hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
局所銀河群銀河の高密度分子ガス広域撮像サーベイに基づく大質量星形成過程の解明

系外銀河における高密度分子ガスの広域サーベイを行うため、ASTE望遠鏡搭載の345GHz帯受信機CATS345に対し、導波管型偏波分離器を用いることで2偏波同時観測を可能にする改良・性能向上を行った。局所銀河群の銀河M33に対し、高密度ガスの効率的なトレーサーであるCO(3-2)分子輝線の広域サーベイを実施、ほとんどのGMCは星形成活動性を示し、その寿命は20-40Myrであること等がわかった。本課題でほ、南米チリに設置されたASTE望遠鏡搭載の345GHz帯受信機に対し両偏波同時受信可能とする改良を行う。非常に近距離にある局所銀河群の銀河のような超近傍銀河に対し、系外銀河観測のメリットを最大限生かす研究を行うためには、対象の見かけ上の大きさが大きいため、非常に広域にわたって比較的小さな分子雲まで検出できる高感度な観測を実行する必要がある。受信機改良により観測効率の大幅な向上をはかることで、高密度ガスの効率的なトレーサーであるCO(3-2)分子輝線を用いて局所銀河群の銀河(M33,NGC 6822等)に対して、かつてない広さ(数100平方分規模)での、系外銀河における高密度分子ガスの無バイアス広域サーベイを実施する。本研究では、まずASTE望遠鏡搭載の345GHz帯受信機CATS345に対する性能向上をはかるため、Orthomode transducer(OMT)を用いることで2偏波同時観測を可能にする改良を進めた。22年度には、大阪府立大学において製作済の345GHz帯用のOMTを利用し、ガウスビーム光学で基本設計を行い、物理光学シミュレーションソフト(GRASP9)を用いて詳細に検討、これを受信機に組み込むための設計を行った。この設計に基づき、必要な部品を購入、一部の組み立てを行った。これらの作業と並行して、これまで取得済の45m望遠鏡、野辺山ミリ波干渉計等のデータを利用して、特に局所銀河群の渦状銀河M33に関する論文出版と学会発表を行った。ASTE望遠鏡搭載の345GHz帯受信機CATS345に対して性能向上をはかるため、Orth omode transducer(OMT)を用いることで2偏波同時観測を可能にする改良を進めた。大阪府立大学において製作済の345GHz帯用のOMTを利用し、これを受信機に組み込むため、詳細な検討・設計を行い、これらを完成させ、実験室で性能評価を行った。非常に近距離にある局所銀河群の銀河のような超近傍銀河に対し、銀河全面での分布を仮定なく知ることができるという系外銀河観測のメリットを最大限生かす研究を行うためには、対象の見かけ上の大きさが大きいため、非常に広域にわたって比較的小さな分子雲まで検出できる高感度な観測を実行する必要がある。受信機改良により観測効率の大幅な向上をはかることにより、高密度ガスの効率的なトレーサーであるCO(3-2)分子輝線を用いて、非常に近距離にある局所銀河群の銀河(M33など)に対し、かつてない広さ(数100平方分規模)での、系外銀河における高密度分子ガスの無バイアス広域サーベイを実施していくことができう。これらとともに、取得済の45m電波望遠鏡の分子輝線データ、ASTE望遠鏡の連続波データ等を用いて、局所銀河群の渦状銀河M33における分子ガス雲や低温ダストの全体像を作成した。これらを用いて、全体の水素ガス雲の量が同じでも銀河の中心に近い内側の領域の方が全体の中の分子ガス雲比率が高くなっていることや、銀河の外側に向かって低温ダストの温度が緩やかに低くなっていること等を明らかにした。これらに関しては、論文出版と報道発表を行った。これらに加え、星形成と密接に関連した高密度分子ガス雲の観測を進めた。高密度ガスの効率的なトレーサーであるCO(3-2)分子輝線を用いて、系外銀河における高密度分子ガスの無バイアス広域サーベイを実施していくことを目的として、ASTE望遠鏡搭載の345GHz帯受信機CATS345に対して性能を向上させるため、Orth omode transducer (OMT)を用いることで2偏波同時観測を可能にする改良を行い、実験室での性能評価を進め完成させた。さらにASTE望遠鏡に搭載して性能評価を行った。これとともに局所銀河群中に存在する最も近傍の渦状銀河の一つであるM33に対し、45m電波望遠鏡及びASTE望遠鏡を用いてCO(1-0), CO(3-2)及び1.1mm連続波による星間物質の広域撮像観測を巨大分子雲(GMC)を識別できる分解能で実行してきたが、CO(3-2)での一部領域を除き予定領域の観測をほぼ完遂した。M33はface-onに近いため、個々のGMCを分解しつつその分布を銀河円盤全体にわたって渦状腕等の大局的構造や個々の星形成領域と対応づけて探ることができる最適の天体である。これにより、(1)質量の大きいGMCほどCO(3-2)/CO(1-0)が高く大質量なGMCほど高密度ガスの割合が大きい、すなわち効率的な高密度ガス形成が行われている可能性を示唆すること、また、

(2) HIIregionや若い星団の付随の有無から、GMCを4つの進化段階に分類したところ、ほとんどのGMCが星形成活動性を示し、GMCの寿命は20-40Myrであると推測される、などが明らかとなった。また、観測を完遂したCO(1-0), 1.1mm continuumについて、取得したデータのホームページでの公開を開始した。受信機改良はほぼ予定通り進んでおり、同時にデータ取得も概ね順調である。また、取得済データに関する出版も進んでいる。24年度が最終年度であるため、記入しない。改良中の受信機は今シーズンに望遠鏡搭載を行い、気透明度や安定度込みの実際の観測環境において、天体高度変化に対するビーム形状や安定性、長時間積分への耐久性等、総合的な性能評価を行う。その上で、これを用いて、主としてM33の分子雲に対する広域CO(3-2)マッピング観測を進め、M33の高密度分子ガス雲の全面マップを完成させる。観測実行と同時に、これまでの観測により得られているCO(3-2)のデータについて、研究会発表や論文出版を行っていくとともに、本年度に得られたデータについても速やかに解析を進めていく。
慢性閉塞性肺疾患患者における気道感染予防のためのセルフプログラム開発に関する研究

