hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
PKCetaを分子標的とした新規肺癌治療戦略

肺がんは我が国の癌死亡率の第1位を占め、罹患率も極めて高く、治療法の確立は喫緊の課題である。本研究課題では、非小細胞肺がん(NSCLC)細胞にアポトーシスを誘導し、浸潤・転移を抑制する分子Protein kinase C eta (PKCeta)を標的とした、新規肺がん分子標的治療法の開発を目指す。具体的には、1) PKCetaに対する新規低分子阻害剤の探索、2)高効率で効果的にPKCetaの発現・活性を抑制する核酸医薬品・ペプチド医薬品の探索、3)PKCetaノックダウンによって生じる、細胞増殖・運動阻害の分子メカニズムの解明とPKCetaの下流シグナル因子の同定である。平成29年度は、PKCetaの機能や発現を阻害しうる新規薬剤の探索として、低分子化合物の網羅的探索を行った。更に上記2)、3)の項目に関して検討を行った。PKCetaを標的とした種々のsiRNA等をコラーゲンベースの核酸導入試薬を用いて、免疫不全マウスによる皮下腫瘍担癌モデルに全身投与し、その効果を検討した。その結果、NSCLC細胞PC-9の増殖が有意に抑制され、その抗腫瘍効果が確認された。また、PKCetaの発現抑制によるアポトーシス誘導や細胞運動の阻害は、EGFR等の増殖因子レセプターやE-Cadherin等の細胞接着因子の細胞内輸送、特に細胞膜上へのリサイクリングが阻害されているためである。この原因として、膜トラフィック制御因子Rab11とそのエフェクター分子Rab11FIP1の蛋白修飾にPKCetaが関与していることが明らかとなった。siRNAやその修飾体の全身投与によって、皮下腫瘍モデルマウスにおけるPKCetaの発現が抑制され、腫瘍増殖が抑制されることが確認された。PKCeta核酸医薬品が非小細胞肺がんの治療に有効であることを示す結果であり、将来的に実臨床に応用できる可能性を示唆するものである。また、増殖・細胞運動阻害のメカニズムの解明が進んだことで、PKCetaの下流シグナル分子を治療標的として利用できる可能性も広がった。今後は、これらの下流因子を阻害する化合物・核酸医薬品に関しても同様の検討を行い、臨床応用への一助としたい。今後は核酸医薬品として、生体内で安定且つ発現抑制効果の高い架橋型核酸製剤等を用いて、より有効性の高いPKCeta阻害剤の開発を目指す。その際には、皮下腫瘍マウスだけではなく、同所性肺腫瘍モデル等も用いて、より生体に近い環境下での検討も行いたい。またPKCeta偽基質ペプチドやその修飾体を用いたペプチド製剤の適用も行う。また、分子メカニズムの解明は、Rab11の活性調整に関わる蛋白質修飾の詳細を質量分析等を用いて検討すると共に、PKCetaの相互作用因子の同定を行う。

29年度において、PKCetaの相互作用因子の同定のために、外部依託として質量分析を用いた解析を行う予定であったが、そのサンプル作成の工程で予想を超えた時間が発生したため、年度内での予算消化が困難であった。準備が完了次第、質量分析の依頼を行い、研究費を使用・執行する予定である。
シナプス発達におけるシナプス形成初期過程から可塑的過程へのスイッチング機構の解明

本研究ではショウジョウバエ幼虫の神経筋接合系を用い、遺伝情報に従って大まかなシナプス形成が行われた後、どのようにして標的細胞に合わせて適切な大きさのシナプスが形成されていくのか、その分子機構を解明することを目的として研究を進めている。そのために、一つの神経細胞が2つの大きさの異なる筋肉細胞にシナプスを形成している系に着目し、標的細胞の大きさに合わせてシナプスを形成するメカニズムの解明を目指している。これまでの研究から、このメカニズムは外界にさらされていない胚の時期には存在せず、艀化後の活発な活動によって、スイッチオンされることが予想されたので、まず、感覚神経細胞の興奮を抑制することによって外界からの刺激を阻害したときに標的細胞の大きさに合わせてシナプスを形成するメカニズムはどのような影響を受けるか調べた。その結果、外界からの刺激を阻害すると、シナプスの大きさ自体は時間とともに成長することはできるが、同じ神経細胞が筋肉細胞の大きさに合わせた大きさのシナプスを形成することはできなくなっていることが明らかになった。つまり、シナプスが体の成長とともに成長するメカニズムと、標的細胞の大きさを正しく知ってバランスよくシナプスを形成するメカニズムを分離できる可能性が示唆された。現在、さらに、成長にかかわると考えられているシグナル系が標的細胞の大きさを正しく知ってバランスよくシナプスを形成するメカニズムにも関与するのかを検討し、解析を続けている。本研究で得られる結果により、遺伝情報に従って大まかに形成された神経ネットワークが全体として正しく機能するようになるために、シナプス間でどのように情報をやり取りしながら、形成されていくのかという、非常に重要な脳の神経回路形成の素過程が明らかになるものと期待できる。
リン脂質非対称膜リポソームを基盤とした人工トランスロコンの創出

