hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ライプニッツによる批判を背景にしたスピノザ哲学の体系的研究

多くの批判を呼び寄せること。4,19世紀におけるFoucher de Careil, Steinから、Friedman, Deleuze, Belavalを経て、現在に至るまでの、当該主題に関する研究史を総括し、よりバランスのとれた研究の必要性を自覚するに至った。5,『エチカ』全体の議論構成と基礎概念に関するスピノザ哲学の体系的研究も進め、とりわけ、『エチカ』第五部後半における永遠性の享受と論証の関係性とその意義、個体的本質の議論の意義、『エチカ』全体における備考の役割に関して、独自の視点を獲得するに至った。平成17年度における研究を受け、18年度は次の研究を進めた。1,ライプニッツによるスピノザ関係文書のうち、平成17年度において翻訳を終えることの出来なかった一連の文書の翻訳・検討を進め、基礎的作業の完成へ向けて努力した。とりわけ『エチカ』関係文書の翻訳・検討を進めることが出来た。2,ライプニッツによるスピノザ批判に対する、あり得べきスピノザの反論を検討した。具体的には、(1)神の存在論的証明、実体概念、属性概念を初めとする形而上学的基礎概念に関する批判、(2)実体概念批判と密接に関係する個体の活動性に関する批判、(3)神概念と密接に関連する自由・必然性・可能性概念に関する批判、(4)1676年から1685年においてのみ用いられるスピノザ的な<十全な観念(idea adequata)>に関する批判、を取り上げ、ライプニッツによる批判を、スピノザ固有の論理を浮かび上がらせるための参照軸として受けとめた上で、検討を進めた。とりわけ、(3)の主題に関しては、分析的形而上学における議論との突き合わせも行い、一定の見通しを得た。3,スピノザ-ライプニッツ間の体系的な比較研究を次の四つのテーマにおいて進めた。(1)神概念の肯定性:無限な属性によって構成される絶対的に無限な存在(スピノザ)、定義によって事象的に構成される存在(ライプニッツ)、(2)「精神的自動機械」の主題系、(3)個体の自発性:様態における個体(スピノザ)、モナドとしての個体(ライプニッツ)、(4)第ニスコラの一連の概念に対するリアクション。(4)の主題に関しては、残念ながら主題的な検討を本格的に進めることが出来なかったが、他の主題に関しては、最近の研究書の検討も含めて研究を進め、一定の見通しを得た。本研究の最終年度にあたる本年度は、研究の締めくくりとして、研究公刊を目指しながら、過去二年間における研究を受け継ぎ、研究成果の総合を行うべく努めた。1/ライプニッツによるスピノザ関係文書の、テクストの確定、編年的な整理、主題的な整理を終え、ライプニッツによる『エチカ』注解とカバラとの比較文書等の主立ったテクストの翻訳を完成させ、基礎的作業に関してはほぼ当初の計画を終えることができた。2/これまで進めてきた、ライプニッツによるスピノザ批判の意義の検討、あり得べきスピノザの反論の検討を通して得られた成果を総合しつつ、近世スコラとの関係、および、デカルト哲学への二人の哲学者の反応に留意しながち、力の哲学としてのスピノザ哲学とライプニッツ哲学の体系的な比較研究の定礎を行った。その過程で、スピノザにおける力能概念がその量的把握を可能にするような独自性をもって導入されたこと、スピノザの原因概念が形相因と作用因との統合の意味を有すること、以上二点がスピノザ解釈に関する新たな論点として浮上し、これに関するライプニッツの議論との突き合わせの必要が強く自覚された。
積雪寒冷地での凍死の法医病態学的研究と診断確立

検屍における凍死事例152例、解剖における凍死事例69例の合計221例について法医病態学研究と診断確立のため以下の研究を行った。1)左右心臓血の色調差総事例数221例中左右心臓血の採取が行われたのは128例であった。その内訳は検屍152例中63例、解剖事例69例中65例である。●色調差がみれらたのは検屍例48/63(76.2%)解剖例62/65(95.4%)であった。2)第1度凍傷(紅斑)175例中84例(男性43例、女性41例)で認められ全体の48%であった。3)胃・十二指腸粘膜下出血(Wischnewski斑)解剖例69例中34例(男性16例、女性18例)、49.3%に認められた。矛盾脱衣は221例中男性33例、女性12例の計45例で認められ、全体の20.4%であった。5)アルコールの関与アルコール濃度測定は検屍例120例中42例で測定が行われ20例で検出された。解剖例50例中38例で測定され19例に検出された。合計170例中39例の22.9%に検出された。6)薬毒物の関与凍死例170例中21例(検屍例4例、解剖例17例)に検出を試み7例に検出された。検出された薬物は、レボメプロマジン(精神神経剤)、フルラゼパム、ブロムワレリル尿素、ブロチゾラム、三環系抗うつ薬であった。7)各臓器の細胞内熱ショック蛋白(ubiquitin蛋白)の動態について剖検例20例について肝臓、腎臓、肺、心臓、膵臓、脾臓、大脳、小脳の各臓器についてubiquitin蛋白の存在を調べたところ、肝臓の胆管上皮、腎臓の尿細管に多くの出現をみた。検屍における凍死事例117例、解剖における凍死事例60例の合計177例について法医病態学研究と診断確立のため以下の研究を行った。1)左右心臓血の色調差総事例数177例中左右心臓血の採取が行われたのは90例であった。その内訳は検屍117例中38例、解剖事例60例中52例である。●色調差がみれらたのは検屍例32/38(84.2%)、解剖例50/52(96.2%)であった。2)第1度凍傷(紅斑)141例中67例(男性35例、女性32例)で認められ全体の47.5%であった。3)胃・十二指腸粘膜下出血(Wischnewski斑)解剖例60例中23例(男性10例、女性13例)、38.3%に認められた。4)矛盾脱衣(Paradoxical undressing)矛盾脱衣は177例中男性28例、女性9例の計37例で認められ、全体の20.9%であった。5)アルコールの関与アルコール濃度測定は検屍例99例中38例で測定が行われ17例で検出された。

