hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
悪性黒色腫を標的とするハイブリッドペプチドによる新しいバイオ療法の研究開発

最近では,癌細胞膜融解による細胞殺傷効果を有する「爆薬ペプチド」と癌細胞表面分子と結合する特異的な「弾頭ペプチド」を組み合わせた抗癌活性を有する「hybrid peptide」の有用性が,分担研究者らにより確認されている.悪性黒色腫は悪性度が高く完全治癒の期待出来ない難治性の癌腫である.また,口腔癌も進行例では難治性の癌腫である.そこで,悪性黒色腫および口腔癌に対するIL-4R-hybrid peptideの抗腫瘍効果について検討を行った.口腔癌では,臨床病理標本において正常上皮に比較してIL-4Rの発現レベルが高いことが確認され,その癌細胞株においてもIL-4Rの発現レベルは正常口腔上皮細胞に比較して高いことが確認された.IL4-lytic hybrid peptideは,in vitroにおいてIL4受容体が高発現している癌細胞株に対して,効果的な殺細胞効果を示し、また、口腔癌細胞株を用いたin vivoにおけるマウス異種モデルにおいても用量依存性に抗腫瘍効果を発揮することが確認された.しかし,悪性黒色腫に対するIL4-lyticの効果は検証出来ていない。ヒト癌腫にはinterleukin-4 receptor(IL-4R)の発現が確認されており, IL-4受容体標的サイトトキシン(IL-4-PE)がヒト胆道癌に対する強力な抗腫瘍効果が示されている.さらに,最近では,癌細胞膜融解による細胞殺傷効果を有する「爆薬ペプチド」と癌細胞表面分子と結合する特異的な「弾頭ペプチド」を組み合わせた抗癌活性を有する「hybrid peptide」の有用性が,分担研究者らにより確認されている.IL-4Rに結合するIL-4R-hybrid peptideは各癌腫に対して強い抗腫瘍効果を発揮する可能性がある.悪性黒色腫は悪性度が高く完全治癒の期待出来ない難治性の癌腫である.また,口腔癌も進行例では難治性の癌腫である.これら癌腫に対しては分子標的療法を含む新規治療法の演じる役割は大きい.本研究では,悪性黒色腫および口腔癌に対するIL-4R-hybrid peptideの抗腫瘍効果を検討した.臨床病理標本を用いたIL-4Rの発現について,悪性黒色腫では検出が困難であった.一方,口腔癌では,臨床病理標本において正常上皮に比較してIL-4Rの発現レベルが高いことが確認された.また,その癌細胞株においてもIL-4Rの発現レベルは正常口腔上皮細胞に比較して高いことが確認された.IL4-lytic hybrid peptideは,in vitroにおいてIL4受容体が高発現している癌細胞株に対して,効果的な殺細胞効果を示し、また、口腔癌細胞株を用いたin vivoにおけるマウス異種モデルにおいても用量依存性に抗腫瘍効果を発揮することが確認された.悪性黒色腫に対するIL4-lyticの効果は検証出来ていないものの,口腔癌におけるIL-4受容体を標的としたIL4-lytic hybrid peptideは,新たな口腔癌の治療に有効である可能性が示唆された.最近では,癌細胞膜融解による細胞殺傷効果を有する「爆薬ペプチド」と癌細胞表面分子と結合する特異的な「弾頭ペプチド」を組み合わせた抗癌活性を有する「hybrid peptide」の有用性が,分担研究者らにより確認されている.悪性黒色腫は悪性度が高く完全治癒の期待出来ない難治性の癌腫である.また,口腔癌も進行例では難治性の癌腫である.そこで,悪性黒色腫および口腔癌に対するIL-4R-hybrid peptideの抗腫瘍効果について検討を行った.口腔癌では,臨床病理標本において正常上皮に比較してIL-4Rの発現レベルが高いことが確認され,その癌細胞株においてもIL-4Rの発現レベルは正常口腔上皮細胞に比較して高いことが確認された.IL4-lytic hybrid peptideは,in vitroにおいてIL4受容体が高発現している癌細胞株に対して,効果的な殺細胞効果を示し、また、口腔癌細胞株を用いたin vivoにおけるマウス異種モデルにおいても用量依存性に抗腫瘍効果を発揮することが確認された.しかし,悪性黒色腫に対するIL4-lyticの効果は検証出来ていない。悪性黒色腫は悪性度が非常に高いことより完全治癒の期待出来ない難治性の癌腫である.これら癌腫に対しては分子標的療法を含む新規治療法の演じる役割は大きい.近年では,細胞殺傷能力を有するペプチドや強力な抗腫瘍効果を有するペプチドが複数報告されている.そこで研究分担者の川上らは癌細胞表面分子と結合する特異的な「弾頭ペプチド」と癌細胞膜融解による細胞殺傷効果を有する「爆薬ペプチド」を精力的に組み合わせ,抗癌活性を有する「ハイブリッドペプチド」の作製に成功した.本研究では,悪性黒色腫に対する新しいバイオ療法を確立する目的で,悪性黒色腫の表面分子を探索し,抗癌ペプチドとの組み合わせにより新規ハイブリッドペプチドを作製し,本ハイブリッドペプチドの抗癌効果についてin vitroおよびin vivoの実験系にて検証した.代表者らは悪性黒色種の臨床標本の解析と臨床経過に関するデータベースの構築中である.IL-4受容体を発現する黒色腫症例と非発現症例に関する悪性挙動と術後予後についても解析中である.そこで,本年度は,すでにIL-4受容体の発現が確認されている口腔癌について検討を行った.膜融解性ハイブリッドペプチドIL-4-lyticの抗腫瘍効果を検討したところ,IL-4-lyticを用いて行った細胞障害性実験では,口腔癌の細胞株すべてにおいてIL-4-lytic濃度依存性に細胞増殖の低下が見られた.一方,IL-4を欠くlyticのみでは細胞障害性は殆ど認められなかった.

本IL-4-lyticの抗腫瘍効果はIL-4受容体を介するものと考えられた.皮下腫瘍モデルでは,IL-4-lyticの腫瘍内投与により,有意な腫瘍の縮小効果が観察された.IL-4受容体を標的とするハイブリッドペプチド療法(IL-4-lytic)は,悪性黒色腫に対しても新規バイオ治療としての有用である可能性がると示唆された.悪性黒色腫の臨床標本における表面分子の解析が遅れている.従来使用していたIL-4受容体の特異抗体によるIL-4受容体の検出が困難な状況である.何種類かの特異抗体を用いて検討を重ねている。膜融解性ハイブリッドペプチドIL-4-lyticの抗腫瘍効果を検討するために,悪性黒色腫細胞における腫瘍表面分子の探索と発現レベルの解析を継続する.また,抗体の選定が終了した際には,早速,悪性黒色腫細胞における発現レベルの解析にも着手する.転移モデルの構築のために,ルシフェレース遺伝子導入細胞を作製し,さらに,担癌動物モデル作製と画像解析を予定している.次年度においては,IL-4受容体の特異抗体の作製,ルシフェレース遺伝子導入細胞の構築,担癌転移モデル動物の作製に研究費を使用する.
樹木群を対象とした野外生体電位計測システムの開発

