hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
fおよびd電子系の高エネルギー分光の研究

また、この研究の延長として、XPSだけではなく、X線放出スペクトル(XES)においても寿命の多重項依存性が重要な役割を演じることがわかり、田中が中心になって理論計算を進めている。この効果をも含めて、XESの実験が辛を中心にして準備されていたが、最近になってXESの予備的な観測結果が得られるところまで研究は進展している。小谷グループとParlebasグループは、従来から続けてきた「軽い遷移金属化合物の高エネルギー分光理論」および「CePd_7の高エネルギー分光」に関する共同研究を大きく前進させることが出来、その成果を国際シンポジウムで発表し、また学術雑誌に投稿した。TiO_2,Ti_2O_3,V_2O_3,Cr_2O_3等の軽い遷移金属の酸化物の電子状態は、これまでよく理解されていなかったが、我々は、XPSを中心とする高エネルギー分光の理論解析をクラスター模型を用いて系統的に実行し、これらの物質が従来の常識を越えた強い共有結合性をもつことを見出した。従来は、Ti_2O_3Cr_2O_3の第一イオン化状態の正孔は3d状態にあると言われてきたが、我々の研究から、3d状態と酸素の2p状態の間の強い混成状態にあることが明らかにされた。これらの成果の一部は、小谷が第17回谷口国際シンポジウムで口頭発表し、そのプロシ-ディングスがSpringer-VerlagからParlebasらとの共著論文として公表される予定である。また、この共同研究に関してParlebasが中心になって準備してきた別の共著論文も、J.Electron.Spectrosc.Relat.Phenom.に掲載されることが決定した。さらに、今回のSteinerの来日により、Steinerが中心になって観測した軽い遷移金属酸化物の新しい実験データが、XPSや電子エネルギー損失スペクトルに関してもたらされ、それらの理論解析が現在進行中である。一方、小谷・Parlebas両グループは、異常に強い原子価混合を示す物質としてCePd_7にも関心を持ち、実験・理論の両面から共同研究を続けてきた。平成6年度はこの物質の表面効果について新しい結果を得たので共著論文としてまとめた。これは、CePd_7中のCeは表面とバルクで電子状態が異なり、表面では原子価混合が弱く、バルクは異常に強いことを明らかにしたもので、この論文もJ.Phys.C:Condensed Matterに掲載が決定している。城は、今回のグロニンゲン大学訪問の機会に、Sawatzky・Tholeグループとの間で強磁性体のXASの円偏向磁気二色性についての研究・討論を行い、有意義な成果を得た。この方面の研究は、van der LaanやCarraが従来から進めている理論とも併せて、今後の大きな発展が期待できる。藤森とAbbate,Sawatzkyらは共同でLaCoO_3のXASの精密測定を行い、温度変化によってCoのスピン状態が高スピンと低スピンの間で転移することを見出した。この研究は、今回のAbbateの来日によってさらに進展している。なお、この実験結果の一部は、バンド計算やクラスター計算による解析をも含めて、Phys.Rev.Bに公表された。
オセアニア地域集団における肥満症の分子基盤の解明

β2アドレナリン受容体遺伝子(ADRB2)の上流領域に存在し、肥満(BMI>27kg/m2)と最も強い関連を示した単一塩基多型(SNP)rs34623097-Aと、オセアニア集団の血清脂質値(中性脂肪(TG)、総コレステロール(T-CHO)、HDLコレステロール、LDLコレステロール)との関連を評価した。ポリネシア地域のトンガ人集団において、rs34623097-Aが血清TG値と有意な関連を示し(P-value=0.037)、rs34623097-Aを1コピーもつごとに血清TGが0.791mmol/L増加することが明らかとなった(Naka l, et al., 2013)。また、ADRB2が受容体として働くカテコラミン誘導脂質分解経路に関わる分子をコードする遺伝子(LIPE, PLIN)と、中性脂肪分解に関わる、リポ蛋白リパーゼをコードする遺伝子(LPL)、脂肪滴の肥大化に関わる遺伝子(CIDLEA, CIDEC)の多型と、肥満、血清中脂質値との関連を評価した。その結果、LPLのイントロンに存在するSNPが肥満と(P-value=0.015)、3'非翻訳領域に存在するSNPが肥満(P-value=0.016)、HDLコレステロール値と有意な関連を示した(P-value=0.037)。当該SNPはLPL遺伝子の発現量低下に関連する機能的SNPであることが報告されている(Richardson K, et al., 2013)。他の遺伝子多型と肥満との有意な関連は見いだせなかったことからも、カテコラミン誘導脂質分解経路のADRB2、および中性脂肪分解に関わるLPLが、オセアニア集団の肥満に大きな影響を及ぼす遺伝因子である可能性が考えられた。(抄録なし)オセアニア集団を対象に、β_2アドレナリン受容体遺伝子(ADRB2)多型と肥満との関連を検討し、ADRB2遺伝子上流領域に存在する単一塩基多型(SNP)rs34623097が肥満(BMI>27kg/m^2)と最も強い関連を示すことを見出した。先行研究では、ADRB2の27番目のアミノ酸置換を伴うSNPの27グルタミン酸アリル(27Glu)は、アジア集団において肥満リスクと関連するが、ヨーロッパ集団においては関連していないことが報告されている。今回、検出したSNPは、ヨーロッパ集団において観察されないこと、本研究により、アジア・オセアニア集団においてrs34623097-Aと27Gluとは正の連鎖不平衡にあることが確認されたことから、rs34623097が第一義的な肥満関連多型である可能性が強く示唆された。次に、当該SNPの機能的意義を解明し、肥満発症にADRB2遺伝子が果たす役割の理解を目指すことを目的とし、rs3462309-Aとrs3462309-Gの各アリルのコンストラクトを作製し、HEK293を利用したリポーター遺伝子アッセイを行った。rs34623097-AアリルがGアリルに比べて10%ほどADRB2の発現量を低下させることを見出した。電気泳動移動度シフトアッセイにより、rs34623097-Aアリル特異的に結合する転写抑制因子の存在が示唆され、rs34623097-AはADRB2の発現を抑制することで肥満リスクを高めていると結論した。さらに、分子進化的解析によって、現生人類のrs34623097-Aアリルは、ネアンデルタールから遺伝子移入した可能性があることを示した。本研究成果は、アジア・オセアニア集団でのみ観察される27Gluと肥満との関連に合理的な説明を与えるとともに、肥満者の肥満細胞で観察されるADRB2発現量の低下が、肥満の結果ではなく肥満の原因であることを示唆している。

他の遺伝子多型と肥満との有意な関連は見いだせなかったことからも、カテコラミン誘導脂質分解経路のADRB2、および中性脂肪分解に関わるLPLが、オセアニア集団の肥満に大きな影響を及ぼす遺伝因子である可能性が考えられた。・2年次計画で行うSNPの機能解析が終了した・成果を論文として発表した血清脂質値と多型との関連を検討し、オセアニア集団における肥満症や脂質異常症の遺伝因子について明らかにする(抄録なし)
HDAC3抑制による頭頸部癌分子標的治療の検討

