hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
核磁気共鳴法によるカルサイクリンとアネキシンXI分子の高次構造解析

一方、カルビンディンD_<9k>はカルサイクリンと同じくS100蛋白に属するが、N末端、C末端のアミノ酸がそれぞれ一部欠損しており、C末端のアミノ酸の欠損が二量体形成に重要なヘリックスIVの構造に変化を与え、そのため二量体を形成しえず、単量体としてのみ存在していることが示された。本研究で示されたカルサイクリンの二量体構造は今後の他のカルシウム結合蛋白質の高次構造研究に多大な影響を与えるものと思われる。カルサイクリンのリガンドであるアネキシンXIはアネキシンファミリーの中で最長の制御ドメインをもち、細胞内で核局在を示し、さらにリン酸化によりその局在を変化させるなどアネキシンファミリーの中で特異な性質をもつ。本研究ではこれらの性質がアネキシンXIに特異な制御ドメインに依存していると考え、アネキシンXIの制御ドメインの解析を分子生物学的手法を用いて行った。その結果、アネキシンXIはこの制御ドメインを核移行シグナルとして核に局在すること、アネキシンXIの核局在は全ての細胞に普遍的なものではなく、細胞種や細胞の分化、増殖期により異なることが示された。アネキシンXIにはこの制御ドメインのスプライシングによる2種類のアイソフォーム(annexin XI-A,B)が存在する。アネキシンXIのアイソフォームを哺乳類細胞、昆虫細胞に発現させ細胞内分布を検討した結果、annexin XI-Aは核、細胞質、annexin XI-Bは核、細胞膜に分布し、細胞内分布が異なることが示された。カルサイクリン-アネキシンXI複合体の高次構造を解明するためには、まずアネキシンXIのカルサイクリン結合部位を正確に同定することが重要である。そこで、種々のアネキシンXIのアミノ酸配列とGST蛋白との融合蛋白を分子生物学的手法を用いて作成し、カルサイクリン分子との相互作用を検討した。その結果、カルサイクリンはアネキシンXIのGln49からThr62の領域に結合することが示された。この領域はα-ヘリックス構造をとり、この領域内の疎水性残基とカルサイクリンの疎水性残基が相互作用を起こすことにより、アネキシンXIがカルサイクリンと結合することが示された。この結合様式は最近他のアネキシンとS100蛋白でも報告され、アネキシン-S100の相互作用に普遍的な機構であることが示唆された。また、このカルサイクリン結合部位を含む合成ペプチドを作成し、このペプチドがアネキシンXIとカルサイクリンの相互作用を阻害すること、すなわちカルサイクリンに結合することを示した。現在、カルサイクリンにこの合成ペプチドを反応させたときのカルサイクリン分子の高次構造をNMR法を用いて解析し、本研究の最終目的であるカルサイクリン-アネキシンXI複合体の高次構造を解析中である。本研究で得られた成果はカルシウム結合蛋白の高次構造研究ばかりでなく、さまざまな蛋白-蛋白相互作用の研究に寄与するものである。本国際学術研究の目的は、カルサイクリン分子及びアネキシンXI分子、更にはこれら分子の結合部位の高次構造を決定することにより、カルサイクリン及びアネキシンXIが細胞内カルシウム情報伝達系において果たす役割を明らかにすることである。
構造抽出による自然言語ビッグデータへの高次高精度なデータマイニング技術の開発

本課題ではWebテキスト等の自然言語ビッグデータから、クラスタやバースト等の意味的、時間的な局所構造を抽出し、分布や関連性を可視化して議論の流れやデマを獲得する手法を開発する。我々が開発したデータ研磨、バーストモデルを融合・発展して質の高い局所構造抽出手法を構築し、分布や関連を高次なマイニングと可視化により既存手法の限界を突破し、趨勢、デマ、多様性等の非言語的な形質を獲得する。社会科学等でのアンケートでの社会の実態や問題の獲得、SNSでの世論の抽出に新しい手法を提唱し、人々がネット情報に過剰に左右されずに情報を獲得し、ヘイトやデマ、いじめがないネット社会の構築に資することを目指す。Web上やソーシャルメディアでの議論の動きやデマ情報の拡散などをいち早くとらえることは重要な研究課題と考えられる。本研究では、Webテキスト等の自然言語ビッグデータからクラスタやバースト等の意味的、時間的な局所構造を抽出し、その分布や関連性を可視化することで議論の流れ等を獲得する手法の開発を目指している。研究代表者の開発したデータ研磨、バーストモデルを融合・発展させ質の高い局所構造の抽出手法を構築し高次なマイニングと可視化によりそれらの分布や関連性を獲得する新たな手法が提案されている。これによって、自然言語ビッグデータの取り扱いを高次な観点から俯瞰することにより、社会実態や社会問題の獲得、世論の抽出を行う新たな手法となることが期待される。
失語症者のためのCAT日本語版作成および信頼性と妥当性の検討

