hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
遺伝子治療用ベクターとしてのヒトサイトメガロウイルス

遺伝子治療用ベクターとしてヒトサイトメガロウイルス(HCMV)を用いる場合には、正常な細胞では増殖できないように改変する必要がある。そのためにウイルスの感染・増殖にもっとも重要であると思われてるIE1遺伝子を欠損したウイルスの構築を試みた。このためにはIE1を恒久的に発現しかつHCMVが感染増殖できる細胞株が必要となる。従来報告されているHCMVが感染増殖できる細胞株について検討を行ったところ、ウイルスの産生量の低さ等の問題で実用的ではないことが判明した。このためHCMVの感染用細胞として用いられてるHEL細胞をSV40によって不死化した細胞のうち、感染・増殖効率のよい株を分離して実験に用いた。これにIE1遺伝子とマーカー遺伝子としてneo遺伝子の入ったプラスミッドをトランスフェクションし、G418でセレクションを行い数十個のコロニーを拾った。蛍光抗体法でIE1産生量の多いコロニーのセレクションを行った。得られた細胞株HIE1を用いて組換えウイルスの構築を行った。ヒトサイトメガロウイルス(HCMV)DAN1μgと1E遺伝子のエクソン4領域にlacZを挿入したプラスミッド1μgをHIE1にコートランスフェクションして、アガロースをオーバーレイした。約3週間後に出現したプラーク中Xgalで青く染まるプラークをピックアップしさらに2回プラークアイソレーションを行った。得られた組換えウイルスVMIE1についてIE1の欠損をPCRとハイブリダイゼーションで確認した。VMIE1をMOI2でHEL細胞に感染させたところ、親株のTowne株と同様の増殖を示した。また感染細胞中には蛍光免疫染色でIE1の発現は認められなかったことから少なくともIE1はin vitroでは必要でないことが判明した。このためIE1欠損ウイルスは遺伝子治療用ベクターとしては不適格であると判断した。今後、IE2欠損ウイルス、IE1&2欠損ウイルスについても検討を行う予定である。IE発現細胞の構築に関しては、トランスフェクション効率に問題があってまだ得られていないが、培養細胞に関する知見が多く得られた。特にトランスフェクションに適した細胞やその条件等基礎的なデータが多く得られ、今後の研究にとって大きな発展が期待できる。現在は種々のトランスフェクション法やエレクトロポレーションを試みている。また培地等でも検討の余地があり、まもなくIE発現細胞が取れる予定である。一方、ベクターとしてのヒトサイトメガロウイルス(HCMV)に関しては現在、複数領域への外来遺伝子の導入を試みている。不要領域が多く見つかれば導入できる遺伝子のサイズの上限が大きくなる可能性がある。これがうまくいけば遺伝子発現のための専用のポリメラーゼをHCMVに取り込むことによって導入遺伝子の大量発現が期待できる。さらにはポリメラーゼの発現が調整できれば最終産物の発現抑制が可能となりこの検討も行っている。これは遺伝子治療用のベクターとしての可能性をより広げるものであり今後の研究に期待がかかるところである。IE1発現細胞の構築には、SV40によって不死化したHEL細胞を用いた。不死化HEL細胞の中でウイルス産生量の多い細胞株を選び出し実験に用いた。ヒトサイトメガロウイルス(HCMV)DNA1μgとIE遺伝子のエクソン4領域にlacZを挿入したプロスミッド1μgをHIE1にコートランスフェクションして、アガロースをオーバーレイした。得られた組換え

ウイルスVMIE1についてIE1の欠損をPCRとハイブリダイゼーションで確認した。VMIE1をMOI2でHEL細胞に感染させたところ、親株のTowne株と同様の増殖を示した。また感染細胞中には蛍光免疫染色でIE1の発現は認められなかったことから少なくともIE1はin vitroでは必要でないことが判明した。このためIE1欠損ウイルスは遺伝子治療用ベクターとしては不適格であると判断した。今後、IE2欠損ウイルス、IE1&2欠損ウイルスについても検討を行う予定である。
地域における非小児科医向け児童虐待予防教育についての研究

日本プライマリ・ケア連合学会会員を対象として、今まで明らかにされてこなかった、児童虐待予防における「支援が必要な家族」に気がつくという重要な役割を担う地域の非小児科医の児童虐待に関する理解と対応について、実態調査を行った。調査は以下の5項目についておこなった:(1)背景情報、(2)児童虐待事例の経験、(3)通告等の意思決定、(4)児童虐待対応で難しいと感じる点、(5)児童虐待に関する教育機会。5215名の日本プライマリ・ケア連合学会メーリングリストに登録している医師会員に対し調査票を送付し、109の有効回答があった。回答者の平均医師年数は15年(IQR=9年)で日常的に小児を診療している者が82.6%だった。そのうち28.3%は集に20人以上の小児患者を診療していた。児童虐待が疑われる児を診察した経験があると答えた者は62.4%であったが、22.8%は特に通告や相談等の行動は起こしていなかった。教育機会について、卒前教育の中で児童虐待について学んだ経験があるのは8.2%で医師免許取得後に何らかの研修等で児童虐待について学んだ経験があるのは34.9%だった。本研究は、非小児科医の中でも比較的小児診療を行っているような医師においても、児童虐待は小児人口100人あたり1人が通告されているという非常に頻度の高い事象であるにもかかわらず、本来気付くべき機会に気付けておらず、さらに気付いたとしても適切に対応が取られていない実態を明らかにした。その背景には、児童虐待に対する教育機会の乏しさがあることが示唆され、今後卒前教育の中での児童虐待対応に関する教育、医師免許取得後の生涯学習の中での児童虐待対応について学ぶ機会を増やしていく必要がある。本研究の目的とする教育プログラムの開発はこの結果の改善に寄与すると考えられる。2018年度に行った実態調査から、プライマリ・ケアにおける非小児科医において、(1)児童虐待への気付き、(2)初動、の2つの課題があることが明らかとなった。これらの課題について、児童虐待対応に関する教育プログラムを構築しその効果を評価していく。また、教育プログラムの構築に合わせて、利用可能なコンテンツの作成も進めていく。本年度調査票調査にかかる費用が削減できたため今回次年度使用額が生じた。次年度は非小児科医向けの教育プログラム作成を行う。この中で、教育ツールの作成等にかかる費用が見込みよりも多くなるため、次年度使用額については同開発にかかる費用として使用していく計画である。
ヴァイマル共和国の経済情勢の変化と社会民主党の経済政策思想の展開

