hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
超臨界流体からのフラーレンを含む電荷移動錯体の結晶化

亜酸化窒素とトリフロロメタンを超臨界流体として用いて,(1)C60フラーレンと電子供与体の飽和超臨界流体からの電荷移動錯体の結晶化について検討した。二酸化炭素を利用した場合と同様に,C60フラーレンは超臨界流体にほとんど溶解せず,C60フラーレンと電子供与体をそれぞれ超臨界流体に溶解させた後,温度・圧力を変化させて超臨界流体から電荷移動錯体を結晶化させる方法は適用出来なかった。そこで,C60フラーレンが超臨界流体にほとんど溶解しない(超臨界流体がC60フラーレンに対して貧溶媒である)ことを利用して,(2)貧溶媒法による電荷移動錯体の結晶化について実験を行った。貧溶媒として二酸化炭素を用い,昨年度構築した結晶作製システムをHPLCポンプを組み込んだ貧溶媒結晶化システムに変更した。その結晶化システムの有用性について検討するために,C60フラーレンのみを溶解させたトルエン溶液を高圧容器内に導入し,そこに超臨界二酸化炭素を導入してC60フラーレンの結晶化を試みた。C60フラーレンの結晶を得ることが出来たが,この結晶には二酸化炭素が取り込まれていた。ピレンとC60フラーレン溶解させたトルエン溶液に,超臨界二酸化炭素を導入して電荷移動錯体の結晶化を行った。その結果,板状の電荷移動錯体の結晶(最大1辺が2mm程度)を得ることが出来た。結晶の大きさの制御には,流体圧力よりも流体のトルエン溶液への導入速度が大きく影響することが分かった。また,C60フラーレンとジアンスレンのベンゼン溶液からの電荷移動錯体の結晶化についても行った。ある程度の結晶を得るには少なくとも一ヶ月程度を要する拡散法に比べて,数時間で電荷移動錯体の結晶化が可能であった。その結晶にはベンゼンと二酸化炭素が取り込まれており,有機溶媒や貧溶媒が取込まれない結晶化法の検討が必要である。新規購入のフィンガータイト型容器(容量100cm^3,耐圧約70MPa),圧力トランスデューサー,圧力指示計を組み込んだ結晶作製システムの構築を行なった。圧力発生には高圧HPLC送液ポンプ(現有),温度制御には恒温槽(現有)を組み込んだ。そのシステムについて,温度制御の安定性,圧力漏れの有無等について検討した結果,研究当初に予定していた所定の温度制御,圧力発生の能力を有するシステムを構築できた。次に超臨界二酸化炭素流体中での各成分の溶解度測定を種々の温度・圧力条件下で行なった結果,電子供与体である芳香族化合物についてはある程度,溶解することが分かった。一方,C60フラーレンの二酸化炭素への溶解度測定を試みたが,その溶解度は極めて低く,ほとんど溶解しなかった。そのため,当初予定していた各成分を超臨界流体溶解させた後,超臨界流体中で電荷移動体の結晶化を行なわせることが非常に困難であることが明らかとなった。そこで,現在は結晶化の方法の見値しを行なっているところである。C60フラーレンがある程度溶解度を示す有機溶媒を使用し,二酸化炭素がフラーレンに対して貧溶媒であることを利用した方法での結晶化を試みる予定である。そのために,本年度構築した結晶作製システムについて,新たなHPLCポンプを組み込んだシステムヘの再構築について検討を行なっている。
顕微光応答法による金属‐半導体界面反応層のミクロ解析

代表的な積層電極材料であるTi/Pt/AuとGaAsとの界面反応について、顕微光応答法を中心として実験的に解析した結果、以下の知見を得た。1)電極形成直後の状態では、光応答の信号強度は大きい。しかし、電流-電圧特性の理想因子(n値)は悪く面内のバラツキも大きい。これは電子ビ-ム蒸着時にGaAs表面に導入された欠陥によるものと考えられる。2)200°Cの熱処理により光応答信号はわずかに減少し、n値は改善される。電極特性の面内均一性はよくなる。ショットキ-障壁高さは熱処理前と比べて変化はないため、この熱処理により欠陥が回復したものと思われる。3)250300°Cにおいて光応答信号はさらに減少し、約400°Cまでは界面内での均一性もよい。電流-電圧特性はこれより約50°C高い温度で変化する。この温度範囲で、中間層であるPtとGaAsとの固相反応が起こっていると思われる。顕微光応答法では、この反応の初期あるいは前駆過程をみているものと考えられる。4)450°Cにおいて電極特性は劣化する。顕微光応答法により、劣化領域はショットキ-障壁が低く、電極周辺部から不均一に発生し拡大していくことが明らかになった。マイクロオ-ジェ分析の結果も併せて考察すると、劣化領域はAu-Ga合金相であると考えられる。このAu-Ga合金領域の面積に対応して、電流-電圧特性にはオ-ミック性の過剰電流が重畳して現われる。
地震と豪雨の複合作用に対するため池堤体の安全性評価手法の開発

現状のため池堤体の安全性評価では,地震と豪雨が連続的に発生した場合の検討は行われていない.近年,複数の災害外力の作用が自然地盤や社会基盤の被害を拡大する事例が増加していることから,ため池堤体の安全性評価にその影響を組み込むことが不可欠である.本研究課題では,ため池堤体土を対象に複数の災害外力を模擬した室内試験を実施し,災害外力の複合的な作用が土質材料の強度・変形特性に与える影響を解明する.また,それら強度・変形特性をため池現地で観測可能な指標を用いて評価する手法を開発する.取得したデータを統合し,複数の災害外力による複合作用を考慮したため池堤体の安全性評価手法を確立する.現状のため池堤体の安全性評価では,地震と豪雨が連続的に発生した場合の検討は行われていない.近年,複数の災害外力の作用が自然地盤や社会基盤の被害を拡大する事例が増加していることから,ため池堤体の安全性評価にその影響を組み込むことが不可欠である.本研究課題では,ため池堤体土を対象に複数の災害外力を模擬した室内試験を実施し,災害外力の複合的な作用が土質材料の強度・変形特性に与える影響を解明する.また,それら強度・変形特性をため池現地で観測可能な指標を用いて評価する手法を開発する.取得したデータを統合し,複数の災害外力による複合作用を考慮したため池堤体の安全性評価手法を確立する.
志賀毒素が血管内皮を傷害する分子機構の網羅的検討

