hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヴィクトリア朝散文家におけるロマン派詩論の継承と発展

否定的な視点で捉えられることの多いペーター作品をもう一度ロマン派継承の面から肯定的に捉えようとする試みである。3については、昨年度掲載が決定し、本年、ランカスター大学のラスキンセンターより出版された論文を翻訳し、手を加えたものが国内の学術雑誌に掲載決定した。
炭素薄膜とナノチューブによる太陽電池

カーボンナノチューブ(CNT)による太陽電池の研究ダブルウォールカーボンナノチューブ(DWCN)とマルチウォールカーボンナノチューブ(MWCN)を光導電性ポリマーP3HTに混入してヘテロ接合太陽電池を作製した。また、DWCNやMWCNを添加した場合と添加しない場合のドナー:アクセプター型太陽電池の作製にも成功した。カーボンナノチューブの添加は、電荷の輸送、エキシトンの分離およびキャリアの再統合を減少させることを見出した。これらの効果は、太陽電池の高効率化と長期間使用を可能にするものである。ダブルウォールカーボンナノチューブ(DWCN)の電界電子放出の研究DWCNの電界放射部を液滴法により作成して、平面放出電極を構成した。そして、3,000分以上の連続電子放出を確認した。DWCNが電界電子放出の電極として、最も適合していることを示した。高分子型燃料電池用電極の研究マルチウォールカーボンナノチューブ(MWCN)を、カーボン原料とフェロセン触媒を用いることにより、熱CVD法により作成した。その後、高純度化することにより、10%20%の白金PtをMWCNに添加した。これをプロトン輸送メンブレンとして、高分子型燃料電池を試作した。そして、分極特性を測定した。その後、H_2およびO_2ガスを用いて燃料電池特性を求めた。最大電力として、167mWの電力を6cm^2の面から得ることができた。この予備実験は、今年3月、東京大学で開催された"Molecular Electronic and Bioelectronics (MBE4)"国際会議で発表し、多くの人々から注目を集めた。これらの成果は、Japan.J.Applied Physicsの2008年2月号に掲載される。炭素薄膜とナノチューブによる太陽電池に関して、まず非晶質カーボン膜を作成するために、周波数2.4GHzのマイクロ波による表面波プラズマのCVD装置を用いて実験して、SP^2/SP^3比を変化させることによりバンドギャップエネルギーを0.8evから3.5evまで広範囲に制御できることに成功した。基板としてシリコン,石英,およびITOガラスを用いた。窒素をドープしたカーボン薄膜の物性を評価した。その結果は、論文としてPhysica Status Solidi (a) 2006年3月号に掲載されることになった。次に、熱CVD法により樟脳やフェロセンを用いてカーボンナノチューブをn-Si, ITOガラスや石英の基板上に作成することに成功し、太陽電池を製作した。この太陽電池は開放電圧が0.60.8ボルトの高い値を得ることができ、太陽電池に適していることを明らかにした。これらの成果は、Chemical Vapor Deposition, Diamond and Related MaterialおよびMacromolecular Chemisty and Physicsに投稿している。3番目に、パルス放電プラズマCVD法により垂直配向した円筒非結晶質カーボンナノチューブ(VA-CACNs)の作成に成功した。これらのカーボンナノ構造は、HR-TEM, FE-SEM, EDAXおよび他の物性測定手法を用いて評価した。この研究成果は、国際的学術誌「Chemical Vaper Deposition」に掲載されることになった。
ヒトパピローマウイルスによる発がんの解析

子宮頸癌やEV患者の皮膚癌とヒトパピローマウイルスとの関係を明らかにすべく,ヒトパピローマウイルスの遺伝子,及び子宮頸癌中のHPVにつき検討を加え,本年度は以下の結果を得ることができた.(1)宿主域の狭いHPVのbioossay系の開発を目指し,レトロウイルスベクター(pZipneoSV_x1)にHPVの遺伝子を挿入し,効率よくHPVの遺伝子を発現できる系を作成した.同系を用いてHPV16のtranstorming遺伝子に関する解析を行い, i)HPV16の初期遺伝子領域にコードされているE_6ORF(open reading frame)がヌードマウスでの造腫瘍性に関与していること, ii)E_6ORFは, fransforming phenotypeの発現を支配し,またラット初代培養細胞のimmortali zationに関与していること, iii)E5ORFは株細胞の造腫瘍性に関与している可能性が高いこと(E5ORFをΨ2細胞にtransfectすると同細胞はヌードマウスに対してnudule形成能を示した). iv)E_2ORFはtrans-acting機能を持つと同時にE6ORFによる造腫瘍性を抑制する働きがあること,をそれぞれ明らかにした.(2)子宮頸癌とHPVとの関係をより一層明確にすべく,子宮頸癌組織中のHPVDNAの検索を行い,インドネシアの子宮頸癌患者の癌組織からHPVDNAを分離,分子クローニングすることに成功し,制限酵素地図や, hybridization試験の結果,同HPVDNAがHPV6, 11, 16, 18, 31, 33及び38型と異なった.新しいタイプのHPVであることを確認した.現在,子宮頸癌組織中のHPVDNAの検出率に地域差の存在が指摘されているが今後このような未知タイプHPVの分離は,上記理由を解明していくうえで重要な知見を提供するであろう.子宮頸癌やEV患者の皮膚癌とヒトパピローマウイルスとの関係を明らかにすべく,ヒトパピローマウイルスの遺伝子,及び子宮頸癌中のHPVにつき検討を加え,本年度は以下の結果を得ることができた.(1)宿主域の狭いHPVのbioossay系の開発を目指し,レトロウイルスベクター(pZipneoSV_x1)にHPVの遺伝子を挿入し,効率よくHPVの遺伝子を発現できる系を作成した.同系を用いてHPV16のtranstorming遺伝子に関する解析を行い, i)HPV16の初期遺伝子領域にコードされているE_6ORF(open reading frame)がヌードマウスでの造腫瘍性に関与していること, ii)E_6ORFは, fransforming phenotypeの発現を支配し,またラット初代培養細胞のimmortali zationに関与していること, iii)E5ORFは株細胞の造腫瘍性に関与している可能性が高いこと(E5ORFをΨ2細胞にtransfectすると同細胞はヌードマウスに対してnudule形成能を示した). iv)E_2ORFはtrans-acting機能を持つと同時にE6ORFによる造腫瘍性を抑制する働きがあること,をそれぞれ明らかにした.(2)子宮頸癌とHPVとの関係をより一層明確にすべく,子宮頸癌組織中のHPVDNAの検索を行い,インドネシアの子宮頸癌患者の癌組織からHPVDNAを分離,分子クローニングすることに成功し,制限酵素地図や, hybridization試験の結果,同HPVDNAがHPV6, 11, 16, 18, 31, 33及び38型と異なった.新しいタイプのHPVであることを確認した.現在,子宮頸癌組織中のHPVDNAの検出率に地域差の存在が指摘されているが今後このような未知タイプHPVの分離は,上記理由を解明していくうえで重要な知見を提供するであろう.
科学実験を行うための安全教育特化型英語視聴覚教材作成