本研究では、真核細胞の細胞膜のリン脂質組成非対称膜リポソーム膜上でのペプチドや膜タンパク質等の生体分子の相互作用観察を通して、リン脂質非対称膜の重要性の検討を目的とした。本研究課題では、大きく分け3つの成果を挙げた。1つ目は、あるリン脂質非対称膜組成であると、膜タンパク質の再構成量が増大した。2つ目は、1つのデバイスで逐次的に様々なリン脂質を持った非対称膜リポソームが作製可能なデバイスを構築した。3つ目は、リポソームの経時観察時は、ブラウン運動を抑制するためにリポソームを固定化する必要があり、静水圧で細胞やリポソームを所望の形状・順番で固定化するデバイスを開発した。本研究ではリン脂質非対称膜リポソームを用い、人工トランスロコン構築を目的とする。申請者が考案したジェット法によって作製された、リン脂質非対称膜リポソームによりリン脂質の様々な相互作用観察に成功している。無細胞タンパク質合成系で発現された膜タンパク質の人工細胞膜への再構成挙動の観察を行った。ある膜タンパク質の場合、外膜に負電荷をもつリン脂質非対称膜リポソームでは、膜タンパク質の取込みが増加した。また、一定濃度以上の負電荷リン脂質が含まれるリン脂質非対称膜リポソームで、膜タンパク質の取込みが増大することが分かりました。また、この膜タンパク質はナノポアを形成することが知られているので、膜タンパク質を再構成したリポソームの内水層から外水層への蛍光輸送を観察した。膜タンパク質の人工膜への再構成量に比例し、リポソーム内の蛍光量が減少したところから、人工膜に再構成されたこの膜タンパク質はナノポアを形成していることが分かった。リン脂質非対称膜リポソームにおいて、膜タンパク質の再構成量の制御の可能性が示唆される結果を得たため。昨年度に引続き、研究代表者が考案されたジェット法によって作製したリン脂質非対称膜リポソームに無細胞発現系より、膜タンパク質の再構成量の定量評価を行った。これらの結果をNature Chemistryにて発表をおこなった。また、1回膜貫通タンパク質の発現に成功し、現在、この膜タンパク質の再構成挙動を観察中である。人工トランスロコン構築には、様々な非対称組成のリポソームで膜タンパク質の再構成を観察しなければならない。したがって、1つのデバイスで様々な非対称膜組成のリポソームが構築できるデバイスを開発した。リン脂質非対称膜と膜タンパク質相互作用の定量的なデータを取得でき論文発表を行った。また、他の膜タンパク質において再構成実験を始めたため。昨年度は、1つのデバイスで複数組成のリン脂質非対称膜リポソーム作製デバイスの作製を開発した。今年度は、このデバイスの性能についての評価を行った。デバイスの構造は、6つのウェルを持った回転テーブルとジェット水流ノズルが存在する1つの固定ウェルからなる。各回転テーブルのウェルにリン脂質のDOPCをベースとして、Rhodamine-DOPEやBODIPY-DHPEを含んだ単分子膜を作製した。そして、回転デーブルを回転させることにより、平面リン脂質非対称膜をさせ、ジェット水流を印加し、リポソームを形成させた。例えば、Rhodamineの蛍光を持つウェルからは、Rhodamineの蛍光を持つリポソームが形成された。また、Rhodamine, BODIPY両方の蛍光を持たないウェルからは、RhodamineとBODIPY両方の蛍光が観察されないリポソームが作製された。この結果より、ウェルの回転によるリン脂質の混和が起きずにリン脂質非対称膜リポソームが形成されることが示された。これらの結果を学会及び雑誌論文で発表した。また、昨年度から引続きリン脂質非対称膜への膜タンパク質の取込み及び機能観察を行っている。今年は、様々な膜貫通数をもつタンパク質の再構成にも成功している。経時観察や細胞間相互作用を観察するためには、細胞やリポソームを同一平面上に固定化する必要がある。そこで、細胞やリポソームを任意の順番や形状で配列させることが可能なマイクロ流体デバイスを雑誌論文に発表した。来年度は、リン脂質の種類や膜流動性を変化させ膜タンパク質の再構成量を検討する。また、再構成された膜タンパク質の配向性の確認を行う。さらに、様々な膜タンパク質(膜貫通数の違い、電荷の違い)での再構成挙動の観察を行う。1回膜貫通タンパク質の再構成挙動観察と機能観察を行う。また、複数種の非対称膜リポソーム作製デバイスの信頼性を向上させる。29年度が最終年度であるため、記入しない。
溶液中における高分子構造形成の大規模シミュレーション

高分子の構造形成機構を分子レベルで解明するため、我々は溶液中における高分子鎖の分子動力学(MD)シミュレーションを行い、配向秩序構造の形成過程を解析した。高分子鎖のモデルとして、最も単純な内部構造を持つポリメチレン鎖を用い、溶媒分子のモデルとして、6個のメチレン基(CH_2)が連結した短い鎖状分子を用いた。メチレン基は一つの質点として扱い、分子力場としてDREIDINGポテンシャルを使った。シミュレーション手法として、速度Verletアルゴリズムを用いた。また、系の温度を一定に保つため速度スケーリング法を、系の圧力を一定に保つためAndersenの方法を適用した。系の圧力は1気圧に設定した。ここでは、500個のメチレン基から成る1本の高分子鎖及び、6個のメチレン基から成る3747本の溶媒分子を扱った。最初に、高温(550K)でランダムな配位の高分子溶液を作り、次にそれを様々な温度(400,350,300K)に冷却し、配向秩序構造の形成過程の解析を行った。その結果、初期において高分子鎖は広がったランダム・コイル状態を取っているが、時間の経過と共に、局所配向秩序ドメインが形成され、その後、局所配向秩序ドメインが成長し、最終的に折り畳まれた配向秩序構造を形成することが分かった。また、大域的配向秩序の成長過程を解析することにより、大域的配向秩序の成長が段階的に進行することが明らかになった。さらに、様々な初期条件、温度条件においてMDシミュレーションを実行することにより、初期条件によっては中間状態としてトロイド構造が形成されることが分かった。また、溶液中の場合、形成される配向秩序構造のステム長は、真空中の場合より長くなることが明らかになった。高分子の構造形成機構を分子レベルで解明するため、我々は溶液中における高分子鎖の分子動力学シミュレーションを行い、配向秩序構造の形成過程を解析した。高分子鎖のモデルとして、最も単純な内部構造を持つポリメチレン鎖を用い、溶媒分子のモデルとして、6個のメチレン基が連結した短い鎖状分子を用いた。また、メチレン基(CH_2)は、一つの質点として扱った。分子力場として、DREIDINGポテンシャルを使った。シミュレーション手法として、速度Verletアルゴリズムを用い、系の温度を一定に保つため、Nose-Hoover法を使った。高分子鎖及び溶媒分子の本数は、それぞれ、1本及び、3747本とした。最初に、高温でランダムな配位の高分子溶液を作り、次にそれを様々な温度に冷却し、配向秩序構造の形成過程の解析を行った。その結果、初期においては広がったランダム・コイル状態を取っているが、時間の経過と共に、トロイド構造を経て、最終的に折り畳まれた配向秩序構造を形成することが明らかになった。さらに、この配向秩序の成長が、不連続に階段状に進行することを見出した。これまで、DNAの様なsemi-flexibleな高分子の場合、トロイド構造を取り得ることは、実験及びコンピュータシミュレーションにより知られている。それに対して、ポリメチレンのような結晶性高分子の場合、実験的困難のため、トロイド構造を取り得るかどうかは明らかではなかった。溶媒分子という抵抗媒質の存在する環境においては、結晶性高分子といえどもトロイド構造を取り得ることが、本シミュレーション研究により、世界で初めて明らかになった。
沖縄県の国語教育史に関する実証的研究

