hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
病原体レセプター抵抗性タンパク質による植物免疫の誘導機構の解明

抵抗性タンパク質Pitは、病原体の侵入を感知する細胞内レセプターである。PitがOsRac1を活性化しうるGDP/GTP exchange factor(GEF)ドメインを有するOsSPIKE1を介して、OsRac1を活性化することを見出した。この、OsSPIKE1によるOsRac1の活性化が、Pitを介した耐病性に重要であることを明らかにした。Pitの脂質修飾であるパルミトイル化が、Pitの細胞膜局在と耐病性誘導に重要であることを明らかにした。さらに、プロテオミクス解析により、新規のPitの相互作用分子を多数同定した。1)抵抗性タンパク質によるOsRac1活性化プロセスの解明抵抗性タンパク質は、病原体の侵入を感知する細胞内レセプターとして働き、植物の自然免疫において極めて重要な分子である。しかしながら、抵抗性タンパク質がどのようなシグナル分子を介して植物の免疫を誘導するかは不明であった。我々は、イネのいもち病菌のRタンパク質PitがOsRac1に直接結合し、OsRac1を活性化することを見出した。また、Pitは、OsRac1を活性化することにより活性酸素や過敏感細胞死を制御して、いもち病に対する抵抗性を誘導することを明らかにした。プロテオーム解析により、OsRac1複合体Defensome networkを構成する因子として、RAR1, Hsp90、RACK1、Hop/Sti1等を同定し、それらのタンパク質が耐病性において重要な役割を果たすことも見出した。さらなる解析から、OsRac1は、PAMPsレセプターと抵抗性タンパク質で異なる、免疫複合体を形成していた。本研究のスタート時点では、不明瞭であったOsRac1を含むタンパク質複合体Defensome networkの分子実体を明らかにすることが出来た。抵抗性タンパク質は、病原体の侵入を感知する細胞内レセプターとして働き、植物の中で最も強い免疫応答を誘導する重要な分子である。抵抗性タンパク質の活性化機構やシグナル伝達機構は長い間不明であったが、申請者は、イネのいもち病菌の抵抗性タンパク質PitがGタンパク質OsRac1の活性化を介して植物の免疫を誘導することを見出した。その研究の過程で、抵抗性タンパク質の下流には、OsRac1以外のシグナル伝達経路も存在することを見出した。本研究では、抵抗性タンパク質の相互作用分子を網羅的に同定し、得られた相互作用分子の免疫における貢献度を定量的な解析を用いて算出して、それらの重要度を評価する。以上の解析を通して、抵抗性タンパク質による植物免疫の誘導機構の全体像を理解する。また、抵抗性タンパク質の細胞内輸送機構や活性化機構の解明も試みる。恒常的活性型のOsRac1により発現誘導がされる転写因子を検索したところ、basic helix-loop-helix型転写因子であるRac Immunity1 (RAI1)を得た。RAI1のアクティベーションタグラインは、顕著に耐病性が向上しており、RIM1が耐病性に関与する分子であることが明らかになった。RAI1により発現が調節される遺伝子として、PAL1とOsWRKY19を同定した。RAI1のアクティベーションタグラインでは、PAL1とOsWRKY19の発現が上昇し、反対に、RIM1 RNAi個体では発現が減少した。さらに、ゲルシフトアッセイにより、RIM1がPAL1とOsWRKY19のプロモーター部位に直接結合することも見出した。以上の結果から、RAI1はPAL1とWRKY29のプロモーター部位に直接結合して、それらの遺伝子発現調節をしていることが明らかになった。本研究課題では、申請時に3つの視点から解析を行うことを目標とした。いずれの解析も順調に研究が進展しており当初の目的を達成している。今後も、遺伝学、分子生物学、細胞生物学、生化学などの様々な手法を駆使して、抵抗性タンパク質を中心とする植物自然免疫応答における役割の解析を行う。特に、平成23年度は、抵抗性タンパク質の相互作用分子OsRac1により誘導される防御関連遺伝子の同定を行った。その結果、以上の解析を通して、抵抗性タンパク質による植物免疫の誘導機構の全体像を理解する。basic helix-loop-helix型転写因子であるRac Immunity1 (RAI1)は、PAL1とWRKY29のプロモーター部位に直接結合して、それらの遺伝子発現調節をしていることが明らかになった。また、予備的結果から、RAI1がMAPK3とMAPK6に直接相互作用することを明らかにした。さらに、OsRac1とMAPK3及びMAPK6も複合体を形成することを見出した。MAPK3あるいはMAPK6依存的にPAL1とOsWRKY19の発現が誘導されることを明らかにした。

以上の結果から、OsRac1はMAPK3あるいはMAPK6によるリン酸化を介して転写因子RAIの活性を調節し、PAL1とOsWRKY19の発現を調節することを明らかにした。このように本計画は、当初の計画通りおおむね順調に進展している。上述のように、本研究は当初の計画通り順調に進行している。したがって、今後も研究計画に沿って、研究を推進する。未使用額が生じた要因は、天候の不順のため感染実験が1回行えなかったのが原因で、研究の進捗状況に合わせて予算執行計画を変更したことに伴うものである。また、次年度、今年度行うことができなかった感染実験を行い、請求額と合わせて執行する予定である。研究は申請者と大学院生(研究協力者)2名の合計3人で構成される研究計画であり、消耗品に年間100万円程度の予算が必要になる。旅費に関しては研究発表や情報収集のために、国内学会(20万円)を年2回(植物病理学会、植物生理学会)、海外学会(40万円)を年1回(アメリカ細胞生物学会)参加する予定である。以上の消耗品及び旅費は本研究を推進するために必要であり、金額的にも妥当であると考えられる。
視覚システムを搭載した消化管内移動ロボットの開発

