hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
粒子加速度を利用した集束型超音波口腔治療器の研究開発

本研究では、集束型超音波洗浄を利用した口腔治療器の研究開発をおこなった。その結果、350kHz前後の周波数帯で、振動子の小型化に成功し、印加電力と音圧関係は印加電圧依存的に音圧が上昇した。バイオフィルムの除去効果は10Wで約17%の残存率で印加電力と残存バイオフィルムの間には、負の相関関係があった。また、EDXで観察すると、試験片表面に細菌塊や、表面に対する損傷は観察されず、元素分析においても、主成分であるTiが96%存在した。ミニブタの口腔組織による安全性試験を行った結果、照射ワット数10Wは好中球浸潤、単核細胞浸潤、水腫等の炎症の急性期の反応がみられなかった。本年度は粒子加速度を有する集束型超音波洗浄技術を応用して歯根表面またはチタン表面に付着するバイオフィルムの除去および殺菌効果に関する、超音波照射条件を検討した。その結果、各周波数共に、振動子から約50mm以上離れた場所に、最大音圧が得られることを、シミュレーション(ビームパタン)によって確認された。その結果を基に、実際の音圧をハイドロホーンを用いて計測した結果、各周波数共に、ビームパタンと同様な結果を示した。また、この音圧は、振動子に印加する電圧依存的に増加することも確認された。そこで、ヒト口腔内由来のバイオフィルムの除去効果を検討した結果、周波数400kHz以下では、バイオフィルムの除去が印加電圧-音圧の増加に依存していることが観察された。またバイオフィルム除去と照射距離に関しては、振動子から50ー60mmの範囲が有効と考えられる。なぜなら、60mm以上離れると、最大音圧は大きくなるが、水流中に安定した音圧を得ることが難しく、バイオフィルムの除去効果が低下する傾向が観察された。このことから、印加電圧10ー15W、振動子から60mm(先端ノズルから10mm)の条件で評価すると、照射開始から60secでバイオフィルムは70%程度除去され、180secまで照射すると、除去率は90%まで増加した。一方で、MHz帯の洗浄装置においては、バイオフィルムの除去効果は低下する傾向が観察された。この結果はチタン表面のSEM像においても同様な結果を示している。本年度は集束型超音波洗浄技術を有する洗浄技術を組み入れた口腔内治療機の作成を目的に、周波数、振動子、印加電力、音圧、洗浄効果、殺菌効果を対象に実験を進めた。その結果、口腔内治療を目的とするため、振動子の小型化と周波数の特定を行った結果、350kHz前後の周波数帯で、振動子の小型化に成功した。そこで、シミュレーション(ビームパタン)によって音場分布を確認すると振動子から40mm程度の所に高い音場が確認された。しかし、水量300ml時の印加電力と音圧関係をハイドロホンを用いて測定すると、振動子から50mm以上離れた時に高い音圧が得られた。また、印加電圧と音圧の関係に関しては、印加電圧依存的に音圧が上昇し、最大電力10W時に0.6Mpaを維持した。次に人工プラークを用いて、除去効果と最少音圧の閾値を計測した結果、印加電力6W時から、除去効果が観察され、散布図からの回帰直線で約0.43Mpaと算出された。しかし実際のヒト口腔内由来のバイオフィルムモデルを用いて、バイオフィルムの除去効果を検討した結果では、6Wでは約60%の残存率に対して、10W,60secで約17.%の残存率であった。このことから、印加電力と残存バイオフィルムの間には、負の相関関係があることを証明した。また、この時の試験片をSEMおよびEDXで観察すると、試験片表面に細菌塊や、表面に対する損傷は観察されず、元素分析においても、主成分であるTiが96%存在することを確認した。一方で、一部の試験片を用いて、殺菌効果を検討したが、10W,60secの照射条件において、殺菌効果は確認できなかった。周波数、振動子、水量、印加電力量の設定は終了し、バイオフィルムの除去効果も確認できている。本年度は集束型超音波洗浄技術を有する洗浄技術を組み入れた口腔内治療機の試作器を作成し動物による安全性試験とヒト口腔内を対象としたプラーク除去および疼痛試験を行った。その結果、振動子の小型化と周波数の特定を行った結果、350kHz前後の周波数帯で、振動子の小型化に成功し、これを用いてミニブタ口腔内による安全性試験を行った。対象は歯肉組織、歯髄組織および舌組織とした。歯周疾患モデルは、歯肉縁下にリガチャーを用いた、歯肉炎モデルと歯槽骨を一部削除し、リガチャーを併用した歯周炎モデルを事前に作製した。炎症を惹起させた実験的炎症モデルの口腔内は、天然歯表面にプラークの蓄積が観察され、これにより歯肉辺縁には著明な発赤が観察された。各炎症モデル、正常歯肉および舌組織に対して、流水式超音波歯垢除去器を作用させる前後の歯肉の状態を観察した結果、流水式超音波処置直後、処置後4時間後、処置後24時間後の歯肉に発赤の増悪は観察されず、出血も観察されなかった。

また、肉眼的に観察した部位を組織学的に評価すると、天然歯の歯周炎及び歯肉炎モデルの処置後24時間で歯肉の粘膜固有層に好中球浸潤がみられたが、単核細胞浸潤を伴っていること及び処置後4時間において水腫等の炎症の急性期の反応がみられていないことから、惹起された炎症モデルに起因する変化と考えられた。舌及び歯髄のいずれの組織においても、照射ワット数10Wで組織学的変化がみられなかったことから、正常組織に対する流水式超音波照射の影響はないと考えられた。また、ヒト口腔内での疼痛試験の結果、連続照射に比べて、間歇照射の方が疼痛も少なく、洗浄効果も高い傾向をしめした。本研究では、集束型超音波洗浄を利用した口腔治療器の研究開発をおこなった。その結果、350kHz前後の周波数帯で、振動子の小型化に成功し、印加電力と音圧関係は印加電圧依存的に音圧が上昇した。バイオフィルムの除去効果は10Wで約17%の残存率で印加電力と残存バイオフィルムの間には、負の相関関係があった。また、EDXで観察すると、試験片表面に細菌塊や、表面に対する損傷は観察されず、元素分析においても、主成分であるTiが96%存在した。ミニブタの口腔組織による安全性試験を行った結果、照射ワット数10Wは好中球浸潤、単核細胞浸潤、水腫等の炎症の急性期の反応がみられなかった。各周波数帯のシミュレーション、音圧測定、バイオフィルム除去効果に関して想定した結果を得ている。動物を用いて安全性試験を実施し、ヒト口腔内での歯垢除去試験を行う。医歯薬学各周波数、印加電圧、流水量、照射距離により、バイオフィルム除去効果に違いが生じるため、流水条件下、霧化条件下の違いによる、殺菌効果と超音波遊起ラジカルとの関係を検討する。インプラント体を用いた安全性試験を予定しており、特殊加工したインプラント体の発注が次年度となったため。チタン試験片を発注しているが、加工に時間がかかり、次年度の請求となったため。動物実験用に加工したインプラント体の費用と埋入器具とラジカル測定費用に費やす現在、発注加工しているチタン試験片試料の使用および、超音波誘起ラジカル測定試薬に費やす。
新規ヒストン修飾であるヒストンH4K5メチル化の造血分化制御における意義の解明

