hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
地域開発銀行と紛争

2018年度には、海外出張によって米州開発銀行、欧州復興開発銀行、アジア開発銀行の事例について現地調査を行うことができた。米州開発銀行においては、近年のベネズエラからコロンビアなど隣国への難民の流出に伴う、人の移動に関する緊急人道事態への対応が焦眉の課題となっている。また欧州復興開発銀行においても、シリア難民が流入するトルコなどへの支援が課題となっていることがわかった。またアジア開発銀行では、主として太平洋島嶼諸国を中心とした脆弱状況を抱えた諸国、アフガニスタンへの平和構築への対応が課題となっていることが聞き取り調査などによって明らかになった。総じて地域開発銀行の中では、アジア開発銀行が最も早くから体系的に域内における紛争や脆弱地域の問題に対応してきたこと、その他の地域開発銀行がアジア開発銀行の例にならってプログラムを導入していることなどが明らかになった。海外出張調査は当初の予定よりも進んだが、成果のとりまとめに時間がかかっているため。最終年にあたるので成果のとりまとめに注力したい。まずアジア開発銀行の政策について論文をまとめ、その上で他の3地域開発銀行と合わせて総合的分析を行ないたいと考えている。その過程で必要な最終的な資料収集や、海外の研究者との意見交換、学会での報告などにも取り組みたい。本研究は、米州開発銀行(IDB: Inter-American Development Bank)、アフリカ開発銀行(AfDB: African Development Bank)、アジア開発銀行(ADB: Asian Development Bank)、欧州復興開発銀行(EBRD: European Bank for Reconstruction and Development)の4大地域開発銀行を取り上げ、紛争への取り組みを体系的に明らかにしようとするものである。2017年度には3回の海外出張による調査を実施することができた。まずアメリカ・ワシントンのIDB本部を訪問し、聞き取り調査を行った。これによりIDBにおける紛争への政策が都市における暴力問題とともに扱われていること、国別のプログラムにおいて紛争関連が含まれている可能性があり、今後の調査の課題であることがわかった。さらにコートジボワール・アビジャンのAfDB本部を訪問し聞き取り調査を実施した。AfDBは戦略文書を採択するなど脆弱国家への対応が組織的になされている点が確認できた。そしてイギリス・ロンドンのEBRD本部にて聞き取り調査を行った。EBRDでは特に紛争関連の戦略・プログラムはないとのことであったが、難民対策関連では紛争に関連したものがあることがわかった。また国別のプログラムの中にも一部で紛争関連のものがみられることがわかった。海外聞き取り調査の一部を前倒しで実施することができた。アジア開発銀行における現地調査を実施するとともに、研究のとりまとめのための作業を進めたい。
ウェーハ規模集積分散・超並列計算機の耐故障化設計に関する研究

原子力や気象,分子科学,画像処理,人工知能などの分野における巨大計算への要請は強く,そのような計算に対しては,多数の処理要素からなる超並列計算機の実現が是非必要である.並列計算機の一形態として,メッシュ(あるいはトーラス)結合並列計算機がある.また計算機の高速化,小型化,省電力化および低価格化の一手段として,ウエーハ規模集積(WSI, Wafer Scale Integration)技術が考えられている.しかしWSIでは,チップ面積の飛躍的な増加により,もし何も工夫しなけれぱ,歩留まりが非常に悪くなるという問題がある.本研究では,計算機におけるこのような社会の二一ズに応えるべく,特にメッシュ(あるいはトーラス)結合並列計算機をWSI実現することに焦点を絞り,以下のような研究成果をあげた.1. 1/2トラックスイッチ方式を用いた耐故障化格子結合並列計算機(トーラスアレー)に対する有効な自律的再構成システムにおいて,プロセッサのみならずトラックやスイッチ等の故障を想定した場合の興味深い解析を行った。2. 1/2トラックスイッチ方式を用いた耐故障化格子結合並列計算機(トーラスアレー)について、新しくかつ有効な自律的再構成システム実現の1手法について論じ、さらにそのハードウェア実現も提案した。3. E-1/2トラックスイッチ方式を用いた耐故障化格子結合並列計算機(トーラスアレー)に対する有効な自律的再構成システムにおいて,プロセッサのみならずトラックやスイッチ等の故障を想定した場合の興味深い解析結果を示した。原子力や気象,分子科学,画像処理,人工知能などの分野における巨大計算への要請は強く,そのような計算に対しては,多数の処理要素からなる超並列計算機の実現が是非必要である.並列計算機の一形態として,メッシュ(あるいはトーラス)結合並列計算機がある.また計算機の高速化,小型化,省電力化および低価格化の一手段として,ウエーハ規模集積(WSI,Wafer Scale Integration)技術が考えられている.しかしWSIでは,チップ面積の飛躍的な増加により,もし何も工夫しなければ,歩留まりが非常に悪くなるという問題がある.本研究では,計算機におけるこのような社会のニーズに応えるべく,特にメッシュ(あるいはトーラス)結合並列計算機をWSI実現することに焦点を絞り,以下のような研究成果をあげた.1.Kungらが提案した11/2トラックスイッチモデルを基にして,E-11/2トラックスイッチモデルという新しい冗長アレー方式を考案した.このモデルは,Kungらのモデルが持っている多くの長所を継承する.またKungらのモデルと比較して,このモデルは,ハードウェアオーバヘッドは若干大きく(10%未満)なるが,歩留まりあるいはシステムの信頼性を飛躍的に向上させるという特徴を持っている.2.11/2トラックスイッチモデルに対してかつて私が提案した,近似アルゴリズムであるEAM再構成手法をFPGAデバイス上に実現し,そのアルゴリズムの動作確認とシステム修復に要する時間の見積りを行った.その結果より,EAM再構成手法は製造時の歩留まり向上だけでなく,動作時の信頼性向上にも有効であると判断した.原子力や気象,分子科学,画像処理,人工知能などの分野における巨大計算への要請は強く,そのような計算に対しては,多数の処理要素からなる超並列計算機の実現が是非必要である.並列計算機の一形態として,メッシュ(あるいはトーラス)結合並列計算機がある.また計算機の高速化,小型化,省電力化および低価格化の一手段として,ウエーハ規模集積(WSI, Wafer Scale Integration)技術が考えられている.しかしWSIでは,チップ面積の飛躍的な増加により,もし何も工夫しなけれぱ,歩留まりが非常に悪くなるという問題がある.本研究では,計算機におけるこのような社会の二一ズに応えるべく,特にメッシュ(あるいはトーラス)結合並列計算機をWSI実現することに焦点を絞り,以下のような研究成果をあげた.1. 1/2トラックスイッチ方式を用いた耐故障化格子結合並列計算機(トーラスアレー)に対する有効な自律的再構成システムにおいて,プロセッサのみならずトラックやスイッチ等の故障を想定した場合の興味深い解析を行った。
森林資源モニタリングにおけるデータの品質保証と有効利用

