hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
産地型集積の振興とコミュニティビジネス

本研究の問題意識は、なぜコミュニティ・ビジネスと呼ばれる公益追求型組織・活動が、私益追求型組織・活動を中心とする産地型集積の振興を担おうとしているのか(担わなければならないのか)、コミュニティ・ビジネスによる産地型集積の振興は、どのような成果を産地にもたらすのか、コミュニティ・ビジネスによる産地型集積の振興にはどのような課題があるのか、にある。このような問題意識のもと、平成18年度は、平成17年度に引き続き、文献サーベイのほか、長崎県を中心とする九州地域における産地型集積と関係するコミュニティビジネス実践者と接触し、活動目的、内容や成果の把握に努めた。特に、長崎県の半島部に位置する西海市や離島部の新上五島町などにおいては、実践者の他に行政や商工団体との接触も図った。以上のような研究調査活動を踏まえ、複数の産地型集積に関係するコミュニティビジネスの目的、活動内容や成果からそれらに共通する要素の抽出を試みたが、現在のところ一般化にはいたっていない。今後は、より多くの事例の把握に努めながら、一般化を試みる予定である。なお、本研究を進める過程で得た知見を用いて、コミュニティビジネスの必要性や事例にかかる伊佐淳・松尾匡・西川芳昭編著[2007]『市民参加のまちづくり-コミュニティビジネス編-』創成社において、第1章および第2章を執筆した。このような問題意識のもと、平成17年度は以下の活動に取り組んだ。1.本研究を開始した当初、産地型集積におけるコミュニティビジネスを、全国540の産地型集積に存在する組合を対象とするアンケート調査によって発掘しようとした。しかし、組合への調査による把握の可能性に疑問が残ったため、コミュニティビジネス、特にそれらに対する中間支援活動を担うコミュニティビジネスの主体へのヒアリング調査を実施し、産地型集積におけるコミュニティビジネスの発掘に努めた。2.国内各地の行政や中間支援組織など、各種団体が発行する文献資料のサーベイに努めた。3.長崎県を中心とする九州地域において発掘された産地型集積と関係するコミュニティビジネスについて、当事者と接触し、活動目的、内容や成果の把握に努めた。特に、長崎県の半島部に位置する西海市や離島部の新上五島町などにおいては、当事者の他に行政や商工団体との接触も図った。4.産業集積論とコミュニティビジネスとの関わりについて理論的な分析を進めた。
固体試料測定用小型フーリエ変換マイクロ波分光器の試作

常温において固体である有機分子の回転スペクトル測定のため、分子流型フーリエ変換マイクロ波分光器(MB-FTMW)を試作することを試みた。固体およびおおよそ沸点が200°C以上の比較的大型分子(B,C=1000MHz以下)のマイクロ波分光は低J遷移が現れる低周波数領域(8GHz以下)において感度が低く、あまり行われてこなかった。本研究では既存MB-FTMW分光器の主にノズル周辺を、固体試料の気体化が容易に行われるように改造し、希ガスとの混合気体の分子流生成方法を検討した。感度および分解能を上げるため分子流の方向がマイクロ波パルスの伝搬方向に一致するGrabow型に改造した。鏡背部が外部に接しているため固体および高沸点液体試料の加熱等が容易になった。また、マイクロ波回路の改良により既存分光器の感度向上に成功した。購入したアンプとミキサーにより導入マイクロ波のパワーアップと検波系のノイズを低減することが出来た。第二段階は別件科研費を戴き数年前より行ってきた、直径550mmの凹面鏡によるファブリーペロー空洞の構築である。大型鏡製作のための冶具を設計・製作し、安価に自作できる目途がついたが現在は表面粗さがミクロンオーダーであり、さらに精度を上げるため冶具・精度測定の改良を行っている。我々は生物化学関連分子と水(複数)との水素結合錯体の構造決定を目標としている。具体的には、安息香酸水、カテコール水、アニソール水などの錯体の測定を試みているが現在のところ遷移は観測されていない。この内で安息香酸水のab initio計算の結果を成果報告書に記載した。計画書段階で予定した小型化はシンセサイザーが予算的に購入不可能なため、既存分光器の大改造により所期の目的を達成することにした。ところが、分光器の光源(HP8673Dシンセサイザー)が平成11年夏に故障し、さらに予算が減少する仕儀になってしまった。既存分光器の改造点は1.直径350mm凹球面鏡を真空容器のフランジに直結した。2.外部に露出した鏡背部に分子流ノズルを接続し、固体用試料貯を種々作製した。3.購入したマイクロ波増幅器を使用し412GHz領域において数100μW以上を空洞に導入することが出来た。4.412GHz領域のマイクロ波回路部品を購入し、目的錯体の低J遷移の測定にそなえた。5.既存の分子流モニター用四重極型質量分析計を真空容器へ接続するための配管を一部完成した。6.質量分析計の分光器本体への出し入れ機構を設計し試作中である。研究の目的である気相状態におけるカテコールと水、安息香酸と水およびアニソールと水の水素結合錯体(1:1錯体)の構造をMP2以上のレベルで予測した。また、改造第二段階である低周波数領域用の大型凹球面鏡(直径520mm)の研磨装置を製作した。それにより2個の鏡を所期の形状精度で製作出来たと思われる。次年度は、分子流中の目的錯体をモニターするため、上記質量分析計に既存のYAGレーザーを使用した光イオン化機構を組み込む予定である。今年度は主としてマイクロ波回路の改良により既存分光器の感度向上に成功した。購入した部品により、導入マイクロ波のパワーアップと検波系のノイズを低減することが出来た。また、マイクロ波空洞を構成する片方の凹面鏡の裏面を真空容器の外部に出すことにより、高沸点液体及び固体試料のスペクトルの観測が容易になった。これまで我々が手がけてきた一連の置換ベンゼン類の再測定による分子定数の精度向上および新規分子の帰属を行った。それらはアニソール及びフッ素置換アニソール、ベンジルアルコール、モノハロゲンベンゼンなどである。研究目的の一つである安息香酸水錯体の構造をMP2/6-31G^

