hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
非対称な知識を持つ集団の対面協調作業支援に関する研究

本研究では、テーブルを囲む少人数参加者の合議に焦点を当て、知識の非対称性を有する参加者間のコミュニケーション様態と議論結果との関連性を分析することを目的としている。本年度は、昨年度に実施した分析をより厳密に測定する実験として、どのような要因が結合型の課題遂行プロセス、すなわち参加メンバ全員の納得・合意によって課題が達成されるタイプの協同プロセスに影響を及ぼすかを調査した。本実験では、昨年度提案した「ワンナイン」課題(九つの代替案から議論を通じて一つの案を選択する課題)を用いて、(1)インセンティブの時間的変動の有無、(2)グループ全体の利得の参照有無、の二つを変数として操作することで参加メンバの合意に至るプロセスを観察した。この結果、グループ全体の効用が参照可能な状況下、かつ全ての参加メンバの各代替案に対する評価が時間変動しない場合に、より参加メンバ全体にとって効用の高い案で合意できる可能性があることが観察された。この結果と得られた議論のログから、(1)事前に全ての代替案に関する検討を各参加メンバに促し、議論の進行に伴う態度変容を最小限に抑えるよう図る、(2)各代替案を選択した場合のグループ全体の効用を提示し、代替案選択の方針を決めるメタな議論の必要性を参加メンバに意識させる、(3)各代替案に関する議論の過程を外在化し、同じ議論の繰り返しを回避させる、といった支援が有効であるという示唆が得られた。この知見は知識の非対称性がある参加メンバの協同におけるプリプロセスの重要性を示すものであり、議論支援システムが効果的に機能するための前提条件として重要な意義を持つ。また、参加メンバの視点を反映してオブジェクトの役割を変更させるために、異なる波長の赤外光を利用し、認識IDを多重化させることが可能なテーブルトップオブジェクトを考案した。これとLumisight Tableを組み合わせることでテーブルを囲む参加メンバ毎に選択的に情報を提供できるシステムの寒現が可能になった。
キナーゼ阻害薬の悪性黒色腫増殖抑制に対するメカニズムの解明

Wntシグナル伝達系は発癌に重要なシグナル伝達系である。悪性黒色腫においてもWntシグナルの活性化が報告されている。今回の研究では消炎鎮痛薬として使用されているcelecoxibが、Wntシグナル伝達系を選択的に阻害する分子標的薬として機能するかどうかを検討した。悪性黒色腫患者切除検体を用いてWntシグナルのkey moleculeであるβ-cateninの発現を検討したところ、この蛋白の発現が認められた。さらに悪性黒色腫細胞株にcelecoxibを添加したところ、増殖抑制効果が認められた。さらに興味深いことに、β-cateninの発現量とcelecoxibの増殖抑制効果に相関が認められた。Wntシグナルは発癌、発生などに関与する重要なシグナル伝達系である。悪性黒色腫においても、Wntシグナルの異常な活性化が起こることが報告されていている。そこで、当科で加療した悪性黒色腫患者から樹立した悪性黒色腫細胞株及び他の研究室から導入された悪性黒色腫細胞株を用いて、細胞株ごとのWntシグナルの活性化状況を調べることとした。これまで報告したように、Wntシグナル伝達系のkey moleculeである、beta-cateninの発現量を免疫組織染色とウエスタンブロットで検討した。その結果、細胞株ごとにbeta-cateninの発現量に差があるとことが解明された。Wntシグナル伝達系が悪性黒色腫の増殖を促進する機序として、細胞周期に関与するcyclinを抑制するp16の転写をbeta-cateninが抑制するというメカニズムが提唱されている。そこで、今回われわれは、悪性黒色細胞株において、beta-cateninとp16の発現に相関関係があるかどうかを検討した。その結果、これらの2つのタンパクは発現には期待された相関関係が見出されなかった。今後は、Wntシグナルがどのように、悪性黒色細胞株を増殖を促進するのかそのメカニズムを検索する予定である。また、Wntシグナルが、悪性黒色細胞株の増殖を促進していることを直接解明するため、RNAiを用いてbeta-cateninの発現を抑制し、細胞増殖は低下するかどうかを検討する予定である。さらに、Wntシグナルを直接阻害する薬剤(分子標的薬)が悪性黒色細胞株の増殖を抑制するかどうかも合わせて検討する予定である。これまで、我々は、悪性黒色腫細胞株を用いて、細胞株ごとのWntシグナルの活性化状況を検索してきた。その結果、細胞株ごとにWntシグナルのkey moleculeであるbeta-cateninの発現量に差があるとことが解明されたものの、細胞周期に関与するcyclinを抑制するp16の発現とbeta-cateninの発現とに相関関係を見いだすことが出来なかった。そこで、他の皮膚悪性腫瘍とWntシグナルとの関連を検討することとした。現在の日本は高齢化社会にはいり、皮膚悪性腫瘍の患者数も年々増加している。特に紫外線の影響が大きい、有棘細胞癌の症例数の増加が著しい。そこで、有棘細胞癌の発症メカニズムと新規の治療法の確立を目指し、有棘細胞癌の発症におけるWntシグナル関与を検索した。有棘細胞癌の発症に紫外線が関与していることは今までの研究結果からも明らかである。しかし、その他に瘢痕や扁平苔癬、萎縮性硬化性苔癬など慢性炎症性疾患も有棘細胞癌の発症母地となることが知られているが、その詳細なメカニズムは不明のままである。我々はこれまで遺伝子変異誘導酵素AIDが有棘細胞癌やその前駆病変で異常な発現をしていることを報告している。今回、AIDを培養表皮角化細胞に強制発現させたところ、Wntシグナルの重要な構成要素であるbeta-cateninの分布に異常を来すこと、細胞接着に重要なE-cadherinの局在が変化することを解明した。このことは、AIDがWntシグナルの異常な活性化を引き起こし、有棘細胞癌の発症や転移などに関与している可能性を示している。さらにAIDを特異的に抑制する分子標的薬が開発されれば、有棘細胞癌の治療に有用な可能性を示唆している。当科ではキナーゼ阻害薬であるイマチニブに投与により転移巣および原発巣が縮小し、生存期間が延長した進行期悪性黒色腫症例を経験した。しかし、すべての悪性黒色腫に対して、イマチニブが著効する訳ではない。我々はなぜ、イマチニブをはじめとするキナーゼ阻害薬に治療効果を示す症例と、治療効果がない症例があるのか、そのメカニズムの解明を目指すこととした。そのメカニズムを解明することで、悪性黒色腫の増殖抑制におけるキナーゼ阻害薬の作用機序を説明できると考えたからである。まず、我々はWntシグナルに注目した。

