hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
温度感受性SV40T抗原遺伝子導入ラットを用いた血液網膜関門培養細胞実験系の開発

温度感受性SV40T抗原遺伝子導入ラット(tsA58 TGラット)からin vivoの内側血液網膜関門と同程度の輸送活性を有する内側血液網膜関門培養細胞実験系を開発することを目的とした。tsA58TGラットからin vivoの内側血液網膜関門機能を保持した条件的不死化網膜ペリサイト株(TR-rPCT)およびMuller細胞株(TR-MUL)を樹立することができた。さらに、先に樹立した条件的不死化網膜毛細血管内皮細胞株(TR-iBRB)とTR-rPCT細胞およびTR-MUL細胞とを共培養することで、血液網膜関門の機能発現に重要な影響を与えることを明らかとした。TR-rPCT細胞とTR-iBRB細胞の接触系における共培養で、あるいはTR-rPCT細胞培養液の濃縮液においてTR-iBRB細胞を培養することで、TR-iBRB細胞の増殖抑制効果を見いだした。網膜ペリサイトから分泌されている液性因子がPKC介在型p44/42MAPKシグナリングを抑制することによって網膜毛細血管新生を制御しているメカニズムが示唆された。さらに、内側血液網膜関門においてsystem xc^-が機能し、抗酸化物質の前駆アミノ酸であるL-cystineの網膜内輸送の生理的役割を明らかとした。TR-iBRB細胞およびTR-MUL細胞においてsystem xc^-を構成するxCTおよび4F2hcの発現が示され、xCT遺伝子およびタンパクはdiethyl maleateを用いた酸化的ストレス条件下において誘導されることが示された。網膜内における抗酸化物質としてはvitamin Cが重要な働きをしているが、TR-iBRB細胞およびTR-MUL細胞においてGLUT1が発現機能し、vitamin Cの酸化型であるdehydroascorbic acidを輸送していることを明らかとした。さらに、TR-iBRB細胞を用いた解析から内側血液網膜関門には中性アミノ酸を輸送するLAT1が発現、機能していることを明らかとした。以上のことから、tsA58 TGラットから内側血液網膜関門の培養細胞実験系を確立することができ、これらの細胞培養実験索を用いて内側血液網膜関門における輸送機構を明らかにすることができた。温度感受性SV40T抗原遺伝子導入トランスジェニックラットから条件的不死化網膜毛細血管ペリサイト株(TR-rPCT)を樹立することを目的とした。tsA58TG rat 3匹から候補株TR-rPCTを10株単離した。これらクローンは節状の多重層形態を示したこと、および節状部位がvon Kossa染色によって陽性であったことから、ペリサイトの特性を示した。さらにRT-PCR法によって、intercellular adhesion molecule-1が検出されたことから平滑筋細胞へ分化していないこと、angiopoietin-1およびplatelet derived growth factor receptor βが検出されたことから脈管形成時に必須のin vivoマーカーを保持していることが示唆された。In vivoの網膜毛細血管ペリサイトはα-smooth muscle actin(α-SMA)を発現していないが、in vitroではtransforming growthfactor β1(TGF β1)によってα-SMAが発現誘導されること、basicfibroblast growthfactor(bFGF)によって発現抑制されることが報告されている。Western blot法によってα-SMAの発現を解析したところ、TR-rPCT1について未処理条件ではα-SMAが検出されなかったが、TGF β1処理条件ではα-SMAが検出され、さらにbFGF処理条件ではα-SMAが検出されなかった。

従って、TR-rPCT1は網膜毛細血管ペリサイトのin vivoおよびin vitroの特性を保持した細胞株であることが示唆された。温度感受性SV40 T抗原遺伝子導入トランスジェニックラット(tsA58 TG rat)から条件的不死化網膜Muller細胞株(TR-MUL)を樹立することを目的とした。tsA58TG rat 2匹から候補株TR-MULを5株単離した(TR-MUL15)。これらクローンは初代培養したラットMuller細胞と同じ形態である、棒状の形状を示した。TR-MUL細胞はSV40 T抗原が発現し、33度ではdoubling-time30時間で増殖した。37度ではdoubling-timeが46時間に増加し、39度では細胞は増殖せずに細胞数が減少した。TR-MUL細胞は、SV40 T抗原による温度依存的な増殖性が示され、条件的不死化細胞株であることが示唆された。酸性アミノ酸輸送系でin vivo Muller細胞に発現していることが報告されているGLASTがmRNAレベルで、L-glutamic acid(L-Glu)をL-glutamineに変換する酵素、glutamine synthetaseの発現がmRNAおよびタンパクレベルで示された。さらに、グリア細胞のマーカーで酸性タンパクであるS-100の発現がmRNAレベルで示された。一方、同じ酸性アミノ酸輸送担体でもin vivo Muller細胞に発現していないと報告されているGLT-1の発現はRT-PCRで示されなかった。このことから、樹立したTR-MULは少なくとも一部はin vivoにおけるMuller細胞の性質を保持していることが示唆された。さらに、酸性アミノ酸L-GluとL-cystineの交換輸送系であるsystem xc^-の発現をRT-PCRで解析したところ、system xc^-を構成するmRNAであるxCTと4F2hcの発現が示された。このxCT遺伝子はdiethyl maleateを用いた酸化的ストレス条件下で12時間培養することで6倍誘導されることが示された。以上のことから、tsA58TG ratから少なくと一部はin vivoの性質を保持したTR-MUL細胞株が樹立できた。さらに、TR-MUL細胞はsystem xc^-を発現し、diethyl maleate処理による酸化的ストレス条件下でsystem xc^-遺伝子が誘導されることが明らかとなった。内側血液網膜関門におけるアミノ酸輸送機能を解明するため、温度感受性SV40T抗原遺伝子導入
ニアフィールド光による波長限界を越える超微細パターンの一括転写

