hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
同期・非同期統合型次世代遠隔教育ネットワークの構築に関する研究 ―IPネットワーク上で実現する教育コンテンツ創生、蓄積、配信、共有、統合化システム―

また、本研究では、従来の「本」の概念を超えた個人のための電子教科書を開発すること、および学習者がネットワーク上で著者(講師)に質問をし、講師がそれに応えるというコミュニケーシヨン過程を通して、教科書の不備な点を指摘し、改善して、レベルアップするという新しい概念の電子教科書を開発することである.2年度にあたる本年度は、ほぼ計画どおりに研究が終了し、その結果を電子情報通信学会・教育工学研究会で発表した。本年度実施した研究開発成果は、次のとおりである。1)遠隔講義操作支援システムの開発書画カメラによる実物提示、PowerPointなどの静止画提示、ホワイトボードの利用、Web情報の提示など、遠隔講義では、マルチメディアを駆使して講義を行うことが効果的であることを先行研究で明らかにした。しかし、講義中の講師が機器操作を手動で行うのは大きな負担である。この問題を解決するために、講師が音声で利用する機器を指定すれば音声認識により自動的に機器選択ができる切り替え制御システムを開発した.2)ユーザ指向型電子教科書の開発XMLの機能をフルに活用し、学習者個人のニーズに対応できる電子教科書を開発した。この教科書は、個人のニーズに対応できるだけでなく、学習者が不明な点を著者(講師)に質問をし、講師がそれに応えるというコミュニケーション過程を記録し、教科書の不備な点を指摘する。著者は、これを改善し、コンテンツのレベルアップを図るという新しい概念の電子教科書である.今年度は、特定の教科書の部分(節)について、質問内容をカテゴリー別に分類したり、メモ書きなどの機能をもつ電子教科書モデルを開発した。次年度はこのモデルをさらに汎用性の高い教科書にバージョンアップし、実用化する予定である。3)高度なWBT教材コンテンツが制作できるオーサリングシステムの開発講師がPowerPointを使って講義をする様子をDVカメラで撮影し、講義終了後、WBT教材が完成するというオーサリングシステムを開発した。このシステムは、静止画(PowerPoint資料)上にリアルタイムにポインティングしたり、強調のためのアンダーラインを引いたり、手書き文字などを自由に記入することができる.このように本オーサリングシステムは、教育に最も重要である感性情報を表現することができる画期的なシステムである.本研究の目的は、次世代の高速インターネット時代を視野に入れ、キャンパス内の知的生産活動のプロセスを見直し、教育コンテンツの創生から配信、共有、フィードバックまでを統合的に行う同期・非同期統合型次世代教育ネットワークを構築することである。最終年度にあたる本年度は、過去2年間の研究成果を具体化し、実用化することに力を注いだ。
フォトボイスを用いた男性高齢者の地域コミュニティ形成支援プログラムの開発

本年度は、研究実施3年目である。昨年度までは、本研究に関連する先行研究の文献検討等を行い、その成果を日本地域看護学会で発表した。また、本年度は、男性高齢者が地域で健康に生活を送るための強みを明らかにし、主体的な健康づくりを支援するあり方を検討するために、7名の男性高齢者を対象にフォトボイスの手法を用いて調査を行った。フォトボイスとは、住民が一定のテーマで写真を撮影して説明を付け、その写真と説明をもとにグループで討議をすることによって地域の強みや課題を共有し、解決方法を住民自らが発見する手法であり、地域住民と研究者がともに取り組む活動である。各対象者が「自分らしい健康的な生活するために取り組んでいることまたは関心を持っていること」を男性高齢者の強みとして定義し、日常生活の中で強みであると考えられる場面を写真撮影した。その後、各自で撮影した写真を持ち寄り、写真を示しながら写真が写し出しているものや生活との関係性を紹介した。それらの紹介をもとに「自分らしく健康的に生活を送るためには何ができるのか」について90分程度のグループ討議を1回行った。このグループ討議の内容を分析し、考察することによって、男性高齢者が主体的な健康づくりを行うために保健師が実施する支援のあり方を検討できると考えられる。また、男性高齢者が健康的で自立した生活を送り、住み慣れた地域社会で活躍することは、生きがいの形成にもつながり健康寿命の延伸にも寄与すると考えられる。研究計画を立案した後、研究対象者を選定することに時間を要した。また、調査方法がグループ討議であったために、研究対象者全員の都合を合わせ、グループ討議を実施する日を調整するために時間を要した。今後は、収集したデータを分析し、考察して論文としてまとめ、研究成果を学術雑誌へ投稿する等、公表を予定している。研究実施にむけて情報収集を行うために国内外の学会に参加した。先行研究では、地域に在住する男性高齢者は女性高齢者と比較し、社会的孤立が多く、地域の資源への満足度が低く、地域活動への参加も少ないことが明らかにされていた。本研究において、男性高齢者に焦点をあてて地域コミュニティの形成を支援することは意義があると考えられた。男性高齢者は、外出頻度の高い者が主観的幸福感が高いことが明らかにされており、地域における健康教室への参加が健康を自己管理する能力や自己効力感にも影響することが示唆されていた。これらのことから、最初の段階では、健康に対する意識や自己効力感が高いと考えられる、地域活動に参加している男性高齢者に焦点をあてて研究を実施することにより、地域でのコミュニティ形成を検討できると考えられた。また、地域住民の健康支援においては、住民個人のポジティブな特性や経験に着目することの重要性が述べられ、地域住民の行動変容を促す研究が行われていた。本研究では、フォトボイスの手法を用いることによって男性高齢者の強みに着目して支援のあり方を検討する。近年の研究の動向においても、強みに着目した研究は重要であると考えられた。情報収集の結果、当初に計画した研究実施計画には修正が必要な部分があると考えられたため、現在は先行研究をふまえ、研究実施計画を修正している段階である。研究計画を修正することにより、地域に在住する男性高齢者の現状をふまえ、地域コミュニティの形成支援を検討する研究になりうると考えられる。国内外の学会へ参加し、情報収集をした結果、当初の研究計画の一部に修正が必要であると考えられた。研究計画の修正に時間を要しているため、当初の研究計画と比較し、進捗状況はやや遅れている状況である。本研究の目的は、男性高齢者の健康状態の維持・増進とコミュニティの形成に着眼し、フォトボイスの手法を用いて健康に自立した生活をするための男性高齢者の強みを明らかにすることにより、当事者の視点から支援プログラムを開発することである。29年度は、研究計画を立案するために、国内の学術集会に参加し、男性高齢者に関する研究の動向と現状について情報収集を行った。また、本研究で用いる手法のフォトボイスについて集会に参加し、情報収集や意見交換を行うことにより、手法に対する理解を深め活用する上での留意点や効果について再検討を行った。研究に関連する情報を収集することにより、男性高齢者の健康づくりの現状や課題をとらえ、本研究の位置づけを明確にした研究計画の立案につながったと考えられる。研究計画書を作成する際には、地域保健に精通し、専門的知見を有する研究者より学術的助言を受けながら遂行した。学術的な助言を受けることにより、関連領域における本研究の位置づけを明確にし、実施意義のある研究計画を立てることができたと考えられる。作成した研究計画書は、研究者が所属する機関の研究倫理審査委員会へ審査の申請を行った。フォトボイスは、倫理的配慮を要する手法であるため、倫理指針を遵守して研究が遂行できるよう研究倫理審査委員会の承認を待っている状態である。また、研究が円滑に遂行できるように研究フィールドの調整を平行して行っている状態である。研究計画書を作成するにあたり、男性高齢者に関する研究の動向と現状について情報収集したり、本研究で用いる手法であるフォトボイスの集会に参加して情報収集や意見交換を行ったりしたために時間を要した。