Wntシグナルは発癌、発生などに関与する重要なシグナル伝達系である。悪性黒色腫においても、Wntシグナルの異常な活性化が起こることが報告されていている。そこで、当科で加療した悪性黒色腫患者から樹立した悪性黒色腫細胞株及び他の研究室から導入された悪性黒色腫細胞株を用いて、細胞株ごとのWntシグナルの活性化状況を調べることとした。具体的には、Wntシグナル伝達系のkey moleculeである、beta-cateninの発現量を免疫組織染色とウエスタンブロットで検討した。その結果、細胞株ごとにbeta-cateninの発現量に差があるとことが解明された。今後、悪性黒色腫細胞株のbeta-cateninの発現量の差でイマチニブの感受性が異なるかどうか、すなわち、症例ごとのイマチニブの治療効果の差がWntシグナルの活性化の差で説明できるかどうかを検討する予定である。Wntシグナルがどのように悪性黒色細胞株の増殖を促進するのか、そのメカニズムが不明のままである。残念ながら、現在は仮説が提唱できていない。文献検索を詳細に行ない、仮説を立て、実験で確かめる必要ある。当初、初代培養色素細胞にconstitutive activeな変異をもつKit遺伝子を導入した細胞株の樹立を目指したが、導入が成功しなかった。この理由として、細胞は持続的な増殖シグナルが入るとapoptosisに陥るか、p16をはじめとするsenescenceを引き起こす遺伝子の発現が誘導される。このため、Kit遺伝子導入細胞株の樹立が難しいと考えた。そこで、すでに樹立されている悪性黒色腫細胞株を使用することとした。細胞株ごとのKitの発現を検討するとともに、細胞株ごとのWntシグナルの活性化状態の違いも、キナーゼ阻害薬の効果に影響するかどうかを調べることとした。Wntシグナルが悪性黒色細胞株の増殖を促進している直接的な証明はまだなされていない。本年度は、RNAiなどを用いて、悪性黒色細胞株でWntシグナルを抑制し、増殖抑制が引き起こされるかどうかを検討する。また、当研究室では、Wntシグナルをターゲットとしたsmall moleculeの導入が可能であるので、これを用いて、悪性黒色細胞株の増殖抑制効果を検討する。さらに、現在使用されている薬剤の中で、Wntシグナル伝達系を抑制するものがあるかどうかを検索し、その薬剤が悪性黒色細胞株の増殖を抑制するのかどうかも検討する。上述したように、Kit変異細胞株の樹立が難しいため、悪性黒色腫細胞株を使用することとした。細胞株ごとにKit及びWntシグナルなどの他の発癌に重要なシグナル伝達系の活性化状態を調べ、キナーゼ阻害薬の効果をin vitroで検討する。また、細胞株に対するキナーゼ阻害薬の増殖抑制が認められない場合には、他の薬剤と併用することで、効果が現れるかどうか検討する。具体的には消炎鎮痛剤であるCOX-2阻害薬はWntシグナルを抑制する可能性が示唆されているので、この薬剤を用いて、増殖抑制を検討する予定である。
ビッグデータを用いた機械学習に適した最適化アルゴリズムとアーキテクチャの構成

本研究では第一にSVMやロジスティック回帰などを包含する正則化付き経験リスク最初化問題について、複数のプロセスが非同期的に動作することで最適化を行うことができるスキームを提案、効率的な分散学習が行えることを理論・実験の両面から示した。第二に、従来では数TBのデータを用いなければ学習できないスパース学習について、扱うデータ量を抑えながらスパース学習が可能であるスキームを提案した。提案手法はテキストデータやDNA配列データなどでは部分文字列の特徴量を用いた学習に関して、接尾辞配列などの効率的なデータ構造を用いる事によって、部分文字列に対応する特徴を効率よく抽出する事が可能であることを示した。本年度はDual Cached Loopsのさらなる大規模化の基盤となる最適化アルゴリズムの開発・実装および論文執筆を行い、スパース学習へのDual Cached Loopsの拡張に関して最適化アルゴリズムの開発・実装をおこなった。前者のアルゴリズムについては新規性が高く、単一マシンのみでなく、複数マシンにまたがる場合でも応用可能であり、当該アルゴリズムの実装を行い、有用性を確認し概要を日本応用数理学会の2014年度年会にて発表し、論文を投稿予定である。後者に関しては検討の結果最適化アルゴリズムとして座標降下法を採用し、これを用いたDual Cached Loopsを実装し、大規模なデータを用いてスパース学習が可能である事を確認した。さらに、これを利用して、特徴を抽出しながらの学習を行う事も可能であると考えられ、これが達成されれば実質的に大量なデータと同様の情報量を持つ少量のデータで代替しつつ学習を行う事ができ、Dual Cached Loopsのさらなる有用性を示す事ができると考えられる。現在、この方法について評価実験の段階である。研究計画で示していたデータ量を抑えながらスパース学習が可能であるスキームを考案、実装し、その有効性を示した。具体的には、従来は非線形識別でしか達成できないほどの高次元写像を特徴抽出アルゴリズムを別のプロセスで処理することによりデータ行列を前もって計算する場合は数TBに上るような場合の学習に対しても生データから効率的に学習が可能である事を明らかにした。特に、テキストデータやDNAデータなどでは部分文字列の特徴量を用いた学習が効率的に行えることを実験により示し、成果を国際会議の発表論文としてまとめた。研究計画で示していたデータ量を抑えながらスパース学習が可能であるスキームを考案、実装し、その有効性を示すことができた。本研究について申請者は以下のように2つの項目について研究実施計画を掲げていた。1. SSDを用いた単一マシンにおけるDual Cached Loopsのさらなる大規模化SSDの特性を生かすことにより数十TBのデータに基づくSVMの学習が可能であるスキームを考案、実装する。さらに、それを実際に利用した知識発見の応用を行い、開発されたスキームの有効性を示し、実データに応用し実際に有用な知識を取り出す事を目的とした実践的なデータマイニングとしての可能性を探る。従来では数TBのデータを用いなければ学習できないスパース学習について、扱うデータ量を抑えながらスパース学習が可能であるスキームを考案、実装する。さらに、それを実際に利用した知識発見の応用を行い、開発されたスキームの有効性を示す。特に研究の後半段階では、本来は非線形識別でしか達成できないほどの高次元写像を利用可能なアルゴリズムを検討する。1.について、數十TBの実データで有用な知識を取り出す実践的な応用がMicrosoft, Google, Facebook等の世界的なスケールを持つIT産業分野には多くあるものの、広く応用可能なデータマイニング手法として確立されうるほどの公開データが存在せず、どのような形で応用研究を行うことが可能か検討中である。2.について、従来では数TBのデータを用いなければ学習できないスパース学習について、扱うデータ量を抑えながらスパース学習が可能であるスキームを考案、実装し、成果をECML-PKDDにて発表した。特にテキストデータやDNA配列データなどでは部分文字列の特徴量を用いた学習により、接尾辞配列などの効率的なデータ構造を用いる事によって、部分文字列に対応する特徴を効率よく抽出する事が可能であることを示した。2.について論文を発表し、さらに派生した研究で成果が出始めている。1.について、SVMだけでなく、ロジスティック回帰などを包含する正則化付き経験リスク最初化問題について、複数のプロセスが同時に動作することで最適化を行うことができるスキームを考案、実装し、成果をECML-PKDDにて発表した。本スキームは単一マシンにおいても複数マシンにおいても同様に動作することができる汎用的なものである。

