hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
都市間道路のサービス水準と幾何構造の評価に関する研究

本研究ではまず,日・米・独の各国を対象として,多車線道路の単路部における車線数決定方法,およびそれに関わる影響要因についての比較分析を通して,車線数決定に際して重要な位置を占めるサービスの質にかかわる考え方とその設定値について,わが国の水準は国際的にどの程度であるのかを明らかにした.次に,総費用,環境負荷の観点からの道路横断面構成の評価手法を用いて,総費用・環境負荷最小となる道路横断面構成とそのときのサービス水準について検討を行った.費用には,管理者費用として建設費用・維持管理費用を,利用者費用として時間費用・走行費用を計上し,これらを建設段階から供用後40年間の経年合計で積み上げて評価している.また,環境負荷としては,CO_2排出量にライフサイクルアセスメントの考え方を適用し,建設による排出と,維持管理および走行による排出を道路構造別に評価の対象としている.本手法を適用して算出した地形条件別の最適横断面と,既往の手法による決定横断面およびサービス水準について比較考察を行った.また,高速道路単路部の様々な交通量レベルにおける,ドライバー満足度や運転挙動の分析を通して,交通状況の具体的評価とドライバーの観点からの道路のサービス水準の設定を試みた.運転挙動データは,走行実験により収集し,これと同時にドライバーへのアンケート調査を行うことによりドライバーの交通状況への感覚を把握した.そして,これらの結果と車両感知器等から得られるマクロな交通特性データを,交通量レベルに応じて明示することが可能となった.さらに,これらの視点を生かしたサービス水準の設定を提案した.本研究ではまず,日・米・独の各国を対象として,多車線道路の単路部における車線数決定方法,およびそれに関わる影響要因についての比較分析を通して,車線数決定に際して重要な位置を占めるサービスの質にかかわる考え方とその設定値について,わが国の水準は国際的にどの程度であるのかを明らかにした.次に,総費用,環境負荷の観点からの道路横断面構成の評価手法を用いて,総費用・環境負荷最小となる道路横断面構成とそのときのサービス水準について検討を行った.費用には,管理者費用として建設費用・維持管理費用を,利用者費用として時間費用・走行費用を計上し,これらを建設段階から供用後40年間の経年合計で積み上げて評価している.また,環境負荷としては,CO_2排出量にライフサイクルアセスメントの考え方を適用し,建設による排出と,維持管理および走行による排出を道路構造別に評価の対象としている.本手法を適用して算出した地形条件別の最適横断面と,既往の手法による決定横断面およびサービス水準について比較考察を行った.また,高速道路単路部の様々な交通量レベルにおける,ドライバー満足度や運転挙動の分析を通して,交通状況の具体的評価とドライバーの観点からの道路のサービス水準の設定を試みた.運転挙動データは,走行実験により収集し,これと同時にドライバーへのアンケート調査を行うことによりドライバーの交通状況への感覚を把握した.そして,これらの結果と車両感知器等から得られるマクロな交通特性データを,交通量レベルに応じて明示することが可能となった.さらに,これらの視点を生かしたサービス水準の設定を提案した.1.都市間高速道路の車線数決定方法の国際比較分析都市間高速道路の単路部における既往の車線数決定方法,およびこれらに関する影響要因について,日・米・独の各国を対象として比較分析を行った。その結果,同じ計画交通量に対して実現する車線数が,これら各国の手法によりかなり異なり,特に米国では交通流に対して最も上質のサービスを提供していることが示された.これらの相違のとりわけ大きな要因は,我が国の手法による考え方に対応させると,(1)基本交通容量,(2)大型車混入率による補正係数,および(3)交通量-交通容量比の3つであり,特にサービス水準の設定が重要な要因であることが示された.2.総費用・環境負荷を考慮した道路横断面構成評価手法の開発総費用,環境負荷の観点から,これらが最小となるような道路横断面構成の評価手法の開発を行った.費用には,管理者費用として建設費用・維持管理費用を,利用者費用として時間費用・走行消費を計上し,これらを建設段階から供用後40年間の経年合計で積み上げている.また,環境負荷としては,CO_2およびNO_x排出量を考慮している.CO_2については,ライフサイクルアセスメントの考え方を適用し,建設による排出と,維持管理および走行による排出道路構造別に評価の対象としている.本手法を適用して算出した地形条件別の最適横断面と,既往の手法による決定横断面について比較考察を行った.1.総費用・環境負荷最小の道路横断面構成とサービス水準昨年度開発した総費用,環境負荷の観点からの道路横断面構成の評価手法を用いて,総費用・環境負荷最小となる道路横断面構成とそのときのサービス水準について検討を行った.費用には,管理者費用として建設費用・維持管理費用を,利用者費用として時間費用・走行費用を計上し,これらを建設段階から供用後40年間の経年合計で積み上げて評価している.また,環境負荷としては,CO_2排出量にライフサイクルアセスメントの考え方を適用し,建設による排出と,維持管理および走行による排出を道路構造別に評価の対象としている.本手法を適用して算出した地形条件別の最適横断面と,既往の手法による決定横断面およびサービス水準について比較考察を行った.2.都市間高速道路における交通状況とドライバー満足度との関連分析また,高速道路単路部の様々な交通量レベルにおける,ドライバー満足度や運転挙動の分析を通して,交通状況の具体的評価とドライバーの観点からの道路のサービス水準の設定を試みた.運転挙動データは,走行実験により収集し,これと同時にドライバーへのアンケート調査を行うことによりドライバーの交通状況への感覚を把握した.そして,これらの結果と車両感知器等から得られるマクロな交通特性データとの関連を分析した.

これより,ドライバーの立場からの交通状況評価や,ミクロな交通特性データを,交通量レベルに応じて明示することが可能となった.さらに,これらの観点を生かしたサービス水準の設定を提案した.
放射状自由液膜流れの乱流遷移を応用した新しい液体微粒化法の開発と微粒化機構の解明

