hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
次世代シークエンサーを用いた難聴遺伝子の網羅的解析

現在までに200名の難聴患者の解析により、既に250カ所以上の新規変異を同定しており成果を取りまとめて論文として報告した。また、典型的な聴力像を有する難聴患者108家系を対象に同様の手法を用いて遺伝子解析を行い、遺伝子型と聴力型の間に相関が有る事を見出すとともに、従来日本人難聴患者から報告の無かった2遺伝子に関して難聴の原因を同定することができた。研究期間全体を通じて次世代シークエンサーを用いた網羅的遺伝子解析の有用性を明らかにすることができた。研究計画当初に予定していた通りにサンガーシークエンスによる確認作業を行い、遺伝子変異が多数同定されつつある。24年度が最終年度であるため、記入しない。次世代シークエンサーにより見出され、サンガーシークエンスにより確認された遺伝子変異に関しては、家系の解析およびコントロールサンプル中での頻度解析などを行うとともに、論文として研究成果を報告する。
２億件超の東日本大震災ツイッターデータからの発言者の役割を反映した時系列話題解析

本研究では東日本大震災後に投稿された2億件に及ぶTwitterデータを対象とし,発言者の役割を反映した時系列話題解析とその評価を行った.発言者と単語の関係を2部グラフで表し,発言者グループを抽出し,それを反映したクラスタリングを行うことで発言者の役割を推定し,解析精度を向上する手法を開発した.アルゴリズムはランダムウォークにより乱択化し,大規模データへの対応も行った.結果として,30分(あるいは1時間)ごとの投稿者と単語の二部グラフを生成し,そのデータに提案手法を適用することで,LDA等の従来手法より精度の高い話題を抽出することが可能であると確認できた.東日本大震災後21日間に投稿された2億件に及ぶTwitterデータ(15G)を対象として,発言者の役割を反映した時系列話題解析とその評価を行っている.まず「1)開発環境整備」として,実験データのクリーニングを行い,発言者と単語の関係を1時間ごとの時系列2部グラフで表現した.さらに「2)時系列話題解析アルゴリズム開発Phase1」として,実験データに対して,オリジナルの特徴抽出手法であるCWCを用いて,各時間ごとの特徴語抽出を行った.特徴語の変化(距離)を時系列で計算することにより,大きく距離が変化した時刻に大きなイベントが発生したと判定し,時系列のイベントの抽出手法を提案した.CWCは高速かつ高性能の特徴抽出アルゴリズムであり,通常の手法(LDA等)ではリーズナブルな時間で解析できないビックデータの解析を行うことができる.特徴語抽出→距離測定→イベント判定を繰り返し行うことで,イベントのより詳細な内容を解析することが可能となっている.また,「3)発言者の役割推定アルゴリズム開発」の開発として, GENETIC ALGORITHMSの一つであるBCヒューリスティックやMedianヒューリスティックを用いて,発言者と単語の時系列2部グラフから話題抽出を行う手法も開発している.従来手法(LDA)との比較を行うことで,高速かつ高精度のソーシャルメディア解析手法を開発を行っている.研究成果を広く公表するために,UCLA(米国)にてSocial Data Analysis Seminarを,チュラルンコン大学(タイ)にて,Big Data Analytics : Method and Applicationsセミナーを実施した.両セミナーとも多くの参加者に恵まれ,UCLA及びタイの研究者と研究の方向性や今後のコラボレーションについて議論する機会を得た.平成27年度は,大規模解析のための開発環境整備[(1)]及び,発言者と単語の2部グラフ生成とそれに基づく発言者の役割推定アルゴリズムの開発・実験[(2)]を行い,時系列話題解析[(3)]にはNMF(Non-negative Matrix Factorization),LDA等の話題抽出手法をオンライン化・乱択化して用いる予定とし,その開発もスタートするという予定であった.大規模解析のための開発環境整備[(1)]としては,2億件のTwitterデータのデータクリーニングを行い,発言者と単語の関係を1時間ごとの時系列2部グラフで表現し,データベースに蓄積する処理を行った.これにより,今後のアルゴリズム開発,実験が非常に容易になった.さらに発言者と単語の2部グラフ生成とそれに基づく発言者の役割推定アルゴリズムの開発・実験[(2)]においては,GENETIC ALGORITHMSの一つであるBCヒューリスティックやMedianヒューリスティックを用いて,発言者と単語の時系列2部グラフから話題抽出を行う手法の開発を行っている.本アルゴリズムは既存手法(LDA)が話題抽出に数時間かかるところを数十秒で実現することを目指したものであり,現在のところ順調に開発が進んでいる.時系列話題解析[(3)]としては,既存手法(LDA)を乱択化するのではなく,オリジナルの特徴抽出手法CWCを開発し,それを適用することで,高速かつ高精度で時系列に話題を抽出できる手法の開発に取り組んでいる.高速なCWCはすでに開発済であり,それを利用した時系列話題抽出手法を28年度に完成させる予定である.東日本大震災後21日間に投稿された2億件強のTwitterデータ(データサイズ約15G)を対象として,発言者の役割を反映した時系列話題解析手法の開発とその評価を行っている.昨年度に実施した1)実験環境整備,2)発言者の役割推定アルゴリズム開発,3)時系列話題解析の結果に基づき,今年度は2)発言者の役割推定アルゴリズムの改良及び,3)時系列話題解析の詳細評価を行った.2)の発言者の役割推定アルゴリズム開発においては,Twitterにおける発言者と発言ワードの関係を2部グラフで表現し,2部グラフの形状を保ったままクラスタリングを行うことでより精度の高い話題抽出が可能となる手法を提案し,実データへの適用を行った.提案手法によって,発言者グループを抽出でき,発言者の役割を反映し精度の高い話題抽出の実現を目指している.3)の時系列話題解析においては,提案手法を実データに適用し,評価を行った.評価はCoherenceというクラスタリングの質を評価するパラメタを用いている.既存手法(ベースラインとしてGibbsLDA)と比較し,Coherenceの高いクラスター(話題)が抽出出来ていることが確認できている.対象データを東日本大震災だけでなく熊本地震にまで広げており,提案手法の汎用性を確認するとともに,災害後のTwitter上の話題発生のモデル化を目指している.研究成果を広く公開するために,学会への論文投稿(ICDMW2016,DH2016,など)や各種Public Lecture(インドネシア大学等)を行っている.また人工知能分野,ビッグデータ解析分野の研究者との交流も積極的に行い,合宿などを通じて,最新の手法・知見の獲得にも務めている.

