hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
免疫不全症に合併した炎症性腸疾患の網羅的解析

2についてはMAIT細胞が低下するという事実に加えて、クローン病の1群では炎症部位のMAIT細胞数が低下することMAIT細胞はIL-17産生能がクローン病では高いことも明らかになった。これらのことはMAIT細胞が炎症性腸疾患において、低下が発症のリスクとなりうること、並びにクローン病においては炎症性サイトカインの供給源となりうることが示唆された。3についてはクローン病では組織におけるMAIT細胞が正常な群と低下している群があるという示唆に富む結果が得られた。今後これらの結果に加えて、遺伝子発現の解析を行うことで、さらなる層別化を行い、炎症性腸疾患の発症リスクとなる疾患関連候補遺伝子を見いだすこと今後進めていくことが可能となった。以上の24年度の成果は炎症性腸疾患の病態の解明、および治療法の開発につながりうるものと考えられ、順調に進展していると評価できる。25年度が最終年度であるため、記入しない。1「炎症性腸疾患の患者のMAIT細胞を測定することにより、炎症性腸疾患の患者を層別化し、さらに細やかな診断、治療戦略を確立すること。」24年度の実績として炎症性腸疾患の患者においては血液中、および組織中のMAIT細胞数が低下していること、そしてクローン病患者では病変組織においてMAIT細胞が正常な群と低下群の2群に分かれることがわかった。このMAIT細胞が臨床経過や治療のよりどのように推移するかについて、同一患者における追跡調査を行う必要がある。すでに同一患者に対し病状とMAIT細胞の追跡解析は行っており、その臨床的意義についてさらなる詳細な検証を行っていく。2「MAIT細胞と炎症性疾患の病態の関連を見いだすこと。」炎症性腸疾患患者ではMAIT細胞が低下していること、そしてMAIT細胞はIL-17産生能が特にクローン病では高いことが明らかになっている。この意義に関しては、MAIT細胞がIL-17を初めとした炎症性サイトカインの供給源となっていること、腸管細菌叢が破綻によるMAIT細胞の分化増殖の低下、MAIT細胞低下を基盤とした腸管防御の破綻、炎症性腸疾患におけるMAIT細胞のアポトーシスの亢進などが考えられる。これらに対してin situにおけるMIAT細胞のサイトカイン産生の評価、炎症性腸疾患患者のMAIT細胞の動態と正常細菌叢の解析、MAIT細胞細胞のアポトーシス感受性の評価を行う。3「MAIT細胞測定による患者層別化と網羅的遺伝子解析を利用し、炎症性腸疾患を合併する遺伝性疾患を見いだすこと。」クローン病では組織におけるMAIT細胞が正常な群と低下している群がある事から、組織のおけるMAIT細胞数、MAIT細胞のアポトーシス感受性や、遺伝子発現解析を組み合わせることで患者の層別化を行い、疾患関連候補遺伝子の同定を進めていく。
ケイ素-炭素結合の活性化に基づく効率的分子変換法の開発

1.白金触媒によるビニルシランと求電子剤の反応触媒量の二塩化白金とヨウ化リチウムの存在下、β-置換ビニルシランとアルデヒドを反応させると、ビニルシランのβ位で反応が進行し、アリルシリルエーテルを収率良く与えた。ビニルシランの求核付加反応は、通常、α位で進行することが知られており、本反応は極めて新奇な反応である。本反応では、まずケイ素-白金交換反応によりビニル白金中間体が生成する。これがβ位でアルデヒドと反応して白金カルベン中間体となり、1,2-水素移動を伴う白金の脱離により、アリルシリルエーテルが生成すると考えられる。トリメチルシリル基を有するビニルシランの触媒的活性化、白金塩の新奇な触媒作用という観点からも、注目に値する研究成果である。同様の条件下、アセタールとの反応を行うと、この場合も主にβ位での反応が進行した。しかし、反応効率は低く、副反応としてアセタールのアリル化が進行した。触媒系について再検討した結果、二塩化白金とトリフルオロメタンスルホン酸銀を用いると、アセタールのアリル化が効率良く進行することがわかった。2.白金触媒によるビニルシランの加アルコール分解触媒量の四ヨウ化白金の存在下、(Z)-1-トリメチルシリル-1-ドデセンをメタノール中で反応させると、1-メトキシドデカンが生成した。この反応もビニル白金および白金カルベン中間体を経由すると考えられる。反応効率の向上を目指して、触媒系の最適化を引き続き行っている。3.α,α-ビス(ジメチルシリル)エステルを用いるカルボニル基のアルケン化ジメチルスルホキシド中、α,α-ビス(ジメチルシリル)エステルが室温、無触媒でアルデヒドと反応して、α,β-不飽和エステルを高収率、高E選択性で与えた。ケトンの反応は、添加剤として硫酸リチウムを用いると効率良く進行した。このように、極めて穏和な条件下でのカルボニル基のアルケン化に成功した。
技術をブランド化するための知的財産戦略に関する調査・研究