本年度は、イギリスで開発された失語症検査CAT(Comprehensive Aphasia Test)の作成者らと情報交換を行いながら、CAT日本語版作成をめざして、各下位検査の刺激語を選定するための調査などを実施した。CATでは、失語症当事者に「ここ1週間」の気持ちや様子を伺う質問紙AIQ(Aphasia Impact Questionnaire-21)に加えて、言語機能や非言語機能を調べる下位検査27項目が含まれる。例えば下位検査17「呼称」に関して、使用される単語は計24語であるが、日本語としての使用頻度などの心理言語学的変数を考慮して、候補単語を約100語抽出した。その後、イラストレーターに候補単語のイラストを描いてもらった。さらに、それらのイラストを用いて、CATで求められている、Name Agreementテスト(名称一致度調査)を実施した。健常者約80名への調査結果に基づき、現在、CAT日本語版の「呼称」に使用する単語を選定中である。また下位検査2「意味記憶」は、例えば「猿」のイラストに対して、4つの選択肢のイラスト、具体的には「バナナ」「洋ナシ」「チョコレート」「封筒」から、意味的に一番近いイラスト(ここでは「バナナ」)を選択する課題であるが、各単語の意味的関連性を調べるために、日本人健常者約45名を対象に調査を行った。その結果を踏まえて、「意味記憶」に使用する語とイラストを選定した。さらに音読や復唱の下位検査では、心理言語学的変数をもとに、候補語をリストアップし、年代の異なる健常者に音読や復唱課題を実施した。健常者でも音読しにくい語があったため、そのような語は候補単語から削除するなど、候補単語を選定するための調査や工夫を行った。このように計27の下位検査に求められる属性や心理言語学的条件に応じて、下位検査ごとに検討を進めている。本研究では、CAT日本語版(JCAT)を作成することを目的としている。原版CATでは、刺激語を選定するためにName Agreement検査(名称一致度調査、以下NA調査と称す)が必要とされ、NA調査で求められる基準、つまりそのイラスト(単語)を使用してもよいという基準は85%以上であることが望ましいとされている。NA調査を実施した結果、85%の基準に満たない単語(イラスト)もあったため、NA検査の2回目および3回目を行った。このようにJCATで使用する刺激語の選定にあたり、必要な調査に時間がかかっている。現在、NA調査3回目が終わっため、今後集計して、下位検査7「単語の聴理解」や下位検査8「単語の読解」などに使用する単語を選定していく予定である。候補単語を抽出するために必要なNA調査がほぼ終わったため、結果を集計して正答率を算出し、JCATに使用する単語を選定するなどの手続きを実施する予定である。候補単語が決まった後には、検査図版としてJCAT仮版を作成する計画である。その後、JCAT仮版を使用して予備調査へと進み、さらに、予備調査の結果を踏まえて、必要に応じて、修正変更を行い、標準化のための本調査を実施する予定である。あわせて、予備調査用・本調査用の記録用紙を作成したり、マニュアルをまとめる計画である。また引き続きCAT開発者らと連絡をとり、経過を報告し質疑応答を実施して、JCATとして取りまとめていく。平成29年度は,本研究を進めるために,まずは文献研究を実施するとともに,イギリスで,Swinburnら(2004)が開発した失語症検査Comprehensive Aphasia Test(以下,CATと称す)に対する調査研究を行った。具体的には,CAT開発者であるSwinburn氏や共同研究者であるHoward博士らとのメールでのやりとりにて,CAT作成時の注意点や配慮点を伺うことで,CAT開発過程を詳細に把握した。今後も,必要に応じて,適宜,開発者らと打ち合わせを行う予定である。またCAT検査そのものを詳細に分析することで,CATで使用されている刺激語に関する心理言語学的変数などを明らかにした。CATでは,心理言語学的変数として,各刺激語の頻度や親密度,心像性などがコントロールされている。我が国では,心理言語学的属性を明らかにした膨大なデータとして,NTTデータベース(天野ら,1999)がある。CAT日本語版での語の選定にあたっては,そのデータベースを利用することを確認した。現在,CAT中のいくつかの下位検査については,予備的に刺激語を選定中であり,かつ選定した語に関してはイラストも作成中である。イラストが完成した後には,イラストを使用したname agreementテスト(名称一致度検査)へと進む予定である。さらにCATには,失語症当事者に失語症になったことへの思いや抱える問題を調査する質問紙が含まれている。その質問紙には計21項目の質問があり,回答は5段階尺度の選択肢となっている。現在,各質問文の邦訳と選択肢の表現について検討中である。この質問紙に関しても,Swinburn氏らとのやりとりを行い,邦訳にあたっての注意点やアドバイスを頂戴している。失語症検査CATの日本版を作成することを目的としている。しかし,直訳しても,英語圏と日本とでは,用いる言語や文化的な違いがあるため,日本の失語症者にはなじみがなかったり,適切ではない刺激語があることが見出された。そのような問題への解決にあたり,検討時間を要したり,CAT開発者への問い合わせを行ったりした。そのため,当初の予定よりも進行がやや遅れている状況である。現在,翻訳に関する文献研究を行ったり,CAT開発者から回答やアドバイスが得られたことにより,方針が定まってきた下位検査もある。

そのような下位検査に関しては,name agreementテストの実施など,次の研究段階に進めていきたい。本年度は、イギリスで開発された失語症検査CAT(Comprehensive Aphasia Test)の作成者らと情報交換を行いながら、CAT日本語版作成をめざして、各下位検査の刺激語を選定するための調査などを実施した。CATでは、失語症当事者に「ここ1週間」の気持ちや様子を伺う質問紙AIQ(Aphasia Impact Questionnaire-21)に加えて、言語機能や非言語機能を調べる下位検査27項目が含まれる。例えば下位検査17「呼称」に関して、使用される単語は計24語であるが、日本語としての使用頻度などの心理言語学的変数を考慮して、候補単語を約100語抽出した。その後、イラストレーターに候補単語のイラストを描いてもらった。さらに、それらのイラストを用いて、CATで求められている、Name Agreementテスト(名称一致度調査)を実施した。健常者約80名への調査結果に基づき、現在、CAT日本語版の「呼称」に使用する単語を選定中である。また下位検査2「意味記憶」は、例えば「猿」のイラストに対して、4つの選択肢のイラスト、具体的には「バナナ」「洋ナシ」「チョコレート」「封筒」から、意味的に一番近いイラスト(ここでは「バナナ」)を選択する課題であるが、各単語の意味的関連性を調べるために、日本人健常者約45名を対象に調査を行った。その結果を踏まえて、「意味記憶」に使用する語とイラストを選定した。さらに音読や復唱の下位検査では、心理言語学的変数をもとに、候補語をリストアップし、年代の異なる健常者に音読や復唱課題を実施した。健常者でも音読しにくい語があったため、そのような語は候補単語から削除するなど、候補単語を選定するための調査や工夫を行った。このように計27の下位検査に求められる属性や心理言語学的条件に応じて、下位検査ごとに検討を進めている。本研究では、CAT日本語版(JCAT)を作成することを目的としている。原版CATでは、刺激語を選定するためにName Agreement検査(名称一致度調査、以下NA調査と称す)が必要とされ、NA調査で求められる基準、つまりそのイラスト(単語)を使用してもよいという基準は85%以上であることが望ましいとされている。NA調査を実施した結果、85%の基準に満たない単語(イラスト)もあったため、NA検査の2回目および3回目を行った。このようにJCATで使用する刺激語の選定にあたり、必要な調査に時間がかかっている。現在、NA調査3回目が終わっため、今後集計して、下位検査7「単語の聴理解」や下位検査8「単語の読解」などに使用する単語を選定していく予定である。今後,name agreementテストを実施できる下位検査に関しては,name agreementテスト実施に向けて,早急に,実施手順などの各条件を整備する予定である。
卵母細胞翻訳系を用いた脳幹部グリシン受容体の機能と薬理学的意義に関する研究

