hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
末期がん患者の家族を支援するための看取りケアに関与する要因

本研究は、一般病棟における終末期がん患者と家族を支援するための看取りケアの実践に関連する要因を特定することを目的とし、一般病棟に勤務する看護師643名を対象に質問紙調査を実施した。分析の結果、看護師の学習経験、先輩ナースなどの実践の手本となる人の存在、身近な人を看取った経験によって看取りケアの実践に差が生じることが示唆された。また、関連要因の探索においては、所属するチームの質、終末期看護に関する知識、手本の存在、終末期看護に関する理論の活用能力、人間関係の形成を促進するコミュニケーション能力などの要因がケア実践に関連していることが明らかとなった。また、看取りケア実践に対する態度の形成の場として、所属するチームの質は大変重要であることが示唆された。これらの成果を基に看取りケア実践教育プログラムを構築し、教育評価をしていくことが今後の課題である。終末期看護の実践において,死と向き合った上でのケアや患者を看取る家族に対する支援は難しく,特に一般病棟においては十分に実践されていない現状にあることから,一般病棟における末期がん患者と家族のQOL向上のためのケアの検討は緊急の課題となっている。そこで,平成19年度は,1)患者を看取る家族支援を目的とした看取りケアの実施状況を測定する尺度の信頼性と妥当性の検討,2)看取りケアに影響する要因の検討,3)エキスパートナースに対する面接調査と分析を目的に下記の計画を実施し,一部を学会で発表した。1.看取りケア尺度の信頼性と妥当性の検討:内的整合性,安定性の検討から尺度の信頼性を確認し,基準関連妥当性,構成概念妥当性の検討から尺度の妥当性を確認し,看取りケア尺度が実用可能な尺度であることが示唆された。この結果を,第27回日本看護科学学会(2007)で発表した。2.看取りケアに影響する要因の検討:関連要因の特定に先立って,看護師の属性や,終末期看護、家族看護に対する関心度などによる,看取りケア得点の比較検討を実施した。その結果,臨床経験年数,終末期看護、家族看護に関する関心度,知識の程度などがケアに影響していることが示唆された。3.エキスパートナースに対する面接調査:終末期看護領域におけるエキスパートナースである,がん看護専門看護師1名,緩和ケア認定看護師1名に対し,看取りケアの実践に関与する要因について面接調査を実施した。得られたデータは質的に分析し,カテゴリーに分類する作業を継続している。今後は面接対象者を増やし,看取りケアに関与する因子の抽出を目指し,抽出した因子,看取りケア尺度,既存尺度などを組み合わせた質問紙を作成し,看護師に対する質問紙調査の実施を検討している。一般病棟における終末期看護の実践において、死と向き合った上でのケアや患者を看取る家族に対する支援が十分ではない現状にあることから、一般病棟における末期がん患者と家族のQOL向上のためのケアの検討は緊急の課題となっている。本研究は、平成1920年度を通して、ケアの実践に関連する要因の特定を目的に研究を進めてきた。特に、平成20年度は、1.終末期看護におけるエキスパートナースに対するインタビューの継続とインタビュー内容の質的分析によるケア実践の関連要因の抽出、2.質的分析から抽出されたカテゴリーに基づいた質問紙の作成と調査を実施し、下記の成果が得られた。1.エキスパートナースに対する面接調査:終末期看護領域におけるエキスパートナースである、がん看護専門看護師4名に対し、看取りケアの実践に関与する要因についてインタビューを実施し、面接調査は終了とした。インタビュー内容を内容分析した結果、「価値観」「役割意識」「情報の共有」「チームの価値観」「症状緩和/家族看護/社会資源/理論に関する基本的知識」「コミュニケーションスキル」「個人の体験」が関連要因として明らかとなった。この成果は、2009年9月に開催される、第1回World Academy of Nursing Science学会で発表する予定である。2.質問紙調査:質的分析の成果を基に、看取りケア尺度、ターミナルケアに対する態度尺度、死生観尺度、コミュニケーション尺度を含む質問紙を作成し、質問紙調査を実施した。回収が終了次第分析し、上記の関連要因の関係性、関連の強さなどを検討していく。成果は随時、学会発表し、論文にまとめていく予定である。
受精・着床におけるヒト主要組織適合性抗原(HLA)の役割の研究

対象:信州大学妊孕外来を受信し、不妊症一般検査及び腹腔鏡検査で不妊の原因が不明とされた夫婦を抽出し、さらにこの夫婦を対象とし、マイクロ化したEPF活性測定系を用い、排卵後4日、8日、12日に採取した血清のEPF活性を測定し、1度でも陽性を示したもののHCG陽性を示めさずに妊娠にはいたらなかった夫婦10組を対象とした。コントロールは第8回日本HLAワークショップにて登録された3人以上健康な子供を有する健康な子供を有する健康な日本人夫婦138組とした。結果:患者群とコントロールとの(1)HLAclass抗原の夫婦間での適合性、(2)HLAclss2抗原の夫婦間での適合性、(3)流産3回以上とコントロールとのHLAclass1抗原の夫婦間での非共通性の4点についてかい2乗検定を用いて、統計的な検討を行ったが、どの検討でも有意差は認められなかった。検討:今回の検討で、受精して着床期に至るまでの過程で妊娠が中断してしまう患者群においては、原因は種々のものがあると考えられるが、習慣性流産で考えられているようなHLAによる拒絶反応が原因となって引き起こされる可能性が低いことが推察された。
日本文学のジャータカ仏教説話と原型・インド説話との比較研究

