hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
思考、判断の基礎過程としての作業記憶の神経機構の研究

思考・判断の基礎過程の神経機構を調べる目的で、課題の遂行に情報の変換や生成が不可欠な課題を用い、課題の時間文脈に依存した情報表現の変化を解析した。2頭のサルに、3秒の遅延後、目標となる視覚刺激の提示位置へ眼球運動をする課題(ODR課題)と、視覚刺激の提示位置から90度時計回りの位置へ眼球運動をする課題(c-ODR課題)を行わせた。前頭連合野背外側部より記録した328個のニューロンのうち、課題関連活動を示した119個のニューロンについて特徴を詳細に検討した。その結果、以下のことが明らかになった。(1)視覚刺激提示期に有意な位置選択性を示した35個のニューロンの全てが、視覚刺激の提示位置の情報を反映していた。(2)遅延期に有意な方向選択性を示した43個のニューロンのうち86%が視覚刺激の提示位置の情報を反映し、12%は反応期に行われる眼球運動の方向を反映していた。(3)反応期に有意な方向選択性を示した45個のニューロンのうち、67%は眼球運動の発現や制御に関わっていたが、27%では選択性が視覚刺激の提示位置と一致していた。追加分析の結果、後者の活動は遅延期間活動の制御信号として機能していると思われる。(4)遅延期に有意な方向選択性を示したニューロンの分析結果は、遅延期間活動の多くが作業記憶の回顧的(retrospective)な側面に関与していることを示しており、先行研究の結果とよく一致している。一方、運動に関する予期的(prospective)な側面をもつ遅延期間活動のいずれもが、視覚刺激提示直後に活動を開始し、遅延期間中活動が持続することから、視覚情報から運動情報への変換が視覚刺激提示後の早い時期に行われている可能性が示唆された。今後、ニューロン活動の相関分析により、時間文脈に依存した情報生成のしくみを明らかにし、思考・推論に関わる内的情報処理機構の解明に迫りたいと考える。
江戸時代元禄期における上方歌人の総合的研究

和歌史的に見て重要度が高いと判断されながらも、従来の研究からは見落とされてきた上方の地下(じげ)二条派歌人のうち、金勝慶安(こんぜけいあん)・水田長隣(みずたちょうりん)・井上友貞(いのうえゆうてい)らについて、略年譜を作成し、それをデータベース化した。また、長隣がその編纂に関与した詞華集『往来松詩歌』(ゆききのまつしいか)を、翻印・解題して刊行した(富加町文化財調査報告書第26号、2006年3月)。具体的には、京都大学・岐阜県富加町郷土資料館ほか、関係文献(自筆本・写本・刊本)を所蔵する各所において調査を行い、それぞれ資料1点ごとに詳細な書誌データを採るとともに、鋭意関連資料の収集を行って複写資料の蓄積に努めた。また、伝記研究上重要な意味を持つ墓碑調査や、古書肆もしくは後裔宅での自筆資料(懐紙・短冊ほか)の探索、折々の資料展観での情報収集、それから明治大正期に刊行された雑誌文献の複写収集も、可能な限り実施した。ついで、収集した諸資料を解読し、分類し、さらに編年体に改編して、略年譜を作成した。現段階では未見の書物や遺漏もかなりあるけれども、ひとまずは、各歌人の活動を同時代の流れの中で定位し、新しい和歌史的展望を獲得するための基盤を整備するという所期の目的は達成し得たと考えている。今後は、なお引き続き年譜の増補改訂に努めつつ、他方、収集済み資料、特に和歌や歌論作品の丁寧な分析を通して、彼らの表現の深層にもメスを入れることを心掛けたい。全国各地に多数現存する、上方の地下二条派歌人の関係資料(自筆本・写本・刊本)の調査に赴き、各々の資料1点ごとの書誌データを採った。特に、岐阜県冨加町郷土資料館には幾度か出向いて、香川宣阿・水田長隣ほかの和歌添削資料(いずれも新出)の調査・整理に努めた。次年度中には、その「目録」を刊行すべく、ただいまパソコンを使って礎稿を作成している。また、河瀬菅雄の関係資料を豊かに含み持つ含翠堂文庫についても、調査を開始することができた。全体として、複写資料の収集も並行して行っているが、まだその集積量は僅かであり、今後のさらなる収集に期したいと思う。また、国文学研究資料館に所蔵されている、マイクロフィルムおよび紙焼写真本等の関連資料についても、少しずつそのデータを集積し得たので、それら収集した関係文献の解読に、徐々に入り始めたところである。なお、伝記研究上極めて重要だと考えられる墓碑調査に関しては、本年度内にも、精力的に実施した(本性寺・銀山寺・知恩寺ほか)が、未見の墓碑は相当数残されており、次年度以降には重点的な調査が必要だと考える。以上を踏まえて、現在、研究対象とする諸歌人ごとの略年譜を、パソコンを使用して作成中である。(1)上方地下二条派歌人の関係文献の調査・収集年度初めの「研究実施計画」に基づいて、早稲田大学・京都大学・富加町郷土資料館ほか、関係文献を所蔵する諸機関において、資料一点ごとの詳細な書誌データを採り、適宜関連文献の複写資料を備えた。さらに、幸運なことに、幾人かの個人蔵資料の調査・閲覧・収集にも恵まれた。また、京都(知恩寺・聞名寺)や岩国(普済寺)ほかに赴いての墓碑調査も精力的に行い、貴重な伝記資料としてデータを蓄積し得た。(2)新出・加点詠草の紹介と考察特に、富加町郷土資料館に伝襲される上方地下の加点詠草(いずれも一次資料)に関して、一部資料を翻印・紹介するとともに、その添削のありようを比較分析して、彼ら元禄期歌人の和歌観や詠歌作法を炙り出した。具体的には、香川宣阿・水田長隣・金勝慶安について、そのそれぞれの特色を考察し、近世和歌史に定位せんと試みた(*神作研一「元禄の添削」<『近世文藝』81号、日本近世文学会、平成17年1月刊>)。(3)元禄期諸歌人の略年譜の増補・作成従来の研究に基づいて作成してきた諸歌人の略年譜を、本年度の成果を踏まえて増補改訂した。未だ管見の及ばない資料に関しては、なお今後に継続して調査を果たしたい。

また、伝記研究上重要な意味を持つ墓碑調査や、古書肆もしくは後裔宅での自筆資料(懐紙・短冊ほか)の探索、折々の資料展観での情報収集、それから明治大正期に刊行された雑誌文献の複写収集も、可能な限り実施した。ついで、収集した諸資料を解読し、分類し、さらに編年体に改編して、略年譜を作成した。現段階では未見の書物や遺漏もかなりあるけれども、ひとまずは、各歌人の活動を同時代の流れの中で定位し、新しい和歌史的展望を獲得するための基盤を整備するという所期の目的は達成し得たと考えている。今後は、なお引き続き年譜の増補改訂に努めつつ、他方、収集済み資料、特に和歌や歌論作品の丁寧な分析を通して、彼らの表現の深層にもメスを入れることを心掛けたい。
ミドリゾウリムシにおける排他的細胞内共生システムの成立機構

