hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
霊長類うつ病モデルを用いた「セロトニン1Bレセプター仮説」の検証

それ以降は飽和状態に達し、一定の170 mL/kg前後の消費量を示した。また、%Preferenceにおいては0.25%スクロース水より90%に達した。このような結果から0.25%と1.0%のスクロース濃度がアカゲザルのうつ状態を把握する上で有用であると考えられた。さらに、摂餌量、摂水量、行動量を同時に測定できるように、実験室に個別ケージを壁に固定し、ビデオカメラを側面と天井面に設置し一頭ずつの個別の量が測定できる設備を構築し、これらの持続的測定に成功している。平成28年度の研究実施計画に記載したLPS惹起性うつ病モデルの作製に関してはうつ状態の行動学的評価であるスクロース嗜好性テストの甘味に対する選好性、摂餌量、摂水量、行動量の構築を試み、特にスクロース嗜好性テストにおいては濃度反応曲線の特定に成功している。現在LPSの用量、種類および種差による反応性の違いに関する詳細な文献研究を慎重に行い、投与実験を実施中であり、全体として研究がおおむね順調に進展していると考えられるため。本研究は側坐核・腹側淡蒼球におけるセロトニン1Bレセプターがうつ病の病因があるとういう「セロトニン1Bレセプター仮説」を検証することが最終目標である。平成29年度は行動評価系のスクロース嗜好性テスト(SPT)をさらに改良し一日で3濃度(0、0.25、1.0%)が実施できるシステムを構築し、ヒトでうつ状態を引き起こすことが知られているリポポリサッカライド(LPS)を投与し、その表面妥当性評価を行った。疾患モデル研究において最も重要な課題はどの濃度のスクロースを用いるかである。5%のように極端に高い濃度を用いることになれば、たとえうつ状態を呈していたとしてもスクロース水をより好むかもしれない。個体による変動を網羅的に捉えるために一日に3濃度を提示する戦略を選択した。前年度において描出したスクロース濃度ー反応曲線を基にし、0、0.25、1.0%の3濃度が選ばれた。最適な提示順序を見つけるために、6通りの提示を行い高い選好性と消費量などの観点から、0.25->1.0->0%スクロースの提示順序が快感喪失行動を標的とした研究においては最適であることが示唆された。LPSはグラム陰性菌の外膜の構成成分であり炎症反応を誘発するが、マウスへのLPS投与はうつ病様行動(砂糖水への選好性喪失や強制水泳法における無動時間延長)を引き起こすだけではなく、ヒトの静脈投与においては数時間後にうつ病評価尺度が上昇することが知られている。LPS処置による快感喪失行動の兆候を検出するために、7頭のマカクザルにLPSを投与し3時間後に行動評価した。その結果、すべての個体においてスクロース水摂取量の低下が認められたものの、スクロース水に対する選好性低下は2頭のみ観察された。この投与用量は人への投与用量と比較して極端に高いことから、げっ歯類より低い用量にて検討する必要性がある。「5-HT1Bレセプターの分布と発現量のin vivo解析」において陽電子放出断層撮影法(PET)を用いたLPS投与時の脳内状態評価において2頭実施した。
血管壁面におけるリポ蛋白の局所濃度に及ぼす流れの影響

粥状動脈硬化症などの肥厚性血管病が動脈血管系に限局的に発症するメカニズムを解明するために,肥厚性血管病を引き起こすコレステロールの担体である低密度リポ蛋白質(LDL)の輸送に着目した解析を行った.種々の血管形状において,血管内を流れる血液から血管壁へのLDLの輸送現象を数値シミュレーションにより解析し,血管壁へのLDLの取込み量に直接的に影響を及ぼす血管内壁面におけるLDLの濃度分布と動脈硬化の好発部位との関係について検討を行った.1.動物実験による検討家兎総頸動脈に紐で緩い軸対称の狭窄を施した後,低濃度のコレステロール食を与えて814週間飼育し,狭窄部近傍の組織構造の変化を調べた.その結果,狭窄部下流側に局所的に内膜肥厚が生じることがわかった.同程度の狭窄を有する血管形状モデルに基づいて流れとLDLの輸送計算を行った結果,壁せん断応力が低い部位を中心に内膜肥厚が生じ,そうした部位ではLDLの壁面濃度が局所的に高くなることがわかった.2.実形状モデルに基づく検討血管壁が局所的に肥厚したヒト右冠状動脈および端々吻合を施したイヌ大腿動脈を透明化し,血管形状および血管壁の厚さを測定した.得られた血管形状に基づいて血液の流れとLDL輸送の計算を行い,LDLの壁面濃度と血管壁の厚さとの関係について検討を行った.その結果,湾曲部内側や吻合部下流側などの壁せん断応力が低い部位で血管壁が肥厚し,その部位の直下でLDLの壁面濃度が局所的に高くなることがわかった.以上の結果から,肥厚性の血管病が好発する部位として知られている壁ずり応力が低い領域では,LDLの壁面濃度が高くなり,それにより肥厚性の血管病が発症・進展する可能性が強く示唆され,血管内壁面における選択的な物質透過性に起因するLDLの流速依存性濃縮現象が,肥厚性血管病が局在化するメカニズムに深く関与していることが明らかとなった.動脈硬化や内膜肥厚などの肥厚性の血管病を引き起こすコレステロールの担体である血液中の低密度リポ蛋白分子(LDL)の輸送に着目し,流れにともなう輸送現象と管壁のろ過作用による濃縮現象から決定される流体中の巨大分子の濃度場をモデル実験およびコンピュータ・シミュレーションにより調べた.1.モデル実験では,直径0.5μmのポリスチレン微粒子を懸濁した水溶液を,血管を模擬した直径6mmの真直ぐな透析用チューブ内に一定流量で流し,チューブの軸中心部に垂直に照射したレーザー光の透過光強度を測定して、流体中のポリスチレン微粒子の濃度変化を観測した.その結果,透析膜からの水透過速度を生体血管に近い値(6.2x10^<-6>cm/s)に設定した場合,壁せん断速度が1s^<-1>以下で粒子濃度が急激に上昇した.このことから,壁の水透過速度が極めて小さい場合でも,壁近傍の粒子濃度が流速に依存して変化することがわかった.2.コンピュータ.シミュレーションでは,壁面でのろ過作用を表わす境界条件下で輸送方程式を数値的に解くことにより,種々の流れ場で形成されるリポ蛋白の濃度分布について調べた.真直ぐな円管の場合,濃度境界層の発達にともない壁面上のLDL濃度が高くなり,同じ長さの血管の場合,流れが遅いほど,また,水透過速度が大きいほど壁面のLDL濃度が高くなることがわかった.また,壁面濃度は分子サイズによって異なる拡散係数の大きさに依存し,LDLの分子サイズ以上で,このような流速に依存した壁面濃度の変化が有意に現れることがわかった.さらに,軸対称の狭窄を有する血管や蛇行した血管に対して解析を行った結果,フローパターンに応じてLDLの壁面濃度が変化し,動脈硬化が起こりやすいとされている低壁せん断応力部でLDLの壁面濃度が局所的に高くなることが示唆された.粥状動脈硬化症などの肥厚性血管病が動脈血管系に限局的に発症するメカニズムを解明するために,肥厚性血管病を引き起こすコレステロールの担体である低密度リポ蛋白質(LDL)の輸送に着目した解析を行った.種々の血管形状において,血管内を流れる血液から血管壁へのLDLの輸送現象を数値シミュレーションにより解析し,血管壁へのLDLの取込み量に直接的に影響を及ぼす血管内壁面におけるLDLの濃度分布と動脈硬化の好発部位との関係について検討を行った.1.動物実験による検討家兎総頸動脈に紐で緩い軸対称の狭窄を施した後,低濃度のコレステロール食を与えて814週間飼育し,狭窄部近傍の組織構造の変化を調べた.その結果,狭窄部下流側に局所的に内膜肥厚が生じることがわかった.同程度の狭窄を有する血管形状モデルに基づいて流れとLDLの輸送計算を行った結果,壁せん断応力が低い部位を中心に内膜肥厚が生じ,そうした部位ではLDLの壁面濃度が局所的に高くなることがわかった.2.実形状モデルに基づく検討血管壁が局所的に肥厚したヒト右冠状動脈および端々吻合を施したイヌ大腿動脈を透明化し,血管形状および血管壁の厚さを測定した.得られた血管形状に基づいて血液の流れとLDL輸送の計算を行い,LDLの壁面濃度と血管壁の厚さとの関係について検討を行った.

