hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
破骨細胞機能におけるNF－kB非古典的経路の役割に関する研究

破骨細胞におけるNF-kBの活性化経路は従来明らかとなっている古典的経路であるp50-RelAが核移行する経路と、近年明らかになってきたNF-kB inducing kinase(NIK)を経てP52-ReIBが核移行して転写活性がず上昇する非古典的経路(alternative pathway)に大別される。すでにNF-kB古典的経路が破骨細胞の機能発現に重要であることを明らかにしているが、非古典的経路に関しては十分な情報がない状況である。我々はこの点に注目して破骨細胞におけるNF-kB非古典的経路の役割を解明する研究を計画した。本年度は研究の初期段階としてNF-kB inclucing kinase(NIK)を欠損するマウス(Aly/Aly)の骨における表現形の解析を行った。Aly/Alyマウスの大腿骨・脛骨をDEXA,マイクロCT,pQCTにより骨塩量測定を行い、さらに非脱灰切片を用いて、骨形態計測を行ったところ、野生型マウスに較べて骨端部の骨密度増加が観察され、大理石骨病様の形態変化を示した。骨形態計測法により詳細な観察を行ったところ海綿骨量、骨幅、海綿骨数の増加が認められた。細胞レベルでは破骨細胞数の減少とともに骨芽細胞数の増加、石灰化速度(MAR)の増加、骨形成量(BFR)の増加が認められた。以上の結果は、NF-・Bに至る非古典的経路(alternative pathway)の重要な因子であるNIが欠損すると破骨細胞機能が障害を受け、その結果骨吸収機能が抑制されて、骨量が増加することを示唆している。NIKはNF-kBの非古典的経路の活性化プロセスにおいて重要な役割をしていることから、本検索の結果は非古典的経路が破骨細胞の分化増殖や機能に関与していることを示している。今後さらにAly/Alyマウスにおける機能変化をin vitroの系において追求することにより、その変化を起こすメカニズムの解明を計画したい。NF-kB非古典的経路の重要性を明らかにすることにより、破骨細胞を創薬標的とした新しい薬物候補の探索が可能になると思われる。
昆虫類の季節多型の進化における性選択

季節多型は、季節によって異なる表現型の個体が出現する現象で、多化性の昆虫類の季節適応の中核をなす。季節多型の適応的意義については未解決の課題が存在する。たとえば、キタキチョウの成虫には休眠する秋型と休眠しない夏型がある。秋に羽化する本種のメスはほぼすべて秋型であるのに対し、オスには夏型と秋型の両方が出現する。このような性特異的な季節型の混棲は従来の学説では十分に説明できない現象である。メスの越冬前交尾の意義は季節型の混棲が生じた背景として重要である。自身で越冬しない夏型オスは越冬前のメスと交尾しなければ子孫を残せない。この戦略をとるオスが進化するには、メスが越冬前に交尾活性をもつことが前提となる。越冬中の精子の維持にかかるコストを考慮すると、メスの越冬前交尾には何らかの意義があると考えられる。そこで当該年度は、昆虫類のメスの越冬前交尾を説明する仮説のひとつである「栄養説」を検証した。「栄養説」は、メスがオス由来の分泌物を越冬のための栄養に用いるという仮説である。まず、25°C12L12Dの条件で幼虫を飼育した。羽化当日の秋型メスの一部は性成熟した夏型オスと交尾させた。既交尾メスと未交尾メスは、幼虫時と同じ条件で1521日十分に摂餌させた後、10°C10L14Dの条件に移し、絶食条件での生存期間を比較した。この条件では一部のメスが休眠から覚めて卵を成熟させてしまう。そこで死亡時に成熟卵を体内にもっていた個体は解析から除外した。平均生存期間は、未交尾メスで7.9週、既交尾メスで13.4週だった。この結果は栄養説を支持している。キタキチョウでは、越冬成功率を高めるためのメスの戦略が季節型の混棲の背景として重要と考えられる。29年度が最終年度であるため、記入しない。秋に出現するキタキチョウの夏型オスと秋型オスの繁殖成功度を明らかにするには、夏型オスと交尾した秋型メスを越冬させ秋型オスと再交尾させ、産下卵の父性を判別しなければならない。野外においても秋型メス体内で夏型オスと秋型オスの精子競争が生じているためである。そこで、秋型成虫を野外または室内における飼育環境下で越冬させたところ、一部の個体が越冬に成功した。越冬中の死亡率を軽減する余地があるものの、夏型オスと秋型オスの繁殖成功度を測定する実験を今後行なうために必要なデータを得た。さらに、父性判別に必要な遺伝マーカーの開発にも着手した。キタキチョウを含む鱗翅目昆虫のオスは有核精子と無核精子という2種類の精子を生産する。無核精子も交尾後にメスの精子貯蔵器官に移動するため、無核精子が長く精子貯蔵器官にとどまる場合は、直接精子競争に関与する可能性も考えられてきた。より簡便に実験できる単婚制のアゲハチョウ類のメス体内における精子動態や活性に関するデータが既に得られていたので、それを解析したところ、無核精子の活性がメスの精子貯蔵器官への到達後まもなくして失われることがわかった。さらに、キタキチョウでは、無核精子そのものがメスの精子貯蔵器官から交尾後数日以内に消失することが明らかとなった。キタキチョウの夏型オスが秋に羽化する意義として、越冬の回避が挙げられてきた。標識再捕獲法による調査結果を解析したところ、越冬後の秋型成虫の個体群サイズは越冬前の半分程度になることがわかった。計画の順序を変えたため、父性判別は達成できなかったものの、キタキチョウの越冬前後の個体群動態を明らかにすることができた。無核精子のメス体内における動態も明らかにできた。キタキチョウの秋型メスは越冬前に夏型オスと越冬後に秋型オスと交尾している。鱗翅目昆虫では後から交尾したオスの精子が優先するのが普通であるため、秋型オスの方が夏型オスよりも有利であると考えられてきた。それでも、関東地方で秋に羽化するオスの約半数が夏型であることから、オスが夏型として羽化する意義が存在すると想定できる。その一つの候補が精子の越冬成功度の向上である。もし秋型メスの越冬成功度が秋型オスよりも高いのであれば、夏型オスが秋型メスに精子を託すことで自らの精子の越冬成功度を高めることができると考えられた。しかし、これまで得られていた屋外ケージでの飼育実験の結果と野外における標識再捕獲調査の結果を最新の手法により解析したところ、秋型成虫の越冬成功度に雌雄差がないことがわかった。精子の越冬成功度の向上では夏型オスの出現を説明できないといえる。オスが夏型として羽化する意義が越冬の回避に関係するのであれば、夏型オスの頻度は生息地の冬の厳しさと関係すると予測された。そこで、冬の厳しさの異なる日本各地において夏型メスを採集し、子を20°C10L14Dもしくは25°C10L14Dで飼育し、羽化個体の季節型を記録する実験を行なった。両型のオスの頻度に地理的変異は認められなかった。この結果を裏付けるために、平年の最高気温が20°C台になる日の前後に、本種の分布北限に近い盛岡から亜熱帯の沖永良部島で飛翔中のオスの季節型を調べた。