本研究は、大腸、小腸を移動できるCCDカメラ視覚システムを搭載したロボットは、生物の移動メカニズムを利用した移動ロボットを開発するもので、形状記憶合金を用いた移動ロボットと空圧式移動ロボットの2つのロボットの比較検討を行い、消化管内移動用として最適なロボットを開発することを目的とする。このため、ロボット開発とCCDカメラ画像により消化管内の観察を目指した。生物の移動メカニズムとしてミズの伸縮匍匐運動を採用し、ロボットが管内を推進するメカニズムとして、2つの管内を保持する機構と推進する機構に分けて運動を再現した。形状記憶合金を用いたロボットには2方向性形状記憶合金を用い、保持部にはパンタグラフ機構、推進部にはコイル形状とし、通電加熱することにより後部のパンタグラフ機構が開いて管内保持し、次に推進のコイルが伸びて推進するものである。本ロボットの特徴として2方向性形状記憶合金は加熱のみで冷却が不要で、自然冷却により機構が運動する点にあるが、曲管への対応、CCDカメラの搭載に問題があった。空圧式ロボットはロボットの保持部はバルーン型を採用しているため、空圧による大腸壁が半径方向に膨らむが、万一膨らみすぎないようにするために大腸の管腔径をセンシングすることとした。センサーはバルーンを保持するパイプにスリットを入れて、ひずみゲージによりバルーンに加わる圧力を測定することにより管腔径を予測する方法とし、異なる管径によりバルーンに加わる圧力と空圧の関係を求め、危険防止システムを構築した。CCDカメラによる目標部位までの距離計測手法の開発したが、小型CCDカメラにズームレンズがないため、得られた画像をパソコンモニターに表示させ、画像上から目標物までの距離を計測するソフトウエアを開発したが、目標物形状の認識、計測誤差及び2枚の画像から距離を計算時間に問題があるため改善が必要である。ロボットの制御にはDSPを用い、パソコンで制御する手法を開発した。また、ロボットの推進速度の可変を可能とした。ロボット本体は直径37mm、全長120mmで曲管も移動できる。肛門括約筋を傷つける恐れがあり、さらなる小型化を目指す必要がある。形状記憶合金を用いたロボットと空圧式ロボットの評価を行った結果、空圧式ロボットが消化管内の移動に適している。しかし、肛門括約筋を傷つける恐れがあり、大腸のS状結腸を通過させるためには、さらなる小型化を目指す必要がある。本研究は、大腸、小腸を移動できるCCDカメラ視覚システムを搭載したロボットとして、形状記憶合金を用いた移動ロボットと空圧を利用した移動ロボットの製作、モデル消化管内走行実験から比較検討を行い、消化管内移動用として最適なロボットを開発することを目的とする。このため、2種類のロボット開発とCCDカメラ画像の取り込み、さらに一つのCCDカメラによる目標部位までの距離計測手法の開発により消化管内の視察を目指すもので、平成11年度は以下の項目について実施した。1.消化管内移動ロボットの動作を検討した結果、生物の移動メカニズムとしてミミズの伸縮匍匐運動を利用するものとした。2.形状記憶合金を用いた移動ロボットの機構は、ねじりコイルばね型の管内保持部と、管内保持部を前後につけたコイルばね型の推進部から構成し、

二方向性形状記憶合金を用いた。3.二方向性形状記憶合金を用いたねじりコイルばね型は直接通電により加熱したときに管内を保持するようにした。コイルばねは加熱したときにばねが伸び、冷却により縮むようにした。二方向性形状記憶合金の熱処理条件を決定した上で各部のばねの試作を行った。4.管径20mmを移動可能なこととしてロボットの設計製作、モデル管内移動実験を行った。ロボットの総重量6g、伸びた状態で全長100mmで、形状記憶合金に直接通電(DC3V)により管内を移動させた結果12mm/minの速度で前後進できることを確認した。5.空圧を利用した移動ロボットの機構は、ゴム膜が半径方向に膨らむ管内保持部と管内保持部を前後につけたゴム製ベローズによる推進部及びカメラ部から構成され、CCDカメラ取り付け、配線コードのために中心部を中空にした。ロボットの総重量105g、伸びた状態で全長90mmで、移動速度90mm/minでモデル管内を前進できることを確認にした。6.形状記憶合金を用いたロボットは小型CCDカメラの搭載ができないため、空圧を利用した移動ロボットにカメラを搭載した。管内に設置した腫瘍モデルを目標にして画像の明瞭度の確認実験を行った結果、光量不足により鮮明な画像が得られなかったため、今後改良する必要がある。7.ロボットの動作、カメラ搭載を25の結果に基づき評価した結果、形状記憶合金を用いた移動ロボットは冷却方法やカメラ搭載の問題及び配線コードが管内の摩擦によりロボットが動作しない状態があったため、空圧を利用した移動ロボットにより小型化を図ることとした。本研究は、大腸、小腸を移動できるCCDカメラ視覚システムを搭載したロボットとして、生物の移動メカニズムを利用した移動ロボットとして、形状記憶合金を用いた移動ロボットと空圧式移動ロボットの開発、モデル消化管内走行実験から比較検討を行い、消化管内移動用として最適なロボットを開発することを目的とする。このため、二種類のロボット開発とCCDカメラ画像の取り込み、さらに一つのCCDカメラによる目標部位までの距離計測手法の開発により消化管内の観察を目指すもので、平成11年度は以下の項目について実施した。1.消化管内移動ロボットの動作は、生物の移動メカニズとしてミミズの伸縮匍匐運動を利用するものとし、平成11年度の研究結果から空圧を利用した移動ロボットを開発することとした。2.平成11年度に試作した空圧式ロボットはゴム膜が半径方向に膨らむ管内保持部とゴム製ベローズによる推進部から構成されるもので、ともに分解できない構造であり、ゴムの疲労強度に問題があった。このため、本年度は分解できる構造にするとともに、曲菅を移動できるように推進部を新たに開発した。3.推進部には金属ベローズを3本採用し、ベローズ内の空圧を制御することにより推進部が傾いて曲菅を移動する構造にした。
ハイパー核の生成・崩壊スペクトルと核物質中のハイペロン

