hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
光ファイバ型光学素子開発を目指したシリカ系ガラスにおける屈折率増大機構の解明

光波長多重通信網においては、光の分波機能を持つ光導波素子が必要となる。本研究は、光ファイバ型および平面型光導波素子にマイクロイオンビームや紫外光を導波素子に照射し、周期的に異なる屈折率を有する格子構造の形成を目指している。1.イオンマイクロビーム照射によるシリカガラスの高密度化と屈折率変化:シリカガラスにH^+マイクロビーム照射を行い、顕微フォトルミネッセンス・ラマン分光、電子スピン共鳴法により評価した。注入イオンのエネルギー損失には原子衝突よりも電子励起の効果が大きいことをシミュレーションにより明らかにした。さらに、光ファイバ中に周期構造を実際に形成し、透過光損失特性を評価した。イオン照射されたシリカガラスの表面および側面に凹みが観測され、その主原因は高密度化であることを明らかにした。誘起屈折率変化は飛程付近で最大となり、回折格子作製に十分な値まで達することが分かった。マスクとして、電子線リソグラフィーによりシリコン窒化膜メンブレン上に周期2.65マイクロメートルのLine/Spaceパターンを作製し、イオン注入を行ったのちエッチングを行い、飛程の差に起因する凹凸の回折格子を形成した。フラウンホーファー回折により、回折格子の周期はLine/Spaceの周期と同じであると計算され、マスクパターン転写の成功が裏付けられた。2.紫外光照射による屈折率増大:屈折率を1.45-2.00まで自在に変化できるシリコン酸窒化物は、光導波路材料の一つとして考えられている。紫外光エキシマレーザを照射することにより、屈折率を増加させることの可能なシリコン酸窒化物の作成方法および組成を明らかにした。屈折率上昇のメカニズムとして、高密度化に因る効果が大きいことを計算により導いた。さらに、周期1μmの平面回折格子を位相格子法により実際に作成し、光加工性の良さを示した。本研究は、マイクロイオンビームによりシリカガラスヘ導波・発光・調光等の機能性を付与する目的で3次元構造を形成し、さらにその構造と機能を評価することを目的としている。次の2項目について研究した。1.顕微分光法によるマイクロビーム照射領域の評価手法の確立:シリカガラスに短冊状にH^+マイクロビーム照射(ビーム径:1μm)を行い、顕微フォトルミネッセンス(PL)分光により評価した。PLにおいては波長650nmで非架橋酸素正孔(≡Si-O・,"・"は不対電子)によるPL帯が観測された。照射域1μm幅に対し、深さ30μmでPL強度分布が15μm程度の広がりを示す。PLの3次元分布とTRIMシミュレーションから欠陥生成機構の検討に着手した。2.光ファイバ形回折格子の形成と評価:マスクを介し光ファイバにH^+注入することにより作製したシリカコア光ファイバへの回折格子の透過光スペクトルを調べた。1300nm付近に透過光損失を有するフィルター素子が形成された。しかし、クラッド部分にも屈折率変化が誘起され1300nm以外での波長域での損失も大きい。そこで、クラッド部の損失を低減し素子の高品質化を図るため、マイクロビームによるコア部への局部的照射を試みた。マイラーフィルムを介した照射の場合、エネルギー2.47MeVでH^+が光ファイバのコア部に達し、屈折率の上昇が確認された。以上により、光ファイバ回折格子形成の最適照射条件を得た。また、屈折率上昇のメカニズムについて、理論的検討を加えた。これらの成果は、学術雑誌および学会発表により公表した。

本研究は、光ファイバ型および平面型光導波素子に分波・調光等の機能を付与する目的で、マイクロイオンビームや紫外光を導波素子に昭射し、周期的に異なる屈折率を有する格子構造の形成を目指している。イオンや紫外光照射により誘起される物性変化を実験的かつ理論的に検証した。1.マイクロイオンビーム照射による欠陥生成:H^+マイクロイオンビーム(ビーム径:1μm)照射によりシリカガラス中に誘起される欠陥の生成機構を顕微フォトルミネッセンス、顕微ラマン分光、および電子スピン共鳴法により評価した。注入H^+イオンの通過による正常結合の切断によって、E'center(O≡Si・,"・"は不対電子)や非架橋酸素孔子(≡Si-O・)等の欠陥が生じる。これら欠陥の生成効率は、シリカガラス中のOH基の有無に強く影響される。注入イオンのエネルギー損失過程において、原子衝突よりも電子励起の効果が大きいことをTRIMシミュレーションにより明らかにした。さらに、マイクロイオンビームを用いて光ファイバ中に周期構造を実際に形成し、透過光損失特性の評価に着手した。2.紫外光照射による屈折率増大:屈折率を1.45-2.00まで自在に変化できるシリコン酸窒化物は、光導波路材料の一つとして考えられている。紫外光エキシマレーザを照射することにより、屈折率を増加させることの可能なシリコン酸窒化物の作成方法および組成を明らかにした。紫外光照射により誘起されるラジカル欠陥種の同定および定量を電子スピン共鳴法により行い、屈折率の変化量をエリプソメータにより見積もった。屈折率上昇のメカニズムとして、高密度化に因る効果が70-98%の割合を占め、ラジカル欠陥生成に因る光吸収増加の効果は数%程度であることを計算により導いた。さらに、周期1μmの平面回折格子を位相格子法により実際に作成し、光加工性の良さを示した。これらの成果は、学術雑誌および学会発表によりすでに公表している。光波長多重通信網においては、光の分波機能を持つ光導波素子が必要となる。我々は光ファイバおよび平面光導波路に高エネルギーイオンを注入し、周期的に異なる屈折率を有する格子構造を形成することに成功している。このことを利用すれば、種類を問わずシリカ系光ファイバに分波素子が作製できるはずである。そこで、本研究では、微細な領域にイオンを注入した場合にシリカに誘起される構造変化を明らかにし、さらに、分波素子である回折格子を作製することを目的とした。1.イオンマイクロビーム照射によるシリカガラスの高密度化と屈折率変化:Hイオンマイクロビーム照射によるシリカガラスの形状および屈折率の変化を原子間力顕微鏡、顕微ラマン分光装置および二光束干渉顕微鏡を用いて調べた。イオンマイクロビーム照射されたシリカガラスの表面および側面ともにイオン注入により凹みが観測され、その主たる原因は高密度化であるということを明らかにした。また、イオン注入誘起屈折率変化は飛程付近で最大となり、回折格子作製に十分な値である0.0059まで達することが分かった。2.イオン注入マスクを用いた光通信用素子作成技術:イオン注入マスクとして、電子線リソグラフィーにより、シリコン窒化膜メンブレン上にレジストと金から構成される周期2.65マイクロメートルのLine/Spaceパターンを作製した。
仮骨延長術における骨リモデリング機構の解明