1.近接場光を利用した微細パターンの転写本実験では、金属の微少開口あるいは微少スリットを形成したマスクを、レジストを塗布した基板に密着させ、紫外光を基板に垂直に入射する。このようにして微少開口からしみだした光によりフォトレジストを露光する。光は集光させても必ず波長で決まる広がりを持ち、この大きさはほぼ波長程度である。近接場は、この波長の壁を越えて局在した場であり、近接場を用いればこの波長の壁を越えてパターンが転写できる。レジストを塗布したシリコン基板にマスクを密着させパターンを転写する実験を行った。近接場光は開口近傍に局在するため、パターンを転写するためにはマスクと基板を十分密着させる必要がある。このため図3に示した装置を用いてマスクと基板の隙間を真空に引いて密着させ、高圧水銀ランプ(主波長436nm)の光を上部から照射した。レジストは化学増幅ポジ型を用いた。この方法でラインのピッチ300nm、線幅170nm以下のパターンが転写できることが確認できた。一方、マスクと基板を十分に密着させるため、転写する基板に薄いフレキシブルなメンブレンを用いる方法も有効であった。2.近接場転写のためのマスク作製微細な金属開口を形成するため、原子間力顕微鏡(AFM)を用いて加工を試み微細な金属開口を形成することに手法を開発した。3.偏向光を用いた近接場パターン転写金属スリット(回折格子パターン)を用いてパターンを転写した時、回折による影響をできるだけ減らすこと、及び近接場をできるだけ局在させことで微細なパターンの転写が可能になると考えられる。スリットに対して垂直方向および平行方向の偏向光を同じ条件で照射して近接場による転写を試み、スリット方向に偏向した光を用いてパターンを転写すればより微細なパターン転写が可能となることを見いだした。
レジリエンスを高めるシームレスケアを実践する精神科看護師教育プログラムの開発

本研究は入院施設において、逆境に対する良好な適応を意味するレジリエンスの概念を基盤とした患者への退院支援を提供するために、精神科病院に勤務する看護師への教育プログラムを開発することである。まずは、文献検討および精神科病院に勤務する看護師への聞き取りから、患者がシームレスに病院から在宅への移行をする上で不足していることを明らかにする。次にレジリエンスの概念分析をし、それを基盤とした教育プログラムを作成する。教育プログラムを受けた精神科病院看護師対象に、プログラムの評価を行う。
血管内皮障害を伴う敗血症の新しい診断法の確立

敗血症ショックにおいて、急性期治療における循環管理は患者の予後に大きく関わる。しかし、そのベースにある血管内皮障害の与える影響は全く不明である.本研究の目的は、基礎疾患として存在する血管内皮障害が敗血症ショック患者の病態に与える影響とそのメカニズムを解明して、新しいバイオマーカーの開発・検討・応用、基礎疾患も考慮に入れたハイおよびローリスク群などの層別化、新しい治療ターゲットの確立とその治療薬の開発・検討を行う。そのことによる本疾患者の短期・長期予後予測、短期生命予後およびQOLの改善を目的とする。敗血症ショック(感染性ショック)の急性期の予後は非常に悪く、死亡率は世界的には未だに4060%と非常に高い。敗血症ショックの急性期治療は循環管理が患者の予後に大きく関わる。しかしながら、急性期敗血症ショックにおける循環管理に関して、患者のベースにある血管内皮障害の与える影響は全く不明であり、無視した治療を行わざるを得ないのが現状である。その敗血症患者のベースに持つ血管内皮機能の評価とともに予後予測、メカニズムの解明および新治療法の検討を目的に3年で以下の3つのプロジェクトを計画した。プロジェクト(1)血管内皮障害をもっ敗血症ショック併発患者の実態調査と予後調査プロジェクト(2)基礎的病態研究:リポポリサッカライド投与モデル動物による分子病態・病理研究プロジェクト(3)血管内皮障害による敗血症ショック患者のリスク層別化の臨床研究:新たなバイオマーカー・検査法の検討・開発・応用、基礎疾患からの予測その初年度(H22年度)において、我々は敗血症モデルラットを用いた基礎研究(プロジェクト(2))を中心に行い、筑波大学病院ICUにおける臨床研究(プロジェクト(1)、(3))のため、本院倫理審査委員会の評価を受ける準備を行った。現在の成果としては、プロジヱクト(2)について2本の学会発表を含め、結果報告とともに今後の展開のための情報収集を行った。さらに、超短時間型β1遮断薬であるランジオロールの敗血症急性期治療での効果を示した。プロジェクト(1)、(3)については、倫理審査委員会通過後(H23年5月)に開始する予定である。計画の進行具合としては、プロジェクト(1)については、倫理審査委員会の通過の遅れから開始が遅れているものの、プロジェクト(2)については、予想以上の十分な成果が得られていると考えられる。前年度に引き続き、以下の3つのプロジェクトを実行した。プロジェクト(1)血管内皮障害をもつ敗血症ショック併発患者の実態調査と予後調査プロジェクト(2)基礎的病態研究:リポポリサッカライド投与モデル動物による分子病態・病理研究プロジェクト(3)血管内皮障害による敗血症ショック患者のリスク層別化の臨床研究:新たなバイオマーカー・検査法の検討・開発・応用、基礎疾患からの予測その2年度目(H23年度)において、我々は敗血症モデルラットを用いた基礎研究(プロジェクト(2))を中心に行い、筑波大学病院ICUにおける臨床研究(プロジェクト(1)、(3))のため、本院倫理審査委員会の評価を受ける準備を継続した。成果としては、プロジェクト(2)についてこれまで3本の学会発表を含め、結果報告とともに今後の展開のための情報収集を行った。報告内容としては、超短時間型β1遮断薬であるランジオロールの敗血症急性期治療での効果を示したことが特筆すべきであり、エンドトキセミアモデルラットにおいて、ランジオロールは中枢性には亢進した心機能を抑えるが、末梢性(肺、腎)ではIL-10、およびエンドセリンを介した抗炎症作用、血流調整作用を示した。特に、ランジオロールの直接の抗炎症作用については、もっとも注目すべきデータである。プロジェクト(1)、(3)については、本院倫理審査委員会通過したものの(H23年7月)、人事異動などによるスタッフ人員不足、また、適応症例不足などもあり、今後も少しずつ症例を集めていく予定である。プロジェクト(2)については、予想以上の十分な成果が得られていると考えられ、論文としで報告する予定である。プロジェクト1血管内皮障害をもつ敗血症ショック併発患者の実態調査と予後調査プロジェクト2基礎的病態研究:リポポリサッカライド投与モデル動物による分子病態・病理研究プロジェクト3血管内皮障害による敗血症ショック患者のリスク層別化の臨床研究:新たなバイオマーカー・検査法の検討・開発・応用、基礎疾患からの予測その3年度目(H24年度)において、我々は敗血症モデルラットを用いた基礎研究(プロジェクト2)を中心に行い、筑波大学病院ICUにおける臨床研究(プロジェクト1、3)のため、本院倫理審査委員会の評価を受ける準備を継続した。成果としては、プロジェクト2についてこれまで4本の学会発表を含め、結果報告とともに今後の展開のための情報収集を行った。

