hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
相対論的量子力学の古典力学的極限における特異性と相対論的コヒーレント状態の応用

(6)Dirac振動子ポテンシャルを持つDirac方程式に対するEhrenfest定理がFW表示を採ることにより自然な形で得られる。これは、FW表示により一般的にDirac方程式の古典力学的極限を定義できることを示唆する。以上の結果は学術雑誌に論文として発表した。本年度は、昨年度に引き続き主としてDirac振動子の相対論的コヒーレント状態の性質について調べた。またこれに関連した問題としてスカラー型及び擬スカラー型の外場中の非線形Diracソリトンの振る舞い、擬スカラー型(Dirac振動子型)の相対論的無反射ポテンシャル、等についても調べた。その結果以下の事柄を明らかにした:(1)オリジナルなDirec表示でのコヒーレント波束の運動は明らかにZitterbewegung効果(Z-効果)を示す。従って、Dirac表示では古典力学的極限は定義できない。しかし、Foldy-Wouthuysen(FW)表示を採ることによりZ-効果を取り除くことができ、Dirac方程式の古典力学的極限を定義できる可能性がある。(2)スカラー型の外場ポテンシャル中の非線形Diracソリトンの質量中心の運動は、特にポテンシャルが空間一次の場合、自己相互作用の結合定数に依存しない(g-independence)。但し、空間二次の外場ポテンシャルの場合はソリトンのサイズ効果のためそのg-independenceが僅かではあるが破れる。(3)擬スカラー型の外場ポテンシャルの場合は、ソリトンの質量中心の運動が、Dirac表示でのコヒーレント波束の場合と同様にZ-効果を示す。これは擬スカラー型の外場ポテンシャルがodd matrixを含んでいるためであり、odd matrixを含まないスカラー型やベクトル型の外場ポテンシャルの場合は、ソリトンのZ-効果は無視できるほど小さいか存在しない。(4)擬スカラー型のポテンシャルで特にDirac振動子型の場合、非相対論的Schrodinger方程式の無反射ポテンシャルに対するKay-Mosesの方法の相対論的拡張が可能である。N個のエネルギーレベルを持つポテンシャルに対して(N+2)個のパラメータを持つ相対論的無反射ポテンシャルの族が得られる。本年度は、関連問題も含めて、主として下記の問題について調べた。1.逆散乱法による相対論的量子力学のおける調和振動子ポテンシャルの可能性:(1)等間隔で無限個のエネルギーレベルを持つ、(2)コヒーレント波束はその形を不変に保ち、その運動は古典的調和振動(HO)と厳密に同じである、という2つの特徴を必要条件として満足するHOの相対論的バージョンの可能性について調べた。
マウス精巣性テラトーマ形成に関わる新規原因遺伝子の同定

本研究の目的は、マウスの精巣に発症する始原生殖細胞を起源としたテラトーマ形成の原因遺伝子の同定である。昨年度までに私は胎仔精巣を移植することによりテラトーマ(ETT)の形成を誘発する原因遺伝子が存在する領域ett1, ett2とett3を同定している。精巣生テラトーマ形成系統と非形成系統のマウスを用いエクソームシークエンス解析を行い、この3領域に変異遺伝子が存在していることを明らかにした。本年度はett1領域に存在している変異遺伝子Mc4rについて原因遺伝子であるか検証するためにゲノム編集(ノックイン)マウスの作出を行った。遺伝子改変技術としてはCRISPR/Cas9システムを用いた。候補遺伝子Mc4rに対し、2つのgRNAとCas9タンパク質と変異型配列を持つシングルストランドオリゴデオキシリヌクレオチド(ssODN)を設計し野生型系統への変異型配列のノックインを試みた。受精卵への導入方法としてはエレクトロポレーターを用いたTAKE(Technique for Animal Knockout system by Electroporation)法を用いた。これまでに110個の2細胞期胚を移植し、13匹の産仔を得ることができた。その得られた13匹の産仔のうち10匹でゲノムに変異を導入することが出来た(76.9%)。得られた産仔のほとんどが2つのgRNAに挟まれた領域に塩基の挿入欠損によるアミノ酸の置換やストップコドン獲得などの変異が導入されていたが、目的の変異のノックイン(KI)マウスも得ることが出来た(20%)。Mc4rがett1の原因遺伝子であるか検証するため、ノックアウト(KO)マウスの交配を行った。野生型の胎仔精巣を移植したものは成体精巣内で胎仔精巣由来の精細管が分化し精子形成が進行していたが、KO型の胎仔精巣を野生型系統成体精巣に移植したものは成体精巣内でケラチンパールを形成していた。この移植実験によりETT様の組織を形成したことから、Mc4rがテラトーマ形成の原因遺伝子である可能性が強く示唆された。29年度が最終年度であるため、記入しない。本研究はマウス12.5日胚の胎仔精巣を成体精巣に移植することによって形成されるテラトーマ(実験的精巣性テラトーマ)の原因遺伝子の同定を目的としている。これまでにマッピングを行った原因遺伝子が存在する候補領域ett1にはタンパク質をコードしている遺伝子が8遺伝子存在していた。その中の一遺伝子Mc4rに変異を確認した。このMc4rの胎仔精巣中での発現局在を免疫蛍光染色により調べた。その結果、タンパク質MC4Rは12.5日胚の胎仔精巣中では生殖細胞で発現していることがわかった。これまでの候補8遺伝子について個々のシークエンスを行ってきたが、本研究ではさらに広い領域を調べるためゲノムレベルでのシークエンス解析である全ゲノムのエクソーム解析を行った。エクソーム解析は北海道システム・サイエンス株式会社に委託して行った。サンプルとして、テラトーマ形成系統と非形成系統の耳片から抽出したゲノムDNAを用いた。それぞれ5729万リード、5927万リードの配列を収集し、データ解析として、得られた全エクソーム配列のマウス標準ゲノム配列mm10へのマッピングを依頼した。それぞれの配列とmm10の配列を比較した結果、私が同定した候補領域(ett1領域)にはMc4r遺伝子のみでミスセンス変異が起きていることが確かめられた。また、テラトーマの形成に関わる遺伝子がett1領域以外の他の領域にも存在している可能性があるため、ゲノムマッピングを行い候補領域の探索を行った。サンプルは胎仔精巣移植によりテラトーマ形成を誘発した胎仔94匹のゲノムDNAを用い解析を行った。その結果、ett1候補領域以外にも幾つかの染色体の領域でテラトーマ形成に有意差が見られた。このマッピングの結果とエクソーム解析の結果を合わせることで、他の変異遺伝子も特定することができた。研究計画に従い、テラトーマ形成の原因遺伝子の同定に向けDNAシークエンス・エクソーム解析・トランスジェニックマウス作出の準備を進めた。当初の本年度の研究計画として、RNAシークエンスによる網羅的発現解析を予定していた。しかし、解析に耐えうるだけのRNAサンプルの調製が困難であるために全ゲノムのエクソーム解析に変更した。サンプルとして、テラトーマ形成系統(129系統)と非形成系統(LT系統)の耳片から抽出したゲノムDNAを用いた。解析の結果、私が同定した胎仔精巣移植によりテラトーマ形成を誘発する原因遺伝子が存在する候補領域18番染色体の66.367.4Mbp(ett1領域)にはMc4r遺伝子のみでミスセンス変異が起きていることが確かめられ、原因遺伝子候補が明確になった。原因遺伝子同定のためにトランスジェニックマウスの作出が必要である。本年度はその準備および実験手技の習得を進めた。本研究で使用する系統のマウスは採卵数や単為発生の問題があり、試行錯誤しているが未だ実験手技が確立できていない。来年度以降も準備を進めていく必要がある。