この研究期間の間に,次のような研究活動および成果の発表を行うことができた。1.ドイツ・インフレーション期の経済情勢およびその期の社会民主党の経済政策思想と政策的な対応について研究し,論文「ドイツ・インフレーションとヒルファディング」を発表した。2.ヒルファディングの組織資本主義を補完するような資本主義観を提出した,フランクフルト学派の経済理論家フリードリヒ・ポロックの論文四編を邦訳,発表し,また,かれの資本主義観に関する二つの論文を発表した。3.ヴァイマル共和国期の社会民主主義の経済思想および政治思想,とりわけ,ヒルファディングとヘルマン・ヘラ-の思想を概観する論文「ドイツ社会民主主義の生成と変容」を執筆し,発表した。5.ヴァイマル共和国期の経済思想に関する,F.Ritter,B.Fischer,C.-D.Krohn,H.W.Weizen,S.Weichelin,H.Dubielなどの研究書を読んだ。これらの研究書を初めとして,当該研究期間に購入した研究書に基づき,今後研究を進め,ヴァイマル共和国期の社会民主主義の経済思想を,その社会経済史的な背景との関連で,さらに解明したいと思っている。1.ヒルファデイングの組織資本主義論を補完する理論と評価できる,フリードリヒ・ポロックの諸論文を邦訳し発表した。すなわち,「資本主義の現状と新計画経済体制の見込み」(愛知大学国際問題研究所,紀要,第103号,1995年9月),「国民社会主義は新体制か」(愛知大学経済学会,経済論集,第139号,1995年12月)などである。これにもとづき,ヒルファデイングの見解との比較で,ポロックの見解を評価する論文「ポロックの国家資本主義論」を執筆した。(近く,発表予定)。2.ヴァイマル共和国期の社会民主主義の経済思想および政治思想として,ヒルファンデイングの組織資本主義論とヘルマン・ヘラ-の国民主義的社会主義に論及した論文「ドイツ社会民主主義の生成と変容」を執筆し,平井俊彦編『社会思想史を学ぶ人のために』(世界思想社,1995)に発表した。3.ドイツ社会民主主義に強い影響を及ぼしたフリードリヒ・エンゲルスの生涯の理論活動の意義を論じた論文「エンゲルスの理論活動の意義と問題-没後100年を記念して-」(経済学史学会,年報,第33号,1995年10月,所収)を発表した。(1)平成8年度5月9-11日にオランダで開催された「ヨーロッパ社会科学史学会」において,ヴァイマル共和国期のヒルファディングの組織資本主義論に関する報告"The ecnomic tought of German Social Democracy in Weimar Republic-specially on the theory of organized capitalism"という報告をおこなった。(2)一昨年来のフリードリヒ・ポロックの経済思想の研究に基づき,ポロックの国家資本主義論をヒルファディングの組織資本主義論と比較し,その特徴や意義を論じた論文「組織化と国家計画-ヒルファディングとポロックとをめぐって-」を発表した。
関節リウマチにおける炎症と動脈硬化

近年、関節リウマチ(RA)は心血管リスクが高い疾患と認識されるようになった。Osteoprotegerin(OPG)はRAの骨破壊に関与しており、ヒトの動脈硬化性プラークでもOPGが発現している。RA患者では、頚動脈プラークがあると血清OPG濃度が高かった。また、年齢、性にかかわらず、血清OPG濃度は頚動脈プラークの有無と相関があった。RA患者における血清OPG濃度増加は頚動脈プラークの存在を反映し、心血管リスクの指標になると考えられた。関節リウマチ(Rheumatoid arthritis : RA)は滑膜炎を主病変とする慢性炎症性疾患で、動脈硬化病変を有する頻度が高い。動脈硬化は血管の慢性炎症でRAにおける滑膜炎の病態に類似しているが、RAの慢性炎症や免疫異常、骨代謝異常など疾患特異的な病態が、動脈硬化病変の形成に関与していると考えて、次の仮説をたてた。1)RA患者では一般人口に比べて動脈硬化の進行が早く、RAの疾患活動性や重症度と相関する。2)RAの滑膜炎や関節・骨破壊において重要な役割を果たしている炎症性サイトカインや骨代謝調節因子が、RAにおける動脈硬化病変形成に関与している。3) MTXや抗TNF製剤を積極的に使用して疾患をコントロールすることで、動脈硬化の進展を抑制できる。以上を証明するため、本研究計画を立案した。本研究の目的は(1)RA患者では一般人口と比較して動脈硬化が進行しているか確認すること、(2) RAの炎症や免疫異常、骨代謝異常が動脈硬化の進行と関連しているか検討すること。(3) RAにおいて早期に積極的治療を開始して病勢を抑えることが、骨破壊の阻止だけでなく動脈硬化抑制にもつながるか検討することである。本研究は、関節リウマチ(Rheumatoid Arthritis : RA)患者で動脈硬化を有する頻度と程度を確認し、RAの炎症や免疫異常、骨代謝異常が動脈硬化の進行と関連しているか検討することを目的としている。すでに、関節リウマチ患者95例より末梢静脈血を採取し、そのうち77例で頚動脈超音波検査を施行し動脈硬化の程度を評価した。現在も症例を蓄積してデータベース化しているところである。平成18年度に得られた結果の概要は下記のとおりで、2007年4月に開催される第51回日本リウマチ学会総会・学術集会のワークショップ(2007年4月28日)で発表予定である。Pentraxin 3(PTX3)はIL-1やTNF-αなどの炎症刺激に反応してマクロファージや血管内皮細胞から産生されるlong pentraxinで、免疫や炎症、動脈硬化への関与が知られている。関節リウマチ(RA)は慢性炎症性疾患で動脈硬化性病変を有する頻度が高い。そこでRA患者76例と全身性硬化症(SSc)患者9例で血漿PTX3濃度を測定したところ、RA患者のPTX3濃度はSSc患者と比較して有意に高値を示した(3.78±2.62(SD)ng/mL vs. 2.62±1.28ng/mL, P=0.038)。また、RA患者のPTX3濃度は血清CRP (P=0.01)、MMP-3濃度(P=0.004)、ステロイド投与量(P=0.0006)と相関があり、年齢、性、ESR、RF、DAS28とは関連がなかった。RAの病態にPTX3が関与していると考えられ、さらに動脈硬化進展への影響についても注目される。本研究は、関節リウマチ(Rheumatoid arthritis:RA)患者で動脈硬化を有する頻度と程度を確認し、RAの炎症や免疫異常、骨代謝異常が動脈硬化の進展と関連しているか検討することを最終目標として進められている。平成1819年度にRA患者108例から末梢静脈血を採取して頚動脈エコーを実施し、得られた結果をデータベース化した。動脈硬化の進展度は3年後に頚動脈エコーで評価するため、現在得られているデータを解析した結果を報告する。RA患者100例で骨吸収マーカーとして知られている尿中I型コラーゲンN末端架橋テロペプチド(NTX)を測定し、RAの疾患活動性や骨関節破壊と関連するか検討した。尿中NTX値は手・足関節レントゲンでの骨関節破壊の程度と有意な相関があり、特に骨びらんよりも関節裂隙狭小化と強い相関があった。RA患者における尿中NTX値は骨関節破壊の程度を反映する指標として有用であることが示唆された。この結果は2008年4月に開催される第52回日本リウマチ学会で発表予定である。また、RA患者99例で免疫や炎症、動脈硬化への関与が知られている血漿pentraxin3を測定したところ、RAの疾患活動性(Disease activity score 28)や骨関節破壊の程度と相関があった。しかし、頚動脈エコーによる動脈硬化の程度とは関連がみられなかった。この結果は2007年11月に開催された第71回アメリカリウマチ学会で発表した。

