hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ビッグデータ可視化手法による安定写像構成イノベーションへの挑戦

可微分多様体間のどんな写像も安定写像で近似できるが,その具体的構成は極めて困難である.そこで本研究では,ビッグデータ可視化手法を応用し,新しい手法で組織的に安定写像を構成する手法を確立することが目的であった.そこで,特異ファイバーの分類を進め,多様体対などの場合に新しい分類結果を得た.それらを同境理論に応用したほか,データ可視化ユーザーインターフェース開発に用いた.それに触発され,既知の写像を具体的に変形させる新手法も開発し,4次元多様体の研究に応用した.こうして幾何的に重要な安定写像を組織的に構成し,写像の不変量の研究に応用できたほか,写像の単純化定理の新証明手法も成果として得た.可微分多様体間の位相的安定写像全体は,写像空間において稠密であり,どんな写像も安定写像で近似できる.ところが驚くべきことに,具体的な安定写像,特に幾何学的に重要な性質を持つ安定写像を具体的に構成することは非常に困難であることが知られている.実際これまで,そうした具体的な安定写像を構成する方法として特に確立されたものはなく,状況に応じてアドホックな方法を用いて構成されてきた.そこで本研究では,これまでにない方法,特にコンピュータサイエンスにおけるビッグデータ可視化の手法を本質的に応用することにより,まったく新しい手法によりシステマティックに安定写像を構成する方法論を確立する.そして具体的に構成した安定写像を厳密に検証・論証し,微分トポロジーにおける種々の問題に応用し,安定写像論のイノベーションを推進することが当初の目的である.そこで平成27年度は,特異ファイバーの分類定理に基づいた形で,3次元領域から2次元空間への多項式写像の特異ファイバーを可視化し,さらにそうした写像を摂動して安定写像とし,その特異ファイバーまで可視化するユーザーインターフェースを開発した.そしてそれを試験的に簡単な多項式写像に適用し,そうした写像の構造の解析を開始した.一方で,3次元境界付き多様体から2次元空間への安定写像の特異ファイバーの普遍複体のコホモロジーを計算することとReebグラフを用いた幾何学的議論により,境界付き曲面上のMorse関数のなす同境群を決定した.3次元領域から2次元空間への多項式写像を具体的に与えたとき,その特異ファイバーを実際に可視化できるユーザーインターフェースを,コンピュータサイエンスの研究者の協力により整備できたことは,本研究課題の目的達成のために非常に重要である.このユーザーインターフェースは,さらに,与えられた写像だけではなく,それを摂動した写像の構造も解析できる点に大きな特長がある.こうして,これまで安定摂動の様子が解明されてこなかった高度に退化した写像の安定摂動の解析が進められる目途が立ったことになる.これにより本研究課題が予定通り,もしくはその予想を超える形で遂行できる期待ができるようになった.可微分多様体間の位相的安定写像全体は,写像空間において稠密であり,どんな写像も安定写像で近似できる.ところが驚くべきことに,具体的な安定写像,特に幾何学的に重要な性質を持つ安定写像を具体的に構成することは非常に困難であることが知られている.実際これまで,そうした具体的な安定写像を構成する方法として特に確立されたものはなく,状況に応じてアドホックな方法を用いて構成されてきた.そこで本研究では,これまでにない方法,特にコンピュータサイエンスにおけるビッグデータ可視化の手法を本質的に応用することにより,まったく新しい手法によりシステマティックに安定写像を構成する方法論を確立する.そして具体的に構成した安定写像を厳密に検証・論証し,微分トポロジーにおける種々の問題に応用し,安定写像論のイノベーションを推進することが当初の目的である.平成28年度は,そうした構成法に用いるため,多様体対,特に3次元多様体とその中の2次元部分多様体の対の上の安定写像の特異ファイバーの分類を進め,分類結果を得た.また,対応する普遍複体のコホモロジーを計算することで,ある場合には対応する同境群が非自明となることを初めて示した.また,3次元実射影空間から平面への安定写像を,4面体からの写像をもとに具体的に構成し,その構造を詳しく解析した.また可視化を行うユーザーインターフェース作成には至っていないが,特異ファイバーを曲線に沿ってつなげてできるファイバー曲面の可視化アルゴリズムの研究を行い,コンピュータサイエンスの研究者と共同でその可視化を実装することができた.多様体対上の安定写像の研究はこれまでほとんどなく,その特異ファイバーの研究としては世界で初めてとなる分類結果を得たことは特筆に値する.多様体対は応用上非常に重要であり,境界を持つ多様体の一般化にあたる.これにより本研究課題が予定通り,もしくはその予想を超える形で遂行できる期待ができるようになった.可微分多様体間の位相的安定写像全体は,写像空間において稠密であり,どんな写像も安定写像で近似できる.ところが驚くべきことに,具体的な安定写像,特に幾何学的に重要な性質を持つ安定写像を具体的に構成することは非常に困難であることが知られている.実際これまで,そうした具体的な安定写像を構成する方法として特に確立されたものはなく,状況に応じてアドホックな方法を用いて構成されてきた.そこで本研究では,これまでにない方法,特にコンピュータサイエンスにおけるビッグデータ可視化の手法を本質的に応用することにより,まったく新しい手法によりシステマティックに安定写像を構成する方法論を確立し,そして具体的に構成した安定写像を厳密に検証・論証して,微分トポロジーにおける種々の問題に応用し,安定写像論のイノベーションを推進することが当初の目的であった.

平成29年度は,3次元多様体から球面や平面への安定写像で,定値折り目特異点を持たないものや,特異点集合と正則ファイバーの位置関係が特殊な写像の具体例を,これまでにない方法で具体的に構成することに成功した.その手法は,既に具体的に得られている写像をもとに,その変形を具体的に構成するという,今までにないアイデアに基づくもので,今後の安定写像の構成論において重要な役割りを果たすことが大いに期待できる.今回はさらに4次元多様体から球面や平面への写像を構成的に簡単化する手法も開発し,4次元多様体のtrisectionの研究に応用した.また可視化を行うユーザーインターフェースについては,特異ファイバーを曲線に沿ってつなげてできるファイバー曲面の可視化アルゴリズムやレーブ空間の可視化手法を研究し,それを用いてシミュレーションなどで得られる安定写像のビッグデータの可視化を実際に行うソフトウェアを,コンピュータサイエンスの研究者と共同で開発することを開始した.可微分多様体間のどんな写像も安定写像で近似できるが,その具体的構成は極めて困難である.そこで本研究では,ビッグデータ可視化手法を応用し,新しい手法で組織的に安定写像を構成する手法を確立することが目的であった.そこで,特異ファイバーの分類を進め,多様体対などの場合に新しい分類結果を得た.それらを同境理論に応用したほか,データ可視化ユーザーインターフェース開発に用いた.それに触発され,既知の写像を具体的に変形させる新手法も開発し,4次元多様体の研究に応用した.こうして幾何的に重要な安定写像を組織的に構成し,写像の不変量の研究に応用できたほか,写像の単純化定理の新証明手法も成果として得た.多項式写像の可視化ユーザーインターフェースが開発できたので,それを用いて,これまで特異ファイバー構造や安定摂動が解明されていなかった具体的写像の様子を解析する.さらにそうした計算機による解析を,特異点論を用いた数学的議論により検証し,その理論的裏付けの研究を行う.ただし,そうした研究の中で,現在のユーザーインターフェースでは不十分となる事態も予想される.そうした際には再びコンピュータサイエンスの研究者の協力を仰いで,ユーザーインターフェースの改良,および新たな開発を行っていく.また,そうした研究を,具体的な安定写像の厳密な構成へと応用する.多項式写像の可視化ユーザーインターフェースが平成27年度に開発できたので,それを用いて,これまで特異ファイバー構造や安定摂動が解明されていなかった具体的写像の様子を解析する.また,多様体対上の安定写像の可視化も可能とするユーザーインターフェースの開発を目指す.さらにそうした計算機による解析を,特異点論を用いた数学的議論により検証し,その理論的裏付けの研究を行う.ただし,そうした研究の中で,現在のユーザーインターフェースでは不十分となる事態も予想される.そうした際には再びコンピュータサイエンスの研究者の協力を仰いで,ユーザーインターフェースの改良,および新たな開発を行っていく.また,そうした研究を,具体的な安定写像の厳密な構成へと応用し,種々の問題の解決や新たな問題の発見へとつなげてゆく.
微粒子・ナノ材料を応用した石灰化誘導能を有する自己修復材料の開発

