hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新規情報伝達因子エクソソームによる変形性関節症治療と診断への展開とその機能解析（国際共同研究強化）

本研究は、ヒト膝関節の病理組織学的解析および遺伝子発現解析より、正常関節軟骨と初期OA、後期OAに分類し、軟骨細胞また培養上清中のエクソソーム中のmiRNAの発現解析を行った。正常関節軟骨細胞内で高発現および高分泌していた数種のmiRNAは、OA軟骨内および分泌型miRNAともに低下していた。この中の1つのmiRNAについて軟骨特異的に過剰発現させるマウスを作製し、OAに対する影響について解析中である。また、このmiRNAの発現は、老化関連転写因子やSOX9によって制御されており、またいくつかの標的候補遺伝子も同定した。内定年度:2015本研究は、基盤研究B (H27-29)とともに、microRNA (miRNA)を含むエクソソームの機能をより明らかにすることで新たなOA発症ネットワーク機構の提唱とOA治療法や診断法の開発のために1) miRNAを含むエクソソーム利用したOA治療効果の検討2) miRNAを含むエクソソームに注目したOA診断マーカーの探索3) OA由来エクソソームの性質およびその機能の解明を目的としている。本研究では、特に上記した2)および3)の一部について米国スクリプス研究所分子医学部門Martin Lotz教授と共同研究を行った。今年度は、ヒト膝関節より関節軟骨を採取し、病理組織学的解析および遺伝子発現解析の結果より、正常関節軟骨と初期OA、後期OA関節軟骨に分類し、各々の関節軟骨組織より軟骨細胞を単離・培養し、初代細胞および継代細胞、またこれらの各培養上清よりエクソソームを収集した。正常およびOA関節軟骨細胞で発現しているmiRNAおよびエクソソーム中のmiRNAを解析した結果、正常関節軟骨細胞で高発現および高分泌している数種のmiRNAは、OA関節軟骨細胞において発現が低下し、分泌型miRNAも低下していた。このmiRNAを組織特異的に過剰発現できるマウスを入手し、軟骨特異的miRNA過剰発現マウスを取得するためにアグリカンCreERTマウスとの交配を開始した。さらに、正常軟骨、OA軟骨およびこれら細胞由来のエクソソームの一部の糖鎖解析を実施した。ヒト膝関節より関節軟骨を採取し、病理組織学的解析および遺伝子発現解析の結果より、正常関節軟骨と初期OA、後期OA関節軟骨に分類し、各々の組織より軟骨細胞を単離・培養し、初代細胞および継代細胞、またこれらの各培養上清よりエクソソームの収集が順調に実施できており、軟骨特異的miRNA過剰発現マウス作製のための交配も進行中であることから概ね計画通りに進展している。本研究は、microRNA (miRNA)を含むエクソソームの機能を明らかにすることで新たな変形性関節症(OA)発症ネットワーク機構の提唱とOA治療法や診断法の開発の基盤となるデータ取得を目的とし、米国スクリプス研究所分子医学部門Martin Lotz教授と共同研究を行った。ヒト膝関節より関節軟骨を採取し、病理組織学的解析および遺伝子発現解析の結果より、正常関節軟骨と初期OA、後期OA関節軟骨に分類し、各々の関節軟骨組織より軟骨細胞を単離・培養し、初代細胞および継代細胞、またこれらの各培養上清よりエクソソームを収集した。各エクソソーム中のmiRNAの発現解析を行った結果、正常関節軟骨細胞内で高発現および高分泌している数種のmiRNAに注目した。そして、これらmiRNAは、OA関節軟骨細胞内において発現が低下していただけでなく、分泌型miRNAとしても低下していた。この中で注目したmiRNAについてCol2-CreおよびAcan-CreERTマウスと交配することで2種類の軟骨特異的にmiRNAを過剰発現するマウスを作製し、現在成長およびOAに対する影響について解析中である。このmiRNAの発現制御メカニズムについても解析を行い、寿命、細胞周期、酸化ストレスなどに重要な役割を示すことが示されている転写因子や軟骨マスター転写因子であるSOX9によって制御されていることが示唆された。さらに、これらmiRNAの標的遺伝子の探索を行い、標的候補遺伝子を同定した。また、加齢による自然発症モデルと靭帯切離によるOA誘導モデルの2つのOAモデルマウスを用いてOA発症に関連がある軟骨下骨の組織学的変化を評価するための新たなスコアリングシステムを開発した。ヒトサンプルの収集を計画通りに遂行していくと同時に、正常およびOA関節軟骨細胞由来のエクソソームによる血管形成抑制能や骨芽細胞、破骨細胞、滑膜細胞など関節構成細胞への影響を解析する。また、関節軟骨細胞由来のエクソソーム中に豊富に含まれているmiRNAの遺伝子改変マウスを用いた解析を進めていく。整形外科学
ポリフェノール光酸化反応を応用した殺菌消毒法の確立：より安全な補綴治療を目指して

本研究は、薬剤耐性菌、真菌やエンベロープを持たないウイルス(中水準消毒薬対象)、および細菌芽胞(高水準消毒薬対象)に対するポリフェノール光照射殺菌法の殺菌効果・不活化の検証と作用メカニズムの解明を行い、補綴治療過程における新しい殺菌消毒処理方法を提案することを目的として実施している。2018年度は、実験的多剤耐性菌を作成するため、一般的に耐性を発現しやすいといわれる細菌数種を供試菌として耐性誘導試験を行った。細菌を5×105程度になるよう懸濁し、ドライプレート`栄研'(7種の一般的な抗菌剤に対する薬剤感受性キット)にそれぞれ播種した。培養後、各抗菌剤における最小発育阻止濃度(MIC)を決定した。ドライプレートから1/2 MICに相当する培養液を採取し、7種すべて混合した。混合液を寒天培地に播種して培養し、得られたコロニーから更に菌懸濁液を作製して上記の工程を繰り返した。その結果、いくつかの抗菌剤に対する耐性獲得が確認できた。耐性獲得細菌は、今後の実験に適宜使用できるよう、その懸濁液を-40°Cで冷凍保存した。殺菌試験では、特にE. coliおよびP. aeruginosaにおいて明確な耐性が認められため、それらを多剤耐性菌として用いた。まず、これまでの研究でより詳細なデータを得ている過酸化水素光分解殺菌法(3%過酸化水素に365 nm LEDを照射して得られるラジカルを利用した殺菌法)の多剤耐性菌に対する殺菌効果と与える影響について検証を行ったところ、高い殺菌効果を示した。特にE. coliにおいては、30秒で103程度の減少が認められた。更に、耐性を獲得していない細菌に対して殺菌処理を行った場合と殺菌効果についてはほぼ違いがないことも確認し、過酸化水素光分解殺菌法が抗菌剤への耐性の有無に関わらず非常に短時間で高い殺菌効果を発揮することが明らかになった。これまでのところ、複数菌種について耐性誘導試験にて耐性獲得を確認することができている。本研究で使用する実験的多剤耐性菌について詳細にデータが得られていること、それを要時使用できるよう保存できていることは非常に大きな成果である。また、E. coliおよびP. aeruginosaを抜粋して殺菌試験も行っており、ポリフェノールを用いた殺菌と近いコンセプトを持つ過酸化水素光分解殺菌法の殺菌効果についても確認できた。本データは、研究を進めていく上で有益であり、今後の研究進行を円滑にする。これまでの研究で詳細なデータが得られており、それをもとに申請している計画に則り実験を遂行していく。
繊維強化金属基複合材料の疲労損傷過程の解析