解剖例42例中34例で測定され16例に検出された。合計141例中33例の23.4%に検出された。6)薬毒物の関与凍死例141例中14例(検屍例4例、解剖例10例)に検出を試み6例に検出された。検出された薬物は、レボメプロマジン(精神神経剤)、フルラゼパム、ブロムワレリル尿素、ブロチゾラム、三環系抗うつ薬であった。各臓器の細胞内熱ショック蛋白(ubiguitin蛋白)の動態、体温低下と意識障害の関係をブレインマイクロダイアリシス法にてグルタメートを指標にしての検討は平成14年、15年度に行う予定である。検屍における凍死事例138例、解剖における凍死事例68例の合計206例について法医病態学研究と診断確立のため以下の研究を行った。1)左右心臓血の色調差総事例数206例中左右心臓血の採取が行われたのは115例であった。その内訳は検屍138例中54例、解剖事例68例中61例である。●色調差がみれらたのは検屍例46/54(85.2%)、解剖例58/61(95.1%)であった。2)第1度凍傷(紅斑) 170例中79例(男性40例、女性39例)で認められ全体の46.5%であった。3)胃・十二指腸粘膜下出血(Wischnewski斑)解剖例68例中31例(男性14例、女性17例)、45.6%に認められた。5)アルコールの関与アルコール濃度測定は検屍例120例中42例で測定が行われ20例で検出された。解剖例50例中38例で測定され19例に検出された。合計170例中39例の22.9%に検出された。6)薬毒物の関与凍死例170例中21例(検屍例4例、解剖例17例)に検出を試み7例に検出された。各臓器の細胞内熱ショック蛋白(ubiguitin蛋白)の動態、体温低下と意識障害の関係をブレインマイクロダイアリシス法にてグルタメートを指標にしての検討は平成15年度に行う予定である。検屍における凍死事例152例、解剖における凍死事例69例の合計221例について法医病態学研究と診断確立のため以下の研究を行った。1)左右心臓血の色調差総事例数221例中左右心臓血の採取が行われたのは128例であった。その内訳は検屍152例中63例、解剖事例69例中65例である。●色調差がみれらたのは検屍例48/63(76.2%)、解剖例62/65(95.4%)であった。2)第1度凍傷(紅斑)175例中84例(男性43例、女性41例)で認められ全体の48%であった。3)胃・十二指腸粘膜下出血(Wischnewski斑)解剖例69例中34例(男性16例、女性18例)、49.3%に認められた。7)各臓器の細胞内熱ショック蛋白(ubiquitin蛋白)の動態について剖検例20例について肝臓、腎臓、肺、心臓、膵臓、脾臓、大脳、小脳の各臓器についてubiquitin蛋白の存在を調べたところ、肝臓の胆管上皮、腎臓の尿細管に多くの出現をみた。
圧電セラミックスを用いた携帯機器用・超小形コイルレス電源に関する研究

本研究は、巻線を用いないセラミックス製の圧電トランスにより超小型のACアダプタ、及びDC-DCコンバータの実現を目指して、構造設計、材料評価、試作実験、性能評価、駆動回路、整流回路について検討を行ってきた。各項目について得られた詳細について以下に記す。【1】パワー密度の観点からの小形化の検討、最適構造の選定高次振動モードを使用するとパワー密度を格段に大きくでき、圧電トランスを著しく小形にできることを見出した。この結果から振動モードとして、二次ラジアル振動ならびに五次幅縦振動が最適な構造であるとの結論を得た。【2】材料の大振幅励振特性を考慮に入れた構造設計法の確立圧電セラミックスは大振幅励振状態では材料定数が劣化する。この特性を考慮に入れた圧電トランスの一般的な設計方法の確立を行った。【3】二次共振ラジアル振動利用の圧電トランス有限要素法ならびに主要設備であるレーザー微小変位計により、振動パターンや不要振動の分析を詳しく行い、構造設計を行った。また、積層化に伴う諸問題を解明し、最適な積層構造の確立を行った。試作実験の結果95%程度の格段に高い効率が得られた。【4】五次共振幅縦振動を利用する圧電トランスより高電力密度化がはかられる構造であるが、不要振動の抑圧が課題であった。モード解析と変位分布の計測により不要振動の影響のない構造を明らかにし、試作実験の結果、90%の高効率が得られた。【5】圧電材料の損失の分離・測定、効率評価への適用圧電材料のハイパワー特性評価装置の高精度、高機能化をはかり、大電力使用状況下での圧電材料の損失の分離測定を可能とした。圧電トランスの効率計算への適用を行って、実験で得られた効率の特性を良く説明できることが示された。【6】安定で効率の良い圧電トランスの駆動回路、整流回路の検討安定で効率の良い整流回路の実現を目指して、共振周波数に自動追尾して発振する駆動回路ならびに整流回路を構成し、特性を調べた。最適な駆動、整流回路の検討を行った。本研究は、巻線を用いないセラミックス製の圧電トランスにより超小型のACアダプタ、およびDC-DCコンバータの実用化を目指して、次の項目について明らかにするものである。すなわち、(1)電源に適した圧電材料の開発・評価・選定、(2)圧電トランスの最適設計手法の確立、(3)小形で高効率、耐衝撃性に優れた形状ならびに利用振動モードの決定。初年度である平成12年度は、研究目的を達成するために、以下の研究を行った。(1)新しい優れた圧電材料開発のための圧電材料の特性測定・評価方法の確立新しく圧電材料の損失の分離測定システムを開発し、2種類の材料について測定を行った。損失の種類の分析と測定は、圧電トランスの厳密設計に不可欠であるとともに、圧電トランスに適した材料の開発になくてはならないものである。本研究では、損失の分離測定の基礎的検討を行った。(2)圧電トランスの新しい構造の提案と構造評価種々構成の圧電トランスを提案し、設計を行った。設計結果について、寸法比較などの評価を行った。