機能性ガラスであるS-PRG緻粒子を添加したシーラント材と充填材料(グラアイオノマーセメントとレジン)から溶出するアルカリ性イオンの種類と溶出量を測定し、それらの酸緩衝能を調べた。硬化した試料を乳酸溶液に浸漬するとイオン溶出効果が発現した。歯質がう蝕になる環境は、う蝕原因菌の酸産生によりpHが5.5以下になるとハイドロキシアパタイトが分解される。ここでアルカリ性イオンを放出する材料により脱灰が抑制され、再石灰誘導が生じる。この作用は材料は本研究で使用したバイオグラス、MTA等にもみられた。これら材料の配合比率を検索しながら再石灰化誘導の実験を行った。象牙質切片と微粒子を添加した実験材料との間に10μmのスペースを作り両端を固定して、人工唾液と蒸留水中に37°Cで長期間保存し、象牙質切片表面上の析出物、結晶成分のSEM観察とエックス線回折とレーザーラマン分光光度計による同定を行った。試料から溶出するアルカリ性イオンや抗菌性のイオン、燐酸アパタイトの構成成分のカルシウムが再石灰化誘導に関与してる様子がわかり、人口唾液に浸漬した場合に析出物が6ヶ月目でわずかに観察された。SEM観察によりフラットな円盤状象牙質表面に針状の結晶が観察された。EDXによる析出物の同定から主に燐酸カルシウムと判断できた。長期的な展望に立った研究が必要である。実験試料とヒト抜去歯の接着強度の測定を微小引張試験(マイクロテンサイル)方法で行った。S-PRGを含有したレジンは歯質との接着方法の工夫により安定した接着強度が得られた。機能性ガラスのS-PRG微粒子を配合した小窩裂溝填塞材(シーラント)の機能について検索した。円盤状試料(直径6mm×3mm)を作製して3mlの蒸留水に浸漬し、一週間毎に溶液を交換して、3ヶ月間にわたり諸性質と機能を調べた。機械的性質は24時間後が最も強度が強く、その後経時的に低下し6か月後には初期の約60%に低下した。これは硬化体から未重合レジンモノマーが溶出すると共に加水分解が硬化体内部を劣化させたと考えられる。しかし、Fuji IIILC(グラスアイオノマー系)は、24時間後でレジン系の約1/2の強度であったが、経時的に低下することはなく、硬化体が水と平衡関係を維持して経時的に強度が保持されていた。フッ素の徐放量は、Fuji IIILCが最も多く、その溶出量はレジン系シーラントの3倍から4倍であった。長期的には減少する傾向にあったが、3ヶ月後でもFuji IIILCのフッ素量はレジン系シーラントよりも多く測定された。試料作製24時間後のアルカリ性イオンの溶出量を測定した結果、S-PRG微粒子配合シーラントはストロンチウムとボロンイオンの溶出が多かった。これらのイオンはフッ素と拮抗してエナメル質の脱灰抑制と歯質強化を行い、う蝕予防効果を行うことが既に明らかになっている。試料を乳酸溶液(pH=4)に浸漬してpHの変化を測定した。その結果、測定2時間後にS-PRG微粒子配合シーラントではpHが6.2に上昇した。一方、GIC系では5.5であった。エナメル質表面のpHが低下するとハイドロキシアパタイトが分解して、歯質の脱灰、欠損によりう蝕が生じる。今回得られた結果は、機能性微粒子であるS-PRG微粒子配合した材料をシーラントに応用すると、イオン溶出によるpHの緩衝作用およびフッ素徐放作用の機能を持たせることにより、う蝕予防に効果的であることが示唆された。
わが国の将来の相続法制の課題―高齢社会を考慮してのドイツ法との比較研究

本研究の目的は、わが国の相続法制度を高齢社会との関係で、かつ、ドイツ法との対比で検討することである。その最初の出発点として、本年から徐々に施行されるわが国の改正相続法の幾つかの制度を検討し、それを同様の機能を有しているドイツ法の制度と比較することから研究を開始した。その具体的内容は、特に、わが国の改正された制度で、ドイツとの対比で重要なものは、(i)配偶者(短期)居住権、(ii)預貯金の仮払い制度、(iii)遺留分制度、特に、現物返還から金銭債権化と猶予制度、(iv)相続人以外の者の貢献の考慮(特別寄与者)である。同様の機能を果たす制度として、ドイツ法では、(i)一種の法定遺贈である30日間の猶予(Dreissigsten)、及び、先位・後位相続(Vor- und Nacherbschaft)、(ii)予防法学である金融商品の共同預金(gemeinschaftliches Konto)、(iii)遺留分(Pflichtteil)での猶予制度の検討であるが、(iv)に関しては、ドイツ法では、同様の機能を果たす私法上の制度は存在しない。(i)(iii)に関しては、両者が)高齢社会への対応((i)、(iii))、遺産分割の側面支援(ii)という側面から共通性を有することの確認を行った。他方で、同じく高齢社会への対応である(iv)に関しては、両者の違いがわが国とドイツの社会事情、法制度の違いに由来することが多いことを確認した。すなわち、ドイツでは血族(法定)相続人の範囲が広く、特別縁故者の制度が存在しないこと、介護保険で現金給付を、しかも、法定相続人ではない隣人の介護などにも認めていることから、特別寄与者の制度を認める必要がなく、他方で、わが国では、法定相続人ではない子の配偶者の介護事例が多いことが背景となっていると考えられる。研究計画の予定どおり、(i)相続法制度の高齢社会への対応、(ii)遺産分割制度の合理化という研究目標との関係では、わが国の法制度に関しては、ある程度以上の検討を進めることができたと考える。他方で、2010年に相続法を改正したドイツ法に関しては、そこで立法された幾つかの法制度に関して、文献による検討はある程度は進展した。ただし、ドイツ法の実体に関して、ドイツ人の研究者に調査協力を依頼したが、その作業は当初予定した程度には進行しなかった。若干遅延している部分を進行させて、当初の方針どおり進行させる予定である。ドイツでの2010年の相続法改正以後のドイツ法の実体の変化に関する共同研究を以来したドイツの研究者であるフックス教授(Prof. Dr. Maximilian Fuchs)をわが国に招待して講演を依頼し、共同研究会を行い、ドイツでの調査の準備をする予定だったが、2018年の年度末に予定していた訪日が教授の疾病で不可能となり、予定していた旅費額を残すこととなった。

