hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
白血病幹細胞を標的とした新規免疫治療法の開発

新規がん抗原CXorf48は慢性骨髄性患者検体より分離した白血病幹細胞に高発現していた。我々が同定したHLA-A24拘束性エピトープを用いて健常人リンパ球から誘導したCXorf48特異的な細胞傷害性T細胞(CTL)はこれらの患者骨髄細胞中の白血病幹細胞を認識した。また、白血病患者末梢血中の同CTLの有無と臨床経過に相関が認められた。更に、白血病細胞株において、脱メチル化剤の添加によって本遺伝子の発現が上昇する一方、正常血液細胞では遺伝子発現が変化せず、脱メチル化剤の併用が有用である可能性を示した。以上より、新規がん抗原CXorf48を用いて、白血病幹細胞を除去する免疫療法の開発が期待される。平成26年度は、以下の2点を中心に研究成果を得た。一つは、同意を得て提供された複数の慢性骨髄性白血病患者骨髄検体より、白血病幹細胞が濃縮していると考えられているCD34陽性CD38陰性細胞をソーティングにて分離し、CXorf48遺伝子の発現量を検討した。検討を行った全ての検体で、幹細胞分画における高発現を確認した。さらに、その内の1検体を用いて、HLA-A*24:02陽性健常人末梢血より申請者が同定したエピトープの刺激により誘導した抗CXorf48CTLによる抗原認識能を検討したところ、CD34陰性細胞と比較して、CD34陽性細胞が強く認識された。以上より、白血病患者においてCXorf48が白血病幹細胞抗原として機能し、白血病幹細胞の排除に有用である可能性が示唆された。次に、脱メチル化剤によるCXorf48遺伝子発現への影響を検討した。具体的には、CXorf48遺伝子を発現していない造血器腫瘍細胞株であるKMS11、HL60、PL21の各細胞を5-アザシチジンで3日間処理したところ、いずれの細胞においてもCXorf48遺伝子の発現量が著明に増加した。一方、健常人由来末梢血単核球細胞および骨髄単核球細胞に同様の処理を行った場合には、CXorf48遺伝子の発現量の変化は認められなかった。以上より、CXorf48遺伝子は腫瘍特異的なエピジェネティクス機構により発現が調節されていることが示唆された。平成27年度は以下の研究成果を得た。前年度に、HL60を含む血液腫瘍細胞株に5-アザシチジン(5-aza)を添加するとCXorf48遺伝子の発現量が増加することを証明したが、さらに他の代表的な脱メチル化剤である5-deoxycitidine(DAC)を添加して同様の検討を行ったところ、5-azacitidineより低濃度(100nM)でCXorf48遺伝子の発現が著明に増加した。また、正常細胞の中でも増殖能の高いPHA blastを作成し、同じく5-azaまたはDAC添加によるCXorf48遺伝子の発現の変化を検討したところ、同遺伝子の発現は変わらず、細胞増殖の有無に関わらず正常細胞におけるCXorf48遺伝子の発現は脱メチル化剤の影響を受けないことが証明できた。次に、DACで48時間処理したKMS11細胞に対する、CXorf48特異的CTLの認識能を51Crアッセイを用いて検討したところ、DAC処理によるがん細胞認識能の増強は認められなかった。用いたCTLの活性が低かった可能性もあるため、今後、新たに誘導したCTLを用いてこの点に関して再検討する必要がある。また、脱メチル化剤によるプロモーター領域のメチル化の影響をパイロシークエンス法で検討するために、プロモーター特異的なプライマーを5種設計し、PCR法にて目的配列の増幅を確認した。今後、これらのプライマーを用いてメチル化の定量を行っていく。脱メチル化剤による、血液がん細胞特異的なCXorf48遺伝子の発現上昇は確認することができたが、当初の予想に反して、脱メチル化剤で処理した血液がん細胞に対するCXorf48抗原特異的CTLの認識能の明らかな上昇が認められなかった。前年度に引き続いて脱メチル化剤によりCXorf48の免疫原性を増強できるかどうかを検討した。健常人末梢血リンパ球よりHLA-A*24:02拘束性CXorf48ペプチドを用いて誘導したCTLが、脱メチル化剤で処理した造血器腫瘍細胞を認識するかどうか検討したが、有意な認識の増強は認められなかった。脱メチル化剤により本抗原の発現が増強することはすでに確認しているため、それ以外にCTLに対する負の影響があるものと考えられた。その機序の一つとして、白血病細胞株PL21を脱メチル化剤で処理したところ、免疫抑制分子であるPD-L1の発現が増加することを見出した。さらに、実際に白血病患者末梢血中に本抗原に反応するCTLが存在するかどうかを検討した。2年以上のCMR維持後にイマチニブ投与を中止した16例のCML患者において、末梢血単核球をCXorf48特異的デキストラマーを用いて染色し解析したところ、3例でCXorf48特異的CTLが検出された。これらの症例では全患者がCMRを維持していた。一方で、CXorf48特異的CTLを検出できなかった13症例中4例で遺伝学的な再発を認め、再発率は31.3%であった。

以上より、CMRを維持している患者では、TKI治療後に残存しているCML幹細胞に対してCXorf48特異的な免疫反応が生じ、CMRの維持に関与している可能性が示唆された。これらの結果から、CXorf48抗原は白血病幹細胞に発現し、CTLの標的となるため、治療標的として有用であると考えられる。また、in vivoモデルの構築のために抗原特異的CTLのクローン化を試みた。健常人リンパ球より誘導した抗原特異的CTLからデキストラマー陽性細胞をソーティングし、限界希釈法により12クローンを得たが、再度行ったデキストラマー染色で陽性細胞が得られなかったため、クローンの樹立は今後の課題と言える。新規がん抗原CXorf48は慢性骨髄性患者検体より分離した白血病幹細胞に高発現していた。我々が同定したHLA-A24拘束性エピトープを用いて健常人リンパ球から誘導したCXorf48特異的な細胞傷害性T細胞(CTL)はこれらの患者骨髄細胞中の白血病幹細胞を認識した。また、白血病患者末梢血中の同CTLの有無と臨床経過に相関が認められた。更に、白血病細胞株において、脱メチル化剤の添加によって本遺伝子の発現が上昇する一方、正常血液細胞では遺伝子発現が変化せず、脱メチル化剤の併用が有用である可能性を示した。以上より、新規がん抗原CXorf48を用いて、白血病幹細胞を除去する免疫療法の開発が期待される。平成26年度に予定していた、白血病患者検体におけるCXorf48抗原の遺伝子発現について一定の成果が得られた。また、脱メチル化剤処理による遺伝子発現への影響についても複数のがん細胞株および正常血液細胞での発現の変化を確認することができた。引き続き、脱メチル化剤で処理した血液がん細胞に対するCXorf48抗原特異的CTLの認識能の変化について検討していくが、その際に、CXorf48抗原特異的CTLとして、抗原認識能の強い、CXorf48抗原特異的T細胞レセプター遺伝子を導入したCTLを用いることが有用であると考えられる。また、脱メチル化剤によるCXorf48遺伝子のメチル化について詳細な検討を進めて行く。腫瘍免疫学血液内科学白血病患者検体を用いた検討については検体数を増やして継続する。さらにCXorf48特異的CTLの抗原認識能についての検討も、CTLクローニングを含めて進めていく。CXorf48を含む免疫関連遺伝子のメチル化解析について、パイロシークエンス法などを用いた詳細な検討を行っていく。
卵巣がん腹膜転移におけるMETおよび播種に関わる新規分子の解明

