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新聞メディアによる〈文学〉創造の総合的研究-『時事新報』文芸欄を中心に

『時事新報』マイクロフィルム版(ニチマイ)を使用し、1927(昭和2)年期を通覧した。その結果、「文学」が広くメディア上に記述された「文化」全般との相関関係によって成立していることが理解された。そのため、「文化」関連記事一覧の作成を試み、同年13月にかけての文化関連記事を目録化して刊行した。また、同時期における一大文学/メディアイベントであったいわゆる「円本」に関する研究発表や、詩歌の動向に関する論文を発表した。今年度の研究内容として、11月後半の交付決定を受けて昭和期「時事新報」のマイクロフィルム(雄松堂)を購入し、その文芸欄を中心とした文芸関係記事・広告のデータベース作成と分析という取り組みに着手したことが掲げられる。「時事新報」文芸欄のデータベースとしては池内輝雄編『時事新報目録文芸篇大正期』(2004年、八木書店)という研究がすでに存在している。これは大変な労作であるが、書名に見るようにデータが大正期に限られたものである。一方、『時事新報』自体は昭和11年まで存続していることから、昭和期の文芸欄を中心とした文学・文化関連のデータベース作りとその分析とが学界においても期待されているところであり、本課題はそこに取り組むものである。平成22年度においては、交付決定を受けてただちに「時事新報」マイクロフィルムを購入し、到着してからは学内のマイクロリーダーを活用して、データベース作りに着手した。交付決定が11月であったことから研究開始が遅くなり、実質的な研究時間が限られたものとなった。そのため、残念ながら年度内にまとまった研究成果を公開するには至らなかった。しかしまとまった年数のマイクロフィルムを購入し、またデータベース構築に際する実際上の手順や問題点を浮き彫りにすることができた。そのため、平成23年度においては、アルバイトの依頼等によってデータ収集の効率化を図ることとした。これにより、ある程度まとまったデータを公開できる目処が立つに至った。平成23年度に於いては、研究代表者を中心に「時事新報」昭和2年期を中心にデータを採取し、広く文化に関連する詳細な目録作りに取り組んだ。従来の「時事新報」に関係する目録が文芸欄を中心とした内容であったのに対し、本研究に於いてはすべての記事に研究代表者が目を通し、文芸欄以外に於いても関連すると判断される記事を確認し採録したことが大きな特徴である。また、内容的にも文芸に偏ることなく、広く文化一般を紹介する記事、たとえば映画や家庭、女性等に関連する記事を採録した。また広告も出版と映画を中心に採録し、昭和2年の前半期に関する詳細なデータベースを作成した。これらは本研究の大きな特色であり、成果といえる。これらは、謝金を用いてアルバイトを活用することによって可能となったものである。また、研究分担者に於いてはこの詳細な目録を活用するためのデータベースの開発に取り組み、今後の活用の幅を広めた。その成果の一部は「「時事新報」文化関連記事目録一九二七(昭和2)年一月」(『金沢大学歴史言語文化学系論集言語・文学篇』4、2012.3、著者:杉山欣也・竹本寛秋)に発表した。本目録は1ヶ月分にすぎないが、その際に構築したデータベースやノウハウのフィードバックが見込まれ、次年度には少なくとも一年分以上の公開が確実に行えることがわかった。なお研究代表者に於いては、ここで蓄積した知識を基に、昭和二年に起こった文化現象である「円本ブーム」に関する論文を執筆した(現在編集中)ことを申し添える。平成24年度は、前年度に引き続き「時事新報」文化関係記事の目録作成と、それに関連する文学関係の研究を行い、また、その成果を基にシンポジウムを開催したことが研究実績として掲げられる。研究の主眼である「時事新報」文化関係記事目録については、平成23年度に採録したデータをもとに検証を行い、研究代表者の杉山欣也が「「時事新報」文化関連記事目録一九二七(昭和2)年二三月」(『金沢大学歴史言語文化学系論集』2013.3発行)を発表した。また、将来的に本目録を出版する方向が定まった。さらに新聞による文学創造の研究に〈地方〉の観点が必要であることに気づき、例を秋田県にとって、地方における新聞と文学の関係を考察した。その結果は近く刊行される『東北近代文学事典』に収録予定である。また、研究分担者の竹本寛秋は本研究において「大洗の山村暮鳥詩碑建立」(雑誌『雲』)、「山村暮鳥と石原純」(雑誌『雲』)を発表した。さらに、他の科研費を受けた研究会と共催で、「『円本』、地域、文学」と題するシンポジウムを開催した(2013年3月24日、於・仙北市新潮社記念文学館)。

これは、1927年前期における「時事新報」文化関係記事の大きな話題であった〈円本〉をテーマに、メディアによるその宣伝活動や地域読者の受け止め方、あるいは当時の出版における大きな問題である検閲の問題などについて4名のパネラーが報告と討議を行ったものである。ここで杉山は、「『現代日本文学全集』における伏字調査(中間報告)ー円本と検閲をめぐって」というタイトルで発表を行い、その後のディスカッションにも参加した。このことは「秋田魁新報」2013年3月28日付朝刊に紹介された。また、会場である仙北市角館町の新潮社記念文学館からは、その内容に関してなにか企画を立てたいという連絡があるなど、反響を呼んでいる。震災に伴う交付額決定時期の遅れと、謝金を用いたアルバイト従事者の練度を高めるために予定より多くの時間を費やした。また、計画の進展に伴い、データの採録範囲を拡げたため、やや遅れ気味となった。24年度が最終年度であるため、記入しない。昭和二年一月分のデータを雑誌論文の形で公開したことから、データベースの構築に関するノウハウの蓄積があった。またアルバイトの練度も上がっているため、少なくとも昭和二年1年分以上のデータを構築し、発表することが可能となると予想される。
培養脳神経細胞の生存と分化を促す蛋白因子の同定とその因子の神経回路形成への影響

