hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新規免疫機能評価系を用いた癌転移の治療標的の探索

昨今悪性腫瘍に対して免疫療法の有効性が数多く報告されるようになりましたが、オプジーボを始めとする抗体製剤は非常に高価であり、医療経済という観点から治療法の新たな戦略が望まれています。そこで、本研究はBiTEという特殊な抗体を用いて、腫瘍内微小環境を再現した新規評価系を構築し、既存の安価な薬剤からリンパ球の活性化を促すものをスクリーニングするという、ドラッグリポジショニングを目的に研究を開始しました。本研究により、vitro系スクリーニングで複数の薬剤がリンパ球を賦活化する可能性を発見し、興味深いことに同じカテゴリーの薬剤(抗菌薬)が特に複数検出されました。そのうちの一つの薬剤であるデメクロサイクリンに着目し、さらに賦活化するメカニズムとマウスモデルを用いたvivo系での評価をさらに進めていきました。その結果、デメクロサイクリンによりT細胞は、グランザイムやIFNγの産生を減弱するという質的効果と、T細胞の分裂を抑制するという量的効果があることが示されました。そしてこのデメクロサイクリンによるリンパ球の賦活化効果は、担癌患者から採取した腫瘍検体より抽出された腫瘍浸潤リンパ球に対しても同様に賦活化することが示されました。さらにマウスモデルを用いたvivo系でもやはりデメクロサイクリン投与による腫瘍の増殖抑制効果が示され、その増殖抑制はリンパ球depletionにより効果がキャンセルされることから、デメクロサイクリンはリンパ球を介して腫瘍に働きかけていることが示されました。ここまでの結果はvitro及びvivo共に単一の細胞株を用いて検討しているため、現在さらにマウスモデルに使用する腫瘍細胞株の種類を変えて、同様の効果が認められるかどうかを評価し、腫瘍の種類を問わずデメクロサイクリンは浸潤リンパ球の活性化が可能かどうかを検討しようと考えています。当初の計画では2年を目処に研究計画を立てていましたが、やや進捗が遅れていることは否定できません。しかし、研究全体の流れとしては概ね当初の計画通りに進んでおり、現在の細胞株変更による検討が終了すれば、論文化できるものと考えています。上記概要で述べましたように、これまでの結果はvitro(vitroではいくつか細胞株を変えた検討を行っておりますがまだ不十分です)及びvivo共に単一の細胞株を用いて検討しています。そのため、現在特にvivo系において、マウスモデルに使用する腫瘍細胞株の種類を変えて、同様の効果が認められるかどうかを評価し、腫瘍の種類を問わずデメクロサイクリンは浸潤リンパ球の活性化が可能かどうかを検討しようと考えています。当研究室ではBiTE(Bispecific T cell engager)を用いたTCR依存的なT細胞の抗腫瘍活性の評価系を開発した。本研究ではこの系を用いて、別の治療を目的に開発された既存薬の中から、腫瘍免疫を賦活化する薬剤をスクリーニングし、その中から特に有用なものを個別に解析することを目的としている。健常人PBMCを用いたスクリーニングで検出された薬剤の中には同系統のものが複数存在しており、その中でもテトラサイクリン系抗菌剤が5つ(テトラサイクリン、クロルテトラサイクリン、メクロサイクリン、デメクロサイクリン、ミノサイクリン)検出できた。特にデメクロサイクリンは他のものと比較して、SIADHといった感染症以外の治療薬としても使用されており、またT細胞がより強く賦活化されていることがわかった。賦活化されている証拠として現在、T細胞のインターフェロンγの産生、グランザイムBの産生、分裂能といった項目を評価し、薬剤投与により産生量増加、分裂促進をしていることが示された。また、健常人PBMCとして評価するだけでなく、CD8陽性T細胞のみを単離し、直接これらの効果がCD8単独でも観察できることを確認した。さらにそのCD8の中でも抗原特異的なT細胞が活性化されていることを、サイトメガロウイルスペプチドにより活性化を受けるT細胞クローンの増殖を評価することで確認した。そして、健常人PBMCだけでなく、肺癌組織中の癌微小環境において抑制されていると考えられる浸潤リンパ球でも、同様に上記の賦活効果が認められることを確認した。概要で述べた通り、本研究は別の治療を目的に開発された既存薬の中から、腫瘍免疫を賦活化する薬剤をスクリーニングし、その中から特に有用なものを個別に解析することを目的としているが、研究初年度は末梢血PMBCを用いたin vitro環境での薬剤効果を主に解析することを目標とし、腫瘍検体が集まれば肺癌組織中の浸潤リンパ球を用いた解析も行うことを予定していた。現在PBMCを用いた研究はほぼ予定通り経過しており、腫瘍検体に関しては予想よりも得られた症例数(2例)が少なく、引き続き解析が必要であるため。

その結果、デメクロサイクリンによりT細胞は、グランザイムやIFNγの産生を減弱するという質的効果と、T細胞の分裂を抑制するという量的効果があることが示されました。そしてこのデメクロサイクリンによるリンパ球の賦活化効果は、担癌患者から採取した腫瘍検体より抽出された腫瘍浸潤リンパ球に対しても同様に賦活化することが示されました。さらにマウスモデルを用いたvivo系でもやはりデメクロサイクリン投与による腫瘍の増殖抑制効果が示され、その増殖抑制はリンパ球depletionにより効果がキャンセルされることから、デメクロサイクリンはリンパ球を介して腫瘍に働きかけていることが示されました。ここまでの結果はvitro及びvivo共に単一の細胞株を用いて検討しているため、現在さらにマウスモデルに使用する腫瘍細胞株の種類を変えて、同様の効果が認められるかどうかを評価し、腫瘍の種類を問わずデメクロサイクリンは浸潤リンパ球の活性化が可能かどうかを検討しようと考えています。当初の計画では2年を目処に研究計画を立てていましたが、やや進捗が遅れていることは否定できません。しかし、研究全体の流れとしては概ね当初の計画通りに進んでおり、現在の細胞株変更による検討が終了すれば、論文化できるものと考えています。現在テトラサイクリン系抗菌薬の中で、特にデメクロサイクリンについて解析を行っているが、同様の解析をその他の同系統薬剤でも行うことで単一薬剤としての効果ではなく、同系統で同様の作用があることを示すことにつながると考える。また、腫瘍検体に関しては少なくとも5症例は必要と考えるため、引き続き検体の収集に努め、さらなるデータ集積を試みる。そして、上記in vitroでの解析だけでなく、今後はさらにマウスの腫瘍モデルに対して、薬剤が効果を示すかを検討する予定である。上記概要で述べましたように、これまでの結果はvitro(vitroではいくつか細胞株を変えた検討を行っておりますがまだ不十分です)及びvivo共に単一の細胞株を用いて検討しています。そのため、現在特にvivo系において、マウスモデルに使用する腫瘍細胞株の種類を変えて、同様の効果が認められるかどうかを評価し、腫瘍の種類を問わずデメクロサイクリンは浸潤リンパ球の活性化が可能かどうかを検討しようと考えています。本年度は当研究室内に物品の在庫が十分にあったため、予想より物品代が低く抑えられたが、今後はマウスを用いたin vivo実験が多くなるため、1回の実験でまとまった額が必要になることが予測される。理由)研究を進めていく上で、必要に応じて研究費を執行したため当初の見込み額と執行額は異なった。使用計画)概ね当初の研究計画の方向に沿って研究を進めるが、今年度までの結果をふまえ、細かい点で作業の進め方に関して変更を加えた形で実験を行う予定である。
術後痛に対するモノアミン選択的再取り込み阻害薬の鎮痛作用とその機序の解明