両型のオスの頻度に地理的変異は認められなかった。夏型オスが秋に出現する意義を越冬成功度の雌雄差や冬の厳しさによって説明できないことがわかった。この結果は、夏型オスが出現する背景として精子競争が重要であることを強く示唆している。季節多型は、季節によって異なる表現型の個体が出現する現象で、多化性の昆虫類の季節適応の中核をなす。季節多型の適応的意義については未解決の課題が存在する。たとえば、キタキチョウの成虫には休眠する秋型と休眠しない夏型がある。秋に羽化する本種のメスはほぼすべて秋型であるのに対し、オスには夏型と秋型の両方が出現する。このような性特異的な季節型の混棲は従来の学説では十分に説明できない現象である。メスの越冬前交尾の意義は季節型の混棲が生じた背景として重要である。自身で越冬しない夏型オスは越冬前のメスと交尾しなければ子孫を残せない。この戦略をとるオスが進化するには、メスが越冬前に交尾活性をもつことが前提となる。越冬中の精子の維持にかかるコストを考慮すると、メスの越冬前交尾には何らかの意義があると考えられる。そこで当該年度は、昆虫類のメスの越冬前交尾を説明する仮説のひとつである「栄養説」を検証した。「栄養説」は、メスがオス由来の分泌物を越冬のための栄養に用いるという仮説である。まず、25°C12L12Dの条件で幼虫を飼育した。羽化当日の秋型メスの一部は性成熟した夏型オスと交尾させた。既交尾メスと未交尾メスは、幼虫時と同じ条件で1521日十分に摂餌させた後、10°C10L14Dの条件に移し、絶食条件での生存期間を比較した。この条件では一部のメスが休眠から覚めて卵を成熟させてしまう。そこで死亡時に成熟卵を体内にもっていた個体は解析から除外した。平均生存期間は、未交尾メスで7.9週、既交尾メスで13.4週だった。この結果は栄養説を支持している。キタキチョウでは、越冬成功率を高めるためのメスの戦略が季節型の混棲の背景として重要と考えられる。本年度の研究により、飼育環境下で秋型メスに越冬を経験させることが可能であるとわかった。遺伝マーカーの開発により父性判別を可能とし、夏型オスと秋型オスの授精成功度を推定することを検討している。本年度の研究は、夏型オスが精子競争で不利ではない可能性を示唆している。現在マイクロサテライトマーカーの開発も進めており、今後は精子競争に関する研究を重点的に進めていく予定である。29年度が最終年度であるため、記入しない。
大規模分子動力学シミュレーションによるメタンハイドレート構成物質間界面現象の解明

本年度は,まず相平衡条件を算出するために最も効率の良いと言われているギブスアンサンブルモンテカルロシミュレーションの高速化に着手した.このシミュレーションの計算時間の大半は,静電ポテンシャルの計算に費やされるため,IPS法と呼ばれる新規計算手法とグラフィックカードと呼ばれる消費者向けの低価格かつ高性能なハードウエアを用いて高速化を試み,'結果として提案手法が高速かつ高精度で実用的であることを見出した(Intemational Conference on Computational Science ICCS 2011).次に,メタン・ネオヘキサン・水系の界面において生成することが期待される結晶相(メタンハイドレートと氷)の界面物性を算出した.これには,長時間・大スケールの大規模分子動力学シミュレーションを使用した.その結果,これまで実験から正確な見積もりが困難だった固/液相間の界面張力の見積もりに成功し,界面張力の温度・圧力条件への依存性などを明らかにした(7th International Conforence on Gas Hydrates).また,シミュレーションにおいて固/液相平衡条件を算出するには,これまで長大な計算時間を必要としてきたが,短い計算時間で正確かつ安定して推測する方法を検証・確立した.それにより,これまで何種類も提案されてきた水のパラメータの中でもっとも実験に近い相平衡条件を与えるパラメータを特定し,また融点の圧力依存性を明らかにした(分子シミュレーション討論会学生優秀発表賞受賞).また,メタン・水系において,実験では測定が極めて難しい,高圧条件下での分子スケールの界面の挙動を明らかにした.その結果,これまで実験結果を解釈するために導入されていた無限希釈近似の妥当性を示した.また,メタンが,常温で3 MPa以下の低圧条件では圧力に比例して水表面に吸着し,吸着する位置が水表面に対してほとんど動かない,という理想的な吸着挙動を示すことを明らかにした(The Journal of Chemical Physics).平成21年度の目標は,単成分系の気液界面シミュレーションから界面の基礎的な物理量を精度良く算出することと,高速計算可能な計算機パーツであるグラフィックカードの分子動力学シミュレーションへの利用であった.まず,単成分系の気液界面のシミュレーションに関しては,グラフィックカードを搭載したワークステーションにおいて実際のシミュレーションを行った後に,外部記憶装置を追加した解析用パソコンにて結果の解析を行うことで,実験などの他の手法からも関心がある様々な熱力学条件における熱力学量の高精度の算出を行った.そしてそれらの結果に関し学会発表を行った(伝熱シンポジウムなど).グラフィックカードを用いた分子動力学シミュレーションの高速化に関しては,プログラムの作成とアルゴリズムの開発を行い,通常の計算機を用いた場合と比べ高い計算精度を保ちながら高速なシミュレーションを実行した.プログラムの実装の詳細に関する学会発表を行い,また実用的な計算でグラフィックカードが有用であることを示すべくいくつかのメタンハイドレートに関する分子シミュレーションを実際に実行した結果も学会発表を行った.(計算力学講演会など)また,今後のさらなる大規模分子動力学シミュレーションの実行に向けて,グラフィックカードを複数同時に並列で使用する高速多重極子展開法のアルゴリズムの実装も行い,論文発表を行った(Computer Physics Communications).本年度は,メタンハイドレートの生成に重要な界面現象の分子動力学シミュレーションを実施した.具体的には,水/メタン系の界面を特徴付ける物理量をグラフィックカードを用いて大規模に計算し解析することを行った.メタンハイドレートは水と気体のメタンが接する界面で成長するため,水の気液平衡物性および水/メタンの気液平衡物性を調査した.その結果,これまでに開発されて来た分子パラメータの中で最も気液平衡物性の実験値の再現性の良いものを見出し,また,表面張力の実験値を最も再現出来る新たなパラメータを提案することができた.この結果は雑誌Journal of Chemical Physicsにて出版された.水/メタン界面においては,界面の物理量の温度/圧力依存性を明らかにし,またメタンの水への溶解度が水/メタン界面の物理量に大きく関係していることを見出した.この結果も雑誌Journal of Chemical Physicsに受理された.分子動力学シミュレーションの高速化そのものも,今後のメタン/水/ネオヘキサン界面のシミュレーションに不可欠であるため,グラフィックカードと呼ばれる性能当りのコストが最も安いゲーム機用の計算機を用いた高速化手法の開発に取り組んだ.安価なグラフィックカードは高精度の演算器を持たないため,低精度の演算器を組み合わせて高速に高精度のシミュレーションを行う方法を開発した.この結果は雑誌International Journal of Computational Methodsに受理された.また,実際に分子動力学シミュレーションのベンチマークテストに使われる系をグラフィックカードを用いてシミュレーションし,高速化率と数値誤差の評価を行った.この結果は雑誌Bulletin of the Korean Chemical Societyに出版された.本年度は,まず相平衡条件を算出するために最も効率の良いと言われているギブスアンサンブルモンテカルロシミュレーションの高速化に着手した.このシミュレーションの計算時間の大半は,静電ポテンシャルの計算に費やされるため,IPS法と呼ばれる新規計算手法とグラフィックカードと呼ばれる消費者向けの低価格かつ高性能なハードウエアを用いて高速化を試み,'結果として提案手法が高速かつ高精度で実用的であることを見出した(Intemational Conference on Computational Science ICCS 2011).次に,メタン・ネオヘキサン・水系の界面において生成することが期待される結晶相(メタンハイドレートと氷)の界面物性を算出した.これには,長時間・大スケールの大規模分子動力学シミュレーションを使用した.その結果,これまで実験から正確な見積もりが困難だった固/液相間の界面張力の見積もりに成功し,界面張力の温度・圧力条件への依存性などを明らかにした(7th International Conforence on Gas Hydrates).また,シミュレーションにおいて固/

