hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
心房細動および致死性不整脈に対する革新的な腎交感神経アブレーション治療法の確立

腎交感神経に対するカテーテル焼灼術において、アデノシンの腎動脈内持続投与量と血圧上昇反応には用量反応関係があり、新たな治療指標の候補と考えられたが、麻酔深度や焼灼に伴う疼痛などの外部要因による血圧の変動が大きく、新たな検討課題が明らかとなった。また、心房細動・致死性不整脈および治療抵抗性高血圧においては、標準治療の効果が限定的なこともあり、腎交感神経焼灼術の効果が期待される症例も少なくない。心房細動および致死性不整脈(心室頻拍・心室細動)に対するカテーテルアブレーション治療が欧米で開発され、本邦にも普及してきたが、薬物治療を併用しても治療困難な症例が多く存在する。これらの不整脈はともに交感神経活性亢進が病態に大きく関与することから、腎交感神経アブレーション治療が、新たな治療法として期待されている。しかし、除神経達成度を治療中に確認する方法がなく、大きな問題となっている。今回、我々は除神経達成度を治療中に確認できる指標を開発していくことを目的として研究を行った。実験用動物として、ウサギ9羽を用いて、ケタミン・キシラジンによる静脈麻酔の後、右大腿動脈にシースを留置し、カテーテルを用いて薬物投与を行い、血圧上昇反応を測定した。その結果、当該指標と血圧上昇反応との間に用量反応関係があることが明らかとなり、当初の予定どおりに用量反応曲線を作成することができた。さらに、腎交感神経活性の指標である腎組織ノルエピネフリンおよび神経体液生因子であるレニン活性・アルドステロン濃度を測定し、当該指標による血圧上昇反応との関連を検討中である。また、ペーシングカテーテルを用いて、期外刺激による心房および心室における有効不応期を測定し、さらに高頻度ペーシングによる心房細動および心室細動の誘発性についても評価を行った。また、今後の臨床研究への発展を見据えて、心室細動症例におけるカテーテルアブレーション治療について検討を行い、国内および国際学会で発表を行った。来年度は、当該指標を用いた腎交感神経アブレーションを施行した動物で評価を行い、さらなる検討を行う予定である。実験用高周波発生装置が老朽化により利用できなくなり、高周波通電による腎交感神経アブレーションを施行した動物が作成できなかったため、アブレーション治療中における手技エンドポイントとしての当該指標の評価を行うことができなかった。しかし、先行して心房および心室における有効不応期や高頻度ペーシングによる心房細動および心室細動の誘発性を評価することができた。さらに、今後の臨床研究へ発展させるための事前調査として、心室細動症例におけるカテーテルアブレーション治療について検討を行い、国内および国際学会で発表を行うことができた。これらの不整脈は治療抵抗性高血圧と同様に交感神経活性亢進が病態に大きく関与することから、腎交感神経アブレーション治療が、新たな治療法として期待されている。我々は除神経達成度を治療中に確認できる指標を開発していくことを目的として研究を行っていたが、カテーテルアブレーションを行うための通電用高周波発生装置が老朽化のために利用できなくなり、同装置の購入および調整が必要であった。このため、致死性不整脈に対する不整脈起源カテーテルアブレーション治療の治療成績に関する検討を行った。カテーテルアブレーションにより不整脈起源の消失が得られた症例は、消失が得られなかった症例と比較して、致死性不整脈の再発が有意に少なく(80% vs. 20%, p=0.002)、予後が良好であることが明らかとなり、この研究成果を欧州心臓病学会で報告した。また、腎交感神経が活性化しており、心房細動や致死性不整脈の発症に大きく関与すると考えられている治療抵抗性高血圧に関する予後調査も行った。治療抵抗性高血圧は、非治療抵抗性高血圧と比較して、主要心血管イベントの発症率が有意に高く(p=0.02)、さらに、非治療抵抗性高血圧の主要な死因は悪性腫瘍であったが、治療抵抗性高血圧には悪性腫瘍による死亡はなく、主要な死因は心血管イベントであることが明らかとなり、この研究成果を日本循環器学会で報告した。通電用高周波発生装置の購入および調整のために、動物実験は進めることができなかったが、致死性不整脈に対する不整脈起源カテーテルアブレーション治療の治療成績に関する検討を行い、研究成果を欧州心臓病学会で報告した。また、腎交感神経が活性化しており、心房細動や致死性不整脈の発症に大きく関与すると考えられている治療抵抗性高血圧の主要心血管イベントに関する予後調査も行い、研究成果を日本循環器学会で報告した。このように、臨床における研究を進めることにより、当該課題領域の新たな知見を得ることができたため。我々は除神経達成度をリアルタイムに確認できる指標を開発していくことを目的として研究を行った。

実験用動物としてウサギを用いて、ケタミン・キシラジンによる静脈麻酔の後、右大腿動脈にシースを留置し、カテーテルを用いて腎動脈内にアデノシン持続投与を行い、アデノシン投与に伴う血圧上昇反応を指標として、腎交感神経に対する高周波カテーテルアブレーションを施行した。腎交感神経への高周波カテーテルアブレーションにより、収縮期血圧は13±8 mmHg低下し、拡張期血圧も11±6 mmHg低下し、腎交感神経活性の指標である腎組織ノルエピネフリンは56±90 ng/g.kidney vs. 303±73 ng/g.kidney (p<0.01)とコントロール群に比べて有意に低下したものの、術中の麻酔深度のコントロールの難しさや、疼痛による血圧上昇、鎮痛麻酔薬であるケタミンによる血圧上昇などの相互作用により、アデノシン投与に伴う血圧上昇反応消失をリアルタイムな指標とした腎交感神経カテーテルアブレーションは、現行のモデルにおいては施行困難であり、モデル動物や麻酔方法の変更等の今後検討すべき課題が明らかとなった。臨床研究においては、心房細動を伴うLVEFの保たれた心不全(HFpEF)症例において、心房細動に対するカテーテルアブレーションによるリズムコントロールが、心不全入院のリスク低減(HR 0.34, p=0.04)に寄与していることを明らかにし、日本循環器学会で発表を行った。腎交感神経に対するカテーテル焼灼術において、アデノシンの腎動脈内持続投与量と血圧上昇反応には用量反応関係があり、新たな治療指標の候補と考えられたが、麻酔深度や焼灼に伴う疼痛などの外部要因による血圧の変動が大きく、新たな検討課題が明らかとなった。また、心房細動・致死性不整脈および治療抵抗性高血圧においては、標準治療の効果が限定的なこともあり、腎交感神経焼灼術の効果が期待される症例も少なくない。高周波通電による腎交感神経アブレーションを施行するため、通電用高周波発生装置を新調し、当該指標を用いた腎交感神経アブレーションした動物における心房および心室の有効不応期や心房細動および心室細動の誘発性と腎組織ノルエピネフリンとの関連性を評価していく予定である。また、臨床研究へ発展させるため、詳細なプロトコル作成や実施体制の整備等を行っていく予定である。通電用高周波発生装置の調整が完了し、購入することができたため、動物実験を進めていく予定である。当該指標を用いた腎交感神経のカテーテルアブレーションを行い、心房および心室における有効不応期や心房細動および心室細動の誘発性と腎組織ノルエピネフリンとの関連性等を評価していく予定である。カテーテルアブレーション年度内に依頼予定であった検体検査の報告予定日が年度を超えることが判明し、次年度に検体検査を依頼することとしたため、検体検査費用分の差額が発生した。通電用高周波発生装置の購入前の調整が必要であり、動物実験を進めることができなかったため。通電用高周波発生装置ならびに実験用動物や器具・試薬など消耗品の購入および前年度分を含めた検体検査費用等に充当する予定である。また、積極的に国内外の学会へ参加し、情報収集および研究成果の発表等を行っていくための必要経費として使用する予定である。実験用動物や器具・試薬など消耗品の購入および検体検査費用等に充当し、動物実験を進めていく予定である。
コンピュータによる『カンタベリー物語』諸写本とキャクストン版の計量的比較