本年度は精巣性テラトーマ高発系統129/Sv-Terと野生型のLTXBJ (LT)系統の全ゲノムのエクソームシークエンス解析及びゲノムマッピングの解析を進め、新規候補領域ett2(Chr3),ett3(Chr7)を同定しett2には3遺伝子、ett3領域に1遺伝子を変異遺伝子としてリストアップすることができた。昨年度までに私が同定したett1領域、これまでに同定されているTer変異とこれらの領域の相互作用を調べるため、二重変異体LT-Ter/ett1系統を作出し、STTが形成されるかどうか解析を行った。Ter遺伝子とett1遺伝子の2遺伝子によりテラトーマが発症するならば、129/Sv-Ter成体精巣のようにテラトーマを形成することが期待されたが、作出した二重変異体ホモ個体の成体精巣は矮小精巣の形態をしていたが、組織切片像を観察するとTer遺伝子が原因である生殖細胞欠損の他に線毛上皮様の組織が観察された。二重変異体のホモ個体はTerとett1の2領域以外はLT系統の遺伝子背景であり、Terとett1の2遺伝子でSTT様の組織が観察できたことから、ett1がSTTの形成に関わることが示唆された。原因遺伝子同定のためにノックインマウスの作出を進めている。ett1候補遺伝子であるMc4rについてLT系統のMc4rに点突然変異の導入を試みている。LT系統のMc4rを129系統型にした場合にETTの形成が形成されればett1遺伝子と同定できる。遺伝子改変技術としてはCRISPR/Cas9システムを用い、gRNAとCas9タンパク質、Mc4rの129系統型遺伝子配列を持つ1本鎖オリゴヌクレオチドをLT系統の受精卵に導入し相同組換えにより目的の1塩基置換をLT系統に導入するものである。これまでに産仔を得ることが出来ていないため次年度も継続して行う。研究計画に従い、テラトーマ形成の原因遺伝子の同定に向けエクソームシークエンス解析・ゲノムマッピング・ゲノム編集マウス作出を行った。原因遺伝子同定のためにトランスジェニックマウスの作出が必要である。まず、ett1の候補遺伝子であるMc4rについてLTXBJ系統のMc4rに点突然変異の導入を試みている。LTXBJ系統のMc4rを129系統型にした場合にETTの形成が見られる様になればett1遺伝子と同定できる。遺伝子改変技術としてはCRISPR/Cas9システムを用い、gRNAとCas9タンパク質、Mc4rの変異型遺伝子配列(129系統型)を持つ1本鎖オリゴヌクレオチド(ssODN)をLTXBJ系統の受精卵に導入している。すなわち、Mc4rの変異型ssODNとの相同組換えにより目的の1塩基置換をLTXBJ系統に導入するものである。これまで二重鎖切断によるノックアウトマウスは得られているが、目的の点突然変異がノックインされた産仔を得ることが出来ていないため次年度も継続して行う本研究の目的は、マウスの精巣に発症する始原生殖細胞を起源としたテラトーマ形成の原因遺伝子の同定である。昨年度までに私は胎仔精巣を移植することによりテラトーマ(ETT)の形成を誘発する原因遺伝子が存在する領域ett1, ett2とett3を同定している。精巣生テラトーマ形成系統と非形成系統のマウスを用いエクソームシークエンス解析を行い、この3領域に変異遺伝子が存在していることを明らかにした。
ウロココラーゲンの骨増生における生体足場材料としての効果

魚類の鱗から精製されたウロココラーゲンはタイプ1コラーゲンであり、線維化能や細胞増殖能、さらには骨形成関連細胞の分化促進に優れているとされることから、骨増生時に細胞の増殖が進み、骨形成も進むと予想される。一方、従来のウシ・ブタ由来コラーゲンは人獣共通感染症の危険を払拭できないため、これに代わる生体足場材料として、ウロココラーゲンは臨床での応用が期待できる。そこでウロココラーゲンの効果を検証するために、実験動物にウロココラーゲンスポンジを用いて実験を行い、ウロココラーゲンスポンジの効果を検討した。初年度では、まずウロココラーゲンスポンジの骨形成と血管新生を調べるために、全身麻酔を施したラットの頭蓋冠に直径8ミリの骨欠損を形成し、ウロココラーゲンスポンジを充填する手術を行った。対照として無填入の個体も同様の手技で外科処置を行った。術後2週、4週、8週で実験動物を安楽死させ、両側総頸動脈からアクリル樹脂を注入し樹脂硬化後、実験部位を摘出して標本作製を行った。術後4週と術後8週では、摘出した実験部位のマイクロX線CT装置による撮影を行い、スライスデータを再構築し、3D画像解析ソフトなどにより、骨欠損部での新生骨形成の解析を行って新生骨を計測し、ウロココラーゲンスポンジの応用の有無による、骨形成の比較を行った。その結果、ウロココラーゲンスポンジを応用すると、術後4週で骨形成を認め、術後8週ではさらに骨形成が進んでいた。さらに、無填入の対照と比較したところ、有意差はないものの対照よりもウロココラーゲンスポンジの方が、骨形成が進む傾向を示していた。実験動物の頭蓋冠骨欠損へのウロココラーゲンスポンジを応用した実験を行い、最小限の実験動物を使用して術後2、4、8週後の骨形成について対照と比較し、ウロココラーゲンの効果に関する検索を行った。その結果の一部については学会発表にて公表しており、研究はおおむね順調に進展している。ウロココラーゲンを実験動物の骨欠損に応用し、治癒過程における骨形成と微細血管構築の変化について調査を行う。また従来のウシ・ブタコラーゲンとの比較を行い、ウロココラーゲンの効果を調査する。実験への使用動物数を最低限にしたことや、標本作製に要する消耗品が安価であったこと、情報収集のための学会参加を取りやめたことによって次年度使用額が生じた。次年度は、計画通りの研究を実施する以外に、情報収集のため国際学会に参加する予定であり、また標本作製の外部委託を開始する予定である。
ゼロエミッションを指向した合成反応経路設計とプロセス設計