これまでの研究から、ニワトリ胚終脳神経細胞に対して特異的に作用して生存を延長し、分化を促進するタンパク性因子がニワトリ脚筋抽出液中に存在することが明らかになった。本年度は、この因子の同定を目指して生化学的手法と免疫学的手法を用いた研究を実施した。まず、HPLCを用いてこの因子の部分精製を試みた。DEAEを結合部位とする陰イオン交換カラムによる数度のクロマトグラフィ-の結果、分子量28Kのタンパクを含む分画に最も強く神経細胞を分化させる活性の残ることが明らかになった。次に、部分精製した、分化(すなわち神経繊維伸長)活性をもつ因子を抗原として用い、モノクロ-ナル抗体の作製を試みた。抗原量等の制約により、in vitroの免疫法による抗体作製法を採用した。抗原を用いたELISA法と吸着解離法を用いたバイオアッセイ法によりスクリ-ニングを行ない、それらの両方でポジティブなモノクロ-ナル抗体が得られた。この抗体を産生するハイブリド-マは3回のクロ-ニングを経ているためモノクロ-ナルであることは確実である。ウェスタンブロッティングによる解析で、この抗体は28Kのタンパク質を認識することが明らかになった。また、この抗体を用いたアフィニテイ精製法によって得られたタンパク質に神経繊維伸長活性が認められた。したがって、この28KDaタンパク質が分化促進因子であることが結論できる。問題点としては、この活性が、抗原として用いた分画よりは比活性で較べると低いこと、クロ-ニング、エキスパンドの過程で、他の有力なモノクロ-ナル抗体が消滅したことがあげられ、この結論に100%の確信が得られるまでには至っていない。今後は、この因子のcDNAクロ-ニングを目指すと同時に、再度モノクロ-ナル抗体の調製を試み、よりこの結論を確かなものにしてゆく予定である。
寺社縁起形成を視点とした慈円法楽百首群についての基礎的研究

慈円の和歌作品の中で特異な性格を持つ諸社法楽百首群を中心として、その歌題についての基礎的考察を行った上で、それぞれの寺社縁起に関する和歌の分析および法楽歌全体に関する和歌表現の解明を進めてきた。その結果、寺社縁起という目標には遠く及ばないものの、法華要文百首(石清水法楽)の詠歌方法や、法楽歌の「基底」となる思想・世界観などを解明し、その社会背景や歴史認識などの考察に辿り着くことが出来た。本研究は、慈円の諸社法楽百首群を中心に作品内容を分析するためのもので、選出された歌題についての基礎的考察、寺社縁起に関する資料整理さらに法楽歌の和歌表現など、多くの課題が残されている。慈円の諸社法楽百首群には形態を異にする個別の伝本の他、『拾玉集』各系統本に収録された作品が存在する。しかし、この内、文集百首(北野社法楽)・法華要文百首(石清水八幡宮法楽)についての基礎的考察がほぼ完了しているので、それ以外の法楽作品の作業を進めることができる。1年目にあたる今年度は、寺社縁起の形成過程を体系的に考究することを目的として、寺社縁起に関する資料整理に焦点を絞って、和歌内容の分析・検討に関する準備作業を進めている。特に難波百首(四天王寺法楽)・四季題百首(伊勢神宮法楽)を中心として収集作業を進めることにした。関係諸機関に所蔵の諸伝本を博捜し、できるだけ遺漏の無いように心掛けた。その一方で、関係書籍の調査収集にも意を払い、寺社縁起に関する基礎的な知識を広めることに腐心した。まだまだ基礎的研究は決して充分とは言えないが、これまで不明であった点などが徐々に明確になっていくように感じている。最終年度まで着実に作業・考察を進め、研究成果を研究論文として公表したいと考えている。本研究は、慈円の諸社法楽百首群を中心として、その内容を分析するためのものである。選出された歌題についての基礎的な考察は不可欠のものだが、底流には当時における寺社縁起が関係している。その寺社縁起に関する資料整理を行った上で、法楽歌全般に関する和歌表現などの課題が多く残されている。慈円の諸社法楽百首群には携帯を異にする個別の伝本の他に、『拾玉集』各系統本に収載された作品が存在する。しかし、この内、文集百首(北野社法楽)・法華要文百首(石清水八幡宮法楽)についての基礎的考察はほぼ完了しているので、その他の法楽百首に関する作業を進める段階に至っている。昨年度の難波百首(四天王寺),四季題百首(伊勢)の調査に引き続いて、今年度は春日百首・春日百首草(春日社)・賀茂百首(賀茂社)を中心として、作業を行った。寺社縁起の形成過程を体系的に考究することを目的として、寺社縁起に関する資料整理に焦点を絞ることにした。諸機関に所蔵の伝本を博捜し、遺漏の無いように心掛けると共に、関係書籍の調査収集にも腐心した。遅々とした歩みであるが、これまで不明であった点が徐々に明らかになってきている。最終年度まで確実な作業・考察を進め、実のある研究成果を上げたいと思っている。本研究は、慈圓の諸社法楽百首群を中心として、その内容を多角的に分析することを目的とする。選出された歌題についての基礎的考察は不可欠だが、その底流には詠作時点での寺社縁起が濃厚に関係している。その寺社縁起に関する資料整理を行った上で、法楽歌全体に関する和歌表現などの多くの課題が残されている。慈圓の諸社法楽百首群には、形態を異にする個別の伝本の他に、『拾玉集』各系統本に収載された作品が存在している。しかし、この百首群の中で、文集百首(北野社法楽)・法華要文百首(石清水社法楽)についての基礎的考察はほぼ完了しているので、その他の法楽百首に関する作業を進めることが可能である。初年度は難波百首(四天王寺法楽)・四季題百首(伊勢神宮法楽)、二年度は春日百首・春日百首草(共に春日社法楽)・賀茂百首(賀茂社法楽)の調査を行ったが、今年度は寺社縁起の形成過程を体系的に考究するために、寺社縁起に関する資料整理を中心に進めてきた。諸機関に所蔵される伝本を博捜し、遺漏の無いように心掛けると同時に、関係書籍の調査収集に努めた。国文学研究資料館が立川移転のために年度後半を閉館するという出来事に見舞われたが、何とか着実に作業・考察を進めている。最終年度には実のある研究成果をまとめたいと思っている。本研究の目的は、慈圓の諸社法楽百首群を中心として、その内容を多角的に分析することにある。選出された歌題についての基礎的考察の他に、その底流に横たわる寺社縁起が色濃く関係している。その寺社縁起に関する資料整理を行った上で、法楽歌全体に関する和歌表現などを行うべきなのであろう。

