hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
リン酸エステル構造をもつ高分子ゲルのイオン認識機能を利用した希土類元素の相互分離

リン酸エステル抽出剤を導入した感温性ゲルを合成し、硝酸塩を含む水溶液からの希土類元素の抽出分離を行った。リン酸エステルには末端にビニル基を有する2-metacrloxyethylacidphospate(MR)を用い、高分子構造体にはn-isopropylacrylamide(NIPA)及びAclyric acid(AA)を用いた。AA-MRゲルは温度に対して殆ど抽出能が変化しなかったが、NIPA-MRゲルは温度相転移を示し、33°C以上の収縮状態で希土類元素を抽出し、低温の膨潤状熊で溶離した。1040°C程度の温度スイングで抽出・溶離操作が可能である。また、NIPA-MRゲルの希土類元素の分離能は、高温での抽出剤固有の分離能と、低温でのゲルのコンフォメーション変化に伴う錯体の分解において生じる分離能よって決定された。NIPA-MRゲルに対する希土類元素の抽出機構を調べたところ、ゲルの膨潤、収縮いずれにおいても抽出の化学量論式は単純なイオン交換反応式によって記述できた。抽出定数から算出したリン酸エステルの利用率は収縮状態で80%と高く、膨潤状熊で30%まで低下した。更に、温度スイング試験を行ったところ、膨潤状熊、収縮状態での希土類元素の分配比はスイング回数によって殆ど変化しなかった。NIPA-MRゲルを構成する高分子ネットワークのコンフォメーションは温度条件だけ決定され、膨潤・収縮を繰り返しても再現されることがわかった。このことは、リン酸エステルを導入した感温性ゲルによる新しい希土類元素の抽出プロセスの構築が可能であることを示唆している。リン酸エステル構造を有する高分子ゲル合成のための準備としてアルキル基構造の異なるリン酸ジエステルの合成を試み、希土類元素間の選択係数とアルキル基構造の関係を検討した。リン酸ジエステルは氷冷下でアルコールによる塩化ホスホニルのジエステル化反応と加水分解反応を利用して合成した。アルコールには直鎖炭化水素を有するオクタノール、フェニル基を有するノニルフェノール、シクロヘキシル基をもつシクロヘキサノールを用いた。合成されたリン酸ジエステルを塩酸、水酸化ナトリウム、シリカゲルカラムで精製し、フーリエ変換型赤外分光装置(本年度購入)や^<31>P-NMRを用いてリン酸ジエステルの存在を確認した。次にリン酸ジエステルをトルエンで0.1mol/dm^3に希釈し、700mg/dm^3のLa(III),Sm(III),Yb(III)を含む水溶液を接触させて、希土類元素の抽出実験を行った。その結果、フェノール、シクロヘキシル基など立体障害を有するアルキル基構造ほど、重希土類元素に対する高い選択性を有すること、重希土類元素に対する選択係数が直鎖アルキル基<ノニルフェニル基<シュクロヘキシル基の順であることが明らかになった。工業規模で利用あるいは利用が検討されているD2EHPA(ジ(2-エチルヘキシル)リン酸)やDHDECMP(dihexyl-N,N-diethylcarbamoylmethyl phosphonate)に比べて重希土元素に対する高い選択性が得られた。立体障害性を有するバルキーなアルキル基を有するリン酸ジエステルが重希土類元素に対してイオン認識性を有することが確認できた。現在、4-ビニルフェノールをアルコールとして、アルキル基の末端にビニルをもったリン酸ジエステルの合成を行っており、スチレン系ポリマーへのリン酸ジエステルの導入を試みている。リン酸エステルには末端にピニル基を有する2-metacrloxyethylacidphospate(MR)を用い、高分子構造体にはn-isopropylacrylamide(NIPA)及びAclyric acid(AA)を用いた。

AA-MRゲルは温度に対して殆ど抽出能が変化しなかったが、NIPA-MRゲルは温度相転移を示し、33°C以上の収縮状態で希土類元素を抽出し、低温の膨潤状態で溶離した。1040°C程度の温度スイングで抽出・溶離操作が可能である。また、NIPA-MRゲルの希土類元素の分離能は、高温での抽出剤固有の分離能と、低温でのゲルのコンフォメーション変化に伴う錯体の分解において生じる分離能によって決定されることがわかった。NIPA-MRゲルに対する希土類元素の抽出機構を調べたところ、ゲルの膨潤、収縮いずれにおいても抽出の化学量論式は単純なイオン交換反応式によって記述できた。抽出定数から算出したリン酸エステルの利用率は収縮状態で高く、膨潤状態で著しく低下した。更に、温度スイング試験を行ったところ、膨潤状態、収縮状態での希土類元素の分配比はスイング回数によって殆ど変化しなかった。NIPA-MRゲルを構成する高分子ネットワークのコンフォメーションは温度条件だけで再現できることがわかった。このことは、リン酸エステルを導入した感温性ゲルによる新しい希土類元素の抽出プロセスの構築が可能であることを示唆している。
外国人高齢者障害者の生活支援に関する調査～外国人福祉委員制度の確立にむけて

