hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
細胞表層工学的手法による汎用性の高い活性化樹状細胞調製法とその抗腫瘍効果の評価

抗体アンカーリング腫瘍細胞と共培養した樹状細胞が、予防的な抗腫瘍応答を有効に誘導するかを検討するために、抗体アンカーリングEL4腫瘍細胞と共培養した樹状細胞をマウスに腹腔内投与した後に、EL4腫瘍細胞をマウス背部皮下に移植した。腫瘍細胞移植後の生存日数は以下の通りであった。PBS(-)を投与したコントロール系では、腫瘍細胞移植後29日以内に全マウス(4匹)が死亡した。腫瘍細胞(-)と共培養した樹状細胞を投与した系では、36日以内に全マウス(4匹)が死亡したのに対した。これに対して、抗体アンカーリング腫瘍細胞(BFA)と共培養した樹状細胞を投与したマウスは、95日後でも約6割(7匹中4匹)のマウスが生存していた。このように、抗体アンカーリング腫瘍細胞(BFA)と共培養した樹状細胞を投与したマウスに、腫瘍正着拒絶応答、延命効果が得られた。腫瘍細胞と共培養した樹状細胞投与による抗腫瘍応答が長期的記憶応答であるかを検討するために、腫瘍細胞と共培養した樹状細胞をマウスに腹腔内投与した後に、EL4腫瘍細胞をマウス背部皮下に移植し、腫瘍細胞移植後95日間生存したマウスに対し、再度EL4腫瘍細胞を背部皮下移植した。未処理のマウスに再移植と同程度の腫瘍細胞を移植した場合の生存日数が23日間であったのに対して、抗体アンカーリング腫瘍細胞(BFA)と共培養した樹状細胞を投与したマウスは、腫瘍細胞再移植80日間延命させることに成功した。以上の結果より、腫瘍細胞と共培養した樹状細胞を投与することによって、腫瘍細胞の正着を拒絶し生存したマウスは、その後も再移植腫瘍細胞の正着を拒絶し、生存する傾向があることが示唆された。これは、樹状細胞投与によって、抗腫瘍免疫応答が誘導され、記憶免疫応答が確立されたことを示唆する結果であると考えられる。(1)マウス大腿骨から採取した樹状細胞前駆細胞の未成熟樹状細胞への分化誘導マウス(C57BL/c)の大腿骨より採取した骨髄細胞をGM-CSF(10ng/ml)存在下、10%FBS添加RPMI1640培地で6日間培養することにより、CD11cを発現し、Fcレセプター高発現、MHCII及びCD86低発現した細胞、つまり未成熟樹状細胞を誘導することが出来た。(2)抗体をアンカーリングした腫瘍細胞に対する樹状細胞の貪食誘導細胞膜修飾剤Biocompatible Anchor for Membrane(BAM)を介して抗体を腫瘍細胞(マウスリンパ腫EL-4)細胞膜上に抗体をアンカーリング出来た。アンカーリングされた抗体は、抗Fc抗体が結合出来、Fc部位を細胞の外側に向けていると考えられる。腫瘍細胞を樹状細胞と1時間共培養したところ、抗体をアンカーリングした腫瘍細胞を用いることで、腫瘍細胞を取り込んだ樹状細胞の割合が、抗体をアンカーリングしていない腫瘍細胞を用いた場合に比べ約4倍増加した。ただし、緑色蛍光標識した腫瘍細胞と共培養した樹状細胞を赤色蛍光標識し、フローサイトメーターで蛍光解析した結果、両蛍光ポジティブ細胞を、腫瘍細胞を取り込んだ樹状細胞とした。また、共焦点蛍光顕微鏡により赤色蛍光を有する細胞の内部に緑色蛍光を有する細胞が観察され、樹状細胞が細胞内に腫瘍細胞を取り込んだことを確認した。(3)腫瘍細胞貪食後の樹状細胞の活性化抗体をアンカーリングした腫瘍細胞と未成熟樹状細胞を24時間共培養した結果、腫瘍細胞を取り込んだ樹状細胞は成熟マーカーであるMHC class II及びCD86分子を高発現していた。腫瘍細胞を取り込んだ成熟樹状細胞を調製出来た。

これは、樹状細胞投与によって、抗腫瘍免疫応答が誘導され、記憶免疫応答が確立されたことを示唆する結果であると考えられる。
音響外傷性難聴に対するプログラムされたネクローシスによる細胞死制御機構

はじめに強大音響に曝露されることにより、難聴になる動物モデルを作製した。次にその難聴モデル動物において、内耳有毛細胞(聴覚を司る神経細胞)の細胞死(アポトーシ)に至るメカニズムを詳細に解明した。最後にその結果に基づき、難聴を治療する方法を種々のアプローチで検討し、聴覚機能・内耳形態の両面において難聴を治す可能性のある結果が得られた。音響外傷性難聴における内耳細胞死のメカニズムを詳細に解明し、その結果に基づき治療へのアプローチを多角的に検討することが本研究の目的である。本年度は、モルモット(ハートレー系、オス、8週齢:250-300g)を用いて、深麻酔下に断頭し、蝸牛を摘出した。その際、同時に血液も採取した。次に顕微鏡下に正円窓・卵円窓からマイクロピペットを用いて、内耳リンパ液を採取した。(1匹2耳より約510μl)採取した内耳リンパ液および血漿から水溶性代謝物を抽出し、フリーズドライ、誘導体化の過程を経て、最後にガスクロマトグラフィー質量分析計(GCMS-QP2010)にて代謝物を測定した。得られたデータは主成分分析にて内耳リンパ液に特異的な代謝物を検討した。内耳リンパ液と血漿代謝物組成の比較によりイノシトールやアスコルビン酸など計12種の代謝物組成が検出された。また血漿成分との比較により、計12種の代謝物を同定した。例えば、今回検出されたアスコルビン酸には、フリーラジカルスカベンジャーとして音響外傷に対する内耳保護効果があることが報告されているこれまでの報告では、聴覚機能(ABR)や内耳形態から内耳保護効果を証明してきたが、この手法を用いることで、直接内耳リンパ液内での代謝物の変化を調べ、統計学的に検討することが可能になると考える。現在は、内耳リンパ液中の代謝物の定量化を進めている。また音響外傷モデル動物における、内耳障害後のリンパ液中の代謝物の変化を探ることによりMetabolic pathwayから内耳障害におけるメカニズム解明につながるのではないかと考えている。さらに治療薬開発への応用も可能と考える。今年度は、予定どおり正常モルモットにおける内耳リンパ液の特異的物質が同定し得た。次年度以降は、今回の結果を基に障害モデル(強大音響負荷モデル)において、内耳リンパ液の組成変化を調べ、メカニズムの解明につなげる予定である。以上からおおむね順調に進展していると考える。音響外傷性難聴における内耳細胞死のカニズムを詳細に解明し、その結果に基づき治療へのアプローチを多角的に検討することを目的である。近年、音響外傷性難聴におけるアポトーシスに関する報告が主に国外を中心にみられるようになった。我々は、音響曝露後の遅発性メカニズムに着目し、経時的な変化を詳細に調べ報告してきており、この視点は国内外含めて我々のみである。他領域ではカスパーゼ非依存的な経路が着目され、我々も内耳性難聴では初めてこの経路に関して報告した。また音響外傷による障害には一過性閾値変化(TTS)と永続的閾値変化(PTS)の両モデルがあり、この両者を比較することで難聴へのメカニズムを解明する手がかりになると思われる。我々は、両モデルとアポトーシスに重要な因子の1つであるBcl-2ファミリーの関与を報告した。最近になりプログラムされた細胞死には、実はアポトーシス以外にネクローシスも関与することが報告された。そこで我々のこれまでの研究成果に加え、両モデルにおいて新しい概念であるプログラムされたネクローシスの発現を調べることは、より詳細な細胞死に至るメカニズムの解明につながり、難治性の感音難聴を完全に治療することにつながることが予想され、独創的かつ発展的であり大変意義深いと考える。また当研究室では、強大音響負荷装置、聴覚の機能解析に必要な聴性脳幹反応(ABR)測定装置、内耳の形態観察に必要な実体顕微鏡・蛍光顕微鏡等の機器が既に設置され、研究を行っている。また共焦点顕微鏡や透過型電子顕微鏡などの高額機器は神戸大学医学部共同実験施設のものを利用可能である。これらの機器の操作方法や内耳標本作製手技はすでに確立されており、研究を推進するにあたって問題ない。今年度は、正常モルモットにおける内耳リンパ液の特異的物質が同定し、報告に至った。次年度は、この結果に基づき、障害モデルでの、内耳リンパ液の組成変化を調べ、メカニズムの解明につなげる予定である。音響外傷性難聴における内耳細胞死のカニズムを詳細に解明し、その結果に基づき治療へのアプローチを多角的に検討することが目的である。