科学実験を安全に行うための高校生、高専生、大学生向けの英語の視聴覚教材を作成した。化学実験及び物理実験を扱った。化学実験ではバーナー、安全ピペッター等、物理実験ではオートクレープ、レギュレーター等の器具の安全な使用方法を実際にこれらの器具を用いながら説明を行う等の教材を作成した。学校で安全に実験を行うだけではなく、彼らが将来エンジニアとして英語を用いて国内だけではなく、海外でも仕事をすることを考慮して、海外の学校で行われている実験及び安全教育をも参考に作成した。科学実験を安全に行うための英語視聴覚教材を作成した。学校で安全に実験を行うためだけではなく、将来高校生、高専生、大学生がエンジニアとして国内、また海外でも英語を用いて仕事を行う際この英語での安全知識は必須のものである。この点を考慮して教材作成に当たっては国内はもとより海外で行われている実験および安全教育をも参考にした。具体的には化学実験、物理実験を行う際の全般に関する安全知識の取得、器具の安全な使用方法を題材とした教材を作成した。扱った題材は高校生、高専生、大学生が実際学校で経験するであろうものとした。また、視聴覚教材なので理解し易い。平成24年度には化学実験を題材にした教材を作成した。バーナー、ピペッターの安全な使用方法等の教材を実際に器具を用いながら説明を行った。オーストラリアの科学教育に特化した高校等を訪問し、実験を視察し、また実験器具・装置を見て、担当教員と安全教育について議論をして教材作成の参考とした。平成25年度には、平成24年度に作成した化学実験を題材にした安全教育の教材を実際に授業で使用し、学生の反応、理解度をみた。学生に身近な実験を題材としているので学生は内容を理解をしており、英語に難解な部分があるという点を除けば好評であった。同時に物理実験を題材とした教材の作成を行った。オートクレープ、レギュレーター等の安全な使用方法を説明した。化学実験で英語に難解な部分があるという意見があったので、可能な限り平易な表現を用いる努力をした。また授業でも使用し、学生の意見を聞いた。この年度はアメリカの大学を訪問し、実験を見学し、担当教員と情報交換をし、参考とした。また、教材作成の成果を英語教育関連の学会で発表した。具体的内容:本年度は化学実験と安全をテーマに、化学実験を安全に行うために必要な基本的な技術を習得させるための英語視聴覚教材を開発した。「バーナーの安全な使い方」、「ピペッターで溶液を安全に量り取る方法」等の題材を扱った。これらの題材は高校、高専、大学の化学実験で普通に行われている実験、及びそれらの実験で用いられる器具・機器の操作方法等を題材に扱っているので、生徒、学生には身近であり理解しやすくなっている。また、海外でも役立つように海外の学校で行われている実験、用いられている器具・器機の操作方法等をも考慮に入れて教材を作成した。意義:グローバル化の時代になり日本国内だけで仕事を行う時代ではなくなってきている。また、逆に日本国内でも海外からの多くの労働者が仕事をしている。特に技術の分野ではこの傾向が強い。このような状況では人々は世界の共通語である英語でコミュニケーションを取らざるを得ない。本研究で作成した教材を学ぶことにより学生は海外で技術者として仕事を行う際、また国内で外国人と仕事を行う際、本教材で学んだことが即役に立つ。重要性:上にも述べたように外国人と仕事を行う機会が増加している。他の職種とは異なり技術者の仕事には危険を伴う可能性が高い。本教材のような安全に焦点を絞った教材で学ぶことにより、学生が将来外国で、また国内で外国人と仕事を行うようになった場合、わが身を守る、また一緒に仕事をしている同僚を守ることが可能となる。当初の予定であった化学実験の教材をほぼ予定通り作成することができた。その目的のために日本国内の英語で授業を行っている学校、海外(オーストラリア)の学校を訪問し、学生が将来海外で行う可能性が大きい種類の実験、実験機器・装置に関する安全の観点からの情報を入手できた。またこれらの学校の教員と議論もすることができ、また資料収集もすることができた。物理実験の資料も入手し、25年度の物理実験教材作成の準備も行うことができた。平成25年度は平成24年度に作成した化学実験の教材を実際の授業で使用し、学生からのフィードバックを基に改良していく予定である。次に、主に年度前半に物理実験の教材を順次作成していき、授業で使用し、学生からのフィードバックを基に改良を加えていく。そのために化学実験同様、国内で英語で実験を行っている学校、海外の学校を訪問し、実験を見学し、また担当教員と議論をし、資料の収集を行う予定である。平成24年度に完成した化学実験、本年度作成予定の物理実験の成果を学会で発表する予定である。平成25年度は物理実験の教材を作成する。以下の項目のために研究費を使用する。

1)物理実験の実施のために必要な機器等の購入費用、2)実験補助・動画編集作業のための人件費・謝金、3)国内、海外の学校への実験の視察のための旅費:平成24年度訪問予定であった国内の英語で実験授業を行っている学校との日程調整がうまくいかず研究費が若干残った。平成25年度はこの費用でこの学校を訪問する予定である。さらにもう1校国内の同様の学校を訪問する予定である。また、海外の学校(アメリカの大学を予定)を訪問する予定である。4)学会発表のための旅費:平成24年度に作成した化学実験教材、平成25年度作成予定の物理実験教材の発表を行う。
「社会脳」の定型発達と自閉症スペクトラムにおけるその変容

