hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
デュアル電流バイアス運動インダクタンス検出器による中性子検出効率の改善

電流バイアス運動インダクタンス検出器の学理を究め、その成果に基づき、空間分解能高い中性子イメージングの性能を未踏の領域まで高めることを目指した。15mmx15mmの有感領域(900nm線幅を持つNb細線メアンダで総延長150m、ピッチ1.5μm)のXとY検出器を直交配置し、10B層を積層する。2つの核反応生成物(7Li、4He)軽イオンが準粒子メゾ励起をX細線とY細線に同時に発生させて、15μm分解能で中性子飛来位置を特定し100万画素イメージングの実現を目指した。また、2つのCB-KIDのライン&スペースを反位相分ずらせて反転積層し、その和信号をデュアルCB-KID方式で検出し、中性子不感帯を大幅に低減することで中性子検出効率を改善を目標としてスタートした。これまでに、【超伝導CB-KIDチップの製作と評価】DUAL CB-KIDのX素子とY素子の伝搬速度が異なり、対策が必要となった。【CB-KIDの信号読出計測系の構築】波形データ保存のオシロスコープ計測系とKalliope回路高速計測系を整備した。特に、Kalliopeでは信号タイムスタンプと信号パルス幅の閾値時間幅(TOT)を残せるようにした。高空間分解能のサさらに高めるため、FGATIのGHz帯動作高速アンプ装備の特定用途集積回路(ASIC)1CHテスト回路を作製した。【J-PARCのマシンタイムの確保】2017年度は5回のマシンタイムを確保して実験を行った。【CB-KIDの動作の超伝導ダイナミクスの学理】CB-KIDでは2対の逆極性の信号が異なる方向に伝搬するが、その発生原理をLondon-Maxwell理論から明らかにした。検出器学理解明のため、空洞共振器における電磁波伝搬の理論を調査し、中性子等の放射線入射後の熱発生に伴い生じる電磁波伝搬のための数値シミュレーション手法の研究を進めた。既に、百万画素レベルの中性子イメージングに成功している。Kalliope回路を改造したKalliope-DC回路での計測システムは完成している。さらに高い分解能を達成するのための第一歩としてテスト回路の試作に着手できた。運動インダクタンス検出器の検出機構の学理研究については、理論研究を中心に進めており、数値計算への実装等については未達であるが、モンテカルロ法を用いた放射線輸送シミュレーション等の新たな研究についても着手できたことは計画を上回る達成事項となっている。【クライオスタットの改造】室温サンプルの計測が可能なように、クライオスタットを絞る改造(修理)を検討する。【検出器の信号波形のシュミレーション】CB-KIDの信号波形は信号波高値と信号半値幅が幅広く分布するが、その原因は理解できていない。モンテカルロ法であるPHITSコードによる素過程の解析と超伝導現象論を組み合わせて信号波形の再現を目指す。【J-PARCでの実験】マシンタイムを申請して採択された場合は、中性子照射実験を行う。【CB-KID検出器素子の安定した製作】CB-KIDの製作は長尺のナノ細線が断線しないとか、XY検出器の相互やグランドプレーンの間にリーク電流が流れないことが必要であり、開発要素が強いが、その改善に取り組む。【計測システム】今年度作成のFGATI(GHz帯で動作する高速アンプを内蔵した特定用途集積回路)の動作実証試験を行う。擬似信号源を用いたオフラインテストに次いで、J-PARC MLFにおける中性子信号を入力して応答をチェックするオンラインテストの2段階を踏む。将来は、上記アナログ回路を既存のKalliope回路に入力し、デジタル信号処理を試みる。【画像処理】この方法は、測定と解析をツー・ステップで行うため解析で画像化することの高速化が求められる。その対策をソフト開発として行う。【理論研究】放射線輸送シミュレーションと超伝導検出器シミュレーションを結合することで、新たな理論体系を構築する。【研究体制】研究分担者を追加して(小嶋、宍戸、幸田、Vu、町田)の体制として、研究協力者として小山富男(大阪府大)、原田正英、相澤一也、Alex Malins(原子力機構)、宮嶋茂之(NICT)、日高睦夫(産総研)が研究進展に協力をする。研究の目的:電流バイアス運動インダクタンス検出器の研究進展を受け、非平衡ダイナミクスの学理を極め、その成果に基づき空間分解能等を高めることで中性子ラジオグラフィを未踏の性能に飛躍させる。10B膜を積層した2枚(X位置検出用とY位置検出用)の15mmx15mm有感検出器(900nm線幅Nbナノ細線メアンダで総延長150m、ピッチ1.5μm)を直交配置し、2つの核反応生成物(7Li、4He)それぞれによる準粒子励起スポットがX細線とY細線で同時に発生し、2つの電磁パルスがNbメアンダ線路の両端に高速伝搬する到着時間差を精度1.5nsで計測し、X方向、Y方向15μm分解能で飛来位置を特定可能な100万画素ラジオグラフィが実現することを目的としている。平成28年度の研究実績:(1)超伝導検出器を設計し、産総研に製作を依頼して素子を完成させた。その中で、2つのCB-KIDのライン&スペースを半位相分ずらせて反転積層して計測するデュアルCB-KID方式を試みたが、2つのCB-KIDで伝搬速度が異なるという課題を見つけた。

