hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
低分子化合物スクリーニングによるパーキンソン病治療薬開発

α-synuclein(α-syn)の産生を低下させる低分子化合物のスクリーニングのため、α-syn遺伝子及び発現調節領域を含むBACに分泌性ルシフェラーゼカセットを挿入したコンストラクトを作製し、これを安定発現するSH-SY5Yを作製した。この細胞を用い主にFDA承認済みの化合物ライブラリーからスクリーニングを行い、α-synの発現を低下させる化合物を複数得た。またその作用機序の一部を明らかにした。化合物の有用性の検証のためパーキンソン病を再現するモデル動物としてα-syn Tgマウスに対して酸化ストレスを遺伝的に負荷した新しいモデルマウスの樹立を試みた。α-Synの産生を低下させる低分子化合物をスクリーニングする方法として、ルシフェラーゼアッセイ系を利用した。まずα-Syn遺伝子と遺伝子発現調節領域を十分に含む約190kbのα-Syn BACクローンを用いて、大腸菌内相同組み換えによりα-Syn遺伝子exon2内のORF(open reading frame)に細胞外分泌性ルシフェラーゼ遺伝子を挿入し、さらにSH-SY5Y細胞にエレクトロポレーションにてトランスフェクションすることにより、ルシフェラーゼ分泌安定株を複数株取得した。このような巨大配列による、神経系へのトランスフェクションとその安定株取得の試みは報告がほとんどないが、遺伝子発現調整領域を網羅するという点において、転写を調整する低分子化合物スクリーニングでは重要と考えられる。200kbの挿入配列であり、断片化の有無を、realtime PCR、パルスフィールド電気泳動にて確認を行っている。同時にin vivoでの候補分子の検討のために、PDマウスモデルを作製している。α-Syn遺伝子導入マウス(α-Syn BACトランスジェニックマウス)にIRP-2(iron regulatory protein 2)トランスジェニックマウスを交配し、ヒトPDの病態・病理を忠実に再現するマウスの作製を進行させている。現在、約6か月齢のα-Syn+/+・IRP-2+/-マウス含めて各群10匹程度のlittermateの経過を観察している。α-synuclein(alpha-syn)の産生を低下させる低分子化合物のスクリーニングを行い、のalpha-synの発現を低下させる化合物を複数得た。得られた化合物の作用機序として、ある転写因子が標的となることが明らかとなった。化合物の有用性の検証のためパーキンソン病を再現するモデル動物としてalpha -synトランスジェニックマウスに対して酸化ストレスを遺伝的に負荷した新しいモデルマウスの樹立を行った。このマウスでは不溶性のalpha -synが増加している結果を得たことから、孤発性パーキンソン病の一部の病態を反映している可能性が示唆された。α-シヌクレイン(α-Syn)の産生を低下させる低分子化合物をスクリーニングする方法として、ルシフェラーゼアッセイ系を使用した。α-Syn遺伝子と遺伝子発現調節領域を十分に含むα-Syn BACクローンを用いて、大腸菌内相同組み換えによりα-Syn遺伝子exon2内のORFに細胞外分泌性ルシフェラーゼ遺伝子を挿入し、さらに神経系cell lineにトランスフェクションすることにより、ルシフェラーゼ分泌安定株を作製した。この安定株を利用して、これに約1000個からなるFDA既存薬ライブラリー、あるいは使用経験のある約9600個からなる低分子化合物ライブラリーを付加し、プレートリーダーを使用してルシフェラーゼアッセイを行っているが、FDA既存薬ライブラリーの第一次スクリーニングが終了した段階である。現在FDA既存薬ライブラリーによる2次スクリーニングを施行中である。次に、ヒトPDの病態・病理を忠実に再現するマウスの樹立に関して、α-Syn BAC TgマウスとIRP-2 Tgマウスの交配を行った。現在、α-Syn (+/+)・IRP-2 (+/-)、あるいはα-Syn (-/-)・IRP-2 (-/-)である野生型マウスを含めた各遺伝子群(4群)10匹以上のマウスを作製した。現在、約15か月齢のlittermateを使用した網羅的な行動解析を終了し、結果を解析中である。マウスモデルの作製は概ね順調に進行している。低分子化合物スクリーニングのためのルシフェラーゼアッセイ系の確立に関しては、BACに挿入された巨大配列による、神経系へのトランスフェクションとその安定株取得の試みは、報告がほとんどなく、我々もトランスフェクション効率が悪いことから、難航した。25年度が最終年度であるため、記入しない。α-シヌクレイン(α-Syn)の産生を低下させる低分子化合物スクリーニングに関して、α-Syn BACクローンを用いて、大腸菌内相同組み換えにより細胞外分泌性ルシフェラーゼ遺伝子を挿入し、さらに神経培養細胞にトランスフェクションすることにより、ルシフェラーゼ分泌安定株を作製した。BAC cloneの改変と神経系培養細胞における安定株作製はほとんど報告がなく、やや時間を要したが、最終的にスクリーニングに耐えうる細胞株を取得できた。

この細胞株を用いたルシフェラーゼアッセイ系とFDA既存薬ライブラリーを組み合わせた低分子化合物スクリーニングに関しても、1次スクリーニングが終了している。パーキンソン病の病態・病理を忠実に再現するために作製された、α-Syn BACTgマウスとIRP-2 Tgマウスの交配マウスに関しては、15か月齢において網羅的な行動解析バッテリーを終了しており、概ね順調と考えられる。マウスモデルの作製に関しては、このまま継続し、12か月齢程度での行動解析・生化学的/病理学的解析を予定している。低分子化合物スクリーニングのためのルシフェラーゼアッセイに関しては、ほぼ確立しつつあり、今後実際の化合物スクリーニングに移行する。使用する化合物ライブラリーに関しては、約1000個からなるFDA既存薬ライブラリーを先行させ、次に使用経験のある約9600個からなる低分子化合物ライブラリーを用いる順序とする。25年度が最終年度であるため、記入しない。α-Synの産生を低下させる低分子化合物のスクリーニングに関して、ルシフェラーゼアッセイ系とFDA既存薬ライブラリーを用いた解析については、2次・3次スクリーニング、あるいは毒性試験を施行し、ヒット化合物を取得する。さらに神経系培養細胞に投与し、α-SynのmRNAあるいはタンパク定量を行い、効果を確認する。同時に使用経験のある約9600個からなる低分子化合物ライブラリーを用いた解析も行う。パーキンソン病の病態・病理を忠実に再現するために作製された、α-Syn BACTgマウスとIRP-2 Tgマウスの交配マウスに関しては、15か月齢において網羅的な行動解析バッテリーを行っており、結果の解析を行う。また線条体シナプトソームを分離し、DAT・TH・VMAT2の定量、HPLCを用いたドーパミンとその代謝物の定量を行う。組織学的には線条体におけるドーパミン神経終末・中脳黒質におけるドーパミン神経細胞体の形態変化を解析する。さらにドーパミン神経細胞数の測定を実施する。これらの交配マウスに低分子化合物スクリーニングで得られたヒット化合物の慢性投与を行う。パーキンソン病発症マウスが得られない場合は、α-Syn BAC Tgマウスにロテノン・MPTPなどの薬物を投与し、これに対して得られた化合物を投与することで毒性軽減効果を確認する。
多段階発がん機構におけるジンクフィンガーホメオドメインタンパク質の機能解析