本研究では最初に、クロロゴニウムChlorogonium elongatum(単細胞の緑色鞭毛虫)を唯一のエサとしたミドリゾウリムシParamecium bursariaの無菌二者培養法を確立し、この培旋法におけるミドリゾウリムシの増殖の様子などを調べた。次に、ミドリゾウリムシが持つ共生クロレラを細胞内で包んでいるperi-algal vacuole(PV)膜の単離を行うために、まずPV膜で包まれた状態の共生クロレラの単除法を孤立した。また、細胞をホモジナイザーで破砕した後、Percoll密度勾配遠心法により完全なPV膜を持つクロレラを単離することに成功した。また、ミドリゾウリムシの無菌二者培養における増殖の様子の観察に基づいて、ミドリゾウリムシの細胞肛門から細胞内の共生クロレラが生きたままエクソサイトーシスによって排出されることを光学顕微鏡観察で明らかにした。これによりミドリゾウリムシにおいて細胞内の共生クロレラの数を調節するためのこれまでに知られていなかった仕組みが存在することが示唆された。さらに、ミドリゾウリムシの細胞膜直下に一細胞辺り数千個ほど配備・固定されているトリコシストと呼ばれる細胞小器官が、電子密度の高い穎粒に変化するなどして消失し、白色ミドリゾウリムシに取り込まれたクロレラがその空いた場所に固定されて共生する、という可能性が示唆された。最後に、酵母ヤロヴィア(Yarrowia lipolytica)が白色ミドリゾウリムシに感染して共生することを発見した。ヤロヴィアの感染を解析したところ、この酵母を保持している白色ミドリゾウリムシの細胞形状にある条件下で異状が生じることが観察され、特に強い異常が起こった宿主細胞はその生存率が低下するなど、宿主白色ミドリゾウリムシにとってヤロヴィアの感染が有害であることが示された。1.ミドリゾウリムシの無菌培養系の改良ミドリゾウリムシの無菌的な大量培養法を開発した。この方法により、多量の細胞を得ることができるようになり、生化学的解析には十分な材料を確保することができるようになった。しかし、この培養法は餌としての単細胞性緑藻Chlorogonium elongatumとの共培養であるために、どうしても餌細胞がミドリゾウリムシに混入する。これは、分子生物学的研究を展開する上では不利であるので、培養系をさらに改良し、餌を必要としない完全合成培地での無菌培養法を開発した。この研究は、Jpn.J.Protozool.に発表した。2.PV膜の単離無菌培養で得たミドリゾウリムシからのPV膜を効率的に単離する方法を確立した。また、磁性ビーズを用いて、食胞を単離する方法を検討中である。これらを用いて、二次元電気泳動などによる膜タンパクの解析を行っている。3.感染性微生物を保持するミドリゾウリムシに対する基本的な光学・電子顕微鏡観察海外協力者のGoertz博士の過去の研究によると、ミドリゾウリムシに感染する種々の微生物には、その感染力に強弱があるという。例えば、イーストが感染しているミドリゾウリムシにクロレラを与えると、イーストは消失してクロレラが共生を確立させる。しかし、クロレラが感染している細胞にイーストを与えても、イーストが感染することはない。このような感染力の強弱は、クロレラ>イースト>セネデスムス>バクテリアという順序であるというが、このような序列を規定している仕組みは不明である。今年度には、まず基本的な観察を進め、クロレラがトリコシストを排除する機構との類似性を検討した。また、Gertz博士の研究室を訪問し、共同研究に関する議論と予備的実験を行った。ミドリゾウリムシの無菌二者

培養における増殖の様子の観察に基づいて、ミドリゾウリムシの細胞肛門から細胞内の共生クロレラが生きたままエクソサイトーシスによって排出されることを光学顕微鏡観察で明らかにした。異なった条件下で24時間中にミドリゾウリムシから排出された共生クロレラの数を調べて統計解析を行ったところ、共生クロレラの排出が宿主ミドリゾウリムシの栄養状態に影響されて起こることが示され、これによりミドリゾウリムシにおいて細胞内の共生クロレラの数を調節するためのこれまでに知られていなかった仕組みが存在することが示唆された。また、酵母ヤロヴィア(Yarrowia lipolytica)が白色ミドリゾウリムシに感染して共生することを発見した。ヤロヴィアの感染を解析したところ、この酵母を保持している白色ミドリゾウリムシの細胞形状にある条件下で異常が生じることが観察され、特に強い異常が起こった宿主細胞はその生存率が低下するなど、宿主白色ミドリゾウリムシにとってヤロヴィアの感染が有害であることが示された。これらの結果と、クロレラを保持している緑色ミドリゾウリムシには酵母はまったく感染しないという観察結果から、自然の淡水環境下において、共生クロレラが存在することが宿主ミドリゾウリムシにとって自然に存在する潜在的に有害な微生物の感染に対するある種の防御機構として機能しているのではないかという示唆が得られた。さらに、ヤロヴィアを保持しているミドリゾウリムシを長期にわたって培養している間に、ミドリゾウリムシ細胞内において共生生物を包んでいる脂質膜小胞(peri-symbiotic vacuole)の形状と細胞内の酵母の細胞形態が変化することが観察された。今年度は、単離培養した共生クロレラの白色ミドリゾウリムシヘの感染過程の電子顕微鏡解析を行った。その結果、大量の電子密度の高い顆粒がゾウリムシの細胞内に出現することを新たに見出した。そのうち、トリコシストの近傍に位置するものは、トリコシストに融合しているように見えた。他のゾウリムシ属において、トリコシストに融合するような顆粒の存在は報告されていないので、この顆粒がミドリゾウリムシにおけるクロレラとの共生の確立・維持に何らかの役割を果たしている可能性が示された。顆粒の微細構造を詳細に電子顕微鏡で観察を行ったところ、顆粒は膜のような構造で仕切られた2重構造をしているらしいことと、少なくとも顆粒の内部構造はトリコシスト本体を包んでいる脂質膜と融合しているらしいこと、しかし顆粒の外側の部分はその構造があいまいでトリコシスト本体と本当に融合しているかどうかは判断がつけられないことが分かった。顆粒の微細構造のより良い保存には液体窒素などを用いた急速凍結などによる固定が必要だと考えられる。今回の一連の研究により、本研究で確立したミドリゾウリムシの無菌二者培養法によって十分な質と鼻の細胞が得られるようになったことから、ミドリゾウリムシ細胞内で共生生物を包んでいるperi-symbiotic小胞の膜の膜タンパク組成の特徴や生理学的特長を、peri-symbiotic小胞の元である通常の食胞膜と比較することで明らかにできるだろうという結論に達した。そのためには、peri-symbiotic小胞膜の分子生物学的・生理学的解析とともに共生生物の感染・維持・排除の過程を詳しく観察する必要があるが、それは今後の課題として残った。
光照射が自律神経機能におよぼす影響についての研究