わが国では1999年に、およそ半世紀ぶりに国レベルの森林資源モニタリング調査が開始され,約1万5千カ所で林分調査や植生調査がおこなわれている。このように森林資源モニタリング調査は多くの資金と人員を要し、データの有効利用が期待されているところであるが、データの精度や正確度に関する情報が全く欠如しているところに大きな問題がある。データがどの程度の信頼性を持っているか、そして信頼性を向上させるにはどのようにすれは良いかという品質保証の視点は国際的に重要視されており、国内外におけるデータの有効利用をはかるためにも品質保証プログラムの実施が不可欠である。そこで、本研究ではコントロール調査チームを結成し、4つの県のプロットや学生実習において再測調査を行い、測定項目毎に誤差の程度・傾向・要因を明らかにし,今後の改善点を整理した。その結果,モニタリング事業では,樹高,直径,本数,種数,傾斜ともに有意に過小推定の傾向があることがわかり,微地形や斜面方位等のカテゴリー変数においても正確度が低いことが明らかになった。直径については測定値のマーキングをすること,本数や種数については全木のマーキングもしくは立木位置図の作成によって誤差が軽減できるものと考えられた。また,樹高やその他の項目については,より詳細なマニュアルやトレーニングが必要であると考えられた。学生実習の結果からは,データに基づく講習会を開催することで大幅に精度が向上することが明らかとなった。以上の結果から,今後モニタリングデータの有効利用を図るには,早急に品質保証プログラムを制度化する必要があり,マニュアルの改善,講習会の実施,定期的な再測評価が必要不可欠であるといえる。わが国では1999年に、およそ半世紀ぶりに国レベルの森林資源モニタリング調査が開始された。4kmメッシュの交点、全国では約1万5千カ所で林分調査や植生調査がおこなわれており、2003年には第一回目の調査が終了し、現在は2回目の調査が行われている。また、データをどのように利活用すべきかについての具体的な議論もほとんどなされていない。データがどの程度の信頼性を持っているか、そして信頼性を向上させるにはどのようにすれば良いかという品質保証の視点は国際的に重要視されており、国内外におけるデータの有効利用をはかるためにも品質保証プログラムの実施が不可欠である。そこで、本研究では以下の4点を行う。●コントロール調査チームを結成し、いくつか県の一部のプロットの再測を行い、測定項目毎に誤差の程度・傾向・要因を明らかにする。●各県の調査実施担当者が一同に会す現地講習会を企画し、同一プロットの測定により測定項目毎に計測誤差の程度・傾向・要因を明らかにする。●上記のデータに基づき品質保証プログラム案(目標精度、コントロールチーム、講習会、マニュアル)を提示する。今年度は九州の4県の合計48プロットを対象に、コントロールチームによる再測を実施した。その結果、直径では過小推定の傾向があり、県による誤差も見られた。樹高についても過小推定の傾向があり、その誤差はサイズに強く依存しており、その結果、材積にもサイズ依存の過小推定傾向がみられた。植生調査に関しても、種数に依存した誤差がみられ、その傾向は生活形によって異なっていた。

データがどの程度の信頼性を持っているか、そして信頼性を向上させるにはどのようにすれば良いかという品質保証の視点は国際的に重要視されており、国内外におけるデータの有効利用をはかるためにも品質保証プログラムの実施が不可欠である。そこで、本研究では以下の4点を行う。●コントロール調査チームを結成し、いくつか県の一部のプロットの再測を行い、測定項目毎に誤差の程度・傾向・要因を明らかにする。●各県の調査実施担当者が一同に会す現地講習会を企画し、同一プロットの測定により測定項目毎に計測誤差の程度・傾向・要因を明らかにする。●上記のデータに基づき品質保証プログラム案(目標精度、コントロールチーム、講習会、マニュアル)を提示する。今年度は九州の3県の合計35プロットを対象に、コントロールチームによる再測を実施した。その際,昨年実施した再測調査の傾向を周知し,その効果を検討した。その結果,多くの測定項目で精度が改善されているものの,Vertexを用いた樹高測定でも,誤差が改善されないケースもみられ,具体的な研修会の必要性が示唆された。わが国では1999年に、およそ半世紀ぶりに国レベルの森林資源モニタリング調査が開始され,約1万5千カ所で林分調査や植生調査がおこなわれている。このように森林資源モニタリング調査は多くの資金と人員を要し、データの有効利用が期待されているところであるが、データの精度や正確度に関する情報が全く欠如しているところに大きな問題がある。そこで、本研究ではコントロール調査チームを結成し、4つの県のプロットや学生実習において再測調査を行い、測定項目毎に誤差の程度・傾向・要因を明らかにし,今後の改善点を整理した。その結果,モニタリング事業では,樹高,直径,本数,種数,傾斜ともに有意に過小推定の傾向があることがわかり,微地形や斜面方位等のカテゴリー変数においても正確度が低いことが明らかになった。直径については測定値のマーキングをすること,本数や種数については全木のマーキングもしくは立木位置図の作成によって誤差が軽減できるものと考えられた。また,樹高やその他の項目については,より詳細なマニュアルやトレーニングが必要であると考えられた。学生実習の結果からは,データに基づく講習会を開催することで大幅に精度が向上することが明らかとなった。以上の結果から,今後モニタリングデータの有効利用を図るには,早急に品質保証プログラムを制度化する必要があり,マニュアルの改善,講習会の実施,定期的な再測評価が必要不可欠であるといえる。
悪性黒色腫におけるBRAF変異遺伝子の機能解析と臨床応用への検討

本年度は悪性黒色腫患者血清中のDNAから腫瘍由来BRAF変異遺伝子を検出し、微小転移の検出・腫瘍の進展や予後を予測する腫瘍マーカーとしての臨床応用の可能性を調べた.原因として、1)血清中への血球由来正常DNAの溶出が多く、変異遺伝子の%が検出感度を下回った2)保存中に血清中のDNAが分解した3)血清中に検出可能量の腫瘍由来DNAが遊離していないが考えられた。2)については現在経過観察中の患者よりの新鮮血を用いても同様の結果であったため可能性は低いと考えられた。腫瘍由来血清DNAのBRAF変異遺伝子とこれまで測定されてきた黒色腫で有用とされる腫瘍マーカー、5-S-CDおよびmelanoma inhibitoryactivity(MIA)との感度の比較ではBRAF変異遺伝子ができなかった例の80%でMIAの上昇を認め、40%で5-S-CDの上昇を認めた。日本人に多い末端黒子型黒色腫ではBRAF遺伝子変異の頻度が少ないこともあり、腫瘍由来BRAF変異遺伝子の転移発見のマーカーとしての有用性は低いと考えられた。本研究では、悪性黒色腫におけるBRAF変異遺伝子の役割を調べるため、良性の色素細胞性母斑とのBRAF変異の頻度の比較およびBRAF変異遺伝子と他の癌関連遺伝子との関連を調べる。1)PCRによるBRAF変異遺伝子検出法の確立2)黒色腫におけるBRAF変異の検出金沢大学医学部附属病院で切除された悪性黒色腫の22例のパラフィン包埋組織からDNAを抽出し、BRAFの遺伝子変異をShifted Termination Assay(Mutector^<TM>TrimGen)およびシークエンシングにて検出したところ、表在拡大型及び結節型10例中5例と比較的高頻度のBRAF変異がみられたのに対し、日本人に多い末端黒子型では12例中1例と低頻度であった。これまでの欧米の報告に比べBRAF変異の頻度が低い理由として末端黒子型では紫外線の影響が少ないこと考えられた。また先天性母斑では20例中5例でBRAF変異がみられ、また黒色腫を発生した患者の多発する母斑にはBRAF変異がみられなかった。本邦の黒色腫患者ではBRAF変異以外にMAPK signaling経路に異常をきたしている可能性が考えられた。今後は以上の結果をもとにBRAF正常およびBRAF変異の黒色腫間で癌関連遺伝子p16,PTENの発現量をRealTimePCRで解析する予定である。
フラーレン化合物の高圧合成と物性研究

