hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
カント『純粋理性批判』の発展史と18世紀ドイツ哲学

本研究は、『純粋理性批判』(以下『批判』)にいたるまでのカント理論哲学の発展史を、18世紀ドイツ哲学の文脈のなかに跡づけ、カント哲学の歴史的な根源を再構成しようとするものである。本年度はとりわけ、『批判』に集約されたテーマ・思想単位から振り返って、前批判期から1770年代までの発展史を、当時の哲学的状況との関係のなかでとりまとめることを試みた。そのテーマとして(超越論的観念論の基本構造、アンチノミー論の諸主題などとならんで)、自我論あるいは自己意識論をとりあげたが、その研究に基づき、論文「カントにおける自己意識の問題」を発表した。この論文では、まず1770年代に自己意識が統覚として演繹の問題圏に導入された経緯を遺稿にもとづいて跡づけ、ヴォルフやメリアンなどに見られる18世紀当時の統覚概念との関係を論じた。ついで『批判』第一版の誤謬推理論における純粋カテゴリーによる自己意識モデルと、ウルリッヒ、ピストリウスなどによるカント批判から余儀なくされた第二版での論点移動とを確認した。最後に演繹論における「統覚の総合的統一」を、それまでの自己意識論のアポリアを克服するための、新たな自己意識の<総合モデル>の構築の試みとして掘り起こした。今後このテーマについてさらに研究をすすめ、『純粋理性批判』第2版におけるcogito ergo sumをめぐるカントの新たな解釈についての論考を発表する予定である。また、カントの啓蒙思想を18世紀ドイツの文脈のなかに置くことを試みた論考「啓蒙時代における成年市民の概念-カント『啓蒙とはなにか』を読む」(図書『賢い大人になる50の方法』に収録)を発表した。本研究は、『純粋理性批判』にいたるまでのカント理論哲学の発展史を、18世紀ドイツ哲学という文脈のなかに跡づけようとするものである。前批判期の諸著作や遺稿、講義録、書簡などを、当時の哲学者たちへのカントの応答として読み解くことで、カント哲学の歴史的な根源、いわばカントの現場の思索を再構成することを目標としている。本年度の研究にもとづいて、「現象と空間--カント超越論的感性論における窃取モデルの論理」を発表したが、これは上記の研究課題の中間報告であり、ひとつのモデルケースとなる。この論文は、1770年の『感性界と叡知界の形式と原理』に現れる「窃取」「窃取的公理」「還元原理」などの一連の方法論的諸概念に着目して、そこから『純粋理性批判』の超越論的感性論の構造を読み解こうとしたものである。1770年論文の方法論的プロセスは、クルージウス的な経験的主観性の哲学原理に対する闘争から獲得されたものであるが、じつはここから、感性論における「超越論的観念性」「超越論的実在性」「経験的実在性」「経験的観念性」という四肢構造の骨格がうみだされたのである。以上のことから明らかになったのは、カントの感性論は、たんに空間時間をめぐる認識論的・存在論的議論にとどまるものではなく、むしろ18世紀哲学の形而上学的ポレーミクのさなかで、体系的におのれの立場を象ろうとした、その闘争の記録として読むことができる、ということであった。来年度は、前批判期から『純粋理性批判』を照らし出す局面をさらに拡大して、自己意識の問題(演鐸論・誤謬推理)、アンチノミーの諸テーマ(その歴史的由来とカントによる変容的獲得)などについて、18世紀ドイツ哲学との対応関係を踏まえて描き出してみたい。
微生物学的統御の違いにおける腸内細菌叢と大腸がんの関連性の解明

本研究は、大腸がんモデル動物のApc Minマウスを用い、SPFないしコンベンショナルな飼育環境で発生する消化管腫瘍が、腸内細菌叢とどのような関係になっているか、また放射線照射により細菌叢の変化がどのように影響するかについて明らかにし、大腸がん対策の基礎データとすることを目的として進めている。2018年度は、先行実験において、SPF飼育環境又はコンベンショナル飼育環境下で、Apc Minマウスに2週齢時に放射線照射し、その後30週齢時に盲腸内容物を採取して凍結保管していたので、これらの試料よりDNA抽出をして16S rRNAのメタゲノム解析を行った。即ち、次世代シークエンスにより決定した塩基配列について、QIIME1.8.0ソフトを用いて97%の類似性でOTU (operational taxonomic unit)を取得し、UniFrac解析をしたところ、SPF環境又はコンベンショナル環境、更に放射線照射の有無により、それぞれの細菌叢の構成に類似性がないことが分った。詳細な細菌叢の解析を進めているが、p_Actinobacteria、p_Bacteroidetes、p_Firmicutes、p_Proteobacteriaの4つの門に98%以上が含まれていた。また細菌叢の特徴として、放射線照射の有無に関係なくSPF飼育環境下のマウスは、コンベンショナル飼育環境のマウスに比べp_Bacteroidetes門の比率が高く、p_Actinobacteria門とp_Proteobacteria門の比率は低いことが分った。ビニールアイソレータでの実験をするために、Apc Minマウスの初期胚を体外受精にて作出し、凍結保存を行った。またビニールアイソレータを用いて、無菌のApc Minマウスの作出の準備を進めている。ビニールアイソレータの微生物のコンタミがあったため、無菌状態のApc Minマウスを作出できなかった。ビニールアイソレータ再立ち上げの準備を行っている。ビニールアイソレータ再立ち上げを行い、無菌のApc Minマウスを作出し、SPF施設で飼育したマウス糞便、ないしコンベンショナル施設で飼育したマウス糞便を、無菌のApcMinマウスに投与して、SPF又はコンベンショナルなApcMinマウスを作出する。またこれらマウスは、2週齢時にX線を照射し、ビニールアイソレータ内で飼育を行い、定期的に糞便を採取して細菌叢の解析を進める。研究計画に従いほぼ予定通りに予算を執行したが、1円が次年度使用額として生じた。この金額と次年度使用予定額と合わせて、動物飼料、無菌マウス、消耗品、ゲノム等の解析に使用する計画である。
がん微小環境に着眼した肺癌に対する栄養療法の抗腫瘍効果の解明