キャクストン版『カンタベリー物語』(c 1476; c14822)と他の写本やテクストとの間に生じた異同の問題を取り上げた。Hengwrt(ヘングウルト)写本とEllesmere(エルズミア)写本は『カンタベリー物語』のみの代表的写本であるが,キャクストン版『カンタベリー物語』は、最初の刊本として重要なものである。これは,地村(2005)で指摘したように、15世紀後期に作成された印刷本であり、写本を写す時代には出来なかった英語の標準化の過程に大きく関わっただけでなく、キャクストン以後の諸刊本に影響を与えたものである。今日までのテクストの伝達と継承の問題を考えるための基盤的研究を実践した。本研究の目的は、ジェフリー・チョーサーの写本と刊本の言語について、コンピュータを利用し、その英語の語彙・統語・文体を総合的に研究し、チョーサーのtextual criticismに貢献することにある。本研究では、キャクストン版『カンタベリー物語』[初版(c 1476)(Cx1)と第2版(c1482)(Cx2)]と他の写本やテクストとの間に生じた異同の問題を取り上げている。本研究は、今日までのテクストの伝達と継承の問題を考えるための基盤的研究である。特に、今回は15世紀後期に出版されたキャクストン版[初版(Cx1)と第2版(Cx2)]のデータ入力をすすめてきた。『カンタベリー物語』の代表的写本と初期の印刷本と今日用いられている刊本とが容易に比較できるように、パソコン上でのテキスト処理をする方法において更に進んだ段階に達したといえる。つまり、Hengwrt写本、Ellesmere写本、Blake版、Benson版、キャクストン版(初版Cx1)、キャクストン版(第2版Cx2)を縦軸に並べて一目で共通点と相違点が把握できるデータが一部完成した。特に、今回は15世紀後期に出版されたキャクストン版[初版(Cx1)と第2版(Cx2)]のデータ入力をすすめている。『カンタベリー物語』の代表的写本と初期の印刷本と今日用いられている刊本とが容易に比較できるように、パソコン上でのテキスト処理をする方法の第一段階に達したといえる。つまり、Hengwrt写本、Ellesmere写本、Blake版、Benson版、キャクストン版(初版Cx1)、キャクストン版(第2版Cx2)を縦軸に並べて一目で共通点と相違点が把握できるデータの作成を始めている。

これは,地村(2005)で指摘したように、15世紀後期に作成された印刷本であり、写本を写す時代には出来なかった英語の標準化の過程に大きく関わっただけでなく、キャクストン以後の諸刊本に影響を与えたものである。本研究は、今日までのテクストの伝達と継承の問題を考えるための基盤的研究である。特に、今回は15世紀後期に出版されたキャクストン版[初版(Cx1)と第2版(Cx2)]のデータ入力をすすめている。『カンタベリー物語』の代表的写本と初期の印刷本と今日用いられている刊本とが容易に比較できるように、パソコン上でのテキスト処理をする方法の第一段階に達したといえる。つまり、Hengwrt写本、Ellesmere写本、Blake版、Benson版、キャクストン版(初版Cx1)、キャクストン版(第2版Cx2)を縦軸に並べて一目で共通点と相違点が把握できるデータが散文を除いて完成した。中世英語英文学初年度は15世紀後期に出版されたキャクストン版[初版(Cx1)と第2版(Cx2)]のデータ入力をすすめた。『カンタベリー物語』の代表的写本と初期の印刷本と今日用いられている刊本とが容易に比較できるように、パソコン上でのテキスト処理をする方法において更に進んだ段階に達したといえる。つまり、Hengwrt写本、Ellesmere写本、Blake版、Benson版、キャクストン版(初版Cx1)、キャクストン版(第2版Cx2)を縦軸に並べて一目で共通点と相違点が把握できるデータが一部完成した。初年度は15世紀後期に出版されたキャクストン版[初版(Cx1)と第2版(Cx2)]のデータ入力をすすめた。つまり、Hengwrt写本、Ellesmere写本、Blake版、Benson版、キャクストン版(初版Cx1)、キャクストン版(第2版Cx2)を縦軸に並べて一目で共通点と相違点が把握できるデータの作成を始めた。新しく研究分担者として佐藤健一氏に加わってもらい、各テキストを2次元上で分析(Cmdscale)したり、各テキストの距離をクラスター分析(hclust)する統計解析のノウハウを提供してもらうこととなった。言語統計解析の専門家が加入されたことによって、本研究課題を推進しやすくなった。中尾佳行氏、川野徳幸氏とともに、総合的に本研究を進めて行き、2014年7月にはNew Chaucer Societyという世界的規模の学会で口頭発表することが決まったので、その準備を進めている。言語統計解析の専門家が加入されたことによって、本研究課題を推進しやすくなったといえる。中尾佳行氏、川野徳幸氏とともに、総合的に本研究を進めて行く予定である。最終年度(平成26年度)に総括をするために、データの確認と研究資料の収集と整理及び国際学会での発表に予算を必要としている。新たなデータ入力、言語統計解析、写本と印刷本についての資料収集などに研究費を必要としている。
人工細胞構築のための光学的制御技術の確立