ゼロエミッションを実現するには、各プロセス(産業)内びおいて可能な限りのクローズド化を行い、自己完結型システムとすることが望ましい。重点領域研究「ゼロエミッション」(A-01班)では、このためにプロセスの改良、生産原理の転換、クローズド化などによるゼロエミッションに向けた必要技術の抽出や開発が行われる。また、最小排出物質について、エミッションの受け手となる他のプロセスとの有機的結合による有効利用も念頭に置いている。さらにA-01班では、各プロセス(産業)における物質・エネルギーの入出力に関する個々の物質循環事例や物質変換技術事例を、一定のフォーマットで整理した物質循環・変換に関するコンピュータ可読型データベースとしてまとめることになっている。なお、ここではこのデータベースに収められたここの事例を、以後簡単のために「物質循環単位情報」と呼ぶことにする。データベースはこれ自体でも十分に有用であるが、一方でこのデータベース中の物質循環単位情報を解析しながら、これらの単位情報間の有機的なつながりの提案(生産プロセス間ネットワーク、他産業間プロセスネットワークなど)や最適な結合を実現するのに欠落している物質循環単位情報(=物質変換技術、物質変換事例)の性格等の提案へ活用することも重要である。本研究では、これらの提案を可能とするシミュレータの研究開発を行った。今年度は、その端緒として物質循環単位情報をいくつかの制約条件の下で相互に有機的に結合して行くためのアルゴリズムについて検討しそのプログラム化に成功した。
ウォーカビリティから見たオールドニュータウンの高齢社会シナリオに対する居住者評価

本研究の目的は、ウォーカビリティの観点から、オールドニュータウンの高齢社会シナリオに対する居住者評価を解明することである。このオールドニュータウンとは、高度経済成長期に、大都市圏周辺地域の丘陵地に、大量かつ大規模に開発された郊外住宅地である。その大半は高齢化率30%を超えているため、健康で自立的な生活環境の維持する必要がある。そこで本研究は、オールドニュータウンにおける高齢社会シナリオを作成して、質問紙調査による高齢社会シナリオに対する居住者評価を解明する。その居住者評価を解明することで、居住者に共感を得て、実現可能性の高い高齢社会シナリオに取り組むことができる。
トライボ化学反応の解析法の開発とフリクションポリマータイプ添加剤の作用機構の解明

1.ヒドロキシフェニルオクタデカン酸添加油の摩擦試験では多量のスラッジが生じた。このスラッジの機器分析によりトライボ化学反応の機構解明を試みた。赤外吸収分析の結果1710〓_<-1>付近の吸収が消失しており、脱炭酸反応が起こることがわかった。さらに活性なベンジル水素を持たない化合物ではスラッジを生じないことから、ベンジル位に生じるラジカルのカップリング反応によりスラッジが生じることを明らにかした。2.2-ヒドロキシカルボン酸は顕著な摩耗低減能を持つ事を明らかにした。その摩擦特性は摩擦時間の経過とともに現れ、長時間持続する。さらにごく低能度の添加量から摩擦低減能を発揮する。基本構造が同じでありながらこれらの点において長鎖カルボン酸の潤滑挙動とは異る事がわかった。作用機構の違いをトライボ化学反応の観点から明らかにするため、摩擦面で生じる化合物の解析を試みた。2-ヒドロキシカルボン酸の場合スラッジ生成はほとんど見られなかったので、摩擦面の赤外吸収分析を行なった。摩擦前後ともに試験片表面には1720cm^<-1>の吸収が見られた。2-ヒドロキシカルボン酸の摩擦低減挙動が長鎖カルボン酸と異なる点を加味してフリクションポリマー型表面膜の形成が裏ずけらた。3.トライボ化学反応を解析するために、摩擦面の温度上昇を除外してメカノケミカル効果だけを見る反応器としてボールミル振動型反応器を試作した。この反応器では単純な熱反応が進行しない事を確認した上でヒドロキシカルボン酸のトライボ化学反応を解析を試みた。ヒドロキシフェニルオクタデカン酸、2-ヒドロキシカルボン酸ともに本反応器では化学変化を起こさなかった。これより前者からスラッジが生成する反応、並びに後者からフリクションポリマーが生成する反応の主な推進力は摩擦面の温度上昇であり、副次的にメカノケミカル効果が作用していることとが判明した。
北海道の新第三系の珪藻層序

