hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
LSIと共存可能なシリコン・イオン注入型MOS発光素子の研究

酸化膜にシリコン・イオンを注入したMOS(Metal Oxide Semiconductor)構造を用いて、大規模集積回路(LSI)内に共存できるシリコン系発光素子の研究を行った。電気的特性解析では、シリコン・イオン注入によって電流-電圧特性がヒステリシスを持つことを示した。発光特性解析では、シリコン・イオンの注入量と注入エネルギーによって発光の主要な波長成分が変化することを示し、発光機構モデルを提案した。大規模集積回路(LSI)は、微細化によって、チップ内あるいはチップ間の信号伝達の高速化が重要な課題であり、電磁波や光を用いる研究が行われている。光による信号伝達のためには、LSIチップ内に共存できる発光素子が必要であり、表示機能の内蔵などの高機能化にも寄与できる。本研究では、シリコン・イオン注入したゲート酸化膜を持つMOS構造を利用したLSIと共存可能な「青色」を含むシリコン系材料による可視発光素子(以下、シリコン・イオン注入型MOS発光素子)に関するものである。n形シリコンウエハ上に厚さ30nmの酸化膜を作製し、シリコン・イオン注入によって過剰なシリコンを酸化膜中に導入した。シリコン・イオンのドーズ量は、0.51.5×10^<16>cm^<-2>とした。シリコン・イオン注入した酸化膜の上面にAuまたはITOを用いて電極を形成しMOS構造とした。酸化膜形成には、通常の熱酸化に加え、将来の積層化に有利なCVDによる方法も検討した。電気的特性については、印加可能電圧は1040Vの範囲となり、シリコン・イオンのドーズ量の増加とともに減少した。I-V特性はヒステリシスを示し、10^<-8>10^<-7>A/cm^2付近で観測される電流密度の上昇が影響している。また、容量-電圧特性でも、印加電圧の変化にともなってヒステリシス特性を示した。酸化膜中の過剰なシリコン・イオンによる界面準位が存在し、印加電圧の極性によって捕獲される電荷が変化し、しきい値電圧のヒステリシスとして現れると考えられる。酸化膜の形成法の違いによって、電気的特性に大きな影響は見られず、CVD膜をMOS構造の酸化膜とする可能性があることが分かった。シリコン・イオン注入エネルギーを5、10keVとして、それぞれドーズ量を0.51.5×10^16cm^-2に変化させた試料を作製した。アニール温度は、900°C、1000°Cとした。基板裏面にはA1膜を、シリコン・イオン注入した酸化膜の上面にはAu薄膜を用いて電極を形成しMOS構造とした。電流-電圧特性におけるヒステリシス特性について、正負の電圧掃引方向での電流値の差(HW)とHWを掃引時間で積分した総電荷量(ICHW)を新たな指標として解析した。HWとICHWは、電圧印加を繰り返すと4サイクル後で収束し、5サイクル以降の測定値を用いることで安定した解析が可能であることを示した。正方向の電圧掃引時のICHW(+ICHW)の全IC進に対する割合は、シリコン・イオン注入した試料では高電圧で上昇し、酸化膜中への電荷の蓄積が非対称であることを示した。ヒステリシス特性を持つことは不揮発性メモリとしての可能性も期待できる。EL発光特性解析を行った結果、2.7、2.3、1.9、1.7および1.3eVの波長成分を持ち、シリコン・イオンの注入エネルギー、ドーズ量によって優勢となる波長が変化することを示した。大規模集積回路(LSI)チップ内に共存できる発光素子は、光によるLSIの信号伝達や表示機能の内蔵などの高機能化に寄与できる。シリコン・イオン注入したゲート酸化膜を持つMOS構造を利用したLSIと共存可能な「青色」を含むシリコン系材料による可視発光素子に関する研究を行った。n形シリコン基板上に厚さ30nmの酸化膜を作製し、シリコン・イオン注入によって過剰なシリコンを酸化膜中に導入した。シリコン・イオン注入した酸化膜の上面にAu電極を形成し、MOS構造とした。発光特性解析では、注入エネルギー5keV、ドーズ量0.5×10^<16>cm^<-2>のものを除きすべての試料で発光を確認した。5keVの試料では、2.7eVに明確なピークが確認されたのに対し、10keVの試料は、短波長成分の発光強度が減少した。

分光特性を5つのガウス分布に分離し、その発光中心エネルギーは、1.3、1.7、1.9、2.3、2.7eVであった。シリコン・イオン注入によって形成された酸化膜中の準位に電子が捕獲され、発光すると考えられる。1.62.8eVは、Siイオン注入によって生じた捕獲準位によると考えられ、1.2eVは、シリコンナノ結晶に起因する発光の可能性がある。交流駆動では、発光強度が増大し、周波数によって分光特性が変化した。1kHzでは2.7eVの発光強度が大きく、10、100kHzでは赤外領域付近の発光強度が増加した。CVDによってゲート酸化膜を形成した試料は、熱酸化によるものとほぼ同等の電気的特性を示した。また、下部電極をポリシリコンとした試料では耐圧が低下しており、今後、改善する必要がある。
完全埋込式リニアパルスモータ駆動型人工心臓の研究

1.本年度の研究成果(1)人工心臓駆動用リニアパルスモータ世界で初めてリニアパルスモータ(以下,LPMという)を駆動源とした人工心臓には多くの工夫が採り入れられた。このLPMは,世界に類のない「せんべい」形とし,磁性材料には高い飽和磁束密度2.3[T]のパーメンジュール,高い最大エネルギー積270[kJ/m^3]のNd-Fe-B合金磁石,最適ピッチの設計,高い耐久性をもつリニア軸受,チタン合金によるハウジング等が採用された。その結果,このLPMの推力/入力比は22[N/W]の世界レコードを達し,理論限界値に近づくことができた。(2)模擬循環試験上述のリニアパルスモータと血液ポンプとを結合させて,リニア形人工心臓を完成させた。本人工心臓の実用性を事前に評価するために,人体の血液循環を模擬した実験装置,すなわち模擬循環試験装置(モック試験装置ともよばれている)に本人工心臓を結合させて,その特性試験を行った。この試験結果によると,拍動数119【回/min】において大動脈の最大流量4.8【L/min】を得ることができた。これらの特性値は成人が安静時の血流量を保証するものであり,実用性がより高くなったことを示した。(3)急性動物実験本人工心臓を羊に装着して急性動物実験を実施した。血行動態を測定した結果,体重42【kg】の羊の血流量は1.5【L/min】,大動脈圧は80【mmHg】であり,本人工心臓は羊に対する2時間の循環代行に初めて成功した。この成果は,直ちに日本経済新聞,産経新聞および国内誌30誌以上に「世界初リニアモーター使用人工心臓」(1993.9.25)として紹介されたばかりでなく,Japan Timesにも“Revolutionary artificial heart"(1993.9.26)として掲載された。上述したように,本研究においては世界的に見て最大の推力/入力比をもつ「せんべい形」の人工心臓用LPMを試作し,このLPMと血液ポンプとを結合させて世界初のリニア形人工心臓を作り,モック試験を経て動物実験に成功し,3年間にわたって所定の成果をあげることができた。1.薄形リニアパルスモ-タの試作試作したリニアパルスモ-タ(LPMーS91)は、前モデルに比ベ、幅は約34%減少して82[mm]に、体積は約13%減少して540[mL]となった。その動推力は、拍動数100[bpm]、速度60[mm/s]において65[N]であった。また、人工弁として東大で開発されたジェリ-フィッシュ弁を採用し、人工心臓として全ての構成要素を初めて純国産とする事ができた。2.リニアパルスモ-タの特性測定LPMの動特性を評価するため、循環系の力学的性質を電気的等価回路で表した循環系シュミレ-ション手法を用いた。その結果、LPMーS91は、さらに10%以上の推力向上が必要である事が判明した。(1)LPMの動特性の精密測定LPMの垂直力および励磁電流と磁束の位相差を考慮した動推力の表現式を導出した。これにより、10%程度の誤差で動特性が推定できた。(2)寿命特性の評価