本研究では、企業等の研究開発において創造された「技術」をブランド化するための知的財産戦略について調査・研究を行った。「技術」のブランド化は、技術そのものを可視化し、顧客の知覚品質を向上させ、製品の競争力を高め収益の増大を図るために有効であると認識している企業は多いが、そのための組織体制の構築や知的財産戦略の実施は十分に行われていないことが把握された。本研究は、企業や大学の研究開発において創造された「技術」をブランド化するための「知的財産戦略」について調査・研究を行うものである。平成22年度は、技術をブランド化し、製造業等の「知的財産」として戦略的に活用するための「知的財産戦略」に関して下記の調査・研究を行って成果を得た。1.「技術のブランド化」及び「知的財産戦略」に関する関連文献及び先行研究論文調査を、各種データベース等を利用して収集し、その内容を検討した。文献・論文調査と並行して、「技術がブランド化された事例」(国内及び外国事例)を文献ベースで収集しその類型化を行った。2.技術ブランドの類型ごとに、関連する裁判例を収集・考察した結果について、日本知財学会にて発表した。また、雑誌「発明」(発明協会)にて、技術ブランドに関する誌上座談会の内容を掲載した。3.収集した文献・論文及び「技術のブランド化」の事例の内容を考慮しながら、日本の企業に対する「技術のブランド化」の知的財産戦略に関するアンケートの設計を行った。4.「技術のブランド化」に関する事例として挙がった海外企業として、「テフロン」を開発した米国デュポン社(デラウェア州)、「Intel Inside」キャンペーンを行っているインテル株式会社(カリフォルニア州)を訪問し、ヒアリング調査を実施した。5.技術ブランドを特許権、商標権などの知的財産権制度を用いて企業がどのように保護しているかについて、米国特許商標庁(USPTO)(ワシントンD.C.)、米国の特許事務所(Sughrue Mion PLLC)を訪問して、ヒアリング調査を行った。平成23年度は、技術をブランド化し、製造業等の「知的財産」として戦略的に活用するための「知的財産戦略」に関して下記の調査・研究を行って成果を得た。1.前年度に設計したアンケート調査票を用いて「技術のブランド化」の知的財産戦略に関するアンケート調査を国内企業を対象として実施し、集計を行った。2.「技術のブランド化」を活用した知的財産戦略に関して先端的な取り組みを行っている国内企業(シャープ、パナソニック)に対してヒアリング調査を行った。3.「技術のブランド化」における知的財産戦略立案・遂行に関して、欧州共同体商標意匠庁(OHIM)及び世界知的所有権機関(WIPO)に対しヒアリング調査を実施した。4.日本の企業に対するアンケート調査に基づき、「技術のブランド化」に関する海外企業へのアンケートを設計し、前年度にヒアリングを行った海外企業(デュポン、インテル)に対しアンケート調査を実施した。5.国内外の大学等の研究機関に対して、産学連携・技術移転に際する「技術のブランド化」による知的財産戦略の実施状況及びその可能性についてアンケート調査を行うため、アンケートの設計を行った。本研究は、企業や大学の研究開発において創造された「技術」をブランド化するための「知的財産戦略」について調査・研究を行ったものである。平成24年度は、技術をブランド化し、製造業等の「知的財産」として戦略的に活用するための「知的財産戦略」に関して下記の調査・研究を行って成果を得た。さらに、本調査・研究の報告書取りまとめを実施した。1.前年度に実施した国内企業を対象とするアンケート調査結果の内容を、さらに分析・検討するため、国内企業に対して「技術のブランド化」の知的財産戦略に関する個別ヒアリング調査を実施した。2.産学連携や技術移転に際する「技術のブランド化」による知的財産戦略の活用について、その実施状況と可能性につき、国内の大学等の研究機関に対してヒアリング調査を実施した。3.「技術のブランド化」による知的財産戦略の立案・遂行について、中国・韓国等において先進的な取組みをしている企業について事例調査を行い、韓国の企業(サムソン電子)及び特許事務所(金&張)を訪問して、「技術のブランド化」による知的財産戦略の立案・遂行に関してヒアリング調査を実施した。4.日本知財学会第10回年次学術研究発表会「デザイン・ブランド戦略分科会」にて「技術のブランド化」について発表を行い、日本ライセンス協会関東月例研究会にて「技術のブランド化」について講演を行った。震災の影響で、国内企業に対するアンケート調査については平成22年度から平成23年度に実施を延期せざるを得なかったため、アンケート結果の分析・検討の成果を学会等で発表する時期が予定よりも遅延した。しかしながら、海外でのヒアリング調査、国内企業へのヒアリング調査等は予定通り実施することができた。24年度が最終年度であるため、記入しない。平成23年度に実施したアンケート調査、ヒアリング調査結果について分析・検討した内容については、平成24年度において学会発表、論文発表を実施する。

また、平成24年度に実施する国内外の大学等の研究機関に対するアンケート調査については、WEBを活用した電子的なアンケート収集方法を用いることで、簡易かつ安価にアンケート調査を実施するものとする。24年度が最終年度であるため、記入しない。
生活習慣病治療薬によるアルツハイマー病治療戦略の基盤構築

降圧薬のアンジオテンシンII1型受容体(AT1)拮抗薬(ARB)は観察研究においてアルツハイマー病(AD)進展抑制作用を有する事が示唆されるが、その機序は明らかでない。一方、AGE受容体(RAGE)はアミロイドβ(Aβ)と結合し、AD進展に関与する事が知られている。本研究では、AβがRAGEを介してAT1を活性化することがAD発症メカニズムの一つであり、ARBがそれを抑制するという仮説の証明を目的とした。その結果、細胞実験においてAβによるAT1活性化機構が証明され、ARBがその現象を一部抑制する事が証明された。一方、動物実験は完結せず更なる検討が必要である。本研究では4つの戦略に基づく計画・方法を立案している。戦略1では本研究の基礎であるRAGEリガンドがRAGE-AT1複合体を介してAT1を活性化することを、AGEをリガンドとして用いて証明する。平成26年度は従来用いていたラット近位尿細管上皮細胞に加えヒト肺動脈上皮細胞(HPAEC)でも検討を行いRAGEリガンドがAT1依存性に細胞内シグナルを活性化することを示した。またAT1とRAGEを発現しないCHO細胞に遺伝子導入を行いRAGEリガンドがAT1依存性に細胞内シグナルを活性化することを示した。戦略2ではRAGEリガンドであるAβがRAGEを介してAT1を活性化することで神経系細胞傷害につながるシグナル伝達系を活性化することを証明する。平成26年度はHPAECや遺伝子改変CHO細胞を用いて検討を行ったがこれまでのところAβによる細胞内シグナル伝達系を明瞭に観察できていない。Aβの処理時間や観察するシグナル伝達系等の条件検討を今後継続していく。戦略3では、AβのRAGEを介するAT1活性化がAβの細胞内移行にも関与することを証明する。本戦略は平成27年度以降に施行する予定であり、現在ベクター作成等準備段階である。戦略4ではまず体循環中のAβの脳組織内への移行がRAGEを介するAT1活性化により制御されることを証明する。またADモデルマウスやAIIを産生しないマウスを用いてAII非存在下でのAT1阻害がAD発症を抑制することを証明する。本戦略は平成27年度以降に施行する予定であり、現在AT1欠損/APP23マウスを交配により作成している。また準備段階として野生型マウスを比較対象として認知機能評価をする予備実験を行っている。戦略1では本研究の基礎であるRAGEリガンドがRAGE-AT1複合体を介してAT1を活性化することを、RAGEリガンドとして証明することを目的とした。これまでにラット近位尿細管上皮細胞やヒト肺動脈上皮細胞を用いた検討でRAGEリガンドによる細胞内シグナル活性化がAT1の阻害により抑制される結果を得た。またRAGEリガンドは癌細胞の増殖に関与することが知られており、癌細胞の増殖や遊走にAT1が関与することを示す実験計画を進めている。CHO細胞への遺伝子導入の検討では変異AT1発現細胞を作成しRAGEリガンドによる細胞内シグナルがAT1活性化能に依存することを見出した。戦略2ではRAGEリガンドであるAβがRAGEを介してAT1を活性化することで神経傷害を惹起することを証明する。神経細胞や遺伝子導入CHO細胞を用いた検討を行っているが、Aβによる細胞内シグナル伝達の検出系が安定せず、条件設定を行っている。戦略3ではAβのRAGEを介するAT1活性化がAβの細胞内移行に関与する事を証明する。現在、Aβ以外のRAGEリガンドによる刺激時のAT1の細胞内移行をライブイメージングで検証する実験を進めており、今後Aβを用いた検討を予定している。戦略4ではAβによるRAGE依存性の認知症発症機序にAT1活性化が関与する事を、マウスを用いて証明する。AT1欠損/APP23tgマウスを用いた行動実験を開始している。上述戦略2のAβによる細胞内シグナル伝達の検出が計画通り進展していない。その他の計画は概ね順調である。昨年度の成果としてCHO細胞への遺伝子導入の検討でRAGEリガンドによるAT1活性化のメカニズムがangiotensin IIによるAT1活性化様式とは異なる事を見出した。angiotensin IIによるAT1活性化時には数種類のG蛋白の活性化とβarrestin2依存性シグナルの活性化が同時に生じる事で種々の細胞反応が生じる事が知られているが、RAGEリガンドによるAT1活性化時のG蛋白の活性化様式はそれとは異なった。RAGEシグナルとAT1シグナルの細胞反応の違いを説明できるメカニズムであり、今後さらに検討する予定である。神経細胞や遺伝子導入CHO細胞を用いた検討を行っており、RAGE, AT1依存性の細胞内シグナルが観察されており更に検討する。Aβ以外のRAGEリガンドによる刺激時のAT1の細胞内移行をFRETで検証する実験を進めている。

