hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
顎口腔領域のMRIにおける金属アーチファクトの出現様相に関する基礎的研究

顎口腔領域のMR画像において,歯科用補綴物による金属アーチファクトにより診断が困難となることがある.アーチファクトは3次元的に出現するものであり,さらに,口腔内にはインレー,クラウンなどさまざまな形態を有する金属が存在し,その出現様相は極めて複雑である.従って,その出現様相を3次元的に把握する必要があると考え,本研究を実施した.1)金属の形態がアーチファクトの出現様相に与える影響:1辺5mmの立方体とそれと同体積の球体を歯科用合金(金合金)において作製し研究に供した.すなわち,自製ファントム内に寒天にて固定し,MRの撮像を行い,アーチファクトの出現様相を3次元的に観察した.その結果,アーチファクトの基本的構造は両者ともに同様であり,金属を中心とした低信号領域と,静磁場方向にみられる高信号領域より構成されていた.その形態は両者間で差を認めたが,体積においては,有意差は認められなかった.2)抜去歯牙のMR画像:全部鋳造冠によるアーチファクトの出現様相を観察するに先立ち,充填処置等が施されていない抜去した下顎第一大臼歯のMR画像を撮像し,3次元的に観察した.エナメル質,象牙質,セメント質の区別は不可能であり,無信号領域として観察された.一方,歯髄腔は中間信号を呈した.自製の体積測定器を用いて,実際の歯牙と3次元MR画像の体積を比較したところ,両者に有意差は認められなかった.3)全部鋳造冠のMR1画像の観察:アーチファクトの基本構造は立方体,球体と同様であった.すなわち,金属体を中心とした無信号領域と,その静磁場方向(周波数エンコード方向)に高信号を呈する領域が認められた.4)撮像方向が金属アーチファクトの出現様相に与える影響:静磁場方向と周波数エンコード方向が垂直である場合と水平となる場合のアーチファクトの出現様相の比較を行った.高信号を呈する領域は,低信号を呈する領域の静磁場方向に認められたが,両者の形態に差が認められた.3次元画像における体積は,周波数エンコード方向と静磁場方向が平行な群において有意に大きかった.本年の研究においては、まず予備実験として、形態を単純化した合金(球体、立方体)による金属アーチファクトの観察を行った。視覚的には合金の形態の相違による金属アーチファクトの形態の違いは明らかであったが、定量的には有意差は認められなかった。撮像シーケンスにおいてはファーストスピンエコー法T2強調像において最も大きなアーチファクトが認められた。さらに金合金において最も大きなアーチファクトが認められたため、特に金合金を用いてアーチファクトの三次元的観察を行った。金属アーチファクトは三次元的に以下の2つの領域よりなっていた。すなわち合金周囲には無信号域を認め、その形態は明らかに違いが認められ、立方体においては紡錘形、球体においては円錐型を呈する傾向が認められた。さらに周波数エンコード方向においては、両形態ともにドーナツ状ならびに三日月状の高信号域が認められた。定量的なアーチファクトの体積の計測においては、両者に有意差は認められなかったが、球体のアーチファクトは立方体のアーチファクトと比較し、小さい傾向が認められた(英文誌投稿中)。次に、天然歯のMRIの撮像を行った。その形態ならびに体積を画像解析ソフトにより計測し、天然歯の実際の体積との相関性を検討し、現在データの分析中である。なお、天然歯の体積計測にあたっては、自家製の歯牙体積計測器を作成し計測した。現在、実際に夫然歯に支台歯形成を行い、クラウンを作成、MR画像の撮像中である。顎口腔領域のMR画像において,歯科用補綴物による金属アーチファクトにより診断が困難となることがある.アーチファクトは3次元的に出現するものであり,さらに,口腔内にはインレー,クラウンなどさまざまな形態を有する金属が存在し,その出現様相は極めて複雑である.従って,その出現様相を3次元的に把握する必要があると考え,本研究を実施した.1)金属の形態がアーチファクトの出現様相に与える影響:1辺5mmの立方体とそれと同体積の球体を歯科用合金(金合金)において作製し研究に供した.すなわち,自製ファントム内に寒天にて固定し,MRの撮像を行い,アーチファクトの出現様相を3次元的に観察した.その結果,アーチファクトの基本的構造は両者ともに同様であり,金属を中心とした低信号領域と,静磁場方向にみられる高信号領域より構成されていた.その形態は両者間で差を認めたが,体積においては,有意差は認められなかった.2)抜去歯牙のMR画像:全部鋳造冠によるアーチファクトの出現様相を観察するに先立ち,充填処置等が施されていない抜去した下顎第一大臼歯のMR画像を撮像し,3次元的に観察した.エナメル質,象牙質,セメント質の区別は不可能であり,無信号領域として観察された.一方,歯髄腔は中間信号を呈した.自製の体積測定器を用いて,実際の歯牙と3次元MR画像の体積を比較したところ,両者に有意差は認められなかった.3)全部鋳造冠のMR1画像の観察:アーチファクトの基本構造は立方体,球体と同様であった.すなわち,金属体を中心とした無信号領域と,その静磁場方向(周波数エンコード方向)に高信号を呈する領域が認められた.4)撮像方向が金属アーチファクトの出現様相に与える影響:静磁場方向と周波数エンコード方向が垂直である場合と水平となる場合のアーチファクトの出現様相の比較を行った.

高信号を呈する領域は,低信号を呈する領域の静磁場方向に認められたが,両者の形態に差が認められた.3次元画像における体積は,周波数エンコード方向と静磁場方向が平行な群において有意に大きかった.
造血幹細胞増殖機構におけるTecチロシンキナーゼの解析

造血前駆細胞に働くサイトカインとしてこれまでstem cell factor (SCF), IL-6が知られていたが、最近になってFlt3/Flk2受容体型チロシンキナーゼ(FR)のリガンドであるFlt3/Flk2-ligand (FL)も同様に造血前駆細胞の増殖を支持することが示された。我々はTecキナーゼがFL/FRを介する細胞増殖機構にも関与することを以下のように明らかにした。FRを導入したマウスBaF/3細胞をIL-3またはFLで刺激後Tecを免疫沈降しそのリン酸化チロシンの有無を検討したところ、TecはFL及びIL-3刺激のどちらによってもリン酸化が誘導されることが示された。またTecはFL刺激にて活性化されるだけでなく、Tec homologyドメインを介してFRと細胞内で会合することも示された。次に生体内でのFL/FRsystemにおけるTecの機能を明らかにするための基礎実験として、マウス骨髄幼若単核球をFLを含む様々なサイトカイン存在下にて液体培養し、その後のCFU-mix形成能を検討した。その結果IL6+FLを添加した場合CFU-mix形成能が数百倍に増強することが示された。興味深いことにこの液体培養時にTecに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを投与することで、CFU-mix形成能の増強はブロックされた。したがってFL/FRを介する細胞内シグナルのなかでも、Tecは細胞増殖機構に関与すると考えられる。
膠原病症例の治療効果判定におけるF-18 FDG PET検査の有用性の検討

