hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
骨髄間葉系幹細胞の移植による脳梗塞・脊髄損傷の治療に関する基礎的研究

現在、さらに本実験を推進している。本年度の研究計画に沿って、以下の研究を実施した。1)マウス大腿骨より骨髄間葉系細胞を分離し、マウス脳梗塞あるいは脊髄損傷モデルに移植する実験系を確立し、今年度、Neuropathology誌に掲載された。2)GFP遺伝子を発現したトランスジェニック・マウスから、同様の手技で骨髄間葉系細胞を採取し継代培養を確立した。継代培養を重ねてもこれらの細胞がGFPの蛍光を発することを倒立型蛍光顕微鏡で確認した。この細胞をマウス脳梗塞あるいはラット脊髄損傷モデルに移植したのち、移植した細胞が脳や脊髄の中を病変部に向かって遊走する様子を最長12週間にわたって動物が生きたままの状態で観察する実験系を確立した。この所見は組織学的にも確認された。それぞれの結果は、Brain Res誌、J Neurotrauma誌に投稿中である。3)移植された骨髄間葉系細胞が神経細胞に特異的に存在するベンゾジアゼピン受容体を保護するかどうかを検証する目的で、マウス脳梗塞モデル、ラット脊髄損傷モデルを用いて、^<125>I-iomazenil autoradiographyを実施した。その結果、細胞移植が脳梗塞モデルにおいて脳梗塞周囲におけるベンゾジアゼピン受容体を保持する役割を有していることが判明した。現在、この結果を投稿準備中である。4)脳・脊髄に移植された骨髄間葉系細胞を生体内で追跡し、神経回路網の再構築の様子を生体内で観察する目的で、MRIによるマウス脳梗塞モデル、ラット脊髄損傷モデルの画像化システムを確立した。骨髄間葉系細胞はMRI造影剤で標識することで生体内において最長12週間、追跡可能であることを確認した。来年度には神経回路網の再構築を画像化する予定である。(1)マウスおよびラットの骨髄間葉系細胞株の確立マウス大腿骨より骨髄間葉系細胞を分離し、マウス脳梗塞あるいは脊髄損傷モデルに移植する実験系を確立し、その結果はNeuropathology誌に掲載された。(2)脳脊髄に移植された骨髄間葉系細胞の組織学的検討(同上)(3)脳脊髄に移植された骨髄間葉系細胞の生体内イメージング技術の確立GFP遺伝子を発現したトランスジェニック・マウスから骨髄間葉系細胞を採取し継代培養を確立した。この細胞をマウス脳梗塞あるいはラット脊髄損傷モデルに移植したのち、移植した細胞が脳や脊髄の中を病変部に向かって遊走する様子を動物が生きたままの状態で観察する実験系を確立した。それぞれの結果は、Brain Res Protoc誌に掲載され、J Neurotrauma誌に受理されている。(4)自己ラット骨髄間葉系細胞の脳脊髄への移植モデルの確立
マウス胎仔生殖細胞の分化制御機構に関する研究

生殖巣原基へ到着後の始原生殖細胞は、雄においては前精原細胞として体細胞分裂期におけるG0停止、雌にわいては卵母細胞への分化、すなわち第一減数分裂初期への移行とMI停止が行われる。未分化幹細胞と共有する多くの表面抗原は、これらの胎仔期には徐々に消失するのでこの時期以降の解析には適さない。今回は平面培養下での始原生殖細胞の減数分裂移行の解析系の確立を行い、フィーダー細胞上での培養と特異抗体による減数分裂の検出を用いることによって次のことを見いだした。PGCにおける減数分裂期蛋白質の発現開始に生殖巣体細胞が必須ではない事、体細胞分裂から減数分裂への移行はコロニーを作る生殖細胞間で同調する傾向のある事、そしてPGCの増殖因子であるLIF-gp130シグナルが体細胞分裂から減数分裂への移行を抑制することを発見した。一方、胎仔生殖巣内では雌雄生殖細胞と雌雄体細胞の相互作用によって性分化の進行が制御されており、精巣決定遺伝子Sryが体細胞で発現した後に遺伝子連鎖が起きる。これらの遺伝子機構を解析するために、性分化が起きる時期の胎仔卵巣と精巣について、サブトラクション法による遺伝子検索を行って、新規遺伝子を得た。これらの遺伝子の中で、bHLH型転写因子であるNephgonadinとCRESPについて、塩基配列と遺伝子構造を調べ、生殖細胞と生殖巣の発生と性分化に伴う発現パターンの解析を行った。Nephgonadinについては、生殖巣分化に重要な役割を果たしているAd4BP/SF-1遺伝子の発現制御を行っている可能性を調べるために、培養細胞へのトランスフェクションによるCATアッセイ法を用いて遺伝子発現制御について解析するとともに、トランスジェニックマウスの作成による機能解析実験を開始した。
リラキシンおよびリラキシンC-ペプチド検出系の確立と卵胞生育機構の研究への応用

リラキシン(RLX)は妊娠ホルモンのひとつとして発見されたが、その作用部位は生殖器官のみならず、脳や心臓にも見いだされ、その多才な役割が注目されている。従って、RLXを検出するための抗体が必要とされている。RLXはインスリンと構造が似ており、S-S結合でつながったA鎖とB鎖からなり、IA鎖内にS-S結合を持ち、前駆体のプロRLXからC-ペプチドがはずれて出来上がる。そのために、RLXのフラグメントでの免疫によりRLXを認識できる抗体を作製することは困難であった。一方、組織には半減期がRLXよりも長いプロRLXが有意に存在する。それ故に、RLXの組織内局在を検出するために、抗ヒトRLXのC-ペプチド抗体を作製し、これを1次抗体として用いた免疫組織染色法を確立した。抗C-ペプチド抗体は大腸菌で発現させたヒトプロRLXのC-ペプチド鎖をウサギに免疫して作製した。我々はヒト卵胞皮質切片の培養実験により、RLXが初期段階の卵胞の発育促進作用を有することを見つけた(J Clin Endocrinol Metab 90:516,2005)。そこで、この抗体を初期段階のヒト卵胞におけるRLXの局在の検討に応用した。原始卵胞、1次卵胞と2次卵胞の卵及び顆粒膜細胞に染色が認められた。一方、RLX受容体であるLGR7の卵胞における局在はin situ hybridizatonと免疫染色により検討した結果、ヒト原始卵胞の扁平な顆粒膜細胞、さらに1次、2次卵胞の顆粒膜細胞に存在が認められた。これらの結果から、RLXがヒトの卵胞発育の初期段階でその受容体を介して、オートクリン及びパラクリン機構で作用している事がはじめて明らかにされた。このようにして、RLXはヒト原始卵胞の成熟開始因子の一つである可能性を明らかにした。本研究で得られた抗RLXC-ペプチド抗体はヒトとブタにおけるRLX産生の局在の検討に有用であった。また、リラキシンの卵胞成熟作用と機序をさらに検討していくため、ヒトリラキシン(H2)の全合成も行っている。RLXはインスリンと構造が似ており、S-S結合でつながったA鎖とB鎖からなり、A鎖内にS-S結合を持ち、前駆体のプロRLXからC-ペプチドがはずれて出来上がる。我々はヒト卵胞皮質切片の培養実験により、RLXが初期段階の卵胞の発育促進作用を有することを見つけた(J Clin Endocrinol Metab 90:516,2006)。

