hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
非ヒト霊長類の嗅球へのαシヌクレイン凝集体の接種によるパーキンソン病モデル

パーキンソン病(PD)は運動障害を中心とした神経難病で、α-シヌクレインというタンパク質が脳内に異常蓄積することで生じる。これまで細胞培養やマウスを使った実験ではα-Synの凝集体が、神経細胞から神経細胞へとまるで感染するように伝播し増幅していくことが示されているが、一方で霊長類では研究が進んでいない。我々はマーモセットの嗅球にα-Syn凝集体を接種することで、嗅覚系にα-Syn凝集体が伝播するマーモセットモデルを作成し、霊長類における凝集体の伝播経路を解明し、パーキンソン病の病態機構の解明を目指す。
医薬品を指向したα-トリフルオロメチルアルコールニユットの不斉合成法の開発

トリフルオロメチル基を有するヘテロ環状化合物は医・農薬品として利用されており,標的分子にトリフルオロメチル基を導入する方法の開発が強く望まれているが,その不斉導入法は未だ不十分である。そこで,フッ素官能基を含む複数の炭素骨格を持つ分子と標的分子とを反応させ,複雑な骨格を構築していくビルディングブロック法を基盤とした不斉合成法の開発を行った。種々のエナミンにトリフルオロピルビン酸エチル(ETFP)を即ち10mol%のキナアルカロイド/Ti(OR)_4存在下,室温,低濃度にて作用させると,光学活性α-ヒドロキシ-α-トリフルオロメチル-γ-ラクタムを一挙に得ることが高い不斉収率で得られることを見出した。また,得られた生成物は様々な化学変換が可能であり,これを鍵中間体として用い,Fluorinated oxindole, Erythrina Alkaloid, Ibophyllidine-like molecule, Fluorinated pseudo-Lactacystineなどの高度に縮環しフッ素化された医薬品様化合物群の合成へと展開した。また,本反応より得られたγ-ラクタムは自己不均一化現象を示すことも明らかとした。即ち,アキラルなシリカゲルカラムクロマトグラフィーにおける初期のフラクションの光学純度が著しく増幅されていることを確認した。本現象はわずか40%eeの試料からでも光学純粋なγ-ラクタムを得ることができる興味深い現象である。2-トリフルオロメチルアクリレート(MAF)は反応性に富んだビルディングブロックであるが,無機塩基などを用いると自身の高い反応性によって自己重合しやすく,これまで不斉反応に用いられた例は限られていた。そこでβ-ケトエステルとの不斉共役付加反応を検討し,キナアルカロイド触媒を用いることで最高でジアステレオマー比85/15,97%eeにて付加体を得ることに成功した。また本反応では1,3の隣接しないトリフルオロメチル基を含む不斉炭素中心を誘起した初の報告である。
超音波加振に基づくMRマイクロエラストグラフィ技術の開発

癌など疾病部の超早期検出を目的とした検査・診断システムにおいては,細胞レベル程度の微小疾病部を検出でき,かつその浸潤範囲を正確に同定できるような技術開発が求められており,そのための物理特性として組織の力学的特性が近年注目されている。癌など疾病組織はその進行に伴って硬さが変化するため,硬さ分布は癌の進展範囲を同定するのに重要な情報を与える。組織の硬さ分布を無侵襲で可視化するエラストグラフィは組織への変形印加技術と,超音波やMRIを用いた変形検出技術との組み合わせからなる。これら変形印加技術と変形検出技術を各々高度化・高感度化して,微細領域を標的変形でき,その変形を高感度に検出して硬さ分布を可視化できれば,細胞レベルでの疾病部の超早期発見につながる。そこで本研究では,音響放射力により組織の標的変形が可能な超音波と,その変形により生じる位相差を高感度に検出可能なMRIに着目して両技術を組み合わせ,マイクロレベルで組織の力学的特性を計測可能とする技術確立を目的とした。本年度の重点課題とした計測の高精度化・高感度化のために,昨年度製作したMRI受信コイルにおいて無感度領域に加振用超音波プローブを配置しつつ測定対象に接触可能なMRIファントムフォルダを導入した。MRI受信コイルとMRIファントムフォルダとの組み合わせにより,寒天ファントムを対象とした撮像が妥当に行われることを確認した。さらに,最適な計測アルゴリズム構築のために,超音波による音響放射力印加前後のMR信号成分の位相差から測定対象内部の変位成分を検出する信号処理方式を試みた。その結果,1μm程度の変位検出が可能であったことから,マイクロレベルでの力学特性計測の可能性が示された。検査・診断システムにおいて近年注目されているエラストグラフィ技術は、組織への変形印加技術と、超音波や磁気共鳴イメージング(MRI)技術を用いた変形検出技術との組み合わせからなる。これら変形印加技術と変形検出技術を各々高度化・高感度化して硬さ分布を可視化できれば、微細な疾病部の超早期発見につながる。そこで本研究では、音響放射力により組織の標的変形が可能な超音波と、その変形を高感度に検出可能な潜在性を有するMRIに着目して両技術を組み合わせて最適化し、マイクロレベルで組織の力学的特性を計測・可視化する技術の開発を行った。まず、音響放射力による組織変位をMRI技法により可視化するための手順及びパルスシーケンスについて、計算機シミュレーションにより検討を行った。また、加振により誘起された変位に基づく弾性率可視化法についても計算機シミュレーションにより検討を行った。その結果、微小変位に基づき、弾性率分布が可視化されることを確認した。さらに、MRエコー受信に最適な特性を有するMRI受信コイルの設計及び製作を行った。また、微弱なMR信号を受信するために差動増幅器を導入した。MRI装置としては現有の動物実験用装置(Bruker, BIOSPEC 20/30,2 Tesla)を用い、非磁性の超音波プローブをガントリ内部に配置して計測対象に接触させ駆動した。寒天製ファントムを用いた実験を行い、変位検出の前段階として、照射位置または超音波音場が推定される可能性があること、及び超音波照射パワーに応じた音響放射力による変位が検出される可能性があることを見出した。
分子間相互作用から見た電気陰性度概念の再検討

