hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
抄紙システムによる多機能性シート状ゼオライト複合体の創製

抄紙システムにより調製した酸化チタン(TiO_2)-ゼオライト複合シートを用いて、酸性雨等を引き起こす窒素酸化物(NOx)の分解実験を行った。シートを置いた反応容器中に0.25ppm一酸化窒素(NO)を供給し、容器出口のNOx濃度[=NO+二酸化窒素(NO_2)]を測定することにより、性能評価を行った。NOは、光触媒酸化により、同じく大気汚染物質であるNO_2、さらに酸化されると硝酸(HNO_3)が生成する。HNO_3の酸化チタン表面上の蓄積は、光触媒能を低下させる。そこで、NO_2の放出、酸化チタン表面上のHNO_3の蓄積を防ぐ目的として、ゼオライトA型(ZeA)、ゼオライトY型(ZeY)を複合させた。TiO_2-ZeA複合シートは、TiO_2単独シートよりもNO_2放出量が少なく、NOx除去量が多かった。ZeAは、NO_2の吸着だけでなく、光触媒活性の低下を引き起こすHNO_3の保持,吸着に有効であることから、高いNOx除去能を示したと考えられる。また、最も高いNOx除去性能は、ZeA単独シートにバインダーとして酸化チタンゾルを含浸したシートが有していた。シート表面上に多くのTiO_2が担持されていたことがNOx除去能の向上につながったといえる。これは、X線光電子分光分析装置によるシート表面の元素分析より、確認された。一方、TiO_2-ZeYシートのNOx除去能は高くなかった。ZeYは、ZeAよりもNO_2ならびにHNO_3の保持機能が劣っていると考えられる。ZeA(約0.4nm, Si/Al=1.4)とZeY(約0.7nm, Si/Al=25.7)の細孔径およびSi/Al比の差異が、NO_2とHNO_3の吸着・保持に影響を与えたと考えられる。酸化チタン-ゼオライト複合シートは、太陽光で活性化され、繰り返し使用できるため、屋外に設置するだけで機能する省エネルギー・省力型の大気環境浄化材への応用が期待される。
クラミジア感染によって誘導される炎症応答の制御システムの探索

クラミジア感染における宿主炎症応答制御機構を明らかにするために、クラミジア感染を感知する新規レセプターの探索や、環境クラミジアを用いた保存性の高いクラミジア因子の探索を行ったところ、非TLRレセプターおよび易熱性のクラミジア分子が炎症誘導に関与することが示唆された。さらにこれらクラミジアによる炎症誘導が低酸素条件下で促進されることも明らかとなった。一方、炎症誘導に関連する宿主細胞のアポトーシス下流分子カスパーゼ3活性測定を行ったところ、感染後期で促進していた。またクラミジア感染においてmiRNAの発現変動が宿主炎症応答に関与する可能性が示唆された。偏性細胞内寄生細菌であるクラミジアは、単に呼吸器感染症や性行為感染症の起因菌となるだけでなく、動脈硬化や気管支喘息、あるいは関節炎などの慢性炎症性疾患への関与が示唆されている。そのためクラミジアによる炎症誘導機構の解明はクラミジア感染症の抜本的な予防・治療法の開発に極めて有効であると考えられる。これまでのところ、クラミジアがTLR依存的に炎症性サイトカインを分泌誘導することが明らかとされてきた。その一方、細菌感染の炎症誘導におけるnon-TLRシグナルの役割が報告されており、これら分子を介した炎症応答・制御機構の解明は、クラミジア感染における宿主炎症応答の理解に必要と考えられる。そこで、本研究ではクラミジア感染を感知するレセプターの探索を試みた。まず肺炎クラミジアおよび単球系細胞であるTHP-1細胞を用いて、ELISA法にて炎症性サイトカインIL-8の分泌を確認した。その結果、肺炎クラミジアが濃度依存的にTHP-1細胞からIL-8の分泌を誘導することが確認された。次に、阻害剤を用いた実験により、クラミジアのレセプターの探索を試みた。またクラミジアとレセプターとの相互作用を確認するために、大腸菌を用いてタグ付けした組換え体を作製するとともに、タグ付けしたレセプターを過剰発現した細胞の構築も行った。現在、これら組換え体を用いて、クラミジアとレセプターの相互作用を検討し、レセプターの同定を試みている。本年度は、阻害剤を用いた実験から、non-TLRレセプター候補が見出された。現在、そのさらなる相互作用やシグナル応答を明らかにするために、組換え体の作成し、実験を行っている。このように、クラミジア感染における炎症誘導にnon-TLRレセプターの関与が明らかとできたので、当初の目標は達成できたと判断した。偏性細胞内寄生細菌クラミジアは、呼吸器感染症や性行為感染症の原因となるのみならず、動脈硬化や気管支喘息、あるいは関節炎などの慢性炎症性疾患への関与が示唆されている。そのため、クラミジアによる炎症誘導機構の解明が、クラミジア感染症の抜本的な予防・治療法の開発につながる可能性がある。そこで、昨年度に引き続きnon-TLRシグナルを介した、クラミジア感染における宿主炎症応答の解明を試みた。昨年度までの実験において、阻害剤を用いて実験から肺炎クラミジアがnon-TLRシグナルを介した炎症シグナルを誘導することを示唆する結果がえられた。そのため、クラミジア分子との分子間相互作用解析を行うために、引き続きnon-TLR受容体候補の大腸菌を用いた組換え体の発現・精製を試みた。可溶化実験には、異なる大腸菌株による発現系を用いて、温度条件などの検討を行ったものの、現在までのところ十分な可溶化条件は見いだせていない。そのため、環境に存在し太古に肺炎クラミジアなどから分岐したと考えられるクラミジアを、以前に病院環境より株化することができたので、これらクラミジアを用いて、炎症誘導能をリアルタイムPCR法およびELISA法にて解析した。その結果、どちらの方法においても菌量依存的にクラミジアの炎症誘導能が確認できた。その一方、加熱処理したクラミジアでは、これらの応答が消失していた。このようにクラミジアによる炎症誘導能は、広く保存された易熱性の分子により誘導されることが示唆された。本年度は、non-TLR受容体候補の組換え体の作成を試みているが、可溶化条件の検討がうまくいかず、実験が予定通り進んでいない。その一方、別の観点からクラミジアの炎症誘導機構を探索し、保存された易熱性の分子がクラミジアの炎症誘導に関与することを示唆する結果を得た。そのため、一部実験がうまく進んでいないため、若干の遅れがあるものと判断した。偏性細胞内寄生細菌であるクラミジアは、呼吸器感染症や性行為感染症の原因となる。また、気管支喘息や関節炎などの慢性炎症性疾患への関与が示唆されている。そのためクラミジアによる炎症誘導の理解は、クラミジア感染症の抜本的な予防・治療法の開発に必須である。そこで本研究課題では、昨年度に引き続きクラミジア感染細胞における宿主炎症応答の制御機構の解明を行った。まず、実際の感染局所同じ酸素濃度環境であると想定される低酸素条件下において、クラミジア感染動態について検討を行った。その結果、クラミジアの増殖は低酸素下で著しく増強された。その一方、アジスロマイシンを用いた薬剤感受性は、通常酸素下に比べ減弱していることが確認された。さらに、低酸素条件下での炎症性サイトカインの分泌誘導を検討したところ、IL-8の分泌は有意に増強されることを見出した。次に、炎症誘導に関連する宿主細胞のアポトースシグナルについても検討を行った。これまでの研究では、クラミジア感染細胞におけるアポトーシス下流分子カスパーゼ3の活性化は認められていなかった。そこで本研究では、環状ルシフェラーゼプローブを用いて、その活性測定を試みた。まず、カスパーゼ3を検出する環状ルシフェラーゼプローブを発現する細胞を作製した。