SMYD3はヒストンH4K5をメチル化修飾するヒストンメチルトランスフェラーゼである.本研究は,ヒトに変異表現型が近いマウスを用いて、ヒストンH4K5のメチル化修飾が造血分化制御にどのように関わっているのかを明らかにすることを目的としている。本年度は昨年度に引き続き,Smyd2ノックアウトマウス(Smyd2-/-マウス),Smyd3ノックアウトマウス(Smyd3-/-マウス)およびSmyd2とSmyd3のダブルノックアウトマウス(Smyd2-/-;Smyd3-/-マウス)を用いて造血系細胞の表現型解析を行った.具体的には,骨髄,脾臓,甲状腺から造血系細胞を採取しフローサイトメトリー法を用いてB-220、CD19、CD3、CD4、CD8、CD11b、Gr-1、CD41等の細胞表面マーカーの発現解析により前駆細胞をはじめとした造血系細胞の分化状況を調べた.その結果,Smyd2-/-,Smyd2-/-;Smyd3-/-マウスでは,造血前駆細胞,T細胞系列やB細胞系列に変化は見られなかったが,Smyd3-/-マウスについては,造血前駆細胞,T細胞系列やB細胞系列の頻度に変化が見られた.今後,これらの結果をもとに,SMYD2とSMYD3の造血分化制御に関わる分子メカニズムの解明を目指して本研究を継続していく.26年度が最終年度であるため、記入しない。26年度が最終年度であるため、記入しない。最近,ヒストンH4K5メチル化修飾が確認され、このメチル化はSMYD3によって付加されることが報告された.SMYD3は、大腸癌、肝臓癌、乳癌でその発現が亢進しており,そしてその発現が癌細胞の生存や増殖に重要な役割を果たしていることが報告されている.また,ゼブラフィッシュを用いた研究ではSmyd3が骨格筋および心臓形成に関与していることが明らかにされている.我々は,骨格筋や心筋と同じ中胚葉由来である血液系に着目し,新規ヒストン修飾であるヒストンH4K5メチル化修飾が血液系に与える影響を検討し、その意義を明らかにしていくことを目的とする.本研究では,Smyd2とSmyd3が互いに機能を補償している可能性があるため、Smyd3-/-マウスだけでなく、Smyd2-/-;Smyd3-/-マウスおよびSmyd2-/-マウスも用いて検討を行った.Smyd2-/-およびSmyd3-/-マウスはCD34-KSL造血幹細胞頻度やコロニー形成能の亢進傾向を示した.しかしながら,Smyd2-/-;Smyd3-/-マウスでは,このような表現型を示さなかった.SMYD3はヒストンH4K5をメチル化修飾するヒストンメチルトランスフェラーゼである.本研究は,ヒトに変異表現型が近いマウスを用いて、ヒストンH4K5のメチル化修飾が造血分化制御にどのように関わっているのかを明らかにすることを目的としている。本年度は,Smyd2-/-,Smyd3-/-およびSmyd2-/-;Smyd3-/-マウス系統を確立した.さらにこれらのマウスを用いて,血液系の表現型に着目し,解析を行うことができた.来年度は,本年度に引き続きSmyd2-/-,Smyd3-/-およびSmyd2-/-;Smyd3-/-マウスを用いて血液系の表現型解析を行っていく.1末梢血を採取して,血球数の測定およびフローサイトメトリー法を用いてB-220,CD19,CD3,CD4,CD8,CD11b,Gr-1,CD41等の細胞表面マーカーの発現状況を解析し,末梢血中の血液細胞の構成に異常がみられるかどうか調べる.2骨髄細胞を採取し,細胞数の測定および各種コロニー形成法やフローサイトメトリー法を用いたSca-

1,c-kit,CD11b,Gr-1,CD-3,B-220,CD41等の細胞表面マーカーの発現解析により骨髄中の造血幹細胞,前駆細胞をはじめとした造血系細胞の分化状況を調べる.3リンパ球系細胞への分化に異常がある場合は,他のリンパ組織についても細胞表面解析を行い各分化段階のリンパ球系細胞構成を比較する. 4抗がん剤である5-FUあるいは放射線照射を用いて,Smyd2-/-,Smyd3-/-,Smyd2-/-;Smyd3-/-、および野生型のマウスの骨髄組織に損傷を与え,末梢血を経時的に採取して、血球数の測定を行う.末梢血中の血液細胞の構成を比較する.さらに,骨髄細胞を経時的に採取し,細胞数,各種コロニー形成細胞数の算定を行い骨髄組織の再構築能を調べる.
木造住宅生産システムの多様化にみる技術・技能の役割分担関係

本年度の研究成果の概要は以下の通りである。1.住宅生産システムにおける技術・技能の役割分担に関する理論的検討住宅生産システムにおける技術と技能の役割分担について、適正技術論をもとに理論的な検討を行った。地域的な性格の強い住宅生産システムにおいて、地域単位・人間の個性の反映する技術、すなわち、技能的要素と技術的要素がうまくかみ合った新しい地域技術・地縁技術としての適性技術開発の必要性を論じた。2.適性技術の開発状況と技術・技能の役割分担関係の調査最近各地で取り組みの始まっている適正技術の開発のうち、克雪住宅の計画・開発(富山県・上平村)、自然環境を活用したパッシブソーラー技術の開発(福岡県・「ふくおか型住宅」)、伝統的な住宅の意匠と構法に近代的な技術を付加した技術開発(富山県・八尾町)、地域産材を活用した構法開発(熊本県・「郷の匠」)、古民家再生の技術開発(岡山県、大分県・臼杵市)などを取り上げて、その住宅生産システムの特徴や技術・技能の役割分担関係について実態調査を行った。開発された適性技術の内容によって技術・技能の態様は様々である。共通点として、生産システムの合理化を図る上で、技能の技術化が多様な側面で積極的に行われていることが明らかになった。ただし、その妥当性については評価方法が確立していないことが大きな課題となっている。3.地域の木造住宅生産システムにおける技術と技能の役割分担関係の再構築地域の木造住宅生産システムにおける適性技術の開発と技術・技能の役割分担関係の再構築のための要件を整理した。とりわけ、新しい適性技術の確認が必要であり、そのためには地域の技術開発のネットワークと地域の建築試験場・林業試験場・大学などの試験・研究機関のネットワークの連携が重要であることを指摘した。
運動時における非活動肢の導管静脈血管の調節機構-活動筋からの反射性制御の影響-

