hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
試作生薬成分配合洗口液の評価に関する研究

義歯性口内炎の予防と治療に義歯洗浄剤を使用した化学的デンチャープラークコントロールが用いられているが,口腔内の清掃も重要な役割を果たしている可能性も指摘されている.しかし義歯装着者の中には口腔内の清掃に介護者を必要とする場合もあり,より簡便なプラークコントロール補助手段として洗口液に着目し,為害性の少ない生薬成分を配合した洗口液を試作,効果の検討を行うことを目的とした.本研究では組成の異なる2種類の市販洗口液に抗真菌活性を持つ生薬成分塩酸ベルベリンを各種濃度で添加し,義歯性口内炎の起炎菌として重要な役割を果たしているカンジダ属に対する抗真菌活性試験を行った.その結果,有効と判断されたものについて,真菌に対する効果と歯科材料の物性に与える影響を検討し,以下の結果を得た.1.2種類の洗口液のうち,Aでは低希釈倍率で高い発育阻害活性を示し,希釈倍率が高くなると活性が急激に低下するのに対し,Bは希釈倍率が高い場合でも発育阻害活性を示した.2.短時間接触において殺真菌作用はAがBより強く,ポストアンチフンガルアクティビティ試験において数種類の試作洗口液が0.5時間以上真菌の発育を遅延させた.3.歯科材料の物性試験において,試作洗口液浸漬試料は蒸留水浸漬試料に対して色差・表面粗さともに有意な差を認めなかった.これらのことから,口腔内常在菌でもあるカンジダ属を過剰に増加させない状態でコントロールしていくために,真菌の発育阻害・発育遅延を起こさせ,歯科材料にも影響を与えない生薬成分を配合した試作洗口液の使用は,プラークコントロールの一助となる可能性が示唆される.義歯性口内炎の予防と治療に義歯洗浄剤を使用した化学的デンチャープラークコントロールが用いられているが,口腔内の清掃も重要な役割を果たしている可能性も指摘されている.しかし義歯装着者の中には口腔内の清掃に介護者を必要とする場合もあり,より簡便なプラークコントロール補助手段として洗口液に着目し,為害性の少ない生薬成分を配合した洗口液を試作,効果の検討を行うことを目的とした.本研究では組成の異なる2種類の市販洗口液に抗真菌活性を持つ生薬成分塩酸ベルベリンを各種濃度で添加し,義歯性口内炎の起炎菌として重要な役割を果たしているカンジダ属に対する抗真菌活性試験を行った.その結果,有効と判断されたものについて,真菌に対する効果と歯科材料の物性に与える影響を検討し,以下の結果を得た.1.2種類の洗口液のうち,Aでは低希釈倍率で高い発育阻害活性を示し,希釈倍率が高くなると活性が急激に低下するのに対し,Bは希釈倍率が高い場合でも発育阻害活性を示した.2.短時間接触において殺真菌作用はAがBより強く,ポストアンチフンガルアクティビティ試験において数種類の試作洗口液が0.5時間以上真菌の発育を遅延させた.3.歯科材料の物性試験において,試作洗口液浸漬試料は蒸留水浸漬試料に対して色差・表面粗さともに有意な差を認めなかった.これらのことから,口腔内常在菌でもあるカンジダ属を過剰に増加させない状態でコントロールしていくために,真菌の発育阻害・発育遅延を起こさせ,歯科材料にも影響を与えない生薬成分を配合した試作洗口液の使用は,プラークコントロールの一助となる可能性が示唆される.義歯性口内炎の予防と治療に,義歯洗浄剤を使用した化学的デンチャープラークコントロールが用いられている。他方,口腔内の清掃がプラークコントロールにおいて,義歯の洗浄と同様重要な役割を果たしている可能性も指摘されている。しかし義歯装着者の中には口腔内の清掃に介護者を必要とする場合もあり,より簡便なプラークコントロール補助手段が必要である。その一つとして洗口液の利用が挙げられる。本研究では組成の違う2種類の市販の洗口液に抗真菌活性を持つ塩酸ベルベリンを各種濃度で添加し,義歯性口内炎の起炎菌として重要な役割を果たしているカンジダ属に対する抗真菌活性,発育阻害希釈倍率,短時間接触による殺真菌効果の3点について検討を行った。その結果,以下の知見を得た。1.拡散法を用いた抗真菌活性の検討において,可溶化剤にポリオキシエチレン硬化ヒマシ油を用いた洗口液(以下A)では,カンジダアルビカンス,カンジダトロピカリス,カンジダグラブラタ3菌株全ウリル硫酸ナトリウムを用いた洗口液(以下B)ではそれぞれ250,63,125μg/mlで阻止円を形成した。2.液体培地希釈法を用いた発育阻害希釈倍率の検討において,Aでは希釈倍率が低い場合により強く発育阻害効果を示し希釈倍率が高くなると急激にその効果が低下し,Bは希釈倍率が高い場合でも発育阻害効果を発揮し続けた。3.短時間接触による殺真菌効果の検討において,殺真菌作用はAが強く,また,カンジダトロピカリス,カンジダアルビカンス,カンジダグラプラタの順に作用が強かった。義歯性口内炎の予防のための手段として,生薬に着目し,義歯性口内炎患者から高頻度に検出されるカンジダ属に対して有効な生薬成分塩酸ベルベリンを添加した洗口液を試作,有効な濃度を決定した.この結果に基づき,試作洗口液の中で有効と判断されたものについて,ポストアンチフンガルアクティビティ試験と,歯科材料の物性に対する影響を調べるための色調安定性試験と表面粗さ測定を行った.

これらの実験から以下の結果が得られた.1.ポストアンチフンガルアクティビティ試験において,1分間の作用時間で数種類の洗口液が0.5時間以上の真菌発育遅延を起こした.2.レジンプレートと硬質レジン歯2種に対する色調安定性試験において,試作洗口液浸漬試料の色差は蒸留水浸漬試料の色差に対して有意な差を認めなかった.3.レジンプレートの表面粗さ測定の結果,試作洗口液浸漬試料の中心線平均粗さは空気中放置試料と蒸留水浸漬試料に対して有意な差を認めなかった.真菌に短時間作用させ取り除いた後の真菌発育遅延は,洗口液の評価として重要な指標の一つと考えられる.このポストアンチフンガルアクティビティ試験の結果,数種類の試作洗口液が真菌の発育を0.5時間以上遅延させ,さらに歯科材料の物性に影響を与えなかったことから,生薬成分を添加した試作洗口液が義歯性口内炎予防手段の一つとしてデンチャープラークコントロールに役立つ可能性が示唆された.
ショウジョウバエゲノムの改変による表現型情報の統合的解析