また、本年度は、男性高齢者が地域で健康に生活を送るための強みを明らかにし、主体的な健康づくりを支援するあり方を検討するために、7名の男性高齢者を対象にフォトボイスの手法を用いて調査を行った。フォトボイスとは、住民が一定のテーマで写真を撮影して説明を付け、その写真と説明をもとにグループで討議をすることによって地域の強みや課題を共有し、解決方法を住民自らが発見する手法であり、地域住民と研究者がともに取り組む活動である。各対象者が「自分らしい健康的な生活するために取り組んでいることまたは関心を持っていること」を男性高齢者の強みとして定義し、日常生活の中で強みであると考えられる場面を写真撮影した。その後、各自で撮影した写真を持ち寄り、写真を示しながら写真が写し出しているものや生活との関係性を紹介した。それらの紹介をもとに「自分らしく健康的に生活を送るためには何ができるのか」について90分程度のグループ討議を1回行った。このグループ討議の内容を分析し、考察することによって、男性高齢者が主体的な健康づくりを行うために保健師が実施する支援のあり方を検討できると考えられる。また、男性高齢者が健康的で自立した生活を送り、住み慣れた地域社会で活躍することは、生きがいの形成にもつながり健康寿命の延伸にも寄与すると考えられる。研究計画を立案した後、研究対象者を選定することに時間を要した。また、調査方法がグループ討議であったために、研究対象者全員の都合を合わせ、グループ討議を実施する日を調整するために時間を要した。今後は研究計画を修正し、研究を実施するために倫理審査の申請をする予定である。研究対象者を地域活動に参加している男性高齢者とするため、研究者自身も地域活動へ参加し、対象者とする予定の男性高齢者と関係性を築く必要があると考えられる。そのことにより、研究が円滑に実施できるようになると予想される。また、研究の計画・実施にあたっては、専門的知見が必要となるため、適宜、研究に関する学術的助言を求めながら推進する。今後は研究を円滑に実施するために、事前に研究フィールドに出向きフィールドワークを行う予定である。また、調査の実施や分析を行うにあたっては、地域保健に精通した研究者より学術的な助言を受けながら進めていく。今後は、収集したデータを分析し、考察して論文としてまとめ、研究成果を学術雑誌へ投稿する等、公表を予定している。当初の研究実施計画よりやや遅れ、研究調査を実施しなかったため、調査時に必要な物品が未購入であり、次年度使用額が生じた。また、研究遂行に使用している研究室のパソコンが壊れて使用できなくなり、研究の遂行が不可能となったため、急遽、使用予定を変更し、パソコンを購入した。29年度は研究計画書の作成のみであり、研究の実施は行わなかったため、研究実施に係る物品費や人件費・謝金、研究成果発表のための旅費を要しなかったために次年度使用額が生じた。次年度は研究を実施するため、研究実施に係る費用を使用する予定である。男性高齢者を対象とした調査の実施が遅れたため、残高が生じた。次年度は、調査内容のテープ起こし等のデータ分析や論文投稿等に使用する予定である。調査研究を実施するために必要な物品を購入したり、学術的助言を得るために謝金を支払ったりして使用する予定である。
送粉者と生育環境からの複合自然選択が加速する被子植物の生態的種分化

