hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
オンラインコミュニティにおける複眼的情報援助モデルの構築

本研究では、オンラインコミュニティの回答者が提供している情報をモデル化することに取り組んだ。熱中症に関して援助されている情報は、熱中症の「発生前-発生後」の軸と、「知識-行動」の軸の2軸でモデル化した。仕事に関する対処行動は対話、対決、待機、無視、退去、自己責任、その他の7つに分類し、対処行動の方略を分析した。市民が有する問題や悩みは千差万別であり、複雑な状況になるほど、同様の経験を有する人は少ない。オンラインコミュニティがもつ情報援助における優位性は、一般的な理論にとどまらない、市民の幅広い意見や実践しているアイデアの提案が得られる点であることが示された。情報通信技術が発達した今日、オンラインコミュニティには電気機器の使い方から人生相談まで、多様な質問と回答が投稿されている。これらの投稿情報は、人々がどのような援助を求めているかを知る手がかりとなり得る。本研究は、オンラインコミュニティへの質問投稿者が有する問題・悩みが回答者による如何なる情報援助により解決されるかを明らかにすることを目的とする。平成27年度は以下の項目に関して研究を行った。(1)オンラインコミュニティに投稿された質問を対象に、熱中症に関する質問内容の主語、場面、要点の観点から分析した。質問の要点では対策、症状、診断、対応において100件を超える投稿があった。主語がない質問では場面の明示がなく、原因や用語などの熱中症の知識に関心がある通有性の高い質問が多かった。少年では学校についての投稿が多く、不特定の人に関心がある通有性が高い質問が多かった。乳幼児では年齢や性別、状況を詳述した質問や、車内の熱中症などの特有性の高い質問が多かった。(2)仕事や職場における問題解決や苦情に関するオンラインコミュニティでの回答で示唆される対処行動の方略を分析した。対処行動を対話、対決、待機、無視、退去、自己責任、その他の7つに分類したところ、対話が最も多く、ネット上でも積極的な対処が提案されていることを示していた。次に多いのは待機であり、積極的な働きかけが有効ではないという助言が多いことは発見であった。また、退去と対決も一定の割合を占めており、転職が重要な選択肢であることを示していた。熱中症に関する質問を分析し、年齢や場面と市民が必要とする熱中症情報との関連が示すことができた。結果については査読付きの学会誌にて発表することができた。また、質問に対応した回答については、分類カテゴリの作成を完了し、分類を行っている。労働に関する投稿では、質問と回答の分析が進んでおり、対処行動の分類を行った。また、質問の種類と対処行動の関係を考察し、学会での発表を行った。平成28年度はオンラインコミュニティに投稿された熱中症に関する質問への回答を抽出し、環境省・日本生気象学会・日本体育協会がそれぞれ発刊している熱中症に関するガイドラインと、提供されている情報の差異を分析した。その結果、熱中症に関して提供されている情報は、熱中症の「発生前-発生後」の軸と、「知識-行動」の軸の2軸で4分類できることが明らかとなった。具体的には、発生前の知識では熱中症になる“原因"、発生語の知識では熱中症の“症状"、発生前の行動では熱中症を予防するための“対策"、発生後の行動では熱中症になった後の“対応"に関する情報が分類された。分類の結果、3つのガイドラインは発生前の知識である“原因"に、とオンラインコミュニティの回答は“対策"や“対応"に分類された。オンラインコミュニティの特性として、市民が自分の経験とともに、熱中症発生前の対策や発生後の対応について情報を提供していることが明らかとなった。研究期間全体を通じて、本研究ではオンラインコミュニティに投稿された約6000万のビッグデータから熱中症と非正規雇用のトピックを取り上げて、情報援助モデルを構築した。得られた成果として、熱中症に関する情報発信は年齢層を考慮した内容が求められること、熱中症と非正規雇用の両方において、回答者の経験を交えた情報援助がなされる点に特徴があることが示された。また、本研究の分析方法は他のトピックにも応用が可能であり、ビッグデータを活用した研究の発展に貢献するものである。熱中症に関する質問と投稿を対応させ、質問が取り上げた熱中症発症者の年齢や場面に応じた情報援助について考察を行う。労働に関する内容では、すでに質問と回答を対応させて分析を進めており、より詳細な解析を行う。また、学会等での発表のため、成果を論文としてまとめる。住生活データ分類のために必要なアルバイトの勤務日が、予定よりも少なくなった。また、データ分類の進捗に合わせ、データ解析用PCを次年度に購入することにしたため、次年度使用額が生じた。
フローサイトメトリーによる成熟リンパ系腫瘍の微小残存病変検出系の確立

医療技術の進歩により、悪性リンパ腫に対する最新の治療法が開発されてきた。一部の病型では末梢血や骨髄に浸潤しやすく、そこに存在するごく少量の腫瘍細胞数(微小残存病変あるいはMRDという)を経時的に測定することにより病勢や治療反応性を評価することができる。本研究は、容易でかつ有用な日常臨床用のフローサイトメトリーを用いた悪性リンパ腫のMRD測定方法を構築することを目的とする。
新医師臨床研修制度の多元的評価