ゲノムの全遺伝子の3分の2は、機能を破壊しても顕著な表現型の変化を伴わないものと推定されている。類似の機能をもつ他の遺伝子や他の経路によって、補完されていると考えられる。しかし、その実態はほとんど解明されていない。遺伝子の多彩な機能をを正確に解明し、新規の遺伝子や既知遺伝子の新規の機能を発見するためには、表現型測定の精度を上げることが肝要である。そこで、本研究課題では、ショウジョウバエの翅画像データを使った形態計測技術、および胚発生過程のライブイメージングによる4次元形態計測の基盤的技術の開発を行った。いずれにおいても、計算機を用いた情報科学的アプローチが不可欠であり、本研究領域の班員や他のグループと連携して研究を推進した。また、新規の機能をもつ遺伝子をスクリーニングするための変異体リソースとして、遺伝子強制発現系統(GS系統)および遺伝子ノックダウン系統(RNAi系統)コレクションの情報を整備するとともに、それらを利用して、発生、ストレス感受性、寿命等に関わる新規の遺伝子を同定し、それらの機能を詳細に解析した。ショウジョウバエのゲノムには約14,000の遺伝子が存在する。各遺伝子について変異体を作製して、その表現型を解析することにより、それらの機能に関する情報を得ることができる。本研究では、1)ゲノムの遺伝子機能を高感度にとらえることを目的として、計算機を使って変異体の表現型を評価する解析法を開発する。また、2)機能的重複の実態を解明するためのモデルとして、類似の機能をもつと推定されるファミリー遺伝子のいくつかに焦点をあて、それらの機能的相同性、異質性を明らかにする。ショウジョウバエのゲノム情報がアップデートされたため、各GS系統におけるマップ情報の大幅な見直しを行った。同時に、ベクター挿入サイトを決定するために用いたベクター隣接配列を見直し、信頼性が高いものだけを使ってマッピングを行った。ベクター隣接部位のゲノム配列を決定するために、Ligation-mediated-PCR法を確立した。この方法では、挿入系統のゲノムDNAを抽出し、制限酵素で切断したあと、ベクター配列を含む断片を特異的に増幅する。従来の方法に比べて効率よく、隣接配列がとれるようになった。マッピングを試みた約16,000系統のうち、約11,000系統について、高い信頼性で挿入位置を決定することができた。個々の系統の情報は、ベクター隣接配列、GAL4存在下で強制発現される遺伝子(センスあるいはアンチセンス)、および表現型情報とともに、DGSPのデータベース(http://gsdb.biol.metro-u.ac.jp/%7Edclust/)に公開した。これらのGS系統をsd-GAL4系統に交配して、GSベクター下流の遺伝子を強制発現させたときの翅画像を取得した。現在までに、約3,000系統について、交配が終了し、系統あたり、雌雄それぞれ10個体分の翅画像を取得した。そのうち、約2,800系統分については、共同研究者の森下研で作製したDrosophila Phenome Serverに登録し、翅の形態に関するパラメータを取得した。研究代表者は、強制発現ベクター挿入系統を用いて,翅原基で強制発現させ、その表現型を画像データとして収集した。画像データの解析では、支脈の長さ以外に、翅の細毛数をカウントする方法を確立した。翅の大きさをあらわす指標として、前後軸方向、遠近軸方向、およびそれらの比をとり、約2,000系統の中から,トップ50を選び出し、それぞれに系統において強制発現された遺伝子をゲノムの挿入位置から推定した。大きくする方向に働いた遺伝子の中には,体の大きさに影響を与えることがすでにわかっているインスリンシグナル経路のコンポネントが含まれていた。分担者の林はGene Searchスクリーンによって得られた上皮形成に関わる因子IKKεの解析を行った。その結果IKKεがカスパーゼシグナリングを通じて細胞骨格系を制御し、細胞の形態形成と分化を制御する新規なメカニズムを担う事が明らかになった。また新規核内因子ChnがEGFRとNotchの下流において働く転写抑制因子であること、Chnが哺乳動物で知られていた神経分化抑制分子NRSFに類似な働きを持つことを示した。分担者の上田は、約7,000遺伝子に対応するRNAi系統を樹立した(13,600系統)。このうち、4,700遺伝子について(sd-GAL4で)翅の形態変化を調べたところ、1,460遺伝子(31%)では致死や極度の形態異常を示し、本研究における画像解析に適しないことが判明した。

現在、GS系統を用いた解析から翅の大きさに異常を示すものが約500系統存在する。これらの遺伝子に対応するRNAi系統を選択し、ノックダウン表現型のデータを取得する作業を開始した。代表者(相垣)と分担者(上田)は,GS系統,およびRNAi系統を用いて,遺伝子強制発現,およびノックダウンしたときの翅画像の収集を行った。画像データを解析し,各種パラメータを取得した。翅の大きさは細胞の増殖や成長と密接な関連にあり,少なくとも,大きさに影響を与える遺伝子の中には,インスリン/IGFシグナル系に関わる遺伝子が含まれていた。インスリンシグナルは,組織の大きさを制御するとともに,ストレス耐性や寿命とも関わっていることが知られている。そこで,遺伝子強制発現による酸化ストレス耐性の表現型と翅の大きさとの関連を解析した。比較的安定したストレス耐性を示すものとして,約20個の遺伝子を同定した。これらについて,翅の大きさにどのように影響があるかを調べたところ,95%の系統において翅を小さくする方向に作用しており,体の大きさとの逆相関が認められた。原因遺伝子がインスリン経路といかなる関係にあるかは不明であるが,少なくともこれらの系統では,体の大きさを小さくするとともに,ストレス耐性を強化したと考えられる。分担者(林)は,ライブイメージング技術を駆使して,ショウジョウバエ胚において外胚葉と胚体外細胞層(amnioserosa)の組織間相互作用を解析した。細胞聞マトリクスレセプターインテグリンの変異体におけるタイムラプス解析から,変異体はいったん深刻な上皮の開裂が起きるがその後損傷部位の修復反応が活性化されて最終的な表現型は比較的軽度に回復することがわかった。1)GS系統、およびRNAi系統を用いて、遺伝子強制発現、およびノックダウンしたときの翅画像の収集を行った。画像解析ソフトウェアを使って、翅脈の交点間の距離を測定し、各種パラメータを取得した。約3,000のGS系統については、酸化ストレスに対する抵抗性について測定を行い、それらの表現型と翅の大きさとの関連を解析した。比較的安定したストレス抵抗性を示すものとして、約20個の遺伝子を同定した。これらについて、翅の大きさに及ぼす影響との関係を調べたところ、95%の系統において翅を小さくする方向に作用していた。このことは、原因遺伝子がインスリン経路といかなる関係にあるかは不明であるが、体の大きさとストレス抵抗性の間に負の相関関係があることを示唆した。2)原癌遺伝子Srcのショウジョウバエホモログの機能解析を行った。まず相垣班員の確立したGS系統を用いたスクリーニングで細胞接着を不安定化する因子としてSrcを同定した。そしてSrcが細胞接着分子の動的な入れ替わりに関わる事を生体内における定量的蛍光イメージング技術(FRAP)を用いて明らかにした。またSrcがArmadillo(beta-catenin)と共同して細胞接着を維持する機構を明らかにした。
血中バイオマーカーによる肺高血圧症肺血管床閉塞消失予測方法の確立