塩素原子や硫黄原子といった,第3周期(およびそれ以降)の原子を分子末端にもつような分子の静電相互作用を正しく表現するためには,これらの原子上に存在する電気四重極子の効果を考慮する必要があることを,四塩化炭素,塩化水素,および二硫化炭素などの分子を対象とした研究により,明らかにしてきた。この効果は,四塩化炭素などが極性分子と相互作用する場合に,顕著に見られると予想される。そこで本研究では,四塩化炭素と水およびメタノールの相互作用を例としてとりあげ,塩素原子上の電気四重極子が相互作用エネルギー等に対してどの程度の影響を持つものであるのかを,理論的に検討した。その結果,どちらの場合においても,C-Cl...Oという相互作用をもつ構造が,安定構造として得られることがわかった。通常使用される電気陰性度スケールではCl原子がC原子より大きな電気陰性度を持つことと,水やメタノールのO原子は部分負電荷を持つことを考え合わせると,C-Cl...O相互作用が安定であるという結果は一見奇妙であるが,Cl原子上の電気四重極子の効果によってC-Cl結合の延長上に大きな外向きの電場が生じていることによって,うまく説明できる。このことは,メタノール-四塩化炭素分子間相互作用のエンタルピーが,四塩化炭素分子どうしの相互作用と同程度であるという実験結果と,うまく対応するものと思われる。また,水と四塩化炭素の界面における液体構造を理解するのに,有用なものと考えられる。双極子微分が大きな値をとる振動モードの振動数は,溶媒分子との静電相互作用の影響を大きく受けやすい。ここで重要になる因子は,双極子微分と溶媒に由来する電場の内積として表される。この電場は多くの場合,溶質の双極子に誘起された溶媒の反作用場として表される。しかし例えば,大きな双極子微分をもつ振動モードの代表例である,カルボニル化合物のC=O伸縮振動モードの場合,四塩化炭素などのクロロアルカンなどを溶媒としたときに,このスキームから期待されるよりかなり大きい振動数シフトが実測される。この点について理解を深めるために,アセトンと4分子の四塩化炭素から成るクラスターを対象とした非経験的分子軌道計算を行い,四塩化炭素分子の周辺に存在する非分極的な静電場が,四塩化炭素溶液中における振動数シフトに大きく寄与していることを明らかにした。四素塩化炭素分子の場合,分子の周辺に存在する静電場はかなり大きく,なお且つC-Cl結合の延長線上で分子の内側から外側へ向かう方向となっている。これは,Cl原子上に1.5 au程度の大きさの四重極子が存在するためである。このようにCl原子上に大きな四重極子が存在する電子構造的理由を明らかにするため,Cl原子を含む最も簡単な分子の1つであるCl_2分子について,分子周辺の静電場と分子内の電子分布を検討した。その結果,分子内のCl原子内部における電子密度は,結合の延長線上で小さく,結合に垂直な方向で大きいことが明らかとなった.これは,3p_zに由来する被占分子軌道は1つであるのに対し,3p_xおよび3p_yに由来する被占分子軌道はそれぞれ2つずつあるためである。さらに,極性のクロロアルカンであるクロロホルムとジクロロメタンを対象として,液体構造に対する塩素原子上の四重極子の効果を検討した結果,幾つかの動径分布関数に,大きな影響が明瞭に見られることが分かった。
認知行動療法コンピューターゲームSPARXは抑うつ児童に継続的改善をもたらすか？

近年、児童・思春期における抑うつ・うつ病が認識され始め、高い有病率が報告されている。児童・思春期にうつ病と診断された者のうち6075%は、成人期にうつ病を再発するとも言われており、社会全体の問題として取り組むべき急務である。しかし、未だ多くが気づかれないままであり、幸いにも気づかれ受診に至っても年齢特有の反発や不信感などから継続せず、その結果として不登校やひきこもりという形で治療につながらない現状がある。そのような中、ニュージーランドのオークランド大学が中心となり、うつ病の精神療法の第一選択とされる認知行動療法(CBT)を取り入れたコンピューターゲーム「SPARX」が2011年に作成された。このSPARX使用により、抑うつ児童においてカウンセリングとゲーム施行は同等の症状改善が見られたことが報告された。SPARXによる支援が受けられるのはニュージーランドだけであったため、SPARX作成者であるMerryらとSPARX共同研究プロトコルを交わし、SPARX日本版の作成を開始した。SPARX日本語版を作成し科学的評価を実施することで、楽しめる抑うつ支援ツールが日本人児童にも有用であることを確認たいという研究目的で研究に着手した。平成27年8月までにSPARXの画面表示やセリフの翻訳・逆翻訳まで行い、日本語吹き替えや日本風キャラクターへの変更・開発を行っている途中であった。しかしながら、平成27年8月に本研究者への説明なしに日本語版ソフトの商業利用契約を日本の民間企業と結ぶと言う形で先方の契約違反がみられた。数カ月にわたって交渉したが契約は覆らなかった。本研究結果がどのようなものであれ今後企業がプログラムの利用範囲を規定することが確定的となり研究結果の有効活用の道もほぼ断たれたため、平成28年1月大変残念ではあるが研究中止決定に至った。
市場仲介と経済成長：日欧４研究所による国際共同研究プロジェクト