2.について、従来では数TBのデータを用いなければ学習できないスパース学習について、扱うデータ量を抑えながらスパース学習が可能であるスキームを考案、実装し、成果をECML-PKDDにて発表した。特にテキストデータやDNA配列データなどでは部分文字列の特徴量を用いた学習により、接尾辞配列などの効率的なデータ構造を用いる事によって、部分文字列に対応する特徴を効率よく抽出する事が可能であることを示した。本研究では第一にSVMやロジスティック回帰などを包含する正則化付き経験リスク最初化問題について、複数のプロセスが非同期的に動作することで最適化を行うことができるスキームを提案、効率的な分散学習が行えることを理論・実験の両面から示した。第二に、従来では数TBのデータを用いなければ学習できないスパース学習について、扱うデータ量を抑えながらスパース学習が可能であるスキームを提案した。提案手法はテキストデータやDNA配列データなどでは部分文字列の特徴量を用いた学習に関して、接尾辞配列などの効率的なデータ構造を用いる事によって、部分文字列に対応する特徴を効率よく抽出する事が可能であることを示した。Dual Cached Loopsのさらなる大規模化に関し、基盤となる最適化アルゴリズムの開発・実装および論文執筆を行うことができた。スパース学習へのDual Cached Loopsの拡張に関して最適化アルゴリズムの開発・実装を完了する事ができた。研究計画段階で示していたように、データを格納する形式を検討することによりさらなる大規模化及び効率化をはかる。必要に応じて汎用KVSデータベースの使用を検討する。1.について、今後のデータの利用可能性を検討しつつ、小データからの大規模学習の可能性について探る。2.について、解釈性の問題をがあることを発見したため、これについても解決策を考案する。機械学習スパース学習を用いたDual Cached Loopsの拡張について、今年度の検討において、実質的に大量なデータと同様の情報量を持つ少量のデータで代替しつつ学習を行う事ができることがわかり。現在、この方法について評価実験の段階である。今後もこの部分に関して重点的に検討を行っていく予定である。研究計画が次年度までに期間延長を申請したため(申請書参照)これに伴い次年度に使用する研究費が生じた。論文執筆、公開に伴う経費や発表のための出張経費へ使用する予定である。
マダガスカルおよび沖縄産植物に由来する生物活性化合物の探索研究

昨年度までにマダガスカル現地で胃の不調に対して用いられるニシキギ科植物Mystroxylon aethiopicumについて化学成分に関する研究を行い、葉部のメタノール抽出物から2種の新規アガロフラン型セスキテルペンを単離しその化学構造を決定し、日本生薬学会第64回年会にてその研究成果を発表した。さらに、マダガスカル産Distephanus属植物の一種についてジカ熱やデング熱などの媒介昆虫(ベクター)である蚊の幼虫ヒトスジシマカAedes albopictusに対する殺幼虫活性物質の探索研究を進めた結果、4種の新規セスキテルペン類を単離した。その化学構造は1Dおよび2D NMR、HR-ESI-MSなどによる解析により決定した。単離した既知化合物について活性を評価したところ、2つの新規化合物に比較的強い活性が見いだされたことから、この化合物がMystroxylon aethiopicumの抽出物に見られた活性の少なくとも一部を担うものであることが明らかになった。一方、沖縄産のヒイラギズイナがヒト肺がん細胞A549に対して良い活性を示したことから含有活性成分の解析を進めた。ヒイラギズイナItea oldhamiiはユキノシタ科ズイナ属の常緑小高木で南西諸島や台湾に分布する。同植物の葉部の抽出物について活性を指標にシリカゲル、ODS、HPLCなどにより単離精製をするめた結果、新規ネオリグナン4種を単離することに成功した。その化学構造は同様に1Dおよび2D NMRなどのスペクトルデータを詳細に解析することで決定した。その他に単離した既知化合物16種とともに、得られた化合物に対しがん細胞増殖抑制試験を行ったところ、新規ネオリグナン類に強い活性を見出した。以上の結果、本研究で得られた新規化合物は有用な抗がん剤候補になりうる可能性が示された。すでにヤブコウジ科植物シシアクチについての化学成分研究により「Alkylated Benzoquinones: Ardisiaquinones A-Hfrom the Leaves of Ardisia quinquegona and Their Anti-Leishmania Activity」というタイトルで, CHEMICAL & PHARMACEUTICAL BULLETIN, 66巻, 7号, pp.757-pp.763, (2018)にて国際学術誌に論文を掲載した。ほか、「ヤブムラサキ(Callicarpa mollis)葉部からの新規化合物及び抗Leishmania活性成分の探索」、「フシグロ(Silene firma)地上部の成分探索」などを学会報告しているなど順調に研究成果を上げているため。また、昨年度の報告で今後の予定として提示したベクター昆虫制御剤の探索研究も順調に進めることができたことから、当初の予定通りに進行していると考えられる。沖縄産植物およびマダガスカル産植物について、継続してヒトがん細胞に対する増殖抑制物質やデング熱やジカ熱などの昆虫媒介性感染症のベクター昆虫ヒトスジシマカ(Aedes albopictus)の幼虫を用いた殺蚊幼虫活性試験、線虫を用いた寿命延長活性試験などを用いて残りの期間でできるだけの成果を生み出せるよう研究を鋭意進めたい。また、単離した化合物の活性を詳細に評価したのち、投与-非投与間でのタンパク質の発現変動解析を2D-PAGEを用いて行い、活性発現メカニズムの一旦を解明することを予定している。マダガスカルから入手したニシキギ科植物Mystroxylon aethiopicumは現地で胃の不調に対して用いられる植物である。化学成分に関する研究が十分でないことから、今回、詳細に検討した結果、葉部のメタノール抽出物から2種の新規アガロフラン型セスキテルペンを単離し、その化学構造を決定した。また、沖縄で採取したカラスザンショウ(Zanthoxylum ailanthoides)の葉部について含有成分の解析を試みたところ、7つの新規配糖体を見出し、その化学構造を改良Mosher法等により絶対配置を含めて明らかにした。同じく沖縄で採取したオオシマコバンノキ(Breynia officinalis)は、抽出物にチロシナーゼ阻害活性が見られたことから活性を指標に分画を進めたところ、4つの新規アシル化ヒドロキノン配糖体を単離した。次に、その他に単離した既知化合物とともにin vitroチロシナーゼ阻害活性を評価したところ、1つの新規化合物に比較的強い活性が見いだされたことから、この化合物がオオシマコバンノキの抽出物に見られた活性の少なくとも一部を担うものであることが明らかになった。さらに、この化合物についてゼブラフィッシュを用いたin vivo melanogenesis阻害活性試験を行った。すなわち、96 well plateに分注したゼブラフィッシュ初期胚に対して、種々の濃度の化合物を投与し、顕鏡下でメラニン合成阻害活性を、また、in vivo毒性に関してはGFPラベルした血管網のパターンを無処置群と比較することで評価した。その結果、本研究で得られた新規化合物はin vivoモデルにおいても有用なメラニン生成抑制剤になりうる可能性が示された。