カスパーゼ3活性を発現細胞でモニタリングできることは、スタウロスポリン刺激で確認した。その結果、クラミジア感染した発現細胞では、感染後期にカスパーゼ3が活性化されることが明らかとなった。さらに感染初期に炎症を制御するmiRNAを明らかにするために、炎症性サイトカインmRNA発現とmiRNAを解析した。その結果、感染2時間で8個の炎症関連遺伝子の発現上昇が確認された一方、炎症関連miRNA発現は上昇(2個)あるいは減少(5個)が認められた。クラミジア感染における宿主炎症応答制御機構を明らかにするために、クラミジア感染を感知する新規レセプターの探索や、環境クラミジアを用いた保存性の高いクラミジア因子の探索を行ったところ、非TLRレセプターおよび易熱性のクラミジア分子が炎症誘導に関与することが示唆された。さらにこれらクラミジアによる炎症誘導が低酸素条件下で促進されることも明らかとなった。一方、炎症誘導に関連する宿主細胞のアポトーシス下流分子カスパーゼ3活性測定を行ったところ、感染後期で促進していた。またクラミジア感染においてmiRNAの発現変動が宿主炎症応答に関与する可能性が示唆された。次年度は、クラミジアによる炎症性サイトカイン誘導にnon-TLRレセプターがどのように関与しているか明らかにするために、組換え体を用いた相互作用解析を試みる。さらに、炎症誘導における細胞内の制御機構を遺伝子発現解析にて行う予定である。次年度は、引き続きクラミジアの炎症誘導におけるnon-TLR受容体の関与の解明を試みる。さらに、クラミジアによる炎症誘導において引き起こされる細胞内制御機構の解明やクラミジア感染をよりヒト体内の環境に近づけた感染モデルを構築し、感染・炎症応答の制御機構の解明を試みる予定である。感染症学本年度は、本研究課題を効率的に運用したため、若干の次年度繰越金が生じた。そのため、次年度に使用予定の経費と併せて、本研究を完遂できるように阻害剤や抗体などを用いた実験に使用する。本年度は、本研究を効率的に運用したため、若干の次年度繰越金が生じた。そのため、次年度に使用予定の経費と併せて、本研究を完遂できるように使用する。次年度は、細胞培養に関る培地・消耗品、阻害剤や抗体を用いた実験に加えて、研究成果発表にかかわる旅費に必要な費用に充当する予定である。次年度は、細胞培養に関る培地・消耗品、遺伝子発現解析実験に加えて、研究成果発表にかかわる旅費に必要な費用に充当する予定である。
産業施設の地震被害の減少を主目的とした設計時の人間の誤りについての研究

この研究は単年度のものであるが、従来から代表者らが手掛けて来たエラ-発生機構として、計算におけるエラ-発生と、FBRを模擬した二重熱交換システムにおける操作の誤りの発生モデルを結合する事に重点を置いたものである。本年度は後者のシステムを模擬しCRT上に表示し、それを被験者が長時間監視することにより、被労を蓄積し、その間、系の特性をランダムに突変させ、それに気付いた被験者が、それを修正するよう操作を行うことにより、その対応能力を見、撮作の過程のデ-タをFuzzy Control系で操作者の特性を表わすことにした。次に、従来の研究のデ-タを見直すことにより、改めて被験者を3群にわけることにした。この3群とは流量の弁の開閉動作の面からの分類であるが、操作頻度の高い、低い、時期に混合のあるなしで計算操作と本操作とは被験者の分類としては共通性があると考えた。さらに極端な混合がある場合、たとえば開けるべきときに閉じるのが、ここで問題とするヒュ-マン・エラ-である。さらにこのモデルを使って、Fuzzy制御系にゆらぎを導入してシュミレ-ションを行った結果、操作結果としてヒュ-マン・エラ-が発生する例を、1001000例の試行で見出すことができた。これは個々の判断は誤りがなくとも、結果的に偏りが重なると、全体としてのエラ-となることを明らかにすることができた。以上により、エラ-のあるなしで、計算作業について行う検討より、より定量的な評価の行えるプラント操作実験を併用することにより、被験者の特性を分類することでができた。またこれにより計算テストに関する従来の研究と合せて基準、計算手順改善の方向を得ることができた。なお、設計作業におけるエラ-についての意識調査のアンケ-トを行った。これは第1のモデルの作成を補強するためのものであったが、意識調査によったため、試行的(研究代表者らで3年前に実施)なものと比べ、定量的な寄与を得るのが難しく、現在検討を続けている。
Wntシグナル伝達経路を標的とした非小細胞肺癌に対する新規治療法の開発

