hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
エンドセリン-1のインスリンシグナルおよび糖尿病性微小血管障害におよぼす影響

【目的】我々は最近,インスリンとエンドセリン-1(ET-1)がどちらもG蛋白であるGαq/11とPI3-Kを介してGLUT4のトランスロケーションを促進することを明らかにした(MCB 19:6765-74,1999,JBC 274:33691-5,1999)。両者は共通の経路を介してブドウ糖の取り込みを促進するので,実際にET-1がインスリンシグナルを抑制するかどうかを検討した。【対象】3T3-L1 adipocytesを対象とした。【方法】2-DOG uptake法,マイクロインジェクション法,免疫染色,PI3-Kアッセイ,ウエスタンブロット法などを利用した。【結果】24時間のET-1前処置(10nM)によりインスリン(100ng/ml)による2-DOG uptakeは37%,GLUT4のトランスロケーションは59%抑制された。ETAレセプター拮抗薬であるBQ610はこの抑制を改善し,Gαi阻害剤であるPertussis toxinとGβγ阻害剤であるGST-BARKは変化を与えなかった。さらにET-1の前処置はGαq/11とIRS-1のインスリンによるチロシンリン酸化,および両者のPI3-Kのp110αサブユニットへの結合を抑制した。この結果PI3-K活性,およびその下流のAktのセリン・スレオニンのリン酸化が低下した。なお、ET-1はインスリンによるIRS-2のリン酸化を増強し,Gab1,Cblのリン酸化に変化を与えなかった。加えてET-1はセリン・スレオニンのリン酸化に続いて24時間でIRS-1蛋白を低下させ,この作用はPI3-K阻害剤であるLY29004とp70 S6-K阻害剤であるラパマイシンにより改善された。さらにアデノウイルスにより持続活性型Gαq/11であるQ209L-Gαqを細胞に高発現させると,同様にIRS-1蛋白が低下し,インスリンによるIRS-1のチロシンリン酸化が抑制された。また,ET-1前処置によりインスリンによるSHCおよびその下流のMAPKのリン酸化も低下した。【考察】ET-1はインスリンによるGαq/11のチロシンリン酸化を抑制するだけでなく,Gαq/11,p110α,およびその下流のp70S6-Kを介してIRS-1蛋白を低下させ,インスリンによるIRS-1のチロシンリン酸化も抑制した。これらの効果によりET-1はインスリンによるPI3-K活性を減弱し,GLUT4のトランスロケーションを抑制することが考えられた。【結語】ET-1はインスリン受容体の基質であるGαq/11,IRS-1およびSHCのインスリンによるチロシンリン酸化を抑制してインスリン作用を減弱させた。なお、ET-1はインスリンによるIRS-2のリン酸化を増強し,Gab1,Cb1のリン酸化に変化を与えなかった。【目的】

我々は最近,インスリンとエンドセリン-1(ET-1)がどちらもG蛋白であるGαq/11とPI3-Kを介してGLUT4のトランスロケーションを促進することを明らかにした(MCB 19:6765-74,1999,JBC 274:33691-5,1999)。両者は共通の経路を介してブドウ糖の取り込みを促進するので,実際にET-1がインスリンシグナルを抑制するかどうかを検討した。【対象】3T3-L1 adipocytesを対象とした。【方法】2-DOG uptake法,マイクロインジェクション法,免疫染色,PI3-Kアッセイ,ウエスタンブロット法などを利用した。【結果】24時間のET-1前処置(10nM)によりインスリン(100ng/ml)による2-DOG uptakeは37%,GLUT4のトランスロケーションは59%抑制された。ETAレセプター拮抗薬であるBQ610はこの抑制を改善し,Gαi阻害剤であるPertussis toxinとGβγ阻害剤であるGST-BARKは変化を与えなかった。