hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
転写因子による膵β細胞の分化と機能維持のメカニズムの解析

この分子機構を明らかにするために,MODY3患者で同定されたP291fsinsC変異に相当する変異HNF1_αを発現するアデノウイルスAdex1CA-HNF1_α-288tを作成した.この組み換えアデノウイルスにより変異HNF1_αをHepG2細胞に過剰発現すると,HNF1_αの標的遺伝子である_α1-antitrypsin遺伝子やphenylalanine hydroxylase遺伝子の発現が抑制され,HNF1_α-288tは,dominant negative効果により内因性のHNF1_αの機能を抑制することが示された.次に,Adex1CA-HNF1_α-288tおよびコントロールとしてAdex1CA-lacZをMIN6細胞に感染後,各種刺激下でのインスリン分泌を解析した.膵β細胞からのインスリン分泌障害は,糖尿病の発症を規定する重要な因子のひとつである.膵β細胞の発生,分化,及び再生を規定する因子についての解析を進めるアプローチのひとつとして,本研究期間にはβ細胞の"mass"の異常をきたす疾患について発症の分子メカニズムの解析を行った.Wolfram症候群はl型糖尿病に視神経萎縮,感音性確聴,尿崩症,精神神経学的異常などを合併する常染色体劣性遺伝性疾患である.患者のラ氏島でβ細胞が選択的に消失することが報告されている.我々はWolfram症候群の原因遺伝子WFS1を同定した.WFSI遺伝子産物は890のアミノ酸よりなり,その構造より膜蛋白であると考えられるが,技能は明かでない.WFSl蛋白の機能の解明のための第1段階として,その中枢神経組織内及び細胞内での局在の解析を行った.WFSl蛋白は,マウスの中枢神経組織では,嗅結節,扁桃体,梨状皮質及び海馬(CAl)に強い発現が認められた.その他,弓状核や大脳皮皮質第2層にも発現が認められた.細胞内では,WFSl蛋白は主としてmicrosome分画、特にERに局在することが示唆された.一方,新生児期に高インスリン血症性低血糖症をきたすpersistent hyperinsulinemic hypoglycemia of infancy(PHHI)患者ではβ細胞の過形成をきたすことが知られている.PHHI患者の一部ではATP感受性カリウムチャネルを構成するスルフォニル尿素剤受容体(SUR1)遺伝子やKir6.2遺伝子に変異が同定されている.我々は日本人のPHHI患者においてSUR-1遺伝子の解析を行い,3種類の変異を同定した.さらにこれらの変異SUR1より再構成されるATP感受性カリウムチャネルの機能解析を行い,そのうちの1つの変異(R1420C)では,アデニンヌクレオチドのSUR1への協調的結合が障害され,そのためにATP感受性カリウムチャネルの活性化(開放)障害をきたし,持続性のインスリン分泌を引き起こしていることが明かとなった.
表皮変位測定可能なフレキシブル筋電センサの開発

まず,先に開発した炭素被覆ナイロンを用いた糸状柔軟変位センサを利用して,全方向湾曲センサや表皮変位センサの開発を行った.つぎに,表皮変位センサ電圧と腕の関節角度やねじり回転角度との関係を調べ,適切なセンサ取り付け位置や複数センサの組み合わせにより,センサ出力電圧から人体の動作角度等が推定できることを確認した.さらに,加速度センサを2つ用いた差動式筋音センサを試作しその有効性を確認した.まず,先に開発した炭素被覆ナイロンを用いた糸状柔軟変位センサを利用して,全方向湾曲センサや表皮変位センサの開発を行った.つぎに,表皮変位センサ電圧と腕の関節角度やねじり回転角度との関係を調べ,適切なセンサ取り付け位置や複数センサの組み合わせにより,センサ出力電圧から人体の動作角度等が推定できることを確認した.さらに,加速度センサを2つ用いた差動式筋音センサを試作しその有効性を確認した.近年の超高齢社会への急激な推移やメタボリックシンドロームに代表される中高年の生活習慣病の増加に伴い,糖尿病や脳溢血などで運動機能が低下する高齢者が増加し,要介護者に対する介護支援者の人手不足は避けられない問題になりつつある.このような状況において,脳溢血等で片麻痺となった患者の自立や生活の質(QOL)の向上を目指し,喪失した身体機能をサポートする機器の開発が望まれている.また,これらの機器は,現在の情報ネットワークにおけるカフィードバックシステムにも応用が可能である.そこで,我々は人体に実装できるソフトアクチュエータの柔軟性を損なうことなく変位量が測定できる柔軟な変位センサの開発を行ってきた.これらのソフトアクチュエータは電磁ノイズが発生しにくく,人体の意思伝達装置として用いられる筋電センサとの親和性が良い.現在,これら人体に直接取り付ける駆動システムの実用化の障害となっているのは、意思伝達装置としての入力システムである.そこで,本研究では,柔軟性を有した筋電センサの開発と柔軟な変位センサとの一体化を考慮した新しい筋電・変位センサの開発を目指す.本年度は,手始めとして複雑な人体の動作計測を行う簡易なセンサの開発を目指し,炭素被覆ナイロンを用いた柔軟ポテンショメータを圧縮コイルばね内部に4本用いた『全方向湾曲センサ』を試作し,センサ出力電圧から湾曲角度の変換モデルを提案した.さらに,湾曲角一センサ出力電圧特性を調べることで変換モデルの有効性を確認した.また,人体の表面変位などの微小変位を計測することができる『表皮変位センサ』の開発を目指し,本年度はいくつかのプロトタイプを試作し,表皮変位センサの実現性について検討した.糖尿病や脳溢血などで運動機能が低下する高齢者が増加し,要介護者に対する介護支援者の人手不足は避けられない問題になりつつあり,身体機能をサポートする機器の開発が強く望まれる.そこで,我々は人体に実装できるソフトアクチュエータの柔軟性を損なうことなく変位量が測定できる柔軟な変位センサの開発を行ってきた.これらのアクチュエータは電磁ノイズが発生しにくく,人体の意思伝達装置として用いられる筋電センサとの親和性が良い.現在,これら人体に直接取り付ける駆動システムの実用化の障害となっているのは,意思伝達装置としての入力システムである.そこで,本研究では,柔軟性を有した筋電/筋音センサの開発と柔軟な変位センサとの一体化を考慮した筋電・変位センサの開発をめざす.まず,複雑な人体の動作計測を行う簡便なセンサの開発をめざし,先に開発した炭素被覆ナイロンを用いた糸状柔軟変位センサを用いて人体の表面変位を計測することができる『表皮変位センサ』の開発を行った.そして,電極などの工夫を行い,腕の表皮に絆創膏のように貼り付けて使用できる表皮変位センサを実現した.次に,このセンサ出力電圧と腕の関節角度やねじり回転角度との関係を調べ,センサ貼り付け位置を適切に選ぶことや複数センサを組み合わせることにより,センサ出力電圧から関節角度等が推定できることを確認した.さらに,加速度センサを2つ用いて,筋音に及ぼす人体運動の影響を取り除くことができる差動式筋音センサを提案・試作し,実験した結果,筋音だけを取り出せることを確認した.
デンプン糖化におけるCO_2排出削減のための難老化性糊化デンプンの開発とその応用

