hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新規転写共役因子LSD１のMR活性制御及び食塩感受性高血圧発症における意義の解明

本年度、我々は腎尿細管特異的LSD1ノックアウトマウスおよびコントールマウスに対して高食塩負荷を行い、また、これらのマウスに対するMR拮抗薬(スピロノラクトン)投与の影響を検討した。16週齢から42週齢まで高食塩負荷を行ったところ、LSD1ノックアウトマウスとコントロールマウスで体重の推移には差が無かった。血圧についてはLSD1ノックアウトマウスではコントロールマウスと比べて有意な上昇を認めた。以上からLSD1ノックアウトマウスでは食塩感受性が亢進していることが示唆された。次に、高食塩負荷下のLSD1ノックアウトマウスとコントロールマウスに対して高スピロノラクトン混餌飼料を投与したところ、LSD1ノックアウトマウスで血圧上昇が消失した。これらはLSD1ノックアウトマウスの食塩感受性亢進がMR作用亢進によるものであることを強く示唆する結果である。現在MR標的遺伝子の発現を定量的PCR法およびwestern blot法、免疫染色法で確認すると共に、腎臓などの各臓器標本を用いた病理学的検討を進行中である。in vivoの実験に関しては、腎尿細管特異的LSD1ノックアウトマウスおよびコントロールマウスに対して高食塩負荷およびMR拮抗薬の投与を行い、それによりLSD1ノックアウトマウスがMRを介して食塩感受性高血圧に寄与していることが示唆された。対してin vitroのH3K4メチル化抗体およびH3K9メチル化抗体を用いたChIP assayに関しては結果が得られていない。高食塩負荷下、スピロノラクトン投与下の腎尿細管特異的LSD1ノックアウトマウスおよびコントロールマウスの検討を引き続き行う。臓器障害の進行を、腎臓を始めとした各臓器の病理学的検討や、尿中微量アルブミンやBNPの測定により評価する。MR標的遺伝子の発現を、定量的PCR法およびwestern blot法、免疫染色法により引き続き行う。今後はDOCA/salt負荷や高脂肪食負荷によるアルドステロン過剰状態の臓器への影響も評価する予定である。更に腸管上皮特異的LSD1ノックアウトマウスを作成し、腎尿細管特異的ノックアウトマウスとの比較も予定している。一方で、患者同意を得、末梢血よりのDNAの採取を開始し、LSD1遺伝子多型(SNP)の検出を行う予定である。次年度使用額が生じた理由は、in vivoのLSD1腎臓特異的ノックアウトマウスを用いた実験が順調であったにも関わらず、in vitroの実験に関しては、H3K4メチル化抗体及びH3K9メチル化抗体を中心としたヒストンメチル化抗体やヒストンアセチル化抗体を用いたChIP assayの実験が進まなかったためである。今後は更なる条件検討を行い、in vitroの実験も平行して行う予定である。
生理活性種一酸化窒素のバイオイメージング法の開発と生体系への応用

一酸化窒素合成酵素から生成する一酸化窒素は循環器系,免疫系,神経系などで多様な生理作用を示す事が明らかになりつつあるが,神経系においてはその真の作用機序は未だ混沌としており,議論の対象となっている.この原因の一つに常温で気体,かつ不安定なラジカル種である一酸化窒素を細胞内・組織中で刻々の時間変化に応じて的確に捉える手段がないことが挙げられる.本研究ではこの点を明らかにするために,すなわち一酸化窒素の細胞内・生体組織中での動態を解析するために,一酸化窒素のバイオメ-ジング法を開発することを目的に行われている.本年度の成果は蛍光法で一酸化窒素を捉える新親プローブ剤DAFを開発したことである.このDAFは刺激した細胞中からの一酸化窒素の検出に有用であるだけではなく,化学的に修飾したDAF-DAを用いることにより血管内皮細胞中から一酸化窒素を蛍光顕微鏡下,画像として検出することが可能である.具体的にはマクロファージ,メサンギウム細胞,内皮細胞,神経組織を用いた細胞系で成功している.一酸化窒素の検出測定法は各種報告されているが,いずれも欠点を有し,バイオイメージングの目的に叶うものはない.DAFは独自に開発されたもので,本方法の開発によりこの分野の研究に大きな進展をもたらすことは疑いない.次年度以降はpHの影響が少なくかつ励起光が生体に障害を与えない長波長領域の吸収を持った高機能性蛍光プローブの開発を行う予定である.さらに適用例として大脳組織切片,小脳組織切片における種々の刺激に対応した一酸化窒素の生成量,生成部位を明らかにすることになる.一酸化窒素合成酵素から生成する一酸化窒素は循環器系,免疫系,神経系などで多様な生理作用を示す事が明らかになりつつあるが,神経系においてはその真の作用機序は未だ混沌としており,議論の対象となっている.この原因の一つに常温で気体,かつ不安定なラジカル種である一酸化窒素を細胞内・組織中で刻々の時間変化に応じて的確に捉える手段がないことが挙げられる.本研究ではこの点を明らかにするために,すなわち一酸化窒素の細胞内・生体組織中での動態を解析するために,一酸化窒素のバイオメ-ジング法を開発することを目的に行われている.本年度の成果は蛍光法で一酸化窒素を捉える新親プローブ剤DAFを開発したことである.このDAFは刺激した細胞中からの一酸化窒素の検出に有用であるだけではなく,化学的に修飾したDAF-DAを用いることにより血管内皮細胞中から一酸化窒素を蛍光顕微鏡下,画像として検出することが可能である.具体的にはマクロファージ,メサンギウム細胞,内皮細胞,神経組織を用いた細胞系で成功している.一酸化窒素の検出測定法は各種報告されているが,いずれも欠点を有し,バイオイメージングの目的に叶うものはない.DAFは独自に開発されたもので,本方法の開発によりこの分野の研究に大きな進展をもたらすことは疑いない.次年度以降はpHの影響が少なくかつ励起光が生体に障害を与えない長波長領域の吸収を持った高機能性蛍光プローブの開発を行う予定である.さらに適用例として大脳組織切片,小脳組織切片における種々の刺激に対応した一酸化窒素の生成量,生成部位を明らかにすることになる.
X線を用いた銀河系内超新星残骸の系統的探査および宇宙線加速に対する寄与解明