その化学構造は1Dおよび2D NMR、HR-ESI-MSなどによる解析により決定した。単離した既知化合物について活性を評価したところ、2つの新規化合物に比較的強い活性が見いだされたことから、この化合物がMystroxylon aethiopicumの抽出物に見られた活性の少なくとも一部を担うものであることが明らかになった。一方、沖縄産のヒイラギズイナがヒト肺がん細胞A549に対して良い活性を示したことから含有活性成分の解析を進めた。ヒイラギズイナItea oldhamiiはユキノシタ科ズイナ属の常緑小高木で南西諸島や台湾に分布する。同植物の葉部の抽出物について活性を指標にシリカゲル、ODS、HPLCなどにより単離精製をするめた結果、新規ネオリグナン4種を単離することに成功した。その化学構造は同様に1Dおよび2D NMRなどのスペクトルデータを詳細に解析することで決定した。その他に単離した既知化合物16種とともに、得られた化合物に対しがん細胞増殖抑制試験を行ったところ、新規ネオリグナン類に強い活性を見出した。以上の結果、本研究で得られた新規化合物は有用な抗がん剤候補になりうる可能性が示された。すでにヤブコウジ科植物シシアクチについての化学成分研究により「Alkylated Benzoquinones: Ardisiaquinones A-Hfrom the Leaves of Ardisia quinquegona and Their Anti-Leishmania Activity」というタイトルで, CHEMICAL & PHARMACEUTICAL BULLETIN, 66巻, 7号, pp.757-pp.763, (2018)にて国際学術誌に論文を掲載した。ほか、「ヤブムラサキ(Callicarpa mollis)葉部からの新規化合物及び抗Leishmania活性成分の探索」、「フシグロ(Silene firma)地上部の成分探索」などを学会報告しているなど順調に研究成果を上げているため。また、昨年度の報告で今後の予定として提示したベクター昆虫制御剤の探索研究も順調に進めることができたことから、当初の予定通りに進行していると考えられる。マダガスカル産植物ライブラリーに対して、ジカ熱などの昆虫媒介性感染症のベクター昆虫であるヒトスジシマカ(一筋縞蚊: Aedes albopictus)の幼虫を用いた殺蚊幼虫活性試験で活性が見いだされた植物2種について現在、検討を進めている、すでに新規セスキテルペンを活性成分として見出しており、今後さらに検討を加えることでより多数の活性新規化合物を発見できると考えている。また、アカハダノキの活性成分やハシカンボクの活性成分に関してさらに含有成分の詳細な検討を進めるとともに、タンパク質の変動解析などを加え、活性発現メカニズムの一旦を解明することを予定している。
縄文時代の通婚圏

これまで行った成果に、新たに広島県の太田貝塚を加えた。今回利用する方法は資料を壊すことのない、非破壊方法である歯冠計測と歯の非計測的特徴を用いた。歯冠計測において、東海では、三河湾沿岸の遺跡には男性、女性とも距離が近い。外群としての太田を加えても結果は殆ど同じで、特に伊川津と吉胡の女性は形態距離が非常に近く近縁の値を示す。男性は、東北の中沢浜と大洞が婚姻後も男性が在地に残る嫁入婚である可能性を示した。非計測的特徴においても、渥美半島の遺跡は他地域とは独立したクラスターを形成し、遺跡間の距離は近く近縁の可能性が強い。渥美半島周辺の遺跡間では、遺伝的にまとまってきたことが証明できた。国内所蔵の縄文時代人骨のデータ収集を継続して行った。今年度は歯の形態にかかわるデータ収集だけでなく、下肢骨の筋付着面における形態の確認作業も同時に行った。歯の形態では、縄文時代後期と晩期では地域内での類似度が高く、他地域とは大きく異なるクラスターを形成することが確認できた。特に東海地域においては、男女とも非常に高い類似傾向を示し、婚姻においては東海地域圏内で通婚が繰り返されている可能性を推測できた。また、男性に比べて女性の方が類似傾向を示す数値が小さいことから、女性の方が婚姻に際して移動する距離が小さく、生まれ育った地域圏で婚姻後も居住する傾向が強いことが指摘できた。これまで山陽地域でサンプル数が大きく年代が特定している遺跡は岡山県の津雲貝塚のみであったが、広島県の太田貝塚の年代が、新たな分析から特定された。それに伴い人骨出土数の多い太田貝塚の歯冠計測と歯の非計測的特徴のデータ収集を行った。山陽地域内の遺跡間比較を行うことが可能になり、データの収集を終了した。下肢骨の筋付着面については縄文時代と同様の傾向を示す古墳時代と江戸時代の一部の資料について、その同一と差異について予備的な考察を行った。これらの成果については国際人類学民族学会議および日本人類学会で成果報告を行った。また本研究の遂行中に英国で検討された縄文時代人骨の頭蓋骨内板に認められる病理痕跡については写真撮影の画像をもとに英国ヨーク大学のBrothwell博士と検証中である。縄文時代後期から晩期の出土人骨のうち、沿岸部に位置する遺跡出土の資料の通婚圏について研究を進めた。三河湾沿岸の縄文時代遺跡群は、土器や副葬品の分析から婚姻後の居住が選択居住であることが指摘されてきた。当地域では、歯の計測および非計測的特徴の分析から、男女ともに非常に限られた狭いエリアでの婚姻が行われた可能性とともに、女性に比べると端正の方がより分散域が大きいことが示された。特に三河湾沿岸地域では歯の分析から得られる差異が殆どなく、遺伝的に近い可能性が示された。そこで、三河湾沿岸部の縄文時代遺跡群では、限られたエリア内での婚姻が繰り返されることにより男女とも、他地域に比べると集約された様に一つの集団となることが確認できた。また、女性に比べると男性の方がやや分散が認められたことから、地域内での婚姻が繰り返されるが、男性の方が移動する範囲がわずかではあるが広い可能性が指摘で来た。同時に縄文時代以降の弥生時代・古墳時代の人骨、韓国地域の同時代人骨などとも比較分析を行い、三河湾沿岸地域の通婚におけるエリアが限られた範囲内であることがより明確に示すことが出来た。以上の分析結果は、東南アジア考古学会、ヨーロッパ人類学会、イギリスの骨考古学会でそれぞれ成果報告を行った。特にイギリスでの研究発表は島国という類似環境ということもあり、活発な意見交換が出来た。特に歯の研究を行うロンドン大学のSimon Hillson博士、土器の地域性の研究を行うセインズベリー研究所のSimon Kaner博士とは今後も頻繁に意見交換を行う事で相互協力の関係を築くことが出来た。縄文時代出土人骨資料の通婚圏について研究した。三河湾沿岸の縄文時代遺跡群は、歯の計測と非計測的特徴の分析から、男女ともに非常に限られた狭いエリアでの婚姻が行われ、女性に比べると男性の方が分散域が大きいことが示された。三河湾沿岸部の縄文時代遺跡群では、限られたエリア内での婚姻が繰り返されることで、男女とも他地域より集約された集団となることが確認できた。新たに広島県の太田の資料を外群データとして用い、女性は特に伊川津と吉胡の形態距離が近縁の値を示した。男性は東北の中沢浜と大洞には差がなく、嫁入婚である可能性を示した。非計測的特徴でも、渥美半島の遺跡は他地域とは独立し近縁の可能性が強い。

