hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
疲労設計理念の実現法に関する研究

本年度の研究で得られた主な研究実績の概要を以下に記す。(1)構造物の使用中の安全性は、種々の安全項目について十分余裕のある検査・補修を行うことで確保できる。船舶、海洋構造物などに生じる疲労損傷を対象に、現場検査におけるき裂能力の把握法、検査の効果を組み込んだ信頼性解析法、および生涯コスト最小化基準に基づく検査計画案の骨格について検討した。(2)海洋構造物に作用する多種の荷重のうち、環境荷重特に波浪荷重は構造物の主要構造の疲労強度を支配する。そこで、不規則波中で海洋構造物に生じる応力振幅の頻度分布の求め方について検討した。さらに求められた応力振幅の頻度分布を基に疲労被害度を求める方法を検討した。(3)海洋構造物の疲労設計を行う際し、使用する設計線図はホットスポット応力を基準としたものが主流となっている。平板構造において明確な定義が示されていない同応力の定義について検討し、さらに実験と有限要素法による解析より疲労設計線図を提案した。また有限要素法の要素分割法についても検討した。(4)船側縦通助骨の横隔壁部の疲労損傷を解明するため、負荷物付きのI型試験体を用いて、実船が嵐に遭遇する場合を想定したランダム荷重の曲げ疲労試験を行った。き裂伝播速度をParis側で求めると安全側の評価になるが、Wheelの遅延モデルで計算すると遅延係数mがほぼ1の場合によい推定ができた。(5)ランダム荷重の性質による疲労き裂伝播挙動の相違を調べるため、CCT試験片による疲労試験を行った。最大荷重が大きいほどき裂伝播速度が遅くなる。しかし、最大荷重が同じで負荷順序が異なる場合、荷重のランダム性が大きいほどき裂伝播速度が大きくなる。最大荷重のほかにき裂伝播速度を支配する因子の存在が示唆された。
ミャンマーにおける生活習慣病に関する実態解明と予防策の検討

最終年度の本研究では、これまで実施してきた研究の成果を論文化することと、研究でやり残した研究課題を明らかにすることの2点を行った。我々は、初めてミャンマーにおける糖尿病患者が10.5%(男性11.5%、女性9.2%)、耐糖能異常は19.7%(男性16.5%、女性23.0%)であることを明らかにし論文として投稿した。これはスリランカ(8.8%)、タイ(6.7%)、バングラデシュ(5.5%)、ネパール(4.5%)と比べても際立って高いことが分かった。特にヤンゴン首都圏は18.2%と著しく高く、最も低い現在の首都ネピドー州(4.2%)に比べ4倍以上も高かった。年齢、都市居住、腹囲、高脂血症が糖尿病関連要因であった。ヤンゴンを除くすべての州で自身が糖尿病に罹患していることを知らない者の割合が知っている者の割合よりも高かった(例えば、マグェー州では知らない者が知っている者より5倍以上高かった)。今後は、遺伝子分析を加えることでより正確なミャンマー人糖尿病の実態が検討できる新たな研究計画を立案したい。次に、昨年まで実施してきたマルコフモデルによるミャンマーにおける糖尿病患者の推移と医療費を推計する研究においてやり残した課題を検討した。今回のモデルで患者の生存年数を推計した際に、死亡との関連が強い合併症である脳卒中と心筋梗塞をモデルに加えたが、これら以外の糖尿病関連の合併症、例えば腎症、網膜症、神経障害などについても含めること、糖尿病の進行と治療のプロセスに「経口糖尿病薬とインスリン」という状態を加えることが新たに提起された。これらの提案をモデルに入れるためのデータが不足しているため、今後文献検索を行うことと同時に、ミャンマー国内で入手できるデータを探すことになった。今後、本研究から開始したミャンマー国の糖尿病将来予測の精度を一層高めるために、マルコフモデル分析を継続する予定である。本研究はミャンマーにおける糖尿病と高血圧の実態を把握することを目的に行われた。報告者らが研究開始前に同国で予備調査を行ったところ、患者の半数が高血圧症、1割が糖尿病に罹患しており、非顕在化された公衆衛生上の脅威であることが判明した。だが、この脅威を裏付ける同国における他のエビデンスは見当たらず、現行保健システムも母子保健と感染症対応で手一杯な状況にあるため、同国の保健関係者における生活習慣病に対する関心は極めて低い状況にあった。当初、本研究は費用対効果分析を行って現行保健システムに負荷の少ない予防策を提案することを目的に開始したが、介入を始めるにもその根拠となる基礎データが全く存在していないことが判明したこと、更に同国の糖尿病学会から糖尿病の実態の把握と政策化に必要なエビデンスを出すことに対する協力要請があったことから、先ずは同国における糖尿病の疫学実態の解明を中心に研究を行うことになった。そこで研究チームは(1)同国における糖尿病患者数の推計、(2)糖尿病のDALY(disability adjusted life year;障害調整生命年)の推計、(3)糖尿病による経済疾病負荷推計を行い、これを保健省や政府に提示して糖尿病予防策を立案するために必要な基礎資料を作成することとした。糖尿病患者数について、2014年にミャンマー糖尿病学会が実施した調査結果を分析し、患者推計を行った。KISH法によりサンプリングされた全国の2564歳の一般住民8,324人における糖尿病患者は10.5%、うち5564歳では22%と推計された。また、19.7%が糖尿病予備軍に相当すると考えられ、全体では約3割が耐糖能異常であることが初めて判明した。これはスリランカの8.8%、タイの6.7%よりも高く、アジアで同国は相対的に糖尿病リスクの高い国であることが分かった。ミャンマーにおける糖尿病患者数の推計に関して、先ずは世界保健機関(WHO)の指導により2014年に同国が実施したSTEP調査結果を入手し、その分析を行った。この横断研究結果から外挿法による患者推計の妥当性を検討した。従来、同国では全国規模で罹患率調査が断片的に実施されてきたため、それらの結果をもとに推計する方法を検討した。DALYは、必ずしもリハビリテーションの理念にそぐわないとか様々な批判にもなっているが、国際比較可能な疾病負担の基準値となっているため、その推計は重要である。ミャンマーでは過去に糖尿病のDALYが137.7というデータが一度だけ世界疾病負荷研究グループにより公表されているが、それ以外のデータを得ることはできなかった。糖尿病の経済評価に関する文献検索を行った。Pubmedでdiabetes mellitus、developing countries、cost analysisを検索語として2005年以降に発表された論文を検索したところ42本がヒットした(原著11本、総説/解説30本、臨床ガイドライン1本)。原著のうち、特定の国の糖尿病の費用又は糖尿病の予防や治療に関する経済評価に関する原著5本とそれらの論文をレビューしている過程で発見した2本の論文を用いて糖尿病による経済疾病負荷推計の方法を検討した。その中でカンボジアを対象に行われたMarkovモデルを用いた2型糖尿病の費用対効果分析が活用できると考えられた。モデルとして、毎年人口の5分の1が高い年齢層に移行すると考え、一定割合が合併症がない糖尿病に罹り、当人はそれを知らないと仮定した。また、診断されるまで平均7年間かかると予想された。1サイクル後(t+1)の各状態の人数は各状態の人数かける各移行確率によって決まるとしたモデルを作成した。