北海道の新第三系においては珪藻質泥岩が広域に渡って厚く発達しているので,地層の対比や年代決定には豊富に存在する珪藻にもとづく生層序の有効性が再度確認された.北海道の新第三系における珪藻層序は本州(東北日本)とソ連(サハリン,カムチャッカ),アメリカ合衆国(アラスカ)の新第三系を対比させる鍵となり得る.北太平洋域における生物事件(出現,消滅,進化など)や生物地理を考える上で新第三系の対比と年代決定は重要な仕事である.本一般研究によって北海道の西部と東部に分布する新第三系から約350個の試料を採集することができた.プレパラートを作成し,光学顕微鏡による観察の結果では,堆積盆地の中央部においては堆積物の累積荷重(埋没深度の増加)によるシリカの続成作用が進行してオパールCTが形成されるために予想以上に珪藻殻の溶解の生じていることがわかった.したがって珪藻殻が保存されていて生層序が設定できる場所としては,堆積物の累重が少ない堆積盆地の縁辺部か,あるいは隆起部が最適であることを確認した.東北日本において設定した珪藻分帯に北海道の新第三系から得た珪藻群集の分析結果を適用すると, D.praelauta帯, D.lauta帯, D.hustedtii帯, C.nicobarica帯など珪質堆積物の形成開始に先立つ前-中期中新世において4化石帯を見出せなかった.これは西部の粟丘ルートでみられた温暖性種の産出頻度の減少と産出期間の短縮と同じ様なことがこの時期にも生じていると考えられる.古地磁気層序や放射年代値の併用が必要である.西部の広い範囲に分布している古丹別層や増幌層で認められたD.hyalina帯が何故東部で認められなかったのであろうか.まだ解決できないが,テクトニクスに関連していると考えられる.北海道の新第三系においては珪藻質泥岩が広域に渡って厚く発達しているので,地層の対比や年代決定には豊富に存在する珪藻にもとづく生層序の有効性が再度確認された.北海道の新第三系における珪藻層序は本州(東北日本)とソ連(サハリン,カムチャッカ),アメリカ合衆国(アラスカ)の新第三系を対比させる鍵となり得る.北太平洋域における生物事件(出現,消滅,進化など)や生物地理を考える上で新第三系の対比と年代決定は重要な仕事である.本一般研究によって北海道の西部と東部に分布する新第三系から約350個の試料を採集することができた.プレパラートを作成し,光学顕微鏡による観察の結果では,堆積盆地の中央部においては堆積物の累積荷重(埋没深度の増加)によるシリカの続成作用が進行してオパールCTが形成されるために予想以上に珪藻殻の溶解の生じていることがわかった.したがって珪藻殻が保存されていて生層序が設定できる場所としては,堆積物の累重が少ない堆積盆地の縁辺部か,あるいは隆起部が最適であることを確認した.東北日本において設定した珪藻分帯に北海道の新第三系から得た珪藻群集の分析結果を適用すると, D.praelauta帯, D.lauta帯, D.hustedtii帯, C.nicobarica帯など珪質堆積物の形成開始に先立つ前-中期中新世において4化石帯を見出せなかった.これは西部の粟丘ルートでみられた温暖性種の産出頻度の減少と産出期間の短縮と同じ様なことがこの時期にも生じていると考えられる.古地磁気層序や放射年代値の併用が必要である.西部の広い範囲に分布している古丹別層や増幌層で認められたD.hyalina帯が何故東部で認められなかったのであろうか.まだ解決できないが,テクトニクスに関連していると考えられる.北海道西部(日本海側)における13ルートの新第三系から約200個の試料を採集した。プレパラートを作成し、光学顕微鏡による群集解析をほぼ終了した。現在までのところ、1.栗山ルートの川端層と追分層の最下部はDenticulopsis praedimorpha帯、追分層はDenticulopsis dimorpha帯に;小平ルートの古丹別層はDenticulopsis hyalina帯とD.praedimorpha帯、大段層はDenticulopsis kamtschatica帯に;港町ルートの古丹別層はD.hyalina帯に;北風連別川ルートの増幌層はD.hyalina帯、稚内層はD.dimorpha帯に;16線川右股沢の増幌層はD.hyalina帯、声問層はD.kamtschatica帯にそれぞれ属することが確認された。その結果、(1)小平ルートの古丹別層ではDenticulopsis nicobarico帯,栗山ルートの追分層ではcoscinodiscus yabei帯が欠如している。この2帯はいずれも温暖性珪藻種D.nicobarica,C.yabeiの部分帯であるので、中-高緯度の北海道では温暖性種の産出頻度の減少と産出期間の短縮が起こっていると考えられる。(2)これとは反対に、寒冷性珪藻種D.praedimorpha,D.dimorpha,D.kamtschaticaなどの産出頻度が増加し、産出期間の延長する傾向が認められる。このように、珪藻基準面の一部は明らかに時間面を斜交しており、北太平洋新第三紀における珪藻地理区と珪藻層序を検討する必要が確認された。そのためには微化石時間以外の時間面を把握することが不可欠である。2.北風連

別川と16線川右股沢ルートでは珪質堆積岩の岩層序からみて連続した地質断面の存在が推定されていたが、北太平洋域における珪質堆積物の形成開始を示すD.praedimarpha帯の欠如していることが判明した。この原因を多角的に検討する必要が生じた。3.加茂川,五勝手川,古櫃川,晩生内などのルートからの試料では珪藻殻の溶解が認められ、群集解析を行えなかった。堆積盆地における堆積機構とシリカの続成過程を知ることが大事である。
Immunomeのシングルセル解析に基づいた肝癌新規分類法の確立

本研究において我々は、肝細胞癌組織浸潤免疫細胞の発現遺伝子解析によって、免疫関連分子の発現レベルが症例ごとに大きく異なっていることを明らかにした。これらの違いは、特に肝細胞癌の背景肝疾患に影響され、非アルコール性脂肪肝炎(NASH)由来の肝細胞癌症例ではB型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス由来の肝細胞癌に比べて、免疫関連分子の発現が低下しており、免疫細胞プロファイルにも大きな違いが認められた。また、NASH関連肝細胞癌では他の二者に比べて、腫瘍抗原特異的なT細胞のfrequencyが低く、こうしたT細胞の免疫応答は特定の免疫細胞プロファイルと相関を認めた。1)腫瘍内浸潤免疫細胞をシングルセルレベルで取得し、RNAを抽出する手法の確立:肝細胞癌における腫瘍内浸潤免疫細胞をシングルセルレベルで取得し、そのRNAを抽出する手法を確立するための検討を行った。まずはじめにgentle MACS Octo Dissociatorシステムを用いて調整・凍結保存された肝細胞癌の外科的切除サンプルを用いて検討を行い、同手法にて調整・凍結保存されたサンプルを用いて、シングルセルレベルでの発現遺伝子解析に必要な質の高いRNAが取得できることを確認した。2)取得した細胞の発現遺伝子解析と細胞の同定ならびに機能予測:また、実際の発現遺伝子解析では、各単一細胞の発現遺伝子パターンによって、T細胞、NK細胞、マクロファージ等の各種免疫細胞の種類を同定することが可能であった。さらにこれらの免疫細胞が発現する表面マーカーの発現レベルをシングルセルレベルで解析することが可能であることが証明された。3)T細胞レセプターの同定とレパートリー解析:腫瘍内浸潤免疫細胞におけるT細胞レセプターの同定とレパートリー解析を行う前に、同研究腫瘍の正確性を検証するために末梢血でのシングルレベルでのT細胞からのT細胞レセプターの同定とレパートリー解析を行った。これまでに肝細胞癌に対してペプチドワクチンの投与を行った症例の末梢血単核球を取得し、同ペプチドを認識するT細胞レセプターをもつT細胞の同定と、それらの単一細胞からのT細胞レセプターのクローニングを行い、研究手法の精度を確認した。本研究は以下の5つの項目から成り立っている。1)腫瘍内浸潤免疫細胞をシングルセルレベルで取得し、RNAを抽出する手法の確立を行う。次に2)取得した細胞の発現遺伝子解析により、細胞の同定ならびに機能予測を行う。3)取得した細胞がT細胞であった場合は、T細胞レセプターの同定とレパートリー解析を行う。4)癌組織全体の発現遺伝子解析データと取得細胞の種類、機能、TCRレパートリー解析結果を総合的に解析し、肝癌immunomeの全体像を明らかにする。5)4)で得られたデータと臨床データをリンクさせ、治療効果・予後に関連するimmunomeの同定を行い、immunome解析により肝癌の新規分類を行うための基盤情報を取得する。このうち、本研究の最大の課題は肝癌組織浸潤免疫細胞のシングルセル解析の手法の確立であり、この課題に関しては研究初年度において手法が確立されたと考えている。今後は同手法によって保存検体の測定を行い、臨床データとリンクさせて解析を行っていく必要があるが、まずは研究手法が確立できたことにより、研究の進歩状況はおおむね順調と判断される。本研究では、外科的に切除された肝癌組織検体と末梢血リンパ球を用いて、肝癌患者の免疫細胞ネットワーク(immunome)の解析を行った。本解析結果からは、肝癌ではその背景疾患に関連して、宿主免疫細胞プロファイルが異なっており、抗腫瘍免疫においては細胞傷害性T細胞が標的とする肝癌関連腫瘍抗原の種類も異なっていることが明らかになった。また、末梢血の免疫細胞プロファイルのうち、細胞傷害性T細胞や制御性T細胞ならびにヘルパーT細胞の表面マーカーの解析では、腫瘍関連抗原特異的なT細胞の免疫応答と相関を示す分子を同定した。一方、本研究においては、腫瘍浸潤リンパ球のシングルセルレベルでの発現遺伝子解析によって、患者の予後や治療効果と関連する肝癌の新規分類法の確立までには至らなかったが、肝癌組織に浸潤する免疫細胞プロファイルと予後や治療効果との関連を同定することできた。これらの結果から、本研究で用いた肝癌を癌細胞そのものではなく、immunome構成細胞にフォーカスを当てて研究する手法により、肝癌に合併する背景肝疾患ごとの宿主免疫細胞プロファイルを明らかにすることができたとともに、治療開始時における予後予測や再発時の治療選択に有用な基盤情報を得ることができた。上記研究成果は、今後、肝癌の治療アルゴリズムの作成や創薬といった臨床分野で利用できるとともに、肝癌における免疫が関連した発癌機構や抗腫瘍免疫機序の解明といった肝臓病学の発展に有用なものであると考えられた。今後は上述した、本研究項目5つのうち、以下の項目を遂行する予定である。