<**>レベルで計算した。その結果、カルボキシル基面内に水の酸素と水素が入り(もう一つの水素は面外)6員環を形成する構造が他の多くの極小値を持つ構造に比べ少なくとも20kJ/mol以上安定であることを見出した。現時点では、この構造をもとにスペクトルの測定を行っている。カテコール水、アニソール水を順次とりあげる予定である。なお、大型(525φ)凹面鏡の製作は表面粗さがミクロンオーダーに入った段階で、面および形状精度の向上を目指している。また、既存四重極型質量分析計の分光器本体へ接続はほぼ完了したが、分析計の不調により初期の目的には到達していない。
小脳プルキンエ細胞樹状突起スパインでのカルシウム動態と機能タンパク質の役割

本研究では小脳プルキンエ細胞樹状突起のCa^<2+>動態が非常に多彩でかつ局所性に富むものであることをNa^+動態と比較しつつ明らかにした。またCa^<2+>放出活性をCa^<2+>流入と分離して記録することで、Ca^<2+>放出能が小脳発達とともに変化することを明らかにした。小脳とは異なり、海馬錐体細胞における神経可塑性ではIP3受容体は補助的な役割を演じていることがわかったが、神経活動依存的なIP3受容体の発現調節を示すことで複雑なCa^<2+>制御機構の一端を明らかにした。IP3受容体がのっているERそのものの一部が樹状突起中をダイナミックに移動することを示し、またIP3受容体のER膜上での側方移動も細胞骨格依存的に制御されていることを明らかにした。これらの知見は、神経細胞樹状突起のCa^<2+>シグナル制御機構の一部としてのCa^<2+>放出調節機構ひとつをとっても非常に複雑な機構が存在することを示唆している。Ca^<2+>放出を担うIP3受容体の構造と機能の相関を精密に知ることも、Ca^<2+>放出調節機構を解明する上で必須であり、今回IP3受容体の構造・機能相関をさらに詳細に明らかにしたことは重要な前進であると考える。刺激入力時のCa^<2+>上昇のシグナル下流に位置する各種機能タンパク質の修飾変化を知ることは、Ca^<2+>シグナルの機能を推し量る上で非常に重要である。神経細胞内でカルシニューリン活性の可視化に成功したことはその他の機能タンパク質の活性を観察する第一歩であり、今後の発展が期待される。以上、本研究により神経細胞内でのCa^<2+>動態、特にCa^<2+>放出機構について多様な制御機構が明らかとなった。これら多角的な研究成果は神経細胞樹状突起内でのCa^<2+>動態の果たす多種多様な生理機能における役割を解明する上で重要な手がかりを与えた。これらの知見をもとにして本研究の目的として揚げたスパインレベルでの可視化に今後取り組みたい。細胞内Ca^<2+>放出チャンネルである1型イノシトール3リン酸受容体(IP3R1)は小脳プルキンエ細胞に豊富に発現している。細胞内Ca^<2+>濃度の増加はプルキンエ細胞でのシナプス可塑性である長期抑圧現象(LTD)に必須であることは知られていたが、IP3R1がLTDに必須であることを、IP3R1の阻害抗体とIP3R1ノックアウトマウスを用いて示した。生後変性、脱落していく、1型小脳脊髄変性症(SCA1)モデルマウスのプルキンエ細胞においてIP3R1の発現量は減少しているが、シナプス刺激によるCa^<2+>放出はむしろ活性化していた。これらの知見は、プルキンエ細胞樹状突起でのCa^<2+>動態は複雑な時間・空間的特性をもって細胞内メカニズムを制御していることを示唆している。プルキンエ細胞樹状突起のCa^<2+>動態をさらに詳細に検討した。平行線維を50Hz、38発刺激するとCa^<2+>の流入と細胞内からの放出が二相性に見られた。

刺激回数を増加するとCa^<2+>上昇は一相性となり、持続時間は刺激回数に比例し、50発刺激では持続時間は68秒、濃度は200μMに達した。IP3R1欠損マウスおよびIP3受容体阻害剤を用いて、この大きなCa2+上昇はほとんどがCa^<2+>流入によることを示し、AMPA受容体阻害剤やCa^<2+>チャンネル阻害剤を用いNa^+とCa^<2+>の濃度変化を測定した結果、P型Ca^<2+>チャンネルがその主役であることが明らかとなった。プルキンエ細胞のAMPA受容体はCa^<2+>を通さないことが分子生物学的研究から示唆されているが、ここでは機能的に示すことができた。細胞内Ca^<2+>放出チャンネルである1型イノシトール3リン酸受容体(IP3R1)は小脳プルキンエ細胞に非常に豊富に発現しており、ERからのCa^<2+>放出の主要な機能を担っている。プルキンエ細胞樹状突起でのCa^<2+>動態はきわめて複雑な時間・空間的特性をもっており、細胞内メカニズムを厳密かつ精妙に制御している。平行線維入力時のプルキンエ細胞樹状突起のCa^<2+>動態において、細胞外からの流入・細胞内放出機構それぞれの関与の度合いを詳細に検討した。50Hz、38発の刺激で見られるCa^<2+>の流入と細胞内からの放出による二相性のCa^<2+>上昇は、刺激回数を増加すると一相性となり、持続時間は刺激回数に比例し、50発刺激ではCa^<2+>上昇は68秒程度持続し、Ca^<2+>濃度は200μMにまで上昇していると推定された。この大きなCa^<2+>上昇はほとんどがCa^<2+>流入によるものであり、更にNa^+濃度とCa^<2+>濃度変化を比較した結果、P型Caチャンネルを通ったCa^<2+>がその本態であることを明らかにした(Kuruma et al.,2003)。更に小脳皮質の生後発達に伴うCa^<2+>放出活性の変化を検討するため、異なる日齢のマウスを用いて二性Ca^<2+>上昇を観察した。23週齢のマウスのプルキンエ細胞ではCa^<2+>放出が相対的に大きく、4週齢以降では逆にCa^<2+>流入の方が大きかった。すなわち平行線維刺激で誘起されるプルキンエ細胞樹状突起のCa^<2+>動態は2週前後の幼弱なマウスにおいてはCa^<2+>放出がCa^<2+>流入よりも支配的であり、成長に伴ってそれが逆転することが示された。2週齢から4週齢は小脳皮質が発達・成熟を遂げる時期であり、シナプス結合の可塑的変化や成熟化にシナプス後部のCa^<2+>放出能が関与している可能を示唆する。
空力騒音の予測と静粛化(流れのフィードバック機構モデル)