1.ヒト上顎癌細胞株IMC3に正常pH(pH7.4)と低pH(pH6.8)条件下で、それぞれ温熱刺激(44°C30分)を加え、6時間後の遺伝子発現をDNAアレイにて解析した。その結果、低pH条件での温熱刺激でのみ発現する遺伝子群があることが解った。我々はこの中でも、histone deacetylase 3(HDAC3)に着目した。2.IMC3に正常pHと低pH条件下で、それぞれ温熱刺激(44°C30分)を加え、12時間後のHDAC3蛋白発現をウェスタンブロット法により解析した。その結果、低pH条件での温熱刺激でのみ、HDAC3蛋白が強発現する事が解った。さらにHDAC3のアンチセンスオリゴヌクレオチドを作製し、実際にHDAC3蛋白発現を抑制できることを確認した。3.フローサイトメトリーを用いた実験で、アンチセンスオリゴによりHDAC3を抑制した状態では、低pH条件での温熱刺激によるG2/M期停止が解除され、アポトーシスが増強する事が解った。5.ヌードマウスを用いた実験により、生体内においても、HDAC3抑制は温熱刺激のアポトーシス誘導効果を増感することが解った。6.ELISA法を用いた実験から、このHDAC3抑制による低pH条件での温熱の増感効果にはNF-kBのサブユニットであるp65が関連する可能性が示された。HDAC3のcDNAからオープンリーディングフレームを解析し、5'末端側より、2023塩基のアンチセンスRNAをデザインし、オリゴヌクレオチド合成を行った。この合成オリゴによって、HDAC3蛋白が確実に発現抑制されることをウェスタンブロット法を用い確認した。このアンチセンスRNAオリゴヌクレオチドによって、HDAC3を抑制した状態でヒト上顎癌細胞株IMC3に低pH環境下(pH6.8)44°C30分温熱刺激、シスプラチン10μg/ml、パクリタキセル10μg/ml、および58Gy放射線照射をそれぞれ加えた24、48時間後に細胞を回収し、フローサイトメトリーにてアポトーシスの解析を行い、未処理群と比較検討した。またそれぞれ回収した細胞についてHoechst33342染色用いて、実際のアポトーシス細胞の数をカウントし、確認を行った。その結果、HDAC3抑制が低pH環境下温熱、シスプラチン、パクリタキセル、放射線のアポトーシス誘導能を著明に増強する事が解った。次にIMC3をヌードマウスの背部に移植し、形成された腫瘤にHDAC3アンチセンスRNAオリゴを皮下注射により投与した。その24時間後にパクリタキセル12.5mg/kgを皮下注射にて投与した。この操作を2回/週で繰り返し行い、腫瘍の体積を経時的に測定した。その結果、HDAC3アンチセンスオリゴ投与がパクリタキセルの抗腫瘍効果を増強することが生体内でも確認された。また、HDAC3アンチセンスオリゴおよび、パクリタキセルを投与された48時間後に腫瘍を摘出し、これを免疫染色(Apop-Tag)し、アポトーシスを生じている細胞数をカウントしたところ、HDAC3アンチセンスオリゴが生体内でもパクリタキセルのアポトーシス誘導能を増強する事が確認された。
肝内胆管癌の発がんにおける核内受容体CARの役割

今年度は、昨年度から継続して下記の2項目について研究を行った。CARは生体異物センサーとして働き、生体防御に関与している。CARが欠損した状態での化学発癌物質の代謝能の変化を検討するために、Thioacetamide(TAA)単回投与時の状態を野生型マウスと比較(薬物代謝酵素、トランスポーターの発現、胆汁中代謝産物濃度)した。また、CARのLigand投与処置を行った場合のThioacetamide(TAA)単回投与への反応を比較した。胆管癌の化学発癌モデルであるThioacetamide(TAA)を用いて、実験的胆管癌の作成を試みた。CARのノックアウトマウスを用いて、発がんの頻度を野生型マウスと比較中である。CARのノックアウトマウスでは、野生型マウスと比較して、Thioacetamide(TAA)に対する薬剤感受性が強く、肝障害が強い傾向にあった。Thioacetamide(TAA)の投与量や投与期間を調節、さらにDEN (Diethylnitrosamine)を併用した発癌モデルなどを作成し、比較解析に至適な投与量・投与期間を検討した。今後、発癌の頻度を比較し、得られた試料を用いて、CARの発現、薬物トランスポーターの発現、薬物代謝酵素の発現を、mRNA、蛋白レベル、病理組織学的に比較検討する予定である。平成29年度はマウスの繁殖状況が思わしくなく、実験に必要なノックアウトマウス数の確保に難渋していたが、今年度は、マウスの繁殖状況に改善が見られ、遅れていたスケジュールを挽回出来てきている。平成29年度はマウスの繁殖状況が思わしくなかったため、今年度は、我々の施設で継代していたノックマウス以外に、共同研究施設より、繁殖用にノックアウトマウスを取り寄せ、新たに継代し、実験用マウス数を確保できた。実験用マウスの確保が順調になり、発癌実験を進行することが出来た。今年度は、核内受容体CARのノックアウトマウスを用いて、下記の2項目について研究を行った。そのため、通常の投与量では、ノックアウトマウスが発癌前に死亡してしまうため、Thioacetamide(TAA)の投与量や投与期間を調節し、発癌の比較解析に至適な投与量・投与期間を検討した。今後、得られた試料を用いて、CARの発現、薬物トランスポーターの発現、薬物代謝酵素の発現を、mRNA、蛋白レベル、病理組織学的に比較検討する予定である。マウスの繁殖状況が思わしくなく、実験に必要なノックアウトマウス数の確保に難渋している。我々の施設で継代していたノックマウス以外に、共同研究施設より、繁殖用にノックアウトマウスを取り寄せ、新たに継代し、実験用マウス数を確保する予定である。実験用マウスの繁殖が計画通りに進まなかったため、若干、実験計画が遅延している。
泌尿生殖器悪性腫瘍における癌抑制遺伝子に関する研究

