hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
奈良南部の歴史文化資源を活かした地域再生研究―暮らし続ける為のまちづくり市民事業

本論は、コミュニティにおける「まちづくり市民事業」の担い手育成を目指し、奈良県桜井市初瀬において、住民参加型ワークショップ、景観シミュレーション、地域資源データベースによる3つの支援を行なった。さらに、20歳以上の住民を対象に、まちづくり活動に至る要因を分析した。その結果、景観まちづくりの具体像とそこに至るプロセスを示し、空家モデル整備を実現した。さらに、20歳から64歳の年齢層では、コミュニティ意識が高い、初瀬地区の環境を評価しより良くしようとする意識を持っている人が参加していると考えられた。これは定性的分析や参与観察を通じて把握しており、今回の定量的な結果を裏付けていることが考えられた。本論の対象は,申請者を含む研究教育機関がまちづくり支援を続け,住民の発意を景観まちづくりビジョンから計画策定,住民による複数の町屋活用へ結びつけた,古都奈良の歴史的小都市(奈良県桜井市初瀬)である.これまでのまちづくり支援の課題をより一層明確化しながら,コミュニティで暮らし続ける為の事業の担い手育成を目指し,成果として支援技術を開発することを目的とする.平成26年度は,キーパーソンに過去の景観まちづくりのビジョンを説明し,その実現に向けたまちづくり市民事業の勉強会を開催した.具体的には,12ヶ月に1度の勉強会開催。景観まちづくりの会にて交通・空家・福祉の事例・意見交換を行った.2現状把握として,8つの自治会の会長と移住者を対象に,自治会・自主防災・福祉・移住者対応などのまちづくり活動歴と,自治会内の独居世帯・5-10年後に空家の可能性がある建物・現空家について少人数で,参加者が地図に書き込む形のワークショップを開催.3移住者交流会を開催し,移住経緯や現在の暮らしとまちづくり活動の情報交換を実施.4担い手の役割確認として,上記の成果と過去の景観まちづくりの経緯を含めて申請者が報告し、まちづくりの担い手(住民・NPO・桜井市・奈良県・専門家)と共有した(大和・空家バンクネットワーク主催の研修会).その結果,移動の多い行政職員やまちづくりに関心のある移住者から,「初瀬のまちづくりの歴史・現状・数年後の未来について考え,役割と方向性を理解することができた」という意見を得た.さらに,空間的な地域資源整備に向けて,桜井市と早稲田大学都市・地域研究所と研究協定を結ぶことに繋がった。これにより,市民による公益的な事業の必要性を空間的・人的に把握することができ,過去の実績を活かし今後も活動を積み重ねやすい状況をつくることができた.本論は,歴史的小都市である奈良県桜井市初瀬において,コミュニテイで暮らし続ける為の事業の担い手育成を目指し,成果として支援技術を開発することを目的とする.前年度は,初瀬の景観まちづくり活動の変遷共有,ワークショップを行い自治会の活動概要把握(空家,防災,福祉,移住者対応など),まちづくりに興味のある方を中心に移住者交流会を開催することで,これまでの取組と現状把握を行い,これからのまちのライフスタイルを共有した.平成27年度は,前年度の活動状況を基に,これからのまちに必要な機能と体制に関し,ステークホルダーと勉強会や県外の事例視察,情報交流を行なった.具体的には,地図を用いたワークショップを開催し,参加者(住民,NPO,行政)にとっての地域資源とその意味,ニーズ,考えられる機能や体制を検討した.そこでは,1物資的資源として;活用できそうな空家,遊休施設,広場を絞込み,2人的資源として;まちづくり市民事業のプレイヤー(住民,移住者),サポーター(周辺住民,来街者,SNS上のファンなど),コーディネーター(NPO,専門家など)との関わり方を検討した.同時に,3各プレイヤーが現在取組む活動(文化活動,伝統工芸品製作,農業,食養,福祉分野)をまとめ,4ゲストハウスやコモンスペースの事例視察(奈良県内,東京)を行い,初瀬での展開や実現可能性を検討した.また,5情報発信として;初瀬に関心のあるサポーターに対し,コミュニティに関する情報発信を,移住者体験談,まちあるき,空家見学など対面やSNSで行った.その結果,大きな方針として,タウンコレクティブ型の場(1棟の空家に複数の機能を持たせ地域に開く)をつくること,現事業のプレイヤーやそのサポーターがステークホルダーとなり,地域をつなぎ,支える先行事例を示し,段階的に他の空家へ展開していく可能性が整理された.平成27年度は,前年度の変更点を含め,以下の3つを遂行することができた.121世紀初瀬小国の会にて成果の再報告をすること,2地域資源調査の不足情報を補うこと,3コミュニティに求められる「まちづくり市民事業」の基礎的な検討支援を実施し,大きな方針を整理することができた.本論は,歴史的小都市である奈良県桜井市初瀬において,コミュニテイで暮らし続ける為の事業の担い手育成を目指し,成果として支援技術を開発することを目的とする.現在までに, 1初瀬の景観まちづくり活動の変遷共有,ワークショップを行い自治会の活動概要把握(空家,防災,福祉,移住者対応など),まちづくりに興味のある方を中心に移住者交流会を開催することでこれまでの取組と現状把握をし,これからのまちに必要な機能を確認した.これらの活動を基に, 2初瀬地区の地域資源の調査と,必要な機能整備に関わるステークホルダーと勉強会や意見交換会を開催し,まちづくり市民事業の内容と担い手の検討を行った.