そこで、この抗体を初期段階のヒト卵胞におけるRLXの局在の検討に応用した。原始卵胞、1次卵胞と2次卵胞の卵及び顆粒膜細胞に染色が認められた。一方、RLX受容体であるLGR7の卵胞における局在はin situ hybridizatonと免疫染色により検討した結果、ヒト原始卵胞の扁平な顆粒膜細胞、さらに1次、2次卵胞の顆粒膜細胞に存在が認められた。これらの結果から、RLXがヒトの卵胞発育の初期段階でその受容体を介して、オートクリン及びパラクリン機構で作用している事がはじめて明らかにされた。このようにして、RLXはヒト原始卵胞の成熟開始因子の一つである可能性を明らかにした。本研究で得られた抗RLX C-ペプチド抗体はヒトとブタにおけるRLX産生の局在の検討に有用であった。リラキシン(relaxin)は妊娠ホルモンのひとつとして発見されたペプチドホルモンで、24個のアミノ酸残基からなるA鎖と29個のアミノ酸残基からなるB鎖によって構成される。インスリンファミリーに属するがインスリン様の生物活性はない。現在までのところ、ヒトではH1、H2、H3リラキシンが報告されている。リラキシンは卵巣などのさまざまな臓器で分泌され、血中に移行し機能する。リラキシンの受容体であるLGR7とLGR8はさまざまな組織に発現している事が近年明らかになった(Hsu SY., et. al.: Science.295:671-4 2002)。しかし、初期の卵胞(胞状卵胞期以前の)成育の調節機構については、今も不明な点が多い。我々はLGR7の卵胞内局在と卵巣皮質切片の培養実験により、リラキシンが初期の卵胞の発育促進作用を有する事を見つけた(J Clin Endocrinol Metab,90(1):516-521,2005.)。リラキシンの卵胞成熟作用と機序をさらに検討していくためには、リラキシン検出用の特異抗体、リラキシン測定系およびリガンドとしてのリラキシンが必要となる。ヒトリラキシン(H2)測定用の抗体を作製するための免疫原として、H2はS-S結合を3個持つことから全合成には工夫が必要であった。Cys残基の選択的脱離が可能である保護基としてAcm基,Trt基,Mmt基,t-Buthio基等を選択してFmoc-Chemistryのみでアプリイドバイオシステム社の自動固相合成装置(Pionner及びABI-433A)でA鎖、B鎖を現在合成中である。S-S-架橋後の精製がし易いように樹脂から脱離せず合成していく方法は新規な方法である。またB鎖のN端からI10残基、および中央部分の1222残基のフラグメントをそれぞれ4本あるいは8本持つデンドリマーを合成終了した。フラグメントを4本持つデンドリマーは精製中である。フラグメントを8本持つデンドリマーに関しては溶解性に問題があったため検討中である。
ニホンザルによる被害対策の現況把握と住民の対策合意形成モデルの解明

サルによる被害への対策支援の実施状況について,全国のサルが生息する市町村の鳥獣担当者を対象に,2回(2015年と2017年)に分けて実施された同一項目を用いたアンケートを解析し,以下の結果を得た。i)加害サル群の生息状況モニタリングの実施状況には地域差があり,東北地方はモニタリング結果に基づく計画的な管理をおこなう自治体が多く,中国・四国地方は農家への被害防除支援を中心とした対策が実施される傾向にある。ii)市町村で実施されている被害対策に関する研修会等の被害対策支援の実施タイミングと被害状況や被害の増減との関連を非計量多次元尺度構成法および相関分析により解析した結果,市町村担当者の被害増減に関する意識と実施タイミングは関連があり,被害が増加傾向にないと判断した市町村担当者は被害対策ソフト事業の当該年度の実施を控える傾向があった。iii)被害対策の有効性については,被害の増減を目的変数とした決定木解析により,市町村側から住民への普及啓発に係る支援をしていない市町村は農業被害が減少しているとする回答が少ない傾向がみられた。また,銃器を用いた捕獲は被害の減少には寄与しない傾向があった。また,鳥獣害対策として,近年普及しつつあるICTを用いた捕獲わなと従来型の捕獲わなの経営面における比較をおこなった。1頭あたりの捕獲に係る経費を効果とした損益分岐点を導出し,自治体担当者からみたICT機器の導入判断に係る一つの指針を示した。本研究課題の目的は,(i)全国的な市町村がおこなうニホンザルによる被害への対策支援政策について,環境省自然環境局が2015年と2017年に全国の市町村を対象に実施した調査結果を用いて,マクロな視点からサル被害対策を評価すること。(ii)(i)で得られた調査結果から現地調査を実施するエリアを選定し,被害リスク等の客観的指標を用いた住民の被害対策合意形成モデルを構築することにある。(i)についてはおおむね順調に取り組んでおり,文章化の目処がたっているが,(ii)については,(i)の解析に時間がかかってしまったこともあり,想定よりも準備に手間取っている状況である。今年度が最終年度にあたるため,まずは全国的な調査の結果をとりまとめ,公表する。その結果から秋季に合意形成モデルに係る調査を実施するため,夏季は被害リスク解析を含めた現地調査の準備や住民への説明をおこなう。アンケートで対応すべき誤差を減少させるため,アンケート調査の前には回答者が質問票の意図を取り違え,調査の信頼性が低くなる測定誤差に対応するため,対面式の調査を実施する。また,アンケート調査の後には回答があったデータのみを用いることによって調査に協力しなかった回答者の意識をくみ取れない無回答誤差に対応するため,無回答数の1割に該当する住民に対して追加調査を実施する。冬季にそれら結果をとりまとめる。

また,アンケート調査の後には回答があったデータのみを用いることによって調査に協力しなかった回答者の意識をくみ取れない無回答誤差に対応するため,無回答数の1割に該当する住民に対して追加調査を実施する。冬季にそれら結果をとりまとめる。現地調査の準備が進んでいないため,現地調査のための旅費に係る経費を次年度に繰り越すこととなった。今年度の使用計画としては,現地調査の準備のために滞りなく使用する予定である。
中国大陸と香港の関係、特に中国政治の民主化における香港の役割の研究