(2)東海村J-PARC MLFでパルス状中性子ビームを用いて、時間デジタル変換回路(TDC)とFPGAからなるKalliope読出回路を改造して、高速でデータ集録のできるシステムを完成させた。(3)中性子ビームタイムにてボロン10の100ミクロンのドットアレイの中性子イメージングを行い、TDCの時間分解能が1ナノ秒で、明瞭な中性子イメージング画像を得た。試験を行った。(4)中性子検出器の実験結果の説明のため時間依存のギンツブルク・ランダウ理論の適用を検討した。また、信号の伝搬を説明するためにジョセフソン伝送線路として近似する現象論理論を構築した。今後は、S-I-S伝送線路モデル理論を基にしたシミュレーション研究を検討する。平成28年度は(1)超伝導検出器素子の試作に成功した。そして、そのひとつのデュアルCB-KID方式の試験で2つのCB-KIDで伝搬速度が異なる課題を見いだすことができた。(2)中性子イメージングを高速で実施するために時間デジタル変換回路(TDC)とFPGAからなる読出回路を改造し、Kalliope-DC回路を製作し、ボロン10の100ミクロンのドットアレイの中性子イメージングを行い、明瞭な中性子イメージング画像を得た。(3)中性子検出器の実験結果の説明のためにS-I-S積層型ジョセフソン伝送線路として近似する現象論理論を構築し、実験で得られた伝送速度の説明に成功した。これらの成果から、初年度としておおむね順調に進展していると言える。電流バイアス運動インダクタンス検出器の学理を究め、その成果に基づき、空間分解能高い中性子イメージングの性能を未踏の領域まで高めることを目指した。15mmx15mmの有感領域(900nm線幅を持つNb細線メアンダで総延長150m、ピッチ1.5μm)のXとY検出器を直交配置し、10B層を積層する。2つの核反応生成物(7Li、4He)軽イオンが準粒子メゾ励起をX細線とY細線に同時に発生させて、15μm分解能で中性子飛来位置を特定し100万画素イメージングの実現を目指した。また、2つのCB-KIDのライン&スペースを反位相分ずらせて反転積層し、その和信号をデュアルCB-KID方式で検出し、中性子不感帯を大幅に低減することで中性子検出効率を改善を目標としてスタートした。これまでに、【超伝導CB-KIDチップの製作と評価】DUAL CB-KIDのX素子とY素子の伝搬速度が異なり、対策が必要となった。【CB-KIDの信号読出計測系の構築】波形データ保存のオシロスコープ計測系とKalliope回路高速計測系を整備した。特に、Kalliopeでは信号タイムスタンプと信号パルス幅の閾値時間幅(TOT)を残せるようにした。高空間分解能のサさらに高めるため、FGATIのGHz帯動作高速アンプ装備の特定用途集積回路(ASIC)1CHテスト回路を作製した。【J-PARCのマシンタイムの確保】2017年度は5回のマシンタイムを確保して実験を行った。【CB-KIDの動作の超伝導ダイナミクスの学理】CB-KIDでは2対の逆極性の信号が異なる方向に伝搬するが、その発生原理をLondon-Maxwell理論から明らかにした。
電気通信設備の接続に関する一般的制度から導出される実体規範に関する研究

本研究は、電気通信事業法に設けられている複数の電気通信事業者の電気通信設備相互間の接続に関する制度のうち接続請求応諾義務及び接続の業務に関する業務改善命令の制度から導き出される実体規範の内容を解明するとともに、立法論上の示唆を得ることを目的とするものである。本研究においては、この目的を達成するため、1電気通信事業法の制定前以来の制度の沿革に即した歴史研究、2欧米における同種の制度との比較法研究、3電気通信事業法に定める関連する他の制度との比較研究及び4電気事業等に関する類似の制度との比較研究を立体的に組み合わせることにより、制度の趣旨・目的、要件、効果、指定電気通信設備制度との関係、民事法との関係、一般競争法との関係等を解釈論として整理した上で、今後の課題として立法論上の示唆を整理することを計画している。平成30年度は、本研究を実施する最初の年度であることから、本研究全体の基礎を得るための準備的作業として、広く複数の電気通信事業者の電気通信設備相互間の接続に関する制度に直接又は間接に関連する行政文書、学術論文、裁判例及びその評釈、国会会議録その他の資料又は文献を可能な限り悉皆的に精読し分析すること等により、論点の所在を電気通信事業法の制定前以来の制度の沿革に即して把握し整理することに取り組んだ。その過程において得られた知見の一部を接続に関する制度及び関連する政策の形成と展開の全体像を概観する論文として整理した。当該論文は、平成31年度(令和元年度)に刊行される書籍に掲載される予定である。広く複数の電気通信事業者の電気通信設備相互間の接続に関する制度に直接又は間接に関連する行政文書、学術論文、裁判例及びその評釈、国会会議録その他の資料又は文献を可及的悉皆的に精読し分析すること等により、概ね当初の計画どおり、論点の所在を電気通信事業法の制定前以来の制度の沿革に即して把握し整理し、平成31年度(令和元年度)以降に継続して実施する研究を進めるに当たっての一応の基礎を得ることができた。当初の計画に基づき研究を進める予定である。特に平成31年度(令和元年度)においては、制度の趣旨・目的、要件及び効果、指定電気通信設備制度との関係並びに民事法との関係を解釈論として整理することに注力する考えである。平成30年度においては、本研究全体の基礎を得るための準備的作業として、我が国の電気通信事業法に設けられている制度に関する歴史研究に注力した。その過程においては、勤務先の図書館等が所蔵する書籍、無償で公開されている文献又は資料(電子媒体によるものを含む。)等に基づく研究がほとんどを占めた。このことに伴い、予算の額と比べると実際の使用額が少なくなった。平成31年度(令和元年度)においては、同年度に執行することを予定していた予算の額と平成30年度に執行しなかった残高とを合わせた額を使用することにより、当初の計画の趣旨に沿った研究を進める考えである。
2色の蛍光蛋白を用いたトキソプラズマ原虫の脳内再活性化原発部位の可視化

トキソプラズマ原虫に緑色蛍光蛋白(GFP)および赤色蛍光蛋白(DsRed Express)遺伝子を組み込み、安定してこれらの蛍光蛋白を発現する組換え体を得ることに成功した。これらの株は数ヶ月以上に及ぶin vitroでの継代培養を経ても安定して蛍光を発しており、遺伝的にかなり安定であることも確認できた。加えてマウスに感染させた場合も宿主組織内で強い蛍光を発しており、in vivo感染時にも安定して蛍光を発することが確認できた。さらにこれらの組換え原虫を精製し、フローサイトメーターにて蛍光を観察したところ、トキソプラズマで発現される緑色蛍光と赤色蛍光は明瞭に区別できることが明らかとなった。これまで作成された赤色蛍光発現トキソプラズマは緑色波長への漏れ込みが問題となり、簡便に2色を識別できなかったが本研究で得た株により、このような区別がはじめて可能となった。これらの組換え原虫がマウス脳内でも明るい蛍光を発するところまでは確認できたが、当初計画で予定していた再活性化原発部位を特定するまでには至らなかった。これはマウスへの感染実験において潜伏状態に導入するまでに予想外の長期間を要したためであるが、この部分は現在も引き続き実験中であり近く達成できる見込みである。本研究によりトキソプラズマの宿主体内動態を研究するための強力なツールを得ることができた。研究期間内に論文として出版は出来ていないがすでに投稿準備中であり平成19年度には本研究の成果を論文に発表できる予定である。平成17年度の研究において、トキソプラズマ原虫の活性化・潜伏期の各ステージ特異的なプロモーターを確保できた。また、得られたプロモーターを用いてステージ特異的と予想されるトキソプラズマ原虫用発現ベクターを構築し原虫での蛍光蛋白発現を検証した。赤色蛍光蛋白遺伝子を導入したトキソプラズマは明瞭な赤色蛍光を発しており、当初の目的どおりの原虫が得られたものと思われた。この明瞭な発現は、半減期の比較的短い赤色蛍光蛋白によっても継続的に観察されているものの、その発現は弱く、半減期の長い蛍光蛋白が本実験系には適していることが明らかになった。また、発現は一過性のものではなく継続的なものであることが分かった。赤色と緑色の2色を発現する系においては、その発現効率が良くないので、この原虫をそのまま以降の研究にもちいることはせず、構造をさらに改良中である。緑色と赤色の蛍光について、生体サンプルを用いた場合でも識別できることが確認され、当初懸念されていた各蛍光色素の波長の重なりによる解析の困難さは解決されている。さらにマウス脳サンプル内での蛍光の検出条件についてもすべての設定が完了し、極めて低いバックグラウンドの中に脳内で蛍光蛋白発現細胞が明瞭に浮き出す映像を得ることができている。平成17年度中に2色の蛍光を発する原虫を作成するという当初の予定は達せられたものの、更なる改良が必要となったことは予想外であった。この意味で計画より若干の遅れがあるが他の多くの条件設定が予想以上の速さで整ったことは予想外であった。この意味で計画より若干の遅れがあるが他の多くの条件設定が予想以上の速さで整ったことを考えると、全体としては予定どうりであるいはそれ以上に順調にすすんだと考えている。現在取り組んでいる2色の傾向タンパクを発現する原虫の作成も技術的に困難な部分は既に終了しており、残された作業を継続することで平成18年度初頭に目的の原虫が得られるものと予想される。
NGFおよびその受容体の下垂体発生過程ならびに腫瘍病変における解析