泌尿生殖器悪性腫瘍、特に移行上皮癌を中心に癌抑制遺伝子と接着分子の1つであるCD44の変異について検討を行った。[平成5年度]1.泌尿生殖器悪性腫瘍の手術標本から正常と癌組織を一部凍結保存し、一部からDNAを抽出保存した。2.組織標本で免疫組織染色を、DNAで遺伝子解析を施行した。[平成6年度]1.泌尿生殖器癌におけるヒトCD44バリアントの遺伝子解析(1)移行上皮癌、腎細胞癌患者において、-80°Cにて凍結保存した正常および癌組織の手術標本よりRNAを抽出し、それをRT-PCR法を用いcDNAに合成、southern blot法にてその多様性を解析した。(2)移行上皮癌8例中6例、腎細胞癌5例中5例にCD44の多様性が検出され、接着分子として移転、浸潤への関与と診断的意義が確認された。2.移行上皮癌におけるヒトCD44バリアントの免疫組織学的解析(1)移行上皮癌において、-80°Cにて凍結保存した正常および癌組織の手術標本を、CD44バリアント(V5,V6,V7,V10)モノクローナル抗体を用いて酵素抗体法で染色、その発現を検討した。(2)移行上皮癌においてCD44バリアント、特にV6は、基底膜近傍の細胞に強い発現を認めた。3.移行上皮癌におけるCD44バリアントの尿中細胞での検討(1-1)-80°Cにて冷凍保存しておいた移行上皮癌患者の尿中細胞を、CD44バリアント(V5,V6,V7,V10)モノクローナル抗体を用いて酵素抗体法で染色、その発現を検討した。(1-2)-80°Cにて冷凍保存しておいた移行上皮癌患者の尿中細胞より、APGC法でRNAを抽出し、RT-PCR法でcDNAに合成、southern blot法にてその多様性を解析した。(2)免疫組織化学的に移行上皮癌患者尿中細胞でCD44バリアントの蛋白発現が確認された。また、RT-PCR産物を用いたsouthern blot法でもmRNAレベルでCD44バリアントを確認した。泌尿生殖器悪性腫瘍、特に膀胱癌を中心に癌遺伝子、癌抑制遺伝子の遺伝子異常と臨床的分類とのあいだの関連の追及を目的として、初年度に以下の実験を施行した。1.泌尿生殖器悪性腫瘍における癌抑制遺伝子産物の組織化学的解析組織化学的解析のため以下のことを施行した。(1)遺伝子産物の同定のため、治療で得られる病理組織検体の中から癌組織を一部を凍結保存、収集した。(2)凍結組織から凍結薄切切片を作成し、これに対し現在p53,retinoblastomaなどの癌抑制遺伝子産物に対する特異抗体を用い免疫組織染色を施行した。(3)検体採取患者の臨床的背景との関連を含めた解析を今後予定している。2.癌抑制遺伝子の遺伝子解析泌尿生殖器悪性腫瘍における癌抑制遺伝子の変異、欠損の有無を検討するために以下のことを施行した。(1)治療で得られる病理組織検体よりDNAを抽出し、検体を集積中である。現在、膀胱癌25例を収集し、DNAを抽出し保存している。(2)遺伝子解析のためのprimerを設計し、これを作成した。(3)PCR法にて遺伝子増幅を行ないRFLP法により遺伝子異常の有無を検索した。

(4)変異の有無の検索のためPCR-SSCP法を今後施行の予定としている。泌尿生殖器悪性腫瘍、特に移行上皮癌を中心に癌抑制遺伝子と接着分子の1つであるCD44の変異について検討を行った。1.泌尿生殖器癌におけるヒトCD44バリアントの遺伝子解析(1)移行上皮癌、腎細胞癌患者において、-80°Cにて凍結保存した正常および癌組織の手術標本よりRNAを抽出し、それをRT-PCR法を用いcDNAに合成、southern blot法にてその多様性を解析した。(2)移行上皮癌8例中6例、腎細胞癌5例中5例にCD44の多様性が検出され、接着分子として転移、浸潤への関与と診断的意義が確認された。2.移行上皮癌におけるヒトCD44バリアントの免疫組織学的解析(1)移行上皮癌において、-80°Cにて凍結保存した正常および癌組織の手術標本を、CD44バリアント(V5,V6,V7,V10)モノクローナル抗体を用いて酵素抗体法で染色、その発現を検討した。(2)移行上皮癌においてCD44バリアント、特にV6は、基底膜近傍の細胞に強い発現を認めた。3.移行上皮癌におけるヒトCD44バリアントの尿中細胞での検討(1-1)-80°Cにて凍結保存しておいた移行上皮癌患者の尿中細胞を、CD44バリアント(V5,V6,V7,V10)モノクローナル抗体を用いて酵素抗体法で染色、その発現を検討した。(1-2)-80°Cにて凍結保存しておいた移行上皮癌患者の尿中細胞より、APGC法でRNAを抽出し、RT-PCR法でcDNAに合成、southern blot法にてその多様性を解析した。(2)免疫組織化学的に移行上皮癌患者尿中細胞でCD44バリアントの蛋白発現が確認された。また、RT-PCR産物を用いたsouthern blot法でもmRNAレベルでCD44バリアントを確認した。4.泌尿生殖器癌でおける癌抑制遺伝子の解析(1)現在解析施行中である。
数値解析による空調空間の局所領域の熱・空気流動解析とその動的最適制御

平成4年、5年度で検討された、負荷変動、空調制御(吹出風量、温度差の変動)、室内に設置された障害物などによる室内流れ場の変動の分析並びにこれによる局所領域の環境形成の構造の解析に基づき、局所領域の最適制御を可能とするシステムを導出した。さらに得られたシステムを実際の流れ場に適用し制御の有効性を確保した。簡便な局所領域を対象とする動的制御用のシステムは、流れの物理的構造を動的に反映する応答関数としてモデル化した。具体的にはシミュレーションで得られた気流、温度、汚染質の分布性状を局所領域で積分評価して作成した。積分に際しては特に制御対象とする局所領域の範囲に着目して検討を行った。実際の空調制御はこのように作成評価したシステムに関し、出力は環境センサーの出力とし、入力は環境制御の状態量としてこれらの時系列変動を採集しこれを更に統計的に処理して動的システムの最適化を計った。本研究は室内空間における局所領域の空調による環境調整の動的最適制御を行うシステムを高精度で固定する方法を開発することを目的としている。本年はOA空間、アトリウム空間等を対象として、精密な流れ場の模型実験と乱流シミュレーションを行い、負荷変動、空調制御(吹出風量温度差の変動)、室内に設置された障害物などによる室内の流れ場の変動を分析し、これにより局所領域の環境形成の構造を解析した。ここでは、選定したモデル室内の流れ場、温度場、汚染質拡散場に関し、空調制御(吹き出し風量、温度差の変動)など各種変動要因の影響を検討した。特に、環境制御の主柱を成す吹出し空気の室内での分配を示す換気効率とこれら変動要素の関連を詳細に解析し、各々の典型的な空調方式の各モデル室内の局所領域における環境制御特性を検討した。本研究は室内空間における局所領域の空調による環境調整の動的最適制御を行うシステムを高精度で同定することを目的としている。平成5年度は典型的な室内流れ場としてアトリウム・大空間などを選定し、これら流れ場を重点検討課題とし、負荷変動等が室内の流れ場、温度場、汚染質拡散場に与える影響を検討した。研究初年度の平成4年度と同じくシミュレーション結果より局所領域の最適制御を可能とする動的制御システムの作成評価及びその最適化手法を検討した。
In vivoでの網膜色素上皮保護蛋白の作用

