hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
頭頸部癌の化学放射線療法に伴う粘膜疼痛の客観的評価

頭頸部癌は、(化学)放射線療法の対象となる疾患のなかでも高い治療効果が期待されるが、その反面治療に伴う副作用としての口内炎による痛みが治療の継続を困難にならしめる。通常、患者の口内炎による痛みの訴えに従って投薬等の処置を施すことにより治療の継続を維持する努力をするが、患者によっては痛みの程度の訴えがうまく表出できない場合もあるため、適切な対応が遅れることもある。そこで、口内炎による痛みの程度を客観的に判断する手段として心電図(レーダーサーク)を「痛み判定装置」として用い、その心電図波形をウェーブレット解析した結果とVAS(visual analog scale)による患者の主観的な痛みの程度との経時的な相関性が証明できるかを明らかにするのがこの研究の主旨であった。もし、患者の痛みについての主観的評価と心電図(レーダーサーク)を用いた「痛み判定装置」によって得られた心電図波形を解析した結果との経時的追随性が証明されれば、放射線治療に伴う口内炎の痛みを客観的に評価できることとなり、早期の投薬等の副作用対策が可能となり放射線治療完遂率の向上に貢献できると期待された。平成25年度の計画として、現在名古屋大学附属病院放射線科における頭頸部癌の半年間の治療患者数は29人であったので、症例数の目標を30人と設定した。平成25年3月に名古屋大学附属病院耳鼻咽喉科において、本研究への協力依頼を兼ね研究内容につき研究代表者がプレゼンテーションを行った。心電図(レーダーサーク)を用いたウェーブレット解析に必要なソフト(フラクレット)の承認販売が平成25年2月におり、同年2月に納入されたところで、本研究を廃棄することになった。従って、本研究の実施及びその成果発表については実現しないこととなった。
反応拡散系および自由境界問題の解のパターンダイナミクスの解明

反応拡散系などの非線形偏微分方程式系の形状のある解を捉えるために,境界の方程式と場の方程式により構成される「反応界面系」という枠組みを導入した.この方程式系は,特異極限問題から得られる自由境界問題の一種である.その方程式系の多次元進行波解の存在証明や1次元解のダイナミクスを調べることに成功した.また,異方的な外力をもつ平均曲率流問題では,異方性のパラメータが形状にもたらす影響を調べることにも成功した.多次元の形状を数理的に調べる手法として,多層化方程式の概念の導入にも成功した.本研究課題では,自由境界の変形とそれがもたらす役割を解明する数学的な基盤作りを行うため,研究計画に基づき,(1)「界面方程式と場の方程式の結合系から形状に関する情報を得る手法の開発」,(2)「形状のもつ性質とその制御」,(3)「反応拡散系と自由境界問題の関係」の3つのテーマについて研究を行った.まず,(1)について説明する.Chenおよび分担者・高坂との共同研究により,解析しやすい自由境界問題を導出し,2次元進行スポット解の構成に成功した.この方程式系は,移動境界の法線速度が場の変数によって決まる界面方程式と移動領域に依存する場の方程式よりなる結合系となっている.この結合系についての数学的な理論の構築を行ってる.二宮・高坂・物部により一般的な枠組みで結合系の時間局所解の存在を等高面法とCauchyの折れ線近似を用いて試みたが,現在のところ,成功には至っていない.また,研究分担者・三竹は,退化粘性Hamilton-Jacobi方程式に対して,非線形随伴法を利用した漸近解析に取り組んだ.その結果,革新的な方法論の確立に成功し,非線形随伴法を利用することで,エネルギー保存則を導き,時間に対する漸近的単調性を示すことに成功した.(2)については,進行スポット解の安定性を数値計算によって調べた.また,回転スポット解の構成や自発的スパイラル形成のメカニズムについての解析的研究を行った.また,連携研究者・物部との共同研究により,細胞運動のモデルの進行スポット解を構成した.外部刺激の条件を緩和し,凸領域の場合に拡張することにも成功し,論文を投稿中である.(3)としては,反応拡散系の解の構成を行った.研究分担者・谷口は,Allen-Chan-Nagumo方程式の非対称な多次元進行波解の構成に成功した.また,研究分担者・飯田と反応拡散系の特異極限問題についてレビュー論文をまとめた.反応拡散系などの非線形偏微分方程式系の特異極限問題として現れる自由境界問題から,より扱いやすい自由境界問題を導出し,その自由境界問題から形状に関する情報を得る数学的手法の開発および形状のもつ性質を調べることを目的としている.テーマ1:自由境界問題と場の方程式の結合系から形状に関する情報を得る手法の開発;テーマ2:形状のもつ性質とその制御;テーマ3:反応拡散系と自由境界問題の関係の3つのテーマについて研究を行っている.まず,テーマ1に関しては,移動境界の法線速度が場の変数によって決まるHamilton-Jacobi方程式と移動領域に依存する場の方程式よりなる結合系を取り上げ,多次元進行スポット解の構成に成功した.また,連携研究者・物部と運動性細胞の形状に関する問題の凸進行領域の作成にも成功した.分担者・三竹はHamilton-Jacobi方程式の解の大域挙動について調べた.テーマ2に関しては,法線方向によって決まる外力付きの平均曲率流の進行波解とその進行方向の関係を調べることにより,制御方法について考察する研究をはじめた.分担者・高坂は,曲面の発展方程式である表面拡散方程式の解の安定性の条件について調べた.テーマ3に関しては,「自由境界問題と場の方程式の結合系」という枠組みを考え,まず空間1次元の場合の解のダイナミクスを調べている.いくつかの結果を得ることに成功し,現在,論文にまとめているところである.また,粘性解の手法を用いて,解のダイナミクスに関する情報を得るために有用な特異極限問題を考察し,その解の存在を示しているところである.また,分担者・飯田,連携研究者・物部らとある種の反応拡散系の特異極限問題から表れる新しい自由境界問題に関して研究を行い,論文を投稿した.分担者・谷口は,Allen-Cahn方程式の多次元進行波解とその切り口の形状に関する研究を行った.テーマ1に関しては,Hamilton-Jacobi方程式と移動領域に依存する場の方程式よりなる結合系の解の存在について,現在も研究を継続している.1次元空間の場合の研究は進んだが,多次元の場合についての考察が遅れている.多次元進行スポット解の構成や回転スポット解の構成に成功しており,順調に進展している.テーマ2に関しては,概要に記したように新しい手法を開発中であり,現在,論文をまとめるところにまで研究を進めており,概ね順調である.テーマ3に関しては,ある種の反応拡散系の特異極限問題から表れる新しい自由境界問題に関して研究を行い,成果を得ており,概ね順調である.なお,ポスト・ドクターの採用が遅れていたが,2016年度に採用することになった.多次元空間上の非線形偏微分方程式系には空間パターンをもった解は数値的,実験的に多く観察されているにもかかわらず,数学的に解の形状に関する情報を得る研究はこれまで進んでいなかった.反応拡散系(拡散項と反応項のみからなる半線型放物型方程式系)などの非線形偏微分方程式系の特異極限問題として現れる自由境界問題から,より扱いやすい自由境界問題を導出し,その自由境界問題から形状に関する情報を得る数学的手法の開発および形状のもつ性質を調べることが本研究の目的である.以下の3つのテーマについて研究を進めている.