その結果,湾曲部内側や吻合部下流側などの壁せん断応力が低い部位で血管壁が肥厚し,その部位の直下でLDLの壁面濃度が局所的に高くなることがわかった.以上の結果から,肥厚性の血管病が好発する部位として知られている壁ずり応力が低い領域では,LDLの壁面濃度が高くなり,それにより肥厚性の血管病が発症・進展する可能性が強く示唆され,血管内壁面における選択的な物質透過性に起因するLDLの流速依存性濃縮現象が,肥厚性血管病が局在化するメカニズムに深く関与していることが明らかとなった.
レセプトデータベース（NDB）を使った高齢者の医療資源の適正化の検討

我が国の高齢化率は年々上昇しており,平成30年高齢社会白書によると65歳以上人口は、3,515万人となり、総人口に占める割合(高齢化率)も27.7%である.高齢化による合併症の増加に伴い多剤併用(polypharmacy)が生じやすくなっており,多剤併用による医療費の増大と同時に有害事象の増加が懸念されている.本研究では,60歳以上の高齢者を対象として睡眠薬・抗精神病薬での多剤併用と骨折リスク,睡眠時無呼吸症候群患者の睡眠薬使用実態についてレセプトデータ(National DataBase)を用いて調査する.我が国の高齢化率は年々上昇しており,平成30年高齢社会白書によると65歳以上人口は、3,515万人となり、総人口に占める割合(高齢化率)も27.7%である.高齢化による合併症の増加に伴い多剤併用(polypharmacy)が生じやすくなっており,多剤併用による医療費の増大と同時に有害事象の増加が懸念されている.本研究では,60歳以上の高齢者を対象として睡眠薬・抗精神病薬での多剤併用と骨折リスク,睡眠時無呼吸症候群患者の睡眠薬使用実態についてレセプトデータ(National DataBase)を用いて調査する.
巨大情報からの超高速情報抽出アルゴリズムの研究

データが膨大である対象をあつかうための、高速アルゴリズムとその計算量の下界値に対して研究を行った。特に、対象となるデータのうちのごく一部、定数個しか見ないで問題を解くという定数時間アルゴリズムを中心に研究し、グラフの最大独立集合や最大マッチングのサイズの近似、外平面性の検査、疎性マトロイドのランクの近似、ナップザック問題の解の近似に対して、高速な定数時間アルゴリズムを与えた。また、線形下界値を示す技法をいくつか与えた。他に、ユニットディスクグラフを描画領域でパラメータ化し、いくつかの問題に対しFPTアルゴリズムと下界値を与えた。主にグラフの次数制限モデル上の準線形時間アルゴリズムについて研究をし、以下の成果を得た。まずグラフの節点を一様ランダム抽出し、その周りを探索することによって独立集合を求めるアルゴリズムについて、探索方法をランダム探索では無く、最良値探索を導入することで、従来のものより高速なアルゴリズムを得た。具体的には、節点数n、次数上限dのグラフに関して、極大マッチングの(1,εn)近似を0(d^4/ε^2)時間で得ることができる。これは2008年のFOCSでNguyenとOnakの与えた算法の計算時間が0(2^0(d)/ε^2)時間と、dに関して指数だったのを多項式にした点で画期的である。このアルゴリズムを用いることで、最小節点被覆の(2,εn)近似を同じ計算時間で得ることができるほか、さらに本アルゴリズムをサブルーチンとして用いることで、最大マッチングの(1,εn)近似をd^0(1/ε^2)(1/ε)^0(1/ε)時間で求めることができる。これは上記の従来算法ではガd^0(1/ε)時間であったものをやはり指数的に改善している。なお、このアルゴリズムの改良自体は単純であるが、その計算時間を正しく評価するのは難解であった。この結果はSTOC2009に採録され、高く評価されている。また、性質検査の下界値についても成果をあげた。この分野では有用な帰着法の開発が研究分野の進捗に対する重要な鍵となるが、我々はクエリ数を線形の範囲で保存する2種類の新たな帰着法である「強間隔保存局所帰着(strong gap-preserving local reduction)」と「強L帰着(strong Lreduction)」を提案し、それを用いて、「3辺彩色」「有向(無向)ハミルトン閉路」「3次元マッチング」「Schaeferの3SATの諸問題」の各問の次数制限版での検査がすべて線形数のクエリを必要とすることを証明した。まずグラフの次数制限モデル上の準線形時間アルゴリズムについて研究をし、以下の成果を得た。与えられたグラフが外平面グラフであるか否かを検査するO(ε^(-13)^(-6)+dε^(-2))時間のアルゴリズムを提案した。このアルゴリズムは与えられたグラフが外平面性を持つならば確率2/3以上で受理し、外平面性より遠ければ(ε遠隔ならば)確率2/3で拒否するという確率的アルゴリズムである(従って、その遠さを示すパラメータ0<ε〓1が計算時間に入る)。重要な点は、この計算時間はグラフのサイズとは無関係だという点である。すなわち、いかに巨大なグラフが与えられても常に同じ計算時間で結果を出すという定数時間アルゴリズムであり、ウェブグラフなど巨大なグラフに対して有効である。さらにこのアルゴリズムを修正することで、グラフが(外平面グラフの部分クラスである)カクタスであるか否かの検査も同じ計算時間で可能である。この結果はRANDOM2010に採録された。他には、ユニットディスクグラフの描画範囲を面積αの正方領域に収まっている場合、αをパラメータとしたパラメータ化計算量についても研究し、ハミルトン閉路問題とk彩色問題がFPT(つまりパラメータが小さいときには簡単に解ける問題)であり、最大独立集合問題と最小支配集合問題とがW[1]困難であることを示した。なお、これらの問題はパラメータαを与えなければ、ユニットディスクに限定してもNP困難であることが分かっている。この結果は、アドホックネットワークなどの比較的狭い領域に限定した無線ネットワーク上では、ハミルトン閉路問題やk彩色問題などは解きやすいということを意味している。グラフの次数制限モデル上の定数時間アルゴリズムについて研究をしている。現実の問題をグラフに定式化した場合、ほとんどの場合が疎になることが分かっており、次数制限モデルはたいへん重要な枠組みである。本年度は以下の成果を得た。グラフG=(V,E)は空でない任意の辺部分集合F⊆Eが|F|≦k|V(F)|-lを満たすとき(k,l)-sparseと言われる(ただしV(F)はFに属する辺に接続する頂点の集合)。(k,l)-sparseな辺集合を独立集合と看做すことでマトロイドが定義できる。これをG上の疎性マトロイド(sparsit ymatroid)と呼ぶ。