4)癌組織全体の発現遺伝子解析データと取得細胞の種類、機能、TCRレパートリー解析結果を総合的に解析し、肝癌immunomeの全体像を明らかにする。5)4)で得られたデータと臨床データをリンクさせ、治療効果・予後に関連するimmunomeの同定を行い、immunome解析により肝癌の新規分類を行うための基盤情報を取得する。特に当初の研究からの大きな計画変更はないが、肝癌組織に浸潤している免疫細胞を発現遺伝子解析で同定するだけではなく、同一症例の固定標本を用いて、多種類の抗体を用いた免疫染色によって、浸潤細胞の種類や部位の同定も併せて行い、これらのとの臨床データとのリンクや治療効果・予後との関連も検証し、肝細胞癌の新規分類法の確立するための基盤情報を取得する。消化器内科T細胞レセプターの同定とレパートリー解析において、腫瘍内浸潤免疫細胞におけるT細胞レセプターの同定とレパートリー解析を行う前に、同研究腫瘍の正確性を検証するために末梢血でのシングルレベルでのT細胞からのT細胞レセプターの同定とレパートリー解析を行ったが、取得できたT細胞の個数が当初の予定より少なかったために、解析費用が安価となった。具体的には、これまでに肝細胞癌に対してペプチドワクチンの投与を行った症例の末梢血単核球を取得し、同ペプチドを認識するT細胞レセプターをもつT細胞の同定と、それらの単一細胞からのT細胞レセプターのクローニングを行い、研究手法の精度を確認したが、得られた単一細胞の個数が予定より少なかった。さらに、T細胞レセプターの解析を行った際に、単一細胞から得られたT細胞レセプターの遺伝子数も当初の見込みより少なかったため、結果として解析費用が安価となった。T細胞レセプターの解析を行うための予備実験の費用が安価で、研究費を節約できたことから、その分を本研究の主目的である、肝癌組織浸潤T細胞の解析において、当初の予定よりもより多くのT細胞の取得を行い、レセプター解析を行う予定である。また、シングルセル解析に使用する検体数も、当初の予定より増やして、より精度の高い結果を出す予定である。
無理数回転C^*-環とその周辺

1次元トーラスtauを2pitheta(ここでthetaは無理数)だけ回転する同相写像により得られるC^*-接合積Athetaを無理数回転C^*-環という。次のような条件を満足するAthetaの準同型写像psiを考える。(1)Athetaからpsi(Atheta)の上への、指数有限型条件付期待値が存在する。(2)psi(Atheta)のAthetaにおけるcommutantがtruralでない。このときもしもthetaが2次の無理数でないならば、上の条件を満たすAthetaの準同型写像は存在しない。次にalphaをAthetaの自己同型写像とし、alphaとAthetaとから得られるC^*-接合積Atheta×_<alpha>Zを考える。もしもalphaのConnes spectrumがtauと一致するならばAtheta×_<alpha>Zは、cancellation propertyをもつことがわかる。
摂食運動に関わる咀嚼と嚥下の機能連関