セロトニン(5-HT)とノルアドレナリンは、脊髄後角で侵害受容の制御に重要な役割を果たしている。抗うつ薬であるSNRI(serotonin-noradrenaline reuptake inhibitor)は脊髄で鎮痛作用を発揮する可能性がある。本研究ではラットの術後痛モデルを用いて、SNRI(ミルナシプラン)の感覚過敏抑制作用を検討した。動物モデルは、雄SDラットの左後趾足底、かかとの部分に1cmの切開を入れて作成した(Brennan et al.,1996)。逃避閾値をvon Frey filamentsによって測定し、薬剤はすべて髄腔内投与した。ミルナシプランは投与量依存性に切開後の感覚過敏を抑制し(EDso=2.93μ9)、その作用はidazoxan(_2受容体拮抗薬)とmethysergide(5-HT受容体拮抗薬)によって拮抗されたが、naloxoneでは拮抗できず、morphineとの相互作用をisobologramで検討したところ相乗的であった。またミルナシプランの髄腔内投与は、ラット神経因性落痛モデル(SNL)に対しても抑制作用があり、その効果はatropineで完全に拮抗できたが、術後痛モデルに対しての感覚過敏抑制作用はatropineで拮抗できなかった。以上より、SNRIの髄腔内投与は術後痛に対して有用であるが、神経因性痙痛を抑制する機序とは異なっていることが示唆された。ラット神経因性疼痛モデル(Chungモデル)および術後痛モデルを用いて新しいタイプの抗うつ薬である、セロトニン・ノルアドレナリン再取り込み阻害薬(SNRI)のmilnacipranが脊髄で抗アロディニア作用・鎮痛作用を示すか調べた。動物は雄性Wistarラットを用いた。まずChungの方法に準じてラットの腰部脊髄神経を結紮し、神経因性疼痛モデルを作成した。術後2週間目にvon Freyfilamentを用いて、逃避閾値を測定した。閾値が4g以下すなわちアロディニアを認めたラットに対して、麻酔下に髄腔内カテーテル(32Gポリウレタン製)を先端が腰膨大部にくるように8.0cm挿入し留置した。このカテーテルで、薬物投与の標的となる脊髄に機械的損傷や炎症性変化を極力与えないようにするため、カテーテルとして十分に細い素材を選び、挿入の仕方を工夫した。カテーテル挿入1週間後、神経学的異常を示さないラットに薬剤をこのカテーテルより投与した。また、脊髄神経を結紮しないラットに対して同様にカテーテルを挿入し、1週間後にBrennanらの方法にしたがって術後痛モデルを作成し、薬剤を投与した。milnacipranを1-30μgを投与し、その後数時間にわたって逃避閾値を測定し、投与量-反応曲線を作成した。その結果、milnacipranはラット神経因性疼痛モデルに対して、脊髄で強力な抗アロディニア作用を容量依存性に示すことが明らかとなった。また、ラット術後痛モデルに対しても、milnacipranは強力な鎮痛作用を示すことが明らかとなった。
粗面小胞体内における変異分泌蛋白の分解に関与するプロテアーゼの研究

分泌蛋白であるアルファ2プラスミンインヒビター(α2-plasmin inhibitor、以下α2Plと略す)の欠損症家系の解析により、1塩基の挿入によるフレームシフトにより、C末端の12個のアミノ酸が178個の別のアミノ酸に置換が確認された。これまでの研究により、変異分泌蛋白は粗面小胞体の膜を通過して、膜内に移行するが、粗面小胞体の内に留まることが確認されている。今回は、粗面小胞体を用いて小胞体内に留まる変異蛋白の分解メカニズムあるいは分解に関与するプロテアーゼについて研究した。正常そして、変異α2PlcDNAを、T7のプロモーターを上流に持つベクターpBlueScriptに挿入した。T7のプロモーターを利用して、mRNAを合成し、^<35>S-メチオニン、アミノ酸混合物(メチオニン抜き)、粗面小胞体を加え、ウサギの網赤血球ライセートを用いたin vitro translationの系にて、翻訳を行い、蛋白合成させた。シグナルぺプチドがはずれたバンドの他に、糖鎖付加部位が4ヵ所に付加された、計5本のバンドが確認された。正常は全く分解されなかったが、変異蛋白は、30分から1時間で分解された。変異蛋白(α2Pl-Naraなど)の分解は、セリンプロテアーゼのインヒビター(TPCKやTLCKなど)により抑制された。同時におこなったstable cell lineの実験では、変異蛋白は分解され、カルネキシンとの結合がみられた。ユビキチンを介するプロテアソームの関与は確認できなかった。分泌蛋白の一つであるアルファ2プラスミンインヒビター(α2-plasmin inhibitor、以下α2PIと略す)は、線溶系の重要な因子である。日本における一家系の異常は、1塩基の挿入によるフレームシフトにより、C末端の12個のミノ酸が178個の別のアミノ酸に置換される。変異分泌蛋白は粗面小胞体の膜を通過して、膜内に移行するが、粗面小胞体の内に留まる。今回の研究は、粗面小胞体を用いて、変異蛋白の分解メカニズムについて研究した。1)コンストラクトの作製と粗面小胞体の分離精製正常のα2PIのcDNA、そして、変異を導入したα2PIのcsDNA(α2PI-Nara)を、T7のプロモーターを上流に持つベクターpBlueScriptに挿入した。粗面小胞体の分離精製は、WalterおよびBlobelらの方法に従い、犬の膵臓より精製した。T7のプロモーターを利用して、キャップが付いたmRNAを合成した。mRNAを、ウサギの網赤血球ライセ-トを用いたin vitro translationの系にて、翻訳を行い、蛋白合成させた。網赤血球ライセ-トに、^<35>S-メチオニン、アミノ酸混合物(メチオニン抜き)そして粗面小胞体を加え、25°Cにて40分反応させた。40分の反応後、RNaseを添加して、蛋白合成を停止させ、移行した蛋白の分解について、時間経過を追ってみた。粗面小胞体を加えることにより、バンドが4本みられた。これは小胞体内に移行するときに、シグナルペプチドが切れ、内部で糖鎖の付加が行われていることを示している。作用時間を変えて変異蛋白の易分解性を検討してみると、正常蛋白ではバンドの濃さは変わらないが、変異蛋白では1-2時間以内に分解されることが確認された。3)インヒビターの影響変異蛋白(α2PI-Nara)の分解に関与しているプロテアーゼについて、セリンプロテアーゼのインヒビター(TRCKやTLCKなど)システインプロテアーゼのインヒビター(ALLNやALLMなど)を添加して、分解を抑制するかについては、現在検討中である。線溶系に重要なアルファ2プラスミンインヒビター(α2-plasmin inhibitor、以下α2PIと略す)の欠損症症例の解析にて、1塩基の挿入によるフレームシフトが確認された。、