ラット骨延長実験:生後8週のラットの大腿骨骨幹部を骨切りし、ホフマン・ミニ創外固定器を用いて徐々に牽引延長した。術後7日間の待機期間をおいた後、0.5mm/dayの速度で開始すると骨切り部には層状構造をもった仮骨が形成された。組織切片を作成しin situ hybridizationによりRunx2/Cbfa1の遺伝子発現を観察した。延長仮骨には骨芽細胞や軟骨細胞の他に牽引ストレスに反応して紡錘形の形態をとる細胞が多数存在する。成熟した骨芽細胞や軟骨細胞だけでなく組織学的には繊維芽細胞としかいえないような紡錘型の細胞までRunx2/Cbfa1を発現していることが分かった。家兎骨延長実験:日本白色家兎の左脛骨にOrthofix M-100創外固定器を装着し、1週間の待機の後、0.7mm/dayで3週間の延長を行った。その後4週間仮骨成熟を待った。三群に分け、第I群は生理食塩水のみ静注した。第II群と第III群はそれぞれ週に0.004mg/kgと0.4mg/kgずつminodronic acidを静注した。定期的に下腿の軟X線撮影を行い、得られた画像をpersonal computerで処理し、骨量をアルミニウム厚換算値で表現した。延長軸に沿って形成されるzoneの骨量を求め、各群でのパターンを表示した。骨強度測定には3点曲げ試験を行いultimate strengthとstiffnessで比較検討を行った。延長終了4週後にはcortical zoneに隣接して認められるremodeling zoneの骨量は第I群より順に平均3.3mm、3.4mm、5.4mmであり、第III群ではremodeling zoneの形成は不明瞭になるだけでなく、cortical zoneも含めて骨量が増加していた。強度試験では、非手術側の脛骨はultimate strength及びstiffnessともに群間に有意差はなかったが、延長側は第III群が他の群に比較してどちらとも有意に増強していた。第II群は増強みられるが、有意ではなかった。結論:骨延長において力学的負荷が少ない延長中は新性骨は直ちに吸収されると思われる。この骨吸収を抑えremodelingを遅くすることにより骨癒合が促進すると考えられた。ラット骨延長実験実験:生後8週のラットの大腿骨骨幹部を骨切りし、術後7日間の待機期間をおいて創外固定器を用いて0.5mm/dayで延長を開始した(Yasui N et al. JBJS 1997)。術直後からミノドロネート(bisphosphonate)を体重(Kg)あたり04mg/week腹腔内投与し、延長仮骨のリモデリングに対する影響を観察した。コントロールでは延長仮骨は形成ても直ちに破骨細胞による骨吸収をうけるが、ミノドロネート投与群では延長仮骨は形成蓄積され続け、骨癒合に要する期間は圧倒的に短縮された。DEXAによる骨密度測定においてもミノドロネート投与群の骨密度は有意に高かった。家兎骨延長実験:体重約2kgの家兎の下腿骨にOrthofix M-100創外固定器を装着し、骨膜下に骨切りを行い術後7日目より0.25mm/12hで延長を開始した。

術直後よりミノドロネート(bisphosphonate)を体重(Kg)あたり04mg/week腹腔内投与し、延長仮骨のリモデリングに対する影響を観察した。コントロール群では延長仮骨は典型的な3層構造を呈した。すなわち中央の骨透明層(延長部)をはさんだ骨硬化層の両外側にリモデリングによる骨吸収層が存在した。ミノドロネート投与群では骨吸収層は全く存在せず延長仮骨は2層構造を呈した。骨癒合に要する期間も大幅に短縮されbisphosphonate投与は骨延長の臨床においても有用であることが示唆された。ラット実験においても家兎実験においてもbisphosphonate投与により延長仮骨の構造は大きく変化し骨癒合期間の短縮がみられた。これは破骨細胞による骨吸収を抑制し延長仮骨のリモデリングを抑制した結果と考える。現在そのメカニズムを解明すべく予定どうり実験を行っている。【目的】骨延長術における治療期間を短縮し、延長部骨強度を増加させるため、remodeling zoneで認められる骨吸収の抑制を試みた。最も強力な骨吸収抑制作用を有するbisphosphonateを骨延長モデルに投与し、延長仮骨における変化を評価した。【方法】日本白色家兎の左脛骨にOrthofix M-100創外固定器を装着し、1週間の待機の後、0.7mm/dayで3週間の延長を行った。その後4週間仮骨成熟を待った。三群に分け、第I群は生理食塩水のみ静注した。第II群と第III群はそれぞれ週に0.004mg/kgと0.4mg/kgずつminodronic acidを静注した。画像評価として、隔週に一定条件の下、下腿の軟X線撮影を行い、得られた画像をpersonal computerで処理し、骨量をアルミニウム厚換算値で表現した。延長軸に沿って形成されるzoneの骨量を求め、各群でのパターンを表示した。骨強度測定には3点曲げ試験を行いultimate strengthとstiffnessで比較検討を行った。【考察】骨延長においてmineralizing zoneではtension stressによって誘導された骨形成因子が作用し、過剰な骨形成がおこっていると考えられる。しかし力学的負荷が少ない延長中は新性骨は直ちに吸収されると思われる。延長中の骨形成には内因性因子だけで十分であり、remodeling zoneでの骨吸収をいかに押さえるかが重要と考えた。
瞬時周波数と瞬時帯域幅による心音解析