平成28年度は,平成27年度に開発した発言者の役割推定アルゴリズムの改良及び,時系列話題解析の詳細評価を行う予定であったが,ほぼ順調に進展したと考える.発言者の役割推定アルゴリズムにおいては,Twitterにおける発言者と発言ワードの関係を2部グラフで表現し,2部グラフの形状を保ったままクラスタリングを行える手法を提案し,それを用いた話題抽出手法の開発を行った.2部グラフの特徴を活かしながらクラスタリングする手法は,世界的に見てもまだ確立されておらず,オリジナリティの高い効果的な手法であると考えている.実際にその手法を2億件強のTwitterデータ(実データ)に適用することで,提案手法の効果を示すことが出来ている.こうした話題抽出の評価は常に困難が伴うが,今年度は,Coherenceというクラスタリングの質を評価するパラメタを用いて,その評価を行っている.Coherenceパラメタを用いて各クラスターの質を数値で表現することで,定量的な評価も実施できている.さらに定性的な評価も実施しており,手法の有効性や改善すべき点などの検討が可能となっている.さらに東日本大震災のみならず熊本地震のTwitterデータまで解析を広げており,手法の汎用性や災害後のTwitter上の話題のモデル化にも着手し始めている.本研究では東日本大震災後に投稿された2億件に及ぶTwitterデータを対象とし,発言者の役割を反映した時系列話題解析とその評価を行った.SNS上の話題構造は曖昧であり,同じ単語(例:「避難」)が複数の話題(「避難生活へ不安」,「原発からの避難」など)に異なった意味(位置付け)で属する場合が多く見られる.この「単語の位置付け」は「誰がどのグループで発言したか」という「発言者の役割」に依存すると考えられる.本研究では,発言者と単語の関係を2部グラフで表し,発言者グループを抽出し,それを反映したクラスタリングを行うことで発言者の役割を推定し,解析精度を向上する手法を開発した.アルゴリズムはランダムウォークにより乱択化し,大規模データへの対応も行った.結果として,30分(あるいは1時間)ごとの投稿者と単語の二部グラフを生成し,そのデータに提案手法を適用することで,LDA等の従来手法より精度の高い話題を抽出することが可能であると確認できた.特に「石油コンビナート爆発」といった決め打ちの単語を用いれば,デマのような特徴的な話題と,それを訂正しようとする話題,さらにそれらの時系列推移を抽出できることを示すことができた.しかし一方で,全く情報が与えられていない段階で新たに発生する特徴的な話題を早期に発見し,その成長パターンを予測することが困難であることも確認できた.今後は,新たに発生する特徴的な話題をいち早く発見し,それがどのような経過をたどるかを予測する手法を開発することで,社会への影響を測ることが可能となり,より的確なソーシャルメディア解析を行えるとの方向性を確認できた.研究成果はICDM,BIGDATA等のトップカンファレンスで発表を行い,最先端の研究者との交流も実施した.招待講演も多数行った.
転写因子による単球分化制御機構の解明と動脈硬化病変形成への関与の検討

IRF8-KLF4転写因子カスケードが単球分化に必須であることを見出した。IRF8依存性単球分化系においてIRF8は主にプロモーター遠位領域に結合し,エンハンサーを形成・増強することで,単球分化に重要な転写因子であるKLF4を含む単球関連遺伝子の発現を誘導する。IRF8欠損マウスの単核貪食細胞前駆細胞ではKLF4の発現が著減しており、KLF4欠損マウスよりも重度の単球分化不全を示すことがわかった。さらに単核貪食細胞前駆細胞においてIRF8は好中球分化を促進する転写因子であるC/EBPαのクロマチンへの結合を阻害することで、これら前駆細胞における好中球分化能喪失にも寄与することを発見した。単球は生体防御や組織恒常性の維持に必須の免疫細胞であり、骨髄造血幹細胞から単球-樹状細胞前駆細胞(MDP)を経て産生される。しかし単球の分化・産生が分子レベルでどのように制御されるかその詳細は良くわかっていない。本研究では血球細胞特異的に発現する転写因子であるInterferon regulatory factor-8(IRF8)が単球、特に炎症性単球の分化に必須であることを見出した。IRF8欠損マウスでは炎症性単球が存在せず、IRF8欠損マウスのMDPにおいては単球分化に必須の別の転写因子であるKLF4の発現が著しく減少することがわかった。さらにクロマチン免疫沈降シークエンス(ChIP-seq)とトランスクリプトーム解析の統合解析から、IRF8はプロモーター遠位のクロマチンに結合することでのエンハンサーの特徴であるヒストンH3リジン4の単メチル化(H3K4me1)を増強し、KLF4を含む単球関連遺伝子の発現を誘導することが明らかとなった。以上のことから単球分化においてはIRF8-KLF4転写因子カスケードが必須であることを昨年我々は報告した(Kurotaki et al. Blood 2013)。興味深いことに上記の研究を進めていく中でIRF8欠損マウスのMDPは単球にならないばかりか、好中球へと分化してしまうことがわかった。現在はIRF8が如何にして単球分化を促進する一方で好中球分化を抑制するのかその分子機構の解明に取り組んでいる。【結果】当該年度においては計画通り順調に研究を遂行することができた。計画にあるようにIRFファミリー分子欠損マウスにおける単球サブセットの解析を行い、IRF8欠損マウスではGr-1陽性単球亜群が骨髄、末梢血、脾臓において消失していることを見出した。一方で、IRF4欠損マウス及びIRF5欠損マウスでは単球の減少や増加は認められなかった。さらにIRF8欠損マウスの骨髄細胞を放射線照射した野生型マウスに移植することで骨髄キメラマウスを作製し、単球の解析を行ったところ、IRF8欠損マウスの表現型と同様にGr-1陽性単球亜群が消失することがわかった。この結果は、IRF8欠損マウスにおけるGr-1陽性単球の消失は骨髄細胞intrinsicであることを示している。次にIRF8-GFPノックインマウスを用いて造血前駆細胞におけるIRF8の発現を解析した。IRF8の発現は造血幹細胞や共通ミエロイド前駆細胞、顆粒球-単球前駆細胞ではほとんど認められず、単球-樹状細胞前駆細胞(MDP)において急激に増加することがわかった。そこで骨髄よりMDPの単離・精製を行い、野生型マウスに養子移入したところ、骨髄移植のデータと一致してIRF8欠損マウス由来のMDPはGr-1陽性単球をほとんど産生できなかった。【意義・重要性】本研究で初めてIRF8がGr-1陽性単球の分化に必須であることを示した。さらにIRF8はMDPで発現することで単球分化を促進していることを見出した。Gr-1陽性単球は自己免疫疾患やがん等の疾患において、疾患の増悪に関与することが知られている。本研究成果はGr-1陽性単球の分化を制御することで、これらの疾患の新たな治療法を提供する可能性がある点で極めて重要である。単球は生体防御及び組織恒常性維持に必須の骨髄由来細胞である。本課題では単球分化の分子メカニズムを転写因子による遺伝子発現制御の観点から明らかにしてきた。