本研究では特定地域・診療科における医師不足・医師偏在を引き起こしたといわれる新医師臨床研修制度について,コンテクストレベルと社会全体レベルの2段階にわたる多元的評価を実施した.その結果,新医師臨床研修制度は,現場レベルでは総合的診療能力の向上と研修医の待遇向上という2つの目標を一定程度達成し,また現場のステークホルダーはそれぞれの価値に基づいてそれらプログラム目標を是認していることが明らかとなった.社会レベルでは,「平等」な医療システムを指向したことについては全面的に評価しうるものであったが,医師の私的性格を尊重した結果医師の偏在という問題を招き,結果として「平等性」を損なうこととなったと分析される.新制度に包含されたマッチングシステムの導入が医師の私的性格拡大を意味すると同時に,医師の偏在を引き起こすトリガーとなっていたことから,新制度については現場レベルでの目標設定は適切であったが,社会的影響も含めた政策設計には問題があったと評価せざるを得ない.また,その解決策として打ち出された政策も根本的価値の観点や長期的影響の可能性から,いずれも十分なものとは評価し得ない.現在の医師偏在問題を解決するためには,医師の公的性格を重視することで平等な医療システムを実現しようとする政策が望ましい.本研究では特定地域・診療科における医師不足・医師偏在を引き起こしたといわれる新医師臨床研修制度について,コンテクストレベルと社会全体レベルの2段階にわたる多元的評価を実施した.その結果,新医師臨床研修制度は,現場レベルでは総合的診療能力の向上と研修医の待遇向上という2つの目標を一定程度達成し,また現場のステークホルダーはそれぞれの価値に基づいてそれらプログラム目標を是認していることが明らかとなった.社会レベルでは,「平等」な医療システムを指向したことについては全面的に評価しうるものであったが,医師の私的性格を尊重した結果医師の偏在という問題を招き,結果として「平等性」を損なうこととなったと分析される.新制度に包含されたマッチングシステムの導入が医師の私的性格拡大を意味すると同時に,医師の偏在を引き起こすトリガーとなっていたことから,新制度については現場レベルでの目標設定は適切であったが,社会的影響も含めた政策設計には問題があったと評価せざるを得ない.また,その解決策として打ち出された政策も根本的価値の観点や長期的影響の可能性から,いずれも十分なものとは評価し得ない.現在の医師偏在問題を解決するためには,医師の公的性格を重視することで平等な医療システムを実現しようとする政策が望ましい.(1)岡山県内の二病院(県南・県北それぞれ一病院)において,医師(初期研修医・後期研修医・指導医など)およびその他医療従事者(看護師・薬剤師・理学療法士・事務など)合計40名程度に対してインタビュー調査による定性的分析を実施するとともに,文献による定量的分析を試みた.この結果,現場の医療機関レベル(コンテクストレベル)においては,医師としての専門性・自立性といった観点から好意的評価が支配的であることが明らかとなった.以上より,第一段階の評価は完了した.(2)まず,新制度が影響したとされる問題・論点について文献調査やコンテクストレベルでのインタビューを元にリストアップし,これらをKJ法により整理・構造化した.その上で各々のイシュー間の因果関係を推定し,仮説形成を試みた.しかしながら,新医師臨床研修制度による社会への影響についての仮説構築は,専門家・文献著者らの事実認識に相当程度規範が深く関係していることが判明した.これにより,仮説構築のための聞き取り調査およびその質問項目だけでは望ましい社会・医療像の仮説構築が不可能であることがわかり,急遽新たな調査計画書およびインタビューガイドを作成し,聞き取り調査の追加のための調査協力者確保を行う必要が生じた.そこで改めて実施した専門家・有識者へのインタビュー(7件)に基づいて,新制度を構成するマッチングとスーパーローテートそれぞれについて因果関係および論点に関する仮説を形成した.(3)現時点では,これまでのインタビュー調査および文献調査に基づいて,「医師の私的性格-公的性格」と「平等性-効率性」という2つの軸による平面上に「望ましい」医療制度や現行制度(日本・アメリカ・イギリス・スウェーデン)を配置するという仮説・分析方法を確定するに至っている.(1)昨年度までに(a)岡山県内の二病院を対象にして調査を実施し,現場の医療機関レベル(コンテクストレベル)における新制度に基づく研修プログラムの評価を実施した.また,(b)専門家らへのインタビュー調査および文献調査に基づいて,新医師臨床研修制度が社会に及ぼした影響に関する因果関係と,「望ましい医療」を分析する枠組みを仮説的に構築した.(2)平成22年度は上記(b)の社会全体レベルにおける評価を実施するため,全国レベルでの専門家に加えて,岡山県・徳島県・高知県における政策担当者・市民活動家らにインタビュー調査を行い,仮説的に構築した因果関係と分析枠組みの検証を行った.(3)結論は以下である.

新医師臨床研修制度は,現場レベルでは総合的診療能力の向上と研修医の待遇向上という2つの目標を一定程度達成し,また現場のステークホルダーはそれぞれの価値に基づいてそれらプログラム目標を是認していることが明らかとなった.社会レベルでは,「平等」な医療システムを指向したことについては全面的に評価しうるものであったが,医師の私的性格を尊重した結果医師の偏在という問題を招き,結果として「平等性」を損なうこととなったと分析される.新制度に包含されたマッチングシステムの導入が医師の私的性格拡大を意味すると同時に,医師の偏在を引き起こすトリガーとなっていたことから,新制度については現場レベルでの目標設定は適切であったが,社会的影響も含めた政策設計には問題があったと評価せざるを得ない.また,その解決策として打ち出された政策も根本的価値の観点や長期的影響の可能性から,いずれも十分なものとは評価し得ない.(4)現在の医師偏在問題を解決するためには,医師の公的性格を重視することで平等な医療システムを実現しようとする政策が望ましい.現在,本研究成果を発表するため研究論文の執筆を進めている.
高齢者の記憶機能の加齢変化に対する糖代謝・内分泌要因の影響