今後Aβでも検証する予定である。戦略4ではAβによるRAGE依存性の認知症発症機序にAT1活性化が関与する事を、マウスを用いて証明する。AT1欠損/APP23tgマウスを用いた行動実験を開始している。今後経静脈的に投与したAβがAT1依存性に脳内移行を起こすか検討する予定である。上述のように戦略1では当初の予測と異なる結果が出ており、解析を更に進めるため時間を要した。戦略2に関しては当初条件設定に時間を要したため、遅延が生じているが現在は進行している。戦略4は当初の予定よりマウスの繁殖に時間を要している。本研究では4つの戦略に基づく計画・方法を立案した。戦略1では本研究の基礎であるRAGEリガンドがRAGE-AT1複合体を介してAT1を活性化することを、RAGEリガンドを用いて証明することを目的とした。昨年度までの検討により全容が解明され下記のメカニズムが存在する事が明らかになった。「angiotensin II(AII)によるAT1活性化時には数種類のG蛋白の活性化が同時に生じるが、RAGEリガンドによるAT1活性化時のG蛋白活性化は選択的でありAII刺激時とは異なる。」戦略2ではRAGEリガンドであるAβがRAGEを介してAT1を活性化することで神経傷害を惹起することを証明することを目的とした。昨年度は遺伝子導入CHO細胞を用いた検討を行い、戦略1で解明したAT1活性化によるG蛋白の選択的活性化がAβにより同様に生じる事を明らかにした。戦略3ではAβのRAGEを介するAT1活性化がAβの細胞内移行に関与する事を証明することを目的とした。蛍光Aβを用いた実験で、Aβの細胞内移行がRAGE, AT1依存性に生じる事を明らかにした。また、高解像度顕微鏡を用いた細胞膜の観察で、蛍光標識したRAGEとAT1がRAGEリガンド刺激により同時に消失する像を観察する事ができており、今後Aβを用いた実験を施行する予定である。戦略4ではAβによるRAGE依存性の認知症発症機序にAT1活性化が関与する事を、マウスを用いて証明することを目的とした。AT1欠損/APP23tgマウスとAPP23tgマウスを用いた行動実験を開始しているが、技術的問題により交配計画に遅延が生じたため、結論には至らなかった。降圧薬のアンジオテンシンII1型受容体(AT1)拮抗薬(ARB)は観察研究においてアルツハイマー病(AD)進展抑制作用を有する事が示唆されるが、その機序は明らかでない。一方、AGE受容体(RAGE)はアミロイドβ(Aβ)と結合し、AD進展に関与する事が知られている。本研究では、AβがRAGEを介してAT1を活性化することがAD発症メカニズムの一つであり、ARBがそれを抑制するという仮説の証明を目的とした。その結果、細胞実験においてAβによるAT1活性化機構が証明され、ARBがその現象を一部抑制する事が証明された。一方、動物実験は完結せず更なる検討が必要である。研究実績の概要に示した如くAβによる細胞内シグナル伝達系の観察ができていない。戦略1に関しては結果が完成すれば論文を作成する。戦略2, 4に関しては認知症研究を専門領域とする研究者と研究を推進する計画を整えている。
癌細胞標識用シリコンナノ粒子の表面修飾技術確立による細胞認識性向上と発光機能制御

近年、医用工学分野において、生体内で高効率の可視発光を示し、がん細胞や薬剤などと融合させることのできる標識(バイオイメージング)用半導体ナノ粒子材料が注目されている。しかし、現在医用工学用に研究・開発されている半導体ナノ粒子材料は、生体内投与における材料の安全性やがん細胞との吸着反応性に問題を抱えている。そこで、本研究では人体への影響の少ない無害性・無毒性材料であるシリコンナノ粒子を用い、粒子とがん細胞との反応性を向上させるために粒子表面への修飾技術の構築について検討した。試料には、既にサイズ制御、マルチカラー化、高輝度化技術を確立している製造方法により生成した球状のシリコンナノ粒子(粒子サイズは約3.0nmである)を用いた。この粒子表面にポリエチレングリコールを修飾した。ポリエチレングリコールを修飾したシリコンナノ粒子は、粒子間での凝集が抑制され、純水中において長時間安定した状態で粒子を分散させることに成功した。また、この粒子に紫外線を照射することで、670nmにピークを有する赤色発光を高い収率で得ることができ、その輝度は肉眼で十分に目視できるものであった。さらに、ポリエチレングリコール以外にも抗体などの生体分子との反応性の高いアミノ基を粒子表面に修飾させても同様の結果を得ることができた。このように、本研究では、発光機能を損なわずに、がん細胞や生体分子などとの吸着性に優れた官能基をシリコンナノ粒子表面に修飾させる技術を確立することができた。
造血幹細胞は自ら動く

MAPキナーゼ(MAPK)系とJAK-STAT系は造血細胞における主要な細胞内シグナル伝達系である。今回、ヒトCD34陽性造血幹/前駆細胞を用いた解析から、サイトカイン(G-CSF、GM-CSF、TNFα、IL-1β、IL-3、IL-6、TPO、SCF、IFNαおよびIFNγ)特異的に、特定のMAPKサブタイプ(ERK、p38およびJNK)とSTAT-1,-3および-5が活性化されることが明らかになった。また、ヒト好中球における細胞内シグナル伝達系活性化と機能発現について検索を進めてきた。MEK-ERK系は未熟な造血細胞においては主として増殖に関与すると考えられたが、成熟した好中球においてはサイトカイン刺激による活性酸素産生や接着に関与することが明らかになった。このことは、同じシグナル伝達分子でも細胞の分化段階に応じてその機能的役割が変化することを示している。また、CD34陽性細胞においては、例えば、GM-CSF刺激によりp38の活性化は認められないが、好中球では比較的強く活性化される。このことは、同一のサイトカイン受容体から生ずるシグナルも細胞の分化段階によって異なることを示している。また、好中球においては、G-CSF、GM-CSFおよびTNF刺激によって、MAPK系の活性化を介して、細胞骨格アクチンの持続的な脱重合が起こることを明らかにした。走化性因子FMLPでは、一過性に強くアクチンの重合が認められた。現在、CD34陽性細胞を用いて、サイトカインおよび走化性因子刺激による細胞形態の変化、細胞骨格分子の再構成および細胞運動について解析を進めている。造血幹細胞の末梢血への動員あるいは骨髄への生着のメカニズムの分子制御機構の解明につながることが期待される。今回、ヒトCD34陽性造血幹/前駆細胞を用いた解析から、サイトカイン(G-FSF、GM-CSF、TNFα、IL-1β、IL-3、IL-6、TPO、SCF、IFNαおよびIFNγ)特異的に、特定のMAPKサブタイプ(ERK、p38およびJNK)とSTAT-1,-3および-5が活性化されることが明らかになった。造血幹細胞の末梢血への動員あるいは骨髄へ生着のメカニズムの分子制御機構の解明につながることが期待される。
ソルボンヌ講義の体系的読解に基づくメルロ＝ポンティ他者論の再解釈

