hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
TGF αとTGF βの瘢痕形成に及ぼす影響とPG剤の瘢痕形成予防効果の基礎的検討

われわれは今回、PGE_1の瘢痕形成抑制効果について検討を加え、いくつかの知見を得たので報告する。われわれは実験に際し、手術時に採取した同一症例の肥厚性瘢痕皮膚および正常皮膚(真皮)から、それぞれ肥厚性瘢痕由来線維芽細胞(SHDF)と正常真皮由来線維芽細胞(NHDF)を分離培養し、その3から5代目の培養線維芽細胞を用いた。検討内容としては、in vitroにおいて同一症例のSHDFおよびNHDFの培養上清中のコラーゲン合成活性とコラ-ゲナーゼ活性およびTGF β_1産生量を定量し、さらにPGE_1を添加した際の効果について比較検討した。その結果、コラーゲン合成活性の両者間での差は認められず、コラ-ゲナーゼ活性はNHDFの培養上清中において、SHDFのそれよりも有意に高い結果を示した。それに対し、PGE_1によりコラーゲン合成活性の有意差は認められなかったが、コラ-ゲナーゼ活性は、両者ともに非添加群に比較して増加傾向が認められ、とくにSHDFでは有意な増加傾向を認めた。一方、TGF β_1は、SHDFでNHDFよりも有意に高い産生量を示し、このことから、瘢痕での線維芽細胞はautocrineにTGF β_1を産生し自らが増殖する方向にあると思われた。また、PGE_1添加では両者ともに有意ではないが、TGF β_1産生は増加傾向を示した。このことから、PGE_1はコラーゲン産生量には直接の影響を及ぼさないものの、コラ-ゲナーゼ活性を高めることにより分解を促進することが示唆され、この作用によりPGE_1は瘢痕抑制作用を発現する可能性があると思われた。しかし、PGE_1により有意ではないもののTGF β_1産生量も上昇するため、臨床においては長期間の使用ではなく、例えば表皮化までの使用にすべきかと思われた。
中世キリスト教圏のスペインにおけるユダヤ教

本年度の研究は概ね「研究実施計画」にもとづいて進められた。6月に京都ユダヤ思想学会第3回学術大会で「バルセロナ公開討論(1263年)-ナフマニデスの『討論録』より-」を発表した。また、8月に東京大学宗教学研究室とバル・イラン大学(イスラエル)の共同セミナーを行い、「Monotheism from Jewish Perspectives Known in Japan」を発表した他、バル・イラン大学の比較文化研究の研究者らと交流を図り、特にVered Tohar氏からは私自身の研究分野である中世ユダヤ教研究について多くのアドバイスを受けることができた。9月には日本宗教学会第69回学術大会で「中世ユダヤ教における『イスラエルの地』」を発表した。また、論文については、私の博士論文の中心に位置づけられる「ナフマニデスの聖書読解-註解と説教-」の査読審査が終わり、『ユダヤ・イスラエル研究』第24巻(2010年)に掲載された。さらに、6月の研究発表をもとに論文「ナフマニデスのメシアニズム-バルセロナ公開討論からの展開-」を日本宗教学会の会誌『宗教研究』に投稿した。本論文は2人の査読者による審査を経て、現在最終的な推敲段階にある。また、著作活動については、『世界宗教百科事典』(丸善、2011年出版予定)の「ラビ・ユダヤ教」の項目を担当し、上梓した。また、Moshe Halbertal氏のPeople of the Bookの翻訳を進めている。同著作はユダヤ教聖典の紹介および理論的研究として日本に紹介すべき優れた水準を持ち、また私の研究にとってもきわめて重要なものである。同書の出版については、私の受入研究者である市川裕教授(東京大学)の推薦を受けて、出版社と話し合いが行われ、来年度中の出版が予定されている。本年度の4-6月にかけて、前年度の研究発表をもとに学術論文「ナフマニデスの聖書読解-註解と説教」の執筆にとりかかった。同論文は日本ではほとんど知られていない中世ユダヤ教の聖書の学習様式について扱ったものであり、ユダヤ教をテーマとする宗教学的な聖典研究として表された。私は22年2-3月に同論文の最終的な推敲を終え、3月31日に日本ユダヤ学会に提出した。審査の後、22年度9月刊行予定の雑誌『ユダヤ・イスラエル研究』第24号に掲載される予定である。8-9月にはイスラエル・ヘブライ大学に渡航し、本研究課題と関わりのあるヘブライ語の文献を調査・収集した。ヘブライ大学図書館と国立図書館、エルサレムを中心とする書籍店などで多くのヘブライ語資料、論文、書籍を集めることができ、また中世ユダヤ教研究の現地での状況を知ることができた。また滞在中にヘブライ大学教授M.Halbertal氏と面会をし、私自身の紹介と研究報告、今後の留学時における受け入れ願いなどをおこなった。Halbertal氏の著作は一部邦訳されている(『偶像崇拝』(法政大学出版局、2007年))が、私自身も彼の研究を日本に紹介する役割を果たすべく準備を進めている。帰国後私は東京大学宗教学研究室の大学院ゼミで研究発表「中世ユダヤ教における聖典と『イスラエルの地』」を発表した。この発表をもとに同タイトルの学術論文の執筆にとりかかっている。私の研究はユダヤ人学者ナフマニデス(1194-1270)を中心とするものだが、上記の論文および研究発表では、彼だけでなく中世ユダヤ教の主要な学者たちの著作にも参照しており、中世ユダヤ教の思想史および聖典解釈史へと向かう視座を定めようとするものでもある。また、私はユダヤ教研究の担い手の多くがユダヤ人であるなか、異文化としてユダヤ教にアプローチし、大学院や学会などで宗教学という議論の場において、他の宗教の研究者とも積極的に議論をおこなうことができた。
英語学術論文作成を目的としたピア・レビューの活用法―科学論文に焦点を当ててー