前年度の研究結果より,健常成人男性に5000luxの高照度光を照射すると,自律神経活動の直接の指標である筋交感神経活動(muscle sympathetic nerve activity : MSNA)は有意に増加するが,血圧,心拍および心電図R-R間隔変動には有意な変化はみられないことが明らかとなった。平成12年度は,500lux,2000luxの光照射を行い,5000luxの光照射によって有意な増加を示したMSNAがどのように変化するのかを検討した。MSNAは,500luxおよび2000luxのいずれの照射中においても増加する傾向を示し,有意な変化が認められた(oneway repeated-measures ANOVA, P<0.005)。さらに,照射中のMSNAは照射前に比較して有意に増加していた(contrast, P<0.005)。血圧および心拍数には有意な変化はみられなかった。次に,各照度とMSNAの増加量との間に,用量依存性があるかどうかについて検討したところ,照度の立方根とMSNA(1分間あたりのMSNAのバースト数burstrate:BR,100心拍に対するMSNAのバースト数burstincidence:BI))の相対的増加量との間には,有意な一次回帰直線関係が見出された(BR:R=0.606,F=10.46,p<0.01,BI:R=0.652,F=13.33,p<0.01)。この用量依存関係は,照度の立方根と深部体温リズムの位相変化との間には,有意な一次回帰直線関係を有するという報告^<1)>と同様の特性を持っており,光は脳内の同じ機序を介して生体リズムの位相変化と,交感神経機能の変化をもたらしている可能性を示唆するものと考えられる。1.研究目的光療法の作用機序を自津神経機能におよぼす影響の面から検討するために,高照度光照射が筋交感神経活動(muscle sympathetic nerve activity:MSNA),血圧,心拍および心電図R-R間隔変動におよぼす影響について分析した。3.研究成績高照度光照射中にMSNAは増加し始め、BRおよびBIのいずれもが,高照度光照射によって有意な変化を示した(p<0.05,one-way repeated-measures ANOVA)。さらに、光照射中には,BRおよび,BIのいずれもが,光照射前に比較して有意に増加していた(p<0.005,contrast)。高照度光照射を行わない対照実験においては、BRおよびBIのいずれにも有意な変化はみられなかった。血圧,心拍数ならびに,LFおよびHFのパワー値,LF/HF比は,いずれの実験においても有意な変動を示さなかった。4.まとめ本年度の研究結果より,5000luxの高度光が,自律神経活動の直接の指標であるMSNAを有意に増加させることが示された。平成12年度は,より低照度(500lux,2000lux)の光照射を行い,光照射の自律神経機能におよぼす影響に関して用量依存性が存在するのかどうかについて検討する予定である。
現代日本の階層構造-現時点での社会諸階層の生活および意識の変動

従来日本の階層構造研究のもっとも包括的体系的な代表的な調査として知られる、いわゆるSSM調査の1985年版が認めるように、現代日本の階層構造自体を明確に実証的に解明することが必ずしもできなかった事を問題とし、その点に焦点をおいた調査を行なった。まず、社会経済的な資源配分上の地位のクラスターを明らかにし、現代日本の階層構造が、企業規模と学歴上の地位によって、基本的に6つのクラスターから成ることを明らかにし、この点に、西欧先進産業社会との階層構造との基本的差異を認めることができることを明らかにした。これらのクラスターが、従来、階層的地位の中核的要素と考えられた職業階層とどう関連するかをみて、職業階層を指標とするとき、それらの職業階層的地位の資源配分上の地位の上下関係がどのようなものか、その内容を明らかにすることができた。これらが社会階層的地位であることを明らかにするために、これと独立に職業生活意識、政治的態度等の意識諸要素の因子分析を行ない、職業階層、地位クラスターを構成する地位との対応でこれらの態度が基本的にどんな意識文脈を分化させているかを解明する事を通して、職業階層、クラスターが、階層構造を構成する階層的地位として理解するとき、一定の現代日本社会の説明を行なうことができることを示唆した。また、上記の階層的地位とGenderの関係を解明し、Gender化した日本の階層構造の現段階の様相を明らかにしたし、また、年令層と階層構造の連関もデータにより解明している。更に、階層的地位の自己認知として重視される、いわゆる“中流意識"と諸階層の政治的態度の関連、職業生活の“Goodness"の認知内容との一定の相関を観察したが、そこに明確な一貫した意識文脈の分化を発見できるとしても、イデオロギー的教化の影響力の大きさこそが、むしろ問題であるかもしれないことを留保することとなった。この研究は二つの部分に分けて行なわれた.第一は,國勢調査,事業所統計の調査区別データ,及び市町村別データ(岡山県)を利用し,岡山県のその他の市町村別記会統計データを加味して,岡山県全体の市町村単位レベルからみた社会階層構造の変動・移動の動向を社会地図に作成する形で分析すること,及び更に調査区別データを利用して,倉敷・玉野・岡山の都市部分周辺を中心として,町・丁別レベルを分析することを,現在進行中である.昭和60年国勢調の磁気テープは, 4次分析以下が未発表であり,既発表部分のみを処理中で,この分析全体は,国調の発表が完結した段階で完結するだろう.第二は,以上の統計分析の成果を背景におきつつ,倉敷市民を事例に,その社会意識調査を行い,現在まで行なってきた倉敷調査の分析結果と比較して何らかの変動を検討する.今回の調査は, 1049人のサンプルを抽出し,留置法により行なわれたもので,学生18人とともに2泊3日の現地回収を行なった.内容は,サンプルの地位属性,生活指標の部分と,家族生活・職場生活,及それらの人々の社会的ネットワークと社会意識及政治意識の調査項目を含んだものである.生活意識・社会意識と階層アスピレーションの関係,経済社会・政治社会の状況認知,イデオロギー意識要素,これらのものが,階層地位別,社会的ネットワークのパターン別などとどう相関し,全体として社会〓階層のそれぞれの意識と行動を,多変量的析を通じて明らかにする予定である.回収率ほヾ70%に近く,まずは調査としては良好であったと思う.これらのデータは現在,コーティングなど整理中であり,入力中である.両方の成果は63年度に分析継続し,幾つかの報告書に分けて詳細発表されるであろうし, 63年度日本社会学会において,中間発表の予定である.

