hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
海藻(ヒジキ・アカモク)に含まれるヒ素の挙動

褐藻類のヒジキとアカモクを同一海域の接近した地点で採集して、各種組織中に含まれるヒ素濃度の分布を測定し比較した。アカモクにはヒジキの2倍程度の高濃度にヒ素元素が含まれることは、これら海藻の特性であろうと推察された。また、ヒジキの生殖器官にはその他の器官よりも高濃度にヒ素の集積がみられた。これらの海藻を調理する過程でヒ素含有量が軽減される過程を、市販乾燥ヒジキの水戻し過程にて観察した。乾燥ヒジキを3040°Cで30分程水に浸漬すると、総ヒ素量の70%量のヒ素元素が溶出され、1回目の水戻し過程で、膨潤ヒジキに残存する無機体ヒ素は総ヒ素量の14パーセントにすぎなかった。ヒジキSargassumfusiforme (Harvey)Setchell中のヒ素濃度が調理前処理によってどの程度に軽減されうるかについて検討した。市販乾燥ヒジキ〔対馬産〕の一定の試料について、ヒ素含有量を測定したところ、ヒ素元素(As)の存在濃度は89.1±6.4ppm(dry weight)であった。この試料を用いて、調理前の水浸漬処理の条件とヒ素溶出の関係を求めた。水温090°C、浸漬時間20360minの各組み合わせにおいてAsの溶出率を求めた。乾燥ヒジキの水溶出に際しては、水温数十度にて30分以上浸漬すると全ヒ素量の70%が溶出されることがわかった。また、膨潤ヒジキ中の水分量を加味すると、ヒジキの固形物に保持されるヒ素量は全ヒ素量の10%であった(1)。溶出されたヒ素化合物は主として、ヒ酸とアルセノベタインであるが、両者の挙動は異なっていた(2)。ヒ素の溶出と共に有用ミネラルの損失がどの程度に起こるかについて検討した。検討条件下においては、Ca,Feの損失はそれぞれ50%,30%であったが、Mg,Znの損失は70%以上に達した(3)。アカモク原藻を含む飼料でラットを2週間飼育し、血液・肝臓・腎臓・脾臓などの諸臓器へのヒ素分布を測定した。一方、対照としてアカモクを含まない飼料でラットを飼育し、諸臓器へのヒ素分布を測定した。ヒ素の測定は京都原子炉実験場において放射化分析法によって定量した。肝臓・腎臓・心臓・肺臓におけるヒ素濃度については、アカモク食群は対照群にくらべて有意に高かった。骨組織・脾臓・血球・および血漿でもアカモク食群は対照群よりもヒ素濃度が高かった。両群ともに、ヒ素は血球に最も多く蓄積されていた。原藻を加工することによってヒ素含有量の少ないアカモクを得、現在、このアカモク加工品をラットに与えて飼育実験を行っている。ヒジキ、アカモクを含む飼料でラットを飼育するにあたり、ヒジキおよびアカモク中の成分組織を把握するために、以下の実験を行った。ヒジキにおけるAsの集積が褐藻類共通の性質なのか、ヒジキ固有のものなのかを知る目的で、伊勢湾の同一海域の隣接地でヒジキとアカモクを採集した。両者の藻体内のヒ素分布は放射分析によって行った。両者とも、藻体内ヒ素分布は茎に沿って均一であるがアカモク藻体内のヒ素含量はヒジキとくらべて約2倍多かった。特に生殖器において同一部位の茎、葉、小枝にくらべて高い値を示した。市販の乾燥ヒジキを水戻しした時に溶出されるヒ素化合物の形態をICP-MS法で同定した。主要成分はヒ素(As(V)、Iとする)とアルセノベタイン様化合物(IIとする)の2種類であり、他形態の化合物は痕跡量であった。Iは抽出液温が上がるにつれて溶出量が増加するのに対し、IIでは漸増にすぎなかった。Iの方はIIよりも抽出されるときのバリアー(障壁)が大きい状態で存在していると推定された。
藩校の蔵書目録の研究-北陸地方を中心に-

本年度は研究の最終年度にあたるので、まず未調査であった近江国修身堂の蔵書目録の研究を実施した。その結果、『修身堂蔵書録』と『修身堂襍録』の2点の目録を発見、『国文学論叢』53号に報告することができた。このうちの後者は今回の調査で初めて明らかになったものである。2つ目に福井藩藩校の蔵書目録に掲載された朝鮮本・琉球版について、麗澤大学教授の藤本幸夫先生からご教示を得て、「福井藩藩校の蔵書目録の韓書・琉書」と題する論文を発表した。これまで藩校の文庫に朝鮮が所蔵されていることは広く知られていたが、福井藩のそれはその蔵書数からみて格段のものである。藩校の蔵書を朝鮮本という通路から見た論文は、これが初めてのはずである。3つ目にこれまで3年間の調査でも判明しなかった藩校、近江では水口藩翼輪堂、西大路藩日新館、若狭の小浜藩順造館、越前の大野藩明倫堂、府中藩立教館、丸岡藩平章館、越中の富山藩広徳館について、現在までに判明したことを、『書籍文化史』第9号に発表した。その後、情報を公開することで、諸先生方からのご教示をえることができた。最後に、2007年12月8日に、これまでの研究成果を日本図書館文化史研究会で「藩校の蔵書目録の研究-滋賀・福井・石川・富山を対象に-」と題して研究発表を行った。現在は、その発表後に寄せられたご意見を踏まえて、論文にする作業を行っている。本年度は蔵書目録の所在確認とその書誌学的調査(蔵書印調査を含む)並びに藩校旧蔵本の現在の所蔵機関の調査を行なった。蔵書目録の所在調査の結果、(1)金沢藩明倫堂・・・「明倫堂御書総目」(1冊本、金沢市立玉川図書館)、(2)大聖寺藩時習館・・・「時習館書目」(4冊本、加賀市立図書館)、(3)膳所藩遵義堂・・・「遵義堂図書目録」(『旧膳所藩学制』収録、滋賀県立図書館)、(4)富山藩廣徳館・・・「廣徳館蔵書目録欠本帳」(1冊本、富山県立図書館)の所在確認がとれた。このうち膳所藩について、本年度は論文にまとめることができた。しかし、その一方で、越前国勝山藩、鯖江藩、府中藩、丸岡藩、近江国宮川藩の各藩校の蔵書目録は、今回の調査では発見することができなかった。藩校旧蔵本の現在の所在調査は、国立国会図書館と北陸各県の図書館を中心に実施した。北陸地方の藩校の旧蔵本が国立国会図書館に多数移管されていることは、すでに朝倉治彦氏の研究などで指摘されていることであり、国立国会図書館での調査は先行研究を踏まえての確認作業が中心になった。また、北陸各県での調査は、金沢藩、富山藩、大聖寺藩、越前国勝山藩、鯖江藩、府中藩、丸岡藩、近江国膳所藩、宮川藩を対象に実施した。その結果、金沢藩は石川県立泉ケ丘高校と金沢大学に現存、富山藩は明治元年の火災により消失、大聖寺藩は加賀市立図書館聖藩文庫、勝山藩は勝山市立図書館と勝山市立成器西小学校、鯖江藩は鯖江市資料館に、それぞれ所蔵されていることが判明した。このうち勝山藩と鯖江藩については、現在の所蔵機関作成の目録がなかったので、私がその書目カードを作成した。本年度は昨年度に引き続いて、滋賀県・福井県・石川見・富山県の公立図書館、及び、藩校の後身にあたる学校、並びに、国立国会図書館を中心に、藩校の蔵書目録の所在調査を実施した。その結果、滋賀県では大溝藩脩身堂の蔵書目録、『脩身堂蔵書録』『脩身堂襍録』の2点が高島市在住の横田三千太郎氏宅に所蔵されていることが確認できた。この2点については、所蔵者である横田家のご都合もあり、本年度は論文にして公刊することができなかったが、次年度において公刊する予定である。また、石川県では金沢市立玉川図書館に、金沢藩明倫堂の蔵書目録4点が所蔵されていることが確認できた.その4点とは稼堂文庫蔵『明倫堂御蔵書目録』、大島文庫蔵『明倫堂御書総目』、藤本文庫蔵『明倫堂御書物目録』、加越能文庫蔵『陸原之淳留記』第1冊収録「明倫堂御書総目」である。また、同館大島文庫には医学館の蔵書目録である『医学館書目』がある。これら金沢藩藩校の蔵書目録については、「金沢藩明倫堂の蔵書目録」と題する論文として発表した。金沢藩明倫堂の蔵書目録は従来は加誠能文庫蔵の『陸原之涼留記』第1冊収録『明倫堂御書総目』1点しか知られていなかったので、今回の調査で4点の蔵書目録が発見されたことは大きな成果であった。また、福井県では、前年度に調査を実施した勝山藩成器堂と鯖江藩進徳館の旧蔵本の蔵書目録を作成し、それぞれ、「勝山藩成器堂の蔵書」「鯖江藩進徳館の蔵書」として論文を公刊した。こちらは藩校の蔵書目録そのものは見出せなかったが、その旧蔵本の蔵書目録が作成できたことで藩校の蔵書の様子をおおよそ把握することができた。