C60及びそのアルカリ金属化合物に対する高圧効果および電子状態の研究を行い、以下の成果をあげた。1.C60ポリマーの高圧合成C60を5GPa、600°C以上の高温高圧下で処理すると、菱面体構造に変化し、それが常温常圧下で準安定に取り出せることを見出した。新しい相では、分子間距離が9.2Åまで縮み、分子の対称性が正二十面体対称性Ihよりも大きく低下していると、溶解度が大きく低下している。このことから菱面体相ではC60のポリマーができていること解釈された。その後ヨーロッパのグループによって、我々の見出した菱面体相はC60の2次元ポリマーであることが明らかにされた。本研究およびヨーロッパグループの研究によってC60ポリマーは新しい炭素の存在形態として確立した。2.C60アルカリ化合物における圧力誘起超伝導の探索C_<60>^<3->の状態を有するカルカリ化合物はほとんど超伝導性を示し、格子定数を大きくするとTcも上昇するという事実はよく知られている。ところが最近、格子定数を大きくしすぎると超伝導が消滅することがわかってきた。そこで、われわれはこのような非超伝導体(NH3K3C60,Cs3C60)に静水圧を印加することによってそれぞれTc=28K,40Kの超伝導が現れることを見出した。3.光学スペクトルによるC60アルカリ化合物の電子状態の研究AxC60(x=0,3,4,6)試料を共昇華法によって作製し、その光反射スペクトルを測定し、それから伝導度スペクトルを求めた。特にK4C60のスペクトルを初めて測定し、バンド描像に反してE=0.5eVに最低の吸収ピークをもつ半導体であることを明らかにした。
脳波と機能的磁気共鳴画像の統合化解析による記憶神経回路創発メカニズムの解明

脳内の神経回路網は,状況に応じて動的に形成される必要がある.しかしながら,従来の脳機能イメージング手法では,この動的に形成される神経回路網を同定することが困難であった.そこで本研究では,脳波と機能的磁気共鳴画像法を同時に計測することにより,脳内で動的に創発する皮質ネットワークを同定する手法を構築した.さらに,記憶化大中の脳波と機能的磁気共鳴画像法の同時計測を実施することにより,記憶保持に関連して動的に生成される脳内のネットワークを同定した.脳内の神経回路網は,状況に応じて動的に形成される必要がある.しかしながら,従来の脳機能イメージング手法では,この動的に形成される神経回路網を同定することが困難であった.そこで本研究では,脳波と機能的磁気共鳴画像法を同時に計測することにより,脳内で動的に創発する皮質ネットワークを同定する手法を構築した.さらに,記憶化大中の脳波と機能的磁気共鳴画像法の同時計測を実施することにより,記憶保持に関連して動的に生成される脳内のネットワークを同定した.脳の機能的なメカニズムを解明するために,従来,ラットやサルなどの脳内に電極を挿入し,その神経活動にともなう電気的信号を観察することで脳の情報処理原理を解明する試みがなされている.ヒトの脳内における情報処理メカニズムを解明するためには,医学的な診断・治療を目的とした皮質脳波を除き,一般にヒトの脳内に直接的に電極を挿入することはできないため,非侵襲(低侵襲)的な方法により脳機能の研究が行われている.しかしながら,従来の非侵襲的な脳機能計測手法は,脳波計測,脳磁計測および近赤外スペクトロスコピーでは空間分解能が低く,またポジトロンCTや機能的磁気共鳴画像法では時間分解能が低いために,脳の設計原理を解明するためには未だ不十分であり,これらに代わる新規な脳機能計測技術の出現が切望されている.また,これらの計測方法は脳内の神経活動にともなう電気信号または血流信号の一方のみしか計測することは不可能で,脳の高次機能を解明するためには,これらの諸物理量を統合的に計測し,解析する必要がある.そこで本研究では高時間・空間分解能を有し,かつ電気活動と血流活動を統合的に解析可能な非侵襲脳機能計測システムとして,機能的磁気共鳴画像法と頭皮脳波の同時計測を実施することでヒトの記憶処理に関連した神経ダイナミクスを解明する.平成18年度においては,暗算課題中に頭皮脳波で観察されたθ波の遠距離位相同期に関連して,暗算の実行処理に関連する皮質ネットワークが発生することがあきらかになった.また,空間記憶課題を遂行中の脳波を測定することで,記憶処理に関連してγ帯域およびθ帯域の脳波活動が頭皮上において増大することがあきらかになった.今後,構築した空間記憶課題を用いて頭皮脳波と機能的磁気共鳴画像の同時計測を実施し,これらを統合化解析することにより記憶処理に関連して創発する神経ダイナミクスを解明する予定である.本年度は,平成18年度において構築した記憶関連課題を用いて,機能的磁気共鳴画像と脳波の同時計測を開始した.また測定する脳波データと機能的磁気共鳴画像の統合化解析手法の構築を行う.同時測定する脳波データには磁気共鳴画像装置の高磁場環境(1.5テスラ)に由来するアーチファクトが重畳する.そこで,測定後の脳波データから重畳するアーチファクトを除去することで連続的な脳波データを抽出する.アーチファクトを除去した脳波データをウェーブレット変換することにより,記憶関連課題を遂行中に頭皮上に出現する脳波イベントを抽出を実施した.さらに,電気活動である脳波イベントは時間的に早い活動(数百ミリ秒)であり,機能的磁気共鳴画像で測定する血流活動に由来する信号値は遅い活動(数十秒)であるため,両者を直接的に比較することは困難である.この問題を解決するために,血流反応動態関数と呼ばれる二つのガンマ関数の和で表現される時間遅れ関数を脳波イベントに畳み込み積分することにより,対応する機能的磁気共鳴画像信号の期待値を導出した.得られた期待値と実測値との回帰解析を実施することで,脳波の発生に関連して活動する空間部位の同定を行なった.なお,平成19年度においては当初予定通り,20名の同時計測を実施した.計測した機能的磁気共鳴画像や頭皮脳波の中には,上述したアーチファクトの除去手法において不完全なものや被験者の課題遂行能力が不十分な場合が発生する問題が予想されるが,本提案研究で用いる統計的手法では12名程度以上のデータがあれば信頼性のある解析結果が得られることから,計測した結果の統計解析を平成20年度において実施することで記憶神経回路創発メカニズムの解明を目指す.本年度は,平成19年度において計測した記憶関連課題遂行中の脳波と機能的MRIの同時計測データの統合化解析を実施した.機能的MRIと同時測定する脳波データには磁気共鳴画像装置の高磁場環境(1.5テスラ)に由来するアーチファクトが重畳する.そこで,測定後の脳波データから重畳するアーチファクトを除去することで連続的な脳波データを抽出した.アーチファクトを除去した脳波データをウェーブレット変換することにより,記憶関連課題を遂行中に頭皮上に出現する脳波イベントの抽出を実施した.その結果,記憶課題遂行中において,シータ帯域の脳波が前頭から発生することが明らかになった.頭皮上で計測する脳波活動は,神経の電気信号に由来する信号であり,一方,機能的MRIで計測する信号は,神経活動に関連した局所脳血流量の増加を反映した信号(BOLD信号)である.したがって,機能的MRIで計測した信号と,頭皮脳波で計測した信号には時間遅れが存在する.

