hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
腸上皮細胞から再放出される断片化ラクトフェリンによる腸内細菌制御に関する研究

腸内細菌叢のバランスは全身の健康状態に影響し、様々な疾患の発症に関連することため、望ましい腸内細菌叢を形成することは、多くの疾患の予防にもつながる。細菌叢の形成を促進的に制御する宿主の内在的因子については研究が進んでいない。ラクトフェリン(LF)は細菌から真菌まで広い菌に対して殺菌・静菌作用を持つ一方で、ビフィズス菌の増殖を促進する。我々はこれまで培養腸上皮細胞により未消化LFが取り込まれ、細胞内で分解され細胞外へと再放出されることを報告している。本研究は、腸上皮細胞でのLF断片化と再放出の機構およびLF断片による腸内細菌叢制御機能や生理的機能について検討することを目的とする。近年のメタゲノム解析により、約1000種類の常在菌からなる腸内細菌叢のバランスが宿主の代謝・免疫に影響することが明らかとされており、そのバランスが疾患の発症にも関連することが明らかにされつつある。健康維持のため望ましい腸内細菌叢を形成するには、疾病関連菌の増殖を抑制しつつ有用菌を腸管内へと生着させる必要がある。腸上皮細胞は物理的障壁として腸管腔内の物質が体内に侵入することを防ぐとともに、RegIIIやLypd8、lysozyme、defensinなど様々な抗菌タンパク質や分泌型IgAを細胞頂端側へと分泌することにより、管腔内の腸内細菌の増殖を制御している。しかしながら、細菌叢の形成を促進する宿主の内在的因子については研究が進んでいない。ラクトフェリン(LF)とその消化断片は広い腸内細菌種の増殖を抑制する一方で、ビフィズス菌の増殖を促進する。我々は培養腸上皮細胞により未消化LFが取り込まれ、細胞内で分解され細胞外へと再放出されることを報告している。本研究では、腸上皮細胞から再放出されたLF断片が腸内細菌への抗菌活性やビフィズス菌増殖促進作用、免疫制御機能を発揮するという仮説を立て、これを検証することを目的とする。今年度は、腸上皮細胞によりLFが取り込まれる機構を明らかとするため、培養腸上皮細胞によるLFの取り込みをリアルタイム観察する系の確立を目指した。顕微鏡下で観察するために使用する蛍光タンパク質融合LFの発現に成功した。また、腸上皮細胞が蛍光タンパク質融合LFを取り込み、細胞内に蓄積する過程の観察に成功した。研究計画では、腸上皮細胞によるLF取り込みのリアルタイム観察は平成28年度以降に計画されている。そのため、平成27年度に計画されているものとは異なるものが進捗したが、計画に大きな変更はない。近年のメタゲノム解析により約1000種類の常在菌からなる腸内細菌叢のバランスが、宿主の代謝・免疫系をはじめ全身の健康状態に影響し、様々な疾患の発症に関連があることが明らかにされつつある。そのため望ましい腸内細菌叢を形成することは、感染症をはじめ代謝疾患など多くの疾患の予防にもつながるため、医療費を削減するという社会的意義も期待できる。健康的に望ましい腸内細菌叢を形成するためには、疾患関連菌の定着・増殖を抑制しつつ乳酸菌やビフィズス菌など宿主の健康状態を改善する菌を腸管内へ定着させる必要がある。腸上皮細胞を物理的障壁として腸管管腔内の物質が体内へと侵入することを防ぐとともに、RegIII, Lypd8, Lysozyme, defensinなど様々な抗菌タンパク質や分泌型IgAを細胞頂端側から分泌することにより、管腔内の腸内細菌の増殖を制御している。細菌の定着や増殖を阻害する物質についての解析は進んでいる一方、細菌叢の形成を促進的に制御する宿主の内在的因子については研究が進んでいない。本研究は、腸上皮細胞から再放出されたLF断片が腸内細菌叢制御機能や生理的機能を発揮する可能性について検討することを目的とする。平成28年度は平成27年度に引き続き培養腸上皮細胞でのラクトフェリン取り込みの経時的解析を進めた。また、この系を用いて平成27年度に計画していたLFの細胞内輸送経路について解析した。平成28年度から計画している腸上皮細胞によるLF取り込みのリアルタイム解析は、平成27年度から開始している。平成28年度は腸上皮細胞によるLF取り込みのリアルタイム解析に加え、平成27年度に計画していた研究も遂行したため、全体的に研究計画通りに進んでいると考えられる。腸上皮細胞を物理的障壁として腸管管腔内の物質が体内へと侵入することを防ぐとともに、ムチンを主成分とする粘液や様々な抗菌タンパク質、分泌型IgAを細胞頂端側から分泌することにより、管腔内の腸内細菌の定着や増殖を制御している。

細菌の定着や増殖を阻害する物質についての解析は進んでいる一方、細菌叢の形成を促進的に制御する宿主の内在的因子については研究が進んでいない。ラクトフェリン(LF)は細菌から真菌まで広い菌に対して殺菌・静菌作用を持つ一方で、ビフィズス菌の増殖を促進する。我々はこれまで培養腸上皮細胞により未消化LFが取り込まれ、細胞内で分解され細胞外へと再放出されることを報告している。本研究は、腸上皮細胞から再放出されたLF断片が腸内細菌叢制御機能や生理的機能を発揮する可能性について検討することを目的とする。最終年度である平成29年度はこれまでに引き続き培養腸上皮細胞でのラクトフェリン取り込みの経時的解析を進め、LFの細胞内輸送経路について解析した。また、ビフィズス菌が腸内で最優勢となる乳児期マウスでのLFの分解を解析したところ、成獣とは異なる分解機構があることを示唆する結果が得られた。腸内細菌叢のバランスは全身の健康状態に影響し、様々な疾患の発症に関連することため、望ましい腸内細菌叢を形成することは、多くの疾患の予防にもつながる。細菌叢の形成を促進的に制御する宿主の内在的因子については研究が進んでいない。本研究は、腸上皮細胞でのLF断片化と再放出の機構およびLF断片による腸内細菌叢制御機能や生理的機能について検討することを目的とする。上記の通り計画の順序は変更されたが、今後も研究計画に則り研究を進行していく予定である。研究計画は順調に遂行されているため、今後も研究計画に則り研究を遂行していく予定である。細胞生物学生化学研究計画の順序に変更があり、支出予定額とは異なる支出となった。研究計画では平成28年度以降に計画していた研究項目を先行して実施し、平成27年度に実施する予定だった研究に必要な物品の購入は次年度に持ち越したため、次年度使用額が生じた。今年度以降も全体的な研究計画に変更はないため、次年度使用額と翌年度分請求助成金を合わせて執行していく予定である。平成27年度では腸上皮細胞により再放出されるLF断片の同定、再放出LF断片の生理活性解析、LF分解・再放出機構の解析を実施する計画であった。このうち、平成28年度ではリアルタイム解析によりLF分解・再放出機構の解析を進めることができたが、それ以外の項目については平成29年度に重点的に行うこととする。
妊娠・育児期における女性の自律神経活動量に基づいた産後の適正体重管理の基礎研究