運動によって生じる非活動肢の静脈血管収縮は交感神経性に調節されているが,そのメカニズムは明らかにされていない.本研究では,運動によって生じる非活動肢の静脈血管収縮に対し,活動筋からの反射性制御がどのように関わっているのか検討した.その結果, 1)筋収縮によって生じる代謝産物を検知する筋代謝受容器を介した反射性調節は静脈血管収縮を引き起こすが, 2)筋の発揮する力を感知する筋機械受容器を介した反射性調節はほとんど影響を及ぼさないことが明らかとなった.運動によって生じる非活動肢の静脈血管収縮は交感神経性に調節されているが,そのメカニズムは明らかにされていない.本研究では,運動によって生じる非活動肢の静脈血管収縮に対し,活動筋からの反射性制御がどのように関わっているのか検討した.その結果, 1)筋収縮によって生じる代謝産物を検知する筋代謝受容器を介した反射性調節は静脈血管収縮を引き起こすが, 2)筋の発揮する力を感知する筋機械受容器を介した反射性調節はほとんど影響を及ぼさないことが明らかとなった.運動時において非活動肢の導管静脈血管は交感神経性に収縮することが示されているが,そのメカニズムは明らかではない.運動由来の交感神経活動亢進を引き起こすひとつに,末梢(活動筋)からの反射性制御(筋機械受容器反射および筋代謝受容器反射)が挙げられる.平成22年度においては,末梢からの反射性制御の一つである筋代謝受容器反射が導管静脈の血管調節に及ぼす影響を明らかにすることを目的とした.被験者は健康な成人男女12名とした.被験者は仰臥位姿勢にて20分以上安静を保った後,次のような2条件のプロトコールを実施した;1)1.5分間の45%MVC強度の静的掌握運動後,運動肢の上腕部を220mmHg以上で2分間虚血する条件(OCCL)と2)1.5分間の45%MVC強度の静的掌握運動後,虚血を伴わない回復期を有する条件(CONT).測定項目は心拍数,平均動脈血圧,尺側皮静脈の血管横断面積と血流速度とした,血管横断面積と血流速度は非活動肢の上腕部を50mmHgで加圧した状態で超音波法にて測定し,両者から血流量を算出した.心拍数はCONTおよびOCCLとも,運動中に増大し,運動後安静値まで戻った.平均動脈血圧はCONTおよびOCCLとも運動中に増大し,運動後はCONTでは安静値まで戻ったが,OCCLでは高値が維持された.尺側皮静脈の血管横断面積と血流量はCONTおよびOCCLとも運動中に低下し,運動後はCONTでは安静値まで戻ったが,OCCLでは低値が維持された。これらの結果から,運動に伴う非活動肢の表在性静脈血管収縮は筋代謝受容器反射を介した交感神経活動亢進により引き起こされる可能性が示唆された.平成23年度は,活動筋からの反射性制御のうち筋機械受容器反射が非活動肢の静脈血管応答に及ぼす影響を明らかにすることを目的とした.被験者は半仰臥位姿勢にて20分以上の安静を保った後,次のような2条件のプロトコールを実施した;1)35%MVC強度で2分間の静的肘屈曲運動のみを行う(EX=セントラルコマンド通常条件)と,2)上腕二頭筋腱部の振動刺激を行いながら1)と同様の運動を行う(EX+VIB:セントラルコマンド低下条件).上腕二頭筋腱部の振動刺激は筋紡錘の求心性神経を刺激し,反射的に筋収縮を生じさせる.つまり,随意的な上腕二頭筋収縮時に腱振動刺激を同時に行うと,随意的な運動時のみと比較して,筋張力は同様である(筋機械受容器反射の程度が等しい)が,セントラルコマンドが低下した状態となる.超音波法を用い,非活動肢の尺側皮静脈血管横断面積を計測し,静脈血管応答の指標とした.もし,筋機械受容器反射による交感神経活動亢進が静脈血管収縮に関わっているのであれば,EXおよびEX+VIBとも運動開始初期から静脈血管横断面積が低下し,静脈血管横断面積の変化は条件間で等しくなると仮説できる.いずれの条件も,運動時の筋張力発揮は35%MVC強度で維持された.しかし,運動中の循環応答やRPEはEXよりもEX+VIBで低値を示した.つまり,セントラルコマンドの賦活程度のみが条件間で異なっていたと推察される.この時,EXで観察された静脈血管横断面積の低下が,EX+VIBでは見られなかった.本研究で得られた結果は仮説と逆の結果となったことから,運動に伴う静脈血管収縮に対し,筋機械受容器反射由来の交感神経活動亢進は有意な影響を及ぼさないことが示唆された.本研究は運動に伴う静脈血管収縮の機序解明を目指したものであり,本研究で得られた結果は,未解決な点が多い運動時の静脈血管応答を理解するうえで有意義な情報になると考えられる.
戦後前衛書の他分野への展開：美術制度の周縁での受容

前衛書は、昭和初期にその萌芽があり戦後に興隆した新たな書の試みで同時代の美術とも交流した。しかし、書は明治期に設定された「美術」の枠外へ置かれていたため美術制度から周縁化された存在で、前衛書家の革新的な制作は書の主流からも疎外された。本研究は、そのような状況下で彼らが展開した制度外での活動とその受容を検討するために、モダニズム建築と協働した森田子龍と篠田桃紅の制作や、上田桑鳩の北海道滝川市での活動と活動内容の多様な展開と受容を調査し、彼らの革新的な制作が支えられた状況を考察する。
マルチメディアによる歯科高速切削シミュレーション教育支援システム確立に関する研究