円菅の先端と円盤とで構成した薄い隙間から水を放射状に流出させ,層流境界層形速度分布を液面まで発達させた液膜を円盤周端から大気中に放出させてできる放射線状自由液膜流れでは,高レイノルズ数において,液膜内部の変曲点型速度分布に起因して,層流から乱流への遷移が生じる.さらに液膜厚さを小さくし,レイノルズ数を増大させると,乱流遷移直後で液幕に多数の穿孔が生じ,液膜が微粒化することがわかった.遷移位置付近を,スチールカメラによる拡大写真撮影,およびマルチパルスレーザとストリークカメラを用いた高速度写真撮影により詳細に観察した結果,遷移や液幕の穿孔・微粒化は以下のような過程で生じることがわかった.(1)同心円状のしわ状波(D波)の出現とその三次元化によるすじ状波の凹凸の形成(2)凸部における微細粒状波(SL波)の集中的派生(乱流遷移)と粒状波の密集したすじ状は液塊部の形成.凹部の薄膜化による薄膜部の形成.(3)薄膜部における穿孔と孔の拡大.液塊部周辺の微小突起の分離による粒径数十ミクロンの液滴生成(4)液塊部の数珠状液糸への変形と液糸の再分裂による粒径数百ミクロンの液滴の生成(5)穿孔過程をLDV,熱線センサー,光センサーおよび写真撮影を同期させて同時に行うことにより,かなり明かにできた.円菅の先端と円盤とで構成した薄い隙間から水を放射状に流出させ,層流境界層形速度分布を液面まで発達させた液膜を円盤周端から大気中に放出させてできる放射線状自由液膜流れでは,高レイノルズ数において,液膜内部の変曲点型速度分布に起因して,層流から乱流への遷移が生じる.さらに液膜厚さを小さくし,レイノルズ数を増大させると,乱流遷移直後で液幕に多数の穿孔が生じ,液膜が微粒化することがわかった.遷移位置付近を,スチールカメラによる拡大写真撮影,およびマルチパルスレーザとストリークカメラを用いた高速度写真撮影により詳細に観察した結果,遷移や液幕の穿孔・微粒化は以下のような過程で生じることがわかった.(1)同心円状のしわ状波(D波)の出現とその三次元化によるすじ状波の凹凸の形成(2)凸部における微細粒状波(SL波)の集中的派生(乱流遷移)と粒状波の密集したすじ状は液塊部の形成.凹部の薄膜化による薄膜部の形成.(3)薄膜部における穿孔と孔の拡大.液塊部周辺の微小突起の分離による粒径数十ミクロンの液滴生成(4)液塊部の数珠状液糸への変形と液糸の再分裂による粒径数百ミクロンの液滴の生成(5)穿孔過程をLDV,熱線センサー,光センサーおよび写真撮影を同期させて同時に行うことにより,かなり明かにできた.円管の先端と円盤とで構成した薄い隙間から水を放射状に流出し,層流境界層形速度分布を液面まで発達させた液膜を円盤周端から大気中に放出してできる放射状自由液膜流れでは,液膜が薄く流出レイノルズ数が大きい場合,乱流遷移直後で液膜に多数の穿孔が生じ,液膜が微粒化することがわかった.実験に用いた円管の内径は25mm,円盤として直径50,60,70,80および100mmの6種類のものを用い,隙間の大きさは0.1mmから0.7mmまで0.05mm間隔で変化させて実験を行った.隙間から流出する前のよどみ点圧力は最高0.8Mpaであった.遷移位置付近を,スチールカメラによる拡大写真撮影,およびマルチパルスレーザとストリークカメラを用いた高速度写真撮影により詳細に観察した結果,遷移や液膜の穿孔・微粒化は以下のような過程で生じることがわかった.(1)同心円状のしわ状波(D波)の出現とその三次元化によるすじ状波の凹凸の形成(2)凸部における微細粒状波(SL波)の集中的派生(乱流遷移)と粒状波の密集したすじ状は液塊部の形成.凹部の薄膜化による薄膜部の形成.(3)薄膜部における穿孔と孔の拡大.液塊部周辺の微小突起の分離による粒径数十ミクロンの液滴生成(4)液塊部の数珠状液糸への変形と液糸の再分裂による粒径数百ミクロンの液滴の生成また,高流出レイノルズ数あるいは円盤回転により円盤上で遷移が生じる場合には穿孔が極端に抑制されることも明らかになった.さらに微小突起形分裂による微粒化が生じる条件を明らかにすることができた.円管の先端と円盤とで構成した薄い隙間から水を放射状に流出させ,層流境界層形速度分布を液面まで発達させた液膜を円盤周端から大気中に放出させてできる放射状自由液膜流れでは,高レイノルズ数において,液膜内部の変曲点型速度分布に起因して,層流から乱流への遷移が生じる.さらに液膜厚さを小さくし,レイノルズ数を増大させると,乱流遷移直後で液膜に多数の穿孔が生じ,液膜が微粒化することがわかった.遷移位置付近を,スチールカメラによる拡大写真撮影,およびマルチパルスレーザとストリークカメラを用いた高速度写真撮影により詳細に観察した結果,遷移や液膜の穿孔・微粒化は以下のような過程で生じることがわかった.(1)同心円状のしわ状波(D波)の出現とその三次元化によるすじ状波の凹凸の形成

(2)凸部における微細粒状波(SL波)の集中的派生(乱流遷移)と粒状波の密集したすじ状は液塊部の形成.凹部の薄膜化による薄膜部の形成.(3)薄膜部における穿孔と孔の拡大.液塊部周辺の微小突起の分離による粒径数十ミクロンの液滴生成(4)液塊部の数珠状液糸への変形と液糸の再分裂による粒径数百ミクロンの液滴の生成(5)穿孔過程をLDV,熱線センサー,光センサーおよび写真撮影を同期させて同時に行うことにより,かなり明らかにできた.
両大戦間期のシュルレアリスムにおける展覧会活動-作品の制作と展示の有機的連関