産後肥満を制御し適正体重を維持するための基礎データを得ることを目的に,妊産褥婦を対象に心拍変動パワースペクトル解析による自律神経活動量と身体組成を測定した.その結果,1)妊娠末期の方が副交感神経活動は減少し交感神経活動は高まる,2)産後の体脂肪率の増加と筋肉量の減少,自律神経活動量の上昇を確認した.本研究の成果は産後1年以降のBMIや身体組成の追跡調査により,産後適正体重管理プログラムの作成へと展開できる.産後肥満を制御し適正体重を維持するための基礎データを得ることを目的に,妊産褥婦を対象に心拍変動パワースペクトル解析による自律神経活動量と身体組成を測定した.その結果,1)妊娠末期の方が副交感神経活動は減少し交感神経活動は高まる,2)産後の体脂肪率の増加と筋肉量の減少,自律神経活動量の上昇を確認した.本研究の成果は産後1年以降のBMIや身体組成の追跡調査により,産後適正体重管理プログラムの作成へと展開できる.[目的]妊娠・出産により女性ホルモン(エストロゲンとプロゲステロン)のバランスは大きく変化する。このホルモンの変化は視床下部の自律神経の働きにも影響を及ぼし、ホルモンのバランスが不安定になると、それにつられて自律神経のバランスも不安定になる。さらに産後は、育児に伴う疲労の蓄積、睡眠不足や精神的ストレスにより自律神経活動は不安定になる。[方法]定期的に健診を受診し、妊娠経過は正常で合併症のない妊婦を対象として心電図(R-R間隔)を5分間測定した。さらに、健康状態(HAD;不安・抑うつ、GHQ)、気分(POMS)、生活習慣(睡眠状態)、妊娠経過として血圧、体重を測定した。[結果]妊娠7週から産後75日までの期間の223のデータを収集した。自律神経活動動態は、まず、CM5誘導の心電図を多チャンネル生体アンプで増幅し、1024HzでA/D変換を行った。次に、R-R間隔を2Hzの時系列データに変換し、高速フーリエ変換を行い、心拍変動中に含まれる周期成分の周波数とその強さ(パワー)を算出した。得られたパワースペクトル(周波数とパワーとの関係で表す曲線)から、低周波成分〈LF:0.0350.15Hz)と高周波成分(HF:0.150.4Hz)の2つの周波数帯域に加え、超低周波成分(VLF:0.0070.035Hz)を定量化し、(VLF+LF)/HF比を交感神経活動指標(SNS Index)、HF/Total比を副交感神経活動指標(PNS Index)とした。PNS Indexは妊娠28週以前の平均0.640、妊娠28週以降0.373、SNS Indexは妊娠28週以前の平均1.231、妊娠28週以降2.852であった。検定の結果、PNS Indexにおいて有意差が認められ(p<.05)妊娠後期の方が低下していることが明らかとなった。[目的]妊娠・出産により女性ホルモン(エストロゲンとプロゲステロン)のバランスは大きく変化する。[方法]定期的に健診を受診し、妊娠経過は正常で合併症のない妊婦を対象として妊娠初期から産後4ヶ月の期間、縦断的に心電図(R-R間隔)を測定した。さらに、健康状態(HAD;不安・抑うつ、GHQ)、気分(POMS)、生活習慣(睡眠状態)、血圧、体重を測定した。[結果]自律神経活動動態は、まず、CM5誘導の心電図を多チャンネル生体アンプで増幅し、1024HzでA/D変換を行った。得られたパワースペクトル(周波数とパワーとの関係で表す曲線)から、低周波成分<LF6.0350.15Hz)と高周波成分(HF : 0.150.4Hz)の2つの周波数帯域に加え、超低周波成分(VLF : 0.0070.035Hz)を定量化し、(VLF+LF)/HF比を交感神経活動指標(SNS Index)、HF/Total比を副交感神経活動指標(PNS Index)とした。総自律神経活動量を反映するtotal powerと副交感神経活動の指標となるHF成分は共に産後において有意に上昇していた(p<.05)。PNS Indexは妊娠後期の平均0.47、産後1ヶ月0.64、4ヶ月.68SNS Indexは妊娠後期1.37、産後1ヶ月0.81、4ヶ月.48であった。検定の結果、PNS indexに有意差が認められ(p<.05)産後において副交感神経活動は上昇することが明らかにされた。[方法]

定期的に健診を受診し、妊娠経過は正常で合併症のない妊婦を対象として妊娠初期から産後12ヶ月の期間、縦断的に心電図(R-R間隔)を測定した。さらに、健康状態(HAD;不安・抑うつ、GHQ)、気分(POMS)、生活習慣(睡眠状態)、血圧、体重、体脂肪率を測定した。[結果]自律神経活動動態は、まず、CM5誘導の心電図を多チャンネル生体アンプで増幅し、1024HzでA/D変換を行った。次に、R-R間隔を2Hzの時系列データに変換し、高速フーリエ変換を行い、心拍変動中に含まれる周期成分の周波数とその強さ(パワー)を算出した。得られたパワースペクトル(周波数とパワーとの関係で表す曲線)から、低周波成分<LF0.0350.15Hz)と高周波成分(HF : 0.150.4Hz)の2つの周波数帯域に加え、超低周波成分(VLF : 0.0070.035Hz)を定量化し、(VLF+LF)/HF比を交感神経活動指標(SNS Index)、HF/Total比を副交感神経活動指標(PNS Index)とした。PNS Indexの産後1週の平均0.48、1ヶ月0.34、4ヶ月.45SNS Indexは1週1.21、1ヶ月2.44、4ヶ月1.52であった。体脂肪率は1週27.5%、1ケ月29.0%、4ケ月29.3%、筋肉量1週38.6、1ヶ月35.6、4ヶ月35.0、BMIは1週22.9、1ヶ月21.5、4ヶ月21.1であった。産後の体脂肪率の増加と筋肉量の減少、交感神経活動の上昇が明らかにされた。
ハイドロプレーニング現象解明に向けた流体構造連成解析手法の構築