本年度は研究の最終年度にあたるので、まず未調査であった近江国修身堂の蔵書目録の研究を実施した。その結果、『修身堂蔵書録』と『修身堂襍録』の2点の目録を発見、『国文学論叢』53号に報告することができた。このうちの後者は今回の調査で初めて明らかになったものである。2つ目に福井藩藩校の蔵書目録に掲載された朝鮮本・琉球版について、麗澤大学教授の藤本幸夫先生からご教示を得て、「福井藩藩校の蔵書目録の韓書・琉書」と題する論文を発表した。これまで藩校の文庫に朝鮮が所蔵されていることは広く知られていたが、福井藩のそれはその蔵書数からみて格段のものである。藩校の蔵書を朝鮮本という通路から見た論文は、これが初めてのはずである。3つ目にこれまで3年間の調査でも判明しなかった藩校、近江では水口藩翼輪堂、西大路藩日新館、若狭の小浜藩順造館、越前の大野藩明倫堂、府中藩立教館、丸岡藩平章館、越中の富山藩広徳館について、現在までに判明したことを、『書籍文化史』第9号に発表した。その後、情報を公開することで、諸先生方からのご教示をえることができた。最後に、2007年12月8日に、これまでの研究成果を日本図書館文化史研究会で「藩校の蔵書目録の研究-滋賀・福井・石川・富山を対象に-」と題して研究発表を行った。現在は、その発表後に寄せられたご意見を踏まえて、論文にする作業を行っている。
着床現象と癌浸潤における接着分子機構の相違点と間質浸潤抑止機構の解明

【目的】IVF-ETにおいて形態良好胚移植にかかわらず妊娠しない原因不明症例がある。近年接着分子の観点から研究が進みつつあるが、子宮内膜細胞の解析が多く、卵に関する研究は進んでいない。様々な面から胚盤胞発育について検討し、また、生検した胚盤胞栄養細胞を解析した。【方法】8週齢ICR雌マウスを過排卵処理し、hCG投与と同時に10週齢の同系雄マウスと交配させ、48時間後卵管還流法により24細胞期胚を採取。5%CO2 in air, 37°Cで96時間、胚盤胞(expanded blastocyst)になるまで培養した。割球をmicro-manupilatorで、内細胞塊の対極側からbiopsyしたものA群、内細胞塊から90度方向からbiopsyしたものB群に、内細胞近傍からbiopsyしたものC群に分類した。biopsy法は、slit法で割球を510個生検した。biopsyした栄養膜細胞についてα5β3integrin・α6β4integrin・α5β1integrinの分布量を免疫組織学的に検討した。解析した胚盤胞は追加培養し、72時間後にディッシュ底面に拡がった胚盤胞面積を測定し接着分子との相関性を観察した。【成績】α5β3integrin・α6β4integrinの発現はA群B群でみられ、C群では認められなかった。α5β1integrinはいずれの群でも発現はみられなかった。α5β3integrin・α6β4integrin発現が半分以上に発現がみられた場合、追加培養による胚底面積が発現のみられなかった群より有意に大きかった。【結論】栄養膜細胞浸潤活性の促進因子といわれるα5β3integrin・α6β4integrin、その抑制因子といわれるα5β1integrinの発現を栄養膜細胞で観察すると、その後の細胞浸潤能・増殖能を予知する重要なマーカーとなる可能性が示唆された。マウス胚盤胞における胚生検法の検討【目的】着床前遺伝子診断において、割球生検は必須である。我々は、4細胞から8細胞期胚から1ないし2割球を生検し診断に応用してきた。近年培養環境の改善により、ヒト体外受精胚移植に胚盤胞移植が臨床応用されてきている。今回、胚盤胞からの様々な生検法を検討したので報告する。【方法】8週齢ICR雌マウスを過排卵処理し、hCG投与と同時に10週齢の同系雄マウスと交配させ、48時間後卵管還流法により4細胞期胚を採取。5%CO2 in air,37°Cで72時間、胚盤胞(expanded blastocyst)になるまで培養した。biopsy法は、acid Tyrodeで透明帯を消化後割球を吸引する方法(タイロード法)と透明帯にスリット上の裂隙を作成後生検する方法(スリット法)を用いた。培養96時間後、割球をmicromanupilatorでbiopsyし、過排卵処理にて同期化させた偽妊娠マウス子宮内に移植した。以下の群に分類し、生仔数を検討した。顕微操作を行わなかった対照群A群、割球をmicromanupilatorで、内細胞塊の対極側からbiopsyしたものB群、内細胞塊から90度方向からbiopsyしたものC群、内細胞近傍からbiopsyしたもの