疎性マトロイドは、連結性、剛性、木のパッキングなど様々な重要な問題の共通の一般化であり、極めて重要な概念である。本研究において、疎性マトロイドのランクの定数時間近似アルゴリズムを与えた。このような一般性の高いマトロイドに対する定数時間近似アルゴリズムはこれまでには無く、定数時間アルゴリズムに対する極めて重要な一歩である。本結果は理論計算機科学の欧州最高の会議であるICALP2012(7月,Coventry, UK)に採録が決定している。また、ナップザック問題に対する定数時間近似アルゴリズムも構築した。ナップザック問題に対するε近似アルゴリズムは過去にも見つかっているが、線形より少ない時間でのアルゴリズムはこれまでには無かった。しかも過去に得られているNP完全問題に対する定数時間アルゴリズムはすべてグラフや論理式の次数を制限するなど、制限付きのものであったが、本アルゴリズムは一般のナップザック問題に対してε近似を定数時間で与えている。この結果は国際会議TAMC2012(5月,北京)に採録が決定している。
重症肝障害における多臓器不全発現と生体内各種マクロファージ機能

ガラクトサミン(GalN1g/kg体重)投与急性肝不全ラットではKupffer細胞のTLR4 mRNA発現は増強していたが,脾臓マクロファージ,肺胞マクロファージのTLR4 mRNA発現には変化がなかった。血清ALTはGalN投与後漸増し、これに平行して肝内TNF-αmRNA発現は増強し続けた。肝内TLR4 mRNA, CD14 mRNA発現も漸増した。次に、GalN(500mg/kg体重)およびLPS(E.coli O55:B55, 50μg/kg)を腹腔内投与してより重症な急性肝不全モデルをラットに作製したところ、24時間までに90%のラットは多臓器障害を伴う急性肝不全で死亡した。本重症急性肝不全モデルでは血清ALTは投与3時間後で著増し、24時間後にはさらに高値を示したが、肝内TNF-αmRNA発現は1時間後から増強し続けた。また、CD14 mRNA発現も1時間後から増強していたが、TLR4 mRNA発現は1時間後、3時間後は逆に抑制され、24時間後には前値に復した。一方、GalN+LPS投与直後にTLR4阻害剤E5564(1.0mg/kg体重)を投与しておくと肝障害は軽度にとどまるとともにラットは24時間後まで生存した。一方、非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)モデルラットでは線維化の軽微な早期からLevovist造影超音波後期相の造影能、latex beads食食能が低下する一方で、全肝TNF-αは増加し、肝内TNF-αmRNA、TLR-4 mRNA、CD14 mRNA発現はコントロール群に比して増強していた。以上の成績から急性肝不全、NASHモデルにおいて肝内TLR-4発現増強がみられ、innate immunityが肝障害の進展に関与している可能性が示唆された。平成15年度は、当初の予定通り、まずコントロールラットから各種マクロファージ(Kupffer細胞、脾マクロファージ、肺胞マクロファージ)を採取し、RPMI1640培地に浮遊して細胞数を調整した後、エンドトキシン添加、非添加条件下に各細胞を培養し、得られた細胞分画をTRIzol試薬で処理して総RNAを抽出し、それぞれについてRT-PCRを行って、β-アクチン、Toll-like receptor (TLR)4、TNF-αのmRNA発現を検討し、TNF-α産生量と対比検討した。なおcDNAはMMLV、ランダムプライマーを用いて作製した。その結果、TNF-αmRNA発現量はKupffer細胞、脾マクロファージ、肺胞マクロファージの順に多くなり、TNF-α産生量の成績と一致した。TLR4発現量はマクロファージ間で特に差を認めず、エンドトキシン刺激時に減少する傾向が認められた。一方TNF-αmRNA発現量はエンドトキシン刺激時に増加し、TLR4発現量との間に解離が認められた。次に各マクロファージのTNF-α産生に及ぼすEP-4受容体アゴニストの影響を検討した結果、EP-4受容体アゴニストはエンドトキシン添加、非添加両条件下でKupffer細胞、脾マクロファージのTNF-α産生を抑制することが明らかになった。今回の実験条件ではTLR4発現の検出感度になお問題が残ったため、次年度さらにこの点を改善した上で、TLR4発現とTNF-αmRNA発現の関係を解明し、続いて各種肝病態での検討に移る予定である。平成16年度は前年度の問題であったラット各種マクロファージ(Mφ)(Kupffer細胞、脾Mφ、肺胞Mφ)のTLR4発現検出のための最適条件を徹底的に検討した。