本研究の目的は、フランスの哲学者メルロ=ポンティの教育学・児童心理学の講座、通称ソルボンヌ講義(1949-1952年)を、『知覚の現象学』に代表される前期他者論とは対比される中期他者論として、体系的に解釈することであった。本年度はソルボンヌ講義の中でも、文化人類学の議論とサイコドラマの議論を、メルロ=ポンティの参照している原典にさかのぼって調査し、それらの議論を人種、ジェンダー、民族、階級などの「類型」についての議論として解釈した。「類型」は親から子への世話や周囲の大人の態度などを通じて世代を通じて伝承されていく側面を持ち、主体が広義の表現、行為をするための基盤の機能を果たすものである。これらの「類型」は伝承によって個々人にとり、あたかも「運命」のような様相を呈することがあるが、この「運命」、集団に典型的な態度・行動の様式も主体自身によるそれらの類型・様式の自覚と「取り上げ直し」によって、個別的で新たな様式・スタイルへと改変され、乗り越えられるという論点が確認された。報告者はこれらの論点を、知覚主体にとっての「他者の現れ」の議論として整理し、博士論文を執筆した。さらに報告者は、3月に二週間弱フランスに滞在し、フランス国立図書館において、『心理学誌』の調査を行なった。同誌にはメルロ=ポンティによるソルボンヌ講義が、学生向けに掲載されており、講義ノートを取った者の姓名およびメルロ=ポンティによる承認の有無などが掲載されている。報告者はこの調査から、ソルボンヌ講義の講義録のうちどこまでをメルロ=ポンティ自身の考えとして確証できるか確認し、さらに他の版との異同を確認した。報告者は以上のソルボンヌ講義についての研究によって、先行研究が看過してきた同講義の重要性を示し、同講義をメルロ=ポンティ思想の中に位置づけることができた。成果は博士論文の出版によって公表する予定である。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究はフランスの哲学者メルロ=ポンティが行った児童心理学と教育学の講義(ソルボンヌ講義)を他者論の発展の軌跡として体系的に読解することを目的としている。メルロ=ポンティはソルボンヌ講義の中で哲学のみならず様々な人間の科学を自在に用いつつ議論を行っている。本年度は特にソルボンヌ講義の中でも「大人から見た子供」に焦点を絞りつつ、文献解釈とフランスでの未刊行資料の調査を行なった。当初の計画では、ソルボンヌ講義の中の子供の出生と家族内の変化に関する議論についての研究を行うことを当該年度中の課題としていたのだが、実際に行ったのは、子供が家族へ加入することで被る大人からの影響、あるいは社会構造からの影響という子供の側の議論であった。とは言え、この議論は精神分析、史的唯物論、文化人類学から想を得たメルロ=ポンティの「集団のスティルstyle」、つまり「類型Type」についての重要な考察である。というのも、この集団のスティルに基づいてこそ、主体は世界や他人の知覚を行うのである。この研究成果は学会で報告した。子供の誕生に伴う大人の側の変化というメルロ=ポンティの議論の研究は引き続き行う。もう一点、メルロ=ポンティの「役割」の概念についてモレノを手掛かりに研究する計画は当該年度中には達成できなかったため、こちらも引き続き研究する。そのほかに、法政大学出版から3月に出版された『メルロ=ポンティ読本』に寄稿を依頼され、ソルボンヌ講義の直前期の著作『意味と無意味』の著作解題を執筆した。当該著作からは、当時のメルロ=ポンティの政治的な問題関心を確認することができた。このことによって上の「集団のスティル」、「類型」の議論が持つ意義ー人種、民族、階級、性別などの社会的属性とその人物の人格との関係、文化・教育形式の継承や差別などのアクチュアルな問題に哲学的基礎を与えうるという意義を確認できた。上述の『意味と無意味』著作解題の執筆により、本研究が標題に掲げるソルボンヌ講義自体の研究ではないものの、メルロ=ポンティ他者論の再構成という本研究の目的に重要な寄与をする研究を進めることができた。また、本研究と直接的に関連するわけではないが、メルロ=ポンティの後期思想に関する研究の補助を行ったことで、中期思想や他者論という主題よりも広い視野から本研究を見つめ直す機会を得た。

報告者はこれらの論点を、知覚主体にとっての「他者の現れ」の議論として整理し、博士論文を執筆した。さらに報告者は、3月に二週間弱フランスに滞在し、フランス国立図書館において、『心理学誌』の調査を行なった。同誌にはメルロ=ポンティによるソルボンヌ講義が、学生向けに掲載されており、講義ノートを取った者の姓名およびメルロ=ポンティによる承認の有無などが掲載されている。報告者はこの調査から、ソルボンヌ講義の講義録のうちどこまでをメルロ=ポンティ自身の考えとして確証できるか確認し、さらに他の版との異同を確認した。報告者は以上のソルボンヌ講義についての研究によって、先行研究が看過してきた同講義の重要性を示し、同講義をメルロ=ポンティ思想の中に位置づけることができた。成果は博士論文の出版によって公表する予定である。今後は、一般的な類型としての他人の現れに対して、スティルの変形による個人の現れというテーマに移行する。また研究のテキストとしている講義録自体の文献学的な正当性があるのか、あるいはないのかということを調査する。これまでの研究では、学会での単発の論文発表のために研究の独自性を追求した結果、メルロ=ポンティによる人間の諸科学の参照を議論する際、心理学や文化人類学などの原書を詳細に読み込んでしまう傾向があったため、今後はメルロ=ポンティの哲学研究であるということを念頭に置いて、必要最小限にとどめたい。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
ステファヌ・マラルメの演劇論と「共和国」の関係についての研究