すなわち、(a)幅縦振動利用の構成、(b)新たに考案したラジアル振動の高次モード共振を利用する構成について設計して評価した結果、現状の圧電トランスに比べ格段に小形化できる構成が明らかとなった。(3)振動解析・実験有限要素法解析により詳しく振動分布解析を行い、【主要設備】であるレーザー振動計により3次元的な振動分布の測定を行った。これにより、幅縦振動利用圧電トランスや高次モードラジアル振動利用圧電トランスなど性能の良い圧電トランスの振動分布や不要振動特性などが明らかとなった。(4)電源研究を行っている大学研究室や材料開発メーカーとの情報交換、討論などを精力的に行い研究手段方法の検討を行った。以上の成果の内の一部について発表した論文ならびに講演資料を、研究発表リストに記載している。本研究は、巻線を用いないセラミックス製の圧電トランスにより超小型のACアダプタ、及びDC-DCコンバータの実用化を目指して、次の項目について明らかにするものである。すなわち、(1)電源に適した圧電材料の開発・評価・選定、(2)圧電トランスの最適設計手法の確立、(3)小形で高効率、耐衝撃性に優れた形状ならびに利用振動モードの決定、(4)パワー電源用圧電トランスの実現。研究期間2年目である平成13年度は、研究目的を達成するために、以下の研究を行った。(1)昨年度に引き続き、圧電材料のハイパワー励振時における特性変化、特に損失の分離測定に関して、新しい方法を提案し、実験的検討を行った。すなわち、圧電トランス効率の測定値を理論曲線で近似して損失抵抗を算出する方法により、圧電材料ハイパワーで使用したときの損失を分離測定が可能となった。この結果は圧電トランスの効率算定に有用である。(2)圧電トランス構成の1方法として、小形化が可能で耐衝撃性が良いとされるラジアル振動の第二次共振を利用することを提案し、設計、試作実験を行った。この結果95%以上の高効率の圧電トランスが実現できることが分かった。また、不要な振動の解明や抑圧方法について、解析とレーザー変位計による測定により明らかにした。(3)圧電トランス構成のもう1つの構成として、やはり小形化可能、耐衝撃性が良いと考えられる幅縦振動を利用する圧電トランスについて試作実験を行った。この構成も効率の実験を行い、やはり95%以上の高効率が得られることが明らかとなった。また、振動パターン測定により、多くの支持点があり安定支持可能であること、不要振動を抑圧できる構造の圧電トランスが実現できる、などのことが明らかにされた。以上の成果の内の一部ならびに関連研究について発表した論文ならびに講演資料を、研究発表リストに記載している。本年度の研究実施計画研究目的を達成するために、以下の研究を行った。1.圧電トランスに使用する圧電材料の評価圧電材料のハイパワー特性評価装置を用いて、大電力使用状況下での圧電材料特性の測定方法について検討した。また、損失の分離測定を迅速に行うシステムについて詳しく研究を行った。この結果を基に圧電トランスの効率計算ならびに材料の選択を行うことができる。2.幅縦振動利用ならびに高次ラジアル振動を利用する圧電トランスの構造設計・試作積層化するための構造設計を行い、不要振動対策を行った。更に試作圧電トランスについてパワー特性、効率特性め実験を行った。
国際商取引における《共通私法》の多層的生成-ウィーン売買条約を基軸として-

本研究は,日本が2008年に締結した私法統一条約である「国際物品売買契約に関する国際連合条約」(CISG)について,第1に,その体系的・解釈論的構造に関する正確な把握の確立をめざした。契約責任の「体系」に関する構造の解明に重点をおいた他,CISGの基礎にある一般原則と目される「favor contractusの原則」の本質の解明も試みた。これらの作業においては,日本における債権法改正論議との比較検討も行った。第2に,CISGを基軸として生成しつつある《共通私法》の規範内容について,UNIDROIT国際商事契約原則2010を中心に検討し,《共通私法》の生成過程についてUNCITRALやICCにおける実態の基礎調査を行った。(1)ウィーン売買条約(CISG)の正確な内在的理解に重点を置いた解釈論的検討を,UNIDROIT国際商事契約原則や日本の債権法改正と比較検討しつつ行う。(2)CISGは,国際商取引において生成しつつある《共通私法》の基軸的地位を占めており,《共通私法》の文脈に位置づけて理解しなければならないところ,そのような《共通私法》として特に国際商業会議所(ICC)等が制定する「援用可能規則」と「モデル契約書」も取り上げ,CISGの規範内容との比較検討を行う。本年度においては, CISGが近くわが国について発効することを踏まえて、その全体構造を指し示すための作業に重点をおいた。そのなかで、次のとおり、第1第3の課題の研究成果を織り込んだ。第1の課題(法解釈学的研究(1))であったCISGの契約責任の体系的構造の研究については、契約解除権および危険負担、不能法理の否定のインパクトについて,その構造を解明し,複数の媒体において研究成果を公表するとともに,債権法改正との関係についても言及した。第2の課題(法解釈学的研究(2))であった「契約違反への債権者の関与が有する免責的効果」については、その構造を明らかにする作業を行い、簡単に研究成果を公表したが,詳細な研究成果の公表は,当初の計画どおり次年度以降の課題である。第3の課題(法解釈学的研究(3))であった、CISG解釈条の諸論点の研究については、取引実務上、最初に避けて通ることのできない問題であるCISGの適用範囲について重点的な検討を行い、また、契約締結プロセスの規律について研究成果を公表した。さらに、次年度以降に予定していた、国際商取引における《共通私法》の多層的な生成過程の実態解明に関わる研究を若干前倒しして行った。第4の課題(翻訳(1))であった、「UNIDROIT国際商事契約原則2004」の翻訳については、その一部を完成し、「インターカレッジ・ネゴシエーション・コンペティション」(2008年12月開催)に参考資料として提供したが、全体の完成には至らなかった。第5の課題(翻訳(2))であったCISG-AC意見の翻訳については、第5号および第6号について、その全文を完成し、公刊した(ただし、第6号については、研究代表者以外の者が翻訳を担当し、研究代表者はそのサポートに回った)。CISGが発効し,『債権法改正の基本方針』(以下,「基本方針」という)の公表と法制審議会における債権法改正の審議が始まった本年度は,「基本方針」と関連づけてCISGの全体構造を解明する作業を行った他,国際商取引における《共通私法》の規範内容及び生成過程の分析にも着手した。前者のうち,第1の課題であった過失責任主義及び履行不能概念の否定のインパクトの解明については,総論的な研究を数点と各論的な研究(瑕疵担保責任の不存在の構造的要因)を1点公刊できたにとどまる。各論的研究として予定していた危険負担に関する研究は,年度内に完成することはできなかった。第2の課題であった過失責任主義の否定に伴う免責法理の構造解明については,CISGと「基本方針」の比較検討を行い,口頭報告を行った。以上に対して,第3の課題であるCISGの解釈論的研究,なかでも,CISGの発効に伴って解明が急がれるその適用範囲の明確化については複数の口頭報告等を行った。また,海外で出版される英文注釈書の執筆,国連国際商取引法委員会(UNCITRAL)がCISGに関する裁判例等を分析して公刊するDigestの編集委員に就任して活動を開始するなど進展がみられた。第4・第5の課題(翻訳(1)(2))については,CISG-AC意見第7号の翻訳に若干の進展がみられたにとどまる。後者(《共通私法》の規範内容及び生成過程の分析)に相当する第6の課題であった,CISGとUNIDROIT原則の比較検討は,上記第2の課題とあわせて実施した。