報告内容としては、超短時間型β1遮断薬であるランジオロールの敗血症急性期治療での効果を示したことが特筆すべきであり、エンドトキセミアモデルラットにおいて、ランジオロールはHIF-1、エンドセリン-1を介した経路により、中枢性には亢進した心機能を抑えるが、末梢性(肺、腎)ではIL-10、およびエンドセリンを介した抗炎症作用、血流調整作用を示した。特に、ランジオロールの直接のHIF-1を介した作用や抗炎症作用については、もっとも注目すべきデータである。今後、詳細なメカニズムの検討が重要となってくる。プロジェクト1、3については、本院倫理審査委員会通過したものの(H23年7月)、人事異動などによるスタッフ人員不足、また、適応症例不足などもあり、今後も少しずつ症例を集めていく予定である。プロジェクト2については、予想以上の十分な成果が得られていると考えられ、論文として報告する予定である。プロジェクト(1)(臨床調査)に関しては、倫理審査委員会の審査や人事異動などによる人員不足もあり、やや遅れ気味ではあるが、プロジェクト(2)(基礎研究)に関しては、予想以上の成果を上げている。特に、ランジオロールの直接の抗炎症効果の可能性が示唆されたたことは、今後の研究の発展につながると考えられる。24年度が最終年度であるため、記入しない。プロジェクト(1)(臨床調査)について今後も臨床調査を進めていく。本年度は人員も整い、目標の100症例を50症例として、調査の完了を目指す。その後、プロジェクト(3)につなげる。プロジェクト(2)(基礎研究)に関しては、予想以上の進展を示しており、ランジオロールの直接の抗炎症効果のメカニズムの解明をin vitroの実験とともに進めると共に、各臓器(心、肺、肝、腎、脳)の効果の違いを詳細に検討する。その結果を論文としてまとめ、臨床試験を行うための根拠とする。さらに、新たな研究課題の作成を行い、今後も本研究の発展につなげる。
網膜中心静脈閉塞症における広角眼底撮影を用いた網膜虚血状態の定量的評価法の開発

模擬眼を用いた実験から、オプトス200Txで撮影された画像の周辺部では2倍以上に拡大されていることが分かった。面積補正ソフトを用いても、方向は正確に補正されているが、面積は十分には補正されていないことが明らかとなった。網膜中心静脈閉塞症に伴う黄斑浮腫に対する抗VEGF薬による治療を一年間続けることにより、中心窩網膜は有意に減少し、視力は有意に改善することが分かった。1+PRNと3+PRN regimenとで視力改善効果には差は見られなかった。治療前視力が不良(0.5以下)の症例では視力改善効果が1年間維持できたが、良好な症例(0.6以上)の症例では視力は維持にとどまった。1模擬眼を使ってオプトス200Txで撮影された画像から面積を計算するプログラムの作成・・・目盛りをつけた模擬眼の角度を10度づつ回転させながらオプトス200Txで撮影を行った。撮影された画像を画像ソフトに取り込み、模擬眼上の点と撮影された画像上の点を結びつけ、画像上の点から模擬眼での対応点への関数を作成中である。目盛りの代わりに一乳頭経大のシールを貼り付けた模擬眼を使って、同様に回転させながらオプトス200Txで撮影した。周辺部では2倍以上に画像が拡大されていることが明らかになった。2網膜中心静脈閉塞症患者の網膜酸素消費量の測定・・・トプコン眼底カメラに取り付けたOxymap T1 (Oxymap社製)を用いてCRVO患者の網膜動静脈の酸素飽和度を測定した。また、動静脈の酸素飽和度の差から網膜酸素消費量を算出を行った。3オプトス200Txの改良ソフトを用いての面積の補正・・・オプトス200Txの改良版面積補正ソフトを用いて、模擬眼での画像の補正を行った。補正ソフトでは方向は正確に補正されているが、面積は十分には補正されていないことが明らかとなった。4抗VEGF薬によるCRVOに伴う黄斑浮腫の治療の継続・・・網膜中心静脈閉塞症に伴う黄斑浮腫に対する抗VEGF薬による治療を一年間続け、視力、眼圧、中心窩網膜、網膜酸素飽和度のデータ取得を続けている。模擬眼に対するオプトス200Txを用いての撮影は施行した。眼底撮影像上の点と模擬眼上の点との対応を関数化に手間取っている。今後は、シールを貼り付けた模擬眼を使って各地点での拡大率を計測するが方針で作成を試みる。1模擬眼を使って作成したプログラムの正当性の評価:模擬眼内面に面積のわかった円形のシールを張り付けた後、模擬眼の角度を10度づつ回転させながらオプトス200Txで撮影した。撮影された画像を画像ソフトに取り込み、模擬眼上の点と撮影された画像上の点を結びつけ、画像上の点から模擬眼での対応点への対応を作成した。2模擬眼を使って作成したプログラムの正当性の評価2:作成された角度を保存するプログラムによって撮影された画像の補正を行った。角度は補正され、横方向の拡大は補正された。拡大率は低下したものの周辺部の拡大は依然残存していることが明らかになった。3眼底カメラとオプトス200Txを用いたフルオレセイン蛍光眼底造影の比較:CRVO患者に対してオプトス200Txを用いてフルオレセイン蛍光眼底撮影し、撮影された画像上ででの網膜無灌流領域の面積の測定を行った。4網膜酸素消費量の測定:トプコン眼底カメラに取り付けたOxymap T1 (Oxymap社製)を用いて視神経乳頭近傍での網膜主幹動静脈の酸素飽和度を測定を行った。また、測定された動静脈の酸素飽和度の差から網膜酸素消費量を算出を行った。健常人にも同様の計測を行い、ECRVO患者との比較を行った。5抗VEGF薬によるCRVOに伴う黄斑浮腫の治療の継続:CRVOに伴う黄斑浮腫に対する抗VEGF薬による治療(ルセンティス、アイリーア)を続け、視力、眼圧、中心窩網膜、網膜酸素飽和度のデータ取得した。とオプトス200Txを用いて計測された網膜無灌流領域の面積との関連を検討する。模擬眼内面に面積のわかった多角形のシールを張り付けた後、模擬眼の角度を10度づつ回転させながらオプトス200Txで撮影した。撮影された画像を画像ソフトに取り込み、模擬眼上の点と撮影された画像上の点を結びつけ、画像上の点から模擬眼での対応点への対応図を作成したが、オートプログラムの作成に手間取っている。2オプトス200Txの面積補正プログラムの正当性の評価:オプトス200Txに搭載された面積補正ソフトの正当性を健常眼を用いて評価した。3BRVO眼における黄斑部、周辺部網膜無灌流領域面積の変化の評価:BRVOに伴う黄斑浮腫に対する抗VEGF薬による治療(ルセンティス、アイリーア)を続け、オプトス200Txを用いて測定した網膜無灌流領域の面積と原因動静脈交叉部のパターンとの関係を評価した。4抗VEGF薬によるCRVOに伴う黄斑浮腫の治療の継続:

