hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ラット受動喫煙モデルにおける腰椎椎間板の変性メカニズムの解析

喫煙下および非喫煙下で2群ともラット各10匹使用して8週飼育し、さらにその期間中にプロスタグランジンE1誘導体製剤(商品名オパルモン)300μl/kgを5ccの滅菌水に溶解し、ゾンデにて胃内に経口投与させたものを喫煙投与群(S8群)、そのコントロールとして8週間喫煙を行わず、同様な方法でプロスタグランジンを投与し飼育したものを非喫煙投与群(NS8群)とする。尾椎を除く胸椎、腰椎を摘出し組織学的評価、mRNAの定量解析を行う。また、BCA Protein Assayにて反応後、プレートリーダーを用いて吸光度測定を行って検量線を作成しタンパク質抽出と定量を行う。以上の結果の各群の群間比較を行う。ラットに受動喫煙を行わせプロスタグランジンを投与することにより椎間板変性の進行を抑制させることが可能か検証する。平成25年度の実験に使用予定していた自動喫煙装置の修理、予定していた動物の入手にも時間がかかり、平成25年度内に遂行予定の実験に遅延が生じ年度内の研究の完了ができなくなった。現在、タンパク質抽出及びプロテオーム解析を行う時点まで進行しているため次年度繰り越し請求としたい。平成25年の研究を引き続き、DNA断片化の組織化学検出、免疫組織化学の研究および成果を論文にまとめ、学会にて発表を行うために必要である。
スチレンの生体内運命

1.スチレンの一定量(0.1,0.175,0.25ml)を腹腔内投与したところ、投与量の約10ー20%が呼気から排泄された。スチレンを多量(0.175および0.25ml)投与したとき,呼気中スチレン濃度が20ppm以上では初期の排泄速度が遅延する傾向にあり,呼気中スチレン濃度が20ppm以下のところでは1次反応速度式にしたがって一定の速度(半減期約4時間)で排泄されることを認めた。2.ラットにスチレンの0.1,0.125,0.175,0.25mlを腹腔内投与し、3種の尿中代謝物(フェニルグリオキシル酸(PGA),マンデル酸(MA),馬尿酸(HA))を測定したところ,投与後PGAのピ-クは7ー10時間,MAは85ー10.5時間で投与量が多くなるに従ってピ-クは遅れた。しかしHAはほぼ8時間となった。減衰は一次反応式に従い,その半減期はPGA約7時間,MA約9時間,HA約20時間であった。また排泄比はPGA:MA:HA=5:1:3となった。さらに投与量に対する総代謝物量は60ー70%で投与量が多くなるに従ってその割合は減少した。ピ-ク時間のずれおよび投与量に対する総代謝物量の変化からスチレン投与量が多量の場合は飽和状態になっていると推定された。3.ラットにスチレンを投与した場合,未反応のままスチレンは呼気から排泄される。さらに肝臓で代謝されてPGA,MA,HAとして尿から排泄される。それは投与されたスチレン量に対し約80%であった。有機溶剤の一種であるスチレンの生体内運命を明らかにするため、ラットを用いてスチレンの呼気からの排泄実験を行なった。実験動物はWistar系雄性ラット(体重約350g)を用いた。スチレン投与はスチレンの0.1,0.175,0.25mlを腹腔内へ投与した。呼気中スチレン濃度はスチレンを投与したラットをガラス製の固定器に入れ、頸のあたりへ空気ボンベから毎分200mlの空気を送り、鼻先から排出した。呼気中のスチレンは排出口より採取し、ガスクロマトグラフィ-で測定した。求めた呼気中の濃度と投与後の時間の関係を最小二乗法により指数関数にあてはめ、その式を用いて、呼気からのスチレンの総排泄量、および排泄後半の半減期および排泄量の算出を試みた。その結果、0.1,0.175,0.25ml投与群のスチレンの呼気中濃度はいずれの投与群においても投与直後が量も高く、その後減少した。その値は投与量に応じた。これらの減衰は指数関数的に減少していると考え、まず、指数関数にあてはめた。この式を用いて全排泄量を計算し、全例におといて投与量のほぼ10-20%が呼気から排泄されていることを認めた。さらに0.25ml群について検討してみると、呼気中濃度が20ppm付近から減少の程度が速くなっていることがわかり、20ppm(投与後約900分)付近で前半と後半について別々の指数関数にあきはめたところ、前半の半減期は後半のそれより約2倍であった。他の群についても20ppm以下のみについてさらに指数関数にあてはめたところ、各群とも0.25ml群と同じ減少速度を示した。スチレン投与後呼気からの後半部分の半減期はほぼ4時間となった。

この部分の排泄量の割合は投与量によって異なるが、絶対排泄量を計算したところ0.007-0.008mlとなり、生体内スチレンがある量になったときからの排泄は投与量にかかわらず一定になることを認めた。本年度は昨年と同様の手法を用いて,ラットの腹腔内に投与とれた一定量のスチレンの呼気からの排泄相式および排泄割合について詳細に得られた実験結果を検討したところ興味ある結果を得た。スチレンの投与量がラット一匹あたり0.1mgのときの投与量に対する総排泄割合は10%であった。ところが0.125,0.2,0.5mgと投与量を増していくと投与量に対し排泄割合は10%より低い値を得た。これらの結果をトキシコカイネティックスの手法を用いて,繁用されている残査法により最終排泄様式を算出した。呼気中スチレン濃度が10ppmになった後は1つの指数関数で示され,直線的に減少し,その半減期は約120分であった。これはラットに0.1mgのスチレンを腹腔内投与したとき,投与直後の呼気中スチレン濃度10ppmに相当する。従ってこの場合はスチレンの投与量に対する呼気からの排泄量は約10%であった。ところが0.125,0.2,0.5mg投与したときのスチレンの呼気からの排泄は,先の残査法では一つの指数関数として表わされなかった。しかしながらこの場合も呼気中スチレン濃度が10ppm付近に低下して以降は一つの指数関数で示されたが,10ppmに低下するまでの減衰を単純な指数関数で示すことは出来なかった。それは,呼気中スチレンの初期濃度は投与量に比例せず,また呼気への排泄速度は遅れ,また呼期からの排泄割合は0.1mgのときより小さくなった。この結果0.1mgより多量投与したときのスチレンの呼気からの排泄様式を指数関数の和で示すことは不可能で,これはミカエリスメンテンの法則に基づくものではないかと考え,ただ今検討中である。さらに一定量のスチレンを投与したときの投与量に対する尿からの排泄割合を尿中代謝物を測定することによって明らかにすることを試みている。今年度は投与されたスチレンの尿から排泄される各代謝物の比および投与量に対する全代謝物の割合を明らかにしようと試みた。Wistar系雄性ラット(350ー450g)を4群に分け、1群5ー10匹とし,各群についてスチレンの0.1,0.125,0.175,0.2mlを腹腔内に投与した。投与前,投与後72時間まで適時に採尿した。採尿時には尿量,尿比重を測定し,これらの尿中代謝物であるフェニルグリオキシル酸(PGA),マンデル酸(MA),馬尿酸(HA)を高速液体クロマトグラフィ-(HPLC)にて同時測定した。さらにスチレン投与後の各尿中代謝物濃度と時間の関係から最小二乗法により指数関数にあてはめ、その式を用いて尿からのスチレンの各代謝物の排泄比総排泄量を求めた。さらに尿中代謝物の投与後のピ-クに達する時間および排泄の半減期の算出を試みた。その結果,投与後PGAのピ-クは7ー10時間、MAは8.5ー10.5時間で投与量が多くなるに従ってピ-クは遅れた。しかしHAはほぼ8時間となった。減衰は一次反応式に従い,その半減期はPGA約7時間、MA約9時間、HA約20時間であった。また排泄割合はPGA:MA:HA=5:1:3となり投与量に対する総代謝物量は60ー70%で,投与量が多くなるに従ってその割合は減少した。ピ-ク時間のずれおよび投与量に対する総代謝物量の変化からスチレン投与量が多量の場合は飽和状態になっていると推定された。また最終代謝物PGAは投与量にほぼ比例して増加したが、中間代謝物のMAは一定の傾向が認められなかった。従って尿中代謝物を用いて生体内スチレン量を推定する場合,生体内に存在するスチレン量にもよるがMAによるよりもPGAによる方が望ましいと考える。
遺伝的腫瘍における器官分化の可変性に関する研究