超高圧処理デンプンの食品加工への応用をならびに難老化性付与の機構解明を目的とし検討を行った。まず、超高圧処理デンプンの結晶性および表面構造を偏光顕微鏡および電子顕微鏡にて観察した結果、超高圧処理を施すと粒の形状は保持するが、結晶性を示す偏光十字の消失が観察された。さらに、α-アミラーゼを作用させ経時的(0180分間)に観察した結果、偏光十字の消失した粒の表面は、分解作用を受けた様子が観察され、超高圧処理デンプンは粒形を保ちながら酵素の作用を十分に受けることが明らかとなった。次に、超高圧処理デンプンの食品への効率的な利用を考え、乾燥粉末化を検討した。超高圧処理デンプンを凍結乾燥、熱風乾燥およびアルコール乾燥の各乾燥法にて乾燥化を試みた結果、アルコール乾燥を施した超高圧処理デンプンのみ、乾燥前に持つ難老化性の特性を保持していた。そこで、アルコール乾燥超高圧処理デンプンの食品への応用を検討したところ、スポンジケーキやクッキー、麺類など高温で処理される食品においては、難老化性の効果は得られず、物性や食味に向上はみられなかった。一方、過度の加熱処理を施されない食品(63°C)であるアイスクリームに対する安定剤としての利用を試みたところ、官能試験において無添加試料に対し高い評価を得、また保型性試験においても優れていることが示唆された。さらに、通常安定剤として用いられる生デンプンを用い、糊化のためアイスクリームミックスを加熱処理(80°C)した試料と比較しても保形性は同様の効果を示し、官能試験においては高い評価を得た。これは熱糊化のための過度の加熱処理を必要としないため、タンパク質の変性や香気成分の損失が抑えられるためと考えられた。これらのことから、本アルコール乾燥超高圧処理デンプンは、過度の加熱処理を伴わない食品において、その難老化性の特性が有効に利用され、天然由来の安定剤として有効活用できるものと考えられる。各種デンプン中で最も難分解性であるジャガイモデンプンを用いデンプン糖化に及ぼす高圧処理の影響について検討を行った。まず、α-アミラーゼによる分解性に及ぼす高圧処理(30分間、10°C)の影響について検討を行ったところ、400MPa以下の圧力では分解性の増大は観察されず、500MPa以上の圧力で分解性が増大し、650MPa処理では分解率が約60%に増加した。また、高圧処理デンプンのα-アミラーゼによる分解生成物の重合度を測定したところ、無加圧では、G2G4の低重合度の糖が多く生成し、分解物中で約80%を占めたのに対し、650MPa処理では、G9G12の比較的高重合度な糖の生成が多く約60%を占めていた。さらに、糊化吸熱量を測定したところ、600MPa以上の処理により糊化吸熱量が著しく低下し、650MPaでは無加圧の約1/7に低下した。これら糊化吸熱量の減少は、α-アミラーゼによる分解性増大圧力量と一致し、デンプンの結晶構造が圧力処理により影響を受け、分解性が増大したものと推察された。次に、圧力デンプンの老化試験を行った。650MPa処理したデンプン懸濁液を20°Cにて07日間貯蔵した結果、α-アミラーゼによる分解性は圧力処理直後に比べ低下はみられず、老化現象が観察されなかった。また、デンプンの結晶構造の指標である偏光十字を観察したところ、650MPa処理にて偏光十字が消失している粒子が一部観察された。しかし、偏光十字が消失した粒子は、熱糊化デンプンのようなデンプン粒子が溶解するまでには至らず、粒子全体が膨潤してはいたが輪郭は保持しており、7日間貯蔵に於いても変化はみられなかった。このことから、デンプンは高圧処理により結晶性が低下し酵素の作用を受けやすく変化するが、デンプン粒が崩壊することはなく、このことが熱糊化デンプンに比べ耐老化性を有する要因であると考えられ、本研究により、高圧処理による耐老化性デンプンの製造が期待される基礎的知見が得られたものと考える。

さらに、通常安定剤として用いられる生デンプンを用い、糊化のためアイスクリームミックスを加熱処理(80°C)した試料と比較しても保形性は同様の効果を示し、官能試験においては高い評価を得た。これは熱糊化のための過度の加熱処理を必要としないため、タンパク質の変性や香気成分の損失が抑えられるためと考えられた。これらのことから、本アルコール乾燥超高圧処理デンプンは、過度の加熱処理を伴わない食品において、その難老化性の特性が有効に利用され、天然由来の安定剤として有効活用できるものと考えられる。
農業用水路における魚類の棲息環境と人工知能を用いた環境選好性の定量化