宇宙を飛び交っている10^<15.5>eV以下の粒子(宇宙線)は、銀河系内の超新星残骸(SNR)で加速されていると信じられている。しかし、現在見つかっているTeVまでの加速が行われているSNRは、系内のSNR 270個のうち10個程度しかなく、そのほとんどが爆発からん1000年経った若いSNRとなっている。従って、宇宙線加速とSNRの環境との関係、宇宙線加速の進化、そして宇宙線の主成分である陽子加速については未だ解明されていない。そこで私は加速源の環境と加速の進化を解明するために、(i)爆発から数万年経ったSNRから、電子加速の証拠となるシンクロトロンX線を発見すること、(ii)系内SNRのうちシンクロトロンX線が受かっているサンプルを集め、光度の時間変化を追うことの2点に着目して研究を行った。(i)については、古いSNR W28と、CTBS7Bという2つのSNRがら初めてシンクロトロンX線を発見した。次に、(ii)に述べたサンプルにW28とCTB37Bのデータを加え、光度の時間変化を見た。その結果、年齢の若いSNRはシンクロトロンX線の光度が10^<34>erg/secと明るく、古くなるにつれて光度がさがる傾向が見られた。この傾向を説明するために、我々はSNRの進化に基づいて衝撃波の速度、磁場、電子の最高エネルギーを計算し、シンクロトロンX線の半径に対する光度を求める簡単なモデルを構築した。その結果、プラズマの密度が0.01-1cm^<-3>の時に観測データを良く再現でき、密度が低い環境下にあるSNRほど高いエネルギーまで電子が加速され、加速のタイムスケールも長くなること発見した。同様のモデルを宇宙線の主成分である陽子加速にも適用した。その結果、陽子はSNRの進化の早い時期に一気に1015eVまで加速されること、また最高到達エネルギーの密度依存性が小さいことがわかった。このように電子加速、陽子加速の進化を追った研究は世界で初めてであり、モデルを構築することによって宇宙線加速と環境の関わりを示唆できたことは、宇宙線加速解明への重要な成果であると言える。
植物糖タンパク質糖鎖分解酵素群の解析から明らかにするビフィズス菌間の共生関係

アラビナンやアラビノキシラン等の植物多糖及び、エクステンシンやアラビノガラクタン・プロテイン(AGP)等の植物糖タンパク質の末端の多くはL-アラビノース(L-Ara)で修飾されている。本研究では、B. adolescentis JCM1275のL-アラビノース分解酵素遺伝子クラスターにコードされたβ-L-アラビノピラノシダーゼ、α-L-アラビノフラノシダーゼ、β-L-アラビノフラノシダーゼの諸性質の機能解析に成功した。これらの酵素は共生関係にある他のビフィズス菌によって遊離された植物多糖及び糖タンパク質由来のオリゴ糖や二糖の分解代謝を担う酵素であると予想される。本年度は、ビフィズス菌Bifidobacterium adolescentis JCM1275株が有する植物糖タンパク質糖鎖分解酵素群のうち、II型アラビノガラクタン糖鎖(II型AG)に作用すると予想された糖質分解酵素(GH)ファミリー51に属すBAD_1524とGH27に属すBAD_1525の諸性質の解析を中心に研究を行った。大腸菌で発現させた組換えBAD_1525タンパク質は、pNP-β-L-arabinopyranoside (Arap)とpNP-α-D-galactopyranosideに作用した。また、カラマツ由来のII型AGからはL-アラビノース(L-Ara)が遊離し、アラビアガムからはL-AraとD-ガラクトースが遊離した。更に、β1,3-Arap側鎖を有するガラクトオリゴ糖鎖に作用させたところ、L-Araの遊離が確認できた。本酵素の至適温度は45°C、至適pHは5.0であった。また、A75IとG76Dの変異導入を行った結果、α-D-galactopyranosidase活性が消失し、β-L-arabinopyranosidase活性のみを示した。これよりBAD_1525は、β-L-arabinopyranosidase活性とα-D-galactopyranosidase活性を合わせ持つ酵素であることが確認された。組換えBAD_1524タンパク質はpNP-α-L-arabinofuranoside (Araf)のみに作用したことから、α-L-arabinofuranosidaseであることが確認できた。本酵素の至適pHは5.5、至適温度は40°Cであった。また、α1,3-Araf側鎖を有するガラクトオリゴ糖鎖に作用させたところ、L-Araの遊離が確認できた。これらの結果より、II型AGから遊離されたオリゴ糖は、B. adolescentisに取り込まれた後、菌体内酵素であるBAD_1524及びBAD_1525によって分解・代謝されると予想される。大腸菌で発現させた組換えBAD_1527タンパク質は、pNP-α-L-arabinofuranoside (Araf)に作用したことから、α-L-arabinofuranosidaseであることが確認できた。また、アラビナンやアラビノキシラン、カラマツII型AGなどのα1,3-Araf側鎖を有する多糖に作用させたところ、L-Araの遊離が確認できた。また、組換えBAD_1528タンパク質はpNP-α-L-arabinopyranoside(Arap)に作用し、pNP-α-D-galactopyranoside (Galp)にもわずかに作用した。その活性をkcat/Km値を用いて比較すると、β-L-アラビノピラノシダーゼ活性がα-D-ガラクトピラノシダーゼ活性のおよそ14倍であった。このため、BAD_1527はGH36で初めてのβ-L-アラビノピラノシダーゼであると考えられる。また、BAD_1528は糖転移活性を示すアノマー保持型の糖質分解酵素であり、至適温度は40°C、至適pHは5.0であった。この結果、II型AGや様々な植物多糖から遊離されたオリゴ糖は、B. adolescentisに取り込まれた後、BAD_1527及びBAD_1528や、既に解析済みのBAD_1524及びBAD_1525の作用によって分解・代謝されると予想される。当初は、GH43 α-L-arabinofuranosidase (BAD_1527)とGH36 β-L-arabinopyranosidase (BAD_1528)に加えて、GH127 β-L-arabinofuranosidase候補(BAD_1529)のクローニングと大腸菌を用いた発現解析を同時に進める予定であったが、十分な発現量を確認することができず、機能解析を行うことができなかった。今後、プライマー設計をやり直し、発現プラスミドを再調製する予定である。本年度は、ビフィズス菌Bifidobacterium adolescentis JCM1275株が有する植物糖タンパク質糖鎖分解酵素群のうち、シグナルペプチドを持たない菌体内酵素としてII型アラビノガラクタン糖鎖(II型AG)由来のオリゴ糖に作用すると予想された糖質分解酵素(GH)ファミリー127に属すβ-L-arabinofuranosidase候補(BAD_1529)のクローニングとその諸性質の解析を中心に研究を行った。大腸菌で発現させた組換えBAD_1529タンパク質は、pNP-β-L-arabinofuranoside (Araf)に作用したことから、β-L-arabinofuranosidaseであることが確認できた。