さらにET-1の前処置はGαq/11とIRS-1のインスリンによるチロシンリン酸化,および両者のPI3-Kのp110αサブユニットへの結合を抑制した。この結果PI3-K活性,およびその下流のAktのセリン・スレオニンのリン酸化が低下した。なお、ET-1はインスリンによるIRS-2のリン酸化を増強し,Gab1,Cblのリン酸化に変化を与えなかった。加えてET-1はセリン・スレオニンのリン酸化に続いて24時間でIRS-1蛋白を低下させ,この作用はPI3-K阻害剤であるLY29004とp70 S6-K阻害剤であるラパマイシンにより改善された。さらにアデノウイルスにより持続活性型Gαq/11であるQ209L-Gαqを細胞に高発現させると,同様にIRS-1蛋白が低下し,インスリンによるIRS-1のチロシンリン酸化が抑制された。また,ET-1前処置によりインスリンによるSHCおよびその下流のMAPKのリン酸化も低下した。【考察】ET-1はインスリンによるGαq/11のチロシンリン酸化を抑制するだけでなく,Gαq/11,p110α,およびその下流のp70S6-Kを介してIRS-1蛋白を低下させ,インスリンによるIRS-1のチロシンリン酸化も抑制した。これらの効果によりET-1はインスリンによるPI3-K活性を減弱し,GLUT4のトランスロケーションを抑制することが考えられた。【結語】ET-1はインスリン受容体の基質であるGαq/11,IRS-1およびSHCのインスリンによるチロシンリン酸化を抑制してインスリン作用を減弱させた。
血管新生阻止因子における肝癌の新しい治療法の開発

【目的】肝細胞癌の特徴は,腫瘍血管新生の非常に強い点にある.われわれは,血管新生抑制物質(TNP-470,武田薬品より供与)がこの血管新生を抑えることにより肝細胞癌の発育を阻止し,治療効果をもたらす可能性があるのではないかと考え,ウッドチャック肝癌の系を用いて検討した.【方法】TNO-470のin vivoの効果を検討するためにウッドチャック肝癌に対して以下の方法で投与した.(1)局所投与として肝左葉,肝右葉に別々に生じた約30mmと腫瘍径のそろった肝癌に対して,エコーガイド下にそれぞれTNP-470 20mgとその基材のみの局注を繰り返し、肝癌の発育を比較検討した.(2)全身投与として肝右葉に10mmの肝癌が生じたウッドチャックに対して,TNP-470 30mgの筋注を16週間繰り返し,腫瘍径を追跡した.(3)選択的肝動脈投与として肝左葉,肝右葉にそれぞれ肝癌が生じたウッドチャックを用い,股動脈よりカテーテルを挿入し,肝動脈造影を行なった後,油性TNP-470 20mgの投与を行った。【成績】(1)約12週間の経過観察では,治療した左葉の癌の発育は抑制され30mmのままであった.コントロールの右葉の癌は徐々に増大し53mm×30mmとなった.組織学的にも治療した癌の血管新生は軽度であった.(2)全身投与を継続した16週間は腫瘍径は10mmのままであった.しかし,投与終了後は,急速な増大を示した.(3)3週間後,施工した血管造影像では,両葉の癌において縮小傾向が認められた.【結論】以上の結果より,血管新生抑制剤(TNP-470)は,肝癌の新しい治療剤の一つになりうると考えられた.【目的】肝細胞癌の特徴は,腫瘍血管新生の非常に強い点にある.われわれは,血管新生抑制物質(TNP-470,武田薬品より供与)がこの血管新生を抑えることにより肝細胞癌の発育を阻止し,治療効果をもたらす可能性があるのではないかと考え,ウッドチャック肝癌の系を用いて検討した.【方法】TNO-470のin vivoの効果を検討するためにウッドチャック肝癌に対して以下の方法で投与した.(1)局所投与として肝左葉,肝右葉に別々に生じた約30mmと腫瘍径のそろった肝癌に対して,エコーガイド下にそれぞれTNP-470 20mgとその基材のみの局注を繰り返し、肝癌の発育を比較検討した.(2)全身投与として肝右葉に10mmの肝癌が生じたウッドチャックに対して,TNP-470 30mgの筋注を16週間繰り返し,腫瘍径を追跡した.