今までに遺伝的腫瘍を形成するタバコF1植物(Nicotiana glauca x N.langsdorffii)を用い、in vitroで腫瘍化と腫瘍組織からの細分化を安易に変換できる実験系を開発し、その系を用いてN.glaucaに存在し、Agrobacterium rhizogenesのrol遺伝子(Rirol)と相同なNgrol遺伝子が、Rirol遺伝子と同様な発現調整機能を保持していることを示した。また、毛状根形成試験において、Ngrol遺伝子群はRirol遺伝子のような毛状根形成機能を持たず、その原因がNgrolB遺伝子にあることを明らかにした。しかし、NgORF13はRiORF13と同様にRirolB遺伝子によって誘導された毛状根形成を促進する効果を示し、35SプロモーターによってNgORF13を強制発現させたトランスジェニック植物の葉や葉と相同な器官である花を構成する器官すべてが、縦方向に短くなる形態異常を示すこと見出した。本研究では、NgORF14にも弱いながらRirolBによる毛状根誘導を促進する作用があること、NgrolCは毛状根形成には顕著な働きを示さないが、35S-NgrolCを強制発現させた遺伝子導入植物が背丈が低く、節間が短く、細長く、皺が多い葉をつけ、また、不稔であるという35S-RirolCの遺伝子導入植物で見られる特徴的形状を示した。NgrolBは途中でストップコドンが入りRirolBに比べ48アミノ酸だけ短くなっているが、そのストップコドンをRirolBの対応するアミノ酸に戻すと毛状根形成機能を回復した。このことからは48アミノ酸が毛状根形成に重要であり、また、N末端側は48アミノ酸が付加されれば機能し得る配列を維持していることがわかる。本研究でNgrolB以外のNgrol遺伝子群が機能を持つことが明らかになったが、遺伝的腫瘍との関係はこれからの問題である。
細胞によるRNAポリメラーゼⅡ転写産物のソーティング機構

hnRNPCの4量体の発現低下した細胞中では、U snRNA輸送因子が結合してしまったような異常mRNAの核外輸送が停止されることが分かっている。このようなmRNA複合体の異常を感知して発現を止める新規核内mRNA監視機構を明らかにする。4量体の活性と拮抗するPHAXに着目して解析したところ、U snRNAの核外輸送因子というかなり特殊な機能を持つと思われていたPHAXの発現低下が、ゲノムの不安定化を引き起こすことが明らかになった。この原因として、DNA損傷応答に重要なヒストンH2AXの発現が低下していることが分かり、PHAXのDNA損傷応答における重要性が明らかになった。1.hnRNPCの4量体がどのようにして200-300塩基長を認識できるのかを構造生物学的手法で明らかにする(EMBL、GrenobleのStephen Cusack博士との共同研究)。hnRNPCのホモ4量体を大腸菌で精製するが、結晶化に必要な発現量を得る条件を検討している。2.4量体は核内でRNAから解離して輸送因子などと置き換わると考えられるので、その解離・置換のダイナミックなメカニズムを明らかにする。HeLa細胞核抽出液中に、4量体をRNAから解離させる活性が存在することが分かった。この活性はATPに依存していた。しかし、HeLa細胞核抽出液中からUAP56を抗体を用いて除去しても活性は変わらなかったことから、この活性の正体の第一候補であったUAP56の可能性は消えた。3.4量体をノックダウンした細胞中では、U snRNA輸送因子がmRNAに結合してしまうという異常な事態が起こり、このような異常mRNAの核外輸送が停止されることが分かっている。この新規核内mRNA監視機構を明らかにするために、コントロールKD HeLa細胞、hnRNP C KD細胞、hnRNP CとPHAXの2重KD細胞の3種類の細胞からRNAを抽出し、RNAの大規模シークエンシングを行った。hnRNP CKD細胞で発現上昇し2重KD細胞で正常に戻る遺伝子群に特に着目し、それらをqRT-PCRで確認する作業に入っている。引き続き、結晶化に必要な発現量を得る条件を検討している。HeLa細胞核抽出液中に、4量体をRNAから解離させるATP依存的な活性が存在することが分かったが、この活性の正体はUAP56ではなかったので、引き続き別のヘリカーゼの可能性を調べている。hnRNP CKD細胞で発現上昇し2重KD細胞で正常に戻る遺伝子群として、M期に活性化する因子群が浮かび上がってきた。これにより、細胞が疑似M期になることによって異常mRNAの核外輸送を停止させているというモデルが考えられる。1.hnRNPCの4量体がどのようにして200-300塩基長を認識できるのかを構造生物学的手法で明らかにする。hnRNP CのどのドメインがRNAの長さを認識しているのかの情報がタンパク質の結晶化を高効率化するためには重要である。hnRNPCには、ロイシンジッパー+塩基性ドメインとRBDという二つの既知のRNA結合ドメインが存在する。今年度には、ロイシンジッパー+塩基性ドメインがRNAの長さを認識し、U snRNA輸送因子であるPHAXをRNAから解離させるために重要であることが明らかになった。HeLa細胞核抽出液中に、4量体をRNAから解離させるATP加水分解依存的な活性が存在することが分かっている。責任因子の生化学的精製・同定のためには試験管内の系を高効率化することが必須である。今年度は様々な系を試したが、十分な高効率化を実現するには至っていない。昨年度のRNAseq解析で、この現象の関連因子としてM期に活性化する因子群が浮かび上がったことにより、細胞が疑似M期になって異常mRNAの核外輸送を停止させているというモデルが考えられた。hnRNP CKD細胞をCDK1阻害剤で処理するとmRNA輸送の遅延が解消されたことから、上のモデルの可能性が高まった。