大強度陽子加速器施設(J-PARC)で展開されるハイパー核物理において,核物質中のハイペロンの性質を明らかにするために,歪曲波衝撃近似を用いてハイパー核の生成・崩壊スペクトルを理論的に研究した。その結果,(1)3Heを標的核とする(K-,π-+)反応によってシグマハイパー核3体系のΣNN準束縛状態の存在が解明できること,(2)離散化連続チャネル結合(CDCC)法を用いた3体破砕を含む理論値は3He(K-,π-)ppΛの実験データをよく再現すること,(3)4-Σ-Heにp波共鳴状態が存在するを予言し,実験データとの比較からΣNやΛN-ΣN相互作用に関する情報が得られることが分かった。大強度陽子加速器施設(J-PARC)において展開されるハイパー核物理において, (Kー,π±), (π±,K+)や(Kー,K+)反応で生成されるハイパー核の構造と反応機構を理論的に解明するとともに,核物質中におけるΣやΞなどのハイペロンの役割を明らかにすることが目的である。1.3ΛH, 4ΛHe, 4ΛHe*,5ΛHeのs殻Λハイパー核の束縛エネルギーの実験値を再現する核内のハイペロン-核子間の有効相互作用を用いて,3体系シグマハイパー核ΣNNの存在可能性について調べた。ΣNNのうち,アイソスピンT=1,スピンS=1/2の準束縛状態として,アイソ3重項(3ΣHe,3ΣH,3Σn)がΣ閾値付近に存在し,その崩壊幅は約9MeVであることが確認された。さらに(Kー,π±)反応によって得られる3ΣHeと3Σnの生成・崩壊スペクトルの振る舞いの違いから,ハイペロン-核子間の有効相互作用とΣNNの構造の重要な情報が得られることが分かった。2.ハイペロンを含むストレンジネス核では,粒子放出の閾値付近にその準束縛状態や共鳴状態が存在する場合が多く,構造の解析には理論的に正しく波動関数を記述することが必要になる。離散化連続チャネル結合(CDCC)法から求めた波動関数を用いてハイパー核の連続状態を記述する方法を開発した。CDCC法は本研究の主要な計算方法のひとつである多配位の結合チャネルグリーン関数法と親和性が良く,応用性が高い。簡単な例として,3Heを標的にした(Kー,πー)反応によるΛpp連続状態の生成反応に適用し,極めて有効であることを確かめた。3.3Heを標的とした(Kー,N)反応によるK-原子核K-ppの生成スペクトルを計算し,実験データとの比較を行った。大強度陽子加速器施設(J-PARC)において展開されるハイパー核物理において, (K-,pi±), (pi±,K+)や(K-,K+)反応で生成されるハイパー核の構造と反応機構を理論的に解明するとともに、核物質中におけるΣやΞなどのハイペロンの役割を明らかにすることが必要である。特にハイペロンを含む3体力は重要な役割を果たすと考えられる。平成26年度の研究成果は以下の通りである。1.s殻ハイパー核の束縛エネルギーを再現するハイペロン-核子間の有効相互作用に基づいてΣハイパー核の3体系ΣNNに準束縛状態が存在することを示した。また3He(K-,pi+)反応のスペクトルは芯核である2核子系の励起による干渉効果のために準束縛状態のピークが打ち消され、実験データを矛盾なく説明できることが分かった。2.連続状態離散化チャネル結合(CDCC)法を用いてハイパー核の連続状態を含む生成スペクトルの計算が可能になった。3Heを標的核にした(K-,pi-)反応によるΛpp連続状態の生成スペクトルを求め、実験データをよく再現することを示した。3.4ΣHeのp波共鳴状態の存在を初めて予言し、J-PARC実験による4He(K-,pi-)生成スペクトルからΣN相互作用の情報が得られることを示した。さらに多重リーマン面上の極の振る舞いを分析して、生成スペクトルへの影響を調べた。4.殻模型の1粒子波動関数を用いて、6Liを標的核にした(pi-,K+)反応のスペクトルの理論計算を行い、J-PARC E10実験のΣ生成領域のスペクトルを解析した。Σ核間ポテンシャルが斥力的であることが確認されたが、Λ連続領域のスペクトルの形を十分に再現できないことが分かった。大強度陽子加速器施設(J-PARC)において展開されるハイパー核物理において, (Kー,pi±), (pi±,K+)や(Kー,K+)反応で生成されるハイパー核の構造と反応機構を理論的に解明するとともに,核物質中におけるΣやΞなどのハイペロンの役割を明らかにすることが目的である。1.多重リップマン-シュウィンガー方程式を解くことにより,多重チャネル2体系の複素ポテンシャルによる多重リーマン面に存在するS行列の極(pole)や影極(shadow pole)の振る舞いを調べ,物理的に観測される状態について極の性質について明らかにした。2.最近の精密な実験データを含めて再現するように調整したpiーp->ΣーK+反応の素過程の振幅を「最適フェルミ平均の方法」を用いて求め,スペクトルの角分布のエネルギー依存性が原子核を標的にした実験データを説明することを示した。

3.殻模型の1粒子波動関数を用いて, 6Liを標的核にした(piー,K+)反応のスペクトルの理論計算を行い, J-PARC E10実験のΣ生成領域のスペクトルを解析し,シグマ核間ポテンシャルに斥力が存在することを示した。4.より詳細なクラスター模型や離散化連続チャネル結合法(CDCC法)による連続状態など微視的な模型による解析を進めるために,微視的模型に基づく「多配位チャネルに拡張されたグリーン関数」を活用したハイパー核の生成・崩壊スペクトルの数値計算コードの開発を進めた。大強度陽子加速器施設(J-PARC)で展開されるハイパー核物理において,核物質中のハイペロンの性質を明らかにするために,歪曲波衝撃近似を用いてハイパー核の生成・崩壊スペクトルを理論的に研究した。その結果,(1)3Heを標的核とする(K-,π-+)反応によってシグマハイパー核3体系のΣNN準束縛状態の存在が解明できること,(2)離散化連続チャネル結合(CDCC)法を用いた3体破砕を含む理論値は3He(K-,π-)ppΛの実験データをよく再現すること,(3)4-Σ-Heにp波共鳴状態が存在するを予言し,実験データとの比較からΣNやΛN-ΣN相互作用に関する情報が得られることが分かった。大強度陽子加速器施設(J-PARC)において展開される(K-,pi±),(pi±,K+)や(K-,K+)反応で生成されるハイパー核の構造と反応機構を理論的に解明することが目的である。平成26年度は3つの論文として(a)ΣNNの束縛状態の存在を予言した論文、(b)CDCC法を用い3He(K-,pi-)Λpp連続状態の生成スペクトルを適用した論文、(c)Σ4HeにP波の共鳴状態の存在する可能性を予言した論文を学術雑誌から出版した。この成果に基づき、p殻核を標的核にした生成スペクトルの計算を進めている。計算コードの開発がやや遅れ気味であるが、全体としてはおおむね順調に進んでいると判断している。物理学,原子核理論6Liを標的核にした(pi-,K+)反応の理論解析では、Λ連続領域のスペクトルの形を十分に再現できないことが分かった。平成27年度は、より詳細な6Li= d +αのクラスター模型やCDCCによる連続状態などの微視的な模型によるJ-PARC E10実験などの解析を進める。歪曲波インパルス近似による「多配位チャネルに拡張されたグリーン関数」を活用し,6Liなどp殻核を標的にした(pi-,K+)反応による中性子過剰ハイパー核の生成・崩壊スペクトルと生成断面積の理論計算を行い、ΣN-ΛN相互作用の性質を定量的に解明していく。最終年度にあたるため,本研究課題の成果と到達点を取りまとめ,次への課題と問題点を整理する。シグマハイパー核の生成・崩壊スペクトルをラムダ-シグマ結合を考慮した結合チャネルの理論的枠組みで計算して理論的な分析を行い,その成果を論文にまとめ,学術雑誌に投稿した。また次年度の計画を進める準備として,離散化連続チャネル結合(CDCC)法と多配位チャネルを考慮した結合グリーン関数法を融合した計算法を提案し,計算コードの開発を進めた。簡単な例として3He(Kー,πー)反応のΛpp連続状態スペクトルに適用した。p殻原子核を標的とする計算コードが開発がやや遅れているが,本研究はおおむね順調に進められていると判断している。
新規ＨＤＬ結合蛋白プログラニュリンは全身性炎症・糖代謝異常・動脈硬化を抑制する

