hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
イヌの潜在精巣の原因遺伝子・マーカー遺伝子の探索と遺伝子診断への応用

本研究では、犬の潜在精巣の原因遺伝子・マーカー遺伝子を同定する目的で、潜在精巣に罹患した小型犬のエストロジェン受容体α遺伝子(ESR1)の一部(ESR1の3'側末端から70kbの領域の9ヵ所の多型を示す塩基)について解析し、正常例との比較を行った。その結果、ミニチュアダックスフンドとチワワの潜在精巣例の当該遺伝子領域の多型塩基は正常例と比較して顕著な差異はみられなかった。ただし、両側性潜在精巣例の同遺伝子領域の多型頻度は正常と異なっていたが、例数が少ないため、両側性例とESR1当該多型との関連性についてはさらなる検討が必要と考えられる。潜在精巣は精巣の下降が不完全で、腹腔ないし鼠径部に停留する疾患であり、イヌに多発する。本疾患の多くは遺伝する傾向があると報告されているが、イヌの潜在精巣の原因あるいはマーカー遺伝子を同定した報告は、見当たらない。本疾患に罹患した男性の一部では、エストロジェン受容体α(ESR1)の一部に一塩基多型(SNP)の組み合わせ配列(ハプロタイプ)がみられ、このハプロタイプは正常男性には見られないことが報告されている。本研究では、潜在精巣を発症したイヌにおいて、ESR1などの、精巣下降に影響を及ぼす因子の遺伝子の塩基配列を解析し、正常犬との比較を行い、それらの原因・マーカー遺伝子を探索する。潜在精巣犬および正常犬のサンプルのゲノムDNAから、候補因子の遺伝子の一塩基多型(SNP)の部位をPCR法で増幅し、発症個体と正常個体の塩基配列を比較して、本疾患の原因・マーカー遺伝子の同定を試みる。平成19年度の研究では、イヌ潜在精巣の原因遺伝子・マーカー遺伝子を探索する目的で、潜在精巣罹患犬のエストロジェン受容体α遺伝子(ESR1)の一塩基多型(SNP)を解析し、正常例との比較を行った。正常犬(n=76)および潜在精巣罹患犬(n=42)の精巣組織からゲノムDNAを抽出した。イヌのSNPデータベースを利用し、第1染色体のESR1内にSNPが181ヵ所あることを見いだした。そのうち、3'側の2カ所のSNPを調査するため、SNPを含む400bp程の領域を増幅するオリゴDNAプライマーを設計し、精巣ゲノムDNAからPCR法により遺伝子を増幅した。得られたPCR産物を精製し、ダイレクトシークエンス法を行い、潜在精巣罹患例と正常例の塩基配列を比較した。その結果、ミニチュアダックスフンドとチワワでは、2カ所のSNPは両方とも3種類の多型(SNP1:A/A、A/C、C/C;SNP2:A/A、A/G、G/G)がみられたが、トイプードルでは、SNP1は2種類(A/A、A/C)、SNP2は1種類(A/A)しかみられなかった。ミニチュアダックスフンドでは、潜在精巣例(n=20)のSNP1のA/Cの割合は、正常例(n=40)と比較して、有意に低い値を示した(p<0.05)。潜在精巣例のSNP2のA/Gの割合は、正常例と比較して、低い傾向がみられた(p<0.1)。チワワおよびトイプードルでは、両SNPともに、正常例(それぞれn=19、n=13)と潜在精巣例(それぞれn=15、n=4)の間において、各多型の割合の顕著な差はみられなかった。平成20年度は、潜在精巣が多くみられる小型犬種(ミニチュアダックスフンド、チワワ、トイプードル)のエストロジェン受容体α遺伝子(ESR1)の3'側末端から70kbの非翻訳(イントロン)領域のSNP解析を行い、潜在精巣例と正常例との比較を行った。イヌのSNPデータベースを利用して、ESR1の当該領域から13ヵ所のSNP候補を選択し解析したところ、実際に多型性を示したのは4ヵ所であり、それら4ヵ所以外は多型はみられないことが判明した。さらに、それら4ヵ所のSNP以外に、データベースには記載のない5つのSNPを発見した。それらのSNPのうち8ヵ所ついて、正常例と潜在精巣例を解析し、比較した。その結果、いずれの品種においても個々のSNPの多型比率は潜在精巣と正常例で顕著な差は見られなかった。解析した8ヵ所のSNPの組み合わせ(ハプロタイプ)の比率は3品種間で異なっていたが、いずれの品種でも潜在精巣と正常例の間で顕著な差は見られなかった。また、3品種のESR1の3'側70kbの連鎖不平衡領域を解析したところ、チワワとトイプードルのそれはミニチュアダックスフンドに比較して短いことが判明した。さらに、ミニチュアダックスフンドでは、潜在精巣のSNP#5と#14の2ヵ所組み合わせの多型比率は、正常例と異なっていた。

以上の成績から、ミニチュアダックスフンド、チワワおよびトイプードルでは、今回解析したESR1の3'側末端から70kbの非翻訳領域には潜在精巣に特異的なSNP多型はみられなかった。しかし、潜在精巣のミニチュアダックスでは、8ヵ所のSNPのうち、2か所の組み合わせは、正常例と異なっていた。今後、ESR1の翻訳(エクソン)領域を含めた他の領域のSNP多型を解析するとともに、罹患犬精巣のエストロジェンに対する反応性についても調査する必要があると考えられる。平成21年度は、SNP多型の類似したミニチュアダックスフンドとチワワに限定し、例数増やして、エストロジェン受容体α遺伝子(ESR1)の3'側末端から70kbの領域の9ヵ所SNPについて、正常例(n=68)と潜在精巣例(n=40)を比較した。その結果、正常例と一側性、腹腔内、鼠径部停留例との間にはそれらのSNPのアリル、遺伝子型およびハプロタイプの頻度に顕著な差異はみられなかった。一方、両側性例(n=5)のSNP#16と#17のSNPの遺伝子型ヘテロ接合型の割合は、正常例に比べて低く、ハプロタイプ(SNP#14-17)のGTTAのホモ接合体の割合は正常例に比較して高かった。また、小型品種の潜在精巣犬の精巣のアンドロジェン分泌に及ぼすエストロジェンの影響を正常例と比較・検討するため、精巣細胞を分散し、その細胞をhCGの存在あるいは非存在下で18時間培養し、エストラジオール-17β(E_2)のテストステロン(T)分泌に及ぼす影響を解析した。その結果、潜在精巣例(停留精巣と陰嚢内精巣)および正常例の両方とも、hCG存在下ではE_2を36.7nMまたは367nMを加えても、無添加群に比べて、T分泌の顕著な差はみられなかった。一方、hCG非存在下では、正常例精巣と潜在精巣例の陰嚢内精巣では、367nMのE_2添加により、Tの顕著な上昇がみられたが、停留精巣ではそのような上昇は生じなかった。以上の成績から、上記の小型犬2品種の潜在精巣例のESR1の当該領域のSNPは正常例と比較して顕著な差異はみられなかった。両側性例とESR1当該領域のSNPとの関連についてはさらなる検討が必要である。また、精巣内分泌機能へのE_2の影響については、LH非存在下では、高濃度のE_2は正常例精巣のT分泌を促進するが、停留精巣では、そのような促進はみられず、エストロジェンに対する反応性は、正常例とは異なる可能性が示唆された。
ドイツ・ポーランド境界地域の研究―第一次世界大戦後のオーバーシュレージエンを例に