同教授の訪日が早期に可能なら今年度の訪日、研究会の費用に、それ以外の場合は、文献の収集、ないしは、ドイツでの実態調査の費用に充てたいと考える。
２０１５年口永良部島噴火後の植生遷移を規定する地下部生態系の役割の解明

鹿児島県口永良部島で2015年に発生した噴火による火砕流跡地では、直後から一次遷移の一般的な先駆植物とされる地衣類や草本類ではなく、クロマツを主体とした「樹木」が広域に侵入していた。これは一次遷移の一般理論では説明できない現象である。申請者らはこの謎の鍵が「地上と地下の生物群、特に菌根菌を介した生態ネットワークの強さ・つながり」にあると考えた。そこで本研究では、1)噴火跡地に成立しつつある植生、2)風及び動物により散布・運搬される種子、3)実生の根の生育を促進し定着を支える菌根菌の3つのアプローチから、火山噴火後の生態系再構築の決定メカニズムを解明し、「植生遷移区分の規定要因の再定義」に迫る。
乳癌ネオアジュバント症例を用いた化学療法前後におけるALDH陽性癌幹細胞の推移

我々は癌幹細胞とEMTの関係に着目し、EMT誘導因子HOXB9や、TGFβの活性化によるEMTが乳癌癌幹細胞分画であるCD44(+)CD24(-)細胞分画の増加を誘導することを確認した。さらに、このTGFβ経路を抑制する薬剤を新規に検証し、EMTに伴うCD44(+) CD24(-)細胞分画の増加が抑制されることが確認された。癌の多様性、浸潤・転移能力の獲得、薬剤耐性の獲得等を説明する理論として、「癌幹細胞理論」に基づいた研究が昨今内外で盛んに行われており、特に抗癌剤耐性獲得機序を説明する上で、その理論的根拠となる有力な候補として考えられているが、本研究の目的はこの抗癌剤耐性獲得という、癌の臨床上重要な現象に焦点を当てることにより、癌幹細胞理論の是非を検証を行うことである。最終的には外科的切除がなされた臨床乳癌検体を用いて研究を遂行することが目的であるが(次年度以降)、この前段階として、我々は乳癌細胞であるMCF7(ER陽性)及びMDA-MB231(ER陰性)の二種類の細胞株を用いて、マウス異種移植モデルを作成し、形成された腫瘍の癌幹細胞分画を同定することを試みた。MDA-MB231細胞は免疫不全マウスにおいて良好に腫瘍を形成したが、MCF7は腫瘍の形成が認められなかったため、本細胞株にactivated-HRASをレンチウイルスベクターを用いて導入したところ、腫瘍の形成が認められた。現在この両者に対して、docetaxel及びdoxorubicinの投与が行われ、至適な投与量と腫瘍経の変異を観察しているが、個体間における差が大きいため、安定した系を作成するために努力が払われている。一方でMDA-MB231細胞にはGFPもしくはアポトーシス誘導因子であるcaspase-8のテトラサイクリンによる誘導発現系が導入され、これら細胞を用いて「擬似的に癌幹細胞を標的とした治療」を実現し、癌幹細胞を標的とした治療の有用性を検証する研究に派生している。今後はこれら基礎データを蓄積し、臨床検体における癌幹細胞のソーティングへ移行していく予定である。本研究の目的は抗癌剤耐性獲得という、癌の臨床上重要な現象に焦点を当てることにより、癌幹細胞理論の是非を検証を行うことである。癌の多様性、浸潤・転移能力の獲得、薬剤耐性の獲得等を説明する理論として、「癌幹細胞理論」に基づいた研究が昨今内外で盛んに行われており、特に抗癌剤耐性獲得機序を説明する上で、その理論的根拠となる有力な候補として考えられている。平成22年度は、前年度に続いて乳癌細胞であるMCF7(ER陽性)及びMDA-MB231(ER陰性)の二種類の細胞株を用いて、マウス異種移植モデルを作成し、形成された腫瘍の癌幹細胞分画を同定することを試みた。さらに、この両者に対して、docetaxel及びdoxorubicinの投与が行われ、至適な投与量と腫瘍経の変異を観察し、安定した系を作成することが可能であった。特に、MCF7-Hrasを用いた異種移植モデルでは、抗癌剤のみならずホルモン療法であるタモキシフェンの投与と腫瘍経の推移について重要な知見が得られ、現在このホルモン療法と癌幹細胞の増減の関係を明らかにする研究が進行中である。今後はこれら癌幹細胞と抗癌剤・抗エストロゲン剤による薬物療法との関係を解明し、最終的には外科的切除がなされた臨床乳癌検体を用いて研究を遂行し、これら薬物療法の耐性化獲得機構を明らかにすることが目的である。平成23年度は、これまでに確認してきた基礎研究の結果が、臨床検体を用いた解析により実際に即しているか否かを検討した。我々は術前化学療法を行う前に、全例マンモトームを用いた生検を行っているが、この方法は超音波画像で病変を確認しながら針を刺し入れ、針の側面にある吸引口で組織を採取する。この吸引システムにより狙った病変部の組織だけを採取でき、1回の穿刺で多数の組織が採取できるため、フローサイトメトリー施行に十分な検体が採取可能である。これにより、(1)化学療法投与前(3)手術時検体の3回検体採取を行い、CD44(+)CD24(-)ALDEFLUOR(+)

分画の増減の推移を検討する予定としていたが、中間(2)の検体採取は倫理的配慮によりこれを施行することが不可能であった。これら採取された検体に対し、Mammosphere forming assayや異種移植モデルによる生着能・多分化能の確認を行うとともに、各分画のRNAを抽出し、幹細胞マーカーや上皮マーカー・間質マーカーの検討を行った。今後はマイクロアレイを用いた網羅的解析を計画する。また、上記解析を当科で施行中の術前ホルモン療法症例においても行い、化学療法との比較検討を施行する。
近世日本社会における町人思想その様相と行方――懐徳堂と東アジア諸地域