花をつける植物(被子植物)は地球上の生物多様性を代表する分類群である。被子植物の多様性は、多様な生育環境への適応や、異なる送粉者(ハチ、チョウ、ガ、ハチドリなど)への適応の産物として説明されることが多い。このことから、「生育環境からの自然選択と送粉者からの自然選択が同時に働くことにより、被子植物の多様化(種分化)が起こりやすくなっているのではないか」という予想が成り立つ。この予想をくわしく検討したところ、生育環境に適応している植物が送粉者の誘引能力も高いことが、予想の成立条件として重要であることが分かった。この発見は、被子植物の多様性が生まれたしくみを理解する重要な鍵を与えるものである。本研究課題は、送粉者と生育環境からの複合自然選択によって被子植物の生態的種分化が促進されるという新しいアイデアを提案するとともに、その理論的妥当性を数理モデルを用いて検討することを目的としている。本年度は、新規生息地に進出した植物個体群が、新しい花色を獲得することによって、元の生息地にいる祖先個体群との間に繁殖隔離が生じて新種を形成するという種分化シナリオを検討した。2遺伝子座2対立遺伝子の集団遺伝学モデルを構築することで、この種分化シナリオの検討を行った。二つのうち一方の遺伝子座には、各生息地における生存率や種子生産力といった適応度を決定する対立遺伝子がのっているものとした。もう一方の遺伝子座には、花色を決める対立遺伝子がのるものとした。また送粉者は定花性をもつとした。種分化の前段階として、どちらかの生息地でより高い適応度を表現する対立遺伝子の多型が植物個体群内にあり、また花色は単型であるとした。この前段階の状態の個体群に、突然変異によって新しい花色を表現する対立遺伝子が生じると考えた。新花色を表現する対立遺伝子が導入されたあと、新規生息地を利用する個体群に新しい花色がひろまると、送粉者の定花性をつうじて異なる生息地を利用する個体群の間に繁殖隔離が成立する。モデル解析の結果、新しい花色が新規生息地の個体群にひろまって繁殖隔離が成立する要件として、各生息地で高い適応度をしめす個体が送粉者への報酬(花蜜など)にもより多く投資することで送粉者の定花性を強めることが必要であることが判明した。この結果は、生育環境への適応が同時に送粉者誘引を強めることによって生態的種分化が促進することを意味しており、本研究課題のアイデアの理論的妥当性を示す重要なものである。この研究と平行し、準備研究の一環として行っていた無報酬花の多型維持機構および送粉共生系の安定化機構に関する論文を発表した。当初は個体ベースモデルを構築する予定であったが、より単純な集団遺伝学モデルで基本アイデアを検討することになった。計画とは異なるモデルとなったが、当初予期していたものに該当する結果が得られた。本研究課題は、送粉者と生育環境からの複合自然選択によって被子植物の生態的種分化が促進されるという新アイデアの理論的妥当性を数理モデルを用いて検討することを目的としている。本年度は、昨年度に作成したモデルの改良とその解析を行った。この生態的種分化メカニズムでは、生育形質を分化させる自然選択(分化選択)が働く生息地にある二つの個体群の一方に新規花形質(新規の花色とする)が進化することで、二つの個体群間に繁殖隔離が成立し種分化が起こる。開発したモデルは二遺伝子座二対立遺伝子も集団遺伝学モデルであり、二つのうち一方の遺伝子座には、各生息地における生存率や種子生産力といった適応度を決定する対立遺伝子がのっている。もう一方の遺伝子座には、花色を決める対立遺伝子がのっている。また送粉者は定花性をもつ。種分化の前段階として、どちらか一方の生息地でより高い適応度を実現する生育形質の多型があるが、花色は単型とする。この状態の個体群の一方に、突然変異によって新しい花色を表現する対立遺伝子が生じる。新花色を表現する対立遺伝子が導入されたあと、この個体群に新しい花色がひろまると、送粉者の定花性をつうじて異なる生息地を利用する個体群の間に繁殖隔離が成立する。この種分化メカニズムの重要点は、(1)生育の良い植物は送粉者への報酬を増やすことができる、(2)送粉者の報酬の高い花への定花性を強める、の2点である。昨年度に作成したモデルでは、植物が送粉者への報酬を増やしても自身の種子生産への影響はないものと仮定していた。これは植物の資源投資にトレードオフがないことを意味し非現実的である。本年度の改良モデルでは、このトレードオフを組み込み、種分化が起きる条件を調べた。その結果、トレードオフのあっても、想定したメカニズムが働き種分化が起きることが分かった。政府関係の特別な委員会に参加することになり、それにエフォートがとられてしまうため。

この発見は、被子植物の多様性が生まれたしくみを理解する重要な鍵を与えるものである。本研究課題の主目的は、送粉者と生育環境からの複合自然選択によって被子植物の生態的種分化が促進されるという新アイデアの理論的妥当性を、数理モデルを用いて検討することである。本年度は、昨年度までの成果を投稿論文にまとめて投稿した。その結果、数理モデルの仮定に関する疑問が査読者から示されて却下された。しかし、基本となるアイデアの新規性と重要性は高く評価されたため、再投稿をしても良いとの判断を得た。査読者が指摘したモデルの欠点の一つは、植物個体間の同類交配が、本研究が主張するように送粉者の好みによって生じているのか、それとも送粉者の生息地間移動の制限によって生じているのかが、判断できないモデルとなっているというものであった。この点を改良した数理モデルを解析したところ、基本となるアイデアの正しさが確認できた。また、送粉者の好みの発現が植物個体の頻度に依存する場合を追加的に解析したところ、この頻度依存性が結果に重要な影響を及ぼすことが判明した。そのため、現在は、この点に関して、より詳細な解析を行っている最中である。また、本研究課題では、送粉共生系の適応放散についての理論条件を解明することも目的の一つとして掲げている。本年度は、一般的な適応放散が起きるうえでの祖先系統の雑種形成が果たす役割を理論的に調べ、その成果を公表した。特に、雑種形成が適応放散を促進するのは、祖先系統間の遺伝的分化が中程度のときであることを明らかにした点が、本研究の大きな成果である。また、新環境への侵入に際して新規形質の進化が必要な適応放散が起きるには、雑種形成によって創り出される遺伝的多様性の増大が必要不可欠となる場合があることも分かった。これらのことから、雑種形成が過去の適応放散において重要な役割を果たした可能性を指摘し、また人間活動が引き起こす雑種形成が将来の生物多様性に与える影響についても議論した。まず、ここまで得られた結果を投稿論文にまとめる予定である。またモデルを拡張し、送粉者シフトを考慮した種分化シナリオを検討する。上記までの結果を投稿論文にまとめている最中である。複数の送粉者を考慮したときに、送粉者の定花性ではなく、送粉者の使い分けによって生態的種分化が起きるしくみを理論的に調べて、これも投稿論文とする予定である。理論生態学当初個体ベースシミュレーションを行うためのワークステーションを購入する予定であったが、本年度には個体ベースシミュレーションモデルではなく集団遺伝学モデルを構築することになった。ワークステーションの購入を個体ベースシミュレーションを構築する次年度以降にずらしたため。コンピュータシミュレーションを行うためのワークステーションの購入と、シミュレーションを行う補助者の雇用に充てる予定の額が、研究の進捗状況が思わしくないため、これらの研究項目を次年度に行うことにしたため。個体ベースシミュレーションを行うためのワークステーションを購入する。コンピュータシミュレーションを行うためのワークステーションの購入と、シミュレーションを行う補助者の雇用、およびここまでの研究成果を発表するための論文投稿料と国際学会への参加旅費に充てる。
ハムスターを用いた食肉類寄生性条虫の実験室内代替終宿主モデルの開発

