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標注を中心とした近世詩論の基礎的研究

詩集への注釈の目的が作詩のためのものであるということを考えると、『錦繍段』は遯庵にとって創作する上でも重要な詩集であった。彼の『遯庵詩集』『遯庵先生文集』における詩文には、『錦繍段』の詩句引用が色濃く見られる。のみならず、四度も注釈を施している遯庵にとって、その換骨奪胎は彼自身の注解内容ともまた無関係ではなかった。以下のことが概ね成し遂げられた。まず対象作品を網羅する。詩文に関する近世標注を刊本・写本・版本ともに収集する(計画1)。その上で、近世標注の位置づけを行う。横軸として、近世注釈との詩論の交渉について整理する(計画2)。そこから中国注釈の説と中世との説を判別する。さらに縦軸として、中世注釈と如何なる関係にあるかを分類する(計画3)。加えて、そのことが近世の他のジャンルにどのように派生しているのかの調査を行う(計画4)。祇園南海(延宝四年<一六七六>宝暦元年<一七五一>)が『明詩俚評』(享保六年<一七二一序文)『詩学逢原』(宝暦十三年<一七六三>刊)『南海詩訣』(天明七年<一七八七>刊)において「影写」は顕著であるし、それは日本詩論史上特異でもある。ただ南海詩論においてその「影写」的理論は「影写」という語だけに表出されているわけではない。南海詩論における「影写」的な説は、まず題意を直接言わないことである。さらにその題意を言外に表すということで、その言外に表す題意は、景物だけでなく、作者の意趣も含まれる。その二重構造が、一句中に虚字で結び付けられて直喩表現になったり、実字によって縁語仕立てで構成されたりすると、それは「アイシライ」になる。「影写」説を含めて南海詩論には、典拠を見出すことも事実である。「鏡花水月」「斡旋」という語や理論は中国の詩論に見られるものであり、「アシライ」は室町連歌論に見られる語である。祇園南海の詩文論において、自身の「影写」説を「古人」の言とするだけで、その原拠を明示してはいない。ただ「鏡花水月」に関しては、『唐詩訓解』がその直接の原拠であると考えられる。荻生徂徠についての詩論を展開することができたので、次に具体的な作品における標注についての傾向を示す。時代を遡って、藤原惺窩の注釈態度について解明する。今後は以下のことを解明していく。概ね調査は終了したが、その調査を体系化し、学会で報告する必要があるため。
ＡＬＳ霊長類モデルによる経シナプス逆行性伝播機序の解明

我々はカニクイザル脊髄でヒト野生型TDP-43を過剰発現することにより、世界初の霊長類ALSモデルの構築に成功した。外因性TDP-43は注入側の前角運動神経細胞だけでなく、脊髄対側および頚髄から腰髄、大脳皮質運動野のBetz細胞にまで拡がっていた。このモデルにおけるTDP-43の伝播機序を解明する目的で、pAAV-IRES-GFPベクターでヒト野生型TDP-43とGFPを脊髄で同時に過剰発現させたところ、TDP-43はGFPより広範囲に拡がっていた。TDP-43の脊髄における伝播機序としては、局所細胞間、単一motor column内、異なるmotor column間の3つが考えられた。我々が世界で初めて構築することに成功した世界初の霊長類ALSモデルにおいて、TDP-43の伝播機序を解明する目的で、pAAV-IRES-hrGFPベクターを用いてヒト野生型TDP-43とhrGFPを同日寺に過剰発現させ、脊髄におけるTDP-43の拡がりを解析した。カニクイザル第6頸髄(C6)利き手側の前角細胞付近にflagで標識したヒト野生型TDP-43発現AAVl-IRES-hrGFPベクター(3x 10^<12>vg/ml、5μl)を注入し、完全麻痺となった4週後に解剖し、病理組織検査、PCR解析を行った。GFPの拡がりは注入部位から4髄節レベル以内に留まっていたが、外因性TDP-43の拡がりはC1からL1レベルまで広範囲に及んでおり、後角や中間外側核での発現は稀で、運動神経細胞にほぼ限局していた。垂直方向の拡がりはmotorco lumn内で連続して発現していたが、対側の内側核の発現は認めず、外側核の発現は非連続していた。また、C6のウイルス注入部位付近では神経細胞だけでなく、グリア細胞にもflag-TDP-43の発現を認め、ウイルス濃度の高い部位では局所のグリア細胞間あるいはグリア-神経細胞間での伝播の可能性が考えられた。外因性TDP-43陽性神経細胞の脊髄における伝播は、局所の細胞間での拡がり(local cell-to-cell spread)と、単一motorco lumn内での拡がり(intracolu mnspread)、異なるmotorco lumn間での拡がり(intercolumn spread)の2方向の機序が考えられた。我々が構築した霊長類ALSモデルにおいて、TDP-43の伝播機序を解明する目的で、pAAV-IRES-hrGFPベクターを用いてヒト野生型TDP-43とhrGFPを同時に過剰発現させ、脊髄および脳におけるTDP-43およびリン酸化TPD-43の拡がりを解析した。カニクイザル第6頸髄(C6)利き手側の前角細胞付近にflagで標識したヒト野生型TDP-43発現AAV1-IRES-hrGFPベクター(3x10E12vg/ml、5microliter)を注入し、完全麻痺となった4週後に解剖し、病理組織検査、PCR解析を昨年に引き続き行った。PCR解析では注入部位C6からTh1まではウイルスベクターが確認されたが、C2より高位脊髄および脳、またTh4以下の下位脊髄では検出されなかった。また、抗リン酸化抗体による病理組織解析では、神経細胞核に強染、非連続に分布しており、外因性のFlag-TDP-43はリン酸化を受けていた。続いて、ALS患者脳から蛋白不溶性画分を抽出してサル脊髄に直接注入し、蛋白伝播モデルを構築することを試みた。ALS患者剖検脳前頭葉皮質約0.5gからサルコシル不溶性蛋白画分を抽出し、タグ無し全長TDP-43を発現させたSH-SY5Y細胞に、このサルコシル不溶性画分をトランスフェクションし、細胞から抽出した蛋白画分をイムノブロットすることでシード効果を確認した。続いてカニクイザル2頭に対して麻酔下に椎弓切除術を行い、ALS患者脳および非ALS患者脳から抽出したサルコシル不溶性蛋白画分を第6頚髄の利き手側の前角細胞付近に注入した。麻痺症状は出現せず、注入32週後に解剖し、病理組織学的検査を行ったが、TDP-43の細胞質異常局在やリン酸化の所見は認められなかった。東日本大震災の影響で医薬基盤研究所からのカニクイザルの供給が十分でなく、年末にようやく外部業者から購入することが決まり、手続きに時間を要したため。25年度が最終年度であるため、記入しない。予定通り、ALS患者脳の界面活性剤不溶性蛋白画分の脊髄注入による伝播モデルの構築を目指したい。未だに医薬基盤研究所からのカニクイザル供給が十分とはいえない状況のため、必要に応じて昨年同様に外部業者からサルを購入し、実験を行っていく予定である。
エストロジェン受容体ノックアウトマウスを用いたエストロジエンの心筋保護作用の機序