D群に分類した。を5から10個生検した。【成績】タイロード法よりスリット法が操作時間、手技の簡便性割球の変形が少ない点で優れていた。biopy後の各群の生仔獲得率は、A群:48.0%(12/25),B群:36.0%(9/25),C群:44.0%(11/25),D群:22.7%(5/22)。得られた生仔に全く異常は認めなかった。【結論】以上より、胚盤胞着床の観点から、胚盤胞生検には内細胞塊に対して90度方向からスリット法でbiopsyする方法が最適な方法である。【目的】IVF-ETにおいて形態良好胚移植にかかわらず妊娠しない原因不明症例がある。近年接着分子の観点から研究が進みつつあるが、子宮内膜細胞の解析が多く、卵に関する研究は進んでいない。当科では胚盤胞栄養膜細胞生検法を確立している。この手法を用いて生検した胚盤胞栄養細胞を解析し、若干の知見をえたので報告する。【方法】8週齢ICR雌マウスを過排卵処理し、hCG投与と同時に10週齢の同系雄マウスと交配させ、48時間後卵管還流法により24細胞期胚を採取。5%C02 in air,37°Cで96時間、胚盤胞(expanded blastccyst)になるまで培養した。割球をmicro-manupilatorで、内細胞塊の対極側からbiopsyしたものA群、内細胞塊から90度方向からbiopsyしたものB群に、内細胞近傍からbiopsyしたものC群に分類した。biopsy法は、slit法で割球を510個生検した。biopsyした栄養膜細胞についてα5β3 integrin・α6β4 integrin・α5β1 integrinの分布量を免疫組織学的に検討した。解析した胚盤胞は追加培養し、72時間後にディッシュ底面に拡がった胚盤胞面積を測定し接着分子との相関性を観察した。【成績】α5β3 integrin・α6β4 integrinの発現はA群B群でみられ、C群では認められなかった。α5β1 integrinはいずれの群でも発現はみられなかった。α5β3 integrin・α6β4integrin発現が半分以上に発現がみられた場合、追加培養による胚底面積が発現のみられなかった群より有意に大きかった。【結論】栄養膜細胞浸潤活性の促進因子といわれるα5β3 integrin.α6β4 integrin・その抑制因子といわれるα5β1 integrinの発現を栄養膜細胞で観察すると、その後の細胞浸潤能・増殖能を予知する重要なマーカーとなる可能性が示唆された。様々な面から胚盤胞発育について検討し、また、生検した胚盤胞栄養細胞を解析した。5%CO2 in air,37°Cで96時間、胚盤胞(expanded blastocyst)になるまで培養した。
ロボット支援腎部分切除におけるAR手術ナビゲーション開発・臨床導入

本邦においてロボット支援手術は普及しているが、画像支援システムの開発は研究段階であり、ロボット手術におけるナビゲーションシステムは、その有効性が期待されている。我々はロボット支援腎部分切除術(RAPN)に、内視鏡の動きを追従する自動追従型手術ナビゲーションシステムを開発した。本システムは術者の見ている術野の「今」を3Dモデルで再現できるが、VR内で完結した参照画像でかつ術野に直接介入するまでのシステムには至っていない。本研究では、RAPNにおいて拡張現実と3Dモデルを用いた仮想現実を併用し腎動脈と腎腫瘍の場所を内視鏡画像内に重畳し高精度のAR手術ナビゲーション開発と臨床導入を行う。
アジア及び南米諸国に於ける高安動脈炎の比較研究

高安動脈炎は病因の難病で、アジアならびに中南米に多い肉芽腫性の血管炎である。また血管炎を生じる部位や好発する性も地域により異なり発症には遺伝要因の存在が強く示唆されている。そこで本研究では国際的な比較研究により高安動脈炎の病因を解析する。高安動脈炎は大型の血管炎の一つで若年の女子に好発する肉芽腫性の病変により血管の狭窄や拡張をきたし、大動脈炎閉鎖不全や頚部血管狭窄、大動脈縮窄、上肢動脈不触知、冠動脈不全など引き起こす難治性の疾患である。その病因は不明であるが、一卵性双生児例や発症に地域差があることより遺伝要因の存在が示されている。この遺伝要因を多国間で検討することは未知の本症の病因を理解する上で重要なアプローチと考えられる。本研究では特に本症との強い相関が示されている免疫制御遺伝子HLA(組織適合性抗原)の解析、また本邦ならびに共同研究各国の家族発症例遺伝子のリンケージ解析による未知の責任遺伝子に迫ることが期待される。これらの解析は本症のみならず、病因の解析が依然困難な他の血管炎の理解にも大変貢献すると考えられる。高安動脈炎はアジアと中南米に多いため、本研究では韓国、タイ、インド、イスラエル、トルコ、中南米からメキシコとコロンビア、加えて米国の各研究所の常勤の本症専門家から成る組織を行った。1998年10月に米国アトランタにおいて第9回高安動脈炎国際会議を開催し、日本ついで米国にて本症の病因解析を進める。特に1)高安動脈炎患者HLA遺伝子のDNAタイピング、2)家族発症例ゲノムDNAの収集、3)RFLPならびにVNTRを用いたリンケージ解析、4)高安動脈炎炎症時血清や血漿の収集、5)炎症時血清中の接着因子の解析、6)炎症血管に発現する接着因子、浸潤するリンパ球ならびにヒートショック蛋白の同定、7)血管炎モデル動物の作製ならびに解析、さらに8)非常にわかりにくい炎症を同定するための画像診断についての検討などを中心として、本症の病態の解明にあたった。