昨年度に引き続き、各研究者が分担して、理論・実証の両面から研究を進めた。プロジェクトの主要部分である市場仲介の理論を担当する渡辺は、本研究の基本概念となる論文Middleman: the visible market makersを公刊し、その発展となる研究の中間成果をアメリカ・ヨーロッパ・アジアの大学で報告している。投稿中の論文は、トップジャーナルであるJournal of Political Economyで再投稿請求を受けるなど、大きな成果が見えてきている。実証分析を担当する中島は、企業間のインタラクションに注目し、企業の近接性や集積が知識創生に持つ効果を論文にまとめ、国際査読ジャーナルに複数公刊した。上東はマクロ経済全般にかかわる理論分析に加え、歴史データを用いた職業選択分析も行った。堀井は経済成長の観点からプロジェクトの理論分析を行った。以前アメリカブラウン大学に在籍していた研究協力者がアメリカウィリアムカレッジに移籍したため、ウィリアムカレッジにて共同研究を実施した。中間成果はディスカッションペーパーにまとめられ、アジア・ヨーロッパで報告を行ったほか、経済動学の主要学会Society for Economic Dynamics (SED)での報告について採択されている。さらに、研究の社会還元という観点から、代表者の堀井は新聞社発行の一般向け経済誌にて解説記事を複数執筆したほか、メディア関係者向けの懇談会において口頭報告も行った理論研究・実証研究いずれにおいても着実な成果が得られており、さらに主要なジャーナルからの改定請求や学会での採択などを得ていることから、今後の進展も期待できるため。5年目となる本年度は、プロジェクト参加者それぞれが研究成果をまとめると同時に、新たな応用に向けた発展研究のための検討立案を行う。本年度後半には、本プロジェクトの主要な研究協力者である渡辺誠(オランダティンバーゲン研究所)を3か月程度大阪大学社会経済研究所へ招へいすることを計画しており、その期間に上記の作業を精力的に進めることを計画している。また、以前アメリカブラウン大学に在籍していた研究協力者がアメリカウィリアムカレッジに移籍したため、前年度ウィリアムカレッジで滞在研究を行ったが、今年度は同研究協力者も大阪大学社会経済研究所へ招へいし、研究を進める計画である。これまでの経済成長理論では、財の開発・生産を行う企業と家計が財や労働力を直接取引する状況を考えており、実際の経済取引で重要な役割を果たしている商社・派遣業者など市場仲介者の働きを明示的に考えてこなかった。一方、市場仲介のミクロ経済的研究は、個々の取引メカニズムにのみ興味を持っており、マクロ変数への波及や長期の動学的効果を考えていなかった。しかし、近年の情報技術の革新や新しい市場技術の登場は、市場仲介が経済成長を牽引する可能性を示唆している。そこで、経済成長分析・実証分析に強みをもつ京阪神の3経済系研究所と、市場仲介の先進的研究実績を持つオランダのティンバーゲン研究所が共同して、経済成長と市場仲介の相互作用を解明し、新しい見地から成長戦略の提言を行うことが本研究の目的である。初年度である本年度は、市場仲介により歴史的経済成長を説明する基本モデルのセットアップと、その根拠となる歴史的背景に関する情報整理(文献調査・関連セミナー等への参加)を行った。本研究課題そのものは初年度で有りまだアウトプットの段階にはないが、それぞれの研究メンバーが関連する研究テーマに関して、精力的なセミナ・学会報告(全体で約30件)、関連論文の執筆(全体で9件)を行っており、組織全体として積極的に活動を行っている初年度である本年度は、市場仲介により歴史的経済成長を説明する基本モデルのセットアップと、その根拠となる歴史的背景に関する情報整理(文献調査・関連セミナー等への参加)を行った。前述の通り、本研究課題そのものは初年度で有りまだアウトプットの段階にはないが、それぞれの研究メンバーが関連する研究テーマに関して、精力的なセミナ・学会報告(全体で約30件)、関連論文の執筆(全体で9件)を行っており、組織全体の研究は概ね順調に進展している。なお、代表者の堀井と、海外研究分担者(JSPSの形式上は研究協力者)の渡辺は2度の海外出張により打ち合わせを行ったが、渡辺がオランダより米国NYUに一時サバティカルに来ていたこと等を利用して、打ち合わせ旅費を節減する事ができた。2年目である本年は、歴史データの超長期マクロ経済成長理論への援用、経済成長理論の数理経済学的分析、市場仲介のミクロ経済学的定式化、およびパネルデータの計量経済学的処理方法の探求というという視点から、それぞれ研究・調査・分析を行った。堀井はブラウン大学において前年度に引き続き歴史データの調査とマクロ理論の定式化・分析を行った。

ブラウン大学では、産業革命以前における市場取引に関連するイベントが、その後の経済成長をどのように誘発した方という観点での研究が多く行われており、その手法を習得することに注力した。海外研究分担者(JSPSの形式上は研究協力者)の渡辺は市場仲介のミクロ経済学的定式化についてRAND Journal of Economicsに成果を発表したほか、多くの国際学会で中間成果を報告した。経済成長の基礎理論を担当する上東もJournal of Mathematical Economics, Journal of Economic Theoryに経済動学関連論文が採択された。計量分析担当の奥井も、パネルデータの分析方法に関して、国際学会での報告を行うと共に、複数の論文が国際ジャーナルに採択されている。平成28年度までは、大阪大学社会経済研究所、ティンバーゲン研究所(オランダ)、神戸大学経済経営研究所、京都大学経済研究所の4研究所体制で研究を進めていたが、実証・計量分析担当であった研究分担者であった京都大学経済研究所の奥井亮が上海ニューヨーク大学へ転出したため、新たに実証分析担当として一橋大学経済研究所の中島賢太郎を加え、阪大・ティンバーゲン・神戸・一橋の4研究所体制で研究を進めることとなった。研究代表者の堀井亮は、平成29年89月に約1ヶ月半ティンバーゲン研究所に滞在し、左記研究所の渡辺誠と市場仲介・成長モデルの構築作業を行った。また、平成29年6月および、平成30年1月には、ティンバーゲン研究所の渡辺を大阪大学社会経済研究所に招聘して、セミナー及び研究打ち合わせを行った。それと並行して、研究代表者の堀井亮はブラウン大学との共同研究により経済成長の基礎理論の研究を行っており、2回の国際カンファレンス(うち1回は、共同研究先の神戸大学にて開催)と2回の国内セミナーにおいて中間報告を行っている。渡辺誠は市場仲介の基礎理論を査読ジャーナルで出版した。神戸大学経済経営研究所の上東貴志はバブルの理論・確率過程を中心に、経済成長理論の研究を行った。新たに参加した一橋大学経済研究所の中島賢太郎は、日本における市場仲介の好例である築地市場に注目し実証分析を行い、研究成果を査読ジャーナルに出版している。研究の中心である代表者の堀井と、ティンバーゲン研究所の渡辺がのべ3回の国際相互訪問をすることが出来、研究が進展した。また、関連研究の出版や国際学会での報告も進んでいる。昨年度に引き続き、各研究者が分担して、理論・実証の両面から研究を進めた。プロジェクトの主要部分である市場仲介の理論を担当する渡辺は、本研究の基本概念となる論文Middleman: the visible market makersを公刊し、その発展となる研究の中間成果をアメリカ・ヨーロッパ・アジアの大学で報告している。投稿中の論文は、トップジャーナルであるJournal of Political Economyで再投稿請求を受けるなど、大きな成果が見えてきている。
海産魚の卵内における脂質蓄積機構に関する比較研究

