hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
付着・穿孔生物化石から絶滅軟体動物の古生態を探る

本研究では、付着・穿孔生物をもとに、その基盤となった中生代軟体動物の古生態を解明することを目的とし、中生代の海成層を対象とした野外調査および採集標本の室内処理を行いながらの産状観察、既存博物館標本の観察等を実施する。古生態推定では、付着・穿孔の位置や、基盤の殻の破損状況、殻の裏打ち構造の有無、アンモノイドの場合は顎器の有無等から、まず生存中の付着・穿孔かどうかを検討し、生存中の付着・穿孔の場合、その位置や方向等から、宿主の生息姿勢や成長速度等を推定する。また、本研究では、その研究過程を通じて、付着・穿孔生物が中生代特有の軟体動物を基盤として利用した実態も明らかにする。
脳梗塞患者における経神経性神経細胞変性の病態に関する分子イメージング研究

脳主幹動脈閉塞性疾患により脳梗塞を呈した患者において、神経細胞障害を反映する中枢性ベンゾジアゼピン受容体(cBZR)低下が、脳梗塞のない領域に認められるか検討した。病変側の大脳皮質領域と視床で、BZR密度の低下が認められ、視床では経神経性の神経細胞障害が原因と考えられた。認知機能との相関は、大脳皮質領域で統計学的に有意であったが、視床では有意ではなかった。まず、脳主幹動脈閉塞性疾患により脳梗塞を呈した患者において、神経細胞障害を反映する中枢性ベンゾジアゼピン受容体(BZR)低下が、脳梗塞のない大脳皮質領域に認められるか、認められた場合大脳皮質機能低下と関連しているか、横断的に検討した。一側の内頸あるいは中大脳動脈に狭窄または閉塞を有する患者60例を対象とし、ポジトロンCTおよび^<15>O標識のガスを用いて、脳血液量、脳血流量、酸素摂取率、および酸素代謝率を、^<11>C標識のフルマゼニールを用いて中枢性ベンゾジアゼピン受容体密度を測定した。病変側の前および中大脳動脈領域大脳皮質において、健常者と比較したBZR低下の程度を示す、abnormally decreased BZR indexを計算し、脳循環代謝パラメータとの関係を検討した。また、大脳皮質機能評価として、ウィスコンシンカード分類テスト(WCST)を施行し、その成績とBZR indexの関連を検討した。その結果、BZR indexは脳酸素摂取率の上昇(脳循環障害の程度の指標)と関連しており、大脳皮質では、慢性脳虚血そのものが、BZR低下の原因であると考えられた。また、WCST達成カテゴリー数低下群39例では、正常群21例と比較してBZR indexが前大脳動脈領域で増加していた.中大脳動脈領域のBZR indexは、左血管病変患者28例を対象としたとき、成績低下群(19例)で正常群9例と比較して有意に増加していた。すなはち、BZR低下として検出される大脳皮質神経細胞障害は大脳皮質機能低下(遂行機能低下)の原因になると考えられた。脳梗塞のない大脳皮質領域においては、神経連絡を介する二次的神経細胞障害(経神経性神経細胞変性)よりは、慢性脳虚血そのものによる一次的神経細胞障害が、神経細胞障害の原因としては重要であり、その予防は、大脳皮質機能障害(認知機能障害)の予防につながると考えられる。昨年度同様、脳主幹動脈閉塞性疾患により脳梗塞を呈した患者において、神経細胞障害を反映する中枢性ベンゾジアゼピン受容体(BZR)低下が、脳梗塞のない領域に認められるか、認められた場合同部位の機能低下と関連しているか、横断的検討を継続した。内頸あるいは中大脳動脈に狭窄または閉塞を有する患者を対象とし、ポジトロンCTおよび^<50>O標識のガスを用いて、脳血液量、脳血流量、酸素摂取率、および酸素代謝率を、^<11>C標識のフルマゼニールを用いて中枢性ベンゾジアゼピン受容体密度を測定した。脳主幹動脈閉塞性疾患により脳虚血を生じないと考えられ、かつ、脳梗塞のない、いくつかの大脳皮質以外の脳領域で、中枢性ベンゾジアゼピン受容体密度と酸素代謝の低下が認められ、経神経性の機能低下の存在が示唆された。そのうちの一部の領域では、両者の低下は並行しており、神経細胞あるいは受容体の障害が機能低下の原因と考えられた。一方、酸素代謝の低下は認めるが中枢性ベンゾジアゼピン受容体密度の低下をともなわない領域もあり、このような領域では、脳梗塞後の比較的早期では神経細胞障害は伴っていないと考えられた。昨年度、慢性脳虚血そのものによる一次的神経細胞障害が、大脳皮質神経細胞障害と大脳機能障害の原因としては経神経性神経細胞障害よりも重要であるという結果をえた。1990年代に比べて2000年代では、治療も進歩している。そこで、2000年代における、慢性脳虚血と脳梗塞発生との関連を再検討した。その結果,1990年代に比べて、脳主幹動脈閉塞性疾患の脳梗塞発生率は低下しているものの、高度脳循環障害と脳梗塞再発との関連は明らかに認められた。この結果は、慢性脳虚血と大脳皮質神経細胞障害の発生との関連を支持し、神経細胞障害の予防に慢性脳虚血の治療が重要であることを示唆していた。昨年、一昨年度同様、脳主幹動脈閉塞性疾患により脳梗塞を呈した患者において、神経細胞障害を反映する中枢性ベンゾジアゼピン受容体(cBZR)低下が、脳梗塞のない領域に認められるか、認められた場合同部位の機能低下と関連しているか、横断的検討を継続した。また、少数例で縦断的に検討した。内頸あるいは中大脳動脈に狭窄または閉塞を有する患者を対象とし、ポジトロンCTおよび15O標識のガスを用いて、脳血液量、脳血流量、酸素摂取率、および酸素代謝率を、11C標識のフルマゼニールを用いてBZR密度を測定した。大脳機能評価として、ウィスコンシンカード分類テスト(WCST)を施行し、その成績とBZR密度の関連を検討した。

その結果、病変側の大脳皮質領域に加えて、脳主幹動脈病変により脳虚血を生じないと考えられる視床で、BZR密度と酸素代謝の低下が認められ、両者の低下は並行しており、経神経性の神経細胞障害が酸素代謝低下の原因と考えられた。WCSTの成績低下とBZR低下との相関は、大脳皮質領域では統計学的に有意であったが、視床では有意ではなかった。神経連絡を介する視床の二次的神経細胞障害(経神経性神経細胞変性)は大脳機能障害(遂行機能障害)への関与は少ない可能性がある。横断的検討であること、および、脳梗塞後の比較的早期の評価であることが問題点であり、経神経性神経細胞変性の臨床的意義の解明には、長期の経過観察による縦断的検討が必要であると考えられた。本年度も、2000年代における、慢性脳虚血と脳梗塞発生との関連を、本研究の対象症例を含む脳主幹動脈閉塞性疾患患者の観察研究により検討し,高度脳循環障害と脳梗塞再発との関連を、昨年度同様、さらに確認した。この結果は、慢性脳虚血と大脳皮質神経細胞障害の発生との関連を支持し、神経細胞障害と梗塞後の大脳機能障害の予防に慢性脳虚血の治療が重要であることを示唆した。横断的検討のための症例は十分集まっている。一方、縦断的検討にはさらに症例の蓄積が必要である。24年度が最終年度であるため、記入しない。縦断的検討のために、経時的検査症例を増やしていく。定量的評価法、関心領域の設定法につき検討する。
複数の元素の協同作用を利用する多官能性分子構築法の開発