本年度(2010年)は、学会発表を二回ほど行う機会を得た。また、富永仲基に関する論文を一本書き上げ、現在、学会誌に投稿中である(この論文は、もともとは修士論文の一章に含まれていたものだが、その後、中国仏教について若干勉強し、三年近くかけてようやく完成させることができた)。もう一本書き上げつつある中井竹山についての論文-上記の学会発表の一つを土台にして、その後、新しい史料をいくつか足したもの-も、近日中に学会誌に投稿する予定である。五井蘭洲についての学会発表は、すでにその要旨が活字になっている。これは、晩年の蘭洲が書き残した「百王-姓論」というテクストを読解したものである。彼の天皇観は、いわゆる「万姓一系」や国学系の随順論とは大きく異なっており、興味深い。懐徳堂の次の世代(中井竹山・履軒等)にどのようにつながってゆくのか、という点も気になるところである。後日、さらに史料を足して論文化する予定である。この三年間で、懐徳堂の主要人物である富永仲基・五井蘭洲・中井竹山の三人について、学会発表や論文作成というかたちで、彼らにかんする個別論を発表・作成することができた。また、個別論として取り上げたテーマも、学校論、「楽」(音楽や娯楽)、仏教(須弥山説や教相判釈等)、天皇観(「百王一姓」論)、災害(天明の京都大火)等、多岐にわたる(これらは、いずれも、「18世紀の成熟した社会の諸相」と見做すことができるだろう)。今年度(2008年度)は、徳川日本の懐徳堂周辺の諸思想・言説を中心に、一次史料と二次文献の両面から読み進めていった。その際、とくに後者(二次文献)については、日中比較や日韓比較の視点を取り入れたものをより多く読むようにした。そして、これらの作業と同時並行的に、町人学者・富永仲基について論じた修士論文を、投稿論文に仕上げるための作業を進めた。こうした一連の作業を進めるなかでの収穫は、町人思想や懐徳堂を考える際の新しいアプローチを思いついたことである。それは、公家社会との接点である。すなわち、町人思想というと、従来は武家社会との距離に注目されがちだが、それだけではなく公家社会との関係にも注意する必要があるだろう(そもそも、町人学者の多くが、京都・大坂周辺で活躍している)。この観点から、中井竹山の学校論-彼が、京都の公卿・高辻胤長の依頼を受けて作成・提出した『建学私議』-を取り上げ、「禁裏・公家社会の周辺(京都)に学校という〈場〉を構想し設けるということ」には一体どのような意味・背景があったのか、という点を考察した。なお、これは、町人思想の観点のみならず、儒学の学校論を考える際にも従来の研究にはなかった切り口である。さて、この考察については、夏に近世史研究会で報告する機会を得、様々なアドヴァイスや批判を頂くことができた。とくに、今後、「家職」(「公家家業」)についてもう少し見解を深める必要がある(そして、この点は、町人思想にも少なからず関わってくるだろう)。また、この機会がきっかけとなって、多くの近世禁裏・公家社会関係の研究者と知り合うことができた。町人学者の生きた近世の京都・大坂の「土地勘」をつけるためには、彼らとの交流は非常に有益である。今後の研究に活かせればと考えている。秋には、宮内庁書陵部で史料調査を行った。この考察は、なるべく近いうちに論文のかたちにして発表したいと考えている。他方で、今年度の反省点と今後の課題は、論文であれ学会報告であれ、より発表の機会を増やすことである。前述した研究会報告以外では、今年度は、仲基についての投稿論文を一本、今年度末ギリギリになって一応完成し提出することはできた。が、今年度は、概して、表に出て発表する機会は少なかったと言わざるを得ない。来年度以降は、今年度に得た蓄積や助言・批判等を活かしつつ、幕末・近代以降も視野に入れながら、引き続き一次史料と二次文献を読み進めていきたい。また、博士論文全体の構想についてもそろそろ具体化する必要がある。そして、これらの作業を踏まえつつ、まずは個々の具体的なテーマについて、投稿論文や学会・研究会報告等で一つ一つ形にして外へ出してゆくことを課題としたい。本年度(2009年)には、ようやく学会誌に論文を1本載せることができた。この論文は、修士論文以降、取り組んできた富永仲基に関するものである。彼の著作のうち、従来の研究においては「反徂徠としての仲基」を傍証するためにのみ使用されてきたテクスト(『楽律考』「楽本」)を、むしろ彼自身が眼にした多様な現実や彼自身が参照した議論(『宋史』「楽志十七」等)を踏まえることで、なるべく同時代のコンテクストを共有しながら再構成することを試みた。その結果、従来、所与の現実を肯定する楽観的な規範(「誠の道」)の提唱者と見なされてきた仲基だが、この「楽本」においては、やはり現実の或る部分の尊重と同時に、きわめて批判的かつ悲観的な現実認識を,示していることが明らかとなった。しかし、彼の場合は、その批判的かつ悲観的な現実認識にもかかわらず、いやそれゆえに結局、規範の有効性の相対化や現実の肯定に近づいてしまうという、独特な論理構造がある。

この辺りの複雑な相貌を本稿では、一応、整合的に捉えることができたと思う。ここから、従来の『翁の文』や『出定後語』の読解を変更してゆくことも可能であろう(この点については、現在執筆中の論文において、その一端を明ちかにする予定である)。さて、本年度に発表されたものはこれ1本に止まったが、次年度の活動に向けて、大阪大学図書館(懐徳堂文庫)や京都大学文学部図書館において史料調査を行った。その結果、懐徳堂の五井蘭洲・中井竹山・中井履軒に関する史料を数多く閲覧・複写してきた。これらを読解し、学会報告や学術論文の作成に活かす予定である。本年度(2010年)は、学会発表を二回ほど行う機会を得た。また、富永仲基に関する論文を一本書き上げ、現在、学会誌に投稿中である(この論文は、もともとは修士論文の一章に含まれていたものだが、その後、中国仏教について若干勉強し、三年近くかけてようやく完成させることができた)。もう一本書き上げつつある中井竹山についての論文-上記の学会発表の一つを土台にして、その後、新しい史料をいくつか足したもの-も、近日中に学会誌に投稿する予定である。五井蘭洲についての学会発表は、すでにその要旨が活字になっている。これは、晩年の蘭洲が書き残した「百王-姓論」というテクストを読解したものである。彼の天皇観は、いわゆる「万姓一系」や国学系の随順論とは大きく異なっており、興味深い。懐徳堂の次の世代(中井竹山・履軒等)にどのようにつながってゆくのか、という点も気になるところである。後日、さらに史料を足して論文化する予定である。この三年間で、懐徳堂の主要人物である富永仲基・五井蘭洲・中井竹山の三人について、学会発表や論文作成というかたちで、彼らにかんする個別論を発表・作成することができた。また、個別論として取り上げたテーマも、学校論、「楽」(音楽や娯楽)、仏教(須弥山説や教相判釈等)、天皇観(「百王一姓」論)、災害(天明の京都大火)等、多岐にわたる(これらは、いずれも、「18世紀の成熟した社会の諸相」と見做すことができるだろう)。
皮膚三次元培養を用いた真皮-表皮相互作用、創傷治癒と、組織工学に関する研究