平成25年度までの結果として、IRF8欠損マウスでは単球-樹状細胞前駆細胞(MDP)においてKLF4の発現が著しく減少しGr-1陽性単球亜群がほぼ消失すること、ミエロイド前駆細胞株を用いた実験から単球分化の際にIRF8はプロモーター遠位のエンハンサー領域に結合することでヒストンH3リジン4の単メチル化(H3K4me1)を増強しKLF4を含む単球関連遺伝子の発現を誘導することなどを計画を大きく前倒しして示してきた。IRF8による単球分化制御機構を解析する中で、IRF8欠損マウス由来MDPは単球の分化能が著しく減少している一方で通常は分化することのない好中球を大量に産生してしまうことがわかった。そこで平成26年度は、IRF8がMDPにおいてどのようにして単球分化促進と好中球分化抑制の両方に機能するのか詳細な解析を行った。以下に主な研究成果を示す。(1)IRF8欠損マウス由来MDPのトランスクリプトーム解析;MDPを単離し、マイクロアレイ解析さらにその結果からパスウェイ解析を行ったところ、IRF8欠損マウスMDPではC/EBPファミリー転写因子が過剰に活性化していることを見出した。(2)IRF8によるC/EBPαの機能抑制;MDPにおいてIRF8がC/EBPαと結合し、それによってC/EBPαのクロマチン結合を阻害することをproximity ligation assayやクロマチン免疫沈降RT-qPCR法により示した。(3)C/EBPの機能抑制によるIRF8欠損マウスにおける好中球過剰産生の抑制;dominant negative C/EBPをIRF8欠損マウス由来骨髄前駆細胞に発現させることで、好中球の過剰産生が抑制されることを示した。免疫学昨年は研究成果を血液学のトップジャーナルであるBlood誌に報告することができた。ほぼ完全に計画に示した研究を遂行することができた。また本研究に関わる研究成果を国内学会(免疫学会、分子生物学会)及び講演(横浜血液集談会)において発表することができた。さらに原著論文としてインパクトファクター9.8点の雑誌に(Blood)本研究に関わる成果を発表することができた。IRF8による単球分化促進及び好中球分化抑制がどのように行われているのか特に生体内に少数しか存在しないMDPを用いて分子レベルの解析を進めていく。次年度も計画通りに研究を遂行することが重要である。具体的にはIRF8が制御すると考えられるMDPからのGr-1陽性単球の分化におけるIRF8の役割の解明を引き続き行う。野生型マウスとIRF8欠損マウスのMDPを分離し、マイクロアレイ解析を行うことで、IRF8の欠損がMDPの遺伝子発現に与える影響を調べる。特に遺伝子発現に広範な影響を与えうる転写因子に注目した解析やGene ontology解析を行う。次に当研究室が保有するIRF8欠損マウスの骨髄細胞に由来する前駆細胞株であるTot2細胞にIRF8を導入することで単球への分化を誘導する。IRF8導入初期において変化のある遺伝子をマイクロアレイにより抽出し、IRF8の結合をChIP-seqにより解析する。この手法によりIRF8が単球分化を誘導する際に直接的に結合し制御する遺伝子を絞り込む。このTot2細胞株の結果とMDPのマイクロアレイデータを統合的に解析し、IRF8欠損マウスMDPで変化がありかつIRF8が直接制御する遺伝子を同定する予定である。その分子が単球分化に必須の役割を持っている可能性が高い。該当なし
血管形成におけるＦＯＸＯ１の機能解析