膠原病は様々な多臓器障害と免疫異常を特徴とし、非腫瘍性・非感染性の全身性炎症性疾患である。私共は全身性炎症性疾患である膠原病、特に大動脈炎症候群、多発性筋炎、皮膚筋炎、IgG4関連疾患などでF-18 FDGを用いてその炎症巣を検出することは非侵襲的で役立つことが分かった。また、膠原病の全身評価診断のみならず、治療効果判定などの活動性評価にも役立つことが分かった。癌の診断においてF-18 FDG PET検査は有用であるが炎症巣に集まることは偽陽性となり診断能の低下につながる。私共は全身性炎症性疾患である膠原病でF-18 FDGを用いてその炎症巣を検出することは非侵襲的で役立つと報告した(炎症PET検査)。今回、大動脈炎症候群のおけるF-18 FDG PET検査の有用性を検討した。大動脈炎症候群は大動脈やその分岐血管を侵す原因不明の血管炎であり、膠原病の一つである。大動脈炎症候群と診断された13例を対象とし、そのうち7例はステロイド治療後にもF-18 FDG PET検査を施行した。F-18 FDG PET検査は静注1時間後に体幹部を撮像した。検討方法は視覚的評価と半定量的評価Standardized Uptake Value(SUV)を用いた。F-18 FDG PET検査で視覚的に異常集積を示した部位は上行大動脈13例、大動脈弓部12例、胸部下行大動脈12例、胸部大動脈の主要分岐血管8例、腹部大動脈8例であった。異常集積を示した68部位のSUV(平均±SD)は3.41±0.94(範囲1.60-7.51)であった。治療前後に行われた7例では、治療前に異常集積を示した38部位のSUV(平均±SD)は3.50±1.03(範囲1.60-7.51)、治療後のSUV(平均±SD)は2.27±0.51(範囲1.20-3.38)で、治療後有意に低下した。今回の結果より、F-18 FDG PET検査は大動脈炎症候群における病変血管の同定や治療効果判定に有用であることが示唆された。多発性筋炎/皮膚筋炎(以下PM/DM)は慢性の筋組織炎症を主徴とする特発性筋疾患である。今回、F-18 FDG PET/CTがPM/DMに有用か否かを検討した。PM/DMと診断された29例を対象とし、そのうち3例は治療後にもF-18 FDG PET/CT検査を施行した。検討方法として筋22箇所の集積亢進の有無につき視覚的評価を行った。また、半定量的評価はstandardized uptake value (SUV)を用い、撮像範囲筋の最大SUV (SUVmax)を計測し、年齢性別の合致する非筋炎患者29例と比較した。当初の目的であるF-18 FDG PET検査を多発性筋炎/皮膚筋炎患者に実施でき、病勢評価や治療効果判定に有用であることが示唆された。IgG4関連疾患の症状は病変部にリンパ球とIgG4陽性の形質細胞の著しい浸潤と線維化を来たし、腫大や結節による圧排や閉塞を来す。臓器浸潤は全身のあらゆる臓器に複数生じることがあり、臓器によって症状が多彩である。今回、F-18 FDG PET検査がIgG4関連疾患に有用か否かを検討した。IgG4関連疾患と診断され、F-18 FDG PET/CTを治療前後に施行した11症例、22検査を対象とした。F-18 FDG PET/CTで視覚的な異常集積部位数、半定量的指標として病変部の最大SUV値を測定した。またSUV値と血清IgG4値、sIL-2R値との関連を検討した。治療前PETで視覚的に異常集積を認めた部位は37箇所、治療後PETでは14箇所であった。治療後SUV(平均値±SD)は3.02±1.08で、治療前SUV(6.80±2.29)と比べ有意に低値を示した(p<0.001)。SUV値と血清IgG4値、sIL-2R値との間には有意な相関はみられなかった。

IgG4関連疾患の診断において、F-18 FDG PET/CTは病変の広がりの把握に有用であり、また病変のSUV値は治療後有意に低下した。膠原病は様々な多臓器障害と免疫異常を特徴とし、非腫瘍性・非感染性の全身性炎症性疾患である。私共は全身性炎症性疾患である膠原病、特に大動脈炎症候群、多発性筋炎、皮膚筋炎、IgG4関連疾患などでF-18 FDGを用いてその炎症巣を検出することは非侵襲的で役立つことが分かった。また、膠原病の全身評価診断のみならず、治療効果判定などの活動性評価にも役立つことが分かった。当初の目的であるF-18 FDG PET検査を大動脈炎症候群患者に実施でき、ステロイド治療の効果判定に有用であることが示唆された。今後も多発性筋炎/皮膚筋炎、大動脈炎症候群など様々な膠原病患者にF-18 FDG PET検査を行い、病勢評価や治療効果判定における有用性を検討していく予定である。今年度は皮膚筋炎や多発筋炎など様々な膠原病患者にF-18 FDG PET検査を行い、その治療効果判定における有用性を検討していく予定である。物品調達の効率化により、残が生じた物品調達の効率化により、少額の残が生じた。物品購入に充てる物品購入に充てる。
非対称ヒ素錯体の高次集積化による機能創発

有機ヒ素化合物は、その合成に揮発性・毒性を有する前駆体を必要とすることから特別な合成設備を要する。そのため、従来は合成研究が忌避されてきた分野であった。申請者は、不揮発性前駆体を用いて安全性の高い合成ルートを開発することでブレークスルーを起こした。本研究では、非対称ヒ素配位子を合成する手法を確立する。「機能発現の中心的役割を担う金属」に対して、直接相互作用する配位点であるヒ素原子上に不斉を導入することで、機能と構造を最もシンプルに設計することのできる系を構築する。これによって生み出される非対称配位圏の可能性は、光機能・触媒作用・分子認識など枚挙に暇がない。
遺伝子デザイン的手法によるウイルスゲノム再構築の研究