1.試作電極(1)幹用電極幹を対象とした刺込型の電極として今回、以下の2種について開発した。一つは、先端を針状に研磨した直径1[mm]のタングステン線を樹脂製取手に固定し、シリコーンゴム充填による防水処理を施すことにより雨露による影響を防いだ金属針型電極、もう一つは、パイプ構造内部にKCI溶液を充填し、対象と銀/塩化銀電極との液絡をとる構成で、上部のタンクからKCl溶液が常に滴下補充させる潅流型である。前者は、ペースト塗布の必要がなく、幹に直接刺入するだけで容易に装着が完了し、現地での動機性が非常に高く、後者はより安定性に優れており、両者を実験状況に応じて使い分けることを可能とした。(2)土壌電位誘導電極銀/塩化銀電極とKCl溶液をポリアクリルアミドゲルと多孔質セラミックにより絶縁パイプ内に封入した電極を試作にた。本構造により、低インピーダンス、低雑音、高安定性などの電気的性能に加え、電位誘導部には十分な耐久性、長期安定性を実現した。2.野外計測システム計測領域は10[m]×10[m]、計測チャンネル数は16として開発を行った。まず、電極により誘導化された信号を利得80[dB](AC成分)、26[dB](DC成分)で増幅する野外用小型生体電位増幅器を開発した。これにV/Fコンバータを内蔵させ040[kHz]のディジタル信号を出力する構成とした。4チャンネル分を1ユニットとして、55×75×200[mm]の筐体に納め、計4ユニットを分散化させることで、様々な電極配置に柔軟に対処可能とした。さらに、16ビット双方向光リンクにより、全チャンネル分の信号をコンピュータに絶縁伝送するとともに、遠隔操作により、AC、DC成分の切り替えを可能として計測領域内を無人化した。なお、以上の全システムをバッテリ駆動とし、原生林内における生体電位計測を可能とした。
フジツボ着生誘起タンパク質の分子生物学的解析

・キプリス幼生を用いたバイオアッセイアカフジツボMegabalanus rosaの1.5M Tris-HCl緩衝液に懸濁し遠心・濾過した粗抽出液とこれを硫酸アンモニウムで塩析した分画を,それぞれドットブロット装置を用いてニトロセルロース膜に吸着させた.これを基質として幼生が付着するかどうかで誘引活性の有無を調べた.・タンパク質の精製・解析上記の硫安分画をPharmacia FPLCsystemを用いたDEAE Sepharose^<TM>カラムによるイオン交換クロマトグラフィーにかけ,得られたそれぞれの分画をニトロセルロース膜に吸着させ,同様のバイオアッセイを行った.また各分画をSDSポリアクリルアミドゲル電気泳動法で解析した.・組織標本の作成とレーザー共焦点走査型顕微鏡観察免疫染色法で着生誘起タンパク質の局在を調べるための前段階として,タテジマフジツボBalanusamphitrite成体と幼生の標本作成を行った.成体では切片作成を容易にするため通常本体から殻を取り除くが,本研究では殻下の組織も観察対象とするため固定液中で脱灰を行い,wholeの組織切片を作成した.幼生ではRNase処理したのちヨウ化プロピジウム染色を施して核染したwholeの標本をレーザー共焦点走査型顕微鏡で観察した.・cDNAライブラリーの作成cDNAライブラリーの作成のためのmRNA抽出を試みた.・タンパク質の精製高知県浦ノ内湾で最も多数容易に入手でき,しかも大型種なので大量のタンパク質抽出に好都合なアカフジツボMegabalanus rosaを100個体余り採集し,冷凍保存してタンパク質精製の材料とした.サンプルを破砕後,1.5MTris-HCl緩衝液に懸濁し遠心・濾過して粗抽出液とし,さらにこれを硫酸アンモニウムで塩析した.この分画をPhamaciaFPLCsystemを用いたDEAESepharose^<TM>カラムによるイオン交換クロマトグラフィーを行った.・幼生飼育アカフジツボ成体を実験室の水槽中に維持し,放出された幼生を回収し飼育を試みた.その結果,採集直後の成体からは容易に幼生を得られたが,しばらくすると成体の状態が悪化し幼生を放出しなくなったため,本種成体の実験室での維持が困難であると判断した.そのため別種のタテジマフジツボBalanus amphitriteを用いることとし,これまでのところ成体の状態も良好で順調に幼生を得られ,キプリス幼生までの幼生飼育も成功している.・キプリス幼生を用いたバイオアッセイ着生誘起タンパク質の活性を検定するため,キプリス幼生を用いたバイオアッセイを計画した.まず,腰高シャーレ,プラスチックシャーレ,試験管などの種々の容器を用いて幼生付着の様子を観察した.予想以上に付着率が低く,第一の問題点としては,幼生が表面張力により水面にトラップされ,そのために通常の着生が出来ない個体が多かった.また,ドットブロット法によりタンパク質を吸着させたニトロセルロース膜に幼生を付着させ着生誘起の活性を検定する試みは,サンプルの調製法や吸着法を検討している段階である.・キプリス幼生を用いたバイオアッセイアカフジツボMegabalanus rosaの1.5M Tris-HCl緩衝液に懸濁し遠心・濾過した粗抽出液とこれを硫酸アンモニウムで塩析した分画を,それぞれドットブロット装置を用いてニトロセルロース膜に吸着させた.これを基質として幼生が付着するかどうかで誘引活性の有無を調べた.・タンパク質の精製・解析上記の硫安分画をPharmacia FPLCsystemを用いたDEAE Sepharose^<TM>カラムによるイオン交換クロマトグラフィーにかけ,得られたそれぞれの分画をニトロセルロース膜に吸着させ,同様のバイオアッセイを行った.また各分画をSDSポリアクリルアミドゲル電気泳動法で解析した.・組織標本の作成とレーザー共焦点走査型顕微鏡観察免疫染色法で着生誘起タンパク質の局在を調べるための前段階として,タテジマフジツボBalanusamphitrite成体と幼生の標本作成を行った.成体では切片作成を容易にするため通常本体から殻を取り除くが,本研究では殻下の組織も観察対象とするため固定液中で脱灰を行い,wholeの組織切片を作成した.幼生ではRNase処理したのちヨウ化プロピジウム染色を施して核染したwholeの標本をレーザー共焦点走査型顕微鏡で観察した.・cDNAライブラリーの作成cDNAライブラリーの作成のためのmRNA抽出を試みた.
塩味増強に効果を与えるうま味の相互作用と咀嚼時の味成分溶出率との関係解明