本研究はミャンマーにおける糖尿病による経済的負荷を将来予測することを目的に実施した。文献検索により、その手法としてカンボジアとマレーシアで先行研究があるマルコフ(Markov)モデルを用いた2型糖尿病の費用対効果分析が活用できると考えられた。2016年度は主としてマルコフ過程の確認と個別の遷移確率(移行率)のデータ収集を行った。なお、ミャンマーで入手できないものは日本のデータを代用することにした。WHOのカントリーレポートからミャンマーの糖尿病死亡率は3%と算出されているので糖尿病以外の死亡率は97%となる。2型糖尿病有病率は本研究協力者により推計された10.5%となる。2型糖尿病で遅延して診断された割合は本研究協力者のデータから2型糖尿病と気付いていない患者の割合と考えられるので7.6%である。早期に診断された割合は本研究協力者のデータから2型糖尿病と気付いている患者の割合と考えられるので2.9%である。経口血糖降下薬(OAD)とインシュリン投与の割合は専門医でそれぞれ60.8%、29.4%で、一般医で76.7%、8.2%である(小橋ら、2014)。ミャンマー医師との協議から同国民のインシュリンおよびOADのアドヒアランスは70%と見込んだ。脳卒中・心筋梗塞の死亡率は日本の人口動態統計(2012年)から96.5%、33.4%を用いる。原腎疾患(Yokoyama H et al:Diabetes Care 30: 2175-6, 2007)、神経障害・網膜症(曽根、2010)、心筋梗塞と脳卒中(diabetes.ebm-library.jp)は日本のデータからそれぞれ42%、36.7%、28.5%、0.745%を使用する。PVD(末梢血管障害)(Jstage)は日本のデータから35%を代用する。マルコフモデルとは「確率変数の系列のモデルで、各時刻の状態における遷移確率分布がその直前の時刻の変数の値のみによって決まると仮定したモデル手法」とされる。この方法ではマルコフ過程の各状態は直接観測可能であり、状態の遷移確率のみがパラメータとなる。本研究で用いるマルコフ過程はFlessaとZembokによりカンボジアの先行研究で提唱されたモデルを活用する(Costing of diabetes mellitustype II in Cambodia. Health Economics Review 2014 4:24)。このモデルは糖尿病の自然史を反映し、国や地域の違いに関わらずに使用できると考えられたからである。このモデル解析にはマルコフ過程の24の遷移確率を得る必要がある。しかし、この遷移確率を客観的な疫学データが不備なミャンマーで収集することは困難である。Flessaらも全ての遷移確率をカンボジアでは収集できなかったため欧州のデータを代用している。同じ考え方で、本研究ではミャンマーと同じアジア圏に属する日本のデータを代替え的に使用することにした。疫学データは前述の「研究実績の概要」で述べたようにミャンマーのデータと日本のデータで得ることができた。しかし、コストに関するデータはミャンマーでの予測値を用いる必要がある。
光映像技術を用いた表情解析に基づく顔面表情運動障害の診断・治療支援システムの開発

我々は、ビデオ撮影画像の表情解析に基づく顔面表情運動障害の診断・治療支援システムの開発を1999年より行い、2003年に初期バージョンを完成させた。これは2次元的表情解析であった為、より正確な表情解析を目指し本研究期間内に撮影方法や解析ソフトの改良を行なって、3次元的解析法を開発し新システムを完成させ、さらに臨床応用によりシステムの評価と改良を続け、今までの研究を新たに展開・推進させた。1.システム改良とシステム実験(1)撮影方法改良:鏡利用の3次元撮影装置として鏡の位置・角度・サイズ、顔とビデオの距離を検討し、また表情撮影・頭部固定法の検討を行い、頭部固定装置と鏡を一体化した新たな頭部固定・3次元撮影装置を開発・作製した。(2)解析ソフト改良:臨床使用により、特に3次元解析を行うことで生じた問題点などにつき改良を行い、3次元解析に適した2nd Version解析ソフトを完成させた。(3)3次元解析のアルゴリズム開発:3次元的な真の移動量を求めるための3次元解析アルゴリズムを開発し実装検討した。(4)システム実験:健常者20名におけるデータ取得を行い、3次元解析のアルゴリズムや解析システムの精度の検討を行った。2.システムの臨床応用と評価主に顔面神経麻痺の再建手術やボツリヌストキシン治療の患者を対象として、治療前後に各種表情運動のビデオ撮影を46名に行い、これらの撮影データから表情運動を解析し、解析結果の臨床的意味付けを行い、これに基づいた手術・治療計画を検討した。また、患者アンケートや顔面運動の機能的検討(兎眼の程度、食事のもれ・会話などでの口唇機能)、及び40点法や筋電図検査など他の評価法などによる評価と解析結果を比較・検討し、システムの有効性を検討した。顔面痙攣の患者4名、異常共同運動の10名の患者で表情解析も行い、顔面痙攣・異常共同運動の定量的評価への応用につき検討した。1.診断・治療・手術支援システムの改良とシステム実験(1)より高い精度と再現性を目指した撮影方法の改良:鏡利用の3次元撮影装置として鏡の位置・角度・サイズ、顔とビデオの距離を検討し、また表情撮影・頭部固定法の検討を行った。その結果、頭部固定装置と鏡を一体化した新たな頭部固定・3次元撮影装置を作製した。(2)解析ソフトの改良:今までの臨床使用により明らかになった問題点、特に3次元解析を行うことで生じた問題点などについての改良を行い、3次元解析に適した2nd Versionの解析ソフトを完成させた。(3)3次元解析のアルゴリズム開発:3次元的な真の移動量を求めるための、3次元解析のアルゴリズムを見直し、新たなアルゴリズムを開発した。(4)システム実験:健常者におけるデータ取得を行い、3次元解析のアルゴリズムや解析システムの精度の検討を行った。2.診断・治療・手術支援システムの運用・臨床応用とシステム評価システムを用いて顔面神経麻痺および表情運動障害の診断・治療評価・手術計画支援を臨床的に行った。主に顔面神経麻痺の再建手術やボツリヌストキシン治療の患者を対象として、治療前後に各種表情運動のビデオ撮影を20名に行った。これらのビデオ撮影データから、開発したシステムを用いて表情運動を解析した。解析結果の臨床的意味付けを行い、これに基づいた手術・治療計画を検討した。また、患者アンケートや顔面運動の機能的検討(兎眼の程度、食事のもれ・会話などでの口唇機能)、および視診による40点法など他の評価法などによる評価と解析結果を比較・検討し、開発したシステムの有効性につき検討した。

