し、甘味受容体との相互作用には側鎖の揺らぎが重要であるという新しい知見を得た。pH8.0での構造解析により特定のリジン残基が加熱凝集に関与している可能性を提起した。甘味受容体を培養細胞に発現させ、客観的に甘味を評価する系の構築に成功した。ソーマチンの応答にはヒト型甘味受容体のサブユニットT1R3のシステインリッチドメインが重要であることを明らかにした。タンパク質は一般的に無味であるが、例外的に甘味を呈するタンパク質が存在する。甘味タンパク質の特徴を見出すことにより、糖代替物として利用が可能であると目論み国内外で多くの研究がなされている。本研究は甘味タンパク質ソーマチン変異体の結晶化を行い、大型放射光施設SPring8にて高分解能のデーターを取得し、変異体およびリコンビナントソーマチン間の構造の比較を行うことで、ソーマチンの強い甘味を決定付ける構造的要因を明らかにすることを目的としている。昨年度はリコンビナントソーマチンの大量発現系の構築(Masuda et al.. Food Sci. Technol. Res., (2010) 16, 585-592.)ならびに結晶化を試み、それぞれPDBに構造をdepositした(3AL7, 3ALD)。構造比較の結果、リコンビナントソーマチンの電子密度が植物ソーマチンと比べ、バリアント間で異なる部位で顕著な改善がみられた。またR82Qについて結晶化を試み高分解能のデーターを収集した。現在、精密化を行っており、他のリコンビナントおよび変異体との構造比較により、ソーマチンが有する特異な甘味発現に必要な構造的要因が明らかになるものと考えられる。次にソーマチンの酸性アミノ酸残基について変異体作製を行い、酸性アミノ酸残基の甘味に与える影響について検討を行った。その結果、多くの酸性残基はほとんど甘味に影響を与えないことが明らかとなった。またその研究過程において甘味が強化された変異体の取得を行うことができた。現在、甘味が強化された変異体の構造解析を進め、甘味増強のメカニズム、新規な甘味料のデザインに応用可能な構造生物学的知見を得ることを目的に研究を継続している。さらに甘味受容体発現細胞を用いた実験よりソーマチンが受容体のシステインリッチドメインと相互作用する知見も昨年度得ることができた。酵母Pichia pastorisで作製したリコンビナントソーマチンIの構造を進め構造を決定した(PDB:3AL7)。由来ソーマチンIについても同様に構造解析を行い(PDB:3ALD)両者の構造の比較を行った。その結果、ソーマチンのバリアント間で異なるアミノ酸残基の電子密度マップの改善が見られた(1)。これまで良好な結晶を得ることができなかったソーマチンIIの精製法および結晶化条件の検討を行い、分解能1.27ÅのソーマチンIIの構造を決定することができた(PDB:3AOK)(2)。ソーマチンIとソーマチンIIので構造比較を行ったところ、双方で異なるアミノ酸残基の近傍において若干の構造変化が観察された。興味深いことに、ソーマチンIにおいて甘味発現に特に重要なリジン67はソーマチンIIではアルギニンであるが、このアルギニン側鎖が大きく揺らいでいた。もう一方の甘味に重要なアルギニン82も同様に大きく揺らいでいたことから、甘味受容体との相互作用は側鎖のフレキシビリイティーの高さが重要な役割を果たすという新しい知見を得る結果となった。また、ソーマチンは中性からアルカリ性条件下で加熱を施すと、急速に加熱凝集し甘味を失うことが知られている。そこでpH 8.0に於いて結晶化を試み、その構造を決定した(PDB:3VJQ)(3)。ソーマチンの甘味発現に重要なArg82、Lys67の変異体(R82A,R82K,R82Q,R82E,K67A)について結晶化条件を再検討し、大型放射光施設(SPring8)にて分解能が1.0Å以下の高分解能回折データーを収集することができた。また興味深いことに、結晶形が異なる(正方晶、斜方晶)結晶を取得することができた。それぞれの結晶形について、構造の精密化を行っている。甘味発現に重要なクレフト面に存在する酸性アミノ酸残基(Asp21,Asp55,Asp59,Asp60,Glu42,Glu89)について変異体作製を行い、甘味に与える影響について検討し、甘味が強化された変異体の取得に成功した。今後詳細に構造特性を明らかにすることにより新規な高甘味度甘味料の創出に繋がるものと考えられる。