金属基繊維強化複合材料は、次世代の宇宙・航空用材料として期待されているが、実用化に際しては、破壊、疲労特性の評価と非破壊的な損傷評価法の確立が重要と考えられる。本研究では、SiC繊維強化Ti合金に対して曲げ試験により繰り返し負荷を与えたときの損傷の進展過程を調べるとともにその評価法についても検討した。試料には、SiC連続繊維で一方向に強化したTi-6Al-4V合金を用いた。この複合材料パネル材(厚さ2mm、積層数8、繊維体積率35%)より試験片を切り出し、4点曲げによって、一定振幅の繰返し荷重を与えた。試験条件としては、応力比0.1、荷重繰り返し周波数10Hz、試験環境は室温大気中とした。複合材中に発生した損傷は、最大負荷応力(σ_<max>)の値に依存して変化した。σ_<max>が0.5σ_B以上では繊維の破断が支配的であった。これは、この応力レベル以上では、繊維にかかる応力が繊維の破断応力を超えるために繊維の破断が先に生じ、それに伴う応力集中のために隣接した繊維が破断するためと考えられる。これに対して、σ_<max>が0.35σ_B以下では、マトリックス中のき裂進展が主たる損傷となった。これは、試料の端部から疲労き裂が発生しても、繊維にかかる荷重が繊維の破断荷重以下になるため、繊維破断は起こらずマトリックス中をき裂が伝播するためである。また、σ_<max>が0.350.5σ_Bの範囲では、ブリッジングが生じた領域で、繊維の破断も認められた。これは、負荷荷重が大きくなると、き裂先端から遠い箇所の繊維にかかる荷重が増大し、破断荷重を超えたためと考えられる。すべての試験において、内部摩擦と損傷部におけるき裂(損傷)密度との間には相関関係が認められた。このことは、内部摩擦から損傷の程度ならびに寿命を推定することが可能なことを示しており、定期点検等に対して有効な損傷評価法として適用できることを強く示唆している。
ギリシア哲学(プラトン・アリストテレス)の批判的継承としてのハイデガ-哲学

ハイデガ-哲学をギリシア哲学(プラトン・アリストテレス)の批判的継承として捉えることが、研究の目的であった。基礎的存在論としての『存在と時間』は、(1)現存在の分析論、(2)存在の意味への問い、という根本性格をもっている。この二つの性格の意味と射程は、ギリシア哲学の批判的継承という観点から、初めて理解される。基礎的存在論を現存在の分析論の内に求めることは、アリストテレス『デ・アニマ』における「受動理解と能動理性」によって深く規定されている。Sorgeとしての現存在の存在、現象学の規定、非秘蔵性としての真理概念は、『デ・アニマ』の解釈に由来する。さらに現存在の分析論としての基礎的存在論の理念は、「存在論-神学」という形面上学の二重性(プラトン、アリストテレス)に定位して、初めてその意味と射程が捉えられる。存在の意味への問いは、アリストテレスのπροζενの問題構制の取り返しであると共に、プラトンの善のイデアの次元に対応する。『存在と時間』における存在への問いは、アリストテレスの「存在者としての存在者の学」の理念によって方向づけられていると同時に、プラトンのイデア論によって構造づけられている。『存在と時間』の体系構想をその最も深い次元で規定しているのは、形面上学の二重性という問題構制である。それは、一方ではアリストテレスに即した「範例的存在者の問題」として解釈され、他方ではプラトンに定位した「超越の問題」として捉えられる。『存在と時間』の体系構想は、この二つの解釈・取り返しの可能性の間を揺れ動いている。それは『存在と時間』の「体系構想の揺れ」であるが、この揺れの中から、ハイデガ-自身の形面上学構想(基礎的存在論-メタ存在論)が生まれる。ハイデガ-思惟の道は、ギリシア哲学の批判的継承という観点から、初めて真に理解されるのである。ハイデガー哲学を「西洋哲学の批判的継承」として捉えることが研究目的である。1.「ハイデガーとナチズム」問題を、プラトン『国家』とニーチェの「神と死」とが形作る西洋形而上学の内に位置づけ、「「詩人-思惟者-国家創造者」の三位一体」を書いた。ハイデガーのナチズム参加を、彼の西洋哲学との対決から捉える試みである。2.ハイデガーの「ソピステス講義」の研究に基づく拙論「『存在と時間』から『ソピステス』ヘ」(1993)をさらに発展させ、ハイデガー・シンポジウム(1993年7月、早稲田大学)において、「イデア論と『存在と時間』」として発表した。この成果は、「プラトン-西洋存在論の射程」として、『ハイデッガーを学ぶ人のために』に発表予定である。3.ギリシア哲学の批判的継承として『存在と時間』を解釈する試みの成果として、「『存在と時間』における道具分析の存在論的射程」を書いた。ギリシア哲学との関わりで、ハイデガー哲学を新たに読み直す作業は、極めて有効であり、この方向で『存在と時間』の射程を明らかにすることを、進めている。4.「ギリシア哲学の批判的継承」という研究視点は、ハイデガー研究を越えて、カント『純粋〓性批判』の研究を促進させた。その成果は、「存在論と超越論哲学」として発表予定である。5.ハイデガー全集が刊行されつつあるが、特に『古代哲学の根本概念』(1926年夏学期講義)は、私の研究目的にとって、極めて重要である。今年出版されたこの講義に基づいて、私の研究課題を、さらに発展させることができる。以上の成果を著作として出版できるようにしたい。