本研究課題に関連して2つの研究を実施した.第1に,中枢ニューロン,特に延髄孤束核ニューロンにおける,麻薬性および非麻薬性鎮咳薬のグリシン誘発電流抑制作用が同じ機序(あるいは同じ作用部位)によるのか否かについて、薬理学的観点からパッチクランプ法を用いて検討した.第2に,咳反射の中枢内伝達機序にグリシンが関与しているのか否かについての基礎知見を得るために,独自に考案した浮遊式のin vivoマイクロダイアリシス法を用いて検討した.その結果,以下の成績および結論を得た.(1)モルヒネ(Mo)およびコデイン(Co)は,11000μmの濃度で濃度依存的にグリシン誘発電流(L_<gly>)を抑制した.両薬物の作用強度はデキストロメトルファン(DM)の薬1/6であった.(2)MoおよびCoのI_<gly>抑制作用は,オピオイド受容体,σ受容体,や5-HT_1,5-HT_2および5-HT_3受容体のそれぞれのブロッカーによって影響を受けなかった.(3)Mo30μmはDMと同様にI_<gly>の濃度-反応曲線の最大反応を抑制せず,この曲線を右側に移動させた.(4)MoおよびCoのI_<gly>抑制作用にuse-dependencyは認められなかった.(5)気管分岐部への5%クエン酸液噴霧による咳の発現時間帯に,延髄孤束咳から採集したサンプルにおいて,グリシンレベルは刺激前のレベルの171.1【plus-minus】20.5%(basalレベルは76.2【plus-minus】4.9pmol/10μl)となり,この増加は対照群に比べて有為であった.他のアミノ酸レベルは変動しなかった.(6)グリシン増加例のプローブ先端の位置は,閂から吻側へ6001000μm,正中から外側へ4001000μm,深さ6001000μmの位置にあった.(7)孤束咳のグリシンレベルは,高K^+刺激により有意に増加し,この増加はCa^<2+>依存性であった.以上の成績から,MoとCoは,DMと同様にグリシン受容体に作用していること,また,延髄孤束核において,グリシンは,咳反射の中枢内機序の一部に関与している可能性のあること,が示唆された.本研究課題に関連して2つの研究を実施した.第1に,中枢ニューロン,特に延髄孤束核ニューロンにおける,麻薬性および非麻薬性鎮咳薬のグリシン誘発電流抑制作用が同じ機序(あるいは同じ作用部位)によるのか否かについて、薬理学的観点からパッチクランプ法を用いて検討した.第2に,咳反射の中枢内伝達機序にグリシンが関与しているのか否かについての基礎知見を得るために,独自に考案した浮遊式のin vivoマイクロダイアリシス法を用いて検討した.その結果,以下の成績および結論を得た.(1)モルヒネ(Mo)およびコデイン(Co)は,11000μmの濃度で濃度依存的にグリシン誘発電流(L_<gly>)を抑制した.両薬物の作用強度はデキストロメトルファン(DM)の薬1/6であった.(2)MoおよびCoのI_<gly>抑制作用は,オピオイド受容体,σ受容体,や5-HT_1,5-HT_2および5-HT_3受容体のそれぞれのブロッカーによって影響を受けなかった.(3)Mo30μmはDMと同様にI_<gly>の濃度-反応曲線の最大反応を抑制せず,この曲線を右側に移動させた.(4)MoおよびCoのI_<gly>抑制作用にuse-dependencyは認められなかった.(5)気管分岐部への5%クエン酸液噴霧による咳の発現時間帯に,延髄孤束咳から採集したサンプルにおいて,グリシンレベルは刺激前のレベルの171.1【plus-minus】20.5%(basalレベルは76.2【plus-minus】4.9pmol/10μl)となり,この増加は対照群に比べて有為であった.他のアミノ酸レベルは変動しなかった.(6)グリシン増加例のプローブ先端の位置は,閂から吻側へ6001000μm,正中から外側へ4001000μm,深さ6001000μmの位置にあった.(7)孤束咳のグリシンレベルは,高K^+刺激により有意に増加し,この増加はCa^<2+>依存性であった.以上の成績から,MoとCoは,DMと同様にグリシン受容体に作用していること,また,延髄孤束核において,グリシンは,咳反射の中枢内機序の一部に関与している可能性のあること,が示唆された.
デジタルコアラボラトリー構築を目指した原油回収の学理の構築