一昨年開始したコホート研究の2年後追跡調査を実施し、149名の縦断データを得た。2年間でのHbAlcの変化と各種認知機能指標(本研究で作成したエピソード記憶機能指標、MMSE下位項目得点)の変化との関連を検討した。対象全体では両者に関連は見られなかったが、75歳以上で平均血圧90mmHg未満の層ではHbAlc変化とエピソード記憶およびMMSE遅延再生の成績変化との間に有意な正の相関が認められた(脳卒中経験者を除外し、性と年齢を調整)。このような関係の生じるHbAlcの閾値は、例数の不足により検討できなかった。以上の結果から、高齢者においてはHbAlcの低下が認知機能の低下を伴う場合があることが確認された。因果の方向は特定できないが、仮に血糖値の低下が認知機能障害の要因となるなら、それが危惧されるのは高期高齢者で血圧がやや低い層であり、その影響が現れやすい認知機能領域の一つはエピソード記憶機能であることが示唆された。本研究で測定したエピソード記憶機能は、社会活動性、記憶愁訴、認知機能予後と関連を有することが確認され、それ自体、高齢期の重要な健康指標であると考えられた。そこで、エピソード記憶機能の急速低下の予知因子を探索したところ、脳卒中、心疾患、糖尿病の既往が有意な要因であることが明らかとなった。記憶機能低下者の半数以上が3疾患既往者の中から発生していた。これら3疾患の予防と管理が、エピソード記憶機能の維持、しいては社会活動性や認知機能の維持のために重要であることが示唆された。高齢期おいて糖尿病や耐糖能障害が血管性認知症やアルツハイマー病の危険因子であるのは明らかであるが、血糖値の相対的低水準が認知機能に与える影響はほとんど検討されて来なかった。筆者の行った地域高齢者の横断研究からは、HbA1c低値者は高次生活機能が低く、全般的認知機能が低いという結果が得られた。低水準の血糖値が認知機能を制限している可能性について更に検討を進めるため、本研究では地域高齢者の血糖値(及び関連する代謝・内分泌要因)と認知機能(特にエピソード記憶)に関する縦断研究を行う計画である。本年度は、まず、エピソード記憶検査法の開発を行った。検査手順はenhanced cued recalltestのフランス語版に準拠しつつ、簡略化により疫学調査に適合させた。また、日本語の語彙特性資料に基づいて、特性の揃った8つの刺激系列を作成し、反復測定に備えた。ついで、縦断研究の初回調査として、地域め高齢者を対象とした総合的健康診査を実施した。65歳以上の約650名について、問診、認知機能検査(MMSE)、身体計測、血圧測定、尿検査、血液検査、心電図検査、眼底検査、動脈脈波速度検査、体力測定を行った。さらに、同意の得られた約半数の受診者について、エピソード記憶機能を測定した。同意者と非同意者との間に明らかな認知機能の差は認められなかった。この調査により、開発したエピソード記憶検査法は実施において特に問題が無いことが確認され、一般高齢者集団における年齢別の得点分布が明らかになった。血糖値の相対的低水準と関連の強い認知機能領域を特定するため、過去に実施した地域高齢者358名の健診データを用いて、HbAlc値とMMSE総得点・下位項目得点との間の関連を検討した。脳卒中既往の無い対象者をHbAlc値により4群(低・中・高・糖尿病)に分類し、各群のMMSE総得点を一般化線形モデルにより比較したところ、75歳未満の対象者においては有意な群間差は認められなかった。いっぽう75歳以上においてはHbAlc低値群と高値群は中値群より低いMMSE得点を示した(p<.05;性、年齢、教育年数、視覚障害、聴覚障害を調整)。MMSE下位項目得点について同様の分析を行ったところ、75歳以上において、HbAlc高値はいずれの下位項目とも関連が無いのに対し、HbA1c低値は見当識および遅延再生下位項目の低得点と関連していた(p<.05)。低血糖傾向は記憶と見当識を中心とする認知領域の障害と特異的に関連することが示唆された。次に、昨年度開始したコホート研究の1年後追跡調査を実施し、脳卒中既往の無い208名の縦断データを得た。このデータセットを用いて、昨年度作成したエピソード記憶検査の妥当性を検討した。初回測定値の相関分析では、記憶検査得点とMMSE遅延再生の得点との間に有意な正の相関が見られ、時間見当識、計算、文の復唱、図形模写との間にも、より弱い相関が認められた(p<.05)。1年後MMSE下位項目得点を目的変数としたロジスティック回帰分析では、初回記憶検査得点がその後1年間の時間見当識、場所見当識、遅延再生の得点変化と関連することが示された(p<.05;性、年齢、教育歴、抑うつ度、初回MMSE下位項目得点を調整)。本記憶検査の得点は、記憶と見当識を中心とする認知領域における進行性の障害を反映する指標として、一定の妥当性を有すものと考えられた。

対象全体では両者に関連は見られなかったが、75歳以上で平均血圧90mmHg未満の層ではHbAlc変化とエピソード記憶およびMMSE遅延再生の成績変化との間に有意な正の相関が認められた(脳卒中経験者を除外し、性と年齢を調整)。このような関係の生じるHbAlcの閾値は、例数の不足により検討できなかった。以上の結果から、高齢者においてはHbAlcの低下が認知機能の低下を伴う場合があることが確認された。因果の方向は特定できないが、仮に血糖値の低下が認知機能障害の要因となるなら、それが危惧されるのは高期高齢者で血圧がやや低い層であり、その影響が現れやすい認知機能領域の一つはエピソード記憶機能であることが示唆された。本研究で測定したエピソード記憶機能は、社会活動性、記憶愁訴、認知機能予後と関連を有することが確認され、それ自体、高齢期の重要な健康指標であると考えられた。そこで、エピソード記憶機能の急速低下の予知因子を探索したところ、脳卒中、心疾患、糖尿病の既往が有意な要因であることが明らかとなった。記憶機能低下者の半数以上が3疾患既往者の中から発生していた。これら3疾患の予防と管理が、エピソード記憶機能の維持、しいては社会活動性や認知機能の維持のために重要であることが示唆された。
壁画の公共性－北米チカーノ・コミュニティにおける壁画受容と歴史表象の分析から－

平成26年度の研究活動は、第一にロサンゼルスにおける長期調査、第二に執筆活動、第三に研究発表活動、第四に学芸員資格取得のための授業履修がある。前年度に引き続き、平成26年9月28日まで、カリフォルニア大学ロサンゼルス校チカノ研究所に客員大学院生として籍を置き、資料収集、参与観察、インタビュー等に集中した。特にロサンゼルスでは、他の研究者とともに複数回、イーストロサンゼルスの壁画をめぐる調査を行った他、地元の若手作家たちにも適宜インタビューを行った。またメキシコ壁画家の壁画ワークショップや、メキシコとロサンゼルス作家によって実施された共同壁画制作イベントにも足を運び、境界のアート(Border Art)についても知見を深めた。続いて平成26年度は『平和研究』第44号の特集「地域・草の根から生まれる平和」に論文を投稿した結果、査読を通過し掲載へと至った。この論文の内容は博士論文の一端となる予定である。また平成26年度は、執筆活動の他、研究発表の機会も複数持つことができた。これらの発表を通じて一般市民にも広く自身の研究活動を伝える機会を得た。この他の活動としては、学芸員資格取得のための授業履修がある。これにより作品批評や保存、美術館に関する専門的かつ実用的な知識を得て、それらを研究の論考に反映した。加えて留学経験を活かし、東京大学のスーパーグローバル大学創成事業の一環である、メキシコ大学院大学との戦略的パートナーシップ構想にリサーチ・アシスタントとして参加し、積極的に共同研究の企画、立案、調査を行った。26年度が最終年度であるため、記入しない。平成24年度の研究活動は、第一に執筆活動、第二に学会発表と参加、第三に日本国内の芸術祭への参加や展覧会調査とアーティストとの意見交換がある。平成24年度は、日本平和学会40周記念事業として出版される『平和を考えるための100冊』のうち、富山妙子『解放の美学ー二〇世紀の画家は何を目指したか』(1979年,未來社)の書評を執筆した。この書評においては、メキシコ壁画運動を含めた複数の時代/地域の芸術運動が、それぞれに社会変革の一要素を担っていたことを論じた。平成24年度の研究活動の二点目では、まず12月22日(土)に開催された日本ラテンアメリカ学会東日本部会にて、「メキシコ、オアバカ州の社会紛争におけるストリートアートを用いた民衆の抵抗」および「メキシコ近代建築運動について」という二つの発表のコメンテーターを行った。また京都大学人文科学研究所主催で12月15日、16日(土日)に開催された「人種神話の解体を知る」国際シンポジウムでは、「チカーノ壁画における人種表象の変遷」というテーマで二日間のポスターセッションに参加し、来場者へ本研究を説明した。セッション後はシンポジウムに参加した国内外の研究者と意見交換を行った。研究活動の第三点目では、「大地の芸術祭」「瀬戸内国際芸術祭」という二つの芸術祭に訪れ調査を行った。この野外での芸術イベントは、芸術における「場所」「人」「歴史」「作品」「参加」を複合的に考える機会であり、インスタレーション作品や壁画作品の分析と作品に関する一次資料(画像、動画、パンフレット、証言)の収集を通じて、地域と作品の関係を理解するための複数の事例を得た。平成25年度の研究活動は海外調査に主軸をおいた。その他の研究活動としては、学会報告、論文執筆、「スペイン語」ティーチィングアシスタントがあげられる。上記以外の研究活動としては、まず日本国内での学会発表があげられる。25年度は、7月29日(月)に基盤研究(S)「人種表象の日本型グローバル研究」主催の「アジアとアメリカの〈帝国〉を超えて」シシポジウムの若手リレートークにおいて"Cultural Decentralization under 'Empire'-A Case study of chicano Mural Movements in the United States"という演題で英語の発表と質疑応答を行った。それにより英語での発表と質疑応答のスキルを学ぶとともに、講演者であった米国研究者から、壁画文化空間を維持するための具体的な経済制度や技術について詳しく考察すべき、という有益なコメントをうけた。続いて、論文執筆に関しては『平和研究』第42号「平和の主体論」へ投稿を行った。査読結果は、「修正後、再検討」となったため再提出を行ったが、最終的には掲載に至らなかった。査読者からは調査協力者がおかれる社会的文脈の詳細な観察と、広範な先行研究への言及を求められたため、これらを次回の検討課題として今年度投稿した論文を修正し、再投稿する予定である。最後に、東京大学では教養学部前期課程「スペイン語(一列)」でティーチングアシスタントを担当し、適宜スペイン語圏の文化の紹介を行う機会を得た。以上の研究活動を通じてチカーノ壁画の公共性の議論に関して必要な視点を確認した。