CRVOに伴う黄斑浮腫に対する抗VEGF薬による治療(ルセンティス、アイリーア)を続け、視力、眼圧、中心窩網膜などのデータを取得した。とオプトス200Txを用いて計測された網膜無灌流領域の面積との関連を検討する。5BRVO眼における網膜酸素飽和度の測定:種々の病期、循環状態(虚血型、非虚血型)のトプコン眼底カメラに取り付けたOxymap T1 (Oxymap社製)を用いて視神経乳頭近傍での網膜主幹動静脈の酸素飽和度の測定を行った。虚血型BRVOでは静脈酸素飽和度が低下しており、動静脈飽和度の差が拡大していることが明らかになった。模擬眼を用いた実験から、オプトス200Txで撮影された画像の周辺部では2倍以上に拡大されていることが分かった。面積補正ソフトを用いても、方向は正確に補正されているが、面積は十分には補正されていないことが明らかとなった。網膜中心静脈閉塞症に伴う黄斑浮腫に対する抗VEGF薬による治療を一年間続けることにより、中心窩網膜は有意に減少し、視力は有意に改善することが分かった。1+PRNと3+PRN regimenとで視力改善効果には差は見られなかった。治療前視力が不良(0.5以下)の症例では視力改善効果が1年間維持できたが、良好な症例(0.6以上)の症例では視力は維持にとどまった。実際の網膜中心静脈閉塞症患者でオプトス200Txを用いてフルオレセイン蛍光眼底造影を行う。オプトス200Txのフルオレセイン蛍光眼底造影画像はコントラストが高いため、画像を2階調化することにより、無灌流領域を自動で検出し、面積を算出することができるようにプログラム作成できるように進めていく。1模擬眼を使って作成したプログラム:オプトス200Txで撮影された画像から眼底上での面積を計算するためのプログラムを作成する。2フルオレセイン蛍光眼底造影画像上で無灌流領域を自動で検出:CRVO患者でオプトス200Txを用いてフルオレセイン蛍光眼底造影を行い、無灌流領域の面積を自動で算出することができるようにプログラムを改良する。3眼底カメラとオプトス200Txを用いたフルオレセイン蛍光眼底造影の比較:CRVO患者に対して眼底カメラとオプトス200Txを用いてフルオレセイン蛍光眼底撮影し、それぞれの画像での網膜無灌流領域の面積を測定する。両者を比較検討し、オリジナルソフトウエアを用いた広角眼底撮影の有用性を明らかにする。4CRVO患者の前房水中のVEGF濃度の測定:抗VEGF薬硝子体内注入の際に採取した前房水中のVEGF濃度をELISAで測定する。5網膜無灌流領域面積、網膜酸素消費量、前房水中のVEGF濃度、臨床データとの関連の評価:上記の網膜無灌流領域面積、網膜酸素消費量、前房水中のVEGF濃度、臨床データ(年齢、視力、網膜厚、虹彩・隅角新生血管など)との関連を多面的に解析する。眼科
萬葉集における訓字の訓詁学的研究

萬葉集に使用される訓読みの漢字、訓字について、それぞれの漢字を当てることの理由を、中国でのその漢字の字義説明、訓詁に従って解明した。それによって、八世紀の日本において使用された漢字の訓字が、後の時代から想像されるより遥かに正確な知識に基づいていることが明らかとなった。代表者がこれまでに発表した萬葉集の訓字に関する研究を整理し、どれだけが既に終わっているかをまず確認した。それらの中には、古辞書をテーマとしているために、萬葉集に関して資料を再整理する必要があり、まずそれを行った。萬葉集に関しても既に論文として発表しているものが多くあるが、それらを萬葉集のテキストへ一元化する作業は、行っていなかったので、それに着手し、その半ばを終えた。そのなかで、諸本に残る訓についての調査に十分でない例が、特に論文の古いものの中に見られた。それは、主として、萬葉集の古写本に関する資料を校本萬葉集に依存するという旧来の方法であったことに起因する。それを画像を資料とするものに作り替える必要があるが、そのためには古写本の画像資料を作成しなければならず、それにかなりの時間を要したが、主な次点本についは果たすことが出来た。更に、平安時代の古本の訓み方についての注意が十分でなかったことを反省し、それらが今後のデータに加えられるように、分析方法を増補した。その研究には、予想以上の時間を要し、そのため、全体の具体的なデータソフトの設計が遅れ、それにかかる具体的に謝金を使っての作業が次年度送りとなったが、上記の課題についての確実な見通しが得られた。それがなによりの成果である。次に、そうした古本に存する文字を入力すべく、ワープロソフトを組み替えて、ほぼすべての文字が入力できるようになった。これで、次年度からの具体的な作業の綿密な計画を立てることが出来る。前年度に続き、代表者がこれまでに発表した萬葉集の訓字に関する研究を整理し、どれだけが既に終わっているかをまず確認した。その結果、これまでのものが、萬葉集の歌本文に限定されていて、題詞、左注部分について、いくつかの問題が残っていることに気づき、それらをデータに加えるようにした。また、訓詁ということに付随して、中国詩文の用語を萬葉集が受容して歌作する場合、必ずしも忠実であるとは限らない、応用であったり、あるいはいっそ誤用であったりする局面のあることが見出され、研究内容を、それらを含む、広い訓字の用法という視野におくこととした。前年度に果たすべきであった作業、古辞書をテーマとしている資料を、萬葉集に関して再整理する作業は、思ったより進捗せず、今年度に継続することとなった。前年度は、萬葉集に関しても既に論文として発表しているものが多くあるが、それらを萬葉集のテキストへ一元化する作業は、行っていなかったので、それに着手し、その半ばを終えている。しかし、古写本のデータを画像として取り込むことは、資料が増えるにつれ容量が大規模になり、処理に手間を要するようになり、苦心した。前年度の実績を得ても、萬葉集の古写本に関する資料を校本萬葉集に依存するという旧来の方法によったことに起因する不十分さは、なお残存しており、そして、今年度は新たに、萬葉集の訓では新点と称される、鎌倉時代の訓について、三度に亙るそれが必ずしも一様でなく、それはそれで独自の内部区分をする必要が生じ、これまでのデータを見直す作業を行った。そのため、項目数としては大きな進展は得られなかった。しかし、具体的に謝金を使っての作業に一定の目処がついたことは収穫であった。前年度に新たな課題として取り上げることになった、訓字の広い用法ということを、今年度はさらに進めた。例えば、「潮」字は、萬葉集でミナトと訓むことになる。これについては、同じくミナトと訓む「湖」字との通用ということが、山田孝雄『萬葉集講義』に見え、諸注はそれに従ってきた。しかし、山田の拠った中国の文献には、そうした事実はなく、文献自体の読みも誤っており、訂正が必要となる。これは、訓詰の常道に還って、『説文解字』の、「水朝宗干海也」(川が海に向かい集まる)を適用すべきで、河口というその義が、即ち日本語のミナトの語源たる「水門」と照応している。それによってミナトに宛てたものである。また「湖」字は、琵琶湖に限って、「潮」字の応用として用いられている。こうしたことは、萬葉集の訓字使用に多く見られる。それらを子細に検討し、幾つか従来の訓詁を改めることができた。前年度に指摘した、萬葉集の古写本に関する資料を校本萬葉集に依存するという旧来の方法によったことに起因する不十分さは、なお十分には克服しえなかった。また、新点と称される、鎌倉時代の訓について、三度に亙るそれが一様でないことに付随するこれまでのデータを見直す作業は、継続したものの、完遂できなかった。が、データの精度は高くなった。