卵巣がんが腹膜播種病巣を形成する過程で、腹膜中皮細胞の防御機構の破綻がおこり、いわゆる"ミルキースポット"と呼ばれる腹膜中皮の欠損および中皮下組織の露出をおこるとされているが、腹膜病巣を形成する点で類似していると考えられる病態に子宮内膜症があり、内膜症患者の腹水中にHGFが高濃度に存在するという報告をもとに、腹膜中皮細胞の防御機構の破綻にHGFが何等かの関与をしていると考えた。それを解明するために、まず子宮内膜症細胞株(EMosis-CC/TERT)にエストロゲン刺激を行い、その培養上澄を、中皮細胞株(MES-F)の培養液中に添加したところ、中皮細胞の間質細胞様形態変化を生じ、細胞間接着が減弱し細胞間隙が生じるという結果を得た。さらにその培養上澄中のHGF濃度をELISAで測定したところエストロゲン刺激の濃度依存性に上昇しており、ウエスタンブロット法で中皮細胞側の接着因子であるE-cadherinの発現がタンパクレベルで減弱しているという知見を得た。さらにN-cadherinの発現亢進やサイトケラチンの減弱、ビメンチンが発現亢進しており、中皮-間葉転換が起こっていることがわかった。これらの事象は、中皮-間葉転換にHGFが関与しており、さらに、その結果、中皮細胞間に間隙が生じ、いわゆるミルキースポットを形成するというメカニズムの存在を示唆するものである。以上の結果を受けて、次の段階として卵巣がんが腹膜播種病巣を形成する過程を検証するにあたり、同様の現象が存在するのかを、卵巣癌細胞株を用いて中皮細胞株と共培養を行うことでHGFや接着因子等の発現変化を検討中である。さらに卵巣癌の腹膜播種において、卵巣癌細胞から分泌されるHGFがパラクライン的に作用し、腹膜中皮細胞のMMTを引き起こすことで卵巣癌細胞の腹膜播種が惹起されることを明らかにし報告した(Gynecologic Oncology 139: 345-354, 2015)婦人科腫瘍学子宮内膜症細胞と中皮細胞間ではあるが、HGFが腹膜播種病巣を形成する過程でのkeyとなる因子であることを同定し、さらに重要なステップとして中皮細胞側に中皮-間葉転換が生じていることを明らかにした。卵巣癌においても子宮内膜症と同様の機序で播種病巣が形成されるのかを検証するために、卵巣癌細胞株を用いて中皮細胞株と共培養を行うことでHGFや接着因子等の発現変化検証する。さらに、生体から摘出された卵巣がん播種病巣の腹膜との関係も、病理組織学的観点から検証予定である。
STIMを中心とした細胞内カルシウム調節機構とサイトカインシグナル

我々が最初に発見したSTIMは、小胞体に存在するカルシウム結合能を持つ蛋白である。特筆すべきは、サイトカイン刺激後の小胞体内カルシウムの枯渇を感知する唯一のカルシウムセンサーである。カルシウムの枯渇を感知したSTIMは、細胞膜直下へ移動しpunctaを形成し、細胞膜に存在するカルシウムチャネルを開放させる。我々は、STIMを中心とした細胞内カルシウム調節に関わる分子機構を解明することを目的として、STIMに結合する分子の網羅的解析を試みた。STIM蛋白のC端領域にFLAG配列をつけた融合蛋白を作製するウイルスベクターを作製した。STIM-FLAG融合蛋白を293T細胞に発現させ、抗FLAG抗体結合ビーズにて免疫沈降した。各免疫沈降物を電気泳動し、特異的バンドを回収し、nano flow LC/MSによるペプチド解析・MASCOTによるデータ分析を行った。結果、STIM分子自身を含む、複数のSTIM結合候補分子を同定した。それらの多くは小胞体内蛋白であったが、数個の細胞質蛋白も含まれていた。各候補分子とSTIMの結合は、免疫沈降一ウエスタンにて確認を行った。特にSTIMと強い結合が認められた1つの小胞体蛋白に注目し、その結合様式を解析した。その結合には、STIMの細胞外領域と膜貫通領域が必要であった。本蛋白を含め複数のSTIM結合候補分子をsiRNAによりノックダウンさせるよう取り組んでおり、細胞内カルシウム調節への影響を解析したいと考えている。既に、先程の小胞体蛋白に関しては、ノックダウンに成功している。本研究を通じ、STIMを中心とした細胞内カルシウム調節に関わる候補分子を多く同定できた。我々が最初に発見したSTIMは、細胞外領域にEF-handドメインやSAMドメインを持ち、現在確認されている唯一のSOC Ca2+センサーとして注目されている。我々は、STIMを中心としたSOC Ca2+流入調節に関わる分子機構を解明することを目的として、STIMに結合する分子の網羅的解析を試みた。EF-handドメインにアミノ酸変異を持ちCa2+結合能を欠くSTIM(mu-STIM)や野生型STIM(WT-STIM)各蛋白のC端領域にFLAG配列をつけた融合蛋白を作製するウイルスベクターを作製した。また、nano flow LC/MSによるペプチド解析・MASCOTによるデータ分析の手法を習得した。mu-STIM or WT-STIM-FLAG融合蛋白をHela細胞・293T細胞・Jurkat細胞に発現させcell lysateを作製し、抗FLAG抗体結合ビーズにて免疫沈降した。各免疫沈降物を電気泳動し、特異的バンドを回収し、ペプチド解析を行った。回収したバンドの一部はSTIM自身であった。本実験系を進めることにより、複数のSTIM会合蛋白の候補分子を同定でき、STIMを中心としたSOC Ca2+流入調節機構の解明に繋げることが可能であると考えられた。
特異な反応場としての電極-溶液界面を利用する有機光化学と光プロセスの開拓