本研究は、外来に通院するCOPD患者を対象に3つの調査を行った。おもな結果、外来で治療するCOPD患者は70歳以上が約7割を占め、病期分類ではIII期以上が約4割を占めていた。COPDの進行によって身体活動のQOLに影響を及ぼしていたが、病期が進行しても精神的健康度はある程度維持されていた。しかし、COPDを患っているにもかかわらず25%のものは喫煙を継続していた。病期にかかわらず全体的には気道感染の予防行動が取れていなかった理由として、疾患に対する認識や知識が少ないことが考えられた。一方で、知識があれば予防行動につながり、肺炎等での入院が少ない、すなわち重症化防止との関連が示唆された。慢性閉塞性肺疾患Chronic Obstructive Pulmonary disease(以下COPD)患者にとって、急性増悪は生活の質(QOL)と予後の悪化を招く。なかでも気道感染は急性増悪の最も大きな原因である。しかし、COPD患者が感染予防に対して実際にどのような行動をとっているかは明らかでない。そこで、本研究は、COPD患者の気道感染に対する認識と予防行動について明らかにすること、またCOPD患者が自己の行動を振り返り、感染の原因となっている行動について明らかにすることを目的とした。この目的を達成するために、1.気道感染に対する認識と予防行動についてのアンケートによる実態調査2.気道感染に対する認識と予防行動についての質的調査を考えていた。実際に調査に入る前に研究の遂行について構成員と文献抄読と詳細な打ち合わせを複数回実施した。そこで、対象者を「1呼吸機能検査によりCOPDの定義を満たすが、明らかな自覚症状がない患者30名2在宅療養中のCOPD中等症から重症の患者30名」と考えていたが、1の対象者を現状の外来患者の中から抽出することが困難ではないかという意見が出た。そこで、この対象群への調査は今後検討することに変更し、主な対象者を2にすることに決定した。また、研究実施前の予備調査として、数人のCOPD患者に面接を行い、調査紙の内容を検討した。調査協力施設を3施設に増やし、各施設の患者の特徴を抽出した。COPDの患者数は年々増加しているが、症状を悪化させる気道感染症についての患者の認識や行動の実態は明らかにされていない。そのため、具体的な予防策については個人まかせになっている。本研究により、気道感染の頻度や予防のための個人の認識・行動などを量的に明らかにする。COPD患者の急性増悪予防が必要性なことは啓発されているが、実際にどのような気道感染予防行動がとられているか、また、それが効果的な予防行動であるかなどの詳細な検討は殆どない。適切な予防行動により急性増悪の回数を減らすことは、確実に症状の進行を遅らせ、QOLやADLの維持に貢献すると考えられる。上記の目的を遂行するために、調査1)COPD患者の気道感染に対する認識と予防行動についての実態調査調査2)COPD患者の感染予防行動についての質的研究を実施した。調査1については、3つの施設から合計60人のCOPD患者を対象にアンケート調査を行った。また、調査2については、調査1の対象の中から患者の同意が得られた方に依頼し、合計6名の方にインタビュー調査を実施した。調査3の「COPD患者の口腔・鼻腔の細菌学的な実態調査」については、文献等の検索を行い、再度研究方法を熟考し、調査遂行のために基礎的な実験を行った。COPD患者にとって、息切れの増加、喀痰の増加、胸部不快感・違和感の出現あるいは増加などの急性増悪は、呼吸不全を引き起こし死亡に至ることもある。急性増悪の4050%は気道細菌感染が関与するといわれている。このため、外来通院中のCOPD患者82名を対象にQOL、重症度、気道感染予防の認識と行動について調査を行った。その結果、QOLは「身体機能」は病期、重症度が増すほどに低下し、国民標準値より低くなっていた。しかし、「体の痛み」「心の健康」は病期、重症度による影響を受けていないことがわかった。呼吸機能の悪化に伴い、おもに室内での生活になるが、動かなければ息苦しさは増強しないことから、各自が自分の状況に合わせた活動の制限を行っていることがわかった【学会発表済み】また、気道感染予防の認識や行動の調査では、過去1年間に気道感染を起こした人は対象者の61.0%で、そのうち約半数は肺炎を併発し、予防接種は受けない(32.9%)、気道感染を起こしても病院には行かない(32.0%)、現在も喫煙を続けている(26.8%)という結果が得られた【学会発表済み】。COPD患者は、ある程度自己管理の知識があると予測を考えていたが、予測に反して対象者の殆どは、気道感染などの急性増悪が予後に及ぼす影響を知らなかった。さらに、COPD患者の呼吸改善に有効であるといわれている呼吸リハビリテーションも、病期の進行した人にさえほとんど認知されていないことがわかった。現在、多方面から解析を行い、セルフケアへの認識の低の原因を調査中である。3施設の研究協力・分担者の医師に患者を選出してもらい、調査を実施した。施設によっては、患者数に違いがあり選出に時間を要したところもあった。

また、患者がCOPD以外の呼吸器疾患を持っていた場合は除外する予定だったが、気管支喘息ももっている患者が多くいることがわかった。このため、当初の選定基準に従い調査を実施していた時点では、対象者が増えず研究の進行が遅れた。そこで、医師が現在の呼吸器の症状はCOPDによるものだと判断した場合、対象に入れることに変更した。また、口腔内の細菌の調査については予備実験を行い、歯科医や口腔細菌学の研究者に意見を聴き、調査方法を変更し実施予定である。今年度は、COPD患者のQOLと症状の実態調査結果をいくつかの方向から検討し、国際学会で報告を行った。対象のCOPD患者の多くは、知識・認識とも低く自己管理があまりできていない結果になった。継続して受診している患者でも、このような結果であるので、自分がCOPDであるということを知らずに喫煙を継続しているような患者であれば、さらに呼吸に配慮した生活をおくれていない可能性が推測された。今後は、住民検診や企業の健康診断などで未診断のCOPD集団にアプローチすることと、長年に渡り受療行動をしているにもかかわらず、なぜ知識と認識が低いのかを検討する予定である。また、COPD患者の病気に対する認識と気道感染予防行動についての質的な調査では、【病気のことを甘く考えていた】と喫煙を続けたことや病気についての感心がなかったことを振り返っており、病状が進行してからの後悔の念が見られた。さらに、最後の研究テーマであったCOPD患者の口腔内の状況と気道感染との関連について調査を実施した。今回は、大学病院に通院し、初めの実態調査にも協力の得られた患者を対象とした。その結果、口腔内の状況については感心があるものとないものに分かれたが、研究者が推測していたよりも口腔環境は良かった。対象者の一部は歯周病の兆候が認められた。口腔内の状況と気道感染の関連については現在分析を行っている。本研究は、外来に通院するCOPD患者を対象に3つの調査を行った。おもな結果、外来で治療するCOPD患者は70歳以上が約7割を占め、病期分類ではIII期以上が約4割を占めていた。COPDの進行によって身体活動のQOLに影響を及ぼしていたが、病期が進行しても精神的健康度はある程度維持されていた。しかし、COPDを患っているにもかかわらず25%のものは喫煙を継続していた。病期にかかわらず全体的には気道感染の予防行動が取れていなかった理由として、疾患に対する認識や知識が少ないことが考えられた。一方で、知識があれば予防行動につながり、肺炎等での入院が少ない、すなわち重症化防止との関連が示唆された。3施設の研究協力・分担者の医師に研究対象者を選出してもらい、調査を実施した。しかし、施設によって患者選出・調査の進行の速度にかなり違いが出た。対象者の選出条件に、COPD以外の呼吸器疾患がないことをあげていたが、気管支喘息などを合併している患者がかなり多く、この条件のままでは目標の患者数を調査することがかなり困難であることがわかった。そのため、選出を依頼した医師にCOPD以外の呼吸器疾患を患者が持っていても現在の症状を引き起こしているのが主にCOPDであると判断できる場合には、対象患者に選出してもらうことにした。現在調査が終了した、QOL調査、重症度調査、気道感染予防行動についての認識・行動について、さらに学会発表を行い論文を作成する。また、COPD患者の肺炎の起炎菌の調査を行い、口腔内の状態と細菌との関連があるかを調査予定である。
異種腎臓移植の基礎的研究

