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チロシンリン酸化シグナルによる染色体分配制御機構の解明

Eg5阻害剤S-trityl-L-cysteine (STLC)及びCdk1阻害剤RO-3306により擬似的な細胞質分裂を誘導し、プロテオミクス解析により、中間径フィラメントタンパク質のチロシンリン酸化の可能性を見出した。遺伝子導入による発現系を構築し、リン酸化部位と推定されるチロシン残基をフェニルアラニンに置換した変異体遺伝子を構築した。チロシンリン酸化と細胞内局在を検討したが、どちらも野生型と比較して変化は観察されず、このチロシン残基リン酸化の生理的意義は低いと推定した。阻害剤ライブラリーを用いたスクリーニングにおいて、3種の受容体型チロシンキナーゼが細胞分裂制御に関与する可能性を見出した。このうち2種をsiRNAによりノックダウンすると、阻害剤と同様な細胞分裂への影響が観察された。残りの1種については、3種の阻害剤が染色体整列に影響し、紡錘体チェックポイントを活性化することで細胞分裂進行を遅延させることを見出し、論文として報告した。また、v-Src発現がSTLCによる細胞分裂前中期の停止を解除し、早期に細胞分裂を終了させることを見出した。v-Srcによるこの効果はキナーゼ活性に依存し、Src抑制性のCskキナーゼのノックダウンによりc-Srcを活性化させると、同様な効果が観察された。in vitroキナーゼアッセイにより、v-Srcが直接Cdk1をリン酸化すること、さらに、Cdk1の基質リン酸化の低下から、v-Srcによるリン酸化がCdk1のキナーゼ活性を低下させることを明らかにした。さらに、v-SrcによるCdk1のリン酸化を介した早期の細胞分裂終了は、抗がん剤パクリタキセル感受性を低下させることを見出した。これらの結果は、v-Srcが細胞分裂異常を介して染色体不安定性を誘導する機構の一つであると考えられ、論文として報告した。細胞分裂後期・終期における,タンパク質チロシンリン酸化の網羅的解析を目指し,当初予定していた細胞周期同調方法に加え,別の細胞周期同調方法を検討した。ヒト子宮頸癌由来HeLa S3細胞にEg5阻害剤であるSTLCを加えて培養すると,細胞は単極性の紡錘体を形成し,細胞分裂の進行が停止して細胞周期が同調した。続いてCdk1阻害剤であるRO-3306を加えると,細胞分裂を終了して次の細胞周期へと進行した。この細胞周期同調方法により,擬似的な細胞分裂後期・終期の細胞を集められることがわかった。予定していた方法に加え,この方法においても細胞周期同調を行い,プロテオミクス解析を行った。それらの結果,細胞分裂後期・終期においてチロシンリン酸化されるペプチドを複数見出した。また,阻害剤ライブラリーを用い,細胞分裂に影響を及ぼす分子の探索を行った。直接的に細胞分裂進行に対する影響を観察するため,阻害剤を培養細胞に加えた直後から細胞をタイムラプス観察し,細胞分裂進行を観察した。さらに,フローサイトメトリーを用い,細胞周期の変化についても調べた。その結果,幾つかの阻害剤により,細胞周期進行,および細胞分裂進行が変化した。これらの結果は,細胞分裂後期特異的なチロシンリン酸化シグナルが存在し,細胞分裂制御,特に,細胞質分裂制御に関与すること,阻害剤ライブラリーを用いた検討結果は,幾つかの阻害剤の標的分子が細胞分裂制御に関与することを示唆している。さらに,幾つかのキナーゼタンパク質も候補にあがったことから,それらの基質としてリン酸化されたタンパク質がプロテオミクス解析により検出された可能性がある。プロテオミクス解析において,細胞分裂期後期特異的にチロシンリン酸化されるペプチドを複数見出しており,解析する分子を検討中である。また,阻害剤ライブラリーを用いたスクリーニングもほぼ終了し,影響を及ぼす阻害剤を見出すことができた。RNA干渉を用い,分子の特定を行っている。よって,概ね予定通り進行している。当初予定していた細胞周期同調方法に加え,別の同調法においてもリン酸化プロテオミクス解析用のサンプルを調製した。すなわち,Eg5阻害剤STLCで細胞分裂期に同調した後,更にCdk1阻害剤RO-3306を添加して擬似的な細胞質分裂を誘導した。ライセート調製前に可溶性画分を除去したサンプルも用意し,プロテオミクス解析の結果を比較した。これらの実験において共通して検出されたリン酸化ペプチドから,細胞分裂後期においてリン酸化されるタンパク質を推定した。細胞分裂後期・終期においてチロシンリン酸化されるのか,内在性タンパク質の免疫沈降により解析したが,非特異的な結合などにより明確な結果を導くに至らなかった。そこで,遺伝子を入手し誘導発現プラスミドを構築した。ドキシサイクリンによる誘導発現可能な細胞株を樹立した。発現したタンパク質は,内在性タンパク質と同じ細胞内局在を示した。これまで,阻害剤ライブラリーを用いたスクリーニングにより,幾つかの受容体型チロシンキナーゼ阻害剤が細胞分裂阻害効果を持つことを明らかにしてきた。そこで,これらの阻害剤の特異性を調べるため,異なる阻害剤を用いて細胞分裂に対する効果を検討した。その結果,標的が同じ異なる阻害剤において,同様な効果が観察された。さらに,siRNAによりノックダウンしたところ,2つの受容体型チロシンキナーゼのノックダウンにおいて,細胞分裂の阻害効果が観察された。よって,これらの阻害剤の標的分子が細胞分裂制御に関与することが示唆された。また,我々が樹立したv-Src誘導発現が可能な細胞株を用い,リン酸化シグナルの亢進が染色体分配にあたえる影響を解析した。