有色家兎の網膜色素上皮細胞(RPE)を用いて、網膜色素上皮保護蛋白(RPP)の作成を施行した。形態学的にRPE培養細胞であることの確認後、crudeRPPの作成を施行し、以下の2実験を行なった。実験1有色家兎のエンドトキシン誘発ぶどう膜炎(EIU)におけるRPPの作用実験2有色家兎のオルニチン網膜症に対するRPPの作用実験1ではリポポリサッカライド(E.coli)を有色家兎の硝子体内に注入しEIUを惹起させ、同時にRPPを硝子体内に注入した。対照群には加熱非活性化したRPPを用いた。24時間後に眼球を摘出し、細胞数と蛋白濃度(前房内、硝子体内)及び虹彩と毛様体、脈絡膜、網膜に含まれる過酸化脂質(Conjugated diene)を測定した。細胞数は前房内、硝子体内とも対照群と有意差はなかった。蛋白濃度は硝子体内のみで有意差がみられ、RPP注入群1.11±0.10(mg/ml)、対照群1.59±0.26であった(P<0.005)。過酸化脂質は網膜のみで有意差がみられ、RPP注入群43.3±6.7(nmol/eye)、対照群49.6±5.6であった(P<0.05)。よってRPPはEIUモデルにおいて硝子体内の蛋白漏出を抑え、また網膜組織障害を軽減させる作用があると考えられた。実験2では0.25M/lまたは0.5M/lのl-ornithinehydrochlorideを硝子体中に注入し、同時に治療群にはcrudeRPPを、また対照群には熱非活性化したRPPを注入した。5日目に眼球摘出を行ない光顕、電顕により検討した。対照群は従来の報告と同様に、網膜色素上皮および網膜外層の組織障害が観察された。一方、治療群では極く軽度の網膜色素上皮の障害がみられた。作用機序は不明であるが、RPPにはオルニチンによる組織障害を軽減させる作用があると考えられた。有色家兎の網膜色素上皮絽胞(RPE)を用いて、網膜色素上皮保護蛋白(RPP)の作成を施行した。形態学的にRPF培養細胞であることの確認後、crude RPPの作成を施行し、以下の2実験を行なった。実験1有色家兎のエンドトキシン誘発ぶどう膜炎(EIU)におけるRPPの作用実験2有色家兎のオルニチン網膜症に対するRPPの作用実駄1ではリポポリサッカライド(E.coli)を有色家兎の硝子体内に注入しEIUを惹起させ、同時にRPPを硝子体内に注入した。

過酸化脂質は網膜のみで有意差がみられ、RPP注入群43.3±6.7(nmol/eye)、対照群49.6±5.6であった(P<0.05)。よってRPPはEIUモデルにおいて硝子体内の蛋白漏出を抑え、また網膜組織障害を軽減させる作用があると考えられた。実験2に関しては現在、病理学的検索中である。網膜色素上皮保護蛋白(RPP)のオルニチン網膜症に対する作用を病理組織学的に検討した。有色家兎を用いてRPPおよびオルニチン網膜症の作成を行なった。0.25M/lまたは0.5M/lのl-ornithine hydrochlorideを硝子体中に注入し、同時に治療群にはコンフルエントになった網膜色素上皮細胞培養上澄み液(RPP)を、また対照群には熱非活性化したRPPを注入した。5日目に眼球摘出を行ない光顕、電顕により検討した。対照群は従来の報告と同様に、網膜色素上皮および網膜外層の組織傷害が観察された。一方、治療群では極く軽度の網膜色素上皮の障害がみられた。作用機序は不明であるが、RPPにはオルニチンによる組織障害を軽減させる作用があると考えられた。
わが国のオフィス立地におけるオフィス供給の役割

本年度は,特に1990年代前期の東京中心地域における,賃貸オフィス市場の空間構造の変容プロセスと変容要因を,賃貸オフィスの空室リスクの発生様式と供給側のリスク管理行動に注目して考察し,都市空間構造の把握を試みた。わが国のオフィス市場は,制度的に主に供給側・需要側のサブ市場で構成され,その間での価値情報の交換が不十分である。この不整合性は空間的なリスクの展開にも反映されている。オフィス市場は情報の交換様式の違いによって大型ビルの上位市場と中小ビルの下位市場に分けられる。この基本構造の下でバブル時に双方の市場で大量建設が起こり,バブル崩壊以後も上位市場では大量供給が継続して供給過剰が生じた。上位市場は空室リスクを賃貸料の切り下げ,つまり価格変動リスクに変化させ回避したが,空室リスクの一部は需要企業の立地変化を通じて下位市場へ移転され,下位市場では空室増加の状態にある。この一連の動きは,上位市場と下位市場でのリスク環境の違いとリスクの展開を通じた相互作用の存在を表している。このように,リスク管理行動によって多層的な空間構造が形成されている。その背景には経済成長があり,バブル期までは多層的構造に基づく安定的なリスク管理が可能であった。しかし,上記の動向は経済成長を前提とした従来型リスク管理の有効性が失われ,リスク管理行動が限界となっていることを露呈している。リスク管理の硬直化の要因としては市場情報の流通不足があり,公的機関の主導によるオフィス市場の情報環境整備が対策として考えられる。概要は以上の通りであるが,具体的な作業としては,前年度からの中間報告として英文論文を作成し,主旨を人文地理学会経済・都市地理部会例会(1998年7月11日,兵庫県民会館)で発表した。現在,GISデータを用いてサブ市場間の相互関係についてさらに詳細な解析を行っており,論文としてまとめている段階である。本研究は,賃貸オフィス供給の企業立地に及ぼす影響と,その空間的範囲を明らかにすることを目的としている.本年度は,東京中心部における賃貸オフィス市場の空間構造について考察し,従来の都心を核とした都市空間構造の変容を,バブル期以降の変動に着目し言及する.まず,オフィス供給床面積はバブル期以降増加している.しかし,需要床面積も一時大幅に減少したものの,その後供給と同様に増加の傾向にある.特に,供給と同じペースで増加しており,昨今のビル不況は主として供給過剰に依るところが大きいといえるが,この傾向は都市空間のさらなる変容の契機となっている.バブル期にみられた賃貸料の地区間格差は供給過剰によって縮小しており,地区内の差も同様に縮小している.賃貸料の設定には竣工年よりも床面積規模が影響する.これはフロア面積を重視する結果であるが,賃貸料設定における柔軟性は竣工年の方に差があり,新規竣工のものほど賃貸料を状況に合わせて設定でき,競争力を有している.さらに,開発リスクの回避と差別化戦略によって,オフィス市場は地区間相互に影響しあい変動していることから,東京の賃貸オフィス市場における空間的分化の可能性を考察した.オフィス市場の多重的構造について詳細に分析するため,グローバリゼーションの指標となる外資系企業の立地とオフィス供給の関係に着目した.賃貸料低下や規制緩和,為替変動など外資系企業を取り巻く環境は変化しており立地移動も活発であるが,一方で非熟練サービス企業の集積による地域市場化も進行しており,オフィス市場は分化傾向にあると考えられる.以上,明らかとなった点については,すでに学会において中間発表を行った.同様に,大都市圏内の中核都市,および市場規模の小さな地方都市におけるオフィス市場の空間構造についても,調査を行っている.本年度は,特に1990年代前期の東京中心地域における,賃貸オフィス市場の空間構造の変容プロセスと変容要因を,賃貸オフィスの空室リスクの発生様式と供給側のリスク管理行動に注目して考察し,都市空間構造の把握を試みた。
軟骨由来成分の摂取による糖鎖合成因子の発現変動について