自閉症スペクトラム(ASD)では社会コミュニケーションが障害される.本研究はASDの腹側(顔認知)視覚路(「社会脳」)の機能変化について調べた.ASDと定型発達(TD)成人で視覚誘発電位を記録した.赤緑(RG),黒白(BW),顔刺激を用いた.TD成人に比べて,ASDではRGのN1潜時延長,BWのN1潜時短縮,顔のP1潜時短縮,N170潜時延長を認めた.これらの所見は,ASDはV1での細部の処理に優れるが,色処理は障害されること,V4でのゲシュタルト顔処理も障害されることを示唆する.従って,腹側視覚路(「社会脳」)の機能変化がASDの社会的処理の異常に関与している可能性が示唆された.本研究では自閉症スペクトラム(ASD)における社会脳ネットワーク異常の脳内基盤を明らかにすることを目的としている。ヒトの視覚路は一次視覚野から側頭葉の四次視覚野に投射する腹側路(形態視、色認知)と、頭頂葉の五次視覚野に投射する背側路(立体視、運動視)に分けられる。社会脳ネットワークの中でも特に重要な扁桃体ネットワークでは、腹側視覚路と密接な関連がある。従って、一次視覚野レベル腹側路の形態視経路を選択的に刺激する黒白格子縞刺激、色認知経路を刺激する赤緑格子縞刺激、四次視覚野レベル腹側路を刺激する中立、喜び、怒りの表情をしている顔刺激を呈示した際の事象関連電位(ERP)をASD者と健常者において記録した。その結果、1)黒白格子縞刺激に対するERP反応はASD者が健常者よりも速い、2)赤緑格子縞刺激に対するERP反応はASD者が健常者よりも遅い、3)顔刺激に対するERP反応はASD者が健常者よりも遅い、という結果が得られた。これまでの行動学的先行研究では、ASD者では局所的な視覚処理に優れるが、全体的な視覚処理能は低下していると報告されている。本研究の結果は、ASD者における形態視経路の局所的な視覚情報処理機能の亢進、顔の全体的な視覚情報処理機能の低下を示唆する所見であり、行動学的研究に一致する結果であった。以上より、ASD者におけるこれらの非典型的な視覚情報処理機能が、社会脳ネットワーク異常を引き起こす一要因になっていると考えられた。本研究では自閉症スペクトラム(ASD)における社会脳ネットワーク異常の脳内基盤を明らかにすることを目的としている。ヒトの視覚路は1次視覚野から側頭葉の4次視覚野に投射する腹側路(形態視、色認知)と、頭頂葉の5次視覚野に投射する背側路(立体視、運動視)に分けられる。社会脳ネットワークの中でも特に重要な偏桃体ネットワークでは、腹側路と密接な関連がある。従って、事象関連電位(ERP)を用いて、ASDにおける腹側路の機能変化について検討した。視覚刺激は、腹側路の1次視覚野レベルの形態視経路を選択的に刺激することができる黒白格子縞(BW)刺激、色経路を刺激する赤緑格子縞(RG)刺激、4次視覚野レベルの形態視経路を刺激する顔刺激(中立、喜び、怒り)を用いた。その結果、ASDは健常者に比べて、RG刺激に対するERP反応(N1)が遅く、BW刺激に対するN1は速かった。また、顔刺激ではASDでは健常者に比べて、1次視覚野の反応であるP1は速かったが、4次視覚野の反応であるN170は遅かった。従って、形態視経路の1次視覚野は処理が亢進しているが、4次視覚野では処理機能が低下していることが分かった。また、色経路は機能が低下していることが分かった。このような腹側路の機能異常が、ASDの非典型的な視覚症状(局所の形態処理に優れるが、顔認知は障害される)を引き起こしていると考えられた。そしてこれが社会脳ネットワークの異常の基礎となっていることが示唆された。平成27年度に予定していたASDと健常者におけるデータ収集は終了したことから、順調に進展していると考えられる。本研究では自閉症スペクトラム(ASD)における社会脳ネットワーク異常の脳内基盤を明らかにすることを目的とした。ヒトの視覚路は後頭葉の1次視覚野(V1)から側頭葉の4次視覚野(V4)に投射する腹側路(形態視、色認知)と、V1から頭頂葉の5次視覚野に投射する背側路(立体視、運動視)に分けられる。社会脳ネットワークの中でも特に重要な扁桃体ネットワークは腹側路と密接な関連がある。従って、事象関連電位(ERP)を用いて、ASD成人における腹側路の機能変化について検討した。視覚刺激は、腹側路のV1レベルの形態視経路を選択的に刺激することができる黒白格子縞(BW)刺激、色経路を刺激する赤緑格子縞(RG)刺激、V4レベルの形態視経路を刺激する顔刺激(中立、喜び、怒り)を用いた。その結果、ASDは健常者に比べて、BW刺激に対するERP反応(N1)は有意に速かったが、RG刺激に対するN1は有意に遅かった。顔刺激ではASDは健常者に比べて、V1の反応であるP1は有意に速かったが、V4の反応であるN170は有意に遅かった。さらにV1からV4への情報の伝達時間を調べたところ、ASDは健常者に比べて有意に延長していた。

これらのことから、ASDではV1レベルでは形態視の機能が亢進しているが、V4におけるそれらの情報の統合が障害されていることが分かった。このような腹側路の機能異常が、ASDの非典型的な視覚症状(局所の形態処理は優れるが、顔認知は障害される)を引き起こしていると考えられた。またASDでは色認知が障害されている所見が得られ、これは我々の先行研究と一致する結果であった。これらの異常が社会脳ネットワークの異常の基礎となっていることが示唆された。自閉症スペクトラム(ASD)では社会コミュニケーションが障害される.本研究はASDの腹側(顔認知)視覚路(「社会脳」)の機能変化について調べた.ASDと定型発達(TD)成人で視覚誘発電位を記録した.赤緑(RG),黒白(BW),顔刺激を用いた.TD成人に比べて,ASDではRGのN1潜時延長,BWのN1潜時短縮,顔のP1潜時短縮,N170潜時延長を認めた.これらの所見は,ASDはV1での細部の処理に優れるが,色処理は障害されること,V4でのゲシュタルト顔処理も障害されることを示唆する.従って,腹側視覚路(「社会脳」)の機能変化がASDの社会的処理の異常に関与している可能性が示唆された.平成26年度に予定していたASDおよび健常成人におけるデータ収集は終了し、統計解析を行っている。順調に進展していると考えられる。昨年度に引き続き、データ収集を行う。学会、論文により、本研究成果を発表する。臨床神経生理学昨年度に引き続き、社会脳ネットワーク刺激を用いたERP計測を継続する。学会および論文により、本研究の成果を発表する。学会出張の頻度が予定より少なかったため。実験数の増加に伴う謝金および実験補助員の作業の増加に伴う人件費のために前倒し申請を行っていたが、最終的には残金が生じたため。次年度に行う実験の謝金、学会出張費、論文校正料、投稿料などに使用する予定である。次年度行う実験の謝金として使用する予定である。
TRB ファミリーの機能解析による肝疾患の統合的理解