慈圓の諸社法楽百首群には、形態を異にする個別の伝本の他に、『拾玉集』各系統本に収載された作品が存在している。しかし、この百首群の中で、文集百首(北野社法楽)・法華要文百首(石清水社法楽)についての基礎的考察はほぼ完了しているので、その他の法楽百首に関する作業を進めることが可能である。初年度は難波百首(四天王寺法楽)・四季題百首(伊勢神宮法楽)、二年度は春日百首・春日百首草(共に春日社法楽)・賀茂百首(賀茂社法楽)の調査を行ったが、三年度は寺社縁起の形成過程を体系的に考究するために、寺社縁起に関する資料整理を中心に進めた。その途中、国文学研究資料館が立川移転のために昨年度後半に閉館という出来事に見舞われたが、何とか支障が無いように努めてきた。今年度は最終年度にあたるので、充実した研究成果をまとめるべく努めた。しかし、寺社縁起形成という壮大な目標には程遠く、忸怩たる思いである。可能の限りの調査成果を報告し、その到達し得なかった目標に関しては引き続き課題として掲げておきたい。できれば、その目標に特化した科学研究費を獲得し、永続的に探求精査して行きたいと思う。
超音波画像処理による義歯床下粘膜に関する研究-荷重時における厚さの変化-

昨今、人口の老齢化が進むにつれ、老人歯科医療に対する重要性が高まってきている。一般に老人の口腔内は、少数歯残存・無歯顎の状態が多いので大型義歯装着の比率が高く、補綴治療に困難を伴う場合が多い。特に、無歯顎補綴においては有歯顎とは異なり、義歯の維持・支持を不安定な義歯床下粘膜にのみ求めている。そのため、義歯床、・顎骨という2つの硬い物質にはさまれている床下組織に関する情報が機能的義歯作製の観点から必要となる。本研究は、(1)高速・簡便に画像入力が可能なシステムの構築、(2)このシステムを用いて荷重時における義歯床下粘膜の厚さの変化を捉えることにより床下粘膜の動的状態の解析、(3)臨床への応用を目的としている。本年度は、システムの構築については終了した。システムは、画像処理を行なう16ビットコンピュータ、画像データを入力するための512×512×8ビットのフレームメモリおよびモノクロビデオ入力ボード、超音波診断装置、CCDカメラ、画像合成装置、高解像度ビデオレコーダ、咬合力計およびモニター用の白黒ディスプレイから構成されている。本システムにおいては、超音波断層像を一度ビデオレコーダーに記録することにより、チェアーサイドでのデータ収集を容易なものとしている。ビデオレコーダーに記録する画像データは、患者の咬合力と超音波断層像である。咬合力はCCDカメラで撮影し、画像合成装置により超音波断層像と合成し、ビデオレコーダーに記録するものである。実験終了後、ビデオレコーダーをフレームメモリを介してコンピュータに入力・保存する。このように、システム全体を移動することなく、データ採取が可能なものとなっており、入力の簡便化については満足すべきものである。
ケミカルジェネティックスを用いた加齢性感覚器障害の発症メカニズム解析

感覚細胞は音や光等の外部からの刺激を絶えず受けているが、個体の一生を通して安定して維持されている。このシステムの破綻によって難聴や視覚障害等のさまざまな疾患が引き起こされると考えられているが、詳しいメカニズムは明らかになっていない。我々は、ショウジョウバエで加齢性難聴のモデルを確立することに成功し、感覚細胞がアポトーシスから逃れるため、アポトーシス関連遺伝子の発現を抑制していることを明らかにした。このシステムは簡便かつ定量的な解析が可能であることから、新たな薬剤スクリーニング系としての検討を行なった。これまでの研究から、ポリフェノールの一種であるテトラヒドロクルクミン(THC)がショウジョウバエの寿命および酸化ストレス応答をFoxo依存的に抑制することを見いだしている。本年度は、THCが哺乳動物においても同様な機構で作用しているかを検討するとともに、加齢性感覚器障害の発症におけるTHCの作用を詳しく検討した。平成22年度(1)哺乳動物の寿命や酸化ストレス応答においてもFOXOの核内移行が重要な役割を持つ事が明らかにされていることから、NIH3T3におけるFOXO4の核内移行を指標にTHCの作用を検討した。その結果、THCの作用によりFOXO4が核内に蓄積することが確かめられた。さらに、FOXO4の核内移行に関わる因子の活性化状態を網羅的に解析した結果、THC処理によりAKTのリン酸化レベルが有意に減少することが確かめられた。これらの結果から、THCの作用はショウジョウバエから哺乳動物に至るまで保存されていることが予想される。(2)ショウジョウバエebiの機能欠損では加齢に伴って光受容細胞の変性が観察されている。このときTHCを作用させたところ光受容細胞の変性が有意に抑制されていることが確認された。現在、ebiによる光受容細胞の変性におけるFoxoの機能を検討している。加齢性難聴の発症では加齢にともなう感覚細胞および支持細胞の変性が発症原因の一つとして考えられているが、詳細は明らかになっていない。加齢性疾患の発症には時間がかかることが最大の問題としてあげられることから、本研究ではショウジョウバエとマウスを用いた解析系を行なっている。これらの解析系に対してケミカルジェネティックスの手法を用いることにより、加齢性難聴の発症を抑制する薬剤を個体レベルの解析から明らかにすることを目的としている。本年度は加齢性難聴のショウジョウバエモデルを用いて、発症メカニズムを詳細に解析した。その結果、転写コリプレッサーEbiの機能低下によりCaspase依存的なアポトーシスのシグナル伝達が過剰になることにより感覚細胞が細胞死に導かれることを見いだした。具体的にはCaspaseの阻害因子(IAP)の機能を阻害するPro-apoptotic遺伝子群の発現がEbiにより抑制されることを明らかにした(Lim et al,PLoS ONE,in press)。マウス加齢性難聴モデルとしてはEbiのヒトホモログTBL1のN末端を感覚細胞特異的なエンハンサーであるMath1^Eの下流につないだコンストラクトを作成し、これをB6バックグランドでTgマウスを作成した。現在、有毛細胞における発現および表現型を観察している。さらに、ショウジョウバエ加齢性難聴のモデルに天然物由来の化合物ライブラリーを投与することにより、表現型である複眼変性が抑制されるものを検索した。これまでのところ、テトラヒドロクルクミン(THC)に抑制効果があることが明らかになっている。本研究から加齢性難聴のメカニズムが明らかになってきたことから、THCの作用点を探る手がかりになると考えられる。加齢性難聴は我が国において重大な医療課題として考えられていることから、本研究が予防・治療薬の開発につながっていくことを期待している。加齢性感覚器障害の発症には長い時間がかかることから、本研究では短時間で加齢性感覚器障害を観察できるショウジョウバエとマウス解析系を確立した。これらのモデルは加齢性感覚器障害を短時間で経時的かつ定量的に解析できることから、化合物を用いたケミカルジェネティックスによる研究アプローチで発症メカニズム解明を試みた。これまでの解析の結果、ショウジョウバエ光受容細胞ではストレス応答を抑制するメカニズムの存在を明らかにすることに成功した(Lim et al. PLOS ONE, 7: e37028, 2012)。このとき、感覚細胞で働く転写コリプレッサーであるEbiと、ストレス応答の下流で機能するAP-1転写因子が共役してアポトーシス関連遺伝子発現を抑制していることを見いだしている。これに先行する研究で、ショウジョウバエに対する寿命延長効果を示すポリフェノール(テトラヒドロクルクミン:THC)の存在を明らかにすることに成功していることから(Xiang et al. Aging, 3: 1098-1109, 2011)、この系をショウジョウバエ感覚器障害のモデルに適用して解析したところ、THCにより感覚器の変性が抑制されることが観察された(投稿準備中)。