変異分泌蛋白は粗面小胞体の膜を通過して、膜内に移行するが、粗面小胞体の内に留まることが確認されている。また、作年度の研究により、正常そして、変異α2PIcDNAを、T7のプロモーターを上流に持つベクターpBIueScriptに挿入して、mRNAを合成し、^<35>S-メチオニン、アミノ酸混合物(メチオニン抜き)、粗面小胞体を加え、ウサギの網赤血球ライセートを用いたin vitro translationの系にて、翻訳を行い、蛋白合成させることができた。シグナルペプチドがはずれたバンドの他に、糖鎖付加部位が4ヵ所に付加された計5本のバンドが確認された。翻訳された蛋白が確実に粗面小胞体のなかに移行しているこも明かにすることができた。今回は、粗面小胞体を用いて小胞体内に留まる変異蛋白の分解についてさらに研究した。正常は全く分解されなかったが、変異蛋白は、30分から1時間で分解された。変異蛋白(α2PI-Naraなど)の分解は、セリンプロテアーゼのインヒビター(TPCKやTLCKなど)により抑制された。他のシステインプロテアーゼのインヒビターでは分解は抑えられなかった。同時におこなったstable cell lineの実験では、変異蛋白は分解され、カルネキシンとの結合がみられたが、ユビキチンの結合は確認できなかった。
大規模データベースからの例外的ルールの発見に関する研究

例外的ルールは,常識的な知識を表す通常的ルールに対する例外を表すものであり,他のルールに比較して知られていない可能性が高いために,きわめて有用となる場合がある.本研究では,主に次の3点について検討し,大規模データベースから領域固有のモデルや知識を用いずに例外的ルールを発見する手法を考案した.1.例外的ルールの知識表現形式例外的ルールと対応する通常的ルールを確率的に成立するプロダクションルールで表現し,それらの組ルールペアを発見対象の知識表現形式とした.この知識表現形式は,領域知識に依存せず,発見過程が効率的でありなおかつ発見対象としても汎用的で興味深いという利点がある。2.情報理論的評価規準まず,確率的プロダクションルールの潜在的有用性を,ITRULEシステムを開発したSmythらに習い,その圧縮情報量で評価することにした.次に,発見対象となるルールペアの評価規準として,通常的ルールの圧縮情報量と例外的ルールの圧縮情報量の積で定義される圧縮情報量積規準を提案した.この規準は,それぞれのルールの良さを適切に考慮し,各ルールの一般性,安定性,意外性を,領域情報に依存せず統一的かつ定量的に評価するものである.3.効率的アルゴリズム圧縮情報量積規準についての理論的な解析の結果,計算結果を変えずに,条件によっては20倍以上の高速化を可能にする新しい分枝限定法を考案した.以上の手法に基づき,計算機上にプロトタイプシステムを構築し,さまざまなデータベースに適用することによってその有効性を実験的に確認した.例外的ルールは,常識的な知識を表す通常的ルールに対する例外を表すものであり,他のルールに比較して知られていない可能性が高いために,きわめて有用となる場合がある.本研究では,主に次の3点について検討し,大規模データベースから領域固有のモデルや知識を用いずに例外的ルールを発見する手法を考案した.1.例外的ルールの知識表現形式例外的ルールと対応する通常的ルールを確率的に成立するプロダクションルールで表現し,それらの組ルールペアを発見対象の知識表現形式とした.この知識表現形式は,領域知識に依存せず,発見過程が効率的でありなおかつ発見対象としても汎用的で興味深いという利点がある。2.情報理論的評価規準まず,確率的プロダクションルールの潜在的有用性を,ITRULEシステムを開発したSmythらに習い,その圧縮情報量で評価することにした.次に,発見対象となるルールペアの評価規準として,通常的ルールの圧縮情報量と例外的ルールの圧縮情報量の積で定義される圧縮情報量積規準を提案した.この規準は,それぞれのルールの良さを適切に考慮し,各ルールの一般性,安定性,意外性を,領域情報に依存せず統一的かつ定量的に評価するものである.3.効率的アルゴリズム圧縮情報量積規準についての理論的な解析の結果,計算結果を変えずに,条件によっては20倍以上の高速化を可能にする新しい分枝限定法を考案した.以上の手法に基づき,計算機上にプロトタイプシステムを構築し,さまざまなデータベースに適用することによってその有効性を実験的に確認した.
培養心膜細胞におけるヒアルロン酸生合成の調節機序に関する研究