これまでに細胞分化、創傷治癒、炎症との関連が報告されていたプログラニュリン(PGRN)であるが、動脈硬化との関連についての直接的な報告はされていなかった。そこで我々は動脈硬化モデルマウスであるアポEノックアウトマウスとPGRNのダブルノックアウト(DKO)マウスを作成したところ、コントロールマウスと比較して動脈硬化が促進していることを見出した。他にもPGRNは様々な炎症性疾患との関連が示唆されており、動脈硬化性疾患も含め新たな治療ターゲットになりうるものと考えられる。我々は、PGRN-KOマウスとApoE-KOマウスを掛け合わせたdouble KO(DKO)マウスを作製し、動脈硬化についての検討を行った。En face解析、大動脈基部におけるOil Red 0染色でいずれもDKOマウスがApoE KOマウスと比較して著明な動脈硬化を示した。興味深いことにDKOマウスでは対照群と比較して血中総コレステロール濃度は有意に低値であったが、大動脈におけるTNF-αやICAM-1、VCAM-1のmRNA発現の有意な増加やeNOSやphospho-eNOSの蛋白発現亢進を認めた。さらにHUVECを用いたvitroの系においても、TNF-α刺激により増加した接着因子の発現をPGRNがdose-dependentに抑制することも見出した。さらにPGRN欠損マクロファージでは対照群マクロファージと比較して酸化LDLの取り込みが有意に亢進しており、これに符号するようにDKOマクロファージでは酸化LDL取り込みに関与するCD36やscavengerreceptorclassAの発現が亢進していることも見出した。さらに、HDL構成蛋白に与える影響についても検討したところ、アポ蛋白A1は量群間で有意な差は認めなかったが、PGRN欠損HDLでは、HDLの抗酸化能を担うplatelet-activating factor acetylhydrolase(PAF-AH)の低下、炎症性蛋白の一つであるseru mamyloid Aの増加を認めた。このようにPGRN欠損は炎症亢進、マクロファージの易泡沫化、HDL機能異常などにより動脈硬化促進されるものと考えられた。また、急性冠症候群(ACS)における血栓吸引血などのculprit lesion近くでは末梢血と比較してPGRN濃度は低値であり、局所でproteaseなどでPGRNが分解されていることが予想され、プラークの不安定性に関与している可能性が考えられた。これまでに我々はPGRN欠損マウスを用いた検討から、PGRN欠損により様々な表現型を呈することを見出してきた。その中で、PGRNと動脈硬化モデルマウスであるアポE欠損マウスとのダブルノックアウト(DKO)マウスを作製してアポE-KOマウスと動脈硬化の程度を比較した。結果としては明らかにDKOマウスの方が、動脈硬化が促進していた。その機序として、DKOマウスの方が、全身の炎症促進、HDL機能異常の可能性、マクロファージの脂質取り込みの促進などが考えられ、これらの成果を論文化した(Cardiovasc Res. 2013 100:125-133)。また、PGRNと急性冠症候群(ACS)との関連を見るスタディについてはすでに登録が終了して、解析を行っている。これまでの検討で血栓吸引したサンプルの免疫染色でPGRNはプラーク部位で認められることを見出している。また、急性期には血中PGRN濃度は低値であり、また冠動脈病変部位近くからの採血でのPGRN濃度の方が末梢血でのPGRN濃度と比較して低値であったことも見出した。現在、その意義についてin vitroの系で検討しているが、PGRNがプラーク安定化に関与している可能性があるものと考えている。PGRNがTNF-αとTNF受容体との結合を競合阻害して、TNF受容体からのシグナルを抑制することが報告されているが、我々は、TNF受容体1,2 DKOマウスのマクロファージにPGRNで刺激した時にaktのリン酸化がされたことからTNF受容体以外のPGRN受容体の存在の可能性を示した。各種炎症疾患へのPGRN発現アデノウィルスやRecombinant PGRNの投与ということであったが、肝臓でのPGRN発現や分泌について再現性をもって十分に発現できていない。また、Recombinant PGRNについても投与に必要な大量の作成にはまだ至っていない。次に熊本大学精神科臨床的に前頭側頭変性症と診断された患者で血中PGRN濃度を測定して低値を認める症例に対して、PGRNの遺伝子変異の有無を調べて、変異を認める症例に対しては糖・脂質異常や動脈硬化について検討する予定であったが、PGRN低値症例がなく、現段階では該当症例を見出すには至っていない。今後、最近関連が指摘されているアルツハイマー病患者においても検討していき、症例を見出す予定である。また、整形外科との共同研究では確かに慢性関節リウマチ患者の方が対照群と比較して血中PGRNは高値であり、CRPと比例することが分かった。

また、一部のPGRN-KOマウスや我々が動脈硬化モデルマウスであるApoE-KOマウスとPGRN-KOマウスとのdouble KOマウスで認める関節腫脹についてMicro CTや免疫組織染色などで検討していただいたが、いわゆる典型的な関節リウマチに認められるような像ではなかった。また我々は先に急性冠症候群(ACS)患者のCulprit Lesion付近ではPGRN濃度が低下していることを見出したが、現在、in vitroやPGRN-KOマウスを用いた実験を行い、更なるPGRNのACSにおける役割の解明の検討を行っている。KOマウスのperitoneal macrophageを用いて野生型マウスのmacrophageと比較してMMPやTIMP、さらには各種炎症性サイトカインなどの分泌にどのような差異を認めるのか、またKOマウスのMI Ligation modelを用いてPGRNの梗塞範囲に与える影響などについて検討を行い、論文化する予定である。26年度が最終年度であるため、記入しない。動脈硬化、脂質代謝26年度が最終年度であるため、記入しない。H24年度に予定していた研究は、おおむね施行しているものと思われる。上述したようにPGRNと動脈硬化との関連についてはPGRN欠損マウス、PGRN/ApoE DKOマウスを用いた検討によりPGRN欠損で動脈硬化が非常に促進することを見出した。PGRNは炎症と強くリンクする分子であるが、PGRN欠損により、全身の炎症反応増強を来たすと共に、血管内皮障害、HDL機能異常、マクロファージの脂質取り込み促進などが動脈硬化促進に関与していることを示し、論文化したことは予定通りである。PGRNと急性冠症候群(ACS)との関連を見るスタディについては、上述の通り、サンプル回収は終了しており、得られた知見からACSにおけるPGRNの意義についてin vitroの実験に移行しており、論文化に向けて準備する予定であり、予定通りといえる。上述の通りTNF受容体1,2 DKOマウスのマクロファージを用いての検討からTNF受容体以外からのシグナルの存在が強く考えられることを示した。前頭側頭変性症(FTD)患者におけるPGRN変異が疑われるPGRN異常低値症例は現在のところまだ見いだせておらず、登録機関延長中である。PGRN発現アデノウィルスを用いた検討は、上述の通り発現確認が出来ていないのが現状である。PGRNが全身炎症性疾患や粥状動脈硬化に対する新規治療標的となるか否かを解明することを本研究は目的としており、その意味では、全体として進行状況はおおむね順調といえる。H24年度で得られた表現型についてのメカニズムの検討やPGRN欠損患者のスクリーニングを行い、その表現型の検討を行う。PGRNと動脈硬化との関連については論文化されたが、PGRNは全身にユビキタスに発現している。我々は、炎症や何らかのストレスによりマクロファージ由来のPGRNが動脈硬化に大きな影響を与えている可能性が高いと考え、マクロファージ特異的PGRN欠損マウスの解析を新たに行う予定である。
脳低温療法の外傷性脳損傷に対する有効性の機序解明と至適実施法の開発