我々は、志賀毒素の重要な標的細胞のひとつであるヒト血管内皮を用いた実験系で、同じ細胞で、毒素受容体量も大きな変化がないにもかかわらず、毒素に対する反応性が1000倍以上低下して、細胞傷害を起こさなくなる現象を報告してきている。平成16年度は、まずヒト血管内皮の、二つの発現形質の背景にあるタンパク発現プロファイルの違いをcDNA subtraction法で比較した。その結果、毒素に高感受性の状態では、プロテアソームやガレクチン-1が多く、低感受性になるとフィブロネクチンやビメンチンが増加する現象が見出されたが、ガレクチンがアポトーシスに関連する可能性はあるものの、有意義な結果は得られなかった。次に、志賀毒素の活性サブユニットが相互作用をする細胞内タンパク質を、大腸菌をホストとしたtwo hybrid法で網羅的に検索し、small glutamine-rich tetratricopeptide repeat containing-α.(SGT)という蛋白と相互作用する可能性が示された。この分子は、細胞質で、細胞骨格や成長ホルモンレセプターの細胞内ドメインと相互作用して、細胞分裂やエンドサイトーシスに関わることが示唆されている分子である。平成17年度は、この分子に対するsiRNAを、我々独自の実験系である、ヒト血管内皮の初代培養系に移入してその発現を抑制した状態で毒素を作用させると、細胞傷害活性が抑制されることが確認された。また、網羅的な蛋白相互作用検索の結果は、SGTと毒素の活性サブユニットのみを大腸菌に発現させたtwo hybrid法で確認できたが、一方で、毒素活性サブユニットがホスト細胞内において蛋白分解酵素で処理された後の分子は、SGTとの相互作用は確認できず、毒素が細胞へ取り込まれた後、Trans Golginetworkに達するプロセスにSGTが関与していることが示唆された。以前より、志賀毒素はリボゾームに作用して蛋白合成を阻害することによって細胞毒性を発揮することが知られているが、我々を含めて多くの研究者がアポトーシスの関与を報告するなど、他にも未知の作用機序が細胞毒性に関与している可能性が高い。次に、志賀毒素が相互作用をする細胞内タンパク質を、大腸菌をホストとしたtwo hybrid法で網羅的に検索したところ、small glutamine-rich tetratricopeptide repeat containing-αという蛋白と相互作用する可能性が示された。この分子は、細胞質で、細胞骨格や成長ホルモンレセプターの細胞内ドメインと相互作用して、細胞分裂やエンドサイトーシスに関わることが示唆されている分子で、現在のところ細胞死との因果関係は不明である。今後siRNAを移入してその効果を観察するとともに、small glutamine-rich tetratricopeptide repeat containing-αの遺伝子組換え蛋白を作成して、蛋白レベルで相互作用を確認する予定である。志賀毒素の活性サブユニットは、宿主細胞にエンドサイトーシスされた後、細胞内のTrans Golginetworkで蛋白分解酵素の作用を受けて活性化されて、Golgi stackを経て細胞質に移行し、リボゾームでの蛋白合成を阻害することによって細胞毒性を発揮することが知られている。しかしながら、その細胞内での輸送メカニズムなどは不明な点が多い。

平成16年度には、志賀毒素の活性サブユニットが相互作用をする細胞内タンパク質を、大腸菌をホストとしたtwo hybrid法で網羅的に検索し、small glutamine-rich tetratricopeptide repeat containing-α(SGT)という蛋白と相互作用する可能性が示された。この分子は、細胞質で、細胞骨格や成長ホルモンレセプターの細胞内ドメインと相互作用して、細胞分裂やエンドサイトーシスに関わることが示唆されている分子である。平成17年度は、この分子に対するsiRNAを、我々独自の実験系である、ヒト血管内皮の初代培養系に移入してその発現を抑制した状態で毒素を作用させると、細胞傷害活性が抑制されることが確認された。また、網羅的な蛋白相互作用検索の結果は、SGTと毒素の活性サブユニットのみを大腸菌に発現させたtwo hybrid法で確認できたが、一方で、毒素活性サブユニットがホスト細胞内において蛋白分解酵素で処理された後の分子は、SGTとの相互作用は確認できず、毒素が細胞へ取り込まれた後、Trans Golginetworkに達するプロセスにSGTが関与していることが示唆された。
ゲノムからの遺伝子発現制御情報の抽出のための基礎研究

最近のゲノム研究の進展により、我々はある生物種のゲノム上に存在する遺伝子をゲノム配列から予測出来る様になったが、遺伝子の発現制御に関しては未だ予測出来ない。そのためには数多くの遺伝子の発現制御領域の解析が必要だが、その際、同じ組織で、同じ時期に、類似したパターンで発現する遺伝子のシリーズについて解析し、それぞれのゲノム上の配列を比較することで効率的にゲノム配列と発現制御の関係を明らかに出来ると考えられる。本研究では、ショウジョウバエの成虫肢形成過程で遠近軸に沿って領域特異的に発現する遺伝子の発現制御領域の同定及び比較検討を試みた。既に単離・解析を進めてきたホメオボックス遺伝子Bar、a1、c11の制御領域について、それぞれ約8Okb、25kb、25kbのゲノム領域を解析する事により、現在までに約1kb,500bp,300bpにまでその必須領域を限定する事が出来た。これらの領域には共通してホメオドメイン・タンパク質の結合コンセンサス配列のコアであるTAATモチーフが密集していた。また、Barの制御領域は約450bpの肢原基で発現するのに必須な部分とその部分の活性を肢原基の特定の領域に限定するのに必要な部分の二つの部分からなっている事も分かった。さらに、制御領域を解析する候補を増やす為に、ショウジョウバエのホメオボックス遺伝子のうち、肢原基での発現が知られていないすべての遺伝子(75遺伝子)についてin situ hybridizationによりmRNAの発現パターンを調べた。その結果、Barやa1,c11と同様の領域で発現するものや、Barよりもさらに近位部側で発現するもの等、Bar, a1,c11と同様に遠近軸に沿って領域特異的に発現する遺伝子が少なくともつ新たに同定できた。
Yb化合物における強相関電子物性の圧力制御と新たな秩序相の探索

