hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
蛋白質複合体形成によって誘起されるユニット機能の大幅な増幅機構の解明

「生物マシーナリー」の特性を解明するために、独自の触媒能を持つサブユニットが複合体形成に伴い大幅な活性増幅を示すトリプトファン合成酵素を取り上げる。同酵素は、一連のトリプトファン合成経路の連続した最終反応を触媒するアロステリック酵素である。バクテリアの同酵素はαサブユニットとβサブユニットからなるα2β2四量体である。両サブユニットはそれぞれ独自の連続した触媒作用(α反応、β反応)を有している。α2β2複合体を形成したとき、それぞれのサブユニット独自の触媒反応は2桁高くなる。そこで、本研究課題では、超好熱菌、P.furiosus,由来のトリプトファン合成酵素複合体とその構成成分αとβサブユニットのX線結晶構造解析を行う。そして、構造変化を伴う複合体形成による活性増幅機構を明らかにする。本年度は、まずαサブユニットのX線結晶構造解析の論文を発表できた。次にβサブユニットについて、測定は筑波の高エネルギー加速器研究機構のPFとSPring8で行い、最高、分解能2.3Åのデータを収集した。結晶の空間群はP212121であった。位相決定は既に報告されているS.Typhimurium由来のα2β2複合体のβ2サブユニットをモデルに同型置換法で求めた。現在、構造のリファイメントも終わり、構造の詳細な検討を行っている。得られた構造はサルモネラ菌由来のβサブユニットと酷似していた。また、立体構造の安定性は中性付近で、好熱菌由来のβ2サブユニットは常温菌おそれに比べ約25度高い。その安定化の原因は、その立体構造の差から、疎水性相互作用に寄るのではなく、水素結合の増加、キャビティーの減少、エントロピー効果に寄ることが分かった。
保育者養成における「表現」領域の教育内容再検討と学習プログラムの開発

保育の場で「表現」という領域が示されてから10年以上が経過した。この10年で子どもを取り巻く環境は大きく変化し、少子化時代を迎え保育者に求められるものも多様化している。このような状況下で子どもの豊かな表現活動を支援する保育者を育成するために養成機関では、何を教えるべきなのか、再度問い直しが必要になっている。そこで本研究では、幼児の豊かな表現活動を支援する保育者を育成するために、保育者養成における「表現」領域の教育内容について再検討を行うことを第一の目的としている。また、今後の保育者養成におけるダンス・身体表現の学習プログラムのあり方について提起を行うことを第二の目的としている。以上のような本研究の目的に即して、本年度は保育者養成機関における身体表現の授業実践の分析・考察により新しい学習プログラムについて検討を進めた。取り上げた授業は「自由」「即興」「他者との交流」を主体としたもので、学生の授業後の内省文を中心に保育者にふさわしい身体のあり方と関連させながら考察を深めた。以上については、「保育者にふさわしい身体を養成する身体表現の実践と可能性」という論文にまとめ、日本保育学会学会誌『保育学研究』に投稿審査中である。今後、本研究で明らかにされたことを基盤に、さらに保育の現場に接近しながら保育者の専門性と身体表現の関係性を探っていきたいと考えている。以上のような本研究の目的に即して、本年度は保育実習生の指導分析から「表現」の教育内容再考に関する手がかりを得ていくことに着手した。保育実習生の指導内容には養成教育の成果が反映されると考えられる。具体的には、保育学生による3歳児クラスの幼児を対象とした身体表現遊びの指導事例をビデオに撮影したものを詳細に分析・検討し、保育者養成に還元される事項を明らかにした。これについては「保育学生による身体表現遊びの指導事例かちの問題提起」という論文にまとめた。引き続き、現在4歳児クラスの身体表現遊びの指導事例について、ビデオから保育者のかかわりや子どもの反応を分析中である。これらについても、資料整理を終了次第、考察を加えまとめていきたいと考えている。併せて来年度は、保育者養成における身体表現の授業内容の見直しに着手していく予定である。
新潟県に多発する胆道癌の疫学的成因研究

新潟県に多発する胆道癌(特に胆嚢癌)の原因として「複合要因説」を仮説にとり研究を進めてきた。即ち、「胆石症や胆嚢炎等を有する者がハイリスク・グループを形成し、彼らが地域特有の環境因子に暴露されることで胆嚢癌が発生する」という仮説である。地域特有の環境因子としては、種々因子を検討したなかで、ジフェニルエーテル系農薬(特にクロルニトロフェン、CNP)が残っている。この度の研究は、この仮説検証を動物モデルを用いて行うことにある。実験には雌ゴールデン・ハムスターを用い、次の5群を設定した。1群は胆石(ビーズ・ワックス)埋め込み手術+普通食、2群は胆石埋め込み手術+CNP(5000ppm)含有食、3群は発癌物質3-メチルコラントレン(3-MC)を含む胆石+普通食、4群は3-MC入り胆石+CNP、5群は胆嚢切開・縫合+普通食である。動物数はそれぞれ20匹とした。胆石埋め込み手術は、動物(910週令)搬入1週間後に行い、その後2週間回復を待ち、投与実験を開始した。実験期間は、第22週までとした。なお、2群のCNP投与は第17週までとし、以後は普通食に切り換えた。CNP投与群(2群と4群)の体重増加は対照群(5群)及びCNP非投与群(1群と3群)に比べ、抑制されていたが、第17週の中止後は、1群、2群と5群で差を認めなかった。摂餌量も同様の傾向を示した。実験期間中の死亡例は、1群及び2群で、72週間中それぞれ3例(15.0%)であった。また、対照群(5群)でも3例(15.0%)であった。3群と4群で、17週間中死亡例はなかった。1群では肝臓の腫瘍1例、2群で肝臓の腫瘍を2例認めた。また、2群の胆嚢の緑色拡大を認めている。病理組織学的検索は、現在実施中である。3群と4群との間には、格別の差はなかった。新潟県に多発する胆嚢癌の原因として「多因子説」を考えている。即ち「胆石症や胆嚢炎等を有する者がハイリスク・グループを形成し、彼らが地域特有の環境因子に暴露されることで胆嚢癌が発生する」とする仮説である。地域特有の環境因子として、ジフェニルエーテル系農薬のCNP(クロルニトロフェン)を疑っている。この仮説検証を動物モデルで行うのが本研究の目的である。実験は2年を要するので今年度は実験群及び投与量の設定、CNP抽出、その後実験を開始した。CNPは製剤からジクロロメタン抽出。動物は雌のシリアン・ゴールデンハムスター(9-10週令)、群は5群を設定。1群は胆石埋込手術+普通食、2群は胆石埋込手術+CNP(5000ppm混餌)、3群は発癌物質3ーメチルコラントレン(3-MC)を含む胆石+普通食、4群は3-MC入り胆石+CNP、5群は胆嚢切開・縫合(sham operation)+普通食である。各群それぞれ20匹を用いた。

