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変化の時代における「衰退言説」：後期共和政・帝政前期ローマの説明原理

本年は一次史料の分析、関連文献の収集、分析概念の定義づけ、および小シンポジウムの開催をおこなった。研究代表者(阿部)は、前1世紀の歴史家ダマスコスのニコラオスの歴史史料集を分析した。また、研究分担者(エレディア=チメーノ)は共和政末期ローマにかんする、サルスティウス、アッピアノス、プルタルコスなどによる文献史料を分析し、その分析結果はすでに複数の論文を通して発表された。また、研究分担者は2018年12月に京都大学で開催された古代史研究会第17回大会にて、その研究成果の一部を“Decline and Concord in the action of M. Aemilius Lepidus (cos. 78 B.C.)"と題して発表した。本研究課題の分析概念である「衰退言説」の定義については、西洋古代の歴史叙述および歴史哲学において、頽廃的(デカダント)な要素が重視され続けていた点を指摘し、衰退が社会・経済的なさまざまな要素を複雑に絡めながら発生することを強調した。これについては、2019年3月に京都大学で開催された古代史研究会第6回春季研究集会の小シンポジウム「古代ギリシア・ローマ世界における衰退言説」にて“Decline narratives: concept, project and examples"と題して報告し、参加者からさまざまな意見を得られた。また、上述の小シンポジウムでは、ギリシア共和国よりアンティゴニー・ズールナツィ博士(国立ギリシア研究財団)を招き、「ギリシア歴史叙述における衰退の物語ーヘロドトスとオリエントの伝統ー」と題した基調報告を中心に、登壇者である研究代表者、研究分担者、岸本廣大助教(同志社大学)、およびフロアーの参加者を交えて、活発な議論をおこなった。本研究課題は当初に立てられた計画にそって進展しており、これまでに研究成果も順調に発表できている。論文の発表先媒体についても、スペイン、フランス、イタリア、日本をはじめ複数の国から刊行されている学術雑誌を選んでおり、じゅうぶんな国際性を有している。口頭発表にかんしては、京都大学で開催されたふたつの研究会の場で研究の中間報告をおこない、その場の質疑応答で得られた意見によって、研究の方向性をより明確に定めることができた。また、これらの研究会では、研究分担者(エレディア=チメーノ)と日本人研究者との交流も築かれ、下記の国際研究集会への協力を呼びかけることができた。上記のような理由より、研究計画は「おおむね順調に進展している」と評価するにいたった。また、本年度の成果を踏まえ、次年度にはさらなる研究成果(学術論文)の発表と、とりわけ2019年11月開催予定の国際研究集会「変化の時代の衰退言説ー後期共和政・帝政初期ローマの説明原理」の成功が期待される。本研究の2019年度の最大の目標は、11月に京都大学でおこなわれる国際研究集会「変化の時代の衰退言説ー後期共和政・帝政初期ローマの説明原理」の開催である。この国際研究集会では研究代表者、研究分担者をはじめ、海外からはキャサリン・スティール教授(グラスゴー大学)、ヴァレンティナ・アレーナ博士(ユニヴァーシティ・カレッジ・ロンドン)、アンケ・ヴァルター博士(ニューカッスル大学)が報告者として参加し、また複数の日本人研究者も研究報告をする。この研究会で、研究代表者は「あるオリエント国家の衰退言説ーダマスコスのニコラオス『世界史』におけるメディア史」と題した研究報告を、研究分担者は「衰退言説:そのコンセプトと共和政後期・帝政初期ローマ史への応用」と題した序論的報告および「アッピアノスとサトゥルニヌス時代の分析:衰退言説の一事例か?」と題した個別研究報告をおこなう予定である。研究集会後には報告論集刊行にむけた準備をおこない、刊行元であるボルドー・モンターニュ大学出版局と交渉する。これと並行して研究分担者は以下の3編の論文を学会誌に投稿予定である。・「国制変革にたいするマルクス・カルプルニウス・ビブルスの執政官としての実践ー反応、あるいは再興か」(スペイン語)ーフランスの学術雑誌『古代史研究年報(Revue des Etudes Anciennes)』に投稿予定・「サトゥルニヌスと『ヘレンニウスに与える弁論書』ー微細レベルでのアプローチ」(スペイン語)ードイツの学術雑誌『クリオ』に投稿予定・「M・アエミリウス・レピドゥスの行動における調和と不安定」(英語)ー日本の学会誌『西洋古代史研究』に投稿予定また、研究代表者もローマ時代のギリシア史学史におけるオリエント叙述の伝統を明らかにすべく、リュディアのクサントスおよびレスボスのヘラニコスといった古典期初期の歴史家の史料を分析する計画である。

本研究課題の分析概念である「衰退言説」の定義については、西洋古代の歴史叙述および歴史哲学において、頽廃的(デカダント)な要素が重視され続けていた点を指摘し、衰退が社会・経済的なさまざまな要素を複雑に絡めながら発生することを強調した。これについては、2019年3月に京都大学で開催された古代史研究会第6回春季研究集会の小シンポジウム「古代ギリシア・ローマ世界における衰退言説」にて“Decline narratives: concept, project and examples"と題して報告し、参加者からさまざまな意見を得られた。また、上述の小シンポジウムでは、ギリシア共和国よりアンティゴニー・ズールナツィ博士(国立ギリシア研究財団)を招き、「ギリシア歴史叙述における衰退の物語ーヘロドトスとオリエントの伝統ー」と題した基調報告を中心に、登壇者である研究代表者、研究分担者、岸本廣大助教(同志社大学)、およびフロアーの参加者を交えて、活発な議論をおこなった。本研究課題は当初に立てられた計画にそって進展しており、これまでに研究成果も順調に発表できている。論文の発表先媒体についても、スペイン、フランス、イタリア、日本をはじめ複数の国から刊行されている学術雑誌を選んでおり、じゅうぶんな国際性を有している。口頭発表にかんしては、京都大学で開催されたふたつの研究会の場で研究の中間報告をおこない、その場の質疑応答で得られた意見によって、研究の方向性をより明確に定めることができた。また、これらの研究会では、研究分担者(エレディア=チメーノ)と日本人研究者との交流も築かれ、下記の国際研究集会への協力を呼びかけることができた。上記のような理由より、研究計画は「おおむね順調に進展している」と評価するにいたった。また、本年度の成果を踏まえ、次年度にはさらなる研究成果(学術論文)の発表と、とりわけ2019年11月開催予定の国際研究集会「変化の時代の衰退言説ー後期共和政・帝政初期ローマの説明原理」の成功が期待される。本研究の2019年度の最大の目標は、11月に京都大学でおこなわれる国際研究集会「変化の時代の衰退言説ー後期共和政・帝政初期ローマの説明原理」の開催である。この国際研究集会では研究代表者、研究分担者をはじめ、海外からはキャサリン・スティール教授(グラスゴー大学)、ヴァレンティナ・アレーナ博士(ユニヴァーシティ・カレッジ・ロンドン)、アンケ・ヴァルター博士(ニューカッスル大学)が報告者として参加し、また複数の日本人研究者も研究報告をする。この研究会で、研究代表者は「あるオリエント国家の衰退言説ーダマスコスのニコラオス『世界史』におけるメディア史」と題した研究報告を、研究分担者は「衰退言説:そのコンセプトと共和政後期・帝政初期ローマ史への応用」と題した序論的報告および「アッピアノスとサトゥルニヌス時代の分析:衰退言説の一事例か?」と題した個別研究報告をおこなう予定である。研究集会後には報告論集刊行にむけた準備をおこない、刊行元であるボルドー・モンターニュ大学出版局と交渉する。これと並行して研究分担者は以下の3編の論文を学会誌に投稿予定である。・「国制変革にたいするマルクス・カルプルニウス・ビブルスの執政官としての実践ー反応、あるいは再興か」(スペイン語)ーフランスの学術雑誌『古代史研究年報(Revue des Etudes Anciennes)』に投稿予定・
骨格筋線維化形成メカニズムの解明とその予防