本研究は,ヒトおよび動物を対象とした実験を並行して行っている.ヒト実験では,嚥下誘発に関わる末梢刺激やその認知との間にどのような相互作用をもつか検討する目的で,種々の咀嚼条件が運動様式にどのような違いをもたらすかについて昨年に引き続き生理学的に解明し,1)自由咀嚼,時間規定咀嚼,回数規程咀嚼などを設定しても咀嚼時の咬筋活動には大きな違いはないものの,食塊形成や食塊移送はお互いに異なり,続く嚥下運動は自然咀嚼の時が最もその負荷が小さいことや同じ食品を摂取する際の咀嚼時間は個人間で大きく異なるが,それは咀嚼能力に依存するのではなく,咀嚼時の食塊移送や食習慣に依存するものであることが示唆される基礎データを得た(Ahiga et al, Scientific Rep, 2019他は投稿準備中).動物実験においては,嚥下運動誘発に関わる末梢の受容機構として,種々のイオンチャネルに注目し,機械刺激に対してはENaCの関与,酸刺激に対してはTRPV1の関与,炭酸刺激に対してはASIC3の関与が考えられることを明らかにした(投稿準備中).一方,本研究期間中に,咀嚼に伴う高次脳への効果を検証するにいたらなかった.動物実験においては,末梢から中枢に至る,あるいは中枢内での末梢と上位脳からの入力の相互作用を明らかにするまでには至っていない.引き続き研究を進めていく.平成30年度が最終年度であるため、記入しない。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は,ヒトおよび動物を対象とした実験を並行して行っている.ヒト実験では,過去に申請者らが咀嚼運動が嚥下反射誘発を遅延させることを発見した実験を発展させて,咀嚼を中心とした顎口腔顔面領域の機能が,嚥下誘発に関わる末梢刺激やその認知との間にどのような相互作用をもつか検討した.ヒト実験においては,種々の条件が咀嚼嚥下動態にどのような違いをもたらすかについて生理学的に解明し,1)咀嚼時の姿勢の違いは,咀嚼様式に変化をもたらし,姿勢を倒すほど重力の影響を受けることで個人差が相殺されること,2)自由咀嚼,時間規定咀嚼,回数規程咀嚼などを設定しても咀嚼時の咬筋活動には大きな違いはないものの,食塊形成や食塊移送はお互いに異なり,続く嚥下運動は自然咀嚼の時が最もその負荷が小さいこと,3)食塊の化学刺激としての温度,酸などは嚥下運動に影響を与えるが,それは脳幹の反射路を経由するものと大脳皮質などの高次脳に影響をもたらすものという要素を考えなければいけないことが明らかとなった.動物実験においては,嚥下運動誘発に関わる末梢の神経路として上喉頭神経,大脳皮質の嚥下野(島皮質)誘発性の嚥下時の三叉神経反射(開口反射,閉口反射)の振幅を比較し,いずれの嚥下時にも三叉神経反射は有意に抑制されることが明らかとなった.おおむね順調に進展している.本研究は,ヒトおよび動物を対象とした実験を並行して行っている.ヒト実験では,過去に申請者らが,咀嚼運動が嚥下反射誘発を遅延させることを発見した実験を発展させて,10分間の刺激後に長期効果(随意嚥下回数の増加)を見出したことを論文化することができた(Takeishi et al, PLOSONE, 2018).また,咀嚼を中心とした顎口腔顔面領域の機能が,嚥下誘発に関わる末梢刺激やその認知との間にどのような相互作用をもつか検討する前に,種々の咀嚼条件が運動様式にどのような違いをもたらすかについて昨年に引き続き生理学的に解明し, 1)自由咀嚼,時間規定咀嚼,回数規程咀嚼などを設定しても咀嚼時の咬筋活動には大きな違いはないものの,食塊形成や食塊移送はお互いに異なり,続く嚥下運動は自然咀嚼の時が最もその負荷が小さいこと,2)同じ食品を摂取する際の咀嚼時間は個人間で大きく異なるが,それは咀嚼能力に依存するのではなく,咀嚼時の食塊移送や食習慣に依存するものであることが示唆される基礎データを得た(論文投稿準備中).動物実験においては,嚥下運動誘発に関わる末梢の神経路として上喉頭神経,大脳皮質の嚥下野(島皮質)誘発性の嚥下時の三叉神経反射(開口反射,閉口反射)の振幅を比較し,いずれの嚥下時にも三叉神経反射は有意に抑制されることが明らかとなった(Suzuki et al, Brain Res, 2018).ヒト実験では,咀嚼に伴う高次脳への効果を検証するにいたっていない.動物実験においては,中枢神経活動の変調の定量的評価を行っている最中である.いずれも今年度の課題である.

本研究は,ヒトおよび動物を対象とした実験を並行して行っている.ヒト実験では,嚥下誘発に関わる末梢刺激やその認知との間にどのような相互作用をもつか検討する目的で,種々の咀嚼条件が運動様式にどのような違いをもたらすかについて昨年に引き続き生理学的に解明し,1)自由咀嚼,時間規定咀嚼,回数規程咀嚼などを設定しても咀嚼時の咬筋活動には大きな違いはないものの,食塊形成や食塊移送はお互いに異なり,続く嚥下運動は自然咀嚼の時が最もその負荷が小さいことや同じ食品を摂取する際の咀嚼時間は個人間で大きく異なるが,それは咀嚼能力に依存するのではなく,咀嚼時の食塊移送や食習慣に依存するものであることが示唆される基礎データを得た(Ahiga et al, Scientific Rep, 2019他は投稿準備中).動物実験においては,嚥下運動誘発に関わる末梢の受容機構として,種々のイオンチャネルに注目し,機械刺激に対してはENaCの関与,酸刺激に対してはTRPV1の関与,炭酸刺激に対してはASIC3の関与が考えられることを明らかにした(投稿準備中).一方,本研究期間中に,咀嚼に伴う高次脳への効果を検証するにいたらなかった.動物実験においては,末梢から中枢に至る,あるいは中枢内での末梢と上位脳からの入力の相互作用を明らかにするまでには至っていない.引き続き研究を進めていく.平成28年度の実績を受けて,平成29年度はこれを発展させて,高齢者を対象とした記録を行う.また,自然咀嚼と条件付咀嚼時における三叉神経感覚入力の違いをS1誘発電位を計測することによって検討する.平成29年度には,前年度に行えなかった慢性実験法の確立と記録,非動化動物を用いた急性実験における三叉神経ニューロン,三叉神経から投射する視床ニューロンの記録を通して,咀嚼嚥下時の感覚路の興奮性変調の実態を明らかにする.ヒト実験においては,咀嚼運動の個人差を生む要因となる高次機能の役割,唾液分泌などの末梢条件について明らかにする.また,高齢者を対象としたデータ採取を行い,唾液分泌量を含む末梢機能の違いが咀嚼様式にもたらす効果を検証する.さらに,咀嚼運動によってもたらされる高次機能の変化をTMS,大脳皮質感覚野の誘発電位を計測することにより明らかにしたい.動物実験では,麻酔動物を用いた三叉神経,視床,大脳皮質感覚運動野ニューロン記録を開始していることから,反射の変調が脳幹,上位脳のいずれに及ぶかについて明らかにする.平成30年度が最終年度であるため、記入しない。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
魚類の味覚入力を介する摂餌行動解発神経機構の解析