続いて平成26年度は『平和研究』第44号の特集「地域・草の根から生まれる平和」に論文を投稿した結果、査読を通過し掲載へと至った。この論文の内容は博士論文の一端となる予定である。また平成26年度は、執筆活動の他、研究発表の機会も複数持つことができた。これらの発表を通じて一般市民にも広く自身の研究活動を伝える機会を得た。この他の活動としては、学芸員資格取得のための授業履修がある。これにより作品批評や保存、美術館に関する専門的かつ実用的な知識を得て、それらを研究の論考に反映した。加えて留学経験を活かし、東京大学のスーパーグローバル大学創成事業の一環である、メキシコ大学院大学との戦略的パートナーシップ構想にリサーチ・アシスタントとして参加し、積極的に共同研究の企画、立案、調査を行った。26年度が最終年度であるため、記入しない。執筆活動、学会発表と参加、日本国内の芸術祭への参加や展覧会調査とアーティストとの意見交換を通じて、チカーノの美学の説明と隣接学問における自身の研究の位置づけを明確にしたため。当初から計画していた海外調査を実現し、博士論文執筆のための資料と知見を着実に得てしているため。またそれらの知見を適宜公開する場を設けているため。今後は投稿論文など執筆活動に更に専念するとともに、カリフォルニアへ長期滞在をし、チカーノ研究の現場での議論や最新の研究を学び、学会報告を行う。カリフォルニア滞在では、各地域の壁画コミュニティセンターへ訪れ参与観察やインタビュー、アクションリサーチ等を適宜行う。今後はより焦点を絞った調査を行うとともに、投稿論文の執筆活動に専念する。海外調査終了後は博士論文のリサーチ・コロキアムを行う。
生体イメージングによる胎生期放射線曝露モデル動物の中枢神経発達障害評価

胎生期放射線曝露モデルの作成として、妊娠期のラット、マウスの全身放射線曝露実験の確立を行い、胎生期放射線曝露ラット、マウスモデルの作成を行った。胎生期放射線曝露ラットにおいて、白質体積の減少、脳容積の減少が確認された。テンソル画像において、FA値から線維組織の異方性の低下、カラーマップで白質神経線維密度の低下が観察された。Micro-CTを用いたCT画像では頭蓋骨形成の異常、三次元CT画像を用いて小頭症、水頭症における脳体積、脳室体積低下が観察された。小動物MRI、Micro-CTの両手法とも胎生期放射線曝露モデルの中枢神経評価に用いることができた。胎生期の放射線曝露線量に依存した中枢神経障害の評価することが本研究の目的である。妊娠15日の妊娠SDラットに0.5Gy、1.0Gy、1.5GyのX線を単回、全身照射した。同様に、妊娠13日目の妊娠C57/B6-jマウスに0.5Gy、1.0Gy、1.5GyのX線を単回全身照射した。すべての放射線曝露動物から胎仔が産まれることが確認された。したがって、胎生期放射線曝露モデルの作成において、1.5Gy以下での被ばく線量が適切だと思われる。その後、胎生期の放射線曝露モデル動物に対して生体イメージングを用い、モデル動物の中枢神経障害の再現性を評価した。MRIおよびCT撮像は、3週齢以降、8週齢まで11.7T垂直型高磁場MRI装置、Micro-CTを使用し撮影を行った。MRI画像解析では、テンソル画像により白質神経線維の発達異常の評価を行った。そのほか、T2強調画像で形態的な変化を評価をした。また、テンソル画像において、FA値から線維組織の異方性の低下、カラーマップで白質神経線維密度の低下が観察された。妊娠15日の妊娠SDラット合計9匹に0.5Gy(3匹)、1.0Gy(3匹)、1.5Gy(3匹)のX線を単回、全身照射した。平成24年度は、胎生期放射線曝露モデルの作成の確立と小動物MRIおよびMicro-CTでの評価を目的に研究を行った。その後、胎生期の放射線曝露モデル動物に対して小動物MRIでの脳の撮影を行い、モデル動物の中枢神経障害を評価した。Micro-