液相平衡条件を算出するには,これまで長大な計算時間を必要としてきたが,短い計算時間で正確かつ安定して推測する方法を検証・確立した.それにより,これまで何種類も提案されてきた水のパラメータの中でもっとも実験に近い相平衡条件を与えるパラメータを特定し,また融点の圧力依存性を明らかにした(分子シミュレーション討論会学生優秀発表賞受賞).また,メタン・水系において,実験では測定が極めて難しい,高圧条件下での分子スケールの界面の挙動を明らかにした.その結果,これまで実験結果を解釈するために導入されていた無限希釈近似の妥当性を示した.また,メタンが,常温で3 MPa以下の低圧条件では圧力に比例して水表面に吸着し,吸着する位置が水表面に対してほとんど動かない,という理想的な吸着挙動を示すことを明らかにした(The Journal of Chemical Physics).
現代日本における階層帰属意識の規定メカニズムの計量的解明

本研究の目的は、現代日本における階層帰属意識の規定メカニズムを計量的に明らかにすることである。近年の階層帰属意識は、階層的地位との関連が継続的に強まっており、階層的地位が階層帰属意識を通じて、その後の階層的地位に影響を与えるという再帰性が実証されつつある状況にある。本研究では、近年注目されるグループレベルの階層帰属意識規定メカニズムを明らかにし、近年の階層帰属意識の変化メカニズムを解明することを目指す。
健常成人のセレンおよび抗酸化ビタミン摂取と血中過酸化脂質との関連

健常な40-59歳の男女約300人を対象に、セレン及び抗酸化ビタミン摂取量を厳密な食事調査及び血液検査にて評価し、これと血清過酸化脂質(TBA値)との関連を包括的に検討したところ、以下のような知見を得た。1.血清過酸化脂質は女性よりも男性で、また、年齢が高いほど高い値を示した。加齢による上昇傾向は、他の要因とは独立した関連であった。2.ビタミンC摂取密度(摂取エネルギー1000kcal当たり摂取量)は、他の要因と独立して血清過酸化脂質と負の関連を示しており、血清過酸化脂質の生成に抑制的に働いていると考えられた。3.血清α-トコフェロールは、血清過酸化脂質との有意な関連を示さなかった。4.ビタミンA摂取量は血清過酸化脂質に抑制的に働くようではなかった。血清ビタミンA濃度は血清過酸化脂質と正の関連を示したが、脂肪肝等による血清ビタミンA上昇を反映したものと考えられた。5.セレン摂取量と血清過酸化脂質との負の関連は認められなかった。今回セレン摂取量の厳密な評価が不十分であったので、今後、セレン成分表の確立や血中濃度の評価を進めてゆく必要がある。6.血清γ-GTPが、アルコール摂取量や肥満度とは独立して、血清過酸化脂質と強い関連を示すことが明らかになった。肝での炎症などによる肝細胞障害が、過酸化脂質の生成に強く関与する可能性が示唆された。これらの知見は、成人の健康管理および生活習慣病予防における酸化ストレスの評価や抗酸化物質の利用方法の確立に寄与するものと考える。本研究は、健常な成人男女を対象にセレン及び抗酸化ビタミン摂取量を厳密な食事調査、24時間蓄尿、血中濃度測定を手法を用いて評価し、これと血中過酸化脂質濃度との関連を検討することを目的とするものである。本年度は、北陸地方に位置する某製造業企業において、フィールド調査の実施と検体の採取を行った。研究対象は同企業の従業員から無作為抽出した40歳から59歳までの男女300人とし、インフォームドコンセントを行って研究に参加を承諾したものとした。40代、50代の男女別に全従業員を4群に分け、各群から無作為に抽出した対象者に研究への参加を依頼したところ、リクルートしたうちの57%にあたる314人で協力が得られ、うち300人(40代男73人、50代男76人、40代女76人、50代女75人)は途中脱落せず完全なデータが得られた。対象者に対し、一定のトレーニングプログラムにより認定された栄養士による計4日分の24時間思い出し法による詳細な食事調査を行った。同時に、全対象者において24時間蓄尿を2日間にわたり実施した。また、体格、血圧の測定および静脈血の採血を行った。セレンの摂取量に関しては本研究独自のセレンに関する食品成分表を開発し、現在、摂取量の算出作業を進めている。1日当たりの総摂取エネルギーは男性で平均2330kcal、女性で平均1862kcalであった。採取した血液に関しては、血清中セレン濃度、グルタチオン・ベルオキシダーゼ濃度、抗酸化ビタミン濃度、および血漿中過酸化脂質(TBA)濃度の測定を進めている。また、尿検体については尿量測定後一部検体を採取し、尿中過酸化脂質(TBA)濃度、セレン濃度の測定を進め、1日尿中排泄量を算出予定である。本研究は、健常な成人男女を対象にセレン及び抗酸化ビタミン摂取量を厳密な食事調査、24時間地区尿、血中濃度測定を手法に用いて評価し、これと血中過酸化脂質濃度との関連を検討することを目的とするものである。対象者は北陸地方に位置する某製造業企業の従業員から無作為抽出した。