脱神経されたラットヒラメ筋の筋周膜や筋内膜でtypeI、IIIcollagenの時間依存的増加が免疫組織化学により示された。COL1_α1 mRNA発現は変化がなかったが、COL3_α1 mRNAは脱神経後3日に減少したが、その後は回復した。TGF-ss1 mRNAおよびタンパクの発現は、脱神経後時間依存的に増加傾向を示し、ともに脱神経後14日で有意に増加を示した。脱神経に伴う骨格筋線維化はTGF-ss1の増加と同期して生じた。〈具体的内容〉線維芽細胞のコラーゲン産生を刺激する物質として知られるtransforming growth factor beta(TGF-β)が脱神経筋でいつの時期から発現するかに注目した。まず、脱神経骨格筋のTGFβ遺伝子発現をリアルタイムPCRで調べるため、ラットの坐骨神経を切除した後3,7,14日のヒラメ筋を採取した(各群6匹)。筋サンプルからtotalRNAを抽出し、逆転写してcDNAを作成した。TGF-βおよび内因性コントロールに使用するβ-actinの発現量を絶対定量するため、それぞれの検量線用の標準サンプルをクローニングした。今後は抽出・調整したサンプルを用い、リアルタイムPCRで脱神経筋でのTGF-β遺伝子発現を経時的に調べる予定。線維化形成の詳細を組織学的に調べるため、ラットの坐骨神経を切除した後のヒラメ筋を採取し、凍結固定もしくはホルマリン固定の後、パラフィン包埋した。今後は、免疫組織化学的手法を用いて細胞外基質タンパクであるI型・III型コラーゲンやTGF-βタンパク発現を調べる予定。〈意義・重要性〉脱神経後の線維化は骨格筋の機能を不可逆的に低下させる。培養線維芽細胞や損傷筋の実験より、結合組織の増生にTGF-βが関与することが示唆されているが、脱神経後に関しては不明である。TGF-βの発現時期、さらにそれ以外に線維化への関与が示唆される成長因子(fibroblast growth factorやplatelet-derived growth factor)を調べ、さらにTGF-βの発現を抑制する介入方法(薬物、機械的刺激など)を探ることで、脱神経後の骨格筋線維化形成を遅延・抑制し得ると考えている。<具体的内容>19年度に抽出・調整したラット脱神経筋サンプルを用い、リアルタイムPCRで脱神経後3,7, 14, 28日のヒラメ筋でのTGF-β1遺伝子発現を調べた。その結果、脱神経後のヒラメ筋では無処置の対照群と比べ脱神経後3日より増加し(1.7倍)、その後増加が見られた(7日: 2.7倍、14日: 2.7倍)。HE染色およびアルデヒドフクシン・マッソンゴールドナー染色を行ったところ、脱神経後7日より血管周囲や筋内膜・筋周膜で結合組織の肥厚がみられ、14, 28日後では線維化傾向が増加した。<意義・重要性>結合組織の増生にTGF-β1が関与することが培養細胞あるいは傷害筋で示唆されているが、今回の結果から、骨格筋脱神経後の結合組織増加に先立ってTGF-β1遺伝子発現の増加が開始し、その後も増加することがわかった。したがって、抗線維化を目的とした介入は、脱神経後早期から行う必要がある可能性が示唆された。脱神経後初期からTGF-β1発現を抑制あるいはTGF-β1の機能自体を抑制できれば、その後に生じる線維化を減少させる可能性がある。今後はTGF-β1の発現を抑制する薬物(ステロイド)、機械的刺激などの介入方法を探ることで、脱神経後の骨格筋線維化形成を遅延・抑制し得ると考えている。<具体的内容>脱神経後の骨格筋で生じる線維化の形成メカニズム解明を目的とした。脱神経後3,7,14日のヒラメ筋でのTGF-β1タンパク発現の変化についてELSAを用いて調べた。その結果、無処置の対照群に対し脱神経後3日で109%、7日で123%、14日で158%と時間依存的に増加した。さらに、脱神経筋で発現するtype Iおよびtype III collagen mRNAの発現をリアルタイムPCRで調べたところ、type I collagenでは変化が見られなかったものの、type III coUagenは脱神経後3日に25%に有意に減少した後、7日で60%、14日で75%と回復した。type III collagen/type I collagenでは、脱神経後3日で56%に減少した後、7日で155%、14日で182%に増加した。さらに、type Iおよびtype III collagenの免疫組織化学を行なったところ、脱神経後7日で筋周膜や筋内膜でtype Iおよびtype III collagenが増加し、14日でさらに著明となった。<意義・重要性>

脱神経後のTGF-β1の発現について、脱神経直後から線維化に至る早期過程での経時的変化を今回初めて解明した。さらに、TGF-β1の発現の変化と同時期にcollagenの変化も生じたことから、TGF-βがcollagenの発現増加や分解抑制に関与することが示唆された。
ディアスポラにみる文学の再発見と蓄積-アーカイヴ化されるマノリティの記憶

