hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
分散ス-パコンピューテイング環境における信頼性のある大域オーダリングに関する研究

本研究は、分散システムにおいて、そのグループのアクテイブな構成要素すべてに対する順序正しいメッセージの伝達を保証する、信頼性のある大域的なオーダリングを可能にしようとするものである。ここでは、マルチキャスト環境において送信元が単一であるオーダリングに焦点を絞って研究を開始し、次のような重要な問題点を明らかにした。参加している全ワークステーションの状態とそれぞれのワークステーションで送児受信されるデータグラムを大域的に記録するにはメッセージの付加が必要となるため、実質的な遅延を招く。データグラムがグループの全構成要素に確実に受信されるように、送信元にデータグラム緩衝装置をおくことはシステムの容量の面で限界がある。また、独自のオーダリングをして処理しなければ不整合やデットロックを引き起こしてしまうようなアプリケーションもかなり存在する。ワークステーションやネットワークの故障からエラーを回復されることは困難である。なぜなら、それはグループの再構成を認めること、ロール・バック及び失われたデータグラムを回復することを要求するからである。以上のように、本研究は今後の研究の出発点となるものである。分散システムにおいて信頼性のある大域なオーダリングの方法を構築する際には、伝達システムに負荷や複雑さを加えずに特定のアプリケーション的の要求を満たすことができる方法の開発が不可欠であることがわかった。
マイクロマンプレ-タ応用によるマイクロサ-ジェリ支援システムの開発

・角膜マイクロサ-ジェリを目的としたレ-ザ-スキャニングシステムについて:角膜形状計測システムにおいては、従来HeーNeレ-ザ光を用いて測定を行ってきたが、その場合角膜表面でのレ-ザ光の散乱が弱いため、測定にエラ-を生じると言う問題点があった。本年度は臨床診断用の蛍光物質(フルオレセイン)と微弱な紫外光(非常に弱めたエキシマレ-ザ光)を用いることによって、エラ-を生じずに角膜の形状計測が可能となった。一方、角膜切除システムにおいては、従来熱影響なく角膜を切除するため、紫外域レ-ザのエキシマレ-ザを用いてきたが、大型でメンテナンスが容易でない、危険なガスを用いる必要があるという問題点があった。本年度は紫外域レ-ザとしてエキシマレ-ザに加え、臨床で幅広く用いられているYAGレ-ザの第4および第5高調波を用いて、角膜切除の基礎的な実験を行った。その結果、角膜の切除性能は特に問題無いことが判明した。・定位脳手術を目的とした。穿刺マニプレ-タについて:昨年度は、穿刺方向を自動的に指示し、穿刺可能な3自由度マニプレ-タが開発された。本年度はそのマニプレ-タに、更に穿刺位置を指定するxyzテ-ブルによる3自由度を付加した。これにより、当研究室において開発されてきた、CT等の断層像から臓器、血管などの3次元モデルを生成するCAS(Computer Aided Surgery)システムによって、穿刺位置および血管を損傷せずに安全に穿刺が行える最適穿刺方向を算出し、そのデ-タに従って自動的に穿刺を行うことが可能になった。穿刺位置の位置ぎめ精度は各軸0.05mm以下、穿刺方向の位置ぎめ精度は各軸0.1mm以下で、システム全体で0.5mm以下の位置ぎめ精度が得られた。画像処理システムに関しては、治療用に使用するレーザスキャナシステムのため、術野表面計測システムの開発を行った。術野表面計測システムは、He-Neレーザのスポット光を術野表面に投影し、それを2次元的に走査することにより術野表面の3次元形状を求める。本年度は、位置計測に関しCCDカメラ、PSD素子を採用し各々で計測を行ってみた。マイクロサージェリ応用を考慮し、40mm×40mmの術野を50点×50点で測定を行った結果、CCDカメラを用いた場合5分近くかかってしまうが、PSD素子を用いる場合1分少々で済むことが明らかになった。精度に関しては、奥行き方向に関してまだ十分でなく今後ビーム系を絞り精度良く行うなどによって改善を図る予定である。治療用レーザスキャナシステムは、術野計測システム中にハーフミラーを付加して、治療用のレーザ光を計測用レーザ光と同軸に出力する様にしている。治療時には、先の術野計測システムで得た術野表面の3次元レーザを基に画面で指示された位置の3次元位置、スキャナの走査データを計算して最終的に位置の確認を行った後、治療用レーザの照射ができるようにした。また、治療用レーザ光として検討したエキシマレーザの使用は保守管理が面倒なため、代わりにYAGレーザを高調波発生器で波長を短くして使用すること、水分子の吸収波長(2μm)を持つEr:YAGレーザを使用することを次年度以降検討する。マイクロマニプレータとしては2種類の試作機の設計を行った。一つは、脳神経外科の分野で、CTスキャナの測定データと組み合わせることにより患部攻撃の位置に、禁忌領域を避けて穿刺できるようになるジンバル構造をした装置である。

もう一つは、手先アタッチメントを交換することで洗浄、注水、組織の移動、切削等を行うことのできる他自由度の関節型マイクロマニプレータである。1.穿刺マイクロマニプレ-タに関しては、先端部における位置決め精度が0.1mm以下であることを精度評価実験により確認した。これは脳外科手術における穿刺として十分な精度と考えられる。更に本マニプレ-タの動作制御に関して、アクリルモデルによるX線CT断層像を用いて評価を行った結果、3次元再構成画像をもとに、大血管等の穿刺禁忌領域を避けた安全かつ侵襲の少ない穿刺方向を算出し、断層像の撮影スライス間隔程度の精度で目標位置へ穿刺カテ-テルを誘導可能であった。2.画像情報入力システムに関しては、レ-ザスポット径を0.1mmに絞り光学系をレ-ル上に組むことで系の高剛性化を図り、測定精度の向上を図った。また、CCD素子の電荷蓄積時間を利用した光切断法により、20倍程度の計測の高速化を実現した。更にス-パインポ-ザを用いて計測結果と実写画面を合成し、計測箇所を合成画面上で3次元的に容易に指示可能なソフトウェアを開発し、手術の際の操作性を向上した。3.先端部アタッチメントに関しては、穿刺カテ-テル内部に挿入し、吸光特性により浸出液の成分を判定する光ファイバシステムを開発した。4.医用レ-ザに関しては、Er:YAGレ-ザによる切除システムの熱影響が大きいことを考慮し、エキシマレ-ザを用いた切除システムの設計、試作を行い、動物角膜を用いた切除実験を行った。角膜の鋭利かつ熱影響の無い切除条件としてのレ-ザ照射条件を明らかにすると共に、ガス媒質(KrF,ArF,XeC1)による違いも検討した。また照射パルス数による切除深さの制御性に関しても検討した。焦点位置でのビ-ムプロファイルを測定し、焦点距離の比較的長い150mm前後の単レンズを用いることにより焦点深度を上げ、切除面におけるエネルギ密度をほぼ一定に保つことが可能となり、エキシマレ-ザ1パルス当りの切除深さを均質化することが可能であった。・角膜マイクロサ-ジェリ-を目的としたレ-ザ-スキャニングシステムについて:角膜形状計測システムにおいては、従来HeーNeレ-ザ光を用いて測定を行ってきたが、その場合膜表面でのレ-ザ-光の散乱が弱いため、測定にエラ-を生じると言う問題点があった。本年度は臨床診断用の蛍光物質(フルオレセイン)と微弱な紫外光(非常に弱めたエキシマレ-ザ-光)を用いることによって、エラ-を生じずに角膜の形状計測が可能となった。一方、角膜切除システムにおいては、従来熱影響なく角膜を切除するため、紫外域レ-ザのエキシマレ-ザを用いてきたが、大型でメンテナンスが容易でない、危険なガスを用いる必要があるという問題点があった。本年度は紫外域レ-ザとしてエキシマレ-ザに加え、臨床で幅広く用いられているYAGレ-ザの第4および第5高調波を用いて、角膜切除の基礎的な実験を行った。その結果、角膜の切除性能は特に問題無いことが判明した。・定位脳手術を目的とした穿刺マニプレ-タについて:昨年度は、穿刺方向を自動的に指示し、穿刺可能な3自由度マニプレ-タが開発された。本年度はそのマニプレ-タに、更に穿刺位置を指定するxyzテ-ブルによる3自由度を付加した。これにより、当研究室において開発されてきた、CT等の断層像から臓器、血管などの3次元モデルを生成するCAS(Computer Aided Surgery)システムによって、穿刺位置および血管を損傷せずに安全に穿刺が行える最適穿刺方向を算出し、そのデ-タに従って自動的に穿刺を行うことが可能になった。
大腸癌肝転移におけるFas/Fasリガンドシステムの役割