本研究では、英語科学論文執筆のためのピア・レビューの活用法について検証した。理系学部1年生100名を、統制群と実験群1、実験群2に振り分け、実験群に一学期間、互いの作文についてコメント・訂正をさせた。使用言語として、実験群1は英語のみ、実験群2は英語および日本語を自由に選択させた。その結果、被験者全員のライティング能力が向上したが、実験群においてより顕著であり、特に作文の複雑さと流暢さが有意に向上した。実験群1と2には差はみられなかったが、日本語を使用した方が論文執筆に対する抵抗感が弱まり、受講者間の相互作用が活発化することが明らかとなった。学術論文の執筆は理系大学生にとって大きな課題である。グローバル的に活躍するために、英語の「書く」力を確保しないといけない。先行研究(科研課題番号21820010)では、理系英語学術論文に関する基礎研究が行われた。論文執筆のための指導法や教材が考察された。その結果、大学生の論文執筆能力を向上させるためにピア・レビューが高い効果をもたらしたことが実証された。本研究は英語科学論文執筆のため、ピア・レビューの活用とその効果を考察した。京都大学の必修英語学術ライティング授業(合計三つのクラス、100人の理系大学一年生)から参加者を集めた。被験者を3つのグループ、対照群、実験群1及び実験群2に分けた。Pre-testでは被験者全員にone paragraph (200 words)を書かせ、内容、構成、語彙、文法など観点から分エラー傾向析を行った。Treatmentではピア・レビューを実験群1及び実験群2のクラスに導入した。実験群1のクラスでは被験者は日本語を利用し、ピア・レビューを行った。実験群2のクラスでは被験者は英語を利用し、ピア・レビューを行った。Post-testでは被験者全員に同じone paragraph(200 words)を書かせ、内容、構成、語彙、文法など観点から分エラー傾向析を行った。結果として対照群より、実験群1及び実験群2の被験者のライティングが上達することができた。また、実験群2より実験群1のライティング能力の方が上達することができた。本研究から日本人大学生の英語学術論文執筆能力の上達に、ピア・レビューは効果であったことが分かった。また、日本語によるピア・レビューの効果が一番高かったことが分かった。現代の日本社会では、科学技術は海外から学び取るものだけではなく、グローバルに発信すべきものある。よって、グローバルな社会で活躍するために、英語を学術的に、「書く」と「読む」力を確保しないといけない。本研究は英語科学論文執筆のため、ピア・レビューの活用とその効果を考察している。Post-testでは被験者全員に同じone paragraph (200 words)を書かせ、内容、構成、語彙、文法など観点から分エラー傾向析を行った。また、実験群2より実験群1のライティング能力の方が高まった。この段階では日本人大学生の英語学術論文執筆のため、ピア・レビューの効果が確認できた。また、日本人大学生にとって日本語によるピア・レビューの効果が一番高かった。本研究は英語科学論文執筆のため、ピア・レビューの活用とその効果の考察を目的としている。科学論文の執筆は大学生にとって極めて困難な課題である。その中、英語が母国語ではない日本人大学生にとって論文の執筆は更に難しい。達成度としては以下である:授業でのピア・レビューの導入仕方を考察することができた。

訓練の繰り返しによって、日本人大学生はピア・レビューを行うことができると分かった。しかし、ピア・レビューの導入に当たって幾つかの問題が発生した。1)大学生はピア・レビューに慣れるまで予測したより時間がかかる。よって、実験群にピア・レビューの訓練時間が不足していると考えられる。2)英語能力によってピア・レビューの学習効果が違ってくる。実験を実施している授業では英語の能力わけがないため、ピア・レビューの導入が難しい。英語能力が低い被験者のため、日本語の説明も必要であると考えられる。英語と日本語の使用によりピア・レビューにどのような違いが出るのかについて調査してみた。結果としては、英語よりも日本語の方が効果が高かった。特に文の内容や構成に対してコメントが多かった。コメントをする及び受け入れることにより、査読者の論文執筆能力がどのように変化するのかについて調査ができなかった。これを今後の課題の一つにしたい。24年度の研究課題に引きついて、25年度でも京都大学の必修英語学術ライティング授業(合計三つの授業、100人の理系大学一年生)から参加者を集める。被験者にone paragraph (200 words)を書かせ、作文の評価を行う。内容、構成、語彙、文法など観点から文のエラー傾向分析を行う。被験者を3つのグループ、対照群、実験群1及び実験群2に分け、Pre-test, treatment及びPost-testを行う予定である。研究の結果を海外・国内の英語教育学会で発表する。研究費を主に謝礼と学会参加費で使用する予定である。被験者が書いた文章を評価してもらうために、Native speaker TAに支払う謝礼である。また、エラー傾向分析を行うため、TAに支払う謝礼として使用する予定である。研究の結果を3つ(一つ海外の英語教育学会と二つ国内の英語教育学会)の学会で発表する予定である。最後に、SurveymonkeyというアンケートソフトとSPSSを購入する予定である。
湿地系の水文学展開のための基礎的研究

湿地系では水の態様、すなわちその水文学が非常に重要な役割を有している。湿地系の土地利用、特にその保全や復元を考えるとき、水文学的検討を十分におこなうことが必要であるが、平坦で過湿な湿地系の水文について、水収支や水流動の形態についてこれまで十分な解明がなされたとはいいがたい。本研究は、特に北海道に広く分布する泥炭地湿原において、その形質を決定づけている水文環境について、泥炭地表面における水分動態を地下水位変動を指標として明らかにし、それをもとに水収支モデルを構築し、泥炭地の保全・復元に資することを目的とした。本研究では北海道北部のサロベツ泥炭地において、各種観測・調査をおこなった。精密な地下水位変動および降雨量の観測を実施し、同時に電気伝導度計(EC計)を用いて、地下水のEC変化を連続観測し、地下水位変動とEC変動の関連を解析した。また現地に設置した簡易なライシメータでのデータを元に、降雨直後の水の動態、あるいは無降雨時の蒸発散が地下水位低下に及ぼす影響等を検討した。さらに表層泥炭の透水性についての検討を、室内実験をもとにおこなった。泥炭地の地下水位変動をモデル化し、蒸発散の季節変化にともなう地下水位変動への影響、水分動態における蒸発散の寄与の割合等を明らかにした。また植生調査を実施し、植生ならびにその群落構造と蒸発散、地下水位変動との関連について検討した。さらに特異な間隙構造を有する泥炭の透水性、不均一性等について、軟X線画像による解析を試みた。本研究は、特に北海道に広く分布する泥炭地湿原において、その形質を決定づけている水文環境について、泥炭地表面における水分動態を地下水位変動を指標として明らかにし、それをもとに水収支モデルを構築し、泥炭地の保全・復元に資することを目的としている。本年度は、北海道北部のサロベツ泥炭地において、各種観測・調査をおこなった。精密な地下水位変動および降雨量の観測を実施し、同時に電気伝導度計(EC計)を用いて、地下水のEC変化を連続観測した。地下水位変動とEC変動の関連を解析している。さらに表層泥炭の透水性についての検討を、室内実験をもとにおこなっている。次年度は、蒸発散の季節変化にともなう地下水位変動への影響、水分動態における蒸発散の寄与の割合等を明らかにしたい。また植生調査を実施し、植生ならびにその群落構造と蒸発散、地下水位変動、栄養塩との関連について明らかにする予定である。さらに特異な間隙構造を有する泥炭の保水性、不均一性等と水分動態について、土壌学的手法を用いて分析する。
魚類個体群における種内二型の維持に対する捕食行動の影響について