デジタルロック技術の実用化を目指して,空隙スケールでのX線CT計測による流体力学的な現象解明手法の開発を行うとともに,空隙スケール計測に基づいた流動数値シミュレーションを行った.流動計測では,原油回収効率の低下の原因になっているスナップオフ現象の直接可視化を行った.また,水・ガス相互圧入やサーファクタント攻法などの原油増進回収法のメカニズムの解明を行った.従来の定性的な現象理解を超える,定量的な把握が可能になった.計測された構造を対象とした単相流および多相流数値解析を行った.特に,トラップされた非湿潤相から湿潤相への物質輸送現象の理解に着目し,CO2ガスに見られる特異な物質輸送現象を見出した.原油回収効率の大幅な向上に資する技術として期待されているデジタル・コア・ラボラトリーの実用化に向け,多孔質内部の空隙スケールでの流動ダイナミクスの計測技術開発を行う.これまでに独自に開発してきたマイクロフォーカスX線CT装置を駆使した可視化手法により,従来の体積平均化されたダルシースケールの現象理解から,空隙スケールでの流体力学的な現象理解へ深化させることにより,多孔質内混相流に関する学術基盤を整備する.これらの知見に基づいて,高効率原油回収手法の開発を行う.具体的には,水・ガス交互圧入法およびサーファクタントフラッディングの原油回収メカニズムを解明する.空隙スケール計測を数値解析と融合し,デジタル・コア・ラボラトリーの実用化に向けた開発を推進する.本年度は,空隙スケールでの現象計測に基づいて,原油回収プロセスにおける多孔質媒体の水・油に対する濡れ性が回収率に与える影響を調べた.親油性の場合,置換プロセスは濡れ性・毛管力の影響を受け,油が細いポアスロート及びその先のポアに残留した.また,連続性を保った不動水の影響を大きく受け,油がネットワークスケールの塊になって残留する様子が観察された.しかし,水・ガスの交互圧入を行うと二回目の水注入時にトラップされたガスが流動を妨げるため,残留した油が生産された.親水性の場合,一回目の水注入で多くの油が生産され,その後の油の生産性向上は見られなかった.トラップされた油はガスによって押し出されるが,二回目の水によって流され,今度はガスがトラップされたポアに入り込むためである.このため親水性の場合,水ガス相互注入を行ったとしても油の生産性向上は期待できないことが明らかとなった.デジタル・コア・ラボラトリー構築に向けた取り組みとして,取得した多孔質媒体に対する直接数値解析を開始した.原油回収効率の大幅な向上に資する技術として期待されているデジタル・コア・ラボラトリーの実用化に向け,多孔質内部の空隙スケールでの流動ダイナミクスの計測技術開発を行うと共に,取得した多孔質構造に対する直接数値解析を開始した.油で飽和された親水性多孔質から水攻法にて油の生産を行い,残留した油クラスターのサイズ分布を調べた.焼結ガラスのポアスロート比や配位数のバラつきが大きく,ガラスビーズに比べて不均質な構造をしているため,強いフィンガリングが発生しやすく,大きな無限大クラスターができる.また,親油性及び親水性焼結ガラスを用いて多孔質体の濡れ性がτの値に与える影響を調べた.親油性の場合τ=2.0002,親水性の場合τ=2.005となり,親油性焼結ガラスを用いた場合のτの値よりやや小さくなったが,濡れ性の影響は小さかった.将来のデジタルロック技術に向けた数値解析の技術開発を行うために,CT画像からデジタルロックを生成し,ポアスケールの多相流解析および濃度分布解析を行った.二相流解析でスピノーダル分解をシミュレーションし,ガス気泡の多孔質内部へのトラップ現象を再現した.この状態に対して,CCSの溶解トラップで重要となる物質輸送の数値解析を行なった.LBMとCIP法を併用することで,複雑な多孔質構造内でも三次元移流拡散方程式を解くことができた.その結果,主流においては下流に進むほど平均濃度が増加して物質溶解が弱まることが分かった.特に,濃度が飽和濃度に達した位置で溶解のフロントが形成されると考えられる.対流を強くすると,気泡表面からの物質供給が十分に行われている条件ではシャーウッド数との間で線形の関係になった.飽和率が増加すると,多孔体全体でCO2濃度が増加するとともに,飽和濃度に達するまでの距離が短くなった.これが原因となり,飽和率が増加するとき,物質輸送が低下することが示された.X線CTを用いた多孔質の空隙構造の取得と数値計算への実装は既に達成している.空隙スケールでの油の生産メカニズムについては,これまでにガラスビーズ充填層において観測を行った結果,ピストンライクディスプレースメントは観察されたが,スナップオフは観察されなかった.本年度は,焼結ガラス多孔質を用いて,多孔質媒体の表面荒さやポア・スロートの面積比を変化させた結果,スナップオフ現象を観察することができた.これと並行して,残留した油泡サイズを統計的に分析する手法を確立し,パーコレーション理論と呼ばれる数理モデルとの比較を行った.一方,本年度からデジタルロック技術の実用化に向けた数値シミュレーションにも着手した.CTにより取得した4種類の多孔質媒体に対して,単相流解析を行い,透過率などのパラメーターの取得の可能性と問題点について議論した.次に,多孔質内部の物質輸送特性の解明を目的として,次の3ステップの解析を行った.

始めに,二相流解析により,スピノーダル分解過程を解析し,ガス気泡が多孔質内部に毛管力によりトラップされる様子を再現した.次に,ガス気泡回りの流動場を単相流解析により求めた.最後に,この流動場に対して物質輸送を解析して,ガス気泡と水の間の物質輸送特性を解析した.これらの解析にはTSUBAMEを用いている.以上のように,予定をやや上回るペースで研究は進捗している.ナノ流体を用いた原油生産向上のメカニズムのについて調べた.ナノ流体の濃度を大きくすると,原油の生産効率は上昇するが,すぐに減少方向に向かい,今回用いたナノ粒子の場合,5 wt%あたりに最適値が存在することが確認された.ナノ流体を添加した場合,ブレイクスルー後の生産の低下が抑制され,長時間かけて生産が継続されることにより,回収効率の向上が達成されている.このとき,多孔質の内部に残留する油胞のクラスターサイズも細分化されており,界面張力の低下による油胞の細分化が継続的な生産に寄与していることが分かった.将来のデジタルロック技術に向けた数値解析の技術開発を行うために,CT画像からデジタルロックを生成し,ポアスケールの多相流解析および濃度分布解析を行った.特に,本年度は実験的により取得された多孔質内部の物質輸送現象を数値的に解釈することを目指し,実験と同一条件,同一多孔質を用いた数値シミュレーションを行った.X線CTにより取得したプラスティック粒子充填層に対する数値シミュレーション方法の開発を行った.昨年度までに開発した,トラップ状態計算,流動場計算,移流拡散現象計算の3段階計算を行い,物質輸送現象における局所的な流動現象の影響について明らかにした.すなわち,多孔質内部にトラップされている非湿潤相は物質輸送(溶解)により,飽和率が低下するが,低飽和率にて物質輸送が抑制される現象が観察される.従来,この現象の説明はなされていないが,数値的なアプローチにより,多孔質内部の移流が非活発な領域があり,ここにトラップされた非湿潤相が長く溶解せずにとどまるため,いわゆる二重フロントを形成することが明らかとなった.デジタルロック技術の実用化を目指して,空隙スケールでのX線CT計測による流体力学的な現象解明手法の開発を行うとともに,空隙スケール計測に基づいた流動数値シミュレーションを行った.流動計測では,原油回収効率の低下の原因になっているスナップオフ現象の直接可視化を行った.また,水・ガス相互圧入やサーファクタント攻法などの原油増進回収法のメカニズムの解明を行った.従来の定性的な現象理解を超える,定量的な把握が可能になった.計測された構造を対象とした単相流および多相流数値解析を行った.特に,トラップされた非湿潤相から湿潤相への物質輸送現象の理解に着目し,CO2ガスに見られる特異な物質輸送現象を見出した.本年度はまず,既設のX線CT装置の受光パネルの増強を行い,計測時間の短縮と高解像度化を行った.従来に比べて,高解像度かつ高時間分解でCT画像の取得が可能となり,従来計測が困難であった,ポアスナップオフ現象の可視化が可能となった.従来の研究では二次元多孔質プレートを使用して三相流を可視化してきている.本研究ではこれを3次元多孔質媒体へと拡張して実験・観察を行った.
ヒト無精子症関連遺伝子の網羅的解析