また、β1,2-,β1,3-,β1,5-Araf構造を持つオリゴ糖からL-アラビノースの遊離が確認できた。このため、広い基質特異性を持つ酵素であることが明らかになった。また、B. longumとB. adolescentisとの共生関係を明らかにするため、II型AG由来のオリゴ糖であるβ-arabinopyranosyl (Arap)-1,3-L-arabinose (Arapβ1,3-Ara)を用いたB. adolescentis JCM1275, JCM7046, JCM15918の資化性試験を行った。その結果、今回用いたB. adolescentis株ではArapβ1,3-Araの資化性を確認することができなかったため、B. adolescentisがII型AG由来のオリゴ糖を利用する明確な証拠を得ることはできなかった。しかし、B. adolescentisが様々なL-アラビノース分解酵素を持っていることから、菌体内に取り込まれたオリゴ糖に修飾されたL-アラビノースを除去するアクセサリー酵素として機能すると予想される。アラビナンやアラビノキシラン等の植物多糖及び、エクステンシンやアラビノガラクタン・プロテイン(AGP)等の植物糖タンパク質の末端の多くはL-アラビノース(L-Ara)で修飾されている。本研究では、B. adolescentis JCM1275のL-アラビノース分解酵素遺伝子クラスターにコードされたβ-L-アラビノピラノシダーゼ、α-L-アラビノフラノシダーゼ、β-L-アラビノフラノシダーゼの諸性質の機能解析に成功した。これらの酵素は共生関係にある他のビフィズス菌によって遊離された植物多糖及び糖タンパク質由来のオリゴ糖や二糖の分解代謝を担う酵素であると予想される。平成28年度は、B. adolescentis由来のHRGP分解酵素群から3遺伝子をクローニングし、その諸性質の解析を行う。平成29年度は、B. adolescentis由来のGH127 β-L-arabinofuranosidase候補(BAD_1529)のクローニングとその諸性質の解析を行う。また、B. longumとB. adolescentisとの共生関係を明らかにするため、II型AG由来の各種オリゴ糖を用いたB. adolescentisの資化性試験を行う。また、カラマツII型AGを炭素源として共培養を行い、II型AGの分解性及びそれぞれの生菌数の評価を行う。本研究は、大学院生1名と学部4年生1名の研究体制により同時並行で進める予定である。このため、予定通り進むと考えている。糖質科学次年度に繰り越す研究費が生じた状況は、酵素の機能解析の遅れに伴い、資化性試験の実施及び論文作成への着手が遅れたことに起因するものである。消耗品を購入するための物品費として100万円程度の支出を予定している。また、論文作成に伴う諸経費として30万程度、旅費として64万円程度の支出を予定している。
擬ロタキサンをプラットフォームとして利用する新規反応場の設計・構築と機能開発

本研究代表者は、クラウンエーテルと二級アミンのアンモニウム塩の組み合わせが水素結合を鍵にして可逆的に擬ロタキサン骨格を与えることに着目し、この擬ロタキサン骨格上で不斉環境を構築することを着想した。これまで擬ロタキサン骨格はその特異な構造を利用する機能性素子として利用することを中心に研究が行われてきているが、遷移金属錯体を用いる反応場として、擬ロタキサン骨格を利用した例はこれまで報告されたことがない。数多くの遷移金属錯体を用いた触媒的な不斉合成反応において有効な不斉配位子として数多く用いられている光学活性なオキサゾリン部位を有するクラウンエーテルとジフェニルホスフィニル基を有する二級アミンとを擬ロタキサン骨格を形成する基軸として利用し、前例の無い擬ロタキサンをプラットフォームとする新規反応場での特異な触媒反応の開発を行った。具体的には、光学活性なホスファイト部位を有するクラウンエーテルとアンモニウム部位を有するホスフィンを合成し、これらが有機溶媒中で効率良く擬ロタキサン構造を取ることを核磁気共鳴装置等で確認した。この溶液中に、ロジウム錯体を加えるとほぼ単一成分から成る擬ロタキサン骨格を有するロジウム超分子錯体の合成に成功した。さらに、この超分子ロジウム錯体存在下で、デヒドロアミノ酸エステルの水素化反応を行ったところ、対応するアミノ酸誘導体が高エナンチオ選択的に得られることを明らかにした。
高品質化と高効率化を実現する革新的粉末食品製造法の開発：誘導帯電バインダの利用

粉末食品はダマの発生を防止するために顆粒状に造粒されているものが多い。食品の造粒ではバインダとして多糖類水溶液等を粉末に添加することが多いが,バインダ使用量を削減できれば加工所要時間が短縮され、プロセスの効率化と製品の高品質化が期待できる。本研究では流動層造粒におけるバインダ液滴を帯電させることにより、粉末粒子とバインダ液滴間に静電気力が働き、プロセスが効率化されるか検討した。バインダ液滴を粉末と異極に帯電させた場合に、少ないバインダ添加量で顆粒が形成される傾向がみられた。しかしながら粉末が持つ電荷が不安定であったことから、造粒時の粉末の電荷を別途制御する技術が必要であることが明らかになった。本研究では粉末食品の高品質化とその製造プロセスの効率化を目的として、流動層造粒におけるバインダとして、誘電分極により帯電させた液滴の利用を試みる。粉末食品は微粉末の状態では使用時に湯や水に溶解する際にランピング(ダマ)を生じやすいため、溶解性を高めるため多くの場合、造粒操作により顆粒状に調製されるが、粉末食品の高品質化と製造コスト削減のため、バインダ添加量(加水量)の低減が課題となっている。本研究では、誘電分極により帯電した液滴とあらかじめ帯電させた粉末粒子間に働く静電気力を利用することにより効率的にバインダ液滴を粒子に付着させることで、加水量を低減した造粒プロセスの構築を目指す。本年度はノズルから噴霧されるバインダ液滴を誘電分極により帯電させるための装置を作製した。始めに噴霧口内径が約3 mmのステンレス鋼製ノズル付近に線径2 mm、内径10 mmのエポキシ樹脂コーティングされた銅製の環状電極を設置し、直流高電圧電源に接続した。電極に-4.5 +4.5 kVの電圧を印加し、蒸留水を20 g/minでノズルから噴霧した。ノズルからアースへ、また液滴を捕捉した電極からアースへ電流が検出され、噴霧された液滴が誘電分極していることが確認された。また上記ノズルおよび電極を流動層造粒装置内に設置した状態で造粒が行なえることを確認した。前述のノズルでは電極が空間に露出しており、電極とノズル間に放電が確認され、さらに電極とノズル間の相対的な位置が安定せず、液滴が持つ電荷が安定しないことから、ノズルに樹脂製キャップを装着し、キャップ中に環状電極を埋設する構造の装置を作製した。キャップを装着することによりノズルからの液滴噴流が乱され安定した液滴噴霧が行なえない現象が観察されたことから、噴霧に影響を与えない形状のキャップを設計した。本年度は流動層装置内部にて、安全に安定した帯電液滴を生成させるため、合成樹脂製の部品内部に包埋された状態で、バインダ噴霧取付ノズルに取り付け可能な環状電極を試作した。バインダ微粒化用の空気圧力、バインダ供給速度、電極内径、印加電圧、合成樹脂素材が、噴霧されるバインダ液滴の電荷に及ぼす影響について調査した。内径が10、12、16 mmの環状電極について試験を行なったところ、内径16 mmより12 mmの電極でより強く液滴が帯電したが、内径10 mmの電極では噴流が電極を包埋している樹脂部品にノズル噴流が接触し、安定した噴霧が行なえなかった。空気圧力は0.18 0.24 MPaにおいて、圧力が高くなるほど、液滴が強く帯電したが、0.18 MPa以下では噴流が安定しなかった。印加電圧が高くなるほど液滴は強く帯電したが、液滴供給速度が大きくなると、バインダ液滴の仮比電荷は低下した。ポリアミド6およびポリテトラフルオロエチレンにて電極包埋部品を試作したところ、ポリアミド6製部品にて、より液滴が強く帯電した。本研究では粉末食品の高品質化とその製造プロセスの効率化を目的として、流動層造粒におけるバインダとして、誘電分極により帯電させた液滴の利用を試みた。本研究では、誘電分極により帯電した液滴とあらかじめ帯電させた粉末粒子間に働く静電気力を利用することにより効率的にバインダ液滴を粒子に付着させることで、加水量を低減した造粒プロセスの構築を目指した。平成27年度は前年度までに作製した電極を流動層流動装置内部のノズルに取り付け、バインダ液滴を帯電させた状態で、デンプン等の流動層造粒を試みた。