このように、ショウジョウバエの解析系は加齢性感覚器に対する薬剤効果を検定する系としても優れていることが予想されたことから、次にマウス解析モデルの作成を行なった。ショウジョウバエで明らかになった転写コリプレッサーの哺乳類ホモログを内耳有毛細胞特異的に阻害した結果、騒音曝露後に聴力が著しく低下する騒音性難聴の表現型が観察された。騒音性難聴は加齢性難聴のモデルとして考えられていることから、本研究システムは加齢性感覚器障害をショウジョウバエとマウスで解析する有効な解析手段になることが予想される。加齢性難聴の表現型解析に予想外の時間がかかってしまい、THCの作用点を解析するまでに至らなかった。また、マウス加齢性難聴でも、当初開発したICRバックグランドでのTgマウスはICRに存在する加齢性難聴の表現型が強く影響することがわかった。そこで、B6バックグランドのものを新たに作成したので、マウスに対するTHCの効果を見る計画も果たせなかった。24年度が最終年度であるため、記入しない。THCをラテックスビーズに結合させたアフィニティーカラムを作成し、これに昆虫細胞抽出液を通す事によりTHCに結合する蛋白質の同定を行なう。このとき構造が似ているクルクミンを結合させたカラムを対照として用いる事によりTHCに特異的に結合する蛋白質を同定する。また、マウス加齢性難聴のモデル系に対してTHCを投与したときの効果を検討する。このとき聴性脳幹反応(ABR)を用いて経時的かつ定量的にアッセイする。
計量の自己双対性と幾何構造について

本研究では、4次元多様体上のリーマン計量および符号数(2,2)の擬リーマン計量(以下、(2,2)型計量と呼ぶ)の自己双対性について考察し、他の幾何構造との関連を調べた。まず、超複素構造と両立するリーマン計量の反自己双対性に注意して、(2,2)型計量の場合にも、分裂四元数構造という概念を定義し、自己双対性と関連して次の結果を得た。命題.4次元多様体が積分可能な分裂四元数構造をもつとする。このとき、この分裂四元数構造と両立する(2,2)型計量が存在し、その計量は自己双対である。超複素構造をもつコンパクト複素曲面はBoyerによって分かっている。積分可能な分裂四元数構造についても同様の議論を試みたが、計量の不定値性による困難があり、現在のところ不明である。また、このような構造の特別な場合である(2,2)型超ケーラー構造に関してRicci曲率の平坦性などの基本的性質を調べた。特に、(2,2)型超ケーラー構造をもつコンパクト単連結複素曲面はK3曲面でなければならないことが分かる。逆に、K3曲面が(2,2)型超ケーラー構造をもつかどうかは不明である。(2,2)型超ケーラー構造をもつ空間として平坦な複素トーラスがある。Fernandez-Gotay-Grayは、ケーラーでないシンプレクティック多様体の構成と関連して、ある小平-Thurston曲面上に(2,2)型ケーラー計量を求めた。この(2,2)型ケーラー計量について次のことが分かった。命題.上の(2,2)型超ケーラー計量と両立する分裂四元数構造で(2,2)型超ケーラー構造となるものが存在する。特に、この計量は自己双対かつRicci平坦である。上記から(2,2)型超ケーラー構造を許容しても通常のケーラー構造を許容するとは限らないことが分かった。この例は、平坦な複素トーラス以外でコンパクト(2,2)型超ケーラー構造もつ最初の例と思われる。
クラウド型リアルタイムフィードバック制御における静・動特性の向上手法の提案