本年度は、これまで国内外で行った両大戦間期のシュルレアリスムの展覧会活動に関する研究・調査によって収集した史資料の総合的な分析・考察に従事した。昨年度は、とりわけマックス・エルンストを中心とするシュルレアリスムの画家の作品制作とその展示の相互関係を検討したが、本年度はそこで浮かび上がった発展的課題を中心に取り組んだ。本年度はまず、両大戦間期のシュルレアリスム国際展として最も重要な展覧会のひとつであるロンドン国際シュルレアリスム展に関する投稿論文(「ロンドン国際シュルレアリスム展(一九三六年)にみる相隔たるもの同士の並置をめぐる諸問題」)が『美學』誌に掲載された(第242号)。また、7月には同テーマを発展させ、ロンドンにおけるシュルレアリスム受容の問題をより包括的に考察した。その成果に基づき、「その道は、長いというより広いー1930年代後半のコーク・ストリートにみるイギリスにおけるシュルレアリスム受容の一側面」と題した口頭発表を行った(於、広島芸術学会第27回総会・大会、2013年7月)。さらに、7月から8月にかけて、イギリス、スイス、スペイン、イタリアで調査を行った。特にスコットランド国立近代美術館のアーカイヴでは、ローランド・ペンローズとE. L. T.メゼンスによるロンドン画廊、ペギー・グッゲンハイムとハーバート・リードによるグッゲンハイム・ジューヌ等の活動等について、数多くの一次資料を収集した。とりわけシェイラ・レッグについての資料は日本ではほとんど入手できないため、有意義な渡航調査となった。これらの資料の分析に基づく成果をまとめた論考を執筆し、現在投稿準備中である。なお、平成26年4月には、これまでの研究をまとめた単著『コラージュの彼岸』(ブリュッケ)も刊行された。(抄録なし)本年度はまず、アメリカ・ヒューストンのメニル・コレクションにおいて、同館所蔵のマックス・エルンスト関連作品および史資料の調査を行った。同館は、アメリカにおけるエルンストの活動を考察する上で極めて重要なコレクションを有しており、学芸員や文書保管員との情報交換は本研究の進展に有益なものとなった。年度後半にはフランス・パリに滞在し、ジョルジュ・ポンピドゥー国立芸術文化センター(カンディンスキー図書館)、フランス国立図書館(調査研究者用閲覧室)、パリ大学付属ジャック・ドゥーセ文学図書館、ドイツ美術史研究所にて調査研究と史資料の収集を行った。この海外渡航調査では、両大戦間期のシュルレアリスムの展覧会に関する一次資料を網羅的に収集した。とくに、閲覧の申請に時間を要する貴重文献(展覧会カタログや写真、書簡類)を多数閲覧できたことは、短期間の渡航調査では得ることのできない成果であった。また、パリ在住のシュルレアリスム研究者たちと意見交換を行い、本研究の更なる発展に繋がる重要な示唆を得た。とりわけドイツ美術史研究所のエルンスト研究者からは、エルンストの未刊行の書簡を多く含むデータベースを閲覧することを許可され、本研究に関わる新たな情報を入手することができた。こうした調査研究に並行し、本研究の成果を含む単行本の出版準備を行った。すでに出版社との打ち合わせも行っており、出版の実現に向けて研究内容の補強に尽力した。また、年度末には美学会西部会第287回研究発表会(3月、於京都市立芸術大学)にて『ロンドン国際シュルレアリスム展(1936年)にみる「相隔たるもの同士の並置」をめぐる諸問題』と題する口頭発表を行い、好評を得た。質疑応答では活発な議論が行われ、学会誌『美学』への論文投稿に向けて内容の精度を高めることができた。本年度は、昨年度にアメリカとフランスで行った両大戦間期のシュルレアリスムの展覧会活動に関する研究・調査に基づき、集めた史資料の分析・考察とそれに基づいた論文執筆に専念した。論考のテーマは、とりわけマックス・エルンストを中心とするシュルレアリスムの画家の作品制作とその展示の相互関係の考察であった。年度前半は、これまで収集した資料を分析し、シュルレアリスムの展覧会における作品展示の状況を具体的出品作や展覧会カタログ、記録写真等から整理した。その上で、エルンストのコラージュ理論とシュルレアリスムのデペイズマンの概念を精察し、エルンストらによる作品の「シュルレアリスム的展示」の在り方との関わりを検討した。こうした研究によって、シュルレアリスムにおけるコラージュの意義が明確となり、またシュルレアリスムにおける展示空間におけるコラージュ的手法を綿密に跡付けることができた。年度後半は、以上のような研究成果の発表のため、論文執筆に力を注いだ。とりわけ本年度は、『コラージュの彼岸』と題する単行本のための原稿を完成させ、来年度の出版に向けて現在その細かい修正作業を行っている。また、昨年度に美学会西部会第287回研究発表会(2012年3月、於京都市立芸術大学)で行った口頭発表に基づく投稿論文(「ロンドン国際シュルレアリスム展(一九三六年)にみる相隔たるもの同士の並置をめぐる諸問題」)が学会誌『美学』に採択され、第242号に掲載予定である。それらに平行し、本年度の研究テーマを発展させたシュルレアリスムの展覧会と「スペクタクル」の関係について考察を進め、その成果の一部を発表するための論文を執筆した。

本年度はまず、両大戦間期のシュルレアリスム国際展として最も重要な展覧会のひとつであるロンドン国際シュルレアリスム展に関する投稿論文(「ロンドン国際シュルレアリスム展(一九三六年)にみる相隔たるもの同士の並置をめぐる諸問題」)が『美學』誌に掲載された(第242号)。また、7月には同テーマを発展させ、ロンドンにおけるシュルレアリスム受容の問題をより包括的に考察した。その成果に基づき、「その道は、長いというより広いー1930年代後半のコーク・ストリートにみるイギリスにおけるシュルレアリスム受容の一側面」と題した口頭発表を行った(於、広島芸術学会第27回総会・大会、2013年7月)。さらに、7月から8月にかけて、イギリス、スイス、スペイン、イタリアで調査を行った。特にスコットランド国立近代美術館のアーカイヴでは、ローランド・ペンローズとE. L. T.メゼンスによるロンドン画廊、ペギー・グッゲンハイムとハーバート・リードによるグッゲンハイム・ジューヌ等の活動等について、数多くの一次資料を収集した。とりわけシェイラ・レッグについての資料は日本ではほとんど入手できないため、有意義な渡航調査となった。これらの資料の分析に基づく成果をまとめた論考を執筆し、現在投稿準備中である。なお、平成26年4月には、これまでの研究をまとめた単著『コラージュの彼岸』(ブリュッケ)も刊行された。交付申請書では、本年度の目的として、両大戦間期のシュルレアリスム(とりわけマックス・エルンスト)の展覧会活動に関する史資料を網羅的に収集・整理することを挙げていた。この目的は、本年度のアメリカおよびフランス渡航調査によって、十分に達成された。また、年度後半の目標としていた資料の分析および研究成果の発表(一部)についても、美学会西部会第287回研究発表会(3月、於京都市立芸術大学)において達成された。本年度は、当初の計画が少々変更され、海外渡航調査よりも昨年度に収集した史資料の分析・考察や論文執筆を優先したが、それは昨年度の海外渡航調査によって予想以上の成果があったためである。論文執筆は順調に進み、来年度にはそれらの成果が公表される。今後は、作品制作と展示との相互関係を考察し、シュルレアリスムにおける展覧会の意義を明らかにするために、これまで収集した史資料を綿密に分析することが課題となる。そうした考察に並行し、今後も必要に応じて渡航調査を行い、本研究の議論に特に必要な史資料を重点的に補完・収集することが重要である。また、今後は学会誌や単行本による研究成果の発表・公開にも尽力する予定である。最終年度となる次年度は、これまでの研究をさらに発展させ、両大戦間(とりわけ1920・30年代)のシュルレアリスムにおける展覧会の意義とシュルレアリスム展の受容の問題を広く考察する。これまでの研究の中で、ロンドンやパリで開催されたシュルレアリスム国際展については調査も進んでいるため、それ以外の地域(デンマークや日本等)の国際展の史資料の収集にも取り組む予定である。これらの研究によって、シュルレアリスムの展覧会に関する巨視的展望を得ることが期待できる。(抄録なし)
永久凍土地帯における森林火災後の地盤変動：時空間変化の検出とモデリング