周期表の様々な元素の特性を活用した選択的かつ効率的な分子変換反応の開発研究の一環として、ジルコニウムやチタン、亜鉛、銅およびセレンの各元素のもつ潜在的な反応特性を相乗的に生かした反応を組み合わせ、有機合成上有用な官能基を有する化合物へ効率よく変換することを検討した。α位あるいはβ位にフェニルセレノ基を有する末端アルキン(1)とSchwartz試薬とのヒドロジルコネーションは、位置および立体選択的に付加反応が進行し、トランス形の末端ビニルジルコノセン誘導体を与えた。引き続き高次有機銅試薬およびジメチル亜鉛とのトランスメタル化反応により系中にフェニルセレノ基を有するビニル銅やビニル亜鉛中間体を生成させ、これとエノン類やエポキシド、アルデヒドとの反応を行った結果、良好な収率で1,4-付加生成物やアリルアルコール誘導体等を与えることを明らかにした。また、ブチルリチウムによる1の末端水素の引き抜きによりsp炭素アニオンを生成させ、引き続き求電子剤との反応および酸化反応を行った結果、アリルアルコールやジエンおよび3,4-ジヒドロキシ-1-アルケンやエンイン部位をもつアルコール誘導体などの有用な官能基に変換できることを明らかにした。一方、アルデヒドから容易に合成できるフェニルセレノールエステルとジメチルチタノセンとの反応をトルエン中行うと、カルボニル基のメチレン化が進行し、対応するビニルセレニドが中程度の収率で得られることを示した。さらに、これらをm-CPBAで酸化後塩基存在下加熱すると、セレノキシド脱離が位置選択的に進行し、末端アルキンが生成することを明らかにした。この一連の反応において、アルデヒド基が増炭を伴い炭素-炭素三重結合に変換されたことになる。周期表の様々な元素の特性を活用した選択的かつ効率的な官能基導入反応の開発研究の一環として、ジルコニウム、亜鉛、銅およびセレンの各元素のもつ潜在的な反応特性を相乗的に生かした反応を組み合わせ、有機合成上有用な官能基を有する化合物へ効率よく変換することを目的に、本年度の研究では3つの重要な活性部位を有するα位あるいはβ位にフェニルセレノ基が置換した末端アルキンを出発原料に用い、多官能性化合物への変換反応について検討した。α位あるいはβ位にフェニルセレノ基を有する末端アルキン(1)とジルコノセンのエチレン錯体との反応ではジルコナシクロペンテンが位置異性体の混合物として生成した。また、1とSchwartz試薬とのヒドロジルコネーションは、位置および立体選択的に付加反応が進行し、トランス形の末端ビニルジルコノセン誘導体を与えた。引き続き高次有機銅試薬およびジメチル亜鉛とのトランスメタル化反応により系中にフェニルセレノ基を有するビニル銅やビニル亜鉛中間体を生成させ、これとエノン類やエポキシド、アリルハライド、ビニルトリフラートおよびアルデヒドとの反応を行った結果、良好な収率で1,4-付加生成物やアリルアルコール誘導体等を与えることを明らかにした。一方、ブチルリチウムによる1の末端水素の引き抜きによりsp炭素アニオンを生成させ、引き続き求電子剤としてアルデヒドやエポキシドとの反応を行うと、三重結合を有するアルコール誘導体が収率良く得られた。さらに、得られたこれらの化合物に存在するアリルセレニドやホモアリルセレニドを過酸化水素で酸化し、対応するセレノキシドの[2,3]シグマトロピー転位あるいはシン脱離を起こさせ、アリルアルコールやジエンおよび3,4-ジヒドロキシ-1-アルケンやエンイン部位をもつアルコール誘導体などの有用な官能基に変換できることを明らかにした。

周期表の様々な元素の特性を活用した選択的かつ効率的な分子変換反応の開発研究の一環として、ジルコニウムやチタン、銅およびセレンの各元素のもつ潜在的な反応特性を相乗的に生かした反応を組み合わせ、有機合成上有用な官能基を有する化合物へ効率よく変換することを目的に、本年度の研究ではフェニルセレノ基を有するカルボニル化合物のチタン試薬によるオレフィン化反応を行い、さらに酸化的脱セレン化反応による多官能性化合物への変換反応について検討した。アルデヒドから容易に合成できるフェニルセレノールエステルとジメチルチタノセンとの反応をトルエン中行うと、カルボニル基のメチレン化が進行し、対応するビニルセレニドが中程度の収率で得られることを示した。さらに、これらをm-CPBAで酸化後塩基存在下加熱すると、セレノキシド脱離が位置選択的に進行し、末端アルキンが生成することを明らかにした。この一連の反応において、アルデヒド基が増炭を伴い炭素-炭素三重結合に変換されたことになる。一方、脂肪族置換基をもつフェニルセレノールエステルとジブロモアルカンを亜鉛と四塩化チタン存在下反応させ、カルボニル基のオレフィン化反応を行った結果、中程度の収率で対応するアルケニルセレニドをZ体優先で与えた。E体とZ体を分離し上記と同様m-CPBAで酸化後塩基存在下加熱すると、E体からはアルキンが、Z体からはアレンが選択的に得られることを明らかにした。また、α-フェニルセレノケトンの同様なメチレン化反応ではアリルセレニド化合物が得られ、これを酸化すると対応するアリルセレノキシドの[2,3]シグマトロピー転位が進行し、アリルアルコール誘導体を与えることを明らかにした。この反応においても、メチレンカルボニル基のアリルアルコール部位への増炭を伴った官能基変換が達成されたことになる。
腕目標到達運動の左右差に対する意識的・無意識的情報処理の影響