大腸菌RNAファージQβの感染性cDNA(ゲノムRNAから作製したDNA)を機能ユニット(モジュール)化した。部位特異的変異作製法により遺伝子領域の両側にユニークな制限酵素切断配列を導入し、cDNAを3個の遺伝子ユニットと発現調節領域を含む4個の非遺伝子ユニットに分割した。さらに、外被遺伝子上流の調節領域にリボソーム結合配列を導入し、2種類の新たな感染性cDNAを作製した。これにより、ユニットどうしの結合によるcDNAゲノムの再構築およびキメラゲノムの作製が可能になった。また、外被遺伝子の発現調節領域はファージ粒子形成にも関与することが推察された。ゲノムは生物が持つすべての遺伝情報がDNAまたはRNA中に適切に配置されたもので、その構造は遺伝子発現全体(発現の量、順序および時期)を支配している。それ故、ゲノム領域の改変、並べ替え、置換などは遺伝子の発現、最終的には生物の生存に影響を与える。しかし、小さなゲノムを持つ微生物でも、そのゲノム構造あるいは遺伝子構成の必然性はまだわかっていない。ゲノム構造を理解することはその生物の成り立ちや進化を知る上で重要であるだけでなく、新たな機能を付加するあるいは有用生物を作り出すためにも不可欠なことである。それには、ゲノムを人工的に再構築してゲノム領域の機能を明らかにすることが必要である。本研究では対象として微生物の中でもゲノムサイズの小さい大腸菌RNAファージQβを選んだ。Qβファージは約4300塩基の1本鎖RNAゲノム中に4種類の遺伝子しか持たないので、モデル・ゲノムとして扱いやすい。本研究成果は、将来、有用な人工RNAウイルス開発の基盤となる知見を提供すると考える。本年度はQβファージの感染性cDNAプラスミドを用い、全ゲノム領域を遺伝子領域、制御領域、およびその他の領域に分けてそれぞれの領域をユニット化し、後に再結合(再構成)することを目指した。そして、ユニット化のために各領域の両端に制限酵素認識配列を設けることを試みた。現在までに、A2遺伝子、RNA複製酵素遺伝子および外被(コート)遺伝子調節領域をユニット化出来た。これにより、A2遺伝子、RNA複製酵素遺伝子を近縁ファージの遺伝子と置換して宿主域の決定、RNA複製酵素の鋳型特異性の決定に係る部位を調べることが出来る。また、次年度に予定していた外被遺伝子制御領域の改変を行なった。同制御領域を一般的なリボソーム結合配列に改変したことにより、外被遺伝子および同遺伝子制御領域のユニット化が可能になった。本年度はファージ遺伝子、発現制御領域のユニット化とcDNAゲノムの再構築を計画した。ユニット化のためには遺伝子領域、調節領域の両端にユニークな制限酵素認識配列を部位特異的変異作製法により導入するが、導入した塩基配列がファージ増殖を抑制しないように注意しなければならない。ファージRNAは感染細胞中で複雑な高次構造を形成して遺伝子発現を制御する。導入した塩基配列がRNA高次構造形成を阻害すると、ファージ増殖が抑制される。QβRNA高次構造の詳細が明らかでないので、制限酵素認識配列候補を導入する度に改変cDNAの感染性ファージ産生を確認し、野生型cDNAと同程度のファージ産生をもたらす配列を採用した。この作業をくり返し、現在までにA2遺伝子、RNA複製酵素遺伝子および外被(コート)遺伝子制御領域のユニット化を行なった。現時点ではゲノム全領域のユニット化は完了しておらず、cDNAゲノムの再構築はまだ行なっていない。一方、平成29年度に計画していた外被遺伝子制御領域の改変を本年度に前倒しした。Qβファージ外被遺伝子には一般的なリボソーム結合配列(SD配列)が無く、同遺伝子開始部位を含む上流域がリボソーム内部侵入配列(IRES)様のRNA二次構造を形成してリボソームを結合する。したがって、外被遺伝子および同遺伝子制御領域のユニット化に先立ちIRES様構造をSD配列で置き換えてこれら領域を独立させる必要があった。また、外被遺伝子および同遺伝子制御領域ユニット化のために同遺伝子上流に制限酵素(NcoI)認識配列を導入したところ、改変cDNAは28°Cで野生型cDNAの10倍以上の感染性ファージを産生した。外被遺伝子開始部位を含む上流域はRNA複製酵素結合領域でもあるので、NcoI認識配列の導入が28°Cでのリボソーム/RNA複製酵素の結合を促進したと推察した。ウイルスゲノムの人工構築を目指して、大腸菌RNAウイルスQβ(Qβファージ)のcDNAを機能ユニット(モジュール)に分割した。本研究では、cDNAはファージゲノムRNAをDNAに変換した相補DNAを指す。部位特異的変異作製法により遺伝子DNA両側にユニークな制限酵素切断配列を導入し、ゲノムが3個の遺伝子(A2、C+RT、R)ユニットと遺伝子発現調節領域を含む4個の非遺伝子(5'-UTR、A2/C、RT/R、3'-UTR)ユニットで構成される感染性cDNAプラスミドpQβ-TUを作製した。感染性cDNAプラスミドは、宿主菌中でファージを産生するプラスミドである。さらに、C遺伝子発現調節領域(A2/C)にリボソーム結合配列(SD配列)を導入し、且つ同領域に存在するRNA二次構造を壊した2種類の感染性cDNAプラスミドpQβ-TU12とpQβ-TU16を作製した。微生物ゲノムを出し入れ可能なモジュール構造に分割したのは本研究が最初であり、Qβゲノムの再構築および異なるウイルス間でのキメラゲノムの作製が可能になった。SD配列の導入によりC遺伝子発現が増加したが、ファージ産生が起きない場合があった。