成人T細胞白血病・リンパ腫(ATLL)に対するゲノム解析を行い、10p11.2領域に染色体切断点集中領域を同定、TCF8遺伝子をATLLのがん抑制遺伝子候補として単離した。TCF8欠損マウスを解析したところ、CD4陽性リンパ腫・白血病を高頻度で発症し、高臓器浸潤性を示した。TCF8はTGF-beta1の情報伝達を促進する事が報告されているため、ATL細胞へのTCF8過剰発現はTGF-beta1への反応性の回復、細胞死に至ることがわかり、ATLL治療の標的になる可能性が示された。成人T細胞白血病(ATL)はHTLV-1ウイルス感染を基礎疾患としてHTLV-1キャリアの約5%が発症する。発症までの長期期間の必要性、白血病細胞でのTax発現消失等、ウイルス感染に加え、キャリア特質やゲノム変異などの影響が、白血病発症には大きく関連していると考えられる。そこで我々はATLの統合的ゲノム解析を行いATL発症機構の解明を行った。成人T細胞白血病(ATLL)はHTLV-1ウイルス感染を基礎疾患としてHTLV-1キャリアの約5%が発症する。そこで我々はATLLの統合的ゲノム解析を行いATLL発症機構の解明を行った。その結果、染色体切断点集中領域として10p11、14q11、14q32領域を同定した。10p11の染色体転座点の解析から不均衡転座に伴う共通欠失領域を同定し領域内に存在する遺伝子群の発現解析を行った。その結果、Transcription factor-8(TCF8)遺伝子が正常CD4陽性Tリンパ球に比べて、ATLL細胞においてゲノム欠失・エピジェネティック変化により転写が著しく低下しておりがん抑制遺伝子候補とした。TCF8欠損マウスの解析を行い、その結果CD4+CD8+DP胸腺原発リンパ腫、もしくはCD4+CD8-SP腹水型リンパ腫を形成した。ATLL細胞の一つの特徴としてTGF-betalを産生し、TGF-betalに不能性であること、かつTリンパ球の胸腺内分化過程では、TGF-betalがCD4+Tリンパ球のnegative selectionに寄与していることが知られている。さらにTCF8はSmadタンパク質に結合し、TGF-betal情報伝達系を正に制御する事が報告されているため以下の実験を行った。TGF-betal不能性ATLL細胞株EDにTCF8遺伝子を強制発現させたところ、TGF-betalによる増殖抑制が回復した。また、TGF-betal感受性白血病細胞株CTLL2にTCF8siRNAを導入しTCF8mRNAをノックダウンしたところ、TGF-betalに対する増殖抑制が弱まった。さらにATLL細胞株に5aza-dCやヒストン脱アセチル化阻害剤(TSA)を加え、TCF8の遺伝子発現が上昇するとTGF-betalへの反応性が回復した。TGF-betal欠損マウスはCD4+Tリンパ球が増加する事が知られており、TCF8欠損マウスがCD4+Tリンパ腫を発生させる機構の一部に関わる事が示唆される。従って、胸腺内T細胞の分化選択性に関わるTGF-betalシグナル伝達に対してTCF8遺伝子発現はCD4+リンパ球の選択性に関わることが示唆される。以上、ATLLにおいてTCF8はゲノム異常により不活化され白血病化に関係すると考えられる。我々はこれまでに成人T細胞白血病リンパ腫(ATLL)のゲノム解析から染色体切断点集中領域10pll.2を同定、TCF8遺伝子をがん抑制遺伝子候補として単離した。TCF8欠損マウスの解析を行い、その結果主としてCD4+CD8-SPTリンパ腫を、一部にCD4+CD8+DP胸腺原発Tリンパ腫を形成した。ATLL細胞の白血病化機構の一つであるTGF-betal不能性について、TCF8がTGF-betal情報伝達を正に制御する事が報告されているため、TCF8発現低下との関連性を検討した。ATLL細胞株へのTCF8遺伝子強制発現は、TGF-betalによる増殖抑制を回復させ、さらにTCF8発現Tリンパ球性白血病細胞株にshTCF8を導入すると、TGF-betalによる増殖抑制能が低下した。一方がん細胞におけるTGF-betal不能性の原因の一つとして抑制性SmadであるSmad6/7の過剰発現が報告されているため、ATLL細胞においてSmad6/7の発現を検討した。その結果Smad7がATLL細胞株並びに患者検体において恒常的に高発現していることがわかった。ATLL細胞へshSmad7を導入しその発現を抑制したところ、TGF-betalによる増殖抑制を回復させた。またこのSmad7の高発現は、NF-kappaB阻害剤の投与もしくはshIKK-alphaの導入により、Smad7発現低下とTGF-betalに対する感受性の回復傾向が見られたことから、NF-kappaBによる制御を受けている可能性を示唆した。