本研究の目的は電解反応に特有の反応場である電極-溶液海面に外部エネルギーを照射することにより、従来の電解反応にはない新たな反応系を創成することである。そのような新たな系を探索すべく種々の有機化合物の電解反応における光照射の効果について検討した。今回、基質として易還元性のvic-ジハライドを対象とし、光照射下で電解還元を行った場合と光照射せず暗所下で電解還元を行った場合の還元生成物(2電子還元体:オレフィン、4電子還元体:アルカン)の収率と電流効率について比較検討した。その結果、例えば1、2-ジブロモ-1,2-ジフェニルエタンの電解還元を光照射しながら行うと4電子還元体であるビベンジル生成の収率と電流効率が光照射しない場合に比べて向上することを見い出した。また、本反応系では中間に生成する2電子還元体(スチルベン)のシス/トランス比が無電解光照射のみの場合にはほぼ1:1となるのに対し、暗所下での電解ではトランス体のみが生成した。これに対し、光照射下での電解ではシス体のみが生成するという非常に興味深い結果が得られた。これは電解系に光照射を行うことにより、新たな生成物選択性制御が可能となることを示唆している。このような反応制御法はこれまで全く知られておらず、さらなる詳しい検討が必要であるが、ここで観測された現象はPhotoassisted Electrochemical Reactionとも言うべき新たな反応系へ展開できるものとして期待できる本研究の目的は電解反応に特有の反応場である電極-溶液海面に外部エネルギーを照射することにより、従来の電解反応にはない新たな反応系を創成することである。このような反応制御法はこれまで全く知られておらず、さらなる詳しい検討が必要であるが、ここで観測された現象はPhotoassisted Electrochemical Reactionとも言うべき新たな反応系へ展開できるものとして期待できる
ドイツの言語と社会-近世から現代へ

本研究は社会史的視点からドイツ語の歴史的発展を近世から現代にいたるドイツ社会の変遷との関わりにおいて捉え直そうとするものである。1516世紀ドイツの言語と社会に関して踊は、宗教改革運動における大衆向け活版印刷物を分析し、宣伝ビラや「新聞」が大衆メディアとして一般信徒の日常生活に浸透し、相互のコミュニケーションに重要な役割を果たしていたことを明らかにした。16、17世紀について新田は、この時代、遠隔地とのコミュニケーションが増えたことから文書の社会的重要性が高まった結果、書き言葉が言語的規範となり、ドイツ語も書き言葉的性格を強めたことをルターのドイツ語の分析によって示した。また、重藤は、近世ドイツ語を中心に現代語に至るまでの分詞によるさまざまな構文を分析し、ドイツ語における分詞用法の歴史的衰退を代替表現との関連において考察し、他の言語との比較によってその類型的位置付けを試みた。18世紀ドイツの言語思想の流れの中で川中子は、ハーマンの言語論を中心的な分析対象とし、彼の言語思想における詩学・文芸学、とくに、比喩形象・修辞の役割を明らかにした。また、ハーマンの生涯について調査し、その全体像を描いて、著書にまとめた。19世紀について杉田は、ニーチェの言語思想を同時代の社会的思想状況の背景において分析し、彼の言語不信はその優れた言語芸術上の才能と知見のゆえのアンヴィアヴァレントな現れであることをを明らかにした。20世紀のドイツの言語と社会に関してSebastian Graeb-Konnekerは、ナチズム運動における文学と言語の問題を分析し、そのさまざまな言語的な現象の具体例をDokumentationという形で公刊した。本研究は、ルターの言語活動、宗教改革運動におけるメディアと言語、近世ドイツの言語規範と規範意識、ハーマン・ヘルダーの言語思想、ニーチェの言語思想、ナチズム運動における言語などの問題設定のもと、近世から現代に至るドイツにおける言語と社会との関わりを総体的、体系的に捉えようとするものであるが、初年度である今年度は次のような作業を行い、また、いくつかの知見を得た:1研究分担者は自分の問題設定に関して、理論的検討を行い、関連資料を収集した。また、杉田、新田、踊、重藤はドイツ、スイスにおいて専門研究者を訪問し、レビューを受け、情報を収集した。2宗教改革運動における宣伝・報道文書、ルター、ハーマン、ニーチェなどの言語資料の分析を開始した。3自らの問題設定を具体的資料にあたって検討していく過程で、次のような点が明らかになった:(1)ルターの言語活動とその規範意識の分析にあたってはザクセン官庁語、南ドイツ官庁語の言語威信との関連が重要である。(2)宗教改革運動という大きな時代変化の中で、瓦版・パンフレット類が読者大衆の宗教的・政治的態度決定や「世論」形成を促進する過程を具体的に検証する手がかりとして有効である。(3)ハーマンの言語論に関してはヘルダーの言語起源論を整理、検討することが必要である。(4)ニーチェの思想には、根強い言語不信感がある。言語を問題にするなら、仮面、表現と伝達、仮象、沈黙、言語と真理、言語と認識、言語と音楽、文学、芸術といった領域に及ばなくてはならない。(5)ナチズムにおける言語操作はそれのみを研究するよりは、他の言語政策、とくに他時期、他国の戦時の言語政策をも視野に入れて行うことが有効である。本研究は、近世から現代に至るドイツにおける言語と社会との関わりを総体的、体系的に捉えようとするものであるが、2年目である今年度は次のような作業を行い、また、知見を得た:1踊、重藤、S.グレープ・ケネカーはドイツ、スイスに専門研究者を訪問し、情報交換、資料収集をした。2 Halle-Wittenberg大学のH.-J.Solms教授を招聘し、講演会、意見・情報交換を行った。3各自がその問題設定に沿って具体的資料分析を開始した:

(1)ルターのドイツ語テクストにおける動詞の現在分詞の用例を他のデータと比較検討し、近世初期のドイツ語の統語構造の特性を探った。(2)ルターのドイツ語テクストを例に、近世初期の社会状況との関連で、話し言葉と書き言葉の有り様を分析した。(3)ルター、バッハなどの宗教歌とその歌詞を分析し、キリスト教布教活動における位置付けと社会的影響力について考察した。(4)1718世紀初頭のスイスの黎明期の新聞内容を調査した。こうした新聞の記事などを利用してヨーロッパ的な視野で政治・経済の動向を把握し、自国の政策決定に関与した知識人の役割を検証した。(5)前年度にドイツで収集した、ニーチェ没後100年を記念して出版された大量の関係資料を分析し、ニーチェ研究史上の意味について考察し、論文にまとめた。(6)ドイツの過去克服問題が第二次世界大戦後およびドイツ再統一後の思想・政治状況との関連でどのような位置付け、意味づけがなされてきたか、その変遷を分析、記述した。本研究は、近世から現代に至るドイツにおける言語と社会との関わりを総体的、体系的に捉えようとするものである。3年目である今年度は昨年度に引き続き、各自が担当する時代区分とそれに関する問題設定に沿って具体的資料分析をすすめた:1.ニーチエの熱愛したヘルダーリンにおけるギリシャ理解、ニーチエのエムペドクレス像、ワーグナー夫妻との交友等を調査し、ワーグナーの作品『トリスタンとイゾルデ』における「愛の死」のモチーフへの影響を考察した。2.ルターを分析対象とし、宗教理論文書と新約聖書ドイツ語訳の文体を比較することによって、ルターの場面や聴衆との関係にもとづく言語使用を分析し、論文にまとめた。3.絵入りパンフレット(Flugblatter)は宗教改革運動において大衆的メディアとして重要な機能を荷っていたが、その、17世紀後半のドイツにおける宗派問題のコンテクストにおける機能を調査した。4.初期新高ドイツ語テクストにおける助動詞と現在分詞の用例を収集、整理し、近世ドイツ語における構文の歴史的発展の分析を行った。5.歌や詩の発生という視点から、ルターからハーマンを分析し、ドイツ語の言語的特長との関わりについて分析を行った。6.ドイツの過去克服問題が第二次世界大戦後およびドイツ再統一後の思想・政治状況との関連でどのような位置付け、意味づけがなされてきたか、その変遷を分析、記述した。以上のように近世から現代にいたる言語とさまざまな社会的側面との関わりが明らかになりつつある。次の課題は、改めてこのような成果を相互に関連付ける理論的根拠を明確にすることである。最終年度である今年度は各自が担当する問題設定をまとめ、言語と社会の関わりの諸相を具体的な事例にもとづいて明らかにするよう努めた:1.ニーチェは、言語表現に深い喜びを感じる哲学者であったが、他方徹底的な言語不信を抱いていた。この矛盾する二つの要素をふまえ、『ツアラトウストラ』を分析した。また、ニーチェの激烈なキリスト教批判の背後にある古代ローマ人への絶大な評価をとりあげ、その高い文化を破壊した弱者の宗教、キリスト教との対立の構図を明らかにした。
西洋古代末期における翻訳論の研究：ヒエロニュムスの論争を中心に

当該年度は、研究計画どおり二次文献の精読を行った。聖書翻訳者としてのヒエロニュムスに関する研究については、博士論文の執筆時に大方フォローしてあったが、ギリシア教父文学の翻訳者としてのヒエロニュムスについては新たに文献を渉猟する必要があった。聖書翻訳に関する研究では、翻訳の理論、実践、そして彼のヘブライ語能力の問題が問われていた。ヘブライ語能力の問題は、本来であれば実践の下位区分とすべき内容ではあるが、独立した分野と言えるほど盛んに研究されている。このように聖書翻訳者としてのヒエロニュムスは、翻訳者でありながら、研究者から強い関心を持たれてきた。しかしながら、当該年度の二次文献の精読によって明らかになったのは、ギリシア教父文学の翻訳者としての彼は、あくまで原著者に対する二次的な存在として、原典を正確に翻訳したかどうかという基準でのみ論じられているということである。こうした非対称性について、次の年度に考察を深めたい。当該年度のヒエロニュムス研究では、博士論文の補遺となる次の2本の論文がアクセプトされた。"Hebrew, Apostles, and Christ: Three Authorities of Jerome's Hebraica Veritas," Vigiliae Christianae 73 (Leiden: Brill, 2019), forthcoming; "Ancient Chronography on Abraham's Departure fromHaran: Qumran, Josephus, Rabbinic Literature, and Jerome," Journal for the Study of Judaism 50 (Leiden: Brill, 2019), forthcoming.翻訳者ヒエロニュムスの翻訳対象となる文書のジャンルによって、研究者たちの対応が異なることを発見したから。また成果の発信に関しては、口頭発表のみならず論文発表にまで至ることができたから。これまでの二次文献の渉猟を踏まえて、今後は一時文献の精読に移りたい。一時文献はギリシア語、ラテン語、ヘブライ語等の古典語で書かれているので、これまでのようにたくさんの量を読むことは困難だが、多くのテクストを分析することを目指したい。研究計画の段階では明らかではなかったが、ヒエロニュムスがギラテン語訳したオリゲネス『エレミヤ書説教』と『諸原理について』が極めて重要なテクストであることが明らかになってので、精読の対象としたい。
p53遺伝子による催奇性障害防御機構の解析

発生初期の胎仔では、組織内に傷をもつ細胞が生じると、p53はその損傷度を認識し、個体を守るためにアポトーシスによってその細胞を積極的に排除し、奇形の発生を防いでいる。さらに、放射線誘発アポトーシス活性はp53遺伝子が正常か否かに依存し、p53(+/-)マウス胎仔細胞はp53(+/+)マウスの胎仔の約半分である。P53(+/-)マウスがp53正常マウスに比し好催奇性であるのは、このアポトーシス活性の低下によるものと考えられる。胎齢9.5日のp53正常(+/+)マウスに2GyのX線を高線量率(450mGy/min)で照射した場合、生存胎仔の40%(自然発生率10%で補正)に奇形が発生する。しかし、1.2mGy/minの低線量率照射(28時間で2Gy)では奇形発生の増加はゼロである。他方、p53欠損(-/-)マウスでは、2GyのX線照射による胎仔死亡率は7%と放射線致死抵抗性を示すが、生存胎仔での奇形発生率は55%(自然発生率21%で補正)に達し、さらに低線量率照射でも15%の頻度(自然発生率で補正)で奇形が発生した。P53(-/-)マウスでは、DNA修復系で完治できなかった損傷細胞をアポトーシスにより組織から排除することができないため、放射線障害が残るものと思われる。これらの結果は、放射線などによりDNAに損傷が生じると、細胞はその損傷度を認識し、細胞周期を遅延させDNA損傷部の修復を行うとともに、細胞の状況によっては、p53が不治のDNA損傷を認識してアポトーシスを誘導し、損傷細胞を組織から排除することを示唆している。この2つの機能(DNA修復とアポトーシスを介した組織修復)がうまく協力して働くと、低レベル放射線などで組織にできる少々の傷は完全排除され、ダメージは蓄積しないと思われる。p53の機能は想像以上に多彩である。分裂能をもつ細胞は、遺伝子に揖傷が生じるとその傷を感知し、細胞周期を遅延させDNA損傷部の修復を行う。また、細胞の状況によってはアポトーシスを誘導し、拐傷細胞を除去している。発生初期の胎児では、揖傷をもつ細胞が組織内に生じると、アポトーシスによってそれを効率よく排除し、奇形の発生を防いでいる。p53へテロ欠損(p53^<+/->)マウスは,正常(p53^<+/+>)マウスに比べ放射線致死抵抗性である。しかし、2GyのX線被曝で生まれてきたp53^<+/->マウスには、30%の高頻度(自然発生率で補正)で奇形が生じる。放射線によるマウス胎仔の外表奇形と死亡率はp53遺伝子が正常か否かで劇的に変化し、放射線致死感受性と催奇感受性とは相反関係を示す。p53は、DNA揖傷の危険から個体を守るためのアポートシスの誘導に必須である。p53正常マウス胎仔での放射線によるアポトーシス誘発頻度は、照射後4時間以内にピーク値に達し、48時間後にはほぼ自然発生のレベルに戻る。単位線量当りの放射線誘発アポトーシス率は、p53遺伝子が正常か否かに依存し、p53^<+/->マウス胎仔ではp53^<+/+>