A2/C領域はファージRNA複製酵素の結合部位と重複するが、リアルタイムPCR解析により、上記の場合でもファージRNA合成は抑制されないことがわかった。そして、A2/C領域のファージ粒子形成への関与、C遺伝子発現増加に伴なう溶菌遺伝子発現の促進が引き起こす早期溶菌の可能性など、新たなアイディアが生まれた。一方、pQβ-TUのA2遺伝子をSPファージA2遺伝子で置換したキメラcDNAを作製したが、ファージは産生されなかった。QβSP間ではA2タンパク質は互換性があるので、原因はQβゲノムRNA立体構造の変化によるA2遺伝子発現あるいはRNA複製の阻害によると推測された。大腸菌RNAファージQβの感染性cDNA(ゲノムRNAから作製したDNA)を機能ユニット(モジュール)化した。部位特異的変異作製法により遺伝子領域の両側にユニークな制限酵素切断配列を導入し、cDNAを3個の遺伝子ユニットと発現調節領域を含む4個の非遺伝子ユニットに分割した。さらに、外被遺伝子上流の調節領域にリボソーム結合配列を導入し、2種類の新たな感染性cDNAを作製した。これにより、ユニットどうしの結合によるcDNAゲノムの再構築およびキメラゲノムの作製が可能になった。また、外被遺伝子の発現調節領域はファージ粒子形成にも関与することが推察された。本研究課題遂行のため、今年度は前年度(平成28年度)に引き続いてゲノム領域のユニット化を継続し、全cDNA領域のユニット化を完成させる。その後、感染性cDNAゲノムの再構築を試みる。現在までのユニット化の過程では、改変cDNAは野生型cDNAと同程度の感染性ファージを産生するので、ゲノム構造改変に伴う不都合は起きていない。しかしながら、今後、制限酵素認識配列の導入に起因するファージ産生の大幅な低下が避けられない場合は、プラーク形成株(復帰変異株)の復帰変異部位を特定し、変異がユニット化を妨げないときはその変異をcDNA上に固定して作業を進める予定である。すでにユニット化を終えたA2遺伝子、RNA複製酵素遺伝子および外被遺伝子制御領域については、今年度の研究実施計画に基づいて研究を進める。(1)近縁ファージ間での遺伝子の相補性:ファージ間でA2遺伝子およびRNA複製酵素遺伝子を置換し、宿主域決定に関与する部位およびRNA複製酵素の鋳型特異性に関与する部位を探索する。(2)外被遺伝子制御領域の改変がファージ増殖に与える効果:同遺伝子制御領域のIRES様構造をSD配列に改変した効果を、外被遺伝子発現とファージRNA増殖の点から調べる。前者では外被遺伝子にレポーターlacZ(β-galactosidase)遺伝子を連結してその発現量を測定し、後者ではリアルタイムPCR法を用いてファージRNA合成量を測定する。分子遺伝学外被遺伝子制御領域を改変することにより感染性ファージの産生が著しく減少する現象が度々観察された。
オピオイド・オキシトシン受容体の遺伝型と養育態度が衝動性・情動欠如に与える影響

衝動性や情動欠如はパーソナリティー障害や様々な問題行動と関連し、これらの人格特徴は環境的要因と遺伝的要因およびそれらの相互作用により形成されると報告されている。一方、脳内オピオイド系と神経ペプチドのオキシトシンは、鎮痛、報酬、動機付け、社会認知、親子間の愛着関係など広範な生理機能の調節に関与している。これまでの基礎研究において、衝動性・情動欠如の形成にオピオイド受容体機能、オキシトシン機能、幼少時期の養育環境が関与することが示唆されているが、ヒトにおいて包括的に検討した研究はこれまでに行われていない。そこで、本研究では健常人を対象としてオピオイド受容体・オキシトシン受容体の遺伝多形と幼少時期の養育態度の相互作用が衝動性・情動欠如に与える影響について検討する。具体的には、精神的および身体的に健常であるとスクリーニングされた日本人約1,000例を対象に、TCI、NEO-PI-R、PBIを用いて対象の衝動性・情動欠如、幼少時期の養育態度を評価する。対象の末梢血液を採取し白血球より抽出したDNAを用い、オピオイド受容体遺伝多形、オキシトシン受容体遺伝多形をPCR法により同定する。得られた結果よりオピオイド受容体・オキシトシン受容体の遺伝多形と幼少時期の養育態度の相互作用が衝動性・情動欠如に与える影響について検討する。研究計画に基づき、平成30年度には対象の募集、衝動性・情動欠如の評価、養育環境の評価、静脈血採血・DNA抽出、OPRM1遺伝多形、オキシトシン受容体遺伝多形の同定を行った。本年度に得られた結果の解析を行い海外雑誌に投稿し、3編の論文として公表、1編が現在投稿中である。研究計画に基づき、平成28年度には対象の募集、衝動性・情動欠如の評価、養育環境の評価、静脈血採血・DNA抽出、資料収集・情報交換を行った。本年度に得られた結果の解析を行い海外雑誌に投稿して、2編の論文が受理された。平成28年度は研究計画に基づき、精神的および身体的に健常であるとスクリーニングされた日本人を対象に、TCI、NEO-PI-R、PBIを用いて対象の衝動性・情動欠如、幼少時期の養育態度を評価を行った。対象の末梢血液を採取し白血球よりDNAを抽出した。同時に資料収集と情報交換を行った。以上より当初の計画以上に進展している、と判断した。研究計画に基づき、平成29年度には対象の募集、衝動性・情動欠如の評価、養育環境の評価、静脈血採血・DNA抽出、資料収集・情報交換を行った。

平成28年度は研究計画に基づき、精神的および身体的に健常であるとスクリーニングされた日本人を対象に、TCI、NEO-PI-R、PBIを用いて対象の衝動性・情動欠如、幼少時期の養育態度を評価を行った。対象の末梢血液を採取し白血球よりDNAを抽出した。同時に資料収集と情報交換を行った。本年度に得られた結果の解析を行い海外雑誌に投稿して、2編の論文が受理された。以上より当初の計画以上に進展している、と判断した。衝動性や情動欠如はパーソナリティー障害や様々な問題行動と関連し、これらの人格特徴は環境的要因と遺伝的要因およびそれらの相互作用により形成されると報告されている。一方、脳内オピオイド系と神経ペプチドのオキシトシンは、鎮痛、報酬、動機付け、社会認知、親子間の愛着関係など広範な生理機能の調節に関与している。これまでの基礎研究において、衝動性・情動欠如の形成にオピオイド受容体機能、オキシトシン機能、幼少時期の養育環境が関与することが示唆されているが、ヒトにおいて包括的に検討した研究はこれまでに行われていない。そこで、本研究では健常人を対象としてオピオイド受容体・オキシトシン受容体の遺伝多形と幼少時期の養育態度の相互作用が衝動性・情動欠如に与える影響について検討する。具体的には、精神的および身体的に健常であるとスクリーニングされた日本人約1,000例を対象に、TCI、NEO-PI-R、PBIを用いて対象の衝動性・情動欠如、幼少時期の養育態度を評価する。対象の末梢血液を採取し白血球より抽出したDNAを用い、オピオイド受容体遺伝多形、オキシトシン受容体遺伝多形をPCR法により同定する。得られた結果よりオピオイド受容体・オキシトシン受容体の遺伝多形と幼少時期の養育態度の相互作用が衝動性・情動欠如に与える影響について検討する。研究計画に基づき、平成30年度には対象の募集、衝動性・情動欠如の評価、養育環境の評価、静脈血採血・DNA抽出、OPRM1遺伝多形、オキシトシン受容体遺伝多形の同定を行った。本年度に得られた結果の解析を行い海外雑誌に投稿し、3編の論文として公表、1編が現在投稿中である。平成28年度に引き続き、平成29年度も研究計画に基づいて対象の募集、衝動性・情動欠如の評価、養育環境の評価、静脈血採血・DNA抽出、資料収集・情報交換を行う予定である。なお、計学的に、男女に分け、TCI、NEO-PI-Rを従属変数とし、PBIの父親・母親における愛情と保護の計4要因、OPRM1遺伝型、年齢を独立変数とした重回帰分析を行う場合でeffect side=0.15、α=0.05、検出力60%以上に必要な症例数は約800例以上であるため、800例を最低募集人数として研究を推進していく予定である。平成29年度に引き続き、研究計画に基づいて対象の募集、衝動性・情動欠如の評価、養育環境の評価、静脈血採血・DNA抽出、OPRM1遺伝多形、オキシトシン受容体遺伝多形の同定を行う予定である。収集したデータを用いて、1.遺伝多形がPBIで評価した養育態度に与える影響、2.遺伝多形がTCI、NEO-PI-Rで評価した衝動性と情動欠如に与える影響、3.遺伝多形とPBIの相互作用がTCI、NEO-PI-Rに与える影響、について統計解析を行う予定である。
肝細胞癌に対する生体肝移植後の再発予防を目的とした革新的遺伝子治療の開発