当初、細胞分画をTRIzol試薬で処理して総RNAを抽出する方法を取っていたが、これでは各種マクロファージから安定した収量のRNAを得にくく、内部標準としたβ-actin発現にもばらつきがみられた。このために種々工夫を加え、最終的にRN easy Mini Kitを用いることにより細胞収量をあげ、さらに安定した総RNA量の抽出のためにコラーゲンコートしたdishとplateを使用して安定した量の総RNA抽出が可能となった。次に各マクロファージの細胞数を5x10^5にそろえた場合、Kupffer細胞のTLR4 mRNA発現が非常に少なく検討しにくかったことから、Kupffer細胞については最大細胞数でも同時に実験を行うこととした。続いて、コントロールラットおよび急性エタノール投与ラットからマクロファージを採取してTLR4 mRNA発現、TNF-αmRNA発現を対比検討した。コントロールラットでは脾マクロファージ、肺胞マクロファージのTLR4mRNA発現、TNF-αmRNA発現は、Kupffer細胞に比して強く、LPS添加によりTNF-αmRNA発現は増強し、TLR4mRNA発現は減弱する傾向に合ったが、急性エタノール投与ラットでは一定の傾向が得られなかった。続いてガラクトサミン投与急性肝不全ラットでCD14 mRNAも加えて検討したところ、CD14とTNF-αmRNAは平行して動く傾向にあるが、TLR4 mRNAはこれらとは関係なく動き、肝障害の程度によりdynamicに変動することが判明した。来年度は慢性エタノール投与ラットにおける検討を追加し、急性肝不全ラットと対比しながらTLR4 mRNAの動態解析を行いたい。平成17年度は当初、慢性アルコール投与ラットおよび急性肝不全ラットにおいて各種マクロファージ(Mφ) (Kupffer細胞、肺胞Mφ、脾MΦ)のToll-like receptor (TLR)4、CD14、TNF-αmRNA発現を検討する予定であった。まず、慢性アルコール投与ラットでの実験を行ったが、急性エタノール投与ラットの場合と同様に一定の傾向が得られず、MφにおけるTNF-α過剰産生の原因としてTLR4の関与を証明できなかった。続いて、ガラクトサミン(GALN;1g/kg体重)投与急性肝不全ラットの実験ではCD14 mRNAとTNF-αmRNAは平行して増加する傾向にあったが、TLR4 mRNAはこれらとは関係なく変動した。これらの成績から、内因性エンドトキシン(LPS)刺激下の各臓器マクロファージのTNF-α産生は必ずしもTLR4 mRNAの発現量には依存しておらず、この時点でTLR4を介さない未知の系の存在が示唆された。しかし、これら一連の実験には常に各種Mφを一定条件で採取することの困難さ、Mφから安定した収量のmRNAを得ることの困難さがつきまとうものであったことから、より解析しやすい実験条件を求めて次に急性肝不全ラットの臓器全体でのTLR4、CD14、TNF-αmRNA発現を検討した。その結果、肝におけるTLR4、CD14、TNF-αmRNA発現は平行して増強していたのに対し、肺、脾では大きな変化はみられず、TLR4-αmRNA発現についてKupffer細胞の成績と肝全体の成績に解離がみられた。これらを踏まえ、MφのTLRとエンドトキシン処理機構の関係の検討にはさらなる手技の熟練と新しい手法の導入が必要と考えられた。
ユーザーインターフェイス評価におけるマルチメディア利用技術の研究

ユーザーインターフェイス設計の工学的手法を確立するための基礎技術の一つとして重要なのが、ユーザーインターフェイス設計評価である。ユーザーインターフェイスの評価方法としては種々あるが、本研究では、ユーザーが実際に計算機を使用した記録を計算機を利用して収集し、さらに収集した記録を自動的に解析するツールを作成することにより、ユーザーインターフェイス評価の信頼性と高め、かつ、簡単に評価が行なえる手法を確立することを目的としている。そのため,さまざまな形式の情報を収集し比較するのが,今年度の予定であった。結果として,デジタル情報の操作記録の収集解析部分は順調に進んだが,当初予定したビデオや音声やマルチメディア情報との統合は,予算の制約で機器が揃わず,あまり進展を見なかった。行なった研究報告1994年3月10日情報処理学会ヒューマンインタフェース研究会「X Windowにおけるユーザ操作記録の比較ツールの開発」来住伸子(津田塾大)(情報処理学会研究報告94-HI-53,pp.41-46に掲載)ユーザーインターフェイス設計の工学的手法を確立するための基礎技術の一つとして重要なのが、ユーザーインターフェイス設計評価である。行なった研究報告1994年3月10日情報処理学会ヒューマンインタフェース研究会「X Windowにおけるユーザ操作記録の比較ツールの開発」来住伸子(津田塾大)(情報処理学会研究報告94-HI-53,pp.41-46に掲載)
発達期における歯状回神経回路形成メカニズムの解明

申請者は、海馬歯状回に存在する苔状線維の一方向性回路の形成メカニズムを解明することを目的とし、研究を行ってきた。これまでに、苔状線維の特異的プレシナプスマーカーであるSynaptoporin (SPO)を用いた組織学的検討により、発達期の海馬歯状回において苔状線維が逆行性にも投射する可能性を発見している。投射様式をより直接的に観察するため、胎生期においてエレクトロポレーションを行い、顆粒細胞にGFPを発現させることを試みた。しかし、術後の仔マウスの生存率は低く、生存した個体でも顆粒細胞におけるGFPの発現は認められなかった。このため、エレクトロポレーション法による苔状線維の観察を断念し、昨年同様にThy1-mGFPマウスを用いて投射様式の観察・解析を行った。申請者は、「脳内免疫細胞であるマイクログリアが発達期において逆行性に投射する苔状線維を貪食・除去することで一方向性の投射が形成・維持される」という仮説を立て、検証を行ってきた。SPOシグナルとマイクログリアの関係性について詳細に検討するため、マイクログリアがGFPでラベルされたCX3CR1-EGFPトランスジェニックマウスを用い、免疫染色を行った。この結果、逆行性投射先である分子層において、マイクログリアのリソソーム内にSPOシグナルが取り込まれる様子が観察された。定量を行ったところ、発達初期において、異所性のSPOシグナルがマイクログリアにより活発に貪食されることが明らかとなった。さらに、マイクログリアとSPOシグナルの相互作用における分子メカニズムについて検討した。マイクログリアのCX3CR1受容体欠損マウスを用いて検討を行った結果、異所性SPOシグナルの消失の程度に変化は認められなかった。本研究により、発達期において苔状線維が逆行性に投射し、この逆行性投射がマイクログリアにより貪食・除去されることで歯状回神経経路が精密化される可能性が明らかとなった。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。申請者は、苔状線維が一方向性に投射する回路形成メカニズムを解明することを目的とし、研究を行ってきた。より詳細に検討するため、神経細胞の一部がGFPでラベルされたThy1-mGFPマウスを用い、発達期における苔状線維の投射様式を直接的に観察した。この結果、顆粒細胞から伸長した苔状線維が分子層に逆行性投射し、他の顆粒細胞に投射することを明らかにした。さらに、申請者は、脳内免疫細胞であるマイクログリアが発達期において逆行性に投射する苔状線維を貪食・除去することで一方向性の投射が形成・維持されるのではないかと考えた。この可能性について検証するため、SPOシグナルとマイクログリアの関係性について観察した結果、活性化型マイクログリアは発達初期において分子層に集積し、より活発に異所性の苔状線維プレシナプスを貪食することが示唆された。さらに、異所性SPOシグナルの消失におけるマイクログリアの必要性についてin vivo実験系を用いて検討した。マイクログリアの生存に関与するCSF1Rチロシンキナーゼ阻害薬であるPLX3397を発達初期のマウスに投与した結果、マイクログリアの密度が減少し、SPOシグナルが残存した。これらの結果から、発達初期における異所性の苔状線維プレシナプスの除去にはマイクログリアが必要であると示唆される。本研究により、発達期において苔状線維が逆行性に投射し、この逆行性投射がマイクログリアにより貪食・除去されることで歯状回神経経路が精密化されることが示唆された。当初の予定では胎生期マウスに対してウイルスインジェクションを行い、苔状線維を可視化する予定であったが、マウスの死亡率が高かったため中止した。代わりに神経細胞の一部にGFPを発現するThy1-mGFPマウスを用い、苔状線維の観察に成功した。