生活習慣病予防に減塩が推奨されているが、塩分摂取量の過剰制限は、塩味だけでなく料理の味自体が薄味になり、食感の低下も引き起こすことから、十分に食生活改善運動としては浸透していない。塩に対するうま味の添加は、塩味を強く感じさせ、少ない塩分量で満足させる効果があると言われている。また、食品の食感は、咀嚼に伴う唾液への味物質の溶出度合に影響を与える。そこで本研究では、うま味がもたらす味や食感への効果を、理化学分析によって明らかにすることを目的とし研究を行った。H30年度はモデル食品として寒天を対象にし、実験を行った。うま味物質として、グルタミン酸にさらに甘味アミノ酸を添加したものを利用した。いずれのうま味物質を添加した場合でも味増強を引き起こすが、塩分量によって味増強効果が発揮される甘味アミノ酸の濃度は異なることがわかった。水溶液では塩味・うま味・甘味、それら3つの味のバランスが味増強に影響を与えるが、モデル食品では同程度の味のバランスでも効果が認められないものもあった。水溶液とモデル食品では味の持続時間が大きく異なっており、味増強には味のバランス以外の要素も関与すると考えられる。また、食品の硬さによって咀嚼時のモデル食品の崩壊度や味成分溶出量が異なり、味強度の違いへとつながることが、ヒト咀嚼試験(官能評価、圧力計測など)や機器による咀嚼モデル試験(物性測定、成分分析、味覚センサ測定などを利用した理化学分析)結果から示唆された。H30年から2年間では、モデル食品を対象とし、ヒト咀嚼試験や咀嚼モデル試験から最も塩味が強く感じられる「塩味とうま味の濃度組成」「浸透度合」「食品の硬さ」を明らかにすることを目的としていたが、概要に報告したように概ね順調に進んでいる。R1年度は、引き続きモデル食品を対象として検討を進めていく。日常生活で食事をする際、食品は種類や形態によって咀嚼時の崩壊の様子は様々であり、それに伴う味物質の溶出も異なると考えられる。寒天以外のモデル食品についても検討を進める。H30年度は学会参加費を計上していたが年度内の発表ができなかったことにより、差額が生じた。R1年度は、タンパク質やアミノ酸、有機酸などを含んだ様々なモデル食品を想定しており、食塩と呈味アミノ酸のみを含んだモデル食品よりも味覚センサ膜への負担が大きくなると予想される。残金は、味覚センサ膜ならびに味測定溶液前処理試薬消耗品購入費に充てたい。また、R2年度の研究である実際の食品を想定して、より応用性の高い電極の作製や、分析用消耗品の購入へ当てる予定である。
アジア・アフリカ地域における睡眠文化の多様性に関する比較研究

これまで科学的側面に偏っていた人間の睡眠行動に関する研究を、人間の文化的行動=「睡眠文化」として考究する新しい学問的な視座の確立と普及につとめた。医学、心理学などの分野でおこなわれてきた最新の睡眠科学研究の成果をふまえながら、アジア、アフリカにおける睡眠文化の多様性とその地域間比較をおこなった。また、現代社会において、睡眠をめぐるさまざまな現象が人間の健全な生活に対する「障害」としてのみ問題化されている現実をふまえ、生物医療的観点に偏りがちな睡眠科学による知見を文化の観点から相対化してとらえなおす作用を備えた「睡眠文化」という視点を導入した。初年度はアジア地域を中心に、eHRAFから入手できる25民族集団のモノグラフを対象にして、睡眠文化要素の抽出をおこなった。作業は京都大学においておこない、その結果を逐次インターネット上に作成した非公開の閲覧型データベースに載せて共有するようにした。また、関連地域の民族誌資料を購入し、睡眠文化要素の抽出作業もおこなった。アジア地域においてインテンシブなフィールド調査をおこなっている地域研究・文化人類学の専門家2名の協力を得て、インタビューをおこない、それぞれの対象民族集団・地域における睡眠文化要素についてその概観と記述的資料を得た。以上の作業によって得られたデータは、まず研究メンバー全員が共有し、それぞれの観点からコメントを加えて、「睡眠文化要素」の検討をおこなった。そのうえで、民族誌記録を集約して最終年度の出版にむけた編纂の準備をおこなった。集約と編纂のプロセスは睡眠文化研究所の研究員が協力して実施した。2008年10月25日立教大学池袋キャンパスにおいて公開研究会として睡眠文化フォーラム「新しい眠りが目を覚ます」を開催し、アジア特に日本の睡眠文化の多様性を中心に「睡眠の歴史」「時空間」「夢」「比較文化」のセッションを設けて研究成果の中間発表をおこなった。アジアにおける」を開催し、平成16年度に開設したホームページの拡充をおこない、研究内容と計画の進捗状況、研究会の案内などを掲載した。て、ひろく一般に睡眠文化研究の成果を還元する。無料のメールマガジン発行サービスを利用して、本研究プロジェクトの内容および睡眠文化に関連した最新の研究成果を隔月刊メールマガジンとして掲載する準備をすすめた。1.「睡眠文化要素」の抽出と民族誌記録の編纂:21年度はアフリカ地域を中心に、eHRAFから入手できる21民族集団のモノグラフを対象にして、睡眠文化要素の抽出をおこなった。作業は京都大学においておこない、研究分担者は、その結果を逐次インターネット上のファイル共有サービスを利用して相互に閲覧しつつ、10回にわたって個別に研究打ち合わせを京都でおこない内容を検討した。アフリカ地域においてインテンシブなフィールド調査をおこなっている地域研究・文化人類学の専門家3名(エチオピア、ケニア、カメルーン)に協力を要請し、インタビューとアンケートを用いて、それぞれの対象民族集団・地域における睡眠文化要素の記述的資料を得た。以上の作業によって得られたデータは、まず研究メンバー全員が共有し、それぞれの観点からコメントをつけ、「睡眠文化要素」の検討をおこなった。民族誌記録は、集約して出版にむけた編纂の準備をおこなった。2.研究会の開催:京都大学において「アフリカにおける睡眠文化の多様性」をテーマに研究会を開催し、研究成果の中間発表をおこなった。また、立教大学においても研究会を開催して研究成果の共有と進捗状況の検討をおこなった。3.Webサイト「睡眠文化研究」の維持:常時更新:ホームページの拡充をおこない、研究内容と計画の進捗状況、研究会の案内などを掲載して、ひろく一般に睡眠文化研究の成果の還元をめざした。4.メールマガジン「睡眠文化研究」の発行:季刊の発行:無料のメールマガジン発行サービスを利用して、本研究プロジェクトの内容および睡眠文化に関連した最新の研究成果を掲載する予定であったが、これについては発行の準備をするにとどまった。1.『世界の睡眠文化(仮題)』の編纂:平成22年度は、計画の1-2年次に収集したアジアおよびアフリカ各10地域の睡眠文化要素に関する資料をまとめて編纂する作業をすすめた。対象とした民族集団の睡眠行動に関する記述的資料について、研究協力者である睡眠科学分野の専門家の協力を得て科学的検討をおこない、通文化的比較を行う際の参照基準として用いることが出来るかどうかの検討をおこなった。2.公開シンポジウムの開催:平成22年2月5日キャンパスプラザ京都2階ホールにおいて、公開シンポジウム「睡眠文化研究フォーラム眠り世界探訪アジア・アフリカ編」を開催した。これまでインタビュー形式で蓄積してきた調査結果の概要の発表にあわせて、ケニア、エチオピア、ブルキナファソ、韓国、ミャンマーそれぞれの地域の研究者・留学生を招いて睡眠文化の多様性に関する事例についてコメントしてもらい、過去3年間の研究成果の総括をおこなった。3. Webサイト「睡眠文化研究会」の維持と「睡眠文化要素」データベースの公開準備:睡眠文化研究に関するウェブサイトを拡充維持するとともに、過去3年間の更新内容をすべてデジタルアーカイブしてDVDなどの電子媒体によって配布する準備をおこなった。