本研究は、左右手目標到達運動制御の非対称性を意識的、無意識的制御の観点から分析した。実験は、(1)左右半視野提示した視覚目標に対してそれぞれ素早い左右反応手目標到達運動を行う課題、(2)左右半視野提示した視覚目標に対して両手同時目標到達運動を行う課題を用いて行った。(1)の時間要因については標的の大きさや位置にかかわらず刺激ー反応の対応性がみられた。正確性要因については提示標的を移動させる条件を加えることで標的が移動しない条件の変動誤差に対応性がみられた。これは、標的移動条件が加わることで無意識的制御が対応性に影響したかも知れない。(2)では両要因とも刺激ー反応の対応性は得られなかった。本研究は、左腕と右腕をそれぞれあるいは同時に用いた目標到達運動制御の非対称性を意識的、無意識的制御の観点から分析し、そのメカニズムを明らかにしようとするものである。この領域の成果は認知心理学や運動心理学の分野における運動制御に大きな貢献をすると考えられる。申請者のこれまでの成果に基づき、左右腕の目標到達運動(腕のリーチングあるいはポインティング)を現時点で可能な複数の分析手法を用いて検討する。平成25年度は、実験1で1標的提示スクリーンに提示された標的(左/右片側1ヶ所)へ左右の示指尖端(あるいはペン先)を一致させる課題を実施する。2左右反応示指に対応した2標的を同時提示し左右示指による同時反応を行い反応時間(前動作時間、動作時間、反応時間)と正確性(位置誤差:X軸、Y軸方向)を測定する予定であった。現在1まで実施て来ているが、2の条件での実施に至っていない。左右反応指の同時反応である本実験課題に入る前に、左右片側指による反応で刺激ー反応の対応性を時間と正確性の要因で確認する追加実験を実施する必要性が生じたためそれを実施した。その結果、追加実験においても反応時間、動作前時間では対応性傾向が確認されたが、正確性については明確な対応性は確認できなかった。学会発表での議論の中で実験参加者の利き目の影響があるのではないかとの指摘があったので、実験参加者の利き目を再調査し、左利き者のデータも追加して分析のやり直しを実施した。その結果、時間については、利き眼にかかわらず標的提示視野と反応指の対応性をほぼ支持する傾向であった。左利き手者については、時間、正確性ともに右手利き者に比べて明確な対応性を示さなかった。以上の追加実験の結果を再分析するとともに、平成25年度の実験1の結果に加えて議論し、研究を進める予定である。本研究は、左右手一側または両側同時に用いた目標到達運動の非対称性を分析し、そのメカニズムを明らかにしようとしたものである。申請者のこれまでの成果に基づき、左右手の目標到達運動を現時点で可能な分析手法を用いて検討した。これまでに、左/右それぞれに1標的ずつ提示して左/右どちらか一側手反応と標的を同時提示して両側手同時反応の検討をした。その結果、一側手反応と両側手同時反応の結果が異なり、一側手反応では刺激ー反応の対応性をほぼ支持したが両側同時反応では時間要因における刺激ー反応の対応性を支持しなかった。両側手同時反応による課題の難度や意識の分散が両手の運動制御に意識下レベルで影響したかもしれない。提示標的の大きさを微妙に変化させた一側手反応実験の結果、動作前時間については2次の交互作用の傾向が得られ、直径9mmの標的条件に刺激ー反応の対応性がみられた。左視野では左手、右視野では右手の時間が短い傾向を示した。動作時間と反応時間については、標的の大きさにかかわらず刺激ー反応の対応生がみられた。正確性については、提示視野や反応手に左右差が得られ反応時間とは異なる結果であった。X軸誤差については、右提示視野と中央提示において反応手間差が得られ、左手誤差が小さい結果であった。Y軸誤差については、左視野提示において反応手間差が得られ、左手の誤差が小さい結果であった。いずれにしても標的提示視野と反応手間の明確な対応関係は得られず、その点では片手反応の結果と同じであった。提示標的の大きさを気づかないほど微妙に変化させた一側手反応実験のX軸誤差については、反応手にかかわらず右よりも左提示視野の誤差が小さく、右提示視野では左より右手の誤差が大きい傾向を示した。提示標的の大きさの明確な違いが刺激ー反応の対応性に影響する傾向が一部ではあるがみられ、今後の実験やデータの分析結果に期待したい。本研究は、2013、2014と実施してきた左右手一側または両側手を同時に用いた目標到達運動における刺激と反応(時間と正確性要素)の対応性の成果を踏まえ、課題提示条件を変えて追加実験を実施し、腕目標運動の左右差が生じる心理的メカニズムを検討しようとしたものである。昨年度までに、左/右視野に1標的ずつ提示して左/右どちらか一側手反応と両側手同時反応の検討をした。これまでに、左/右それぞれに1標的ずつ提示して左/右どちらか一側手反応と標的を同時提示して両側手同時反応の検討をしたが、一側手反応と両側手同時反応の結果が異なった。

また、標的の大きさを微妙に変化させた一側手反応実験の結果では動作前時間について直径9mmの標的において刺激ー反応の対応性が得られたが、不十分な結果であった。そこで、本研究ではさらに標的の大きさを微妙に変化させた追実験を実施したが、標的の微妙な大きさの違いによる影響は得られず、動作時間や反応時間については大きさにかかわらず刺激-反応の対応性が得られた。正確性については、反応手や標的の大きさにかかわらずX軸誤差が左提示視野において小さくなる結果であった。従って、これまでの結果をまとめると、刺激と反応の対応性は、動作時間と反応時間については提示標的の大きさにかかわらずみられるが、動作前時間にはみられなかった。正確性についても、提示標的の大きさの違いによる影響はみられなかった。画像の動作分析が遅れているが、現在までの結果は、反応手の動作空間での動きが標的提示空間(左/右)によって異なる可能性がある。今後の追加実験やデータの分析結果に期待したい。平成26年度は、予定していた実験2を実施することができたが、平成27年度は実験条件に使用する提示標的の大きさや標的を移動させるためのプログラムの変更に手間取ったり、実験2の追加実験などを行ったために27年度予定の実験が少し遅れている。現在、変更したプログラムを用いた実験3がほぼ終わったところである。最終年度に遅れているデータの分析や必要があれば追加実験を実施していく予定である。本研究は、これまでに実施してきた左右手一側または両側手を同時に用いた目標到達運動における刺激と反応(時間と正確性要素)の対応性の成果を踏まえ、必要ならば課題提示条件を変えて追加実験を実施し、腕目標運動の左右差が生じる心理的メカニズムを総合的に検討、考察したものである。昨年度までに、左/右視野に1標的ずつ提示して左/右どちらか一側手反応と両側手同時反応の検討や標的の大きさや提示位置の違いによる検討をした。その結果、一側手反応と両側手同時反応の結果が異なり、一側手反応では刺激ー反応の対応性をほぼ支持したが両側同時反応では支持しなかった。また、時間要因の刺激ー反応の対応性は比較的強固であるが、正確性については標的の大きさや提示位置の違いによる対応性への影響は支持しなかった。そこで、今年度は提示後に標的を移動させる試行を加えて移動させない条件との比較を行い、標的追従の修正動作による刺激ー反応の対応性への影響や標的移動試行を加えることによる標的固定条件の対応性への影響を検討した。標的追従の修正動作による刺激ー反応の対応性への影響は、時間要因、正確性要因ともに刺激ー反応の対応性は観察できず標的移動の影響も確認できなかった。標的移動試行を加えることによる標的固定条件の対応性の分析では,時間要因については、動作時間と反応時間において先行報告にみられた対応性傾向が観察された。また、先行報告ではほとんどみられなかった正確性要因については、x軸方向の変動誤差(VEx)に刺激ー反応の対応性傾向が得られた。これらの結果は、標的移動試行が標的固定条件での目標到達運動の無意識的な制御に影響する可能性を示唆していると考えられる。今後、明確に意識レベルには上がってこない実験条件を整えて検討する必要があると考える。本研究は、左右手目標到達運動制御の非対称性を意識的、無意識的制御の観点から分析した。実験は、(1)左右半視野提示した視覚目標に対してそれぞれ素早い左右反応手目標到達運動を行う課題、(2)左右半視野提示した視覚目標に対して両手同時目標到達運動を行う課題を用いて行った。
X線無所見扁平上皮癌の自然史および、これを決定する染色体・遺伝子ファミリー解析