ウサギ心膜腔から心膜細胞(中皮細胞)の培養系を確立し、生理活性物質によるヒアルロン酸(HA)合成の調節機構ならびに生理的意義を解明することを目的として本研究に着手した。明かとしたHA合成の促進経路としては以下のものがあげられる。1.受容体のチロシンキナーゼを介する経路(1)ウサギ心膜細胞にインシュリン様増殖因子-I(IGF-I)(10-500ng/ml)、あるいは、上皮増殖因子(EGF)(10-500ng/ml)を添加すると、HA合成、ヒアルロン酸合成酵素(HASase)活性共に濃度依存的に増大した。しかし、インシュリン様増殖因子-II(IGF-II)(600ng/ml)ではこのような作用は認められなかった。(3)チロシンキナーゼの特異的阻害剤ゲニステインにより、IGF-I、EGFによるHA合成の促進は有意に抑制された。(4)IGF-I、EGFの受容体の細胞内ドメインにはチロシンキナーゼ活性を有すドメイン構造が存在するが、IGF-IIの受容体にはそのような構造は存在しない。以上の実験事実に基づいて、IGF-IとECFの様なHA合成の促進には、増殖因子の受容体のチロシンキナーゼを介する情報伝達系が関与することが示唆された。チロシンキナーゼ活性化以降、HA合成を導く過程に関しては現在不明で、今後の課題といえる。2.プロスタグランジンE_2(PGE_2)などによるcAMPを介する経路(2)PGE_2(1000ng/ml)で心膜細胞を処理すると、細胞内cAMP量は、5分間で、約7倍に上昇した。(3)アデニル酸シクラーゼ阻害剤(2',5'-dideoxyadenosine)、及びプロテインキナーゼ(PK)A阻害剤(PKI5-24)によりPGE_2によるHA合成の促進は有意に抑制されたが、PKC阻害剤(H-7)では抑制されなかった。(4)細胞内cAMP量を上昇させる試薬(Bt2-cAMP,forskolin等)によってもHA合成が促進された。以上、心膜細胞が産生、遊離するPGE_2によるHA合成は、cAMPを介する細胞内情報伝達系を介して作動することが示唆された。ウサギ心膜細胞において、少なくとも受容体の異なる上述の二つのHA合成を促進する細胞内情報伝達経路の存在について提示することができた。1.ウサギ心膜腔からmesothelial細胞を分離培養する方法を確立した。2.この細胞を用いてIGFーI(インシュリン様成長因子ーI)とEGF(上皮成長因子)のヒアルロン酸合成に対する併用効果の有無を調べた。心膜細胞に対してIGFーIとEGFを同時に併用処理すると,IGFーI,あるいは,EGF単独処理の場合と比べてヒアルロン酸合成,ヒアルロン酸合成酵素活性ともに相乗的に増大した。しかし,硫酸化されたグリコサミノグリカン合成に対しては作用を示さなかった。3.IGFーIとEGFの受容体の細胞内ドメインには受容体型

チロシンキナ-ゼが存在する。そこで,チロシンキナ-ゼに特異的な阻害剤ゲニステインで細胞を前処理したところ,これらの成長因子により惹起されるヒアルロン酸合成,ヒアルロン酸合成酵素活性の増大は阻害された。また,ゲニステインそれ自体にはヒアルロン酸合成酵素活性を直接阻害する作用は認められなかった。本研究から,本細胞にはIGFーIとEGFの併用によりヒアルロン酸合成が相乗的に増大する細胞応答が認められ,その応答にはIGFーIとEGFの受容体に存在するチロシンキナ-ゼ系の情報伝達がかかわることを初めて示唆することができた。表面を単層扁平上皮性の中皮細胞で覆われている心膜は,心膜腔を形成して,その中に心膜液を貯えている。最近,心膜がプロスタサイクリン,プロスタグランジンE_2やヒアルロン酸を生合成することが判明し,生理学的にも極めて重要な役割を有する組織であることが,明らかになってきた。本年度は、ウサギ心膜腔より分離培養した心膜細胞を用いて,ヒアルロン酸合成に対するプロスタグランジンE_2(PGE_2)の作用を調べ,以下の研究成果を得た。1)ウサギ心膜細胞にPGE_2を添加すると,ヒアルロン酸合成は濃度依存的に促進されたが,PGI_2,PGF_<2α>では,かかる作用は認められなかった。2)PGE_2(1000ng/ml)で心膜細胞を処理すると,細胞内サイクリックーAMP(cーAMP)量は,5分間で約7.1倍に上昇した。3)アデニル酸シクラ-ゼ阻害剤(2',5'ーdideoxyadenosine)及びPKA阻害剤(PKI5ー24)により,PGE_2によるヒアルロン酸合成促進作用は、有意に抑制されたが,PKC阻害剤(Hー7)では抑制されなかった。4)細胞内cーAMP量を上昇させる試薬(ジブチルーサイクリックAMP,forskolin等)によってもヒアルロン酸合成が促進された。以上,ウサギ心膜細胞が産生,遊離するPGE_2は,cーAMPを経由する細胞内情報伝達系を介して,ヒアルロン酸合成を促進することを明らかにした。表面を単層扁平上皮性の中皮細胞で覆われている心膜は、心膜腔を形成し、その中に心膜液を貯えている。最近、心膜がプロスタサイクリン,プロスタグランジンE_2(PGE_2)やヒアルロン酸(HA)を生合成することが判明し、生理学的にも極めて重要な役割を有する組織であることが次第に明らかになってきた。前年度に、ウサギ心膜細胞が産生・遊離するPGE_2は、cAMPを経由する細胞内情報伝達系を介してHAを合成促進する事を明らかとしたので、最終年度の本年度は、残りの課題について検討を加え、以下の研究成果を得た。ウサギ心膜腔より分離培養した心膜細胞を用いて、本細胞にIL-1Bを添加すると、血清存在下ではIL-1Bの濃度を0.25V/mlから2V/mlと増大させるとPGE_2の産生は促進されたが、血清非存在下では促進されなかった。このことは、IL-1Bと血清中の因子の相互作用によりPGE_2産生が促進されている可能性と血清によりIL-1受容体の発現が保持され反応する可能性のいずれかが考えられる。いずれにせよ、心膜炎などの病態時にIL-1等でPGE_2が異常に産生亢進し、それにより心膜細胞のCAMPを経由する経路を介して1gで6lの水を吸収、水和する能力のある高分子HAが合成促進される可能性は充分考えられる。本研究は、これまで不明であった心液貯留現象の因果関係の一端を生化学的に説明する根拠を与えたものと考える。
異文化理解としての異質学-近代フランスにおける異文化理解の新動向とその限界