平成28年度は,前年度に資源として確認された, 3住民が自主的に開催し継続している文化活動,物的資源(活用できそうな空家,公共施設,空地などの空間),技術(伝統工芸の伝承,農業,食養)などの事業に繋がる要素について,まちづくり市民事業への試行を行なった.具体的には, 4地域資源調査として前年度までに明らかにした空家の中で所有者の了承を得られた物件について具体的な調査を行い,まちづくり市民事業として移住者間で検討されていた空家活用案の一つを実現させることができた.また, 5住民による空間活用の仕組み(軒下を活用した暖簾の掲載,駐車場での手作りマーケット等)が実現し,まちづくりの様子をSNSや研究会で発信すること, 6このような初瀬地区の変化を,空家活用の専門家や移住に関心がある方に対して奈良県内外で成果報告会を開催して意見交換を行うことで,事業実現の条件について検討することができた.平成28年度は,前年度の変更点を含め,以下の3つを遂行することができた.1奈良県内外において空家活用の専門家や移住に関心がある方へ成果報告をすること,同時に住民との意見交換をすること, 2地域資源調査として具体的な空家調査ができたこと, 3コミュニティに求められる「まちづくり市民事業」の成果として移住者間で検討されていた空家活用の一部を実現させることができた.本論は,歴史的小都市である奈良県桜井市初瀬において,コミュニティで暮らし続ける為のまちづくり市民事業の担い手育成を目指し,その成果として支援技術を開発することを目的とした.現在までに, 1初瀬の景観まちづくり活動の全体把握を行い,これからのまちに必要な機能を確認し,これらを基に, 2初瀬地区のまちづくり市民事業の内容と担い手の検討を行った.さらに, 3社会環境調査として具体的な空家調査を行い事業実現の条件を整理した.平成29年度は,これまでのまちづくり活動の総括として, 4コミュニティ意識とまちづくり活動との関連性を郵送調査により定量的に検討した.調査対象者は,桜井市初瀬地区在住の20歳以上(1,947名)で,回収率は37.6%(731件)であった.分析方法は,物理的・社会的環境評価と地域への愛着,まちづくり活動への参加,活動の種別と頻度を得点化し,年代別(20歳から64歳, 65歳から74歳, 75歳以上)に相関分析を行なった.その結果,20歳から64歳の年齢層のみ関連性(r=0.302, p>.000)が認められた.一方で活動頻度の得点を見ると, 20代から徐々に増加し, 60代が最頻値で以降の年代では緩やかに低下する傾向であった.このことから,活動頻度の平均得点が高いものの,コミュニティ意識と活動との相関性が認められなかった65歳から74歳までの参加者は,別の要因が影響していると推察した.以上から, 20歳から64歳の年齢層では,コミュニティ意識が高い層,すなわち,初瀬地区の環境を評価しより良くしようとする意識を持っている人が参加していると考えられた.また,これは前年度までの定性的分析や参与観察を通じて把握できていたことであり,今回の定量的な結果を裏付けているものと考えられる.本論は、コミュニティにおける「まちづくり市民事業」の担い手育成を目指し、奈良県桜井市初瀬において、住民参加型ワークショップ、景観シミュレーション、地域資源データベースによる3つの支援を行なった。さらに、20歳以上の住民を対象に、まちづくり活動に至る要因を分析した。その結果、景観まちづくりの具体像とそこに至るプロセスを示し、空家モデル整備を実現した。
神経ペプチドPACAPによる脳・脊髄損傷の新規予防・治療法の開発と臨床応用研究

PACAP (Pituitary Adenylate Cyclase-Activating Polypeptide)は、神経細胞の保護、神経修復・再生の二つの作用を有する神経ペプチドである。1昨年からマーモセットを用いて脳虚血モデルを作成してPACAPによる実験を行う予定で研究を進めてきた。共同研究者の宮田らは脳虚血モデルの作成実験を継続しており、脳虚血のモデル作成に成功したがまだ例数が届かず、十分信頼性のあるデータがとれていない。そこで、培養系の虚血モデル系を立ち上げてPACAPによる神経細胞死抑制機構の解析の研究がを行なった。実験概要としては、ラットの初代培養神経グリア賠償細胞(胎性14.5日)のOGDモデル(酸素およびグルコースの低濃度培養系モデル)を用いて神経細胞とアストログリアを共存下で培養し、その培地にPACAPを微量濃度添加して遅発性神経細胞死の抑制が起きるかどうかをしらべた。その結果PACAPは1nMから0.1pM濃度で虚血性神経細胞死を抑制することが分かった。この系を用いれば、マーモセットの胎児神経細胞で同様の実験を行うことが可能となり、人臨床への応用を行うための動物実験にもつながってくるものと考えられる。一方、マウスを用いたPACAPの機能性評価をさらに進めて行う目的でPACAP受容体(PAC1R)の遺伝子改変動物を作出して受容体が欠損した場合の虚血性神経細胞死防御のより詳細な研究を行うことを目的として遺伝子改変動物の作出を専門業者(サイアジェン社)に委託した。その結果、F0世代のPAC1R Kマウスが12匹ようやくこれらの動物を繁殖することにより、in vivo, in vitro両方の虚血性神経細胞死実験に使用して実験研究を行い、PACAPによる神経細胞死防御および神経再生・新生の実態を解明したいと考えている。実験動物としてマウスを用いたPACAPの遅発性神経細胞死防御の分子機構などについてはDNAアレイ解析を用いて順調に研究が進んでいる。さらに培養実験下でPC12細胞をつかったより詳細な神経細胞死抑制機構および軸索伸長の分子機構の解析も順調に進んでいる。マーモセットによる動物実験については共同研究者の鹿児島大学医歯学研究分野の宮田教授のほうで動物の繁殖と維持は行なっており、これについては問題がない。ただし、マーモセットを使って脳虚血実験を行なっていた救急医学のドクターが他の大学に移動されたため、動物実験が一時中断していた。ただ緊密な情報交換の結果、鹿児島大学にて共同研究ができるようになった。しかし、こちらでは独自にGODモデルを立ち上げ、培養下で虚血モデル系の実験を行い、ラットの胎児の神経細胞死をPACAPが低濃度で抑制する結果をえている。今後はマーモセットをつかったトランスレーショナルな研究を培養実験下で行うことできるようになり、我々のもっている知財を有効かつようして人での臨床応用研究に向けて進んでいくことができると考えている。さらに当教室ではマウスを使ってPACAPの受容体の遺伝子欠損動物の作出にも成功しており、これを使ってより詳細なPACAPによる神経細胞死あるいは神経再生・新生の動物実験も可能である。我々は、以前にカニクイザルを用いたプレリミ脳虚血動物実験にて、PACAPが若干の血圧低下作用を示すこと、血糖値に作用するなどの現象を確認した。ただ、その時は、動物個体数を集められず、脳梗塞や運動機能の解析については個体数の問題、繁殖飼育の問題などがあり、有意な差異は得られなかった。そこでより実現可能な動物としてマーモセットを選択した。これは共同研究者の鹿児島大学の宮田教授のところで繁殖維持をしており、またそこでは脳虚血モデルを作成する技術があるので、人でのトランスレーショナルな研究として、マーモセットを用いて中大脳動脈閉塞モデルを作出し、PACAPを静脈内持続投与する実験を行う計画をしている。またそれと並行して培養下での虚血性神経細胞死モデルを立ちあげたので、今後はこの実験系を用いてマウスやマーモセットなどの胎児の神経系にて実験を行なっていく予定である。また採取する部位は海馬や大脳皮質のみならず脊髄も対象となるので、脊損によるPACAPの神経細胞死抑制機構についても実験が可能となる。さらに神経細胞死のみならず神経再生や神経新生などの実験もこのin vitro系で行うことが可能となり、研究がより前進して効率よく結果がえられると考えている。。さらに我々の教室では、培養実験系でPACAPによるPC12細胞を使って細胞死防御機能のさらなる検索も行なっている。またDNAアレイ解析も行うシステムができており、培養細胞でのOMICS解析も行なっている。さらにPAC1Rの遺伝子改変動物が作出できたので、今後はこの動物を繁殖させて動物実験および培養実験に用いることを計画している。またVPAC1R, VPAC2RなどのPACAP受容体のKOマウス作出を行い、より詳細な分子制御機構の解析を行う予定である。昨年からマーモセットを用いて脳虚血モデルを作成してPACAPによる人でのトランスレーショナルな研究を行うために実験を行う予定で研究を進めてきた。しかしながらマーモセットを使った動物実験については実験室の整備などが十分にできず、動物の繁殖もなかなか思うようにできない状況であった。そこでマウスを用いたPACAPの動物実験を並行して行い、PACAPの新しい神経細胞への機能の発見につとめた。まず、脳虚血マウスの側脳室内に超微量のPACAPをミニオスモルポンプにて投与し、海馬歯状回における神経再生・新生をしらべた。その結果、PACAPが同部位において神経幹細胞の増殖を促進し、神経細胞およびグリア細胞の分化を促進することが分かった。