抗LGR6抗体を用いた免疫染色法により、210のNSCLC手術検体(腺癌112検体、扁平上皮癌98検体)におけるLGR6タンパク発現解析を行った。LGR6タンパク発現レベルは0から4までの5段階で評価を行い、0から2までを低発現、3と4を高発現とした。肺腺癌の30%、肺扁平上皮癌の5%でLGR6の高発現が認められ、肺扁平上皮癌よりも肺腺癌でLGR6高発現の割合が高いことが示された。肺腺癌において、LGR6発現と、性別、年齢、喫煙歴、病期、ドライバー遺伝子変異(EGFR変異、KRAS変異)、リンパ管浸潤、脈管浸潤、胸膜浸潤との関連を調べた。その結果、LGR6高発現の割合はEGFR遺伝子変異陰性群や脈管浸潤陽性群で有意に高かった。また、リンパ管浸潤陽性群、男性、喫煙者において、LGR6高発現の割合が高い傾向にあった。肺腺癌を、LGR6低発現群とLGR6高発現群に分けて、術後の生存期間を比較したところ、LGR6高発現群の生存期間が有意に短いことが示された。さらに、肺腺癌を、EGFR遺伝子変異陽性群とEGFR遺伝子変異陰性群に分けて、LGR6低発現群とLGR6高発現群とで術後の生存期間を比較したところ、EGFR遺伝子変異陽性群では生存期間の有意差は認められなかったが、EGFR遺伝子変異陰性群ではLGR6高発現群の生存期間が有意に短いことが示された。以上より、LGR6発現は、EGFR遺伝子変異のない肺腺癌の悪性形質の獲得に寄与していることが示唆された。肺癌細胞株を用いてreal-time RT-PCR法によるLGR6 mRNA発現解析を実施し、beta-cateninをコードするCTNNB1遺伝子の変異を有するHCC15を含むNSCLC細胞株の33%、小細胞肺癌(SCLC)細胞株の65%においてLGR6が高発現していることが確認された。LGR6高発現の割合はEGFR変異陽性NSCLC細胞株で低く、KRAS変異やBRAF変異を有するNSCLC細胞株で高いことが示された。210のNSCLC手術検体(腺癌112検体、扁平上皮癌98検体)を用いて免疫染色法によりLGR6タンパク発現解析を実施し、LGR6発現と臨床病理学的因子、ドライバー遺伝子変異との関連について解析を行った。さらに、肺腺癌におけるLGR6発現と術後生存期間との関連について解析を行った。その結果、喫煙歴のある男性、リンパ管・脈管浸潤陽性、EGFR変異陰性の肺腺癌でLGR6が高発現しており、EGFR変異陰性かつLGR6高発現の肺腺癌の予後が不良であることが示された。NSCLC細胞株を用いて、CTNNB1あるいはLGR6を標的としたsiRNAsにより各遺伝子発現を効率的にノックダウンできる至適条件設定を行った。CTNNB1変異陽性かつLGR6高発現のHCC15細胞において、siRNAによるCTNNB1発現ノックダウンにより、LGR6 mRNAおよびLGR6タンパク発現が低下することが確認された。HCC15細胞において、Wnt/beta-catenin経路の阻害薬であるXAV939処理によりLGR6発現が低下することが確認された。LGR6高発現NSCLC細胞において、siRNAによるLGR6発現ノックダウンが細胞増殖に与える影響を調べるための機能解析を行い、LGR6高発現NSCLC細胞のin vitro細胞増殖がLGR6発現ノックダウンにより抑制されることが示された。LGR6高発現NSCLC細胞株の中に、Wnt/beta-catenin経路の構成分子であるAPCの遺伝子変異を有するNSCLC細胞株が含まれていたことから、この細胞株を用いて、siRNAによるAPC発現ノックダウンや、Wnt/beta-catenin経路の阻害薬であるXAV939により、TCF転写活性やLGR6の発現が低下するか検証する。CTNNB1遺伝子変異型発現ベクターを作成し、LGR6低発現NSCLC細胞株や、不死化ヒト気管支上皮細胞株HBEC4にベクターを導入して、変異型beta-cateninの強制発現が、LGR6発現の上昇を誘導するか検証する。TCF転写活性やLGR6発現の高い肺癌細胞株を用いて、レポーターアッセイやクロマチン免疫沈降アッセイにより、LGR6がWnt標的遺伝子であるか検証する。免疫染色法によりLGR6タンパク発現解析を行った肺腺癌において、単変量解析や多変量解析により、LGR6発現の予後因子としての意義を調べる。SCLC細胞株においてLGR6高発現の割合が高かったことから、肺小細胞癌20検体や肺大細胞神経内分泌癌16検体の手術検体を用いてLGR6タンパク発現解析を行い、肺の神経内分泌腫瘍におけるLGR6発現の臨床病理学的因子との関連や予後因子としての意義を調べる。CTNNB1変異陽性あるいはAPC変異陽性でLGR6を高発現するNSCLC細胞株を用いて、siRNAによるLGR6発現ノックダウンやWnt/beta-catenin経路の阻害薬が、細胞増殖抑制作用やアポトーシス誘導能を有するか検証する。さらに、これらのNSCLC細胞株において、siRNAによるLGR6発現ノックダウンが、シスプラチン、ペメトレキセド、ドセタキセルなどの殺細胞性抗癌剤、EGFRチロシンキナーゼ阻害薬などの薬剤感受性に与える影響を調べる。

非小細胞肺癌(NSCLC)細胞41株におけるLGR6 mRNA発現解析をリアルタイムRT-PCR法により行った。βカテニンをコードするCTNNB1遺伝子の変異を有するNSCLC細胞株HCC15において、LGR6が過剰発現していることが検証された。また、KRAS変異、BRAF変異、EGFR変異などのCTNNB1変異以外のドライバー変異と、LGR6発現との関連性について調べたところ、KRAS変異細胞16株中7株(44%)、BRAF変異細胞4株中2株(50%)、EGFR変異細胞10株中2株(20%)、CTNNB1変異陽性細胞株HCC15以外のKRAS/BRAF/EGFR全て野生型の細胞10株中1株(10%)において、不死化人気管支上皮細胞株HBEC4のLGR6発現レベルよりも2倍以上の高発現を認め、KRAS変異もしくはBRAF変異を有するNSCLC細胞株においてLGR6発現が高い傾向があることがわかった。さらに、小細胞肺癌(SCLC)細胞23株におけるLGR6 mRNA発現解析を行ったところ、SCLC細胞株群におけるLGR6発現レベルは、NSCLC細胞株群のLGR6発現レベルと比較して有意に高いことがわかった。LGR6高発現を示すHCC15において、LGR6 mRNAとLGR6タンパク発現が、small interfering RNAs (siRNAs)によるβカテニンのノックダウンにより有意に低下することが検証された。LGR6高発現を示すHCC15以外のNSCLC細胞株について、LGR6あるいはCTNNB1を標的としたsiRNAにより、各標的遺伝子の発現を効率的にノックダウンするための至適条件設定を行った。抗LGR6抗体(EPR6874;abcan社)を用いて、NSCLC手術検体におけるLGR6タンパク発現解析のための免疫染色法の至適条件設定を行った。各肺癌細胞株におけるLGR6 mRNA発現を評価するためのreal-time RT-PCR法に必要なprimerやTaqMan probeの選定と至適条件設定を行った。また、LGR6タンパク発現を評価するためのWestern Blot法に必要な抗LGR6抗体の選定と至適条件設定を行った。さらに、NSCLC細胞株41株、SCLC細胞株23株における至適培養条件の設定を行い、各細胞株におけるLGR6発現解析を完了した。免疫組織染色によるLGR6タンパク発現解析のための抗LGR6抗体を選定し、NSCLC手術検体を用いてLGR6タンパク発現の免疫組織染色の至適条件設定を完了した。βカテニンあるいはLGR6を標的としたsiRNAsを選定し、HCC15細胞株を用いて、βカテニンあるいはLGR6を標的としたsiRNAsにより各標的遺伝子の発現を効率的にノックダウンするための至適条件設定を行った。HCC15において、siRNAsによるβカテニンのノックダウンが、LGR6 mRNAおよびLGR6タンパク発現を有意に低下させることを検証することができた。一方で、肺癌細胞株におけるTCF転写活性の評価に関しては解析途中の段階である。また、HCC15と同じCTNNB1遺伝子変異型であるCTNNB1-S45F変異の発現ベクターについては作成準備段階である。
開発途上国の母子保健人材育成プログラムの客観的評価指標に関する検討