その結果,v-Src発現により,染色体分配を行わずに細胞分裂を終了する現象が観察され,チロシンリン酸化シグナルの破綻が染色体分配異常を引き起こすことが示唆された。プロテオミクス解析,および阻害剤スクリーニングにより,チロシンリン酸化シグナルの関与により細胞分裂制御に関わるタンパク質の候補分子を見出すことができた。Eg5阻害剤S-trityl-L-cysteine (STLC)及びCdk1阻害剤RO-3306により擬似的な細胞質分裂を誘導し、プロテオミクス解析により、中間径フィラメントタンパク質のチロシンリン酸化の可能性を見出した。遺伝子導入による発現系を構築し、リン酸化部位と推定されるチロシン残基をフェニルアラニンに置換した変異体遺伝子を構築した。チロシンリン酸化と細胞内局在を検討したが、どちらも野生型と比較して変化は観察されず、このチロシン残基リン酸化の生理的意義は低いと推定した。阻害剤ライブラリーを用いたスクリーニングにおいて、3種の受容体型チロシンキナーゼが細胞分裂制御に関与する可能性を見出した。このうち2種をsiRNAによりノックダウンすると、阻害剤と同様な細胞分裂への影響が観察された。残りの1種については、3種の阻害剤が染色体整列に影響し、紡錘体チェックポイントを活性化することで細胞分裂進行を遅延させることを見出し、論文として報告した。また、v-Src発現がSTLCによる細胞分裂前中期の停止を解除し、早期に細胞分裂を終了させることを見出した。v-Srcによるこの効果はキナーゼ活性に依存し、Src抑制性のCskキナーゼのノックダウンによりc-Srcを活性化させると、同様な効果が観察された。in vitroキナーゼアッセイにより、v-Srcが直接Cdk1をリン酸化すること、さらに、Cdk1の基質リン酸化の低下から、v-Srcによるリン酸化がCdk1のキナーゼ活性を低下させることを明らかにした。さらに、v-SrcによるCdk1のリン酸化を介した早期の細胞分裂終了は、抗がん剤パクリタキセル感受性を低下させることを見出した。これらの結果は、v-Srcが細胞分裂異常を介して染色体不安定性を誘導する機構の一つであると考えられ、論文として報告した。プロテオミクス解析により,細胞分裂後期・終期にチロシンリン酸化されるタンパク質候補を見出し,また,阻害剤ライブラリーのスクリーニングにより,細胞分裂制御に関わる新規タンパク質の候補を見出した。よって,これらの候補分子について,細胞分裂制御との関連を解析する。リン酸化ペプチドが見出された分子については,遺伝子導入による発現系を構築し,さらに変異を導入してリン酸化を確認するとともに,リン酸化部位を特定する。さらには,内在性の分子をノックダウンした上で変異体を発現させるレスキュー実験系を構築して,リン酸化の生理的意義を解析する。阻害剤ライブラリーを用いたスクリーニングにより見出された候補タンパク質については,まず,阻害剤の特異性を確認するため,標的が同じ別の化合物により同様な表現型が観察されるか検討する。さらに,RNA干渉法により分子の特定を行う。
レンブラントと17世紀オランダ美術における女性表現に関する研究

本研究の目的は、レンブラントやその同時代の画家たちの手になるさまざまな女性表現-娘から老女にいたるまで-をとりあげその特徴を明らかにすることであった。女性たちが統べる領域は家庭という小さな世界であったが、それはけっしてとるに足りない矮小な世界などではなかった。オランダの風俗画にあって女性たちは絵の中心的役割をはたしていた。この点において十七世紀オランダ風俗画は水際だっている。オランダ絵画は宗教や神話や寓意を説明する役割から解放され、外界を写し取るのではなく、人間のありさまを詩的な想像力によって目に見える形に変容させたものだと見抜いたのは、さすがにヘーゲルの炯眼である。リアリズムとは、共同体としての精神が産みだそうとする世界を、ありうべきこととしてその共同体を構成する人々に受け入れさせる手段であり、絵はその手段を用いてまだ存在していない、いわば仮想を現実として描きだし、逆に現実が仮想としての絵をシミュレート(模倣)することになるのである。オランダ人は、スペインとの独立戦争に勝ち抜くことで存在するようになった祖国を、女性になぞらえたイメージをつぎつぎと創りだしていくことによって意識化し、現実のものとしていったのである。オランダははじめからオランダとしてあったわけではなく、対立する「他者」(スペイン=男性性)との衝突によって、形づくられていった。時代の鑑でもあるオランダの風俗画の誕生は、祖国オランダの成立過程と深くかかわっていたのである。もちろん十七世紀オランダとは時代背景が異なるものの、現代では女性の活躍する場は家庭から社会へと飛躍的に拡がっている。女性の力は社会に欠くべからざるものになっているのである。そうした現実をまのあたりにしている私たちには、十七世紀オランダ風俗画はけして遠い時代の遠い国の絵画ではない。そこに描きだされた女性たちは、私たちが自分たちの時代を考えるための鏡のような働きをしているのである。宗教世界を脱し日常を礼賛する近代世界へと至る17世紀ヨーロッパにあって、シャルダンなど18世紀フランス美術に見られる多様な女性表現を準備したのがオランダ美術である。この中にあってレンブラントは独自の女性表現を生みだした画家である。レンブラントは、妻をモデルに一見何の変哲もない日常生活の一コマを描いたようでいて、じつはそこに「メランコリー」というような、古代ギリシア以来よく知られた意味を重ねあわせたりもした。あるいはヌードにおいても、従来の伝統的な表現に追従するのではなく、おのれの目で吟味し、その時代にふさわしいリアルな女性像を描くことに腐心した。本研究ではそうしたレンブラントの女性表現を画家の内側からみるというよりも、むしろ、中世後期から近代にいたる通時性という歴史的なパースペクティヴの中に位置づけ、さらに、ヤン・ステーンやフェルメールなど同じ17世紀のオランダ画家との共時的な連関関係から捉え直した。初年度である今年は、オランダを中心とした海外調査によって基礎資料の蒐集をおこない、これまでの研究の不足を補い、資料の充実をはかった。具体的には、17世紀オランダで量産された風俗画、とくに女性が活動する様子の描かれた室内画がどの程度当時の市民階級に購入され、どのように展示されていたのかを検討するために、アムステルダム、レイデン、ハールレム、デン・ハーグなどに遺されている財産目録、売立目録を調査した。くわえてデン・ハーグの王立美術研究所(RKD)に保存蒐集されている、美術作品の写真資料を調査し、視覚資料の蒐集に努めた。

さらに、国内でも西洋美術館をはじめとする関連の図書館などで研究文献を調査した。調査はなお十分とはいえず、継続して調査研究を行う。ドレスデン国立絵画館にレンブラントが自身と最初の妻サスギアをモデルにして描いた絵画(以後《放蕩息子》)がある。レンブラントのドレスデンの絵画において、フォン・アーヘンの作品に芸術的な競争心を起こした可能性は十分にある。レンブラントという芸術家は、身近な芸術家はもとよりデューラーやラファエッロのようなルネサンス期の芸術家とも熾烈な競争意識をいだくことでおのれの芸術を造りあげてきた画家であったからだ。それではどうして道徳的に糾弾されるような「放蕩息子」にみずから扮し、あまつさえ妻を娼婦に仕立てたのだろうか。レンブラントのような芸術家の場合、こうした動機にかかわる領域にまで踏みこんでいかなければ、作品の意義に深く迫ることはできない。「居酒屋の放蕩息子」を描いた他の画家の作品はもとよりレンブラントのデッサンにおいても、娼婦が客にこびを売ることもなく、いやそれどころか見ようによっては客に称賛されているような姿勢をとる娼婦は他にはみあたらない。こうみえるのも、かの女の背中がほとんど正面向きあることとも無関係ではない。しかも、振り返る頭部は極端な角度までねじられている。いかにも不自然である。そこには妻サスキア、ひいては女性にたいするアンビヴァレントな感情がレンブラントのなかにあったからではないかと思わせる。アムステルダム大学図書館、ロンドン大英博物館などに遺されている財産目録、売立目録を調査した。くわえて前年に引き続きデン・ハーグの王立美術研究所(RKD)、レイデン大学図書館に保存蒐集されている、美術作品の写真資料を調査し、視覚資料の蒐集に努めた。これまでレンブラントやその同時代の画家たちの手になるさまざまな女性表現-娘から老女にいたるまで-をとりあげ研究を遂行してきた。女性たちが統べる領域は家庭という小さな世界であったが、それはけっしてとるに足りない矮小な世界などではなかった。オランダの風俗画にあって女性たちは絵の中心的役割をはたしていた。しかも聖女でも神話のなかの悪女でもなく、どこにでもいるようなごく平凡な女性たちであり、かの女たちは生き生きとした姿で描かれていたのである。この点において十七世紀オランダ風俗画は水際だっている。オランダ絵画は宗教や神話や寓意を説明する役割から解放され、外界を写し取るのではなく、人間のありさまを詩的な想像力によって目に見える形に変容させたものだと見抜いたのは、さすがにヘーゲルの炯眼である。リアリズムとは、共同体としての精神が産みだそうとする世界を、ありうべきこととしてその共同体を構成する人々に受け入れさせる手段であり、絵はその手段を用いてまだ存在していない、いわば仮想を現実として描きだし、逆に現実が仮想としての絵をシミュレート(模倣)することになるのである。したがって、ヘーゲルがオランダ絵画に見たものは、たんなる外界の描写ということとは距離がある。そればかりではない。
炭素フラーレンを用いる単電子トンネル接合の探求