魚類の味覚入力を介する摂餌行動解発の神経機構を解析するために、次の実験を行なった。第一の実験ではコイの口腔の味蕾の神経支配様式を調ベゴンズイとヒメジの触鬚での結果と比較し考察した。コイの口蓋器には直径200μmくらいの団子上の隆起が存在し、そこに1030個の味蕾からなるクラスターが分布し、個々のクラスターが一本の神経小束に支配されていることが分かった。第2の実験ではゴンズイの第一次味覚中枢からの脳幹と脊髄への投射経路を調べた。投射部位は上・下行性の第二次中枢と延髄の脳幹網様体の様々な部位であった。顔面葉からこの脳幹網様体ニューロンを介して脊髄運動ニューロンに味覚情報が送られることを示し、味覚入力が摂餌遊泳行動を制御する神経回路を明らかにした。第3の実験では、ヒメジの顔面葉での体部位局在構築を電気生理学的に解析し、触鬚が背側顔面葉に4回折れ曲がりながら連続的表され、腹側顔面葉は唇と口腔内上皮が表されることを明らかにした。第4の実験では、ヒメジの触鬚の運動制御機構を解析した。触鬚には中央に基部から先端に走る軟骨が存在し、この軟骨の基部に腱を介して繋がる筋肉が4種類存在することを示した。各筋肉は触鬚を異なった方向に動かすが、すべて顔面神経運動ニューロンの支配を受けていることが分かった。これらの運動ニューロンと触鬚の感覚情報を運ぶ三叉と顔面神経との間で反射弓が存在することを示した。実験魚として、ゴンズイとヒメジ科に属するオジサン、ホウライヒメジ等を用いた。これらの魚での顔面葉から脳幹への投射経路、脊腎・脳幹と顔面葉での線維連絡の有無について、固定脳標本にdioctad ecyl-3,3,3'3'-tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate(Dil)法を適用して解析した。その結果、ゴンズイの顔面葉から三叉神経運動核、顔面神経運動核、脳幹網様体への投射が分かった。これらの部位に線維を送るニューロンはゴルジ解析で明らかにした大型のもであることが分かった。特に脳幹網様体に軸索を送るものは顔面葉の4つの触鬚小葉の最も腹側に位置し、その樹状突起は小葉の内部に広く分布していることから、顔面葉内部の多くのニューロンからの収束があると考えられる。脊髄の運動野に色素をいれた場合、脳幹網様体に多数のニューロンが逆行性に標識された。これとほぼ同じ結果がヒメジ科の魚でも得られた。これらの結果より、顔面味覚情報は延髄網様体を経て脊髄連動ニューロンへ送られることが証明された。過去のナマズでの行動実験は、ナマズは味覚入力だけで摂餌行動を誘起できることを証明しており、今回の結果はその神経機構の概要を具体的に示したことになる。ヒメジ科の魚は下顎に一対の太くて長い触鬚を有し、これを砂泥中に突っ込んで激しく動かして餌を探す。今回の解析で顔面葉から顔面神経運動核近傍への投射が特に明瞭であることが判明した。この運動ニューロンは触鬚の運動制御に関与する4種の筋肉を支配することより、触鬚顔面神経-顔面葉-顔面運動神経核を経る反射経路が明らかになり、触鬚を介する摂餌行動解発の神経機構の概略も解明することができた。現在、これらの神経機構の詳細をさらに解析するために、生きた魚で目的の脳の部位にhorseradish peroxidaseまたは蛍光標識したdextran amineなどを電気泳動的に与えるて生存させる方法を検討している。

ゴンズイでは顔面葉・迷走葉から脊髄の運動ニューロンにいく投射経路を解析した。顔面葉の4つの触鬚小葉からは脳幹網様体に存在するニューロンへの投射がみられた。これらのニューロンはクラスターを形成しており、脳幹の体節的な配列に対応すると考えられた。脊髄にトレーサーを与えるとこの脳幹網様体のニューロンと顔面葉の胴体小葉の大型のニューロンが標識された。このことより顔面葉と脊髄運動ニューロンとの間で二種類の投射経路があることが分かった。迷走葉と脊髄との間の神経連絡は確認されず、迷走葉から疑核に投射する線維が観察された。この結果は他の魚種での知見と一致し、迷走味覚系が餌の飲み込みや吐き出しに関与していることを確認した。ヒメジの触鬚を動かす神経機構を解析した。触鬚の運動には4種の筋肉が関与し、それらは腱を介して触鬚軟骨の基部に繋がっていた。これらの筋肉は顔面運動ニューロンの支配を受け、その数は約300個であった。味蕾を支配する顔面神経の入力は顔面葉の介在ニューロンを介して顔面運動ニューロンと反射弓を形成した。一方、触鬚の軟骨の周りの弾力ある組織すなわち軟骨膜に多く分布する三叉神経は脊髄下行路を通りながら直接に顔面運動ニューロンの樹状突起野に線維を送るのが確認された。この結果より三叉感覚神経と顔面運動ニューロンとの間ではモノシナップテックナな反射弓が存在することがわかった。三叉神経は同時に三叉神経運動ニューロンともモノシナップテックは反射弓を形成し、顎骨の動きを制御している。従って、触鬚の動きと顎骨の動きとが連動して制御されることになり、三叉と顔面運動ニューロンとの間での神経連絡が存在することが考えられる。餌を口でついばみ口腔内に取り込むための仕組みを明らかにするために、ゴンズイの顎骨運動について解析した。この魚は顎関節を支点として、下顎骨のみを動かして口を開閉を行い、顎関節は関節頭と関節窩の接触面が円柱面を形成し、一方向にのみ動く蝶番関節であることが分かった。この下顎骨を引き上げて口を閉める筋肉を4種類同定した。これらの筋肉は下顎骨の尾方基部に腱を介してつながっており、その機能から下顎内転筋14と命名した。下顎内転筋を支配する運動ニューロンは三叉神経であり、その運動核には体部位局在性があることが分かった。三叉運動ニューロンは三叉感覚神経とモノシナプテックな反射弓を形成することも分かった。三叉運動ニューロンと味覚入力との反射弓は顔面葉を介するものと推察される。ゴンズイとヒメジで第一次味覚中枢から上位中枢への投射経路を解析した。第一次味覚中枢の出力ニューロンはその中枢内に単独で散在する中型か大型のもので、これらの線維は第一次味覚中枢後方下部より延髄腹側に向かって伸長し、第二次味覚路を上行して小脳下部の橋に位置する第二次味覚核に両側性に入った。この核は横断面で見ると両端が球状に膨らみ吻方で交連線維により左右がつながっていた。細胞体の局在分布により、第二次味覚中枢は34対の明瞭な亜核に分かれた。ゴンズイではここから第三次味覚中枢への投射も明らかにした。第二次味覚中枢からの出力線維はその前方下部より腹側へと向かい、そのまま腹側外方に向かいつつ上行し下葉の背側部に達して終わることが分かった。この部位はchannel catfishで同定されているnLBとnLTと推定され、自律神経系の中枢に多くの味覚入力が入ることを確認した。一方、第三次味覚中枢から第一次と第二次味覚中枢へのfeed-back投射も明らかになり、味覚情報は上行性に伝えられると共に、高次中枢から低次中枢に情報がfeet-backされており味覚情報の制御に貢献しているものと推察される。ヒメジの触鬚の運動制御機構を明らかにするために、顔面運動核の解析を更に進めた。
有限単純群に関連する離散的幾何の研究

