hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
高分解能核磁気共鳴装置を用いた触媒定数の向上した変異リゾチームの動的挙動の解析

それぞれのリゾチームにおいて、立体構造が酵母より産生されたそれぞれのリゾチームと同一であることを確認するため、600MHzNMR装置を用いて、それらの^1H-^1HCOSYスペクトルを測定し、フィンガープリント領域(αH-NH相関領域)のスペクトルパターンを比較したところ、個々のプロトンの化学シフトは、概ね同一であることがわかった。本研究の主目的は、NMRを用いて野生型とArg14とHis15を欠失したリゾチーム(Δ14,15リゾチーム)の全アミノ酸残基の主鎖の動きを解析し、酵素活性の増加と共役して分子運動が変動している領域を明らかにすることである。このことを達成するためにまず均一に^<15>Nラベル化した野生型およびΔ1415リゾチームが必要となる。ラベル化する試薬^<15>NH_4Clは、高価であることから、効率の良い発現系を確立する必要がある。昨年度では、プロモーターpETの下流にリゾチームをコードする遺伝子を接続したベクターを大腸菌BL21(DE3)に組み込み、リゾチームを発現させる系で、培地1Lあたり(1gの^<15>NH_4Clを含む)、活性構造を持つリゾチーム5-10mg(野生型)、2-4mg(Δ14,15リゾチーム)を調製することができた。しかし、これらのリゾチームは、大腸菌由来なので、N末端にそれぞれのMetが付加している。このために野生型において極端に溶解度が低下し、緩和時間を測定する濃度には不十分であった。そこで、酵母Pichia pastorisを用いた発現系の確立を試みた。Pichia pastorisは、目的の遺伝子をこの酵母のクロモソームに導入し、目的の蛋白質を発現する系である。そのため、正しくはプロモーター下流に組み込まれている株を選び出す必要がある。数百の株の中から、1Lあたり野生型リゾチーム及びΔ14,15リゾチームをそれぞれ10mg程度発現するものを選別した。また、これは、メタノール代謝酵母であり、至適メタノール濃度を検討した。その結果、0.5%のメタノール存在下で、前培養と本培養に^<15>Nラベルした硫安をくわえておくことで、ほぼ定量的に^<15>Nが取り込まれているリゾチーム20mgを得ることができた。さらに、これらのリゾチームは予想どおりNMR測定には充分な溶解度を与えた。現在、これらの縦緩和及び横緩和速度定数、NOEを測定中である。この詳細な結果は、研究成果報告書に記載する。
ブタ原始生殖細胞の体外増殖能と特異糖鎖抗原の発現

本研究は,ブタ原始生殖細胞(PGC)の同定に関わる糖鎖抗原の特定と,標識された細胞がPGCであることを形態的および微細構造学的に明らかにすること,また対象となる糖鎖抗原の細胞内分布を示すことを目的に行われた。さらに,明確にされたPGCの分布と増殖パターンから,PGCの採取に最適な磁気と局在部位を明らかにすることによって,培養に必要なPGCの効率的採取方法を確立することを目的とした。種々の抗Lewis糖鎖抗体を使用することによって,PGCを標識する糖鎖抗原としてはLewis^xを対象として用いるのが最も効率がよく,その発現は少なくとも16から24日齢の間で確認できたが,22日齢以降には発現性の低下が認められ,まったく発現していないPGCもかなり認められた。Lewis^x低発現性,または非発現性のPGCはすでに生殖隆起内部に到達していた。移動途上にある後腸上皮,および背側腸間膜に分布するPGCでは強い発現性を示すことから,Lewis^xはPGCの移動に関連することが示唆された。免疫組織学および微細構造学的検討から,Lewis^x糖鎖はPGCの細胞膜表層では比較的均一に分布していたが,細胞質内では核以外の細胞質に不均一に分布していた。また,PGCの特徴と考えられる大きくて丸い核や球状ミトコンドリアが多く認められ,周囲の細胞との間には,多くの場合間隙を形成していた。移動期のPGCには,仮足を形成しているものも多く観察され,マウスなどの既報の哺乳動物と同様に,生殖隆起に向って自発的に移動していることが明らかにされた。これらの観察から,PGCの効率的採取には,1822日齢が適当であり,採取部位は中腎腹側ならびにそれに付随する後腸および背側腸間膜から採取するのがよいと考えられた。こうして得られた細胞をマウス用のES培養液で培養を試みたところ,増殖する細胞が認められ,Lewis^xの発現を認めたが,現在のところ,この細胞がPGCである証拠は認められていない。本研究は,ブタ原始生殖細胞(PGC)の同定に関わる糖鎖抗原の特定と,標識された細胞がPGCであることを形態学的および微細構造学的に明らかにすること,また対象となる糖鎖抗原の細胞内分布を示すことを目的に行われた。さらに,明確にされたPGCの分布と増殖パターンから,PGCの採取に最適な時期と局在部位を明らかにすることによって,培養に必要なPGCの効率的採取方法を確立することを目的とした。

また,PGCの特徴と考えられる大きくて丸い核や球状ミトコンドリアが多く認められ,周囲の細胞との間には,多くの場合間隙を形成していた。移動期のPGCには,仮足を形成しているものも多く観察され,マウスなどの既報の哺乳動物と同様に,生殖隆起に向かって自発的に移動していることが明らかにされた。これらの観察から,PGCの効率的採取には,1822日齢が適当であり,採取部位は中腎腹側ならびにそれに付随する後腸および背側腸間膜から採取するのがよいと考えられた。こうして得られた細胞をマウス用のES培養液で培養を試みたところ,増殖する細胞が認められ,Lewis^xの発現を認めたが,現在のところ,この細胞がPGCである証拠は認められていない。
コンテンツと「食」による新たなマーケティング戦略の構築