平成14年度科学研究費補助金による活動報告。6月に研究発表(仏教文学会大会・於明治大学、論題「スタソーマ王本生譚のもうひとつの側面」=(1))および資料収集(於東京大学東洋文化研究所)のための出張、9月に研究発表(唱導文学研究会・於京都女子大学、論題「スタソーマ王本生譚の原型と展開(三)」=(2))および資料収集(於立命館大学)のための出張、ほかに資料収集を中心とした出張を3回行った。また、今年度前半には論文「スタソーマ王本生譚と『三宝絵』」(=(3)→『伝承文化の展望』・三弥井書店)を、また後半には「スタソーマ王本生譚の原型と展開」(=(4)→『仏教文学』第27号)を執筆。-前掲「スタソーマ王本生譚と『三宝絵』」((3))では、平安時代初期成立の仏教説話集『三宝絵』上巻第二話のスタソーマ王(「須陀摩王」)本生譚を取り上げている。「持戒波羅蜜」(持戒の完成)を説く本話を『大智度論』『六度集経』の類話と比較・検討して、この話は本来「持戒波羅蜜」を教えるものではなかったようだと述べた。仏教文学会大会研究発表((1))および同学会の学会誌『仏教文学』に掲載された論文「スタソーマ王本生譚の原型と展開」((4))では、以上の論をさらに進め、『旧雑比喩経』「雑比喩経』『僧伽羅刹所集経』、そしてパーリ語仏典の「マハースタソーマ・ジャータカ」「(ジャータカ)ニダーナ・カター」『チャリヤー・ピタカ』の類話と比較・検討した結果、このスタソーマ本生譚は本来「真実語」の説話であっただろうと述べた。唱導研究会の研究発表((2))では、スタソーマ王本生の「真実語」のありかたについて、ヒンドゥー教叙事詩の『マハー・バーラタ』に記録されている関連話と比較し、その形成と意味について何点かのことを述べた。これについてはさらに論を進め、平成15年度に学会発表を行う予定である。今年度科学研究費補助金による活動報告。9月に資料収集のための出張、1月に研究発表と資料収集のための出張を行った。現在、つぎのように論をまとめつつある。--『三宝絵』の須陀摩(スタソーマ)王本生譚で、スタソーマ王は妄語戒を守って食人鬼(カルマーシャ・パーダ)を改心させる。この話は『大智度論』『六度集経』のスタソーマ王本生譚の系譜を引き、菩薩行としての六波羅蜜の一・持戒波羅蜜を例証する説話という性格をもつ。一方、『旧雑比喩経』『雑比喩経』等の比喩経典中のスタソーマ説話では、菩薩道に限定されない、世俗一般の人々にもむけたもっと素朴な倫理としての「至誠」が強調されている。『僧伽羅刹所集経』は独特の菩薩行を説き、その中に「審諦(波羅蜜)」をもつ。これはパーリ聖典の「十の完成(十波羅蜜)」の一、「真実の完成(真実波羅蜜)」に相当するが、『僧伽羅刹所集経』はスタソーマ本生譚を持戒波羅蜜ではなく、この審諦波羅蜜の例証話としている。パーリ聖典の世界では、アングリマーラを帰依させた仏を讃える「マハースタソーマ・ジャータカ」に「真実語」の主題を見出すことができる。遅れて成立した「(ジャータカ)ニダーナ・カター」や『チャリヤー・ピタカ』はスタソーマ・ジャータカを「真実の完成」の解脱に当てている。以上によって、スタソーマ本生譚はもともと不妄語、真実語を主題とする話として伝えられていたと思われる。「至誠」を説く比喩経典の例は本生譚となる以前の古い形であろう。そこで、「真実の完成」をふくむ「十の完成」説をとるパーリ聖典はスタソーマ本生譚をそのまま「真実の完成」の例証とした。一方、真実波羅蜜を欠く六波羅蜜説が主流となった漢訳仏典の世界では説話の機能に若干の修正が加えられ、スタソーマ本生譚は持戒波羅蜜の例証話となった(例外は『僧伽羅刹所集経』)。『三宝絵』の須陀摩王本生譚はこの系譜の最後に位置する。また、『楞伽経』類等はカルマーシャ・パーダを主人公とした類話を載せるが、それらは「断肉食」を教える説話となっている。叙事詩『マハー・バーラタ』「序の巻」等にはカルマーシャ・パーダの物語が存在するが、これらを見ると、この食人鬼の物語が「断肉食」とかかわって語られるのには伝統がありそうだ。--以上のうち前半を『日本の伝承・芸能・文学』(仮称・三弥井書店)に掲載予定・現在執筆中、また、後半を来年度仏教文学会大会(明治大学)にて口頭発表の予定・現在準備中。6月に研究発表(仏教文学会大会・於明治大学、論題「スタソーマ王本生譚のもうひとつの側面」=(1))および資料収集(於東京大学東洋文化研究所)のための出張、9月に研究発表(唱導文学研究会・於京都女子大学、論題

「スタソーマ王本生譚の原型と展開(三)」=(2))および資料収集(於立命館大学)のための出張、ほかに資料収集を中心とした出張を3回行った。また、今年度前半には論文「スタソーマ王本生譚と『三宝絵』」(=(3)→『伝承文化の展望』・三弥井書店)を、また後半には「スタソーマ王本生譚の原型と展開」(=(4)→『仏教文学』第27号)を執筆。-前掲「スタソーマ王本生譚と『三宝絵』」((3))では、平安時代初期成立の仏教説話集『三宝絵』上巻第二話のスタソーマ王(「須陀摩王」)本生譚を取り上げている。「持戒波羅蜜」(持戒の完成)を説く本話を『大智度論』『六度集経』の類話と比較・検討して、この話は本来「持戒波羅蜜」を教えるものではなかったようだと述べた。仏教文学会大会研究発表((1))および同学会の学会誌『仏教文学』に掲載された論文「スタソーマ王本生譚の原型と展開」((4))では、以上の論をさらに進め、『旧雑比喩経』「雑比喩経』『僧伽羅刹所集経』、そしてパーリ語仏典の「マハースタソーマ・ジャータカ」「(ジャータカ)ニダーナ・カター」『チャリヤー・ピタカ』の類話と比較・検討した結果、このスタソーマ本生譚は本来「真実語」の説話であっただろうと述べた。唱導研究会の研究発表((2))では、スタソーマ王本生の「真実語」のありかたについて、ヒンドゥー教叙事詩の『マハー・バーラタ』に記録されている関連話と比較し、その形成と意味について何点かのことを述べた。これについてはさらに論を進め、平成15年度に学会発表を行う予定である。
mRNA前駆体制御機構を基盤とした脊髄性筋萎縮症の病態解明