自動車は、水膜のある路面を走行するとハイドロプレーニング現象が生じ、制動力を失う危険がある。ハイドロプレーニング現象は、タイヤと路面の接触によって行き場を失った流体が強い力を発生することでタイヤを浮上させ、接触を失うことで制動力がなくなると考えられる。この排水性能は実験により評価すること自体は困難ではないものの、現象自身を観測したり、定量的に測定したりすることは大変困難である。そこで、本研究ではタイヤと路面の接触によって生じる流体構造連成問題においてハイドロプレーニングを含む多相流れを精度良く再現可能な数値解析手法の構築を目的とし,その手法による本現象の詳細な解明およびその定量評価を目指す。
連携型eラーニングにおける高等教育の質保証に関する研究

本研究は,広範な地域に分散した複数の教育機関が連携してeラーニングのみで単位互換を実施する連携型eラーニングにおける教育改善に関して,基盤技術構築と体系化,及び教育実践・評価を行うものである。本研究により,効果的なeラーニング活用法に関するWeb技術・知的情報処理技術の構築と評価,質保証のための受講者分析と適合性の評価,教育効果向上策としての授業モデルの提案と評価について,成果を得た。本研究における研究実績は以下のとおりである。1.eラーニングによる単位互換の拡充:長岡技術科学大学主幹のeラーニング高等教育連携(eHELP)への参加招請を全国の高等専門学校(高専)に実施し、新規に4高専の参加を得て、eラーニング教育実践の規模拡大を実現した。また、eHELPにおいて、全参加機関が集結する全体会議を2007年7月と2008年1月に合計2回開催し、教育実践上の課題への対応と、eHELP研究グループの成果発表会を行い、情報共有を図った。2.学習スタイルの分析:分析手法の調査結果から、Kolbの学習スタイルモデルを採用することとし、eラーニング受講者を中心にアンケート調査を実施した。また、eHELPでの授業配信システムと配信科目を対象としたアンケート調査を実施した。この結果を踏まえて、さらに2008年度に詳細調査と分析を実施する。また、受講者のモチベーション向上方式として、コーホートベースモデルによる授業配信と自動メンタリングシステムの導入により履修促進を図り、受講完了率の改善を検証した。3.質保証体制の強化:eラーニングの質保証を充実させるため、開発、運用、評価、組織の観点から、(1)eラーニング配信に必要、(2)単位付与のために必要、(3)さらに質向上のために必要の3分類で整理したチェックリストを開発した。また、著作権に関するセミナ実施と長岡技術科学大学内eラーニング著作権規則新設の方針を策定した。4.連携型コミュニケーション機能の開発:単位互換などの連携型eラーニングにおける受講者のコミュニケーション支援を実現するため、Webサービスを応用した統合型の掲示板システムの試作を行った。また、eラーニングを用いたPBL(Project based Learning)の実践を目的として、高機能チャット機能のプロトタイプ試作を行った。本研究は,広範な地域に分散した複数の教育機関が連携してeラーニングのみで単位互換を実施する連携型eラーニングにおける教育の質保証に関して,アークテクチャ構築と組織体系化,及び教育実践を行うものである。本研究において,効果的なeラーニング活用法として,Webサービスにより複数オープンソースLMS(OSSLMS及びMoodle)を連携させた統合コミュニケーションサービスを実現し,それを用いた数学のインタラクティブ協調学習を実践した。また,メタバース(仮想空間)における教室環境を構築し,学習者コミュニティを提供して,PBL (Problem Based Learning)の実践を支援した。単位互換実践においては,Cohort Based Modelにメンタリングメールシステムを組合わせて学習効果向上を図った。質保証の体系化に関しては,受講生の学習スタイルに着目して,eラーニング特有の学習モデルを新規に考案し,調査分析を行い適合性の可能性を示した。さらに教育効果の評価に関しては,4項目の視点と3レベルのカテゴリを導入したチェックリストを考案し,複数機関間での統一的なコンテンツ評価を可能とした。また,Webを対象としたレポート提出システムの実現手法と,完全オンラインテストの可能性に向けた自動化,本人認証方式(筆跡認証など)に関する提案と評価を実施した。その他,上記教育実践の基盤となるeラーニング高等教育連携(eHELP)の活動を拡大・拡充して組織の体系化を図るとともに,教育実践結果の各機関へのフィードバックを図った。なお,高等教育実践のベストプラクティスに関して,北欧(フィンランド,オランダ)の大学・eラーニング推進機構を訪問して現況調査を行った。
電子親和力の高い複素環を有する新規有機酸化還元系の合成とEL素子への応用

有機EL素子の研究開発においてキャリヤ輸送材料の開発は重要であり、さまざまな有機材料の合成研究が行われている。本研究課題では、電子輸送性の高いユニットをもっ1.新規配位子および錯体、2.新規オリゴマー・ポリマー、3.新規マクロサイクルの合成に焦点を絞り合成研究を行った。1.新規配位子および錯体の合成研究新たなりん光発光材料として、イリジウム錯体にキャリア認識部位を導入した化合物を合成し、高いEL発光効率を達成した(Eur.J.Inorg.Chem. 2006, 3676)。(2)電子輸送性発光ユニットとしてホウ素錯体に着目し、配位子の構造と発光特性の関係を調査した。この結果、配位子の構造により発光波長をコントロールすることができると共に、EL素子の発光ドーパント材料として有望であるという知見を得た。(3)電子輸送材料であるジアザフルオレンを配位子に有するルテニウム錯体を合成し、色素増感太陽電池の増感色素を開発した。この結果、代表的な色素と比較して高い性能を示した。2.新規オリゴマー・ポリマーの合成研究新たな電子輸送材料の開発として、1,3,4-オキサジアゾールをクロスリンカーに用いたアセンダイマーの合成研究を行った。この結果、アントラセンダイマーにおいて強い分子間相互作用が観測されると共に、基板上に整列することが明らかになった(Heterocycles 2007, 72, 85)。3.新規マクロサイクルの合成研究前年度の研究から、マクロサイクルは強い分子間相互作用をもつ結果、高い電子輸送性を有することが明らかになった。そこで、キャリア輸送性をコントロールする目的で、自己組織化能を有する環状2-フェニル-1,3,4-オキサジアゾールオリゴマー:四量体と三量体の合成研究を行った。この結果、特異な構造を有する超分子構造体が得られた(特許出願)。有機EL素子の研究においてキャリア輸送材料の開発は非常に重要であり、さまざまな有機材料の合成研究が行われている。これは発光層へのホールと電子の注入バランスが再結合(発光)効率に強く影響を及ぼすためである。今までに開発されてきた物質の多くはホール輸送材料のため、電子輸送材料の合成研究は近年主要な課題となっている。そこで我々は、電子親和力の高い複素環構成ユニットをもつ有機酸化還元系を合成し、新規な電子輸送材料の開発を行った。本研究課題では、電子輸送性の高いユニットをもつ(1)新規配位子、(2)新規オリゴマー・ポリマー、(3)新規マクロサイクルの合成に焦点を絞り、研究を行った。1.新規配位子および錯体の合成研究(1)ジアザフルオレン化合物は高いホールブロック性を有するものの、電子輸送性が低いことが課題である。そこでdirect arylationを用いたπ電子拡張を行った。現在、EL素子を作製中であるが、電子親和力が上昇していることが分かった。(2)新しいπ電子系として5,10-ジヒドロ-1,9-ジアザシラントレン骨格に着目し、誘導体の合成研究を行った。この結果、一般的な電子輸送材料を用いた素子と比較して、高い発光効率が観測された(Chem.Lett.,2005,34,1698)。2.新規オリゴマー・ポリマーの合成研究電子親和性の高いオリゴマーとして、1,3,4-オキサジアゾールとナフタレンの共重合体の合成を行った。分子鎖が異なる構造異性体の合成に成功し、分子構造が電子輸送性に与える影響を調査した。3.新規マクロサイクルの合成研究1,3,4-オキサジアゾールを有するマクロサイクルの合成研究を行った。