ディアスポラ集団の結束の心的紐帯として、どの時代にもそれぞれに重要な役割を果たしてきた、マイノリティ自身による文学作品について、4つのマイノリティを例に、1)マイノリティ集団によるその収集および保存の実情、2)それに対するマジョリティによる援助と干渉、現在のアーカイヴの学術性とその保障、アーカイヴの利用とそれに基づく研究の実情、および3)グローバル化したディアスポラにおけるそのアーカイヴの意義について検証した。・各研究対象のアーカイヴおよびアーカイヴに相当するコレクションの保存先を訪問し、その周辺機関とコンタクトをとり、アーカイヴの設立背景や維持の方法、マイノリティ文学の収蔵状況等について把握した。必要に応じて関係者とのインタビューを試み、資料を収集した。訪問先は以下の通り。○鈴木:トランシルヴァニア各都市の残存ドイツ文学アルヒーフ(シビウなど3箇所)、クルージ・ナポカ大学内カール・クルト・クライン遺贈文庫○山下:シンガポール国立図書館○藤田:ミュンヘン大学付属南東ヨーロッパ文化研究所等○佐藤:国立プラハ図書館および個人蔵書コレクション・フィールド調査の取りまとめの討議、本研究の主要な柱である「アーカイヴ形成と操作の問題」、「外的圧力と援助の問題」・「アーカイヴの学術性に関する問題」に関する討議と認識の共有を行い、アーカイヴの維持運営の母体、国家や州などの関与と介入について比較研究を行った。個別分野の調査の一例を挙げれば、トランシルヴァニアのドイツ人たちによる自立的かつ批判的な開かれたアーカイヴは、昨年マイノリティの「負の記憶」を暴き出す作品でノーベル文学賞を受賞したヘルタ・ミュラーの作品世界が成立した背景に照らしてみると、それを読み取る上でこの上ない資料庫であり、「負の記憶」をも無視しないその営為には、かかるアーカイヴの一つの規範をすら提示していることが示された。その運営の力学に関する研究が急がれる。・以上により得られた研究成果のうち、今年度中に発表しうる研究成果を刊行した。各マイノリティが、それぞれのアーカイヴ形成に示している非常な労力と集積の実態を再確認し、とりあえずの認識の共有のための研究会を継続しつつ、各マイノリティ内部の研究者との連絡をさらに密にすることができている。この状況を受けてフィールド調査の取りまとめの討議、「アーカイヴ形成と操作の問題」、「外的圧力と援助の問題」、「アーカイヴの学術性に関する問題(アーカイヴの閉鎖性に関する問題も含む)」に関する討議と認識の共有に重点を置き、「アーカイヴ化された文学と仮想空間のディアスポラをめぐる問題」についての討議を開始し以下を遂行した。・とくに「アーカイヴ形成と操作の問題」、「外的圧力と援助の問題」、「アーカイヴの学術性に関する問題」に関する論文の執筆と学術雑誌への投稿・個別領域の資料収集の継続・研究代表者鈴木はミュンヘン大学付属東方ドイツ人会館付属研究所の研究員アッカー博士とともに、同郷人会アーカイヴの大学による接収に関する討議と情報収集を、メディアを介して継続的に遂行した。・発表可能な成果に関しては、雑誌論文などでの公刊を開始している。なお、平成23年3月の大震災のため、一部の機器の納入が停止したために資料の収集に差支えが出ている状態だが、次年度で遅れを取り戻すことは可能であると考えている。本研究は作業を1)アーカイヴ形成とその操作の問題2)外的圧力と援助の問題3)アーカイヴの学術性に関する問題4)アーカイヴ化された文学と仮想空間のディアスポラをめぐる問題に集約している。これらに関して、前年度までにフィールドにおける調査の大半を終えたが、若干の補完を行った。また、「アーカイヴ化された文学と仮想空間のディアスポラをめぐる問題」についての討議を本格化し、研究の重心を以下を中心としたものに移行した。(1)各研究者の個別事項・「アーカイヴ化された文学と仮想空間のディアスポラをめぐる問題」に関する各対象ディアスポラに関わる論文の作成と学術雑誌への投稿・藤田は同郷人会ホームページと文学アルヒーフの関係の調査(2)研究組織の全体事項・公開研究会「ディアスポラにみる文学の再発見と蓄積-アーカイヴ化されるマイノリティーの記憶-」の開催・引き続き研究成果の公刊をおこなった。
バレット食道の病態・癌化に関わるエピゲノム異常の解析

本研究では食道癌発症機構の解明を目指し、バレット腺癌及び食道扁平上皮癌におけるエピジェネティックな遺伝子発現異常の解析を行った。まず、バレット食道における糖鎖発現を検討した結果、正常腸で発現が認められるSda糖鎖が、バレット食道の一部で異所的発現し、バレット食道腺癌ではDNA高メチル化を伴い発現低下することを明らかにした。食道扁平上皮癌を用いた網羅的DNAメチル化解析及び発現解析の結果、細胞増殖抑制及び細胞接着等に関わる遺伝子群がDNAメチル化を介して発現低下していることを明らかにし、バレット食道癌及び食道扁平上皮癌にエピジェネティック異常が密接に関わる事を明らかにした。バレット食道は、胃食道逆流症による傷害からの修復過程で生じる異常分化上皮であり、腺癌発症の母地となるため臨床的に重要視されている。申請者らのグループは、消化管の慢性炎症性疾患である潰瘍性大腸炎、及びそれに伴う炎症発癌過程において、正常型Sda糖鎖の合成酵素遺伝子群の発現がエピジェネティック機構により転写抑制されていることを見出し、消化管の炎症・発癌にエピゲノム変化が密接に関与していることを明らかにしてきた。本研究では、糖鎖発現変化を指標としたバレット食道の網羅的エピゲノム異常解析を行うことで、腺癌発生に至る病態の解明を目指した。さらに、同じく喫煙・飲酒誘発性エピゲノム異常が発癌に密接に関わっている食道扁平上皮癌の網羅的解析を行った。平成25年度は、食道扁平上皮癌及び同一症例の正常食道粘膜組織より抽出したDNA及びRNAを用い、MeDIP-seq法によるメチローム解析、serial analysis of gene expression (SAGE)-seq法によるトランスクリプトーム解析を行った。正常食道粘膜組織に比べ食道扁平上皮癌においては、159個の遺伝子が発現低下しており、その内56個の遺伝子においては、その転写開始点近傍(-10kb-+2kb)にDNA高メチル化が認められた。また、食道扁平上皮癌細胞株を用いたDNA脱メチル化剤5-Aza-2'-deoxycytidine処理により、これらの遺伝子の発現回復を確認した。さらに、食道癌細胞株を用いた機能解析により、DNAメチル化により発現低下しているこれらの遺伝子は、細胞増殖抑制、及び、細胞接着等に関わる食道上皮における新規癌抑制的遺伝子であることを示した。これらの解析より見出されたエピゲノム変化は、食道扁平上皮癌、バレット腺癌の新たな診断マーカーに成り得る可能性が考えられる。平成24年度は、バレット食道における糖鎖発現を、生検検体の免疫組織染色により検討した。正常腸で発現が認められるSda糖鎖は、正常食道扁平上皮細胞には発現していなかった。バレット食道検体の一部ではSda糖鎖の異所的発現が見られたが、ムチン発現による胃型(MUC5AC、MUC6)ないし腸型(MUC2)との関連は認められなかった。Sda糖鎖合成遺伝子のプロモーター領域のDNAメチル化状態をPyrosequence法により定量した結果、正常食道では低メチル化状態であったのに対し、Sda糖鎖陰性バレット食道生検およびバレット食道腺癌ではメチル化レベルは著しく高かった。以上より、バレット食道腺癌に至る過程で、DNAメチル化異常が生じること、バレット食道に異所的に発現するSda糖鎖がその指標となり得ることが明らかとなった。更に、バレット食道癌手術検体より抽出したDNA及びRNAを用い、MeDIP-seq法によるメチローム解析、serial analysis of gene expression (SAGE)-seq法によるトランスクリプトーム解析を行った。平成24年度の研究実地計画のうち、1)バレット食道検体におけるSda糖鎖発現パターン解析、2)バレット食道検体におけるメチローム解析、についてはほぼ計画通りに遂行できた。しかしながら、臨床検体を用いた研究においては研究目的に使用できる標本量に限界があり、特に生検検体という微量組織を用いて上記研究計画1)2)と、3)バレット食道上皮細胞培養系の確立を同時に行うことは量的に不可能であった。