40歳代、50歳代の男女300人(40代男73人、50代男76人、40代女76人、50代女75人)から完全なデータが得られ、4日分の24時間思い出し法による詳細な食事調査、2日分の24時間蓄尿、採血などを完了した。栄養調査から得られた各種抗酸化ビタミンの摂取量と所要量に対する充足率は男がVitA:2389IU(119%)、VitC:126.3IU(130%)、女はVitA:2496IU(139%)、VitC:123.4IU(247%)であり、いずれも十分に摂取されていた。血中の抗酸化ビタミンについてはビタミンA、α、β、γ、δ-トコフェロールの測定を終了した。血中ビタミンAは栄養調査によるビタミンA摂取量と有意な正相関を示した。αトコフェロールは血中ビタミンEの80%以上を占めていた。αトコフェノールの平均値は男40代0.821、50代0.832、女40代は0.812、50代は0.889と男女とも50代が40代より高値を示した。現在、血中グルタチオンペルオキシダーゼについても測定中である。セレンの摂取量に関しては本研究独自のセレンに関する食品成分表を開発し、摂取量の算出作業が進められている。尿中のセレンは現在測定中である。また、血中過酸化物質についても現在測定を行っている。これらのデータが揃い次第、セレンおよび各種抗酸化ビタミンの摂取と血中過酸化脂質との関連を検討する予定である。
小児開心術時急性心不全に対する補助循環法の研究

小児の開心術において起こり得る急性心不全に対する補助循環法を開発する目的で、幼小児を想定して犬を使い、上行大動脈と大動脈末梢側の間に体外バイパスを造設し、その途中で、通常の開心術の体外灌流で使用される拍動流発生デバイス(Pulsatile Bypass Pump用)を心拍に同期して作動させてcounterpulsationを行う方法を考え、「大動脈-大動脈拍動バイパス」と呼称して検討した。1.正常心に対する効果をみる実験において、拍動バイパスにより、平均大動脈圧をさほど低下させることなく収縮期大動脈ピ-ク圧、大動脈の拡張終期圧および左室ピ-ク圧を低下させ、拡張期大動脈圧を作動前の収縮期圧と同じか、それ以上に維持できてcounterpulsationが可能であった。2.冠動脈を結紮した不全心に対する検討で、大動脈中枢側へのバイパス接続に人工血管を介在させたが出血も少なく、counterpulsationがより容易となった。対照群では経時的に心機能が悪化する傾向にあったが、拍動バイパス群では経時的に心機能が回復し、1時間のバイパス後における心機能の改善が著しかった。3.本法の臨床応用に際しては、ヘパリン使用による出血傾向が問題であり、それに代る抗凝固剤としてメシル酸ガベキサ-トを使用して凝固機能と血栓形成の点から検討したが、本剤45-65mg/kg/hrの持続投与でバイパスが可能であった。この拍動バイパスでは、デバイス内の血液は往復運動であっても、基礎に血液の一方向性があり、かつ、血液の停滞する「かど」や弁構造がないためにself-wash out効果もあることがうかがわれた。「大動脈-大動脈拍動バイパス」は小児開心術時の急性心不全に対する補助循環法として、臨床応用の可能性が高い方法と考えられ、今後も研究していきたい。小児開心術時に起こり得る急性心不全に対して,有効な補助循環法を開発する目的で小児の体格に相当する雑種成犬をモデルとして大動脈ー大動脈バイパス実験を行った.犬の上行大動脈と大腿動脈間にバイパスを作成しその途中に,通常体外循環で拍動流発生に用いられるディスポーザブルバルーンユニット(コントロン社製)を挿入,拍動流ポンプ(コントロン社製モデル20)に接続して, ECGに同期させ,心収縮期にはバルーンを拡張させて回路内に血液を汲み出し,拡張期にはバルーンを収縮させて回路内血を駆出させるようにした.犬28頭でこの装置を作動させたが,バルーン収縮,報張時間,バルーン内圧を調節することにより,拡張期血圧を収縮期血圧と同じか,わずかに高く保つことが出来,収縮期血圧(ピーク圧)と,拡張終期圧は,作動前にくらべてバイパス中は有意差(P〈0.01)をもって低下し,一般に臨床で実用化されている大動脈内バルーンパンピング(1ABP)と同じ二峰性の曲線が得られた.心拍出量は有意差はないがわずかに増加の傾向があるのに左室収縮期圧は有意に(P〈0.05)低下した.本法が補助循環法としての効果を持つことが示唆された.腎,腸間膜の組織所見でも著変は見られなかった.

このユニットは弁構造を持たないが,血流の方向性があり(4050ml/min), self washoutにより,ある程度抗血栓性を持つと思われる.さらに,メシル酸がベキサートを量を変えて投与し, 19頭において,動静脈間に装着したフィルターの走査電顕像,血液凝固学的検討から,本剤, 4565mg/kg/minで血栓形成を防止出来,実施に当ってヘパリン投与を不要とするか,あるいは減量出来る可能性があるものと思われた.前粘土までの研究では、小児開心術時に起こり得る急性心不全に対する補助循環法の開発を目的として、通常の体外循環で拍動流発生に用いられるディスポーザブル・バルーンユニット(コントロン社製)を上行大動脈と大腿動脈間に着想してバイパスを作成し、大動脈内バルーンパンピングと同じ要領で心電図に同期してバルーンを収縮、拡張させて、圧曲線波形からは満足すべき結果を得た。さらにシメル酸ガベキサート4565mg/kg/minの使用により、ヘパリン使用量も減量出来た。ただし前年度までの実験においては、装着部位からの出血が問題となったため、中枢側の上行大動脈へは腕頭動脈から、末削側へは大腿動脈に直接カニュレーションせざせるを得ず、臨床応用を考える時には問題であった。今年度は、ユニット装着に人工血管を介する方法を行った。懸念された出血、圧波形の歪形はなく、デバイスへの血液汲み出し、拍出が無理なく出来て補助循環効果は一層確実に得られるようになった。心不全に対する効果を検討するため、犬心の冠動脈前下行枝の分枝を結紮して1時間放置、左房圧15mmHg以上になればその状態で、15mmHg以下であれば15mmHg以上にあるまで輸血を行い、その後上記補助循環を施行して経時的に観察した。心拍出量はこれまでの結果ではばらつきがあって一定の傾向を見出だせないが、平均18mmHgの左房圧が補助循環開始後5分で下降し、1時間補助循環して中止30分後には平均7mmHgの低下、同様に上昇していた左室拡張末期圧も平均10mmHg下降し、十分な補助循環降下がみられた。動脈内への直接力ニュレーションでは溶血のみられた例もあったが、人工血管使用するようになってからは、溶血も少なくなった。本法が人工血管介在で、当初予期したよりも容易に効果的な補助循環が可能となったことで、臨床応用への目途がついて来たと考えられる。小児開心術時に起こり得る急性心不全に対する補助循環法として、大動脈-大動脈拍動バイパス法の実験を継続してきたが、実験方法の改良とともに、不全心に対する本来の効果を検討した。左冠動脈結紮により不全心とした犬を1時間放置後に、大動脈-大動脈拍動バイパスを1時間作動させた。バイパス群とバイパスをしない対照群について経時的に、心電図、各部の圧、心拍出量を観察、測定した。各測定時には、左房圧を10mmHg、15mmHg、20mmHgに調節して観察した。バイパス作動により、圧曲線パタ-ンは、大動脈バル-ンパンピングと同様のsystolicunloading効果とdiastolic augumentation効果を示し、左房圧が著名に低下して、1時間のバイパス後は心電図も改善した。左房圧15mmHgにおける左室最大収縮期圧は、対照群では初回124.1±27.4mmHg、60分後110.0±23.7mmHgと低下傾向を示したが有意差なく、一方、バイパス群では初回108.0±23.2mmHg、60分後87.7±15.2mmHgと初回の値および対照群に比して有意に低下した。心係数(心拍出量/体重)についてみると、対照群では初回(結紮1時間後)105.6±18.6ml/min/kgから、有意差はないものの60分後に95.8±18.6ml/min/kgまで、次第に低下傾向を示したのに対し、バイパス群では初回(バイパス前)113.0±20.8ml/min/kgから、60分後には155.8±30.1ml/min/kgと有意に上昇し、バイパス停止後は173.7±34.8ml/min/kgとさらに上昇した。左室1回仕事係数、左室分時仕事係数でも同様の結果が得られた。
画像処理を用いるスポーツトレーニング支援