一般に、金属粒子の単層薄膜の成長初期過程では膜全体はまだ島状になっているため、いわゆる非金属的な電気伝導を与えると考えられているが、成長に伴ってあるところから、膜の一端からその対向した他端まで伝導パスが生じうる。その臨界点はいわゆるパーコレーション閾値として知られている。このパーコレーション閾値での膜の構造を考えてみると、それに起因した微小部分において、ある金属球と金属球がまさに接触した臨界的な状態になっていると考えられる。すなわち、このパーコレーション閾値近傍での膜の電気特性は、接触面積の小さい数個の接合がこの際の電気伝導を決めているような臨界的な状況であろうと推測される。そこで、このような、状況の単層膜を用いて、C60クラスター膜での微小接合を実現しようとすることを考えた。前年度の結果では、C60を用いたクラスター薄膜においてこのようなパーコレーション閾値を観測できたので、今年度は間隔が数十ミクロン以下のギャップ構造の接合において観測することをまず計画した。そして、その電流電圧特性を観測することにより、SET現象の観測を試みることにした。その結果,臨界点でのIV特性等が得られ、室温でクーロン階段らしき振る舞いが観測された。しかし、まだクーロンダイヤモンド等の確実な証拠が得られていないので、SETの室温での観測と断定することは出来ない。現在、これらの臨界点での電気特性を詳しく調べるため、ゲート電極の導入の可能性について検討をしている。次年度以降、クーロンダイヤモンド等のゲート電圧依存性により、SETの室温での観測がはっきりするならば、それらの膜の微細加工を考え、室温SETデバイスの実現に向けた研究を行う計画である。
長波長帯トランジスタレーザによる新たな波長安定光出力制御・変調帯域拡大手法の開拓

平成30年度は、29年度に明らかになった設計指針に基づき、素子の寄生容量の低減のための構造設計やプロセスについて取り組んだ。寄生容量低減のためには、共振器の短共振器化およびストライプ幅の縮小が必要となってくる。まず短共振器化に関しては、ブレーカーのプレーキング条件の最適化とともに、プレーキングの際に設置するマウントテープの種類の選定や剥離の際の剥がれを良好にするためのUV照射条件の検討を行った。その結果、従来よりも短い共振器長でのプレーキングが可能となった。また、短共振器化した場合、端面へのHigh Reflection (HR)コーティングが必要になってくるため、誘電体スパッタ装置でのSiO2/TiO2積層でのDBRを作製し、反射率60%を得ることに成功した。また、実際の素子形状バーの端面を電子顕微鏡で観測した結果、良好な反射鏡形成を確認することが出来た。ストライプ幅の縮小に関しては、これまでアライメントトレランスを考慮し最小ストライプ幅が決定されてきた。これを解決するため、高精度なアライメントが可能なマスクレス露光装置を導入した。プロセス上で必要になる複数のフォトレジストを利用し、露光条件の検討を行った。その結果、従来に比べて最小ストライプ幅を減少することが出来ることを明らかにした。以上の結果を用いて素子作製を行ったが、良好な電流ー電圧特性を得ることに成功したものの、残念ながら発振動作を得ることはできなかった。次年度に向け原因追及を行っていく。プロセス条件出しは行うことが出来たが、実際の素子作製に失敗し、期待する結果が得られなかったため。現在発振特性を得られなかった理由を検討中である。原因不明の素子不良を減らすため、プロセス途中での記録を徹底するようにプロセスレシピを修正することを検討する。平成29年度は、長波長帯トランジスタレーザの高速電圧変調動作に向けて計算と実際の作製の両面から取り組んだ。まず計算においては、これまで光の観点と電気の観点のそれぞれから理論計算を行ってきたが、この2つを同時に考慮することにより、より正確な理論性能の検証を目指した。その結果、コレクタ/ベース間の接合容量が、速度の律則となるとともに、著しく光出力特性に影響を与えることが分かった。これは、接合容量のため、キャリアの充放電が過渡的に発生し、活性層に注入されるキャリアの量を多く変えるためであると予想され、接合容量を低減した構造での計算結果では良好な特性を得ることができることが分かった。次に実際に素子を作製し、電圧変調構造を測定した。この段階では接合容量の低減は行わず、理論との比較を目的として行った。高周波特性の向上を目的として金ワイヤではなく直接高速プローブを素子に落とす形とした結果、7GHz以上の小信号帯域を得ることができた。一方で大信号測定では、大きなパルス遅延などが見られたが、計算による結果と完全に一致することが確認されたため、接合容量の低減を行うことで、改善が得られることに強い自信を持つことが可能となった。また、これまでの素子は動作温度として40°Cまでしか動作しなかったが、メッキの導入などを行うことによって長波長帯トランジスタレーザでは最高温度となる80°C以上の発振を得ることに成功した。来年度以降は接合容量の低減素子を作製していく予定である。当初の予定である変調特性に関する理論と実測の一致を完全にみることができた。また、世界最高動作温度を実現することができたため。接合容量低減素子の作製のため、関連する装置(端面反射膜形成装置、スクライバ装置)の早期の立ち上げを行うことによって、素子作製を短期に行うことを目指したいと考えている。
蛋白質1分子の回転のイメージング