(目的)前年度までの検討で摘出灌流心モデルを用いてエストロジェンの直接的な心筋保護作用を確認した。また雌性卵巣除去ラットを作製し摘出灌流心モデルを用いエストロジェン機能低下による心筋虚血障害の増悪を確認した。今年度は同モデルを用いて圧負荷肥大心モデルを作成し、in vivoでの心筋障害発生にエストロジェンがどのような影響を及ぼすか検討した。(方法)雌性Wistarラット(生後5週)の卵巣を摘出しエストロジェン機能低下ラットを作製。2週後に同ラット(OVG)および卵巣非摘出ラット(RHT)の左腎動脈を0.4mmクリップで狭窄し腎高血圧性肥大心を作成し心肥大の程度を検討した。また卵巣除去ラットに17βエストラジオールペレットを皮下に植え込み、エストロジェン再負荷ラット(OVE)を作成しエストロジェンの心筋障害軽減作用を検討した。(結果)収縮期血圧はOVPラットで211±11、OVEラットで210±6と差異は認めなかった。拡張期血圧はOVPラットで179±12、OVEラットで164±6と有意な改善が認められた。心重量/体重比は、OVPラットで3.69±0.11、OVEラットで3.73±0.19と有意な差は認めなかった。一方で組織学的な検討によりRHTラットおよびOVPラットで血管周囲を中心とした広範囲な心筋線維化が認められた。OEGラットでは心筋線維化の亢進は認められるものの、血管周囲の心筋線維化の進行は抑制された。また冠血管平滑筋肥厚の進行も抑制傾向にあった。(考察)高血圧負荷による心筋障害の進展において卵巣除去-エストロジェン低下による大きな影響は認められなかった。しかしエストロジェン再負荷による心筋障害の軽減作用、すなわち拡張期圧の低下、心筋線維化の促進抑制作用が認められた。これはエストロジェンによるNO産生亢進とくに内皮系細胞でのeNOSを介した血管拡張作用によることが推測された。目的本年度はエストロゲンが心機能障害の発生に関与するかどうかを明らかにする目的で摘出灌流心モデルを用いて,エストロゲンの心血行動態に与える影響を,好気的灌流あるいは虚血再灌流条件下に検討した.方法1)実験1;30分間の好気的灌流を行い、1uM,10uMの17β-Estradiolを加え,血行動態に与える影響を薬剤非投与群と比較検討.2)実験2;好気的灌流の後、一方向性バルブを作動させることにより拡張期の冠灌流を遮断し10分間の虚血を作成し,20分間の再灌流を行った.虚血負荷を一定にする為虚血中に200bpmのペーシングを加えた.10μM17β-Estradiolを虚血前に投与し心機能に与える効果,再灌流不整脈に対する効果について非投与群と比較検討した.灌流中,心血行動態として大動脈流量、冠灌流量,左室圧を測定し,心電図をモニターした.結果好気的灌流では1μM,10μMの17β-Estradiolは心拍出量,心拍数に影響は与えなかった.

しかし,再灌流後の心拍出量の回復は薬剤非投与群に比較し改善傾向を示した(41.0±9.3,28.1±11.2ml・min-1).再灌流不整脈の発生率、持続時間は薬剤非投与群におい67%,800±253sec(p<0.05vs17β-Estradiol投与群)であった.一方,17β-Estradiol投与群では再灌流不整脈は完全に抑制された.考察エストロゲンの虚血再灌流傷害の抑制をin vitroな系で確認した.エストロゲンはNOによる血管拡張作用や細胞内カルシウムの関与によって心筋保護作用を示す事が考えられている.次年度以降はこれらエストロゲンの心筋保護作用の機序について細胞内Ca変化、脂質代謝といった面からさらに検討を行う予定である.またエストロゲンの心保護作用を卵巣除去モデルラットを用いたin vivoの系で行う予定である.【目的】estrogenの心筋保護作用の機序を解明するため本年度は、卵巣剔出術(OVX)によるestrogen低下ラットを作製し、摘出灌流心法により心血行動態の変化を検討した。また,同ラットにestrogenを再負荷し、心機能がどのように変化するかを検討した。【方法】実験1;雌性SD系ラット(150g)を用い、腹腔麻酔下にて開腹し卵巣を摘出、OVXラットを作製、2週後あるいは4週後に心臓を摘出しWorking heart modeにて灌流し、心筋虚血8分および再灌流20分を行い心血行動態の影響を検討した。実験2;同OVXラットにestrogenペレットを皮下に植え込みestrogen負荷ラットを作製し同様の検討を行った。【結果】再灌流後の心拍出量の回復はコントロール群で虚血前値の95%(2W),91%(4W)であったのに対し、卵巣摘出群では82%(2W),55%(4W)と有意な低下を示した。Sham-operated群では再灌流不整脈を認めなかったのに対して、卵巣摘出群では17%(2W)、50%(4W)の発生率を示した。一方、17β-Estradiol投与群において、虚血再灌流後の心拍出量は虚血前値の97.7±1.8%まで回復したのに対して、卵巣摘出群では55.2±16.2%であった。また、冠動脈灌流量も17β-Estradiol投与群において、虚血再灌流後は虚血前値の93.2±1.7%まで回復したのに対して、卵巣摘出群では75.8±8.5%であった。また、卵巣摘出群における灌流液中のNOxレベルは17β-Estradiol投与群に比較し、有意な低下を示した。そして、再灌流後の心機能の回復の悪化は、NOドナーであるFK409(10uM)投与にて軽減された。【考察】OVXラットにより心機能の低下が認められ、この変化はエストロゲン投与により回復したことよりエストロゲンによる心保護作用をin vitroな系で確認した。そして虚血再灌流時のエストロゲンの心筋保護効果にはNOの関与していることが明らかにされた。次年度以降はこれらエストロゲンの心筋保護作用の機序について細胞内Ca変化、脂質代謝といった面からさらに検討を行う予定である。(目的)前年度までの検討で摘出灌流心モデルを用いてエストロジェンの直接的な心筋保護作用を確認した。また雌性卵巣除去ラットを作製し摘出灌流心モデルを用いエストロジェン機能低下による心筋虚血障害の増悪を確認した。今年度は同モデルを用いて圧負荷肥大心モデルを作成し、in vivoでの心筋障害発生にエストロジェンがどのような影響を及ぼすか検討した。(方法)雌性Wistarラット(生後5週)の卵巣を摘出しエストロジェン機能低下ラットを作製。2週後に同ラット(OVG)および卵巣非摘出ラット(RHT)の左腎動脈を0.4mmクリップで狭窄し腎高血圧性肥大心を作成し心肥大の程度を検討した。
現代企業の製品政策についての理論的・実証的研究