非環状分子と比較して電子的性質には違いがみられなかったものの、物理的性質に大きな差が観測された。これはマクロサイクル構造によって強いπ...π相互作用を有する分子配列が構築された結果である。この影響はEL素子のキャリア輸送特性に顕著な差となって現れた(Macromol.Chem.Phys.,2005,206,1576)。有機EL素子の研究開発において、キャリア輸送材料の開発は重要な課題であり、さまざまな有機材料の合成研究が行われている。本研究課題では、電子輸送性の高いユニットをビルディングブロックにもつ1.新規配位子および錯体、2.新規オリゴマー・ポリマー、3.新規マクロサイクルの研究開発を行った。1.新規配位子および錯体の合成研究新たなりん光発光材料として、イリジウム錯体にキャリア認識部位を導入した化合物を合成し、高いEL発光効率を達成した(Eur.J.Inorg.Chem.2006,3676)。(2)電子輸送性発光ユニットとしてホウ素錯体に注目し、配位子の構造と発光特性の相関を調査した。この結果、配位子の構造により発光波長を制御することが可能となり、EL素子の発光ドーパントとして有望と考えられる知見を得た。(3)電子輸送材料であるジアザフルオレンを配位子に有するルテニウム錯体を合成し、色素増感太陽電池の増感色素を開発した。この結果、代表的な色素と比較して高い光電変換効率が測定された。2.新規オリゴマー・ポリマーの合成研究新規電子輸送材料の開発として、オキサジアゾールをクロスリンカーに用いたアセン二量体の合成研究を行った。この結果、アントラセン二量体において強い分子間相互作用が観測されるとともに、シリコン基板上に整列することが明らかになった(Heterocycles 2007,72,in press)。3.新規マクロサイクルの合成研究マクロサイクルは高いキャリア輸送性を有することが、前年度の研究で明らかになった。これは、強力な分子間相互作用に基づいていた。そこで、自己組織化によってキャリア輸送性を制御する目的で、環状2-フェニル-1,3,4-オキサジアゾールオリゴマー:四量体と三量体の合成研究を行った。この結果、チューブ状の特異な超分子構造体が得られた(特許出願)。
難治性慢性ウイルス感染症及び腫瘍に対する新規細胞治療システム

ウイルス誘発疾患(HTLV-I/ATL、HIV I/エイズ、およびEBV/関連リンパ腫など)や非ウイルス性腫瘍に対しては、形態学的、遺伝学的、そして、分子生物学的手法を駆使し、原因ウイルスによる持続感染、リンパ増殖性/変性的な異常、および免疫反応の分子機構などを理解する必要がある。そして、薬理学的/免疫的治療を含む新規坑ウイルス戦略を開発を行う必要がある。このため私たちはまず、NOD/SCID/IL2Rγ/マウス(NOG)を開発し、無処理マウスで新しいATLの動物モデルを確立した。さらに、私たちはいくつかの新たに開発されたNF-kB抑制剤の効果を示した。NK細胞は抗原感作なしで、腫瘍細胞とウイルス感染細胞を認識して攻撃するが、私たちはNOGマウスと実際の患者で、肺がんや乳がんに対するNK細胞の効力と安全を立証した。次に完全なヒト型マウスの完成を目指して、ヒト臍帯血移植を行った。ヒトB細胞、T細胞、および他の単核細胞/大食細胞の誘導が見られ、造血幹細胞とリンパ濾胞様組織の発達も見られた。この系では、CCR5とCXCR4-HIV-1の顕著な感染が起こり、急激なウイルス血症に引き続いて120日後以上も遷延する持続感染が見られた。その上、高率のウイルス感染を示した動物ではHIV-1Env gp120とGag p24に対する両者の抗体を検出した。同様に、これらのヒト化マウスでは、EBV感染に非常に感受性が高いことも示し、それらがヒトでの持続性ウイルス感染の特徴についてかなり再現できることを示した。これらの結果は、難治性慢性ウイルス感染症や非ウイルス性悪性腫瘍に対する新規治療法、とくに細胞を用いた治療法の開発に有用であろう。本研究では、多くのウイルス性腫瘍、非ウイルス性腫瘍を用いてその病態モデルをNOGマウスに再現することに成功した。それらはEBVにより不死化したBCL細胞、KSHV(カポシ肉腫関連ヘルペスウイルス)感染細胞であるPrimary effusion lymphoma(PEL)、ATL患者由来の白血病細胞、ホジキン腫瘍、乳癌、胃癌など多岐にわたる。とくに興味深い結果として、乳癌細胞とKSHV陽性株細胞が、T、B、NK細胞を欠損するNOGマウスで活発な増殖とともに全身に浸潤を起こすのに対し、TとB細胞は欠くもののNK細胞は存在しているNOD/SCIDマウスではNOGマウスに比較して、その増殖、浸潤はともに有意に抑制されていた。そこでこのNOD/SCIDマウスにNK細胞を抑制するTM-β1抗体を投与したところそれらの増殖性と浸潤能は著明に回復した。さらにHTLV患者(ATL)由来の白血病細胞の病態モデルを構築した上で、他家NK細胞がこれを効率よく抑制するという免疫治療法のモデルの確立に成功した。また同じ系にHIV-1 protease inhibitorであるritonavirを投与するとその増殖と浸潤は著明に抑制された。以上、今まで困難であった実際のヒト細胞を用いた病態モデルマウスを簡便かつ高効率に構築することが可能となった。このことはヒト病態モデルマウスとしても実際の患者における病態を再現できる可能性を示唆しており、その意義は小さくない。またNK細胞がさまざまな腫瘍系の増殖と浸潤をマイナスに制御していることが示唆された。現在、このシステムを用いて他家および自己NK細胞やCD8T細胞などを用いてex vivoで活性化後にマウスに投与し、その免疫治療効果を確立しようと試みているところである。現時点では有効な治療薬がまったくないATLの患者血液を用いて、NOGで例外なしに生着すること、エイズのプロテアーゼ阻害薬が有効であることも確認している。