昭和62年度に収集、コンピューター投入した国勢調査調査区レベル及市町村レベルデータ、事業的統計データの分析を続けたが、次第に予定より規模が大きくなり、岡山県社会生活指標、農村集落調査等を追加しパンチ投入するなどして、分析を続行することとなった。これらを用いて岡山県の地域構造、その中での倉敷市の位置づけ等行なった。多変量解析の幾つかの手法を利用し、この結果を地図化して、社会諸階層の空間的構造を解明した。一応本年の9月末にこれを原〓化することができたが発表をまだしていない。(出版社を模索中)このようなマクロレベルの岡山県の階層構造分析を前提として行なった調査の分析を本年度後半で行なった。これが研究課題の本来の申請内容となっているものである。この分析の結果は、次のようにまとめられた。まず、職業、〓業上の地位、企業規模、勤続年、学歴、収入、性などの社会的地位に対する生活機会や資源配分の不〓〓構造として階層構造を定義するとき、職業階層を機軸として分析されるべきことを確認した。これらの社会的経済的地位をクラスター分析し、8つのクラスターを見出し、これを用いて、職業階層のそれぞれがどんな社会的地位のクラスターとして理解されるかを解明し、現代日本の階層構造の具体相を明らかにした。また、世代、性、学歴層等が、どんな社会的地位の複合セットとなっているかも明らかにし、重要な認知をえた。例えば20代には、大企業大卒クラスターと中小企業高卒クラスターへの階層分化が進行し、大企業高卒クラスターがなくなりつつあるという認知、女性は個人の努力が労力市場を通って階層的地位を配分されるとき、中小企業高卒クラスターにとどまり、婚姻市場で男性と同じ〓年構成の階層的地位に達すること等。また職業階層別に職業生活意識22項目の因子分析を行ない、各職業別に異なった職業生活に対する態度があることを具体的に解明した。報告書を作成した。
中学校における理科と体育を融合した新しいカリキュラム関発の研究

中学校理科における「力や運動」の分野を自分の動きから学習するとより生徒に分かりやすい授業になると考え、教科を越え体育の「陸上競技」と融合した授業カリキュラムの開発と実践を行った。京都教育大学附属桃山中学校で2クラス、以下のような模擬授業を行った。(1)50走を行い、デジタルビデオカメラにその様子を録画する。(1時間)(2)パソコンに取り込んだ録画データをもとに各自速度のグラフを描きその変化を見る(1時間)(3)走行中での速度の変化と働く力の様子を足の着地画面をもとに分析する。(1時間)(4)ピッチやストライドなど走法の様々な視点から動画分析を行う。(1時間)(5)再度50走を行う。(1時間)○明らかになった主な点・カメラの位置はできるだけ離し、常に走行中のフォームを真横から写すことが重要。・カメラのシャッタースピードが手動で変えられるものを選び1/5001/1000秒程度にする。・キャプチャ及び再生に必要な装置は情報機器でほぼ可能でどの学校でも即実施できる。・インターレースの解除ができる再生ソフトを選ぶことで1/60秒の精度での分析が可能。・説明を加えることによって中学生でも予備知識なしに映像の分析は可能。・着地から離地までの映像を分析することで減速、加速と力の関係が実感できる。○生徒の反応・自分の走行フォームを見るのは始めてで新鮮みがありかつ興味関心は大きかった。・速度の変化と着地時の力のかかり方の関係がよくわかり運動の原因としての力を学習させるのに非常に効果があった。・足と地面の間で働く力の向きから作用・反作用の学習にもなることがわかった・ほぼすべての生徒が授業に親しみがもて理解が深まるという感想であった。・再走の結果、ほとんどの生徒のタイムが向上していた。科学的理解が運動能力の向上に役立つと思われる。中学校理科における「力や運動」の分野を自分の動きから学習するとより生徒に分かりやすい授業になると考え、教科を越え体育の「陸上競技」と融合した授業カリキュラムの開発と実践を行っている。平成15年度は大学の基礎物理の授業、体育の陸上競技及び附属桃山中学校での模擬授業においてそれぞれ以下の試みを行った(1)短距離走を行い、デジタルビデオカメラにその様子を録画する。(2)パソコンに取り込んだ録画データをもとに各自速度、加速度(中学校では加速度を除く)を導く(3)走行中での速度・加速度の変化と働く力の様子を画面をもとに分析する○明らかになった主な問題点・カメラの位置はできるだけ離し、常に走行中のフォームを真横から写すことが重要。・キャプチャ及び再生に必要な装置は既存の情報機器でほぼ可能。・インターレースの解除ができる再生ソフトを選ぶことで1/60秒での分析が可能。・ポールを横切る時刻の読みとり精度は最大で1/100秒なのでポールは5m間隔で十分。○受講生の反応・自分の走行フォームを見るのは始めてで新鮮みがありかつ興味関心は大きかった。・走行フォームの違いが力の及ぼし方に影響しそれが速度の変化に影響していることが実感できた。ほぼすべての生徒が授業に親しみがもて理解が深まるという感想であった。・全員がもう一度走るとタイムはよくなると答え、科学的理解が運動能力の向上に役立つと考えている。

中学校理科における「力や運動」の分野を自分の動きから学習するとより生徒に分かりやすい授業になると考え、教科を越え体育の「陸上競技」と融合した授業カリキュラムの開発と実践を行った。京都教育大学附属桃山中学校で2クラス、以下のような模擬授業を行った。(1)50走を行い、デジタルビデオカメラにその様子を録画する。(1時間)(2)パソコンに取り込んだ録画データをもとに各自速度のグラフを描きその変化を見る(1時間)(3)走行中での速度の変化と働く力の様子を足の着地画面をもとに分析する。(1時間)(4)ピッチやストライドなど走法の様々な視点から動画分析を行う。(1時間)(5)再度50走を行う。(1時間)○明らかになった主な点・カメラの位置はできるだけ離し、常に走行中のフォームを真横から写すことが重要。・カメラのシャッタースピードが手動で変えられるものを選び1/5001/1000秒程度にする。・キャプチャ及び再生に必要な装置は情報機器でほぼ可能でどの学校でも即実施できる。・インターレースの解除ができる再生ソフトを選ぶことで1/60秒の精度での分析が可能。・説明を加えることによって中学生でも予備知識なしに映像の分析は可能。・着地から離地までの映像を分析することで減速、加速と力の関係が実感できる。○生徒の反応・自分の走行フォームを見るのは始めてで新鮮みがありかつ興味関心は大きかった。・速度の変化と着地時の力のかかり方の関係がよくわかり運動の原因としての力を学習させるのに非常に効果があった。・足と地面の間で働く力の向きから作用・反作用の学習にもなることがわかった・ほぼすべての生徒が授業に親しみがもて理解が深まるという感想であった。・再走の結果、ほとんどの生徒のタイムが向上していた。科学的理解が運動能力の向上に役立つと思われる。
パーキンソン病における異常型α-synucleinの病的機能の解析