本研究により、海外ではコンテンツを通じて日本の「食」を認知する傾向が強く見られた。クールジャパン政策は本質的にコンテンツと「食」の関係を重視すべきだ。そうすればもっと海外での日本の競争優位性は高まっていくだろう。そしてそれが日本の独自性となり、インバウンド観光を促進することにもなっていくはずだ。ただ現状のクールジャパン政策は様々な省庁でそれぞれに実施されており、一見、効率性に欠けるように見える。2017年12月策定の内閣官房と文化庁の「文化経済戦略」が果たしてどこまで効果を上げるのかに関しては注視していきたいし、東京オリンピック以降にも継続性を持ち得るかについても議論を深めていく必要がある。本研究の目的は、マーケティング戦略のひとつであるプロダクトプレスメントに注目し、海外での日本のコンテンツ伝搬の際の「クール・ジャパン」事業の文脈において、マンガ、アニメ、映画などの作品と「食」の関わり方の検証を行うことにある。ただマンガ、アニメ、映画に関しては商業的なプロダクトプレイスメントという手法に限らず、作者の個人的な趣味により「食」が作中に描かれることも多い。あくまでこれは偶発の産物であるが、それによりコンテンツと「食」のクロスメディア的な関係を分析、考察することによって日本のコンテンツの、海外への伝搬を戦略的に捉えることが可能なのかもしれない。そのため、以下の調査を実施した。また翌年度に実施予定の現地調査のための事前調査を当該年度で行った。1.プロダクトプレイスメントの先行研究及び事例調査が当該年度の調査の中心であったが、ヒアリングを断わられた企業もあったが、コミックスウェイブを始めとして数社、ヒアリングを実施した。また文献調査も適宜、行った。また科研費とは別の予算で大連大学で「おにぎり」に関するイベントを実施、これも来年度の現地調査のために意味のあるものであった。特に現地の学生の「おにぎり」の認識はアニメからという意見が多かったことがもっとも印象的であった。この「おにぎり」は日本の「食」その一つの具体例だが、WEBで確認できるだけで「おにぎり」が登場するアニメ作品は50作品近くあったので、それも新たな発見であった。2.現地調査のための事前調査を台北(東立出版、マンガ作家から情報収集)、バンコク(タマサート大学、在住日本人起業家から情報収取)で行った。翌年度、実施のアンケート調査並びにヒアリング調査に役立てたいと考えている。まず当初予定していた企業のヒアリングに数社、断わられた。やはりプロダクトプレイスメントに関してはナーバスになる企業があったということである。確かにマネタイズの手法に関して、対価が発生してるかに関しては口外したくなというのが本音であろう。しかし差し支えない範囲で数社には答えてもらったので、引き続きサンプルは増やしていこうと考えている。ただヒアリングが難しい領域であることもよく理解できた。また海外での調査をひとりで実施するため、現地とのネットワーク作りが大変だった。これは現時点で充分な形が作れたかというともちろん完ぺきではない。翌年度の現地調査を効果的に実施するために、JETROや国際交流基金等の団体の力も借りるつもりである。しかし当初の予定からすれば、当該年度の進捗状況は概ね順調といえるのではないだろうか。本研究のひとつの学術的背景にはプロダクトプレイスメントというマーケティング手法がある。プロダクトプレイスメントとは、従来は映画の中でスポンサー商品をさりげなく登場させることで観客の深層心理に刷り込んだり、作品内で人気の演者にスポンサー商品を使用させることで、商品への好感を持たせようとするマーケティング手法である。「美味しんぼ」「孤独のグルメ」などグルメマンガも隆盛を極め、それ以外にもマンガ飯、アニ飯等と称されているコンテンツ作品の中に描かれている「食」を再現するレシピ本が売れている。同時にウェブでも個人レベルでのレシピコラムも増えている。また東南アジアでは「ラーメン」の普及にはアニメ「NARUTO」等の存在が大きいという声も聞かれる。日本のコンテンツが「食」と関連している現状が本研究構想の原点になった。台湾、タイでの調査の結果、日本の「食」は海外での認知度を高めており、その浸透に日本のコンテンツ作品が役割を果たしているといえるだろう。つまりコンテンツ作品と日本食という一見、関連性がないと思われるものもクロスメディア的に関わりを持っている点は重要だ。これも広義に捉えたプロダクトプレイスメントといえるに違いない。プロダクトプレイスメント的な手法が、日本の「食」にも、アニメを通じた形で海外に伝達されていることは特筆すべき点である。観光立国という文脈ではインバウンドは重要だが、コンテンツや「食」に関する議論がもっとあってもよい。おそらく一朝一夕に結果が出るものではないが、具体的な施策に関する議論がいかに活発化するかが問われるに違いない。ローカルが今まで以上に積極的に施策策定に取り組む姿勢が求められていくだろうし、ローカルも集客という観点からはそれぞれがインバウンドを視野に入れなければならない。

2017年12月策定の内閣官房と文化庁の「文化経済戦略」が果たしてどこまで効果を上げるのかに関しては注視していきたいし、東京オリンピック以降にも継続性を持ち得るかについても議論を深めていく必要がある。研究を進めていて、このテーマは意外と奥行きと広がりを伴うものだという実感がある。現地での日本文化の普及の歴史的な背景や、文化の輸出という手法のモラリティの問題とかの存在が見えてきた。2016年は『君の名は。』『あの世界の片隅に』といったヒットアニメが生まれ、本格的な海外への輸出の方向が具体的に見えてきた年でもあった。そういう意味では本研究を企画した時点と、調査する時点では周辺環境に大きな差があるので、そこをいかに消化していくかが最大の課題であろう。しかし台湾、タイともに日本のアニメには高い安心をユーザーが寄せてくれているので、研究のモチベーションは上がっている。単にマーケティング研究にとどまらない政策的な視点にも言及できればと考えているが、ただ時間的な制限があるので、それは次回の研究機会に委ねる方向になるかと考えている。文化地理学誤差の範囲かと思う。資料購入に回したいと考える。
耕作放棄の要因分析と対策に関する研究