当該年度においても、昨年度に引き続き「第一次世界大戦直後のオーバーシュレージエンにおける分離主義運動」について研究を行った。本年度の成果は、主に以下の2点に分けられる。1ポーランドのヴロツワフ大学における在外研究:本年度における報告者の学術活動の中で最も重要なものは、主にポーランドにおいて実施した在外研究である。これは、報告者が2017年6月から2018年3月にかけて、断続的にポーランドのヴロツワフ大学を拠点として行ったものである。その期間中においては、第一に、同大学附属図書館において資料調査を実施し、報告者の研究テーマである「オーバーシュレージエンの分離主義運動」についての必須文献を多数収集した。第二に、現地の研究者との面談を実施した。特にヴロツワフ大学での受け入れ教員であるトマシュ・プシェルヴァ氏からは、多くの指導、コメント、助言を頂いた。第三に、ヴロツワフ大学歴史学部の主催する歴史学セミナーに参加した。これはヴロツワフ大学の学生・博士課程院生を対象として、ドイツにおいて実施されたものである。このセミナーを通じて、報告者の研究領域であるドイツ・ポーランド関係史、もしくは旧ドイツ東方領土と現在のポーランドないしはドイツ社会との関連に関する知見を多く得ることができ、非常に学ぶところが大きかった。2博士論文・投稿論文の執筆:以上の活動と並行して、博士論文原稿の執筆も行った。当該年度において、博士論文の大枠が定まり、各章を構成する論考の執筆状況にも大幅な進捗が見られた。また、これまでの研究成果を論文にまとめ、査読付き論文雑誌に投稿している(現在、査読中)。29年度が最終年度であるため、記入しない。申請者の研究目的は、「オーバーシュレージエン人同盟/グルヌィシロンスク人同盟」という組織に着目することで、近現代ヨーロッパの文化・言語境界領域に居住していた人々の主体的な動きや対応の一端を明らかにすることである。私の主要な研究対象は近現代のドイツ・ポーランド境界地域であり、それに関して、当該年度では主に上記組織に関連する文献や史料の収集を実施した。「研究実施計画」に基づき、ナショナリズム、中東欧史、オーバーシュレージエン史の研究書を網羅的に購入した。また8月のドイツ渡航の際には、ベルリンとマールブルクの文書館・図書館において、欧語で書かれた関連史資料を収集した。2月のポーランド渡航中には、私の研究領域における先行研究者であるヴロツワフ大学のトマシュ・プシェルヴァ氏と面談を行い、多くの有益な助言を得ることが出来た。その際にも、ヴロツワフ大学の図書館において、オーバーシュレージエン史に関する現地資料を収集している。それ以外にも、研究を円滑に遂行するための機材などを購入した。大量の文献収集を速やかに実施するために、スキャナーや高性能PC、PDFデータ編集・閲覧ソフトを研究用に導入した。それによって膨大な文献の電子化やPC上でのデータの活用が容易になり、多数の史資料を短期間に解読することが可能となった。また研究成果を研究会などで発表するために、数度の出張も実施した。8月には長野県小谷村で開催された「ポーランド史研究者集会」に参加・発表し、9月にも神戸市で催された「東欧史研究会・ハプスブルク史研究会合同例会」において、研究成果の報告を実施している。以上の科研費に基づく研究の進捗により、現在申請者は2本の研究論文の投稿を準備している。今後の進捗にも寄るが、これらの研究論文は平成29/30年度にも学会誌に掲載されるよう、投稿に向けた作業を行っている。第一に、当該年度においては史資料の収集を実施したが、それらの計画は予定通りに進捗した。第二に、研究に必要となる機材(PC、ソフトウェアなど)の購入も順調であった。第三に、研究成果を発表するための学会・研究会参加も、数度実施することが出来ている。最後に、当該年度における研究成果の投稿論文化も、現在進行中である。

当該年度において、博士論文の大枠が定まり、各章を構成する論考の執筆状況にも大幅な進捗が見られた。また、これまでの研究成果を論文にまとめ、査読付き論文雑誌に投稿している(現在、査読中)。平成29年度における研究課題の推進方策は、基本的には昨年度の研究計画を踏襲する。まず私の研究課題である「第一次世界大戦後のオーバーシュレージエン分離主義組織(オーバーシュレージエン人同盟/グルヌィシロンスク人同盟)」に関する研究成果の投稿論文化を進める。そのために、平成28年度において収集した史資料の読解を実施する。平成29年度の研究計画において、最も重要となるのは、6月から翌年3月までを予定しているポーランドでの研究滞在である。これは特別研究員DC2の「研究指導委託」制度に基いて実施されるもので、その期間中は主にヴロツワフ大学において、現地研究者との連携を図りつつ、当該研究課題の進展を目指す。特にヴロツワフ大学図書館及び近隣のシロンスク図書館には、膨大な数の関連研究文献が所蔵されており、それらを活用した研究の飛躍的な発展が期待される。29年度が最終年度であるため、記入しない。申請者の所属する東京大学日独共同大学院プログラムのウェブサイト。
動画シンボルを社会生活のさまざまな場面で活用するための認知心理学的応用研究