門脈より肝実質に侵入した大腸癌細胞が転移巣を形成するには、何らかの方法で肝細胞を破壊し、増殖の場を獲得する必要があると考えられる。しかし、大腸癌が肝細胞を破壊し、肝実質に生着する機序は明らかでない。我々は大腸癌の肝転移巣が原発巣や正常組織に比較してFasリガンドを強く発現することおよび大腸癌細胞が発現するFasリガンドがFas抗原陽性細胞(JURAKAT T細胞)のアポトーシスを惹起することを明らかにした。一方、肝細胞はFas抗原を発現し、Fasリガンドによりアポトーシスを起こす事が報告されている。本研究ではFasリガンドを発現する癌細胞が肝細胞のアポトーシスを惹起するか否かを検討し、大腸癌肝転移の成立におけるFas/Fasリガンドシステムの役割を明らかにした。すなわち、ヒト大腸癌、特に、大腸癌の肝転移組織ではFasリガンドを強く発現することが明らかにした。また、co-culture実験によりFas抗原陽性T細胞が大腸癌細胞のFasリガンドによりアポトーシスを起こすことを示した。一方、肝細胞はFas抗原を発現し、Fasリガンドに対して感受性を持つことが知られている。そのため、Fasリガンドの発現は、大腸癌の転移標的臓器である肝細胞のアポトーシスを起こし、大腸癌細胞の生着と転移に重要な役割を果たしていると考えられる。本研究により大腸癌の肝転移巣におけるFasリガンドの発現により肝細胞のアポトーシスの活性化が起こり、その結果、大腸癌細胞の肝実質への生着と増殖が促進されることが示された。1. Fasリガンド発現大腸癌細胞(MCA38-FasL)の肝転移能の検討:C57BL/6マウス由来大腸癌細胞であるMACA38細胞株にFasリガンド遺伝子を導入して作製したFasリガンド発現細胞(MACA38-FasL)を同系のマウスの門脈に静脈注射した。コントロールには、MCA38-MockおよびMCA38親株を用い、肝転移形成を肝重量の測定により判定した。これら3種の大腸癌細胞株はin vitroにおいて増殖能に差を認めず、Fasリガンド遺伝子の発現によりin vitorにおける細胞の増殖は影響を受けないことが明らかとなった。これらの細胞株10^6個をC57BL/Cマウスの門脈に注射し、2週目後に解剖すると、MCA38親株やMCA38-Mockでは明らかな肝転移の形成が見られず、マウスの肝重量にも増加は見られなかった。これに対し、Fasリガンドを発現するMCA38-FasLを門脈に静注したマウスでは肝臓全体に大きな転移巣を形成し、転移巣のため肝重量は有意に増加した。また、細胞の数を10^5個に減らし、5週目後に解剖した結果でもMCA38-FasL門脈静注群では転移巣のため肝重量は有意に増加した。2.肝転移巣における肝細胞アポトーシスの検討:肝細胞のアポトーシスがFasリガンド発現大腸癌細胞によりin vivoで起こりうるか否かを明らかにするため、10^6個のMCA38-FasLをC57BL/6マウスの門脈に注射し、その後7日間連日肝を摘出、TUNEL染色法で肝細胞のアポトーシスを組織学的に検出した。その結果、MCA38-FasLの微小肝転移巣に隣接する肝実質細胞がTUNEL染色で陽性となった。すなわち、Fasリガンドを発現するMCA38-FasLは肝実質細胞のアポトーシスをin vivoで惹起することが明らかとなった。
月経前症候群のある女性のQOL向上を目指した呼吸法の有用性