ラット腎移植に先立ち免疫抑制剤の投与量決定の為、ラット異所的心移植にて15-deoxyspergualin(DSG)の投与を行った。拒絶反応の発現と程度は^<31>P核磁気共鳴法(NMR)を用い、in vivoで経時的に移植心のエネルギー代謝を測定して検討した。DSG 5mg/kg/day15日間投与で拒絶反応の発現は完全に抑えられ、2.5mg/kgでは生着延長はするが拒絶反応を十分には抑えられなかった。そこで、腎移植に於ける投与量は5mg/kg/dayとし、15日缶の投与を行った。尚、投与は腹腔内に行った。ラット腎移植は、ドナーとしてWKHAラット及びハムスターを用い、レシピエントとしてF344ラットを用いた。ドナー腎は左腎を用い、腎動静脈は大動脈、大静脈を付着した状態で摘出した。大動・静脈とも中枢側は結紮し、末梢側を吻合口として用いた。尿管は膀胱を付けたまま摘出した。レシピエントは開腹し、右腎を摘出した。移植は、右側で自己腎部より尾側の大動・静脈部に移植腎の動・静脈と端側吻合した。ドナーの尿管は末端の膀胱壁をパッチとし、膀胱壁に吻合した。同系移植例(n=3)全例100日以上生存した。同種移植例で免疫抑制剤非投与群では6、7、8、10日で死亡し、DSG投与を行った群では25、26、30日で死亡した。一方、異種移植例の生存日数は、免疫抑制剤非投与例で、7、8、9日、DSG投与例で9、10、11日とやや投与例の生存日数が長い様に思われたが、有意差はなかった。本研究は、今後共続けて行く予定であり、現在も進行中である。さし当り検討して行く点は、DSGの投与量の増加、投与時期の検討、他の免疫抑制剤との合併投与、更には術前にドナーリンパ球の輸入とDSGの投与により、異種抗原特異的に反応するリンパ球クローンを障害する実験の検討などを計画している。
ヤマトマダニ由来有用蛋白を利用したEhrlichiaの感染防御

1.SPFビーグル犬2匹に日本のヤマトマダニから分離され、単球性エーリキア症を起こすEhrlichia canisおよびE.chaffeensisに近縁のEhrlichia HF565を接種した。接種後約1ヶ月観察を続けたが、発熱、血小板減少等の臨床症状は認められなかった。また、末梢血白血球、剖検後の肝・脾由来のDNAを鋳型として行なったPCRも陰性であった。これらの結果から、HF565はイヌに病原性を示さず、感染も成立しないことが示唆された。2.ラットにHF565を接種したところ、マウスのように立毛、元気消失等の臨床症状や肝細胞壊死といった病理的変化は見られず、接種後4週たっても生存していた。接種後1週のラットでは軽度の肝細胞壊死、肝小葉へのリンパ系細胞の浸潤といった病理的変化が認められた。また、血管内皮細胞を中心に多数のEhrlichia封入体が認められた。肝、脾、腎、肺由来のDNAを用いたPCRは全例ではないものの、多くで陽性であった。病変は接種後4週までに軽減し、菌は排除される可能性が示された。また、実験期間中、末梢血中にHF565は検出されず、ラットの野外でのレゼルボアの可能性は低いものと考えられる。3.E.canis感染犬での免疫応答について調べるため末梢血単核球中のサイトカインmRNAの発現をRT-PCRで調べた。IFN-γおよびTNF-αmRNAが感染初期から感染後約2ヶ月間、持続的に発現した。そのうち、IFN-γはE.canis感染に伴い末梢血単核球から産生されろこと、ならびにE.canisの増殖を抑制することが試験管内で確認された。このことより、IFN-γが感染免疫において重要な役割を果たすことが示唆された。1.ヤマトマダニ成虫を北海道穂別町で採取し、ハムスターに寄生させた。吸血落下した雌ダニを集め、23°Cで飼育、産卵させた。13ヶ月で孵化した幼ダニを正常マウスに寄生させ、飽血幼虫とした。23°Cで34ヶ月休眠後、脱皮した若ダニを正常マウスに寄生させて飽血若虫とし、現在、休眠中である。2.幼ダニと若ダニをEhrlichia HF565株を接種したマウスに寄生させ、飽血させた。現在、休眠中である。脱皮後、PCRを行ない、吸血による媒介を確認する予定である。3.イヌ1頭にHF565株を静脈内接種し、3週間飼育した。発熱などの臨床症状は認められなかった。また、経時的に採血を行ない、PCRで感染を調べたが、すべて陰性であった。末梢血単核球からRNAを抽出し、RT-PCRで、サイトカインmRNAの発現を調べたところ、インターフェロンγmRNAの発現が認められた。これはE.canis接種犬と同じ結果であった(一部を2005年6月、4th International Conference on Rickettsia and Rickettsial Diseasesで発表予定)。剖検時の肉眼所見、組織所見に異常は認められなかった。今後、再確認および、免疫抑制状態下での感染について調べる予定である。4.HF565検出のための新しいプライマーをデザインし、real-time PCRの条件設定を行なった。

5.HF565接種マウスの血液、臓器を用いてreal-time PCRを行ない、感染が成立する時期について調べたところ、腹腔内接種の場合、リケッチア血症が接種後2日で生じ、脾臓、肝臓では3日後にリケッチアが認められることが明らかになった。1.野外で採取したヤマトマダニからハムスター吸血中の唾液腺を採取、mRNAを抽出してcDNA libraryを作製した。2.ハムスターを吸血させた野外採取のヤマトマダニ成虫を25°Cで維持して産卵させた。孵化した幼ダニをヤマトマダニ由来Ehrlichia(HF565)を接種したマウスにつけ、吸血させた。脱皮後の若ダニ30匹のHF565保有の有無をPCRで調べたが、すべて陰性であった。また、脱皮するダニの割合が、正常マウスを吸血させた場合に比べて低く、ダニに対してもHF565がなんらかの影響を与えている可能性も伺われた。3.マウス以外の宿主の可能性を検討するため、ラットにHF565を接種し、接種後4週目まで1週間ごとに血中への出現をPCRで調べた。その結果、2週目までは血中に出現するが、その後、陰性に転じた。また、HF565の大量投与にもかかわらず、ラットは死亡しなかった。肝・脾のHF565の検出ならびに病理所見については、現在、検討中である。4.SPFビーグル犬3匹にHF565接種マウスの肝・脾10%乳剤を静脈内接種し、毎日観察をすると同時に週1回採血を行ない、PCRで血中への出現を調べた。接種後4週まで調べたが、臨床所見に変化はなく、PCRも陰性であった。2匹のイヌには、4週後にプレドニゾロンを投与し、改めてHF565を接種したが、その後も変化はみられなかった。病理所見も異常はなかった。5.SPFビーグル犬1匹にEhrlichia canisを接種し、シュルツマダニの若虫を吸血させ、脱皮後の成ダニについてE. canisの保有の有無をPCRで調べたが、30匹すべて、陰性であった。6.E. canis接種犬の末梢リンパ球がIFN-γを産生することで感染を防御することをin vitroで証明した。7.野生鹿の血中に新種のEhrlichiaをPCRで検出した。
プロスタグランジンD_2によるアデノシン遊離の調節と睡眠誘発機構について