生細胞は、その機能を遂行するために、多くの状況で膜突起を形成させる。細胞は、細胞骨格を伸張することによって膜突起を形成させているが、その力学的メカニズムを探求するためにリポソームを用いたモデル系を開発した。リポソーム膜の本質的な特性はわずか5mmの厚さの液晶相であることに由来する。脂質分子の協同作用から生じるメカトロニクス特性を解明することが肝要である。リポソームの形態変化は連続的変化が蓄積して、臨界状態では著しい協同的なトポロジー変化を示すので2次元流体の協同作用を研究する最適の材料である。当課題で新しく開発したダブルビームのレーザーツイーザーシステムによって、リポソーム内部の張力によってリポソームは、まずレモン型に変型し、次いで管状の突起が楕円球上に非連続的に形成されることが判った。本年度は、特にこれらの変形過程に必要な力を詳しく測定した。即ち球形からレモン型への変形過程では、長軸の伸張に伴い急激に力は増加し平均15pNの力が要った。しかし、レモン型端での突起形成と同時に急激にその力は減少し、3pNになった。この力は突起の長さの伸長には依存せず一定であった。驚くべきことに短縮過程でも3pNの大きさは一定に保たれた。そして、突起が短縮して消滅しレモン型に復帰する際に5pNの力が一時的に発生した。これらの結果は、膜の分子構造が管部と球部では異なりその境界を創出したり、消滅させることが膜の小細胞形態形成の主要な要因であることを示している。細胞は多種類のコンパートメント(生体膜胞)から成るミクロのコンビナートである。この構築機構を探るために、人工膜小胞(リポソーム)の内部に細胞骨格ネットワークを再構築させて、膜系に基づくナノマシンシステム(人工細胞)を創製することは、バイオ工学にとって魅力的かつ緊急の課題である。その際に不可欠な、ミクロな膜小胞の形態制御とトポロジー変換の技術を確立することを目的とする。そのために、細胞骨格や生体膜を、溶液中で同時に直視できる実験系を高輝度暗視野光顕を利用して開発する。1,超薄液晶膜小胞(リポソーム)の力学的応答測定技術の開発リポソームにラテックスビーズ(直径=1mm)を取り込ませる方法を確立し,ビーズを2個取り込んだリポソームを選び、新しく構築したダブルビームのレーザーツイーザーシステムを用いて片方のビーズに機械的張力を加え、その形態応答を可視化・制御した。その結果、張力によってリポソームはまずレモン型に変型し、さらに力を大きくすると管状の突起が形成されることが判った。フォスファチジルコリンを含む脂質二重層膜から成るリポソームでは、突起形成に必要な力は50pNであった。2,微細操作の可能なる倒立暗視野照明法の開発リポソームなどの生体関連構造は溶液中で操作・観測できることが必須である。しかし、リポソーム膜の厚さは、わずか5nmである。したがって、その十分な可視化は暗視野法によらざるを得ない。一方、従来の暗視野コンデンサーを使った手法では対象分子の機械的操作は不可能である。そこで、倒立顕微鏡の試料中に、水銀燈光源による照明光を光ファイバーを用いて導入した(レーザー光は干渉像が生じるので採用しない)。その結果、照射光に対して直角方向の膜成分は可視化出来たが、全体像を得るまでには至っていない。多方向から照射する方法を探索しているところである。細胞は多種類のコンパートメント(生体膜小胞)から成るミクロのコンビナートである。その際に不可欠な、ミクロな膜小胞の形態制御とトポロジー変換の技術を確立することを目的として研究を進めている。そのために、細胞骨格や生体膜を、溶液中で同時に直視できる実験系を高輝度暗視野光顕を利用することも試みている。細胞モデルを用いた膜突起形成過程の力学的測定生細胞はその機能を遂行するために、多くの状況で膜突起を形成させる。細胞は細胞骨格を伸張することによって膜突起を形成させているが、その力学的メカニズムを探求するためにリポソームを用いたモデル系を開発した。まず、リポソームにラテックスビーズ(直径=1μm)を取り込ませる方法を確立し、ビーズを2個取り込んだリポソームを選び、新しく構築したダブルビームのレーザーツイーザーシステムを用いて片方のビーズに機械的張力を加え、その形態応答を可視化・制御した。張力によってリポソームはまずレモン型に変型し、さらに力を大きくすると管状の突起が形成されることが判った。その結果・膜管形成開始期に最大力が要り、伸長期に減少することが判った。そして力の減少率は理論予測値よりも大きかった。構築した測定システムでは張力増加を手動ダイヤルを用いて行っているので、力の時間的変化データーが取得出来ない。この系を用いて、理論の定性的な立証は出来たが、液晶膜転移現象の詳しい分子メカニズムにせまるためには、張力増加速度を定量的に制御する必要があり、装置の改良が求められる。細胞モデルを用いた膜突起形成過程の力学的測定と自動化による超薄液晶膜の特性解析。

生細胞はその機能を遂行するために、多くの状況で膜突起を形成させる。細胞は細胞骨格を伸張することによって膜突起を形成させているが、その力学的メカニズムを探求するためにリポソームを用いたモデル系を開発した。リポソーム膜の本質的な特性はわずか5nmの厚さの液晶相であることに由来する。脂質分子の協同作用から生じるメカトロニクス特性を解明することが肝要である。リポソームの形態変化は連続的変化が蓄積して、臨界状態では著しい協同的なトポロジー変化を示すので2次元流体の協同作用を研究する最適の材料である。当課題で新しく開発したダブルビームのレーザーツイーザーシステムによって、リポソーム内部の張力によってリポソームはまずレモン型に変型し、次いで管状の突起が楕円球上に非連続的に形成されることが判った。突出時に最大力が必要であり、その後の伸長時に必要な力が減少することを、我々は理論的に予測している。それは、3次元結晶の転位現象に相当する2次元液晶の形態転位であるといえる。ピコニュートン張力発生の自動化と張力増加速度を定量的に制御により、この現象の基本特性の測定に成功した。生細胞は、その機能を遂行するために、多くの状況で膜突起を形成させる。細胞は、細胞骨格を伸張することによって膜突起を形成させているが、その力学的メカニズムを探求するためにリポソームを用いたモデル系を開発した。リポソーム膜の本質的な特性はわずか5mmの厚さの液晶相であることに由来する。当課題で新しく開発したダブルビームのレーザーツイーザーシステムによって、リポソーム内部の張力によってリポソームは、まずレモン型に変型し、次いで管状の突起が楕円球上に非連続的に形成されることが判った。本年度は、特にこれらの変形過程に必要な力を詳しく測定した。即ち球形からレモン型への変形過程では、長軸の伸張に伴い急激に力は増加し平均15pNの力が要った。しかし、レモン型端での突起形成と同時に急激にその力は減少し、3pNになった。この力は突起の長さの伸長には依存せず一定であった。驚くべきことに短縮過程でも3pNの大きさは一定に保たれた。そして、突起が短縮して消滅しレモン型に復帰する際に5pNの力が一時的に発生した。これらの結果は、膜の分子構造が管部と球部では異なりその境界を創出したり、消滅させることが膜の小細胞形態形成の主要な要因であることを示している。
小児がん発生の高危険体質の分子遺伝学解析とその臨床応用