また、1-2年次に作成してきたアジア・アフリカ地域の「睡眠文化要素」資料のデータベースの整備をおこなった。一般公開には著作権の問題があることが判明したため研究グループ内の利用に留めることにした。
血漿中ｍｉｃｒｏＲＮＡ濃度のバイオマーカーとしての有用性の検討

前年度までに、miR-328が細胞分泌exosomeより検出できることを確認している。今年度は、ヒト末梢血を用いた臓器特異的miRNA定量について定量方法の確立を目指した。ヒト結腸腺癌由来LS123細胞において、腸管上皮特異的膜タンパクであるA33抗原を用いた免疫沈降により腸管由来exosomeを分取できexosomeに含まれるmiR-328を定量できた。ヒト血液中からもヒト腸由来exosomeを分取することでヒト腸におけるmiR-328発現量を定量できることを示唆する結果を得た。また、miR-328発現に個体間変動をもたらす要因について検討した結果、miR-328 5'上流域上のCpG islandの一部の領域のDNAメチル化が発現量の変動に重要な役割を果たし、miR-328発現量が高い検体では低メチル化状態、発現量が低い検体では高メチル化状態であった。興味深いことにmiR-328 5'上流域のメチル化状態とmiR-328により抑制的に制御される薬物トランスポーターABCG2との間に有意な相関が認められた。以上のことから、ヒト末梢血から小腸由来exosomeを分取しmiR-328発現量またはmiR-328 5'上流域のメチル化測定することによりヒト小腸におけるABCG2機能を予測できる可能性が示された。血漿中microRNA(miRNA)のバイオマーカーとしての妥当性を確認するため、はじめにCaco2細胞を用いてエキソソームの分泌とその方向性を確認した。解析の結果、72時間後をピークとする分泌を確認しその方向はapical方向への分泌が強いものであったが、basal方向への分泌も確認できた。このことは腸から血管方向へのmiR-328の分泌の可能性を示す。また、分泌されたmiR-328はRNase非感受性でり、界面活性剤であるTriton X存在下ではRNase感受であったことから、miR-328はエキソソーム中に存在することによりRNaseに対して安定であったと考えられる。これは、臨床検体を取り扱う上でマーカーとしての安定性が高いことを示唆しており、重要な特徴である。血中から得られるエキソソームについて臓器特異的なmiR-328発現定量法の確立を目指し、ヒト結腸癌由来細胞を用いて腸管上皮細胞特異的膜タンパク質であるA33抗原を用いたエキソソームの免疫沈降を行った。その結果、小腸特異的に発現するmiRNAを指標とすることでmiR-328の小腸特異的な発現定量が可能であることを示す結果が得られた。以上の結果を踏まえ、BCRPの基質薬物であるスルファサラジンを用いた臨床試験を行い、血中miRNAのバイオマーカーとしての可能性を検討した。試験に先立ち、被検者についてBCRPの機能に重要な変化を及ぼすことが知られる421C>A変異の遺伝子診断を行った。試験の結果、これまでの報告と同様に421C>A変異によるスルファサラジンのAUCの上昇を認めた。血中のエキソソーム中のmiR-328発現量とスルファサラジンの体内動態との間に関連を認めなかったが、これはA33抗原による分離を経ていないmiR-328発現量であったことから、今後は小腸由来miR-328発現と体内動態との関連を再度解析していく予定である。Caco2細胞においてmiR-328の細胞外分泌を超遠心法によるexosome分画の抽出(120K pellet)を行った後、解析した結果72時間後ピークとする分泌を確認した。細胞外分泌の方向は、apical方向への強い分泌であったがbasal方向への分泌も認めた。このことは腸から血液方向へのmiR-328分泌の可能性を示す。分泌されたmiR-328のバイオマーカーとしての安定性を明らかにするためRNaseに対する感受性について検討した。その結果、exosome分画におけるmiR-328はRNase非感受性でありTriton X存在下ではRNase感受性であった。このことから、miR-328はexosome中に存在することでRNaseによる分解を受けなかったと考えられる。Caco2細胞におけるexosomal miRNAの細胞透過性を検討した。Caco2細胞に発現しておらずかつexosomeに内包されたmiRNAを用いるため、Caco2細胞において発現のないmiR-223を測定対象とし同miRNAは血球由来K562細胞分泌exosomeとして調製した。Caco2細胞の単層膜を作成し、K562細胞由来exosomeをapical・basal方向それぞれに投与し経時的サンプリングし(0, 2, 4, 8, 16, 32, 64 hr)測定した。その結果、分泌はapical側に約5倍傾いていたがbasal側への分泌も認めた。本年度は最終的な研究計画である患者臨床試験に向けた基礎的な検討を行った。研究実績の概要にあるとおり、患者臨床試験に向けて血液中exosomeを用いたmiR-328の薬物トランスポーターABCG2機能予測バイオマーカーとしての確立を行った。ヒト血液中から定量可能レベルの小腸由来miR-328を得ることが出来たことから来年度以降の研究の推進に支障はなく、達成度としておおむね順調に推移していると言える。研究計画では平成23年度以下の2項目について検討する計画であった。(a) miR-328の細胞外分泌(basal並びにapical側)