そこで,頭皮脳波のパワーに血流動態反応関数と呼ばれる時間遅れ関数を重畳積分することで,頭皮上に発生したシータ帯域の脳波に関連した活動を,機能的MRIを用いて同定した.その結果,頭皮上に発生したシータ波に関連して,前頭前野内側面のBOLD信号が,シータ波の脳波パワーと負の相関を示す結果を得た.また,これとともに,海馬傍回および前頭眼野のBOLD信号が正の相関を示す結果を得た.これらのことは,シータ波により記憶回路が動的に形成されていることを示している.
群馬県における教師のライフヒストリーの聞き取り調査

科研費補助金の助成を受ける以前からのものも含めて30名の群馬の小・中・高の教師の公開インタビューを実施し、参加者が10名に満たない時もあったが、多い時は50名を超える一般市民も含めた参加者たちと共に、「語り」を触媒とする地域における意味生成の実験的空間を創出・維持してきている。その貴重な記録は、「戦後教育史学習会ニュース」というかたちで学習会を支える会員たちに郵送され、さらにそれを製本した「年報戦後教育史を学ぶ」も3冊が刊行済みで、4冊目もすでに編集を終え、印刷・製本を待つばかりになっている。2009年3月にはシンポジウム「日本の教師の歩んできた道」を開催し、北海道における「教師の学校」の実践・研究との交流を通じて、教師のライフヒストリーの語り・聞き取りの研究的実践の現段階における成果と課題を確認した。2005年5月7日、前橋市総合福祉会館にて、公開のライフヒストリー・インタビュー実施。2005年6月18日、前橋市総合福祉会館にて、公開のライフヒストリー・インタビュー実施。2005年7月17日、館林市城沼公民館にて、公開のライフヒストリー・インタビュー実施。2005年9月11日、館林市城沼公民館にて、公開のライフヒストリー・インタビュー実施。2005年10月8日、前橋市総合福祉会館にて、公開のライフヒストリー・インタビュー実施。2005年11月12日、前橋市総合福祉会館にて、公開のライフヒストリー・インタビュー実施。2005年12月10日、前橋市総合福祉会館にて、公開のライフヒストリー・インタビュー実施。2006年2月11日、前橋市総合福祉会館にて、公開のライフヒストリー・インタビュー実施。2005年度は、4名の方に、それぞれ前半生と後半生に分けて各2回ずつ公開ライフヒストリー・インタビューを実施した。お一人目は高校の国語教師で、教科通信の実践や学校新聞の指導などを中心にお話をうかがった。お二人目も中学の国語の先生で、いわゆる戦後新教育の時期における地域サークルをつうじての多彩な実践を中心にお話をうかがった。3人目の方も国語の先生(高校)だが、詩人としての活動も続けてこられた方で、自らが創作者であることを生かして、独特の奥行きのある読解の授業実践を中心にお話をうかがった。4人目の方は中学の数学の先生で、数教協のメンバーとして、「量」という観点からさまざまな実験を駆使した数学教育実践についてうかがうとともに、退職後のフリースクールにおける不登校児童・生徒の支援の実践についてもうかがった。これらの聞き取りの記録は、『年報(2006)戦後教育史を学ぶ』としてまとめる予定である。また、2005年8月に、東京学芸大学で開催された日本教育学会では、補助金の支給が始まる直前の2005年3月に実施したライフヒストリー・インタビューに基づいて、教師のキャリア形成という視点から口頭報告を行った。1.今年度実施した公開インタビュー調査(1)菊地慶四郎さん(6月23日・7月15日):高校教諭。植物生態学を学び、高校教師をする傍ら県の尾瀬保護専門委員として環境保護活動に従事。日本の環境教育におけるパイオニア的存在。(2)松本美津枝さん(9月30日・10月28日):小学校教師。日教組の教育課程自主編成運動のなかで育てられ、60年代から80年代にかけて全国的に注目される実践を展開してきた。(3)星野武さん(11月23日・12月17日):高校教師。勤評闘争の体験とそれに続く不当配転訴訟を闘いぬくことを通じて教師としてのキャリアを築いてきた異色の教師。(4)大前忍さん(3月10日):小学校教師。作文や詩の指導を通じて子どもたちと深い内面的なコミュニケーションを展開することで教師としてのキャリアを築いてきた。以上のインタビューの記録は、「戦後教育史学習会ニュース」No.3541に掲載されている。2.研究成果の公表上記(2)の松本美津枝さんの公開インタビューの2回目(10月28日)については、高崎健康福祉大学の学園祭(藤龍祭)とのタイアップ企画とすることで、一人の教師の生きざまと実践を題材として、学生・一般市民が教育問題をともに考えあう生涯学習的なイベントとすることができた。3.方法論の深化質的研究に関する最新の文献資料を収集し、整理する作業を進めている。