肺動脈性肺高血圧症では(n=81)、診断時の心嚢水貯留・平均右房圧が10mmHg以上、CIが2.5L/min/m2が予後不良因子であった。左心不全に伴う肺高血圧症(n=31)では、左室収縮末期容積係数が死亡と関連していた。心肺運動負荷テスト(CPX)での呼気終末二酸化炭素分圧(PETCO2)は、治療前後の慢性血栓塞栓性肺高血圧では改善することを見出し、血管床残存量の予測マーカーになりうることを明らかにした。ある種の肺高血圧症では、血管増殖抑制因子である血清VEGF165b濃度が上昇していた。現在、血清VEGF165b濃度と肺血管床障害程度との関連を検討中である。肺高血圧は、特異的内服薬の出現により疾患の管理は著しく進歩し、生存率は大きく改善した。しかし一方では内服薬の出現により、むしろエポプロステノール導入のタイミングが遅れ手遅れになる患者が散見されている。現時点では、肺高血圧症を治癒する薬はなく肺血管病変は徐々に進行していく。肺血管床が一定以上閉塞消失すれば、もはや手遅れであり、エポプロステノールを導入しても治療効果は極めて乏しい。肺高血圧症の診断には、右心カテーテル検査を行うことがゴールドスタンダードであるが、疾患の重症度や治療に反応するバイオマーカーが存在すれば、きわめて有用と考えられる。過去に入院歴のある肺動脈性肺高血圧症81名に対して、総死亡を予測するマーカーを検索した。初診時において、心臓著音波検査での心嚢水存在と、右心カテーテル検査んでの神経数2.5L/分/m2未満が、死亡率上昇を示すマーカーであった。次に、肺高血圧症29名(肺動脈性肺高血圧症17名、慢性血栓塞栓性肺高血圧症12名)に対し、心肺運動負荷試験施行時のバイオマーカーを検索した。エンドセリン受容体拮抗薬の投与による自覚症状改善の有無と心血行動態について相関を示すマーカーを検索した。エンドセリン受容体拮抗薬投与後、ピーク時の呼気終末二酸化炭素濃度(PETCO2)が改善しており、有用なバイオマーカーであることが判明した。また、運動時の最大心拍数も、肺高血圧症の重症度を示すマーカーであった。次に、肺高血圧症の患者5名に対して、心肺運動負荷試験・心臓超音波検査による右心機能検査、両心カテーテル検査による右室圧測定・左室圧測定、血流依存性血管拡張反応、トロンボモジュシン、血漿VEGF、血管内皮前駆細胞(EPCs)を初回入院時について測定した。肺高血圧症のうち1群肺動脈性肺高血圧症(PAH)は、特異的内服治療薬の出現により疾患の管理は著しく進歩し、生存率は大きく改善しつつある。一方内服薬治療は、一時的に症状を軽減させるために、本疾患の治療薬の中で最も強力であるエポプロステノールの導入時期をむしろ遅らせ、結果的にはかえって予後を悪化させる可能性がある。肺血管床が一定以上閉塞消失すれば、肺移植以外に救命不可能なため、肺血管床の消失程度を客観的に評価可能とすることは急務である。昨年までの肺動脈性肺高血圧症患者81例の解析から、初診時の心嚢水貯留と心係数2.5L/分/m2は死亡上昇のマーカーであることを見出している。肺高血圧症患者29名(PAH17名、慢性血栓塞栓性肺高血圧症「CTEPH]12名)の解析より、心肺運動負荷試験におけるピーク時の呼気終末二酸化酸素濃度(PETCO2)ならびに最大心拍数が肺高血圧重症度のマーカーになりうることを見出している。さらに、PAH患者(18名)では、治療により血流依存性血管拡張反応(FMD)が改善するも、CTEPH患者(8名)ではFMDは改善せず、CTEPHでは内皮機能低下もマーカーとなりうることを見出した。現在は、心肺運動負荷試験・FMDに加えて、心臓超音波検査における右心機能・両心カテーテル検査における圧データ、血中血栓凝固マーカー、血中各種血管成長因子を測定し、その値の病的意義を解析中である。本疾患は、特定疾患治療研究事業対象疾患であり、基本的には患者は他病院から紹介されてくる。紹介から確定診断までに時間がかかるため、一昨年までは患者組み入れが困難であった。また、バイオマーカーとして測定している血栓止血マーカーや各種の血管内皮成長因子ならびに血管内皮前駆細胞の測定確立までに時間を要した。本研究では、名古屋大学の関連施設にて診断・治療を行っている肺動脈性肺高血圧症(ダナポイント分類1群)の予後予測因子の調査を行い、診断時の心嚢水貯留・平均右房圧が10mmHg以上、CIが2.5L/min/m2が予後不良因子であることを明らかにした。さらに、ダナポイント分類2群の肺高血圧症では、平均肺動脈圧が25mmHg以上と左室収縮末期容積係数が死亡と関連していることを明らかにした。なかでも2群肺高血圧症のうち、特に拡張型心筋症による肺高血圧症患者では、非肺高血圧症患者にくらべ、有意に死亡が多いことが判明した(ハザード比11.8、p<0.0001))。心肺運動負荷試験(CPX)は、肺高血圧症患者の運動耐容能や肺血管床の破壊の程度を推測する有用な手段である。運動耐容能ならびに予後予測因子であるpeakVO2は、肺動脈性肺高血圧症(1群)ではエンドセリン受容体拮抗薬内服治療にて改善が認められる一方、慢性血栓塞栓性肺高血圧症(4群)では改善しないことを見出した。

一方、呼気終末二酸化炭素分圧(PETCO2)は、肺高血圧症患者では残存肺血管床減少度の指標であり、肺動脈性肺高血圧症(1群)ではエンドセリン受容体拮抗薬では改善せず、慢性血栓塞栓性肺高血圧症(4群)では改善することを見出した。さらに、ある種の肺高血圧症では、血管増殖抑制因子である血清VEGF165b濃度が上昇することを見出した。現在、血清VEGF165b濃度と平均肺動脈圧・肺血管抵抗・心係数との関係やCPXで得られるパラメーターとの関連を検討中である。肺動脈性肺高血圧症では(n=81)、診断時の心嚢水貯留・平均右房圧が10mmHg以上、CIが2.5L/min/m2が予後不良因子であった。左心不全に伴う肺高血圧症(n=31)では、左室収縮末期容積係数が死亡と関連していた。心肺運動負荷テスト(CPX)での呼気終末二酸化炭素分圧(PETCO2)は、治療前後の慢性血栓塞栓性肺高血圧では改善することを見出し、血管床残存量の予測マーカーになりうることを明らかにした。ある種の肺高血圧症では、血管増殖抑制因子である血清VEGF165b濃度が上昇していた。現在、血清VEGF165b濃度と肺血管床障害程度との関連を検討中である。本疾患は特定疾患治療研究事業対象疾患であり、研究対象患者は基本的には少なく、患者組み入れまでに時間がかかってしまったため。特定疾患治療研究事業対象疾患の難病であり、紹介時の診断がしばしば異なっていることがあったため、組み入れができなかった。バイオマーカーの一つである血管内皮前駆細胞や血栓止血マーカーを再現性をもって測定する方法の確立に時間がかかったため。昨年度より、紹介患者を円滑に当研究機関の附属病院で精密検査を行うことが可能となり、データを積み重ねつつある。バイオマーカー測定も再現よく行われ、疾患の重症度や進行度と各種バイオマーカーとの関連が明らかになりつつある。本年度は、最終年度として解析結果をまとめる予定である。循環器内科学現在では、紹介元の医療機関への教育も行い、初期検査を紹介元施設で、精密検査を当研究機関附属病院で行うことが可能となり、スムースに紹介可能となった。また、バイオマーカーの測定方法が再現よく確立でき、今後は症例を重ねてデータをつみあげていく予定である。本研究で研究対象としている肺高血圧症は、特定疾患治療研究事業の対象疾患であり、稀な疾患である。したがって、患者は定期的に紹介されることはなく、紹介から確定診断までに時間が要し、測定確立までに時間を要したため、次年度使用額が若干生じている。本研究で研究対象としている肺動脈性肺高血圧症は、特定疾患医療受給者証交付件数から見た厚生労働省の統計では、平成25年度で全国に2587名と、稀な疾患である。また、確定診断も熟練した専門医の診断が必要である。私たちの研究グループでは、すでに東海地区の関連施設から肺動脈性肺高血圧症疑いの患者の紹介システムを確立している。しかし、実際紹介を受けた患者の殆どは、左心不全に伴う肺高血圧症や呼吸器疾患に伴う肺高血圧症であった。従って、現時点では患者登録の進捗が当初より遅れており、次年度まで患者登録を行う必要が生じた。その結果、次年度使用額が生じている。現在、肺高血圧症のバイオマーカーとなりうるパラメーターと疾患の病気の進行度や重症度と解析中である。解析結果が明らかとなり次第、学会発表や論文発表を行う必要があり、その費用として使用する予定である。
高音短時間加熱装置の試作と拡散精密測定への応用