在日コリアンや中国からの帰国者は、言葉や習慣の壁を持って地域で生きている。中でも、高齢者、障害者は特別な生活支援が必要であり、その充実の方策を探る調査を京都市において行った。調査の結果、「福祉関係者を知っている人」は、日本人43%、コリアン32.6%、中国帰国者20%、「不幸感をもつ人」は、日本人6.4%、中国帰国者10%、コリアン20%であった。また、「幸福感をもつ人」は、日本人44.5%、コリアン35.7%、中国帰国者10%であった。その他のデータからも、日本に暮らす外国籍の人や外国の風習を身につけた人たちの生活支援の必要性と地域の人たちとつなぐ機能の必要性を明らかにしえた。今年度は、中国残留孤児帰国者が集住する京都市伏見区小栗栖団地と、在日コリアンが戦前から集住する京都市南区東九条においてアクション・リサーチを行った。調査員には外国人福祉委員をはじめ、立命館大学、同志社大学、龍谷大学、大阪人間科学大学、大阪大学の学生らが59名参加した。参画型の調査過程重視の観点から、当初、調査の主旨、調査方法について自由討儀を行い、共通認識を形成した。その結果、地域の日本人高齢者も含めて調査する意義が確認された。調査票を検討し完成させた。自治会と何度も話し合い、協働調査を行った結果、強い信頼関係が形成された。これは、調査成果を今後の多文化共生の地域づくりに生かす上で高く評価できる。地域への説明と調査員へのオリエンテーションに時間をかけた。調査員が民生委員や老人福祉委員とともに戸別訪問をして、40-60分の聞き取りを行った。これは、生活の実態と思いを理解する上で大きな意義があった。小栗栖団地では、市営住宅136人、うち残留孤児14人、日本語教室26人を調査対象とした。そのうち、面談できたものは、それぞれ96人、9人、10人であった。東九条は、山王学区では趣旨が十分伝わらず、調査主体を代え調査票を活かしつつ調査委託を行った。陶化学区には大きな協力を得た。300名の高齢者を無作為に抽出し、聞き取った者は175人、調査拒否53人、調査不能37人、長期不在35人であった。そのうち在日コリアン高齢者は、43人、帰化した者2人であった。民生委員を知らない人が多いこと、近所づきあいが希薄になっていること、在日コリアンを露骨に嫌う人、中国帰国者と仲良くなれないと訴える人、など具体的な課題を顕現化することができた。地域包括支援センターの協力を得たことや、支援NGOとの協働が進んだこともアクション・リサーチの成果と言える。今後、調査結果を分析するほか、同じ調査票を使って、民族団体会員向けの調査を行う。平成23年度は、前年度に行った中国残留孤児帰国者が集住する京都市伏見区小栗栖団地と、在日コリアンが戦前から集住する京都市南区東九条においてアクション・リサーチを行った結果の分析を行った。また、5月に民族団体の協力を得て、東九条において在日コリアンだけの追加調査を同じ調査票を用いて行った。回収データ64人、拒否や不在が14人、回収率は82.1%であった。調査の結果、民生委員より肌理細やかに地域の高齢者の見守りを行っている「老人福祉員」を知っている人と、「幸福感」が比較的高い人が重なっていることが判明した。福祉関係者を知っている高齢者は、日本人43%、コリアン32.6%、中国帰国者20%であった。言葉や習慣の違いが壁になっていることが明らかとなった。不幸感を持っている高齢者は、日本人6.4%、中国帰国者10%、コリアン20%、幸福感を持っている高齢者は、日本人44.5%、コリアン35.7%、中国帰国者10%であった。以上の調査結果からも外国人福祉委員の必要性が明らかとなった。また、地理情報システム(GIS)を用いて分析したところ、「困ったことがたくさんあるにもかかわらず相談する人がいない」という地域が浮かび上がってきた。このような地域格差も意識しつつ、地域の見守りシステムを構築していかねばならない。平成23年8月に専門機関や研究者中心の調査結果報告会を開催した。平成23年10月に陶化学区住民向けの調査報告会を開催した。平成23年11月に山王学区住民向けに調査結果の報告会を行った。平成23年12月に小栗栖市営団地住民向けの調査報告会を開催した。いずれも協力いただいた住民には高い評価をもらった。

かつ、コリアンの高齢者や中国残留孤児帰国者の置かれている状況と外国人福祉委員の意義について理解を促進した。平成23年2月、中国残留孤児帰国者が集住する京都市小栗栖地区と、在日コリアンが集住する東九条地区においてアクション・リサーチを行った。外国人福祉委員をはじめ、学生らが民生委員や老人福祉委員とともに戸別訪問をして、4060分の聞き取りを行った。小栗栖地区では、120人のデータを回収した。東九条は、山王学区では住民の協力により225人のデータを回収した。陶化学区では、聞き取った者は175人であった。そのうち在日コリアン高齢者は43人、帰化した者2人であった。5月に同じ調査票を使って、民族団体会員向けの調査を行い、64人のデータを回収した。生活の幸福感を7段階で答えてもらったところ、どちらかと言えば不幸と答えた者は、日本人で6.4%、中国帰国者で10%、コリアンで20%だった。これに対して、どちらかと言えば幸福と答えた者は、日本人で44.5%、コリアンで35.7%、中国帰国者で10%であった。中国帰国者の厳しい状況がうかがわれる。幸福感との多変量解析から、老人福祉員を知っていることが、幸福感と深く関連することが明らかとなった。また、外国人福祉委員制度の重要性が浮かび上がった。当該委員と民生委員、老人福祉員、NPO、行政、大学の連携を進め、地域活動主体のネットワーク形成を図っていく必要性が確認された。また、小栗栖の調査を契機に、習慣が違うため、引きこもりがちの中国帰国高齢者を対象に、帰国者の2世・3世とともに、誘いかけて集まる会が創設され、NHKテレビや京都新聞に取り上げられた。平成24年度は、京都市、宇治市、八幡市の民生児童委員の悉皆調査を行い、1自治会運営のノウハウの開発、2住民による高齢者見守りと福祉サービス機関、警察や消防署との連携の仕組み作り、3離れて暮らす子どもとの連携の仕組み作り、などに大学や学生が住民主体で協力していく必要性が明らかとなった。1調査回収率が8割り近くあった。2外国人福祉委員の参画によって委員としての仕事内容の理解とモチベーションがあがった。3地域住民に調査結果をポイントを押さえて返す(報告会を開催する)ことにより、地域住民との協働のための関係基盤が形成された。4大学生の関わり方に関して方向性が確認された。5地域の諸団体や福祉サービス機関、社会福祉協議会、行政との連携の基盤が形成された。6研究者と地域の民生委員、老人福祉員との座談会を開催することができ、地域の歴史の中で民生委員が培われてきた経緯を理解することができた。24年度が最終年度であるため、記入しない。地域の高齢者の見守りシステム全体の中で、外国人福祉委員の役割と機能を位置づけていくために、当初の計画通り、民生委員の調査を実施したい。また、外国人福祉委員と民生委員、老人福祉員との座談会を、相互理解を推進するために開催したいと考えている。
マイクロサテライトマーカーによるChattonellaの生活史解明