月経前症候群(PMS)は,多くの女性が経験し女性のQOLを低下させる。本研究はPMS女性に対する呼吸法の効果を明らかにするためにPMS女性60人を対象に実験を行った。その結果,呼吸法後に副交感神経の指標であるHFは有意に増加し,唾液コルチゾールと気分調査票得点も有意な変化がみられた(p<0.05)。次に症状が激しい14人を対象に呼吸法を約1か月間実施してもらった。介入後に,HFは有意に増加し(p<0.05),主観的には,「頭がすっきりした」「イライラが解消した」「痛みが軽減した」など症状の緩和がみられた。以上から呼吸法は,リラックス効果およびPMS症状を緩和することが示唆された。1.目的;月経前症候群(premenstrual syndrome:以下PMSとする)の女性は、症状が出やすい黄体期に自律神経系の交感神経活動が亢進していることが知られている。リラクセーションを誘発する呼吸法(以下、呼吸法とする)は副交感神経活動を優位にするといわれており、PMSの症状の緩和も可能ではないかと考えた。そこで、本研究は呼吸法によるPMSの症状緩和の効果を生理心理学的な評価から明らかにすることを目的に行った。平成22年度は、心拍変動の解析による評価から呼吸法の効果を検討した。2.方法;対象者は本研究への同意が得られた2030歳代の女性20人であった。これらの女性は、PMSの自覚のある者、婦人科疾患を含めた疾患がない者、常用薬を服用していない者、非喫煙者であった。また、対象者の基礎体温表から、月経周期が規則的であること、基礎体温が2相性を示すことを確認した。呼吸法は長息呼吸とし、座位で10分間行う方法とした。対象者は呼吸法の説明を受けたのち、約1か月間自宅で練習を行った。呼吸法実施前の安静後、心電図の電極を装着し測定の準備を行った。その後、最初に閉眼安静で5分間の心電図測定を行い(前安静)、次に呼吸法を10分間行い、最後に閉眼安静で5分間の心電図測定を行った(後安静)。3.結果と考察;前安静と後安静を比較した結果、副交感神経活動の指標であるHF(high-frequency)が有意に増加し、交感・副交感神経活動のバランス指標であるLF(low-frequency)/HFには変化がみられず、副交感神経活動が優位な状態に保たれた。今回の結果から、呼吸法はPMSの女性の自律神経系に働きかけ、副交感神経活動を優位にすることが示された。今後は、呼吸法の効果を複数の測定指標から検討し、PMSの症状緩和の効果を検証していく予定である。本研究は月経前症候群(premenstrual syndrome; PMS)の女性に対するリラクセーションを誘発する呼吸法(以下、呼吸法とする)の効果を生理学・心理学的な指標から明らかにすることを目的に検討した。2038歳のPMSの女性(呼吸群20人、対照群20人)を対象に、呼吸法のリラクセーション効果を測定した。測定項目は、心電図の解析による心拍変動(HF、LF/HF)、唾液コルチゾール、気分調査票(Mood Inventory; MOOD)で、時期は各対象者の黄体期に行った。呼吸群は測定に先行し、1月経周期の期間(約1か月間)の呼吸法の練習期間を設けた。測定の手順は、最初に唾液採取とMOODの回答を求め、続いて10分間の測定前安静の後、心電図を5分間計測した。この後、呼吸群は呼吸法を、対照群は平常呼吸を10分間実施し、次いで両群とも心電図を5分間計測し、MOODの回答、唾液採取を行った。その結果、呼吸群は呼吸法実施後に、心拍変動のHFが有意に増加し(p<0.01)、唾液コルチゾールは有意に低下した(p<0.05)。MOODの「緊張と興奮」「爽快感」「疲労感」「抑うつ感」「不安感」のすべての項目で有意な変化がみられ(p<0.01)、特に「爽快感」は、対照群に比して呼吸群で有意な増加を示した(p<0.05)。つまり、PMSの女性が呼吸法を行った結果、副交感神経活動の指標であるHFが有意に増加しリラックスした状態となった。さらにストレスの内分泌的な指標である唾液コルチゾールも有意に低下し、MOODの各項冒も有意に変化し、気分状態が改善されたことが示された。

従来の研究ではPMSの女性に対する呼吸法のリラクセーション効果は明らかでなかったが、今回の結果からPMSの女性に対しても、呼吸法は副交感神経活動を有意に増加させるリラクセーション効果があることが示された。1.目的:月経前症候群(PMS)の女性は黄体期の交感神経活動が亢進していることが知られている。平成23年度までの実験結果から、PMS女性の黄体期においても呼吸法は副交感神経活動を有意に増加させる即時的なリラクセーション効果があることが明らかとなった。そこで平成24年度は、呼吸法の日常生活での継続的な実施による長期的なリラクセーション効果およびPMS症状緩和効果を検討した。2.方法:対象者は2030歳代の女性20人のうちPMSの症状が顕著な14人とした。呼吸法は閉眼座位で10分間行う方法とし、対象者には自作のパンフレットで説明した後、1月経周期の間(約1か月間)1日1回程度の実践を依頼した。測定項目は心電図の解析による心拍変動、唾液コルチゾール、月経随伴症状(Menstrual Distress Questionnaire;MDQ)、呼吸法の感想であった。測定は呼吸法の説明前(介入前)と1月経周期後(介入後)に行い、時期は各人の黄体期とした。3.結果と考察:対象者の黄体期のMDQ得点は35.6±22.28点であった。介入前と介入後を比較した結果、副交感神経活動の指標であるHF (The high-frequency)は、介入前724.6ms2に比べ、介入後は1198.9ms2と有意な上昇が見られ(P < 0.05)、約1か月間の呼吸法の実施により副交感神経活動が活発になったことが示された。唾液コルチゾール、MDQ得点は介入前後で有意な差は見られなかった。感想を分析した結果、呼吸法を行って頭がすっきりした、イライラが解消した、痛みが軽減したなどが症状緩和に関する記載が多くみられた。4:結論:日常生活の中での継続的な呼吸法の実践は、PMS女性の黄体期における副交感神経活動を亢進させリラクセーション効果をもたらすとともに、PMSの一部の症状を緩和されることが示唆された。平成23年度に計画した実験は概ね順調に進んでいる。実験から得られたデータは、現在分析中であり、今後、多面的に分析し検討する予定である。24年度が最終年度であるため、記入しない。(1)平成23年度までに得られた結果をまとめ、学会等で報告する。(2)平成23年度までの結果から、PMSの女性に対する呼吸法のリラクセーション効果は明らかになった。そこで、平成24年度は、呼吸法をより簡便にかつ効果的に日常生活で用いることができるように、呼吸法を説明するリーフレットを作成し評価する。(3)呼吸法の効果を簡便で瞬時に判定することができれば、呼吸法を行う際の動機付けともなる。そこで、日常生活において、呼吸法の生理学的効果を簡便に翻定する方法の1つである唾液アミラーゼ測定キットを用い、リラクセーションの効果測定の有用性を検討する。
枯草菌のGABA代謝に関与する酵素の構造と機能