コラーゲン由来ペプチドが軟骨細胞の初期分化を促進して後期分化を抑制することにより、軟骨形成を促進する可能性を示した。また、II型コラーゲンペプチドとグルコサミンは関節リウマチに異なる作用を有しており、その併用により相乗効果がみられる可能性を示した。一方、I型コラーゲンペプチドの投与は一部の糖鎖合成遺伝子の発現を変化させたが、関節炎症状の改善作用を示さず、その構成アミノ酸の摂取もむしろ関節炎を悪化させた。このことから、II型コラーゲンペプチドの摂取はI型コラーゲンペプチドと異なり、軟骨形成の促進ではなく、主に経口免疫寛容などの機構により関節炎の発症を抑制するものと考えられる。本年度は、細胞外マトリックスの構成成分が癌細胞の増殖に与える影響を中心に検討した。大腸癌細胞であるDLD-1細胞の増殖に与える影響を、ヘパラン硫酸、コンドロイチン硫酸、フコイダンの3種類の硫酸化糖鎖について検討した結果、ヘパラン硫酸とコンドロイチン硫酸は低濃度では増殖を促進したが、フコイダンは低濃度から大きく細胞増殖を阻害し、癌細胞の接着と細胞遊走能の両方を阻害した。DLD-1細胞はWntシグナルの抑制因子であるAPCの変異を持つため、Wntシグナルが異常亢進している。したがって、硫酸化糖鎖がAPCの変異を持つ細胞でもWntシグナルを抑制できるかどうかを検討した。ウェスタンブロットによるβ-カテニン量の定量およびレポーターアッセイによる転写活性では、フコイダン添加の影響は認められなかった。フコイダンは細胞周期を停止させることにより細胞増殖を抑制するとともに、アポトーシス誘導により細胞死を増加させることを示した。癌細胞における細胞外マトリックス形成に関わる遺伝子の発現状態に関しては、リアルタイムPCRによる測定系を構築した。軟骨由来成分によるこれらの遺伝子の発現状態の変動に関して、現在培養細胞を用いて検討しているところである。軟骨モデル細胞であるATDC5細胞を用いて、コラーゲン由来のペプチドが軟骨細胞の初期分化に及ぼす影響を検討した。コラーゲン摂取後に血液中に存在する代表的なジペプチドであるプロリン-ヒドロキシプロリン(Pro-Hyp)とヒドロキシプロリン-グリシン(Hyp-Gly)が軟骨細胞への分化を促進するとともに、軟骨の構成成分である細胞外マトリックス成分の合成を増加させ、軟骨形成を促進する可能性を示した。細胞のコラーゲン量とグリコサミノグリカン量は、ともに1mMのPro-HypあるいはHyp-Glyの存在により有意に増加した。リアルタイムPCRを用いた遺伝子発現量の比較では、1mM Pro-Hyp及び1mM Hyp-Glyは軟骨特異的転写因子であるSox9の発現を増加させるとともに、II型コラーゲンa1タンパク質及びグリコサミノグリカン修飾タンパク質であるアグリカンの発現を増加させた。糖鎖合成因子に関して、その発現量に大きな変動は見られなかったが、コンドロイチンのグリコサミノグリカン伸長酵素であるChSy-1の発現は1mM Pro-Hypの存在により有意に増加した。さらに、コラーゲン誘導性関節炎モデルマウスを用いて、コラーゲンペプチド投与の有効性を検討した。無感作群、コントロール食群、アミノ酸投与群、コラーゲンペプチド投与群を比較したところ、コラーゲンを構成するアミノ酸あるいはコラーゲンの投与により関節炎の発症が促進された。軟骨における糖鎖合成因子の発現状態は、アミノ酸あるいはコラーゲンの投与による明確な影響は認められなかった。これらのことから、コラーゲンを構成するアミノ酸あるいはコラーゲンの投与は関節炎の軽減作用のみならず、場合によっては重症化させる可能性があることを明らかにした。27年度は軟骨細胞モデルであるATDC5細胞を用いた検討と、コラーゲン誘導性関節炎モデル動物を用いた検討の両方により、コラーゲンペプチドの関節炎に及ぼす影響を調べた。ただし、予期しない結果も得られたため、その有効性に関してはさらに検討を進める予定である。軟骨前駆細胞株としてATDC5細胞を用い、軟骨細胞への初期分化、後期分化への移行期、後期分化のそれぞれの段階において、コラーゲンペプチドの存在が軟骨分化に与える影響を、シリウスレッド染色を用いたコラーゲン量の測定と、アルシャンブルー染色によるプロテオグリカン量の測定、アリザリンレッド染色によるカルシウム沈着量の測定により評価した。また、分化マーカー遺伝子と、軟骨細胞基質および糖鎖合成関連遺伝子群の発現状態を、リアルタイムPCRを用いた定量的RT-PCR法により解析した。その結果、コラーゲン由来のジペプチドは初期軟骨分化から後期軟骨分化への移行を促進し、それにより軟骨形成を促進する可能性が示された。また、前年度の研究でコラーゲン誘導性関節炎モデルマウスではI型コラーゲンペプチドあるいはそれを構成するアミノ酸の投与により逆に関節炎が悪化する現象がみられたことから、関節リウマチモデルであるSKGマウスを用いてコラーゲンペプチドの摂取がリウマチ関節炎に及ぼす影響について検討した。その結果、リウマチ関節炎発症動物においては、軟骨の分化・成熟が抑制され、軟骨の分解と炎症が亢進していたが、コラーゲンペプチド投与の明確な効果は認められなかった。ただし、今回投与したコラーゲンペプチドはニワトリ足I型コラーゲン由来であり、コラーゲンペプチドの投与は軟骨形成促進よりも炎症軽減作用の方で効果が大きい可能性が示唆されたことから、今後は軟骨構成成分であるII型コラーゲン由来ペプチドを用いてその効果について検討する必要があると考えられる。軟骨前駆細胞株であるATDC細胞を用いて、コラーゲン由来ジペプチドによる軟骨細胞への分化促進効果について検討することにより、コラーゲン由来のジペプチドが軟骨細胞の初期分化を促進するとともに、初期軟骨分化から後期軟骨分化への移行を促進することにより軟骨形成を促進する可能性を示した。