1.本研究は、バタイユの他者概念である"異質学"を検討して、異文化理解への新たな展望を切り開くことにむかった。その際に、単に"異質学"を操作概念として転用するのではなく、異文化を理解するうえでのこの概念の可能性と限界を認識し明示することに留意した。2.研究の対象として設定した分野、地域、年代は、芸術(とくに美術)であり、1860年のフランスを中心にしたヨーロッパである。異文化として特に注目したのは、近代西洋から見ての日本の江戸時代庶民文化である。具体的には、印象主義および新印象主義の画家(モネ、ゴッホ、スーラ、シニャック等)さらにアール・ヌーヴォーの装飾芸術家(エミール・ガレ)におけるジャポニスム(日本趣味)に第一に注目した。3.本研究の成果としては、上記の芸術家たちの作品に、バタイユの考える"異質学"(すなわち人間中心主義を離れて自然の内奥と交わろうとする姿勢)が先駆的に見られる点、および"異質学"的な姿勢が自然に根ざした日本の江戸時代庶民文化の深層を理解するうえできわめて有効である点を指摘しえたことである。この指摘によって従来のジャポニスム研究をいっそう深化させることができた。また"異質学"の限界については、ファシズムを、近代西洋にとっての内なる異文化(異質なるものを同質化する強力な政治システム)の出現と捉え、これに1920年代から30年代のバタイユの思想がうまく対処しえなかった点を指摘した。4.今後の研究の展開としては、"異質学"に立ってシニャック論を完成させるとともに、シニャック以降の現代アートに関して、広くその文化的な意義をフランス現代思想の他の概念に拠りつつ解明してゆく予定である。今年度の研究は次の二つに大別される。1)ジョルジュ・バタイユ(1897-1962)の「他者」の問題を、彼の初期の概念「異質学」に立ち返って解明してゆくこと。そしてこの「異質学」の概念が近代西欧とくにフランスにおける異文化理解の底流にある姿勢-すなわち異質なものに開かれた姿勢-とつながることを理解した。その成果は日本語論文「ジョルジュ・バタイユにおける他者の問題-ジャポニスムへの新たな解釈に向けて(前篇)」に発表した。2)19世紀後半のフランスにおける異文化理解の具体例として陶芸家エミール・ガレの日本理解を彼の実作にあたって把握すること。その際、ガレの自然観と日本人の自然観を対比させてその異同を理解すること。これらのために本年度は、松江北堀美術館へ赴いてガレの所蔵作品を精査し、また貴重な資料を入手した。その成果は、当時の日本人留学生高島北海(画家でもあった)の美意識、フランス象徴派の自然理解とあわせて、仏語論文「Galle, Takashima, et lapoesie symbeliste de la nature」にまとめ、フランスの雑誌Le Pays Iorrainへの掲載を決めた(現在校正をすませ、刊行されるのを待っている段階)。本研究は、バタイユの「異質学」の考え方を20世紀前半における異文化理解の新たな動向と捉え、この考え方を応用して、19世紀後半から20世紀前半にかけてのフランスのジャポニスム(日本趣味)およびケルト復興という異文化理解の現象を考察した。まずジャポニスムについては、19世紀のフランス風景画家たち(モネ、シニャック、ゴッホが中心)およびアール・ヌーヴォーの陶芸家(エミール・ガレ)に注目した。従来の研究では、彼らの内面化された日本趣味は等閑に付されていたが、本研究は、バタイユの概念を導入することにより、彼らの意識が、狂的な日本文化の深層にまで開かれていたことを明示した。

同様に、同じ手法でケルト文化復興運動にも注目して、この運動がナショナリズムを越える不合理な生命現象にまで開かれていたことを解明した。これらの成果は、日本およびフランスの学術誌、さらに日本での講演会で発表した。本研究のもう一つの特徴たる「異質学」の限界については、バタイユがファシズムという1930年代の新たな文化現象について不充分な考察を展開していたことを解明した。すなわち、不合理な民衆の情念が政治権力に吸収され、利用される様をバタイユが看過していたことを解明した。この成果については目下、論文を制作中である.
iPS細胞を用いた緑内障再生医療の開発

緑内障の再生医療を念頭に、iPS細胞から網膜神経節細胞および成体における網膜幹細胞であるミューラー細胞を分化誘導する方法の確立、網膜内のミューラー細胞の同定法の探索を行った。まずiPS細胞からの分化誘導を行うために、網膜前駆細胞マーカーであるRx遺伝子座に赤色蛍光タンパク質DsRedが発現する組換えBACを作成しipS細胞に安定導入した。また、ミューサー細胞を同定するためにマーカーを探索し、エピプラキンが該当することを見いだした。緑内障は、遺伝的要因や眼圧の上昇などの環境的要因により、網膜神経節細胞が細胞死を起すことにより発症する。申請者は主に、iPS細胞を網膜神経節細胞に分化誘導して移植する再生医療を研究しているが、生体内において自然に起こっている網膜神経節細胞の再生についても解析を行なっている。既にげっ歯類において、NMDAを投与して網膜神経節細胞死を誘導した時ミューラー細胞が幹細胞として働くことが報告されているが(Osakada et al.,2007)。しかし、その分子機構は不明である。そこで、申請者は、申請者自身が膵臓において幹細胞で発現していることをみいだしたEpiplakinl遺伝子が、NMDAを投与網膜においてどのような発現パターンをしめすかを調べた。その結果、胎児期においてEpipllkinlは網膜神経節細胞、ミューラー細胞を含む7種類の網膜細胞を分化する網膜幹細胞に発現しており、成体においてはNMDA投与前からミューラー細胞、双極細胞、網膜神経節に発現していた。NMDAを投与すると、ミューラー細胞における発現が上昇したことから、ミューラー細胞が幹細胞として働くために関与していることが示唆された。このことは、iPS細胞を網膜神経節細胞に分化誘導して移植するのではなく、ミューラー細胞に分化誘導したから移植することができることを示唆した。この成果は、Journal of Japanese Ophthalmology誌に報告するとともに、OIST Workshopにて発表した。2007年にヒトiPS細胞が樹立され、眼科領域においては加齢黄斑変性などの再生医療を念頭にiPS細胞から視細胞への高効率な誘導が積極的に行われている。しかしながら、日本においては網膜神経節細胞が変性する緑内障が失明原因の第1位であるにもかかわらず、再生医療の研究は進んでいない。そこで、緑内障の再生医療を念頭に、iPS細胞から網膜神経節細胞および成体における網膜幹細胞であるMuller細胞を分化誘導する方法の確立、網膜内のMuller細胞の同定法の探索を行った。iPS細胞から網膜細胞への分化誘導は、まずRx陽性網膜前駆細胞に分化誘導する必要があるため、申請者はRx遺伝子座に赤色蛍光タンパク質DsRedが発現する組換えBACを作成しiPS細胞に安定導入した。このiPS細胞を網膜前駆細胞に分化誘導した後DsRed陽性細胞をセルソーターで純化することには成功しており、現在、液性因子の添加や遺伝子導入による網膜神経節細胞への分化誘導を試みている。また本研究ではMuller細胞の分化誘導も試みているが、Muller細胞のマーカー分子はそれほど多くない。そこでミューラー細胞のマーカー探索も行った。膵臓の幹細胞マーカーであることが報告されているEpiplakin1遺伝子の網膜における発現パターンを調べたところ、Muller細胞において発現が検出された。よってEpiplakin1はiPS細胞からMuller細胞を分化弓道した際におけるマーカーとしても利用できることが明らかとなった。我が国において、緑内障は糖尿病網膜症とともに高齢者失明原因の上位を占め、今後さらなる増大が予想される。本研究によって、網膜変性疾患に対するiPS細胞を使用した再生研究が進展すれば、高齢化を迎える日本社会全体のQOLを向上させることが期待される。
溶液中における低分子量高分子の構造