テーマ1:界面方程式と場の方程式の結合系から形状に関する情報を得る手法の開発テーマ2:形状のもつ性質とその制御テーマ3:反応拡散系と自由境界問題の関係テーマ1では,移動境界の法線速度が場の変数によって決まる界面方程式(等高面法を介してHamilton-Jacobi方程式)と移動領域に依存する場の方程式よりなる結合系という概念を導入し,その方程式の進行波解や回転スポット解の構成に成功した.テーマ2については,障害物によるスパイラル波の自発的生成についての研究を行った.また,異方性のある曲率流問題において,進行波解の存在とその凸性を調べた.また,不安定であることも示し,現在,論文にまとめているところである.テーマ3では,界面方程式と場の方程式の結合系の解を近似解として用いることで,反応拡散系など非線形放物型偏微分方程式系の解を構成について着手し始めた.テーマ1については,Hamilton-Jacobi方程式系の連立系について,大域解の存在非線形項についての条件を調べ,ある程度の情報を得ることに成功した.一部遅れている部分もあるが,現在解決の見通しもたったため,予定通り進んでいると判断できる.また,テーマ1での手法は,多次元平均曲率流を扱う新しい手法の開発にも応用できることが分かってきており,当初予定より進んでいる内容もある.さらに,結合系の回転スポット解の構成に成功した.テーマ2に関しては,上述の結果に加えて,数値計算により新しい現象が見つかり,その数学的証明を行う研究を始めており,当初より進んでいると判断できる.テーマ3については,FitzHugh-Nagumo型方程式の進行波解の構成に着手した段階であり,概ね予定通りと言える.テーマ2では,結合系の特殊解の安定性について数値計算を行う.不安定固有関数を数値計算で求めることで,解の形状とパラメータの関係を調べる.また,端点付き曲線運動方程式の解析をもとに,領域の形状と自由境界の運動の関係を調べる.さらに,1次元ダイナミクスの詳細を調べている.これを用いることで,wave trainと呼ばれる周期進行波解を調べていく.これは,スパイラル解を構成する際に役立つと考えられる.反応拡散系(拡散項と反応項のみからなる半線型放物型方程式系)などの非線形偏微分方程式系の特異極限問題として現れる自由境界問題から,より扱いやすい自由境界問題を導出し,その自由境界問題から形状に関する情報を得る数学的手法の開発および形状のもつ性質を調べるため,以下の3つのテーマ(1)界面方程式と場の方程式の結合系から形状に関する情報を得る手法の開発,(2)形状のもつ性質とその制御,(3)反応拡散系と自由境界問題の関係について研究を行った.まず,テーマ1では,解の形状が得られる方程式として,移動境界の法線速度が場の変数によって決まる界面方程式(等高面法を介してHamilton-Jacobi方程式)と移動領域に依存する場の方程式よりなる結合系を提案し,V字進行波解の構成を行った.結合系の局所解の存在定理については,1次元の場合に成功し,その大域的挙動も込めて調べることができた.現在,論文を執筆中である.
収穫後処理における圧力・温度ストレスが青果物の鮮度に及ぼす影響について

現在広く行われている真空予冷では冷却される青果物は短時間に急激な圧力と温度の低下による強いストレスを受ける。本研究の目的は、この圧力および温度ストレスが予冷中、予冷後の青果物の品質にどのような影響を及ぼすか明らかにすることである。AsA含有量はホウレンソウ個体の大きさに左右されるため長さ22-25cm、質量20-25gの株を選んで供試した。同じ株においても葉によりAsA含有量に差があるため、1枚の葉を半分に切り分けそれぞれ異なる条件の実験に供試して比較した。本研究では供試材料としてホウレンソウを用い、ホウレンソウの品質評価の指標としてビタミンC(AsA)を用いた。実験の結果、最終圧力0.6:kPaでは真空予冷前後でAsA含有量の減少が見られたが、0.8kPaでは見られなかったことから、両者の間の圧力にホウレンソウの品質に影響を与えるcritical pointがあることが示唆された。また、減圧速度の速い従来法と指数関数的減圧において予冷前後でAsA含有量の減少が見られた。従来法におけるAsA含有量の減少は、予冷初期の急激な圧力低下によるものと考えられた。さらに、真空予冷における急激な温度低下はAsA含有量の低下を招くことが明らかにされた。一方、圧力はAsA含有量にはほとんど影響を及ぼさないことが分かった。真空予冷したホウレンソウは、真空予冷をしなかったホウレンソウに比べてAsA含有量の減少が大きくなるということはなかったが、累積炭酸ガス放出量が大きくなる傾向が見られ、流通過程における生理的な損耗が大きいことが示唆された現在広く行われている真空予冷では冷却される青果物は短時間に急激な圧力と温度の低下による強いストレスを受ける。真空予冷したホウレンソウは、真空予冷をしなかったホウレンソウに比べてAsA含有量の減少が大きくなるということはなかったが、累積炭酸ガス放出量が大きくなる傾向が見られ、流通過程における生理的な損耗が大きいことが示唆された平成12年度は本研究計画の初年度であり、研究目的に沿った実験装置のセットアップが先ず最初の取り組みであった。青果物の真空予冷(冷却)にあっては約30分間で圧力は大気圧から6Pa程度まで急激に低下し、温度は25°Cから5°Cまで約20°C低下する。この温度および圧力の急激な変化がその後の流通過程下での環境で青果物にどのような影響、特に鮮度にどの様な影響を与えるかを調べるのが本研究の目的であり、この二つの要因、温度と圧力が青果物の品質に与える影響を究明することが究極の目的である。真空冷却過程では温度と圧力のストレスを同時に受けるが、個々の要因を分離してそれぞれの要因による影響を知らなければならない。そのために、真空予冷過程の青果物の温度変化を水槽中の水温度変化にシミュレーションして圧力の影響を分離する装置を組み立て、試験をした結果水温変化が真空予冷過程の圧力の変化に連動して、青果物の温度変化を正確に再現できることを確認した。青果物の品質変化、特に真空予冷が広く行われているホウレンソウの品質評価指標として環境条件の変化に応じて顕著に含有量が変化するビタミンCを用いることとしたが、ホウレンソウの固体毎、また葉ごとに含有量に分布があり、その測定方法および解析方法を検討しているところである。また、ホウレンソウに顕著に多いビタミンAを品質指標として用いることも検討しているところである。実験材料としてのホウレンソウが定常的に入手困難なため実験室で水耕栽培による栽培を考えている。これらのことに対処しつつ、来年度は直ちに本格的に研究本来の目的に向けた実験を開始する予定である。真空予冷では圧力と温度は同時に低下するため、2つのファクタが同時に品質に影響を与えていることになる。それぞれのファクターがどのような影響を与えているのか知るためには、一方のファクターの影響を除く必要がある。温度のみのAsA含有量に与える影響を知るために、真空予冷の最終圧力に対応した飽和蒸気温度にホウレンソウを低温水槽中で冷却し、それを真空チャンバー内に移し予冷操作を行ない圧力の影響を除いた。このようにな処理を行ったホウレンソウと真空予冷を行ったホウレンソウのAsAの含有量を比較して温度の影響を検討した。