予定された研究の内で現在までに以下の研究が遂行された。ヒト胎児では、排卵後50日前後の時期には、内分泌細胞の分化が認められる。この時期には、少数のNGF陽性細胞が見られた。これらのNGF陽性細胞はsynaptophysin陽性の内分泌細胞よりサイズがかなり小さく、また、内分泌細胞と異なりRathke腔に近い位置に分布していた。この時期にはS-100やGFAPで染色されるfolliculo-stellate細胞への分化は認められなかったが、胎生3ヶ月以降の胎児では、26-30週齢の流産児の連続切片で検索をした結果、NGF陽性細胞の一部はS-100、GFAP陽性でfolliculo-stellate細胞としての性格を有するものと、Prolactinなど内分泌細胞の性格のあるものが後葉との境界部近傍で数多く見出された。したがって、NGF産生細胞は、下垂体の成熟に伴い、異なった性格の細胞群へ別れて行く可能性が示唆されたものの、この点に関しては今後さらに検討を要する。また、排卵後50日前後の下垂体原基では、抗Trk A抗体で認識されるNGF受容体は、未熟で小型な内分泌細胞としての性格の明らかでない細胞のほとんどに見出された。したがって、この時期に下垂体内にみられるNGFが、未熟な細胞が内分泌細胞として分化して行く際にparacrine的に作用している可能性が伺えた。排卵後50日前後の視床下部から下垂体への神経連絡は完成しておらず、この時期では、NGF受容体の明瞭な発現は認めなかったが、連携が明瞭な26週には、NGF受容体の発現が下垂体後葉から視床下部にかけて強く発現しているのが認められた。したがって、当初の予想通り前葉で作られたNGFが視床下部の神経との連携の成立あるいは維持に何らかの関係を有していることが示唆された。また、腫瘍性病変では、下垂体腺腫12例の内6例にNGFを認めたが、産生ホルモンとの関連がとくに認められた。
神経炎症・酸化ストレスに着目し電気けいれん療法の再発予測因子を探索する前向き研究

本研究は、気分障害と統合失調症における神経炎症・酸化ストレスに着目し、電気けいれん療法の再発予測因子を探索する。本研究で電気けいれん療法術後の精神症状の再燃を予測する臨床指標、生物学的指標が明らかになれば、再発のハイリスク患者について重点的なフォローアップ体制をとり、再発予防あるいは再発時の早期介入が可能となる。
アラキドン酸代謝酵素と細胞骨格の相互作用の解析

アラキドン酸代謝系の開始酵素である細胞質ホスホリパーゼA_2(cPLA_2)と細胞骨格系タンパク質であるビメンチンとの結合部位をFar-Western法で検索した結果、cPLA_2のC2ドメインとビメンチンのヘッドドメインを介することが明らかとなった。そこで、構成的にcpLA_2とビメンチンを発現し、細胞内カルシウムイオン濃度上昇にともないプロスタグランジンE_2を産生する細胞株であるラット線維芽細胞3Y1にビメンチンのへッドドメインのみの部分に相当するcDNAを遺伝子導入し高発現細胞株を樹立した。本細胞株をカルシウムイオノフォアA23187で刺激しアラキドン酸代謝反応を解析した。その結果、ビメンチンヘッドドメイン高発現株は親株細胞と比較してアラキドン酸遊離反応ならびにプロスタグランジンE_2合成反応が顕著に減弱した。本現象はビメンチンへッドドメインによるdominant negative効果のためであると考えている。
肝胆膵癌に対する蛍光ナビゲーション手術の開発と光線力学的治療への応用