固体ないし組織のレベルでは、「回転機構」が見いだされた例がない。ひとつながりのものの中では、真の回転は起き得ないのである。しかし分子レベルまで降りていくと、分子どうしは結合解離を繰り返して「滑り」あうことができ、しかも、分子集合体は多くの場合螺旋構造(円板や円輪を含む)をとる。螺旋に沿って滑れば回転である。分子レベルでは、回転は当たり前のことかもしれない。これまで回転がみられた例はわずかしかないが、それは単に分子レベルの回転を検出するのが難しかったためだとも考えられる。本研究では、分子レベルの回転の検出のため、(1)蛍光色素1分子の向きを蛍光偏光イメージングにより実時間測定する、(2)分子に比べてはるかに大きなプローブを結合させることにより分子の回転を捉える、という2種のアプローチを提案し、実現した。(1)の例として、ミオシン上を滑走するアクチン線維が、滑走しながら線維軸の回りに回転する様子を定量的に捉えることができた。また、(2)の例として、ATP合成酵素が1分子でできた回転モーターであることを示した。また、真の回転ではないが、アクチン線維のねじれ運動も捉えることもできた。分子の回転が捉えられたということは、分子の構造変化(必然的に向きの変化を伴う)を実時間測定できることを意味する。蛋白質分子でできた「分子機械」が一体どのような仕掛け(構造変化)により働くのかを、1分子イメージングにより追求する、「1分子生理学」の発展に大きな寄与をすることが期待される。すでに開発した蛍光色素1分子のイメージング光学系に改良を加え、信号/雑音比を向上させた。その結果、イメージング光路にさらに複像光学系を挿入する余裕ができ、ロ-ダミン1分子からの蛍光を縦・横両偏光成分に分離して同時に撮影できるようになった。すなわち、色素1分子の向きを実時間測定できるようになったことになる。現状では、時間分解能が15分の1秒の場合、角度決定の精度は30度程度である。そこで、アクチン線維1本につき1分子程度のロ-ダミンを結合させ、線維の回転の検出を試みた。ミオシン上を直線的に滑走するアクチン線維にしっかりと結合させたロ-ダミンの蛍光は毎秒数回偏光方向を変え、アクチン線維が線維軸周りに回転しながら滑走することがわかった。回転数は滑走距離1μmあたり1回転程度で、アクチンの螺旋構造のピッチとは一致しない。すなわち、ミオシンはアクチンの螺旋に沿ってアクチンを動かすとは限らないようである。なお、線維軸周りの回転は、アクチン線維にたくさんの蛍光色素を結合させてしまってはわからない。色素1分子の偏光を測定できて初めて捉えられるものである。一方、ミオシンの構造変化、およびプロトンATPaseの回転を捉えるため、共同研究者と色素結合部位の設計を始めた。色素をしっかりと結合させるため、2つのSH基に結合するような色素を合成して用いる予定で準備を進めている。結合部位以外のSH基は遺伝子工学的につぶしてしまう作業を始めている。蛋白質でできた分子機械は確率的に働くため、互いに同期させることができない。従って、その働きを理解するにはどうしても1個1個の分子機械を観察する必要がある。本研究では、蛋白質分子1個の構造変化を、その分子の特定部分の向きの変化、すなわち回転として捉えることを試みた。構造変化の検出法として、2つのアプローチを考えた。第1に、プラスチックビーズのように蛋白質分子に比べてはるかに巨大なプローブを用いる方法、第2に蛋白質分子よりずっと小さい蛍光色素分子をプローブに用いる方法である。現時点で、それぞれのアプローチに付き一つずつ成果が得られたので。以下に報告する。1.巨大プローブによるATP合成酵素の回転のイメージング(東工大と共同)Boyerにより、ATP合成酵素のF1部分の中央にあるγサブユニットが回転することによりATPが合成されるという仮説が提出された。

この真偽を確かめるため、F1をガラス面上に固定し、γサブユニットに巨大プローブとして蛍光染色したアクチン線維を結合させた。ATPを加えて蛍光顕微鏡下で観察したところ、アクチン線維が1方向に何百回も回転するのが見られた。これはATP合成の逆反応によるものであり、回転の方向はこの酵素の結晶構造から予想されるものと一致した。たった1分子でできた、知られている限り世界最小の回転モーターが見つかったことになる。2.蛍光偏光によるアクチン線維の回転のイメージング(早大と共同)アクチン線維に1分子の蛍光色素をしっかりと結合させ、蛍光の縦・横両偏光成分を同時観察することにより、アクチン線維がミオシン上を滑走するときには線維軸の周りに回転することがわかった。色素1分子の向きを蛍光偏光測定により実時間連続イメージングすることに成功したものであり、蛋白質1分子の構造変化検出の道を開くものである。
新しい分子マーカーを用いた後生動物の系統関係の解析

本研究では、軟体動物を主な研究対象として、ミトコンドリアDNA(mtDNA)の全塩基配列または部分的な塩基配列を決定し、ゲノム上の各遺伝子の配置を比較することにより系統解析を行った。これまで、後生動物のmtDNAのゲノム構造は保守性が高く、同じ動物門の中ではほとんど変化しないと考えられていたが、軟体動物や腕足動物では近縁な分類群の間でもゲノム上の遺伝子配置が大きく異なっており、ゲノム構造の進化速度が分類群によって著しく異なることが分かった。軟体動物の腹足綱については、主要な上位分類群を全て網羅してゲノム構造の変異を詳細に調べた。遺伝子配置について分岐分類学的な解析を行い、腹足綱の上目レベルの系統関係を構築した。得られた系統樹は形態学的データと非常によく一致し、ゲノム構造を指標とした解析が有効であることが裏付けられた。また、腹足類では後鰓類、マイマイ上科についても、同様な解析を行い、遺伝子配置を指標とした系統解析が高次分類群のみならず、科、属レベルの低次分類群の解析にも使えることが分かった。さらに、塩基配列データを用いた通常の分子系統解析では解析が困難な状況(塩基置換が飽和していたり、複数の分類群がほぼ同じ時期に分岐したような場合)においても、遺伝子配置を指標とした系統解析では系統関係を明らかにできる場合があり、そのような状況ではむしろ通常の分子系統解析よりも優れた方法であることが示された。昨年度までの研究により、l)軟体動物門腹足綱では、mtDNAの遺伝子配置に著しい多様性があること、2)古腹足類は、多板類と共通の原始的な遺伝子配置を残しているのに対し、有肺類と後鰓類は特殊化した遺伝子配置を共有していることが明らかになった。そこで、本年度は、有肺類と後鰓類の共通祖先から分岐したと考えられる原始的な異鰓類(異鰓類)に注目して、mtDNAのゲノム構造の解析を行った。トウガタガイ科、ミジンワダチガイ科のmtDNAの全ゲノムをクローン化し、その部分的な遺伝子配置を決定したところ、これらの分類群の遺伝子配置は、基本的には後鰓類や有肺類と同じであり、派生的な配置を数多く共有していることが分かった。この結果は、トウガタガイ科、ミジンワダチガイ科、後鰓類、有肺類が単系統辞をなしていることを示している。そこで、次に、ミズシタダミ科のmtDNAの遺伝子配置を解析したところ、ミズシタダミ科のmtDNAには、後鰓類と共通の派生的な配置と、古腹足類と共通の原始的な配置が混在するモザイク状のゲノム構造をしていることが分かった。これは、まさに、後鰓類と古腹足類をつなぐ中間的なゲノム構造であり、ミズシタダミ科が原始的な分類群であることを強く支持する。これまで、後鰓類と古腹足類は遺伝子配置があまりにも異なるため、古腹足類型の原始的な遺伝子配置から後鰓類型の特殊な遺伝子配置が、どのようにして生じたかが不明であった、しかし、本研究により、その間をつなぐ中間的なゲノム構造が発見されたことにより、その分子進化過程を推定することも可能になった。本年度は、生きた化石として知られ、系統学的位置が不明な腕足動物門のミトコンドリアDNA(mtDNA)ゲノム構造の解析を行った。有関節類のホウズキチョウチンLaques rubellusと無関節類のミドリシャミセンガイLingulaunguisのmtDNAを超遠心法により精製またはPCR法により増幅した後、クローン化し、その全塩基配列を決定した。ゲノム上の遺伝子配置を比較したところ、これら2種の腕足類の遺伝子配置は著しく異なっており、共通する遺伝子配置を見い出すことができなかった。また、これらの腕足類の遺伝子配置はいずれも他の動物門の遺伝子配置とは大きく異なっており、真体腔動物群に共通する配置から大きく逸脱していることが分かった。