神経血管柄付き筋移植例については筋電図(誘発電位や干渉波形)検査を行い、筋電図検査による経過観察と比較・検討した。1.診断・治療・手術支援システムの改良とシステム実験(1)より高い精度と再現性を目指した撮影方法の改良:昨年度(17年度)に改良作成した鏡利用の3次元撮影装置・頭部固定装置を用いた患者及び健常者の撮影を行ない、装置の使用上の問題点や鏡の位置・角度・サイズ、顔とビデオの距離などの再検討を行なった。そして、これらの検討によりさらに装置に改良を加えた。顔面細部の運動評価のためのビデオ撮影法も検討した。(2)解析ソフトの改良:昨年度に改良作成した表情解析ソフト改良版を用いて、患者及び健常者の表情解析を行なった。そして、改良版の問題点やさらなる改良点につき検討を行なった。(3)3次元表情運動解析の改良:昨年度に開発した3次元表情運動解析のアルゴリズムのシステム実装を目指して、実際的な実装検討を行なった。2.治療・手術支援システムの運用・臨床試用・評価昨年度に改良したシステム(新3次元撮影装置・頭部固定装置、ソフト改良版)を用いて、顔面神経麻痺の再建手術やボツリヌストキシン治療の患者を対象として、治療前後に各種表情運動のビデオ撮影を12名に行なった。これらのビデオ撮影データから改良版解析ソフトによる表情解析を行なった後、解析結果の臨床的意味付けを行い、これに基づいた手術・治療計画を検討した。また、顔面運動の機能的検討(兎眼の程度、食事のもれ・会話などでの口唇機能)や40点法による評価と解析結果を比較・検討し、開発したシステムの有効性につき検討した。筋移植例については筋電図(誘発電位や干渉波形)検査を行い、筋電図検査による経過観察と比較・検討した。また、顔面痙攣の患者4名の表情解析も行い、顔面痙攣の定量的評価への応用につき検討した。旧解析ソフトにより解析した患者の内、30名分のビデオ撮影画像についても改良ソフトにより解析し直した。これらについても、40点法など他の評価法などによる評価と解析結果を比較・検討し、改良したシステムの有効性や問題点につき検討した。1.診断・治療・手術支援システムの改良とシステム実験(1)より高い精度と再現性を目指した撮影方法の改良:改良作成した鏡利用の3次元撮影装置・頭部固定装置を用いた患者及び健常者の撮影を行ない、装置の使用上の問題点や鏡の位置・角度・サイズ、顔とビデオの距離などの再検討を行なった。また、改良以前の頭部固定装置による撮影での解析結果との精度を比較した。これらの検討によりさらに装置に改良を加えた。また、顔面細部の運動評価のためのビデオ撮影法や、検査法の患者への指導ビデオ作成を検討した。(2)解析ソフトの改良:表情解析ソフト改良版を用いて、患者及び健常者の表情解析を行ない、改良版の問題点やさらなる改良点につき検討を行なった。(3)3次元表情運動解析の改良:開発した3次元表情運動解析のアルゴリズムのシステム実装を目指して、実際的な実装検討を行なった。2.治療・手術支援システムの運用・臨床試用・評価
間葉系幹細胞のステムネスにおけるTWIST1の機能解明

間葉系幹細胞(Mesenchymal stem cell: MSC)は骨髄、脂肪、滑膜から分離される組織幹細胞であり、優れたサイトカイン産生能力と分化能力を有することから様々な疾患に対する再生医療材料として注目されている。一方で、MSCの未分化性や分化多能性、増殖といった幹細胞としての性質(ステムネス)がどのように成立し、維持されているのかはわかっていない。本研究ではMSCのステムネスに関わる重要な転写因子としてTWSIT1に注目しオミックス技術を用いてエピゲノム転写制御におけるTWIST1の機能の全貌解明を試みる。
ｉＰＳ細胞を利用した新規抗癌剤シーズ化合物の探索系の樹立