本研究では、空力騒音の原因の多くがせん断層内の渦と物体壁面との干渉であることに着目し、流れの干渉による空力音の発生機構の解明と「流れの制御」による静粛化技術の確立を行うことを目的として研究を行った。せん断流中の渦と物体との干渉において、流れのフィードバック機構が重要である。しかし、一般的にこの機構に対する共通な定性的理解はあるが、フィードバックループを構成する流れの要素それぞれがもつ役割・寄与についての具体的理解は乏しい。本研究では、流れのフィードバック機構が顕著に現れる直列異径2円柱周りの流れを対象にし、この機構を構成する流れの構造およびその役割を明らかにすることによってフィードバック機構モデルを構築する。これにより、フィードバック機構におけるどの流れ要素をどの様に制御すれば良いかという指針が得られる。異径二円柱によって発生する空力音の円柱直径比および円柱中心間距離に対するその強さおよび周波数の変化を詳細に調べた結果、つぎのことが明らかとなった。(1)上流円柱からの渦放出音の強さは中心間距離に対して周期的に極大値をとる。隣合う極大値間の間隔は上流円柱の直径の約4倍であることがわかった。(2)この極大値間の間隔は二円柱間の流れのフィードバック機構によって説明できる。(3)直径比が1に近い場合、下流円柱の渦放出音は上流円柱のそれに同期し、下流円柱からの渦放出音の周波数は上流円柱のものと一致する。
癌幹細胞と口腔癌転移患者血液の２つに着目した転移特異的miRNA同定と診断法確立

口腔癌の転移特異的なmicroRNAの同定を本研究の目的とする.転移特異的な候補miRNAの選定法として2つの提案がある.第1は同一癌患者の1術後非担癌状態時の血液と,2頸部リンパ節,遠隔転移時の血液を用いアレイ解析して候補miRNAを得る。第2は、癌幹細胞に着目した方法である.これらをB88細胞に導入して癌幹細胞様細胞を作製し,親細胞と解析を行い,候補miRNAを得る.候補miRNAは上記モデルを用いて検証して,口腔癌の転移に特異的なmiRNAを同定する.平成30年度の研究実績としては以下のことを行った。I.口腔癌患者の血液に着目した転移関連miRNAの選定と同定.1)口腔癌患者の血液に着目した転移関連miRNA候補の探索と選定.2)上記で選定した転移に関連する候補miRNAの検証による転移特異的miRNAの同定II.癌幹細胞に着目した転移関連miRNAの選定と同定.1)口腔癌組織における癌幹細胞マーカー発現の検索.2)ALDH1とSOX2を発現させた癌幹細胞様細胞株の樹立.3)癌幹細胞に特異的な転移に関連するmiRNA候補の探索と選定.4)上記で選定した転移に関連する候補miRNAの検証による転移特異的miRNAの同定前述のI.口腔癌患者の血液に着目した転移関連miRNAの選定と同定.1)口腔癌患者の血液に着目した転移関連miRNA候補の探索と選定に関して,口腔癌患者の根治手術後,担癌状態でないと考えられる時の血液1と,原発巣に再発がなく,転移が判明した時(体内に転移巣のみ存在している状態)の同一患者の血液2をサンプルとして,miRNAのマイクロアレイ解析(1と2)を行い,20例の解析結果から,発現差が3倍以上あるmiRNAを,候補miRNAとして選定する予定としていたが,解析結果にばらつきがあり候補miRNAが絞り切れていないため.令和元年度以降は以下のことを行う予定としている.転移に関連するmiRNAの機能解析を行う.具体的には,培養口腔癌細胞(SAS,CAL27, B88細胞)で同定したmiRNAの発現を調べる.インヒビターを用いて同定したmiRNAの機能を抑制,あるいはmiRNA発現プラスミドを用いて過剰発現させる.miRNAの発現を抑制あるいは強制発現した癌細胞のスフェロイド形成,足場非依存性増殖能をsoft agar assay,腫瘍形成能を調べ,癌幹細胞の特性を有しているか確認する.また,同定したmiRNAが治療の標的になり得るかを,マウスリンパ節転移モデルを用いて検討する.同定したmiRNAが高発現している癌細胞をヌードマウス咬筋内に移植し,同定したmiRNAを標的とした抗腫瘍効果と転移抑制効果を確認する.具体的には,腫瘍体積が100 mm3を超えた時点で,miRCURY microRNA Inhibitorとアテロコラーゲンを複合化させ,200μlの溶液としたものを,1週間に一度腫瘍近傍へ投与する.腫瘍体積を測定し,30日後に腫瘍を摘出する.転移巣での癌細胞の有無,腫瘍での同定したmiRNAの発現,癌幹細胞の表面マーカーの発現を比較検討する.また,癌細胞を尾静脈より注射し,肺に転移巣が形成される2週間後より,miRCURY LNA microRNA Inhibitorとアテロコラーゲンを2週間に4回投与する.その後,肺への転移数,肺重量を測定し,腫瘍内の同定したmiRNAの発現を定量する.以上の結果より,同定したmiRNAが遠隔転移に関与し,癌治療の標的となるか,動物実験で明らかにする.口腔癌の転移特異的なmicroRNAの同定を本研究の目的とする.転移特異的な候補miRNAの選定法として2つの提案がある.第1は同一癌患者の1術後非担癌状態時の血液と,2頸部リンパ節,遠隔転移時の血液を用いアレイ解析して候補miRNAを得る。I.口腔癌患者の血液に着目した転移関連miRNAの選定と同定.1)口腔癌患者の血液に着目した転移関連miRNA候補の探索と選定.2)上記で選定した転移に関連する候補miRNAの検証による転移特異的miRNAの同定II.癌幹細胞に着目した転移関連miRNAの選定と同定.1)口腔癌組織における癌幹細胞マーカー発現の検索.2)ALDH1とSOX2を発現させた癌幹細胞様細胞株の樹立.3)癌幹細胞に特異的な転移に関連するmiRNA候補の探索と選定.4)上記で選定した転移に関連する候補miRNAの検証による転移特異的miRNAの同定前述のI.口腔癌患者の血液に着目した転移関連miRNAの選定と同定.1)口腔癌