ギリシア哲学(プラトン、アリストテレス)の本格的受容が『存在と時間』への道を可能にしたが、その決定的な出発点となるのが、『デ・アニマ』である。「デ・アニマ」への着目は、今まで全くなされていない新しい論点、解釈視点である。人間の生を「現存在」と規定し、基礎的存在論が現存在の分析論の内に求められるという『存在と時間』の基本構想は、『デ・アニマ』の解釈に由来する。『デ・アニマ』の「受動理性と能動理性」は現存在の分析論を深く規定している。さらに『デ・アニマ』の研究は、現存在をSorgeと捉えること、真理を非秘蔵性と解釈することを可能にした。以上のことを『存在と時間』ならびに『存在と時間』への道に即して論証した。プラトンに関しては、イデア論の表現と、ハイデカ-の存在の規定との同型性を明らかにした。つまり、『存在と時間』におけるWoraufhin(存在と存在の意味の規定)は、イデア論の「それへ目を向けるそれ」という基本構造と同型である。このことは、『存在と時間』がイデア論の問題圏を動いていることを示している。さらに具体的には、「存在者と存在」の区別は『テアイテトス』の内に読み取ることができる。「存在者-存在-存在の意味」という『存在と時間』を規定する三つの次元は『国家』における「現われ-イデア-善のイデア」に正確に対応している。そして『ソビステス』の内に、ハイデガ-は存在への問いの独自の次元を読み取っている。以上のことを、プラトンのテキストを、それに対するハイデガ-の解釈を検討することを通して示した。ハイデガ-哲学をギリシア哲学(プラトン、アリストテレス)の批判的継承として捉えることが、研究の目的であった。基礎的存在論としての『存在と時間』は、(1)現存在の分析論、(2)存在の意味への問い、という根本性格をもっている。この二つの性格の意味と射程は、ギリシア哲学の批判的継承という観点から、初めて理解される。基礎的存在論を現存在の分析論の内に求めることは、アリストテレス『デ・アニマ』における「受動理性と能動理性」によって深く規定されている。Sorgeとしての現存在の存在、現象学の規定、非秘蔵性としての真理概念は、『デ・アニマ』の解釈に由来する。さらに現存在の分析論としての基礎的存在論の理念は、「存在論-神学」という形而上学の二重性(プラトン、アリストテレス)に定位して、初めてその意味と射程が捉えられる。存在の意味への問いは、アリストテレスのπροζενの問題構制の取り返しであると共に、プラトンの善のイデアの次元に対応する。『存在と時間』における存在への問いは、アリストテレスの「存在者としての存在者の学」の理念によって方向づけられていると同時に、プラトンのイデア論によって構造づけられている。『存在と時間』の体系構造をその最も深い次元で規定しているのは、形而上学の二重性というて問題構制である。それは、一方ではアリストテレスに即した「範例的存在者の問題」として解釈され、他方ではプラトンに定位した「超越の問題」として捉えられる。『存在と時間』の体系構想は、この二つの解釈・取り返しの可能性の間を揺れ動いている。それは『存在と時間』の「体系構想の揺れ」であるが、この揺れの中から、ハイデガ-自身の形而上学構想(基礎的存在論-メタ存在論)が生まれる。ハイデガ-の思惟の道は、ギリシア哲学の批判的継承という観点から、初めて真に理解されるのである。
不完全性を持つ非線形多重スケールデータのためのオンライン解析法の開発と実応用

多重スケールデータのオンライン解析に向けた基礎検討として、以下を実施した。1.カーネルPCAによる次元削減が非線形回帰問題に与える影響を明らかにする関連次元解析に取り組んだ。特異値分解に基づくシンプルな方法でアプローチすることにより、従来研究で生じていた打ち切り誤差の影響を完全に消去することに成功した。また、従来研究で扱えていなかった中心化の影響も同じ枠組みで扱えることを明らかにした。本成果は、信号処理のトップカンファレンスIEEE ICASSP2018(カルガリー、カナダ)で発表した。2.多カーネル適応フィルタをデータ分類問題に適した形に変形し、自然言語処理における感情分析に応用した。コンペ型ワークショップSemEval2013で用いられたTwitterデータで数値検証を行い、提案法の優位性を示した。本成果は、国内の信号処理研究者が一堂に集う信号処理シンポジウム2018で発表した。さらに、複数のオンライン手法に対する優位性の検証も完了している(国際会議に投稿中)。3. L1正則化項を含む確率的最適化のための「凸射影と双対平均法に基づくアルゴリズム」を導出した。2乗距離関数(滑らか)を損失関数とした点、学習率と正則化パラメータを定数にした点、計量と正則化項に対してスパース化を促進する工夫を施した点が従来研究(RDA)と大きく異なる。複数の実データ(手書き文字MNIST,ニュース文書RCV,音響データ)を用いた分類問題・回帰問題において、高いスパース性と推定精度を同時に実現すること、正則化パラメータへの性能依存性が低いことを実証した。さらに、多カーネル適応フィルタへ応用し、少ない辞書サイズで高精度な推定が実現されることを示した。本成果は、信号処理のトップジャーナルIEEE Transactions on Signal Processingへの採録が決定している。関連次元解析を当初の予定どおり、完了できた。H31年度に実施予定である多カーネル適応フィルタの分類問題への拡張について、初期検討まで実施することができた。確率的最適化に対する効果的なアルゴリズムを構築できたことは、今後の研究を実施していく上でとても重要である。主成分分析への拡張については、大学院生と議論し、検討を進めている。
小学校英語教育：ニーズ分析とオンラインを用いた研修教材開発