肝臓は生体の恒常性を担う臓器であり、エネルギーの貯蔵、代謝、解毒作用など多種多様な機能を備えている。転写因子C/EBPαは出生後に必須の糖新生系やアンモニア代謝系酵素の発現を制御する重要な転写因子である。TRBファミリーのTRB1は肝芽細胞に強く発現し、過剰発現により肝細胞分化マーカーの発現を負に制御した。対照的に、TRB1欠損マウスでは肝細胞分化マーカーの発現が増加した。Lucアッセイの結果、肝芽細胞においてTRB1は量依存的にC/EBPαの転写活性を抑制する因子であることが判明した。今年度は、TRBによるC/EBP制御に関して、肝障害から肝癌に至る各病態について、肝実質細胞および星細胞において検証するための準備を行った。はじめに、TRB1,TRB2に関しては有用な抗体が存在しなかったため、それぞれ大腸菌融合タンパク質を作製し、ウサギに免疫して、ウエスタンブロッティングで使用可能な抗血清を得た。また、TRB2の肝疾患への関与を個体レベルで検証するための評価系として、TRB1および2をノックアウトしたマウスを入手し、マウスの繁殖ならびにダブルノックアウトマウスの作製を行っている。さらに、星細胞の活性化過程におけるTRBの遺伝子発現変化を検討するため、マウスからの星細胞単離系の確立、および、in vitro線維化の系の確立を行った。これらの系を用いてTRBファミリー遺伝子の発現を解析した結果、TRBファミリー遺伝子すべてにおいて持続的な発現が見られた。そのため、TRBファミリー遺伝子いずれも線維化に関与しうることが判明した。TRB2はC/EBPalpha,betaと結合するが、タンパク質分解に関与する既知のドメインがないことから、TRB2のC末端にタンパク質分解を促進する因子が相互作用する可能性が示唆される。この可能性を検証するために、Yeast two-hybrid法により相互作用因子を同定した。その中には、E3ユビキチンリガーゼ遺伝子が複数含まれていた。現在は、これらの因子の作用機構の解明を進めている。Tribblesは、ショウジョウバエにおいて、転写因子C/EBPオルソログのSlboのタンパク分解を促進する因子として単離された。哺乳類では、TribblesオルソログとしてTRB1、TRB2、TRB3が同定されているが、TRB1とTRB2が機能的にも構造的にも類似している。我々は、以前に、C/EBPが重要な役割を果たす脂肪細胞分化において、TRB2の発現が脂肪細胞分化に伴い減少すること、TRB2の恒常的な発現は、C/EBPβのタンパク分解を介して脂肪細胞分化を抑制することを明らかにし、TRBファミリーによるC/EBP分解機構が哺乳類でも保存されていることを示した。また、マウス造血幹細胞にTRB1もしくはTRB2を過剰発現することにより、C/EBPαのタンパク分解を引き起こすこと、急性骨髄性白血病の患者では、TRB1およびTRB2の発現が亢進していることが報告されている。多くの肝機能は出生前後に発現し、そのために多くの転写因子が関与する。我々は、C/EBPαが出生後に必須の糖新生系やアンモニア代謝系酵素の発現を制御する重要な転写因子であることを報告している。今回我々は、肝発生におけるTRBファミリーの役割について検討した。TRB2は胎生肝において強く発現し、成体肝では発現が著しく減少していた。TRB1, TRB3は恒常的に肝臓で発現していた。次に、欠損マウスにおける代謝関連遺伝子の発現を検討した結果、TRB1欠損マウスでは、出生前後の肝臓での糖新生関連遺伝子の発現低下が見られた。また、生後14週では肝臓の障害を示すAST, ALTの上昇、および肝機能を示すアルブミンの低下、さらに肝臓への油滴の蓄積が観察された。一方、TRB2欠損マウスにはそうした異常は見られなかった。24年度が最終年度であるため、記入しない。
多文化社会におけるメディアの公共性と文化的市民権

本格的な多文化社会の到来を前にどのようなメディアの公共性が可能なのか。「文化的市民権」という概念を用いて検討しようとした。結論は以下の5点にまとめられる。(1)マスメディア,特にテレビを中心としたメディアにおける在日外国人の表象は一定程度見られるが、芸能人やスポーツ選手に偏っており、一般的外国人の表象限定的である。(2)在日コリアンや在日中国人の表象はほとんどなく、差別的言説も少なくない。(3)在日外国人は視聴者として意識されていない。(4)独立系映画の中に豊かで多様な在日外国人の表象を見ることができる。(5)日本で「文化的市民権」という概念が根付くのには時間がかかるだろう。グローバル化によって急速に進む多文化社会において、どのようなメディアの「公共性」が可能なのか。デジタル化の時代、多種多様な人々の「文化的市民権」をどのように構想できるのか。本研究は、既存の「公共性」や「市民権」の議論を踏襲しつつ、近年の国内外の議論や政策を参照しながら、新しいアイデンティティと「公共性」、「文化的市民権」の関係を明らかにしようというものである。平成23年度は(1)これまでの議論の整理(2)多文化社会の聞き取りと研究会の開催(3)海外に住む日本人に対する聞き取り(4)研究インフラの整備、の四点を大きな方針として活動を行った。(1)と(2)については、隔月のペースで会議または研究会を開催した。特に10月に北九州市で開催された公開シンポジウム「多文化社会における新たな〈公共性〉へ向けて」では、議論の整理とともに、九州地区のこれまでのNPOやNGOの活動、支援団体、メディアに対する調査と情報交換を行った。この成果は、本研究プロジェクトの報告書『公共性の再創造』(多文化メディア市民研究会発行全72頁)で読むことができる。また分担者二名も寄稿している『マス・コミュニケーション研究』79号は、この領域における研究状況の現状のベーシックなサーベイになっている。(3)に関しては、研究会を共同研究の基盤として活用するとともに、本年度は研究代表者の毛利が英国、共同研究者の岩渕が豪州、イシがブラジル、イギリスの海外調査を行った。国内については、北九州におけるシンポジウムを中心に福岡/北九州地区の聞き取り調査を行った。(4)については、研究組織「多文化メディア市民研究会(MCMC=Media & Citizen-ship in Multi-Cultural Society)」を立ち上げ、HPを開設した(http://mcmc.main.jp/)。この研究組織を中心に、研究会の開催、基本的文献や情報、研究成果の共有、そして情報発信を継続的に行ってきた。今年度は東日本大震災の影響もあり、メディアと「公共性」、「市民権」をめぐる状況と議論が激変した。本研究は、その変化を分析し、理論化する研究としての意義あるものである。本研究は、既存の「公共性」や「市民権」の議論を踏襲し近年の国内外の議論や政策を参照しながら、新しいアイデンティティと「公共性」、「文化的市民権」の関係を検証したものである。完成年度の平成25年度は、(1)過去2年間の議論の整理、(2)多文化社会における文化表現と文化的市民権の調査研究、(3)東日本震災時の在日外国人のメディア文化環境の調査、(4)日本国内の中の異文化と多文化の4点を大きな柱として研究活動を行った。(1)(2)(3)については、隔月のペースで会議または研究会を開催した。特に今年度はドキュメンタリー映画やアニメ、音楽などの表現活動に注目した。(4)については、10月に沖縄那覇市で公開シンポジウムを開催し、多文化主義のひとつのあり方として沖縄を捉えると同時に沖縄の中の多文化主義を考えた。こうした研究を通じて、マスメディアでは、ナショナリスト的な言説が広まり文化の多様性が不可視化される一方で、ソーシャルメディアや自主制作のドキュメンタリー映画の中でさまざまな活動が広がっていることが確認された。本研究は、既存の「公共性」や「市民権」の議論を踏襲し近年の国内外の議論や政策を参照しながら、新しいアイデンティティと「公共性」、「文化的市民権」の関係を明らかにしようというものである。研究2年目の平成24年度は(1)これまでの議論の整理(2)多文化社会における文化表現と文化的市民権の調査研究(3)在外日系人の調査