バドミントンやテニス選手のコート上での位置を検出し、選手の動きを分析・フィードバックするためのシステムを2種類開発し、それにより実際に選手の動きの分析を行った。第1のシステムは、DSPを用いたインタフェースによりリアルタイムに選手位置を検出するもので、位置情報のみをPCに送る。コート上から撮影した入力白黒画像からコート画像との差をとり、適当なフィルタをかけることにより、選手位置を検出する。当初バドミントン等の屋内スポーツのみを想定したが、輝度変化の大きい屋外スポーツにも対応できるよう背景更新アルゴリズムを実装した。また、雑音を軽減するフィルタを採用するとともに、雑音が混入して誤検出となった場合にそのフレームを棄却するアルゴリズムも提案した。128×128画素の画像を78フレーム/秒の処理が可能である。得られた位置情報を音などで選手にフィードバックすることで、トレーニングを効率良く支援できる。第2のシステムは、リアルタイム性を犠牲にしてカラー360×240画素の高精度の検出を行うもので、すべてPC上のソフトウェアとして開発した。コート上から撮影した入力画像からコート画像との差をとり、選手領域を抽出する。続いて差分画像を2値化、ラベリングすることで選手領域と雑音を区別する。得られた領域の重心まわりの矩形領域を切り出し初期テンプレートとする。次フレーム以降はテンプレートマッチングにより選手位置を追跡しテンプレートを更新していく。このシステムにより、バドミントンのシングルスとダブルスにおいて初心者同士、経験者同士で試合を行わせ、移動軌跡を比較分析した。その結果、初心者と経験者で、シングルスでは左右の移動速度に差がなく、前後移動速度では経験者が有意に高いのに対し、ダブルスでは前後移動速度に差がなく、左右移動速度では経験者が有意に高いことが明らかになった。また平均位置についても有意な差が確認された。これらの結果は初心者がトレーニングする際に留意すべき点を明確に指摘している。また、試合中の心拍数、血糖値、血中乳酸値を測定した結果、乳酸値の変化において、総移動距離と移動速度の強い影響が見られることが確認された。これより、位置追跡により、選手の乳酸値を推定できる可能性が示唆された。バドミントン等のコート上の画像をビデオカメラからパーソナルコンピュータに取り込むための,DSPを用いたインターフェースを設計し,制作した.検出の精度とリアルタイム動作を考慮して,テレビジョン信号の1画面を64×64画素に間引くこととした.また,インタレース走査されているテレビジョン信号の偶数フィールドのみをサンプルすることで,ずれのない画像を得るようにした.DSP上では,取り込んだ画像から選手のいないコート画像との差分をとることにより,選手のみを取り出し,フィルタにより選手位置を求める.その際のフィルタを6種類取り上げ,比較検討した.直線上を歩く選手を検出したときのエラー率を測定し,検出精度が高く,雑音に強いという意味で最良のフィルタとそのパラメータを決定した.経験者どうし,初心者どうしでバドミントンのゲームを行わせ,選手の移動軌跡を分析した結果,経験者と初心者とで,左右の移動速度には差がなく,前後移動速度では経験者が有意に高いこと,また滞在時間の多い位置として,初心者は中央よりやや前方の左側,経験者は後方の両側となることが明らかになった.さらに運動期と休息期という観点でみると,初心者の休息期が有意に長く,運動期には差がないこと,バドミントンよりテニスの方が休息期が長いことがわかった.

ゲーム中の心拍数,血糖値,血中乳酸値を測定した結果,乳酸値の変化において,総移動距離と移動速度の強い影響が見られることが確認された.これらの検討から,本システムがゲーム分析や競技力向上の一助となり得ることが明らかとなったが,いくつか問題点もわかり,次年度への課題としたい.バドミントンやテニス選手のコート上での位置を検出し、選手の動きを分析・フィードバックするためのシステムを2種類開発し、それにより実際に選手の動きの分析を行った。第1のシステムは、DSPを用いたインタフェースによりリアルタイムに選手位置を検出するもので、位置情報のみをPCに送る。コート上から撮影した入力白黒画像からコート画像との差をとり、適当なフィルタをかけることにより、選手位置を検出する。当初バドミントン等の屋内スポーツのみを想定したが、輝度変化の大きい屋外スポーツにも対応できるよう背景更新アルゴリズムを実装した。また、雑音を軽減するフィルタを採用するとともに、雑音が混入して誤検出となった場合にそのフレームを棄却するアルゴリズムも提案した。128×128画素の画像を78フレーム/秒の処理が可能である。得られた位置情報を音などで選手にフィードバックすることで、トレーニングを効率良く支援できる。第2のシステムは、リアルタイム性を犠牲にしてカラー360×240画素の高精度の検出を行うもので、すべてPC上のソフトウェアとして開発した。コート上から撮影した入力画像からコート画像との差をとり、選手領域を抽出する。続いて差分画像を2値化、ラベリングすることで選手領域と雑音を区別する。得られた領域の重心まわりの矩形領域を切り出し初期テンプレートとする。次フレーム以降はテンプレートマッチングにより選手位置を追跡しテンプレートを更新していく。このシステムにより、バドミントンのシングルスとダブルスにおいて初心者同士、経験者同士で試合を行わせ、移動軌跡を比較分析した。その結果、初心者と経験者で、シングルスでは左右の移動速度に差がなく、前後移動速度では経験者が有意に高いのに対し、ダブルスでは前後移動速度に差がなく、左右移動速度では経験者が有意に高いことが明らかになった。また平均位置についても有意な差が確認された。これらの結果は初心者がトレーニングする際に留意すべき点を明確に指摘している。また、試合中の心拍数、血糖値、血中乳酸値を測定した結果、乳酸値の変化において、総移動距離と移動速度の強い影響が見られることが確認された。これより、位置追跡により、選手の乳酸値を推定できる可能性が示唆された。
アジア―アフリカ諸国間の模造品交易に関する文化人類学的研究―携帯電話を事例に