魚類において、筋肉・骨格が体の左右で異なることが知られている。これを左右性と言い、右(左)体側が発達している個体を右(左)利きと言う。現在、左右性が魚類において普遍的に見られる種内二型であることを、研究代表者を含む研究チームが確認しつつある。同時に、全種に共通して用いることができる利き判定指標の計測方法が確立された。このことにより、種間の利きの大きさを比較することが可能となり、食性や系統的な古さとの関係を検討することが可能となった。また、右(左)利きの捕食者は左(右)利きの個体を多く捕食することが知られている。このように捕食者と被食者の利きが逆である捕食を交差捕食、利きが同じである捕食を並行捕食と名付けた。本研究は、食う-食われるの関係を介して右利きと左利きにおいて頻度依存淘汰が起きていることを示唆する数理モデルを発表してきた。一方で、自然界で交差捕食が卓越している理由はまだ明らかになっていない。そこで、捕食行動に体の非対称性が影響しているのではないかと考え、オオクチバスを用いた実験を行った。魚が静止状態から急発進する際には体の左右一方を縮めてから逆方向へ跳ねることで推進力を得ることが多いが、この縮める側が利きの側であり、跳ねた方向は利きと逆であると予想される。実験結果からも、体の左体側が発達している左利きは右方向へ、右利きは左方向へ跳ねることが示唆された。結果は論文として投稿中である。さらにこの結果をアメリカ生態学会年会や日本水産学会関東支部会等で発表した。研究対象としている魚類の右利き・左利きという種内二型(左右性)は、タンガニイカ湖のシクリッドおよび琵琶湖の数種で確認されている。その遺伝性や交差捕食といった生態学的特徴から、その二型の数理的研究は進んでいる。しかし左右性研究の端緒は開かれたばかりであり、その狭義の定義も左右性が確認される魚種が増えるたびに広がっている。いずれの魚種においても利きは下顎の左右の付根の位置のずれで判定するが、どのくらい右利きあるいは左利きなのか、という利きの度合いの指標はこれまでの研究ごとに異なっており、確立されていない。直感的には、利きが強いほど利きが行動に与える影響(交差捕食と並行捕食の差、進行方向と進行速度の関係等)は大きいはずであり、この仮説は利き度合い指標が確立されれば実験的に確かめることができる。利きの進化を考えるにあたっては、このような利きと行動の相関が重要である。左右非対称性は、元は対称であった個体が何らかの要因で左右にずれ、そのずれが自然淘汰の結果広がったものと考えられているからである。そこで、形態調査と行動実験から利き度合いと行動の相関を調べ、得た結果を生かした数理モデルを構築して左右性の進化を解明する研究を行なった。具体的には、オオクチバスを用いた捕食行動の実験結果をまとめ、その結果を生かした数理モデルを構築している。また、モデル構築に当たり、カナダ・トロント大動物学科のPeter A.Abrams教授が所有するデータおよび文献を参考にするために渡加した。また、数理モデルを国際学会(The European Conference on Mathematical & Theoretical Biology 05)において発表した。
フッ素ラベルリガンドとレセプターとの相互作用に関する研究

昨年度に引き続き、さらに局所麻酔薬であるペンサイクリジン(PCP)誘導体の合成を行った。シクロヘキサノンにピペリジンを作用させ、シッフ塩基とした後、これに種々のフッ素グリニャール試薬を作用させ、フッ素PCP誘導体を得た。生理活性試験及び安定度試験を行ったが、昨年度発見した、m-CF_3-PCPを越える誘導体は得られなかった。次に、m-CF_3-PCPを用いて、ニコチン性アセチルコリンレセプターとの結合実験を試みた。まず、詳細な結合条件の検討を行った。次に、m-CF_3-PCPを結合させ、個体NMR(SS-NMR)によるフッ素シグナルの観測を試みたみた。Enrichedmembrane protein 10mg(約20%がnAChR,ca 7 nmol)にm-CF_3-PCP(2μl of 5mM solution)をTorpedo salines中で結合さた。次により強力なアンタゴニストであるTCPを加え、シグナルの変化をSS-NMRで観察した。予備実験の結果、43 KDa proteinをアルカリ処理により除いたレセプターに結合したm-CF_3-PCPのフッ素シグナルが観測され、このシグナルはTCPの投与により消失する事が確認された。また、43 KDa proteinを残したままのレセプターにもCF_3基に由来するシグナルを観測することができた。また、距離測定のモデル化合物の再検討を行った。フッ素キノリン誘導体が距離測定に最適であることを発見した。更に距離測定の際、問題となる非フッ素誘導体による希釈の方法についても詳細な検討を行った結果、共結晶化が最も有効であることを発見した。局所麻酔薬であるぺんサイクリジン(PCP)のフッ素誘導体の合成を試みた。シクロヘキサノンにピペリジンを作用させ、シッフ塩基とした後、これに種々のフッ素フェニルグリニャ-ル試薬を作用させPCPのフッ素誘導体を得た。この内、パラ位にトリフルオロメチル基を有する物は、本実験条件下で不安定であることが判明したので、オルト位にトリフルオロメチル基を有するPCP誘導体を使用することとし、生理活性試験を行った。ニコチン性アセチルコリン(nAChR)に対するアンタゴニスト活性試験を行ったところ、Ki=113nMというまずまずの値を得ることができた。また、レセプターとの結合実験に必要である競合阻害剤を見つけるため、PCP誘導体の競合阻害実験をも行った。種々の化合物を検討した結果チオフェン誘導体であるTCPが効率よく、このPCP誘導体をレセプターより追い出すことを見いだした。さらに、フッ素固体NMRのために、PCPのフォトアフィニティー実験の条件について詳細な文献検索をおこなった。また、フッ素固体NMRのついもNMRメーカーである日本電子の技術員と詳細な議論を行い、その汎用性について検討した。さらに、フッ素官能基間の距離測定を目的として、モデル化合物の再検討を行った結果、以前緩和時間等の問題により使用不可能と考えられていたモノフッ素官能基が実験条件によっては使用可能であることを見いだした。これによりより効率的なモデル化合物を新たにデザインする事が可能になった。
低温誘導性細胞膜修復タンパク質に注目した植物耐凍性機構の解明とその応用

昨年度計画の目標は、1)EGTA、Ca^<2+>、Mg^<2+>存在下でのプロトプラストを用いた低温馴化前後での生存率の測定、2)synaptotagmin-likeタンパク質の特異抗体の作製、3)anti-synaptotagmin-like protein存在下でのプロトプラストを用いた低温馴化前後での生存率の測定、4)抗体を用いた内膜synaptotagminisoformの検索とTOF-MSによる同定、の4項目であった。このうちの2項目めまではほぼ達成でき、3項目めの実験を検討しているときに、岩手大学農学部COE助教授として赴任することになり、日本学術振興会特別研究員を途中辞退することになった。2項目までの結果をまとめと、1)耐凍性の半分以上はCa^<2+>依存性であり、少なくともCa^<2+>は0.5mM以上必要であることが明らかとなった、2)synaptotagmin-likeタンパク質の重要なドメインであるC2Aドメインのペプチド抗体を作製したところ、synaptotagmin-likeタンパク質に特異的に反応する抗体が得られた。Mg^<2+>はこのCa^<2+>依存性の細胞膜修復に対して拮抗阻害することが報告されているので(Steinhardt et al. 1994)、当初はMg^<2+>存在下での生存率測定も行うことも検討されていた。しかしCa^<2+>依存性の耐凍性が以上の実験で十分に示されたので割愛することにした。上記に記したとおり、申請者は平成17年度1月15日より岩手大学農学部COE助教授として赴任することになったが、今回の研究で得られた実験結果を下に、引き続き、また実験規模を拡大し、低温馴化後の細胞の凍結に対する安定性上昇のメカニズムを細胞膜修復機構の観点から更なる研究を行っていく予定である。
熱外中性子偏極デバイスの開発と実用化に関する研究