プロスタグランジン(PG)D_2は強力な睡眠誘発作用をもつ内因性物質である。ラットにおいてPGD_2は吻側前脳基底部の脳膜組織に作用して睡眠を誘発するが,この睡眠量の増加はアデノシンA_<2A>受容体拮抗薬の前処置で抑制される。本研究では,PGD_2による睡眠誘発の作用機構を明らかにするため,ラット吻側前脳基底部くも膜下腔の細胞外アデノシン量をマイクロダイアリシス法を用いて測定し,PGD_2とアデノシンとの機能的関連を明らかにする。前年度はウレタン麻酔条件でくも膜下腔にPGD_2およびPGD_2受容体(DP受容体)作動薬を投与し,アデノシン量が用量依存性に基礎遊離の2.2倍にまで増加することなどを報告した。本年度は,このアデノシン増加の作用機構を明らかにするために以下の薬理学的検討を行った。アデノシンの生合成に必須の酵素,5'-ヌクレオチダーゼの阻害剤であるα,β-メチレンADP(10,100μM)の局所投与により,くも膜下腔のアデノシン量は投与前の50%以下に速やかに減少した。しかしPGD_2はα,β-メチレンADP存在下でアデノシン量を対照群と同様に増加させた。一方,アデノシン分解経路に関わるes-ヌクレオチドトランスポーターの阻害剤,NBTI(10μM)とジピリダモール(10μM)の共投与はアデノシン量を40%増加させたが,この条件下でPGD_2は相加的にアデノシン量を増加した。さらにRT-PCR法によりラットくも膜組織におけるヌクレオチドトランスポーター類のmRNA発現を検討した結果,この組織にはes-およびCNT2-の異なるトランスポーターが発現することが分かった。従って,PGD_2はくも膜組織のDP受容体を介してCNT2-トランスポーター活性を阻害し,アデノシン取り込みを抑制することで脳脊髄液中のアデノシン量を増加すると考えられる。このアデノシンの増加により前脳基底部の神経回路が影響を受け,睡眠調節に関わる神経群の活動が亢進することが強く示唆される。これまでの当研究グループの検討により,PGD_2はラットにおいて吻側前脳基底部の脳膜組織に作用し睡眠を誘発すること,またPGD_2投与による睡眠増加はアデノシンA_<2A>受容体アンタゴニスト前処置で抑制されることなどが明らかとなった。本研究では,PGD_2による睡眠誘発の作用機構を明らかにするため,ラット吻側前脳基底部くも膜下腔における細胞外アデノシン量をマイクロダイアリシス法を用いて測定し,睡眠誘発に関わるPGD_2とアデノシンとの機能的関連を明らかにする。本年度はウレタン麻酔条件でくも膜下腔におけるアデノシン量を測定し,PGD_2投与による細胞外濃度の変化を調べた。くも膜下腔におけるアデノシンの基礎遊離量は0.70±0.06pmol/20分であった。PGD_2 (100-400pmol/分)およびPGD_2受容体(DP受容体)の選択的アゴニストであるBW245C(400 pmol/分)の同部位への投与はアデノシン量を用量依存性に基礎遊離の2.2倍にまで増加したが,代謝物であるイノシン,ヒポキサンチン量に顕著な変化は見られなかった。また,PGD_2投与により誘発されるアデノシン量の増加は,DP受容体アンタゴニストであるBW A868C(0.1,1mg/kg,iv)の前処置により用量依存性に拮抗された。以上の結果は,PGD_2が前脳基底部くも膜下腔のアデノシン量をDP受容体を介して増加することを示し,このアデノシンの増加により同部位の神経回路が影響を受け,睡眠調節に関わる神経群の活動が亢進することが強く示唆される。来年度はくも膜下腔でDP受容体の刺激によりアデノシン量を調節する機構の解明と共に,この増加とPGD_2による睡眠誘発との相関を無麻酔非拘束条件で検証する。

一方,アデノシン分解経路に関わるes-ヌクレオチドトランスポーターの阻害剤,NBTI(10μM)とジピリダモール(10μM)の共投与はアデノシン量を40%増加させたが,この条件下でPGD_2は相加的にアデノシン量を増加した。さらにRT-PCR法によりラットくも膜組織におけるヌクレオチドトランスポーター類のmRNA発現を検討した結果,この組織にはes-およびCNT2-の異なるトランスポーターが発現することが分かった。従って,PGD_2はくも膜組織のDP受容体を介してCNT2-トランスポーター活性を阻害し,アデノシン取り込みを抑制することで脳脊髄液中のアデノシン量を増加すると考えられる。このアデノシンの増加により前脳基底部の神経回路が影響を受け,睡眠調節に関わる神経群の活動が亢進することが強く示唆される。
アトピー性皮膚炎における皮膚細菌叢と皮膚免疫の解析