高品質・高性能材料の開発のための基礎的情報として拡散デ-タは重要不可欠である。しかし、それらの材料の結晶粒は高々数10μmであり、転位密度も低くはないので、体拡散、粒界拡散、転位拡散の相互の寄与を分離してそれぞれの拡散係数を決定するためには、従来の長時間拡散と機械的セクショニングによる方法では不可能である。すなわち、放射性トレ-サ-を用いて急速加熱・拡散温度短時間保持・急速冷却し、サブミクロン以下の極めて短かい距離拡散させ、スパッタセクショニングによってプロファイルを精密に測定することによってのみ得られる。本研究はこの条件を満足する装置を試作し、拡散の精密測定に応用しょうとするものである。熱源として急熱・急冷が容易な赤外線放射加熱装置を用いた。試料を真空チャンバ-にセットし、高真空到達時間が短かいタ-ボ分子ポンプを用いて排気し、赤外線はその吸収を無視し得る透明石英ガラス製ビュ-ポ-トを透過させて試料に放射させた。本研究の試作装置を利用して、Ni基Ni-Cr-Fe合金(インコネル)中の^<51>Crの体拡散係数および粒界拡散係数を分離して決定した。超伝導金属間化合物Nb_3Sn中の^<113>Snの拡散に応用し、結晶粒が10μm以下の試料について体拡散係数を決定した。さらにFe中の^<51>Crの拡散に用いて比較的大きい拡散係数の測定に対しても有効であることがわかった。さらに、侵入型拡散への応用としてCo中の^<14>Cの拡散に用いて体拡散係数を決定した。高品質・高性能材料の開発のための基礎的情報として拡散データは重要不可欠である。しかし、オーステナイトステンレス鋼やインコネルなどの実用構造材料およびNb_3Snのような特殊な金属間化合物においてはそれらの結晶粒は高々数10μmであり、転位密度も低くはない。これらの材料中の転位拡散、粒界拡散、体拡散のそれぞれを分離した拡散係数は放射性トレーサーを用いてサブミクロン以下の極めて短かい距離拡散させ、その濃度プロファイルを精密に測定することによってのみ得られる。このためには加熱中および冷却中の拡散を無視し得るように、急速加熱・短時間拡散温度保持・急速冷却の温度制御が可能な装置が必要である。本研究はこの条件を満足する装置を試作し、拡散精密測定に応用しようとするものである。試料を真空チャンバーにセットし、高真空到達時間が短かいターボ分子ポンプを用いて排気し、赤外線はその吸収が無視し得る石英ガラス製ビューポートを透過させて試料に放射させた。拡散後の放射性トレーサーの濃度プロファイルはスパッタ・マイクロセクショニング装置を用いて測定した。本研究の試作装置を利用して、Ni基NiーCrーFe合金(インコネル)中の^<51>Crの体拡散係数および粒界拡散係数を分離して得ることができた。さらに超電導金属間化合物Nb_3Sn中の^<113>Snの拡散実験に応用し、結晶粒が10μm以下の試料を用いたにもかかわらず体拡散係数を得ることができた。さらに、比較的大きい拡散係数の測定に対しても、短時間拡散とスパッタ・マイクロセクショニングによる方法は従来の長時間拡散と機械的セクショニングによる方法よりも拡散係数を高い精度で得るのに有効であることがわかった。構造材料や機能材料(超伝導材料などの)の実用材料における結晶粒は高々数10μmであり、転位密度も低くはないので、これらの材料中の体拡散、粒界拡散、転位拡散のそれぞれの寄与を分離してそれぞれの拡散係数を正確に決定するためには放射性トレ-サ-を極めて短かい距離拡散させ、そのプロファイルを精密に測定する必要がある。このためには急速加熱・拡散温度短時間保持

・急速冷却の温度制御を行なわせる必要があり、本研究はこの条件を満足する装置を試作し、拡散の精密測定に応用しようとするものてある。熱源として急熱・急冷が容易な赤外線放射加熱装置を用いた。試料を真空チャンバ-にセットし、高真空到達時間が短かいタ-ボ分子ポンプを用いて排気し、赤外線はその吸収が無視し得る石英ガラス製ビュ-ポ-トを透過させて試料に放射させた。放射性トレ-サ-の拡散プロファイルはスパッタ・マイクロセクショニング装置を用いて測定した。本研究の試作装置を利用して、Ni基Ni-Cr-Fe合金(インコネル)中の^<51>Cyの体拡散係数および粒界拡散係数を分離して得ることができた。さらに超伝導金属間化合物Nb_3Sn中の^<113>Snの拡散に応用し、結晶粒が10μm以下の試料について体拡散係数を得ることができた。さらにFe中の^<51>Crの拡散にも用いて、比較的大きい拡散係数の測定に対しても、短時間拡散とスパッタ・マイクロセクショニングによる方法は従来の長時間拡散と機械的セクショニングによる方法よりも有効てあることがわかった。
血管新生制御技術の複合的応用による新規リビングマテリアルの開発