法社会学的検討を行う第7の課題については,ICCにおけるIncotermsの改訂過程について若干の聞き取り調査を行った他,ICC日本委員会の仲裁委員会との接触を開始した。さらに,国連国際商取引法委員会(UNCITRAL)の第6作業部会に日本政府代表として継続的に出席する機会を得たことから,UNCITRALにおける共通私法の生成過程を直接に観察することができた。本年度は,CISGの全体構造を債権法改正と関連づけて解明する作業を行った他,国際商取引における《共通私法》の規範内容及び生成過程の分析を行った。前者のうち,当初は第3の「その他の課題」という位置づけであったCISGの適用範囲に関する諸問題の検討について喫緊の論争が生じたため,この問題に注力せざるを得なくなった(成果は公表済み)。その結果、第1の課題であった、過失責任主義及び履行不能概念の否定のインパクトの解明については,小稿を1点公刊できたにとどまる。懸案の危険負担に関する研究は,年度内に完成することはできなかった。第2の課題であった過失責任主義の否定に伴う免責法理の構造解明については,まず,favor contractusの原理との関係において分析を行い,その成果は印刷中である。第3の課題であるCISGの解釈論的研究については,上述のとおり,適用範囲の明確化については研究を深めた他,買主の検査通知義務をfavor contractus原理との関係で位置づける口頭報告を行った他,海外で出版される英文注釈書の執筆,国連国際商取引法委員会(UNCITRAL)が公刊しているCLOUT Digestの編集委員としてその改訂を行った。第4・第5の課題(翻訳(1)(2))のうち、UNIDROIT原則の翻訳については着手したが,CISG-AC意見第7号の翻訳に若干の進展がみられたにとどまる。後者(《共通私法》の規範内容及び生成過程の分析)のうち、第6の課題のICCモデル契約書等の研究は,INCOTERMSの改訂があったためにその分析を優先して行った(成果の公表にはいたっていない)。法社会学的検討を行う第7の課題については,UNCITRALの第6作業部会における共通私法の生成過程を直接に観察することができた。ICC関係者へのインタビューは,相手方の急病のために実現しなかった。本研究の最終年度に当たる本年においても、CISGの全体構造を債権法改正と関連づけて解明する作業及び国際商取引における《共通私法》の規範内容及び生成過程の分析を行った。前者については、第1の課題であった危険負担の研究については、日本民法との比較を行う研究は年度内の完成にはいたらなかったものの、UNCITRALが刊行するCLOUT Digestの2012年改訂版において、CISGにおける危険移転規定とそれをめぐる裁判例の状況についての執筆を担当し、成果を公表することができた。これは今後、内外で参照されることになる文献で、重要な意義を有する。第2の課題であった、CISGの基礎にある一般原則としてFavor Contractusを位置づける作業については、一区切りをつけることができ、その成果を英文と邦文で公表した。これも、現時点の内外における議論水準の到達点を示すことができたと考えている(もちろん、これからはその先が問題となる)。第3の課題(その他の解釈論的研究)としては、判例解説を1本執筆した他、CISG第5条に関するCISG-AC意見の執筆と、日本の契約法に関する英文概説書の共同執筆の準備を進めた。
キメラウイルスによる植物ウイルスタンパク質の機能と構造に関する研究

Potyvirus属のカブモザイクウイルス(TuMV)は世界中に分布し、主にアブラナ科植物に病害を起こす。TuMVゲノムは5′末端から、5′非翻訳領域、P1タンパク質遺伝子、ヘルパー成分-プロテアーゼ(HC-Pro)タンパク質遺伝子、P3タンパク質遺伝子、6K1タンパク質遺伝子、細胞質封入体タンパク質遺伝子、6K2タンパク質遺伝子、核内封入体a-ゲノム結合タンパク質遺伝子、核内封入体a-ポリメラーゼタンパク質遺伝子、核内封入体b-プロテアーゼタンパク質遺伝子、外被タンパク質(CP)遺伝子及び3′非翻訳領域の遺伝子を持つ、約10kbの一本鎖でRNAである。これらの遺伝子の中でHC-Proタンパク質遺伝子はアブラムシの伝搬性に関与し、感染植物体の中で2量体を形成していると言われている。しかしながら、HC-Proタンパク質の植物体中の動態、即ち植物体の中でどのように蓄積しているのか、また遺伝子領域のどの部分がアブラムシ伝搬性に必要なのか知られていない。TuMVのHC-Proタンパク質を感染植物体から精製するのは極めて困難なため、HC-Proタンパク質遺伝子の塩基配列を決定後、大腸菌発現ベクターに組み込み、大腸菌内でHC-Proタンパク質を発現させた。精製したそのタンパク質をウサギに免疫し、HC-Proタンパク質に対する抗血清を作製した。その抗血清をプローブとしてTuMV感染植物体内での蓄積を追跡した結果、HC-Proタンパク質はCPに比べて遅れて蓄積し、またCPに比べて不安定であることが明らかとなった。また、HC-Proタンパク質遺伝子のアブラムシ伝搬性に必要な遺伝子領域を特定する目的で、タバコモザイクウイルス感染性cDNAをベクターに全長及び欠損HC-Proタンパク質遺伝子を組み込みHC-Proタンパク質遺伝子領域を調査した結果、N末端から30アミノ酸、C末端から67アミノ酸は必ずしもアブラムシの伝搬性に必要でないことが明らかとなった。カブモザイクウイルス(TuMV)はポティウイルスグループに属しアブラムシで非永続的に伝搬するウイルスである。また精製ウイルスのみでは伝搬されず、精製ウイルスとTnMV遺伝子由来のヘルパー成分プロテアーゼ(HC-Pro)タンパク質を混合しアブラムシに獲得吸汁させることで、アブラムシ伝搬性が認められることが知られている。さらにTuMVは大きなポリタンパク質として翻訳後、ウイルス遺伝子由来のプロテアーゼにより分解され機能を持つ成熟した10種類のタンパク質となる。しかしながら今日まで行われてきた感染性cDNAの研究では、各々の遺伝子に欠損を与えることができなくウイルスタンパク質の機能の解析は困難であった。そこでキメラウイルスの実験系を用いて欠損HC-Proタンパク質を植物体内で発現させ、HC-Proタンパク質遺伝子のどの領域がアブラムシ伝搬性に必要かを検討するための予備的な実験を行った。まず、タバコモザイクウイルス(TMV)の外被タンパク質(CP)遺伝子領域にTuMVの全長HC-Pro遺伝子をクローニングし、このキメラウイルスcDNAからin vitro転写系によりRNAを作出した。そのRNAを植物体(Nicotiana benthamiana)へ接種し、TuMV HC-Pro抗血清を用いて検討した結果、HC-Proタンパク質が発現していることが明らかとなった。また、アブラムシをその植物体につけ獲得吸汁後精製ウイルスを膜越し吸汁させ、健全植物に接種吸汁させた結果発病が認められ、その後のアブラムシ伝搬試験においても伝搬性が認められた。即ちキメラウイルス実験系が今後欠損HC-Proタンパク質遺伝子の解析に有効であることが認められた。そこで、HC-Proタンパク質遺伝子から推測されるアミノ酸配列を考慮して、幾つかの欠損HC-Proタンパク質を植物体内で発現させた。現在、発現した欠損HC-Proタンパク質のアブラムシ伝搬性について検討中である。