患者の血液に着目した転移関連miRNA候補の探索と選定に関して,口腔癌患者の根治手術後,担癌状態でないと考えられる時の血液1と,原発巣に再発がなく,転移が判明した時(体内に転移巣のみ存在している状態)の同一患者の血液2をサンプルとして,miRNAのマイクロアレイ解析(1と2)を行い,20例の解析結果から,発現差が3倍以上あるmiRNAを,候補miRNAとして選定する予定としていたが,解析結果にばらつきがあり候補miRNAが絞り切れていないため.令和元年度以降は以下のことを行う予定としている.転移に関連するmiRNAの機能解析を行う.具体的には,培養口腔癌細胞(SAS,CAL27, B88細胞)で同定したmiRNAの発現を調べる.インヒビターを用いて同定したmiRNAの機能を抑制,あるいはmiRNA発現プラスミドを用いて過剰発現させる.miRNAの発現を抑制あるいは強制発現した癌細胞のスフェロイド形成,足場非依存性増殖能をsoft agar assay,腫瘍形成能を調べ,癌幹細胞の特性を有しているか確認する.また,同定したmiRNAが治療の標的になり得るかを,マウスリンパ節転移モデルを用いて検討する.同定したmiRNAが高発現している癌細胞をヌードマウス咬筋内に移植し,同定したmiRNAを標的とした抗腫瘍効果と転移抑制効果を確認する.具体的には,腫瘍体積が100 mm3を超えた時点で,miRCURY microRNA Inhibitorとアテロコラーゲンを複合化させ,200μlの溶液としたものを,1週間に一度腫瘍近傍へ投与する.腫瘍体積を測定し,30日後に腫瘍を摘出する.転移巣での癌細胞の有無,腫瘍での同定したmiRNAの発現,癌幹細胞の表面マーカーの発現を比較検討する.また,癌細胞を尾静脈より注射し,肺に転移巣が形成される2週間後より,miRCURY LNA microRNA Inhibitorとアテロコラーゲンを2週間に4回投与する.その後,肺への転移数,肺重量を測定し,腫瘍内の同定したmiRNAの発現を定量する.以上の結果より,同定したmiRNAが遠隔転移に関与し,癌治療の標的となるか,動物実験で明らかにする.平成30年度に購入予定であった物品の多くは,以前より当教室で有している物品等を使用することで研究を遂行することが可能であった.そのため予定額より少額で済み、差額を次年度使用額とした.次年度は,転移に関連するmiRNAの機能解析を行う.そのために,培養液,培養ディッシュなど培養に関連した消耗品やmiRNAの機能を抑制,あるいはmiRNA発現プラスミドを用いて過剰発現させるための試薬が必要である.さらに得られたトランスフェクタントを動物実験に供し,miRNAが治療の標的になり得るかをin vivoで検討するために,動物実験に関する消耗品が必要である.
hook length posetの組合せ論的及び表現論的研究

本研究では「hook length posetの完全な分類」と「hook length posetの組合せ論的構造と表現論的意味付け」を目的とした研究を行い,主として次の結果が得られた.1.d-complete posetの拡張となるposet (leaf posetと呼ぶこととする)を導入し,leaf posetがhook length posetになることを証明した.また,その系としてCauchy identityの類似や拡張となるSchur functionの積公式を多数発見した.さらに,leaf posetがmultivaliable hook length posetになること証明した(hook length formulaの多変数化ができるposetをmultivaliable hook length posetと呼んでいる).また,既存の(multivaliable)hook length posetを利用した新しいhook length posetの構成法を発見し,元の個数が7個以下の全てのhook length posetはこの構成方法を用いて作られることが分かった。2.2003年に岡田聡一氏によって予想されていたCauchy型の行列式とSchur型のPfaffianに関する等式の証明を行った。1982年,B.Saganによって導入されたhook length posetは「P-partitionの母関数がq-整数を用いた積の形で表される」といった性質をもっている.他方,d-complete posetは,hook length posetとなることが知られており,15系列に完全に分類されている。また,d-complete posetのlinear extensionはCoxeter groupのminuscule elementの最短表示と対応している。以上のことを考慮した上で「hook length posetの完全な分類」と「hook length posetの組合せ論的構造と表現論的意味付け」を目的とした研究を行い,今年度は主として下記の結果を得た.1982年,B.Saganによって導入されたhook length posetは「P-partitionの母関数がq-整数を用いた積の形で表される」といった性質をもっている.他方,d-complete posetは,hook length posetとなることが知られており,15系列に完全に分類されている.また,d-complete posetのlinear extensionはCoxeter groupのminuscule elementの最短表示と対応している.以上のことを考慮した上で「hook length posetの完全な分類」と「hook length posetの組合せ論的構造と表現論的意味付け」を目的とした研究を行い,今年度は主として下記の結果を得た.1.d-complete posetの15系列の中のSwivels caseのq-hook length formulaの多変数化を行った.そのときに鍵となったのは,Swivels caseのq-hook length formulaの証明のときに得られた等式であった.そこで,鳥取大学の石川氏との共同研究により,q-hook length formulaの証明が未完成であったPumps, Tailed Pumps, Near Bats, Bat caseに対してその証明を行い,系として6次のPfaffianの積公式を得た.尚,このことにより,これまでの結果と合わせると,全てのd-complete posetに対するq-hook length formulaの証明ができたことになった.2.鳥取大学の石川氏,名古屋大学の岡田氏.リヨン大学のZeng氏との共同研究により,Cauchy DeterminantとSchur's Pfaffianの拡張として岡田氏によって2003年に予想されていた等式の証明およびそのさらなる拡張を行った.これらの拡張された等式はq-hook length formulaの多変数化の証明に利用できると期待している.