従って、ATLLにおけるTGF-betalの不能性は、NF-kappaB活性化を介したSmad7の恒常的な高発現、及びゲノム異常に伴うTCF8の発現低下が関与しているものと考えられる。ATLLの特徴であるTGF-betal不能性とNF-kappaB活性化が白血病化に深く関係していることから、今回発見したTCF8転写抑制とSmad7活性化を起点に、新しいATLL発症機構が解明できる可能性がある。成人T細胞白血病(ATL)のTGF-beta1抵抗性にSmad7の高発現とTCF8の発現低下が関与していることを証明するために以下の実験を行った。TGF-beta1感受性ヒト肝細胞株HepG2にSmad7を過剰発現させると、TGF-beta1誘導性Smad応答性プロモーター3TP-Luxの転写活性が抑制された。しかし、TCF8をSmad7発現プラスミドと共に発現させるとSmad7による転写抑制が解除された。Smad7とTCF8タンパク質間相互作用を免疫沈降実験と免疫蛍光染色法により検討した。293T細胞にFlagタグを付けたSmad7及びTCF8を過剰発現させた全細胞抽出液において抗Flag抗体を用いた免疫沈降実験を行ったところ、TCF8の共沈を検出した。内在性タンパク質の相互作用は、内在的にSmad7とTCF8を発現しているヒトT細胞白血病細胞株MOLT4細胞抽出液における免疫沈降実験により確認した。TCF8及びSmad7の細胞内局在を調べるために、MOLT4とATL細胞株KK1を用いて細胞染色を行った結果、両細胞内におけるTCF8とSmad7の免疫蛍光は大部分が核内に存在することが観察された。TCF8が直接Smad7と結合し転写抑制活性に影響を及ぼす可能性を検証するために、HepG2細胞にSmad3、Smad7並びにTCF8発現プラスミドと3TPレポーターを導入し、クロマチン免疫沈降法によりプロモーターDNAに対する結合能を解析した。その結果、Smad3とSmad7を共発現させた細胞においてはSmad7が3TPプロモーターに有意に結合したが、Smad-3/7並びにTCF8を過剰発現させた細胞では、これら3つのタンパク質が同プロモーター上に会合したことから、TCF8はSmad7存在下においてSmad3をプロモーター上にリクルートし転写活性化に機能することを示唆した。我々はこれまでに成人T細胞白血病リンパ腫(ATLL)のゲノム解析から染色体切断点集中領域10p11.2を同定、TCF8/ZEB1遺伝子をがん抑制遺伝子候補として単離し、さらにZEB1欠損マウスはその多くがCD4^+Tリンパ腫白血病を発症することを報告した。今回、ATLL細胞におけるZEB1の標的遺伝子を同定するためZEB1安定発現ATLL細胞株を樹立し遺伝子発現解析を行った。その結果、ZEB1安定発現ATLL細胞株は増殖抑制性を示し、CCNG2、CDKN1A(p21/WAF1)等の細胞周期調節遺伝子群の転写活性化が認められた。
量子論的時空上の場の量子論とその現象論、宇宙論、弦理論への応用

古典重力は曲がった時空により記述され、その上の粒子のダイナミクスは、曲がった時空上の場の理論で記述される。しかし、重力の量子化まで考えたとき、その上の粒子のダイナミクスがどのように記述されるか、まだ分かっていない。そこで我々はこれまで、3次元の量子重力理論であるPonzano-Reggeモデルにスカラー粒子を結合させたものから導かれる非可換時空上の場の理論の研究を進めてきた。そして、この理論のもっとも重要な特徴の1つであるSL(2,R)/Z_2運動量空間は、3次元時空に結合したスカラー粒子(conical singularity)の運動量と等価であることを、Ponzano-Reggeモデルによらずに幾何学的な方法により示した。また、この場の理論のHopf代数的並進対称性を保つために必要なbraidと呼ばれる非自明な統計性は、3次元時空に結合した2つのスカラー粒子の交換に対応することも示した。これにより、この非可換時空上の場の理論のクリアな物理的解釈を与えることができた。また、この非可換時空上のφ^3理論のユニタリティーを1ループの自己エネルギーダイアグラムにおいて調べた。その結果、質量がある値を超えると、ユニタリティーを満たさなくなる可能性があることが分かった。これは、SL(2,R)/Z_2運動量空間の周期性からくるものであることもわかった。最後に、この非可換時空上の場の理論のゲージ理論への応用を議論した。しかし、ゲージ場のエルミート性や可換極限で通常のゲージ理論に戻らないなど、幾多の困難が残っており、まだ解決には至っていない。古典重力理論はリーマン幾何学により記述されるが、重力の量子論を考えたとき、その有効理論としての時空構造が、リーマン幾何学では記述できないことが予想される。例えば、弦理論は重力の量子論を含んでいるが、ある背景場をもつ弦理論を考え、その点粒子極限を考えると、座標に非可換性や非結合性をもった場の理論が有効理論として現れることが知られている。また、弦の場の理論は開弦の場合、場は非可換、結合的であり、閉弦の場合、可換、非結合的であることも知られている。一方、我々のよく知っている非可換時空上での場の理論は、時間座標と空間座標に交換関係を持つとき、量子論において本質的なユニタリティーの性質を持たないことが知られている。また並進対称性は持つがローレンツ不変性は持たない。そこで、我々は可換であるが、座標に非結合性を持った時空上でのボアンカレ不変、すなわちローレンツ不変性も並進対称性も持つ場の理論を構成し、3次元、4次元において、1-loopレベルで振幅がCutkoski ruleを満たすか否かを見ることにより、ユニタリティーを調べた。その結果、どちらの場合でもユニタリティーを持つことがわかった。この結果は時間方向に非局所的を持つ理論であるにもかかわらず、ユニタリティーを満たす点で非常に興味深い時空であると思われる。また、非可換時空においてしばしば発生するUV-IR mixingと呼ばれる、外線運動量が0に近づくと、振幅が発散する現象は、我々の可換、非結合時空では発生しないだろうことを考察した。また、構成した場の理論との関係は未知であるが、非結合代数から非可換代数が導かれる例を紹介した。これは量子論において重要な非可換代数と非結合代数がまったく無縁ではなく、よって非結合代数もまた量子論的時空の候補に成り得るという意味で興味深い。SU(2)リー代数型の座標の非可換性を持つ時空上の場の理論は、物理的には3次元量子重力理論に質量を持つスカラー粒子を結合させた理論を記述していると考えられており、我々はその非可換時空上の場の理論のHopf代数的対称性について研究してきた。その研究成果を以下に述べる。場の理論が量子論的にも対称性を持つためには、相関関数がその対称性に関してWard恒等式を満たさなければならない。我々は一般に場の理論がHopf代数的対称性を持つためには必ずbraidと呼ばれる一種の非自明な統計性を導入しなければならないことを示した。これにより部分的に知られていた非可換時空上の場の理論のbraidの存在が普遍的なものであることがわかった。次に、SU(2)リー代数型の座標の非可換性を持つ時空上の場の理論における並進対称性について研究した。この場の理論には通常のLie代数的並進対称性はないが、Hopf代数的並進対称性を持つ。我々はこの対称性の座標表示を理解するため、この理論の運動方程式の1次元系の解であるdomain wall解とモジュライ空間を求めることにより、Hopf代数的対称性をその解のモジュライの生成子として理解することを試みた。その結果、可換な理論と異なるが可換極限では一致する非自明な生成子であることがわかった。また、domain wallを伝播するモジュライ場の質量も0であることがわかり、可換な理論の場合と一貫していることもわかった。この研究により今まで理解されていなかったHopf代数的対称性の座標的な見方が部分的には理解された。しかし、3次元空間全体のHopf代数的対称性の座標的な見方はまだ理解されておらず、完全な理解にはまだ至っていない。