これまで、甘味タンパク質の甘味特性評価はヒトによる官能検査によって評価してきたが、客観的な評価が可能な甘味受容体を動物培養細胞に異種発現させた細胞を用いての甘味評価系の構築を行った(4)。さらに甘味受容体とソーマチンとの応答を検討したところ、ヒト型甘味受容体のサブユニットT1R3のシステインリッチドメインが重要である知見が得られた。酵母Pichia pastorisで作製したリコンビナントソーマチンI,植物由来ソーマチンIについての高分解能構造解析を皮切りに、これまで良好な結晶を得ることができなかったソーマチンIIの分解能1.27Åの構造を決定し、ソーマチンIとの相違点を明らかにした。アルカリ性条件下(pH 8.0)に於いて結晶化を試み、その構造を決定し、熱安定性に係る残基についての知見を得た(1)。ソーマチンの甘味発現に重要なArg82、Lys67の変異体(R82A, R82K, R82Q,R82E, K67A)について結晶化条件を再検討し、大型放射光施設(SPring8)にて分解能が1.0Å以下の高分解能回折データーを収集した。酸性アミノ酸残基(Asp21, Asp55, Asp59, Asp60, Glu42, Glu89)について変異体作製を行い、甘味に与える影響について検討を行い、甘味が強化された変異体の取得に成功した。そのうちAsp21についてその近傍に存在するアミノ酸残基に変異を導入し、甘味特性、甘味増強に係る構造的特性についても検討した。これまで、甘味タンパク質の甘味特性評価はヒトによる官能検査によって評価してきたが、客観的な評価が可能な甘味受容体を動物培養細胞に異種発現させた細胞を用いての甘味評価系の構築を行った。この系を用いて、さらに甘味受容体とソーマチンとの応答を検討したところ、ヒト型甘味受容体のサブユニットT1R3のシステインリッチドメインが重要かつ、5つのアミノ酸残基がソーマチンとの応答に重要な役割を果たすという知見が得られた(2)。研究当初、各変異体の結晶化に多くの労力を割くのではないかと考えていたが、ロッシニル塩や低分子化合物を使用することにより、高分解能解析に耐えうる良好な結晶を得ることができた。Spring-8のビームタイムは限られているため、予め機関で保有しているX線解析装置で予備実験、凍結条件等の検討を行うことにより、スムーズに回折データの取得ができためもおおむね順調に研究が進展した一因である。細胞を用いた甘味受容体発現系の構築、ソーマチンとの応答については、従来の官能試験とよく相関する結果を得ることができ、客観的に甘味を評価できる系の構築に成功した。24年度が最終年度であるため、記入しない。甘味に顕著に影響を与えた変異体の結晶化、高分解能の回折データーの収集を引き続き行い、それぞれの構造を決定する。構造を決定した変異体は順次、プロテインデータバンク(PDB)への登録を行う。ソーマチンのすべてのリジン残基については網羅的な構造解析を行う。アルギニン残基についても分子表面にある残基に着目し検討を行う。甘味が強化された変異体の取得を行うことができたが、さらにこの変異体の構造解析を進め、甘味増強のメカニズムについて構造生物学的知見を得る。この残基の近傍に存在するアミノ酸残基の変異体を作成することでさらに甘味を増強できるかについても検討を行う。甘味受容体発現細胞を用いた実験より、ソーマチンが甘味受容体のシステインリッチドメインと相互作用する知見を得ている。
イスラエル国ガリラヤ湖周辺地域の宗教文化に関する総合研究

(1)イスラエル国エン・ゲヴ遺跡における発掘調査2004年7月30日8月29日,ガリラヤ湖東岸エン・ゲヴ遺跡において発掘調査と遺跡保存作業を行った。発掘調査はこれまで継続してきたケースメット市壁北端のタワーと下層の列柱式建物の構造調査を中心に行った。発掘調査は今年度の第8次調査で終結するため、イスラエル考古局の指導の下で遺構の保存作業を行い、発掘に協力いただいたキブツ・エン・ゲヴの観光資源として利用できるように、リーフレットや説明板などの作成を進めている。2005年3月23日31日,夏期調査で行うことが出来なかった遺物の実測および撮影を行った。(2)東地中海地域のユダヤ教会堂ならびにキリスト教会遺跡の踏査名取四郎・益田朋幸2004年8月27日9月12日チュニジア共和国およびイタリア共和国におけるキリスト教遺跡踏査佐藤研・高井啓介(日本学術振興会特別研究員)2004年11月1日8日ギリシア共和国パウロの伝道に関連するキリスト教遺跡調査(3)イスラエル考古学研究会の創設および開催2005年3月4日,イスラエル考古学研究会を創設し、第1回の研究会を立教大学において開催した。