瞬時周波数f_i(t)は解析信号z(t)の位相角の微分としてf_i(t)=1/(2π)d/(dt)[argz(t)]で定義される.しかし、定義式による推定法は一般に雑音に弱いと考えられる.そこで、昨年度は実信号x(t)の解析信号z(t)を求め,その解析信号z(t)の時間一周波数分布から瞬時周波数と瞬時帯域幅を推定するシミュレーションを行った。その結果、解析信号z(t)に変換するためのHilbert変換の性質から,有限長の信号を離散化するという操作のために、連続信号には表れない性質が離散信号に表れることを明らかにした。本年度は、瞬時周波数ではなく、瞬時帯域幅に関する研究に焦点を絞って理論的に検討した。瞬時帯域幅は比較的よく研究されている瞬時周波数に比べ、まだ詳しく研究されているとは言えない。瞬時周波数は一般的に、時間-周波数分布の分散と考えるのが普通であるが、狭帯域信号の場合はどうするかなど問題点も多い。そこで、情報理論的な視点から、まず確率過程のα次等価帯域幅を定義した。これは、Renyiのαエントロピーから導かれるもので、これまでに提案されている重要な帯域幅の定義を含むような一般的な確率過程の等価帯域幅のクラスを定義するものである。現在のところ、心音のように非定常な信号における瞬時帯域幅を推定できる段階ではないが、今後の研究には期待が持てる。瞬時周波数f_i(t)は解析信号z(t)の位相角の微分としてf_i(t)=1/(2π)d/(dt)[argz(t)]で定義される.しかし、定義式による推定法は一般に雑音に弱いと考えられる.そこで、本年度は信号の時間一周波数分布(Wigner-Ville分布表現)から瞬時周波数と瞬時帯域幅を推定した方が良いと考え,シミュレーションを行った。まず、実信号x(t)の解析信号z(t)を求め,その解析信号z(t)の時間一周波数分布から瞬時周波数と瞬時帯域幅を推定する。これは実信号x(t)から瞬時周波数などを求めようとしても,そのWigner分布は正負の両側に対称に分布するため,時間一周波数分布を一種の二次元確率密度関数であると考えたときの条件付き平均値と分散である瞬時周波数と瞬時帯域幅は意味をなさないからである。解析信号z(t)に変換するためにHilbert変換を用いて変換するが、Hilbert変換の性質から,有限長の信号であること,また信号を離散化するために、連続信号には表れない性質が離散信号に表れることを明らかにした。また、Wigner-Ville分布を計算するときも、離散化による影響があるという事実も明らかにしつつあるが,詳細については更なる検討が必要である。
ヘリコバクター・ピロリ菌除菌後胃癌の克服に向けて

近年、早期胃癌の内視鏡治療後の症例にたいしてもピロリ菌の除菌治療は行われているが、近年ではピロリ菌の除菌治療後に出現する除菌後胃癌が問題となっている。除菌後胃癌と未除菌の胃癌のゲノム変異に差がないかを解析をおこなった。まず未除菌早期分化型胃癌でのゲノム変異を同定し、除菌後胃癌とのゲノム変異と差がないか検討したが有意な差を認めなかった。またこの除菌後胃癌は発見が遅れる傾向にあるという報告が散見させるが、理由の一つに正常上皮に近いような上皮(低異型度上皮)に覆われる事がしられている。このためこれらの上皮が正常部由来か癌由来をゲノム変異をもちいて検討したところ、癌部に似通った変異パターンをしめした。胃癌に対して内視鏡治療がひろくおこなわれるようになり、胃の温存ができるようになった。このため異時性癌の早期発見が問題となっている。胃癌の最もたかいリスクであるヘリコバクター・ピロリ菌は異時性癌の発症予防のため除菌をおこなわれているが、除菌にともない形態変化を起こすことが報告されており、この形態変化によって胃癌の視認を困難にしているとの報告もある。本研究では異時性癌の特徴を同定する研究である。現在は未除菌の胃癌及び除菌後胃癌の集積を行なっている。未除菌胃癌については別の研究にて行なった20症例にたいして次世代シークエンサー(NGS)を用いた全エキソン解析の結果を元に、関連の強い約150遺伝子について選択し、別の30症例にたいしてdeep sequenceを行う予定である。同症例について当院が保持しているLMDにてDNAの抽出を内視鏡治療検体のFFPE切片より抽出を行い、ほぼ終了している。今後は関連の強い約150遺伝子に対してdeepsequenceを行うようにライブラリー作成パネルを作成中である。また除菌後胃癌についても同様に内視鏡治療検体のFFPE切片から癌部、正常部からマイクロダイセクションを用いて抽出を行っている。特に除菌後胃癌で認められることもある癌上皮に認められる低異型度な上皮からのFFPE切片からの抽出も行なっている。この組織は上皮のみであるため収量が少ないが、現時点では2例まで抽出が終了しており、残り8例について抽出を行う予定である。事前の予定ではNGSでのライブラリー作成とシークエンスを行う予定であったが、当院で保持している次世代シークエンサーが故障してため、そちらの修理に時間がかかった影響で、ライブラリー作成とシークエンスができていない。しかしながら修理は完了したため、今年度中にシークエンスを行い、解析結果が出せる予定である。逆に除菌後胃癌からのDNA抽出については当初の予定より進んでいる。日本における胃癌は、発症の主要因であるヘリコバクター・ピロリ菌(HP)は除菌治療が適応となっており罹患数・患者数ともに減少傾向である。しかし、近年HPの除菌後に発見される胃癌が問題となっている。このためヘリコバクター・ピロリ菌除菌後に発症する胃癌について特徴的なゲノム変異について解析をおこなった。とくに除菌後胃癌では癌の上皮に低異型上皮(ELA)といわれているが、癌由来なのか正常部由来なのかはっきりしていない。今年度の研究は、ELAを伴った除菌後胃癌10症例からELAと癌部、正常部、血液からgDNAを抽出し、癌パネルを用いたdeepシークエンスを行う事によってゲノム変異の比較検討をおこなうこととした。また未除菌胃癌、30例の解析をおこない同様にシークエンスをおこなった。未除菌胃癌ではAPC, ERBB2, TP53に変異が多くみとめられ、遺伝子長を考慮したmutation rateの解析においてTP53は胃癌の発症に有意な関連があることがわかった。また除菌後胃癌はAPC,ERBB2, NOTCH1, TP53に変異をみとめた。変異の割合は除菌後胃癌と未除菌胃癌では変異の割合に有意な差をみとめなかった。正常部において癌関連遺伝子に変異をみとめているかの解析をおこなったところ、正常部には変異はみとめられず、食道癌などとくらべて前癌状態から変異を認める訳ではないことがしめされた。さらにELAの部分の変異は癌、正常部を比較して興味深い結果をみとめており、現在論文にまとめている段階である。ライブラリー作成とシークエンスを行い、解析を行う予定である。また除菌後胃癌についても抽出を完了させ、シークエンスまで行う。

消化器内科経費が使用させなかった理由としては当科で保持している次世代シークエンサーが故障したことが最大の理由である。DNAの抽出については当院で保持しているレーザーマイクロダイセクションを使用するため、経費が発生しない。現在修理は完了しており、今年度の使用は問題なく行うことができる。ライブラリー作成とシークエンス試薬の購入に充てる予定である。未除菌胃癌については別の研究にて行なった20症例にたいして次世代シークエンサー(NGS)を用いた全エキソン解析の結果を元に、関連の強い約150遺伝子について選択し、別の30症例にたいしてdeep sequenceを行う予定である。また除菌後胃癌についても同様に内視鏡治療検体のFFPE切片から癌部、正常部からマイクロダイセクションを用いて抽出を行っているおり、特に除菌後胃癌で認められることもある癌上皮に認められる低異型度な上皮からのFFPE切片からの抽出も今年度中に終了できる予定ある。除菌後胃癌は正常部、癌部、低異型度上皮部のシークエンスを行う予定である。
終末期医療で看護師が体験する困難　―患者の自己決定を支えるためのケアをめざして―