PACAP遺伝子欠損マウスではこのような現象はみられなかった。さらに脊髄損傷モデルマウスを用いてPACAPによる新規軸索伸長因子CRMP2の産生刺激作用を調べたところ、超微量のPACAP投与によりCRPMの遺伝子発現が有意に上昇し、さらに運動機能の回復が2週間後に起き、同時に軸索伸長も同様に生じていることがトレーサー実験で明らかになった。PACAPはCRMP2発現量を上昇させ、損傷後の軸索再生を誘導することにより運動機能の回復を促進すると示唆される。今後は、人臨床への応用を行うためのトランスレーショナルな研究として、マーモセットを用いて中大脳動脈閉塞モデルを作出し、PACAPを静脈内持続投与する実験を行う。動物実験室もようやく整備ができてマーモセットでの動物実験が可能となっているので、虚血モデルをこの動物で確立し、人での臨床研究に向けた動物実験を行う予定である。マーモセットを用いて脳虚血モデルを作成してPACAPによる人でのトランスレーショナルな研究を行うために実験を行う予定で研究を進めてきた。しかしながらマーモセットを使った動物実験については実験室の整備などが十分にできず、動物の繁殖もなかなか思うようにできない状況であった。今後は動物実験室もようやく整備ができてマーモセットでの動物実験が可能となっているので、虚血モデルをこの動物で確立し、人での臨床研究に向けた動物実験を行う予定である。PACAP (Pituitary Adenylate Cyclase-Activating Polypeptide)は、神経細胞の保護および神経修復・再生の二つの作用を有する神経ペプチドである。昨年からマーモセットを用いて脳虚血モデルを作成してPACAPによる人でのトランスレーショナルな研究を行うために実験を行う予定で研究を進めてきた。共同研究者の宮田らがこの動物を繁殖維持しており、脳虚血モデルの作成実験を継続しており、脳虚血のモデル作成に成功したがまだPACAPによる神経細胞死の実験については例数が届かず、まだ十分信頼性のあるデータがとれていない。そこでマウスを用いたPACAPの動物実験を並行して行い、PACAPの新しい神経細胞への機能の発見につとめた。まず、脳虚血マウスのにおいて虚血後における神経細胞の再生と新生について遺伝子およびタンパクレベルでのOMICS解析を行なった。その結果、虚血巣周囲のペナンブラ領域において大変興味深い実験データを得た。主な結果として、DNAアレイ解析によってPACAP投与群においてパスウェイ解析で細胞の移動に関わる遺伝子群の活性化がみられた。これは損傷した部位への神経細胞の移動をPACAPが促し機能修復に関わる栄養を及ぼすことを示唆するものであり、今後さらに追求を行う。さらにPACAP投与したペナンブラ領域において、PACAPが軸索伸長因子の遺伝子およびこのタンパクのリン酸化を促進していることも発見した。
日本における患者-看護師間の対人援助関係の構築・促進・維持に関する看護技術の特徴

(1)日本での看護師経験をもち、かつ、海外において看護師としての経験をもつ日本人看護師、(2)自国など日本以外の国で看護師経験をもち、かつ、日本において看護師あるいは看護研修生(FTA : Free Trade Agreement(自由貿易協定)/EPA : Economic Partnership Agreement(経済連携協定)等)として経験をもつ外国人看護師、(3)FTA/EPAで外国人看護師を受け入れた医療現場において指導にあたった日本人看護師の3つの対象者(群)にインタビュー調査を行い、それぞれの対象者(群)から、日本における患者-看護師間の対人援助関係の構築・促進・維持に関する看護技術の特徴が抽出された。本研究の目的である、日本における患者-看護師間の対人援助関係の構築・促進・維持に関する看護技術の特徴を明らかにする第一段階として、まず、平成21年度は関連文献の収集・研究協力者とのブレインストーミング・関連学会やセミナーへの参加により基礎的な資料収集を行った。また、海外で働く日本人看護師を対象としたインタビュー調査に着手した。具体的には、オーストラリア在住でコーディネーション業務を行うことが可能な日本人看護師を通じて、日本での看護師経験を持ち、オーストラリアで看護師として働く、あるいは、オーストラリアで看護大学在学中の日本人看護師10名を対象とした個別、あるいは、グループによるインタビューを行った。インタビューは、対象者らが勤務・生活するオーストラリアのブリズベン(対象者のうち1名はゴールドコースト)で実施し、場所としては、対象者宅あるいは勤務先の病院内や図書館内のミーティングルーム等を利用した。さらに、日本に来ているインドネシア人看護師を次年度の研究対象者として募集・依頼していくための情報や方法を検討するため、厚生労働省関連の団体に確認・相談しつつ計画を立案したり、インドネシア人看護師の日本での状況を理解するための研究発表などから資料収集を行ったりした。オーストラリアでの経験をもつ日本人看護師へのインタビューは分析に着手しはじめたところであり、平成23年度に看護系の学術集会でその成果を発表予定である(現在エントリー中)。本研究の目的である、日本における患者-看護師間の対人援助関係の構築・促進・維持に関する看護技術の特徴を明らかにするために、平成22年度は関連文献の収集・研究協力者とのブレインストーミング・関連学会やセミナーへの参加により基礎的な資料収集を行うとともに、海外で働く日本人看護師を対象としたインタビュー調査を10月に行った。具体的には、日本での看護師経験を持ち、オーストラリアで看護師として働く、あるいは、オーストラリアで看護大学在学中の日本人看護師10名を対象とした個別、あるいは、グループによるインタビューを行った。インタビューを質的帰納的に分析した結果、日本人看護師が特異的に、あるいは、多く、行っている対人援助関係の構築・促進・維持に関する看護技術(カテゴリー)が導き出された(本研究の成果は、2011年7月中旬にメキシコにおいて行われる第2回世界看護学会(WANS)で口演発表する予定)。また、今年度、3月の日本の看護師国家試験において、合格したインドネシア人看護師が数名出たため、その方々を対象にしたインタビューを行うための事前準備を行った。それに向けて、学術集会においては、外国人看護師を対象にしている他研究者や、対人援助関係に関する研究を行っている研究者との情報交換を行ったりした。来年度以降、厚生労働省関連の団体に当該看護師の所属を確認し、インドネシア人看護師のインタビューにむけて、研究協力依頼・データ収集・分析を行っていく予定である。本研究の目的である、日本における患者一看護師間の対人援助関係の構築.・促進・維持に関する看護技術の特徴を明らかにするために、本年度は日本の看護師国家試験を合格し、日本の病院で働いているインドネシア人看護師ならびに、当該施設においてインドネシア人看護師の指導に携わった指導者(日本人看護師)にインタビュー調査を行った。インドネシア人看護師からは、日本人の患者との関わり方だけでなく、日本人医療者との関係性の構築・促進・維持における難しさが語られた。また、高齢化による認知機能の低下した患者とのかかわり、高度医療を国民皆保険のもとで行う長期慢性疾患患者とのかかわりなど、日本の医療政策や人口動態などと関連した対人援助関係構築の特徴が抽出された。平成22年度に行った、海外で働く日本人看護師を対象としたインタビュー調査の結果をThe 2nd World Academy of Nursing Science(第2回世界看護学会)(メキシコ)において発表した。インタビューを質的帰納的に分析した結果、日本人看護師が特異的に、あるいは、多く、行っている対人援助関係の構築・促進・維持に関する看護技術の5つのカテゴリーとそれぞれのカテゴリーに25のサブカテゴリーが導き出された。対象者の3群((1)海外で働く日本人看護師、(2)EPAで来日して日本の看護師国家試験を合格し日本で働いているインドネシア人看護師、(3)インドネシア人看護師の指導に携わった指導者(日本人看護師))のうち、インドネシア人看護師については、慣れない環境での就労環境ということもあり、今年度は1名の対象者のみにとどまった。
明治～戦前期の木造建築に使われた良材の産地とその年輪データに関する基礎的研究