iPS細胞と悪性腫瘍の共通性に注目し、転写制御領域の脱メチル化を誘導する低分子化合物を探索する実験系を試みた。E6/E7によって不死化されたマウス胎児由来線維芽細胞に対して4因子を発現させた。感染後に立体的なコロニーの出現を認め、出現したコロニーをpick upし立体的なコロニーを形成した。樹立後の合計6回のパッセージにおける培養上清のルシフェラーゼ活性は全てのクローンでPassage 2よりルシフェラーゼ活性は下降、1/1000以下にまで低下した。レポーター遺伝子のサイレンシングが行われていることを意味する。サイレンシング状態のプロモーター活性を回復させる薬剤をスクリーニング中である。【目的】本研究はiPS細胞と悪性腫瘍の性質の共通性に注目し、iPS細胞を利用して転写制御領域の脱メチル化を誘導する低分子化合物を探索する実験系を樹立することを目的とした。本研究はiPS細胞に認められる外来性遺伝子のサイレンシングに与える影響を指標に、新たな脱メチル化剤を探索するシステムの樹立を目的とした。iPS細胞は転写制御領域を高頻度にメチル化によりサイレンシングする特徴を持ち、この特性を本研究で利用した。【研究成果】計画当初は、iPS細胞化する際のサイレンシングを検出するために、蛍光蛋白質(EGFP)を使用することを予定していたが、より感度良く加えて培養上清より簡便に検出出来る実験系を目指し、分泌型ルシフェラーゼ(Metluc)とカイアシ由来の蛍光蛋白質(copGFP)加えて薬剤耐性遺伝子(Neo)を2Aペプチドで連結したMetluc-copGFP-Neoのマーカー遺伝子を開発した。まず、初期段階としてマウスの線維芽細胞へMetluc-copGFP-NeoカセットをLTRプロモータの支配下のレトロウィルスにて導入した。その後、山中4因子を含むレンチウィルスであるSTEMCCAの導入により、iPS細胞を誘導した。得られたコロニーを元に合計5株のマウスiPS細胞株を得た。それらのiPS細胞において初期に導入したマーカーはiPS化する前と比較し、培養上清におけるルシフェラーゼ活性では1/100,リアルタイムPCRを用いた検出では1/1000にサイレンシングされていることが明らかになった。iPS細胞化する際のエピジェネティックな変化によって新規に開発したマーカーが不活性化したことが明らかになった。この結果を元にゲノムの脱メチル化剤である5-Aza-dCの暴露を行い、ゲノムの脱メチル化活性を検出可能であるか検討中である。本研究ではマウス線維芽細胞にLTRプロモータ制御下に分泌性ルシフェラーゼを使用したレトロウィルス由来のレポーターを導入した。分泌性ルシフェラーゼは培養上清から簡便かつ高感度にその活性を検出することが出来る。この細胞へ山中リプログラミング4因子を導入しiPS細胞への誘導した。合計で20を越えるマウスiPS細胞様形態を示す株の樹立に成功、アルカリフォスファターゼ活性、Nanog, Oct3, SSEA-1の陽性を示し、得られた細胞株はiPS細胞であるデータを得た。興味深いことに、プログラミングの程度が高い品質の高いiPS細胞は線維芽細胞の段階で導入された分泌性ルシフェラーゼ遺伝子が強くサイレンシングしているが、リプログラミングの程度が低いiPS細胞はルシフェラーゼ遺伝子のサイレンシングが行われないまま、高い活性が保持されていた。すなわち我々は分泌性ルシフェラーゼの利用により、培養上清中からiPS細胞のサイレンシングを鋭敏に検出出来る実験系を樹立したと結論した。ゲノムのメチル化状態を変化させることが知られている5-Aza-dCを分泌性ルシフェラーゼマーカーがサイレンシングしているiPS細胞株に暴露したが、フィーダー細胞上で幹細胞の未分化状態を保持する限り、マーカー遺伝子の再活性化が検出できない結論に至った。加えてマウスの幹細胞においてLTRプロモーターはメチル化だけではなく、ESETと呼ばれる転写の不活性化する仕組みが存在することが近年、明らかになっている。従ってiPS細胞を未分化状態ではなく、分化状態に移行させることで脱メチル化活性を検出出来る可能性があり、胚様体(EB)を用いた検出を試みている。マウス胎児由来線維芽細胞にレトロウィルスを用いて蛍光蛋白質および薬剤耐性マーカーを導入し、ほぼ100%の頻度で遺伝子導入されていることを確認した。さらにiPS細胞化を誘導するために、マウス由来Oct3/4, Klf4, Sox2, c-mycの4種類の遺伝子をレトロウィルスによって導入した。これらの4因子の導入後、約3週間後に立体的に隆起した細胞形態を示すiPS細胞の出現を確認した。このコロニーを顕微鏡下でピックアップし、合計20を超すiPS細胞ラインの樹立に成功した。全てのiPS細胞株で事前に導入した蛍光蛋白質遺伝子は不活性化しており、LTRプロモーターの高頻度なサイレンシングが確認された。

事前に導入されていた蛍光および薬剤耐性遺伝子のLTRプロモーターはiPS細胞化に際する李プログラミングにより不活性化(サイレンシング)を受けたと考えられた。その後、樹立されたiPS細胞において、NanogおよびOct3/4遺伝子などの多能性マーカー遺伝子の発現を検出しており、さらに生物学的特徴を明らかにする予定であった。しかし、東北・東日本大震災により、大規模ならびに長期間にわたる停電が東北大学農学研究科において生じた。このため、一度樹立したiPS細胞は超低温冷凍庫がほぼ室温にさらされたために死滅したことを、平成23年6月の震災後に確認を行なった。長期停電によって温度変化にさらされ、細胞は死滅したと考えられた。現在、再度同様のマーカー遺伝子を導入したマウスiPS細胞を樹立すべく実験を行なっている。当初の目的であるゲノムのエピゲネティックな変化を検出するiPS細胞の実験系の構築は達成した。しかし研究遂行する初年度は研究実施機関である東北大学が東日本大震災からの被害からの復旧に大きく労力を割かれた年度であり、研究計画の遂行が大きく遅延した。このために陽性対象物質である5-Aza-dCによる評価が遅延した。一度はマーカー遺伝子を導入したマウス由来iPS細胞の樹立に成功したが、その後に発生した東北・東日本大震災によって生じた停電によって、死滅することとなった。現在、再度蛍光マーカーおよび薬剤耐性遺伝子を持つマウスiPS細胞を樹立できるよう実験を進行している。加えて樹立した細胞は、茨城県つくば市に存在する理化学研究所、バイオリソースセンターに一部を保管して頂く予定である。今後の災害に対する研究リソースの保全を行う予定である。一部、遅延したゲノムの脱メチル化低分子化合物、特に陽性対象物質である5-Aza-dCによる暴露実験を今後進行する予定である。iPS細胞への化合物の細胞毒性が生じる可能性があるが、その場合はiPS細胞を分化させる実験系、胚様体形成を行う別の実験系において検出を試みる予定である。陽性対象である5-Aza-dCでの結果を元に、化学物質のライブラリーから新規脱メチル化活性を持つ化合物のスクリーニング系を稼働させる予定である。蛍光マーカーおよび薬剤耐性遺伝子を持つマウス由来iPS細胞を樹立し、その後に脱メチル化化合物の陽性対象物質である5-Aza-dCを暴露し、一度サイレンシングされた遺伝子が発現の回復を生じることを明らかにする。加えて、導入したLTRプロモーターのメチル化状態を検出し、5-Aza-dC処理によってメチル化状態が変化したことを検出する。培養細胞用血清(50千円X10 =500千円)細胞培養用ディッシュ(20千円X 10= 200千円)低分子シグナル阻害剤(50千円X 6= 300千円)遺伝子導入試薬、培養細胞用血清、遺伝子抽出試薬など、消耗物品に使用する予定である。
話者と発話の選択的視聴覚認知に関する基礎的研究