そのため、本年度はバレット生検を用いた検討では、解析対象検体の臨床病理学的分類に必要な研究計画1)を最優先させた。3)についてはバレット食道検体のかわりに、食道癌近傍部の食道扁平上皮細胞を分離し、初代培養系を確立した。今後2)のトランスクリプトーム解析結果を見ながら、食道扁平上皮細胞培養系に種々の因子を添加することより、バレット食道で見られる増殖性円柱上皮細胞の誘導を試み、その分子病態を明らかにして行く予定である。本研究の目的である、糖鎖発現変化を指標にしたバレット食道から腺癌発生過程におけるエピゲノム変化の網羅解析によるバレット腺癌に至る病態の解明を目指し、交付申請書に記載した研究計画に基づき研究を推進して行く予定である。具体的には、ChIP-seq法によりバレット食道検体におけるヒストン修飾変化の解析を行い、ヒストン修飾とDNAメチル化及び遺伝子発現変化との関連を明らかにする。次に、これらの解析によりエピジェネティックな遺伝子発現異常が認められた遺伝子ついて、これまでに確立した食道上皮培養系を用いた機能解析を行う。さらに、これらの解析より見出されたエピゲノム変化を、蓄積されたバレット食道及び腺癌症例において解析することで、病態との関連を明らかにし、バレット食道及び腺癌の新たな診断マーカーに成り得るかどうかを解析する。該当なし。
敗血症における好中球高齢化とその病態解明に関する研究

昨年我々はマウスと同様にヒト好中球においても時間経過、すなわち高齢化でCXCR4が増加することを示し、高齢好中球マーカーとしてのCXCR4の有用性を示した。さらに我々は、昨年と継続して健常者と敗血症患者(受診72時間以内)から血液サンプルを採取し、同様に好中球を分離後、蛍光標識抗体(CXCR4)を用いて高齢好中球の全血液中に対する割合をフローサイトメトリー法を用いて測定した。結果として、健常者と比較して敗血症患者においては有意に血中CXCR4発現陽性好中球(高齢好中球)の割合さらにはCXCR4発現陽性好中球表面の発現量が増加していることを突きとめた。さらに、昨年と継続して敗血症患者の高齢好中球陽性の割合と重症度スコア(SOFAスコア)や種々の臓器障害マーカーや臨床パラメーターとの相関関係を解析すると、高齢好中球の割合は重症度スコアと有意に逆相関を示し、また腎機能(クレアチニン)とも有意に逆相関関係を示していた。興味深いことに、敗血症群と敗血症ショック群で比較すると、高齢好中球における表面CXCR4発現量は敗血症ショック群で増加する一方、その血中での陽性割合は低下していた。我々は、この結果の解釈として、高齢好中球は他の好中球phenotypeと比較して、炎症組織への血管外遊走能に優れているpenotypeであり、そのため敗血症が重症化するほど循環血中からいなくなってしまい、血中での割合は減少するのではないかと考えている。今後は、これら仮説の証明のため、継続して高齢好中球の血管外遊走能の評価を主体として研究を行っていく方針である。当初の当該年度の研究の達成目標である高齢好中球と敗血症における炎症、臓器障害や重症度との関連を明らかにする研究に関して予定通り施行ができており、前述のように高齢好中球の割合は重症度スコアと有意に逆相関を示し、また腎機能(クレアチニン)とも有意に逆相関関係を示していることを証明している。そのため、我々は研究の進歩状況はおおむね順調に進展していると評価しているこれまでに達成してきた研究結果から、高齢好中球はその他好中球phenotypeと比較して、血管外遊走能が優れた好中球phenotypeである可能性がある。今後は好中球遊走に関わる様々な機序やステップ(好中球変形能、接着、遊走、血管外漏出など)が高齢好中球において亢進しているのかどうかを評価する実験系を検討している。さらには、当初の目標である高齢好中球の敗血症患者血中での継時的変化を明らかにする研究や好中球の加齢に関わるタンパク質の探索を行う研究を開始していく方策である。まず、マウス高齢好中球表現型を示すと考えられているCXCR4が、ヒト好中球でも高齢マーカーとして使用可能かどうか検討するために、健常者から血液サンプルを採取し、好中球を分離後、0,2,20、24時間と時間を分けて細胞培養を行い、それらを蛍光標識抗体(CXCR4)を用いてフローサイトメトリー法を用いて測定した。結果として、CXCR4の発現は無刺激で培養時間が長くなればなるほど増加を示しており、マウスと同様、ヒト好中球においても時間経過、すなわち高齢化でCXCR4が増加することを示し、高齢好中球マーカーとしてのCXCR4の有用性を示した。さらに我々は、健常者と敗血症患者(受診72時間以内)から血液サンプルを採取し、同様に好中球を分離後、蛍光標識抗体(CXCR4)を用いて高齢好中球の全血液中に対する割合をフローサイトメトリー法を用いて測定した。結果として、健常者と比較して、敗血症患者において有意にCXCR4発現好中球(高齢好中球)が増加していることを突きとめた。さらに、敗血症患者の高齢好中球の割合と重症度スコア(SOFAスコア、APACHEIIスコア)や種々の臓器障害マーカーや臨床パラメーターとの相関関係を解析すると、高齢好中球の割合は重症度スコアと有意に逆相関を示し、また腎機能(クレアチニン)と逆相関関係傾向、血小板数と相関関係を示していた。現在まだサンプル数少なく統計学的パワー不足であるが、今後サンプル数を増加させた場合、こちらの結果も統計学的相関関係を証明できる可能性は十分ある。これらの研究成果は、血中高齢好中球の増加が、敗血症患者の特に腎機能改善、血小板数増加に関与している可能性を示唆するものであり、最終的には重症度低下に寄与する可能性を示している。当初の当該年度の研究の達成目標はヒト高齢好中球マーカーを同定することであったが、上記の通り、マウス好中球と同様にCXCR4がヒト好中球においても高齢化マーカーとして適当であることを証明することができた。さらに、次年度以降の達成目標である高齢好中球と敗血症における炎症、臓器障害や重症度との関連を明らかにする研究に関しても、まだサンプル数不足で完遂はできていないが、進行中であり、研究としておおむね順調に進展していると我々は評価している。