本研究では、ステファヌ・マラルメの演劇論を当時の演劇状況および社会・政治状況のうちに置き直し、新たな視点からの読解を試みた。具体的には、同時代の劇評家たちの評言と突き合わせ、また批評対象となった作品を実際に読み、新聞・雑誌等に掲載された版画等の補助資料も用いながら、舞台を観る詩人のまなざしの特異性を明らかにしようとした。これと並行して、19世紀末パリで上演された芝居の基礎情報とマラルメが「演劇に関する覚え書」で採り上げている作品を論じた他の劇評の電子化を行い、データ・ベースを構築した。本研究は「演劇についての覚え書」(1886-87)を出発点とし、『ディヴァガシオン』(1897)へと至るマラルメ演劇論の成り立ちを通時的に捉える視点を持つと同時に、それらの劇評が書かれ、演劇論として要約され、纏められ、また解体されるそれぞれの時期における、その目的・効果などを、同時代の演劇・社会状況やマラルメの演劇観の進展・洗練を視野に入れながら、共時的にも考えようとするものである。筑摩書房刊『マラルメ全集』における渡邊守章氏の仕事が詩人のテクストから抽出される「未来の祝祭演劇のパラダイム」を明らかにしようとする理念的なものへと向かっているのに対し、我々はあくまで実際に上演された(読まれた)作品との批評的格闘によって生成・展開するマラルメのエクリチュールに焦点を当てるとともに、「演劇についての覚え書」が濃厚に有する社会・政治批判的な側面を詩人の演劇論においても強調したい。「社会的矮小化の代償として<国家>に要求する権利」として演劇をみていたマラルメは、1885年以降ようやく機能し始めた第三共和制に対する期待と失望を、演劇の批評を通して、演劇の問題に限定して語っているのであり、その劇評には「犠牲の論理」を押し付ける国家、すなわちエルネスト・ルナンが指し示すような国民国家に対する人間としての正当な権利要求という側面があるのではないか。そして、社会における演劇の必要性を詩人はどのように主張するのか。我々はマラルメの演劇論を単に美学的・哲学的にだけ読むのではなく、社会的・政治的にも読み得ると考えている。本年度は、SoubiesのAlmanach des spectaclesを中心に、まずは1880年代にパリで上演された芝居・演奏会等の情報を電子化し始めた。研究者の利用に供するため、多様な有用性を考慮しつつレイアウト等を確定し、できるだけ早い公開を考えている。このデータ・ベースは、同時代の劇評などの書誌的資料によって補完し、今後も随時情報の更新・修正を予定している。また、後期マラルメの出発点を画す彼のワーグナー論を採りあげ、そこに現れてくる「国家」「国民」といった政治的側面の読解を試みた。「社会的矮小化の代償として〈国家〉に要求する権利」として演劇を捉え直すマラルメは、戦禍とコミューンの騒乱によって廃墟と化したパリに半ば強引に居を定めたそのときから、新しい「共和国」のあり方を〈詩人〉の立場からじっと見つめ続けていたにちがいない。「演劇についての覚え書」を書く彼は、それゆえ、1885年以降、政治的にはなんとか機能し始めた第三共和制に対する期待と失望を、演劇の批評を通して、演劇の問題性に限定して、語っていく。そのエクリチュールには、90年代に遥かに多面展開される詩人の〈行動〉の種があちこちに播かれ、すでに芽吹いており、それはとりわけワーグナーを召喚する批評=危機の場に見出される。パナマ事件やアナーキストの爆弾事件などが演出する国家の危機を舞台に、政治と言語の問題(より正確には言語の政治学というべきもの)を通して、文芸(lettres)に宿る〈フィクション〉の力を読者(public)に意識させ、言語への信を取り戻させることで人間の社会的基盤を再編しようとする批評詩の試みへと発展していく批判精神がそこに見出せる。ワーグナーとは、『ディヴァガシオン』の著者にとって、その思考の賭金として、美学的だけでなく、政治・社会的にも重要な存在であったことを論じた。本年度は9月にパリのジャック・ドゥーセ文学図書館において、マラルメが『パージュ』(1891年)および『詩と散文』(93年)をそれぞれ出版するにあたって作成した台紙貼付け見本(maquette)の現物を手に取り、その作業の現場を確認した。とくに86年から87年にかけて書かれた劇評「演劇に関する覚え書」がその二つの著作においていかに編集・統合・分解されていくのかを、切り貼りされた校正刷・雑誌初出のテクスト、またマラルメ自筆の書込み等から追うことができた。これらマケットに関しては残りの研究期間中に繰り返し検討し、最終的には詳細な研究資料を作成したいと考えている。発表論文は2本。「私は未知なるものを待っている-

マラルメの『エロディアード』上演をめざして(2)」、および「思考における『夢のような正しさ』について-ワーグナーの『挑戦』に応えるマラルメ」である。ワーグナー論は前年度学会で発表したものに大幅に手を加えた。演劇というものの社会的・宗教的役割を意識させた重要な存在としてワーグナーを位置づけつつ、彼の神話の扱い方を批判する詩人の手つきから、マラルメ的共同体がいかなるものであり得るかという問いへと論を進めることができた。今年度は結局、ワーグナーとバレエ論を中心に論をまとめることになったが、研究環境の変化に伴う雑事によって、あまり研究が進まなかったことも事実である。3年目となる今年度以降、マラルメが夢想する「ドラマ」のあり方を念頭に置き、同時代風俗劇を扱った彼の劇評の考察に着手したい。本年度も1880年代にパリで上演された演劇情報のデータ・べース化を継続したが、膨大な、しかも無味乾燥な情報になりかねないその資料をいかに有効活用できるかたちで提供し得るのか。この点に関し、ウェブ上での公開をめざして、サイト構成の方向を明確に決定する必要があるだろう。本年度もひき続き、パリのジャック・ドゥーセ文学図書館での資料閲覧・調査により、マラルメが『パージュ』および『詩と散文』のために手ずから作成したマケットにおいて、彼の演劇論がどのように編纂あるいは再編されていくのかを確認しつつ、それぞれの生成批評版作成を進めた。また、初年度から継続しているSoubiesのAlmanach des spectaclesを基にした上演データを、『フィガロ』紙に掲載されていた上演案内によって補うとともに、マラルメが演劇評で論じたのと同じ作品を扱っている他の批評家たち(Stoullig、Saint-Mor、Raoul Tocheなど)のテクストも電子化を行っている。あいかわらず、諸データの公開には手間取っているが、これらの劇評と劇作品それ自体とを併読することで、同時代におけるマラルメのまなざしの特異性、その目指す地点が実証的に確認できるであろう。ただ、本年度は拙著『世紀末の白い爆弾-ステファヌ・マラルメの書物と演劇、そして行動』(水声社)出版のために予想以上に時間を取られ、本研究に関しては専ら資料を読み、その整理に追われ、新たな論文の完成にまで至らなかったことが残念である。とはいえ、本研究の成果を反映させる形で『世紀末の白い爆弾』の各章、とりわけ第三章「詩人の夢想-演劇と政治」には大幅に手を加えることができ、また東北大学で開催されたマラルメ・シンポジウム2010では、「マラルメと第三共和制」と題した発表を行い、詩人と共和国との関係を新たな視点で考え直すための見取り図を自分なりに描くこともできた。最終年度にあたる平成22年度は、これまでの研究によって得られた成果をひとつずつ論文として纏めていきたいと思う。パリのジャック・ドゥーセ文学図書館での資料閲覧・調査により、マラルメが手ずから作成した『台紙貼付け見本(maquette)』それぞれの生成批評版作成を進めた。『詩と散文』のマケットに関しては生成批評版を完成させることができた。予想以上にさまざまな雑誌からの切抜きによって構成されており、それらの特定には至らなかったが、演劇論については詩人によるテクスト(再)編成の手つきが確認でき有益であった。『漆塗りの抽出し』『パージュ』に関してはまだ不十分な箇所が多く、未完成であるが、今後も手を入れていきたい。
核融合炉超電導マグネットにおけるエネルギー損失評価に関する基礎研究