溶液中における高分子鎖のコンフォメ-ションに関してはこれまで高分子量物について数多くの研究がなされてきたが,本研究では特に低分子量の高分子鎖のコンフォメ-ションに焦点をあてゝ解析を行ない,高分子量物との相異点,特殊性等を明らかにする事を目的とした。1.数平均分子量(Mn)=4000のポリスチレンとMn=2000のポリアクリル酸ソ-ダの高分子鎖の持続長は,高分子試料と同程度の711Aとなり,これらの高分子鎖のコンフォメ-ションは,分子量に関係なくみみず鎖モデル等の同一モデルで記述する事ができる。2.アセトン及びトルエン溶液中におけるアイソタクティック及びシンジオタクティックポリメチルメタクリレ-ト(iso.PMMA,iso.triad=85%及びSyn.PMMA,Syn.triad=90%)のコンフォメ-ションをX線小角散乱法によって得られた散乱関数に基づいて解析した。その結果,分子量1万以下の低分子量のiso.PMMAのコンフォメ-ションは,分子量の大きさに関係なくいわゆるみみず鎖モデルによって表現できるが,分子量1万以下のSyn.PMMAのコンフォメ-ションは,分子量が大きなものについてはみみず鎖モデルで記述できるものゝ,分子量が小さいものについてはこのモデルで記述できない事が明らかとなった。3.低分子量直鎖ポリエチレンの溶液中におけるコンフォメ-ションをθ条件下で明らかにするためにジフェニルメタン溶液について142°CでX線小角散乱の測定を行なった。その結果,分子量が1万以上ではランダムコイル鎖として挙動するが,それ以下に分子量が減少するにつれて,ランダムコイル鎖から棒状分子へと移行して行く事が,高分子鎖の回転半径と分子量の関係から明らかにされた。溶液中における高分子鎖のコンフォメ-ションに関してはこれまで高分子量物について数多くの研究がなされてきたが、本研究では特に低分子量高分子鎖のコンフォメ-ションのの高分子量物のそれとの相違点は、特殊性等の解析に焦点を絞って研究を行なっている。平成元年度においては立体規則性ポリメチルメタクリレ-トと直鎖ポリエチレンを取り上げたが、その結果、次の研究実績が得られた。1.アセトン及びトルエン溶液中におけるアイソタクティックポリメチルメタクリレ-ト(iso.PMMA,iso.triad=85%)とシンジオタクティックポリメチルメタクリレ-ト(sun.PMMA,syn.triad=90%)のコンフォメ-ションをX線小角散乱法によって得られた散乱関数に基づいて解析した。その結果、分子量約1万以下の低分子量のiso.PMMAのコンフォ-ションは、分子量の大きさに関係なくいわゆるみみず鎖モデルによって記述できるが、分子量が1万以下のsyn.PMMAのコンフォメ-ションは、分子量が大きなものについてはみみず鎖モデルで記述できない事が明らかとなった。2.日条件下における低分子量直鎖ポリエチレン(PE)のコンフォメ-ションを研究するために分子量200から2500程度までのPEのジフェニルメタン溶液について142°CにおいてX線小角散乱の測定を行なった。その結果、PEは、分子量が約1万以上の高分子量側ではランダムコイルとして振舞うが、それよりも分子量が小さくなるにつれてランダムコイルからはずれていく。このはずれ方は、回転半径と分子量の関係からも散乱関数の立場からもみみず鎖モデルでは説明できない事が明らかとなった。

1.数平均分子量(Mn)=4000のポリスチレンとMn=2000のポリアクリル酸ソ-ダの高分子鎖の持続長は,高分子試料と同程度の711A^^°となり,これらの高分子鎖のコンフォメ-ションは,分子量に関係なくみみず鎖モデル等の同一モデルで記述する事ができる。2.アセトン及びトルエン溶液中におけるアイソタクティック及びシンジオタクティックポリメチルメタクリレ-ト(iso.PMMA,iso.triad=85%及びsyn.PMMA,syn.triad=90%)のコンフォメ-ションをX線小角散乱法によって得られた散乱関数に基づいて解析した。その結果,分子量1万以下の低分子量のiso,PMMAのコンフォメ-ションは,分子量の大きさに関係なくいわゆるみみず鎖モデルによって表現できるが,分子量1万以下のsyn.PMMAのコンフォメ-ションは,分子量が大きなものについてはみみず鎖モデルで記述できるものゝ,分子量が小さいものについてはこのモデルで記述できない事が明らかとなった。3.低分子量直鎖ポリエチレンの溶液中におけるコンフォメ-ションをθ条件下で明らかにするためにジフェニルメタン溶液について142°CでX線小角散乱の測定を行なった。その結果,分子量が1万以上ではランダムコイル鎖として挙動するが,それ以下に分子量が減少するにつれて,ランダムコイル鎖から棒状分子へと移行して行く事が,高分子鎖の回転半径と分子量の関係から明らかにされた。
リングフィンガーを持つ新規遺伝子によるベーターカテニンを介したカドヘリンの制御

細胞間接着・細胞極性は器官形成と維持に極めて重要であり、これらの異常は骨組織や腎臓の発生や形態維持に大きな障害となる。細胞間接着・細胞極性を制御する代表的な遺伝子はWntのシグナル伝達のカスケードに属するベーターカテニンやカドヘリンである。我々はこの分野において変異マウスの解析から、上位からのシグナルを直接ベーターカテニンやカドヘリンに伝達する重要な分子であるMakorin1を発見した。1.Makorin1はWntのシグナル伝達に重要なベーターカテニンと同様にGSK3やCaseine Kinaseのリン酸化部位を持つ。そこでこれらのリン酸化部位に対しリン酸化特異的なモノクロナル抗体を作成し、Makorin1がどの様にWntのシグナルを直接ベーターカテニンやカドヘリンに伝え、骨組織や腎臓の器官形成にかかわっているかを解明した。また、GSK3やCaseine Kinaseのリン酸化を誘導する上位のシグナルも明らかにした。その結果、Makorin1はCaM kinaseのリン酸化によって細胞膜から遊離しGSKによるリン酸化によって核内に移行し転写調節をしていることが分かった。2.アフリカツメガエルを用いた実験からMakorin1は中胚葉の分化誘導と収斂進展の両方に関わる遺伝子であることが示唆された。現在cDNA chipを用いて標的遺伝子の同定を行っている。3.個体レベルでのMakorin1の機能を明らかにするためにMakorin1のノックアウトマウスを作成し表現型を解析している。現在キメラマウスを作成しその交配からアグーチマウスが生まれており、表現型の解析ができるところまで進んでいる。我々は骨密度の低下に伴う骨変形と嚢胞腎を特徴とする変異マウスを作成し、表現型の詳細な解析を行った。その結果、骨芽細胞の分化異常によって骨密度が低下すること、近位尿細管の遠位化や細管の拡張が起こることがわかった。これらはヒトに見られる嚢胞腎や骨粗鬆症の病態をよく反映していることを示していた。さらに我々はリングフィンガーモチーフを持つ原因遺伝子・Makorin1を同定した。Makorin1はベーターカテニンやカドヘリンと結合しWntシグナルのカスケードに位置する遺伝子で、骨細胞の分化、上皮細胞の極性・接着を制御する機能があることを明らかにした。生物の形づくりの設計図ボディープランの解明によって形態形成遺伝子群からなる「発生システム」ともいうべき発生プログラムが存在していることが明らかとなっている。中でもWntシグナルとその伝達機構は代表的な形態形成遺伝子群であり、体軸の決定、胚葉の組織、パターン形成、器官形成・再生などの諸過程で繰り返し用いられているだけでなく、様々な遺伝疾患や細胞のがん化と深く関連している。特にMakorin1はユビキチネースの機能をもつ新規のカスケードに位置するもので、Wntシグナルを伝達しベーターカテニンやカドヘリンの制御を通して器官の形成と維持に重要であることがわかってきた。Makorin1のmRNAをアフリカツメガエルの卵に注入した場合二次の軸の形成がみられ、一方モルフォリーノRNAでノックダウンした場合、原腸陥入後に発生が停止することが分かった。これらの事からもMakorin1はWntシグナルのカスケードにおいて重要な役割を果たすことが分かった。