本研究ではシリアンハムスターに高Chol(コレステロール)食、及び副腎皮質ホルモンを大量投与して高脂質血症を作出し、食肉類を終宿主とするテニア科条虫の寄生を成立させ、これら条虫の実験室内代替終宿主モデルを開発することを目的とする。副腎皮質ホルモンとしては昨年度使用したブチル酢酸プレドニゾロン(PTBA)が製造中止のため、酢酸プレドニゾロン(PA)を使用した。今回はPA(4mg/kg体重)投与ハムスター(P-Ham群)、高Chol食給与・PA投与ハムスター(CP-Ham群)、対照ハムスター(Con-Ham群)、更に高Chol投与スナネズミ(CP-Ger群)を使用した。これらの動物にTaeniacrassiceps幼虫各40虫体を経口感染させた。感染日を0日として、高Chol食は-6日から連日給与、PAは-6、-3、0、3、6、9、12、14、18、21日目に皮下投与した。動物は-6、0、10、20、30日目に体重測定・採血をし、血漿の総コレステロール(TC)、トリグリセライド(TG)等の値の変化を調べた。10、20、30日目には順次剖検を行った。体重はCon-Ham群以外ではほとんど増加せず、また、15日目以降は状態悪化で死亡する個体があった。特にP-Ham群、CP-Ham群ではPA投与中にGPTが平均323579IU/lを示し肝臓障害が疑われた。血漿TCはCP-Ham群はP-Ham群よりやや高く、20日目で平均279mg/dlであった。CP-Ger群では0日目には既に平均294mg/dlを示し、10日目には400mg/dl以上となった。血漿TGは各Ham群では変異が大きく傾向は認められなかったが、CP-Ger群では顕著に上昇し、10日目には500mg/dl以上となった。残念ながら虫体はどの群からも回収できず、各群での発育の比較はできなかった。大量PA投与は前回のPTBA投与に比べ動物に悪影響があると思われた。また、スナネズミは高Chol食給与・PA投与により血漿TC・TGが顕著に増加し、ハムスターとは異なる興味ある結果が得られた。本研究では,シリアンハムスターに高Chol(コレステロール)食,または副腎皮質ホルモンを大量投与して高脂質血症を作出し,食肉類を終宿主とするテニア科条虫のハムスター体内での感染性・発育を観察する。最終的には,ハムスターを用いた食肉類寄生性条虫の実験室内代替終宿主モデルを開発することを目的とする。今年度は,ハムスター(5週齢,雄)を,高Chol食(0.3%)給与群,PTBA(ブチル酢酸プレドニゾロン)皮下投与(4mg/匹)群,高Chol食給与とPTBA皮下投与の両処置群,PTBA経口投与(4mg/匹)群,対照群に分け(各群4匹),各処置によるハムスターの体重および血液生化学的性状(総コレステロール(Tc),トリグリセライド(TG))の変化を調べた。実験期間は28日で,高Chol食は連日給与,PTBAは0,3,6,9,12,14,18,21,24日目に投与した。ハムスターは0,4,7,10,15,18,21,24,28日目に体重測定し,採血して血液生化学分析装置で測定した。体重は高Chol食給与群と対照群では順調に増加したが,PTBA皮下投与群と高Chol食+PTBA皮下投与群では10日目以降はほぼ横ばいであった。PTBA経口投与群は中程度の増加であった。血漿TCはPTBA経口投与群と対照群では実験期間中ほとんど変わらず139195mg/dlであったが,高Chol食給与群とPTBA皮下投与群では28日目には293375mg/dlに上昇しており,高Chol食+PTBA皮下投与群では400mg/dlを越えていた。血漿TGは測定値にかなり変異があったが,高Chol食+PTBA皮下投与群と対照群では増加する傾向がみられた。大量のPTBA皮下投与はハムスターの発育に悪影響があるが血漿TCの増加に効果があり,高Chol食給与により更なる高Chol血症を作出することができた。

動物は-6、0、10、20、30日目に体重測定・採血をし、血漿の総コレステロール(TC)、トリグリセライド(TG)等の値の変化を調べた。10、20、30日目には順次剖検を行った。体重はCon-Ham群以外ではほとんど増加せず、また、15日目以降は状態悪化で死亡する個体があった。特にP-Ham群、CP-Ham群ではPA投与中にGPTが平均323579IU/lを示し肝臓障害が疑われた。血漿TCはCP-Ham群はP-Ham群よりやや高く、20日目で平均279mg/dlであった。CP-Ger群では0日目には既に平均294mg/dlを示し、10日目には400mg/dl以上となった。血漿TGは各Ham群では変異が大きく傾向は認められなかったが、CP-Ger群では顕著に上昇し、10日目には500mg/dl以上となった。残念ながら虫体はどの群からも回収できず、各群での発育の比較はできなかった。大量PA投与は前回のPTBA投与に比べ動物に悪影響があると思われた。また、スナネズミは高Chol食給与・PA投与により血漿TC・TGが顕著に増加し、ハムスターとは異なる興味ある結果が得られた。
組織構築プログラムの実行を支える異常細胞排除システムの解析