結果として、健常者と比較して敗血症患者においては有意に血中CXCR4発現陽性好中球(高齢好中球)の割合さらにはCXCR4発現陽性好中球表面の発現量が増加していることを突きとめた。さらに、昨年と継続して敗血症患者の高齢好中球陽性の割合と重症度スコア(SOFAスコア)や種々の臓器障害マーカーや臨床パラメーターとの相関関係を解析すると、高齢好中球の割合は重症度スコアと有意に逆相関を示し、また腎機能(クレアチニン)とも有意に逆相関関係を示していた。興味深いことに、敗血症群と敗血症ショック群で比較すると、高齢好中球における表面CXCR4発現量は敗血症ショック群で増加する一方、その血中での陽性割合は低下していた。我々は、この結果の解釈として、高齢好中球は他の好中球phenotypeと比較して、炎症組織への血管外遊走能に優れているpenotypeであり、そのため敗血症が重症化するほど循環血中からいなくなってしまい、血中での割合は減少するのではないかと考えている。今後は、これら仮説の証明のため、継続して高齢好中球の血管外遊走能の評価を主体として研究を行っていく方針である。当初の当該年度の研究の達成目標である高齢好中球と敗血症における炎症、臓器障害や重症度との関連を明らかにする研究に関して予定通り施行ができており、前述のように高齢好中球の割合は重症度スコアと有意に逆相関を示し、また腎機能(クレアチニン)とも有意に逆相関関係を示していることを証明している。そのため、我々は研究の進歩状況はおおむね順調に進展していると評価している現在既に進行中である、高齢好中球と敗血症における炎症、臓器障害や重症度との関連を明らかにするための研究を引き続き継続し、統計学的解析に十分なサンプル数を目指す。さらに、当初の該当年度目標である高齢好中球の敗血症患者血中での継時的変化を明らかにする研究や好中球の加齢に関わるタンパク質の探索を行う研究を開始していく方策である。これまでに達成してきた研究結果から、高齢好中球はその他好中球phenotypeと比較して、血管外遊走能が優れた好中球phenotypeである可能性がある。今後は好中球遊走に関わる様々な機序やステップ(好中球変形能、接着、遊走、血管外漏出など)が高齢好中球において亢進しているのかどうかを評価する実験系を検討している。さらには、当初の目標である高齢好中球の敗血症患者血中での継時的変化を明らかにする研究や好中球の加齢に関わるタンパク質の探索を行う研究を開始していく方策である。本研究に必要な抗体や試薬、備品が想定内より安価で購入できていることが第一に挙げられる。さらに、健常者や患者からの研究サンプル採取数不足で使用額が想定以下で収まっている。ただし、今後サンプル数の増加が必要であり、試薬、検体も不足してきており追加購入が必要な状態である。もともと予定されている新たな研究計画も遂行予定であり、これらの実行のために助成金が使用される予定である。研究計画は概ね順調に進行しているが、実際に算定した研究サンプルサイズはまだ達成しておらず、そのため実験に使用する医療試薬の購入などが予定より少額で次年度使用額が生じたと考えられる。しかし、予定していなかった高齢好中球遊走能亢進を評価する実験系を計画中であり、これらの費用として次年度使用額を考えている。
東アジアにおけるホームレス支援モデルの構築

本研究は、グローバル化やそれに伴う産業再編によって、都市の再構築が進められてきた東アジアにおけるホームレス支援モデルの類型化を図っていくことを目的としている。そのため、東アジアの先進都市におけるホームレス化と社会的排除との関連性、住宅困窮層に対する居住支援や社会的企業などに関する評価を行うと共に、東アジアの包摂都市に向けたワークショップを企画、実行し、今後も研究や支援手法、政策的な連携が期待できる交流ネットワークを継続させていく基盤構築に資することができた。そのため、東アジアの先進都市におけるホームレス化と社会的排除との関連性について、実証的で総合的な調査手法を包括的に用いながら実地調査に取り組んだ。今年度は、日韓比較に重点を置いて調査を進め、とりわけ、非常に劣悪な居住状態でホームレスとの相関性が高い人々の居住地に対する研究、そして日韓のホームレス居住支援策についての研究を行った。簡単に概要を述べると以下の通りである。まず前者の研究からはその成果をまとめ国際学会にて発表を行い、同時に学術論文集にも掲載された。また学内のワーキングペーパーとしても掲載された。その内容は、ホームレスとの相関性が高くその日の収入如何ではホームレス生活を余儀なくされている人々の居住地の調査を行い、当該地域の再生や居住者の生活および居住支援のあり方を模索したものである。とりわけ、地域との関連性という視点からホームレス問題を捉えようとした点に独創性がある。そして後者の研究は、日韓の複合的な居住支援策を比較したものである。その成果については、日韓両国の学術大会にて報告を行った。今年度は、日本の調査結果の分析に焦点をあてて成果報告を行ったが、次年度は、韓国の調査内容の分析についても引き続き論文および学会報告を行う予定で進めている。内容は、これまでのホームレス支援における一般解であった「路上→施設→自立」という伝統的な支援システムのやり方を払拭する形で、「路上→支援付き住宅」あるいは「施設や劣悪な住居→支援付き住宅」という住宅を第一にしたホームレス支援策を試みてきた両国の居住支援プログラムに焦点を当ててその有効性を比較分析した研究である。今年度は、昨年度に引き継いで住宅困窮者支援の日韓比較を始め、これまでの調査研究過程の中で非常に類似した問題を抱えていることが発見できた、台湾における住宅困窮層及び社会的不利地域についても実地調査や文献のレヴューなどを行いながら他の東アジア諸国との比較検討を行った。さらに、住宅困窮層及び社会的不利地域の再生に向けた都市間のネットワークを図るため、東アジアの包摂都市に向けたワークショップを企画し、実行させ、今後も研究や支援手法、政策的な連携が期待できる交流ネットワークを継続させていくことを進めている。研究の成果においても関連した施策や支援手法が多様化しつつあるホームレスなど住宅困窮層に対する居住支援や社会的企業など、関連したプログラムに対して実態調査を踏まえた調査分析および、評価を行った。そして、国際シンポジウムでの報告をおこなうと共に学術ジャーナルや都市政策に関連した雑誌、そして文献等を通じて発表を行った。これらの研究成果を通じて各先進都市が抱えている同様の問題の現状に対する共通的な認識に資すると共に実践のレヴェルにおいてもフィードバックできることが期待できよう。
カルベン型高活性分子