今年度は、櫻井英比古氏(小学校・美術)・富木茂氏(高校公民)・吉幸かおる氏(高校体育)・秋山みち子氏(高校養護教諭)・須田章七郎氏(高校書道)の5氏のライフヒストリーの公開インタビューを実施した。芸術教育分野において、戦後教育史に名高い島小学校の校舎を数多くの卒業制作作品で彩らせた櫻井氏と書による自己表現という書道教育の新境地を開拓した須田氏、生活指導分野において、群馬高生研の中心メンバーとして、市立伊勢崎女子高(現市立伊勢崎高校)と県立下仁田高校で70年代の群馬県の高校生活指導をリードする実践を展開した富木氏と吉幸氏、'72年の「保健体育審議会答申」によって養護教諭の職務が具体的に規定されたときに新任養護教諭として下仁田高校に赴任して以来、群馬県における養護教諭の実践を切り拓き、リードしてきた秋山氏から、その生い立ちと教師となったきっかけ、教師としてのキャリア形成と具体的な実践について、貴重なお話を伺い記録することができた。8月に刊行した『年報2006戦後教育史を学ぶ』は、2005年7月2006年7月に実施した公開インタビューの記録で、本来2006年度中に刊行する予定であったが、編集作業の遅れで今年度の刊行となったものである。上記5氏の記録は、2006年8月以降に実施したインタビューの記録とともに、『年報2007戦後教育史を学ぶ』として近く刊行の予定である。群馬県高校教育研究所から刊行されている年報は非売品であるが、貴重な記録を広く公開するため、現在、これまで年報に収録した記録を改めて整理編集し、研究成果公開の助成を得るなどして公刊することを計画中である。今年度は、金井秀行氏(高校数学)、倉林順一氏(高校地歴)、関山禮子氏(小学校)、嶋津良夫氏(高校地歴)の4氏のライフヒストリーの公開インタビューを実施した。数学の授業にくいついてこない生徒たちを前に試行錯誤を重ねて"楽しい数学"の授業を開発した金井氏、適応指導教室に配属された経験を生かして一人ひとりを大切にする教育に開眼した倉林氏、就学を猶予されていた病弱・したい不自由の子どもたちが通い始めた初期の養護学校で教員生活をスタートし、そういう子どもたちならではのユニークな表現活動の指導に独自の境地を切り開いた関山氏、職場の同僚性が若手の教師たちを育てるという信念のもとに、教師が安心して働ける職場づくりをライフワークとした嶋津氏から、その生い立ちと教師となったきっかけ、教師としてのキャリア形成と具体的な実践について、貴重なお話を伺い記録することができた。ライフヒストリーの公開インタビュー自体は今後も継続するプロジェクトであるが、4年間の研究のまとめとして、研究のパートナーである群馬県高校教育研究所と共催で、3月に「シンポジウム日本の教師の歩んできた道-群馬の教師たちのライフヒストリーを聴く会の5年間-」を開催し、報告者として「歴史の創造と継承-戦後第一世代の教師の経験をどう発展的・創造的に継承するか-」を報告した。シンポジウムの成果は近日中に報告書として刊行を予定している。
細胞選択能の付与によるがん特異的ネクローシス誘導化合物の開発

がん治療におけるネクローシス誘導剤の有用性を調べるために,肺がんおよび乳がん細胞に非アポトーシス性細胞死を誘導するニューロピリン-1(NRP-1)結合ペプチドと細胞死誘導配列を連結したハイブリッドペプチドを合成した.本ペプチドで誘導される細胞死は,ネクローシスの特徴を有しており,siRNAによるノックダウン実験によりNRP-1を介した作用であることがわかった.また,ネクローシスマーカーであるHMGB-1の細胞外放出が著明に観察された.本ペプチドは,ネクローシス誘導薬として,新しい概念に基づく抗悪性腫瘍薬の開発に役立つと期待される.「ネクローシス型細胞死」の細胞特異的制御化合物の開発を目的とし、抗菌ペプチド由来ペプチドミメティック化合物D(KLAKKLAK)2とがん細胞選択的に膜透過可能なペプチド(CPP)を連結した新規ハイブリッド化合物を創製する。平成27年度は、がん細胞選択的膜透過性ペプチドの取得を目指し、肺がん細胞及び乳がん細胞に結合するペプチドリガンドの探索を行った。これまで細胞膜透過性ペプチドリガンドの同定に成功例があるbrasilパニング法を用いて上皮性腫瘍細胞株(lung adenocarcinoma A549及びbreast adenocarcinoma MCF-7)に結合するペプチドリガンドを探索した。ファージディスプレイライブラリCX7Cから3回のパニングにより、それぞれの細胞株に結合するファージクローンを複数回収し、れらのペプチド配列をDNA配列より決定した。しかし、特定のペプチド配列への収束は観察されず、複数のがん種の培養細胞株を用いてその結合特性を調べたが顕著な細胞選択性はみられなかった。細胞選択性のないCPP・HIV-1 tatを連結したD(KLAKKLAK)2は、用いたすべての細胞に細胞死を誘導した。その細胞死をカスパーゼ類の活性化など生化学的指標をもとに解析すると、1)非アポトーシス性細胞死であり、2)ネクローシスの指標であるHMGBの細胞外放出が起こっていることがわかった。これまでD(KLAKKLAK)2はアポトーシス誘導により細胞死を引き起こすと考えられていたが、状況によってはネクローシスも起こることがわかった。本結果は、連結される細胞選択的CPPの種類によって、誘導される細胞死がアポトーシスとネクローシスと変化することを意味している。したがって、本研究により新たなネクローシス誘導剤の開発が可能であることを示唆する。ヒト肺がん細胞A549およびヒト乳がん細胞MCF-7を用いたパニングの結果、細胞選択性の高いリガンドを得るには至らなかった。これまで白血病細胞やミクログリアを標的細胞としたファージディスプレイ法では、細胞選択性の高い細胞膜透過性ペプチドリガンドが効率良く得られている。理由ははっきりしないが、上皮系細胞と浮遊系細胞の違いや用いた細胞種が本パニングに適していなかった可能性が考えられる。平成27年度に実施予定であったネクローシス誘導配列D(KLAKLAK)2とのコンジュゲート作製、及びその細胞死誘導活性の評価には至っておらず、計画は「やや遅れている」状況である。アポトーシス耐性がんや難治性がんの新規治療法として「ネクローシス誘導」が提唱されている。しかし、腫瘍細胞選択的にネクローシスを誘導する化合物は、現在のところ見つかっておらず、本アプローチによる治療戦略の開発は進んでいない。本研究では、ネクローシス誘導配列とファージディスプレイ法で取得した細胞選択的膜透過ペプチド配列を連結させることにより、様々ながん細胞に対応する細胞選択的ネクローシス誘導化合物の創製を行い、新がん治療戦略の開発にむすびつける。初年度に肺がん細胞選択的に結合するペプチドリガンドの同定を試みたが獲得には至らなかった。そこで、我々が先にファージディスプレイ法で同定した細胞選択的ペプチドリガンドを見直した結果、白血病細胞結合ペプチドの一つが肺がん細胞株に対しても強く結合することを確認した。すなわち、肺がん細胞では血管内皮細胞増殖因子(VEGF)受容体のパートナー分子ニューロピリン-1(NRP-1)が高発現しているという知見を基に、先に我々が見出したNRP-1結合ペプチドの肺がん細胞株(A549など)への結合をファージ結合実験で調べた結果、本ペプチドは強く結合することがわかった。次に、本ペプチドをネクローシス誘導配列D(KLAKKLAK)2に連結させたペプチド化合物をペプチド合成機により調製し、種々の細胞株を用いて細胞死誘導活性を調べた。WST-8試薬による比色定量法で評価した結果、種々の肺がん細胞株に対して細胞死が誘導されることを観察した。さらに、本ペプチドが肺がん細胞株に誘導する細胞死について細胞染色および電子顕微鏡解析を用いて詳細に解析した結果、ネクローシスであることを確認した。平成28年4月発生の熊本地震によりペプチド合成装置、MALDI-TOF質量分析装置が被害を受けた。このため、本研究で中心的な役割を担うペプチドの調製ができず、研究が大幅に遅延したため期間延長を行った。現在、本研究遂行に必要な機器が回復したので、本年度は昨年度計画の研究を行う。昨年度、ヒトニューロピリン(NRP-1)に結合する9mer環状ペプチドを抗菌ペプチド由来D(KLAKLAK)2配列に連結したハイブリッドペプチド(GFY-KLA)を合成してヒト肺がん細胞株への影響を調べた結果、ネクローシス誘導活性があることがわかった。そこで、本年度は、このネクローシス誘導活性がNRP-1依存的であるか確かめることを目的とし、siRNAによるNRP-1ノックダウン実験を行い確認した。