本研究は、「言葉」、「教育」、「文化」、「地域」、「国家」というキーワードを手がかりにしながら、日本本土とは異なる歴史を歩んできた沖縄の言語教育(国語教育を含む)の歴史を示して、従来の国語政策を背景とする本土中心の国語教育史像の相対化を試みようとするものである。報告書に収録した5本の論文は、いずれも新しい資料を発掘しながら、地域沖縄の言語文化や言語教育の実態を解明するという成果があり、従来の沖縄の言語教育史研究に新しい知見を加えたり、先行研究に訂正を求めるものでもある。5本の論文名は、次のとおり。1.村上呂里「地域の言語文化と近代学校-八重山地域における近代学校出立の頃-」2.梶村光郎「沖縄の標準語教育史」3.梶村光郎「宮良當壮と『日本の言葉』」4.梶村光郎「沖縄の作文教育運動-沖縄作文教育協議会を中心に-」5.村上呂里「戦後沖縄『学力問題』における『言語問題』-上村(1978)を中心に-」これらの論文によって、沖縄の言語教育史の全体像への接近が進み、従来の国語政策を背景とした本土中心の国語教育史像の相対化の試みが、今後なされていくであろう。「沖縄県の国語教育史に関する実証的な研究」を行うために、第一年度にあたる本年度は、明治期以降の教育・国語教育関係雑誌を保管している教育・研究機関に出向き、沖縄県の国語教育史に関する資料や文献の調査・収集を行った。今年度の県外調査は、梶村が主に国立国会図書館、国立国語研究所、東京大学教育学部図書室。文教大学付属図書館、日教組教育図書館、日本作文の会で行った。「季刊作文教育」、子どもの作品、秋田県や鹿児島県における方言指導の記録、「昭和14年11月国語対策協議会議事録」などに関する文献を収集することができた。村上は、関西方面での調査を試みた。県内調査では、梶村が八重山の石垣小学校、宮古の伊良部小学校・佐良浜小学校、県立図書館、沖縄県公文書館などを訪れた。学校沿革史の調査の他、「沖縄教育」、各学校の記念誌や学校文集を収集することができた。こうした資料の調査・収集を経て、今年度の成果として、梶村の「宮良當壮と『日本の言葉』」という論稿が執筆された。宮良は八重山出身の言語研究者であり、方言を中心とした国語学の研究と民俗学研究の両面において業績を残した人物である。沖縄の言語研究や国語教育にとって無視できない存在である。本稿は、そうしたことを踏まえ、戦後初期に国語改革の潮流を背景に、言語改良運動を全国的なレベルにおいて展開しようとして宮良が主宰した国語雑誌の資料的意義を、沖縄県の国語教育史とも絡めて論じたものである。本年度の研究実施計画に基づき、明治期以降の教育・国語教育関係雑誌を所有している教育・研究機関に出向き、沖縄県の国語教育史に関する文献・資料の調査・収集を行った。本年度の県外調査は、梶村が主に担当し、国立国会図書館、国立国語研究所、旧国立教育研究所、東京大学教育学部図書室、筑波大学中央図書館、日教組教育図書館などで行った。村上は、関西の児童図書館などで調査を行った。雑誌『帝国教育』、『作文と教育』、『作文教育』、『教育実践』、『国語教育』、『部落』などから、沖縄の国語教育関係の論文を収集することができた。県内調査では、村上と重梶村が石垣島で共通語教育を含む言語生活に関する調査を行った。また、文献調査についても、村上が石垣の県立図書館八車山分館などで資料収集を二度にわたり行った。梶村は、宮古の各小学校の記念誌や沿革史の調査を行い、普通語(標準語、共通語)教育についての資料を収集した。研究成果としては、村上が、ベトナムと沖縄の言葉の教育史に関する比較研究についてまとめている。梶村も沖縄作文教育協議会の活動に関する論文をまとめるとともに、方言札に関する研究報告を行った。以上が今年度の成果である。本年度は、「沖縄県の国語教育史に関する実証的研究」の最終年度に当たるため、報告書をまとめるために、論文作成において必要な資料の収集を前年度同様に行った。

最終年度においても、資料の収集を追求したのは、沖縄県の場合戦火で大半の資料が消失し、県内だけで資料を得ることが難しいからである。それで今年度も、沖縄県の内外の教育・研究機関(東京大学の文学部や教育学部の図書室、国立国会図書館、独立行政法人国立国語研究所、早稲田大学図書館、法政大学沖縄文化研究所、日教組教育図書館、石垣市立図書館、石垣市立白保小学校、沖縄県公文書館など)と、個人では江口季好、大浜敏夫、宮城信勇、崎原久などの各氏にお会いし、沖縄の作文教育や標準語教育のことについてお話をうかがった。成果として、岩崎卓爾が大正期に発行した『児童の産業』(子ども向けの新聞)、生活綴方関係の子ども向け雑誌である『鑑賞文選』と『綴り方倶楽部』、竹原家文書『作文宿題』、文集『ひなわし』など、比較的入手が困難な資料を収集することができたことがあげられる。報告書の作成については、梶村は「宮良當壮と『日本の言葉』」と「沖縄の作文教育運動」を、村上は「地域の言語文化と近代学校-八重山地域における近代学校出立の頃-」を、それぞれリライトして収録する。この他に、収集した資料、たとえば、子どもの作品や沖縄作文の会の機関誌について紹介する。
不死化培養角膜上皮細胞を用いた角膜上皮細胞の細胞増殖と分化の制御メカニズムの解明

初年度は温度感受性不死化細胞株の培養温度による性状変化に関する基礎的データの収集を行ない、以下の結果を得た。1.不死化株の培養温度による細胞増殖能の差温度感受性不死化細胞株を32°C、37°C、42°Cの3条件で組織培養をおこなった。その結果、37°Cで細胞増殖は対数曲線を示したのに対し、32°Cで細胞増殖は認められず、42°Cでは一定の増殖の後、プラトー状態となった。2.不死化株の培養温度によるT抗原発現の差上記3条件のうち、細胞の生着を認めた、37°C、42°Cの培養温度でT抗原発現を経時的に抗T抗原抗体を用いた免疫組織化学法にて検討をおこなった。その結果、37°Cでは常に強い染色性を示した。一方、42°Cでは細胞増殖の停止とともに染色性の低下を認めた。3.不死化株の培養温度による細胞形態の差上記3条件のうち、細胞の生着を認めた、37°C、42°Cの培養温度で細胞培養をおこない、位相差顕微鏡、走査型、透過型電子顕微鏡で観察をおこなった。その結果、37°Cでは均一な敷石状の形態を示し、細胞間の接着機構を有しなかった。一方、42°Cでは重層化の後、家兎角膜上皮初代継代培養に類似した形態を示した。以上、角膜輪部上皮-幹細胞の分化機構解明のモデルとして、SV40ウイルスの変異株から分離された、温度感受性T抗原遺伝子を角膜輪部上皮細胞に導入した不死化株を作成した。その結果、培養温度を変化させることによりT抗原発現を介し細胞増殖能を制御し、形態学的分化の誘導可能な不死化培養細胞株の作成に成功した。
ES細胞を用いた心筋幹/前駆細胞の同定と心筋分化再生への応用