2番のアプローチがもたついているものの、1番と3番については大きく進展した。全体としてはかなり進展したと考える。1.hnRNPCの4量体が200-300塩基長を認識する様式を構造生物学的手法で明らかにする。hnRNP CのどのドメインがRNAの長さを認識しているのかの情報がタンパク質の結晶化を高効率化するためには重要である。H28年度には、多量体形成ドメインであるロイシンジッパーとRNA結合ドメインである塩基性ドメインがRNAの長さを認識し、U snRNA輸送因子であるPHAXをRNAから解離させるために最も重要であることが示唆された。一方、よく知られているRNA結合ドメインであるRBDは必須ではないものの上記活性に弱く貢献することが示唆された。また、予備的な結果ではあるが、ロイシンジッパードメインがないと長いRNAは認識できるがPHAXを解離できないことが示唆された。2.4量体の核内での解離・置換のダイナミックなメカニズムを明らかにする。HeLa細胞核抽出液中に、4量体をRNAから解離させるATP加水分解依存的な活性が存在することが分かっている。責任因子の生化学的精製・同定のためには試験管内の系を高効率化することが必須である。H28年度には様々な系を試したが、十分な高効率化を実現するには至っていない。3.4量体をノックダウンした細胞中では、U snRNA輸送因子が結合してしまったような異常mRNAの核外輸送が停止されることが分かっている。このようなmRNA複合体の異常を感知して発現を止める新規核内mRNA監視機構を明らかにする。H28年度はhnRNP Cの活性と拮抗するPHAXのKDの表現型を中心に解析した。予備的な結果によると、U snRNAの核外輸送因子というかなり特殊な機能を持つと思われていたPHAXの発現低下が、グローバルな転写の低下やゲノムの不安定化を引き起こすことが示唆され、PHAX側からのアプローチの重要性が明らかになった。2番のアプローチがもたついているものの、1番と3番についてはかなり進展した。全体としては期待通り進展したと考える。hnRNPCはRNA結合を担うRRMとBASICの2つのドメインと、多量体形成に必要なZIPPERやACIDICドメインを持つ。H29年度には、hnRNP Cの変異体解析により、RNA分類にはBASICドメインとZIPPERドメインが必要であることがわかった。BASICドメインは阻害活性におけるhnRNP CのRNA結合に大きく寄与し、ZIPPERドメインはRNA結合活性を強化する。また、ZIPPERドメインはRNAの長さの分類に寄与することが示唆された。
外胚葉形成異常症の遺伝子解析及び成長因子による皮膚付属器誘導の実験的研究

外胚葉形成異常症は神経、皮膚、歯芽に代表される外胚葉由来の臓器の発生過程における異常であり、このうち最も頻度の高いものが伴性劣性無汗性外胚葉形成異常症(anhidrotic ectodermal dysplasia,EDA)である。1996年、連鎖解析、ポジショナルクローニングにより本疾患の遺伝子が同定され、我々も本邦のEDA患者において新規の変異を検出し遺伝子診断にも成功し報告した(Yotsumoto S et al.,J Invest Dermatol 111:1246-1247,1998)。これによって日本国内の諸施設から遺伝子変異同定依頼の為に患者の検体が我々のところに集まってきている。しかし本遺伝子は未だ断片しか解っていなかった為に変異の同定に苦慮している。また近年常染色体優性のEDAについても原因遺伝子(DL)が報告された。我々はEDAおよびEDAの亜型と思われる患者を数例フォローしておりこれらの遺伝子を解析中である。平成12年度は次のような手順で解析を行った。1)当院皮膚科でフォローされている患者とその家族(3家系)、他施設より依頼されている患者3人、類縁疾患と思われる患者2人、今後依頼される予定の患者および正常人コントロールを対象とした。2)EDA遺伝子の各exonおよびintron-exon境界部に特異的primerでPCRを行った。3)PCR産物をdirect sequenceした。現在のところ、新たな変異の同定には至っていないが、今後さらにDL遺伝子についても解析する予定である。
重イオン衝突物理に関する基礎問題の研究