農家の高齢化、担い手不足等を背景に耕作放棄地は増加している。耕作放棄地の増加は、我が国の農業生産、ひいては食料安全保障にも悪影響を及ぼし、耕作放棄の抑制は農政の重要な課題である。近年,米をはじめ,多くの農産物の価格は低迷している.そして,さらなる農産物価格低下によって耕作放棄地が増加することが懸念されている.そこで,本研究では,岡山県高梁市有漢町S集落を対象として,(1)まず,農家主体均衡論を基に,目標計画法を用いて,農家行動をモデル化した.(2)次に,このモデルを用いて,各農産物価格が低下した場合の耕作放棄行動をシミュレーション予測した.(3)さらに,諸耕作放棄抑制対策による耕作放棄抑制効果と,政策実施に必要な費用とを推測した.分析結果から以下の示唆を得た.1)米価が現状から20%低下しても耕作放棄は発生しないと予測される2)省力的な作物である小麦価格が現状から20%低下すると耕作放棄が発生すると予測される3)耕作放棄を抑制するためには,作付もしくは保全管理されている農地に面積当たり一定額の補助金を支払うことが有効である4)また,耕作放棄を抑制するためには,省力的な作物・農地利用の開発・普及が重要である本研究は,WTO交渉などに関連して農産物価格低下が懸念されるなか,農産物価格が低下することによって耕作放棄が増加することを示した.また,耕作放棄抑制対策を検討した.また,本研究で農家行動をモデル化した方法は,独自の方法であり,これまでの方法に比べ,短期間・低予算で分析することができる.農家の高齢化、担い手不足等を背景に耕作放棄地は増加している。近年,米をはじめ,多くの農産物の価格は低迷している.そして,さらなる農産物価格低下によって耕作放棄地が増加することが懸念されている.そこで,本研究では,岡山県高梁市有漢町S集落を対象として,(1)まず,農家主体均衡論を基に,目標計画法を用いて,農家行動をモデル化した.(2)次に,このモデルを用いて,各農産物価格が低下した場合の耕作放棄行動をシミュレーション予測した.(3)さらに,諸耕作放棄抑制対策による耕作放棄抑制効果と,政策実施に必要な費用とを推測した.分析結果から以下の示唆を得た.1)米価が現状から20%低下しても耕作放棄は発生しないと予測される2)省力的な作物である小麦価格が現状から20%低下すると耕作放棄が発生すると予測される3)耕作放棄を抑制するためには,作付もしくは保全管理されている農地に面積当たり一定額の補助金を支払うことが有効である4)また,耕作放棄を抑制するためには,省力的な作物・農地利用の開発・普及が重要である本研究は,WTO交渉などに関連して農産物価格低下が懸念されるなか,農産物価格が低下することによって耕作放棄が増加することを示した.また,耕作放棄抑制対策を検討した.また,本研究で農家行動をモデル化した方法は,独自の方法であり,これまでの方法に比べ,短期間・低予算で分析することができる.
陸海を統合した詳細ステレオ画像による南西諸島とその周辺海域の変動地形学的研究

本研究は,海底と陸上の詳細な地形データを用いて海陸を統合したステレオ画像を作成し,変動地形を読み解くことを通して,南西諸島沿岸域の地殻変動様式を検討することを目的としている。平成30年度は沖縄島の北端から西北西約30kmの伊是名島とその周辺を対象に,沿岸部の陸上と海底の地形の情報を作成・収集し,統合した数値標高モデルを作成し,1枚の画像で海陸を判読できる地形アナグリフや地図を作成した。陸上地形については,国土地理院のカラー空中写真をSfM-MVS技術を用いたソフトウェア(Agisoft社PhotoScan Professional 1.2.6)に取り込み,数値表層モデル(DSM)を生成して分析に用いた。一方,海底地形の情報は,1)海上保安庁の取得したマルチビーム測深データ,2)JAMSTECのデータ探索システム「Darwin」から収集したマルチビーム測深データ,3)(財)日本水路協会発行のM7020の等深線データ,4)海上保安庁の500m間隔のデータ(J-EGG500)を用いた。これらを統合して作成した地形アナグリフを変動地形学的な手法で判読したところ,西北西ー東南東方向に延びる活断層が陸上から海底に連続して延びることが新たに解った。地形の特徴から正断層と考えられ,沖縄島の北の島棚を横切る活断層と同様の走向,変位様式であった。伊是名島は東西約4km,南北約4kmの小規模な島であり,変動地形はこれまで報告されていなかった。孤立した小規模な島が分布する南西諸島などでは,最終氷期の地形が観察できる沿岸海底を含めて地形発達を検討することで広域的で連続的な変動地形が確認できるようになる可能性があることが示されたと考える。海域の測深データを収集・加工するとともに,陸上の詳細な地形データを自ら作成し,南西諸島沿岸域の海陸を統合した地形ステレオ画像を作成するとともに,この画像を変動地形学的に判読・分析して,琉球海溝から沖縄トラフにかけて海陸をまたいだ活構造を明らかにしようとしている。平成28年度は,SfM-MVSを用いて撮影年代の古い空中写真を用いて陸上地形の地形モデルを作成する方法について検討を行った。地形モデルに地理情報を与えるために行う測量を1周波のGNSS測量機器を用いて四国の中央構造線に沿った変位地形において実施し,地形モデル作成のための準備を行った。また,近年,南西諸島周辺海域においてナローマルチビームを用いて詳細な海底地形計測を広域的に行った産業技術総合研究所の研究チームと打ち合わせと議論を行い,沖縄本島北部周辺から沖永良部島周辺海域の地形データの提供を受けた。2016年4月に発生した熊本地震に伴って出現した地表地震断層を詳しく調査し,分布と変位量を明らかにするととともに,活断層によって形成されてきた変位地形と比較することを通して,正断層成分を伴う断層地形について検討を行った。島棚周辺に見られる正断層成分を伴う断層地形と比較する際に重要な視点をもたらすものと思われる。2016年4月に熊本地震が発生し,1995年の兵庫県南部地震以来,21年ぶりに明瞭な地表地震断層が出現した。この地震断層は正断層性の運動を伴っていることが明らかとなり,明治期以降初めて正断層による地震断層が詳細に記載された。地表地震断層の調査は活断層の作る地形を研究する上で,極めて貴重な研究対象であり,本課題研究で対象としている海底活断層の地形と比較対照させる上でも極めて重要である。人間活動および降雨や動植物の活動の活発な日本においては,地形が消滅する前に,できる限り速やかに地形を記載する必要がある。平成28年度においては,その調査研究を優先し,本研究課題が予定通り進まなかった。平成29年度は、まず,1970年代に撮影された空中写真を素材にしてSfM-MVSを用いて作成する地形モデルに関し,GCPの設定方法の違いによって生成される地形の精度の違いがどの程度あるかについて検証を行った。国土基本図を用いてGCPを設定した地形モデルとGNSSを用いて測位した位置情報をもとにしたGCPによる地形モデルを比較し,大きな違いがないことを確認した。次に,与論島において1970年代から大きく変化していない地点を抽出し,それらについて現地でGNSSによる測位を行った。また,その情報をもとに,SfM-MVSを用いて地形モデルを生成し,3mメッシュのDSMとした。産業技術総合研究所および海上保安庁,海洋研究開発機構で測深された海底地形データについて提供を受けたり,収集を行った。不足している地域については日本水路協会の等深線データを後藤(2015)の方法で加工し,与論島周辺海域の統合したDEMとした。これらの陸海の地形データを用いて,海陸を統合した地形図および地形アナグリフを作成した。これを変動地形学的に判読し,与論島の変位および変形様式を明らかにした。また,海底地形の変動地形を読みとるとともに,海底および陸上の変動地形の関連について検討した。一方,石垣島において,国土地理院のDEMおよび日本水路協会の等深線データを用いて,海陸を統合した地形図およびアナグリフを作成した。