第II種超電導体内での電流分布を表す構成方程式を構築し、申請者らがすでに開発している電流ベクトルポテンシャル法に基づく渦電流解析コードを改良して数値解析を実施した。すなわち、超電導体中での電流分布に関しては電流密度が臨界電流を越えないという条件を満足するように数値解析を行い、超電導体中での電磁現象を評価した。さらに、熱場との連成問題を解析するため、新たに、極低温場下での超電導体を取り扱える温度場解析コードを作成し、輸送電流が存在する場合の、非定常磁場下でのエネルギー損失を定量的に評価し、クエンチ伝播の安定限界を詳細に解析した。その結果、クエンチ時の電流分布の変化の様子や、温度場の形成の様子が明かとなった。さらに、従来からの簡易的解析手法では評価することが不可能であった、外部磁場の強さの磁束流による発熱への影響が非常に大きいことが明かとなり、安定限界に関する詳細解析が不可欠であることが分かった。特に、外部磁場が大きいときには、磁束流による発熱が大きくなり、クエンチに対する発熱限界がかなり小さくなることが明かとなった。
片麻痺脳血管障害者の局所下肢運動時における循環調節の検証

本研究の実施計画では、片麻痺脳血管障害者の局所運動時における循環調節の検証を目的に、運動療法可能なブルンストロームステージ3前後で理学療法実施可能者を対象としている。脳血管障害対象者の多様な障害像の中で一律となる本研究遂行のための基準を満たす対象者が少なく、計測方法や実施手順等に関しても検討を費やすこととなったが、簡易式掌握運動機器エルゴメータの設計を作成し、5名の片麻痺対象者に対して非麻痺側上肢運動を実施し、運動時の非麻痺側上肢及び麻痺側上肢、ならびに両下肢大腿、あるいは下腿の酸素循環動態について検討した。麻痺側上肢はブルンストロームステージ3を対象としているが、多くの対象者は随意的な運動に制限があり、非麻痺側上肢運動中に、随意的な運動はみられなかったにも関わらず、酸素動態が運動とともに変化するケースも認められた。この現象(メカニズム)を証明するには、今後より多くのデータ検証が必要であるが、推論としては運動肢からの中枢性フィードバックを介した麻痺側上肢の骨格筋循環への影響の存在を示唆する所見であると考えられた。一方、脳血管障害等の運動療法の循環動態に関する知見等の情報を得るために、心臓リハビリテーション学会やリハビリテーション学会等に参加した。リハビリテーション領域で頻繁に使用する強度の異なる6種類のゴムバンドをそれぞれ足関節に巻き、そのゴムバンドを伸張させることで得られる動的膝伸展動中の下肢血流量(超音波法)の計測を行った。負荷強度依存性に下肢血流量の増加が検証され、この結果は膝伸展モデルにおいて血流制限下(切断肢)における循環動態についてジャーナル誌Physical Therapy and Rehabilitationに公表した。これらの研究成果をもとに、さらに、脳血管障害における麻痺肢循環動態について考察を深めることへの足掛かりとなった。本研究の実施計画では、片麻痺脳血管障害者の局所上・下肢運動時における循環調節の検証を目的に従命にて運動療法可能なブルンストロームステージ3前後で3か月以上の理学療法実施可能者を対象としている。平成27年度では安静時における四肢血流量の再現性について検討することを目的としていた。しかしながら、本研究遂行のための基準を満たす脳血管障害対象者の多様な障害像の中で一律となる選定が容易でなく、また計測方法や実施の手順等に関しても検討を費やすこととなった。特に、急性期の加療を中心としているリハビリテーションセンターが研究実施場所のために、対象者の全身状態が安定した中での研究実施の時期についても療法担当者との間で検討を行った。また、機器備品等において作成検討していた簡易式掌握運動機器エルゴメータの代用として従来使用していた膝伸展機器を使用して、実際に片麻痺の対象者の運動モデルとして下肢運動が遂行できるかも併せて検討した。脳血管障害等の有疾患の運動療法の循環動態に関する知見等の情報を得るために、心臓リハビリテーション学会やリハビリテーション学会等に参加した。研究報告に関しては、健常者における下肢等尺性運動時における一心拍に連動した血流動態についての研究成果を公表し、今後の運動時の活動筋収縮と筋弛緩を考慮にいれた血流評価について参考にしていく予定である。また、脳血管障害の麻痺肢の局所循環の評価のアプローチの手がかりとして以前より実施している動脈硬化性疾患保有者の循環動態の計測方法や運動時の循環応答に関してより詳細な検討を行い、今後学会にて報告予定としている。対象者の選別において、急性期における病態の多様性(特に、意識レベルや障害の程度)により均一な対象者を選定することが困難なことや、研究代表者の人事異動も重なり、当初の予定から進捗状況は大幅に遅れている。平成28年度では安静時における四肢血流量の再現性について検討することを目的としていた。機器備品等において比較的高負荷の設定が可能な簡易式掌握運動機器エルゴメータの設計を行い機器作成の発注を行った。実際に片麻痺の対象者の運動モデルとして上肢運動が遂行できるかも併せて検討した。研究報告(第53回日本リハビリテーション学会)に関しては、末梢動脈血管疾患(閉塞性動脈硬化症)における下肢運動時の筋血流動態についての研究成果を発表した。更には、膝伸展モデルにおいて等張性と等尺性筋収縮時の血流動態の違いについてジャーナル誌Phys Med Rehabil Resに公表した。これらの研究成果を公表し、今後の運動時の活動筋収縮と筋弛緩を考慮にいれた血流評価について参考にしていく予定である。