TuMVゲノムは5^1末端から、5^1非翻訳領域、P1タンパク質遺伝子、ヘルパー成分-プロテアーゼ(HC-Pro)タンパク質遺伝子、P3タンパク質遺伝子、6K1タンパク質遺伝子、細胞質封入体タンパク質遺伝子、6K2タンパク質遺伝子、核内封入体a-ゲノム結合タンパク質遺伝子、核内封入体a-ポリメラーゼタンパク質遺伝子、核内封入体b-プロテアーゼタンパク質遺伝子、外被タンパク質(CP)遺伝子及び3^1非翻訳領域の遺伝子を持つ、約10kbの一本鎖RNAである。これらの遺伝子の中でHC-Proタンパク質遺伝子はアブラムシの伝搬性に関与し、感染植物体の中で2量体を形成していると言われている。しかしながら、HC-Proタンパク質の植物体中の動態、即ち植物体の中でどのように蓄積しているのか、また遺伝子領域のどの部分がアブラムシ伝搬性に必要なのか知られていない。TuMVのHC-Proタンパク質を感染植物体から精製するのは極めて困難なため、HC-Proタンパク質遺伝子の塩基配列を決定後、大腸菌発現ベクターに組み込み、大腸菌内でHC-Proタンパク質を発現させた。精製したそのタンパク質をウサギに免疫し、HC-Proタンパク質に対する抗血清を作製した。その抗血清をプローブとしてTuMV感染植物体内での蓄積を追跡した結果、HC-Proタンパク質はCPに比べて蓄積し、またCPに比べて不安定であることが明らかとなった。また、HC-Proタンパク質遺伝子のアブラムシ伝搬性に必要な遺伝子領域を特定する目的で、タバコモザイクウイルス感染性cDNAをベクターに全長及び欠損HC-Proタンパク質遺伝子を組み込みHC-Proタンパク質遺伝子領域を調査した結果、N末端から30アミノ酸、C末端から67アミノ酸は必ずしもアブラムシの伝搬性に必要でないことが明らかとなった。
後周期遷移金属メタラサイクルの新規調製法と反応性の研究:不斉触媒への展開

メタラサイクル錯体は,アセチレン類あるいはジイン類などの環化三量化反応の重要な中間体(活性種)として知られており,さまざまな金属錯体が単離され構造解析ならびに反応機構が明らかにされている。本研究では,ビスオキサゾリニルピリジン(PYBOX)と[Rh(Cyclooctene)_2Cl]_2との混合物が極めて高い反応性を示し塩化メチレンが酸化的付加した事実をふまえ、アセチレン類の金属状での環化付加の可能性を考え検討したととろ,安定な新規ロダサイクル錯体を単離することでき,構造解析とともに触媒活性を検討した。過剰のアセチレンジカルボン酸エステルを加えると,橙色の錯体を得ることできた。安定なロジウム三価錯体であることを解明した。この錯体は,安定であり室温付近ではアセチレン類の環化三量化反応の触媒として働かない。次に,ジインを用いて錯体形成を検討したところ良好な収率でロダサイクル錯体を得ることができた。この錯体を過剰のフェニルアセチレンと反応させたとごろ80120°Cにおいて環化三量化物を与えた。また,非対称な置換ジインを用いて検討したとろこ立体選択的に反応が進行し,フェニル基で置換されたメタラサイクル末端がエカトリアル位となることが明らかになった。ロダサイクル生成の機構も推定した。これらの構造は,X線結晶解析によって行った。ジイン錯体を用いて触媒的な環化三量化反応を検討したところ,70°C以上で反応が進行し三量化物を与えた。非対称なジインでは,錯体は立体選択的であったが環化三量化反応での選択性はなかった。ジインの置換基,アセチレンの置換基を変更して立体選択性の向上する系をした。また種々の置換基を有するPyboxを用いることによる立体選択性の変化,不斉誘導を検討できる系の探索を行った。分子触媒の核である遷移金属元素を含む環状構造メタラシクロペンタジエンとブテン骨格に注目し,従来多くの高分子合成や精密合成の重要触媒反応の中間体であるとされてきた不安定な環状化合物を簡単な有機分子から構築し,安定に取りだすことに成功した。X線結晶解析による精密な構造解析と安定性ならびに反応性を解明した。不斉合成に展開しようとこころみたが,現在のところラセミ体である。生成する有機物質の付加価値を高め利用性のある物質へと変換する方法として確立させ,次世代分子技術の進歩に貢献することを目標として検討中である。具体的には,アセチレン類あるいはジイン類を合成し,メタラシクロペンタジエンとの基本骨格前駆体を調製した。ビニルカルベン前駆体として,置換ビニルジアゾ酢酸エステルを数種合成し,ルテニウム錯体との反応から新たなアリル錯体の生成を発見し,X線結晶解析にも成功した。オレフィンとの反応から,加熱によって不安定ながらカルベン錯体が生成していることが示唆された。一方,アセチレン類の共三量化反応の中間体であるメタラシクロペンタジエン錯体の単離を試みたところ,ジインとロジウム-Pybox反応系において錯体を単離することができた。X線結晶解析(現有設備)により,結合様式について明らかにすることができた。また,不斉配位子を有する錯体の合成,単離,解析にも成功した。本錯体とさらにアセチレン類との環化三量化反応によってベンゼン誘導体の合成に成功した。現在,反応点に近傍における不斉誘導についての可能性を検討している。
看護職者・看護管理者の職業性ストレスと組織活性化に関する研究

本研究は、看護管理者(看護師・助産師)および看護職者の職業性ストレス、ワーク・エンゲイジメント(Work Engagement:以下WEとする)について実態を明らかにすることを目的として実態調査行う。さらに看護職者のセミナーを開催し、WE・セルフエフィカシーを高め、組織に活用するための思考力を育成する。本研究は3年間で計画し、看護管理の視点から仕事に対する前向きな心理面を促進するための実践的アプローチを探索し、看護職者のセミナーを開催することを目的とする。
植物細胞の分化と増植特性に関する共同研究