この研究では、「一国二制度」方式の下で、中国大陸と香港がどのような関係を築くか、特に返還後の香港が、中国政治の民主化に対して、どのような役割を果たすかについての研究を進めた。採用第2年目の本年度は、当初の計画では、1年目に収集した資料を駆使し、香港の大陸政治に対するインパクトを総合的に検証する論文を作成することを予定していたが、それに基づき、特に香港メディアの中国大陸の政治に対する影響力を検証する論文を作成した。同論文は2007年5月に開催されたアジア政経学会東日本大会で発表された。また、香港返還10周年にあたる本年、各種中国政治関連の雑誌誌上において、香港返還以来の10年間の総括や、本年実施された香港行政長官選挙の回顧などの論文を3篇執筆し、発表した。返還10周年にあたる2007年7月1日前後には香港に滞在し、資料の収集やインタビューなどの活動を現地で行った。これらの研究活動によって得られた知見を活用し、本年度は2年間の採用期間の研究成果の総括として、博士学位論文の執筆を予定していたが、予定通り2007年12月に博士学位論文『「小さな冷戦」の終結-「一国二制度」下の中港関係-』を東京大学大学院総合文化研究科地域文化研究専攻に提出した。審査の結果、2008年3月、同大学院より博士(学術)の学位を授与された。このように、本年度は当初の計画通りに研究を遂行し、成果を挙げることに成功した。この研究では、「一国二制度」方式の下で、中国大陸と香港がどのような関係を築くか、特に香港が中国政治の民主化にどのような役割を果たすかについての研究を進めており、18年度は香港での情報収集に重点を置いた研究活動を行った。主として香港大学図書館及び香港中文大学中国研究服務中心での文献収集と、香港政界・学界・メディア関係者へのインタビューを行ったが、特に課題の一つとして挙げた香港メディアの中国大陸への影響力について、香港メディア関係者がどのような形で大陸の政治的問題を取材しているのか、また、それが中国政治に対してどのような影響を与えているのかを、記者への直接のインタビューによって知ることができた。また、中国大陸における香港メディアの情報の受容についても、統計的資料や過去の研究などの情報を入手することができた。これらの研究の成果は、近く学会での口頭発表や、雑誌への掲載によって公表される予定である。また、研究の具体的内容として計画していた、広東省と香港の行政的関係の処理についての研究は、主として香港紙の報道内容を分析する作業を行い、中国・上海交通大学でのシンポジウムにおいて18年9月に発表するに至った。これらの研究成果を、香港と中国大陸の間で擬似国境を越えて相互に影響を与え合う「越境現象」として分析し、過去の研究実績と合わせて博士論文にまとめる作業も順調に進展しており、19年度中の論文完成を目標に執筆を行っている。
ヒトDNA除去修復の分子機構の解析

研究代表者の田中亀代次、研究協力者の中津可道、西條将文は、それぞれオランダのロッテルダム市にあるエラスムス大学医学部にJan H.J.Hoeijmakersを訪れ、in vitro系でのDNA修復蛋白質の機能解析および遺伝子ターゲティング法により樹立されたDNA修復遺伝子欠損マウスに関して互いの研究データや研究材料、研究技術の交換を行なった。また、成果を取り纒めるにあたり、本研究に関連した研究を独自に進めている他の研究者との情報交換あるいは解析技術を取得するため、オランダのエラスムス大学以外に、中津はイタリアのパビア大学を、西條はイギリスの王立癌研究所を、田中と西條はアメリカ合衆国のロスアラモス国立研究所を訪問した。1.DNA除去修復遺伝子の機能の解析:田中は、XPA蛋白質が紫外線や化学発癌剤によって障害を受けたDNAに特異的に結合する事を明かにし、XPA蛋白質がDNA除去修復過程において障害部位の認識機構に関わる蛋白質である事を示唆した。ついで、プロテアーゼによるXPA蛋白質の部分分解法により、その障害DNA結合ドメインを同定し、Znフィンガードメインを含む122個のアミノ酸からなる蛋白質部分だけでXPA蛋白質の障害DNA結合能が保持されている事を明かにした。この結果は、種間でよく保存されているN末端のEクラスター領域やC末端部分はDNA結合には不要であり、別の機能を担っている事を示唆した。我々は、それらが蛋白質間相互作用に関わるドメインではないかと推測した。そこで、酵母におけるtwo hybrid systemを用いてXPA蛋白質と結合する蛋白質を検索した。その結果、既知の蛋白質としてERCC1およびRPA(replication protein A)が同定された。そこで、Hoeijmakersから入手したERCC1 cDNAを大腸菌内で発現させ組換えERCC1蛋白を精製し、さらにHoeijmakersから分与された抗ERCC1蛋白質抗体を用いて、ERCC1蛋白質はGST-XPAビーズに結合するが、GSTビーズには結合しない事を確認した。一方、正常細胞抽出液を抗XPA蛋白質抗体で免疫沈降すると、RPAがXPA蛋白質と共に共沈する事が明かになり、細胞内でもXPA蛋白質とRPAが結合している事が示唆された。さらに、田中は、ERCC1蛋白質はそれ自身では障害二本鎖DNAには結合しないが、XPA蛋白質と混ぜる事によりXPA蛋白質の障害DNAへの結合能が著明に増加する事を見いだした。Hoeijmakersらのデータより、ERCC1蛋白質はXPF蛋白質やERCC11蛋白質と結合し、障害DNA部位の3′側でDNAに切れ目を入れるエンドヌクレアーゼ活性を担っていると考えられている。XPA蛋白質はERCC1蛋白質と結合する事により、これらのエンドヌクレアーゼを障害部位に誘導する役割を担っているのではないかと考えられるが、われわれの結果は、XPA蛋白質とERCC1蛋白質の結合が効率よく障害部位を認識する上でも重要な役割を担っている事を示唆している。2.DNA修復遺伝子欠損マウスの樹立と解析:田中はXPA欠損マウスを樹立し、HoeijmakersはERCC1欠損マウスを樹立した。XPA欠損マウスは正常に発育するが、ERCC1欠損マウスは生後一か月以内に死亡した。いずれのマウスもDNA除去修復能は欠失していた。XPA遺伝子はDNA除去修復過程のみに働いているのに対し、ERCC1遺伝子は発育に必須の他の生命機構にも関与している事を示唆する。XPA欠損マウスは低線量の紫外線や化学発癌剤DMBAの処理により高頻度に皮膚パピローマや有棘細胞癌を発生し、XP患者の高発癌性を解析する上でよいモデルになる事が示唆された。