本研究では,1肺癌患者の栄養状態と腫瘍局所における腫瘍浸潤リンパ球・PD-L1などを含むがん微小環境との関連の解明を目指す.腫瘍局所においてどのように患者の栄養状態が関わっているかを明らかにすることで,低栄養患者における癌進展のメカニズムおよび栄養療法のターゲットの候補が見いだせる可能性がある.さらに,2低栄養マウスモデルを作成し,肺癌細胞株を移植することで作成した皮下腫瘍の観察により,栄養状態および栄養療法が腫瘍進展とがん微小環境に与える影響を動物モデルで前向きに検証する.これらの研究成果は、低栄養患者に対して腫瘍免疫環境の調節により予後改善を図る栄養療法へと発展していく可能性を秘めている.本研究では,1肺癌患者の栄養状態と腫瘍局所における腫瘍浸潤リンパ球・PD-L1などを含むがん微小環境との関連の解明を目指す.腫瘍局所においてどのように患者の栄養状態が関わっているかを明らかにすることで,低栄養患者における癌進展のメカニズムおよび栄養療法のターゲットの候補が見いだせる可能性がある.さらに,2低栄養マウスモデルを作成し,肺癌細胞株を移植することで作成した皮下腫瘍の観察により,栄養状態および栄養療法が腫瘍進展とがん微小環境に与える影響を動物モデルで前向きに検証する.これらの研究成果は、低栄養患者に対して腫瘍免疫環境の調節により予後改善を図る栄養療法へと発展していく可能性を秘めている.
鉄鋼循環チェーンにおける不純物制御によるリサイクル高付加価値化

日本における2017年から2018年に生産された形鋼と棒鋼を採取し、ハンドヘルド蛍光X線ならびにスパーク放電発光分光分析を用いて不純物濃度を調査した。ハンドヘルド蛍光X線では、組成が0.1%以下の不純物元素についてスパーク放電の結果より低くなることが分かった。さらに、スパーク放電では測定が難しい極微量(ppmレベル)に含まれる不純物元素については、GD-MS測定によって定量分析を行い、各種鋼材中に含まれる不純物の種類と濃度を明らかにした。溶鉄中トランプエレメントの除去法について系統的に整理し、その可能性について検討した。さらに溶鉄中に溶解する種々の元素の活量におよぼすCu,Snの影響について、未知のデータを実験により測定し、既知のデータと合わせて整理した。得られたデータに基づき、溶鉄中にトランプエレメントが溶解した場合、他の不純物元素にどのような影響を与えるかを考察した。動的MFAを用いて、雑品スクラップによる国内鉄鋼循環に対する影響を評価し、無視できないことを明らかにした。各起源から混入が想定されるCu量を積上げたところ、実際のCu量の半分くらいが説明でき、その多くは建設物由来の鉄スクラップ中の分電盤や配線等の混入であると推計された。動的IO-MFAモデルの1つであるMaTraceモデルを適用する事で、鉄および主要な合金元素を対象物質として、リサイクルに伴う物質と価値の散逸機構の同定および散逸量の推計を実施すると共に、自動車エンジンを事例として、再生利用(リビルド・リマン)を適用する事による散逸回避効果の推計モデルの開発を進めた。合わせて、2011年表の作表を進めている。日本における現在の鉄鋼材の不純物濃度ならびにその分布の代表性のある結果を得るための試料採取は想定以上にスムーズに実施できた。一方、ハンドヘルド蛍光X線の分析結果が低濃度において不確かであること分かったため、想定以上に分析に時間がかかることとなった。鉄鋼材に含まれる微量不純物濃度の測定は順調であった。一方、LA-ICPTOFMSによる偏析状況の可視化については、装置不調の影響を受け、今年度は測定ができなかった。トランプエレメントの代表であるCu,Snについて、その除去方法ならびに他元素におよぼす影響の調査を進め、概ね予定通り進捗した。MaTraceならびにWIO-MFA分析モデルの開発および事例研究は順調であった。一方、2011年表の作表に関しては、統計の再編・廃止等の影響を受けて主要データの整備・精緻化に課題があることが明らかになった。鋼材中に含まれる極微量不純物の情報を集めるとともに、それら情報を活用し不純物の混入起源の推定手法を開発する。極微量不純物は、偏析している可能性があることが明らかになっているため、LA-ICPTOFMSのメンテナンスを行い、各種不純物元素の偏析状況を明らかにする予定である。過去に生産された鉄筋棒鋼を建築物解体から得ることで、時系列の不純物濃度データを集め始めたが、分析の結果からさらなる試料採取の必要性が明らかになったため、試料点数を拡充する。分析した結果の解釈について、その時系列変化を説明するモデルを開発し、混入起源の推計にも貢献する。溶鉄中に溶解する種々の元素の活量におよぼすトランプエレメントの影響について、さらに調査を進める。熱力学的な除去可能性ならびに、実態としての不純物濃度を踏まえ、それら不純物が特性に与える影響について、既存の知見の整理をおこなう。さらに、鉄鋼材に要求される各材料特性と、その特性を必要とする需要先ならびに需要量に関して、需要統計とJIS規格を接続するモデルを開発して明らかにし、トランプエレメントの混入に対してロバストな循環システムの構築に向けた知見を整備する。MaTraceモデル開発および事例研究を進める。加えて、2011年表の作表に向けて、整備が完了している2000年表等からの投入係数に関するデータ補完と線形計画法などの適用を進める。

動的IO-MFAモデルの1つであるMaTraceモデルを適用する事で、鉄および主要な合金元素を対象物質として、リサイクルに伴う物質と価値の散逸機構の同定および散逸量の推計を実施すると共に、自動車エンジンを事例として、再生利用(リビルド・リマン)を適用する事による散逸回避効果の推計モデルの開発を進めた。合わせて、2011年表の作表を進めている。日本における現在の鉄鋼材の不純物濃度ならびにその分布の代表性のある結果を得るための試料採取は想定以上にスムーズに実施できた。一方、ハンドヘルド蛍光X線の分析結果が低濃度において不確かであること分かったため、想定以上に分析に時間がかかることとなった。鉄鋼材に含まれる微量不純物濃度の測定は順調であった。一方、LA-ICPTOFMSによる偏析状況の可視化については、装置不調の影響を受け、今年度は測定ができなかった。トランプエレメントの代表であるCu,Snについて、その除去方法ならびに他元素におよぼす影響の調査を進め、概ね予定通り進捗した。MaTraceならびにWIO-MFA分析モデルの開発および事例研究は順調であった。一方、2011年表の作表に関しては、統計の再編・廃止等の影響を受けて主要データの整備・精緻化に課題があることが明らかになった。鋼材中に含まれる極微量不純物の情報を集めるとともに、それら情報を活用し不純物の混入起源の推定手法を開発する。極微量不純物は、偏析している可能性があることが明らかになっているため、LA-ICPTOFMSのメンテナンスを行い、各種不純物元素の偏析状況を明らかにする予定である。過去に生産された鉄筋棒鋼を建築物解体から得ることで、時系列の不純物濃度データを集め始めたが、分析の結果からさらなる試料採取の必要性が明らかになったため、試料点数を拡充する。分析した結果の解釈について、その時系列変化を説明するモデルを開発し、混入起源の推計にも貢献する。溶鉄中に溶解する種々の元素の活量におよぼすトランプエレメントの影響について、さらに調査を進める。熱力学的な除去可能性ならびに、実態としての不純物濃度を踏まえ、それら不純物が特性に与える影響について、既存の知見の整理をおこなう。さらに、鉄鋼材に要求される各材料特性と、その特性を必要とする需要先ならびに需要量に関して、需要統計とJIS規格を接続するモデルを開発して明らかにし、トランプエレメントの混入に対してロバストな循環システムの構築に向けた知見を整備する。MaTraceモデル開発および事例研究を進める。加えて、2011年表の作表に向けて、整備が完了している2000年表等からの投入係数に関するデータ補完と線形計画法などの適用を進める。
卵巣明細胞癌の新規バイオマーカーLeftyの上皮間葉転換転写制御による抗腫瘍作用