CTを用いた、画像では頭蓋骨形成の異常、三次元CT画像を用いて小頭症、水頭症における脳体積、脳室体積低下が観察された。胎生期放射線曝露げっし類モデルの安定的な作成、MRIおよびMicro-CTでの評価が可能となった。24年度の実施した研究において、最も重要な胎生期放射線曝露モデルの作成が順調にすすみ、MRI、Micro-CTでの撮影も可能となった。したがって、現在までの研究の達成度はおおむね順調といえる。平成24年度は、胎生期放射線曝露げっし類モデルの作成の確立とMRIでの評価を目的に研究を行い、安定的なモデル動物の作成、MRIでの評価が可能となった。今後は、MRIの撮影に加え、Micro-CTや行動解析など多角的な評価を加えたいと考えている。また、MRIの結果より大脳白質の変性に加え、海馬での顕著な組織変性をが観察された。海馬は、動物の記憶に関わる行動などの評価も合わせて行いたい。また、免疫組織染色を行い、脳神経の分子レベルでの評価も加えたいと考えている。[平成25年度]平成25年度は,以下の2項目について,実験・検討を行う.(1)マイクロCTでの評価、CT撮像は、3週齢以降、8週齢までMicro-CTにより撮像を行う。MRI撮影と同様に当初の目標は、3週齢以降での評価を目的とするが、3週齢より前の時期での撮影の可能性を検討する。撮影後の画像は、頭部領域におけるヒストグラムを作成などによりCT値の変化、Volumemetryにより脳体積を評価する。その一方で、三次元での撮影が可能であるため、三次元的な解析、評価の可能性を検討する。(2)組織染色での評価、組織染色は、出生後3週齢から8週齢までの固体をランダムに選び、週齢ごとの障害の変化を観察する。撮影後のすべての個体に対し脳組織切片を作製し、HE染色および免疫組織染色(GFAP、IBA1、NCAM、LFB、SMI-32、GAP-43、Laminin)を行う。また、組織染色に関しては、研究協力者の澤田教授と連絡を取り、脳発達障害の関連する染色法を試してみる。(3)行動解析、行動解析は、出生後3週齢から8週齢までの固体をランダムに選び、週齢ごとの記憶に関する行動を観察する。
AE法を応用した高感度地すべり監視装置の開発

通常、地すべり速度は非常に緩慢である。このような地すべり挙動を短期間の観測で正確に把握することは困難である。本研究では、AE法を応用した高感度地すべり監視装置を開発し、計測期間の短縮化を実現することを目的としている。本年度の研究に当っては、これまで開発してきたAEモニタリングシステムの改良を更に進めた。実際には、AE発生材の材質とロッド構造について改善し、高感度の変位検出器を製作した。また、ロッドの変形に起因するAEの専用モニタリング装置の改良も進め、AE発生頻度の分析結果から、すべり量、すべり速度およびすべり面の深さを正確に決定できるようになった。一方、実用化試験では、北海道積丹町の沼前地すべりおよび小平町の臼谷地すべりを新しく開発したAEモニタリングシステムによって観測した。これらの観測結果、以下の諸点が明らかになった。(1)AEモニタリングロッドは、土塊の変位や変形挙動に忠実に応答し、AEを発生した。また、地すべり面の深さが20m以上になってもロッドからのAEは十分なS/N比で検出できた。(2)AEモニタリングロッド専用監視装置によるAE発生頻度の分析結果は、信頼性が高く、これにより長期間の無人観測も可能になった。(3)専用の監視装置にデジタルオシロスコープを組込むことによって一次元の標定が可能になり、すべり面の深さを決定できるようになった。(4)AEのモニタリングシステムが高感度であるため、AE発生頻度の経時変化から地すべり因子や斜面崩壊因子を特定できるようになった。これらの計測資料は、抑止対策を講ずるのに非常に有効な情報になると確信される。通常、地すべり速度は極端に遅い。従来、このような地すべり挙動を短期間の観測で把握することは困難であり、新しい発想の計測方法の開発が要望されている。本研究では、この観点からAE法を応用した高感度地すべり監視装置を開発し、計測期間の短縮化を実現することを目的としている。初年度の研究に当っては、これまで開発してきたAEモニタリングロッドの改良から着手した。このロッドの鋼管(40A)内にAE発生材を充填したものである。実際には、AE発生材の材質とロッド構造について改良し、高感度のすべり検出器の製作に成功した。また、ロッドの変形に起因するAEの専用モニタリング装置の開発も予定通り進み、AEの頻度分析結果からすべり量、すべり速度およびすべり面の位置を正確に決定することができるようになった。実用化試験では、羽田湾岸道路掘さく擁壁の変形と北海道積丹町沼前地すべりを新しく開発したAEモニタリングシステムによって観測した。これらの結果、以下の諸点が明らかになった。(1)AEモニタリングロッドは地盤変位に高感度に応答してAEを発生した。また、すべり面の深さが50m以上になってもロッドからのAEは十分なS/N比で検出できた。(2)専用モニタリング装置の頻度分析は信頼性が高く、これにより長期間の無人観測も可能になった。(3)専用モニタリング装置にデジタルオシロスコ-プを組合わせることによって一次元の位置標定が可能になり、すべり面深さが決定できた。(4)AEのモニタリングシステムが高感度であるため、すべり速度の変化から地すべり因子の特定が可能になった。本年度の研究に当っては、これまで開発してきたAEモニタリングロッドの改良を更に進めた。また、ロッドの変形に起因するAEの専用モニタリング装置の改良も進め、AE発生頻度の分析結果から、すべり量、すべり速度およびすべり面の深さを正確に決定することができるようになった。

実用化試験では、北海道積丹町沼前の地すべりおよび上川町層雲峡の斜面崩壊を新しく開発したAEモニタリングシステムによって観測した。これらの観測結果、以下の諸点が明らかになった。(1)AEモニタリングロッドは地盤の変位や変形挙動に応答してAEを発生した。また、地すべり面の深さが50m以上になってもロッドからのAEは十分なS/N比で検出できた。(2)AEモニタリングロッド専用の監視装置の頻度分析は信頼性が高く、これにより長期間の無人観測も可能になった。(3)専用の監視装置にデジタルオシロスコ-プを組込むことによって一次元の標定が可能になり、すべり面の深さを決定できるようになった。(4)AEのモニタリングシステムが高感度であるため、AE発生頻度の経時変化から地すべり因子や斜面崩壊因子を特定できるようになった。これらの計測資料は、抑止対策を講ずるのに非常に有効な情報になると確信される。通常、地すべり速度は非常に緩慢である。このような地すべり挙動を短期間の観測で正確に把握することは困難である。本研究では、AE法を応用した高感度地すべり監視装置を開発し、計測期間の短縮化を実現することを目的としている。本年度の研究に当っては、これまで開発してきたAEモニタリングシステムの改良を更に進めた。実際には、AE発生材の材質とロッド構造について改善し、高感度の変位検出器を製作した。また、ロッドの変形に起因するAEの専用モニタリング装置の改良も進め、AE発生頻度の分析結果から、すべり量、すべり速度およびすべり面の深さを正確に決定できるようになった。一方、実用化試験では、北海道積丹町の沼前地すべりおよび小平町の臼谷地すべりを新しく開発したAEモニタリングシステムによって観測した。これらの観測結果、以上の諸点が明らかになった。(1)AEモニタリングロッドは、土塊の変位や変形挙動に忠実に応答し、AEを発生した。また、地すべり面の深さが20m以上になってもロッドからのAEは十分なS/N比で検出できた。(2)AEモニタリングロッド専用監視装置によるAE発生頻度の分析結果は、信頼性が高く、これにより長期間の無人観測も可能になった。(3)専用の監視装置にデジタルオシロスコープを組込むことによって一次元の標定が可能になり、すべり面の深さを決定できるようになった。
フェンシクリジン精神病モデル動物に対するシグマ遮断薬の効果について