また、圧力の影響を知るために、真空予冷中の圧力変化に対応した飽和蒸気温度変化をコンピュータを介して水槽の水温変化として再現し、ホウレンソウをその水槽中で冷却することにより、圧力の影響を受けることなく真空予冷されたホウレンソウと同じ温度変化を作り出して、圧力の影響を除いた。本実験から、真空予冷における急激な温度低下はAsA含有量の低下を招くことが明らかにされた。一方、圧力はAsA含有量にはほとんど影響を及ぼさないことが分かった。真空予冷を行ったホウレンソウが、その後の流通過程で真空予冷による品質への影響を予冷をしていないホウレンソウと比較することにより調べた。真空予冷後の流通過程における集荷場での保冷、市場までのトラック輸送、店頭を想定して、真空予冷したホウレンソウを6時間6°Cに置いた後、5,10,25°Cに4日間保持して、この間の品質(AsA)変化および生理的変化を調べた。生理変化はホウレンソウの累積炭酸ガス放出量を測定して検討した。
大脳皮質視覚野の細胞集団における注意の視覚表現への影響

本研究では神経細胞集団による感覚情報の表現および、その状況依存的な修飾の解明を目的とした。特に、マウスの大脳皮質視覚野を対象として、集団神経活動での自然画像の表現や視覚弁別課題中の視覚応答を調べた。成果として、マウス一次視覚野においては、個々の細胞が表現する情報が多様であることで、少数の細胞により自然画像の表現が可能になっていることを明らかにした。また、予備実験の結果からマウス視覚野の視覚応答は弁別課題中に修飾を受けることが示唆された。本研究は、マウス大脳皮質視覚野の神経活動を計測し、そこからマウスが見ている画像を予測(復元)することにより、脳に視覚情報がどのように表現されているのか、そして「注意」によりその画像表現がどのような影響を受けるのかを調べることを目的とする。当該年度においては、まず、一次視覚野の神経活動から画像を復元する際の計算方法を改良した。従来の方法では刺激画像の各画素を神経細胞の活動の線形和で表現していたが、新規の手法では、刺激画像を大脳皮質一次視覚野の応答特性を示す2次元ガボール関数の足し合わせとして表現し、各ガボール関数は各細胞の活動の線形和で表現した。この方法では、各ガボール関数の表現において少数の神経細胞を使用した方がすべての細胞を使用する場合に比べ画像復元の成績が向上した。一次視覚野の神経細胞に効率良く情報を表現する際にはより少数の細胞を使用すること(スパースな表現)が重要と考えられてきたが、今回の結果は、実際の画像復元に際してもスパースな表現が有用であることを示唆するものである。視覚的注意に関与する高次視覚野探索の予備実験として、高次視覚野の基本的な視覚特性を調べた。特に、脳梁膨大後部皮質の細胞が一次視覚野と同程度の方位選択性を持つことを明らかにした。脳梁膨大後部皮質は動物の移動行動やナビゲーションなどとの関連も示唆されており、この結果は、それらの情報処理に視覚情報がどのように関与するのかを調べるための基礎となる知見となると考えられる。また、神経活動の計測に関しては、カルシウム感受性タンパク質(GCaMP)を用いた継続的な神経活動の計測手法を確立し、画像復元の継時的な安定性を検証中である。さらに視覚的注意課題の実験系の作成に着手し、こちらも現在継続中である。当初の計画では視覚的注意課題の作成や行動課題の条件検討を当該年度内に終わらせる計画であったが、現在も進行中であり、その点においては計画からやや遅れている。ただし、神経活動の計測系に関しては経時的な計測法など条件検討が済んでいるので、行動課題の実験系が確立され次第、データの取得を開始することができると考えられる。データの解析に関しては、ガボール関数とスパース表現を用いる方法により画像復元の成績を向上させることができ、十分な進展があったと言える。特に、この手法ではガボール関数の傾きやサイズなどのパラメータ毎の表現を調べることが可能であり、注意などの影響により、どのパラメータが変化するのかを調べるなど、今後のデータ解析に有用な手法となる。また、脳梁膨大後部皮質の基本的な視覚特性を明らかにし、報告できた点も十分な進展と考えられる。本研究はマウス大脳皮質視覚野の神経活動を計測し、デコーディング手法により神経活動に含まれる情報及び注意などによるその情報変化を推測することを目的とした。当該年度では、マウスを用いた視覚弁別課題の実験系を構築し、訓練などの実験条件の最適化を行った。また、神経活動の解析においては、これまで神経活動からその時にマウスが見ていた画像を予測することを行ってきた。この解析から各細胞が画像のどのような特徴の予測を担うのかがわかる。他方で、同じデータを用いて、各細胞が画像のどのような特徴に応答するのか(受容野)を調べることができる。そこで、細胞の受容野と、その細胞が画像予測に対して担う画像特徴を比較したところ、両者はある程度一致した。また、画像予測においては、予測される画像の特徴と受容野が一致する細胞だけでなく、部分的にしか受容野が一致しない細胞からもある程度の情報を取り出せることが分かった。このことから、ある画像特徴に関する情報は、その特徴に似た受容野を持つ細胞だけでなく、より多くの細胞に表現されていることが示唆された。その他に、マウス一次視覚野における色覚表現の解析を行った。マウスは2色型の色覚を持ち紫外線および緑色を知覚できるが、その受容タンパクの発現は網膜上での分布に偏りがあることが知られていた。紫外及び緑色域波長の視覚刺激に対する応答をマウス一次視覚野全体で観察したところ、この2色の応答の強さに偏りがあり、その偏りは網膜上での偏りと一致するものであった。他方で、局所的な色覚表現としては、隣合う細胞同士は異なる色に応答するような、いわゆるソルトアンドペッパー型の表現を示した。この結果は多くの哺乳動物が2色型色覚を持つことから、2色型色覚動物における皮質での色覚表現を考えるうえで重要な知見であると考えられる。