海成段丘の地形分類と旧汀線高度の測定によって,島の南西部が最も隆起速度が大きく,西に傾動していること,その地殻変動の要因として島の南西近海に分布する海底活断層が関わっている可能性が高いことを明らかにした。1970年代に撮影された空中写真とGNSS測位による地理情報を用いてSfM-MVSによって精度良く地形モデルが生成できるようになった。与論島周辺を対象に,陸上地形についてはDSMの作成を行い,海底地形についてはこれまでに実施されたデータを入手して,これらを加工して海陸を統合する地形図およびアナグリフ画像が作成できた。石垣島については,国土地理院から詳細な地形データが公開されたことを踏まえ,年度当初予定していなかったが,周辺海域のデータを集めて地形発達について検討を行った。いずれの地域でも,これまでとは異なる地殻変動像が導き出されつつある。本研究は,海底と陸上の詳細な地形データを用いて海陸を統合したステレオ画像を作成し,変動地形を読み解くことを通して,南西諸島沿岸域の地殻変動様式を検討することを目的としている。平成30年度は沖縄島の北端から西北西約30kmの伊是名島とその周辺を対象に,沿岸部の陸上と海底の地形の情報を作成・収集し,統合した数値標高モデルを作成し,1枚の画像で海陸を判読できる地形アナグリフや地図を作成した。陸上地形については,国土地理院のカラー空中写真をSfM-MVS技術を用いたソフトウェア(Agisoft社PhotoScan Professional 1.2.6)に取り込み,数値表層モデル(DSM)を生成して分析に用いた。一方,海底地形の情報は,1)海上保安庁の取得したマルチビーム測深データ,2)JAMSTECのデータ探索システム「Darwin」から収集したマルチビーム測深データ,3)(財)日本水路協会発行のM7020の等深線データ,4)海上保安庁の500m間隔のデータ(J-EGG500)を用いた。これらを統合して作成した地形アナグリフを変動地形学的な手法で判読したところ,西北西ー東南東方向に延びる活断層が陸上から海底に連続して延びることが新たに解った。地形の特徴から正断層と考えられ,沖縄島の北の島棚を横切る活断層と同様の走向,変位様式であった。伊是名島は東西約4km,南北約4kmの小規模な島であり,変動地形はこれまで報告されていなかった。孤立した小規模な島が分布する南西諸島などでは,最終氷期の地形が観察できる沿岸海底を含めて地形発達を検討することで広域的で連続的な変動地形が確認できるようになる可能性があることが示されたと考える。平成29年度は,SfM-MVS技術と撮影年代の古い空中写真を用いて作成される地形モデルの精度検証を最初に実施する。また,沖縄本島北部周辺から沖永良部島周辺を対象に,国土地理院が1970年代に撮影したカラー空中写真を購入し,SfM-MVSソフトを用いて地形モデルを作成する。モデルに地理情報を与えるために,電子基準点を利用したGNSSによる高精度な測位を行う。沖縄県ではモデルに与える地理情報として国土基本図の利用可能性について検討する。産業技術総合研究所および海上保安庁等で測深されたデータを可能な限り収集し,加工してDEMに変換する。不足している地域については日本水路協会の等深線データを後藤(2015b)の方法で加工し,沿岸海域のDEMを生成する。
流体力のみを用いて潜水・浮上する生物型水中移動体の開発

本研究はオホーツク海の調査に用いるための水中移動体を実現するため、水中で流体力のみを利用して移動やホバリングをしていると考えられるマンタ(オニイトマキエイ)をモデルとした生物型水中移動体を開発することを目的としている。平成19年度は重心移動を利用して体軸のピッチ角を変化させ、流体力を利用して体軸方向に潜水または浮上する水中ロボットについて主として実験的に検討した。この方法は流体力のみを利用した潜水・浮上に該当しないが、昨年度までの浮力調整機構を用いる方式では体軸角度の変化が不十分だったので、この方式も検討が必要だと判断し研究対象とした。既存の羽ばたき型水中ロボットを改造して行った検証実験により、全長数10cmの水中ロボットの場合は重心と浮心との距離が50mm程度あれば、重心移動によりピッチ角±45°の範囲で安定して潜水・浮上できることが分かり、本研究の対象とする水中ロボットでも利用できる見通しを得た。上記の結果を踏まえ、重心移動を利用して潜水・浮上する羽ばたき型水中ロボットを設計した。このロボットは全長約50cmで、重心移動装置を本体中央部に設置し、これを利用して体軸のピッチ角を変化させる。ピッチ角は±45°の調整を可能とする設計とした。羽ばたき翼は重心付近の左右に設置する設計とした。全体設計及び詳細設計を終え、部品の製作に取り掛かるにいたったが、平成19年度中に完成させることはできなかった。本研究はオホーツク海の調査に用いるための水中移動体を実現するため、水中で流体力のみを利用して移動やホバリングをしていると考えられるマンタ(オニイトマキエイ)をモデルとした生物型水中移動体を開発することを目的とし、実機の開発・実験と数値計算の両面から研究を推進する。平成17年度はヒレ運動の解析を行うため、任意のひねり角および位相遅れを実現できる羽ばたき推進性能測定装置を製作し、これを回流水槽に設置してその性能を評価した。その結果、これらの装置が羽ばたき型推進の特性評価に利用できること、計測される推力は翼素理論による予測と同様の傾向を示すことが示された。ただし計測された値は予測値より10倍程度大きく、非定常効果の適切な取り扱いが必要であることが示唆された。また計測の信頼性向上や可視化による流れ場の把握などが課題として残った。また、マンタのように柔らかいヒレを変形させながら振る遊泳方法を解析するため、柔らかいヒレを有するマンタ型小型水中移動体を製作し、水槽試験によってヒレの変形の様子を観察するとともに、ヒレの変形を数値解析によって予測した。この数値解析では流体力の予測には翼素理論を用い、これとヒレの変形の材料力学的計算とを連成させて解くプログラムを新たに開発した。この解析結果から、非定常効果を考慮しない場合は実験結果と解析結果の傾向に違いがあること、非定常効果を仮想質量として導入することで、傾向が近づくことが示された。しかし仮想質量の適切な導入方法を示すにはいたらず、今後の研究課題として残された。またこの解析により、ヒレのひねり方を適切に与えることによる羽ばたき運動の性能向上が可能であることが示唆された。平成18年度は17年度に開発した羽ばたき推進性能測定装置の改良に努めた。測定部を作り変えて不要な応力を排除し、課題であった計測の信頼性向上に成功した。またこれを用いて2次元翼及びテーパ翼を用いた性能測定を行い、これら2つの翼の羽ばたき周波数に対する特性が異なることを見出した。この羽ばたき推進性能測定装置が行うヒレの動作によって発生する流れ場を計測する手法を検討し、3次元流速の点測定を系統的に行う方法を選択した。この選択に基づき、5孔ピトー管を用いた3次元流速測定装置を設計・製作した。性能評価や測定には至らず、19年度以降の課題として残された。また、浮力を利用して体軸のピッチ角を変化させ、流体力を利用して体軸方向に潜水・浮上する羽ばたき型水中ロボットを設計・開発した。このロボットは浮力調整装置を本体内前方と後方に2機設置し、これを不平衡に調節することで浮心位置を変化させ、体軸のピッチ角を変化させることを目指している。本ロボットの詳細な性能測定には至らず、これも19年度以降の課題として残された。