本研究の目的は、2020年度から実施される小学校中学年に向けた外国語活動、高学年を対象とする外国語科をみすえ、現在の小学校では英語教育がどのように推進・実施されているのか、また課題は何かをアンケート調査および小学校教員および関係者に聞き取り調査を行う、また授業見学などを通して明らかにすることである。これを受けて研究計画としては、科研1年目および2年目はアンケートや聞き取り調査など主にデータ収集をし、3年目はそれを分析し結果を発表するというものであった。本研究は、2018年度に3年目を迎え、引き続き小学校での授業の見学や教員への聞き取り調査を行うことに加え、研究結果を情報発信するという当初の計画に基づき、国内外での学会発表や論文発表を行った。この内訳は、論文に関しては、合計6本出版した。このうち日本語による論文は2本、英語による論文は4本である。出版されたテーマとしては、効果的なティームティーチングのあり方、小学校教員の英語力に基づいた研修への提言、フォニックスの実践例などである。学会発表は単著は5件(国内学会3件、国際学会2件を含む)、共著で1件(国際学会)である。国内の学会に関しては、主に小学校教諭および小学校教育関係者が出席する実践的報告や研究発表を主なものとする学会での発表であった。国際学会では日本における外国語教育を報告し日本を越えてアジア圏の研究者との意見交換・異文化の観点から英語教育を振り返るという意図のもとで行われた。これに加え本研究に基づく結果を踏まえた日本の英語教育の状況を公開講座でも発表・解説した。学会発表および論文とも研究代表、および研究分担者がそれぞれ単著で、あるいは協力しながら共著で進めることができたと考える。前述の研究実績にあるように、学会発表は国内・国外を合わせて6件、また論文も国内のオーディエンスに向けた日本語のもの、また国外のオーディエンスに向けた英語のものを合わせて6本執筆することができたことは、本研究が3年目を迎え研究の分析結果を発信するという時期にきていることを鑑みると予定通りに進んでいると言える。またこれに加え、アンケート調査および聞き取り調査のデータを共起ネットワークを使用し分析を始めている。これによりこれまでの結果に加えて新しい視点からの研究報告をし、それを学会および論文として発表する予定である。また本研究の最終的な目的として、前述の学術的な論文・発表だけにとどまらず、研究結果を研修内容として、現職の小学校教員および小学校英語関係者に広く周知するというものがある。こちらは鋭意制作中であるが、現在、小学校英語は2020年度の実施を見据えた移行期間にありこれに関する情報が刻一刻と発信されている状況にある。この時点で速急に情報をまとめることは望ましくないため、文科省などからの情報を踏まえながら2019年度で研修内容をまとめ、ウェブサイトとして構築したいと考える。引き続き学会発表・論文執筆を続けていく予定である。この時点ですでに2019年度の学会2件(招待講演を含む)、論文も3件採択されることが決定している。これに加えて最終年度としてなるべく多岐にわたるテーマで学術的・一般向けの情報発信を続けていきたい。また前述のようにこれに加え、小学校の先生方に向けてのわかりやすい情報発信を心がけたウェブサイトを完成させる予定である。小学校での外国語活動にたずさわる(あるいはその可能性がある)教員から小学校英語についての意識調査をするため、アンケート用紙を作成した。まず、どういった内容を織り込むかを研究代表者が先行研究などを参考とし、教員研修を目的とした研修内容を聞く項目として「教室英語」「ティームティーチング」を選択した。次に、教員の英語力を測るために「話すこと」「聞くこと」「読むこと」「書くこと」それぞれについての能力の自己診断ができるアンケート形式とした。アンケート調査では、教員自身が、自己肯定感を失なわないよう「どういう能力に欠けているために研修が必要か」という否定的な表現ではなく、「何ができるか」という肯定的な表現を用いたCan-Do形式を用いて100名あまりにアンケートを配布し36名から回答を得、その結果を学術論文として出版した。具体的には、アンケート調査前半の、「教室英語」「ティームティーチング」に注目しこの二項目についてどういった研修内容が必要かという結果を導き出した。またアンケートに加え、質的研究を行うためインタビューを行った。研究代表者および研究分担者合計3人がそれぞれ二人ずつにインタビューを行ったため、合計6名にアンケートでは収集することのできない教員の小学校英語への考えを聞き取り調査することができた。平成28年度中には、インタビュー結果の文字おこしが70%ほど終了した。これに加え、日本国外での外国語教育を視察し、日本の英語教育の参考にするため、研究代表者はNZの日本語教育について、研究分担者はイギリスでのフランス語教育、オーストラリアでの外国語教育、さらにもう一人の研究分担者は、タイのインターナショナルスクールでの英語教育を視察することにより早期外国語教育についての知識を深めた。平成28年度の目標であるアンケート用紙を作成し、それを配布・回収することができた。アンケート調査にあたっては、パイロット調査を行い、アンケート用紙の信憑性や妥当性についても検証した。これを100部配布し、36部回収した。このアンケート調査に加え、研究者3人でインタビュー調査に関する質問項目を統一し、研究代表者および共同研究者が、それぞれそれ統一された質問項目に関してインタビュー調査を行った。3人の研究者がそれぞれ二人ずつのインタビュー調査を行ったので計6人に聞き取り調査を行うことができた。

3年間の研究計画で、平成28年度は主にデータ収集の時期と位置付けているので、研究はおおむね順調に進展しているといえる。また、代表者および研究分担者がそれぞれ海外の外国語教育を視察した。我が国が直面している課題を大義的にとらえ、小学校での外国語活動の早期化、外国語科の教科化にむけた我が国の外国語教育政策および小学校教員が技能や知識としてどういう研鑽を積むべきかという点で大いに参考になった。ただ少し予定より遅れているのは、アンケート回収率が当初の予定より低いことである。これは、校区や学区によって外国語活動のあり方がかなり異なるため、異なる環境で働く小学校教員からアンケートを募りたいと考えたためである。ただやみくもにアンケート調査の数だけを集めるのではなく、幅広く異なる状況にいる小学校教員に意見を聞きたいとのことから、アンケート調査については予定より時間がかかっている。この点は平成29年度に引き続き継続していかなければいけない点である。今年度までに、研究データを精力的に収集することができた。まず中国、韓国、フィリピンで小学校英語についての実態調査をすることができた。アジア圏では英語教育の早期化が日本よりも進んでいることを踏まえ、現地での授業や施設見学、および小学校教員へのインタビュー調査を行えたことは、これからの日本の英語教育を考えるうえで大変参考になった。またこれに加え、日本においての英語はEnglish as Foreign Languageの状況であるため、その言語がコミュニティーにおいて話されていないという状態で言語習得が目標となっている。この視点から日本の状況を客観視するために、他のイギリスでのフランス語教育、ニュージーランドでの日本語教育についても異文化教育という観点から授業見学・インタビューおよび言語政策についての調査を行った。また昨年度に引き続き日本の小学校英語教育について現状を把握するうえで質問紙配布・回収をさらにすすめ、外国人ALTを含む教育関係者へのインタビュー、またある教育委員会を通し、複数の小学校での外国語活動を長期にわたって観察できたことは研究を進めるうえで大変有意義であった。これらの多岐にわたるデータから、小学校英語においてさらに研究を進めるべきテーマが浮き彫りになってきた。これらのテーマは、リテラシー教育の視点からの文字指導、小学校英語における4技能5領域の評価、ティームティーチング、フォニックスの指導、効果的な教室英語について、などである。先述のように多岐にわたるデータを日本国内および海外で収集することができ、その結果を理論的観点から分析し学術論文・国際学会での発表ができたことはかなり成果があがったと考えられる。特に小学校教員の英語能力と英語教授力を測る質問紙を分析した結果、ある程度の信憑性と妥当性のあるものだと判断できたことはこの段階の研究結果として高く評価できる。この質問紙は教員の現時点での英語能力および教授能力を測るだけでなく、さらなる目指すべき目標を提示できるという観点から研修用の教材としても活用される可能性がある。
関節症におけるfree radicalの関与