温暖化に伴う北極圏の永久凍土の融解は北極圏だけの問題ではなく,グローバルな影響が懸念されている.本研究ではシベリア平原の森林火災跡地に注目し,火災後の地盤変動(沈降や隆起)の時空間変化を合成開口レーダー(SAR)画像の干渉処理によって詳細に検出する.この地盤変動は地下表層部の温度分布,含水率,凍結度等で決まる活動層の厚さや永久凍土の体積そのものを反映している.SARで得られる地盤変動データを熱・水文学的な数値モデルに基づいて物理的に解釈することによって,凍土融解の物理的実態に迫る.温暖化に伴う北極圏の永久凍土の融解は北極圏だけの問題ではなく,グローバルな影響が懸念されている.本研究ではシベリア平原の森林火災跡地に注目し,火災後の地盤変動(沈降や隆起)の時空間変化を合成開口レーダー(SAR)画像の干渉処理によって詳細に検出する.この地盤変動は地下表層部の温度分布,含水率,凍結度等で決まる活動層の厚さや永久凍土の体積そのものを反映している.SARで得られる地盤変動データを熱・水文学的な数値モデルに基づいて物理的に解釈することによって,凍土融解の物理的実態に迫る.
線虫由来の糖鎖分解酵素の生理機能の解明と糖鎖の代謝機構の解析に関する研究

Endo-β-N-acetylglucosaminidase (ENGase)が遊離糖鎖の分解に関与することを明らかにするために、線虫Caenorhabditis elegansのENGase (eng-1)欠損株の遊離糖鎖の構造および量について比較を行った。その結果、野生株のものでは還元末端にGlcNAc1残基を持つ構造(GN1)が約75%であったが、eng-1欠損株ではGlcNAc2残基のGN2が90%以上を占めた。これはGN2からGN1への変換にeng-1が関与することを示す結果であった。また、eng-1欠損株では遊離糖鎖全体量が約1.9倍増加しており、GN1に比べ、GN2ではその後のリソソームへの輸送の効率が低下したためと考えられた。さらに、ラットおよび酵母のサイトゾルα-mannosidaseと相同性のあった遺伝子F58H1.1についても欠損株を取得し、遊離糖鎖の解析を行った。すると、M5M8の遊離糖鎖の他に新たにGNM5が見出された。GNM5はゴルジα-mannosidase IIの基質となる構造であることから、F58H1.1はサイトゾルではなくゴルジα-mannosidaseである可能性が示唆された。そこで、F58H1.1欠損株の糖タンパク質糖鎖の構造を分析したところ、paucimannose typeおよびcomplex typeの糖鎖構造が消失していた。この劇的な糖鎖構造の変化は構造の分岐点となるゴルジα-mannosidase IIを欠くことによるものである。よって本遺伝子F58H1.1はゴルジα-mannosidase IIであることが証明できた。M5Aの構造がシスゴルジで形成されるものと同じであること、ゴルジα-mannosidase II欠損によって生じる糖鎖が遊離糖鎖として生成されていることより、ゴルジ体由来の新しい遊離糖鎖生成経路の可能性が示された。多細胞動物ではサイトゾルのα-Mannosidaseが遊離糖鎖の代謝に関与しているとされている。そこでC.elegansのCytosolic α-Mannosidaseを同定するために、線虫由来のα-Mannosidase遺伝子のykクローンである、yk37b5、yk128b8、yk130c5(それぞれα-Mannosidase遺伝子、F58H1.1、F48C1.1、F55D10.1に対応)を入手し、それぞれについて大腸菌における発現を試みた。しかし、いずれの発現産物も細胞内で速やかに分解してしまい、活性を調べることは不可能であった。大腸菌において発現がうまくいかなかった理由として、真核生物の遺伝子であること、発現タンパク質がいずれも約100kDaと大きかったこと、またyk37b5、yk128b8に関しては完全長でなかったことなどが考えられた。そこで現在、完全長の遺伝子を酵母で発現させることを試みている。まずそのために、遺伝子F58H1.1、F48C1.1に関して5'RACE法を用いて欠失していたcDNAの5'末端を取得した。その結果、F58H1.1、F48C1.1のmRNAは、Spliced Leader 1を有しtrans-splicingを受けることを見出した。また、F48C1.1に関してはゲノムより予想されたmRNAよりも約220bp、アミノ酸にして約70残基長いことが明らかになった。新たに見出された部分のアミノ酸配列も他の生物種のα-Mannosidaseと相同性が見られた。線虫C.elegansの糖鎖分解酵素(Endo-β-N-acetylglucosaminidase(Endo-CE,ENG-1)、α-Mannosidase(F58H1.1))の生理機能を調べるためには、基質と考えられる細胞内遊離糖鎖の構造を知ることは不可欠である。そこで、C.elegans N2株(野生型)を大量培養し、遊離糖鎖を抽出、精製、蛍光標識したのちにHPLC、MS分析によりその糖鎖構造を分析した。その結果、還元末端に1残基のN-acetylglucosamine(GlcNAc)を有し、非還元末端側に59残基のMannoseを有する糖鎖(M5'M9')を多く有することが明らかとなった。さらにエキソマンノシダーゼ消化による解析によって、M5'はすべてM5A'であることを見出した。これは哺乳類の遊離糖鎖に見られるM5C'とは異なり、むしろ植物から見出されている構造と類似であることが明らかとなった。また、各遺伝子(eng-1,F58H1.1)の欠損株作製のために、C.elegans deletion mutantライブラリーをTMP/UV法で作製し、284,000ゲノム分の変異株ライブラリーを構築することに成功した。そのライブラリーよりPCRを用いてF58H1.1の変異を持つ株の取得に成功した。また、eng-1の5'RACEを行ったところ、成熟mRNAの5'末端には開始コドンのすぐ上流にSplicing Leader 2(SL2)と呼ばれる22ntの配列が付加されていることを見出した。SL2はオペロンの一番下流の遺伝子特異的に付加されるものであることが知られている。よって本遺伝子も上流の遺伝子(F01F1.11、F01F1.15)とオペロンを構成している可能性が示唆された。