近年、アフリカをはじめとした発展途上国と中国との草の根のインフォーマル交易に着目した人類学的研究が台頭した。このトランスナショナルなインフォーマル交易の主力商品の一つがコピー商品や模造品、偽物である。本研究の目的は、1.コピー商品や偽物が中国で生産・交易され、アフリカで消費されるまでのプロセス・経済実践と、2.中国の製造業者や卸売業者、仲介業者、アフリカ系交易人、消費者がコピー商品や偽物に付与/見いだす道義性や価値の異なりと、その折衝・交渉の過程を明らかにすることで、模倣や海賊行為の意味およびこの草の根のグローバル化のダイナミズムをめぐる議論を再考することにある。本年度の実績は次のとおりである。日本文化人類学会で香港在住のアフリカ系交易人・ブローカーが構築したビジネスプラットフォームに綴られる記録を「オートエスノグラフィ」とみなす可能性について口頭発表を行なった。また同学会の日韓合同フォーラムおよび韓国文化人類学会の韓日合同フォーラムで「自言語による人類学的実践」に関する講演・討論を行った。9月に韓国のソウル大学と延世大学に招待され、香港在住のアフリカ系交易人による独自のシェアリング経済とプラットフォーム型市民社会をテーマに講演した。2018年5月、2019年2月および3月に香港においてフィールド調査を実施し、タンザニア人組合の活動、交易のシステム、および移民や難民の権利とそれに関わる問題等を明らかにした。春秋社のWeb雑誌に「チョンキンマンションのボスは知っているー香港の地下経済と日本の未来」というテーマで連載した他、日本文化人類学会の英文雑誌に香港の組合活動に関する論文、環太平洋文明研究センターの紀要に携帯電話交易と地下経済に関する論文、アジア経済研究所の英文論集に中古品交易に関する論文、日本文化人類学会の学会誌にオートエスノグラフィに関する論文を投稿した。前年度に、香港・中国在住のアフリカ系商人がソーシャル・ネットワーキング・サービスと携帯口座による送金システムを駆使して模造品等を商う独自のビジネスプラットフォームを構成していること、その仕組みや論理は近年においてICTやブロックチェーン等の発展に伴って先進諸国で注目を集めるようになったシェアリング経済やフリー経済ときわめて近似していることを発見した。本年度には、これらのビジネスプラットフォームや送金システムの仕組みを丁寧に解き明かし、専門的なビジネスプラットフォームと類似しているものの、違いもあることを明らかにできた。彼らのプラットフォームは、「遊び」と「労働」、「経済的な利益追求」と「分配・シェア」といった価値の両立が巧みに図られており、ユーザーにとって中国・香港とアフリカ諸国間を横断した巨大なセーフティネットとしても機能している。また、こうした「海賊的な」プラットフォームの形成が、移民・難民としての生存戦略だけでなく、中国・香港とアフリカ諸国間の人口動態にも大きな影響を与えていることも示唆した。2018年度には、国内外の学会・ワークショップでこれらの成果を口頭発表した他、本テーマに関連した論文を英語ジャーナルを含む学術雑誌に積極的に投稿した。また春秋社のWebジャーナルで香港・中国とアフリカ諸国間の交易に関する連載を完了し、すでに出版が決定している。以上のように当該課題に関する研究成果を順調に公刊していることから、順調に研究が進展していると考える。2019年度の前半期には、昨年度末に投稿した日本文化人類学会とアジア経済研究所の投稿論文の査読結果への対応を行い、着実な成果の公刊を目指す。4月末までに『都市科学辞典』の分担項目「インフォーマルセクター」を執筆する。6月に日本文化人類学会の「アジアにおける市民社会」をテーマとする分科会で、香港のタンザニア人組合の事例について口頭発表を行う。また、昨年度に春秋社のWeb雑誌に連載した「チョンキンマンションのボスは知っているー香港の地下経済と日本の未来」を単著にまとめ、前半期までに春秋社から出版する。9月に香港およびタンザニアに渡航し、香港・中国とアフリカ諸国間の交易で財を成した交易人たちの帰国後の商売や人生設計等に関する調査を実施する。また、近年の香港・中国における移民政策の変化に対応して、中国・香港から買い付け場所を日本に移したアフリカ系交易人たちもおり、タンザニア人を事例に彼らの交易システムとの比較調査を行う。10月下旬に韓国および中国から研究者を招聘し、アジア諸国への商業的な移動に関する国際シンポジウムを企画する。これらの成果をまとめて『アフリカ研究』等に投稿する。以上の計画で、最終年度にあたる2019年度は、査読論文の公刊、単著の出版、国際シンポジウムの開催を滞りなく進め、本研究課題の成果を形にすることを最大の目標とする。本研究の目的は、1、コピー商品や偽物が中国で生産・交易され、アフリカで消費されるまでのプロセス・経済実践と、2、中国の製造業者や卸売業者、仲介業者、アフリカ系交易人、消費者がコピー商品や偽物に付与/見いだす道義性や価値の異なりと、その折衝・交渉の過程を明らかにすることで、模倣や海賊行為の意味およびこの草の根のグローバル化のダイナミズムをめぐる議論を再考することにある。平成28年度の前期は日本において前年度に連載した原稿を『「その日暮らし」の人類学』として光文社より公刊し、文献研究と学会発表を行った。後期は学外研究期間と重なり、香港中文大学に所属して受け入れ教員のゴードン・マシューズ教授とともに中国に押し寄せた草の根の商人たちによる「下からのグローバル化」に関連するワークショップを実施した。また香港・中国(広州市および義烏市)において現地調査を行った。