Chattonella3種115株の核相解析を行った結果、すべてがヘテロ接合体であり、栄養細胞は接合(有性生殖)で生じたと考えられた。また小型細胞の細胞レベルの核相解析を行った結果、ヘテロ接合体とその半数体の2タイプの存在が明らかになった。減数分裂で小型細胞が形成され、小型細胞同士の接合の結果としてシストが形成される可能性に加えて、ヘテロ接合体の小型細胞から直接シストが形成される経路が推察された。個体識別の可能なマイクロサデライトマーカーおよび分子生物学的手法を利用して、有害植物プランクトンの一種であるChattonella(ラフィド藻)の生活史の全容を解明することを目的として研究を進めた。具体的には、Chattonellaの生活史における各ステージの細胞(栄養細胞、小型細胞、シスト)を分離して、各々の細胞の核相をマイクロサテライトマーカーで直接的に決定し、これにより減数分裂時期と複相化の時期を特定するというアプローチをとった。またシストからの発芽細胞において無性的複相化が起きるという過去の報告の検証も併せて行うこととした。平成19年度は、C.antiquaの栄養細胞と小型細胞をマイクロピペットによって単離し、1細胞ごとにマイクロサテライトマーカーによる解析を行った。その結果、すべての栄養細胞において、いずれかのマイクロサテライトマーカーにより2本バンドが検出された。このことは栄養細胞が2倍体でヘテロ接合体であることを示唆しており、接合の結果生じた可能性を示唆するものであった。小型細胞については、1本バンドのみが検出される小型細胞(タイプ1)と2本バンドを示す細胞(タイプ2)の存在が明らかとなった。タイプ1の小型細胞は、減数分裂の結果生じたと考えられた。タイプ2の小型細胞は栄養細胞と同じ核相(2倍体ヘテロ接合体)と考えられ、接合を経ずに栄養細胞から直接シスト(休眠細胞)へ変化する可能性が考えられた。単細胞レベルのマイクロサテライトマーカー解析が核相解析に有効であることが明らかになったことから、今後は同手法を自然界からのシストあるいは実験的に誘導したシストに適用することで、シストの核相解析を行い、Chattonellaの生活史の全容を明らかにする予定である。Chattonella antiqua DEM-124株の栄養細胞17細胞と小型細胞20細胞、C.antiqua DEM-3011株の栄養細胞17細胞と小型細胞19細胞をマイクロピペット法により単離し、全ゲノム増幅キット(QIAGEN社製)を用いて全ゲノムを増幅した後、6セットのマイクロサテライトマーカーで遺伝子型を決定した。その結果、解析したすべての栄養細胞において、マイクロサテライトマーカーによる増幅断片が2本検出され、栄養細胞が2倍体ヘテロ接合体であることが示唆された。すなわち栄養細胞は、接合の結果生じたことが強く示唆された。一方、小型細胞の解析から、マイクロサテライトマーカーによる増幅断片が1本しか検出されないタイプ(DEM-124株の8細胞とDEM-3011の9細胞)と栄養細胞と同じ2本の増幅断片をもつタイプ(DEM-124株の12細胞とDEM-3011の10細胞)の存在が明らかとなった。前者のタイプは、減数分裂の結果生じた可能性が、そして後者は、減数分裂を行う前の段階の可能性とそのままシスト化する可能性が考えられた。瀬戸内海の海底堆積物より分離した8細胞のシストの解析では、いずれもマイクロサテライトマーカーによる増幅断片が得られなかった。以上の結果から、Chattonellaは減数分裂により栄養細胞から小型細胞へと移行し、小型細胞同士の接合の結果、2倍体のヘテロ接合体のシストが形成される場合と2倍体の状態で小型細胞からシストが形成される場合の2つの経路が推察された。
フォトニック結晶ファイバの解析設計理論ならびに最適化手法の開発とその実験的検証

本研究は,従来の光ファイバでは実現不可能な特性を有するフォトニック結晶ファイバ(PCF)を導入することで,PCFの曲げ特性も考慮に入れた設計を行い,様々な有用な性能を有するPCFの最適構造を明らかにすることを目的とする.こうした研究目的を達成するために,高精度高信頼度のベクトル有限要素法を開発するとともに,最適化手法を組み込んだ全く新しい解析設計支援ツールを開発し,新規なPCFの開発を進めてきた.独自に開発した設計支援ツールを駆使するとともに,柔軟に構造設計可能なPCFを用いることにより,通常の光ファイバでは実現不可能な特性を有する,PCFに基づく新たなファイバレーザに関する構造設計指針を明らかにし,また,その有用性を示した.これまでのPCFに基づくファイバレーザは,シリカガラスと空孔領域を用いることで実現していたが,ファイバレーザの取扱いの容易さといった観点から,光ファイバ断面に空孔領域は無いことが望ましい.そこで当該年度において,私はシリカガラスとフッ素添加ガラスを用いた,まったく新しいPCF型ファイバレーザを提案し,所望の特性を得るためには,コア形状を最適化する必要があることを示した.また,ここで提案した新規PCF型ファイバレーザは,非常に大きなコア径を有しながらも,曲げ損失が低減可能であることを示した.この研究成果については,論文誌IEICE Electronics Expressに採録決定済みであり,また2008年に開催された国際会議Opto-Electronics and Communications Conferenceにて公表済みである.従来の光ファイバでは実現不可能な特性を有するフォトニック結晶ファイバを導入することで,非線形性の低減化を図り,フォトニック結晶ファイバの曲げ特性も考慮に入れた設計を行い,その最適構造を明らかにすることを目的とする.こうした研究目的を達成するために,高精度高信頼度のベクトル型有限要素法を開発するとともに,最適化手法を組み込んだ全く新しい解析設計支援ツールを開発し,新規なフォトニック結晶ファイバの開発を進めてきた.独自に開発した解析設計支援ツールを駆使し,また,柔軟に構造設計可能なフォトニック結晶ファイバを用いることにより,さまざまなコア形状を有するフォトニック結晶ファイバの単一モード伝送条件等に関わる基本特性の解明,および,低曲げ損失低非線形フォトニック結晶ファイバの最適構造の特性評価を行ってきた.ここで新たに提案したフォトニック結晶ファイバを用いることにより,従来の光ファイバでは,その構造上,光ファイバが損傷する恐れのある高光強度の光源を利用した,ファイバアンプやファイバレーザなどが実現できる.これによって,将来のフォトニックネットワークの実現に大きく貢献し,毎秒テラビット,さらにはペタビットレベルの超高速データ通信を支える各種光デバイスへの応用にも大いに役立つもとの考えられる.今後の研究の展開としては,これまでに開発した解析設計支援ツールによって得られた基礎データを基にして,提案した低曲げ損失低非線形フォトニック結晶ファイバを試作し,実験的にその曲げ損失特性,非線形特性を測定するとともに,ここで開発した光ファイバの優位性について多面的に評価する.本研究は,従来の光ファイバでは実現不可能な特性を有するフォトニック結晶ファイバ(PCF)を導入することで,PCFの曲げ特性も考慮に入れた設計を行い,様々な有用な性能を有するPCFの最適構造を明らかにすることを目的とする.こうした研究目的を達成するために,高精度高信頼度のベクトル有限要素法を開発するとともに,最適化手法を組み込んだ全く新しい解析設計支援ツールを開発し,新規なPCFの開発を進めてきた.独自に開発した設計支援ツールを駆使するとともに,柔軟に構造設計可能なPCFを用いることにより,通常の光ファイバでは実現不可能な特性を有する,ファイバレーザやポーラライザなどの,PCFに基づく新たな光機能デバイスの構造設計指針を明らかにし,また,その有用性を示した.これまでのファイバレーザは,ファイバレーザへ入射した光によるファイバ自身の損傷を抑えるために大きなコア断面を有しているが,非常に曲げに弱いという問題があった.しかしながら,PCFにおいては,コア断面を拡大しても,従来の光ファイバよりも曲げ特性を低減することが可能である.それにより,曲げを加えてもレーザ特性に劣化が生じないPCF型のファイバレーザが実現可能であることを示した.また,これまでの光ファイバ型ポーラライザは,コア部を楕円にするなどの工夫が必須であり,そのためビーム形状が歪んでしまうという問題があった.しかしながら,PCFに基づくポーラライザでは,PCFの設計自由度の高さを利用し,これまで問題となっていたポーラライザのビーム品質を改善し,共振結合を利用した新たなポーラライザの開発に成功している.今後は,これまでに提案してきたPCF型光機能デバイスが有する様々な光学特性を実験的に検証するとともに,その優位性を多面的に評価する所存である.本研究は,従来の光ファイバでは実現不可能な特性を有するフォトニック結晶ファイバ(PCF)を導入することで,PCFの曲げ特性も考慮に入れた設計を行い,様々な有用な性能を有するPCFの最適構造を明らかにすることを目的とする.こうした研究目的を達成するために,高精度高信頼度のベクトル有限要素法を開発するとともに,最適化手法を組み込んだ全く新しい解析設計支援ツールを開発し,新規なPCFの開発を進めてきた.独自に開発した設計支援ツールを駆使するとともに,柔軟に構造設計可能なPCFを用いることにより,通常の光ファイバでは実現不可能な特性を有する,PCFに基づく新たなファイバレーザに関する構造設計指針を明らかにし,また,その有用性を示した.