そこで我々のこれまでの研究成果に加え、両モデルにおいて新しい概念であるプログラムされたネクローシスの発現を調べることは、より詳細な細胞死に至るメカニズムの解明につながり、難治性の感音難聴を完全に治療することにつながることが予想され、独創的かつ発展的であり大変意義深いと考える。今回モルモットの内耳リンパ液の質量分析を行うことにより、内耳特異的代謝物を同定し得た。今後は障害もデルでのリンパ液の代謝物組成の変化を調べることにより、内耳障害のさらなるメカニズムの解明および治療薬への開発につなげたいと考えている。はじめに強大音響に曝露されることにより、難聴になる動物モデルを作製した。次にその難聴モデル動物において、内耳有毛細胞(聴覚を司る神経細胞)の細胞死(アポトーシ)に至るメカニズムを詳細に解明した。最後にその結果に基づき、難聴を治療する方法を種々のアプローチで検討し、聴覚機能・内耳形態の両面において難聴を治す可能性のある結果が得られた。次年度は、障害モデルでのリンパ液の代謝物組成の変化を調べる事により、内耳障害のさらなるメカニズムの解明および、治療薬への開発につなげたいと考えている。今年度の残額と併せて、次年度も動物購入代、飼育代、抗体・試薬各種、生化学(免疫染色等)関連消耗品を主体に本研究をすすめる予定である。また、成果を取りまとめるにあたっては、国内外の学会発表や海外英文誌への投稿などを積極的に行う予定であり、その際の旅費、謝金、学会参加費に使用する予定である。次年度は障害もデルでのリンパ液の代謝物組成の変化を調べることにより、内耳障害のさらなるメカニズムの解明および治療薬への開発につなげたいと考えている。またプログラムされた細胞死とネクローシスの関連にも結び付けることにしたいと考えている。医歯薬学
ガンジス河流域の複合文化形成動因の比較研究 ーアーリア文化と土着文化の相互関係ー (Survey of Cultural Interactions in Asianized India)

インド文化圏と呼ばれる地域は多民族・多言語社会として知られ,そこにおいて形成される文化の複合構造がその最も大きな特徴をなしている.複合文化形成のメカニズムを考察するにあたり,二つの極からの動きを考えることができる.一方にはM.エリアーデの言うASIANIZED INDIAの中核的概念の代表されるような,サンスクリット語の担い手である「上層文化」による汎アジア的な「土着要素」の消化があり,他方,逆の動きとして,民俗文化を背負った層によるサンスクリット文化の模倣吸収(M.N.シュリーニヴァースの言うSanskritization)がある.本研究では上記ふたつのダイナミックスが明瞭に観察できる北インドのガンジス河流域,特にビハール州及びこれと境を接するネパール中・南部を中心に,広域的な調査により,複合文化の動態・文化接触・統合のメカニズムとその動因を,宗教学・文献学・文化人類学・言語学の観点から学際的に調査・研究し,それに関する資料の集積とモデル化を行うことを目的とする.言語学的調査としては,ベナレス市・パトナ市及び同市南郊におけるチベット語とヒンディー語・マラーティー語との接触を,北村が音韻論の立場から,又,長野が統辞論の立場から記述分析を行った.更にカトマンス市近郊において,タマン語(北村)及びネワール語(長野)とネパール語のそれを,上と同様の観点から観察し,アーリア諸語のアジア化或いはチベット・ビルマ系諸語のアーリア化の動因を調査した.この結果,基礎的資料の集積と言う点で成果が挙がったが,ガルワール語の調査は不成功に終わった.文化人類学的調査としては,岩田が農耕儀礼,飯島・カランが婚姻習俗を中心に,ガンジス河流域の広域的比較調査を行い,他方,石井が人生儀礼を,関根が社会構造をそれぞれ軸とする,ネパール中・南部及びビハール北西部の局所的調査を実施した.そこに作動する複合文化形成動因を明確にするため,飯島・カラン・関根はタミール・ナドゥ州での比較調査をも併せて行った.儀礼に関する新資料や婚姻習俗についての貴重な統計資料が蓄積された.宗教学的調査としては,宗教儀礼におけるアーリア文化と土着要素の統合関係を,井狩・田中が広域的比較調査により,又,永ノ尾がビハール及びネパール中部の集中的調査により,解明することを試みた.又,立川はこれに仏教という観点を加味し,ネパール中部において永ノ尾と同様のフィールドワークを行った.この結果,特に,土着要素に関する部分で見るべき成果が挙った.63・64年度も同様の調査研究を続行して資料を更に蓄積し,分析の精度を上げる方向で研究を進めたい.インド文化圏と呼ばれる地域は多民族・多言語社会として知られ,そこにおいて形成される文化の複合構造がその最も大きな特徴をなしている.複合文化形成のメカニズムを考察するにあたり,二つの極からの動きを考えることができる.一方にはM.エリアーデの言うASIANIZED INDIAの中核的概念の代表されるような,サンスクリット語の担い手である「上層文化」による汎アジア的な「土着要素」の消化があり,他方,逆の動きとして,民俗文化を背負った層によるサンスクリット文化の模倣吸収(M.N.シュリーニヴァースの言うSanskritization)がある.本研究では上記ふたつのダイナミックスが明瞭に観察できる北インドのガンジス河流域,特にビハール州及びこれと境を接するネパール中・南部を中心に,広域的な調査により,複合文化の動態・文化接触・統合のメカニズムとその動因を,宗教学・文献学・文化人類学・言語学の観点から学際的に調査・研究し,それに関する資料の集積とモデル化を行うことを目的とする.言語学的調査としては,ベナレス市・パトナ市及び同市南郊におけるチベット語とヒンディー語・マラーティー語との接触を,北村が音韻論の立場から,又,長野が統辞論の立場から記述分析を行った.更にカトマンス市近郊において,タマン語(北村)及びネワール語(長野)とネパール語のそれを,上と同様の観点から観察し,アーリア諸語のアジア化或いはチベット・ビルマ系諸語のアーリア化の動因を調査した.この結果,基礎的資料の集積と言う点で成果が挙がったが,ガルワール語の調査は不成功に終わった.文化人類学的調査としては,岩田が農耕儀礼,飯島・カランが婚姻習俗を中心に,ガンジス河流域の広域的比較調査を行い,他方,石井が人生儀礼を,関根が社会構造をそれぞれ軸とする,ネパール中・南部及びビハール北西部の局所的調査を実施した.そこに作動する複合文化形成動因を明確にするため,飯島・カラン・関根はタミール・ナドゥ州での比較調査をも併せて行った.儀礼に関する新資料や婚姻習俗についての貴重な統計資料が蓄積された.宗教学的調査としては,宗教儀礼におけるアーリア文化と土着要素の統合関係を,井狩・田中が広域的比較調査により,又,永ノ尾がビハール及びネパール中部の集中的調査により,解明することを試みた.又,立川はこれに仏教という観点を加味し,ネパール中部において永ノ尾と同様のフィールドワークを行った.この結果,特に,土着要素に関する部分で見るべき成果が挙った.63・64年度も同様の調査研究を続行して資料を更に蓄積し,分析の精度を上げる方向で研究を進めたい.
環境エンリッチメントは麻酔の質を向上させるかー扁桃体／海馬における脳科学的研究ー