本研究では、熱外中性子を効率良く偏極して用いるための、熱外中性子の偏極技術開発およびその実用化に関する研究として、熱外中性子を安定に且つ効率良く偏極させることができる唯一の方法と考えられる、オンビーム型スピン交換光ポンピング(Spin-Exchanged Optical Pumping, SEOP)法に基づくHe-3ガスを用いた中性子偏極フィルター(以下、He-3偏極フィルターと称する)の開発を行う。熱外中性子を効率良く偏極させるためには、多量(約500cc)のHe-3ガスの核スピンを約80%程度以上の高い偏極度まで偏極させる必要があり、本研究では、その実現のために以下の項目の開発に取り組む。開発項目1:レーザー波長をSEOP法で用いるアルカリ金属の吸収幅(0.2nm)程度まで狭帯域化した、安定で且つ高出力(100W程度以上)の高強度小型レーザー光学系の開発。開発項目2:アルカリ金属の電子スピン偏極を、He-3核スピンの偏極へ効率良く移行させるために、特殊アルミシリケートガラスにHe-3ガスと共にルビジウムRbおよびカリウムKを最適な混合比で封入したセル(以下、ハイブリッドセルと称する)の開発本研究課題の1年目である2018年度は、以下を実施した。体積ブラッグ回折格子および半導体レーザーダイオード素子を用いて、開発項目1の高強度レーザーの開発を行い、所望の波長幅で、設計通り出力の有するレーザー発振部を開発した。また、開発項目2のセル開発の準備として、超高真空仕様の超高純度He-3ガスを封入装置の立上げを行い、所望の最高到達真空度(10-7Pa台)を達成した。上記の開発研究の成功により、当初の計画通り、2018年度の研究開発目標を達成することができた。計画段階から周到に調査を進めて、事前にしっかり計画を立てられたこと、また、研究を推進しながら、学会や研究会で他の研究者と有意義な議論を行い、得られた知見を研究活動に上手く活かせたことで、計画通りに研究を推進することが出来たと考えている。研究の途中に於いても、発表できる成果については、積極的に学会や研究会等で発表し、他の研究者と議論を行うことで、研究の進め方について、常に客観的な評価を確認しながら、研究活動に当たることを心がけるようにする。研究を進める過程で、消耗品の仕様の変更が発生したため、わずかに残額が発生した。本残額については、2019年度の成果最大化のために消耗品等の仕様の見直しを行い、使用する
角膜の損傷治癒過程におけるMMPsとTIMPsの発現と役割についての実験的研究

近年、筋線維芽細胞(MF)が組織の損傷治癒過程で重要な働きをなすことが明かとなって来ている。私達は角膜の損傷治癒過程においても実質細胞がMFに形質転換することを明らかにした。今回、創傷の治癒過程における細胞外基質(ECM)再構築に重要な役割を行っている、マトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)とそのインヒビターであるTIMPがMFによって産生される可能性について検討を行った。さらに新生血管内皮細胞におけるMMPの発現についても検討を行った。実験はウサギ角膜にアルカリ損傷、全層切開、Arthus反応による損傷を惹起させ主として形態的検索を行った。この結果、光顕及び電顕免疫組織学によりアルカリ損傷及び全層切開群において、MMP-1はMFに1週間目より明かな発現を認め、MMP-2、MMP-9は4週目頃より発現の増強が観察された。MMPの発現はアルカリ損傷群により強い発現が観察された。TIMP-2はいずれの損傷においても1週目よりMFに陽性であった。In situ hybridizationによりMFにMMP-9のmRNAの存在が確認された。MMP-2,MMP-9についてgelatin zymographyにより検討したところ、形態的観察とほぼ一致して活性型のMMP-2及びMMP-9の存在が確認された。角膜内にArthus反応を起こすことにより夥しい血管の新生が観察され、これらの新生血管の内皮細胞は普遍的にMMP-2の発現を認められた。一方、MMP-9は血管進展領域部の内皮細胞のみに陽性であった。MFはすでに報告されている様にECMの産生に関与して損傷治癒を進めるばかりでなく、損傷により生じた変性ECM及び本来角膜にはほとんど存在せず、治癒過程に合目的的にMF自ら産生したType III、Type IVコラーゲンの様なECMのその後の分解などにも関与し、組織の再構築により積極的に参加していることが明らかとなった。血管新生に関してはMMP-9が重要であることが示唆されたが、今後さらに検討する予定である。
鳥類松果体をモデルとしたリズムの発信機構と光受容機構の分子細胞学的研究