そこで、Hoeijmakersから入手したERCC1 cDNAを大腸菌内で発現させ組換えERCC1蛋白を精製し、さらにHoeijmakersから分与された抗ERCC1蛋白質抗体を用いて、ERCC1蛋白質はGST-XPAビーズに結合するが、GSTビーズには結合しない事を確認した。一方、正常細胞抽出液を抗XPA蛋白質抗体で免疫沈降すると、RPAがXPA蛋白質と共に共沈する事が明かになり、細胞内でもXPA蛋白質とRPAが結合している事が示唆された。さらに、田中は、ERCC1蛋白質はそれ自身では障害二本鎖DNAには結合しないが、XPA蛋白質と混ぜる事によりXPA蛋白質の障害DNAへの結合能が著明に増加する事を見いだした。Hoeijmakersらのデータより、ERCC1蛋白質はXPF蛋白質やERCC11蛋白質と結合し、障害DNA部位の3′側でDNAに切れ目を入れるエンドヌクレアーゼ活性を担っていると考えられている。XPA蛋白質はERCC1蛋白質と結合する事により、これらのエンドヌクレアーゼを障害部位に誘導する役割を担っているのではないかと考えられるが、われわれの結果は、XPA蛋白質とERCC1蛋白質の結合が効率よく障害部位を認識する上でも重要な役割を担っている事を示唆している。2.DNA修復遺伝子欠損マウスの樹立と解析:田中はXPA欠損マウスを樹立し、HoeijmakersはERCC1欠損マウスを樹立した。XPA欠損マウスは正常に発育するが、ERCC1欠損マウスは生後一か月以内に死亡した。いずれのマウスもDNA除去修復能は欠失していた。XPA遺伝子はDNA除去修復過程のみに働いているのに対し、ERCC1遺伝子は発育に必須の他の生命機構にも関与している事を示唆する。XPA欠損マウスは低線量の紫外線や化学発癌剤DMBAの処理により高頻度に皮膚パピローマや有棘細胞癌を発生し、XP患者の高発癌性を解析する上でよいモデルになる事が示唆された。A群色素性乾皮症(XPA)遺伝子およびERCC1遺伝子は、ヌクレオチド除去修復(NER)の初期段階に重要な働きをする遺伝子である。我々は、XPA蛋白が傷害を受けたDNAに特異的に結合する事、C末端に蛋白結合ドメインを持つ事を明らかにした。一方、ERCC1蛋白は一本鎖DNAに結合し、エンドヌクレアーゼのサブユニットである事が示唆されている。そこで、XPAとERCC1蛋白が相互作用をするか否かを明らかにする為、XPA蛋白と全細胞抽出液を混ぜ、XPA蛋白と特異的に結合した蛋白をSDS-PAGEで分離後、抗ERCC1蛋白抗体を用いたウエスタンブロット法で解析したところ、ERCC1蛋白がXPA蛋白に結合している事が明らかになった。結合は0.5M NaCl存在下でも認められ、強固であった。HoeijmakersよりERCC1 cDNAを得てin vitro translation法でERCC1蛋白を生成し、XPA蛋白と混ぜると、やはりERCC1蛋白はXPA蛋白と結合する事が明らかになった。さらに、Hoeijmakersより種々の変異ERCC1 cDNAを得て、in vitro translation法で変異ERCC1蛋白を作りXPA蛋白との結合を調べており、ERCC1蛋白の蛋白結合ドメインを明らかにしつつある。
ダウンバーストシミュレータの製作と風荷重評価の試み

先ず,既往の研究並びに気象庁等による竜巻やダウンバースト等突風災害に関する調査結果に基づき,ダウンバーストの特性を把握した。次に,ダウンバーストシミュレータの設計の参考資料を得るため,我が国並びに北米の大学等で開発された竜巻シミュレータを調査した。そして,それらの成果をもとに,ダウンバーストシミュレータの試作を行うとともに,ダウンバースト中に置かれた建物に作用する風力の測定方法について考察した。本研究では,近年,我が国でもしばしば被害を発生させているダウンバーストについて,その内部の風速分布特性やダウンバースト内におかれた構造物に作用する風圧・風力の特性を明らかにするため,ダウンバーストシミュレータを試作し,それを用いた実験に基づき,ダウンバーストに対する構造物の風荷重評価法を提案することを目的としている。なお,ここでいうシミュレータとは物理的装置としてのシミュレータと数値モデルの両方を指している。平成22年度は,ダウンバーストおよびそれによる構造物被害の特性を明らかにすること,並びに,シミュレータを試作するための基礎資料を収集することを目的に,まず,気象学および風工学分野における既往の文献調査,我が国の突風災害データベースの作成を行った。次に,国内外の類似施設(具体的には,東京工芸大学,カナダ・ウェスタンオンタリオ大学,米国・アイオワ州立大学)の視察を行い,装置の開発に当っての留意点など,貴重な知見を得た。それらの成果に基づき,一定速度で移動できるダウンバーストシミュレータの基本設計を行い,次年度に予定しているダウンバーストシミュレータの試作の準備を行った。また,数値シミュレーションを行うための準備(汎用ソフトウェアのインストール,乱流モデルや境界条件の検討など)を行った。まず,北海道および東北地方における突風(竜巻;ダウンバーストなど),並びに,それによる強風被害に関するデータベースを作成した。このデータベースには,1950年代からのデータが含まれている。このデータベースを用いた解析,並びに,平成22年度に行った文献調査に基づき,実際に発生する竜巻やダウンバーストの特徴を明らかにした。次に,そのような特性(特に,ダウンバーストによる吹き出し風速やダウンバーストの移動速度,並びに,ダウンバースト内の風速分布)を再現するためのダウンバーストシミュレータの設計と製作(製作は外注)を行った。設計に当っては,平成22年度に行った海外学術調査の成果が活かされている。設計図に基づき送風機を試作し,吹き出し風の風速分布を風速計で測定したところ,風速分布が軸対称になっていないことが判明したので,その原因を追究し(主としてモーターの取付け位置が原因であった),装置の改良を行った。その結果,風速分布は概ね軸対称となり,得られる風速分布が概ね設計通りであることが確認された。装置の改良に時間を要したため,研究スケジュールが遅れてしまったため,研究期間内に建物の縮尺模型を用いた風力測定までには至らなかった。
C型肝炎ウイルスのツパイ感染実験モデル系の開発

C型肝炎ウイルス(HCV)は感染後高率に持続感染を成立し、慢性肝炎・肝硬変に移行して肝がんを引き起こす。日本では全人口の約2%が抗体陽性であるが、有効な実験動物モデルがない事がその解決の大きな障害となっていた。これに対し我々は、ツパイをHCVの感染動物モデルとして樹立する事を目指して解析を行なった。ツパイの血液性状は他のマカク等のサルとほとんど変わらない事が明らかとなった。また、1回の採血量は1匹あたり0.5mlが限度であり採取できるリンパ球数は1x10^5以下と少なくCTL活性は血中のIFN-γ測定による方が好ましい事が明かとなった。ツパイへのHCV外被膜蛋白の免疫には我々が開発した麻疹ウイルス(MV)ベクターを用いる事とし、予めツパイのリンパ球で、MVが感染する事を確認した上で組み換えMVの作製を行なっている。HCV持続感染成立の分子メカニズムを解明するため、我々の樹立したHCV構造蛋白のトランスジェニック(Tg)マウス解析も行なった。マウスに抗Fas抗体を投与すると、劇症肝炎を起こして12時間以内に50%が死亡するのに対し、HCV構造蛋白発現下ではほとんど死ななくなる事を見いだした。Fas下流の経路を解析したところCaspase8活性には差がないがCaspase9活性は低下している事が明らかとなった。そこで、この間のミトコンドリア経路が修飾されている可能性が考えられたため、肝細胞ミトコンドリアからのチトクロームC放出を検討したところ、HCV Tgマウスでは抑制されていた。以上の知見はHCVがアポトーシスを阻害して持続感染を成立させている可能性を強く示唆しており、ツパイ感染系でもこれらの検証を行なっていく予定である。
褥瘡の治癒過程時期を看護師が正確に判断できる指標の同定と臨床的有用性の実証研究