無線通信環境におけるフィードバック制御システムを構築するときに,通信遅延はむだ時間となり,制御系に悪影響を与える.むだ時間の影響を補償するために可変スケーリング通信外乱オブザーバと線形で制御系設計が容易であるハイパスフィルタ通信外乱オブザーバを提案した.実機実証実験により,提案手法は定常偏差を改善することができた.特にハイパスフィルタ手法では,過渡応答も同時に改善することを確認し,無線ネットワーク制御技術を確立した.初年度は,実環境における無線通信モデルの解析結果をもとに,シミュレーションモデルに適用し提案制御方式である「可変スケーリング通信外乱オブザーバ」の実機実証実験を行った.無線通信モデル解析については,無線スペクトルアナライザにより無線通信によるむだ時間の時間的推移を計測することが出来た.その結果,Bluetoothにおける無線通信のむだ時間は1040msの範囲で周期性を持つことが確認できた.この解析結果をもとにシミュレーションシステムのむだ時間変動モデルの再構築を行った.そして,提案手法をシミュレーションにより検証し,有効性を確認することが出来た.次に,実機実験により,提案手法の有効性を確認した.制御対象をDCモータ,無線通信デバイスをBluetoothとしてリアルタイムフィードバック制御系を構築し,実験を行った.前述のように,むだ時間が変動するため,通信外乱オブザーバのみの場合,モデル化誤差の影響から定常偏差が発生していた.これは,通信外乱オブザーバの出力部に残差が発生してしまい,等価的に目標値に変更が加わったためであると考えられる.通信外乱オブザーバの出力に指令値とフィードバック値の偏差に基づいた可変スケーリングを加える提案手法により,定常偏差を解消することが出来た.また,これまでに,通信外乱オブザーバと外乱オブザーバの併用は困難であるとされていた.提案手法を用いることで外乱オブザーバの併用が可能となることがシミュレーションにより検証された.平成26年度の研究成果では,出力スケーリング手法が定常偏差の改善に有効であることが確認されたが,制御系設計手法の確立が困難であった.そこで,本年度は,当初の研究計画に沿って,多自由度ロボットや小型ヘリコプターの設計・製作を実施するとともに,スケーリング手法と同等以上の性能を持ち,制御系設計が容易なハイパスフィルタ(HPF)手法を検討した.有効性が確認されたスケーリング手法のロボットアプリケーションへの適用を検討するためにロボットの設計・製作を実施した.現在,多自由度ロボットおよび小型ヘリコプターの設計・製作の途中であり,実機実験は実施できていない.スケーリング手法では,通信外乱オブザーバ(CDOB)の出力を非線形なスケーリング項を用いて減少させ,定常偏差を改善した.しかし,非線形項のため制御系設計が困難であるという問題点があった.そこで,定常偏差の原因がCDOB出力の直流成分であることに着目し,スケーリング項に(HPF)を適用した.結果として,定常偏差が改善するとともに,過渡応答も改善が見られた.また,位相余裕・ゲイン余裕やH∞ノルムに基づいて制御系を設計することが可能となった.無線通信環境におけるフィードバック制御システムを構築するときに,通信遅延はむだ時間となり,制御系に悪影響を与える.むだ時間の影響を補償するために可変スケーリング通信外乱オブザーバと線形で制御系設計が容易であるハイパスフィルタ通信外乱オブザーバを提案した.実機実証実験により,提案手法は定常偏差を改善することができた.特にハイパスフィルタ手法では,過渡応答も同時に改善することを確認し,無線ネットワーク制御技術を確立した.計画通りに無線通信モデルの解析が行われ,シミュレーションおよび実機実験により提案手法の検証が行われているため,(2)おおむね順調に進展していると判断した.また,これまでに通信外乱オブザーバと外乱オブザーバの併用は困難であるとされていたが,提案手法により可能性が見いだせた意義は大きい.制御工学初年度に,DCモータ単体における提案手法の有効性を十分に検証することが出来た.2015年度は計画通りに,多自由度化しより産業用ロボットに近づけた形での有効性を検証する.そして,提案手法の適用拡大のために,遠距離を想定した小型ヘリコプターの制御と画像フィードバック制御での検証を実施する.また,外乱オブザーバの併用についても可能性が見いだせたことから,提案手法の更なる改善も行う.
第二次大戦後　南満州鉄道引揚者の職業体験：神奈川県、大阪府、広島県の調査分析

本研究の目的は、1930年代から1940年代の日本の外地国策企業の企業内教育が、戦後日本の人的資本の向上や産業技術の普及に果たした役割を究明することである。2年間という研究期間を有効に活用するため、既に資料収集の見通しが立っていた南満州鉄道株式会社(満鉄)に焦点を絞り、課題を次のように3点設定し、研究を行った。【課題1】満鉄の人事記録と厚生省の「引揚者在外事実調査」(1956年)の調査票を用い、旧満鉄社員の戦時中の職務経験と戦後の職業選択を統計的に把握する。【課題2】満鉄における企業内教育(養成所及び職場での実地訓練)の実態と教育内容を、満鉄の社内資料から解明する。【課題3】課題1と課題2で得られたデータベースと資料をもとに、満鉄の企業内教育によって若手社員が習得した知識は、戦後経済の中で、どのように活用されたのか、どのような知識がどの分野において役立ったのか、死蔵されたと考えられる技術や知識はあったのか、などを考察し、満鉄引揚社員の戦後日本経済における役割を検証した。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。2年間という研究期間を有効に活用するため、国策企業の中で最大規模であった南満州鉄道株式会社(満鉄)に焦点を絞り、下記の課題を設定して研究を行った。【課題1】満鉄の人事記録と厚生省の「引揚者在外事実調査」(1956年)の調査票を用い、旧満鉄社員の戦時中の職務経験と戦後の職業選択について統計的に把握する。【課題3】課題1と課題2で得られたデータベースと資料をもとに、満鉄引揚社員の戦後日本経済における役割を検証する。研究一年目の2017年度は、【課題1】に主に取り組んだ。その中で、広島県文書館所蔵の「引揚者在外事実調査票」を収集したが、予備調査を行った段階で、資料の劣化が進んでいることが明らかになった。資料の取り扱いに細心の注意を要することから、広島文書館の資料撮影の実績がある専門業者に依頼をすることになり、2017年度分経費を一部2018年度に繰り越した。研究一年目となる2017年度は、主に史料の収集とデータベースの構築を行った。広島県文書館所蔵の「引揚者在外事実調査票」の収集に関してのみ、資料の劣化が進んでいたため、文書館の資料に詳しい専門業者に撮影を委託することになり、2018年に作業を繰り越すことになったが、その他は予定通り進めることができた。2年目となる2018年度は、【課題1】とした資料収集を完了し、【課題2】満鉄における企業内教育(養成所及び職場での実地訓練)の実態と教育内容を、満鉄の社内資料から解明、及び【課題3】課題1と課題2で得られたデータベースと資料をもとに、満鉄引揚社員の戦後日本経済における役割を検証、の作業を行う。
脳虚血-再灌流時のフリーラジカル発生及び神経伝達物質遊離と高気圧酸素の影響