さらには自己NK細胞やCD8T細胞などを用いてex vivoで活性化後にマウスに投与しその免疫治療効果を示した。とくにNK細胞による抗癌免疫治療の効果を検証しており、その効果があることが示された。一方、HIV-1研究でも同様に、NOGマウスを用い、新しいHIV-1感染モデルとしての特徴と有用性の検討を行った。ヒト造血幹細胞移植NOGマウスでは、B細胞、T細胞の他、単球/マクロファージ、樹状細胞などのヒト細胞群の発生がみとめられた。リンパ組織中には、HIV-1コレセプターであるCXCR4やCCR5を発現するCD4陽性細胞が確認された。HIV-1感染実験により、R5およびX4指向性両方のHIV-1に高い感染感受性を示し、血漿中には投与後3ヶ月以上高いウイルスコピー数が検出された。感染マウスの末梢血と脾臓ではCD4陽性T細胞の割合が経時的に減少し、胸腺内ではCD4/CD8共陽性の未熟T細胞の消失がみられた。また、HIV-1特異抗体を産生する個体がみられ、このマウスがHIV-1に対する免疫誘導能を持つことが明らかとなった。このことから、ヒト造血幹細胞移植NOGマウスは、新しいエイズモデルとしてその発症機序の研究や新規薬剤・ワクチン開発への応用が期待される。
磁気流体方程式系の解の適切性と爆発判定条件について

本研究では,大規模なプラズマ流体を代表する磁性流体に対し,磁場やホール効果が流れの様相に及ぼすメカニズムを,非線形偏微分方程式の観点から数学的に解明することを目的とする.申請者は磁場やホール効果により現れる磁性流体の流れの異方性を,線形作用素のスペクトルや特異極限問題,及び解の長時間漸近挙動の観点から解析する.また,解の爆発に対して,流体の速度場の回転による特徴付けを精密化し,磁気流体力学に対する数学的理論の構築を目標とする.本研究では,大規模なプラズマ流体を代表する磁性流体に対し,磁場やホール効果が流れの様相に及ぼすメカニズムを,非線形偏微分方程式の観点から数学的に解明することを目的とする.申請者は磁場やホール効果により現れる磁性流体の流れの異方性を,線形作用素のスペクトルや特異極限問題,及び解の長時間漸近挙動の観点から解析する.また,解の爆発に対して,流体の速度場の回転による特徴付けを精密化し,磁気流体力学に対する数学的理論の構築を目標とする.
支えあう生物多様性のポストゲノム科学

当該期間では主に以下の4課題を中心に研究を行なった。1)尿酸酸化酵素(UOX)遺伝子:UOXはプリン代謝を司る遺伝子であるが、類人猿では独立の原因で種特異的に偽遺伝子化している。これは、霊長類のUOX遺伝子で停止コドンに置換し易いアルギニンコドンが多用されたためと考えられた。更に、UOXの偽遺伝子化に先立ち、尿酸(UOXの基質)を産生する酵素遺伝子の転写の抑制が起きた可能性を示し、代謝系の進化で個々の要素間での協調的変化を示す遺伝子共進化の実例を示した。2)ノイラミン酸水酸化酵素(CMAH)遺伝子:CMAHはヒト特異的に偽遺伝子化している。偽遺伝子化の原因はAluの挿入によるエクソン消失である。この偽遺伝子化の時期を推定すると300万年程前、ヒトの脳容量が急激に増加する直前にあたる。またヒト集団中のCMAHの多型とその地理的分布の説明には、アフリカ集団内の分集団構造が必須であることを示した。3)性染色体の分化:哺乳類の性染色体の進化には、雄性決定遺伝子が相同染色体間の部分的な組み換えを抑制し、XとY染色体の段階的な分化に重要な役割を担ってきたことを示した。またこの分化によってY染色体上の遺伝子は大半が不活性化または消失した。性染色体の段階的分化の境界をDNAレベルで明らかにし、性染色体の分化機構に新しい知見を得た。4)主要組織適合性抗原遺伝子群(MHC):霊長類のMHCはヒトと新世界猿の共通祖先ですでに、遺伝子重複により現在各々の種が持つ遺伝子座は分化していた。種分岐を経て祖先種の多様な遺伝子から、遺伝子を失うことで、各々の種はその特性を獲得していった。さらに機能を持った遺伝子数がゲノム当たり一定となるような自然選択が働いている可能性も示唆した。この他、ヒトで特異的に発現が抑制されている遺伝子の探索等も行なった。また期間中に海外共同研究者であるクライン教授と執筆してきた「我々はどこからきたか?-ヒトの由来の分子的証拠-」を、ドイツのスプリンガーから出版した。本研究は「不完全ゲノム仮説」を検証し、生物はゲノムレベルでも相互依存的であることを示す。最近のヒトゲノムのドラフトシークエンスによれば、遺伝子の総数は3万程度であり以前の推定値を大幅に下回る。これも仮説の予測と一致し、ヒトに至る進化の過程で多くの遺伝子が消失したことを示す。当初本年度はデータベースの検索を計画していたが、他の生物でもゲノム計画が進行中であり、検索の実行は延期した。cDNAをもちいた実験は、材料と人材が揃い開始したところである。本年度は、プリン代謝に関係した尿酸酸化酵素(UOX)とノイラミン酸水酸化酵素(HO)の遺伝子、およびヒトY染色体の遺伝子発現消失に関して報告する。UOXはすべての生物に存在しプリン代謝を司る遺伝子であるが、類人猿では独立の原因で種特異的に壊れ偽遺伝子化している。旧世界猿の血中尿酸量を調べたところ(京大霊長研と共同)、旧世界猿においても偽遺伝子化が進行中である。メカニズムとしてプロモータの失活を追及している。HOはヒト特異的に失活した唯一つの例で,原因はエクソンの消失による。