保存修復学の卒前教育において,臨床実習に入る前段階としてのファントームを用いた基礎学習の果たす役割は重要であり,臨床実習へのスムーズな移行ならびに臨床で不可欠なスキルの習得という点でより効率的なシステムの登場が望まれている.本研究では,術者のスキルの習得度並びに学習による効果を評価するシステムの確立を目指して,試作ダイヤモンドポイントによるメラミン樹脂素材のブロック(ニッシン社)に対する手指切削実験を行い,1.切削シミュレーションソフトを用いた切削圧変化2.抜切削歯の形態計測の双方から評価する方法について検討した.1.切削シミュレーションソフトを用いた切削圧変化負荷圧と切削効率から切削幅とポイントの角度が異なる条件下における適正な切削の評価方法について検討を加えた.切削中はハンドピ-ストレーナー(モリタ社)と切削シミュレーションソフト(モリタ社)により,手指制御によって常にあらかじめ設定した一定の切削圧になるように調節した.各実験郡とも異なった切削圧を設定し,各切削圧毎の切削量を印象材による密度法によって測定した.その測定結果から切削効率を算出し,切削圧と切削効率から各種条件下における適切な切削の評価方法について検討を加えた.その結果,切削効率からみる限り,ポイントの角度や切削幅に関わらず切削圧の変化に対する切削挙動の変化は近似した傾向を示し,切削幅やポイントの角度への影響が小さいことが判明した.以上より,本システムにおいて切削圧を基準とした切削シミュレーショントレーニングへの応用が可能であることが示唆された.2.抜切削歯の形態計測被切削歯の形態をデジタルカメラ(NEC社)を介してパーソナルコンピュータ(日本IBM社)に取り込み,数値データに変換し,その解析結果に基づいて最小自乗法による最適化問題から切削技法の適正度について評価するために最も有効であるような臼歯1級窩洞の理想窩洞の設計を試みた.その結果,メラミン人工歯上で,咬合面の裂溝と裂溝並びに裂溝と辺縁隆線との交点を基準とし,窩洞の境界を基準点間の距離の比として表現する方法が最適であった.現在,被切削歯の形態を点の集合として座標値に変換する手法とその精度について目下検討中である.保存修復学の卒前教育において,臨床実習に入る前段階としてのファントームを用いた基礎学習の果たす役割は重要であり,臨床実習へのスムーズな移行ならびに臨床で不可欠なスキルの習得という点でより効率的なシステムの登場が望まれている.本研究では,術者のスキルの習得度並びに学習による効果を評価するシステムの確立を目指して,試作ダイヤモンドポイントによるメラミン樹脂素材のブロック(ニッシン社)に対する手指切削実験を行い,1.切削シミュレーションソフトを用いた切削圧変化2.抜切削歯の形態計測の双方から評価する方法について検討した.1.切削シミュレーションソフトを用いた切削圧変化負荷圧と切削効率から切削幅とポイントの角度が異なる条件下における適正な切削の評価方法について検討を加えた.切削中はハンドピ-ストレーナー(モリタ社)と切削シミュレーションソフト(モリタ社)により,手指制御によって常にあらかじめ設定した一定の切削圧になるように調節した.各実験郡とも異なった切削圧を設定し,各切削圧毎の切削量を印象材による密度法によって測定した.その測定結果から切削効率を算出し,切削圧と切削効率から各種条件下における適切な切削の評価方法について検討を加えた.その結果,切削効率からみる限り,ポイントの角度や切削幅に関わらず切削圧の変化に対する切削挙動の変化は近似した傾向を示し,切削幅やポイントの角度への影響が小さいことが判明した.以上より,本システムにおいて切削圧を基準とした切削シミュレーショントレーニングへの応用が可能であることが示唆された.2.抜切削歯の形態計測被切削歯の形態をデジタルカメラ(NEC社)を介してパーソナルコンピュータ(日本IBM社)に取り込み,数値データに変換し,その解析結果に基づいて最小自乗法による最適化問題から切削技法の適正度について評価するために最も有効であるような臼歯1級窩洞の理想窩洞の設計を試みた.その結果,メラミン人工歯上で,咬合面の裂溝と裂溝並びに裂溝と辺縁隆線との交点を基準とし,窩洞の境界を基準点間の距離の比として表現する方法が最適であった.現在,被切削歯の形態を点の集合として座標値に変換する手法とその精度について目下検討中である.
胎盤における輸送担体（トランスポーター）の制御に関する研究

1.cAMPがマウス胎盤初代培養において、グルコースの取り込み及びグルコーストランスポーター1の発生発現を抑制することを示した。このことより、cAMPがグルコーストランスポーターの制御因子のひとつであることが明らかになった。次にグルコースのグルコーストランスポーター1に及ぼす影響を3H-2deoxy glucoseの取り込み、グルコーストランスポーター1のNothern blot解析、Immunoblot解析を行って、検討した。グルコースは、マウス胎盤初代培養において、グルコースの細胞への取り込みを抑制し、グルコーストランスポーター1のmRNA、蛋白レベルを抑制することが明らかになった。グルコース自身が、グルコーストランスポーター1の制御因子である可能性が示唆された。現在、ストレプトゾトシンを用いて、糖尿病合併妊娠マウスを作成し、in vitroにおける高血糖の胎盤グルコーストランスポーターへの影響を検討中である。近年グルコース輸送を担う、グルコーストランスポーター(GLUT)の蛋白構造が決定され、その蛋白量・遺伝子レベルの解析が可能となった。我々は,GLUT-1が胎盤での糖輸送に重要な役割をし、妊娠後期に増加することを証明してきた。糖尿病患者の胎盤を採取し、GLUT量を検討したところ、健常胎盤に比し、有意な差は認められなかった。マウス胎盤初代細胞を行い、cAMP及びグルコースのGLUTへの制御につき検討を加えた。cAMP及びグルコースが、マウス胎盤初代細胞で、GLUTレベルを抑制することを証明した。しかし、セロトニンや、ロイシンのとりこみは抑制しなかった。また、正常分娩後の胎盤と陣痛のない帝王切開時の胎盤より、それぞれRNAを抽出し、mRNA Diffrential Display-RT-PCRを行い、PCR断片を採取し、両者間で発現の異なる輸送担体を含めたmRNAのcDNAを現在スクリーニング中である。
危機管理体制の整備に関する研究―組織開発的手法の援用と提言にむけて