1及び2群はCNPの発癌性の有無を検索、3及び4群はCNPの補助発癌性の検索である。胆石埋込手術は動物搬入1週後に行い、その後2週間回復を持ち、投与実験を開始した。実験期間は、3群及び4群は第17週までとし、1群、2群及び5群は第78週までを予定している。なお1群及び2群のCNP投与は実験第17週までとし、以後は普通食に変えて実験を継続中である。動物実験開始時の体重は15群でそれぞそ125.0±7.87、123.1±8.80、122.9±8.94、121.5±7.86、121.0±7.09(g)であり、この間に差を認めなかった。第17週では、それぞれ217.5±12.14、144.7±13.34、211.9±13.78、143.8±17.29、209.8±12.59(g)であり、CNP投与群(2群、4群)の体重増加の抑制が見られたが、中止後は回復した。なお摂餌量には差を認めなかった。補助発癌性をみる3群及び4群は既に屠殺し、現在組織検索中である。本研究は新潟県に多発する胆道癌の原因を、作業仮説「複合要因説」検証の一環として、動物モデルを用いて確かめることにあった。研究は2年間にわたったが、今年度は、昨年度にすでに実施している実験の継続と結果の判定が主要な研究内容である。その概要は以下のようである。実験には雌ゴールデン・ハムスターを用い、次の5群を設定した。1群は胆石(ビーズ・ワックス)埋め込み手術+普通食、2群は胆石埋め込み手術+CNP(5000ppm)含有食、3群は発癌物質3-メチルコラントレン(3-MC)を含む胆石+普通食、4群は3-MC入り胆石+CNP、5群は胆嚢切開・縫合+普通食である。動物数はそれぞれ20匹とした。胆石埋め込み手術は、動物(910週令)搬入1週間後に行い、その後2週間回復を待ち、投与実験を開始した。実験期間は、第22週までとした。なお、2群のCNP投与は第17週までとし、以後は普通食に切り換えた。CNP投与群(2群と4群)の体重増加は対照群(5群)及びCNP非投与群(1群と3群)に比べ、抑制されていたが、第17週の中止後は、1群、2群と5群で差を認めなかった。摂餌量も同様の傾向を示した。実験期間中の死亡例は、1群及び2群で、72週間中それぞれ3例(15.0%)であった。また、対照群(5群)でも3例(15.0%)であった。3群と4群で、17週間中死亡例はなかった。1群では肝臓の腫瘍1例、2群で肝臓の腫瘍を2例認めた。また、2群の胆嚢の緑色拡大を認めている。病理組織学的検索は、現在実施中である。3群と4群との間には、格別の差はなかった。
前立腺癌の進行に関連する糖鎖の研究

1.PNA染色性はBPHの管腔側分泌細胞でわずかであり、偶発癌で高く、進行癌で低下した。UEA-1染色性はPNAと同様にBPHの管腔側分泌細胞でわずかであり、偶発癌ではA1、A2と病期が進行するとともに染色性が亢進した。進行癌での染色性は病期A2と同等であった。PNA、UEA-1染色性と組織学的分化度との間には関連性を認めなかった。2.DNA ploidy patternとPNA、UEA-1染色性は関連しなかったが、高分化偶発癌の細胞内でのPNA染色陽性部位はdiploidとnon-diploidで異なった。UEA-1染色性と癌占有体積の間に正の相関性を認めた。3.臨床病期C、Dで、PNA染色性が2+以上の症例の癌特異的生存率は1+以下に比較して良好であった。UEA-1染色性は予後と関連しなかった。以上からPNAおよびUEA-1結合糖鎖は前立腺上皮の癌化に関連していた。そして、PNA結合糖鎖は癌のアンドロゲン依存性と関連することが示唆され、PNA染色性は進行癌の予後予測因子して有用であると考えられた。UEA-1染色性は偶発癌の体積と関連し、UEA-1結合糖鎖の発現は癌の進行と関連するものと考えられた。研究計画では、前立腺癌培養細胞株から界面活性剤を用いて得られたレクチン結合性の,高い分画を免疫源としてマウスモノクロナル抗体を得る予定であったが、得られた抗体が細胞膜表面に存在するepitopeと反応することが今後の本研究の発展性を考えた際に重要と考え、前立腺癌培養細胞株(PC-3)を生細胞のまま免疫源としてBalb/cマウス腹腔内に注射し免疫した。現在までに2回の細胞融合を行ったが1回目はハイブリドーマの生育を全く認めなかった。2回目の細胞融合では1次スクリーニングとしてPC-3との反応性を検討し、陽性のwellを得たが、2次スクリーニングが困難であり、その後のクローニングが進んでいない。1次スクリーニングで陽性であったwell内のハイブリドーマは拡大培養し、凍結保存していおり、2次スクリーニングの方法が確立され次第クローニングを行う予定としている。2次スクリーニングの問題点は界面活性剤を用いてPC-3から抽出したレクチン(UEA-1、PNA)と結合する物質をアッセイプレートに吸着させる際の条件設定にあると考えられ、現在その条件を検討している。前立腺癌培養細胞株PC-3を免疫源として免疫されたBalb/cマウスの脾細胞とマウス骨髄腫細胞を用いてハイブリドーマを作成した。当初、レクチンUEA-1をウェルに固相化しPC-3のcell lysateを反応させ、それにハイブリドーマの培養上清を反応させる方法でスクリーニングを行う予定であったがコストが高いため、この方法を2次スクリーニングとし、1次スクリーニングにはウェルにフォルマリンで固定したPC-3細胞との反応を用いた。この方法を用いて、現段階で2A1と4B7のUEA-1が結合する糖鎖を含むPC-3細胞内物質に対するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマを得た。両者ともヒトから得た前立腺癌の組織に反応した。正常組織との反応性に関しては、泌尿器科領域では腎との反応性が認められた。現在、affinity chromatographyにて抗原の精製を行っている。1.前立腺癌培養細胞株PC-3を免疫源として、レクチンUEA-1と結合する糖蛋白質に対するモノクロナル抗体を産生するハイブリドーマを得た。前立腺特異性についての検討では、必ずしも特異性は高くなく、前立腺癌の進行に伴い高発現するUEA-1結合蛋白質は正常組織にも広く分布するものであることが示唆された。レクチンによるブロッティングとモノクロナル抗体によるウェスタンブロッティングの結果からは、現在得ている抗体が認識しない蛋白質も存在しており、この物質に対する今後の研究も重要であることが示唆された。