また、ネクローシスを起こした細胞の炎症誘導の可能性について、炎症マーカーHMGB1の放出に着目して調べた。肺がん細胞株A549にNRP-1のsiRNAを常法に従い導入した。ウェスタンブロット法によりNRP-1分子ノックダウンを確認した。GFY-KLAペプチドを処理したところ、コントロールsiRNA導入細胞に比べ、細胞生存率の顕著な増大を示した。一方、シスプラチンやドキソルビシンなどの抗悪性腫瘍薬の細胞生存率への影響は、NRP-1ノックダウンの有無で変化なかった。A549細胞をアポトーシス誘導薬(シスプラチン、ドキソルビシン)もしくはGFY-KLAで処置して細胞死を誘導した。ウェスタンブロット法により炎症マーカーHMGB1が細胞外に放出されるか否かを調べた。アポトーシス誘導薬では無処置のコントロール細胞と同程度のHMGB1しか検出されなかったのに対し、GFY-KLA処置群では速やかにかつ大量のHMGB1が細胞外に放出されていることが観察された。以上のことから、GFY-KLAによって誘導される細胞死は、ネクローシスの特徴の一つである炎症を惹起することが示唆された。がん治療におけるネクローシス誘導剤の有用性を調べるために,肺がんおよび乳がん細胞に非アポトーシス性細胞死を誘導するニューロピリン-1(NRP-1)結合ペプチドと細胞死誘導配列を連結したハイブリッドペプチドを合成した.本ペプチドで誘導される細胞死は,ネクローシスの特徴を有しており,siRNAによるノックダウン実験によりNRP-1を介した作用であることがわかった.また,ネクローシスマーカーであるHMGB-1の細胞外放出が著明に観察された.本ペプチドは,ネクローシス誘導薬として,新しい概念に基づく抗悪性腫瘍薬の開発に役立つと期待される.次年度は、既に報告のある肺がん細胞に結合するペプチドリガンドを用いて、ネクローシスを誘導するハイブリッドペプチドを作製する。続いて、Dアミノ酸置換体をマルチ自動ペプチド合成機により調製し、完全ペプチドミメティク化合物を得る。ペプチドミメティック化合物がネクローシスを起こしているか否か電子顕微鏡による観察、および生化学分析により精査する。さらに肺上皮系腫瘍細胞の移植動物モデルを作製し、本コンジュゲート化合物の腫瘍増殖能およびネクローシス誘導活性をin vivoで評価する。ニューロピリン1結合ペプチドが肺がん細胞株に結合することがわかり、D(KLAKKLAK)2配列と連結させたペプチド化合物がネクローシスを誘導することを見出した。本年度は、昨年度の地震の影響によりペプチド合成ができずに進めることのできなかった細胞選択的ネクローシス誘導ペプチドミメティク化合物を合成する。それぞれのペプチドについて、D体アミノ酸置換もしくは環状化のためのCys導入を行った新規配列を設計する。得られたペプチドの安定性と分解性等を調べ、白血病細胞株で細胞死誘導活性を評価した後、ヒト白血病細胞異種移植モデルを使った抗腫瘍効果の評価を行う。
薬物代謝酵素カルボニルレダクターゼの分子多様性と遺伝子欠損の機構解析

薬物代謝酵素カルボニルレダクターゼの分子多様性と遺伝子欠損の機構を検討した.以下に本研究において得られた知見を示す.1.雄性ラット肝臓のミクロソーム画分からメチラポンを基質にして一つ酵素が部分的に精製された.その部分精製されたメチラポン還元酵素は,アセトヘキサミドに対して還元能力をもたなかった.したがって,メチラポンとアセトヘキサミドのケトン基還元反応は異なる酵素によって触媒されることが示唆される.2.1)ラット肝ミクロソーム画分のアセトヘキサミド還元酵素活性において,顕著な系統差と性差が観察された.しかしラット肝可溶性画分のアセトヘキサミド還元酵素活性においては,系統差や性差は存在しなかった.2)カドミウムの処理は,雄性ラット腎ミクロソーム画分において観察されるアセトヘキサミド還元酵素活性を間接的に低下させた.一方雄性ラット腎可溶性画分では,そのようなカドミウム処理の効果は見られなかった.上述の結果から,ラット肝臓と腎臓に存在するカルボニルレダクターゼの多様性が推察される.3.雄性ラット肝ミクロソーム画分におけるアセトヘキサミド還元酵素活性の遺伝解析結果は,その酵素活性(表現型)が常染色体上にある共優性の遺伝子によって制御されることを示している.また雌性ラットでは,雄性ラットと異なって,全ての世代で酵素活性を示さなかった.これらの結果から,本酵素活性は限性遺伝されるものと結論される.雄性ラットの肝ミクロソーム画分におけるアセトヘキサミド還元酵素活性の遺伝子欠損の機構を明らかにするために,さらに多くの研究が進行中である.薬物代謝酵素カルボニルレダクターゼの分子多様性と遺伝子欠損の機構を検討した.以下に本研究において得られた知見を示す.1.雄性ラット肝臓のミクロソーム画分からメチラポンを基質にして一つ酵素が部分的に精製された.その部分精製されたメチラポン還元酵素は,アセトヘキサミドに対して還元能力をもたなかった.したがって,メチラポンとアセトヘキサミドのケトン基還元反応は異なる酵素によって触媒されることが示唆される.2.1)ラット肝ミクロソーム画分のアセトヘキサミド還元酵素活性において,顕著な系統差と性差が観察された.しかしラット肝可溶性画分のアセトヘキサミド還元酵素活性においては,系統差や性差は存在しなかった.2)カドミウムの処理は,雄性ラット腎ミクロソーム画分において観察されるアセトヘキサミド還元酵素活性を間接的に低下させた.一方雄性ラット腎可溶性画分では,そのようなカドミウム処理の効果は見られなかった.上述の結果から,ラット肝臓と腎臓に存在するカルボニルレダクターゼの多様性が推察される.3.雄性ラット肝ミクロソーム画分におけるアセトヘキサミド還元酵素活性の遺伝解析結果は,その酵素活性(表現型)が常染色体上にある共優性の遺伝子によって制御されることを示している.また雌性ラットでは,雄性ラットと異なって,全ての世代で酵素活性を示さなかった.これらの結果から,本酵素活性は限性遺伝されるものと結論される.雄性ラットの肝ミクロソーム画分におけるアセトヘキサミド還元酵素活性の遺伝子欠損の機構を明らかにするために,さらに多くの研究が進行中である.ラット肝臓のミクロソーム画分に存在する薬物代謝酵素カルボニルレダクターゼは,種々の生理的因子によって調節されることを,これまでに明かにしてきた.またその研究過程において,本酵素活性を欠損するラットを偶然にも発見した.そこで本酵素における遺伝子欠損の機構を明かにするために,まず本酵素の欠損症ラットと正常ラットを交配させ遺伝様式を決定した.本酵素活性は,遺伝の理論比に従って雄特異的に限性遺伝することが判明した.限性遺伝には,遺伝子が性染色体に存在する場合と,遺伝子が常染色体に存在し,その遺伝子の発現が性特異的な因子によって制御される場合の2つのタイプに分けられるが,本酵素の活性発現はテストステロンに依存しており,後者のタイプに属することが明らかになった.次に正常ラットの肝臓から目的とするカルボニルレダクターゼの精製を試みた.しかし本酵素の可溶化には成功したものの,各種クロマトグラフィーに付すと著しい失活が認められるため,均一な酵素の精製には至らなかった.そこで本酵素が生体内でどのような役割を有するか,また生体内に本酵素と類似した酵素が存在しないか検討した.本酵素はステロイドホルモンであるプロゲステロンによって強く阻害され,さらに基質に対して拮抗的に阻害されることが分かった.これらの結果から,本酵素は20β-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ(20β-HSD),もしくはその分子種である可能性が示唆された.また興味深いことに,欠損症ラットと正常ラットでは,本酵素の幾つかのアミノ酸残基が異なることを示唆するデータが得られた.以上の成果をもとに,次年度では本酵素蛋白質をコードする遺伝子のクローニングを試み,さらに遺伝子欠損の機構を解析することを目的とする.これまでにラット肝臓のミクロソーム画分に存在する薬物代謝酵素カルボニルレダクターゼが,性差や年齢差などの種々の生理的因子によって制御されていることを明かにしてきた.また興味深いことに本酵素活性は,遺伝の理論比に従って雄特異的に限性遺伝することが明らかになった.