この結果、逆行性投射先である分子層において、マイクログリアのリソソーム内にSPOシグナルが取り込まれる様子が観察された。定量を行ったところ、発達初期において、異所性のSPOシグナルがマイクログリアにより活発に貪食されることが明らかとなった。さらに、マイクログリアとSPOシグナルの相互作用における分子メカニズムについて検討した。マイクログリアのCX3CR1受容体欠損マウスを用いて検討を行った結果、異所性SPOシグナルの消失の程度に変化は認められなかった。本研究により、発達期において苔状線維が逆行性に投射し、この逆行性投射がマイクログリアにより貪食・除去されることで歯状回神経経路が精密化される可能性が明らかとなった。Thy1-mGFPマウスでは、発達初期においてGFPを発現する顆粒細胞が少ないため、発達初期における苔状線維の投射様式を観察することが困難である。このため、今後は幼若期マウスにエレクトロポーレーションを行い、発達初期における苔状線維の可視化を試みる。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
リチウムイオンに対し高選択的錯体生成能をもつ光応答性クラウンエーテルの合成と構造

1、3-ビス「p-(2-クロロカルボニル)フェニル」プロパンを出発物質とし、これより数段階の反応でp,p-トリメチレン-ジシンナモイル-キャブド-2、n-ジアザクラウンエーテル(1)を合成した。次いで1の分子内[2+2]光環化によりシクロブタン-1、2-キャブド-2、n-ジアザクラウンエーテル(2)を得た(a:n=1b:n=).溶液中で1は>300nm光で2を、2に220nmの光を照射すると可逆的に1を生成し、光応答性クラウンエーテルとして働くことを見いだした。1aと1bはアルカリ、アルカリ土類金属および他の金属イオンとは錯体を生成しないのに対し、シクロブタン-1、2-ジカルボニル-キャプド-2、1-ジアザクラウンエーテル(2a)はリチウムイオンに対し高い選択性で錯体を生成することを見いだした。さらに、2aのリチウムチオシアネートおよび水銀(II)チオシアネートとの1:1錯体(3および4)を得た。次いでそれらのX腺回折を行い錯体の構造について詳細な知見を得た。3および4のシクロブタン環は少し歪んだβ型構造をしている。さらに錯体3ではリチウムイオンは二つのアミド基の酸素原子、二つのカウンターアニオンの窒素原子と結合し、少し歪んだ四面体配位をしている。また、4では水銀イオンは二つのアミド基の酸素原子、二つのカウンターアニオンのイオウ原子、さらに隣接分子のカウンターアニオンの窒素原子と結合し歪んだ三方両錐配位をしている。通常、クラウンエーテルはその環内に金属イオンを取り込む性質をもつのに対し、本化合物は金属イオンをクラウン環ではなくてアミド基のみで配位しており、このような錯体の生成例は少ない。今後は、上記の結果に基づき、さらにクラウンエーテルの構造を説計し、高度に特定イオン(特にリチウムイオン)に対し選択的に錯体生成能をもつ化合物を合成、検討する計画である。
機能的インナーセントロメア形成機構の解明

がん細胞に広く観られる性質である高頻度の染色体分配異常(染色体不安定性)は、細胞のがん化、がんの悪性化の引き金となることが示唆されているものの、その分子基盤については未解明の点が多い。本研究課題では、培養細胞を用いて染色体不安定性を引き起こす分子機構について解析を行った。その結果、分裂期の姉妹動原体間に形成されるインナーセントロメア構造の不安定化が、染色体不安定性を引き起こす要因であることが明らかとなった。また、インナーセントロメア形成に必須の分裂期キナーゼHaspinが、ヒト細胞においてコヒーシン複合体構成因子PDS5との結合に依存してセントロメアに局在することを見出した。染色体不安定性は、がん細胞において広くみられる性質である。また、がんの悪性度との相関が報告されており、がんの進行に関連すると考えられている。しかしながら、染色体不安定性を引き起こす分子メカニズムの理解は十分ではない。本研究により、染色体不安定性を示す種々の培養細胞株において、インナーセントロメアの構造異常が広く生じていることが見出された。この異常は、分裂期における微小管の異常安定化を通じて染色体分配異常を引き起こすことが明らかとなった。さらなる解析の結果から、セントロメアヘテロクロマチンの異常、およびコヒーシンの局在異常がインナーセントロメア構造異常を引き起こす主要な原因である可能性が示唆された。また、本研究で見出されたインナーセントロメアの構造異常は、培養細胞株のみならず、肺がん患者由来臨床検体においても観察された。今後は、セントロメアヘテロクロマチンを維持する分子機構を調べるとともに、より多くの臨床検体について解析を行う。多くのがん細胞は、染色体分配異常の頻度が高いことが知られている。染色体不安定性と呼ばれるこの性質は、細胞のがん化またはがんの悪性化の引き金となっていると考えられている。モデル動物において染色体の均等分配に関わる遺伝子に変異を導入することで、腫瘍の形成が促進されることも報告されている。しかしながら、実際のがん細胞において染色体不安定性が引き起こされる分子機構については未解明の点が多い。我々の研究結果から、シュゴシンタンパク質・オーロラBキナーゼを中心としたICSネットワークの不安定化が、染色体不安定性の主要な原因である可能性が示唆された。ICSネットワークの不安定化の原因について調べた結果、セントロメアにおけるヒストンH3K9me3レベルの低下が主要な原因であることが明らかとなった。また、コヒーシンの染色体への結合レベルの低下も原因となることがわかった。H3K9me3によって局在化するヘテロクロマチンタンパク質およびコヒーシンはそれぞれ直接的にシュゴシンタンパク質と結合し、セントロメアにおけるその安定化を促進していることもわかった。興味深いことに、ICSネットワークを人工的に安定化させた細胞では、染色体不安定性が抑圧された。また、ICSネットワークの不安定化は、肺がんの臨床検体においても観察された。これらの研究成果は、がんの進展を促す染色体不安定性のメカニズムを明らかにした重要な知見であるとともに、がん細胞特異的に不安定化しているICSネットワーク構成因子が分子標的薬のよいターゲットとなる可能性を示唆する。染色体不安定性細胞株におけるICSネットワークの不安定化について論文として発表することができたことは大きな成果であった(Tanno et al. Science 2015)。しかしながら、ICSネットワークを不安定化する分子基盤については未解明の点が多く残されている。また、実際の腫瘍検体におけるICSネットワークの解析についても解析が不十分である。これらの課題は急務であり、今後全力を挙げて取り組む。染色体不安定性(CIN)と呼ばれる高頻度の染色体分配異常は、がん細胞に広く観られる性質である。マウスモデルを用いた解析などから、CINが細胞のがん化およびがんの悪性化の引き金となることが報告されているものの、その分子基盤については未解明の点が多い。本研究課題において私たちは、培養細胞を用いてCINを引き起こす分子機構を調べた。その結果、シュゴシンタンパク質や染色体パッセンジャー複合体(CPC)の局在部位として知られるインナーセントロメア領域の構造異常が、CINの主要な原因となっていることが明らかとなった。この構造異常は、セントロメア領域におけるヘテロクロマチン構造の不安定化や、染色体接着因子コヒーシンの局在レベルの減少によって引き起こされることが示唆された。複数のがん抑制遺伝子が、インナーセントロメア構造を安定化させる役割を担っていることも見出した。分裂期キナーゼHaspinは、ヒストンH3のリン酸化を通じてインナーセントロメア形成を促進することが知られている。しかしながら、哺乳動物細胞におけるその局在の部位および制御機構については未解明であった。本研究課題において我々は、Haspinがコヒーシン構成因子PDS5に直接的に結合し、インナーセントロメア領域へと局在することを見出した。これらの研究成果により、正確な染色体分配を制御する分子機構およびCINの分子基盤の一端が明らかとなった。また、CIN陽性細胞特異的に不安定化しているインナーセントロメア構成因子が分子標的薬のよいターゲットとなる可能性が示唆された。