検診の喀痰細胞診でチェックされ、胸部X線無所見肺癌の診断が得られながらも、治療不可能あるいは治療拒否の症例について、その自然史を調査した。約1/3の症例は臨床的な自覚症状無く、かつ胸部異常陰影も呈さず経過していた。残りの症例は、4-5年以内に胸部X線で腫瘤の形成が見られるものが多かった。検診で発見される胸部X線無所見肺癌の一部は、癌により死亡に至らないover diagnosisに相当すると考えられた。胸部X線無所見肺癌における遺伝子変異を検討し、通常の進行扁平上皮癌と比較した。p53のエクソン5-8をトータルシークエンスし、通常の進行扁平上皮癌では従来報告されているミスセンス変異が主に見られるのに対し、胸部X線無所見肺癌ではこれとは異なるタンパクのトランケーションを生じるタイプの変異が約1/3の症例に認められることが確認された。他のバイオマーカーとして、hnRNPB1、MDM2、WAF1、PD-ECGF、Bc12、Baxなどそれぞれに対する抗体を用いて、タンパクの発現を検討した。その結果、hnRNPB1は扁平上皮癌の前癌病変の段階から発現していることが確認された。一方、その他のタンパクの抗体を用いた検討では、前癌病変の段階からclonal growthを示すものは認められなかった。血管新生因子であるマトリックスメタロプロテアーゼ(MMPs)とその抑制因子と考えられているthetissueinhibitors of MMPs (TIMPs)の扁平上皮癌における関与をMMP-2、MMP-3、MMP-9、TIMP-2それぞれに対する抗体を用いて検討した。MMPsの肺扁平上皮癌の発現率は低かったが、TIMP-2の発現率は高く、早期の癌から陽性であった。以上から、肺扁平上皮癌は発生の段階から進行の緩徐な遺伝子変化を伴った一群が存在し、それらを規定するものは、予後因子や腫瘍マーカーとなりうる可能性があると考えられた。本年度当初の段階で。種々の理由により、治療不可能あるいは治療を拒否した胸部X線無所見の肺扁平上皮癌例の自然史を調査した。全例、喀痰細胞診により、癌の存在が確認された症例で、その後の癌の進展を把握した。その結果、症例によっては、1年以内に癌腫による異常陰影を呈したものも見られたが、異常陰影を呈した症例の多くは4-5年以内に胸部X線写真で腫瘤を形成した。一方、約1/3の症例で臨床的な自覚症状がなく、かつ、異常陰影も呈さない症例がみられた。さらに、死亡した症例でも、最後まで、肺癌の存在が臨床的に問題とならなかった症例の存在した。また、最長で8年間、喀痰中より癌細胞が出現しながらも、臨床症状を示さない症例が存在した。これらのことはover diagnos is biasの関与を示唆する結果となった。これらの特異な臨床経過を示す群と通常の肺癌例とを比較し、その予後や臨床経過を決定する遺伝子・染色体変化を検索することが本研究の目的であり、初年度の計画として、p53の変化について、検討した。これら胸部X線無所見肺扁平上皮癌例において、p53のエクソン5-8の遺伝子変異について、トータルシークエンスで確認し、新たな知見を得た。すなわち、通常の進行扁平上皮癌例では、過去の同様の報告にミスセンス変異が主に見られた。

一方、胸部X線無所見肺扁平上皮癌例では、これらミスセンス変異が約1/3の症例に見られたが、これとは別に、タンパクのトランケーションを生じるタイプの変異が約1/3の症例で確認された。このトランケーションタイプの変異においては、異常タンパクがダイマーを形成できないため、もう、一方の正常のアレル由来のタンパクのみによる正常なダイマーが形成され、結果的にp53遺伝子に異常がありながらも、タンパク質レベルでは、正常の機能を果たしていると推定された。このような変化が、臨床経過の緩序な胸部X線無所見肺扁平上皮癌に影響している可能性が考えられた。本研究の初年度に、種々の理由により、治療不可能あるいは治療を拒否した胸部X線無所見の肺扁平上皮癌例の自然史を調査した。全例、喀痰細胞診により、癌の存在が確認された症例で、その後の癌の進展を把握した。その結果、症例によっては、1年以内に癌腫による異常陰影を呈したものも見られたが、異常陰影を呈した症例の多くは4-5年以内に胸部X線写真で腫瘤を形成した。一方、約1/3の症例で臨床的な自覚症状がなく、かつ、異常陰影も呈さない症例がみられた。さらに、死亡した症例でも、最後まで、肺癌の存在が臨床的に問題とならなかった症例の存在した。また、最長で8年間、喀痰中より癌細胞が出現しながらも、臨床症状を示さない症例が存在した。これらのことはover diagnosis biasの関与を示唆する結果となった。これらの特異な臨床経過を示す群と通常の肺癌例とを比較し、その予後や臨床経過を決定する遺伝子・染色体変化を検索することが本研究の目的であり、初年度の計画として、p53の変化について、検討した。これら胸部X線無所見肺扁平上皮癌例において、p53のエクソン5-8の遺伝子変異について、トータルシークエンスで確認し、新たな知見を得た。すなわち、通常の進行扁平上皮癌例では、過去の同様の報告にミスセンス変異が主に見られた。さらに、2年目にあたる平成13年度には、新たなbio-maekerと思われるhnRNPB1に対する抗体やMDM-2,WAF1 P D-ECGF,VEGF,Bc12,Baxなどに対する抗体を用いて、多角的にこれらの症例における遺伝子・タンパクの発現について検討した。その結果、hnRNPB1は前癌病変の段階から発現していることが確認された。しかし、その染色様式からは前癌病変の段階では、まだclonal gtowthを積極的に示唆する所見は得られなかった。胸部X線無所見肺癌の発生母地とされる、気管支粘膜の異形成において、血管新生の著名な一群が存在することが報告されている。
九州四万十付加体の精密地質構造解析