組織血流の確保は、組織の生存性や修復能力を高めるための鍵である。本研究では血管新生誘導能をもつ多機能型の新規足場マテリアルとしてスポンジ状材料とゲル状材料を開発し、動物への埋植実験を通じて最適化を実施した。これらを皮膚欠損や骨欠損の動物モデルに適応して、その治療効果を確認した。また、薬剤徐放マテリアルを応用して血管新生因子の効率的デリバリーを目的とした新規ドラッグデリバリー・システムを開発し、動物モデルを用いた修復組織への血管網誘導実験に成功した。(1)血管新生を誘導するインテリジェント,スカフォールドの開発(a)血管新生因子の徐放機能を付与したコラーゲン,ゲルの開発コラーゲンをクエン酸誘導体やその他の化合物を用いて物理的に結合させた各種の物理ゲルを作成した。さまざまなプロトタイプを作成しラット筋膜下埋植モデルにおいて検討した結果,マテリアル内部にむけての血管新生を有意に誘導する最適な成分のゲルを作成することに成功した。このゲルに対し,適量のbFGFを結合させることによりさらなる血管新生効果の増強を確認することができた。(b)微小血管のスカフォールド機能を持っコラーゲン,スポンジ開発まず,コラーゲンとポリグリコール酸の混合をエレクトロスピニング法によりナノ,ファイバイー化し,スポンジ状の立体構造をもつ不織布を作成した。この不織布を上記と同様にラット筋膜下埋植モデルで評価したところ,マテリアル内部にむけた新生血管の発達を確認することができた。(2)血管新生を促進する非ウイルス,ジーンデリバリー,システムの開発高分子ナノ,ミセル構造体にてreverse transfection技法を持ちて遺伝子導入する実験をin vitroで実施したが,reverse transfectionを用いない場合と比較して有意な遺伝子導入効率の改善は認められなかった。(3)血管新生因子の効率的デリバリー,システムの開発ラビット下肢の薄筋には,dominant pedicleとminor pedicleの2系統の栄養血管により養われており,この場合dominant pedicleを切断すると広範な筋壊死が惹起させる。この薄筋に対して,bFGFを結合させた酸性ゼラチンハイドロゲルを筋注することによりminor pedicleの成長を誘導し,dominant pedicleを切断しても筋壊死を回避することに成功した。平成20年度は、平成19年度研究で開発した「新しい血管新生制御技術」を応用することにより、以下にあげる新規リビングマテリアルの開発研究を実施した。(1)骨形成促進マテリアルの開発骨形成促進を目的とした新しい「血管新生因子徐放コラーゲン・ゲル」を開発した。具体的には、修飾コラーゲンに対して様々なカチオン性物質を作用させてイオンコンプレックスとすることによりハイドロゲルを作製するというコンセナトである。カチオン性物質としては、カルシウムイオン、マンガンイオン、アテロコラーゲンなどが使用できることを明らかにした。血管新生因子であるbFGFをゲル内に結合させた状態で動物モデルへ埋植し、良好な血管新生誘導効果を確認することができた。(2)皮膚・軟部組織治癒促進マテリアルの開発すでに開発した「微小血管のスカフォールド機能も併せ持つコラーゲン・スポンジ」に対してファイブロネクチン誘導体を結合させ、さらにそこにbFGFを結合させることにより、コラーゲン・スポンジとbFGFの複合化を実現した。コラーゲン・スポンジに直接bFGFを作用させても、bFGFとの結合能が低いためスポンジ内部への十分な血管誘導が得られないためである。このbFGF複合型ゴラーゲン・スポンジを動物モデルに埋植したところ、コラーゲン・スポンジ単独の揚合と比較し、有意な血管新生誘導作用の増強を認めた。(3)栄養血管誘導能を備えた次世代型骨再生用スカフォールドの開発骨再生用のβ-TCPスカフォールドに対して「血管新生因子徐放コラーゲン・ゲル」を併用して動物モデルに埋植したところ、スカフォールド周囲に対する有意な血管誘導効果を認めることができた。栄養血管の誘導は、骨再生の促進につながると考えられるため、現在、ラット骨欠損モデルに対して、スカフォールドとゲルの混合体を移植して骨再生を促す実験を実施中である。(1)骨形成促進マテリアルの開発本研究で開発した骨形成促進用「血管新生因子徐放コラーゲン・ゲル」において、コラーゲン濃度、架橋剤濃度、架橋密度を様々な条件に振ってプロトタイプを作成し、ラット埋植モデルを用いた評価によって、血管新生誘導のための最適条件を明らかにした。また、血管新生因子であるbFGF(塩基性線維芽細胞増殖因子)をゲルに固定化することにより、血管新生効果が強化されることも明らかにした。(2)皮膚・軟部組織治癒促進マテリアルの開発本研究で開発した創傷治癒促進用マテリアルの治療効果をマウス皮膚欠損モデルで検討した。創傷治癒が不良であるdb/dbマウスの背部に作成した皮膚欠損にマテリアルを貼付し、3,7,14日後における皮膚欠損サイズと同部の組織所見を解析した。結果は、マテリアルを貼付しない場合と比べ、有意な欠損サイズの縮小と組織学的な創傷治癒傾向を認めた。(3)栄養血管誘導能を備えた次世代型骨再生用スカフォールドの開発

骨形成促進用「血管新生因子徐放コラーゲン・ゲル」の人工骨への血管誘導能とそれによる骨再生促進効果をラット骨欠損モデルで検討した。ラットモデルは、大腿骨骨幹部の緻密骨を2mm幅で長軸方向に10mm除去して作成した。緻密骨除去によって露出した髄腔内の海綿骨も除去し、同部に人工骨とゲル・マテリアルの混合体をインプラントし(実験群)、7,14日後における血管誘導能と骨再生を組織学的に検討した。対照群では、ゲルを用いず人工骨のみをインプラントした。結果は、インプラント後7日目において、実験群では人工骨周囲に豊富な血管網の形成が認められたのに対し、対照群ではフィブリン沈着を認めるのみであった。また、インプラント後14日目においては、実験群では人工骨の周囲は完全に器質化し部分的に骨基質化も認められたのに対し、対照群では部分的な器質化を認めるのみであった。
ジベレリンによる共生シグナルネットワークへの干渉機構の解明