本研究では、手術前に静注されたICGが肝細胞癌組織内および転移性肝癌周囲の非癌部肝実質に滞留する機序を解明し、肝癌に対する光線力学的治療が成立する可能性を示した。また画質が改善された新規赤外観察用硬性鏡システムを用い、ICG蛍光法による肝癌同定法、胆道造影・血管造影法を腹腔鏡下肝胆膵手術に導入して有効性を評価した。一方、癌細胞に高発現する酵素と反応する新規蛍光プローブを用い、肝胆膵領域の腺癌組織を特異的に標識できることを明らかにした。さらに、膵液中のchymotrypsinと反応して速やかに蛍光を呈すプローブを開発、手術中に膵液漏出部位を同定するとともに、術後膵液漏のリスク評価に応用した。本研究は以下の4つの領域で構成されている。1)新規蛍光プローブを用いた肝胆膵癌手術診断法の開発:γ-glutamyltransfbrase(GGT)で活性化される蛍光プローブを肝切除標本の割面に散布することにより、肝細胞癌20/43結節(47%)、肝内胆管癌6/6結節(100%)、大腸癌肝転移34/35結節(97%)で肉眼的蛍光が確認された。2)新規蛍光プローブを用いた膵管・膵液漏同定法の開発:患者体外サンプルを用いて、膵液中のキモトリプシノゲンを特異的に標識する蛍光プローブを作成した。これを、手術中に膵断端を転写した濾紙(n=30)に散布したところ、16例で主膵管のみが、7例で主膵管と周囲の膵実質が蛍光標識され、残る7例では膵液の蛍光を認めなかった。主膵管あるいは膵断端に蛍光を呈した24例では、いずれにも蛍光を認めなかった7例に比べて術後膵液漏(ISGPF grade B以上)の頻度が高かった(57%vs.0%,P=0.01)。3)ICG蛍光法を用いた肝癌手術診断法の基礎的検討と光線力学的治療への応用:肝細胞癌切除標本の癌部と非癌部組織片の遺伝子発現解析を行い、癌部肝組織に対する癌組織の遺伝子発現量の比(T/N)を求めた。Indocyanine green(ICG)蛍光法により切除標本上で癌組織が蛍光を呈した13結節では、周囲肝実質のみリング状の蛍光を呈した6結節に比べて、ICGの取り込みに関与するNACPとOATP8のT/Nが高い傾向を認めたが(中央値[範囲];NACP.O.93[<0.01-1.8]vs0.12[0.01-0.47],P=0.02;OATP8,0.54[0.01-1.9]vs0.06[<0.01-0.89],P=0.16)、細胆管へのICG排泄に関与するMRP2では両群に差を認めなかった。また、ヌードマウスの皮下にヒトHCC培養細胞を移植し、あらかじめICGを静注し近赤外レーザー(823nm)を3分間照射した群(ICG+NIR+,n=10)、ICG静注のみを行った群(ICG+NIR-,11=8)、近赤外レーザー照射のみを行った群(ICG-NIR+,n=4)で腫瘍径の変化を観察した。近赤外レーザー照射当日、3日後、9日後の平均腫瘍径(mm2)はICG+NIR+群で217、249、1058、ICG+NIR-群で402、1164、4272、ICG-NIR+群で127、967、3596であり、ICG+NIR+群では他の2群に比べて有意に増殖が抑制されていた(P<0.01)。4)日常臨床への普及を目指した次世代赤外観察用硬性鏡システムの開発:腹腔鏡下胆摘術97例蛍光胆道造影を行った結果、Calot三角剥離前/後における胆嚢管-総肝管合流部の同定率はそれぞれ76%/93%と良好であった。また、次世代システムを用いて、ICG蛍光法で切除予定肝区域を蛍光標識する新たな区域同定法を確立した。1)新規蛍光プローブを用いた肝胆膵癌手術診断法の開発:γ-glutamyltransferase(GGT)で活性化される蛍光プローブを切除標本に散布し、肝細胞癌(41結節)の約50%、肝内胆管癌(5結節)および大腸癌肝転移(46結節)の全てを同定できた。免疫染色で、本プローブに蛍光を呈す腫瘍ではGGT1/6が高発現している可能性が示された。

2)新規蛍光プローブを用いた膵管・膵液漏同定法の開発:膵液中のchymotrypsinで加水分解され蛍光を呈す新規プローブ(glutaryl-phenylalanine hydroxymethyl rhodamine green)を作成。これを患者膵手術(n=35)に際して膵断端を転写した濾紙上に散布してイメージングを行い、膵液漏出部位の同定と術後膵液漏のリスク評価が可能であることを示した。また動物実験にて、本プローブを用いて体腔内で膵液漏出部位の同定が可能であることも確認した。現在、本プローブの患者体腔投与を目標とした非臨床試験を計画中である。3) Indocyanine green (ICG)蛍光法を用いた肝癌手術診断法の基礎的検討と光線力学的治療への応用:切除標本の遺伝子発現解析と免疫染色により、ICG蛍光法で肝癌組織が同定される機序を解明した。本結果をふまえ、光線力学的治療の条件を再設定し実験継続中である。4)日常臨床への普及を目指した次世代赤外観察用硬性鏡システムの開発:臨床使用可能な近赤外腹腔鏡装置5機を用いて腹腔鏡下胆摘および肝切除、膵切除中にICG蛍光イメージングを行い、本法による脈管および肝腫瘍の同定能を評価した。上記1),2)の新規蛍光プローブを描出するための腹腔鏡システムも開発中である。総括)ICG蛍光イメージングは、基礎的検討の結果をふまえて実臨床に応用し、手術の確実性向上に役立てることができた。新規プローブを用いた膵液漏の蛍光イメージングは臨床応用に向けた非臨床試験を計画する段階に到達した。1)新規蛍光プローブを用いた肝胆膵癌手術診断法の開発:γ-glutamyltransferase(GGT)で活性化される蛍光プローブを切除標本に散布し、肝細胞癌の約50%、肝内胆管癌および大腸癌肝転移のほぼ全てを同定できた。また、胆管癌の約30%,膵癌の約50%で、癌部の蛍光強度が非癌部よりも2倍以上高くなり、胆膵癌の標識にも応用できる可能性が示された。2)新規蛍光プローブを用いた膵管・膵液漏同定法の開発:glutamyl-phenylalanine hydroxymethyl rhodamine greenを新規に作成。これを患者膵手術(n=30)に際して膵断端を転写した濾紙上に散布してイメージングを行い、膵液の漏出部位とその蛋白分解酵素活性をリアルタイムに評価した。また、ブタを用いて体腔内で膵液漏出部位を同定するシステムを構築した。3) indocyanine green (ICG)蛍光法を用いた肝癌手術診断法の基礎的検討と光線力学的治療への応用:遺伝子発現解析および免疫染色を用い、ICG蛍光法で癌組織が蛍光を呈す肝細胞癌では、ICGの細胞内取り込みに関与するNACPやOATP8の発現が維持されているものの、胆汁排泄機構に障害があるために、ICGが癌組織に滞留することを解明した。光線力学的治療については、最大の腫瘍縮小效果を得るために、近赤外レーザーの照射強度と時間を最適化する作業を継続している。4)日常臨床への普及を目指した次世代赤外観察用硬性鏡システムの開発:腹腔鏡下胆摘術8例で、従来の標準画質の硬性鏡システムとハイビジョン画質のシステムの両者を用いて蛍光胆道造影を行い、ほぼ同等の胆管描出能が得られることを確認した。また、腹腔鏡下肝切除10例でICG蛍光法による肝癌同定、膵脾切除6例で血管造影を行い、それぞれ肝癌描出能と血管同定能を評価した。1)新規蛍光プローブを用いた肝胆膵癌手術診断法の開発では、標本上で腫瘍を標識することができた。2)新規蛍光プローブを用いた膵管・膵液漏同定法の開発では、膵液中のキモトリプシノゲンを特異的に標識する蛍光プローブを作成することができた。3)ICG蛍光法を用いた肝癌手術診断法の基礎的検討と光線力学的治療への応用では、マイクロアレイと免疫染色を用いて本法の機序解明に成功したほか、動物実験で肝癌に対するICGを用いた光線力学的療法の腫瘍増殖抑制効果を確認した。
ミクログリアを利用した脳内特異的DDSの開発