脊髄性筋萎縮症(SMA)は、原因遺伝子の一つであるSMN1の欠失・変異によるsurvival mutor neuron (SMN) proteinの不足で生じる。一方、正常ヒトでは、SMN1の他に同染色体上にSMN1のホモログであるSMN2遺伝子が存在することが報告されているが、SMA患者では、SMN2遺伝子のコピー数の違いによるSMN2mRNAの発現量やその翻訳されるSMNタンパク質の発現量が、個々の患者病態において異なることが示唆されている。我々の先行研究においても、SMAI型患者由来皮膚線維芽細胞を用いた解析より、SMN2遺伝子のコピー数の違いによりSMN2 mRNAやSMNタンパク質の発現量の差異を有する結果を得ており、その結果を基にして研究を進めている。昨年度までに、SMA患者由来皮膚線維芽細胞2株及び正常ヒト皮膚線維芽細胞を用いた網羅的なRNA-seq解析より、細胞骨格系の遺伝子群やその制御遺伝子が高発現していることを見出した。さらに、本年度は、これらの遺伝子群に加えて解析した結果、神経分化に関わる遺伝子(SERPINF1, DAB1, SEMA3D, SEMA3A)が患者由来細胞2株ともに減少していること、またRho/ROCK signalに関わるが患者由来細胞で高発現していることを見出し、そのタンパク質発現量や細胞内局在について検討している。これらの結果は、SMNタンパク質の発現量の差異によって制御されている可能性を示唆する。さらに、これらの遺伝子発現の神経幹細胞から運動神経への影響を調べるために、ヒト脊髄由来神経幹細胞や運動神経細胞への検討を行っている。脊髄性筋萎縮症患者由来線維芽細胞を用いた解析結果から、神経分化に影響する遺伝子の減少が示唆されたために、これら遺伝子発現がSMNタンパク質の増減との関わりを調べるための神経幹細胞から運動神経細胞への分化誘導系の確立が遅れている。脊髄性筋萎縮症(SMA)患者由来の線維芽細胞2株のRNA-seq分析の結果、正常ヒト線維芽細胞と比較解析から神経分化に関わる4つの遺伝子発現の減少、Rho/ROCK signal系の遺伝子の高発現、さらにアクチン制御系の遺伝子の高発現が観測されたことから、原因遺伝子産物SMNタンパク質の不足による神経分化誘導時の細胞骨格の脆弱がSMAの病態に関わると考えられる。SMNタンパク質は、mRNA前駆体制御機構に関わることが知られているが、その標的分子の特定には至っていない。今後は、これまでに同定された遺伝子発現の増減がSMNタンパク質との関わりや神経分化との関わりを細胞レベルや分子レベルでの解析に取り組む予定である。準備が遅れている神経幹細胞の分化誘導系の構築を行い、SMAモデル細胞の構築し、SMNタンパク質の標的分子を明らかにしていく予定である。脊髄性筋萎縮症(SMA)の病態解析で重要なことは、遺伝子検査によるSMN1遺伝子の欠失・変異の同定とSMN2遺伝子のコピー数の検出である。本研究では、SMN2遺伝子翻訳産物のSMN蛋白質の発現量に着目して、SMAI型患者由来皮膚線維芽細胞2株を用いて、SMN蛋白質の発現量を比較したところ、免疫染色法及びウエスタンブロット法によりSMN蛋白質の発現量が異なっていた。詳細な遺伝子検査(MLPA法)によりSMN2遺伝子のコピー数も2、3と異なっており、蛋白質量も高コピー数の方が高い発現傾向があった。さらに、リアルタイムPCR法にて、mRNA前駆体制御機能による全長SMN2mRNAとexon7のエキソンスキップしたトランケートなmRNA量もコピー数との相関を示した。これらの結果からSMN蛋白質の発現量による病態への影響を調べるために、コントロール(SMN1/SMN2遺伝子を有する)として正常ヒト皮膚線維芽細胞と2つの患者由来細胞のトータルRNAを用いた網羅的なRNA-seq解析を行った。その結果、以前行ったリアルタイムPCR法やRT-PCR法に準じたSMN2mRNAの定量評価を得ることができ、ウエスタンブロットの蛋白質量を裏付ける結果を得た。さらに、解析を続けた結果、正常皮膚線維芽細胞と比べて、SMAI型由来線維芽細胞では、細胞骨格系の遺伝子群やその制御遺伝子群が高発現していることが明らかとなった。特に、アクチン制御遺伝子5つに着目して、現在、蛍光免疫染色法、ウエスタンブロット法や免疫沈殿法を用いて、それぞれの蛋白質の発現量とその細胞内局在を詳細に調べている。また、これらの遺伝子群が神経幹細胞から運動神経細胞に分化する時の表現系の影響を調べるために、ヒト脊髄由来神経幹細胞の培養条件の検討を進めている。本研究では、患者由来細胞のSMN蛋白質の発現量の違いによる表現系を調べるために、網羅的な遺伝子発現解析法としてRNA-seq解析を行った。その結果、網羅的な解析に予想以上に時間がかかった。現在、その解析によって抽出された遺伝子の細胞における機能解析を一つずつ細胞系による確認実験を行っているために進捗はやや遅れている。我々の先行研究においても、SMAI型患者由来皮膚線維芽

細胞を用いた解析より、SMN2遺伝子のコピー数の違いによりSMN2 mRNAやSMNタンパク質の発現量の差異を有する結果を得ており、その結果を基にして研究を進めている。昨年度までに、SMA患者由来皮膚線維芽細胞2株及び正常ヒト皮膚線維芽細胞を用いた網羅的なRNA-seq解析より、細胞骨格系の遺伝子群やその制御遺伝子が高発現していることを見出した。さらに、本年度は、これらの遺伝子群に加えて解析した結果、神経分化に関わる遺伝子(SERPINF1, DAB1, SEMA3D, SEMA3A)が患者由来細胞2株ともに減少していること、またRho/ROCK signalに関わるが患者由来細胞で高発現していることを見出し、そのタンパク質発現量や細胞内局在について検討している。これらの結果は、SMNタンパク質の発現量の差異によって制御されている可能性を示唆する。さらに、これらの遺伝子発現の神経幹細胞から運動神経への影響を調べるために、ヒト脊髄由来神経幹細胞や運動神経細胞への検討を行っている。脊髄性筋萎縮症患者由来線維芽細胞を用いた解析結果から、神経分化に影響する遺伝子の減少が示唆されたために、これら遺伝子発現がSMNタンパク質の増減との関わりを調べるための神経幹細胞から運動神経細胞への分化誘導系の確立が遅れている。今後も網羅的な遺伝子発現解析から抽出された遺伝子群の細胞における機能解析を進めて、培養細胞系による表現系を明らかにして、これらの結果を基にヒト脊髄由来神経幹細胞の培養系を確立するとともに、表現系を調べる予定である。脊髄性筋萎縮症(SMA)患者由来の線維芽細胞2株のRNA-seq分析の結果、正常ヒト線維芽細胞と比較解析から神経分化に関わる4つの遺伝子発現の減少、Rho/ROCK signal系の遺伝子の高発現、さらにアクチン制御系の遺伝子の高発現が観測されたことから、原因遺伝子産物SMNタンパク質の不足による神経分化誘導時の細胞骨格の脆弱がSMAの病態に関わると考えられる。SMNタンパク質は、mRNA前駆体制御機構に関わることが知られているが、その標的分子の特定には至っていない。今後は、これまでに同定された遺伝子発現の増減がSMNタンパク質との関わりや神経分化との関わりを細胞レベルや分子レベルでの解析に取り組む予定である。準備が遅れている神経幹細胞の分化誘導系の構築を行い、SMAモデル細胞の構築し、SMNタンパク質の標的分子を明らかにしていく予定である。脊髄性筋萎縮症患者由来細胞の網羅的な遺伝子解析により抽出された遺伝子群の解析が遅れているために、神経幹細胞の培養系の構築が遅れたために生じた。その培養系の構築のために次年度に使用する。本年度では細胞の遺伝子解析データの抽出作業に予想以上に時間がかかり、ヒト脊髄由来神経幹細胞の運動神経分化誘導の実験が遅れている状況で、必要とする抗体や試薬の購入を延期した。次年度、細胞の遺伝子解析データから抽出された遺伝子に関する抗体や試薬などを購入する予定である。公益財団法人微生物化学研究会微生物化学研究所ホームページhttp://www.bikaken.or.jp公益財団法人微生物化学研究会
特異な構造と生物活性を有する天然有機化合物の合成化学研究～新規薬剤リード開発