本研究は、関節リウマチ(Rheumatoid arthritis:RA)患者で動脈硬化を有する頻度と程度を確認し、RAの炎症や骨代謝異常、骨関節破壊が動脈硬化の進展と関連があるか検討することを最終目標として進められている。平成1820年度にはRA患者133例から末梢静脈血を採取して、心血管リスクに関連する血清脂質、RA疾患活動性、骨代謝に関連するマーカーを測定、関節レントゲンで骨・関節破壊の程度や骨代謝関連マーカーの測定も行っている。また、頚動脈エコーを実施し、得られた結果のデータベース化を継続中である。動脈硬化の進展度は初回検査の3年後である平成21年度に頚動脈エコーで評価予定である。本研究は、関節リウマチ(Rheumatoid arthritis:RA)患者で動脈硬化を有する頻度と程度を確認し、RAの炎症や骨代謝異常、骨関節破壊が動脈硬化の進展と関連があるか検討することを目標として進められた。平成1821年度にRA患者から末梢静脈血を採取して、心血管リスクに関連する血清脂質、RA疾患活動性、骨代謝関連マーカーを測定した。また、頚動脈エコーを実施し、得られた結果をデータベース化した。RAは骨量の低下や骨関節破壊を生じる疾患である。Osteoprotegerin (OPG)は破骨細胞の分化抑制因子で、RAの骨破壊にも関与している。一方、ヒトの動脈硬化性プラークではOPGが発現しており、血清OPG濃度は冠動脈硬化の重症度と相関がある。そこで、RA患者における血清OPG濃度と頚動脈プラークとの関連について検討した。RA患者96例で血清OPG度を測定し、頚動脈エコーでプラークを検出した。プラークありのRA患者(n=41)は、プラークのないRA患者(n=55)と比較して年齢が高く(P=0.004)、CRP (P=0.043)、MMP-3 (P=0.037)および血清OPG濃度(median : 1374 vs. 868pg/ml, P=0.003)が有意に高かった。一方、両群間で、性、罹病期間、血圧、BMI、喫煙、LDLコレステロール値、DAS28、modified Sharpscore、PSLおよびMTX投与量に有意差はなかった。多変量解析では、年齢、性にかかわらず、血清OPG濃度はプラークの有無と相関があった(P=0.034)。RA患者における血清OPG濃度増加は頚動脈プラークの存在を反映した。この結果は2010年4月に開催される第53回日本リウマチ学会で発表する。
バイオイメージングを用いた骨髄間質細胞による神経再生の研究

まず、骨髄間質細胞(bone marrow stromal cell;BMSC)が神経細胞に分化する過程での分子生物学的な遺伝子発現を評価するために、神経細胞とともに培養したBMSCをマイクロアレイにかけ、発現の高い遺伝子についてRT-PCRによる確認評価を行った。その結果、BMSCの神経細胞への分化の過程で数種類のGrowth factorの発現が確認され、この結果はBrain Res誌(2006)に掲載された。モデルを用いた実験系では、BMSCをマウス脳梗塞モデルの線条体、ラット脊髄損傷モデルの損傷部近傍に移植すると、神経細胞に特有な受容体機能を獲得しており、BMSCの損傷中枢神経内における機能面からの役割を明らかにした。これらの結果については、ラット脊髄損傷モデルに関してはJ Neurotrauma誌(2006)に、マウス脳梗塞モデルはJ Nucl Med誌(2006)に掲載された。また、SDF-1/CXCR4システムがBMSCの遊走に不可欠であることを証明し、Brain Res誌(2007)に掲載された。その他、BMSCと神経細胞の共培養実験系を確立し、BMSCの一部が神経細胞への分化、一部は神経細胞と細胞融合することを初めて証明した。また、BMSCはBDNFやNGFの産生を増加させることで、神経細胞を保護することも明らかとし、J Neurosci Res誌(2008)に掲載された。現在、ラット脊髄損傷モデルや脳挫傷モデルなどを用いて、BMSCを定位的に移植し、軸策再生の研究を行っている。また、MRIにより、軸策を生存モデルで評価する方法を確立しつつあり、免疫染色法などを併用して軸策再生の機序解明の研究を推し進めている状況である。まず、骨髄間質細胞(bone marrow stromal cell ; BMSC)が神経細胞に分化する過程での分子生物学的な遺伝子発現を評価するために、神経細胞とともに培養したBMSCをマイクロアレイにかけ、RT-PCRによって発現の高い遺伝子について確認評価を行った。モデルを用いた実験系では、BMSCをマウス脳梗塞モデルの線条体、および、ラット脊髄損傷モデルの損傷部近傍に移植すると、BMSCが生体内に生着し、病変部に向かって遊走する。免疫染色では神経細胞のマーカーを発現する細胞に分化を示すが、その他にも神経細胞に特有な受容体機能を獲得しており、BMSCの損傷中枢神経内における機能面からの役割を明らかにした。これらの結果については、ラット脊髄損傷モデルに関してはJ Neurotrauma誌(2006)に、マウス脳梗塞モデルに関してはJ Nucl Med誌(2006)に掲載された。また、BMSCと神経細胞の共培養実験系を確立した。この実験系を活用することにより、BMSCの一部が神経細胞そのものへ分化すること、一部は神経細胞と細胞融合することを初めて証明した。また、BMSCはBDNFやNGFの産生を増加させることで、glutamateに暴露された神経細胞を保護することも明らかとした。現在、Brain Res誌に投稿中である。現在、ラット脊髄損傷モデルや、脳挫傷モデルなどを用いて、BMSCを定位的に移植し、軸索再生の研究を行っている。これまで、移植細胞を鉄製剤で標識し、MRIによってモデルを生存させたまま経時的に細胞の動向を確認する方法を確立した。また、MRIを用い軸索を生存モデルにおいて評価する方法を確立しつつあり、免疫染色法などを併用して軸索再生の機序解明の研究を推し進めている状況である。本研究では、骨髄間質細胞(bone marrow stromal cell; BMSC)の移植による神経症状改善の機序解明を目的として行っている。これまでの研究成果としては、まず、BMSCそのものが持つstromal derivedfactor-1(SDF-1)とその特異レセプターであるCXCR4に注目した。