九州の四万十帯において地質構造に関する新知見を得た.北薩地域では玄武岩,チャート,泥岩からなる地層ユニットが覆瓦状構造を構成している.八瀬尾地域では蛇紋岩小岩体が砂岩・泥岩層の構造上位をほぼ水平に覆っている.長屋山周辺の四万十累層群は西傾斜で西側上位の同斜構造である.徳之島では低角傾斜のレンズ状蛇紋岩体が砂・泥質の変成岩の中に不連続に散在し,西海岸の秋利神川河口では泥質変成岩に厚さ10ないし20cmの粉砕岩脈が貫入している.九州の四万十帯において地質構造に関する新知見を得た.北薩地域では玄武岩,チャート,泥岩からなる地層ユニットが覆瓦状構造を構成している.八瀬尾地域では蛇紋岩小岩体が砂岩・泥岩層の構造上位をほぼ水平に覆っている.長屋山周辺の四万十累層群は西傾斜で西側上位の同斜構造である.徳之島では低角傾斜のレンズ状蛇紋岩体が砂・泥質の変成岩の中に不連続に散在し,西海岸の秋利神川河口では泥質変成岩に厚さ10ないし20cmの粉砕岩脈が貫入している.<九州各地における地質調査の結果>北薩地域の四万十累層群大川層群池之段層を詳しく調査し、内部構造を解析した。池之段層には、玄武岩質溶岩、チャート、および泥岩を基本単位とする地層ユニットが少なくとも4枚あり、それぞれが北北東-南南西の走向で西に高角度で傾斜し(西上位)、全体として南北方向に雁行状に配列していることが明らかになった。雁行状配列の東側は一つの断層に収斂している。池之段層は西側を南にずらすセンスの変位によって形成される覆瓦状構造をなしていると推察される。薩摩半島中央部の四万十累層群に「貫入」するとされている蛇紋岩小岩体の産状を再検討し、蛇紋岩が砂岩層・泥岩層の構造上位をほぼ水平な境界面をもって覆っていることを発見した。「クリッペ」のような構造は薩摩地方の四万十帯では従来は見つかっていなかったものである。境界面そのもめの露出は発見できなかったが境界付近の蛇紋岩の定方位岩石試料を6か所で採取できた。徳之島の中央東部には四万十累層群に「貫入」するとされる超マフィック岩体が存在する。超マフィック岩体の分布域を予察的に調査し、蛇紋岩・かんらん岩は、既存の地質図に描かれているように、北北東-南南西に帯状に連続して分布するのではなく、塊状の小岩体が不連続に散在していることがわかった。<小型精密切断機の導入効果>「小型精密切断機」は、スライドガラスに接着した岩石スラブを少ない切りしろで半自動的に薄切できるので、岩石試料の薄片作成の効率が大幅に向上した。北薩地域の四万十累層群大川層群池之段層の地質構造を調査した。前年度の調査範囲を南方に拡張し、池之段層分布域の北部(野田)に認められる覆瓦状構造(玄武岩、チャート、および泥岩または砂岩を基本単位とする北東走向の地層ユニットが全体として南北方向に雁行状に配列)が約6km南方の池之段まで連続することが明らかになった。薩摩半島八瀬尾地域の四万十累層群の砂岩層・泥岩層を構造的に覆う蛇紋岩体の周辺を調査するとともに、前年度に採取した定方位試料を樹脂で固定して切断研磨し、内部の変形構造を観察した。その結果八瀬尾地域の蛇紋岩体は、ほぼ水平または浅い皿状の構造的境界面を介して西傾斜の堆積岩層の上に載っていることと、蛇紋岩体基底部の変形構造は構造上位を相対的に東に変位させるような勢断センスに対応することがわかった.これらの観察結果は蛇紋岩体が西側から移動してきて四万十累層群の上に定置したクリッペであることを示している。前年度の予察的調査の結果に基づいて、対象地域を超マフィック岩体の分布域に絞って重点的に調査し、蛇紋岩・かんらん岩は、既存の地質図に描かれているように、北北東-南南西に帯状に連続して分布するのではなく、砂質および泥質の変成岩の中に低角傾斜のレンズ状の小岩体として不連続に散在していることが明らかになった。この構造は、前述した八瀬尾地域の蛇紋岩体の構造と対比できる可能性がある。北薩地域の四万十累層群大川層群池之段層の地質構造を明らかにした.同層分布域北限の尾毛無から南方の池之段に至るまで,玄武岩,チャート,泥岩,および砂岩の組み合わせを基本セットとする地層ユニットが全体として南北方向に雁行状に配列し,覆瓦状構造を構成している.これに加えて,田代と鶴河内の間に衝上断層帯における「ポップアップ」に相当する構造を認識できた.

田代付近に北西走向で右横ずれのback-thrust,鶴川内付近に北東走向で左横ずれのout-of-sequence thrustがあり,これらに挟まれた横向きV字型の領域がその北側と南側に比べて西に張り出している.覆瓦状構造とポップアップは,北向きに沈み込むプレート境界で成長した付加体の内部で形成され,それが西側を上位に横倒しになって断面が露出したものと解釈できる.南西諸島徳之島の西海岸で特異な貫入岩脈を発見した.秋利神川河口の砂浜の汀線付近に周囲長約30m,地上高約3mの岩塊がある.この岩塊は泥質片岩層を主体とし,少なくとも3枚の砂質片岩層を含む。泥質片岩層の面構造の走向傾斜はN27°E, 20°Nである.この岩塊の北東面から東面に約12mに渡って母岩由来岩片と黒色の基質からなる脈状岩(暗色脈)が露出している.暗色脈は厚さが1020cmであり,概ね泥質片岩層と砂質片岩層の境界面に平行に貫入しているが,砂質片岩層を分断して階段状になっている部分や,枝分かれして尖滅していることがある.岩片の長径は脈の延長方向と平行に配列しているものが多い.これらの産状から暗色脈は母岩が粉砕されて流動化して形成されたものであると考えられる.溶融したことを示す組織は確認できていないが,シュードタキライトである可能性もある.粉砕岩脈(またはシュードタキライト)は,四万十付加体形成時またはその後の地震に伴って形成されたと考えられる22-23年度の野外調査および岩石試料解析により、北薩地域、八瀬尾地域、および徳之島中央部の地質構造が既存の報告と大きく異なっていることが判明した。さらに八瀬尾地域については本研究による直接的な成果を論文として公表できた。科学研究費補助金申請時の計画にあげていた九州東部の調査は行っていない。前述した地域の研究を優先する必要があったので、研究計画を部分的に変更したものである。24年度が最終年度であるため、記入しない。北薩地域および徳之島中央部の地質構造を重点的に研究する。日帰りが可能な(実質的に旅費が不要)北薩地域は、野外調査と岩石試料の記載を平行して実施する。徳之島については採取済み岩石試料の変形構造解析を行う。
脆性金属間化合物の低温変形能とその工学的応用