(b) exosomal miRNAの消化管透過性「研究実績の概要」において記述したとおり、2項目ともに解析結果を得ることが出来た。細胞内のmiR-328は血液方向の輸送を示すbasal側への分泌することが明らかとなると同時に分泌されたmiRNAはCaco2細胞単層膜を透過することが示唆された。これにより研究計画において予定していた細胞におけるmiRNA分泌に関する検討はすべて達成することが出来た。「研究実績の概要」に記述したように、これまでにヒト末梢血から小腸由来exosomeを分取しmiR-328発現量またはmiR-328 5'上流域のメチル化測定することによりヒト小腸におけるABCG2機能を予測できることが示唆される結果を得ている。次年度以降にこれまでの研究結果を踏まえ、バイオマーカーとしての有用性の確立に関する検討について主に臨床試験を中心に推進していく。一方、サプリメントとして繁用されるクルクミン(ウコンの主成分)はmiRNAの脱メチル化による発現上昇を引き起こすことが報告されている。興味深いことに、クルクミン暴露により内在性ABCG2発現が著しく減少することが報告されている。このことからクルクミンが脱メチル化を介したmiR-328発現上昇を引き起こし、それに伴うABCG2発現低下が生じているのではないかと考えた。そこで臨床試験ではABCG2遺伝子多型診断を行い遺伝子型を同定した被験者についてクルクミンの前投与を行った上で消化管由来の血中miR-328発現定量ならびにSASP投与(ABCG2の基質薬物)を行い、miR-328発現量とSASPの体内動態を比較検討することを予定している。近年、ヒトがん組織においてmiR-328の5'上流域のDNAメチル化がmiR-328発現制御に関与していることが報告された。そこで本年度はこれまでに研究計画に加え新たにmiR-328発現の個人差要因の解明を目指して、同領域のDNAメチル化解析を行う予定である。解析対象はヒトABCG2遺伝子の発現臓器の1つである胎盤を用いる。すでに同組織においてmiR-328発現量とABCG2 protein発現量との間には有意な負の相関を認めていることから、miR-328発現量の個人差要因を解明することでABCG2の個人差を引き起こす本質を明らかにすることができるのではないかと考えている。miR-328がABCG2機能のバイオマーカーとなるのかについては、ヒトを対象とした臨床試験が必須であることから、研究計画に基づきヒト末梢血中のmiR-328定量とABCG2基質薬物の体内動態との関連を明らかにする臨床試験を実施する予定である。平成25年度の設備備品費は当初から計上しておらず特に新規に必要とする機器はないことから、研究費は主に耗品費や国際誌投稿料に充当される計画である。消耗品の使途は主に以下の品目を予定している。PCRプライマープローブリアルタイムPCRマスターミックスDNAメチル化解析キット成24年度の設備備品費は当初から計上しておらず特に新規に必要とする機器はないことから、研究費は主に耗品費に充当される計画である。PCRプライマープローブ、リアルタイムPCRマスターミックス、細胞small RNA抽出キット、ルシフェラーゼアッセイキット、トランスフェクション試薬
ゴルジ装置の多様性と成熟過程：3D-SEM法による下垂体前葉形態ライブラリの構築

本年度の研究では、平成29年度に引き続き、1成体ラット下垂体前葉ホルモン産生細胞におけるゴルジ装置の3D構造解析を行った:平成29年度では、走査電子顕微鏡(SEM)連続断層像観察・3D再構築法(連続切片SEM法)により下垂体前葉ホルモン産生細胞(GH,PRL,LH,TSH,ACTH細胞)のゴルジ装置の全体像を明らかにした。さらに本年度は、ゴルジ装置だけでなく、この小器官の形態形成に関係が深い中心小体の空間的局在も明らかにすることができた。オスミウム浸軟法は、細胞内微細構造を再構築することなく直接SEM観察できるイメージング技法である。そこで、オスミウム浸軟法により各前葉細胞のゴルジ装置のシス・トランスの微細構造解析を行った。その結果、シスの微細構造は扁平な板状の膜に孔が開いた構造を呈しており、その特徴は各細胞に共通していることがわかった。一方、トランスの微細構造は、各ホルモン産生細胞によって多様で、空間的に複雑な構築を呈していた。さらに、各ホルモン産生細胞を正確に同定するため、オスミウム浸軟法と金コロイド標識法を組み合わせた新たな手法の開発も行った。今後は、この最新のイメージング技法も併用しながら、下垂体前葉ホルモン産生細胞の3D微細構造解析を進めていきたい。さらに本年度は、2発生・成熟過程における下垂体前葉ホルモン産生細胞の形態的解析も進めた。樹脂に包埋した下垂体組織切片の連続切片を切削、SEMによる連続切片観察を行っており、順次再構築モデルを作製する予定である。本研究では、様々な走査電子顕微鏡の技術を駆使して、「ゴルジ装置の多様性と成熟過程」の解析を目的としている。そこで本年度では、昨年度に続き「成体ラット下垂体前葉ホルモン産生細胞のゴルジ装置の3D構造解析」について検討した。具体的には、オスミウム浸軟処理した下垂体組織の走査電子顕微鏡(SEM)解析により、各前葉細胞ゴルジ装置の3D微細構造を明らかにした。さらに、オスミウム浸軟法と金コロイド標識法を組み合わせた新たな手法の開発にも成功し、下垂体前葉各ホルモン産生細胞を正確に同定した上で、ゴルジ装置の構造解析が可能となった。連続切片3D再構築法による解析も進めており、ゴルジ装置の3D全体像だけに留まらず、中心小体との空間的配置関係も詳細に示すことができた。成体ラットの解析に関しては、計画以上の内容を行う事ができた。「発生・成熟過程における下垂体前葉ホルモン産生細胞の解析」については、現在着手しているが、現状では計画よりも少し遅れが生じているため、早急に形態解析を進めていく予定である。今後は、連続切片SEM法だけに留まらず、オスミウム浸軟法による解析も行っていきたい。以上の結果より、「発生・成熟過程における下垂体前葉ホルモン産生細胞の解析」については、少し遅れが生じているが、一方で、下垂体前葉細胞に最適なイメージング技法の開発に成功し、今後の下垂体組織における形態学的研究に大きな可能性を示すことができた。将来的には、これらの技術を用いた多角的な解析を展開していきたい。以上の事から、全体としてはおおむね順調に進展していると評価した。今後は引き続き、「成体ラット下垂体前葉ホルモン産生細胞のゴルジ装置の3D構造解析」、「発生・成熟過程における下垂体前葉ホルモン産生細胞の解析」について、解析を進めていく予定である。これらの結果について、論文を作成・投稿する予定である。本年度の研究では、成体ラット下垂体前葉組織におけるゴルジ装置の3D微細構造の解析を行った。1免疫組織化学標識を加味した連続切片SEM・3D再構築法:下垂体前葉では、多種類の内分泌(ホルモン産生)細胞が混在しており、これらの細胞を正確に同定するには、免疫組織化学染色法を加味する必要がある。そこで、連続切片SEM法と免疫組織化学染色法を組み合わせた新たな手法の開発を試みた。その結果、下垂体前葉の5種類の内分泌細胞を金コロイド標識により正確に同定した上で、各細胞のゴルジ装置の3D再構築像の作製と解析に成功した。性腺刺激ホルモン産生細胞のゴルジ装置は、下垂体前葉細胞中で最も発達しており、「球体」という特殊な形状であることがわかった。さらに、各前葉細胞のゴルジ装置の3D全体像を比較することで、細胞種によってその形状が多様であることが明らかになった。2SEM-CLEM法:連続切片SEM法では、ゴルジ装置の大局的な構造を解析できるが、この小器官の膜の表面3D微細構造の観察には、オスミウム浸軟法が効果的である。しかし、オスミウム浸軟法単独では、四酸化オスミウムによる蛋白の抗原性低下が著しいため免疫組織化学標識は困難である。そこで、新たに開発したSEM-CLEM法を用い(Koga et al., 2015)、目的の細胞を免疫組織化学的に標識した上で、その深部に広がるゴルジ装置の3D表面微細構造を解析した。本研究では、ゴルジ装置の発達した性腺刺激ホルモン産生細胞に注目し、去勢後にみられるゴルジ装置の形態的変化を示すことができた(Koga et al., 2017)。