また、予備実験の結果からマウス視覚野の視覚応答は弁別課題中に修飾を受けることが示唆された。今後は視覚的注意の行動課題の実験系をすみやかに確立する。その後、データの取得、解析を行い、注意により視覚表現がどのように変化するのかを明らかにする。行動課題の確立と平行して、麻酔下や覚醒下等の脳の状態変化の視覚表現への影響を調べる。また、注意に関与するとされる高次視覚野やアセチルコリン投射の影響を検証する。上述の実験で取得されたデータの解析では、ガボール関数とスパース表現による画像復元方法を用いて、ガボール関数のどのようなパラメータが上記の実験的操作により影響を受けるのかを調べる。神経科学行動課題装置作成のための予定費用の一部が節約できたため、次年度への繰り越しを行った。次年度計画にあるデータ取得実験で使用する試薬の購入に充てることにより、データ量を増やし、再現性の高い実験結果の取得を目指す予定である。
精巣組織はどこまで免疫学的に守られているのか？

平成30年度は、昨年度判明した同性間(♂→♂)移植に比べ異性間(♂→♀)移植において急性拒絶反応が生じることをふまえ同性間および異性間骨髄細胞移植による免疫応答を比較した。骨髄移植前日にrecipient C57BL/6♂マウスを麻酔下にて固定し、10 Gyの骨髄破壊的放射線照射を行った。この時、精巣局部のみを鉛板にて遮蔽し、放射線による精巣への影響を軽減させた。放射線照射から24時間後、donor C57BL/6の大腿骨から骨髄を採取し、同性間(♂→♂)および異性間(♀→♂)にて尾静脈から骨髄移植を行い、移植から120日後に評価を行った。結果として両群において精子形成障害が認められた。しかしながら、この結果は骨髄移植をせずに放射線のみを照射した群にも認められたため放射線の影響だと考えられた。また、放射線照射群および同性間移植群では精巣周囲にリンパ球は確認されなかったが、異性間移植群では精巣の白膜に存在する血管周辺にリンパ球が認められ、精巣上体周囲においてもリンパ球の浸潤が認められた。以前の結果により、♂生殖系が♀免疫細胞により異物として認識することが示されていることから、骨髄移植により移入された♀免疫細胞が♂生殖系臓器を異物として拒絶している可能性が示唆された。さらに、放射線照射群を詳細に解析すると、♂生殖細胞を保護している精巣のblood-testis barrierおよび精巣上体のblood-epididymis barrierが放射線照射により破壊され、保護能力が著しく低下していることが判明した。これにより、精巣や精巣上体が有する免疫特権の一部が失われており、♀免疫細胞により強く拒絶反応が生じたと考えられる。これらの結果は、男性において異性由来のdonorリンパ球がGVHDを引き起こし、精巣に何らかの免疫学的障害を引き起こしている可能性を示唆するものである。平成27年度は、精巣のimmune privileged siteの性質を移植によって明らかにするために、簡易的かつ成功率の高い「異所性」精巣移植技術をラットにおいて考案・確立した。これまで報告されてきた「同所性」精巣移植は、その支配血管の細さから移植技術が難しく、手術に時間がかかり、成功率が不安定であった。今回我々が考案した異所性移植と同所性移植を比較し、また異所性(頸部)に移植する際に考えられる問題点について各対照群を用いて比較・検討を行った。異所性精巣移植は、ドナーの精巣を支配血管の起始部である腹大動脈と下大静脈と共に摘出し、大血管の上端を吻合閉鎖し、下端をレシピエントの総頸動脈と外頸静脈に繋ぎ、頸部にて精巣への血流を再開させて行った。異所性精巣移植と同所性精巣移植の手術時間と成功率を比較した結果、異所性移植の手術時間は59.9±7.1minと同所性の約3分の1であった。成功率においては、同所性では71%だったのに対して、異所性では100%であった。異所性へ移植する際、精管閉塞、血流閉塞、温度障害などが懸念されるため、3群(精管を結紮した精管結紮群、支配血管を結紮した虚血群、精巣を腹腔に移動させた停留精巣群)の対照群の精巣と組織学的に比較した。その結果、対照群らで見られるような精子形成障害は異所性移植群の精巣では確認できず、頸部皮下へ移植しても精巣は正常に機能することがわかった。よって、実験移植モデルとして、異所性精巣移植による手術時間短縮と成功率の高さは、実験の効率を向上させると考えられる。またドナー精巣の虚血時間を減らし、レシピエントの侵襲性を減らすことで、実験にかかる余計な要素・影響を省き、より精度の高い実験が可能になると思われる。精管閉塞、血流閉塞、温度障害という考えうる3つの影響を除外したことで、頸部異所性精巣移植の移植モデルとしての有用性が示唆された。精巣の特殊な免疫環境を解明するためのこの研究は、段階を経て順調に進んでいる。精巣がどこまで免疫学的に守られているのか?ということを解明するためには、精巣の「移植」は、非常に重要な要素である。これまでの「同所性」の精巣移植は、術者の技術や手術時間・成功率の不安定さなどの影響が大きく、実験の精度が不安定であった。今回、考案した「異所性」の精巣移植は、それらの要素を払拭できる可能性を示唆した。この方法により、一定の精度をもって実験を進めることを可能にし、また効率性を高め、より多くのデータの積み重ねと検証が可能になると考えられる。この移植法を足がかりにして、さらに免疫学的な解析を進めることで、精巣のimmune privileged siteの性質をより詳細に解明していく。平成28年度は、精巣のimmune privileged sitesの性質を明らかにするために、昨年度我々が考案した異所性精巣移植を用い、同系ラットと異系ラットの精巣をそれぞれ移植し、移植後の精巣における免疫応答の差異を比較した。具体的内容:異所性精巣移植を用いて、LEWラットの精巣をLEWに移植した拒絶を起こさない同系群、移植実験で急性拒絶モデルとしてよく使用されるACIラットからLEWに移植した急性拒絶群、また慢性拒絶モデルによく使用されるF344ラットからLEWに移植した慢性拒絶群、これら3群を移植から3日後に評価を行った。