本研究では、Yb化合物における強相関電子物性、特にf電子の「遍歴性」⇔「局在性」を圧力によって制御し、両者の臨界領域を調べること、また新たな物性の探索を行うことである。以下に主な研究業績を列記する。1.YbInCu_4の高圧磁気秩序相の研究YbInCu_4は、我々の研究によって2.4GPa以上の高圧下において磁気秩序状態を基底状態に持つことが分かっている。この高圧相の詳細を調べるため、超高圧下帯磁率測定(大阪大学工作センターとの共同研究)、高圧下NMR(核磁気共鳴)測定を行った。帯磁率測定は27GPaの超高圧下まで行われ、初めて高圧相における強磁性秩序の直接的な実験的証拠が得られた。また、強磁性転移温度の圧力依存性は小さいが、9GPa付近で構造相転移に起因すると思われる異常が観測された(現在論文投稿準備中)。現在、超高圧下でのX線測定によって構造相転移の確認を行っている。また、高圧下NMRにより、強磁性相転移は圧力に対して一次相転移であり、高圧下相においてf電子は局在性の強い状態にあることが分かった。YbCuCu_4はYbXCu_4物質群の中で最も電子比熱係数が大きい重い電子系物質である。この物質について高圧下NMR測定を行い、圧力の増加によってf電子はより局在性を増し、有効質量が増すことが分かった。また、4.1GPaまでの電気抵抗測定(T>60mK)を行い(岡山大学理学部との共同研究)、圧力の増加につれてFermi液体として振舞う温度領域が低温側に狭まり、「遍歴性」⇔「局在性」の臨界圧力が45GPaの範囲にあると予測される(現在論文投稿準備中)。YbXCu_4化合物の中で、X=Cu,Ag,Inの物質は圧力パラメタによってf電子の非局在-局在変化を引き起こすことができる可能性の高い物質である。本プロジェクトでは主にX=Cu,In試料についての研究を進めており、以下に実績をまとめる。この物質は、これまで高圧下合成法によってのみ作成可能であるとされていたが、Idzikowski等は最近急冷法によっても合成が可能であることを示した。我々は急冷法によって合成された試料を用いて初めてYbCu_5の圧力効果を調べた。高圧下電気抵抗測定によると、f電子と伝導電子が重い電子を形成し始めると考えられる温度が42K⇒28K(常圧⇒2.1GPa)と減少し、圧力によって電子系の局在性が増したことを示している。この結果より、YbCu_5はYbAgCu_4と比べると常圧下で既に5GPaの化学的圧力下にあることが分かり、比較的低圧力によって量子臨界点近傍へアプローチすることができる可能性が高いことが分かる。この他、高圧下NMR(核磁気共鳴)、NQR(核四重極共鳴)測定も行っている。これまでの我々の研究により、この物質は2.4GPa以上の圧力下では基底状態が価数揺動⇒強磁性秩序状態と変化することが分かっている。そのメカニズムを探るため、詳細なNQR測定を行った結果、この圧力変化は一次相転移であることが実験的に明らかにされた。転移は両相の自由エネルギーにおいてどちらが安定かによって決められていると考えられる。一方、磁気秩序相におけるNMR測定からは、期待されたほどの内部磁場が観測されず、磁気秩序構造が単純な強磁性ではないことを示唆している。
細胞核の形態・構造と力学的特性の統合的解析および細胞核内外の力学場の解明

1.単一細胞と単離細胞核の圧縮試験倒立型顕微鏡に,恒温チャンバー,マイクロマニピュレータ,三次元電動マイクロマニピュレータ,画像記録・計測装置等を組み込んで,顕微鏡ステージ上で細胞および細胞核の圧縮試験を行えるようにした。Hanks'液中に浮遊させた細胞/細胞核を2台のマイクロマニピュレータにそれぞれ固定された微細ガラスマイクロプレートの間に把持する。一方のプレートのバネ定数は他方のものの100分の1以下であり,このプレートのたわみ量とバネ定数から試験中の圧縮荷重が求められる。まず,一方のマイクロプレートを0.32 um/sの速度で動かすことにより細胞の圧縮試験を行った。次に,細胞核単離液をチャンバー内に灌流させて,試験を行った細胞から細胞核を単離した後,同様にHanks'液中で単離細胞核の圧縮試験を行った。変形量と圧縮荷重の関係にHertzの接触理論を適用して細胞と細胞核のみかけの弾性率を求めたところ,それぞれ約0.6 kPa,細胞核は約1.2 kPaであった。細胞核は細胞全体よりも弾性率が約2倍大きかった。2.接着細胞における細胞核負荷応力の推定遺伝子導入を行いF-アクチンと細胞核を蛍光標識した線維芽細胞を24時間培養した後,F-アクチン脱重合剤Cyto Dを投与する前後に共焦点レーザ顕微鏡を用いてF-アクチンと細胞核の三次元蛍光画像を取得した。F-アクチン/ストレスファイバー(SF)がほぼ完全に消失したCyto D投与60分後の細胞核の平均高さは,投与前の1.5倍であった。SFの消失により回復した細胞核のひずみは約0.33であった。また,圧縮試験により求めた単離細胞核のみかけの弾性率は平均約2.1 kPaであった。このことから,接着線維芽細胞においてF-アクチン/SFにより細胞核が受けている圧縮応力は約0.7 kPaであると推定された。24年度が最終年度であるため、記入しない。1.アクチンフィラメントの脱重合に伴う接着細胞と細胞核の形態変化の計測遺伝子導入によりアクチンフィラメントと細胞核を蛍光標識した線維芽細胞を24時間培養し,共焦点レーザ顕微鏡を用いてアクチンフィラメントと細胞核の三次元蛍光画像を取得した。次に,アクチンフィラメントの脱重合剤であるサイトカラシンDを投与してから,経時的に同様に三次元蛍光画像を取得した。アクチンフィラメントの脱重合が進むにつれて細胞核の形態が扁平からいびつな山形に変化するとともに表面に皺が形成された。細胞核の表面積と体積は減少する傾向を示した。細胞の高さは1.8倍に増加したが,細胞核の高さ変化は1.3倍に留まっており,細胞核は自身に作用する応力に応じて核骨格構造を適応的に変化させることが強く示唆された。2.細胞用引張試験装置の構築現有の共焦点レーザ顕微鏡に,恒温チャンバー,マイクロマニピュレータ,画像記録・計測装置,および購入した三次元電動マイクロマニピュレータ等を組み込んで,顕微鏡ステージ上で細胞核サイズの試料の引張/圧縮試験を行えるようにした。試料は,マイクロマニピュレータにそれぞれ固定された微細ガラスマイクロプレートとマイクロピペット/マイクロプレートの間に細胞を把持し,ピペット/マイクロプレートを電動マイクロマニピュレータで移動させて細胞に引張/圧縮負荷を与える。線維芽細胞および線維芽細胞から単離した細胞核の圧縮試験を行って装置の性能を評価し,圧縮試験が可能であることを確認した。みかけの弾性係数を求めたところ,細胞核の方が細胞よりも約3倍大きい値であった。操作性改善および振動ノイズ低減により信頼性を向上させ,単離細胞核格納装置の導入を完了すれば,同一細胞において細胞と細胞核の力学試験が可能となり,細胞内力学場解明のための強力なツールとなる。

また,圧縮試験により求めた単離細胞核のみかけの弾性率は平均約2.1 kPaであった。このことから,接着線維芽細胞においてF-アクチン/SFにより細胞核が受けている圧縮応力は約0.7 kPaであると推定された。24年度が最終年度であるため、記入しない。実験に使用する顕微鏡と計測装置の故障および東日本大震災の影響による物品購入の遅れのため。早急に細胞用引張試験装置を完成させる。細胞と細胞核の引張/圧縮試験を,無処理の細胞,アクチンフィラメントを脱重合させた細胞,核骨格のノックダウンを行った細胞について行い,アクチンフィラメントと核骨格が細胞核の形態と力学的特性に及ぼす影響を定量的に評価する。また,故障している局所的力学計測装置の修理を行うが,修理が困難である可能性があるため,その場合には,別の方法により局所力学計測を行い,引張/圧縮試験結果と合わせてデータ解析を行う。
高歪みシクロパラフェニレン類の合成とその機能解明