平成30年度は、卵巣明細胞癌におけるLefty発現意義を、培養細胞(特にOVISE及びTOV21G細胞)を用いたLefty恒常発現系及びノックダウン系細胞の作製より検証を行った。OVISE細胞でshRNAによるLeftyノックダウン系では、SKT2培地(間葉系幹細胞用培地:上皮細胞を培養するとEMT化が生じる)による細胞のSpindle化の抑制及びSpheroid数の低下が観察された。また、Aldefluor assayによりALDH1活性の低下が見られた。反対にTOV21細胞を用いたLefty恒常発現系では、SKT2による細胞のSpindle化、ALDH1活性が認められ、間葉系マーカーであるVimentinやがん幹細胞系マーカーであるSox2やALDH1の発現が亢進していた。以上より、卵巣明細胞癌におけるLefty発現は、細胞のEMT化のみならずがん幹細胞化誘導と密接な関係にあることが示唆された。今後は病理組織上におけるLefty発現とEMT化、がん幹細胞化との関連性、及びLefty発現制御機構としてのSmad2依存/非依存系シグナルとの関連性を解析する予定である。卵巣明細胞癌培養細胞を用いたLefty恒常発現系、ノックダウン系細胞の作製は大きな問題もなく順調に作製され、Lefty発現意義を推考できた。来年度はその発現制御機構及び阻害剤選択を行う予定である。卵巣明細胞癌におけるLefty発現意義をEMT化及びがん幹細胞化の観点から解析を行う。特に病理組織上における発現と臨床病理学的因子との相関性から、卵巣明細胞癌の特徴である抗癌剤耐性機構の解明に繋がることを期待する。平成29年度は、卵巣明細胞癌におけるLeft-right determinant factor(Lefty)発現制御機構とその解析を行った。その結果、LeftyはTGF-β/Smad2シグナルによりmRNA及びタンパク質レベルにより発現亢進することが明らかとなった。さらに、Lefty遺伝子のプロモーターを用いたルシフェラーゼアッセイにおいても、同様の結果が得られた。しかし、Smad2活性阻害剤であるSB525334を添加した培養細胞では、pSmad2の発現は抑制されたが、Lefty発現に変動はなかった。このことより、Leftyはnon-Smad系による発現制御機構が存在することが考えられた。一方で、Bisulfate-Sequence法の結果、Lefty遺伝子のメチル化とタンパク質発現は相関関係にないことを確認した。卵巣明細胞癌培養細胞へ発現コンストラクト導入による恒常発現系細胞、snRNA発現コンストラクト導入によるノックダウン系細胞の作製に着手しており、今年度中にLeftyの機能解析を行う予定である。卵巣明細胞癌におけるLefty発現意義を、EMTやCSCの観点から解析を行い、腫瘍の特性である抗癌剤低感受性の性格の一端を担うか否かの検討を行う予定である。プロモーター解析及びBisulfate-Sequence解析が予定より早く完了したため、その経費を次年度の病理組織を用いた解析(抗体及びRNA probe)へ計上することとした。卵巣明細胞癌培養細胞を用いた恒常発現系及びノックダウン系の作製が完了したため、その経費を次年度の病理組織を用いた解析(抗体及びRNA probe)へ計上することとした。
パルテノン彫刻研究－オリエント美術を背景とする再解釈の構築

2018年度は、右記の6種類の事業を実施した。16月17日研究例会において、アテナイ、アクロポリス奉納物について、および、また古代ギリシア青銅鋳造の技法について研究発表と討議を行った。29月3-7日に、J. Barringer教授(エジンバラ大学)を招聘し、古代ギリシア聖域奉納物の研究発表と討議を行った。他科研と共同して、古代地中海文明に関する日欧コロキアムに参加した。39月9日から16日まで、ロドス島およびアテネにおいて現地調査。研究代表、分担者、協力者の9名参加。ロドス島アクロポリス、リンドス、カメイロス、イアリッソス遺跡を調査。アテネにおいて、アクロポリス遺跡、国立考古博物館における調査を実施。イタリア考古学研究所において、古代儀礼に関するコンファレンスに参加した。アクロポリス博物館において、Vasileia Manidaki博士(アテネ工科大学・アクロポリス修復保存局)によるガイダンスを実施。4C. M. Keesling教授(ジョージタウン大学)を招聘し、11月14日に京都大学において、11月17日に早稲田大学において、古代ギリシア、ローマ宗教における奉納記念物と碑文に関する研究会を開催した。512月9日に、筑波大学芸術系において、「パルテノン・フリーズを制作者の視点から検討する」研究例会を実施した。分担者大原央聡、中村るいによる研究発表と石膏室における討議を行った。62019年3月18日、千葉商科大学において、他科研と共同して、Antigoni Zournatzi博士(National Hellenic Research Foundation, Athens)およびNikolaos Papazarkadas教授(University of California, Berkeley)を招聘し、古代ギリシア碑文と奉納物に関する研究会を開催した。歴史班および美術史班の研究として、1において、特にテレマコス記念碑について研究成果を得た。齊藤貴弘の発表題目は「アスクレピオスのアテナイ勧請とテレマコス記念碑ー概観と近年の研究動向」。2においては、いわゆるマグナ・グラエキア世界における聖域と奉納習慣について解明しえた。J. Barringer教授の題目は「西ギリシアのポリスと本土の聖域」。3においては、特にロドス島の聖域建造とその展開について調査を実施しえた。4においては、古代ギリシア、ローマ宗教と家系および奉納記念物の関係について解明しえた。Keesling教授の京都大学における講演題目は「Reusing the Past in Roman Greece」、早稲田大学における講演題目は「Ancestors in Greek Art」。6においては、Antigoni Zournatzi博士による発表は、ペルシア文明のパルテノン時代の芸術への影響関係についてその一端を解明する内容であった。題目は「Greeks and Persians: Perspectives on Ancient East-West Political and Cultural Interactions」。Nikolaos Papazarkadas教授による発表は、アクロポリス出土碑文の断片を復元するもので、題目は「Two fragments of inventory lists from the 5th and 4th cent. B.C. from the Acropolis」。歴史班の活動として、1において、鋳造技法について解明を行うことができた。中村義孝の発表題目は「青銅鋳造の技法について」。5においては、口頭発表およびワークショップによって、制作者の観点からパルテノン彫刻の技法細部について解明することができた。2019年度の事業として、右記の5つを計画している。1パルテノン彫刻研究会の開催。J.B. Connelly教授(ニューヨーク大学)を招聘し、パルテノン神殿造営目的と、附属彫刻の美術史的な解釈について研究発表と討議を実施する(10月19日予定)と。Connelly教授は、パルテノン彫刻の独自の神話解釈と、女性学の成果による独創的な研究によって名高く、本研究課題の進展に必須の協力者である。2海外研究例会の開催。9月第二週に、アテネの国立碑文博物館において、研究例会と碑文ガイダンスを計画している。3奉納碑文に関する研究例会の開催。Vasileia Manidaki教授(National Technical University of Athens, Architecture, Service for Restoration of the Acropolis Monuments)およびAdele Scafuro教授(Brown University)を招聘し、古代ギリシア奉納物と碑文に関する研究会を実施する予定。既に両教授の了承を得ている。さらに、制作班の活動として、4高知大学における、制作者の観点によるパルテノン彫刻研究例会を実施する。56月に全体集会、69月に、アテネ、アクロポリスその他における現地調査を実施する。これら1から6の活動によって、パルテノン神殿装飾に影響したと思われるアクロポリス奉納記念物群に注目し、パルテノン彫刻との比較検討を行う。神殿彫刻と奉納記念物群の共通性を踏まえ、建築装飾が必ずしも民主政の表象をメッセージとしていたのではなく、むしろ、神々への神殿の奉納という、オリエント宗教にも共通する古代文明に一般的な宗教観を表出していたことを検討する。美術史学と歴史学の共同調査により、欧米の価値観から離れた視点から解釈基盤を問い、日本隊独自の成果として発表する。