【符号問題】符号問題のある模型として、複素ランジュバン方程式を用いる解析をフェルミオン模型に対して継続した。論文に一度まとめたが、解析に不十分なところがあり、数値解析を継続していいるところである。また、符号問題に関連する重要な課題として、格子上の実時間シミュレーションを目指した基礎研究を菊川氏と大学院生と共同で開始し、まず、格子QCDに対する実時間形式の有限温度経路積分の表式を書き下した。さらに、自由場の場合には、得られた格子作用が物理的に妥当な振舞いをすることを確認した。実時間シミュレーションが可能になれば、この形式を用いて輸送係数の評価に貢献するものと考えられる。2018年8月には、符号問題に対する力学変数複素化の手法について、大学院生向けの夏の学校で講義を行った。【QGPのハドロン化に伴う光子生成機構の評価】高エネルギー重イオン衝突において、光子生成は、強い相互作用を行わないために、衝突初期の情報を担う観測量として注目されてきた。しかしながら、近年では、QGP相およびハドロン相からの光子生成の総合的な理解が、有意な情報を引き出すために不可欠であるという認識がある。われわれは、QGPのハドロン化過程における光子生成という、これまで見落とされていた過程に注目して、光子生成への寄与を研究している。ハドロン化過程に伴う光子の分布・収量とこれまでの観測結果との比較を行い、物理学会において発表した。現在、論文投稿にむけて準備中である。【高エネルギーハドロン反応】高エネルギーハドロン反応で重要になる、いわゆるsmall-xハドロン構造の研究について、宇宙線に関する国際会議(名古屋大学)、および日米物理学会原子核部門合同学会において、招待講演を行い、分野の現状を紹介した。符号問題のある作用に対して、変数複素化の方法の数値シミュレーションをQCDに対して行う計画であった。しかし、複素ランジュバン方程式を簡単なフェルミオン模型に適用するという準備研究の段階で、かねてよりの相転移領域における手法の問題に対して、複素化した上での平均再重み付けの方法の解析に時間が予想以上に検討時間を要したため。準備研究の結果をまとめなおして、公表できるようにしたい。これまでは、有限化学ポテンシャルの導入に伴う、熱平衡系の統計平均に現れる符号問題を中心に研究を行ってきた。現在では、同時に、符号問題を伴う実時間シミュレーションへの応用可能性の研究が、プロジェクトの重大種目の一つになってきた。意欲的に、並行して取組みたい。【符号問題】0および1次元のフェルミオン模型(Thirring model)について、粒子密度の化学ポテンシャル依存性を複素ランジュバン方程式(CLE)の方法を用いて評価し、解析解と比較することによって正当性を検討した。その結果、密度が変化する遷移領域では、ランジュバン方程式のドリフト項の特異点がサンプルされるために、CLEでは正しい結果が得られないことがわかった。特異点のサンプリングを回避するために、変形されたモデルを参照して統計サンプルを生成する方法と、遷移領域を外れた化学ポテンシャルの値で生成したアンサンブルを用いた再荷重の方法という二通りの方法を試したところ、後者の再荷重の方法が比較的有効であることが明らからになった。この方法の汎用的な優位性について、ランダム行列模型をはじめ他の複数のフェルミオン模型に用いて、今後検討する。【高エネルギー原子核衝突の非平衡初期過程】事象の初期過程と平衡化機構の理解を目的に、まず、1次元膨張するスカラー場の理論に対して、2PI形式の量子場の運動方程式を解析を準備した。膨張系特有の空間2+1次元系としての座標系のとり方や離散化、数値アルゴリズムの工夫を行い、数値精度を確認するための予備計算を行った。また、初期に強い古典場が存在する非可換ゲージ場の膨張系について、大学院生と協力して、ボソン・フェルミオンのシュヴィンガー機構による粒子生成と局所平衡化への漸近の可能性を平均場理論を展開して解析した。当該年度は、符号問題に関連する0+1次元フェルミオン模型の数値計算に重点を置いて、複素ランジュバン方程式の方法を実行し、成果を得ることができた。また、カイラルランダム行列に対する適用も順調に進んでいる。一方で、QCDの非平衡場の理論の研究については、膨張系を扱うための枠組み上の定式化を進めたものの、時間的な制約のために本格的な数値計算を次年度に延期することとなった。【符号問題】有限密度条件での統計平均に符号問題の現れる可解模型として、引き続き0+1次元のThirring模型を対象にして、複素ランジュバン方程式の方法に再重みづけ法を組み合わせるアプローチを詳細に調べ、その有効性と制限について論文にまとめた。【高エネルギー原子核衝突における臨界揺らぎ観測】有限温度密度のQCD相図上に存在が期待される臨界点の実験的同定を目的とする測定が系統的に実施されている。その際には、非平衡時間発展する衝突事象の観測量の中に臨界揺らぎの有無を確定することが肝要となる。QCDの臨界点の秩序変数であるバリオン数密度が保存量であることに注目し、臨界点に伴う揺らぎの増大がバリオン感受率のラピディティ区間依存性の非単調性として現れることを指摘する論文を発表した。【ハドロン化に伴う光子生成】高エネルギー原子核衝突において、クォーク・グルーオンプラズマ生成が達成されたと判断する根拠の一つに、高温熱源を起源とする生成光子スペクトル成分が認められることが挙げられる。

一方で、この光子スペクトルが大きな集団流を持つことから、むしろ集団流の十分に発達した衝突事象後期からの生成が主要であることが示唆されて、現在は混乱した状況にある。我々は、クォーク自由度がハドロンに転化する過程において、光子生成が伴うことが自然であることを指摘した上で、クォーク再結合模型を用いて、強い動径方向集団流と楕円流を持つクォーク物質のハドロン化に伴う光生成が、上記の光子スペクトルの特徴を持っていることを示した。今年度には高エネルギー原子核衝突の初期過程の非平衡シミュレーションを実施する予定であったが、衝突後期の観測量に関連する共同研究に研究時間をむしろ重点的に割いたため、予定の課題に遅れが生じている。【符号問題】符号問題のある模型として、複素ランジュバン方程式を用いる解析をフェルミオン模型に対して継続した。論文に一度まとめたが、解析に不十分なところがあり、数値解析を継続していいるところである。また、符号問題に関連する重要な課題として、格子上の実時間シミュレーションを目指した基礎研究を菊川氏と大学院生と共同で開始し、まず、格子QCDに対する実時間形式の有限温度経路積分の表式を書き下した。さらに、自由場の場合には、得られた格子作用が物理的に妥当な振舞いをすることを確認した。実時間シミュレーションが可能になれば、この形式を用いて輸送係数の評価に貢献するものと考えられる。2018年8月には、符号問題に対する力学変数複素化の手法について、大学院生向けの夏の学校で講義を行った。【QGPのハドロン化に伴う光子生成機構の評価】高エネルギー重イオン衝突において、光子生成は、強い相互作用を行わないために、衝突初期の情報を担う観測量として注目されてきた。しかしながら、近年では、QGP相およびハドロン相からの光子生成の総合的な理解が、有意な情報を引き出すために不可欠であるという認識がある。われわれは、QGPのハドロン化過程における光子生成という、これまで見落とされていた過程に注目して、光子生成への寄与を研究している。ハドロン化過程に伴う光子の分布・収量とこれまでの観測結果との比較を行い、物理学会において発表した。現在、論文投稿にむけて準備中である。【高エネルギーハドロン反応】高エネルギーハドロン反応で重要になる、いわゆるsmall-xハドロン構造の研究について、宇宙線に関する国際会議(名古屋大学)、および日米物理学会原子核部門合同学会において、招待講演を行い、分野の現状を紹介した。符号問題のある作用に対して、変数複素化の方法の数値シミュレーションをQCDに対して行う計画であった。しかし、複素ランジュバン方程式を簡単なフェルミオン模型に適用するという準備研究の段階で、かねてよりの相転移領域における手法の問題に対して、複素化した上での平均再重み付けの方法の解析に時間が予想以上に検討時間を要したため。準備研究の結果をまとめなおして、公表できるようにしたい。【符号問題】有限温度密度のカイラル行列模型に対して複素ランジュバン方程式の方法を適用して検証する。そして、結果を論文にまとめる。
不斉空間の構築