既存の羽ばたき型水中ロボットを改造して行った検証実験により、全長数10cmの水中ロボットの場合は重心と浮心との距離が50mm程度あれば、重心移動によりピッチ角±45°の範囲で安定して潜水・浮上できることが分かり、本研究の対象とする水中ロボットでも利用できる見通しを得た。上記の結果を踏まえ、重心移動を利用して潜水・浮上する羽ばたき型水中ロボットを設計した。このロボットは全長約50cmで、重心移動装置を本体中央部に設置し、これを利用して体軸のピッチ角を変化させる。ピッチ角は±45°の調整を可能とする設計とした。羽ばたき翼は重心付近の左右に設置する設計とした。全体設計及び詳細設計を終え、部品の製作に取り掛かるにいたったが、平成19年度中に完成させることはできなかった。
筋萎縮に対する鍼通電療法の臨床応用に向けた基礎研究

我が国の高齢者人口の増加に伴い、高齢者は骨格筋の筋力低下を有し、その結果、介護を必要とする人の増加が予想される。筋力の低下は、転倒を引き起こす要因であり、転倒を主とし介護が必要となる場合も多くみられる。近年、介護を取り巻く仕組が大きく変化し、地域で患者をケアしていく地域包括ケアシステムが構築された。この取り組みの中で、鍼灸師の果たす役割も大きくなりつつある。鍼灸刺激に関する多くの研究が、自律神経、疼痛、筋緊張に対するものであり、鍼刺激そのものが骨格筋に与える影響を検討した研究は少ない。しかしながら、筋緊張緩和や疼痛軽減のみならず鍼刺激が骨格筋の筋力維持や筋萎縮抑制に影響できると考えており、本研究においては、臨床応用可能な刺激について明らかとすることを目的としている。我々は、これまで上腕二頭筋に対する鍼通電刺激の影響を刺激周波数や刺激時間を中心に検討してきた。しかしながら、高齢者の転倒などに着目した場合、下肢の筋力に着目することが重要となる。そこで、下腿にある前脛骨筋と下腿三頭筋への鍼通電刺激による影響を検討した。100Hzの鍼通電刺激を行ったところ、両筋への刺激の電流量に差はなかったが、上腕二頭筋への電流量と比較すると低下傾向であった。鍼通電刺激後の筋力の変化は、前脛骨筋では筋力の減少傾向が認められたが、下腿三頭筋では刺激前後での差は認められなかった。また、どちらの筋においても刺激後に不快感が残る傾向が認められた。これまでの研究成果から、低頻度(1Hz)の鍼通電刺激と比べ、高頻度(100Hz)では、高頻度鍼通電刺激において、速筋線維に対し選択的に刺激を及ぼす一方で、刺激部位により刺激後に違和感が強くなることや筋力に影響を及ぼす可能性もある。現在実施した刺激強度よりも強度を下げて検討することで、筋力の低下抑制や維持・増進を目的とする鍼通電刺激の有用性が見出せる可能性がある。現在、我が国において介護を必要とする高齢者の数は500万人を超える。この介護人口に対し、介護保険の仕組も変化している。医療・介護サービスを行うスタッフの一人としてはり師・きゅう師も挙げられてきており、鍼灸における基礎研究の必要性は高まっている。そこで、本年度は鍼通電刺激実施による刺激量の定量化について取り組んだ。まず、定量化に際し、鍼の刺入深度を確認するため、超音波画像診断装置を用い、大腿部への鍼の刺入状況の確認を行う。次に、鍼通電刺激装置を用いて、1Hz、4Hz、8Hz、15Hzの撮影を行った。超音波画像診断装置で筋の収縮が確認できる上限が10Hz程度であることがわかった。また、視覚的に筋の収縮が感じられていないが、被験者が筋の収縮様の感覚を得ている場合には、明らかな筋収縮が画像上においても認められないことがわかった。我が国の介護を必要とする高齢者の数は500万人を超え、介護保険の仕組みも変化している。要介護となる原因疾患の第1位は脳血管障害であり、その後遺症として引き起こされる片麻痺は患者のQOLの低下を招く。近年、介護される患者を中心とした仕組みの中で、地域包括ケアシステムが示され、その中におけるはり師きゅう師の役割も高い。この仕組みの中で鍼灸を業する場合、そして他業種との連携を組むうえで、他業種にも理解される鍼灸の基礎研究の成果が求められている。そこで、本研究では片麻痺など不動により誘発される筋萎縮に対する効果的かつ臨床研究へ応用可能な鍼通電刺激法とその効果を明らかとする。本年度は昨年度より実施している周波数による鍼通電刺激の収縮の定量化及び収縮における生体反応について評価した。なお、鍼通電刺激による筋収縮高の定量評価については、動画データを静止画像として取り込み、現在評価解析中である。また、鍼通電刺激による生体反応の評価として、1鍼通電刺激後の筋力の変化、2鍼通電刺激による血糖値、乳酸値の変化についての評価を試みた。1、2ともに刺激周波数は1Hz、10Hz、100Hzであった。各周波数は臨床において、疼痛の緩和や筋循環の改善を目的として用いられている周波数である。筋力は1Hzにくらべ鍼通電刺激後に100Hzの方が減少傾向がみられた。一方、乳酸値は100Hzにおいて鍼通電刺激後に増加傾向が見られた。これらの結果から、100Hzは治療後に筋の収縮能力を低下させる可能性が示された。画像所見の定量化が進んでいない。我が国の高齢者人口の増加に伴い、介護を要する人の数も増加する事が予想されている。介護を要する際、原因となる疾患の一つとして脳血管障害が挙げられる。脳血管障害患者の多くは後遺症として片側が麻痺する事がある。片麻痺は患者のQOL低下を招く恐れもある。近年、このような患者を他職種と連携し地域でケアするシステムが構築されてきた。このシステムの中ではり師・きゅう師が担う役割も多くある。しかし、片麻痺やその後に誘発される筋萎縮に対する明確な鍼灸の臨床効果は少なく、その基礎研究の成果が求められている。本研究においては、不活動により誘発される筋萎縮に対する鍼通電刺激について効果的かつ臨床応用可能な刺激法についてその効果と共に明らかとすることを目的としている。