研究協力者の宮崎修二氏(立教大学講師)から鉄器時代の編年に関するイスラエルの研究動向報告、巽善信氏(天理大学附属天理参考館学芸員)から日本隊が発掘したテル・ゼロールの出土遺物の整理状況に関する報告があり、イスラエルの最新の研究とイスラエルにおける日本隊の発掘史を確認した。2005年11月11日,第2回研究会を天理大学において開催した。イスラエルより発掘調査協力者のイツィク・パズ氏を招聘し、青銅器時代のガリラヤ地方に関しての講演を行った。あわせて、研究協力者の牧野久実氏(滋賀県立琵琶湖博物館主任学芸員)からガリラヤ湖の水運に関する報告、越後屋朗氏(同志社大学神学部教授)からメギド遺跡の年代決定に関する報告、研究分担者の桑原久男氏(天理大学文学部助教授)よりレヘシュ調査の概要に関する報告があり、イスラエルの最新の研究とイスラエルにおける日本隊の今後の発掘の方向性について確認した。2005年12月23日、第3回研究会を八王子市北野台南部会館において開催した。研究代表者月本昭男が下ガリラヤにおけるイスラエル部族時代の研究成果を報告した。(2)イスラエル考古学研究会の創設および開催2005年3月4日,イスラエル考古学研究会を創設し、第1回の研究会を立教大学において開催した。

研究協力者の宮崎修二(立教大学講師)から鉄器時代の編年に関するイスラエルの研究動向報告、巽善信(天理大学附属天理参考館学芸員)から日本隊が発掘したテル・ゼロールの出土遺物の整理状況に関する報告があり、イスラエルの最新の研究とイスラエルにおける日本隊の発掘史を確認した。(3)チュニジア共和国およびイタリア共和国におけるキリスト教遺跡踏査2004年8月27日9月12日,研究分担者名取四郎が,イスラエル国ガリラヤ湖周辺の古代ヘレニズム・ローマ都市との比較研究を目的として,チュニジア共和国およびイタリア共和国の古代都市踏査を実施した。地中海古代都市の地誌上の諸問題、ならびに古代都市における教会堂の配置の問題を実地調査し,後期古代,初期中世,中世ビザンティン時代の都市史の写真資料および文献資料を収集した。(4)ギリシア共和国におけるキリスト教遺跡踏査2004年11月1日8日,研究分担者佐藤研が,イスラエル国ガリラヤ湖周辺で成立したキリスト教の西方への伝播をパウロの伝道を中心に検討することを目的として,ギリシア共和国の古代都市踏査を実施した。パウロが伝道したギリシア都市の地誌上の諸問題および教会遺構の残存状況を実地調査し,各都市の写真資料および文献資料を収集した。(5)デカポリス研究会の開催2004年12月11日,2002年度のヨルダン調査から発足したデカポリス研究会を立教大学において開催した。江添誠(慶應義塾大学大学院博士課程)からデカポリス都市の成立に関する研究動向報告、高井啓介(日本学術振興会特別研究員)から上記のギリシア調査に関する報告があり、イスラエル周辺地域の都市文化を検討した。(1)イスラエル国エン・ゲヴ遺跡における発掘調査報告書作成のための会議2005年6月30日7月1日,エン・ゲヴ遺跡発掘調査に関して、最終報告書の構成を確認、決定した。イスラエルの研究協力者モシェ・コハヴィ教授の発題(Where is Aphek of I Kings 20 and II Kings 13?)に基づき、エン・ゲヴとアフェクの同定をめぐって、意見交換を行った。(2)イスラエル考古学研究会の開催2005年11月11日,第3回研究会を天理大学において開催した。イスラエルより発掘調査協力者のイツィク・パズ氏を招聘し、青銅器時代のガリラヤ地方に関しての講演を行った。あわせて、研究協力者の牧野久実(滋賀県立琵琶湖博物館主任学芸員)からガリラヤ湖の水運に関する報告、越後屋朗氏(同志社大学神学部教授)からメギド遺跡の年代決定に関する報告、研究分担者の桑原久男氏(天理大学文学部助教授)よりレヘシュ調査の概要に関する報告があり、イスラエルの最新の研究とイスラエルにおける日本隊の今後の発掘の方向性について確認した。2005年12月23日、第4回研究会を八王子市北野台南部会館において開催した。研究代表者月本昭男が下ガリラヤにおけるイスラエル部族時代の研究成果を報告した。(3)エン・ゲヴ遺跡発掘調査に基づく学会発表2005年10月29日,九州大学にて行われた日本オリエント学会第47回大会にて研究分担者の杉本智俊氏(慶應義塾大学文学部助教授)が「エン・ゲヴ遺跡の成立年代」という題で学術発表を行った。(4)デカポリス研究のための講演会の開催