また、最終年度である今年は、萬葉集以外の古代文献から得られた訓詁を、萬葉集の訓みと解釈に応用することに成果を見た。例えば、形容詞ヤサシの平安時代に起こった語義変化を萬葉集に漫然と湖らせていたことは、訓詁の不徹底と資料の十分な批判を欠くことの結果であったが、改めることができた。そうした検討の中で、風土記など上代の他の文献との比較に新しい視野を得たことは大きな収穫であった。
結核菌による宿主免疫回避機構の解析

本研究より,p57/coronin-1のThr-412はPKCαによってリン酸化されていることが明らかになった。また,結核菌の細胞内寄生性因子であるLipoamide dehydrogenase C(LpdC)のp57/coronin-1への結合は,Thr-412をアスパラギン酸に置換したリン酸化模倣体(T412D)では著しく減弱した.これらの結果より,結核菌の産生するLpdCはp57/coronin-1に結合することでPKCαによるThr-412のリン酸化を抑制し,ファゴソーム成熟を抑制している可能性が考えられた.本研究より,p57/coronin-1のThr-412はPKCαによってリン酸化されていることが明らかになった。また,結核菌の細胞内寄生性因子であるLipoamide dehydrogenase C(LpdC)のp57/coronin-1への結合は,Thr-412をアスパラギン酸に置換したリン酸化模倣体(T412D)では著しく減弱した.これらの結果より,結核菌の産生するLpdCはp57/coronin-1に結合することでPKCαによるThr-412のリン酸化を抑制し,ファゴソーム成熟を抑制している可能性が考えられた.本研究は、アクチン結合タンパク質p57/coronin-1を介した白血球の貪食機構の解明および細胞内寄生細菌(結核菌)の細胞内寄生機構の解明を目的としている。白血球の貪食の際、p57/coronin-1は一過性にファゴソームに局在し、その後リン酸化されファゴソームから解離することが示されている。また、結核菌を取り込んだファゴソームからは本分子の解離が認められないことより、本分子のリン酸化に伴うファゴソームからの解離が貪食機構に重要であると考えられている。これまでに申請者は、p57/coronin-1がプロテインキナーゼC(PKC)によってリン酸化されることを報告しているが、PKCには少なくとも11種類のアイソフォームが存在すること、またそれらは厳密な時空間的制御を受けていることが知られている。p57/coronin-1の制御機構を明らかにするため、本分子のリン酸化に関連するPKCアイソフォームの特定を試みた。複数のPKCアイソフォーム選択的阻害薬を用いて本分子のリン酸化の抑制について解析したところ、PKCα/β選択的阻害薬処理により抑制されたため、PKCαまたは/およびPKCβが、本分子のリン酸化に関連していることが示された。また、PKCα/β選択的阻害薬処理により、p57/coronin-1のファゴソームからの解離も抑制された。次に、RNA干渉法を用いてPKCαまたはPKCβの発現を抑制したところ、PKCαの発現を抑制した場合においては、本分子のリン酸化が抑制された。さらに、精製した本分子および組換え型PKCαまたはPKCβを用いたin vitroキナーゼアッセイを行ったところ、PKCαによって本分子のリン酸化が認められた。以上のことより、本分子のリン酸化にはPKCαが関与しており、このリン酸化が本分子のファゴソームからの解離に関与していると考えられた。白血球に特異的に発現するp57/coronin-1は、免疫細胞の機能制御に関連すると考えられている。私たちの研究グループは、白血球の貪食過程において、p57/coronin-1が一過性にファゴソームに局在すること、リン酸化されることによりファゴソームから解離すること、412番目のトレオニン残基(Thr-412)のリン酸化が起こることなどを明らかにしている。また、細胞内寄生細菌である結核菌を取り込んだファゴソームでは、本分子の解離が認められないことから、結核菌は本分子のリン酸化過程(ファゴソームからの解離過程)を調節することにより、細胞内寄生性を獲得していると考えられている。本研究は、p57/coronin-1を介した白血球の貪食機構の解明および細胞内寄生細菌(結核菌)の細胞内寄生機構の解明を目的としている。H25年度は、p57/coronin-1のリン酸化に関与するリン酸化酵素の特定を試み、選択的阻害薬(Go6976、PKCαβ阻害薬)を用いた実験から、プロテインキナーゼC(PKC)αまたはPKCβの関与が示唆された。さらに、siRNAを用いたRNA干渉法およびin vitroキナーゼアッセイ法により、p57/coronin-1はPKCαによってリン酸化されることを明らかにした。H26年度は、結核菌の細胞内寄生性に関連すると考えられているタンパク質であるLipoamide dehydrogenase C(LpdC)の発現プラスミドを作製し、p57/coronin-1との結合能について免疫沈降法にて解析した。その結果、p57/coronin-1とLpdCの結合が認められ、この結合は、Thr-412のリン酸化模倣体(アスパラギン酸置換体、T412D)では著しく減弱した。これらのことより、LpdCがp57/coronin-1に結合しThr-412のリン酸化を抑制することにより、結核菌は細胞内寄生性を発現していることが示唆された。生化学H25年度に計画していた「ノックダウン細胞、変異体レスキュー細胞の樹立」において、ノックダウン細胞の樹立は行えた。

変異体レスキュー細胞は、ウイルスベクターを用いても安定した株が得られにくく、全ての変異体において完了した訳ではないが、おおむね順調であるといえる。しかし、「結核菌由来p57/coronin-1制御因子の探索」に関連する実験は結果が得られていない。そのため、引き続く「欠損株の作製」は行えていない。一方、H26年度に計画している「リン酸化酵素の特定」が先行しており、本研究計画的にはおおむね順調である。引き続き「結核菌由来p57/coronin-1制御因子の探索」を行う。菌体の破砕方法やタンパク質の量を検討することで結果が得られると考えられた。「レスキュー細胞の樹立」は発現ベクターを変更することやウイルス濃度の検討などで対処できると考えられる。ドイツより輸入手配したマウスの輸送費が年度末まで確定しなかったために、少し余分に残しておいたことによる。3月末になったしまったために残金の使用が出来なかった。昨年度に購入を控えていた消耗品の購入に充てる。
「ニューエコノミー」の比較ジェンダー分析―高齢社会のサービス化と情報化