本研究は、緩和ケア病棟で重要な役割を担う看護師が直面する困難に注目し、看護師以外の医療従事者ー医師、理学療法士、理学療法士ら、患者・家族にも注目することによって以下3点を明かにした。1.緩和ケア病棟で看護師は、患者や家族の希望にそったケアをすることを望んでいるが、それが不可能な場合ジレンマに直面する。2.看護師たちは、マニュアル的な対応ではなく、病棟で患者・家族に対して行なうことが可能なこと・不可能なことに即して妥協点を見つける術を身につけていく。3.こうした困難は、緩和ケア病棟における患者の自己決定権とかかわっており、個々の困難を明確にすることによって、ケアの質を高めることが可能となる。終末期医療をになう緩和ケア病棟では看護師が重要な位置を占めており、実質的に病棟を運営している場合も少なくない。看護師たちは日々さまざまな困難に直面しつつ、患者のケアを行なっている。そして、こうした困難のなかには、患者の自己決定権とかかわっているものも少なくない。研究代表者の松岡はフィールドワークを行なう過程で、これらの困難が重要な研究課題であるという認識を得た。しかし、このような視点からの研究は、これまであまり行なわれていない。本研究の目的は、以下の3点を明らかにすることである。1.緩和ケア病棟で看護師はどのような困難と直面しているのか、2.彼らがそれら困難をどのように解決していくプロセス、3.それら困難は、緩和ケア病棟における患者の自己決定権とどのように関係しているのか。研究分担者の岩崎と渡部は調査が十全に遂行できず、平成24年度は研究分担者となることを辞退した。このことは残念なことであるが、緩和ケア病棟でフィールドワークを行なうことの難しさを明らかにしたと考えられる。一方、研究代表者の松岡は順調にフィールドワークを行ない、緩和ケア病棟において患者の自己決定を支えるためのケアをめざした看護師たちの創意工夫を明らかにしている。研究成果を多くの学会で発表するとともに、「生、死、ブリコラージュー緩和ケアで看護師たちが直面する困難への医療人類学からのアプローチ」を安藤泰至・高橋都編、『シリーズ生命倫理第4巻終末期医療』(東京:丸善出版、2012年12月刊)に執筆した。日本で高齢者の人口比率は増加しており、今後医師のみならず看護師が苦痛の緩和に立ち会う機会は否応なしに増加していくと考えられる。その際に、緩和ケア病棟において看護師がどのような困難に遭遇し、それをどのように解決しているのかを検討する本研究は参考となることを確信している。緩和ケア病棟で看護師は日々さまざまな困難に直面しつつ患者をケアしているが、この困難についての研究はこれまであまり行なわれてこなかった。本研究は、看護師たちが、1院患者のほとんど死亡退院となるという現実に直面するという困難、2患者がいかに安らかに亡くなるかをサポートする医療に携わるという看護師としてのアイデンティティーにかかわってくる困難、に直面することを明らかにした。彼らは、これらの困難をブリコラージュを用いて解決していく。「ブリコラージュ」とは、文化人類学者レヴィ=ストロースが用いた概念で、臨機応変な柔軟さで手持ちの材料と道具だけを用いて特定の目的に応じたなにかをつくりあげることを意味する。これを行えるようになるためには、病棟で頻繁に行なわれているさまざまなカンファレンスが重要な役割を果たしている。なぜなら、看護師が困難への対応のしかたを身につけることは、看護師個人がマニュアル的な知識を獲得する次元ではなく、知識や技術の習得や研鑽、また新たな知識や技術の創造のために、継続的に相互交流が行なわれる緩和ケア病棟、すなわち医療従事者と患者によって形成されているひとつのコミュニティという社会的な次元、においておこることが明らかになった。松岡と池田は、研究成果を臨床死生学会、生命倫理学会、文化人類学会等々の学会で発表し、松岡は「生、死、ブリコラージュー緩和ケアで看護師たちが直面する困難への医療人類学からのアプローチ」を、安藤泰至・高橋都編『シリーズ生命倫理学第4巻終末期医療』(丸善出版2012年12月刊)に執筆した。終末期医療をになう緩和ケア病棟は看取りの場であるため、医療従事者のなかで看護師が重要な位置を占めており、実質的に病棟を運営している場合も少なくない。だが、拠点病院でも彼らは日々さまざまな困難に直面しつつ患者のケアを行なっているのが実情である。そして、諸々の困難のなかには患者の自己決定権とかかわっているものも少なくない。このことは重要な問題と考えられるが、これまであまり研究されてきていない。研究代表者の松岡はフィールドワークを行なう過程で、医療従事者が直面するさまざまな困難が重要な研究課題であるという認識を得た。本研究の目的は、背景を異にする三つの緩和

ケア病棟でフィールドワークを行ない、2年間で以下の3点を明らかにすることである。(1)緩和ケア病棟で看護師はどのような困難と直面しているのか、(2)彼らがそれら困難をどのように解決していくプロセス、(3)それら困難は、緩和ケア病棟における患者の自己決定権とどのように関係しているのか。研究分担者の岩崎と渡部はさまざまな問題に直面し、調査が予定していたようには遂行できていない。しかしながら、研究代表者である松岡はフィールドワークを順調を行なってきており、緩和ケア病棟において患者の自己決定を支えるためのケアをめざした看護師たちの創意工夫を明らかにしつつあり、その成果を日本文化人類学会(平成23年6月)日本臨床死生学会(同11月)で発表を行った。また、著作として公表する予定である(印刷中)。渡部は、緩和ケア病棟で調査を行なう際に遭遇した困難さについて、日本で高齢者の人口比率は増加しており、今後医師のみならず看護師が苦痛の緩和に立ち会う機会は否応なしに増加していくと考えられる。その際に、緩和ケア病棟において看護師がどのような困難に遭遇し、それをどのように解決しているのかを検討する本研究は参考となることを確信している。研究代表者である松岡は国立病院機構東京病院(東京都清瀬市)において、学期間中は週1回程度、夏季休暇期間中は週34回程度、参加観察とインタビューを中心としたフィールドワークを行なった。そこで得られたデータを分析し考察を加え、平成23年度には、第45回日本文化人類学会研究大会(6月)、第17回日本臨床死生学会学術大会(11月)、平成24年度には、第38回日本保健医療社会学会大会(5月)、第46回日本文化人類学会研究大会(6月)、第18回第17回日本臨床死生学会大会(11月)で口頭発表を行なった。また、平成23年度のアメリカ人類学会(於モントリオール、11月)においては、現代社会におけるホスピスや緩和ケア病棟における死にかんする発表を聞き、発表者たちと意見を交換することができた。そして『シリーズ生命理学第4巻終末期医療』の第12章として「死、生、死、ブリコラージュ:緩和ケア病棟で看護師が経験する困難への医療人類学からのアプローチ」(東京:丸善出版、2012年12月刊)を執筆した。平成23年度において、渡部は、勤務先である藤田保健衛生大学の第一教育病院(愛知県豊明市)緩和ケア病棟藤田保健衛生大学の緩和ケア病棟で、岩崎は、勤務先の淑徳大学看護学部の学生実習の受け入れ先でもある聖隷佐倉市民病院でフィールドワークを行なったが、困難をきわめ研究成果を出せないまま平成24年度には分担研究員を辞退した。このため、平成24年度は松岡がフィールドワークを行ない、研究成果を池田と討論するという方法で研究を行ない、上述のような成果を得ることができた。以上を勘案して、分担研究者2名が辞したとはいえ、本研究はおおむね順調に進展していると評価する。そこで得られたデータを分析し考察を加え、日本文化人類学会(平成23年6月)日本臨床死生学会(同11月)で学会発表を行なった。
サイトカインにより活性化されるアストロサイトの神経栄養効果 ニューロン・グリア相互作用の解明ならびに傷害された神経機能回復のための基礎研究