「不斉空間の構築」は、不斉合成の要である。本研究班は、有効な不斉空間構築法と、それを活用した新しい不斉合成法の開拓、およびその触媒的不斉合成反応への展開を精力的に行い、以下の成果をあげた。1)キレート構造ととらせることによって効率的に不斉空間を構築しうる多座配位子型キラルリチウムアミドあるいは多座配位子型キラルアミンを設計、合成し、不斉脱プロトン化、不斉アルキル化、不斉プロトン化等を実現し、それらの不斉触媒化にも成功した。2)光学活性α-アミノ酸誘導体を強塩基で処理して生成するエノラートがキラリティーを保持し、アルキル化反応において光学活性の生成物を与える例を見出し、「不斉記憶」という新しい概念を導入すると共に、その機構を明らかにした。3)糖質を有効な不斉空間として有機合成に利用するため、グリコシドを高収率、高立体選択的に得る手法を検討し、2-アミノ糖のαおよびβ選択的グリコシル化、αおよびβ選択的グリコシル化、アシル糖のβ選択的アジド化、遊離のアルコールを用いる2-アミノ糖のαおよびβ選択的グリコシル化、遊離の糖と遊離のアルコールを用いるαおよびβ選択的グリコシル化を見出した。4)キラルなジエーテル誘導体、アミドホスフィン誘導体を有効な不斉空間を構築する不斉配位子として設計、合成し、有機リチウム、有機銅等を反応剤とする触媒的不斉共役付加反応を実現した。5)不斉反応場の本質を実験および理論化学的手法を併用して明確にすることによって新形式の不斉合成反応を開拓することを試み、新しい有機銅化合物、アリル亜鉛錯体を開発し、塩化アリル化合物、シクロプロペン、イミン等の高立体選択的付加反応を初めて実現した。1効率的な不斉空間を構築するキラルリチウムアミドを設計して、環状アキラルケトンの不斉脱プロトン化反応、不斉アルキル化反応、不斉プロトン化反応を実現、前二者の反応については触媒化に成功した。キラルリチウムアミドの溶液構造を^6Liおよび^<15>NNMR、結晶構造をX線結晶構造解析により解明し、実際の反応との相関性を明らかにした。2不斉記憶の概念に基づけば、光学活性なα-アミノ酸誘導体から生成するエノレートもキラリテイーを持てると期待できる。そこでフェニルアラニン誘導体を塩基(LiTMP)処理して生成するエノレートとハロゲン化アルキルとの反応を行ったところ、最高88%eeで不斉アルキル化反応が進行した。3糖質を不斉源として有機合成反応に利用することを考え、糖質誘導体、とくに糖質の1位のアノメリック炭素に由来する二つのジアステレオマーを効率良く合成する手法の開発を目標に研究を行い、種々の高立体選択的グリコシル化反応を見い出すことができた。4反応性に富む有機リチウムを炭素求核剤として組み込み可能な不斉触媒反応系の構築を目指して検討を進めた。その結果、立体化学と反応性の制御を同時に可能とするキラル配位子としてヒドロベンゾインのジメチルエーテルやキラルアミノエーテルが有機リチウムのイミンへの付加反応を制御して、最高90%eeのアミンの不斉合成を達成することがわかった。さらに、触媒回転も可能とすることがわかった。5合理的設計に基づいた不斉反応の開発:有機金属化合物の付加反応を中心課題として取り上げ、立体選択的アリル化反応の開発とその選択性の検討、オレフィンのアリルメタル化反応の立体化学制御、およびカルボニル化合物への有機金属化合物の付加の遷移状態の理論計算を行った。6生体高分子のつくる不斉空間に対して、特異的に結合する新規リガンドを設計するための方法論を開発し、その有効性を示す。また、それらの方法論を利用した応用研究を行う。

1効率的な不斉空間を構築するキラルリチウムアミドを設計して、環状アキラルケトンの不斉アルキル化反応を実現、触媒化に成功した。キラルリチウムアミドの溶液構造を^6Liおよび^<15>NNMRにより観測し、実際の反応との相関性に関する知見を得た。また、新たなタイプの塩基として設計、合成したキラルなリチウム2-アミノアルコキシドが、フェニル酢酸エステルのマイケル付加反応の不斉誘起に有効であることがわかった。2フェニルアラニン誘導体の不斉α-アルキル化反応は、α-位炭素の不斉を唯一の不斉源として6988%eeで進行する。本不斉誘導はmixed aggregateメカニズムによるものではなく、中間体アニオン種自体が持つキラリティーによるものであることがわかった。3糖質を不斉源として有機合成反応に利用することを考え、グリコシドの二つのアノマーを簡便に作り分けることを目的として研究を行った結果、遊離の糖と各種の求核剤から触媒的に効率良くグリコシドを得る手法を開発することができた。4反応性に富む有機金属反応剤を炭素求核剤として組み込み可能な不斉触媒反応系の構築を目指して検討を進めた。その結果、立体化学と反応性の制御を同時に可能とする有機銅の不斉付加をキラルホスフィンアミドを配位子として実現した。また、複数の反応点を有する不飽和イミンの位置選択性の発現要因を分子軌道法計算から明らかにした。さらに、従来合成困難であったキラルアミノエーテル配位子の合成法を開発できた。5アリル亜鉛化合物のオレフィン付へのエナンチオ選択的付加に初めて成功すると同時に、その反応遷移状態を分子軌道法計算によって明らかにした。またフラーレンを置換基として持つ光学活性リン化合物を合成し、これによって不斉合成が行えることを初めて明らかにした。6受容体の立体構造が既知の場合に、薬物結合部位に安定に結合できる構造を既存化合物の三次元データベースから検索する方法Adαm&Eveの開発に成功した。市販試薬のデータベースであるACD-3D (MDL社:約11万化合物)を対象に、HIV proteaseの系に適用してみた。ヒットした構造のうち12個の化合物を入手し活性を測定したところ、5個に既知のノンペプチド阻害剤ハロペリドールよりも強い活性が認められた。1.単配座型キラルリチウムアミドを設計合成し、この結晶構造をX線で、溶液構造を多核NMRで解析し明らかにした。更に、その不斉脱プロトン化反応における高不斉誘起の発現にははリチウムブロミドの存在が不可欠であることが判明し、その会合状態の解析にも成功した.2.α-アミノ酸のα位不斉炭素のみを不斉源とする不斉α-アルキル化を検討している。既にN-メチルアミノ酸誘導体については88%eeでα-アルキル化が進行することを見出しているが、今回除去が容易な窒素置換基(MEM基、ピバロイルオキシメチル基)を持つα-アミノ酸誘導体の不斉α-アルキル化反応(75%ee)の開発に成功した.3.糖質を不斉源として有機合成に利用することを考え、グリコシドを高収率、高立体選択的に得る手法の開発を目的として研究を行い、遊離の糖と遊離のアルコールを用いるα及びβ選択的グリコシル化反応を見出すことができた.4.キラル不斉補助剤を組み込んだ不飽和カルボニル化合物へのフェニルチオールのジアステレオ面選択的付加反応が、金属塩の有無、また種類によって大きく影響を受け、その事実を基盤としてジアステレオ面の任意選択に成功した.
不完全知識下の法的推論の実現方法の研究

本研究の目的は、不完全な知識のもとで柔軟かつ的確な推論を行なうための理論を構築し、法的推論システムを試作してその有効性を実証することである。本研究では次の点を研究した。1.不完全知識の表現方法や、不完全知識による推論の基礎理論を「等価変換による計算」に基づいて定式化した。2.本方法を従来の仮説推論のアプローチと比較し、推論の柔軟性と有効性を確認した。3.従来の仮説推論方法を等価変換による方法で計算する理論を与えた。4.否定の計算を正しく行なう方法を与え、その実装を行なった。
塗布積層有機薄膜太陽電池のための低分子光電変換材料の開発