本研究の目的は、わが国における危機管理議論に枠組みを提供することである。昨年度にひきつづき、本年度も在米研究をおこない、最終的にアメリカ危機管理の学理について整理し、わが国の危機管理(学術と実務)に提言をおこなうことに成功した。アメリカ危機管理は、応用管理科学と実務学問という性質をもつ。応用管理科学はアメリカ行政学に依拠し、実務学問は個人・集団レベルから国レベルまでを包含するマルチレベルアプローチを有する。その学理は、マルチレベルアプローチをもちアメリカ行政学の中心的概念である組織論によって、その組織構造と組織設計に関する議論を基礎とすることがわかった。わが国の危機管理は定義が多様でまとまらないという指摘があるが、それは下位概念化が進んでいることを意味しているので、上位概念を用意するのが有用であろう。その際は組織論を中心として概念整理をおこない、理論構築をすることが適切であるように思われる。本研究では、上位概念としての危機管理および応用管理科学であり実務学問である危機管理の概念整理をおこない、日本危機管理への提言も提示した。これまでの危機管理議論に新たな見解を提供できたという意味で、大いに成果があったように思う。組織開発的手法を危機管理に採用しているアメリカ型危機管理について参与観察をおこなったほか、アメリカ以外の国でアメリカ型危機管理を導入しているオーストラリア・クイーンズランド州の危機管理局にて、アメリカ型危機管理の汎用性について訪問調査もおこなった。これらは、2010年度予定している在米研究のためのプレサーヴェイとして位置づけられるとともに、これまでに発表してきた資料分析に基づく研究成果をフォローするものである。実際のデータを用いたアウトプットは、基本的には2010年度の在米研究で計画している本調査の結果によるものとし、現段階ではプレサーヴェイの結果については発表していない(但し、現在査読中の投稿論文1本を除く)。一方、機会をとらえて日本の制度における論点について発表した。国際学会での発表を2回おこなった(ひとつは医療を事例としたシミュレーション教育に関する経済効果、もうひとつは大規模災害発生時の多当局協働における組織間コンフリクトの問題を取り上げた)ほか、日本の防災制度について概観する報告書を英語で発表した。以上、初年度にあたる今年は、本研究を遂行するための諸条件を整備するべく、わが国における危機管理や防災制度の問題点について理解すること、また、組織開発的手法を援用しているアメリカ型危機管理について、これまで専ら資料分析によっていた理解をより実際的なものにすること、の2点を目標に研究を実施し、多くの好機に恵まれ、国内外において十分に有意義な参与観察と予備調査がおこなえたと考えている。今年度はアメリカ型危機管理における組織開発の実態について実際的な理解を深めるため、在米研究を開始した。とくに、組織開発の中心的概念である教育に焦点を当てるため、以下の3種類の教育組織において観察をおこなった。第一に、連邦危機管理庁(FEMA)の高度教育プログラムに参加している大学で、アメリカ合衆国で最初に危機管理学位を作ったジョージワシントン大学にて、一般の総合大学における危機管理教育の発展や役割について観察することができた。次に、当局附属の教育機関が、ファーストレスポンダーや危機管理専門職に対し、どのような教育開発をおこない、その職務に連携させているのかを観察するため、合衆国消防大学校(National Fire Academy)および沿岸警備隊大学校(the United States Coast Guard Academy)で、訪問調査をおこなった。最後に、連邦危機管理庁の教育開発担当組織であるEMI(Emergency Management Institute)で訪問調査をおこなった。以上、一般の大学、当局附属の教育機関、連邦レベルでの教育開発牽引組織をそれぞれ実際に調査できたことで、危機管理という実務学問領域における成人教育の役割について、その概観ならびに個別組織の役割や全体における位置づけなどが具体的に把握することができた。これらの成果は、京都大学大学院経済学研究科ワーキングペーパーおよび、日本公共政策学会の学会誌にて発表している。上記以外の活動としては、以前より引き続き、参与観察としてIAEM(International Association of Emergency Managers)の会員活動をおこなっているほか、ジョージワシントン大学での国際災害マネジメントの授業において、ゲストスピーカーとして阪神大震災に関するプレゼンテーションをおこなった。
Ｄドーパクロムトートメラーゼが関わるインスリン抵抗性発症機序の多角的研究

新規アディポカインであるDドーパクロムトートメラーゼ(DDT)はインスリン抵抗性改善能を有する。DDTのインスリン抵抗性改善機序の解明を目的に、脂肪細胞特異的DDT過剰発現マウス(TGマウス)を用いた解析、DDTシグナルで発現変動する遺伝子の同定、DDTの脂肪分化抑制機序の検討を行った。TGマウスでは高脂肪食によるインスリン抵抗性発症の抑制傾向が示された。DDT発現抑制脂肪細胞では、インスリン抵抗性の抑制作用を有するVEGF-Aの発現抑制が、増悪作用を有するSEPP-1の発現上昇が認められた。DDTのヒト脂肪細胞分化抑制機序にc-Fosを介したLMO3の発現抑制が関与することが示唆された。脂肪細胞から分泌されるD-dopachrome tautomerase(DDT)の組換え蛋白質を肥満マウスに投与するとインスリン抵抗性の改善が認められる。これまでにDDTは脂肪組織に作用し、1)cAMP-activated protein kinase (AMPK)を介する脂質代謝を抑制すること、2)インスリン抵抗性惹起因子である脂肪酸結合タンパク質aP2やセレノプロテインPの発現を抑制すること、3)インスリン抵抗性を改善することが報告されている血管増殖因子VEGF-AとIL-6の発現を高めることが確認されており、これらがDDTのインスリン抵抗性改善機序に寄与する可能性が考えられた。脂肪細胞特異的にDDTを過剰発現する遺伝子改変マウス(TGマウス)では高脂肪食を摂取させた際にインスリン抵抗性の改善傾向が認められたが、体重には差異が認められなかった。またヒト前駆脂肪細胞株SGBSにDDTを作用させると脂肪脂肪への分化抑制能を示すが、マウス前駆脂肪細胞株3T3L1では認められなかった。最近、糖質コルチコイド依存性のLMO3遺伝子発現がヒト特異的に脂肪細胞への分化を促進させる報告がなされたため、SGBS細胞でのDDTがLMO3発現に及ぼす影響を検討した。DDTを作用させたSGBS細胞では糖質コルチコイドによるLMO3発現誘導が阻害されたことから、DDTはLMO3を介して脂肪細胞への分化を抑制すること、DDTの脂肪細胞分化抑制作用はヒト特異的である可能性が示唆された。そのインスリン抵抗性改善機序を明らかにするために、脂肪細胞特異的にDDTを過剰発現する遺伝子改変マウス(TGマウス)を3系統作製し、それらの系統の繁殖及び、表現形の観察を行なっている。通常食で飼育したTGマウスでは体重、空腹時血糖値、耐糖能、血清中中性脂肪濃度に野生型との間に差異は認められなかった。一方、高脂肪食を与え、肥満誘導を行ったTGマウスでは対象マウスと比較検討では、体重には差異が認められなかったが、TGマウスで空腹時血糖値の上昇抑制が認められ、さらにグルコース負荷試験、インスリン負荷試験の結果より耐糖能の低下の抑制が認められた。これらの結果より脂肪細胞でのDDTは肥満により誘導されるインスリン抵抗性を抑制する作用があることが確認された。またマイクロアレイ解析とリアルタイムRT-PCR解析によりDDT発現抑制脂肪細胞と対照細胞間で発現変動する遺伝子の探索を行い、DDT発現抑制脂肪細胞で血管内皮成長因子(VEGF)の発現が低いこと、セレノ結合タンパク質(SEPP-1)の発現が高いことを見出した。さらに高脂肪食を与えたTGマウスの脂肪組織ではVEGFの発現上昇・SEPP-1の発現減少が、肝臓ではVEGFの発現減少及びSEPP-1の発現上昇がそれぞれ認められた。脂肪組織でのVEGF発現低下や肝臓でのSEPP-1発現上昇が全身性のインスリン抵抗性の発症を惹起することが近年報告されており、脂肪組織及び肝臓において、これらの因子の発現がDDTにより調節されている可能性があり、そのことがDDTによるインスリン抵抗性改善機序に関与している可能性が示唆された。脂肪細胞から分泌されるD-dopachrome tautomerase(DDT)はインスリン抵抗性改善作用を有する。これまでにDDTは脂肪組織に作用し、1)cAMP-activated protein kinase (AMPK)を介する脂質代謝を抑制すること、2)インスリン抵抗性惹起因子である脂肪酸結合タンパク質aP2やセレノプロテインPの発現を抑制すること、3)インスリン抵抗性を改善することが報告されている血管増殖因子VEGF-AとIL-6の発現を高めることが確認された。さらにDDTは前駆脂肪細胞に作用して脂肪分化抑制作用を示す。これらの作用がDDTのインスリン抵抗性改善機序に関与すると考えられる。ヒト前駆脂肪細胞株SGBSにDDTを作用させると脂肪脂肪への分化抑制能を示すが、マウス前駆脂肪細胞株3T3-L1では認められないことから、DDTの脂肪分化抑制作用はヒト特異的と考えられる。糖質コルチコイド(GR)シグナルの下流に位置するLMO3はヒト