一方、腕足類が真体腔動物群の一員であることは形態学的知見や18SrRNAを用いた解析から示されており、このことはホウズキチョウチンのmtDNAにコードされている蛋白質遺伝子のアミノ酸配列を用いた分子系統解析によっても支持された。これらの結果は、腕足動物門においては、mtDNAのゲノム構造の変化する速度が速くなっていることを示している。mtDNAの遺伝子配置は、腕足動物門内で多様に変化していることが予想されるので、腕足動物門内の系統関係を解析する分子マーカーになると考えられる。また、一部の軟体動物ではmtDNAのゲノム構造変化の速度が著しく速くなっていることが申請者らの研究によって分かっていたが、今回の研究結果は、このような現象が軟体動物に限ったものではなく、複数の動物門においても独立に生じていることを示唆する。後鰓類は、腹足綱の一大分類群で、伝統的な分類体系では独立の亜綱に位置づけられている。しかし、近年の形態データや分子データを用いた解析では、後鰓類の単系統性は支持されていない。そこで、後鰓類の主要な上位分類、後鰓類の姉妹群とされている有肺類、異旋類について、mtDNAの遺伝子配置を決定し、そのデータに基づいて分岐分類学的な解析を行った。その結果、後鰓類は他の分類群にはない派生的な遺伝子配置を共有しており、単系統群であることが確認された。今回見出された特異な遺伝子配置は、現時点で知られている後鰓類の唯一の共有派生形質となる。一方、上記の研究の過程で、マイマイ上科内においても遺伝子配置が変化していることが分かったので、マイマイ類の主要な科について部分的な遺伝子配置を決定し、その系統解析を行った。まず、最初に、塩基置換速度が遅いと言われているtRNA遺伝子の塩基配列データを用いて通常の分子系統解析を行ったところ、塩基置換が飽和しており、信頼性のある解析結果は全く得られなかった。そこで、柄眼目の別の上科を外群として、遺伝子配置データについて分岐分類学的解析を行ったところ、ナンバンマイマイ科は単系統群ではないことが明確に示された。これらの結果から、塩基配列データを用いた通常の分子系統解析では解析が困難な状況(塩基置換が飽和していたり、複数の分類群がほぼ同じ時期に分岐したような場合)においても、遺伝子配置を指標とした系統解析では系統関係を明らかにすることが可能であり、そのような状況ではむしろ通常の分子系統解析よりも優れていることが分かった。また、遺伝子配置を用いた系統解析は、亜綱や上目などの上位分類群のみならず、科、属レベルの解析にも適用できることが分かり、遺伝子配置に変化が生じていれば、様々な分類階級での解析に使えることも分かった。
力学系の解析と関連する幾何学

今年度の研究の概要ならびに得られた成果について主なものを以下に述べる。1.(離散力学系に関するもの)シンプレクティック写像の不動点の周りでのバ-コフ標準化については,非共鳴不動点の場合は容易であるが,共鳴不動点の場合には研究も少なかった.これに対して伊藤は,実解析的なシンプレクティック写像のバ-コフ標準化の収束性と積分可能性の同値性を,時間に依存するハミルトニアンの標準化の観点から統一的に示した。また、辻井は一次元力学系の族におけるエントロピーの単調性を研究し、凸で対称かつ負のシュワルツ微分を持つ一次元単峰写像に定数を足すという写像族において、多くのエントロピーの値においてエントロピーがその値を越えるとそれ以降はエントロピーがその値より小になることがないという結果(エントロピーの部分的単調性)を証明した。2.(微分方程式に関するもの)村田は放物型偏微分方程式に対する混合問題の非負解の一意性が成り立つために必要かつ十分な領域の形を決定した。また非有界領域のMartin境界に関して、一般化されたCranston-McConnel型の不等式を証明した。ヴァイスは∂_tu-Δu=-u^γX_<{u>0}> ((t,x)∈R×R^n)という強吸収のついた熱方程式(γ∈[0,1))またはquenching問題(γ∈(-1,1))の解の自由境界点での漸近性状を研究して、自由境界∂{u>0}のHausdoff次元を求めた。さらにγ∈[0,1)の場合はHausdorff測度の評価も証明した。3.(複素解析に関するもの)複素平面から3次元射影空間への正則写像が代数的に退化するための条件について考察した。問題の正則写像がある特別な代数的超曲面を除外集合として持つとき、指数関数を含む関数方程式が導かれるが、野田はこの方程式の正則関数解の挙動について調べその形を決定した。
大域解析学とスペクトル幾何学

本科学研究費補助金は,交付申請書に記載した通り,「第21回国際数学者会議(IGM)(平成2年8月21日から同年8月29日,京都)に関連したPRECONFERENCEを開催するために使用された。従来の習慣にしたがって、「第37回微分幾何学シンポジュウム」として、東京都立大学教養部で、平成2年8月13日から同年8月17日まで研究集会を開催した。現在盛んに研究されている幾何学の分野は解析学・トポロジ-・代数幾何学・物理学とも深い関係している。外国人研究者11名(フランス・米国・ベルギ-・イタリ-)、日本側4名計15名に最近の研究成果の報告を依頼し、それに対して討論を行った。また、韓国からの研究者の参加を得ることができた。参加者は日本人187名にもおよび、従来の「シポジュウム」と異なり、若い研究者の参加がめだったことは特筆すべきことである。また、参加者全員には予稿集を配布し、シンポジュム終了後は、その報告の今日的意味を考慮して、記録として平成2年度日本数学会秋季総会で配布した。本科学研究補助金が単年度であることを考慮しても、日本研究者には大きな影響を与え、論文、著書等が出版されつつあり,今後の発展が期待できる。
構造化テキストのための高速パタン照合機械