血管形成に関与する多くの遺伝子の一つであるFOXO1を血管内皮特異的に欠損させたマウスモデルを用いて、生後に血管形成過程が進行する網膜血管に異常が生じるかを検討した。その結果、血管の伸長抑制、分岐点の増加、tip細胞数の増加などの異常がおこることが分かった。FOXO1蛋白はすべての血管内皮細胞に発現しているが、その細胞内局在を見るとstalk細胞や多くのtip細胞では細胞質に、また一部のtip細胞や毛細血管部分では主に核に局在しており、部位により大きく異なることからFOXO1は血管形成過程にある血管内皮細胞において部位ごとに異なる機能を持つ可能性が示唆された。FOXO1を血管内皮特異的に欠損するマウスを作成し、生後での網膜血管の形成を観察した。その結果、FOXO1欠損により網膜中心からの血管伸長が抑制されること、tip細胞数の増加傾向、tip細胞から伸びる突起の横方向への広がり傾向、分岐数の増加傾向などが示唆された。これらの観察を背景に、正常に伸長しつつある血管のtip細胞におけるFOXO1の細胞内局在および、そのリン酸化レベルを調節するAkt1の活性化について免疫組織学的に検討を加えた。FOXO1はtip細胞の核に局在しており、stalk細胞では核での局在が明らかに低下していた。またT308リン酸化Akt1の局在もまたtip細胞に局在していたことから、FOXO1の局在はAkt1以外の調節機構によって調節されている可能性が示唆された。次に、tip細胞の形成に重要なNotch経路の発現へのFOXO1の関与を明らかにするため、大動脈由来の内皮細胞およびHUVECに対してsiRNA法によってFOXO1の発現を抑制して検討した。ウエスタンブロット法により検討したところJagged1の発現の上昇が認められた。Jagged1に対するmiRNAとして知られているmiRNA-34cの発現を検討したが明らかな変化は見出せなかった。最後にリンパ管形成について検討を開始した。、FOXO1の欠損でang2の発現が低下し、ang2の欠損ではリンパ管形成に異常が起こる。そこでFOXO1を欠損させたマウスの尻尾のリンパ管の形成過程を生後4ー6日令で観察したところ、リンパ管網の形状に異常が観察された血管形成に関与する多くの遺伝子の一つであるFOXO1を血管内皮特異的に欠損させたマウスモデルを用いて、生後に血管形成過程が進行する網膜血管に異常が生じるかを検討した。(1)tip細胞の形態変化in vitroでFOXO1を欠損する血管内皮細胞は、VEGF投与後に正常の内皮細胞が示す形態変化に異常をきたすことが報告されている。生体の血管形成時にその先端に位置するtip細胞はVEGFの濃度勾配を感知して血管の伸長を調節している。このことからtip細胞の形態がFOXO1の欠損により影響を受けると血管伸長をコントロールできないために血管形成に異常が生じる可能性が高い。これを明らかにするため血管特異的にFOXO1を欠損させたP6の網膜の血管内皮細胞をFITC-GS-lectinにて染色後、共焦点レーザー顕微鏡によりtip細胞数、そこから伸びる突起の数、方向等についてジェノタイプによる違いを検討した。まだ予備的ではあるが、FOXO1欠損によりtip細胞数の増加傾向、そこから伸びる突起の数の減少と横方向への広がりの増加傾向が観察された。また血管分岐の増加傾向も認められた。これらの結果についてさらに検体数を増やして確認する予定である。(2)Notch関連分子の発現変動tip細胞の形成を調節する重要な経路であるNotch経路の分子の発現へのFOXO1の影響を検討するため、大動脈由来の内皮細胞でのFOXO1発現抑制時のJagged1、Dll4の発現量をウエスタンブロット法、および定量PCR法にて確認した。FOXO1欠損によりJagged1タンパクは増加傾向を示し、Dll4は変化がなかった。網膜を用いた発現検討ができていないので試料が得られ次第検討する予定である。FOXO1分子を欠損する血管内皮細胞は、in vitroでVEGFによる形態変化応答に異常をきたす。また生体の血管形成時に先端に位置するtip細胞はVEGFの濃度勾配を感知して血管の伸長を調節している。これらのことからFOXO1欠損によるtip細胞の機能異常がおこる可能性がある。このことを検証するためFOXO1を血管内皮特異的に欠損するマウスを作成し生後6日令時での網膜血管の形成を観察した結果、血管伸長の抑制、tip細胞数の増加傾向、tip細胞から伸びる突起の横方向への広がり傾向、分岐数の増加傾向が示された。さらにtip細胞でのFOXO1の細胞内局在および、その局在を調節するakt1のリン酸化レベルを免疫組織化学法にて検討したところ、FOXO1は大部分のtip細胞において核に局在しstalk細胞では細胞質に局在していた。また全活性型のAkt1が認められる少数のtipやstalk細胞ではFOXO1が細胞質に局在していることから、akt1がtipとstalk細胞でのFOXO

1の局在に大きな関与をしていることが示唆された。このことからFOXO1は少なくともtip細胞において転写調節を行うことにより血管形成過程に影響していると考えられる。これまでにtip細胞に特異的に発現するとされる遺伝子についてFOXO1欠損の影響を調べたところang2、PDGF-Bなどについては有意な発現低下が認められFOXO1による転写調節の可能性が示唆されたが、直接的に転写調節をしているという証明をすることはできなかった。またFOXO1欠損網膜を用いたDNAマイクロアレイ実験を行い上記以外の遺伝子の同定を試みた。さらに生後3日目のマウス尾の真皮リンパ管形成途中でのリンパ管内皮細胞にFOXO1の発現が確認されることからリンパ管の形成過程にも関与していることが示唆された。解剖学・形態形成学マウス大動脈から血管内皮細胞を単離培養し、この培養系を用いてsiRNAを使用してFOXO1の発現抑制ができることはウエスタンブロット法および定量PCRによって確認された。本研究の目的のひとつである、FOXO1欠損マウスのtip細胞においてPDGF-Bが発現抑制される仕組みを明らかにするため、この培養系を用いてPDGF-Bのプロモーター領域を用いたレポーターアッセイを行った。その結果、予期せぬことにsiRNAのネガティブコントロールを細胞に導入するだけでレポーター活性の増加がおこり、FOXO1のsiRNAを導入した場合にはsiRNA処理をしないレベルまでレポーター活性が上昇することが分かった。さらにこの現象はPDGF-BのプロモーターのTATAボックスの直上まで欠失させたレポーターでも観察され、TATAボックスを欠失させると消失した。これらの結果はHUVECでも全く同様であった。これらのことから、siRNA系を用いてFOXO1のPDGF-B転写活性機構を明らかにすることは現時点で不可能であるため、あらたな実験系を再構築する必要に迫られている。他の計画についてはほぼ予定通り進行している。動物飼育施設の汚染のため、マウスを一時的に淘汰し再度クリーンアップするなどの非常事態がおきたため、再度マウスの個体数を増やすのに予想外の時間がかかっていることが大きな遅れの原因となっている。マウスの大動脈からの内皮細胞の培養はおおむね順調に行えるようになったため、細胞培養を用いた実験を優先して行っている。PDGF-Bのプロモーター解析について、内皮細胞にCreアデノウイルスを感染させることによりノックアウト状態を誘導する試みを行ったが、内皮細胞の増殖度に変化が起こるなどのトラブルが頻発するため、siRNAを用いたノックダウンによりFOXO1タンパクレベルを低下させるべく方針変更した。その確認などに時間を要したため当初予想していたよりも進行が遅れている。PDGF-Bの転写活性機構の解明は現時点で困難であるため、tip細胞でのFOXO1の機能解析と、リンパ管形成過程におけるFOXO1の機能解析に重点を移していく。tip細胞においてのみFOXO
増粘剤を用いた経腸栄養剤の胃内固形化における増粘効果の実験的検討