平成4年度以来3年間にわたって、小児期に頻度が高く、また特有と考えられる数種の悪性腫瘍について、種々のがん抑制遺伝子についての検索を行って来た。現在までに検索した遺伝子は、p53およびp16遺伝子、Rb遺伝子、DDCおよにDAN遺伝子である。小児悪性腫瘍の頻度が低いことに鑑み、新鮮腫瘍のみでなく、それぞれの腫瘍の細胞株についての検索をあわせ行ってきた。これらの結果から明らかになったことは、一般にこれらの遺伝子は細胞株および進展例の新鮮腫瘍での異常の頻度が高く、発癌過程ないしはその進展に関わっていると思われること、p53などのようにPNETでは異常の頻度が高率であるが、神経芽腫では進展例、細胞株共に異常の頻度が低いなど、同一系統の腫瘍間でもその異常の頻度に差があることなどが明らかになった。また、小児悪性新生物全国登録に蓄積されているデータから、高危険体質の遺伝が疑われる家系の洗い出しとそこからの試料の収集も行ってきているが、これについては手続き等の問題があること、過去のデータであることなどから資料の収集は十分ではなく、現時点では家族集積性の調査の段階にある部分が多く、今後も引き続き資料収集の努力が必要である。登録例の中の1例に、悪性リンパ腫が兄弟3例に発生した家族があり、この例についてp53遺伝子の解析を行ったが、異常は見いだされなかった。また、11歳の男児に肺の腺癌が発生した例があり、、この例についてもp53遺伝子の異常を検索したがやはり異常は検出できなかった。また、本研究の一部として、小児悪性新生物全国登録の内、関東甲信越地区登録のデータにより、家族集積性の調査を行い、(1)がん患児の家族に見られるがんの種類は、一般人口のそれに比べて偏りがあること、(2)がん患児の両親には一般人口に比べて脳腫瘍の発生が有意に多いことなどの結果を得た。今後、これらの点についてより詳細な調査の必要性が示唆された。小児固型腫瘍と白血におけるP53遺伝子の変異について検索し、以下の結果を得た。1.固型腫瘍神経芽腫6株、横紋筋肉腫2株、悪性間葉腫1株、新鮮神経芽腫組織18例ではP53遺伝子の変異は認められなかった。ユーイング肉腫5株のうち4株で変異を認めた。この変異は、1株でコドン141(TGC→TAC)、2株でコドン176(TGC→TTC)、1株でコドン283(CGC→CG)にみられた。これに対して9例の新鮮組織では1例からのもののみに変異を認めた。ウィルムス腫瘍では、3株のうち1株でコドン213(CGA→TGA)に変異を認めたが、これは16歳の患者に発生した非定型的な腫瘍から得られた細胞株であった。以上のごとく、調べ得た範囲では、P53の変異はユーイング肉腫とウイルムス腫瘍にのみ認められたが、大多数は細胞株にみられたものであり、小児固型腫瘍ではP53の変異はその発生に関与するところは少ないものと考えられた。2.白血病(li19)転座を有する小児ALL初発16例、再発3例、細胞株3例の計22例についてP53の変異を検索したところ、初発2例、再発および細胞株の全例にこれを認めた。初発時と再発時とに検索を行い得た例のうち、1例では初発時と再発時とに同一の変異を認めた。

他の例では再発時にのみ変異を認めたが、この例では初発時に細胞株が樹立されており、この細胞株にも同一の変異が認められた。後者は、検出限界以下の数初発時に存在した少数のクローンが再発に関与した可能性を示唆しており、再発の機序を考える上で興味深く思われた。(1)固形腫瘍:ユーイング肉腫(EW)14例中2例,細胞株7株中6株,横紋筋肉腫(RMS)22例中3例,細胞株4株中1株,神経芽腫(NB)50例中1例,細胞株8株中1株,ウイルムス腫瘍(WT)5例中0例,細胞株3株中1株でP53遺伝子の変異がみられ、多くはmissense mutationであった。(2)急性リンパ性白血病(ALL):T-ALL24例中3例,細胞株8株中7株,t(1;19)-ALL21例中6例,細胞株5株中3株,c-ALL20例中0例,B-ALL2例中2例、Ph1-ALL2例中0例に変異がみられた。今回のP53遺伝子の変異の検討では、EWの細胞株で7株中6株,T-ALLの細胞株で8株中7株,t(1;19)-ALLの再発時腫瘍で5例中4例,細胞株で5株中3株,B-ALL2例中2例と高頻度であった。今回の結果より、P53遺伝子の変異は再発例や細胞株に高頻度でみられることが明らかになり、この変異は腫瘍の進展(progression)に関すると思われ、予後の指標になると思われた。一方NB,WT,c-ALL等ではP53遺伝子の変異はまれであり、発生年令の低い先天性素因の関与する腫瘍では頻度が低く,また発生母体(組織)の違いによって頻度が異なることが示唆され興味深い。現在RAS遺伝子とRB遺伝子の検討も行なっており,更に小児がん発生の高危険体質の早期分子遺伝学的診断の確立のため研究を続けていく予定である。本年度は、近年注目されているp16遺伝子にていての検索を行い、また前年度に引き続きRb遺伝子、DCCおよびDAN遺伝子についての検索も併せ行った。p16遺伝子に関しては、T-ALL細胞下部18株と30例からの新鮮細胞について、Southem法ならびにSSCP法によって検索した。その結果、細胞株10株中6株に、16例の新鮮細胞中6例にSouthem法でhomozygous deletionが認められ、細胞株2株と新鮮細胞1例にSSCPで点突然変異が認められた。この結果、p16遺伝子もp53遺伝子同様T-ALLの発癌過程ないし進展に関与していることが考えられた。Rb遺伝子に関しては、神経芽腫4株、PNET2株、横紋筋肉腫1株、ユ-イング肉腫1株、T-ALL 10株、AMoL 4株、Ph1陽性ALL 2株、非ホジキンリンパ腫1株について検索したところ、PNET1株、T-ALL 3株、AMoL1株にhomozygous deletionまたは変異が認められた。DCC遺伝子とDAN遺伝子に関しては、神経芽腫13株、横紋筋肉腫1株、白血病7株についてPCR法による検索を行った。DCC遺伝子は、神経芽腫3株、横紋筋肉腫1株、白血病3株で、DAN遺伝子は、神経芽腫1株、白血病1株で発現が認められなかった。これらの結果から、これらの腫瘍抑制遺伝子が、発癌過程ないしは少なくともがんの進展に関係していることが推測された。今後これらの腫瘍抑制遺伝子のhomozygous deletionの新鮮腫瘍での頻度、heterozygous deletionの一般人口中での頻度並びに担腫瘍患者の体細胞での頻度などを明らかにすることが必要であると思われた。
歪制御した強誘電体薄膜の圧電特性とＭＥＭＳ超音波トランスデューサへの応用