当教室では、サイトカインにより活性化されたアストロサイトが、脳損傷時の神経機能維持、再生に重要な役割を果たしていると想定し、fibroblast growth factor(FGF)、interleukin-1β(IL-1β)、tumor necroting factor-α(TNF-α)、epidermal growth factor(EGF),transforming growthfactor-β1(TGF-β1)などの、脳障害の際に供給される各種サイトカインが、アストロサイトによるnerve growthfactor(NGF)をはじめとする様々な神経栄養因子の産生もしくは分泌を増強することを明らかにしてきた。本研究期間中、我々は、培養アストロサイトに発現する18、22、24-kD bFGF isoformのうち、IL-1β、TNF-α、EGFが22、24-kD isoformの発現量を選択的に増量し、さらに、発現が増強したbFGFはアストロサイトの細胞質から核内に移行することを明らかにし、神経再生過程におけるbFGF isoformの発現の重要性が示唆された。アストロサイト培養上清中には脳幹コリン作動性運動神経細胞のChAT活性を増強する神経栄養因子が存在することを示し、この因子は既存の栄養因子とは異なる新たな生理活性物質であることを明らかにした。さらに、IL-1β、TNF-αの刺激によりアストロサイト培養上清のPonsコリン作動性ニューロンに対する神経栄養効果が増強されることを明らかにした。我々は、hepatocyte growthfactor(HGF)の膜受容体であるc-Met蛋白が、培養アストロサイトに発現する事を明らかにした。さらに、サイトカインによりc-Metの発現が増強することを明らかにした。当教室では、サイトカインによる活性化されたアストロサイトが、脳損傷時の神経機能維持、再生に重要な役割を果たしていると想定し、fibroblast growth factor(FGF)、interleukin-1β(IL-1β)、tumor necroting factor-α(TNF-α)、epidermal growth factor(EGF)、transforming growthfactor-β1(TGF-β1)などの、脳障害の際に供給される各種サイトカインが、アストロサイトによるNGFをはじめとする様々な神経栄養因子の産生もしくは分泌を増強することを明らかにしてきた。本年度、我々は、培養アストロサイトに発現する18、22、24-kD bFGF isoformのうち、IL-1はアストロサイトの細胞質から核内に移行することを明らかにし、神経再生過程におけるbFGF isoformの発現の重要性が示唆された。アストロサイトに発現する細胞接着因子であるneuralcell adhesion molecule(NCAM)も、神経細胞の移動、神経突起の誘導・伸長などに関与し、神経栄養効果を有している。我々は、TGF-β1がアストロサイトのNCAM発現量を増強することを示したが、本年度は、サイトカインによるNCAMの発現制御についてさらに検討中である。我々は、アストロサイト培養上清中には脳幹コリン作動性運動神経細胞のChAT活性を増強する神経栄養因子が存在することを示し、この因子は既存の栄養因子とは異なる新たな生理活性物質であることを明らかにした。本年度は、サイトカインにて刺激したアストロサイト培養上清の目的とする分画を作成中であるが、現在のところ、含有する複数の蛋白の構造決定には至っていない。当教室では、サイトカインにより活性化されたアストロサイトが、脳損傷時の神経機能維持、再生に重要な役割を果たしていると想定し、fibroblast growth factor (FGF)、interleukin-1 β(IL-1β)、tumor necroting factor-α(TNF-α)、epidermal growth factor (EGF)、transforming growthfactor-β1 (TGF-β1)などの、脳障害の際に供給される各種サイトカインが、アストロサイトによるNGFをはじめとする様々な神経栄養因子の産生もしくは分泌を増強することを明らかにしてきた。本年度、我々は、HGFの膜受容体であるc-Met蛋白が、培養アストロサイトに発現する事を明らかにした。

さらに、サイトカインによるc-Metの発現調節につき検討中である。アストロサイトに発現する細胞接着因子であるneuralcell adhesion molecule (NCAM)も、神経細胞の移動、神経突起の誘導・伸長などに関与し、神経栄養効果を有している。我々は、TGF-β1がアストロサイトのNCAM発現量を増強することを示したが、本年度は、サイトカインによるNCAMの発現制御についてさらに検討中である。我々は、アストロサイト培養上清中には脳幹コリン作動性運動神経細胞のChAT活性を増強する神経栄養因子が存在することを示し、この因子は既存の栄養因子とは異なる新たな生理活性物質であることを明らかにした。本年度は、サイトカインにて刺激したアストロサイト培養上清の目的とする分画を作成中であるが、現在のところ、含有する複数の蛋白の構造決定には至っていない。当教室では、サイトカインにより活性化されたアストロサイトが、脳損傷時の神経機能維持、再生に重要な役割を果たしていると想定し、fibroblast growth factor(FGF)、intetleukin-1β(IL-1β)、tumor necroting factor-α(TNF-α)、epidermal growth factor(EGF)、transforming growthfactor-β1(TGF-β1)などの、脳障害の際に供給される各種サイトカインが、アストロサイトによるNGFをはじめとする様々な神経栄養因子の産生もしくは分泌を増強することを明らかにしてきた。我々はすでに、HGFの膜受容体であるc-Met蛋白が、培養アストロサイトに発現する事を明らかにしたが、本年度はさらに、サイトカインによりc-Metの発現が増強することを明らかにした。アストロサイトに発現する細胞接着因子であるncuralcell adhesion molecule(NCAM)も、神経細胞の移動、神経突起の誘導・伸長などに関与し、神経栄養効果を有している。我々は、TGF-β1がアストロサイトのNCAM発現量を増強することを示したが、本年度は、サイト力インによるNCAMの発現制御や、NCAMのシアル酸による修飾のメカニズムについてさらに検討中である。アストロサイトに発現する非分泌性蛋白であるbasicFGF等が神経栄養因子として作用するためには細胞外に放出されることが必須であると考えられるが、本年度は、その放出のメカニズムについてさらに検討中である。
担子菌類由来のセルロース分解酵素に対する部位特異的変異の導入と触媒機構の解析