本研究課題のテーマは,一対の視聴覚情報の発生源としての話者を,効率的に定位,認識できるメカニズムについて,人間の感覚情報処理に関する基礎的知見から説明することである。話者の特定には,発話内容の知覚,構音動作の知覚,および,これらの視聴覚情報の統合という段階的な処理過程が関与しているが,これら全ての過程では,共通して,何らかの感覚情報間の対応付けが行われている。そこで,私は,感覚モダリティ内,および感覚モダリティ間の対応付けに用いられるメカニズムの性質を明らかにすることを目的としている。先行研究では,バインディング(対応付け)課題を用いた実験によって,視覚の異属性(e.g.色と運動)間,および異種感覚モダリティ(e.g.視覚と聴覚)間の対応付けが,約2.5Hzという共通の時間限界を示し,ゆえにこれらの対応付けが,高次の共通のメカニズムで行われている可能性が示唆されている。よって,視覚以外の感覚モダリティ(e.g.聴覚)においても,異属性(e.g.振幅と音高)間の対応付けの時間限界が上記と共通の値になるのであれば,感覚モダリティを問わず,独立のモジュールで処理された感覚情報の対応付けは,共通のメカニズムで行われると推察することができる。前年度までの研究においては,三種類の聴覚属性を用いて,属性間の対応付けの時間限界を測定した。その結果,属性間の対応付けの時間限界は約2.54Hzであり,条件によっては, 2.5Hzよりも有意に高い値となった。しかし,この実験においては,聴覚末梢系で生じる何らかの手掛かりによって,対応付けの可否によらず課題が遂行できていた可能性があった。そこで,聴覚末梢系で生じる手掛かりを可能な限り統制できる刺激を用い,さらに刺激の顕著性を操作して,聴覚属性間の対応付けの時間限界について,再検討を行った。その結果,聴覚属性間の対応付けの時間限界は約34Hzであり,この若干高い時間限界は末梢の手掛かりや刺激の顕著性によらず安定していることが分かった。このことから,聴覚においては,異なる属性間の対応付けであっても,視覚属性間および異種感覚モダリティ間の対応付けに用いられる共通のメカニズムよりも低次の,聴覚系内部のメカニズムで行われるものと考えられる。(抄録なし)本研究の目的は、一対の視聴覚情報の発生源としての話者を我々が効率的に定位、認識できるメカニズムについて、視覚、聴覚、およびクロスモーダル認知に関する基礎的知見から説明することである。このためには、外界に多数存在する視覚情報と聴覚情報の対応付け、つまり発生源を共有すると考えられる視聴覚情報のバインディングがどのように行われているのか、という問題を解決する必要がある。対応付けの最も重要な手掛かりである同時性知覚の時間限界を探るアプローチとして、バインディング課題が存在する。一定の時間周波数で特徴の交代する刺激を二つ提示し、同時に提示された特徴のペアを答えさせるもので、課題を遂行できる最大の時間周波数をバインディングの時間限界として測定する。これまでに様々な視覚刺激を用いて検討が行われてきた。視覚の同属性内の対応付けにおいては時間限界が比較的高く、かつ用いる刺激の属性や刺激同士の距離といった低次のパラメータによって影響を受けること、また一方で、視覚の異なる属性や視聴覚といった異なるモダリティ同士の対応付けにおいては時間限界が23Hzと低く、属性の組み合わせによらず常に一定の値になることが知られている。前者は特定の刺激属性に特化した低次の専用メカニズムの時間限界を、後者は複数の刺激属性およびモダリティにまたがる比較的高次の汎用メカニズムの時間限界を反映していると考えられる。そこで本研究では視覚と聴覚における情報統合メカニズムの共通性について検討するため、聴覚においても視覚と同様に、処理の階層に応じた様々な情報統合メカニズムの時間限界が見られるかを調べた。視覚刺激として方位と色、聴覚刺激として純音や帯域制限雑音、反復ルプルノイズを用いて同属性内、異属性間の対応付けを行わせたところ、聴覚においても視覚と同様に、低次から高次までのどの処理段階が関与するかによってバインディング課題の時間限界が異なり、かつ異なる属性間の対応付けにおいては視聴覚で同じ、または類似のメカニズムが用いられることを示唆され、視聴覚の共通性が明らかになった。本研究課題のテーマは,一対の視聴覚情報の発生源としての話者を,効率的に定位、認識できるメカニズムについて,人間の感覚情報処理に関する基礎的知見から説明することである。先行研究では,バインディング(対応付け)課題(※)を用いた実験によって,視覚の異属性(e.g.色と運動)間,および異種感覚モダリティ(e.g.視覚と聴覚)間の対応付けが,約2.5Hzという共通の時間限界を示し,ゆえにこれらの対応付けが,高次の共通のメカニズムで行われている可能性が示唆されている。

そこで,平成23年度の研究において,三種類の聴覚属性を用いて,属性間の対応付けの時間限界を測定したところ,属性間の対応付けの時間限界は約2,54Hzであり,条件によっては,視覚の属性間および異種感覚モダリティ間の対応付けよりも有意に高い値となった。しかし,この実験においては,聴覚末梢系で生じる何らかの手掛かりによって,対応付けの可否によらず課題が遂行できていた可能性があった。そこで,平成24年度の研究では,聴覚末梢系で生じる手掛かりを可能な限り統制できる刺激を用いて,聴覚属性間の対応付けの時間限界について,再検討を行った。用いた刺激は,音高(純音の周波数で定義),振幅(純音の振幅で定義),時間情報に基づく音高(帯域制限パルス列の繰り返し周波数で定義)であった。単一聴覚フィルタ内の相互作用,周波数変調によって周辺の帯域にもたらされる振幅変調,同時に提示される二つの周波数成分間の調和性の変化,帯域制限パルス列の成分が聴覚フィルタで分解されることによるスペクトル情報の利用,等といった手掛かりの利用可能性を可能な限り排除できるよう,注意を払って,刺激を提示する帯域や,周波数成分を設定した。その結果,聴覚属性間の対応付けの時間限界は約34Hzであり,やはり視覚属性間および異種感覚モダリティ間の対応付けの時間限界(約2.5Hz)より有意に高い値となった。このことから,聴覚においては,異なる属性間の対応付けであっても,視覚とは異なり,視覚属性間および異種感覚モダリティ間の対応付けに用いられる共通のメカニズムよりも低次の,聴覚系内部のメカニズムで行われるものと考えられる。本研究課題のテーマは,一対の視聴覚情報の発生源としての話者を,効率的に定位,認識できるメカニズムについて,人間の感覚情報処理に関する基礎的知見から説明することである。話者の特定には,発話内容の知覚,構音動作の知覚,および,これらの視聴覚情報の統合という段階的な処理過程が関与しているが,これら全ての過程では,共通して,何らかの感覚情報間の対応付けが行われている。そこで,私は,感覚モダリティ内,および感覚モダリティ間の対応付けに用いられるメカニズムの性質を明らかにすることを目的としている。先行研究では,バインディング(対応付け)課題を用いた実験によって,視覚の異属性(e.g.色と運動)間,および異種感覚モダリティ(e.g.視覚と聴覚)間の対応付けが,約2.5Hzという共通の時間限界を示し,ゆえにこれらの対応付けが,高次の共通のメカニズムで行われている可能性が示唆されている。よって,視覚以外の感覚モダリティ(e.g.聴覚)においても,異属性(e.g.振幅と音高)間の対応付けの時間限界が上記と共通の値になるのであれば,感覚モダリティを問わず,独立のモジュールで処理された感覚情報の対応付けは,共通のメカニズムで行われると推察することができる。前年度までの研究においては,三種類の聴覚属性を用いて,属性間の対応付けの時間限界を測定した。その結果,属性間の対応付けの時間限界は約2.54Hzであり,条件によっては, 2.5Hzよりも有意に高い値となった。
中国古代の陰陽五行　―占と科学の成立―