光変換型可溶性前駆体法を用いて塗布積層可能な有機薄膜太陽電池(OPV)材料の開発を行った.光変換型可溶性前駆体法は光照射による構造変化に伴い溶解度の制御が可能である.これにより,溶液プロセスでの積層素子構造(p-i-n構造)作製が可能となり,各層の役割に応じた材料の使い分けによる光電変換効率(PCE)の向上が期待できる.その素子構造において,これまでに研究されてきた正孔輸送材料の光捕集波長は500 nmまでであり,長波長側の光吸収特性を改善する事が, PCEの向上につながると考えられる.そこで,本研究では長波長側の吸収特性の改善が可能な正孔輸送材料の開発を行った.正孔輸送材料として最適なHOMOレベルを示すアントラセンを基本骨格とし,強い電子受容性ユニットであるピラジノキノキサリンを組み合わせた分子を設計し、合成を行った.合成した分子は分子内電荷移動吸収帯の発現により長波長吸収を効果的に改善するに成功した.また,大気下光電子分光法によるイオン化エネルギー測定および吸収末端から算出したHOMOレベルは-5.3eV, LUMOレベルは-3.8eVであり,フェニルC60酪酸メチルエステル(PCBM)を電子輸送材料とする場合の最適なエネルギーレベルを持つ事を明らかにした.さらに積層型の素子作製を可能にするために光変換型可溶性前駆体の効率的な合成ルートの開発を行った.得られた前駆体の光変換反応をプロトンNMR測定,紫外可視吸収スペクトル測定,赤外分光測定によりモニターすることで,溶液条件および薄膜条件での定量的な構造変化を確認した.これらより,平成26年度研究計画である目的化合物の合成および基礎物性の評価は達成された.今後OPV素子を作製する事によりPCEの向上が期待される.本研究内容は日本化学会第95春季年会において成果発表を行う予定である.本研究課題は平成26年度が最終年度のため、記入しない。本研究課題は平成26年度が最終年度のため、記入しない。
流暢さートーイックスコアに見る流暢さと統語論的複雑さの度合いの関連性

データによると、トイックの得点が英語の堪能さや流暢さを計測する手段を提供してくれることが分かった。流暢さはトイックの得点が上がるにつれて上昇するが、700点までかそれ以上では流暢さの増加率は限定的だ。トイックの高い領域においてのみ流暢さが顕著に向上していることが示されている。流暢さに影響を及ぼす学習者の個性、動機、留学の経験というような厄介な要素もあるが、トイックテストの得点が、学生の口頭や筆記での生産的技量について、信頼できない誤解を招くような情報を提供することが多々あるのは明らかである。平成24年度はビデオ収録の場所の設定し、機器を選定して、被験者とのインタビュー・セッションを行った。当初の予定に沿ってトイック・スコアの400点程度から900点以上の被験者を5段階ほどのレベルのカテゴリに分け、モノローグ、ダイアローグ、朗読セッションの分野のタスクを全ての被験者に実施し、それをビデオカメラに収録した。当該年度はほぼ予定通り52名ほどの被験者の収録を行った。上記の方法で収録されたデータを書き下ろす作業とデータの分析は主に次年度に実施する予定の作業であるが、現在既に3割ほどの転写を実施している。今年度は上記に加え、英語を母語とする6名のインタビューも実施する予定である。この研究の目的はトイックのスコアと流暢さ、ポーズの長さ、沈黙の頻度と長さ、統語上の複雑さ等との関連性があるかどうかを探索することである。具体的には下記の3つを明らかにすることである。(1)流暢さと統語上のスコアとトイックのスコアの関連性の程度を突き止めること(2)特定の談話の任意のスピーチが流暢さと統語上の複雑さとの説得力のある情報を提供できるかを検証すること(3)口頭試験における談話を補完する全体的な流暢さを測る方法を確立すること、である。50名以上のインタビューの実施と3割ほどのデータの分析により、上記課題の(1)と(2)については、ある程度の方向性は見えてきたが、科学的な確証を得るためには、全ての談話データの書き下ろしとデータ分析、英語母語話者のデータとの比較が必要である。これは平成25年度の研究実施計画に明記されている通りである。英語教育上記の繰り返しになるが、当初の予定に沿ってトイック・スコアの400点程度から900点以上の被験者を5段階ほどのレベルのカテゴリに分け、モノローグ、ダイアローグ、朗読セッションの分野のインタビューを実施し、それをビデオカメラに収録した。上記の方法で収録されたデータを書き下ろす作業とデータの分析は主に次年度に実施する予定の作業であるが、現在既に3割ほどの転写を完了している。上記に加え、英語を母語とする6名のインタビューも実施する予定である。当初の予定より研究計画がやや早めに進んでいるので、今後はインタビューデータの転写と分析を集中して行い、国内外の学会での発表に重きを置き研究成果を国内外に広く流布したいと思う。端数が余ってしまったため。次年度の学会参加費に使用する予定である。被験者への謝金が予定より掛からなかったためである。残金は国内外の学会参加費、旅費の補填にあてる予定である。
肝ミクロゾームメタルプロテアーゼの特異的インヒビターの精製と構造解析

ウサギ肝臓約1kgより50μgのMEPが精製できるが、通常、インヒビターは、その標的酵素より量的に多く存在することから、MEPの際に用いた同程度の精製スケールでそのインヒビターも精製可能と考えられた。肝臓の界面活性剤抽出液を精製の出発物質とし、インヒビター活性をMEPの蛍光消光系ペプチド基質、Abz-ARVRRANS-Dnaに対する水解活性の阻害で評価しながら、イオン交換樹脂、色素カラム、ゲルろ過などの手法を組み合せて精製を進めた。実験の最中に東工大の広瀬らにより、MEPがsoluble angiotensin-binding prtoteinと同一であることが報告された。そこで、界面活性剤を用いず、soluble angiotensin-binding proteinの精製に用いられた疎水性クロマトグラフィーを取り入れてMEPの精製を行ったところ、ウサギ肝臓1kgから200μgのMEPが得られた。また、ホモゲナイズした肝臓の各遠心画分のインヒビター活性を調べたところ、核の画分にMEPの阻害活性が存在することが判明した。しかし、この活性は非常に不安定であった。また、MEPのニワトリ卵抗体により、MEPが脳、肺、肝臓の脈管の表皮の細胞膜に局在していることが判明したため、核に局在すると考えられるインヒビターの役割は現在のところまったく不明である。
通貨から視る西アフリカ地域経済の分断と再統合の可能性の検証：２０・２１世紀