本研究では,人工知能技術として知られるファジィ推論,遺伝的アルゴリズムおよびニューラルネットワークを用いて,メダカ(Oryzias latipes)の生息場選好性を定量化するモデルを開発した.まず,室内実験で予備的にメダカの生息場選好性を把握し,次に,農業用水路で実施したフィールド調査から実水域における生息場選好性を定量化した.室内実験では,水深因子,流速因子および遮蔽因子を注目し,開水路実験により生息場選好性を表現するモデルを構築し,得られたモデルを平面水槽実験により検証した.開水路実験の結果,与えられた環境に対するメダカの環境応答に大きなばらつきが見られたため,簡略化法によるファジィ推論を導入し,このばらつきをメダカの選好判断のあいまいさとして積極的にモデルに組み込んだ.モデルの最適構造は遺伝的アルゴリズムによる最適値探索で決定した.得られたファジィ選好強度モデルはメダカの空間分布を良好に再現した.また,得られた重みから流速因子がメダカの生息場選択に最も重要な因子であることが分かった.次に,フィールド調査を基にメダカの生息場選好性を定量化した.その際,物理環境測定値に含まれる観測誤差や水域内でのばらつきをファジィ数で表現した.その結果,メダカの空間分布の予測精度が向上し,得られた選好強度分布からメダカの生息場選好性の季節変化や側方遮蔽の重要性が明らかになった.また,水生植物がメダカの生息場選択に与える影響をファジィ選好強度モデルとAIC(赤池情報量基準)を用いて評価した結果,水生植物の重要性が定量的に示された.最後に,複雑な環境下にあるメダカの生息場選択を,複雑系のモデリングに優れたニューラルネットワークによりモデル化した.入力層にファジィ推論を導入し,物理環境測定値をファジィ数で表現した.本モデルによりメダカの生息場選好性および空間分布が精度良く再現された.以上,メダカの生息場選好性を人工知能技術により良好に定量化できることを明らかにした.本研究では,人工知能技術として知られるファジィ推論,遺伝的アルゴリズムおよびニューラルネットワークを用いて,メダカ(Oryzias latipes)の生息場選好性を定量化するモデルを開発した.まず,室内実験で予備的にメダカの生息場選好性を把握し,次に,農業用水路で実施したフィールド調査から実水域における生息場選好性を定量化した.室内実験では,水深因子,流速因子および遮蔽因子を注目し,開水路実験により生息場選好性を表現するモデルを構築し,得られたモデルを平面水槽実験により検証した.開水路実験の結果,与えられた環境に対するメダカの環境応答に大きなばらつきが見られたため,簡略化法によるファジィ推論を導入し,このばらつきをメダカの選好判断のあいまいさとして積極的にモデルに組み込んだ.モデルの最適構造は遺伝的アルゴリズムによる最適値探索で決定した.得られたファジィ選好強度モデルはメダカの空間分布を良好に再現した.また,得られた重みから流速因子がメダカの生息場選択に最も重要な因子であることが分かった.次に,フィールド調査を基にメダカの生息場選好性を定量化した.その際,物理環境測定値に含まれる観測誤差や水域内でのばらつきをファジィ数で表現した.その結果,メダカの空間分布の予測精度が向上し,得られた選好強度分布からメダカの生息場選好性の季節変化や側方遮蔽の重要性が明らかになった.また,水生植物がメダカの生息場選択に与える影響をファジィ選好強度モデルとAIC(赤池情報量基準)を用いて評価した結果,水生植物の重要性が定量的に示された.最後に,複雑な環境下にあるメダカの生息場選択を,複雑系のモデリングに優れたニューラルネットワークによりモデル化した.入力層にファジィ推論を導入し,物理環境測定値をファジィ数で表現した.本モデルによりメダカの生息場選好性および空間分布が精度良く再現された.以上,メダカの生息場選好性を人工知能技術により良好に定量化できることを明らかにした.一般に,魚類の生息場選好性は,流水要素,水質要素および空間要素の複雑な相互影響の下で決定される.本研究では,人工知能技術として知られるファジィ推論,遺伝的アルゴリズムおよびニューラルネットワークを用いて,メダカ(Oryzias latipes)の生息場選好性を定量化するモデルを開発した.まず,所望の環境条件を設定可能な室内実験で予備的にメダカの生息場選好性を把握し,次に,農業用水路で実施したフィールド調査から実水域における生息場選好性を定量化した.室内実験では,水深因子,流速因子および遮蔽因子を採り上げ,開水路実験により生息場選好性を表現するモデルを構築し,得られたモデルを平面水槽実験により検証した.開水路実験の結果,与えられた環境に対するメダカの環境応答に大きなばらつきが見られたため,簡略化法によるファジィ推論を導入し,このばらつきをメダカの選好判断のあいまいさとして積極的にモデルに組み込んだ.モデルの最適構造は遺伝的アルゴリズムによる最適値探索で決定した.得られたファジィ選好強度モデルはメダカの空間分布を良好に再現した.また,得られた重みから流速因子がメダカの生息場選択に最も重要な因子であることが分かった.次に,フィールド調査を基にメダカの生息場選好性を定量化した.

その際,物理環境測定値に含まれる観測誤差や水域内でのばらつきをファジィ数で表現した.その結果,メダカの空間分布の予測精度が向上し,得られた選好強度分布からメダカの生息場選好性の季節変化や側方遮蔽の重要性が明らかになった.また,水生植物がメダカの生息場選択に与える影響をファジィ選好強度モデルとAIC(赤池情報量基準)を用いて評価した結果,水生植物の重要性が定量的に示された.最後に,複雑な環境下にあるメダカの生息場選択を,複雑系のモデリングに優れたニューラルネットワークによりモデル化した.入力層にファジィ推論を導入し,物理環境測定値をファジィ数で表現した.本モデルによりメダカの生息場選好性および空間分布が精度良く再現された.以上,メダカの生息場選好性を人工知能技術により良好に定量化できることを明らかにした.最終年度となる平成18年度は,フィールドデータを更に蓄積し,以上で得られたモデルの予測精度の向上を目指す.一般に,魚類の生息場選好性は,流水要素,水質要素および空間要素の複雑な相互影響の下で決定される.本研究では,人工知能技術として知られるファジィ推論,遺伝的アルゴリズムおよびニューラルネットワークを用いて,メダカ(Oryzias latipes)の生息場選好性を定量化するモデルを開発した.まず,所望の環境条件を設定可能な室内実験で予備的にメダカの生息場選好性を把握し,次に,農業用水路で実施したフィールド調査から実水域における生息場選好性を定量化した.室内実験では,水深因子,流速因子および遮蔽因子を採り上げ,開水路実験により生息場選好性を表現するモデルを構築し,得られたモデルを平面水槽実験により検証した,開水路実験の結果,与えられた環境に対するメダカの環境応答に大きなばらつきが見られたため,簡略化法によるファジィ推論を導入し,このばらつきをメダカの選好判断のあいまいさとして積極的にモデルに組み込んだ.モデルの最適構造は遺伝的アルゴリズムによる最適値探索で決定した.得られたファジィ選好強度モデルはメダカの空間分布を良好に再現した.また,得られた重みから流速因子がメダカの生息場選択に最も重要な因子であることが分かった.次に,フィールド調査を基にメダカの生息場選好性を定量化した,その際,物理環境測定値に含まれる観測誤差や水域内でのばらつきをファジィ数で表現した.その結果,メダカの空間分布の予測精度が向上し,得られた選好強度分布からメダカの生息場選好性の季節変化や側方遮蔽の重要性が明らかになった.また,水生植物がメダカの生息場選択に与える影響をファジィ選好強度モデルとAIC(赤池情報量基準)を用いて評価した結果,水生植物の重要性が定量的に示された.最後に,複雑な環境下にあるメダカの生息場選択を,複雑系のモデリングに優れたニューラルネットワークによりモデル化した,入力層にファジィ推論を導入し,物理環境測定値をファジィ数で表現した.本モデルによりメダカの生息場選好性および空間分布が精度良く再現された.以上,メダカの生息場選好性を人工知能技術により良好に定量化できることを明らかにした.
脂質分布と膜物性の同時可視化で迫る糸状仮足形成における脂質ラフト動態と機能の解明