1、2018年度は、研究打ち合わせ会を兼ねた「日書研究読書会」を京都大学人文科学研究所等において全7回開催・参加した。また、楚簡研究会と連携し、研究討論会を1回開催・参加した。また、天地瑞祥志研究会と連携し、研究討論会を全10回開催・参加した。2、2018年9月8日に、国際シンポジウム「『天地瑞祥志』を中心とした前近代東アジア思想・文化の総合的研究」を開催し、フランスからハイエク=マティアス氏(パリ・ディドロ大学准教授)を、中国から孫英剛氏(浙江大学歴史系教授)を招聘した。3、中国古代占術を研究するために、関連文献の電子テキスト化を行った。対象として取り上げたのは、関沮周家台秦簡、銀雀山漢簡等である。4、中国古代占術の中で漢初の占術理論を記述した馬王堆帛書の中から、『陰陽五行甲篇』の全体像の復原を行い、「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《徙》《天地》《女発》《雑占之二》綴合校釈(修訂版)」、「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《雑占之六》、《築(二)》、《五行禁日》綴合校釈(修訂版)」、「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《堪輿》綴合校釈上」、「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《堪輿》綴合校釈下」等の4編の論文を中国語で執筆し、関連する論文「北京大学漢簡「堪輿」と馬王堆帛書『陰陽五行』甲篇「堪輿」の対比研究」、「“皋"与“@(澤ー水)"」、「『抱朴子』所見呪語の遡及的考察」等の3編の論文を中国語・日本語で執筆した。その他、出土資料・術数に関する論文4編を中国語・日本語で執筆した。また、湖北出土簡帛日書国際学術研討会、世界漢字学会第六届年会等の国際学会において10回の報告を中国語・日本語で行った。5、研究成果を纏めた『東アジア思想・文化の基層構造ー術数と『天地瑞祥志』ー』を汲古書院から出版した。1、2016年度は、研究打ち合わせ会を兼ねた「日書研究読書会」を京都大学人文科学研究所等において全8回開催・参加した。また、上海博楚簡研究会と連携し、「出土資料と漢字文化研究会」を全5回開催・参加した。また、天地瑞祥志研究会と連携し、研究討論会を全7回開催・参加した。2、2016年度、本務校の公立大学法人山梨県立大学教員特別研修派遣制度を利用し、京都大学大学院文学研究科において公立大学研修員として研修を行った。その間、北京大学歴史学系(5月)・復旦大学出土文献与古文字研究センター(910月)に訪問学者として滞在・研究・学術交流を行った。また、北京大学歴史学系(大学院)、清華大学歴史学系(大学院)、山東大学儒学高等学院(大学院)等において特別講義を依頼され行った。対象として取り上げたのは、北京大学蔵西漢竹書、清華大学所蔵戦国竹簡等である。4、中国古代占術の中で漢初の占術理論を記述した馬王堆帛書の中から、『陰陽五行甲篇』の全体像の復原を行い、「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇整體結構的復原」「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《諸神吉凶》綴合校釋」「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《諸神吉凶》前半章綴合校釋」「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《道》《雜占之四》綴合校釋」等の5編の論文を中国語で執筆し、関連する論文「關於《陰陽五行甲篇》所見的“病"」「《抱朴子》詞彙試釋一則」「“諾皋"考」等の3編の論文を中国語で執筆した。また、第四届世界漢字学会、出土文献与諸子学学術研討会等の国際学会において4回の報告を中国語で行った。5、東京大学で行われた中国出土資料学会に鄧佩玲助理教授(香港大学中文学院)を招聘し、学術報告を行ってもらい、学術交流を行った。研究実績の概要の通り、計画以上に進んでいる。業績としては、馬王堆漢墓帛書「陰陽五行甲篇」・「陰陽五行乙篇」の訳注作業を行ったが、『陰陽五行甲篇』の全体像の復原を行い5編の論文を執筆し、関連する論文を3編執筆することができた。また、海外で開催された国際学会において4回の学術報告を中国語で行うことができた。海外からは鄧佩玲助理教授(香港大学中文学院)を招聘し、学術報告を行ってもらい、国際学術交流を行うことができた。1、2017年度は、研究打ち合わせ会を兼ねた「日書研究読書会」を京都大学人文科学研究所等において全8回開催・参加した。