1.新規骨格・活性化合物の探索(植物):バラ科モモ属樹木からは黄桃や白桃が栽培果実として利用されている。一方、これら栽培種の元と考えられるモモ原種の実には古来より薬効があると伝わる。そこで、岡山県内の栽培種や野生モモの実や花を探索、採集して含有成分の解析を行った。栽培種の葉からはsqualene、kaurene、isophytol、beyereneなどのテルペン系炭化水素及び誘導体が見つかった。一方野生種の花の香りの主成分はmethyl eugenolおよびbenzaldehydeであった。その他成分について構造解析を進めている。2.新規骨格・活性化合物の合成研究:抗腫瘍性を示す植物成分maoecrystal Vについて、大量合成研究を進めるとともに、橋状環-ラクトン環部骨格のモデル合成に成功した。導入するC1単位にジチアンを用いて、酸化的脱保護と同時に分子内ヘミアセタール環化を生じさせるものであり、全合成に応用可能である。海洋環形動物の生産する新規ポリケチド=アミノ酸=スルフィドthelepamideアミノ酸部位のモデルについて、新規な(酸触媒を用いて分子間N,O-アセタールを形成する主)手法による合成に成功した。藍藻の生産するsanctolide Aについて、側鎖部分の不斉合成を行った。また、マクロ環を含むモデル化合物11,12,13-trinor-7-demethoxy体の新規合成法に関する検討を行った。CortistatinAのアルキンメタセシス前駆体の合成を行った。同じく新規なアナログの合成を行った。1.新規骨格・活性化合物の探索(植物):天然資源からの新規化合物の単離は順調に進んでいる。中国研究協力者の事情により探索が制限されていたため、国内資源の活用にシフトした。2.新規骨格・活性化合物の合成研究:Maoecrystal Vについては、中間体の供給に加えて、鍵となるラクトン環部のモデル構築に成功した。Enacyloxin類については、従来開発した経路に従って中間体の大量合成を進めている。Thelepamideについては、天然物に類例の無いオキサゾリジノン環の新規な構築条件(酸触媒分子間N,O-アセタール環化)を見出すことができた。全合成に適用可能である。Sanctolideについては、モデル化合物11,12,13-trinor-7-demethoxy体の新規骨格構築法の検討と側鎖不斉合成を進めており、順調である。CortistatinA類:全合成鍵中間体と新規アナログの合成を達成した。1.新規骨格・活性化合物の探索(植物):中国の天然資源については、入試でき次第探索を進める。日本国栽培モモおよび野生モモからの新規物質の単離と生物活性評価については、これまで通り進める予定である。2.新規骨格・活性化合物の合成研究:Maoecrystal V:鍵となるエーテル環構築の再現性を確認し、ラクトン環形成を試みる。Enacyloxin類:全合成研究を進める。Thelepamide:得意なオキサゾリジノン環部分の誘導体を各種合成し、構造活性相関研究を行う。Sanctolide:全合成研究を行う。モデル類縁体の合成により、構造活性相関を明らかにする。Clionamine類:合成に必要なジケテンが入手不要になったため、代替手段によるラクトン部合成を試みる。Cortistatin類:アルキンメタセシスによる全合成を試みる。Greensporone類:Takaiカップリングを用いた全合成研究を行う。1.新規骨格・活性化合物の探索(植物):キク科オグルマ属植物から単離されたイソアラントラクトンについて、ラット腸内細菌により、H2Sが共役付加した形の種々類縁体に変換されることを見出した。キク科ノコギリソウ属植物から単離されたmillifolide Aがヒト肺ガン細胞の増殖阻害活性を持つことを見出した。中国産マングローブ(Xylocarpus granatum)から、BC環部が橋状環となった新規骨格を有するリモノイド(ジテルペノイド)xylomexicanin Iおよび、新規物質xylomexicanin Jを単離し、構造決定した。その他数種のセスキテルペン類の構造研究を進めている。2.新規骨格・活性化合物の合成研究:抗腫瘍性を示す植物成分maoecrystal Vについて、大量合成研究を進め、鍵となるC2或いはC1単位の求核的導入反応を行った。抗生物質enacyloxin類について、中間体の合成を進めている。海洋環形動物の生産する新規ポリケチド=アミノ酸=スルフィドであるthelepamideについて、アミノ酸部位のモデル合成を更に検討し、再現性良くオキサゾリジノン環を構築することに成功した。ポリケチド部位について、不斉アリル化反応を鍵とする合成を進めている。藍藻の生産するsanctolide Aについて、2度の縮合反応と分子内エナミド化反応を組み合わせて、マクロ環を含むモデル化合物11,12,13-trinor-7-demethoxy体を合成することに成功した。全合成研究を進めている。昨年度に公表した化合物の他、構造未決定のものも含め生物検定が進行中である。単離化合物について、化学変換を進めており、微生物変換については報告した。2.新規骨格・活性化合物の合成研究:Maoecrystal Vについては、鍵中間体の供給とC1あるいはC2単位の導入に成功した。Enacyloxin類については、大量合成に困難があるが、慎重に進めている。