1998年10月に米国アトランタにおいて第9回高安動脈炎国際会議を開催し、日本ついで米国にて本症の病因解析を進める。特に1)高安動脈炎患者HLA遺伝子のDNAタイピング、2)家族発症例ゲノムDNAの収集、3)RFLPならびにVNTRを用いたリンケージ解析、4)高安動脈炎炎症時血清や血漿の収集、5)炎症時血清中の接着因子の解析、6)炎症血管に発現する接着因子、浸潤するリンパ球ならびにヒートショック蛋白の同定、7)血管炎モデル動物の作製ならびに解析、さらに8)非常にわかりにくい炎症を同定するための画像診断についての検討などを中心として、本症の病態の解明にあたった。高安動脈炎は病因の難病で、アジアならびに中南米に多い肉芽腫性の血管炎である。また血管炎を生じる部位や好発する性も地域により異なり発症に遺伝要因の存在が強く示唆されている。そこで本研究では国際的な比較研究により高安動脈炎の病因を解析する。高安動脈炎は大型の血管炎の一つで若年の女子に好発する肉芽腫性の病変により血管の狭窄や拡張をきたし、大動脈炎閉鎖不全や頚部血管狭窄、大動脈縮窄、上肢動脈不触知、冠動脈不全など引き起こす難治性の疾患である。その病因は不明であるが、一卵性双生児例や発症に地域差があることより遺伝要因の存在が示されている。この遺伝要因を多国間で検討することは未知の本症の病因を理解する上で重要なアプローチと考えられる。本研究では特に本症との強い相関が示されている免疫制御遺伝子HLA(組織適合性抗原)の解析、また本邦ならびに共同研究各国の家庭発症例遺伝子のリンケージ解析による未知の責任遺伝子に迫ることが期待される。これらの解析は本症のみならず、病因の解析が依然困難な他の血管炎の理解にも大変貢献すると考えられる。高安動脈炎はアジアと中南米に多いため、本研究では韓国、タイ、インド、イスラエル、トルコ、中南米からメキシコとコロンビア、加えて米国の各研究所の常勤の本症専門家から成る組織を行った。特に1)高安動脈炎患者HLA遺伝子のDNAタイピング、2)家族発症例ゲノムDNAの収集、3)RFLPならびにVNTRを用いたリンケージ解析、4)高安動脈炎炎症時血清や血漿の収集、5)炎症時血清中の接着因子の解析、6)炎症血管に発現する接着因子、浸潤するリンパ球ならびにヒートショック蛋白の同定、7)血管炎モデル動物の作製ならびに解析、さらに8)非常にわかりにくい炎症を同定するための画像診断についての検討などを中心として、本症の病態の解析にあたった。
高立体選択的に多官能化された複素環合成ブロックの創製研究

複素環を合成ブロックとして利用する新しい有機合成反応を確立するためには、高度に立体選択的に多官能化された複素環を容易に合成できる優れた方法の開発が必須であるとの観点に立脚して、本研究では複素環の構築をアゾメチンイリド1,3-双極子の環状付加反応で行うこととし、従来のイリドには見られない特徴を備えた新しいアゾメチンイリドの開発を行った。まず、本申請者らが最近見いだしたN-リチオ化アゾメチンイリドの研究を更に進展させ、イミンの窒素原子上の金属としてナトリウム、マグネシウム、亜鉛、アルミニウムなどをもつ新しいN-メタル化イリドの発生に成功した。これらのイリドと電子不足オレフィンとの環状付加反応は、1)キレーション遷移状態を経て高立体選択的に進行すること、2)途中にMichael付加生成物を経る段階的な反応であること、3)反応条件を制御することによってMichael付加体の生成を優先させることが可能である、などの新知見を得た。窒素原子上の金属がマグネシウム、アルミニウムなどのようにヘテロ原子に強くキレーションを起こす場合は環状付加反応の立体選択性が極めて高いのに対し、ナトリウムのように陽性な金属の場合はキレーションの寄与が減じ全く異なる立体選択性を示す。一方、これも本申請者らによって最近開発されたアミノ酸とカルボニル化合物との脱炭酸を伴う縮合反応を経るアゾメチンイリドの発生法を更に深く検討した。その結果、1)5-オキサゾリジン体が反応中間体であること、2)脱炭酸は共奏的に起こるため発生するイリドの立体化学は中間体のそれを忠実に反映すること、3)この反応にはアセトアルデヒド以外の全てのアルデヒドの使用が可能であること、を明らかにできた。これらの成果によって、立体選択的な複素環合成への道が大きく拓かれたと言える。合成された複素環を合成ブロックとする有機合成の研究が現在鋭意進行中である。
ナトリウム代謝感受性遺伝子多型および変異の検査同定法の確立とその臨床応用

今回の検討では、ナトリウム代謝感受性遺伝子について臨床的および基礎的検討を行った。臨床的検討では、ナトリウム代謝感受性遺伝子として重要と考えわれるCYP11B2遺伝子のT-344C多型およびIC多型と高血圧との連関解析を行った。CYP11B2 T-344C多型の遺伝子型は高血圧群でC対立遺伝子の頻度が低くTC+CC遺伝子型が健常対照群の67%に比し56%を占めていた。T-344C多型は高血圧症と有意に関連していた。(p=0.027;odds ratio,0.6;95%confidence interval,0.6-0.9)。一方、IC多型は遺伝子型および対立遺伝子とも、高血圧群と健常対照群の両群間に差は認められなかった。以上の結果から、東北地方における高血圧の遺伝的危険因子としてCYP11B2 T-344C多型が関与している可能性があり、遺伝子マーカーとして臨床応用の必要性が示唆された。引き続きアミロライド感受性Na-K-2Cl共輸送体の遺伝子多型との連関解析を施行中である。一方、基礎的検討では、サイアザイド感受性NaCl共輸送体遺伝子非翻訳領域上流の単離・機能解析から糖質コルチコイドによる調節の可能性を見い出している。また、Gitelman's症候群で見い出されたL623P変異の変異体組み換えクローンによる機能解析を試みている。
看護師の倫理観形成プロセスに関する研究－新人看護師の倫理観と倫理観を育む要因－