繰り返し往復動作のLPMは、リニアベアリングに加わる負荷により耐久性が大幅に異なってくる。そこで、模擬循環試験装置により、大動脈圧、拍動数を可変できるようにして寿命試験を実施した。3.リニアパルスモ-タの制御特性の解析(1)LPMのクロ-ズドル-プ制御特性の測定マイクロプロセッサで制御する人工心臓を試作し、大動脈圧を検出して拍動数を調節する制御アルゴリズムを設計した。(2)モック試験改良形オ-バ-フロ-式模擬循環試験装置を試作し、モック試験が可能となった。現在、動物実験を実施するための対応を検討中である。1.本年度の研究成(1)人工心臓を内蔵した人体模型“くにこ"リニアパルスモータ(LPM-S92)で駆動される完全埋込式人工心臓を試作した。これを人体模型(材質が透明なマネキン)に埋め込み,さらにその体外から経皮を通じて電力を無線で供給して本人工心臓を作動させ,生理食塩水を体内に循環させた。この人工模型を92年に開発したことを記念にして“くにこ"と命名した。1992年8月,第4回国際人工心臓シンポジウム(東京)で動態展示したところ参加者から好評であったばかりでなく,くにこは日経新聞,読売新聞で紹介された。このことは筆者ら研究グループを大いに勇気づけることにつながった。(2)リニアルパルスモータの加速寿命試験本人工心臓の駆動源であるリニアパルスモータ(LPM-S92)のMTTF(平均故障間隔)を調べるために加速寿命試験を行った。実験の結果,LPM-S92の寿命は実測値117日(計算値137日)となり,約4ヶ月の寿命であることがわかった。この寿命試験を制約する要因はリニアベアリングであることが判明し,今後はその対策を検討する時期に入った。本人工心臓を軽量化するためにそのハウジングにチタン合金を利用したことには成功した。(3)ソレノイド駆動式人工心臓の試作前述したLPM駆動式の寿命はリニアベアリングに依存することが大きいために,ベアリングを一切使用しないソレノイド駆動式人工心臓を試作した。LPMはストロークが20mmであり,拍動数は人間と同じ60120回/分に維持できるが,ソレノイドのストロークは5mmに制約されるので,その拍動数は300600回/分となる。この高拍動数形人工心臓をいかに小型化するかが,今後の研究課題となる。2.今後の研究開発(1)動物実験の実施本年度は,本人工心臓システム全般にわたっての問題点を“くにこ"等の試作によってはっきりと認識できた。LPM駆動式およびソレイド駆動式の両人工心臓をヤギあるいは仔牛に埋め込んだ動物実験を実施する時期に到来した。(2)本人工心臓の周辺機器の小型化本人工心臓の動物実験は,他大学(たとえば,広島大学,東京大学医学部)で実施する予定である。したがって,その周辺機器としての電池,経皮エネルギー伝送システム,ドライバの小型化を計らなければならない。国産技術で小型化できるところから始め,携帯化を進めていく予定である。1.本年度の研究成果(1)人工心臓駆動用リニアパルスモータ世界で初めてリニアパルスモータ(以下,LPMという)を駆動源とした人工心臓には多くの工夫が採り入れられた。このLPMは,世界に類のない「せんべい」形とし,磁性材料には高い飽和磁束密度2.3[T]のパーメンジュール,高い最大エネルギー積270[kJ/m^3]のNd-Fe-B合金磁石,最適ピッチの設計,高い耐久性をもつリニア軸受,チタン合金によるハウジング等が採用された。
異文化接触が及ぼす影響に関する研究-社会人となった海外・帰国子女の視点から-

海外・帰国子女の問題はある意味で一段落したと言われるが、最近では、以前の帰国生が成人し、社会人として日本の図内・外で職業をもつなかで、人との「違い」をそのまま抱えていることは新たな現実として受け止めなければならない。そこで、本研究では、(1)海外での教育経験を経て社会人となった人々がその経験を現時点でどう捉えているか(2)帰国して日本の教育機関にはいった経験を社会人となった現時点でどう捉えているか(3)彼らが社会人としてもっている価値観・友人関係の特性はなにかという諸点を解明するために、主に1980年前後にニューヨークで調査を行なった当時、現地で出会った児童・生徒・学生で現在社会人として活躍している人々に対して、調査、ならびに面接を行なった。その結果、以下の点が明らかになった。(1)中学生以上の年齢での海外経験は、現地校の場合、大変辛い思いとなっている。大抵の帰国生は最初の1年は泣いて過ごしたといい、その辛さは結局親にはわかってもらえないとコメントしている。(2)中学生以上の年齢で現地校にはいった場合、結局現地のネイティブと友人関係は結べない。現地佼にいた日本人生徒あるいは外国人生徒と気が合えば、やっと安心できる環境づくりができる。(3)辛い経験をしている間は親を恨んでいるが、社会人になってふりかえると、他の人にはできない経験をさせてもらえたと感謝の気持ちに変わる。(4)海外滞在中、日本人学校に通学した場合、帰国時に日本語での苦労が少なかったことはさておき、英語力等いわゆる帰国生の特性を充分に身に付けられなかったことを悔いている。(5)社会人となるころまでには、自分が帰国生であることによる特性や、一般の日本人との違いも自分なりに冷静に受け止めることができるようになっている。海外・帰国子女の問題はある意味で一段落したと言われるが、最近では、以前の帰国生が成人し、社会人として日本の国内・外で職業をもつなかで、人との「違い」をそのまま抱えていることは新たな現実として受け止めなければならない。そこで、本研究では、1海外での教育経験を経て社会人となった人々がその経験を現時点でどう捉えているか2帰国して日本の教育機関にはいった経験を社会人となった現時点でどう捉えているか3彼らが社会人としてもっている価値観・友人関係の特性はなにかという諸点を解明するために、今年度は以下の方法で研究をすすめた。1 1980年前後にニューヨークで調査を行った当時、現地で児童・生徒・学生として出会った人々の現在の居住地を、主にキャンプ関係者のネットワークでつきとめた。2上記の人たちにアンケート調査票を送付し、現況の概略を把握することに努めた。3上記の人たちのうち都合のつく人にインタビューを行うことにより、現時点で考える海外でうけた教育・異文化体験ならびにその影響をどう考えているか聴取した。4以上の調査によって得られた資料の整理・分析を開始した。これにより、従来論じられてきた海外・帰国子女と異なった視点でさらに研究をすすめる意義を確認した。来年度以降は、本年度の資料分析を継続するとともに、さらに、広いネットワークでニューヨーク以外の地域からの帰国者も対象として研究をすすめたい。