SPATA17遺伝子およびLMTK2,PARP-2遺伝子に着目し、減数分裂異常による無精子症患者と正常コントロール群との比較解析を行い、LMTK2,PARP2遺伝子はともにヒト減数分裂異常による無精子症に関連することを明らかにした。また、ヒト精巣を用いたマイクロアレイ解析により同定された遺伝子の一つであるSPATA17の解析では、3カ所のSNPを認め、SNP3のアレル出現頻度は無精子症患者で有意に高率であり、ヒト精子形成に関与することを明らかにした。ヒト無精子症原因遺伝子を複数同定し、精子形成メカニズム、特に減数分裂過程のメカニズムを解明することを目的に、本年度はマウスで減数分裂異常による無性症をきたすRPDM9(MISETZ), CDK2, PSMC3IP遺伝子に着目し、減数分裂異常による無精子症患者18名とコントロール群300名を対象として検討した。1. RPDM9のmutation解析を施行し3つのcoding single nucleotide polymrphism(SNP1, 2, 3)を同定した。Genotypeおよびアレルの出現頻度の解析を行ったところ,無精子症患者とコントロール群の間にSNP2とSNP3において有意差が認められた(p<0.05)。SNP3のメチレーション解析を行ったが、正常とバリアントの間に差は認められず, RPDM9のSNPの精子形成に関する役割の解明にはいたらなかった。2. CDK2, PSMC3IP遺伝子の検討では、各々1つのSNPを認めたが、いずれのSNPにおいても無精子症患者とコントロール群の間にgenotype,アレルの出現頻度に有意差は認められなかった。今回の成績からRPDM9で同定されたSNPの機能は十分に解明できない結果であったが、ヒト精子形成過程、特に減数分裂に重要な役割を担っている可能性が示唆された。今後新たな無精子症関連遺伝子群の同定、および、同定された遺伝子の精子形成に関する機能解析を行う予定であるヒト無精子症に関連する遺伝子群を同定し、精子形成メカニズム、特に精子形成時の減数分裂過程の異常を解明することを目的に、今年度はSPATA17遺伝子およびLMTK2,PARP-2遺伝子に着目し減数分裂異常による無精子症患者と正常精子形成を有する対象群と比較検討を行った。1)18名の減数分裂停止による無精子症患者、20名のsertoli cell only患者、96名の健常者に関しSPATA 17遺伝子に関し検討した結果、無精子症患者のSPATA17遺伝子にmutationは認められなかったが、3個のSNPを認め、そのうちのSNP3のアレル頻度は減数分裂異常による無精子症患者で有意に高率であり、SPATA17遺伝子はヒトの造精機能に関与することが明らかとなった。2)LMTK2およびPARP-2遺伝子のmutation解析によりLTMK2には9個のSNPを、PARP2には5個のSNPを認めた。LMTK2のすべてのSNPには無精子症とコントロール間のアレル頻度に差は認められなかった。PARP2のSNP1のアレル頻度は患者群で有意に高く、ハプロ解析ではSNP1-4で有意に患者群で高率である結果より、PARP2遺伝子はヒト精子の減数分裂に強く関与することを明らかにした。今回の成績からSPATA17およびPARP-2遺伝子は精子形成とくに減数分裂に重要な役割を担っていることが明らかとなった。今後はさらなる精子形成に関与する遺伝子群を同定し、機能解析を行う予定である。ヒト無精子症に関連する遺伝子群を同定し、精子形成メカニズム、特に精子形成時の減数分裂過程の異常を解明することを目的に、これまでLMTK2,PARP2遺伝子は、ともにヒト減数分裂異常による無精子症に関連すること、また、ヒト精巣を用いたマイクロアレイ解析により同定された遺伝子の一つであるSPATA17の解析では、3カ所のSNPを認め、SNP3のアレル出現頻度は無精子症患者で有意に高率であることから、SPATA17遺伝子も減数分裂異常による精子形成障害に関連することを明らかにした。本年度は、減数分裂異常による無精子症患者,セルトリ細胞症候群および正常精子形成群を対象としてSEPTIN12遺伝子に着目し3群間の比較検討を行い、以下の結果が得られた。SPATA17遺伝子と同様に、ヒト精巣を用いたマイクロアレイ解析により同定された遺伝子の一つであるSEPTIN12遺伝子の解析ではmutationは認められなかったが、8カ所のSNPを認め、SNP3,4,6のアレル出現頻度はセルトリ細胞症候群患者で他の群と比較し有意に高率であり、ヒト精子形成に関与することが示唆された。今回の成績からSEPTIN12遺伝子は精子形成に重要な役割を担っていることが明らかとなり、今後はこれらの遺伝子の精子形成に関与するメカニズムを明らかにしたいと考えている。
モンテーニュの『エセー』における、歴史をめぐる諸考察

主要課題であるモンテーニュの研究については、博士論文をおよそ八割がた完成させ、提出のめどが立ちつつある。具体的には、自己について語る歴史家とモンテーニュのエクリチュールとの関係を明らかにした。古代のカエサルやクセノフォン、モンテーニュに近い時代のコミーヌやデュ・ベレー兄弟からジャック・オーギュスト・ドゥ・トゥーやアウリッパ・ドービニェに至る、回想録を著した歴史家たちである。そこでは、修辞学の枠組みの中で行われる公式の歴史記述とは反対に、自分の経験したありのままの出来事を潤色抜きの簡潔な文体で表すような「裸の歴史」が奨励された。それらは、建前としては無視無欲な視点から同時代の重要な出来事を記述し、公式の歴史記述に材料を提供するものとされるが、実際は、自己の近親者や後世に対して自分の行動を弁疏するという意図をしばしば持っていた。16世紀を通じて次第に盛んになっていったこのようなジャンルとの比較から、『エセー』における、文体の選択、作者としての自己正当化、想定する読者との関わり方、といった問題を解明した。2012年度にはまた、16世紀フランスの歴史記述のあり方をより広い視点から捉えるべく、二つの論文を発表した。一つは、アンリ二世の王室修士官であったピエール・パスカルと、時に彼の友人であり時に彼と反目したプレイヤード派の詩人たち及びその周辺の文学者たち(ロンサール、デュ・ベレー、オリヴィエ・マニー、アドリアン・トゥルネブス、エチェンヌ・パーキエなど)とのやり取りから、世紀中葉の、キケロ主義的な歴史記述からの転換点を明らかにした。もう一つは、同世紀末の法曹歴史家の代表的な一人であるニコラ・ヴィニエの『歴史叢書』に関する論文である(2013年3月時点では未刊行)。これは、シチリアのディオドロスの同名の書から名を取ったものであるが、世紀後半における、人類の過去すべてを網羅しようとする「全体史」への指向と、フランス王権の文献学と歴史研究に基づいた顕揚という二つの方向性が、いかに緊張感をはらみつつ共存しているかを明らかにした。申請者は、現在準備中の「モンテーニュの『エセー』における、歴史をめぐる諸考察」と題する博士論文において、『エセー』を同時代の様々な歴史・歴史記述論との関係から読み直すとことを目指して研究を進めている。本年度は特に、歴史における「真実の探求」をめぐる認識論的な問題を取り扱った。具体的には、16世紀フランスの法曹歴史家たちによる方法論的な「真実の探求」が、モンテーニュによってどのように理解され、利用され、また反駁されているかについて、ジャン・ボダンやエチェン・パーキエ、アンリ・エチエンヌといった同時代の重要な歴史家・歴史理論家との対照から検討し、モンテーニュの『エセー』の中における、実証的な方法論の有用性とその限界、証言の信頼性と証言者の「権威」の関係、「真実」と「真実らしさ」(あるいは「信じられること」)の齟齬といった複層的な問題を析出することができた。このために、前年度から引き続いて、本年度10月までパリに滞在し、16世紀文学研究の専門家とコンタクトを取る一方、図書館等で多くの貴重な資料を閲覧、複写することができた。また、モンテーニュ研究において最も権威のある雑誌の一つである、Montaigne Studies誌に記事を発表することができたのも、大きな成果であった。この論文は、背教者ユリアヌスを擁護したとしてスキャンダルを引き起こした、「良心の自由について」という『エセー』の重要な章を、法曹歴史家たちの政治思想の淵源にあったガリカニスムの伝統及びマキャヴェリ的な政治理論という視点から読み直したものである。また、プレイヤード派の周辺に位置し、ロンサールとも交流があったキケロ主義者の歴史家、ピエール・パスカルについて、雄弁家としての歴史家と時代の証人としての歴史家という二つの概念の相克を示す好例として分析した論文を、紀要『仏語仏文学研究』に投稿した(現在査読中)。