1982年,B.Saganによって導入されたhook length Posetは「P-partitionの母関数がq-整数を用いた積の形で表される」といった性質をもっている.他方,d-complete posetは,hook length posetとなることが知られており,15系列に完全に分類されている.また,d-complete posetのlinear extensionはCoxeter groupのminuscule elementの最短表示と対応している.以上のことを考慮した上で「hook length Posetの完全な分類」と「hook length posetの組合せ論的構造と表現論的意味付け」を目的とした研究を行い,今年度は主として下記の結果を得た.1.d-complete Posetの15系列の中のShapes, Insets, Swivels, Shifted shapes及びPumpsの拡張となる5種類のposetを導入し,それらの拡張されたposetがhook length posetとなることを証明した.さらに,それらのposetに対するq-hook length formulaの多変数化を行い,系として,これまで得られていなかったTailed Insets, Shifted Shapes, Banners, Pumps, Tailed Pumps, Near Bats, Bat caseのq-hook length formulaの多変数化が得られた.また,Cauchy identityの拡張や類似式となる複数個のSchur functionの積に関する新たな等式も得られた.2.これまで偶数次に対してのみ考えられていたHyper determinantを奇数次にまで拡張し,通常の行列式に対して成立している性質(行や列の交換,転置行列との関連等)のHyper版,及びLaplace展開公式のHyper版となる等式を得た,1982年,B.Saganによって導入されたhook length posetは「P-partitionの母関数がq-整数を用いた積の形で表される」といった性質をもっている.他方,d-completeposetは,hook length posetとなることが知られており,15系列に完全に分類されている.また,d-complete posetのlinear extensionはCoxeter groupのminuscule elementの最短表示と対応している.以上のことを考慮した上で「hook length posetの完全な分類」と「hook length posetの組合せ論的構造と表現論的意味付け」を目的とした研究を行い,今年度は主として下記の結果を得た.1.d-complete posetの15系列の中のSwivels Shiftedの拡張となるposetを導入し,そのposetがhook length posetとなることを証明し,その系としてCauchy identityの拡張となるSchur functionの積に関する新しい等式を得た.さらに,その新しく導入したposetのq-hook length formulaの多変数化を行い,系として,これまで得られていなかったSwivels Shifted, Tailed Swivels, Tagged Swivels, Nooksのq-hook length formulaの多変数化が得られた.この結果として,本研究課題の目的の一つである全てのd-complete posetに対するq-hook length formulaの多変数化ができた.
新しい作用機序をもつい天然物由来の抗がん物質の開発

本研究では、陸と海の動植物、微生物を素材として、従来の殺細胞活性に加えて、新しい分子標的(チロシンキナーゼ、チューブリン、P-糖蛋白質など)をスクリーニングに加え、新しい作用機序をもつ抗がん剤の探索と開発を目的とする。本年度は以下のような結果を得た。日本産イチイTaxus cuspidataの抽出物からTaxuspineKWを単離し、化学構造を明らかにした。ヒト卵巣癌の耐性発現株2780AD細胞において、Taxuspine Mはベラパミルよりやや弱いビンクリスチンの蓄積増強作用を示した。一方、Taxuspine SとTには、チューブリン脱重合阻害活性が幾分認められた。また、Taxuspine Q,S,Tは顕著な殺細胞活性を示した。放線菌Nocardiabrasiliensisより単離したBrasiliquinone Cにチロシンキナーゼ阻害活性(EGFレセプター、IC_<50>2.1×10^<-6>M;c-erbB-2、IC_<50>2.1×10^<-5>Mが認められた。また、海綿Jaspis stelliferaより単離したJaspiferalA,Bには、Cキナーゼ阻害活性(IC_<50>2.7×10^<-6>M)が認められた。渦鞭毛藻より単離した新規マクロリドAmphidinolide Q、海綿より分離した新規アルカロイドKeramaphidin BおよびManzamine L、新規ノルテルペノイドJaspiferal AおよびBC、新規アゼチジンアルカロイドPenaresidin AとB、放線菌より単離した新規ベンツアントラキノン化合物Brasiliquinone A,B,Cには、マウス白血病細胞L1210およびヒト上皮癌細胞KBに対して殺細胞活性が認められた。
急性骨髄性白血病におけるRAS経路関連遺伝子の意義

本研究は「急性骨髄性白血病の治療において、どのタイミングで同種造血幹細胞移植を行うべきか」という問いを解明することが目的である。今回はRAS経路関連遺伝子について、予後解析と機能解析を行う。研究方法は、AMLへの治療反応性をRAS経路関連遺伝子変異と他の遺伝子変異との併存ごとに次世代シークエンサーで解析し、RAS経路関連遺伝子変異の臨床的意義を調べる。さらには、in vitroでの機能解析で遺伝子変異の意義を明らかにする。
長鎖π共役配位子中の動的電荷移動を特徴とする遷移金属錯体の構築と機能

ビス(1,5-シクロオクタジエン)ニッケル(O)錯体Ni(cod)_2を用いた脱ハロゲン化重縮合により,ポリ(1,10-フェナントロリン-3,8-ジイル)(PPhen)及びその5,6-ジアルコキシ誘導体(PPhen(5,6-OR))を合成した。また,これらのポリマーの構造をIR, NMR,元素分析により確認した。電気化学的測定により,これらのポリマーが電子受容性のポリマーであることが分った。また,これらの長鎖π共役系を有するポリマー配位子はルテニウムや銅等と金属錯体を形成することが分った。ルテニウムとの金属錯体においては,PPhenに基づく紫外可視(UV-vis)吸収が353nmに見られ、またMLCT吸収帯が440nmに見られた。さらに,PPhen系ポリマーの新しい展開をはかるために,ポリ(2,2'-ビピリジン-5,5'-ジイル)において2,2'-ビピリジル間が-N=N-基,-O-基,-NHCONH-基で結ばれた,新しい長鎖π共役配位子を合成した。-N=N-基で結ばれたポリマーはAg^+/Agに対して-1.38Vで還元され,最も電気化学的還元を受け易い長鎖π共役配位子であることが分った。また,チオフェンとチアゾールから成る位置規則性電荷移動型共重合体を合成し,この共重合体中の動的性質を持つ電荷による光学的物性及び固体秩序構造形成能を有らかにした。
噛みごたえのある固形食物を用いた高齢者の咀嚼・嚥下機能維持・改善プログラムの開発