動物の組織構築は、Wnt/β-cateninシグナルやBMPシグナルなどのモルフォジェンシグナルの活性強度勾配によって制御されている。私は、これまでの研究でβ-catenin活性に異常を持つ細胞が周辺の正常細胞の働きによって初期胚から積極的に排除されることと、この異常細胞排除を人為的に抑制すると胚発生に異常が生じることを示した。私はこの知見から、動物初期胚はWnt/β-cateninシグナル依存的な組織構築プログラムを確実に実行するために"不適切なβ-catenin活性強度を持つ細胞"を感知して積極的に取り除くシステムを備えている、という仮説を立てた。しかしながら、動物組織がどのようなメカニズムでWnt/β-cateninシグナル異常細胞を感知して排除するのか、については不明である。前年度の解析から、異常細胞の感知にはCadherinが関与することが分かり、また異常細胞の細胞死にはTGF-βタイプのSmadの活性化による活性酸素種(ROS)上昇が必要であることが分かった。今年度は、とくに生理的状況下においての解析を進めた。具体的には、通常の発生過程で自然発生するWnt/β-catneinシグナル異常細胞の出現とその異常細胞の細胞死を発光と蛍光のdual in vivoイメージングにより明らかにした。また、人為的に誘導したWnt/β-cateninシグナル異常細胞の解析から明らかになった異常細胞の感知と細胞死の誘導メカニズムが、自然発生するWnt/β-cateninシグナル異常細胞でも同様に起きているのかを明らかにした。前年度のメカニズム解析を成果としてまとめ、論文投稿できた。リバイス段階であり、またプレプリントサーバーbioRxivにて既に公開済みである。さらに、人為的に誘導した状況下のみならず、生理的条件下で生じるWntシグナル異常細胞の解析を進めたことにより、生理学的意義を大きく深めることができたから。Wnt/β-cateninシグナルは、初期胚だけでなく腸管や肝臓などの構築後組織においても活性勾配を形成しており、その組織の機能や恒常性維持に寄与する。今後は、ゼブラフィッシュを用いた解析から明らかになった、Wntシグナル異常細胞の排除システムが、構築後組織でも起きるのかについて解析を進めていく。また、BMPシグナルやShhシグナルは、Wnt/β-cateninシグナルと同様に、動物初期胚において活性勾配を形成して組織に位置情報を与え、胚発生を支えており、その勾配の乱れは胚発生を破綻させる。この事実は、BMPシグナルやShhシグナルの活性異常を生じた細胞も、Wnt/β-cateninシグナル異常細胞と同様に、ゼブラフィッシュ初期胚から排除される可能性を期待させる。BMPシグナルとShhシグナル異常細胞も排除されるのかについて解析を行う。これらのシグナル異常細胞とWnt/β-cateninシグナル異常細胞の排除のメカニズムが共通の分子基盤を介するのかなども解析していく。私は、これまでの研究で、β-catenin活性に異常を持つ細胞が周辺の正常細胞の働きによって初期胚から積極的に排除されることと、この異常細胞排除を人為的に抑制すると胚発生に異常が生じることを示した。私はこの知見から、動物初期胚はWnt/β-cateninシグナル依存的な組織構築プログラムを確実に実行するために“不適切なβ-catenin活性強度を持つ細胞"を感知して積極的に取り除くシステムを備えている、という仮説を立てた。しかしながら、動物組織がどのようなメカニズムでWnt/β-catenin異常細胞を感知して排除するのか、については不明である。まず網羅的RNA-seq解析を行い、Wnt/β-cateninシグナル異常細胞の排除にかかわる制御因子の候補を絞り込んだ。その候補因子群の機能解析を行った結果、制御因子として、TGF-β/Smadシグナル経路が異常細胞排除に必要であることが明らかになった。さらに、ほかの候補因子として、活性酸素種(Reactive oxygen species/ ROS)を制御する分子群が変動していたが、ROSの産生上昇が異常細胞のアポトーシスによる排除に必要であることも明らかになった。また、異常細胞のアポトーシス誘導に必要なROS産生の上昇は、上記のTGF-β/Smadシグナル経路の活性化によって引き起こされることが判明した。Wnt/β-catneinシグナル異常細胞がどのように感知されるのかに関して、β-cateninが結合する細胞接着分子であるcadherinが関与することを明らかにした。Wnt/β-cateninシグナルの異常がcadherinを介して周囲の細胞に感知されて、その結果、上述のTGF-β/Smadシグナル経路の活性化を引き起こして、異常細胞がアポトーシスによって排除されることが分かった。Wntシグナル異常細胞を排除するシステムのメカニズムの解析に注力し、網羅的な解析などからどのように異常細胞を感知して、どのように細胞死が誘導されるのかの分子基盤を明らかにできた。この成果については、投稿段階に入っており、次年度には論文としての報告が完成する予定である。

しかしながら、動物組織がどのようなメカニズムでWnt/β-cateninシグナル異常細胞を感知して排除するのか、については不明である。前年度の解析から、異常細胞の感知にはCadherinが関与することが分かり、また異常細胞の細胞死にはTGF-βタイプのSmadの活性化による活性酸素種(ROS)上昇が必要であることが分かった。今年度は、とくに生理的状況下においての解析を進めた。具体的には、通常の発生過程で自然発生するWnt/β-catneinシグナル異常細胞の出現とその異常細胞の細胞死を発光と蛍光のdual in vivoイメージングにより明らかにした。また、人為的に誘導したWnt/β-cateninシグナル異常細胞の解析から明らかになった異常細胞の感知と細胞死の誘導メカニズムが、自然発生するWnt/β-cateninシグナル異常細胞でも同様に起きているのかを明らかにした。前年度のメカニズム解析を成果としてまとめ、論文投稿できた。リバイス段階であり、またプレプリントサーバーbioRxivにて既に公開済みである。さらに、人為的に誘導した状況下のみならず、生理的条件下で生じるWntシグナル異常細胞の解析を進めたことにより、生理学的意義を大きく深めることができたから。Wnt/β-cateninシグナルは、初期胚だけでなく腸管や肝臓などの生体組織においても活性勾配を形成しており、その組織の機能や恒常性維持に寄与する。今後は、ゼブラフィッシュを用いた解析から明らかになった、Wntシグナル異常細胞の排除システムが、生体組織でも起きるのかについて解析を進めていく。また、BMPシグナルやShhシグナルは、Wnt/β-cateninシグナルと同様に、動物初期胚において強度勾配を形成して組織に位置情報を与え、胚発生を支えており、その勾配の乱れは胚発生を破綻させる。この事実は、BMPシグナルやShhシグナルの活性異常を生じた細胞も、Wnt/β-cateninシグナル異常細胞と同様に、ゼブラフィッシュ初期胚から排除される可能性を期待させる。BMPシグナルとShhシグナル異常細胞も排除されるのかについて解析を行う。これらのシグナル異常細胞とWnt/β-cateninシグナル異常細胞の排除のメカニズムが共通の分子基盤を介するのかなども解析していく。Wnt/β-cateninシグナルは、初期胚だけでなく腸管や肝臓などの構築後組織においても活性勾配を形成しており、その組織の機能や恒常性維持に寄与する。今後は、ゼブラフィッシュを用いた解析から明らかになった、Wntシグナル異常細胞の排除システムが、構築後組織でも起きるのかについて解析を進めていく。
腫瘍免疫の抗原認識機構の解析と人為的制御

腫瘍抗原の認識機構及び抗腫瘍免疫誘導における抗原提示細胞(APC)の役割を研究した結果、本年度はおもに以下の成果を得た。1.BALB/cマウス由来CSA1M線維肉腫に特異的に反応するT細胞株を得た。このT細胞株はCD4^+CD8^-でCSA1M腫瘍抗原刺激によりIL-2とインタ-フェロンγを産生するヘルパ-型T細胞株であることがわかった。重要な知見は、このCSA1M特異的T細胞株は種々の形のCSA1M腫瘍抗原(腫瘍細胞自身、腫瘍細胞膜画分、可溶化腫瘍抗原)で刺激されたが、いずれの際もAPCの存在を必要とした。更に、腫瘍膜画分と正常マウスAPCを共培養して作成した。腫瘍抗原-pulsed APCによってもこのCSA1M T細胞株は効率よく刺激された。この結果は、ヘルパ-型の抗腫瘍T細胞は、腫瘍抗原をpick upしそれを細胞表面で提示しているAPCによって活性化されることを示している。2.前述の腫瘍抗原-pulsed APCを正常マウスin vivoに5回免疫し、その後CSA1M生細胞を攻撃接種したところ、著明なCSA1M特異的免疫抵抗性の誘導が確認された。即ち、腫瘍抗原をパルスしたAPCを用いてマウスを免疫する事により、in vivoにおける抗腫瘍提抗性を誘導し得る抗腫瘍免疫誘導系を確立しえた。この結果は、腫瘍抗原がAPCを介して抗腫瘍ヘルパ-型T細胞を中心とする免疫系を活性化するという経路の最初の段階を直接証明しえたものである。今後腫瘍抗原に対する抗原認識機構を詳細に解析する上で、この腫瘍抗原-pulsed APCを用いた抗腫瘍免疫誘導系は極めて有用なアプロ-チとなると考えられる。
体外循環を用いた消化器癌手術の腫瘍免疫能に与える影響に関する研究