現代マーケティング競争行動空間の下での製品政策の意義と展開についての理論的・実証的研究を目的として、以下のような研究を行ないかなりの成果をえた。1製品が重要な戦略変数となっていることの歴史的含意を考察するとともに、製品政策の競争行動的意味合い、および他のマーケティング変数との関連について検討した。2経済学の領域で製品や品質がどのように扱われてきたかについて、チェンバリンやアボットの先駆的業績や複数製品企業間の製品競争についての最近の業績について検討を加えてきた。3製品政策の展開により、マーケティングは企業の諸活動の総合としての性格を濃くしてくる。したがって、マーケティング,生産,研究開発の間の機能的関係を明確に分析することが不可欠の課題となるが、それへの接近方法について検討を加えてきた。4製品差別化,市場細分化,製品多様化,製品陳腐化など、製品政策の主要な形態と各形態間の関係について検討してきた。5先年、我々はわが国の大企業を対象にして「企業行動調査」を実施したが、上記1,3,4,の視点からその結果を検討・分析してきた。そしてその一部を『現代日本大企業の行動様式』(山口経済研究双書第23集)の中で報告してきた。詳細な分析を継続中である。6次年度以降に予定している「現代企業の製品政策の形成と展開」についての本格的な実証研究のための準備をも併せて行なってきた。この研究でえられた成果をふまえて、製品政策を統合的に説明する分析枠組の構築をめざしてゆく。
非拡大写像の不動点集合上の最適化と最適信号推定・設計問題への応用

本研究では,多様な先験情報を柔軟に援用しながら"信号処理結果の最適性"を保証する新しい"集合論的信号推定法"としてヒルベルト空間で定義された非拡大写像族T_ι(ι∈I)の共通不動点集合F:=∩_<ι∈I>Fιx(T_ι上で凸関数【horizontally divided circle】の最小化を実現するハイブリッド最急降下法を提案し、これを実際の信号処理問題へ応用している。ハイブリッド最急降下法は、回路とシステムに関する最大の国際会議ISCAS'99(Florida)の中で招待講演となったように信号処理分野で"新しい逆問題の解法アルゴリズム"として注目されており、2000年3月に世界中から選ばれた38名の数学者・工学者・計算機科学者・数理経済学者が集う非線形解析のワークショップ(主催:Institute of Advanced Studies in Mathematics,TECHNION,Israel)でも招待講演の栄誉を得ており、今後の応用分野の拡大が期待されている。このようにハイブリッド最急降下法は多くの信号処理問題を解決する汎用ツールとなっているが、これまでは主に、(1)準完全再構成型直線位相フィルタバンクの最適設計問題、(2)ブラインド最適画像復元問題、(3)入力に最も近い記憶パターンを想起する連想記憶ニュートラルネットワークの構成問題、への応用を中心に検討した。以下特に(2)への応用例を具体的に報告する。画像信号の観測過程では線形劣化歪(Point Spread Function)と加法雑音の影響を受けるため、観測信号から先験情報を用いて真の信号を推定復元する必要となる。特に、生体信号や宇宙空間信号などを観測の対象とする場合、線形劣化歪を既知とする古典的画像復元技術の仮定はほとんど成立しないため、真の信号と線形劣化歪の双方に関する部分先験情報を用いて真の信号を推定する"ブラインド画像復元システム"の実現が重要な課題となっている。ブラインド画像復元技術の高性能化成功の鍵は線形非線形の形で表される多様な先験情報を如何に有効利用できるかにかかっている。本研究では(1)画像のエッジ情報を保ったまま加法雑音の影響を抑える"(非線形)ε分離プリフィルタ"、(2)すべての先験情報を可能な限り同時に満足するよう設計された線形劣化歪の除去用"線形復元フィルタ"という2段階の信号処理システムによってこれまでのブラインド画像復元技術の性能が飛躍的に向上可能であることを明らかにしている。まず、(i)真の画像信号値の非負値性、(ii)被写体を取り囲むおおまかな領域("サポート"と呼ぶ)、(iii)サポート外での背景画像信号値、という現実的な先験情報を最も効果的に反映する線形復元フィルタの設計問題を"非拡大写像の不動点集合上の凸関数最小化問題"として定式化し、これを申請者らが提唱する"ハイブリッド最急降下法"によって解決している。次にε分離フィルタの併用によって加法雑音の影響にロバストな高性能ブラインド画像復元システムが実現されることを示している。本研究では,多様な先験情報を柔軟に援用しながら“信号処理結果の最適性"を保証する新しい“集合論的信号推定法"としてヒルベルト空間で定義された非拡大写像族T_i(i∈I)の共通不動点集合F:=∩_<i∈I>Fix(T_i)上で凸関数Θの最小化を実現するHybrid Steepest DescentMethodを提案している。本手法は、これまで実現が困難視されてきた(1)“凸集合族S_i(i∈I)が充足不能(S:=∩_<i∈I>S_i=φ)な場合には,有限個の集合Iに対して,Sの最良近似点集合(S_0上で集合S_i(i∈I\{0})への距離の2乗和を最小とする点の集合)でΘを最小化する並列算法",(2)“凸集合族S_i(i∈I)が充足可能(S:=∩_<i∈I>S_i≠φ)な場合には,可算無限個の集合Iに対して,S上でΘを最小化する超並列算法"の具体的な構成法を与えており、多くの信号処理問題を解決する汎用ツールとなることが期待されている。具体的には、これまで未解決であった以下の諸問題が、本手法を利用することによって初めて解決されている。(a)凸制約一般化逆写像の逐次最良近似問題:この問題は、多くの信号画像推定問題を統一的に定式化する極めて重要な問題であるが、これまで、強収束性を保証する具体的な算法は知られていなかった。本研究では、Hybrid Steepest Descent Methodによって、この問題が直ちに解決されることを明らかにしている。(b)最大許容リップル条件を満たす多次元ディジタルフィルタの最小2乗設計問題:遮断域のスペクトルのピークを許容値以下に抑えながら、そのエネルギーをも最小化する最適フィルタがHybrid SteepestDescent Methodの適用によって、直ちに設計できることを示している。本手法は、完全再構成条件を満たす直線位相フィルタバンクの設計問題にも同様に応用可能である。(c)ブラインド最適画像復元問題:画像信号値の非負性と背景画像値のみを本質的な先験情報とし、劣化画像から真の画像を推定するブラインド画像復元問題は、劣化要因の同定が困難である生体画像処理や宇宙画像処理の分野で極めて重要である。