さらに、関節炎モデル動物として、コラーゲン誘導性関節炎マウスと、関節リウマチ自然発症動物であるSKGマウスを用いて、コラーゲンペプチドの摂取が関節炎に及ぼす影響について検討した。これらの検討により、細胞と個体レベルの両方を用いてコラーゲンペプチドの効果を検討している。ただし、コラーゲンペプチド摂取による効果については明確ではなく、コラーゲン誘導性関節炎マウスではコラーゲンペプチドあるいはそれを構成するアミノ酸の摂取により関節炎を悪化させる可能性も示されたことから、その有効性についてはさらに詳細に検討する必要がある。本年度は軟骨構成成分の有効性を明確にするために、軟骨構成成分であるII型コラーゲン由来ペプチドとグルコサミンを関節リウマチ自然発症モデルであるSKGマウスに投与することにより、リウマチ関節炎の発症に及ぼす影響と相互作用を比較検討した。関節炎スコアによる関節炎症状の評価では、II型コラーゲンペプチドの摂取は関節炎症状の軽減効果を示したのに対し、グルコサミン単独の摂取では寧ろ悪化傾向がみられた。一方、両者の併用ではII型コラーゲンペプチド単独より関節炎の抑制効果が高く、相乗効果を持つことが示唆された。また、グルコサミンの摂取は骨形成を抑制し、骨強度を低下させる可能性が示されたが、これに関してもII型コラーゲンペプチドとの併用により改善されることが示された。SKGマウスにおけるグルコサミンの作用には、軟骨分化能の低下や骨破壊の促進、骨形成の低下などがみられたが、一方で軟骨を破壊するマトリックス分解酵素を抑制し、組織膨潤化と軟部組織の増加を抑制したことから、関節炎症状進行に対して、二面性を持つものと考えられる。SKGマウスにおけるリウマチ関節炎の発症には、インターロイキン-6やインターロイキン-17などの炎症性サイトカインが関与しているが、II型コラーゲンペプチドの摂取はこれらを抑制することにより関節炎を軽減したのに対し、グルコサミンはその抑制効果を持たないものの、軟骨基質の破壊を抑制する可能性が示された。これらの結果から、関節リウマチを発症したSKGマウスでは関節の炎症と軟骨分解が亢進するが、軟骨由来成分であるII型コラーゲンペプチドの投与によりその症状が軽減される可能性が示された。一方、グルコサミン単独の投与では有効性が乏しいものの、コラーゲンペプチドの作用を増強することによる相乗効果が期待できることが示された。コラーゲン由来ペプチドが軟骨細胞の初期分化を促進して後期分化を抑制することにより、軟骨形成を促進する可能性を示した。また、II型コラーゲンペプチドとグルコサミンは関節リウマチに異なる作用を有しており、その併用により相乗効果がみられる可能性を示した。一方、I型コラーゲンペプチドの投与は一部の糖鎖合成遺伝子の発現を変化させたが、関節炎症状の改善作用を示さず、その構成アミノ酸の摂取もむしろ関節炎を悪化させた。
細胞のDNA修復能の差にもとづく放射線誘発突然変異の質的変化

DNA修復能の異なる細胞間、およびin vitroとin vivoでの放射線誘発突然変異の頻度と種類の違いを調べることを目的とした。シャトルベクタープラスミドを用いて、マウス細胞とヒト細胞における紫外線によって起こる点突然変異の種類と頻度を比較した。DNA修復機構を欠損するA群色素性乾皮症(XP)患者細胞におけるG:C→A:Tトランジションの頻度はヒト正常細胞およびマウス細胞より有意に高かった。マウス細胞におけるこれらの値はXP-A細胞とは有意に異なり、ヒト正常細胞での値に近かった。この結果、マウス細胞はヒト正常細胞と比べてDNA修復能が低いにもかかわらず、紫外線誘発突然変異の種類と頻度は、修復を欠損するXP-A細胞よりもヒト正常細胞のそれに近いことがわかった。XP患者の皮膚腫瘍のp53遺伝子の突然変異をPCR-SSCPで調べたところ、約半数に突然変異が生じていた。主たる変異は5′-TC、5′-CC部位での3′側のC→Tトランジションであった。この結果はin vitroで見られるUV誘発突然変異の型と一致しており、XP患者の皮膚腫瘍のp53遺伝子の変異は太陽光UVで誘発されたと考えることができる。Ha-ras、Ki-ras、N-ras遺伝子の変異は調べた限りでは見いだせなかった。正常Ha-ras配列を持つプラスミドに紫外線照射してBALB3T3細胞にトランスフェクトし、トランスフォーメーションを指標にしてras遺伝子の突然変異を検出・同定すると、最も多い変異は12、13番コドンの5′-TC,5′-CC部位でのC→Tトランジションであった。この結果はin vitroで見られるUV誘発変異の型と一致した。シャトルベクターを用いて、マウス細胞とヒト細胞におけるに紫外線によって起こる点突然変異の種類と頻度を比較することを目的とした。pYZ289(7.6Kb)とpZ189(5.5Kb)は共にsupF遺伝子、pBR322複製点、アンピシリン低抗性遺伝子を持つ。pYZ289はポリオーマウィルスのT遺伝子と複製点を持ちマウス細胞と大腸菌で複製が可能であり、pZ189はSV40のT遺伝子と複製点を持ちヒト細胞と大腸菌で複製が可能なシャトルベクターである。マウスHL18細胞から回収した紫外線照射pYZ289の生存率は、ヒトの除去修復能を欠くXP-A細胞から回収したpZ189の生存率より有意に高く、ヒト正常細胞と同程度であった。紫外線誘発突然変異率は、XP-A細胞から回収したpZ189の変異率よりも有意に低く、ヒト正常細胞同程度であった。約60個のUV誘発突然変異体のうち、トランジション変異が54%、トランスバージョンが46%であった。全塩基置換のうち49%がG:C→A:Tの変化であり最も多かった。G:C塩基対での突然変異は全塩基置換のうちの70%であった。以前に我々はXP-A細胞におけるG:C→A:Tトランジションの頻度がヒト正常細胞より有意に高いことを報告しており、マウス細胞におけるこれらの値はXP-A細胞とは有意に異なり、ヒト正常細胞での値に近かった。以上の結果、マウス細胞はヒト正常細胞と比ベてDNA修復能が低いにもかかわらず、紫外線誘発突然変異の種類と頻度は、修復を欠損するXP-A細胞よりもヒト正常細胞のそれに近いことがわかった。14個の変異のうち13は塩基置換変異であった,そのうち10個は5'-TC、5'-CC部位での変異で、6個は3'側のCが変異しており、4個は両方の塩基が変異していた。7個がC→Tトランスバージョンであった。