本研究は、地域高齢者が日常的に取り組めるような「噛みごたえのある固形食物」を用いた新たな咀嚼・嚥下機能維持・改善プログラムを開発する目的で実施している。平成28年度の計画として、予備調査1・2を行い、継続可能な咀嚼・嚥下機能訓練の訓練内容を確立し、嚥下体操・口腔体操のモデルとなる映像を作成予定である。平成28年度の研究実施状況は、プレパイロットスタディとして、地域高齢者の摂食機能の実態調査も兼ねて、口腔ケア・嚥下体操の指導が地域の高齢者に対してどのような影響を及ぼすのか、健康管理への意識の変化の探索的介入研究を実施した。研究テーマ「口腔ケアおよび嚥下体操の指導がもたらす地域高齢者の摂食機能に対する健康管理への意識の変化」を倫理審査申請後、介入を行った前後で調査を行った結果、地域在住の高齢者72名から有効回答が得られた。介入前のアンケート結果から、唾液腺マッサージ、嚥下体操の認知度は約40パーセント程度と低く、地域高齢者の多くはウォーキングや体操等の健康維持のための運動を実施しているが、摂食機能の維持・向上に対する健康管理行動は、歯磨きにとどまっていた。介入後には、歯磨きを実施しようとする回数が有意に増加するなど、健康意識の高まりが認められた。現在この研究結果に関して、論文執筆中である。この研究により、高齢者への指導を行う際には、ゆっくりと時間をかけて丁寧に説明を行ったり、大勢に対するよりも数名程度に研究スタッフが1名がついて、研究に関する説明や指導を行うようにする、また理解を確認しながら進めていくなどの留意事項が明らかになったため、予備調査1・2で活かしていくことにする。また予備調査1・2に関して、倫理審査委員会の承認を得ており、リクルート活動中であり、平成29年度7月8月にかけて実施予定である。当初の計画では、平成28年度に予備調査1・2を実施している予定であったが、現在予備調査1・2の倫理審査委員会承認後のリクルート活動中であり、リクルート活動に時間を要している。平成29年度に予備調査1・2を実施し、継続可能な咀嚼・嚥下機能訓練の訓練内容を確立後、嚥下体操・口腔体操のモデルとなる映像を作成する計画に修正を行う。可能であれは、10月3月までの期間に予備調査1・2の論文を執筆し、第2段階の研究を実施する予定である。平成29年度に予備調査1・2を実施し、DVDを作成するように計画修正する。研究にかかる消耗品購入やDVDの作成費用等を次年度使用額(1,470,476円)で計上する。次年度使用額として、【物品費】本年度行う予定であった予備調査1・2が、症例者数が目標に達せず実施できなかったため、平成29年度に行い、調査で使用する消耗品および食品の購入費用とDVDの作成費用に充てる。【謝金】本年度行う予定であった予備調査1・2が、症例者数が目標に達せず実施できなかったため、平成29年度に行い、統計依頼費用に充てる。

可能であれは、10月3月までの期間に予備調査1・2の論文を執筆し、第2段階の研究を実施する予定である。当初平成28年度に計画していた予備調査1・2が、リクルートの過程で難航しているため実施できなかった。平成29年度の実施に延期されたことにより、予備調査1・2の研究に要する費用やDVD作成費用が平成29年度に必要となるため、次年度使用額が生じた。平成29年度に予備調査1・2を実施し、DVDを作成するように計画修正する。研究にかかる消耗品購入やDVDの作成費用等を次年度使用額(1,470,476円)で計上する。次年度使用額として、【物品費】本年度行う予定であった予備調査1・2が、症例者数が目標に達せず実施できなかったため、平成29年度に行い、調査で使用する消耗品および食品の購入費用とDVDの作成費用に充てる。【謝金】本年度行う予定であった予備調査1・2が、症例者数が目標に達せず実施できなかったため、平成29年度に行い、統計依頼費用に充てる。
EBV関連腫瘍の実態解明のための病理学的・分子病理学的研究

1.慢性膿胸患者に発生する膿胸関連リンパ腫(PAL)はほぼ全例がEBV陽性であり、EBNA2を発現している。又、LMP-1発現細胞も少なからずみられる。このようなEVNA2、LMP-1発現PAL細胞が宿主のcytotoxic T細胞による免疫学的監視からのがれる機序として、腫瘍細胞によって分泌される免疫抑制性サイトカインIL-10が関与している可能性がある(Am J Pathol 1997)。又、PALには高率にp53遺伝子の変異が観察される(Cancer Res in press)。3.胃癌におけるEBV陽性率を大阪と中国蘇州で検討したところ7-9%と同様であった。EBV認識に関係するといわれるHLA class IのうちA2の発現頻度について調べたところ、EBV陽性例と陰性例間で相違はなかった。(Int J Cancer 1997)4.臓器移植患者に悪性腫瘍が多く発生するのは使用される免疫抑制剤の影響と考えられている。免疫抑制剤投与による免疫抑制状態下ではEBV潜伏感染細胞が排除されず、悪性腫瘍の発生に至る可能性が考えられる。本邦の腎移植患者1744例を調べたところ46例(2.6%)に悪性腫瘍の発生がみられた。EBVゲノムの検出されたのは悪性リンパ腫のみであった。(Int J Cancer 1997,J Cancer Res Clin Oncol 1997)(1)琉球大学および大阪大学の咽頭癌におけるEBVゲノムの有無をしらべたところ,いづれの地区でも上咽頭癌にのみ高率にゲノムを認めた.中,下咽頭癌にはEBVゲノムのみられる症例は一例もなかった.多変量解析により,EBVゲノムの有無と有意に関連している因子を調べたところ部位のみが重要な因子であることが判明した.今後は何故,上咽頭眼のみでEBVによる発癌が起るかということについての検討が必要となる.(2)従来,EBV関連腫瘍としてよく知られているのは悪性リンパ腫と上咽頭,唾液腺,胃,胸などから発生する癌である.一方,AIDSなど免疫不全患者に発生するリンパ腫に高率にEBVゲノムが検出されることが知られている.そこで全国調査により腎移植患者に発生した悪性腫瘍を収集し,EBVゲノムを調べた.腎移植に際して免疫抑制剤が投与されている.70例について調べたことろ,リンパ腫においてのみEBVゲノムが検出された.癌は全てEBVゲノム陰性であった.(3)中国蘚州および大阪地区の胃癌におけるEBVゲノムの有無を調べたところ,中国の8%,大阪の6%にEBVゲノムをみとめた.latent membrane protein-1の発現はいづれも陰性でLat Iのパターンを示した.EBV感染細胞の排除に関係していると考えられているHLA-A2を調べたところ64%の症例はA2型を示した.しかし,A2型と他のHLA型の間において,腫瘍周囲のリンパ球浸潤の程度に差はなかった.(4)EBV関連リンパ腫の一つである鼻腔リンパ腫におけるEBVゲノムの有無をNK細胞関連マーカーであるCD56発現との関係において調べた.又,EBVの亜型(A,B型)も調べた.その結果,CD56発現症例の85%がゲノム陽性であり,この両者の密接な関連が示された.EBVの亜型は大部分がA型であった.スイスからの報告では約半数がB型であったと報告されていることから,鼻腔リンパ腫のEBV亜型には地域差のあることが考えられる.1.慢性膿胸患者に発生する膿胸関連リンパ腫(PAL)はほぼ全例がEBV陽性であり、EBNA2を発現している。(Int J Cancer 1997,J Cancer Res Clin Oncol 1997)
最悪クラス台風・高潮の予測モデル開発と再現確率推定