本研究は、ユニバーサルデザインに配慮したコミュニケーション・ツールを社会生活のさまざまな場面で活用するための認知心理学的応用研究である。そのため、(1)幼児教育の場面での対話、(2)大学における留学生を対象にした学生支援の対話に場面を限定して、それぞれの対話場面での会話データを収集するとともに使用頻度の高い語彙と文の構造を分析した。そして、それらを表現するために必要な視覚シンボルを用いたコミュニケーション・ツールの開発を目指した。前年度の留学生と日本人とのコミュニケーションの語用論的分析に続き、誤解が多くみられる場面における具体的なを会話データの収集を行った。その一つは、幼児と保育者に関するもので、この内容に関しては、中国と日本のそれぞれの幼稚園でのビデオ撮影を行い、その後、保育者にインタビューをして、その会話の内容を確認するという手法を用いた。なお、中国と日本の幼稚園での教育方法のつがいに関する様子は、著者が参加する共同研究の形で、異文化理解を中心に、国際会議などで発表した。本研究の主たる目的は、誤解が多く生じると思われる場面で、視覚シンボルを活用して、その誤解を防ぐ、あるいは、軽減すことであるが、そのために、視覚シンボルのアニメーション化の研究を同時並行の形でおこなった。その結果は、雑誌『教育文化』で英文の論文として報告している。そのタイトルは、"Comprehensibility of animated ideograms that incorporated Japanese sign language"である。そこでの単語数は、少数に限られているが、動画シンボルを作成するときに、重要な要素が徐々に明らかにされてきており、今後は、実際の場面で必要な語彙の特定が必要であると考えられる。そのため、まず1幼児教育の場面での対話、2大学における留学生を対象にした学生支援の対話に場面を限定して、それぞれの対話場面での会話データを収集するとともに使用頻度の高い語彙と文の構造を分析した。また、異言語間コミュニケーション場面での異文化理解要因も視野に入れて結果の分析などをおこなうことを目的とした。研究は大きく以下の4つの内容に分類できる。(1)特定の2状況下(1中国と日本の幼児教育の現場、および2大学での留学生支援)における対話データの収集とその分析、(2)特定場面で日常的にサービスを提供する人たちとサービス利用者の両者への聞き取り調査、(3)すでに類似のコミュニケーション・ツールが、どの程度使用されているのかについてのフィールド調査、(4)対話データから得られた高頻度使用の概念と表現のシンボル化を含むコミュニケーション支援ツールの開発である。本研究の結果からは、たとえば、中国と日本の幼児教育の場面は、一見類似した様子が見られるものの、教師の子どものとらえ方や教育観が異なることから、コミュニケーションにおいても、個々の指示内容や子どもの望ましいあるべき姿についても違いがみられることが明らかにされた。それに伴い使用される語彙の内容にも、当然のことながら違いがみられた。つぎに、留学生の支援場面での会話分析については、外国人留学生の日本語の発音や文法の問題から、会話において誤解が生じる可能性が具体的に数多く指摘された。さらに、日本語と中国語における同形異議語(愛人・手紙・汽車など)の問題も深く誤解にかかわっていることなどが示唆された。語用論に関する基本的な知見をレビューするとともに、具体的な日常生活のさまざまな領域において、これまで言われていることが現実的にどのように応用可能かという点について検討した。このことは、直接、本研究に一見関係がないように思われるが、コミュニケーションの場面で、どのようにして誤解が起こり、話し手の意図が、相手にうまく伝わらないかを考察する上では欠くことのできない準備作業であると思われるためである。また、実際の具体的なデータとしては、外国人留学生と日本人との対話データを収集し、誤解の諸要因を分析することから、それらの誤解を防ぐための、シンボル使用の検討に入った。日本語を母語としない外国人留学生は、発音面において正確な単語の発音が難しいなどのことにより、聞き手が誤解するような音韻論的誤解があることが、本研究から明らかにされた。また、相手が当然知っていると思っているような知識の欠如からも、誤解は頻繁に観察できた。このことは、単に交わされる言語表現上の問題だけではなく、双方が前提と考えている相互の知識の共有の問題がいかに重要であるかを改めて認識させる結果となった。これらのことは、これまでのいわゆる絵を使用した「指差しコミュニケーション」ではなく、まさに交わしている会話のトピックにまつわる知識の一部を、視覚シンボルで表現することが、スムーズな会話には、必要であることを示したものとも考えられる。さらに、視覚シンボルの研究やそのソフト化については、複数の専門家の助言を受け、会話の分析研究と並行して準備を進める結果となった。当初予定していた会話の場面で、変更をおこなったため、すでに他の研究者がおこなった空港カウンターや医療場面での会話は収集できていないが、当初予定していなかった幼児と保育者との会話などを詳細に分析した。

同時に、子どもや知的な問題を持つ子どもたちにも理解が容易な動画シンボルの研究が進んでおり、それらの結果を実際の会話場面で応用するための、具体的なデータがかなり収集できたものと考えられる。また、そのほかのさまざまな場面での視覚シンボルの有用性についても、調査済みであるので、そのデータをまとめることによって、本研究は大きく前進するものと思われる。計画書には、医療場面、空港カウンター、大学での留学生支援の3つの場面を、具体的な会話のおこなわれる現場ととらえていたが、実際には、そのひとつの場面でしかデータを収集することができなかった。その理由としては、会話のデータ収集とその分析に予想以上の時間を費やしたことと、語用論の基礎研究に要した時間を長かったことが考えられる。本研究は,ユニバーサルデザインに配慮したコミュニケーション・ツールを社会生活のさまざまな場面で活用するための認知心理学的応用研究である。次年度が最終年度にあたるため、当初の研究計画のほぼすべての内容を遂行できるように実現的な対応をとるとともに、ポイントを絞って研究結果をまとめる作業をすすめていく。すでに結果が得られている内容については、心理学関係の国際会議で発表するとともに、国内の学会や研究会で報告をおこない、参加者からコメントを得ることによって、最終的な論文の考察を、より豊かなものにしていく。また、すでに、大学生を対象にどのような場面で視覚シンボルのコミュニケーションが必要だと感じるかについての調査と、その際に用いるべき視覚シンボルの概念を尋ねた調査を実施しているため、このような直接的なデータについても整理して、その有用性を実際の場面で吟味できるコミュニケーションのツールを作成する。より緻密な研究を進めていくためには、具体的な会話がおこなわれる場面を、再度精査するとともに、もう少し限定した範囲でデータ収集を続けていく必要があるように感じている。また、個人情報やプライバシーの問題で、会話の収録についての理解が得られない部分が多く、単なる日常場面での会話データの収集ではなく、ロールプレイなどの実験的要素を加味したデータ収集の必要性があることも感じている。今後は、これらの点を踏まえて、より現実的な研究へと軌道修正する必要があるように思われる。幼児と保育者のコミュニケーションについては、日本での幼稚園と中国での幼稚園の様子の分析を進めているため、その一部の結果を、9月にスイスで開催されるヨーロッパ発達心理学会の大会で発表する予定である。そのための旅費を支出することになる。また、それらの結果は英語論文にまとめる予定であるため、英語の校閲の費用、さらには、学術論文に掲載するためと別刷りの印刷費などの諸費用を支出する必要も生じる。最終的には、視覚シンボルを用いた,音声言語の不備を補完するコミュニケーション・ツールを開発することが必要なため、そのためのデザイナーへの謝金の支出や紙媒体のツールの特殊な印刷費を要することになることが予想される。
カルニチン欠乏に基づく心肥大において発現異常を示す新規遺伝子の機能と役割