【目的】本研究は、心筋に分化する幹細胞または前駆細胞を予見的(prospective)に同定し、心筋分化機構の解析を行うとともに、心再生医療へ応用可能な新しい心筋分化誘導技術の開発を目的とする。すなわち、1)心筋分化能を有する幹/前駆細胞の単離同定。2)同定した細胞の維持培養、大量培養法の開発。3)同細胞からの効率的心筋分化誘導法の確立。4)心筋分化関連遺伝子の網羅的クローニング。5)誘導心筋細胞の移植による心筋再生療法への応用。6)得られた知見の体細胞への応用。以上により、心筋再生医療へ向けた心筋分化における幹細胞生物学と分化機構に関する基礎的知見の蓄積と新しい細胞培養技術の開発を行う。【結果】ES細胞由来Flk1陽性細胞から単一細胞レベルで心筋を分化誘導することが可能な新しい心筋分化誘導システムを構築し、心筋前駆細胞の予見的同定を行った。Flk1陽性細胞から心筋分化途上において、高い心筋分化能を有する心筋前駆細胞の同定に成功した(Yamashita et al.,論文改訂中)。同システムを用いて心筋分化における細胞レベルでの遺伝子プロファイルの検討を行っている。また、テトラサイクリン誘導性siRNA発現システムをES細胞に導入し、ES細胞分化途上における遺伝子機能解析システムの開発に成功した。すなわち、Flk1陽性細胞から内皮細胞への分化途上において内皮細胞マーカーVE-カドヘリン遺伝子発現を抑制し、VE-カドヘリン陰性内皮細胞の誘導に成功している(Hiraoka-Kanie et al.,投稿準備中)。同システムを用いて、同定心筋分化関連遺伝子の機能解析がES細胞分化系を用いて簡便に行うことが可能となった。【結語】新しい心筋分化誘導システムを用いて、心筋前駆細胞群の同定に成功した。さらに心筋分化遺伝子機能解析が可能な新たなシステムを構築した。【背景・目的】本研究は、単一細胞からも心筋細胞を分化誘導できる我々の新しいES細胞心筋分化系の利点を生かし、心筋に分化する幹細胞または前駆細胞を予見的(prospective)に同定し、心筋幹/前駆細胞の分化誘導と単離を行い、心筋分化機構の解析を行うとともに、心再生医療へ応用可能な新しい心筋分化誘導技術の開発を目的とする。すなわち、1)心筋分化能を有する幹/前駆細胞の単離同定を行う。2)同定した細胞の維持培養、大量培養法の開発を行う。3)同細胞からの効率的心筋分化誘導法を確立する。4)心筋分化関連遺伝子の網羅的クローニングを行う。5)誘導心筋細胞の移植による心筋再生療法への応用を検討する。6)得られた知見を体細胞における幹/前駆細胞の同定と心筋分化誘導に応用する。以上6項目の検討により、心筋再生医療へ向けた心筋分化における幹細胞生物学と分化機構に関する基礎的知見の蓄積と新しい細胞培養技術の開発を目的とする。【結果】本年度は、心筋前駆細胞分画の探索を行い、Flk1陽性中胚葉細胞から心筋細胞への分化途上において、全体の約5%前後に相当する細胞分画に、心筋分化能が他の細胞分画の約5-15倍濃縮していることを見出した。この細胞群の単一細胞培養をしたところ、約80%のコロニーに心筋細胞の出現を認め、同細胞群は高い心筋分化能を有した心筋前駆細胞と考えられた。Flk1陽性細胞からの心筋分化および新たに同定した心筋前駆細胞の分化はともに、BMPシグナル阻害剤により抑制され、心筋分化過程におけるBMPシグナルの重要性が明らかとなった(未発表)。現在、心筋前駆細胞の分化誘導法等、研究計画2)-5)について検討中である。【結語】高い心筋分化能を有した新たな心筋前駆細胞群を同定することに成功した。

同システムを用いて、同定心筋分化関連遺伝子の機能解析がES細胞分化系を用いて簡便に行うことが可能となった。【結語】新しい心筋分化誘導システムを用いて、心筋前駆細胞群の同定に成功した。さらに心筋分化遺伝子機能解析が可能な新たなシステムを構築した。
投影法による生涯学習の効果に関する基礎的研究

生涯教育・生涯学習は現代社会の重要課題だが、その効果について客観的に測定・評価したものは見当らない。それは、同一の心理検査などを用いて一貫して効果測定をするのに、年齢的に検査によって効用と限界があるためである。そのなかにあって、投影法のひとつの代表としてのバウムテストは実施が容易、一貫して測定可能、被験者に精神的負担が少ない、測定・評価が信頼性・妥当性に富むことがこれまでの研究で明確化された。そこで主としてこのバウムテスト(樹木画)を中心に、幼児期から高齢期(70才代)までを中心として概ね1500名を対象に生涯教育の効果を測定することとした。結果的に、要約して次のことが明らかになった。(1)抽出され樹木での樹冠と幹との比率は、被験者の環境への対処を示唆するが、ここでは、比率がU字型(幹>冠、→幹=冠、→冠>幹、→幹>冠)に加齢的に変化する。(2)画面に対して樹木を抽出する広さ(面積)は逆U字型(小→大→小)に加齢的に変化する。また、画面に対して樹木を抽出する位置は、加齢的にみて、左下→左下→右上・左上といった形で変化していき、全体として、画面下部から画面上部に抽出するといった具合に変移していくことがわかった。(3)特に高齢者について在宅老人と施設収容老人とを比較すると、在宅老人の方が画面に対してより広く大きな樹木を抽出することが見出された。また、中年期ないし熟年期の男女の樹木画を比較すると、女性の方が男性よりもより広く大きく樹木を抽出することも明らかになった。このような概要的結果からみて、(1)高齢者の場合、孤立化せず、家族とともに在宅し、あいるは高齢になっても高齢者対象のシルバ-大学や老人大学等社会的刺激の多い場面に接しているか否かが樹木抽出からみて、より若年層に近い状態を持続していること、(2)中年期では、相対的にみて、社会的ストレスの多い男性の方が樹木抽出が収縮することなどが明らかとなり、社会的中堅層へのストレス解消の健全な方策が課題であることなどが示唆され、生涯教育の重要性を暗示した。
ラット小脳由来神経分化誘導因子の機能解析