これまでのPCFに基づくファイバレーザは,シリカガラスと空孔領域を用いることで実現していたが,ファイバレーザの取扱いの容易さといった観点から,光ファイバ断面に空孔領域は無いことが望ましい.そこで当該年度において,私はシリカガラスとフッ素添加ガラスを用いた,まったく新しいPCF型ファイバレーザを提案し,所望の特性を得るためには,コア形状を最適化する必要があることを示した.また,ここで提案した新規PCF型ファイバレーザは,非常に大きなコア径を有しながらも,曲げ損失が低減可能であることを示した.この研究成果については,論文誌IEICE Electronics Expressに採録決定済みであり,また2008年に開催された国際会議Opto-Electronics and Communications Conferenceにて公表済みである.
CGHアレイ法によるゲノム異常解析に基づく口腔癌の悪性度予測と治療標的分子の探索

(1)口腔癌及びその前癌病変の臨床検体と臨床・病理学的データの収集の推進口腔扁平上皮癌細胞株の収集を進め解析に利用可能なリソースの充実化を図るとともに、口腔癌及び前癌病変臨床検体と臨床・病理学的情報の収集とデータベース化によるバンキングを推進した。(2)ゲノムアレイを用いたアレイCGH解析で検出されたゲノム異常の標的候補遺伝子の解析口腔癌細胞株、食道扁平上皮癌細胞株の(1)ゲノムワイドなコピー数異常のスクリーニング用アレイ(MCG Whole Genome Array-4500)ならびに(2)癌関連遺伝子に特定したアレイ(MCG Cancer Array-800)を用いたアレイCGH法による解析で検出された増幅ならびにホモ欠失領域に着目して、これらの異常の標的となる新規癌関連遺伝子の同定を行なった。増幅に伴い発現亢進の認められる癌遺伝子候補やホモ欠失株以外でも高頻度にDNAメチル化などの機序により発現消失の起こる癌抑制遺伝子候補が同定され、これらの臨床検体における異常とその臨床病理学的意義ならびに生物学的機能の検討により有力な候補遺伝子が得られた。(3)ゲノムアレイの応用法によるメチル化標的となる癌抑制遺伝子候補の同定ゲノムアレイとMethylated CpG Island Amplification(MCA)法と組み合わせた遺伝子プロモーター領域のメチル化異常の解析法(BAC array-based MCA、BAMCA法)およびこれにクロマチン免疫沈降法とアレイCGH法を組み合わせたChIP-on-chip法を併用することで、口腔癌・食道扁平上皮癌において異常メチル化を受けるメチル化標的遺伝子候補を検出し、その中から臨床検体でも高度にメチル化を受ける新規癌抑制遺伝子候補を同定した。(1)口腔癌及びその前癌病変の臨床検体と臨床・病理学的データの収集の推進これまでの研究に引き続き、口腔癌及びその前癌病変の臨床検体と臨床・病理学的情報の収集ならびにこれらのデータベース化を進めた。また、口腔癌細胞株についてもさらに収集を行った。(2)CGHアレイの作製とこれを用いた解析の検討これまで作製を進めた実用レベルのアレイのうち、〓ゲノムワイドなコピー数異常のスクリーニング用アレイ(MCG Whole Genome Array-4500)ならびに〓癌関連遺伝子に特定したアレイ(MCG Cancer Array-800)を用いて、これまで解析の進んでいる食道扁平上皮癌を中心に、細胞株DNAならびに臨床検体よりマイクロダイセクションを用いて抽出したDNAについてCGHアレイ法による解析を行った。その結果、少量のDNAであってもアダプターPCR法を用いた不死化(無尽蔵化)を行い増幅することにより、充分な精度(1コピーレベル)と解像度でゲノムコピー数変化が検出できることを確認するとともに、従来型CGH法に比較してさらに詳細な欠失(特にホモ欠失)や増幅が検出できた。(3)ゲノム異常の標的候補遺伝子の探索と解析(2)で得られたコピー数異常を示す領域からは、口腔癌でも共通して異常の認められる遺伝子が同定されてきている。これらは新たな癌関連遺伝子候補として、コピー数異常と発現レベルを臨床病理学的データと比較して意義を検討するとともに、細胞株を用いた強制発現ならびにノックダウンによる生物学的機能の検討を進めている。(1)口腔癌及びその前癌病変の臨床検体と臨床・病理学的データの収集の推進これまでに引き続いて、口腔扁平上皮癌細胞株の収集、ならびに口腔癌及び前癌病変臨床検体と臨床・病理学的情報の収集とデータベース化を進めることにより、解析に利用可能なリソースの充実化を図った。(2)ゲノムアレイを用いたCGH