2.前立腺癌におけるUEA-1結合物質の陽性率は偶然発見癌において、より臨床的悪性度が高いと見なされているT1b癌での陽性率が高く、局所進行癌、有転移症例での陽性率はさらに高いが、前立腺肥大症での発現は軽微であった。3.アンドロゲン依存性と関連があるとされてきたPNA結合物質は、確かに前立腺肥大症や臨床病期が早期の癌での陽性率が高く、進行癌では陽性率は減少した。PNA陽性率と予後との関連性は今後の検討課題と考えた。現在、その関連性について検討中である。
ナノ相分離構造を有する機能性材料の構築

(1)高イオン伝導性を示す二次元異方性フィルムの開発イオン伝導性を示すオリゴエチレンオキシド部位及び、絶縁性であり配向構造を誘起しやすい液晶性メソゲン部位を構造中に有する液晶性モノマーを設計・合成した。この材料とリチウム塩との液晶性複合体は、等方相からスメクチックA相に徐冷することにより、基板上で容易に均一な配向構造を形成する。このようにして得られた液晶性複合体の配向構造を光重合法を用いて固定化し、均一な配向構造を有する液晶性フィルムを合成した。この材料においては、イオン伝導部位とイオン絶縁部位がナノレベルで相分離した構造が巨視的なスケールまで均一に配向しているために、内部に効率よくイオンを輸送する異方的なパスが形成されている。さらに運動性の高いイオン伝導性部位を、液晶の形成するナノ相分離構造中に効率よく組織化することにより、これまでに報告されているイオン伝導性液晶材料と比較すると、約1000倍以上高いイオン伝導性を示す高分子材料の作製に成功した。(2)異方的イオン伝導性液晶化学ゲルの開発イオン伝導性部位と液晶性メソゲン部位からなる低分子量の液晶性ブロック分子とアルカリ金属塩との複合体は、液晶相温度において配向制御することにより異方的なイオン伝導性を示す。この複合体に対して、多官能モノマーを添加し、材料全体の配向制御を行った後に光重合反応を行った。これにより、低分子異方的イオン伝導性液晶を溶媒とした液晶化学ゲルの作製に成功した。得られたゲルは、低分子量液晶性複合体が形成するナノ相分離構造、及びこれらとミクロ相分離構造を形成する高分子ネットワークが効率よく組みあがった階層的相分離構造を持つことがわかった。この液晶化学ゲルは、異方的イオン伝導性、機械的安定性、動的な配向構造形成能を併せ持つ、非常に高性能・高機能の新規液晶性複合材料となった。
癌幹細胞特異的に発現するクロライドイオン輸送体を標的とした食道癌新規治療法の開発

食道扁平上皮癌細胞株(TE8)から、ALDH1高発現細胞をsorting後、sphere形成能を有する細胞のみを分離し、癌幹細胞を培養した。作製した癌幹細胞と親株での遺伝子発現をmicroarrayを用いた網羅的解析により比較検討したところ、TRPV2, CLCN2, ATP1B2等の重要なイオン輸送体が癌幹細胞で高発現していることを見出した。その中から、Ca2+透過性陽イオンチャネルであるTRPV2チャネルに着目し、その選択的阻害剤であるトラニラストが、癌幹細胞特異的に、増殖抑制効果を示すことを明らかにした。また、親株をトラニラストで処理したところ、ALDH1発現が抑制されることを確認した。平成27年は、まず、ヒト食道癌組織における癌幹細胞マーカー(ALDH1, CD44)発現レベルを解析し、各々の高発現が食道癌における予後不良因子となることを解明した。続いて食道扁平上皮癌細胞株(TE8)から、ALDH高発現細胞をsorting後、sphere形成能を有する細胞のみを分離し、癌幹細胞を培養することに成功した。また、抽出された癌幹細胞における抗癌剤耐性能、再分化能も確認した。さらに、作製した癌幹細胞と親株での遺伝子発現をmicroarrayを用いた網羅的解析により比較検討したところ、種々のイオン輸送体が癌幹細胞において高発現していることを確認した。その中から、TRPV2チャネルに着目し、その選択的阻害剤であるトラニラストが、癌幹細胞特異的に、増殖抑制効果を示すことを明らかにした。また、親株をトラニラストで処理したところ、ALDH発現が抑制されることを示した。当初の研究計画のうち、ヒト食道癌組織における癌幹細胞マーカーの発現解析・ヒト食道癌細胞株を用いた癌幹細胞の作製・癌幹細胞特異的に発現するイオン輸送体の同定の基礎実験は、ほぼ終了している。また、新たに癌幹細胞におけるTRPV2チャネルの高発現に着目し、その選択的阻害剤であるトラニラストの癌幹細胞増殖抑制効果を確認している。トラニラストは抗アレルギー剤として広く臨床使用されており、新たにその癌幹細胞特異的抑制効果を示す意義は大きく、研究目的・研究計画はおおむね順調に進展していると考える。食道扁平上皮癌細胞株(TE8)から、ALDH高発現細胞をsorting後、sphere形成能を有する細胞のみを分離し、癌幹細胞を培養した。抽出された癌幹細胞における抗癌剤耐性能、再分化能も確認した。作製した癌幹細胞と親株での遺伝子発現をmicroarrayを用いた網羅的解析により比較検討したところ、TRPV2, CLCN2, ATP1B2等のイオン輸送体が癌幹細胞において高発現していることを同定した。また、TRPV2, CLCN2, ATP1B2のmRNAが高発現していることを細胞株でのReal-time PCRでも再確認した。同時に、他の食道扁平上皮癌細胞株(KYSE790)からも癌幹細胞を抽出培養し、同様に癌幹細胞においてTRPV2が高発現する現象を確認した。一方で、ヒト食道癌組織においてTRPV2の免疫染色を行い、様々な染色パターンを解析した。また、TE8細胞においてsiRNAを導入し、TRPV2をノックダウンしたところ、細胞増殖抑制効果を認めた。さらに、トラニラストのTRPV2選択的抑制効果を検証するため、Ca2+ chemical-specific dyeであるFluo-8を用い、細胞内Ca2+濃度の変化を解析した。Carbacholによって誘導される細胞内Ca2+濃度の上昇は、トラニラストやTRPV2 siRNAにより抑制されることが示され、トラニラストの選択的効果が明らかとなった。次年度以降は、TRPV2チャネルを介する癌幹細胞の細胞増殖制御メカニズムの解明と、in vivo実験を推進する予定である。ヒト食道癌組織における癌幹細胞マーカー(ALDH1, CD44)発現とTRPV2チャネル発現の相関解析、術前化学療法症例の組織内ALDH1, CD44, TRPV2発現変化を解析する。また、TRPV2をノックダウン後、microarrayを用いた網羅的解析により、細胞増殖制御に関わるpathwayを明らかにする。同時に、in vivoモデルを用い、各種抗癌剤、トラニラスト(TRPV2チャネル阻害剤)の皮下腫瘍成長抑制効果を検討するとともに、皮下腫瘍内のALDH1, CD44, TRPV2発現変化を解析する。