免疫抑制下でもインターロイキン12(IL-12)/樹状細胞(DC)併用腫瘍内免疫療法によって、移植皮膚片の拒絶を起こすことなく、腫瘤形成した皮下接種腫瘍の増大抑制及び完全な肺、肝への転移抑制を認め、良好な抗腫瘍効果を示した。これらの抗腫瘍効果にはT細胞とNK細胞の両方が関与していた。特に、IL-12/DC併用腫瘍内免疫療法と腫瘍切除を組み合わせた術前補助免疫療法では、腫瘍切除と同時に肝細胞癌細胞を静脈内投与した場合でも、長期にわたる無再発期間と生存期間の著明な延長を認めた。生体肝移植では肝内に発生したHCCは摘出され、術中操作に伴う微小なHCC播種や既に肝外に存在する微小なHCCに対する抗腫瘍効果を追求する事が必要となる。そこで、より臨床に即したモデルを用いた。IL-12/DC併用療法、免疫抑制剤の開始は同様で、Day9に原発腫瘍を切除し、強制的に5.0×10^5個のMH134肝癌細胞を静脈内投与して、Day28における肺及び肝の微少転移に対する転移抑制効果を検討した。肺転移はIL-12単独群では3例中3例(100%)に、DC単独群では3例中2例(67%)に、コントロール群では3例中3例(100%)に認めた。肝転移はIL-12単独群では3例中3例(100%)に、DC単独群では3例中3例(100%)に、コントロール群では3例中3例(100%)に認めた。IL-12/DC併用群では、免疫抑制下においても、肺及び肝転移は認めなかった。この結果から、IL-12/DC併用療法はHCCに対する生体肝移植後の新しい治療法として期待できると考えられた。また、免疫抑制下におけるIL-12/DC併用療法では、どの細胞が主なeffecter細胞として働くのか、CD8陽性T細胞、CD4陽性T細胞、NK細胞に対する抗体除去実験を施行した。IL-12/DC併用療法下では、CD8陽性T細胞、CD4陽性T細胞、NK細胞のいずれを除去しても原発MH134腫瘍の増殖抑制が無効となり、肺及び肝転移に対する抗転移効果が消失した。肺及び肝転移共に、CD8陽性T細胞除去群、CD4陽性T細胞除去群、NK細胞除去群の全てで3例中3例(100%)に認められた。この所見から、IL-12遺伝子治療を併用した腫瘍内DC投与療法では、T細胞の反応が増強され、IL-12/DC併用免疫療法による局所での腫瘍増殖抑制、抗転移効果はT細胞及びNK細胞の反応の相互作用に依存していると考えられた。(791字)肝移植は肝細胞癌(hepatocellular carcinoma : HCC)に対する効果的な治療として認められている。しかし、再発は致死的合併症の一つである。本研究の目的は、免疫抑制下でのHCCの効果的な治療を目的としたInterleukin (IL)-12遺伝子治療と樹状細胞(dendritic cells : DC)療法を用いたIntratumoral immunotherapy(腫瘍内免疫療法)の効果を明らかにすることである。2011年度には免疫抑制下でもIL-12/DC併用腫瘍内免疫療法が、移植皮膚片の拒絶を起こすことなく、腫瘤形成した皮下接種腫瘍の増大抑制及び完全な肺、肝への転移抑制を認め、良好な抗腫瘍効果を示すこと、これらの抗腫瘍効果にはT細胞とNatural killer (NK)細胞の両方が関与していたことを明らかとした。2012年度の研究目的は、IL-12/DC併用腫瘍内免疫療法と腫瘍切除を組み合わせたNeoadjuvant immunotherapy(術前補助免疫療法)の効果を明らかにすることであった。同治療を行った場合、腫瘍切除と同時にHCC細胞を静脈内投与した場合でも、長期にわたる無再発期間と生存期間の著明な延長を認めた。一方、IL-12単独治療、DC単独治療やコントロール群のマウスでは全例で肺、肝転移を認めた。これらの結果より、IL-12遺伝子治療及びDC療法を用いたIntratumoral neoadjuvantimmunotherapy(腫瘍内術前補助免疫療法)はHCCに対する肝移植後のHCC再発の制御に効果的な治療法になり得る可能性があり、また、一般的な癌治療として応用可能であるという結論に至った。以上の結果をまとめ、HCCに関する治療、肝移植に関する知見を含めた幅広い発表を主に論文、学会等にて行らた。(770字)
高速固気混相流の直接数値解析による乱流混合／騒音発生のプロセスの解明