細胞膜における現象を明らかにするため、脂質ラフトの動態や性質、細胞骨格との相関を明らかにする必要がある。本研究は、HeLa細胞の細胞伸展をモデルとして全反射顕微鏡を用いて細胞膜における脂質を正確に可視化する事により、脂質ラフトの動態を調査した。細胞伸展において細胞膜外層のラフト脂質は段々と分離し、別々のドメインを形成した。コレステロールドメインは糸状仮足先端に局在し、秩序液体層様の性質を示した。このドメイン形成は、ドメインの裏側でシグナル脂質PIP2、低分子量Gタンパク質Cdc42、その制御下のABCタンパク質ABCA1によるフィードバック制御機構を介して動的に制御される可能性が示唆された。本年度は、糸状仮足先端に形成される細胞膜外層コレステロールドメインに着目し、その裏側にある因子の特定を行った。細胞膜内層では昨年度に関連が示唆されたホスファチジルイノシトール脂質群に加えて、コレステロールプローブの細胞膜内層発現系を構築した。その結果、細胞膜外層コレステロールドメイン裏側の内層ではコレステロールドメインが劇的に減少している可能性が示唆された。続いて、細胞膜内層脂質よって制御される糸状仮足形成アクチン細胞骨格関連因子と細胞膜外層コレステロールドメインの関連性について調査を行った。昨年度に関連が示唆された、ホスファチジルイノシトール脂質群と結合性を示し、アクチン細胞骨格形成において中心的役割を担うN-WASPが一過性で局在した。そのシグナルの上流に位置し、アクチン重合を制御することで糸状仮足の形成に重要な低分子量GTPaseCDC42は糸状仮足の先端に局在し、糸状仮足形成の進展とともに構造全体的に局在が拡散する動態が確認された。変異の強制発現や薬剤処理によりCDC42の活性を変化させる事で、コレステロールドメインが劇的に減少したが、他の脂質群については大きな変化が確認されなかった。コレステロールを細胞膜より除去する操作、または過剰添加する操作を用いたコレステロール量の調整によりCdc42の活性化型が増減した事から、コレステロールの量とCdc42の活性に相関が確認され、さらに糸状仮足自体の形成に大きな影響を及ぼした。一方、アクチン重合を阻害する処理をした場合、コレステロールドメインに変化は見られなかった。これらの結果は、コレステロールドメインの形成とCdc42の活性化が相互に影響するフィードバック制御の存在を示唆する。この制御によりCdc42の活性化が起る事で、その下流に位置するタンパク質を制御しアクチン重合を引き起こし、糸状仮足形成を促していると推測される。脂質ラフトは細胞膜に存在する特定の脂質の集合体であり、細胞形態の制御における細胞骨格と細胞膜の相互作用において重要な機能を果たすと考えられている。本研究では、細胞膜における脂質ラフトの機能を解明するために、糸状仮足形成過程をモデルとして生細胞内における1脂質ラフトを構成する脂質の細胞膜外層と内層の分布の関係、2脂質ラフトにおける膜物性、そして、3脂質ラフトの外内層の脂質分布と膜物性の相関について解明する。今年度は、細胞膜に特化した観察を行う事、そして、細胞膜外層脂質と内層脂質分布と脂質膜の物性の三者を同時に観察する事を目的とし、全反射顕微鏡の改造および観察試薬の検討を行い、蛍光3色観察系と蛍光スペクトルが膜物性により変化する試薬Di-4-ANEPPDHQ(以下、膜物性試薬)を用いた生体内膜物性解析系を立ち上げた。細胞膜が動的に変化する細胞伸展試験から得られた糸状仮足先端のコレステロールドメインの特異的分布について、現在までにHeLa細胞伸展における脂質分布と脂質膜物性の時系列変化を調べ、次の結果を得ている。1、コレステロールドメインは進展初期に先端に局在しているが、次第に糸状仮足全体に分布が広がった。2、膜物性試薬の蛍光強度を元に糸状仮足先端コレステロールドメインの膜物性を求めた結果、コレステロールドメインプローブで染色された先端は他の部位より流動性に乏しく固い秩序液体相であった。3、糸状仮足先端の外層のコレステロールドメインの裏側、細胞膜内層ではホスファチジルイノシトール2リン酸(PLCdelta-PHドメインで可視化)とホスファチジルイノシトール3リン酸ドメイン(BTK-PHドメインで可視化)が存在した。これらの結果から、糸状仮足先端における細胞膜外層のコレステロールドメインと内層のホスファチジルイノシトール脂質群の相関が示唆された。平成24年度前半で、細胞膜に特化した観察を行う事、そして、細胞膜外層脂質と内層脂質分布と膜物性の三者を同時に観察する事を目的とし、全反射顕微鏡の改造および観察試薬の開発を行い、反射顕微鏡における3色観察及び、生体内膜物性解析系を立ち上げた。

実験を確固たるものにするために予定していた期間より長い約8ヶ月の期間を有したため、予定していた脂質プローブ観察は行ったが、定量解析については、現在進行中である。それ以外の実験についてはおおむね良好に進行している。顕微鏡観察の技術的な点については、ほぼ解決したため、まずは、糸状仮足形成における細胞膜内層脂質と外層ラフト脂質の分布との相関、それと膜物性について予定していた顕微鏡画像の定量的解析を速やかに行う。また、当初予定していた平成25年度の実験(以下)については、速やかに開始する。1、薬理学的手法や遺伝学的手法により関連脂質の部分分解または細胞内生産量を変化させ、他の脂質の分布や膜物性に対する機能を明らかにする。薬学的手法の一つとしてChemical inducible dimerization法にて脂質量を変化させる実験を開始している。2、糸状仮足についてその形成に関わる細胞骨格と膜物性の相関、さらには細胞骨格とラフト脂質との相関を明らかにする。当初は予定していなかったが、研究を進めていく段階で細胞接着関連分子との関わりを示唆する知見を得たため、そちらについても平行して試験を行う。実験については、当初予定していた研究計画がおおむね順調に進展しているため、平成25年度予定する実験を遂行するため物品費として予算を使用する。また、平成24年度は学会発表する段階には至っていなかったため、平成24年度予定していたものについては平成25年度内の国内学会発表を行うために使用する事を予定している。
ドイツ国法学上の国家憲法と宗教憲法の衝突の観点からみた現代的宗教問題の検討

憲法学の現代的問題として、公立学校での宗教的シンボルの着用、宗教法人経営病院での労働争議など、宗教に関わる法的/憲法的問題がある。本研究は、ドイツの国法学や教会法学の成果を参考にしながら、憲法条項そのものの解釈ではなく、その背後にある憲法理解や憲法理論、あるいは国家秩序及び宗教秩序の構造そのものから、その原因と解決策を検討することを目標とする。
グリーンツーリズムがもたらす農村女性の役割、地位変遷に関する研究