近年,新たに見出した脆性材料における低温変形能および界面誘起塑性変形能はバルクでは観察できない新規な力学物性である.本研究では,「転位の核生成にはある臨界体積が必要で,その大きさはバルクでの変形開始温度および低温変形能が出現する臨界試料サイズと相関がある」との仮説のもと,マイクロピラー圧縮試験によりCRSSおよびその歪速度依存性の試料サイズ依存性を実測することを通じて,転位生成の臨界核サイズ,界面誘起塑性変形能発現の脆性相臨界厚さおよびその相関関係の解明を試みる.Fe2Nbラーベス相単結晶のミクロンサイズの試験片で見出されている室温での変形現象について、「転位の核生成にはある臨界体積が必要で、その大きさはバルクでの変形開始温度および低温変形能が出現する臨界試料サイズと相関がある」との仮説に基づき、転位生成の臨界核サイズ、界面誘起塑性変形能発現の脆性相臨界厚さおよびその相関関係の解明を試みる。バルクでは脆性破壊を示す金属間化合物でも微小体積では転移が活動するという新しい現象の原理の実験的解明を目指す研究であり、金属分野における結晶構造物性に関する新たな学問分野の構築が期待できる。本研究により得られる成果は、鉄鋼材料の脆化抑制やさらなる高強度化などへとフィードバックされることで、実用材料の高性能化も期待できる。近年,新たに見出した脆性材料における低温変形能および界面誘起塑性変形能はバルクでは観察できない新規な力学物性である.本研究では,「転位の核生成にはある臨界体積が必要で,その大きさはバルクでの変形開始温度および低温変形能が出現する臨界試料サイズと相関がある」との仮説のもと,マイクロピラー圧縮試験によりCRSSおよびその歪速度依存性の試料サイズ依存性を実測することを通じて,転位生成の臨界核サイズ,界面誘起塑性変形能発現の脆性相臨界厚さおよびその相関関係の解明を試みる.
中世前期掛幅縁起絵の造形と技巧

主な成果としては、20152018年度に解体修理が実施された山梨県立博物館所蔵「法然上人絵伝」二幅について、修理から得られた技法材料に関する知見をまとめ、修理報告書に寄稿した。同作については2016年の修理経過調査に参加し、旧裏打ち紙除去後の裏面から作品を観察することができたが、本年度は修理後の作品を博物館で熟覧することができた。また、修理時に実施された近赤外線撮影や透過光観察、透過エックス線撮影についても画像資料や修理報告を入手することができたため、作品の制作手法や工程を考察する上で非常に参考となった。報告書では法然上人の事績を示す銘札の彩色材料が二幅で異なることや、画中に描かれる仏像の彩色技法に仏画の技法との共通点が見られる一方で、東大寺大仏部分などには下描き線が見られず、作画の自由度が高いことなど、顕微鏡撮影や赤外線撮影、裏面観察から得られた新知見を中心に報告している。顔料分析は行われなかったため、彩色よりも線描や造形に注目することとなったが、下描き線が描き起こし線に近く、複雑な建物や群像の描写にも破綻がないことから、精度の高い粉本・下図を利用したことが推測された。一方で自然景や霞にはやや緩やかな作画態度が看取され、大画面に多数の説話場面を配する初期の掛幅縁起絵、高僧絵伝の絵作りの手法を考える上でも示唆に富む作品と感じられた。本作以外の作例についても裏面観察や赤外線撮影、絵具の剥落部の観察などを通して下描き線の質の違いに注目することで、転写法や拡大縮小法など粉本の具体的な使用法や、作品の原初性を測る手がかりが得られるのではないかと考え、事例や画像資料を集めている。その他、作品調査や研究協力者から提供を受けた掛幅縁起絵や高僧絵伝、絵巻物などの画像資料の分析を行った。最終年度に中世前期掛幅縁起絵の作画技法に関する論文をまとめるため、準備を進めている。本年度は万福寺旧蔵「法然上人絵伝」の修理後調査に参加し、作品の制作態度や制作者についての考察結果を修理報告書にて発表することができた。本作は中世前期の大画面掛幅絵として重要な作品であり、中世前期の地方寺院で単発的に制作された他の掛幅縁起絵についても下描き線に注目して粉本の使用実態について考察を進めている。最終年度には中世前期掛幅縁起絵の造形と技巧に関して、中世やまと絵系絵画の中での位置づけを再確認し論文としてまとめる計画であり、そのための資料収集や作品調査等、論文執筆のための準備を進めることができた。現在、本法寺蔵「法華経曼荼羅図」の高精細画像および赤外線撮影画像を利用し、具体的な制作手法について、粉本・型の使用状況や全体の構成手法に関して調査を進めている。研究成果は2019年9月開催の同作に関するシンポジウムにて口頭発表を予定している。最終年度は本法寺本や万福寺旧蔵絵伝をはじめ、赤外線画像を入手することができた掛幅縁起絵を中心に作画工程や制作姿勢の分析をまとめ、論文発表を行う計画である。初年度は、作品調査や、研究協力者から提供を受けた掛幅縁起絵や高僧絵伝、絵巻物などの画像資料の収集・整理を重点的に進めた。特に、甲斐万福寺旧蔵絵伝群については、現在山梨県立博物館が所蔵する「法然上人絵伝」の修理経過調査に参加し、旧裏打ち紙を除去した状態で作品を裏面から熟覧することができたため、制作手法や工程、補彩・補筆箇所などについて再考することができた。今後、絵画制作技法の面から、他の法然絵伝や万福寺旧蔵絵伝と比較した分析結果をまとめる準備を進めている。他作品についても下図線、構図制作から転写・骨描きに至るまでの作画工程に着目して、研究対象である掛幅縁起絵をはじめとした大画面絵画の制作手法を考察したいと考えた。初年度中に論考をまとめるまでには至らなかったが、なるべく多くの作品の下図線を比較するために、美術史研究者から作品のスライドポジフィルムの提供を受け、画像資料のデジタル化に取り組んだ。豊富な作品資料をデジタルスキャンすることでPC画面上での細部比較を効率化することができるため、この作業については継続して進めていきたい。現時点では、下図線と描き起こしがほぼずれることなく、完成形に近い下絵に基づいて描かれているとみられる作品や、転写後に本画の画面上で修正が加えられている作品、あたりをつける程度のラフな下図から制作された作品など、下図線と完成図を観察することで制作手法や制作姿勢をいくつかのパターンに分ける作業を行っており、今後はそうした制作手法と作品の制作背景や使用用途、制作時期、制作地などとの関連性について考察してみたいと考えている。また、掛幅縁起絵に限らず絵巻物や名所絵、肖像画、花鳥画、仏画、水墨画など他の絵画ジャンルについても作画の手法を改めて整理することで、絵画技法史において不明な点が多い中世絵画の制作実態を明らかにしていきたい。作品の原本調査が必要とされる研究課題であるが、山梨県立博物館所蔵「法然上人絵伝」については、作品の解体修補という絶好の機会を得て詳細な観察を行うことができた。また、他の美術史研究者と取り組んでいる科研費研究等でも本課題で研究対象としている中世前期の大画面絵画について原本調査や資料入手の機会に恵まれ、着実に研究資料を蓄積しつつある。