His-tagを付与したコハク酸セミアルデヒド脱水素酵素をNi-NTAをもちいたカラムクロマトグラフィーで精製した。GABAアミノ基転移酵素の立体構造を酸性と中性の条件で決定した。GabRタンパク質の結晶化に成功し、2.2Å分解能のネイティブデータを収集した。Hg誘導体を用いた重原子同形置換法により位相の決定に成功した。現在、3次元モデルの構築中である。枯草菌では、GABAを唯一の窒素源として利用できることや、GABA透過酵素についての詳細が研究されているが、GABA代謝系を担う他のタンパク質についてはそれほど研究が進んでいない。そのGABA代謝を担うのが、GABAアミノ基転移酵素(GABA-AT)とコハク酸セミアルデヒド脱水素酵素(SS-DH)である。更に、それら2種の酵素は、培地中のGABAで発現誘導されるオペロンにコードされており、オペロンの上流にコードされているGabRが、そのオペロンの転写制御因子として働いている。本研究では上に挙げたオペロン上で隣接する3つのタンパク質の立体構造を決定し、生化学的、分光学的研究の結果と総合して、原子レベルでの構造・機能解析を行うことを目的としている。研究初年度である本年度では、C-末端にHis-tagの付いているGabRの結晶化条件の検索を行った。しかし、以前に行った4.0Å分解能以上のデータを得ることはできなかった。そのため、トロンビン処理でHis-tag部分を切ることのできる配列にしたプラスミドを作製し、精製することに成功した。今後は、His-tagの付いているGabRとトロンビン処理しHis-tagの除かれたGabRの結晶化条件の検索を行っていく。また、GABA-ATおよびSS-DHのクローニング、大量発現系の構築、タンパク質の精製も行うことができた。来年度は、これらの精製タンパク質を用いて、結晶化条件を検索していく。そのGABA代謝を担うのが、GABAアミノ基転移酵素とコハク酸セミアルデヒド脱水素酵素である。本研究では上に挙げたオペロン上で隣接する三つのタンパク質の立体構造を決定し、生化学的、分光学的研究の結果と総合して、原子レベルでの構造・機能解析を行うことを目的としている。研究開始から2年目の本年度は、トロンビン処理でHis-tagを除いたGabR、およびN末端にHis-tagの付いたGabRの精製に成功し、それぞれ結晶化することができた。高エネルギー加速器研究機構の放射光施設(PF、PF-AR)の利用により、3.0A分解能のフルデータセットを得ることに成功した。現在は、重原子誘導体を用いた同形置換法による位相の決定を目指すとともに、更なる結晶化条件の最適化を行う。コハク酸セミアルデヒド脱水素酵素のクローニングは完了しており、発現条件の検討、精製を経て結晶化条件の検索を行う予定である。GABAアミノ基転移酵素については、酸性条件での結晶化に成功した。PFおよびPF-ARでのX線回折強度データ測定により1.9A分解能のデータを得ることができた。分子置換法により位相の決定を行い、立体構造を決定し、精密化も完了した。今後は、生体内に近い中性条件での結晶化条件を検索する。研究最終年度の本年度では、C末端にHis-tagの付いたGabR、およびN末端にHis-tagの付いたGabRの結晶化の最適化を行い、高エネルギー加速器研究機構の放射光施設(PF、およびPF-AR)を用いたX線回折強度データ測定により、それぞれ2.4、および2.2A分解能のデータを得ることに成功した。さらに最近、Hg誘導体を用いた重原子同形置換法により、C末端にHis-tagの付いたGabRの位相の決定に成功した。現在は、この決定した位相を基にした電子密度をもちいてモデルの構築を行っている。コハク酸セミアルデヒドについては、大腸菌を用いた大量発現を行い、カラムクロマトグラフィーによる精製を終了している。

この精製サンプルを用いて結晶化条件のスクリーニングを行っているが、未だ有望な結晶を得ることができていない。そのためサンプルの精製度の向上や結晶化時の温度の最適化を含めた条件の検討を行う。GABAアミノ基転移酵素については、昨年度に酸性の結晶化条件での立体構造を決定することに成功したのに引き続き、中性の結晶化条件での結晶化、データ測定、および立体構造の決定にも成功した。今後は、酸性、および中性での基質アナログ複合体の結晶化条件の検索を行い、GABAアミノ基転移酵素の反応メカニズムを明らかとする。
レチノイド関連核内受容体の化学制御剤の創製

遺伝子発現に関わる因子には、低分子化合物により活性化されてはじめて特異的応答遺伝子の発現を制御する核内受容体群が存在し、リガンド依存的に細胞の分化、増殖、形態形成、代謝、ホメオスタシスなどの重要な生理作用を厳密に制御している。近年、種々の核内受容体の機能が癌、骨粗鬆症、リューマチ、糖尿病、肥満など様々な疾患の発症と治療に関与していることが明らかに成りつつある。本研究では細胞分化・増殖の特異的調節因子として知られるレチノイドの受容体RAR、RXRおよびそれに関連した核内受容体の特異的リガンド分子の創製を行った。レチノイドと関連し、睡眠・脳機能に重要な核内受容体RORの機能を解明すべく、そのリガンド候補として報告されたメラトニンをリード化合物として誘導体の創製を行った。メラトニンのインドール骨格にtrifluoromethyl基などの置換基を導入した結果、これらの誘導体は、メラトニン自身も含めてRORのリガンドとしては機能しなかった。本誘導体を用いて、REM及びNREM睡眠に対する効果を検討したところ、REM睡眠に対して促進効果を発揮することをみいだした。更に、レチノイドの新たな構造を目指して、ピリミジンなどの含窒素複素環を有する芳香族分子を設計し、その合成を行った。これらの生物活性については検討中である。本研究では細胞分化・増殖の特異的調節因子として知られるレチノイドの受容体RAR, RXRおよびそれに関連した核内受容体の特異的リガンド分子の創製を行った。本年度は、RXRとヘテロダイマーを形成するビタミンDの核内受容体リガンドの探索を行い、ホウ素クラスターであるカルボランを含む化合物にヒト白血病細胞HL-60の分化誘導活性を見いだした。その詳細な構造活性相関を明らかとするために、鍵中間体である有機リン化合物の大量合成を行った。本リン化合物を用いた効率的なビタミンD誘導体の合成を検討中である。
ユビキチンシステムによる細胞周期制御

ユビキチン結合酵素(E2)の多様性とそれにより発現される特異的なユビキチン経路が種々の細胞機能制御に極めて重要であると考えられるが、これまでE2分子種の系統的探索はわづかに出芽酵母S.cerevisiaeにおいて、それもPCR増幅を主な方法として行われたものと、それの他生物種に於けるhomologue探索で得られたものが主である。そこでここでは分裂酵母S.pombeからその本来の機能を指標に検索を行った。大腸菌発現vectorを用いて作成したLibrary約20000個から、菌抽出液中で標識ユビキチン受容能を指標に約20のE2cDNAを分離した。その内の一つubcP4は細胞周期G2/M期での阻害が起こり、MPF活性を阻害したときと酷似した表現型を示すことが分かった。この遺伝子産物を枯渇させた細胞抽出液中ではMPF活性が低く、これに大腸菌で発現させたubcP4蛋白質を添加するとMPF活性が速やかに上昇したことから、cdc25やwee1遺伝子産物による制御とは別に、より直接的にMPF活性を抑制している蛋白質が存在し、ここで同定したものはその分解を担うユビキチン系である可能性が非常に高いと思われ、ubcP4のユビキチン化標的蛋白質がMPF inhibitorではないかと思わせる結果が蓄積してきている。G2期の制御に新たな局面を開く可能性を秘めたものとして今後のその解析が期待される。昨今、essentialな細胞機能に関わるE2遺伝子、蛋白質がいくつか同定されてきているが、本来ユビキチン系が担っている多様な細胞機能を考えると、今回は扱いやすさの点からS.pombeを用いたが、培養細胞をも含めて、更に機能特異的なE2を蛋白、遺伝子の両方から系統的に同定、分離することが必要であると思われる。
乳幼児期における双子言葉(宇宙語)現象の発生予防とファミリーケアの研究