パーキンソン病(PD)患者脳においては変性神経細胞内にLewy小体(LB)が形成され、その構成蛋白として家族性PDの原因遺伝子産物であるα-synuclein蛋白が同定されている。脳内におけるα-synucleinの異常蓄積は神経細胞死と関連していると考えられるが、その蓄積過程については不明な点が多い。本研究では脳内に蓄積したα-synucleinについて解析を加えることによりα-synuclein蓄積の原因を探索し,これまでに脳内に蓄積した異常型α-synucleinが特異的にユビキチン化および高度のリン酸化を受けることを明らかにした。本年度はこれらの異常な翻訳後修飾についてさらに検討を加えた。患者脳内に蓄積したα-synucleinに生じるユビキチン化部位を蛋白化学的解析により明らかにした。PD同様α-synucleinが蓄積するHallervorden-Spatz患者大脳皮質をTris, Triton, Sarkosyl,尿素を用いて順次可溶化し、蓄積型α-synucleinを尿素可溶画分に回収した。陰イオン交換カラムや逆相HPLC等により精製した蛋白をプロテアーゼ消化し、得られたペプチド断片を質量分析により解析し、12番Lysがユビキチン化部位であることを同定した。過去の知見と考えあわせると、α-synucleinは脳内に蓄積した後にユビキチン化を受けることが推測された。本研究により同定した蓄積α-synuclein特異的なリン酸化を認識するモノクローナルを作製し、α-synuclein蓄積病変をもつ患者脳の免疫組織化学的検討を詳細に行った結果、これまでには報告のない大脳皮質の糸状のα-synuclein蓄積物(Lewy threads)、直径1μm程度の点状蓄積物(Lewy dot)、小脳プルキンエ細胞軸索内のα-synuclein蓄積等の新規病理構造物が同定された。パーキンソン病(PD)患者脳においては変性神経細胞内に線維性の異常蓄積物であるLewy小体(LB)が形成され、その構成成分として家族性PDの原因遺伝子産物であるα-synucleinが同定されている。脳内に蓄積したα-synucleinについて解析を加えることによりα-synuclein不溶化の原因を探索している。抗ヒトα-synuclein抗体を用いてウェスタンブロット解析すると尿素可溶画分中には正常型α-synucleinと同じ移動度のリン酸化α-synucleinを示すバンドのほかに22K,29Kに陽性バンドが確認された。これらのバンドは抗リン酸化α-synuclein抗体、抗ユビキチン抗体にも陽性であり、またin vitroにおいてユビキチン化したα-synucleinが示す移動度と同じであった。尿素可溶画分並びにin vitroにおいてユビキチン化したα-synucleinをCNBrにより化学切断した後に抗α-synuclein抗体を用いてウェスタンブロット解析した場合にも両者は同じバンドパターンを示した。これらのことから脳内に蓄積したα-synucleinの一部はユビキチン化を受けていることが示唆された。
炭化水素系ラジカルとNOxの反応過程に関する研究

ステンレス製衝撃波管を用いて15003500KにおけるC_2H_2-N_2O-NO系の反応過程を主として化学的活性種(原子、ラジカル)の挙動を中心に研究を行った。測定はイメージインテンシファイァを用いたマルチ、チャンネル分光検出システム、300600nmにおける代表的な反応中間体(CN、CH、C_2、OH等)の発光強度履歴および真空紫外吸収分光法によるH、O、C等の濃度変化について行い、以下の知見を得た。1.上記温度領域において、CH、CN、C_2等のラジカル種は強い化学発光を生じる。発光過程は2段階にわかれ明かに別々の反応機構に由来する。O原子の発光量と共に化学発光強度は急激に増大しまた第2段階の化学発光強度は減少する。しかし、N_2O添加量が12%を境いとしてこの発光強度は全体的に減少する。2.上記化学発光過程はいずれのラジカル種についても誘導期を有する。C_2スワン帯(515nm)の発光についてはこの誘導期の活性化エネルギーが6.7(Kcal/mol)、C_2H_2およびN_2O濃度に関する反応次数は、それぞれ、0.6、0.4で表わされる。過去に発表されたC_2H_2-O_2系における化学発光過程に関する活性化エネルギーの約半分であることからO原子の化学的な活性が影響しているものと推定される。また理論計算から推定される活性化エネルギーは13(Kcal/mol)であり2000K付近を除いて誘導期の測定値の説明は不完全であることが判明した。3.真空紫外吸収分光法によるアルゴンに大希釈されたC_2H_2+NO系中でのH原子生成速度は大体広い温度範囲で理論計算と一致した。C_2H_2、NO濃度がより高い条件下でのNOの生成、消失機構に関しては今後の検討課題として残されている。
骨肉腫の予後因子としての劣性癌遺伝子の変化

我々は骨肉腫(OS)における劣性癌遺伝子の関与を、網膜芽細胞腫(RB)遺伝子の変化、及び各染色体のヘテロ接合性の変化の検索というアプローチにより検討してきた。その結果約40%のOSにおいてRB遺伝子に何等かの構造異常が認められ、また約66%において13番染色体のヘテロ接合性の消失を認めた。これらの結果はRBにおいて報告されているものと同等であり、RB遺伝子がOSの発生に深く関与していると考えられる。またこれらの中で両親の染色体が識別可能であったもので、RB遺伝子の突然変異の起源を解析したところ、父方由来の13番染色体に有意に偏って生じていることがわかった。この事実は体細胞において、相同染色体における突然変異の感受性に何等の相違が存在することを示唆する。さらに、RBと異なりOSでは13番以外の染色体においてもヘテロ接合性が消失しており、その中でも特に17番染色体にでは高頻度に変化しいることがわかった。このことにより17番染色体OSにおける新たな劣性癌遺伝子が存在していることが想定される。その遺伝子を追求するために、まず共通してヘテロ接合性が消失している部分の同定を、17番染色体上の多数の多型性プローブを用いて試みた。その結果共通して変化している部分は17p13の一部であることがわかった。治療開始後一年以上経過した症例において、この部分の変化の有無と肺転移出現までの期間の相関をみたところ、変化していた腫瘍では変化していないものに比べて、有意に早期に転移巣が出現していることがわかり、17p13になる問題の遺伝子が肺転移に関与している可能性を示唆する結果が得られた。今後の研究としては、更に経過観察を継続し治療等の他の因子を含めた解析でこの相関関係を検討することと、17p13に存在する遺伝子の同定が考えられる。この遺伝子の有力な候補としてはp53遺伝子が考えられ、この遺伝子のOSおにける構造・発現の変化の検索を行う予定である。
唾液腺の発生と再生における亜鉛トランスポーターの役割解明