シクロパラフェニレン(CPP)は、近年ボトムアップ合成法が報告されたのを契機として、その化学が大きく進展している。しかし、研究開始当初、フラーレンC60および(5,5)アームチェアカーボンナノチューブの環状構成単位である[5]CPPの合成は達成されていなかった。そこで、本研究では、[5]CPPの初めての合成を目的とし、その合成を達成した。さらに、紫外可視吸収スペクトル、電気化学測定より[5]CPPがC60に匹敵する狭いHOMO-LUMOギャップを有していることを明らかにした。このことは、[5]CPPが材料開発における新しいリード化合物となる可能性を示していると考えられる。ベンゼン環をリング状につなげた分子であるシクロパラフェニレン(CPP)は、フラーレンやアームチェア型のカーボンナノチューブの最小構成単位であることから、次世代の有機機能性材料としての応用に興味が持たれている。この数年の間に、CPPの化学合成が報告されているが、、五個のベンゼン環からなり、フラーレンC60と同じ直径(約0.7ナノメートル)を持つ[5]CPPは、理論的に興味深い性質を示す可能性が予想されていたが、その合成は困難であり、未だ達成されていなかった。本年度、既存のCPPの合成経路を融合させた新しい合成経路の開発を行うことで、[5]CPPの合成を達成した。[5]CPPは有機溶媒によく溶け、空気中でも安定であり、有機材料として非常に取り扱い易い性質を持つことが分かった。さらに、光、電気化学的測定より、[5]CPPのバンドギャップを評価したところ、C60に匹敵する狭いバンドギャップを有していることが明らかになった。有機薄膜太陽電池の有機電子受容体としてフラーレン誘導体が通常用いるが、その構造と電子状態の多様性は制限されている。一方、CPPは原理的にフラーレン類に比べて様々な誘導体の合成が行えることから、物性の制御などにおいても、フラーレン誘導体に比べて有利であると考えられる。シクロパラフェニレン(CPP)は、近年その化学が大きく進展している。昨年度までに、研究代表者は、新しいCPPの合成経路の開発を行うことで、これまでに合成された中で最も環サイズが小さく、最も興味深い電子物性を持つ[5]CPPの初めての合成に成功している。本年度は、[5]CPPを材料科学のリード化合物として用いることを考え、スケールアップを検討した。しかし、最終ステップの還元的芳香族化の再現性が悪く、50 mgを超えるサンプルの合成でさえ困難であった。そこで、この段階の条件について詳細に検討したところ、二塩化スズに2.0当量の塩酸を加えることで、室温、短時間、かつ再現性良く芳香族化が進行することを明らかにした。本手法を用いることで、2 gを超える[5]CPPの合成に成功した。さらに、この技術を民間企業に移転することで、[5]CPPを試薬として販売することに成功した。また、本手法を用いることで、[6]-[12]CPPを容易に合成出来たことから、本手法が実用的なCPPの合成法であることを明らかにした。さらに、[5]CPPをはじめとしたCPPの変換反応について検討を行い、小さな環サイズに由来する特異な反応性を明らかにした。また、CPPと遷移金属の金属錯体の合成にも成功し、CPPの選択的な官能基化への利用や、特徴的な触媒機能や光、電子物性の発現といった観点から興味深い知見を得ることが出来た。研究計画通り、CPPの実用的な合成法の開発に成功し、その合成法を用いることで、最も興味深い物性を持つ[5]CPPの大量合成に成功し、民間会社から市販化するに至ったため。また、物性解明、機能開拓等も順調に進行し、論文発表に至っているため。本年度は、シクロパラフェニレン(CPP)の合成化学のさらなる進展や、それらの分子を材料科学へ利用することを見据え、種々のCPP誘導体の合成について検討を行った。前年度までに、我々は、CPPの実用的な合成法の開発を行い、市販の試薬から短工程で環サイズの異なるCPPをグラム量で合成することに成功している。そこで、入手容易となったCPPを出発基質とした官能基化について検討を行った。例えば、求電子反応を例にとり、CPPと臭素との反応について検討を行った。その結果、環サイズが8より小さなCPPにおいて、置換反応の代わりに、CPPの2つのベンゼン環上で付加反応が起きることを明らかにした。さらに、理論計算より、本反応の進行が、CPPの歪みの解消による発熱性と、CPP上のベンゼン環が芳香族性を失う吸熱性のバランスで決まっていることを明らかにした。また、生成する臭素付加物を、炭素、ヘテロ元素置換基を持つ単置換CPP誘導体のみならず、多置換CPP誘導体へ変換出来ることも明らかにした。今後、CPPの官能基化により、新しい環状π共役分子の合成が可能となると期待される。

研究開始の初期に、本研究の標的分子、[5]CPPの合成を達成できたため。入手が容易になったCPPを出発原料とした誘導化について検討を行い、様々なCPP誘導体を効率的かつ自由度高く合成出来る手法の開発について検討する予定である。有機合成化学今後、[5]CPPをベースとした化学修飾によるCPP誘導体の合成を行う。
骨髄腫の癌化とPax-5遺伝子の変異について