研究目的:本研究の目的は、これまでに見られなかった「反応性中間体を研究の中核に据える」研究体制を、(1)高活性分子に関する理論的、物理化学的な基礎研究、(2)高活性分子種の創出と反応、(3)高活性分子を用いる合成反応、(4)新物性開発に基づく触媒・素材研究への応用、の4研究区分に分けて、創造的学術成果を生み出せる重点領域研究の総合的組織化を企画することにあった。そこでは高次原子価欠損型分子であるカルベン、カルバインとそれらのN,Si,S,P,Ge,Sn,Pb等の類似分子、カルベノイドとその類似体、金属錯体、イオン等価体、を中心とした高活性分子の創出、物性と反応、基礎と応用、を結ぶ創造的化学を、重点領域研究体系を通じて広く厚く展開する計画を練り上げた。基本的思想:編成した研究計画の基本思想は基礎的研究にある。基礎的研究から示唆されるカルベン型高活性分子の特性を合成反応として展開する演繹的研究班と、望まれる物質機能あるいは分子機能を実現できる分子構築手段としての高次原子価欠損型活性分子の設計を目的とする帰納的研究班を、次の研究班に分けて検討することになった。(1)理論と設計ならびに検出、(2)反応と合成、(3)機能と応用。重点領域研究班(案)の完成のために全体会議1回、分科会1回、ワーキンググループ会議数回を開催した。その結果、添付資料の平成7年度重点領域研究申請書[高次原子価欠損型分子種]を完成し、文部省研究助成課へ2月17日に提出した。
オリゴシランエピタキシャル膜と量子井戸構造形成による新機能の発現に関する研究

本研究では、シリコン鎖状ポリマー(ポリジメチルシラン、PDMS)およびその低分子亀体(ジメチルドデカシラン、DM12)の超薄膜を石英やアルカリハライド上に分子線蒸着法を用いて作製し、その構造と光学特性の関連を調べた。X線回折および原子間力顕微鏡を用いて、PDMSおよびDM12薄膜の分子配向を調べたところ、石英基板上では、分子が基板に垂直に「立って」配向することがわかった。基板が平坦であれば、数マイクロメートル程度の大きさの板状グレインを形成し、成長条件を制御することにより、大面積で均一な薄膜の作製が可能であることが示された。一方、アルカリハライド(KBr、KC1およびNaCl)劈開面上では分子は基板の<110>軸に沿って配向することがわかった。KBrおよびKCl上では、PDMSの(010)面が基板に平行になるのに対し、NaCl上では(001)面が平行になる。これは、PDMSの格子定数と基板の格子定数のマッチングの度合いで説明される。この構造の違いを反映して、光学吸収スペクトルにも大きな違いが現れた。石英基板上の薄膜では、主鎖のσ-σ^*遷移に基づく鋭い吸収が観測された。一方、アルカリハライド上の薄膜では、吸収ピークがブロードでかつ長波長側にシフトした。これらの光学特性は、異なる分子会合状態における双極子-誘起双極子相互作用の違いで説明される。
新しいタイプのDNA結合蛋白質JκRBPの機能の解析

我々はRBP-Jκ遺伝子を発現ベクターに組み込み、RBP-Jκ蛋白を発現誘導できるトランスジェニックフライを作成した。この形質転換体にRBP-Jκ蛋白質の過剰発現を誘導したところ、神経芽細胞がなくなり、RBP-Jκ遺伝子はニューロジェニックジーンとしての機能を有することが判明した。上皮芽細胞となる細胞膜上には、ニューロジェニックジーンのひとつであるNotch蛋白質が神経芽細胞からのシグナルを受け取る。遺伝学的および細胞生物学的解析より、RBP-Jκ遺伝子産物がNotchのシグナル伝達系において細胞膜から核へシグナルを伝えることが報告された。我々は酵母ツ-ハイブリッドシステムを用いて、Notch蛋白質とRBP-Jκ蛋白質の会合がショウジョウバエの変位体において変化していることを証明した(投稿中)。また、我々はRBP-Jκ蛋白質の結合性の高いDNA配列がC/TGTGGGAAであることを見いだした。RBP-Jκ蛋白質はこの配列に強く結合し転写を活性化した。さらに、遺伝学的解析によりRBP-Jκ蛋白質と拮抗する機能をもつと考えられてきたHairless蛋白質は、RBP-Jκ蛋白質の転写活性能を強く抑制することも示した。我々はニューロジェニックジーンのシグナル伝達系の最終ステップで働くE(spl)m8のプロモーター領域にRBP-Jκ蛋白質の結合配列を発見し、RBP-Jκ蛋白質がこのプロモーターをin vitroおよびin vivoともに活性化することを示した。(投稿中)。ヒト上咽頭癌の原因ウイルスであるEBウイルスがコードする種々の遺伝子産物のうちEBNA2はBリンパ球が不死化するのに必須の役割を果たす。我々がクローニングしたヒトRBP-Jκ蛋白質はEBNA2と協同でCD23,CD21などの遺伝子の転写を活性化することを証明した。発生やリンパ球の活性化の過程においてもRBP-Jκ蛋白質はEBNA2に相当する細胞因子と会合して様々なイフェクター遺伝子の転写を制御しているものと考えられる。実際にその因子を同定すべく我々はtwo-hybrid systemを用いてマウスembryoからRBP-Jκ蛋白質に会合する蛋白質をスクリーニングし複数個の候補を得ている。(投稿中)。
「科学への低関与層」に明確にターゲティングした戦略的アプローチ手法の開発と体系化