また、インナーセントロメア形成に必須の分裂期キナーゼHaspinが、ヒト細胞においてコヒーシン複合体構成因子PDS5との結合に依存してセントロメアに局在することを見出した。多くの染色体不安定性細胞株において、インナーセントロメアの構造異常が染色体分配異常の原因となっている可能性が示された。さらに、その主要な原因が、セントロメアヘテロクロマチンの異常およびコヒーシンの局在異常が原因であることも示唆された。セントロメアヘテロクロマチンを維持するメカニズムについてはまだ理解が不十分であることから、さらなる解析が必要である。また、臨床検体についてもより多くのサンプル解析を行い、本研究で見出されたインナーセントロメアの構造異常が、実際の悪性腫瘍においてどの程度生じているのかを明らかにする必要がある。ICSネットワークの不安定化が染色体不安定性細胞株においてひろくみられることから、種々のがん関連遺伝子がICSネットワークを制御する可能性について調べる。また、腫瘍検体におけるICSネットワークについてもさらなる解析を行う。細胞生物学インナーセントロメアタンパク質の免疫沈降産物について質量分析を行い、新たなインナーセントロメア構成因子を同定する。また、構成因子の解析を通じて、分裂期セントロメアヘテロクロマチンを維持する分子機構を解明する。また、悪性腫瘍検体の免疫染色を行い、インナーセントロメア構造異常の頻度を調べる。既知のがん遺伝子、がん抑制遺伝子とインナーセントロメア形成機構との関連についても解析を行う予定である。
明和九年刊書籍目録所載「奇談」書の研究

明和九年刊書籍目録所載「奇談」書76点の基本書誌データ作成を行った。国会図書館・天理大学附属図書館・早稲田大学附属図書館・筑波大学附属図書館・東京都立中央図書館・内閣文庫などの所蔵する文献を調査して補充し、一応現段階における可能な限りのデータ収集を終了し、『明和九年刊書籍目録所載「奇談」書の研究』(成果報告書)としてまとめた。報告書においては、これまで収集した、書誌データ・原本写真に基づき、各書目につき書名、書型・巻冊、編著者、刊年、板元、『割印帳』および『享保以後大阪出版書籍目録』における記述、概要、所見本書誌(詳細なデータを記載)・諸本などについて箇条書きにまとめた。従来の研究に負う所も少なくなかったが、網羅的な調査としてははじめてのものである。また、これらの調査結果を元として考察したことを研究発表・講演・論文の形で公にした。研究発表としては、2001年12月15日に、京都近世文学研究会において、「明和九年刊書籍目録所載「奇談」書について」と題して、これら奇談書のデータを簡略にしたものを報告し、かついくつかの「奇談」書を取り上げて、その特徴や内容を紹介した。ついて、2002年1月12日に、大阪大学国語国文学会において、「近世奇談の<場>」と題して講演をした。この講演では、(1)「奇談」の意味、(2)「奇談」集編成のための場の設定、(3)談義の場、(4)咄の場などについて考えるところを述べた。論文としては、「語文」78号(2002年6月刊行予定。大阪大学国語国文学会誌)に「「奇談」の場」と題して、講演の内容を元にまとめた。さらに、奇談書における宝暦五年の意味を考察する「談義本史の-齣-宝暦五年の談義本管見-」を現在、執筆中である。今後は、「奇談」作者および板元(その両者を兼ねるものもあるが)について追求し、より深めた形で研究を継続していく予定である。明和九年書籍目録所載「奇談」書76点に関係する研究文献目録の作成、同「奇談」書翻刻資料の網羅的収集、研究書・研究論文の網羅的収集を行い、仮基本データ・べースを作成した。仮基本データとは、書名・巻冊・編著者・刊年・版元・翻刻・国書総目録および古典籍総合目録の所在情報、先行研究文献、日本古典文学大辞典の記述、水谷不倒『選択古書解題』の記述などである。この仮基本データ・べースから出発して、原本の書誌データ採取を行った。本年度は、国立国会図書館・都立中央図書館・国文学研究資料館・東京大学総合図書館・大阪府立図書館・西尾市教育委員会岩瀬文庫所蔵資料の調査を行い、書誌データを採取、また文献複写の上、資料収集を行った。これらの作業から次のような知見を得た。明和九年刊書籍目録の「奇談」書においては書目に「談」「物語」「夜話」など<語り>を示すものがほとんどであるが、その内容も<語り>の枠組みをもつものが多い。また通例の文学史で「談義本」と言われているものが多くを占める。談義本の実態を明らかにするには「奇談」書の調査が欠かせないことが明らかになった。