(1)同調したタバコBY2培養細胞を用いた実験により、S期特異的にテロメラーゼ括性が促進されること、この活性促進がオーキシン依存的に起こることを明らかにした。次に、アラビドプシス及びイネよりテロメラーゼの触媒蛋白質の遺伝子(AtTERT、OsTERT)のcDNAをクローン化し、塩基配列の決定、器官特異的な発現の確認を行った。(2)植物細胞の核抽出液よりテロメラーゼ活性の調節に関わっていると考えられるテロメアーゼ活性阻害蛋白質を同定した.(3)シロイヌナズナよりテロメアを含む染色体末端の維持、修復に関わるKu70とKu80ホモログ(AtKu70とAtKu80)をコードするcDNAsを単離し、の塩基配列を決定した.これらのタンパク質は、特異的にヘテロ二量体を形成して二本鎖DNA末端に特異的に結合することを明らかにした.また、一本鎖DNA-依存性のATPase活性とATP-依存性のDNAヘリカーゼの活性を持つことを示した.さらに、BleomycinやMMS処理、すなわち二重鎖切断(DSB)の生成によって発現誘導されることを明らかにした.(4)シロイヌナズナ、タバコにおける核コードプラスチドシグマ因子様遺伝子(sig遺伝子群)の構造解析と機能の解析を行い、新規遺伝子sigD, sigE, sigFを含めて計6個の遺伝子の存在を明らかにした.uid及びGFP遺伝子との融合遺伝子形質転換体の作成と解析を進めた.また、SIG2(sigB)遺伝子のT-DNA挿入変異体(Sjg2-1)について解析を行った結果、葉緑体の発達に欠損を認めた.クロロフィル(テトラピロール)の生合成に不可欠なtrnE-UUCを含むいくつかのプラスチドtRNAsが著しく減少していた.(1)同調したタバコBY2培養細胞を用いた実験により、S期特異的にテロメラーゼ括性が促進されること、この活性促進がオーキシン依存的に起こることを明らかにした。(2)植物細胞の核抽出液よりテロメラーゼ活性の調節に関わっていると考えられるテロメアーゼ活性阻害蛋白質を同定した.(3)シロイヌナズナよりテロメアを含む染色体末端の維持、修復に関わるKu70とKu80ホモログ(AtKu70とAtKu80)をコードするcDNAsを単離し、の塩基配列を決定した.これらのタンパク質は、特異的にヘテロ二量体を形成して二本鎖DNA末端に特異的に結合することを明らかにした.また、一本鎖DNA-依存性のATPase活性とATP-依存性のDNAヘリカーゼの活性を持つことを示した.さらに、BleomycinやMMS処理、すなわち二重鎖切断(DSB)の生成によって発現誘導されることを明らかにした.(4)シロイヌナズナ、タバコにおける核コードプラスチドシグマ因子様遺伝子(sig遺伝子群)の構造解析と機能の解析を行い、新規遺伝子sigD, sigE, sigFを含めて計6個の遺伝子の存在を明らかにした.uid及びGFP遺伝子との融合遺伝子形質転換体の作成と解析を進めた.また、SIG2(sigB)遺伝子のT-DNA挿入変異体(Sjg2-1)について解析を行った結果、葉緑体の発達に欠損を認めた.クロロフィル(テトラピロール)の生合成に不可欠なtrnE-UUCを含むいくつかのプラスチドtRNAsが著しく減少していた.(1)シロイヌナズナ、タバコにおける核コード、プラスチド・シグマ因子遺伝子(sig遺伝子群の構造及び機能解析を行なった結果、新規遺伝子sigD,sigE,sigFを同定した。sigA,sigB,sigCについてuid及びGFP遺伝子との融合遺伝子の形質転換体の作成と解析を行なった。(2)タバコ培養細胞を用いて細胞周期特異的なテロメラーゼの活性化を調べた。同調培養したタバコBY-2細胞を用いて実験を行なった結果、S期特異的かつオーキシン依存的なテロメラーゼの活性化が起こることを発見した。(3)シロイヌナズナよりテロメラーゼの触媒蛋白質の遺伝子(At TERT)のeDNAをクローン化し、塩基配列の決定、器官特異的な発現を確認した。(4)テロメラーゼ活性を示さない植物細胞の核抽出液よりテロメラーゼ活性を阻害する40KDaの蛋白質を同定した。テロメラーゼ活性の調節に関わっていることが示唆された。(チェコ・グループ)。(5)相互交流と国際共同研究。高橋は、1999年9月Institute of Biophysics,チェコアカデミーを訪問し、研究連絡セミナー等を実施。J,Fajkus.B.Vyskot博士は1999.1011東京分生研他を訪問、研究連絡セミナー等を実施した。2000.2田村はチェコアカデミーを訪問。(1)シロイヌナズナ、タバコにおける核コードプラスチドシグマ因子これらの遺伝子の制御領域とリポーター遺伝子との融合遺伝子を用いて発現を調べたところ、種子からの発芽期にはsigBが先に次いでsigAの発現が起こることが分かった。(2)シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)及びイネ(Oryza sativa)のテロメラーゼ触媒サブユニットのcDNAクローンを取得し、塩基配列の決定、in situ hybridization法による発現時期と組織・器官の特定を行った。

また、Agrobacterium tumefaciensの感染によって誘導されるクラウンゴール(癌腫)におけるテロメラーゼ(AtTERT遺伝子)の発現について解析を行った。(3)植物のテロメラーゼ活性は、細胞周期によって厳密な制御を受けている。この制御と関係していると考えられるテロメラーゼ特異的な40kDの阻害蛋白質を同定した。(チェコの研究グループ)。(4)植物のDNAのメチル化と遺伝子発現の制御との関係について解析を進めた。花粉形成期おける特定性染色体遺伝子の発現と染色体DNAのメチル化、ヒストンのアセチル化についての解析を進めた。発現期には特定遺伝子のDNA塩基(シトシン)の脱メチル化とヒストンのアセチル化とが関連して起こることを明らかにした。(1)シロイヌナズナの6種類の核コードのプラスチドσ因子遺伝子(SIG)のうち、SIG2(sigB)遺伝子のT-DNA挿入変異体(Sig2-1)について解析を行った結果、葉緑体の発達に欠損が見られた.この変異体では、クロロフィルの蓄積と光合成および光合成関連遺伝子産物の蓄積が特異的に低下しており、クロロフィル(テトラピロール)の生合成に不可欠なtrnE-UUCを含むいくつかのプラスチドtRNAsが著しく減少していた.これらの結果から、SIG2によってクロロフィル合成と葉緑体タンパク質合成とのカップリングが起こるとするモデルを提唱した.(2)単子葉植物であるイネ(Oryza sativa)よりテロメラーゼの触媒蛋白質の遺伝子(AtTERT)のcDNAを単離し、塩基配列の決定した.また、in situ hybridization法を用いて茎頂分裂組織における特異的な発現を確認した。(3)高等植物(シロイヌナズナ)よりKu70とKu80ホモログ(AtKu70とAtKu80)をコードするcDNAsを単離し、の塩基配列を決定した.大腸菌で過剰生産したAtKu70とAtKu80タンパク質は、特異的にヘテロ二量体を形成して二本鎖DNA末端に特異的に結合することを明らかにした.また、一本鎖DNA-依存性のATPase活性とATP-依存性のDNAヘリカーゼの活性を持つことを示した.さらに、培養細胞系を用いることにより、AtKu70とAtKu80遺伝子がBleomycinやMMS処理、すなわち二重鎖切断(DSB)の生成によって発現誘導を受けることを明らかにした.
ＨＤＡＣ分子標的エピジェネティクスＰＥＴ診断の基礎及び臨床的応用