(3)選択的肝動脈投与として肝左葉,肝右葉にそれぞれ肝癌が生じたウッドチャックを用い,股動脈よりカテーテルを挿入し,肝動脈造影を行なった後,油性TNP-470 20mgの投与を行った。【成績】(1)約12週間の経過観察では,治療した左葉の癌の発育は抑制され30mmのままであった.コントロールの右葉の癌は徐々に増大し53mm×30mmとなった.組織学的にも治療した癌の血管新生は軽度であった.(2)全身投与を継続した16週間は腫瘍径は10mmのままであった.しかし,投与終了後は,急速な増大を示した.(3)3週間後,施工した血管造影像では,両葉の癌において縮小傾向が認められた.【結論】以上の結果より,血管新生抑制剤(TNP-470)は,肝癌の新しい治療剤の一つになりうると考えられた.肝癌の血管新生にVEGFが関与しているか否かをまず検討した。肝癌組織、非癌部肝組織、肝癌細胞株においてノ-ザンブロッドを行なったところ、VEGFの発現を認めた。ヒトVEGFに次いで、マウスのVEGFもPCR法を用いてCーDNAをクロ-ン化した。VEGFの肝での生理的作用をみる目的で、SAPプロモ-タ-にマウスVEGFをつなげ、マウスの肝でVEGFが過剰発現するようなトランスジェニックマウスの作製を試みた。マウスのVEGF遺伝子が入ったマウスを作ることに成功した。現在トランスジェニックマウスの肝に何らかの変化(例えば肝腫瘍が肝障害など)が生じるかを解析中である。又、VEGFに対する抗体を作製し、肝組織の染色体を行ない、肝のどの部分で産生するかを検討する予定である。VEGFが肝癌の血管新生に本当に関与しているか否かを、今後検討する予定である。一方、血管新生阻止因子が肝癌の新しい治療法となり得るかを現在検討中である。我々はウッドチャック肝癌のモデルを保有しているが、血管新生阻止因子として開発されたアンギオインヒビンが肝癌の治療に効果があるかを検討中である。ウッドチャック肝炎ウイルスキャリヤ-の一頭に肝癌が生じ、右葉に径3cm、左葉に約3cm大の腫瘍が発症した。右葉の腫瘍にコントロ-ルの薬剤を、左葉の腫瘍にアンギオインヒビンを、エコ-ガイド下に周一回、局注を続けている。アンギオインヒビンを局注した腫瘍は増殖が止まり、一部内部が壊死におちいった。今後も、アンギオインヒビンが肝癌の新しい治療薬となるかを検討していく予定である。

肝癌の血管新生にVEGFが関与しているかを検討した。ノーザンブロット法および免疫染色法により検討したところ、肝癌組織が肝癌細胞株においてVEGFの強い発現をみとめ、肝癌血管新生へのVEGFの関与が示唆された。又、VEGFのレセプター(flt)の発現は、特殊染色法による検討では、肝癌部での発現はなく、非癌部肝組織での発現をみとめた。肝癌部でVEGFが強く産生され、非癌部でレセプターが発現して、血管新生が誘導され、肝癌が増殖していくものと考えらる。VEGFが肝で強く発現するようなトランスジェニックマウスを作成したところ、一部で腹水を発症するマウスが得られた。現在解析中である。一方、血管新生を抑制するアンギオインヒビンという物質が、肝癌の新しい治療薬となりうるかを検討した。ウッドチャック肝癌に局所投与を行なったところ、血管新生を著明に抑制して肝癌は縮少した。コントロール実験では薬剤の毒性はみとめられなかった。又、全身投与による検討も行なった。1cmの腫瘍の生じたウッドチャックに、アンギオインヒビン30mgを週に12回筋注したところ、6ヶ月間たっても、腫瘍の大きさは1.5cm程度におさえられており、全身投与も有効なことが確認された。又、アンギオインヒビンの油性製剤を開発し、肝動脈カテーテルをそう入し、肝動脈塞栓術(TAE)を行なって、治療効果があるか否かを現在検討中である。以上、肝癌の血管新生へのVEGFの関与が強く示唆され、又、血管新生抑制物質であるアンギオインヒビンが、肝癌の新しい治療薬となりうることが考えられた。
分子系統学および化石記録に基づく日本の生物相の起源と形成プロセスの研究