カルニチンは、長鎖脂肪酸がミトコンドリアにおいてβ-酸化を受けるためには必須の因子である。Juvenile visceral steatosis(JVS)マウスは、脂肪肝、低血糖、高アンモニア血症、成長陣害、心肥大などの多彩な症状を呈し、ライ様症候群疾患モデル動物として、1988年に金沢大学医学部実験動物施設から報告された。その後、全身性のカルニチン欠乏を呈すること、腎臓スライスにおけるカルニチンの取り込みが低下していること、細胞膜のカルニチン輸送を司るカルニチン輸送体、Octn2、の欠損マウスであることが解明され、原発性カルニチン欠損症モデル動物として確立された。我々は、JVSマウスが心肥大を呈することを発見し、その発症機構に注目し、mRNA differential display法を用い、JVSマウス心臓において発現が変化した新規遺伝子3種を発見した。本研究ではこれら3種の新規遺伝子の構造とその機能を解明し、カルニチン欠乏に起因する心肥大形成過程をあきらかにすることを目的とした。発現が変化している3種の遺伝子をcarnitine deficiency-associated gene expressed in ventricle(CDV)と名づけた。CDV-1は心臓で発現しており、JVSマウスの肥大した心室において発現が低下していたが、カルニチン治療によって正常化した。関連遺伝子として同時にクローン化したCDV-1Rは心臓以外にも発現が見られ、またJVSマウスにおいて発現の変化は見られない。CDV-1遺伝子はCDV-1Rの3'後半と共通であり、CDV-1Rのイントロンに独自のプロモーターが存在した。タンパクは、coiled-coil構造を示すことから他のタンパクと相互作用しているものと考えている。CDV-2は心臓のみならず、骨格筋にも発現しており、JVSマウスにおいて発現が増強している。その後の解析によって、CDV-2は、pyruvate dehydrogenase kinase4 (PDK4)のマウスホモローグであることが判明した。絶食によっても発現が増強するが、JVSマウスではカルニチンの投与によって、正常化した。PDK4たんぱく質もJVSマウスにおいて増加しており、酸化還元状態に従って、pyruvate dehydrogenaseと結合・解離する調節があることを見出した。CDV-3はc-erbB-2を強制発現したヒト細胞で発現が増強する核たんぱく質(H41)と高い相同性を有していた。以上の結果から、CVD-1とCDV-3は心肥大と関連が深い遺伝子で、CDV-2(PDK4)はカルニチン欠乏と関連した遺伝子と考えている。本研究の目的は、細胞膜カルニチン輸送体蛋白の欠損に起因する原発性カルニチン欠乏症マウス(juvcnile visceral steatosis:JVSマウス)で見い出した、本症の代表的症状である心肥大の発症機構を分子レベルで明らかにすることであり、本年度は以下の成果が得られた。

1)申請者らがJVSマウスで発見した、カルニチン欠乏で発現変動する3種類の新規遺伝子(CDV-1/-1R,CDV-2=PDK4,CDV-3)の発現調節機構を解析するために、まずCDV-1/-1RおよびCDV-3に対するゲノムDNAのクローニングを行った。得られたBACクローンのmappingとsequencing解析により、CDV-1とCDV-1Rを転写する遺伝子は、マウス5番染色体に座位する1つの遺伝子に由来し、少なくとも19個のエクソンから成ることを明らかにした。またCDV-1Rに対してはイントロンに相当する部分にCDV-1の転写開始点があり、その上流には転写調節領域と考えられる塩基配列が存在していた。CDV-1Rの転写開始点およびその上流領域については現在検討中である。一方、CDV-3の遺伝子クローニングに際して、170個余りのBACクローンがCDV-3cDNAプローブと反応し、遺伝子単離に困難を生じた。しかし、ゲノムDNAのinverse-PCRによりイントロンと考えられる短い断片を調整することができ、それをプローブして得られた8個のクローンはcDNAとも反応するので、遺伝子構造の解析を行っている。今後これらの遺伝子は、発現調節機構の解明とノックアウトならびにトランスジェニックマウスの作成に利用する。2)これら新規遺伝子産物の機能解明の一環として、本年度は細胞内局在性の検討および相互作用する蛋白質の同定のための準備を行った。CDV-1、-1R、-2、-3の4種類すべてのリコンビナント蛋白を大腸菌発現系で大量に合成し、各々の精製蛋白標品を用いてウサギに免疫した。CDV-2およびCDV-3に対しては力価の高い抗体が得られたが、CDV-1/-1Rについては更に検討を行っている。JVS(juvenile visceral steatosis)マウスは、カルニチンの細胞膜輸送タンパク質の欠損に基づく全身性原発性カルニチン欠乏症を呈する。その結果、顕著な心肥大をきたす。これまでにJVSマウス心室に特異的な遺伝子発現異常を示す新規遺伝子を3種発見している。心臓でのみ発現がみられ、肥大した心室でのみ発現低下する遺伝子、CDV-1(carnitine deficiency-associated geneexpressed in ventricle)、のゲノム遺伝子を単離した。本遺伝子は類縁遺伝子、CDV-1R、と3'部分を共有する遺伝子でそれぞれ固有のプロモーターを有することを明らかにした。CDV-1のプロモ-ター部には、Nkx-2.5、CREB、SRF、Sp-1、YY-1などの心筋特異的転写因子や抑制因子の結合部位が発見され、心筋特異的発現とカルニチンによる抑制の機構を説明できるものと考えられる。今後、心筋細胞を調製し、発現実験を行う予定である。現在、CDV-1を強制的に心室に発現させるためのplasmidを調製し、トランスジェニックマウスの作成に取りかかっている。
アルカリ溶解性会合高分子溶液中の気泡に発現する特異なミクロ構造の解明