遺伝子発現過程にて必須であるヒストン蛋白の脱アセチル化反応に着眼し、その反応を担う酵素・HDACの基質となる分子イメージング18F-FAHA PETの、基礎研究並びに臨床応用展開を通じてエピジェネティクスPET診断法の確立を目指す研究である。遺伝子発現過程で重要なピストン蛋白の脱アセチル化反応に着眼し、その酵素:HDACの基質となるPET診断薬:^<18>F-FAHAを新規合成し、癌組織内HDAC活性のBiomarkerとなるPET診断法を開発する。SAHAなどのHDAC酵素阻害剤は分子標的抗癌剤として注目され、18F-FAHA-PETは、癌の早期診断や、HDAC酵素阻害剤による治療効果予測や治療後効果判定などを可能にし、HDAC酵素阻害剤による癌分子標的治療に大いに寄与すると期待される。平成23年度の研究成果は以下の通りである。平成22年度の成果をふまえて、それぞれの検討項目をさらに詳細に検証した。(1)正常マウス脳切片や腫瘍細胞を用いた薬剤集積実験を昨年度に引き続き検討継続を行い、18F-EAHAは生体内でHDACの基質となり腫瘍への集積・滞留することが確認された。(2)また動物実験では、18F-FAHAは投与後速やかに体内HDACとの反応により18F-フルオロ酢酸(18F-EACE)、に代謝されることがTLCやHPLCを用いた代謝物解析検討で確認された。(3)サルを用いた画像化検討、薬剤の肝、腎への集積排泄が認められた他、脳集積も認められた。薬剤動態検討や臨床使用時の放射線被曝予想シミュレーションの結果、ヒトに18F-FAHA3.7MBq/kgを投与しても、現在臨床応用されている18F-FDG PETと同程度の被ばく線量であることが算出され、18F-EAHA PETの臨床応用への期待が確認された。(5)実験動物の加齢や脳代謝の変化、また脳血管障害モデル動物の脳代謝変化と18F-FAHA脳神経集積変化の関連が脳内HDACの局在と活性と密接に関連していることを示唆するデータが得られた。平成25年度の研究成果は以下の通りである。平成22-24年度の成果をふまえて、それぞれの検討項目をさらに詳細に検証した。1前年度研究に続き、小動物実験では、18F-FAHAは投与後速やかに体内HDACとの反応により18F-フルオロ酢酸(18F-FACE)に代謝されることがTLCやHPLCを用いた代謝物解析検討で確認された。2Wayne大学との共同研究成果により、FAHAのさらなる誘導体であるtrifluoro FAHAの脳内集積はFAHAに比し良好であることがわかった。Trifluoro FAHAの合成も今後検討する。合成法の資料や合成原料の入手も手配済みである。理研との協力体制で行う。3実験動物の加齢や脳代謝の変化、また脳血管障害モデル動物の脳代謝変化と18F-FAHA脳神経集積変化の関連が脳内HDACの局在と活性と密接に関連していることを示唆するデータが得られた。さらに検討をすすめた結果、脳血管障害モデルでの超急性期での脳集積はFAHAの代謝体であるFACEの脳神経細胞内集積の寄与が大きいことが示唆された。(第8回日本分子イメージング学会総会・学術集会最優秀発表賞・受賞)おそらく急性障害からの脳神経保護作用に関わるFACE集積亢進であることを示唆する実験結果が得られている。(脳血管障害モデルにモノフルロ酢酸を投与すると脳神経麻痺の軽減、回復現象を確認している。)これまで報告のないデータであり現在検証作業や更なる集積機序解明研究を継続中である。4FAHAの体内動態を知る上で、その代謝物であるFACEの動態を追究する必要がある。そのため、基礎研究成果をもとにF-18 FACE-PETを臨床応用しはじめた。2サルを用いた画像化検討をさらに重ね、18F-FAHA PETの臨床応用への期待が確認された。FAHAの薬剤安全性試験をH25年度行う予定である。この集積にはモノカルボン酸トランスポーターが関与しているのではないかというデータが得られた。これまで報告のないデータであり現在検証作業や更なる集積機序解明研究を継続中である。518F-trifuluoro FAHAが18F-FAHAよりも脳神経集積に有望であるという実験結果が得られた。

これは米国のGelovani博士との共同研究成果として得られた。これを受け、研究費を繰り越しし、新規化合物の組成検討や18F-trifuluoro FAHAの原料合成や放射線合成検討に着手した。これは次年度以降の検討に引き継いでいる。平成26年度の研究成果概要は以下の通りである。前年度までの成果をふまえて、それぞれの検討を行った。1)臨床応用に向けた18F-FAHA合成法の検討継続滋賀県立成人病センター内のサイクロトロンにて、安全で安定した合成・精製の検討をした。また、18F-FAHA以外のHDACを標的とした診断薬の検討としてtrifluoro FAHAに着目し、米国米国Wayne大学と共同研究を行い継続中である。2)サルを用いた18F-FAHA PET検査サルを用いその有用性検討を継続して行った。18F-FAHA静脈注射後経時的に得られる全身像と体内分布結果から臨床応用可能と考えられた。PET検査における推定被ばく線量もFー18 FDG-PET検査他と同等であった。血漿中の18F-FAHA或いはその他F-18標識代謝物をHPLC法にて解析した結果、主たる体内代謝物18F-フルオロ酢酸(18F-FACE)が脳内に滞留することが分かった。3)この18F-FACEについては臨床研究第一相試験まで研究展開した。その結果腫瘍PETイメージングとして有望であることが示唆された。脳神経診断についても解析中である。4)18F-フルオロ酢酸の脳内集積機序を前年度に引き続き検討した結果、脳虚血状態において18F-フルオロ酢酸は虚血早期より病巣に集積亢進することが分かった。しかもその集積機序は脳障害後の活性化グリアの遊走よりも早い時期の現象であることも判明し、急性期脳虚血画像診断が期待できる結果と考えられた。26年度が最終年度であるため、記入しない。画像診断学26年度が最終年度であるため、記入しない。18F-FAHAの安定合成はほぼ達成している。動物における18F-FAHAの代謝物解析検討は順調にすすんでいるが、主な生体内代謝物である18F-フルオロ酢酸の組織内の挙動、代謝については更なる検討が必要である。18F-フルオロ酢酸についてはそれ単独のPET画像検査として臨床応用開始している。その結果もふまえ18F-FAHAの安全性試験を行うことにする。遺伝子発現過程で重要なヒストン蛋白の脱アセチル化反応に着眼し、その酵素:HDACの基質となるPET診断薬:18F-FAHAを新規合成し、癌組織内HDAC活性のBiomarkerとなるPET診断法を開発である。診断薬の候補となるF-18標識FAHAの合成に成功し、生化学実験、動物実験も順調に実施できている。当該薬剤の脳神経診断検討も動物で行い、F-18 FAHAの体内代謝化合物であるF-18フルオロ酢酸が急性期脳虚血病変診断に有望である可能性を示唆するデータは動物で得られている。F-18フルオロ酢酸の臨床応用も開始出来ており、脳神経疾患への応用も検討中であり、近い将来研究結果も得られると考えている。
睡眠発現に密接に関連するウリジン受容体の構造と機能