【研究目的】経管栄養患者管理における下痢、胃・食道逆対策として経腸栄養剤を半固形化させる方法が有用であるが、この半固形化法の中でも増粘剤を先に投与し、後に経腸栄養剤を投与して行う胃内固形化法は、細いチューブでも注入可能であり、ベッドサイドでの調製の手間も省ける。そこで、胃内固形化法で実際に半固形化されるか、実験的検討を行った。また増粘剤の多くは、陽イオンの影響を受けるため、イオンを放出し、なお且つ経管栄養患者が使用する可能性がある薬剤について、増粘効果に与える影響を検討した。【方法】37°C、100rpmの振盪下、増粘剤リフラノン75g中に各種経腸栄養剤200mLを滴下した。また、人工胃液50mL中に液状リフラノン75gを加えた中に、同条件で各種経腸栄養剤200mLを滴下した。粘度測定はB型粘度計を用いた。陽イオンを放出する薬剤として、塩化ナトリウム、乳酸カルシウム、グルコン酸カリウム、酸化マグネシウムを1g/50mLの濃度で水に溶解し、リフラノンで半固形化した各経腸栄養剤に加えた。【結果】リフラノンを先行投与し、後に各種経腸栄養剤を滴下したところ、いずれの経腸栄養剤においてもその粘度は37°C、100rpmの条件下で、約4050%低下した。また、人工胃液中での粘度はさらに低下した。よって、胃内固形化法を行う場合には、通常の半固形化法よりもリフラノンを増量する必要があることが示唆された。また、経腸栄養剤を滴下する速度は、粘度には大きく影響しなかった。陽イオンを放出する薬剤を各経腸栄養剤に加えて、半固形化を行ったところ、いずれの経腸栄養剤でも塩化ナトリウム、乳酸カルシウム、酸化マグネシウムの添加により粘度は低下した。とくに乳酸カルシウムは著しく粘度を低下させ、経腸栄養剤によっては10%以下まで低下した。一方、グルコン酸カリウムは、いずれの経腸栄養剤においてもわずかに粘度を増大させた。
ホメオボックス蛋白質Sixの核-細胞質移行と、細胞周期制御・ガン化との関係

SIX1は乳がん細胞株において広く発現が見られ、悪性度の強いがん細胞ほどその発現が昂進している。また、X線照射時のG2/Mチェックポイントによる増殖停止が、SIX1の強制発現によって回避されることから、細胞周期の調節および増殖制御に深く関与していることが示唆された。分化の道筋が明確で、種々の分化制御因子によって、分化をコントロールできる血球細胞に注目し、SIX1の細胞周期と細胞増殖における役割と、細胞がん化のコントロール因子としての可能性を明らかにするために、血球細胞分化Lineageに伴うSIX1発現の消長とUT-7細胞の分化に伴う発現変動を検討した。SIX1は未分化血球細胞で発現し、赤芽球、骨髄球、巨核球いずれの分化系列においても、分化刺激後2日でその発現が増加し、刺激後4日でいったん低下した後、分化刺激後6日で、再び発現が顕著に増大した。UT-7細胞株においては、増殖培地でのSIX1の発現は顕著であるが、エリスロポイエチンおよびトロンボプラスチンによる分化刺激後2日でSIXの発現が著しく低下した。これらの結果から、血球細胞分化によって、SIX1が一元的に増加ないし減少するのではなく、分化の道筋によって発現量を調節することで、分化状態での増殖をコントロールしている可能性が示された。そのことを実験的に示すために、HL-60細胞にSIX1を強制発現させたときの分化増殖への影響と、UT-7にアンチセンスSIX1を発現させたときの効果を検証している。
アラル海周辺地域における水と住民の健康に関する研究

[目的]アラル海縮小に伴う環境変化が小児の健康に及ぼす影響について1995年以来検討を続けてきた.今回,2004年(夏)と2005年(冬)にカザフスタン共和国において周辺住民の健康状態と飲料水との関連に焦点を当てた疫学調査を実施した。[対象と方法]同国カザリンスク地域において,水道水供給地域(A地域)と井戸水利用地域(B地域)において,児童(9-15歳)を対象とした調査を2004年夏(255名),2005年冬(216名)に行った.対象者より飲料水の提供を受け,現地で水質検査キット(柴田科学社製)を用いて,一般細菌群(一),大腸菌群(大)のコロニー数を計測した.消化器系症状(最近4週間の有無)については,質問紙を用いて聞き取りを行った.[結果と考察]A・B地域共に,(一)および(大)のコロニー数は,冬より夏の方が有意に高かった,しかし,どちらのコロニー数とも,夏・冬共に地域間の差は認められなかった。消化器系症状の有無とコロニー数との関連については,夏は,A地域では腹痛と(大),調査したすべての症状と(一)の間に関連が認められ,B地域ではどの項目も認められなかった.冬は,A地域では,腹痛および嘔吐と(大),嘔吐と(一),B地域については,腹痛および吐き気と(大),吐き気と(一)との間に関連がみられた.カザリンスク地域において,水利用対策の見直しおよび飲料水利用に関する健康教育の必要性が示唆された.本研究では、アラル海周辺地域における水源および飲料水の細菌学的汚染の状況と小児の自覚症状との関連について明らかにすることを目的にした。そこで、アラル海に近い地域内から、井戸を主な飲料水源にしている1村をケース、給水施設から給水車により飲料水を購入できる2村をコントロールとして選んだ。平成16年8月に、それぞれの村の診療所にある住民票からランダムサンプリングによって、ケースおよびコントロールから150人ずつ(9歳から15歳まで)計300人抽出し、指定した調査日に診療所にて、質問紙を用いたインタビューを行った。児童の保護者に対して、調査の概要について説明を行い、インフォームドコンセントをとった。調査は、調査項目の季節変動を考慮し、同一の対象集団に対して、平成17年冬:2月にも同一の調査を行った。8月・300人中255人、2月・255人中218人を分析の対象とした。その結果、ケースおよびコントロール地域ともに、2月よりも8月の方が、一般細菌数および大腸菌群数ともに有意に高い値を示した。ケースおよびコントロールの間に優位な差は見られなかった。下痢や腹痛といった自覚症状についても、ケースとコントロール地域で差はみられなかった。コントロールとして選んだ地域では、飲料水購入は月に一度であり、塩素消毒の効果は期待できないことから、井戸水を利用している地域と細菌学的な汚染状況や自覚症状に差がみられなかったと考えられる。同地域の年間を通じた衛生的な水の供給が急がれるとともに、塩素消毒処理や煮沸後に飲料すると行った教育対策の必要性が示唆された。消化器系症状の有無とコロニー数との関連については,夏は,A地域では腹痛と(大),調査したすべての症状と(一)の間に関連が認められ,B地域ではどの項目も認められなかった.冬は,A地域では,腹痛および嘔吐と(大),嘔吐と(一),B地域については,腹痛および吐き気と(大),吐き気と(一)との間に関連がみられた.カザリンスク地域において,水利用対策の見直しおよび飲料水利用に関する健康教育の必要性が示唆された.
東日本大震災後の海洋スポーツ・レジャーの状況分析と復興に関する調査研究