19世紀末から現在までの西アフリカの通貨圏の分断と再統合について研究している。再統合については、旧仏領西アフリカの現在の制度の見直しなくして実現は困難であるという確信が強まってきている。また、そのインセンティブもそれほど大きくはないことがわかってきた。これ以外に、10月に大阪大学で開催されたアフリカの通貨に関するワークショップに参加し、次年度に19世紀のセネガルの金融システムの確立とその影響についての研究発表をさせていただけることになった。また、Toyomu MASAKI 'Weights of Money, Credibility and Sphere of the Money Circuit: Observations througha Monetary Evolution in West Africa'(金沢大学経済学経営学系ディスカッションペーパーNo.44)をまとめ、ディスカッションペーパー専用の学術系SNS、Researchgateにアップロードしたところ、約半年余りで71人の研究者にダウンロードしていただいた。マイナーな分野にしては予想以上に多くの方に関心をもっていただいたように思う。何人かの研究者からはコメントもいただけた。同内容のペーパーをジャーナルに投稿したところ、査読にまわったものの、採択にはいたらなかったため、修正再投稿の予定である。11月には、フランスのエキスヴァン・プロバンスにある国立公文書館とマルセーユ公文書館で19世紀末から20世紀初頭にかけての仏領西アフリカの通貨についての史料収集を行い、現在、その史料を読み込んでいるところである。今年度が最終年度であったが、他の科研費の課題研究の方に時間をとられ、こちらには十分な時間をとれなかったため研究期間を1年間延長することとなった。今年度の9月末までは科研費(国際共同研究加速基金)の方に注力する必要があったため。西アフリカ地域は、植民地化によって宗主国が形成した通貨圏で分断されることになった。独立後は、旧英領や旧葡領は独自の通貨を発行したが、旧仏領の大半は植民地時代の通貨制度を概ね維持することを選択した。21世紀に入り、西アフリカ全体で一つの共通通貨を創設する取り組みが始まったが、フランスと通貨協力をしている地域は、それが原因で、第3国との通貨統合が困難な状況にある。申請者は19世紀から21世紀までの仏領西アフリカの通貨と金融制度の変遷を、国際的な金融制度の変化等も踏まえて研究をしているが、本研究では、これまでの研究でカバーできていない1901ー94年期間の(旧)仏領の発券銀行および地域中央銀行の制度・オペレーション・操作勘定等の動きをフランス銀行等の史料に基づいて明らかにすることを目的としている。初年度となる今年度は,セネガルの文書館およびフランスマルセーユの商業会議所・文書館,パリの文書館を訪問して資料収集にあたった。そのための旅費および資料収集に用いるデジタルカメラ,タブレットを購入した。また,10月中旬にサセックス大学で開催されたアフリカ経済史ネットワークで発表した。それにあたり英文校閲費,発表パワーポイント英文校閲費,参加のための旅費に本科研費を充てた。発表論文は発表後に手を加えてディスカッションペーパーとしてまとめた。ディスカッションペーパーにすぎないがElzevier社のSSRNに掲載していただき,doiも取得した。これ以外に研究に必要な書籍やオンライン論文ダウンロードのための費用,消耗品購入のための費用を本科研費から拠出した。後期以降は,夏の調査で収集した資料の読み込みを中心に行った。前年度までの科研費の研究(延長)および分担研究者として受けた科研費研究にエネルギーを向ける必要があった。また,西アフリカの社会経済を明らかにすることを目的に以前から行っていたセネガル発祥の宗教団体に関する研究に対して外部の機関から発表要請があり,口頭発表および英文論文を刊行する必要があった。以上の理由より,当初考えていたほどには本研究を進めることができなかった。申請者は19世紀から21世紀までの仏領西アフリカの通貨と金融制度の変遷を、国際的な金融制度の変化等も踏まえて研究をしているが、本研究では、これまでの研究でカバーできていない1901ー94年期間の(旧)仏領の発券銀行および地域中央銀行の制度・オペレーション・操作勘定等の動きをフランス銀行等の史料に基づいて明らかにするともに、21世紀の動きを調査することを目的としている。今年度後期から海外で実施された別課題の国際共同研究加速基金のプロジェクトの方に注力したため、本課題については資料の読み込み、整理、英文でのドラフト執筆が中心となった。したがって、予算の支出も、それに必要な文具やOA機器の更新、英文校閲等にとどまった。もっとも国際共同研究加速基金の課題は、本課題の前課題を国際共同研究レベルに発展させることを意図したものであり、両課題の内容は重なるところもあることを申し添えたい。なお、前年度に行った調査報告として、日仏歴史学会の会報に新しくなったセネガル公文書館についての情報を掲載いただいた。他の用務が重なり、研究を予定どおり進めることができなかった。

また、そのインセンティブもそれほど大きくはないことがわかってきた。これ以外に、10月に大阪大学で開催されたアフリカの通貨に関するワークショップに参加し、次年度に19世紀のセネガルの金融システムの確立とその影響についての研究発表をさせていただけることになった。また、Toyomu MASAKI 'Weights of Money, Credibility and Sphere of the Money Circuit: Observations througha Monetary Evolution in West Africa'(金沢大学経済学経営学系ディスカッションペーパーNo.44)をまとめ、ディスカッションペーパー専用の学術系SNS、Researchgateにアップロードしたところ、約半年余りで71人の研究者にダウンロードしていただいた。マイナーな分野にしては予想以上に多くの方に関心をもっていただいたように思う。何人かの研究者からはコメントもいただけた。同内容のペーパーをジャーナルに投稿したところ、査読にまわったものの、採択にはいたらなかったため、修正再投稿の予定である。11月には、フランスのエキスヴァン・プロバンスにある国立公文書館とマルセーユ公文書館で19世紀末から20世紀初頭にかけての仏領西アフリカの通貨についての史料収集を行い、現在、その史料を読み込んでいるところである。今年度が最終年度であったが、他の科研費の課題研究の方に時間をとられ、こちらには十分な時間をとれなかったため研究期間を1年間延長することとなった。今年度の9月末までは科研費(国際共同研究加速基金)の方に注力する必要があったため。今年度は,前年度に投稿した論文の書き直し,書籍の執筆の継続,収集した資料の読み込みを行う予定である。平成30年度秋に日本に帰国し、こちらの研究に注力する予定である。まだ十分に読めていない公文書館で入手した史料を読み込み、CFAフランの形成過程を明らかにする予定である。希望するスペックのノートパソコンが今年度中に発売されなかったこと,また,今年度は分担研究あわせて4つの科研費に恵まれ,これに加えて他大学の予算で本研究とは全く異なる内容の西アフリカの研究を行うこととなったため。英文校閲費を多めに計上していたが、英文論文の仕上がりが遅れたため。平成30年度中に英文論文を仕上げる予定である。他の科研費(国際共同研究加速基金)の研究に注力したため、本課題に十分に取り組むことができなかった。来年度には、6月に大阪大学で予定されている研究会で発表することになっている。また、今年度、採択に至らなかったペーパーの再投稿、中断している別論文の投稿に力を入れる予定である。翌年度は,国際共同加速基金の研究を本格的に行う年となりこちらに注力することとなるが,平行して関連書籍の購入,史料の整理のための電子機器,文具等の購入に充てる予定としている。
アジア・アフリカ地域における睡眠文化研究の可能性