本研究では、アトピー性皮膚炎(AD)に定着する黄色ブドウ球菌(S. aureus)が、どのような皮膚の免疫反応を誘導するのかを検討した。S. aureusの標準株(NCTC8325)およびAD患者の皮膚より分離したAD株(TF3378)を用いて、末梢血単核球由来のランゲルハンス細胞(MoLC)とT細胞の反応を解析した。AD株で刺激されたMoLCは、より多くのT細胞の増殖を誘導し、さらにT細胞からのTh1サイトカイン(IFN-γ)の産生を減少させた。T細胞のmRNAではTh1/Th2比が減少していた。S. aureusのAD株は、標準株とは異なるLCを介した免疫反応を示すことが明らかとなった。アトピー性皮膚炎(AD)患者では、健常人に比べ皮膚における細菌感染症に罹患することが多いことが知られているが、その病態は十分には明らかにされていない。ランゲルハンス細胞(LC)は皮膚から侵入する病原体を察知し、それらを駆除する免疫担当細胞である。今回、健常人とADでのLCの機能の違いについて検討した。2015年度は、健常人とAD患者の末梢血から単球を分離し、in vitroでLCを作製し、自然免疫レセプターの発現および黄色ブドウ球菌による刺激後のLCの活性化について検討した。まず、黄色ブドウ球菌を認識するToll様受容体(TLR2)のLC表面上の発現について、フローサイトメトリーで解析した。両群ともにTLR2の発現していたが、発現の程度には差が見られなかった。次に、TLR2を介したLCの機能に着目した。AD患者由来および非AD由来の黄色ブドウ球菌をそれぞれ作製し、それらを抗原として用いてLCを刺激し、その後のLC活性化について検討を行った。刺激前のLCの活性化マーカー(CD83)の発現はわずかであったが、黄色ブドウ球菌で刺激したLCは優位にCD83が上昇した。また、抗原提示マーカー(HLA-DR)も優位に発現が増強した。健常人とAD患者で活性化の程度に差は見られなかったものの、AD患者由来の黄色ブドウ球菌で刺激したLCは、非AD由来のものと比べ、強い活性化を示す傾向が見られた。ADと非AD由来の黄色ブドウ球菌で異なる免疫応答を示す可能性が示唆された。AD患者の黄色ブドウ球菌刺激後のLCの機能は、まだ十分に解明できていないアトピー性皮膚炎(AD)は長期間にわたり、痒みを伴う湿疹を繰り返す疾患である。これまでAD患者では、湿疹部の皮膚表面から黄色ブドウ球菌(S. aureus)が高率に検出され、さらに健常人に比べ皮膚の細菌感染症に罹患することが多いことが知られていた。しかし、なぜAD患者にのみS. aureusが高率に定着し、それらが皮膚にどのような影響を与えているのかは明らかになっていない。本研究では、AD患者の皮膚より分離したS. aureus株が、標準のS. aureus株と比較して、どのような免疫反応を誘導するのかについて検討を行った。皮膚ではランゲルハンス細胞(LC)が、皮膚から侵入する病原体を察知し、T細胞に抗原提示を行うことで病原体の駆除が誘導され、皮膚の恒常性が保たれている。本研究ではこの免疫応答系におけるS. aureusの反応を解析するために、健常人とAD患者のそれぞれから末梢血単核球由来のLC(MoLC)とT細胞を分離し実験に供した。また、S. aureusについても、標準株とAD患者の皮膚より分離したAD由来株の2種類を使用した。それぞれのS. aureus株で刺激したMoLCを同一ドナー由来のT細胞と共培養を行い、T細胞の増殖およびサイトカインの産生を解析した。AD由来株で刺激されたMoLCは、より多くのT細胞の増殖を誘導した。またAD由来株はT細胞からのIFN-γの産生を減少させ、共培養後のT細胞のmRNAはT-bet/Gata3比が減少していた。なお、健常人とAD患者間には違いは見られなかった。本研究により、S. aureusのAD由来株は、標準株とは異なるランゲルハンス細胞を介した免疫反応を示すことが明らかとなった。健常人およびAD患者由来のLCはともに黄色ブドウ球菌を認識し、活性化することが確認できた。次年度以降は、LCがT細胞へ与える免疫学的影響を、細胞増殖およびサイトカイン分泌を中心に解析を進める予定である。28年度が最終年度であるため、記入しない。皮膚科28年度が最終年度であるため、記入しない。
超高圧下における氷の結晶構造と金属転移

高圧下における氷の物性の研究は圧縮による水素結合の対称化に伴う相転移とそれに付随して起こるプロトン位置の秩序一無秩序転移、外感星の内部構造と磁場生成に関した超高圧下の氷の状態方程式(EOS)と絶縁体ー金属転移等、物性物理、感星物理的観点から興味深い。本研究課題において上記に関して問題点を指摘すると共に今後の研究の方向を示した。これまで得られた中間結果は本報告書に記した論文において発表したが、その概略を下記に示す。(1)X線回折によるEOSのデ-タを解析してP40及び70GPaにおいて相転移があることを見い出し、氷の水素結合対称化転移に関する光学的測定とX線回折測定間の不一致が解消され得ることを示した。更に高圧側にicox^1(プロトン無秩序相)が出現することを予測した。この転移は従来信じられているより複雑である。(2)氷の対称水素結合相(iceX)はHrijbーHocjapbelの予測(立方晶)とは異なり正方晶の可能性が高いことを示した。(3)密度汎関数理論に基ずき超高圧下の氷のEOS及び電子状態を計算し、外惑星の氷の中間層に対して用いられている統計模型はよくないことを示した。また結果より外惑星内部の氷の中間層は温度効果を考慮しても電子伝導は十分小さいが、巨大惑星内部の氷の中間層は金属化していると予測される。(4)超高圧下の氷の結晶構造は従来の説とは異なり六方晶である可能性をを示すと共に遂次転移をする可能性を予測した。従来のイオン模型に基ずく、分子動力学あるいはmoclibied electron gas理論による結果は再検討する必要がある。以上より研究の方針は明確になったが、定量的にこれらの問題を解明する研究は現在進行中である。時間を要する問題もあるが、最終結果については後日適当な雑誌に発表することで報告の代りとしたい。
歴史物語と物語文学の相関に関する研究

『栄花物語』や『増鏡』は、『源氏物語』をはじめとする物語文学の強い影響下にある。『大鏡』や『今鏡』においても,物語文学に対する多大な関心がうかがえる。歴史物語各作品は物語文学の盛行と無縁には存立できないであろう。一方,物語文学も,その基盤において,歴史物語と深くかかわるのは否定できない。『源氏物語』の顕著な歴史性,『海人の刈藻』や『我身にたどる姫君』の歴史物語的性格など,その徴証は尽きない。このように,歴史物語と物語文学は根底において深く相関するのであるが,その実態の究明は(歴史物語の発生や物語文学の退潮の問題の追究を除いて)ほとんどなされていないように思われる。そこで,各作品の構想の基幹にかかわる「政権構造」(皇位や政権の推移を中心とした宮廷世界の諸事象)に注目して両者の比較研究を試みたのが本研究である。特に,摂関・大臣・「先坊」を指標にすると,『栄花物語』『大鏡』『今鏡』『水鏡』『六代勝事記』『五代帝王物語』『増鏡』『梅松論』『保暦間記』などの歴史物語作品と,『源氏物語』『いはでしのぶ』『浅茅が露』『海人の刈藻』『我身にたどる姫君』などの物語文学作品との交流の諸相が明らかになった。また,上の考察の過程で,軍記文学作品群をも視野に入れなければ十分な究明ができないことが判明した。すなわち,相関関係は「歴史物語」と「物語文学」の間においてではなく,「通史的歴史叙述」と「物語体文学」との間において生じるものなのである。したがって,今後は対象作品の範囲とその分類方法を修正して,考究を継続する予定である。本年度は、まず、歴史物語各作品における政治史的性格-皇位継承の過程、政権の推移、登場人物の地位の変化など-の個別的な究明を目指し、並行して物語文学諸作品の政治性との対比を試みた。研究計画に即した実績は以下のとおりである。(1)歴史資料や歴史学の成果を利用して王朝政治史の流れを把捉し、それと歴史物語各作品から読み取れる政治構造(皇位継承過程、政権争奪の実相、上級貴族の官位昇進など)との対比を試みた。その結果、歴史物語の政治構造は、現実の(歴史的)政治構造とは必ずしも一致しないことが明らかになった。『栄花物語』『大鏡』『今鏡』などの歴史物語において摂関時代の複雑な権力基盤が天皇と貴族との血縁関係に一元化される点などはその顕著な例に数えられる。(2)初期物語文学作品を概観し、そこに潜在する政治構造の抽出を試みた。その結果、物語文学作品のいくつかには、政治構造の特色として、反体制的傾向、天皇家と源氏中心の政権構想が指摘できた。(3) (1)(2)で解明された歴史物語と物語文学の政治構造の比較を試行的に実施した。その結果として、王朝政治体制に対する把捉方法については歴史物語と物語文学の間にほとんど差異はない点、政治構造においては歴史物語の体制的・藤原氏中心の姿勢と物語文学の反体制的・源氏中心の姿勢とは背反する点などが注目される。本年度は,前年度に引き続いて,歴史物語・物語文学諸作品の「政治構造」(皇位継承や政権推移の過程を中心とした宮廷世界の動向)の解明と対比を試みた。研究計画に即した主な実績は以下のとおりである。1歴史物語各作品に描かれる「政治構造」の闡明を試みた。