植物と根粒菌、アーバスキュラー菌根菌(以下、菌根菌)との相利的相互作用である根粒共生や菌根共生では、共生菌からの養分供給によって宿主植物に大きな生育促進効果を与えることが知られている。本研究では、これらの共生機構の解明に向け、植物ホルモン「ジベレリン」による共生制御についての解析を行った。菌根、根粒共生遺伝子プロモーター上においてジベレリンシグナルによる発現制御を行う領域を発見し、それらの共生における機能解析を行った。この解析から、ジベレリンによる共生シグナルへの干渉機構と遺伝子発現制御機構を明らかとした。植物と共生菌である根粒菌、アーバスキュラー菌根菌(以下、菌根菌)との相互作用は、共生菌からの養分供給によって宿主植物に大きな生育促進効果を与えることが知られている。この共生では、宿主植物内へ共生菌が侵入し、共生器官を形成することによって養分供給が可能となることから、共生菌を宿主植物体内に受け入れ、共生を成立させる感染過程が重要な過程となる。この感染過程ではさまざまな共生遺伝子が発現し、それらの遺伝子機能によって共生菌の侵入を制御している。我々は、これらの共生遺伝子発現を制御する因子として、植物ホルモン「ジベレリン」(GA)に注目した解析を行っている。GAは共生に正負、双方の作用をもたらすが、この作用は共生遺伝子発現によるものが大きいことが明らかとなった。そのため本課題では、この共生遺伝子発現制御に関する分子機構の解明と、この共生遺伝子の変動が共生菌の感染過程にもたらす作用についての解析を行った。これまでの研究で明らかとしたGA濃度変動により影響を受ける共生遺伝子は、数種の遺伝子のみであったが、より網羅的にGAシグナルの変動によって発現量に影響を受ける遺伝子群を同定するため、RNA-Seqを用いたトランスクリプトーム解析を行った。ここではGA添加に加え、GA合成阻害剤の添加したマメ科植物ミヤコグサの根を用い、その発現プロファイルの取得を行った。また、すでに同定しているGA応答性の共生遺伝子のプロモーターを詳細に解析し、この発現を制御するシス領域の探索を行い、菌根共生遺伝子RAM1のプロモーター上にGA応答性のシス領域を発見した。これまでの植物-微生物相互作用への植物ホルモンの関与は、生理学的応答の変化の観測に留まることが多く、その分子機構についてはほとんど分かっていなかった。しかし、この発見により、ホルモンシグナルと共生シグナルの合流点と干渉機構についての解明が期待できる。次世代シーケンサーを用いたトランスクリプトーム解析により、ジベレリン濃度変化に応答する網羅的な遺伝子の探索を行った。この解析では、すでに次世代シーケンスによるデータの取得を完了し、現在、シーケンスデータをインフォマティクス手法を用いて解析中である。また、共生シグナル分子であるNod factorやキチンオリゴマーを添加した植物でのシーケンスデータも取得しており、これらのデータ解析により、新規の共生シグナル、ジベレリンシグナル双方に制御される共生遺伝子群を同定する。また、先行研究により同定していたGAと菌根共生応答性の遺伝子RAM1のプロモーターGUS活性を指標として、プロモーターバッシング解析(プロモーターを短くした複数のコンストラクトを宿主植物へ導入し、GA応答性がみられなくなる領域を特定する)を行った。この解析の結果、低いGA濃度環境下でRAM1発現を誘導するGA応答領域を特定し、Low gibberellin response region (LoGA-RE)と名付けた。LoGA-RE領域を介したGAによるRAM1誘導は共生応答と独立して誘導することができ、RAM1は一般的なGA応答反応にも機能することが推定された。このLoGA-RE配列は、すでにin silico解析から推定されていた配列とは異なっていた。また、この応答領域以外にもGA応答性の領域が存在していることが示唆される結果が得られており、その領域の探索を開始している。これらの解析によって、低い共生菌感染率と低GA含量を示す共生変異体nsp1におけるectopicな共生遺伝子群の発現誘導は、LoGA-REを介して生じていることが推定された。現在、同様のアプローチで、ジベレリン応答と根粒共生シグナル応答の遺伝子NINに対するGA応答領域と共生応答領域との関係についても解析を続けている。この共生の成立では、宿主植物内への共生菌が侵入し、共生器官を形成することによって養分供給が可能となることから、共生菌を宿主植物体内に受け入れ、共生を成立させる感染過程が重要な過程となる。我々は、これらの共生遺伝子発現を制御する因子として、植物ホルモン「ジベレリン」に注目した解析を行っている。ジベレリンは共生に正負、双方の作用をもたらすが、この作用は共生遺伝子発現によるものが大きいことが明らかとなった。昨年度に発見したGA応答性のシス領域の解析を進め、菌根共生遺伝子であるRAM1遺伝子は共生シグナルおよびGAシグナル双方の交差点となっていることが明らかとした。さらに、この研究を根粒共生にも拡張し、NINプロモーター上にGA応答シス領域の特定に成功した。この研究から、NIN遺伝子が共生シグナルとGAシグナルの交差点となることが判明した。現在、菌根共生におけるGAシグナルと共生シグナルとの干渉作用についての論文を投稿中であり、この論文の受理に向けた実験や考察の追加などを行っていく。

また、NIN遺伝子を中心としたGAと共生シグナルの作用についても解析を進め、CRISPR/CAS9を用いたゲノム編集技術によるシス領域の除去などを試みる。これらの研究によって、異なるシグナルネットワーク間での干渉作用の分子メカニズムを解明する。昨年度の解析と昨年度に報告された研究成果から、菌根共生に特異的に働くRAM1遺伝子上にジベレリン応答性のシス領域が複数存在することが分かった。この結果から、RAM1遺伝子は共生シグナルおよびGAシグナル双方の交差点となっていることが明らかとなった。GA合成異常を示す共生変異体nsp1でのRAM1遺伝子の空間的発現を詳細に解析すると、共生シグナル活性化時に表皮付近でのRAM1発現が低下していた。nsp1変異体では、菌根菌の感染が表皮において阻害されることから、ectopicなGA濃度の上昇がRAM1などのGA応答性遺伝子群の発現低下を生じさせ、そのために感染率が低下していると考えられる。現在、この成果をまとめ、論文を投稿中である。RAM1プロモーター上で同定した低いGAシグナル環境下で応答するシス領域をタンデムに挿入した35S minimal promoter GUSでのGA応答性を確認した。この結果からよりGA応答性の領域を狭め、シスエレメントを特定することを試みたが、明確な低GA濃度下における応答は見られなかった。しかし逆に高GA濃度下において応答しうることが判明した。さらに、根粒形成に必須の遺伝子NINの発現制御にもGAが深くかかわることが明らかとなってきている。GA添加した植物ではNIN依存的に根の細胞分裂が誘導され、根粒様の細胞塊が形成される。この細胞分裂による細胞塊の形成を指標に、NINプロモーター解析を行ったところ、NINプロモーター上にGA応答シス領域の特定に成功した。この領域はまだ100bp以上と広い領域ではあるが、これまでのNINプロモーター上で同定された転写因子結合領域とは全く異なる位置する新規のシス領域であることが明らかとなった。植物と根粒菌、アーバスキュラー菌根菌(以下、AM菌)などの土壌微生物との相互作用は、双方の生物から養分物質を供給することによって両共生体の生育と生存に大きく貢献している。この共生の成立では、宿主植物内へ根粒菌、AM菌などの共生菌が侵入し、共生器官を形成することによって養分供給が可能となることから、共生菌を宿主植物体内に受け入れて共生を成立させる感染過程が重要となる。この感染過程では、さまざまな共生遺伝子が発現し、それらの遺伝子機能によって共生菌の侵入を制御している。我々は、これらの共生遺伝子発現を制御する因子として、植物ホルモン「ジベレリン」に注目した解析を行った。これまでの研究で、ジベレリンは共生に正負、双方の作用をもたらすが、この作用は共生遺伝子発現によるものが大きいことが明らかとなっている。
高次脳機能障害に対する経頭蓋的磁気刺激治療の検討