後述する出来事により、各地における年輪データの収集調査は断念したが、引き続き新潟県(中越・下越)と東北地方(福島県福島・岩手県盛岡周辺)において、地元あるいは近隣産材のデータ収集を目指し、実地調査対象の探索作業を継続するとともに、既存データの再検討を進めた。これら新潟・東北方面における探索状況を総括すると、本研究課題の目的にかなった良材、とくに年輪幅の細かい柾目の意匠を凝らした建物は、期待したほど多くなく、本課題に至る着想を得た西日本、とりわけ四国中部の建物で頻繁に見かけるような細かい幅は、あまり普遍的でない。これは柾目の意匠自体がないということではなく、例えば新潟県J市のS邸2階の天井に使われた柾目板は、竣工当時、地元新聞に「幅尺五寸の杉柾板!」「千年寿命の一本杉!」「ゑにしあつてか(中略)此処の座敷の天井飾る」「委細合点至極恐れ入つて候」などと書き立てられたものであるが、年輪データとするには、必要な年輪数を満たしてはいるが、少々物足りない。つまり、当時の認識と実物の材質に大きな開きがある。また、新潟に多い豪農層の住宅がその代表例になると思われるが、この方面の木の使い方として、良材の質よりも、遠くの大都市で買い付けて貨車で運んだとか、遠隔地産の巨材や長大な一本物をわざわざ運んで来た、などといったエピソードにより重きを置いて、建物の威容や施主の財力が表現されることが比較的顕著なのではないだろうか。そうすると、本研究課題に見合ったデータの収集を、この地方の建築を題材におこなう試みは、やや望み薄の結果になるかもしれない。しかし、とくに新潟は年輪データが不足している地域でもあり、もう少し様子を見たい。なおこの方面の、江戸時代後期幕末頃の建築とされる農村部の民家で、年輪幅の詰まった柾目板を多用するものが意外とある。対象時期からは外れるが、非常に興味深い。既報の通り、2017年度は計画の半分程度の進捗実績にとどまったことから、2018年度は早々から探索に立ち上がり、その成果を踏まえて実地における年輪データの収集に順次乗り出す計画としていた。しかしその矢先の7月、研究代表者が所属する研究室の研究員について刑事事件が発覚した。この捜査では、年輪データの収集と解析に常用していた研究室備え付けの機器が突然押収されて使えなくなるなど、本研究も少なからず影響を受けた。また、捜査の内容について十分な判断材料を欠く一方、その長期化も次第に見込まれる状況になり、先々の情勢が見通せなくなったことから、当面の間、対外交渉が必要な活動を自粛せざるを得なくなった。以上により、2018年度の研究活動は探索と既存データの再検討に終わり、新しい年輪データの収集には至らなかった。犯罪捜査にかかわることでありやむを得ないこととはいえ、本研究課題は年輪データ自体の収集に重点を置いており、それを停止した結果、進捗は大きく遅れた状況にある。本研究課題は、次の2019年度が最終年度となる。これまでの探索活動により、年輪データの収集対象とすべき物件がすでにいくつか挙がっており、2017年度実績報告において述べた今後の推進方策を引き続き保持し、対象候補の実地調査を推進する。2019年度前半は、2018年度に積み残しとなった新潟・東北方面に、後半は、本研究課題当初に対象を選定していた西日本方面に調査の手を差し向ける。ただし、これら実地調査で収集されるデータの計測と処理は、残り期間と必要な作業時間からみて、どうしても2019年度内に終わらせることができない。最終年度は、実地調査と計測・処理の立ち上げに専念し、一連の研究活動による最終的な成果は、やむを得ず研究期間が終了した後の段階に、順次まとめていく段取りとしたい。2018年度は、先述した理由により、各地における年輪データの収集調査を断念したが、その欠を補うため、2019年度夏以降は、本研究課題のための活動時間を例年になく多く確保できる見込みである。また2017年度に生じていた代表者の生業上の諸問題は、2018年度に続き、2019年度にあっても再現しない見通しである。2019年度は実地のデータ収集を主とし、探索は補助的におこなうこととし、東日本の物件に関しては、探索と現地調査を代表者と分担者が協同しておこなう態勢とし、より多くのデータの蓄積につなげたい。初年度となる2016年度は、研究計画全体における資源配分などを考慮して事前準備に徹することとし、調査用共通機材の購入、および実機の操作習熟のための実地テストを泊まり込みでおこない、同時に調査方針の討議と確認を図った。年輪計測用画像取得のための共通機材(ソニーα7s2、およびEマウントマクロレンズ群)の購入については、本研究課題申請の計画調書の段階から具体的な機種および仕様をすでに決定ずみで、年度当初の段階においても当時最善かつ妥当と考えられる予算配分を設定し、交付申請をおこなった。しかし、その直後に発生した熊本地震で製造工場が被災した影響により市中価格が急激に上昇し、半年以上の間、予算を大幅に超過する事態になった。やむなく購入と実地テストの時期を冬頃まで遅らせ、また購入アイテム数を削減することで対処した。実地テストは、近代和風建築のひとつである愛媛県喜多郡