秋田農村部、都市部間での男女格差のレベルの違いは顕著に見られず、むしろ農村部では世代別での男女格差の認識の違いが明らかになった。同時に地域、家庭内でいまだに男女格差があるのは事実であり、農村女性はGT活動に関わることにより彼女らの役割、地位が徐々に向上していると認識していることが明らかにされた。本研究の目的はグリーンツーリズム(GT)活動が、どのように現代農村地域の女性たちの役割、地位に影響しているかを実証的に明らかにすることである。具体的には、地域、家庭での伝統的な女性の役割、地位がGT活動にかかわることによりどのように変化しているか分析している。文献調査より以下のようなことがとしてあげられた。1)秋田市外、農村のほうでは市部よりも男女の役割がさらに顕著である。2)農村女性はグリーンツーリズムと関わることにより外活躍する機会を持ち、自分でお金を稼ぎ男は外、女は家庭内という役割が変わってきた。3)農村女性がGT活動に従事することにより、生きがいを感じ、彼女らに自信をもたらし、最終的には彼女らの地位を向上させている。この仮説をもとに参与観察、インタビューを実施し、この課題を分析してきた。平成22年3月時点で以下のことが明らかにされだ。1)農村のほうでは都市部のほうよりも男女の役割がさらに顕著であり(男は外、女は家庭内という役割)、就労(農村での無報酬労働)、家庭、教育面で男女格差がある。2)他県よりGT活動への規則が緩和であることから、秋田県は他県よりもGT活動がさかんである。3)農村女性はGT活動と関わることによりで活躍る機会を持ち、経済力を持ち、彼女らの役割、地位が徐々に変わってきている。また、女性のGT活動などの活躍ぶりに抵抗を感じていかる地域住民が多ったということがイシタビューなどで明らかにされたが、次第にこれらの女性の活動に対する地域住民の認識も変化している。これまで実施してきたインタビューにより秋田県中央、県南、県北では地理的条件などから、地域色が違い、GT活動もそれぞれの特色があるとのことが示唆された。来年度は地域によってどのように農村地域の女性たちの役割、地位に影響しているかを実証的に比較したい。本研究の目的は、グリーンツーリズム(GT)活動がどのように現代農村地域の女性たちの役割・地位に影響しているかを、実証的に明らかにすることであった。具体的には、地域・家庭での伝統的な女性の役割・地位が、GT活動にかかわることによりどのように変化しているか分析した。文献調査より、以下の仮説を打ち立てた。1)秋田市外・農村のほうでは都市部よりも男女格差がさらに顕著である。2)農村女性はGT活動と関わることにより、外で活躍する機会を持ち、自分でお金を稼ぎ、『男は外、女は家庭内』という役割が変わってきた。3)農村女性がGT活動に従事することにより、生きがいを感じ、自信をもち、最終的には彼女らの地位を向上させている。この仮説をもとに参与観察・インタビューを実施しこの課題を分析した結果、以下のことが明らかにされた。1)農村部、都市部間での男女格差のレベルの違いは顕著に見られず、むしろ農村部では世代別での男女格差の認識の違いが明らかになった。具体的には、農業の機械化、また現代農業の経営難状況の影響により、70歳未満の農村女性は70歳以上の農村女性よりも男女平等になりつつあると認識している。2)しかしながら、地域・家庭内で未だに男女格差があるのは事実であり、農村女性はGT活動に関わることにより(例公共の場に出る、自分の意見を発表する、個性を主張する機会が多くなる、自分で自由に使えるお金を稼ぐことができる)彼女らの役割・地位が徐々に向上していると認識していることが明らかにされた。3)女性のGT活動などの活躍ぶりに抵抗を感じている地域住民が多かったということがインタビューなどで明らかにされたが、これらの助成の活動に対する地域住民の認識も徐々に変化していることも判明された。
固相マイクロ抽出法による新規乱用薬物のスクリーニング分析

次にSPME法とGC-FPDを組み合わせて,8種類の有機リン剤の検出法の検討を行った。各薬物の標準品をメタノールで溶解し,GC-FPDに直接注入して,保持時間を測定した。次に各薬物の標準品をヒト全血中に添加し除タンパクなどの前処理をした後、SPME抽出を行い,GC-FPDで測定した。各薬物の回収率は,0.03-2.19%で,検量線は,フォサロン(200-800ng/0.5ml)を除き,25-400ng/0.5mlの範囲で直線性を示し,検出限界は,ジクロルボス,フェニトロチオン及びマラソンは0.2ng/0.5ml以下,フェンシオンは1.6ng/0.5ml以下,プロフェノフォス及びエチオンは6.3ng/0.5ml以下,イソキサチオンは25ng/0.5ml以下,フォサロンは200ng/0.5ml以下であった。これらの結果から,全血をジエテルエーテルにより液-液抽出した試料をトライエージに用いたスクリーニング法とSPME法とFPDを組み合わせた方法による有機リン剤の検出法は,法医実務への応用が可能であると考えた。乱用薬物や薬毒物の包括的なスクリーニング法を構築し、さらに法医実務や救急外来における薬物スクリーニング等への応用をはかるために、抽出法としてSPME、スクリーニングにフレームサーミオニック検出器ないしFPD、同定及び定量にはGC/MS及びGC/タンデム質量分析計(MS/MS)を用いた方法を最終的に確立するのが本研究の目的である。その前段階の簡易スクリーニング法として、トライエージDOAによるヒト全血中乱用薬物の検出の検討を行った。トライエージDOAは尿中乱用薬物を簡便かつ迅速にスクリーニングできるキットであるが,全血を試料とした検出法については、十分な検討が行われているとはいいがたい。今回全血をジエチルエーテルで液-液抽出を行って,抽出後の試料について本キットを用い,薬物の検出が可能であるかどうか検討した.本研究の目的は,法医実務や救急外来における迅速診断に応用可能なスクリーニング法の開発であり,抽出法としてSPME,迅速検出にFTDないしFPD,同定及び定量にはGC/MS及びGC/タンデム質量分析計(MSIMS)を用いた検出法を想定している。その前段階の簡易スクリーニング法として,トライエージDOAを用いた血中薬物の検出を試みてきた.トライエージDOAは尿中乱用薬物検出キットであり,これを血中薬物の検出に応用するために,ジエチルエーテルによる全血からの液-液抽出の回収率の検討を行った.本研究の目的は、法医実務や救急外来における迅速診断に応用可能なスクリーニング法の開発である。本年度は、最近中国製餃子で問題になった有機リン系農薬の分析を試みた。抽出法として固相マイクロ抽出(Solid Phase Microextraction: SPME)法、検出には有機リン系化合物を選択的に高感度分析するGC-FPD(FPD:炎光光度検出器を搭載したGC:ガスクロマトグラフ)を用いた。最初に、各薬物の標準品をメタノールで溶解し、GC-FPDに直接注入して、それぞれの薬物の保持時間を測定した。次に各薬物を1mlのヒト全血に添加し、さらの過塩素酸と炭酸カリウムを加わえて混合した後、遠心分離し、その上清にSPMEファイバーを浸す(直接浸漬)することにより、ファイバーに目的物質を吸着させた。ついでそのファイバーをGCの気化室内に露出して目的物質をGCに導入し、測定を行った。各薬物の回収率は0.03-2.19%であり、また検量線はフォサロン(200-800ng/ml)を除き、25-400ng/mlの範囲で直線性を示し、検出限界は、ジクロルボス、フェニトロチオン、及びマラチオンは0.2ng/ml以下、フェンシオンは1.6ng/ml以下、プロフェノフォスとエチオンは6.3ng以下、イソキサチオンは25ng/ml以下、そしてフォサロンは200ng/ml以下であった。血中致死濃度は、フェニトロチオン16ng/ml、マラチオン12ng/mlなどが報告されているが、本法による検出限界はこれらの数値をはるかに下回った。

測定に要する時間は、1時間弱であるが、これはGCの昇温条件の調整などにより、十分に改善の余地がある。これらの結果と操作の簡便性から、法医実務への応用が十分可能であると考えた。
熱電子活性化高周波反応性イオンプレーティングによる成膜とそのコントロール