ヒトの造血器腫瘍の一つである骨髄腫の発癌機構を明らかにするべく、骨髄腫細胞で特異的にその発現が欠失しているPax-5遺伝子につき、転写調節領域のクローニング、構造変異の有無等につき研究した。さらに、Pax-5遺伝子の発現欠失によるCD19分子の発現の消失が、骨髄腫細胞の増殖動態とどのような関連があるかどうかも検討した。骨髄腫細胞株および患者骨髄腫細胞において、Pax-5遺伝子の5'上流領域も含めてDNA塩基配列上特に異常は認められなかった。さらに、転写調節領域に結合すると予想されるE2A,Ik-1,Sox-4,5,c-Ets-1等の転写因子の発現も特に変異はなかった。しかし、5'上流領域約4kb内のCpG部位は、骨髄腫細胞株および患者骨髄腫細胞では高度にメチル化されていた。骨髄腫細胞におけるPax-5遺伝子発現の特異的欠失は、転写調節領域の高度のメチル化による転写の抑制が示唆された。一方、骨髄腫細胞株KMS-5にCD19遺伝子を導入発現させると、in vitro増殖およびSCIDマウスでの腫瘍形成能が著明に抑制された。このことは、骨髄腫細胞におけるCD19発現の消失は、単にPax-5遺伝子の発現欠失の結果だけでなく、骨髄腫細胞の増殖優位性の獲得に関連している可能性が示された。以上、本研究により、骨髄腫の癌化にPax-5遺伝子の変異は密接に関連していることが示唆された。骨髄腫細胞でその発現が特異的に変異しているPax-5遺伝子につき、そのゲノム遺伝子の5'上流領域約1kbのDNA塩基配列を決定した。欠失ミュータント実験の結果から、Pax-5遺伝子の基本的な転写調節に必要な領域は-70-820の領域であることがわかった。この領域内に結合する転写因子は、c-Ets,E-47,Ikaros-2(IK-2),Sox-5,GATA-1,GATA-2,GATA-3,IK-1,Oct-1等であることが明らかとなった。まず、骨髄腫細胞株U-266,KMS-5,NOP-2および新鮮分離骨髄腫細胞からDNAを抽出して、Pax-5cDNAあるいはクローニングした5'上流DNA断片をプローベにしてサザンブロット解析を行なった。その結果は、Pax-5+のB細胞株および正常末梢血リンパ球のそれらと比して相違はなかった。更に骨髄腫細胞からのDNAで、5'上流約1kbの領域をPCR法で増幅しDNA塩基配列を決定したが、変異は見出せなかった。そこで、5'上流約1kbの領域に結合する転写因子の発現をRT-PCR法で検討した。骨髄腫細胞(株)で特にそれらの発現に変異はなかった。以上、今のところPax-5遺伝子の5'上流約1kbの領域内には特に変異はなさそうである。現在、更に上流領域をクローニング中である。一方、骨髄腫細胞株KMS-5にCD19cDNAを遺伝子導入しCD19+骨髄腫細胞株を樹立した。これらの細胞は、コントロールのベクターのみ導入した細胞に比してそのin vitro増殖が抑制された。他の骨髄腫細胞株でも検討を加えている。このことは、CD19陰性(CD19-)骨髄腫細胞株にCD19分子の発現を回復させると増殖抑制シグナルを出すことを証言した。骨髄腫細胞で特異的にその発現が欠失しているPax-5遺伝子につき、5'上流約9kbまでクローニングし構造的変異の有無を検討した。骨髄腫細胞株および患者骨髄腫細胞において、DNA塩基配列上特に異常は認められなかった。骨髄腫細胞株でアザシチジン処理により、Pax-5遺伝子の発現が回復した。

骨髄腫細胞におけるPax-5遺伝子発現の特異的欠失は、転写調節領域の高度のメチル化による転写の抑制が示唆された。一方、骨髄腫細胞株KMS-5にCD19遺伝子を導入発現させると、in vitro増殖およびSCIDマウスでの腫瘍形成能が著明に抑制された。このことは、骨髄腫細胞におけるCD19発現の消失は、単にPax-5遺伝子の発現欠失の結果だけでなく、骨髄腫細胞の増殖優位性の獲得に関連している可能性が示された。
中枢ニューロテンシン作動性回路の形成とその可塑性

我々は以前ニューロテンシン(NT)様構造の脳内での個体発生を検討する過程において帯状回や背側海馬支脚には周生期にのみ非常に強いNT様構造が出現し、脳の他の部位と異なり、これらの陽性構造は成長と共に激減し成熟動物では殆んど検出できないことを見い出した。我々は本研究においてこの様に周生期にのみ出現するこの領域のNT様構造の意義を明らかにする目的でラット大脳皮質におけるNT結合部位の個体発生について検討を加えた。オートラジオグラフィーによる検討:生直後のラット梨状葉を除く大脳皮質にはNT結合部位が高密度に存在する。生後3-5日でこれらは更に著しく増加する。Retrosplenial皮質や視覚領で最も高密度である。生後6日以降この領域のNT結合部位は激減する。一方生直後のラット梨状葉,間脳,腹側被蓋野及び黒質ではNT結合部位は極めて疎であるが生後12日以降これらの領域のNT結合部位は急増し、その増加は生後40-60日まで続く。生化学的検討:まず生直後ラット脳スライスを用いて生直後脳におけるNT結合が飽和で特異的であることを確認した。Scathard分析によりNT結合部位の飽和と特異性を確認した。次にNT binding assay実験を大脳皮質尾側部と間脳で行った。各発育段階における大脳皮質のNT結合部位のSoathard分析はすべてkd=2.15+0.84nMでありBmaxは生直後で725fmol/mg protein,生後5日で約5倍、その後激減した。一方間脳を含む脳幹ではkdは全発育段階を通じ2.32+0.23nMであり、Bmaxは生後0日で85.7fmol/mg proteinでその後生後15日にplateauに達した。以上の検索によりNTリセプターと推定されるNT結合部位もNT量の変動と連動し成長とともに激減する。それ故この部位においてはNT細胞が成長と共に死滅するのか或は単にNTの産生を止めているのかは不明であるが、海馬支脚や帯状回の発達に関与している可能性も指適される。
調節蛋白AmfRを介した放線菌の形態分化制御機構の分子レベルでの解析

2成分制御系の応答因子をコードするamfRはstreptomyces griseusのA-ファクター欠損変異株にプラスミド上で導入することでその気中菌糸形成を回復させることから、この菌の形態分化の開始を正に調節する制御遺伝子であることが予想されていた。今回このamfR遺伝子の破壊株の取得に成功した。方法はamfRのコード領域中にカナマイシン耐性遺伝子を挿入したDNA断片を脱落しやすい性質をもつベクターpKU296にクローン化したプラスミドを用いた相同組み替えによった。その結果取得した4株の破壊株はいずれもYMP-グルコース寒天培地上で完全な気中菌糸欠損の性質を示した。このことはamfRがこの菌の形態分化の開始に必須の役割を果たす正の調節遺伝子であることを示している。次にこの破壊株を宿主に用いて高コピープラスミドを用いてショットガンクローニングを行い、気中菌糸形成能欠損の性質をサプレスする遺伝子の取得を試みた。その結果現在までに良好に気中菌糸形成を回復させる4種のDNA断片の取得に成功した。この方法によって得られる遺伝子の中にはamfRの下流で作用する制御遺伝子が存在する可能が考えられる。取得したDNA断片のうち1種についてその塩基配列の部分配列を決定したところ、GTP結合部位をもつ蛋白質をコードする完全な読みとり枠が存在することが明らかになった。現在気中菌糸回復能を指標にしたサブクローニングによって活性を有する読みとり枠の特定を行っている。amfRはストレプトマイシンを生産することで知られる放線菌Streptomyces griseusno形態分化において重要な役割を果たすと予想して我々が単離・同定した制御遺伝子である。amfRはプラスミド上でS.griseusのA-ファクター欠損変異株に導入するとその気中菌糸から胞子の形成を誘導する性質をもつことから、特に気中菌糸の形成の開始を正に制御していることが示唆されていた。このamfRの役割をさらに詳細に検討することを目的として、本年度はamfR遺伝子破壊株の取得を中心に実験を行った。方法は、かつて我々がamfc遺伝子破壊株を取得した時と同様に、プラスミドpKM206を用いてカナマイシン(Km)耐性遺伝子を挿入したamfR遺伝子断片をS.griseus野性株に導入し、pKM206の脱落のしやすさを利用して2回組み替えの結果破壊片amfR遺伝子が染色体上の残った株をKm耐性をマーカーとすることで行った。その結果、4株のKm耐性株を取得し、その内の少なくとも1株は期待通りのamfR遺伝子破壊株であることがサザンハイブリダイゼーションの結果明らかになった。上記のようにして取得したamfR破壊株は、YMP-グルコース培地上でほぼ完全に気中菌糸・胞子形成が欠損した形質を示すことが判明した。この株の胞子形成は、野生型amfR遺伝子をクローン化したプラスミドを導入することで野生株とまったく同レベルに回復したことから、ここで観察した胞子形成欠損の性質はamfR遺伝子を破壊したことに由来していることが確認された。また、amfR破壊株は野生株と同レベルのA-ファクラ-生産性、ならびにストレプトマイシン生産性を示したことから、当初の予想どおりamfRはS.griseusの形態分化に特異的に作用する制御遺伝子であることも明らかになった。
日本と韓国・朝鮮における「信教の自由」をめぐる比較宗教史的研究