研究の目的は、睡眠文化研究という新しい研究分野の可能性を、企画調査を通して探ることにありました。これまで、人の行動としての睡眠は専ら科学研究の領域において、その神経・生理学的メカニズムを明らかにすることを主目的に研究されてきました。一方、文化を扱う文化人類学の領域では、研究対象のほとんどすべてが覚醒時の人間の活動に焦点をあわせたものでした。睡眠行動に纏わる人の文化的事象とその多様性について、たとえば寝具や寝間着、寝る姿勢、眠る場所、眠り方、眠りの儀礼などは民族誌のなかで個別的に注目されることはあっても通文化的比較を可能とするような体系的な研究の対象とはなってきませんでした。このような状況を超えて睡眠文化研究を推進するために研究プロジェクトは、この1年間のあいだに計6回にわたって研究会をおこない、内4回を広島、東京、大阪、京都において公開研究会として開催し、ひろく人類学、地域研究、心理学などさまざまな分野の研究者を集めて体系的な睡眠文化研究の可能性を議論しました。日本文化人類学会(於北海道大学)では「睡眠文化研究の可能性」をテーマに分科会を組織しました。またウイーンで開催されたヨーロッパ日本研究学会において、我が国における睡眠文化研究の現状と展望について口頭発表をおこないました。さらに、これらの議論の一部は多数の著作・論文だけでなく、新聞・雑誌や科研費によるホームページ等でひろく一般に対して公表し、新しい学問分野としての可能性を世に問いました。
腫瘍細胞の進展にともなう非特異免疫の変化に及ぼす運動とストレスの影響

〔目的〕われわれは今までに各種ライフスタイルと生態防御機能との関係について動物実験、高齢者の健康管理、アンケート法による調査などにより多方面の研究を行ってきたが、その中でストレスの少ない適度な自由運動が非特異免疫能を中心とした生態防御機能の向上に大きな役割を果たしていることを見出して来た.そこで積み重ねられたいろいろな手法を用いてこれらのライフスタイルの癌細胞に与える影響を腫瘍の大きさと各種生態防御機能より把握することを試み、次の3種の実験を行った.〔実験〕(1)平成10年度:皮下移植腫瘍(SST-2)の移植に伴う非特異免疫系を中心とする生態防御機能の変化に与えるストレスの影響。(2)平成11年度:皮下移植腫瘍(SST-2)の移植に伴う非特異免疫系を中心とする生態防御機能の変化に与える運動の影響。(3)平成12年度:皮下移植腫瘍(SST-2)の移植に伴う非特異免疫系を中心とする生態防御機能の変化に与える抗酸化作用を持つ補助食品の影響。{結果と考察}ストレス方法としては電気刺激とそれを見ている心理ストレス群の2群を設定した.ストレス負荷により腫瘍は有意に増大したが、腫瘍移植前までストレス負荷し、移植後ストレス負荷を停止した群は両群とも対照群より有意に腫瘍が軽かった.しかもこれらの傾向は好中球機能、NK活性、リンパ球幼若化機能でもそれを裏付ける結果を示した。自由運動は腫瘍が有意に軽かったが、強制運動は対照群と変わらなかった.しかしNK活性は両群とも有意に高かった.補助食品としてはセレンとスピルリナに対する影響を見たが、両群とも対照群に比べ腫瘍の大きさは小さかった.ストレスや運動ほどの大きな差は認められなかったが、腫瘍を移植されたスピルリナ群はリンパ球のサブセットを誘導している可能性を示唆する結果を示した.〔目的〕われわれは今までに各種ライフスタイルと生態防御機能との関係について動物実験、高齢者の健康管理、アンケート法による調査などにより多方面の研究を行ってきたが、その中でストレスの少ない適度な自由運動が非特異免疫能を中心とした生態防御機能の向上に大きな役割を果たしていることを見出して来た.そこで積み重ねられたいろいろな手法を用いてこれらのライフスタイルの癌細胞に与える影響を腫瘍の大きさと各種生態防御機能より把握することを試み、次の3種の実験を行った.〔実験〕(1)平成10年度:皮下移植腫瘍(SST-2)の移植に伴う非特異免疫系を中心とする生態防御機能の変化に与えるストレスの影響。自由運動は腫瘍が有意に軽かったが、強制運動は対照群と変わらなかった.しかしNK活性は両群とも有意に高かった.補助食品としてはセレンとスピルリナに対する影響を見たが、両群とも対照群に比べ腫瘍の大きさは小さかった.ストレスや運動ほどの大きな差は認められなかったが、腫瘍を移植されたスピルリナ群はリンパ球のサブセットを誘導している可能性を示唆する結果を示した.我々は今までに各種ライフスタイルと生体防御機能との関係を動物実験、高齢者の健康管理、アンケート法による調査など多方面の研究により明らかにしてきたが、その中でストレスの少ない適切な運動が非特異免疫能を中心とした生体防御機能の向上に大きな役割をはたしていることを見いだしてきた。今までに循環機能、脂質代謝、肝機能・腎機能に与える影響などを中心とした各種機能をみてきたが、癌とライフスタイルとの関係の研究は今まで行なってこなかった。そこで腫瘍に及ぼすライフスタイルの影響を非特異免疫能を中心とした生体防御機能に対する影響で把握することを試みた。今年度は皮下移植腫瘍(SST)の進展に伴う非特異免疫細胞を中心とする生体防御機能の変化に与えるストレスの影響についての研究を行なった。研究方法は生後8週令の雄性SHRラットを購入し、2週間順化後、腫瘍(SST)接種対照群、接種後物理ストレス負荷と心理ストレス負荷を2週間された3群に加え、物理ストレスと心理的ストレスを2週間負荷された後に腫瘍を接種され、その後ストレス負荷をしないで2週間飼育した2群、さらにストレス負荷も腫瘍も接種しなかった非接種対照群の全部で6群(各12匹)で実験をおこなった。いずれの群も実験4週間後に尾静脈より採血し、全血による好中球活性酸素産性能及び貧食能の測定(NBT法)を行なった後に、ネンブタール麻酔下で全採血を行ない、NKおよびNKT細胞数、CD4及びCD8細胞数の測定(以上フローサイトメトリー法)、NK活性(YAC1およびSST2細胞を標的とした乳酸脱水素定量法)、過酸化脂質およびヴィタミンCの定量、各種生化学分析等の測定を行なった。その結果前接種後ストレス群で著名な腫瘍の増加と生地防御機能の低下を、逆に前ストレス群では顕著な腫瘍の減少と生体防御機能の活性化が認められた。