主な成果は以下の3点である。第一に、タンザニア商人を中心として、香港・中国でコピー商品を含む商品の買い付けを担うアフリカ系商人の組合活動を実証的に明らかにした。第二に、アフリカ系商人が買い付ける、コピー携帯、再生携帯、対アフリカ市場向け中国ブランドの携帯それぞれの仕入れ経路と流通経路を明らかにした。第三に、アフリカ系商人が携帯電話を駆使した「Trust」という流通システムを新たに開拓していることを明らかにした。以上から香港・中国からアフリカへのコピーを含む商品の流通の概要とそれを担うアフリカ系商人たちの経済実践が大まかに明らかになった。平成28年度前期は、前年度まで実施していた科研費の成果公開と本研究の調査計画の立案をおこなった。後期から在外研究と重なり、香港中文大学に客員教員として所属した。香港中文大学に6ヶ月間所属している間に、香港および中国本土を基盤とする「下からのグローバル化」を扱う研究者とのアカデミックなネットワークを構築できた。さらに香港・中国本土で商品を買いつけるアフリカ系商人の組合を参与観察し、コピー商品や模造品をあつかう商人たちとのラポールを構築することができた。既に数十人のアフリカ系商人からライフストーリーや、商品の買い付け方法等について聞き取り調査を終えており、何人かの商人に同行して多様な模造品・中古品の買い付けも参与観察した。特にアフリカ系商人がソーシャル・ネットワーキング・サービスと携帯口座による送金システムを駆使し、十分な信頼関係を築いていない/築けない商人との間で、模造品をふくむ「リスクの高い」商品を取引する独自の仕組みを形成していることが明らかになったのは、本研究の遂行において重要な発見であった。平成28年度は、アフリカ系商人と取引を行う中国系商人に対する聞き取り調査は十分に行うことができなかったが、香港滞在中に中国の経済文化に関する文献研究をおこない、広東語のスキルを向上させることができたため、今後の本格的な聞き取り調査の準備を整えることができたと考えている。平成28年度は本研究に着手した年であるため、まとまった研究成果を提出するには至らなかったが、香港中文大学において2回の口頭発表を実施した他、いくつかの雑誌に小論を発表した。以上から、今後の研究の発展に必要な人脈を形成し、フィールド調査の切り口や糸口、基礎情報を集めることができたため、おおむね順調に研究が進展していると考える。近年、アフリカをはじめとした発展途上国と中国との草の根のインフォーマル交易に着目した人類学的研究が台頭した。このトランスナショナルなインフォーマル交易の主力商品の一つがコピー商品や模造品、偽物である。
ナノ カプセルを用いた大腸癌特異抗原を分子標的とした新しいミサイル療法の開発

<方法>MPC polymer、抗EGFR抗体(マウスモノクローナル抗体:528)、paclitaxelを用いて、抗癌剤封入ナノ粒子、抗癌剤未封入ナノ粒子、抗癌剤封入抗体結合ナノ粒子、抗癌剤未封入抗体結合ナノ粒子をそれぞれ作成する。in vitroでEGFR過剰発現細胞株A431と非発現株H69を用いて、ナノ粒子における抗癌剤の有無と528抗体の有無による殺細胞効果をMTT assay法にて比較検討した。<結果>ナノ粒子単独、528抗体単独ではA431、H69には殺細胞効果を認めなかった。また、抗癌剤未封入抗体結合ナノ粒子においてもA431、H69に対して殺細胞効果を認めなかった。A431ではpaclitaxe1単独とpaclitaxel封入非抗体結合ナノ粒子に比べて、paclitaxel封入抗体結合ナノ粒子では低用量のpaclitaxelでIC50を得ることができた。H69ではpaclitaxel単独・paclitaxel封入非抗体結合ナノ粒子・paclitaxel封入抗体結合ナノ粒子の間では殺細胞効果に差を認めなかった。ナノカプセルは約50nmの中空な疎水性ユニットを含んだ水溶性カプセルである.抗癌剤の多くは難溶性のものが多いが,このナノカプセル内に内包することにより水溶性にすることができる.さらにこのナノカプセルに癌特異的抗体を結合させることにより,組織特異性を高め,難水溶性の抗癌剤を内包した水溶性ポリマーを用いて,新しいミサイル療法を開発することが本研究の目的である.今年度は,まず抗癌剤単独群(A群),抗癌剤+MPCポリマー群(B群),抗癌剤+MPCポリマー+癌特異的抗体群(C群)における各種大腸癌細胞株に対する殺細胞効果を測定した.抗癌剤として,現在臨床にも用いられているCPT-11,CPT-11の活性物質である,Oxaliplatin,5-fluorouracilを用い,MTTアッセイ法を用いて評価した.CPT-11,の殺細胞効果はA群,B群間で有意差を認めなかった.現在,抗癌剤の封入効率に関して,検討中である.また,結合させる抗体の候補として,当初抗CEA抗体,p53抗体を想定していたが,血中にもそれらの抗体が浮遊しており,標的臓器に到達する前に抗体結合ポリマーが結合してしまうのではないかと指摘があり,代わって使用する抗体を血中に浮遊しにくいST-421,EGFR抗体の使用を検討中である.EGFR抗体も進行再発大腸癌に対する治療に用いられているが,高価な点が難点である.現在,各種大腸癌細胞株におけるこれら候補抗原の発現状況をウエスタンブロットおよび免疫染色にて,確認中である.ナノカプセルは約50nmの中空な疎水性ユニットを含んだ水溶性カプセルである.抗癌剤の多くは難溶性のものが多いが,このナノカプセル内に内包することにより水溶性にすることができる.さらにこのナノカプセルに癌特異的抗体を結合させることにより,組織特異性を高め,難水溶性の抗癌剤を内包した水溶性ポリマーを用いて,新しいミサイル療法を開発することが本研究の目的である.抗癌剤として,現在臨床にも用いられているCPT-11,CPT-11の活性物質であるSN-38, Oxaliplatin, 5-fluorouracilで殺細胞効果を評価したが,ナノカプセルの封入が安定しなかった.従って,封入が容易であるパクリタキセル(PTX)を用いた.使用する抗体には,当初抗CEA抗体,p53抗体を想定していたが,血中にもそれらの抗体が浮遊しており,標的臓器に到達する前に抗体結合ポリマーが結合してしまうのではないかと指摘があり,抗EGFR抗体(マウスモノクローナル抗体:528)を用いた.抗癌剤単独群(A群),抗癌剤+MPCポリマー群(B群),抗癌剤+MPCポリマー+癌特異的抗体群(C群)におけるEGFR過剰発現細胞株(A431),EGFR非発現細胞株(H69)に対する殺細胞効果をMTTアッセイ法で測定した.A431ではA,B群間には殺細胞効果に差を認めなったが,C群ではA,B群の半量の抗癌剤にてIC50を得ることができた.H69ではA,B,C群間には殺細胞効果に差を認めなかった.今後は担癌ヌードマウスを作製し,抗癌剤単独群,抗癌剤+MPCポリマー群,抗癌剤+MPCポリマー+癌
症状特性によるグルーピングに留意した統合失調症の5-HT系候補遺伝子研究