造粒の初期段階においては、バインダ液滴を正に帯電させた場合は顆粒の成長が促進され、逆に負に帯電させた場合は顆粒の成長が阻害されたが、これは試験に用いた粉末が流動層内での摩擦などにより負に帯電していたためと考えられた。造粒を継続するとバインダ液滴を正負いずれに帯電させた場合も、顆粒が大型化して粗大粒が発生した。造粒を継続すると粉末はバインダ液滴から電荷の供給を受けバインダ液滴と同極性に帯電し、またバインダ液滴はノズル近傍に設置した電極に印加した電圧と異極性に帯電することから、粉末がノズル近傍に誘引され大型の顆粒が生成したと考えられた。研究実施期間を通して本研究では、流動層造粒装置内部のバインダ噴霧用ノズルに取り付けてバインダ液滴を帯電させることが可能な電極を開発し、効率よくバインダ液滴を帯電させるための条件を導出した。また流動層造粒におけるバインダ液滴の帯電が、顆粒の成長プロセスに与える影響について解明し、プロセス効率化のための基礎的知見を得た。粉末食品はダマの発生を防止するために顆粒状に造粒されているものが多い。食品の造粒ではバインダとして多糖類水溶液等を粉末に添加することが多いが,バインダ使用量を削減できれば加工所要時間が短縮され、プロセスの効率化と製品の高品質化が期待できる。本研究では流動層造粒におけるバインダ液滴を帯電させることにより、粉末粒子とバインダ液滴間に静電気力が働き、プロセスが効率化されるか検討した。バインダ液滴を粉末と異極に帯電させた場合に、少ないバインダ添加量で顆粒が形成される傾向がみられた。しかしながら粉末が持つ電荷が不安定であったことから、造粒時の粉末の電荷を別途制御する技術が必要であることが明らかになった。平成25年度の研究計画にしたがい、ノズル近傍に設置した電極に高電圧を印加することにより、流動層造粒におけるバインダを誘電分極により帯電させるための装置を作成し、所期の性能が得られることを確認した。また、電極からノズルへの放電が予測されたことから、放電を防ぎながら安定した帯電バインダの噴霧を行うための装置改良を必要に応じて行う計画であった。当初作製した装置では予測通り、電極からノズルへの放電が確認されたことから、研究計画にしたがいノズルに装着可能な樹脂に埋設された電極を作製し、噴霧の安定性について確認した。平成26年度の研究計画にしたがい、電極からノズルへの放電を防ぎながら安定した帯電バインダ液滴を噴霧するための電極部品を作製して性能を評価した。電極部品に噴霧したバインダが付着すること等により、電極の性能が大幅に低下するなどの問題点が見つかり、その問題の対処に時間を要したものの、電荷量および噴流ともに安定したバインダ噴霧が行なえるようになった。食品工学平成26年度の研究計画にしたがい、平成25年度に作製した装置を用いて帯電させたバインダによる食品粉末の流動層造粒を行い、バインダ液滴がもつ電荷が造粒工程に及ぼす影響について検討する。また微細水滴を含んだ水蒸気(アクアガス)の水滴について、その帯電状態について調べ、さらにアクアガスの水滴の電荷を変化させるため、アクアガス噴霧ノズル近傍に設置可能な電極を作製する。平成27年度の研究計画にしたがい、平成26年度に作製した電極部品を用いて、帯電バインダによる食品粉末の造粒試験を行い、効率よく造粒を行なうための条件について検討を行なう。また流動層など、造粒物の特性について、従来方法で造粒されたものと差異があるか、調査を行なう。
多剤耐性グラム陰性菌対策としてのAntimicrobial Stewardship

【方法】対象期間は2005年3月2014年2月とした。抗菌薬の使い分けの指標は、カルバペネム、TAZ/PIPC、4世代セフェム+CAZ、キノロンの4系統における3ヵ月毎のAHIとし、3ヵ月毎の耐性菌の分離率とAHIとの相関性を検討した。【結果】AHIは当初0.5前後を推移したが、2009年6月以降より目標である0.85以上を維持し、病院全体における抗菌薬の使い分けを達成することができた(AHI改善期: 2005年3月09年5月、高レベル維持期: 2009年6月14年2月)。AHI改善期では、AHIと緑膿菌の耐性率には有意の逆相関が認められた(耐性≧1系統:相関係数R^2=0.361 p=0.022、≧2系統: R^2=0.316 p=0.036、≧3系統: R^2=0.335 p=0.029)。しかし、使い分けを達成後の高レベル維持期間では、AHIと緑膿菌の耐性率に相関性は認められなかった。【結論】抗菌薬の使い分けを目標とした全病院的なASPを行うことによって、使い分けの改善期においては緑膿菌の耐性菌発現抑制効果が確認された。一方、使い分けが達成された段階では、抗菌薬の使い分けは耐性率に影響しなかった。以上の結果より、多剤耐性グラム陰性菌対策としては、抗菌薬の適正使用だけでなく、伝播対策などの多面的な対策が必要であることが明らかとなった。
北方宗教哲学の共生原理と「神」概念-北方少数先住民族とキリスト教-