アレイ解析ならびにゲノム異常の標的候補遺伝子の探索と解析口腔癌細胞株、食道扁平上皮癌細胞株、ならびにこれらの癌の臨床検体よりマイクロダイセクションを用いて抽出したDNAについて、(1)ゲノムワイドなコピー数異常のスクリーニング用アレイ(MCG Whole Genome Array-4500)ならびに(2)癌関連遺伝子に特定したアレイ(MCG Cancer Array-800)を用いたCGHアレイ法による解析を行った。この結果検出できた新規のホモ欠失や増幅領域から、発現消失あるいは亢進により口腔癌や食道癌の病態に関与する遺伝子群が同定され、これらの臨床病理学的意義や生物学的機能の検討を進めた。(3)ゲノムアレイの応用法の開発とメチル化遺伝子単離(1)口腔癌及びその前癌病変の臨床検体と臨床・病理学的データの収集の推進口腔扁平上皮癌細胞株の収集を進め解析に利用可能なリソースの充実化を図るとともに、口腔癌及び前癌病変臨床検体と臨床・病理学的情報の収集とデータベース化によるバンキングを推進した。(2)ゲノムアレイを用いたアレイCGH解析で検出されたゲノム異常の標的候補遺伝子の解析口腔癌細胞株、食道扁平上皮癌細胞株の(1)ゲノムワイドなコピー数異常のスクリーニング用アレイ(MCG Whole Genome Array-4500)ならびに(2)癌関連遺伝子に特定したアレイ(MCG Cancer Array-800)を用いたアレイCGH法による解析で検出された増幅ならびにホモ欠失領域に着目して、これらの異常の標的となる新規癌関連遺伝子の同定を行なった。増幅に伴い発現亢進の認められる癌遺伝子候補やホモ欠失株以外でも高頻度にDNAメチル化などの機序により発現消失の起こる癌抑制遺伝子候補が同定され、これらの臨床検体における異常とその臨床病理学的意義ならびに生物学的機能の検討により有力な候補遺伝子が得られた。(3)ゲノムアレイの応用法によるメチル化標的となる癌抑制遺伝子候補の同定ゲノムアレイとMethylated CpG Island Amplification(MCA)法と組み合わせた遺伝子プロモーター領域のメチル化異常の解析法(BAC array-based MCA、BAMCA法)およびこれにクロマチン免疫沈降法とアレイCGH法を組み合わせたChIP-on-chip法を併用することで、口腔癌・食道扁平上皮癌において異常メチル化を受けるメチル化標的遺伝子候補を検出し、その中から臨床検体でも高度にメチル化を受ける新規癌抑制遺伝子候補を同定した。
Entamoebaのシスト形成に関する研究

Entamoebaのシスト形成機構を明らかにするために,主として蛇の病原性アメーバーE.invadensを用いて生化学的・形態学的検討を行ない,以下の結果を得た.1.シスト中の核数の多少にかかわらず,シスト当りのDNA量は全て4Cの値を示し,減数分裂の可能性を示唆した.また,脱シスト後の栄養型は,異常な接合の結果と考えられる巨大多核細胞を形成した.2.染色体数の調査では,一核シストに1012本,四核シストに56本の染色体様構造が観察れ,減数分裂の存在を示唆した.しかし,減数分裂の示標となるシナプトネーマ構造は見出せなかった.3.11種の細胞分裂阻害剤を用いて核分裂中期像の増大を試みたが,いずれの阻害剤も効果はなかった.verrcarinAのみ強い細胞分裂阻害を示し,シスト形成も著しく阻害された.特に,赤痢アメーバ(HM-1株)に対して, ED50値が約1.0ng/mlと極めて低濃度であり,抗アメーバ剤としての今後の応用に興味が持たれた.4.E.invadensでは, Ca^<2+>依存性代謝活性を高めるとシスト形成が著しく阻害され, cAMP依存性の薬剤では影響をうけなかった.5.猿から分離した大腸アメーバもグルコース除去培地で培養するとシスト形成が誘導されたが,赤痢アメーバではシスト形成は全く認められなかった.6.ヒトH-rasをプローブとしてアメーバにおけるras相同遺伝子を検索したところ, E.invadensからrasの存在が確認された.また,酵母の胞子形成制御遺伝子であるMAT, mam, mei13,およびキチン合成酵素の遺伝子をプローブとして相同遺伝子の検索を試みたが,見出せなかった.Entamoebaのシスト形成機構を明らかにするために,主として蛇の病原性アメーバーE.invadensを用いて生化学的・形態学的検討を行ない,以下の結果を得た.1.シスト中の核数の多少にかかわらず,シスト当りのDNA量は全て4Cの値を示し,減数分裂の可能性を示唆した.また,脱シスト後の栄養型は,異常な接合の結果と考えられる巨大多核細胞を形成した.2.染色体数の調査では,一核シストに1012本,四核シストに56本の染色体様構造が観察れ,減数分裂の存在を示唆した.しかし,減数分裂の示標となるシナプトネーマ構造は見出せなかった.3.11種の細胞分裂阻害剤を用いて核分裂中期像の増大を試みたが,いずれの阻害剤も効果はなかった.verrcarinAのみ強い細胞分裂阻害を示し,シスト形成も著しく阻害された.特に,赤痢アメーバ(HM-1株)に対して, ED50値が約1.0ng/mlと極めて低濃度であり,抗アメーバ剤としての今後の応用に興味が持たれた.4.E.invadensでは, Ca^<2+>依存性代謝活性を高めるとシスト形成が著しく阻害され, cAMP依存性の薬剤では影響をうけなかった.5.猿から分離した大腸アメーバもグルコース除去培地で培養するとシスト形成が誘導されたが,赤痢アメーバではシスト形成は全く認められなかった.6.ヒトH-rasをプローブとしてアメーバにおけるras相同遺伝子を検索したところ, E.invadensからrasの存在が確認された.また,酵母の胞子形成制御遺伝子であるMAT, mam, mei13,およびキチン合成酵素の遺伝子をプローブとして相同遺伝子の検索を試みたが,見出せなかった.Entamoebaのシスト形成機構を明らかにするため、主として蛇の病原性アメーバE.invadensを用いて検討し、以下の結果を得た。1.栄養増殖中のG2期細胞をシスト形成倍地に移すと、一度細胞分裂を行ない、次いでDNA合成と2回の核分裂を経て、四核の成熟シストになることが判明した。DNAフルオロメトリーでは、【G^2】期細胞(栄養型),末成熟-核シストおよび成熟シストの全DNA量は、共に4Cの値を示し、成熟シストの一核は1Cであった。また、DAPI染色による調査では、染色体様構造が末成熟シストでは10本、成熟シストでは5本観察された。これらの結果は、減数分裂の存在を示唆している。電顕観察では、分裂時に三層のキネトコア様特異構造が新たに見出されたが、減数分裂の指標とされるシナプトネーマ構造はまだ見付かっていない。今後も、シスト形成倍地中での経時的な変化を電顕により検討し更にキネトコア数を測定することにより染色体数も明確にしたい。2.シスト形成過程における細胞内情報伝達因子の関与について調査したところ、CAMP依存性ホスホジエステラーゼの活性化因子であるイミダゾールや塩化アンモニウムにより、シスト形成が著しく阻害され、シスト形成がCAMPによって正の制御を受けるものと考えられた。一方、プロティンキナーゼCの活性化因子であるTPAにより強い阻害が認められたことから、【Ca^(2+)】-プロティンキナーゼC系による負の制御が示唆された。今後は、CAMP量、アデニル酸サイクレース活性の変動やシスト形成能のない赤痢アメーバ倍養株におけるCAMPの役割について検討したい。3.CAMPによる制御が予測されたことから、ヒトのC-H-ras遺伝子をプローブとしてサザンハイブリダイゼーションを行ったところ、少なくとも2本のras相同遺伝子の存在が確認された。
運動イメージ能力と鏡像手凝視による皮質脊髄路細胞の興奮性との関連の解明