内子町高橋邸離れ(文化交流ヴィラ高橋邸)の年輪調査を兼ねて実施し、針葉樹材(目視観察によるとヒノキ、スギ、またはツガと判断される)製の天井板および建具の羽目板を対象に、年輪計測用の画像撮影をおこなった。その結果、室内暗所において、ストロボ等撮影用の重装備をとくに用意しなくても、幅広い条件のもと鮮明良好な計測用画像が得られることが確認でき、計画調書において論じたところの所期の成績を収めることができた。一方、撮影した画像による計測と分析作業はこれまでにおおむね完了しているが、既存の手持ちデータとの照合はいまのところまだ一切成立していない。このほか、近代和風建築調査報告書などに基づいた調査対象物件のリストアップ作業を継続した。本研究によって収集したデータにより具体的な研究成果を得るところまではいたっていないが、年度初めに発生した熊本地震、およびそれによる経済情勢による間接的な影響を受けた点を除いては、計画調書に記載した方向性、および交付申請書において計画した目論見通りにおおむね推移している。また、実地テストを通じて、調査用の共通機材として新規に購入したデジタルカメラの有効性、妥当性、応用可能性を確認することもできた。以上のことから、(2)とした。2年目にあたる2017年度は、計画通りデータの収集と計測を本格的に開始した。西日本方面に関しては、高知県高岡郡四万十町窪川・旧都築半平別邸の天井板を対象に年輪計測用画像(ツガ)を撮影し、別件で収集した愛媛県喜多郡内子町・旧下芳我家住宅隠居屋の天井板(スギ)とも併せて計測をおこなった。その結果、旧都築半平別邸の対象材はおもな5群にまとめられ、うち2群の年代は、高知城ツガ現用材Aグループのパターン(343層・15991941年)により、それぞれ17391890年、16251794年と求められた。本データはツガに関して懸案の現生・古材間のパターン接続に資するものと期待されたが、今回もそれは実現しなかった。しかし、窪川周辺はツガ資源が豊富で、既往のデータの産地・収集地、照合状況を総合的に考慮すると、上記のデータが高知県の、とりわけ西部に由来する可能性が高まったといえる。旧下芳我邸隠居屋の対象材は1群(166層)に集約され、同町内高橋邸離れ(昨年度収集計測)のスギ天井板のうち一部の群(175層)と照合が成立した(重複年輪数156層)。建築のいきさつや場所が異なる当該期の2棟の建物で、年輪パターンが同調していることになる。分担者の大山が産地推定研究の目的で全国各地から収集してきた現生木のデータ(大山ほか2017、註)にこれと同調するものは見当たらず、上記のスギ材は未知の産地からもたらされた可能性が高い。東日本方面では、山形県鶴岡市旧風間家住宅丙申堂の天井板を対象に年輪計測用画像の撮影を開始した。撮影は年度内に終わらず、計測ともども次年度にまたがって作業をおこなう計画である。また、新たに新潟県において調査対象物件の探索を開始した。(註)大山幹成ほか2017日本産ヒノキ科樹木の木材産地推定に向けた標準年輪曲線ネットワーク構築,第32回日本植生史学会大会(口頭発表)2017年度は、代表者にあっては生計上の立場における予想外の事態によってやむを得ず5月から1月まで一切の研究活動を停止せざるを得なくなり、また分担者にあっても既報のとおり年度当初から8月末まで外国出張のため国内における調査ができなかった。このため、年度内におこなえた西日本方面での現地収集調査は2件、計測も含めた検討は3件に(計測試料合計141点)、また東日本方面の現地収集調査は1件と、出来高としては当初計画の約半分にとどまった。
褐色脂肪機能における不飽和脂肪酸、特にドコサヘキサエン酸の意義に関する実験的研究

褐色脂肪組織(BAT)の熱産生機能における膜リン脂質脂肪酸・ドコサへキサンエン酸(DHA)の意義を明らかにするために種々の実験条件下でラットBATのin vitro熱産生、リン脂質脂肪酸組成、BAT熱産生の指標・脱共役タンパク質共役タンパク質(UCP)について検討した。(1)BAT熱産生の高い新生期に成熟期に比べてDHAとアラキドン酸(AA)が高いレべルを示す。(2)DHA添加食はDHAを増加させたが、一方AAを減少させた。BATのin vitro熱産生反応は変化しないか、DHA添加が長期になるとむしろ抑制された。(3)DHA欠乏食はDHAを減少させたが、AAは変化させず、in vitro熱産生には差がみられなかった。(4)DHAとAAの同時添加食はBATリン脂質の両脂肪酸を増加させたが、in vitro熱産生には影響しなかった。しかしUCP1 mRNAの発現の増大がみられた。(5)一酸化窒素(NO)合成酵素阻害剤(L-NAME)の慢性投与はBATを萎縮させ、BATの熱産主を減少させたが、DHAは変化しなかった。(6)暑熱馴化と絶食はBAT熱産生産生を抑制し、DHAを減少させて、BATのin vitro熱産生とDHAレべルの間に正の相関が認められた。(7)甲状腺機能低下(メチマゾール投与)はAAおよびDHAを減少させてBATの熱産生反応を抑制した。一方甲状腺機能亢進(トリヨードサイロニン投与)はBATの脂肪酸組成を変化させなかったがBATを増殖させ熱産主を促進した。(8)出生後10週間低温(10°C)で飼育したラットは温暖下(25°C)で飼育したものに比べ20週後、さらに一年後においてもBATの増殖(DNA増加)によるin vitro熱産生、全身の非ふるえ熱産生が大であった。しかしUCP1、2,3mRNAの発現、DHAには差がなかった。以上の研究結果はBATの熱産生機能においてDHAが制御因子の一つである可能性を示す。1)DHAは新生期から成熟期にかけて変化しなかったが、アラキドン酸は成熟期にかけて低下し、特に成熟期には新生期の40%に減少した。すでに報告したようにBATのin vitro熱産生反応は成熟期に比較して新生期に高いから、この結果はDNAとともにアラキドン酸レベルの高いことがBATの熱産生の促進の要因であることを示唆する。2)DHA添加はBATリン脂質のDHAを増加したが、同時にアラキドン酸を減少させた。BATのin vitro熱産生反応は変化しないか、DHA投与が長期になるとむしろ抑制された。この結果はDHAがアラキドン酸の増加を伴うことがその熱産生反応の促進にとって必要であることを示す。3)DHA欠乏食はBATリン脂質のDHAを減少させ、DHAの補充はDHAを増加したが、BATのin vitro熱産生反応には差がみられなかった。その他の脂肪酸組成ではアラキドン酸に差がなく、DHA欠乏食ではDHAが低いため、全体としての多不飽和脂肪酸は低いが、リノール酸は差がなく、細胞機能に促進的に働くと報告されている単不飽和脂肪酸はむしろ高かかった。