担癌患者における体外循環を用いた消化器手術の周術期サイトカインおよびTh1/Th2バランスの変化を解析し、これらの術後再発との関連を明らかにするべく研究を行っている。現在まで下大静脈腫瘍栓を合併した肝細胞癌に対して体外循環を併用し切除した1症例、および横隔膜浸潤を伴う胆管細胞癌に対して体外循環を用いず肝切除した1症例の検討を行った。体外循環施行例ではIL-6,IL-8値は手術開始時より上昇傾向を示し、手術終了時まで増加したが、IL-8は循環後に一時的に低下した。INF-γおよびIL-10は体外循環後にのみ著明な増加を認めた。TGF-β1は体外循環後に低下した。体外循環を用いず肝切除しえた例ではTh1/Th2バランスは手術開始直後よりTh2にシフトし、その傾向は術後1日目においても継続していた。INF-γは周術期を通して測定下限以下であり、IL-10は閉腹時において上昇傾向を示した。TGF-β1は肝切除後より閉腹時まで低下していたが術後1日目には術全値の約4倍まで上昇した。体外循環後に特異的な変化を示したのは、INF-γおよびIL-10であった。INF-γは、いわゆるTh1型免疫応答に必須の役割を果たし、TNF-α産生の増強、マクロファージの殺菌活性化の誘導に関与する。一方、IL-10は強力な抗炎症性サイトカインであり、マクロファージからの炎症性サイトカイン産生の抑制やTh1型免疫応答の抑制に働く。体外循環後に惹起された炎症性メデイエーターに対するフィードバックシステムのひとつとして抗炎症性サイトカインのIL-10が誘導された可能性が考えられる。体外循環後に低下したTGF-β1は癌細胞をアポトーシスに誘導する作用を有すると考えられている。つまり、TGF-β1の低下は癌細胞の発育に促進的に働いたとも考えられる。現在までの検討により、体外循環後のサイトカイン変動が担癌状態における患者の腫瘍免疫反応に不利な状態を作り出している可能性があると推察されたが、今後、更に症例を重ね検討する必要があると思われる。
低温誘導性植物転写因子Lip19の誘導機構と標的遺伝子(群)の探索

昨年度までの研究成績をまとめると以下のようになる。(1)トウモロコシ低温誘導性遺伝子mliP15の種々のストレスに対する発現様式を明らかにした。(2)遺伝子産物(mLIP15)のhexamer配列やG-box配列に対するDNA結合活性を示した。さらに、mLIP15が低温誘導性のAdh1遺伝子のプロモーターに試験管内で結合することを明らかにした。(3)タバコのcDNAホモログtbz17を単離した。tbz17の発現も低温により誘導される。このことは双子葉植物にもbZIP型のDNA結合蛋白質をコードする低温誘導性遺伝子が存在することを示す。(4)タバコTBZ17蛋白質とトウモロコシmLIP15蛋白質のDNA結合特性は極めて類似していること、通常のbZIP蛋白質よりも長い塩基配列を認識することが示唆された。今年度は、(1)トウモロコシよりカルシウム依存性プロテイン・キナーゼ遺伝子(ZmCDPKl)を単離した。低温によるZmCDPK1転写物の蓄積が、mlip15転写物の蓄積よりも早く起こることが判明した。(2)蛋白質合成阻害剤として知られるシクロヘキシミドが、極めて低濃度でZmCDPK1,mlip15およびAdh1の転写物のレベルを高めた。しかしカルコン合成酵素遺伝子は低温でのみ発現した。他の薬剤特異性を調べたところ、アニソマイシンがシクロヘキシミドと同様な効果を示したが、さらに薬剤は上記遺伝子群の発現になんら影響を与えなかった。(3)カルシウムキレーターであるBAPTA(2mM)を用いた実験より、低温およびシクロヘキシミドによる上述遺伝子群の転写物の蓄積にはカルシウムイオンの関与が示唆された。(4)タバコtbz17遺伝子を構成的に発現しているトランスジェニックタバコはいずれも対照のタバコにくらべて、小型化していた等を、明らかにした。上記の結果に基づき、低温がトウモロコシ植物体に誘起するシグナル伝達系は少なくとも2つあり、そのうちの1つは上記2種の薬剤によっても誘起される、との作業仮説を提出した。その際にカルシウムイオンが関与していることを示唆した。イネの低温誘導性遺伝子のひとつとして分離されたlip19遺伝子はbZIP蛋白質をコードしていることが明らかとなり、低温処理により転写因子が誘導される可能性が示唆された。ところが種々の検討にもかかわらず、lip19遺伝子産物であるLIP19蛋白質のDNA結合性をこれまでのところ証明できていない。lip19遺伝子がトウモロコシOBF1遺伝子に類似している知見より、トウモロコシのlip19相同遺伝子がOBF1遺伝子そのものか否かを明らかにする為に、低温処理トウモロコシ植物体よりlip19プローブに反応する新規なcDNAクローンを得てmlip15と命名した。この遺伝子の発現はイネlip19と同様低温により誘起される。種々のストレス処理の影響を検討したところ、mlip15は塩、アブシジン酸処理で低温と同様に誘導されるが、乾燥、嫌気、熱処理では誘導されないこと、葉よりも根で転写物の蓄積が強いことが示された。この遺伝子産物mLIP15は、当然のことながらbZIP蛋白質であり、LIP19との間には約70%の相同性が見られた。