マウス胎仔細胞の半分である。さらに、マウス胎仔では2GyのX線照射によっても、放射線被曝によるp53タンパク質の増加は認められない。従って、潜在的な非活性型p53タンパク質分子が、DNA損傷を直接認識して、アポトーシスを誘導するものと思われる。つまり,胎仔ではp53の転写活性を経由しない経路のアポトーシスを介した組織修復で奇形を回避している。さらに、放射線による催奇性障害にはp53依存性監視機構のおかげでしきい値があり、主要器官形成期のマウス胎仔にγ線を42mGy/hrの低線量率で2Gy照射しても、奇形は正常値を越えない。p53.はさまざまなストレスに対して個体を守るための生体危機管理装置として作用している。主要器官形成期に2GyのX線照射すると、p53^<+/+>マウスでは胎内死亡が60%、奇形の発生頻度は20%未満である。p53^<-/->マウスでは胎内死亡頻度は小さいが、奇形の発生は70%にも達する。正常マウスの初期胚には、発生異常を起こすような傷をもつ細胞を積極的に排除する組織修復機能が存在し、それを支配しているのがp53遺伝子である。事実、p53^<+/+>マウスの胎仔組織ではX線被曝数時間後に大量のアポトーシス死(p53の転写活性を経由しない即時型のアポトーシス)がみられるのに対して、p53^<-/->マウス胎仔ではそのような細胞死はみられない。p53遺伝子へテロ変異(p53^<+/->)マウスも正常マウスに比べ放射線致死抵抗性である。しかし、2GyのX線照射後に生まれてきたp53^<+/->マウスには、30%の高頻度(自然発生率で補正)で奇形が発生した。さらに、単位線量(1Gy)当りの放射線誘発アポトーシスの発生率はp53遺伝子が正常か否かに依存し、p53^<+/->マウス胎仔細胞はp53^<+/>+マウス胎仔の約半分である。p53^<+/->マウスが好催奇性であるのは、このアポトーシス活性の低下によるものと思われる。また、正常なp53遺伝子をもつ主要器官形成期のマウスに^<137>Csγ線を高線量率(2分間で2Gy)で照射した場合、胎仔の80%(自然発生率14%で補正)に発生異常が誘発される。しかし、この異常胎仔の発生率は、放射線線量率に大きく依存し、24時間で2Gyの低線量率照射では、発生異常の増加は全くみられない。胎児期被曝では、アポトーシスを介した組織修復により、低レベル放射線で生じる少々の損傷は組織から排除され、蓄積は起こらないものと思われる。我々はこれまでに、p53遺伝子の機能を欠損したp53(-/-)マウスとヘテロ欠損マウスp53(+/-)を作り、正常のp53(+/+)マウスを加えて、三者で催奇性障害を定量的に比較・解析できる実験系を開発し、DNA損傷の危機から胎児を守り、奇形の発生を防ぐ"組織の守護神"としてのp53の重要な役割を明らかにしてきた(Nature Med.,2(5):577-580,1996)。本研究では、これまでの研究成果を踏まえ、それをさらに発展させる方向で、p53依存性アポトーシスと組織修復の分子機序、さらに、催奇性障害の線量率依存性等を明らかにし、放射線被曝の奇形及び発がんリスクにおけるしきい線量の実態に関しても、生体防御機能の観点から解明することを目指した。その結果、放射線などによりDNAに損傷が生じると、細胞は細胞周期を遅延させるとともにDNA損傷部の修復を行う。細胞の状況によっては、p53が不治のDNA損傷を認識してアポトーシスを誘導し、損傷細胞を組織から排除する。
多重構造を持った組合せ的デザインの統合と統一的構成法の研究

組合せ的デザインにおいて,ブロックがさらに小ブロックに分割され,様々な組合せ的条件を持つデザインがたくさんある.組合せ条件は各応用分野の必要に応じて生まれ,構成法の研究も独立に行われていた.今までは,異なる分野で,異なる名前で呼ばれており,解析や構成法も独立に研究されてきた.当然重複した研究もかなりある.これらのデザインを多重構造デザインと呼ぶこととし,それらを統一的に定義し,統一的な性質やバウンドや一般的な構成法を確立に取り組んだ.Nested design, Row-Column design, splitting designなどと言われていたデザイン問題を統一的に扱うことに成功した.組合せ的デザインにおいて,ブロックがさらに小ブロックに分割され,様々な組合せ的条件を持つデザインがたくさんある.組合せ条件は各応用分野の必要に応じて生まれ,構成法の研究も独立に行われていた.今までは,異なる分野で,異なる名前で呼ばれており,解析や構成法も独立に研究されてきた.当然重複した研究もかなりある.これらのデザインを多重構造デザインと呼ぶこととし,それらを統一的に定義し,統一的な性質やバウンド,そして一般的な構成法に関して研究した.23年度に続き,小さないくつかのデザインからより大きなデザインを構成する,再帰的構成法の研究に関して,23年度のアイデアに基づき,続けて研究を行った.一つは1950年代から一般のブロックデザインの構成によく用いられていた,braking up法が多重構造デザインの構成にも適応できることを証明した。これにより,構成が難しいと思われていた一部の多重構造デザインにも適応可能で,多くの新しいものが構成可能となった。つぎに巡回的な多重構造デザインの再帰的構成法を試みた。Kuriki-Jimbo(1983)の巡回的デザインの構成法が多重構造デザインの組合せ条件を保存することを証明した。この方法はブロックサイズを固定し,より多くの点とブロック数の多重構造デザインを作ることが可能である。しかし,対称性(ブロックの数と点の数が同一)は保存しない.対称性を持つ巡回的多重構造デザインは多くの符号への応用を持つため,更に研究を続ける.また中国からCuilin Fanを招聘し,これらの課題を議論した.組合せ的デザインにおいて,ブロックがさらに小ブロックに分割され,様々な組合せ的条件を持つデザインがたくさんある.組合せ条件は各応用分野の必要に応じて生まれ,構成法の研究も独立に行われていた.今までは,異なる分野で,異なる名前で呼ばれており,解析や構成法も独立に研究されてきた.当然重複した研究もかなりある.これらのデザインを多重構造デザインと呼ぶこととし,それらを統一的に定義し,統一的な性質やバウンド,そして一般的な構成法に関して研究した. 23年度に続き,小さないくつかのデザインからより大きなデザインを構成する,再帰的構成法の研究に関して,24年度のアイデアに基づき,続けて研究を行った.巡回的な多重構造デザインの再帰的構成法を試みた。しかし,対称性(ブロックの数と点の数が同一)は保存しない.対称性を持つ巡回的多重構造デザインは多くの符号への応用を持つため,更に研究を続ける.組合せ的デザインにおいて,ブロックがさらに小ブロックに分割され,様々な組合せ的条件を持つデザインがたくさんある.組合せ条件は各応用分野の必要に応じて生まれ,構成法の研究も独立に行われていた.今までは,異なる分野で,異なる名前で呼ばれており,解析や構成法も独立に研究されてきた.当然重複した研究もかなりある.これらのデザインを多重構造デザインと呼ぶこととし,それらを統一的に定義し,統一的な性質やバウンドや一般的な構成法を確立に取り組んだ.Nested design, Row-Column design, splitting designなどと言われていたデザイン問題を統一的に扱うことに成功した.組合せ的デザインにおいて,ブロックがさらに小ブロックに分割され,様々な組合せ的条件を持つデザインがたくさんある.組合せ条件は各応用分野の必要に応じて生まれ,構成法の研究も独立に行われていた.今までは,異なる分野で,異なる名前で呼ばれており,解析や構成法も独立に研究されてきた.当然重複した研究もかなりある.これらのデザインを多重構造デザインと呼ぶこととし,それらを統一的に定義し,統一的な性質やバウンド,そして一般的な構成法に関して研究した.当初24年度に計画していた,小さないくつかのデザインからより大きなデザインを構成する,再帰的構成法の研究に関して,新しいアイデアが浮かんだため,今年度に行うこととした。一つは1950年代から一般のブロックデザインの構成によく用いられていた,braking up法が多重構造デザインの構成にも適応できることを証明した。しかし,対称性(ブロックの数と点の数が同一)は保存しない.対称性を持つ巡回的多重構造デザインは多くの符号への応用を持つため,更に研究を続ける.また中国からCuilin Fanを招聘し,これらの課題を議論した.組み合わせ的デザインにおいて,ブロックがさらに小ブロックに分割され,様々な組み合わせ的条件を持つデザインがたくさんある.