褥瘡スケールの中には判断が難しい項目が含まれており、使用者の知識・経験によって褥瘡状態の判定に違いが生じる可能性があり、看護ケア内容の選択に影響を与える。申請者は、創傷治癒に関与しているフィブロネクチン(FN)に着目し、褥瘡状態を判断できる材料とし継続して分析を行なっている。今回は、褥瘡の治癒過程を特異的に反映する抗FN抗体をデザインし、この抗FN抗体を用いて褥瘡の評価を行なった。結果から、FNが褥瘡の治癒過程に関係していることが明らかになり、褥瘡の治癒過程を判断するマーカーとしての可能性が証明され、看護師が正確に褥瘡の治癒過程を判断できる材料になることの有用性が示唆された。(1)各種抗FN抗体を用いた褥瘡創面とFN断片化の多様性に関する検討研究の同意の得られた対象者から、分析対象としている褥瘡分類ステージIIIIVに相当する褥瘡創面に使用されていたガーゼを回収した。回収したガーゼからタンパク質を抽出した後、遠心機にかけ上清液を回収し試料とした。市販の抗FN抗体を用いて検出した結果、C末端側に位置する抗体、N末端側に位置する抗体では検出に違いを認めた。FN分解状況を確認し、FNの分解された断片が、治癒過程に関与しているのか検討を行ったところ、治癒が遅い褥瘡創面においては、N末端側の抗体が検出される傾向にあった。研究協力者の皮膚科医の助言を得るとともに結果の妥当性を確認した。(2)褥瘡創面とMMP活性及び抗原値との関連性に関する検討(1)で回収した試料をもとに、MMP3抗原について酵素免疫測定法を、MMP3活性についてはザイモグラフィーを用いてそれぞれを解析した。結果、酵素免疫測定法を用いてMMP3が検出されたが、ザイモグラフィーの分析からはほとんどMMP3の検出はされなかった。つまり、MMP3の活性は認められなかった。また、MMP3の検出結果と褥瘡の治癒過程との関連について検討を行ったが、関連性はなかった。他のMMPsの影響を受けていないか確認する目的でMMP2をザイモグラフィーを用いて確認したところいくつかの試料からMMP2が検出され、褥瘡の治癒過程と関連がある可能性が示唆された。(1)褥瘡の治癒過程と関係のあるFNのペプチド構造の同定:前年度(H26)の結果より、褥瘡の治癒過程と関係のあるFNのペプチド講構造を同定し、FN抗原を作成(業者委託で作成)した。その後、作成したFN抗原が発現可能か確認を行い、抗体精製キットを用いてFN抗原を精製しFNの抗体検出に使用した。作成した抗体は2箇所のペプチド構造を検出する抗体(カクテル抗体)であったことから、検出結果が不明瞭であった。そこで、作成したFN抗原が1箇所を検出できるよう処理を行った。処理を行ったFN抗原を用いて、イムノブロット法を行い、FNの検出を行っている。しかしながら抗原の処理に時間を費やしたことから、現在は処理を行ったFN抗原を用いて抗原抗体の検出ができる段階にとどまっている。(2)褥瘡創面とMMP活性及び抗原値との関連の検討:(1)で回収した試料について、ストロメリシン検出ザイモグラフィーを用いた結果、MMP3のバンドが確認されが、治癒遅延をきてしているサンプル(1例)ではMMP3のバンドは確認できなかった。MMP2,9の活性に関してゼラチンザイモグラフィーを用いた結果、MMP3は検出されず、一部のサンプルにおいてMMP2及び9のバンドが確認された。結果より、MMP3の活性と褥瘡創面の治癒過程について、炎症期においてMMP3が活性化されている傾向がある。しかしながら、傾向に沿わなかったものもあったため、MMP3活性の発現に影響を及ぼす因子は褥瘡の治癒過程の他にもあると考えられる。MMP2、9など、MMP3以外にも活性が確認されたため、他のMMPが存在の関係も検討しMMP3が影響しているのかどうかを特定する必要がある。平成27年度の計画予定としてFNの抗体作成し、作成したFN抗体が、看護師が褥瘡治癒過程の判断材料として使用可能かを実証する計画であった。FNのペプチド構造をもとにFN抗原の作成を業者へ依頼しFNの抗原が使用可能であることを明らかにしている。現在は、分析結果から看護師が判断材料として活用可能かの検証を行っている段階であるため。FNやMMP3活性の多様な褥瘡の治癒過程を判断するマーカーとしての有用性を証明し、さらには、褥瘡の状態や治癒過程におけるFNの分解パターンの検討から、褥瘡の状態や治癒過程を特異的に反映する抗FN抗体をデザインし、FN分解評価の看護師による褥瘡の治癒過程を判断できる方法としての有用性を実証することを目的として分析を進めている。現在までにFNの断片から褥瘡の治癒過程に関与するペプチド構造の同定を行い、治癒過程の時期を識別できるためのFN抗体を作成した。作成した抗体は抗体FN1、抗体FN2、抗体FN3としイムノブロット法を用いて抗体の検出状況を確認している。さらに、褥瘡創面とMMP活性及び抗原値との関連の検討については、ストロメリシン検出ザイモグラフィーを用いた結果、MMP3のバンドが確認され、治癒遅延をきたしているサンプルではMMP3のバンドは確認できなかった。

ゼラチンザイモグラフィーを用いた結果、MMP3は検出されず、MMP3の活性と褥瘡創面の治癒過程の中で、炎症期においてMMP3が活性化されている傾向があることが示唆された。しかしながら、傾向に沿わなかったものもあったため、MMP3活性の発現に影響を及ぼす因子は他にもあると考えられた。今後は、褥瘡創面の状態と作成した抗FN抗体の断片との関連性について検討し、褥瘡創面を判断する材料になりうるか分析を重ね検討する。このことは、FNの断片の科学的なエビデンスを背景に褥瘡創面の状態を判断することにつながり、褥瘡創面の状態に応じた最適な褥瘡ケアの選択につなげることができる。平成28年度の計画予定としてFNのペプチド構造を同定し、抗体作成したものが使用可能か、また、その結果から、看護師が褥瘡治癒過程の判断材料として活用可能かを実証する計画予定であった。作成した抗FN抗体(カクテル抗体)で確認を行なったところ、FNの断片の特定が難しく判断ができなかったことから、再度抗FN抗体を作成し(業者委託)することとした。この段階で時間が費やされたため進行が遅くなったことが要因である。【目的】これまでの結果を基に、褥瘡の治癒過程と関係性が強いと推定されたFNの構造部位(ドメイン)を明らかにし、褥瘡の状態をアセスメントする指標として活用可能か基礎的知見を得ることを目的とした。【方法】FNペプチド構造を同定し作成した抗体(抗体FN1、抗体FN2、抗体FN3)を用いてウェスタンブロット法を用いて分析を行った。【結果】作成した抗体FN123が検出可能であることを確認した。その後、抗体FN123を用いて分析するサンプル数を増やし、褥瘡創面の状態と治癒過程を照合し、検出された結果と治癒過程に関係があるかを検討した。抗体FN1は、肉芽組織が良好な時期で褥瘡の治癒過程時期が構築期であっに時に高分子の断片が検出され、抗体FN2は検出されなかった。抗体FN3は検出されたが、治癒過程時期との関係を見出すことはできなかった。【考察】FNのペプチド構造から治癒に関係するドメインを推定して作成した抗体FN12は肉芽の状態を判断可能であることが明らかとなった。このことは、FNの分解物の量的な増減が褥創組織における創傷治癒過程に関与し、構造的不備や他分子との結合阻害によってECMの構築状態を変化させていることが考えられる。さらには、抗体FN1が検出された時期が褥瘡の肉芽組織が良好な時期であったことから、褥瘡の治癒過程を判断する材料の1つとしての可能性が示唆される。今後、抗体FN12の量的な増減や分解の程度について傾向を解明し、褥瘡の状態と治癒過程を含めたアセスメントの指標につながると考える。抗体FN3は、FNの構造部位(ドメイン)の領域を再度確認し、創傷治癒との関係がないのか検討する必要がある。褥瘡スケールの中には判断が難しい項目が含まれており、使用者の知識・経験によって褥瘡状態の判定に違いが生じる可能性があり、看護ケア内容の選択に影響を与える。申請者は、創傷治癒に関与しているフィブロネクチン(FN)に着目し、褥瘡状態を判断できる材料とし継続して分析を行なっている。今回は、褥瘡の治癒過程を特異的に反映する抗FN抗体をデザインし、この抗FN抗体を用いて褥瘡の評価を行なった。結果から、FNが褥瘡の治癒過程に関係していることが明らかになり、褥瘡の治癒過程を判断するマーカーとしての可能性が証明され、看護師が正確に褥瘡の治癒過程を判断できる材料になることの有用性が示唆された。平成27年度の計画予定としてFNの抗体作成を上げている。
WT1ペプチドを用いた難治性胸部悪性腫瘍免疫治療確立を目指した癌免疫動態解析