アルカリ溶解会合性高分子(HASE)溶液中を上昇する気泡の気液界面に発現する特徴的なマイクロスケール構造が研究される.マイクロスケール構造が発現するのはHASEとしてPrimal-TT935水溶液を用いた場合であることが示される.マイクロスケール構造の発現は,レオロジー特性と気泡径に依存し,また,レオロジー特性に応じて発現するマイクロスケール構造の形態が異なることが示される.アルカリ物質の影響を調べた結果,Primal-TT935に添加するアルカリ物質はNa原子を含んでいると,溶液が透明となり,特徴的な弾性効果が発現すると予想される.アルカリ溶解性会合高分子(HASE)溶液を用いて,HASE溶液における気泡上昇運動時に発現するマイクロ構造について調べた.まず,NaOHによりpH = 7に調整したPrimal TT-935水溶液を対象として従来から使用して観察装置を用いて実験を開始したが,装置が大きいため高速度ビデオから気泡までの距離が遠くなり,マイクロ構造の撮影が不鮮明となることが多かった.そこで15cm×15cmの正方断面を持つコンパクトな実験装置を新たに作成した.また,粘度計を購入し,非ニュートン粘度を実験時に実測できることになった.まず,高粘性に調整を行ったPrimal TT-935水溶液中で実験を行った結果,これまでに観察できなかったマイクロ構造を伴う現象を鮮明に捉えることに成功した.観察された現象は,非常にユニークな構造であり,気泡の大きさに応じて出現する形態が変化した.本現象は,気泡にPrimal TT-935を構成する高分子が直接界面に作用した結果であると考えられるが,流体力学の範疇においては非常に特異な現象であると言える.同じHASE溶液の一種であるPrimal TT-615水溶液でも実験を行った.高粘性に溶液を調整したPrimal TT-615水溶液は,Primal TT-935水溶液とは全く異なるレオロジー特性を持ち,気泡運動の特徴についても全く異なることが分かった.Primal TT-615水溶液では,見掛け上のレオロジー特性の実測結果からは弾性特性がないと判断されるにも関わらず,気泡運動には弾性効果が反映される.形状自体に大きな特徴はないが,見掛け上弾性特性がないと判断されるにも関わらず,発現する弾性効果が出現する点は非常に興味深い現象である.Primal TT-615水溶液は若干白濁しているため,まだ十分にマイクロ構造の撮影を行えておらず,今後,マイクロ構造に焦点を当てた実験を行う予定である.平成27年度の達成度としては,概ね予定通りであった.新たな実験装置を作成したため,物理条件を幅広く変更した実験を十分に行えていないが,鮮明にマイクロ構造を撮影できるようになったことは本研究の進展において非常に大きい.本年度もアルカリ溶解性会合高分子(HASE)溶液を用いて,気泡上昇運動時に気液界面で発現するマイクロ構造について調べた.まず,昨年度末より開始したPrimal TT-615水溶液を用いた実験を引き続いて行った.Primal TT-615水溶液中の気泡は,Primal TT-935水溶液中の気泡のような特異な形状とはならず,また,幅広い物理条件に対してマイクロ構造の発現はなかった.ただし,気泡形状とは別の点で興味深い現象が観察された.Primal TT-615水溶液中の気泡,Primal TT-935水溶液中の気泡では速度の不連続変化現象が観察され,気泡形状変化と密接に結び付いていた.また,Primal TT-615水溶液中の気泡は,これまで観察されていない速度の不連続変化が二回起こっている可能性がある.また,Primal DR-72による実験も計画していたが,Primal DR-72のレオロジー特性がPrimal TT-615と類似していたため,マイクロ構造の発現しないことが予想できた.そのため,pH値を制御したPrimal TT-935水溶液で実験を行った.これまでは,NaOHをアルカリ添加物質としてpH = 7のPrimal TT-615およびPrimal TT-935水溶液を用いてきたが,Primal TT-935はpH = 9の水溶液の方がpH = 7の水溶液よりも粘弾性特性が強い.pH = 9のPrimal TT-935水溶液で実験を行った結果,pH = 7の水溶液中で観察されるような非常にユニークな形状が観察された.見掛け上の特異な形状に大きな相違はなかったが,マイクロスケールレベルでは明らかに相違が観察され.pH = 9のPrimal TT-935水溶液の気泡では,より顕著にマイクロスケールの特異な構造が出現し,構造もpH = 7とは異なった.これより,pH = 9のPrimal TT-935水溶液の方が気液界面への高分子の直接作用が強いことが明らかになった.概ね予定通りの実験を実施でき,興味深い結果を得られた.昨年度までの検討・考察によりアルカリ溶解性会合高分子(HASE)の種類によって,特徴的な気泡形状の形成やマイクロ構造の発現に相違があることが分かった.Primal TT-935は,特徴的なマイクロ構造が観察できるHASE溶液となるが,添加するアルカリ物質の影響を調べるために水酸化カリウムをアルカリ物質として添加して,pH = 7の溶液を調整して実験を行った.HASE溶液の原液はエマルション状態にあり,Primal TT-935にアルカリを添加すると親水性の増粘した透明な溶液に変わる.

Primal TT-935に水酸化カリウムを添加すると親水性の溶液に変化したものの,水酸化ナトリウムを添加した際のように透明な溶液にはならずに少し白濁した溶液となった.溶液の見掛けのレオロジー特性は,水酸化ナトリウムで中和した場合とは大きな違いはなかった.水酸化カリウムを添加したHASE溶液中の気泡の形状は水酸化ナトリウムを添加した場合と同様の形状となることが分かった.ただし,マイクロ構造の発現に関しては,溶液は白濁していたために詳細な観察ができず,判断ができなかった.水酸化ナトリウムを添加した場合と水酸化カリウムを添加した場合で溶液の状態が異なるため,HASEに添加するアルカリ物質の影響はレオロジー特性に顕著に現れないものの,溶液の性状を変化させると考えられる.昨年度においては気泡上昇運動の実験を行うまでに至らなかったが,炭酸ナトリウムをPrimal TT-935に添加すると,親水性の増粘した透明な溶液となった.ナトリウムを含むアルカリ物質を添加するとPrimal TT-935は親水性の増粘した透明な溶液に変わると考えられる.今後も,アルカリ物質やアルカリ溶解性会合高分子の種類と気泡界面に発現するマイクロ構造の関係を調べ,気泡の特徴的な形状とマイクロ構造発現に関与する主因子を検討する予定である.アルカリ溶解会合性高分子(HASE)溶液中を上昇する気泡の気液界面に発現する特徴的なマイクロスケール構造が研究される.マイクロスケール構造が発現するのはHASEとしてPrimal-TT935水溶液を用いた場合であることが示される.マイクロスケール構造の発現は,レオロジー特性と気泡径に依存し,また,レオロジー特性に応じて発現するマイクロスケール構造の形態が異なることが示される.アルカリ物質の影響を調べた結果,Primal-TT935に添加するアルカリ物質はNa原子を含んでいると,溶液が透明となり,特徴的な弾性効果が発現すると予想される.当初の予定通りに,Primal TT-935水溶液とPrimal TT-615水溶液系で,マイクロ構造の発現に焦点を当てて実験を行う.Primal TT-935水溶液では,昨年度は高粘度に調整した溶液を用いたため,今年度は低粘度系での実験を行う.低粘度系では気泡は大きく変形し上昇速度が大きくなる.変形気泡にマイクロ構造が発現するかを調べる.また,Primal TT-615水溶液系では低粘度に溶液を調整すると弾性効果が全く出現しないと予想できるため,高粘度系に焦点を絞ってマイクロ構造の発現について検討する.両溶液系での結果を比較しながら,特異な構造が発現するメカニズムを考察する.また,その分子構造と実験で観察されるような気泡に発現する特異な弾性特性の作用効果についても考察する.平成27年度以降に得られた成果を国際会議(1件)と国内学会(2件)にて発表する予定である.次年度の主たる使用用途は,アルカリ溶解性会合高分子,KOHやBa(OH)2等のアルカリ物質の購入経費である.また, 2つの国際会議での発表を計画しており,研究発表経費にも予算計上する.流体工学3月に参加した学会の参加登録費の支払いが完了していなしため.4月に支払いが完了する予定である.
シス・トランス型脂肪酸等の新規高精度分析法による食品の汚染実態及び健康影響の解明