開発途上国の妊産婦、新生児、乳幼児死亡は予防可能な原因で起こっている。財源不足、通信・道路インフラの未整備、保健人材の不足、継続教育機会の不足によりサービスの質の担保が困難である。看護師免許更新に必要な継続教育単位修得の機会が乏しい同国で保健省、看護協会、WHOや世界銀行と協働で遠隔教育プログラムを実施し、看護職の約4割が参加した。成果の量・質的な評価と他国への汎用性を検討するため本研究を行った。科学的根拠に基づく最新知識・技術習得により臨床実践力の向上、仕事への満足度や自己効力感の向上、院内や基礎教育のカリキュラム改善に役立てることができた。一方でロジスティック面の課題などが明らかとなった。具体的内容:過去5年間にわたって実施したモンゴル国の母子保健に携わる看護職対象に実施した遠隔教育プログラム(衛星通信による双方向のビデオ会議を日本から、首都、遠隔地域に接続した継続教育)に関する客観的評価のために、現地調査により質的、量的データを収集、入力し、英国ロンドン大学、元WHO母子保健事業局長などの海外専門家によるスーパービジョンのもとに分析を進めている。研究成果の一部を第11回ICMアジア太平洋地域会議・助産学術集会、第22回カナダ国際保健学会などの国際学会で発表した。また、2016年2月に英国ロンドン大学からグローバルヘルスの専門家を招へいし、兵庫県立大学で質的研究手法に関する公開セミナーを開催した。日本全国から40名余の看護教育、研究者らが参集し、好評を博した。意義:質的、量的データの分析により、本プログラムのインパクトや問題点、今後、取り組むべき具体的課題を明らかにすることができる。開発途上国の母子保健指標(妊産婦死亡率、乳幼児死亡率)に影響をもたらす要因として、保健医療人材の不足、現場の医療従事者のコンピテンシー不足によるケアの質の低さがある。問題改善のための一手段として、多くの国際協力現場では、専門家派遣を行うことが一般的である。本プログラムではITを活用することにより、低コストで持続可能な継続教育モデルを提示することができる。重要性:開発途上国に共通する母子保健上の問題の根底には、保健医療政策の未整備、経済的な困難、教育に携わる人材の能力や質の問題、教材不足がある。本研究でモデルを提案し汎用化することで、同様の問題に対峙する多くの国々で活用される可能性がある。現地で得られた質・量的データは入力作業を終えて、分析も順調に進んでいる。また英国の専門家招へいは、研究計画を立案した当初は予定していないものであったが、単に研究者自身と連携研究者だけが研究指導を受けるためだけなく、公開セミナーを企画・開催したことにより、同様のトピックスに関心を持つ国内の専門家らに新しい知識を得る機会を提供することができた。国際協力、質的研究手法に関する活発な討議をすることができ、国内のネットワークの形成に貢献することができたことは有意義であった。今年度は、得られた量的、質的なデータ分析を進め、国内、海外の専門雑誌に投稿するための論文執筆に時間を確保し、成果をまとめていく予定である。平成28年度は量的研究結果の一部を連携協力者と共に6月にタイのチェンマイの国際学会Optimizing Healthcare Quality: Teamwork in Education, Research, and Practiceで発表した。ルワンダの看護職、ジャマイカの助産師、タイ北部の大学の看護教員から共同研究ができないかと打診もあった。低コストな継続教育のモデルが開発途上国で求められていることが再度、確信できた。タイ訪問に際してチェンマイ大学看護学部とアポイントメントを取り、学部長(同学会長)、副学部長、母性、小児、地域看護の教員から母子保健概況、継続教育、将来的な共同研究の可能性やテーマに関して協議をした。また、保健省看護専門官との面談により、看護政策、看護教育における問題点や課題、遠隔地の継続教育に関する情報収集ができた。2月にはロンドンで開催されたLSEHSC International Health Policy Conference 2017に参加した。グローバルな医療人材の流動と不足、継続教育について情報を得た。今後15年間以内に深刻化する看護人材の世界的不足の発表が非常に興味深かった。ミレニアム開発目標に代わり、国連が提唱する持続可能な開発目標に関する討議が白熱した。米国の終末期医療における麻薬とマリファナの使用に関する政策提言も貴重な知識を得る機会となった。また、学会期間中にロンドン大学グローバルヘルス研究所学科長の共同研究者Dr. Chris Willott氏と研究の進捗状況に関して協議することができた。英文雑誌投稿は3月末に国際看護協会のInternational Nursing Review(INR)に質的研究結果を投稿した。編集者のアドバイスと投稿規定等に合わせて現在、共同研究者らと書き直しを進め、6月初旬の期限までに再投稿予定である。計画通り、質的データに関しては、すでに英文雑誌への論文投稿まで進展している(現在、編集者のアドバイスと投稿規定に沿った修正をしている)。また、量的データの結果については、分析・考察まで書き終えているが、字数を大幅にオーバーしているため、共同研究者らと共に推敲している。モンゴルで過去5年間実施した遠隔教育プログラム受講者の看護職を対象にした調査結果をまとめた。質的データは、国内外の共同研究者らと共に分析し英語論文を執筆、International Nursing Review誌に投稿し2018年3月に出版された。また、モンゴル保健省のインカントリーネットワークを活用して、看護師、助産師対象に初めて開催した国際遠隔シンポジウムの参加者のアンケート結果(量的研究)を分析し、Central Asian Journal of Medical Sicenceへの投稿依頼をうけ、論文の最終校正している。