特筆すべき点は、非計測的特徴で示された山陽地域についてである。津雲と太田の遺跡間に明らかな有意差が認められ、津雲の遺伝的隔離は太田にも該当すること示された。山間部の資料の中心となる長野県北村遺跡出土人骨は、データの収集が終了したので、今後速やかに公表の予定である。以上の分析結果は、国内外の学会で成果報告を行った。特に英国での発表は島国という類似環境のため、活発な意見交換が出来た。歯の研究を行うロンドン大学のSimon Hillson博士とCarolyn Land博士とは本研究期間終了後も長期的に共同研究を行うことで合意し、今後も相互協力の関係を築くことが出来た。京都大学が交換標本として、オーストリアのウィーン国立自然史博物館へ寄贈した縄文時代人骨の標本については、資料の確認と基礎データの収集を行い、所蔵する日本コレクションについてもデータを収集した。これらの資料は過去に報告が一切なく、交換標本となった経緯についても日本には記録がない。今回観察した結果は、ウィーン国立自然史博物館に残された記録をまとめて迅速に公表する予定である。これは海外保管の日本文化財記録としてまとめる予定である。骨考古学2013年度は10月1日に急な形での職場の異動があった。そのため、予定していた調査や海外に所蔵されていた資料のデータ収集がかなわなかった。異動の決定が海外出張中であったため、異動に伴う引っ越しがスムーズに行えず長期化してしまったことも原因の一つである。新しい職場での業務が予想以上に多忙であり、申請していた研究可能なエフォートの比率が大きく下がることとなり、年度の前半に行っていた研究成果の発表は次年度に繰り越す形となった。歯の形態学的研究と同時に進行している下肢骨の研究は研究協力関係にある米国スミソニアン自然史博物館のOrtner博士の急死により研究を一時中断していた。しかし、スミソニアン自然史博物館の人類研究部Collections ManagementのHunt博士から、研究を遂行する許可を得て現在進行中である。データを取った資料に関しては順調に成果を発表している。また沿岸部地域の資料に関しては研究の目的を達成したと判断できる。ただし初年度は予定していたよりも多く国際学会への発表や依頼された講演などが重なり、山間部地域の遺跡群のデータの解析が予定したよりもやや遅れた印象である。そこで初年度の達成度を「おおむね順調に新ている」と自己評価した。昨年度の研究がやや遅れているため、その分の作業に加えて予定していた作業を行う。特に調査許可を得ているオーストリアのウィーン自然史博物館とウィーン大学でのデータ収集は8月と9月に予定している国際学会での学会発表時に組み込み作業を進める。特にオーストリアの所蔵資料は、大正時代の発掘調査ののち、基礎報告のないままに交換資料として搬出されていることがわかっている。交換資料として選出されて経緯は、残念ながら残されてはいない。しかし、保存されている部位や特徴といった人骨そのものの情報については可及的速やかに人骨を研究する研究者の読者が多い雑誌への投稿を予定している。国内でも発掘調査に伴い、縄文時代の人骨の出土が報告されており、使用可能な資料についてはデータを収集し、これまでの分析に加えて成果として報告する。山間部地域のデータ収集と関東地域で人骨の出土が多く報告されているため、当地域を中心にデータの収集・解析を行う。
「普遍的」言語運用モデルの構築-日本語・中国語からの貢献-

本研究は,これまで普遍的とされてきた欧米主導の言語運用理論に対して、日本語、中国語から修正を加え,新たな「普遍的」言語運用モデル構築のための基礎資料の作成と理論的考察を行うことを目的とした。その結果以下の点が明らかになった。1 Brown & Levinsonのポライトネス理論における"face"は、個人的な欲求を尊重した概念であるのに対して,中国語と日本語の「面子」は、社会的共同体の規範・慣習に従うことが前提とされていた。更に、日本語では、相手や場面との関係をわきまえた行動が要求される点がわかった。2マクロレベルの言語運用原則を探るため、古代中国社会の行動規範を示す『礼記』と、西欧のキリスト教文化の行動規範となる『聖書』のことばによる記述を考察した。『礼記』では、発話者の社会的属性や場面を捨象した欧米主導の一般語用論原則とは対照的に、言語禁則の具体的な行動指針が多く、これらが「陰陽秩序の原則」などの古代中国における礼の原理によって機能することが明らかになった。『聖書』では、中国語のように具体的な言語行動として整理することが難しいことがわかり、ことばについて書かれている部分を「神のことば」と「人のことば」とに分けてまとめた。3質問紙調査によって「謝罪」という同一言語行為における3言語社会の言語規範意識の違いを考察した。その結果、中国語では、謝罪行為をしない率が最も高く、家族に対してはほとんど謝罪をしないことがわかった。英語では、相手や場面による言語形式の使い分けがほとんどなかった。中国語と日本語では、相手による使い分けが認められ、日本語が最も顕著な使い分けを行っていた。以上、欧米主導型の言語運用理論再構築の必要性とそれを提示する方法論の可能性の一端を示した。包括的な「普遍的」言語運用モデルの構築にむけて更に言語実態調査も加えた継続研究行う予定である。本研究は,これまで言語の指示的意味に重点が置かれ普遍的とされてきた欧米主導の言語運用理論を,自己と他者との関係性を示すなどの言外の意味である,言語の指標的意味に注目することで東南アジアの言語文化圏の観点から修正を加え,新たな[普遍的],言語運用モデル構築のための基礎資料作成と理論的考察を行うことが目的である。初年度は,まず目に見える言語運用や言語形式などの言語事象のミクロレベルでの違いを取り出すのではなく,ミクロ事象を眺める社会文化的価値観世界観自体が異なるということを実証的に説明する方法を次の様な観点から探った。1個々の言語事象を支えている社会文化的価値観世界観を実証的に取り出すために,同じ事象をどのように見ているかを明らかにする方法を検討した。2自己と他者をどのようにとらえるかは,人間の世界観価値観の基礎となるものであり,自己と他者との関係,自己のアイデンティティーをどのようにとらえているかを探る方法を検討した。その結果,同じ絵を異なる言語文化社会の人々(日本語,韓国語,中国語,英語母語話者)に見せ,説明してもらうという以下のパイロットスタディーを行った。(1)テニスの試合を自分がしているところを描いてもらう。(2)集合写真のイラストを見せ,自分はどこに並ぶか,それはなぜかを尋ねる。この結果をふまえて本調査のための項目を抽出し,次年度に本調査を行う。本研究の目的は,これまで普遍的とされてきた欧米主導の言語運用理論に対して東南アジアの言語文化圏の観点から修正を加え,新たな「普遍的」言語運用モデル構築の為の理論的考察と方法論の提言にある。