そこで、本研究では、1海外での教育経験を経て社会人となった人々がその経験を現時点でどう捉えているか2帰国して日本の教育機関にはいった経験を社会人となった現時点でどう捉えているか3彼らが社会人としてもっている価値観・友人関係の特性はなにかという諸点を解明するために、昨年度は主に1980年前後にニューヨークで調査を行なった当時、現地で出会った児童・生徒・学生で現在社会人として活躍している人々に対してアンケート調査、ならびに面接を行なった。今年度はそれをさらに発展させて以下の方法で研究をすすめた。1さらに広範囲に対象を広げるため、フレンズの会、および海外子女教育センターで情報を収集し、帰国者を特定した。2上記の人たちにアンケート調査票を送付し、現況の概略を把握することに努めた。3上記の人たちのうち都合のつく人にインタビューを行うことにより、現時点で考える海外でうけた教育・異文化体験ならびにその影響をどう考えているか聴取した。4以上の調査によって得られた資料ならびに、昨年の調査から得られた資料の整理・分析を開始した。これにより、従来論じられてきた海外・帰国子女と異なった視点でさらに研究をすすめる意義を確認した。来年度以降は、昨年度ならびに本年度の資料分析を継続するとともに、さらに、総合的視野から研究をすすめたい。海外・帰国子女の問題はある意味で一段落したと言われるが、最近では、以前の帰国生が成人し、社会人として日本の国内・外で職業をもつなかで、人との「違い」をそのまま抱えていることは新たな現実として受け止めなけれはならない。そこで、本研究では、(1)海外での教育経験を経て社会人となった人々がその経験を現時点でどう捉えているか(2)帰国して日本の教育機関にはいった経験を社会人となった現時点でどう捉えているか(3)彼らが社会人としてもっている価値観・友人関係の特性はなにかという諸点を解明するために、昨年および一昨年、主に1980年前後にニューヨークで調査を行なった当時、現地で出会った児童・生徒・学生で現在社会人として活躍している人々に対して、また、それ以外の帰国子女のグループに関係し現在社会人として活躍している人々に対してアンケート調査、ならびに面接を行なった。(1)一昨年度および昨年度に行った調査方法にのっとり、日本在住の帰国生の調査をさらに継続した。(2)上記の人たちにアンケート調査票を送付し、現況の概略を把握した。(3)上記の人たちのうち、可能な範囲で個別あるいはグループでインタビューを行うことにより、現時点で考える海外でうけた教育・異文化体験・その影響を聴取した。(4)以上の調査によって得られた資料、ならびに一昨年度からの資料の整理・分析を行った。(5)今迄の資料を総合的に分析し、考察した。
農用流域の不確実な時空間降水量・流出量分布に関する地球統計学的高精度再現法の開発

水文観測データ不足の農用流域では従来扱うことが困難な降水量や蒸発散量の時空間分布について,地球統計学的手法を採用することで,粗い解像度のレーダー観測データ・衛星観測データを,数値地図モデル(DEM)のセル解像度までダウンスケール推定し,同時に水文パラメータ(粗度係数,透水係数,斜面勾配,標高データ,河道勾配,斜面長,斜面方向,河道長など)の空間分布を,解析解像度レベルで高精度再現した.これらにより,水文観測データの乏しい流域で高精度の分布型流出シミュレーションを行う手法を確立できた.水文観測データ不足の農用流域では従来扱うことが困難な降水量や蒸発散量の時空間分布について,地球統計学的手法を採用することで,粗い解像度のレーダー観測データ・衛星観測データを,数値地図モデル(DEM)のセル解像度までダウンスケール推定し,同時に水文パラメータ(粗度係数,透水係数,斜面勾配,標高データ,河道勾配,斜面長,斜面方向,河道長など)の空間分布を,解析解像度レベルで高精度再現した.これらにより,水文観測データの乏しい流域で高精度の分布型流出シミュレーションを行う手法を確立できた.当該年度においては,設備備品の時空間分布再現システムを導入利用し,水文パラメータの時空間分布再現を求めた.その際に降水量などの時空間分布を利用するが,レーダー観測降水などの実測データを扱う前に,モデルバイアスを含めた不確実性が或る程度評価できる時空間データのGCM出力をまず採用して,PUB問題に対応できるようなノウハウの取得を目指して検討に入った.最初に降水量分布を100km格子ベースのGCM出力を扱って対象試験流域(長良川流域や淀川流域)の流出解析を行った,その後,20km格子ベースのGCM出力の降水量分布に替えて再度同じ期間同じ流域で流出解析を行った.ただし,その際,GCM出力から実観測に近い値にするための統計的ダウンスケーリングを行い,同分布のバイアス(不確実性の一種)を取り除いている.その結果,水文パラメータの不確実性がGCM出力の格子間隔で大きく異なる事が分かった.よって,条件付きシミュレーション等の地球統計学的分布再現を用いられれば,降水量時空間分布の不確実性,さらには,その利用に関わる水文パラメータ時空間分布の不確実性が取り除けると期待できることが分かった.また地球統計学以外の方法を用いれば,どの程度の不確実性の減少効果があるかについても試して確認した.具体的には,過去の計測データの蓄積による事例ベースを活用した推定手法であるTCBMを用いて調べた.すると,データベースにおいて未経験と判断される状況が発生すれば,対応しきれずに"外挿的な推定"になってしまう点に問題があることがわかり,そこをシミュレーションによって得た疑似計測値を用いて実測値として代用することで対応させたHydro-TCBMからある程度の不確実性に留めた結果が得られるようになった.水文観測データ不足の農用流域では従来扱うことが困難な降水量や蒸発散量の時空間分布について,粗めの解像度のレーダー観測データ・衛星観測データを,数値地図モデル(DEM)のセル解像度単位の細かさに見合う分布までダウンスケール推定し,水文パラメータ(粗度係数,透水係数,斜面勾配,標高データ,河道勾配,斜面長,斜面方向,河道長など)の空間分布を同セル解像度単位で高精度に再現すること,ならびに,それらから分布型流出解析を遂行し,水文観測データが乏しい流域で高精度に流出シミュレーションを行うことを目的としている.その際,不確実性を評価したり取り除きながら時空間推定したりダウンスケール推定する事が可能な点において優れていると判断した地球統計学手法を採用することとした.初年度では計算出力であるGCMデータを主対象としたが,当該年度では実際の観測データを対象として,降水量分布ならびに地下水位分布についてまず着目し,時空間分布推定を試みた.その結果,実測の不確実性とモデル化誤差の影響から,当初手法を更に改良する必要が生じ,時間と空間の相関性の融合や時空間変動パラメータの工夫の面で新たな手法を提案して良好な結果を得た.それを受けて,初年度開発した推定システムを実測に応じたシステムに移行した.最終的には,分布計算出力のビジュアル化に必要な分布可視化システムもソフトウエアの面で機能充実させるべき課題は残っているが,総じて開発に成功しており,ポストプロセッシングとして有効に機能している.
メラノサイトの分化とその制御-悪性黒色腫治療への応用-