(4)東日本震災時の在日外国人のメディア文化環境の調査の4点を大きな方針として活動を行った。(1)(2)については、隔月のペースで会議または研究会を開催した。特に今年度は音楽や映画など具体的な表現活動に注目し、多文化社会における文化的市民権のあり方を検討した。(3)に関しては戦後の日本人のオーストラリア移住の記録と資料の収集と整理を行った。(4)については、10月に仙台市と石巻市で開催された公開シンポジウムを開催し、東日本大震災の時の在日外国人に対する行政のサポートや彼らのメディアのアクセスに関する調査を行った。この成果は、現在編集中の報告書『多文化主義と文化的市民権(仮題)』(多文化メディア市民研究会発行全72頁)で読むことができる。またその一部は、国際学会Association for Cultural Studies(Paris)やAssociation for sian Studies (US San Diego)で報告された。初年度ということで、研究発表がやや少なく感じられるが、研究会メンバーで初年度報告書をかねるシンポジウム記録「公共性の再創造」を発行することができた。近年グローバリゼーションとデジタルメディア技術の登場により大きく議論が変容しつつある中、国内外の研究と比較しても先端を切り開く研究をしていると自負しており、おおむね順調に進展していると評価できる。25年度が最終年度であるため、記入しない。今年度、研究分担者の一人岩渕功一が急遽オーストラリアのモナッシュ大学へ異動し、分担者を辞退する事になったが、塩原良和を中心にオーストラリアの調査を埋め合わせをすることができた。特に東日本震災において大きく変化した日本の多文化主義と在日外国人のメディアのアクセスについて、数回に渡って集中的に調査研究を行う事ができたので、すでに十分興味深い結果が得られつつある。昨年度の報告書に続き、二冊目の報告書の現在編集作業がほぼ終了しており、その成果の一部を着実に発信し始めている。変化の早いデジタルメディアへの対応を含めて、国内外の研究と比較しても先端を切り開く研究をしていると自負しており、おおむね順調に進展していると評価できる。全体の研究計画の提出は東日本大震災以前だったが、マスメディアと新しいデジタルメディア、とりわけソーシャルメディアの影響の関係は、この一年で大きく変容しつつある。今年度は、研究テーマの中に東日本大震災の影響をきちんと組み込み、東日本被災地での調査や研究会、シンポジウムを予定している。急激な変化に対応すべく、技術的な動向に関心を払うとともに、研究成果の発信においても、現在のHPを充実させていく予定である、それ以外は、研究計画に関する大きな変更はない。二年次は、一年目の研究方法を維持しつつも、積極的に国内外の学会、学会誌、図書等で研究発表を行って行きたい。完成年度の今年の推進方策は、次の5点である。(1)これまでの議論の整理:多文化社会におけるメディアの「公共性」と「文化的市民権」の議論、特に欧米の状況と理論的な発展を中心に検討し、整理する。
川崎病の血管内皮機能および血小板由来一酸化窒素:ビタミンC投与による新しい治療的試み

川崎病急性期の冠状動脈障害を有する患児に対して心臓カテーテル検査時に冠動脈内にアセチルコリンを注入して血管内皮由来の血管内皮由来弛緩因子(EDRF)の低下を証明した。このことを米国心臓学会で報告した。また、同時に施行したシンチグラフィーにおいて同様の結果を非観血的に得ることができた。この血管内皮由来弛緩因子(EDRF)の本体は一酸化窒素(NO)であり、一酸化窒素合成酵素(NOS)により産生放出され、血管拡張作用や、血小板凝集抑制作用をを有し、血管トーヌスの調整や抗血栓性に関与している。これらの患児に対してビタミンC投与を行い、同様の検査を行った。冠状動脈瘤の程度が軽いものではEDRFの改善が認められるが、巨大な冠状動脈瘤を有するものではEDRFの改善が認められなかった。これらの症例ではNOS産生放出能が低下していた。ビタミンC投与によりこれらの症例においてNOS産生能が改善した。また、EDRFの低下の原因となる急性期の冠状動脈障害と細胞接着分子の関係を検討した。細胞接着分子のP-,E-,L-セレクチンは、川崎病急性期および亜急性期には、慢性期および対照群に比して明らかに上昇しており、また、冠状動脈瘤を生じた例では生じなかった例に比して有意に上昇しており冠動脈瘤発生の予測因子となることが示唆された。また、同時期に炎症により上昇することが知られている血管新生因子(VEGF)が血管炎の程度に一致して上昇していた。この事を2001年の米国心臓会議(AHA)にて発表した。現在論文を投稿中である(Furui J、Ishii M, Eto G, et al. Acta Paediatr,投稿中)。また、同時に施行したシンチグラフィーにおいて同様の結果を非観〓に得ることができた。今後、これらの症例とNOS産生放出能を検討する予定である。こ〓ことがEDRFと関係していることを報告した。(Furui J、Ishii M,Eto G,et al.JACC,投稿中)。
東南アジアにおける熱帯林の破壊と生態系の変貌過程

平成2年度は、全体として海外における調査研究の準備、とくに東マレ-シア・サラワク州およびタイ・ナラチワ州に長期観察・定点観測の基地の設定、外国人研究者との今後の熱帯林研究の方向についての検討またインドネシアの熱帯林の共同調査が中心となり、一部の定点観測及び調査を開始した。研究実績を要約すると次の如くである。1)サラワクの熱帯雨林生態系がどのような生物過程によってささえられ、機能しているかを明らかにすることを目的として、サラワク州ミリ市近傍のランビア国立公園内に50ヘクタ-ルの大面積の長期観測調査区の設定を開始し、平成3年度前半にこれを完了する予定である。ここでは、多雨林の群集・個体群変動の解析、主要構成種の生態生理的特性の解明、林冠構造と根圏の生態の解析及び微気象・炭素循環の観測などを行うことを予定している。2)ナラチワ湿地林においては、気球法と即地調査を結合した湿地林生態系の劣化と再生過程の解明のための長期観察調査区を設置しつつある。ここでは、植生図の経時的変化を追跡し、また森林・草原・開発地における環境特性を把握するために、気球による微気象測定を開始しており、これによって熱・水分・二酸化炭素などの物質輸送量の測定をおこなう。3)熱帯林、とくに東南アジアにおける湿地林の嫌気的環境、また伐採・焼畑地における白蟻などの土壌動物の腸管は温室効果に関与するメタンガスの重要な発生源の一つであると考えられるが、東南アジアにおけるこれら熱帯林生態系のメタン発生源としての寄与に関してはほとんど研究されていない。本研究では、湿地林、二次林及び水田に定点プロットをおき、年間を通じてメタン及び亜酸化窒素の発生量の観測を行って、これらのメタン発生源としての評価及び土地利用の影響を解析、またそのガスの安定同位体自然存在比の測定を実施して代謝経路を明らかにする定点観測を開始した。本年度は林内、田面の気泡ガス及び田面水の採取を行い、溶存メタン、亜酸化窒素、酸素、pH及び気泡メタンのδ^<13>( ^<13>C含量)の測定を行った。その結果として、メタンのδ^<13>Cについて、水田気泡メタンより林内で採取したものが有意に低い値を示すことが認められた。これは、二つのメタン生成経路ー酢酸のメチル基転移反応と炭酸還元ーのうち、炭酸還元系が湿地林内でより活発に起こっていることを示唆するものである。4)日本とインドネシアにおいて、外国人共同研究者と熱帯林研究について相互理解と将来協力のための会議を持ち、またスマトラ島の熱帯雨林の共同調査を実施した。これらの国際協力の機会に、東南アジアの熱帯雨林は世界で樹種相がもっとも多様な森林で、樹高が60メ-トルをこえる巨大高木層以下、林冠が幾重にも重なる重層構造によってでき上がっており、林冠層に三次元的に進入して調査活動できるための技術の開発が重要であるという認識に達した。