平成27年度、上腕二頭筋に対し1Hz、10Hz、100Hz(連続)の刺激周波数について15分間の鍼通電刺激を行い、筋力の評価と共に血糖値、血中乳酸濃度を指標とした評価を刺激前後で検討した。その結果、100Hz(連続)の周波数による鍼通電刺激後に筋力低下の可能性、血中乳酸濃度の上昇を示した。しかし、15分間の鍼通電刺激は、長時間同一姿勢をとる必要があり、患者の負担も大きくなることから、平成28年度は同様の刺激において10分間での効果を検討した。その結果、15分間で得られた結果と同様の結果が得られた。さらに、100Hz(連続)の刺激は筋力低下を招くことから、100Hzの間欠刺激での効果を検討した。100Hzの間欠刺激では、筋力の明らかな低下は認められなかったものの、血中乳酸濃度は100Hz(連続)に類似した効果が得られた。これらの結果から、10分間での100Hz(連続)および100Hzの間欠が効果的な刺激である可能性がある。昨年度の研究成果を踏まえ、刺激周波数だけでなく、刺激時間の違いによる速筋線維への治療効果について検討する事ができた。上腕二頭筋への鍼通電刺激後に生じる乳酸は、特に速筋線維の収縮に伴い発生する。これらの事から、本研究で得られた100Hzの高頻度鍼通電刺激は、速筋線維を選択的に収縮させる可能性があることが考えられる。一方で、筋線維タイプによる反応性の違いは検討できていないため。我が国の高齢者人口の増加に伴い、高齢者は骨格筋の筋力低下を有しその結果介護を必要となる人の増加が予想される。筋力の低下は、転倒を引き起こす要因のであり、転倒を主とし介護が必要となる場合も多くみられる。近年、介護を取り巻く仕組が大きく変化し、地域で患者をケアしていく地域包括ケアシステムが構築された。この取り組みの中で、鍼灸師の果たす役割も大きくなりつつある。鍼灸刺激に関する多くの研究が、自律神経、疼痛、筋緊張に対するものであり、鍼刺激そのものが骨格筋に与える影響を検討した研究は少ない。しかしながら、筋緊張緩和や疼痛軽減のみならず鍼刺激が骨格筋の筋力維持や筋萎縮抑制に影響できると考えており、本研究においては、臨床応用可能な刺激について明らかとすることを目的としている。我々は、これまで上腕二頭筋に対する鍼通電刺激の影響を刺激周波数や刺激時間を中心に検討してきた。しかしながら、高齢者の転倒は上肢の筋力低下によるものではなく、下肢の筋力やバランス能力に影響される。そこで、平成29年度は上肢の上腕二頭筋への影響だけでなく、下肢(下腿)の筋である下腿三頭筋と前脛骨筋に対する鍼通電刺激を行い、その影響を検討した。上腕二頭筋と前脛骨筋は速筋線維であり、上肢と下肢での刺激による変化の有無について検討した。その結果、筋力や血中乳酸濃度を指標とした場合、上下肢の変化に差はなかったものの、下肢への刺激が不快感を顕著とした行った。また、現在、前脛骨筋と下腿三頭筋への影響について検討している。これは、筋線維タイプの構成が速筋が主体となる前脛骨筋と遅筋が主体となる下腿三頭筋との反応特性をみるために実施している。これにより、速筋線維、遅筋線維への鍼通電刺激の有用性が示せる可能性がある。これまでの研究成果を踏まえ、下腿の筋線維タイプの異なる筋への影響を検討している。しかし、十分な被験者数の確保に至っておらず、継続した研究実施が必要である。さらに、生化学評価実施予定であったものの、測定が終わっていない。
インスリン分必顆粒輸送の可視化解析-貯蔵からFusionまで-