本研究の目的は「科学への低関与層」にアプローチする手法を開発することにあった。オーストラリア・ヴィクトリア州政府が開発した手法を用いることで、科学技術イベントへの主参加者が「科学への高関与層」であることを明らかにした。科学への低関与層へのアプローチ手法としては、テーマを生活と関連づける、飲食物の供与・持込に関する工夫を行う、他分野と融合させる等の方法を開発した。2年目に予定していた以下の2つの項目の実施、及び3年目に予定していた2つの項目への取りかかりを行った。2年目に予定していた2項目は以下である。3.「誰が、何を、いつ、どこで、なぜ、どのように」の5W1Hを明確に意図した戦略立案4.参加者への質問紙調査とインタビュー調査を通して立案戦略に関するデータ収集それにより、以下の成果が得られた。3.「誰が、何を、いつ、どこで、なぜ、どのように」の5W1Hを明確に意図した戦略立案昨年に引き続き「科学への低関与層」へアプローチするため、科学コミュニケーション分野で培われた知見を活用し、5W1Hを明確に意図した戦略立案を行った。4.参加者への質問紙調査とインタビュー調査を通して立案戦略に関するデータ収集立案戦略に基づいた科学コミュニケーション(SC)活動への「科学への低関与層」の参加割合を調べた。100以上のSC活動に関するデータ収集を行った。3年目に予定していた2項目は以下である。5.立案戦略と参加者層との相関関係を見出し、さらに相関関係が正しいかを検証6.「科学への低関与層」へアプローチする手法を体系化し、広く用いられるようにするこれらの項目について以下の取りかかりを行った。5.立案戦略と参加者層との相関関係を見出し、さらに相関関係が正しいかを検証収集したデータから立案戦略と参加者層との相関関係を見出し、最善の5W1Hの組み合わせをいくつか考案した。また、考案した戦略に基づいて改めて場づくりを行い、「科学への低関与層」にアプローチできているかを検証しはじめた。6.「科学への低関与層」へアプローチする手法を体系化し、広く用いられるようにするWeb等の手段を通じて、科学コミュニケーターや科学教育者等が広く使えるようにする方法について検討をはじめた。一年目に予定していた2項目の実施、及び二年目に予定していた2項目への取りかかりを行った。1年目に予定していた2項目は以下である。1.全国規模の質問紙調査の実施により、「科学への低関与層」を見出す手法を開発2.グループインタビューの実施により、「科学への低関与層」のニーズを深掘りそれにより、以下の成果が得られた。1.全国規模の質問紙調査の実施により、「科学への低関与層」を見出す手法を開発科学に対する国民の関心、ニーズ、行動様式等を調べる全国規模のインターネット調査により、全国にどの程度の割合で「科学への低関与層」が存在するのかを明らかにした。その際「研究の斬新性・チャレンジ性」において述べた、豪・ヴィクトリア州政府による「科学への低関与層」を見出す手法の開発プロセスを参考にした。2.グループインタビューの実施により、「科学への低関与層」のニーズを深掘り「科学への低関与層」に対してグループインタビューを行うことで、「科学への低関与層」のニーズや価値観を深掘りした。3.「誰が、何を、いつ、どこで、なぜ、どのように」の5W1Hを明確に意図した戦略立案4.参加者への質問紙調査とインタビュー調査を通して立案戦略に関するデータ収集これらの項目について以下の取りかかりを行った。3.「誰が、何を、いつ、どこで、なぜ、どのように」の5W1Hを明確に意図した戦略立案「科学への低関与層」へアプローチするため、科学コミュニケーション分野で培われた知見を活用し、5W1Hを明確に意図した戦略立案を行った。4.参加者への質問紙調査とインタビュー調査を通して立案戦略に関するデータ収集立案戦略に基づいた科学コミュニケーション(SC)活動への「科学への低関与層」の参加割合を調べはじめた。すでに合計80程度のSC活動に関するデータ収集を行った。3年目に予定していた次の2項目を実施した。5.立案戦略と参加者層との相関関係を見出し、さらに相関関係が正しいかを検証。6.「科学への低関与層」へアプローチする手法を体系化し、広く用いられるようにする。具体的には、収集したデータから立案戦略と参加者層との相関関係を見出し、低関与層が集まる場へ赴く重要性を見いだした。また、科学コミュニケーターや科学教育者等が広く使えるように、様々な場で講演会を行った。科学コミュニケーション二年目に予定していた実施項目を予定通り遂行し成果を得るだけでなく、三年目に予定していた検証についてもすでに実施し始めているため。一年目に予定していた実施項目を予定通り遂行し成果を得るだけでなく、二年目に予定していたデータ収集についてもすでに合計80程度のSC活動のデータ収集ができているため。

引き続きデータ収集に務め、3年目に実施予定の「検証」および「体系化」を進める。引き続きデータ収集に務め、3年目に予定しているデータ分析についても先行して実施したい。「誰が、何を、いつ、どこで、なぜ、どのように」の5W1Hを明確に意図した戦略立案についても実施し、その戦略の評価を行いたい。当該年度の資料整理の謝金が当初予定していたよりも少なくて済んだため。次年度の資料整理の謝金として使用する。データ収集・分析のための記録媒体・分析ソフトウェア・計算機などを必要に応じて購入し、データ処理に関して必要に応じてアルバイトなどを雇用する。様々なSC活動へのデータ収集のための旅費も必要となる。また、立案戦略を実施するための活動費(会場費、消耗品費、広報・印刷費など)も必要である。さらに、戦略立案のための情報収集として書籍等を購入する。
乾燥適応型光合成CAMの多様性とその制御機構に関する研究

これまでの研究から,ベンケイソウ科のカランコエ属をはじめとする数種の多肉植物において,乾燥ストレスと光の複合的な要因によって葉肉細胞の葉緑体が集合する現象を見出した.この現象は,一般的に知られている植物,イネ,トウモロコシ,エンドウ,ソバでは見出されず,CAMを遂行する多肉植物のみで見出された.この場合,葉緑体の集合体は細胞内部に塊状体として形成される.このような集合体の形成は,植物ホルモンの一つであるアブシジン酸(ABA)によっても誘導され,さらに集合体が形成されることで葉の光透過率が著しく上昇することが明らかになった.これらの結果から,多肉植物で見出された葉緑体の集合現象は,乾燥ストレス応答に密接に関連した形態反応であると考えられた.本年度の実験では,多肉植物における葉緑体の運動機構を明らかにするため,葉緑体集合運動に対する光質の影響や,細胞骨格を担うアクチン繊維と微小管との関わりについて調査した.カランコエ葉の葉片を,蒸留水(対照区),50μg/mlのサイトカラシンB溶液(アクチン繊維阻害区),および50μg/mlのノコダゾール溶液(微小管阻害区)に浸し,12時間遮光した.その後,それぞれの葉を5μMのABA溶液に移し,青色光,赤色光,紫外光を照射した.その結果,(1)多肉植物における葉緑体集合運動では青色光および紫外光の関与が示唆された.(2)葉緑体集合運動とアクチン繊維の関わりが示唆された.(3)葉緑体の集合誘導の情報伝達経路では,光受容の下流にアクチン繊維による制御機構があることが考えられた.これまでの研究により,CAMに関わる鍵酵素の1つであるPPDKの葉肉細胞内局在は,葉緑体のみに局在するもの(Chlt型),細胞質のみに局在するもの(Cyt型),並びに細胞質と葉緑体の両方に分布するもの(Cyt-Chlt型)という3つの型に分けられ,多様性に富むことを明らかにした.本研究では,このようなPPDKの局在型の変異から,CAMの新規な代謝経路の存在を明らかにすることを目的として進めている.一般的に細胞質型PPDKは光合成代謝には直接関わっていないと考えられている.そこで今年度は,CAM光合成における本酵素の役割を調べるために,サイトゾル画分からPPDKを分離し活性測定を行った.その結果,活性をもつ機能タンパク質であることを明らかにした.現在さらに,光,温度等の外部環境要因に対する酵素の活性や動的特性を調査中である.一方,最近の研究から,数種のCAM植物において,水ストレスに遭遇すると葉肉細胞の葉緑体が集合体を形成することを見出した.この現象は強光による過剰な還元力を抑制すると同時に,限られたCO_2,水分下で,より効率的な代謝サイクルを構築するものと予想される.そこで,まず細胞内における構造特性を明らかにするために,葉緑体だけでなく,核,ミトコンドリアの細胞内での動態について,蛍光顕微鏡法により解析した.その結果,CAM植物の葉緑体集合運動は,核と連動した形態反応であることが示唆された.また,葉緑体集合の誘導には青色光が関与していることが示唆された.細胞内の機能の効率性を考慮すると,各種オルガネラの配置,動向は極めて重要な意味をもつ.葉緑体と他のオルガネラとの関連も含め,集合体の中でどのような代謝機構が働いているのかはさらに検討すべき課題として残された.これまでの研究により,数種のCAM植物において,乾燥ストレスと光の複合的な要因によって葉肉細胞の葉緑体が集合する現象が見出されている.この場合,葉緑体の集合体は細胞内部に塊状体として出現する.強光,乾燥,塩などさまざまな環境ストレスは,植物細胞内の活性酸素の生成を促し,機能障害や細胞死をもたらす.自由に移動できない植物には,このような活性酸素に対する防御・応答機能が存在することが知られている.本研究では,活性酸素種の一つである過酸化水素(H_2O_2)がCAM植物の葉緑体運動に及ぼす影響について調査した.また,葉緑体集合運動に伴う抗酸化酵素;アスコルビン酸ペルオキシダーゼ(APX),カタラーゼ(CAT),スーパーオキシドジスムターゼ(SOD),およびグルタチオンレダクターゼ(GSSG-R)の活性変動について調査した.供試植物にはベンケイソウ科のベニベンケイ(Kalanchoe blossfeldiana)を用いた.活性酸素の生成を抑制するためNADPHオキシダーゼ阻害剤であるdiphenyleneiodonium chloride(DPI)を使用した.1,植物を水耕栽培して,培養液(対照区)に100μM ABA(ABA区),100μM H_2O_2(H_2O_2区),100μM ABAと100μM DPI(ABA+DPI区)をそれぞれ含む実験区を設定した.光照射下で,処理12時間後,ABA区およびH_2O_2区では葉緑体の集合体は見出されたが,ABA+DPI区では見出されなかった.ABA+DPI区での葉緑体は,対照区の配列と比べると,葉緑体同士が若干密接していた.