手術を受ける患者が何らかのストレスを受けていることは想像に難くない.精神的ケア等により術前の恐怖心を取り除くと,手術中の全身麻酔薬の必要量が少なく麻酔作用が安定することが経験的に知られているが,その脳科学的メカニズムは不明である.当該研究では術前の心理的幸福(環境エンリッチメント)が全身麻酔薬作用を修飾するメカニズムを解明する.当該研究により,術前の精神的ケアが全身麻酔を修飾する脳科学的エビデンスを築く.さらに麻酔の質の向上,ひいては患者にとってより快適な全身麻酔法の確立することを最終目的とする.手術を受ける患者が何らかのストレスを受けていることは想像に難くない.精神的ケア等により術前の恐怖心を取り除くと,手術中の全身麻酔薬の必要量が少なく麻酔作用が安定することが経験的に知られているが,その脳科学的メカニズムは不明である.当該研究では術前の心理的幸福(環境エンリッチメント)が全身麻酔薬作用を修飾するメカニズムを解明する.当該研究により,術前の精神的ケアが全身麻酔を修飾する脳科学的エビデンスを築く.さらに麻酔の質の向上,ひいては患者にとってより快適な全身麻酔法の確立することを最終目的とする.
顧みられない熱帯病に対する予防および治療を目的とした革新的技術の開発

顧みられない熱帯病(NTD)に対するワクチン開発を行った。まず、ワクチンに適したベクターの構築を試みた。その結果、pDNA、dendrigraft poly-L-lysine (DGL)とγ-polyglutamic acid (γ-PGA)の混合比と調製手順を最適化することで脾臓標的型遺伝子ベクターを開発することに成功した。このベクターをマラリアDNAワクチンに応用した結果、高い免疫誘導効果を示し、感染マウスの生存期間を延長させた。さらに、住血吸虫症のDNAワクチンに応用した結果、Th1の免疫反応が優位になり、肝臓のegg burdenを著しく減少させた。核酸医薬品を臨床応用するためには、生体適合性に優れた遺伝子ベクターの開発が必須である。我々は、新規カチオン性高分子であるDendrigraft poly-L-lysine (DGL)に着目した。DGLはlysineのみで構築されており、デンドリマー構造を有することから、遺伝子ベクターとしての有用性が期待できる。そこで、DGLを構成成分とする遺伝子ベクターの構築を試みた。pDNAとしてfirefly luciferaseをコードしたpCMV-Lucを用いた。pDNAとDGLを様々な電荷比で混合し、pDNA-DGL複合体(DGL複合体)を調製した。また、コントロールとしてpDNA-PLL複合体(PLL複合体)を作製した。電荷比と調製プロセスを最適化することで安定なナノサイズの複合体を構築できた。マウスメラノーマ細胞B16-F10を用いて、各複合体の遺伝子導入効率を評価した結果、DGL複合体はPLL複合体と比較して有意に高い遺伝子発現を示した。また、DGLは細胞内で分解していることが観察された。一方でDGL複合体はPLL複合体と同様に細胞毒性および血液毒性を示した。我々はすでにカチオン性複合体をγ-polyglutamic acid (γ-PGA)で被膜することで、高い遺伝子発現効果を維持し、毒性を軽減できることを報告している。そこで、DGL複合体をγ-PGAで被膜した三重複合体(γ-PGA複合体)を構築した。γ-PGA複合体はDGL複合体に匹敵する遺伝子発現を示し、DGL複合体で観察された毒性を改善した。γ-PGA複合体をマウスに静脈内投与した結果、脾臓において高い遺伝子発現が見られた。以上のように、我々は本年度の研究によって、DGLおよびγ-PGAを用いた生体分解型遺伝子ベクターの開発に成功した。現在、本ベクターを用いたシャーガス病に対するDNAナノワクチンの有用性を評価している。来年度以降は、さらにリーシュマニア症および住血吸虫症のDNAワクチンへも展開していく。本研究では、昨年度開発に成功した脾臓標的型遺伝子ベクターをDNAワクチンへ応用した。まず、マウスマラリア原虫P yoelii GPI8ptransamidase-related proteinをコードしたpVR1020-TAM (pyTAM)を用いて、マラリアDNAナノワクチン(pyTAM-DGL-γ-PGA複合体)を開発した。マラリアDNAナノワクチンは、マラリアに特異的な免疫誘導を惹起し、マラリア感染による死亡および寄生虫血の増加を著しく抑制できることが示唆された。以上のように、我々は本年度の研究によって、脾臓標的型遺伝子ベクターをマラリアワクチンおよび住血吸虫症ワクチンへ応用することで、高い免疫誘導効果を示す画期的なDNAナノワクチンを開発できた。来年度以降は、さらにリーシュマニア症のDNAワクチンへも展開していく。当初予定していた平成27年度の研究実施計画をおおよそ達成しているため、おおむね順調に進展していると評価した。本研究では、我々が開発に成功した脾臓標的型遺伝子ベクターを顧みられない熱帯病に対するDNAワクチンへ応用することを目的とした。昨年度までに、脾臓標的型遺伝子ベクターをマラリアワクチンおよび住血吸虫症ワクチンへ応用することで、高い免疫誘導効果を示す画期的なDNAナノワクチンを開発できた。本年度は、シャーガス病に対するDNAナノワクチンの開発を試みた。シャーガス病に対するDNAワクチン候補のスクリーニングを行った。まず、シャーガス病ワクチンの系統的レビューにより抗原の候補となるペプチドを精査し、候補を絞り込んだ。これらの情報をもとに、さらに寄生生物の各成長ステージで発現する遺伝子についてデータベーススクリーニングを行った。その結果、ASP2、TCG1、TC52、Transialidase、TCG2、Cruzipain、TCG4、およびTC24の8つの遺伝子を同定した。そこで、これらの遺伝子をVR1020に組み込み、DNAワクチンを必要量作製した。TCG1、TCG4、およびTC24の3つの遺伝子をそれぞれ組み込んだDNAワクチン(pVR1020-TCG1、pVR1020-TCG4、pVR1020-TC24)が既に調製済みであり、その他の遺伝子についても調製中である。さらに、調製済みの3種のDNAワクチンとDGL、およびγ-PGAを様々な混合比で静電的に組合せ、最適な条件を見出した。自己組織化された安定なナノワクチンを、C57BL/6系マウスに2週間おきに腹腔内投与し、現在、免疫誘導を行っている。以上のように、我々は本年度の研究によって、シャーガス病のDNAワクチンを作製することができた。現在DNAナノワクチンの有効性を評価しているところである。