本研究では、先端的な3Dイメージング技法を駆使して、「ゴルジ装置の多様性と成熟過程」の解析を目的としている。そこで平成28年度では、成体ラット下垂体前葉組織におけるゴルジ装置3D微細構築の多様性の解析を行った。具体的には、1免疫組織化学標識を加味した連続切片SEM・3D再構築法の解析、2SEM-CLEM法による解析の2項目について順調に計画が遂行されている。本年度の研究では、平成28年度に引き続き、成体ラット下垂体前葉組織におけるゴルジ装置の3D微細構造解析を行った。1免疫組織化学標識を加味した連続切片走査電子顕微鏡(SEM)・3D再構築法によるゴルジ装置全体像の解析:LR white樹脂に包埋した下垂体組織ブロックから、連続超薄切片(500枚以上)を切削した。次に、これらの切片に抗下垂体ホルモン抗体(GH,PRL,LH,TSH,ACTH)と金コロイド標識二次抗体による免疫組織化学標識を施し、各ホルモン産生細胞を同定した上で、連続断層SEM像を撮影した。最後に、撮影した連続断層像から各ホルモン産生細胞のゴルジ装置の全体像やそのほかの細胞小器官の空間的配置を解明した。その結果、下垂体各前葉細胞のゴルジ装置の3D全体像は、細胞種によって多様であることが明らかになった。また、本年度は発生・成長に伴うゴルジ装置の3D微細構築の成熟過程の解析にも着手することができた。2標本作製: 8週齢以降の雌雄ウィスター系ラットを掛け合わせ、生後0日から7日までの各日、および成体となる8週までの1週間間隔での下垂体標本を作製した。3形態的解析:現在、連続切片SEM法やSEM-CLEM法など、様々なイメージングアプローチを駆使して、生後発達過程での機能成熟(身長・体重の増加や性成熟)との関連性を念頭に置き、ゴルジ装置の経時的形態変化の解析を進めている。本研究では、先端的なイメージング技法を駆使して、「ゴルジ装置の多様性と成熟過程」の解析を目的としている。そこで本年度(平成29年度)では、昨年度に続き「成体ラット下垂体前葉組織におけるゴルジ装置3D微細構築の多様性」の解析を行った。具体的には、近年開発に成功した連続超薄切片SEM・3D再構築法に免疫組織化学手法を加味した新たなイメージング技法を用いて、下垂体前葉各ホルモン産生細胞のゴルジ装置の3D全体像を解明した。さらに、発生・成熟過程における下垂体前葉ホルモン産生細胞のゴルジ装置の形態学的な解析にも着手できており、順調に計画が遂行されている。本年度の研究では、平成29年度に引き続き、1成体ラット下垂体前葉ホルモン産生細胞におけるゴルジ装置の3D構造解析を行った:平成29年度では、走査電子顕微鏡(SEM)連続断層像観察・3D再構築法(連続切片SEM法)により下垂体前葉ホルモン産生細胞(GH,PRL,LH,TSH,ACTH細胞)のゴルジ装置の全体像を明らかにした。さらに本年度は、ゴルジ装置だけでなく、この小器官の形態形成に関係が深い中心小体の空間的局在も明らかにすることができた。オスミウム浸軟法は、細胞内微細構造を再構築することなく直接SEM観察できるイメージング技法である。そこで、オスミウム浸軟法により各前葉細胞のゴルジ装置のシス・トランスの微細構造解析を行った。その結果、シスの微細構造は扁平な板状の膜に孔が開いた構造を呈しており、その特徴は各細胞に共通していることがわかった。一方、トランスの微細構造は、各ホルモン産生細胞によって多様で、空間的に複雑な構築を呈していた。さらに、各ホルモン産生細胞を正確に同定するため、オスミウム浸軟法と金コロイド標識法を組み合わせた新たな手法の開発も行った。
超対称性に基づいた宇宙論の諸問題

超対称性理論に基づく宇宙モデルにおいて、宇宙における物質・反物質の起源はどのように説明されるか、不安定粒子の宇宙論的影響などの問題に取り組んだ。主要な成果としては、まず、バリオン数生成機構であるアフレック・ダイン機構のダイナミックスを有限温度の効果を取り入れて調べた。特に、ゲージ場が超対称性の破れを媒介するモデルにおいては、有限温度の効果によってアフレック・ダイン場のポテンシャルの形は大きな変更を伴い、場の期待値が大きなところでポテンシャルが極小になる場合があり、このような場合でのアフレック・ダイン場のダイナミックスとその結果生成されるバリオン数に関する系統的な解析を行った。その結果、有限温度とQボールの生成のためアフレック・ダイン機構によるバリオン数生成は阻害されるが、宇宙のバリオン数を説明できる理論パラメターが存在することが分かった。また、この研究に関連して一般のスカラー場がコヒーレントな振動を行う場合、その系の断熱不変性のために「I-ball」と呼ばれる球状の準安定なスカラー場の凝縮が生成されることを発見した。また、超対称性理論では100GeV程度の質量をもち、重力のみでしか他の粒子と相互作用しないために宇宙論的な寿命を持つものが存在する。そのような粒子に対して、その質量・寿命・存在量に対する制限を求めた。特に長寿命を持つ不安定粒子が崩壊してハドロンを放出する場合に、ハドロンが宇宙のバックグランド・プラズマとの間の強い相互作用・電磁相互作用によって引き起こすハドロン・シャワー過程を定量的に評価しそれが宇宙初期の元素合成に与える影響を計算した。その結果、不安定粒子のハドロン崩壊は従来考えられてきた放射崩壊(光子を放出する崩壊)に比較してより厳しい制限を導くことが分かった。さらに、この結果を超対称性理論で予言されるグラビティーノに応用し、グラビティーノの存在量に対する制限から宇宙の再加熱温度に対する制限をもとめた。再加熱温度がMeVスケールの宇宙でニュートリノの熱平衡化過程を詳しく調べることによって、再加熱温度の下限を求めた。制限を求める際、従来考慮されていなかったニュートリノ振動がこの熱平衡化過程に重要な働きをし、このため従来の結果とは異なり再加熱温度の制限は約2MeVと厳しくなることが明らかになった。超対称性理論に基づくバリオン生成機構として有望視されているアフレック・ダイン機構のダイナミックスを有限温度の効果を取り入れて調べた。特に、ゲージ場が超対称性の破れを媒介するモデルにおいては、有限温度の効果によってアフレック・ダイン場のポテンシャルの形は大きな変更を伴い、場の期待値が大きなところでポテンシャルが極小になる場合があり、アフレック・ダイン場のダイナミックスは非常に複雑になる。さらに、近年アフレック・ダイン場の宇宙論的進化においてQボールと呼ばれるソリトンが作られ、バリオン数生成に大きな影響を与えることがることが明らかになっている。したがって、今年度はこのような場合のアフレック・ダイン場のダイナミックスとその結果生成されるバリオン数に関する系統的な解析を行った。