しかし、重力の量子化まで考えたとき、その上の粒子のダイナミクスがどのように記述されるか、まだ分かっていない。そこで我々はこれまで、3次元の量子重力理論であるPonzano-Reggeモデルにスカラー粒子を結合させたものから導かれる非可換時空上の場の理論の研究を進めてきた。そして、この理論のもっとも重要な特徴の1つであるSL(2,R)/Z_2運動量空間は、3次元時空に結合したスカラー粒子(conical singularity)の運動量と等価であることを、Ponzano-Reggeモデルによらずに幾何学的な方法により示した。また、この場の理論のHopf代数的並進対称性を保つために必要なbraidと呼ばれる非自明な統計性は、3次元時空に結合した2つのスカラー粒子の交換に対応することも示した。これにより、この非可換時空上の場の理論のクリアな物理的解釈を与えることができた。また、この非可換時空上のφ^3理論のユニタリティーを1ループの自己エネルギーダイアグラムにおいて調べた。その結果、質量がある値を超えると、ユニタリティーを満たさなくなる可能性があることが分かった。これは、SL(2,R)/Z_2運動量空間の周期性からくるものであることもわかった。最後に、この非可換時空上の場の理論のゲージ理論への応用を議論した。しかし、ゲージ場のエルミート性や可換極限で通常のゲージ理論に戻らないなど、幾多の困難が残っており、まだ解決には至っていない。
長寿遺伝子Sirt2による血管老化、血管障害抑制機構の角明

ヒト臍帯静脈由来血管内皮細胞の早期老化に対するSirt1抑制と活性化の影響を検討し、Sirt1阻害薬sirtinolおよびSirt 1 siRNAの処理により、10日目には、老化関連beta-galactosidase (SA-beta-gal)活性の増加、増殖の停止、大型化といった老化形質の発現が認められた。また、PAI-1発現の増加、内皮型NO合成酵素(eNOS)の活性低下がみられた。SirtinolおよびSirt 1 siRNAはHUVECにおけるp53のタンパク発現に影響することなくアセチル化を促進した。Sirt1阻害で老化形質を示したHUVECは、増殖因子刺激による細胞内シグナルも減弱していた。これらとは逆に、遺伝子導入によりSirt1を過剰発現させると、過酸化水素刺激で誘導したHUVECの早期老化形質はすべて抑制された。次に、Sirt1発現・活性を保持し、内皮細胞老化を抑制する薬剤を探索した。その結果、フォスフォジエステラーゼ3阻害薬のシロスタゾールが、eNOS活性とSirt1発現の保持を介して、過酸化水素刺激で誘導されるHUVECの早期老化形質を抑制することがわかった。これらの結果から、Sirt1は血管内皮細胞の老化を防ぎ、NO産生など内皮細胞機能の維持に作用すると考えられる。ヒト血管内皮、平滑筋細胞を用いた血管壁細胞老化における長寿遺伝子Sirt1の役割に関して、Sirt1過剰発現が、酸化ストレス誘導性血管壁細胞老化を抑制することを確認した。また、逆にSirt1阻害が老化形質を促進することを確認した。その分子機序としてp53アセチル化が重要であること、また結果として血管細胞老化形質が血管内皮機能障害(eNOSの発現減少、PAI-1の発現増加)を引き起こすことを示した(2006年日本老年医学会、日本動脈硬化学会、日本循環器学会にて発表、現在論文投稿中)。培養血管内皮細胞を用いた血管内皮保護作用のある薬剤とSirt1の関連性の検討について、PDE3阻害薬シロスタゾール、PDE4阻害薬ラロプリム、PDE5阻害薬バルデナフィル、ポリフェノール類であるレズベラトロールに関して検討を行い、酸化ストレスにより誘導される血管老化形質に対する抑制効果を確認、またその分子生物学的機序として、eNOSの活性化に伴うNO産生増加がSirt1の発現亢進を誘導し、その抑制効果に大きな役割を果たしていることを確認した(2007年日本循環器学会にて発表)。動物血管障害モデルの検討に関しては、パラコート投与マウスにより血管老化を促進させる系を用い、上記細胞レベルで効果が確認されたシロスタゾールを投与することにより、eNOS、Sirt1の発現が亢進、血管保護作用に大きな役割を果たしていることが確認された(現在投稿準備中)。
リジン水酸化酵素Jmjd6を介したAire発現制御の分子基盤とその進化学的考察

Jmjd6は、鉄と2-オキソグルタル酸、および溶存酸素を共役因子として、リジン残基の水酸化を触媒する酵素である。研究代表者は最近、Jmjd6を欠損した胸腺では、Aire (autoimmune regulator)遺伝子のイントロン2のスプライシングが障害され、N末端103アミノ酸残基だけからなる不完全なAireタンパク質(immature Aire)が増加する結果、免疫寛容誘導が正常に作動しないことを見いだした。本研究では、Aire遺伝子の選択的スプライシングを制御する分子基盤を解明すると共に、その新しい機能を同定することを目的に研究を行い、本年度は以下の結果を得た。1) Jmjd6の会合分子として、スプライシング因子であるU2AF65とSrsf3を同定し、その機能をAireを内在性に発現するES細胞を用いて検証した。その結果、U2AF65をノックダウンすると、Jmjd6ノックアウトの場合と同様に、Aireのスプライシング異常が生じるのに対して、Srsf3のノックダウンではそのような異常は認められなかった。2) B細胞特異的にJmjd6を欠損したマウスを樹立し、骨髄における成熟B細胞の割合が低下すること、抗原特異的なIgG1抗体の産生が障害されることを見出した。3) Aire intron 2の3'スプライスサイトのGAG配列をTTTに置換したノックインマウスを作製した。このマウスにおいて、Aireタンパク質の発現が亢進することを期待したが、そのような変化は検討した限り認められなかった。4)ヒト大腸がん細胞株DLD-1を対象に、CRISPR/Cas9システムを用いて、Jmjd6をノックアウトした細胞株を樹立した。野生型のDLD-1では、ダブルチミジンリリース後5時間でS期への移行が認められるが、Jmjd6欠損株では、この移行が障害されていた。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。研究代表者は、Jmjd6を欠損した胸腺では、Aire (autoimmune regulator)遺伝子のイントロン2のスプライシングが障害され、N末端103アミノ酸残基だけからなる不完全なAireタンパク質(immature Aire)が増加する結果、免疫寛容誘導が正常に作動しないことを見いだした。本研究では、Jmjd6が選択的スプライシングを制御する分子基盤を解明すると共に、その新たな機能を明らかにすることを目的としており、以下の成果を得た。1) in vitro transcriptionにより、Aireのイントロン2およびイントロン1を含むmRNA断片を調製し、これに結合するタンパク質をLC-Ms/Msを用いて同定した。その結果、イントロン2特異的に会合する候補分子を20種類同定した。2) immature Aireタンパク質とmature Aireタンパク質を共発現させると、mature Aireタンパク質の局在が核から細胞質に変化し、プロテアソーム依存性にタンパク質分解を受けることを見いだした。3)新たに作製したコンディショナルKOマウスをFoxN1-Creマウスと交配することで、胸線上皮細胞特異的にJmjd6を欠損したマウスを樹立した。このマウスを用いて、膵臓に発現する自己抗原に対する免疫寛容誘導の解析に着手した。4)超霊長類に保存されるGAG配列の生理的意義を解明するため、Aire intron 2の3'スプライスサイトのGAG配列をTTTに置換したノックインマウスを作製した。多くの遺伝子改変マウスを作製すると共に、候補会合分子の同定を行った。さらに、immature Aireタンパク質の機能に関して興味深い知見を得ており、研究は順調に進行していると言える。本研究では、Jmjd6が選択的スプライシングを制御する分子基盤を解明すると共に、その新たな機能を明らかにすることを目的としており、本年度は以下の成果を得た。1) RNAseqの情報を基に、Aire以外に、Jmjd6によってスプライシング制御される分子の探索を行い、Cbr1とS100pbpを候補分子として同定した。そこで、分解に関わるE3リガーゼの探索を実施し、TRIM21、MIB1、Roquin、TRIM25、TRIM11を候補として同定した。このマウスを、インスリンプロモーターの下流でOVA(卵白アルブミン)を発現し、且つOVA抗原特異的に反応するT細胞受容体(OTI TCR)を発現するマウスと交配することで、膵臓に発現する自己抗原(OVA)に対する免疫寛容誘導の解析に着手した。