我々は新規神経分化誘導因子を単離するために、ラット小脳cDNA発現ライブラリーを作製し.COS-1細胞に導入して一過性に発現させ、その順化培地をPC12細胞に加え交感神経様細胞に分化誘導するcDNAのクローニングを試みた。その結果、cDNAクローン398(grp75R3)が得られた。本クローンは約1.1kbのインサート配列を有し、ヒートショクタンパク質ファミリーに属するラットgrp75のC末端領域に高い相同性を示す67アミノ酸から成るORFが存在する。本因子の神経分化における役割を明かにするために、まず大腸菌での大量生産システムを確立し、ポリクローナル抗体を作製した。次に、grp75R3を安定に発現するCOS-7細胞(grp75R3細胞)を樹立し、本因子の分化誘導能について解析を行った。その結果、COS75R3細胞の順化培地はPC12細胞を交感神経様細胞に分化誘導する高い活性示したが、grp75R3は検出されなかった。そこで、COS75R3細胞の培養上清に存在するNGFファミリー神経栄養因子であるNGF,BDNF,NT-3についてRT-PCR及び抗体を用いて解析を行った。その結果、COS-7細胞内で発現されたgrp75R3は直接PC12細胞を分化させるのではなく、COS-7細胞内でNGF遺伝子発現を選択的に促進することによってPC12細胞の分化を誘導していることが判明した。さらに、grp75R3と高い相同性を有し、ラット脳を含む種々の組織で発現が見られるgrp75もにも同様な作用が認められた。また、ラットグリオーマC6細胞にgrp75R3及びgrp75を導入した場合でもNGF mRNAの選択的な発現誘導が認められた。これらのデータ及びラットを絶食させると脳内でのgrp75mRNAの発現が誘導されることより、ストレスによってグリア細胞でのgrp75或いはgrp75R3の発現が促進される。その結果、NGF遺伝子の発現が上昇し、NGF、応答性のコリン作動性神経細胞などの生存が維持されるものと思われる。我々は今までに小脳mRNAを材料としてpCD-2発現ベクターを用いてcDNAライブラリーを作製し、COS-1細胞に導入して一過性に発現させ、その順化培地をPC12細胞に添加すると交感神経様細胞に分化誘導するするクローン398が得ている。本クローンは約1.1kbのインサート配列を有し、ヒートショクタンパク質ファミリーに属するラットgrp75のC末端領域に高い相同性を示す67アミノ酸残基から成るORFが存在する。本研究においては、まずクローン398にコードされる67アミノ酸残基から成る新規神経栄養因子の大量生産システムの確立と特異的抗体の作製を試みた。クローン398にインサート配列をPCR法により増幅し、pTZ19RのSma Iサイトにサブクローニングした。このクローンをSau 3AIで処理し、Bam HIとEco RIで処理したpGEX-2Tに導入してCSTとの融合タンパク質を発現するプラスミドを作製した。本プラスミドを導入したJM109株を100μM IPTG存在下で培養し、融合タンパク質を得ることができた。融合タンパク質は、菌体を超音波で可溶化後、グルタチオン-セファロースカラムにかけ還元型グルタチオで溶出した。その結果、500ml培養から1.2mgの融合タンパク質が得られた。次に、融合タンパク質50μgをBALB/cA

Jclマウスの皮下に投与して、抗体の作製を試みた。その結果、ウエスタンブロット法で融合タンパク質を認議する抗体を得ることができた。しかし、モノクローナル抗体の作製はできなかった。来年度は、融合タンパク質とそれに対す抗体を用いてPC12細胞に直接作用させることによって交感神経様細胞に分化させることができるのかどうか、またクローン398がαCOS-1細胞での神経栄養因子の発現を誘導して間接的に作用しているかどうかを明らかにする予定である。我々は今までに小脳mRNAを材料としてpCD-2発現ベクターを用いてcDNAライブラリーを作製し、COS-1細胞に導入して一過性に発現させ、その順化培地をPC12細胞に添加すると交感神経様細胞に分化誘導クローン398(grp75R3)を得ている。本クローンは約1.1kbのインサート配列を有し、ヒートショクタンパク質ファミリーに属するラットgrp75のC末端領域に高い相同性を示す67アミノ酸から成る0RFが存在する。昨年度の研究においては、本grp75R3の大腸菌での大量生産システムを確立し、マウスを用いてポリクローナル抗体の作製に成功した。本年度においては、grp75R3を安定に発現するCOS-7細胞を樹立し、本因子の分化誘導能について解析を行った。pBK-CMV発現ベクターにgrp75R3を導入し、pBK-CMV-grp75R3を作製した。次に、本発現ベクターをリポフェクション法によりCOS-7細胞に導入し、G418でセレクションを行ってgrp75R3を安定に高発現するCOS75R3細胞を樹立した。この細胞のライセートを昨年度作製した抗grp75R3抗体を用いてウエスタンブロット法で調べたところ、約12kDaの位置にバンドが検出された。本因子の推定分子量は6.7kDaであるので、糖鎖の付加やリン酸化などの修飾を受けいるものと考えられる。COS75R3細胞の培養上清でPC12細胞を処理したところ、交感神経様細胞に分化し、神経突起の伸長が認められた。しかし、順化培地をウエスタンブロット法で解析したところ、12kDaのgrp74R3のバンドは認められなかった。これらの結果は、grp75R3が直接PC12細胞の分化に関与していないことを示唆おり、来年度はCOS75R3細胞の培養上清に存在する分化誘導因子について解析を行う予定である。我々は今までに小脳mRNAを材料としてpCD-2発現ベクターを用いてcDNAライブラリーを作製し、COS-1細胞に導入して一過性に発現させ、その順化培地をPCl2細胞に添加すると交感神経様細胞に分化誘導クローン398(grp75R3)を得ている。本クローンは約1.1kbのインサート配列を有し、ヒートショクタンパク質ファミリーに属するラットgrp75のC末端領域に高い相同性を示す67アミノ酸から成るORFが存在する。平成10年度の研究においては、本grp75R3の大腸菌での大量生産システムを確立し、ポリクローナル抗体の作製に成功した。平成11年度においては、grp75R3を安定に発現するCOS-7細胞を樹立し、本因子の分化誘導能について解析を行った。その結果、COS75R3細胞の培養上清にはPCl2細胞を交感神経様細胞に分化誘導する高い活性が認められたが、grp75R3は検出されなかった。
ポリオウィルス感染モデルマウスに導入された遺伝子のモニタリングに関する研究

本年度は、導入遺伝子近傍のゲノム領域のクローニングと遺伝子型スクリーニング法の開発を行った。a.導入遺伝子と宿主ゲノムのジャンクション部位のクローニング:ジャンクション部位をカバーした約3kbの断片が得られる制限酵素BglIIによりTgホモ個体ゲノムDNAを消化し、ショ糖密度勾配遠心法によってジャンクション部位を含む断片を回収した。inverted PCR法により塩基配列が未知であるゲノム領域を増幅し、得られたPCR産物のダイレクトシークエンシングにより、導入遺伝子より上流のゲノム領域約1kbをクローニングした。ホモロジー検索の結果、第13染色体B3領域にマップされているBAC Clone No.RP23-62F4(全長約324kb)の一部と配列が一致した。b.PCRによる遺伝子型スクリーニング法の確立:a.の解析結果から、遺伝子が導入された座位の野生型アレルを検出するプライマーセットAを設計し、導入遺伝子を検出するプライマーセットBと共にduplex PCRを行った。PCR産物を視覚化した際に、Tgヘミ個体は野生型アレルと導入遺伝子、Tgホモ個体は導入遺伝子のみのバンドが検出されるようduplex PCRの条件設定を行ったが、Tgホモ個体において野生型アレルの非特異的なバンドが出現したことから、ヘミおよびホモ個体の判別が困難であり、本法による遺伝子型スクリーニングは有効ではないと判断した。そこで、導入遺伝子近傍に残存しているファウンダー系統(ICR)のゲノム領域に着目し、ICRと本マウスのレシピエント系統であるIQIとの間で多型を示し、かつTgと強く連鎖するマイクロサテライトマーカーの検索を行った。その結果、導入遺伝子より約2.0cMの距離に位置するD13Mit10を見出した。本マーカーはホモ個体においてICRタイプのホモ型、ヘミ個体においてICRタイプとIQIタイプのヘテロ型を示すとことから、ヘミおよびホモ個体の判別に有用であると考え、来年度より本マーカーを用いた遺伝子型スクリーニングを実施することとした。本年度はポリオウィルス感染モデルマウスの導入遺伝子モニタリングの方法について検討を行った。本マウスに導入された遺伝子が経世代的に安定して伝達されているかを調べるため、N3ヘミ個体群、N20ヘミ個体群およびnon Tg(野生型)個体群の計3群を対象とし、以下の解析を行った。b.構造:解析対象のゲノムDNAをBamHIにて消化し、Southern blot解析を行った結果、出現するバンドパターンは既報告と一致し、N3およびN20の間に差は認められなかった。c.発現:(1)mRNA全長の検出:解析対象の脳からtotal RNAを抽出し、Northern blot解析を行った結果、両世代ともに既報告と一致する約3.3kbの転写産物が得られた。(2)mRNAの検出:alternative splicingが生じる領域を検出するプライマーを用いてRT-PCRを行った結果、既報告と同様に両世代の脳、腎臓および小腸でα、βおよびγ型mRNAが検出された。(3)PVRαcoding領域の塩基配列:主要な転写産物であるα型PVR遺伝子の塩基配列をRT-PCR-direct sequencing法により決定した結果、両世代ともに塩基置換等の変異は認められなかった。以上の結果から、本マウスに組み込まれたPVR遺伝子は構造、発現および機能を保持したまま安定して受け継がれていることが示唆された。以上のことを踏まえ、本マウスにおける導入遺伝子モニタリングは、比較的おおまかな導入状況を検出するFISH解析および遺伝子機能の状況を検出するためのPVRαcoding領域塩基配列確認の2点について、原種の世代更新時に実施することを決定した。
上行結腸穿孔敗血症モデルにおける転写因子エヌエフカッパビーとアラキドン酸の役割