高周波イオンプレーティングに熱電子によるガス粒子の活性化機構を付け加えるため、熱電子放射用電極を取付け、さらにイオン収束用電圧を印加できるようにした高周波イオンプレーティング装置を作製した。最初、TiN膜を作るため、37X【10^(-4)】torrの希薄な窒素ガス中においてTiを電子ビーム溶解し蒸発させて鋼上にTiN膜を作った。その結果、熱電子の放射により窒素ガスはイオン化し易くなり、高周波電力が小さくてもイオン化しにくい低いガス圧でグロー放電が起るようになり、上質のTiN膜、即ち、平滑かつ金色に近いTiN膜が得られることがわかった。また、Al-Zn合金上にTiN膜を得た。そこで、同イオンプレーティング装置を用いて、イオン収束用バイアス電圧,熱電子放射量,窒素ガス圧を変化させ、TiN膜を作り、膜の組化構造に与える影響を調べた。バイアス電圧は0600Vまで印加した。ガス圧やTiの蒸発速度を変化させると膜の色彩が変わり、組成が変化することがわかった。また、熱電子放射量を増大させると、低ガス圧でも安定したグロー放電が起り、低ガス圧下でのイオンプレーティングができ、膜質をコントロールし易いことがわかった。バイアス電圧を変え、イオン電流を変化させると、膜の配向性,結晶性などに変化が生じた。次に同装置を用いてZr,NbやAlのイオンプレーティング実験を行った。ZrとAbは融点が高いため、現有の装置の最高電力200Wをかけても蒸発しないので、ハースライナーを使用し蒸発させなければならないことがわかった。Alも熱伝導性が良いので蒸発するにはハースライナーが必要であった。従って、このような金属のイオンプレーティングを行う時は、大容量の高周波電源を使用する必要がある。
神経細胞由来エクソソームの脳内除去機構

エクソソームは、様々な細胞から放出される細胞外ナノ顆粒であり、脳神経細胞からも分泌される。エクソソームには細胞機能に不要なタンパク分子が多く含まれ、その役割の一つは不要物質の廃棄であると考えられている。本研究では、細胞の外に出されたエクソソームを処理する脳内の機構を明らかにすることを目的として、培養細胞およびマウスを用いた実験によって、エクソソームの取り込み細胞を検索した。その結果、脳内貪食細胞のミクログリアが、エクソソームの取り込みとエクソソーム結合分子の分解除去に関与していることがわかった。様々な細胞から放出される細胞外ナノ粒子であるエクソソームが、ニューロンからも分泌されることが報告されており、不要分子を処理するための運搬体として働いている可能性が示唆されている。本研究課題では、これまで不明であったエクソソームの脳内処理機構の探索をテーマとした。昨年度(23年度)の培養細胞を用いた実験によって、エクソソームはミクログリアに積極的に取り込まれ、取り込み後は細胞内でリソソームに輸送されることがわかった。今年度(24年度)は、このエクソソームのミクログリアへの取り込みが生体内でも起こるか確認するために、蛍光エクソソームのマウス脳海馬領域へのインジェクション実験を行った。エクソソームを投与したマウスを3時間放置した後、脳を取り出し切片を作製した。その後、ニューロン、ミクログリア、アストロサイトの各マーカー分子に対する抗体で免疫染色した後、蛍光顕微鏡で観察した。その結果、エクソソームは、ミクログリアマーカーとの明確な共局在が見られた。ニューロン、アストロサイトマーカーとの共局在は観察されなかった。これらの結果から、ニューロン由来エクソソームの除去に関しては、ミクログリアが主な役割を担っていると考えられる。また、近年、アルツハイマー病の原因物質とされているアミロイドbetaペプチドがエクソソームに結合することが明らかとなっている(Yuyama K et al, J Biol Chem, 2012)。本研究課題において、このエクソソーム結合Abetaも、エクソソームと共にミクリグリアへ取り込まれることを、培養細胞系およびマウス脳で確認した。これらの結果は、Abetaの脳内クリアランスにおいてエクソソームが運搬体として働いている事を示唆しており、アルツハイマー病の病態発現においてエクソソームが関与する可能性も考えられる。さまざまな細胞から放出されるエンドソーム膜由来の細胞外顆粒であるエクソソームが、近年神経細胞からも分泌されることが報告されている。このエクソソームの放出はエンドサイトーシス障害時に亢進されることから、未分解分子の新規処理機構であるとの考察がなされている。本研究課題では、現在不明である細胞外エクソソームの脳内処理機構の探索をテーマとして進めている。予備的実験で、エクソソームがミクログリア細胞の貪食活性を促進することを見いだしており、ミクログリア細胞を中心にエクソソーム取り込み活性ついて解析する。また、アミロイドbeta蛋白質(Abeta)などエクソソーム結合性の神経変成疾患関連分子の取り込み・分解についても検討する計画である。23年度は、神経細胞株Neuro2A細胞由来のエクソソームを取り込み、分解する標的細胞種を、培養神経細胞、ミクログリア細胞を候補として検討した。その結果、神経細胞と比較してミクログリアは大量のエクソソームを短時間に取り込むことがわかった。また、Abetaが結合したエクソソームの場合、Abetaもエクソソームと共にミクログリアに取り込まれ、ミクログリア内のリソソームで分解されることを見出した。この結果は、エクソソームを介する新規のAbeta分解経路を示唆するものである。さらに生体内でエクソソームを取り込む細胞種を同定するために、マウス脳に蛍光ラベルしたエクソソームをマイクロインジェクションし、3時間後に脳を固定・摘出し、免疫組織化学によりエクソソームを含有する細胞を解析した。結果は、培養細胞を用いた実験と同様に、神経細胞、アストログリアと比較すると、エクソソームがミクログリアと共局在する像が高頻度で観察された。これらの結果から、中枢神経系においてエクソソームを取り込み除去する細胞はミクログリアである可能性が高いと考えられる。研究計画調書に記載した平成23年度の研究計画である(1)ミクログリア細胞によるエクソソームの取り込みの確認、(2)ニューロンを含む各種培養細胞によるエクソソームの取り込み活性の確認、(3)取り込み細胞内でのエクソソームの可視化、(4)エクソソーム取り込みに関わる分子の同定が、ほぼ完了し、成果を論文発表した。このため24年度も研究計画に従い実施する予定である。23年度の研究がほぼ予定通り遂行されたので、24年度は研究計画調書に記載した計画を進めていく予定である。
樹状細胞を介した心筋虚血再灌流障害に及ぼす14員環マクロライドの影響