ロドス島アクロポリス、リンドス、カメイロス、イアリッソス遺跡を調査。アテネにおいて、アクロポリス遺跡、国立考古博物館における調査を実施。イタリア考古学研究所において、古代儀礼に関するコンファレンスに参加した。アクロポリス博物館において、Vasileia Manidaki博士(アテネ工科大学・アクロポリス修復保存局)によるガイダンスを実施。4C. M. Keesling教授(ジョージタウン大学)を招聘し、11月14日に京都大学において、11月17日に早稲田大学において、古代ギリシア、ローマ宗教における奉納記念物と碑文に関する研究会を開催した。512月9日に、筑波大学芸術系において、「パルテノン・フリーズを制作者の視点から検討する」研究例会を実施した。分担者大原央聡、中村るいによる研究発表と石膏室における討議を行った。62019年3月18日、千葉商科大学において、他科研と共同して、Antigoni Zournatzi博士(National Hellenic Research Foundation, Athens)およびNikolaos Papazarkadas教授(University of California, Berkeley)を招聘し、古代ギリシア碑文と奉納物に関する研究会を開催した。歴史班および美術史班の研究として、1において、特にテレマコス記念碑について研究成果を得た。齊藤貴弘の発表題目は「アスクレピオスのアテナイ勧請とテレマコス記念碑ー概観と近年の研究動向」。2においては、いわゆるマグナ・グラエキア世界における聖域と奉納習慣について解明しえた。J. Barringer教授の題目は「西ギリシアのポリスと本土の聖域」。3においては、特にロドス島の聖域建造とその展開について調査を実施しえた。4においては、古代ギリシア、ローマ宗教と家系および奉納記念物の関係について解明しえた。Keesling教授の京都大学における講演題目は「Reusing the Past in Roman Greece」、早稲田大学における講演題目は「Ancestors in Greek Art」。6においては、Antigoni Zournatzi博士による発表は、ペルシア文明のパルテノン時代の芸術への影響関係についてその一端を解明する内容であった。
形式的意味論における概念形成モデル

外延的概念理解の典型的な枠組であるモデル論的意味論をベースにして自然言語、特に日本語固有の各種の内包性、様相概念を多世界モデル意味論(クリプキ可能世界モデル理論)の手法を用いて導入し、外延的意味論の上により高度な概念構造の表現論を与えた。このことはモンターギュ文法理論の手法を用いて高階の様相論理体系の中で実現された。特に日本語の「モード」「話者の意図」「話者の主観的態度」「様相」を表現する各種のとりたて助詞、係り助詞、敬語表現、感情動詞、知覚動詞、いろいろな文末の言い切り表現等の論理的意味構造を表わすことが可能な高階様相論理体系、内包論理体系の充実を前年度に引き続き進めた。又、この高階タイプ付論理表現の特徴をUNIXワークステーションを用いてUNIX環境下で分析した。このことを通してMLを変形して設計された我々の言語表現用プログラム言語によりモンダーキュ文法に基づく概念表現論が非常によく表わされることが示された。
ディファレンシャルディスプレイ法による血管疾患の疾患関連遺伝子の探索

下肢静脈瘤の手術で採取した静脈瘤は17検体、大動脈-冠動脈バイパス術時に採取された正常静脈は5検体得られた。液体窒素で凍結し、-70°Cの冷凍庫で保存した。標本を細かく砕いてホモジェナイザーですりつぶし、total RNAを抽出した(RN easy Kit,QIAGEN)。下肢静脈瘤患者の静脈では、浸潤してきたマクロファージがIL-6等のサイトカインを放出していると報告されている。IL-6、OSM、LIF、TGF-β1の4種類のプライマーでcDNAを合成し、PCRを行った。PCR産物を2.5%アガロース・ゲルで電気泳動し、エチジウムブロマイド(EtBr)で染色した。OSMは初めに作ったプライマーでは、どの検体でも発現が認められなかったため、シークエンスを変えて作り直した。IL-6の発現が認められた検体ではLIFも発現していることが多かった。また、正常静脈でも1検体でIL-6,LIFが発現していた。RNAの発現が明らかに認められた静脈瘤4検体のプール、発現の認められなかった静脈瘤4検体のプール、およびこれらの発現が認められなかった正常静脈4検体のプールから純度の高いRNAを抽出した。これらをマイクロアレイ法に提出した。この3つの群でどのような遺伝子が異なっているのかが明らかにされる予定である。今後は、違いの認められた遺伝子がcodeしているRNAそれぞれについて検討していく予定である。下肢静脈瘤患者の手術で摘出した9検体の大伏在静脈の近位部を液体窒素で凍結した。対照として大動脈-冠動脈バイパス術時に採取した1検体の健常大伏在静脈を同様に凍結保存した。逆転写酵素とTGFβ-1、IL-6、OSM、LIFの4種類のプライマーでそれぞれのcDNAを合成した。これらを2.5%アガロースゲルで電気泳動し、エチレンブロマイドで染色した。静脈瘤9検体のうち、2検体でIL-6のバンドが明らかであった。TGFβ-1も4検体に発現していた。OSMとLIFの発現は認められなかった。今後は正常および静脈瘤の検体を増やし、様々なサイトカインの発現を検索する予定である。その後、それらのRNAを使用してデイファレンシャル・デイスプレイ法を行い、静脈瘤の形成に関与している遺伝子を探索する予定である。
ラフパス理論とその確率偏微分方程式への応用