本研究は日本と韓国・朝鮮を基軸とし、比較宗教史的な視点から「信教の自由」についての分析を試みるものである。18年度は、各人で個別に研究を深化させることを第一義としたが、それと合わせて、研究合宿を9月15・16日に開催、研究代表者の李省展が本プロジェクトが目指すものという研究目標と方法論に関する報告を行い、分担研究者とそれらについて論議を重ねた。また明治学院大学・キリスト教研究所客員研究員の坂井悠佳氏を招き研究発表を実施した。「日本思想史からみた信教の自由」という観点から報告を受け、主に明治期の植村正久などの代表的キリスト者に関する思想史的な知見を多く得ることができた。資料収集と分析が本研究の要であるが、本年度は主に研究代表者が海外での資料調査・収集を実施した。カナダのバンクーバーのThe University of British ColumbiaのIrving K. Barber Learning CentreのRare Books and Special Collectionで資料を閲覧、またAsian Libraryでも資料を閲覧し、宣教関連資料を収集した。また、アメリカのニュージャージー州のNew Brunswick Theological Seminaryにて主に朝鮮宣教との関連でUnderwoodの書簡などの収集を行った。またラトガース大学図書館ではグリフィス・コレクションの中から朝鮮に関する資料を大量に閲覧、収集した。さらに韓国では基督教歴史研究所にて、オーストラリア・ミッション関連資料を収集した。研究代表者は、以下の研究会に参加し研究との関連で見識を深める機会を得た。キリスト教史学会大会、東アジアキリスト教交流史研究会台湾国際セミナーなどである。明治学院キリスト教研究所主催国際セミナにて政教分離と関連するルーミスに関する研究発表を行った。研究初年度は順調に推移した。海外資料調査では特にアメリカでの資料収集に成果があった。いままで注目されてこなかったグリフィス・コレクションの朝鮮関連資料にアクセスでき、本研究と関連する資料収集をなすことができた。また、新教出版社から出版予定の「植民地朝鮮における『信教の自由』ー改正私立学校規則と神社参拝の強要をめぐって」という論考の執筆が順調に進められた。また日本のほうでは研究代表者が宣教師・ルーミスに関する戦時下の政教分離、戦争協力に関しての研究発表を行うことができた。19年度の研究は以下の方策によって推進される。昨年度に引き続き研究テーマと関連する資料の収集を積極的に行う。今年度は朝鮮南部を基盤としていたオーストラリアの長老派ミッションの資料収集を行う。そのためオーストラリアのメルボルンに所在する、Presbyterian Theological College、Presbyterian Theological Seminaryにて資料調査を行う。また、朝鮮の宣川、平壌で宣教活動したジョージ・S・マッキューンはこのテーマのキー・パーソンである。ハワイ大学のCenter for Korean Studiesにジョージ・M・マキューン・コレクションに関連資料が存在することから、ハワイにて資料調査ならびに収集を実施する予定である。また国内では同志社大学人文科学研究所所収資料、明治学院・学院資料室などで資料調査・収集を行う。それに並行して収集した資料の分析も行う。今年度はシンポジュームを開催予定であったが、申請予算減額により規模を縮小し韓国から金興洙牧園大学名誉教授を招き、テーマに関する研究会を実施することを予定している。現在、資料整理の上執筆中の論考を完成し、出版を完成する。これには徐正敏・研究分担者の論考も収録される予定である。その他、研究会などに参加し研究を深めていく。

19年度の研究は以下の方策によって推進される。昨年度に引き続き研究テーマと関連する資料の収集を積極的に行う。今年度は朝鮮南部を基盤としていたオーストラリアの長老派ミッションの資料収集を行う。そのためオーストラリアのメルボルンに所在する、Presbyterian Theological College、Presbyterian Theological Seminaryにて資料調査を行う。また、朝鮮の宣川、平壌で宣教活動したジョージ・S・マッキューンはこのテーマのキー・パーソンである。ハワイ大学のCenter for Korean Studiesにジョージ・M・マキューン・コレクションに関連資料が存在することから、ハワイにて資料調査ならびに収集を実施する予定である。また国内では同志社大学人文科学研究所所収資料、明治学院・学院資料室などで資料調査・収集を行う。それに並行して収集した資料の分析も行う。今年度はシンポジュームを開催予定であったが、申請予算減額により規模を縮小し韓国から金興洙牧園大学名誉教授を招き、テーマに関する研究会を実施することを予定している。現在、資料整理の上執筆中の論考を完成し、出版を完成する。これには徐正敏・研究分担者の論考も収録される予定である。その他、研究会などに参加し研究を深めていく。研究代表者、残金59268円を次年度へと繰越す。研究分担者・小檜山ルイの残金、4926円を次年度に繰り越す。
各種顕微鏡によるミクロ画像情報処理システムの開発