以下の研究を実施した.「単一固体/液滴周りの高マッハ数流れのDNSデータベース構築」に関しては,回転単一球周りの流れ場の高精度直接数値解析を実施し,高Mach数・低Re数の条件下において,Mach数・Re数・無次元回転数等の諸条件が流れ場や抗力係数,揚力係数にどのような影響を与えるかを明らかにした.特に,球の回転による揚力はMach数が大きい条件では非圧縮性流れと比較して著しく抑制されることがわかった.これは,非圧縮性流れでは回転の影響で負圧が生じる領域近傍において,圧縮性流れでは衝撃波が形成されることで負圧領域の形成が抑制されることなどに起因する.粒子の回転による揚力は混相流中の粒子の挙動を考える上で重要なパラメータであり,例えば粒子クラスタが形成された際にクラスタ外縁の粒子が回転し,その回転による揚力で粒子クラスタは分散する.また,回転により生じる付着衝撃波の影響で球表面での摩擦応力分布が大きく変化し,回転を止める方向のモーメントは非圧縮性流れの場合よりも大きいことを明らかにし,圧縮性混相流のモデル構築に向けて重要な知見を得た.「複数の球周りのDNS解析」に関しては,これまでに開発してきた直交格子法を基にした圧縮性流体解析ソルバの並列性能評価と3次元圧縮性大規模固気混相流問題の解析を進め,その結果,解析ソルバの性能評価においては大規模解析が実現可能な性能結果となり,単一球周りのDNS解析で得られた知見を基にクラスタ現象の解明を進めており,現象把握に関する知見も徐々に取得できつつある.研究の中核となる「単一固体/液滴周りの高マッハ数流れのDNSデータベース構築」に関しては,解析が順調に進んでおり,様々な知見が得られている.また,「複数の球周りのDNS解析」に関しては,コード開発および高速化がほぼ終わり,解析により様々な知見が得られ始めており,今後は,各種条件での解析を進めることで現象の把握をさらに行っていく予定である.さらに,固気混相流のLESモデルの構築,ソルバーの開発に関しては,実問題の適用において予想される計算の破綻が起きない方法を検討しており,次年度以降にスムーズに実施可能であると考えている.単一固体/液滴周りの高マッハ数流れのDNSデータベース構築を引き続き行い,マクロモデルの開発に役立てるため,抵抗モデルの構築につながる知見を得る.また,粒子の運動方程式を加味した複数固体/液滴周りの高マッハ数流れのDNSの実施に関しては,計算コードの基礎部分は既に完成していることから,解析を進め,現象の把握を行う.また,データ量が非常に膨大となるため,あらかじめ見るべき物理量(衝撃波の構造や,乱流スペクトル,せん断層の発達率など)について円滑な解析を行うことを計画している.マクロモデルの構築と実用問題への適用に関しては,上記の粒子の運動方程式を加味した複数固体/液滴周りの高マッハ数流れのDNSの結果を基に,マクロモデルである粒子抵抗モデルとLESモデルを再構築する.本研究グループが有する多重極展開などの技術を活用することで,高い精度のモデル構築に努める.さらに,構築した粒子抵抗モデルとLESモデルを,工学的実用問題である固体ロケット噴流の流れに適用する.解析結果から粒子混入が高マッハ数流れ場及び音響波の発生と伝播に与える影響を検討するとともに,本研究で提案した手法の予測精度を検証する.本年度は以下の研究を実施した.1)単一球周りのDNS解析の実施2)複数球周り流れ解析のための埋め込み境界法ベース圧縮性流体ソルバーの開発とDNS解析の実施1)に関しては,単一球周りの流れ場の高精度解析を実施し,高Mach数・低Re数の条件下において,Mach数・Re数・温度比等の諸条件が流れ場や抗力係数,Nusselt数にどのような影響を与えるかを明らかにした.特に,球と流れ場との温度比について詳細な検討を行い,温度比が小さい条件下では,非定常的な渦の放出が促進されるのに対して,温度比が大きな条件下では非定常的な渦の放出が抑制されることが確認された.また,温度比の増加とともに抗力係数が増大することをも明らかとなった.また,各条件の違いが渦構造の生成に与える影響についても明らかにし,体積力モデル/SGSモデル構築のために必要な様々なデータを獲得し,物理現象に基づいたモデル化の可能性を見出すことができた.2)に関しては,1)の結果との比較により,単一球の抗力係数に関して十分な解析精度があることを確認した上で,コードの高精度化,高速化を行い,超音速流中を複数球が飛び交うような流れ場を非常に低コストに計算することが可能なコードを開発した.今後は,超大規模計算の実施, LESモデル構築のための直接解析の実施を行い,更なる成果に繋げる予定である.さらに,今後は,開発したツールを利用することで,圧縮性固気混相流ソルバー用の体積力モデル,SGS modelを開発しLES解析を実現することを目指していく予定である.本研究の中核となる「単一固体/液滴周りの高マッハ数流れのDNSデータベース構築」に関しては,解析が順調に進んでおり様々な知見が得られ始めたところである.また複数の球周りのDNS解析に関してはコード開発および高速化がほぼ終わり,今後,各種の条件で解析を進めることで現象の把握を進める予定である.最後に,固気混相流のLESモデルの構築,ソルバー開発に関しては,実問題適用時に問題となる計算の破綻がおきない方法を検討しており,次年度以降スムーズに実施することができると考えられる.以下の研究を実施した.

「単一固体/液滴周りの高マッハ数流れのDNSデータベース構築」に関しては,回転単一球周りの流れ場の高精度直接数値解析を実施し,高Mach数・低Re数の条件下において,Mach数・Re数・無次元回転数等の諸条件が流れ場や抗力係数,揚力係数にどのような影響を与えるかを明らかにした.特に,球の回転による揚力はMach数が大きい条件では非圧縮性流れと比較して著しく抑制されることがわかった.これは,非圧縮性流れでは回転の影響で負圧が生じる領域近傍において,圧縮性流れでは衝撃波が形成されることで負圧領域の形成が抑制されることなどに起因する.粒子の回転による揚力は混相流中の粒子の挙動を考える上で重要なパラメータであり,例えば粒子クラスタが形成された際にクラスタ外縁の粒子が回転し,その回転による揚力で粒子クラスタは分散する.また,回転により生じる付着衝撃波の影響で球表面での摩擦応力分布が大きく変化し,回転を止める方向のモーメントは非圧縮性流れの場合よりも大きいことを明らかにし,圧縮性混相流のモデル構築に向けて重要な知見を得た.「複数の球周りのDNS解析」に関しては,これまでに開発してきた直交格子法を基にした圧縮性流体解析ソルバの並列性能評価と3次元圧縮性大規模固気混相流問題の解析を進め,その結果,解析ソルバの性能評価においては大規模解析が実現可能な性能結果となり,単一球周りのDNS解析で得られた知見を基にクラスタ現象の解明を進めており,現象把握に関する知見も徐々に取得できつつある.研究の中核となる「単一固体/液滴周りの高マッハ数流れのDNSデータベース構築」に関しては,解析が順調に進んでおり,様々な知見が得られている.
マイコバクテリウム属細菌が有するユニークな酸化酵素の機能解析と応用