本研究はミクログリアの脳への選択的移行特性機構の解明を目的とし、ミクログリアの血液脳関門移行における走化性因子の影響を検討した。ミクログリアの走化性因子の1つとして報告されているATPについて構築したアッセイ系での最適濃度および時間について検討を行った。この条件をもとに、ATP以外のヌクレオチドについても検討を行い、TTPおよびCTPがミクログリアの走化性に影響を与える可能性が示唆された。本研究はミクログリアの脳への選択的移行特性を利用した脳内特異的ドラッグデリバリーシステムの開発を目的としている。しかしながら、現時点において、ミクログリアの持つ血液脳関門(BBB:blood-brain barrier)通過機能に関与する分子実体は明らかになっていない。そこで、20年度は効率よくミクログリアの持つBBB通過機能に関与する分子実体の解明を行うために、BBBを構成している脳毛細血管内皮細胞(株化したものを使用)をin vitroでミクログリアが通過するアッセイ系を用いて走化性因子の解析を行った。脳内においてはミクログリアの化学走化性因子の1つとして核酸であるATPが関与していることが報告されている。そこで、ミクログリアのBBB通過機構におけるATPの濃度依存性および時間依存性について検討を行った。トランスウェルの下部チャンバーに100μM, 10μM, 0μM ATPを加え、上部チャンバー上には脳毛細血管内皮細胞とミクログリアを共培養し、ミクログリアの脳毛細血管内皮細胞通過に対する影響の検討を行った。その結果、濃度依存的にミクログリの脳毛細血管内皮細胞通過能の上昇が観察された。また時間依存性については24,48および72時間の3点で検討を行い、ミクログリアの通過率および脳毛細血管内皮細胞の状態からミクログリアと脳毛細血管内皮細胞との共培養時間は24時間が最適であると判断した。さらに、ミクログリアが脳毛細血管内皮細胞を通過する様子を観察する系を確立するために細胞蛍光標識試薬の検討を現在行っている。しかしながら、現時点において、ミクログリアの持っ血液脳関門(BBB:blood-brain barrier)通過機能に関与する分子実体は明らかになっていない。そこで、21年度も効率よくミクログリアの持つBBB通過機能に関与する分子実体の解明を行うために、BBBを構成している脳毛細血管内皮細胞(株化したものを使用)をin vitroでミクログリアが通過するアッセイ系を用いて走化性因子の解析を行った。今後の研究においては、ATP濃度は100mMを用いることにした。さらに、ATP以外のヌクレオチドの影響についても現在検討を行い、ATP以外にもTTPおよびCTPがミクログリアの走化性に影響を与える可能性が示唆された。また、GFPをミクログリアに導入し、ミクログリアが脳毛細血管内皮細胞を通過する様子を観察する系を確立した。この条件をもとに、ATP以外のヌクレオチドにういても検討を行い、TTPおよびCTPがミクログリアの走化性に影響を与える可能性が示唆された。また、ミクログリア(Ra2細胞)、および脳毛際血管内皮細胞(MBEC細胞)を用いてDNAマイクロアレイを行い、トランスポーターの発現プロファイリングの検討を行った。その結果、物質の取り込みに関わるトランスポーターの種類としてRa2細胞とMBEC細胞で共通して、ミトコンドリアでATP産生に関与するトランスポーターファミリーの発現量が高かった。さらに、糖ヌクレオチドトランスポーター、アミノ酸トランスポーターおよび亜鉛トランスポーターファミリーの発現量も高かった。排出に関わるトランスポーターについてもRa2細胞とMBEC細胞で共通して、Abcb, Abcc, Abcd, AbcfおよびAbcfファミリーの発現が高かった。また、DNAマイクロアレイの結果をもとにパスウェイ解析を行った。その結果、Ra2細胞にATPを添加した場合は、アクチンフィラメント形成に関わる遺伝子の発現量が増加しており、一方、脳毛際血管内皮細胞であるMBEC細胞では、アクチンフィラメント形成に関わる遺伝子の発現量が減少していた。

これらの結果は、ATP添加によりミクログリアの走化性が増加したことと深く関わりがあることが予想された。今後、アクチンフィラメントとミクログリアの走化能がどのように関連しているのか検討していく予定である。
SIRT7による多面的代謝制御機構の解明