幼若メラノサイトの分化に及ぼす因子を検討した。マウス神経冠培養系(primary cultule)とマウス神経冠細胞由来メラノサイト前駆細胞株を使用した。この前駆細胞株は当教室で樹立したもので、NCCmelb4とNCCmelb5の2種ある。前者はtyrosinase(TYR)陰性、DOPA反応陰性、endothelin B receptor(EDNBR)陰性の分化段階に留まる幼若な細胞で、メラノサイトの分化誘導因子を検討するのに適している。また後者は全て陽性の分化の進んだ細胞で、対照として使用した。この実験系に活性型ビタミンD_3(以下VD_3)を添加培養したところ、10^8Mより高濃度で増殖は抑制された。また、VD_3を添加培養すると、TYR, DOPA反応、EDNRBは陽性に変化し,電顕的観察でstageの進んだmelanomeの存在力確認された。さらにマウス神経冠細胞初代培養系においてもVD_3を添加培養すると、DOPA反応用性細胞の増加とEDNRBの発現を認めた。NCCmelb4にVP_3とEDNRBのリガンドであるendothelin3を添加培養すると、転写因子であるMITF(microphatalmia-associated transcliption factor)mRNAの発現がみられたが、VD_3単独の添加では見られなかった。以上のことから、活性型D_3はEDNRBの発現を誘導することでメラノサイト前駆細胞の分化を誘導することが証明された。このことは色素異常症の病態の解明や治療法に役立ち、さらには悪性黒色腫の分化誘導療法の治療薬としてVD_3を有用となりうる可能性があることを示している。次に、悪性腫瘍の分化、転移に関して検索されている弾力線維の成分であるエラスチンのレセプターがNCCmelb4に発現していることをみつけ、エラスチンが未分化メラノサイトの分化に関連しているかを検討した分化は電顕でメラノソームを観察し、光顕下で樹枝状突起の長さを測定した。またAramar Blue Assayで細胞数を数えた。エラスチンはprimary cultuleのメラノサイトおよびNCCmelb4を分化させるが増殖はさせなかった。最近、悪性腫瘍株にエラスチンのレセプターが発現しているとの報告がある。細胞の増殖なしに分化を促進するエラスチンは、悪性黒色腫の治療にも有用となりうる可能性があると考える。活性型ビタミンD_3(1,25-dihydroxyvitamin D_3)がマウス神経冠細胞由来メラノサイト前駆細胞株に及ぼす影響について検討した。このメラノサイト前駆細胞株は当教室で樹立したcell lineで、tyrosinase(TYR)陰性、DOPA反応陰性、endothelin B receptor (EDNRB)陰性の分化段階にとどまる幼弱な細胞であるため、メラノサイトの分化誘導因子を検討するのに最適である。このcell lineに活性型ビタミンD_3を添加培養したところ、10^<-8>Mより高濃度で増殖は抑制された。

また、活性型ビタミンD_3を添加培養すると、TYR、DOPA反応、EDNRBは陽性に変化し、電顕的観察でstageの進んだmelanosomeの存在が確認された。さらに、マウス神経冠細胞初代培養系においても活性型ビタミンD_3を添加培養すると、DOPA反応陽性細胞の増加とEDNRBの発現を認めた。このcell lineに活性型ビタミンD_3とEDNRBのリガンドであるendothelin 3をともに添加培養すると、転写因子であるMITF(microphthalmia-associated transcription factor)mRNAの発現がみられたが、活性型ビタミンD_3単独の添加ではみられなかった。以上のことから、活性型ビタミンD_3はEDNRBの発現を誘導することでメラノサイト前駆細胞の分化を誘導することが証明された。このことは、色素異常症の病態の解明や治療法に役立ち、さらには悪性黒色腫の分化誘導療法の治療薬として活性型ビタミンD_3が有用となりうる可能性があることを示している。昨年に引き続き幼若メラノサイトの分化に及ぼす因子を検討した。マウス神経冠培養系(primary culture)とマウス神経冠細胞由来メラノサイト前駆細胞株を使用し検討した。このメラノサイト前駆細胞株は当教室で樹立したcell lineで、NCCmelb4とNCCmelb5の2種ある前者はtyrosinase(TYR)陰性、DOPA反応陰性、endothelin B receptor(EDNBR)陰性の分化段階に留まる幼若な細胞であるため、メラノサイトの分化誘導因子を検討するのに最適である。また後者は全て陽性の発達のすすんだ段階の細胞で、コントロールとして使用した。悪性腫瘍の分化、転移に関して検索されている弾力線維の成分であるエラスチンのレセプターがNCCmelb4に発現していることをみつけ、エラスチンが未分化メラノサイトの分化に関連しているかを検討した。分化は電顕でメラノソームを観察し、光顕下で樹枝状突起の長さを測定した。またAramaar Blue Assayで細胞数を数えた。エラスチンはprimary cultureのメラノサイトおよびNCCmelb4を分化させるが増殖はさせなかった。最近、悪性腫瘍株にエラスチンのレセプターが発現しているとの報告がある。細胞の増殖なしに分化を促進するエラスチンは、悪性黒色腫の治療にも有用となりうる可能性があると考える。
多様な就業形態を含む職場のマネジメント手法に関する研究