双生児は単体時と比較すると乳幼児期に言語発達が遅れることが知られており、また宇宙語(Twin Language)と呼ばれる双生児ペア内でのみ通じる独自の言語は世界各国で報告され、双生児の約50%に出現するといわれている。本研究では、言語学的に学術上の貴重な現象である宇宙語現象の発生機序を解明することにより、双子出産家庭における言語発達の遅れを予防するための育児指導指針を確立し、これら家族のファミリーケアの向上に資することを目的としている。本研究では、かねてより協力を得ているツインマザースクラブの会員や双子の母親の互助組織の会員を対象に自宅訪問によるインタビュー調査し、また双子の親の協力を得て宇宙語現象発生時をビデオ・テープレコーダーにより記録し音声言語学的に分析を実施した。06歳の双生児家庭6組において、音の出ないおもちゃ(パズル、キャラクターを探す絵本、シール貼り絵本、スポンジ立体パズル)を使用し、(1)双生児とAと親、(2)双生児Bと親、(3)双生児A・Bと親という3場面をICレコーダー録音及びビテオ撮影を行った。1発話は話者交代および500msecのポーズにより定義し、平均発話長は自立語の平均発話長のみを計算した。音声の分析にはArcadia AcousticCore8を使用した。各家庭において、2者間(双生児AもくはB)での遊び場面と比較すると、3者間では母親の発話割合は約10%減少し、双生児それぞれの発話回数は半減した。また子が親の親が子の言葉を繰り返す回数も、2者間に対して3者間では減少する傾向が見られた。録音時に行ったアンケート調査結果では、1日のうち双生児が大人と1対1で会話する時間はほぼ無く、双生児同士か、親を交えての3者で過ごすことがほとんどであった。言語獲得期である乳幼児期において、母親からのinput情報が多ければ、その後の子の言語獲得や言語認知が早くなることが知られているが、双生児の場合は親のinputや言葉の繰り返しが量的に少ないことで、言語発達に影響を受けると考えられる。また子自身も発話できる回数が限られていることよりoutputの減少による言語発達への影響も示唆された。全国で最大規模の双子の母親互助組織であるツインマザースクラブの会員2,733名を対象に自記式質問紙調査を実施した。双生児の親密性と下位領域である「所有物」、「行動」、「情緒」、「共同参加」、「共同防衛」の5領域の得点と双子言葉「Twin Language」との関係について検討した。結果:親密性得点については、一卵性男ペアと一卵性女ペアは、二卵性男ペアや二卵性男女ペアに比較して、また一卵性女ペアは、二卵性女ペアに比較して親密性得点が有意に高かった。各領域の得点を分析した結果、「所有物」、「共同防衛」の得点にかんしては、グループ間の平均値に有意差は見られなかった。有意な差異が見られたのは、「行動」、「情緒」「共同参加」の項目であった。(1)「行動」:二卵性女ペア、一卵性男ペア、一卵性女ペアは、二卵性男女ペア、二卵性男ペアに比較して有意に行動面での結び付きが強かった。(2)「情緒」:一卵性男ペア、一卵性女ペアは、二卵性男女ペア、二卵性男ペアと比較して有意に情緒面での結び付きが強かった。(3)「共同参加」:一卵性男ペア、一卵性女ペアは、二卵性男女ペアと比較して、また一卵性男ペアは、二卵性男ペアと比較して有意に共同参加の意識が強かった。双子言葉Twin Languageと双生児の親密性に関して、双子の年齢、性別、卵性、社会的環境(兄弟、姉妹、祖父母の有無、保育園・幼稚園への通園)によって統計学的に補正を行い、ロジスティック回帰分析を行った結果、情緒的な結びっきが強い双子ペアはそうでないペアと比較して2.795倍(95%CI:1.179-6.623,p<0.05)双子言葉Twin Languageをよく話していることが示された。

各家庭において、2者間(双生児AもくはB)での遊び場面と比較すると、3者間では母親の発話割合は約10%減少し、双生児それぞれの発話回数は半減した。また子が親の親が子の言葉を繰り返す回数も、2者間に対して3者間では減少する傾向が見られた。録音時に行ったアンケート調査結果では、1日のうち双生児が大人と1対1で会話する時間はほぼ無く、双生児同士か、親を交えての3者で過ごすことがほとんどであった。言語獲得期である乳幼児期において、母親からのinput情報が多ければ、その後の子の言語獲得や言語認知が早くなることが知られているが、双生児の場合は親のinputや言葉の繰り返しが量的に少ないことで、言語発達に影響を受けると考えられる。また子自身も発話できる回数が限られていることよりoutputの減少による言語発達への影響も示唆された。
赤外大電力用可撓性導波路の製作

波長10.6μmの大出力炭酸ガスレーザ光を可撓性をもって伝送することを目的とし、誘電体内装中空導波路の製作とそれに関連する研究を行なった。研究成果の概要は以下のようにまとめられる。1.高周波スパッタリング法による誘電体内装導波路の製作高周波スパッタリングを用い、誘電体としてゲルマニウム薄膜を形成し、その後に金属めっきを行ない、母材パイプをエッチング除去し内装導波路を製作する場合、低損失化を妨げる大きな原因の一つは、電気めっきによって発生する応力による導波路変形にあることが分った。高応力めっきの方が低応力めっきよりも導波路の低損失化に有利であることが分った。2.ゲルマニウムめっきによる内装導波路の製作ゲルマニウムめっき法を確立し、長さ1m,内径4mmのゲルマニウム内装導波路を製作した。出力40ワットのレーザ光を導波路に入射させ、導波路の長さ方向について温度分布を測定したが、内装導波路の場合には金属パイプ,ガラスパイプ等に比較して温度上昇も少なく、透過時性も良好な特性を持つ事が確認された。3.中空金属導波路の電力容量大きな光電力を中空導波路で伝送する場合、その容量は導波路に於ける温度上昇で制限される。誘電体内装導波路,金属中空導波路などの電力容量を明らかにした。また、温度上昇に関する従来の理論の見直しを行ない、実験事実を説明できる理論の構築を行なった。4.電磁界理論導波路がある基準系から摂動を受けた場合に、伝送波の位相定数をベクトル的に正しく得る一服手法を開発し、これを誘電体伝送路,中空導波路に応用した。炭酸ガスレーザは発振効率が高いので大きな出力が得られ、また水に対する吸収がきわめて良いので、大出力レーザ加工機用光源、あるいはレーザメス用光源に適している。しかしながら、光源からの光を効率よく、しかも可撓性をもって導く伝送路の開発は充分ではない。筆者等は、赤外電力伝送用導波路として誘電体内装金属中空導波路を提案し、一連の解析を行なってきた。本研究は、内装導波路の特性許価と製作を行なったもので、その実績は以下のようにまとめられる。1.誘電体内装金属中空導波路の電力容量中空導波路の電力容量を支配する要因として考えられるものは、空気の絶縁破壊と導波路の熱上昇である。CW光に対して前者によって制限される電力容量は後者のものよりもはるかに大きい。そこで、導波路の温度上昇に着目して導波路の最大電力容量を理論的に明らかにした。その結果、内装導波路は通常の金属導波路に比較して、約2桁程度大きな電力容量をもつことが明らかになった。2.内装導波路の製作大きな電力を伝送することを目的とし、最初に比較的太い内装導波路を製作した。これには、筆者等が新たに開発したゲルマニウムめっき法を用い、製作工程を従来に比較してはるかに簡略化した。3.内装導波路の伝送特性の測定50W出力の炭酸ガスレーザ装置を用い、管径4mm、長さ1mの導波路の損失特性、ならびに導波路に沿う温度分布を測定した。内装導波路は接続損失が少なく長尺化できること、金属導波路に比較して導波路の熱上昇が少ないことが確かめられた。4.高効率結合器の設計レーザ光源と導波路とのビームの広範囲な整合を企る為、レンズ系の設計を行なった。また、実験によりその有効性も確かめられた。