このの結果は2017年9月の国際学会の招待講演で発表した。質的・量的結果ともに、参加者らの満足度は非常に高かった。世界銀行の衛星通信システムを利用し、北里大学看護教員、臨床専門家、世界保健機構母子保健局との協働により、科学的根拠に基づく最新の知識を遠隔地域まで届けることができた。ムードル上で講義資料、ビデオ、教材、関連文献を掲載したものは現地の院内継続教育や大学の基礎教育のカリキュラムの枠組み、内容の改変に貢献し、教材として広く活用されていた。遠隔システム活用によって参加者の移動時間や経済的負担を軽減できた結果、アウトリーチの看護職らに新たな教育機会と、5年ごとの看護免許の更新に必要な単位数を提供することができた。最新の科学的根拠に基づく知識の普及によって看護実践力が強化され、仕事への誇り、満足度が増加していた。医療器材や医薬品が乏しい同国では、妊娠から産褥期までのリスク予防のための基本的な観察、リスクアセスメント能力向上が強く求められていた。しかし一方で通信インフラや技術的問題、専門用語の翻訳や通訳、ロジスティック面での多くの課題も明らかとなった。今後はこれらの課題に対して改善に向けた検討を重ねて、他国への汎用化に向けた取組みを進めていく予定である。開発途上国の妊産婦、新生児、乳幼児死亡は予防可能な原因で起こっている。財源不足、通信・道路インフラの未整備、保健人材の不足、継続教育機会の不足によりサービスの質の担保が困難である。看護師免許更新に必要な継続教育単位修得の機会が乏しい同国で保健省、看護協会、WHOや世界銀行と協働で遠隔教育プログラムを実施し、看護職の約4割が参加した。成果の量・質的な評価と他国への汎用性を検討するため本研究を行った。科学的根拠に基づく最新知識・技術習得により臨床実践力の向上、仕事への満足度や自己効力感の向上、院内や基礎教育のカリキュラム改善に役立てることができた。一方でロジスティック面の課題などが明らかとなった。研究計画の通り、引き続きデータ分析、論文執筆を進めていく。また、他国において本プログラムの汎用性について検討するため、タイのチェンマイ大学看護学部、タイ国保健省看護課を訪問し、タイ国における母子保健上の問題、課題、母子保健医療に従事する看護職への継続教育、特に遠隔地域でアクセスが困難な看護職へのサポート体制や評価方法について、情報収集・情報交換を行う予定である。さらに、今後の国際共同研究の立ち上げの可能性について、協議する計画である。最終年度は、研究結果から得られたものをベースに文献検討を重ね、モンゴルと同様の発展状況にある開発途上国での導入ができるよう、「継続教育モデルの汎用化」をめざし、その枠組みとコンテンツについて、さらなる検討を重ねる計画である。汎用化のモデルの枠組みについては、さらに考察を深め、新たな論文への投稿を検討している。
カプセル形状が細胞取込に及ぼす影響の解明および魚雷型カプセルを用いたがん治療

魚雷型カプセルの開発および、それを用いた細胞取込実験を行い、カプセルのアスペクト比と取込速度の関係を調査した。魚雷型カプセルは、両親媒性ポリペプチドSL12からなる筒状集合体の開口部に、両親媒性ポリペプチドSL16を自己集合化させ、球状集合体を形成させることで中空のロッド状集合体として得られた。両親媒性ブロックコポリペプチドSL12およびSL16は同一のポリサルコシン親水性ブロックを有し、疎水性ブロックの残基数のみ異なる(12および16残基)分子である。SL12を水中に分散させ、90度1時間加熱することで直径80 nm長さ200 nmの筒状集合体を得た。加熱時間を3時間、5時間と長くすることで、直径80 nmはそのままで長さのみ300、500 nmと伸長した。この筒状集合体分散液にSL16を分散させることで、SL16は筒状集合体の開口部に相互作用、自己集合化し、筒の口を半球でキャップした形状の魚雷型カプセルが得られた。長さの異なる筒状集合体を用いることで長さの異なる魚雷型カプセルが得られた。SL16のみを水中に分散させると、直径80 nmの球状集合体であった。長さの異なる筒状集合体および球状集合体を用いて細胞取込実験を行った。直径はいずれも80 nmで、長さは100、200、300、500 nmの筒状集合体を使用した。HeLa細胞に対して、1時間後の取込量を蛍光強度から評価したところ、筒状集合体はいずれも球状集合体より多く細胞に取り込まれた。特に200 nmが最大の取込量であり、最適なアスペクト比が存在することがわかった。阻害剤を用いた実験から細胞に取り込まれる機構はいずれの集合体もクラスリン介在性エンドサイトーシスであった。この取込機構は200 nm程度以下の物質を取り込むと知られているため、200 nmが細胞内輸送に最適なサイズであることと一致した。本研究課題は4年の計画であるが、すでに2つの目標(1カプセル形状が細胞取込に及ぼす影響の解明、2魚雷型カプセルを用いたがん治療)のうち1の目標を達成し、論文にまとめた。進捗としては申し分無いと考えている。2年目は魚雷型カプセルを用いたドラッグデリバリーシステム(DDS)の研究を進める。具体的には、魚雷型カプセル内への薬剤内包能、血中安定性、体内動態、腫瘍集積性、抗腫瘍成長効果の評価などを行う。また、球状カプセルやステルスリポソームとの比較を行い、それら性質の違いを明らかにする。研究計画に変更は無い。
深海酵母Cryptococcus liquefaciens N6株の銅耐性機構