WT1ペプチドを用いた難治性胸部悪性腫瘍に対する免疫治療の確立を目指し、癌抗原WT1に対する免疫動態解析を行った。マウスをWT1ペプチドで免疫することにより誘導されるWT1特異的細胞傷害性Tリンパ球が持つT細胞レセプターの遺伝子クローニングに成功し、我々のマウス実験系の分子基盤が構築された。患者末梢血単核球のSyndecan-4発現量が神経膠芽腫に対するWT1ペプチドワクチン治療の効果予測に有用である可能性を示した。WT1ペプチドワクチン接種はそのペプチド特異的な抗体産生を誘導し得ることを示した。胸腺悪性腫瘍などに対するWT1ペプチドワクチン臨床試験において有望な結果を得た。我々は、先行研究により、癌抗原WT1由来のWT1-126ペプチド(9-mer)はマウスMHC class IのH-2Db拘束性にマウスWT1特異的細胞傷害性Tリンパ球(cytotoxic Tlymphocyte, CTL)を誘導できることをすでに示している。癌抗原WT1特異的な免疫応答を分子生物学的により詳細に解析することを目的として、H-2Db分子に提示されるWT1-126ペプチドを認識できるT細胞レセプター(T cell receptor, TCR)の遺伝子クローニングを試み、その結果、2種類のそのTCRの遺伝子クローニングをすることができた。そのうちの1種類のTCRを発現させたCD8陽性Tリンパ球は、内因性にWT1を発現する腫瘍細胞に対してCTL活性を示した。つまり、そのTCRは、生体内に存在するWT1発現細胞が細胞表面に提示するWT1-126ペプチドを認識できることが示された。これにより、WT1特異的T細胞応答の動態解析をさらに詳細に行うことが可能になったと考えられた。また、WT1を標的としたTCRを用いた免疫遺伝子治療のモデルマウスの構築が可能になった。呼吸器領域腫瘍(肺癌、胸腺腫瘍)を含む種々の領域の難治性悪性腫瘍を有する患者に対して、WT1ペプチドワクチンを用いた免疫治療を継続的に行った。そして、その治療を受けた患者から癌免疫応答の解析のための検体(末梢血単核球や血清など)を得、保存した。また、今までに蓄積された患者検体の一部を用いて、癌免疫応答に関する解析を行った。WT1特異的免疫応答をさらに詳細に解析することに役立つと思われる「マウスH-2Dbに提示されるWT1ペプチドを認識できるTCR」の遺伝子クローニングをすることができた。WT1ペプチドワクチン臨床試験を継続的に続行することができ、また、それにより、癌免疫応答を解析するための貴重な臨床検体をさらに蓄積することができた。さらに、これらの臨床検体の一部を用いて、癌免疫応答に関する解析を行うことができた。WT1ペプチドワクチン療法を受けた悪性膠芽腫(glioblastoma: GBM)患者の血清を解析することにより、ワクチン治療前には陰性であった抗WT1ペプチドIgG抗体がワクチン治療後には高率に陽性化することを見出し、WT1ペプチドワクチン療法はWT1ペプチド特異的細胞性免疫だけでなく液性免疫も誘導することを示した。また、ワクチン治療後の抗WT1ペプチドIgG抗体の産生はこのワクチン治療の予後因子となることを示した。この結果を論文報告した。WT1ペプチドワクチン療法を受けたGBM患者のワクチン治療前の末梢血単核球の遺伝子発現を網羅的に測定し、そしてそれらの発現量と患者予後との相関を解析することにより、Syndecan-4(SDC-4)の発現が低い患者のほうがそれが高い患者よりも予後がいいことを見出した。つまり、患者末梢血単核球のSDC-4発現量が、癌免疫療法であるWT1ペプチドワクチン療法を行う上で、その効果予想のバイオマーカーになり得ることが示唆された。胸部悪性腫瘍を含む悪性疾患に対するWT1ペプチドワクチン療法の臨床試験を継続的に行った。そのワクチン治療では、WT1特異的キラー誘導ペプチド単独治療だけでなく、commonなHLA class Iの型であるA*0201とA*2402それぞれに拘束性のキラー誘導ペプチドであるWT1-126とWT1-235m(modified WT1-235)、さらに多くの患者に適応できるヘルパー誘導ペプチドであるWT1-332の3種を混合したWT1ペプチドワクチン治療の臨床試験も継続的に行った。また、ワクチン治療患者から解析用の検体を採取し保存した。蓄積してきたWT1ペプチドワクチン治療患者由来の臨床検体(血清、末梢血単核球など)を用いて、癌免疫応答に関連した解析をすることができた。胸部悪性腫瘍を含む種々の悪性疾患に対するWT1ペプチドワクチン療法の臨床試験を継続的に行うことができ、また、それにより、癌免疫応答の解析に役立つと期待される患者検体をさらに保存・蓄積することができた。WT1ペプチドワクチンを投与した時に誘導される免疫応答を解析できるin vivoマウス実験系をすでに有している。それを用いて、癌抗原特異的免疫応答に関する解析を継続的に行った。また、WT1特異的ヘルパーTリンパ球を誘導できるマウスWT1ヘルパーペプチドの同定を目指す実験を行った。これらの実験は、癌抗原を標的にした免疫療法を発展させるためであり、実際に、次に述べるような臨床研究を行った。呼吸器領域の悪性腫瘍に対して、WT1ペプチドワクチン臨床試験を継続的に行った。