膵β細胞内insulin顆粒の貯蔵からフュージョンまでの細胞内トラフィックを詳細に研究する手法として,入射角可変式全反射顕微鏡(V-TIRFM)を新規開発し、分泌顆粒の時間空間的動態解析を行った(Proc.SPIE, 2006)。V-TIRFMは従来のTIRF顕微鏡とは異なりエバネッセント場を任意に調節することができるため、カバーガラス上の細胞の形質膜近傍から細胞質内部までの蛍光変化を任意の厚さで高空間分解能で観察可能な顕微鏡である。この新規開発したV-TIRFMを用いて、insulin-GFPを初代培養膵β細胞に発現させることで特異的に標識したinsulin顆粒の貯蔵からフュージョンまでの細胞内動態を観察し、単一顆粒レベルで画像解析した。β細胞内のインスリン顆粒の貯蔵状態を調べたところ,細胞には形質膜上にドッキングしている顆粒のプールと、形質膜より約500nm内部に存在する細胞質内顆粒プールの少なくとも2つの顆粒の貯蔵プールが存在していた。高グルコース刺激下での分泌第1相に相当する刺激後5分以内のinsulin分泌では、前者の形質膜上貯蔵プールよりの顆粒のフュージョンが選択的に観察された。一方,刺激後5分以降のinsulin分泌第2相では、後者の細胞質内貯蔵プールより形質膜に選択的に供給され、非常に短時間(<50ms)dockingした顆粒のフュージョンが観察された。なお、この細胞質内貯蔵プールは細胞骨格系蛋白質、とくにアクチンによって調節されており、その調節分子機構を現在検討している。このように新規V-TIRFMを用いて、2相性insulin分泌を担っている顆粒の細胞内貯蔵プール及びフュージョンまでの細胞内トラフィックの実態を初めて明らかにすることができた。本研究では、ヒトインスリンのC末端にGFPを融合したキメラ蛋白質を初代培養膵β細胞に発現させることでインスリン顆粒を標識し、全反射顕微鏡(TIRFM)下で顆粒の動態を時間的空間的に解析し、分泌顆粒の貯蔵→形質膜へのターゲティング→ドッキング→プライミング→融合(fusion)をリアルタイムでかつ単一顆粒レベルで画像解析し、以下の点を明らかにした。(1)グルコース刺激による膵β細胞からのインスリン分泌は2相性である。1)高glucose刺激下での分泌第1相では予めdockingしている顆粒からのfusionが見られ、第2相では新たに供給されて形質膜上にdockingした顆粒からのfuisonが観察された。2)第2相で観察される顆粒のdocking時間は50ms以下であり、第1相に比べて非常に短かった。3)第1相での顆粒のfusion部位はTAT融合Cy3標識抗体を用いた解析からsyntaxin1 clusterの局在と一致したが、第2相ではsyntaxin1 clusterとは異なる部位でfusionが観察された。以上の結果より第1相と第2相におけるインスリン顆粒の開口放出機構は共通のメカニズムではなく、顆粒のプライミングの状態および放出部位が異なっている可能性が強く示唆された(Biochem.J.2004,Diabetologia,2004)。(2)CASTは神経synapseのactive zone構成蛋白質(CAZ : cytomatrix at the active zone)である。本研究で私達はCAST2が膵β細胞に存在し、insulin顆粒のdocking/fusionを調節していることを見出した。免疫電顕法による膵島の解析ではCAST2はblood vesselに面したβ細胞の形質膜上に局在していた。TIRFMによるMIN6β細胞の観察では、CAST2は形質膜上でclusterを形成しており、insulin顆粒はsyntaxin clusterと共局在しているCAST2 cluster上にdockingし、fusionはCAST2 cluster上で選択的に引き起こされた。CAST2のCAZ complex形成を阻害するペプチドを細胞内に導入した場合、またCAST2 siRNAを細胞内に導入した場合、インスリン顆粒のdocking/fusionが強く阻害された。以上の結果よりCAST2はインスリン顆粒のexocytosis部位を規定しており、docking/fusionを調節している可能性が強く示唆された。このようにCAZタンパク質CAST2は神経細胞における神経伝達物質放出に関与するだけでなく、膵β細胞におけるインスリン分泌にも関与していることが示唆された(Mlo.Cell.Biol.in submitted)。

一方,刺激後5分以降のinsulin分泌第2相では、後者の細胞質内貯蔵プールより形質膜に選択的に供給され、非常に短時間(<50ms)dockingした顆粒のフュージョンが観察された。なお、この細胞質内貯蔵プールは細胞骨格系蛋白質、とくにアクチンによって調節されており、その調節分子機構を現在検討している。このように新規V-TIRFMを用いて、2相性insulin分泌を担っている顆粒の細胞内貯蔵プール及びフュージョンまでの細胞内トラフィックの実態を初めて明らかにすることができた。
種多様性の連鎖反応が強化する生態系サービス：ハエ目―天敵―害虫系による検証

本研究は、複数の栄養段階を縦断した種の多様性と生態系サービスの連鎖効果を検証することを目的とした。水田に生息する造網性クモ類(天敵)、害虫(ヨコバイ、ウンカ、カメムシ)、ハエ目昆虫(クモの主要な餌で、「ただの虫」)の3つの栄養段階に着目し、「ハエ目の種多様性が天敵の多様性を支え、それが害虫防除の効果を強化する」、という仮説を検証した。調査と解析の結果、ハエ目の種の季節的入れ替わりがハエ目全体の密度を高め、密度の変動を安定化させることがわかった。また、ハエ目の量は、クモ類の個体数に影響を与えること、クモ類の個体数は害虫のカメムシ類に負の影響があることが示唆された。本年度は、栃木県塩屋町の水田において、水田害虫の天敵であるアシナガグモ類(3種ほど存在する)の主要な餌であるハエ目(ただの虫)の多様性が、ハエ目自身の個体数の時間変動や天敵(アシナガグモ類)の個体数に及ぼす影響を明らかにするため、以下の2つの仮説を検証した。1ハエ目の季節的な種の時間的入れ替わり(相補性)は、ハエ目の個体数の変動を安定化させ、個体数を高める、2ハエ目の個体数が増加するほどアシナガグモ類の個体数が高まる。調査は季節的な種の相補性を評価するため、2015年68月にかけての6時期で調査を行った。具体的には、本年度は、そのうちの4時期でハエ目の同定と個体数の計測を行った。まず、仮説を検証するための指標を決定した。ハエ目の種の季節的な相補性の指標としては、時期が移り変わる際に群集中に加入する種数(加入種数)、そして、ハエ目の季節的な個体数の安定性や個体数のレベルを示す指標は独自に指標を作成した。解析の結果、農法によって傾向が異なっていたもののハエ目の加入種数は自身の安定性や個体数を高める傾向があること、そして、ハエ目の個体数がアシナガグモ類の個体数を増加させることが示唆することができた。なお、ハエ目にはユスリカやチョウバエ、ヌカカ、タマバエなどが含まれている。なお、3月の日本生態学会大会では、この研究でポスター発表をした学生が優秀賞を受賞した。ハエ目の種レベルの同定はDNA解析が必要であるが、現在は材料を採集するにとどまっている。しかし、研究協力者の承諾も受けているため、次年度前半には目立がたつ見込みである。栃木県塩谷町において、水田害虫の土着天敵として知られるアシナガグモ類が水田と水路の餌量の季節的な変化に応じて、生息環境を変えることを明らかにした。この地域のアシナガグモ類は、主に非耕作期は代替生息地として水路を利用していること、害虫以外に水辺から発生するハエ目昆虫が主な餌であることがわかっている。このことから、以下のような仮説を検証した。1アシナガグモ類の個体数は、餌量とともに多くなる。2餌量は、水田で水深が低くなるほど少なくなる。3水田で水深が低くなるにつれて、水田よりも代替生息地である水路で餌量は多くなる。4田植え直後の水路でアシナガグモ類の個体数が多いほど、水田に移入する個体数が多くなる。5水田でアシナガグモ類の個体数が多いほど、その周辺の水路の個体数が後に多くなる。本研究では、まずアシナガグモ類が実際に捕食している餌量を定量的に評価する方法を確立した。そして、4時期で水田と水路のアシナガグモ類の個体数と餌量を評価した。その結果、仮説の1、2、3、4が一部支持された。1に関しては、水路から水田へ移入を開始する時期に、餌量ではなく、移入する前の水路の個体数が有意に影響しており、また水路の餌量が多い場所で個体数が多くなった。これは水路から水田へのスピルオーバーを示唆している。また、水田で最も水深が低くなる時期では、餌量と水深に有意な関係性はなく、水深が直接アシナガグモ類に有意な影響を及ぼしていることがわかった。今年度は昨年度採集したハエ目のDNAバーコーディングを行うとともに、アシナガグモ類を採集し、胃内容物に含まれるDNAを抽出して、実際にどのような餌を季節を通して食しているか明らかにする。その結果をもとに、ハエ目の多様性に対するアシアシナガグモ類の餌メニューの応答、および植食性昆虫への餌の季節的シフトを明らかにする。生態学当初は採集したサンプルを使ってDNAの予備解析を行う予定であった。しかし、採集サンプルの同定作業に予想以上に時間がかかったことから、翌年度に持ち越すことになった。5月中旬以降からDNAの予備解析に着手する予定である。
英文学における「中世」と「ルネサンス」の時代区分に関する表象文化論的考察