Free radicalfamilyはいろいろな病態に関与していることが知られているが,関節症における報告はなかった.我々がこれまで得た知見としては,IL-1によって惹起される軟骨破壊に活性酸素の関与を示唆する結果のみであった.そこで本研究では実際に活性酸素の誘導を測定することより出発した.これにより軟骨細胞はIL-1により活性酸素を誘導することを証明した.またIL-1による軟骨基質合成抑制における一酸化窒素(nitric oxide,NO)の役割についても検討を開始した.当該期間中にこの現象にprostaglandinが関与するという知見も得られたが,NOはこれよりもさらに強力な調節因子であることが明らかにされた.これらの知見は関節症,特に慢性関節リウマチに焦点を当てて行われたものであるが,我々はこのほかにも機械的ストレスによって発生する変形性関節症についても動物モデルを用いて検討を行った.軟骨欠損を作製し,その軟骨における活性酸素およびNOを測定することにより,変形性関節症の発症過程におけるこれらガスメディエーターの増加を証明した(投稿中).以上の結果より,関節症の発生にはfree radicalは明らかに関与し,これらの調節が将来的な薬物治療の方向であることが示された.実際に当該期間中の研究により,現在臨床的に広く使用されているヒアルロン酸にもこれらの調節作用があることが明らかにされた.Free radicalfamilyはいろいろな病態に関与していることが知られているが,関節症における報告はなかった.我々がこれまで得た知見としては,IL-1によって惹起される軟骨破壊に活性酸素の関与を示唆する結果のみであった.そこで本研究では実際に活性酸素の誘導を測定することより出発した.これにより軟骨細胞はIL-1により活性酸素を誘導することを証明した.またIL-1による軟骨基質合成抑制における一酸化窒素(nitric oxide,NO)の役割についても検討を開始した.当該期間中にこの現象にprostaglandinが関与するという知見も得られたが,NOはこれよりもさらに強力な調節因子であることが明らかにされた.これらの知見は関節症,特に慢性関節リウマチに焦点を当てて行われたものであるが,我々はこのほかにも機械的ストレスによって発生する変形性関節症についても動物モデルを用いて検討を行った.軟骨欠損を作製し,その軟骨における活性酸素およびNOを測定することにより,変形性関節症の発症過程におけるこれらガスメディエーターの増加を証明した(投稿中).以上の結果より,関節症の発生にはfree radicalは明らかに関与し,これらの調節が将来的な薬物治療の方向であることが示された.実際に当該期間中の研究により,現在臨床的に広く使用されているヒアルロン酸にもこれらの調節作用があることが明らかにされた.Free radicalfamilyはいろいろな病態に関与していることが知られているが,関節症における報告はない.我々は間接破壊にfree radical(superoxideおよびNO)の関与を示唆する結果を得た(Agents Actions,1994).本研究の目的は,1)軟骨細胞におけるfree radicalの産生機序,2)軟骨代謝に対する影響,3)臨床上の意義を検討することにある.平成7年度の目標として,1)関節軟骨よりのsuperoxide産生の検討を挙げたが,科学研究費補助金により購入したArgus50を用いることによりこれに成功した.また2)薬剤添加時のfree radicalの誘導も目的の一つであったが,これについても軟骨の層別解析を行い,IL-1添加時のNO産生に差のあることを見い出した(Inflammation Res,1995).さらに3)その条件における軟骨代謝の変化も目標の一つとしたが,これについてもウシ軟骨細胞にIL-1を添加することで関節破壊を再現することに成功した(J Pharmacol Exp Therap,in press).以上の結果より,当初平成7年度の目標として設定した項目については全て達成できており,研究は順調に進捗していると言える.平成8年度はこれらの見知の上にたって,関節症への関与を検討する予定である。Free radical familyはいろいろな病態に関与していることが知られているが,関節症における報告はなかった.我々がこれまで得た知見としては,IL-1によって惹起される軟骨破壊に活性酸素の関与を示唆する結果のみであった.そこで本研究では実際に活性酸素の誘導を測定することにより出発した.これにより軟骨細胞はIL-1により活性酸素を誘導することを証明した.またIL-1による軟骨基質合成抑制における一酸化窒素(nitric oxide,NO)の役割についても検討を開始した.当該期間中にこの現象にprostaglandinが関与するという知見も得られたが,NOはこれよりもさらに強力な調節因子であることが明らかにされた.これらの知見は関節症,特に慢性関節リウマチに焦点を当てて行われたものであるが,我々はこのほかにも機械的ストレスによって発生する変形性関節症についても動物モデルを用いて検討を行った.軟骨欠損を作製し,その軟骨における活性酸素およびNOを測定することにより,変形性関節症の発症過程におけるこれらガスメディエーターの増加を証明した(投稿中).以上の結果より,関節症の発生にはfree radicalは明らかに関与し,これらの調節が将来的な薬物治療の方向であることが示された.実際に当該期間中の研究により,現在臨床的に広く使用されているヒアルロン酸にもこれらの調節作用があることが明らかにされた.
がん遺伝子および関連遺伝子の染色体マッピング