特異的に脂肪細胞への分化を促進させる。DDTを作用させたSGBS細胞では、デキソメタゾンによるLMO3発現誘導が抑制された。GRの標的遺伝子であるHSD11β1、KLF15、c-FosのmRNA発現について検討した。これらの中でGRに早期応答するc-Fosの発現が有意にDDTにより阻害された。このことにより、DDTのLMO3のGR依存性発現抑制作用にc-Fosの関与が示唆された。薬理学、内分泌学脂肪組織特異的にD-dopachrome tautomerase (DDT)を発現するマウス(TGマウス)を作製し、表現形の解析を行ったところ、DDTのインスリン抵抗性改善作用の再現性の確認と、その機序に関わる分子を幾つか絞り込むことができた。さらにヒトでは脂肪量とDDT発現量には負の相関があるが、TGマウスでは体重、脂肪量には野生型と差がないことから、ヒトとマウスでのDDTの作用に差異がある可能性を新たに見出した。さらに細胞株を用いた検討により、DDTの脂肪細胞分化抑制作用はヒト特異的であること、DDTはヒト特異的に脂肪分化に関与するLMO3の糖質コルチコイド依存性の発現を阻害することを見出したことは、この仮説を裏付けるものであり、今後の研究方針に確たる道筋をつけることができたと考えている。これらの点を考慮して本研究は概ね順調に推移していると判断する。脂肪組織特異的にD-dopachrome tautomerase (DDT)を発現するマウス(TGマウス)を作製し、実験に必要な数まで繁殖させることができた。そのTGマウスを用いた研究で、組換えDDT投与した肥満マウスの研究と同様に肥満によるインスリン抵抗性発症抑制作用を確認することで、DDTの抗肥満作用を確たるものとすることができた。またDDTのインスリン抵抗性改善機序に関わる候補因子を同定できたため、今後の研究方針に確たる道筋をつけることができたと考えている。D-dopachrome tautomerase(DDT)のインスリン抵抗性改善機序と脂肪分化抑制機序の解明に向けてさらなる検討を行う。1)DDTのVEGFA発現促進機序を各シグナル分子阻害剤やsiRNA発現抑制系を用いて検討する。同様にaP2、SEPP1の発現抑制機序を検討する。2)DDTのLMO発現抑制の作用点についての検討を行う。3)TGマウスと肥満モデルマウス(db/dbマウスやob/obマウス)を掛けあわせ、インスリン抵抗性発症の有無を検討する。D-dopachrome tautomerase(DDT)のインスリン抵抗性改善機序解明に向けてさらなる検討を行う。具体的には、1)前駆脂肪細胞、分化脂肪細胞、肝細胞の細胞株に組換えDDTを作用させた際の関連因子候補VEGF-A、SEPP-1の発現変動を検討する。2)脂肪組織
がん細胞の分化・極性異常と生体膜シグナリング