Phencyclidine(以下PCP)をヒトが乱用すると分裂病に酷似した精神症状を惹起することはよく知られており、これを動物に投与したときに誘発される異常行動は分裂病の動物モデルとみなされている。これは、これまで広く研究されてきたmethamhetamine逆耐性モデルとは分裂病の異なる側面・病態を反映していると考えられており、分裂病の横断症状モデルあるいは治療抵抗性モデルとみなされている。分裂病の病態および新しい治療可能性を検討するためこのモデルを用いてsigmaアンタゴニストの効果を検討した。また、比較として従来の抗精神病薬の主要な薬理作用であるドパミンアンタゴニストの効果もサブタイプ別に検討した。PCP10mg/kgの単回腹腔内投与はラットに多彩な異常行動を生じ、Locomotion、sniffingを中心とした過活動と中等度から軽度のrearing、ataxia、headmovement、弱いhead twitchingを生じた。PCPの主な薬理作用はN-methyl-D-aspartate(以下NMDA)受容体遮断作用であるが、この作用に選択性の高い(+)-dizocilpine 1mg/kgもほぼ同様の異常行動を生じた。これら誘発性異常行動に対しsigmaアンタゴニストのBMY-14802は用量依存的に全ての行動に拮抗した。また、rimcazole 50mg/kgもこれらの行動に拮抗し、その力価はBMY-14802 10mg/kgとはぼ同定度であり、sigma受容体への親和性の強さの順と一致した。一方、ドパミンアンタゴニストではD1/2アンタゴニストのhaloperidolとD1アンタゴニストのSCH 23390は強く拮抗したが、D2アンタゴニストのsulpirideは全くこれらの行動に対し作用しなかった。(+)-dizocilpine誘発性行動に対してもsigma antagonistはPCP同様に抑制した。以上の結果はsigmaアンタゴニストがNMDA受容体に相互作用を示すことがin vivoで明らかとなると共に、sigmaアンタゴニストがPCP精神病やある種の分裂病の治療薬として有望であることを示唆するものと考えられる。
咬合感覚異常の発症メカニズムの解明

睡眠時ブラキシズム(SB)ならびに日中歯牙接触習癖(TCH)の有無と咬合感覚との関連性を検討した.30名の被験者をSBとTCHの有無により,1(SB+,TCH+),2(SB+,TCHー),3(SBー,TCH+),4(SBー,TCHー)の4グループに分類した.咬合感覚の指標に用いた歯根膜の判別閾はグループ間に有意差はなかった.SBの有無による2群の比較ではグループ1,2の判別閾は有意に小さな値となったが,TCHの有無による2群の比較では有意差はなかった.以上のことから,SBは歯根膜感覚を鋭敏化に関連するが,TCHは歯根膜感覚の鋭敏化との関連性はないことが明らかとなった.睡眠時ブラキシズム(SB)ならびに日中歯牙接触習癖(TCH)の有無と咬合感覚との関連性を検討した.30名の被験者をSBとTCHの有無により,1(SB+,TCH+),2(SB+,TCHー),3(SBー,TCH+),4(SBー,TCHー)の4グループに分類した.咬合感覚の指標に用いた歯根膜の判別閾はグループ間に有意差はなかった.SBの有無による2群の比較ではグループ1,2の判別閾は有意に小さな値となったが,TCHの有無による2群の比較では有意差はなかった.以上のことから,SBは歯根膜感覚を鋭敏化に関連するが,TCHは歯根膜感覚の鋭敏化との関連性はないことが明らかとなった.咬合感覚異常の発症メカニズムを解明するために,"咬合接触頻度の増大が咬合感覚を鋭敏化させる"という仮説を立て,本仮説を検証するために,咬合接触頻度を増大させる睡眠時と覚醒時のパラファンクションである睡眠時ブラキシズム(Sleep Bruxism ; SB)ならびに日中歯牙接触習癖(Tooth Contacting Habit ; TCH)の有無と咬合感覚との関連性を明らかにする.臨床的に咬合異常が認められないにも関わらず咬合感覚の異常を執拗に訴える患者,咬合感覚異常患者への対応は臨床的に難しい,これの発症に社会心理学的要素が関わっている場合が多いが,一方では咬合感覚が鋭敏化していることも多い.咬合感覚の鋭敏化と機能時以外の歯の接触頻度(パラファンクション)との間には有意な関連性のある可能性があり,我々の研究によりSBと咬合感覚との間に有意な関連性が示されている.しかし,上記の仮説を実証しパラファンクションを評価するためには,睡眠時のみならず日中の歯牙接触すなわちTCHについてもその影響を検討する必要がある.また,覚醒時の習癖であるために理論的には是正可能であるTCHに対して,現状では定型的な治療法のないSBとでは自ずから対処が異なるため,両者の関連性を明らかにすることにより,より包括的なパラファンクションへの対応が可能となり,歯科臨床において重要な情報が得られると考えられる.現在,健常被験者に対し,問診(質問票),臨床的診断,携帯型EMG記録システムおよびTCH測定システムによりSBとTCHの有無により1(SB+,TCH+),2(SB+,TCH-),3(SB-,TCH+),4(SB-,TCH-)の合計4グループに分類し,各グループの咬合感覚(歯根膜の判別閾)の測定を行って,データ蓄積中である.本研究は,咬合感覚異常の発症メカニズムを解明することを目的とし,"咬合接触頻度の増大が咬合感覚を鋭敏化させる"という仮説を立て,本仮説を検証するために,咬合接触頻度を増大させる睡眠時と覚醒時のパラファンクションである睡眠時ブラキシズム(Sleep Bruxism; SB)ならびに日中歯牙接触習癖(Tooth Contacting Habit; TCH)の有無と咬合感覚との関連性を明らかにする。今年度は,27名の健常被験者に対し,問診(質問票),臨床的診断,携帯型EMG記録システム(一部被験者は睡眠ポリソムノグラフ)およびTCH測定システムによりSBとTCHの有無により1(SB+,TCH+),2(SB+,TCH-),3(SB-,TCH+),4(SB-,TCH-)の合計4グループに分類し,各グループの咬合感覚(歯根膜の判別閾)の測定を行った.各グループの被験者数は,グループ1が13名,グループ2が8名,グループ3が1名およびグループ4が5名となり,SB-のグループ3の被験者数が現段階で十分な確保ができていない.それぞれのグループの歯根膜の判別閾の平均値は,グループ1が24ミクロン,グループ2が22ミクロン,グループ4が26ミクロンとなった.我々の過去の研究でSB+の被験者は,歯根膜の判別閾がSB-の被験者に比べ有意に小さいことが分かっているが,現段階ではSB-の被験者が少ないことから,今後グループ3中心に被験者数を増やし検討する必要があるとともに,SBの判定基準についても再検討する予定である.咬合感覚異常の発症メカニズムを解明するために,咬合接触頻度を増大させる睡眠時と覚醒時のパラファンクションである睡眠時ブラキシズム(Sleep Bruxism; SB)ならびに日中歯牙接触習癖(Tooth Contacting Habit; TCH)の有無と咬合感覚との関連性を検討した.