脳虚血-再灌流による脳障害の発生機序として興奮性神経伝達物質(glutamate)の脳細胞外遊離の増加、及びフリーラジカル(nitric oxide:NO、活性酸素)の発生増加が考えられている。従ってglutamate及びNOの脳細胞外遊離をラットの前脳虚血-再灌流モデルでin vivoでreal timeに測定し検討した。モデルは両側頚動脈結紮と低血圧により前脳虚血とし、10分後結紮解放と換血により再灌流を行った。NO発生としてはNOの終末産物であるnitrite、nitrateを測定した。更にフリーラジカル(nitric oxide、活性酸素)が増加するエンドトキシン投与及び出血性ショックモデル(ラット)でNO発生増加に及ぼす高気圧酸素の影響と、高気圧酸素による中枢神経系酸素中毒の発生機序としてNOと活性酸素の関与を検討した。a)ラット脳(線状体、海馬、前脳皮質)での細胞外glutamate遊離は虚血中は二相性に約6倍まで増加し、再流後30分以内にbase line値となった。b)Nitriteは虚血中と再灌流後40分に増加したが、nitrate値は逆の方に動いた。c)脳虚血中のglutamateの著増はL-NAMEによっても抑制されず、再灌流後にはglutamate値は対照ラットより高値となった。2) NOと活性酸素発生に及ぼす高気圧酸素の影響a)エンドトキシン投与によるNO増加は高気圧酸素により影響を受けなかった。出血性ショックラットモデルでのnitrite.nitrateは高気圧酸素により著明に増加したが、生存期間は対照ラットより延長した。b)NOと活性酸素発生に関与する薬剤による検討の結果、NOと活性酸素の発生増加が中枢神経系酸素中毒発生に関与していることが確認出来た。脳虚血-再灌流時の脳障害の発生機序として考えられているフリーラジカル(活性酸素、niktric oxide)の発生増加と興奮性神経伝達物質(glutamate)の遊離を脳血流量の変化と共にin vivoでreal timeに測定し、これらに対する高気圧酸素(再酸素化)の影響をラットで検討することを目的とし、1.平成8年度の目的は、1)ラット前脳虚血-再灌流モデルで、マイクロダイアレシスバイオセンサーシステムにより興奮性神経伝達物質であるglutamateの遊離をin vivo,in situで脳血流量と共にreal timeに測定、2)ラット脳in vivoでの活性酸素の発生をH_2O_2発生を指標として、マイクロダイアレシスバイオセンサーシステムのマイクロダイアリシスブローブ内部に設置されたPt作用電極でH_2O_2発生を測定する方法を検討し、ラット前脳虚血-再灌流モデルでのH_2O_2発生を脳血流量と共に測定する、を検討課題とした。2.結果は、1)脳血流量は血圧と共に再灌流後一過性に上昇し、各々再灌流後15分、25分で虚血前値になり、2)H_2O_2は平均で虚血中虚血前値(32μM)より一過性に上昇(54μM)後減少するが、再灌流後急上昇し、薬10分後にmax(105μM)となり、その後は徐々に減少し、再灌流後40分には虚血前値となった。3)同時に測定し得たGlutamate(n=7)は虚血中虚血前血(2.1μM)より上昇を続け、再灌流直後にmax(6.1μM)となり5分後には2.6μMと急減し、30分後には前値まで減少した。以上より,Glutamateは虚血中急増するが再潅流によりCBFの急増と共に急激に減少するのに対し、H_2O_2は再潅流後著明に上昇し、農障害の原因となりうると考えられた。

脳虚血-再灌流時の脳障害の発生機序として考えられているフリーラジカル(活性酸素、nitric oxide)の発生増加と興奮性神経伝達物質(glutamate)の遊離を脳血流量の変化と共にin vivoでreal timeに測定し、これらに対する高気圧酸素(再酸素化)の影響をラットで検討することを目的とし、1.平成9年度の目的は、(1)ラット前脳虚血-再灌流モデルで、マイクロダイアレシスバイオセンサーシステムにより興奮性神経伝達物質であるglutamateの遊離を線条体でin vivo,in situで脳血流量、血圧と共にreal timeに測定し同時に、(2)ラット脳in vivo,でのnitric oxide(NO)発生をNO_2/NO_3の変動を指標として線条体で測定する方法を検討し、ラット前脳虚血-再灌流モデルでのNO発生を検討課題とした。2.結果は、(1)脳血流量(n=12)は血圧と共に再潅流後一過性に上昇し(各々194%、125%)、各々再潅流後15分、25分で虚血前値になり、60分後には減少(各々53%,87%)した。(2)同時に測定し得たGlutamate(n=9)は虚血中虚血前値(25μM)より上昇を続け、再潅流直後にmax(107μM)となり5分後には41μMと急減し、30分後には前値まで減少した。(3)NOとしてNO_3は虚血中及び再灌流40分後に各々50%、80%減少したのに対し、NO_2は虚血中及び再灌流30-50分後に各々591%、880-910%に増加した。以上より、Glutamateは虚血中急増するが再潅流によりCBFの急増と共に急激に減少するのに対し、NOの発生は虚血中のみでなく、再潅流によっても増加すると考えられた。高気圧酸素のNO発生に及ぼす影響を見るため、indusible NOが増加するendotoxin投与と出血生shockモデルで高気圧酸素による血清中のNO_2/NO_3への影響を検討したが、高気圧酸素による抑制効果はなかった。脳虚血-再灌流時の脳障害の発生機序として考えられているフリーラジカル(活性酸素、nitric oxide)の発生増加と興奮性神経伝達物質(glutamate)の遊離を脳血流量の変化と共にin vivoでreal timeに測定し、これらに対する高気圧酸素(再酸素化)の影響をラットで検討すること,を目的とした。2.結果:(1)対照群ではMAPが経時的に低下し4hr前後で死亡したのに対し、HBO(3ATA、60min)後では4hr迄はMAPは維持され、その後は経時的に低下したが6hr以上生存した。この時、nitrite/nitrateの変化はショック後4hr値で対照群は2.2/72.9、HBO群は4.08/110.0pmol/μlでHBO群では死亡時迄継続して増加した.従ってHBOはindusibleNOの発生増加を抑制しなと考えられた。(2)Ascorbateのin vivo、real timeの測定はmicrodialysis biosensor内のPt作用電極のoxidationsignalとcoating及びascorbate oxidaseを潅流したbiosensor signalとの比較で行った。その結果虚血後の再潅流時にascorbateがbaseline79.0-μMより223.2μM迄上昇し、oxidative stressに対する変化と考えられた。
グリッド計算環境でのナノ摩擦に関するマルチスケールシミュレーション