最近発表された宇宙背景放射の精密観測(WMAP)のデータに基づいて、観測ともっとも適合するインフレーション宇宙モデルの構築を試みた。新しい観測では密度揺らぎのスペクトルに関して、通常インフレーションモデルで予言されるスケール不変なものと少し異なり、スペクトル指数がスケールに依存する傾向が見られた。そこで、これを説明するために、超対称性理論の枠組みで実現できるダブルインフレーションモデルであるハイブリッド・ニュー・インフレーションを考え、実際に観測された密度揺らぎのスペクトルを説明できることを示した。また、宇宙背景放射の揺らぎにおいて低いマルチポールでの揺らぎが理論予測よりも低かったことに関しても、上のダブルインフレーションモデルで説明できることを示した。また、WMAPの結果から導かれた宇宙のバリオン密度と宇宙の軽元素合成理論から導かれるバリオン密度の整合性を調べ、公表されている最新の軽元素の観測値とその誤差を使うと、理論に予言値と観測値が有意にずれていることを示した。これは観測値に大きなシステマティック・エラーがあるか新しい物理的効果が存在することを示唆している。そこで、後者の立場から元素合成と宇宙背景放射の両方を説明できるシナリオをレプトン数の非対称や元素合成後のバリオン数の増大等を導入することによって作った。さらに、それを具体的に実現するものとして超対称性理論におけるQボール生成に基づくモデルを提案した。超対称性理論では100GeV程度の質量を持つ新しい粒子の存在がが数多く予言されている。そのような粒子の中には重力のみでしか他の粒子と相互作用しないために宇宙論的な寿命を持つものが存在する。そのような粒子に対してその質量・寿命・存在量に対する制限を求めた。特に長寿命を持つ不安定粒子が崩壊してハドロンを放出する場合に、ハドロンが宇宙のバックグランド・プラズマとの間の強い相互作用・電磁相互作用によって引き起こすハドロン・シャワー過程を定量的に評価しそれが宇宙初期の元素合成に与える影響を計算した。その結果、不安定粒子のハドロン崩壊は従来考えられてきた放射崩壊(光子を放出する崩壊)に比較してより厳しい制限を導くことが分かった。さらに、この結果を超対称性理論で予言されるグラビティーノに応用した。グラビティーノはインフレーション宇宙においては再加熱時に密度が再加熱温度に比例して作られる。したがって、グラビティーノの存在量に対する制限から宇宙の再加熱温度に対する制限が導かれる。このようにして求めた再加熱温度の制限は10の6-7乗GeVで極めて厳しい制限となり、宇宙の物質・反物質の非対称性の起源の説明にとっても重要な結果となった。超対称性理論では重力を媒介するグラビトンのスパー・パートナーであるグラビティーノが存在し、宇宙論特に、宇宙初期の軽元素合成に影響を当てるためその存在量は厳しく制限される。インフレーション宇宙ではグラビティーノはインフレーション後の再加熱時にその再加熱温度に比例して作られる。したがって、超対称性に基づく宇宙モデルにおいては「熱い」
燃焼プロセスから排出される気相析出型微粒子の生成機構の解明とその低減技術の開発

石英製ロータリキルン反応装置を使用し、高温燃焼雰囲気からの冷却ゾーンの温度域で、Pb,Cd,ZnおよびCu金属元素と共存ガス中のSO_2、HCl、H_2Oなどとが反応し、温度の高い方から硫酸塩、塩化物の順に気相析出(過冷却)の競争反応がおこり、種々の粒子状浮遊物質が発生するとともに、共存する金属元素と非金属元素とのモル比によって、気相析出微粒子の化合物形態が異なり、その結果として毒性が変化することを明らかにした。また、気相析出する金属種の化合物の予測を、熱力学データベースを利用した擬平衡反応器を組み込んだプロセスシミュレータ(FactSage/Chemapp/Intel Fortran)を開発した。エネルギー資源である石炭、未利用資源である廃棄物、およびカーボン・ニュートラルで再生可能な資源であるバイオマスなどには、土砂や粘土鉱物などの主要鉱物に加え、砒素、ホウ素、カドミウム、鉛、水銀、モリブデン、セレンなどの有害金属をppmレベルで含んでいる。発電や熱利用プロセスにおいて、原料の高温反応・分解時に、燃料中に含まれるトレースエレメントの大気放出に伴う環境影響、生態や健康障害が、近年、問題になりつつある。本研究では、これらの燃料から発生する蒸気状有害元素ならびにそれらを冷却したときに生成する気相析出型微粒子(PMI)の低減機構に関する研究を3年間で実施する。1.38個の塩素系の素反応式を選び、CHEMKINを使用して、化学種の濃度変化を計算した実験結果との比較の中で、高温場で発生した塩素ラジカルがガス冷却過程において、ラジカル同士の再結合によって塩素ガスが発生し、水蒸気との反応によって塩化水素ガスに変化することを明らかにした。また、塩化水素と塩素ガスとの生成比率は、水蒸気濃度およびガスの冷却速度に支配されることを明らかにした。2.名古屋大学情報連携基盤センターのスーパーコンピュータ用にチューニングされた非経験的分子軌道法(Gaussian)ソフトウエアを利用して、Pb、Cu、Zn系の素反応式の反応速度式を10個決定した。3.Pb-Cu-Zn-02-HC1-H20-N2-C02系のモデル物質について、回分式ロータリーキルン反応装置に入れて6001100°Cの温度で反応実験を行い、生成する気相析出型微粒子の粒子径状や化合物形態、結晶径などを明らかにした。その結果、析出の核となる元素、およびその核の周りに析出する元素とが、SEM-EDS分析で確認された。また、原子吸光分析装置やイオンクロマトグラフィーなどを使用して、生成物の物質収支を高い精度で求めた。本研究では、これらの燃料から発生する蒸気状有害元素ならびにそれらを冷却したときに生成する気相析出型微粒子(PM1)の低減機構に関する研究を3年間で実施する。本年度の成果として、1.塩化揮発した重金属蒸気が冷却過程において気相析出する化学種の形態測定、およびその反応機構を明らかにした。石英ガラス製ロータリキルン型反応装置を使用して、Pb、Zn,Cu,Cdを含むモデル試料を燃焼温度9001050°Cで塩化揮発化し、発生した金属蒸気を、ガス冷却装置を模擬した900300°Cに温度勾配をつけた3段の円筒濾紙型捕集装置で捕集され、その生成量と化合物形態がSEM-EDS、XRF、XRD、イオンクロマトグラフィーなどの分析装置を使用して同定した。重金属類の析出は、温度の高い方から硫酸鉛、塩化鉛、硫酸銅/硫酸亜鉛、塩化銅/塩化亜鉛の順であり、硫酸鉛が析出すると他の金属蒸気が硫酸塩を核にして不均一核生成によって析出すること、また、水蒸気や硫黄/塩素比などの影響について明らかにした。2.ab-initio量子化学計算法を利用してPb/O/Cl系の6本の素反応速度式の活性化エネルギーと頻度因子を決定した。確定した反応速度式を利用して、反応シミュレーションを行ったところ、実験結果とほぼ傾向が一致し、本データの信頼性は高いと判断された。