ヒヨコ松果体は一個一個の細胞に光受容機構、時計機構、およびメラトニン合成機構が備わり、明暗条件下で培養すると暗期に高く、明期に低いメラトニン分泌リズムが認められ、恒常暗下では自由継続リズムを示す。この恒常暗下でのメラトニンの自由継続リズムは時計自身のリズムを反映しているわけであるから、細胞内において時計は何らかの伝達因子を使ってメラトニンリズムを駆動していることになる。今回この「時計からのリズムがどのようにしてメラトニン分泌リズムを駆動させているのか?」の解明を試みた。恒常暗下でヒヨコ松果体細胞を培養し、細胞内・外Ca^<2+>キレート剤およびカルモジュリン依存性プロテインキナーゼII(CAMKII)の阻害剤の濃度を変えて培養液にそれぞれ添加した。その結果、いずれもcAMP、メラトニン分泌を同時に抑制した。そこで、cAMP反応エレメント結合蛋白質(CREB)のリン酸化が関与しているかどうかを検討するため、恒常暗下でのヒヨコ松果体細胞培養においてCAMKIIとPKAの阻害剤を添加した後、リン酸化CREB抗体を用いて免疫染色した。その結果、無添加群に比べてリン酸化が有意に抑制された。以上の結果から、時計のリズムがメラトニンの合成、分泌を誘起する過程に、Ca^<2+>-カルモジュリン、およびその下流にcAMP-CREBリン酸化が関与していると推察された。そこで、次に、どのようなタイプのアデニル酸シクラーゼがヒヨコ松果体に存在するのかを検討するため、アデニル酸シクラーゼ(AC)のクローニングを行った。その結果、哺乳類のアデニル酸シクラーゼタイプVIII(AC8)と高い相同性のものが存在することが明らかとなつた。このAC8はCa^<2+>/calmodulin感受性であり、先の結果と矛盾しない。以上の結果により、時計のリズムがメラトニン合成を誘起する過程に、Ca^<2+>/calmodulin-cAMP-CREBリン酸化の経路が関与していること、また、ヒヨコ松果体細胞には細胞内のCa^<2+>/calmodulinによって活性化されるアデニル酸シクラーゼタイプVIIIが存在することが明らかになった。これらのことから、ヒヨコ松果体では、時計からのシグナルがカルシウムチャネルを開き、流入したカルシウムはカルモジュリンと結合した後、AC8を活性化しcAMP-PKA-CREBのリン酸化を通してメラトニン合成へ伝達されると推察された。ヒヨコ松果体は一個一個の細胞に光受容器、時計機構、およびメラトニン合成機構が備わり、互いに共役することによりメラトニン分泌リズムを示す。松果体細胞を明暗条件下で培養すると、暗期に高く明期に低いメラトニン分泌リズムが認められ、恒常暗下では自由継続リズムを示す。この恒暗条件下のメラトニンリズムは時計のアウトプットを反映する訳であるから、細胞内に時計からの伝達因子が存在することになる。今回、この時計からのリズムはどのようにして、メラトニン分泌リズムを作っているのかを生化学的に検討した。ヒヨコ松果体細胞を還流培養し、メラトニン上昇時に種々の薬物を添加したところ、以前に見られたプロテインキナーゼAの阻害剤と細胞内、および細胞外Caキレート剤のみメラトニンの上昇を阻止した。これらのことから、時計のリズムがメラトニン合成へ伝達される過程に、cAMPとCaが関与している可能性が示唆された。さらに、タプシガルジンやダントロレンなどが夜間のメラトニン上昇を抑制しなかったことから、Caの関与は細胞外からの流入にあると推測された。次に、EGTAの濃度を変えて、培養液に添加したときのメラトニン分泌量と培養液中のcAMPの濃度の相関を検討した結果、Caのキレート剤は両者を同時に抑制することが判明した。ヒヨコ松果体ではcAMPはメラトニン合成を促進することが以前から知られていることから、今回の結果と併せて推測すると、時計のシグナルはCaの流入を招き、これによってアデニルサイクラーゼが活性化し、cAMPを介してメラトニン合成を行っていると推測された。現在どのタイプのアデニレートサイクラーゼが存在するのかのクローニングを行っている。

以上の結果から、時計のリズムがメラトニンの合成、分泌を誘起する過程に、Ca^<2+>-カルモジュリン、およびその下流にcAMP-CREBリン酸化が関与していると推察された。そこで、次に、どのようなタイプのアデニル酸シクラーゼがヒヨコ松果体に存在するのかを検討するため、アデニル酸シクラーゼ(AC)のクローニングを行った。その結果、哺乳類のアデニル酸シクラーゼタイプVIII(AC8)と高い相同性のものが存在することが明らかとなつた。このAC8はCa^<2+>/calmodulin感受性であり、先の結果と矛盾しない。以上の結果により、時計のリズムがメラトニン合成を誘起する過程に、Ca^<2+>/calmodulin-cAMP-CREBリン酸化の経路が関与していること、また、ヒヨコ松果体細胞には細胞内のCa^<2+>/calmodulinによって活性化されるアデニル酸シクラーゼタイプVIIIが存在することが明らかになった。これらのことから、ヒヨコ松果体では、時計からのシグナルがカルシウムチャネルを開き、流入したカルシウムはカルモジュリンと結合した後、AC8を活性化しcAMP-PKA-CREBのリン酸化を通してメラトニン合成へ伝達されると推察された。
温度感受性レトロウイルスを用いたリンパ系細胞分化の解析

リンパ球分化誘導の機構を蛋白分子・遺伝子レベルで解析するための新しいシステムを開発するために, Abelsonマウス白血病ウイルス(A-MuLV)より温度感受性変異ウイルス(ts変異株)の単離を試み,これに世界で初めて成功した.このウイルスに感染し形質転換された幼若Bリンフォーマは,低温度の培養条件では幼若細胞の分化段階に固定されたまま自立的な増殖を続けるが,高温度の培養条件では細胞表面免疫グロブリン(sIg)陽性の成熟細胞へ,更にマイトーゲンの刺激により抗体分泌細胞へと分化する.この過程で,細胞の腫瘍化に大きな役割をはたすA-NuLV由来蛋白p120のチロシンキナーゼ活性が著明に減少することから,幼若リンフォーマにあらかじめプログラムされていた分化誘導関連機構がウイルス感染とそれに続く形質転換の過程でブロックされること,またこのブロックがp120のキナーゼ活性の低下に伴って解除されることが示唆された.このts変異株ウイルスを用い前B細胞,前々B細胞クローンや,幼若T細胞株が確立された.得られた幼若Bリンフォーマクローンに分化を導入しIg遺伝子発現の過程を同一クローン内で経時的に観察した結果,少なくとも我々の得たクローン内では, Ig再構成の際に用いられるVH遺伝子が再構成前の分化段階ですでに決定されていること,再構成後産生されたμ鎖が未知の蛋白と共に細胞表面に発現されることなどの新しい知見を得た.一方我々は胸腺組織培養法を用いて,胎生期胸腺に存在する種々の幼若リンパ球の株化に成功した.これらの細胞株のあるものは前B細胞の分化段階に属していることが明らかとなり,また種々の細胞移入の実験から,胎生期胸腺には高頻度でB前駆細胞が存在することを初めて明らかにした.またこのシステムを用いて今まで報告のない.Thy-1陽性, AA4陽性, IL-2レセプター陽性の表現型をもつ幼若T細胞の株化にも成功した.リンパ球分化誘導の機構を蛋白分子・遺伝子レベルで解析するための新しいシステムを開発するために, Abelsonマウス白血病ウイルス(A-MuLV)より温度感受性変異ウイルス(ts変異株)の単離を試み,これに世界で初めて成功した.このウイルスに感染し形質転換された幼若Bリンフォーマは,低温度の培養条件では幼若細胞の分化段階に固定されたまま自立的な増殖を続けるが,高温度の培養条件では細胞表面免疫グロブリン(sIg)陽性の成熟細胞へ,更にマイトーゲンの刺激により抗体分泌細胞へと分化する.この過程で,細胞の腫瘍化に大きな役割をはたすA-NuLV由来蛋白p120のチロシンキナーゼ活性が著明に減少することから,幼若リンフォーマにあらかじめプログラムされていた分化誘導関連機構がウイルス感染とそれに続く形質転換の過程でブロックされること,またこのブロックがp120のキナーゼ活性の低下に伴って解除されることが示唆された.このts変異株ウイルスを用い前B細胞,前々B細胞クローンや,幼若T細胞株が確立された.得られた幼若Bリンフォーマクローンに分化を導入しIg遺伝子発現の過程を同一クローン内で経時的に観察した結果,少なくとも我々の得たクローン内では, Ig再構成の際に用いられるVH遺伝子が再構成前の分化段階ですでに決定されていること,再構成後産生されたμ鎖が未知の蛋白と共に細胞表面に発現されることなどの新しい知見を得た.一方我々は胸腺組織培養法を用いて,胎生期胸腺に存在する種々の幼若リンパ球の株化に成功した.これらの細胞株のあるものは前B細胞の分化段階に属していることが明らかとなり,また種々の細胞移入の実験から,胎生期胸腺には高頻度でB前駆細胞が存在することを初めて明らかにした.またこのシステムを用いて今まで報告のない.Thy-1陽性, AA4陽性, IL-2レセプター陽性の表現型をもつ幼若T細胞の株化にも成功した.リンパ球分化の機構に関する蛋白分子・遺伝子レベルの解析を可能にするシステムを作るために、Abelsonマウス白血病ウイルス(A-MuLV)より温度感受性変異ウイルス株(ts mutant)を単離し、このts mutantに感染した幼若リンフォーマクローンを確立した。このクローンは低温の培養条件では細胞表面抗体(SIg)陰性のpreB細胞の成塾段階に属し増殖を続けるが高温度の培養条件ではSIg陽性の成塾細胞へ、更にマイトーゲンの刺激により抗体分泌細胞へと分化する。これらの各分化段階におけるIgの異なった発現は、抗体遺伝子RNAレベルでの調節に関連することが明らかにされた。細胞感染温度感受性A-MuLV由来蛋白(p120)はチロシンキナーゼ活性を持つことが知られており、またこの蛋白の発現は細胞の腫瘍化に重要な役割をはたすことが示唆されている。我々の確立したリンフォーマ・クローンでは、低温度でのA-MuLV由来蛋白のキナーゼ活性は正常であるにもかかわらず、高温度ではその活性が1/10から1/100に低下することが認められた。この事実は、幼若リンフォーマにあらかじめセットされた分化の機構がA-MuLVの感染を契機としてブロックされると、またこのブロックがp120蛋白のキナーゼ活性の低下により部分的に解除されることを示唆する。現在我々は、A-MuLV温度感受性変異ウイルス遺伝子のクローニングを試み、また同一のウイルスを用い幼若T細胞ラインの獲得を試みている。幼若胸腺細胞のts mutant感染により現在いくつかのラインが単離されその性状を解析している。