さらに、各種薬剤処理後の皮下腫瘍から細胞を抽出し、sphere形成能を有する細胞量を比較検討する予定である。消化器外科学
ホメオ蛋白質の移動原理と新たな効能の探究

ただ泣いていた赤ちゃんが、3歳になる頃には言葉で気持ちを伝えられるようになる。子どもの脳の発達は非常に急速かつ柔軟だが、経験に伴って発達する仕組みには、未だ解明されていない点が多い。申請者らは、胎児の脳を作るOtx2ホメオ蛋白質が、生後の脳の発達を促進することを明らかにしてきた。Otx2は経験のメッセンジャーとして目から大脳視覚野へと移動し、標的遺伝子の発現を制御することで臨界期を誘導する(杉山&侯, 2019)。一方で、ホメオ蛋白質が視覚以外の機能にも経験のメッセンジャーとして作用するのか、脳内を移動する詳細な仕組みとは何か、未だ不明な点も多い。申請者らは、Otx2が視覚だけでなく、視床および中脳領域にも局在し、情動発達に関与すると推測している。この領域においても、Otx2は外から経験依存的に運ばれる可能性がある。成体マウスにおいて恐怖条件付け行動解析を行うと、Otx2変異マウスでは恐怖記憶が低下し、幼児健忘のように恐怖記憶を忘れてしまうことが分かった(飯島/杉山, 2018)。この際、Otx2は、恐怖記憶の中枢である扁桃体において抑制性細胞の成熟に影響を与えることが観察された。さらに、Otx2の標的遺伝子をChIP-seq解析により網羅的に探索すると、概日リズムやドーパミン分泌に関わる遺伝子が標的として同定され、Otx2がこれらの標的遺伝子の発現に関与することが示唆された(Sakai & Sugiyama, Dev. Growth Differ. 2018)。これらの結果は、ヒトのOtx2変異において睡眠障害や摂食障害などが報告されていることと一致する。Otx2が情動の関連領域においても経験のメッセンジャーとして機能するのか、さらに解析を進めていく。Otx2は、胎児期に中脳ドーパミン細胞の分化や投射に作用することが知られている。これまでの申請者らの研究から、生後においてもOtx2がドーパミン経路の成熟に関与することが、Otx2標的遺伝子の同定と恐怖記憶の行動解析から示唆された(Sakai&Sugiyama, 2018、飯島/杉山, 2018)。特に、Otx2はドーパミンの下流で働く機能分子の発現を制御すると考えられ、その作用は大脳皮質にも及ぶことが示された。Otx2の分子作用が脳内の領域間をまたいで観察されることは、このホメオ蛋白質が情動と行動の形成に広く関与することを支持している。申請者らの研究から、ドーパミン伝達にホメオ蛋白質が関与することが分かってきた。そこで、Otx2変異マウスを用いて中脳ドーパミン細胞からの電気生理学解析を行い、このホメオ蛋白質がドーパミン細胞の活動および成熟に影響を与えるのかを明らかにする。近年、ドーパミン量とホルモン量のリンクが報告されている。ホルモン分泌は概日リズムに制御されることから、中脳・視床領域におけるホメオ蛋白質の局在は、ドーパミンおよびホルモンの分泌に広く関与する可能性がある。そこで、ホルモン遺伝子の変異マウスを導入し、情動の発達およびホメオ蛋白質との関連を解析する。一連の解析によって、ホメオ蛋白質が情動の生後発達においても経験のメッセンジャーとして機能するのか、解析を進めていく。

特に、Otx2はドーパミンの下流で働く機能分子の発現を制御すると考えられ、その作用は大脳皮質にも及ぶことが示された。Otx2の分子作用が脳内の領域間をまたいで観察されることは、このホメオ蛋白質が情動と行動の形成に広く関与することを支持している。申請者らの研究から、ドーパミン伝達にホメオ蛋白質が関与することが分かってきた。そこで、Otx2変異マウスを用いて中脳ドーパミン細胞からの電気生理学解析を行い、このホメオ蛋白質がドーパミン細胞の活動および成熟に影響を与えるのかを明らかにする。近年、ドーパミン量とホルモン量のリンクが報告されている。ホルモン分泌は概日リズムに制御されることから、中脳・視床領域におけるホメオ蛋白質の局在は、ドーパミンおよびホルモンの分泌に広く関与する可能性がある。そこで、ホルモン遺伝子の変異マウスを導入し、情動の発達およびホメオ蛋白質との関連を解析する。一連の解析によって、ホメオ蛋白質が情動の生後発達においても経験のメッセンジャーとして機能するのか、解析を進めていく。
日英語対照による語形成と音韻構造に関する発展的研究