細胞内の亜鉛レベルの恒常性は亜鉛トランスポーター(ZIP)により制御されている。我々はZIPファミリーが唾液腺の発生・再生に重要であるとの仮説を立てその検証を行った。ZIP6遺伝子欠損マウスの解析では、唾液腺の組織構造に著変はみられず、蛋白質分泌にも影響を与えなかったが、水分泌に関わる機能を有することが示唆された。一方ZIP10はヒト唾液腺由来培養細胞株を用いた解析では、ZIP10は細胞増殖には関与しないが、導管上皮細胞の放射線細胞障害による細胞死の抑制に関与することが明らかとなった。本研究成果はZIP10の発現コントロールによる唾液分泌障害の新たな治療法開発への一助となることが期待される。亜鉛は微量必須元素であり、組織のターンオーバーや機能維持、発生に重要な役割を担うことが解明されつつある。我々は亜鉛トランスポーター(ZIPs)が唾液腺で果たす役割を解明するため、唾液腺の発生から再生までの一連のメカニズム解明を目的として本研究課題を開始した。昨年度は、唾液腺に亜鉛が果たす役割を形態形成、水・タンパク質分泌機能の観点から解析した。1我々のマイクロアレイ解析およびRT-PCRの結果から、8週齢マウス顎下腺と比較して胎生14,18日齢で高い遺伝子発現を示したZIP遺伝子群に着目し、そのうち胎生致死の表現系を有さないZIP6ノックアウトマウス(-KOマウス)を用いてHE染色による形態形成および水分泌能における役割を解析した。2ZIPsにより細胞内に亜鉛イオンを取り入れ、それによりcAMPホスホジエステラーゼ活性を阻害してcAMP代謝に関わることが骨系の細胞で報告されている。唾液腺腺房細胞においては、β受容体刺激によりcAMP依存性に唾液タンパク質の開口分泌が起こることから、ラット耳下腺腺房細胞におけるβ受容体刺激によるアミラーゼ分泌に対する亜鉛イオンの効果を検討した。結果、12いずれにおいても亜鉛イオンおよびZIP遺伝子は相関を示さなかった。ZIP遺伝子の成体マウス唾液腺における形態形成ないし水分泌能への関与は否定的であるが、今後、加齢やストレス負荷状態におけるその関与を検証する予定である。また、他のZIP遺伝子群に関しても、マイクロアレイ解析において発生過程に高い発現量を示したZIP10に関しfloxマウスを準備中であり、表現系の解析を行う予定である。我々は亜鉛輸送体の中でも特に発生期において唾液腺に発現を示すZiP6およびZiP10に着目し本研究を開始した。これまで8週齢の雄性ZiP6-KOマウスの顎下腺では形態学的な変化は認められず、ピロカルピンの腹腔内投与によるムスカリン性アセチルコリン受容体刺激後の唾液分泌に著変は見られなかった。亜鉛キレート剤存在下でβ受容体を刺激したときのタンパク質分泌の変化をアミラーゼ分泌量により解析したところ、著変は見られなかった。ZiP10については、理化学研究所からZiP10-floxマウスを搬入し、唾液腺特異的なプロモーター下でCreリコンビナーゼを発現する遺伝子改変マウスとの交配を進めている。平成27年度はZiP6-KOマウスの顎下腺におけるムスカリン性受容体刺激下の細胞内カルシウム濃度の変化を共焦点レーザー顕微鏡により解析する予定である。また、ZiP10の遺伝子発現欠失が唾液腺の形態形成、タンパク質分泌、水分泌に与える影響を検討する予定である。さらに、ZiP6および10がストレス負荷試験、加齢に示す相関を遺伝子の発現量、タンパク質量、タンパク質局在の変化により解析する予定である。ストレス負荷モデルには、昨年度予定した放射線照射以外に唾液腺導管結紮モデルを加え、導管障害性の唾液機能低下における亜鉛輸送体の発現とタンパク質の局在について解析する。以上の結果からZiPファミリーが唾液腺疾患に果たす役割を検討する。損傷後の唾液腺組織の再生または細胞障害におけるZIP10の役割を解明する目的で、ZIP10の遺伝子発現の変化について解析した。すなわち正常顎下腺細胞株であるNS-SV-AC細胞(腺房由来・AC細胞)、NS-SV-DC細胞(導管由来、DC細胞)、NS-SV-MC細胞(筋上皮由来、MC細胞)を用い、それぞれの細胞に対し放射線照射装置MBR-1520R-3を用いて放射線を10Gy照射し、24時間後のZIP10の遺伝子発現量を定量的PCR法により検討した。結果、導管由来細胞株であるDC細胞において、有意な遺伝子発現量の減少を認めた。この結果から、唾液腺細胞への放射線照射によりZIP10の遺伝子発現量が変化することを見出した。現在、ZIP10遺伝子の過剰発現用ベクターを作製し、ZIP10遺伝子の過剰発現が放射線照射後の唾液腺細胞に与える影響について検討中である。また、ZIP10は胎生14,18日目のマウス唾液腺に存在することより、in vivoにおけるZIP10の機能についても解析を進める。

平成25年度及び本年度の解析結果では、ZiP6欠損マウスの唾液腺においては野生型マウスと比較して成獣マウスの形態学的な著変が認められないこと、またピロカルピンの腹腔内投与によるムスカリン性アセチルコリン受容体刺激後の唾液分泌量に変化が無いことが明らかとなってきた。また、唾液腺(顎下腺)の急性単離細胞を亜鉛キレート剤下でイソプロテレノールによるβアドレナリン受容体刺激を行った後、培養上清中に分泌されるアミラーゼ活性を測定した結果、著変は認められなかった。これらの結果から、少なくともZiP6は正常のマウス唾液腺の発達や唾液分泌に不可欠なものとはいえないことが明らかとなった。さらに、ZiP10の唾液腺の形態形成および機能に関する解析を進める目的でZiP10-floxマウスを搬入(理化学研究所・深田俊幸の作出)し、唾液腺特異的なプロモーター(CK5など)下でCreリコンビナーゼを発現する遺伝子改変マウスとの交配を進め、仔マウスのGenotypingを進めている。口腔病理学平成27年度はZiP6および10がストレス負荷試験および加齢に示す相関を解析する予定である。ストレス負荷モデルには、昨年度予定した放射線照射以外に唾液腺導管結紮モデルを加え、導管障害性の唾液機能低下におけるZiP6およびZiP10遺伝子の発現量の変化を検討する。また、ZiP6-KOマウスの顎下腺におけるムスカリン性受容体刺激下の細胞内カルシウム濃度の変化を共焦点レーザー顕微鏡により解析する予定である。さらに、ZiP10-floxマウス作製後は昨年度に予定したとおり、唾液腺特異的なプロモーター(CK5など)下でCreリコンビナーゼを発現する遺伝子改変マウスとの交配によりコンディショナルノックアウトマウス(ZiP10-Creマウス)を作製中であり、ZiP10-Creマウスにおける胎生期および新生成体時の3大唾液腺の形態変化を解析する。また、同唾液腺における組織内遺伝子発現量の変化をRNA sequence解析により網羅的に検索する。唾液腺に亜鉛が果たす役割を形態形成、水・タンパク質分泌機能の観点から解析した。1ZIP6遺伝子欠損がマウス顎下腺に与える影響を、形態学的および生理学的に検討した。まず、8週齢の雄性ZIP6-KOマウスおよびコントロールとしてのC57BL/6マウスから顎下腺を摘出し、パラホルムアルデヒド固定後に通法に従ってHE染色標本を観察した。その結果、コントロールに比較して、ZIP6-KOマウスの形態に変化はみられなかった。次に、水分泌能をピロカルピン腹腔内投与後の唾液分泌量で評価した。結果、コントロールと比較してとZIP6-KOマウスの唾液分泌量に有意差はみられなかった。2ZIPを介して流入した亜鉛がcAMPホスホジエステラーゼ活性を阻害し、cAMP代謝を上昇させるかどうかを検証するため、酵素処理により調製したラット耳下腺腺房細胞を用いてβ受容体刺激によるアミラーゼ分泌に対する亜鉛イオンの効果を検討した。結果、亜鉛イオンはβ受容体刺激によるアミラーゼ分泌には全く効果を示さなかった。以上の結果から、ZIP6遺伝子の成体マウス唾液腺における形態形成ないし分泌能への関与は否定的であった。
肥満細胞のサイトカイン産生機構の解明