また現在我々は、Bリンパ球の各分化段階に特異的に発現される分化関連遺伝子の単離を遺伝子工学・免疫化学の技術を用いて行なっているが、これらの試みは、リンパ球分化の機構の解明に有用と思われる。
Th1/Th2バランス制御法の癌免疫療法への応用

免疫制御の中枢的役割を演じるTh1,Th2細胞の抗腫瘍免疫における役割を以下の方法によって世界に先駆け明確にすることができた。1.抗原特異的なTh1およびTh2細胞を用いた養子免疫療法モデルの確立:Th1,Th2細胞をOVA特異的TCRトランスジェニックマウスから誘導し、A20,BリンフォーマOVA遺伝子を導入したA20-OVAに対する抗腫瘍活性を生体内で検討する。2.RAG2-/-マウスを用いたTh1,Th2細胞媒介腫瘍メカニズムの解析:A20-OVA担癌RAG2-/-マウスを用いてTh1,Th2細胞による抗腫瘍効果を検討して、DC8+T細胞の要求性を明らかにする。3.Th1,Th2細胞の腫瘍組織への浸潤に重要な接着分子の検討を行う。その結果、抗原特異的Th1,Th2細胞はいずれも強いin vivo抗腫瘍活性を示すが、その作用機序は異なることが明らかにされた。すなわち、Th1はリンパ球浸潤をともなった細胞性免疫で腫瘍を拒絶したが、Th2は好酸球の浸潤をともなった炎症反応で腫瘍壊死を誘導した。RAG2-/-マウスを用いた実験からTh1,Th2細胞の抗腫瘍発現には、宿主のCD8+T細胞が不可欠であることも示された。さらに、Th1細胞療法においてはLFA-1/ICAM-1接着分子が不可欠であるが、Th2細胞療法においてはLFA-1分子を必要としないことが証明された。Th1細胞によって完治したマウスからは腫瘍特異的CTLが誘導されたが、Th2で完治したマウスからはCTLが誘導されなかったことから判断して、将来的にはTh1主導免疫増強法の開発が新しい癌免疫法の開発に有用と考えられる。
せん断弾性波速度測定による盛土の健全性評価手法の提案

標準貫入試験をはじめとするサウディングやPS検層などから得られる地盤情報は一次元的な線情報であり,二次元(あるいは擬似三次元)の情報を得るには多大な費用と労力が必要である.一方,表面波探査は非破壊探査であり,乱さない状態における原地盤の二次元的な力学情報老得ることができる.地盤の地表付近を伝播する表面波(レイリー波)を測定・解析することにより,深度20m程度までの地盤の二次元的なせん断波速度Vsの分布がボーリング孔を掘ることなく,迅速に得ることができる.最近,地盤工学における表面波探査の適用が広まりつつあり,今後,自然斜面や盛土の内部状態を把握する手法を確立する上では,非破壊試験である表面波探査は有望であると考えられる.また,室内試験と現場調査の両方を合理的に相互補完するツールとして表面波探査が有用であると考えられる.本研究では,壁面工に大変状が発生したジオテキスタイル補強土壁に対して表面波探査,PS検層,RI検層,ボーリング調査および標準貫入試験から補強土壁および背面盛土の現況を調査した事例について検討を行った.表面波探査より得られたVsの分布において局所的にVsが低下していた箇所と当該補強土壁の変状箇所が一致した.さらに変状箇所近辺において,N値および乾燥密度が相対的に小さな脆弱層が確認できた.また,この脆弱層における含水比は,盛土の他の部分よりも相対的に高かった.以上の結果から,表面波探査を用いることで既存盛土の含水比や乾燥密度の低下を概略把握できるとことがわかった.さらに,従来の1次調査の際に表面波探査を実施して,大まかなVsの分布を把握することで効率的なボーリング調査などが可能となり,それによって調査費用の大幅な削減が期待できると言えよう.標準貫入試験をはじめとするサウディングやPS検層などから得られる地盤情報は一次元的な線情報であり,二次元(あるいは擬似三次元)の情報を得るには多大な費用と労力が必要である.一方,表面波探査は非破壊探査であり,乱さない状態における原地盤の二次元的な力学情報老得ることができる.地盤の地表付近を伝播する表面波(レイリー波)を測定・解析することにより,深度20m程度までの地盤の二次元的なせん断波速度Vsの分布がボーリング孔を掘ることなく,迅速に得ることができる.最近,地盤工学における表面波探査の適用が広まりつつあり,今後,自然斜面や盛土の内部状態を把握する手法を確立する上では,非破壊試験である表面波探査は有望であると考えられる.また,室内試験と現場調査の両方を合理的に相互補完するツールとして表面波探査が有用であると考えられる.本研究では,壁面工に大変状が発生したジオテキスタイル補強土壁に対して表面波探査,PS検層,RI検層,ボーリング調査および標準貫入試験から補強土壁および背面盛土の現況を調査した事例について検討を行った.表面波探査より得られたVsの分布において局所的にVsが低下していた箇所と当該補強土壁の変状箇所が一致した.さらに変状箇所近辺において,N値および乾燥密度が相対的に小さな脆弱層が確認できた.また,この脆弱層における含水比は,盛土の他の部分よりも相対的に高かった.以上の結果から,表面波探査を用いることで既存盛土の含水比や乾燥密度の低下を概略把握できるとことがわかった.さらに,従来の1次調査の際に表面波探査を実施して,大まかなVsの分布を把握することで効率的なボーリング調査などが可能となり,それによって調査費用の大幅な削減が期待できると言えよう.
光周反応による家畜家禽の松果体-下垂体腺葉との関連性についての生体機構学的研究