脳梗塞モデルにBMSCを移植すると、SDF-1/CXCR4のノックアウトマウスでは、ワイルドタイプマウスに比べて、移植したBMSCの遊走や増殖が劣っており、このSDF-1/CXCR4システムが移植細胞の遊走、増殖に重要な因子であることを同定し、Brain Res誌(2007)に掲載された。In vitroの実験系では、BMSCはダメージを受けた神経細胞と共培養すると、正常神経細胞と共培養した時に比べてBMSCの神経細胞への分化が促進されることを解明した。また、これらの細胞形態学的な変化、蛍光染色などの結果、損傷中枢神経内に移植されたBMSCは単一の機序ではなく、細胞融合、移植細胞の神経細胞への分化、神経栄養因子の放出など、様々な機序が関わりあって神経機能の改善をもたらすという事を解明した。この結果はJ Neurosci Res誌(2008)に掲載された。また、高次機能障害を呈する脳挫傷モデルにおいても、BMSCは高次機能の改善をもたらす事を解明し、Brain Res誌に投稿中である。現在、ラット脊髄損傷モデルにおいて、BMSCを移植した結果、軸索がどのように再生されているかを、軸索を可視化する軸索とレーサーを用いて評価し、神経回路網の再構築に関わる機序解明を行っている。また、ラット脳挫傷モデルにおいて、移植したBMSCによる細胞機能的再生の観点から、小動物用のPETを用いたバイオイメージングにより、臨床応用にむけた細胞観察技術の確立を推し進めている状況である。
視覚的ファントムとステレオキャプチャにおける透明視と遮蔽視の役割

本研究の目的は、視覚的補完(visual completion)の一種である視覚的ファントム(visual phantom)とステレオキャプチャ(stereo capture)の関係を明らかにすることである。これまで両者の相互作用はこれまでほとんど検討されて来なかったが、両者は(1)主観的輸郭の生成と充填を伴い、(2)図地分離に関連した立体視を伴う、という点で類似性が高いと思われる。異なる点として、視覚的ファントムが透明視との関係が強く疑われるのに対し(Kitaoka, Gyoba, Kawabata and Sakurai, 2001, Perception, 30, 959-968 <本研究による発表論文>)、ステレオキャプチャでは遮蔽視との関連が指摘されている(Vallortigara and Bressan, 1994)。本研究においては、このように類似性の高い視覚的ファントムとステレオキャプチャの諸特性を比較し、共通する特性の抽出・同定および両現象に独自の特性の把握を通して、視覚的補完現象の本質的なプロセスを探り出すことを目的とした。その結果として、視覚的ファントムに特徴的な空間周波数特性がそのままステレオキャプチャにも見られることがわかった。このことは、これら2つの現象には何らかの共通したメカニズムが横たわっていることを示す。一方、誘導刺激を透明面を使うものと使わないもので比較すると、前者では視覚的ファントムが起きやすく、後者ではステレオキャプチャが優勢であった。以上のことから、視覚的補完としては両者は共通した土台を持ち、誘導刺激が透明面を持つかどうかで最終的な知覚がファントムとなるかステレオキャプチャとなるかが決定されることが示唆された。本研究は視知覚における面形成のメカニズムの解明に重要な知見を提供できたと考えられる。本研究の目的は、視覚的補完(visual completion)の一種である視覚的ファントム(visual phantom)とステレオキャプチャ(stereo capture)の関係を明らかにすることである、これまで両者の相互作用はこれまでほとんど検討されて来なかったが、両者は(1)主観的輪郭(subjective contour)の生成と充填(filling-in)を伴い、(2)図地分離に関連した立体視を伴う、という点で類似性が高いと思われる。異なる点として、視覚的ファントムが透明視(transparency)との関係が強く疑われるのに対し(Kitaoka, Gyoba, Kawabata and Sakurai, 2001, Perception<本研究による発表論文>)、ステレオキャプチャでは遮蔽視(occlusion)との関連が指摘されている(Vallortigara and Bressan, 1994)。本研究においては、このように類似性の高い視覚的ファントムとステレオキャプチャの諸特性を比較し、共通する特性の抽出、同定および両現象に独自の特性の把握を通して、視覚的補完現象の本質的なプロセスを探り出すことを目的としている。結果としては、視覚的ファントムに特徴的な空間周波数特性がそのままステレオキャプチャにも見られることがわかった。以上のことから、視覚的補完としては両者は共通した土台を持ち、誘導刺激が透明面を持つかどうかで最終的な知覚がファントムとなるかステレオキャプチャとなるかが決定されるように思われる。これまで両者の相互作用はこれまでほとんど検討されて来なかったが、両者は(1)主観的輪郭(subjective contour)の生成と充填(filling-in)を伴い、(2)図地分離に関連した立体視を伴う、という点で類似性が高いと思われる。

異なる点として、視覚的ファントムが透明視(transparency)との関係が強く疑われるのに対し(Kitaoka, Gyoba, Kawabata and Sakurai,2001,Perception,30,959-968<本研究による発表論文>)、ステレオキャプチャでは遮蔽視(occlusion)との関連が指摘されている(Vallortigara and Bressan,1994)。本研究においては、このように類似性の高い視覚的ファントムとステレオキャプチャの諸特性を比較し、共通する特性の抽出・同定および両現象に独自の特性の把握を通して、視覚的補完現象の本質的なプロセスを探り出すことを目的とした。その結果とし、視覚的ファントムに特徴的な空間周波数特性がそのままステレオキャプチャにも見られることがわかった。このことは、これら2つの現象には何らかの共通したメカニズムが横たわっていることを示す。一方、誘導刺激を透明面を使うものと使わないもので比較すると、前者では視覚的ファントムが起きやすく、後者ではステレオキャプチャが優勢であった。以上のことから、視覚的補完としては両者は共通した土台を持ち、誘導刺激が透明面を持つかどうかで最終的な知覚がファントムとなるかステレオキャプチャとなるかが決定されることが示唆された。
母語と非母語の音の音響的実測値と知覚上の距離: 3言語の母語話者の相互比較