Thelepamideについては、新規オキサゾリジノン環構築に再現性を持たすことに成功し、順調に推移している。Sanctolideについては、マクロ環を含むモデル化合物11,12,13-trinor-7-demethoxy体の合成に成功し、順調である。1.新規骨格・活性化合物の探索(植物):バラ科モモ属樹木からは黄桃や白桃が栽培果実として利用されている。一方、これら栽培種の元と考えられるモモ原種の実には古来より薬効があると伝わる。そこで、岡山県内の栽培種や野生モモの実や花を探索、採集して含有成分の解析を行った。栽培種の葉からはsqualene、kaurene、isophytol、beyereneなどのテルペン系炭化水素及び誘導体が見つかった。一方野生種の花の香りの主成分はmethyl eugenolおよびbenzaldehydeであった。その他成分について構造解析を進めている。2.新規骨格・活性化合物の合成研究:抗腫瘍性を示す植物成分maoecrystal Vについて、大量合成研究を進めるとともに、橋状環-ラクトン環部骨格のモデル合成に成功した。導入するC1単位にジチアンを用いて、酸化的脱保護と同時に分子内ヘミアセタール環化を生じさせるものであり、全合成に応用可能である。海洋環形動物の生産する新規ポリケチド=アミノ酸=スルフィドthelepamideアミノ酸部位のモデルについて、新規な(酸触媒を用いて分子間N,O-アセタールを形成する主)手法による合成に成功した。藍藻の生産するsanctolide Aについて、側鎖部分の不斉合成を行った。また、マクロ環を含むモデル化合物11,12,13-trinor-7-demethoxy体の新規合成法に関する検討を行った。CortistatinAのアルキンメタセシス前駆体の合成を行った。同じく新規なアナログの合成を行った。1.新規骨格・活性化合物の探索(植物):天然資源からの新規化合物の単離は順調に進んでいる。中国研究協力者の事情により探索が制限されていたため、国内資源の活用にシフトした。2.新規骨格・活性化合物の合成研究:Maoecrystal Vについては、中間体の供給に加えて、鍵となるラクトン環部のモデル構築に成功した。Enacyloxin類については、従来開発した経路に従って中間体の大量合成を進めている。Thelepamideについては、天然物に類例の無いオキサゾリジノン環の新規な構築条件(酸触媒分子間N,O-アセタール環化)を見出すことができた。全合成に適用可能である。Sanctolideについては、モデル化合物11,12,13-trinor-7-demethoxy体の新規骨格構築法の検討と側鎖不斉合成を進めており、順調である。CortistatinA類:全合成鍵中間体と新規アナログの合成を達成した。1.新規骨格・活性化合物の探索(植物):天然資源からの新規物質の単離と生物活性評価については、連携研究者と共同でこのまま進める。
電場下における高分子ブロック共重合体の秩序・無秩序相転移ダイナミクス現象の解明

高分子ブロック共重合体は、数十nmサイズで均一なミクロ相分離構造を形成するため、近年、この構造を制御する技術の確立が望まれている。その技術として電場による制御が期待されている。本研究では、電場下での高分子ブロック共重合体の相構造形成時のラメラの配向度の経時変化を、時分割小角X線散乱実験を用いて、また構造を原子間力顕微鏡像を用いて測定を行った。これらの実験と数値計算シミュレーションから「電場下での配向機構は電場下でのラメラ相グレインの回転運動に由来している」ことを明らかにした。本研究の目的は電場下における高分子ブロック共重合体の秩序・無秩序相転移ダイナミクス現象の解明であり、実験と理論の2つのアプローチにより,秩序・無秩序相転移温度(T_<odt>)近傍での低電場強度によるラメラ状ドメイン配向のメカニズムを解明し,高分子ブロック共重合体の低電場による構造制御に必要な物理的条件を明らかにすることである。まず、本研究で用いるサンプル(ポリイソプレン(PI)とポリイソブチルメタクリレート(PiBuMA)のジブロック共重合体P(I-b-iBuMA))に対して、小角X線散乱(SAXS)実験行い、秩序・無秩序相転移温度を測定しその温度が92.5°Cであることを特定した。高温の無秩序相から、相転移温度より数°C低い温度に冷却し、電場下と非電場下で相構造をAFMを用いて可視化を行った。その結果、相転移温度近傍で電場を印加すると従来、メソ構造を電場方向に配向させるのに必要とされていた電場強度(1020kV/mm)よりかなり小さい電場強度において配向構造を実現できることが、サンプル断面のAFM観察により確認できた。この従来よりはるかに小さな電場強度で配向が実現した起源を解明するため、電場下でのメソ構造の経時変化、つまり、ラメラ構造を持ったドメインの配向度合いの経時変化をSAXSにより測定した。ラメラ面の配列過程として考えられる予想((1)配向したラメラの核生成,(2)ランダム方向を向いたラメラグレインが電場方向に再配列する,(3)ランダム方向を向いたラメラドメインが電場方向に回転する)に基づくSAXSイメージと実際に実験で得られたデータとの比較から、相転移近傍のラメらの配向は、主に(3)のランダムな方向を向いたラメラドメインが電場方向に回転し配向することによるものであることが分かってきた。来年度は、この結果を確かめるために更に実験を行い、併せて数値シミュレーションを行い、どの予想が主要な配向過程であるかを明らかにする。高分子ブロック共重合体は、数十nmで層間隔が均一なミクロ相分離構造を形成するため、近年、応用の観点からこのミクロ相分離構造を制御する技術の確立が望まれている。しかし、相分離構造を形成している系に電場を印加しラメラ構造を電場方向に配列させる従来の方法では数十kV/mmの非常に高い電場が必要であった。そこで我々は、より低い電場強度でラメラ状ドメインを配列させる方法がないか検討を行い、秩序・無秩序相転移点(以下T_<ODT>)近傍では以前の約1/10の電場強度で高配向の構造が得られることを確認した。しかし、なぜこの程度の低電場で配向が実現できたのか、また配向へ至る動的過程に関しては全く解明されていない。このような背景から本研究は「電場下での高分子ブロック共重合体の秩序・無秩序相転移タイナミクス現象の解明」を目的に研究を行った。まず高分子ブロック共重合体試料の相構造を原子間力顕微鏡(AFM)により観察し、また小角X線散乱実験の結果とを合わせてT_<ODT>を決定した。T_<ODT>近傍で、2kV/mm程度の低電場を印加し、ラメラが配向することを確認した。また、なぜ低電場により配向が実現できたのかを調べるために、相構造変化時のドメインの配向度の経時変化を時分割SAXSによって測定し,各時刻でのAFM像の解析を行った。それらの結果とブロック共重合体相構造形成の数値計算から低電場での配向機構が「電場下でのグレインの回転運動」に由来していることを実験的及び理論的に明らかにした。つまり「高温の無秩序相からT_<ODT>近傍に急冷した系に電場を印加した系では、まずランダムに配向したグレインが出現し、或るサイズまで成長したところで電場の影響(Maxwell力)が効き始め、ラメラ面が電場方向に配向するようにグレインが回転運動することで、従来より低電場でメソスケールの構造の配向が実現する」ことが分かった。
ABCタンパク質を制御する細胞浸透性ペプチドの開発