一方生体の非ふえる熱産生(ノルアドレナリン熱産生)能はDHA欠乏食で有意に抑制された。この結果はDHA欠乏がin vivoでBATの熱産生反応を抑制することを推測させる。4)一酸化窒素(NO)の合成酵剤阻害剤(L-NAME)の慢性投与はBATを萎縮して、BAT全体としての熱産生を減少したことから、NOがBATの機能調節に関与していると推測される。L-NAMEの慢性投与はBATのリン脂質脂肪酸のDHAに影響しなかったが、BATの増殖に関係すると考えられる単不飽和脂肪酸を低下した。以上の成績はBATの機能調節に膜リン脂質脂肪酸の全体としての不飽和化のみでなく、不飽和脂肪酸の分子種が種々の側面から関与していることを示し、特に生理的条件下ではDHAの増加が重要であることを示唆する。ドコサヘキサエン酸(DHA)の褐色脂肪組織(BAT)熱産生反応における意義をさらに知るために以下の実験を行った。1)32°Cに4週間暴露した暑熱馴化ラットでは温暖対照群(25°C、4週間)に比較してBATリン脂質のDHAの減少が認められた。BATのin vitro酸素消費量は暑熱適応群で基礎レベルが低下して、ノルアドレナリンによる酸素消費量の増加も低かった。またBATのリン脂質DHAとin vitro基礎酸素消費量およびノルアドレナリン刺激最大酸素消費量の間に正の相関が認められた。2)72時間絶食はBATリン脂質脂肪酸の多不飽和脂肪酸を増加させたが、DHAが減少した。BATのin vitro酸素消費量は基礎レベルが低下して、ノルアドレナリンによる酸素消費量の増加も低かった。またBATリン脂質DHAとin vitro基礎酸素消費量の間に正の相関が認められた。以上のような脂肪酸組成および酸素消費量にみられた変化は再摂食72時間によって完全に回復した。1)、2)の結果はBAT膜リン脂質脂肪酸のDHAの減少がBAT熱産生反応を抑制することを推測させる。3)甲状腺機能低下(メチマゾール投与)はBATリン脂質脂肪酸のアラキドン酸、DHAを減少させた。BATの基礎酸素消費量は変化させなかったが、ノルアドレナリンによるDNAおよび組織当たり酸素消費量の増加が抑制された。一方甲状腺機能亢進(トリヨードサイロニン投与)はBATリン脂質脂肪酸組成は変化させなかったが組織DNA量を増加させた。BATのDNA当たり基礎およびノルアドレナリン刺激酸素消費量は変化しなかったが組織当たりでは増加した。この結果は甲状腺ホルモンがBATの増殖により熱産生能を促進すること、甲状腺ホルモンの欠乏は膜リン脂質脂肪酸組成の変化(DHA、アラキドン酸の減少)により細胞熱産生反応を抑制することを示唆する。ドコサヘキサンエン酸(DHA)の褐色脂肪組織(BAT)機能における意義とその作用機構を知るために、ラットでこれまでの実績をふまえて次の実験を行った。1)DHA+アラキドン酸(AA)投与実験:DHAのみの投与はBAT機能亢進時に認められる膜リン脂質AAの増加を低下させてBATのin vitroの熱産生反応を変化させないか、あるいはむしろ抑制させることが明らかにされたので、DHAと同時にAAを投与して両脂肪酸のリン脂質におけるレベルを増加させてBAT熱産生反応の促進をもたらすことが出来るかどうかを検討した。両脂肪酸の投与はBATのin vitro熱産生反応に影響を与えなかった。しかしDHA、DHA+AA投与群とも熱産性能の指標であるBATに特異的な脱共役タンパク質UCP1のmRNAの発現増大がみられた。
有機素材の経時的変質に関する研究(油脂よごれの自動酸化による黄変)

着用した衣服に付着する皮脂よごれは、生活環境の中で、酸素、光、温度水分などの影響により経時的に変質し、黄変が進み、しだいに洗浄されにくい状態になることが日常的に知られている。これは、皮脂に含まれる不飽和化合物が、酸化重合することによるものと言われている。60年度は、不飽和脂肪酸の酸化による黄変の機構、および繊維基質との関係について分光学的方法を用いて研究を行った。その結果、不飽和脂肪酸と繊維基質との化学的結合、化学的相互作用は認められなかった。また、不飽和脂肪酸の可視・紫外吸収スペクトルが経時的に変化し、可視部の吸光度が増大する(黄変の進行と考えられる)のは、酸素による酸化が主原因ではなく、不飽和脂肪酸の分子中の二重結合部分のラジカル重合によるものであることを推測した。そこで本年度は、黄変の主原因がラジカル重合反応であるかどうかを確認し、さらに黄変にいたる反応生成物を分離定量することを目的として研究を行った。不飽和脂肪酸としてリノール酸を用い、バルク状のリノール酸にラジカル捕促剤としてガルビノキシルを0.001モル添加したものを、酸素の影響を除外して(窒素雰囲気中)、70°Cで静置し、経時的に自記分光光度計UV-240を用いて可視・紫外吸収スペクトルを測定し、また、その過程で生成される反応物をイアトロスキャンTH-10で分離定量した。その結果、1)リノール酸の可視・紫外吸収スペクトルの増大は、ラジカル重合反応が大きく関係しているといえる。2)このことから、黄変の主原因はラジカル重合反応によるものであることが確認された。3)リノール酸が経時的に変質し、数種の反応物が生成していくことが定量的に観察され、この結果は、可視・紫外吸収スペクトルの変化とよく対応していることが明らかとなった。以上の結果から、今後さらに、不飽和脂肪酸の黄変は、変質によるどの生成物が関係するのかを検討する。
動物組織のリン脂質分子種組成の独立性と外的因子による制御