アメリカ英語、日本語、韓国語の母語話者を対象にして、この3言語の母音、子音の知覚トの距離(似た音か否かの判定)と音響的測定可能な実測値との関係を考察した。全体的に母語の音韻による影響が知覚トの距離の判定に見られた。ここで、知覚トの距離が大きいとは音声的な違い敏感であり、距離が小さいとは音声的な違いに敏感でないことを意味する。全体的に第1言語の音韻が判定に影響し、閉鎖音、摩擦音の音声的な違いへの反応に各言語の母語話者特有の傾向が見られた。母音については、日本語話者のみ母音長が判定に影響する傾向が見られた。また、音節末の鼻音、開放されない閉鎖音の同定実験では、日本語話者の正答率が最も低かった。3年間の研究課題の初年度にあたる平成21年度は、研究計画の立案、実験準備、実験の実施とそのデータ分析を行い、平成21年度中に学会発表等は行っていない。まず、アメリカ英語、韓国語、日本語の母語話者各4名の発話を日本とアメリカにおいて収集し、知覚実験で使用する音声刺激を作成した。本研究課題の目的は、音響分析において測定可能な数値と実際に知覚される音声的な差異の大小を異なる言語の母語話者の間で比較することであるが、実験の対象を、1)音節末の鼻音と閉鎖音、2)母音、3)子音に絞って実験を行うこととした。実験は、日本とアメリカで行うため、実験に先立ち2箇所で同じ手順で実験が行われることを確認するため、海外共同研究者の下に渡り、打ち合わせを行った。3言語の母語話者がそれぞれ10数名被験者として実験に参加した。音節末の鼻音と閉鎖音は、同定実験を行い、母音と子音は異なる言語の音を1回の試行で提示し、その音の間の差異を判定する形をとった。平成21年度中に学会発表に至らなかったが、音節末の鼻音と閉鎖音に関しては、平成22年4月に開催されるAcoustical Society of Americaの第159回大会で発表することとなった。音節末の鼻音と閉鎖音の間に音素対立のある英語と韓国語の母語話者の方がそれぞれの母語のみならず他の言語の鼻音と閉鎖音の同定実験においても日本語の母語話者よりも高い正答率を示したが、必ずしも母語の音の正答率の方が高いという傾向は見られなかった。先行する母音の影響も見られ、一般に高母音の後では正答率は低く、低母音の後の方が正答率は高い傾向が見られた。英語、韓国語、日本語の母語話者を対象にした音節末の鼻音と開放を伴わない閉鎖音の同定実験では、日本語話者が最も正答率が低く、韓国語話者は有声・無声閉鎖音の間の誤答を他の言語の話者よりも多くすることがわかった。一般に、鼻音では[n]の正答率が低く、鼻音、閉鎖音とも低母音よりも高母音に先行されると同定が困難になる傾向が見られた。母音の知覚上の距離に関しては、3言語の話者とも英語の/i/、/u/と日本語の「イ」、「イー」、「ウ」、「ウー」との距離では、英語の/i/、/u/は2モーラの母音との類似性が高いという判定をしたが、日本語話者のみ母音長による判定に有意差を示した。英語の/∩/と日本語の「イ」は、韓国語話者を除いて知覚上の距離は平均よりも離れているという判定をしたが、英語話者は英語の/∩/と「エ」が非常に近いという判定をした。実際、/I/と「エ」は母音空間上の位置でも近い。韓国語の/i/と英語の/i/,/I/との距離の判定では有意な差がなく、母音空間上の位置でも韓国語の/i/は英語の/i/や日本語の「イ」に比べて低く、Frieda & Nozawa (2007)で韓国語話者が英語の/i/-/I/の弁別を苦手にしていた結果を支持している。母音空間上の距離は離れており、日本語話者と韓国語話者は離れた距離にあると判定した英語の/a/と日本語の「オ」を英語話者は比較的近いと判定した。また、子音の知覚上の距離に関しては、有声・無声の判定において各言語の母語話者の間で差が大きく見られ、日本語話者は日本語の無声閉鎖音と英語の無声閉鎖音、韓国語の激音を近い音と判定したが、韓国語話者は離れた音と判定した。日本語話者は日本語の有声閉鎖音と韓国語の平音を近い音と判定したが、韓国語話者は離れた音と判定した。

また、英語話者は英語の有声閉鎖音と韓国語の濃音を近い音と判定する傾向が他の言語の話者よりも強かった。本研究は、音響上の実測値と3言語の母語話者が知覚する音の間の距離との関係を比較検討することを試みたものである。母音、子音ともに3言語の母語話者の特徴が顕著に表れた実験結果が得られた。子音の知覚実験結果の概要は以下の通りである。1)韓国語話者は、有気音(英語の無声閉鎖音、韓国語の激音)と日本語の無声閉鎖音の違いに敏感である。2)韓国語話者は、英語の有声閉鎖音と日本語の有声閉鎖音の違いにも他の言語の話者よりも敏感である。3)韓国語話者は、英語の有声閉鎖音と韓国語の平音を他の言語の母語話者よりも近い音と判定したが、英語と日本語話者は英語の有声閉鎖音と韓国語の濃音とを近い音と判定した。4)韓国語話者は無声歯茎摩擦音の音声的な違いに、他の言語の母語話者よりも敏感で、英語の/s/と韓国語の濃音の/s*/が平音の/s/よりも有意に近い音と判定した。音響分析の結果、摩擦の持続時間、摩擦の後の帯気の持続時間、後続の母音への移行時のFl周波数などにおいて英語の/s/と韓国語の濃音/s*/が近いことがわかった。5)英語の/r/と日本語のラ行音、韓国語の/r/との音声的な違いには英語話者の方が、日本語話者と韓国語話者よりも敏感であった。6)音声的には必ずしも近くはないが、英語の/f/と日本語のフの子音、英語の/f/と韓国語の/p□/は、それぞれ日本語話者、韓国語話者の方が英語話者よりも近い音と判定した。母音の知覚に関しては以下のような母語による違いが見られた。英語と日本語の母音の知覚上の距離については、どの言語の話者も英語の/i/と日本語の「イー」、英語の/u/と日本語の「ウー」が近い母音と判定した。日本語話者のみ日本語の母音の長短による英語の母音との知覚上の距離の判定に有意な差が見られた。英語と韓国語の母音に関しては、特徴的な傾向として英語話者は英語の/∪/と韓国語/□/を近い母音と判定した一方で、韓国語話者は英語の/〓/と韓国語の/〓/が特に似ていない母音とした。
ＬＥＳ乱流計算と微細構造観測による海洋乱流過程の解明