現在まで、トランス型やシスートランス混合型脂肪酸の健康影響については余りにも未解明であった。しかし、健康影響を評価するには、我々が、毎日摂取する食品中の濃度を正確に把握することが必要となる。本研究成果は、1)現在まで定量されていないリノール酸とリノレン酸の異性体を新たに合成、精製し、それらを含めた高精度脂肪酸分析法を確立した。2)種々の食品及び母乳試料中の濃度レベルを明らかにした。3)調理加熱時にトランス脂肪酸などが生成することを観察した。これら結果は、トランス体を含めたシス-トランス型必須脂肪酸が有する健康影響評価に資する有益な知見を提供することが可能となるものと確信される。平成28年度は、現在までαーリノレン酸(n-3系)のシスートランス混合型脂肪酸標準品が未市販であったことより、αーリノレン酸の標準品をトランス化反応させた試料を用いて、銀イオンカラムを2本連結・装着したリサイクルバルブ・HPLC法を用いて、オールシス体を除くα-リノレン酸のトランス体とシス-トランス混合体7種の合成・精製に成功した。また、各精製試料は、高分解能GC/MS及びNMR解析に供し、それら試料の同定にも成功した。次に、上記の精製・同定した標準品を組み込んだ高分解能GC/MSによる高精度分析法の構築を試みた。具体的には、研究代表者が作成したオレイン酸(n-9系)、リノール酸(n-6系)とαーリノレン酸のトランス型及びシスートランス混合型脂肪酸(以下、トランス脂肪酸等)の3つの脂肪酸異性体の計14種(シス体を含むC18:1△9;2種、C18:2△9,12;4種、C18:3△9,12,15;8種)に、44種の市販脂肪酸標準品を加えた、全59種類の脂肪酸の新規高精度型脂肪酸分析法の構築を試みたところ、極めて精度良く定量可能な分析法を開発することができた。その際、興味深い深いことには、分析した母乳試料中に上記3種のシス・トランス型の脂肪酸が高濃度で検出されたことであった。さらに、市販食品についても調査したところ、市販のカレーや調理パンにおいても、高濃度のトランス脂肪酸が観察されたことであった。今後の計画としては、日本人の真のトランス脂肪酸等の1日摂取量および健康影響の解明を目的として、種々の市販食品や食事試料のほか、調理過程で非意図的に生成するトランス脂肪酸の生成機序について検討を行う予定である。本研究課題の進捗状況については、αーリノレン酸の一部異性体の生成・同定に手間どったものの、概ね順調に進展している。今後の計画についても、上記同様、不測の事態が起こることも想定し、平成28年度の計画見積もりを再検討し、平成29年度の詳細な研究計画を立案し、4月より精力的に研究を推進させる。代表者は、本研究期間内に、まず、銀イオンカラムを2本連結・装着したリサイクルバルブ・HPLC法を用いて、リノール酸のトランス体とシス-トランス混合体3種、同様にα-リノレン酸7種の合成・精製・同定に成功し、それら純品を組み込んだ炭素数C1422の飽和・不飽和脂肪酸を含む高精度分析法の構築に成功している。次に、本分析法を駆使して、食用油脂原材料(ショートニング、マーガリン)、牛乳、ヒトの生体試料(血清、母乳)中のトランス等脂肪酸の組成比について調査した結果、全試料中にトランス等脂肪酸が検出されたこと、並びにマーガリンで高比率であったリノール酸及びα-リノレン酸のシス-トランス体(両異性体の中では、C18:2は△9c,12tが、C18:3は△9c,12t,15tが高比率)が母乳中でも高比率で検出されたこと、更に母乳と血清試料中のトランス等脂肪酸の組成パターンが著しく異なっていることが観察された。さらに、この生成機構及びその因子を解明することを目的として、食用(菜種)油100mgを小型バイアルに取り、そこにラジカル補足剤1%BHT添加し、ホットプレート上(開放系)で180°Cにて1時間加熱し、上記脂肪酸の生成量を比較したところ、BHT(ブチルヒドロキシトルエン)添加ではトランス等脂肪酸の生成が抑制されていた。加えて、純品のオレイン酸にラジカル反応開始剤のt-BuOOBu-t(ジ-tert-ブチルペルオキシド)を添加し、上記と同様に加熱した結果、オレイン酸の著しい分解とエライジン酸の生成促進が観察されたことより、代表者は、通常の食品加工時や家庭での食事の調理時においても、食品加工時に生成するラジカルにより、新たにトランス等脂肪酸が非意図的に生成しているものと推察した。また、窒素を封入した嫌気的な条件では、試料中のトランス型脂肪酸の生成が抑制されていることを観察した。

平成29年度の推進方策としては、前年度の計画の進捗状況や改善点を精査し、必要な修正を加え、研究課題の完全遂行を目指す。既に、本年度の計画予定の大阪府内のスーパーにて、a)国内外の製造会社等が異なるマーガリンやショートニング等の市販硬化油(20品目)、b)国内外の反芻動物由来のチーズ、牛乳等の乳製品(10品目)、c)その他、大量の油脂類及び食肉類等を使用した市販加工食品(20品目;フライドポテト、コンビーフ・オイルサーディン等の缶詰類、調理パン・ケーキ、各種レトルト食品)を購入済みであり、またそれら試料の一部については、分析定量が終了している。同様に、調理過程で非意図的に生成する食用油中のトランス脂肪酸等の生成機構の検討についても、各調理段階の試料については調製済みであり、あとはそれら試料について精力的に分析を行っていくだけである。疾病予防学、食品衛生学
アミド結合の立体特性の医薬化学への応用

芳香族アニリド類において二級アミドが結晶および溶液中でトランス体をとるのに対し、N-メチル化して得られる三級アミドはシス型を優先する。この現象は芳香族ウレア類でもみられる。芳香環上に置換基を有する化合物の構造解析(X-ray)により、シス型優先性の一般性を明らかとし、詳細なNMR解析によりその動的挙動を解明した。このシス型アミド・ウレア結合は芳香環を層状に位置づける有用な官能茎であり、これらを組み合わせることでユニークな結晶構造を有する化合物の創製ができる。不斉中心を持たない光学活性アミド誘導体や多層体芳香族ウレア化合物について動的NMRを用いて、溶液中での特異な立体挙動を明らかとした。また、シス型ウレア骨格に適当な極性官能基等を導入することにより、目的分子と特徴的に相互作用を有する化合物の創製が可能である。今回核酸誘導体(ピス・シトシル誘導体)と水素結合しうるピリジルウレア誘導体をデザイン・合成し、このシス型優先性が高親和性複合体を生じさせることを示した。この結果は核酸分子を塩基特異的な認識する化合物へと応用可能である。アミドのシス型優先性をみいだすに至ったビタミンA研究においてall-trans-レチノイン酸と、最近注目されている9-cis体の誘導体としてトランスおよびシス型アミドを導入したジエナミド誘導体を合成し、その活性を評価した。その結果トランス型ジエナミドがレチノイド活性を示すのに対し9-cis-レチノイン酸に対応するシス型ジエナミドは活性を示さなかった。
カチオンプール法及びカチオンフロー法を用いる革新的有機合成反応の開発