本研究では、アレルギー反応の鍵として働くマスト細胞による炎症性サイトカインの産生における知見を新たに得る目的で、マスト細胞内の遊離亜鉛に着眼した。申請者は昨年度までに、亜鉛蛍光指示薬と蛍光顕微鏡を用いて細胞内遊離亜鉛を経時的に観察する手法を確立し、マスト細胞内の遊離亜鉛濃度が抗原刺激依存的により上昇する事を明らかにした。この現象を亜鉛ウェーブと名付けた。この亜鉛ウェーブは、カルシウム濃度の上昇とRas-MAPKシグナル伝達経路の活性化依存的に、核周辺の小胞体近傍から起こる事を明らかにした。この亜鉛ウェーブはチロシン脱リン酸化酵素の活性を抑制することで炎症性サイトカインIL-6やTNF-αの産生に関与している可能性を明らかにした。しかしながら、核周辺部から亜鉛が放出される機構や、放出された亜鉛が標的タンパク質に作用する分子機構については不明であった。そこで、カルシウム依存的なMAPKの標的タンパク質を2次元電気泳動で同定を試み、いくつかの候補タンパク質についてsiRNAで発現を低下させ亜鉛ウェーブが抑制されるかどうかを検討した。現在のところ、亜鉛ウェーブを抑制するタンパク質は同定されていない。また、亜鉛トランスポーターのノックアウトマウス由来のマスト細胞を用いて亜鉛ウェープが抑制されるかどうかを確認したが、現在までに確認した中で亜鉛ウェーブが抑制されるものは見つかっていない。この先、亜鉛ウェーブの制御機構が明らかになることで、アレルギー反応の制御につながる知見が得られることが期待できる。本研究では、アレルギー反応の鍵となる肥満細胞における炎症性サイトカインの産生機構についての新たな知見を得る目的で、肥満細胞内での遊離亜鉛に着眼した。われわれは、亜鉛蛍光指示薬を用いて蛍光顕微鏡で経時的観察を行い、抗原刺激依存的に肥満細胞内の遊離亜鉛濃度が上昇する事を明らかにした。この刺激依存的な遊離亜鉛の上昇が、抗原受容体の下流のSykおよびPLCγ2依存的なシグナル伝達で制御されていること、さらに細胞内カルシウム濃度の上昇とRas-MAPKシグナル伝達経路の活性化依存的に起こる事を明らかにした。また、細胞内小器官特異的な蛍光試薬を使用して観察を行った結果、核周辺の小胞体近傍が遊離亜鉛の発生源であることを確認した。この刺激依存的な遊離亜鉛の上昇が肥満細胞の炎症性サイトカインであるIL-6やTNF-αの産生に関与しているかどうかを確かめるために、薬剤を用いて人為的に遊離亜鉛の上昇を再現させた。その結果、細胞内亜鉛の上昇により抗原刺激依存的なサイトカインの産生が亢進し、反対に亜鉛のキレート剤では抑制されることが明らかになった。これらのサイトカインの転写活性化には、主要な転写因子であるNF-κBではなくMAPKが関与していることが明らかになった。さらに、細胞内遊離亜鉛濃度の上昇との活性には負の相関がある事が示され、このことから遊離亜鉛が脱リン酸化を抑制することでMAPK活性化を持続することに関与している事が示唆された。以上の結果から、本研究では肥満細胞による炎症性サイトカイン産生において細胞内遊離亜鉛が役割を果たしているという新たな知見を得る事ができた。今後この知見が肥満細胞以外の免疫細胞においても明らかにされることが期待できる。
Synbiotics療法による小腸移植後拒絶反応の抑制効果

【背景】小腸移植はグラフトの保存、虚血再灌流障害、急性拒絶反応や免疫抑制剤の影響で腸管内細菌の増殖、粘膜バリア機能が侵されやすい状態にある。一方、外科領域においてもsynbiotics療法が脚光を浴びている。【目的】ラット小腸移植モデルにおいて、synbiotics療法の拒絶反応、Bacterial Translocation発症に与える影響、および便中有機酸の濃度変化がグラフト拒絶反応の程度を予期するfactorとしての役割に関して検討した。【方法】BNをドナー、Lewisをレシピエントとした同所性小腸移植を行いsynbiotics投与群・非投与群の2群とした。糞便細菌叢・有機酸濃度分析・臓器細菌培養・グラフト拒絶反応スコアリングを行った。【結果】(糞便細菌叢)通性嫌気性菌で投与群において菌数の減少傾向に有意差が認められたのはEnterococcusのみであった。(糞便有機酸濃度)酢酸がIO日目の投与群において有意に増加傾向が認められた。(臓器への細菌移行)すべての臓器において投与群で細菌数が少ない傾向が認められ、特にグラフト小腸の所属リンパ節と腹水において、投与群で有意に臓器内細菌数が低かった。(グラフト拒絶反応)拒絶反応スコアリングでは非投与群2.6±0.54に対して、投与群では2.3±0.57と両群間に有意差は認められなかった。【結論】ラット小腸移植モデルにおけるSynbiotics療法の効果として、グラフトの急性拒絶反応の進展に伴う、臓器への細菌移行の抑制効果を確認した。糞便中有機酸分析は腸管内環境の把握に重要で、特に酢酸の動きは拒絶に伴う腸内細菌叢変化のマーカーとして有用な可能性が示唆された。強度の急性拒絶反応を誘発する移植コンビネーションでは拒絶反応は抑制できなかったが、今後慢性拒絶反応モデルなど臨床に近いと思われるモデルでの検討が必要と思われた。ラット小腸移植モデルを用いて、術後にsynbiotics投与群と、非投与群の2群に分けた。Synbiotics protocolは、probioticsとしてBifidobacteruim breve、Lactobacillus caseiを、Prebioticsとして、Tlansgalactosylated oligosacchalidesを投与した。結果<糞便細菌叢>symbiotics投与群、非投与群における術後5・10日目の糞便細菌叢の変化を検討すると、偏性嫌気性菌においては両群で術後5日目と10日目の間に明らかな変化は認められなかった。通性嫌気性菌では、Enterobacteriaceae, Staphylococcusでは、投与群において術後10日目の菌数の減少傾向が認められたものの、有意差が認められたのは、Enterococcusのみであった。<糞便有機酸濃度>総有機酸や腸内の主要な有機酸である酢酸や酪酸、乳酸、プロピオン酸において、投与群で増加傾向が認められた。特に、酢酸では、10日目の投与群において有意に増加傾向が認められた。<臓器への細菌移行>すべての臓器において、投与群で細菌数が少ない傾向が認められた。特に、グラフト小腸の所属リンパ節と腹水において、投与群で有意に臓器内細菌数が低かった。考察本研究の結果では、synbiotics投与による糞便細菌叢に大幅な変化は認められなかったものの、便中有機酸濃度が優位な増加傾向を示し、グラフトの所属リンパ節と腹水において明らかなBacterial Translocationの抑制効果が認められたと考えられる。今後、拒絶反応の病理学的検索を含め、synbiotics投与による、免疫学的側面からの評価を行う予定である。【背景】