本科学研究費補助金により以下の知見を得た。我々はこれまでに、ウリジンN^3位置換体が催眠作用を有し、その発現機構が既知の中枢系受容体ではなくウリジン誘導体に特異的な新規受容体を介していることを報告してきた。今回、5-ブロモウリジンのN^3位置換体を合成し薬理作用を検討した結果、マウス2.0μmol/mouseの脳内投与でアルキル(メチル-ブチル)、アリル、フェナシル、メチルベンジル、メトキシフェナシル体には催眠作用が認められないものの、ベンジル体で94分の催眠作用を示した。また、ペントバルビタールとの相互作用においては、N^3-ベンジル及びN^3-(m-メトキシフェナシル)-体にコントロールと比較して3.0及び3.5倍の増強作用が認められた。さらに、各異性体間で薬理作用の強さが異なることから、作用発現に対してN^3位置換基並びに5位のブロムによる影響があることが示唆された。また、4-チオウリジンのN^3-位置換体においてもα-フェネチル、ベンジル、フェナシル体が催眠作用を有し、ピリミジン環4位は酸素の代わりに硫黄原子も有効であるが、中枢抑制作用は減弱することが明らかとなった。本結果は、核酸誘導体の有する新たな中枢抑制作用としてこれら誘導体が医薬品として開発可能であることを示すものである。一方、受容体の精製は、ウシ視床より以下のように行った。まず、常法に従いシナプス膜を調製、CHAPSで4°C1時間可溶化、48000×gで20分間遠心分離した。可溶化画分はSepharose 4Bカラムに付し0.1%CHAPS含有50mM Tris-HCl緩衝液(pH7.4)で溶出した。続いて液体等電点電気泳動を行い分子量29kdのほぼ単一な蛋白質を分離・精製した。本受容体蛋白質は[^3H]N^3-フェナシルウリジンと結合し、その結合は各種ウリジン誘導体により阻害された。MALDI/TOFMSの結果、N末端アミノ酸は修飾されており、既存のタンパク質とは異なる新規の受容体であることが明らかとなった。なお、誘導体の結合阻害度は催眠作用と相関性が確認されていることより、本ウリジン受容体が催眠機構に関与していることが考察された。我々はウリジンN3位置換体が催眠作用を有し、その発現機構がバルビツレート、ベンゾジアゼピン類とは異なることを明らかにしている。そこで、本研究はピリミジンヌクレオシド誘導体の中枢抑制機構解明を目的として、ウリジン誘導体の構造活性相関及び受容体の精製を行い、以下の新知見を得た。ウリジン誘導体の合成及び薬理作用ウリジンとは糖2'位の水酸基の配位を異にするアラビノフラノシルウラシルのN3位に置換基を導入した誘導体を合成し、催眠作用を検討した結果、N3-o-メトキシフェナシルアラビノフラノシルウラシルに強い催眠作用が確認され、オキソピリミジンヌクレオシドN3位におけるフェナシル関連置換基の重要性が再確認された。さらに、フェナシル基にニトロ基を有する置換基をウリジンN3位に導入したN3-p-ニトロフェナシルウリジンがマウスにおいて痙攣を誘発し、中枢興奮作用を有することも明らかとなった。いずれの誘導体もフェナシル基上のo,m,p位の各異性体間で薬理作用の強さが異なることから、作用発現に対してフェナシル部位における立体特異性があることが示唆された。また、Tail pintch,Hot plate,酢酸writhing反応による鎮痛作用の検定を行った結果、N3-フェナシルウリジン及びN3-ベンジルウリジンに鎮痛作用が認められた。本結果は、核酸誘導体の有する新たな中枢作用すなわち鎮痛薬としてこれら誘導体が医薬品として開発可能であることを示すものである。ウリジン受容体の精製ウシ視床より常法に従いシナプス膜を調製、1%3-[3-(cholamidopropyl)-dimethylammonio]-]1-propane sulfonate(CHAPS)で可溶化した。ウシ脳シナプス膜可溶化画分上清はSepharose 4Bカラムで溶出した。続いて液体等電点電気泳動により分子量29kdのほぼ単一な蛋白質にまで分離・精製することができた。本受容体蛋白質は[3H]N3-フェナシルウリジンと結合し、その結合は各種ウリジン誘導体により阻害された。なお、誘導体の結合阻害度は催眠作用と相関性が確認されていることより、本ウリジン受容体が催眠機構に関与していることが示唆された。

また、ペントバルビタールとの相互作用においては、N^3-ベンジル及びN^3-(m-メトキシフェナシル)-体にコントロールと比較して3.0及び3.5倍の増強作用が認められた。さらに、各異性体間で薬理作用の強さが異なることから、作用発現に対してN^3位置換基並びに5位のブロムによる影響があることが示唆された。また、4-チオウリジンのN^3-位置換体においてもα-フェネチル、ベンジル、フェナシル体が催眠作用を有し、ピリミジン環4位は酸素の代わりに硫黄原子も有効であるが、中枢抑制作用は減弱することが明らかとなった。本結果は、核酸誘導体の有する新たな中枢抑制作用としてこれら誘導体が医薬品として開発可能であることを示すものである。一方、受容体の精製は、ウシ視床より以下のように行った。まず、常法に従いシナプス膜を調製、CHAPSで4°C1時間可溶化、48000×gで20分間遠心分離した。可溶化画分はSepharose 4Bカラムに付し0.1%CHAPS含有50mM Tris-HCl緩衝液(pH7.4)で溶出した。続いて液体等電点電気泳動を行い分子量29kdのほぼ単一な蛋白質を分離・精製した。本受容体蛋白質は[^3H]N^3-フェナシルウリジンと結合し、その結合は各種ウリジン誘導体により阻害された。MALDI/TOFMSの結果、N末端アミノ酸は修飾されており、既存のタンパク質とは異なる新規の受容体であることが明らかとなった。なお、誘導体の結合阻害度は催眠作用と相関性が確認されていることより、本ウリジン受容体が催眠機構に関与していることが考察された。