ゴムの樹(Hevea brasiliensis)から産出される天然ゴム(NR)はゴム素材として要求される物性をバランスよく兼ね備えている.しかしながら,耐油性や耐オゾン性などのマトリックスに支配される物性に劣ることが問題とされており,これらを軽減するために,NRへのビニルモノマーのグラフト共重合が検討されている.特に,NR粒子表面へのビニルモノマーのグラフト共重合は興味深く,NR粒子が機能性ポリマーで覆われるため,たとえ機能性ポリマーが少量であっても,その機能を十分に付与できると考えられる.NR粒子表面へのビニルモノマーのグラフト共重合は,平均直径約1μmのNR粒子を水に分散したラテックスの分散質を覆うように異種モノマーをグラフト共重合することにより達成されると考えられる.しかしながら,水中に分散するNR粒子は化学反応を阻害するタンパク質で覆われているため,NRラテックスにグラフト共重合をしても副反応によりグラフト効率は低くなることが知られている.本研究では、当研究室が開発した尿素存在下での脱タンパク質化により得られた脱蛋白質化天然ゴム(DPNR)に3.0mol/kg-rubberのアクリロニトリル(AN)をグラフト共重合させることにより,直径約1μmのNR粒子が厚さ10nm程度のPANで覆われていることがTEM観察により明らかとなった.また,リノール酸を用いた浸透速度測定より,DPNR-graft-PANの浸透時間は未処理のDPNRよりも長くなることが判明した.以上の結果から,ANをDPNRにラテックスの状態でグラフト共重合することにより,NR粒子がPANで覆われていると考えられる.有機電解合成反応では、反応基質を含む溶媒中に電流を流すことにより、陽極では酸化反応が進行してカチオン種が生成し、陰極では還元反応が進行してアニオン種が生成する。この場合、酸化還元反応は電子の移動によって起こるため、有害で取り扱いに注意を要する重金属酸化剤や金属還元剤を用いる必要がない。しかしながら、これまでに報告されている有機電解合成反応のほとんどは陽極もしくは陰極のみの電子移動を利用した反応であり、対極の電子は無駄に使われている。本研究の目的は、陽極で発生するカチオン種と陰極で発生するアニオン種を一時的に蓄えた後、カップリングさせることにより、新たな炭素-炭素結合を形成する高電子効率的環境調和型炭素-炭素結合形成反応を開拓することである。本研究では、まず2-pyridylvinylsilane類やpentafluorophenyl bromideの陰極還元による炭素アニオンの発生と蓄積について種々検討した。しかしながら、これらの反応では複雑な反応混合物が得られ、炭素アニオンを安定に蓄えることはできなかった。次に、ジシランの陽極酸化により発生する不安定なシリルカチオンの分子間配位による安定化について検討した。ケトン存在下にてジシランの低温陽極酸化を行ったところ、副生成物が混在しているがCSI-MSにてシリルカチオンがケトンと相互作用することにより安定化されて蓄えられていることが明らかとなった。また、ジシランの代わりにジスタナンを用いた場合では、スズカチオンを安定に蓄えることが可能であり、さらに、発生したスズカチオンの溶液に様々なカルボニル化合物を添加することにより、スズカチオンがカルボニル化合物と相互作用することが明らかとなった。現在、これらのカチオン種を利用した有機合成反応について検討中である。ゴムの樹(Hevea brasiliensis)から産出される天然ゴム(NR)はゴム素材として要求される物性をバランスよく兼ね備えている.しかしながら,耐油性や耐オゾン性などのマトリックスに支配される物性に劣ることが問題とされており,これらを軽減するために,NRへのビニルモノマーのグラフト共重合が検討されている.特に,NR粒子表面へのビニルモノマーのグラフト共重合は興味深く,NR粒子が機能性ポリマーで覆われるため,たとえ機能性ポリマーが少量であっても,その機能を十分に付与できると考えられる.NR粒子表面へのビニルモノマーのグラフト共重合は,平均直径約1μmのNR粒子を水に分散したラテックスの分散質を覆うように異種モノマーをグラフト共重合することにより達成されると考えられる.しかしながら,水中に分散するNR粒子は化学反応を阻害するタンパク質で覆われているため,NRラテックスにグラフト共重合をしても副反応によりグラフト効率は低くなることが知られている.本研究では、当研究室が開発した尿素存在下での脱タンパク質化により得られた脱蛋白質化天然ゴム(DPNR)に3.0mol/kg-rubberのアクリロニトリル(AN)をグラフト共重合させることにより,直径約1μmのNR粒子が厚さ10nm程度のPANで覆われていることがTEM観察により明らかとなった.また,リノール酸を用いた浸透速度測定より,DPNR-graft-PANの浸透時間は未処理のDPNRよりも長くなることが判明した.以上の結果から,ANをDPNRにラテックスの状態でグラフト共重合することにより,NR粒子がPANで覆われていると考えられる.
ヘテロスピン系の特異な結合を利用した材料群の創出と構造相転移物質への展開