本研究では、この問題を集合論的信号推定問題として定式化し、優れた画像復元性能を実現する最適復元フィルタが、Hybrid Steepest Descent Methodによって直ちに構成できることを示している。(d)入力に最も近い記憶パターンを想起する連想記憶ニューラルネットワークの構成問題:ホップフィールド型のニューラルネットワークが、連想記憶システムの機能を実現する現象はよく知られているが、入力から最も近い記憶パターンを想起するニューラルネットワークの構成問題は未解決であった。本研究では、Hybrid Steepest Descent Methodの動作を実現するネットワーク構成によって、この問題が解決されることを示している。本研究では,多様な先験情報を柔軟に援用しながら"信号処理結果の最適性"を保証する新しい"集合論的信号推定法"としてヒルベルト空間で定義された非拡大写像族T_ι(ι∈I)の共通不動点集合F:=∩_<ι∈I>Fιx(T_ι上で凸関数【horizontally divided circle】の最小化を実現するハイブリッド最急降下法を提案し、これを実際の信号処理問題へ応用している。ハイブリッド最急降下法は、回路とシステムに関する最大の国際会議ISCAS'99(Florida)の中で招待講演となったように信号処理分野で"新しい逆問題の解法アルゴリズム"として注目されており、2000年3月に世界中から選ばれた38名の数学者・工学者・計算機科学者・数理経済学者が集う非線形解析のワークショップ(主催:Institute of Advanced Studies in Mathematics,TECHNION,Israel)でも招待講演の栄誉を得ており、今後の応用分野の拡大が期待されている。このようにハイブリッド最急降下法は多くの信号処理問題を解決する汎用ツールとなっているが、これまでは主に、(1)準完全再構成型直線位相フィルタバンクの最適設計問題、(2)ブラインド最適画像復元問題、(3)入力に最も近い記憶パターンを想起する連想記憶ニュートラルネットワークの構成問題、への応用を中心に検討した。以下特に(2)への応用例を具体的に報告する。画像信号の観測過程では線形劣化歪(Point Spread Function)と加法雑音の影響を受けるため、観測信号から先験情報を用いて真の信号を推定復元する必要となる。特に、生体信号や宇宙空間信号などを観測の対象とする場合、線形劣化歪を既知とする古典的画像復元技術の仮定はほとんど成立しないため、真の信号と線形劣化歪の双方に関する部分先験情報を用いて真の信号を推定する"ブラインド画像復元システム"の実現が重要な課題となっている。ブラインド画像復元技術の高性能化成功の鍵は線形非線形の形で表される多様な先験情報を如何に有効利用できるかにかかっている。本研究では(1)画像のエッジ情報を保ったまま加法雑音の影響を抑える"(非線形)ε分離プリフィルタ"、(2)すべての先験情報を可能な限り同時に満足するよう設計された線形劣化歪の除去用"線形復元フィルタ"という2段階の信号処理システムによってこれまでのブラインド画像復元技術の性能が飛躍的に向上可能であることを明らかにしている。まず、(i)真の画像信号値の非負値性、(ii)
新しい自動微分と計算ファイナンスへの応用

近年、自動微分を用いた金融派生商品の価格感応度分析やリスク管理の効率化が計算ファイナンスの領域、さらに金融実務で注目されている。金融実務における自動微分の活用は画期的であるといえるが、一方現在用いられている標準的な自動微分の方法は数値計算の観点で見れば収束そのものが速い方法であるとは言えない。より高速な計算が要求される金融実務において自動微分を有効に活用することを目的とし、本研究では「自動微分の高速化」を可能にする新しい理論と方法を構築する。ファイナンスモデルに本研究の方法を応用し、既存の方法に対する優位性を確認する。
アジア型メインストリートの構成と屋台・露店の再評価

ソウル、釜山、上海、香港、ジョグジャカルタ、マラッカ、バンコク、福岡等のアジアの都市での現地調査を通じ、欧米都市とは異なる近代化の過程を経て形成されたアジア型メインストリートの空間構成上の特性と都市の活性化や賑わい創出に供する仮設的要素の役割を整理すると共に、屋台・露店等の仮設的な要素で賑わいを創出しているメインストリートにおける仮設要素の役割や公共空間の利用と管理運営上の課題を明らかにした。平成18年度は、基礎的なデータの整理とアジアの2都市おける現地調査を実施し、下記の成果を得た。1.メインストリートの類型と基礎データ整理アジアの主要都市の地図資料や観光情報を収集し、観光情報において一般に掲載されている街路を都市を代表するメインストリートとして定義し、文献調査に基づき、その都市構造上の位置づけや立地特性などの整理を行ない、類型化を試みた。その中から、アジア都市を代表するメインストリートとして、ソウル、上海の2都市のメインストリートを選定して下記の現地調査を実施すると共に、既往研究で取り上げた天津市の商業空間に関する追跡調査と中国全般の商業の動向を調査し、整理した。2.ソウル市のメインストリートと屋台・露店に関する調査ソウル市での屋台・露店が立ち並ぶメインストリートとして鐘路を選定し、平成18年11月に役所、全国露天商組合等へのヒアリング調査と鐘路における現地調査を実施した。街路空間や屋台・露店の測量、来街者へのアンケート調査、ビデオ・写真撮影による観察を行い、その結果の分析を進め、鐘路の空間構成や歩行者行動や密度の特性を明らかとした。仮設的な屋台・露店は、一般に道路占用許可との問題を抱えるが、鐘路では暫定的措置として時間帯を限定して許可され、屋台・露店も組織化され、管理・運営の向上が図られている点を明らかにした。3.上海市のメインストリートと歩行者専用道路の環境に関する調査上海市では、歩行者専用道路として有名な南京路を対象に、平成18年12月に現地調査を行なった。区役所や専門家へのヒアリングに基づき、歩行者専用化の考え方とデザイン方針、管理運営方法を整理した。また、現地測量を実施し,配置構成を図面化して、来街者アンケート調査、ビデオ・写真による歩行者分布変化の記録等を行い、その結果を分析し、歩行者空間の時間変化や空間内でのアクティビティの実態を明らかにした。平成19年度は、4つの課題に関する現地調査と文献調査を実施し、下記の成果を得た。1.香港におけるメインストリートと屋台・露店に関する調査香港での屋台・露店が立ち並ぶメインストリートとして九龍地区のテンプル・ストリートを選定し、平成19年711月にかけて役所、現地の測量調査、ビデオ等の記録調査を実施した。街路空間の平面構成、断面構成と屋台・露店の位置、来街者へのアンケート調査、ビデオ・写真撮影による記録を行い、その結果の分析を進め、密度分布や歩行者行動の特性を明らかとした。一見無秩序に見える仮設的な屋台・露店の配置構成に一定の秩序がある点や、行政による管理・運営の向上が図られている点を明らかにした。2.マカオにおける植民地時代の街路構成に関する調査マカオの都心部における植民地時代に形成された街路の断面構成の変化と特徴を現地での測量調査により明らかにした。3.福岡市における屋台景観の評価に関する分析福岡市の屋台景観の写真画像を用いて、一対比較法との手法により披見テストを行い、屋台の構成、形態、設えの違いによるストリート景観の印象に及ぼす影響を明らかにした。4.メインストリート上でのモールファーニチャ事業に関する研究近年、先進国の大都市都心部での広告付きバス停の普及を契機として、広告事業によるメインストリート上での広告付きサイン等の運用の検討が進んでいる。本研究でも仮設的な工作物の一種として捉え、ストリートを構成する景観要素としての設置可能性や制度上の課題を文献調査等により考察した。屋台・露店が集中するアジアの都市における現地調査の実施と共にロンドン、アムステルダムにおいてアジアの植民都市に関する文献調査を中心に行い、タイプの異なるアジア都市のメインストリートの実体の把握と特性を明らかにした。特に、マレーシア・マラッカ市と韓国・釜山市における現地調査を行い、それぞれの都市の代表的な屋台・露店で賑わうメインストリートの実態把握と仮設物で構成される道路空間構成の分析を行った。また、以前に現地調査を行ったタイ・バンコク市、インドネシア・ジョグジャカルタ市のメインストリートの運営に関するインタビュー調査等の補足調査を行い、メインストリートの運営方法と課題に関する整理を行なった。マラッカは、世界文化遺産に指定されている旧市街地内のメインストリート(ジョンカー・ストリート等)が週末の18:000:00の間に歩行者天国化され、地元コミュニティの委員会が管理運営するマーケットに屋台・露店が並ぶが、そこでのビデオ撮影、道路空間の測量調査、利用者と出店者に対するアンケート調査等を実施し、利用実態、空間構成の時間変化、密度等の実態を明らかにし、運営主体へのインタビュー等により課題を明らかにした。釜山の調査では、国際市場周辺の旧市街地における屋台・露店が集中する道路における現地調査を実施した。