我が国の沿岸災害の危機管理の目標となる最悪クラスの台風・高潮の推計のため,台風・高潮シミュレーションと将来気候予測データを用いた台風モデルをそれぞれ開発し,両者を融合させた最悪クラスの台風・高潮予測手法を確立した.これらの数値予測モデルを用いて,最悪クラスの台風・高潮予測モデルの開発,3大湾等における最悪クラス台風の高潮の推定,台風・高潮の再現確率およびリスクの算定を行った.・最大クラスの台風・高潮予測の開発:最大クラス台風による高潮を推定する2種類のモデルを開発した。ひとつは、海面での運動量輸送において風速制限を行い、波浪・流れの相互作用による波浪依存する海面抵抗係数を推算するもので、高潮と波浪に相互作用の影響を調べた。もう一つは3次元高潮モデルの開発であり、大気、高潮、波のモデル間の不確実性を考慮するために開発するもので、結合モデル間の一方向もしくは双方向の結合条件の違いによって、台風下の大気と海洋の推算に与える影響を検討した。別の方法として、大気再解析値や気候モデル出力から台風最大可能強度(MPI:Maximum Potential Intensity)等の場の推定を行った。・3大湾等における最大クラス台風の高潮予測:過去の大規模高潮氾濫が検証可能な名古屋大都市圏(伊勢湾)に高潮モデルを適用し、キャリブレーションを行った。過去の堤防高さおよび地形を用い、浸水範囲および名古屋港の観測潮位の再現を行った後、現在地形を用い、現状の防御レベルにおいて高潮氾濫解析を実施した。ついで、気候変動による中心気圧の緯度依存の変化により、伊勢湾台風を強度化させ、将来気候における氾濫解析を行った。さらに、経験的台風モデルを用い、伊勢湾台風の経路を平行移動および回転させ、簡易的に最大クラス高潮が起こる台風経路を算出した。・最大クラス台風・高潮の再現確率の算定:観測台風資料および気象研全球大気気候モデルからの台風資料、加えて海面温度の情報を中心気圧の算定に取り込む、確率台風モデルを開発した。3大湾に対しては過去の台風来襲に関する統計的特性がどの程度高精度に再現されるかの検討を行った。精度検証の後、1万年程度の台風のシミュレーションを行い、3大湾に来襲する最大クラス台風の再現確率をはじめ、各再現期間の台風規模を推定できるアルゴリズムを開発した。計画通り、順調に進んでいる。研究論文を発表している。最悪クラスの台風・高潮予測モデルの開発前年度に引き続き、2Dおよび3D高潮モデルの開発を行うとともに、過去台風・高潮を対象に精度検証とモデル改良を進めた。MRI-AGCM3.2から抽出した極端台風に加えて、過去の巨大台風経路を平行移動・回転させた模擬台風の作成とその再現性を調べた。これらの模擬台風と前年度に設定した最悪クラス台風との関連を調べた上で、リスク評価目標として最悪クラス台風を設定した。また、再解析値による過去からGCMによる2100年末の将来予測結果の気候値より、気候学的最悪クラス高潮ポテンシャルの推定を行い、長期的な最悪クラス台風・高潮の長期評価を行った。3大湾等における最悪クラス台風の高潮予測上記の最悪クラスの台風に対する高潮シミュレーション対する高潮計算を行って、最悪高潮について検討した。現在気候における最悪クラス台風の出現確率や各出現確率を有する代表台風を設定した.これにより、高潮ハザード曲線の算定を行った。また,将来の最悪クラス台風の物理的条件に相当する台風シナリオを確率台風モデルの計算結果から抽出して,それらの再現年数についても考察した.計画通り順調に進んでいる.論文発表を行った.・評価モデル開発前年度に引き続き、2Dおよび3D高潮モデルの開発を行うとともに、過去台風・高潮を対象に精度検証とモデル改良を進めた。再解析値による過去からGCMによる2100年末の将来予測結果の気候値より、気候学的最悪クラス高潮ポテンシャルの推定を行い、長期的な最悪クラス台風・高潮の長期評価を行った。・最悪クラス台風・高潮の評価ついで,最悪クラスの台風に対する高潮シミュレーション対する高潮計算を行い、最悪高潮について検討した。現在気候における最悪クラス台風の出現確率や各出現確率を有する代表台風を設定した.最悪クラス台風の物理的条件に相当する台風シナリオを確率台風モデルの計算結果から抽出して,それらの再現年数についても考察した.3大湾における最悪クラス高潮のシミュレーション結果の見える化として、高潮ハザードマップおよび高潮ハザード曲線(被害関数)を推定した。さらに、現在気候下および将来気候下での最悪クラス高潮とその浸水範囲、高潮被害リスクの変化についても見える化を行った。・最悪クラス高潮のリスクマネジメント高潮予測モデルを3大湾以外の日本の主要な高潮脆弱地域に適用し、危機管理目標としての高潮浸水ハザードマップを作成できるような数値データを作成した。昨年度までの研究結果を踏まえ,再現確率に対する台風規模、台風規模に対する再現確率が求められるデータを作成した。特に台風予測の不確実性が及ぼす種々の影響についても,再現確率の信頼区間に反映させることで評価した。我が国の沿岸災害の危機管理の目標となる最悪クラスの台風・高潮の推計のため,台風・高潮シミュレーションと将来気候予測データを用いた台風モデルをそれぞれ開発し,両者を融合させた最悪クラスの台風・高潮予測手法を確立した.これらの数値予測モデルを用いて,最悪クラスの台風・高潮予測モデルの開発,3大湾等における最悪クラス台風の高潮の推定,台風・高潮の再現確率およびリスクの算定を行った.今年度得られた結果をもとに、研究グループ内で連携を図りつつ、高潮予測モデルをもとに、確率台風モデルを用いて、最悪クラスの規模と再現確率の推定方法の確率を目指す。

今年度までの結果をもとに,高潮の発生頻度・強度についての長期評価を行う.29年度が最終年度であるため、記入しない。海岸工学29年度が最終年度であるため、記入しない。
低分子量酵素キチナーゼRS-9Kの活性発現機構