Endo-β-N-acetylglucosaminidase (ENGase)が遊離糖鎖の分解に関与することを明らかにするために、線虫Caenorhabditis elegansのENGase (eng-1)欠損株の遊離糖鎖の構造および量について比較を行った。その結果、野生株のものでは還元末端にGlcNAc1残基を持つ構造(GN1)が約75%であったが、eng-1欠損株ではGlcNAc2残基のGN2が90%以上を占めた。これはGN2からGN1への変換にeng-1が関与することを示す結果であった。また、eng-1欠損株では遊離糖鎖全体量が約1.9倍増加しており、GN1に比べ、GN2ではその後のリソソームへの輸送の効率が低下したためと考えられた。さらに、ラットおよび酵母のサイトゾルα-mannosidaseと相同性のあった遺伝子F58H1.1についても欠損株を取得し、遊離糖鎖の解析を行った。すると、M5M8の遊離糖鎖の他に新たにGNM5が見出された。GNM5はゴルジα-mannosidase IIの基質となる構造であることから、F58H1.1はサイトゾルではなくゴルジα-mannosidaseである可能性が示唆された。そこで、F58H1.1欠損株の糖タンパク質糖鎖の構造を分析したところ、paucimannose typeおよびcomplex typeの糖鎖構造が消失していた。この劇的な糖鎖構造の変化は構造の分岐点となるゴルジα-mannosidase IIを欠くことによるものである。よって本遺伝子F58H1.1はゴルジα-mannosidase IIであることが証明できた。M5Aの構造がシスゴルジで形成されるものと同じであること、ゴルジα-mannosidase II欠損によって生じる糖鎖が遊離糖鎖として生成されていることより、ゴルジ体由来の新しい遊離糖鎖生成経路の可能性が示された。
アクティブラーニングにおける学生の授業中の行動と学習プロセスに関する研究

本研究の目的は、学生の授業理解のプロセスの特徴を明らかにすることで、理解や状況に応じた学習への適切な介入方法を提案すること、及び教授支援方法を検討することである。これを実現するために本研究では、大学教育におけるアクティブラーニング型の授業を対象として、学生が「何を書いているか(ライティング)」「どのような思考をしているか」について、授業中の学生の行動と理解のプロセスの検討を行っている。研究手法としては、学生がワークシート等に記入している内容をリアルタイムで把握するデジタルペンを用いて、学生の授業中のライティングのプロセスや内容の分析を行っている。また、授業中の学生の思考のプロセスを検討するために、疑問を随時、ワークシートに書くことを促す手法を開発し、その評価を行った。2018年度春学期、秋学期に実施した授業実践研究、及び、その前提となる実験的研究を通して、以下のことを明らかにした。第一に、ライティングに関して、約2割の学生が、本来、ワークシートに記入すべき時間ではない時間(グループ学習や講義中)に、何らかの記入を行っており、これがグループ活動や授業理解の妨げになっている可能性が示された。また、事後のインタビューの結果、このような活動は、ワークシートの記入内容が自身の成績評価と直結しているという誤認識から生じている可能性が示された。学生の評価懸念や、評価指標の理解を、どのように変えていくかが、今後重要になってくると考えられる。第二に、疑問を随時書かせる試みは、授業内容の理解度が高い場合には有効だが、低い場合には逆に理解の妨げになっていることを明らかにした。一方、ノートテイキングを得意としていない学生にとっては、疑問を随時書かせるという介入方法が授業へのコミットメントを高め、授業の振り返りを通した理解深化にも肯定的な影響を与えている可能性を示唆できた。本研究は、実際の大学教育現場を対象とした授業実践研究であり、研究代表者が所属大学で開講している授業(学部・大学院)を研究対象としている。いずれもアクティブラーニング型の授業であり、前期・後期各2科目の実践を研究対象としている。2018年度は、予定通り授業実践の中で、ライティングプロセスやグループ学習プロセスについて必要なデータを得ることができた。研究実績の概要で示したように、具体的な研究手法としては、学生がワークシート等に記入している内容をリアルタイムで把握するデジタルペンを用いて、学生の授業中のライティングのプロセスや内容の分析を行っている。また、授業中の学生の思考のプロセスを検討するために、疑問を随時、ワークシートに書くことを促す手法を開発し、その評価を予定通り行った。当初予定していた画像解析は、利用予定だった(株)オムロンの画像センシング技術ヒューマンビジョンコンポ(HVC)の一部製品の販売終了などの影響を受け、代替手段の構築に時間を要した。しかし、2019年1月以降、遅れを取り戻すことができた。現状得られたデータ分析でも、ライティングに関して、約2割の学生が、本来、ワークシートに記入すべき時間ではない時間(グループ学習や講義中)に、何らかの記入を行っていること、また、これを量的に推定することが可能であることを明らかにするなど成果を上げている。本研究に関連する成果(網岡など2018)では、ワークシートの記載内容と、学習成果との関係を定量的に検討し、ワークシートの記述量の変動が重要な指標になることを明らかにしてきた。これに本提案のライティングのプロセスの検討を加えることで、どこで学習者がつまづき、どのようなフィードバックを返すことが適切かを明らかにすることが、本研究の最終的な目標である。これまでの研究では、本来ライティングすべきではない時間に書く行為が学習の阻害になっていると考えられるため、この改善策を検討する。また、事後のインタビューの結果、このような活動は、ワークシートの記入内容が自身の成績評価と直結しているという誤認識から生じている可能性が示されているため、学生の評価懸念や、評価指標の理解の変容にも着目した研究を行っていきたい。また、疑問を随時書かせる手法は、授業内容の理解度が高い場合には有効だが、低い場合には逆に理解の妨げになっており、低い場合の介入方法を検討している。本研究は、これまで申請者が実績のあるライティングプロセスの計測に加え、新たな教授法(発話思考法のライティングへの応用)や表情計測を組み合わせる内容であり、研究の独自性の高さと、実現可能性を両立しているが、画像解析など技術の変化が大きい領域でもあるため、最新の技術動向にも目を向けていく必要がある。共同研究者の江木、森らとは、定期的に研究の進捗報告を行っており、これを継続する。