本研究の実施計画では、片麻痺脳血管障害者の局所四肢運動時における循環調節の検証を目的に、運動療法可能なブルンストロームステージ3前後で理学療法実施可能者を対象としている。平成28年度では安静時における上肢血流量の再現性について検討することを目的としていたが、脳血管障害対象者の多様な障害像の中で一律となる本研究遂行のための基準を満たす対象者が少なく、計測方法や実施手順等に関しても検討を費やすこととなった。機器備品等で簡易式掌握運動機器エルゴメータの設計を作成し、3名の片麻痺対象者に対して上肢運動が遂行できるかも併せて検討したが、途中計測の主体となる機器の故障に伴い修理代替え等で大幅な遅延を余儀なくされた。一方、脳血管障害等の有疾患の運動療法の循環動態に関する知見等の情報を得るために、心臓リハビリテーション学会やリハビリテーション学会等に参加した。研究報告に関しては、先行データをもとに解析し、下肢等張性及び等尺性運動時の筋血流動態について第54回日本リハビリテーション学会にて発表した。更には、膝伸展下肢運動モデルにおいて等尺性筋収縮時と筋弛緩時の血流動態の違いについてジャーナル誌Journal of Cardiac and Pulmonary Rehabilitationに公表した。これらの研究成果をもとに、さらに、脳血管障害における麻痺肢循環動態について、運動時の活動筋収縮と筋弛緩を考慮にいれた血流評価について研究計画を遂行していく予定である。対象者の選別において、急性期における病態の多様性(特に、意識レベルや障害の程度)により均一な対象者を選定することが困難なことや、本研究で中心的となる計測機器の故障がおきたため、当初の予定から進捗状況は大幅に遅れている。本研究の実施計画では、片麻痺脳血管障害者の局所運動時における循環調節の検証を目的に、運動療法可能なブルンストロームステージ3前後で理学療法実施可能者を対象としている。脳血管障害対象者の多様な障害像の中で一律となる本研究遂行のための基準を満たす対象者が少なく、計測方法や実施手順等に関しても検討を費やすこととなったが、簡易式掌握運動機器エルゴメータの設計を作成し、5名の片麻痺対象者に対して非麻痺側上肢運動を実施し、運動時の非麻痺側上肢及び麻痺側上肢、ならびに両下肢大腿、あるいは下腿の酸素循環動態について検討した。麻痺側上肢はブルンストロームステージ3を対象としているが、多くの対象者は随意的な運動に制限があり、非麻痺側上肢運動中に、随意的な運動はみられなかったにも関わらず、酸素動態が運動とともに変化するケースも認められた。この現象(メカニズム)を証明するには、今後より多くのデータ検証が必要であるが、推論としては運動肢からの中枢性フィードバックを介した麻痺側上肢の骨格筋循環への影響の存在を示唆する所見であると考えられた。一方、脳血管障害等の運動療法の循環動態に関する知見等の情報を得るために、心臓リハビリテーション学会やリハビリテーション学会等に参加した。リハビリテーション領域で頻繁に使用する強度の異なる6種類のゴムバンドをそれぞれ足関節に巻き、そのゴムバンドを伸張させることで得られる動的膝伸展動中の下肢血流量(超音波法)の計測を行った。
短大生における中学時導入の文法項目および語彙の習得状況に関する統計的研究

「基礎的な英語」を中学校英語とみなし、被験者である短大生が実際に中学時に使用した中学英語検定教科書の文法項目と語彙を整理し、それらについてテストを作成、実施、結果の分析を行った。1.(被験者265名)抽出した53文法項目の習得度は正答率にして57.9%、3年次導入項目は約30%と低い達成率であり、また1・2年次導入の疑問文の低調さが正答率全体を引き下げる要因となっている。中間言語を知る上で参考となる被験者の誤答を整序問題の答案より整理し、誤答表を作成した。同テストを平成7年から平成11年度の5年間実施(被験者総数1353名)した結果、文法テストの総点には統計的に有意な下降パターンが見られた。2.(被験者51名)中学校検定教科書(全7社)の語彙を分析し、アルファベット順と頻度順の語彙リストを作成した。語彙力を音声(S)・意味(M)・綴り(O)の3要素間の変換能力、すなわち6下位能力の総体と定義し、作成した語彙リストをものにテストを作成・実施した。6下位能力の順位は、O→M、S→M、S→O、M→O/O→S、M→Sの順であり、総合的英語力(クローズテストの結果を利用)の高い被験者ほど音声入力の語彙力(S→M、S→O)が高く、逆に下位者は視覚的語彙力(O→S、O→M)での成績が高いという結果が得られた。3.(被験者46名)文法力と語彙力では後者の方が英語総合力への影響力が強く、語彙の下位能力のレベルでは、OM,SM,SO,MSが英語総合力に、SM,SO,MOが文法力に寄与するとの結果を得、2での上位者に特徴的なSM,SO,MOと文法力との関連性がみとめられた。特にSMとSOは文法力・総合的英語力の両者と係わっており、これは、音声入力の単語の処理能力が文法の獲得、ひいては英語学習全体に有効に作用する可能性を示唆しているように思われる。我が国の英語教育で培われる語彙力について、その習得状況を質的側面から明らかにするという目的で、意味、音声、綴りの3領域をとりあげた。今回調査の対象とするのは中学時に導入される単語に限り、語彙レベルでの意味^→_←綴り、綴り^→_←音声、音声^→_←意味の相互変換の能力を調べる計6種類の下位テストを作成した。被験者は神奈川県内のA短期大学の学生(英語専攻)51名である。テストの対象とする単語の選定にあたっては、被験者である学生たちが中学時に使用していた7社の英語検定教科書の単語リスト(異語数2、767)を作成した。そして3社以上も教科書に採用されていた1、019語の中からそれぞれのテストに不適切と思われるもの(例えば外来語や同音異義語など)を除き30個の単語を選んだ。これらの単語を用いて6種類のテストを行う際、テストによる単語の学習効果を避けるため、また学習者によって得意なテストタイプがある可能性を考慮して、単語を3群に分け、被験者も3グループに分けて、同じ単語が3回以上テスト項目に再出しないようにテストを実施した。

6種類の下位テストの結果を比較する際には、単語の形態的、音声的また意味的な差異がテスト結果に影響を及ぼさないように、被験者ごとに下位テストの正答率を順位に変換して統計処理を行った。その結果、英語の綴りを与えられ日本語に置き換える、すなわち、<綴り⇒意味>のテストの結果が最も良く、<意味⇒綴り>と<音声⇒綴り>という2種類のテストの結果は中程度の成績であり、<意味⇒音声>という発話に関するテストは最も成績が悪かった。英語の総合力と6下位テストとの関連なども含め、詳細は分析中である。短大生である被験者たちが中学在学年度に採用されていた中学検定教科書7社の文法・語彙をリスト化し、テストを作成・実施した。短大入学直後の4月にテストの実施を予定していたが、語彙テストを検討する際、実際の言語運用に必要な語彙力は従来型の英語対日本語の翻訳能力のみを問うテスト形式では測定できないと判断し、音声面・生産面をも考慮した結果、同一被験者グループに対し3回の受験機会を設定する必要が生じ、被験者確保の困難も伴い、当初の計画を変更せざるを得なかった。1.文法テスト(予備研究を含め被験者数355名(実施時期短大1年次4月))全53項目について整序問題の形式で作間、実施。平均正答率は約70%、中学3年次の導入項目は正答率約30%、特に接続詞that,第5文型などの正答率は極めて低かった。2.語彙テスト(被験者数90名(実施時期短大2年次11月)、有効被験者数51名)7社の英語検定教科書の3社以上に共通の1,019語から30語を選定。語彙力を意味【double arrow】綴り、綴り【double arrow】音声、音声【double arrow】意味の相互変換能力からなるものと見なし、6種類の下位テストを作成、実施。(1) 6下位能力の順位は、綴り→意味、音声→意味、音声→綴り、意味→綴り/綴り→音声、意味→音声の順であり、受容>産出、視覚>聴覚>作文>口頭という語彙力のプロフィールが得られた。(2)英語総合力との関連については、総合的英語力の高い被験者ほど音声入力の語彙力(音声→意味、音声→綴り)が高く、逆に英語総合力テストの下位者は視覚的語彙力とも言うべき語彙力(綴り→音声、綴り→意味)での成績が高い、という結果が得られた。
骨細胞のギャップ結合細胞間コミュニケーションに対する、メカニカルストレスの影響