その結果、pDNA、dendrigraft poly-L-lysine (DGL)とγ-polyglutamic acid (γ-PGA)の混合比と調製手順を最適化することで脾臓標的型遺伝子ベクターを開発することに成功した。このベクターをマラリアDNAワクチンに応用した結果、高い免疫誘導効果を示し、感染マウスの生存期間を延長させた。さらに、住血吸虫症のDNAワクチンに応用した結果、Th1の免疫反応が優位になり、肝臓のegg burdenを著しく減少させた。当初予定していた平成26年度の研究実施計画をほぼ達成しているため、概ね順調に進展していると評価した。平成28年度も当初予定してた研究実施計画に従い研究を推進する。28年度が最終年度であるため、記入しない。医療薬剤学、製剤学平成27年度も当初予定していた研究実施計画に従い研究を推進する。キャンペーン期間に購入するなどして研究費を効率的に使用したため28年度が最終年度であるため、記入しない。キャンペーン期間に試薬を購入するなどして、研究費を効率的に使用したため。平成27年度の繰越は消耗品に補填する予定である。次年度の消耗品費に補填する。
高分子固体表面のナノレオロジー解析装置の開発と高分子鎖のローカルダイナミクス評価

高分子固体の表面・界面は異種の相と接しているため、固体内部(バルク)と比較して極めて異なった状態にある。このため、高分子固体の表面・界面領域の構造と物性はバルクとは著しく異なっている。本研究では、高分子固体膜表面の動的粘弾性測定装置の試作を行い、その測定技術を確立した。その結果、高分子固体膜表面でのガラス転移温度は、膜内部と比較して、著しく低下していることを明らかにした。表面で観測される得意な分子運動特性と高分子の一次構造の関係を詳細に検討し、その発現機構についても明らかにした。表面には高分子の分子鎖末端が濃縮し、過剰な自由体積が誘起される。また、表面では空気面側に分子鎖が存在しないため、大きなスケールの分子運動が容易に達成できる。これらの理由により、高分子表面の分子運動特性は膜内部と比較して異なっていることが明らかとなった。1)高分子固体表面・界面のナノレオロジー測定装置の試作と高分子鎖のローカルダイナミクスの解析申請者らが既に測定技砺を確立している動的ナノインテンテーション法による高分子固体表面の動的粘弾性測定装置(走査粘弾性顕微鏡、Scanning Viscoelasticity Microscope、SVM)をさらに発展させ、分子鎖のローカルダイナミクスを検出できる表面動的帖弾性評価法の確立を検討した。表面動的粘弾性測定法として、探針が試料表面をナノメートルオーダーで変形させる動的ナノインテンテーション法を用いた。表面動的粘弾性の温度依存性評価のために、加熱・冷却ステージと温度制御装置を試作した。一方、高分子固体表面に吸着した水分などの物質の表面粘弾性に及ぼす影響を排除するために、真空チャンバーを試作した。2)高分子固体表面の動的粘弾性解析試料としてリビングアニオン重合によって合成した種々の末端基を有する単分散ポリスチレン(PS)を用いた。PS固体膜はスピンコーティング法によりシリコン基板上に製膜した後、真空中、バルクのガラス転移温度、Tg以上の423Kで12hrs熱処理した。種々のPS固体膜の表面分子運動特性を温度依存SVM測定に基づき評価した。表面及びバルクのTgは、それぞれ膜表面における印可変位と応答力の位相差及びバルクtanδが増加し始める温度と定義した。分子鎖両末端にフルオロアルキル鎖を有するPS(α,ω-PS(C_2C^F_6)_2)固体膜の表面Tgはプロトン末端を有するPS(PS-H)のそれと比較して著しく低い値を示し、逆にカルボキシル基末端及びアミノ基末端を有するPS(それぞれα,ω-PS(COOH)_2、α,ω-PS(NH_2)_2)固体膜は高い値を示した。これらの結果は、過剰な自由体積を有する分子鎖末端の膜表面における濃度分布により以下のように説明できる。フルオロアルキル鎖はプロトン末端と比較して高表面自由エネルギー成分であるため、プロトン末端を有するPS固体膜より過剰な表面濃縮を示す。一方、アミノ基、カルボキシル基は主鎖と比較して低表面自由エネルギー成分であるため、分子鎖末端は膜内部に潜り込んだ構造を形成し、高い表面Tg値を示したと結論した。本年度は、種々の対称両末端基を有する高分子固体膜表面の分子凝集状態と分子運動特性の関係を明らかにした。リビングアニオン重合法により合成した-H、-COOH、-NH_2、9(CH_3)_2((CH_2)_2(CF_2)_5CF_3)の対称末端基を有する単分散ポリスチレン(PS)を試料として用いた。PS固体膜表面の分子運動特性は、試作した走査型粘弾性顕微鏡(SVM)を用いて評価した。SVM測定では試料表面における印加変位と応答応力の位相差を検出することができ、この位相差の温度に対する変化に基づき表面のガラス転移温度(Tg)が決定できる。全てのPS固体膜の表面Tgは、分子鎖末端の化学構造によらず低下していた。特に、分子鎖の両末端にフルオロアルキルシリル鎖を有するPS固体膜の表面Tgはプロトン末端を有するPSのそれと比較して著しく低い値を示した。逆に、カルボキシル基末端及びアミノ基末端を有するPS膜の表面Tgはプロトン末端を有するPSのそれと比較して高い値を示した。これらの結果は、末端の表面自由エネルギーが異なるために過剰な自由体積を誘起している分子鎖末端の膜表面における濃度分布が異なっていると考えることにより説明できる。以上より、分子鎖末端の化学構造を変化させることによって、高分子固体膜表面の分子凝集状態及び分子運動特性の制御に可能であることが明らかになった。