ヤギ(日本ザーネン種)の生後10日から成体に至る10頭(雄6、雌4)、長野県伊那地方で捕殺された、ニホンカモシカの生後6ヵ月頃から老齢に至るもの及び妊娠中のもの29頭(雄16、雌13)と成鶏(産卵鶏と休産鶏)30羽ウズラの雄のふ化後から6週齢(成体)までの68羽を用い、松果体,下垂体腺葉,生殖腺と光周反応やライフサイクルとの関連性を生体機構学的に研究し、下記のような結果を得た。1.ヤギの松果体では成長とともに色素顆粒含有細胞が増加し、神経細胞が減少する。ヤギやカモシカの下垂体腺葉には、濾胞型コロイドが、若齢のものでは隆起部や前葉隆起帯にだけ出現し、加齢とともに前葉腺体全域に波及し、雌では妊娠の進行に伴なって増加する。カモシカの松果体でも妊娠によって嚢胞が多少増加する。2.ヤギとカモシカの下垂体隆起部の先端は視交叉に致達していた。牛では致達していない。短日繁殖動物であるヤギやカモシカの視交叉上核(生物時計の座らしい)との関連性を示唆する重要な知見である。カモシカの下垂体中間部には牛と同位置にビュルチェンの円錐が存在していた。また、前葉腺体内に中間部孤島(lsland of lntermediatissue)が存在していた。3.鶏の松果体では成長とともに瀘胞構造が減少し、小葉構造に変る。ウズラの松果体ではふ化後から成体まで、瀘胞構造が存在する。ふ化直後のウズラの松果体にパラボロイドや外節様平行層板などの光受容構造を観察した。ウズラの松果体は鶏のものに較べて、光感受性の高い構造をしていた。4.老雄鶏,老去勢鶏の下垂体前葉と隆起部に細胞ドロップが多数出現した就巣鶏の下垂体では'就巣細胞'は前葉前部腺体の後域から出現し、前部腺体にだけ波及する。換羽鶏の下垂体には特殊細胞は出現しなかった。
同一視野内に短時間呈示される色相の異なる文字・図形情報の知覚・認知に関する研究

1.多色表示装置を搭載した車両を運転した多くのドライバからの「赤色表示像は緑色表示像よりよく見える」と言われる報告は,自動車ドライバの視環境の分析により,表示像のコントラスト比が走行条件等で低くなる条件で発生することを示した.(これを「色相の差異による知覚の不均一」と呼ぶ.)2.同一画面に同一輝度条件で複数の多色表示像を呈示し,情報認識の指標として認識正答率を用いて実験室実験で評価すると,赤色表示像の認識正答率が,緑色や青色表示像に比較して,数倍から10倍良好となるという結果を得,「色相の差異による知覚の不均一」が実験室実験でも定量的に実証できた.3.分光視感特性に矛盾するように見えるこの現象を,色相別空間周波数特性という観点から実験評価し,輝度を規定している分光視感特性は空間周波数的には低周波成分での感度特性を表現しており,表示像情報の認識特性は,表示像の高周波成分での感度特性が大きな規定要因であることを明らかにした.4.表示像の短時間視標呈示実験結果と,色相別空間周波数遮断特性の計測結果から算出した認識正答率とが,極めて良い一致を見ることが分かった.5.分光視感特性は3種類の視細胞の感度特性を表わし,それぞれの視細胞の分布密度特性が色相別空間周波数特性を表現すると推論されることが分かった.自動車用表示装置等で発生する低コントラスト下での文字・図形情報の可読性では,後者の特性が決定的要素となることが示唆される.6.以上の考え方を任意の色相の表示文字・図形情報に適応する場合を考察し,「背景地輝度バイアスを有する三原色のコントラスト閾変動」の知覚・認知モデルを構築し,モデルに従い,黄色,オレンジ,紫等の色相を選び,表示像としてスネレン図形対を用いて可読性を評価した結果,良好なモデルの検証結果を得ることができた.7.以上の研究成果をまとめ,学術論文8件,研究会等発表19件,その他の発表4件(分担執筆著書含む)の成果発表を行った.1.多色表示装置を搭載した車両を運転した多くのドライバからの「赤色表示像は緑色表示像よりよく見える」と言われる報告は,自動車ドライバの視環境の分析により,表示像のコントラスト比が走行条件等で低くなる条件で発生することを示した.(これを「色相の差異による知覚の不均一」と呼ぶ.)2.同一画面に同一輝度条件で複数の多色表示像を呈示し,情報認識の指標として認識正答率を用いて実験室実験で評価すると,赤色表示像の認識正答率が,緑色や青色表示像に比較して,数倍から10倍良好となるという結果を得,「色相の差異による知覚の不均一」が実験室実験でも定量的に実証できた.3.分光視感特性に矛盾するように見えるこの現象を,色相別空間周波数特性という観点から実験評価し,輝度を規定している分光視感特性は空間周波数的には低周波成分での感度特性を表現しており,表示像情報の認識特性は,表示像の高周波成分での感度特性が大きな規定要因であることを明らかにした.4.表示像の短時間視標呈示実験結果と,色相別空間周波数遮断特性の計測結果から算出した認識正答率とが,極めて良い一致を見ることが分かった.5.分光視感特性は3種類の視細胞の感度特性を表わし,それぞれの視細胞の分布密度特性が色相別空間周波数特性を表現すると推論されることが分かった.自動車用表示装置等で発生する低コントラスト下での文字・図形情報の可読性では,後者の特性が決定的要素となることが示唆される.6.以上の考え方を任意の色相の表示文字・図形情報に適応する場合を考察し,「背景地輝度バイアスを有する三原色のコントラスト閾変動」の知覚・認知モデルを構築し,モデルに従い,黄色,オレンジ,紫等の色相を選び,表示像としてスネレン図形対を用いて可読性を評価した結果,良好なモデルの検証結果を得ることができた.7.以上の研究成果をまとめ,学術論文8件,研究会等発表19件,その他の発表4件(分担執筆著書含む)の成果発表を行った.本年度は,従来データの分析,実験室実験系の構築,実験室定量実験の実施,及び後述する「色相の差異による知覚の不均一」の原因として設定した色相別空間周波数仮説について検定の実験を行った.結果は論文としてまとめ投稿準備している.以下に主な成果を概述する.1.多色表示装置を搭載した車両を運転した多くのドライバからの「赤色表示像は緑色表示像よりよく見える」と言われる報告内容は,自動車ドライバの視環境の分析により,表示像のコントラスト比が走行条件等で低くなる条件で発生することを明らかにした.これを本研究では「色相の差異による知覚の不均一」と定義した.2.同一画面に同一輝度条件で複数の多色表示像を呈示し,「色相の差異による知覚の不均一」を,情報認識の指標として認識正答率を用いて実験室実験で評価すると,赤色表示像の認識正答率が,緑色や青色表示像に比較して,数倍から10倍良好となるという結果を得,「色相の差異による知覚の不均一」が実験室実験でも定量的に実証できた.3.視感度特性に矛盾するように見える「色相の差異による知覚の不均一」を,色相別空間周波数特性という観点から実験評価した.結果,輝度を規定している視感度曲線は空間周波数的には低周波成分での感度特性を表現しており,表示像情報の認識特性は,表示像の高周波成分での感度特性が大きな規定要因である実験結果を得た.4.自動車用多色表示