その結果,それぞれの対象とする時代が異なるためにその時代相が各政治構造に投影して各作品に独自性をもたらしている実態が明瞭に確認できたが,その一方で,全歴史物語が皇位継承過程(「世継」)を機軸に構想され,「家」が重視され,特に藤原氏摂関家が重視されるという共通性も明らかになった。2物語文学諸作品の構想の基底に潜在する「政治構造」にも注目した。そこにも,皇位継承過程への関心,「家」の重視,皇族と源氏の重視などの共通点が認められ,同時に政治構造の不完全性や矛盾が少なくないことが明らかになった。3如上の成果に基づいて物語文学と歴史物語の政治構造を対比してみると,両者は宮廷社会の政治組織や制度に対する認識の面で共通し,その中で支持する勢力や体制において隔絶するという漠然とした傾向が指摘できる。また,『源氏物語』に代表される物語文学の一代記的な性格と歴史物語の年代記的性格との根本的な相違に留意すると,両者の中間に『海人の刈藻』『苔の衣』『我身にたどる姫君』などの「年代記的物語文学」作品群が介在していると考えられるのである。なお,物語文学に関しては,藤原・源両氏以外の氏族が存在すること,物語世界に記述される以前の政治状況の不可解さ,『源氏物語』の年立の矛盾などが新たな問題点として浮上した。本年度も,前年度に引き続いて,歴史物語と物語文学の政権構造(皇位継承や政権推移の過程を中心とした宮廷世界の様相)の変遷を究明し,それぞれの対比を試み,さらに,歴史物語と物語文学の相関性について検討した。その主な成果は,次の3項にまとめられる。1,歴史物語各作品(『栄花物語』『大鏡』『今鏡』『水鏡』『秋津島物語』『六代勝事記』『五代帝王物語』『増鏡』『梅松論』『保暦間記』『神明鏡』など)と物語文学諸作品(『竹取物語』『宇津保物語』『落窪物語』『源氏物語』『夜の寝覚』『いはでしのぶ』『浅茅が露』『海人の刈藻』『我身にたどる姫君』『雫に濁る』など)の政権構造を概括して、それぞれを対比し,分類した。2,上の成果に基づきつつ,「大臣」「摂関」「先坊」などをキーワードに定めて,各作品の史的系列化を試みた。その結果,現実世界が古代から中世へと転換していく実相を反映するだけでなく,歴史物語・物語文学作品群が独自の政治世界を自律的に構想している側面が見いだせた。特に,歴史物語と物語文学各作品が相互に影響し,交流する点が留意される。3,また,上記の影響・交流の展開を検証するためには,歴史物語と物語文学だけでなく,軍記文学作品群も視界に入れる必要があることが明らかになった。すなわち,密接な相関関係は「歴史物語」と「物語文学」の間にだけ見られるものではなく,「通史的歴史叙述」と「物語体文学」との間に生じるものである。また,該当する各作品はどちらか一方に属するもの,双方ともに属するもの,双方ともに属さないものに再分類されなければならない。これが今後の新たな課題となる。
自己免疫疾患根治を可能とする革新的DDS創薬

実績として既に、自己抗原(ミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質部分ペプチド:MOG35-55)が表面修飾され、細胞障害性薬物(ドキソルビシン:DOX)を封入したリポソーム(MOG-LipDOX)を、MOG35-55の免疫により誘導した実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)マウスに投与することにより、臨床症状である運動機能低下を有意に改善できることを明らかとしている。このため平成30年度は、その機構解析の一環として、自己抗原修飾リポソーム(MOG-Lip)のEAEにおける体内分布ならびに、MOG-LipDOX投与後の自己抗原を認識する免疫細胞数への影響を調べた。その結果、MOG-Lipは全身免疫を司る脾臓ならびに肝臓に多く集積し、特に脾臓においては、自己抗原未修飾リポソームに比べ有意に集積していることを明らかとした。実際MOG-LipDOXを投与することにより、脾臓に存在するMOG35-55を認識するCD4陽性T細胞数が未処置群に比べ有意に減少することを明らかとしている。また疾患部位である脊髄での組織解析を行い、投薬による病理変化を調べたところ、EAE誘導により観察される脊髄への免疫細胞の浸潤が、MOG-LipDOX投与により有意に抑制され、さらに神経脱髄も抑えられていることが示された。また比較対象として用いた、薬剤単体投与群、薬剤未封入自己抗原修飾リポソーム投与群、薬剤封入自己抗原未修飾リポソーム投与群では、細胞の浸潤抑制が確認されなかった。一方でリポソームの内封薬物について、多発性硬化症の治療薬として現在臨床で用いられているフィンゴリモドに着目し、リポソームへの内封方法の検討を行なった。その結果、リポソーム内外のpH勾配差を利用したリモートローディング法を用いることで、リポソーム内にフィンゴリモドを高効率かつ安定に封入できることを明らかとした。平成30年度の研究計画は、自己抗原修飾リポソームの標的細胞を同定するために、リポソームの体内動態解析、標的臓器におけるリポソームの分布解析さらにはFACSを用いた標的細胞の解析としており、結果としては自己抗原修飾リポソームが脾臓に多く集積し、またMOG-LipDOX投与することで自己抗原認識T細胞数が減少したことを明らかとしたことから、標的細胞としては脾臓内の自己抗原T細胞であることが示唆された。脾臓内でのリポソームの分布解析までは至らなかったが、次年度に行なっていく予定である。またフィンゴリモドのリポソーム封入についても平成30年度に計画しており、実際に封入を試みた。当初の予定では、マイクロ流路を用いた封入・調製方法を予定していたが、フィンゴリモドの構造式に着目し、pH勾配を利用したリモートローディング法にて封入を行うことに切り替えた。実際この方法を用いることで、高効率かつ安定にリポソーム内に封入できることが示されたため、当初の目的は十分達成できていると考えている。次年度は当初の計画通り、治療効果の機構解析について重点的に実施していく予定である。特に治療後のTh17/Tregバランスへの影響や脊髄において見られた浸潤抑制された免疫細胞の同定を行う。また平成30年度に実施することができなかった、脾臓におけるリポソームの分布解析を行い、さらにリポソームの標的免疫細胞として推察される自己抗原認識T細胞中のエフェクター細胞の同定を、FACSを駆使して解析を行う。またフィンゴリモド内封リポソームを用いたEAEに対する治療実験を行うことで、実用化に向けた基礎的データを蓄積する。