強誘電体薄膜の圧電応答は、分域内の自発分極の伸縮と回転に加え、分域壁の運動や振動が重畳した複雑なものである。これらの寄与を包括的に理解し最適化する方法の確立は、高効率な圧電MEMS素子の開発に有効であると期待できる。本研究では非鉛強誘電体薄膜として期待されているBiFeO3薄膜の正圧電特性の微視的解析に取り組んだ。開発した正圧電応答顕微鏡(DPRM)と従来の圧電特性評価手法を組み合わせることで、本年は以下の成果を得た。1) DPRMと従来の顕微鏡手法(PFM)の比較からDPRMはナノスケールレベルの空間分解能を有していることが明らかになった。また、DPRMとPFMでは同一の分域パターンが観察される一方で、大きな正圧電応答を有する分域と逆圧電応答を有する分域は相互排他的な関係にあることも明らかになった。2)巨視的-微視的領域間の正圧電特性の比較と有限要素法によるDPRMの出力特性の解析結果から、DPRMを用いた正圧電特性の定量解析が可能であることが示唆された。3) PFMを用いて精密に分域構造を決定する方法を確立し、DPRMと組み合わせることで、正圧電応答への分域構造の寄与について詳細に解析した。BiFeO3薄膜中に形成される数種類の分域壁の内、膜厚方向に傾斜した71°分域壁の近傍で大きな正圧電応答が得られることが分かり、71°分域壁を有する分域の正圧電応答は有さない分域と比較して最大で40%程大きくなること、71°分域壁密度の増大によりBiFeO3薄膜の電気機械結合係数をさらに向上できる可能性を見出した。これらの結果は圧電MEMS素子応用に向けた強誘電体薄膜の開発だけでなく、圧電応答の発現機構の解明や鉛系強誘電体における大きな圧電応答の起源の解明においても大きく貢献するものである。29年度が最終年度であるため、記入しない。本研究ではがん病巣のスクリーニング診断装置として広帯域強誘電体MEMS超音波トランスデューサの開発を目的としている。検出感度の高いトランスデューサを開発する為には、強誘電体薄膜の正圧電応答の大きさが重要になる。しかしながら、強誘電ドメインやドメイン壁での正圧電応答の発現機構は十分に理解されておらず、目的のデバイス開発には問題となる。本研究ではBiFeO_3薄膜を用いたマクロ領域からの正圧電応答と微小領域の逆圧電応答の比較から、内因的な寄与に加えて、ドメイン壁の寄与が正圧電応答に重畳される可能性を見出している。本年度はこれを直接確かめる方法として、正圧電効果を用いた新規な圧電応答力顕微鏡法を開発した。本手法を従来のPFM法と組み合わせることで、正圧電応答に対するドメインやドメイン壁の寄与を詳細に解析し、71°ドメイン壁が正圧電応答に大きく寄与することを明らかにした。本研究で開発した正圧電効果を用いた新規な圧電応答力顕微鏡法は、本質的に電歪等の圧電以外の成分が検出されないことから、強誘電性ドメインの観察だけでなく、定量的な微視的領域のダイポールの評価を可能にする新規な技術である。その知見は圧電MEMSデバイス応用に向けた強誘電体薄膜の開発のみならず、圧電応答の発現機構の解明においても貢献できる。さらに、極薄膜における強誘電ドメインの観察や強誘電体トンネル接合素子などの分野においても本手法は有用であり、多彩な分野に展開可能な極めて有意義な研究成果であると確信する。上記は本年度の計画以上の成果であり、研究が期待以上に進展したと考える。強誘電体薄膜の圧電応答は、内因的な寄与にドメイン壁に起因した外因的な寄与が重畳した複雑なものである。これらの寄与を包括的に理解し最適化する方法の確立は、高効率な圧電MEMSデバイスの開発に有効であると期待できる。本研究では非鉛強誘電体薄膜として期待されているBiFeO3薄膜の圧電応答におけるドメイン壁の寄与に着目している。本年度は新規に開発した走査型プローブ顕微鏡を基盤とした微視的領域における正圧電応答の観察手法を用いてBiFeO3薄膜のドメイン構造が正圧電応答に及ぼす寄与を定量的に解析した。109°ドメイン壁を有するドメインと比較して71°ドメイン壁を有するドメインでは30%程大きな圧電応答が観察され、71°ドメイン壁が正圧電応答に大きく寄与することが明らかになり、71°ドメイン壁密度の向上が大きな正圧電応答の発現に重要であることが示唆された。また、従来の逆圧電応答を用いた顕微鏡技術と組み合わせることで、正圧電応答に含まれるドメインやドメイン壁の寄与の大きさをそれぞれ分離して評価することに成功した。これらの知見から巨大圧電応答を発現させるための強誘電体薄膜の設計指針の確立に向けて大きな一歩を踏み出した。本研究で開発した正圧電効果を用いた新規な圧電応答顕微鏡法はドメインやドメイン壁での応答を直接観察でき、本質的に電歪などの圧電以外の成分が現れないことから、正圧電応答に重畳される寄与をそれぞれ分離して定量的に評価することが可能である。今年度は正圧電応答に71°ドメイン壁の寄与が含まれることを明らかにし、71°ドメイン壁密度の増大によるe31,f定数の向上の可能性を示した。

これらの知見はセンサや振動発電応用に向けた強誘電体薄膜の開発だけでなく、圧電応答の発現機構の解明や鉛系強誘電体における大きな圧電応答の起源の解明においても大きく貢献すると考えている。強誘電体薄膜の圧電応答は、分域内の自発分極の伸縮と回転に加え、分域壁の運動や振動が重畳した複雑なものである。これらの寄与を包括的に理解し最適化する方法の確立は、高効率な圧電MEMS素子の開発に有効であると期待できる。本研究では非鉛強誘電体薄膜として期待されているBiFeO3薄膜の正圧電特性の微視的解析に取り組んだ。開発した正圧電応答顕微鏡(DPRM)と従来の圧電特性評価手法を組み合わせることで、本年は以下の成果を得た。1) DPRMと従来の顕微鏡手法(PFM)の比較からDPRMはナノスケールレベルの空間分解能を有していることが明らかになった。また、DPRMとPFMでは同一の分域パターンが観察される一方で、大きな正圧電応答を有する分域と逆圧電応答を有する分域は相互排他的な関係にあることも明らかになった。2)巨視的-微視的領域間の正圧電特性の比較と有限要素法によるDPRMの出力特性の解析結果から、DPRMを用いた正圧電特性の定量解析が可能であることが示唆された。3) PFMを用いて精密に分域構造を決定する方法を確立し、DPRMと組み合わせることで、正圧電応答への分域構造の寄与について詳細に解析した。BiFeO3薄膜中に形成される数種類の分域壁の内、膜厚方向に傾斜した71°分域壁の近傍で大きな正圧電応答が得られることが分かり、71°分域壁を有する分域の正圧電応答は有さない分域と比較して最大で40%程大きくなること、71°分域壁密度の増大によりBiFeO3薄膜の電気機械結合係数をさらに向上できる可能性を見出した。これらの結果は圧電MEMS素子応用に向けた強誘電体薄膜の開発だけでなく、圧電応答の発現機構の解明や鉛系強誘電体における大きな圧電応答の起源の解明においても大きく貢献するものである。今後は、ドメイン壁における正圧電応答の向上メカニズムを解明することを目指す。正圧電応答の大きさと歪場印可時におけるドメイン構造の変化を調べることで、ドメイン壁近傍でのダイポールの応答メカニズムを解明し、超音波トランスデューサに適したナノ構造を有する強誘電体薄膜の設計指針を明らかにする。今後は本測定装置を活用してMEMS超音波トランスデューサへの応用に最適な強誘電ドメイン構造を検討する。異なる成長方位を有する試料のマクロ・ミクロ間の強誘電特性や圧電特性を詳細に解析することで巨大圧電応答を発現させるための薄膜設計指針を構築することを目指す。29年度が最終年度であるため、記入しない。
ナノ空間を用いた新規スピンクロスオーバー錯体の配列制御と機能開拓