決定性文脈自由言語のクラスのサブクラスであり,等価問題や所属問題が可解となるクラスとして,NTS言語のクラスが知られている.しかし,与えられた文法がNTSか否かの判定は一般に多項式時間を要するため,実用的ではない.NTSのサブクラスで,判定が容易であるようなクラスとしては,正規言語の他に,parenthesis languages,very simple languagesなどが知られている.与えられた文法から決定性スタックオートマトンを作成する計算時間を小さくする必要があるため,本研究では,上記のクラスにさらに制限を加えた言語クラスを検討した.このクラスは,LaTeXのソースや生物学的分類の木構造を表す目録のテキストなどを含み,実用的にも有用なクラスである.そこで,これらの構造を意識しながら高速にパターン照合を行うことが可能となった.決定性文脈自由言語のクラスのサブクラスであり,等価問題や所属問題が可解となるクラスとして,NTS言語のクラスが知られている.しかし,与えられた文法がNTSか否かの判定は一般に多項式時間を要するため,実用的ではない.NTSのサブクラスで,判定が容易であるようなクラスとしては,正規言語の他に,parenthesis languages,very simple languagesなどが知られている.与えられた文法から決定性スタックオートマトンを作成する計算時間を小さくする必要があるため,本研究では,上記のクラスにさらに制限を加えた言語クラスを検討した.このクラスは,LaTeXのソースや生物学的分類の木構造を表す目録のテキストなどを含み,実用的にも有用なクラスである.そこで,これらの構造を意識しながら高速にパターン照合を行うことが可能となった.
ディープラーニングを用いた生活習慣病予防のための新たな成長曲線の開発

本研究は、成人期の体格および生活習慣病発症を予測するため、子どもから成人期までの新たな成長曲線を開発することを目的としている。初年度である2018年度は、小児期から成人期をつなぐためのデータ入手、欠損値の多いデータを分析するための分析手法の検討、小児期の体格および成人期のメタボリックシンドロームに影響を与える生活習慣の検討を行った。その結果、7歳から38歳までの体格および特定健診項目の結果をもつ193人のデータを入手することができ、また、データ取得率が5%未満の対象者を削除することで主成分分析が適用できる可能性が見いだされた。さらに、小児期および成人期の生活習慣として睡眠状況との関連を検討した結果、夕食後2時間以内の睡眠は、小児・成人期ともに関連が認められないことを示した。一方で、小児期のBody Mass Index (以下、BMI)時系列データの各グループが,成人期のBMI時系列データのどのグループに所属するかを示す確率を理論的に導出しても、小児期から成人期へと接続可能なデータ数が少ないためか,成人期のグループは2つしか検出できなかったため、有効な結果とはなりえなかった。また、BMIという簡便な指標ではあるが、メタボリックシンドロームを見出す精度について、現在は腹囲を含めた検討が提案されており、New York市立大学の研究者から、分析について協力する旨、提案を受けている。今後、成人期までをつなぐことのできる更なるデータの収集を継続しつつ、機械学習による分析を取り入れた手法を検討する。また、最新の知見を用いた体格指標の活用により、これまでよりも精度を向上させることを目指し、生活習慣と体格の関連について、検討を深めていく予定である。当該年度に予定していたデータの入手は全て完了でき、主成分分析法をもちいた分析の試行も実施できた。一方で、小児期から成人期までの不定期な飛び値データを結ぶ手法は難しく、機械学習を適用してどこまで目標が達成できるか不明である。また、小児期から成人期をつなぐこれ以上のデータの入手は困難であり、その点をいかにして乗り越えるか、検討する余地がある。既存データを用いて、機械学習によりどこまで成人期を予測できるか検討を重ねる。また、最新の知見を用いた体格指標の活用により、小児期、成人期、それぞれにおいて、これまでよりも精度を向上させることを目指し、生活習慣と体格の関連を検討する。最初の研究論文の完成が想定していたよりも早まったため、次年度支払う予定であった掲載代金を前倒しする必要があったが、その後、予定していたジャーナルではなく他誌に掲載することとなり、出版料が変更(金額が減少)となったため。
遺伝医療における患者の人権擁護に関する研究

遺伝に関する知見が次々と明らかになり、患者参加型および契約医療への転換がなされている現在は、先端医療といわれる医療の恩恵を受けつつ、生命の尊重と人々の安全を守り、人権を擁護していく視点を具体的に考えていくことが急務になっている。医療を提供する人々と、患者相互の個の尊重がなされ、障害をもつ人々との共生のためには、医療環境の整備は重要である。特に遺伝医療においては、患者だけでなく、遺伝子を共有する家族の援助も重要となる。障害をもつ人々や、遺伝医療を支える社会環境の整備のためには、患者の最も身近に接することの多い看護者を対象とした遺伝に関する基本知識の再確認と患者の人権擁護に関する示唆を深めることが必須であると考え研究を行った。1)人として生きることは、自己の尊厳と自己の人格の自由な発展がなされることであり、それが保障される一人一人の力を合わせた環境づくりが必要である。2)遺伝医療では、(1)個人の命、家族の命、地球生命号としての命、(2)個人の価値、家族の価値、社会の価値、といった何か一つを選択することができないことが多い。3)不確実な情報の下で、患者は遺伝医療に関する意思決定を求められることが増えていく。4)民族、人種といった特徴は、厳しい自然環境への適応が積み重なった貴重なものである。遺伝医療においては、精度の高い知見を明らかにするのに必要な情報である。これらは、遺伝医療には不可欠な要因であるが、個人のプライバシーとしての位置づけも高い。今後は、(1)職場環境において医療従事者自身も安全であることが基盤となる。(2)どのように遺伝情報を伝えるか、遺伝情報に関する情報の取扱いや、遺伝情報と情報行動についての今後の研究が必要であると思われる。生命情報である遺伝子の解明は、生命そのものに深く関わってくる。遺伝子は、ひとの生命の根幹をなす。現在の先端医療といわれる医療の恩恵を受けつつ、生命の尊重と人々の安全を守り、人権を擁護していくことを具体的に考えていくことが急務となっている。特に、遺伝医療においては、患者だけでなく、遺伝子を共有する家族の援助が重要である。本年度は、いくつかの遺伝に関するセミナーや文献等多方面から、科学の立場の遺伝に関する情報を集めた。一方で、患者の擁護を主眼にして検索を行った。患者の権利やアドボカシーに関する文献検索や海外での制定を比較した。精神医療において権利擁護組織が育ってきた。この理由としては、精神医療において患者の権利、とりわけ患者の自己決定権が重要視されるようになってきたことにある。そこで、司法精神医療視察団の一因として、本年度は、イギリスとオランダを訪れ、患者の権利法起草者からの講義や司法精神医療を中心とした視察を行った。欧州でも、精神障害者を中心としてスタートしたが、医療を含む多くの事に共通する問題が明らかになったという報告を受けた。遺伝子が明らかになっても、未だ治療法が確立されていない疾患もある。遺伝子診断や治療を受けるか否かという選択は患者が成す。しかし、遺伝情報は未だ、不確かなものもある。このような状況で患者が選択するためには、臨床では、患者が自分の感情を表出でき、意見を言えるという受療環境を整えておく必要である。次年度は、この具体策に向けて、調査研究を継続する。現在の先端医療といわれる医療の恩恵を受けつつ、生命の尊重と人々の安全を守り、人権を擁護していく視点を具体的に考えていくことが急務になっている。遺伝医療における課題は、過去の疾患史においても共通している。過去にも、疾患に関する社会的現象に対する反省がいくつか報告されている。