本年度はラフパス理論に関するプレプリントを大阪大学の永沼伸顕氏と書き、特異な確率偏微分方程式に関するプレプリントを首都大学の澤野嘉宏氏と書いた。どちらもarXiv Preprint Serverにおいて公表しており、さらに学術雑誌に投稿済みで、現在審査中である。前者は非整数ブラウン運動で駆動されたラフパスの意味での確率微分方程式の解の密度関数を考察したのものである。係数ベクトル場にヘルマンダー条件を仮定すると、解はなめらかな密度関数を持つことが、マリアヴァン解析を使うと証明できることはすでにわかっている。密度関数の単時間での漸近挙動をしらべ、通常の確率微分方程式の場合でよくしられるBen Arousの有名な結果を、この場合にも拡張することができた。後者はGubinelli-Imkeller-Perkowskiの創案によるPara-controlled calculusの枠組みにおいて、2次元トーラス上でQuasi-geostrophic equationという2次元流体のための微分方程式に白色雑音をつけたものの時間局所解を(しかるべき仮定の下で)得ることができた。またこれ以外に研究集会での発表は6件行った。それ以外に中国の大学においてセミナー発表を3件行った。本年度はラフパス理論に関するプレプリントと特異な確率偏微分方程式に関するプレプリントを一本づつ書いた。研究テーマに掲げた二件についてともにまずまずの成果が出たので、一安心している。また口頭発表も6件ほど行い、そのうちのかなりの割合で当科研費のお世話になったので、大変感謝している。ほぼ順調に推移しているので、いままでと同じ方針、同じペース配分で研究を進める。本年度はラフパス理論の研究を主に行った。主にマリアバン解析とラフパスとの融合をすすめた。その結果ラフパス理論を用いて、マリアバン解析が得意にしていた熱核の短時間漸近展開を深める結果を証明できた。もっと具体的に述べよう。従来のマリアバン解析におけるとても重要の結果の一つに、高信と渡辺による準楕円条件(ヘルマンダー条件)の下での熱核の非対角短時間漸近展開を示すというものがある。これは考える二点間を結ぶエネルギー最短線が一つではなく、無限個存在してコンパクト多様体をなす、という非常に複雑な場合を扱ったもので、概念的にも計算技術的にも、(ラフパス理論誕生以前の)確率論における最高峰であるといっても過言ではないと思う。筆者は九州大学の谷口説男氏と昨年度に書いた共著において、この高信と渡辺による結果をラフパス理論を使った別証明を与えた上で、さらに拡張し、基礎の空間がユークリッド空間の場合だけでなく、多様体のような「曲がった」空間の場合にもこの種の結果が成立することを示した。この結果はおそらく微分幾何学の観点からも新しいものであると思っている。またラフパスそのものとは別に、ラフパス理論の変種である正則性構造の理論や被制御超関数の理論の勉強をすすめた。これらはラフパス理論の考え方を、かなり特異性が強いために通常の手法では解けない確率偏微分方程式に適用するものであり、研究対象になっている具体例が物理的にも重要であるとされていることから、現在注目を集めている。筆者はこの勉強をもとに、新年度にはこのトピックで論文を一つ書けるように共同研究者とともに目下努力中である。順調に研究が進んでおり特に問題はないと思う。今のところ予想外のトラブルも起きていない。実は昨年度分の研究は難しい話題だったために、始める前は自信がなかったのだが、運があったのか無事に証明できたために、現時点では幸せな気分で研究ができている。本年度はラフパス理論の研究と、その派生である特異な確率偏微分方程式の研究を半々ぐらいの割合で同時に行った。ラフパス理論に関しては共著者である谷口説男氏と劣楕円型の作用素から決まる劣リーマン多様体上の熱半群のトレースの漸近展開をマリアヴァン解析を用いて研究した。まだ完成はしていないが、ほぼ完成の目処は立っており、2、3ヶ月以内に発表できると思っている。この論文は高信(1988)によるその種の熱核に対する対角型の短時間漸近展開に基づいていて、かなり深い議論が行われる。ラフパス理論を本格的に使ったわけではないが、証明の中で中心的な役割を果たす自由ベキ零群上の拡散過程というのが、ラフパス理論にでてくるブラウニアン・ラフパスという確率過程とほぼ同じであり、ラフパスの研究で培った知識が役にたった。特異な確率偏微分方程式に関しては共著者である星野壮登氏と永沼伸顕氏の協力のおかげもあり、初めて論文を書くことができ、目出度くこの話題に参入できた。書いた論文の研究対象は空間3次元の場合に時空間白色雑音で駆動される複素ギンズブルグ・ランダウ方程式であり、証明した内容は時間局所解の存在および適切性である。この種の方程式は雑音の性質が悪すぎるために通常の方法では解けなかったが、3年ぐらい前より正則性構造理論(regularity structure theory)とパラ制御理論(para-controlled calculus)と呼ばれる2種類の理論が発明されて、解析できるようになった。今回の共著でも、この2通りの手法で方程式を解いた。順調に研究が進んでいるので、特に問題はない。予想外のトラブルも起きなかった。実は昨年度は特異な確率偏微分方程式という話題に参入して、初めて論文を書いた。この話題はいままでやってきたラフパス理論の派生とはいえ別の理論であるので、やはりかなりの努力を要したが、共著者の協力もありなんとか形になったので、一安心している。