印環細胞がんは細胞間相互作用が失われていること、タンパク質の分泌が亢進しているために大きな液胞が観察されるのがの特徴である。その細胞相互作用のシグナル伝達は今までにホスファチジルイノシトール3キナーゼ、Rac、MKK6、p38MAPキナーゼを経て、最終的にはアクチンの再構成を伴って細胞間相互作用の喪失につながると考えられている。しかしながら、p38MAPキナーゼがどのように細胞間相互作用を調節するのか、わかっていない。そこで、細胞に活性型MKK6(p38MAPキナーゼの上流因子)を発現誘導できるように組み込ませ、発現誘導とともに細胞間相互作用が失われる細胞系をMCF7細胞を用いて作成した。この系を用いてp38MAPキナーゼの下流因子と考えられる分子に対する阻害剤の効果について調べた。その結果、MAPKAPキナーゼの阻害剤がp38MAPキナーゼを介する細胞間相互作用の調節に関係し、MAPKAPキナーゼの関与がわかった。一方、SWAP-70に関しては、SWAP70依存的な細胞移動に関して、各種薬剤の効果を調べた。SWAP-70欠損マウス胎児繊維芽細胞にSWAP-70を発現させた細胞、v-Srcを発現させた細胞はSWAP-70欠損マウス胎児繊維芽細胞より運動性を増している。この系を用いて、SWAP-70依存的な細胞運動を阻害する薬剤を検索した。ボイデンズチャンバーを用いた血清による細胞の走化性を指標に薬剤の効果を検定した。特から支給されるキットを用いた結果、17-AAGのみが求める活性を示した。これらの関係はビデオ撮影による細胞運動の観察でも確認された。17-AAGはHsp90というタンパク質の阻害剤で、その抗がん活性に注目が集まっている。SWAP-70もマウス胎児繊維芽細胞のトランスフォーメーションと関係があることが示されているが、17AAGの抗がん活性にSWAP-70が何らかの関与をしていることが示唆された。印環細胞がんでは細胞間相互作用が失われていること、ムチンなどの粘質の分泌が亢進されている事などの特徴がある。今年度はムチンの分泌について検討した。印環細胞がんではErbB2とErbB3が活性化され、ホスファチジルイノシトール3キナーゼ(PI3K)が活性化されたErbB3と結合している例が多い。ErbB2やErbB3をRNAiでノックダウンするとムチンの分泌が阻害される。さらに印環細胞がんでPI3K結合タンパク質を検索するとErbB3のほかにアダプタータンパク質Gab1が見つかる。ErbB2、ErbB3はもとより、Gab1のノックダウンもムチンの分泌が抑制される。そこで、Gab1とムチンの関係について、詳細に調べた。Gab1の局在を調べたところ、印環細胞がん株ではゴルジ体であった。一般にGab1は活性化されると細胞質から細胞膜に移行すると言われているので、ゴルジ体に移行するのはどのような場合か調べた。その結果、heregulinやNGFの刺激による場合はゴルジ体に移行するが、EGFなどの場合は細胞膜に移行することがわかった。PI3KはGab1とともにゴルジ体に移行した。ゴルジ体でのPI3Kの酵素活性の上昇も検出された。Gab1ノックダウン細胞におけるムチン蓄積場所を調べたところ、ゴルジ体ではなく、初期エンドソームであった。ムチンはゴルジ体から細胞膜にいったん移行した後、再度取り込まれ、エンドソームを経てゴルジ体に戻るといういわゆるリサイクリングをしていることが知られている。これらのことを総合するとPI3K/Gab1複合体はゴルジ体において、ムチンのリサイクリングに関与していると考えられる。印環細胞がんではPI3K/Gab1複合体によりムチンの分泌が亢進されていると思われる。細胞極性、細胞間相互作用と膜シグナリングを検討するため、ふたつの研究を主に展開した。ひとつは、印環細胞がんに関わる研究である。われわれは、細胞極性を喪失し、細胞間相互作用をまったく失っている印環細胞がんではErbB2/ErbB3複合体が恒常的に活性化されていることを検出していた。しかしながら、ErbB2やErbB3に変異が見られないことから、これがなぜ起こっているのか不明であった。CarrawayたちはMuc4というムチンがErbB2と結合し、活性化させることを示したが、世界的に認められるにいたらなかった。われわれは、抗ErbB2抗体、抗Muc4抗体を自作することにより、Muc4の印環細胞がんへの関与を検討した。その結果、他の胃がん細胞株ではErbB2/Muc4の複合体は検出されないのに比べ、印環細胞がん株NUGC4とKATOIIIでは明らかに、この複合体が存在することが明らかとなり、Muc4の印環細胞がんへの関与が示唆された。一方、SWAP-70はホスファチジルイノシトール(PI)3キナーゼの反応産物である膜上2次メッセンジャーでPI三リン酸(PIP3)に結合することにより、増殖因子の刺激に応じて細胞膜に移行する。SWAP-70のがんへの関与を調べるために、SWAP-70欠損マウス繊維芽細胞をv-Srcでトランスフォームさせた。SWAP-70をも発現させた細胞は足場非依存的に増殖したが、SWAP-70を発現させなかった細胞では増殖しなかった。

また、増殖能もSWAP-70が存在しないと大きく劣ることがわかった。さらに、ヌードマウスに移植した際もSWAP-70欠損のトランスフォーム細胞は増殖が大きく抑制されていた。以上の事より、SWAP-70はマウス繊維芽細胞のv-Srcによる悪性腫瘍化に重要であることが示された。このことは、人がんでのSWAP-70の関与を示唆している。印環細胞がんは細胞間相互作用が失われていること、タンパク質の分泌が亢進しているために大きな液胞が観察されるのがの特徴である。その細胞相互作用のシグナル伝達は今までにホスファチジルイノシトール3キナーゼ、Rac、MKK6、p38MAPキナーゼを経て、最終的にはアクチンの再構成を伴って細胞間相互作用の喪失につながると考えられている。しかしながら、p38MAPキナーゼがどのように細胞間相互作用を調節するのか、わかっていない。そこで、細胞に活性型MKK6(p38MAPキナーゼの上流因子)を発現誘導できるように組み込ませ、発現誘導とともに細胞間相互作用が失われる細胞系をMCF7細胞を用いて作成した。この系を用いてp38MAPキナーゼの下流因子と考えられる分子に対する阻害剤の効果について調べた。その結果、MAPKAPキナーゼの阻害剤がp38MAPキナーゼを介する細胞間相互作用の調節に関係し、MAPKAPキナーゼの関与がわかった。一方、SWAP-70に関しては、SWAP70依存的な細胞移動に関して、各種薬剤の効果を調べた。SWAP-70欠損マウス胎児繊維芽細胞にSWAP-70を発現させた細胞、v-Srcを発現させた細胞はSWAP-70欠損マウス胎児繊維芽細胞より運動性を増している。この系を用いて、SWAP-70依存的な細胞運動を阻害する薬剤を検索した。ボイデンズチャンバーを用いた血清による細胞の走化性を指標に薬剤の効果を検定した。特から支給されるキットを用いた結果、17-AAGのみが求める活性を示した。これらの関係はビデオ撮影による細胞運動の観察でも確認された。17-AAGはHsp90というタンパク質の阻害剤で、その抗がん活性に注目が集まっている。SWAP-70もマウス胎児繊維芽細胞のトランスフォーメーションと関係があることが示されているが、17AAGの抗がん活性にSWAP-70が何らかの関与をしていることが示唆された。
植物の生理現象にかかわるグルコシダーゼの網羅的検索 ―特異的グルコシダーゼ阻害剤をツールとしたvivoアッセイ―