その中で、前治療抵抗性の胸腺悪性腫瘍(胸腺癌や浸潤性胸腺腫)に対して行った臨床試験の結果を論文発表した。ワクチン投与後3か月間の評価で、多くのstable disease (SD)症例が得られた。画像的に腫瘍の縮小が観察された症例もあった。ワクチン治療後に病勢の安定化などがみとめられた場合は3か月以降もワクチン治療を続行し、長期間のワクチン治療を続行できた症例が存在した。また、ワクチン開始後、WT1特異的な免疫反応の誘導が多くの症例でみとめられた。このように、WT1ペプチドワクチンは胸腺悪性腫瘍の治療に有用であることを示唆する結果を得た。将来、呼吸器領域・胸部悪性腫瘍の免疫治療につながる可能性のある成果として、同じく固形癌である膵臓癌に対する「化学療法とWT1ペプチドワクチン併用療法」の有望な結果を得た。この臨床試験で、stage IVの患者で、コントロール群(化学療法のみ)に比べて、併用群(化学療法+WT1ワクチン)のPFSが有意に良好であった。ランダム化した2群の臨床試験で癌抗原ペプチドワクチンの優位性を示したのは、この結果が世界で初めてであり、論文発表した。WT1ペプチドを用いた難治性胸部悪性腫瘍に対する免疫治療の確立を目指し、癌抗原WT1に対する免疫動態解析を行った。マウスをWT1ペプチドで免疫することにより誘導されるWT1特異的細胞傷害性Tリンパ球が持つT細胞レセプターの遺伝子クローニングに成功し、我々のマウス実験系の分子基盤が構築された。患者末梢血単核球のSyndecan-4発現量が神経膠芽腫に対するWT1ペプチドワクチン治療の効果予測に有用である可能性を示した。WT1ペプチドワクチン接種はそのペプチド特異的な抗体産生を誘導し得ることを示した。胸腺悪性腫瘍などに対するWT1ペプチドワクチン臨床試験において有望な結果を得た。今年度の研究成果をもとに、癌免疫動態の解析を、癌抗原WT1をモデル抗原として推し進める。マウス実験とヒト検体を用いた実験の両面で、研究を進めていく予定である。また、WT1ペプチドワクチンを用いた癌治療の臨床試験も継続して行う。2015年度および2016年度の研究成果をもとに、癌免疫動態の解析を、癌抗原であるWT1をモデル抗原として、さらに進めていく。マウスを用いた実験(個体レベルも含む)とヒト検体を用いた実験の両面で、研究を進めていく予定である。また、WT1ペプチドワクチン臨床試験を継続的に行う。呼吸器内科学、腫瘍免疫学想定していた必要量の試薬より少ない量の試薬で期待した結果が得られたため。予定していた学会に参加できなかったため。もともと、実験遂行のための経費(試薬や実験動物の購入など)や旅費の経費(情報収集など)などを2017年度にも使用する計画を立てていた為。平成28年度以降の試薬購入、情報収集のための学会出張などに使用する。研究の遂行のため、試薬や実験動物などの購入や旅費(情報収集や研究打ち合わせなど)などに適切に使用する。
ICPFアクチュエータの連成有限要素解析モデリングおよび動的変形挙動の検討

本研究では,複数の物理現象の相互作用を解析する連成有限要素解析手法を用いて,人工筋肉などへの応用が期待されている,イオン導電性高分子膜(ICPF)-金属複合材アクチュエータの動的変形挙動とメカニズムを明らかにすることを目的とした。1.連成解析手法の検討連成効果の測定・評価実験で得られた,ICPFアクチュエータの変形メカニズムに影響する連成効果の大きさを評価できる変形モデルに対し,連成解析手法との組み合わせ方,精度,解析時間について総合的に評価し,ICPFアクチュエータに適した連成解析手法を提案した。特に、数値的な不安定性の生じにくい、効率的な練連成手法について、理論的な検討と、数値実験を行い、検討した。2.種々の条件下でのモデルと実験との比較上記の連成変形モデルの適用性を検討するため,一様ではないメッキを施したり,不定形膜を用いるなどの条件で,解析と実験を比較・検証した。試料として他の材料を使用した場合や,溶液を粘性流体として流れを含めた連成解析への拡張を行い,汎用性や実用性の高い連成解析モデルを開発した。3.今後の発展性の検討サイズ,形状,構造を変えてICPFアクチュエータの動解析を行ない,モデルの問題点および今後の課題について,総合的に検討・評価した。特に、流れまで含めた連成解析が今後、必要になると考えられ、複合・多重連成解析手法の開発が重要と思われる。本研究では,複数の物理現寒の相互作用を解析する連成有限要素解析手法を用いて,人工筋肉などへの応用が期待されている,イオン導電性高分子膜(ICPF)-金属複合材アクチュエータの動的変形挙動とメカニズムを明らかにすることを目的とした。1.変位測定装置の準備と予備実験波形発生器(PC,現有設備),ポテンショスタット,レーザ変位計,測定用PCからなる変位測定装置を準備し,表面に白金をメッキしたNafion膜試料の動的変形,流れる電流などを測定した。印加電圧,電極の取り付け方法,試料の固定方法,変位測定位置,応答速度等を調整した。なお,測定する変位レンジや応答速度に応じてレーザ変位計は現有設備も含めて複数を用意した。2.連成有限要素解析コードの作成および予備解析による実験条件の決定イオンの移動現象,水分子の拡散現象,ひずみ/応力の発生およびそれによって生じる動的変形挙動を解析する2次元,3次元非定常有限要素解析コードを作成した。既に開発している電磁構造連成解析有限要素法コードをベースにして改造し,弱連成交互解法および強連成同時解法を使用可能とした。この解析結果から,実験条件を最終的に決定した。3.変形挙動の測定印加電圧,波形,周波数,Nafion膜厚さ,白金メッキ厚さ,試料サイズ,試験環境(空気中,溶液中など)を変えて変位および電流等を測定し,各現象ごとに解析結果と実験結果を定性的および定量的に比較を行い,各モデルの妥当性を検証した。4.連成効果の測定予備実験次年度に実施する連成効果評価実験のための測定方法を検討した。試料の変形の拘束状態を変えて,電流や反力を測定することによって,連成効果の大きさを精度よく評価する方法を開発した。1.連成効果の測定・評価実験前年度の予備実験に基づき,相互作用による連成効果の強さを板厚、拘束条件、荷重負荷パターンなどの各条件を変えて測定した。その結果に基づき,ICPFアクチュエータの変形メカニズムに影響する連成効果の大きさを評価し,変形モデルに反映させた。連成有限要素解析コードを実験条件の決定に利用するほか,直接測定できない物理量の推定にも利用した。2.連成解析手法の検討