1.がん遺伝子のマッピング:srcがん遺伝子に属するyes,erbB,ros由来の7種のがん遺伝子のヒト染色体上への位置づけを行った。yes関連遺伝子として、プロトyesであるc-yes-1は18q21.3上へ、yes-1の僞遺伝子であるc-yes-2は22q11上に位置づけした。第1染色体上へ位置づけしたc-fgrはアクチン遺伝子との結合はなくv-fgrと異ったものであること、さらに先にc-src-2と呼ばれ1p34-p36に位置づけされていたものはc-fgrであることが分りこれに改められた。c-synは6q21へマップした。erbB関連遺伝子のc-erbB-2は17q21へマップした。この遺伝子はラット癌細胞から分離したneu遺伝子と同じであることが分った。ros関連遺伝子、c-ros-1は6q22上へ、c-ros-2は13q12上へと夫々マップした。ヒト以外では、H-ras-1をラット1q43上へ、c-sisをラット第7染色体上へ、また肝癌発生に関連しているグルタチオンSトランスフェラーが遺伝子を1q43上へ位置づけした。2.がん特異的染色体異常とがん遺伝子発現:白血病および悪性リンパ腫180症例の染色体分析を行い、新たな特異的異常として、t(7;11)転座をAML,CMLで、逆位iuv(3)をCMLで、t(6;18)転座を瀘胞性リンパ腫でそれぞれ見い出した。Instuハイブリダイゼーションにより、t(7;11)では、no.11上のras遺伝子が転座によりno.7へ移動しているのが分ったが、CMLの転座ではrasはno.11に残っていた。同様な転座にもかかわらず症例により分子レベルでの切断点が異っているものと思われる。また、AMLにみられた【Pb^1】染色体上には、no.9由来のabl遺伝子が移動してきていることが分った。また、【Pb^1】染色体がみられるCML由来のB細胞株においてノーザンブロット法により、bcr-abl遺伝子のmRNAの発現を分折したが、その転写活性はみられなかった。【Pb^1】染色体上にはabl遺伝子が転座しているにもかかわらず、CMLにおいては、必らずしもbcr-ablの転写活性を件うものではないことが分った。
エンテロウイルス71受容体の研究

エンテロウイルス71(EV71)はコクサッキーウイルスA16と共に手足口病の主要な原因ウイルスである。EV71による手足口病は稀に重篤な神経合併症を生ずる。我々はスカベンジャーレセプターB2(SCARB2)がEV71の受容体の一つであることを明らかにした。SCARB2は試験した全てのEV71臨床分離株の受容体として機能した。さらに同じく手足口病を引き起こすCVA16,CVA14もSCARB2依存的な感染をする。また我々はウイルス結合や感染成立に必須の64アミノ酸からなるSCARB2の領域を同定した。エンテロウイルス71はピコルナウイルス科エンテロウイルス属に属するウイルスで、コクサッキーウイルスA16などと共に乳幼児に手足口病を引き起こすことが知られている。このウイルスはヒト由来の培養細胞RD細胞には感染するが、マウス由来のL929などにはほとんど感染が成立しない。ところがL929細胞にウイルスRNAをトランスフェクションすれば子孫のウイルス粒子が産生されることから、L929細胞への感染不成立はウイルスの感染初期段階(細胞への吸着,侵入、脱殻など)がうまくいかないためであると考えられた。そこでこの細胞にヒトRD細胞のゲノムDNAをトランスフェクションして形質転換細胞株群を得て、その中からウイルス感受性を獲得した株をクローニングした。この形質転換細胞Ltr051細胞ともとのL929細胞からRNAを調整し、Whole Human Genome Microarray kit 4x44K(Agilent)を用いてLtr051細胞に発現があり、L929細胞に発現のない遺伝子の同定を試みた。複数の遺伝子候補が見いだされたが、それらの候補遺伝子が実際にLtr051細胞DNAに導入されているかPCR法で調べ、1つの遺伝子が導入されている事を確認した。この遺伝子の全長cDNAをクローニングして単独でL929細胞に発現させたところ、細胞はウイルス感受性を獲得した。またこのタンパクあるいはそれを発現するL929細胞とウイルスは結合し,その結合は抗体により阻害された。また細胞に対するウイルス感染も抗体によって阻害されたことからこの分子がエンテロウイルス71受容体であることを確認した。複数の遺伝子候補が見いだされたが、Scavenger receptor B2(SCARB2)遺伝子が導入されている事を確認した。この遺伝子の全長cDNAをクローニングして単独でL929細胞に発現させたところ、細胞はウイルス感受性を獲得したことなどからこの分子がエンテロウイルス71受容体であることと同定した。マウスにはヒトのこの遺伝子と相同なマウスScarb2が存在する。この遺伝子を過剰発現するとウイルス受容体としての活性を示すが、ヒトSCARB2と比較するとその活性は低い。両者のキメラを作製することにより、ヒトSCARB2のウイルス感染成立に重要であると考えられる部分を同定した。感染成立に重要な部位の同定が可能になったことにより、マウスScarb2のその部分をヒト型に置換し、EV71感染モデル動物を作製する可能性が開けた。エンテロウイルス71(EV71)はピコルナウイルス科エンテロウイルス属に属するウイルスで、コクサッキーウイルスA16などと共に乳幼児に手足口病を引き起こすことが知られている。EV71のこのような種特異性を利用して、昨年度までに我々はヒトScavenger receptor B2(SCARB2)がEV71受容体であることと同定した。EV71はSCARB2と直接結合することをpull down assayなどにより確認した。

この遺伝子を過剰発現するとウイルス受容体としての活性を示すが、ヒトSCARB2と比較するとその活性は著しく低い。両者の遺伝子は12個のエクソンによってコードされているが、いくつかのエクソンをヒトとマウスで入れ替えたキメラを作製することにより、ヒトSCARB2のエクソン4によってコードされる64アミノ酸の部分がウイルス感染成立に必須であることを同定した。また、ヒトSCARB2には10箇所のN型糖鎖付加可能な部位が存在し、実際にその分子量から推定していくつかの糖鎖が付加されていると考えられた。糖鎖をPNGase Fにより除去した可溶性SCARB2を用いたpull downassayにより糖鎖の付加はウイルスとSCARB2の相互作用に必須ではないことを明らかにした。
鉄酸化細菌の銅耐性を利用した集積培養法の改善