今回の当初の研究目的であった外傷性脳損傷における脳内産成サイトカインの変動と、それに及ぼす脳低体温療法の効果に関しては、データのばらつきなどにより、明らかにすることはできなかった。しかし、頭部外傷や脳梗塞などの脳損傷時において注目されている脳内ミクログリアのLPSに対する反応性の温度変化の効果を、機能的及び形態的変化において検討した。結果:1、37°C培養:LPS刺激によりNO2の蓄積量は、数時間の潜時の後、48時間までほぼ直線的に増加した。一方、IL-6は、6時間後より増加し12時間後にピークを認め、以降はさらなる増加は認められなかった。TNF-αは、刺激後3時間より急激に増加し、6時間後にピークを認めた。低温培養(30,33°C)の影響:NO産生は温度依存性に抑制され、その抑制効果は48時間まで持続した。一方、33°CでのIL-6産生は、LPS刺激開始後6時間より48時間まで抑制された。TNF-α産生は、3時間後では有意に抑制されたが、12時間以降では抑制されなかった。また、低温培養によるサイトカイン(IL-6,TNF-α)の抑制効果は、30,33°Cの間では有意差を認めなかった。ミクログリアの形態変化:37°C培養ではLPS暴露後6時間には、短長径差のあまりないアメーバ型より双極型に変化し、12時間後には再びアメーバ型へ復帰していた。それに対し低温培養では、アメーバ型への復帰が24時間後まで遅延した5そのような成果の一部は、Maekawa S, Aibiki M, et al. "Differential Effects of Lowering Temperature on Mediator Release from LPS-stimulated Neonatal Rat Microglia" Crit Care Med,30:2700-2704,2002.にて発表した。実験方法:平成12年度は、頭部外傷モデルにおける脳内産成サイトカインの測定実験を行った。ウレタン麻酔下に、震盪脳損傷ラットを作成し、脳室内に挿入留置したカテーテルより、脳脊髄液を受傷後24時間後まで経時的に採取し、IL-1.TNF、IL-6、IL-8、IL-10を測定した。対照として、同様の麻酔下で、脳室内カテーテルを挿入のみした動物で、同様の測定を行なった。この検討を、脳温を32°Cに低下させた群と、脳温を正常に保った群で行なった。結果及び問題点:1、頭部外傷モデルの衝撃の均一性の問題:現在までに一定した衝撃度が得られていない。来年度は一定したpercussion injuryを作成できる機器を、独自に購入し実験を行う予定である。2、脳脊髄液の採取の問題:小動物であるため、採取量が限定される問題点が明らかとなった。来年度は動物種を変えて検討することも視野にいれている。以上のごとく、今年度の目標が十分には達成できていないため、来年度は方法を変え検討する予定である。平成13年度(今年度に提出した計画書と実験内容を変更し、当初の計画に沿い検討した)方法:正常ラットにおける、脳内マイクロダリア低体温負荷後のLipopolysaccharide (LPS)に対する反応性の検討を行った。ウレタン麻酔下に、ラットの脳組織を取りだし、ホモジュネート後、培養液にて希釈洗浄を繰り返し、培養皿で培養する。得られたマイクログリアに対して、37°C,33°C,30°Cの各培養温度における、LPS投与に対する反応性を検討した。測定項目はTNF、IL-6、NOである。

この検討で、脳内免疫担当細胞の低温負荷後のLPSに対する反応性変化が明らかにする。2.同IL-6およびNO産生能:LPS投与後3および6時間において、33および30°Cで、37°C時に比し有意に抑制された、その抑制はLPS投与後48時間まで持続した。以上の結果より、脳内マイクログリアのサイトカイン産生は、培養温度の低下により抑制されるが、各サイトカインでの経時的差が存在することが明らかとなった。これらの差が、生理学的にどの様な意味を有するかについての検討が必要である。今年度は、当初の実験計画を変更し、研究をを行った。頭部外傷や脳梗塞などの脳損傷時において注目されている脳内ミクログリアのLPSに対する反応性の温度変化の効果を、機能的及び形態的変化において検討した。結果:1、37°C培養:LPS刺激によりNO2の蓄積量は、数時間の潜時の後、48時間までほぼ直線的に増加した。一方、IL-6は、6時間後より増加し12時間後にピークを認め、以降はさらなる増加は認められなかった。TNF-αは、刺激後3時間より急激に増加し、6時間後にピークを認めた。低温培養(30,33°Cの影響:NO産生は温度依存性に抑制され、その抑制効果は48時間まで持続した。一方、33°CでのIL-6産生は、LPS刺激開始後6時間より48時間まで抑制された。TNF-α産生は、3時間後では有意に抑制されたが、12時間以降では抑制されなかった。また、低温培養によるサイトカイン(IL-6,TNF-α)の抑制効果は、30,33°Cの間では有意差を認めなかった。ミクログリアの形態変化:37°C培養ではLPS暴露後6時間には、短長径差のあまりないアメーバ型より双極型に変化し、12時間後には再びアメーバ型へ復帰していた。それに対し低温培養では、アメーバ型への復帰が24時間後まで遅延した。そのような成果の一部は、Maekawa S, Aibiki M, et al."Differential Effects of Lowering Temperature on Mediator Release from LPS-stimulated Neonatal Rat Microglia" Crit Care Med,30:2700-2704,2002.にて発表した。
低酸素脳におけるサイトカインの発現と血管内皮細胞傷害に関する免疫組織学的研究