そこで本酵素の分子多様性と遺伝子欠損の機構を明らかにするために,昨年度に引き続き,まずラットの肝臓から目的とするカルボニルレダクターゼをアセトヘキサミドを基質にして精製を試みた.しかし精製するに伴い,著しい失活が認められるため,均一な酵素の精製には至らなかった.ところでメチラポンは,アセトヘキサミドと同様に,ケトン基を有する薬物で,ラット肝臓のミクロソーム画分において還元される.そこで,ラットの肝臓からメチラポンを基質にしてカルボニルレダクターゼを部分精製した.しかし意外なことに,本部分精製酵素は,アセトヘキサミドを還元する能力を全くもたないことが分かった.これらの結果から,ラット肝臓のミクロソーム画分には異なる分子種のカルボニルレダクターゼが存在することが予想された.最近,ラット肝臓のミクロソーム画分における20β-ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ(20β-HSD)活性が,雄特異的および男性ホルモン依存的であることが報告された.そこで昨年度に引き続き,本酵素が生体内で20β-HSDとしての役割を有するかさらに詳しく検討した.その結果から,本酵素は20β-HSD,もしくはその分子種であることが強く示唆された.哺乳動物では,幼若ブタの精巣から20β-HSDがすでに精製され,そのアミノ酸一次配列も決定されている.ごく最近,その抗体を入手することができたので,本酵素蛋白質をコードする遺伝子のクローニングに応用できないかどうか,現在検討中である.
神経新生のin vivoイメージング技術の開発と、その幹細胞療法への応用

22年度では、21年度に引き続き、in vivo蛍光イメージング装置およびpositron emission tomography (PET)を用いて、神経幹細胞の成体サル脳内における動態をin vivoで可視化するための神経幹細胞特異的な標識技術の開発を行った。ここでは、神経幹細胞特異的に賦活されるnestinプロモーター/エンハンサーを、カニクイザルBACライブラリーよりクローニングし、その下流に緑色蛍光タンパク質(EGFP)、あるいはアミノ酸トランスボーター遺伝子を挿入したレンチウィルスベクターを構築することで、感染神経幹細胞において特異的にそれらタンパク質を発現するレンチウィルスを調製した。それを、ラット胎仔海馬歯状回より初代培養した神経幹細胞に感染させ、当該神経幹細胞を成獣ラット脳室下帯に移植した後に、in vivo蛍光イメージング装置およびpositron emission tomography (PET)を用いて、生体脳内における移植神経幹細胞の増殖・遊走をin vivoで検出画像化することを行った。本技術により、さらに、ほ乳動物成体脳内に内在する神経幹細胞のin vivoイメージングを行うことが可能である。22年度には、次に、脳内において神経幹細胞の細胞膜で特異的に発現するCD133受容体様膜タンパク質に結合するリガンドタンパク質の検索をCDファミリータシパク質への結合活性を有するリード化合物ライブラリーより、蛍光相関分光法(FCS)を用いて探索することで、CD133に結合するリガンド候補ペプチドを新規に同定した。これらペプチドは、今後、神経幹細胞の脳内動態をPETで解析するためのトレーサー前駆体の創出に有用であり、これまでに血液脳関門透過能を持つペプチドを付加することにより、当該トレーサー前駆化合物の脳への送達を確認した。本研究では、大うつ病、統合失調症やパーキンソン病等の広汎な精神・神経疾患の患者脳において、その機能障害の報告されている成体脳神経新生の、脳内での動態をPETやMRI等を用いて非侵襲的に画像化することにより、病態脳における神経幹細胞障害の分子機構を解明する端緒とするとともに、神経幹細胞を治療標的とする精神・神経疾患の幹細胞療法を創出するための技術的基盤を構築することを目的とする。これまでに、国内外においてほ乳動物成体脳内での神経新生を非侵襲的に脳深部にまで亘り画像化できる技術の例はなく、また近年、精神・神経疾患の病因遺伝子として同定されたDISC1等の多くの遺伝子が、神経幹細胞の増殖・分化に機能することが示されたので、精神・神経疾患の診断治療への応用が可能な神経新生のin vivoイメージング技術の開発が俟たれていたところである。本研究では、神経幹細胞をPETにより脳内で可視化するために、ポジトロン標識各種で神経幹細胞に特異的に標識を施すことを行う。そこで、最初に、独自に樹立したヒト胎児脳由来神経幹細胞株にレンチウイルスを感染させることで、神経幹細胞においてネスチンプロモーターの制御下に中性アミノ酸トランスポーターを発現させ、ついでそれを成体ラット脳室下帯に脳定位装置を用いて移植した後に、^<18>F-FLTを末梢より投与しPETを用いて画像化した。これまでに、移植移植神経幹細胞が、特定の中性アミノ酸トランスポーター発現させることで選択的に^<18>F-FLT等の既成のPETトレーサーで標識されること、また、移植神経幹細胞がEGFやbFGF等の増殖因子の投与により増殖を賦活されることが明らかにされている。21年度では、本研究により、in vivo蛍光イメージング装置およびpositron emission tomography(PET)を用いて、神経幹細胞の成体サル脳内における動態をin vivoで可視化するための神経幹細胞特異的な標識技術の開発を、最初に行った。ここでは、神経幹細胞特異的に賦活されるCD133プローモーターをカニクイザルBACライブラリーよりクローニングし、その下流に緑色蛍光タンパク質(EGFP)、あるいはアミノ酸トランスポーター遺伝子を置いたレンチウィルスベクターを構築することで、感染神経幹細胞において特異的にそれらタンパク質を発現するレンチウィルスを調製した。それを、ラット胎仔海馬歯状回より初代培養した神経幹細胞に感染させ、当該神経幹細胞を成獣ラット脳室下帯に移植した後に、in vivo蛍光イメージング装置およびpositron emission tomography(PET)を用いて、生体脳内における移植神経幹細胞の増殖・遊走をin vivoで検出画像化することを行った。本技術により、さらに、ほ乳動物成体脳内に内在する神経幹細胞のin vivoイメージングを行うことが可能であり、22年度には、ラットおよびサルにおいて成体脳内神経新生の健常時あるいは病態時における動態解析を試みる予定である。21年度には、次に、脳内において神経幹細胞の細胞膜で特異的に発現するCD133受容体様膜タンパク質に結合するリガンドタンパク質の検索をCDファミリータンパク質への結合活性を有するリード化合物ライブラリーより、蛍光相関分光法(FCS)を用いて探索することで、CD133に結合するリガンド候補ペプチドを新規に同定した。これらペプチドは、今後、神経幹細胞の脳内動態をPETで解析するためのトレーサー前駆体の創出に有用である。ここでは、神経幹細胞特異的に賦活されるnestinプロモーター/エンハンサーを、カニクイザルBACライブラリーよりクローニングし、その下流に緑色蛍光タンパク質(EGFP)、あるいはアミノ酸トランスボーター遺伝子を挿入したレンチ