魚類の卵内には、大量の脂質が胚や仔稚魚のエネルギー源および細胞膜の構成物質として蓄積される。しかし、その卵内における代謝や蓄積機構に関しては、まだ多くの部分が未解明のままである。本研究では、その学術的および産業的な重要性に注目し、海産魚の卵脂質蓄積機構の究明を目的とした。海産魚卵の比較モデルとして、カタクチイワシとスマを選択し、申請者により確立された実験系を用いて解析を行なった結果、それぞれの卵および脂質輸送体の特徴や構成は異なるものの、主要脂質輸送体である超低密度リポタンパク質を中心とした魚類一般的の中性脂質の運搬・代謝経路の存在が示唆された。様々な環境に適応し多種多様な繁殖戦略を持っている魚類は、生残に有利な色んなタイプの卵を生産する。そして、卵脂質の構成や成分などは形質と品質を決定する重要な要因になるが、その卵内における蓄積や作用メカニズムについては、未だによく知られていない。本研究では、主に中性脂質から成る油球を大量に持つタイプであるマグロ類の一種「スマ(Euthynnus lineatus)」、そして油球の代わりに大量のリン脂質を含む卵黄球を持つタイプであるイワシ類の一種「カタクチイワシ(Engraulis japonicus)」を卵内脂質蓄積機構の比較モデルとし、先行研究で確立された培養系を用いて様々な解析を行うことで、それぞれの蓄積機構に関する基礎的な知見を得ることを目指す。平成27年度は、まずスマとカタクチイワシの卵黄蓄積における重要な役割をする卵黄タンパク前駆物質の同定を行い、それぞれ3つのタイプの因子(vtgA, vtgB, vtgC)を確認するとともに、脂質蓄積に関わっているリポタンパクリパーゼファミリーのクロニングにも着手し、一部因子の部分配列を得ることができた。また、それぞれの血清からサケ類で確立した超遠心分離法を用いてリポタンパク質の分離を試みた結果、PAGE上の各分画から特異的なアポリポタンパク質の存在が確認されたが、その密度とパタンは異なっていた。一方、卵内における脂質取り込み経路を確認することを目的とし、蛍光標識した超低密度リポタンパク(Vldl)を卵濾胞との培養系に用いた結果、スマの卵は予想の通り大量の脂肪酸が油球として卵内に蓄積されること及び、その経路が大量の油球を持つサケ類と似ていることが確認できた。しかし、油球が存在しないカタクチイワシの卵内には、Vldlに含まれている脂肪酸が卵黄球に大量に蓄積されスマとは異なる経路を示したことから、スマとカタクチイワシの卵内における種特異的な脂質取り込み経路が示唆された。今年度の計画であった、脂質輸送蛋白質の同定および脂質代謝に関わる重要因子のクロニングや発現解析が予定の通り進み概ね完了している。なおかつ、次年度に行う予定であったリポタンパク質の蛍光標識や培養系の確立など、二種のモデルにおける脂質蓄積機構を比較するために不可欠な実験系の確立にすでに着手し、一部の成果を得ていることから、おおむね順調に進展していると考えられる。魚類は、様々な環境に適応し多種多様な繁殖戦略を持ち、生残に有利な色んなタイプの卵を生産する。そして、卵の構成成分のうち脂質は、卵の形質と品質を決定する重要な要因になるものの、その卵内における蓄積や作用メカニズムについては、未だによく知られていない。そこで本研究では、海産魚の中で油球を卵内に大量に持つタイプであるマグロ類の一種「スマ(Euthynnus lineatus)」、そして油球の代わりに大量の卵黄球を卵内に持つタイプであるイワシ類の一種「カタクチイワシ(Engraulis japonicus)」を比較モデルとし、それぞれの卵脂質蓄積機構に関する基礎的な知見を得ることを目指した。まず、HCS LipidToxを用いて卵の中性脂質およびリン脂質を蛍光反応させることで、それぞれの卵脂質タイプを確かめた。その結果、スマの卵内には大量の中性脂質を含む油球が優位であり、カタクチイワシの卵内には中性脂質と大量のリン脂質が混在されている卵黄球が優位であることが明らかとなった。そして、スマとカタクチイワシの血漿から卵脂質源の主たる運搬体である各リポタンパク質(Vldl、Ldl、Hdl)を超遠心分離法で分離し、PAGE上でそれぞれのタイプを同定すると共に、その血中割合を確認した。また、得られたVldl(超低密度リポタンパク)のタンパク質と脂質の部分に二重で蛍光標識した後、それぞれの卵濾胞細胞と培養した結果、以前本研究者によって確認されたサケ科魚類の卵内における脂質取り込み経路と同様に、いずれにおいても主たる脂質源であるVldlが卵母細胞外で代謝され、そこで生じた遊離脂肪酸が卵母細胞内に蓄積されることが確認された。即ち、淡水魚と海産魚、そして油球を形成するタイプと形成しないタイプに大きい差はなく、魚類全般にわたってVldlを中心とした脂質代謝・蓄積(主に中性脂質)経路の存在が示唆された。

海産魚卵の比較モデルとして、カタクチイワシとスマを選択し、申請者により確立された実験系を用いて解析を行なった結果、それぞれの卵および脂質輸送体の特徴や構成は異なるものの、主要脂質輸送体である超低密度リポタンパク質を中心とした魚類一般的の中性脂質の運搬・代謝経路の存在が示唆された。平成28年度は、昨年度に確認された脂質運搬体をより詳細に同定し、その動態を持続的に観察していくとともに、得られた周年サンプルを用いて脂質代謝や合成に関わる重要因子の遺伝子クロニングおよび発現解析を進めていく。また、抗体の作成や生化学的な解析にも着手することで、それぞれ因子の役割を明らかにする。そして、確立されたin vitro培養系を用いて様々な解析を行うことで、スマとカタクチイワシを比較モデルとした魚類の卵脂質蓄積機構に関する新たなモデルを提唱する。魚類繁殖生理学本来初年度の予算全てを使用する予定であったものの、注文した消耗品の値段が変わったので残額が発生した。それから、その時点ではスケジュール上研究費の使用が間に合わなかったので、その残額を次年に使用すると思った。残額である16,714円は、実験に必要な消耗品の購入代として使用する予定である。
染色体ドメインレベルでDNAメチル化・クロマチン構造を解析する方法の開発と応用