このため、高分子固体の表面・界面領域の構造と物性はバルクとは著しく異なっている。本研究では、高分子固体膜表面の動的粘弾性測定装置の試作を行い、その測定技術を確立した。その結果、高分子固体膜表面でのガラス転移温度は、膜内部と比較して、著しく低下していることを明らかにした。表面で観測される得意な分子運動特性と高分子の一次構造の関係を詳細に検討し、その発現機構についても明らかにした。表面には高分子の分子鎖末端が濃縮し、過剰な自由体積が誘起される。また、表面では空気面側に分子鎖が存在しないため、大きなスケールの分子運動が容易に達成できる。これらの理由により、高分子表面の分子運動特性は膜内部と比較して異なっていることが明らかとなった。
転写因子EIAFのアンチセンス発現ベクターの導入によるガン細胞の浸潤・転移の抑制

E1AFはHigashinoらにより発見されたets-oncogene familyに属する転写因子で、我々は既に、E1AFがマトリックスメタロプロテナーゼ(MMP)の転写を亢進させ、腫瘍細胞の浸潤性増殖に関与していることを報告してきた。今回、E1AFmRNAを強く発現し、同時にMMPタンパクの発現を示す口腔扁平上皮がん細胞株HSC3にE1AFのアンチセンス発現ヴェクターを導入し、これによる細胞の生物活性の変化について検索した。さらに、実際の口腔扁平上皮がん患者から採取した試料でのE1AFの発現と腫瘍の悪性度との関連とE1AFが活性化するMMP以外の遺伝子について検討を加えた。1)in vitroにおけるE1AFの発現の制御アンチセンスE1AF発現ベクターを構築し、遺伝子導入したHSC3 ASは、HSC3細胞に比べMMP-1,-3,-9がmRNAおよび蛋白レベルで制御され、in vitroならびにin vivoで、浸潤能は低下していた。これらの実験結果より、E1AFは複数のMMPの転写を活性化し、腫瘍の浸潤に重要な役割を担っているものと思われた。2)ヒト口腔がん患者におけるE1AF発現の検索北海道大学歯学部附属病院口腔外科にて、口腔扁平上皮がんと診断された27人の患者のE1AFの発現の有無をRT-PCR、Southern blot、in situ hybridizationにより検索し、腫瘍のE1AFの発現の有無と臨床病理学的な性質との比較検討を行った。E1AFmRNAの発現は27例中15例(55%)に認められ、T1/T2の早期症例では、E1AF陽性例にリンパ節転移が多い傾向がみられ、浸潤性増殖を示す腫瘍においてE1AF発現陽性例が有為に多かった(P<0.04)。シスプラチンで処理によりp21^<wafl/cipl>とE1AFの相関した発現の亢進が認められた。p21^<wafl/cipl>の転写調節領域のルシフェラーゼアッセイで、E1AFが、細胞周期のinhibitorであるp21^<wafl/cipl>の転写をp53非依存性に直接亢進させることが示された。E1AFは、東野らにより1993年に報告されたets-oncogene familyに属する転写因子で(Higashino et al., Nucleic Acids Res., 1993)、約2.5kbの遺伝子によりコードされた481個のアミノ酸からなり、C末端側に85アミノ酸からなるETS domainを有してる。このE1AFのN末端側のn.n.402から761をRSVプロモーターの下流にアンチセンス方向に組み込んだアンチセンスE1AFmRNA発現ベクター(pRVSVΔF)を構築した。この発現ベクターを口腔扁平上皮がん由来細胞株HSC3にリポフェクション法で遺伝子導入した。HSC3細胞はE1AFおよびMMP1,9を強く発現し、浸潤性増殖を示すことを我々は既に報告している。遺伝子導入後、ネオマイシンでセレクションし、十数個のクローンを得た。E1AFのcDNA (n. n. 196/760)をプローブにしたNorthern blottingによってE1AFアンチセンスmRNAが安定して発現しているクローン(HSC3-AS)を選択した。

Northern blottingの結果、HSC3-ASはparental HSC-3に比しMMP-1, -3, -9 mRNAの発現が低下しており、ゼラチンザイモグラムや免疫染色においてもHSC3-ASではMMP1、9ともにparental HSC3に比しシグナルが弱く、MMPタンパクの発現が低下していることが示された。このような形質を示すE1AFアンチセンス遺伝子導入細胞HSC3-AS細胞の生物学的な湿潤動態の違いを明らかにするまえに、in vitro三次元培養(Raft culture)およびヌードマウス舌への注入を行い、生物学的性状の違いについて検討した。Raft cultureでparental HSC3がゲルの中へ浸潤しているのに比べ、HSC3-ASはゲルの表面に重層しているに過ぎなかった。ヌードマウス舌においてはparental HSC3由来の腫瘍が索状に周囲に湿潤性に増殖しているのに対し,HSC3-AS由来の腫瘍は周囲と比較的境界明瞭で低湿潤型の増殖形式をとっていた。E1AFはHigashinoらにより発見されたets-oncogene familyに属する転写因子で、我々は既に、E1AFがマトリックスメタロプロテナーゼ(MMP)の転写を亢進させ、腫瘍細胞の浸潤性増殖に関与していることを報告してきた。今回、E1AF mRNAを強く発現し、同時にMMPタンパクの発現を示す口腔偏平上皮がん細胞株HSC3にE1AFのアンチセンス発現ヴェクターを導入し、これによる細胞の生物活性の変化について検索した。さらに、実際の口腔偏平上皮がん患者から採取した試料でのE1AFの発現と腫瘍の悪性度との関連とE1AFが活性化するMMP以外の遺伝子について検討を加えた。1)in vitroにおけるE1AFの発現の抑制アンチセンスE1AF発現ベクターを構築し、遺伝子導入したHSC3ASは、HSC3細胞に比べMMP-1,-3,-9がmRNAおよび蛋白レベルで抑制され、in vitroならびにin vivoで、浸潤能は低下していた。これらの実験結果より、E1AFは複数のMMPの転写を活性化し、腫瘍の浸潤に重要な役割を担っているものと思われた。2)ヒト口腔がん患者におけるE1AFの発現の検索北海道大学歯学部附属病院口腔外科にて、口腔偏平上皮がんと診断された27人の患者のE1AFの発現の有無をRT-PCR、Southern blot、in sitn hydridizationにより検索し、腫瘍のE1AFの発現の有無と臨床病理学的な性質との比較検討を行った。E1AF mRNAの発現は27例中15例(55%)に認められ、T1/T2の早期症例では、E1AF陽性例にリンパ節転移が多い傾向がみられ、浸潤性増殖を示す腫瘍においてE1AF発現陽性例が有為に多かった(P<0.04)。シスプラチンで処理によりp21^<wafl/cip1>とE1AFの相関した発現の亢進が認められた。p21^<wafl/cip1>の転写調節領域のルシフェラーゼアッセイで、E1AFが、細胞周期のinhibitorであるp21^<wafl/cip1>の転写をp53非依存性に直接亢進させることが示された。
ターミナル患者への情報開示の枠組みとその検証-個と家族の関係性を視点に-