本研究課題はスピン自由度に関連する新規材料の開発研究を主眼とする。我々は有機材料/無機材料の区別なく広範な元素、分子群を取り扱ってきた。電導性、磁性、誘電性、光物性を目指した材料の設計は、「フロンティア軌道設計」と言い換えることができる。本課題で「分子自由度」の意味するものは、スピンの持つ自由度の他に、様々なフロンティア軌道を組み合せられるという設計性自由度である。本課題では、有機結晶の柔軟さと相転移挙動、つまり構造相転移の自由度も取り入れた。これにより比較的高温で挙動するスイッチ物質の開発に近づくことができた。1.反磁性-常磁性転移を示すビラジカル系:基底三重項ビラジカル(bpbn)の一連化合物群が、逐次構造相転移を示し、反磁性からS = 1/2常磁性、続いてS = 1常磁性となることを明らかにしている。この誘導体の中からS = 1/2常磁性のさらに半分のスピン量を示す新しい相を見いだした。2.スピンクロスオーバー物質の探索:鉄(II)イオンにトリピリジルメタノールが配位した物質群が高い頻度で高スピン/低スピンスイッチを見せること明らかにした。光誘起スピン励起状態捕捉という現象を示すことも明らかにした。3. 3d-2p系のスピンクロスオーバー:有機ラジカルが2分子キレートしたニッケル錯体において、エントロピー駆動型の三中心スピン状態転移とも言うべき現象が見られた。4. 4f-2p交換相互作用:有機ラジカル配位の希土類錯体において、4f-2p交換相互作用にも原子番号依存性が示された。さらに、構造パラメーターと磁気カップリング定数との間に良好な相関を描くことができた。これらは希土類元素の周期律の理解を前進させるものである。また、幾つかの4f-2p錯体から単分子磁石を開発することができた。24年度が最終年度であるため、記入しない。我々は合成開発寄りの材料科学研究を進めており、有機材料/無機材料の区別なく広範な元素、分子群を取り扱ってきた。π-dやd-fの組み合わせの中から、現在、新しい電子機能を目指した新材料開発を推進しつつある。本課題では、有機結晶の柔軟さと相転移挙動、つまり相の自由度も取り入れた。1.反磁性-常磁性転移を示すビラジカル系:基底三重項ビラジカル(bpbn)の一連化合物群が、逐次構造相転移を示し、反磁性からS=1/2常磁性、続いてS=1常磁性となることを明らかにしている。この一つの誘導体で、ビラジカルであるにも関わらず幅広い温度領域でS=1/2常磁性を示すものを見いだした。2.テトラピリジルメタンを用いたスピンクロスオーバー物質の探索:鉄(II)イオンにテトラピリジルメタンが配位した物質群で、高い頻度で高スピン/低スピンを熱/光でスイッチするものを見いだした。3. 4f-3d交換相互作用に見られる化学的傾向:錯体[LnCu_2]の系において、Lnが重希土類の場合は4f-3d間に強磁性的カップリングが見られた。しかも、原子番号Zに対してプロットすると、明瞭なZ依存性を見せた。4. 4f-2p交換相互作用:有機ラジカル配位の希土類錯体において、4f-2p交換相互作用にもZ依存性が示された。この相互作用は、希土類磁性材料の中では非常に大きい部類に属する。現在、中性子散乱実験へ研究を展開させつつある。4. 4f-2p交換

相互作用:有機ラジカル配位の希土類錯体において、4f-2p交換相互作用にも原子番号依存性が示された。さらに、構造パラメーターと磁気カップリング定数との間に良好な相関を描くことができた。これらは希土類元素の周期律の理解を前進させるものである。また、幾つかの4f-2p錯体から単分子磁石を開発することができた。24年度が最終年度であるため、記入しない。磁化率の変化を伴う相転移物質の開発を主眼におき、2pスピン系や3dスピン系では順調に合成開発が進められている。さらに発展的課題として、磁気カップリングの元素依存性や構造依存性について重要な知見を得ることができた。磁化率の変化を伴う相転移物質の開発に対して、3d-2pもしくは4f-2pヘテロスピン系の物質開発がやや計画より遅れている。研究課題のメインストリームを補強しつつ、これまでに得られた興味ある派生的研究も同時に進行させる必要がある。
軽度パーキンソン徴候から認知症・パーキンソン病への進行に関する縦断的疫学研究

健常者群に比してMPS群では有意に多くPSに進行し(p<0.001)、MPSは認知症発症の危険因子であることも示された。正常群に比してMPS群では有意に死亡率が高いことが示された。今後、MPSに注目して進行予防などの介入について検討してくことが必要であると考えられた。1)平成23年度に行ったアンケートの解析23年度に行った60歳以上の町民に対するアンケート調査(902人/1109人、回収率:81.3%)についての解析を進めた。うつが24%、アパシーが53%、睡眠障害が27%、日中の眠気が6%、レム期睡眠異常症が6%、むずむず脚症候群が2%であった。運動習慣のある人はない人と比較してうつや意欲低下が著明に少なく、運動習慣がある人はない人と比較して平成20年から平成23年にかけて睡眠障害が改善し、独居の住民はそうでない住民と比較してうつや意欲低下が多い、といった結果が得られた。2)住民検診、神経学的診察住民健診により神経学的診察を行ない、認知症、PD・パーキンソン症候群、MCI、MPSなどを有す住民の把握を行ない、パーキンソン症候群や認知症への進行について調査した。また、パーキンソン症候群、MPS群では死亡率が高いことも明らかにした。健常者群では320例中11例(3.4%)がPSに進行したのに対し、MPS群では103例中20例(19.4%)がPSに進行しており、MPS群はPSに進行する率が有意(p<0.001)に高率であった。MPSからPSへの移行群は、非進行群に比して高齢、睡眠障害、認知症を示すことが特徴であることも明らかになった。また、MPSは認知症発症の危険因子であることも示された。一方、MCI例において、MPSを有す群は有さない群に比して有意に高率に認知症に移行した。さらに、死亡についてのPS群、MPS群、正常群における検討では、PS群では19.4%、MPS群では12.2%、正常群で5.2%とPS群、MPS群で有意に死亡率が高いことが示された。認知症やパーキンソン病(PD)が急増し、その治療法、予防法の開発が求められている。最近、認知症予防の観点から認知症の前駆段階として軽度認知障害(MCI)が注目されていると共に、軽度の運動症状である軽度パーキンソン徴候(mild Parkinsonian signs:MPS)などがPDや認知症の前駆段階である可能性が指摘されている。我々は、島根県海士町において調査し、MPSの頻度を本邦で初めて明らかにした(Uemura Y, et al. J Neurol Sci 2011)。本研究においては、これらのMCIやMPS、うつなどを示す住民がどのような転帰を示すかを確認して認知症やPDへの進行を調査する縦断的疫学研究を行う。本研究の目的は、これら前駆症状と考えられる状態からその後の転帰を明らかにし、認知症・パーキンソン症候群の発症予防、早期発見、進行予防へ向けての基盤研究を行うことにある。平成23年度においては、下記を実施した。1)アンケート調査うつ、自覚的なもの忘れ、やる気、睡眠障害、むずむず脚症候群、レム期睡眠行動異常症などに関するアンケート調査を60歳以上の町民に対して実施し、1109人中902人で回収した(回収率:81.3%)。アンケート結果データのコンピュータ入力をすでに終了した。現在、アンケート結果についてさらに解析中である。2)住民検診、神経学的診察住民健診により神経学的診察を行ない、認知症、PD・パーキンソン症候群、MCI、MPSなどを有す住民の把握を行なった。3年間の研究の2年度目の研究として、予定していた主な研究としては、1)海士町町民を対象とした健康に関する住民アンケートの解析、2)海士町と江府町の住民健診や在宅訪問などにより住民の診察を行い、新たな発症者を把握すると共に、MCI・MPSなどと診断していた住民のその後の変化を確認することであった。下記の研究を実施し、ほぼ計画通りに進展していると考えられる。1)平成23年度に実施したアンケートの解析を進めた。運動習慣とうつ・意欲低下、睡眠障害などとの関連性を確認した。また、独居とうつ・意欲低下などとの関連性についても明らかにした。2)平成24年度には鳥取県江府町においてもアンケート調査を実施した。すでに実施している日本海の離島である島根県海士町の結果と比較検討し、農山村である江府町との差を明らかにして、認知症やパーキンソン症候群、それらの進行に関する課題などを抽出する検討に向けての準備を進めた。