イメージ時の皮質脊髄路興奮性には運動イメージ能力が関与すると報告されているが、運動イメージ能力とミラーセラピー(以下MT)時の皮質脊髄路興奮性との関連は明らかにされていない。本研究では、MT実施時に最も皮質脊髄路の活動が高まる条件を検討し、その活動と運動イメージ能力の関連を解明することを目的とした。結果、鏡像手注視あり・随意運動あり時に皮質脊髄路興奮性は増加し、その値は運動イメージ(筋感覚的)の鮮明性と相関関係を認めた。これによりMTの実施条件として鏡像手注視・随意運動の組み合わせが重要であり、筋感覚的運動イメージの鮮明性を評価することでMT適応の判断基準とすることができる可能性が示唆された。本研究の目的は,リハビリテーション診療で注目されているミラーセラピーの可能性を運動イメージ能力の観点から解明することである.具体的には,ミラーセラピーの効果的な実施条件を明らかにすること,さらにミラーセラピー実施時の皮質脊髄路の興奮性と個々の運動イメージ能力との関連を解明することを目的とした.本研究では健常成人を対象とした.ミラーセラピーに類似した環境として鏡像手凝視+左示指随意運動を課題とし,安静時と課題実施時の各条件において左一次運動野への経頭蓋磁気刺激による運動誘発電位(MEP)を計測した.また運動イメージ能力を数値化するため,運動イメージの鮮明性評価に「Movement Imagery QuestionnaireーRevisedsecondversion(MIQ-RS)」を,運動イメージの統御可能性評価に「手のメンタルローテーション課題」を用いた.得られた運動誘発電位と運動イメージ能力との相関関係を求めた.結果,課題実施時のMEP振幅値は,安静時より有意に高い値を示した.さらに課題実施時のMEP振幅値はMIQ-RSスコア(筋感覚的)との間に有意な相関関係を認めた.一方で,MIQ-RSスコア(視覚的)と手のメンタルローテーション課題の結果とは有意な相関関係を認めなかった.本研究の結果から,ミラーセラピーと類似した条件である鏡像手凝視と随意運動の複合により生じる皮質脊髄路の興奮性増大は,運動イメージ能力(筋感覚的運動イメージの鮮明性)と関連することが明らかとなった.このことは,ミラーセラピーの治療効果は対象者の運動イメージ能力に依存する可能性が示唆された.イメージ時の皮質脊髄路興奮性には運動イメージ能力が関与すると報告されているが、運動イメージ能力とミラーセラピー(以下MT)時の皮質脊髄路興奮性との関連は明らかにされていない。本研究の目的は,リハビリテーション診療で注目されているミラーセラピーの可能性を運動イメージ能力の観点から解明することである.具体的には,ミラーセラピーの効果的な実施条件を明らかにすること,さらにミラーセラピー実施時の皮質脊髄路の興奮性と個々の運動イメージ能力との関係を明らかにすることを目的とした.健常成人10名を対象に,ミラーセラピーの効果的な実施条件を明らかにするために,ミラーセラピーの実施に類似した環境として,左示指の随意的外転ー内転の反復運動あり・なし条件と鏡像左手注視あり・なしの条件を組み合わせた4条件において,経頭蓋磁気刺激による運動誘発電位(MEP)を計測し,各条件間で比較した.また運動イメージ能力の評価として,運動イメージ(筋感覚的・視覚的)の鮮明性の評価にはMIQ-RSを,運動イメージの統御可能性の評価には手のメンタルローテーション課題を実施した.次いで,運動誘発電位と各運動イメージ能力との相関関係を求めた.結果,Mirror Therapy実施条件として随意運動はMEP振幅値に対し有意に影響することを認めた.また,随意運動あり・鏡像手注視あり条件におけるMEPは筋感覚的運動イメージ鮮明性のスコアとの間に有意な相関関係を認めたが,視覚的運動イメージ鮮明性のスコアと統御可能性のスコアとは有意な相関関係を認めなかった.本研究の結果は,鏡像手の注視に加えて随意運動を行った条件で皮質脊髄路の賦活化が高まり,それは筋感覚的運動イメージの鮮明性能力と関連することを示唆していた.このことは,Mirror Therapyは随意運動を併用することが治療効果に与える大きな要因となっていることを示しており,その治療効果を予測するためには筋感覚的運動イメージ能力を評価することが重要であると考えた.本研究の目的は,リハビリテーション診療で注目されているミラーセラピーの可能性を運動イメージ能力の観点から解明することである.具体的には,ミラーセラピーの効果的な実施条件を明らかにすること,さらにミラーセラピー実施時の皮質脊髄路の興奮性と個々の運動イメージ能力との関連を解明することを目的とした.本研究では健常成人を対象とした.ミラーセラピーに類似した環境として,左示指随意的外転ー内転の反復運動あり・なし条件と鏡像手凝視あり・なし条件を組み合わせた4条件を設定し,各条件において左一次運動野への経頭蓋磁気刺激による運動誘発電位(MEP)を計測し比較を行った.