大腸菌の発現系およびウサギ網状赤血球無細胞翻訳系で作ったmLIP15蛋白質は、OBF1蛋白質が結合するocs配列(オクトピン合成酵素遺伝子のエンハンサー領域に存在するシス配列)には弱くしか結合しないが、いずれも植物のシス配列として同定されているヘキサマー配列(5'-ACGTCA-3')とG-box配列(5'-CACGTG-3')に強く結合すること、さらにこの結合が特異的であることを示した。したがって、DNA認識配列においてもmLIP15はOBF1とは異なることが明らかである。同時にこの結果は、mLIP15が低温誘導性の転写因子であることを強く支持する。イネおよびトウモロコシではアルコール脱水素酵素遺伝子(Adh1)低温で誘導されることが報告されているが、mLIP15がAdh1プロモーターに結合することも明らかとした。現在、この結合の生物学的意義について検討を進めている。イネの低温誘導性遺伝子のひとつとして分離されたlip19遺伝子はbZIP蛋白質をコードしていることが明らかとなり、低温処理によって転写因子が誘導される可能性が示唆された。トウモロコシよりlip19の相同遺伝子であるmlip15を単離した。この遺伝子の発現は低温処理、塩ストレスそしてアブシジン酸処理で誘導される。一方乾燥、嫌気および熱ショックでは誘導されない事が判明した。遺伝子産物であるmLIP15が植物のシス配列として同定されているヘキサマー配列やG-ボックス配列に結合すること、さらにはイネやトウモロコシで低温誘導性であることが知られているアルコール脱水素酵素遺伝子1のプロモーターの15bp断片に結合することも昨年度報告した。本年度は以下の事を明らかにした。(1)mLIP15の標的遺伝子の一つとして脂肪酸不飽和化酵素遺伝子が考えられた。シロイヌナズナFAD7をプローブにしてトウモロコシより2種の上記cDNA遺伝子を単離し、FAD7とFAD8と名付けた。前者は常温で強く発現しており、後者は低温で誘導される。それぞれのゲノムクローンを単離した。ただし後者のゲノムクローンは5′上流域を欠いている。(2)低温処理によりmlip15遺伝子が誘導されるよりも早く、カルシウム依存性蛋白質リン酸化酵素遺伝子(ZmCDPK1)が誘導されることを示した。今後完全長のcDNAを得て、大腸菌で酵素蛋白質を発現させ、ZmCDPK1がmLIP15蛋白質をリン酸化するかどうか検討して行きたい。(3)低温処理したトウモロコシの核抽出液にmLIP15蛋白質と[7^<-32>P]ATPを加えると、2種の蛋白質が特異的にリン酸化を受けることを明らかにした。この反応はmLIP15蛋白質の存在に依存しており、また常温で生育した植物体からの核抽出液では起こらないことも確認した。この事実はmLIP15の機能を考えるうえで重要であると思われる。昨年度までの研究実績をまとめると以下のようになる。(1)トウモロコシ低温誘導性遺伝子mlip15の種々のストレスに対する発現様式を明らかにした(2)遺伝子産物(mLIP15)のhexamer配列やG-box配列に対するDNA結合活性を示した。
血液脳関門の薬物排出輸送機能制御分子設計

分子量809の蛍光試薬BCECFR-AMの血液脳関門透過速度はオクタノール-水分配係数から予測される値にほぼ一致した。さらに、分子量が500以下のキニジンは血液脳関門のmdr1a輸送系で排出されることが分かったことから、血液脳関門に分子量篩は存在しないことが示された。血液脳関門の薬物排出輸送機能制御分子を設計するために血液脳関門排出速度を測定する新規実験方法としてBrain Efflux Index法を開発した。アジドチミジンとジデオキシイノシンの脳への移行性が低い原因は、血液脳関門排出輸送系で運ばれることが主な原因であり、この過程は有機アニオン輸送系であることが示唆された。有機アニオンのパラアミノ馬尿酸の血液脳関門透過過程は排出方向選択的であった。この排出速度は飽和性を示し担体輸送系であることが示唆された。βアラニンも血液脳関門排出輸送系で汲み出されることが分かった。また、キノロン系合成抗菌薬も血液脳関門排出輸送系で汲み出されることが分かった。さらに、GABAや酸性アミノ酸などの神経伝達物質を認識する排出輸送系が血液脳関門で機能しているという結果が得られた。これらの結果から、血液脳関門にはP-糖蛋白以外に種々の排出輸送系が機能していることが明らかになった。これらの輸送系の排出機能の大きさを定量的に評価できた。特に、酸性薬物はパラアミノ馬尿酸などの腎臓排泄輸送系類似の基質構造輸送認識性を示すことが明らかになった。脳への移行性を高めるにはこれらの排出輸送系で排出されないように分子設計するという新しいアプローチ方法が提案された。脳細胞間液中薬物濃度はその中枢効果発現を左右する重要な指標であり、この濃度は主として血液脳関門(BBB)を介した薬物のinfluxとeffluxの比で決定される。本研究は従来の戦略とは異なり薬物のBBBを介したefflux過程に着目して中枢動態を制御するという新しい発想による。初年度は、これまで非常に困難であった脳からの排出速度を定量的に評価するBrain Efflux Inde(BEI)法を確立することに成功した(研究論文#2)。BEI法は、薬物とBBB難透過性内部標準物質(イヌリン)の混液を大脳皮質にmicroinjection後、一定時間経過後の脳内残存率から脳排出速度を測定するものである。従来法を用いた場合(研究論文#3#6)よりも高感度で簡便に測定できるという長所があることが分かった。BEI法の確立により課題遂行に大きく道が開かれた。中枢での治療効果と副作用軽減の観点から、アジドチミジン(AZT)とその誘導体とキノロン系合成抗菌剤を選び検討中である。いずれの薬物でも非常に速い速度で脳から排出されることが明らかになった。特に、有機アニオンに共通の排出輸送系が中枢解毒機構に重要な役割を果たしていることが示唆された。標的組織への移行率は標的組織細胞膜透過クリアランスと全身クリアランスの比で決ることから、消失臓器としての肝臓や腎臓の輸送担体の基質構造認識特性を考慮したより合理的な分子設計が重要である。現在、BEI法を用いてBBB排出輸送系の基質構造認識特性を解析中である。一方、本研究による画期的な発見として、神経伝達物質の1種GABAがBBBから能動的に排出されることが明らかになった。従来、BBBは神経伝達物質を保持する役割があると信じられていることから、本研究成果によって向精神薬の分子設計に新しい方向性が開かれた。血液脳関門には分子量500以上の分子の透過性を制限するという分子篩仮説が提唱されてきたが、分子量809の蛍光試薬BCECF-AMの血液脳関門透過速度を測定したところオクタノール-水分配係数から予測される値にほぼ一致した。