被験者は,顎口腔系に機能異常を認めない成人36名に対し,問診(質問票)と臨床的診断,音声・ビデオ映像付きPSG検査,TCH測定システムを用いて. SBとTCHの有無によりグループ1(SB+,TCH+),グループ2(SB+,TCHー),グループ3(SBー,TCH+),グループ4(SBー,TCHー)の合計4グループに分類した.被験者36名中6名がドロップアウトしたため,各グループの被験者数は,グループ1が8名,グループ2が6名,グループ3が7名,グループ4が9名となった.咬合感覚の指標とした歯根膜の判別閾は,我々の過去の報告と同様に550μmで5μmごとの金属箔をランダムに咬合させ,判別できた最小の値の平均値とした.その結果,グループ1(SB+,TCH+)が21.9μm,グループ2(SB+,TCHー)が20.3μm,グループ3(SBー,TCH+)が25.6μm,グループ4(SBー,TCHー)が29.1μmとなった.統計解析の結果,4グループ間に有意な差はなかったが,SBの有無による2群の比較(グループ1,2 vsグループ3,4)では,グループ1,2の歯根膜の判別閾は有意に小さな値となり,我々の過去の報告と一致していた.一方,TCHの有無による2群の比較(グループ1,3 vsグループ2,4)では,有意な差はなっかた.以上のことから,睡眠時ブラキシズムは歯根膜感覚を鋭敏化する可能性があるが,日中歯牙接触習癖は,歯根膜感覚の鋭敏化との関連性はないことが明らかとなった.被験者の確保が十分でなく,データの統計解析ができていない.25年度が最終年度であるため、記入しない。被験者の対象拡大し,教職員や学生に協力を仰ぐ.また,当初のグループ分け通りに被験者が確保できない場合には,分析方法についても再検討する.25年度が最終年度であるため、記入しない。
TH2細胞優位に発現される新規サイトカインレセプターの解析

申請者はレトロウイルスベクターを利用した新しいシグナルシークエンストラップ法(Kojima and Kitamura,Nature Biotechnol.1999)を利用してTh1細胞およびTh2細胞に発現されている膜蛋白質あるいは分泌蛋白質をスクリーニングした。スクリーニングにおいてTh2優位の発現を示す新規サイトカインレセプターδ1を同定した(Fujio et al.,Blood 2000)。δ1は共通γ鎖と相同性を有し細胞内部位にはシグナル伝達に必要なbox1およびbox2領域がある。box1領域はJak2に結合していること、エリスロポイエチンレセプターのbox1と交換すると、エリスロポイエチンの増殖シグナルを伝えることが判明した。その後アメリカNIHおよびImmunex社のグループによりδ-1がTSLPというサイトカインのレセプターの一部であることが報告された。申請者らは現在、δ-1が他のレセプターのサブユニットでもある可能性も考え、ノックアウトマウスを作製するなどさらに詳細な解析を進めている。
画像処理技術を用いた計画代替案選定支援システムの開発及び適用に関する研究

本研究は、パ-ソナルコンピュ-タを用いた画像処理技術を利用して、都市・交通計画や大規模土木施設計画のための計画代替案選定支援システムを開発し、その適用性を検討したものである。システムは、パ-ソナルコンピュ-タ、TVモニタ、フレ-ムバッファを中心に画像合成を行なう。その他、入力装置としてイメ-ジスキャナ、出力装置としてフルカラ-プリンタ及びVTRを用いる。また、光ディスクを用いて、大量の記憶容量を必要とする画像デ-タを保存する。システムのプログラムは、C言語(一部BASIC)により独自に開発した。システムの開発については、特に、画像自体を洗練させること、及び計画代替案の選定を効率的に行えるようにすること、の2点を重視した。まず画像の洗練に関しては、背景画像に合成するパ-ツ画像の縮小及び回転を可能とし、また、合成時に発生する雑音(画像と画像の間に発生する色彩や形状の乱れ)を除去できるようにした。また色の変更(色相、彩度、明度各々の変更)を可能とし、背景画像とパ-ツ画像を違和感なく合成できるようにした。さらに、テクスチャ-マッピングの技術を用いて、平面のパ-ツ画像を背景画像の中に立体的に表現することが可能となった。次に、効率的な計画代替案選定の支援に関しては、光ディスクに蓄積した樹木や舗装材などのパ-ツ画像デ-タを随時選択し、呼び出すことができる画像デ-タベ-スシステムを構築した。システムの適用に関しては、日野市における住区内道路改良計画及び熊谷市における商店街改装計画におけるケ-ススタディを行った。特に前者では、一連の意識調査を行った結果、本システムを適用することによって、計画代替案に対する住民の理解が促進されることが立証された。本研究は、デスクトップコンピュ-タを用いた画像処理技術により、メモリ上に取り込んだ画像デ-タの合成・着色・拡大縮小および回転などを行い、フォトモンタ-ジュを簡便かつ迅速に行なうシステムの開発を目指すものである。これにより、都市・交通計画あるいは土木施設計画において重要性が高まっている将来景観の事前予測を容易にするとともに、住民参加の一手法として、一般市民に対して計画内容を周知するために用いることが可能になる。本研究は2ケ年に渡るものであり、本年度はその第1年度目として、以下の研究成果を得た。<1.システムの開発>___ー:次の2点の研究開発を重点的に進めた。(1)画像デ-タベ-スを用いた代替案画像の選定システム:現状の景観場面に合成する計画代替案の画像デ-タを大容量の光ディスクに多数登録しておき、TVモニタ上での合成要素の選択から景観場面内での合成位置の決定までを対話形式で容易に行えるシステムを開発した。(2)3次元画像合成処理による動的景観設計支援システム:3次元のデ-タ構造を持つCG出力画像を現状の景観場面に合成し、それを連続的な動画とすることで、構造物などが景観に与える影響をダイナミックに捉えることのできるシステムを開発した。<2.システムの適用性の検討>___ー:住宅地内の道路の改造計画を立案中の住民に対して、システムの有効性を検証するためのアンケ-ト調査を行った。その結果、(1)平面図のみを用いた場合より、本システムを併用した方が代替案選好の程度が明瞭になること、(2)図面や文章などによる説明よりも、本システムを併用する方が代替案に対する住民の理解を得やすいこと、などがわかった。本研究は,パ-ソナルコンピュ-タを用いた画像処理技術を利用して、都市・交通計画や大規模土木施設計画のための計画代替案選定支援システムを開発し、その適用性を検討したものである。