観光客のみでなく、住民が利用する商店街の内部に午後の時間帯になると屋台・露店が集中し、道路上が高密度に変化する変容過程についてビデオ撮影、実測調査により明らかにし、利用者や屋台営業者に対するインタビュー調査により、運営の実態や課題を明らかにした。本調査では、植民都市等として近代化の過程の中で整備が進んだ道路基盤整備や伝統的建築物を活かし、屋台・露店の仮設的な要素取り入れながら空間を変容させ、柔軟な運営による課題への対処を進めながら賑わいを創出してきた特性を明らかにした。
Webサービスにおけるユーザ視点のサービス品質評価環境の構築

平成21年度までに行ったユーザ視点のWebサービスの品質評価方法の検討結果を基に、平成22年度は、対象とするWebサービスをオンラインショッピングサービスに限定し、より詳細な評価を行った.本研究では、ユーザ視点のWebサービス品質評価尺度として、ユーザビリティを考えているが、Webユーザビリティの評価尺度・方法は明確に定義されていない。本研究では、ISO勧告に基づくユーザビリティと、ヤコブ・ニールセンのものの二つを対象とした。前者を用いた評価においては、生体信号である筋電位信号を用いた評価を行った。また,後者を用いた評価においては、Webサービスを利用する際の問題点に対する深刻度を評価尺度として、評価を行った。評価実験においては通信品質を変化させた状態で、被験者に実際のWebサービスを利用させ、各評価方式でそのサービス品質の測定を行った。実験結果から、オンラインショッピングを扱うWebサービスにおいて、通信品質がWebユーザビリティに及ぼす影響を定量的に評価することができ、この評価結果の示す意義は大きいものと考えられる。今後,ますますWebサービスへの依存度が大きくなる中で,Webサービスの設計において通信品質が考慮すべき要因の1つであることを示したことは、社会的な意義も大きいものと考えられる。なお、本研究結果の一部は、国際会議IEEE/IPSJ SAINT Workshop C3NETで1件、電子情報通信学会インターネットアーキテクチャ研究会において1件、同ソサイエティ大会において2件、同総合大会で1件の発表を行った。初めに,WebサービスにおけるユーザレベルQoS,特に主観品質の測定を主とした評価環境を構築した.この評価環境は,被験者が評価を行うための空間(評価用スペース)と,評価実験の監視・制御を行うための空間(監視・制御用スペース)とから構成される.評価用スペースには,被験者が評価を行うための機材と,評価時の評価者の振舞いを観察するための監視用ビデオカメラを設置した.監視・評価用スペースには,評価用スペースからの監視映像を記録するためのPC,通信品質を制御するためのPC,および,評価環境内のトラヒックを解析するためのPCとこれらを接続するためのポートミラーリング及びVLAN機能を有するスイッチングハブを設置した.次に,主観品質を含むユーザ視点のサービス品質評価方法の検討を行った.ここでは,ISO勧告に基づいた評価を検討した.次に、対象となるユーザ視点のQoSを評価するための尺度の検討を行った.特に,本研究ではISO勧告で定義されたユーザビリティに関する尺度により,Webサービスのサービス品質評価を検討した.検討を行った評価方法および環境において,検討した評価方法に基づき、実際にWebサービスにおけるユーザ視点のサービス品質の評価のための予備環境を構築した.ネットワークの品質制御方法として、ネットワークエミュレータであるdummynetを用い、ユーザビリティ評価用ソフトとして、静岡工業技術センターで開発されたObservant Eyeの利用を試みた。本予備環境を利用し、簡単な評価実験が行えることを確認できた。平成20年度までに確立した、ユーザ視点のWebサービスの品質評価方法により、平成21年度は、実際の被験者を用いた評価実験を行った。本研究における評価方法は、ユーザ視点のサービス品質評価尺度として、ユーザビリティを考えるものであり、Webユーザビリティの評価方法としては、ISO勧告に基づくもの、ヤコブ・ニールセンのユーザビリティ評価方法に基づくもの、生態信号を用いるものの三つを採用した。生態信号としては、筋電位信号を用いた。被験者は、20代の男女32名とした。実験結果から、Webサービスにおけるユーザ視点のサービス品質の評価方法として、提案方式の有効性を確認することができた。これまでの研究では、通信品質とWebユーザビリティの関係を明確にしたものは見られないので、本評価結果の意義は大きいものと考えられる。また、筋電位による評価方法の有効性を示したことは、今後多くのユーザ、特に高齢者や障害者の方々などに対してもユーザ視点のサービス品質の評価を正確に行うことが可能となることを示唆している。したがって、提案手法は、近い将来の高齢化社会において、高齢者層の顧客満足度を評価できるという観点から、社会的な意義も大きいものと考えられる。なお、本研究結果の一部は、電子情報通信学会東海支部卒業研究発表会において2件、ならびに電子情報通信学会総合大会において1件発表を行った。

なお、本研究結果の一部は、国際会議IEEE/IPSJ SAINT Workshop C3NETで1件、電子情報通信学会インターネットアーキテクチャ研究会において1件、同ソサイエティ大会において2件、同総合大会で1件の発表を行った。
京丹後地域健康百寿因子探索研究と久山町研究・岩木町健診との連携多因子AI解析