鉱山排水起源の集積培養菌による硫黄および鉄の酸化実験を行った。硫黄基質では、硫黄酸化細菌と原生動物が共存する硫黄酸化細菌による単体硫黄の酸化挙動と,純粋培養菌による酸化挙動を比較し,両者の挙動について検討するために,若干の酸化条件について実験を行い,また,鉄基質では鉄酸化細菌以外の微生物の存在を検討するために栄養塩無添加における酸化実験および有機物であるSDSを添加した実験を行った。また,高速液体クロマトグラフィーを用いて鉄基質集積培養における培養液中の物質の分析を行った。以上の結果,以下の結論を得た。(1)原生動物が生存する集積培養の場合,硫黄酸化細菌による酸化速度および増殖収率は純粋培養の場合よりも小さくなる。(2)Cu^<2+>を添加した集積培養において,硫黄酸化細菌は阻害作用を受けたにもかかわらず増殖したが,原生動物はCu^<2+>濃度100mgdm^<-3>以上では増殖できなかった。さらに,原生動物はCu^<2+>にたいする耐性を獲得しなかった。(3)鉄基質集積培養菌の栄養塩無添加における酸化挙動は,時間の経過とともに細菌によるFe^<2+>の酸化速度が大きくなり,細菌の増殖がみられた。(4)鉄基質集積培養において,SDSを添加した場合,鉄酸化細菌は1×10^<-5>moldm^<-3>以上の濃度で阻害された。しかし,この濃度で継代培養を行うと,鉄酸化細菌はSDSに対する耐性を獲得する。(5)鉄基質集積培養を行った培養液中からピルビン酸は検出されなかった。しかし,9K培地には含まれていない物質が検出された。栄養塩類無添加における鉄基質集積培養の実験結果と併せて考えると,それが鉄酸化細菌の栄養素となっている可能性がある。鉱山排水から採取した鉄酸化細菌の集積培養を行い,鉄基質集積培養菌を得た。さらに,この集積培養菌から固体培地を用いて鉄酸化細菌を分離し,純粋培養菌を作成した。その集積培養菌および純粋培養菌を用い,栄養塩類無添加での酸化実験を行った。ここで使用した細菌は,純粋培養および集積培養のどちらの場合においても,前培養として栄養塩類無添加で回分培養を行ったものである。すなわち,細菌細胞体内に蓄積された栄養素を放出させた定常期の細菌であると推定される。また,初期菌体濃度を10^6cell/mlとし,十分な反応時間を確保している。その結果,純粋培養の場合,鉄酸化細菌の増殖および酸加速度の増加は見られず,実験期間を通じてほぼ一定となった。一方,集積培養の場合,実験途中において,鉄酸化細菌が増殖し,酸化速度が増加するという現象が見られた。この結果から,栄養塩類無添加における鉄酸化細菌の酸化挙動は,純粋培養と集積培養とで大きく異なることがわかる。純粋培養と集積培養との大きな違いは,鉄酸化細菌が単独で存在しているかどうかであり,上記より,集積培養の場合において,共存する従属栄養微生物の働きが重要であり,その微生物の働きにより,鉄酸化細菌にとっての栄養素が循環し,鉄酸化細菌に供給されることが推測される。また,鉄酸化細菌に阻害作用を及ぼす有機物として界面活性剤の硫酸ドデシルナトリウムを添加し酸化実験を行った。その結果,硫酸ドデシルナトリウム濃度1×10^<-5>mol/l以上では,添加後速やかに鉄酸化細菌が阻害されることが確認された。鉄基質集積培養における培養液中の物質変化を検討するために,高速液体クロマトグラフィーを用いた。測定に用いた高速液体クロマトグラフィーは,東ソ-全自動マルチシステムである。

また,使用した分析カラムは,イオン交換クロマトグラフィ用TSKgelDEAE-2SW(4.6mmID×25cm東ソ-製)である。溶離液としてNH_4H_2PO_4およびCH_3CNを3対1の割合で合わせたものを使用し,測定を行った。なお,測定時間は30分である。また,測定温度は40°Cであり,検出には紫外吸光度計(UV-8010東ソ-製)を用い,210nmで測定した。試料となる培養液は,0.2μmのメンブランフィルターで濾過した後、1NのNaOHでpHを3に調整した。なお,使用の注入量は50mm^3である。まず,9K培地を4倍に希釈しピルビン酸を添加し,分析を行った。その結果,9K培地の各成分がピルビン酸の検出を妨げないことが確認された。次に,鉄基質集積培養を行った後の培養液を採取し,0.45μmのメンブランフィルターで濾過した試料を分析した。この培養では,4倍に希釈した9K培地を用い,初期pHを2とした。これは,分析カラムの適正pHが2以上となっているためである。この結果,保持時間2.5分付近のピークが小さきなっており,鉄が酸化されているのがわかった。しかし,ピンビル酸のピークは検出できなかった。一方,9K培地には含まれていない物質のピークがいくつか検出された。これらの物質は,培養中に現れたものであると考えられる。しかし,現時点では,これらの物質がなにであるか判明しておらず,今後の課題である。
代数学および微分方程式論における解の構成的研究

本研究の目的は、代数学および微分方程式における解の構成的研究である.まず,代数学の分野の報告から始める.この分野では,代数方程式の重複解の重複度を代数的な対応の理論を基に数値計算を用いて求める方法の研究を行った.基礎理論では,何変数の連立代数方程式に対しても成り立つ方法が得られたが,数値計算の実行上の問題があって,2変数に限って研究をすすめた.その方法は,与えられた連立代数方程式の重複解を電子計算機を用いてホモトピ-法を用いて求めた上,ゾイタンの法則を用いて,多重度を計算するのである.この計算のため科学研究費補助金によって購入されたワ-クステ-ションが用いられた.多変数の連立代数方程式は,従来数値解法あるいは,数式処理を用いて解かれるが,数値解法には誤差の問題があって特に多重解を求めることが困難であり,ましてや多重度を求めることはほとんど不可能であった.一方数式処理を用いると多重度を正確に求めることはできるが,連立代数方程式のサイズが大きくなると扱うことができない.原理的に多重解を一重の解と同じ精度で求めることは不可能だが,多重度を求めることにより数値解法によって得られた解が,全てか否かの判を与えることが目標である.以上の研究に加えてさらに,代数学の分野では,整数論の研究成果があがった.微分方程式の分野では,構成的な研究は連立代数方程式に関して,空間曲線の追跡にルンゲクッタ法を適用することが,検討され一部アルゴリズムとして完成した.また,微分方程式の基礎理論で,2件,トポロジ-の分野で1件の業績発表が行われた.本研究の目的は、代数学および微分方程式における解の構成的研究である.まず,代数学の分野の報告から始める.この分野では,代数方程式の重複解の重複度を代数的な対応の理論を基に数値計算を用いて求める方法の研究を行った.基礎理論では,何変数の連立代数方程式に対しても成り立つ方法が得られたが,数値計算の実行上の問題があって,2変数に限って研究をすすめた.その方法は,与えられた連立代数方程式の重複解を電子計算機を用いてホモトピ-法を用いて求めた上,ゾイタンの法則を用いて,多重度を計算するのである.この計算のため科学研究費補助金によって購入されたワ-クステ-ションが用いられた.多変数の連立代数方程式は,従来数値解法あるいは,数式処理を用いて解かれるが,数値解法には誤差の問題があって特に多重解を求めることが困難であり,ましてや多重度を求めることはほとんど不可能であった.一方数式処理を用いると多重度を正確に求めることはできるが,連立代数方程式のサイズが大きくなると扱うことができない.原理的に多重解を一重の解と同じ精度で求めることは不可能だが,多重度を求めることにより数値解法によって得られた解が,全てか否かの判を与えることが目標である.以上の研究に加えてさらに,代数学の分野では,整数論の研究成果があがった.微分方程式の分野では,構成的な研究は連立代数方程式に関して,空間曲線の追跡にルンゲクッタ法を適用することが,検討され一部アルゴリズムとして完成した.また,微分方程式の基礎理論で,2件,トポロジ-の分野で1件の業績発表が行われた.
局所筋血流と骨格筋萎縮の関係