【目的】低酸素性虚血性脳障害においてサイトカインが重要な役割を果たしていることが報告されているが、サイトカインの生成細胞、作用機序は明らかではない。今回はサイトカインとNOの脳障害発生への関与を検討し、脳障害の治療に結びつけることを最終目的として研究を計画した。【対象と方法】(1)新生仔ラット大脳皮質スライス灌流モデルを用い、30分間の低酸素またはNMDA負荷を行う。スライスは負荷前と負荷後4時間まで時間を決めて採取する。採取したスライスの凍結切片を作成し、抗IL-1β抗体で免疫染色した。(2)NOSinhibitorとしてnNOS選択性の7-nitroindazole(7M)を、低酸素負荷60分前から低酸素負荷終了まで灌流液中に混合する。凍結切片を作成し、peroxynitrite生成のマーカーであるニトロチロシン(NT)染色を行った。(3)フリーラジカル消去剤であるエタラボン(MCI-186)を、NMDA負荷60分前から低酸素負荷終了まで灌流液中に混合し、同様の手技で凍結切片を作成しTUNEL染色を行い、アポトーシスの指標であるTUNEL陽性細胞を観察した。【結果】(1)低酸素またはNMDA負荷後15分から30分をピークにIL-1β陽性細胞が血管内皮細胞とグリア細胞に認められたが、神経細胞は染色されなかった。(2)7NI投与ではHE染色で組織障害の改善は認められず、NT陽性細胞数にも変化がなかった。(3)NMDA負荷4時間後でTUNEL陽性細胞の増加が見られたが、エタラボン投与によりTUNEL陽性細胞は有意に減少した。【考察】低酸素脳障害早期のNO生成はnNOSの関与が少なく、その時点のNOは直接組織障害に関与していないと思われた。エタラボン投与で負荷4時間後のTUNEL陽性細胞が減少したことは負荷後早期に発生するサイトカインがNOを介し、アポトーシスのシグナルとなっていることが示唆された。[目的]低酸素により血管内皮細胞でNOが生じる過程でサイトカインが関与しているという仮説を証明することを最終目的とする。今年度は低酸素性脳障害の発生機序の増悪に関与するNOがどの組織由来であるかを確認する実験を行った。[方法]低酸素負荷ラット大脳皮質スライス灌流モデルを用い、30分間の低酸素負荷を行った。今回は、NOSinhibitorとしてnNOS選択性の7-nitroindazole(7NI)を、低酸素負荷60分前から低酸素負荷終了まで灌流液中に混合する。スライスは負荷前、負荷後2時間まで時間を決めて採取する。20μmの凍結切片を作成し、peroxynitrite生成のマーカーであるニトロチロシン(NT)染色を行った。[結果]低酸素負荷によりNT陽性細胞は増加した。低酸素負荷中に7NIを添加することにより、NT陽性細胞は減少した。[考察と展望]低酸素性脳障害早期にはnNOS由来のNOが関与していることが示唆された。今後、iNOS選択性のNOSinhibitorを用いて同様の実験を行う。さらに同じ実験モデルにおいてIL-1β抗体による染色を行い、NT陽性細胞とIL-β発現細胞の関係を検討する。【目的】低酸素により血管内皮細胞でNOが生じる過程でサイトカインが関与しているという仮説を証明することを最終目的とする。

今年度は低酸素性脳障害の発生機序の増悪に関与するNOが、フリーラジカルスカベンジャーの一つであるエタラボンの投与で、どの程度修飾されるかの実験を行った。【方法】低酸素負荷ラット大脳皮質スライス灌流モデルを用い、30分間の低酸素負荷を行った。今回は、エタラボン(MCI-186)を、低酸素負荷60分前から低酸素負荷終了まで灌流液中に混合する。スライスは負荷前、負荷後2時間まで時間を決めて採取する。20μmの凍結切片を作成し、peroxynitrite生成のマーカーであるニトロチロシン(NT)染色を行った。【結果】低酸素負荷によりNT陽性細胞は増加した。低酸素負荷中にエタラボンを添加することにより、NT陽性細胞は減少した。【考察と展望】エタラボンは酸素ラジカルを特異的に消去することがしられている。低酸素性脳障害早期にはNOによる組織障害が存在することが示唆されたが、エタラボンにより障害が軽減したことより、低酸素脳障害にはNOと酸素ラジカルの両方が関与していることが示唆された。さらに同じ実験モデルにおいてIL-1β抗体による染色を行い、NT陽性細胞とIL-β発現細胞の関係を検討する予定である。【目的】低酸素性虚血性脳障害においてサイトカインが重要な役割を果たしていることが報告されているが、サイトカインの生成細胞、作用機序は明らかではない。今回はサイトカインとNOの脳障害発生への関与を検討し、脳障害の治療に結びつけることを最終目的として研究を計画した。【対象と方法】(1)新生仔ラット大脳皮質スライス灌流モデルを用い、30分間の低酸素またはNMDA負荷を行う。スライスは負荷前と負荷後4時間まで時間を決めて採取する。採取したスライスの凍結切片を作成し、抗IL-1β抗体で免疫染色した。(2)NOSinhibitorとしてnNOS選択性の7-nitroindazole(7NI)を、低酸素負荷60分前から低酸素負荷終了まで灌流液中に混合する。凍結切片を作成し、peroxynitrite生成のマーカーであるニトロチロシン(NT)染色を行った。(3)フリーラジカル消去剤であるエタラボン(MCI-186)を、NMDA負荷60分前から低酸素負荷終了まで灌流液中に混合し、同様の手技で凍結切片を作成しTUNEL染色を行い、アポトーシスの指標であるTUNEL陽性細胞を観察した。【結果】(1)低酸素またはNMDA負荷後15分から30分をピークにIL-1β陽性細胞が血管内皮細胞とグリア細胞に認められたが、神経細胞は染色されなかった。(2)7NI投与ではHE染色で組織障害の改善は認められず、NT陽性細胞数にも変化がなかった。(3)NMDA負荷4時間後でTUNEL陽性細胞の増加が見られたが、エタラボン投与によりTUNEL陽性細胞は有意に減少した。【考察】低酸素脳障害早期のNO生成はnNOSの関与が少なく、その時点のNOは直接組織障害に関与していないと思われた。エタラボン投与で負荷4時間後のTUNEL陽性細胞が減少したことは負荷後早期に発生するサイトカインがNOを介し、アポトーシスのシグナルとなっていることが示唆された。
脳の神経回路の機能解明