ウィルスベクターを構築することで、感染神経幹細胞において特異的にそれらタンパク質を発現するレンチウィルスを調製した。それを、ラット胎仔海馬歯状回より初代培養した神経幹細胞に感染させ、当該神経幹細胞を成獣ラット脳室下帯に移植した後に、in vivo蛍光イメージング装置およびpositron emission tomography (PET)を用いて、生体脳内における移植神経幹細胞の増殖・遊走をin vivoで検出画像化することを行った。本技術により、さらに、ほ乳動物成体脳内に内在する神経幹細胞のin vivoイメージングを行うことが可能である。22年度には、次に、脳内において神経幹細胞の細胞膜で特異的に発現するCD133受容体様膜タンパク質に結合するリガンドタンパク質の検索をCDファミリータシパク質への結合活性を有するリード化合物ライブラリーより、蛍光相関分光法(FCS)を用いて探索することで、CD133に結合するリガンド候補ペプチドを新規に同定した。これらペプチドは、今後、神経幹細胞の脳内動態をPETで解析するためのトレーサー前駆体の創出に有用であり、これまでに血液脳関門透過能を持つペプチドを付加することにより、当該トレーサー前駆化合物の脳への送達を確認した。
英語リスニングでの閾値仮説とボトムアップ処理:高周波音域弁別と子音聞き取り能力

言語音声処理に関するプロセス・モデルでは上級者ほどボトムアップは自動化され、トップダウン処理を働かせることが知られており、効率的なトップダウン処理が可能になるためには、ボトムアップ処理が閾値を越えている必要がある、との考え方がある。本研究ではボトムアップ音声処理の中でも「高周波音域」の弁別能力の、英語習熟度への寄与について、(1)リスニング習熟度の高い英語学習者は、高周波音域の弁別能力が高い。(2)リスニング習熟度の高い英語学習者は、子音聞き取り能力が高い。(3)高周波音域の弁別能力と子音聞き取り能力は正の相関関係にある。(4)リスニング習熟度に対する高周波音域の弁別及び子音聞き取り能力の寄与には、閾値が存在する、の4つの仮説に基づき、実験を行なった。実験では純音弁別テスト(2000Hz,3000Hz)、L-R音同定テストを作成し、132名のデータを分析した。L-R音同定テストには[light-right][play-pray]ペアを用い、4つの話速条件及び高周波音/低周波音除去条件を組み入れた。その結果、1)GTECによるリスニング習熟度の高い英語学習者は、2000Hzと3000Hzの両音域の弁別能力が高かった。また、2)いずれの話速条件でもリスニング習熟度の高い英語学習者は、有意に子音の聞き取り能力が高かった。3)純音の弁別能力とリスニング習熟度の相関はあまり高くはないものの、2000Hzでのみ有意であった。4)リスニング習熟度の高い英語学習者のみが、高域の手がかりのみを残した音声の弁別が可能であり、仮説(4)を支持する結果が得られた。研究計画初年度はまず英語のリスニングにおいて「高周波音域の聞き取り」を問題としている学習法として「トマティスメソッド」「傳田式」「英語耳」などを、文献をもとにその内容および理論背景の信ぴょう性について審議した。その結果、これら市販の教材の説明にある「英語は子音中心の言語であるため、その聴解は高周波音声の聞き取りを必要とする」とする説明はかなり粗雑であることがわかり、さらに音響音声学の文献にあたった。音響音声学の音素弁別実験の結果などとも合わせ、確かに高周波の音声素性がリスニングのボトムアップ処理に影響を及ぼしている可能性は示唆された。しかし「高周波音声」の聞き取りといっても「音の知覚」が問題なのではなく、音素のカテゴリー知覚、その中でも「時間分解能」の重要性に着目すべきであることが、本年度の議論で明らかになってきた。さらに聴解の情報処理モデルを用いると、音素のカテゴリー知覚はより高次の情報単位である「単語」や「文」という意味の塊によってoverrideされる可能性が高い。文(単語)の意味と子音そのものが矛盾する場合、聞き手はどちらの情報を優先するのか、またそれは習熟度によって異なるのか。以上のような文献研究の成果を元に2年目は、高周波域で時間分解能を必要とする音素のカテゴリー知覚を測定するプログラム、および文法・意味が、含まれる単語の意味と相反する条件を含む語彙同定プログラムを構築し、データ収集を行なう予定である。また今年度の文献研究は論文として準備中であり、来年度投稿の予定である。今年度は、(1)英語のリスニングにおいて「高周波音域の聞き取り」を問題としている市販の学習法・教材が立脚する、「英語は子音中心の言語であるため、その聴解は高周波音声の聞き取りを必要とする」とする説明は、問題を単純化・一般化しすぎである、(2)高周波の音声素性がリスニングのボトムアップ処理に影響を及ぼしている可能性は極めて高い、という初年度の知見を踏まえ、どのような「高周波音声の聞き取り」がリスニングに影響するかについて検討した。