慢性拒絶群の精細管は保たれており、同系群と有意な差はなかった。急性拒絶群は、多くの精細管に精子形成障害をきたしているのが観察され、定量した結果においても同系群との差は有意であった。また急性拒絶群は、精巣内の毛細血管周辺にリンパ球が見られ、CD4、CD8の免疫組織化学染色の結果では、同系群、慢性拒絶群と比べ有意にそれらの陽性細胞が認めらた。Real-Time RT-PCRでは、炎症性サイトカイン(IFN-γ、IL-10、IL-1β)、細胞死関連(Casapse3、8)の発現が急性拒絶群において有意に高いことを示した。慢性拒絶群は、同系群と有意な差は見られなかった。意義・重要性:移植免疫実験によく用いられる急性拒絶モデルと慢性拒絶モデルを比較に用いたことで、精巣における免疫反応がこれまで報告されている他の臓器(心臓、腎臓)による移植実験の結果と類似していることが分かった。精巣のiummune privilegeの有無およびその程度を明らかにするために、精巣、心臓および腎臓間での拒絶の継時的な比較を観察することが、今後重要と考えられる。今回得られた結果は、異所性精巣移植が精巣の免疫学的実験移植モデルとして有用であることが示唆された。精巣の免疫環境を解明することを目的とした本研究は、段階を経て順調に進んでいる。昨年度、過去の移植法と比較し、手術時間を短縮させ、成功率を安定させた「異所性」精巣移植を確立したことで、今年度の免疫学的な解析を効率よく進めることができた。異所性移植を用いて、同系と異系(急性・慢性拒絶モデル)を比較したことによって、異所性精巣移植が精巣の免疫学的実験移植モデルとしても有用であることが示唆された。これらの結果を踏まえ、異所性精巣移植を免疫学的移植モデルとして使用することで、効率的に移植を行え、安定した結果をさらに得ることができるだろう。今回は移植後3日というポイントでしか見ていなかったが、移植数を重ね、交差適合条件、経時的変化などより多くの条件で観察し、免疫学的な解析を進めることで、精巣のimmune privileged sitesの性質をより詳細に解明していく。平成29年度は、精巣におけるimmune privileged siteの性質を明らかにするために、昨年度我々が免疫学的実験移植モデルとして有用であると報告した異所性精巣移植モデルを用いて、精巣を同系ラットのメスに移植し、オス→オスに移植した場合との免疫応答を比較した。異所性精巣移植を用いてLEWラットの精巣を同系ラットのオスに移植したオス→オス群とLEWラットの精巣を同系ラットのメスに移植したオス→メス群の2群について移植から3日後に評価を行った。両群において移植精巣における精細管や間質の形態は良好に保たれており、精子形成障害は認められなかった。しかしながら、オス→オス群に比べオス→メス群では移植精巣内の毛細血管および精巣の白膜に存在する血管周辺にリンパ球が多く認められ、さらに、精巣と同時に移植した精巣上体では、オス→メス群においてリンパ球の浸潤が認められ、精巣上体炎様の組織像を示していた。精巣上体ではblood-epididymis barrierが精子を自己免疫系により保護しているが、このバリアーは精巣のblood-testis barrierに比べ脆弱であり、この保護能力の違いにより精巣上体において顕著に拒絶反応が出た結果と考えられる。また、CD4、CD8の免疫組織
プレパラートがタイプ標本である場合における劣化標本の危急的救済と分類学的課題解決

本研究はプレパラート標本がタイプ標本となっているササラダニ亜目という分類群について,分類学的措置を考えるモデルとして管理手法の検討も合わせて進めてきた.タイプ標本を整理しデータベース化した,次に,トポタイプなどでこれを補いDNA抽出が将来的に可能な状態での管理体制を確立した.このため,日本全国から土壌試料を再採集した.また,日本記録種を再検討し,日本産ササラダニ約750種について土壌生息性を中心にリビジョンとして出版した.平易な図による検索表を付けて,誰にでも種まで,たどり着ける様にした.トポタイプ以外にも,新種記載を開始した.合わせて,DNA塩基配列データの蓄積を複数の遺伝子座で行った.本研究はプレパラート標本がタイプ標本となっている分類群について,分類学的措置を考えるモデルとして管理手法の検討も合わせて進めている.1.国立科学博物館などに保管されているタイプ標本,および登録されている標本の精査をおこない,まず,所蔵標本のデータベース化をおこない,現存する標本の状態をデータベース化している.また,一部は,リマウントを開始した.また,国立科学博物館所蔵の約1650点の所蔵ササラダニ標本について,シーリングを手作業でおこなっている.特にリマウントについては,粉砕した標本を除き,黒化したガムクローラル標本であれば,この中から当初の標本を救い出すことが可能であることがわかったため,さらに,黒化したガムクローラル標本についてリマウントをおこなう予定である.2.国立科学博物館所蔵の約1650点の所蔵ササラダニ標本についてデータベース入力をほぼ終了した.3.タイプ産地から土壌とリターを採集し,ツルグレン装置にてササラダニを抽出する作業を開始した.ソーティングおよび簡易同定をした後,トポタイプは液信標本としての保管を開始した.4.日本産,ササラダニ約750種について,土壌性を中心にリビジョンを作成した.平易な図による検索表を付けて,誰にでも種までたどり着けるようにした.今年度中には出版できる予定である.5.これらの標本に基づく,新種記載をおこなっている.投稿中本研究はプレパラート標本がタイプ標本となっているササラダニ亜目という分類群について,分類学的措置を考えるモデルとして管理手法の検討も合わせて進めてきた.タイプ標本を整理しデータベース化した,次に,トポタイプなどでこれを補いDNA抽出が将来的に可能な状態での管理体制を確立した.このため,日本全国から土壌試料を再採集した.また,日本記録種を再検討し,日本産ササラダニ約750種について土壌生息性を中心にリビジョンとして出版した.平易な図による検索表を付けて,誰にでも種まで,たどり着ける様にした.トポタイプ以外にも,新種記載を開始した.合わせて,DNA塩基配列データの蓄積を複数の遺伝子座で行った.本研究はプレパラート標本がタイプ標本となっている他の分類群について分類学的措置を考える良いモデルとして,管理手法の検討も合わせて,進めている.1.国立科学博物館などに保管されているタイプ標本,および登録されている標本の精査を行い.まず,所蔵標本のデータベース化を行い,現存する標本の状態を確認している.また,一部は,リマウントを開始した.また,国立科学博物館所蔵の約1650点のタイプ標本を含む,すべての所蔵ダニ標本について,これ以上,劣化しないように,シーリングを手作業で行っている.特に,リマウントについては,粉砕した標本を除き,黒化したガムクロラール標本であれば,このなかから当初の標本を救い出すことが可能であることがわかったため,今後,黒化したガムクロラール標本についてのリマウントを行う予定である.2.タイプ産地から土壌とリターを採集し,ツルグレン装置にてササラダニを抽出する作業を開始した.ソーティングおよび簡易同定をした後,トポタイプは液浸標本として保管する.3.日本産,ササラダニ約750種について,土壌性を中心にリビジョンを作成した,平易な図による検索表をつけて,だれにでも種までたどり着けるようにした.現在印刷中.4.標本の作製手法,現在の分類体系,及び,分類学的な背景をわかりやすく記述し,図表等を合わせて一般書として出版公表した.5.これらの標本に基づく,新種記載を行っている.本研究はプレパラート標本がタイプ標本となっているササラダニ亜目という分類群について,分類学的措置を考えるモデルとして管理手法の検討も合わせて進めてきた.タイプ標本を整理し破損しているものなどを整理し,トポタイプなどでこれを補い,かつDNA抽出が将来的に可能な状態にした.このため,日本全国から土壌試料を再採集した.また,分類学的にも日本記録種を再検討しリビジョンを作成するとともに検索表として出版した.1.国立科学博物館等に保管されているタイプ標本,および登録されている標本の精査を行い,約1650点の所蔵ササラダニ標本についてデータベース入力をほぼ終了した.2.黒化したガムクロラール標本について,粉砕した標本でなければ,リマウントすることで当初の標本を救い出す事が可能である事が分かった.また,該当標本のシーリングを手作業で行った.3.タイプ産地から土壌とリターを採集し,ツルグレン装置にて,ササラダニを抽出する作業をほぼ終えた.ソーティングおよび簡易同定をし,トポタイプをエタノールに液体浸漬の形で保管を始める事が出来た.標本は国外のものも含めて,DNAデータの蓄積を開始する事が出来た.4.日本産,ササラダニ約750種について,土壌性を中心にリビジョンを出版した.平易な図による検索表を付けて,誰にでも種を同定できる様にした.5.トポタイプ以外にも,同時に得られた標本に基づいて,新種記載を開始する事が出来た.