Cryptococcus liquefaciens N6株は、高い銅イオンに耐性を示すユニークな酵母である。本株の銅イオン耐性の分子機構を明らかにする目的で、C. liquefaciensの分子生物学手法の確立を目指した。まず、5-FOAを選択マーカーとして、ura5変異株を分離した。これを用いて電気穿孔法による遺伝子導入の条件を確立した。次にNAT耐性遺伝子をマーカーとして2回交差によるURA5座の遺伝子破壊を試みた。その結果、NAT耐性形質転換体はすべて異所組み込みによるものであることが判明した。このことからC. liquefaciensの栄養増殖期は相同組換え能が極めて低いと考えられた。日本海溝の深海5000m付近から単離されたCryptococcus liquefaciens N6株は、銅イオンに高い耐性を示すユニークな深海酵母である(阿部等JAMSTEC J Deep Sea Res 1998)。興味深いことに、馴化培養を行うと耐性度が増し、50 mM以上の極めて高い銅イオンの存在下でも増殖可能となる(Abe et al., Biotech Lett 2001)。これまで、C. liquefaciens酵母の分子遺伝学・分子生物学的解析はほとんどされておらず、形質転換法やプラスミド系などの基本的な解析ツールが存在しない。本研究では、C. liquefaciens酵母の分子遺伝学・分子生物学的ツールを新たに開発し、これを用いて、ユニークな特徴をもつC. liquefaciens N6株の高濃度銅イオン耐性機構の分子機構を解明することを目的としている。そのためには、まず、形質転換法の確立が必須である。そこで、ウラシル要求性を選択マーカーとするために、野生型C. liquefaciensから5-FOA耐性を指標にウラシル要求性変異を数種類分離した。これらの全ゲノムをNGSによって配列決定をおこない、原因遺伝子を特定し、そのうち1株において、ura5を同定した。現在、得られたura5変異株を宿主として、ura5+遺伝子断片を用いて、ウラシル非要求性を指標に様々な形質転換法を試みている。自然突然変異によるURA要求株を得られ、これを形質転換の宿主として用いることができるようになった。そこで、現在、様々な方法で形質転換を試している。主なものは、エレクトロポレーション法、リチウム酢酸法、パーティクル・ガン法などである。なかでも、エレクトロポレーション法に注力して、様々な条件を検討しているが、現在までのところ、有効な条件を設定できていない。近縁の病原性菌C. neoformansでは、エレクトロポレーション法による形質転換法が確立しているので、C. neoformans菌の条件に近いところをさらに重点的にサーベイする予定である。また、C. liquefaciensの標準株のひとつ、C. albidus (saito) Skinner var. albidusをATTCから入手し、この全ゲノムを決定した。現在、N6株との比較解析を行っているとことである。また、銅存在下と非存在下、それぞれの培養条件での遺伝子発現の違いを解析する目的で、RNA-seqを行った。これについても、現在、詳細に解析中である。また、C. albidusにおいても、同様に、ウラシル要求性を分離し、この菌を用いて形質転換の条件検討を平行して行っていく予定である。得られたura5変異株を宿主として、ura5+遺伝子断片を用いて、ウラシル非要求性を選択指標に様々な形質転換法を試みた結果、エレクトロポレーション法で有効な条件を設定できた。これを用いて、相同組換えを利用した遺伝子破壊を試みたが、非相同組換えによるインテグレーションによるウラシル非要求性形質転換体しか得られなかった。すなわち、出芽酵母で見られる相同組換えによるインテグレーションが、Cryptococcus酵母ではほとんど起こらないことが、分かった。そこで、現在、CRSPR-CAS9ゲノム編集技術による、形質転換体の導入方法について検討中である。

このことからC. liquefaciensの栄養増殖期は相同組換え能が極めて低いと考えられた。形質転換法の確立に思いの外、梃摺っている。菌体内にDNA断片が導入されにくいという可能性や相同組換えそのものの頻度が低いという可能性、さらに、異所的にintegrateしたDNAはサイレンシングの効果により、遺伝子発現が抑制されるなどの原因を予想している。形質転換法を確立しないかぎり、C. liquefaciensを新たなモデル微生物とすることは困難なので、あきらめずに、至適条件を見出す努力を続けていく。系が動くようになると、今までうまくいかなかったことが、信じられないというようなことは経験上よくあることなので、ここは地道にこつこつと条件設定に邁進したい。また、形質転換が困難な理由についても、一つ一つ検討し、それがこの微生物の特徴であるのであれば、生物学的に重要な意義をもつものと予想している。また、上述のように、標準株C. albidusを宿主にした形質転換の系も平行して開発していき、C. liquefaciensと比較解析する。一方、銅イオン耐性機構の解析そのものは、標準株C. albidusとの比較解析をすることである程度解答は得られると予想している。これまでに、ゲノム配列の決定RNA-seqを行っており、現在は、そのデータの詳細な解析中である。これらのアプローチによって、研究期間内には、C. liquefaciens N6株がなぜ高濃度の銅イオンに耐性を示すのか、その原因を明らかにできるものと予想している分子生物学、分子遺伝学
海馬スライス標本における反響興奮現象と短期記憶のメカニズム