フィールドインバージョン電気泳動(FIGE)による広領域DNaseI感受性試験法を開発して、マウス7番染色体のIns2/Igf2/H19遺伝子領域の解析を行い、この方法の有効性を確かめた。すなわち胎児細胞核を材料として上記領域のうち合計100kb近くをスキャンし、その結果新たに3つのDNaseI高感受性部位のクラスターを発見することができた。これらの存在を確認するため従来の方法による解析を行ったところ、大部分の高感受性部位は恒常的にどの細胞でも見られるもので、いくつかの部位は胎児期の細胞に特異的であることが分かった。このことは本法が高感受性部位を同定するのに信頼性の高い方法であることを示している。以上の詳細についてはさらに成果を蓄積後投稿の予定である。一方DNAのメチル化状態についても、メチル化感受性制限酵素HpaIIやHhaIによる部分消化とFIGEを組み合わせ、大きなゲノム領域(25kb以上)を解析できることが分かった。さらにこの方法によりCpGアイランドがHpaIIやHhalサイトのクラスターとして検出できることを、マウス・ヒトの種々のゲノム断片をもつファージ・コスミド・P1クローンを用いて示した。この場合最大85kbまで一時に解析できることが分かった。これらメチル化解析・CpGアイランド検出については研究協力者の修士論文として発表したが、現在雑誌への投稿を準備中である。以上から本研究の目的であるドメインレベル(数十kb以上)のメチル化・クロマチン解析法を開発することができた。今後さらに改良を加えるとともに、染色体ドメイン構築研究への応用を進めたい。本研究は、染色体DNAの修飾やクロマチン構造を広範囲に効率よく解析する手法の確立を目的とする。そのため平成6年度は、従来のメチル化感受性制限酵素を用いる方法やヌクレアーゼ感受性に基づくクロマチン解析法を、大きなDNA断片の分離が可能なフィールドインバージョン電気泳動(FIGE)やパルスフィールド(PFGE)と組み合わせることを試みた。解析の対象として、マウスの7番染色体遠位部(ゲノムインプリンティングを受ける遺伝子群がある)を用いた。まず、7番染色体遠位部から単離されたYACやコスミドクローンを用いて、レアカッター制限酵素(SfiIやSse8387I)のマップを作成し、プローブとして用いるDNA断片を収集した。次にクロマチンを調べるため、マウス胎児から得た細胞核をDNaseIで処理し、FIGEで分画した後、サザンブロット法で解析した。その結果、少なくとも約30kbの領域にわたりDNaseI高感受性部位を検出できることが分かった。また、インスリン2遺伝子の下流にこれまで知られていなかった高感受性部位を新たに4つ発見した。DNaseI高感受性部位はしばしばエンハンサーなどの遺伝子調節配列と一致することから、本法は重要な配列をスキャンニングする方法として優れていると思われる。現在はさらに広い領域の解析に応用するためPFGEで検討中である。一方DNAメチル化に関しては、メチル化感受性制限酵素による部分消化後、FIGE、サザンブロッティングを用いて解析することを試みており、これは特にCpGアイランドの同定に有望である。現在は部分消化の最適条件の検討中である。平成7年度はこれらの方法を完成し、応用的研究を行う。平成6年度に開発したフィールドインバージョン電気泳動(FIGE)によるDNaseI感受性試験法を用いて、マウス7番染色体のIns2/Igf2/H19遺伝子領域の解析を行い、この方法の有効性を確かめた。

以上の詳細についてはさらに成果を蓄積後投稿の予定である。一方DNAのメチル化状態についても、メチル化感受性制限酵素HpaIIやHyaIによる部分消化とFIGEを組み合わせ、大きなゲノム領域(25kb以上)を解析できることが分かった。さらにこの方法によりCpGアイランドがHpaIIやHhaIサイトのクラスターとして検出できることを、マウス・ヒトの種々のゲノム断片をもつファージ・コスミド・P1クローンを用いて示した。この場合最大85kbまで一時に解析できることが分かった。これらメチル化解析・CpGアイランド検出については研究協力者の修士論文として発表したが、現在雑誌への投稿を準備中である。以上から本研究の目的であるドメインレベル(数十kb以上)のメチル化・クロマチン解析法を開発することができた。今後さらに改良を加えるとともに、染色体構築研究への応用を進めたい。
^<189>Osの電子遷移による核励起現象の観測

1.3素子アレイAPD検出器2組を組み込んだ小型真空槽製作とその評価APD素子(Φ3mm)3素子をアレイ化(1列に配置)した検出器2個(計6チャンネル)を内部転換電子線検出効率(立体角)を高めるために装着し、かつ検出器をより試料に接近させられる小型真空槽を製作した。装置の評価(検出効率、エネルギー分解能、時間分光特性等)を低エネルギー電子線への応答も調べるために放射光研究施設BL-14Aにて8.4keVのX線を用いて行った。平成13年度の研究でエネルギー分解能の問題(有感面内の放射線入射位置に依存したゲイン差大、隣り合った素子からの電荷流入)明らかになったが、平成14年度にはその問題を改善した新しいAPD素子を製作し、立体角を大きくするために素子ホルダーも改良した。2.^<193>Irおよび^<189>OsのNEET実験1で製作した装置を使って^<189>Os-NEET観測のための第1段階として^<193>IrのNEET観測を実施する予定であったが、APD素子の欠陥のために新しい装置での実験は取りやめ、そのかわり従来使用してきた1チャンネルAPD素子による実験をSPring-8のビームラインBL09XUにおいて2002年1月に行った。その結果、100秒あたり2-3カウントと微弱ながらK殻電離に伴う内部転換電子線による信号を検出することに成功した。その後^<189>OsのNEET観測実験を2002年12月に行う予定であったが、アレイ素子改良が遅れたこと、SPring-8のリング真空漏れ(2002年6月)により実施できなかった^<197>AuのNEET精密観測実験は1チャンネル素子で観測可能なため、^<197>Au実験を先行して12月に行った。したがって^<189>Osの実験は予定研究期間内に実施できず2003年4月に順延された。この実験では3素子アレイの信号/雑音比が予想より小さかったため、3mm径APD素子を試料の表裏、各1つ、計2チャンネルを使ったが、残念ながら^<189>OsのNEETを観測するにはいたっていない。1.3素子アレイAPD検出器2組を組み込んだ小型真空槽製作とその評価APD素子を試料に近づけて内部転換電子線を直接測定するための装置を準備した。APD素子(Φ3mm)3素子をアレイ化(1列に配置)した検出器2個(計6チャンネル)を電子線検出効率(立体角)を高めるために装着し、かつ検出器をより試料に接近させられる小型真空槽を製作した。その結果新しく用意したAPDアレイ素子のエネルギー分解能が有感部面内で信号増幅度がX線入射位置によって異なるために大幅に悪化しているという問題が判明した。2.核共鳴およびNEET内部転換電子線検出実験の実施