本研究は2段階で構成されている.第1段階では,看護師の倫理観に影響を及ぼす要因を明らかにするため,倫理観の形成に影響を及ぼす要因に関する文献の内容分析を行い,得られた結果を用いて,インタビューガイドを作成する.第2段階はエピソード・インタビューを実施し,逐語化されたインタビューデータを用いて,看護師はどのような倫理観を持ち,経験と要因に関連はあるのか質的手法で分析する.更に,現在の倫理観の傾向を捉えるため,対象者に日本語版MST(Moral Sensitivity Test)を実施する.医療の質が問われる時代となり,看護師に高い倫理観を持って行動することが期待されている.倫理観は看護実践の積み重ねの中で変化し,形成されていくものと考え,本研究は,看護師の倫理観形成プロセスについて,1次調査として新人看護師に焦点を当てた.本研究は,新人看護師の持つ倫理観は,どのような経験から,どのようなサポートを受け,どのように変化し,形成されていくのか明らかにすることを目的としている.研究質問は次の2点である.1看護師の倫理観の形成に影響を及ぼす要因は何か.2新人看護師はどのような倫理観を持っているのか.それはどのような経験に基づき,どのようなサポートを受けたのか.影響を及ぼす要因との関連性は何か.この研究は2段階で構成され,初年度である平成30年度は,第1段階の倫理観の形成に影響を及ぼす環境要因に関する文献検討を行った.文献検索データベース医学中央雑誌Web版などを使用し,国内の倫理観の形成に影響を及ぼす要因に関する文献を収集し,倫理観の形成に影響する要因について検討を行った.その結果,「誠実に看護する姿勢」「人的サポートとしての先輩・同僚の存在」「内省」「ジレンマの経験」などが導き出されたものの,倫理観に影響を及ぼす要因について明確に述べられている文献は稀少であった.書籍の中に価値観に影響を与えるものとして「生育環境」「社会規範」「文化」「職業」「人生経験」「身についている教養」などが述べられているが,具体的な内容は記載されていなかった.今後,第1段階の分析結果を基にインタビューガイドを作成し,第2段階のデータ収集を行っていく予定である.対象となる文献の収集に時間を要している.国内においては,対象となる原著の文献がほとんど見当たらないため,研究報告などに対象を広げて文献を収集している.国外については文献を収集しているところである.倫理観の形成に影響する要因について国外の文献検討を実施する.第1段階の文献検討の結果をもとに,インタビューガイドを作成する.インタビューガイド作成後,第2段階のエピソード・インタビューとMSTによる道徳的感受性の測定を実施する.本研究は2段階で構成されている.第1段階では,看護師の倫理観に影響を及ぼす要因を明らかにするため,倫理観の形成に影響を及ぼす要因に関する文献の内容分析を行い,得られた結果を用いて,インタビューガイドを作成する.第2段階はエピソード・インタビューを実施し,逐語化されたインタビューデータを用いて,看護師はどのような倫理観を持ち,経験と要因に関連はあるのか質的手法で分析する.更に,現在の倫理観の傾向を捉えるため,対象者に日本語版MST(Moral Sensitivity Test)を実施する.医療の質が問われる時代となり,看護師に高い倫理観を持って行動することが期待されている.倫理観は看護実践の積み重ねの中で変化し,形成されていくものと考え,本研究は,看護師の倫理観形成プロセスについて,1次調査として新人看護師に焦点を当てた.本研究は,新人看護師の持つ倫理観は,どのような経験から,どのようなサポートを受け,どのように変化し,形成されていくのか明らかにすることを目的としている.研究質問は次の2点である.1看護師の倫理観の形成に影響を及ぼす要因は何か.2新人看護師はどのような倫理観を持っているのか.それはどのような経験に基づき,どのようなサポートを受けたのか.影響を及ぼす要因との関連性は何か.この研究は2段階で構成され,初年度である平成30年度は,第1段階の倫理観の形成に影響を及ぼす環境要因に関する文献検討を行った.文献検索データベース医学中央雑誌Web版などを使用し,国内の倫理観の形成に影響を及ぼす要因に関する文献を収集し,倫理観の形成に影響する要因について検討を行った.その結果,「誠実に看護する姿勢」「人的サポートとしての先輩・同僚の存在」「内省」「ジレンマの経験」などが導き出されたものの,倫理観に影響を及ぼす要因について明確に述べられている文献は稀少であった.書籍の中に価値観に影響を与えるものとして「生育環境」「社会規範」「文化」「職業」「人生経験」「身についている教養」などが述べられているが,具体的な内容は記載されていなかった.今後,第1段階の分析結果を基にインタビューガイドを作成し,第2段階のデータ収集を行っていく予定である.対象となる文献の収集に時間を要している.国内においては,対象となる原著の文献がほとんど見当たらないため,研究報告などに対象を広げて文献を収集している.国外については文献を収集しているところである.倫理観の形成に影響する要因について国外の文献検討を実施する.第1段階の文献検討の結果をもとに,インタビューガイドを作成する.インタビューガイド作成後,第2段階のエピソード・インタビューとMSTによる道徳的感受性の測定を実施する.
ホウ素栄養ストレス耐性の作物への付与

ホウ素は植物の必須元素であり、その一方で高濃度のホウ素は生物に毒性を示す。農作物におけるホウ素欠乏症状や過剰症の発生は世界で報告され、ホウ素欠乏・過剰に耐性な作物品種の開発が望まれている。本研究の目的は、これまでにシロイヌナズナで成功したホウ酸トランスポーターBOR1とBOR4を用いたホウ素欠乏・過剰耐性の付与の手法を応用し、作物にホウ素栄養ストレス耐性の付与を試みることである。ホウ素栄養ストレス耐性付与を試みる対象とする作物としては、ホウ素過剰耐性としてはトマトとコムギ、ホウ素欠乏耐性としてはアブラナが作付面積や生産額の観点から重要であると考え、形質転換体の作出作業を開始した。トマトについては、矮性トマトであるマイクロトムを用い、構成的な発現を誘導するカリフラワーモザイクウィルス35S RNA(CaMV35S)プロモーター制御下でシロイヌナズナBOR4を発現させるコンストラクトを導入した。コムギの実験では、コムギで構成的な発現を誘導するユビキチンプロモーター制御下でシロイヌナズナBOR4を発現するコンストラクトの作製を行った。遺伝子導入作業は共同研究として、アグロバクテリウム法による形質転換コムギの作出を開始した。ナタネについては、構成的な発現を誘導するCaMV35Sプロモーター制御下でシロイヌナズナBOR4を発現させるカナマイシン選抜のコンストラクトの作製を行った。このコンストラクトとCaMV35Sプロモーター制御下でBOR1を発現するコンストラクトの計2種類のコンストラクトの導入を共同研究として申し込み、ナタネの形質転換を開始した。
地盤構造物の実用的な信頼性設計法の開発と地盤調査の最適化