本研究では心臓虚血再灌流モデルを用いてエリスロマイシン(EM)の効果を検討した。ウィスターラットを術前30分にEMもしくは生理食塩水(control)の静脈内投与を行う2群に分け、30分の心筋虚血の後、再灌流を行った。虚血再灌流24時間および14日後の左室収縮率、左室収縮期圧、最大dP/dtはcontrol群に比しEM群で有意に大きかった。虚血再灌流24時間後の梗塞領域および心筋IL-6、TNF-α、好中球浸潤はEM群で有意に低下していた。心筋虚血再灌流におけるEM投与は急性期のみならず慢性期においても左室収縮能を改善させ、その機序として好中球浸潤の抑制ならびに炎症反応の抑制が考えられた。本研究では、心臓虚血再灌流モデルを用いてエリスロマイシン(Erythromycin ;以下EM)投与が虚血再灌流後の心機能や炎症・免疫応答に与える急性および慢性効果を検討し、新たな治療法の開発を目指すことを目的とする。ウィスターラット(250-300g)をペントバルビタール麻酔下に、気管内挿管後人工呼吸器に接続し左肋間開胸の上、左前下行枝の近位部より阻血を行い、30分後に阻血を解除し再灌流を行った(虚血再灌流群)。阻血/再灌流以外の全処置を行う群をSham群とした。術前30分に、EM(25mg/kg)もしくは生理食塩水(control)の静脈内投与を行った。(1)虚血再灌流+EM投与群(2)虚血再灌流+生食投与群(3)Sham+EM投与群、上記のそれぞれの群に対して、虚血再灌流後以下の項目を検討した。(1)心筋コントラスト心エコー法による再灌流の定量的評価。再灌流後60分の時点で心筋コントラストエコーを行ったところ、心筋虚血エリアへのレボビストの取り込みはcontrol群に比し、EM群で有意に高かった。(2)左室機能、血行動態の評価。心エコー(Mモード)及び2.0Frカテ先マノメーターを用いた血行動態評価では、虚血再灌流24時商後の左室収縮率、左室収縮期圧、最大dP/dtはcontrol群に比しEm群で有意に大きかった。(3)TTC染色によるリスク領域、壊死領域の検討。虚血再灌流24時間後にEvans-BlueとTTCを用いた梗塞領域の評価では、リスクエリアは両群で有意差を認めない一方で、梗塞エリアはEM群がcontrol群より有意に小さかった。(4)RT-PCIR。虚血再灌流24時間後の心筋組織よりTRIzolを用いてRNAを抽出し、real time PCR法を用いてIL-6、TNF-αの定量化を行ったところEM群ではcontrol群に比し有意に低値であった。本研究では、心臓虚血再灌流モデルを用いてエリスロマイシン(Erythromycin;以下EM)投与が虚血再灌流後の心機能や炎症・免疫応答に与える急性および慢性効果を検討し、新たな治療法の開発を目指すことを目的とし、平成20年度にはその急性効果についてすでに報告した。ウィスターラット(250-300g)をペントバルビタール麻酔下に、気管内挿管人工呼吸器に接続し左肋間開胸の上、左前下行枝の近位部より阻血を行い、30分後に阻血を解除し再灌流を行った(虚血再灌流群)。術前30分にEM(25mg/kg)もしくは生理食塩水(control)の静脈内投与を行った。(1)左室機能、血行動態の評価。心エコー(Mモード)及び2.0Frマノメーターを用いた血行動態評価では先に報告した虚血再灌流24時間後と同様、虚血再灌流14日後においても左室収縮率、左室収縮期圧、最大dP/dtはEM群ではcontrol群に比して有意に大きかった。(2)ミエロペルオキシダーゼ染色による心筋免疫組織染色。虚血再灌流24時間後の心筋への好中球の浸潤はEM群がcontrol群で有意に低下していた。

以上より、心筋虚血再灌流におけるエリスロマイシン投与は急性期のみならず慢性期においても左室収縮能を改善させ、その機序としては虚血再灌流部位への好中球浸潤の抑制ならびに炎症反応の抑制が考えられた。
19世紀オーストリア帝国における少数諸民族の言語権獲得過程とナショナリズムの研究

今年度も、昨年度に引き続き、ガリツィアに生まれた同化ユダヤ人作家カール、エーミール、フランツォース(Karl Emil Franzos 1848-1904)を対象としたが、今年度は特に19世紀後半のドイツの法学者イェーリング(Rudolf von Jhering 1818-1892)とフランツォースとの関わりを、論文「権利のための闘争カール、エーミール、フランツォース試論(2)」において明らかにすることができた。フランツォースは、1867年ウィーン大学に入学し法律学を専攻するが、その翌年、ギーセンのローマ法教授イェーリングが、オーストリア帝国法務大臣アントン・ヒュエによって招聘されウィーンへやって来る。19世紀後半のドイツにおける法思想の主流はサヴィニーの歴史法学であったが、イェーリングはそれに対して異を唱えた人物であった。すなわち、サヴィニーの歴史法学が民族性に法の根拠を見出していたのに対してイェーリングは、ローマ法の研究を通じて普遍性に法の根拠を見定めていたのであった。同化ユダヤ人として幼い頃から啓蒙主義の中で育てられてきたフランツォースがイェーリングに傾倒していったのは当然の成り行きであった。1872年3月イェーリングはウィーンの法律家協会における講演「権利のための闘争」を置き土産にゲッティンゲンへ去る。方フランツォースは同じ年、あれほど心酔し、生涯を捧げる決意していた法学を断念し大学を去り、作家活動に入ってゆく。フランツォースが法学を断念したのは、彼がユダヤ人であったことと、おまけにブルシェンシャフトでの活動が公職に就くことが困難としたからであった。この年の秋イェーリングの講演は『権利のための闘争』として刊行され、この書によってフランツォースは「権利/法の神聖」を強く確信し、10年後、小説『権利のための闘争』(1882年)を書かせるきっかけとなったのであった。今年度は、ウィーンの、オーストリア国立公文書館(Staatsarchiv)および国立図書館(Nationalbiblitothek)においておよそ4週間にわたり当初の研究目的に従って資料の調査・収集にあたった。対象としたのは主として18世紀後半から20世紀初頭のハプスブルク帝国の官報、法令集、判例、国勢調査記録、地図などであった。マリア・テレジアのころから帝国崩壊に至るまでの間にオーストリア帝国は、言語に関わるものだけでも500600に及ぶ勅令、法令、条令、通達を発している。この数からだけでも、オーストリア帝国の、多民族・多言語国家としての特殊性はうかがい知ることができる。しかし、仔細に見ると帝国政府の言語政策、民族政策は19世紀半ばに憲法を持ったとはいえ、事情を異にする地域ごとに異なっており、政府が帝国としての外形を保つためにいかに苦慮したかということが見て取れ大変興味深いものがある。なかでも注日すべきは、ガリツィアであろう。ガリツィアは1772年と1795年の第1次および第3次ポーランド分割によってオーストリア帝国に領有されが、しかしこのことは、対外的にガリツィアがオーストリア領になったというだけのことであり、この地が文化的にゲルマン化されたということを意味するものではなかった。ここでは、ポーランド貴族の実権はそのまま温存されていたからである。政府はそれに対抗させるためルテニア人(ウクライナ人)、ルテニア語優遇の政策をとっている。さらにこの地はユダヤ人(いわゆる東方ユダヤ人)が多く住んだ地域であったが、彼らは、法的に「民族」として認められておらず(法的には「宗教共同体」であった)、また彼らの言語、イディッシュも帝国公認の「地方語」とはされなかった。ガリツィアは、同じオーストリア帝国内とはいえ、チェコ人対ドイツ人という構図が成り立つボヘミア地方よりははるかに複雑であったようで、次年度は焦点をガリツィアに絞る予定でいる。今年度は、ガリツィアに生まれた同化ユダヤ人作家カール・エーミール・フランツォース(Karl Emil Franzos1848-1904)の生涯に研究対象を絞った。フランツォースは、1848年、すなわち「ヨーロッパ・ナショナリズムの元年」と呼ぶことのできる年に、当時オーストリア帝国ガリツィア・ロドメリア王国のチョルトコフ(現ウクライナ)という人口およそ3500人の街に、同化ユダヤ人医師の長男として生まれ、ドイツ文化(啓蒙主義)の中で育てられる。この街は、他の多くのガリツィアの小邑がそうであったように、ユダヤ人が6割、ポーランド人が2割、ルテニア人が1割、ドイツ人その他が1割という多民族が混住する街であった。このおよそ6割のユダヤ人たちはほとんどが正統派東欧ユダヤ人であり、フランツォースのような同化ユダヤ人との間には、超えがたい溝があった。さらに、支配階級ポーランド人と小作農民層ルテニア人との間の軋轢もあった。フランツォースは、彼自身が「半アジア」と呼ぶ、このガリツィア、ロドメリア、ブコヴィナ、ルーマニア、南ロシアの地に、啓蒙主義と教養を普及させ、そうすることによって民族的な軋轢、また、それに基づく後進性からガリツィアを解放することを願った。ドイツ人であり同時にユダヤ人であったフランツォースにとっては、民族性の克服は自らのアイデンティティにも関わる問題であった。ところが、19世紀後半のハプスブルク帝国は、そのようなフランツォースの理想とはまったく逆のコースを歩むのである。すなわち、ハンガリーとのアウスグライヒ(1876年)、ポーランド人たちによる「ガリツィア決議」(1878年)、あるいは、ボヘミアのチェコ人たちによる言語権拡大の要求などに見られるナショナリズムの台頭であった。さらに1880年代以降には反ユダヤ主義も顕在化してくる。