スピンクロスオーバー錯体は2つのスピン状態を持ち、それらが熱や光照射に応答してスイッチング可能であることから、メモリーデバイスなどへの応用が期待されている。これまでの研究において我々は、適切な配位子設計を行うことで、スピンクロスオーバー現象と、バルクの液晶相転移現象がシンクロナイズ可能であることを見い出した。本年度はさらに長鎖アルキル鎖を有するトリアゾール配位子と鉄からなる一次元高分子スピンクロスオーバー錯体がアルカン溶媒中においてゲルを形成することを見い出し、さらにゾルゲル転移とスピンクロスオーバーがシンクロナイズしていることを明らかにした。ゲル状態においては、配位子と対アニオンが鎖内において水素結合していることが赤外吸収測定から確認された。この水素結合が低スピン状態の配位空間を安定化させ、かつゲル状態の構造安定化に寄与しているものと推察される。低スピン状態にあるゲルを加熱すると60度付近でゾル状態に変化し、同時に高スピンへと転移することが紫外可視吸収測定、磁化率測定などから確かめられた。この変化は可逆的に何度も繰り返すことができた。この転移において水素結合が切れることが温度可変赤外吸収測定から明らかになったことから水素結合がこの現象を支配していると予測された。それを裏付けるように少量のアルコールを添加することでもゾルゲル転移およびスピンクロスオーバーを誘起することができた。この錯体はベンゼンなどの芳香族系の溶媒中ではゲルを形成せず液体状態のままでスピンクロスオーバーを起こすことも分かった。ゾル状態と比較しスピンクロスオーバー温度が20度も低かったことからもゾル状態が低スピンを安定化していることが支持される。さらに興味深いことに高スピン状態から低スピン状態への応答速度を比較すると、ゾルゲル転移とシンクロナイズしているアルカン溶媒中では数分で完結したのに対し、ベンゼン中においては6時間以上を要した。これにより、構造的な相転移とシンクロナイズさせることで素早い応答を実現できることが明らかとなった。スピンクロスオーバー錯体においては2つのスピン状態を加熱、加圧、光照射などの様々な刺激に応答させて変換させることが可能であり、さらに2つの状態においては色、磁化率、体積など様々な変化を伴うことからメモリーやスイッチング材料としての応用が期待されている。本研究では、スピンクロスオーバー鉄トリアゾール一次元高分子錯体についてソフトマテリルの融合と機能開拓について検討した。申請者は、まず長鎖アルキル鎖を有するトリアゾール配位子と鉄の錯体において集積したアルキル鎖の相転移によってスピン状態を制御すると言う興味深いアプローチを実現させた。配位子に導入したアルキル鎖の結晶状態は低スピン配位空間を安定化させ、転移温度を高温部まで安定化させた。さらにアルキル鎖集積体の結晶-溶融相転移はアルキル鎖の長さにより異なるために鎖長を替えることで転移温度を制御することに成功した。一方、配位子間の効率的な相互作用により協同効果が発現するとスピン転移はドミノ効果により効率的に起こり、光誘起スピン転移に対しては素早い応答を、熱的スピンクロスオーバーに対しては狭い温度で転移が完結することが知られている。この理想的なスイッチングを実現させるため分子間の大きな重なりにより効率的な相互作用が期待できるデンドリマーを導入したデンドリマー鉄トリアゾール錯体を合成した。その結果、適度な広がりを有し、一次元錯体の外周部に密に集積する第一世代デンドロンを導入した錯体において急峻な熱的スピンクロスオーバー、つまり高い協同効果が認められた。以上、本研究はスピンクロスオーバー錯体においてスピン状態をソフトマテリアルにより集積した秩序構造により制御するという全く新しい方法論を構築しスピンクロスオーバー材料の発展に大きく寄与するものであったと言えよう。
人間の生理学的機能を模擬した発話ロボットの開発および言語獲得能力の研究