ジェンダーレジームをキー概念としつつ、産業組織の労働のあり方、規制改革を含む福祉国家改革の実情に焦点をあてて「ニューエコノミー」の実相の国際比較分析を行うプロジェクトの中に、本研究は位置づけられる。文献購読や海外共同研究者とのワークショップを通じて、日本に限らず、米国や英国等諸外国においても、介護労働者の大多数が中高年女性であり、またその職業的地位や労働条件が介護従事者のジェンダーと深く関わっていることを確認した。日本においても、訪問介護サービスは創設当初から現在にいたるまでその労働供給の中心は家庭の主婦であり、期待されたのはその家庭での家事や育児の経験である。職業としての介護職の確立は未だ発展途上にある。本研究では、介護職の専門性や専門的技能とは何かを中心課題に置き、聞き取り調査やアンケート調査を実施した。その結果、介護労働者の専門性を捉える際のキーワードが、「個別性」と「感情労働」にあることをつきとめた。介護労働に必要なスキルは、家事支援や身体介護、そして痴呆介護等、直接的なスキルだけではなく、自身や利用者の感情や立場を理解しそれを実践に反映させるスキル、またメッセージの伝達や行動説明、解決策の提案、利用者の説得などに必要なコミュニケーションスキル、ネガティブな感情を抑えヘルパーとして適切な感情を維持するスキル、さらには利用者のニーズ把握などサービス提供の場の設定のスキルも重要であることが判明した。またこれらのスキルは必ずしも経験と共に伸びるわけではなく、また資格とも必ずしも連動しておらず、むしろ現場での個々のヘルパーの学習能力や、その所属する組織におけるスキルアップ促進の取り組みや、ヘルパー自身のエンパワメントを促す組織風土、および困難事例や良い事例を共有し改善点を定期的に話し合うなど組織学習の取り組み等から影響を受けることがわかった。「ニューエコノミー」の実相を比較分析するという大きな枠組みの中で、本研究では特に日本の介護労働に関する調査分析として、本年度は、1.文献を収集し、2.介護労働関係者への聞き取り調査およびフォーカスグループ調査から得た知見を吟味し、3.海外共同研究者とのワークショップ(8/30-9/1)をもち、4.来年度のアンケート調査の項目策定にむけて計画をたてた。その結果得た知見はそれぞれ下記のとおり。1.介護関係では、福祉と社会政策の領域での文献は多いが、労働に関する文献はかなり限られ、かつ、介護労働者の実態調査はなされていても、介護を担う労働者の視点からの介護労働の議論が極端に少ない。2.介護労働者、特にホームヘルパー(以下HH)という職業に必要な技能、「専門性」について尋ねた結果、(1)HHの技能には、テクニカルなスキルと感情スキルとがあり、特に利用者やその家族と信頼関係を築く感情スキルが非常に重要。この「感情労働」の側面がこれまでの研究では決定的に欠落。(2)テクニカルなスキルと感情スキルの技能習得過程における相互関係の検討が必要。(3)身体介護と家事援助では、家事援助の方がより高度な個別性への対応、利用者とその生活をそのままトータルに理解する能力が必要。(4)在宅介護のHHは、主婦が自宅で行う無償の家事・育児・ケア労働とは異なる技能を必要とする。(5)HHは利用者の居宅が職場であるため、介護施設で働くヘルパーと異なる能力が必要とされる3.HHの労働としての位置づけは、看護職(専門職)とボランティア、家族の無償ケア労働との関係で理解する必要があり、HHの技能形成や専門性に関する研究はまだ始まったばかり。4.感情労働、個別性に対応する能力などを測定するための項目作りのために、R.Steinburgが看護師を対象に行った調査項目が利用できる。

「ジェンダーレジーム」をキー概念としつつ,産業組織と労働のあり方,規制改革を含む福祉国家改革の実情に焦点をあてて「ニューエコノミー」の実相の本格的な比較分析を行うプロジェクトの中に、本研究は位置付けられており,2年目の本年は、日本の介護労働に関する調査分析、および同領域に関して海外共同研究者とのワークショップを行った。2.「ホームヘルパーの技能とその向上に関する調査」を事業所対象に行った。ワムネット(独立行政法人福祉医療機構の運営する福祉情報サイト)の介護事業者リストから、訪問介護を実施する、都内の1000事業所を無作為に抽出して、郵送によるアンケート調査を実施した。(有効回収率、30.2%)3.上記調査、および同時進行していた調査(田中が分担者として関わっていた大手の介護事業所プロジェクト)の2次分析から,下記のような知見を得た。(1)地域密着型の事業所の場合大手事業所と比較して,登録ヘルパーの相対的位置付けが高いが、仕事の質向上のための対応は遅れ気味である。(2)ヘルパーの顕在化した行動からみると,感情的知性、コミュニケーション、感情管理、関係構築という4種類のスキルが存在する。(3)これらの4種類のスキルレベルは、管理者評価(初心者,中堅、ベテラン、超ベテラン)と相関する。(4)感情的知性、コミュニケーションスキル、および関係構築スキルは,経験とともに伸びる傾向にあるが,感情管理スキルは経験年数との相関がみられない。
HIV感染によるTRAILを介した神経細胞死(HIV脳症への関与)