大出力の炭酸ガスレーザー光(波長10.6μm)を伝送することを目的とし、中空導波路および誘電体内装金属中空導波路の試作したが、次のような事が明らかになった。1.高周波スパッタリング法による誘電体内装導波路の製作高周波スパッタリングを用いて誘電体(ゲルマニウム)の形成し、その後に金属めっきを行ない、母材となっているパイプをエッチング除去し内装導波路を製作する場合、低損失化を妨げる大きな原因は、電気めっきによって発生する応力であることが分った。めっき応力について種々検討した結果、高応力めっき洛が低応力めっきよりも導波路の低損失化にとって有益である事が判明した。2.ゲルマニウムめっきによる内装導波路の製作プロピレングリコール中の7vol.%四塩化ゲルマニウム溶液を洛とし,アノードに白金線を用いることで、やや内径の大きな金属パイプ内にゲルマニウムを内装する技術を確立し、長さ1m、内径4mmのゲルマニウム内装導波路を得た。伝送特性を測定したところ、通常の金属パイプ,ガラスパイプ等に比較してはるかに良い特性をもつ事が分った。また、出力の大きなレーザ光(40W)を導波路に入射させ、導波路の長さ方向について温度分布を測定したが、内装導波路の場合には温度上昇も少ない事が確認された。3.中空導波路の電力容量大きな光電力を中空導波路で伝送する場合、その容量は導波路に於ける温度上昇で制限される。温度上昇に関する従来の理論の見直しを行ない、実験事実を説明できるような理論の構築を行なった。
工学的手法による非対称性姿勢変形(胸郭変形）の解明

本研究は体重接触支持面の不均衡差と胸郭変形との関連を解明すると共にその評価と治療・予防プログラムを開発する事を目的とした。健常成人の胸郭をGoldsmithらが考案したMeasurement of the depth/width ratio of the chest(俗称:Pin-man-graph)にて立位・仰臥位(立位直後と10分後)に姿勢変化を計測した。姿勢変化での計測結果では平均値では有意差があった。姿勢によって胸郭偏平化には自重応力による影響がある事が解明された。今回の結果により、この計測法は重症心身障害児・者の姿勢変形及び胸郭変形を客観的に示す有用な手段である。本研究の初年度では健常人で計測を実施し、予備実験として体重接触支持面の不均衡差及び脊柱変形と胸郭変形との関連性を体圧分布装置と胸郭形状を数値化して相関性を考察する。またその評価方法の妥当性も検討し、安全性と信頼性を高めていく。本年5月に採択を頂き、本学倫理委員会に研究承認申請を提出し、8月に採択を得た。予備実験対象者として、本研究の目的、手順などを説明した上で同意を得られた健常人40名(過去に脊椎・胸郭に整形外科的な既往歴のない男女平均年齢22±3歳)を目盛付支柱計測を用いて立位時並びに仰臥位10分後の胸郭をGoldsmithらが考案した胸郭の評価としてMeasurement of the depth/width ratio of the chest(俗称:Pin-man graph)にて計測した。その結果、立位時時と仰臥位時での相関にばらつきが多く見られ、評価方法の妥当性と安全性を再検討した結果。立位時と仰臥位10分後の測定時の姿勢安定性の設定調整を再構築し、新たに対象者を募り、同意を得られた健常人70名の学生に再評価を行った結果、立位時と仰臥位時(立位から直後と10分後)での計測結果では平均値では有意差があった。対象群から無作為に選出した30名の仰臥位での体重支持面の不均衡差を(株)ニッタHUGEーMAT体圧分布測定装置にて計測した。仰臥位時での荷重値差(左右差)の計測結果では平均値では有意差がなかった。しかし、平均値が径時的に僅かに減少している事から健常者では体重接触支持面の不均衡差が軽減された。立位時と仰臥位時(立位から直後と10分後)でのPin man graphでの計測結果では平均値では有意差があった事は胸郭偏平化には自重応力による影響があると考えられる。また、仰臥位での荷重値差減少は、健常者では体重接触支持面の不均衡差(左右差)を時間経過と共に修正できるからと考えられる。平成25年度の状況報告より研究成果を本年度の工学系学会、整形外科学会への報告を申請したが採択とならず修正中である。その為本年度には重症心身障害児・者への計測には移行できず研究が遅れている。本年度秋季の工学系学会への基礎研究論文発表の採択を取り発表し、同時に重症心身障害児施設並びに在宅重症心身障害児への計測を実施に向けて本学の倫理委員会の承認申請を行う。本研究の対象となる重症心身障害児施設並びに在宅重症心身障害児・者への研究承諾の認可を得た時点で計測を開始する。本実験の詳細は以下に記す。【本実験】対象者は、本研究の目的、手順などを説明した上で同意を得られた非対称性変形の有る重症心身障害児20名とする。【計測者】計測手技を十分に取得した医療専門職(PT,OT、Nrs等)3名【計測手順1】1被測定者に胸郭変形測定器を用いて、胸骨剣状突起レベルの胸郭の厚さと幅を仰臥位にて、4回計測する。胸郭の厚さと幅の比率(胸郭の厚さ÷幅)を算出する。重症心身障害児は刺激によって、過剰な姿勢筋緊張を引き起こす場合があるので、緊張が落ち着いた時点で計測する。更に胸郭変形による呼吸状態を把握する為に血中酸素飽和度(SPO2)をパルスオキシメーターで計測する。2同様に体重支持面の不均衡差を(株)ニッタHUGEーMAT体圧分布測定装置にて計測する。【計測手順2】1計測1終了後、体重支持面の不均衡差に対して、均等な支持面を設置する為に接地不足面下に物理的介入を施す。30分経過後(体重支持面の不均衡差を是正し、均等に体重支持されたと考えられる)に物理的介入を解除して、再び支持面の不均衡差、胸郭計測、血中酸素飽和度(SPO2)を計測する。計測結果に関しては対象者の健康状態に配慮し、本年度を超える場合がある可能性があるが、データ採収が完了した際には次年度春季の重症心身障害児・者関連の学会に論文発表の準備を行う予定である。昨年度の状況報告より基礎研究成果を本年度の工学系学会、整形外科学会への報告を申請したが採択とならず修正中である。