ターミナルケアの倫理問題に関するこれまでの基盤研究から浮かび上がったテーマとして、情報開示(いわゆる告知)の4つの枠組みを擦し、それを検証することを目的に研究を行った。枠組みは、患者が病気を知り医療に参加する程度、情報開示に家族が関与する程度、および日本の伝統的価値観に注目し、次の4つを提案した。A:患者には知らせず、情報を知り、意思決定する役割は家族が負う.患者が病気のことはこの知りたくないと言い、あるいは家族がすでに患者のその気持ちを知っていて、かつ、患者との間によい関係性をもっている場合のみ、この枠組みは倫理的である。B:家族がまず情報を知らされ、患者はその後で知らされる。この枠組みが倫理的なのは、治療で得る利益は何もないことを家族が同意した時である。C:患者と家族の双方に知らせる。D:情報を患者だけに開示する。今の日本では、この枠組み家族のいない患者にほほ限定され、数は比較的少ないであろう。以上の枠組みを、(1)患者をなくした家族へのインタビュー、(2)がん患者の遺族のアンケート調査の文献、および(3)積極的に患者に告知している医師へのインタビューによって検証した。結果、どの場合も、枠組みD(患者だけに告知)は行われていなかった。これは、家族との関係性を重視した告知が今の日本の文化に適合していることを示しているといえる.ただし、患者には知らせない、又は遅れて知らせるという告知の中には、我々の提案する倫理的な枠組みとは異なるものがあり、そのような告知は患者や家族によい結果をもたらしていない。患者・家族双方にとってもっともよい告知は、家族同席で患者に知らせるCの枠組みであった。最初、患者・家族ともいきなり知らされたと捉えるが、家族と患者との関係性はよく、患者はその後の治療に進んで対処し、死の迎え方を自ら決め納得して死を迎えていた。また、積極的に患者に告知してい4医師も、患者が超高齢の場合を除き、この枠組みを使っていた。終末期患者に対する病気の信実の開示/非開示は、その患者がこれから受ける治療のありようを左右しまた、その人が死にいたるまでの時間の過ごし方にも大きく影響する。これは終末期看護の倫理的問題に関するこれまでの3つの科学研究費助成研究から浮かび上がった大きなテーマである。そこで、今年度はこれらのデータを分析し、情報開示の4つの枠組み仮説を設定した。枠組みA:病む人に悪い情報を知らせることは患者に対する害であるという、古くからの日本の価値観に則り、患者には情報を開示せず、意思決定は家族が行う。枠組みB:家族がまず情報の開示を受け、患者はその後で、心の準備ができたと患者自身が思ったときに知らせる。枠組みC:病名が決定し、臨床的知見に基づき予後が判断された早い時点で、その情報を医師は患者と家族の双方に開示する。枠組みD:病名と予後、および、それらが患者のこれからにとって何を意味するかについての情報を、患者だけに開示する。これら4つの枠組みの検証を、医療者や家族へのインタビューと質問紙によって進めている。結果、(1)がん等の病名告知を積極的に行っている医師の通常の告知形態は枠組みCである。(2)極めて高齢の(2)患者は枠組みAをとる、(3)告知された患者は最初はいきなり知らされたととらえるが、家族と共に前向きに立ち向かう姿勢を見せる、などが明らかになった。13年度はこの検証作業を更に進める。

ターミナルケアの倫理問題に関するこれまでの基盤研究から浮かび上がったテーマとして、情報開示(いわゆる告知)の4つの枠組みを提案し、それを検証することを目的に研究を行った。枠組みは、患者が病気を知り医療に参加する程度、情報開示に家族が関与する程度、および日本の伝統的価値観に注目し、次の4つを提案した。A:患者には知らせず、情報を知り、意思決定する役割は家族が負う。患者が病気のことはこの知りたくないと言い、あるいは家族がすでに患者のその気持ちを知っていて、かつ、患者との間によい関係性をもっている場合のみ、この枠組みは倫理的である。B:家族がまず情報を知らされ、患者はその後で知らされる。この枠組みが倫理的なのは、治療で得る利益は何もないことを家族が同意した時である。C:患者と家族の双方に知らせる。D:情報を患者だけに開示する。今の日本では、この枠組みは家族のいない患者にほほ限定され、数は比較的少ないであろう。以上の枠組みを、(1)患者をなくした家族へのインタビュー、(2)がん患者の遺族のアンケート調査の文献、および(3)積極的に患者に告知している医師へのインタビューによって検証した。結果、どの場合も、枠組みD(患者だけに告知)は行われていなかった。これは、家族との関係性を重視した告知が今の日本の文化に適合していることを示しているといえる。ただし、患者には知らせない、又は遅れて知らせるという告知の中には、我々の提案する倫理的な枠組みとは異なるものがあり、そのような告知は患者や家族によい結果をもたらしていない。患者・家族双方にとってもっともよい告知は、家族同席で患者に知らせるCの枠組みであった。最初、患者・家族ともいきなり知らされたと捉えるが、家族と患者との関係性はよく、患者はその後の治療に進んで対処し、死の迎え方を自ら決め納得して死を迎えていた。また、積極的に患者に告知している医師も、患者が超高齢の場合を除き、この枠組みを使っていた。
水ミスト噴霧による快適空間の創出のための設計手法の構築