本研究は、東日本大震災後の海洋レジャー活動の現状と復興について考察することを目的とした。海水浴客は2011年より2012年は回復傾向であった。サーフィンポイントは地盤沈下、海岸の消滅など地形の変化が認められた。危険な瓦礫の撤去作業が、自治体、地元サーファーや全国のダイバー・サーファーによるボランティアによって行われていた。活動場所の復興には、環境への配慮はもちろんのこと、インフラ整備や景気浮揚策のみの長期的な展望を欠いた短期志向の戦略展開といった一過性ではない視点が重視される。大津波での壊滅的被害は、多くの人々を海から遠ざける結果となったが、海に携わる関係者により着実に復興の道を歩んでいた。本研究は、体育・スポーツ科学をベースとした野外教育、環境倫理、スポーツ経営管理、心理学、社会学の視点から、東日本大震災後に影響を受けた海洋スポーツ・レジャー(海水浴含む)の状況分析と復興に関して調査を実施し考察を行った。その結果、1サーフィン・ダイビングポイント(フィールド)の物理的変化は24年には復興途中であった仙台新港において駐車場が再オープンし利用者の利便性が向上し、震災前の水準に戻っていた。しかし、場所によっては瓦礫の除去が進まず再開していない。ダイビングは地形の変化に伴い潜水が不可能となった場所もあるが、新たなダイビングポイント(竹浦)が創出されていた。2サーフィン・ダイビング活動に関連した地域との関係は、良い方向に進む場合と新たな問題や課題が指摘される場合があった。ダイビングは、漁業者の世代交代も重なり商業ダイビングが開始されボランティアダイビングから商業ダイビングに発展し良好な関係が築かれていた。サーフィンは、震災直後からの地道な活動実績に加え自治会や観光協会・体育協会などの地域組織との信頼関係や、サーフィンを愛する地域住民の人的ネットワークなどが間接的に行政機関との良好な関係構築に寄与していた。しかし、場所によっては震災後に一時離れた愛好者やサーフィン業者がポイントに戻りルールの再調整などの新たな問題も生じている。3復興と環境倫理は「環境の持続可能性の確保」という点に着目し、スポーツ・レジャー活動が復興という観点から地球環境問題に対してどのような社会的貢献を果たすのかを考察した。スポーツ・レジャー活動を通じた「身体的体験」は被災地の地球環境の大切さを知る「感性の教育」と成り得ることが示唆された。4海水浴入込客数は、各都道府県の統計データを集約し経時変化を分析した。天候など要因が多岐に渡り一概に判断できないが多くの地域で震災前の水準に戻っていない。本研究は、体育・スポーツ科学をベースとして、野外教育学、環境学、心理学、社会学の視点を持って、2011年3月に発生した東日本大震災において被害を受けた海洋スポーツ・レジャー(海水浴含む)を対象に、現地フィールド調査(物理的変化)、半構造化面接法による聞き取り調査の手法によって現状分析を行った。その結果、課題とした1サーフィン・ダイビングポイントの物理的な変化(地盤、構造物、海流等)は、宮城県の仙台新港、菖蒲田海岸、小泉海岸において、経年的な変化の状況を把握することができた。現在も変化が続いていることが確認され継続的な情報収集を続けることが重要である2サーフィン・ダイビングに関する聞き取り調査から、サーファーのボランティア活動の状況や、復興支援などの具体的内容を把握することができた。また、サーフポイントの再開に関しては、地元のサーフショップユニオンなどが、自治体との地道な努力により再開にこぎつけている現状を確認できた。その結果から、自治体との関連についての調査の必要性を認識し、25年に研究分担者を追加して詳細な調査を実施することとした。ボランティアダイバーの状況についても、岩手県南三陸町の現地調査から現地の実態を把握することができた。ダイビングによる復興と新たなレジャー産業の算出という側面からの考察が重要である3海水浴に関する調査については、入込客の統計データによる入込客の推移と、現地調査から、震災直後の諸条件により、日本海側の一部で一時的な入込客増などが発生していたことなどについての現状把握と考察が重要である4復興に向けた環境倫理・環境啓発に関する考察については、各地で行われている復興に関して、海洋スポーツの視点からみて、単なる観光の為の復興や、場当たり的なものではない、人と観光産業が自然環境との共存という意味合いについて考えることが重要であり、検討を継続している。本研究は、東日本大震災後に影響を受けた海洋スポーツ・レジャー(海水浴を含む)の状況分析と復興に関して、体育・スポーツ科学をベースとした野外教育、環境倫理、心理学、社会学などの視点から質的・量的調査を実施し考察を行った。平成26年度は、震災前後の海水浴に関する調査を実施し、震災前後での海水浴経験について明らかにすることができた。

研究期間全体を通しての成果は1サーフィン・ダイビングのポイントの物理的変化については、サーフィンポイントにおいては、多くの場所で再開がなされ駐車場やトイレ等の施設が整備され利便性が向上していた。しかし、自治体によっての対応の違いが見られた。2サーフィン・ダイビング活動に関した地域との関係については、ダイビングにおいて、新たなダイビング事業の開始など漁業者との良好な関係が見られ震災をきっかけに東北の海でのダイビングが推進したと考えられる。サーフィンにおいて、復興当初は、自治体との協力による早期再開や施設の整備など順調に進んでいたが施設の整備などが進むにしたがって、一時休止していた人や新規参入業者などを含めて、新たな課題が生まれている。3復興と環境倫理は、「環境の持続可能性の確保」という点に着目し、スポーツ・レジャー活動が復興という観点から地球環境問題に対してどのような社会的貢献を果たすのかを考察した。スポーツレジャー活動を通じた「身体的体験」は、被災地の地球環境の大切さを知る「感性の教育」となり得ることが示唆された。4海水浴の入込客数に関しては、全国の統計データを集約し時系列変化を分析した。天候要因等の影響を受けるために一概に判断できないが、多くの地域で震災前の水準には戻っていない。また、宮城、岩手、福島の海水浴場の再開は、まだ、十分に行われていない。今後の課題としては、復興に関する地元住民の意識の違いをどう調整していくかということになるであろう。野外教育スポーツ心理学研究計画の目的達成度は、1サーフィン・ダイビンポイントの物理的な状況については、25年度の現地調査にても状況が把握され、計画以上に達成されている。ダイビングでは、気仙沼市の竹浦ポイントの解放が行われ、現地潜水調査を実施した。また、潜水ボランティアの継続状況も把握することができた。26年度も現地との良好な関係があり継続的活動情報を入手でき計画以上に進展している。2行政との関係は、現地調査結果による状況の把握と問題点の整理が進んでいる。しかし、サーフィンは新たな課題も発生していることから継続調査が必要である。ダイビングは漁業者との関係について考察し達成度は高い。3海水浴調査は全国自治体が公表している入込客データの集約は概ね終了し分析を行っている。しかし、質問紙調査は、福島原発問題が関連していることから、海水浴場の入込客と再開に関する問題の所在が、原子力発電にフォーカスされ原発の賛否として捉えられてしまうことが懸念された。また、海水浴場の入込客低下の為営業を取りやめた宿泊施設も多数あり、サンプリング問題も含め25年度の調査実施を見送った。この点において遅れている。4サーフィン・ダイビングショップの経営状態調査に関して、サーフィン調査は研究分担者が9月に退職したことと、商業ベースの再開が遅れていることから26年度での調査に変更を行った。現地調査による研究成果及び復興と環境倫理との考察は計画以上に進展している。しかし、質問紙調査計画のみが遅れているが、原発問題の影響があり慎重な対応することは重要であるとの判断は正しいと感じている。
動脈硬化治療の新しい標的:マクロファージ転写因子MafB