有限群GをG=F/N,Fはn元生成自由群,n=<r_1^F,r_2^F,・・,r_m^F>,riはGの基本関係,により与えたとき、Aut Fは一般にNを異なるsubgroupに移すが、新しく移された生成元に関するGの基本関係は、もとの基本関係から原理的には簡単に求められる。とくに生成系のdeficiency m-nは変わらない。したがって何らかの意味で性質の良い生成系を考える場合、それはAut Fによるorbitに依存する場合が多い。そこで2元生成の場合、9次までの交代群をGとしてAut Fによる生成系のorbitを求めることを樋口と共同で行った。Gの生成元と基本関係から、その有限指数の部分群Hのそれらを求めるReidemeister Schreierアリゴリズムでは、一般に非常に多数の生成元と関係式が出てくる上に、代入可能な生成元の代入をくり返すことにより関係式の長さが非常に長くなる。この操作のために計算時間がどんどん長くなるばかりか、途中で計算しきれなくなることがしばしばおきる。そこで代入により関係式の長さが一定以上になる場合には代入を途中でやめる、また、ある関係式の長さの半分以上列が一致する場合に部分列の残りのinverseを代入するの2点をプログラムに組込んだ。これにより、計算時間の短縮、関係式の簡単化がある程度可能になった。
脳梗塞形成過程における小胞体輸送関連蛋白RA410の変動に関する実験的研究

目的:平成9年度に引き続きRA410の脳虚血時における脳内動態およびその機能について検討した。方法と結果(1)ラット左中大脳動脈一過性虚血により、虚血再潅流30分後には、梗塞巣の中心部のMAP2の染色性が低下し始めた部位に一致してRA410はグリア細胞に軽度発現した。さらに再潅流6時間後にはMAP2の染色性の消失部位に一致してRA410は大脳皮質の神経細胞に高度に観察された。(2)in situ hybridization histochemistryを用いて、ラット左中大脳動脈一過性虚血負荷後のRA410mRNA動態を検討した。コントロール群では神経細胞に極く軽度にシグナルを認めた。虚血再潅流2時間後には虚血領域の大脳皮質のグリア細胞と神経細胞の両者でシグナルの増強が観察された。虚血再潅流6時間後には虚血中心部においてさらに顕著にシグナルは増強していた。虚血再潅流24時間後には虚血領域でシグナルは消失した。(3)培養アストロサイトを用いアンチセンスによるRA410産生抑制が低酸素負荷後のアストロサイトによるサイトカイン放出に与える影響を培養液中に放出されるインターロイキン6(IL-6)をWestern blottingで測定することにより評価した。その結果、センス導入細胞においてはIL-6の培養液中ヘの放出が観察されたが、アンチセンス導入細胞ではRA410の発現は認められず、IL-6の放出もほぼ抑制された。考察:以上の所見は、RA410は梗塞形成過程でのストレス応答としてIL-6などのサイトカインの活性蛋白分泌に関与する蛋白ではあるが、従来報告されているストレス蛋白、すなわちtrascriptiontはされるがranslationまでなされない蛋白とは異なり、神経細胞死に至る過程の中でさえ合成される蛋白質であることが示唆された。目的:RA410は培養アストロサイトでクローニングされた小胞体輸送関連蛋白で、サイトカインの産生放出に関与していることが示唆されている。しかしながらRA410の脳内動態およびその機能については全く不明であり、特にin vivoにおいて実験的に検討した報告はない。本研究ではRA410の脳虚血負荷後の脳内動態および発現細胞を検討し、脳梗塞形成過程においてRA410が如何なる役割を演じているかを検討した。方法:実験には雄性ラット(体重280-320g)を用いた。45mg/kgネンブタール麻酔下にてナイロンモノフィラメントを用いて左中大脳動脈領域の脳虚血モデルを作成した。虚血時間は2時間とした。再潅流直後、15分、30分、1時間、3時間、24時間後に4%パラフォルムアルデヒドにて潅流固定し、免疫組織化学を用いてRA410の発現を検討した。さらに発現細胞の同定のために同一切片や連続切片をMAP2染色、GFAP染色を用い検討した。結果:sham control群ではRA410の発現は大脳皮質および線条体の神経細胞に弱くほぼ均等に観察された。虚血再潅流30分後には、梗塞巣の中心部のMAP2の染色性が低下し始めた部位に一致してRA410の軽度の発現がグリア細胞に観察された。この発現は再潅流6時間後には消失した。再潅流6時間後にはMAP2の染色性の消失部位に一致してRA410は大脳皮質の神経細胞に高度に観察された。考察:以上の所見は、RA410は梗塞形成過程でのストレス応答としてサイトカインなどの活性蛋白分泌に関与する蛋白ではあるが、その反応過程が従来報告されているストレス蛋白とは異なり、神経細胞死に至る過程の中で蛋白合成を伴う新たなタイプの蛋白質である可能性が示唆された。

考察:以上の所見は、RA410は梗塞形成過程でのストレス応答としてIL-6などのサイトカインの活性蛋白分泌に関与する蛋白ではあるが、従来報告されているストレス蛋白、すなわちtrascriptiontはされるがranslationまでなされない蛋白とは異なり、神経細胞死に至る過程の中でさえ合成される蛋白質であることが示唆された。
スポーツイベントにおける社会効果の検証とイベントレバレッジ戦略の構築

本研究は、2つのメガ・スポーツイベント(ラグビーワールドカップ2019/東京オリンピック・パラリンピック2020)を研究文脈に、メガ・スポーツイベントが開催地域にもたらす社会効果を、開催地域住民の縦断的データを用いて検証し、イベント運営側へのインタビュー調査を通じて、イベントレバレッジ戦略のメカニズムを明らかにする。すなわち、どのようにしてメガ・スポーツイベントが開催地域にもたらす社会・経済効果を最大化することが出来るのかという問いに答えるのが本研究の最終ゴールである。