我々は臨床に即したモデルとしてマウスの上行結腸穿孔ステント敗血症モデル(CASP)を確立した。炎症関連分枝の発現の抑制作用をもつNFkB認識配列を有する二本鎖オリゴヌクレオチド(NFkBデコイ)を治療薬として投与した。16時間前に100μg投与後、術後に200μg投与する群の死亡率は27%から0%に改善され、気管内洗浄液中のロイコトリエン濃度は、4.2ng/mlから1.3ng/mlと有意に減少した。腹腔内投与により腹腔内の炎症が抑えられ、肺への炎症が抑えられた結果と考えられる。臨床的にも腹腔内投与で簡便で著しい侵襲性を要せず、消化管穿孔の手術待機時の敗血症性ショックの予防になる可能性がある。アラキドン酸から発生するロイコトリエンやプロスタグランジンは、重要な炎症反応のメディエーターである。近年、プロスタグランジンはシクロオキシゲナーゼ(COX)の経路だけではなく、cysLT1受容体やLTC4によっても生じることが判明した。またこの反応は、炎症反応のシグナルを受けていない時は生じないことからCOX-2によるものであると断定されLPSによる刺激も同様のCOX-2の活性により生ずる。よってこのcysLT1受容体拮抗薬やLTC4の拮抗により、COX-2の活性化が抑制され、上行結腸穿孔ステント敗血症モデルの炎症反応も抑制され、生存率の増加につながると仮説をたてた。一方、1986年に免疫グロブリンのkL鎖遺伝子のエンハンサー領域に結合する転写因子として同定されたNF-Kbは炎症の刺激に対する細胞内シグナルとして重要な働きを持つため、この経路を阻害すれば炎症のカスケードを根本から断つ事が出来ると推測する。LPSの実験系では立証されている。本研究計画にて本年度は無治療群のBALF中インターロイキン、ロイコトリエンの測定、解析によりNFkBならびにcysLT1、LT4受容体の関連性を明らかにした。従来の対症療法から、炎症反応の阻害という病態の根本的治療法への変換、上行結腸穿孔ステント敗血症モデルを使用することでより臨床に即したものとなること。NFkBの阻害ならびにcysLT1,LT4受容体阻害により、炎症の程度がどこまで押さえられるか、病理学的ならびにメディエーターの測定解析は重要なものであり、その予測される結果の重要性は高い。また生存率まで言及することができ、臨床医学への貢献も期待される。我々は臨床に即したモデルとしてマウスの上行結腸穿孔ステント敗血症モデル(CASP)を確立し、その24時間死亡率は27%であった。同じモデルに炎症関連分子の発現の抑制作用をもつNFkB認識配列を有する二本鎖オリゴヌクレオチド(NFkBデコイ)を治療薬として投与した。本剤を腹腔内投与し、投与方法を2群にわけた。NFkBデコイ200μgを上行結腸穿孔ステント術後に単回投与する群(NFkB群)N=12と16時間前に100μg投与後術後に200μg投与する群(pre NFKB群)N=12とした。NFkB群の死亡率は25%と有意には減少しなかったが、pre NFkB群では死亡率は0%であり改善された。CASP群の体重減少は5.9%、NFkB群では7.7%、Pre NFkB群では1.6%だった。各群の気管内洗浄液中のロイコトリエンの濃度は、CASP群4.2ng/mlがNFkB群1.2ng/ml、pre NFkB群では1.3ng/mlと有意に減少した。このことは、腹腔内投与により腹腔内の炎症が抑えられ、肺への炎症も抑えられた結果であると考えられる。今回の実験では臨床的にも腹腔内投与で簡便で著しい侵襲性を要せず、消化管穿孔の手術待機時の敗血症性ショックの予防ともなる可能性がある。今回の測定で各群の気管内洗浄液中のTNF-αは、有意差はなかった。これはTNF-αの発現時間によると思われる。効果を判定するには、治療後6時間などのもっと早期の測定が必要な可能性がある。より効果を得るためには、HVJリポソームなどでNFkBデコイを封入し、静脈内投与し肺に集積させ肺への炎症抑制を強めるなどの工夫が今後必要となってくると思われる。また今回は上行結腸にステントを留置したため、腸管の修復はなかったが穿孔によるモデルでは、さらなる改善が期待できる可能性がある。