本年度は未分化な神経細胞における細胞障害および比較のため他のウイルス性脳炎における細胞破壊のメカニズムとTRAIL分子の関与について検討した。新規培養系については組織学的に再構築された中枢神経系細胞培養系である脳スライス培養系と未分化な細胞群が増殖するneurosphere形成培養系を確立した。脳スライス培養系において、HIVに感染したマクロファージと共培養を行うと、神経細胞系に優位な障害が生じることが確認された。また、neurosphere形成培養系においてHIVに感染したマクロファージと共培養を行うと、著明な増殖障害が生じることが明らかになった。これまでにHIVに感染したマクロファージにはTRAIL分子が発現していることが複数のグループにより報告され、また未分化な神経細胞にもTRAIL受容体が発現している可能性があることから、TRAIL分子を介した神経細胞障害は分化した神経細胞のみならず未分化な神経細胞にも起こっている可能性が考えられた。次にエイズ脳症以外の代表的ウイルス性脳炎である単純ヘルペス脳炎についてモデル動物を作製するとともに、neurosphere形成培養系を用いて解析した。単純ヘルペス脳炎モデルラットの脳では、従来報告されているように神経細胞優位に感染し、グリア系細胞やリンパ球、マクロファージなどを含んで高サイトカイン血症が起こり、著明な組織破壊が起こっていると考えられた。また、Neurosphere形成培養系においては、感染が効率よく起こるのにも関わらず、細胞障害は軽度であった。これらのことからエイズ脳症で起こっている神経細胞障害はHIV感染特異的な障害であり、TRAIL分子はウイルス性脳炎の一部の病態に関与する可能性が考えられた。申請者はエイズ脳症患者剖検脳の解析、脳分散培養系実験の一部施行をし、すでに論文として発表している。(Journal of Medical and Dental Sciences(第51号、2003年))今年度はまずこの結果を海外および国内の学会に発表した。その結果、非常に有意義な専門的コメントが得ることができた。その内容はTRAILレセプターの発現、新規スライス培養系での応用および神経幹細胞での機能障害に関することであり、いずれも今年度中に研究が進展した。TRAILレセプターの発現に関しては、マウス脳分散培養系において神経細胞にTRAILレセプターの発現が確認された。このレセプターの発現は中枢神経系に限らず、リンパ球系細胞においても非常に複雑に制御されていることが報告されていることから、さらに詳細なメカニズムを解析する必要があると考えられる。次に新規培養系として新生ラットから海馬スライス培養系を確立することができた。この培養系の確立によりさらにウイルス性脳炎培養実験系を確立すべく、まず遺伝子操作により感染性ヒト免疫ウイルスにGFPを組み入れたものを用いて応用し、感染実験系を実現した。また、比較のために感染性単純ヘルペスウイルスにGFPを組み入れたウイルスも用いている。神経幹細胞に関しては、ヒト免疫不全ウイルスに感染したマクロファージは成熟した神経細胞にアポトーシスを起こすだけでなく、さらに神経幹細胞の機能障害を引き起こす可能性があるという実験結果が得られ、現在追加の検討を行っているところである。一方、脳炎モデルの基盤となるhu-PBL-SCIDマウスにおけるヒト細胞の体内動態の調査の結果、脾臓においてヒトにおける二次リンパ組織様の細胞構築がなされ、ヒト二次リンパ組織のモデルとしても有用であることが示された。
血清エクソソームの機能性RNA発現解析による非B非C肝癌の新規診断法の開発

非B非C肝癌患者における血清エクソソーム中のアンチセンスRNA発現異常の解析と新しい治療法への応用を検討する。本研究の同意を得た非B非C肝癌患者約30名から末梢血を採取して血清の分離を行い、対照群として肝癌患者と健常人からも同意を得た上で血清を採取している。アンチセンスRNAのマイクロアレイを用いた網羅的発現解析を行った。差があった個別アンチセンスRNAのリアルタイムPCRおよびISHを用いた発現解析を行っている。近年エクソソーム由来分泌型ncRNAはさまざまな癌のバイオマーカーとして注目を集めている。我々はこれまで培ってきた解析技術を用いて、血清エクソソーム中にアンチセンスRNAが存在するか非かに注目した。すでに予備的実験で、健常人の末梢血清に存在するエクソソームを単離し、アンチセンスRNAが存在することを確認した(未発表)。これらの予備実験の結果を踏まえて、本研究の目的は、非B非C肝癌患者における血清エクソソーム中のアンチセンスRNAおよびmiRNAの発現異常の解析と新しい治療法への応用を検討することである。現在までに本研究の同意を得た非B非C肝癌患者20名から末梢血を採取して血清の分離を行っている。血清からのエクソソーム回収は超遠心法およびExoMir Plus Kit (Bioo Scientific社)を使用して行っている。対照群として肝癌患者と同年代の健常人からも同意を得た上で血清を採取している。血清中エクソソームからRNA抽出は、BiooPure試薬(Bioo Scientific社)およびISOGEN II (ニッポンジーン社)を使用して行っている。現在症例を集積中であり、今後センス/アンチセンスRNAのカスタムマイクロアレイを用いたアンチセンスRNA発現の網羅的解析を行う予定としている。本研究の目的が達成することで、血液検査という簡便な検査で過去10年間で倍増している非B非C肝癌の早期発見が可能になり、世界的な健康増進に大きく寄与すると考えている。エクソソーム由来分泌型ncRNAは様々な癌のバイオマーカーとして注目を集めている。予備的実験で、健常人の末梢血清に存在するエクソソームを単離し、アンチセンスRNAが存在することを確認した。予備実験の結果を踏まえて、本研究の目的は、非B非C肝癌患者における血清エクソソーム中のアンチセンスRNAおよびmiRNAの発現異常の解析と新しい治療法への応用を検討することである。現在までに本研究の同意を得た非B非C肝癌患者約30名から末梢血を採取して血清の分離を行っている。症例が目標の30例に達したため、今後センス/アンチセンスRNAのカスタムマイクロアレイを用いたアンチセンスRNA発現の網羅的解析を行い、個別アンチセンスRNAのリアルタイムPCRおよびISHを用いた発現解析を経て、最終的には低コストで迅速診断が可能な新しい癌診断カスタムマイクロアレイの開発を行う。本研究の目的が達成することで、血液検査という簡便な検査により過去10年間で倍増している非B非C肝癌の早期発見が可能になり、世界的な健康増進に大きく寄与すると考えている。当初予定していたより、症例の蓄積が遅れている。現在までに20症例の非B非C肝癌症例が集まっており、当初50例を予定していたが、30例集まった時点で、センス/アンチセンスRNAのカスタムマイクロアレイを用いたアンチセンスRNA発現の網羅的解析を行い、その後の研究計画を進めて行く予定としている。医歯薬学本研究では、1.非B非C肝癌患者および健常人の末梢血エクソソーム単離とRNA抽出2.センス/アンチセンスRNAのカスタムマイクロアレイを用いたアンチセンスRNA発現の網羅的解析3.個別アンチセンスRNAのリアルタイムPCRおよびISHを用いた発現解析4.低コストで迅速診断が可能な新しい癌診断カスタムマイクロアレイの開発5.in vitroでの個別アンチセンスRNAの機能抑制による治療効果の検討6.動物モデルを用いた個体レベルでの個別アンチセンスRNAのloss-of-functionによる治療効果判定を行う計画である。現在までに、非B非C肝癌患者の症例が20例集積できている。今後30症例に達した時点で、計画の2.以降の解析に移る予定としている。本研究は当初予定していたよりも症例の蓄積が遅れている。よって、当初の計画では平成26年度に使用予定だった消耗品費などを平成27年度に繰り越している。当初の予定から変更はなく、平成26年度に使用予定だった消耗品を平成27年度に使用することになる。
演劇的手法を用いた学習活動に関する総合的研究