スライド写真を利用した下描きと完成図との綿密な比較事例の集積も順調であり、おおむね計画通りに研究が進展している。本年度は作品調査および研究協力者から提供を受けた掛幅縁起絵や高僧絵伝、絵巻物などの画像資料の収集・整理を重点的に進めた。甲斐万福寺旧蔵絵伝群について、現在山梨県立博物館が所蔵する「法然上人絵伝」の修理経過調査に参加し、同じく甲斐万福寺旧蔵で現在東京芸術大学大学美術館が所蔵する「源誓上人絵伝」の熟覧・撮影調査を実施した。通常撮影に加え赤外線撮影を行い、下図線や彩色で見づらくなった線描を確認することで、同寺旧蔵の「法然上人絵伝」や「親鸞聖人絵伝」との筆致・作画工程・制作姿勢の違いを明らかにすること、また制作年代の再検討を目指している。これまで調査が不十分であった画面最上部の基底材の欠失部分と補筆・補彩についても改めて観察し、最上部が意図的に切り取られた可能性もあることが確認できた。第二幅にあたるシアトル美術館本の不自然な補彩と併せて、今後の検討課題といえる。赤外線画像は画面の黒変が著しい作品等について、図像を判別する目的で観察に用いられることが多いが、下図線の線質や図柄の変更など、作画工程に関わる情報を得るためにも有効であり、今後も資料として積極的に活用していきたいと考えている。その他、20162017年に制作に関わった春日大社の春日厨子絵制作に関して、同社発行『春日』に制作報告文を発表した。春日大社の第60次式年造替を記念して制作された春日厨子の天井および扉絵について、下図作成と彩色補助を担当したもので、御鎮座伝承の絵画化や御旅所をメインモチーフとした春日宮曼荼羅の図案作成に、中世絵画研究の成果を反映させた。本年度は7月に出産のため、6月11月は研究を中断した。12月より研究再開準備支援期間に入ったが、育児の都合上、遠方への出張・作品調査などは難しかったため、日帰りの範囲で実施可能な作品調査や、画像資料の収集・整理を重点的に進めた。当初の研究計画と比べて研究実施時期が多少変動したが、採用中断期間中も前年度までの研究成果発表など、在宅で可能な作業を行うことで、大きく断絶することなく研究に取り組むことができた。分担者として参画する科研費研究など他者との共同研究を通しても研究資料の蓄積を進めており、次年度以降の研究準備を順調に進めることができた。主な成果としては、20152018年度に解体修理が実施された山梨県立博物館所蔵「法然上人絵伝」二幅について、修理から得られた技法材料に関する知見をまとめ、修理報告書に寄稿した。同作については2016年の修理経過調査に参加し、旧裏打ち紙除去後の裏面から作品を観察することができたが、本年度は修理後の作品を博物館で熟覧することができた。また、修理時に実施された近赤外線撮影や透過光観察、透過エックス線撮影についても画像資料や修理報告を入手することができたため、作品の制作手法や工程を考察する上で非常に参考となった。報告書では法然上人の事績を示す銘札の彩色材料が二幅で異なることや、画中に描かれる仏像の彩色技法に仏画の技法との共通点が見られる一方で、東大寺大仏部分などには下描き線が見られず、作画の自由度が高いことなど、顕微鏡撮影や赤外線撮影、裏面観察から得られた新知見を中心に報告している。顔料分析は行われなかったため、彩色よりも線描や造形に注目することとなったが、下描き線が描き起こし線に近く、複雑な建物や群像の描写にも破綻がないことから、精度の高い粉本・下図を利用したことが推測された。一方で自然景や霞にはやや緩やかな作画態度が看取され、大画面に多数の説話場面を配する初期の掛幅縁起絵、高僧絵伝の絵作りの手法を考える上でも示唆に富む作品と感じられた。
脂肪細胞分化を促進するfad104の肺形成における機能の解析

本研究において、脂肪細胞分化を促進するfad104が肺の発生過程において、肺胞上皮II型細胞の分化・成熟にも極めて重要な役割を担うことを明らかにした。さらに、fad104ホモ欠損マウスは骨形成にも異常が見られること、また、fad104が骨分化を抑制する働きを有することを明らかにした。これらの検討により、fad104の肺および骨における機能について極めて有用な知見を得ることができた。申請者らは、脂肪細胞分化初期過程に発現が増加する遺伝子として単離された新規遺伝子fad104のホモ欠損マウスは出生直後にチアノーゼを呈し死亡することから、fad104欠損により肺形成、特に肺胞上皮II型細胞の異常により、出生直後に死亡する可能性が強く示唆されている。しかしながら、fad104がどのようなメカニズムで肺形成に寄与しているかについては不明である。そこで本研究では、肺の形成や肺胞上皮II型細胞の分化におけるfad104の役割と機能メカニズムを明らかとすることを目的とし、検討を行った。まず、出生前であるEl8.5の野生型ならびにfad104欠損マウスから肺を摘出し、肺胞機能に重要な役割を担うサーファクタントタンパク質の発現を検討した。その結果、fad104ホモ欠損マウスの肺では、4種類のサーファクタントタンパク質の発現はいずれも減少していることが明らかになった。次に、肺の発生に重要な転写因子群の発現を検討した結果、fad104欠損マウスの肺ではfoxa2等の発現が減少していた。さらに、電子顕微鏡を用いた観察の結果、fad104欠損肺は、野生型マウスに比べて肺胞上皮II型細胞の分化が未熟であり、かつ、その数も顕著に減少していることが明らかとなった。このことから、fad104は新生児における肺形成、特に肺胞上皮II型細胞の分化に必須な因子であることが強く示唆された。また、肺における機能の検討に加えて、fad104の骨分化に与える影響についても検討した結果、fad104欠損細胞は、野生型細胞に比べて著しく骨分化が促進することを見出した。この結果より、脂肪細胞分化を促進する新規遺伝子fad104は、肺の形成過程にも極めて重要な役割を担うことにより、出生後の生命維持に寄与していること、さらに、脂肪細胞と同じ中胚葉系細胞に属する骨分化も制御することが明らかになった。昨年度の検討において、脂肪細胞分化を促進する新規遺伝子fad104が、新生児の肺胞上皮II型細胞にも多く存在すること、さらに、fad104を欠損した肺では、肺胞上皮II型細胞の分化・成熟が未熟であり、肺胞上皮II型細胞の分化を制御する転写因子群の発現も減少していることがわかった。これらの結果より、fad104は、未分化な上皮細胞から肺胞上皮II型細胞への分化に大きく寄与する因子であることが明らかになった。さらに、fad104ホモ欠損細胞は、野生型細胞と比較し、脂肪細胞分化が抑制される一方で、骨分化が顕著に促進することから、骨分化制御にも重要であることが示唆された。今年度は、培養や遺伝子導入が比較的容易である株化骨芽細胞や、胎児のカルバリア細胞を用いてfad104が機能する分子メカニズムについて解析を行った。まず、fad104欠損および野生型マウスの頭蓋より調製したカルバリア細胞に骨分化誘導剤を添加した結果、fad104欠損マウスでは野生型に比べ顕著な骨分化促進が観察された。さらに、fad104欠損マウスの胎児頭蓋を観察すると、野生型マウスと比較して骨化が進んでいることが明らかになった。これらの結果より、生体内において、fad104は肺形成に加えて、骨形成にも重要な役割を担うことが強く示唆された。そこで次に、アデノウイルスによるfad104過剰発現系を構築し、野生型およびfad104欠損カルバリア細胞にfad104を過剰発現させた。その結果、野生型細胞では骨分化が抑制された。また、fad104欠損細胞にfad104の発現を戻すことによって、fad104欠損により観察された骨分化の顕著な促進作用が消失した。このことから、fad104は骨分化を阻害する機能を有することが示された。さらに、fad104は、骨分化に重要な役割を担うBMP2シグナルを阻害することも明らかにした。BMP2シグナルは、骨分化だけでなく、肺形成にも重要であることから、fad104は肺形成においてもBMP2シグナルを制御する可能性が考えられた。
反射電界型エネルギー分析器による基板入射イオンエネルギー分布の測定