研究の最終年度となった平成19年度は、平成17年度、18年度の研究成果を踏まえ、多様な就業形態を含む職場のマネジメントを効果的に行うための指針となるべくコンセプトごとに研究成果をまとめ、国内外の学会や研究雑誌において以下のような分類において広範囲な研究発表を行った。まず、多様な就業形態を含む職場のマネジメントを効果的に行うためには、企業のトップマネジメントが、すべての従業員を公正に扱うことについての強い倫理観に基づいた経営の実践が求められるという視点から、トップマネジメントの公正倫理観と職場の公正マネジメントの視点から掘り下げた研究成果を発表した。次に、ミクロな視点から見ると、多様な就業形態を含む職場のマネジメントには、職場における上司と部下との関係性や、従業員の自尊心、および従業員が職場環境に埋め込まれている度合いといった現象の理解が重要であるという考えのもと、それらについて実証的な分析を行った研究成果を発表した。また、多様な就業形態からなる人材は、国内のみならずグローバルな文脈からも考察されるべきであるという視点に立ち、さまざまな国籍からなる人材の配置とマネジメント、人材採用における法的環境、およびそれらの要素の経営業績への効果についての研究成果発表を行った。さらに、多様な就業形態を含む職場のマネジメントに影響を及ぼす人事制度の特徴とその経営業績への効果についての時系列データを用いた実証分析結果も発表した。これらの研究活動によって、本研究の目的であった、多様な人材からなる職場に求められる効果的なマネジメント手法について、多角的な視点から、実践的有効性の高い理論的フレームワークの基礎となる研究成果を生み出すことができた。研究の初年度でもある平成17年度は、文献研究を中心に、労働の非正規化や、非典型的な雇用化におかれる働き手の就業行動やそれらのマネジメントに関する理解を深める活動を行なった。具体的には、派遣社員やパート、アルバイト、契約社員といった非正規労働の近年の動向や就業意識について、および、高度専門職もしくはプロフェッショナルといった、一般的なホワイトカラー・ブルーカラー正社員と性格を異にし、組織に頼らず、より独立した仕事のやり方を志向するするタイプの人材の特徴について、文献を中心に幅広く資料収集を行った。また、雇用の多様化と絡んで社会的にも問題となっている若年者の労働状況についても調査を行った。文献サーベイを中心とする資料収集に基づいた初年度の具体的な研究成果としては、まず、若年者の労働問題を扱った論文を、カウンセラー経験のある研究者と共同で執筆し、学会発表を行ない、さらに紀要に掲載した。また、プロフェッショナルについては、海外の研究成果をサーベイしたものに基づいた論文を作成し、紀要に掲載した。その他、本研究の基礎的な位置づけとなる日本的経営と労使関係に関する展望論文を紀要に掲載し、さらに、多様な人材のマネジメントのひとつのヒントとなりうる理論論文を、書籍の一章として掲載した。その他、今後2年間のあいだに実施を予定している聞き取り調査やアンケート調査の準備段階として、人材ビジネスや派遣会社との人的ネットワークの拡充にも力を注いだ。その1つの手段として、民間企業や派遣会社の実務家達とHRM研究会を組成し、関連する分野の勉強会も主催した。研究の2年度目となった平成18年度は、初年度にひきつづいて文献研究をすすめるとともに、これまでに蓄積された成果を海外の学会で発表したり、実験的アンケート調査を行なったり、新たなコンセプトに基づいたワーキングペーパーを作成するなどの活動を行なった。まず、今後のグローバリゼーションの進展を考慮し、わが国の人材のみならず、様々な国や文化からの人材とともに働くということを念頭においた雇用の多様化についての理解を進めるため、わが国の拠点において活動を行なっている外資系企業のローカル人材および本国もしくは第三国からの派遣人材を含む職場のマネジメントに関する研究プロジェクトを推進した。そして、その研究成果を韓国ソウルで開かれた国際学会にて発表した。つぎに、大局的見地から多様な人材のマネジメントに接近するべく、戦略的人的資源管理の研究プロジェクトに参加し、理論論文および実証論文の2本を共同研究者とともに作成し、東京で行なわれた国際学会で発表を行なった。さらに、文献研究および他の研究者との交流を通じて、多様な雇用形態からなる職場のマネジメントを効果的に行なうために重要な概念として、公正さに注目し、組織的公正研究の実験的アンケート調査の作成および実施と理論論文の作成を共同研究者とともに実施した。アンケート調査については、第一次段階のデータ分析を終了し、理論論文については、ワーキングペーパーとして作成した。これらの研究成果をふまえ、終年度につなげるための理論的フレームワークの整備にとりかかった。

さらに、多様な就業形態を含む職場のマネジメントに影響を及ぼす人事制度の特徴とその経営業績への効果についての時系列データを用いた実証分析結果も発表した。これらの研究活動によって、本研究の目的であった、多様な人材からなる職場に求められる効果的なマネジメント手法について、多角的な視点から、実践的有効性の高い理論的フレームワークの基礎となる研究成果を生み出すことができた。
多雪地域の森林における、撹乱土壌内の窒素循環に関する研究

多雪地域の森林における窒素動態に、植生・表土除去処理および融雪プロセスが及ぼす影響を明らかにするために、北海道大学北方生物圏フィールド科学センター雨龍研究林内の掻き起こし処理区域において調査を行った。掻き起こし処理区および対照区である天然林において降雨および深度10・40cmの土壌溶液を採取し成分濃度を分析した。処理区土壌内の溶存NO_3-濃度は対照区より80倍以上高い値を示した。濃度の季節変動を見ると、深度10cmでは夏期に高く融雪期に急激に減少している一方深度40cmでは融雪期の濃度低下以外の変動は小さかった。深度40cm土壌からのNO_3-流出量を算出したところ、対照区での正味流出は無く、処理区では年間の約60%が融雪期に流出していた。これらのことから処理区では夏期に表層で生成されたNO_3-が下層に蓄積され、初春に多量の融雪水と供に流出するというメカニズムの存在が示唆された。掻き起こし処理経過年数が17年の計7地点における単位面積当たりの土壌中のNO_3-現存量は、処理後2年間は対照区よりも高く、年々減少していく傾向を示した。回復した植生による窒素吸収量は年々増加していたものの、処理後3年目までの吸収量はNO_3-現存量の経年減少量には及ばなかった。また、処理後1および5年が経過した土壌の窒素無機化特性を測定したところ、処理区ではC基質に富む有機物層の除去が正味硝化速度増加とそれにつながるNO_3-濃度上昇を引き起こしていることが示された。年数の経過とともに処理区土壌の正味硝化速度は低下していたが、対照区よりは高いままであった。一方窒素無機化特性は年数と共に対照区に近づいていく傾向が見られ、処理後3年までのNO_3-現存量の急激な減少には,回復した植生による窒素吸収よりも、このような窒素無機化特性の変化(および,この地域では融雪による溶脱)が影響しているであろうことが示唆された。多雪地域の森林における窒素動態に、植生・表土除去処理および融雪プロセスが及ぼす影響を明らかにするために、北海道大学北方生物圏フィールド科学センター雨龍研究林内の、掻き起こし処理区域において調査を行った。野外において降雨および10cmと40cmの2深度における土壌溶液を、処理から2年が経過した処理区とその対照区において1週間毎に採取し、成分分析を行った。掻き起こし処理区の土壌溶液中の硝酸態窒素(NO_3-N)濃度は、両深度とも対照区に比べ非常に高かった。降水の形態によって季節を無雪期(611月)、積雪期(123月)、融雪期(4・5月)の3つの期間に分けると、深度10cm土壌溶液中のNO_3-N濃度は無雪期に高く、積雪期に入ると低下し、融雪期で急激に低下するという季節変動を示したが、深度40cmでは融雪期の濃度低下以外には変動が少なかった。深度40cmの土壌からのNO_3-N正味流出量を算出した結果、正味流出は処理区でのみ起こっており、年間の約60%が融雪期に流出していた。これらのことから、掻き起こし処理区では無雪期に表層で生成されたNO_3-Nが水移動の少ない積雪期には下層に貯留され、それが融雪期に多量の融雪水と共に急激に土壌から流出する、と言うメカニズムが存在することが示唆された。掻き起こし処理経過年数が17年の計7地点における単位面積あたりの土壌中のNO_3-N現存量は、処理後1-2年は対照区より高く、その後年々減少する傾向を示した。一方、回復した植生による窒素吸収量は年々増加しており、このことがNO_3-N現存量経年減少の大きな要因であると考えられる。しかし、植生が回復していない処理後13年目にも現存量は年々減少していた。融雪による土壌からの養分物質の溶脱やそれに伴う微生物活性の変化などが初期の現存量減少に影響している可能性があるため、それらについては目下解析中である。