本研究はコンピュータシミュレーションのみでは解明困難な人間の発話運動について,物理モデルとしての人間形発話ロボットを構築することによりその解明への糸口を見つけることを目的としている.われわれは声帯・口蓋・舌・口唇・鼻腔など発声に関わる諸器官を弾性体を用いて3次元モデルで構築し,音声生成の再現に取り組んでいる.既存の人間形発話ロボットWT-7Rは,子音の生成が難しかった.そこで,全19自由度を有する新型発話ロボットWT-7RII(Waseda Talker No.7 Refined II)の製作を行なった.WT-7Rの口唇部は開口面積の再現に主眼を置き,平板の弾性体の開口部の4隅に引っ掛けられた部材によって制御されていた.これは,母音生成には十分であったものの,子音生成に不可欠な完全閉鎖ができず,また,人間の器官を模擬するという目的から見ても,人間と大きく機構が異なっており,改良が必要であった.そこで,弾性体によって人間の口唇の形状を立体的に再現し,口唇周りに万力状に挟み込むことで押し引きが可能な駆動点を5点設けることにより,開口面積の再現とともに,人間に近い完全閉鎖や突き出しなどを再現した.この機構を用いて口唇破裂音/p/を生成した.声帯機構においては,これまでの研究により,人間の声帯形状・振動様式を再現したヒダ型モデルを構築し,気息性発話やフライ発声などの再現に取り組んできたが,さらに人間の生理現象による発話時の声帯動作の解明を目的とし,笑い声の再現に取り組んだ.笑い声の再現のために,人間の通常発話時と笑い声の発話時のデータの比較から,笑い始めにおける強い空気流,高い基本周波数,周期的な発声が笑い声の特徴とみられるため,計測データより,ロボットの制御ルールを構築し,その制御ルールによる発声を行った.本研究はコンピュータシミュレーションのみでは解明困難な人間の発話運動について,物理モデルとしての人間形発話ロボットを構築することによりその解明への糸口を見つけることを目的としている.今年度は既存の発話ロボットWT-6の問題を解決し,多様な音声生成を実現するために,舌機構部および声帯機構部の改良を行ない,全19自由度を有する新型発話ロボットWT-7 (Waseda Talker No.7)の製作を行なった.まず,声帯においては人間の生理学的構造を模擬した声帯モデルでのピッチレンジの狭さを解決するために,より大きなテンションを与える内転機構を用いることで,声帯のピッチレンジが150[Hz]程度に改善され,人間の通常発話時のピッチ変化を再現することが可能になった.さらに,音声の多様性を再現するために,音圧,スペクトル傾斜といった音響特徴量を任意に変更可能な駆動機構を構築した.舌機構部においてはWT-6の機構で問題であった再現性,目標追従性の低さを解決するために舌内部に4組のリンク機構を搭載し,舌の外形および中央部の溝を再現可能な機構を設計・製作した.これらと同時に制御の面で多様な音質を再現可能とするために,音響特徴量を目標値に追従可能となるようなソフトウェアの開発を行なった.これらのパラメータは調整可能であるが相互に影響を与えてしまうため,以下のような順逆モデリングの手法を用いた.まず,声門伸張量,声門開閉量,呼気流量を変化した時の音をサンプリングし,音響特徴量であるピッチ,音圧,スペクトル傾斜を抽出する.それらを訓練データとして,ロボットの順モデルをニューラルネットにより同定し,その後,学習した順モデルを逆モデルの出力誤差推定に利用し,逆モデルを同定した.この機構に加えて実時間聴覚フィードバック機構を用いることで,外乱やモデル化誤差といった現実問題に対応した.本研究はコンピュータシミュレーションのみでは解明困難な人間の発話運動について,物理モデルとしての人間形発話ロボットを構築することによりその解明への糸口を見つけることを目的としている.われわれは声帯・口蓋・舌・口唇・鼻腔など発声に関わる諸器官を弾性体を用いて3次元モデルで構築し,音声生成の再現に取り組んでいる.今年度は既存の人間形発話ロボットWT-7の問題を解決し,多様な音声生成を実現するために,全19自由度を有する新型発話ロボットWT-7R(Waseda Talker No.7 Refined)の製作を行なった.まず,声帯においては人間のような多様な声質の再現を目的として,機構の追加を行った.人間の発話においては,通常発話であるModal(地声)の外に,パルス性の強いCreakyと呼ばれる音声や雑音性の強いBreathyと呼ばれる音声などが生成される場合がある.これらの音声を再現するため声門開閉の調整や,横から力を加える機構を加えることなどにより,声帯の振動様式そのものを制御し,これらの音声の生成を実現した.舌においては,これまで,リンク機構の配置上の制約から声道形状の再現が不十分であったため,より小型のリンク機構を用いることで,人間の舌とほぼ同様の変形量を再現した.さらに,舌素材(弾性体)には音響管として用いた際の共鳴特性が不十分という問題があったが,舌体の変形性の観点から素材変更が不可能であったため,舌部に液体を封入した.口唇機構においては,これまで開閉面積の変更可能範囲が狭く,母音が不明瞭になってしまっていたため,駆動機構を顎と独立させ,開口断面積を直接コントロールする機構を導入した.これらの結果,/o/母音においてのバンド幅が50[Hz]狭くなるなど母音の明瞭性の向上が見られた.

本研究はコンピュータシミュレーションのみでは解明困難な人間の発話運動について,物理モデルとしての人間形発話ロボットを構築することによりその解明への糸口を見つけることを目的としている.われわれは声帯・口蓋・舌・口唇・鼻腔など発声に関わる諸器官を弾性体を用いて3次元モデルで構築し,音声生成の再現に取り組んでいる.既存の人間形発話ロボットWT-7Rは,子音の生成が難しかった.そこで,全19自由度を有する新型発話ロボットWT-7RII(Waseda Talker No.7 Refined II)の製作を行なった.WT-7Rの口唇部は開口面積の再現に主眼を置き,平板の弾性体の開口部の4隅に引っ掛けられた部材によって制御されていた.これは,母音生成には十分であったものの,子音生成に不可欠な完全閉鎖ができず,また,人間の器官を模擬するという目的から見ても,人間と大きく機構が異なっており,改良が必要であった.そこで,弾性体によって人間の口唇の形状を立体的に再現し,口唇周りに万力状に挟み込むことで押し引きが可能な駆動点を5点設けることにより,開口面積の再現とともに,人間に近い完全閉鎖や突き出しなどを再現した.この機構を用いて口唇破裂音/p/を生成した.声帯機構においては,これまでの研究により,人間の声帯形状・振動様式を再現したヒダ型モデルを構築し,気息性発話やフライ発声などの再現に取り組んできたが,さらに人間の生理現象による発話時の声帯動作の解明を目的とし,笑い声の再現に取り組んだ.笑い声の再現のために,人間の通常発話時と笑い声の発話時のデータの比較から,笑い始めにおける強い空気流,高い基本周波数,周期的な発声が笑い声の特徴とみられるため,計測データより,ロボットの制御ルールを構築し,その制御ルールによる発声を行った.
シュードタイプ・バキュウロウイルスベクターを用いたSly病マウスの遺伝子治療

Sly病の遺伝子治療を目的とした新しい遺伝子導入法として、今回バキュロウイルスを用いた系を検討した。更にin vivoでの神経細胞への遺伝子導入の前段階としてラット神経系初代培養細胞への遺伝子導入をpseudotypeを用いて検討した。方法としてはまず、Sly病の欠損酵素であるβ-glucuronidase発現遺伝子(HBG)を挿入した組替えバキュロウイルスをヒト肝細胞癌セルラインであるHepG2に感染させその導入効率を検討した。またLacZ,VSVG(水泡性口内炎ウイルス糖蛋白発現遺伝子)を組み込んだpseudotype baculovirusをRat primary mixed glialcultureに3日間感染させたあとβ-galおよびGFAPの二重染色を施行。Double positive cellを検討することによりアストロサイトへの導入を検討した。結果はCAGプロモーターを持つ発現ベクターを用いてHepG2に感染させた場合mock41nmol/mg/hrに対し223-1397nmol/mg/hrと高い導入効率を得た。またpseudotype baculovirusをRat primary mixed glialcultureに感染させた結果、全アストロサイト(n=500)のうち4.7%にlacZの導入が確認された。今回バキュロウイルスを用いた系として初めて神経系初代培養細胞への遺伝子導入に成功した。その機序としてpseudotypeにすることにより宿主細胞内での小胞体などへの取り込み率が低下するため導入効率が上昇すると考えられた。これはバキュロウイルスを用いた系におけるin vivoでの神経系細胞への遺伝子導入の可能性を示唆する結果であり、今後HBGを組み込んだpseudotype baculovirus等を用いて更なる検討を続ける予定である。方法としてはまず、Sly病の欠損酵素であるβーglucuronidase発現遺伝子(HBG)を挿入した組替えバキュロウイルスをヒト肝細胞癌セルラインであるHepG2に感染させその導入効率を検討した。またLacZ,VSVG(水泡性口内炎ウイルス糖蛋白発現遺伝子)を組み込んだpseudotype baculovirusをRat primary mixed glialcultureに3日間感染させたあとβーgalおよびGFAPの二重染色を施行。
吉野川河口干潟における絶滅危惧巻貝4種の保全・保護と架橋工事による撹乱評価