音速の気温依存性を利用している超音波風速温度計を用い、水滴の影響を受けずに乾球温度を測定することで、微細水ミスト噴霧による気温低下領域を実測することが可能であることを示した。また、気温低下の瞬時変動について解析し、これまで計測できなかった気温低下の持続時間と出現率が、ミストの粒径・ノズルの配置、湿度・風などの気象条件でどのように変化するかを具体的に明らかにした。さらに、被験者実験を行い体感評価の時間変化と気温変動の関係を検討した。ミスト噴霧下で感じる「涼しさ」には、気温低下だけではなく、皮膚に付着したミストの蒸発冷却効果も寄与している。初年度は、日本工業大学のキャンパス内に実験サイトを作成し、主に物理量の計測を行なった。実験サイトは、幹線道路の歩道空間を念頭に幅3.6m、日除けを設置する高さを3mとし、長さ方向は14.4mとした。風の影響を考慮するために、片側にプラスチック製の透明な波板を組み合わせて取り付けた。屋根面には、布製の遮蔽材を取り付けた。ミストノズルは2.5m高さに1.8m間隔で2列、計16個取り付けた。今回の噴霧量はノズル1個当たり約45g/minである。ノズルにビニールチューブをかぶせることで、圧力と噴霧量を変えずに、ノズルの数を変化させながら実験を行った。今回は、超音波風速温度計を9台用いて、微細水ミスト噴霧による気温低下領域と気温変動(1秒毎)を測定した。1秒毎のデータでは、弱風時に最大5°C程度の気温低下が起こっていた。しかしながら10秒平均では最大低下量は3°C、1分平均では2°Cとなっており、気温低下が非常に瞬時的な現象であることがわかった。経時変化を詳細に検討すると、3°Cを超える気温低下は大半が数秒の持続時間となっていた。ただし、一時的に静穏となった条件では、高さ0.75mで数分間3°Cを超える気温低下が持続する現象も見られた。水平風速による風下方向への気温低下領域の広がりを検討した結果、ミストを噴霧しているノズルの直下付近では、無風条件で気温低下量が大きくなるが、風速が大きくなると気温低下はほとんど見られなくなった。一方、風下側の各センサーでは、無風時には気温低下が見られないのに対し、成分風速が大きくなるにしたがって気温低下が現われた。なお、気温低下量の大きさはノズルからの距離とともに小さくなっていた。以上のように、音仮温度を用いた気温計測により、微細水ミスト噴霧による気温低下の瞬時変動と、その空間的な広がりを把握することができた。昨年度の実験により、音仮温度を用いた気温計測法の実用性が検証できた。しかし、超音波風速計の温度目盛りの経時変化が予想以上に大きく、その原因追求と対処方法の考案手間取ったため、ミスト粒径の影響など、予定していた実験の一部が実施できずに終わった。そこで2年目の今年は、実験の開始時期を予定よりも早め、5月半ばからスタートした。実験サイトの仕様は昨年とほぼ同様であるが、今年は屋根面についても、側面と同様の透明波板を施工した。まず、ミストの粒径を20μmから60μmまで5種類のノズルを用いて変化させ、あわせてノズルの設置密度を2段階に変化させた状態で、系統的な気温低下の瞬時変動を計測した。1秒毎の気温変化から、各測定点における気温低下の持続時間分布を解析するとともに、それらを基に、気温低下出現率をー1°C、からー5°Cまで、1°C刻みで算出した。大半の気温的は、持続時間が5秒以内となっているが、30秒以上持続する場合も見られた。持続時間の出現分布は、湿度・風速条件、ノズルの数によって変化した。次に、ミスト噴霧による涼しさのメカニズムを探るため、ミスト噴霧下において被験者実験を行った。椅座安静状態の被験者(半袖半ズボン)の周囲、高さ0.132.0mに超音波風速温度計9台を配置し、1秒毎の気温変化を測定すると同時に、肘掛けに水平においた右下腕部の皮膚表面温度をサーモカメラで3秒毎に収録した。さらに、右手の4指の位置にボタンスイッチを設けたボックス(ボタンで出力電圧が変わる)を自作し、ミスト噴霧時の体感温度を、押さないを含めた5段階で評価させ、1秒毎に申告値を収録した。体感温度申告値は上半身付近の気温に対する反応が大きく、皮膚温度との相関は明確ではなかった。今回の結果からは、皮膚へのミストの付着に伴う蒸発冷却の効果が体感温度に及ぼす影響は小さく、涼しさの主因は近傍気温の低下であると解釈できる。超音波風速計の温度目盛りの経時変化という予定外のトラブルで、昨年度は予定した実験の一部を積み残したが、今年度は、梅雨明け以降に予定していた実験を5月中旬からスタートしたことで、遅れを挽回できた。なお、実験期間が長くなったため、ミスト発生装置のレンタル費用の追加分が発生した。今年度の中心課題としていた被験者実験に関しては、5人の被験者を用いて計92回のデータが取得できた。体感評価の細かい時間変化を把握するための自作のボタンスイッチも、試行錯誤しながら満足のいくものが作成でき、順調に作動した。3秒毎という細かい時間間隔で、気温の瞬時変動と皮膚音の変化を同時測定したデータは、これまでになかった貴重なデータセットである。

今回の測定では、熱画像による皮膚温度の瞬時変動を解析したが、予想以上に皮膚温度の変化が小さく、体感温度との相関も大きくないという結果となった。ただし、熱画像による皮膚温の測定精度にやや疑問が残った。カメラと対象との距離は1.5m程度であったが、その間を通過するミスト自体の影響が熱画像動画から推測された。また、皮膚温の変化が小さいからといって蒸発によって熱が奪われている量が必ずしも小さいとは断定できない面もあると思われる。今回、ピンポン球を黒塗装した小型グローブ温度も計測したが、応答が良くないため申告値との対応関係は認められなかった。測定方法をさらに工夫し、皮膚の濡れ影響の寄与について、さらに検討を加えたい。昨年までの研究で、ミスト噴霧による皮膚表面温度の変化は小さいことがわかった。しかし、皮膚温は人体の血流の影響で温度保持をしている可能性があるため、今年度は断熱した模擬試験体を作成し、表面温度変化を比較した。直径100mmの円筒形の断熱材に黒く塗装した厚さ0.5mmのアルミ板を貼り付けたものを腕の模擬試験体とし、人の腕と模擬試験体を間近に並べ、赤外放射カメラと熱電対を用いて表面温度を連続測定した。腕の表面温度低下は小さいが、断熱した試験体の表面温度は最大で16°C近く低下した。従って、ミスト噴霧で感じる「涼しさ」には、気温低下だけではなく、皮膚に付着したミストの蒸発冷却効果も寄与していることが明らかとなった。ミスト噴霧による暑熱緩和効果については、冷却効果の大きさや広がり、実際に感じる涼しさのメカニズムについては不明な点が多いことから、本研究では、水ミスト噴霧の気温低減効果の定量化と、体感される涼しさのメカニズムを実験的に明らかにし、効果的な設計手法を構築することを目的とした。期間全体の成果を要約すると、初めに音速の気温依存性を利用している超音波風速温度計を用い、水滴の影響を受けずに乾球温度を測定することで、微細水ミストによる気温低下領域を実測することが可能であることを示した。さらに、ミストの粒径も変化させながら、気温低下の瞬時変動について解析するとともに、ミスト噴霧下において被験者実験を行い、体感評価の時間変化と気温変動の関係を検討した。その結果、これまで計測できなかった気温低下の持続時間と出現率が、ミストの粒径・ノズルの配置、湿度・風などの気象条件でどのように変化するか、具体的に明らかにすることに成功した。被験者実験からは、涼しさの主因は近傍気温の低下であると解釈できたが、模擬試験体による実験を追加し、皮膚に付着したミストの蒸発冷却効果も寄与していることを明らかにした。音速の気温依存性を利用している超音波風速温度計を用い、水滴の影響を受けずに乾球温度を測定することで、微細水ミスト噴霧による気温低下領域を実測することが可能であることを示した。また、気温低下の瞬時変動について解析し、これまで計測できなかった気温低下の持続時間と出現率が、ミストの粒径・ノズルの配置、湿度・風などの気象条件でどのように変化するかを具体的に明らかにした。さらに、被験者実験を行い体感評価の時間変化と気温変動の関係を検討した。ミスト噴霧下で感じる「涼しさ」には、気温低下だけではなく、皮膚に付着したミストの蒸発冷却効果も寄与している。当初計画では、実験で変化させる要素として、ミスト噴霧高さ、ノズルの密度、ミストの粒径、を考えていた。ノズルからの距離(噴霧高さ)とノズルの密度については実験できたが、ミストの粒径変化についてはデータ取得ができていない。
現代ヘブライ語の音韻体系に対する実験音声学研究