高齢化社会の急務課題は、いかに健康に人生を全うするかを解明することである。これまで、久山町研究にて日本人の死因は克明に研究され、弘前大学岩木町研究では、青森県の短命県返上を目指した2000項目に及ぶコホート研究が実施されているが、その2大コホート研究と連携し、同じ方法と健診項目を京都大学奥野研究室にてAIを利用することで、腸内細菌や遺伝情報、生活身体情報を含め多項目多角的解析を行う。京都府立医科大学の臨床全科が参加し、15年間追跡し、死因も検討することでコホート研究を行う。また、基礎研究・臨床研究のこれまでの研究と遺伝子研究を融合し、老化予防の機序解析も行い、健康長寿の因子を科学的に解明する。
小脳皮質視覚領域の機能とシナプス可塑性

小脳の信号処理機能を知るために、本研究では麻酔下のラットを用いて、小脳の背側傍片葉領域とcrus II領域における機能局在と信号処理機構を調べた。背側傍片葉領域では、強固な視覚刺激に対する応答があり、顆粒細胞を介した信号がプルキンエ細胞に単純スパイクを発生させることが確認された。Crus II領域においては、口唇部の触覚刺激に対して強固な応答があった。この領域の顆粒細胞と大脳皮質体性感覚野の細胞群から同時記録を行ったところ、45Hzの周期的な活動が同期していることが見出された。さらに、この活動は橋核ニューロンのバースト発火によって伝達されていることを明らかにした。本研究ではラットの小脳半球の背側傍片葉(dorsal paraflocculus)の顆粒細胞およびプルキンエ細胞における視覚誘発性応答を精査し,視覚刺激を用いて平行線維プルキンエ細胞間のシナプス可塑性を誘導することを目指している.また,この系により視覚野を含む大脳皮質と小脳の連関を明らかにすることもこの研究の意義である.前年(平成23年)度においては,視覚刺激および大脳皮質電気刺激による小脳プルキンエ細胞の応答を探索した.これに引き続き,平成24年度は,プルキンエ細胞から効率良くユニット記録を行うための多チャンネル記録装置を導入してデータ取得を継続した.更に,小脳顆粒細胞と大脳皮質活動の同期性を検証し,45Hzのいわゆるシータ域帯において同期が見られることを明らかにした.また,大脳と小脳の中継核である橋核の細胞においても同様の域帯での同期が見られた.単一細胞からの細胞内記録法を用いて,上記の知見を得たことは新規の発見である.今後はプルキンエ細胞の記録を継続してデータ取得および解析するとともに,大脳皮質活動と小脳皮質細胞の活動の連関を精査していく.本研究はラット及びマウスの小脳半球の背側傍片葉の顆粒細胞およびプルキンエ細胞における視覚誘発性応答を精査することを当初の目的としていた。さらにその発展として、視覚野を含む大脳皮質の各領域と小脳の機能的連関の解明に迫ることが本研究の意義であった.平成23年度から平成24年度においては、視覚刺激による小脳プルキンエ細胞の応答を探索した。また、大脳皮質体性感覚野と小脳の顆粒細胞の活動の同期を見出し、さらに脳幹の橋核においても同様の同期的活動があることを見出した。これらの知見から、視覚よりもむしろ体性感覚信号に着目した方がより効率よく大脳小脳連関の機能解析が可能であることが示唆されたため、平成25年度においては、大脳皮質体性感覚野と小脳の顆粒細胞の活動について精査することに注力した。その結果、麻酔下の動物の小脳crusII領域の顆粒細胞には、末梢から三叉神経核を介して直接的に到達する信号と、大脳体性感覚野を経由して間接的に到達する信号が到達していることが確認され、大脳皮質を薬理学的に抑制することで間接的経路を選択的に抑制できることが示された。さらに、単一顆粒細胞からホールセル記録により、個々の顆粒細胞に対して両方の経路からの収束的な入力があることが初めて明らかになった。このことは、小脳の入力段階に位置する顆粒細胞において、末梢からの信号と大脳皮質からの信号が統合されていることを示しており、大脳小脳連関の基本的な仕組みの一つが示されたと考えられる。ラットの小脳半球の背側傍片葉(dorsal paraflocculus)と呼ばれる領域の顆粒細胞には高密度の視覚信号が入力していることが我々の未発表研究で明らかになっている.本研究ではこの経路の下流に位置するプルキンエ細胞における視覚誘発性応答を精査し,さらに視覚刺激を用いて平行線維プルキンエ細胞間のシナプス可塑性を誘導することを目指している.また可塑性の誘導には登上線維の活動が重要であることから,背側傍片葉領域における登上線維の活動を誘発する刺激を探索することも本研究の重要な課題である.平成23年度においては,視覚刺激によるプルキンエ細胞の応答を調べた.その結果,視覚刺激により単純スパイクの増加が観察された.このことは,予測された通り,顆粒細胞(平行線維)からの興奮性入力がプルキンエ細胞の発火頻度を増加させていることを示唆している.一方で,複雑スパイクの頻度が視覚刺激によって増加することはなかった.このことは,視覚刺激によっては登上線維経路の活動は影響を受けないことを示唆している.さらに,体表面への局所的空気圧刺激による触覚刺激によっても,登上線維経路の活動が誘発されることはなかった.そこで,登上線維を活性化させる刺激を探索するために,大脳皮質視覚野を直接的に電気刺激する方法を用いたところ,プルキンエ細胞において単純スパイクと複雑スパイクを誘発することが可能であった.

現在は,刺激部位の僅かな違いにより,単純スパイクと複雑スパイクを独立的に誘発する刺激方法を探索しており,これによりプルキンエ細胞における視覚信号処理の特徴を抽出できるものと期待される.これまでの実験結果から,研究項目の「登上線維入力を惹起する感覚刺激の同定」においては当初の想定以上に複雑な視覚刺激パターンの提示が必要であることが分かってきた.このため,視覚刺激装置の最適化に時間を要している.結果として,プルキンエ細胞におけるシナプス可塑性を誘導する課題においては進捗が遅れている.一方で,小脳顆粒細胞におけるシナプス入力について,大脳皮質活動との同期という興味深い新規の知見が得られている.平成23年度の目的は2項目からなっている.1つめの「小脳の視覚情報処理様式の検討」については,プルキンエ細胞からの記録により,平行線維を介した視覚信号がプルキンエ細胞に到達していることが示された.2つめの「登上線維入力を惹起する感覚刺激の同定」については,触覚刺激等の自然な刺激を用いて,登上線維の活動を誘発することには成功していないが,代替策として大脳皮質を直接刺激することで登上線維の活動を惹起することに成功しており,このことは大脳・小脳連関の仕組みを知る上でも興味深い知見である.以上より,本研究はおおむね順調に進展していると考えられる.プルキンエ細胞における,複雑スパイクと単純スパイクを特異的に誘発する視覚刺激パターンの探索を継続する.多チャンネル記録装置の導入は完了したので,これを用いてデータの取得と解析を加速する.また,小脳の視覚応答と,大脳皮質の周期的活動との関連を明らかにする.登上線維入力を惹起する感覚刺激の同定を行うためには,プルキンエ細胞から効率よくユニット記録を行う必要がある.このため,多チャンネル記録を用いて複数のプルキンエ細胞から同時記録を行い,実験効率を高めて行く.これにより,プルキンエ細胞における可塑性の誘導という目的をより早く達することを目指す.研究項目の「登上線維入力を惹起する感覚刺激の同定」において,進捗が遅れているため,平成25年度にも研究を繰り越して行う.未使用残額は,そのための実験動物および試薬の購入のための経費に充てる.平成23年度においては,最近発売されたマイクロマニピュレーターを購入した.これは当初購入を計画していたマイクロマニピュレーターより安価であったため,平成23年度収支に残金が生じた.平成24年度においては,この残金を用いて,より効率よくプルキンエ細胞からの記録を行うための多チャンネル記録装置を導入し,研究の効率化を図る.また,実験動物,試薬,及びその他の消耗品を購入するために相当の研究費を必要とする.
大環状ポリアミンによるインテリジェント・ロボット分子の創造