MEMS等を実用化するには,部品がナノオーダーに小さくなった際に顕著となる摩擦の理解が不可欠である.ナノメートル規模の部品同士の摩擦現象をシミュレートする為には,部品の大規模変形振動と部品構成原子一不純物分子間の局所的化学反応を,共に取り入れることが必要である.このためには,化学反応領域には電子密度汎関数法,その近傍には古典分子動力学法,周辺には計算量を減らすための粗視化手法を適用し,これらを同時並列的にハイブリッド化することが望ましい.局所的な化学反応を取り入れられるハイブリッド密度汎関数-分子動力学法において,任意に選んだ密度汎関数領域に対して安定的に利用できるbuffered cluster法を初めて考案した.buffered cluster法を用いることで,シミュレーションの経過に従って自動的に密度汎関数領域を変化させて化学反応をトレースすることが可能となった.また実際的規模系の大規模変形を扱うために,新しい粗視化手法である粗視化粒子法のコード化を進めた.開発したコードの応用例として,水素終端化したSi表面とSiチップとの間に複数の水分子及び水酸基をはさみ高速度で擦るハイブリッド密度汎関数-分子動力学シミュレーションを,日米の合計800ノード程度の世界最大規模のグリッド計算環境において一週間程度連続して実行することに産総研と協力して成功した.この結果はSpercomputing2005国際会議において設置したブースにおいて発表した.MEMS等を実用化するには,部品がナノオーダーに小さくなった際に顕著となる摩擦の理解が不可欠である.ナノメートル規模の部品同士の摩擦現象をシミュレートする為には,部品の大規模変形振動と部品構成原子一不純物分子間の局所的化学反応を,共に取り入れることが必要である.このためには,化学反応領域には電子密度汎関数法,その近傍には古典分子動力学法,周辺には計算量を減らすための粗視化手法を適用し,これらを同時並列的にハイブリッド化することが望ましい.局所的な化学反応を取り入れられるハイブリッド密度汎関数-分子動力学法において,任意に選んだ密度汎関数領域に対して安定的に利用できるbuffered cluster法を初めて考案した.buffered cluster法を用いることで,シミュレーションの経過に従って自動的に密度汎関数領域を変化させて化学反応をトレースすることが可能となった.また実際的規模系の大規模変形を扱うために,新しい粗視化手法である粗視化粒子法のコード化を進めた.開発したコードの応用例として,水素終端化したSi表面とSiチップとの間に複数の水分子及び水酸基をはさみ高速度で擦るハイブリッド密度汎関数-分子動力学シミュレーションを,日米の合計800ノード程度の世界最大規模のグリッド計算環境において一週間程度連続して実行することに産総研と協力して成功した.この結果はSpercomputing2005国際会議において設置したブースにおいて発表した.本研究は,世界的大規模グルッド計算環境において,ナノ摩擦のような微小機械開発に役立つ基礎物性に関する実際的規模の大規模計算機シミュレーションを,様々な手法を融合させたマルチスケール-ハイブリッド法によって実行しうることを証明することが目的である.初年度は,ハイブリッド量子古典計算コードを発展させると共に連続体的手法を融合させること,大規模グリッド計算環境を実際に安定して利用できることを実証することの計2点のサブテーマで発展があった.(i)ハイブリッド量子古典シミュレーション法をさらに発展させ,ボンド破壊や再結合する空間領域を密度汎関数法で扱いその周辺領域を分子動力学法によって古典原子として扱うシミュレーションコードとして確立した.また,実際的規模の系を扱うためには,連続体記述法を周辺領域に適用する必要がある.連続体的手法の一つであり原子論的手法とのハイブリッド化に適すると思われる粗視化粒子法を改良し実際の三次元系に適用できるようにした.分子動力学法との融合のテストを行い,シームレスに連結することを確かめた.(ii)開発したハイブリッド量子古典コードを用い,アメリカ・ピッツバーク計算機センターの512CPUと産業技術総合研究所-グリッドセンターの1280CPU(=1024+256)の合計1792CPUからなる,前例がないほど大規模な計算グリッドを太平洋をはさんで構築し,腐食前駆現象に関するシミュレーションを実際に10時間連続して一度もダウンさせずに行うことに成功した.十分に大規模計算グリッドが実用的であることを実証した.MEMS等を実用化するには,部品がナノオーダーに小さくなった際に顕著となる摩擦の理解が不可欠である.ナノメートル規模の部品同士の摩擦現象をシミュレートする為には,部品の大規模変形振動と部品構成原子-不純物分子間の局所的化学反応を,共に取り入れることが必要である.このためには,化学反応領域には電子密度汎関数法,その近傍には古典分子動力学法,周辺には計算量を減らすための粗視化手法を適用し,これらを同時並列的にハイブリッド化することが望ましい.平成17年度は,局所的な化学反応を取り入れられるハイブリッド密度汎関数-分子動力学法において,任意に選んだ密度汎関数領域に対して安定的に利用できるbuffered cluster法を初めて考案した.buffered cluster法を用いることで,シミュレーションの経過に従って自動的に密度汎関数領域を変化させて化学反応をトレースすることが可能となった.また実際的規模系の大規模変形を扱うために,新しい粗視化手法である粗視化粒子法のコード化を進めた.開発したコードの応用例として,水素終端化したSi表面とSiチップとの間に複数の水分子及び水酸基をはさみ高速度で擦るハイブリッド密度汎関数-分子動力学シミュレーションを,日米の合計800ノード程度の世界最大規模のグリッド計算環境において一週間程度連続して実行することに産総研と協力して成功した.この結果はSpercomputing2005国際会議において設置したブースにおいて発表した.
変形性関節症で誘導される軟骨特異的遺伝子CILPのプロモーター解析

1.CILPの成長軟骨における発現パターンの解析前年度作成した抗CILPポリクロナール抗体の特異性をCILPの強制発現系を用いて確認した。N末端側、C末端側の両エピトープにおいてペプチド抗体を作成したが、作成した抗体はウェスタンブロッティングにおいて感度、特異度とも間題なかったため、発生肢において免疫染色を行いその局在をみた。組織レベルの解析と同様CILPの発現は成長軟骨および筋肉に強く認めた。とくに軟骨においては増殖軟骨細胞層から前肥大軟骨細胞層にシグナルが検出され、SOX5/6の発現パターンにオーバーラップしていた。2.CILPの転写活性化に働く新規分子のクローニング前年度にしぼりこんだDSOXRE1を3コピー重ねたDNA配列をベイトにヒト軟骨、マウスエンブリオ由来のcDNAライブラリーを用いてワンハイブリッドアッセイ、およびサウスウェスタンスクリーニングを行って結合転写因子の候補を得た。得られた約30個の候補分子のうちp63とZNF18がCILPのプロモーターを特異的に活性化した。SOX5、SOX6との直接の協調的な作用は明らかではなく、さらに他の分子が介在している可能性が高いが、p63はHeLa細胞に単独でCILP mRNAを誘導可能であるばかりでなく、II型コラーゲン、SOX6、SOX9などさまざまなプロモーターの転写を活性化した。また、ZNF18はCILP以外の軟骨特異的遺伝子への反応性は小さかったが、抗アポトーシス分子であるBCL2のプロモータに高い反応性を示し、このさいp63と協調的に作用した。SOXトリオの抗アポトーシス作用の一部はp63やZNF18との協調作用によって生じている可能性が示された。軟骨形成のマスター分子であるSOX5,SOX6,SOX9を各種培養細胞に強制発現させ、CILPのmRNAレベルをreal time PCRにて検討した。CILPはSOX9の強制発現系では全く誘導されなかったが、SOX5またはSOX6の強制発現系では遺伝子導入後48時間以内にすみやかに誘導された。この反応は軟骨細胞、未分化間葉系細胞、ヒト癌細胞株にて共通であった。抗CILPポリクロナール抗体をN末端側とC末端側の2箇所のエピトープに対応する合成ペプチドを用いて作成した。in situ hybridyzationによる検討では十分なシグナルを得られなかったため、Real Time PCRにてCILP mRNAの組織ごとの発現パターンをヒト、マウスで検討した。その結果軟骨組織の他、肝臓、筋肉、眼球、顎下腺などSOX5またはSOX6の発現レベルの比較的高い組織において、中等度の発現を示すことが確認された。CILPプロモーターに対するルシフェラーゼ・レポーターアッセイの結果、CILPの転写開始点から上流1kbの配列はSOX5,SOX6の強制発現に対し強い反応を示した。このプロモーター配列に対し欠失、置換変異体を作成することでとくに転写開始点から80-100塩基上流の配列が重要であることを見出しgroup D SOX relatedenhancer 1(DSOXRE1)と命名した。同配列を用いたElectrophoretic Mobility Shift AssayでDSOXRE1に特異的に結合する核蛋白の存在が示唆されたが、SOX5またはSOX6に対する直接の結合は検出できず、配列内に明らかなSOX結合モチーフは存在しなかった。またDSOXRE1内に既知の転写因子結合配列モチーフは同定できず、同配列に結合しSOX5,SOX6と協調して働く新規転写因子の存在が予測された。
角膜由来MMPの発現に対する緑膿菌病原因子の影響