ATP-bindingcassette (ABC) superfamily proteinは、高等生物の細胞膜に存在し、種々の脂溶性物質のトランスポーターとして働く一方、癌細胞内に取り込まれた薬物を排出し、癌の多剤耐性の要因となるものと考えられている。本研究では、ABC superfamily proteinの一種、MDR1の阻害剤、あるいは活性化剤となるペプチドをファージディスプレイ法により検索,細胞浸透性を有するペプチド性阻害剤を開発することを目標としている。昨年度はMDR1のATPaseドメインと結合する5群のペプチド配列を提示したファージを得た。今年度は、これらのペプチドのMDR1阻害活性を検討した。ファージが呈示した配列を有する6残基のペプチド5種を固相合成法により合成し、HPLCで精製後、質量分析によりその純度を確認した。これらペプチドのMDR1のATPase活性に対する阻害効果を検討した。合成した5種類のペプチAAP1-5のうち、AAP-3が他よりも強いATPase阻害活性を示した。ATPase活性を50%阻害するのに要するペプチドの濃度は約、1mMであった。またこのペプチドは動物のアルカリフォスファターゼは阻害しなかった。なおMDR1のATPaseドメインは、リン酸のホモログであるortho-vanadateとMgイオン、およびADPとの間で不活性な複合体を作る。これをミミックする意図から、ortho-vanadate-Mgイオン-ADPの存在下でファージディスプレイを行って得られたAAP-5も、ATPase活性を阻害したが、ortho-vanadate-MgイオンーADPの効果は認められなかった。本研究では、ABC superfamily proteinの一種、MDR1の阻害剤、あるいは活性化剤となるペプチドをファージディスプレイ法により検索することを目的としている。本年度は、ファージディスプレイ法によりMDR1のATPaseドメインと結合するペプチドをスクリーニングした。ところでMDR1はターンオーバーする過程においてADP結合型のコンフォメーションをとるが、この際リン酸のホモログであるortho-vanadateとMgイオンが存在すると、これらとADPおよびMDR1の間で、親和性の高い不活性な複合体を作ることが知られている。そこでファージディスプレイの戦略として、このような複合体もパニングの対象とすることとし、その前段階として、MDR1のATPaseドメインのみでもortho-vanadate-Mgイオン-ADP複合体を作ることを検証し、確認した。そこでMDR1のATPaseドメインを磁性ビーズ上に固定化し、ortho-vanadate-Mgイオン-ADPの存在下、非存在下で、ランダムペプチドライブライブラリーを発現した線状ファージとパニングを行い、標的への結合、洗浄、溶出、大腸菌への感染による増幅、再結合という過程を繰り返し、ATPaseドメインに親和性の高いファージ群を選択した。その結果、パニング条件に依存し配列を異にする5群のペプチドを得た。
CM及びCRコンドライトの受けた変質作用についての電子顕微鏡岩石学的研究

本年度は、CRコンドライトの変質について研究を行った。CRコンドライトの一種であるPCA91082隕石を用いて、母天体における変質過程によって形成されたフィロ珪酸塩鉱物の組織と組成をSEM及びEPMAを用いて詳細に観察・分析を行った。CRコンドライトの全般的な記載はWeisberg et al.(1991)に詳しいが、今回研究を行ったPCA91082は、その論文で研究されたどのCRコンドライトよりもコンドリュールの変質の程度は低かった。コンドリュールの変質はコンドリュール周囲の340μmに限られ、コンドリュールガラス、Caに乏しい輝石、Fe-Ni金属粒子が変質していることが観察された。EPMAの分析結果から推定するとCaに乏しい輝石は、Feに富むserpentineを主体とするフィロ珪酸塩鉱物の集合体に置き換えらている。それに対してコンドリュールガラスは、saponiteとFeに富むserpentineを主体とするフィロ珪酸塩鉱物の集合体に置き換えられている。これらのフィロ珪酸塩鉱物の集合体の組成は、より変質の進んでいるほかのCRコンドライトと比較してよりFeに富む。今後、変質の程度の進んだほかのCRコンドライトのいくつかについて研究する事で、フィロ珪酸塩鉱物の組成・種類と変質の程度とどの様に関係してくるのかということを明らかにしたい。TEMを用いた研究であるが、ultramicrotomeを用いた超薄切片法を用いる計画であった。しかし、本学分析センターに導入されたultramicrotomeには防震台が付属していなかったため、とりあえず従来から行われているion milling装置を使い試料を作成した。こうして作成した試料では、saponiteが分解しかかってしまうので、十分な観察が出来なかった。ごく最近、防震台ではないが、天秤台をultramicrotomeの台として入手したので、今後、超薄切片試料を作成できるであろう。
赤外画像伝送システムの実用化と工業計測・生体計測への応用

銀ハライド結晶(AgCl-AgBr)およびカルコゲナイドガラス(コア/クラッドはAsSSe/AsS、GeAsSeTe/GeAsSe、GeSeTe/GeAsSeTeの3種類)のファイバを製作し、赤外光の透過特性を調べた。次に、これらのファイバを使用して、赤外分光計測システムおよび赤外光分布計測システムを設計・製作した。分光計測システムには、フーリエ変換赤外分光光度計(FTIR)を使用した。赤外光を光源や分光測定装置から離れた測定場所まで伝送するために、FTIR本体を改造して側面から赤外光を外部に取り出せるようにし、波長収差のない放物面鏡で赤外ファイバに接続した。また、受光用の赤外ファイバは高感度のHgCdTe検出器に接続した。プロパン・ブタン・アルコールなどの燃料ガスを2本のファイバ間に流すことにより、赤外の特定波長での吸収が増大し、ガス検知などの工業計測に利用できることが示された。また、人間の呼気をファイバ間に吹きかけた結果、炭酸ガスや飲酒によるアルコール分などが検出され、医用・生体計測などへの利用も可能であることが分かった。赤外画像(赤外線分布)の測定には、波長15μmに感度をもつCCDカメラを利用した。バンドル化した赤外ファイバを接続することにより、加熱物体の温度分布を計測できることが示された。また、このカメラは温度計測用に設計されているため、光学系・検出部・計測ソフトウェアなどを改造し、赤外光の強度分布を直接測定してガス分布などが観察できるようにした。銀ハライド結晶(AgCl-AgBr)およびカルコゲナイドガラス(コア/クラッドはAsSSe/AsS、GeAsSeTe/GeAsSe、GeSeTe/GeAsSeTeの三種類)のファイバを製作し、赤外光の透過特性を調べた。上記の3種類のカルコゲナイドファイバの透過波長域は、それぞれ1.56μm、58μm、79μmであり、また銀ハライドの透過域は812μmであった。この結果から、これらのファイバを用途に応じて使い分ければ、1.512μmの広い範囲で任意の波長の赤外光を計測するシステムを構成しうることを示すことができた。カルコゲナイドファイバについてはマニュアルアセンブルによるバンドル化を検討し、コア径500μm、長さ1mのファイバを7本束ねたものを試作した。計測システムの一部として現場で使用するための実用性を考慮して、このバンドルファイバを金属のフレキシブルチューブに挿入し両端にコネクタを付けることにより、取り扱いの容易なファイバケーブルを製作した。赤外線計測システムを作る上で、ファイバ端面やレンズ表面における反射損失が大きな問題となる。反射損失を低減し高効率で高感度な計測を実現するため、赤外光学部品に反射防止コートをすることを検討した。一般に赤外材料は耐湿性が劣ることを考慮して、防湿コートとしての効果も考えて、フッ素樹脂をコーティング材料として選んだ。KRS-5、CsIなどの赤外結晶基板上にフッ素樹脂をスピンコートすることにより、赤外波長域で優れた反射防止・防湿保護コートができることがわかった。前年度に製作したカルコゲナイドガラスファイバ(コア/クラッドはAsSSe/AsS、GeAsSeTe/GeAsSe、GeSeTe/GeAsSeTeの3種類)を使用して、赤外分光計測システムおよび赤外光分布計測システムを設計・製作した。