放線菌由来の二核鉄型酸化酵素はユニークかつ有用な反応を触媒するが、異種の細胞内で発現させることが困難であり、このことが応用を妨げている原因の1つになっている。本研究では、Mycobacterum属細菌由来二核鉄型酸化酵素の異種発現に成功した。当該酸化酵素の活性発現にはタンパク質の立体構造形成を補助するシャペロニンタンパク質が不可欠なことを明らかにした。本研究における新規シャペロニンタンパク質の発見は、本ファミリー酸化酵素の異種発現や応用に大きなブレークスルーをもたらす可能性を秘めていると考えられる。Mycobacterium goodii 12523株およびM. smegmatis mc2155株は、フェノールのパラ位を選択的に酸化してヒドロキノンに変換するユニークかつ有用な活性を有している。筆者はこれまでに、当該活性が二核鉄型酸化酵素遺伝子クラスターmimABCDにコードされていることを同定している。MimABCD等の放線菌由来の当該ファミリー酸化酵素は工業的に有用な反応を触媒するため生体触媒への応用に関心が寄せられているが、異種の細胞内で活性を発現させることが困難であり、このことが応用を妨げている原因の1つになっている。昨年度までの研究において、MimAの可溶化発現にはシャペロニンタンパク質MimGが必要なことを明らかにし、MimGを共発現させることによりMimABCDの活性を放線菌Rhodococcus opacus内で発現させることに成功している。本年度は、属種の大きく異なる大腸菌を宿主とした異種発現に挑戦した。大腸菌発現のメリットとして、菌体の増殖速度が高いことや高発現システムが整っていることが挙げられ、生体触媒への応用に向けて高いポテンシャルを有している。mimABCDおよびmimGを各遺伝子に分割して3種のベクターに連結し、大腸菌に導入した。その結果、MimGとの共発現によりMimAタンパク質が可溶化し、大腸菌細胞内においても活性型のMimABCD複合体を再構成することができた。また、大腸菌細胞内においてはカップリングプロテインMimDの発現量が著しく低かったが、mimDのコドンを大腸菌用に最適化することにより発現量は改善され、フェノールのヒドロキノンへの変換活性も11倍に向上した。さらに、本組換え大腸菌を利用してMimABCDのアセトン代謝における機能を解析したところ、MimABCDはアセトンをアセトールに変換する活性を有していることが強く示唆された。Mycobacterium goodii 12523株およびMycobacterium smegmatis mc2155株は、フェノールのパラ位を位置選択的に酸化してヒドロキノンに変換するユニークかつ有用な活性を有している。筆者はこれまでに、当該活性をコードする新規な酸化酵素遺伝子mimABCDを同定することに成功している。MimABCDは活性中心に二核鉄を有する酸化酵素で、とくにMimABCD等の放線菌由来の当該ファミリー酸化酵素は興味深い反応を触媒するため生体触媒への応用に期待が寄せられている。しかしながら、異種の細胞内で活性を発現させることが困難であり、このことが応用を妨げている原因の1つになっている。本研究では、MimABCDの異種発現をRhodococcus属細菌を宿主として試みた。まず、mimABCD遺伝子をRhodococcus属細菌に導入したが、酸化活性を発現させることはできなかった。SDS-PAGE解析を行ったところ、MimAタンパク質が不溶化していることを確認した。そこで、他に必要な因子の存在を考慮してM. smegmatis mc2155株のゲノム配列を精査し、mimABCDの下流に存在する遺伝子がシャペロニン様タンパク質をコードしていることを見出した。本遺伝子(mimGと命名)をクローニング後、mimABCDと共にRhodococcus属細菌に導入した。その結果、MimGの共発現によりMimAが可溶化し、フェノールに対する酸化活性を発現させることに成功した。本研究は、二核鉄型酸化酵素に特異的なシャペロニン様タンパク質の共発現により放線菌由来酸化酵素の異種発現に成功した初めての例であり、他の二核鉄型酸化酵素の異種発現にもブレークスルーをもたらす可能性を秘めているため重要である。平成24年度は、「MimGの機能解析とMimABCDの異種発現」の実施を計画していた。筆者は、MimGタンパク質の機能をSDS-PAGEおよびウエスタンブロッティングにより詳細に解析し、MimGはMimAタンパク質の可溶化発現、つまり立体構造形成に寄与していることを明らかにした。さらに、mimG遺伝子とmimABCD遺伝子を導入したRhodococcus opacus B-4株の培養方法等を検討し、MimABCDの効率的な発現条件を確立した。その結果、組換え株のヒドロキノン合成活性は最大で0.80μmol/g-dry cell weight/minに達した。以上より、当初の計画を達成できており、おおむね順調に進展している。

申請書の計画に沿って、「mimABCDのアセトン代謝における機能の解析」と「mimABCDの生体触媒への応用」を実施する。次年度使用額はわずかであり(3,476円)、次年度の物品費(消耗品費)として有効に活用する。
長期追跡コホート研究の保存白血球を用いたDNAのメチル化解析