本年度は、患者の権利にたちかえり、人々の擁護や、患者の権利に関するまとめをおこなった。人として生きることは、自己の尊厳と自己の人格の自由な発展がなされることである。遺伝に関する知見が次々と明らかになり、患者参加型および契約医療への転換がなされている現在、医療を提供する人々と、患者相互の個の尊重がなされ、障害をもつ人々との共生のための医療環境の整備は重要である。このためには、患者と最も接することの多い看護師を対象として、患者の人権擁護に関する具体的な方法を構築することが必要である。そこで、本年度は、看護師らに調査を行った。その結果、遺伝ということについては、具体的には考えられず、怖いという気持ちが前にでるということが明らかになった。しかしながら、命を育み、生命と生活に携わる職種として、遺伝医療やその他の医療においても人々の尊厳を守るという意識の重要性が再認識された。これらの成果をふまえて、最終年度となる来年度は、患者擁護、遺伝医療に関する社会的課題を中心とした文献等をまとめるとともに、患者側の意見を加えて報告をまとめていく。遺伝に関する知見が次々と明らかになり、患者参加型および契約医療への転換がなされている現在は、先端医療といわれる医療の恩恵を受けつつ、生命の尊重と人々の安全を守り、人権を擁護していく視点を具体的に考えていくことが急務になっている。医療を提供する人々と、患者相互の個の尊重がなされ、障害をもつ人々との共生のためには、医療環境の整備は重要である。特に遺伝医療においては、患者だけでなく、遺伝子を共有する家族の援助も重要となる。障害をもつ人々や、遺伝医療を支える社会環境の整備のためには、患者の最も身近に接することの多い看護者を対象とした遺伝に関する基本知識の再確認と患者の人権擁護に関する示唆を深めることが必須であると考え研究を行った。1)人として生きることは、自己の尊厳と自己の人格の自由な発展がなされることであり、それが保障される一人一人の力を合わせた環境づくりが必要である。2)遺伝医療では、(1)個人の命、家族の命、地球生命号としての命、(2)個人の価値、家族の価値、社会の価値、といった何か一つを選択することができないことが多くなると考える。3)不確実な情報の下で、患者は遺伝医療に関する意思決定を求められることが増えていくと考える。4)民族、人種といった特徴は、厳しい自然環境への適応が積み重なった貴重なものである。遺伝医療においては、環境と疾患についてなど、遺伝医療をより精度の高い知見を明らかにするのに必要な情報である。これらは、遺伝医療には不可欠な要因であるが、個人のプライバシーとしての位置づけも高い。今後は、(1)職場環境において医療従事者自身も安全であることが基盤となり、援助側の支援も必要である、(2)どのように遺伝情報を伝えるか、遺伝情報に関する情報の取扱いや、遺伝情報と情報行動についての今後の研究が必要であると思われる。
縮環エーテル骨格を有する新規Ｎａ＋／Ｋ＋ＡＴＰａｓｅ阻害剤の開発

筆者は以前(ー)-aplysialleneがNa+/K+ ATPaseのα2サブタイプ選択的に阻害活性を示すことを世界で初めて発見した。また、(ー)-aplysialleneはステロイド系化合物のouabainと構造が全く異なることからも新たなリード化合物になると考えられる。しかし、活性値は中程度であり、サブタイプ選択性が不十分であることが問題であった。本問題を解決するために(ー)-aplysialleneの中央骨格と側鎖を変換した誘導体合成が必要である。そこでcis,cis体のfused-THF骨格又は異なる側鎖を有する誘導体の合成を検討した。研究1:(ー)-Aplysialleneの側鎖をアルキル鎖及び、含ヘテロアルキル鎖に変換した誘導体は、以前の(ー)-aplysialleneの全合成研究で得られた中間体(A)を利用して合成しようと考えた。結果、Aのアルコール部位を脱離基に変換した後、グリニャール試薬などの様々な求核剤を用いて単純炭素鎖又は含ヘテロ炭素鎖へ変換しようと試みた。しかし、現在までに目的化合物は得られていない。研究2:(ー)-Aplysialleneのfused-THF骨格をtrans,trans体からcis,cis体へ変換した誘導体は、申請者の研究室で見出されたfused-THF骨格の立体選択的構築法を利用して合成しようと考えた。しかし、モデル実験に倣って合成を試みたが、反応系が複雑になり未だ目的物を得られていない。目標は完全には達成していないが70%ほどは達成したため。研究1:今後は求核剤だけでなく、カップリング反応を用いて単純炭素鎖又は含ヘテロ炭素鎖の構築を検討する予定である。研究2:今後はハロゲン化剤、溶媒などを種々検討する予定である。
植物防御システムの分子制御機構に関する基礎的研究と農学への応用

植物は,進化の過程で病原菌に対する様々な物理的あるいは化学的防御システムを構築して生存してきている。この抵抗反応に関与する物質群の解明より,その機能を最大限に誘因させ,かつ新しい防御機構を備えた植物を創製することが可能となる。また病原抵抗性発現の新しい引き金物質(エリシター)の開発は,二次代謝活性因子として培養細胞などを用いた有用物質生産の面からも注目されている。上記事情に艦み,生体高分子を素材としてそれらの潜在的植物活性化能を精査し植物の防御システムの分子制御機構を解明するために本研究を行った。以下に本研究の内容をまとめた。1.部分的に脱アセチル化したオリゴキチンを精製しマメ科植物に対するエリシター活性を見いだした。2.リゾチームを利用した酵素化学的合成による部分的脱アセチル化キチンの簡便合成法ほ開発した。3.海藻由来多糖であるラミナランの酵素加水分解物よりエリシター活性を有するオリゴ糖を単離精製しその構造を明らかにした。4.上記エリシター活性オリゴ糖の活性発現最小単位を明らかにした。農薬の使用を最小限に抑えた、より安全性の高い農産物増産のために、植物本来が具備している潜在的な罹病抵抗反応を利用する新しい防御手段の開発が望まれている。植物は、進化の過程で病原菌に対する様々な物理的あるいは化学的防御システムを構築して生存してきている。この抵抗反応に関与する物質群の解明により、その機能を最大限に誘因させ、かつ新しい防御機能を備えた植物を創製することが可能となる。また、病原抵抗性発現の新しい引き金物質(エリシター)の開発は、二次代謝活性化因子として培養細胞などを用いた有用物質生産の面からも注目されている。そこで、生体高分子化合物を素材にいて、それらの持つ潜在的植物活性化能を精査した。当初計画した、中性多糖であるラミナランを酵素分解して得られた画分からエリシター活性をもつオリゴ糖を純粋に調整する事ができ、その化学構造式を決定して、J.of Carbohydr.に投稿し公表される運びとなった。また、甲殻類の外套構造をなすキチンから、キトサンを調製し化学修飾して、新たに植物の二次代謝を著しく活性化するオリゴ糖を得ることに成功した。現在、それらの活性発現の種特異性について検討しており、次年度も継続してこの問題に取り組む。農薬の使用を最小限度に抑えた,より安全性の高い農産物増産のために,植物本来が具備している潜在的な罹病抵抗反応を利用する新しい防御手段の開発が望まれている。この抵抗反応に関与する物質群の解明により,その機能を最大限に誘因させ,かつ新しい防御機構を備えた植物を創製することが可能となる。そこで,生体高分子を素材としてそれらの潜在的植物活性化能を精査し海藻由来の多糖であるラミナランの酵素分解物に活性を見いだし前年度報告した。今回,さらに研究を進め活性物質を大量に分離精製することに成功し,マメ科植物における種特異性を精査した。加えて,エリシター活性を有するオリゴ糖の植物による代謝を明らかにした。
新しい同種複合組織移植の開発と社会の意識調査