前年度までの研究により、真皮線維芽細胞と表皮角化細胞はそれぞれ解剖学的部位に特異的な分化をする特質をそれ自身で持ち合わせていることが明らかになった。手術時に余剰となった口腔粘膜から粘膜固有層由来の線維芽細胞と粘膜上皮細胞を、皮膚からは真皮由来の線維芽細胞、表皮角化細胞を採取し培養細胞を得た。これら2種類の線維芽細胞を用いてコラーゲンゲルを作成して間葉モデルにして、それぞれの上に粘膜上皮細胞と表皮角化細胞を播種して三次元培養し、それぞれ、ホモ・ヘテロに組み合わせた4種類の皮膚・粘膜モデルを作成した。得られたモデルのパラフィン切片では、細胞の角化形態を調べた。また凍結切片では、粘膜上皮・表皮に特異的な発現をするサイトケラチン4-13、サイトケラチン1-10で免疫染色を行い、その発現形式を調べた。その結果、間葉モデルの線維芽細胞が真皮由来のものでは、その上に播種する上皮細胞が表皮由来であれ口腔粘膜由来であれ、皮膚に特異的なサイトケラチン1-10をsuprabasalで発現することが確認された。間葉モデルの線維芽細胞が口腔粘膜固有層由来のものでは、表皮角化細胞を播種したものだけがサイトケラチン1-10を発現し、粘膜上皮細胞を播種したものでは発現が見られなかった。サイトケラチン1-13では、間葉モデルが口腔粘膜固有層由来の線維芽細胞で上皮も口腔粘膜上皮細胞のモデルのみがsuprabasalに発現し、残りのモデルではモデルの場所によりさまざまな発現様式を示すことが分かった。角化形態では、口腔粘膜上皮細胞は一般には錯角化しか見られないが、間葉モデルに真皮線維芽細胞を用いたものに限って、正常角化するものが認められた。以上の所見より、上皮細胞はそれぞれに固有な分化形態を独自に示すことができるが、上皮下に存在する線維芽細胞は上皮細胞に対して、その線維芽細胞の由来する場所の分化形態の方向に修飾する能力を持つ可能性が示唆された。このことは、口腔粘膜を表皮の代替として用いることができる可能性があり、将来的には人工真皮に部位特異的な線維芽細胞を播種し、上皮細胞をその上に播種したものをヒトに移植し、解剖学的部位特異的な複合皮膚のTissue engineeringの臨床応用が可能であることを示していると考えられる。表皮角化細胞、メラノサイト、真皮繊維芽細胞の三種類の細胞を用いた皮膚三次元培養モデルを樹立し、安定した表皮-真皮相互作用の実験系として用いることが可能になった。この実験系を用いて口腔粘膜上皮と表皮の分化の違いについて、その深層の粘膜が組織と真皮に由来する線維芽細胞が、どの程度上皮細胞の分化に影響を与えるかどうかを検討した。結果としては、真皮線維芽細胞は口腔粘膜上皮細胞に対して、皮膚様の正常角化と皮膚に特異的なサイトケラチン1-10の有棘層、顆粒層での発現を誘導する能力があることが確認された。一方、口腔粘膜下組織由来の繊維芽細胞も、表皮角化細胞の分化に関して、サイトケラチン1-10、サイトケラチン4-13の発現パターンに影響を与えることが確認された。このような上皮細胞の分化の誘導が、胎内ではなく成人の細胞で確認できたことは有意義である。この上皮細胞の分化に影響を与えているシグナルに関してはサイトカインの発現等を含めて現在研究中である。一方、皮膚病変部の相互作用の研究としては、先天性の皮膚色素沈着性病変である扁平母斑では、その病変部局所の表皮角化細胞や真皮繊維芽細胞が、エンドセリンや肝細胞増殖因子、幹細胞因子などのサイトカインを持続性に分泌する性質を持ち、これがメラノサイトの増殖とメラリン産出を刺激し、皮膚の色素沈着性病変を引き起こしている可能性があることが分かった。また同じ扁平母斑でも、正常人に孤立性に存在するものとレックリングハウゼン病患者に多発性に発生するものとではその発生機序に違いがあることが分かった。サイトケラチン1-13では、間葉モデルが口腔粘膜固有層由来の線維芽細胞で上皮も口腔粘膜

上皮細胞のモデルのみがsuprabasalに発現し、残りのモデルではモデルの場所によりさまざまな発現様式を示すことが分かった。角化形態では、口腔粘膜上皮細胞は一般には錯角化しか見られないが、間葉モデルに真皮線維芽細胞を用いたものに限って、正常角化するものが認められた。以上の所見より、上皮細胞はそれぞれに固有な分化形態を独自に示すことができるが、上皮下に存在する線維芽細胞は上皮細胞に対して、その線維芽細胞の由来する場所の分化形態の方向に修飾する能力を持つ可能性が示唆された。このことは、口腔粘膜を表皮の代替として用いることができる可能性があり、将来的には人工真皮に部位特異的な線維芽細胞を播種し、上皮細胞をその上に播種したものをヒトに移植し、解剖学的部位特異的な複合皮膚のTissue engineeringの臨床応用が可能であることを示していると考えられる。
補体調節因子系の解析システムの構築とこれを用いた非典型溶血性尿毒症症候群の診断

本研究は本邦における非典型溶血性尿毒症症候群(aHUS)患者の診断システムの構築と、これを用いた本邦aHUS患者の病態解析を目的として行った。研究期間内に106例のaHUS患者の集積をなし得、71例について溶血試験、抗H因子(CFH)抗体解析、遺伝子解析を行った。結果、溶血試験では17例の患者(17/71, 24%)に異常を認め、うち12例にCFH関連異常を認めた。71例中21例の患者にC3: I1157T変異を認め、本邦好発の変異である可能性が示唆されるとともに、本変異は関西地域に多いという地域特異性も認められた。本研究成果は、本邦aHUS患者の早期診断・早期治療の向上に貢献しうると考える。奈良医大輸血部で実施している本邦の血栓性微小血管障害症(TMA)患者のコホート研究を通して、2013年末までに77例(男性54例、女性23例)の先天性aHUS疑い症例を同定し、46例について羊赤血球を用いた溶血試験と遺伝子解析を実施した。溶血試験では10例の患者に明らかな羊赤血球の溶血亢進(50%以上)を認め、3例にCFH異常を、4例に抗CFH自己抗体を認めた。これより、溶血試験において溶血度50%以上を示す症例はCFH異常の可能性が高いという知見が得られた。残りの3例のうち、1例はC3異常(K1105Q)が同定されたが、2例では遺伝子異常は同定されなかった。遺伝子解析では46例中19例の患者にC3変異を認め、そのうち16例がI1157Tという同じ変異を有していた。興味深いことに19例は全て関西圏の症例であり、I1157T変異を有していた16例のうち13例は全て三重県の症例であった。C3異常症例では、前述したK1105Qを除く全ての症例において溶血試験で明らかな溶血亢進を認めなかった。そのため、I1157T変異の同定においては、PCRと制限酵素処理により変異の有無を判定することができるRFLP解析が有用であった。上記のような経過から、本邦では海外に比べCFH異常の頻度が低く、C3異常の頻度が高い可能性が示唆された。また、CFH異常とC3異常症例の臨床背景を比較すると、CFH異常症例ではわずか数回の発作で腎不全に至るケースが多いが、C3異常症例では再発回数は多いものの比較的腎機能の予後が良く、腎不全に至ったケースは1例も存在しなかった。今後も本邦におけるaHUS症例のgenotype-phenotype解析を進めることで、aHUS診断・治療の発展に貢献し得るデータが得られると考える。奈良県立医科大学輸血部で実施してきた非典型溶血性尿毒症症候群(aHUS)患者の解析システムが、2014年9月に東京大学医学部附属病院腎臓・内分泌内科に移行した。これに伴い、研究代表者も東大病院へ異動したことから、本研究の実施拠点が東大病院へ移行した。患者集積については、奈良医大輸血部で2014年8月末までに計90例のaHUS患者を、東大病院で9月から2015年3月末までに計14例の症例を集積した。補体調節因子系の解析システムの構築については、羊赤血球を用いた溶血試験、抗H因子抗体解析、本邦好発の変異であるC3のI1157T変異を簡便に検出するRFLP解析を樹立した。解析を実施した70例のうち、溶血試験では15例(20%)の症例で溶血度50%以上の溶血亢進を認め、うち4例にH因子遺伝子異常、6例に抗H因子抗体、1例にC3異常を認めた。C3のRFLP解析では21例の患者にI1157T変異が同定された。遺伝子解析の結果、本邦ではC3異常が35%(25/70)と欧米(5-10%)に比べて高く、特にI1157T変異を有していた21例は全て関西地域の症例であったことから、本変異の地域特異性が示唆された。今回集積したaHUS患者の約60%は関西地域に分布していたことから、今後はより全国レベルでの患者収集・解析の必要性が示唆された。本研究を通して本邦初の計104例のaHUS患者コホートの樹立、aHUS患者解析システムの構築を成し得た。