本研究は、新しい乱流観測手法を開発し、東シナ海に於いて乱流観測を実施し、並行して乱流の並列数値計算からその再現と解析を行ったものである。2011年度の観測では、乱流微細構造プロファイラーを用いエネルギー散逸率と、5ビーム超音波ドップラー式多層流向流速計を用い潮汐流を観測した。また、2013年の観測では、高周波数での計測が可能となる装置を新たに導入し、レイノルズ応力を計測し潮汐の半日周潮に伴うレイノルズ応力の周期的変動を見いだした。LESを用いた乱流の数値計算では、2011年の観測結果から初期値と潮汐の外力を推定し乱流計算を行い、潮汐振動流とそれに伴う乱流の主な特性の再現に成功した。長崎大学長崎丸により2010年7月18日24日の間、東シナ海陸棚上海底に5ビーム付ADCPを設置し、流速の鉛直構造の観測を行った。同時に、乱流微細構造プロファイラーによる観測も同19日20日行い、水深約10mから海底直上までに至る乱流運動エネルギー散逸率の鉛直プロファイルを1時間おきに測定することができた。しかし、ADCPシステムの不具合により十分な流速データは取得できなかった。そのため、長崎丸により2010年10月5日14日の間、長崎県沿岸域の海底に5ビーム付ADCPを設置し、流速の鉛直構造の再観測を行った。この結果、5ビームADCPを用いて良好なデータを取得できた。海底境界付近の乱流混合強度を表す鉛直渦粘性係数を、流速の鉛直構造の観測値から推定する手法について検討した。従来用いられた手法に加え、新たに二つの手法を考案し、その特性や誤差依存性を調べた。その結果、新たに考案した手法は計測誤差の影響が小さく、より良い推定値を与えることを確認した。LES乱流数値計算では8方位の地衡流に対しそれぞれ海底境界層の厚さを調べた。その結果西向きの流れが最も厚く、最も薄い東向きの流れに対し約2倍の海底境界層の厚さになることを示した。同時に、海底境界層流の線形固有値問題による安定性解析を行ったところ、境界層の鉛直シアーと地球回転軸の水平成分によるコリオリ力の影響により西向流が最も不安定であり、LESの数値計算の結果に不安定解によく似た筋状擾乱が海底近傍にあることを示した。乱流の大規模循環への応用では、大気境界層の乱流クロージャーモデル(Nakanishi and Niino, 2009)を適用した海洋混合層モデル(NNモデル)を日本海海洋循環モデルに組み込み、そのパフォーマンスを調べるための予備実験を行った。2003年9月12日14日に日本海を通過した台風による海表面水温の低下について、モデルと衛星データとの比較を行った。その結果、海表面水温偏差(通過後-通過前)の水平パターンは概ね類似しているが、台風通過後のモデルの海表面水温の低下が衛星データと比べて1/3程度であること分かり、現在モデルのチューニング行っている。長崎大学・長崎丸により、済州島南西沖の水深約68mの陸棚上に5ビームADCPを設置して、2011年7月16日21日の約5日間にわたり流速の鉛直構造を計測した。さらに、このADCPの直上で7月17日19日の約1日半にかけて、乱流微細構造プロファイラーを用いて、乱流運動エネルギー散逸率を約1時間おきに計測した。流速データを調和解析して、散逸率の時間変動と比較した結果、55m以深の海底近傍においては、半日周潮の流速シアーに伴う1/4日周期の時間変動が卓越しているのに対して、深度3555mでは、日周潮、慣性振動、平均流の流速シアーの重ね合わせによる1日周期の時間変動が卓越していた。これらの流速は小さくとも、生成される乱流運動も無視できない可能性が示された。LES数値実験により、これらの観測点の環境場を想定した半日周潮の数値実験を行った。この結果も、地球回転や成層の影響により、エネルギー散逸率などは海底近傍に集中しており海面起源の影響の可能性を示唆する。LESによる理想実験として地球回転ベクトル水平成分の潮汐振動への影響を調べた。その結果、鉛直渦粘性係数が潮汐流の流向の変化に伴い大きく変動することがわかった。海洋混合層モデルの中西・新野モデル(NNM)、Mellor and Yamadaモデル(MYM)およびNoh and Kimモデル(NKM)を海洋循環モデルに組み込み、そのパフォーマンスを調べた。

2003年9月12日14日に日本海を通過した台風による海面水温の低下は、NNMはMYMに比べて、明らかによく再現しているが、衛星データと比べると若干高温となる傾向がある。しかし、1時間ごとの気象条件データを使うことにより、22年度に比べて表面水温の再現性が大幅に向上した。また、NKMを組み込んだモデルとの比較も行ったが、NNとの顕著な違いは見られないので今後その理由の解明も行っていく。海底近傍の乱流特性の研究は、大きなスケールの流れの減衰機構の解明や、海底近傍に多く分布する栄養塩や浮遊物質の鉛直拡散過程を知る上で非常に重要である。本研究は、乱流消散率やレイノルズ応力を、新しい観測手法を開発し、東シナ海で実際に乱流観測を実施し、同時に乱流の並列数値計算からその再現と解析を目的とするものである。2011年度の観測で用いた5ビーム超音波ドップラー式多層流向流速計(ADCP)に、これまでの3倍の高周波数での計測が可能となるハードウェアオプション(モード12)を新たに導入して、2013年7月1928日に行われた長崎大学長崎丸の観測航海時に、海底境界層内におけるレイノルズ応力を約1日間計測した。モード12の導入により単位時間あたりのピン発信数が増えた結果、2011年度の計測で見られたノイズが激減し、この海域で卓越している潮汐の半日周潮に伴うレイノルズ応力の周期的な変動を見いだすことに成功した。さらにノイズの激減によって、5ビームオプションの特性をフルに生かすことが可能となり、海底近傍に限られるものの、乱流運動エネルギーの見積もりもまた可能となることが示された。乱流の数値計算では、2013年の観測結果から初期値と潮汐の外力を推定し、乱流計算を行った。半日周潮に伴う乱流の再現に成功したが、日周潮に関する乱流は発達しすぎた。この観測時には台風が近くを通過しており、観測の日周潮成分に慣性振動が含まれることが原因であると考えられる。また、乱流の直接観測によらず、流速鉛直プロファイルから鉛直渦粘性係数の推定手法を開発している。前年度までに開発した、流速鉛直プロファイルの観測値より渦粘性係数分布を推定する手法をさらに改良を行った。その結果、境界層上端付近で渦粘性係数値の推定値が小さく見積もられるという問題が改良され、現実の観測値への適用の妥当性も検証し良好な結果が得られた。平成23年度までに得られた、5ビームADCPと乱流微細構造プロファイラーによる時系列観測データを解析し、これまで沿岸域でしか観測されてこなかった、成層の周期的な変動が海底境界層内にも存在していることが初めて確認された。この成層の周期的な変動に伴って潮汐流の安定度が変化した結果、乱流運動エネルギー散逸率の変動が、海底境界層上部では日周期、下部では1/4日周期の変動が卓越していたことが明らかとなった。さらに、乱流運動エネルギー散逸率の日周期変動が、海底境界層直上に存在するクロロフィル極大層への高濁度水の巻き上げを担っていることも示された。次に、東シナ海で計測されたADCP測流結果を解析し、海底付近での混合を引き起こす潮流の特性について調べた。また東シナ海の同化数値実験で算出された調和定数の補正係数を求めた。さらに、補正後潮流を用いて計測流を除潮し平均流の空間・季節変化を求め、太平洋から東シナ海への海水輸送を議論した。潮流に関する理論研究の一環として、東シナ海など海底が平坦で浅海の海域に見られる潮汐流ホドグラフの海底近傍における楕円形状特性について、理論とLES数値モデルから考察した。潮汐振動解の海底近傍極限解を調べる事により、潮流楕円の長軸方向と扁平率の海底に近づくにつれての変化特性について、地球の回転速度と潮流の回転速度から普遍的に説明できることがわかかった。そしてLES数値計算からその妥当性も検証した。
細胞動態における分子構造の遷移と機能発動