その結果、胸線上皮細胞特異的にJmjd6を欠損したマウスでは、自己免疫性糖尿病の発症が、亢進・増悪することを見いだした。Aireの分解に関わる候補分子を探索すると共に、Jmjd6によってスプライシング制御されるAire以外の標的分子を同定した。また、胸線上皮におけるJmjd6の生理的機能を明らかにする等、研究は順調に進行していると言える。Jmjd6は、鉄と2-オキソグルタル酸、および溶存酸素を共役因子として、リジン残基の水酸化を触媒する酵素である。研究代表者は最近、Jmjd6を欠損した胸腺では、Aire (autoimmune regulator)遺伝子のイントロン2のスプライシングが障害され、N末端103アミノ酸残基だけからなる不完全なAireタンパク質(immature Aire)が増加する結果、免疫寛容誘導が正常に作動しないことを見いだした。本研究では、Aire遺伝子の選択的スプライシングを制御する分子基盤を解明すると共に、その新しい機能を同定することを目的に研究を行い、本年度は以下の結果を得た。1) Jmjd6の会合分子として、スプライシング因子であるU2AF65とSrsf3を同定し、その機能をAireを内在性に発現するES細胞を用いて検証した。その結果、U2AF65をノックダウンすると、Jmjd6ノックアウトの場合と同様に、Aireのスプライシング異常が生じるのに対して、Srsf3のノックダウンではそのような異常は認められなかった。2) B細胞特異的にJmjd6を欠損したマウスを樹立し、骨髄における成熟B細胞の割合が低下すること、抗原特異的なIgG1抗体の産生が障害されることを見出した。3) Aire intron 2の3'スプライスサイトのGAG配列をTTTに置換したノックインマウスを作製した。このマウスにおいて、Aireタンパク質の発現が亢進することを期待したが、そのような変化は検討した限り認められなかった。4)ヒト大腸がん細胞株DLD-1を対象に、CRISPR/Cas9システムを用いて、Jmjd6をノックアウトした細胞株を樹立した。野生型のDLD-1では、ダブルチミジンリリース後5時間でS期への移行が認められるが、Jmjd6欠損株では、この移行が障害されていた。Jmjd6の生理機能の解明に向けて引き続き精力的に研究を進めると同時に、がんとJmjd6に関する報告が散見されることから、この方面の解析にも注力したい。Jmjd6の生理的機能の解明に向けて、引き続き研究を進めると共に、がんとJmjd6に関する報告が散見されることから、この方面の解析も精力的に進める。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
浅い富栄養湖沼のひとつの安定系モデル「水生植物系」を成立させる要因の解析

浅い水域における水生植物群落の有無が、水環境とプランクトン群集に与える影響を、釧路湿原の湖沼の調査、兵庫県ため池の調査、隔離水界実験などから検討した。まず湖沼面積の40%以上が沈水植物群落で被われている湖では、そうでない湖沼に比べ、同じ制限栄養塩レベルの夏季の植物プランクトン現存量が有意に低かった。また、植物プランクトン群集組成が大きく異なっていた。従って、沈水植物群落の有無は、生態系機能に大きな影響を及ぼすと考えられた。抽水植物・浮葉植物群落のあるため池と、そうした群落がなく護岸されているため池での水質ならびに植物プランクトン群集組成を比べた。双方ともに池の全リン濃度(TP)は0.11-0.52mg・1^<-1>、全窒素濃度(TN)は1.00-4.73mg・1^<-1>、TN : TP比(重量比)は4.6-14.6の間にあったが、植生のない後者の池ではアオコが発生する場合が多かった。従って、抽水植物・浮葉植物群落のある池とない池でも植物プランクトン群集組成が大きく異なることが示唆された。自然湖沼のヒシ群落中では、水中の光の減衰が大きく、溶存炭素濃度が高く、水中のpHと底泥付近の酸素濃度がともに低くなった。こうした水質への影響は顕著にもかかわらず、植物プランクトン群集への影響は顕著でなかった。さらに、ため池の中に隔離水界4基を構築して、そのうちの2基にヒシを植裁した実験を行った。ヒシの植栽によって、水質や物理環境は先の湖沼での結果と同じになった。しかし、動植物プランクトン群集への顕著な影響は認められなかった。沈水植物群落の生態系への影響は顕著であるが、他の群落の水質ならびにプランクトン群集への影響は検討の余地を残した。1.植生が異なる釧路湿原3湖沼において、植生が水質とプランクトン群集に及ぼす影響を調べた。沈水植物群落が多い湖はほとんど存在しない湖に比べ、制限栄養塩濃度当たりのクロロフィルa量が少なかった。沈水植物が豊富な「水生植物系」から「植物プランクトン系」に移行する制限栄養塩濃度とクロロフィルa量が推定できた。さらに、沈水植物群落の有無は植物プランクトン組成に大きな影響があることがわかった。釧路湿原内にある達古武沼は、現在沈水植物群落喪失の危機にあるため、早急な対策が必要である。2.兵庫県三木市、小野市、神戸市、明石市、加古川市、稲美町、社町のため池35ヶ所を対象に、景観(集水域の土地利用、周辺環境、植生)、環境要因(水質、池環境)、生物多様性(トンボの幼虫・成虫、プランクトン、ベントス、魚)などを現地調査した。池周辺の景観要素と池の植生は、ヘリコプターによる空中写真を基に画像上で定量化した。池の水質環境は主成分分析の結果、樹林で囲まれている谷池群が市街地や田園地帯にある皿池群と異なり、栄養塩レベルが比較的低いという一つの傾向を示した。水質環境は池の中の植生にも大きく規定された。すなわち、景観に関係なく植生のない池の水質は、それ以外の池に比べて、pH、アンモニア濃度、底泥付近の溶存酸素濃度がそろって高い傾向を示した。