本研究は、多様で異質な文化・価値観・世界観を人類が、互いに尊重し合い平和に共存していくうえで、最大の障壁である宗教間の理解の齟齬を無くして、真に互いの存在を認め合って相互に発展していくうえで中核となる思想的原理を究明するのが目的であった。本研究の成果は、従来、北方少数民族のアニミズムやシャーマニズムと高度に発展したキリスト教との間には、思想的に越えがたい齟齬が存在してきたが、こうした齟齬が、多重多層世界の想定をとおして、解決可能であり、血の復讐の克服・有機的自然観の受容・慈愛の成長をとおして現実可能であることを、明らかにしたことである。平成21年度は、1.ノルウェー初期木造教会調査撮影済みアナログフィルムのデジタル処理化、2.北方少数先住民族関連文献収集(とりわけイヌイット・サーミ・シベリア先住民の民話資料)、3.『グレティルのサガ』を中心とする血の復讐をめぐる文献研究と精読、4.オホーツク文化人や北方少数先住民の北海道における調査、5.3月の公開講座といった、作業や活動をおこなった。こうしな作業の成果の一貫としてあらわした著書や論文として、本研究に関連する生命観・宗教観・死生観をあつかった『新版増補生命倫理事典』やキリスト教と比較研究する意味で『デンマークを知るための六八章』・「キェルケゴール思想研究にともなうアポリアについて」・「キリシタン信仰と死生観」を公刊した。学会では、「古代北欧社会における血の復讐-主としてサガを通して-」を口頭発表して、『グレティルのサガ』研究の一端を公開した。意義や重要性として1.については、本作業を通して、ノルウェー以外ではあまり知られていない初期木造教会の詳細を多角的に分析できることになること、2.については、北方少数先住民の世界観や生活感をより総合的に理解できるようになること、3.については、応報主義の限界や合理主義の限界と自然観の関係が明らかになること、4.については、北海道立北方民族博物館における調査などから極めて内容豊かな個々の民族に対する研究方法や態度が明らかになること、5.については、本研究の一般市民への知識の還元がなされること、などが挙げられる。さらに本研究遂行過程において、三木成夫の進化論的解剖学・ルードヴィッヒ=クラーゲスの哲学的人間学(精神と心情の関係性理解)・野口三千三の体操法から、北方少数生住民の生活実感を理解するうえで、有益な見方を学ぶことができた。平成22年度は、ノルウェー初期木造教会調査済み資料のデータベース作成作業・北海道アイヌの現地調査・イヌイットやサーミなど先住民族の宗教儀礼や神話観の研究をおこなった。より具体的には、1.北方地域の少数民族に保存されているシャーマン儀礼やアニミズム的世界観における共生原理について、調査研究した。2.そのさいヨーロッパ的思考のシンボルとしてのキリスト教が、そうした共生原理を如何に保存・変容・破壊しているかも同時に、調査研究した。3.今後、日本においてそうした共生原理を実践するにはいかなる方法が具体的に可能か、その展望を示した。4.西洋哲学における神観や理神論の再検討をおこなった。作業としては、年間を通しての初期木造教会データベース化作業・アイヌやイヌイットの文献資料のリスト化や情報の収集や解読・北海道アイヌ文化現地調査・初期木造教会図像解読・アイヌ文化やオホーツク文化やイヌイット文化の宗教儀礼の比較ならびに資料整理・論文作成・より学問的に意義ある形として公開講座に代わる検討会をおこなった。意義・重要性としては以下の通りである。1.北方少数民族のアニミズム的自然観が今後の共生原理構築にとってモデルとなり得ることが明らかになってきたこと。2.キリスト教における共生性と反共生性について、ノルウェー初期木造教会画像解読から明瞭になってきこと。3.共生原理の構築にとって古神道とアイヌ宗教民俗ならびに縄文民俗の関係性が重要であることが明らかとなってきたこと。4.キリスト教との大きな違いは、暴力や支配や権力にかんする理解について、大きな違いが見られることが明らかとなってきたこと。以上である。平成23年度は、1.ノルウェースターヴ教会図像(アナログ写真のデジタル化)の保存・整理作業ならびに分析をほぼ1年間通しておこなった。本作業は、本研究において一貫しておこなっているものであるが、北欧土俗信仰をめぐる初期キリスト教会における特徴を明らかにするものである。2.アイスランド語テキスト・北欧全般における考古学的-民俗学的資料・イヌイットやサーミなど北方少数先住民族資料・日本におけるオホーツク文化やアイヌ文化などの北方少数先住民族資料といった、現在まで中里が調査研究してきた資料をとおして、西洋哲学に対する北方固有の共生原理を究明した。3.アイヌ文化や、アイヌ以前の文化における宗教儀礼を調査するため、旭川に2回調査に訪れた。