動脈硬化巣では、マクロファージの集積が認められ、動脈硬化の進展に関与している。マクロファージ活性化のメカニズム解明は、動脈硬化の抑制に重要であると考えられる。そこで我々は、近年マクロファージの分化および活性化に重要な役割を果たす転写因子MafBに注目し(EMBO J2000;19:1987-1997)、動脈硬化進展との関係を検討した。マウス腹膜マクロファージRAW264.7細胞を用いて、MafBの働きを解析したところ、MafBはマクロファージのアポトーシスに関与していた。またMafBを過剰発現させるとLOX1(oxidized LDL receptor1)およびスカベンジャー受容体CD36のメッセンジャーRNAの増加が見られた。逆にshRNAを用いてMafBをノックダウンするとこれらの発現を抑制した。またヒト冠動脈粥腫切除標本では、粥腫プラーク周辺にMafBを強発現したマクロファージおよび泡沫細胞を認めた。さらに急性冠症候群患者に血栓吸引療法を行い、得られた標本を解析すると、やはりMafB陽性マクロファージを認めた。これより冠動脈動脈硬化およびプラーク破綻にMafBが関与していることが示唆された。MafBの働きをさらに解析するために、MafBドミナントネガティブマウスを作成中した。MafB欠損マウスは後脳の発達障害により、生まれて直ぐに無呼吸で死亡するため(Nat Neurosci 2003;6:1091-1100)、解析には用いることはできない。現在、MafBドミナントネガティブマウスの表現形を解析しており、アポE欠損マウスとの交配により、動脈硬化進展におけるMafBの役割を明らかにする。そこで我々は、近年マクロファージの分化および活性化に重要な役割を果たす転写因子MafBに注目し(EMBO J 2000;19:1987-1997)、動脈硬化進展との関係を検討した。またMafBを過剰発現させるとLOX1(oxidized LDL receptor 1)およびスカベンジャー受容体CD36のメッセンジャーRNAの増加が見られた。またヒト冠動脈粥腫切除標本では、粥腫内にMafBを強発現したマクロファージおよび泡沫細胞を認めた。MafBの働きをさらに解析するために、現在MafB dominant negativeマウスを作成中である。
脳内酸化ストレスに対する麻酔薬の抗酸化機序の解明

68週齢の雄Slc : ddYクリーンマウスに中枢神経興奮薬であるペンチレンテトラーゾール60mg/kgbody weightを腹腔内投与すると痙攣が出現し,1時間後の大脳中央部において酸化傷害の指標であるMDA産生量が増加し、3時間後の海馬において酸化ストレスの指標であるHO-1遺伝子発現が増加した。次にペンチレンテトラゾール投与15分前に麻酔薬であるミダゾラム70mg/kgbody weightおよびフェノバルビタール25mg/kgbody weightを投与すると、痙攣、MDAおよびHO-1の増加がすべて抑制された。さらに致死量のペンチレンテトラゾール100mg/kgbody weightを使用した場合では、フェノバルビタールでは痙攣は抑制できなかったにも関わらず、HO-1の発現およびMDA産生は抑制された。中枢神経興奮薬をマウスに投与したところ,脳に酸化反応が認められた。酸化反応の指標としては,HO-1遺伝子発現が鋭敏であり,麻酔薬の影響を調べるのに有用な脳酸化モデルであることが示された。さらに,この方法を用いて静脈麻酔薬であるミダゾラムとフェノバルビタールの脳酸化反応への影響を調べた結果,ミダゾラムとフェノバルビタールは脳において,抗酸化用を有していることが示唆された。また、麻酔薬の抗酸化作用は痙攣の抑制に関与しない可能性が示唆された。
樹体内木部圧ポテンシャル測定によるさし木発根率の推定