また、上海博楚簡研究会と連携し、「出土資料と漢字文化研究会」を全5回開催・参加した。また、天地瑞祥志研究会と連携し、研究討論会を全10回開催・参加した。また、中国出土資料学会と連携し、東京大学において「新出土医学簡講演会」を開催・参加した。2、2017年5月1日に、これまでの研究業績が評価され、山東大学儒学高等研究院国際漢学研究センター教授を委嘱された。3、中国古代占術を研究するために、関連文献の電子テキスト化を行った。対象として取り上げたのは、隨州周家寨M8漢簡、天水放馬灘秦簡等である。4、中国古代占術の中で漢初の占術理論を記述した馬王堆帛書の中から、『陰陽五行甲篇』の全体像の復原を行い、「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《室》《築》綴合校釋」「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《雜占之七》綴合校釋」「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《徙》《天地》《女發》《雜占之二》綴合校釋」「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《雜占之六》《築(二)》《五行禁日》綴合校釋」等の5編の論文を中国語で執筆し、関連する論文「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》乙篇綴合之一」「出土資料「堪輿」考」等の3編の論文を中国語・日本語で執筆した。また、第28屆中國文字學國際學術研討會、世界漢字學會第五屆年會等の国際学会において6回の報告を中国語で行った。5、東京大学で行われた「新出土医学簡講演会」に柳長華教授(中国中医科学院中国医史文献研究所)ら5名を招聘し、学術報告を行ってもらい、学術交流を行った。また、日本女子大学で行われた「Multi Disciplinary Approachによる新出土資料の総合的研究」に范常喜教授(中国・中山大学)ら3名を招聘し、学術報告を行ってもらい、学術交流を行った。研究実績の概要の通り、計画以上に進んでいる。業績としては、馬王堆漢墓帛書「陰陽五行甲篇」・「陰陽五行乙篇」の訳注作業を行ったが、『陰陽五行甲篇』の全体像の復原を行い5編の論文を執筆し、関連する論文を3編執筆することができた。また、海外で開催された国際学会において6回の学術報告を中国語で行うことができた。海外からは柳長華教授(中国中医科学院中国医史文献研究所)、マーティン・カーン教授(米国・プリンストン大学)、范常喜教授(中国・中山大学)らを招聘し、学術報告を行ってもらい、国際学術交流を行うことができた。1、2018年度は、研究打ち合わせ会を兼ねた「日書研究読書会」を京都大学人文科学研究所等において全7回開催・参加した。また、楚簡研究会と連携し、研究討論会を1回開催・参加した。2、2018年9月8日に、国際シンポジウム「『天地瑞祥志』を中心とした前近代東アジア思想・文化の総合的研究」を開催し、フランスからハイエク=マティアス氏(パリ・ディドロ大学准教授)を、中国から孫英剛氏(浙江大学歴史系教授)を招聘した。対象として取り上げたのは、関沮周家台秦簡、銀雀山漢簡等である。4、中国古代占術の中で漢初の占術理論を記述した馬王堆帛書の中から、『陰陽五行甲篇』の全体像の復原を行い、「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《徙》《天地》《女発》《雑占之二》綴合校釈(修訂版)」、「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《雑占之六》、《築(二)》、《五行禁日》綴合校釈(修訂版)」、「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《堪輿》綴合校釈上」、「馬王堆漢墓帛書《陰陽五行》甲篇《堪輿》綴合校釈下」等の4編の論文を中国語で執筆し、関連する論文「北京大学漢簡「堪輿」と馬王堆帛書『陰陽五行』甲篇「堪輿」の対比研究」、「“皋"与“@(澤ー水)"」、「『抱朴子』所見呪語の遡及的考察」等の3編の論文を中国語・日本語で執筆した。その他、出土資料・術数に関する論文4編を中国語・日本語で執筆した。
哺乳動物における生体調節因子としての分岐鎖アミノ酸の生理機能

分岐鎖α-ケト酸脱水素酵素(BCKDH)キナーゼ(BDK)は、分岐鎖アミノ酸代謝の重要な調節酵素である。これまで実施してきたBDK活性に対するチアミンピロリン酸(TPP)とCaイオンの作用に関する研究において、生理的細胞内濃度のCaイオンによりTPPによるBDK阻害作用は著しく増大することを発見した。よって、生体内ではCaイオンがBCAA代謝を調節することが判明した。これまでBDKの組織特異的KOマウスを作製し、研究を実施してきた。本研究では、筋特異的BDK-KO(BDK-mKO)マウスと正常Controlマウスに通常食(20%タンパク質食)もしくはタンパク質含量を5%または2.5%まで減らした低タンパク質食で1週間飼育した。その後、BCAAを経口投与し、骨格筋中のBCAA濃度とS6K1のリン酸化量を測定したところ、ControlとBDK-mKOマウスのいずれにおいても、食餌タンパク質量による筋BCAA濃度に対する影響はなかったが、両マウスともに低タンパク質食摂取によりS6K1のリン酸化が有意に上昇し、特に2.5%タンパク質食を摂取させたBDK-mKOマウスで最も高値を示した。すなわち、食餌タンパク質の著しく低い食餌で短期間飼育すると、マウス(特にBDK-mKOマウス)の骨格筋のmTORC1の反応性が有意に上昇することが判明した。一方、BDK-mKOマウスは運動持久力が低下することをこれまでの研究において観察したが、我々は本研究において、運動持久力に強く関係する筋グリコーゲンを回復する能力について検討した。その結果、運動後の筋グリコーゲン回復力はBDK-mKOマウスで低下していることが判明した。脳神経におけるBCAAの機能を検討するために、本研究では前頭部興奮性ニューロン特異的BDK欠損マウス(Emx1-BDK-KOマウス)の作製に挑戦し、成功した。予定していた研究は、概ね順調に進行している。CaイオンによるBCAA代謝調節に関する研究は、一応決着がついたと判断している。今後は、BDK-mKOマウスおよびEmx1-BDK-KOマウスを用いた研究が中心となる予定である。BDK-mKOマウスにおける筋タンパク質合成に関する研究では、低タンパク質食と共に3%BCAA水を摂取させるとBCAAによる筋mTORC1活性化がどのように変化するかを検討する。さらに、このmTOC1活性化の増大を利用して、効果的に筋原線維タンパク質を増大する食事法についても検討したい。BDK-mKOマウスの低下した筋グリコーゲン回復力については、運動直後から3%BCAA水を与えることによりBDK-mKOマウスの筋グリコーゲン量の回復が改善されるかを検討し、筋グリコーゲン代謝に対するBCAAの作用を確認する。脳神経特異的BCAA代謝亢進マウス(Emx1-BDK-KOマウス)においては、尾懸垂による後肢の抱えこみ動作を指標にして脳神経系機能の異常を明確にすると共に、その異常が発生する直接的な原因について検討する。その方策として、Emx1-BDK-KOマウスに低タンパク質食を与えて飼育し、より脳内のBCAAが不足した状態での脳神経機能について検討する。さらに、脳の組織切片を用いてより詳細にBDK発現の有無を調べることが重要であろう。筋において特異的にBCAA分解が亢進し筋におけるBCAAレベルが有意に低下する筋特異的BDK欠損(BDK-mKO)マウスを用いた研究において、筋肉の低BCAAレベルでは、トレーニング後の筋グリコーゲン含量が低下するとともに、エネルギー代謝の乱れも起こり、その結果として持久的運動能力が低下することが認められた。一方、そのBDK-mKOマウスにBCAAサプリメントを投与しながら飼育およびトレーニングを行うと、筋グリコーゲン量は正常レベルに回復し、エネルギー代謝の乱れも認められず、トレーニング後持久的運動能力が回復することが判明した。運動トレーニングにおけるBCAAの重要性が示唆された。予定していた研究計画は、概ね計画通りに実施中である。ほとんどの研究は、平成29年度に開始して現在も進行中である。