我々は骨格筋萎縮モデルとして、ギプス固定による動物実験を用いて、骨格筋萎縮と遺伝子発現の変化を解析してきました。骨格筋を栄養する局所の血流量を測定したところ、Type-1線維を多く含む筋は、固定直後から血流の有意な低下が認められました。経時的な変化を調査する為に、実験日を6時間、1日、4日、10日と設定しました。いずれかの実験日において、有意に大きな動態を示した遺伝子発現が86probesで見つかり、ここから血流相関性遺伝子群をピックアップして、その役割について分析を行いました。その結果、血流相関性遺伝子群は、特に筋の構造維持と調節に関わるものが低下していることを見つけました。筋萎縮に関わる遺伝子の発現変化を分析するために、DNAアレイ解析を行い、とりわけ、血流量と組織重量変化に相関するそれぞれの遺伝子群を精査した。大きな発現変動(FC>10)を示す86probesのうち、血流相関性の高いものが12probes、組織重量相関性の高いものが17probesであった。血流相関性の高いprobesのGOプロファイルの特徴はBiological processに関係するもので、血流相関性の高いprobesではCellular Componentであった。詳細の検討は27年度に引き継ぐが、現段階で、血流の低下は筋内のある種の代謝を抑制し、これがトリガーとなり、構造遺伝子群を主にダウンレギュレートし、筋の萎縮が進むことと予測される。初期の変化である血流相関性の高い遺伝子群の中にはAtf3などの調節系の中心的な役割となる遺伝子が含まれ、組織相関性の高い遺伝子群にはAnkrd2など筋線維構造に関わる構造系、および転写因子のいくつかが含まれている。さらにその後に、分解系が進展することで、筋萎縮が可逆的なものから不可逆的なものへと移行すると考えられる。DNAマイクロアレイ解析を行い、血流量と重量変化に相関するそれぞれの遺伝子群を精査した。大きな発現変動(FC>10)を示す86Probeのうち、血流相関性が12probe、重量相関性が17probeであった。血流相関性遺伝子群のGOプロファイルの特徴は、Biological Processに関与するものが多く、重量相関性はCellular Componentが多く含まれた。血流相関性遺伝子群で特徴的なHspa1bやRcan1はいずれもType-1線維との関係性が最近の研究で報告されている。その上で、トリガーの1つが血流であることが新たに示唆された。一方、重量相関性遺伝子群は、Actc1, Ankrd2, Csrp3などSarcomere関連遺伝子群の発現低下が認められた。CI後、極初期には血流低下をトリガーとした筋のリモデリングに調節障害が発生し、徐々に筋のProtein synthesisとdegradationのバランスがdegradation有意となり、筋の不可逆的な崩壊が最終的に進むものと考えた。CI初期における遺伝子発現の変化を捉え、これをモニタリングすることで筋萎縮の前兆を見いだす可能性を示唆することができた。平成26年においては、研究実施計画としては実験モデルと実験系の確立、基礎データの蓄積・筋萎縮プロセスの誘導と確認、筋萎縮トリガーについて研究を進めるとしていたが、基礎研究データの再現性が高かったために、予定よりも小規模の実験で有益なデータが取得することができた。とりわけ、不明であった遺伝子発現の動態解析が科研費の効果によって効率的に行うことができたので、より一層、加速的な研究が達成できた。従来、困難であった、筋血流の動態解析についても、Microspheres法とその応用実験によって十分なデータが取得でき、我々の予想以上に、Cast Immobilization後、短時間の間に血流が低下し、低灌流状態で維持されることSO-Fiberを多く含むSMで起きていることが分かった。血流変化と組織重量変化に大きなタイムラグが発生することが結果から分かり、それに相関する遺伝子群をDNAアレイ解析によってピックアップすることが可能となり、廃用性萎縮のトリガーと発展プロセス解明へのきっかけとなることが出来た。解剖学先行研究および26年度の研究結果から、筋萎縮の過程で特にSO-Fiberに欠かすことの出来ない酸素運搬能の主体である循環器系、血流変化が大きなトリガーとなることが推察されている。本研究の背景でもある、サルコペニアや寝たきりの筋萎縮も同様に血流と筋の萎縮の関係は、重要なテーマであると再考させられている。27年度においては、筋萎縮のトリガーを遺伝子レベルで同定させ、多目的・多因子的解析を利用し、各因子を決定する。筋原線維の変成とその拡大のプロセスをまとめ、筋萎縮の発現過程については、遺伝・生化学的なPathwayとして詳細に分析を続ける。血流とSMの萎縮にはとても大きな相関関係が生理的構造的にあると考えており、これを証明し、遺伝子レベルにおいてもそのPathwayを同定したいと考えている。

その後、血流コントロールにおける筋萎縮の抑制が可能であるか、実験を行い、ヒトへの応用的治療の可能性を検討する。すなわち、血流を改善することで、筋萎縮の誘導を抑制し、筋重量低下を抑制することが目的となる。また、筋萎縮の特性は若齢を老齢で異なることが知られており、この点についても実験動物による研究から、血流に着目をした分析法によって、検討を続けたいと考えている。基礎実験が予想以上に適切であったために、実験規模を縮小することができたことが影響した。しかしながら、一部の実験(老齢実験)に関しては、予想よりも実験開始時期が遅延したために、予算消化が満たされなかった。この分の研究試薬等に関しても次年度での使用と変更をした。今後も、研究ガイドラインに遵守し、動物愛護の観点からも必要最低限の動物実験として、採取された組織から有益なデータを抽出することに努める。一方で、詳細な遺伝子解析などには多大な費用が必要となるので、必要最低限の犠牲と最大限の解析費用として、27年度も研究を継続させていく。27年度の実験計画に変更は無いが、26年度に使用されなかった予算は、当初の予定通りに詳細な遺伝子解析に使用する。以上より、実験目標と目的に充足する研究を行い、最終年度としてのまとめに着手する予定である。