「中世」と「ルネサンス」の時代区分について、実体的連続性、実体的断絶性、歴史表象としての区分という三点に分けて考察を進め、それぞれ以下のような結論を得た。(1)実体的連続性--言語的基盤から見るならば、ラテン語と英語という二重構造はほぼ変わらず「中世」「ルネサンス」を通底する。もちろん古典的正統ラテン語の復活あるいは英語も中英語から近代英語へという大きな変容はあったが、知の言語的基盤の二重構造では重要な連続性が存在した。文化的基盤という観点からもトロイを起源とするヨーロッパに普遍的な歴史的神話とそれに接続するロマンスが厳然と存在し、その限りでは、この面においても連続性が認められる。(以下、一章「アングロサクソン」と第二章「ルネサンス」と参照。)(2)実体的断絶性--悲劇という演劇的ジャンルに典型的に現れているように、主体の内面の世界への探求という心理的モーメントは、ひとつの断絶として捕らえられるだろう。これは主客の別にたいする意識の強化と言ってもよいが、このことは、逆に見るならば、相容れない矛盾的要素の包含ととられることもできる。これは、古代ギリシアに象徴される異教的要素の積極的導入に通じる。(以下、第二章「ルネサンス」を参照。)(3)歴史表象としての区分--「ルネサンス」と「中世」は同時発生的であるが、その表象区分の歴史的根源はペトラルカが直前の時代に抱いた「暗黒時代」という感覚に始まる。その歴史的感覚は、宗教上の「プロテスタント」的批判的精神により研ぎ澄まされ、さらに、世俗国家台頭とともに高まった国民文化形成への意識と密接に関係する。これらの基盤を共有する種々の要素がそれぞれ確立してゆくなかで、「中世」と「ルネサンス」の時代区分は明確化されていった。(以下、第二章「ルネサンス」と第三章「17世紀」を参照。)「中世」と「ルネサンス」の時代区分について、実体的連続性、実体的断絶性、歴史表象としての区分という三点に分けて考察を進め、それぞれ以下のような結論を得た。)「中世」と「ルネサンス」の時代区分を具体的に見るには後者に視点を定めるのが妥当であり、シェイクスピアとエドマンド・スペンサーに考察の土台を置くことにした。シェイクスヒアの場合に限って報告すれば作品群を概観したとき、空間・場所的には土着のイギリスと異国のヨーロッパ大陸との大別がある。その上で、時間軸でみると、イギリスの場合は、殆ど同時代と思しき極少数の喜劇を除けば、12世紀から16世紀初頭に及ぶ英国史が構想されており、それと切れたかたちで古代英国の世界を描いている。ヨーロッパ大陸の場合は、同時代に属するものとして、「ルネサンス」と思しき文化状況を背景に、唯一北欧のデンマークを除くならば、多くはイタリアを舞台とした作品が書かれている。また、この「現代」イタリアの世界とはやや区別されたかたちで、古代ローマを扱う一連の作品が構想されている。古代ギリシアも僅かに取り上げられているが、それは少なくとも18世紀以降に想像される「古代ギリシア」とは明らかに異なるものである。このような作品世界を基にして、「中世」と「ルネサンス」の時代区分を再考するならば以下のようになる。「ルネサンス」に関わる指標は、(1)「現代イタリアもの」においてその文化的背景と主題に、(2)「古代ローマ劇」という対象とその主題に、(3)「英国史劇」という自国の歴史を扱うその態度にも看取しうる。但し、近代に暗黙の了解とされている「ルネサンス」=「ギリシア文芸復興」というイメージは読み取りがたい。『トロイラスとクレシダ』は古代ギリシア(トロイア)を舞台とするが、ギリシア文芸の復興といった雰囲気は全くなく、かえって中世以来の「トロイア物語」の伝統を想起させ、時代的断絶を前提とする「ルネサンス」というよりは、「中世」との連続性を感じさせてしまう。

この世界像における「連続」の問題こそ本研究課題の鍵を握る課題であり、次年度はこれに焦点を当てる。「中世」と「ルネサンス」の時代区分について、実体的連続性、実体的断絶性、歴史表象としての区分という三点に分けて考察を進め、それぞれ以下のような結論を得た。(1)実体的連続性--言語的基盤から見るならば、ラテン語と英語という二重構造はほぼ変わらず「中世」「ルネサンス」を通底する。もちろん古典的正統ラテン語の復活あるいは英語も中英語から近代英語へという大きな変容はあつたが、知の言語的基盤の二重構造では重要な連続性が存在した。文化的基盤という観点からも、トロイを起源とするヨーロッパに普遍的な歴史的神話とそれに接続するロマンスが厳然と存在し、その限りでは、この面においても連続性が認められる。(2)実体的断絶性--悲劇という演劇的ジャンルに典型的に現れているように主体の内面の世界への探求という心理的モーメントは、ひとつの断絶として捕らえられるだろう。これは主客の別にたいする意識の強化と言ってもよいが、このことは、逆に見るならば、相容れない矛盾的要素の包含ととられることもできる。これは、古代ギリシアに象徴される異教的要素の積極的導入に通じる。(3)歴史表象としての区分--「ルネサンス」と「中世」は同時発生的であるが、その表象区分の歴史的根源はペトラルカが直前の時代に抱いた「暗黒時代」という感覚に始まる。その歴史的感覚は、宗教上の「プロテスタント」的批判的精神により研ぎ澄まされ、さらに、世俗国家台頭とともに高まった国民文化形成への意識と密接に関係する。これらの基盤を共有する種々の要素がそれぞれ確立してゆくなかで、「中世」と「ルネサンス」の時代区分は明確化されていった。