1.で製作した装置を使って^<189>Os-NEET観測のための第1段階の実験を2002年1月に実施する予定であったが、APD素子の欠陥のために新しい装置での実験は取りやめにした。そのかわり従来使用してきた1チャンネルAPD素子によるNEET観測実験をSPring-8のビームラインBL09XUにおいて2002年1月に行った(課題番号:2001B0448-ND-np)。^<189>OsよりもNEET確率が高いと予想される^<193>IrのNEET観測実験を行ったところ100秒あたり4-5カウントと微弱ながらK殻電離に伴う核励起(内部転換電子線による信号)を検出することに成功した。その実験結果は放射光研究施設での入射ビーム強度を評価するための実験と合わせ現在解析中である。NEET確率を求めたのち、Phys. Rev. Lett.に投稿する予定である。1.3素子アレイAPD検出器2組を組み込んだ時間分光装置の評価平成13年度に製作した電子線時間分光装置(3つのAPD素子(Φ3mm)をアレイ化(1列)した検出器2個(計6チャンネル)を電子線検出効率(立体角)を高めるために装着しかつ検出器をより試料に接近させられる)を金箔試料により評価した。平成13年度の研究で明らかになったエネルギー分解能の問題(APD有感面内のゲイン差大、隣り合った素子からの電荷流入による)を改良した新しいAPD素子を購入し素子ホルダーも改良して試料により近づけられるようにした。検出効率、エネルギー分解能、時間分光特性等の評価を高エネルギー加速器研究機構・放射光研究施設(PF)にて実施した。当初、試料はOs金属粉末の予定だったが2で述べるようにSPring-8での実験時期の遅れ、金による実験の先行実施に合わせた。2.X線ビーム強度較正実験実施と^<193>Ir-NEET実験の結果解析PFにてX線ビーム強度を求める検出器較正実験を実施し、その結果から2002年1月にSPring-8ビームラインBL09XUにおいて行った(課題番号:2001BO448-ND-np)1チャンネルAPD素子による^<193>IrのNEET観測実験の結果をまとめた(論文投稿準備中)。K殻電離に伴う核励起の確率を意味するNEET確率は計算値2.3×10^<-9>(E.Tkalya, private communication)に対して実験値として(2.82±0.23)×10^<-9>と求められた。^<189>Osの実験を2002年12月に行う予定であったが並行して進めていた^<197>AuのNEET精密観測実験(6月)がSPring-8のリング真空漏れのため実施できず、こちらを先に12月に行ったため^<189>Osの実験は順延された。2003年4月実施予定である(課題番号:2003A0586-CD3-np)。
聴覚刺激のクロスモーダル知覚による擬似触力覚の呈示

本研究は,ヘッドマウントディスプレイ(HMD)を用いた従来の視覚刺激のみによる疑似触力覚呈示手法に対し,聴覚刺激を人工的に付加することでより大きな疑似触力覚呈示が可能であるかを検証し,得られた知見をアート・エンタテインメントコンテンツ制作へと応用することを目的としている.当該年度においては,特にばねを引っ張る動作や手のひらで仮想物体を転がす動作,平面を歩く動作に着目し,得られる疑似触力覚の量や質についての検証を行った.はじめに,HMDを装着したVR環境下において,ばねを引っ張る動作量に合わせて音高が変化する人工音を呈示した場合,呈示音なしの場合や,音高が一定の呈示音に比べて得られる疑似力覚が有意に上昇することを明らかにした.次に,HMDを装着したMR環境下において,仮想物体と手のひらが接触する際にスポンジを指で叩打する音を提示すると,音のない場合に比べて知覚される触覚の大きさが有意に上昇することを明らかにした.一方,実験参加者へのインタビューから,現実と乖離した聴覚刺激を与えられたと参加者が感じた場合,擬似触覚ではなく違和感を感じることが示唆された.さらに,HMDを装着したVR環境下において,平面を歩く際に振動スピーカを内蔵したサンダルから歩行音を呈示すると,呈示音なしに比べて知覚される床面の硬さが上昇することが示唆された.これより,VR空間における視覚情報に即した歩行音を足部に提示することがもたらす擬似圧覚が,足部の体性感覚表現に有力である可能性が示された.以上より,HMDを用いたVR/MR環境下において,聴覚刺激を付加することでクロスモーダルな触力覚知覚を引き起こし,視覚刺激の加工による従来の疑似触力覚を強化させる手法としての有用性を示した.当該年度の研究予定は,1.聴覚刺激の重畳による擬似触覚呈示の検証と,2.聴覚刺激の重畳呈示による擬似触力覚を応用したコンテンツ制作であった.このうち1.については,当初の予定であった「VR環境下においてばねを引っ張る動作」および「MR環境下において仮想物体を手のひらで触れる動作」に関して,聴覚刺激の重畳による効果を検証できた.このことに加え,研究者同士での議論の中から,手に対する疑似触力覚だけでなく足に対する疑似触力覚呈示の可能性という着想を得て,新たに「VR環境下において平面を歩く動作」を対象とした聴覚刺激の効果を検証できた.このため,1.については当初の計画以上に研究が進展したと言える.2.については「VR環境下において平面を歩く動作」をモチーフとした疑似歩行コンテンツを制作し,デモ展示を行い,多くの来場者からフィードバックを得られた.一方,その他の「VR環境下においてばねを引っ張る動作」および「MR環境下において仮想物体を手のひらで触れる動作」に着目したシステムに関しては,疑似触力覚呈示の検証までに留まっており,これらをモチーフとしたアート・エンタテインメント作品の展示には至っていない.2.については次年度以降も継続して進める予定であり,当初の計画に比べてわずかに遅れているものの,それほど深刻な状況ではない.以上より,本研究はおおむね順調に進展していると言える.今後の研究方針として,聴覚刺激を用いた疑似力覚呈示における効果的な音響パラメータや,客観的指標による評価を行う.また,得られた知見をもとに社会・に広く発信できるアート・エンタテインメント作品の展示活動を行う.具体的には,聴覚刺激を呈示する音響機器(ヘッドホン,スピーカ等)による差異や音量,周波数特性など,様々な音響パラメータが疑似触力覚呈示に影響を及ぼしていると考えられこれらの影響について詳細に検討する.また,擬似力覚を評価する生理指標として腕の皮膚表面における筋電位を測定し,聴覚刺激の有無による筋収縮への影響を検証する.また,本研究の研究成果を社会・国民に発信する方法として,毎年開催される国際会議(ICMI, ACE)や国内研究会(エンタテインメントコンピューティング研究会)での発表や,論文(日本バーチャルリアリティ学会)への投稿を予定している。また,システムを応用したコンテンツの展示イベント(インタラクション等)への出展にも積極的に取り組む予定である。特にこれらの展示イベントは,研究者だけでなく一般の方も非常に多く来場するため,研究成果を社会・国民に広く発信できる重要な方法であると期待できる。本研究は,ヘッドマウントディスプレイ(HMD)を用いた従来の視覚刺激のみによる疑似触力覚呈示手法に対し,聴覚刺激を人工的に付加することでより大きな疑似触力覚呈示が可能であるかを検証し,得られた知見をアート・エンタテインメントコンテンツ制作へと応用することを目的としている.当該年度においては,特にばねを引っ張る動作や手のひらで仮想物体を転がす動作,平面を歩く動作に着目し,得られる疑似触力覚の量や質についての検証を行った.はじめに,HMDを装着したVR環境下において,ばねを引っ張る動作量に合わせて音高が変化する人工音を呈示した場合,呈示音なしの場合や,音高が一定の呈示音に比べて得られる疑似力覚が有意に上昇することを明らかにした.次に,HMDを装着したMR環境下において,仮想物体と手のひらが接触する際にスポンジを指で叩打する音を提示すると,音のない場合に比べて知覚される触覚の大きさが有意に上昇することを明らかにした.一方,実験参加者へのインタビューから,現実と乖離した聴覚刺激を与えられたと参加者が感じた場合,擬似触覚ではなく違和感を感じることが示唆された.