約60種の針葉樹及び広葉樹のXPP(本部圧ポテンシャル)を測定し,さし木発根との関係を追求した.XPPは圧室法によって1年目にはさし木親木を正午頃, 2年目には同じさし木からの採穂によって,日の出前に,いずれも年57回測定した.さし木はミストかん水装置のある野外のさし木床に春と初夏にさしつけ,秋に掘り取り, XPPとさし木発根率の関係を調べ次の結果を得た.1.さし木親木のXPPと発根率の関係. 1年のうちでは8月のXPPが最も低い. XPPと発根の関係は68月で相関が高い.発根率を良し,普通,不良に分け,春ざし,夏ざしを針葉樹,広葉樹及び常緑樹,落葉樹別に分け,さしつけ時の3月, 6月, 8月, 11月及び年平均ポテンシャルとの関係をみるといずれも発根のよい樹種はポテンシャルが高く,発根不良樹種でポテンシャルが低いことがわかった.常緑樹は落葉樹に比べXPPの年変化が少なく,着葉の有無がXPPに強く影響している.同じ科内樹種のXPPの月別変化は着葉形態が同じ場合にはかなり類似した.2.さし木のXPPと発根率の関係.さし木のXPPはさしつけ後徐々に, 1カ月あたりから回復した型と回復せずそのまま低下した型がみられた.前者は発根率がみられ,後者はほとんど枯死した. XPPと発根率の相関はさしつけ後1カ月以降徐々に高くなった.常緑針葉樹ではさしつけ時から高い相関がみられた.枝葉の含水率とXPPの関係は多くの樹種で平行関係がみられた.土壌の乾燥につれてXPPは低下した.上述の結果は約60種に及ぶ多数の材料を用いたものであるが, XPPは測定時期によっても,また, 1日のうちの時間によって変るので今後は同種についてより多くの材料を用いての実験が望まれる.また,同一さし木から57回も小枝や葉の採取は光合成器官を減少させ,発根に少なからず影響を及ぼすことが考えられるので, XPPの測定方法の改良,開発が今後の課題であろう.約60種の針葉樹及び広葉樹のXPP(本部圧ポテンシャル)を測定し,さし木発根との関係を追求した.XPPは圧室法によって1年目にはさし木親木を正午頃, 2年目には同じさし木からの採穂によって,日の出前に,いずれも年57回測定した.さし木はミストかん水装置のある野外のさし木床に春と初夏にさしつけ,秋に掘り取り, XPPとさし木発根率の関係を調べ次の結果を得た.1.さし木親木のXPPと発根率の関係. 1年のうちでは8月のXPPが最も低い. XPPと発根の関係は68月で相関が高い.発根率を良し,普通,不良に分け,春ざし,夏ざしを針葉樹,広葉樹及び常緑樹,落葉樹別に分け,さしつけ時の3月, 6月, 8月, 11月及び年平均ポテンシャルとの関係をみるといずれも発根のよい樹種はポテンシャルが高く,発根不良樹種でポテンシャルが低いことがわかった.常緑樹は落葉樹に比べXPPの年変化が少なく,着葉の有無がXPPに強く影響している.同じ科内樹種のXPPの月別変化は着葉形態が同じ場合にはかなり類似した.2.さし木のXPPと発根率の関係.さし木のXPPはさしつけ後徐々に, 1カ月あたりから回復した型と回復せずそのまま低下した型がみられた.前者は発根率がみられ,後者はほとんど枯死した. XPPと発根率の相関はさしつけ後1カ月以降徐々に高くなった.常緑針葉樹ではさしつけ時から高い相関がみられた.枝葉の含水率とXPPの関係は多くの樹種で平行関係がみられた.土壌の乾燥につれてXPPは低下した.上述の結果は約60種に及ぶ多数の材料を用いたものであるが, XPPは測定時期によっても,また, 1日のうちの時間によって変るので今後は同種についてより多くの材料を用いての実験が望まれる.また,同一さし木から57回も小枝や葉の採取は光合成器官を減少させ,発根に少なからず影響を及ぼすことが考えられるので, XPPの測定方法の改良,開発が今後の課題であろう.1.さし木発根率とその親木の水分状態をみるため、圧室法によって約60種の木部圧ポテンシャルを1年間にわたって測定し次の結果を得た。(1)春ざし、夏ざしともその親木のポテンシャルは8月に最低値を示す樹種が多く、発根率と月別ポテンシャルの関係では6、8月は他の月に比べやや高い傾向を示した。(2)発根率を良、普通、不良に分け、春ざし、夏ざしを針葉樹、広葉樹及び常緑樹、落葉樹別に分け、さしつけ時の3月,6月,8月,11月及び年平均ポテンシャルとの関係をみるといずれも発根のよい樹種はポテンシャルが高く、発根不良樹種ではポテンシャルが低いことがわかった。また、常緑と落葉樹のポテンシャルの月別変化をみると、常緑樹は落葉樹に比べポテンシャルの変化が少なく着葉の有無がポテンシャルに強く影響していると考えられた。しかし、対応した各グループ内の樹種数が一定でなく精確な検討はできなかった。

(3)同一科内に属する樹種のポテンシャルの月別変化をみると着葉形態(常緑、落葉)が同じ場合にはかなり類似することがわかった。(4)各樹種より採穂した5本の試料は採穂後ほぼ3分以内にポテンシャルの測定を終えたが、この時間内でも時間経過とともにポテンシャルが低下するもの、あまり変動しないもの、また同じ樹種でも低下、変動の仕方が月により異なり一定の傾向はみられなかった。2.鉢植えしたスギクローンをガラス室内に入れ、かん水した鉢とかん水しない鉢を設けポテンシャルの変動を調べた実験ではかん水スギのポテンシャルは徐々に増加した後ほぼ一定値に達したが、無かん水区では徐々に減少した。これはポテンシャルが土壌水分に影響され、水分が不足すると樹体内で水欠差を生じポテンシャルが減少すると考えられた。3.62年度はさし木発根率とその親木の採穂後の時間経過に伴うポテンシャルの変化の仕方について調査し、発根とポテンシャルの樹種特性を明らかにしたい。
低周波放電のプロセスプラズマとしての適用とその制御法の開発

集積回路などにおけるプラズマを利用したドライプロセス技術は、ほとんどRFなど高周波電界を使って行なわれる。しかし、高周波では行なうことができない、低周波放電プラズマの特徴を生かした独自のプロセスと、それの制御法の開発がほとんど行なわれておらず、本研究の目的はこの点に付いて実験的に研究を行なうことにある。現在までに、窒化シリコン薄膜を50Hz低周波プラズマCVDで基板非加熱で良質な膜が大面積に均一に堆積できることを見出してきた。このメカニズムの究明を行なうことで低周波プラズマのプロセスへの応用が可能となる。この点に関して63年度の研究成果から、低周波プラズマの特徴であるイオンの可動性とプラズマの断続性が重要な役割をしていることが明らかになってきた。結果の要約として、1)プラズマ中の原子・分子イオンの堆積膜への射突による埋め込みで高密度薄膜形成がなされ、更にイオンの持つ運動エネルギーの射突後の原子再配列エネルギーへの変換による化学量論的な組成への薄膜生成、2)またプラズマ中の生成物(イオン、励起・解離・ラジカル種)の低周波プラズマの断続による発生消滅の結果として、プラズマ発生電圧とプラズマ維持電圧の上昇に伴うプラズマ内の電子エネルギー上昇によるガス分子の効率的な解離が、生成薄膜の物性的評価とプラズマ内電子エネルギー測定などから得られた。これらの事実から低周波プラズマCVDによる基板非加熱条件による良質薄膜堆積が可能ではないかと考えられる。これらをふまえ、高温での堆積が条件と考えられているダイヤモンドライクカーボン薄膜の堆積を低周波非加熱プラズマCVDでH_2+CH_4混合ガスを材料として薄膜堆積した結果、この薄膜が天然ダイヤの物性(電気的・工学的・物理的)に近い物であり、上記の考えが間違いではないことが認められた。今後の研究課題として、このプラズマの制御法について研究を進める予定である。