その結果、溶血試験とRFLP解析により患者の約半数は早期に診断が可能であることが示され、本邦と欧米では異なる遺伝子背景を持つ可能性も示唆された。本研究は希少疾患かつ診断が難しいaHUS患者の診断システムの向上に貢献できたと考える。今後は、aHUS患者の遺伝子異常別の予後、治療への反応性を調べるとともに、新たな遺伝子解析法を立ち上げ、新規遺伝子異常の発見を目指す。血栓止血学本邦aHUS患者を77例同定し、うち半数以上の症例で溶血試験と遺伝子解析を施行することができた。この結果、本邦では海外に比べCFH異常症例が少ない一方でC3異常症例が多いという新たな知見が得られた。これにより、本邦aHUS患者の診断にあたっては溶血試験とC3-I1157T変異の有無を調べるRFLP解析が有用であると考えられた。また2013年に公表されたaHUS診断基準作成の際には、診断の際の検査数値等に我々が集積したaHUS患者のデータが反映されるなど、診断基準の作成に寄与することができた。一方で、明らかな原因が同定されていない症例も3割近く存在していたことから、今後はこれらの症例のさらなる精査が必要であると考えられる。明らかな遺伝子異常を同定することができなかった症例について、今後は全ゲノム解析等の施行により精査を実施する。最近では血小板活性化に必須のアラキドン酸代謝経路シグナルを遮断するDiacylglycerol Kinaseε(DGKE)の遺伝子異常が、小児で高血圧を呈するaHUS患者の原因として報告されるなど、補体系以外の因子の異常も明らかとなってきている。そこで、当レジストリー内において小児でかつ高血圧を呈する症例についてはDGKEの遺伝子解析を国立循環器病研究センターにおいて実施することも予定している。これまでに得られた結果については、現在、論文化を進めている段階であり、学会発表も予定している。CFH自己抗体陽性症例について、当初、海外の報告と同様に本邦においてもCFHR関連異常を示す症例が多いと考えていたが、予想に反してCFHR異常を呈する症例が少数であった。このためCFHR抗原量解析に要する抗体を購入する機会が当初の計画より減ったため、未使用額が発生した状況にある。本年度の解析結果より、次年度はC3のRFLP解析を積極的に実施する必要性が示唆された。RFLP解析の際に使用する、PCR関連試薬、制限酵素、電気泳動用のアガロース等は高額なものが多いため、次年度は特にこれらの物品の購入が増えることが予想される。さらに、今後は前述したようなDGKE等の新たな因子についての解析の必要性も出てきたため、これらの解析の構築に当たり必要な資材の購入に使用する予定である。
遺構・遺物中の堆積物の化学分析による遺跡探査

本研究では、平成8年8月に発掘された、宮崎県の西都原遺跡および高千穂野古墳群遺跡、さらには兵庫県の池ノ内古墳遺跡から出土した土器類および土壌類から得られた脂質およびアミノ酸について分析した。一方、遺構の被熱探査のために、岐阜県の穂高砂防観測所、および岡山県恩原遺跡での焚き火モデル実験を行い探査法の基礎的考察を行うとともに、被熱遺構と推定されている恩原遺跡の砂礫堆から採取された試料について探査を試みた。その結果、土器類および土壌からは脂質の存在が確認され、しかも一部の土器の表面には、お供え物として奉納されたと推察される動植物の脂質が付着していて、その中に高度不飽和脂肪酸であるドコサヘキサエン酸(DHA)と同定される脂質が存在していたことを明らかにした。このことから、古墳内の土器中に魚が存在したことが初めて証明された。アミノ酸組成解析の結果では動植物の特定は困難であるが、組成比から検討すると、西都原古墳からはアスパラギン酸、池ノ内古墳からはセリン等の多く含有する土壌が認められ、遺物・遺構の特徴が現れた。一方、焚き火モデル実験では、被熱土壌と非被熱土壌とでは質量磁化率の変化があり、それは鉄酸化物の成分組成比の違いに起因することが明らかにされた。
bisphosphonateの慢性腎不全に伴う異所性灰化融解作用の研究

異所性石灰化巣にたいするのbisphosphonateの効果:SD系雄4週令のラットに外科的に腎部分切除(5/6腎摘)を行い慢性腎不全動物を作成し、これらの動物に6週令よりdietIIにCaCO_3. neutralphospateをそれぞれ4.5%,3.5%添加し実験的に異所性石灰化巣(EC巣)を作成した。軟部におけるEC巣は動物用軟線x線により、その存在を確認した。EC巣が明らかである動物を15匹選び、その中の16匹に0mg/kgBW,2mg/kgBW,10mg/kgBWのbisohosphonateを投与し、EC巣消退作用について検討した。計測は投与を終了した時点でEC巣の消退を動物用軟線x線filmにより抽出計測するとともに、凍結全身矢状切片を作成しcontactmicrox-rayにより抽出されたEC巣の面積を計測し後者の投与量において明らかなEC抑制作用をみとめた。本研究成果は本薬剤が慢性腎不全患者に高頻度に合併する異所性石灰化の治療に役立つことを初めて動物実験で確認したことに意義がある。
加賀藩関係の霊廟建築に関する研究