また、光ディスクを用いて、大量の記憶容量を必要とする画像デ-タを保存する。システムのプログラムは、C言語(一部BASIC)により独自に開発した。システムの開発については、特に、画像自体を洗練させること、及び計画代替案の選定を効率的に行えるようにすること、の2点を重視した。まず画像の洗練に関しては、背景画像に合成するパ-ツ画像の縮小及び回転を可能とし、また、合成時に発生する雑音(画像と画像の間に発生する色彩や形状の乱れ)を除去できるようにした。また色の変更(色相、彩度、明度各々の変更)を可能とし、背景画像パ-ツ画像を違和感なく合成できるようにした。さらに、テクスチャ-マッピングの技術を用いて、平面のパ-ツ画像を背景画像の中に立体的に表現することが可能となった。次に、効率的な計画代替案選定の支援に関しては、光ディスクに蓄積した樹木や舗装材などのパ-ツ画像デ-タを随時選択し、呼び出すことができる画像デ-タベ-スシステムを構築した。システムの適用に関しては、日野市における住区内道路改良計画及び熊谷市における商店街改装計画におけるケ-ススタディを行った。特に前者では、一連の意識調査を行った結果、本システムを適用することによって、計画代替案に対する住民の理解が促進されることが立証された。
歯周組織の細胞周期アトラスの作製

生細胞の細胞周期の進行をリアルタイムで識別できるトランスジェニックマウス(Fucciマウス)は、歯周組織での時空的な細胞周期の動態を解析するための重要なツールであり,特に未分化な細胞と歯肉上皮の細胞周期の可視化に有用である。これを応用したFucciマウスの歯周病モデルの分子イメージング結果から,歯周組織の炎症期に活性化好中球が産生する一連の活性酵素が,歯周組織構成細胞の細胞周期をG1期で停止させる可能性が示唆された。昨年度の研究から、Fucciマウスの歯周組織の脱灰パラフィン包埋標本の解析は、歯肉上皮の細胞周期の可視化に有用であることが分かった。本年度は、歯周組織の全ての構成細胞の細胞周期の解析、および細胞機能分析に向けて、1、マウス胎児標本を用いた歯胚発生期の解析、2、凍結非脱灰標本を用いた間葉系組織の解析、3、in vitroにおける創傷治癒アッセイによる細胞増殖・遊走機能の解析を行い、以下の成果を得た。1、胎生期1316日のマウス歯胚組織の脱灰パラフィン包埋標本の解析の結果、ほぼ全ての組織構成細胞の細胞周期を緑赤の蛍光色素標識で確認できた。蕾状期から帽状期の歯堤の内エナメル上皮には緑色を示す増殖細胞が豊富である一方、星状網の上皮細胞の大部分は赤色を示すG1期の細胞であった。2、Fucciマウス(10週齢)の歯周組織の凍結非脱灰標本の解析の結果、上皮組織では細胞周期マーカーの発現が顕著である一方、間葉系組織では殆ど認められなかった。3、Fucciマウス(34週齢)の歯肉組織から分離した歯肉上皮細胞を用いた創傷治癒アッセイの結果、スクラッチ部への細胞遊走と共に細胞周期マーカーの発現を認めた。さらにトランスフォーミング増殖因子β1存在下においては、赤色を示すG1期アレストの傾向が確認できた。以上の結果から、Fucciマウスは創傷治癒の細胞周期解析に有用であることが示唆されたものの、間葉系組織における検出感度向上の必要があることが分かった。昨年度までの研究から、Fucciマウスは上皮創傷治癒の細胞周期解析に有用であることが示唆されたものの、間葉系組織においては細胞周期マーカーの発現が極端に少ないことが分かった。そこで本年度は、さらに感度の高い検出系を備えたFucci2マウス(Abe et al, Development, 2013)を入手して、マウス歯周炎モデルにおける歯周組織構成細胞の細胞周期解析を行い、以下の成果を得た。1、まず、間葉系組織における細胞周期マーカーの発現を確認するために、Fucci2マウス(10週齢)の大腿骨骨髄から間葉系幹細胞を分離・培養し、コロニーを構成する全ての細胞の細胞周期を緑から赤の蛍光色素標識によって確認した。2、Fucci2マウス(10週齢)の上顎第二大臼歯にPorphyromonas gingivalis菌を浸透させた絹糸を巻き付けることによって歯周病モデルを作製した。ミエロペルオキシダーゼ活性を認識する発光プローブと、発光・蛍光in vivoイメージングシステム(IVIS)およびマイクロCT装置を用いて、歯周組織の炎症・骨吸収程度を、定量解析した。3、Fucci2歯周病モデルマウスにおける、細胞周期パターンのIVIS解析によって、赤色を示すG1期アレストの蛍光強度が歯周炎症部位に有意に高いことが明らかになった。以上の結果から、歯周組織の炎症期に活性化好中球が産生する一連の活性酵素が、歯周組織構成細胞の細胞周期をG1期で停止させる可能性が示唆された。細胞増殖と分化は厳密なメカニズムを介して協調し,組織の恒常性を制御しているが,生体内における制御機構の全体像は未だ不明瞭である。本研究では歯周組織の一連の生体反応における細胞増殖・分化を制御する分子メカニズムを解明することを全体構想とし、本年度は, 1,トランスジェニックマウスラインの確立2,歯の発生時を含む歯周組織における細胞周期の進行・停止の局在を解析した。1,理化学研究所バイオリソースセンターから、Fucci-S/G2/M-Greenマウス、およびFucci-G1-Redマウスの供与を受け、これらを交配することによってダブルトランスジェニックマウスラインを確立した。すなわち、このマウス全ての組織構成細胞の細胞周期を緑赤の蛍光色素によって標識できるシステムが完成した。2,歯および歯槽骨を含む硬組織形態の詳細を解析するために、まず、上記の標識システムを利用した10週齢Fucciマウスの歯周組織を固定・脱灰後にパラフィン包埋した標本切片を用いて、構成細胞の細胞周期を調べた。この切片では、緑色蛍光標識が微弱であったため、monomeric Azami Green抗体を用いた蛍光免疫染色を併用して解析を行った。歯肉上皮の基底細胞層では、緑色標識された増殖期の細胞が散在し、接合上皮部で顕著であった。