また、処理後1および5年が経過した土壌の窒素無機化特性を測定したところ、処理区ではC基質に富む有機物層の除去が正味硝化速度増加とそれにつながるNO_3-濃度上昇を引き起こしていることが示された。年数の経過とともに処理区土壌の正味硝化速度は低下していたが、対照区よりは高いままであった。一方窒素無機化特性は年数と共に対照区に近づいていく傾向が見られ、処理後3年までのNO_3-現存量の急激な減少には,回復した植生による窒素吸収よりも、このような窒素無機化特性の変化(および,この地域では融雪による溶脱)が影響しているであろうことが示唆された。
DTMを用いたヴァイオリン奏者への演奏支援の効果

DTM(DeskTop Music)は,MIDI(Musical Instrument Digital Interface)によってコンピュータに音程(音高),音の長さ,音の大きさをユーザが指定して入力することにより音が発音され,曲を演奏する仕組みである。このDTMで楽曲を演奏させヴァイオリンの演奏者と合奏する事によりヴァイオリンの演奏者は定まった音程とリズムを習得することがより容易になるのではないかと考え,DTMを用いた演奏支援を提案した.ある楽曲をMIDIで演奏させた音と本物のヴァイオリンの音のFFT解析を行い,音の違いを調べた.実際の楽器G(ソ;開放弦)を弾いた波形は,スペクトログラム上の解析によりMIDI音源のヴァイオリン音に比べて倍音がより多く出ていて,音色が豊かである事が分かった.ヴァイオリンの個人レッスンを受けて1年の筆者(2010年04月現在)は,過去に一度も演奏していない楽曲をDTMで演奏させ,一通り聴いてパソコンの演奏と合わせた時とDTMを全く用いない練習において楽曲の演奏の習熟度に違いが見られるか実験を行った.録音機と再生機(ヘッドフォン)は,音楽業界でモニタとして使用される事が多い機器を使用し,音質に考慮した.それにより,実際の楽器とMIDIで発せられた楽器音を,厳密に比較し練習の際に注意すべき点と活用できる点を調べた.MIDIを用いた時と用いないときのヴァイオリン奏者の演奏を,短い曲で一フレーズを弾き,音程をFFTで分析する.又,テンポをMIDIの演奏とずれていないか,FFT解析を利用してチェックした.実験結果は,MIDIの伴奏及び主旋律の演奏支援に並行して,練習の回数を重ねていくと音程とテンポの改善が見られた.模範演奏を1回演奏前に聴くとテンポの間違いが少なくなった.音程の高低を録音で聴き直すと改めてよく分かり次回の練習の課題とした.更に,演奏時にピアノの伴奏が有ると,音をイメージしやすくて楽器を弾きやすく音程とテンポの乱れが,伴奏なしの練習よりも改善された.一方で,シーケンスソフト(パソコンで楽譜を表示させるソフト)を用いるときは,通常の楽譜に記載されている強弱記号や発想記号などが表示されないので練習する際,注意が必要である.今回の実験に対する,プロヴァイオリニストニストのご意見を頂戴した.「初心者の演奏者には使用できる方法ではないか」とのことです.今後,筆者はこのDTMを用いた演奏家支援でアマチュア・オーケストラでの楽曲演奏に応用できるか引き続き,検証を行っていく予定である.DTM(DeskTop Music)は,MIDI(Musical Instrument Digital Interface)によってコンピュータに音程(音高),音の長さ,音の大きさをユーザが指定して入力することにより音が発音され,曲を演奏する仕組みである。このDTMで楽曲を演奏させヴァイオリンの演奏者と合奏する事によりヴァイオリンの演奏者は定まった音程とリズムを習得することがより容易になるのではないかと考え,DTMを用いた演奏支援を提案した.ある楽曲をMIDIで演奏させた音と本物のヴァイオリンの音のFFT解析を行い,音の違いを調べた.実際の楽器G(ソ;開放弦)を弾いた波形は,スペクトログラム上の解析によりMIDI音源のヴァイオリン音に比べて倍音がより多く出ていて,音色が豊かである事が分かった.ヴァイオリンの個人レッスンを受けて1年の筆者(2010年04月現在)は,過去に一度も演奏していない楽曲をDTMで演奏させ,一通り聴いてパソコンの演奏と合わせた時とDTMを全く用いない練習において楽曲の演奏の習熟度に違いが見られるか実験を行った.録音機と再生機(ヘッドフォン)は,音楽業界でモニタとして使用される事が多い機器を使用し,音質に考慮した.それにより,実際の楽器とMIDIで発せられた楽器音を,厳密に比較し練習の際に注意すべき点と活用できる点を調べた.MIDIを用いた時と用いないときのヴァイオリン奏者の演奏を,短い曲で一フレーズを弾き,音程をFFTで分析する.又,テンポをMIDIの演奏とずれていないか,FFT解析を利用してチェックした.実験結果は,MIDIの伴奏及び主旋律の演奏支援に並行して,練習の回数を重ねていくと音程とテンポの改善が見られた.模範演奏を1回演奏前に聴くとテンポの間違いが少なくなった.音程の高低を録音で聴き直すと改めてよく分かり次回の練習の課題とした.更に,演奏時にピアノの伴奏が有ると,音をイメージしやすくて楽器を弾きやすく音程とテンポの乱れが,伴奏なしの練習よりも改善された.一方で,シーケンスソフト(パソコンで楽譜を表示させるソフト)を用いるときは,通常の楽譜に記載されている強弱記号や発想記号などが表示されないので練習する際,注意が必要である.今回の実験に対する,プロヴァイオリニストニストのご意見を頂戴した.「初心者の演奏者には使用できる方法ではないか」とのことです.今後,筆者はこのDTMを用いた演奏家支援でアマチュア・オーケストラでの楽曲演奏に応用できるか引き続き,検証を行っていく予定である.
国際関係をとおしてみる現代ロシア教会の列聖と聖人崇敬