この時の各処理区の葉内H_2O_2量を比較すると,ABA区およびH_2O_2区は,対照区に比べ1.4から1.7倍高い値を示した.2,通常条件下で育成されていた植物体を抜き取り乾燥土壌に植え替えることで乾燥ストレスを誘導し,葉緑体の動態,H_2O_2量,および抗酸化酵素活性の日周的な変動を調査した.葉緑体集合体の形成時(暗期直前)にH_2O_2量およびGSSG-R活性のピークがみられ,その後,葉緑体が分散していくにつれてH_2O_2量およびGSSG-R活性は減少した.APX活性のピークは暗期開始3時間後にみられ,SOD活性は暗期に移って増加した.CAT活性は日周的に大きな変動はみられなかった.以上の結果から,CAM植物の葉緑体集合の誘導にH_2O_2が関与していることが示唆された.この誘導にはABAも関与しているが,さらにその下流の誘導因子としてH_2O_2が位置すると考えられる.また,このような活性酸素の調節機構には,アスコルビン酸/グルタチオン(AsA/GSH)回路が重要な役割を果たしているのかもしれない.これまでの研究から,ベンケイソウ科のカランコエ属をはじめとする数種の多肉植物において,乾燥ストレスと光の複合的な要因によって葉肉細胞の葉緑体が集合する現象を見出した.この現象は,一般的に知られている植物,イネ,トウモロコシ,エンドウ,ソバでは見出されず,CAMを遂行する多肉植物のみで見出された.この場合,葉緑体の集合体は細胞内部に塊状体として形成される.このような集合体の形成は,植物ホルモンの一つであるアブシジン酸(ABA)によっても誘導され,さらに集合体が形成されることで葉の光透過率が著しく上昇することが明らかになった.これらの結果から,多肉植物で見出された葉緑体の集合現象は,乾燥ストレス応答に密接に関連した形態反応であると考えられた.本年度の実験では,多肉植物における葉緑体の運動機構を明らかにするため,葉緑体集合運動に対する光質の影響や,細胞骨格を担うアクチン繊維と微小管との関わりについて調査した.カランコエ葉の葉片を,蒸留水(対照区),50μg/mlのサイトカラシンB溶液(アクチン繊維阻害区),および50μg/mlのノコダゾール溶液(微小管阻害区)に浸し,12時間遮光した.その後,それぞれの葉を5μMのABA溶液に移し,青色光,赤色光,紫外光を照射した.その結果,(1)多肉植物における葉緑体集合運動では青色光および紫外光の関与が示唆された.(2)葉緑体集合運動とアクチン繊維の関わりが示唆された.(3)葉緑体の集合誘導の情報伝達経路では,光受容の下流にアクチン繊維による制御機構があることが考えられた.
養護教諭の自己啓発を支援するプログラム開発に関するアクションリサーチ

本研究の目的は、多様な健康課題の解決に養護教諭への期待が高まる一方、日々の対応に追われ自己啓発(精神的回復力)の機会は多いとは言えない現状から、ライフステージにおける必要な力や経験を明らかにすることである。以下3点について研究した。(1)養護教諭及び教員免許取得大学生を対象とした自己啓発に関する実態調査共通する調査は、「精神的回復度尺度」「抗うつ度の評価」「ストレスコーピング」、養護教諭のみ「職業性ストレスの評価」を用いて、分析及び考察を行っている。困難をはねのける力「精神的回復度」の比較では、「自分の感情をコントロールできる」「いつも冷静にいられるように心がけている」「動揺しても自分で落ち着かせることができる」は、養護教諭が高く、「自分の将来に希望を持っている」「将来の目標がある」は大学生が高いという結果だった。一方、「色々なことを知りたい」「困難なことは人生にとって価値がある」は、双方とも共通していた。調査結果は、予備報告書を作成し調査対象者(705名)に返送しそのフィードバックを期待している。(2)養護教諭の自己啓発を支援している経験等のインタビュー調査経験20年以上の全校種の養護教諭4名を対象に実施した半構造化面接では、新任から5年目は、困難な事例の解決のためには、管理職や保健主事、経験が豊富な先生方からの「周囲のサポート」が効果的で、経験が浅いからこそ組織の一員として実感できる「仕事の満足度」も解決できる力や経験となっている。また、6年目以降は、周囲の期待から複雑化する「ストレス要因」が明らかになった。(3)自己啓発を支援するプログラム開発の検討養護教諭として、過去に解決した事例の周囲のサポート、課題、その思いなどを書き示し、振り返る過程によって自己啓発を支援できるのではないかと考え、実践的な研究として12事例に取り組んだ。今後も(1)、(2)の結果を踏まえ、省察を繰り返しながらプログラム開発を進める予定である。