また運動イメージ能力を数値化するため,運動イメージの鮮明性評価に「Movement Imagery Questionnaire-Revised second version (MIQ-RS)」を,運動イメージの統御可能性評価に「手のメンタルローテーション課題」を用いた.前述の4条件の中で最も高いMEPが記録された条件で得られたMEP振幅値と運動イメージ能力との相関関係を求めた.結果,左示指随意運動あり+鏡像手凝視あり条件において最も高い値を示した.さらにこの条件のMEP振幅値はMIQ-RSスコア(筋感覚的)との間に有意な相関関係を認めた.一方で,MIQ-RSスコア(視覚性)と手のメンタルローテーション課題の結果とは有意な相関関係を認めなかった.本研究の結果から,鏡像手の注視に加えて随意運動を行った条件で皮質脊髄路の賦活化が高まり,それは筋感覚的運動イメージの鮮明性能力と関連することを示唆していた.このことは,ミラーセラピーは随意運動を併用することが治療効果に与える大きな要因となっていることを示しており,その治療効果を予測するためには筋感覚的運動イメージ能力を評価することが重要であると考えられた.リハビリテーション科学今年度の実験途中に,本研究で使用する実験器具に不具合が生じ,研究継続が困難となってしまった.早急に対応を行ったが実験環境の整備に時間を要したため,研究がやや遅れている状態である.実験道具や器具などといった環境面の整備が順調に整ったため,概ね当初の研究実施計画通りに研究は実施できている.今後はデータの信頼性をより高めるために被験者数を増やし検討していく.今後は,個々の運動イメージ能力がイメージトレーニングの効果に影響を与えるかどうかを明らかにすることを目的として研究を進めていく.まずは個々の運動イメージ能力をMIQ-RSと手のメンタルローテーション課題を用いて評価するとともに,鏡像手注視・随意運動時の皮質脊髄路の興奮性を計測する.その後,1週間のイメージトレーニングを実施し,再度皮質脊髄路の興奮性を計測する.得られた結果をもとに,イメージトレーニングの介入効果を検討し,さらに介入効果と運動イメージ能力との関連を明らかにする.今後の研究の方策としては,個々の運動イメージ能力がイメージトレーニングの効果に影響を与えるかどうかを明らかにすることを目的として研究を進めていく.まずは個々の運動イメージ能力をMIQ-RSと手のメンタルローテーション課題を用いて評価すると同時に,鏡像手注視・随意運動時の運動誘発電位を計測する.その後,7日のイメージトレーニングを実施し,再度運動誘発電位を計測する.得られた結果を基に,イメージトレーニング前後の運動誘発電位を比較し,イメージトレーニングの結果を検討し,さらにそれらの効果が実施前に評価を行った運動イメージ能力が関与するかどうかを明らかにする.今年度の実験途中に実験器具に不具合が生じ,研究継続が困難となってしまった.これにより本研究で使用する予定であった実験備品・消耗品の購入費用や被験者へ謝金などが発生しなかったため,次年度使用額が生じた.不具合が生じた実験器具を購入するための費用として使用する.また実験が再開可能となった後に生じる消耗品の購入費や被験者への謝金などの費用に充当する.次年度の研究費使用計画として,運動誘発電位を計測するための磁気刺激装置で利用する磁気刺激用のダブルコイルを購入する予定である.
GPER標的薬と遺伝子導入用高分子材料を用いた抗イヌ腫瘍自然免疫活性化の検討

抗腫瘍獲得免疫の効率よい誘導の規定因子はいくつか挙げられるが、腫瘍に対する自然免疫の効果も考慮すべき点である。瘍に対する自然免疫系を効率よく活性化させるためには、1腫瘍細胞に細胞死を誘導し抗原量が過多にならないようにする、2死んだ腫瘍細胞や生き残った腫瘍細胞を取り込んだ樹状細胞内で安定的に腫瘍由来DNAが存在し自然免疫の活性化が効率よく行われる、という2点がポイントとなる。本研究ではイヌ腫瘍細胞を対象とし、GPER分子の標的薬と遺伝子導入用高分子材料を用いて、前述の2点が効率良く誘導され自然免疫活性化が亢進されるかについて検討する。今年度はまず、標的細胞上のGPER発現検討およびGPER標的薬による細胞死の誘導の検討を行った。対象とする腫瘍細胞はイヌ肥満細胞腫細胞とした。まずイヌ肥満細胞にGPERが発現しているかどうかを検討した。その結果、GPERの発現はイヌの他の腫瘍細胞や正常細胞に比べ高いことが明らかとなった。この結果を受けて、イヌ肥満細胞腫細胞にGPERアゴニストを作用させて細胞増殖を検討した。その結果、GPERアゴニストを投与したイヌ肥満細胞腫では細胞増殖が抑制されることを見出した。トリパンブルー染色法による細胞死検出では、GPERアゴニストを投与したイヌ肥満細胞腫において死細胞が増加していることもわかった。次に、遺伝子導入用高分子材料を用いた抗原取り込みについて検討した。マウス樹状細胞株DC2.4に、抗原としてFITC-OVAを、アルギニンを付加した高分子遺伝子導入材料を添加して取り込み能を調べた。その結果、この高分子遺伝子導入材料の存在化で樹状細胞は効率よくFITC-OVAを取り込むことが明らかとなった。平成3031年前半を目安にGPER標的薬による細胞死の誘導の検討の遂行を当初計画していた。すなわち、1.イヌ腫瘍細胞上のGPER発現の確認、2. GPER標的薬によるイヌ腫瘍細胞の細胞死誘導検討、3. GPER標的薬によるイヌ腫瘍細胞上の免疫回避分子(PD-1, LAG3等)の発現影響を解析し、細胞死誘導・自然免疫活性化の手がかりを検討、を計画していた。そして平成30年度は1.については完了し、2.についてもGPERアゴニストによりイヌ肥満細胞腫細胞が細胞死を起こすことを明らかにすることができた。3.については現在イヌ免疫回避分子に結合可能な抗体を検討中である。さらに、平成31年以降に遂行予定だった実験(DC2.4に腫瘍細胞を貪食させ、腫瘍由来のDNAを効率よく検出できる実験条件の確立)にも着手しており、条件確立の一途となる結果も得ている。すなわち、1.イヌ腫瘍細胞上のGPER発現の確認、2. GPER標的薬によるイヌ腫瘍細胞の細胞死誘導検討、3. GPER標的薬によるイヌ腫瘍細胞上の免疫回避分子(PD-1, LAG3等)の発現影響を解析し、細胞死誘導・自然免疫活性化の手がかりを検討、を計画している。1.、2.については前述した。次に、平成3132年前半を目安に高分子材料による樹状細胞内での腫瘍由来DNAの安定性促進検討を計画してる。すなわち、1.DC2.4に腫瘍細胞を貪食させ、腫瘍由来のDNAを効率よく検出できる実験条件の確立、2. DC2.4のみと比べ、作用後腫瘍由来DNAの細胞内存在量が高くなる高分子材料の探索・検討、3. 1.および2.で同定した高分子材料を使用した腫瘍細胞貪食後の樹状細胞活性化の検討、を計画している。すでに平成30年度で、アルギニンを付加した高分子遺伝子導入材料がタンパク抗原を効率よくDC2.4細胞に取り込ませることを明らかにした。そのためこの結果を元に腫瘍細胞の取り込みについて今後検討していく。