この結果はin vitroで見られるUV誘発突然変異の型と一致しており、XP患者の皮膚腫瘍のp53遺伝子の変異は太陽光UVで誘発されたと考えることができる。Ha-ras、Ki-ras、N-ras遺伝子の変異は調べた限りでは見いだせなかった。マウス正常Ha-ras配列を持つプラスミドに紫外線照射してBALB3T3細胞にトランスフェクトし、トランスフォーメーションを指標にしてras遺伝子の突然変異を検出・同定し、紫外線損傷の部位・種類との関係を調べた。17個のフォーカスより得たHa-rasのうち、10個は1つの変異を12、13、61番コドンに、3個は2つの変異を異なったコドンに、4個は2つの変異を60番コドンの隣接塩基に持っていた。計24個の塩基置換のうち、23個は隣接ピリミジンの片方または両方の塩基が変異し、22個はシトシンの変異であった。最も多い変異はシトシンからチミンへのトランジションで(17/24,71%)、それらはすべて5'-TC,5'-CC部位の3'-シトシンで起こっていた。コドン61の5'-TT部位では2個の変異しか生じていなかった。この結果はin vitroで見られるUV誘発変異の型と一致し、紫外線はマウスHa-ras遺伝子を活性化する塩基置換突然変異を、主に12,13,60番コドンに引き起こし、その原因は主に6-4光生成物であることが示唆された。
高齢期におけるストレス脆弱性の神経基盤とその性差の解明

高齢期にはストレスに対する脆弱性が高くなる。しかし高齢期のストレス応答の神経基盤については未だ不明な点が多い。本研究では、高齢期の脳内ストレス応答について明らかにするため、脳内ストレス関連因子発現に及ぼす加齢の影響について、若齢および老齢ラットを用いて検討した。その結果、若齢ラットと比較して、ストレス負荷によるセロトニン等のストレス関連因子の発現誘導が高齢ラットで変化すること、その変化にはエストロゲン受容体βが関与することが示された。さらに、高齢期のストレス負荷後のセロトニンの発現には性差があることが明らかとなった。ストレス関連疾患であるうつ病は認知症とならび、老年期精神疾患を代表するものである。しかし、高齢期のストレスに関する研究の多くは社会・心理的もしくは臨床的観点からのアプローチであり、その神経基盤については未だ不明な点が多い。エストロゲンは生殖機能だけではなく、ストレス応答の調節などにおいて重要な役割を果たす。我々はこれまでに、老齢ラットを用いて脳内エストロゲン受容体(ER)-βmRNAの発現を解析した一連の研究から、加齢によってER-β発現量が部位特異的に減少すること、また、その加齢の影響には性差があることを明らかにしてきた。そこで本研究では、高齢期のストレス応答におけるエストロゲンの役割に注目し、加齢がER-βおよび脳内ストレス関連因子に及ぼす影響およびその性差について明らかにすることを目的とした。本年度は、雌雄のラットを用いて以下の実験群を作製した:(G3)若齢期無処置・老齢期無処置群(雄)、(G4)若齢期無処置・老齢期ストレス群(雄)、(G5)若齢期無処置・老齢期ストレス+ER-β遮断薬投与群(雄)、(G6)若齢期ストレス・老齢期ストレス群(雄)、(G7)若齢期無処置・老齢期無処置群(雌)、(G8)若齢期無処置・老齢期ストレス群(雌)。なお、(G1)若齢期無処置群(雄)、(G2)若齢期ストレス群(雄)については前年度に組織採取を終えている。(G3)(G8)の各群については、老齢期(20か月齢)まで通常飼育を行った後、該当月齢に達した時点で、拘束ストレス(1時間/日)を連続して5日間負荷し、最終日のストレス負荷直後に麻酔下で採血および灌流固定を行い、脳を摘出した。(G3)(G8)の群から採取した脳組織を用いて、凍結切片の作製を行った。本年度は、雌雄のラットを用いて以下の実験群を作製した:(1)若齢期無処置群(雄)、(2)若齢期ストレス群(雄)、(3)若齢期無処置・老齢期無処置群(雄)、(4)若齢期無処置・老齢期ストレス群(雄・雌)、(5)若齢期ストレス・老齢期ストレス群(雄)。(1)および(2)の群については、若齢期(8週齢)に拘束ストレス(1時間/日)を連続して6日間負荷し、最終日のストレス負荷直後に麻酔下で採血および灌流固定を行い、脳を摘出した。(3)および(4)の群については、若齢期は無処置のまま、老齢期(20か月齢)まで通常飼育を行っている。(5)の群については、若齢期(8週齢)に拘束ストレス(1時間/日)を連続して14日間負荷した後、老齢期(20ヵ月齢)までの通常飼育に戻した。(1)および(2)の群から採取した脳組織を用いて凍結切片を作製し、ストレス関連因子(CRF、オキシトシン、トリプトファン水酸化酵素)に対する免疫組織化学染色を行った。

エストロゲンは生殖機能だけではなく、ストレス応答の調節などにおいて重要な役割を果たす。我々はこれまでに、老齢ラットを用いて脳内エストロゲン受容体(ER)-βmRNAの発現を解析した一連の研究から、加齢によってER-β発現量が部位特異的に減少すること、また、その加齢の影響には性差があることを明らかにしてきた。そこで本研究では、高齢期のストレス応答におけるエストロゲンの役割に注目し、加齢がER-βおよび脳内ストレス関連因子に及ぼす影響およびその性差について明らかにすることを目的とした。最終年度は、前年度までに作製した実験群[(G1)若齢期無処置群(雄)、(G2)若齢期ストレス群(雄)、(G3)若齢期無処置・老齢期無処置群(雄)、(G4)若齢期無処置・老齢期ストレス群(雄)、(G5)若齢期無処置・老齢期ストレス+ER-β遮断薬投与群(雄)、(G6)若齢期ストレス・老齢期ストレス群(雄)、(G7)若齢期無処置・老齢期無処置群(雌)、(G8)若齢期無処置・老齢期ストレス群(雌)]のラット脳サンプルを用いてセロトニンやオキシトシン等のストレス関連因子に対する免疫組織化学染色を行った。縫線核セロトニンの発現解析は終了しており、すでに第88回日本薬理学会年会において成果発表を行っている。研究期間全体を通じての本研究の成果から、高齢期の脳内ストレス応答は若齢期のそれとは異なること、また加齢による影響は脳部位特異的であることが明らかとなった。神経解剖学平成25年度は、当初の計画通りに全ての実験群を作製し、脳組織の採取を終えた。若齢群に関しては、計画通り組織実験が終了しており、今後老齢群と合わせて解析を行う。また、老齢群に関しては、切片作製まで終えており、次年度に組織実験を行う。採取した血液サンプルを用いたELISAのみ進捗が遅れているが(次年度に実施予定)、それ以外は当初計画に沿って遂行した。平成24年度は、当初の計画通りに全ての実験群を作製した。若齢群に関しては、ストレス負荷実験および組織採取を終えて、現在組織実験を行っており、概ね当初計画に沿って遂行した。平成26年度は、当初の計画通り、まず老齢期の各群から採取した脳組織の切片を用いて、ストレス関連因子(CRF、オキシトシン、トリプトファン水酸化酵素)に対する免疫組織化学染色を行う。その後、若齢群および老齢群のすべての発現解析をおこなう。最終的には、全脳での組織解析を目指すが、研究期間内に一定の成果を得るため、特に注目している視床下部、扁桃体、青斑核、縫線核を中心に発現解析を進める。平成26年度後半は、前年度に行うことができなかった血中濃度測定を行う。若齢群および高齢群から採取した血液サンプルを用いて、ELISA法によりエストロゲン、コルチコステロンおよびACTHの濃度を測定する。測定には市販のELISAキットを用いる。高齢期のストレス応答におけるエストロゲンの役割と加齢がER-βおよび脳内ストレス関連因子に及ぼす影響について明らかにするため、前年度に作製した実験群を引き続き飼育し、老齢期にストレス負荷実験を行う。我々が以前に加齢ラットを用いて行った一連の実験において、22ヵ月齢頃より死亡率が急激に高くなったことを踏まえて、本研究では老齢期のストレス負荷を、20ヵ月齢で行う予定である。購入時期から算定して、平成25年度後半に実験群が順次20ヵ月齢に達する。
セラミックスと鋼の接合界面における初析フェライトの核生成