平成30年度は、(前年度に取り組んだ)後半要素が漢語である複合語のアクセント型が非標準的になる例の分析を、後半要素が和語である例にも広げ、そこで働く原則を求めた。例えば「バイク買い取り」では、(通常の複合語アクセント規則を適用すれば、「バイクカ'イトリ」というアクセントが予測されるが、)「バ'イク買い取り」という変則的なアクセントになる。これは、「買い取り」自体が一種の複合語であり、その主要部である「取り」がアクセントの計算において支配下に取り込めるのは「買い」までだからである。それよりも前にある「バイク」の部分は、「買い取り」とは独立してアクセントが与えられることになる。よって、前半要素と後半要素がそれぞれ単独で持つアクセントが、複合語としてのアクセントとして具現される。このことを、統語理論において提唱されてきた「c統御」という概念を援用して、フォーマルに捉え直し、4つないし5つの要素から成る、より複雑な複合語のアクセント型も説明できることを示した。さらに、このc統御による複合語アクセントの決定のメカニズムは、英語の様々な複合語の強勢アクセントの配置・度合いの説明にも応用できることを論じた。また、英語の通時的音変化に関する研究にも取り組み、いわゆる大母音推移(Great Vowel Shift)が生じたメカニズムと理由について試論としてまとめた。3年間の研究期間において取り組んだテーマは、i)日英語の複合語のアクセントのメカニズム、ii)日本語の派生名詞の音韻的特徴、iii)日英語の混成語が標準よりも長くなる場合の特徴、iv)英語の「する人/もの」を表す-orが選択される条件、v)英語の形容詞の比較級と最上級の形を決定する制約、vi)英語の歴史上の音変化について、と多岐にわたり、日英語を比較対照させながら語形成と音韻構造の関係を幅広く、かつ、詳細に論じることができた。平成28年度は、混成語形成における「長さの制約」が破られるのはどのような場合かという問題、及び日英語の名詞形成接辞の音韻特性について論文にまとめた。混成語は、日本語も英語も、右側(後半)の原語の長さに合わせて作られるのが一般的である。例えばbreakfast + lunch →brunchでは、brunchはlunchと同じ1音節になっている。ところが、例えば「バカ+カップル→バカップル」のように、右の原語よりも長い混成語が作られることもある。このときの特徴は、左の原語の終わりの部分と、右の原語のはじめの部分に同音が含まれていることである。このように同音が含まれていると、その同音を生かして洒落てみたいという意識が働きやすくなる。そこで、こうしたタイプの混成語を「ダジャレ混成」と命名して論じ、英語にもまったく同じ傾向があることを明らかにした。日本語の形容詞を名詞化する代表的な派生接辞は「-さ」と「-み」である。そして、従来の研究では、「-さ」は「-み」よりも多くの語に付加できるという生産性の観点から、「-さ」と「-み」は、それぞれ、英語の-nessと-ityに相当すると指摘されてきた。しかしながら、-nessの特徴は元の語のアクセントを一切変えないことであるのに対して、「-さ」は、例えば「しろ'い→し'ろさ」のように、アクセントの移動を通常引き起こす。そして「-み」も、「-さ」と違ったパターンのアクセント変化をもたらすことが多い。そこで、英語の接辞の音韻的な振る舞いを説明するために仮定されてきたレキシコン(語彙部門)とは、内部構造がまったく異なるものを日本語に仮定する必要があることを主張した。当初の研究計画では、28年度は、主に複合語の例外的なアクセント型について論じる予定であった。しかしながら、査読付き論文に仕上げるのに思った以上に時間を要したため、先に、(29年度に予定していた)混成語と派生語の研究をまとめ上げた。また、日本語の複合語の連濁とアクセントについての論考も脱稿し、29年度中には出版予定である。さらに、査読付きではないが、複合語のアクセントに関する小論も29年度中に出版される。よって、順番が入れ替わってしまったが、論文の執筆・発表は全体として順調に行うことができた。平成29年度は、日本語の複合語の音韻構造に関する研究を中心に行った。従来の研究では、後半要素のアクセント型がいわゆる「中高型」の場合には、そのアクセントの型・位置が複合語全体に継承されるとされてきた(例:イソップ+ものが'たり→イソップものが'たり)。しかしながら、例えば「ゆで+たま'ご→ゆでた'まご」のように、後半要素のアクセント型が中高型であっても、アクセントの位置が変化する例もある。そこで、日本語の複合語のアクセントの計算においては、最後の2モーラを不可視にする(すなわち、計算から除外する)方式が妥当であることを論じた。また、日本語の複合語のアクセントは基本的に後半要素に置かれるが、例えば「憲法改正(け'んぽうかいせい)」のように、前半要素にアクセントがあるものもある。このような一見例外的と思われるアクセントを持つ例では、前半要素が、後半要素が意味する行為等の対象物という関係で結びついていることが分かる。そこで、後半要素の項構造ーすなわち、どのような意味役割を持つ要素を要求するかの指定ーを基に複合語を分類した上で、前半要素が後半要素から独立してアクセントを持ちうるメカニズムを提案した。

この他に、複合語のアクセントと連濁の関係について無意味語実験を用いた考察をまとめ、アクセントと連濁が相補分布の(すなわち、アクセントがあれば連濁せず、連濁すればアクセントがなくなるという)関係にはなっていないことを明らかにした。さらに、英語の派生語(特に「する人」を表す接尾辞の付加された例)と屈折変化(特に形容詞の比較級・最上級の形式決定の原則)に関する自身の過去の研究の再検討にも取り組んだ。取り組む研究の順序が当初の予定とは逆になってしまったが、学会発表や論文執筆は全体として順調に行うことができた。平成30年度は、(前年度に取り組んだ)後半要素が漢語である複合語のアクセント型が非標準的になる例の分析を、後半要素が和語である例にも広げ、そこで働く原則を求めた。例えば「バイク買い取り」では、(通常の複合語アクセント規則を適用すれば、「バイクカ'イトリ」というアクセントが予測されるが、)「バ'イク買い取り」という変則的なアクセントになる。これは、「買い取り」自体が一種の複合語であり、その主要部である「取り」がアクセントの計算において支配下に取り込めるのは「買い」までだからである。それよりも前にある「バイク」の部分は、「買い取り」とは独立してアクセントが与えられることになる。よって、前半要素と後半要素がそれぞれ単独で持つアクセントが、複合語としてのアクセントとして具現される。このことを、統語理論において提唱されてきた「c統御」という概念を援用して、フォーマルに捉え直し、4つないし5つの要素から成る、より複雑な複合語のアクセント型も説明できることを示した。さらに、このc統御による複合語アクセントの決定のメカニズムは、英語の様々な複合語の強勢アクセントの配置・度合いの説明にも応用できることを論じた。また、英語の通時的音変化に関する研究にも取り組み、いわゆる大母音推移(Great Vowel Shift)が生じたメカニズムと理由について試論としてまとめた。3年間の研究期間において取り組んだテーマは、i)日英語の複合語のアクセントのメカニズム、ii)日本語の派生名詞の音韻的特徴、iii)日英語の混成語が標準よりも長くなる場合の特徴、iv)英語の「する人/もの」を表す-orが選択される条件、v)英語の形容詞の比較級と最上級の形を決定する制約、vi)英語の歴史上の音変化について、と多岐にわたり、日英語を比較対照させながら語形成と音韻構造の関係を幅広く、かつ、詳細に論じることができた。28年度中に仕上げることができなかった複合語の例外的アクセント型に関する論文の完成に最優先で取り組む。また、混成語のデータの再収集と統計処理を開始する。これまでは日本語の派生語、複合語、混成語の音韻構造に関する研究を中心に行ってきたので、次に、同じ原理や制約が英語にどのくらい当てはまるかを検討する。また、残された課題である借用語と短縮語の特徴に関する研究にも取り組む。28年度に海外の学会での発表が実現しなかったため、旅費が残ることとなった。そこで、29年度に海外の学会・講座に複数回出かけることとし、28年度の未使用分は、その渡航費用の補充にすることにした。また、28年度の物品購入費も抑えて、29年度の渡航費用にできるだけ回すようにした。
スナメリの個体群生態的研究-画像処理による洋上での体長推定と群れ構造の解析-