対象者は、本研究の目的、手順などを説明した上で同意を得られた非対称性変形の有る重症心身障害児20名とする。体重支持面の不均衡差に対して、均等な支持面を設置する為に接地不足面下に物理的介入を施す。30分経過後(体重支持面の不均衡差を是正し、均等に体重支持されたと考えられる)に物理的介入を解除して、再び支持面の不均衡差、胸郭計測、血中酸素飽和度(SPO2)を計測する。本研究は体重接触支持面の不均衡差と胸郭変形との関連を解明すると共にその評価と治療・予防プログラムを開発に貢献するものと期待する。本研究の基礎研究論文発表の学会採択とならず再度採択に申請中である、また同時に重症心身障害児施設並びに在宅重症心身障害児への計測実施に向けての本学の倫理委員会への承認申請を行う必要があるが、同時に本研究の対象となる重症心身障害児施設並びに在宅重症心身障害児への研究承諾の認可を進めて折、その為計測に至らず遅延している。早急に承認を取り、学会発表並びに論文作成を進めたい。本研究の予備実験として、本研究の目的、手順などを説明した上で同意を得られた健常人40名(過去に脊椎・胸郭に整形外科的な既往歴の無い男女平均年齢22±3歳)を目盛付計測器を用いて立位時並びに仰臥位10分後の胸郭をGoldsmithらが考案した胸郭の評価法にて計測した。その結果立位時と仰臥位時(立位から直後と10分後)での計測結果では平均値では有意差があった。この基礎研究成果の報告が工学系学会、整形外科学会、褥瘡学会等の申請採尺が取れず修正中である。また同時に本研究の重症心身障害児・者への計測に移行できず研究が遅れている。学会への再申請を同時に進めながら、重症心身障害児施設並びに在宅重症心身障害児・者への計測実施に向けて本学の倫理委員会の承諾を得たが、対象となる重症心身障害児施設並びに在宅重症心身障害児・者への施設からの倫理研究承諾の認可が難航しており、研究対象とする対象数確保にも遅れ、計測が遅延している。従って対象施設も病院だけでなく特別支援学校等への拡大も視野に入れる予定である。本実験の詳細は以下に記載する。対象者は本研究の目的、手順などを説明した上で同意を得られた非対称性変形を有する重症心身障害児20名とする。体重支持面の不均衡差に対して、均等な支持面を設置する為に設置不側面下に物理的介入を施す。30分経過後(体重支持面の不均衡差を是正し、均等に体重支持されたと考えられる)に物理的介入を解除して、再び支持面の不均衡差(体圧分布計測装置を使用)、胸郭計測(専用計測装置使用)、血中酸素飽和度(パルスオキシオメータを使用)を計測する。本研究は体重支持面の不均衡差と胸郭変形との関連を解明すると共にその評価と治療・予防プログラム開発に貢献するものと期待する。また将来的には重症心身障害児のみならず、長期臥床高齢者の姿勢変形改善、褥瘡予防アプローチへの応用にも転換が可能である。本研究は体重接触支持面の不均衡差と胸郭変形との関連を解明すると共にその評価と治療・予防プログラムを開発する事を目的とした。健常成人の胸郭をGoldsmithらが考案したMeasurement of the depth/width ratio of the chest(俗称:Pin-man-graph)にて立位・仰臥位(立位直後と10分後)に姿勢変化を計測した。姿勢変化での計測結果では平均値では有意差があった。姿勢によって胸郭偏平化には自重応力による影響がある事が解明された。今回の結果により、この計測法は重症心身障害児・者の姿勢変形及び胸郭変形を客観的に示す有用な手段である。
リンパ動態の可視化-乳麋胸腹水、慢性リンパ浮腫における新たな診断と治療法の確立

(乳麋槽および胸管の内圧測定)細径カテーテルの先端に圧センサーを取り付ける試みであったが、既存のセンサーの小型化は容易ではなく、直接的な測定を断念した。細径カテーテルを中空として、手元操作部での圧から先端の圧を推測する方法へ転換することとした。現在も方法論を検討中である。(胸管および乳麋槽におけるリンパ逆流と弁機能の評価)静脈角合流部から胸管内への逆行性カテーテル挿入は弁構造の間を通過できる極細径のガイドワイヤーを要する。ブタにおいては鼠径リンパ節の中枢側からの穿刺にて順行性であれば胸管までのカテーテルの挿入は可能である。先端にコイル状に金属を巻き、かつ、インドシアニングリーンの色素粉末を加工したものを素材に練り込むことで、比較的浅い部位であれば超音波検査機および近赤外蛍光法により先端部の位置が確認できるカテーテルを作成することができた。本カテーテルは先端が非常に細くしなやかで追従性に優れ、これまでのカテーテルに比し蛇行した乳麋槽を上行するのが容易だった。しかし、圧測定や逆流評価を行う位置まで上行しうる確率は、未だ充分とは言えず、先端の形状や柔軟性、恒常性に更なる工夫を要すると考えられた。以上より、現段階では臨床応用できるレベルには満たず、今後も操作性や安全性に改善を要するが、ブタを用いた動物実験での使用には耐えうるリンパ管挿入用の先端マーカーつき細径カテーテルを作成し、基礎データの蓄積に着手できた。平成27年度はブタ3頭を用いて実験を行った。1.超音波診断装置によるブタ後肢リンパ管の走行確認:全身麻酔下仰臥位にて、ICG蛍光リンパ管造影法と色素法を用いてリンパ管の走行を確認し、末梢より細径ガイドワイヤーを挿入した。ブタでは皮下脂肪が少なく、USGで追随する際にカプラを使用したが、体毛のため表皮への密着が困難だった。硬度の高いエコー用ゼリーの大量使用で、比較的ガイドワイヤーの視認性が改善したが、X線透視装置を用いる方が容易にガイドワイヤーを確認できた。また、ガイドワイヤー通過後のリンパ管の内膜の評価として行ったHーE染色やMーT染色では明らかな損傷は認めなかった。内皮欠損を確認するために免疫染色が必要だが、抗体の生物学的特性の問題が発生し、試薬を検討中である。2.ブタリンパ管、乳び槽、胸管の造影検査:同じブタを用い、全身麻酔下仰臥位で直視下に腸骨リンパ節より近位のリンパ管へガイドワイヤーを挿入し、細径カテーテルを留置した。非イオン性水溶性造影剤を用いた描出で、乳糜槽が網目状に複雑な構造であることが判明した。動脈造影検査用ロードマップ作成を応用し、ガイドワイヤーの通過を試みたが、細径カテーテルが追従できたのは1頭のみにとどまり、胸管の分枝の描出は困難だった。胸管の直接穿刺による分枝の描出を試みる必要があると思われた。その他に予定していた項目は以下の状況である3.乳糜槽および胸管の内圧測定:圧センサー付きカテーテルを用いた乳糜槽および胸管内リンパ圧測定を予定していたが、本年度はカテーテルの入手が困難だった。使用物品を再検討すべきと思われた。4.胸管および乳び槽におけるリンパ逆流と弁機能の評価:ブタの静脈角から逆行性にリンパ管内へ直接、細径ガイドワイヤーを挿入する予定だったが、仰臥位では困難であり、体位変換などの準備を要することが判明した。細径ワイヤーは順調に試作を繰り返し、使用に耐えうる物ができた。市販の血管造影用細径カテーテルなどとの組み合わせでリンパ管の描出が可能であり、当初の計画として可能なこととさらなる工夫を要することが判別でき、次年度以降の計画の補正に有用だった。しかし動物実験設備が限られており、日程および費用の両面から頻回な実験が困難だった。ヒトに近いと言われるブタであっても、解剖学的な構造などの違いがあり、想定した準備物品では全行程を終えることが困難だった。前年度に予定していた項目1.乳糜槽および胸管の内圧測定:圧センサー付きカテーテルは存在するが、ブタの下肢リンパ管を通過する細径サイズへの加工が不可能なことが判明した。Dos Santos法など体表から直接、胸管を穿刺する方法や外科的に露出した胸管へカテーテルを挿入するなど、アプローチ方法の再検討が必要であることが判明した。2.胸管および乳び槽におけるリンパ逆流と弁機能の評価:当初はブタの静脈角から逆行性にリンパ管内へ直接、細径ガイドワイヤーを挿入する予定だった。しかし、マイクロカテーテルを胸管近位に配置して造影しても、おそらく弁が存在するであろう部位での造影剤逆流がある程度阻止される様子がわかった。静脈角直前に配しての造影では中等度以上の圧で造影剤を注入しないと、胸管から静脈内への流入もなく、予想より胸管の内圧が高いことが示唆された。今年度に予定していた項目1)細径ガイドワイヤーをブジーとして使用したリンパ管拡張術のための基礎実験および3)バルーン拡張術のための基礎実験:ワイヤーのサイズを大きくしながらの実験予定だったが、ブタ後肢のリンパ管は比較的壁が厚く、弾力性が不足していた。