動物臓器のリン脂質、特にホスファチジルコリン(PC)、の分子種組成について、その保持機構の代謝生化学的な解析と外的因子による介入の可能性を検討し下記の成果を得た。(1)外的介入因子として用いたクロフィブリン酸はラット肝臓のPCのde novo合成系を亢進することによってPC含量を、また、ホスファチジルエタノールアミン(PE)生合成の副経路(PC→ホスファチジリセリン→PE経路)を亢進することによってPE含量を増加させる。クロフィブリン酸による肝臓のリン脂質代謝の変動はPCの分子種組成の著しい改変を引き起こしたが、これはPCのde nove合成に供給されるジアシルグリセロール分子種の変化、PCおよびPEの再アシル化系の亢進、PEN-メチル化系の抑制が相互に関連しあって生じた結果である。(2)腎臓は肝臓や血液のリン脂質にはほとんど認められないジパルミチルPCをde nove合成し、多量に含むというリン脂質分子種の臓器独自性を有しているが、一方、(3)に記載したように、リン脂質分子種組成の血液依存性の高い臓器でもある。(3)肝臓で生じたPC分子種組成の変化が血液を介して末梢臓器にどの程度波及するかを、クロフィブリン酸投与、無脂肪食投与、糖尿病誘発ラットの脳、膵臓、腎臓のPCについて調べた。脳のPCの分子種組成はきわめて厳密に保持されており、まったく変動しない。腎臓のPC分子種組成は血液のリン脂質分子種組成に強く依存しており、膵臓は脳と腎臓の中間的な臓器である。本研究の結果は多くの末梢臓器のリン脂質の分子種組成は外的因子((クロフィブリン酸や食餌の脂肪酸)によって介入が可能であることを示唆している。肝臓と腎臓のホスファチジルコリン(PC)の分子種組成に対するクロフィブラートの影響を代謝生化学的に明らかにし、腎臓のリン脂質の分子種組成の肝臓からの独立性と肝臓への依存性について検討した。(1)クロフェブラートをラットに投与すると、肝臓中のホスファチジルエタノールアミン(PE)が増える。これはPEメチル化の抑制、PC→ホスファチジルセリン→PE系の亢進およびPE代謝回転の抑制に起因するものであり、PEのde novo合成系はむしろこの薬物で抑制された。(2)クロフィブラートはラット肝臓のPCのパルミチル-オレイル分子種のde novo合成を亢進した。一方、肝臓のPC中のパルミチル-アラキドニル分子種に比べると、ステアリル-アラキドニル分子種はクロフィブラートの投与で著しく減少するが、これはPEのメチル化で生成するステアリル-アラキドニル分子種が減少するためであることが判明した。(3)クロフィブラートの投与で肝臓中のステアリル-アラキドニル分子種が減少し、これに伴って血液中のアラキドン酸を含むリン脂質が減少した。この変化の影響を受けて腎臓中のアラキドン酸を含むPCは減少した。一方、肝臓とは異なり、腎臓はde novo合成されるジパルミチルPCをPCの最多成分として20%も含んでいることが明らかになった。さらに、この分子種はクロフィブラートの投与で激減した。現在、クロフィブラートによる肝臓のリン脂質分子種組成の組換えの機序と腎臓のPC分子種の肝への依存性と肝からの独立性の機序についてさらに詳しく検討している。肝臓のホスファチジルコリン(PC)の分子種組成の改変の機序とPCの分子種組成の臓器独立性について検討し、下記の結果を得た。(1)ラットにクロフィブリン酸を投与すると肝臓のパルミチル-オレイル(16:0-18:1)PCが増加し、ステアリル-アラキドニル(18:0-20:4)PCが減少する。

この16:0-18:1PCの増加はPCのde novo合成に関わる酵素の基質特異性の変化によるものではなく、16:0-18:1ジアシルグリセロールの供給増加とPCのde novo合成の亢進に起因するものであり、一方、クロフィブリン酸による再アシル化の亢進によって16:0-20:4PEと18:0-20:4PEの生成は増加するが、18:0-20:4PEから18:0-20:4PCへの変換が抑制されるために肝臓中の18:0-20:4PCは減少することが明らかになった。(2)ラットに対するクロフィブリン酸の投与、無脂肪食の投与、糖尿病の誘発によって、肝臓のPCのアシル基を変化させると、その変化に連動して血液中のリン脂質のアシル基組成は変化した。腎臓のPCのアシル基のうち主な不飽和脂肪酸の含量は血液のリン脂質中の対応する脂肪酸の含量に依存して変動した。腎臓とは対照的に、脳のPCのアシル基組成はまったく変動せず、厳密に保持されていた。一方、膵臓のPCのアシル基組成は腎臓と脳の中間的な変化を示した。これらの結果は、臓器のリン脂質の分子種組成の血液からの独立性には様々な程度のあることを示唆している。
病的心筋リモデリングにおける新規治療標的としてのTRPCチャンネルの意義の解明

本申請研究ではTRPCの新規心肥大・心不全治療標的としての可能性を検討する目的で、TRPC阻害薬を心臓病モデルマウスに投与しその作用と分子機序を検討した。その結果、複数の心肥大モデルマウスにおいてTRPC阻害薬がその病的状態を改善させることを見出した。また心保護的に働くことが知られる心房性ナトリウム利尿ペプチドがTRPC3/6の活性を抑制的に制御することを新たに見出した。これらの研究からTRPCの新規心肥大・心不全治療標的としての可能性が明らかとなった。本申請研究では、TRPC阻害薬の心肥大・心不全改善作用の検討およびその分子機序の解析と、そのデータを基にしたより効果的かつ選択的なTRPC阻害薬の開発のためのデータの収集を行なうことを目的とする。(1)TRPC阻害薬のGC-Aノックアウトマウスに対する作用の検討:高血圧性心肥大モデルであるGC-Aノックアウトマウスにおいては一部のTRPCチャンネル発現が心室において亢進している。また我々はAMPのGC-Aを介したPKG活性化がTRPC6をリン酸化し、そのイオンチャネル活性を強力に抑制することを見出した。そこでTRPC阻害薬であるBTP-2をこのGC-Aマウスに投与し、その作用を解析すしたところ、BTP2は血圧には影響を与えず、心肥大を抑制した。また他の心肥大もデルでも同様であることを確認するためにアンジオテンシンIIによる心肥大モデルにおいても同様のBTP2投与を行なったところ、やはり心肥大を抑制した。(2)マイクロアレイによるTRPC標的遺伝子群の網羅的解析:上記結果を受け、現在BTP2投与の有無による遺伝子発現の変化をDNAマイクロアレイ解析にて検討中である。本年度本申請研究では、新規心不全治療薬としての可能性を探るべく、TRPC阻害薬の心肥大・心不全改善作用の検討およびその分子機序の解析と、そのデータを基にしたより効果的かつ選択的なTRPC阻害薬の開発のためのデータの収集を行なうことを目的とし、TRPC阻害薬の心肥大・心不全モデルマウスに対する作用の検討をおこなった。昨年度の高血圧性心肥大モデルであるGC-Aノックアウトマウスに加えて本年度は、アンジオテンシンIIの持続投与による心肥大マウス、および心不全・突然死モデルマウスであるdnNRSFTgマウスにたいしTRPC阻害薬BTP2を投与し、これら病態に対する効果を解析した。またTRPC阻害による下流の病的シグナル抑制効果の検討、およびその標的遺伝子のマイクロアレイによる網羅的解析を行った。さらにin vitroにおけるBTP2のエンドセリン1やアンジオテンシンIIによる心筋細胞肥大反応に対する抑制効果も確認した。これら心筋細胞における受容体活性化によるカルシウム流入は、TRPC6または3のノックダウンでほぼ両者の同時ノックダウンと同様のレベルまで低下したことから、心筋細胞ではTRPC3と6がヘテロコンプレックスを形成していることが予想された。そこで、さらにBTP2と比較してよりTRPC3に特異性の高いBTP3を入手し、BTP2と同様にアンジオテンシンIIの持続投与による心肥大マウスに投与したところ、BTP3はBTP2よりより低濃度で、高効率に肥大を抑制した・このことよりTRPC3あるいは6を標的としたより選択的な阻害薬開発が心不全予防・治療薬としては期待されることが明らかとなった。また我々は昨年度にANPのGC-Aを介したPKG活性化がTRPC6をリン酸化し、そのイオンチャネル活性を強力に抑制することを見出したが、その分子機序の詳細な検討を行い、ANPの抗心肥大作用の一部にTRPC6および3抑制が重要な働きをしていることを明らかとした。
スコイエン・コレクションのアフガニスタン出土仏教写本研究