本研究は、脳の神経回路の機能解明を目指す特定領域研究(領域番号020)の総括班として、平成16年に開始された。平成16年度には、次年度に開始する計画研究及び公募研究の研究方針の決定、研究項目の策定を行い、平成17年度から21年度までは、計画研究と公募研究の円滑な進展のために、領域の年2回の領域班会議の開催、研究方針の策定、企画調整、評価、研究成果の発信等の活動を行った。脳の最大の特徴は神経細胞が単独で機能するのではなく、多くの神経細胞が連結した神経回路として機能することである。神経回路はからだが出来上がるにつれて「形成」され、成長・発達するにつれて機能的に「成熟」する。成体となるまでに、脳領域の特異性に応じて「発現」される個々の神経回路の独特な機能が完成する。これらのメカニズムを明らかにするため、本特定領域研究では、A01:神経回路の形成、A02:神経回路の機能的成熟、A03:神経回路の特異的機能発現、という3つの研究項目を設定し、12名の計画研究班員と、総勢79名の公募研究班員から構成した。班員の間で極めて活発に連携や共同研究がおこなわれ、5年間に、Nature, Science, Cell, Neuronなどの一流国際学術誌に900編を超える論文が発表された。また、新聞報道をはじめとして研究成果の一般への発信も盛んに行われた。本研究領域は平成21年度をもって終了したが、極めて多くの研究成果が得られており、共同研究をはじめとする人的交流が盛んに行われ、脳の神経回路の機能解明を目指す研究者間のネットワークが出来上がった。これらの有形・無形の財産を、今後の我が国の脳神経科学の発展のために役立てるため、平成22年度において、計画班員とこれまでに公募研究で参加した全ての公募班員の研究成果をまとめ、成果をわかりやすい形で冊子体にまとめ、本特定領域研究の集大成とした。脳の神経回路の機能解明を目指す特定領域研究(領域番号020)の総括班として、研究方針の決定、研究項目の策定、研究の評価と情報発信などを行った。研究組織はA01:神経回路の形成、A02:神経回路の機能的成熟、A03:神経回路の特異的機能発現、の3項目から成り、12名の計画研究班員と、5年間で79名の公募研究班員から構成した。これらの班員の間で極めて活発に連携や共同研究がおこなわれた。5年間に、班員からNature, Science, Cell, Neuronなどの一流国際学術誌に900編を超える論文が発表された。本研究は、脳の神経回路の機能解明を目指す特定領域研究(領域番号020「神経回路機能」)の総括班として、研究方針の決定、研究項目の策定、研究の評価と情報発信などを行う。脳の最大の特徴は、それを構成する神経細胞が単独で機能するのではなく、多くの神経細胞がシナプスを介して連絡することによって神経回路を形成し、さらに神経回路が集積してシステムとしての脳が構成されることである。したがって、脳機能の理解の目的には、その構成素子を対象とした分子レベルの研究に立脚し、神経回路の働きと脳全体のシステムとしての働きを解明する必要がある。そこで、本研究領域には神経回路が「形成」され、「機能的に成熟」し、「特異的な機能を発現する」過程のメカニズムを明らかにする目的で、研究項目A01「神経回路の形成」、研究項目A02「神経回路の機能的成熟」、研究項目A03「神経回路の特異的機能発現」という3つの研究項目を設定した。平成16年10月2日に、領域番号018「統合脳」の総括班の主催で、「統合的脳研究への新展開」というシンポジウムが開催された。ここで研究分担者の大森がこれまでの神経回路研究について紹介するとともに、本研究代表者の狩野が、今後の研究の進め方に関して講演した。また、(領域番号020「神経回路機能」の計画研究班員全員と評価委員がシンポジウムに出席した。多くの研究者及び一般聴衆の参加があり、本研究領域の目指すところとその意義について、広く知らしめることができた。また、平成16年11月12日に総括班員と評価委員が一同に会して、総括班会議を開催し、今後の本領域全体の研究の進め方について種々意見交換した。その後、11月12日13日に、本領域の計画研究班員全員と評価委員全員が参加して班会議を開催し、各計画研究の経緯と今後の研究の進め方について討議し、研究の方向付けを行った。「神経回路」は、動物のからだが出来上がるにつれて「形成」され、成長・発達するにつれて機能的に「成熟」する。動物が成体となるまでに、脳領域の特異性に応じて「発現」される個々の神経回路の独特な機能が完成する。本研究領域では、様々な研究手法を結集してこれら3つのプロセスの解明を目指す。このため、A01:「神経回路の形成」、A02:「神経回路の機能的成熟」、A03:

「神経回路の特異的機能発現」、という3つの研究項目を設定し、12名の研究者による計画研究と、領域の研究方針の策定、企画調整、評価等の目的で総括班を置いた。これらに公募研究を加え、「脳の神経回路の機能解明」をめざして研究を推進した。また、本領域は、同時に発足した脳関連の4特定領域研究(「018:統合脳」、「019:高次脳機能学」、「021:分子脳科学」、「022:病態脳」)との密接な連携と協力の下に、「統合脳5領域」として運営されている。平成17年度は、本研究領域において49件の公募研究を採択し、計画研究も順調に開始された。8月に統合脳5領域合同のワークショップを開催するとともに、「021:分子脳科学」と合同で班会議とサテライトシンポジウムを開催した。12月には、統合脳5領域合同で公開シンポジウムを開催し、領域の班会議をおこなった。また、8月と12月に本研究領域の総括班会議を開催して、神経回路機能の研究方向、運営、などについて討議するとともに、領域内の評価委員の評価・助言をいただいた。9月には、本領域の第1回の中間評価が行われたが、評価結果はA(現行のまま推進すればよい)であり、研究は高いレベルで順調に進行していると判断された。本研究は、脳の神経回路の機能解明を目指す特定領域研究(領域番号020:神経回路機能)の総括班として、研究方針の決定、研究項目の策定、研究の評価と情報発信などを行う。神経回路は、動物の身体が出来上がるにつれて「形成」され、成長・発達につれて機能的に「成熟」する。動物が成体となるまでに、脳領域の特異性に応じて「発現」される個々の神経回路の独特な機能が完成する。本研究領域では、様々な研究手法を結集してこれら3つのプロセスの解明を目指す。このため、A01:神経回路の形成、A02:神経回路の機能的成熟、A03:神経回路の特異的機能発現、という研究項目を設定し、12名の研究者による計画研究と総括班を置いた。これに公募研究を加え、「脳の神経回路の機能解明」をめざして研究を推進した。また、本領域は、同時に発足した脳関連の4特定領域研究(018:統合脳、019:高次脳機能学、021:分子脳科学、022:病態脳)との密接な連携と協力の下に、統合脳5領域として運営されている。平成18年度には本研究領域において42件の公募研究を採択したが、これらは平成19年度までの2年間継続することとなる。計画研究は平成17年度に引き続き2年目も順調に行われた。8月に統合脳5領域合同のワークショップと、3つのテーマ(海馬、大脳基底核、分子細胞イメージング)について領域横断的な統合シンポジウムを開催した。また、第1回の領域班会議を開催し、新たに参加した公募班員が研究発表を行った。12月には、統合脳5領域合同で公開シンポジウムを開催した。また、第2回の領域班会議を開催し、計画班員と平成17年度から参加している公募班員が研究発表をおこなった。
脳の硫酸化グリコサミノグリカン:機能と生合成のメカニズムへの構造解析によるアプローチ

申請者らは、これまでにホヤ、ヌタウナギの脊索、ウニ、サメ軟骨などの海産資源から精製した高硫酸化コンドロイチン硫酸やデルマタン硫酸に、神経突起伸長促進活性や増殖因子との特異的結合を見い出してきた。また、イカ軟骨由来のコンドロイチン硫酸がヘルペスウイルスの感染を特異的に阻害することを見い出した。今年度は(研究期間H15.10.03-H16.03.31)、サメの肝臓およびマグロの皮から硫酸化GAGを単離し、構造上の特徴を明らかにした。具体的には、タンパク質分解酵素でタンパク質成分を徹底分解後、エタノール沈澱法、CPC沈澱法、イオン交換クロマトグラフィーなどで精製し、粗硫酸化糖鎖画分を調製した。それらの試料について、亜硝酸分解や、ヒアルロニダーゼでの消化をすることによってさらに精製し、コンドロイチナーゼで消化して、構造の特徴を調べた。その結果、二つの材料から精製した標品はともにコンドロイチナーゼABCでは分解されるが、コンドロイチナーゼACでは分解率が低くデルマタン硫酸様の構造を主成分とし、コンドロイチン硫酸様構造も少し含む糖鎖が存在することを見い出し、両者の混成鎖として存在する可能性を示した。陰イオン交換HPLCで消化物を分析した結果、主成分はいわゆる4-硫酸化二糖単位を主成分とし、ともに硫酸化二糖単位も含むいわゆる多硫酸化構造を有することが分かった。サメ肝臓のGAGの収量は極めて低かったが、二糖組成分析の結果、サメ肝臓のCS/DSはラットやウシの肝臓のCS/DSなど哺乳動物のものとは異なっており、特にイズロン酸を含む二糖単位が多かった。今後、神経突起伸長促進活性や増殖因子との特異的結合活性を評価する。
戦後形成期の日本外交