昨年度メタノール資化性酵母による大量発現の構築に成功した白色木材腐朽担子菌Phanerochaetechrysosporium由来のβ-グルコシダーゼに関して反応速度論的解析を行い、加水分解と同時に糖転移反応が起こっていることを明らかにし、これまで基質阻害と考えられてきた現象が糖転移反応によるものであることを定量的に証明した。この結果はCarbohydrate Research 339号2851-2857頁に掲載された。さらに昨年度部位特異的変異の導入に成功したP.chrysosporium由来のセロビオース脱水素酵素は、昨年度作成した166番のフェニルアラニンをチロシンに置換した酵素(F166Y)に関して、定常状態における反応を調べるとともに、ストップトフロー分光光度計を用いて前定常状態における酸化還元反応を詳細に調べ、本酵素が電子伝達鎖反応によって酸化還元反応を行っていることを明らかにした。この結果は現在FEBS Journalに投稿中である。また、上述の部位特異的変異を導入した酵素に加えて、90番のチロシンをフェニルアラニンに置換した酵素(Y90F)、および90番のチロシンと166番のフェニルアラニン双方に変異を導入した酵素(Y90F/F166Y)を作成し、それらにおける電子伝達速度を詳細に調べた。その結果90番のチロシンが電子伝達に重要な役割を担っていることを明らかにし、その結果を第55回日本木材学会大会において発表した。白色木材腐朽担子菌Phanerochaetechrysosporiumをセルロースを炭素源とした培地で10日間培養し、その培地からβ-グルコシダーゼをカラムクロマトグラフィーを用いて精製した。得られたタンパク質はSDS-PAGEによって分子量が116kDaであり、さらにクリーブランド法によって分解されたフラグメントのN末端アミノ酸解析から、すでに他株でクローニングが行われた糖加水分解酵素ファミリー3に属するβ-グルコシダーゼであることが明らかになった。本酵素の基質特異性を調べたところ、β-1,4結合を有するセロビオースやセロオリゴ糖ではなく、β-1,3結合を有するグルカンに対する反応性が高かった。さらに本酵素の大量発現系を構築するために培養3日目の菌体からは全RNAを抽出し、RT-PCR法によって本酵素をコードするcDNAのクローニングを行った。得られたcDNA断片を酵母形質転換用のベクターに導入し、メタノール資化性酵母を形質転換した。形質転換されたメタノール資化性酵母による本酵素の生産性はこれまでのP.chrysosporiumによる野生型酵素の生産量の38倍にも達した。生産された酵素の反応性は野生型のそれとほとんど変わらなかったことから、メタノール資化性酵母による本酵素の部位特異的変異の導入が可能となった。これらの成果はJouurnal of Bioscience and Bioengineering第95巻572-576頁およびBioscience, Biotechnology, and Biochemistry第67巻1-7頁に公表された。本菌由来のセロビオース脱水素酵素に関しては、ヘムの近傍である166番目のフェニルアラニン残基をチロシンに変えた組換え酵素の生産に成功した。この成果に関しては現在投稿準備中である。
微細藻類の増殖制御要因に関する動力学的研究

中海,宍道湖のような汽水環境下での微細藻類の増殖制御要因として、栄養塩(N及びP)制限下の増殖パラメータ及び薬物(有機リン剤)の増殖抑制能についての解析を行うと共に、藻類の薬物分解能の評価も行った。(1)栄養塩(N及びP)制限下の藻類増殖パラメータの作製(2)薬物(有機リン剤)の藻類増殖抑制能の解析薬物(I)存在下での藻類(X)の初期増殖域の動態は、dX/dt=CXで示される。但し、C/μ〓1+I(μ-D)/μ/Ks,C,μ:I存在下と不在下での比増殖速度定数、Ks:I半飽和定数、μ、D:I飽和下の増殖速度定数と死減速度定数.C/μ:IのグラフからC/μ=0.5の時のI,即ち【IC_(50)】が容易に求められる。【IC_(50)】値で見た有機リン剤7化合物の増殖抑制能は、化合物の水溶解度及び生物濃縮係数と夫々負及び正の高い相関を示した。(3)藻類による薬物(有機リン剤)分解能の評価藻類(X)存在下の薬物(S)の濃度変化は、ln(〔S〕/〔S〕o)=-kot-【kA∫o^t】×dtで示される。但し、〔S〕,〔S〕o:時間tとOのS濃度、【k_A】,ko:XとX以外の要因によるS消失速度定数.Xの変化を生長曲線式で近似させ、コンピュータ解析により【k_A】を求めた。3化合物の5種藻類での【k_A】は、(1179)×【IO^(-9)】ml/cell/dayの間で変化した。その変化は、化合物間よりも藻類間で大きく、最大120倍の差を示した。
生成語彙意味論に基づく名詞の事象性の日英比較研究