理解の深化をもたらす媒体としての演劇的活動に着目し、学習に役立てられる演劇的手法とその意義について次の3つの方面の研究を行った。1940年代後半から50年代にかけての日本の学校劇運動を分析し、当時の議論の到達点を明らかにした。イギリスのドラマ教育の理論を検討すると共に、現地の学校においてフィールドワークを行い、演劇的手法の運用の具体像を明らかにした。日本の学校の教師たちとの共同研究により、日本の教育課程における演劇的手法を用いた授業・単元の開発を行った。本研究は、演劇的手法を用いた学習に関して、(1)日本の教育実践の蓄積の掘り起こし、(2)イギリスのドラマ教育の理論および実践の検討、(3)学校現場との共同授業研究の3つを研究の柱としている。それぞれについての本年度の成果は以下の通りである。(2)イギリスのドラマ教育関連の文献を、ドラマを通じての授業改善・学校改善に関するものを中心に収集した。また、2週間弱の渡英を行い、Warwick UniversityのJonothan Neelands氏へのインタビュー、ロンドンの2つの小学校でのドラマの授業の視察を行った。それにより、カリキュラムのさまざまな領域へのドラマの結びつけ方、ドラマ教育の各種手法の具体的運用方法などについて、知見を得ることができた。(3)愛知県の公立小学校においての実験授業、埼玉県の公立小学校においての教員向け研修などを行い、ビデオでの記録を行った。演劇的手法を用いた授業によってもたらされる学習の質・教員がそれを行っていく際の障壁などを実証的に明らかにしていくために必要なデータを収集することができた。上記の研究の成果を、日本演劇学会、日本教育方法学会、全国大学国語教育学会の3つの学会において発表した。また、雑誌『演劇と教育』において、「授業で活かす演劇的活動のチカラ」と題する連載(全8回)を執筆した。本年度は主に(2)と(3)に焦点を当てた。それぞれの成果は以下の通りである。(2)6月と3月に2度の渡英を行い、小学校3校、中等教育学校1校にてドラマの授業あるいはドラマの手法を用いた授業の観察を行った。特に、Wimbledon Park Parimry SchoolのJo Fife先生の授業には計6日間訪問し、分析のために必要なビデオ録画を得ることができた。それをもとに、ドラマによって引き起こされる学習の様相やそれを可能にする教師の働きかけについて分析を始めている。物語の「隙間」を埋めるような即興的活動の設定、教師の応答による架空の状況への子どもの「巻き込み」、「学びの作法」としてのドラマの手法の子どもとの共有などの特徴を見出している。そうした成果の一部を、編集したビデオとともに、日本教育方法学会のラウンドテーブルおよび他4箇所の研究会にて発表した。欧米のドラマ教育の紹介が日本でさかんに行われるようになってきたとはいえ、実際の映像をもとに授業過程を報告・考察するものはこれまで存在してこなかったため、大きな反響を呼んだ。(3)和歌山大学附属小学校においてドラマ教育の知見をもとに授業における演劇的手法の可能性を検討する研究会を行った。今後、同校の先生方と実践研究を進めていく予定である。また、神戸大学附属住吉小学校の安部明直先生とも、2011年度の共同授業研究に向け、単元づくりのための準備を行った。(2)ドラマの手法を使っての物語の世界の体験が国語教育の観点からはどう意味づけられるか、J.ニーランズの理論とJ.ファイフの実践事例をもとに考察を行い、論文にまとめた。これは、日本で中心を占めている本文の叙述の直接的な再現とは異なるタイプの演劇的活動の方法と意義を示唆している点で、重要である。また、J.ファイフの実践事例をめぐっては、教師が果たす役割という点からも分析を行い、学会で発表を行った。教師の役割として「役モード」「教師モード」「語り手モード」の3つを抽出し、それぞれの働きを明らかにした。さらに、現在のイギリスでのドラマに直接通じる流れをっくった人物としてG.ボルトンに注目し、関連文献を蒐集・読解するとともに、渡英して関係者へのインタビューを行った。(3)城陽市、神戸市、高島市などの小学校教諭との共同研究を進めた。特に、城陽市の教諭2名とは、単元全体を通しての、ドラマの手法を用いた「スーホの白い馬」の学習を設計し、実践、検討に到った。

これらを通して、具体物による見立てや色の象徴的な使用などといった、活動をより効果的にするための実践的な知見を得た。同時に、こうした学習方法に親しんできていない教師や子どもが新たに取り組もうとする際に生じやすい問題点(表現させることに傾斜したホットシーティングの使用など)を明らかにすることができた。本研究は、演劇的手法を用いた学習に関して、(1)日本の教育実践の蓄積の掘り起こし、(2)イギリスのドラマ教育の理論および実践の検討、(3)学校現場との共同授業研究の3つを研究の柱としている。最終年度である本年度は(3)に焦点を当てた。2012年4月に、演劇的手法を用いた授業の可能性を実践的に追求する研究グループ「学びの空間研究会」を小中高の教員らと共に設立した。以降、隔月で定例会を実施。そこでは、(A)演劇的手法を用いた学習活動の考案と試行、(B)創出された活動の学校現場での実施、(C)その実践報告と検討というサイクルを繰り返してきた。それにより、小学校国語の物語文や外国語活動、中学校国語の文法での実践などを生み出してきた。この試みは、これまでの演劇的手法に関する研究において十分に扱われてこなかった授業論と教師教育とを射程に入れようとするものであり、その本格的な展開は、2013年度からスタートする科研費若手研究(B)「演劇的手法の活用に関する授業論の構築と教師の力量形成の仕組みの開発」に引き継がれる。また、研究成果の実践的な還元として、教師や演劇関係者向けに、2012年7月には鹿児島県志布志市にて音読指導に関する研修、東京都にて「カリキュラムを通してのドラマ」の講座、8月には山口県で開かれた全国演劇教育研究集会にて「授業で活かす演劇的活動のチカラ実践編」の講座、2013年3月には帝塚山大学にて「想像力を生かす学習授業における演劇的手法」の講座を催した。なお、前年度に全国大学国語教育学会の学会誌『国語科教育』に発表した論文「ドラマによる物語体験を通しての学習への国語教育学的考察ーイギリスのドラマ教育の理論と実践を手がかりにー」に対して、同学会より「第1回優秀論文賞」を受賞した。研究の3つの柱のうち、「日本の教育実践の蓄積の掘り起こし」については、資料は相当量蒐集してあるものの、その分析が進んでいない。一方、「学校現場との共同授業研究」に関しては、関心を持つ教師、学校が当初の予想以上に多く現れ、プロジェクトを進めることができている。24年度が最終年度であるため、記入しない。演劇的手法を用いた学習活動の導入に関心を持つ教師が多数得られたことを受け、「学びの空間研究会」という共同研究組織を2012年4月に発足させた。今後、この研究会にて、活動の開発、実践の報告と検討などを行っていく予定である。