動物系統分類学標本のデータベース化の入力はほぼ終了した.トポタイプも西日本および南西諸島については,かなりの部分で再採集をおこなうことができた.リビジョンの出版に向けて校正に入っている.標本の収集について,全国25箇所の比較的良好な森林からのササラダニ採集を終えた.標本のデータベース化は順調に進んでいる.計画を前倒しして,リビジョンを作成した,また標本の作製マニュアルや分類学的背景をわかりやすくのべた一般書を執筆発行した.標本データベースの整理と,採集標本の整理などをまとめる.リビジョンの出版.トポタイプの収集は,今年度集中して行う.また,標本の収集について,全国25カ所から土壌を収集し,これをトポタイプおよびDNA用標本とする計画を新たに作成し,実施する.当初の予定通り
細菌の外膜小胞を利用した新機軸のニワトリ用ワクチンの開発

ニワトリは、自給率の低迷する我が国において、主要な動物性タンパク源として高い可能性を有する。現在、越境性動物疾病に対する経済的で有効なワクチンの開発は、多くを輸入に依存する我が国において喫緊の課題となっている。本研究計画では、既存のニワトリ用ワクチンの問題点を改良する新機軸の技術基盤を構築するため、細菌外膜小胞(OMV)のワクチン応用の可能性について検証する。ニワトリの液性、細胞性、および粘膜免疫全ての活性の評価に適したサルモネラ属菌をモデル病原体として用い、外側あるいは内側に組換え抗原タンパク質を発現するOMVのニワトリに対する免疫賦活作用および感染防除作用について検証する。
密教思想と他の仏教思想との関係性～ヴィクラマシーラ寺院の学僧の著作群を中心に～

【本研究の目的】後期インド仏教の密教思想が他の仏教思想をどのように受容したのかという問題を、特に10世紀以降のヴィクラマシーラ寺院の学僧の著作群に焦点を絞って考察する。具体的目標は以下の3点である。(1)当時の同寺院に関わるデータベースを作成し、利用体制を構築する。(2)同寺院の代表的学僧の著作における「密教思想における他の仏教思想の位置づけ」について、各人が検討する。(3)同寺院の学僧たちに共通する思想的傾向について、チベット仏教の伝承も用いつつ総合的・多角的に考察する。【今年度の主な作業状況】加納は、後期密教註釈書『パドミニー』第1章における悟りについて顕密両面から検討した。菊谷は、ジュニャーナパーダ流の諸文献を検討した。倉西は、『パドミニー』に引用される密教文献を分析した。種村は、アバヤーカラグプタの著作を中心に、顕密両者の実践を検討した。苫米地は、ITLR (Indo-Tibetan Lexical Resource)との協力体制を構築するとともに、バヴィヤキールティ著『灯作明再註』冒頭部のデータの構造化を進めた。宮崎は、アティシャの密教思想における中観思想の位置づけを検討するために、主に密教部の著作から関連記述を収集した。望月は、アティシャに帰せられる『一念説示』と『根本過犯注』を解読した。久間は、ジュニャーナシュリーミトラに帰せられる密教文献の著者問題を検討した。【学会・研究会など】第17回国際仏教学会(2014年8月19日、ウィーン大学)において、本科研のパネルを組織した。また、国内研究会を3回開催した。第1回研究会(2014年11月22日、身延山大学)では加納が研究発表を行った。第2回研究会(2015年2月17日、大正大学)では研究計画の実施体制を検討した。第3回研究会(同年2月21日、京都大学吉田泉殿)では、データベース入力作業を行った。【本研究の目的】平成26(2014)年度研究実績報告書に記載。【今年度の主な作業状況】加納は、ジュニャーナシュリーミトラ作『有相唯識論証』(『宝性論』引用注解箇所)およびアバヤーカラグプタ作『牟尼意趣荘厳』(二諦に関する部分)の梵文写本を校訂し、1113世紀のヴィクラマシーラ寺院における顕教・密教の知識体系の一端を明らかにした。また、アティシャによりヴィクラマシーラからチベットへもたらされた梵文写本についての英文論考を発表した。倉西は、インド後期密教に影響を与えた『金剛場荘厳タントラ』の経題を考察した。種村は、加納・倉西と共同で後期密教註釈書『パドミニー』の校訂を進めた。苫米地は、バヴィヤキールティ作『灯作明復註』の内容分析およびTEIマークアップ作業を遂行した。また、科研データベースについて、当該年度を通じて入力作業を統括するとともに、ハンブルク大学Dorji Wangchuk教授らと共同作業の調整を行った。宮崎は、密教部所収のアティシャの著作の検討を続ける一方で、別の観点から密教の位置づけの問題に迫るために、アティシャの如来蔵思想の再検討を開始した。望月は、アティシャの著作のうち『自作次第勧誡語句摂集』『上師所作次第』『菩薩行略教教誡』『種姓誓願』を調査し、彼がチベットに伝えた所作次第について考察した。久間は、研究全体を統括するとともに、ジュニャーナシュリーミトラの著作問題を引き続き検討した。【学会・研究会など】国内研究会を2回開催した。第1回研究会(2015年9月21日22日、高野山大学)では、初日に海外研究者を招聘してワークショップ(研究発表と文献講読会)を行い、2日目にデータベース入力作業を行った。第2回研究会(2016年2月18日、大正大学、19日、人文情報学研究所)では、初日にワークショップ(研究発表と文献講読会)、2日目にデータベース入力作業を行った。研究計画の具体的目標のうち、(1)のデータベース作成については、今年度開催した2回の国内研究会において、実際に入力作業を進めるとともに、今後の作業の進め方についても検討を行った。また、具体的目標の(2)についても、国内研究会において開催したワークショップ(研究発表と文献講読会)を通じて、成果報告および意見交換を行うことができた。これらは、具体的目標の(3)につながる成果とみなすことができる。以上の理由から、現時点において研究計画はおおむね順調に進展しているものと考える。【本研究の目的】平成26年度(2014年度)業績報告書に記載。【今年度の主な作業状況】加納は『宝性論』に関する単著を刊行し、如来蔵思想と密教の関係を論じた。菊谷は、後期密教註釈書『アームナーヤマンジャリー』第1章の校訂・訳注研究を進めた。倉西は、加納・種村と共同で後期密教註釈書『パドミニー』第1章の部分訳と第13章の部分校訂テクストを作成した。種村は、加納・倉西と共同で『パドミニー』の成仏理論と生起次第の有効性の議論を検討した。苫米地は、科研基盤(S)