これらの国際協力の機会に、東南アジアの熱帯雨林は世界で樹種相がもっとも多様な森林で、樹高が60メ-トルをこえる巨大高木層以下、林冠が幾重にも重なる重層構造によってでき上がっており、林冠層に三次元的に進入して調査活動できるための技術の開発が重要であるという認識に達した。
ファインマン積分とその摂動展開から導出される幾何学的不変量の研究

近年,いくつかの幾何学的不変量が,数理物理との関連からファインマン積分の形で導入・提案されてきた.ファインマン積分は,数学的な基礎付けが不十分であるにもかかわらず,これらの不変量は別の形で数学的な基礎付けがなされている.さらに,これらのファインマン積分には物理的に意味のあるパラメータが入っており,このパラメータに関する漸近展開からもさまざまな不変量を考えることができる.ここでは主にリーマン多様体間の写像空間上のファインマン積分を考える.すなわち定義域多様体と値域多様体を固定し,定義域多様体から値域多様体への写像から定義される関数(主要部はこの写像のエネルギー指数関数)をこの写像空間上積分する.値域多様体が一般のケーラー多様体の場合にファインマン積分の高次摂動展開を考えることにより,Gromov-Witten不変量の一般化を導入し,さまざまな表示をえることを長期的な目標とし、平成8年度は,定義域多様体が2次元球面の場合を考えた。Gromov-Witten不変量は,擬正則曲線のモデュライ空間上の積分として、表わせるという結果が出たため(深谷-小野)、直観的には停留点法から得られるファインマン積分の値に等しいと理解できた。高次摂動展開のため、このモデュライ空間を写像空間に埋め込み、そこでの法バンドルを考える必要がある。さらに、このモデュライ空間はコンパクトではないため、コンパクト化への法バンドルの拡張が必要になる。平成8年度は、先に引用した結果の理解とこの拡張の構成に終始した。高次摂動展開には至らなかったが、そのための基礎的な枠組みの構成の見通しを得た。
hSCARB2-Tgマウスを用いたEV71神経毒力因子の解析

エンテロウイルス71(EV71)はピコルナウイルス科エンテロウイルス属、A群ヒトエンテロウイルスに分類される。このウイルスは神経病原性を示すがその神経毒力決定機構は不明である。EV71分離株の中には温度順化株が存在し、神経毒力に変化を及ぼすと考え、温度馴化変異株に焦点を当てウイルス因子を同定することとした。本研究を遂行中にEV71粒子を構成するVP1の145番目のアミノ酸が毒力に影響することが明らかになった。そこで計画を変更し温度感受性よりも影響を及ぼす可能性のあるVP1-145アミノ酸の毒力への関与を霊長類モデルで比較し、VP1-145アミノ酸が強い毒力を示すことを明らかにした。エンテロウイルス71(EV71)はピコルナウイルス科エンテロウイルス属、A群ヒトエンテロウイルスに分類される、手足口病の原因ウイルスの1つである。EV71感染では神経症状を伴う死亡例が報告されている。しかし、その神経毒力決定機構は不明である。我々はEV71感染受容体であるhSCARB2を発現したマウス(hSCARB2-Tgマウス)を作製した。本研究は一つのウイルス株を基準とし、その株の変異体を作出、ウイルス学性質とhSCARB2-Tgマウスでの毒力を比較することで神経毒力に関与するウイルス因子の同定を目的とする。EV71分離株の中には温度抵抗性株と温度感受性株が存在している。温度馴化による変異はウイルス増殖能を含め神経毒力に変化を及ぼす可能性が高いと考え、温度馴化変異株を選定し、SCARB2-Tgマウスを用いて親株との神経毒力を比較することで神経毒力に関与するウイルス因子を同定することとした。まず温度感受性株を選定するため13株の低温(37°C)と高温(39°C)での増殖能を比較したところ6株(Hungary株、NETH株、THAI株、KED005株、1095株、KOR株)が温度感受性であった。次に温度感受性株が高温継代することで温度抵抗性株になることを確認するため温度感受性株である、KED005株、1095株、KOR株を高温(39°C)で3代継代し、37°Cと39°Cでのウイルス力価を比較したところ3代高温継代株は37°Cと39°Cでそのウイルス増職能が同等になっていた。従って温度感受性株を高温継代することで変異が生じ、温度抵抗性を獲得したと考えられる。当初の計画通り、高温継代により温度抵抗性株を3株選定した。EV71粒子を構成するVP1の145番目のアミノ酸がグリシンである株とグルタミンの株が存在する。本研究遂行中にVP1の145番目がグルタミンの方が毒力強くなることが明らかになった。今回高温継代に使用した1095株、KOR株はVP1の145番目アミノ酸はグリシンであり、より明確な解析を行うためVP1の145番目がグルタミンを有する温度抵抗性株を用いた解析に変更したため当初計画よりも遅れている。我々はEV71感染受容体であるヒトSCARB2を発現したマウス(HSCARB2-Tgマウス)を作製した。本研究は1つのウイルス株を基準とし、その株の変異体を作出、ウイルス学的性質とhSCARB2-Tgマウスでの毒力を比較することで神経毒力に関与するウイルス因子の同定を目的とする。温度馴化による変異はウイルス増殖能を含め神経毒力に変化を及ぼす可能性が高いと考え、温度馴化変異株を選定し、hSCARB2-Tgマウスを用いて親株との神経毒力を比較することで神経毒力に関与するウイルス因子を同定することとした。本研究を遂行中にEV71粒子を構成するVP1の145番目のアミノ酸がグリシン(G)である株とグルタミン酸(E)の株が存在し、Eを持つ株の方が毒力が強くなることが明らかになったためEを持つ株を元に温度抵抗性株を選定した。Hungary株はVP1-145がグルタミン酸であり、温度感受性である。当該年度ではこのHungary株を高温継代し温度抵抗性株を得た。現在までに4株ほどの温度抵抗性株を得ており、これらを性状解析することにより温度抵抗性に着目した共通の毒力因子の同定に繋がることが期待される。現在、高温継代により温度抵抗性株を3株選定している。EV71には粒子を構成するVP1の145番目のアミノ酸がグリシン(G)である株とグルタミン酸(E)の株が存在する。平成27年度、当研究室の他の研究プロジェクトの成果によりEを持つ株の方がGを持つ株よりも毒力が強いこと明らかになった。そこで当該年度ではEを持つ株を用いた方が実験結果がより明確になると考え、Eを持つ株を元に新たに温度抵抗性株の再選定を行なった。次にhSCARB2-Tgマウスを用いて温度抵抗性株の毒力試験を実施する計画であった。