植物プランクトン種の出現を対応分析で座標付けした結果、主軸は変動の18%を説明し、pH、TN、Chl. aと有意な負の相関を、抽水植物数、浮葉植物数、全水生植物数、水生植物機能数(沈水、浮葉、抽水のいくつが揃っているか)と有意な正の相関を示した。正の方向には、藍藻を除く多くの種が分布したが、負の方向にはアオコを構成する藍藻が分布した。こうした結果は植物プランクトン種の出現が、水生植物群落の有無と関係していること、そのためその分布がリンでなく窒素と相関すると理解でき興味深い。浅い水域における水生植物群落の有無が、水環境とプランクトン群集に与える影響を、釧路湿原の湖沼の調査、兵庫県ため池の調査、隔離水界実験などから検討した。まず湖沼面積の40%以上が沈水植物群落で被われている湖では、そうでない湖沼に比べ、同じ制限栄養塩レベルの夏季の植物プランクトン現存量が有意に低かった。また、植物プランクトン群集組成が大きく異なっていた。従って、沈水植物群落の有無は、生態系機能に大きな影響を及ぼすと考えられた。抽水植物・浮葉植物群落のあるため池と、そうした群落がなく護岸されているため池での水質ならびに植物プランクトン群集組成を比べた。双方ともに池の全リン濃度(TP)は0.11-0.52mg・1^<-1>、全窒素濃度(TN)は1.00-4.73mg・1^<-1>、TN : TP比(重量比)は4.6-14.6の間にあったが、植生のない後者の池ではアオコが発生する場合が多かった。従って、抽水植物・浮葉植物群落のある池とない池でも植物プランクトン群集組成が大きく異なることが示唆された。自然湖沼のヒシ群落中では、水中の光の減衰が大きく、溶存炭素濃度が高く、水中のpHと底泥付近の酸素濃度がともに低くなった。こうした水質への影響は顕著にもかかわらず、植物プランクトン群集への影響は顕著でなかった。さらに、ため池の中に隔離水界4基を構築して、そのうちの2基にヒシを植裁した実験を行った。ヒシの植栽によって、水質や物理環境は先の湖沼での結果と同じになった。しかし、動植物プランクトン群集への顕著な影響は認められなかった。沈水植物群落の生態系への影響は顕著であるが、他の群落の水質ならびにプランクトン群集への影響は検討の余地を残した。
唐代の芸能・行事と伝奇小説の相互関係の解明

本研究は、唐代におこなわれたさまざまな芸能娯楽(語り物、俗講、参軍戯、踏揺娘など)と年中行事や風俗習慣(打春、上元観灯、寒食、清明節、孟蘭盆会、駆儺など)が、どのように志怪伝奇小説に表現されたのか、またその小説の流行がどのように地域の芸能や習俗に影響をあたえたのか、その関係を解明することをおもな目的とした。中国の伝統的な民俗行事や宗教儀礼は、唐代にいたると、国際的な文化の東西交流や安定した王朝体制のもたらした経済的な繁栄などにより、しだいに世俗的な波の中で芸能化大衆化していった。とりわけ安史の乱以降の唐代後半に、その傾向が著しくみられる。こうした民衆の間に浸透した芸能娯楽の実態は、士人と呼ばれる知識階層の人々によって筆記小説に記述され、伝えられた。志怪伝奇小説には当時の幅広い民衆の意識や願望が、直接的や間接的に反映されており、公式的な歴史書には見逃されがちな、さまざまな真実を伝えている。本研究が唐代小説を資料とする所以である。2年間にわたる本研究では、こうした複雑で循環的な芸能行事と小説との関係性を、具体的な作品を多角的総合的に分析することで、いちおうの解明の手がかりを得ることができた。唐代の代表的な小説「柳毅伝」については、中国できわめて重要な存在である龍をめぐる多彩な神話的な伝承を分析考察し、その演劇的な構造や古代神話の投影を指摘し、仏教的な乞食歌や語り物として伝承されていたことを推測した。また槐樹という特異な中国的シンボリズムを使った「南柯太守伝」では、古代から詩文にうたわれてきた軌跡を掘り起こし、文学と時代の関係を洞察し、異類の夜宴を主題とした「東陽夜怪録」では、荒唐無稽にみえる人物設定が強烈な諷刺を含んでいたことを指摘した。本研究では、時間的な制約もあって、投龍儀礼、祈雨儀礼、観潮行事、社日習俗などの考察にしぼらざるをえなかったが、今回の研究成果を土台にさらに今後も検討をかさね、唐代の習俗全体に対象を広げていきたいと考えている。本研究の課題「唐代の芸能・行事と伝奇小説の相互関係の解明」について、1年目である平成14年度は、次の3つの分野にわたり基礎的な作業を進めた。1、唐代伝奇小説を多く収める「太平広記』巻の中から、李朝威「柳毅伝」を選び、作品の中にあらわれた芸能、とりわけ演劇戯曲との関連性について分析をすすめた。この作品は古代神話や民俗宗教が濃厚に投影されており、本研究課題の対象にふさわしいと考えられる。湖南や浙江など各地の習俗や神話や祭祀との関連からこの作品を再解釈し、演劇や芸能と小説との微妙な相互関係に一つの結論を打ち出した。(岡本担当)2、唐代芸能では「踏揺娘」「参軍戯」「三国戯」などの寸劇や歌劇が知られる。それらはおおむね宮廷や役所や寺院の戯台で演じられた。