一つは、アンリ二世の王室修士官であったピエール・パスカルと、時に彼の友人であり時に彼と反目したプレイヤード派の詩人たち及びその周辺の文学者たち(ロンサール、デュ・ベレー、オリヴィエ・マニー、アドリアン・トゥルネブス、エチェンヌ・パーキエなど)とのやり取りから、世紀中葉の、キケロ主義的な歴史記述からの転換点を明らかにした。もう一つは、同世紀末の法曹歴史家の代表的な一人であるニコラ・ヴィニエの『歴史叢書』に関する論文である(2013年3月時点では未刊行)。これは、シチリアのディオドロスの同名の書から名を取ったものであるが、世紀後半における、人類の過去すべてを網羅しようとする「全体史」への指向と、フランス王権の文献学と歴史研究に基づいた顕揚という二つの方向性が、いかに緊張感をはらみつつ共存しているかを明らかにした。年度の初めに設定した課題をおおむね達成することができた。その上で、博士論文で取り上げるモンテーニュ以外に、同時代の幾人かの作家にまで対象を広げることができた点、大きな進展があった。引き続き、博士論文の完成を目指す。来年度は歴史の有用性をめぐる問題を分析する予定である。
ヒトに対する癌化学予防剤の選択基準に関する研究と、テーラーメイド癌予防法の開発

ヒト発癌において最も重要な癌抑制遺伝子p53は、多くの癌で失活している。本研究では、実際的な癌予防を目指し、約800種類の食品由来成分や薬剤を用いてその機能を回復・活性化させる物質の探索を行い、その作用機構を解析した。その結果、ヒト癌細胞に対して細胞増殖抑制効果を有する物質を複数見出した。さらに、その作用機構がp53標的遺伝子の発現量の調節であることを明らかにした。現在、それらを組み合わせ、動物試験により発癌抑制における相乗・相加効果の検討に移った段階である。1)ヒトに用いる癌化学予防剤の選択基準の確立に関する研究計画今までに、発癌プロモーターであるTPAがp18発現を抑制し、クルクミンとゲニスティンがこの抑制効果を阻害することを見出していた。さらに、TPAによるp18発現抑制効果を阻害する食品由来成分を探索し、植物に含まれる成分を3種類見出した。また、TPAによるp18発現抑制機構を解析し、細胞内シグナル伝達に関わるチロシンキナーゼが関与していることを明らかにした。今回見出した薬剤はp18発現が低下して生じる癌の予防剤として使用できるという可能性が示唆された。2)発癌家系であるリ・フラウメニ症候群に対するテーラーメイド予防に関する研究計画リ・フラウメニ症候群はp53遺伝子が失活しており、その機能を回復させるためにp53下流遺伝子の一つであるDR5遺伝子の発現を増加させる薬剤の探索を行った。野菜や果物に含まれ発癌予防効果を有するフラボノイドであるルテオリンとアピゲニンがDR5発現を増加することを見出した(Oncogene, Mol Cancer Ther, Horinaka M.et al.)。DR5のリガンドTRAILは癌細胞特異的にアポトーシスを誘導し、発癌抑制作用を持つ。ルテオリンおよびアピゲニンとTRAILの併用は癌細胞に強力にアポトーシスを誘導したが、正常細胞にはほとんど影響を及ぼさなかった。これらの結果から、フラボノイドとTRAILの併用はリ・フラウメニ症候群に対するテーラーメイド予防に効果的である可能性が示唆された。また、ブロッコリーに含まれるスルフォラファンやERストレス誘導剤であるツニカマイシンにも同様の効果があることを見出した(Carcinogenesis, Matsui T.et al. Cancer Res, Shiraishi T.et al.)。1)ヒトに用いる癌科学予防剤の選択基準の確立に関する研究多くの癌でp16遺伝子の不活性化が認められているが、p16遺伝子は、p15、p18、p19遺伝子からなるファミリーを形成している。我々はp16が不活性化している場合には、これらのp16ファミリーの活性化が癌予防、癌治療に有効と考え、p15の発現制御機構に関する研究を実施した。その結果、p15の発現は転写因子Oct-1に制御されていること(Hitomi T.et al.)、p15の発現はEGFRを介したMAPK/MEK経路により制御されていること(Koyama M.et a1.)を明らかにした。今回見いだした成果は、p16が不活性化している場合のp15誘導による癌予防法の開発に重要な示唆を与えるものである。2)発癌家系であるリ・フラウメニ症候群に対するテーラーメイド予防に関する研究遺伝子の一つであるDR5遺伝子の発現誘導を増加させる薬剤の探索を行った。ホヤや貝類に含まれるカロテノイドであるHalocynthiaxanthinがDR5発現を増加させることをみいだした(Yoshida T.et a1.)。DR5のリガンドTRAILは癌細胞特異的にアポトーシスを誘導するが、HalocynthiaxanthinとTRAILの併用は癌細胞には強力にアポトーシスを誘導した。これらの結果、HalocynthiaxanthinとTRAILの併用はリ・フラウメニ症候群に対するテーラーメイド予防に効果的であることが示唆された。またFenretinideや15-deoxy-Δ^<12,14>-prostaglandin J_2にも同様な効果があることを見出した(Kouhara J.eta1.& Nakata S.eta1.).1)ヒトに用いる癌化学予防剤の選択基準の確立に関する研究多くの癌で、癌抑制遺伝子p16の不活性化が認められている。我々は、p16のファミリー遺伝子であり、G1期での細胞周期停止に関与するp15^<INK4b>の発現誘導剤の探索を行った。その結果、ZD1839(gefitinib, Iressa)や、新規MEK阻害剤であるJTP-70902に、p15<INK4b>の発現誘導能を見いだした。今回の成果は、p16が不活性化している場合のp15誘導による癌化学予防法の開発に重要な示唆を与えるものである。2)発癌家系であるリ・フラウメニ症候群に対するテーラーメイド予防に関する研究リ・フラウメニ症候群は、癌抑制遺伝子p53遺伝子が失活している悪性腫瘍多発家系である。