しかし培養細胞で継代を繰り返すとVP1-145がEからGへと容易に変異し、弱毒化することが明らかになった。従って高温継代した温度抵抗性株もVP-145がグリシンに変異し、弱毒化している可能性がある。hSCARB2-Tgマウスを用いた毒力試験でも明確な結論を得られない可能性があり毒力試験を延期したため計画はやや遅れている。エンテロウイルス71(EV71)はピコルナウイルス科エンテロウイルス属、A群ヒトエンテロウイルスに分類される、手足口病の原因ウイルスの1つである。EV71感染では神経症状を伴う死亡例が報告されている。しかし、その神経毒力決定機構は不明である。我々はEV71感染受容体であるヒトSCARB2を発現したマウス(hSCARB2-Tgマウス)を作製した。本研究は1つのウイルス株を基準とし、その株の変異体を作出、ウイルス学的性質とhSCARB2-Tgマウスでの毒力を比較することで神経毒力に関与するウイルス因子の同定を目的とする。EV71分離株の中には温度抵抗性株と温度感受性株が存在している。温度馴化による変異はウイルス増殖能を含め神経毒力に変化を及ぼす可能性が高いと考え、温度馴化変異株を選定し、hSCARB2-Tgマウスを用いて親株との神経毒力を比較することで神経毒力に関与するウイルス因子を同定することとした。本研究を遂行中にEV71粒子を構成するVP1の145番目のアミノ酸がグリシン(G)である株とグルタミン酸(E)の株が存在し、Eを持つ株の方が毒力が強くなることが明らかになった。ヒトにおいてもVP1-145アミノ酸による毒力の違いがあるかは不明である。そこで計画を変更し温度感受性よりも影響を及ぼす可能性のあるVP1-145アミノ酸の毒力への関与をヒトに近い霊長類モデルで比較した。その結果霊長類モデルにおいてもEを持つ株はGを持つ株よりも優位に増殖し、強い毒力を示すことを明らかにした。エンテロウイルス71(EV71)はピコルナウイルス科エンテロウイルス属、A群ヒトエンテロウイルスに分類される。このウイルスは神経病原性を示すがその神経毒力決定機構は不明である。EV71分離株の中には温度順化株が存在し、神経毒力に変化を及ぼすと考え、温度馴化変異株に焦点を当てウイルス因子を同定することとした。本研究を遂行中にEV71粒子を構成するVP1の145番目のアミノ酸が毒力に影響することが明らかになった。そこで計画を変更し温度感受性よりも影響を及ぼす可能性のあるVP1-145アミノ酸の毒力への関与を霊長類モデルで比較し、VP1-145アミノ酸が強い毒力を示すことを明らかにした。Hungary株、NETH株、THAI株はVP1-145がグルタミンである。これらの株を高温継代し温度抵抗性株を得た後、当初の実験計画に沿い、EV71感染モデルマウスでの神経毒力比較を行い、毒力決定因子の同定へと繋げる。培養細胞での継代によるVP1-145アミノ酸の弱毒化変異に関する問題は、現在他のプロジェクトにより取り組んでいる。従って本研究課題では、hSCARB2-Tgマウスを用いた毒力試験を行う前に温度抵抗性獲得機構の解明に焦点を定めることとする。これまで得られた複数の温度抵抗性株のVP1-145のアミノ酸の確認および親株との比較を行い、変異している箇所を同定する。変異箇所同定後、機能解析を行うとともにVP-145アミノ酸をEに変えた組み換えウイルスを作製し毒力比較を行い毒力に関与する部位を明らかにする計画である。ウイルス学他の研究成果からより明確な結果を得るため実験計画変更の必要性が生じ、当初予定していた実験遂行に至らなかったため次年度使用額が生じた。
培養ヒト肝由来細胞の肝特異機能を応用した人工肝補助装置開発の基礎的研究

肝臓は生体内の種々の代謝の中心臓器である。すなわち体内で生産された老廃物の排泄にとどまらず、蛋白の合成、脂質の代謝等複雑な機能を一臓器で行っている。人工肝開発の最終目的はこれらの機能の全てを代行する事にある。このプロジェクトは継代培養肝細胞の有する機能を人工肝の一部に応用するための研究である。われわれの樹立したヒト肝癌由来細胞株は6株におよび、現在も鋭意樹立を試み新たな樹立株の可能性がでてきている。このうちJHHー4,5,7は無血清培養可能となっている。蛋白代謝の面よりアルブミン、レチノ-ルバインディング蛋白、AFPなどの肝特異蛋白を産生していることをimmunoprecipitation,western blotting,metobilic labeling法により確認し蛋白代謝に関しては肝特異の機能を保有維持していることが明かとなった。さらにこれらの細胞のアンモニア代謝能や、ビリルビン代謝能、アミノ酸代謝につても検討中である。一方大量培養法の確立のため、フォロ-ファイバ-培養法について検討を行った。まずJHHー7株を用いてフォロ-ファイバ-繊維の違い、あるいは繊維のコラ-ゲン処理による株細胞の繊維に対する付着に差異の存在することを確認した。フォロ-ファイバ-内で細胞を順調に増殖させるためには、株細胞がファイバ-に付着するまでの処置、還流培養液と細胞数の比、あるいは還流速度が極めて重要であることが明確になった。さらにアルブミンの産生のメカニズムを知ることは、より効率のよい人工肝作成には重要な要素である。長瀬らが開発した血清中アルブミンの極めて少ない、無アルブミンラットより、他に先駆けて4株の樹立細胞の作成に成功した。これらの細胞よりアルブミン合成を惹起するための、因子を明かとするため細胞生物学的見地より検討中である。
単層カーボンナノチューブロープの捻りによるエネルギー・物質変換

単層カーボンナノチューブ(SWCNT)には捻ることでリチウムイオン電池の10倍以上の機械的エネルギーが貯蔵できる可能性が示されている。本研究の目的は,化学・物理的修飾によりSWCNT間を接合したロープを作製し,捻りによりSWCNTに貯蔵できる機械的エネルギーの実験値を大幅に向上させることである。また,貯蔵したエネルギーを機械的・電気的エネルギー源として活用する方法,さらには,SWCNTを「ナノ試験管」と捉え,捻りで生じる高温・高圧によってSWCNTロープ内部で化学反応・物質変換を引き起こす方法を開発し,SWCNTをエネルギー・物質変換媒体として応用する可能性を探ることである。
共生体感染により変動する共生遺伝子制御ネットワークの解明