小腸移植はグラフトの保存、虚血再灌流障害、急性拒絶反応や免疫抑制剤の影響で腸管内細菌の増殖、粘膜バリア機能が侵されやすい状態にある。一方、外科領域においてもsynbiotics療法が脚光を浴びている。【目的】ラット小腸移植モデルにおいて、synbiotics療法の拒絶反応、Bacterial Translocation発症に与える影響、および便中有機酸の濃度変化がグラフト拒絶反応の程度を予期するfactorとしての役割に関して検討した。【方法】BNをドナー、Lewisをレシピエントとした同所性小腸移植を行いsynbiotics投与群・非投与群の2群とした。糞便細菌叢・有機酸濃度分析・臓器細菌培養・グラフト拒絶反応スコアリングを行った。【結果】(糞便細菌叢)通性嫌気性菌で投与群において菌数の減少傾向に有意差が認められたのはEnterococcusのみであった。(糞便有機酸濃度)酢酸が10日目の投与群において有意に増加傾向が認められた。(臓器への細菌移行)すべての臓器において投与群で細菌数が少ない傾向が認められ、特にグラフト小腸の所属リンパ節と腹水において、投与群で有意に臓器内細菌数が低かった。(グラフト拒絶反応)拒絶反応スコアリングでは非投与群2.6±0.54に対して、投与群では2.3±0.57と両群間に有意差は認められなかった。【結論】ラット小腸移植モデルにおけるSynbiotics療法の効果として、グラフトの急性拒絶反応の進展に伴う、臓器への細菌移行の抑制効果を確認した。糞便中有機酸分析は腸管内環境の把握に重要で、特に酢酸の動きは拒絶に伴う腸内細菌叢変化のマーカーとして有用な可能性が示唆された。強度の急性拒絶反応を誘発する移植コンビネーションでは拒絶反応は抑制できなかったが、今後慢性拒絶反応モデルなど臨床に近いと思われるモデルでの検討が必要と思われた。
「分子寄生体」としての制限酵素と宿主の共進化

1)染色体上に置いた制限修飾遺伝子が、相同な遺伝子による置き換えに対して抵抗すること、これが宿主の相同組換え経路によって影響されることを示した。2)大腸菌のRecBCD経路の相同組換え酵素群が制限修飾系による宿主殺しに抵抗することを示した。3)バクテリオファージの二重鎖切断修復型相同組換えが、制限修飾系に対する適応であることを提案した。4)減数分裂での二重鎖切断型相同組換えが、トランスポゾンなどの利己的な遺伝子の挿入に対する適応であると提案した。5)EcoRV制限修飾単位に、制限にプラスに働く遺伝子Cを同定した。既に細胞内にある制限修飾遺伝子単位のC遺伝子が、新たに侵入した別の制限修飾遺伝子単位に働きかけて制限酵素を発現させ宿主細胞の染色体を切断させ、宿主を殺させることを示した。
近世藩校規則に見る秩序原理の学習環境史的研究

本研究は、学習環境の構成要因に潜む前近代性がどのような契機や経緯で変化し、また今日の学校教育の中に、何が残存しているのかを総合的に検討するための予備的・基礎的研究を行おうとするものであり、あわせて学習環境史の方法的枠組みの確立を目指すものである。すなわち、前近代学校(藩校)を対象に、それが保持した学習空間の秩序原理を、規則とりわけ出席規定、座席規定、年齢規定、生活様態の制限について分析し、時代の変化、地域性、学統・学派の違いなどを実態的に解明することを目的とする。補助金の受領期間において得られた成果は、以下の通りである。(ア)『日本教育史資料』他、既刊の文献に基づく「藩校規則一覧」の作成と、画像(史料)データベースの構築、および規則内容の分析。その結果、分析視角として、「座席図」「儀式規程」「出席規則」「職制」「服務規程」などが有効であることを確認し、それらの異同、発達、地域差を検討した。(イ)藩校がもつ秩序原理は、近世(武家)社会と不可分であるが、年齢・身分などの伝統的・形式的なものから、獲得的(能力的)な「教育的身格」が支配するようになること、藩校のそのような「先駆性」は近世社会では違和感があったが、当該地方、同時代に様々な影響を与えたこと、それが近代教育への「文化的先行経験」を形づくったことなどを明らかにした。今後は、さらに、多くの事例を以て検討を続け、明治期の諸学校を視野に入れて検討する必要を感じている。すなわち、前近代学校(藩校)を対象に、それが保持した学習空間の秩序原理を、規則・学とりわけ出席規定、座席規定、年齢規定、生活様態の制限について分析し、時代の変化、地域性、学統・学派の違いなどを実態的に解明することを目的とする。本年度は、研究初年度にあたり、(ア)「藩校規則一覧」の作成と、画像(史料)データベースの構築、(イ)そのための史料調査・収集に専念した。「藩校規則一覧」は、『日本教育史資料』他、既刊の文献に紹介された活字資料の中から関係規則を収集・整理したもので、(1)建学理念(2)学習態度(3)生活管理(4)教育課程・授業形態(5)施設・設備(6)その他の要素について分析したものであり、今後その完備をめざしている。また、現地史料調査は、福井藩・小浜藩・鳥取藩・広島藩・宇和島藩・西条藩・佐倉藩・仙台藩・弘前藩などについて行い、学校関係史料を撮影し収集したが、田原藩・南部藩などは公刊された家老や奥向きの者の職務日誌の精査と分析を通して、学校の動向を側面的に把握しようとした。本年の調査研究を遂行するに当たり、史料保存情報の交換はもとより、近世的「秩序原理」の分析視角についての検討を重ね、「座席図」「儀式規程」「出席規則」「職制」「服務規程」などを通じて行うごとの有効性を確認した。すなわち、前近代学校(藩校)を対象に、それが保持した学習空間の秩序原理を、規則・学則とりわけ出席規定、座席規定、年齢規定、生活様態の制限について分析し、時代の変化、地域性、学統・学派の違いなどを実態的に解明することを目的とする。本年度は、研究2年度目にあたり、前年度に作成した「藩校規則一覧」と画像(史料)データベースに基づいて(ア)個別藩校の史料調査・収集を行った。「藩校規則一覧」における、(1)建学理念(2)学習態度(3)生活管理(4)教育課程・授業形態(5)施設・設備(6)その他の要素について分析を一層精緻にし、今後の利用に役立てる予定である。また、(イ)現地史料調査は、福井藩・小浜藩・宇和島藩・西条藩・佐倉藩・彦根藩・田原藩などについて行い、学校関係史料を撮影し収集したが、田原藩については公刊された城中職務日誌の精査と分析を通して、学校の動向を側面的に把握しようとした。本年の調査研究を遂行するに当たり、史料保存情報の交換を頻繁に行い、前年に引き続いて近世的「秩序原理」の分析視角についての検討を重ね、「座席図」「儀式規程」「出席規則」「職制」「服務規程」などの個々の内容と問題点を明らかにした。