現在産業界で広く利用されているマグネトロンスパッタリング法で酸化物薄膜を作成する際の大きな問題は,基板全体で一様な抵抗率が得られにくいことである.この理由について様々な要因が議論されているが(昔と比べれば随分理解が進んできているが),本当の理由は未だによくわかっていない.本研究では,その問題を解き明かすために,基板に入射する粒子がどこにどれだけどのようなエネルギーで入射するかを、磁石を取り付けた反射電界型エネルギー分析器という比較的安価で簡便な装置を用いて調査する.現在産業界で広く利用されているマグネトロンスパッタリング法で酸化物薄膜を作成する際の大きな問題は,基板全体で一様な抵抗率が得られにくいことである.この理由について様々な要因が議論されているが(昔と比べれば随分理解が進んできているが),本当の理由は未だによくわかっていない.本研究では,その問題を解き明かすために,基板に入射する粒子がどこにどれだけどのようなエネルギーで入射するかを、磁石を取り付けた反射電界型エネルギー分析器という比較的安価で簡便な装置を用いて調査する.
部位特異的な皮膚再生医療に関する研究

メラノサイトは神経堤に由来し、胎生期に背部の神経管から腹側に向かって遊走することが知られているが、その遊走がどのようにしておこなわれているのかはほとんど明らかにされていない。我々は大学倫理委員会の承認のもと、堕胎された胎児の頭部、背部、腹部、足底の4か所から皮膚生検を行い、胎生期のメラノサイトの分化、遊走についてさまざまな解析を施行した。まず、同一個体から得た上記4ヶ所由来の凍結切片を用いてメラノサイトを標識する抗体を用いて免疫染色を行った。初期メラノソームの構成蛋白であるGp100の発現がチロシナーゼ、DCT、MART-1の発現に先行した。また、毛包のメラノサイトは真皮から直接供給されるのではなく、表皮を経由し供給されるということが分かった。また足底では、胎児メラノサイトは汗管開口部にのみ限局して存在しており、悪性黒色腫が皮丘より発症することとの関連性が示唆された。次に胎児メラノサイトを部位別に分離、培養したところHMB-45、αPEP-7h、αPEP-8h、Melan-Aでは染色されなくなり、Nestinでのみ染色されるようになった。しかし成人のケラチノサイト、線維芽細胞との共培養を行うと、HMB-45で陽性に染色されるようになった。培養によって未熟化した胎児メラノサイトがケラチノサイトや線維芽細胞からの何らかの因子により分化成熟したことが示されたが、部位による差異は確認できなかった。さらにマイクロアレイによって4か所の胎児メラノサイトの遺伝子発現解析を行った。その結果、足底由来のメラノサイトとその他の部位のメラノサイトの間で差異を再び認め、そのいくつかの遺伝子(bFGFなど)はウエスタンブロットによる蛋白レベルの解析によっても明らかな差を認めた。マウス胎生期の皮膚形成には上皮系と間葉系との相互作用が重要であることが多数報告されている。我々も表皮のみにカテニンを強制発現させる系を用いて、相互作用の重要性を証明した。(Development 2009)また我々は「ヒト成人においても、上皮間葉系相互作用(真皮線維芽細胞がその上にある上反糸細胞に与える作用)により部位特異性(皮膚のさまざまな部位で性質が異なること)を決定付けていること」を実証してきた。(J Biol Chem 2007; Faseb J 2008)手のひら・足のうらの皮膚は、分厚い皮膚で外からの刺激に強い・毛が無い・色素が薄いという3つの特徴があり、手のひら・足のうらの真皮線維芽細胞で強発現しているDKK1の作用であることを報告してきた。今回は、ヒト胎生期においても上皮間葉系相互作用が重要であり、部位特異性があることを証明するために、中絶胎児より皮膚を4ヶ所(頭部、背部、腹部、足底)から生検し、相互作用を調べた。頭部ではメラノサイトの発現が他部位より早く成熟しており、毛包形成数は頭部、背部、腹部の順で多かった。足底には毛包構造が認められなかっだ。メラノサイトの分布も大きく違っていた。マウスにはない毛包間表皮のメラノサイトも発現を認めた。メラノサイトの数も頭部、背部、腹部、足底の順番に多く認めた。真皮内のメラノサイトは染色した抗体(7種類以上)で殆ど認めることがなかった。今後更に解析を進め、相互作用の部位特異性と皮膚形成メカニズムを解析していく予定である。
コンピュータを応用した摩耗の性状評価による超保存的修復法開発の試み

臼歯部コンポジットレジン修復に際し、予防拡大と称し、健全歯質の多大なる犠牲を強いていた従来の方法と比較して、今回検討を行った歯質保存的臼歯部コンポジットレジン修復法は、歯質の切削量が大幅に減じられたばかりでなく、その修復物の寿命をも改善した。従来の臼歯部コンポジットレジン修復法はその寿命が5年とされているが、今回の方法では最長で7年経過しても良好な状態を維持している。コンピュータによる摩耗量の計測において、小窩裂溝部に塗布されたシ-ラントは経時的に摩耗はするものの、幅薬200mumにまで摩耗が進むと、摩耗の影響を受けにくくなることが判った。しかしながら、窩洞のコンポジットレジン部分は摩耗の影響を受けやすく、経時的に摩耗像が肉眼でも観察できた。コンピュータによる摩耗量の計測は、咬合状態との関係を併せて検討できる利点を有しているが、Occlusal Contact Areaの摩耗が著明であった。従ってBowenらの開発したグラスセラッミックインサートのようなメガフィラーを窩洞部分に応用した、新たなる超歯質保存的臼歯部コンポジットレジン修復法が永久修復へのさらなる一歩を指し示すであろうと推察された。