第一に、ライティングに関して、約2割の学生が、本来、ワークシートに記入すべき時間ではない時間(グループ学習や講義中)に、何らかの記入を行っており、これがグループ活動や授業理解の妨げになっている可能性が示された。また、事後のインタビューの結果、このような活動は、ワークシートの記入内容が自身の成績評価と直結しているという誤認識から生じている可能性が示された。学生の評価懸念や、評価指標の理解を、どのように変えていくかが、今後重要になってくると考えられる。第二に、疑問を随時書かせる試みは、授業内容の理解度が高い場合には有効だが、低い場合には逆に理解の妨げになっていることを明らかにした。一方、ノートテイキングを得意としていない学生にとっては、疑問を随時書かせるという介入方法が授業へのコミットメントを高め、授業の振り返りを通した理解深化にも肯定的な影響を与えている可能性を示唆できた。本研究は、実際の大学教育現場を対象とした授業実践研究であり、研究代表者が所属大学で開講している授業(学部・大学院)を研究対象としている。いずれもアクティブラーニング型の授業であり、前期・後期各2科目の実践を研究対象としている。2018年度は、予定通り授業実践の中で、ライティングプロセスやグループ学習プロセスについて必要なデータを得ることができた。研究実績の概要で示したように、具体的な研究手法としては、学生がワークシート等に記入している内容をリアルタイムで把握するデジタルペンを用いて、学生の授業中のライティングのプロセスや内容の分析を行っている。また、授業中の学生の思考のプロセスを検討するために、疑問を随時、ワークシートに書くことを促す手法を開発し、その評価を予定通り行った。当初予定していた画像解析は、利用予定だった(株)オムロンの画像センシング技術ヒューマンビジョンコンポ(HVC)の一部製品の販売終了などの影響を受け、代替手段の構築に時間を要した。しかし、2019年1月以降、遅れを取り戻すことができた。現状得られたデータ分析でも、ライティングに関して、約2割の学生が、本来、ワークシートに記入すべき時間ではない時間(グループ学習や講義中)に、何らかの記入を行っていること、また、これを量的に推定することが可能であることを明らかにするなど成果を上げている。本研究に関連する成果(網岡など2018)では、ワークシートの記載内容と、学習成果との関係を定量的に検討し、ワークシートの記述量の変動が重要な指標になることを明らかにしてきた。これに本提案のライティングのプロセスの検討を加えることで、どこで学習者がつまづき、どのようなフィードバックを返すことが適切かを明らかにすることが、本研究の最終的な目標である。これまでの研究では、本来ライティングすべきではない時間に書く行為が学習の阻害になっていると考えられるため、この改善策を検討する。また、事後のインタビューの結果、このような活動は、ワークシートの記入内容が自身の成績評価と直結しているという誤認識から生じている可能性が示されているため、学生の評価懸念や、評価指標の理解の変容にも着目した研究を行っていきたい。
哺乳動物細胞のDNA修復時にdNTPs供給を担保するRNR制御機構の解析

ヒトをはじめとする哺乳動物の細胞は日常的に紫外線等によるDNA損傷を受けている。DNA損傷が修復されないと癌などの発生を促すことになる為、効率的な修復は必須である。筆者はDNA修復の際に原料となる核酸(dNTPs)を合成する経路のribonucleotide reductase (RNR)がヒストンアセチルトランスフェラーゼTip60によりDNA損傷箇所に集積されることを明らかにした。この機構は効率的なDNA修復に必要であることを証明した。1、Yeast Two-hybrid系を利用しYeast内におけるR1とTip60の結合部位を同定した。Tip60との結合に必要な部位はR1のC末端側に有り、この必須の部位を欠損させてもR2との結合には影響がないことが明らかとなった。このR1変異体を用いてin vivoにおけるR1とTip60の結合の重要性について検討を行った。2、内在性のR1とTip60についてその相互作用を証明した。Tip60は主としてクロマチンに局在したので細胞のクロマチン画分をマングビーンヌクレアーゼで消化してTip60を遊離しR1との結合をIPウェスタンブロットにより証明した。3、ChIP法に用いるための細胞の樹立。本実験の目的に合う細胞を樹立するために親細胞株に非相同的末端結合(NHEJ)に必須のKu70-/-マウス繊維芽細胞を用いた。この細胞株にGFP遺伝子内に極めてユニークなDNA切断認識部位をもつI-Sce I認識配列を一カ所含むphprt-DR-GFP DNA断片を染色体上に組み込んだ。この細胞を用いてR1がTip60依存的にDNA損傷部位にリクルートされることを示した。4、Tip60によるR1のDNA損傷部位へのリクルートがDNA修復に必要であるかについて検討した。まずRNR(R1とR2の複合体)の特異的阻害薬であるハイドロキシウレアを投与するとX線によるDNA損傷は修復されないことを確かめた。次にR1をsiRNAを用いてノックダウンしても修復がされないことを確認した。真核生物にとり外的、内的要因によりDNAに受けた損傷を修復することは生存に必須である。DNAを修復する際にはその原料となるデオキシリボヌクレオチド(dNTPs)を過不足なく供給されることが必要となる。下等真核生物である出芽酵母とは異なり哺乳動物細胞ではDNAに損傷を受けた後も細胞内に顕著なdNTPsの増加は認められないため、修復箇所近傍の局所において効率的にdNTPsが産生されていることが考えられる。この点を明らかにするためdNTPs合成の律速酵素であるリボヌクレオチドレダクターゼ(RNR)の局在を支配する分子の探索をyeast two hybrid法により行い、ヒストンアセチルトランスフェラーゼの一つTip60を同定した。RNRはその触媒サブユニットR1がTip60と直接作用しTip60依存的にDNA損傷箇所にリクルートされることを、クロマチン免疫沈降法及び免疫染色法を用いて明らかにした。この複合体形成をR1変異体を用いて阻害するとRNRとしての酵素活性は変わらないのにDNA修復に異常をきたすことがわかった。この傾向はdNTPsプールの少ない細胞周期のG1期に顕著であり、生体を構成する静止細胞においてTip60依存的RNRの損傷箇所への集積が重要であることが示唆される。哺乳動物に発達したこの機構は細胞全体のdNTPs量を厳密に保ちつつ効率的にDNA損傷を修復することを可能にし染色体への変異の誘発を防いでいるものと考えられる。
鳥類における摂食器官形態の多様化―ヘテロトピーおよびヘテロクロニーの解析―