SIRT7はNAD依存性の脱アセチル化酵素である。Adiponectin-CreトランスジェニックマウスとSIRT7floxマウスを交配することで脂肪細胞特異的SIRT7ノックアウトマウスを作製した。同マウスにおいては褐色脂肪組織(BAT)における熱産生タンパク質UCP1の発現が上昇しており、酸素消費の亢進が認められた。またコントロールマウスに比して体温の上昇が認められた。BATから間質細胞(SVF)を単離し、褐色脂肪細胞に分化させたところ、野生型とSIRT7ノックアウトマウスにおいて脂肪細胞の分化度に差は認めなかった。以上の結果からSIRT7は褐色脂肪細胞の分化には影響せず、脂肪細胞機能を制御することでBATの機能を調節していることが明らかになった。PPARgは脂肪細胞の機能維持に重要な核内受容体型転写因子である。SIRT7とPPARgの結合について免疫沈降法により検討したところ、両者は細胞内で結合することが確認できた。そこでSIRT7がPPARg活性に及ぼす影響についてリポーターアッセイを用いて検討したところ、SIRT7はPPARg転写活性を増強作用を有していることが判明した。293T細胞にSIRT7とPPARgを共発現させ、PPARgのアセチル化状況について検討したところ、SIRT7はPPARgを脱アセチル化することが判明した。現在、SIRT7とPPARgとの結合部位の検討を行っている。SIRT7により脱アセチル化されるリシン残基を同定し、同部位のアセチル化の有無がPPARgの機能にどのような影響を及ぼすか検討を行う予定である。またPDX1-Creトランスジェニックマウスを用い、膵β細胞特異的SIRT7ノックアウトマウスを作製することに成功した。同マウスを用いることで膵β細胞におけるSIRT7の役割について検討を進めていく。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。SIRT7はNAD依存性の脱アセチル化酵素であり、転写因子TR4のタンパク発現を介して肝臓における脂質蓄積量を制御している(Cell Metabolism 2014)。SIRT7によるTR4発現制御の分子機構を解明するために、TR4の分解を制御するCul4B E3ユビキチンリガーゼ複合体の構成分子とSIRT7の結合について検討を行った。その結果、SIRT7は複合体の構成因子の一つであるDDB1と特異的に結合することが判明した。次に細胞内におけるDDB1のアセチル化状態について検討を行った。HEK293T細胞にDDB1とSIRT7を共発現させるとDDB1のアセチル化が著明に低下した。以上の結果から、DDB1はSIRT7により脱アセチル化を受けることが明らかになった。またSIRT7ノックアウトマウスでは熱産生の亢進や褐色脂肪組織におけるDio2などの熱産生関連遺伝子の発現が認められた(Cell Metabolism 2014)。SIRT7による熱産生関連遺伝子上昇のメカニズムを解明するため、マウス褐色脂肪細胞株でSIRT7をノックダウンする実験を計画した。しかし本検討で用いた褐色脂肪細胞株ではDio2の発現レベルが野生型マウス褐色脂肪組織に比して極めて低く、解析には適さないことが判明した。そこでマウス褐色脂肪組織由来の間質細胞(SVF)から分化させた脂肪細胞を検討に用いることとした。マウス褐色脂肪組織からコラーゲン処理でSVFを分離後、SV40で不死化させた細胞を脂肪細胞に分化誘導を行った。その結果、Dio2の発現レベルは通常の褐色脂肪組織における発現と同程度であったが、脂肪細胞への分化後の細胞内脂肪蓄積量が十分ではなかった。現在、脂肪細胞への分化が良好なクローンを単離中である。SIRT7はNAD依存性の脱アセチル化酵素であり、転写因子TR4のタンパク発現を介して肝臓における脂質蓄積量を制御している(Cell Metabolism 2014)が、その詳細な分子機構は不明である。本年度の研究結果により、TR4を分解するCul4B E3ユビキチンリガーゼ複合体の構成成分であるDDB1とSIRT7が結合し、SIRT7がDDB1を脱アセチル化することが明らかになった。SIRT7は転写因子TR4のタンパク発現を介して肝臓における脂質蓄積を制御している(Cell Metabolism 2014)が、その詳細なメカニズムは不明であった。本研究の結果、SIRT7はCul4B E3ユビキチンリガーゼ複合体の構成分子であるDDB1の1121番目のリシンを脱アセチル化すること、脱アセチル化されたDDB1はDCAF1の結合が減弱するため、E3ユビキチンリガーゼ複合体の基質の分解活性が低下することが判明した。SIRT7存在下ではDDB1の脱アセチル化を介してTR4の分解が低下するためTR4のタンパク発現量が増加し、Cd36やCideaなど脂質蓄積的に働く標的遺伝子の発現が増加するため脂質蓄積が増加するというSIRT7による肝臓内脂質蓄積制御の詳細な分子機構が明らかになった(BBRC 2017)。

またSIRT7ノックアウトマウスでは熱産生の亢進や褐色脂肪組織におけるDio2など熱産生関連遺伝子の発現が上昇しているが(Cell Metabolism 2014)、adiponectin-Creトランスジェニックマウスを用いて作製した脂肪細胞特異的SIRT7ノックアウトマウスの褐色脂肪組織においても熱産生関連遺伝子であるDio2やUcp1の発現上昇が認められた。この結果から、褐色脂肪組織自身のSIRT7が熱産生の制御に重要であることが明らかになった。褐色脂肪細胞におけるSIRT7の役割を解明するためにはin vitroの解析系が必要であるが、一般的に使用されている褐色脂肪細胞培養細胞株ではDio2の遺伝子発現が低いために、SIRT7の機能を検討することが困難であった。そこで新たに褐色脂肪組織由来の間質細胞(SVF)を脂肪細胞に分化させる系の構築を試み、SVFを褐色脂肪細胞へ分化させることに成功した。SIRT7は転写因子TR4のタンパク発現を介して肝臓における脂質蓄積を制御している(Cell Metabolism 2014)が、その詳細なメカニズムは不明であった。本研究の目的の一つはSIRT7による肝臓内脂質蓄積量制御の分子機構を解明することであったが、H29年度の研究成果により、SIRT7がDDB1を脱アセチル化することで脂質代謝を制御するというメカニズムが判明した。また褐色脂肪組織由来間質細胞から褐色脂肪細胞を分化させる系を立ち上げることに成功した。この分化系は褐色脂肪細胞におけるSIRT7の役割を解明する上で重要である。SIRT7はNAD依存性の脱アセチル化酵素である。Adiponectin-CreトランスジェニックマウスとSIRT7floxマウスを交配することで脂肪細胞特異的SIRT7ノックアウトマウスを作製した。同マウスにおいては褐色脂肪組織(BAT)における熱産生タンパク質UCP1の発現が上昇しており、酸素消費の亢進が認められた。またコントロールマウスに比して体温の上昇が認められた。BATから間質細胞(SVF)を単離し、褐色脂肪細胞に分化させたところ、野生型とSIRT7ノックアウトマウスにおいて脂肪細胞の分化度に差は認めなかった。以上の結果からSIRT7は褐色脂肪細胞の分化には影響せず、脂肪細胞機能を制御することでBATの機能を調節していることが明らかになった。PPARgは脂肪細胞の機能維持に重要な核内受容体型転写因子である。SIRT7とPPARgの結合について免疫沈降法により検討したところ、両者は細胞内で結合することが確認できた。そこでSIRT7がPPARg活性に及ぼす影響についてリポーターアッセイを用いて検討したところ、SIRT7はPPARg転写活性を増強作用を有していることが判明した。293T細胞にSIRT7とPPARgを共発現させ、PPARgのアセチル化状況について検討したところ、SIRT7はPPARgを脱アセチル化することが判明した。現在、SIRT7とPPARgとの結合部位の検討を行っている。SIRT7により脱アセチル化されるリシン残基を同定し、同部位のアセチル化の有無がPPARgの機能にどのような影響を及ぼすか検討を行う予定である。またPDX1-Creトランスジェニックマウスを用い、膵β細胞特異的SIRT7ノックアウトマウスを作製することに成功した。同マウスを用いることで膵β細胞におけるSIRT7の役割について検討を進めていく。
胎児と内分泌因子が関与する妊娠維持・分娩発来機構の解明