さらに,HMDを装着したVR環境下において,平面を歩く際に振動スピーカを内蔵したサンダルから歩行音を呈示すると,呈示音なしに比べて知覚される床面の硬さが上昇することが示唆された.これより,VR空間における視覚情報に即した歩行音を足部に提示することがもたらす擬似圧覚が,足部の体性感覚表現に有力である可能性が示された.以上より,HMDを用いたVR/MR環境下において,聴覚刺激を付加することでクロスモーダルな触力覚知覚を引き起こし,視覚刺激の加工による従来の疑似触力覚を強化させる手法としての有用性を示した.当該年度の研究予定は,1.聴覚刺激の重畳による擬似触覚呈示の検証と,2.聴覚刺激の重畳呈示による擬似触力覚を応用したコンテンツ制作であった.このうち1.については,当初の予定であった「VR環境下においてばねを引っ張る動作」および「MR環境下において仮想物体を手のひらで触れる動作」に関して,聴覚刺激の重畳による効果を検証できた.このことに加え,研究者同士での議論の中から,手に対する疑似触力覚だけでなく足に対する疑似触力覚呈示の可能性という着想を得て,新たに「VR環境下において平面を歩く動作」を対象とした聴覚刺激の効果を検証できた.このため,1.については当初の計画以上に研究が進展したと言える.2.については「VR環境下において平面を歩く動作」をモチーフとした疑似歩行コンテンツを制作し,デモ展示を行い,多くの来場者からフィードバックを得られた.一方,その他の「VR環境下においてばねを引っ張る動作」および「MR環境下において仮想物体を手のひらで触れる動作」に着目したシステムに関しては,疑似触力覚呈示の検証までに留まっており,これらをモチーフとしたアート・エンタテインメント作品の展示には至っていない.2.については次年度以降も継続して進める予定であり,当初の計画に比べてわずかに遅れているものの,それほど深刻な状況ではない.以上より,本研究はおおむね順調に進展していると言える.今後の研究方針として,聴覚刺激を用いた疑似力覚呈示における効果的な音響パラメータや,客観的指標による評価を行う.また,得られた知見をもとに社会・に広く発信できるアート・エンタテインメント作品の展示活動を行う.具体的には,聴覚刺激を呈示する音響機器(ヘッドホン,スピーカ等)による差異や音量,周波数特性など,様々な音響パラメータが疑似触力覚呈示に影響を及ぼしていると考えられこれらの影響について詳細に検討する.また,擬似力覚を評価する生理指標として腕の皮膚表面における筋電位を測定し,聴覚刺激の有無による筋収縮への影響を検証する.また,本研究の研究成果を社会・国民に発信する方法として,毎年開催される国際会議(ICMI, ACE)や国内研究会(エンタテインメントコンピューティング研究会)での発表や,論文(日本バーチャルリアリティ学会)への投稿を予定している。また,システムを応用したコンテンツの展示イベント(インタラクション等)への出展にも積極的に取り組む予定である。特にこれらの展示イベントは,研究者だけでなく一般の方も非常に多く来場するため,研究成果を社会・国民に広く発信できる重要な方法であると期待できる。当初の計画にはなかった出費として,展示発表用のノートPCやケース等の物品購入をする必要があった.一方,当初の計画に比べて展示発表の機会が少なく,旅費と相殺する形でこれらの費用を充当した.こうした経緯から僅かな差額が生じた.生じた差額は少額のため,研究遂行時に生じる消耗品(コピー用紙,電池等)の購入に使用予定である.
手指運動の習熟に伴う、体性感覚野の機能的および形態的変化

手指運動の習熟に伴って、サル皮質体性感覚野におこる形態的変化すなわちGABA receptorの分布密度の変化をしらべるため、ナイーブなサルで、まず対照実験を行った。雄ニホンザルの中心後回の頂部の10点に、表面に垂直に1.5mmの深さで、^3H-Muscimol(0.0005%水溶液)を各点に0.5μl(0.5μCi)に注入し、灌流固定、パラフィン包埋後、10μmの連続切片を作成、オートラヂオグラフ法で観察した。注入針の先端は殆どの場合皮質のIV層とV層の境界付近にあった。各注入例とも、この注入針の先端を中心の微細な現象銀顆粒が分布していたが、これらは広くニューロピル内に散在していた。注入から固定までの時間と、現象銀の分布ないし活性部位の広がりとの間には次のような対応が見られた。1)20分後:放射活性は注入点を含む、皮質表面の接線方向に直径1.07mm、高さ1.1mm程の紡錘形の分布域を示した。2)40分後:接線方向の活性の広がりは直径2.42mmにも拡大し、分布域の形は紡錘形から樽型に変化し、注入部位直下の白質中にも1mm程の深さまで活性が出現した。3)60分後:活性は直径2.75mmの円盤状の広がりを示した。陽性銀粒子はほぼ一様に分布し活性域の境界はやや曖昧となった。4)80分後:活性域は直径4.05mmに拡大したが活性度は全般的に低下した。III、IV、V層に活性は高いが、I、II層は注入部位を除いて低かった。5)100後:活性域は直径約6.5mmとなり中心後回の頂部のほぼ吻尾全長に広がった。別の雌ニホンザルの中心後回にも計9個所の注入を行い結果を確かめた。次に充分訓練して熟練したサルでは、感覚野ニューロンの受容野が小さいものが多いことがわかった。このサルについても^3H-Muscimolの注入を行い、対照例と比較するべく組織標本を作成中である。また、このサルならびにもう一例の対照例について、エポン樹脂に包埋後2μmの薄切片をも作成し、銀粒子の存在部位をより詳細に追求する予定である。
遠赤外線点源の気球搭載干渉計による高解像観測