また<語り>を示すものの中には「怪談」が少なくない。これは宝暦四年書籍目録に比べると格段に増加している。『西播怪談実記』『怪談御伽猿』『席上怪談』『怪談笈日記』『怪談直宿袋』『怪談実録』『怪談国土産』『怪談三鞆絵』『怪談御伽童』であり、このうち、明和五年刊の大江文坡作品が三つを占める。版元に注目すると、大坂または汗戸の吉文字屋の関わるものが多い。『西播怪談実記』『世説麒麟談』『新選百物語』『近代百物語』『続可笑記』『たのしみ草』『今昔雑冥談』『そこさがし』『本朝国語』『不埒物語』がそれである。昨年度は、研究課題に関わる研究文献目録の作成、「奇談」書翻刻資料の網羅的収集、研究書・研究論文の網羅的収集を行い、各書目に関する書名・巻冊・編著者・刊年・版元・翻刻・国書総目録および古典籍総合目録の所在情報、先行研究文献等のデータを収集し、原本の書誌データ採取を一部行った。本年度は、前年度に引き続き、「奇談」参考文献目録の補遺および文献の収集、翻刻資料・研究書・研究論文の収集をおこなった。また書誌データ採取を行い、前年度より構築しつつある奇談書基本データおよび原本所在仮データ・ベースの作成を行った。本年度のデータ採取は、東洋大学附属図書館・国立国会図書館・都立中央図書館・国文学研究資料館・お茶の水図書館・大阪府立図書館・九州大学附属図書館らで行った。明和九年書籍目録所載「奇談」書の研究と関って、いくつかの課題が浮上してきた。第一に同書籍目録に多く「百物語」の書名があることに関連して〈百物語〉モノの文学史的意味を考えることができた。宝暦から明和にかけての〈百物語〉モノの流行には、〈百物語〉モノが実態としての百物語を反映せず、奇談・怪談の代名詞と化しており、短編説話集の構成法としてそれが百で終わる、終らないに関らず便利な方法であることが窺われる。第二に、「奇談」書が宇治拾遺物語などの中世説話の影響を強く受けていることが判明しつつあり、中世説話の受容・再構成という点から近世奇談を再考するという観点が出てきた。なお「舌耕夜話」「名なし草」については翻字作業を進めている。また、奇談書の「語り」の問題と関連して、「長物がたりの系譜-春雨物語論のために-」を「江戸文学」第22号(平成13年2月、ぺりかん社刊)に発表した。平成13年度は、明和九年刊書籍目録所載「奇談」書76点の基本書誌データ作成を行った。前年度までの調査研究のデータの不足部分を、天理大学附属図書館・早稲田大学附属図書館・筑波大学附属図書館・東京都立中央図書館・内閣文庫などの所蔵する文献を調査して補充し、一応現段階における可能な限りのデータ収集を終了し、『明和九年刊書籍目録所載「奇談」書の研究』(成果報告書)としてまとめた。報告書においては、これまで収集した、書誌データ・原本写真に基づき、各書目につき書名、書型・巻冊、編著者、刊年、板元、『割印帳』および『享保以後大阪出版書籍目録』における記述、概要、所見本書誌(詳細なデータを記載)・諸本などについて箇条書きにまとめた。従来の研究に負う所も少なくなかったが、網羅的な調査としてははじめてのものである。また、これらの調査結果を元として考察したことを研究発表・講演・論文の形で公にした。研究発表としては、2001年12月15日に、京都近世文学研究会において、「明和九年刊書籍目録所載「奇談」書について」と題して、これら奇談書のデータを簡略にしたものを報告し、かついくつかの「奇談」書を取り上げて、その特徴や内容を紹介した。ついで、2002年1月12日に、大阪大学国語国文学会において、「近世奇談の<場>」と題して講演をした。この講演では、(1)「奇談」の意味、
高分子光機能ナノ空間の構築とその機能

様々な光機能材料の多くは固相状態での反応を活用しているため、高分子固相中での光反応論を確立することは基礎的に重要であると共にも応用的にも重要である。本研究では高分子ナノ自由空間におけるフォトクロミズムなどの化学反応の不均一分布を定量的に解明し、動的自由空間では光反応分子の律速段階のダイナミクスとマトリックスの緩和のダイナミクスの相関で反応性が決まることが明らかになったまた、材料のナノ空間を制御することにより巨視的な構造変化や相変化を誘起することに成功した様々な光機能材料の多くは固相状態での反応を活用しているため、高分子固相中での光反応論を確立することは基礎的に重要であると共にも応用的にも重要である。本研究では高分子ナノ自由空間におけるフォトクロミズムなどの化学反応の不均一分布を定量的に解明し、動的自由空間では光反応分子の律速段階のダイナミクスとマトリックスの緩和のダイナミクスの相関で反応性が決まることが明らかになったまた、材料のナノ空間を制御することにより巨視的な構造変化や相変化を誘起することに成功したチオインジゴ、フルギドを光プローブとして光反応の量子収率の分布を求めた。プローブ分子の光異性化の量子収率は水中では単一の値であったがPMMA中では0の成分を含む幅広い分布となった。また、チオインジゴはC=C二重結合の回転機構で異性化が進行するので臨界自由体積が大きくPMMA中で自由体積の影響を受け量子収率が溶液中と比べ小さくなったのに対し、フルギド540は局所的な閉環反応であるため臨界自由体積はそれほど大きくないため平均量子収率の絶対値は溶液中とそれほど変わらなかった。しかし、分子のコンフォーメーション変化は自由体積の影響を大きく受けた。フルギド670は嵩高いアダマンチリデン基のためコンフォーメーションの多様化に対応する量子収率分布が観測された。次に、モデル分子を用いて分子間距離と分子間相互作用エネルギーをGaussian03を用いてクラスター展開法および密度汎関数法で計算した。系の過剰エネルギーが室温におけるボルツマンのエネルギー程度の増加を示すか、あるいは光励起エネルギーの振動緩和による過剰エネルギー程度に達するか2つの場合を想定してみたが、いずれの計算条件において核間距離を2.4Åより近づけると二分子の相互作用エネルギー値が増加し分子間相互作用が生じていることが分かった。従って、電子密度の広がりを考慮にいれたとしても分子のファンデルワールス半径程度の距離が相互作用半径であることが分かった。この結果をもとに光反応プローブの活性化体積を定量化が可能にな理、ポリマー中の自由体積の分布および異方性と、ポリマーの物性や緩和現象との相関が明らかになった。光反応の量子収率は分子の反応を表す重要な指標であり、通常は分子の種々の光物理過程のうち反応の割合として定義される。しかし、高分子固体中では高分子マトリックスの作る自由体積の影響を受け、広い分布をもつ。この分布は各極微反応空間の局所自由体積と分子の活性化体積の相対的関係できまると予想される。本研究では種々の活性化体積をもつ分子の量子収率分布を求めた結果、分子の活性化体積が大きくなるに従って、高分子中における平均量子収率と溶液中における平均量子収率の比が増加し、ついには固体中の反応が溶液中の反応よりも大きくなることを見出した。これは、溶液中では動的な自由体積があるのに対し、固体中では静的に反応空間が保持されていることによると説明される。この知見は、光酸発生剤などの高分子系の光機能材料の分子設計に重要であり、効率的な分子設計と、それを活用した機能について継続して検討を行って行く。ポリメタクリル酸メチルなどの高分子固体中の光化学反応速度の不均一分布を定量的に求め、マトリックスポリマーの自由体積と緩和挙動との相関を明らかにした。高分子固相中の光反応は、分子固有の光物理過程とマトリックスポリマーの自由体積の相関で決まるため、通常の溶液反応と異なり不均一な分布をもつ。分子の臨界自由体積と量子収率分布の相関をしらべたところ、常識に反して、分子の活性化体積が大きいほど高分子固体中の反応が溶液中よりも有利になることが分かった。その理由として、ガラス状高分子固体中の反応は、高分子のつくる静的な自由空間で反応がおこるのに対し、溶液中では溶媒分子のつくる動的な自由体積の中での反応になる。その際、分子の光反応の律速段階速度を速くすると、自由体積はより静的であるのに対し、光反応の律速段階速度を溶媒分子のダイナミクス(ナノ秒)以上に長くすると、自由体積は動的となるためであることが明らかとなった。この知見に基づき、実用的にも重要な光酸発生剤の光反応性化にも成功した。
特別教育支援を目的とした注意機能のアセスメント