p53により活性化されるp53標的遺伝子のタンパク量が減少するために、細胞増殖抑制やDNA修復やアポトーシスがおきなくなっている。そこで、p53標的遺伝子として、GI期での細胞周期停止に関与しているp21と、アポトーシス誘導に関与しているDR5の発現を誘導する薬剤・食品由来成分の探索を行った。その結果、p21発現誘導成分の検討において、新規HDAC阻害剤であるYM753や、植物成分であるsulforaphaneやcryptolepineに、p21の発現誘導能を見いだした。また、DR5発現誘導成分の検討において、カロテノイドであるhalocynthiaxanthinやperidinin、リポキシゲナーゼ阻害剤であるnordihydroguaiaretic acid、抗血小板薬であるdipyridamoleに、それぞれDR5発現誘導能があることを見出した。そしてそれらと、DR5の特異的リガンドであり、抗腫瘍性サイトカインであるTRAILとの併用によって、腫瘍細胞に対するアポトーシス誘導が、TRAIL単剤に比べて著しく増強することを確認した。今回の成果は、リ・フラウメニ症候群に対するテーラーメイド予防法の開発に重要な示唆を与えるものである。1)ヒトに用いる癌化学予防剤の選択基準の確立に関する研究RB経路はヒト発癌において最も重要な経路であり、この経路を回復・活性化させる食品成分の探索を行い、それらの成分の作用機構を解析した。さらにこれら食品由来成分を組み合わせて発癌抑制における相乗・相加効果の検討を行った(現在、論文投稿中)。2)発癌家系であるリ・フラウメニ症候群に対するテーラーメイド予防に関する研究リ・フラウメニ症候群は、癌抑制遺伝子p53遺伝子が失活している悪性腫瘍多発家系である。p53により活性化されるp53標的遺伝子のタンパク量が減少するために、細胞増殖抑制やDNA修復やアポトーシスが生じなくなっている。そこで、p53標的遺伝子として、アポトーシス誘導に関与しているDR5の発現を誘導する薬剤・食品由来成分の探索を行った。尿酸合成阻害薬のallopurinol、抗血小板薬のdipyridamole、さらに植物成分では、生薬オウゴンの成分であるbaicalein、生薬カンゾウの成分であるisoliquiritigenin、ダイコンやタマネギの成分であるkaempferol、マメ科植物の成分であるbrandisianin Dに、それぞれDR5発現誘導能があることを見出した。さらに、これまでの研究成果から、in vitro試験においてp53標的遺伝子の発現量を調節する作用を有する食品由来成分を組み合わせ、in vivo試験により発癌抑制における相乗・相加効果の検討に移った段階である。
歴代構造物の漏水自然治癒現象の分析を通した新しいひび割れ自己治癒技術の開発

現在,様々なひび割れ自己治癒メカニズムが提案されているが,本研究では,鉱物混和材料による化学作用を利用した自己治癒に着目し,この機能をコンクリートに付与させることで,構造物の長期的な信頼性を向上させることを目的としている.1次年度には,まず歴代土木構造物の漏水状況とそういう構造物で一部ひび割れが自己治癒されるようになる現象を検討して,その治癒メカニズムの究明と生成物の化学分析を行った.また2次年度には,このようなひび割れの自己治癒に効果があると推定される組成物によるセメント化学作用を利用した自己治癒に着目し、この機能をひび割れ補修材に付与させることで,構造物の長期的な信頼性を向上させることを目的として行った.具体的には,自己治癒コンクリートの既往の研究を参考にして,新規建設トンネル現場、既存トンネル漏水補修工事への自己治癒コンクリートの適用を基礎検討行った.想定する工法は,新設構造物を対象として,自己治癒組成物を含む吹付けコンクリートを施工することにより構造物全体のひび割れを治癒させる方法と,既設構造物を対象として,ひび割れ部に適当な間隔で削孔を行い,そこに自己治癒成分を含む補修材を充填することにより周辺のひび割れを治癒させる方法であり,両工法を模擬した室内簡易通水試験により検討した.検討の結果,系全体ではなく一部分に自己治癒組成物を含有する場合でも,止水性能の旧複が認められ,自己治癒メカニズムに基づく効率的な漏水抑制対策の可能性が示唆された.現在,様々なひび割れ自己治癒メカニズムが提案されているが,本研究では,鉱物混和材料による化学作用を利用した自己治癒に着目し,この機能をコンクリートに付与させることで,構造物の長期的な信頼性を向上させることを目的としている.1次年度には,まず歴代土木構造物の漏水状況とそういう構造物で一部ひび割れが自己治癒されるようになる現象を検討して,その治癒メカニズムの究明と生成物の化学分析を行った.また2次年度には,このようなひび割れの自己治癒に効果があると推定される組成物によるセメント化学作用を利用した自己治癒に着目し、この機能をひび割れ補修材に付与させることで,構造物の長期的な信頼性を向上させることを目的として行った.具体的には,自己治癒コンクリートの既往の研究を参考にして,新規建設トンネル現場、既存トンネル漏水補修工事への自己治癒コンクリートの適用を基礎検討行った.想定する工法は,新設構造物を対象として,自己治癒組成物を含む吹付けコンクリートを施工することにより構造物全体のひび割れを治癒させる方法と,既設構造物を対象として,ひび割れ部に適当な間隔で削孔を行い,そこに自己治癒成分を含む補修材を充填することにより周辺のひび割れを治癒させる方法であり,両工法を模擬した室内簡易通水試験により検討した.検討の結果,系全体ではなく一部分に自己治癒組成物を含有する場合でも,止水性能の旧複が認められ,自己治癒メカニズムに基づく効率的な漏水抑制対策の可能性が示唆された.現在,様々なひび割れ自己治癒メカニズムが提案されているが,本研究では,鉱物混和材料による化学作用を利用した自己治癒に着目し,この機能をコンクリートに付与させることで,構造物の長期的な信頼性を向上させることを目的としている.1次年度には,まず歴代土木構造物の漏水状況とそういう構造物で一部ひび割れが自己治癒されるようになる現象を検討して,その治癒メカニズムの究明と生成物の化学分析を行った.一例として,1950年代に建設された黒部ダムにおける内部トンネルひび割れに自然的に多くの2次生成物が生成されたことを確認することができた歌以外にも歴代構造物の2次生成物分析を通じて,炭酸カルシウムの形成と圧縮強度において様々なorganic substrateの影響があることが分かった.このようなbiomineralは有機成分を持った炭酸カルシウム複合体で破壊抵抗が一般純粋な無機物單結晶より高い材料である.したがって,今まで開発された材料以外にも1次年度で確認された結果を応用しでひび割れ部位の2次生成物に高い強度を発現する無機化学物を製造することができると考えている.特にこのような強度が増進された炭酸カルシウムは止水性能以外にも構造物の機械的特性を修復する可能性が高いと考えている.また2次年度には,このようなひび割れの自己治癒に効果があると推定される組成物によるセメント化学作用を利用した自己治癒に着目し、この機能をひび割れ補修材に付与させることで,構造物の長期的な信頼性を向上させることを目的としている.現在,様々なひび割れ自己治癒メカニズムが提案されているが,本研究では,鉱物混和材料による化学作用を利用した自己治癒に着目し,この機能をコンクリートに付与させることで,構造物の長期的な信頼性を向上させることを目的としている。1次年度には,まず歴代土木構造物の漏水状況とそういう構造物で一部ひび割れが自己治癒されるようになる現象を検討して,その治癒メカニズムの究明と生成物の化学分析を行った.また2次年度には,このようなひび割れの自己治癒に効果があると推定される組成物によるセメント化学作用を利用した自己治癒に着目し、この機能をひび割れ補修材に付与させることで,構造物の長期的な信頼性を向上させることを目的として行った.