その結果、リポソーム内外のpH勾配差を利用したリモートローディング法を用いることで、リポソーム内にフィンゴリモドを高効率かつ安定に封入できることを明らかとした。平成30年度の研究計画は、自己抗原修飾リポソームの標的細胞を同定するために、リポソームの体内動態解析、標的臓器におけるリポソームの分布解析さらにはFACSを用いた標的細胞の解析としており、結果としては自己抗原修飾リポソームが脾臓に多く集積し、またMOG-LipDOX投与することで自己抗原認識T細胞数が減少したことを明らかとしたことから、標的細胞としては脾臓内の自己抗原T細胞であることが示唆された。脾臓内でのリポソームの分布解析までは至らなかったが、次年度に行なっていく予定である。またフィンゴリモドのリポソーム封入についても平成30年度に計画しており、実際に封入を試みた。当初の予定では、マイクロ流路を用いた封入・調製方法を予定していたが、フィンゴリモドの構造式に着目し、pH勾配を利用したリモートローディング法にて封入を行うことに切り替えた。実際この方法を用いることで、高効率かつ安定にリポソーム内に封入できることが示されたため、当初の目的は十分達成できていると考えている。次年度は当初の計画通り、治療効果の機構解析について重点的に実施していく予定である。特に治療後のTh17/Tregバランスへの影響や脊髄において見られた浸潤抑制された免疫細胞の同定を行う。また平成30年度に実施することができなかった、脾臓におけるリポソームの分布解析を行い、さらにリポソームの標的免疫細胞として推察される自己抗原認識T細胞中のエフェクター細胞の同定を、FACSを駆使して解析を行う。またフィンゴリモド内封リポソームを用いたEAEに対する治療実験を行うことで、実用化に向けた基礎的データを蓄積する。【理由】当初平成30年度に実施を予定していた、脾臓における自己抗原修飾リポソームの分布解析を行うことができなかったため、次期使用額が生じてしまった。【使用計画】次年度に本検討を行う予定であるため、次年度に使用額を費やし研究計画を元に実験を進める予定である。
ヒト気道液中に見出したトリプターゼの生物学的意義、特に気道感染における意義

1.ヒト気道トリプシン様酵素(HAT)の生化学的性質:ヒト粘液性痰からHATを単離できた。HATは分子量約27kDaの単量体、基質特異性、プロテアーゼ阻害物質に対する態度はトリプシンに類似していた。そのN末端の20アミノ酸残基配列は既知のいずれの蛋白のそれとも一致せず、新しいトリプシン様プロテアーゼであることが明らかになった。2.HAT遺伝子(cDNA)構造:細胞工学的手法でヒト気管DNAからHATのcDNAのcloningに成功し、その全塩基配列を明らかにした。このcDNAの塩基配列からHATの一次構造を推定した。HATには418アミノ酸残基からなる前駆体が存在し、これが活性化され成熟HATになると推定された。3.組換えHATの生合成:2.の研究に基づき得られた前駆体HAT遺伝子(全長cDNA)のバキュロウイルス/昆虫細胞での発現を構築し、昆虫細胞内に活性型HATの発現がみられた。4.呼吸器系におけるHATの局在:HATに対する抗体を用いた免疫組織化学的研究で、HATは気道粘膜下の漿液腺細胞や粘膜下分泌腺の導管内の上皮細胞から気道粘膜面に分泌されると推定された。5.HATの活性化機構:ヒト気管抽出液に前駆体HATが含まれていることが判明した。この前駆体はautocatalyticな機序で限定分解され、活性型(成熟HAT)に転換されることを示唆する成績が得られた。6.HATの生物作用:インフルエンザウイルスはその表面タンパクであるヘマグチニン(HA)がトリプシン型のプロテアーゼの作用によりHA_1とHA_2に開裂することにより活性化され、感染性を獲得する。トリプシンを対照としてHATに本ウイルス活性化作用があるか否かを検索した。しかし、HATは単独ではHA分解作用を示さず、in vitroで本ウイルスの活性化作用を示さなかった。しかし、HATの基質特異性が塩類の存在や有機溶媒処理で変化する成績が得られており、HATの活性化機構を充分に解明した後にHATにインフルエンザウイルス感染における意義を再検討する必要があると考えられる。1.申請者の安岡劭が慢性気道疾患患者の喀痰中に見出したトリプシン様酵素、ヒト気道トリプターゼ(HAT)を、喀痰から精製する方法をさらに検討し、精製法を一応確立した。1リットルの喀痰から約10μgのHATが得られた(以上投稿中)。帝人生物工学研究所との共同研究で、HATの遺伝子(cDNA)のクローニングに成功し、その塩基配列からHAT前駆体(precursor HAT)のアミノ酸配列を推定することができた。その結果、HAT前駆体の分子量は約47,000で、我々が精製したHAT(分子量27,000)は前者が活性化された成熟型(mature HAT)に相当すると推定された(以上論文作成中)。ついで細胞工学的手法で大腸菌によるrecombinant HATの合成に成功した。2.native HATおよびrecombinant HATのインフルエンザウイルスの増殖(感染性)に対する影響を、感染細胞としてMDCK細胞を用いin vitroで検索した。対照として用いた膵トリプシンが文献に一致して本ウイルスの感染性を増強したのに対し、両HATともに本ウイルスの感染性を抑制した。この作用機構はいまだ未解決である。