一方、BDK-mKOマウスは運動持久力が低下することをこれまでの研究において観察したが、我々は本研究において、運動持久力に強く関係する筋グリコーゲンを回復する能力について検討した。その結果、運動後の筋グリコーゲン回復力はBDK-mKOマウスで低下していることが判明した。脳神経におけるBCAAの機能を検討するために、本研究では前頭部興奮性ニューロン特異的BDK欠損マウス(Emx1-BDK-KOマウス)の作製に挑戦し、成功した。予定していた研究は、概ね順調に進行している。CaイオンによるBCAA代謝調節に関する研究は、一応決着がついたと判断している。今後は、BDK-mKOマウスおよびEmx1-BDK-KOマウスを用いた研究が中心となる予定である。BCAA代謝調節にCaイオンが関与する研究については、研究結果をまとめて論文化する予定である。BDK-mKOマウスでは、筋タンパク質を維持するために十分量のBCAAを摂取することが重要であることが判明しているので(Sci Rep. 2017;7:39825)、本研究ではタンパク質2.5%と5%の低タンパク質食をBDK-mKOマウスに与えて飼育した場合の骨格筋および筋タンパク質に及ぼす影響を解析する予定である。これらのマウスにおける筋ミトコンドリアの生合成についても解析する予定である。脳神経特異的BDK欠損マウスを作製するために、神経幹細胞特異的にCre組み換え酵素を発現するEmx1-Creノックインマウス(大脳皮質、海馬、嗅球の興奮性神経細胞特異的にCre組換え酵素を発現)とBDK-floxedマウスを交配する予定である。BDK-mKOマウスにおける筋タンパク質合成に関する研究では、低タンパク質食と共に3%BCAA水を摂取させるとBCAAによる筋mTORC1活性化がどのように変化するかを検討する。さらに、このmTOC1活性化の増大を利用して、効果的に筋原線維タンパク質を増大する食事法についても検討したい。BDK-mKOマウスの低下した筋グリコーゲン回復力については、運動直後から3%BCAA水を与えることによりBDK-mKOマウスの筋グリコーゲン量の回復が改善されるかを検討し、筋グリコーゲン代謝に対するBCAAの作用を確認する。脳神経特異的BCAA代謝亢進マウス(Emx1-BDK-KOマウス)においては、尾懸垂による後肢の抱えこみ動作を指標にして脳神経系機能の異常を明確にすると共に、その異常が発生する直接的な原因について検討する。その方策として、Emx1-BDK-KOマウスに低タンパク質食を与えて飼育し、より脳内のBCAAが不足した状態での脳神経機能について検討する。さらに、脳の組織切片を用いてより詳細にBDK発現の有無を調べることが重要であろう。
就学前幼児におけるストレス・マネジメントの効果

平成10年度に行われたプレ・テスト,および実験結果からは,子ども版腹式呼吸法,子ども版漸進的筋弛緩法,イメージトレーニングなどから編成される訓練型プログラムには,プログラムを実施する教員の指導力によって効果に違いがある,幼児の社会性発達の程度によってプログラムの適用には限界があるなどの問題点が示唆された。そこで,本年度は,ストレスからの回復力(レジリエンス)の育成に主眼をおき,幼児自らがストレス・マネジメントを学習する環境づくりを検討した。レジリエンスとは,逆境に直面し,それを克服し,その経験によって強化される,また変容される普遍的な人の許容力であり(Grotberg,1999),ソーシャル・サポートのような環境要因を,子どもが備えた媒介要因の一部分であるとする,従来の国内には見られなかったストレス研究への視点である。この視点から,環境要因として,母親-子どもの関係,保育者-子どもの関係,母親-保育者の関係が子どもの日常的なストレス反応に与える影響を分析する必要性が見い出された。そこで,Hiew & Grotberg(1998)によって開発された大学生を対象とするSRC(State-Resilience Scale)を用いてレジリエンス測定を試み,子どものストレス反応,および母親のストレス強度との関連の検討を行った。その結果,4歳では,ストレス反応における「幼稚園関連問題」との間に,5歳では「引きこもり・消極性」,「人前での緊張」,「幼稚園問題」との間にレジリエンスとの強い相関が認められた。また,レジリエンス項目における「愛想が良くなつきやすい」には母親のストレス強度による差が認められた。しかし,全般的に見れば,幼児期の日常的なストレス反応項目とレジリエンス尺度項目は,年齢別に作成される必要があり,そのためのサンプル数を十分に確保することの重要性が示された。阪神・淡路大震災後に神戸市内の幼稚園で行った筆者らの調査では,幼児にも多くのストレス反応が出現することが示され,震災後の3年間に,震災により2次的に発生した母親との関係を中心とする家庭内での問題が,幼児にとってのストレッサーとなっていることが見い出された。しかしながら,幼児のストレス反応の要因や対処行動についてはレヴューも少なく,具体的な対応については十分に検討されていない。そこで,本研究では,幼稚園教育において実践可能な,幼児を対象とするストレス・マネジメントプログラムの検討を目的とした。先行研究より,子ども版腹式呼吸法,子ども版漸進的筋弛緩法,イメージトレーニングから編成されるリラクゼーションを5歳児169名を対象として実施し,それぞれの実施前後に自覚された感情(活気,疲労,緊張-不安,落ち込み,敵意,平常)を測定した。また,通常保育内容より描画,体操,お遊戯を選択し,同様に実施前後の感情測定を行った。その結果,腹式呼吸は,活気を減少させ,疲労などのネガティブな感情を増加させる傾向にあることが示された。また,イメージトレーニングには,緊張-不安もしくは落ち込みを減少させる効果が認められた。しかし,漸進的筋弛緩,および各保育内容については,実施担当者によって幼児の感情変化の違いが著しく,一貫した効果を認めることはできなかった。以上の結果より,まず,実施担当者を同一に設定する,腹式呼吸法を一種の訓練ではなく,遊びの中に取り入れることが必要であると考えられる。今後は,協力幼稚園と相談の上,プログラムの変更と変更後の効果の検討を行う予定である。