本研究では、骨細胞を用いて、メカニカルストレスに対する骨組織の応答と、細胞間ネットワークを形成するギャップ結合の機能との関わりについて明らかにすることを目的としている。まず、骨細胞の分離法の取得を試みた。16日齢ニワトリ胚を用い、その頭頂骨を取り出した。骨膜を除去し、比較的骨細胞が多いと思われる部分のみを残すように、トリミングを行った。コラゲナーゼ処理をおこなって、頭頂骨表面の細胞を取り除き、類骨骨細胞を多く含む骨片を得た。次にEDTA処理にて骨小腔を拡大させ、さらに再度コラゲナーゼ処理をおこない、骨片から骨細胞を分離した。フィルターを通すことにより、比較的大きいストローマ細胞を除き、骨細胞が多く含まれる細胞浮遊液を得ることができた。さらにdishへの接着性の差を利用して、より純度の高い骨細胞を分離した。その結果、純度8090%で、ニワトリ骨細胞を得ることが可能となった。そこで次に、分離された骨細胞が、実際に細胞間コミュニケーションをもっているのかどうか、レーザーサイトメーター[ACAS Ultima]を用い検討した。まず、骨細胞に、蛍光色素である、5-(and-6-)carboxyfluorescein diacetate(CFDA)を取り込ませた。任意細胞のCFDAをレーザーにて消光し、隣接する細胞からのCFDAの流入に伴う蛍光強度回復速度を測定・分析した。そして、CFDAが実際に細胞間を移動していることから、この分離された骨細胞は、互いに細胞間コミュニケーションをもっていることが明らかとなった。今後、分離骨細胞にメカニカルストレスを付与することにより、細胞間コミュニケーションがどのように変化するか、さらに、その際、骨細胞のギャップ結合の主要な構成蛋白質であるコネクシン43の発現量がどのように変化しているか、詳細に検討していく予定である。
単純ヘルペスウイルスにおける増殖機構及び病原性発現の解明　～ＵＬ１２の機能解析～

単純ヘルペスウイルスがコードするUL12はヌクレアーゼとしての働きを持つが、これは培養細胞におけるウイルス増殖に重要な役割を果たすことが示唆されている。これは、UL12欠損株接種時に野生型UL12を発現させた際にはその培養細胞における増殖性は補完されるが、ヌクレアーゼ活性消失UL12を発現させた際には補完されないという知見に基づく。しかし、本研究において実際に変異体ウイルスを作製し、Vero細胞における増殖性を比較したところ、UL12欠損株はその復帰株や野生株と比較して増殖性が約1/6,000に低下したのに対し、UL12ヌクレアーゼ活性消失株はその復帰株や野生株と比較して増殖性は低下したものの1/10程度であった。本結果より、培養細胞におけるウイルス増殖へのヌクレアーゼ活性以外のUL12の機能の重要性が初めて示された。これはUL12の未知の機能を探索するという研究目的に沿ったものであるといえる。また、in vivoにおけるUL12のヌクレアーゼ活性の重要性を検証するためにマウス脳内へ各変異体ウイルスを接種し、半数致死量を比較した。結果、UL12欠損株はその復帰株と比較して半数致死量が約1000倍上昇したのに対し、ヌクレアーゼ活性消失株はその復帰株と比較して半数致死量が約100倍上昇した。本結果より、UL12のヌクレアーゼ活性はマウスの病原性発現においては重要な役割を果たしていることが示唆された。また、昨年度までの解析によりUL12リン酸部位Xのin vivoにおける重要性が示されているのだが、本リン酸化のin vivoにおける重要性につい同様に検証を行ったところ、リン酸化部位変異体ウイルス接種時はその復帰株接種時と比較して半数致死量が約100倍上昇した。すなわち、本リン酸化はマウスの病原性発現において重要であり、新規抗ウイルス薬のターゲットとなる可能性が示された。(抄録なし)単純ヘルペスウイルス(HSV-1)がコードするUL12はヌクレアーゼとしての働きを持つ。UL12はその欠損ウイルスにおいて増殖性が100倍から1,000倍低下することから、ウイルス増殖に重要な役割を果たすことが示唆されている。しかし、ウイルス増殖機構におけるその詳細な役割や制御機構については未知である。本研究ではプロテオーム解析により、UL12の相互作用タンパク、そしてリン酸化部位の同定を行うことで、UL12のウイルス増殖に果たす詳細な役割や制御機構について明らかにすることを目的とした。プロテオーム解析の結果同定されたリン酸化部位について、アミノ酸置換を行うことでリン酸化能消失変異体ウイルスを作製した。その結果、野生株のウイルスとは異なる表現系が得られ、増殖性が野生株と比較して著しく低下した。更に、本変異体ウイルスの復帰株及び恒常的リン酸化を模倣する産生アミノ酸置換体においては、野生株と同様の表現系が得られたことから、本リン酸化部位のリン酸化が表現系に関与していることが示唆された。また、これらの表現系はUL12のヌクレアーゼ活性能消失変異体ウイルスにおいて観察されるものとは異なった。本結果は、今回同定されたリン酸化部位がヌクレアーゼ活性能とは異なる機能を制御していることを示唆している。更に、今回作製したリン酸化部位変異体ウイルスは増殖性が著しく低下したことから、本リン酸化部位の上流キナーゼを解明することで、これを標的とした抗ウイルス薬の開発につながる可能性がある。単純ヘルペスウイルス(HSV-1)がコードするUL12はヌクレアーゼとしての働きを持つ。プロテオーム解析の結果同定されたリン酸化部位について、アミノ酸置換を行うことでリン酸化能消失変異体ウイルスを作製し、その表現系を野生株と比較解析するという作業を昨年に続き行ってきた。その結果、野生株のウイルスとは異なる表現系が得られた。具体的に述べると、増殖性が野生株と比較して著しく低下し、また感染細胞内におけるUL12の局在が著しく変化し、これに伴い過去の研究でUL12と相互作用することが知られているウイルスタンパクであるICP8の局在についても変化が生じた。故に現在、本リン酸化部位の上流キナーゼを同定すべくスクリーニング作業を行う準備をしている。これは、UL12欠損