最小径のガイドワイヤーは挿入可能だったが、近位側へ進める際に容易にワイヤーがリンパ管壁を突き抜けたり、途中先端以外の部位で亀裂を生じるなど、ヒトの動脈や静脈の様な可塑性に乏しかった。本来の直径以上の拡張は困難な組織であることが判明した。2)乳び胸治療のための基礎実験:昨年の実験結果から、より同部に近い腸骨リンパ節近位からのガイドワイヤー挿入を行ったが、同部から乳麋槽にいたるまでの経路も複雑で、予定した方向にガイドワイヤーが進まなかった。乳び胸モデルを作成する前に鼠径リンパ節から胸管まで確実にワイヤーを通過させる手段の検討を要する。ヒトに近いと言われるブタであっても、解剖学的組織学的な構造な違いがあり、想定した準備物品では不可能な実験内容もあったため。(前年度までに予定していた項目)乳麋槽および胸管の内圧測定:ガイドワイヤーを含め、ブタの下肢リンパ管を通過するサイズの圧センサー月カテーテルの開発が遅れているため、内圧測定困難な状況である。胸管および乳麋槽におけるリンパ逆流と弁機能の評価:これまでの実験で静脈側からリンパ管へワイヤーおよびマイクロカテーテルを通過させても逆流の確認をできるほどの圧力で造影剤を注入できない可能性、弁構造のために十分にカテーテルを挿入できない可能性がわかっている。そのため、リンパ管側から静脈角手前までカテーテルを挿入しての実験が必要だが、細径カテーテルの開発に困難を要している。同様に細径ガイドワイヤーをブジーとして使用したリンパ管拡張術のための基礎実験およびバルーン拡張術のための基礎実験、乳麋胸治療のための基礎実験もワイヤーの開発が困難であるところで頓座している。(今年度に予定していた項目)ガイドワイヤー穿刺挿入の練習用キットの考案:ブタの乳麋槽を想定したモデルを練習用キットとして考案する予定だったが、上記理由にて今年度の動物実験が見送りになり、乳麋槽の走行チェックや型どりができなかった。当初は市販の物より細径のガイドワイヤーを作成できたため、実験動物を用いてリンパ管や胸管の精査が可能と思われていたが、実際のブタリンパ管は想定よりもかなり細かった。そのため「細径ガイドワイヤー、細径カテーテル」ありきで想定したいずれの実験系も、著しく研究が遅れる原因となった。より細径かつ柔軟性に富んだガイドワイヤーを要し、作成を検討しているが、設計段階で材質や追従性の問題を解決できず、新たにブタを用いての実験を開始できない。(乳麋槽および胸管の内圧測定)細径カテーテルの先端に圧センサーを取り付ける試みであったが、既存のセンサーの小型化は容易ではなく、直接的な測定を断念した。細径カテーテルを中空として、手元操作部での圧から先端の圧を推測する方法へ転換することとした。現在も方法論を検討中である。(胸管および乳麋槽におけるリンパ逆流と弁機能の評価)静脈角合流部から胸管内への逆行性カテーテル挿入は弁構造の間を通過できる極細径のガイドワイヤーを要する。ブタにおいては鼠径リンパ節の中枢側からの穿刺にて順行性であれば胸管までのカテーテルの挿入は可能である。先端にコイル状に金属を巻き、かつ、インドシアニングリーンの色素粉末を加工したものを素材に練り込むことで、比較的浅い部位であれば超音波検査機および近赤外蛍光法により先端部の位置が確認できるカテーテルを作成することができた。本カテーテルは先端が非常に細くしなやかで追従性に優れ、これまでのカテーテルに比し蛇行した乳麋槽を上行するのが容易だった。しかし、圧測定や逆流評価を行う位置まで上行しうる確率は、未だ充分とは言えず、先端の形状や柔軟性、恒常性に更なる工夫を要すると考えられた。
アクティブエンハンサーを介した悪性脳腫瘍の治療抵抗性獲得機序のダイナミズム

脳腫瘍の中で最も予後の厳しい膠芽腫を難治性たらしめている要因の一つとして、唯一明確な効果が示されている化学療法薬(テモゾロミド)に対する耐性メカニズムの存在が挙げられる。近年膠芽腫のゲノム解析が進み、様々な知見が集積されつつあるものの、未だこの問題の解決には至っていない。本研究では、遺伝子の発現を調整するエピゲノム機構(特にアクティブエンハンサー)に着目し、化学療法抵抗性に寄与する異常メカニズムを見出し、これまでにないアプローチから新規治療法開発に繋げることを目指す。