発電や熱利用プロセスにおいて、原料の高温反応・分解時に、燃料中に含まれるトレースエレメントの大気放出に伴う環境影響、生態や健康障害が、近年、問題になりつつある。本研究では、これらの燃料から発生する蒸気状有害元素ならびにそれらを冷却したときに生成する気相析出型微粒子(PM1)の低減機構に関する研究を3年間で実施した。本年度の成果として、1.塩化揮発した重金属蒸気が冷却過程において気相析出する化学種の形態測定、およびその反応機構を明らかにした。昨年度と同様に、石英ガラス製ロータリキルン型反応装置を使用して、Pb、Zn, Cu, Cdを含むモデル試料を燃焼温度9001050°Cで塩化揮発化し、発生した金属蒸気を、ガス冷却装置を模擬した900300°Cに温度勾配をつけた3段の円筒濾紙型捕集装置で捕集して、その生成量と化合物形態を同定した。HCl/SO_2/H_2O共存下におけるH_2Oの影響、HCl/SO_2比に及ぼす金属化合物の析出挙動について検討し、共存ガスとしてH_2Oが存在する方がより安全なPbSO_4、CdSO_4が生成しやすいことを明らかにした。また、この傾向を理論的に説明するため、擬平衡反応器を用いた反応モデルを作成し、冷却ゾーンにおけるPb/Zn/Cu/Cd/Cl/SO_2/H_2O系の過冷却の粒子析出挙動について実験結果のシミュレーションを行った。2. ab-initio量子化学計算法を利用してPb/O/Cl系の6本の素反応速度式の活性化エネルギーと頻度因子の再計算を行いその値を決定した。確定した反応速度式を利用して、反応シミュレーションを行ったところ、実験結果とほぼ傾向が一致し、本データの信頼性は高いと判断された。
自家組織移植による組織欠損再建治療の基礎的・臨床的研究

皮膚癌、乳癌患者を対象に、悪性腫瘍摘出後欠損に対し各種自家組織移植による再建を行ってきた。本研究は、如何なる欠損に如何なる自家組織を用いることが、機能的、形態的に最も有効かを知るべく行われた。その結果、皮層表層血行、血管皮層支配領域の検索に加え、遊離皮層、脂肪、骨組織の生着率、成長度、組織変化についても検討した。結果として新しい皮弁の開発、顔面における分節理論の確立、乳癌術後乳房再建法などを成し得、これらを各種学会、論文として発表するだけでなく、患者に対しての啓蒙活動も合わせて行った。
非欧米型宗教間対話と政治状況の相関関係:東アジア・中東を中心にして

欧米のリベラル派において主流となっている宗教多元主義や多元主義的宗教政策は、しばしば、非欧米圏におけるファンダメンタルな価値を追求する「排他主義」的立場を進化論的な優位性から批判する。しかし、価値の衝突を避けるためには、多元主義的モデルを、近代社会の普遍的な宗教理解・政教理解と短絡すべきではない。また、近現代史における宗教理解は、ナショナリズムとの関係を無視できない。それぞれの宗教は、置かれた土地に根ざそうとする根源的欲求を持つが、それが国家的な価値観に吸収されるプロセスにおいて、同化だけでなく反発・抵抗を生じるのであり、そのコンテキストの分析が平和構築のためには欠かせない。宗教間対話あるいは宗教の神学において、比較的広く用いられている類型に排他主義、包括主義、多元主義がある。そして宗教多元主義の立場からは、しばしば、排他主義や包括主義は克服されるべき前時代的なモデルとして批判されてきた。本年度は、そうした従来の宗教問対話モデルでは説明できない事例として「原理主義」に注目し、それを欧米だけでなく日本近代史との関係において研究した。「原理主義」と名指しされる宗教復興現象の多くに、多元主義的な啓蒙的価値・近代主義に対する抵抗の姿勢を見ることができる。それは単にプレモダンへの伝統回帰ではなく、モダニズムの影響を多分に受けながら、それに包摂されない価値観を打ち立てようとしているという点ではポストモダンとさえ言い得る要素を有している。そのことを近代日本宗教史と比較することを通じて、日本においても「ファンダメンタルなもの」を追求することによって、西洋近代と対峙しようとした類似の思想構造があることを認識するに至った。近代化を急いだ日本の場合には、プレモダン・モダン・ポストモダンが一時期に混在し、結果的に、そのことが戦争や植民地主義を正当化するイデオロギーにつながっていったことを考察することができた。宗教間対話において広く用いられてきた類型に、排他主義、包括主義、多元主義がある。宗教多元主義の立場からは、しばしば、排他主義や包括主義は克服されるべき前時代的なモデルとして批判されてきた。このような宗教多元主義モデルが前提としている進歩史的な価値観を批判すると共に、その問題は現実の宗教界や政治の世界などにおいても反映されていることを、西洋および日本における事例を通じて研究してきた。その上で、排他主義や包括主義に分類される宗教や運動の中にも評価すべき要素があること、また西洋の神学サークルの中で議論されてきた多元主義モデルが、非西洋世界において、どのような有効性を持つのかを、イスラームや日本宗教の視点を交えて批判的に考察してきた。3月には、中国に出張し、急速に変わりつつある中国の宗教研究の現状について、大学や国家宗教事務局において聞き取り調査をすると共に、上海師範大学のInternational Scholars'Forumで「現代社会における宗教研究の重要性」と題する講演を行い、意見交換の機会をもった。欧米から、しばしば「信教の自由」に関して問題視されている、イランや中国などの国と、どのような関わりを持つべきかを今後考えていくきっかけを多く得ることができた。本研究では、欧米を中心に構築されてきた宗教間対話を批判的に考察し、これまで十分に研究の対象とされてこなかった非欧米圏の宗教間対話の取り組みの実態を調査することを目的としてきた。それと同時に、欧米圏および非欧米圏の宗教間対話が、テロ・地域紛争・戦争などによる政治状況の変化から受けている影響を調べ、また関連各国の政策決定において宗教政策がどのように変容してきたのかを明らかにしようとした。以下に成果を上げる。(1)従来の宗教間対話モデルの批判的考察欧米のリベラル派の学者において主流となっている宗教多元主義や多元主義的宗教政策の問題点を示し、同時に、それを非欧米圏に適応することの難しさを示唆した。(2)非欧米圏(特にアジア・中東)の宗教間対話の調査・研究特に日本の近代史における宗教政策を研究対象とし、宗教概念そのものが国策に大きく依存していることを明らかにした。また、欧米とは異なる形で、近代日本においても宗教間対話はなされていたが、それが時には戦争協力へと結びついていくメカニズムを考察した。(3)政治的変化と他宗教理解の相関関係の調査・研究宗教間対話は、それぞれの宗教伝統の交流だけでなく、政治的な文脈に依拠すること、とりわけ、近現代史においてはナショナリズムとの関係を無視できないことを明らかにした。それぞれの宗教は、置かれた土地に根ざそうとする根源的欲求を持つが、それが国家的な価値観に吸収される近代特有の現象を分析した。