脳卒中後高次脳機能障害に対する経頭蓋的磁気刺激療法がどのような影響を及ぼすかについては検討が十分なされていない。またこれらの領域における画像的変化の検討も殆ど成されていない。我々は、今回慢性期脳卒中後患者に対して、rTMSを行い、画像的変化の検討を行った。エイリアンハンド症候群に対しては、健側大脳半球に対するrTMSが効果を示し、加えて画像的に半球間抑制のアンバランスの解消が認められた。失語症に対しては、fMRIにより得られた言語賦活領域の活性化を狙ったrTMSにより言語機能の改善が認められ、SPECTによる検討では、左右の大脳半球に対するrTMSで、画像的変化の違いが認められた。1.前年度から実施している慢性期脳卒中失語症患者に対するrTMSを対象とした画像的変化解析を継続した。対象症例は最終的に50人。fMRIを用いた言語賦活野の同定を行い、低頻度rTMS照射部位を同定した。そのrTMS前後にSPECTを撮影し、その画像をSPM5を用いて解析した。病巣側半球が賦活し健側大脳半球rTMS実施群と健側大脳半球が賦活し病巣側大脳半球rTMS実施群とでは、SLTAと言語関連領域の脳血流変化との相関関係に違いがあることが証明された。現在論文作成中である。2.本年後より、失語症患者に対するfMRI言語賦活野同定法が実施不可能な症例に対してfNIRSを使用した言語賦活野の同定を実施した。現在数症例であるが、復唱や使用頻度の高い単語によるタスクを行い脳活動の変化を測定した。これらの症例に対してrTMSを行い一定の効果を認めている。今後は症例を増やす、もしくはfMRIによる同定方法とfNIRSによる同定方法の比較を行っていきたいと考えている。3.脳卒中後Alien hand syndrome(AHS)患者に対して、低頻度rTMSと集中的リハビリテーションを行った。fNIRSを用いてrTMS前後の脳血流変化を測定し、麻痺側上肢タッピング時にrTMS前後で脳血流の有意な変化を捉えることができ、加えてAHS症状の改善が認められた。過去の報告では、AHSの皮質内抑制をrTMSで評価した研究と、rTMS前の脳活動の変化が矛盾しないものであった。AHSに対するリハビリは代償的アプローチが中心であり、今回の報告は過去に前例がなく貴重な報告と考える。4.上記3の高次脳機能障害を伴う上肢麻痺患者が存在することから、慢性期脳卒中患者に対して我々の研究グループが実施している健側低頻度rTMSと集中的リハビリテーションが注意に及ぼす影響について検証した。現在検証継続中である。本年度は、高次脳機能障害に対する適切な磁気刺激部位の同定が必要と考えた。そのため、被験者と病変の統一、磁気刺激方法の統一が必要と考えた。本年度は脳卒中後失語症患者に対する磁気刺療法患者を対象に、その画像的変化と言語機能、注意機能の変化を検証した。磁気刺激方法は、われわれの研究グループで実施している方法に準ずる(Abo M, Kakuda W et al . Eur Neurol 2012)。fMRI下で反復復唱課題を実施し、言語活動部位を同定し、大脳半球間抑制の原理から言語活動部位の一層の活動を引き出すことを狙い、その対側に低頻度磁気刺激と集中的言語療法を実施した。入院時、退院3ヶ月後に言語機能評価、ECD-SPECT、可能症例にはTMT-A,Bを実施した。対象症例は、慢性期脳卒中後失語症患者40人(全て左病変患者)。刺激部位はfMRIに基づいた結果から、右上側頭回(11人)、左上側頭回(9人)、右下前頭回(13人)、左下前頭回(7人)に実施した。言語機能は対象患者において優位なSLTAの改善を示した。入院時、退院3ヵ月後のSPECT画像を解析し、そのLatelality index(L.I.)を計算した。そして、ブロードマン領域のうち、言語関連領域のL.I.の変化率とSLTAの聴く、話す、読む、書くの4項目との相関関係を統計学的に解析した。この結果右上側頭回では書くが、左上側頭回では話すと読むが、右下前頭回では聴くと書くが、左下前頭回では全ての項目で言語関連領域と有意な相関関係を示した。しかしながら、多重比較では有意差は認めなかった。1.慢性期脳卒中患者に対するrTMS患者と対象とした画像的変化の解析を継続して実施。そのrTMS前後にSPECTを撮影し脳血流の変化を捉えた。その画像をSPM5を用いて解析し、言語に関連したブロードマン13領域のROIsとLatelality indexを計算した。健側半球(右半球)LF-rTMS群では、totalSLTAの向上とBA44に有意な相関が認められたが、病側半球(左半球)LF-rTMS群では認めなかった。SLTAの下位項目では、病側半球(左半球)LF-rTMS群でも相関関係を認める脳領域が認められた。健側半球(右半球)LF-rTMS群と病側半球(左半球)LF-rTMS群では、SLTA合計や下位項目を言語関連領域の脳血流変化に違いがあることが証明された。

2.我々の研究グループが実施している失語症患者に対するfNIRSを使用した言語賦活野の同定を実施した。複数症例での実施を行い、多くの患者で有意な言語機能の改善を認める結果となった。4.慢性期脳卒中患者に対して我々の研究グループが実施している健側低頻度rTMSと集中的リハビリテーションが注意に及ぼす影響について検証した。症例は32名で入院、退院時にTMT-A・Bを実施。右麻痺(右半球LFS)群と左麻痺(左半球LFS)群で比較したところ、右麻痺群でTMT-Bの有意な改善が認められた(TMT-A、B-Aは有意な改善なし)。左麻痺群では有意な改善を認めなかった。現在詳細な検討を行っているところである。1.慢性期脳卒中患者に対するrTMS患者と対象とした画像的変化の解析を継続して実施した。対象症例は最終的に50人(男40人女人)、平均年齢は60.3歳、これらの患者に対して、fMRIを用いた言語賦活野の同定を行い、それに従って低頻度rTMS照射部位を同定した。そのrTMS前後にSPECTを撮影し、脳血流の変化を捉えた。その画像をSPM5を用いて解析し、言語に関連したブロードマン13領域のResion of interests(ROIs)とLatelality index(L.I.)を計算した。健側半球(右半球)LF-rTMS群では、totalSLTAの向上とBA44に有意な相関が認められ。病側半球(左半球)LF-rTMS群では有意な相関関係は認められなかった。しかしながらSLTAの下位項目では、病側半球(左半球)LF-rTMS群でも相関関係を認める脳領域が認められた。健側半球(右半球)LF-rTMS群と病側半球(左半球)LF-rTMS群では、SLTA合計や下位項目を言語関連領域の脳血流変化に違いがあることが証明された。2.脳卒中後Alien hand syndrome(AHS)患者に対して、低頻度rTMSと集中的リハビリテーションを行った。fNIRSを用いてrTMS前後の脳血流変化を測定し、麻痺側上肢タッピング時にrTMS前後で脳血流の有意な変化を捉えることができ、加えてAHS症状の改善が認められた。過去の報告では、AHS症例の皮質内抑制をrTMSで評価した研究があり、rTMS前の脳活動の変化は、その報告を矛盾しないものであった。3.健側低頻度rTMSと集中的リハビリテーションが注意に及ぼす影響について検証した。健側低頻度rTMSと集中リハを完遂した32名で入院、退院時にTMT-A・Bを実施した。TMT-Bの変化率とFMAの変化率に有意な相関関係が認められた。TMT-Bは、過去の報告より、set-shiftingや遂行機能に関わるとされている。現在論文投稿中である。脳卒中後高次脳機能障害に対する経頭蓋的磁気刺激療法がどのような影響を及ぼすかについては検討が十分なされていない。またこれらの領域における画像的変化の検討も殆ど成されていない。我々は、今回慢性期脳卒中後患者に対して、rTMSを行い、画像的変化の検討を行った。エイリアンハンド症候群に対しては、健側大脳半球に対するrTMSが効果を示し、加えて画像的に半球間抑制のアンバランスの解消が認められた。
先天性視覚障害児童のメンタルローテーションと移動行動のつまずき分析