オウム目は堅果食適応することで南半球を中心に繁栄を遂げた鳥類系統である。オウム類特有の顎筋群の創出機構を探るため、オカメインコ(オウム目)とニワトリ・ウズラ(キジ目)の一連のステージの胚標本間で筋マーカー遺伝子(MyoD)、骨格マーカー遺伝子(Sox9,Runx2)、筋結合組織マーカー遺伝子(Scx、Six2)、筋骨格系の形成に関わるとされるシグナル経路の構成遺伝子(Tgfβ2,Bmp4,Fgf8)の発現パターンの比較を行った。オウム類に特有な顎筋の一つに下顎内側と眼窩間中隔を結ぶ節骨下顎筋があるが、オカメインコではこの筋が母体である翼状筋群より分化するステージ30以前の胚で、神経堤細胞由来の間葉で発現するTgfβ2とBmp4の異所的な発現が観察された。これらのシグナル分子の発現パターン変化が下流に位置するScxなどの発現パターンにも影響を与え、新奇な顎筋を誘導したと推察された。オウム類に特有なもう一つの顎筋が下顎外側から頬骨の外側を通過し眼窩の下縁部に達する擬咬筋であるが、この筋の上端部には結合組織の凝集がみられ、それは擬咬筋の分化に先立って頬骨の外側背側領域に現れる。オカメインコ胚ではまだ擬咬筋が形成されていないステージの頬骨外側背側領域にSix2を発現する特異な細胞群が認められた。これらの細胞群はキジ目に属するニワトリ・ウズラ胚の相当領域では確認することができなかった。Six2は神経堤細胞に由来し、のちに靱帯や腱などの結合組織に分化する細胞群で発現することが先行研究でも知られている。以上の結果から、オウム類特有の顎筋は神経堤細胞の発生プログラムを大規模に改変することで創出されたことが示唆された。オウム類において堅果食適応を促進したと考えられる特異な顎筋群の創出機構を探るため、オカメインコ胚から新たに複数の骨格筋関連遺伝子(MyoD,Myongenin,Myostatin)と筋結合組織関連遺伝子(Six2,Tenomodulin,Tenascin-C),さらには代表的なシグナル経路を構成する複数の遺伝子を単離し、in situハイブリダイゼーション法によりウズラ胚における相同遺伝子の発現パターンと比較を行った。その結果、オカメインコ胚の頭部において、一部の遺伝子の特異な発現パターンが観察された。今後はこれらの遺伝子の新奇な筋形成において果たす役割を調べるために、ニワトリ胚での強制発現系を用いた解析を進めていく予定である。また、オカメインコとウズラの胚(ステージ28、30、32、34、36、38)の連続組織切片に対してアセチル化チューブリン抗体の免疫染色を行うことにより神経細胞を特異的に標識したのち、切片の三次元立体構築を行い、2種の鳥類の各発生ステージにおいて顎筋、その支配神経、周辺の硬組織がどのようなパターンで形成されてくるのかを詳細に比較した。すでに母体となる筋集合からの分離が進んでいる筋の内部には運動神経の軸索が分布していたが、分離開始直後の筋内部には分布していなかった。この比較形態学的解析により、複数の組織系からなる複合体である脊椎動物の摂食器官がどのような機序で形づくられ、多様化していくのかについての知見を得ることができた。
肝細胞癌増殖および発生抑制に対するインターフェロン利用の検討

1 C型慢性肝炎に対してインターフェロン治療が行われ、長期に経過観察できた症例が存在するようになった。C型肝硬変の自然経過で肝細胞癌の発生率は、50%以上におよぶことが知られている。当教室でインターフェロン治療を施行した症例の治療後の肝細胞癌の発生率と無治療群における肝癌発生率を比較したが前者において有意に低いことを報告した。2インターフェロンが肝細胞癌由来細胞株(HLF)の増殖抑制効果を持ちαおよびβがγインターフェロンにくらべ、強く抑制することを認めた。その効果はcytostaticであり、cytolyticな効果では無かった。3インターフェロンを培養液中に添加することでOrnithine decarboxylase(ODC)活性は低下しc-myc蛋白の産成量は低下した。ODCの抑制はmRNA量の低下に由来することがNorthern blloting法にて証明した。4 c-myc antisenseを培養液中に加えることでc-myc蛋白の産生量は低下し、同時に細胞増殖を抑制することを証明し、c-mycが肝癌細胞中で増殖調節に強く関わっていることが認められた。5インターフェロンγはαに比べc-myc、c-Ha-ras産生蛋白の産生を強く抑制した。この効果と増殖抑制はαがγに比べ強い効果を示したことから、増殖抑制と、癌遺伝子蛋白の発現に対するインターフェロンの作用機序は一部異なることも考えられた。
中部太平洋における海面変動とテクトニクス

本研究の目的は,中部太平洋の海洋島の地形・地質及び古生物学的調査により,完新世の海面変動の地域的な特徴を明らかにし,地球物理学的な解析と比較しながら,マントルの粘性分布を決定することである.本年度は昨年度に現地調査を行なったマリアナ,東カロリン,マーシャル,ハワイ,フィジー,および西サモア諸島の島々において採取に試料の分析と放射性炭素年代測定にもとづき,いくつかの島における完新世の海面変動を復元した.その結果,中部太平洋の多くの島で,約4000ー3000年前の海面が現在より1ー2m高かったことを示す事実が発見された.すなわち,マリアナ諸島のロタ島・グァム島には完新世の離水サンゴ礁が分布し,5000ー3000年前当時の海面が現海面より高かったこと,約3000年前の離水礁の形成後にはその海側に現成礁が形成されつつあること;ハワイ諸島カウアイ島では完新世の海成層の頂面が海抜約1.3m付近により,約4000年前には現在より海面が高かったこと;フィジー諸島ビチレブ島南部の沖積低地における海成層の分布高度とその年代から,約4000ー2600年前には現在より約1m高い海面が存在したこと;フィジー諸島バヌアレブ島の離水ノッチの高さと離水サンゴの年代から約4000年前に現在より高い海面が存在したことなどである.地球物理学的なモデル計算によれば,完新世の相対的高海面が中部太平洋海域に存在し,その高海面は小さい島では約4000年前に,大きな島では約6000年前に生ずることが予測されている.中部太平洋の各地の島々での観測結果はこの予測と定性的には一致していることが明らかとなった.しかし定量的には理論値と観測値の間に若干のずれもあり,完新世の相対的高海面を生ずるのにテクトニクスがどの様な役割をはたしているかを吟味することが必要である.本研究の目的は,中部太平洋の海洋島の地形・地質及び古生物学的調査により,完新世の海面変動の地域的な特徴を明らかにし,地球物理学的な解析と比較しながら,マントルの粘性分布を決定することである.本年度は昨年度に現地調査を行なったマリアナ,東カロリン,マーシャル,ハワイ,フィジー,および西サモア諸島の島々において採取に試料の分析と放射性炭素年代測定にもとづき,いくつかの島における完新世の海面変動を復元した.その結果,中部太平洋の多くの島で,約4000ー3000年前の海面が現在より1ー2m高かったことを示す事実が発見された.すなわち,マリアナ諸島のロタ島・グァム島には完新世の離水サンゴ礁が分布し,5000ー3000年前当時の海面が現海面より高かったこと,約3000年前の離水礁の形成後にはその海側に現成礁が形成されつつあること;ハワイ諸島カウアイ島では完新世の海成層の頂面が海抜約1.3m付近により,約4000年前には現在より海面が高かったこと;フィジー諸島ビチレブ島南部の沖積低地における海成層の分布高度とその年代から,約4000ー2600年前には現在より約1m高い海面が存在したこと;フィジー諸島バヌアレブ島の離水ノッチの高さと離水サンゴの年代から約4000年前に現在より高い海面が存在したことなどである.地球物理学的なモデル計算によれば,完新世の相対的高海面が中部太平洋海域に存在し,その高海面は小さい島では約4000年前に,大きな島では約6000年前に生ずることが予測されている.中部太平洋の各地の島々での観測結果はこの予測と定性的には一致していることが明らかとなった.しかし定量的には理論値と観測値の間に若干のずれもあり,完新世の相対的高海面を生ずるのにテクトニクスがどの様な役割をはたしているかを吟味することが必要である.
細胞膜内の情報変換分子集合領域の解析