いったん参入できてしまえば、同じ話題でさらに論文が書ける可能性はかなり高いので、このままの方向で努力を続ける予定である。もちろんラフパス理論の研究もこのまま続ける。今年度の前半は確率微分方程式を使って劣リーマン幾何の問題をとくことができた。おもな道具はマリアヴァン解析であり、さらにラフパス理論は直接は使っていないものの、その考え方を使った。解いた問題を説明する。スペクトル幾何においては、多様体の幾何学的な情報がどのようにラプラシアンなどの微分作用素のスペクトルに反映されるか、というのが基本的な問題意識である。その分野ではラプラシアンから決まる熱半群の跡(トレース)の短時間の漸近挙動を調べるというのが長い伝統を持つ非常に重要な定理である。筆者が共著者の谷口節男氏と行った研究はいわばこの定理の劣リーマン幾何版である。劣リーマン幾何の枠組みでは、熱核の解析が難しくて簡単にはわからないので、今まではCR多様体などのいい状況でしかわかっていなかったが、この研究でいっきに"equiregular劣リーマン多様体"という非常に広いクラスの多様体のときにも解決できた。また後半には白色ノイズ付きの準地衡流方程式を時間局所的に解く研究を行った。これは白色ノイズの挙動が悪すぎるために、通常の意味では解の意味がつかない。よって、研究テーマに掲げた得意な確率偏微分方程式というクラスに属する。筆者はこのモデル時間局所的な適切性を澤野嘉宏氏と共に行った。主にGubinelli-Imkeller-Perkowskiが発明した擬制御解析(paracontrolled calculus)という非常に実解析的な手法を使った。おもな道具はマリアヴァン解析であり、さらにラフパス理論は使っていないが、その考え方を使った。また後半には、白色ノイズ付きの準地衡流方程式を時間局所的に解く研究を行った。未発表だがすでにほぼ完成している。この方程式は白色ノイズの挙動が悪すぎるので、筆者が研究テーマに掲げた特異な確率偏微分方程式というクラスに属する。一年間にかなり重いテーマで2本論文を書けたのは思っていた以上の進捗だといえる。本年度はラフパス理論に関するプレプリントを大阪大学の永沼伸顕氏と書き、特異な確率偏微分方程式に関するプレプリントを首都大学の澤野嘉宏氏と書いた。どちらもarXiv Preprint Serverにおいて公表しており、さらに学術雑誌に投稿済みで、現在審査中である。前者は非整数ブラウン運動で駆動されたラフパスの意味での確率微分方程式の解の密度関数を考察したのものである。係数ベクトル場にヘルマンダー条件を仮定すると、解はなめらかな密度関数を持つことが、マリアヴァン解析を使うと証明できることはすでにわかっている。密度関数の単時間での漸近挙動をしらべ、通常の確率微分方程式の場合でよくしられるBen Arousの有名な結果を、この場合にも拡張することができた。
PETと酸素15標識ガスで測定した脳血流と酸素代謝画像の正常データベースの作成

ポジトロン放出断層撮影法(PET)において、酸素15標識の3種類のガス、すなわち二酸化炭素ガス(CO2)、酸素ガス(O2)、一酸化炭素ガス(CO)を用いると、局所脳血流(CBF)、酸素消費量(CMRO2)、酸素摂取率(OEF)、および血液量(CBV)を測定し画像化できる。本法は脳血管障害の診断とくに脳動脈閉塞症の血行再建手術の適応決定や術後の評価などに有用で、健康保険も適用されている。しかし、ガスの吸入方法、撮影時間、諸定数の設定値など測定方法の詳細がPET施設によって異なり、しかも測定値がこれらの影響を受けるため、異なる施設の測定値を直接比較することが困難である。そこで本法を実施している施設から正常データと測定方法の詳細情報を集めて比較した。11施設から70例のデータを集めた。CO2ガスでは7施設(O2ガスでは8施設)がsteady-state法を用い、残りがnon-steady-state法、水の分配係数の設定値は0.8から1.0まで施設によって異なった。中大脳動脈領域の前頭葉から頭頂葉にかけての大脳皮質に関心領域を設定して求めた全例の平均と標準偏差は、CBF=44.4±6.5mL/100mL/min;CBV=3.8±0.7mL/100mL;OEF=0.44±0.06;CMRO_2=3.3±0.5mL/100mL/minであった。施設により有意差があったが、その程度は個人差に比べて許容できる程度に小さく、わが国における本法の正常データベースの構築は十分可能と考えられた。次に、各被検者の脳画像を解剖学的に標準化し、標準脳座標系において、正常例の平均画像を作成した。12施設76人のCBFデータをSPM99を用いて解剖学的標準化し、さらに同条件でCMRO2、OEF,CBV画像も標準化し、それぞれの平均正常画像を作成した。これはわが国における本法で測定した脳の各部位における正常値の指標となると考えられた。ポジトロン放出断層撮影法(PET)において、酸素15標識の3種類のガス(二酸化炭素ガス(CO2)、酸素ガス(O2)、一酸化炭素ガス(CO))を組み合わせて用いると、局所脳血流(CBF)、酸素消費量(CMRO2)、酸素摂取率(OEF)、および血液量(CBV)を測定し画像化できる。本法は脳動脈閉塞症の血行再建手術の適応決定や術後評価、脳循環代謝改善薬の効果の評価など、幅広い有用性があり、健康保険も適用されている。しかし、定量値がガスの吸入時間や撮影時間、水の分配係数など諸定数の設定値の影響を受け、施設によって方法の詳細やソフトウエアの設定が異なるため、PET施設によって正常値が異なる可能性がある。本研究では、国内の11のPET施設から、健常人の酸素15標識ガスPETデータを集めるとともに、各施設の測定方法の詳細を調べた。その結果、CO2とO2については、古典的なsteady-state法(一定濃度の放射性ガスを吸入させて放射能が平衡に達してから測定する)は7施設で、残りの4施設は短時間吸入法やボーラス吸入法、あるいはCO2ガスのかわりに酸素15標識水の1回静注法など、平衡状態を用いない方法であった。