組み合わせ条件は各応用分野の必要に応じて生まれ,更生法の研究も独立に行われていた.今までは,異なる分野で,異なる名前で呼ばれており,解析や構成法も独立に研究されてきた.当然重複した研究もかなりある.これらのデザインを多重構造デザインと呼ぶこととし,それらを統一的に定義し,統一的な性質やバウンド,そして一般的な構成法に関して研究した.25年度に続き小さな多重構造デザインからより大きなデザインを構成する,再帰的構成法の研究を続けて行った.また,巡回的な多重構造デザインの統一的構成法を確立する研究も行った.Kuriki-Jimbo(1983)の巡回的構成法の拡張を試みた.米国Delware大学のQuinq Xiang教授,ドイツDuisburg-Essen大学のTran van Trung教授の来日のサポートをおこない,有益なな議論を行った.組み合わせ理論とその応用23年度には,今年度予定の課題に関して,アイデアが浮かんだため,繰り上げて実施した。今年度はそのアイデアに基づいて更なる研究を行った.再帰構成法に関しては一般多重構造デザインに対応したbraking up法が有効であることが証明できた。また巡回的多重構造デザインに関してはdifference matrixを用いるKuriki-Jimbo再帰構成法が有効であることがわかった。これらの結果は,海外での国際会議で発表した。論文も投稿の予定である。今年度は24年度までのアイデアに基づいて更なる研究を行った.巡回的多重構造デザインに関してdifference matrixを用いるKuriki-Jimbo再帰構成法が有効であることがわかった。24年度に計画していた課題について,いくつかのアイデアが得られたため,今年度に繰り上げて研究した。再帰構成法に関しては一般多重構造デザインに対応したbraking up法が有効であることが証明できた。藤原は続けて,有限アフィン幾何および射影幾何による統一的構成法の研究を行う.これらの有限幾何は古典的な組合せ的デザインの構成にも広く使われており,有用な性質を数多く持っている.互いに接続しない,直線や平面(一般にt-flat)の集合を作ることによって,多重構造デザインのいくつかの条件を満たすようにすることが可能である.繆はCyclotomyを使った統一的構成法の研究を行う.繆は光直交符号や周波数ホッピング系列の研究を行ってきた.
アルツハイマー病抑制因子ヒユーマニンの発癌作用の検討

アルツハイマー病神経細胞死を特異的に抑えるヒューマニン(HN)あるいはHN類似分子が細胞癌化に密接に関与するという仮説を検証するために、1)HNが発癌促進に関係することの分子レベル及び個体レベルでの直接証明、2)HNあるいはその受容体などを標的とした癌治療開発、などの研究を行った。1.HNあるいはHN様分子が癌細胞で高発現していることの証拠およびHN様分子の同定前年度同定した大腸癌培養細胞(Caco-2)において、HNモノクローナル抗体とクロスするサイトケラチン群に属する蛋白質は残念ながら明瞭なHN様作用を持たなかった。そこで、方針を変更し、まずマウスの正常睾丸においてHN用分子を同定し、その構造情報をもとに、これらのHN様分子が種々の癌細胞で発現しているかどうかを検討することにした。マウス正常睾丸組織に約4kDと10kDの2種類のHNポリクローナル抗体PO4とクロスする分子の発現を見いだした。現在2次元電気泳動法を用いてこれらのタンパク質の構造を明らかにしつつある。2.発癌に関係することのin vitroでの証明培養癌細胞(PC12細胞、ヒトBリンパ球)などの細胞に血清除去による細胞死を誘導し、HNが細胞死を抑制できるかどうかを検討したが、このような作用は確認できなかった。CMV promoter下にFlag tagをC末につけたHNを高発現させるベクターを作成して、これをマウスES cellsに導入して、HN transgenic mouseを作成したがHNの高発現を確認できなかったため、現在新たにHN transgenic mouseを作成中である。4.HNの細胞膜受容体を介するシグナル伝達経路の解明昨年度HNの細胞膜受容体がCNTFR/WSX-1/gp130であることを見いだしたが、さらにWSX-1にはalternate splicingにより細胞外に分泌されるアイソフォームsWSX-1があり、CNTFR/sWSX-1/gp130もHNの受容体として機能することを見いだした。また、下流のシグナルとしてSTAT3を介する経路以外にPI3K/Akt経路も関与することを見いだした。アルツハイマー病神経細胞死を特異的に抑えるヒューマニン(HN)あるいはHN類似分子が細胞癌化に密接に関与する可能性は非常に高いと考えられる。この仮説を証明するために、1)HNが発癌促進に関係することの分子レベル及び個体レベルでの直接証明、2)HNあるいはその受容体などは標的とした癌治療開発、などの研究計画の一年目を行った。1.HNあるいはHN様分子が癌細胞で高発現していることの証拠およびH様分子の同定大腸癌培養細胞(Caco-2)におけて、HNモノクローナル抗体とクロスする約45KDのHN様分子(HN45)発現が亢進しているを見い出した。この抗体を用いて、大量のCaco-2細胞中のHN45を免疫沈降し、最終的にこの分子がサイトケラチン群に属する蛋白質であることを同定した。さらに、そのC末に存在するHN抗体とクロスするエピトープにHN様活性があるかいなかを現在検討中である。2.発癌に関係することのin vitroでの証明in vitroでコロニー形成をHNが促進する傾向を見出せなかった。3の研究により、HN受容体は限定した細胞にのみ、発現しているため、今後は、神経細胞などに絞って他の因子共存下で同様な検討を行う。3.HNの細胞膜受容体をかいするシグナル伝達経路野解明HNの神経保護作用にはgp130/Jak2/stat3 cascadeが関与していることを明らかにした。またこの研究を進め、HNの細胞膜受容体がCNTFR/WSX-1/gp130であることを見い出した。CMV promoter下にFlag tagをC末につけたHNを高発現させるベクターを作成して、これをマウスES cellに導入して、HN transgenic mouseを作成した。現在、発現を確認中であるアルツハイマー病神経細胞死を特異的に抑えるヒューマニン(HN)あるいはHN類似分子が細胞癌化に密接に関与するという仮説を検証するために、1)HNが発癌促進に関係することの分子レベル及び個体レベルでの直接証明、2)HNあるいはその受容体などを標的とした癌治療開発、などの研究を行った。4.HNの細胞膜受容体を介するシグナル伝達経路の解明