本研究は研究室で増大多用化するミクロ画像情報に対して、一時保存、永久保存、集中管理、報告書作成、画像解析処理を含めたミクロ画像情報処理システムを開発することにより、ミクロ画像情報の検索から画像解析処理、Desk Top Publishing (DTP)により報告書作成、高精細印字出力による電子写真化までを一元的に扱い、研究業務の能率化、研究画像データの共同利用とデータ蓄積の一元化を指向することを目的として計画された。さらに画像データをデジタル画像として格納することにより、画像劣化のない画像情報を保存でき、最新の情報処理技術と融合させ、保存されたデータを過去に遡って検索、印刷出力、利用することができるシステムの構築を試みた。実際に構築したシステムは、画像を含めた報告書を集中管理する画像ファイリング部を中心に、レーザー顕微鏡、光学顕微鏡、EM902電子顕微鏡の画像データを入力するインターフェース部と、画像編集機能と高精細印字機能による報告書作成、学会投稿原稿作成等をサポートするDTP部、および画像処理部から構成されている。画像データの入力方式としてはCCDカメラより光学顕微鏡画像および透過原稿あるいは反射原稿の画像情報をデジタル画像インターフェース部を介して入力し、またレーザー顕微鏡画像およびEM902電子顕微鏡画像は光磁気ディスクを媒体として本システムに入力する構成とした。画像データのファイリングは画像処理部内のハードディスクおよび画像処理部に接続された光磁気ディスクを使用することとした。またファイリングされた画像データの出力としては高精細プリンタおよび新規開発したRGB切り替え器を介して既設のFR-3000フィルムレコーダーに接続し使用することとした。さらに我々は、構築したミクロ画像処理システムを用い、1.共焦点レーザー走査顕微鏡を応用した歯牙組織の微細構造学的観察2.ラット下顎頭の加齢変化に関する形態学的・免疫組織化学的研究3.ラット歯槽骨の生理的加齢変化及び矯正力に対する組織反応の加齢変化に関する細胞学的、組織化学的研究4.実験的歯周炎における歯槽骨吸収に関する細胞化学的研究5.ラット切歯エナメル芽細胞におけるH^+-ATPaseと炭酸脱水酵素の局在性について-免疫組織、細胞化学的研究等の基礎研究を行い学会論文等にて発表した。解剖学教室で用いられている電子顕微鏡、光学顕微鏡、レーザ顕微鏡、蛍光顕微鏡などの各種顕微鏡のデータを十分に活用するためには、単に各々の性能面のみならずデータの管理、作業の効率化までを考慮する必要がある。しかしながら、現状ではこれら各種顕微鏡から得られた多量のデータは規格の異なる写真およびフィルムとして保存されているため、(1)データ管理(写真、フィルム)の煩雑化(2)時間経過による写真品質の劣化(3)写真を使用した報告書作成に多くの作業時間を必要とすること、又、複数部数作成するときに均一な品質とならないこと、などのような問題があった。これらの問題を含め、研究室で増大多用化するミクロ画像情報に対して、最新の情報処理技術を応用し、一時保存、永久保存、集中管理、報告書作成、画像解析処理を含めた画像情報処理環境を構築し、ミクロ画像情報の検索から画像解析処理、Desk Top Publishing(DTP)による報告書作成、高精細印字出力による電子写真化までを一元的に扱い、研究業務の能率化、研究画像データの共同利用とデータ蓄積の一元化を指向することを目的とし、平成6年度には以下に述べるようなミクロ画像情報処理システムを開発し、各種顕微鏡と接続させた。

本システムでは画像を含めた報告書を集中管理する画像ファイリング部を中心に、レーザー顕微鏡、光学顕微鏡、EM902電子顕微鏡の画像データを入力するインターフェース部と、画像編集機能(文章データと画像データの同時編集)と高精細印字機能による報告書作成、学会投稿原稿作成等サポートするDTP部、および画像処理部から構成されている。画像データの入力方式としてはCCDカメラより光学顕微鏡画像および透過原稿あるいは反射原稿の画像情報をデジタル画像インターフェース部を介して入力し、またレーザー顕微鏡画像およびEM902電子顕微鏡画像は光磁気ディスクを媒体として本システムに入力する。画像データのファイリングは画像処理部に内蔵のハードディスクおよび画像処理部に接続された光磁気ディスクを使用する。また画像処理ファイリングされた画像データの出力としては高精細プリンタおよび新規開発したRGB切り替え器を介して既設のFR-3000フイルムレコーダーに接続し使用することとした。平成7年度は前年度に構築したミクロ画像情報処理システムを用い、以下の様な研究を行った。顎骨の老化現象など骨粗鬆症を主体とした骨組織の生理的・病的組織変化をCMRや軟X線写真あるいは光学顕微鏡および共焦点レーザー走査顕微鏡や走査型電子顕微鏡を用いて検索し、その画像データをミクロ画像情報処理システムにてディジタル化し集積した。次に、ファイリングされたディジタル画像データを用いて、顎骨形態計測定量化解析ソフトの開発と定量解析後のデータ処理システムの開発を試み、以下に示すような解析項目(1.全骨梁面2.全形成面3.活性形成面4.全吸収面5.活性吸収面6.全骨量7.全類骨量8.全骨組織量9.線維組織量11.1重標識面12.2重標識面13.2重標識幅14.類骨層幅15.平均骨梁単位幅16.休止面17.低石灰化骨量18.2次パラメータ)について半自動に解析することが可能であることを示した。さらに本システムを用い、顎骨の骨代謝メカニズムおよび顎骨の加齢変化を定量的に解析した結果から、炎症に伴う歯槽骨吸収開始機構には歯槽頂表面の骨芽細胞系の細胞が重要な役割を果たしており、それらに影響を及ぼす炎症性細胞浸潤の程度が歯槽骨改変に重要な要因となっていることが示唆された。また、老齢ラット歯槽骨の骨芽細胞および破骨細胞の活性は生理的な状態では若齢ラットより低下しているが、矯正力を加えた場合、老齢ラット歯槽骨でも若齢ラットと同様に活性の高い骨芽細胞や破骨細胞が分化・動員されることが明らかとなった。同時に、ラットの下顎骨では加齢現象として生じる骨硬化症的骨添加現象が、卵巣摘出によるエストロジェンの低下により、統計学的に有意に抑制されることが明らかとなった。このエストロジェン欠乏による骨量減少はPTHの間欠投与により予防されることがラットの脛骨を用いた形態計測学的研究で明らかになった。
野生ボノボとチンパンジーにおけるパーティ構成の違いの要因の解明