脳組織を材料に細胞膜中の情報変換分子集合領域(ラフト)の解析を行い以下の知見を得た.1.主要成分についてはアミノ酸配列決定によるタンパク質同定,並びに特異抗体を用いた免疫ブロット法によりその同定を行ない,チューブリン,アクチン,NAP-22,GAP-43,Gタンパク質の存在を示した.2.グリコシルフォスファチジルイノシトールアンカー(GPI)-アンカー型タンパク質については,F3/コンタクチン,T-カドヘリン,OBCAM,ニューロトリミンといった諸タンパクが濃縮されていることをみいだしたが,加えて新規のタンパク質の存在を見い出し,これをクローニングし,キロン(kilon)と命名した.3.またラフト画分を抗原に種々のモノクローン抗体の作製を行い,ラフトに局在するタンパク質の発見を試みた結果,1つの局在タンパク質を発見しこれをパラレミンと同定した.4.ラフトの脂質分析を行い,フォスファチジルコリンとコレステロールが濃縮されていることを見い出した.更にコレステロールの特異的抽出により,神経特異タンパク質NAP-22が特異的に可溶化することを見い出した.さらにNAP-22とコレステロール含有リポソームとの結合がカルモジュリンによって阻害されることを見い出した.脳組織を材料に細胞膜中の情報変換分子集合領域(ラフト)の解析を行い以下の知見を得た.1.主要成分についてはアミノ酸配列決定によるタンパク質同定,並びに特異抗体を用いた免疫ブロット法によりその同定を行ない,チューブリン,アクチン,NAP-22,GAP-43,Gタンパク質の存在を示した.2.グリコシルフォスファチジルイノシトールアンカー(GPI)-アンカー型タンパク質については,F3/コンタクチン,T-カドヘリン,OBCAM,ニューロトリミンといった諸タンパクが濃縮されていることをみいだしたが,加えて新規のタンパク質の存在を見い出し,これをクローニングし,キロン(kilon)と命名した.3.またラフト画分を抗原に種々のモノクローン抗体の作製を行い,ラフトに局在するタンパク質の発見を試みた結果,1つの局在タンパク質を発見しこれをパラレミンと同定した.4.ラフトの脂質分析を行い,フォスファチジルコリンとコレステロールが濃縮されていることを見い出した.更にコレステロールの特異的抽出により,神経特異タンパク質NAP-22が特異的に可溶化することを見い出した.さらにNAP-22とコレステロール含有リポソームとの結合がカルモジュリンによって阻害されることを見い出した.哺乳類脳組織より非イオン性界面活性剤不溶性低比重画分を調製しこの画分を存在する蛋白質について解析を行った.蛋白質の部分アミノ酸配列よりGAP-43,NAP-22以外の主要蛋白質として三量体G蛋白質Goのαサブユニット,G蛋白質のβサブユニットを同定した.2次元電気泳動及び免疫ブロット法によりチューブリン,アクチンといった細胞骨格蛋白質,グリコシルフォスファチジルイノシトール(GPI)アンカー蛋白質であるN-CAM-120,Thy-1といった細胞接着因子,さらに蛋白質チロシンキナーゼであるsrc,yes,fynといったサークファミリーキナーゼ群の局在を見い出した.細胞骨格蛋白質に関してはアクチン細胞骨格調節因子であるゲルゾリンが存在し確かに活性を持つことを生化学的解析により示した.GPI-アンカー蛋白質についてはフォスファチジルイノシトール特異的フォスフォリパーゼCによる膜画分よりの可溶化を試み,N-CAM,Thy-1の他に数種の蛋白質が可溶化することを発見した.その内の1つはアミノ酸配列よりOBCAM(opiate binding cell adhesion molecule)と同定したが他の1つは新規の蛋白質であることを見い出した.抗リン酸化チロシン抗体を用いてこの領域に特異的に存在するチロシンリン酸化蛋白質が存在し発生に伴ってそのパターンが変化することを見い出した.またこの画分を抗原に多数のモノクローン抗体を得,これらの抗原の多くがシナプス領域に局在していることを見い出しこれら抗原について現在解析を続けている.哺乳類脳組織より非イオン性界面活性剤不溶性低比重画分(TIF)を調製しこの画分に存在する蛋白質について解析を行った.主要なタンパク因子については免疫ブロット法,2次元電気泳動,および部分アミノ酸シークエンスにより同定を行い,チューブリン,アクチン,NAP-22,GAP-43,ヘテロ三量体Gタンパク質,数種のチロシンキナーゼ類の存在を示した.GPI-アンカー蛋白質についてはフォスファチジルイノシトール特異的フォスフォリパーゼCによる膜画分よりの可溶化を試み,N-CAM,Thy-1の他に数種の蛋白質が可溶化することを発見した.アミノ酸配列よりこれらをF3/contactin,T-cadherin,更にOBCAM(opiate binding cell adhesion molecule)あるいはLAMP(OBCAMとLAMPは最近同定された細胞接着因子)と同定したが他の1つは新規の蛋白質であることを見い出した.これについてはcDNAクローニングをほぼ終えようとしている.またこのTIFを抗原に多数のモノクローン抗体を得,これらの抗原の内,この画分に局在する分子の1つはcDNAクローニングに進んでいる.この抗原は免疫組織化学的解析によってシナプス部に局在することが確かめられた.またブタノール抽出によりTIFより特定のタンパク因子群が可溶化されることを発見した.これはこの領域における脂質とタンパク質との相互作用の解析への手がかりをあたえるものである.

脳組織を材料に細胞膜中の情報変換分子集合領域(ラフト)の解析を行い以下の知見を得た.1.主要成分についてはアミノ酸配列決定によるタンパク質同定,並びに特異抗体を用いた免疫ブロット法によりその同定を行ない,チューブリン,アクチン,NAP-22,GAP-43,Gタンパク質の存在を示した.2.グリコシルフォスファチジルイノシトールアンカー(GPI)-アンカー型タンパク質については, F3/コンタクチン,T-カドへリン,OBCAM,ニューロトリミンといった諸タンパクが濃縮されていることをみいだしたが,加えて新規のタンパク質の存在を見い出し,これをクローニングし,キロン(kilon)と命名した.3.またラフト画分を抗原に種々のモノクローン抗体の作製を行い,ラフトに局在するタンパク質の発見を試みた結果,1つの局在タンパク質を発見しこれをパラレミンと同定した.4.ラフトの脂質分析を行い,フォスファチジルコリンとコレステロールが濃縮されていることを見い出した.更にコレステロールの特異的抽出により,神経特異タンパク質NAP-22が特異的に可溶化することを見い出した.さらにNAP-22とコレステロール含有リポソームとの結合がカルモジュリンによって阻害されることを見い出した.