本研究の目的は胎児と内分泌因子が関与する妊娠維持・分娩発来機構の解明である。本年度は、機能的プロゲステロン(P4)減少機構に関与する可能性のある蛋白の一つであるdecorin(DCN)に着目し検討した。プロテオグリカンの一種でコラーゲンを安定させる働きのあるDCNは、P4により発現増強されることが子宮内膜症モデル細胞で知られる。またDCNは羊膜に高発現するが、分娩時の頸管近傍の羊膜では発現が減少することが報告されている。我々の検討では、FACSで単離した羊膜上皮細胞と間質細胞の比較で、DCN mRNAは間質細胞で約3倍高発現していた。また妊娠中期に比べ末期羊膜において、DCN mRNA発現量は著明に減少していた。前年度までの検討で判明したように、羊膜では局所でのP4産生に関与するHSD17B2が高発現しているが、上皮細胞と間質細胞のDCN発現パターンはHSD17B2に類似していた。よって、妊娠末期の羊膜DCN発現減少は、局所のP4減少による可能性があるものと考えられた。またDCNは、妊娠中期の羊水中に豊富に存在する成長因子midkine(MDK)により正の発現調節を受けている可能性が、培養羊膜上皮細胞へのMDK添加による網羅的発現解析の結果から示された。DCN発現減少はコラーゲンの不安定化から卵膜の脆弱化や破水の契機になりうることが推測されることから、前期破水例などの早産関連病態における今後の研究の展開が期待された。平成28年度は、まず羊膜におけるプロゲステロン(P4)の受容体やP4代謝・産生系因子の発現プロファイル・局在の検討をおこなった。羊膜のmRNA発現をみると、P4の核型受容体であるPGRの発現レベルは極めて低く、これはPGR蛋白陰性であった免疫組織染色の結果と合致した。この点に関して、羊膜から単離した上皮細胞(EPCAM陽性)と間質細胞(EPCAM陰性、Vimentin陽性)との間で差異はなかった。一方、P4の膜性受容体であるPGRMC1 (progesterone receptor membrane component 1)については、羊膜でmRNA発現レベルが高く、これは既報の免疫組織染色の結果と合致し、こちらもPGRと同様に上皮細胞、間質細胞間で発現レベルに差異は認めなかった。P4代謝・産生系因子のmRNA発現に関しては、P4の代謝に関わるSRD5A1(steroid-5-alpha-reductase, alpha polypeptide 1)やAKR1C1C3(aldo-keto reductase family 1; member C1,C2,およびC3)の羊膜上皮細胞発現レベルは低かった。またP4の局所生成に関わる酵素であるHSD17B2のmRNA発現レベルは非常に低かった。しかし間質細胞においては、HSD17B2は特徴的な高発現を示し、これは上皮細胞と比較し300倍以上の発現レベルであった。今後蛋白レベルでの検討を要するものの、上記の結果は、P4がPGR受容体発現のない羊膜においても膜性受容体などを通じて作用を及ぼしている可能性、また羊膜局所でP4濃度維持機構が存在する可能性を示唆するものと考えられた。正常妊婦検体は順調に得られつつあるが、各種病態における検体が、まだ十分に得られていないためヒト胎児副腎(HFA)は体のサイズに比べ相対的に最も大きい臓器であり、胎盤で産生されるエストロゲンの前駆体を産生し、妊娠末期には肺など胎児臓器の成熟に不可欠なコルチゾールの産生を開始する。HFAでは外層(DZ)にほぼ限定して細胞増殖が生じるが機序は不明である。これまでの我々の研究から、成長因子のうち、FGF-2はどの部位のHFA由来細胞に対しても増殖促進効果を示すが、Midkine(MK)はDZ細胞のみに増殖促進作用を示す。またFGF-2はヒト副腎皮質モデル細胞株であるNCI-H295RやNCI-H295Aのいずれにも増殖促進作用を示すが、MKはより胎児副腎皮質の表現型に近いNCI-H295A細胞に対してのみ増殖促進作用を示す。上記の細胞選択性の差異を、DZ選択的な細胞増殖の機序解明の端緒とするべく、今年度は、NCI-H295RやNCI-H295A細胞のMKの受容体候補およびFGF受容体(14)に関するmRNA発現パターンの差異を網羅的に解析した。その結果、MKの受容体候補では、ITGB1の発現レベルが両細胞で最も高く、SDC3とNCAM1がそれに次いだ。またLRP1はNCI-H295A細胞で4倍高発現していた。以上より、MKのNCI-H295AやDZの細胞増殖促進作用にLRP1介在の可能性が示唆され、今後の検討課題と考えられた。また両細胞にはFGFR1と4が発現し、FGFR1はNCI-H295A細胞で3倍高発現していた。FGFファミリー(FGF120)についても解析すると、FGF9、11、13を除き両細胞にはほとんど発現していなかった。

これはモデル細胞株の基礎値の結果ではあるが、HFA皮質細胞に関して、FGF-2がACTHにより発現・産生亢進しオートクラインに作用して細胞増殖をもたらすという従来有力だった仮説と反する結果であり、今後の検討を要する。各種病態における検体採取がやや遅れている。また研究分担者の当該年度での退職等により研究実施体制の変更が必要となり、次年度に先送りする研究部分が生じたため。本研究の目的は胎児と内分泌因子が関与する妊娠維持・分娩発来機構の解明である。本年度は、機能的プロゲステロン(P4)減少機構に関与する可能性のある蛋白の一つであるdecorin(DCN)に着目し検討した。プロテオグリカンの一種でコラーゲンを安定させる働きのあるDCNは、P4により発現増強されることが子宮内膜症モデル細胞で知られる。またDCNは羊膜に高発現するが、分娩時の頸管近傍の羊膜では発現が減少することが報告されている。我々の検討では、FACSで単離した羊膜上皮細胞と間質細胞の比較で、DCN mRNAは間質細胞で約3倍高発現していた。また妊娠中期に比べ末期羊膜において、DCN mRNA発現量は著明に減少していた。前年度までの検討で判明したように、羊膜では局所でのP4産生に関与するHSD17B2が高発現しているが、上皮細胞と間質細胞のDCN発現パターンはHSD17B2に類似していた。よって、妊娠末期の羊膜DCN発現減少は、局所のP4減少による可能性があるものと考えられた。またDCNは、妊娠中期の羊水中に豊富に存在する成長因子midkine(MDK)により正の発現調節を受けている可能性が、培養羊膜上皮細胞へのMDK添加による網羅的発現解析の結果から示された。DCN発現減少はコラーゲンの不安定化から卵膜の脆弱化や破水の契機になりうることが推測されることから、前期破水例などの早産関連病態における今後の研究の展開が期待された。羊膜上皮細胞や間質細胞の培養法など、実験手法はほぼ確立してきており、今後は各種病態から得られる検体数を増やしていくことに注力する。またもう一方の研究対象であるヒト胎児副腎細胞のモデル細胞のNCI-H295A細胞についても網羅的解析や遺伝子サイレンシング実験を進めつつあり、これらの結果を踏まえて検討候補遺伝子やその産物を抽出し、研究計画に対して適切なmodificationを加えながら機能解析等の検討を進めていく予定である。前年度はヒト胎児副腎細胞モデルであるNCI-H295A細胞を用いた実験に進展が見られた。今年度は、同細胞の網羅的解析結果から得られたデータを基に計画していた実験を進めていきたい。また研究実施体制については、次年度に実験業務を補助してくれる人員の目処がたったので、やや遅れていた実験部分の進捗が取り戻せるものと考えている。研究を遂行するために必要な試薬の新規購入が安価なものですんだこと、また次年度に解析予定の因子に関連した実験に必要な試薬などについて、購入前に慎重に吟味する手順を踏んだことで、結果的に残金が発生し、次年度使用額が生じたものである。(理由)前年度後半に、研究人員の問題から一部の実験の進展に遅れが生じたため、その分に必要な額を次年度にまわすことになった。(計画)今年度は、実験の補助をおこなってもらう要員の雇用を行って研究実施体制を強化し、やや遅れていた部分の研究を精力的に進めていきたい。繰越金と本年度分の金額の支出については、これまで通り効率的に実施する予定である。次年度では、研究の進展に伴い新たな因子に対する検討や各種のassayのために必要な比較的高額な試薬などの購入を予定している。また国内外の研究成果の発表に要する費用も支払う予定としており、繰り越し金と本来の次年度分と合わせた金額の支出を、無駄のないよう効率的に実施する予定である。
プラトン美学におけるアイステーシス論の創始と展開