アラキドン酸から発生するロイコトリエンやプロスタグランジンは、重要な炎症反応のメディエーターである。近年、プロスタグランジンはシクロオキシゲナーゼ(COX)の経路だけではなく、cysLT1受容体やLTC4によっても生じることが判明した。またこの反応は、炎症反応のシグナルを受けていない時は生じないことからCOX-2によるものであると断定されLPSによる刺激も同様のCOX-2の活性により生ずる。よってこのcysLT1受容体拮抗薬やLTC4の拮抗により、COX-2の活性化が抑制され、上行結腸穿孔ステント敗血症モデルの炎症反応も抑制され、生存率の増加につながると仮説をたてた。一方、1986年に免疫グロブリンのkL鎖遺伝子のエンハンサー領域に結合する転写因子として同定されたNF-Kbは炎症の刺激に対する細胞内シグナルとして重要な働きを持つため、この経路を阻害すれば炎症のカスケードを根本から断つ事が出来ると推測する。LPSの実験系では立証されている。本研究計画にて本年度は無治療群のBALF中インターロイキン、ロイコトリエンの測定を行い関連性を明らかにした。従来の対症療法から、炎症反応の阻害という病態の根本的治療法への変換、上行結腸穿孔ステント敗血症モデルを使用することでより臨床に即したものとなる。NFkBの阻害ならびにcysLT1,LT4受容体阻害により、炎症の程度がどこまで押さえられるか、病理学的ならびにメディエーターの測定解析は重要なものであり、その予測される結果の重要性は高い。また生存率まで言及することができ、臨床医学への貢献も期待される。16Gでの腸管穿孔敗血症モデルは確立しており、その気管洗浄液中のロイコトリエンも上昇している。気管洗浄液中のLTC4/D4/E4はCASP 6時間群が24時間群と同等の上昇を認めていた。この理由をつきとめるべく、血液中の白血球数をカウントしたところ、CASP 6時間と24時間では敗血症のため24時間群が1/3以下となっており、肺内の白血球数が6時間では高いため、気管洗浄液中のLTC4/D4/E4も高くなっていることが証明された。ただ16Gでの腸管穿孔敗血症モデルは死亡率が高く、5LOのブロッカーであるMK886を投与しても、マウスの活動性の上昇、白血球数の低下にはつながっていない。(CASP 6hrs vsMK886:WBCcounts in BALF MEAN 35 vs 31)モデルを確立されている緩徐な20G,22Gのステントにすることにより、死亡率を少し低下させ、より多くの治療効果がわかるようにする。NFkB decoyの投与ならびにMK886,MK571のブロッカー投与および両者の併用により死亡率の改善、気管洗浄液中のロイコトリエンが低下するかを確認していく。治療群のプロトコールを作成し、投与時期、投与回数を含めプロトコールを作成する。治療群の気管洗浄液内のロイコトリエン量、血清中のTNF-alpha、IL-6の量を測定する。拮抗薬の効果とその評価ならびに実験結果の発表、論文の作成国内外の学会にて発表し、意見交換を行い論文発表をし貢献する。治療群(NFkBデコイ投与群、MK886投与群,NFkBデコイ+MK886投与群)の治療薬投与量確立のための予備実験、確立後の気管洗浄液中のロイコトリエン、インターロイキン濃度の測定を行う予定である。治療群(NFkBデコイ投与群、MK886投与群、NFkBデコイ投与+MK886投与群)の治療薬投与量の確立のための予備実験、ならびに確立後の気管内洗浄液内ロイコトリエン濃度、インターロイキン濃度の測定、ならびに臓器内のRNA測定を行う予定である。
テフラ・データベース作成のための最近10万年間の高精度火山噴火編年

九州の霧島火山,阿蘇火山,九重火山の過去約10万年間のテフラの層序と分布の詳細を明らかにした。テフラから霧島・阿蘇・九重の各火山の高解像度の爆発的噴火史の復元を試みた。霧島火山や阿蘇火山は成層火山の形成を伴う爆発的噴火を繰り返しているが,九重は,溶岩ドーム形成が主体で,爆発的噴火は少ない。噴出率については,阿蘇は最近低下しているが,霧島と九重は増加傾向にあり,将来大規模な噴火が発生する可能性が高い。九州の主な火山のテフラ・データベース作成のために、テフラを用いた各火山の過去10万年間の高精度の火山活動史を明らかにする。さらにテフラの層序や分布、産状をデータベース化する。本年度は,テスト的テフラ・カタログのデータソースとなる火山の選定とそのテフラ・データの収集を行った.火山は,阿蘇・九重・霧島とした.姶良・霧島火山は,すでに地質調査は終了し,既存の研究資料も収集された.来年度にデーターベースの作製に入る予定である.姶良火山は過去10万年間活動的であったが,特に5万年前以降活動的である.3万年前の姶良火砕流噴火が起き,現在は桜島の活動が続いているが,巨大なマグマ溜りの存在が予想され,姶良火山は将来大規模噴火が起こりうる危険な火山である.霧島火山は,過去10万年間非常に活動的で,特に最近3万年間は,新期のステージに入り大型の火砕丘群を形成するような爆発的噴火を繰り返し,多数のテフラを放出している.阿蘇火山も地質調査はほぼ終了したが,テフラの年代および給源火山に関して,不明な点があり,来年度も補足的に調査を続行し,20年度にはデータ・ベース作製を行いたい.これまでのところ,阿蘇火山中央火口丘は,9万年前以降噴火頻度が高く,活動的であるが,マグマ溜りが分割され,阿蘇4火砕流のような大規模火砕流噴火は今後起きそうにない.また最近1万年間は活動が穏やかで,過去9万年間の活動の中で極めて特異である.雲仙・九重火山は,今年度地質調査を行ったが,天候不順のため給源地域(溶岩ドーム群)の調査が行えず,来年度および再来年度調査を継続し,データベース作製は最終年度の予定である.本年度は、阿蘇・九重火山のテフラ・データの編集と雲仙火山・福江火山のテフラ調査を行った。阿蘇・九重火山に関しては、去年度までのデータ編集と論文化を行っている。阿蘇火山中央火口丘は、9万年前以降噴火頻度が高く、活動的である。九重火山は約5万年前の飯田火砕流噴出以後、溶岩ドーム崩壊型火砕流に伴う小規模降下火山灰と小規模の降下軽石・スコリア噴火を行っている。その噴火頻度や規模は阿蘇中央火口丘に較べ10分の1と極めて小さい。しかし、溶岩ドーム噴火そのものは考慮していないので、過小に評価している可能性がある。雲仙火山については、古期雲仙火山の調査を行った。しかし、軽石流以外顕著なテフラはなく、溶岩流主体の活動であった。ただ、地上に露出する火砕流については、過去50万年間の層序がほぼ確立した。福江火山では、富江・赤島・黄島・黒島・嵯峨ノ島・岐宿の各火山の地質調査を行った。黄島・黒島・嵯峨ノ島では、マグマ水蒸気噴火に起因する火砕サージ堆積物を確認した。これらの火山は間氷期の高海面期に活動したことは明らかである。K-Ar年代測定のために各火山の溶岩をサンプルし、測定を行っている。本年度は、朝鮮半島チュガリョン火山の噴火史の総括、五島列島福江火山群の層序と年代測定を行った。チュガリョウン火山は、朝鮮半島中央部、北朝鮮と韓国の国境付近に形成された玄武岩質の盾状火山である。地理的な困難さもあって、その活動史はほとんどわかっていなかった。去年度までの野外調査とカリウム・アルゴン年代測定により、その一部が明らかとなった。チュガリョン火山は少なくとも、50万年前には活動を開始し、大規模な玄武岩質溶岩を噴出し、その一部はソウルや黄海、日本海にまで達していた。その後35万年間の休止期間を経て約15万年前に大規模な玄武岩質溶岩流の噴火があり、漢灘江上流部を埋め尽くした。さらにその後スコリア丘の形成を経て、現在は休止期間に入っている。噴火周期は3040万年間で、次回は2015万年後と推定される。長崎県の福江火山群では、従来50万年前が最古の活動と考えられてきた。しかし、今回、古くは約200万年前から噴火が起きていたことがわかった。これにより、1000万600万年前に北松浦半島で起きたマントル上昇流の単純な延長モデルは通用しなくなった。