健常者データは全部で70人分(平均52歳)が集まり、前頭葉頭頂葉の大脳皮質領域の正常値の平均は、CBFが44.4ml/100ml/min、CMRO2が3.3ml/100ml/min、OEFが0.44、CBVが3.8ml/100mlであった。施設毎の正常平均値はCBFが35.6から47.7、CMRO2が2.7から3.9、OEFが0.36から0.51、CBVが3.0から4.9まで分布していたが、施設内の個人差も同程度に大きかった。ポジトロン放出断層撮影法(PET)において、酸素15標識の3種類のガス、すなわち二酸化炭素ガス(CO2)、酸素ガス(O2)、一酸化炭素ガス(CO)を用いると、局所脳血流(CBF)、酸素消費量(CMRO2)、酸素摂取率(OEF)、および血液量(CBV)を測定し画像化できる。本法は脳血管障害の診断とくに脳動脈閉塞症の血行再建手術の適応決定や術後の評価などに有用で、健康保健も適用されている。しかし、ガスの吸入方法、撮影時間、諸定数の設定値など測定方法の詳細がPET施設によって異なり、しかも測定値がこれらの影響を受けるため、異なる施設の測定値を直接比較することが困難である。そこで、本法を臨床実施している全国のPET施設から、正常データと測定方法の詳細に関する情報を集めて比較し、正常値の施設や方法による違いを検討した。11施設から70例の正常データが集め、中大脳動脈領域の前頭葉から頭頂葉にかけての大脳皮質に関心領域を設定して求めた全例の平均と標準偏差は、CBF=44.4±6.5mL/100mL/min;CBV=3.8±0.7mL/100mL;OEF=0.44±0.06;CMRO_2=3.3±0.5mL/100mL/minであった。施設により有意差があったが、その程度は個人差に比べて許容できる程度に小さく、わが国における本法の正常データベースの構築は十分可能と考えられた。次に、各被検者の脳画像を解剖学的に標準化し、標準脳座標系において、正常例の平均画像を作成した。12施設76人のCBFデータをSPM99を用いて解剖学的標準化し、さらに同条件でCMRO2、OEF,CBV画像も標準化し、それぞれの平均正常画像を作成した。これはわが国における本法で測定した脳の各部位における正常値の指標となると考えられた。
アスパラギン酸プロテアーゼ阻害剤の医薬化学研究

AIDSの原因ウイルスであるHIV,成人T-細胞白血病をおこすHTLV-1,マラリアの原虫Plasmodium,アルツハイマー病を発症させるβアミロイドタンパク生成,これらはいずれもアスパラギン酸プロテアーゼが重要な役割を果たしている.申請者の研究グループでは,これらのプロテアーゼ阻害剤のデザイン・合成に成功している,これらの研究結果をもとに申請者は,酵素のX線結晶構造のコンピュータ支援シミュレーション・ドッキングを行い,高活性化合物を探索した。また,薬剤耐性克服や,細胞膜透過性向上のため,脂溶性の高い低分子化合物の探索も行った。さらに,このドッキング方法を用いて,重症呼吸器疾患を引き起こすSARSコロナウイルス,慢性肝炎の原因菌であるHCVのプロテアーゼの阻害剤の探索も行い,難病克服を目指した。1.ATL治療薬をめざした、HTLV-1プロテアーゼ研究においては、オクタペプチドKNI-10161の小分子化を進め、ヘキサペプチドKNI-10166が阻害活性を有することを見出した。2.アロフェニルノルスタチン含有HIVプロテアーゼ阻害剤のP2/P3位にD-システインを導入し、高活性、高選択性を有する阻害剤KNI-1931の合成に成功した。3.膜透過性改善のため高活性BACE1阻害剤KMI-429のP1'位酸性残基の変換を行った。P1'位に疎水性基を持つKMI-758とP1'位の低分子化を行ったKMI-880が高い活性を持つことを見出した。AIDSの原因ウイルスであるHIV,成人T-細胞白血病をおこすHTLV-1,マラリアの原虫Plasmodium,アルツハイマー病を発症させるβアミロイドタンパク生成,これらはいずれもアスパラギン酸プロテアーゼが重要な役割を果たしている.申請者の研究グループでは,これらのプロテアーゼ阻害剤のデザイン・合成に成功している.これらの研究結果をもとに申請者は,酵素のX線結晶構造のコンピュータ支援シミュレーション・ドッキングを行い,高活性化合物の探索をめざした.また,薬剤耐性克服や,細胞膜透過性向上のため,脂溶性の高い低分子化合物の探索も試みた.さらに,このドッキング方法を用いて,重症呼吸器疾患を引き起こすSARSコロナウイルス,慢性肝炎の原因菌であるHCVのプロテアーゼの阻害剤の探索も行い,難病克服を目指した.1.アルツハイマー病を引き起こすβ-セクレターゼ(BACE1)のX線結晶構造のコンピュータ支援シミュレーション・ドッキングを行い,P2位の構造を様々に変換した化合物を合成した.2.マラリア発症に重要なplasmepsin IIのX線結晶構造のコンピュータ支援シミュレーション・ドッキングを行い,P2位の構造を様々に変換した化合物を合成するための予備実験を行った.3.HTLV-1プロテアーゼおよびプラスメプシンIVの構造が発表されたので,データを収集し評価した.4.HIVプロテアーゼ阻害剤,HTLV-1プロテアーゼ阻害剤を合成した.AIDSの原因ウイルスであるHIV,成人T-細胞白血病をおこすHTLV-1,マラリアの原虫Plasmodium,アルツハイマー病を発症させるβアミロイドタンパク生成,これらはいずれもアスパラギン酸プロテアーゼが重要な役割を果たしている.申請者の研究グループでは,これらのプロテアーゼ阻害剤のデザイン・合成に成功している.これらの研究結果をもとに申請者は,酵素のX線結晶構造のコンピュータ支援シミュレーション・ドッキングを行い,高活性化合物を探索した。AIDSの原因ウイルスであるHIV,成人T-細胞白血病をおこすHTLV-1,マラリアの原虫Plasmodium,アルツハイマー病を発症させるβアミロイドタンパク生成,これらはいずれもアスパラギン酸プロテアーゼが重要な役割を果たしている.申請者の研究グループでは,これらのプロテアーゼ阻害剤のデザイン・合成に成功している.これらの研究結果をもとに申請者は,酵素のX線結晶構造のコンピュータ支援シミュレーション・ドッキングを行い,高活性化合物を探索した。1.約50のHTLV-1プロテアーゼ阻害剤を合成した。酵素阻害活性を、測定中である。X線結晶構造解析も計画中である。2.HTLV-1プロテアーゼ阻害剤の構造活性相関データ解析の結果をBioorganic Medicinal ChemistryLettersに投稿して受理され、印刷中である。3.アルツハイマー病治療薬をめざしたβセクレターゼ阻害剤において、P1'位の構造活性相関を検討し、C末端にテトラゾール基を有する高活性のKMI-570,KMI-684を得た。また、P4位の構造変換を行い、KMI-574が高い酵素阻害活性と、細胞内での阻害活性を示した。AIDSの原因ウイルスであるHIV,成人T-細胞白血病をおこすHTLV-1,マラリアの原虫Plasmodium,アルツハイマー病を発症させる