本研究は、20世紀に入ってからロシア正教会および亡命ロシア人の結成した在外ロシア正教会が行った列聖を手掛かりに、正教会の歴史認識や政治的立場、さらには亡命教会との関係からソ連外交チャンネルとしての正教会の位置づけを明らかにしようとするものである。具体的には、ロシア帝国最後の皇帝ニコライ二世とその家族を取り上げた。ロシア本国におけるニコライ二世崇敬の現状について、ニコライ二世一家銃殺の地であるエカテリンブルグでのフィールドワークや参与観察を行った。しかし、ロシア正教会の外務省ともいうべき渉外部のアーカイヴ資料は閲覧不可であったため、かつてここで勤務していた聖チーホン人文正教大学教授のアンドレイ・コストリューコフ教授の研究指導の下、在外ロシア正教会のアーカイヴでの調査を行った。さらにこのアーカイヴ調査からは、皇帝に対する崇敬の始まりから列聖に至るプロセスを分析した。ロシア革命後の亡命ロシア社会においては、次期皇帝を擁立するという理由で、ニコライ二世の生死に関心を寄せるものもいたが、次第にその悲劇的な死が重視されるようになった。後に上海主教として知られるイオアン・マクシモーヴィチは皇帝を苦難の聖者ヨブになぞらえる説教を行い、崇敬の神学的素地を形成した。彼の説教は、革命を体験した亡命第一世代の罪の意識を反映したものであると同時に、国内に残る正教徒への弾圧を怖れて明確なソ連体制批判を避けるものであった。一方で1981年の列聖は、革命批判の立場を明確に打ち出し、ロシア的伝統に関心を寄せるソ連の異論派や信者共同体への呼びかけという性格を持っていたことを明らかにした。平成28年度は、ロシアでのフィールドワークを中心に、(1)モスクワ総主教庁による列聖のプロセスと聖人崇敬、(2)モスクワ総主教庁とエキュメニカル運動の2点を研究する計画であった。(1)については、ロシア帝国最後の皇帝ニコライ2世一家の崇敬と列聖を中心に研究を進めた。2016年3月にモスクワで行った「列聖に関する聖宗務院委員会」の委員であるオレグ長司祭、イリヤ・グラズノフ絵画・彫刻・建築アカデミーのボリシャコフ教授に対するインタビュー調査、またエカテリンブルグで行ったニクーリン司祭、エカテリンブルグ郷土博物館学芸員ネウイマン氏および歴史家シートフ氏に対するインタビューと州立図書館で収集した文献を検討した。調査結果については、国内の研究会及び国際ワークショップで報告することができた。現在、報告内容を基に、論文として発表する準備を進めている。また(1)について、帝政末期の君主主義的傾向の強かった司祭、クロンシュタットの聖イオアンももうひとつの事例として研究する予定を立てていた。これについては、Kizenko N. A Prodigal Saint: Father John of Kronstadt and the Russian People (The Pennsylvania State University Press, 2000)をはじめとする先行研究を収集・精読し、現地調査のための準備を進めた。(2)のエキュメニカル運動については、先行研究を調査した結果、エキュメニカル運動の全体像を把握するためには、かなり広範囲にわたってアーカイブ調査をする必要があることが明らかになり、短期滞在の調査では不十分であった。平成28年度は、7月から1月まで産休・育休を取得した。産休・育休の前後も妊娠と育児の関係で、現地調査を計画通りに行うことは不可能であった。こうした状況にもかかわらず、前年度に行った現地調査での資料や、先行研究などの精読を通じて、意義のある研究を進めることができたと考える。前期は事務が多忙であったことと、妊娠に伴う移動の制限のため、学会・研究会で研究成果を発表することは叶わなかったが、論文執筆や先行研究の精読に時間を充てることができた。1月20日に育休から復帰した後には、本研究課題に関するものについては国内の研究会で1回、国際ワークショップで1回、研究成果を報告することができた。平成29年度は、これまで調査してきたサンクト・ペテルブルグの聖クセーニヤについて、査読誌に論文を投稿し、掲載された。また、最後の皇帝ニコライ二世一家殺害事件に対するソ連国内での歴史認識を明らかにし、一家に対する崇敬について調査した。この結果について、国際学会で報告することができた。12月にはアメリカのシカゴ主教区とニューヨーク州の在外ロシア正教会聖シノド・アルヒーフ、およびジョルダンビリーの聖三位一体修道院の図書館で調査を行うことができた。シカゴでは、在外教会におけるニコライ二世一家列聖に関わった司祭の妻に話を聞くことができた。また、彼女自身が1970年代にツーリストとしてレニングラードの聖クセーニヤの墓を訪れた経験についても明らかになった。聖シノドおよび聖三位一体修道院での資料集では、クロンシュタットの聖イオアン神父、聖クセーニヤ、皇帝一家の崇敬と列聖に関する大量の一次資料および、新聞・雑誌記事を手に入れることができた。在外教会が列聖に踏み切るに至った経緯として、在外教会を本国のロシア教会に従属するものではなく、真のロシア教会と考えた府主教フィラレート(ボズネセンスキー)が指導者となったことが、重要な意味をもっていたことを明らかにした。また、イオアン神父やクセーニヤの列聖に向けては、一般信徒からなる兄弟会/姉妹会がイニシアティブを取って、奇跡譚を収集し、イオアンやクセーニヤの文化的表象の造形に大きく貢献していたことがわかってきた。一方の皇帝一家の列聖に関しては、歴史認識が大きな問題となった。皇帝一家の運命をどのように表象し、普及するかという問題が極めて重要であり、これに高位聖職者や知識人などのロシア人ディアスポラのエリートが大きく関わっていたことが、さまざまな資料から明らかになってきた。