信頼性設計法は,過去15年ほどの間に,設計コードの開発という分野で急速に普及した.しかし構造工学分野で発展してきた信頼性解析法には,地盤構造物の信頼性解析を考えたとき解決されなければならない,多くの問題が顕在化した.本研究は,これらの問題を解決した研究であり,1統計学の概念に基づき,サイトごとの地盤パラメータの調査に基づく設定方法,2地盤パラメータの空間的バラツキが,構造物の性能に与える影響の定量的官位評価方法,3複雑化する地盤解析ツールと信頼性解析の有効な結合方法等について,開発した.さらにこれらを体系的に取り込んだ,地盤構造物設計のための簡易な信頼性解析法を提案した.信頼性設計法は,過去15年ほどの間に,設計コードの開発という分野で急速に普及した.しかし構造工学分野で発展してきた信頼性解析法には,地盤構造物の信頼性解析を考えたとき解決されなければならない,多くの問題が顕在化した.本研究は,これらの問題を解決した研究であり,1統計学の概念に基づき,サイトごとの地盤パラメータの調査に基づく設定方法,2地盤パラメータの空間的バラツキが,構造物の性能に与える影響の定量的官位評価方法,3複雑化する地盤解析ツールと信頼性解析の有効な結合方法等について,開発した.さらにこれらを体系的に取り込んだ,地盤構造物設計のための簡易な信頼性解析法を提案した.H24年度中に実施された研究内容は,以下の通りである.課題1局所平均値を取る地盤の体積の決定法:確率有限要素法の解を真値として,空間のバラツキが構造物の変形,支持力等の性能に与える影響評価のための局所平均の体積を決定する方法を確立した.課題2河川堤防の浸透破壊:ある一級河川の堤防20kmに渡る調査および約20箇所の河川断面についての堤防設計データを入手し,整理した.浸透解析,堤体の安定解析を実施し,各断面における信頼性評価方法に目処をつけた.今後はこれを線状構造物としての評価に結び付ける.課題3軟弱地盤の多段階掘削:掘り込み式の高速道路建設の山留設計問題を取り上げ,本スキームの適用性を検討,有効であることを実証した.特に土層厚の不確実性を評価する方法を確立した.課題4道路橋基礎への適用:道路橋基礎として典型的な,浅い基礎と杭基礎構造物を具体的に取り上げ,それらと調査地点を考慮した信頼性解析を実施し,本スキームの適用性を確認した.課題5港湾防波堤の設計と,課題6地盤調査の位置と数の関係の定量的把握は,次年度以降の課題とする.課題1局所平均値を取る地盤の体積の決定法: H.24年度に確立した局所平均を用いた,空間のバラツキの影響評価と統計的推定誤差評価の理論を,いろいろな構造物への適用を図っている.なお,この理論の根幹をなす本城・大竹・加藤(2012)の土木学会論文集の論文は,H.25年度土木学会論文賞(C地圏工学分野)に内定した.課題2河川堤防の浸透破壊:ある一級河川の堤防20kmに渡る調査および約20箇所の河川断面についての堤防設計データを入手し,整理した.浸透解析,堤体の安定解析を実施し,各断面における信頼性評価方法を行った.特に液状化危険度解析については,この河川の他に,北関東で東日本大震災で大きな液状化被害を受けた河川20kmについても解析し,同様の手法で解析・発表した(Otake,Honjo & Hiramatsu,2013;大竹他,2014).課題3軟弱地盤の多段階掘削:掘り込み式の高速道路建設の山留設計問題を取り上げ,本スキームの適用性を検討,有効であることを実証した.特に土層厚の不確実性を評価する方法を確立した.この結果を発表(Honjo他,2013),別の大型掘削現場からのデータも提供され,解析を続行する.課題4道路橋基礎への適用:浅い基礎と杭基礎構造物を具体的に取り上げ,それらと調査地点を考慮した信頼性解析を実施し,本スキームの適用性を確認した.さらにこれらの構造物の設計に関する変換誤差とモデル化誤差に関する情報を論文にまとめ,土木学会論文集に掲載(大竹・本城,2014a,2014b)した.これら例題と情報を含む著書を執筆中で,H.26年度中の発行を目指している.課題5地盤調査の位置と数の関係の定量的把握は継続中,最終年度の課題とする.信頼性設計法は,過去15年ほどの間に,設計コードの開発という分野で急速に普及が,そのためになお解決の必要な問題も顕在化した.本研究の目的は,地盤構造物の信頼性設計において,次のような問題の解決を目指している.(1)地盤構造物の特性を踏まえた,簡易で実務的な信頼性解析法の開発と不確実性要因の特定(2)地盤構造物の信頼性と地盤調査の位置と数の関係の定量的把握と,最適化スキームの提案.現時点では設計コードは信頼性設計法レベルI(部分係数法)で書かれている.しかし,港湾基準や道路橋示方書のような設計コードが実際に発効すると,大規模構造物や特殊構造物では,設計者が直に信頼性設計(レベルIII:確率計算)を実施して,より経済的な構造物の設計を行うことが許されているし,実際実施されようとしている.設計コード開発のために整えられた,荷重や材料に関する統計資料は公開されており,設計者にとって信頼性設計(レベルIII)を実施することは,以前に比べはるかに容易になっている.

地盤構造物の信頼性解析を,必ずしも信頼性解析に精通していない実務家が,容易かつ間違いなく実施できる手順と方法が求められている.現在までに開発されている信頼性設計法は,主に構造工学分野で開発された手法の借用であり,地盤構造物の設計の特性を反映していない.具体的にはその相違は,1サイトごとの地盤パラメータの調査に基づく設定,2地盤の不均質性がが構造物の性能に与える簡易な影響評価方法,3複雑化する地盤解析ツールと信頼性解析の有効な結合等である.本研究は,この様な問題点を考慮した,地盤構造物のための信頼性解析法を開発した.さらに本研究では,地盤構造物設計の大きな課題である,設計結果の信頼性と地盤調査の位置や数の関係を定量的に把握する方法についても示した.26年度が最終年度であるため、記入しない。地盤工学26年度が最終年度であるため、記入しない。発表論文にあるように,多くの査読付き論文を提出できた.また,多くの協力者より順調に必要データが入手できている.課題1局所平均値を取る地盤の体積の決定法:この理論の根幹をなす本城・大竹・加藤(2012)の土木学会論文集の論文は,H.25年度土木学会論文賞(C地圏工学分野)に内定した.また,H.24年3月に,国立台湾大学,鋼構造物研究シンポジウム主題講演等をこの成果に基づき行い好評を得た.既に土木学会論文集で5編の論文を刊行しており達成度は非常に高い.課題2河川堤防の浸透破壊:中部地方一級河川20kmについて膨大なデータの処理を終え,また解析も順調に推移している.既発表の論文もある.(Otake,Honjo and Hiramatsu,2013;大竹他,2014).最終年度は公表できる成果が多数出る予定.達成度はかなり高い.課題3軟弱地盤の多段階掘削:すでに成果を発表(Honjo他,2013),この結果,別の大型掘削現場からのデータも提供され,解析を続行する.達成度良好.課題4道路橋基礎への適用:土木学会論文集に成果を掲載(大竹・本城,2014a, 2014b)した.これら例題と情報を含む著書を執筆中で,H.26年度中の発行を目指している.達成度は良好.課題5地盤調査の位置と数の関係の定量的把握:基本理論は既に課題1で確立している.適切な例題を作成し,実証する必要がある.最終年度の課題とする.達成度は現段階では低い.26年度が最終年度であるため、記入しない。当初の計画に沿って,研究を進展させる.課題1局所平均値を取る地盤の体積の決定法:順調に推移しており,最終成果を執筆中の著書にまとめることが,最終年度の課題である.課題2河川堤防の浸透破壊:上記のように順調に推移している.国土省水管理・国土保全局との打ち合わせの場もあるので,成果を着実に河川行政に生かせるようにプレゼンテーションすることが課題である.課題3軟弱地盤の多段階掘削:順調に推移しているので,新しく入手したデータも取り入れ,成果をまとめる. .課題4道路橋基礎への適用:順調に推移しているので,成果を体系的に執筆中の著書に取り入れる.課題5地盤調査の位置と数の関係の定量的把握:基本理論は既に課題1で確立している.適切な例題を作成し,実証する必要がある.最終年度の課題とする.26年度が最終年度であるため、記入しない。研究担当者と経理担当者の若干の連絡の不備で,研究担当者は全額使い切ったと考えたいた.未使用額は5千円未満の比較的少額であり,次年度の予算に加算して使用する.消耗品購入費の一部とする.
環境調和型分子集合性イオン液体の開発