1の作業の主な成果としては、トーテムポールに類似した柱様の神像信仰がサーミ文化や初期ゲルマン文化に存在し、こうした神像信仰の変容がノルウェースターヴ教会の柱に認められること、ノルウェースターヴ教会の構成が北欧北方精神史の流れと重なっていること、タキトゥスの『ゲルマニア』に記述されている宗教儀礼やゲルマンの神の痕跡が、ノルウェースターヴ教会の伝承等に認められることなどである。2の作業の主な成果としては、アニミズム的世界観に基づく生活の智恵ないしは大規模な自然破壊をともなわない村落の形成と維持が北方少数先住民族文化には認められること、ただし、血の復讐といった争いについては、とりわけアイスランドのサガ文学に保存されているものが目立つが、イヌイット文化・アイヌ文化・オホーツク文化・フィンランドのカレワラにも、サガほど激しくはないが、復讐という出来事は記述されており、復讐の解決が大きな要点であることを突き止めたことである。3の作業の主な成果は、縄文時代から現代にいたるアイヌ文化の精神視的潮流の存在を認めたことである。H21H23年度にわたる研究成果をふまえて、1疑念として残された悪の克服について研究遂行した。2また、北方少数先住民族の宗教習俗や世界観を個別にその特質についてまとめて、近代化の過程で以下に悪の概念が変容したか、要点を明確化した。1悪の克服についてその要点を云えば、どの民族においても程度の多少はあれ、血の復讐観が見られ、スカンディナヴィア地域や東欧地域における血の復讐観を最も程度の強い無限連鎖として続く復讐観として定義するならば、アイヌ・オホーツク文化・エスキモー・サーミ・シベリア少数民族などは、無限連鎖とはならず、自然観による調停が見られる。2について云えば、近代化過程で世界観が変容したことはどの民族について例外がなく、そのメルクマールは生活であって、近代化以前の生活が持続していないかぎり、たとえ、宗教習俗の存続が見られるにしても、世界観は変容している。その理由は、少数民族の特徴であるシャーマニズムやアニミズムの宗教性が、世界観シンボリズムであるわけであるが、こうした宗教性は、自然に大きく依存する日常生活が変容してしまえば、大きな変容を受けるか消滅してしまうからである。ただし、こうした宗教性が変容もしくは消滅することによって、それまでは血の復讐観とのバランスが巧妙にとれて、外面的にも内面的にも平和が保たれていたにもかかわらず、近代化によってそれまでの宗教性が変容もしくは消滅したために、逆に、血の復讐観が先鋭化され、悪の解決が困難になるということが多々起こることになった事例が少なくない。3キリスト教との関連で云えば、我々自身のキリスト教観がローマンカトリックよりであるということ自体に、注意する必要がある。むしろ、キリスト教最初期のギリシア教父の世界観や倫理観にまで遡及すると、汎神論的世界観やシャーマニズム・アニミズムを包括する宗教性が散見できる。正教は大きな鍵である。アニミズムやシャーマニズムの世界観・そうした世界観にみられる共生原理とキリスト教との軋櫟・日本における共生原理の可能性・西洋哲学や神学にみられる排他性や抽象性について、調査研究するのがH23年度であったが、おおむね目的は達成された。また、H23年度の作業をとおして、共生原理の背後に、復讐観が存在することを発見した。これは大きな成果であった。
南シベリア地域の古代碑文と遺物からみたイエニセイ・キルギズ族の歴史的再検討

本研究成果としては,中央ユーラシア史上におけるイェニセイ・キルギズ族の歴史的役割を考察する上で,第一資料ともいうべきイェニセイ川上・中流域で発見され,現地の各研究機関や博物館の協力を得て,各機関に所蔵されている古代テュルク・ルーン文字諸銘文について現地調査を行い,そこから新たな読みを提示することができたことを第一に挙げることができる。1991年のソ連の崩壊以前には,現地人及びロシア人以外の研究者が行えなかった南シベリア地区において,私は日本人として最初の専門家として,現地に入って,関係銘文の計測や撮影と解読調査を行うことができたのであり,ここから得られたデータをもとに従来の解読成果について検証並びに歴史学上の問題に新たな解釈を提起し得たことは大きな意味を持とう。まず現地調査としては,平成14年には8月初旬から9月初旬までトゥヴァ共和国のキジル市郷土博物館及びハカス共和国のアバカン郷土博物館及びミヌシンスク郷土博物館の各所蔵の銘文資料について,また平成15年9月上旬にはミヌシンスク博物館所蔵の銘文の一部について,同じく平成16年8月下旬9月上旬にもミヌシンスク博物館所蔵の銘文資料の調査とそこから西北に離れた位置にあるスレク岩絵銘文の現地調査を行ったことが挙げられる。また平成17年9月には,字体や字句の使用でイェニセイ碑文との共通性が指摘されているアルタイ共和国のゴルノ・アルタイ地区発見の埋葬地や岩絵に記された銘文について,ロシア人考古学者のI.L.キィズィラソフが当地で行った現地調査とその解読成果について,文献学的再検討を加えた。ここで得られた成果は今後,イェニセイ・キルギズ族について,今後,その実態や歴史的役割について考察する上で確実な研究基盤を提供するものであるという観点から,その意味は極めて大きいといえるものであることを申し述べたい。本年度は,当初の計画通り,7月23日から8月16日にかけてイェニセイ河上・中流域にあるロシア連邦内のトゥバ共和国のキジル市郷土博物館及びハカス共和国のアバカン市郷土博物館及びミヌシンスク市郷土博物館を訪れ,古代テュルク・ルーン文字銘文の現地調査及び銘文の所蔵状況に関する聞き取り調査を実施した。渡航前にはトゥヴァ国立大学のドルジュ副学長から現地での滞在許可と上記博物館での調査協力を約束するお手紙をいただき,またハカス共和国のミヌシンスク市郷土博物館館長からも同博物館での調査許可をいただいていたこともあり,現地では博物館員の献身的な協力が得られ,トラブルもなく調査研究に従事することができた。総発見数約155点ほどの銘文のうち,今回は上記の博物館に所蔵されている大小約30点の銘文について,先行の研究者による銘文名や分類番号と照合しつつ,字句の刻まれた石材の寸法の測量や,文字の配置や形状に注意しつつ,調査を行った。その際,記録のために,不明もしくは解読困難な文字についてはビデオや写真で撮影し,特に不明な部分は拓本によっても採択作業を行いつつ調査を進めた。この結果,これまで知られていない銘文が1点新たに見つかったこと,また行方不明として放置されていた銘文1点も明らかになったことに加え,D. D.ワシリエフ及びコルムシンといったロシア人研究者によって公表され,通説として受け入れられてきた読みを訂正せざるを得ない字句を含む銘文があることが確認されたことは,今回の調査における最大の収穫である。