本年度は,初年度に行ったパイロット調査結果をふまえ,個々の言語運用や言語形式に現われるミクロの言語現象を支えるマクロレベルの社会文化的価値観における東南アジアと欧米言語文化圏との相違点を多角的に探る方法論を見い出すべく,以下のような研究と調査を行った。1.近年ポライトネス理論に対して出された中国語,日本語からの異議を検討し,間題の所在を確認した。2.「詫び」という言語行為について異なる3種類の相手と複数種類の場面を設定した発話完成テストと,異なる2場面の「集合写真」の絵を提示し,どこに並ぶかの質問紙とインタヴュー調査を行った。3.中国の『礼記』と『聖書』に見られる言語行動に関する規範の抽出を試みた。パイロット調査の結果,日本話では,相手との関係によって言語形式の違いだけではなく,談話の運び方や「感謝」表現と連続関係をもつか否かにも違いがあること,自己の位置付けが個々の場における他者との関係から決定されることが認められた。『礼記』では,具体的な言語行動規範において,欧米のポライトネス理論では説明できない点が出てきた。次年度は,日本,中国,米国で本調査を行い,『礼記』と『聖書』から取り出された項目をカテゴリー分けし,各言語文化圏内でミクロの言語内形式とマクロの世界観価値観との間に一貫性が見い出せることを明らかにする。それによって,欧米の社会文化的価値観世界観に支えられた言語理論を見直し,より「普遍的」な言語運用理論の構築を目指す必要性があることを学会や報告書において提言する。ポライトネス理論や言語行為理論などの欧米主導型の言語運用理論は,これまで欧米の言語社会文化的価値観に支えられながらも普遍的なものとされてきた。しかしその普遍性を明らかにするためには,それが異なる言語においても汎用性をもっていなければならない。そこで本研究は,個々の言語運用や言語形式に現れるミクロな言語事象を支えるマクロレベルの社会言語文化的価値観を探り,日本語と中国語の観点から,新たな「普遍的」言語運用モデル構築のための理論的考察を行い,その方法論を提言することを目的に企画された。最終年度は,本研究の目的達成に向けてのマクロレベルの言語運用の原則を探るために,古代中国社会の行動規範を示すものとしての『礼記』と西欧のキリスト教文化の行動規範となる『聖書』とを取り上げ,規範を示す項目を整理し,言葉の禁則事項について比較考察した。更に,前年度までのパイロット調査の結果をふまえ,「謝罪」という同一言語行為場面を支える行動の規範意識を日中米語において探るために,質問紙を作成し調査を行った。その結果,まず『礼記』における言語禁則では,その原則を発話参加者の人間関係や場面などのコンテクスト抜きでは説明できないものであり,社会的属性を捨象したポライトネス理論などの欧米主導型の言語理論とは対照的であることが明らかになった。質問紙調査では,言語行為理論の適切性条件を満たしていない場面においても,日本語では謝罪を行う傾向が強いことが明らかになった。これにより,欧米主導型の言語運用理論を再構築する必要性を提示する方法論の可能性を示すことができた。『礼記』と『聖書』に示されている行動規範は,まだまだ多様なものがある。それらを継続して探り,更に同一言語行為の調査の種類もふやし,これらを地道に蓄積していくことで,より包括的な「首遍的」言語運用モデル構築に貢献していきたいと考える。
形態形成におけるメルトリンの機能

本研究は、ADAMファミリーの形態形成における役割の解明を目的とする。1)メルトリンα遺伝子の役割まず、メルトリンα遺伝子欠損マウスを作成し、解析を行った。現在、BALB/c,C3H/He,C57BL6の3系統に戻し交雑を行って解析を行っている。いずれの系統(n=8)でもホモ個体の4050%が出生前に胎内で死亡することが明らかになった。また、成体の筋肉ではメルトリンは発現していないが、筋破壊後の再生過程では、再生部位に一過的にメルトリンαの発現が誘導されることを見いだした。2)メルトリンβ遺伝子の役割メルトリンβは発生過程において後根神経節など抹消神経の生ずる領域で発現が活性化されることを蛋白レベルで確認した。そして、メルトリンβのメタロプロテアーゼドメインが、神経分化にかかわる細胞膜貫通型増殖因子の膜型から可溶化型への変換に関わっている事を見い出した。一方、マウスメルトリンβ遺伝子を単離し、ES細胞を用いた遺伝子ノックアウトマウスを作成中である。現在、heterozygoteが得られている。
動的空間の認知と言語に関する研究