イオン液体は、高い熱安定性や導電性などの特性を有し、不揮発性や不燃性の性質から環境負荷の低い溶媒として近年注目されている。また、従来の単鎖型両親媒性物質を2分子繋いだ構造のジェミニ型両親媒性物質は、対応する単鎖型と比べて高い表面張力低下能や低い臨界ミセル濃度(CMC)などの優れた界面活性を示すことが知られ、環境負荷低減の材料としても期待されている。本研究では、環境調和型の分子集合性イオン液体の開発を目的として、これまでに報告のない四級アンモニウム塩系ジェミニ型イオン液体の分子設計・合成を行い、ジェミニ型イオン液体の諸物性および水溶液中での物理化学的性質を調べ、また、これらのイオン液体を媒体として、オキシエチレン(EO)鎖長に分布のない単一鎖長EO系非イオン界面活性剤の物性や集合体のナノ構造を検討する。各種エチレンアミン(エチレンジアミンや酸素・窒素原子をスペーサーに含むエチレンアミン誘導体のメチル化化合物)から誘導した環境負荷低減機能を有するジェミニ型の分子集合性両親媒性イオン液体を合成した。この新規両親媒性イオン液体の物性と、水溶液中での両親媒性物質としての性質および形成する集合体のナノ構造を種々の測定により詳細に調べ、さらに、これらの両親媒性イオン液体を媒体として、ポリオキシエチレン系非イオン界面活性剤の物理化学的性質および形成する集合体またはドメインのナノ構造について検討した。また、これらの物性に及ぼすイオン液体の構造(アルキル鎖長や対イオン)の影響について調べた。平成30年度の計画は、(1)粘度のずり速度依存測定、(2)単一鎖長ポリオキシエチレン系非イオン界面活性剤の合成、(3)ジェミニ型両親媒性イオン液体中における単一鎖長非イオン界面活性剤の集合体ナノ構造、(4)乳化剤としての評価、であった。(2)の非イオン界面活性剤の合成に関しては、試行錯誤を繰り返しながら、目的物を高純度で収率よく得ることに成功した。(1)に関して、合成した2タイプのジェミニ型両親媒性イオン液体の性質ならびに水溶液中での物性(粘度)を調べた。また、(3)のジェミニ型両親媒性イオン液体を媒体として用いた非イオン界面活性剤のナノ構造は、動的光散乱、蛍光、低温透過型電子顕微鏡、X線小角散乱、偏光顕微鏡などの装置を駆使して検討したが、イオン液体の構造と物性との関係は明らかとなっていない。今後、この関係を明らかにすべく、さらに詳細な実験を行う予定である。今後は、(1)両親媒性イオン液体の乳化剤としての評価について検討する。水相にはジェミニ型両親媒性イオン液体を超純水に溶解したもの、油相には流動パラフィンやスクワランを用いる。この水相と油相を任意の比で混ぜて、ホモジナイザー、超音波処理により、安定なエマルションの調製を行う。調製したエマルションの粘度をずり速度に対して測定し、得られる流動曲線から例えば擬塑性流動の場合、液滴の詰まり具合やサイズの評価、合一や破壊の定常状態について検討する。また、エマルションの安定性を溶液安定性・分散性評価装置タービスキャンMAを用いて調べ、粒子の形状を光学顕微鏡の観察により調べる。さらに、水相と油相の界面に働く界面張力および界面粘弾性を界面粘弾性測定装置Trackerを用いて調べ、エマルションとの関連性について検討し、エマルションの熱力学的安定性および生成機構(メカニズム)について明らかにする。本研究では、環境調和型の分子集合性イオン液体の開発を目的として、これまでに報告のない四級アンモニウム塩系ジェミニ型イオン液体の分子設計・合成を行い、ジェミニ型イオン液体の諸物性および水溶液中での物理化学的性質を調べ、また、これらのイオン液体を媒体として、オキシエチレン(EO)鎖長に分布のない単一鎖長EO系非イオン界面活性剤の物性や集合体のナノ構造を検討した。まず、2本のアルキル鎖長の異なるジェミニ型イオン液体を、エチレンジアミンのアミノ化化合物(N,N,N',N'-テトラメチルエチレンジアミン)と2種類の臭化アルキルの四級化、さらに対イオンもイオン交換によりる合成した。次に、ビス(ジメチルアミノエチル)エーテルやN,N,N',N",N"-ペンタメチルジエチレントリアミンなどのエチレンアミン誘導体と臭化アルキルの四級化により、ジェミニ型イオン液体を合成した。これらの両親媒性イオン液体は、1H NMRおよび元素分析などにより構造の確認を行った。さらに、合成したジェミニ型両親媒性イオン液体の性質ならびに水溶液中での物性を、DSCによる融点、電導度、粘度、静的および動的表面張力、界面粘弾性の測定により調べ、気/液界面での吸着・配向性について検討した。また、ジェミニ型両親媒性イオン液体の単独および水溶液中での集合体ナノ構造を、動的光散乱、蛍光、低温透過型電子顕微鏡、X線小角散乱などにより検討した。

平成29年度の計画は、(1)2本のアルキル鎖長の異なるジェミニ型イオン液体の合成、(2)各種エチレンアミンを用いたジェミニ型イオン液体の合成、(3)合成したジェミニ型両親媒性イオン液体の性質ならびに水溶液中での物性、であった。(1)と(2)の新規イオン液体の合成に関しては、試行錯誤を繰り返しながら、目的物を高純度で収率よく得ることに成功した。(3)に関して、合成した2タイプのジェミニ型両親媒性イオン液体の性質ならびに水溶液中での物性は、静的表面張力の測定を終え、気/液界面での吸着・配向性について調べた。また、ジェミニ型両親媒性イオン液体の単独および水溶液中での集合体ナノ構造は、動的光散乱、蛍光、低温透過型電子顕微鏡、X線小角散乱、偏光顕微鏡などの装置を駆使して検討したが、イオン液体の構造と物性との関係は明らかとなっていない。今後、この関係を明らかにすべく、さらに詳細な実験を行う必要がある。イオン液体は、高い熱安定性や導電性などの特性を有し、不揮発性や不燃性の性質から環境負荷の低い溶媒として近年注目されている。また、従来の単鎖型両親媒性物質を2分子繋いだ構造のジェミニ型両親媒性物質は、対応する単鎖型と比べて高い表面張力低下能や低い臨界ミセル濃度(CMC)などの優れた界面活性を示すことが知られ、環境負荷低減の材料としても期待されている。本研究では、環境調和型の分子集合性イオン液体の開発を目的として、これまでに報告のない四級アンモニウム塩系ジェミニ型イオン液体の分子設計・合成を行い、ジェミニ型イオン液体の諸物性および水溶液中での物理化学的性質を調べ、また、これらのイオン液体を媒体として、オキシエチレン(EO)鎖長に分布のない単一鎖長EO系非イオン界面活性剤の物性や集合体のナノ構造を検討する。各種エチレンアミン(エチレンジアミンや酸素・窒素原子をスペーサーに含むエチレンアミン誘導体のメチル化化合物)から誘導した環境負荷低減機能を有するジェミニ型の分子集合性両親媒性イオン液体を合成した。この新規両親媒性イオン液体の物性と、水溶液中での両親媒性物質としての性質および形成する集合体のナノ構造を種々の測定により詳細に調べ、さらに、これらの両親媒性イオン液体を媒体として、ポリオキシエチレン系非イオン界面活性剤の物理化学的性質および形成する集合体またはドメインのナノ構造について検討した。また、これらの物性に及ぼすイオン液体の構造(アルキル鎖長や対イオン)の影響について調べた。平成30年度の計画は、(1)粘度のずり速度依存測定、(2)単一鎖長ポリオキシエチレン系非イオン界面活性剤の合成、(3)ジェミニ型両親媒性イオン液体中における単一鎖長非イオン界面活性剤の集合体ナノ構造、(4)乳化剤としての評価、であった。(2)の非イオン界面活性剤の合成に関しては、試行錯誤を繰り返しながら、目的物を高純度で収率よく得ることに成功した。(1)に関して、合成した2タイプのジェミニ型両親媒性イオン液体の性質ならびに水溶液中での物性(粘度)を調べた。また、(3)のジェミニ型両親媒性イオン液体を媒体として用いた非イオン界面活性剤のナノ構造は、動的光散乱、蛍光、低温透過型電子顕微鏡、X線小角散乱、偏光顕微鏡などの装置を駆使して検討したが、イオン液体の構造と物性との関係は明らかとなっていない。今後、この関係を明らかにすべく、さらに詳細な実験を行う予定である。今後は、次の3点について検討する。(1)粘度のずり速度依存測定:イオン液体はその分子の構造上、高濃度になると溶液に粘性が現れる場合が多い。
肺疾患におけるRas-ERKカスケードの調節機構の解明とその治療に関する研究