連成効果の測定・評価実験で得られた結果に基づき,連成解析手法との組み合わせ方について種々の方法を比較・検討・評価した。すべての条件に対して精度良い解を与える決定的な方法はないが、条件に応じて連成解析手法を使い分けることによって対応できる。3.種々の条件下でのモデルと実験との比較変形の完全拘束、部分拘束、一定荷重負荷状態など、繰り返し荷重負荷状態など、種々の条件で,解析と実験を比較し,モデルの汎用性,妥当性を検証した。試料の物性値として異なるものを使用した場合や,溶液の種類を変えた場合について検討を行い,特に汎用性や実用性の観点からも、連成解析モデルの妥当性について検討を行った。本研究では,複数の物理現象の相互作用を解析する連成有限要素解析手法を用いて,人工筋肉などへの応用が期待されている,イオン導電性高分子膜(ICPF)-金属複合材アクチュエータの動的変形挙動とメカニズムを明らかにすることを目的とした。1.連成解析手法の検討連成効果の測定・評価実験で得られた,ICPFアクチュエータの変形メカニズムに影響する連成効果の大きさを評価できる変形モデルに対し,連成解析手法との組み合わせ方,精度,解析時間について総合的に評価し,ICPFアクチュエータに適した連成解析手法を提案した。特に、数値的な不安定性の生じにくい、効率的な練連成手法について、理論的な検討と、数値実験を行い、検討した。2.種々の条件下でのモデルと実験との比較上記の連成変形モデルの適用性を検討するため,一様ではないメッキを施したり,不定形膜を用いるなどの条件で,解析と実験を比較・検証した。試料として他の材料を使用した場合や,溶液を粘性流体として流れを含めた連成解析への拡張を行い,汎用性や実用性の高い連成解析モデルを開発した。3.今後の発展性の検討サイズ,形状,構造を変えてICPFアクチュエータの動解析を行ない,モデルの問題点および今後の課題について,総合的に検討・評価した。特に、流れまで含めた連成解析が今後、必要になると考えられ、複合・多重連成解析手法の開発が重要と思われる。
二十世紀の前衛諸運動とダダ・超現実主義の総合的研究

「ダダ・超現実主義」の運動と,それが深い関わりを持つ二十世紀の「前衛芸術」全般を考察するにあたり,本研究グループのメンバーの仕事は自ずと歴史的地理的に広範囲に亙るものとなった.そして,フランス・ヨーロッパにおける前衛運動のみならず日本におけるその受容・展開の過程をも跡づけることが,当初からの目標であった.研究の出発点となったのは, 1986年秋から翌年春にかけての,パリ・ポンピドゥ国立文化センターにおける「前衛の日本」展であるが,これには本研究グループから阿部・渡邊・蓮實の三名が企画段階から参加し,そのカタログに論文を寄稿した.この展覧会で浮き彫りにされたのは,日本とフランス(あるいはヨーロッパ)における「前衛性」のずれである.日本における「前衛」が必ずしも同時代のフランスでの「前衛」に見合うものではなく,日本では重要な変革と看做されるものが,ヨーロッパではもはやそのようなものとして認知されないということがしばしば起こる.また「二十世紀の前衛」とは言っても,直接ダダ・超現実主義に関わらないものも包含されるわけであるから,考察の視点をダダ・超現実主義のみに絞ると,「前衛芸術」の捉え方が極めて〓頗なものになるという問題が生じる.以上のような反省を踏まえて,昭和62年5月-6月に本研究グループを中心として東京大学教養学部において,『今,アヴァンギャルトとは』と題する連続シンポジウムを行った.各回のテーマは,「ポスト・モダンの地平」,「テクノロジーと前衛」,「劇場というフィクション」,「現代音楽の地平」である.上記二つのイヴェントを軸に展開された本研究において各メンバーが専攻分野で挙げた成果については,「研究成果報告書」を参照されたい.本研究は,課題として掲げた分野において,特に,国際的視野から,また諸芸術の相関関係の視野から,見るべき成果を収めたものと考える.「ダダ・超現実主義」の運動と,それが深い関わりを持つ二十世紀の「前衛芸術」全般を考察するにあたり,本研究グループのメンバーの仕事は自ずと歴史的地理的に広範囲に亙るものとなった.そして,フランス・ヨーロッパにおける前衛運動のみならず日本におけるその受容・展開の過程をも跡づけることが,当初からの目標であった.研究の出発点となったのは, 1986年秋から翌年春にかけての,パリ・ポンピドゥ国立文化センターにおける「前衛の日本」展であるが,これには本研究グループから阿部・渡邊・蓮實の三名が企画段階から参加し,そのカタログに論文を寄稿した.この展覧会で浮き彫りにされたのは,日本とフランス(あるいはヨーロッパ)における「前衛性」のずれである.日本における「前衛」が必ずしも同時代のフランスでの「前衛」に見合うものではなく,日本では重要な変革と看做されるものが,ヨーロッパではもはやそのようなものとして認知されないということがしばしば起こる.また「二十世紀の前衛」とは言っても,直接ダダ・超現実主義に関わらないものも包含されるわけであるから,考察の視点をダダ・超現実主義のみに絞ると,「前衛芸術」の捉え方が極めて〓頗なものになるという問題が生じる.以上のような反省を踏まえて,昭和62年5月-6月に本研究グループを中心として東京大学教養学部において,『今,アヴァンギャルトとは』と題する連続シンポジウムを行った.各回のテーマは,「ポスト・モダンの地平」,「テクノロジーと前衛」,「劇場というフィクション」,「現代音楽の地平」である.上記二つのイヴェントを軸に展開された本研究において各メンバーが専攻分野で挙げた成果については,「研究成果報告書」を参照されたい.本研究は,課題として掲げた分野において,特に,国際的視野から,また諸芸術の相関関係の視野から,見るべき成果を収めたものと考える.61年度の研究業績は、大別して次の三領域に分けられる-1)ダダ・超現実主義運動を準備した19世紀以降の芸術各分野における動きの考察。2)1930年代の超現実主義運動のなかから生まれた絵画の新しいレアリスムの解明(主としてバルチュスをめぐる)。3)西洋前衛運動の日本における採取・展開の研究。1に関する成果としては、マラルメの演劇観についてパリ第四大学で行なった発表に基く渡辺の論文,蓮實のアクシム・デュ・カン研究,中地のランボー『地嶽の一季節』に関する二論文(外国語科紀要/仏語仏文学会機関誌)などがある。2の具体的成果としては、阿部編『バルチュス』(白水社)における阿部,渡辺の論文と翻訳。3に関する主な成果は、パリのポンピドゥセンターで開催された「前衛の日本」展の企画に参加した阿部,渡辺,蓮實の三名が、そのカタログにそれぞれ、「日本におけるダダ・超現実主義芸術の移入」,「映画におけるヨーロッパ芸術の消化」,「日本の新劇運動」に関する論文を執筆した。また、1986年8月ワシントンで開催された国際美術史学会において、阿部が「近代日本の美術史的思考の発足時点におけるヘーゲル的歴史観の導入」をテーマとする発表を行なった。全般的に見て、今年度は3の領域での成果が特に豊かであった。なお、13のいずれにも属さないが、本研究に関連する業績として、ベルクのオペラ『ルル』に関する渡辺の論考、蓮實の映画監督論(ブレッソン.グリフィス)、また、フランス現代哲学の翻訳-フーコー『性の歴史【I】』(渡辺訳)、バタイユ『エロティシズムの歴史』(中地-共訳)など-がある。