本研究は、ノルウェーの写本蒐集家マーティン・スコイエン氏が数年前に購入したアフガニスタンのバーミヤン渓谷出土の仏教写本コレクションを調査し、それらに対する解読研究を行うことを目的としている。スコイエン・コレクションに含まれる写本類は、破片を含めて全体で約1万点以上にのぼるが、昨年度に引き続いて、本年度もオスロにおける現地調査を行い、ほぼすべての写本断簡のカラー複写を入手し、解読研究を行った。スコイエン・コレクションの重要性は、スタインやペリオ等の蒐集した中央アジア出土文献と異なり、直接的なインド文化圏、すなわち古代に仏教が栄えたガンダーラの地より現れた、初めての大規模仏教写本だという点である。同じようなものにギルギット写本もあるが、こちらにはそれよりはるかに古い時代の写本が数多く含まれている。また、カローシュティー文字による貝葉写本断簡も『大般涅槃経』を含めて約200点が見い出されたが、これまでのカローシュティー文字資料は樺皮か木簡であって、貝葉写本の発見は世界初である。研究代表者は、解読の終了した文献からそれらを出版する準備を進めていたが、その第1巻が平成12年末にオスロより他の研究者からの寄稿も含んで出版された。その中で研究代表者は、本研究の成果として『新歳経』と『勝鬘経』の梵文写本断簡を、ローマ字転写、校訂テキスト、対応する漢訳とチベット語訳、さらに英訳とカラー写真を付して出版した。本研究は、ノルウェーの写本蒐集家マーティン・スコイエン氏の蒐集したアフガニスタン出土仏教写本(スコイエン・コレクション)を調査し、それらに対する解読研究を行うことを目的としている。コレクションに含まれる写本類は、破片を含めて、全体で約1万点以上にのぼるが、本年度はオスロにおける現地調査を行い、ほぼすべての写本断簡のカーラー複写を入手した。本年度はこれらの写真を用いて断簡類を書体、内容別に分類して同定作業を行い、それと平行してローマ字転写テキストを順次コンピュータに入力した。それによると、コレクションには、破片を除いて、カローシュティー文字写本(200点)、クシャーナ文字写本(240点)、グプタ文字写本(1000点)、ギルギット・バーミヤン第1型文字写本(550点)、同第2型文字写本(110点)が含まれていることが判明した。これらの中から、本年度に解読の完了した文献は『勝鬘経』および『新歳経』の断簡である。なお平成11年8月末にスイスのローザンヌで開催された国際仏教学会において本コレクションを研究しているヨーロッパの研究者数名と共にコレクションの概要について研究発表を行ったことを付け加えておきたい。
CYP2Cサブファミリーの遺伝子多型と薬物代謝の個人差に関する研究

154名の日本人健常人を対象にCYP2C18とCYP2C19遺伝子変異の連鎖に関する検討を行った。解析を行った総ての個体についてCYP2C18m1(T→A204)とCYP2C19m2(G→A636)、CYP2C18mFR(T→C-478)とCYP2C19m1(G→A689)、は完全な連鎖の関係を示した。これらの結果からCYP2C19m2のホモ接合子はCYP2C18m1のホモ接合子であり、両CYP分子種のdouble defectである可能性が示された。しかし、その臨床的な意味は不明である。野生型であるCYP2C9-Ile359と変異型であるCYP2C9Leu359の発現系を作成し、7種の基質に対する活性を比較した。検討を行った総ての基質にっいて、CYP2C9Leu359の活性はCYP2C9-Ile359より低値を示したが、その程度は1/30から1/4と基質により異なっていた。Ile359からLeu359への変異による影響が基質によって異なる理由は不明である。しかし、この変異遺伝子をヘテロ接合子として持つ個体は日本人では25人に一人の割合で存在することから、開発中の医薬品がCYP2C9で代謝されることが明らかになった場合、CYP2C9Leu359の発現系等を用いることにより、変異型ではどの程度活性が低下するかを非臨床の段階で検討することが必要と考えられた。解析を行った全ての個体についてCYP2C18m1とCYP2C19m2及びCYP2C18mFRとCYP2C19m1は連鎖していた。この結果はCYP2C19m2遺伝子をホモ接合体として持つ個体は同時にCYP2C18m1のホモ接合体であることを示している。いずれの変異も正常なタンパクの欠損を起こす変異であることからCYP2C19m2遺伝子をホモ接合体はCYP2C18とCYP2C19の両方のタンパクが発現していないdouble defectsである可能性が強く示唆される。一方、CYP2C18mFRについてはCYP2C18の活性にどの様な影響を与えるかが明らかにされていないため、CYP2C19m1遺伝子をホモ接合体として持つ個体でCYP2C18の活性がどの様な状態にあるのかは現在の所不明である。CYP2C19によって代謝される薬物は数多く報告されているが、CYP2C18によってのみ代謝をい受ける薬物の報告は無い。従って、今回見出されたCYP2C18とCYP2C19の変異遺伝子の連鎖がどの様な臨床的意義を持つかについては、現在の所不明である。CYP2C9は抗てんかん薬であるフェニトインや血糖降下薬であるトルブタミドなどの代謝に関わる酵素である。CYP2C9遺伝子には幾つかのバリアントの存在が知られているが、最近、359番目のIleがLeuに変化した変異型CYP2C9を持つ個体はフェニトイン、トルブタミドなどの薬物代謝能が著しく低下していることが明らかにされた。本研究では、野生型であるCYP2C9-Ile359と変異型であるCYP2C9Leu359の発現系を作成し、7種の基質に対する活性を比較した。その結果、検討を行った総ての基質について、CYP2C9Leu359の活性はCYP2C9-Ile359より低値を示したが、その程度はピロキシカムの5'位水酸化の1/30からジクロフェナクの4位水酸化の1/4まで様々であった。

一方、CYP2C9Leu359におけるフェニトインの主代謝物であるp-hydroxyphenytoin(HPPH)の生成速度はR-体では約1/2に低下したのに対しS-体では約1/6に低下しており、Ile359からLeu359への変異により、立体選択制が変化することが明らかとなった。Ile359からLeu359への変異による活性低下の程度が基質により異なる理由は不明である。しかし、この変異遺伝子をヘテロ接合子として持つ個体は日本人では25人に一人の割合で存在することから、開発中の医薬品がCYP2C9で代謝されることが明らかになった場合、CYP2C9Leu359の発現系等を用いることにより、変異型ではどの程度活性が低下するかを非臨床の段階で検討することが必要と考えられた。