癌の進展、転移には、癌細胞自身の特性に加えて癌細胞をとりまく微小環境が重要である。最近、癌細胞自身あるいは転移先組織に発現する接着分子やケモカインが癌細胞の遠隔転移に関与する可能性が示唆されている。接着分子CD44は特定の癌細胞に発現し、ヒアルロン酸に結合することで癌転移に関与する可能性がある。一方ケモカインは間質細胞、血管内皮細胞、神経細胞など種々の細胞から産生され、特定のケモカインが特定の受容体に結合することで細胞応答性が調節される。本研究により、リガンドで誘導されるCD44の一過的構造変化、ケモカイン受容体の細胞膜での一過的局在変化が、各分子機能に重要であることが明らかになった。私たちはこれまでに、免疫細胞動態制御におけるケモカインの役割解析の過程で、CXCL12がCCR7発現誘導することなく、CCR7リガンド誘導性T細胞ケモタキシスを促進することを明らかにした。これらの知見は、ケモカイン応答性は、接着分子やケモカインレセプターの発現レベルだけでなく、細胞膜上での分子修飾、多量体化、局在変化など多様なレベルで機能調節を受け、そのような分子構造の遷移が細胞動態に大きな影響を与えることを示す可能性を示唆するものである。そこでケモカインレセプターのリガンド結合誘導性の機能活性化において、レセプター局在変化、多量体化との関連について解析をすすめるため、平成21年度はケモカインレセプター細胞内局在変化の検出システムの開発を試みた。まず、遺伝子組換えによりCXCR4とmCherryの融合タンパク質、およびGFPとCCR7融合タンパク質を乳癌細胞株に発現させ、リガンド結合による細胞内局在変化や多量体化の解析システムの開発を試みた。またこの癌細胞株ではCXCL12処理によりCCR7リガンドに対する感受性亢進が観察されることから、この細胞株をCXCL12およびCCR7リガンドで刺激した際のケモカインレセプターの細胞内局在変化とCCR7リガンド感受性との関連について解析した。この結果、CXCL12処理により、CCR7リガンド非存在下においてCCR7の細胞膜局在に変化が生じ、この変化はCCR7リガンドで誘導される局在変化と類似していた。このことから、CXCL12は、CCR7の細胞内局在変化を誘導することで、CCR7のリガンド感受性亢進に貢献する可能性が示唆された。上記のシステムを応用し、CXCR4リガンド結合ドメイン(N末端)欠失変異体、及び活性増強型(C末端欠失)変異体とmCherryの融合タンパク質発現細胞株を用い、リガンド存在下、非存在下におけるレセプター局在変化を解析する。また変異株を発現する細胞の遊走能を解析し、ケモカインレセプターの構造変化と細胞遊走誘導との関連を明らかにする。ケモカインは主に血球系細胞に働いて細胞骨格の再構成、細胞運動性の亢進や細胞生存延長などをもたらし、免疫恒常性の維持に重要な役割を果たす。私たちはこれまでに、CXCR4リガンドであるCXCL12が、マウスT細胞のCCR7リガンド(CCL19/CCL21)への応答性を促進することを明らかにした。同様にCXCR4/CCR7陽性ヒト乳癌細胞株MDA-MB-231においても、CXCL12存在下で、CCR7リガンド(CCL19/CCL21)への応答性が有意に促進された。そこでCXCR4リガンドによるCCR7活性促進が癌のリンパ節転移のメカニズムの一つである可能性を検討するために、MDA-MB-231腫瘍組織におけるCXCL12およびCCR7リガンド発現を解析した。その結果、CXCL12は癌細胞集塊周囲に発現し、CCL21は癌細胞集塊内部および集塊周辺部のリンパ管周囲に濃縮して発現していた。この結果は、CXCR4発現癌細胞がCXCL12と相互作用することでCCR7リガンドに対する反応性が亢進し、その結果、癌組織内およびリンパ管への癌細胞移動が誘導されるという仮説と矛盾しない。また、同所性移植マウスに転移リンパ節から癌細胞を分離し、再培養後に同所性移植を二回繰り返し、リンパ節高転移株を3株樹立した。これらのリンパ節高転移株では、CXCR4及びCCR7の発現が親株と比較してそれぞれ50倍から250倍および5倍から25倍程度増加していた。以上の結果から、CXCR4リガンドによるCCR7活性促進が、定常状態におけるリンパ球生体内動態だけでなく、ヒト癌細胞のリンパ節転移にも関与する可能性が示唆された。CCR7は、二次リンパ組織へのリンパ球移動に必須の役割を果たすケモカインCCL19・21に対する受容体である。