この近傍を解析したところ、Aluの挿入が原因である可能性が高くなった(論文作成中)。生物学的意義については、発見者であるバルキ博士と共同して追究している。かつてY染色体はX染色体と共に常染色体のように挙動していたが、その後性決定遺伝子の分化によって大半が不活性化または消失した。歯のエナメル質形成に重要なアメロジェニン遺伝子は、両染色体に生きた遺伝子をもつ例である。このパラログを比較したところ、イントロン2を境目に相同性の程度に明瞭な差が見い出された。この境界は両染色体が組み換えを停止した時期に対応すると考えられる。遺伝子内で組み換えの制御が変わったことは、染色体の再編成が直接の原因ではありえない(論文投稿中)。今後は、Y染色体の分化と不活性化の原因を追及する。本年度は多くの成果があった。最大の成果は、海外共同研究者であるヤン・クライン教授と執筆してきた「我々はどこからきたのか?-ヒトの由来の分子的証拠-」を、ドイツのスプリンガーから出版することができたことである。主題は人類史の分子情報に基づく復元であるが、人類の未来についても考えを述べた。内容の高さと巾の広さは類例がないものと自負している。また、代表者が提唱している「不完全ゲノム仮説」と関連して、生物の同胞性と共存原理を訴えた(岩波「科学」)。ゲノムレベルの共存関係は、人間の生物としての歴史的な側面を明らかにするだけでなく、人間という存在を深く考えさせる真理を含んでいることを主張した。こうした活動に加えて、(1)、現代人の起源に関する分子集団遺伝学的研究、(2)類人猿プリン代謝系に関係する尿酸酸化酵素(UOX)遺伝子の分子進化、および(3)ヒト特異的な偽遺伝子(ノイラミン酸水酸化遺伝子)の生成時期の特定と分子機構の解明に関する基礎研究を行い、それぞれの成果を国際誌に発表した。(1)では、多地域進化説を分子情報に基づき検討し、対立仮説である現代人の単一起源説を支持した。(2)では、哺乳類のUOX遺伝子が停止コドンになり易いアルギニンのコドンを多用しており、この変化が類人猿で繰り返し起きた事実やUOXの偽遺伝子化と寿命との関係を議論した。(3)では、ヒトのゲノムの10%にも達する反復配列が、ヒトゲノムの特徴に重要な役割を果たした可能性を示した。このほか、発現レベルの種間(とくに、ヒトと他の霊長類や哺乳類間)の違いを研究するため、サブトラクションを用いた予備的実験を行ってきた。また、生物システムを研究する目的で、プリン代謝系に関係する遺伝子群の有無をさまざまな生物のゲノムデータベースで探索している。これは、個々の遺伝子ではなく、生物らしさの基盤となるシステムの歴史的変容を探るためである。本年度は以下の4課題について有意義な結果を得た。結果の多くはすでに国際誌に掲載済または掲載の予定である。1)現代人の起源に関する分子集団遺伝学的研究:データ解析と理論的考察から、今日の人類集団に保有される遺伝的変異とその地理的分布の説明には従来の現代人の起源に関するモデルはいずれも不十分であり、アフリカ集団内の分集団構造が必須であるとの知見をえた。これは現代人の単一起源説を支持する上で、重要なポイントになると予想している。2)プリン代謝系における分子共進化:類人猿で独立に起きた尿酸酸化酵素(Uox)の二度の偽遺伝子化と、Uoxの基質(尿酸)を産生するキサンチン酸化還元酵素(Xor)との関係を調べた。
分子標的薬使用を目指した肺がんのＲＥＴ過剰発現・スプライシング異常の検査法の確立

今回、チロシンキナーゼの一種であるRETを過剰発現している肺癌では予後が悪いことが示された。これは、mRNAの発現だけでなく、容易に検査可能な病理組織の免疫組織化学的検査によってしめされている。現在RETの融合遺伝子変異に対して臨床試験が行われているRETの阻害剤が、このようなRET過剰発現の肺癌においても効果が見られる可能性があることを示した。RET過剰発現による肺がんにおける発がん・がんの増殖・薬剤抵抗性への影響を解明し,RETを阻害する分子標的薬の対象となる症例を明らかにするとともに,実臨床においてそのような症例を見つけ出す検査法を開発することである.本年度計画していた1EGFR変異のあるヒト肺がん細胞株に,正常RET・新規スプライシングバリアント(以下SV)を強制発現させ,EGFR阻害薬の耐性化が起こるかを検討するため,a)レンチウイルスを作成し,b)EGFR変異陽性のヒト肺がん細胞株NCI-H1650, HCC827, HCC4006と,変異陰性のA549, NCI-H23に対し,強制発現株を得た.c)遺伝子導入細胞株におけるEGFR阻害薬gefitinib及びEGFR/RET阻害薬vandetanibのIC50(50% inhibitory concentration)を求めた.IC50の比をとることで,過剰発現株においてはvandetanibの法がgefitinibに対して相対的に効きやすいことが示された.これは,裏を返せばRET過剰発現によりRET阻害薬で可逆的なgefitinibに対する耐性が獲得されて鋳ることを示している.生存曲線からもRET過剰発現の肺がん症例でEGFR陽性の場合のみ予後が不良となっていた.これは,EGFR-TKIへの耐性ないしは耐性獲得への寄与が示唆されており,これが細胞株レベルでも示されたと考えられる.今後当初予定通り,下流シグナルの検討を行う.また,tissue micro arrayによる免疫染色のデータとの比較検討を行うことで,より臨床応用しやすい免疫染色による判定が可能かどうかを検討していく.EGFR変異のあるヒト肺がん細胞株に正常RETを強制発現させ,EGFR阻害薬の耐性化が起こるかを検討した.RETの遺伝子導入によりEGFR阻害薬の耐性化がみられた.また下流シグナルについてERK,AKT,STAT3のリン酸化抗体を用いて検討を行い,現在解析中である.現在下流シグナルなどのデータを合わせて投稿準備中である.おおむね順調に進展している.当初計画通りの実験では十分なノックダウン効率が得られにくいということが判明し,siRNAによるRETノックダウンの系の構築で若干の遅れがみられている.一方,tissue micro arrayによる免疫染色は既にすんでいる.25年度が最終年度であるため、記入しない。当初予定通り,下流シグナルの検討を行う.また,tissue micro arrayによる免疫染色のデータとの比較検討を行うことで,より臨床応用しやすい免疫染色による判定が可能かどうかを検討する.25年度が最終年度であるため、記入しない。
精神障害者の医療施設及び社会復帰施設の利用状況に関する研究