やがて第1次世界大戦によってハプスブルク帝国は崩壊し、第2次世界大戦によって、フランツォースの作品の背景となったガリツィアの東欧ユダヤ人世界は壊滅し、フランツォースの名前も忘れ去れていったのであった。今年度も、昨年度に引き続き、ガリツィアに生まれた同化ユダヤ人作家カール、エーミール、フランツォース(Karl Emil Franzos 1848-1904)を対象としたが、今年度は特に19世紀後半のドイツの法学者イェーリング(Rudolf von Jhering 1818-1892)とフランツォースとの関わりを、論文「権利のための闘争カール、エーミール、フランツォース試論(2)」において明らかにすることができた。フランツォースは、1867年ウィーン大学に入学し法律学を専攻するが、その翌年、ギーセンのローマ法教授イェーリングが、オーストリア帝国法務大臣アントン・ヒュエによって招聘されウィーンへやって来る。19世紀後半のドイツにおける法思想の主流はサヴィニーの歴史法学であったが、イェーリングはそれに対して異を唱えた人物であった。すなわち、サヴィニーの歴史法学が民族性に法の根拠を見出していたのに対してイェーリングは、ローマ法の研究を通じて普遍性に法の根拠を見定めていたのであった。同化ユダヤ人として幼い頃から啓蒙主義の中で育てられてきたフランツォースがイェーリングに傾倒していったのは当然の成り行きであった。1872年3月イェーリングはウィーンの法律家協会における講演「権利のための闘争」を置き土産にゲッティンゲンへ去る。方フランツォースは同じ年、あれほど心酔し、生涯を捧げる決意していた法学を断念し大学を去り、作家活動に入ってゆく。フランツォースが法学を断念したのは、彼がユダヤ人であったことと、おまけにブルシェンシャフトでの活動が公職に就くことが困難としたからであった。この年の秋イェーリングの講演は『権利のための闘争』として刊行され、この書によってフランツォースは「権利/法の神聖」を強く確信し、10年後、小説『権利のための闘争』(1882年)を書かせるきっかけとなったのであった。
仔稚魚の単一個体分析による栄養状態評価法

海産仔稚魚に含まれる必須脂肪酸成分(DHA,EPA)を1個体ごとに高感度かつ簡便に分析する手法を確立し,これを天然仔稚魚の分析に適用して脂肪酸成分の個体差の特徴を捉えた。1.高安定蛍光検出器を導入して高速液体クロマトグラフィー(HPLC)による脂肪酸分析の微量化を行った。この高感度分析により,体長が数mmの仔稚魚1個体の体幹部,眼部(1個)の脂肪酸分析が可能となった。2.脂質の抽出,反応,回収の過程を極力簡略化して分析の迅速化を行った。脂質抽出以後の過程は一本の使い捨てガラスバイアル中で実施可能となった。ひとつの分析に要する時間はHPLCを含めて約3.5時間,多検体を同時に分析する場合は1日当たり約10検体の処理が可能であった。3.噴火湾および陸奥湾で採集した18魚種326個体の仔稚魚の体幹部(消化管・卵嚢を除く)の脂肪酸分析を実施した。仔稚魚の主要脂肪酸はすべての個体に共通してDHA(18-32%),パルミチン酸(18-27%),EPA(4-19%),オクタデセン酸(7-12%),ステアリン酸(4-23%)の5種類であることが明らかとなった。4.上記の仔稚魚のDHA含有量(μg/個体)を算出し,仔稚魚を体長に応じて9個体ずつ分級した場合の変動係数(CV)を比較した。その結果,高い変動係数が2.4-3.1mmおよび4.4-5.2mmのマガレイ(CV0.6-1.0),4.8-6.0mmのカタクチイワシ(CV0.7-0.9)で認められた。また,イカナゴでは5.1mmのクラスを除いて全体的に低い値(CV0.2-0.5)であった。天然仔稚魚のDHA含有量は個体差が常に一定であるわけではなく,その差の大きくなる特定の発育段階があることが明らかとなった。海産仔稚魚に含まれるDHA、やEPA等の脂肪酸成分を1個体ごとに迅速かつ簡便に分析する手法を考案し、その有用性と実用性を明らかにした。1.高安定蛍光検出器を新たに導入することによって、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)による脂肪酸分析の微量化を実現した。このことによって1個体の組織レベル(例えば眼部)の脂肪酸分析が可能となった。2.HPLCにおける分離カラムの種類、溶媒の種類、流速、温度の検討を行い、DHA・EPAを始めとする高度不飽和脂肪酸、さらに主要な飽和、モノ不飽和、ポリ不飽和脂肪酸を20分以内に分離できる条件を確立した。3.脂質の抽出、反応、回収の行程を簡略化し、分析の全行程を一本の使い捨てガラスバイアル中で行なえるようにした。これらの簡略化を行なっても抽出効率にはほとんど影響のないこと、むしろ分析中に混入し得るコンタミネーションの防止に有効であることを示した。この簡略化により、所要時間の短縮と多検体の分析処理が可能となった。4.アイナメ1個体の眼部(1個)の分析に適用しその実用性を明らかにした。