そこでこれらのリン酸化部位に対しリン酸化特異的なモノクロナル抗体を作成し、Makorin1がどの様にWntのシグナルを直接ベーターカテニンやカドヘリンに伝え、骨組織や腎臓の器官形成にかかわっているかを解明した。また、GSK3やCaseine Kinaseのリン酸化を誘導する上位のシグナルも明らかにした。その結果、Makorin1はCaM kinaseのリン酸化によって細胞膜から遊離しGSKによるリン酸化によって核内に移行し転写調節をしていることが分かった。2.アフリカツメガエルを用いた実験からMakorin1は中胚葉の分化誘導と収斂進展の両方に関わる遺伝子であることが示唆された。現在cDNA chipを用いて標的遺伝子の同定を行っている。3.個体レベルでのMakorin1の機能を明らかにするためにMakorin1のノックアウトマウスを作成し表現型を解析している。現在キメラマウスを作成しその交配からアグーチマウスが生まれており、表現型の解析ができるところまで進んでいる。
エリシター誘導性過敏感細胞死のシグナル伝達と細胞周期制御機構の解析

エリシターが認識され過敏感細胞死(HR)が誘導される最初期に、細胞膜の脱分極と、細胞膜を介したCa^<2+>流入が誘導されることが明らかとなり、膜電位依存性Ca^<2+>チャネルが関与する可能性が示唆された。そこでタバコBY-2細胞やイネで発現する新規の膜電位依存性Ca^<2+>チャネル遺伝子を単離した。この遺伝子の過剰発現細胞では、エリシターに対する感受性が高まっており、逆にトランスポゾンの挿入変異によるノックアウト株の培養細胞では、エリシター誘導性のHR様細胞死が著しく抑制された。タバコBY-2細胞の発現抑制株では、エリシター誘導性のCa^<2+>動員とHRが共に著しく抑制された。これまで植物のCa^<2+>チャネル遺伝子の機能が解明された例はほとんどないが、本研究により単離したこの遺伝子は、エリシターなどの感染シグナルに対する感受性を決定し、HRシグナル伝達の制御の鍵を握る極めて重要な機能を担っている可能性が考えられる。細胞周期を同調させることにより高度に同調的なHR誘導系を構築し、植物においてこれまで全く未解明だった細胞死と細胞周期制御とのクロストークを解析した。細胞死は細胞周期依存的であり、エリシターシグナルはどの時期にも認識されるが、S期とG1期でエリシターが受容された時のみ細胞周期が停止し、その後に防御遺伝子の発現や細胞死が誘導される、すなわち植物のHR細胞死の誘導は細胞周期によって厳密に制御されていることが明らかとなった。そこで細胞死誘導に必要なエリシターシグナルの受容の性質を詳細に解析するため、エリシターの処理時間を変えて細胞死や防御関連遺伝子の転写誘導を解析した結果、HR細胞死誘導には、エリシターシグナルが持続的に受容されることが必要であることが明らかとなった。
知的障害者(児)のコミュニケーションを促進する支援技術機器の開発

1.比較的障害の重い知的障害者(自閉性障害者を含む)を対象にコミュニケーション及び生活支援を促進するための機器として、PDAによるVOCAを「ピクチャーエイド」として完成させた。障害のある人の個別のニーズに合わせカスタマイズ可能なものとして設計した。モニターによる実証実験を繰り返し、知的障害者に有効な形態と機能について検討を重ね、完成度の高いVOCAを作り上げた。プログラムは、「生活支援」、「ピクチャーボイス」、「ピクチャータイマー」、「ことばスロット」である。一方、市販のメッセージカードを活用したカード型VOCAについても、モニターによる実証評価を行ない、特に再生ボタンの改良版を作成した。2.特定の発話困難者専用の音モデルを作成することによって、実験的段階における発話困難者の音声認識技術利用の可能性を示すことに成功した。今後、さらに、多くの発話困難者の音声を収集する事が必要であり、特別な音響技術に関する知識がなくても、音声の収集が出来るツールを開発した。さらに、収集された音声から音モデルを構築できるツールも開発した。多くの発話困難者の音声が集まることによって、音モデル開発の可能性と範囲が広がるのは確実であり、音モデル開発の方向性を明らかにした。1.知的障害者(自閉性障害者を含む)を対象にコミュニケーション及び日常生活技術の習得を促進指導するための支援機器としてVOCA試作品を完成させた。VOCAはPDAによるものであるが、親等の支援者が利用者に反復学習させる内容や順序を編集するためにパソコンを使用しPDAの学習プログラムを適宜利用者のニーズに応じて変更できるものである。また、PDAの画面上には、利用者の注意を喚起するために絵や動画像を使用し、同時に音声、文字による表示を行うものである。今後、試作VOCAは附属養護学校に在籍する障害のある生徒・家庭等にも協力を得て、生徒が日常生活場面で実際に使用し、評価とプログラムの修正を行い、知的障害者に有効な形態と機能について検討する。さらに、利用者がより簡便に安価に使用できるために、市販のメッセージカードを改良し、簡易型カード型VOCAの試作品も作成した。2.知的障害者等の音声認識用音響モデルのトレーニング・データ収集システムを作成した。音声認識用の音響モデルを構築するためには様々な症例ごとに音声データをなるべく多量に収集する必要がある。そこで、知的障害者が興味関心を持ち取り組めるようゲーム性を持たせた音声収録システムとして作成し、収録された音声データを音響モデルの再トレーニングの基礎的なデータとして利用できるように、選別作業とラベリング作業を行えるものとした。3.VOCA作成の基礎研究として、健常児、学習障害児、軽度知的障害児を対象にアイカメラ(竹井機器工業製Free View平成14年度科学研究費補助金にて購入)を使用した検査を継続実施し、眼球運動や視覚的情報処理について心理生理学レベルでデータを収集・分析した。1.16年度に比較的障害の重い知的障害者(自閉性障害者を含む)を対象にコミュニケーション及び生活支援を促進するための機器としてVOCAの試作品を作成した。VOCAはカメラ付PDAによるもので、障害のある人の個別のニーズに合わせカスタマイズ可能な設計にするために、実際にモニター(知的障害者、自閉性障害者を対象)による実証実験を繰り返し、プログラムの修正や追加を行ない、知的障害者に有効な形態と機能について検討を重ね、完成度の高いVOCAを作り上げた。プログラムは、「生活支援VOCA」、「ピクチャーボイス」、「ピクチャータイマー」、「ことばスロット」である。一方、市販のメッセージカードを活用した簡易版カード型VOCAについても、モニターによる実証評価を行ない、スピーカー、ろぅおん・再生ボタン等の改良点を明らかにした。2.昨年度に作成した言語障害を有する知的障害者を対象とした音声認識用音響モデルのトレーニング・データ収集システムについて、予備実験をした後に、さらに知的障害者が興味を持って取組めるよう一部修正し、音声認識用の音響モデルを構築するために音声データを収録した。収録した音声データを音響モデルの基礎的なデータとして利用できるように、原波形の分析と処理を行ない、音声認識の第三段階である「言語処理」の準備を整えた。