エピジェネティクスの機構の1つにDNAのメチル化があり、DNAメチル化の変化による遺伝子発現調節が生活習慣病の発症に重要な役割を担うと考えられている。我々は白血球LINE-1 DNAメチル化率の測定法を確立し、住民健診受診者を対象としてメタボリックシンドロームとの関連、さらに縦断調査により死亡に及ぼす影響の評価を行った。その結果、白血球LINE-1 DNAの低メチル化はメタボリックシンドローム及び脂質異常と有意な関連を認めた。さらに白血球LINE-1 DNAの高メチル化群では癌死亡リスクが高かった。LINE-1DNAメチル化率の変化がその後発生する癌死亡に影響を及ぼすことが推察された。癌や心疾患など生活習慣病は遺伝的要因と環境要因が互いに影響することにより発症する。その関連に重要な役割を果たすとして注目されているのが、遺伝子発現を調節する仕組み「エピジェネティクス」である。代表的なエピジェネティクスの機構の1つにDNAのメチル化がある。DNAメチル化は、DNAを構成する塩基であるシトシンの5位炭素原子へのメチル基の付加反応であり、メチル化の起こりやすい部位は,主に遺伝子のプロモーター部分のCpG islandであり、この部位のメチル化が起こると転写が阻害され、遺伝子は不活性となる。このようなDNA配列の変化を伴わず、後天的な修飾により遺伝子発現が制御される仕組みであるDNAのメチル化が疾患の発症に重要な役割を果たすことが様々な研究から示唆されている。白血球DNAにメチル化異常は、様々な組織(細胞)で起こっているメチル化異常を反映している可能性が推察される。しかし生活習慣等によるDNAメチル化の変化による遺伝子発現調節が生活習慣病の発症に重要な役割を担うと考えられているが、疫学分野おいて一般住民を対象としたエピジェネティクスの観点からの科学的エビデンスは未だ乏しい状況にある。そこで、平成27年度の健診受診者及び、長期保存している検診受診者のリンパ球を用いてDNAメチル化の解析を行い、白血球DNAメチル化について生活習慣病の発症との関連およびバイオマーカーとしての意義を明らかにすることを目的として研究を進めている。本研究で得られる知見は、疾病発生のメカニズム解明・予防対策の樹立に寄与するとともに、今後行われる長期的な縦断研究を行う上で有用であると考える。癌や心疾患などの生活習慣病の発症は遺伝的要因と環境要因が複雑に関係しあうことにより発症する。その関連に重要な役割を果たす要因として近年注目されているのが、遺伝子発現を調節する仕組み「エピジェネティクス」である。様々なエピジェネティクスの機構の中で、代表的なエピジェネティクス機構の1つがDNAメチル化である。DNAメチル化は、DNAを構成する塩基であるシトシンの5位炭素原子へのメチル化の付加反応であり、メチル化の起こりやすい部位は、主に遺伝子プロモーター部分のCpG islandである。この部位にメチル化が起こると転写が阻害されるため、遺伝子は不活性となる。この遺伝子発現制御の仕組みが疾患発症に重要な役割を果たすことが、様々な研究から示唆されている。しかし、一般住民を対象とした疫学的エビデンスは乏しい状況にある。我々は、昭和57年から一般住民を対象として長期追跡コホート研究を行っており、平成27年度の健診受診者及び長期保存しているリンパ球を用いてDNAメチル化の解析を行い、白血球DNAメチル化について生活習慣病の発症との関連およびバイオマーカーとしての意義を明らかにすることを目的として研究を進めている。平成27年度は白血球DNAメチル化の測定を中心に行い、データベースの作成・解析へと進めている段階である。本研究で得られる知見は、疾病発生のメカニズム解明に寄与するとともに、新たな視点での疾病予防対策の樹立に貢献する事が期待できるとともに、今後行われる長期的な縦断研究を行う上で有用であると考える。我々はこれまでに平成26年度に白血球DNAメチル化の測定方法を確立し、平成27年度はその測定法を用いて一般住民の白血球DNAを用いて解析を行った。そのために平成27年度は健診受診者のゲノム採取および生活習慣調査を行うためのアンケートを行うための準備を行い、実施することができた。白血球メチル化レベルの測定もいくつかの者は測定を終了することができた。白血球DNAメチル化レベルと健診データおよび生活習慣データを結合し、データベースを作成、解析をすすめる段階にきている。癌や循環器疾患などの生活習慣病は遺伝的要因と環境要因が互いに影響することにより発症する。その関連に重要な役割を果たすとして注目されているのが、遺伝子発現を調節する仕組みエピジェネティクスである。DNAメチル化は主に遺伝子のプロモーター部分のCpG islandであり、この部位のメチル化レベルが高いと転写が阻害され、遺伝子は不活性となる。白血球DNAのメチル化異常は、様々な組織(細胞)で生じているメチル化異常を反映している可能性が示唆されているが、疫学分野において一般住民を対象としたエピジェネティクスの観点からの科学的エビデンスはいまだ乏しい状況にある。ゲノム全体のメチル化レベルを知る有用なマーカーであるlong interspersed nuclearelement-1 (LINE-1)に着目し、平成23年および平成2627年の住民健診受診者を対象として白血球DNAのLINE-1DNAメチル化レベルの測定を行い、白血球DNAメチル化レベルデータとベースライン時の健診・アンケート調査から得られたデータをまとめ、データベースの作成を行い、横断的・縦断的な解析を進めている。横断的な解析により、メタボリックシンドローム、高脂血症及び高血糖と白血球

DNAメチル化レベルと関連を認めた。高血糖者ではLINE-1DNAのメチル化レベルが有意に低く、高脂血症及びメタボリックシンドロームの者ではLINE-1DNAのメチル化レベルが有意に高かった。また縦断的な調査により、ベースライン時のLINE-1DNAのメチル化レベルの高値者はがん死亡率が有意に高い結果を得た。今後はLINE-1DNAメチル化率と各死因との関連及びLINE-1DNAメチル化レベルの経年変化についてさらに解析を進めていく。エピジェネティクスの機構の1つにDNAのメチル化があり、DNAメチル化の変化による遺伝子発現調節が生活習慣病の発症に重要な役割を担うと考えられている。我々は白血球LINE-1 DNAメチル化率の測定法を確立し、住民健診受診者を対象としてメタボリックシンドロームとの関連、さらに縦断調査により死亡に及ぼす影響の評価を行った。その結果、白血球LINE-1 DNAの低メチル化はメタボリックシンドローム及び脂質異常と有意な関連を認めた。さらに白血球LINE-1 DNAの高メチル化群では癌死亡リスクが高かった。LINE-1DNAメチル化率の変化がその後発生する癌死亡に影響を及ぼすことが推察された。我々が長期にわたり追跡調査を行っている住民検診の平成23年に受診した人を対象者と平成27年度の健診受診者を対象として本研究を行う。平成23年の住民検診受診者全員は、検診で採血した血液について、検査終了後、血清やDNAを凍結保存して、将来癌や脳卒中のような成人病の病因解明や予防対策のために役立てるためにご協力をお願いする書面によるインフォームドコンセントを行っており、同意が得られた者のみを解析対象者とした。平成27年度の健診受診者についてはゲノム採取のための準備(人権の保護及び法令等の遵守への対応)を進めた。また、メチル化解析に向けての測定法の確立もおおむね順調に進展している。測定をしていない白血球DNAメチル化レベルの測定を完了し、白血球DNAメチル化レベルと健診データ、生活習慣等のアンケートデータおよび死亡データをまとめ、データベースの作成を行う。さらに平成28年度の健診にも参画し、平成27年度同様に血液を採取し、DNAメチル化レベルの測定を行う。作成したデータベースを用いて解析を行い、得られた知見は関連学会等で報告、論文作成を行い公表する。28年度が最終年度であるため、記入しない。疫学対象者から得た保存白血球を用いて、DNAメチル化レベルの測定を行う。ベースライン時のアンケート調査から得られた生活習慣や検診時の肥満度、血液成分値および血圧などをまとめ、データベースの作成を行う。作成したデータベースを元に、白血球DNAメチル化レベルと生活習慣、肥満、メタボリックシンドローム等との関連について横断調査を行う。
日本の尊厳概念史・影響作用史の構築に関する総合的研究－－欧米との比較を踏まえて

日本哲学会と金沢大学の第1回鈴木大拙・西田幾多郎記念金沢大学国際賞の記念講演会に参加した。日本哲学会に研究協力者2名も同行してもらい、研究発表などを行ってもらうと同時に、研究分担者の一部の先生にも紹介してこの研究プロジェクトが円滑に運営できるように指導した。なお、研究分担者の一人であるギブソン松井佳子氏の参加する主体概念の転換に関するワークショップから多くの示唆を得ることができて有益であった。この論点を研究プロジェクトにも組み込むことは有効であると思われた。また、金沢大学国際賞でのロベール氏の講演からも日本哲学が潜在的にもつ可能性を読み取ることができた。それはやはり主体概念に関わる論点であり、日本の尊厳概念史を考える上で、特に「生命の尊厳」を考察する上で重要な論点になりうると確信できた。「生命の尊厳」に関連したこれらの論点は科学研究費基盤研究(S)にとっても重要な意味をもつので、その研究プロジェクトの中でも生かしていきたいと考えている。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。