また、FTIR本体に内蔵されている赤外線検出器では感度が低いことが分かったので、高感度の窒素冷却型HgCdTe検出器を新たに採用し、測定システムに接続した。FTIRと測定部をつなぐ入射ファイバと、測定部と検出器をつなぐ受光ファイバとの間には、アルミニウム製の凹面鏡を置いて両者を効率よく接続した。プロパン・ブタン・アルコールなどの燃料ガスを2本のファイバ間に流すことにより、赤外の特定波長での吸収が増大し、ガス検知などの工業計測に利用できることが示された。また、人間の呼気をファイバ間に吹きかけた結果、炭酸ガスや飲酒によるアルコール分などが検出され、医用・生体計測などへの利用も可能であることが分かった。赤外画像(赤外線分布)の測定には、波長15μmに感度をもつCCDカメラを利用した。バンドル化した赤外ファイバを接続することにより、加熱物体の温度分布を計測できることが示された。また、このカメラは温度計測用に設計されているため、光学系・検出部・計測ソフトウェアなどを改造し、赤外光の強度分布を直接測定してガス分布などが観察できるようにした。
在宅緩和ケアにおける地域連携クリニカルパスおよび緩和ケアチームの有用性の検証

本研究では、1)高岡医療圏で開発された在宅緩和ケア地域連携クリニカルパス(以下、連携パス)とアウトリーチ介入の有用性調査(質問紙調査およびインタビュー調査)、並びに、2)これらの介入が在宅移行率や在宅看取り率に与える影響の調査を実施した。そして、連携パスを使用することや緩和ケアチームのアウトリーチが、在宅移行率や在宅看取り率に好ましい影響を与える事、並びにその理由を明らかにできた。本研究の目的は、1)富山県高岡医療圏で開発された在宅緩和ケア地域連携クリニカルパスの利用、および病院の緩和ケアチームが患家を訪問すること(地域緩和ケアチーム)がどのような理由で患者にとって有用となるかを質問紙調査により明らかにすること(プロセス研究)、並びに2)上記2つの介入が地域における在宅移行率・在宅看取り率などのアウトカムに与える影響を多変量解析により明らかにすること(アウトカム研究および因子研究)である。1については、地域医療者に対して配布する質問紙を作成するため、質問項目の基となるインタビュー調査を実施し、内容分析により質問項目を確定させた。さらに、完成した質問紙の配布までを終了し、現在は回収作業中である。内容分析により得られたカテゴリーからは、上記2つの介入が、患者への安心感や医療機関とのつながりを感じる効果などを持つとする意見の他、患者の死後に遺族が患者とのつながりを感じる効果を持つなど、研究者側では予想していなかった新たな知見を得た。2については、上記2つの介入を行った在宅療養群の方が在宅死亡率が高いことなどを明らかにし、解析結果を関連学会にて発表した。その際、更に信頼性の高い解析方法として、一般化推定方程式および傾向スコアマッチングを用いた解析などを用いた方が良いとの意見が他の研究者から討議を通じて得られたため、追加解析を実施中である。これらの結果は、本研究目的を達成するにあたっての、重要な基礎的データとなるため、今後、更なる研究結果の信頼性・妥当性を高めることが可能となると期待される。本研究には以下の2つの目的がある。すなわち、1)高岡医療圏で開発された在宅緩和ケア地域連携クリニカルパス(以下、連携パス)とアウトリーチ介入の有用性調査(質問紙調査およびインタビュー調査)、並びに、2)これらの介入が在宅移行率や在宅看取り率に与える影響の調査である。このうち、1については、実臨床における連携パスの実施可能性試験を行い、インタビュー調査と診療録を基にした解析を行った結果、その有用性と実施可能性が確認された。この成果は、American Journal of Hospice and Palliative Medicine誌に受理・掲載された。また、2については、両介入と在宅緩和ケアを受けた「在宅療養群」と対照群である「病院療養群」の間に生存率の差を認め、傾向スコアマッチング法により交絡因子を調整しても在宅療養群の方が予後が良いことを明らかにした。この成果は、BMC Palliative care誌に受理・掲載された。上記の通り、平成26年度は計画通り研究を進めることができ、2報の論文を海外誌に発表することができた。いずれの学術誌もインパクトファクターのついた引用回数の多い雑誌であり、今後の在宅緩和ケア分野における研究のさらなる推進に貢献できる結果を残せたと考える。このうち、1については、新たに遺族に対してインタビュー調査を行い、前年度に実施した医療者へのインタビュー調査と合わせて分析を行った。この結果を受け、連携パスとアウトリーチの有用性に関する質問紙を作成し、質問紙調査を実施した。因子分析を実施した結果、それらの有用性が生じる理由や、介入から自宅死亡率の上昇と在宅療養期間の延長につながるプロセスを明らかにすることができた。この成果は、平成28年度の日本緩和医療学会学術集会で発表予定であり、そこでの議論を踏まえて論文を作成し、国際誌に投稿する予定である。上記の通り、平成27年度も計画通り研究を進めることができ、2報の論文を海外誌に発表することができた。論文投稿時の査読にて、予定していた多変量解析よりもさらに信頼性が高い手法での統計解析(傾向スコアマッチング)を求められたが、対応している解析ソフトを購入し、速やかに対処することができた。また、連携パスとアウトリーチについても、その有用性と実施可能性を論文として報告できた。現在、遺族へのインタビュー調査と、その内容分析が終了しており、質問紙を作成中である。本質問紙を遺族に配布し得られた回答を解析することで、患者や遺族の視点から連携パスやアウトリーチの有用性を評価し、結果を関連する学術大会や学術雑誌で発表する予定である。