緑膿菌性角膜炎の病原性を解明する目的で、近年注目されているmatrix metalloproteinase (MMP)に着目して、その発現と活性化に及ぼす緑膿菌病原因子および炎症性サイトカインの影響を検討した。まず、臨床分離株の緑膿菌をウサギ角膜に接種して、角膜病変と角膜内に発現されるMMPを調べた。さらに、ウサギ角膜線維芽細胞(RCF)およびヒト線維肉腫(HT1080)細胞におけるMMPの発現と活性化に対する緑膿菌病原因子(エラスターゼ、アルカリプロテアーゼ、エキソトキシンA、リポ多糖)および炎症性サイトカイン(TNF-α、IL-1β)の影響をRT-PCR、ザイモグラフィー、ウエスタンブロッティングを用いて検討した。典型的な輪状膿瘍を伴う角膜潰瘍が緑膿菌接種12-24時間後にみられ、MMPs、特に、MMP-9が角膜内で発現が亢進していた。緑膿菌エラスターゼは両細胞に対して最も強い細胞障害を示した。緑膿菌エラスターゼ、アルカリプロテアーゼ、あるいはリポ多糖処理によりRCFからMMP-9の発現・分泌が誘導された。エキソトキシンAはMMPの発現に影響を及ぼさなかった。IL-1β、TNF-αともHT1080におけるMMP-9の発現を亢進させた。緑膿菌エラスターゼは両細胞からのMMP-2およびMMP-9を限定分解により活性化した。これらの結果は緑膿菌感染時にみられる角膜潰瘍病変は角膜細胞由来のMMP発現亢進および緑膿菌エラスターゼによるMMPの活性化による可能性が示唆された。コンフルエントになった兎角膜実質細胞を無血清培地(RPMI-1640)で培養し、その培養上清を採取し、ゼラチン・ザイモグラフィーおよびカゼイン・ザイモグラフィーにて解析するとMMP-2(gelatinase A)が検出された。この培養系に緑膿菌の病原因子(エラスターゼエ、アルカリ・プロテアーゼ、エキソトキシンA、リポ多糖(LPS)を種々の濃度で添加したところ、エラスターゼ添加ではMMP-2の発現増加に加えて、MMP-9(gelatinaseB)の発現もみられた。さらに、エラスターゼの濃度依存性にそれぞれの活性型と思われるやや低分子のA-MMP-2とA-MMP-9が増加し、前駆体のMMP-2とMMP-9が減少した。このことにより、緑膿菌エラスターゼがMMP前駆体を限定分解して活性化させることが分かった。アルカリ・プロテアーゼやLPS添加でもMMP-2とMMP-9の発現が亢進したが、活性化は認められなかった。一方、エキソトキシンA添加では濃度依存性にMMPの発現が低下した。これはエキソトキシンAによる細胞内での蛋白合成阻害を反映していると考えられる。兎において緑膿菌性角膜炎を惹起させ、継時的に角膜を摘出し、角膜内に産生されるMMPをゼラチン・ザイモグラフィーで解凍するとコントロール(非感染眼)に比べ、MMP-2に加えてMMP-9の発現増加、さらには活性型のMMP-2とMMP-9が検出されることから、これらのMMPの活性化は緑膿菌が分泌するエラスターゼによることが示唆された。コンフルエントになった兎角膜実質細胞を無血清培地(RPMI-1640)で培養し、その培養上清を採取し、ゼラチン・ザイモグラフィーおよびカゼイン・ザイモグラフィーにて解析するとMMP-2(gelatinasa A)が検出された。

この培養系に緑膿菌の病原因子(エラスターゼ、アルカリ・プロテアーゼ、エキソトキシンA、リポ多糖(LPS)を種々の濃度で添加したところ、エラスターゼ添加ではMMP-2の発現増加に加えて、MMP-9(gelatinase B)の発現もみられた。さらに、エラスターゼの濃度依存性にそれぞれの活性型と思われるやや低分子のA-MMP-2とA-MMP-9が増加し、前駆体のMMP-2とMMP-9が減少した。このことより、緑膿菌エラスターゼがMMP前駆体を限定分解して活性化させることが分かった。アルカリ・プロテアーゼやLPS添加でもMMP-2とMMP-9の発現が亢進したが、活性化は認められなかった。一方、エキソトキシンA添加では濃度依存性にMMPの発現が低下した。これはエキソトキシンAによる細胞内での蛋白合成阻害を反映していると考えられる。兎において緑膿菌性角膜炎を惹起させ、継時的に角膜を摘出し、角膜内に産生されるMMPをゼラチン・ザイモグラフィーで解析するとコントロール(非感染眼)に比べ、MMP-2に加えてMMP-9の発現増加、さらには活性型のMMP-2とMMP-9が検出されることから、これらのMMPの活性化は緑膿菌が分泌するエラスターゼによることが示唆された。