天草通詞島周辺海域に生息するハンドウイルカの個体群管理-個体識別と目視観察に基づく個体群特性値の推定-九州天草の通詞島周辺ではハンドウイルカが周年にわたって見られ、ウォッチングボ-トも運航されている。本研究の目的は、ハンドイルカ通詞島個体群の保護・管理に関連して、(1)生息数の推定、(2)分布とその制限要因の把握、(3)個体群特性値の推定、(4)将来の生息数変化の予測、(5)ウォッチングが個体群に与える影響の評価である。調査目的に変更はないし、当初の調査計画にほぼ沿ってデータを蓄積できた。ただし、予定していた他海域でのハンドウイルカ背鰭写真撮影は行わなかった。これは、天草灘での本種の来遊期が春であると示唆され、撮影を試みる時間的余裕がなかったためである。現時点で以下の知見を新たに得た。・天草灘に出漁する漁業者はハンドウイルカを主に春に発見していた。しかし、彼らは天草灘内で、通詞島周辺海域のように本種が周年にわたって出現する海域を知らなかった。通詞島ハンドウイルカ個体群は定住性の可能性が高い。・合計で154頭の個体識別ができた。通詞島周辺海域には200頭以上生息すると推定した。平成7年の出産盛期は夏以前と推定した。・全ての目視観察調査で通詞島周辺で群れを発見できた。群れの出現位置はどの調査日にも重複がかなり見られ、通詞島の北1.01.8kmの東西方向の帯状の範囲内にほぼ入っていた。この範囲は水深520mであった。・ときどき複数の群れが観察されたが、各群の移動方向の一致や行動様式の類似性が認められることが多かった。本研究はビデオカメラにより撮影された小型歯鯨のスナメリの画像の解析、長崎大学の所有するスナメリの標本の精査、および飛行機や船からの目視調査に基づいて、長崎沿岸海域に生息するスナメリの個体群生態学的特性値を推定することを目的とした。本年度までの研究成果を以下に記す。(1)飛行機からのビデオ撮影により、これまでに37群の画像撮影を行った。このうち36群は単一個体の群であり、1群のみ20頭以上の大群であった。個体の体長推定、これによる特性値の推定は予定通り次年度に行う。有明海における生息数はビデオ撮影画像より少なくとも500頭、人間の目視により2千頭と推定した(平成6年度日本水産学会で発表予定)。(2)長崎大学の所有する標本の精査から、長崎沿岸海域における本種の年齢、成長および繁殖に関する論文をまとめた(Shirakihara et al.1993,Marine Mammal Science)。本種は体長80cmで生まれ、5歳で140cmになる。雌は6-9歳で性成熟に達する。出産期は秋から春である。船からの目視調査に基づき、長崎沿岸海域における本種の分布と生息密度に関する論文をまとめた(Shirakihara et al.1994,Fisheries Science)。有明海、橘湾および大村湾が本種の主分布域であり、角力灘や佐世保以北での出現は稀である。生息密度は有明海中部で1平方km当たり1.31-1.60頭であった。群れの大きさは平均で1.7頭であった。本研究はビデオカメラにより撮影された小型歯鯨の画像の解析、長崎大学の所有するスナメリの標本の精査、および飛行機や船からの目視調査に基づいて、長崎沿岸海域に生息するスナメリの個体群生態学的特性値を推定することを目的とした。1.飛行機からのビデオ撮影により、46頭の画像を得た。

これらの体長推定値は0.72.2mの範囲にあった。有明海、橘湾における生息数は撮影個体数より少なくとも800頭と推定した。並行して実施した人間の眼による目視観察から、同海域の生息数を3093頭と推定した(平成7年度日本水産学会で発表予定)。2.船からの目視調査に基づき、長崎沿岸海域における本種の分布と生息密度に関する論文をまとめた。有明海、橘湾および大村湾が本種の主な分布域であり、角力灘や佐世保以北での出現は稀である。生息密度は有明海中部で1平方km当たり1.31-1.60頭であった。群れの大きさは平均1.7頭であった。3.スナメリ標本の歯と生殖腺の精査から、長崎沿岸海域における本種の年齢、成長および繁殖に関する論文を発表した。本本種は体長80cmで生まれ、5歳で140cmになる。雌は6-9歳で性成熟に達する。出産期は秋から春である。4.骨格標本の精査から骨格形態変異に関する2つの論文を発表した。1つは成長に伴う形態の変異と形態の雌雄差を記述し、他は形態の海域差より系群識別を試みたものである。頭骨の成長は4歳で停止する。頭骨の形態の雌雄差は顕著ではない。長崎沿岸海域では、有明海橘湾、大村湾の2つの系群が存在するとの見解を示した。
関節不動化が原因で生じる痛覚閾値低下による情動制御機構の解明

慢性痛は、組織損傷を伴う急性痛とは異なり、ストレスや抑うつ状態などの心理的要因が痛みの認知に大きく関与している。本研究では、足関節を不動化したラットを用い、情動の変化に関係する中脳辺縁系ドパミン神経に焦点を当て、慢性痛の心理的要因と痛覚閾値の低下との関連性を調べている。具体的には、1腹側被蓋野のドパミン神経の投射先である側坐核では遺伝子的変化を生じるのか、2腹側被蓋野に影響を及ぼす扁桃体は活性化するのか、1、2で痛覚閾値がどのように変化するのかを調べることで、痛覚閾値低下の神経調節機構を明らかにすることを目的とする。該当年度は、まず、足関節を固定し不動化したラットにおいて、von Freyfilamentの刺激による固定側の足部の痛覚閾値低下が生じることを確認した。また、うつ状態や不安関連行動については、関節固定により軽微なストレス状態ではあるものの過剰なストレス状態でないことが明らかとなった。1について調べるため、足関節不動化ラットの足部に刺激を加えたときの中脳辺縁系ドパミン神経のドパミン放出量をin vivoマイクロダイアリシ法により解析したところ、側坐核における足部の痛み刺激直後のドパミン放出量は関節を固定していないラットと異なる反応を示した。そこで、報酬刺激に対する応答性が変化しているかについて、嗜好性の高い食物を与えた後の側坐核でのドパミン放出量の変化を解析したところ、足関節不動化ラットではドパミンの応答性が消失していた。足関節不動化ラットにおける痛み刺激や報酬に対する中脳辺縁系ドパミン神経のドパミン応答性の変化の原因を解明するため、側坐核にドパミン受容体アゴニストやアンタゴニストを灌流したところ、中脳辺縁系ドパミン神経活性の変化が固定側足部の痛覚閾値の変化に影響を及ぼすことが明らかとなった。そのため、dual-probeマイクロダイアリシス法を用いた中脳辺縁系ドパミン神経活性の解析の研究も推進している。慢性的な痛覚閾値低下における中脳辺縁系神経回路の機能的役割を引き続き検討し、中脳辺縁系ドパミン神経系の反応と痛覚閾値の関係を明らかにする。また、鎮痛に関わるオピオイド受容体についても関与を明らかにしたいと考えている。具体的には、in vivoマイクロダイアリシス法により、ドパミン神経回路の機能調節に関わるドパミン関連シグナルを解析する。また、RT-PCR法を用いて側坐核でのドパミン受容体および鎮痛に関わるオピオイド受容体の発現量を測定する。中脳辺縁系ドパミン神経に影響を及ぼす扁桃体の活動性の関与の解明として、電位依存性ナトリウムチャネルを抑制するテトロドトキシンを扁桃体に注入し、活性化するものとしてChR2ウイルスを用いて発現させてオプトジェネティクスで刺激する。このときのドパミン反応性と痛覚閾値低下に変化があるかを調べる。