また、連携パスやアウトリーチは、病院内の医療者だけではなく、地域医療者との協働により成り立つため、地域医療者から見た評価も必要であると考えられる。したがって、訪問看護師等にも協力を仰ぎ、上記介入における地域連携・多職種協働の有用性を評価することも予定している。この点については、すでにデータの収集・解析は概ね終了しており、次年度には成果発表を主に行う予定である。研究結果の信頼性・妥当性を高めるため、追加の統計解析を行う事が必要と判断されたが、本年度に計画していた解析を行い、関連学会にて発表する事ができた。また、インタビュー調査の結果、収集された遺族向けの質問文に関するカテゴリーが少なく、別途、遺族に対するインタビュー調査が必要と判断されたが、医療者向けの質問紙は計画通り作成・配布する事が出来た。上記の追加解析並びに追加調査を行う時間的余裕は十分にあり、本事業遂行にあたって大きな影響は与えないものと推察される。当初の予定通り、平成26年度に計画されている研究を遂行すると共に、結果をより強固なものとするために、在宅死亡率に対する一般化推定方程式、傾向スコアマッチング、遺族へのインタビュー調査と質問紙の作成・配布を追加で行う。また、得られた結果に関して、随時関連学会にて成果を発表し、他の研究者との討議を通じて、より信頼性の高い結果を得るために計画をブラッシュアップする。さらに、追加の統計解析を行うにあたり、対応している統計ソフト(アドインソフト)など、必要資材の追加購入を速やかに行う。端数のため次年度に繰り越し、次年度予算と合わせて使用するのが妥当であると考えたため。次年度の物品費と合わせて、追加で必要となった統計のアドインソフト購入に使用する。
アゼピン骨格を有する天然化合物ライブラリーの構築とVCD法による絶対構造の決定

平成30年度は、ビャクブ科植物、タマビャクブ(Stemona tuberosa)の根のメタノール抽出エキスを分配操作して得られた各画分を種々のクロマトグラフィーにより分画して得たアルカロイド含有画分を、分取用高速液体クロマトグラフィー装置により分離・精製し、新規アルカロイド5種を単離した。このうち3種の化合物は、単結晶X線解析により相対立体構造を決定した。2種の化合物については、IRスぺクトル、MSスペクトル、および二次元NMRスペクトルの解析により、一部の相対配置を含む平面構造を決定した。これらのうち4種の化合物はアゼピン骨格を持つが、1種はアゼピン骨格が酸化開裂した構造であった。5種のアルカロイドはいずれも微量であったため、VCDスペクトルの測定はできなかった。3種の化合物についてアセチルコリンエステラーゼ阻害活性を評価したが、いずれもガランタミン(IC50 = 0.12 μg/mL)に比べて活性は弱かった(IC50 = 124 >200 μg/mL)。また、昨年度VCD法により立体構造を決定することができなかった茜草根(Rubia cordifoliaの根)由来RA系ペプチド化合物(分子量950)について、誘導体化後単結晶X線解析を行うことにより、絶対配置を含めてその構造を決定することができた。平成28年度平成30年度を通じて、11種の新規ステモナアルカロイドを単離・構造決定した。また、比較的多量に得られる既知ステモナアルカロイドを用いてNーオキシド体を得る条件を見出し、アゼピン骨格の配座構造を固定できることを確認した。一方、VCDスペクトル法について、構造中の一部の立体配置が不明な中分子化合物の構造決定への応用を検討した。中国産ビャクブコン(タマビャクブStemona tuberosaの根)のメタノール抽出エキスを分配操作して得られた粗アルカロイド画分を各種クロマトグラフィーにて分画した。一部の画分について高速液体クロマトグラフィーにより分離・精製を行い、新規構造を有するアルカロイド4種とともにNーオキシド誘導体の合成原料となる3級アルカロイドtuberostemonineおよびstemoninineを単離した。新規アルカロイドのうち1種は単結晶X線解析により構造決定を行い、3種についてはMS、IR、1次元および2次元NMRスペクトルの解析により構造決定した。そのうちの1種はイミニウム構造を持つ4級アルカロイドで、1種はスルホン酸基が骨格炭素原子に結合したユニークな構造を有していた。これらのアルカロイドは種々の医薬品の構造中に見出されるアゼピン骨格を母核としており、その構造は医薬シーズ探索におけるin vitroおよびin silicoスクリーニングに用いられる質の高い化合物ライブラリー構築をするうえで重要な要素となる。アゼピン骨格は7員環構造を有するため、高い配座自由度を持つ。このように自由度の高い環状化合物への振動円二色性(VCD)スペクトル法の適用性と限界を把握するため、配座探索と配座構造についてデータの蓄積が多い二環性ペプチド化合物RA-VIIについて密度汎関数理論(DFT)計算を試みた。得られた計算スペクトルをRA-VIIの重クロロホルム中の実測VCDスペクトルと比較したところ、よい一致を示した。当該年度において新規アルカロイド4種を単離し、それらの構造決定(相対立体配置)を行うことで、化合物ライブラリーを拡充することができた。併せてN-オキシド化合物の原料となる既知3級アルカロイドtuberostemonineおよびstemoninineを単離することができた。また、これらのアルカロイドより配座自由度の高い18員環ペプチド化合物についてVCDスペクトル測定とDFT計算を実施することで、フレキシビリティの高い環状分子にもVCDスペクトル測定/DFT計算を用いた配座解析ー絶対配置決定法が適応可能であることを検証できた。化合物ライブラリー構築のため、中国産ビャクブコン(タマビャクブStemona tuberosaの根)のメタノール抽出エキスより得られた粗アルカロイド画分の分離探索を継続した。その結果、tuberostemonine、stemoninine、oxystemoninine、stemona-lactam F等の既知アルカロイドとともに新規アルカロイド2種を単離し、機器スペクトル解析により平面構造および一部の立体構造を決定した。一方、アゼピン骨格を有する3級アミン型ステモナアルカロイドのNーオキシド化の条件を検討するためにstemoninineを過酸化水素と反応させたところ、Nーオキシド体を得ることができた。また、VCDスペクトルは溶液状態で長時間の測定を要するが、Nーオキシド体は中性条件では安定であることを確認した。VCD法は、一般に相対配置がわかっている化合物の絶対配置の決定に用いられるが、光学活性の低分子化合物の場合、構造中一部の立体配置が不明な化合物の構造決定にも応用できる。本法が中分子化合物においても適応可能であるか否かを検証するため、一部の立体配置が不明な茜草根(Rubia cordifoliaの根)由来RA系ペプチド(分子量950)の構造決定への応用を検討した。NMRスペクトルの解析により、化合物の構造を2種類のジアステレオマーに絞り込んだ。それぞれの構造についてCONFLEXプログラムを用いて配座探索を行い、密度汎関数法により構造最適化とともにVCDスペクトルを算出したが、それらのスペクトル間に顕著な差が認められず、実測VCDスペクトルとの類似性についてもジアステレオマー間で明確な差異は認められなかった。従って、このような立体配置が不明の中分子化合物の構造をVCDスペクトルにより決定することは困難と考えられた。