米ヌカより単離・精製したキチナーゼRS-9Kのアミノ酸配列に基づき、BamHI切断部位を末端に持つN末端側およびC末端側のプライマーを合成した。イネ子葉からゲノムDNAを抽出し、合成したプライマーを用いてPCR法によりキチナーゼ9KのcDNAを増幅した。得られたキチナーゼRS-9K DNAを配列分析用のベクターにサブクローニングし、DNA Sequencerにて塩基配列を分析して、キチナーゼRS-9Kのアミノ酸配列と相同な塩基配列を持つベクターを選別した。このベクターを導入して形質転換した大腸菌を培養し、プラスミドDNAを抽出後、制限酵素BamHIによってBamHI-9K DNAを切り出した。得られたキチナーゼDNAはトランスファーベクターpAcGP67aにライゲーションした。これをヨトウガ細胞に感染するウイルスDNAとco-transfectionすることにより、組み換えウイルスを作成した。しかし、この系によるタンパク質の発現は認められなかった。次に大腸菌発現系を用いるために、キチナーゼDNAをpET vector,pMAL vectorにそれぞれライゲーションし、発現条件で発現を試みた。しかし、キチナーゼの発現は認められなかったため、グルタチオンS-トランスフェラーゼ(GST)とのフュージョンタンパク質として大腸菌で発現する系を採用した。発現したタンパク質はグルタチオンカラムにより、1ステップで単離・精製された。発現タンパク質は、SDS-PAGEにより、フュージョンタンパク質であることが確認された。精製したGST-9Kフュージョンタンパク質はPreScission^<TM>ProteaseによりGSTとキチナーゼ9Kを切断し、ゲルろ過、逆相クロマトグラフィーを用いることに精製した。しかし、精製リコンビナントキチナーゼ9Kにはキチナーゼ活性はなく、現在、発現タンパク質を活性型で発現する、酵母(Pichia)による発現系による発現を試みている。米ヌカより単離・精製したキチナーゼRS-9Kのアミノ酸配列に基づき、Bam HI切断部位を末端に持つN末端側およびC末端側のプライマーを合成した。イネ子葉からゲノムDNAを抽出し、合成したプライマーを用いてPCR法によりキチナーゼのcDNAを増幅した。得られた9K DNAを配列分析用のベクターにサブクローニングし、DNA Sequencerにて塩基配列を分析して、キチナーゼRS-9Kのアミノ酸配列と相同な塩基配列を持つベクターを選別した。このベクターを導入して形質転換した大腸菌を培養し、プラスミドDNAを抽出後、Bam HI-9K DNAを切り出し、pET発現ベクターへ挿入しpET発現ベクターにより大腸菌を形質転換し、細胞破砕液をSDS-PAGEで発現タンパク質を検索したが、活性型タンパク質を確認することはできなかった。次ぎに、ヨトウガ細胞に感染するウイルスDNAをベクターとするバキュロウイルス発現系にBam HI-9K DNAを挿入して、組み換えウイルスを作成した。しかし、この系によるタンパク質の発現量も微量であった。十分量のタンパク質の発現を確保するため、マルトースバインディングプロテイン(MBP)とのフュージョンタンパク質として大腸菌で発現する系を採用した。発現したタンパク質はマルトースカラムにより、1ステップで単離・精製された。SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動およびドットブロット法により、フュージョンタンパク質であることが確認された。

得られたキチナーゼRS-9KDNAを配列分析用のベクターにサブクローニングし、DNA Sequencerにて塩基配列を分析して、キチナーゼRS-9Kのアミノ酸配列と相同な塩基配列を持つベクターを選別した。このベクターを導入して形質転換した大腸菌を培養し、プラスミドDNAを抽出後、制限酵素BamHIによってBamHI-9KDNAを切り出した。得られたキチナーゼDNAはトランスファーベクターpAcGP67aにライゲーションした。これをヨトウガ細胞に感染するウイルスDNAとco-transfectionすることにより、組み換えウイルスを作成した。しかし、この系によるタンパク質の発現は認められなかった。次に大腸菌発現系を用いるために、キチナーゼDNAをpET vector,pMAL vectorにそれぞれライゲーションし、発現条件で発現を試みた。しかし、キチナーゼの発現は認められなかったため、グルタチオンS-トランスフェラーゼ(GST)とのフュージョンタンパク質として大腸菌で発現する系を採用した。発現したタンパク質はグルタチオン力ラムにより、1ステップで単離・精製された。発現タンパク質は、SDS-PAGEにより、フュージョンタンパク質であることが確認された。精製したGST-9Kフュージョンタンパク質はPreScission^<TM> ProteaseによりGSTとキチナーゼ9Kを切断し、ゲルろ過、逆相クロマトグラフィーを用いることに精製した。しかし、精製リコンビナントキチナーゼ9Kにはキチナーゼ活性はなく、現在、発現タンパク質を活性型で発現する、酵母(Pichia)による発現系による発現を試みている。
歯根膜形成におけるTGF-βならびにBMPの作用に関する研究

歯根膜を形成する細胞は上皮鞘細胞と歯小嚢間葉細胞の接触によって、始めて歯小嚢間葉細胞が機能分化し、この接触により上皮鞘細胞が歯小嚢間葉細胞の"道の案内者"となっている。この時、基底膜を貫通して接触が起こる部位には、歯小嚢間葉細胞の表面にFNが濃縮し、上皮鞘細胞が接着し易くなり、両細胞が接着し、間葉細胞間の情報伝達がおこり、上皮細胞の間隙の拡大が派生し、歯小嚢間葉細胞の象牙質表面への到達を可能にする。歯根膜のコラーゲン線維の形成、維持に与るのは歯根膜細胞と呼ばれる間葉細胞である。歯胚の歯根を形成するヘルトウイヒの上皮鞘の上皮細胞に平行に配列していた間葉細胞が、ヘルトウイヒの上皮鞘の内層の上皮細胞の間隙が広くなり歯根表面に接触すると,歯小嚢間葉細胞にTGF-βが認められ,直角に配列する歯根膜のコラーゲン線維を形成する歯根膜細胞に分化する。そこで、歯小嚢間葉細胞が分化と増殖をすることにより、規則的な配列を歯根膜が形成されるようになった。さらに、骨誘導蛋白であるBMPがヘルトウイヒの上皮鞘の上皮細胞間隙が広がると出現する.特にマラッセ上皮遺残には強く認められた。