本研究では、プラトンの思想の中でのアイステーシス論を分析して、それが哲学的思索の構造へ組み入れられていることを示した。このアイステーシス論が『パイドン』において確立されており、それが『国家』では展開されて、とりわけ現れの受容の場面における<尺度>の概念が感覚機能と知性的認識とを結びつける役割を果たしていることを確認できた。このように、プラトン思想におけるアイステーシスの位置づけを再評価した。本研究では、感性論の歴史的な出発点としてのプラトン思想を詳細なテキスト分析を通してもう一度見直し、アイステーシス(感覚、感性)についての議論の創始と発展のありようを明らかにすることに努める。21年度においては、プラトンにおける感性の理論が彼自身の哲学に不可欠なかたちで組み入れられた地点を明確にするために、対話編『パイドン』の前半部分を考察対象として、テキスト分析を行い、これまで美学の分野で着目されることのなかった魂と肉体の分離についての議論に対して新たな読解を試みた。欺きの現れに対立する似像的現れの働きを確保する思索の出発点として、『パイドン』のスキアグラフィア批判、浄化と想起に関する議論を位置づけた。また否定的観点から用いられているスキアグラフィアの概念を、他の対話篇に見られる芸術否定の議論と比較して検討した。感覚は肉体と結びついたものであるが、テキスト分析を通じて肉体のあり方に引きずられない感覚独自の機能をプラトンがこの文脈において示していることを明らかにした。浄化は魂と肉体の分離に関わり、肉体を否定するものであるが、感覚機能そのものをすべて否定するわけではなく、かえって、感覚を鋭敏化することに通じてもいるという解釈を提示した。こうしたプラトンにおけるアイステーシスに位置づけを、一部プロティノスの議論とも比較しつつ、ブリュッセル自由大学およびリヨン第三大学において報告し、他の研究者からの意見を伺うことができた。プラトンによるイデア論の導入は、感覚に関わる理論的考察にも裏付けられていることを確認することができた。プラトンにおけるアイステーシスのあり方を明確化するキーワードとしての「尺度」、「現れ」などの概念をめぐって、感覚の領域に関わる機能がいかに働いて彼の思想構造に組み込まれているかを考察した。とりわけ、『パイドン』以後のプラトン思想の展開においても感性の機能に対する問題意識が形而上学的思索の発展に通底していることを明らかにすることに努めた。「尺度」(metron)に関しては、感覚の対象のあり方と感覚の機能のあり方とを秩序づける働きをもっていることを明確にし、さらに、「虚像」(phantasma)としての現れと「似像」(eikon)としての現れを区別する要因として、モデルとの尺度に適っているかどうかという「つりあい」(summetria)の問題を考察した。「似像」の条件であるモデルと現れとの間の事実上のつりあいと、「虚像」をもたらす見かけ上のつりあいとを見定めた上で、前者のつりあいとの関連で、プラトンが「尺度に適ったもの」と「尺度に反したもの」とを対立させていることをテキスト分析を通じて明確化した。尺度の問題に関しては、国際プラトン学会(慶應大学)で発表することができた。また、フランスのプロヴァンス大学で『パイドン』に見られる美の問題をプロティノス思想との関係を含めて研究発表し、ベルギーのブリュッセル自由大学で、日本文化との比較をおりまぜながら『国家』第十巻の「模倣」(mimesis)と「自然」(phusis)について発表し、パリ高等師範学校において、やはり日本文化との比較を行ないつつ『国家』教育論の議論の解釈について発表した。以上を通じて、プラトン思想における感覚の位置づけについての考察を深め、『パイドン』から『国家』にかけての理論展開をより明らかにすることができた。プラトンにおけるアイステーシスの位置づけとその意味とを対話篇のテクストを読解しつつ明確化するために、昨年考察した「尺度の概念をより発展的に「測定術」や「絵画術」との関連で解釈を進め、創造行為の問題がプラトンにおいて、人間の感覚能力との関係でいかに扱われているかを明らかにするよう努めた。また、「デーミウールゴス」などの概念と、それらをめぐって、感覚の領域に関わる機能がいかに働いてプラトンの思想構造に組み込まれているかについて考察した。プラトン思想の中期から後期にかけての『パイドン』以後の展開においても感性の機能に対する問題意識が形而上学的思索の発展に通底していることを明確化することを目的とし、とりわけ、『国家』におけるスキアグラフィアの位置づけに関して、また、同対話編の洞窟の比喩におけるタウマトポイオイのもつ意味に関して、後期対話篇である『ソフィスト』などにおける現れを作り出す行為、あるいは絵画技術について批判的に主題化した議論との比較検討を通じて考察した。古代哲学関係の文献の豊富なベルギーのブリュッセル自由大学の古代哲学研究所において資料収集をおこない、古代思想に詳しいボードアン・ドシャルヌー教授、ファビアン・ノビリオ研究員、およびシルヴァン・ドラコミネット講師のもとで批判を受けた上で議論し、さらには、プラトン思想と絵画技術との関連性の問題に関しては、3月にパリで行なわれたハーヴァード大学研究員ヨアンナ・パパドプル氏が企画する研究会で発表し同氏や他の出席者からの批判と助言を受けた。