聖イオアン神父については、神父と帝政末期のロシア社会についての優れた研究"A Prodigal Saint: Father John of Kronstadt and the Russian People" (Penn, 2000)を表したNadieszdaKizenko教授とコンタクトを取ることができた。キゼンコ氏は在外教会の歴史にも造詣が深く、今後の研究を進める上で、氏から様々な助言を得ることによって、研究を大きく飛躍させることが期待される。ロシアで収集した資料から、在外教会の列聖が本国の教会に及ぼした影響について、聖人の表象の仕方や、歴史認識という点において少しずつ明らかになってきた。今後は、本国の教会と在外教会の関係というより大きな文脈を明らかにしながらこの問題について論考を深めることが望まれる。また、北米における資料収集およびインタビュー調査では、イオアン神父、聖クセーニヤ、皇帝一家それぞれの列聖と崇敬に関して、非常にたくさんの資料を集めることができた。資料収集の過程で、聖チーホン正教人文大学のAndrey Kostriukov教授による亡命教会についての優れた先行研究(Russkaia Zarubezhnaia Tserkov' v 1939-1964 gg. (Moscow, 2015))を参考にすることができた。氏は、ロシア正教会渉外部に勤務した経験があり、外部のものには閲覧不可能な渉外部のアルヒーフ資料をふんだんに用いた研究を上梓している。コストリューコフ教授とは、次回のモスクワ調査の際に助言と協力を得られるよう、連絡を取っている。今後、本研究課題の統括に向けて、十分な準備を行うことができたという点で、現時点の研究はおおむね順調に進捗しているといえる。本研究は、20世紀に入ってからロシア正教会および亡命ロシア人の結成した在外ロシア正教会が行った列聖を手掛かりに、正教会の歴史認識や政治的立場、さらには亡命教会との関係からソ連外交チャンネルとしての正教会の位置づけを明らかにしようとするものである。具体的には、ロシア帝国最後の皇帝ニコライ二世とその家族を取り上げた。ロシア本国におけるニコライ二世崇敬の現状について、ニコライ二世一家銃殺の地であるエカテリンブルグでのフィールドワークや参与観察を行った。しかし、ロシア正教会の外務省ともいうべき渉外部のアーカイヴ資料は閲覧不可であったため、かつてここで勤務していた聖チーホン人文正教大学教授のアンドレイ・コストリューコフ教授の研究指導の下、在外ロシア正教会のアーカイヴでの調査を行った。さらにこのアーカイヴ調査からは、皇帝に対する崇敬の始まりから列聖に至るプロセスを分析した。ロシア革命後の亡命ロシア社会においては、次期皇帝を擁立するという理由で、ニコライ二世の生死に関心を寄せるものもいたが、次第にその悲劇的な死が重視されるようになった。後に上海主教として知られるイオアン・マクシモーヴィチは皇帝を苦難の聖者ヨブになぞらえる説教を行い、崇敬の神学的素地を形成した。
肝細胞癌で発現するp63の機能：DNA損傷応答およびウイルス発癌との関連

本研究はがん抑制遺伝子p53ファミリーの1つであるp63の肝癌細胞での発現と機能、肝癌ウイルス関連因子とp63の相互作用を解析し、p63と肝癌発症の関連を明らかにすることを目的とした。扁平上皮癌と対照的に、p63のTAアイソフォーム(TAp63)を強く発現する肝癌細胞が多かった。しかし、肝癌細胞ではTAp63のDNA損傷に対する応答性やp63とウイルス関連因子の直接的な相互作用は検出できなかった。B型およびC型肝炎ウイルスで活性化されるWnt/βカテニンシグナル伝達をΔNp63αが核内で抑制することが明らかになり、ΔNp63が発現される場合、腫瘍化・悪性化の過程を抑制する可能性が示唆された。TP63(p63)はがん抑制遺伝子TP53(p53)ファミリー遺伝子で、主として未分化な外胚葉性上皮に発現し、細胞の増殖と分化に重要な役割を果たす。扁平上皮癌で高レベル発現するp63の機能に関する研究は多いが、肝細胞や肝癌細胞における発現様式と細胞分化および腫瘍化との関連については理解が進んでいない。実施した項目: 1.肝癌細胞株におけるp63の発現解析を行った。p63のTA型とΔN型の転写産物およびスプライス・アイソフォームについてRT-PCR法とWestern Blot法により解析した。がん抑制遺伝子TP53野生型(p53wt)のHepG2株、TP53変異型(p53mut)のHuh7株、HLE株などの肝癌細を用いた。対称としてp53-nullのSAOS2骨肉種細胞株を用いた。2.p53およびp63のトランス・アクチベーション活性を検討した。TAp63およびp53の標的遺伝子のプロモーター領域を使ってレポータ・アッセイを実施した。得られた結果:1. Huh-7、HLE、FCL-4の肝癌由来細胞ではp63のTA型(α、β、γ)が主に発現しており、ΔN型はFCL-4以外では検出されなかった。p53wtを有するHepG2細胞ではp63の発現は全く検出されなかった。扁平上皮癌ではΔN-p63の発現が優勢であるが、p53に類似する構造を持つp63のTA型だけが発現している肝癌細胞が複数検出できた。2.Huh-7細胞でp21waf1などのプロモーターを用いて調べた結果、p53とTA型p63の転写誘導機能が抑制されることはなく、p53mutの肝癌細胞で発現しているTA型p63は正常に機能していると考えられた。研究代表者らは肝癌の細胞株がp63のTA型およびΔN型を発現していることを明らかにした(25年度の成果)。肝癌細胞におけるp63の発現と、腫瘍細胞の性質の関連、およびウイルス発癌との関連を調べるために研究を実施した。C型肝炎ウイルス(HCV)のコアタンパク質(HCV-C)がWnt/β-カテニンのシグナル伝達系を活性化する報告がある。そこで、肝細胞癌におけるこのシグナル伝達系に関するp63およびウイルスタンパク質の関連を調べた。1.p63とGSK-3βのリン酸化およびβ-カテニン核移行の関連: TA-p63とΔN-p63を発現する肝癌細胞株でsiRNA法によりp63をノックダウンし、細胞質と核画分でタンパク質を解析した。p63は核内でGSK-3の脱リン酸化酵素と会合していたが、p63はGSK-3βのリン酸化およびβ-カテニン核移行に影響しなかった。2.核抽出液でのp63とTCF4および関連因子の分子会合: Myc-TCF4、Flag-β-カテニン、p63(アイソフォームΔN-p63αなどを強制発現させ、抗Myc抗体、抗Flag抗体で免疫沈降を行った結果、ΔN-p63はTCF4と結合し、β-カテニンのアンタゴニストTLEの結合を促進することが示唆された。3.クロマチン標的遺伝子でのβ-カテニン/TCF複合体: p63抗体、TCF4抗体、β-カテニン抗体、対照抗体を用いてクロマチン免疫沈澱(ChIP)を行った。精製したDNA断片をリアルタイムPCR法により定量・分析したところ、p63はDNA/β-カテニン/TCF複合体に含まれ、β-カテニンの結合または機能を抑制すると考えられた。4.HCV-Cによる遺伝子発現制御: HCV-Cはp63の標的遺伝子発現には影響しないが、限られた細胞株ではWnt標的遺伝子発現を促進する結果が得られた。本研究は肝癌ウイルスと関連するタンパク質とがん抑制遺伝子p53ファミリーの1つであるp63タンパク質との相互作用を検出することによって、p63とウイルス性肝癌発症の関連を明らかにすることを目的として実施した。B型およびC型肝炎ウイルス(HBV, HCV)による肝癌発症と悪性転化において、刺激因子Wntのシグナル伝達因子であるβ-カテニンの核移行が増強されることが報告されていることから、核内でのp63によるWnt/β-カテニン標的遺伝子の発現調節について解析を行った。機能解析ではWnt/b-カテニン応答配列(WRE)を標的とするレポータ・アッセイを実施した。世界で広く使われているLuc遺伝子レポータ・プラスミドpGL3-OTに加えて、その変異型、ヒト・ゲノムのWRE配列を連結し作成したベクターを用いた。肝癌細胞Huh7、HEK293、ほかを用いた。