βアミロイドタンパク生成,これらはいずれもアスパラギン酸プロテアーゼが重要な役割を果たしている.申請者の研究グループでは,これらのプロテアーゼ阻害剤のデザイン・合成に成功している,これらの研究結果をもとに申請者は,酵素のX線結晶構造のコンピュータ支援シミュレーション・ドッキングを行い,高活性化合物を探索した。また,薬剤耐性克服や,細胞膜透過性向上のため,脂溶性の高い低分子化合物の探索も行った。さらに,このドッキング方法を用いて,重症呼吸器疾患を引き起こすSARSコロナウイルス,慢性肝炎の原因菌であるHCVのプロテアーゼの阻害剤の探索も行い,難病克服を目指した。1.ATL治療薬をめざした、HTLV-1プロテアーゼ研究においては、オクタペプチドKNI-10161の小分子化を進め、ヘキサペプチドKNI-10166が阻害活性を有することを見出した。2.アロフェニルノルスタチン含有HIVプロテアーゼ阻害剤のP2/P3位にD-システインを導入し、高活性、高選択性を有する阻害剤KNI-1931の合成に成功した。3.膜透過性改善のため高活性BACE1阻害剤KMI-429のP1'位酸性残基の変換を行った。P1'位に疎水性基を持つKMI-758とP1'位の低分子化を行ったKMI-880が高い活性を持つことを見出した。
両指向性HIVを支持する新規HIVコレセプターの単離とその解析

HIVの感染にはその標的細胞上のCD4分子及びケモカイン受容体であるCXCR4ないしCCR5分子がその侵入に必須であり、CXCR4がT細胞株HIV(X4 HIV)、CCR5がマクロファージ指向性HIV(R5)の感染を支持することが明かとなっている。また、HIV感染の病態進行にしたがい、ウイルスはR5からX4へと進化していくと考えられているが、そのメカニズムについては未だ明らかではない。一般にマクロファージ指向性HIV感染はCCR5の正常リガンドであるC-Cケモカイン類、MIP-1α,MIP-1β,RANTESにより阻害され、CXCR4のリガンドであるSDF-1には抵抗性である。そこで、このようなC-Cケモカインの存在がR5からX4への進化と関連しているのではないかと考え、in vitroにおいてR5 HIV感受性T細胞株であるCCR5発現MOLT-4#8(MOLT-4#8/CCR5)を標的細胞として、MIP-1α存在下でR5 HIVからMIP-1α抵抗性ウイルスを樹立し、このような抵抗性の獲得がHIVのR5からX4へのシフトに関与しているかどうか検討した。得られたMIP-1α抵抗性ウイルスは、CD4及びCCR5発現HeLa細胞であるMAGI/CCR5を使用したアッセイ系で、親株のJR-FLと比較して、約4-5倍の耐性を示していた。またウイルスエンベロープのアミノ酸配列上、親株と比較しV2とV3と呼ばれる変異に富んだ領域にそれぞれ単一アミノ酸変異が認められた。すなわち抵抗性HIVのV2領域においてはバリンからメチオニン(V166M)への、V3領域においてはセリンからグリシン(S303G)への変異が生じていた。これらの変異の中で、いずれのアミノ酸変異がその抵抗性付与に関連しているかを検討するために、V2,V3領域単独変異及び両者の変異をもつHIVエンベローブ発現ベクターと、ルシフェラーゼをリポーター遺伝子としてもつHIVとのシュードタイプHIVを作製し、MAGI/CCR5を標的細胞としてMIP-1α抵抗性について検討した。その結果V2及びV3領域の両者の変異がMIP-1α抵抗性に必要であることが判明した。しかしながら、このウイルスのケモカイン受容体利用性は親株と同様にCCR5だけであり、CXCR4へとは変化していなかった。これらの所見より、このようなC-Cケモカインの存在はR5からX4へ進化のプレッシャーとしては機能していないと考えられたが、CCR5を利用しながらC-Cケモカイン抵抗性を獲得するウイルスがin vitroで存在できうることから、HIVのエンベロープの侵入に際してのCCR5認識と、正常リガンドであるMIP-1αのCCR5の認識は、まったく同一ではなく分子学的に差違があることが明かとなった。さらにはエンベロープのCCR5認識にはV3領域が主要な働きをしていることが以前より報告されていたが、今回の所見からV2領域もその認識に関連していることが明かとなった。

これらの所見より、このようなC-Cケモカインの存在はR5からX4へ進化のプレッシャーとしては機能していないと考えられたが、CCR5を利用しながらC-Cケモカイン抵抗性を獲得するウイルスがin vitroで存在できうることから、HIVのエンベロープの侵入に際してのCCR5認識と、正常リガンドであるMIP-1αのCCR5の認識は、まったく同一ではなく分子学的に差違があることが明かとなった。さらにはエンベロープのCCR5認識にはV3領域が主要な働きをしていることが以前より報告されていたが、今回の所見からV2領域もその認識に関連していることが明かとなった。
プロリン特異性ペプチダーゼの選択的オリゴペプチダーゼ作用とプロリン特異性機構解明

種々のプロリン特異性ペプチダーゼが存在し、多くのプロリンを持つ生理活性ペプチドの代謝関係し重要な働きをしていると考えられている。この中、セリン酵素に属するプロリン特異性ペプチダーゼは、アセチルコリンエステラーゼやリパーゼも含む新しいファミリーを形成していることを明らかにしてきた。への特異性の発現機構を明らかにすることプロリルアミノペプチダーゼの立体構造解析に成功した。既にピログルタミルペプチダーゼの構造解析に成功しているが、両者はアミノペプチダーゼであり、基質特異性もプロリンとピログルタミン酸は同じ5員環構造を持ち、その他共通の性質が見られる。そのため両酵素を比較研究した。(1)ピログルタミルプチダーゼの結晶解析Bacillus由来ピログルタミルペプチダーゼのX線結晶解析行い、アミノ酸残基をターゲットとして部位特異的変異酵素の結晶解析を行って来た。R91A変異酵素は野生酵素の10倍の活性化が見られ、理由を解析した。(2)プロリルアミノペプチダーゼの結晶解析全く独自で、プロリルアミノペプチダーゼのX線結晶解析に成功した。今回初めて大腸菌での発現にセレノメチオニンを入れ、重原子置換に利用した。酵素は2量体で、活性部位はかなり奥深くにあり、触媒に関与するセリン残基他catalytic triadとプロリンが結合する疎水ポケットが明らかになった。(3)ペプチド基質を用いたプロリンへの選択的認識の機構解明6種類のプロリン特異性ペプチダーゼはプロリンをサルコシンやアラニンに置換えた基質に作用することから、プロリン特異性酵素は5員環を同じ機構で認識していることを明らかにした。