昨年度HNの細胞膜受容体がCNTFR/WSX-1/gp130であることを見いだしたが、さらにWSX-1にはalternate splicingにより細胞外に分泌されるアイソフォームsWSX-1があり、CNTFR/sWSX-1/gp130もHNの受容体として機能することを見いだした。また、下流のシグナルとしてSTAT3を介する経路以外にPI3K/Akt経路も関与することを見いだした。
高カカオチョコレート摂取による認知機能および循環機能の改善効果に関する研究

本研究は,認知症の症状を改善する方策として,高カカオチョコレートの継続的な摂取の有効性について検証する。中でも,認知症の予備軍とされる軽度認知障害(mild cognitive impairment, MCI)や,脳卒中などを発症原因とする脳血管性認知症の改善に有効であるかについて明らかにする計画である。併せて,血管内皮機能の改善効果についても検証し,両者の改善における関連について検討する。本研究では,安価で入手可能な市販の高カカオチョコレートの健康機能性を検証することから,認知症の二次予防方策のひとつとして,おやつ感覚で手軽に取り入れやすい食品の摂取を提案できる可能性がある。
口腔内悪性腫瘍患者の局所ならびに全身の免疫能と染色体遺伝子異常の研究

平成9-11年に来院した頭頚部扁平上皮癌患者53例、男38例、女15例、(年齢45-84歳、平均年齢64.2歳)において検索をおこなった。対照群としては悪性腫瘍、良性腫瘍、通常の基礎疾患を除いた健常なボランティアで年齢を合わせた男性13例、女性7例、計20例(年齢45-86歳、平均年齢66歳)をコントロールとした。免疫能として測定した項目は末梢血リンパ球数、補体タンパクC3c、C4、免疫グロブリンIgG、IgM、IgA、免疫複合体IC、血清補体価CH50、血清中サイトカイン1L1β、IL2、IL4、IL6、IL8、IL10、IL12、IFNγ、また末梢血よりフローサイトメトリーにてリンパ球表面抗原、CD3、4、8、16、45RA、45RO、56、95、TRCγを測定した。これらを、術前、放射線治療30Gray照射後、術後1か月、2か月、3か月、6か月、1年、5Fu、CDDPによる化学療法後、1週、2週、1か月、2か月にて測定した。患者の免疫グロブリンではIgGが有意に上昇していた。サイトカインでは、1L1β、IL10、IL12、においてp<0.05で患者群で高値であった。その他は測定は終了しているが現在解析中である。術前照射をおこなった34例中、16例でリンパ球数、CD4PCD8N、CD3NCD19Pが減少し、CD4NCD8Pの上昇がみられた。CD16PCD56P、TCRγに変化はなかった。化学療法による影響は大きく直後よりダメージは出現し、とくにCD4PCD8N、CD4NCD8P、CD3NCD19P、の低下は著明で、施術前の状態に回復するのに2か月を要した。遺伝子変異はSSCP法にてp53および関連遺伝子を検索し現在解析中であるがその結果は第59回日本癌学会総会にて発表を予定している。平成10年度の研究では当科に来院した頭頚部扁平上皮がん患者25例,男性19例,女性6例,(年齢41歳-82歳,平均年齢68歳)において検索を行った.対照群としては悪性腫瘍,良性腫瘍,通常の基礎疾患を除いた健常なボランティアで年齢を合わせた男性13例,女性7例,計20例(年齢45-86歳,平均年齢66歳)を検索した.測定した項目は末梢血リンパ球数,補体タンパク,C3c,C4,免疫グロブリンIgG,IgM,IgA,免疫複合体IC,血清補体価CH50,IL1β,2,4,8,10,12,IFNγ,フローサイトメトリーによりリンパ球表面抗原,CD3,4,8,16,45RA,45RO,56,TCRγ,δを末梢血および,Ope検体よりTIL(Tumor Infiltration Lymphocyte)を測定した.これらを,術前,放射線治療30Gray照射後,術後1ヵ月,2ヵ月,3ヵ月,6ヵ月,1年,5Fu,CDDPによる化学療法後1週,2週,1ヵ月,2ヵ月にて測定した.またPrimaryとOpe検体よりRT-PCR法にてDNAを抽出して-80°Cにて保存した.患者の免疫グロブリンではIgGが有意に上昇していた.サイトカインはIL1β,IL10,IL12においてp<0.05で有意に上昇がみられた.術前照射30grayを行った8例で,リンパ球数,CD4^+CD8^-,CD3^-19^+が減少しており,CD4^-8^+の軽度上昇が認められた.CDl6^+56^+,TCRγ,δに変化はなかった.化学療法施行直後よりダメージは出現し,とくにCD4^+CD8^-,CD4^-8^+,CD3^-19^+の低下は著しく施術前の状態に回復するのに2か月を要した.TILではCD16^+56^+,が90%以上発現している群と,5%以下の2群に大別できた.平成11年度は症例をさらに重ね,現在保存してあるDNAより特定遺伝子の解析を重点的におこない,学会報告,論文の作製を行う予定である.これまでの結果は腫瘍の放射線感受性等の腫瘍の性質や宿主の免疫能をよく示唆していると思われた.今後症例数を重ね,病期分類,病理組織学的所見,予後,と今回の研究データを分析しこれからのがん治療に役立てたい.平成9-11年に来院した頭頚部扁平上皮癌患者53例、男38例、女15例、(年齢45-84歳、平均年齢64.2歳)において検索をおこなった。これらを、術前、放射線治療30