第一に,本研究グループを基礎にして進めてきた戦後外交に関する共同研究を,『戦後外交の形成』(年報近代日本研究・第16号)として11月に山川出版社から刊行することが出来た。これは,北岡班のメンバーのうち梅本を除く5名と五十嵐班の2名(李,中西<公募研究>),それに戦後研究グループ以外の様々な分野(思想史,国内政治史,外交史,中国研究)の研究者4名を加えた11名によるもので,戦後外交というテーマの新しさのみならず、様々な分野の密接な共同作業の成果であること,科研グループとそれ以外の研究者との交流を促進したこと,さらに韓国,中国出身の仲間が参加したことなどにおいて,ユニークな成果であると信じる。さらに,北岡が国際政治学会の機関紙,『国際政治』(5月刊行予定)において,戦後50年を記念して,特集号「戦後外交と戦後構想」を編集することとなったため,この研究グループとも共同研究を進め,戦前と戦後の連続性,戦後構想と戦後外交の関連などについて,理解を深めることが出来た。それ以外には,今年も五十嵐班との共同研究会を中心に,研究を進め,本重点領域研究の総括的国際シンポジウムの開催や,本研究終了後の活動方針などについても議論した。他方,このように,研究の総括,出版に力を注いでいたこともあって,とくに新しい取り組みをする時間は十分なかった。止むを得ないと考えている。三年計画の初年度のため、それぞれ基礎的な資料・文献の収集と研究に従事した。北岡は憲法と憲法解釈の歴史についての研究や、戦後国際主義の知的先達たる新渡戸稲造に関する研究を発表した。また他のプロジェクトで収集した沖縄返還問題関係資料を、さらに充実させることに努めた。石井は、従来収集したアメリカ外交資料を基礎にして、日米関係とアジアについての研究をまとめ、また岸内閣とアメリカについて研究を進めた。後者は本重点領域研究の御殿場研究集会で発表された。波多野は外交における国際金融の役割に注目して、高橋是清に関する研究を発表し、また冷戦と日米同盟に関する論文をまとめた。森山は戦後日韓関係に関する時系列的なデータ、および人物データの整理に力を入れた。梅本は国際環境の変化と安全保障政策及び安全保障論議の関係を研究し、その成果の一部をまとめた。また酒井は戦後初期の日ソ関係、および日本の安全保障政策におけるソ連要因に関する研究のための基礎的作業に従事し、外務省公開資料および国会図書館憲政資料室所蔵資料の収集整理、それに最近の内外の研究成果の吸収などに努めた。共同の研究の場としては、五十嵐班と共同で研究会を持ち、各自の研究を披露しあうだけでなく、最新の研究成果を持つ研究者や関連する分野の研究者(たとえばフィリピン研究の吉川・京都産業大学教授)を招き、知識の吸収と意見の交換に努めた。また公募研究の坂元・三重大学助教授とは相互に有意義な共同作業を行うことが出来たので、次年度は北岡班に参加してもらうこととなった。そして年度の最後には、多数の外部参加者を含め、3泊4日のインテンシブな研究会を行った。インタビューについては、外交資料館と協力して、インタビューすべき人物を確定し、接触を進めたが、双方の日程のずれから、実施に至らなかった。次年度には積極的に実施したい。1993年度は,昨年度の成果を踏まえて,次のような活動を行った。まず資料収集については,外務省公開文書のマイクロフィルムを始め,様々な基礎資料の収集に力を入れたほか,国内でアメリカ関係の資料では最も充実している同志社大学アメリカ研究所を訪問し,資料の補強に努めた。また,北岡,石井,森山,坂元が科学研究費国際学術調査その他によって米,英,カナダ,韓国に行き,資料収集を行った。「戦後形成〕の他の班のメンバーに依頼して,海外で資料を入手してもらったこともある。次にインタビューについては,ダグラス・マッカーサー二世(元駐日大使),岸信介関係者,椎名悦三郎関係者について行った。また,戦後外務省の内部の様子を知るため,若干の関係者のインタビューを行った。しかし,予定よりもやや遅れ気味であり,また,公開を好まぬ人もあり,良い資料を残せるかどうか,やや流動的な面もある。研究会については,戦後外交について最近ユニークな成果を挙げた人を招く研究会を数回開いた。また,この「戦後外交」班を中心に,他の班のメンバーを加え,さらに「戦後形成」以外の研究者をも加えて成果を刊行する準備を進めている。そのための研究会を,合宿形成のものを含め,やはり数回開いた。今年の秋には,山川出版社より,『年報・近代日本研究』第16号という形で刊行される予定である。既発表の個別研究は,別紙の通りであるが,それ以外に,北岡,坂元はNHKの戦後外交シリーズにも参加している。全体として,インタビューを除き,研究は順調に進んでおり,ユニークな成果を生み出しつつあるが,研究の包括性においては,やや欠けるところがあるかも知れない。最終年度である来年度には,とくにこの点に留意したい。

これは,北岡班のメンバーのうち梅本を除く5名と五十嵐班の2名(李,中西<公募研究>),それに戦後研究グループ以外の様々な分野(思想史,国内政治史,外交史,中国研究)の研究者4名を加えた11名によるもので,戦後外交というテーマの新しさのみならず、様々な分野の密接な共同作業の成果であること,科研グループとそれ以外の研究者との交流を促進したこと,さらに韓国,中国出身の仲間が参加したことなどにおいて,ユニークな成果であると信じる。さらに,北岡が国際政治学会の機関紙,『国際政治』(5月刊行予定)において,戦後50年を記念して,特集号「戦後外交と戦後構想」を編集することとなったため,この研究グループとも共同研究を進め,戦前と戦後の連続性,戦後構想と戦後外交の関連などについて,理解を深めることが出来た。それ以外には,今年も五十嵐班との共同研究会を中心に,研究を進め,本重点領域研究の総括的国際シンポジウムの開催や,本研究終了後の活動方針などについても議論した。他方,このように,研究の総括,出版に力を注いでいたこともあって,とくに新しい取り組みをする時間は十分なかった。止むを得ないと考えている。