脳はモジュール・システムであり,その高次情報処理機能は多数のモジュールの協調動作によって実現されている.そのため,モジュール単体の性質のみならず,モジュールの相互作用や協調メカニズムを明らかにすることが重要である.本研究では,モルモット海馬スライス標本内の局所神経回路(CA3領域)を脳モジュールと見たて,これを脳モジ(ールを模擬した人工モジュール(Radial Isochron Clock振動子,RIC)と相互結合し、脳内の多モジュール結合系を模擬する実験系を構築した.モルモット海馬スライス標本を高濃度カリウム・ペニシリン含有人工脳脊髄液で維持することによりCA3ニューロン群の自発バースト活動を誘発した。バースト活動を検出したときRICを"位相シフト"させ、逆にRICの"位相"がゼロになったとき,CA3に電気刺激を与えるように結合した.RICはRTLinux V.2を導入したPCによりリアルタイムシミュレーションした.CA3→RICの結合強度Aを肇化させ(A>0;興奮性フィードバック,A=0;一方向結合,A<0;抑制性フィードバック),系のダイナミクスを計測・解析することにより,海馬モジュールにおける反響興奮時のダイナミクス,およびそのときのシナプス可塑性現象について検討した.結合モードに依存して様々な引き込みパターンが観測された.特に,CA3→RICを抑制性結合としたとき,結合パラメータの変化に対して頑強な3:2相互引き込み同期活動が観測された.単方向結合の場合は最も引き込みがよわく,CA3のバースト間隔は不安定に変化した.また,CA3とRICの相互結合後,CA3自発バースト活動の振幅、周期やそのゆらぎの性質が変化した.これは,引き込み同期振動によりCA3回路内シナプス可塑性が生じ、ネットワークの機能構造が変化したためであると考えられる.脳はモジュール・システムであり,その高次情報処理機能は多数のモジュールの協調動作によって実現されている.そのため,モジュール単体の性質のみならず,モジュールの相互作用や協調メカニズムを明らかにすることが重要である.本研究では,モルモット海馬スライス標本内の局所神経回路(CA3領域)を脳モジュールと見たて,これを脳モジ(ールを模擬した人工モジュール(Radial Isochron Clock振動子,RIC)と相互結合し、脳内の多モジュール結合系を模擬する実験系を構築した.モルモット海馬スライス標本を高濃度カリウム・ペニシリン含有人工脳脊髄液で維持することによりCA3ニューロン群の自発バースト活動を誘発した。バースト活動を検出したときRICを"位相シフト"させ、逆にRICの"位相"がゼロになったとき,CA3に電気刺激を与えるように結合した.RICはRTLinux V.2を導入したPCによりリアルタイムシミュレーションした.CA3→RICの結合強度Aを肇化させ(A>0;興奮性フィードバック,A=0;一方向結合,A<0;抑制性フィードバック),系のダイナミクスを計測・解析することにより,海馬モジュールにおける反響興奮時のダイナミクス,およびそのときのシナプス可塑性現象について検討した.結合モードに依存して様々な引き込みパターンが観測された.特に,CA3→RICを抑制性結合としたとき,結合パラメータの変化に対して頑強な3:2相互引き込み同期活動が観測された.単方向結合の場合は最も引き込みがよわく,CA3のバースト間隔は不安定に変化した.また,CA3とRICの相互結合後,CA3自発バースト活動の振幅、周期やそのゆらぎの性質が変化した.これは,引き込み同期振動によりCA3回路内シナプス可塑性が生じ、ネットワークの機能構造が変化したためであると考えられる.
現代日本語名詞シソ-ラスによる意味の分類体系

現代日本語の名詞シソ-ラスを作成しながら、語彙の意味分類の研究を行なった。このシソ-ラスは、パソコン内に構築されている。また、検索ソフトを作成したので、いつでも柔軟な検索ができるようになっている。シソ-ラスの記述は、上位/下位関係と同義関係を基準にしている。一部に、全体部分関係の記述が含まれる。現在までに、約6万語の名詞見出しが整理された。このシソ-ラスを通して現代日本語の名詞の意味分類ができあがりつつあるが、こうして似た意味の単語をまとめてみると、全体が不整合になる現象が発生する。そこで、ある単語のグループを取り出して、そのグループが確かにグループになっているかどうかを検討することにした。このプロセス自体が研究であった。検討結果をもとに、パソコン内のシソ-ラスの記述を改訂した。これまでの手続きにより、名詞シソ-ラスの公開の準備が整った。シソ-ラスができあがってくると、上位/下位関係とは何かという問題について考察を加えることが可能になってきた。その結果、上位/下位関係は「文化」(ある言語の母語話者が共有するものの見方)であるという結論になった。本研究では、現代日本語の名詞シソーラスを作成しながら、語彙の意味分類の研究を行なう。まず、研究補助者に依頼してシソーラスの中の語の意味のチェックを行なった。シソーラスの中では、語は、互いの意味関係を通して相互に結び付いている。その結び付きが、システム全体として整合性を保つようになっていないと、シソーラスの構造がつかめず、研究の目的である「語彙の意味分類」にまで進むことはできない。そこで、シソーラスの中の語の意味関係が正しくついているかどうかということは、たえずチェックしていかなければならない大きな問題なのである。現在までに、シソーラスを通して現代日本語の名詞の意味分類ができあがりつつあるが、こうして似た意味の単語をまとめてみると、全体が不整合になる現象が発生する。今年度は、約300グループ(5000語程度)について検討が終わった。不整合を生む原因はいろいろあるが、最も大きなものは、上位/下位関係の多様性である。下位語を上位語の下に位置付ける際、いろいろな観点から上位/下位関係が設定できる。必ずしも体系的な語彙分類によって上位/下位関係が構築されるのではない。検討結果をもとに、パソコン内の記述を改訂した。本研究では、現代日本語の名詞シソ-ラスを作成しながら、語彙の意味分類の研究を行なう。今年度も、研究補助者に依頼してシソ-ラスの中の語の意味のチェックを行なった。シソ-ラスの中では、語は、互いの意味関係を通して相互に結び付いている。その結び付きが、システム全体として整合性を保つようになっていないと、シソ-ラスの構造がつかめず、研究の目的である「語彙の意味分類」にまで進むことはできない。そこで、シソ-ラス中の語の意味関係が正しくついているかどうかということは、たえずチェックしていかなければならない大きな問題なのである。現在までに、シソ-ラスを通して現代日本語の名詞の意味分類ができあがりつつあるが、こうして似た意味の単語をまとめてみると、全体が不整合になる現象が発生する。今年度は、昨年度に引き続き、約300グループ(5000語程度)について検討が終わった。また、「状態」を表す単語グループの語数が非常に大きくなったので、それを意味的な観点から分割整理した。本研究では、現代日本語の名詞シソ-ラスを作成しながら、語彙の意味分類の研究を行なった。今年度は、昨年度までに行なってきたシソ-ラスの中の語の意味のチェックを、パソコンに入力することを中心に行なった。

そこで、シソ-ラス中の語の意味関係が正しくついているかどうかということは、たえずチェックしていかなければならない大きな問題なのである。現在までに、シソ-ラスを通して現代日本語の名詞の意味分類ができあがりつつあるが、こうして似た意味の単語をまとめてみると、全体が不整合になる現象が発生する。そこで、ある単語のグループを取り出して、そのグループが確かにグループになっているかどうかを検討することにした。検討結果をもとに、パソコン内のシソ-ラスの記述を改訂した。これまでの手続きにより、名詞シソ-ラスの公開の準備が整った。なお、詳しくは、研究成果報告書を作成したので、そちらを参照していただきたい。
低酸素血症誘導性肺高血圧に対するCardiotrophin-1の効果の検討