具体的には,自己治癒コンクリートの既往の研究を参考にして,新規建設トンネル現場、既存トンネル漏水補修工事への自己治癒コンクリートの適用を基礎検討行った.想定する工法は,新設構造物を対象として,自己治癒組成物を含む吹付けコンクリートを施工することにより構造物全体のひび割れを治癒させる方法と,既設構造物を対象として,ひび割れ部に適当な間隔で削孔を行い,そこに自己治癒成分を含む補修材を充填することにより周辺のひび割れを治癒させる方法であり,両工法を模擬した室内簡易通水試験により検討した.検討の結果,系全体ではなく一部分に自己治癒組成物を含有する場合でも,止水性能の旧複が認められ,自己治癒メカニズムに基づく効率的な漏水抑制対策の可能性が示唆された.
レオナルド・ダ・ヴィンチの『絵画論』研究:その比例理論の位置づけ

今日までレオナルドの比例論についての定説は、音楽的な調和比例に基づく分数システムと考えられてきた。この考えはウィットコーワの『ヒューマニズム建築の源流』を始めとしてパノフスキーの研究以後定説化し、ペドレッティやレティなどにも支持されてきている。筆者のレオナルドの『人体権衡図』研究以前にヴィトルヴィウスの調和比例の解釈は単純な整数比の分数システムとする見方以外はもたらされていない。この研究はレオナルドの『絵画論』第一章の「パラゴーネ」(paragone)に含まれる記述と、人体比例研究の具体的素描を比較し、パラゴーネに書かれた「神聖比例」が黄金分割を意味することを目的としている。この「パラゴーネ」に本研究で検討した課題として、美しい顔とその容貌のプロポーションについて記述した部分が存在している。何故ならこれらの記述の中に'divinaproportione'と記した部分が三箇所あるが、「神聖な比例」と訳されているだけで、今日までプロポーションに係る形容詞である'divina'のもつ意味が、レオナルドの人体比例研究と対照して検討されていなかった。ごく近年のファラゴの研究のように黄金分割を想定しているものも具体的比例関係は何も示していない。この研究でジゥセッペ・ファバロの検討を吟味した結果、レオナルドの数値が黄金分割を示す線形回帰数列とフィボナッチ数列が、調和比例の分数表記に使われていることが明らかになった。ヴェネチアのアカデミア美術館紙葉236に残された記述や、ウィンザー紙葉12601および『人体権衡図』の比例関係の記述がそこに使われた数学的なパラダイムから見た結果、レオナルドの比例論の形成過程において黄金分割の無理数を単純な整数として使っていることが明らかになった。レオナルド・ダ・ヴィンチの『絵画論』をホイヘンス稿本と対照して検討してゆくこの研究は、1997年の鹿島美術研究でのレオナルドの遠近法の作図方法の研究を引き継ぐものである。本研究においてウフィツィ美術館に収蔵されたレオナルドの遠近法の作図、『マギの礼拝』背景図の素描から『マギの礼拝』制作過程を推定するための構図決定の手掛りを得ている。レオナルドの遠近法の作図を検討した鹿島美術研究での成果は、レオナルドの遠近法の作図方法と、ホイヘンス稿本の第一葉が密接に結びついていることであった。筆者はこの作図方法から、『マギの礼拝』制作過程で板絵に残された構図決定のために用いられた釘穴と推定できる幾つかの点を発見している。これらの点と遠近法の素描を板絵に写す際に使用した基準線から、『マギの礼拝』制作のための構図の枠組みを確認することができた。従来レオナルドの『マギの礼拝』背景図の素描について、ケンプやペドレッティ、ダリ・レゴーリなどの研究者から遠近法の消失点の位置が、黄金分割の位置に近いと指摘されていたが、この研究から黄金分割が導かれるための数学的原理が明らかにされ、上記の研究者の論拠となるものが提出されている。ホイヘンス稿本の第一葉の持つ数学的原理として、筆者の提唱してきた「ダブルスクェアーのフィオゲネシィス」は、『マギの礼拝』背景図の消失点の位置を決定しているだけでなく、実際の絵画作品『マギの礼拝』の制作のための構図をも確定するものであったことが明らかになっている。