同時に,今回の調査において,新たな読みを裏付けるビデオ資料や写真,さらには一部の拓本資料が我が国に将来できたことは今後の,同地域の銘文に関する文献学的・歴史学的研究にとって大きな意味を持ち,国際的な情報を発信する際のデータベースを構築する上での基盤資料と位置づけることができよう。まず,本年の研究活動としては,8月1日から12日まで,ハカス共和国のミヌシンスク博物館を訪れ,現地研究員のレオンチェフ氏等の協力を得て,イェニセイ河上中流域で発見され本館に収蔵された古代テユルク・ルーン文字で書かれた古代トルコ語碑文の中から,エレゲスト碑文(E10),ベグレ碑文(E-11),エリ・バジ碑文(E68),ヘムチック・チュルガック碑文(E41)の計4点の調査を行なったことが挙げられる。今回は博物館の事情もあり,調査期間が短かったので,イェニセイ碑文の中でも大きな碑文もしくは複雑な構成をもつ碑文にしぼって,測量し,写真及び部分的な採拓作業の上で解読研究を行った。その際には従来の判読研究との比較作業を行い,これまで見落とされていた文字を指摘したり,欠損個所の何点かを復元することができた。しかし一部の碑文字句については判読が困難なものもあり,今後とも調査を継続すべき必要があることを痛感した。また本調査時には,偶然ながらロシアを代表する古代イェニセイ碑文の専門家I.L.クィズラソフ(モスクワ考古学研究所上級研究員)が本館を訪れたことを機に,同氏から本館所蔵の碑文の原発見地や古代テュルク・ルーン文字碑文に関する日露両国での研究現状について情報交換を行うことができたことは誠に貴重な収穫であり,大きな刺激となった。またこの調査時には本博物館の附属図書館からはイェニセイ碑文及び当地方の考古文物に関する貴重な当時の報告書や論著について複写の許可を得たうえで,複写蒐集することができた。この他,本年は昨年から始めた碑文のデータ整理及び解読作業を継続しており,昨年来の現地調査の成果を踏まえて,碑文で頻出する字句についての用法について考察を行ったことも付言しておきたい本年度の研究では,これまでの2年間にトゥバ共和国およびハカス共和国の現地博物館で調査したイェニセイ川流域の草原で発見・蒐集された幾つかの古代テュルク・ルーン文字銘文の現地調査で得られた結果について,特に先行研究を代表するロシアのワシリエフ,コルムシンおよびクィズラソフが発表している解読成果と比較検討を行った。又,可能な限り,関連する銘文字句については,同時代の漢文史料やモンゴリアで発見されたルーン文字資料とつき合わせつつ,文献学的・歴史学的観点からも再検討を行った。中でも,イェニセイ川中流域に発見され,私自身もかつて考察を行ったことがある,古代テュルク時代の石人の背中に刻まれたルーン文字銘文(トゥバ第3碑文-E37)は,その字句内に<カラ・カン(黒汗国)>,<テュルギッシュ族(突旗施)>,<チャンシュ(<chin.長史)>などの貴重な歴史字句を含むことが今回,確認されたことは当該地域の歴史背景を探る上でも極めて貴重であると考える。私はこの碑文を初めとする現地調査を踏まえつつ,その成果の一端を2004年10月46日にキルギス共和国のマナス大学で開催された<第2回トルコ文明に関する国際会議>において成果報告を行った。又この学会には,ロシアやトルコ,中アジア諸国のトルコ文献学・歴史学・考古学の諸分野で第一線の研究者とも,碑文の調査研究情報や今後の碑文・遺跡に関する保事業について,様々な観点から有意義な討論を行うことができた。その際に,キルギズ共和国に残るタラス碑文などの古代チュルク文字諸銘文や同時代のアクベシム遺跡やクラスナヤ・レチカ遺跡やそこからの出土品についても実見する機会をもてたことは大きな収穫となった。
動的再結晶と動的相変態に基づく微細組織制御に関する研究

鉄鋼材料の結晶粒超微細化処理に対して,動的再結晶と動的相変態を併用する新たな加工熱処理法の開発とその基本原理を解明することを目的として,動的再結晶組織からの拡散変態特性と加工中に生じる動的相変態特性を,超高純度IF鋼とフェライト系ステンレスCr鋼を用いて調査し,次の諸結果を得た。1,2は前者,3,4,5は後者より得た結果である。1.動的再結晶γ粒組織を焼きなますと多段階からなる軟化課程を示し,長時間焼きなまし後でも完全軟化状態には至らない。これに対応して拡散相変態によって生じるα粒組織における粒径も不完全軟化域ではほとんど増加せず,微細粒のままである。2.動的再結晶γ粒組織中の高密度転位線上に優先的に微細炭窒化物が析出し,それが転位下部組織を安定化する結果,γ粒組織は長時間の高温保持によっても粗粒化が抑制され,引き続きγ-α相変態で生じるα粒径の増加も抑制される。3.Fe-Cr鋼のγ-α域でのσ-ε曲線は,鋭いピーク応力に達した後,顕著な加工軟化を生じながらある一定応力に近づく。この加工軟化はγ粒組織が変形に伴いα粒へ変態する動的相変態によって引き起こされる。しかし,同じ温度で静的に長時間保持してもγ-α変態は進行しない。4.動的相変態によって生じる平均α粒径は,ひずみ速度の増加に伴い微細化すると共に高温下では更に微細化する。鉄鋼材料の結晶粒超微細化処理に対して、動的再結晶と動的相変態を併用する新たな加工熱処理法の開発とその基本原理を解明することを目的として、動的再結晶組織からの拡散変態特性と加工中に生じる動的相変態特性を、超高純度IF鋼とフェライトステンレス系Cr鋼を用いて調査し、次の諸結果を得た。(1)、(2)、(3)は前者、(4)、(5)は後者より得た結果である。(1)フェライト(α)粒組織はオーステナイト(γ)域での変形とともに再粒化し、定常状態応力を示す高ひずみ側である一定の粒径を有する組織に近づく。後者はγ域での動的再結晶によって温度とひずみ速度に敏感に依存して変化する。(2)動的再結晶γ粒組織を焼きなますと多段階からなる軟化課程を示し、長時間焼きなまし後でも完全軟化状態には至らない。これに対応して拡散相変態によって生じるα粒組織における粒径も不完全軟化域ではほとんど増加せず、微細粒のままである。(3)動的再結晶γ粒組織中の高密度転位線上に優先的に微細炭窒化物が折出し、転位下部組織が安定化される結果、γ粒組織は長時間の高温保持によっても粗粒化が抑制される。(4)Fe-Cr鋼のγ-α域でのσ-ε曲線は、ピーク応力に達した後顕著な加工軟化を生じながらある一定応力に近づく。同じ温度で静的に長時間保持してもγ-α変態は進行しない。(5)動的相変態によって生じるα粒組織は、ひずみ速度の増加とともに減少する。鉄鋼材料の結晶粒超微細化処理に対して、動的再結晶と動的相変態を併用する新たな加工熱処理法の開発とその基本原理を解明することを目的として、動的再結晶組織からの拡散変態特性と加工中に生じる動的相変態特性を、超高純度IF鋼とフェライト系ステンレスCr鋼を用いて調査し、次の諸結果を得た。1、2は前者、3、4、5は後者より得た結果である。1、動的再結晶γ粒組織を焼きなますと多段階からなる軟化過程を示し、長時間焼きなまし後でも完全軟化条体には至らない。