「仏教学新知識基盤の構築」(代表:下田正弘教授)と連携して『アームナーヤマンジャリー』のTEI準拠Text Markupに関する合同研究会を組織した。また、インド古典文献に対するTEIの適用に関する講演会(Patrick Mc Allister博士、オーストリア科学アカデミー)を開催すると同時に、同博士から本科研のTEIの活用について助言を得た。さらにDorji Wangchuk教授(ハンブルク大学)らと共同で、ITLRデータベースのヴィクラマシーラ寺院関連項目の入力・編集を統括した。宮崎は、アティシャの顕教の著作における神通の概念に注目し、その源流と意義を解明すべく大乗の経典・論書を調査した。望月は、アティシャの『般若心経釈』と他の註釈書との影響関係と、彼のアドヴァヤヴァジュラ観を解明した。久間は、研究全体を統括しつつ、海外学術誌への投稿論文6篇の編集を進めた。【学会・研究会など】ワークショップ(2016年9月7日13日、ナポリ、プロチダ)で文献講読会と科研データベースの紹介(資料作成者:苫米地、発表者:倉西)を行った。また、国内研究会(2017年2月16日18日、大正大学・東京大学・人文情報学研究所)を開催した。初日と2日目に文献講読会、3日目にMc Allister博士の講演会と本科研の打ち合わせを行った。研究計画の具体的目標のうち、(1)のデータベース作成については、今年度開催した国内研究会において実際に入力作業を進めるとともに、今後の作業の進め方についても検討を行い、海外研究者を招聘してアドバイスを求めた。さらに、海外ワークショップにおいて科研データベースのプレゼンテーションをすることによって、参加者と意見交換を行った。また、具体的目標の(2)についても、海外ワークショップ(文献講読会)と国内研究会を通じて、成果報告および意見交換を行った。これらの事柄は、具体的目標の(3)の実現につながる成果とみなすことができる。以上の理由から、現時点において研究計画はおおむね順調に進展しているものと考える。【本研究の目的】平成26年度(2014年度)研究実績報告書に記載。【今年度の主な作業状況】加納は種村・倉西と共にラトナラクシタの後期密教註釈書『パドミニー』第1章傍論部の梵文校訂を刊行した。また、アバヤーカラグプタ著『牟尼意趣荘厳』梵本の校訂・訳注を発表した。菊谷はアバヤーカラグプタの後期密教註釈書『アームナーヤマンジャリー』第1章の校訂・訳註を進めるとともに、彼の曼荼羅儀軌書『ヴァジュラーヴァリー』の内容を分析した。倉西は『パドミニー』第9章の梵文校訂・英訳註を刊行した。種村は『パドミニー』における伝統的仏教教理による密教実践の正当化について国際仏教学会で発表した。苫米地は『アームナーヤマンジャリー』のTEIマークアップ作業を継続しつつ、同文献の梵蔵バイリンガル写本に基づく梵文テクストの電子化を行い、その作業状況について発表した。また、同書所引文献の調査結果の一部を刊行した。さらに、科研データベースの作成に関してハンブルク大学と協議を進めた。宮崎は顕教の中でも密教との関連が特に強いと考えられる神通を取り上げ、大乗仏教における神通の意義について国際仏教学会で発表した。望月はディーパンカラシュリージュニャーナの密教文献を調査し、彼が伝えた儀軌の一部を解明した。また、師のラトナーカラシャーンティとの関係も明らかにした。久間は研究全体を統括するとともに、海外学術誌のguest editorとして当該科研関連の英語論文集を編集・刊行した。【学会・研究会など】
骨髄性白血病で欠失する7q責任遺伝子候補の発がんとDNA修復における機能の検討

7番染色体長腕(7q)領域に存在することが確実視されている骨髄異形成症候群(MDS)ならびに骨髄性白血病抑制遺伝子候補を同定するため、われわれは微小染色体欠失を高感度に検出できるマイクロアレイCGH法を独自に開発した。このシステムを用いて、Miki、Kasumi、Titanと命名した新規遺伝子を2005年までに単離した。これら三遺伝子は脊椎動物以外に相同遺伝子がなく、哺乳類になってからも遺伝子構造を大きく変えていた。既知遺伝子との相同性に乏しく、既知モチーフを持たないなど、進化上新しい遺伝子群であった。本科研費の支援を受け当該三候補遺伝子産物の機能解析を行った。その結果、MikiはpolyADP-ribosy1(PAR)化を受け、分裂前期分裂中期の中心体・紡錘糸に局在する。その発現抑制により中心体の成熟障害が生じる結果、紡錘系の形成不全が生じ、染色体遅延、染色体散乱や多核・小核細胞の形成などMDSと酷似した分裂異常と核形態異常を生じた。また、異常分裂によって生じる染色体不安定性も、骨髄性白血病発症への大きなカギとなると考えられた。KasumiとTitanは75%程度の相同性を有し、単一の遺伝子より進化した関連遺伝子である。マウスにはTitan遺伝子のみが存在し、Kasumi遺伝子はないので、Titan遺伝子欠失マウスを作成した。Titan欠失マウスは一見して正常であるが、レトロウイルスの感染により、高頻度に骨髄性白血病を発症した。これらの結果より、われわれが単離した上記三遺伝子候補は、7qに存在することが想定されているMDS/AMLの抑制遺伝子である蓋然性が非常に高いと考えられ、Titan/Kasumi蛋白質の機能解析などの検討を進めている。7番染色体長腕(7q)領域には、古くより放射線による骨髄性白血病(AML)や骨髄異形成症候群(MDS)の発症を抑制する遺伝子の存在が想定されてきた。この遺伝子を同定するため、われわれは微小染色体欠失を高感度に検出できるマイクロアレイCGH法を独自に開発した。このシステムを用いて、Miki、Kasumi、Titanと命名した新規遺伝子を単離した。Mikiは分裂前期中期の中心体・紡錘糸に結合し、その発現抑制は染色体散乱や多核・小核細胞などMDSと酷似した分裂異常と核形態異常を生じた。KasumiとTitanはKu70/Ku80/DNA-PKcs複合体との結合が示され、DNA二重鎖切断時の非相同組換え断端結合(NHEJ)による修復に関与している可能性が示された。MDSは強い異型性を持つ点が通常(de novo)のAMLやCML、MPDなどと決定的に違う点である。異常分裂に伴う多核細胞や核形態異常は、MDSに高頻度に見られるだけでなく、細胞死(アポトーシスやいわゆるmitotic catastrophe)を引き起こして無効造血の原因となると考えられる。また、染色体不均等分配による-5/+8の付加異常や、多倍体化を通じて白血化にも関与すると考えられる。このように分裂期の異常は、異型性、無効造血、白血化というMDSの三主徴に深く関与している可能性が高い。引き続きこの三遺伝子の検討を促進していく予定である。