今年度の研究目的は、我々が完成させた世界初の宇宙遠赤外線干渉計FITE (Far-Infrared Interferometric Telescope Experiment)を用いて、空間分解能3 - 5秒角の遠赤外線観測を実現する。AGB星及び大規模星形成領域をこの分解能で遠赤外線観測を行い、ダスト分布の空間情報を得る。サブミリ波などの観測データと合わせて解析することで、ダストの温度分布と密度分布について優れた解像度のデータが得られる。世界初の遠赤外線干渉計観測技術を確立し発展させることで、AGNエネルギー源の特定、銀河スターバースト本体の解明、原始惑星系円盤の温度分布解明などに有効な観測技術を実証することである。今年度はFITE干渉計を用いて、2018年5,6月にオーストラリア・Alice Springsの気球フライト基地から打ち上げ、代表的晩期型星であるIRC+10216などを対象として観測する計画であった。しかしながらJAXA宇宙科学研究所が設定したフライト予定期間(ロンチウィンドウ)内で、干渉計が打ち上げ可能でかつ気象条件が良い機会を得ることができなかったため、フライトするに至らなかった。機材は2018年度中に、国内に返送を完了した。機材は適切な環境の中で、保管されている。これと並行して、新たに開発した干渉光学系調整手法について、オーストラリアでの使用実績も加えて成果を取りまとめた。次年度早々に公表する予定である。科学観測用大気球の打ち上げのために、オーストラリア・アリススプリングスの打ち上げ基地において準備を進め、打ち上げ直前の状態まで到達した。しかしながら、打ち上げができる気象条件に総ぐしなかったために、2018年度の打ち上げは断念した。2019年度以降の機会を探ることとした。研究期間内に気球フライトをすることを目指し、機会を探る。機材は適切な環境で保管されている。これと並行して、技術的な研究成果は取りまとめて公表する。
胃がん休眠と晩期再発の早期診断法の開発

進行胃がん組織から分離培養したがん間質細胞と胃がん再発患者血清の解析からVEGFなどを介した血管新生とがん休眠に関与するCCL2/CCR2 axis阻害が病勢進行に関与していることが明らかになった。臨床研究としてCCL2/CCR2 axis阻害薬であるプロパゲルマニウムを胃がん再発患者15名に投与した結果、全生存期間の延長傾向を認めた。また、治療効果を認めた症例における血清中VEGF-A濃度は低く、末梢血中のcytolytic NK細胞の活性化が見られることを明らかにした。胃がん間質反応による晩期再発の早期診断法を開発して新しい治療戦略を確立する。本研究では、胃がん臨床検体を使ったがん間質反応の解析により、胃がん再発に直結する微小転移の高感度診断法と増殖活性評価法の開発・がん休眠機序の解明を通して胃がん治療戦略を確立することを目的とする。以下に研究実績概要を示す。1.進行胃がん組織由来の初代培養がん間質細胞の分離と凍結保存ライブラリーの拡充:同一患者のがん間質細胞・非がん胃組織間質細胞・正常小腸間質細胞のライブラリーを拡充して-150°Cで保存した。2.老化間質細胞由来の分泌タンパクの精製:ライブラリー化した間質細胞を特定の環境で老化させて無血清培養上清を継時的かつ大量に採取した。アニオンおよびカチオンカラムを用いてタンパク精製を行った。3.老化間質細胞由来のエクソソーム精製:がん細胞に様々な作用を及ぼすことが知られているエクソソームを2の老化細胞から回収・精製した。4.まとめ:2,3で精製したSenescence associated secretory phenotype(SASP)を使い、胃がん細胞に対する作用を細胞周期・増殖能・運動能指標にして定量解析した。その結果、カラム精製した特定のタンパク質分画が、低酸素特異的にがん細胞の悪性度を増すことが明らかになった。対して、SASP由来の精製エクソソームは細胞周期にはほとんど影響を与えないことを明らかにした。老化間質細胞はがん細胞の細胞周期・増殖能・運動能を修飾する。この現象において、低酸素特異的に作用するSASPがあること、原因分子がタンパク質であり濃度依存性があること、エクソソームが細胞周期に直接影響を与えるものではないこと、などをフローサイトメトリーとfucci遺伝子導入胃がん細胞株を使って明らかにすることができた。4. 2,3で精製したSenescence associated secretory phenotype(SASP)を使い、胃がん細胞に対する作用を細胞周期・増殖能・運動能指標にして定量解析した。5.胃がん再発症例における血清および末梢血中単核細胞(PBMCs)の解析から、CCL2など間質細胞由来のケモカインが転移病変増大に関与していることを明らかにした。また、がん再発患者PBMCs解析を経時的に行うことで、病勢評価ができることを明らかにした。当初は、がん細胞と間質細胞の相互作用において直接的な細胞間接着が重要と予測していたため、ナノスプレイチップによるSingle Cell Analysisを予定していた。しかし、カラム精製などにより特定のタンパク質分画の重要性が明らかになった。したがって、Single Cell Analysisよりも解析が容易な特定のタンパク質分画のプロテオーム解析を優先的に行うこととした。外科学がん細胞と間質細胞の相互作用において直接的な細胞間接着が重要と予測していたため、ナノスプレイチップによるSingle Cell Analysisを予定していた。しかし、カラム精製などにより特定のタンパク質分画の重要性が明らかになったため、Single cell Analysisに使用する予定であった器材・試薬の購入を中止した。

この現象において、低酸素特異的に作用するSASPがあること、原因分子がタンパク質であり、濃度依存性があること、エクソソームが細胞周期に直接影響を与えるものではないこと、などを明らかにすることができた。平成28年度は、タンパク質の大量精製とプロテオーム解析に用いる器材と試薬購入、原因分子の同定とその制御法の開発を予定している。