世界中の言語による空間のカテゴリー化には、自己中心的な「相対的指示枠」と環境主体の「絶対的指示枠」があるが、日本においてはその両方が存在しており、平成10年度のアンケート調査で「絶対的指示枠」を日常の身辺空間にまで適用している地域が多くあることが判明した。そうした用法が特に顕著に見られる地域として高知県高知市に注目し、山と海をランドマークとした生活を送っている人々の空間把握方法において、まず地形的な要因が与える影響を検証した。高知市の被験者の回答では、静的空間を見るかぎりでは「絶対的指示枠」を適用する空間領域は、地理的空間→身の回り→身体部位、と範囲を狭め、身の回りは高校生以上、身体部位にまで及んでいる例は80才以上の高齢者に限られた。しかし動的空間では、身の回りの物事に対しても「絶対的指示枠」でコミュニケーションをはかるケースが20才代間でも観察された。そこで平成11年度はさらに調査対象年齢を小学生にまで下げ、動的空間を代表する「道案内」のコンテクストを組み込んだゲームを行い、コーパスデータを作成した。その際、対象地域の高知市内を2つの地区に分け、(1)山と平野に囲まれた地区と(2)平野と海に囲まれた地区の対比を見ることにした。結果は、高知市民の空間把握方法においては、居住地の周辺の地形的な要因が及ぼす影響力は、動的空間においては静的空間におけるものよりも大幅に減少し、それはまた被験者の年齢との相関性も見られないということである。具体的には、小学3年生でも「絶対的指示枠」を使った動的空間把握を認知・言語双方の手段として日常用いていることが、2つの地区両方で確認された。今後の研究展望としては、ここで得られたデータを基に、オーストラリア、メキシコなどで共同研究者によって収集された動的空間の発話データを照らし合わせ、空間認知方法の普遍性/相対性の検証を行う予定である。世界中の言語による空間のカテゴリー化には、自己中心的な「相対的指示枠」と環境主体の「絶対的指示枠」があることは、先行研究で明らかにされたが、日本においてはその両方が存在しており、今年度のアンケート調査で「絶対的指示枠」を日常の身辺空間にまで適用している地域が多くあることが判明した。そうした用法が特に顕著に見られる地域としては、高知県高知市を挙げることができる。これは、山と海をランドマークとした生活を送っている人々の空間把握方法においては、地形的な要因が大きいことを示唆していると思われる。高知市の被験者(サンプル数47人)の回答では、静的空間を見るかぎりでは「絶対的指示枠」を適用する空間領域は、地理的空間->身の回り->身体部位と範囲を狭め、身の回りは高校生以上、身体部位にまで及んでいる例は80才以上の高齢者に限られた。しかし、動的空間を代表する道案内のコンテクストでは、身の回りの物事に対しても「絶対的指示枠」でコミュニケーションをはかるケースが20才代間でも観察された。これまでの調査により、空間認知には居住地の周囲の地形、年齢、動きの有無が大きな影響要因になっていることが明らかになった。それぞれの要因をさらに細かく分析するため、平成11年度は直接観察のフィールドワークによるデータ収集を行う。
都市環境データベースとその意味的検索システムに関する研究

リモートセンシングと都市環境との係わりが注目される中,都市環境を備えた知識データベースの整備が益々重要となっている.本研究は,都市環境データを意味的に記述することに主眼を置き,一般の人にも都市環境データベースヘのアクセスを可能にするような「環境データベース」の構築を目指す基礎的研究である.そのための具体的な研究内容は,「リモートセンシング画像データ」と,公開されている「環境データ」を統合し,さらにこれらのデータを理解するための「知識」を加えた「環境知識ベース」のプロトタイプを作成することである.本研究では北九州市の環境を具体例として取り上げた.北九州市の環境データは,北九州市環境局から毎年「北九州市の環境」という報告書の形で公表されている.この報告書を基に,環境知識データベースシステムのプロトタイプを試作した.具体的な研究項目は次の通りであった.(1)ランドサット画像解析,(2)自然言語の意味記述,(3)対話型環境情報検索システムと仮想現実感の融合の三項目である.(1)に関して,ランドサット画像解析の中でも特に,多時期画像の識別法と大規模画像の対話型解析法を提案した.またテクスチャ領域のセグメンテーションに関してもMRFモデルを利用した新たなセグメンテーション手法を開発した.(2)に関して,環境情報システムに入力された自然言語を解析するために必要となる意味表現,具体的にはSD式の意味量,意味差,さらには,SD式作成支援システムについて研究を行った.最後に,(3)に関しては,SD式を利用した対話型環境情報システムのプロトタイプを作成し,さらにそれと仮想空間を融合した親しみやすい環境情報システムを試作した.さらに,画像情報を利用した仮想空間の生成支援システムについても検討を行った.リモートセンシングと都市環境との係わりが注目される中,都市環境を備えた知識データベースの整備が益々重要となっている.本研究は,都市環境データを意味的に記述することに主眼を置き,一般の人にも都市環境データベースヘのアクセスを可能にするような「環境データベース」の構築を目指す基礎的研究である.そのための具体的な研究内容は,「リモートセンシング画像データ」と,公開されている「環境データ」を統合し,さらにこれらのデータを理解するための「知識」を加えた「環境知識ベース」のプロトタイプを作成することである.本研究では北九州市の環境を具体例として取り上げた.北九州市の環境データは,北九州市環境局から毎年「北九州市の環境」という報告書の形で公表されている.この報告書を基に,環境知識データベースシステムのプロトタイプを試作した.具体的な研究項目は次の通りであった.(1)ランドサット画像解析,(2)自然言語の意味記述,(3)対話型環境情報検索システムと仮想現実感の融合の三項目である.(1)に関して,ランドサット画像解析の中でも特に,多時期画像の識別法と大規模画像の対話型解析法を提案した.またテクスチャ領域のセグメンテーションに関してもMRFモデルを利用した新たなセグメンテーション手法を開発した.(2)に関して,環境情報システムに入力された自然言語を解析するために必要となる意味表現,具体的にはSD式の意味量,意味差,さらには,SD式作成支援システムについて研究を行った.最後に,(3)に関しては,SD式を利用した対話型環境情報システムのプロトタイプを作成し,さらにそれと仮想空間を融合した親しみやすい環境情報システムを試作した.さらに,画像情報を利用した仮想空間の生成支援システムについても検討を行った.平成8年度は次の項目について研究を実施した。1.VR技術に基づく3次元とし環境モデルデータ作成本研究では環境データベースと、その利用者の間のインターフェイスとして、仮想現実感の技術を取り入れた「3次元Walk-through」機能を必要とする。そしてそのためには、3次元世界でWalk throughするための3次元構造物モデルデータをシステム上で作成しなくてはならない。そのようなデータ作成は多大な労力を要するため、北九州市の一部をなす本学戸畑キャンパスのモデルを作成した。限られた空間ではあるが、キャンパスをWalk-throughしながら、キャンパス情報の質問応答システムを試作した。2.LANDSAT時系列データ駆動型セグメンテーションLANDSAT画像データは環境を視覚的にとらえられる恰好の情報である。この研究項目では、階層的MRFモデルによるLANDSAT画像について、領域ラベルの相関と、特徴ベクトル間の相関を共に考慮に入れた「データ駆動型セグメンテーション」である。扱ったデータは北九州周辺のTM画像であり、512X400画像、8bit/pelで、7バンドからなるものである。結果は、4種類の領域への良好な分割が得られ、本方式の有効性が確認された。3.環境情報データベースと自然言語とのインターフェイスとしてのSD式作成支援システムの開発環境に関する情報は、単に数値データを検索が可能であるだけではあまり有効ではない。むしろ環境データにあまり詳しくない一般の人が「自然言語」を通じてシステムに質問し、システム側は、質問の内容を「意味的に」理解して応答を返す、ことが出来ることが望まれる。このような観点から、自然言語の意味を計算機データとして記述する「SD式」作成の支援システムを試作した。本研究は都市環境を意味的に記述することに主眼を置き、非専門家にも容易に都市環境データベースへのアクセスが可能となるような「環境データベース」の構築を目指す基礎研究である。本年度行った具体的なテーマは、「バーチャル都市空間構築のための基礎モデル」、「都市・社会・環境統合データベース作成方法の検討」、「知識データ間の矛盾の解消」などを行った。(1)バーチャル都市空間構築のための基礎モデル都市環境は3次元的な広がりをもつ空間として捉えられる。