オーステナイト粒内に介在物を意図的に分散させ、変態核発生サイトとして利用し、溶接熱影響部や非調質高張力用鋼の組織や材質を改善する試みが行われている。そこで、核生成がどのような要因によって支配され、どのような介在物が最も有効に核生成サイトとして働くかを解明する目的で、介在物セラミックスと鋼を高温のオーステナイト域で拡散接合し、Ae_3以下の温度で等温保持して、界面におけるフェライトの核生成挙動を観察した。4種類のセラミックス(Ti0_2,Al_2O_<3'>,MnS及びVN)について実験を行ったが、TiO_2とMnSについては接合が不完全、もしくは界面の融解が見られた。Al_2O_3とVNについては界面と母相オーステナイト粒界におけるフェライト粒子数を比較し、VNと接合界面における核生成速度が促進されていることが確認できた。Al_2O_3D2においても核生成は促進されていると見られるが、その度合いは大きくない。SEM-EDXによる界面付近の組成分析を行ったが、界面反応や溶質原子の拡散はあまり起こっていなかった。フェライト生成の熱力学的駆動力や熱膨張係数の違いによる歪エネルギー、介在物とオーステナイト及びフェライトとの界面エネルギーを計算して、古典核生成理論により、核生成の支配因子を検討した結果、界面エネルギーが有力との結論を得た。しかし、界面エネルギーは簡単な転位モデルを用いており、理論値の信頼性は高くはなく、界面構造の直接観察等が必要であろう。その他、セラミックスの物性データの不備、核生成理論の臨界核モデルの改良、微量添加元素の影響など、今後に多くの検討課題が残されている。接合条件多結晶セラミックス(焼結体)とFe-2%Mn-0.1%C合金を加工フォーマスターにより、軽い圧縮応力をかけながら、10001250°Cで加熱し、接合状況を調べた。圧縮応力が8kg/mm^2は常温に冷却後、界面が剥離しているものがあったが、15kg/mm^2では剥離はみられなかった。1000°C付近では負荷時の歪みが除去されないので、接合は1200°C以上が適当である。界面の反応性接合界面近傍のSEM-EDX分析を行い、セラミックスの反応や成分原子の拡散状況を調べた。反応性は予想していたよりは低く、鉄側への成分原子の拡散はあまり起こっていなかった。フェライト生成挙動VNやMnSでは接合界面で母相内部の粒界より、生成するフェライトの粒子数が多いことが観察された。用いたセラミックスは焼結体であり、気孔を含んでいる。よって、試料表面における生成状況と比較の結果、やはり、核生成の促進効果が認められる。今後の方針多結晶試料については変態条件を変えて、データを補足する。また、焼結体の気孔の影響をより詳細に検討したい。結晶成長により育成した単結晶セラミックス(アルミナなど)を用いて、接合方位を変え、フェライトの生成挙動や生成したフェライトの方位分布等を測定し、界面の整合性の影響の有無を検討したい。フェライト粒子数密度(核生成速度)の検討前年度、TiO_2、A1_2O_3、MnS、及びVNについて接合条件と界面の反応性を調べ、一部フェライト粒子数密度の測定に着手している。TiO_2については接合界面の剥離が起こり、MnSについてはFe及びSの拡散により、界面付近で融解現象が見られた。A1_2O_3とVNについては界面、オーステナイト粒界、及び試料表面についてSchwartz-Saltykov法を用いて、フェライト粒子数密度を測定した。その結果、界面においては母相粒界より、フェライト生成が促進されており、その度合いはVNの方がA1_2O_3よりも大きいと判断される。測定結果の解析

フェライト変態の駆動力(線膨張係数の違いによる介在物周辺の歪エネルギー)、セラミックス/鉄合金の界面エネルギーを理論的に推定し、核生成促進の要因を検討した。歪エネルギーが大きいほど、核生成は促進されると考えられるが、母相オーステナイトの降伏、高温における回復、再結晶を考慮すると、介在物間で余り差を生じないと見られる。セラミックスとオーステナイトの界面エネルギーが大きく、フェライトとの界面エネルギーが小さいほど、核生成は促進されると考えられるが、実験結果はこれと定性的に合致する。今後、さらに他種類のセラミックスと、単結晶を使用して、界面の整合性の影響を調べる予定である。
原発性ネフローゼ症候群にみられる糸球体肥大の成因について-サイトカインの関与-

近年実験的動物モデルでの検討から、糸球体障害の進展機序の1つとして、糸球体肥大(glomerular hypertrophy)の果たす役割が注目されている。そこで今回、巣状糸球体硬化症(以下FGS)にみられる糸球体肥大の成因を解明するため、とくに糸球体硬化に中心的役割を果たしていると考えられているメサンギウム細胞に注目し、FGS症例、微小変化群(以下MCNS)症例および健常者の末梢血リンパ球の培養上清を用いて、これらが培養メサンギウム細胞の細胞外基質産生能に与える影響について解析を試みた。当科において経験した原発性ネフローゼ症候群症例のうち、腎生検にてFGS、MCNSと診断された症例および健常者、各数名の末梢血を採取、Ficoll-Conray法によりリンパ球を分離し、PHA2-5mug/mlの刺激下に、10%FCS加RPMI1640液10ml当たり10^7個の割合で7日間培養した。以上により得られたリンパ球の培養上清を、1%、3%、5%の割合で培養ラットメサンギウム細胞に添加し、メサンギウム細胞の細胞外基質代謝を中心に観察した。細胞外基質代謝は、laminin、typeIV collagen、fibronection、heparan sulfate proteoglycanなど、各種細胞外基質成分およびその代謝にかかわるmetalloproteinase、およびそのインヒビターであるtissue inhibitorofmetalloproteinaseのmRNAレベルをNorthernblot法にて解析している。添加する培養上清の培地に対する濃度の決定や上清添加による細胞のviability等の問題もあり、現在実験を積み重ねて更に検討中である。また、メサンギウム細胞に何らかの影響を与える因子として、リンパ球培養上清中のIL-1、IL-2、IL-6、TNF-alphaにつき測定中である。