1.吉野川河口干潟には,全国的にも減少が著しいヒロクチカノコガイを含む4種の絶滅危惧種の貝類が高密度に存在し,健全な個体群が維持されていることが明らかになった.特に,ヒロクチカノコが,これほど高密度に健全な個体群を維持している干潟は他に無いものと思われる.2.これらの4種が生息している干潟の周辺では現在架橋工事が行われているが,3年間のモニタリングでは,特に知覚しうる影響は見られなかった.しかしながら,その影響の有無を判断するには,工事後も含めた長期間にわたるモニタリング調査が必要であろう.3.4種の中でもヒロクチカノコに注目し,その生活史特性を明らかにした.月1回の定期調査を軸に,標識再捕,産卵期には産卵基盤の設置をおこない,成長,産卵,寿命などについて明らかにした.4.前年の調査により,ヨシの枯れ葉がヒロクチカノコにとって重要な役割を果たすことが明らかになった.よって今年度は,毎月の定期調査時に枯れ葉の測定を行い,季節変化を明らかにした.さらに,毎月リターバッグを設置して,ヒロクチカノコによる枯れ葉分解速度の季節変化を明らかにした.また,年に4回小型甲殻類,バクテリアをふくむリターバッグ実験を行い,それぞれの枯れ葉分解速度を計測した.5.ヒロクチカノコおよびフトヘナタリが分布する干潟のランダムに設定した150地点において定量調査を行った.同時に,標高,粒度組成,水分,枯れ葉の量,ヨシの密度などの環境要因を計測し,ヒロクチカノコの分布に影響を与える要素を解析した.6.この研究結果の一部は,2006/9/29の日本プランクトン学会・日本ベントス学会合同大会(広島)にて発表を行った.本研究の目的は、絶滅が危惧されている干潟の巻き貝3種および普通種2種を材料として、1.架橋工事による成長・再生産・生息密度などへの影響を明らかにするため、個体群特性を3年間継続的にモニタリングすること、また同時に各種物理環境も計測し、生息環境への工事の影響を調査する。2.これらの稀少巻き貝類を、密度、生息ゾーンを変えたケージで囲い込み飼育を野外で行い、種間相互関係・生息場所嗜好などの基本生態を明らかにして、保護策をたてることである。3年間の個体群動態モニタリングの初年度として,その定量採集方法を確立した.とくに今年度は,絶滅危惧種であるヒロクチカノコガイに注目し,その生活史と生態を調査した.秋の大潮時に,吉野川住吉干潟のヨシ原内に70カ所のサンプリング地点をランダムに設定した.それぞれに地点に0.1m^2のコドラートを設定し,深さ5cmまでの底質を2mm目のふるいでふるいながら,コドラート内にいる生物をすべて採集した.採集した生物は実験室に持ち帰り,同定後,体サイズ,乾燥・軟体部焼却重量を測定した.また同時に生息場所の物理環境を測定するために,直径10cmのコアを用いて,コドラート内の砂を採集し,粒度分析により土粒子組成をあきらかにした.また,ヨシの密度,含水率,落ち葉の量,高低差も同時に測定した.この結果,ヒロクチカノコガイの個体群体サイズ組成,寿命,成長,分布密度があきらかになった.また物理環境要因とヒロクチカノコガイの密度を共分散構造分析し,それらの関係を考察した.なお,この詳しい結果は,日本貝類学会平成十七年度大会(平成17年4月16日,西宮市貝類館)において,口頭発表予定である.昨年の結果より,吉野川河口干潟には,全国的にも稀なヒロクチカノコガイの高密度な個体群が存在することが明らかになった.ヒロクチカノコガイは,全国のレッドデータブックに取り上げられている500種あまりの貝類のなかでも,もっとも高頻度に掲載されている種である.すなわち,この種は,いまもっとも注目を集めている絶滅に瀕する貝類である.よって,本年度は,ヒロクチカノコガイの詳しい生態解明を中心に,フトヘナタリ(絶滅危惧種)も同時にモニタリングしながら,吉野川河口干潟の干潟貝類の生活史特性をあきらかにした.方法としては,月1回の個体群モニタリングにより,成長・産卵などの生活史特性を詳しく調査した.さらに,標識再捕をおこない,成長のパターンを個別に追跡した.これにより,継続的に個体群がモニタリングされ,架橋工事による影響を観察した.現状では工事の影響による個体数の変化は見られなかった.さらに,野外ケージを用いた成長実験を行い,ヨシ原の落ち葉がヒロクチカノコガイの成長に与える影響を検証した.その結果ヨシの枯れ葉が存在することでヒロクチカノコの成長があきらかに促進された.また,安定同位対比を用いてヒロクチカノコの餌資源を推定したところ,海洋由来有機物(おもに植物プランクトン)であることが明らかになった.よって,ヒロクチカノコは,ヨシの枯れ葉を「お皿」にして,そこに付着する海洋起源の有機物を摂餌しているといえる.なお,この研究結果は2006/03/27の第53回日本生態学会(新潟)にて発表を行った.1.吉野川河口干潟には,全国的にも減少が著しいヒロクチカノコガイを含む4種の絶滅危惧種の貝類が高密度に存在し,健全な個体群が維持されていることが明らかになった.特に,ヒロクチカノコが,これほど高密度に健全な個体群を維持している干潟は他に無いものと思われる.2.これらの4種が生息している干潟の周辺では現在架橋工事が行われているが,3年間のモニタリングでは,特に知覚しうる影響は見られなかった.しかしながら,その影響の有無を判断するには,工事後も含めた長期間にわたるモニタリング調査が必要であろう.

3.4種の中でもヒロクチカノコに注目し,その生活史特性を明らかにした.月1回の定期調査を軸に,標識再捕,産卵期には産卵基盤の設置をおこない,成長,産卵,寿命などについて明らかにした.4.前年の調査により,ヨシの枯れ葉がヒロクチカノコにとって重要な役割を果たすことが明らかになった.よって今年度は,毎月の定期調査時に枯れ葉の測定を行い,季節変化を明らかにした.さらに,毎月リターバッグを設置して,ヒロクチカノコによる枯れ葉分解速度の季節変化を明らかにした.また,年に4回小型甲殻類,バクテリアをふくむリターバッグ実験を行い,それぞれの枯れ葉分解速度を計測した.5.ヒロクチカノコおよびフトヘナタリが分布する干潟のランダムに設定した150地点において定量調査を行った.同時に,標高,粒度組成,水分,枯れ葉の量,ヨシの密度などの環境要因を計測し,ヒロクチカノコの分布に影響を与える要素を解析した.6.この研究結果の一部は,2006/9/29の日本プランクトン学会・日本ベントス学会合同大会(広島)にて発表を行った.