Manly, Robertson, Anderson, & Nimmo-Smith(1999)が開発したTest of Everyday Attention for Children(以下,TEA-Chと略す)を参考とし,(1)注意が単一ではなく複数の機能から構成されているとみなす理論的枠組みに立脚し,(2)児童・生徒に親しみやすい刺激材料や課題を使用し,検査の生態学的妥当性に配慮している集団式注意機能検査バッテリーを作成した。検査バッテリーは,4種の下位検査(地図探し,音数え,指示動作,二重課題)から成っており,それぞれ異なる注意機能(つまり,選択的注意,持続的注意,反応抑制,注意分割)の査定を意図している。この検査バッテリーを小集団トレーニングプログラムに参加を希望したADHD児童に実施したところ、どの児童にも共通して平均より劣っているのは持続的注意の指標であった。このことから,小集団トレーニングプログラムでは,持続的な注意の改善を基本の目標に据え、行動管理の原則を用いるとととした。バークレー(2002)では、AD/HDを有する子どもの行動管理の原則として、即時的で頻繁なフィードバックと目立つ結果、否定の前の肯定、一貫性の保持を挙げている。このプログラムでも、これらの行動管理の原則を守り,子どもが学習や遊びの場面でつまずいた時に担当者がすぐに対応し、できないことを叱るのではなくできたことを誉めるようにし、がんばってシールをためると誉めてもらってご褒美がもらえるよう設定した。小集団トレーニング開始時と終了時の行動観察(生起頻度の評定)から,児童の立ち歩く回数が減り衝動的に発話することが減っていったことが確認された。また開始時と終了時および終了後2ヶ月の保護者の行動評定から,話し合いの態度や協調性,望まない状況での対処や決めたことへの取り組みが以前よりできるようになり効果が維持されたことが明らかになった。注意機能の診断は従来、主観的な評定に依存してきた。これに対し本研究では、客観的パフォーマンスを指標とした注意機能検査を新たに開発し、注意能力の定量化を試みようとするものである。開発にあたっては生態学的妥当性を重視し、児童生徒にとって親しみやすい刺激材料を用い、かつ、学校での授業場面をシミュレートした検査場面を設定した。授業場面との類似性を考慮し、検査は個別ではなく集団で実施することとした。検査では、視覚的刺激(文字、図形、映像)、および聴覚的刺激(音声)をコンピュータ制御し、ビデオプロジェクターを用いて被験者に提示するようにした。被験者は、授業場面と同様、これらの刺激をモニタリングし、教示に従って適切な反応をすることが求められる。本年度は注意の統制/切替(一定の規則に従った反応が成立した後、規則が次々と変化し、それぞれに応じた反応を要求する)にターゲットを絞り予備実験を繰り返すことによって検査課題の選定を進め、同時提示課題と、継次提示課題,音声提示課題を作成した。さらに健常中学生を対象として検査を実施した。この結果,同時提示課題,継次提示課題,音声提示課題ともに,チェックリストによって注意に問題があると評定された被験者と問題を評定されていない被験者の間に有意な差が認められ,また外的基準として実施した既存の注意の統制/切替課題との相関が認められたため、作成した課題が注意の統制/切替を測定するのに妥当であると判断できた。注意機能の診断は従来,主観的な評定に依存してきた.これに対し本研究では,客観的パフォーマンスを指標とした注意機能検査を新たに開発し,注意能力の定量化を試みようとするものである.開発にあたっては生態学的妥当性を重視し,児童生徒にとって親しみやすい刺激材料を用い,かつ,学校での授業場面をシミュレートした検査場面を設定した.授業場面との類似性を考慮し,検査は個別ではなく小集団で実施した.検査では,視覚的刺激(文字・数字)や聴覚的刺激(音)をコンピュータ制御し,被験者に提示した.被験者は,これらの刺激をモニタリングし,教示に従って適切な反応をすることが求められる.本年度は持続的注意や反応抑制に関わるとされる注意の統制/切替(一定の規則に従った反応が成立した後,規則が次々と変化し,それぞれに応じた反応を要求する)と時間知覚(ある一定の長さの時間をどのように知覚するか)にターゲットを絞り検査課題の選定を進め,課題転換課題と,時間弁別課題,周波数弁別課題を作成した.作成した課題を大学生,小学生及び軽度発達障害のある小学生を対象として実施した.この結果,課題転換課題では,小学生では問題待ちが課題転換の速度に影響しており,問題待ちが短い時に課題転換が速くなること,大学生では,問題待ちが課題転換の速度に影響せず反応準備が影響することが明らかになった.発達障害児では,問題待ちが長いことが課題転換を遅延させる要因であった.年齢が低い児童では何をすればよいか分からない時間が長くなると課題転換は遅くなり,発達障害が認められる場合この傾向はさらに強いものであった.時間弁別課題及び周波数弁別課題においては,課題における比較時間や比較周波数の設定,弁別閾算出方法の妥当性をさらに検討し,課題を精選することが来年度の課題となった.Manly, Robertson, Anderson, & Nimmo-Smith(1999)が開発したTest of Everyday Attention for Children(以下,TEA-Chと略す)を参考とし,(1)注意が単一ではなく複数の機能から構成されているとみなす理論的枠組みに立脚し,(2)児童・生徒に親しみやすい刺激材料や課題を使用し,検査の生態学的妥当性に配慮している集団式注意機能検査バッテリーを作成した。

検査バッテリーは,4種の下位検査(地図探し,音数え,指示動作,二重課題)から成っており,それぞれ異なる注意機能(つまり,選択的注意,持続的注意,反応抑制,注意分割)の査定を意図している。この検査バッテリーを小集団トレーニングプログラムに参加を希望したADHD児童に実施したところ、どの児童にも共通して平均より劣っているのは持続的注意の指標であった。このことから,小集団トレーニングプログラムでは,持続的な注意の改善を基本の目標に据え、行動管理の原則を用いるとととした。バークレー(2002)では、AD/HDを有する子どもの行動管理の原則として、即時的で頻繁なフィードバックと目立つ結果、否定の前の肯定、一貫性の保持を挙げている。このプログラムでも、これらの行動管理の原則を守り,子どもが学習や遊びの場面でつまずいた時に担当者がすぐに対応し、できないことを叱るのではなくできたことを誉めるようにし、がんばってシールをためると誉めてもらってご褒美がもらえるよう設定した。小集団トレーニング開始時と終了時の行動観察(生起頻度の評定)から,児童の立ち歩く回数が減り衝動的に発話することが減っていったことが確認された。また開始時と終了時および終了後2ヶ月の保護者の行動評定から,話し合いの態度や協調性,望まない状況での対処や決めたことへの取り組みが以前よりできるようになり効果が維持されたことが明らかになった。