また、RT-PCR法を用いて側坐核でのドパミン受容体および鎮痛に関わるオピオイド受容体の発現量を測定する。中脳辺縁系ドパミン神経に影響を及ぼす扁桃体の活動性の関与の解明として、電位依存性ナトリウムチャネルを抑制するテトロドトキシンを扁桃体に注入し、活性化するものとしてChR2ウイルスを用いて発現させてオプトジェネティクスで刺激する。このときのドパミン反応性と痛覚閾値低下に変化があるかを調べる。当該年度において、学会発表可能となるまでの調査が終了しておらず、明確な結論付には至っていないため発表を行わなかった。このため、旅費としての支出がなかった。次年度は、マイクロダイアリシス法による解析に加え、RT-PCR法やオプトジェネティクスを用いた側坐核でのドパミン受容体および鎮痛に関わるオピオイド受容体の遺伝子的変化を測定に用いる物品、および研究成果の学会発表費として使用する。
平衡・非平衡における強相関系の理論的研究

近藤効果は、そのテーマの面白さとは裏腹に理論的にたいへん手ごわい問題である。これを扱うには、進んだ理論手法が特に重要となる。このため、本研究では数値繰り込み群という強力な理論手法を用いて研究を行なった。以下に本年度の成果をまとめる。(a) 2不純物系の近藤効果:スピントロニクスなどへの応用も期待される2不純物近藤模型の研究を精力的に行い、その成果を3編の原著論文としてPhys. Rev. B誌に出版した。論文タイトルの和訳は:●「1次元2不純物模型における現実的な量子臨界点」●「2不純物近藤モデルにおけるスピン相関関数の平衡・実時間の性質」●「2不純物アンダーソンモデルにおける有効低エネルギー記述」、である。これらの論文では、2つの近藤不純物の間の相関を詳細に調べ、物理的なパラメータを変化させたときに現れる興味深い量子臨界点の性質を明らかにした。数値繰り込み群を用いた正確な計算を基にした面白い成果である。この研究はLechtenberg氏が中心となり進めたものである。(b)近藤格子系における超伝導と磁気秩序・電荷秩序の競合:上記の近藤不純物のテーマはLechtenberg氏が以前より研究を始めていたものであるので、短期間に論文として成果発表することができた。一方で、本年度新たなにチャレンジしたテーマに関しては、多くの下調べに基づいて、近藤格子系の超伝導を取り上げた。これは、重い電子系CeCu2Si2の超伝導に関する最近の実験結果に触発されたものである。特に重い電子系を記述する近藤格子模型に、短距離の引力相互作用を導入した時の超伝導と磁気・電荷秩序との競合を調べた。この研究のため、超伝導と磁性が共に扱えるように数値繰り込み群の方法を改良した。得られた結果は●「引力ハバード相互作用をもつ近藤格子における電荷・磁気・超伝導の協奏」というタイトルで原著論文として出版した。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、局所的な多体効果に重点を置き、強相関系の平衡・非平衡現象の理論的研究を行うことを目的としている。特に、局所多体効果の典型例である近藤効果を中心に時間依存により発現する現象を解明する。本年度は、不純物系での近藤効果に関する新奇な現象を理論的に解明した。特に、2不純物アンダーソンモデルに現れる新しいタイプの量子臨界点の存在を明らかにした。さらに、この考察をスピン相関関数の実時間ダイナミクスに拡張した。不純物間の距離が短い場合は、RKKY相互作用によって系の性質が支配される一方で、長距離の場合は近藤効果が相関関数の符合と振幅に大きな影響を与えることを明らかにした。突然のパラメタの変化に伴うクエンチ非平衡ダインミクスに関しては、フェルミ速度を持った強磁性の波が系の中を伝わることを見出した。中でも最も顕著な性質は、不純物の距離がある特別な値をとるとき、相関関数は近距離でのみ変化するというものである。これは、この特別な距離においては、低温で伝導電子が不純物と分離するためである。この効果は、スピンキュービット作成するのに有用である。というのは、パリティの対称性は、スピン間のエンタングルメントを保護し、スピン相関が減衰するのを防ぐためである。この成果は、論文投稿準備ができている段階である。現在、周期的に不純物が並んだ近藤格子における超伝導の研究を展開している。特に、スピン密度波に対する超伝導の影響を調べている。これまでにBauerらによってDMFTを用いて、このような系は研究されてきたが(Phys. Rev. B 79, 214518, 2009)、これはSU(2)対称性を破っているためスピン密度波には利用できない。京都大学のR. Peters講師と共同で対称性の破れをうまく取り入れる新しい方法を開発し、その有用性を確認した。当初計画していた、局所的な電子相関の典型例である近藤効果のダイナミクスと、近藤効果と超伝導の絡み合いによる新奇な現象を理論的に理解することができた。これには、最先端の数値計算の方法である数値繰り込み群を用いた。精度が高く信頼できる結果が得られている。また、共同研究に関しても、本研究室の講師であるRobert Peters氏と相補的な方法を用いることで、高いレベルの協力関係を生むことができた。京都大学に来てから始めた近藤効果と超伝導のテーマに関しても、着実の成果が得られつつある。現在、論文発表に向けて成果をまとめているところである。