本研究は,新規の大環状ポリアミンおよびそれらの錯体を数多く合成し,生体系の高次機能を再現し、その機能を分子レベルで理解しようとするものである。本研究により以下のようなインテリジェント機能性分子を創造し,酵素反応の化学的機構解明,人工酵素の開発,新規機能性分子および新医薬品の開発に多大の成果をあげた。(1)核酸塩基であるチミジンやウラシルの選択的な認識能を持つ新規大環状ポリアミン亜鉛錯体を合成し、その錯体の構造や認識メカニズムを明らかにするとともに、メッセンジャーRNAの特異的阻害による蛋白合成系の制御に成功した。(2)ダイマー構造を持つ一連の大環状ポリアミン誘導体とそれらの金属錯体が強い抗エイズウイルス活性と高い安全性を有することを発見した。なかでも,キシリル基でつないだサイクレン亜鉛錯体のダイマーは薬として実用可能なレベルの活性を持っている。(3)新しい金メッキ剤としての可能性をもつ一連のポリアミン金錯体の合成法を開発した。無公害金メッキ法の開発への応用が期待される。(4)電子プール機能を持つペンダントを有する数多くの大環状ポリアミン錯体の合成に成功し,弱い電子供与体の存在下でもそれらが効率よく二酸化炭素の還元触媒として機能することや酸化還元反応を利用した新しい分析試薬としての可能性を見い出した。(5)新規アルコール性水酸基を持つ大環状ポリアミン亜鉛錯体を合成した。それらは生理条件下で容易にアルコラート錯体を形成し,強い求核剤として機能することが明かとなった。それらの亜鉛錯体は,世界ではじめて成功したアルカリフォスファターゼのモデルであり、低分子人工エフォスファターゼの開発の可能性を示した。新規の大環状ポリアミンおよびそれらの金属錯体を合成し、以下のようなインテリジェント機能を発見、開発し、酵素反応の機構解明、人工酵素の開発、新機能性分子のデザインおよび新医薬品の開発に多大の成果をあげた。1.12員環大環状トリアミン亜鉛錯体と芳香族スルホンアミドとの極めて強い親和性を見い出し、スルホンアミドの炭酸脱水酵素(活性中心に亜鉛を含む)の阻害作用の化学的証明に世界で初めて成功した。2.12員環大環状トリアミン亜鉛錯体のアルコール脱水酵素様活性を発見した。これは、世界で初めて成功したアルコール脱水酵素モデル例である。本研究により、活性中心亜鉛の意義が明らかとなり、新たな触媒開発が可能となった。3.12員環大環状テトラアミン亜鉛錯体が1:1組成でDNAの高次構造変換(右巻き→左巻き)機能を有すること、及び核塩基のうち、チミジン(RNAの場合は、ウラシル)のみを選択的に認識すること発見した。4.ルテニウム-トリスピリジル錯体(光増感基)とニッケル-サイクラム錯体(電子受容体)の両方の機能錯体からなる超分子を合成した。光エネルギーによる二酸化炭素の高効率かつ高選択的な還元触媒となることを見い出した。5.14員環大環状テトラアミン金錯体が無公害、リサイクル金メッキ剤として、従来の金シアン錯体以上に優れていることを発見した。6.一連の大環状ポリアミン及びその金属錯体が、強い抗HIV-ヴィールス活性をもつことを発見した。その機構を明らかにしつつある。新たな抗エイズ薬開発の途を開いた。新規の大環状ポリアミンおよびそれらの錯体を数多く合成し,以下のようなインテリジェント機能を発見,開発し,酵素反応の化学的機構解明,人工酵素の開発,新規機能性分子および新医薬品の開発に多大の成果をあげた。(1)核酸塩基であるチミジンの選択的な認識能を持つ芳香属ペンダントを持つ新規大環状テトラアミン亜鉛錯体を合成しその錯体の構造や認識メカニズムを明らかにした。

(2)ダイマー構造を持つ一連の大環状ポリアミン誘導体とそれらの金属錯体が強い抗エイズウイルス活性と高い安全性を有することを発見した。現在,それらの構造活性相関と作用メカニズムを明らかにしつつある。(3)新しい金メッキ剤としての可能性をもつ一連のポリアミン金錯体の合成法を開発した。無公害金メッキ法の開発への応用が期待される。(4)電子プール機能を持つペンダントを有する一連の大環状テトラアミンニッケル錯体の合成に成功し,弱い電子供与体の存在下でもそれらが効率よく二酸化炭素の還元触媒として機能することを見い出した。(5)新規のアルコール性水酸基を持つ大環状トリアミン亜鉛錯体を合成した。その錯体は生理条件下で容易にアルコラート錯体を形成し,強い求核剤として機能することが明かとなった。これは,世界ではじめて成功したアルカリフォスファターゼのモデルである。本研究を発展させれば低分子人工フォスファターゼの開発が可能となる。平成45年度に合成した大環状ポリアミンおよびそれらの新規誘導体を用いて,以下のようなインテリジェント機能を発見,開発し,酵素反応の化学的機構解明,人工酵素の開発,新規機能性分子および新医薬品の開発に多大の成果をあげた。(1)核酸塩基であるチミジンやウラシルの選択的な認識能を持つ大環状テトラアミン亜鉛錯体を用い,ポリ-Uをメッセンジャーとする蛋白合成を阻害することを見いだした。(2)キシリル基で架橋した大環状テトラアミン誘導体の亜鉛錯体が強い抗エイズウイルス活性と高い安全性を有することを発見した。(3)クリプタンド骨格を持つオクタアミンの亜鉛二核錯体が燐酸モノエステルと選択的に反応し,リン酸エステル結合を切断することを見いだした。(4)電子プール機能を持つペンダントを有する新規大環状テトラアミン金属錯体の合成に成功し,それらが核酸塩基やイミド誘導体を特異的に認識することを見い出した。それらは,酸化還元能を持つホスト分子が利用した新しい核酸塩基の定量定性システムの可能性を示した。(5)新規アルコール性水酸基を持つ大環状テトラアミン亜鉛錯体を合成した。その錯体は生理条件下で容易にアルコラート錯体を形成し、強い求核剤としてリン酸エステルを分解することが明かとなった。
原発性肝癌に対する生体肝移植の成績向上へ向けての総合的研究-----適応範囲,免疫抑制療法,抗癌剤使用,癌免疫の検討-----