加賀藩に関係する御霊屋を対象として、遺構の調査を行って図面を作成し、関連資料の収集、分析と合せて、建築年代や建築経緯、建築の特徴について明らかにした。一般的には18世紀初頭を境に御霊屋の建設は下火になるとされているが、加賀藩ではその後も建設が続けられたことから、数多くの御霊屋が現在まで残った。その平面形式や規模は多様であるが、ごく初期を除いて位牌堂の形式をとった。主要な建物から回廊で結ばれ、内部で礼拝するための施設であり、外観意匠は乏しい。内部装飾は障壁画や天井画が中心で、旧天徳院御霊堂は彫刻が充実しているが、全体的に控えめな装飾にとどまっている。本研究は、加賀藩に関係する霊廟建築(御霊屋)を対象として、現存遺構の実測調査と図面史料による復原的研究と、御霊屋に関する文献の解読、分析、加賀藩墓所との関係や、徳川家の東照宮関係の霊廟建築との比較を通じて、加賀藩における霊廟建築の建築的特徴と歴史的な位置づけを明らかにすることを目的としている。平成27年度は、調査対象となる遺構の準備調査を行い、一部の建物について実測調査を実施した。加賀藩関係の遺構として、大乗寺御霊堂(本多家霊屋)(石川)、芳春院前田家霊屋(京都)について実測調査を行って平面図、配置図などを作成し、高野山前田家墓所(和歌山)について写真撮影による準備調査を行った。また、比較対象として徳川将軍家や大名家ほかの霊廟建築や墓所について準備調査を行った。対象は以下の通り。徳川家関係として、旧台徳院霊廟惣門(東京)、増上寺台徳院殿霊廟模型および徳川将軍家墓所(東京)、常憲院霊廟勅額門(東京)、厳有院霊廟勅額門(東京)、高野山徳川家霊台(和歌山)、旧自証院霊屋(東京)。大名家ほかの霊廟建築として細川家霊廟・妙解寺跡・泰勝寺跡(熊本)、高台寺霊屋(京都)、松平秀康及び同母霊屋(和歌山)、佐竹義重霊屋(和歌山)、上杉謙信霊屋(和歌山)、瑞巌寺陽徳院御霊屋(宮城)、瑞鳳殿霊屋(宮城)。また、御霊屋に関する資料調査として、金沢市立玉川図書館近世史料館において、天徳院御霊屋、大乗寺御霊堂、芳春院前田家霊屋に関する古図や絵画などの閲覧と撮影を行った。実測調査と資料調査に基づき、大乗寺御霊堂は建築年代を19世紀前半の文政弘化頃に絞り込むことができ、また古い壁紙の発見によりかつての装飾の一部を明らかにした。芳春院前田家霊屋について、瑞龍院霊屋と芳春院霊屋の寸法、仕様、装飾などの比較ができ、改築箇所を明らかにした。加賀藩関係の御霊屋について、28年度に予定していた実測調査の内、大乗寺御霊屋、芳春院前田家霊屋の調査が先行して実施できた一方で、比較対象となる徳川家や各地の大名家の霊廟建築の準備調査については、部分的な調査にとどまった。大乗寺御霊屋の実測調査においては、平面図、立面図、断面図の作成、建築年代の推定と建設経緯、建築装飾の復原考察、絵画資料との比較考察を実施。芳春院前田家霊屋の調査においても、平面図、配置図の作成、詳細な仕様調査を実施した。比較対象の調査は、国宝、重要文化財の霊廟建築をリスト化し準備調査に着手したものの、県市町村指定の文化財や史跡、さらに霊廟との関係が深い墓所の調査も必要であることが明らかになってきたため、未だ調査範囲の全体像の把握に至っていない。加賀藩関係の調査についても、支藩である富山藩、大聖寺藩などの遺構と資料の調査、現存しない遺構についての調査が、未だ不十分である。平成28年度は、御霊屋と墓所について、調査を実施した。加賀藩関係の遺構として、真国寺・長岡御廟の富山藩主前田家墓所(富山)、練馬広徳寺の前田家墓所(東京)、加賀藩家老長氏の菩提寺東嶺寺の霊屋(石川・七尾市)、池上本門寺の前田利家室の層塔(寿福院の供養塔)(東京)などを対象に、建物、墓地の配置関係、整備された年代と現在に至る遍歴などを調査し、写真撮影を行った。比較調査として、徳川将軍家や他の大名家などの霊廟建築や墓所について調査を行った。対象は以下の通り。西藤島観音堂(旧結城秀康霊屋)(福井)、大安禅寺福井藩主墓所(福井)、称名寺観音堂(松平斉善霊屋)(福井)、狭山不動寺旧台徳院霊廟勅額門・丁子門及び御成門(埼玉)。また、御霊屋に関する資料調査として、富山県立図書館において長岡御廟、真国寺・富山藩前田家墓所に関する情報収集、大阪くらしの今昔館において徳川家御大工中井家に関する情報収集などを行った。2016年度日本建築学会大会(九州)において、研究発表を行った。発表テーマは「旧天徳院御霊堂(佐奇神社拝殿)の復原考察」、建物の当初復復原とその後の変遷についての研究成果を報告し、質疑応答、意見交換などを行った。

加賀藩関係の御霊屋・墓所について、昨年度の京都・芳春院に加え、富山藩主前田家墓所、練馬広徳寺の前田家墓所の調査を行い、加賀藩家老の霊屋についても東嶺寺の霊屋の調査を行うことで、最終年度に行う分析の対象となる遺構が広い範囲に現存することが明らかになった。また、比較分析の対象となる各地の霊廟建築については、福井藩主の霊屋三棟が仏堂などに移築再利用されている状況を確認し、これまで調査した調査した旧天徳院霊屋、旧自証院霊屋も含め、近代以降の霊屋の移築状況についても、共通する歴史的背景が明らかになってきている。徳川家の霊廟関連遺構については狭山不動寺に移築された台徳院関連遺構の調査を行い、また徳川家墓所の資料調査を進めているものの、遺構の調査はより一層進める必要がある。現存しない遺構に関する資料調査については不十分であり、金沢城下の寺院、神社などに限って、調査分析を進めていく必要があると思われる。本研究は、加賀藩に関係する霊廟建築(御霊屋)を対象として、現存遺構の実測調査と図面史料による復原的研究と、御霊屋に関する文献の解読、分析、加賀藩墓所との関係や、徳川家の東照宮関係の霊廟建築との比較を通じて、加賀藩における霊廟建築の建築的特徴と歴史的な位置づけを明らかにすることを目的としている。平成29年度も引き続き、御霊屋と墓所について、調査を実施した。加賀藩関係の遺構として、妙成寺書院(寿福院霊屋)(石川・羽咋)、勝興寺御霊屋(富山・伏木)、尾崎神社(石川・金沢)などを対象に、建物、墓地の配置関係、整備された年代と現在に至る遍歴などを調査し、写真撮影を行った。比較調査として、徳川将軍家や他の大名家などの霊廟建築や墓所について調査を行った。対象は以下の通り。御香宮神社東照宮(京都)、名古屋東照宮(愛知)、日光東照宮・輪王寺大猷院(栃木)、上野東照宮(東京)、日吉東照宮(滋賀)、吉祥寺大名家墓所(東京)、根津神社(東京)。また、御霊屋に関する資料調査として、石川県立図書館において妙成寺境内に関する史料収集、竹中大工道具館において建築儀式と大工道具に関する情報収集などを行った。2017年度日本建築学会大会(中国)において、研究発表を行った。発表テーマは「大乗寺御霊堂について」、金沢市・大乗寺にある加賀藩家老・本多家の御霊屋について、建築年代の考察と建築の特徴に関する研究成果を報告し、質疑応答、意見交換などを行った。三年間の研究成果として、加賀藩に関係する霊廟建築の現状を記録し、大名家墓所と霊廟の関係や徳川将軍家、他大名家の遺構との比較分析を通じて、調査対象の建築的特徴および歴史的な位置づけを明らかにした。加賀藩に関係する御霊屋を対象として、遺構の調査を行って図面を作成し、関連資料の収集、分析と合せて、建築年代や建築経緯、建築の特徴について明らかにした。一般的には18世紀初頭を境に御霊屋の建設は下火になるとされているが、加賀藩ではその後も建設が続けられたことから、数多くの御霊屋が現在まで残った。その平面形式や規模は多様であるが、ごく初期を除いて位牌堂の形式をとった。主要な建物から回廊で結ばれ、内部で礼拝するための施設であり、外観意匠は乏しい。内部装飾は障壁画や天井画が中心で、旧天徳院御霊堂は彫刻が充実しているが、全体的に控えめな装飾にとどまっている。当初の目的は霊廟建築のみを対象としていたが、他藩の霊廟建築との比較や大名家墓所の研究などを参考にすることにより、加賀藩の位牌堂としての霊廟建築の特殊性の分析や、霊廟と墓所との関係についても調査が必要なことが明らかになってきた。そこで、東照宮など徳川家関係の霊廟のみならず、他藩の大名の霊廟建築とその墓所について、調査と比較分析をより進めていく必要がある。そこで今後は、1)おもに金沢市以外の加賀藩関係の霊廟建築・墓所の詳細調査、2)東照宮など徳川家関係の霊廟建築・墓所の調査、
13C二酸化炭素投与による植物細胞壁リグニンの化学構造および形成過程の解析