これらの論文では、2つの近藤不純物の間の相関を詳細に調べ、物理的なパラメータを変化させたときに現れる興味深い量子臨界点の性質を明らかにした。数値繰り込み群を用いた正確な計算を基にした面白い成果である。この研究はLechtenberg氏が中心となり進めたものである。(b)近藤格子系における超伝導と磁気秩序・電荷秩序の競合:上記の近藤不純物のテーマはLechtenberg氏が以前より研究を始めていたものであるので、短期間に論文として成果発表することができた。一方で、本年度新たなにチャレンジしたテーマに関しては、多くの下調べに基づいて、近藤格子系の超伝導を取り上げた。これは、重い電子系CeCu2Si2の超伝導に関する最近の実験結果に触発されたものである。特に重い電子系を記述する近藤格子模型に、短距離の引力相互作用を導入した時の超伝導と磁気・電荷秩序との競合を調べた。この研究のため、超伝導と磁性が共に扱えるように数値繰り込み群の方法を改良した。得られた結果は●「引力ハバード相互作用をもつ近藤格子における電荷・磁気・超伝導の協奏」というタイトルで原著論文として出版した。平成29年度の局所的な不純物系の理論研究を継続して進めるとともに、遍歴する多体系に研究の重点を置く。H29年度の研究で、重い電子系における超伝導と磁気秩序の関係をある程度明らかにすることができた。この研究をさらに展開し相転移の性質をより詳しく調べ、相図を完成する予定である。さらに、half-fillingの条件からずれた場合の、スピン密度波への超伝導の影響も調べる。また、強相関電子系の量子相における相関関数の実時間ダイナミクスに関する研究にもチャレンジしたい。主に代表の川上と分担者のLechtenbergが研究を進めるが、多体系の数値計算の専門家である、同じ研究室所属のPeters講師とも共同研究を継続する。異なる理論手法を合わせて用いることでシナジー効果が生まれ、重い電子系において面白い成果が得られると考えている。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
子宮内膜への一過性遺伝子導入技術を用いた着床不全患者への遺伝子治療法の開発

我々は、まず生体内に高い効率で遺伝子を導入するための試行錯誤を行い、ゼンダイウィルスを不活化しその外殻に外来遺伝子を導入するHVJ-Eベクターが、マウス妊娠子宮内膜に最も高い効率で一過性に遺伝子を導入しうることを報告した(Mol Hum Reprod 2003:9;603)。続いて、着床期に子宮内膜で増加、減少する物質を調べ、多機能転写因子であるNF kappaBが着床期、子宮内膜上皮で活性化されていることを発見、報告した(Am J Reprod Immunol 2004:51;16)。しかし、NF kappaBシステムのノックアウトマウスの報告によると、胎性致死、あるいは正常表現型となり、NF kappaBの着床における生理的意義は不明であった。そこでNF kappaBの活性化をおさえるI NF kappaB alphaのドミナントネガティブ変異体cDNAをマウス着床期子宮内膜に一過性強制発現させた。すると、NF kappaB活性は対照の半分以下に抑制され、エバンスブルーによる着床部位の判定、その後の胎児発育、分娩日は1日遅れながら正常に経過し、新生児にも何ら影響を与えなかった(BBRC 2004:321;886)。さらに我々は二本鎖DNAデコイをNF kappaB結合コンセンサス配列に対し作成し、このデコイも同様に子宮内膜に導入すると着床を1日遅延させることを確認した(未発表)。これからの研究成果は不妊治療時の最大の問題である着床不全の病態を解析する基礎的知見となる。子宮腔内に安定して遺伝子を胎児に悪影響を及ぼすことなく導入できる本システムは将来の遺伝子治療の有用な手技となりうる。NF kappaBがマウス子宮内膜上皮において、発情前期、発情期、および着床期に強く活性化されており、そのコンポーネントはp50とp65であることをゲルシフトアッセイ・免疫組織化学法を用いて証明した。この成果はAmerican Journal of Reproductive Immunology 51:16-21,2004に掲載された。センダイウイルス由来のHVJ-Eベクターを用いた妊娠初期マウス子宮内膜に対する生体内一過性遺伝子導入・発現系を確立した。この方法は従来のカチオニックリポソーム法に比べルシフェラーゼ発現ベクターを用いた検討では100倍以上の高効率を示し、発現ベクター由来のベータガラクトシダーゼ活性は子宮内膜上皮に局在し、なおかつ妊娠経過を阻害しなかった。この成果はMolecular Humanreproduction 9;603-609,2003に掲載された。HVJ-Eベクターを用いた遺伝子導入・発現系を応用し、NF kappaBの活性化を阻害するI kappaBdominant negative変異体(IkBaM)を発現ベクターに組み込み、妊娠初期子宮内膜に導入した。これにより、妊娠初期子宮のNF kappaB活性は半分以下に減少したことをゲルシフトアッセイで証明した。また、妊娠経過を詳細に解析したところ着床の日が一日遅れ、これに伴い分娩日も一日遅延することが明らかになった。この成果は現在投稿準備中である。我々は、まず生体内に高い効率で遺伝子を導入するための試行錯誤を行い、センダイウイルスを不活化しその外殻に外来遺伝子を導入するHVJ-Eベクターが、マウス妊娠子宮内膜に最も高い効率で一過性に遺伝子を導入しうることを報告した(Mol Hum Reprod 2003:9;603)。続いて、着床期に子宮内膜で増加、減少する物質を調べ、多機能転写因子であるNF kappaBが着床期、子宮内膜上皮で活性化されていることを発見、報告した(Am J Reprod Immunol 2004;51;16)。そこでNF kappaBの活性化をおさえるI kappaB

alphaのドミナントネガティブ変異体cDNAをマウス着床期子宮内膜に一過性強制発現させた。すると、NF kappaB活性は対照の半分以下に抑制され、エバンスブルーによる着床部位の判定、その後の形態的観察から、着床が1日遅延することが明らかになった。しかし、この操作によってその後の胎児発育、分娩日は1日遅れながら正常に経過し、新生児にも何ら影響を与えなかった(BBRC 2004:321;886)。さらに我々は二本鎖DNAデコイをNF kappaB結合コンセンサス配列に対し作成し、このデコイも同様に子宮内膜に導入すると着床を1日遅延させることを確認した(未発表)。これらの研究成果は不妊治療時の最大の問題である着床不全の病態を解析する基礎的知見となる。子宮腔内に安定して遺伝子を胎児に悪影響を及ぼすことなく導入できる本システムは将来の遺伝子治療の有用な手技となりうる。