このシステムを用いて、Miki、Kasumi、Titanと命名した新規遺伝子を2005年までに単離した。これら三遺伝子は脊椎動物以外に相同遺伝子がなく、哺乳類になってからも遺伝子構造を大きく変えていた。既知遺伝子との相同性に乏しく、既知モチーフを持たないなど、進化上新しい遺伝子群であった。本科研費の支援を受け当該三候補遺伝子産物の機能解析を行った。その結果、MikiはpolyADP-ribosyl(PAR)化を受け、分裂前期分裂中期の中心体・紡錘糸に局在する。その発現抑制により中心体の成熟障害が生じる結果、紡錘糸の形成不全が生じ、染色体遅延、染色体散乱や多核・小核細胞の形成などMDSと酷似した分裂異常と核形態異常を生じた。また、異常分裂によって生じる染色体不安定性も、骨髄性白血病発症への大きなカギとなると考えられた。KasumiとTitanは75%程度の相同性を有し、単一の遺伝子より進化した関連遺伝子である。マウスにはTitan遺伝子のみが存在し、Kasumi遺伝子はないので、Titan遺伝子欠失マウスを作成した。Titan欠失マウスは一見して正常であるが、レトロウイルスの感染により、高頻度に骨髄性白血病を発症した。これらの結果より、われわれが単離した上記三遺伝子候補は、7qに存在することが想定されているMDS/AMLの抑制遺伝子である蓋然性が非常に高いと考えられ、Titan/Kasumi蛋白質の機能解析などの検討を進めている。
小胞体ストレス病としての関節リウマチ研究

これまですでに新規E3ユビキチンリガーゼシノビオリンをリウマチ滑膜細胞より単離し、RAの原因遺伝子であることを報告した。本研究ではその基質を探索することを目的とした。シノビオリがE3ユビキチンリガーゼであること応用し、同遺伝子欠損マウス由来のmouse embryonic fibroblasts (MEFs)とその比較対象である同腹の野生型マウス由来のMEFsよりタンパク質を抽出し、二次元電気泳動法により比較プロテオミクス解析を行った。すなわち、シノビオリン欠損細胞内では基質(群)が分解されずに蓄積すると想定した。その結果、仮説のとおり幾つかの分子群がシノビオリン欠損MEFで蓄積されていることが明らかとなった。その一つは、驚くべきことにアンチオンコ遺伝子産物p53であった。この発見はp53が小胞体で制御されていることを世界で初めて証明したことになる。以上の結果から、RAの滑膜細胞anti-apoptotic分子であるシノビオリンがERストレス1とともにp53のシグナルを介してRAを引き起こすという斬新なモデルを提唱することとなった。また、本モデルはRAに留まらず、がん・動脈硬化などの増殖性疾患に一般に展開可能であることは自明である。また、蛋白分解の基盤研究の面でもシノビオリンのユニークな双方向的シグナル調節機構は今後、多大なる貢献を予想させる発見であろう。われわれの研究成果は、ついにRAのみならず、がんなどへの大きな展開を見せることとなった。さらに、同分子を標的とすることにより革新的RA治療が可能となることの理論構築がなされたと自負している。関節リウマチの病因機序の解明および根治的治療法の開発を目的とした、関節リウマチ滑膜細胞に強発現している分子群の系統的な解析を通じて、我々が同定したシノビオリンが、小胞体(ER)ストレス誘導性アポトーシスへの抗アポトーシス作用により、滑膜細胞の過増殖、ひいては関節症の発症・進展を制御していることを証明した(Genes Dev 2003 17:2436-49)。これをもとに、小胞体ストレスにおける過剰な応答が関節症を引き起こすという、疾患モデルを提唱し、(1)ヒトの関節リウマチにも当てはまる疾患モデルであるのか?(2)関節リウマチにおける小胞体ストレス源は何であるのか?(3)本シグナル経路の制御は関節リウマチ制圧に繋がるのか?(4)免疫異常に対するシノビオリンの関与。(5)シノビオリンを標的とした治療戦略。といった点の解明を試みている。これまでの研究実績として、(1)リウマチ滑膜細胞が小胞体ストレス誘導剤によるアポトーシスに極めて耐性であり、しかもその耐性機能の一端をシノビオリンが担っていること、すなわち上記疾患モデルがリウマチ滑膜細胞にも当てはまることが証明された。(2)関節リウマチ組織における小胞体ストレス源の探索を目的として、小胞体ストレス反応配列を含むシノビオリンプロモーターの遺伝子改変マウスの作成が完了した。今後、このマウスおよびこれから単離された細胞を用いて、ストレス因子あるいはストレス誘導病態を解析する。(3)シノビオリンを中心とした網羅的な関連蛋白質解析よって、シノビオリンを巡って、未知のシグナルネットワーク経路のいくつかの候補が同定されている。今後、これらの確証を得るための確認実験を行っていく。このシグナルネットワーク解析によって、今後二年間で(4)免疫機能特におけるシノビオリン機能解析、あるいは(5)シノビオリンを標的とした新たなリウマチ治療標的分子の発見へと展開させていく。われわれは、代表的自己免疫疾患である関節リウマチ(RA)の病因機序の解明、および根治的治療法の開発を目指し、RA滑膜細胞の生物学的特性を明らかにすることを主要テーマとして研究を行っている。これまでに、RA滑膜細胞に強発現している分子群を分子・細胞・個体レベルで系統的に解析し、その中の一つであるシノビオリンが、小胞体(ER)