【概要】リスペリドン(RIS)について、RIS単剤治療を8週間行った時点での陰性症状を評価し、統合失調症との関連が示唆されているHTR2A遺伝子についての研究を行った。【対象と方法】対象は統合失調症患者合計102例。RIS単剤治療8週時点で、PANSSを用いて陰性症状評価を行った。罹患年数は9.1±13.1、RIS投与開始時点でのPANSSの総合点数は83.7±26.8、8週時点でのRIS投与量は3.53±1.76mg。T102C多型遺伝子型はPCR-RFLP法を用いて行った。ハーディー・ワインベルグ平衡の検定をX二乗法で行った。PANSSの陰性尺度合計点を従属変数とし、T102C多型遺伝子型、罹患年数、投与開始時PANSS総合点数、初発例か切り替え例か、8W時点RIS投与量を説明変数として重回帰分析を行った。【結果】102Tと陰性症状との間で有意な相関(P=0.014、検出力0.78)を示した。すなわち102T/Tノホモの患者は102T/Cヘテロの患者より9.7%、102C/Cホモの患者より31.9%8週時点での陰性症状が悪いことが示された。【考察】RIS単剤治療8週時点でPANSSでの陰性尺度症状評価とHTR2A-T102C多型との関連を認めた。さらにRIS単剤治療での対象者の獲得を進めている。我々は、HTR2AのT102CのTとdeficit typeとの間に関連を認めた。この結果は、1998年に日本人でT102Cと陰性症状との関連がないと報告されたことと、一致しないが、この理由は以下のように考えている。1998年の解析では、使用薬剤の規定はなく薬剤の影響が排除させていなかったが、我々は少数例ではあるが、リスペリドン単剤のコントロール下で陰性症状を検討しているため、薬剤の影響を少なくし、より統合失調症の病態に即した解析ができた。一方、T102CのTalleleとCalleleで脳におけるHTR2Aの発現に差異があること、Talleleに対するCalleleの比率は統合失調症で低下しており、しかもその比率の低下は非定型抗精神病薬の投与によって改善することなどが示唆されていることから、T102CがHTR2Aの発現や薬剤反応性の違いを反映する指標である可能性は高いと思われる。我々はdeficit TypeでTalleleが多いことを確認したが、これは、統合失調症における前頭葉のHTR2A発現低下や前頭葉の機能低下を反映していると考える。しかしながら、Deficit type, non deficit typeに命けてHTR2Aの発現を解析した報告はなされでおらず、今後の検証が待たれる。今回の検討結果から、昨今、統合失調症が症候群であり、統合失調症の状態像をより生物学的な指標で捉えた中間表現型によって検討する必要性が言われている。今回の我々の検討は中間表現型に類似するものとして、治療コントロール下でのPANSS得点をもちいて解析した結果、そのサブタイプと統合失調症との間で関連を認めた。このことは、より病態を鋭敏に反映する中間表現型を用いた統合失調症の関連解析が、これまで混乱を極めてきた統合失調症の病態解明の糸口となることも、少数例ではあるが、実証できたと考える。ハーディー・ワインべルグ平衡の検定をχ二乗法で行った。すなわち102T/Tホモの患者は102T/Cへテロの患者より9.7%、102C/Cホモの患者より31.9%8週時点での陰性症状が悪いことが示された。

罹患年数は9.1±13.1、RIS投与開始時点でのPANSSの総合点数は83.7±26.8、8週時点でのRIS投与量は3.53±1.76mg。T102C多型遺伝子型はPCR-RFLP法を用いて行った。ハーディー・ワインベルグ平衡の検定をX二乗法で行った。PANSSの陰性尺度合計点を従属変数とし、T102C多型遺伝子型、罹患年数、投与開始時PANSS総合点数、初発例か切り替え例か、8W時点RIS投与量を説明変数として重回帰分析を行った。【結果】102Tと陰性症状との間で有意な相関(P=0.014、検出力0.78)を示した。すなわち102T/Tノホモの患者は102T/Cヘテロの患者より9.7%、102C/Cホモの患者より31.9%8週時点での陰性症状が悪いことが示された。【考察】RIS単剤治療8週時点でPANSSでの陰性尺度症状評価とHTR2A-T102C多型との関連を認めた。さらにRIS単剤治療での対象者の獲得を進めている。
シグナルシークエンストラップ法を用いたリン代謝異常改善物質の同定

慢性腎不全、長期透析患者では腎機能の多くが破綻しているため、生体内リンは恒常性を失う。結果として腎不全患者や長期透析患者はしばしば高リン血症を引き起こす。長期透析患者では血管石灰化及び心血管合併症を発症する。高リン血症の予防治療には腸管におけるリン吸収阻害が必須である。腸管におけるリン吸収調節機構については食事性リン含量、活性型ビタミンD、FGF-23が関与していることが報告されているが、未だ謎が多い。そこで、腸管より分泌される新規リン調節ペプチドホルモン様物質(Low phosphate induced peptide:LPP)の同定、機能解析を通して、長期透析患者、腎不全患者に見られる高リン血症の治療を目指した基礎的知見を提供することを目的とした。昨年度は、「腎臓培養細胞(OK細胞)を用いた、リン調節ペプチドホルモン様物質(LPP)候補の評価系の確立を行った。既に報告されているリン調節調節ホルモンである、活性型ビタミンD、PTH、FGF-23においてはリン酸輸送活性を指標として、ホルモンの活性を検討することが出来た。本年度は新規リン調節ペプチドホルモン様物質を同定するため、シグナルシークエントラップ法により、得られたLLP候補分子(機能が未知である分子を含む7個)の機能を解析に重点を置いた。確立した評価系を用いて、解析を行うため、細胞内に候補遺伝子を投入し、機能を検討中である。また同時に現在候補分子の、リコンビナントタンパク質を精製中である。今後、さらにLLP候補分子の添加実験を行い、リン輸送活性変化、ナトリウム依存性リン輸送担体の局在変化を調べる予定である。新規リン調節ペプチドホルモン様物質(LPP)候補ペプチド評価系の確立腸管より分泌される新規リン調節ペプチドホルモン様物質(LLP)候補分子は腎臓でのリン再吸収を調節し、血中リン濃度をコントロールすると想定している。まず、シグナルシークエントラップ法により、得られたLLP候補分子を評価する培養細胞系の確立に取り組んだ。リン再吸収機能を調節するFGF23をOK細胞,HeLa細胞に導入した。また、FGF23のレセプターとしてFGFRと複合体を形成するKlothoを恒常的に発現した培養細胞系を構築した。これらの細胞を使いLLP候補分子の添加実験を行い、リン輸送活性変化、ナトリウム依存性リン輸送担体の局在変化を調べる。血清中のLLP候補分子の探索腎不全モデルラットを作成し、低リン食投与により、血清リン濃度の改善効果を検討する改善効果の高い個体N=3以上の血清を採取し、IgG除去処理、及び分子量10kD以下に分画した。次ににショットガン法にてAXIMA-CFRレーザーイオン化飛行時間型質量分析装置(MALDI-TOFMS)を用いて質量分析を行い、LPPの候補ペプチドのアミノ酸配列を同定する。シグナルシークエンストラップ法を用いた、LLP候補分子のスクリーニング腎不全ラットにコントロール食、低リン食低リン/低カルシウム食で飼育したラット腸管cDNAを用い、サブトラクションを行い、腎不全ラットに低リン食を与えた群のみ変化するcDNAプールを作製した。サブトラクション後のcDNAをシグナルシークエンストラップ用カセットに挿入しライブラリーを構築した。同様に培養細胞である、マウス腸管分擁細胞(STC-1細胞)を培養液中のリン濃度を3群に分け培養後、上記に示した方法と同様にライブラリーを構築した。現在これらのライブラリーを培養細胞に導入してスクリーニング中である。