本研究には次の2つの目的があった。(1)現代ヘブライ語におけるプロソディに対し、実験音声学的手法を用いて定量的根拠を与えること。(2)ヘブライ語学音韻論における従来からの諸説と、(1)で得られた定量的根拠とを対照し、諸説の妥当性を検証すること。ヘブライ語話し言葉コーパスの研究チームの一員でもあるSh.Bolozky教授(マサチューセッツ大学)の協力も得て研究を進めた結果、ヘブライ語のシュワーについて多くのことが明らかとなった。なかでも特筆に価するのは次の3点である。1.歴史的シュワーに対応する音声学的実体が明らかになった。持続時間長・フォルマント周波数・スペクトログラムの目視を通して歴史的シュワーは無音・e・a・超短母音1・超短母音2の5種類に分類される。歴史的シュワーに対応するeやaは、明瞭母音の/e, a/とは音響的に区別できる。歴史的シュワーに対する音声実現形は弱化していると考えられるが、これは音声学的アクセントに付随した弱化ではなく、別の要因によって弱化していると考えられる。2.今から千年以上前に歴史的シュワーは「弱さ」というプロソディーを表示する字素として考案された。現代ヘブライ語では歴史的シュワーで表記される母音が脱プロソディー化したと考えられる。脱プロソディー化した母音が再びプロソディー化している例も見られる。したがって、プロソディー化はヘブライ語に内在的な指向性変化の1つだと考えることができる。3.母音が存在するかどうかは、最終的には脳波実験などを用いた再現性の高い聴覚実験音声学的研究によって結論を出さなければならない。従って、本研究は、究極の実験音声学的課題である聴覚情報処理系の実態に迫るための予備的段階でしかない。すなわち、この物理的実態を踏まえて近い将来に聴覚実験音声学的研究を行うことが出来た暁に、ここで掲げた課題に対する明白な答えが見えてくるはずである。外務省からイスラエルへの渡航延期勧告が出ているため渡航は自粛し、今年度はすでにおこなった予備調査資料の解析を中心に研究を進めた。具体的には、現代ヘブライ語でシュワー記号によって転写される音の音声学的実体に対して以下のアプローチを行なった。(1)音響音声学による解析を通じてサウンドスペクトログラムを提示すること。(2)シュワーの音種を分類すること。データは研究代表者がヘブライ語学の観点から、研究分担者が実験音声学の観点から解析した。その際、研究協力者(2名)に実験補助、資料整理、専門的知識の供与を依頼し、謝金を支払った。今年度の研究によって確認できた事実は以下の通りである。(1)スペクトログラムの目視から、先行研究の指摘どおり全く母音が出現しないもの、[e]に相当する母音が出現するもの、[a]に相当する母音が出現するものが確認できた。(2)先行研究の指摘とは異なり、音環境によって持続時間長が短い母音が出現することが確認できた。この成果は『一般言語学論叢』に掲載される予定である。フォルマント周波数の解析、持続時間長の計測、アクセントとの相関などを考慮して、今回の音響音声学的に記述したデータの詳細を解析することが今後の課題となる。そのために、来年度の早い時期にイズレエル教授(テルアビブ大学)を招聘して、アドバイスを受ける方向で調整を進めている。また、シュワーは音素ではないため、母語話者はシュワー記号を通してのみその存在を意識することができる。

今回の実験でインフォーマントに見せたカードには母音記号を記入しなかったが、将来的にはシュワー記号からの視覚的刺激を考慮に入れた認知実験も必要だと考えられる。この点を考慮に入れ、視覚刺激にも対応できる解析装置(ハード・ソフト一式)を購入した。今年度もイスラエルへの渡航は自粛した。Sh.Izre'el教授(テル・アビブ大学)の都合がつかなかったため、ヘブライ語話し言葉コーパスの研究チームの一員でもあるSh.Bolozky教授(マサチューセッツ大学)を6月に招聘した。教授の滞在中に研究代表者と研究分担者全員を交えた研究会を開催し、昨年度の研究成果についてレヴューを受けた。また、今年度の実験に向けてアドバイスを受けた。このレヴューとアドバイスに基づいて被調査者を選定し、調査票を作成した。新たに選定したインフォーマントを対象として、9月6日に録音を行った。録音後、データをwaveファイルに変換し、昨年度に購入した機器を用いて城生と福盛が音響解析を行なった。解析と平行して研究成果の発表に努めた。まず、池田と福盛が第19回日本音声学会全国大会(9月24-25日)において「現代ヘブライ語におけるシュワーの音響解析」と題する研究発表をおこなった。その後、現在までに学会誌を含む4本の論文を執筆した。目下、これらを中核とした研究成果報告書(冊子体)を作成中である。本研究によってヘブライ語のシュワーについて多くのことが明らかになったが、特筆に価するのは次の3点である。(1)歴史的シュワーに対応する音声学的実体が明らかになった。持続時間長・フォルマント周波数・スペクトログラムの目視を通して歴史的シュワーは無音・e・a・超短母音1・超短母音2の5種類に分類される。歴史的シュワーに対応するeやaは、明瞭母音の/e,a/とは音響的に区別できる。(2)今から千年以上前に歴史的シュワーは「弱さ」というプロソディーを表示する字素として考案された。現代ヘブライ語では歴史的シュワーで表記される母音が脱プロソディー化したと考えられる。(3)母音が存在するかどうかは、最終的には脳波実験などを用いた聴覚実験音声学的研究によって結論を出さなければならない。