それらの演目内容と各地に存在した先祖崇拝、古代神話、駆儺、節句行事などの伝承や儀礼がどのように相互に関係しあっていたのかを、「文苑英華」「全唐詩」「全唐文」「太平広記」などを対象として、幅広く予備的な調査をおこなった。(橘担当)3、唐代伝奇小説の制作発生の場と芸能の伝達者を想定してみた。前者については仏教や道教の寺院があげられる。俗講という仏教の語り物が、次第に芸能化したことと関係している。後者の芸能の伝達者としては、宗教者以外に、商工業者があげられる。それは従来指摘されては来たが、実態は必ずしも解明されていない。具体的には西胡商人や茶塩商人などが芸能の伝達者として想定されるのであるが、各種の筆記史料から目下正確なデータを調査中である。最終年度である来年度には結果を出す予定である。(岡本担当)唐代の芸能や行事は、古代からのさまざまな伝統的な民俗行事(たとえば正月、寒食、清明節、七夕、社日、駆儺など)や宗教儀礼(祈雨、中元節、孟蘭盆会など)をうけつぎ、発展させてきた。だがそうした発展は、一方ではこれらの行事や儀礼から、しだいに本来の厳粛さを失わせ、世俗の波の中で芸能化大衆化されていった。またさらには士人の手により、志怪伝奇小説などにまとめられ、新しい意味を賦与される形で、再び民衆の中に浸透していった。本研究では、こうした唐代の民俗宗教行事と芸能と伝奇小説との間の、複雑かつ循環的な相互関係について、新しい視点を導入し、かつ具体的な作品分析を通じて、その関係の網の目の一端を解明することができた。洞庭湖の龍の一族の活躍を扱った「柳毅伝」、槐樹の中の蟻の世界を描いた「南柯太守伝」、異類たちの夜宴を主題にした「東陽夜怪録」など、荒唐無稽にもみえるこれら物語に、じつは当時の民俗行事や芸能が形を変えて投影されていることを指摘した。本研究で示した、「柳毅伝」と投龍儀礼や観潮行事、「南柯太守伝」の背後に流れる聖樹と三公の臂喩としての槐樹のイメージ、「東陽夜怪録」の異類のパロディと人間との距離感など一連の指摘や、唐詩を網羅した社日の表現や意味の全面的な検討は、従来にはない研究手法や指摘であり、今後の唐代の芸能と文学の関係をさぐる上で、有力な手がかりになるものと思われる。
短・超短パルスレーザ時空間ビームシェイピング技術開発と微細加工への応用

ナノ秒パルスレーザビームの時間強度分布シェイパの開発とレーザ微細加工への応用を睨んで,2016年度には(1)透明導電薄膜のベッセルビームスクライビングプロセスと(2)4H-SiCのTSVのためのレーザドリリング加工の特性解明に取り組んだ.(1)について:透明導電薄膜のナノ秒パルスレーザスクライビングにベッセルビームを用いることでアブレーション中のプラズマ遮蔽の影響を最小化し,単パルス照射による薄膜の除去が可能であることを実験および数値モデリングにより解明した.レーザビームの伝搬とレーザ加熱による材料の温度上昇をカップリングした数値モデルを開発した.この数値モデルを用いてベッセルビームがプラズマプルーム後方で回折して薄膜厚方向でも顕著な加熱が行われることを明らかにした.数値解析結果は実験結果ともよい一致を示していた.この研究により今まで貫通穴加工に限られていたベッセルビームの応用分野を透明薄膜の除去加工まで拡張できたと考えられる.(2)について:化学・機械的に耐久性の優れた4H-SiCは従来のエッチングが困難であり,エッチングレートも非常に遅いことが現状である.一方,基板の貫通加工は電子デバイスの形状と機能の高度化のために不可欠なプロセスである.ここで,本研究では高速な加工が可能なナノ秒パルスレーザを4H-SiCの穴あけ加工に用いるための基礎的な検討を行った.ビームプロファイル(ガウシアン,ベッセル),波長(1064 nm, 532 nm)および加工環境(空中,水中)を変化させながら穴あけ加工の特性を調べた.穴あけ加工結果についてラマン分光等を用いて検討した結果,表面の炭化とSi再凝固層形成が加工の分解能と穴の深さに大きな影響を及ぼすことが分かった.本研究で得られた知見は高バンドギャップ半導体材料のレーザ穴あけ加工手法の提案に用いられると考えられる.翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。レーザビームの時間強度分布シェイパの開発とそれを用いたエネルギーデバイスの微細加工への応用を睨んで,2015年度には(1)液体光学素子における自然対流の影響の解明と(2)薄膜型太陽電池向けの透明導電薄膜のナノ秒パルスレーザベッセルビームスクライビングに取り組んだ.(1)について:液体光学素子の動作阻害要因となるレーザ加熱による自然対流の発生とその影響について実験とCFD,ビーム伝搬法を用いたシミュレーションにより検討した.その結果,自然対流の発生を抑えるためには液体光学素子の厚みを小さくし,自然対流によるビームプロファイルの歪みの抑制には検出光の光軸補正が必要であることが分かった.また,本研究で用いたシミュレーション手法を用いることで,自然対流を考慮した液体光学素子の設計が可能であることを示した.(2)について:本研究では,単一パルス照射による透明導電膜の完全な除去が可能な基板側照射の加工メカニズムを明らかにすること,回折限界を超える集光が可能なベッセルビームを用いることで加工精度を向上させることを目的とした.まず,時分解計測により加工中のレーザビームのプロファイル変化を調べ,さらに加工結果を観察することで透明導電薄膜はレーザの照射方向にかかわらずその表面から熱的に除去されることを示した.そのとき,表面におけるプラズマの遮蔽のため基板側照射の場合のみ単一パルス除去が行われることが分かった.また,ベッセルビームを用いた加工を施し,絶縁性のある幅数ミクロンのスクライビングに成功した.このとき,ベッセルビームは優れた焦点深度を持つことから,光軸方向の試料位置決めのロバスト性が向上されることも分かった.本研究によりレーザ薄膜スクライビングにおけるベッセルビームの有効性を示されたとともに,加工メカニズムが明らかにされ,光学系の高度化に資することが可能であったと考えられる.2015年度には研究計画調書に記載したとおり,微細加工用レーザ光学系の高度化を目指して,液体光学素子の検討と現有のNd:YAGナノ秒パルスレーザ光源を用いた微細加工実験系の作成を行なった.まず,液体光学素子に関しては自然対流の影響を支配するパラメータを検討した.また,アキシコンレンズを用いたベッセルビームシェイパをデザインし,Nd:YAGナノ秒パルスレーザの基本波長の1064 nmのビームを高品質ベッセルビームに整形することができた.そのベッセルビームを用いて薄膜型太陽電池の透明導電薄膜として用いられるフッ素ドープ酸化スズ薄膜に対する加工実験を施した結果,従来のガウシアンビームシステムに対して加工精度とロバスト性を大幅に改善することができた.また,加工メカニズムを調べることで照射方向の影響を明らかにすることも可能であった.今後,ビームシェイピング光学系をさらに高度化し,SiC等の他の材料の加工に応用することにより,研究の幅が広がっていくと考えられる.しかし,5月から8月にかけて渡航していたニューヨーク州立大学においてはフェムト秒パルスレーザが使用不可の状態となっていたため,フェムト秒パルスレーザを用いた実験データの取得はできなかったので、関連する文献調査を精力的に実施した.今後,超短パルスレーザに関しては数値解析等の手法を代替に用いることで,ビームシェイピング特性,微細加工現象等に関する検討を行なっていく必要があると考えられる.