都市の中の構造物に多くは多面体、しかも、立方体で近似できることが多い。本年度は2次元的なデーター(航空写真など)から得られる立方体構造物の3次元復元の基礎モデルを作成し、その復元プログラムを試作した。(2)都市・社会・環境統合データベース作成方法の検討いわゆる環境データは地方自治体などの刊行物として公開されている。しかしこれらは数字と文章の羅列であり、そのままデータベース化しても統合化された有効なデータベースとはならない。本年度はそのようなデータの意味記述を行い、それをデータ化するモデルを検討した。(3)知識データ間の矛盾の解消意味的に環境データが処理できるためには、「環境問題に対する知識データ」のモデル化が不可欠であり、知識間の矛盾の解消問題は最も基本的な課題である。本年度は、SD式意味モデルに基づく矛盾解消のアリゴリズムを考案し、実験システムで検証した。本研究は都市環境を意味的に記述することに主眼をおき、非専門家にも簡単に都市環境に関するデータベースにアクセスできるような「環境データベース」の構築を最終目標とする基礎研究である。本年度実施した具体的なテーマは、1.都市構造物モデルの作成、2.音声インターフェイスに関する研究、3.情報検索システムのモデル化の研究等であった。(1)都市構造物モデルの作成都市構造物は多様で複雑である。従って構造物を、モデルユーザの自然性を損なわない範囲で如何に単純化したモデルが作れるかが問題となる。本年度の研究は、一般の建物を立法体で近似することを基本にして、壁面に簡単な窓枠をはめ込めるようなモデルとした。しかしながら、このような簡単化では、質の高いデータを作成することは出来ず、単に建物の所在や、地上高を大まかに再現できる程度のものに留まった。(2)音声インターフェイスに関する研究本研究の目標の一つとして、都市環境のモデル世界の中のウオークスルー機能がある。このような場合のコマンドインターフェイスとして音声は好ましいものであり、さらに、発声者を識別しながらコマンドにレスポンス出来る機能が実現できれば便利である。このような観点から本年度は話者識別のシミュレーションを行った。(3)情報検索システムのモデル化の研究情報検索を意味的に行うためには、「意味の違い」を定量的に計る仕組みが必要となる。本年度は意味構造記述式モデル(SD-Form Model)による、知識データを利用する一般的な自然言語の意味差の計算アルゴリズムを開発した(Prologによる)。
マクロファージの獲得免疫制御におけるケモカイン受容体会合分子FROUNTの役割

ケモカイン受容体細胞内会合分子FROUNT(フロント)は、マクロファージの遊走・集積に促進的に働く。炎症性疾患においては、マクロファージの活性化状態は適応免疫応答にも影響を与える。本研究では、マクロファージによる適応免疫応答制御におけるFROUNTの役割の解明を目的とする。本年度は、昨年度までに誘導条件をセットアップしたFROUNT欠損マクロファージを用いて、各種刺激に対する応答性を解析した。刺激後のマクロファージの応答性の解析を容易にするために、温度応答性細胞培養プレートを用いた。骨髄細胞より分化誘導したコントロールおよびFROUNT欠損マクロファージにLPS刺激を行い、刺激後のマクロファージを回収してフローサイトメトリーにより細胞表面活性化マーカーの解析を行った結果、刺激後にCD80、CD86、MHC class IIなどの活性化マーカーの発現増強が認められ、これについてフロント欠損マクロファージでは刺激後の発現増強の減弱が認められた。また、通常の培養プレート内で刺激を行った際にはマクロファージの接着能亢進が認められたが、これがFROUNT欠損により減弱することを示唆する結果を得た。T細胞とマクロファージの共培養系において、サイトカイン・抗サイトカイン抗体添加による各ヘルパーT細胞サブセット誘導条件で共存するマクロファージにおけるFROUNT欠損の影響を解析した結果、FROUNT欠損による各ヘルパーT細胞サブセット誘導効率の違いは認められなかった。今後はIn vivoの病態モデルで認められているT細胞サブセットの変化について、さらなる検討を進める。マクロファージの刺激応答性に対するFROUNT欠損による影響、およびT細胞との共培養系におけるFROUNT欠損の影響についても順調に解析を進めた。新たに示唆された刺激応答性の変化について検証を進める予定である。30年度に明らかにしたFROUNT欠損によるマクロファージの刺激応答性の変化について、機序を明らかにするための解析を進める。In vivoの病態モデルで認められているT細胞サブセットの変化との相違について、今後さらなる検討を行う。ケモカイン受容体細胞内会合分子FROUNT(フロント)はマクロファージの遊走・集積の制御を介して炎症性疾患の病態に重要な役割を果たすことを明らかにしてきた。本研究では、これまで不明であった、マクロファージによる適応免疫応答制御におけるFROUNTの役割の解明を目的とする。本年度は、FROUNT欠損によるマクロファージの刺激応答性の変化を解析するために、FROUNT欠損マクロファージの調製方法を検討した。タモキシフェン誘導型コンディショナル欠損マウスより骨髄細胞を調製してM-CSF存在下で培養し、骨髄由来マクロファージを分化誘導した。培養開始時よりヒドロキシタモキシフェンを添加することによりFROUNT欠損を誘導した。また個体レベルでマクロファージにおけるFROUNT欠損の影響を調べるために用いる予定のミエロイド系細胞特異的Creマウスからも同様に骨髄由来マクロファージを調製した。FROUNT mRNAの発現量を定量PCRにより定量したところ、いずれもフロント欠損が誘導されていることを確認した。またこれらのマクロファージの各種刺激に対する応答性におけるFROUNT欠損の影響を明らかにするために、マクロファージの分極化刺激として、IL-4あるいはLPS存在下で培養し、M1型、M2型マクロファージに特徴的なマーカーの発現量を定量PCRにより定量したところ、今回測定したマーカーについては、in vitroにおける分極化刺激に対する応答におけるFROUNT欠損による影響は認められなかった。以上より、マクロファージによる適応免疫応答制御におけるFROUNTの役割を解析するためのFROUNT欠損マクロファージの誘導条件が整った。マクロファージ分化誘導とFROUNT欠損誘導の検討、および次年度に予定していたマクロファージ活性化刺激に対する応答の解析まで順調に進んだ。T細胞応答の解析系の準備については次年度に取り組む。29年度に完了したin vitroにおけるフロント欠損マクロファージの誘導系を用いて、T細胞との共