障害のある人の個別のニーズに合わせカスタマイズ可能なものとして設計した。モニターによる実証実験を繰り返し、知的障害者に有効な形態と機能について検討を重ね、完成度の高いVOCAを作り上げた。プログラムは、「生活支援」、「ピクチャーボイス」、「ピクチャータイマー」、「ことばスロット」である。一方、市販のメッセージカードを活用したカード型VOCAについても、モニターによる実証評価を行ない、特に再生ボタンの改良版を作成した。2.特定の発話困難者専用の音モデルを作成することによって、実験的段階における発話困難者の音声認識技術利用の可能性を示すことに成功した。今後、さらに、多くの発話困難者の音声を収集する事が必要であり、特別な音響技術に関する知識がなくても、音声の収集が出来るツールを開発した。さらに、収集された音声から音モデルを構築できるツールも開発した。多くの発話困難者の音声が集まることによって、音モデル開発の可能性と範囲が広がるのは確実であり、音モデル開発の方向性を明らかにした。
国境離島における対外戦略についての研究

本研究はフィールドワーク調査に基づき、与那国町の状況を明らかにし、国境地域での存続のための地域戦略を検討した。与那国町は、30年以上、台湾の花蓮市との直接的な人的、物的交流を発展させようと試みてきた。だが、国家の規制、台湾の需要の低さなどから、経済的関係までには発展していない。一方で与那国町は、経済効果を狙って自衛隊基地の誘致を求めてきた。住民の激しい議論を経て、住民投票の結果、誘致を進めることになった。今後、議論で2分された地域が、どのように修復され、その上で、いかに国際的な交流を発展させるか。本研究では、今後の重要なプレイヤーを、歴史的記憶を巡って活性化している市民グループに見出した。今年度は、3度の現地調査、1回の講演を行い、現在、2本の報告書を作成中である。現地調査では、まず8月中旬には与那国町を訪れ、町長選挙を視察するとともに、自衛隊誘致の賛否についてヒアリングを行った。また9月上旬には沖縄県庁を訪れ、物流と観光の両面から、与那国町の台湾との関係を中心にヒアリングを行った。こうした国内での情報を踏まえ、2月下旬には台湾を訪れ、まず花蓮市公所で修学旅行中の与那国町の中学生の表敬訪問を視察し、観光の担当職員などから姉妹都市関係を中心に現状について聞いた。また、与那国町の通訳をつとめている元助役から、交流の実情についてヒアリングを行った。併せて、国立東華大學、県立図書館、県庁などで日本との交流関係の資料収集を行った。また、台北では、国立図書館において、日本総督府時代の統計資料を花蓮市関連のものを中心に収集した。これらの調査で、まず自衛隊の誘致については、反対は多いものの配備の可能性が高いこと、また花蓮市との関係については、姉妹都市としての友好関係は順調なものの、活発な経済交流にまではなかなか至らないことなどが明らかになった。こうした知見を通して、賛否で二分された与那国町の住民と自衛隊の誘致を進める与那国町との今後の関係について、さらに検討するという課題が残された。併せて、総督府時代からの歴史的関係に基づいた与那国町と花蓮市との市民レベルでの交流の可能性について検討することが、与那国町にとっての新たな対外戦略の一環になるのではないかという仮説を見出し、その検証という新たな課題が生じた。11月下旬には、本プロジェクトのこれまでの成果を勤務大学の公開講座で広く公表した。24年度は、主な研究対象である与那国町の自衛隊誘致についての現状の把握と、地域の実情に関する資料収集を中心に研究を進めるとともに、沖縄県の軍事基地全体での位置づけに努めた。そのため、まず8月に与那国町で関係者にヒアリングを行い、自衛隊誘致の賛成、反対の論点の把握に努めた。また、八重山地域の平和への歴史的経緯を知るため、石垣市の八重山平和祈念館で資料収集を行うとともに、沖縄県全体での与那国の実情を知るため、沖縄県庁、県立図書館等で資料収集を行った。同時に、自衛隊誘致が実現したときに生じるであろう軍用地の現状を知るため、沖縄本島の地主会などからヒアリングを行った。並行して、理論的文献、地域の実情の文献などの通読に努めた。本年度は、最終年度であり、最終報告に向け、与那国町と台湾において確認調査を行うとともに、これまでの成果に基づいて日本社会学会での中間報告を行った。まず、9月には、町議会選挙の視察を中心に与那国町における現地調査を行った。具体的には選挙活動、投票、開票などを視察するとともに、共同売店、アヤミハビル館などでヒアリングを行った。議員選挙は、野党が自衛隊誘致の是非を前面に押し出すのに対し、与党は政策全般を訴えた選挙であった。また、ヒアリングでは、基地建設による動植物に対する影響は少ないと町役場では判断していることなどが明らかになった。また、2月には、台北市で主に資料収集を中心に確認調査を行った。具体的には、沖縄県観光コンベンションビューローや日本交流センターなどを訪問するとともに、國家圖書館、國立臺灣圖書館などで資料収集を行った。とりわけ、与那国と姉妹関係にある花蓮市について、日本総督府時代の状況に関する状況を把握することができた。これらの調査を通じて、自衛隊誘致推進により住民の間に亀裂が生じたことが具体的に明らかになり、今後、その亀裂が地域社会にどのように影響していくのかを追尾する課題が生じた。