1精神障害者社会復帰施設の職員および利用者に関する研究;1)全国の精神障害者社会復帰施設から3分の1を抽出し、利用実態および利用者満足度についての調査を実施した。153施設とその利用者1098名の回答を分析した結果、利用者満足度は入所授産施設に比べて生活訓練施設、福祉ホームA、通所授産施設で有意に得点が抵かった。利用者の属性・特性と利用者満足度との関係についても分析した。2)1999年に地域における拠点として法定化された精神障害者地域生活支援センターの中から無作為に3分の1の施設を抽出し、サービス満足度に関する郵送調査を行った。利用者の満足度は、相対的に30代は満足度が高く、40代は低かった。また、契約経路およびセンター設置主体の違いによって、サービスの受け止め方に差がみられた。3)さらに無作為に抽出した全国の精神障害者社会復帰施設の職員について、役割機能、職務満足および援助の質などについての調査を実施し、検討を行った。2.精神障害者の医療施設および社会復帰施設の利用実態に関する保健統計学的な検討:1)福岡県における精神障害者の通院および入院の受療圏の実態を明らかにするため、通院医療費公費負担制度の利用者について福岡県所管の患者票の情報を用いて分析した。住所地以外の医療圏への受療について、二次医療圏によって大きな違いがみられた。住所地以外の医療圏を受療するものには、年齢が若い、病院よりも診療所を受療、精神障害者保健福祉手帳を保有していない、保険は「共済保険」ないし「健康保険」、連絡先の家族が親といった特徴がみられた。病院入院にかかわる受療圏についてしも、患者調査を用いて同様に検討した。今回、明らかになった受療実態が精神障害者とって適切なものであるのか、今後さらに検討を深めていくことか必要である。2)前年度に実施した1973年から1996年までの厚生労働省所管の患者調査および病院報告を用いた保健統計学的検討をさらに進め、1999年までの精神疾患精神障害者についての保健統計としての整備を行った。1.精神障害者の医療施設および社会復帰施設の利用実態に関する保健統計学的な検討:1)1973年以降の厚生省病院報告を用いて、精神病床の平均在院日数や病床利用率を病院ごとに算出して、その分布の経年的推移を示した。また、医師・看護婦(士)・准看護婦(士)などの医療従事者数,病院開設者,病床規模,外来患者数,地域ブロックなどの病院特性との関連を検討し、病院特性の面から長期在院に関わる問題を明らかにした。2)1973年から1993年までの厚生省患者調査を用いて、精神疾患に関わる外来患者数,在院患者数,在院期間,継続在院期間に関して、性別・年齢・診断・地域などの要因との関連を含めて、その推移を整理した。3)1988年以降の社会福祉施設等調査、1996年以降の患者調査および病院報告についての目的外使用の申請準備を行った。2.精神障害者社会復帰施設の機能評価:1)日本における精神障害者社会復帰施設の位置づけと課題についてまとめた。2)社会復帰施設利用者への満足度調査票を検討し、家族満足度もあわせもつVerona Service Satisfaction Scale(VSSS)を用いることを決定し、原著者に翻訳の了解を得て翻訳を終了した。

3)精神障害者社会復帰施設協議会の代表者と、具体的な調査デザインについての打ち合わせを行い、より会員施設に意義のある調査にするための検討会を新たに組織し、調査の実施準備を完了した。4)満足度調査結果の分析方法を精緻化するために、これまで実施してきたデータを用いて論文を作成した。職務満足度調査について、これまで実施してきたデータを用いて論文を作成した。調査票に参考になる洋書を翻訳した。1.精神障害者社会復帰施設の職員および利用者に関する研究:1)全国の精神障害者社会復帰施設から3分の1を抽出し、利用実態および利用者満足度についての調査を実施した。153施設とその利用者1098名の回答を分析した結果、利用者満足度は入所授産施設に比べて生活訓練施設、福祉ホームA、通所授産施設で有意に得点が低かった。利用者の属性・特性と利用者満足度との関係についても分析した。2)1999年に地域における拠点として法定化された精神障害者地域生活支援センターの中から無作為に3分の1の施設を抽出し、サービス満足度に関する郵送調査を行った。利用者の満足度は、相対的に30代は満足度が高く、40代は低かった。また、契約経路およびセンター設置主体の違いによって、サービスの受け止め方に差がみられた。3)さらに無作為に抽出した全国の精神障害者社会復帰施設の職員について、役割機能、職務満足および援助の質などのついての調査を実施し、検討を行った。2.精神障害者の医療施設および社会復帰施設の利用実態に関する保健統計学的な検討:1)福岡県における精神障害者の通院および入院の受療圏の実態を明らかにするため、通院医療費公費負担制度の利用者について福岡県所管の患者票の情報を用いて分析した。住所地以外の医療圏への受療について、二次医療圏によって大きな違いがみられた。住所地以外の医療圏を受療するものには、年齢が若い、病院よりも診療所を受療、精神障害者保健福祉手帳を保有していない、保険は「共済保険」ないし「健康保険」、連絡先の家族が親といった樹特徴がみられた。病院入院にかかわる受療圏についても、患者調査を用いて同様に検討した。今回、明らかになった受療実態が精神障害者とって適切なものであるのか、今後さらに検討を深めていくことが必要である。2)前年度に実施した1973年から1996年までの厚生労働省所管の患者調査および病院報告を用いた保健統計学的検討をさらに進め、1999年までの精神疾患、精神障害昔についての保健統計としての整備を行った。
多重散乱物体中での時間分解スペックルトモグラフィ

本研究の目的を達成するため以下の理論的・実験的研究を行った。1.実験システムとして、現有品のTAC(Time to Amplitude Converter)を基本とした、本研究で新しく提案する「時間スペックル」を観測するシステムを完成させ、予定どうりの性能で時間スペックルを観測した。2.さまざまなスペックル計測を新しく時間領域に拡張するために、従来からの空間スペックルをも含む形で、時間スペックルの理論を定式化した。この結果、従来の空間スペックルと時間スペックルの対応関係を明らかにすることができた。3.時間スペックルをトモグラフィーに応用する例として、多重散乱物体中の特定の散乱体の動きによって時間スペックルの形がどのように変化するかを、拡散方程式と、モンテカルロ法によるシミュレーションで解析した。この結果、時間分解することによって新しい情報が得られることが確認できた。また、このような考え方を実証する目的で、固体の多重散乱物体中にブラウン粒子を埋め込み、物体の外部から観測するスペックルの動きから、このブラウン粒子の位置が決まられることを実験的に確かめた。4.上記(3)の応用研究と合わせて、基礎物理的現象として、ランダム媒質中を伝播した波動に現れる「長距離相関」を新しく時間分解して調べた。5.以上の研究から、多重散乱領域に現れる「時空間スペックル」の利用は、ランダム系での波動現象に関する基礎物理的研究、また応用計測においても極めて有用であることが実証された。今後上記、4.の「長距離相関」に関してより詳しく解析する予定である。
小児神経因性排尿障害のウロダイナミックスタディ