本研究課題では植物細胞壁リグニンの化学構造および形成過程の解析を目的とする本研究では、構造解析における感度および測定手法の拡張を目的とし、13Cを高濃度に含有する植物試料の育成および得られた試料の分析を目的とした。密閉型グロースチャンバーの新規設計ならびに運用ノウハウを確立し、長期の環境制御育成を実施した。得られた試料を各種分析手法に供したところ、高濃度に13Cを含み、超高感度分析が実現できた。リグニン化学構造解析の歴史は長いが、未だ決着を見ない。本研究では、近年その分解能および検出感度の進展著しいNMR分光法ならびに質量分析法を用いてリグニンに関する情報を最大限に引き出すため、13C標識法を用いる。これまでの報告で分析を困難にしていた標識率不足や12C化合物と13C化合物との混在問題を解決するため、13C二酸化炭素の長期投与による新生木部の全13C化を行う。各種の最新分析技術を駆使してリグニン化学構造ならびにその形成過程に迫る。初年度ではまず、特殊な環境制御下で植物試料を育成するため、密閉型のグロースチャンバーの設計を行った。さらに育成予定であるイチョウ苗木について、通常の育成環境(露地)における育成を行い、各種分析に供した。得られた結果について、各種学会、学術誌に発表した。1)グロースチャンバーの設計:小型グロースチャンバーの試作によるパーツの選定ならびに専門業者との打ち合わせを繰り返すことで、環境制御型グロースチャンバーの設計を行った。2)イチョウの育成と構造解析:イチョウ苗木を1年間育成し、得られたイチョウ試料について以下の分析を行った。天然での13C量を確認するため、δ13C測定を行った。高速液体クロマトグラフィー測定およびガスクロマトグラフィー/マススペクトロメトリー測定により抽出成分の同定と定量を行った。チオアシドリシス分析によりリグニン化学構造に関する基本的な情報を得た。固体NMR分析に供して各種ピークの帰属を行った。誘導体化を経て液体NMR分析に供し、詳細な二次元NMR解析を行った。27年度ではグロースチャンバーの設計・作製、イチョウ試料の13CO環境育成、および各種構造解析を計画していた。計画の基礎となる13CO2について、設計・納期の長期化により、初年度にグロースチャンバー作製と13CO2育成を同時に遂行することが困難となった。そのため計画を一部変更し、初年度はCO2、13CO2の確保ならびにグロースチャンバーの設計、天然試料の各種構造解析を行った。分析手法の確立、グロースチャンバーの設計などは順調に進展しており、次年度以降で十分に挽回できるため、おおむね順調に進展しているものと判断した。第二年度では、初年度に設計を完了した密閉型グロースチャンバーを作成し、実際に使用してイチョウ苗木を育成した。今年度は通常の二酸化炭素を用いて育成条件の検討ならびにコントロール試料を得ることを目的として実験を行った。気温・湿度の調整、CO2およびO2濃度の変化、個体差の考慮など、様々なパラメータについて検討を行った。結果より、制御環境下において十分に生長したイチョウ試料を得ることができた。得られたイチョウ試料を用いてNMR分光法および質量分析法に供する各種の試料調製メソッドを確立した。前年度に得られた露地育成したイチョウについての結果と比較するため、チオアシドリシス分析によりリグニン化学構造に関する基本的な情報を得た。結果より、当該育成法によって得られたイチョウ木部細胞壁が天然状態で育成されたものとほぼ同じ構造を有することを確認できた。13CO2を用いた育成については当初計画よりも1年間の遅れが生じているものの、通常CO2を用いて育成条件を十分に検討できていること、および露地育成および通常CO2育成試料を用いた各種分析手順について確立できたことから、当初計画内容は最終年度内に十分に完了できるため、概ね計画通りに進展しているものと判断した。最終年度では、前年度までに確立された密閉型グロースチャンバーを用いた樹木育成手法に13CO2を用いて実験を行った。結果より、得られたイチョウ試料を用いて各種分析用試料を調製し、分析に供した。具体的には、まず各種光学顕微鏡を用いた組織観察を行い、樹木成長状態を観察した。

結果に基づいて当年度成長部分に相当する木部を外側と内側に分けつつ分取し、それぞれの試料についてチオアシドリシス分析により基礎的なリグニン化学構造に関する分析ならびに質量分析により同位体比の調査を行った。詳細な同位体比分析の結果、高濃度に13Cを有する細胞壁が形成されていることが明らかとなった。得られた試料に各種微細化処理を施した後、固体13C CP/MAS NMRおよび液体NMR分析を行った。結果より超高感度での13Cシグナルを検出した。複雑な多次元NMRスペクトルの解析結果より、リグニン化学構造に関する詳細な知見が得られた。今後、得られた成果について学会発表・国際誌へ投稿予定である。本研究課題では植物細胞壁リグニンの化学構造および形成過程の解析を目的とする本研究では、構造解析における感度および測定手法の拡張を目的とし、13Cを高濃度に含有する植物試料の育成および得られた試料の分析を目的とした。密閉型グロースチャンバーの新規設計ならびに運用ノウハウを確立し、長期の環境制御育成を実施した。得られた試料を各種分析手法に供したところ、高濃度に13Cを含み、超高感度分析が実現できた。新規設計したグロースチャンバーを用いてイチョウの育成を進める。初年度に確立された各種分析手法を適用し、リグニン化学構造ならびにその形成過程を明らかにする。育成実績のある環境条件の下、既に準備済みの13CO2を用いてイチョウの育成を行う。これまでに確立された各種分析手法を用いてリグニン化学構造ならびにその形成過程を明らかにする。木質科学