本研究は、生成語彙意味論の枠組みを用いて英語と日本語の名詞の事象構造を分析し、種々の構文における名詞のふるまいについて、意味の共合成やタイプ強制という観点から説明することを目的とする。名詞は一般に個体名詞と事象名詞に分けられるが、本研究では、個体を表す名詞も事象を含意することに着目し、その事象性の含意が項の選択や修飾関係、さらには軽動詞構文や複雑述語の形成において意味の合成プロセスに関わることを、日英語の比較分析によって明らかにする。この目的を達成するため、本研究では、主に次の2点に関わる研究を行ってきた。(1)生成語彙意味論のモデルによって、事象性の関わる名詞タイプの分析を提示する。(2)日英語のデータを比較し、動作主名詞、名詞の項選択、軽動詞構文、複雑述語、名詞修飾などにおける意味生成プロセスを明らかにする本研究プロジェクトの最終年度である平成30年度は研究課題の総括的なまとめおよび評価を行い、国内外の学会へ積極的な情報発信をすることを計画していたが、二つの国際学会に招待発表者として招かれ研究成果の発信を行った。一つは、2018年5月に開催された日本英語学会国際春季フォーラム、もう一つは2018年6月に開催された中国北京大学の創立120周年国際学術研究会である。ジャーナル等への投稿は、現在準備中であるが、研究目的に沿った成果の発信については上記の会議において有意義に行うことができたと考えている。今年度は、特に動作主名詞の事象性について一定の成果を上げることができた。動作主名詞には、事象への関与を含意するものとそうでないものがあるが、この点に関して、Pustejovsky (1995)は、場面レベルと個体レベルの名詞という分類を導入している。これは次のような例で示される。(『場面レベルの名詞」pedestrian, passenger, customer, smoker, winner:「個体レベルの名詞」violinist, professor, doctor, author, magician)今年度は、日本語の動作主名詞、「ー者」「ー手(しゅ)」「ー手(て)」「ー主(ぬし)」「ー家(か)」などについて、上記の区別による分析を行い研究論文にまとめた。本論文は海外出版社より出版予定である。平成27年度は、本研究の中心的なテーマである「動作主名詞の事象性」および「名詞の項選択」についての検討を行った。この検証作業を進めることによって、英語と日本語のデータの比較から、名詞の事象性についていくつかの具体的な問題点が浮き上がった。そのひとつは、動作主名詞における事象解釈の問題である。日本語には動作主を表す名詞に出来事的な解釈のあるものと恒常的な性質の解釈をもつものを形態的に区別することがある。たとえば、英語のdriverに対し「運転者」と「運転手」の2通りの名詞形態があるが、この区別がそれに相当する。日本語の動作主名詞における事象解釈について論文を書き、国外の出版社から出版された論集に発表した。また、併せて日本語のreduplicationについての研究を進め、語彙意味論の観点から分析を行った。その成果は共編として出版した論集の中に収めた。当初の計画に沿って、名詞の事象性の問題に取り組み、論文にまとめて発表する成果を上げた。また、それに加えて、語彙意味論の論集を共編者としてまとめて出版した。本研究の目的は、生成語彙意味論の枠組みを用いて英語と日本語の事象構造を分析し、種々の構文における名詞のふるまいについて、意味の合成性やタイプ強制という意味解釈における操作という観点から説明することを目的としている。平成28年度は、この目的に即して、昨年度行った研究の成果を国際学会(The 9th International Conference on Practical Linguistics of Japanese)で発表した。また、事象構造の分析として、「事象フレームの類型と2つの達成事象」という論文を発表した。この論文の中では、「動詞フレーム」「サテライト・フレーム」として事象構造を分類できるとする仮説の背景には、達成事象の2つのタイプ、すなわち漸増的達成事象と差分的達成事象が存在すること、そして、その違いについてはこれまであまり明確に議論されてこなかったことを指摘した。その上で、事象意味論的な分析によって2つのタイプの違いを明らかにした。これによって、達成事象と呼ばれる事象構造が、どのような事象を表出するかによって実は異なるものであることを提示することができた。また、昨年度、国際シンポジウムで発表した研究が、海外出版社より論文集として刊行されたことも今年度の成果としてあげられる。この研究では、日本語の「重複」という現象に焦点を当て、この表現形成過程が他には見られない特徴をもつこと、そしてそれが名詞の意味に深く関係していることを論じた。昨年度行った「動作主名詞の事象性」の課題についての研究、および「名詞の項選択」の課題についての研究は、今年度成果発表に至った。本研究の計画段階では、平成28年度は分析結果のまとめと成果発表を行い、さらに次の段階へ深化させることを計画していたが、上記のように国際学会での成果発表および論文の出版を通して、計画はほぼ達成されたと考えている。

本研究プロジェクトの目的は、生成語彙意味論の枠組みを用いて英語と日本語の事象構造を分析し、種々の構文における名詞の振る舞いについて意味の合成性やタイプ強制という意味解釈における操作の観点から解明することを目的としている。平成28年度は、「軽動詞、複雑述語」と「名詞の事象性」のテーマのうち、特に意味の多重性に関わる問題で名詞の事象性を明らかにすることを試みた。その成果は、論文にまとめ高見健一(他)編、『不思議に満ちたことばの世界』(開拓社)に「くびき語法と多義の仕組み」と題する論文として発表した。また、関連する専門的な問題に関しては、平成28年9月にポルトガルで開催されたEuropean Association of Japanese Studies、同年10月に中国天津で開催された国際学術会議などで発表及び討議を行った。今年度は「多義性」について研究成果を発表したが、これは本研究の課題である生成語彙意味論の枠組みによる意味分析の結果である。発表件数は少なかったが、国際会議等への参加により成果発信を行うことができたので、計画したことは概ね実行できたと考えている。本研究は、生成語彙意味論の枠組みを用いて英語と日本語の名詞の事象構造を分析し、種々の構文における名詞のふるまいについて、意味の共合成やタイプ強制という観点から説明することを目的とする。名詞は一般に個体名詞と事象名詞に分けられるが、本研究では、個体を表す名詞も事象を含意することに着目し、その事象性の含意が項の選択や修飾関係、さらには軽動詞構文や複雑述語の形成において意味の合成プロセスに関わることを、日英語の比較分析によって明らかにする。この目的を達成するため、本研究では、主に次の2点に関わる研究を行ってきた。(1)生成語彙意味論のモデルによって、事象性の関わる名詞タイプの分析を提示する。(2)日英語のデータを比較し、動作主名詞、名詞の項選択、軽動詞構文、複雑述語、名詞修飾などにおける意味生成プロセスを明らかにする本研究プロジェクトの最終年度である平成30年度は研究課題の総括的なまとめおよび評価を行い、国内外の学会へ積極的な情報発信をすることを計画していたが、二つの国際学会に招待発表者として招かれ研究成果の発信を行った。一つは、2018年5月に開催された日本英語学会国際春季フォーラム、もう一つは2018年6月に開催された中国北京大学の創立120周年国際学術研究会である。ジャーナル等への投稿は、現在準備中であるが、研究目的に沿った成果の発信については上記の会議において有意義に行うことができたと考えている。研究課題について論文作成を進め完成に至ったが、年度中の出版には間に合わなかった。具体的な成果発表は来年度になるが、計画は概ね順調に進んでいる。今後はさらに名詞の事象性について分析を進める。今年度の研究によって課題として上がった名詞の項選択について事象性との関連からより広範なデータを参照して分析を続けていく。
微小脈管(リンパ管・血管)の臓器内分布と新生に関する組織化学的研究