平成3031年前半を目安にGPER標的薬による細胞死の誘導の検討の遂行を当初計画していた。すなわち、1.イヌ腫瘍細胞上のGPER発現の確認、2. GPER標的薬によるイヌ腫瘍細胞の細胞死誘導検討、3. GPER標的薬によるイヌ腫瘍細胞上の免疫回避分子(PD-1, LAG3等)の発現影響を解析し、細胞死誘導・自然免疫活性化の手がかりを検討、を計画していた。そして平成30年度は1.については完了し、2.についてもGPERアゴニストによりイヌ肥満細胞腫細胞が細胞死を起こすことを明らかにすることができた。3.については現在イヌ免疫回避分子に結合可能な抗体を検討中である。さらに、平成31年以降に遂行予定だった実験(DC2.4に腫瘍細胞を貪食させ、腫瘍由来のDNAを効率よく検出できる実験条件の確立)にも着手しており、条件確立の一途となる結果も得ている。すなわち、1.イヌ腫瘍細胞上のGPER発現の確認、2. GPER標的薬によるイヌ腫瘍細胞の細胞死誘導検討、3. GPER標的薬によるイヌ腫瘍細胞上の免疫回避分子(PD-1, LAG3等)の発現影響を解析し、細胞死誘導・自然免疫活性化の手がかりを検討、を計画している。1.、2.については前述した。次に、平成3132年前半を目安に高分子材料による樹状細胞内での腫瘍由来DNAの安定性促進検討を計画してる。すなわち、1.DC2.4に腫瘍細胞を貪食させ、腫瘍由来のDNAを効率よく検出できる実験条件の確立、2. DC2.4のみと比べ、作用後腫瘍由来DNAの細胞内存在量が高くなる高分子材料の探索・検討、3. 1.および2.で同定した高分子材料を使用した腫瘍細胞貪食後の樹状細胞活性化の検討、を計画している。すでに平成30年度で、アルギニンを付加した高分子遺伝子導入材料がタンパク抗原を効率よくDC2.4細胞に取り込ませることを明らかにした。そのためこの結果を元に腫瘍細胞の取り込みについて今後検討していく。購入試薬が発注した時期にメーカーがセール(キャンペーン)を行っており、当初の想定より安い価格で購入することができたため、次年度使用額が生じた。これについては、平成31年度に消耗品費に充てる予定である。
長期療養施設における非薬物療法としてのユーモアセラピーモデルの開発

本研究の目的は、長期療養施設における高齢者に非薬物療法としてのユーモアセラピーを用いて、心身の活性化を図り、ユーモアセラピーの効果を明らかにすることである。さらに、プログラムや実施上の留意点などを検討しモデルを開発することである。本年度は、総合保健施設の通所サービスを利用している高齢者で、調査に同意の得られた「ちんどんセラピー」介入群(18名)、非介入群(対照群)12名を分析対象とした。平日の午前中に、ちんどん屋を専業としている協力者による「ユーモアセラピー」(演奏、口上、大道芸、踊りなど30分間)を行った。介入前後に採血を行い、神経系、内分泌系、免疫系の変化を分析した。気分評価には5段階尺度を用いた。また、ちんどん屋によるユーモアセラピー中の表情・行動の変化を分析するため、同意の得られた患者6名にビデオ撮影を行った。対照群は別の日の午前中に2回採血を行い、介入群と比較検討した。その結果、介入群では、βエンドルフィン値、アドレナリン値、ノルアドレナリン値が介入前と介入後の間で有意に高値を示し、コルチゾール値は有意に低下したが、NK細胞活性は有意な差は認められなかった。対照群では、2回のそれぞれの値に有意な差はみられなかった。気分評価は実施前と実施後で快の方向に有意に変化した。プログラムの面白度では、「玉すだれ」が最も高く、踊りの場面で笑顔が多くみられた。ちんどん屋による「ユーモアセラピー」は、ちんどん太鼓やゴロス、トランペットなどの楽器で生演奏を行い、場内を練り歩くプログラムで構成されている。賑やかでリズミカルな音楽、大道芸、盆踊り等を行うことは、交感神経系を刺激して適度な緊張状態に導き、心身の活性化につながると考えられる。ちんどん屋による「ユーモアセラピー」での楽しい笑いは、高齢者の気分を高め、神経・内分泌系に影響を与えて、高齢者の健康増進に役立つ可能性が示唆された。プログラムは音楽と大道芸と踊りの三要素で構成し、楽しい雰囲気を作ることが重要である。本年度は、77歳95歳までの入院中の認知症高齢者男女11名と病棟スタッフ12名を対象に調査した。方法は上記対象者に、病棟デイルームにおいて、プロのちんどん屋によるユーモアセラピー(演奏、口上、大道芸、踊りなど30分間)を鑑賞・体験してもらい、介入前と終了後に、唾液を採取(唾液中コルチゾールなど)した。ユーモアセラピー前及び中の表情・行動との比較のため、同意の得られた患者6名にビデオ撮影で行動評価を行った。2週間後に再度同様のユーモアセラピーを行い、唾液採取とビデオ撮影で行動評価を行った。その結果、1回目のユーモアセラピーでの唾液中コルチゾール値は、介入後に下降したものが5名、上昇したものは4名であり、介入後に唾液を採取できなかったものが2名であった。2回目のユーモアセラピーでの唾液中コルチゾール値は、介入後に下降したものが4名、上昇したものが6名、介入前に唾液を採取できなかったもの1名であった。2回とも介入前後に有意な差は認められなかった。一方、病棟スタッフの唾液中ニルチゾール値は、介入前から介入後に有意に下降し(P=0.05)、ストレスホルモンが変動した。ビデオによる行動評価では、患者の表情に快、驚き、笑いなどの変化が認められ、拍手・手拍子などの行動も伴った。ちんどん屋の派手な装束での音楽・大道芸や踊り、鉦と太鼓のリズムは視覚・聴覚を刺激するがストレスホルモンの変動には個人差があり、認知症高齢者では変化がなかった。しかし、高齢者の表情や感情を活性化すると同時にスタッフのストレス軽減にも役立つことが示唆された。

ちんどん屋による「ユーモアセラピー」は、ちんどん太鼓やゴロス、トランペットなどの楽器で生演奏を行い、場内を練り歩くプログラムで構成されている。賑やかでリズミカルな音楽、大道芸、盆踊り等を行うことは、交感神経系を刺激して適度な緊張状態に導き、心身の活性化につながると考えられる。ちんどん屋による「ユーモアセラピー」での楽しい笑いは、高齢者の気分を高め、神経・内分泌系に影響を与えて、高齢者の健康増進に役立つ可能性が示唆された。プログラムは音楽と大道芸と踊りの三要素で構成し、楽しい雰囲気を作ることが重要である。