ナノ秒パルスレーザビームの時間強度分布シェイパの開発とレーザ微細加工への応用を睨んで,2016年度には(1)透明導電薄膜のベッセルビームスクライビングプロセスと(2)4H-SiCのTSVのためのレーザドリリング加工の特性解明に取り組んだ.(1)について:透明導電薄膜のナノ秒パルスレーザスクライビングにベッセルビームを用いることでアブレーション中のプラズマ遮蔽の影響を最小化し,単パルス照射による薄膜の除去が可能であることを実験および数値モデリングにより解明した.レーザビームの伝搬とレーザ加熱による材料の温度上昇をカップリングした数値モデルを開発した.この数値モデルを用いてベッセルビームがプラズマプルーム後方で回折して薄膜厚方向でも顕著な加熱が行われることを明らかにした.数値解析結果は実験結果ともよい一致を示していた.この研究により今まで貫通穴加工に限られていたベッセルビームの応用分野を透明薄膜の除去加工まで拡張できたと考えられる.(2)について:化学・機械的に耐久性の優れた4H-SiCは従来のエッチングが困難であり,エッチングレートも非常に遅いことが現状である.一方,基板の貫通加工は電子デバイスの形状と機能の高度化のために不可欠なプロセスである.ここで,本研究では高速な加工が可能なナノ秒パルスレーザを4H-SiCの穴あけ加工に用いるための基礎的な検討を行った.ビームプロファイル(ガウシアン,ベッセル),波長(1064 nm, 532 nm)および加工環境(空中,水中)を変化させながら穴あけ加工の特性を調べた.穴あけ加工結果についてラマン分光等を用いて検討した結果,表面の炭化とSi再凝固層形成が加工の分解能と穴の深さに大きな影響を及ぼすことが分かった.本研究で得られた知見は高バンドギャップ半導体材料のレーザ穴あけ加工手法の提案に用いられると考えられる.(1)2016年度について:研究計画調書で示したとおり,昨年度作成した光学系を用いて,さらに高度なビームシェイピング実験と様々な材料に対してのレーザスクライビング,ビア加工実験を施していく.なお,2015年度の加工実験結果から,透明材料の熱加工においては周囲環境への熱伝達により加工メカニズムが左右されることが分かったため,水中・空気中加工等の比較実験も行なう.加工精度の向上,加工メカニズムの解明を狙い,エネルギーデバイスにレーザ加工を用いる場合の有用性について検討する.特に,ビームシェイピングに関しては,昨年度までは空間強度分布変調に集中していたが,2016年度には液体光学素子を用いた空間強度分布変調も試みる計画である.時間強度分布変調により過渡的な集光制御,パルス幅短縮等が可能となると考えられ,その実験的な検討を施す.(2)2017年度以降について:前年度までの実験結果をもとに,光学パラメータと加工メカニズムの関係について明らかにするために,加工現象の理論的な検討を中心に研究を遂行する.固体材料におけるクラックの発生,加工中の輸送現象等について幅広い考察を行うことを目指す.必要に応じてパラメートリックな加工実験を行い,時分解計測も利用する.このことにより,ビームプロファイルの時空間変調を用いた新たな短・超短パルスレーザ加工手法を提案し,エネルギーデバイスプロセッシングの高度化に資することを睨む.翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
生命の価値評価に関する日米比較と法制度研究

わが国の人身賠償論は、交通事故における賠償論を中心として発展してきた。ここでは、人間の価値を専ら労働力の喪失という観点からのみ評価するにすぎず、それゆえ人身被害により将来得られるはずであった収入額の減少または喪失を基礎に主に逸失利益を算定してきた。しかし、この逸失利益を中心とする賠償論では、今日被害者や遺族が被っている経済的損失にとどまらない多方面にわたる人身被害に対応できず、賠償範囲が狭いことになる。そこで、本研究は、アメリカのSherrod v. Berry判決を契機として、人間の生命の価値そのものについて賠償を試みるHedonic Damages理論について考察した。その結果、人間は労働するために生きているのではなく、人生を享受するために生きていることを基礎に、経済的・道徳的・哲学的価値など生命を保持しうる全ての価値を含む人間の価値全体として捉えられた「生命の喪失」という非財産的損害を金銭評価すべきであるとの示唆を得た。そして、この生命の喪失について金銭評価する方法を考察するため、アメリカの生命評価に関する研究を幾つか収集し分析した。今後の課題として、アメリカの生命評価の研究にも幾つかの方法があり、それにより評価資料や賠償額に差異が見られるので、わが国においてどの方法が最も適合するかという観点から考察を深めたい。さらに、わが国の現在の算定方法による賠償額を把握し分析した上で、アメリカの生命評価の研究に基づく生命の喪失の評価方法によればどれだけ高額の賠償額を創り出せるか検証したい。
母体血中の細胞外小胞による妊娠高血圧腎症の予知法と発症関連蛋白に関する研究

最近、胎盤由来の細胞外小胞が妊娠高血圧腎症(preeclampsia: PE)妊婦血中で増加していると報告されたが、母体血中の細胞外小胞の測定が妊娠中のPEの発症予知、特に妊娠初期でのPEの発症予知に有用かどうかはわかっていない。今回、『妊娠初期の胎盤由来の細胞外小胞(特にエクソソーム)でPEを予知し得る』との仮説を立てた。本研究では、妊娠初期(10-13週)、中期(20-23週)、後期前半(28-29週)の血漿中エクソソーム量を測定し、その後のPE発症を予知し得るか否かを検討する。本研究により、PEの病態へのエクソソームの関与や、妊娠初期でのPE新規予知法開発への展望を探る。