Gray照射後、術後1か月、2か月、3か月、6か月、1年、5Fu、CDDPによる化学療法後、1週、2週、1か月、2か月にて測定した。患者の免疫グロブリンではIgGが有意に上昇していた。サイトカインでは、1L1β、IL10、IL12、においてp<0.05で患者群で高値であった。その他は測定は終了しているが現在解析中である。術前照射をおこなった34例中、16例でリンパ球数、CD4PCD8N、CD3NCD19Pが減少し、CD4NCD8Pの上昇がみられた。CD16PCD56P、TCRγに変化はなかった。化学療法による影響は大きく直後よりダメージは出現し、とくにCD4PCD8N、CD4NCD8P、CD3NCD19P、の低下は著明で、施術前の状態に回復するのに2か月を要した。遺伝子変異はSSCP法にてp53および関連遺伝子を検索し現在解析中であるがその結果は第59回日本癌学会総会にて発表を予定している。
「発達・知能検査結果の伝え方」ガイドラインの作成～有効な発達障がい児支援のために

保護者ニーズを踏まえた「発達・知能検査結果の伝え方」ガイドラインの作成を目的として、療育機関を利用している子どもの保護者23名に対して再度の予備調査を行い、その後95名に対して本調査を実施した。また並行して、報告者である専門家11名に面接調査を行った。その結果、1日常用語と専門用語を並記して伝えていく2数値についても、十分な説明とともに伝えていく3具体的な支援方法を伝えていく等が確認された。現在も調査は継続しており、今後、両調査の結果を踏まえて、最終的にガイドラインを作成する予定である。近年の「発達障がい」への関心の高まりから、従来の臨床心理学の分野に留まらず、医療・教育・福祉・保健・司法・労働など、様々な関連分野で発達検査・知能検査が活用されている現状が最近はある。そして、これら関連領域においては、発達・知能検査などの「心理検査結果」の報告に関する工夫が報告者レベルで行われおり、論文や書物としての報告は極めて少ないものの、学会・研究会での発表や報告は散見される。この状況を踏まえ、「保護者への再予備調査」「保護者用調査票の作成」および「専門家への予備調査」「専門家用調査票の作成」にあたっては、関連領域における情報収集が不可欠であろうとの結論に研究代表者・研究分担者(以下、研究者ら)間で合意に至った。そのため、初年度である平成27年度については、これら関連情報の収集に先ずは取り組むことを加え、関連学会や専門家への直接的な聞き取りなどを研究者等で協力して行い、上述の「再予備調査」「予備調査」「調査票」における質問項目や質問内容について、改めて検討を行った。現在は、質問項目・質問内容についての検討を終え、「保護者への再予備調査」「専門家への予備調査」実施および「保護者用調査票の作成」「専門家用調査票の作成」に向けての準備を行っている段階である。また一方で、速やかに調査の実施に至るように、研究の円滑な実施に必要である「ノートパソコン」を購入し、「プリンタ」「統計解析ソフト」についても平成28年3月末時点で購入を既に購入を終えている。研究実績の概要で記したように、最近は臨床心理学以外の分野においても発達・知能検査などの「心理検査結果」の報告に関する発表や報告が散見される。そのため、より有効な発達障がい児支援を行っていくでのガイドラインを作成いるためには、関連分野の知見や情報を収集する必要性を感じた。当初は、研究者らの研究報告や臨床場面で得た知見を再検討して「保護者への再予備調査」「保護者用調査票の作成」および「専門家への予備調査」「専門家用調査票の作成」を行うという計画であったため、研究の進捗としては遅れを生じる結果となった。近年、発達障がい児に対して、発達・知能検査を実施する機会が増えたものの、検査結果の「伝え方」に関する研究は非常に少ない。そのため心理臨床の現場においては、検査の倫理規定を踏まえた上で、各報告者の創意工夫のもとに結果報告がなされており、当時者である保護者のニーズが十分に反映されていない実情がある。本研究では、これまでに我々が行なってきた結果報告における保護者ニーズ把握の予備調査結果をベースに、発達障がい児の保護者に調査を実施し、結果報告における当事者ニーズを明らかにする。並行して、報告者である専門家に結果報告の在り方に関する調査を行なう。以上の結果を統合し、保護者への実践を経て、「発達障がい児の保護者ニーズを踏まえた結果の伝え方」に関するガイドラインを作成する。平成28年度は、関連学会などで「心理検査結果の伝え方」に関する研究情報を更に収集するとともに、研究発表者との意見交換を行った。その後、以前に我々が実施した「結果報告における保護者ニーズ把握の予備調査」の質問紙調査項目を踏まえて、分担研究者とともに再予備調査項目を選定し、再予備調査のための質問紙を作成した。平成29年3月に、研究協力者の協力のもと、児童デイサービスを利用している発達障がい児(疑いを含む)の保護者40名に対して再予備調査を実施し、同意を得た23名から回答を得た。また報告者である専門家4名に対して、面接による聞き取り調査を実施した。研究スタート前は、関連研究の報告は皆無に等しい状況であったが、研究がスタートした頃より、関連するであろう考えられる研究発表がごく僅かではあるものの認められた。そのため、それら情報の収集や研究者との意見交換に時間を要する結果となった。近年の「発達障がい」への関心の高まりから、従来の臨床心理学の分野に留まらず、様々な関連分野で発達検査・知能検査が活用されている現状がある。しかしながら筆者らの先行研究においては、1結果報告に対する保護者の満足度が高くないこと、2報告内容に関して、保護者と報告者側の間には重要視する点に差異が認められることを見出したため、「保護者ニーズを踏まえた結果の伝え方」について検討した。児童デイサービスまたは放課後児童デイサービスを利用している子どもの保護者23名を対象として再度の予備調査を実施した。その後、質問項目についての検討を行い、児童デイサービスまたは放課後児童デイサービスを利用している子どもの保護者100名に対して本調査を行った。また並行して、報告者の立場にある専門家11名に対し、結果説明において重要視している点等について、面接による調査を実施した。再予備調査の結果では、個人間差や個人内差と密接に関係してくる数値についても十分な説明とともに伝えていくことや日常用語と専門用語を併記していくことの必要性などについて再確認した。