麻酔下ウロダイナミックスタディ(同針電極による外尿道括約筋筋電図(EUS-EMG)と膀胱内圧(CMG)の同時測定)を73人の小児に施行した。対象小児の内訳は、男児50、女児23、年令は2ヶ月14才、平均5.6才であった。23例は脊椎・神経に顕性の異常を有し(I群)、37例は機能的排尿障害が疑われるが顕性の異常の無い群(II群)で、残り15例は排尿機能正常のコントロール群(III群)であった。蓄尿反射は93%(68/73)に認められた。消失の5例(7%)の内訳はI群4例、II群1例であった。麻酔レベルを浅くする事で自排尿を57例(83%)に鑑察する事が出来た。内訳はI群95%(18/19)、II群84%(31/37)、III群62%(8/13)であった。57例中広義の利尿筋・括約筋強調不全(DSD)と考えられるものはI群7例(38%)、II群6例(19%)であった。III群は全例synergic voidingでDSD(-)であった。以上より同針電極の操入など侵襲性故に協力が得られない小児例でも麻酔下UDSにて排尿障害の主因たるDSDの診断は可能で、治療方針の選択に有用であった。小児の機能的排尿障害の主因たる利尿筋・括約筋協調不全(DSD)診断上の排尿時膀胱尿道造影(VCU)の有用性を検討した。対象は2ヶ月14才、平均4.5才小児55例で尿勢減弱、残尿率20%以上、膀胱肉柱形成、後部尿道拡張等の自他覚所見を有していた。VCU上の後部尿道最大径(PUD)、外尿道括約筋部最大径(EUSD)、その比率(PUD/EUSD)を計測、PUD/EUSD>2をもって後部尿道拡張(UD)有りと判定した。21例(38%)の小児がUDS上DSDを有していた。尿線減弱と途絶の両者を有する例では100%(9/9)DSD陽性で減弱あるいは途絶の何れかを有する例では56%(9/16)がDSDを示した。一方、正尿排尿例でのDSD陽性率は僅か10%(3例)に過ぎず排尿パターンはDSDと相関する傾向にあった。VCU上の各部の最大径をパラメーターとした場合EUSDがDSDと最も良く相関していた。すなわちDSDを有する例のEUSDは平均2.0mmとDSDを有しない例の平均4.6mmより優位に(P<0.00001)低値であった。EUSD3.0mmをカットオフ値とした場合敏感性、特異性、陽性予測値、因性予測値は各々93、86、78、96%であった。以上より臨床上排尿障害を有する小児ではVCU所見上のEUSDがDSDの診断上有用となる事が示唆された。尿線減弱と途絶の両者を有する例では100%(9/9)

DSD陽性で減弱あるいは途絶の何れかを有する例では56%(9/16)がDSDを示した。一方、正尿排尿例でのDSD陽性率は僅か10%(3例)に過ぎず排尿パターンはDSDと相関する傾向にあった。VCU上の各部の最大径をパラメーターとした場合EUSDがDSDと最も良く相関していた。すなわちDSDを有する例のEUSDは平均2.0mmとDSDを有しない例の平均4.6mmより優位に(P<0.00001)低値であった。EUSD3.0mmをカットオフ値とした場合敏感性、特異性、陽性予測値、因性予測値は各々93、86、78、96%であった。以上より臨床上排尿障害を有する小児ではVCU所見上のEUSDがDSDの診断上有用となる事が示唆された。・麻酔下ウロダイナミックスタディー(以下UDS)は73人の小児に施行した。・UDSとしては同針電極による外尿道括約筋筋電図(EUS-EMG)と膀胱内圧(CMG)の同時測定を行った。・対象小児の内訳は、男児50、女児23、年令は2ヵ月14才、平均5.6才であった。23例は脊髄・神経に顕性の異常を有し(I群)、37例は機能的排尿障害が疑われるが顕性の異常の無い群(II群)で残り15例は排尿機能正常のコントロール群(III群)であった。・蓄尿反射は93%(68/73)に認められた。消失の5例(7%)の内訳はI群4例、II群1例であった。・麻酔レベルを浅くする事で自排尿を57例(83%)に鑑察する事が出来た。内訳はI群95%(18/19)、II群84%(31/37)、III群62%(8/13)であった。同時に内視鏡切開・切除を要した例が含まれるIII群で自排尿が得られない傾向があった。・57例中広義の利尿筋・括約筋強調不全(DSD)と考えられるものは、I群7例(38%)、II群6例(19%)であった。III群は全例synergic voidingでDSD(-)であった。・DSD 13例はBlaivas分類ではTypeIIIが8例、IIが4例、Iが1例であった。・DSDの再現性は8例(I群5、II群3)61.5%で確認された。・術前CMG評価が可能で利尿筋過反射(DH)を認めた10例では1例を除き麻酔下ではDHの消失・抑制を認めた。膀胱コンプライアンスは不変であった。・DSD(+)例では間歇自己導尿(CIC)による排尿管理にてその後順調に経過している。・以上より同針電極の操入など侵襲性故に協力が得られない小児例でも麻酔下UDSにて排尿障害の主因たるDSDの診断は可能で、治療方針の選択に有用であった。・小児機能的排尿障害の主因たる利尿筋・括約筋協調不全(DSD)診断上の排尿時膀胱尿道造影(VCU)の有用性を検討した。・対象は小児(2ヶ月-14才平均4.5才)55例で尿勢減弱、残尿率20%以上、膀胱肉柱形成、後部尿道拡張等の自他覚所見を有していた。・VCU上の後部尿道最大径(PUD)、外尿道括約筋部最大径(EUSD)、その比率(PUD/EUSD)を計測、PUD/EUSD>2をもって後部尿道拡張(UD)有りと判定した。・21例(38%)の小児がUDS上DSDを有していた。原疾患は聴仙部脂肪腫6例、脊髄髄膜瘤4、鎖腰3、けい留脊髄1、原因不祥7であった。尿線減弱と途絶の両者を有する例では100%(9/9)DSD陽性で減弱あるいは途絶の何れかを有する例では56%(9/16)がDSDを示した。・残尿UD、膀胱肉柱形成を認める例は然らざる例よりもDSD陽性率が優位に高かった。71%>32%(P<0.005)、93%>64%(P<0.05)、71%>33%(P<0.01)。・VCU上の各部の最大径をパラメーターとした場合EUSDがDSDと最も良く相関していた。・EUSD3.0mmをカットオフ値とした場合敏感性、特異性、陽性予測値、陰性予測値は各々93、86、78、96%であった。・以上より臨床上排尿障害を有する小児ではVCU所見上のEUSDがSDの診断