済州島に代表されるような西側の東シナ海からの新たなマントルの流れを想定しなければならないようである。また、福江火山群では、海水とマグマの接触によるマグマ水蒸気噴火がたびたび起き、火砕サージや降下火山灰などのテフラがしばしば生産されてきた。宮崎平野に分布する段丘面を覆うテフラは,南部で25m以上,北部で5m以下の厚さで分布しており,日向ロームと呼ばれている。また,中前期の堆積物中にも多数の水成テフラが確認される(Endo,1968;木野・太田,1976;木野ほか,1984;遠藤・鈴木,1986;長岡,1986;図.2)。これらの後期更新世から完新世までの層序については,ほぼ確立しているが、中前期更新世のテフラ層序については,平野全体の層序や対比が確立していない。本発表では,宮崎平野における前期・中期更新世のテフラ層序を確立し,後期更新世から完新世のテフラ群と併せて、過去60万年間の霧島火山の爆発的噴火史を考察する。テフラについては,双眼実体顕微鏡による斑晶鉱物および火山ガラスの観察と温度一定型屈折測定法により屈折率測定を行った。さらに,一部のテフラのフィッション・トラック年代測定を行った。宮崎平野から霧島火山東麓に分布する過去約100万年間のテフラは50ユニット以上あり,その約8割は、霧島火山やその近傍を給源とする。テフラから霧島火山周辺の爆発的噴火史の復元を試みた。テフラは,900-600kaの先霧島火山群と550-0kaの霧島火山によるものに分けられる。先霧島火山群の詳細は不明である。一方、霧島火山は、550-300Maの古期霧島火山と300-0kaの新期霧島火山の2つの活動時期に分けられる.古期霧島火山は,カルデラ形成を伴う2度の大規模な小林笠森・加久藤火砕流の噴火を特徴とし、さらに間欠的なプリニー式・ブルカノ式・マグマ水蒸気噴火を伴う。こうした噴火の特徴から、古期霧島火山は、ブルカノ式噴火やマグマ水蒸気噴火からなる01ステージ(約550ka)、大規模な小林笠森降下軽石・火砕流を噴出し、小林カルデラを形成した02ステージ(約500ka)、プリニー式噴火やマグマ水蒸気噴火からなる03ステージ(約400ka)、大規模な加久藤火砕流噴出と加久藤カルデラ形成からなる04ステージ(約300ka)に細分される。新期霧島火山の爆発的活動は、加久藤火砕流噴火直後の0.3Maから始まり、現在に至る。テフラに基づくと,霧島火山の爆発的噴火は,平穏期および休止期の存在,噴出率の違いなどにより,Y1ステージ(300130ka),Y2ステージ(13050ka)は,Y3ステージ(5030ka),Y4ステージ(3050ka)に区分される。いずれの活動も溶岩流と降下テフラを主体とする噴火からなる。Y3ステージは霧島火山の活動の中で,最もテフラの噴出率が最も高く,爆発的で大量の降下テフラを広い範囲に飛散させた時期である。
アフリカ音楽の世界的興隆とアフリカ文化表象の無意識的政治性に関する基礎的研究

本研究で目標としていたのは大きく分類すれば二つある。一つは、日本におけるアフリカ音楽とアフリカ文化表象を関連づける研究の方向性を明確にすることである。アフリカ音楽に関しては学術的な言説と商業的な言説が存在する。前者は文化人類学的な研究が多いが基底にあるものは「音楽」としてよりも「音文化」として文化の中に埋め込まれている「音」のあり方を提示しようとするものであり、その視点から逆に「音楽」という概念自体を相対化しようと試みるものである。私見では川田順造を中心とした研究が特に西アフリカを舞台として精緻な形で実施されこの分野での実績をあげているが、他の民族音楽の研究の多くは民族の音文化、民族音楽は多様であるとしながらも安易な文化相対主義的な立場を前提としている印象は否めない。かつてE.リーチが「蝶の収集」として揶揄した文化提示の方法が民族音楽の映像やテキスト資料の内部に亡霊のように生き延びているという印象を受けた。むしろ商業的な効果を意識しつつもアフリカの音楽を日本に紹介してきた中村とうようを中心とするアフリカ音楽の捉え方のほうが現在のカルチュラル・スタディーズ(Cultural Studies/文化研究)を先取りしているようで興味深い。日本でアフリカ音楽を聴くこと・演奏することの意味が主題化されるような研究を推進することの必要性を痛感した。本研究のもう一つの目標は基礎的な資料の収集とデータベースの構築にある。基礎的な資料はほぼ揃いデータベース化も進んでいる。当初予定していたインターネット上での資料の公開は現在のハードウェアの性能、ネットワーク上の著作権や盗用の問題、プレゼンテーションの形式など複雑な問題が錯綜しているため今後も慎重な検討を必要とする。資料の徹底化及びネットワーク上での資料公開の方法を明確にするという課題が残った。本年度は国内で収集可能なアフリカ音楽関係資料の収集・整理を行った。特に1980年以降のCDは最新のものも含めて重要なものはカバーすることができた。また、雑誌に関しては、音楽雑誌だけでも数十種類のものがあり、どの雑誌をメインに検討するのかに多少の時間を要したが、論じるべき点を明確にするために「ミュージック・マガジン」を検討すべき資料としたため1985年以降のバックナンバーを全て揃えた。これらの集められた資料は購入したパソコンでデータベース化されている。また、インターネット上のWWWのアフリカ音楽関連のサイトも積極的に見つけるようにし、実験的に大学に開設しているホーム・ページにリンクを張る試みなども行なっている。また、データベース化された資料の一部にもアクセスできるようにしてみた。ただし、まだ実験的な段階なので公のものとするまでには、少々時間がかかりそうである。次ぎに資料収集の傍らアフリカ音楽に対するジャナーリスティックな言説(特に「ミュージック・マガジン」)と学術的な言説に注目しながら映像の構成の仕方やCDのライナーノ-ツを検討してきたが、同じようにアフリカの音楽を扱っているにも関わらず両者の言説は思った以上に乖離している印象を受け、2つの言説を節合しようという試みは殆ど見られなかった。但し、欧米ではCS (Cultural Studies)を中心にポピュラー音楽の見直しは盛んであり、興味深い成果もいくつかみられる。また、アフリカのポピュラー音楽での有名なア-ティストたちは殆ど、P.ガブリエルがアフリカの現代音楽をイギリスに普及させようと提唱して始まったWOMAD (World of Music Arts and Dance:音楽芸術とダンスの世界・祭典)を通して世界で活躍するようになっているが、日本ではWOMADがアフリカ音楽の受容としてのみ開催されているのではなく、日本を含めたアジアの音楽を世界へ向けて発信する場として利用されているのも興味深い。研究成果の公表について本研究は申請した研究の性格上、通常の学術論文としての形式をとりにくい。