私たちのグループは過去に内在的なRas-ERKカスケードのドミナントネガティブアンタゴニストとしてDA-Rafを同定し、DA-Rafを特異的に欠損するノックアウト(DA-Raf-KO)マウスを作製した。Ras-ERKカスケードは、ブレオマイシン(BLM)誘導性の肺線維症に関与しているが、その調節機構は明らかにされていない。昨年度の解析から、DA-Rafは2型肺胞上皮細胞(AEC2)においてBLM誘導性の肺線維症にRas-ERKカスケードの抑制を介して関わっている可能性が示唆された。そこでDA-Raf-KOマウスを用いて、以下の事柄を明らかにした。(1)DA-Raf-KOマウスではwtマウスに比較して、BLMが誘導する好中球などの炎症性細胞の浸潤を多く認めた。(2)DA-Raf-KOマウスにおいて炎症性サイトカインの発現亢進を認めた。従って、DA-RafはBLMが誘導する炎症反応を抑制的に制御すると考えられた。BLMは肺胞上皮細胞を標的とし、さらにDA-RafがAEC2に発現しているので、ラットAEC2株(RLE-6TN細胞)を用いて、分子メカニズムについて明らかにした。(1)DA-Rafのノックダウン(KD)によりBLMが誘導する炎症性サイトカインの発現がさらに増強された。(2)この炎症性サイトカインの発現上昇はp38インヒビターによって抑制された。(3)近年の研究からp38シグナリングは、BLMが肺胞上皮細胞に誘導するSASP (senescence-associated secretory phenotype)において中心的役割を果たすことが知られているので、DA-RafとSASPについてさらに解析した。(4)RLE-6TN細胞にBLMを添加するとSA-β-galの活性上昇と細胞の扁平化が見られた。(5)DA-RafのKDにより、BLM誘導性のSA-β-galの活性上昇と細胞の扁平化はさらに増悪した。これらのことから、DA-Rafは38シグナリングの上流でRas-ERKカスケードを抑制することによってBLM誘導性のSASPを抑制的に制御すると考えられる。(抄録なし)肺線維症についての解析私達は、すでにBLM誘導性の肺線維症サンプルにおいて、DA-Rafの発現が有意に上昇することを見出していた。BLMで誘導される肺線維症は急性炎症期と線維化期に大別されるため、BLM誘導後の経時サンプルを用いて、DA-Rafの発現上昇および、Ras-ERKカスケードの活性化レベルを検討した。その結果、DA-Rafの発現は、線維化進行期に有意な上昇が見られた。これに対して、MEKやERKのリン酸化レベルは、DA-Rafの発現上昇と相補的に減弱が認められた。このことから、DA-RafがMEK、ERKの活性制御を介して、線維化の進行に関与する可能性が示唆された。そこで、DA-Raf-KOマウスにBLMを経気道的に投与し、肺線維症を発症させた。BLM投与後9日のサンプルを用いて組織学的解析を行ったところ、野生型マウスにおいては進行したポリープ型の線維化巣が優位であるのに対して、DA-Raf-KOマウスの線維化巣は肺胞壁に拡散した壁在型が優位であった。このことから、DA-Rafが線維化の進行に促進的に関与する可能性が示唆された。肺癌についての解析DA-Raf-KOマウスはB6系統においては生後1ヶ月程度で致死となるが、B6と129系統の交雑系では致死性が部分的に回避されるため、このマウスを用いて解析を進めた。B6系統のK-Ras-LA2マウスと129系統のDA-Raf-HTマウスを交配させ、K-Ras-LA2/DA-Raf-KOの作製を試みた。しかし、K-Ras-LA2マウスはホモで致死であるため、K-Ras-LA2/DA-Raf-KOマウスの作製は非常に困難であることが判明した。現在は、わずかに得られた個体を用いて解析しているところである。

(2)この炎症性サイトカインの発現上昇はp38インヒビターによって抑制された。(3)近年の研究からp38シグナリングは、BLMが肺胞上皮細胞に誘導するSASP (senescence-associated secretory phenotype)において中心的役割を果たすことが知られているので、DA-RafとSASPについてさらに解析した。(4)RLE-6TN細胞にBLMを添加するとSA-β-galの活性上昇と細胞の扁平化が見られた。(5)DA-RafのKDにより、BLM誘導性のSA-β-galの活性上昇と細胞の扁平化はさらに増悪した。これらのことから、DA-Rafは38シグナリングの上流でRas-ERKカスケードを抑制することによってBLM誘導性のSASPを抑制的に制御すると考えられる。DA-Raf-KOマウスを用いた肺繊維症モデルの病理を詳細に解析することにより、期待通りその糸口が見つかってきている。また肺癌モデルについては系統維持のきわめて困難なマウス同士の交配であるため解析には至っていないが、これも困難であることは予想された範囲内である。本研究課題の方向性に大きな変更はないが、肺癌モデルの系統維持が困難であるため、DA-Raf遺伝子がX染色体上に存在することを利用して、雌のヘテロ接合マウスを解析に用いることも検討する。(抄録なし)