植物の生育促進に大きく貢献する菌根共生・根粒共生において、共生菌の感染不全を示す変異体の表現型解析、トランスクリプトーム解析から共生機構を明らかとした。また、菌根共生遺伝子プロモーターのシス領域に結合する共生因子の解析では、RNAiによる発現抑制変異体、トランスポソンによる破壊株の解析、トランスクリプトーム解析やChipSeq解析から、この因子の共生における機能とともに、菌根共生以外の機能も持つことが推定された。植物の生育促進に大きく貢献するアーバスキュラー菌根共生(以下、菌根共生)と根粒共生において、共生菌の感染不全を示す変異体cerberus, nsp1の表現型解析から明らかとなった菌根共生と根粒共生における共通機構について報告を行った。これらの変異体の共生時、非共生時におけるトランスクリプトーム解析から、両共生変異体においてジベレリン(GA)合成遺伝子群の発現異常がみられた。このことから、両共生体が示す菌根菌感染阻害表現型とGAシグナルとの関連が示唆され、GAの菌根共生における機能解析を行った。その結果、菌根共生においてGA合成促進と濃度上昇がみられ、宿主根内での菌糸の分岐促進に貢献することが分かった。これまでの研究でGAは共生菌の感染において負の作用を持つことは知られていたが、本研究ではGAが共生において正の作用も持つという新たな側面が明らかとなった。さらに、共生遺伝子発現の抑制あるいは促進・維持することで、表皮においては負の作用、皮層においては正の作用をもつことを示した。菌根共生遺伝子プロモーターのシス領域に結合する因子RAMI1の解析では、発現抑制変異体、破壊株を取得し、ホモログRAMI2とともに、これらの表現型解析を中心に解析を行った。現在のところ、菌根共生においては明確な表現型は得られていない。これはこれらの2つのホモログによる遺伝子重複が原因であることが考えられるが、一方、根粒共生においては明確な根粒形成の阻害がみられ、RAMIの根粒共生への関与が示唆された。そのため、菌根共生とともに根粒形成における機能も見据えた解析を行っている。また、転写因子であるNSP1とともにRAMI1の次世代シーケンスを用いたChipSeq解析を行っており、これらの転写因子により制御される遺伝子群の特定と、網羅的な転写制御ネットワークの解析を行っている。申請者がマメ科植物ミヤコグサで新たに同定した菌根共生変異体cerberusとnsp1の表現型解析を、これまでに確立したマーカー遺伝子の発現解析、蛍光染色よる微細共生構造の観察、前感染構造(感染前の細胞内リモデリング)の可視化技術を用いて行った。その結果、これらの変異体は共生マーカー遺伝子の発現や前感染構造の形成、共生器官の形成などは正常に行われていることが分かった。しかし、これらの共生体の宿主植物への感染率は低下しており、これまでに知られていた感染がまったく進行しない菌根共生変異体とは異なり、感染の定量的制御の異常が原因となって表現型が表れていることが示唆された。この共生因子の発見と変異表現型を引き起こす原因となった遺伝子発現の異常を観測するために、次世代シーケンサーを用いたRNAseqによるトランスクリプトーム解析を行った。その結果、nsp1に見られる共生体感染不全に植物ホルモンであるジベレリンの関与が示唆されたことから、菌根共生に対するジベレリンの作用についての研究を開始した。もう一つの共生因子として同定している菌根共生に対して負の影響を与えると考えられる転写抑制因子として考えられるRAMI1とそのホモログRAMI2について、作成した過剰発現体、発現抑制体の表現型解析を行った。RAMI2抑制体では地上部での生育阻害の表現型がみられ、また地下部での発現が低いことからRAMI2は主に地上部において作用することが推定された。そのため、RAMI1の共生における機能ついての解析を行った。RAMI1の抑制変異体においては根粒形成の不全がみられるが、現在のところ菌根共生における明確な感染異常は観測されていない。RAMI1に関してはトランスポソン挿入された植物体を得ることができたことから、このホモ変異体の取得を行っている。当初の目標であった共生変異体が示す感染の停止段階を明確化することができた。また変異体が示す表現型とトランスクリプトームの比較から、NSP1によるジベレリンシグナルの制御と、その異常による感染不全の機構が明らかとなった。NSP1はGRASファミリーの転写因子をコードしていることから、この成果はNSP1による共生遺伝子制御が植物ホルモンシグナルへの接続していることを示す重要な知見となるものであった。また、CERBERUSについても宿主内での菌糸の伸長に影響を与える共生遺伝子群をトランスクリプトーム解析により同定することができた。これらの結果から当初の予定よりも大きな研究の進展と今後の発展が期待できる。一方で、RAMI1の解析については過剰発現体や抑制体の解析から菌根共生における表現型解析を行ったが、RAMI1タグラインが取得できたことから、トランスクリプトーム解析をこの変異体を用いて行うため、次年度に延期している。これまでのnsp

1変異体の解析から明らかとなった共生遺伝子ネットワークとしてのジベレリンシグナル伝達と共生シグナル伝達との関連の解析を進めていく。また、cerberus変異体についてはシグナル伝達としての機能ではなく、根の細胞壁構造の変化による伸長阻害が表れている可能性がトランスクリプトーム解析によって示唆されている。CERBERUSはE3ユビキチンリガーゼとしてプロテアソーム系を介したタンパク質発現制御に関わると考えられることから、同定した遺伝子群との関連を検証していく。これらの共生因子と他の共生変異体との関連についても解析を行うことで、共生遺伝子制御の全体像を見ることができると考えられる。しかし、ジベレリンを介した共生体感染制御については海外の複数の研究グループが注目して研究を進めており、これらの研究室との競合することが懸念される。そのためこの研究課題を最優先として集中して解析を行っていく。RAMI1のRAMI遺伝子にトランスポソンが挿入されたタグラインを入手できたことから、RNAiによるノックダウンではなく、遺伝子機能が完全に破壊された個体での表現型や機能解析を行うことができるようになっている。そのため、この破壊株での解析を優先的に行うことで、研究の推進を行っていく。詳細な表現型の観察のため、現在保有する実体顕微鏡への蛍光照明装置の増設を行う。この機器については当初の予定より高性能な機器が必要となったため、昨年度予算と合わせて年度の初期に購入し、研究の推進に充てる。またこれまでの研究成果の発表のために宮崎県で行われる国際窒素固定会議への学会参加費を計上する。前年度に行えなかったRAMIのトランスクリプトーム解析の予算とChipSeqによる解析を行うために、次世代シーケンスの費用を計上する。