【総括】CT-1は内皮依存性血管弛緩反応の障害を軽減させた。前年度の研究でCT-1が肺動脈圧の上昇を抑制することを明らかにしているが、このメカニズムにCT-1の内皮依存性血管弛緩反応障害軽減作用が関与すると考えられた。CT-1は肺高血圧の治療に有効であると考えられた。【方法】4週齢雄Wistarラットをnormoxia群(n=39)、CT-1+normoxia群(n=18)、hypoxia群(n=30)、CT-1+hypoxia群(n=21)の4群に分けた。normoxiaの2群は室内空気環境下で、hypoxiaの2群はO_210%環境下で9日間飼育した。同期間にCT-1投与の2群にはmouse recombinant CT-1 50μg/kgを、他の2群には同量のリン酸バッファー液を1日1回腹腔内投与した。10日目に、(i)人工呼吸、麻酔下に肺動脈圧、体血圧、心拍数を測定した。また肺体血圧比(Pp/Ps)を求め比較した。(ii)体重(BW)、右室自由壁重量(RV)、左室および心室中隔重量(LV+S)をそれぞれ測定し、RV/(LV+S)、RV/BWを検討した。【結果】(i)平均肺動脈圧はnormoxia群、CT-1+normoxia群、hypoxia群、CT-1+hypoxia群でそれぞれ20.3±4.0、21.1±2.4、33.9±6.6、27.9±4.1mmHgでCT-1+hypoxia群ではhypoxia群に比べ有意に低かった(P=0.0019)。さらに、Pp/PsはCT-1+hypoxia群(0.31±0.06)ではhypoxia群(0.40±0.09)に比べ有意に低かった(P=0.0005)。またPp/Psはnormoxia群(0.26±0.05)とCT-1+hypoxia群の間に差はなかった。平均体血圧および心拍数は4群間に差を認めなかった。(ii)RV/(LV+S)はCT-1+hypoxia群(0.36±0.07)ではhypoxia群(0.42±0.05)に比べ有意に低かった(P<0.0001)。同様に、RV/BWはCT-1+hypoxia群(1.08±0.17mg/g)ではhypoxia群(1.29±0.16mg/g>に比べ有意に低かった(P<0.0001)。【総括】(i)CT-1は肺動脈圧の上昇を抑制し肺高血圧を予防した。(ii)CT-1は低酸素誘導性肺高血圧による右室肥大の進行を抑制した。
ハワイ島マウナケア山頂北西地域における天文観測条件の調査研究

1987年にはマウナケア山頂北西部、KECK望遠鏡の隣の土地に30mの気象観測用タワーを立て、微熱乱流その他の測定を行なった。この結果、温度ゆらぎからモデルを介してシーイングを推定すると、大型の望遠鏡で0.1′′の星像を得るためには、地表乱流層でのシーイングの劣化をさけて、地表から27m以上の高さが必要なことがわかった。1988年にはカナダ、フランス、ハワイ望遠鏡の協力を得て鏡の位置における風圧測定を行なった。
脊髄小脳変性症の新規原因遺伝子の同定と発症機序の解明

本研究では、小脳萎縮を呈する患者から見出された遺伝子変異が、脊髄小脳萎縮症の新規原因遺伝子となり得るのかを証明する。患者と同じ変異を有するモデルマウスを作成し、病原性を証明することを第一とし、さらにそのモデルマウスを用いて、遺伝子機能の異常からもたらされる病態メカニズムを分子レベルで明らかにすることを目指している。それにより、脊髄小脳萎縮症の治療標的が明らかになれば、新規治療法を創生していくことも可能となる。
パーキンソン病における大脳基底核の代謝型グルタミン酸受容体の動作様式

本研究では、パーキンソン病の病態生理に関して近年もっとも注目されてきた、「パーキンソン病の発症過程において、大脳基底核のグルタミン酸作動性神経伝達が亢進する」という報告に基づき、まずパーキンソン病の際に大脳基底核の代謝調節型グルタミン酸受容体(mGluRs)の発現様式がどのように変化するかを免疫組織化学的に解析した。その結果、MPTP投与により実験的に作製したパーキンソン病のモデルサルでは、mGluR1αの発現が淡蒼球と黒質において特異的に低下していることを明らかにした。次に、覚醒下の健常なサルで、mGluR1やgroup I mGluRsに対する選択的な薬物を淡蒼球に局所注入し、淡蒼球ニューロンの自発発火活動がどのように変化するかを電気生理学的に解析した。その結果、淡蒼球ニューロンの発火頻度は、group I mGluRsの作動薬であるDHPGにより著明に増加し、group I mGluRsの桔抗薬であるAIDAやmGluR1の拮抗薬であるLY367385により有意に減少した。以上のデータは、視床下核由来と思われるグルタミン酸がmGluR1αを介して淡蒼球ニューロンを興奮させることを示唆しており、パーキンソン病における淡蒼球や黒質のmGluR1αの発現低下は、視床下核ニューロンの活動性が増大することによる淡蒼球ニューロンの過剰興奮を補償するための変化であると考えられる平成13年度は、MPTPにより作製したパーキンソン病モデルザルを用いて、代謝調節型グルタミン酸受容体(mGluRs)の大脳基底核における発現様式の変化を免疫組織化学的に解析した。実験の手順は以下のとおりである。(1)ニホンザルの内頸動脈にMPTP(0.52.0mg/kg)を一側性に投与し、ヘミパーキンソン病モデルを作製した。(2)MPTP投与後、さまざまなステージの運動症状(主として無動、固縮)を示すサルを10%ホルマリン溶液で灌流固定した。(3)摘出した脳から大脳基底核の凍結切片(前頭断;60ミクロン)をミクロトームで作製した。(4)ドーパミンの合成酵素であるチロシン水酸化酵素の抗体を用いて、パーキンソン病モデルにおける黒質線条体投射ニューロンの変性・脱落の程度を、健常なサルの場合と比較しながら、免疫組織化学的に解析した。(5)個々のmGluRsに対する抗体を用いて、パーキンソン病モデルにおける大脳基底核のmGluRsの発現変化を、健常なサルの場合と比較しながら、免疫組織化学的に解析した。その結果、パーキンソン病モデルザルでは、淡蒼球内節・外節および黒質網様部でmGluR1αの発現が特異的に減弱していることが明らかになった。このようなmGluR1αの発現変化は、mGluR1αが淡蒼球や黒質のニューロン活動に重要な役割を果たしていることを示唆している。平成14年度は、選択的なアゴニストやアンタゴニストを用いてmGluR1αの機能を修飾することにより、これらのニューロン活動がどのように変化するかを電気生理学的に解析する予定である。以上のデータは、視床下核由来と思われるグルタミン酸がmGluR1αを介して淡蒼球ニューロンを興奮させることを示唆しており、パーキンソン病における淡蒼球や黒質のmGluR1αの発現低下は、視床下核ニューロンの活動性が増大することによる淡蒼球ニューロンの過剰興奮を補償するための変化であると考えられる