装置設計ガイドラインとして,空間的に微細構造を有する表示像には赤色系表示色を,空間的に粗い表示像には緑色や青色を用いることが望ましいことがわかった.本年度は三原色を中心に実験したが,次年度は,任意の色相の表示像について三原色での空間周波数特性から数式的に導出可能なのか,あるいは個別に色相ごとの評価実験が色相ごとに必要となるのか,また,視覚情報の情報処理モデル構築等について実験考察していきたい.昨年度,明らかにした「色相の差異による知覚の不均一」(同一輝度の表示像であっても,文字・図形表示情報の可読性が色相によって知覚・認知特性が異なる現象)の主要因が色相別空間周波数特性によることを定量的に検証した.この仮説に基づき,任意の色相の表示像における可読性を,三原色の空間周波数特性から説明する「異なる色相表示像の知覚・認知」に関する認知モデルを構築し,いくつかの色相について実験検証した.結果は論文としてまとめ,国際会議を含め内外の学会に投稿した.以下に主な成果を概述する.1.表示像としてスネレン図形対を用い,短時間視標呈示実験を行い認識正答率を計測した結果と,上下法により色相別空間周波数遮断特性を計測し算出した正答率とが,極めて良い一致を見ることが分かった.2.分光視感特性は3種類の視細胞単体の感度特性を表現し,それぞれの色相に相当する視細胞の分布密度特性が色相別空間周波数特性を表現すると推論することができる.従りて,自動車様表示装置等で発生する低コントラスト下での文字・図形情報の可読性は,後者の特性が決定的要素に成ることが示唆される.3.以上の考え方を任意の色相の表不文字・図形情報に適応する場合を考察し,「背景地輝度バイアスを有する三原色のコントラスト閾変動」の知覚・認知モデルを構築した.4.上記のモデルに従って,黄色,オレンジ,紫等の色相を選び,表示像としてスネレン図形対を用いて可読性を評価した結果,良好なモデルの検証結果を得ることができた.5.以上の知見を照明学会・映像メデイア情報学会等へ学術論文として投稿した.6.また,自動車用途に広く用いられている「発光型ディスプレイデバイス」だけではなく,標識表示等に用いられる「受光型ディスプレィデバイス」でも「色相の差異による知覚の不均一」が同様に発生し〃リオンで説明ができる可能性を示した.
遺伝子クローニングを媒介としたアンモナイト殻体中の有機物質成分の構造解析

分子進化の研究は、もっぱら現生生物の持つ特定のタンパク質のアミノ酸配列と、このタンパク質をコードする遺伝子の塩基配列のデータに基づいて行われている。本研究課題は、化石生物の硬組織中に残存するタンパク質のアミノ酸配列のデータを基にして、分子進化を検討しようとする世界で初めての試みである。化石試料としては、北海道の後期白亜系産のアンモナイトとイノセラムス化石殻体真珠層を、比較のための現生種としてはオウムガイとタイラギ殻体真珠層を選んだ。化石殻体は破片として堆積物中に散在していたが、稜柱層と真珠層とを区分することが可能なほど保存状態は良好であった。これらの試料の脱灰成分中に含まれる有機基質タンパク質成分のSDS-PAGEによる分離と各バンド成分のアミノ酸配列分析を行った。その結果、オウムガイとタイラギ穀体中には高分子量から低分子量までの複数成分がバンドとして検出されたが、アンモナイト殻体中の脱灰成分からは通常のSDS-PAGEでは特定の分子量を持つ成分は検出できず、また、イノセラムス殻体中の脱灰成分からは分子量約1KDaの成分が検出された以外はレーン全体がスメアー状に染色されたのみであった。このため、イノセラムス殻体中から発見された分子量約1KDaの成分についてアミノ酸配列分析を行い、N末端から20残基までの配列を決定した。しかし、この配列には、タイラギ穀体中の有機基質タンパク質成分のN末端付近の配列とは相同性が認められなかった。以上の結果から、アンモナイト殻体真珠層中に含まれていた有機基質タンパク質成分は7000万年の期間の間にそのほとんどが分解・消失し、残された成分も種々の大きさのペプチド断片化していて、アミノ酸配列分析の対象にならないと推定された。このため、アンモナイトの脱灰全成分のTOF-MS分析を試みたが、イオン化された成分の存在は全く認められなかった。この原因は不明であり、今後さらに、アミノ酸組成分析やLC-MS分析なども行って残存していると思われる有機物の構成成分を明らかにする必要がある。一方、イノセラムス殻体中には、低分子量成分が含まれていたが、この成分が、イノセラムス殻体中の有機基質タンパク質の一部に相当するものかどうかの判断はできなかった。この判断のためには、タイラギ殻体真珠層中の有機基質タンパク質成分の一次構造の決定を行う必要がある。北海道産の白亜紀のアンモナイトとフィリッピン産の現世のオームガイを分析試料として用意した。化石殻体は、周囲の堆積物から分離・洗浄後、真珠層を稜柱層から分離した。現世種は、軟体部を除去後の殻体を十分に洗浄し、稜柱層をグラインダーで除去して、真珠層のみとした。これらの真珠層試料を粉砕・脱灰(EDTA)・透析し、有機基質を得た。有機基質は、遠心により可溶性と不溶性の2成分に分離し、可溶性成分をSDS-PAGEで分画した。