前年度(平成9年)に引き続き、微小循環系、とくに毛細リンパ管網の微細分布の臓器特異性を基礎に、リンパ管の組織化学的研究をおこない、以下の結果を得た。1)正常および病理組織における微小脈管(リンパ管・血管)の確定のための酵素組織化学法と免疫組織化学法の適用の可能性(対比)酵素組織化学法:、腸管壁について、粘膜層や筋層を注意深く剥離し、薄層の伸展試料を5′-Naseとacetylecholine esteraseの二重染色し、リンパ管と神経の光顕像とSEM反射電子像(硝酸銀処理)を観察し、両者の分布状況をさらに明らかにした。免疫組織化学法:基底膜構成物質であるIV型コラーゲンやラミニンに対する抗体を用いて、これらの免疫染色により、血管も染別・同定した。また、nitric oxide synthesis(eNOS)の分布も調べた。最近入手し得た抗ヒト胸管抗体を、ヒト胆嚢及び歯髄などの組織を用いて検討(免疫染色)し、特異性を調べたが、本抗体に関しては必ずしも一定の特異的な結果は得られていず、さらに詳細な検討が必要であるものと考えられる。尚、引き続き上記両方法を併用した効果的な観察法について、両試料(切片・伸展)ともに検索中である。2)リンパ管の再生・新生実験1)ラットの下腿部のリンパ管を切断、あるいは腹部胸管を結紮・切断し、一定期間後(12週目)の再生時に局部の両脈管の増殖・新生状況を調べた。特に新生リンパ管の5′-Nase酵素活性は対照群のそれらと比較して高かった。2)腸間膜の酵素染色・免疫染色による両脈管の内皮細胞の増殖(出芽)の検索や培養リンパ管内皮細胞の細胞化学的検索は現在もなお進行・検討中で明確な結果を得ていない。1正常および病理組織における微小脈管(リンパ管・血管)の確定のための酵素組織化学法と免疫組織化学法の適用の可能性(対比)酵素組織化学法:5'-nucleotidase(5'-Nase)染色によりリンパ管を、alkaline phosphatase(ALPase)染色により動脈およびdipeptidylaminopeptidaseIV(DAP)染色により静脈の三者の染別(二重・三重染色)をヒト及び実験動物(マウス・ラット・ハムスター・サル等)の種々の組織や器官の切片や伸展試料(全載標本)で試み、良好な結果を得た。さらに、腸管壁については、粘膜層や筋層を注意深く剥離し、薄層の伸展試料を5'-Naseとacetylecholine esteraseの二重染色し、リンパ管と神経の光顕像とSEM反射電子像(硝酸銀処理)を観察し、両者の分布状況を明らかにした。また、nitric oxide synthesis(NOS)の分布も調べた。さらに、最近入手し得た抗ヒト胸管抗体を、ヒト胆褒組織を用いて検討(免疫染色)し、特異性を調べた。尚、現在上記両方法を併用することにより、両試料(切片・伸展)ともにより効果的な観察法を検索中である。2リンパ管の再生・新生実験1)ラットの下腿部のリンパ管を切断、あるいは腹部胸管を結紮・切断し、一定期間後(12週目)の再生時に局部の両脈管の増殖・新生状況を調べた。特に、新生リンパ管の5'-Nase酵素活性は対照群のそれらと比較して高かった。

2)腸間膜の酵素染色・免疫染色による両脈管の内皮細胞の増殖(出芽)の検索や培養リンパ管内皮細胞の細胞化学的検索は目下進行・検討中である。前年度(平成9年)に引き続き、微小循環系、とくに毛細リンパ管網の微細分布の臓器特異性を基礎に、リンパ管の組織化学的研究をおこない、以下の結果を得た。1)正常および病理組織における微小脈管(リンパ管・血管)の確定のための酵素組織化学法と免疫組織化学法の適用の可能性(対比)酸素組織化学法:、腸管壁について、粘膜層や筋層を注意深く剥離し、薄層の伸展試料を5′-Naseとacetylecholine esteraseの二重染色し、リンパ管と神経の光顕像とSEM反射電子像(硝酸銀処理)を観察し、両者の分布状況をさらに明らかにした。免疫組織科学法:基底膜構成物質であるIV型コラーゲンやラミニンに対する抗体を用いて、これらの免疫染色により、血管も染別・同定した。また、nitric oxide synthesis(eNOS)の分布も調べた。最近入手し得た抗ヒト胸管抗体を、ヒト胆嚢及び歯髄などの組織を用いて検討(免疫染色)し、特異性を調べたが、本抗体に関しては必ずしも一定の特異的な結果は得られていず、さらに詳細な検討が必要であるものと考えられる。尚、引き続き上記両方法を併用した効果的な観察法について、両試料(切片・伸展)ともに検索中である。2)リンパ管の再生・新生実験1)ラットの下腿部のリンパ管を切断、あるいは腹部胸管を結紮・切断し、一定期間後(12週目)の再生時に局部の両脈管の増殖・新生状況を調べた。特に新生リンパ管の5′-Nase酵素活性は対照群のそれらと比較して高かった。2)腸間膜の酵素染色・免疫染色による両脈管の内皮細胞の増殖(出芽)の検索や培養リンパ管内皮細胞の細胞化学的検索は現在もなお進行・検討中で明確な結果を得ていない。
食道がんの予後に関連する13番染色体上の遺伝子変異の同定

食道がんにおける13番染色体上の予後に関連する遺伝子変異を明らかにするために、I3番染色体の詳細な欠失地図を作製したところ、13q12-13の多型性マイクロサテライトマーカーD13S1701からD13S267の間に予後と関連した共通欠失領域が認められた。この領域の近傍に位置するがん抑制遺伝子であるBRCA2遺伝子とRB遺伝子はこれまでの我々の研究から食道がんではほどんど変異を生じてないことが明らかになったので、他の遺伝子に変異が主じていると考えられる。そこで、最近この部位に新たに同定され、前立腺がん細胞のアンドロジェン感受性を制御していると考えられているAS3遺伝子について食道がんにおける変異を解析した。AS3遺伝子の全てのゴーディングエクソンについてPCR-SSCP法および直接シークエンス法で変異を検索した結果、5カ所に変異が見られたが、全て同一患者の正常組織部分にも見られる多型性切変異であり、食道がんに関与すると思われるこの遺伝子のがん細胞特異的な体細胞変異は検出されなかった。しかし、この遺伝子自体のヘテロ接合性の消失は食道がんのリンパ節転移と有意に相関を示し、また遺伝子ないの各多型性の部位における稀なアリルも食道がんのリンパ節転移を示した患者に多く見られることが明らかになった。そこで、食道がん細胞株におけるこの遺伝子の発現量の変異を定量PCR法で解析した。その結果、各細胞株の発現量は一定ではなく、非常に高いもの、低いもの、中間のものの3グループが見られ。この遺伝子は変異以外のメカニズムによって発現が調節され食道がんの転移と関連している可能性が示された。