近年、乳癌などの癌において、CCR7を介したシグナルが癌細胞のリンパ節転移に関与する可能性が示唆されている。私はこれまでに、マウスT細胞およびヒト乳癌細胞株MDA-MB-231のCCR7反応性が、CCR7非結合性のCXCL12により亢進することを明らかにした。本年度は、1.CXCL12処理により癌細胞膜上のCCR7の局在が変化し、これによりCCR7反応性が亢進する可能性について検討した。ケモカイン受容体・EGFPあるいはmCherryキメラを発現する乳癌細胞株を用いて、各ケモカイン受容体の細胞膜局在の変化を解析したところ、CXCL12添加により、CCR7/CXCR4集積ラッフル膜の形成が促進され、CCR7/CXCR4集積ラッフル膜部位におけるCCR7リガンドの結合が亢進することが明らかになった。また膜ラッフル部位ではCCR7リガンド依存的CCR7シグナル亢進が観察された。これらの結果から、CXCL12がCCR7/CXCR4集積ラッフル膜形成を促進し、ラッフル膜でCCR7リガンド結合とCCR7シグナリングを亢進することにより、CCR7反応性が亢進するメカニズムが考えられた。2.CXCR4リガンドによるCCR7活性促進と癌のリンパ節転移との関連を検討するため、CCR7依存的細胞浸潤に対するCXCL12の影響を解析した。その結果CXCL12処理によりCCL21依存性細胞浸潤が有意に増加した。また、CCR7遺伝子導入細胞では、in vitro細胞浸潤能とリンパ節転移能が増加した。またコンディショナルCXCL12発現細胞株でもリンパ節転移能が亢進した。免疫組織学的解析により、MDA231腫瘍原発巣のCXCL12とCCL21はそれぞれ、腫瘍全域とリンパ管周囲に検出され、CXCR4/CXCL12の相互作用により乳癌細胞がCCL21依存的にリンパ管へ移動するという仮説と矛盾しない結果が得られた。以上の結果から、CXCL12は乳癌細胞のCCR7依存的リンパ節転移を促進する可能性が示唆された。私は昨年までにマウスT細胞およびヒト乳癌細胞株において、ケモカイン受容体であるCCR7の活性が別の受容体であるCXCR4シグナルにより亢進することを明らかにしてきた。本年度はこの現象の基盤となる分子機構について詳細な検討を行った。CXCR4リガンド処理、非処理の条件下でCCR7発現レベルをフローサイトメトリーで解析したところ、顕著な変化は見られなかった。一方蛍光顕微鏡下での発現解析では、CXCR4リガンド処理条件下で細胞膜へのCCR7リガンドの局所的な結合促進が観察された。またCXCR4リガンド処理では、CCR7リガンド非依存的なCCR7ホモダイマー形成の促進および、局所的なCCR7/CXCR4ヘテロダイマー形成の促進が観察された。以上の結果から、CXCR4リガンドで誘導されるCCR7反応性亢進のメカニズムとして、1CXCR4結合分子により細胞膜上でCCR7ホモダイマーおよびCCR7/CXCR4ヘテロダイマー形成が形成される。またCCR7/CXCR4ヘテロダイマーの局所的集積が誘導される。21の結果、細胞膜局所のCCR7リガンド結合能が上昇する。32の結果、CCR7リガンド誘導性細胞遊走が亢進する、という一連の経路が関与する可能性が考えられた。一方、第二の研究テーマとして、接着分子CD44の立体構造平衡がin vivoにおけるがん細胞動態に重要である可能性の検討を行った。
誘電率測定に基づく血液凝固機能評価法の臨床応用：心臓手術における検討

心臓手術の術中に採血した検体で、誘電コアグロメーターを用いて全血凝固検査を行い、ROTEMによる測定と比較し、さらに、術直後の血液の分析結果と術後のドレーンからの出血量の相関について検討するプロトコールで、前向きの臨床研究を行った。また、組織因子に対する血液の反応性についても、誘電コアグロメーターで評価を行い、血漿中のTFPI濃度との相関、トロンビン生成能との相関について検討した。本研究の対象は、人工心肺を用いる予定心臓血管手術を受ける患者100名であり、各症例において、手術に関するデータ[麻酔時間、手術時間、出血量及び尿量、輸液量、輸血量(濃厚赤血球液、新鮮凍結血漿、血小板濃厚液)、人工心肺時間、大動脈遮断時間、人工心肺中の体温とポンプ流量]、術後データ[術後12時間及び24時間経過時のドレーンからの出血量、術後の輸血量、術後第2病日における血算、再止血術施行の有無]について記録する形で行った。また、(1)麻酔導入後手術開始前、(2)人工心肺終了後・プロタミンによるヘパリン中和の終了時、(3)閉胸後手術終了時に採血し、誘電コアグロメーターによる測定、ROTEMによる測定、血算、凝固検査用に分注し、それぞれ検討を行った。本研究において、誘電コアグロメーターにおけるClotting timeがCalibrated automated thrombogramによるトロンビン生成能を反映することが示された。また、TFPIによりトロンビン生成能が抑制されている可能性が示唆され、これを誘電コアグロメーターで評価することができる可能性がある。今後、分析を進め、研究成果の発表を行う予定である。計画した前向き臨床研究において、臨床データ及び検体の採取について、当初予定された100例での施行が終了し、トロンビン生成能や凝固に関する指標についての測定が終了した。得られたデータの解析を行い、成果の発表を行う。心臓手術の術中に採血した検体で、誘電子アグロメーターを用いて全血凝固検査を行い、ROTEM,TEG6sによる測定と比較し、さらに、術直後の血液の分析結果と術後のドレーンからの出血量の送還について検討するプロトコールで、前向きの臨床研究を開始した。また、組織因子に対する血液の反応性についても、誘電子アグロメーターで評価を行い、血漿中のTFPI濃度と相関があるかどうかについても検討する予定である。また、(1)麻酔導入後手術開始前、(2)人工心肺終了後・プロタミンによるヘパリン中和の終了時、(3)閉胸後手術終了時に採血し、誘電コアグロメーターによる測定、ROTEMによる測定、TEG6sによる測定、血算、凝固検査用に分注し、それぞれ検討を行った。現在、100症例におけるデータ及び検体の採取が終了した段階であり、今後解析を進めていく予定である。なお、中間解析において、TEG6sとROTEMを比較した結果、TEG6sにおいて、使用した採血管との適合性に問題がある可能性があり、41例目以降はTEG6sによる解析を行わないこととした。計画した前向き臨床研究において、臨床データ及び検体の採取について、当初予定された100例での施行が終了した。

計画した前向き臨床研究において、臨床データ及び検体の採取について、当初予定された100例での施行が終了し、トロンビン生成能や凝固に関する指標についての測定が終了した。採取された検体及びデータの解析を行う予定である。得られたデータの解析を行い、成果の発表を行う。前倒し支払い請求額の受け入れ後、トロンビン生成に関するCATシステムによる評価を導入した。各検体における測定の進行の関係もあり、少額の次年度繰越額が発生したが、2018年度における論文作成費用(英文校正費用等)などとして使用していく予定である。検体の測定のための物品費等の関係で、少額の次年度繰越額が発生したが、2019年度における論文作成費用(英文校正費用等)などとして使用していく予定である。