2、動的再結晶γ粒組織中の高密度転位線上に優先的に微細炭窒化物折出し、それが転位下部組織を安定化する結果、γ粒組織は長時間の高温保持によっても粗粒化が抑制され、引き続きγ-α相変態で生じるα粒径の増加も抑制される。3、Fe-Cr鋼のγ-α域でのσ-ε曲線は、鋭いピーク応力に達した後、顕著な加工軟化を生じながらある一定応力に近づく。この加工軟化はγ粒組織が変形に伴いα粒へ変態する動的相変態によって引き起こされる。しかし、同じ温度で静的に長時間保持してもγ-α変態は進行しない。4、動的相変態によって生じるα粒組織は、高いひずみ速度下では単一ピーク、低速変形下では二重ピークを持つ粒径分布を示す。後者はピーク応力までの加工硬化域とそれ以後の加工軟化域で動的変態で生じるα粒組織に対応して現れる。5、動的相変態によって生じる平均α粒径は、ひずみ速度の増加に伴い微細化すると共に高温下では更に微細化する。
ゴム弾性転移に基づく新規環境シンクロゲルの合成と新規材料への展開

本年度は昨年度調製したポリサイラミンゲル及び粒子を用いて、以下のように検討を進めた。i)ポリサイラミンマイクロスフィアスキン層形成の速度論的解析:ポリサイラミンマイクロスフィアを膨潤状態(酸性)からアルカリ性溶液につけると、表面から相転移し、スキン層が形成された。これまで知られている感温性ゲルなどのスキン層は準安定状態から最終的にはスキン層が崩壊し、安定状態に到達する。一方、ポリサイラミンのスキン層は数ヶ月にわたってその構造を維持することが確認された。この現象は物質透過のON-OFFを高度に制御するためには極めて重要な現象であり、スキン層の形成及び消失の速度的課程を詳細に検討した結果、通常のゲルで起こる化膨潤状態からの浸透圧ゆらぎが起こらないため、安定スキン層が形成していることが確認された。ii)ポリサイラミンマイクロスフィアからの薬物リリース:上述したようにポリサイラミンマイクロスフィアのスキン層は緻密で極めて安定に形成されるため、その安定スキン層を利用した薬物リリースのON-OFF制御に関する検討を行った。蛍光物質をモデルとして用い、スキン層形成に伴う薬物リリース制御は完全に起こり、スキン層の透過が完全にシャットアウトしていることが確認された。iii)ポリサイラミン機能界面の設計:ロッドーグロビュール転移を示すポリサイラミンはその相転移とともに親-疎水性、硬さ、分子末端間距離などを著しく変化させる今までに無い材料である。基板表面にポリサイラミンをブラシ上に構築させることにより表面の硬さ、すべり面等を信号により転移させうる機能性界面の構築が期待される。ポリサイラミン末端にメルカプト基あるいはシラノール基を導入し、機材として金やガラス表面を用い、モデルブラシの構築を行った。I)ポリサイラミンテレケリックス合成:リチウムアミドを触媒として、2級ジアミンとジビニルシラン誘導体とのアニオン重付加反応で様々な分子量、組成のポリマーを合成した。プレポリマー末端に関しては、アミン過剰の条件下、一段で両末端2級アミノ基テレケリックスの合成を行なった。また別途、1 : 1付加物を単離し、その付加物の自己重化反応を行うことにより、片末端に2級アミノ基、他末端にビニルシリル基を有するヘテロテレケリックスの合成を行った。これは両末端が架橋に関するホモテレケリックスとの比較として、片末端をフリーにする材料設計に供する。ii)分子応答特性の解析:これまでに得られている相転移現象に対して、I)で合成した材料の応答特性の比較検討を行なった。特にpH及び温度応答性、アニオンバインド能さらにはゴム弾性等を分子構造と信号応答特性の相関に基づき詳細に検討を加えた。iii)架橋体の合成:3ないし4感応性のチオール及びイソシアナートを用い、両末端に2級アミノ基を有するテレケリックスの科学架橋体を調製した。また、ジイソシアナートを両末端に反応させた後、ジアミンで鎖延長し、ハードセグメントを有する物理架橋体の調製も行った。物理的架橋体は溶剤に可溶のため、キャスト法による製膜、デバイス化が可能である。さらにヘテロテレケリックポリサイラミンを任意の割合で用いることにより、自由末端を有するセグメントの導入が可能である。iv)分子協調的相転移による増幅効果:架橋体を構成するポリサイラミン鎖はゴム弾性転移に伴い、コイル-クロビュール転移を引き起こし、分子鎖の両末端距離に一桁程度の変化を引き起こす事が期待できる。このような分子鎖一本についての信号変化が架橋点間距離を大きく変化させ、ゲル全体として増幅される事によりマクロな信号として取り出す事が可能である。この現象を追究するため、膨潤状態における粘弾性の測定を行い、膨潤して堅くなる初めてのゲルの調製が達成された。また分散重合により調製したマイクロ粒子の相転移に関して検討し、極めて安定なスキン相が、剛直に広がったコア膨潤ネットワークの過膨潤安定状態に起因することを突き止めた。
生殖腺の性分化機構の解明

主要なステロイドホルモン産生組織である生殖腺と副腎皮質は、共に同一の細胞集団より派生することが、Ad4BP抗体による免疫組織染色の結果より示された。すなわち、Ad4BP陽性として認められる一つの細胞集団は、後に二つに分離し生殖腺原基と副腎原基を形成する。各々の原基は更に生殖腺と副腎皮質へと分化することになる。この過程で特徴的なことは、生殖腺が性依存的に精巣と卵巣に分化するのに対し、副腎皮質ではそのような性分化は認められないことである。本研究においてはこれらの組織の分化に不可欠な転写因子の機能と発現を基に、性的に未分化な生殖腺が精巣および卵巣へと分化する過程を検討することで、性依存的分化のメカニズムを明かにする。Ad4BPとDAX-1と呼ばれる転写因子を中心に研究をおこなった。これらは生殖腺や副腎皮質などのステロイドホルモン産生細胞に発現するが、Ad4BPが全ての体細胞に発現するのに対し、DAX-1はその一部の細胞に発現するなど、その分布に顕著な差が認められた。また11.5日齢の胎仔泌尿生殖隆起における発現も、全てのAd4BP陽性細胞がDAX-1陽性とはならず、その分布に差が認められた。一方、DAX-1の機能を調べたところ、Ad4BPで活性化するP450遺伝子の転写を抑制した。またDax-1遺伝子自身はAd4BPの制御下に転写が活性化されることを見い出した。DAX-1は性腺や副腎特異的に発現する遺伝子の転写に対し抑制的に働くと推測される。また、Dax-1遺伝子がAd4BPの制御下にありながら、両者の分布が異なるという結果からはAd4BPはDax-1の転写制御に不可欠であるが、他の因子の関与も必要であることを示唆している。一方で、P450遺伝子はAd4BPによって正に制御されており、DAX-1による負の制御を考慮する必要がある。