1これまで軽視されてきたストーマ患者の抱える問題に対し、形成外科、大腸肛門外科、移植外科、獣医師、創傷管理専門の看護師(WOCナース)、解剖学者、神経再生研究者らが異分野共同研究という形で解決法を追求する。2自家組織を犠牲にした既存の手術や人工物を用いた方法とはアプローチの異なる、「同種複合組織移植」という新たな手法による機能再建の可能性を検討する。3臨床応用を見据えて、ヒトに解剖生理学的に似ており便禁制能をもつ実験動物であるイヌを使用する。4医学的問題だけでなく、倫理的問題や社会的問題からもアプローチする。5国内外の施設と協力し、国際共同研究として進めていく。
移民により再生産される越境的パンジャーブ文化とその多様性

インド亜大陸北西部に位置するインド領パンジャーブおよびパキスタン領パンジャーブから、カナダ・トロント市周辺へ移住した人々の生活やパンジャーブ移民同士の関係について調査を実施した。本研究を通して、インド・パキスタン移民の中でも文化的近似性の強いインド出身パンジャーブ移民とパキスタン出身パンジャーブ移民が、出身地ではほぼ不可能である相互交流をもち、分断されている現在のパンジャーブ地方を越境的に捉え直す実践がなされていることが明らかになった。移民が発信する越境的パンジャーブの姿は、国境線による領土範囲に基づき文化的差異を認識させる国民国家の枠に留まらない文化の越境性を示しているといえる。北米最大のスィク教徒コミュニティを有するカナダ・ヴァンクーバーを訪問し、集住地区、寺院、商業施設、商店、学校、移民支援団体、コミュニティ新聞社にて、関係者への聞き取りを実施した。ヴァンクーバー市内にはブリティッシュ・コロンビア州で一番古いスィク教寺院のほか、南アジア系住民が集まる商店街が存在するが、現在では地価が高騰するヴァンクーバ市内ではなく、市南東の郊外地区にインド・パンジャーブ出身の移民が集中していることが明らかになった。移民子弟教育のための学校、高齢者施設、定住のための支援、テレビ・ラジオ・新聞等メディア、コミュニティ・ホールなど、パンジャーブ移民に特化したサービスが多くみられた。地元の大学の一つであるブリティシュ・コロンビア大学ではアジア研究を専門とする学部があり、南アジア研究を専門とするコースもあるが、大学による南アジア系移民コミュニティーの調査は実施されていない。ただ、2014年は、パンジャーブ移民を乗せた船舶「駒形丸」がヴァンクーバー港への入港を不当に拒まれた事件から100年にあたり、その100周年記念のイベントには大学が主催するものもあった。このようにインド・パンジャーブ出身者を中心とするヴァンクーバー地区の南アジア系移民社会の様子や、地域の大学と南アジア系コミュニティの関係などが明らかとなった。一方、カナダ東部の都市トロントには、ヴァンクーバー郊外にインド・パンジャーブ出身スィク教徒集住地区がみられたのと同様に、トロント市西部の郊外にパンジャーブ出身者の集住地区がみられた。しかしながらヴァンクーバーとの大きな違いは、インドのみならずパキスタン・パンジャーブ出身者が多く存在することであった。パンジャーブ移民に特化した様々なサービスがトロント郊外地区でもみられたが、これらはインド側だけではなくパキスタン側出身者も同様に想定されていることが明らかとなった。インド亜大陸北西部に位置するパンジャーブ地方から、カナダ・トロント市周辺へ移住した人々の生活および出身地との関係について調査を実施した。パンジャーブ地方は、イギリス植民地支配からインドとパキスタンが分離独立した1947年以降、インド領パンジャーブとパキスタン領パンジャーブに領土が分断されたままである。現在、国境を越えた両パンジャーブ間の日常的な交流はみられない。しかしながら、現在でも同様の生活慣習を共有していることもあり、移住先ではインド・パキスタン移民のなかでも「同胞」的立場となりえるのがパンジャーブ移民である。本研究では、インド出身のパンジャーブ移民とパキスタン出身のパンジャーブ移民が、移住先のどのような場面で遭遇し、どのような関係を築いているのかを明らかにするため、南アジア系移住者が増加するトロント市およびその近郊のなかでも、とくにパンジャーブ移民の増加が著しい地区を中心に、移民支援組織のプログラムやコミュニティ活動での参与観察、参加者へのインタビュー、コミュニティ・メディアについての資料収集及び調査をおこなった。また、移民と出身地社会との関係について明らかにするため、帰省や巡礼ツアーなどに関する調査及びインタビューも実施した。本研究を通して、インド・パキスタン移民のなかでも文化的近似性の強いインド出身パンジャーブ移民とパキスタン出身パンジャーブ移民が、出身地ではほぼ不可能である相互交流をもち、分断されているパンジャーブ地方を越境的に捉え直す実践がなされていることが明らかになった。移民が発信する越境的なパンジャーブの姿は、国境線による領土範囲にもとづき文化的差異を認識させる国民国家の枠に留まらない文化の越境性を示しているといえる。インド・パキスタン双方のパンジャーブからの移民が多いカナダを調査地として選定し、研究のスタート段階として、とくにパンジャーブ移民の多いヴァンクーバーとトロントを訪問した。19世紀末から20世紀初頭にかけてのパンジャーブ移民初期の研究や、現在のコミュニティの問題点等を指摘する論文が先行研究としてあるが、それらの先行研究からは現在のコミュニティの概要や全体像を把握するのが困難であった。そのため、フィールド調査に赴き各地区のパンジャーブ移民社会の概要をつかむことが研究初年度の最大の目的であり、その目的はおおむね達成したと考えている。上記の目的およびその達成は本研究の第一歩として必要不可欠な部分ではあるが、実際の研究および考察はこれからの作業である。