現在,当科における原発性肝細胞癌の手術適応は,(a)遠隔転移を認めない,(b)大血管への侵襲を認めない,の二点である。しかしながら,原発性肝細胆癌の手術適応の世界的コンセンサスは得られておらず,各施設が独自の基準で,移植術を行っているのが現状である。今後,既存の病期分類による移植成績を調べるのみならず,その他に予後に関わる因子を解明すること,それらを術前・術後に評価可能かどうかを解明することは極めて重要である。当科で施行された原発性肝癌に対する生体部分肝移植56例での検討において、TNM分類でStage I 8例、Stage II 13例、Stage III 5例、Stage IVa 30例であった。これらを、脳死肝移植の適応に用いられるMilan Criteria別に見ると、31例がCriteriaに合致、25例がCriteriaを満たさなかった。非癌患者と比べ全原発性肝癌患者3年生存率は65%と、成績の低下を認めた。予後因子がある程度明らかになってきたことで、今後、免疫染色法を用いた病理組織学的検索及び癌免疫からの視点で、検討を発展させていきたいと考えている。また、今後の適応範囲の決定の確立にfeedbackできると考えられる。しかしながら,原発性肝細胞癌の手術適応の世界的コンセンサスは得られておらず,各施設が独自の基準で,移植術を行っているのが現状である。2002年12月までに当科で施行された68例の肝細胞癌の患者については、3年生存率56%、同時期非腫瘍症例の生存率は72%であった。再発は68例中8例に認められた。病理学的な検索からは、porに50%の再発が認められ(wellとmodは11.7%)、vp(+)では69.4%に再発が認められた(vp(-)では、6.6%)。切除標本の免疫組織染色の手技を用いて,増殖マーカーKi-67やEpidermal growth factor,類洞特異マーカーthrombomodulinによる腫瘍の進展具合を評価し,収容の活動性の程度を分析は、これからの予定である。また、癌免疫には,一般的にNK細胞の関与が言われている。術前・術後のNK細胞の数や活性を測定,評価することは,個人の癌免疫能を相対的に評価出来ることとなる。末梢血からのリンパ球の分離、RNAの単離などのテクニックは、初年度の今年、研究室内での予備実験を終え、ほぼ修得されてきたので、これから実際の患者サンプルを用いた本実験を始めたいと考えている。
認知機能の関連遺伝子同定と分子メカニズム解明

本研究は、近交系もしくは異種交配マウスの行動解析と遺伝子発現解析・ゲノム解析、IQ不一致一卵性双生児を用いた遺伝子発現解析とDNAメチル化解析、精神遅滞のゲノム解析、サルとヒトでの脳の遺伝子発現解析を行い、認知機能に関連する遺伝子の同定を目的とした。近交系マウスと一卵性双生児の解析から、認知機能関連候補であるいくつかの遺伝子および遺伝子群を同定し、また精神遅滞の解析から既知の原因遺伝子と未知の原因遺伝子候補を同定した。今後のさらなる検討が必要である。本研究では、近交系もしくは異系交配マウスの行動解析を用いたマウス認知機能関連遺伝子の同定、IQ不一致一卵性双生児を用いた認知機能関連遺伝子の同定を行い、また精神遅滞の原因遺伝子の同定、サルとヒトで発現の異なる言語遺伝子の同定、認知機能関連遺伝子として同定された遺伝子の産物の機能解析を行うことで、知能発現の分子メカニズムの解明、環境因子との関係の解明、精神遅滞における原因遺伝子同定、病態解析と治療法開発を目指している。本年度は、以下の実験を行ってきた。1.近交系マウスの行動解析による得点化と遺伝子発現・DNAメチル化解析現在継続してマウスの行動解析、得点化と、各種行動パラメーターの因子分析を行っている。マウス脳由来RNAを用いた遺伝子発現マイクロアレイ解析によって得られているデータを用いて、すでにデータベース化されている各種疾患や薬剤についての遺伝子発現解析データとの比較検討を行い、自閉症との関連が示唆された。2.異系交配マウスの行動解析による得点化とQTL連鎖解析C57BL/6系統と129系統のマウスの交配、雑種第二世代での連鎖解析による遺伝子同定を目指したが、129系統の脳奇形の遺伝子の同定につながる可能性が否定できないことが考えられ、別系統のマウスを使用することとした。3.IQの差が顕著な一卵性双生児を用いた遺伝子発現・DNAメチル化解析新たにサンプル数を増やす目的で、75組150人の双生児の卵性診断を行った。1.近交系マウスの行動解析による得点化と遺伝子発現・DNAメチル化解析:昨年度から継続してマウスの行動解析とマウス脳由来RNAを用いた遺伝子発現マイクロアレイ解析によって得られているデータを用いて関連を調べてきた。現在その成果について論文を作成している。また、DNAメチル化解析に向けて、次世代シークエンサーを用いて予備実験を行っている。3.IQの差が顕著な一卵性双生児を用いた遺伝子発現・DNAメチル化解析:一卵性であると卵性診断が確定した、IQ差が15以上(1 SD)の不一致一卵性双生児のうち採血にご協力くださった12組について、DNAを用いて、マイクロアレイによるゲノムワイドのCNV解析を行った。1組において、新生CNVと考えられる領域を同定した。詳細な確認を行っている。4.精神遅滞の原因遺伝子の同定:2つの家系について、全エクソン塩基配列決定を行い、遺伝子変異を検索した。1家系において、既知の原因遺伝子に変異を同定した。もう1家系では、新規の原因遺伝子候補を同定した。本年度は、以下について検討を行ってきた。1.近交系マウスの行動解析による得点化と遺伝子発現・DNAメチル化解析:マウスの行動解析とマウス脳由来RNAを用いた遺伝子発現マイクロアレイ解析のデータの関連を調べてきた。次世代シークエンサーを用いたDNAメチル化解析を進めている。2.異系交配マウスの行動解析による得点化とQTL連鎖解析:賢さの判定が研究者により曖昧であり、独自のデータが必要であることがわかった。3.IQの差が顕著な一卵性双生児を用いた遺伝子発現・DNAメチル化解析:以前同定したDNAメチル化に差の見られた遺伝子について、トランスジェニックマウスを作製する準備を開始した。4.精神遅滞の原因遺伝子の同定:新規の原因遺伝子候補について詳細に解析したが、未だ確証は得ていない。他の原因