したがって、分子量500以上の分子も受動拡散で脳へのデリバリーが可能であることが分かった。脳への移行性が低いアジドチミジンとジデオキシイノシンの脳内動態を解析したところ血液脳関門から排出されることが脳移行性が低い主因であり、この排出過程は有機アニオン輸送系であることが示唆された。有機アニオンの基質としてパラアミノ馬尿酸の血液脳関門透過過程を解析したところ、排出方向選択的であった。この排出速度は飽和性を示したことから担体輸送系であることが示唆された。さらに、塩基性で分子量が500以下のキニジンをP-糖蛋白modulatorのPSC833と併用したところ血液脳関門透過速度は約10倍増加した。Mdr1a遺伝子欠損マウスにおける血液脳関門透過速度は正常マウスの約30倍であったことから、キニジンは血液脳関門のmdr1aで排出されることが分かった。以上の結果から、酸性薬物ではパラアミノ馬尿酸などの腎臓排泄型の分子は血液脳関門から排出される可能性が高いこと、分子量500以下でもP-糖蛋白の基質は血液脳関門排出輸送系で認識され脳への移行性は低くなることが明らかになった。現在、GABAや酸性アミノ酸などの神経伝達物質を認識する排出輸送系が血液脳関門で機能しているという結果が得られており、これらの分子認識特性を今後検討する予定である。
新しいパルス磁場匂配NMR法による液晶の異方的並進ダイヤミクスの研究

本研究では、我々が開発しつつある新しいパルス磁場勾配NMR法を液晶研究に適用し、様々な液晶系において自己拡散係数テンソルを測定し、それらのデータと液晶物性との関係を探った。スメクティック液晶の自己拡散係数テンソルに関する研究成果:(1)液晶同族群において末端置換基によって自己拡散異方性が反転する系を見出した。(2)スメクティックA(SA)液晶OBBFにおいては、ひとつの相内で自己拡散異方性が反転することが分かった。(3)SA液晶の種類によって自己拡散系数テンソルには特徴的な違いがあることが分かった。通常の単分子属型SA液晶においては自己拡散の活性化エネルギーの異方性が大きい。つまりE_<a‖>がE_<a⊥>より2倍程度大きい。いっぽう、強い極性基を持つ液晶に見られる会合型のスメクティックAd(SAd)相における自己拡散係数テンソルはネマティック液晶ののそれに似ている。つまりD_‖>D_⊥で、二つのE_aの大きさはほぼ等しい。(4)リエントラント液晶CBOBPにおける高温と低温の2つのSA液晶の自己拡散係数テンソル及び活性化エネルギーの異方性には特徴的な違いがある。高温相では構造から予測されるように会合型ののSAd相の特徴を示すのに対し、低温相では単分子属型のSA1相の特徴を示す。(5)反強誘電性液晶MHPOBCにおいては、常誘電相(SA相)において既に大きな拡散異方性が存在する。つまり、拡散係数自身が1桁近く異なる(D_‖>>D_⊥)と共に、活性化エネルギーに3.1倍もの違いがある(E_<a⊥>=3.1E_<a‖>)ことが分かった。この結果は、SA相において既に分子が層内に強く束縛されていることを示すものであり、反強誘電的秩序化に有利な特性が常誘電相において形成さえていることを示している。(6)ヘクサティック液晶PHOABのSA相においては自己拡散の活性化エネルギーに大きな異方性がことが分かった。凝縮系における分子の並進運動を、振動や回転の自由度から切り離して選択的に測定する手法としてパルス磁場勾配スピンエコーNMR法がある。我々はこの手法をスピン間が強く双極子結合した系の,しかも異方的な拡散係数(D)テンソルの測定へと拡張するための方法を開発し,新たな分光器を製作した[Oishiand Miyajima,J.Magn.Reson.,Ser A123,64(1996),宮島大石、固体物理、31巻947頁(1996)]。本研究では、この手法を液晶のダイナミクス研究法として確立すること、及びそれを種々の液晶系に適用して物性研究を進めることを目指している。当年度に得られた進歩は、(1)コンピュータ制御で16チャンネルの独立なパルスを発生できる高性能パルス発生器を開発、製作した。(2)前年度製作の磁場勾配発生回路を改良し、45Aのパルス電流によって11.3T/mのパルス磁場勾配を実現した。(3)リエントラント液晶OBBCの同族群について拡散係数テンソルの異方性を系統的に測定した。

この実験研究はまだ進行中だが、拡散係数テンソルの異方性と分子の化学構造、液晶における凝集構造との関係を総合的に解明しようとしている。(1)については既に出版発表した[Toyoda et al,Rev.Sci.Instrum.68,3140(1997)]。(2)、(3)については3月に口頭発表を行う[大石、宮島、日本化学会年会(1998京田辺)]。当年度に購入した備品のうち、液体窒素貯蔵容器は温度制御のための蒸発ガス吹き付け用に、電気マッフル炉電源は試料調製用に、電子計算機はパルス制御用に用いた。この研究の目的は、液晶状態における分子の異方的自己拡散係数を定量的に評価するNMRの新しい手法と実験装置を確立すること、及びこの方法を使って液晶の並進ダイナミクスと物性の関係を統一的に明らかにすることである。実験手法と装置の面では、高速パワーMOSFETを用いたスイッチング回路を完成させ、磁場勾配パルスの過渡特性を大幅に改善した。また、stimulated echoを測定できるようになったので、従来より更に遅い拡散を測定できるようになった。改良された装置によって、液晶の拡散異方性の測定はかなり自動化され、よいデータを生産しつつある。以下に最近の成果の一例を記す。反強誘電性液晶MHPOBCのSA相(常誘電相)において、拡散異方性が大きいこと(SA相で既に1桁近く異なる)、及び活性化エネルギーが3.1倍異なることを見出した。これは分子が層内に強く束縛されていることを示す結果であり、反強誘電的秩序化に有利な特性が常誘電相において形成されていることを示している。MHPOBCについては、以前に他の研究者によって、ドープした色素分子の拡散係数とその異方性が測られ、報告されている。その結果は我々のものとは著しく異なっている。このことは、不純物プローブを用いて得られた結果の持つ意味の曖昧さ、及びNMRの有効性を改めて示すものでもある。10年度に得られた結果の多くはまだ出版していないが、Newsletterに1報が掲載された。