本研究は、グルコース、ガラクトースおよびキシロースから合成した一連のβ-グリコシルアミジン誘導体を、直接、植物(シロイヌナズナ)に与え、その結果観察される、植物の生育および形態上の変化を手がかりに、植物の生理現象にどのような種類のグリコシダーゼが関与しているか、その手がかりを得ることを目的としたものである。そこで、ベンジル基を共通のアグリコン部とし、グルコース、ガラクトースおよびキシロースをグリコン部とする3種類のβ-グリコシルアミジン誘導体(Glc-amidine,Gal-amidineおよびXyl-amidine)を合成し、それぞれの化合物を固形寒天培地(GM培地)に適量加えて、シロイヌナズナ(野生株)を播種あるいは幼植物体を培養し、植物の生育状況と形態を経時的に観察した。その結果、Xyl-amidineを加えた場合のみ、葉の色が黄色くなり、葉の厚みが薄くて垂れ下がった異常な形態を示すことが観察された。また、これらの変化には濃度依存性が見られ、アッセイに用いた最小濃度である0.1μMのXyl-amidine存在下でも、顕著な変化が見られた。一方、グリコン部の構造の異なるGlc-およびGal-amidineでは、このような異常な形態は観察されず、また、構造的に類似したβ-キシロシルアミド(Xyl-amide)でも、この変化は見られなかった。Xyl-amideにはβ-キシロシダーゼ阻害活性がほとんどないことから、シロイヌナズナに見られた形態上の変化はXyl-amidineに特徴的なもので、これら形態上の変化には、何らかの形でβ-キシロシダーゼの阻害が関与していることが示唆された。一方、植物から抽出した粗酵素液には、高いβ-グルコシダーゼ活性およびβ-ガラクトシダーゼ活性とともに、低いレベルではあるがβ-キシロシダーゼ活性が観測された。In vitroでの阻害実験により、それぞれの酵素活性は、対応するアミジン誘導体によって強く阻害され、特に、粗抽出液中のβ-キシロシダーゼ活性は、Xyl-amidineによって完全に阻害されることが判明した。この結果は、植物の形態異常を引き起こす原因が、β-キシロシダーゼの阻害にあるというin vivoでの結果を裏付けるものである。
心筋の異常興奮と伝導のメカニズム

1.シリコンラバーに培養したラット心室筋細胞にfura2を負荷し、0.5Hzで電気刺激しながら1030%の機械的伸展を加えた際の細胞内Ca^<2+>濃度の変化を観察した。伸展により拡張期[Ca^<2+>]_iは急速かつ著明に増加し、その後軽度の増加を維持した。初期の増加はgallopamil,ryanodineで変化なくgadoliniumによって阻止されるので伸展誘発イオンチャネルの活性化によると考えられる。後期の増加はこれ以外の機序による。2.モルモット心室筋細胞から得た内側外面型パッチでI_<K,ATP>チャネルのランダウンの機序を調ベた。Mg-ATPはランダウンを回復させるが、これはチャネルのリン酸化によるものではないこと,またトリプシンやカルボキシペプムダーゼ処理によってランダウンが阻止できることからチャネル蛋白のC末端がランダウン発現に必要であることが判明した。3.モルモット心室筋細胞にダブルパッチ法を適用し,_<c->AMP依存性クロライドチャネルの性質を検討した。その結果,_<c->AMP-PKA系はチャネルを燐酸化し、これをavailableな状態にすることにより電流を増加するが,チャネル自身のキネティクスには影響を与えないこと,さらにこの電流は外向き整流特性を有することが判明した。4.家兎洞結節微小標本を用い,外液Ca^<2+>濃度増加による。異常自動能の発生に,SRからのCa^<2+>放出(ryanodine感受性)が重要であることを明らかにした。5.心筋梗塞犬を用い心筋線維に平行(L伝導)および垂直な伝導(T伝導)に対する交感神経刺激(ST),ノルアドレナリン(NA)投与の効果をみた。L伝導はST,NAとも変化なかったが,T伝導はNAで増加した。また局所的伝導ブロックがNAにより消失したが,これは必ずしも不整脈誘発性の改善には結びつかなかった。6.カエル心房標本を相補的な波長依存性スペクトルを有する膜電位感受性色素のペア(NK2761とWW781)で染め分け,興奮伝播の三次元マッピングを行う実験にはじめて成功した。今後の応用が期待される。
素養の高い生徒の潜在能力を引き出すための教材・スキーム研究および開発

1.教材開発:微積分,行列・1次変換の教科書を作成(総ページ数:498)。2.教科書作成に伴う成果:(1)構成は「基本→標準→発展」形に拘らず,場合によっては「発展(難問)→原理・本質」とした。素養の高い生徒の場合,本質を含んだ難問を提示し,理由を追求して基礎に下りるという学習は効果的であるとの結果を得た(アンケート)。(2)問題解決能力は,(できるだけ)頭の中だけの反復を通して,イメージする力を身につけ,経験(記憶)を結合させることで向上すると仮設を立て,その通りの結果を得た。一方,反復は生徒の努力に依存するものであるから,自発的反復のきっかけを与えるものとして「驚き(本質的内容を含む難問(1))を与え」た。アンケートでは,驚き(難問)を完全に理解したいという欲求から,反復し,イメージを持てるようになったとの回答を得た。試験等で問題解決能力の向上は確認した。(3)1次変換は,空間を潰すイメージ(基底の変換に言及)であることに着目させた。このためにMathematica(科研費で購入)やGRAPES(フリーソフト)を用いた。イメージに注目することは多くの生徒の賛同を得た(アンケート)。微積分では立体図形の構成をMathematicaで実感させた。頭の中で図形を思い浮かべ,自在に操作することのできる能力は数学的な力の重要な1つであると考えられる。視覚的に図形の構成を示すことによって能力の向上がはかれた(アンケート結果)。(4)別解を多く与える。または別解を考えさせる。イメージ能力・経験(記憶)の結合の涵養に必須である(アンケート結果,試験等)。3.授業方法論に関する成果:(1)time pressure。基本演習に関しては,時間制限によりモチベーションが上がりミスも減少する(実証済)。(2)何らかの作業を導入し,常に考えている状態を作る(講義のみは学習効果が薄い,実証済)。(798字)1.教材開発:微積分,行列・1次変換の教科書を作成(総ページ数:498)。3.授業方法論に関する成果:(2)何らかの作業を導入し,常に考えている状態を作る(講義のみは学習効果が薄い,実証済)。(798字)