目的:先天性視覚障害児の移動行動とメンタルローテーション能力の発達との関連性について分析する。方法:先天性視覚障害児童を対象として、小規模空間でのメンタルローテーションの様子及び食堂等の大規模空間におけるメンタルローテーションの様子について、積み木等を複数用いた模型空間について、基点を0°、90°、180°、270°変えた位置からの読み取り及び構成課題を行った。あわせて、大規模空間(食堂)でのメンタルローテーションの様子について、基点を0°、90°、180°、270°変えた位置を出発点としてある目的地まで実際に移動する際の様子を記録し、つまずきの要因との関連性について分析を行った。結果:小規模空間における模型の読み取りと構成課題では、0°における間違いが最も少なく、次いで180°での成績がよかった。また、大規模空間での移動においても出発点を0°、180°にした場合の方が、90°、270°にした場合よりも成績がよかった。移動行動のつまずきの要因については、以下の6つに分類された。(1)空間認知能力(メンタルマップ、メンタルローテーション)、(2)移動前の行動計画・記憶(道順、曲がる場所・方向、手がかり等)、(3)現在地や目的地を特定するための知識・技術(手がかりの活用、距離感等)、(4)移動における技術・知識(伝い歩き、方向の取り方等)、(5)迷った時の対応(その場での手がかりの入手と活用等)、(6)その他(自信の有無、思い違い、体調等)。今後の課題:先天性視覚障害児童の空間認知能力については、個人差が大きいことが考えられる。今後の課題として、日常における行動観察により移動行動との関連性について検討していくことが求められる。また、用いる空間参照枠が自己中心枠であるか外部参照枠であるかと、メンタルローテーション課題における結果との関連性について検討していきたい。本研究の意義と重要性:先天性視覚障害児童の空間認知能力については、いまだ十分明らかとはされておらず、個人特性と移動行動との関連性を分析していくことは大変重要であると考える。本研究は、先天性視覚障害児童を対象とした歩行指導における、チェックリストや指導項目・方法等の作成につながるものであり、大変意義深い研究であると考える。
ルーン碑文を利用した、中世ノルウェー語の英語への影響研究

本研究の成果は次の4点に集約できる。一、北欧語語彙の借入の「揺れ」の状態を、カンブリア地方の地名に明確に確認できたこと。二、カンブリアのブライドカーク教区教会に現存する洗礼槽に刻まれたルーン碑文の未読二文字に新たな解読を行えたこと。三、1214世紀にかけてノルウェー語が屈折語尾を保持する一方で、母音や子音に音変化が見られるが、その中世ノルウェー語と比較することで、カンブリア方言の北欧語からの借入語の語幹母音の変化の過程をより明確に確認できたこと。四、日本人英語教育者のために、北欧語話者と中世英語話者の言語接触の歴史的過程について新たな記述と理解の必要性を説いたことである。当該年度の最も重要な成果は3つあった。第1に、デンマークのオーフス大学で行われた第15回国際サガ学会(3年に一度開催)にて、学会発表を行い、最新の研究事情について多くの情報交換ができたことである。現在、その研究発表の内容をさらに改訂した論文を出版できるように準備している。第2に、その学会発表の後、ベルゲン大学のバルザル博士の協力で、デンマークの中世ヴァイキング時代の遺物、ヴァイキング船の博物館による研究資料展示、および異教時代の遺跡を巡る小旅行による取材ができたことである。これにより、ノルウェー方面とは別にイングランドに渡ってきた北欧人たちの地域環境が、極めて明確に把握できた。第3に、国際学会および国内学会の情報交換を通じて、国内外における古英語・中世北欧語言語接触の研究について多くの文献を集めることができたことである。専門書の価格が高騰している現在、この1年間の円高と学会関係者からの情報によって、これまで以上に古書情報を入手できたと同時に、高価過ぎて買えなかった文献がいくつも入手できた。その一方で、当初の計画で会談を予定していたイギリスのヨーク大学の研究者が学会を欠席するなどして、計画していた密接な交流ができなかった研究者との交流が次年度の課題となる。それらを通じて、熊本大学の松瀬准教授および立教大学の小澤准教授らと、年末にシンポジウムを行うことも再計画している。当初の計画通り、研究のまとめ期間となる今年度は、国内外での研究発表を中心に行った。7月には熊本に出張を行い、熊本大学の松瀬准教授との会見、年度末の学会でのシンポジウムを中心に、研究課題に関する意見交換や情報交換を行うことができた。11月まで、松瀬准教授(熊本大)、小澤准教授(立教大)、横田准教授(東京家政大)と、北欧語が英語史・中世イングランド史に与えた影響に関するシンポジウム「善きヴァイキングとの出逢い」の準備として、それぞれの研究および発表内容について、メイルなどを通じて討議を繰り返し、その結果を日本中世英語英文学会第29回全国大会の初日シンポジウムで発表した。本研究代表者は、総論と本研究成果の一部を盛り込んだ研究発表を行った。なお、このシンポジウムは、中世の北欧文化を保持する北イングランドの言語文化の在り方を啓蒙し、英語教育を行う日本の教師に向けて英語文化の多様性を訴える意義を呈するものとして、日本中世英語英文学会事務局長からも成果の出版を強く奨められるという評価を得た。現在東京都内の出版社と出版の準備を行っている。当該年度の最も重要な成果は3つある。第1に国際学会(国際中世学会、於米国カラマズー;国際歴史言語学会、於大阪)における二度の研究発表によって、英米および北欧の研究者との情報の交流が行えたこと。第2に、ノルウェー王国に渡り、ベルゲンにあるブリュッゲン博物館に所蔵されたルーン碑文の実物と605片のうち約1割にあた60点の碑文と既存データと照会しつつ、オスロ大学Spurkland博士とTerje博士との交流によって助言を受け取ったことがある。これにより、標準再建音に関して、ノルウェーのルーン学者の間でも方言差(例えば西ノルウェー方言とオスロ近郊の方言差)による音価の確定が問題視されており、以前より「標準再建音」に疑いが持たれていることを知ることができた。第3に、島根県立大学の横田由美准教授との議論が進められたことである。その一方で、計画通りに行かなかったことは3点ある。第1に、最先端のルーン文字研究者の間で、標準再建音への信頼度が薄れていることがわかったことによって、本研究の目標とした再建音の範囲を特定することが当初の予想以上に困難となっていることが確認された。このことによって、オスロ大学のSpurkland博士との情報の交流を密にする必要が提起された。第2に、碑文の実物との照会に費やすべき時間が予想以上にかかり、予定していた碑文の1割程度しか照会が行えなかったことである。これはベルゲンへの再訪とオスロ大学のデータベースのより効率的な利用が必要とされることとなった。