3.native HATのN末端20個のアミノ酸配列を持つペプチドを合成し、これに対する抗体を家兎を免疫することにより作成した。Western blot法でこの抗体がHATに特異的に結合することが判明したので、この抗体を用い免疫組織化学的な手法で呼吸器系におけるHATの局在を検索した。その結果、この抗体と反応する細胞は、気道粘膜下の漿液腺に存在した。この成績からHATは気道に分泌腺から粘膜面に分泌されると考えられた。1.ヒト気道トリプシン様酵素(HAT)の生化学的性質:ヒト粘液性痰からHATを単離できた。HATは分子量約27kDaの単量体、基質特異性、プロテアーゼ阻害物質に対する態度はトリプシンに類似していた。そのN末端の20アミノ酸残基配列は既知のいずれのタンパクのそれとも一致せず、新しいトリプシン様プロテアーゼであることが明らかになった。2.HAT遺伝子(cDNA)構造:細胞工学的手法でヒト気管DNAからHATのcDNAのcloningに成功し、その全塩基配列を明らかにした。このcDNAの塩基配列からHATの一次構造を推定した。HATには418アミノ酸残基からなる前駆体が存在し、これが活性化され成熟HATになると推定された。組換えHATの生合成:2.の研究に基づき得られた前駆体HAT遺伝子(全長cDNA)のバキュロウイルス/昆虫細胞での発現を構築し、昆虫細胞内に活性型HATの発現がみられた。4.呼吸器系におけるHATの局在:HATに対する抗体を用いた免疫組織化学的研究で、HATは気道粘膜下の漿液腺細胞や粘膜下分泌腺の導管内の上皮細胞から気道粘膜面に分泌されると推定された。5.HATの活性化機構:ヒト気管抽出液に前駆体HATが含まれていることが判明した。この前駆体はautocatalyticな機序で限定分解され、活性型(成熟HAT)に転換されることを示唆する成績が得られた。6.HATの生物作用:インフルエンザウイルスはその表面タンパクであるヘマグチニン(HA)がトリプシン型のプロテアーゼの作用によりHA_1とHA_2に開裂することにより活性化され、感染性を獲得する。トリプシンを対照としてHATに本ウイルス活性化作用があるか否かを検索した。しかし、HATは単独ではHA分解作用を示さず、in vitroで本ウイルスの活性化作用を示さなかった。しかし、HATの基質特異性が塩類の存在や有機溶媒処理で変化する成績が得られており、HATの活性化機構を充分に解明した後にHATにインフルエンザウイルス感染における意義を再検討する必要があると考えられる。
16世紀イタリア演劇における戯曲と上演の関係

研究の最終年度にあたる19年度は、過去2年の成果を補完する作業にあたりました。具体的には、非文学的であり、極めて上演的であったコンメティア・デッラルテの俳優による文学活動、出版活動について調査を進めました。とりわけ、詩人としても活躍した女優イザベッラ・アンドレイーニの文学性および、その出版における文学戦略について考察を進め、1610年代から30年代にかけて、俳優による出版活動が盛んであったのは、彼女の影響が多大であったことを突き止めました。イザベッラの夫で、自身俳優でもあったフランチェスコ・アンドレイーニと友人で座長であったフラミニオ・スカーラの二人が、イザベッラの死後、彼女のテクストを編纂・出版するのですがその後この二人は、自らの劇の素材も続々と出版していきます。またフランチェスコとイザベッラの長男で俳優のジャンバッティスタ・アンドレイーニは、20年代以降、数多くの戯曲や、聖職者から俳優に向けられた非難に対する弁明の書を刊行していきます。こうした動きに呼応して、ジャンバッティスタやスカーラの劇団で活躍していた他の俳優たちも筆をとり、様々なジャンルの文芸作品を刊行することになります。一見煩雑でまとまりのない俳優たちの出版活動が、イザベッラ・アンドレイーニの死を契機としていること。また、2次的3次的に彼女に関わった俳優という限られた人脈の中で発生した現象であることを解明しました。今後は、その出版活動を大きく(1)テクスト自体の分析(2)出版活動という戦略、の2点に分けて、さらに研究を進めていくつもりです。初年度にあたる17年度は、16世紀イタリア喜劇における理想の文体について研究活動および発表を行った。100年間にイタリアで出版、上演された100篇以上の喜劇を調査する中で、そのほとんどが韻文ではなく散文で書かれていたことが判明した。唯一といっていいほどの例外は、世紀初頭の劇作家アリオストの作品であり、彼は韻文・散文の両方で喜劇を書いている。イタリア近代喜劇の第一作にもあたる『長櫃騒動』は散文で書かれており、以降の喜劇の文体の規範ともなったが、それが作家個人の創造力によるのではなく、15世紀後半のラテン喜劇の翻訳の文体の影響下にあったことを立証した。具体的には...1480年代にはじまるフェラーラ宮廷でのラテン喜劇の翻訳上演においては、最初は格調の高い文語調の韻文が使用されたが、90年代後半の宮廷人の書簡などから、公式の場以外では徐々にリアリティに満ちた散文が嗜好されるようになっていったことが見て取れる。イタリア語によるオリジナルの喜劇の誕生はその後になるが(1508年のアリオストの前述喜劇)、ラテン喜劇のイタリア語訳が、単なる翻訳というレベルを超えて、大きな影響を与えていたことが明らかになった。その成果は、6月の日本演劇学会大会で口頭発表の後、論文として「京都外国語大学研究論叢」に掲載された。また、9月にはコンメディア・デッラルテと狂言を比較したシンポジウム(京都・大阪)に参加し発表を行った。そして3月刊行の「京都外国語大学研究論叢」に、ソンミの『上演芸術に関する四つの対話』の前半部分を訳出した。これは16世紀半ばにイタリア語で書かれた対話編であるが、近代ヨーロッパ初の演劇論として名高いものの、邦訳は最初の試みとなる。前半部分は喜劇の誕生や文体論、幕の分割についてなど詩学的な色彩が強い。次年度は俳優論や舞台美術を扱った後半部分を訳出する予定である。当該研究の2年目にあたる18年度は、文人劇作家によるコンメディア・デッラルテの理解と評価について調査を進めた。同時代の文人たちは、概ね、コンメディア・デッラルテに対して、消極的な評価にとどまるか、あるいはほとんどの場合は批判の筆を向けていたのだが、フィレンツェの詩人にして劇作家アントン・フランチェスコ・グラッツィーニ(ラスカ)は、理想的な喜劇の一例として、熱狂的な賛辞を述べている。コンメディア・デッラルテのフィレンツェ公演が文人たちに与えた衝撃や、その人気にうろたえる文人たちの有様を述べた彼の詩には、過剰に偽悪的な趣味を差し引いたとしても、ラスカがコンメディア・デッラルテに与えた評価が見て取れる。また、1580年代に発表した喜劇『魔女』の序文において、ラスカは、当時隆盛を誇っていたアリストテレスらの「詩学」の指針に基づいた喜劇を理想とする「前口上」の擬人化を批判するにあたり、分かりやすい喜劇を提唱する「梗概」を登場させているのだが、この「梗概」もまた、コンメディア・デッラルテを評価するにあたり、その賞賛を惜しまない。コンメディア・デッラルテを巡るラスカのテクストは、彼の喜劇観だけでなく、その課刺の矢の矛先となった、いわゆる文人作家たちの反応を浮き彫りにさせていて、貴重な証言となっている。今年度は、以上のように、コンメディア・デッラルテを巡るラスカの詩や劇を分析しながら、文人作家たちの喜劇観を考察した。その成果は19年3月発行の「美学芸術学」に、論文として発表した。とりわけ、詩人としても活躍した女優イザベッラ・アンドレイーニの文学性および、その出版における文学戦略について考察を進め、