2015年1月から引き続き2015年7月まで、コンゴ民主共和国ルオー科学保護区において、野生ボノボの観察を行った。1攻撃交渉のパターン:集団内の攻撃交渉において、約7割がオス同士の攻撃交渉であった。またオスーメス間の攻撃交渉では、ほぼメスが勝者となった。オスーメス間での攻撃交渉において、他のメスが攻撃交渉に介入して支援することで、メスが勝者となることが多く観察され、メス間の同盟関係がボノボにおけるメスの社会的地位の高さに大きく影響していることが示唆された。また、メスの支援は、年上の個体が年下の個体を支援する傾向が見られ、年下の個体が年上の個体を支援することは少なかった。2集団の動きの意志決定:集団追跡中、3分以上の停止状態から、3頭以上の個体が移動した際、移動を開始した個体を「先導個体」、その個体に追尾した個体を「追尾個体」と定義し、どのような個体が先導個体となる傾向にあるか分析した。その結果、高齢のメスが先導個体となることが多く、若いメス、オス、未成熟個体は、追尾個体となることが多かった。このことから、ある場所から、次の採食・休息場所へ移動するタイミングは、高齢のメスが決定している傾向にあることがわかった。ボノボでは、オスではなく、メスが集団の動きをリードすることで、休息時間や採食時間の長さを調節していると考えられる。高齢個体は採食場所等、遊動域内の資源に関する知識が豊富であると考えられる。帰国後は、データ分析と論文執筆に取り組んだ。学会での発表を積極的に行った。7月に札幌で行われた国際野生動物管理学会と、三月に仙台で行われた日本生態学会で、ボノボの集団の動きの意思決定について発表した。8月にオーストラリア・ケアンズで行われた国際動物行動学会で、ボノボのメスの同盟関係について発表した。27年度が最終年度であるため、記入しない。ボノボとチンパンジーは両種とも、集団がいくつかのパーティ(一時的な部分集団)に分かれて遊動するという、離合集散と呼ばれるグルーピングパターンを示すが、そのパーティ構造は大きく異なっている。チンパンジーのパーティは主にオスと乳児を持たないメスで構成され、乳児を連れたメスはパーティから離れて遊動を行うことが多い。対して、ボノボは乳児をもつメス達を中心とするパーティで遊動を行う。チンパンジーの乳児持ちのメスがパーティに参加しない理由として、1.オスからの攻撃や子殺しを避けるため、2.子供を背負い移動が不自由であるためにパーティの遊動についていきにくく、多くの休息、採食時間を必要とするため、という要因が考えられている。対してボノボでは、1.メスやコドモが攻撃を受けにくく、2.メスが集団の動きをリードし、パーティの動きや活動時間を調節しているため、アカンボウ持ちのメスがパーティに参加しやすいと考えられている。しかし、これらの仮説は量的データによって検証されていない。コンゴ民主共和国において、野生ボノボを対象に調査を行った。1.攻撃交渉:オスメス間の攻撃交渉では、ほぼメスが勝者となった。メスが劣勢となった場合、他のメスが介入して支援することで、メスが勝者となることが多く観察され、メス間の同盟関係がボノボにおけるメスの社会的地位の高さに影響することが示唆された。また、年上の個体が年下の個体を支援する傾向があり、年下の個体が年上の個体を支援することは少なかった。2.集団の動きの意志決定: 2頭以上の個体が移動した際、移動を開始した個体を「先導個体」と定義した。高齢のメスが先導個体となることが多く、ある場所から次の採食・休息場所へ移動するタイミングは、高齢のメスが決定している傾向にあることがわかった。ボノボではメスが集団の動きをリードし、休息時間や採食時間の長さを調節していると考えられた。2014年度は主に、野外調査を行った。2014年6月から9月まで、コンゴ民主共和国ルオー科学保護区において野生ボノボの観察を行った。12月まで観察を行う予定だったが、調査地の近隣でエボラ出血熱が発生したため、9月に帰国を余儀なくされた。エボラ出血熱のコンゴ民主共和国内での収束確認後の一月に再渡航し、2015年7月初めまでの予定で野外調査を続けている。観察中は、パーティ追跡を行い、パーティ内の攻撃交渉の頻度とその詳細、遊動開始の意志決定、遊動中の動きの意志決定のデータを収集した。攻撃交渉については特に、2頭以上が協力して攻撃する「同盟」関係に注目して観察した。遊動開始の意思決定については、停止状態から移動を開始する際、どの個体が最初に動きだし、集団の遊動開始のイニシエーションを取っているか記録した。遊動中は、先頭をあるいている個体を記録し、どの個体が遊動のスピードのコントロールをしているかに注目した。平行して、対象群の個体間の血縁関係を推定するため、追跡中、ボノボの排便、排尿を観察した場合は、フン、尿からDNAサンプルを採集した。データ収集に集中したことや、エボラ出血熱により年間計画に狂いが生じたことで、学会発表はすくなかった。

11月に、「SAGA17アジアアフリカに生きる大型類人猿を支援する集い」にて、ボノボの攻撃交渉における支援関係について発表をおこなった。また、2015年7月に行われる「Vth International wildlife management congress」において、ボノボの集団移動の意志決定についての発表をすることが決定している。アウトリーチ活動としては、11月に、日本モンキーセンターにて野生ボノボの攻撃交渉について、一般向けの講演を行った。2015年1月から引き続き2015年7月まで、コンゴ民主共和国ルオー科学保護区において、野生ボノボの観察を行った。1攻撃交渉のパターン:集団内の攻撃交渉において、約7割がオス同士の攻撃交渉であった。またオスーメス間の攻撃交渉では、ほぼメスが勝者となった。オスーメス間での攻撃交渉において、他のメスが攻撃交渉に介入して支援することで、メスが勝者となることが多く観察され、メス間の同盟関係がボノボにおけるメスの社会的地位の高さに大きく影響していることが示唆された。また、メスの支援は、年上の個体が年下の個体を支援する傾向が見られ、年下の個体が年上の個体を支援することは少なかった。2集団の動きの意志決定:集団追跡中、3分以上の停止状態から、3頭以上の個体が移動した際、移動を開始した個体を「先導個体」、その個体に追尾した個体を「追尾個体」と定義し、どのような個体が先導個体となる傾向にあるか分析した。その結果、高齢のメスが先導個体となることが多く、若いメス、オス、未成熟個体は、追尾個体となることが多かった。このことから、ある場所から、次の採食・休息場所へ移動するタイミングは、高齢のメスが決定している傾向にあることがわかった。ボノボでは、オスではなく、メスが集団の動きをリードすることで、休息時間や採食時間の長さを調節していると考えられる。高齢個体は採食場所等、遊動域内の資源に関する知識が豊富であると考えられる。帰国後は、データ分析と論文執筆に取り組んだ。学会での発表を積極的に行った。7月に札幌で行われた国際野生動物管理学会と、三月に仙台で行われた日本生態学会で、ボノボの集団の動きの意思決定について発表した。8月にオーストラリア・ケアンズで行われた国際動物行動学会で、ボノボのメスの同盟関係について発表した。本来の計画では、コンゴ民主共和国での野生ボノボの観察は2014年12月に終え、その後はデータ分析と論文執筆に集中する予定であった。しかし、調査地近隣でのエボラ出血熱の発生により、調査期間の途中での帰国を余儀なくされた。このことにより、2014年度中にデータ収集を終えることができなかった。コンゴ民主共和国内でのエボラ出血熱の終結を待ち、2015年1月から7月までの予定で再渡航し、データの収集を再開した。予定はやや遅れているものの、データの収集は順調であり、予備分析でも興味深い結果がでてきている。2015年7月までのデータ収集で、論文作成のためのデータは揃う予定であるし、学位習得のために必要な国際学会での発表についても、2015年7月の国際野生動物管理学会で発表を行うことが決まっている。27年度が最終年度であるため、記入しない。27年7月初旬まで(27年1月より継続)、コンゴ民主共和国ルオー保護区ワンバにおいてフィールドワークを行い、野生ボノボの観察を行う。観察中は、パーティ追跡を行い、パーティ内の攻撃交渉の頻度とその詳細、遊動開始の意志決定、遊動中の動きの意志決定のデータを収集する。攻撃交渉については特に、2頭以上が協力して攻撃する「同盟」関係に注目して観察する。