日本の動物相の起源と成立過程を解明するため当初計画された日本の陸生および海生の代表的な動物種とそのアジアにおける近縁種の分子系統学的研究をほぼ完了した.陸生動物の哺乳類では,アジア全域のすべての種・亜種を含むシカ属,イノシシ属,ツキノワグマ属;爬虫類としてはハブ類,マムシ類;両生類としてはイモリ類,魚類のドジョウ類,タナゴ類,オヤニラミ類,軟体動物としてカワニナ類を,また海生動物としては,軟体動物のカサガイ類,アワビ類,ニシキウズ類,カキ類,アカガイ類,ハマグリ類の分子系統樹を構築し,日本に生息する種・亜種のアジア・世界における近縁種との系統学的関係,その系統の分岐年代の推定,化石記録と形態情報から日本への渡来時期と渡来ルートの解明を行った.これらの研究結果から,日本の動物種は異なった時期に,異なった移住ルートを経て,すでに大陸で(海洋生物では日本を含む北西太平洋地域以外の北米西海岸,熱帯太平洋などで)分化していた種・集団が渡来して,その集団から,日本の種または亜種が成り立っていることが明らかになった.現在の日本の動物相は更新世中期の43万年前および更新世後期数万年前の氷河期の低海水準期の陸橋及びアイスブリッジを経て,西方から九州,四国本州へ,また北方から北海道,本州へ渡来した種・集団が主体となり成立していることが明らかにされた.一方,琉球列島の固有動物相の起源を解明するために3年間にわたり実施された前期および中期更新世の含脊椎動物化石層の発掘で収集された膨大な化石の分類学的検討をほぼ終了し,モノグラフを出版するための図版作成を進めた.その結果,シカ類5種,イノシシ類1種,ウサギ類1種,げっ歯類4種,食虫類1種,鳥類3種,爬虫類8種,両生類複数種よりなる多様性に富む化石動物群の存在がはじめて明らかとなり,現在の琉球の固有動物相の起源をほぼ解明できた.日本の動物相の起源と成立過程を解明するため当初計画された日本の陸生および海生の代表的な動物種とそのアジアにおける近縁種の分子系統学的研究をほぼ完了した.陸生動物の哺乳類では,アジア全域のすべての種・亜種を含むシカ属,イノシシ属,ツキノワグマ属;爬虫類としてはハブ類,マムシ類;両生類としてはイモリ類,魚類のドジョウ類,タナゴ類,オヤニラミ類,軟体動物としてカワニナ類を,また海生動物としては,軟体動物のカサガイ類,アワビ類,ニシキウズ類,カキ類,アカガイ類,ハマグリ類の分子系統樹を構築し,日本に生息する種・亜種のアジア・世界における近縁種との系統学的関係,その系統の分岐年代の推定,化石記録と形態情報から日本への渡来時期と渡来ルートの解明を行った.これらの研究結果から,日本の動物種は異なった時期に,異なった移住ルートを経て,すでに大陸で(海洋生物では日本を含む北西太平洋地域以外の北米西海岸,熱帯太平洋などで)分化していた種・集団が渡来して,その集団から,日本の種または亜種が成り立っていることが明らかになった.現在の日本の動物相は更新世中期の43万年前および更新世後期数万年前の氷河期の低海水準期の陸橋及びアイスブリッジを経て,西方から九州,四国本州へ,また北方から北海道,本州へ渡来した種・集団が主体となり成立していることが明らかにされた.一方,琉球列島の固有動物相の起源を解明するために3年間にわたり実施された前期および中期更新世の含脊椎動物化石層の発掘で収集された膨大な化石の分類学的検討をほぼ終了し,モノグラフを出版するための図版作成を進めた.その結果,シカ類5種,イノシシ類1種,ウサギ類1種,げっ歯類4種,食虫類1種,鳥類3種,爬虫類8種,両生類複数種よりなる多様性に富む化石動物群の存在がはじめて明らかとなり,現在の琉球の固有動物相の起源をほぼ解明できた.日本の動物相の起源と系統進化を解明するため,陸生および海生の代表的動物種とそのアジアにおける近縁種の分析試料の収集を中心に研究を進めた.陸生動物では,哺乳類のツキノワグマ,ニホンジカ,ニホンイノシシ,は虫類としては,マムシ類,ハブ類,両生類としては,イモリ類,軟体動物としてはカワニナ類を重点的に日本各地のみならず,中国大陸,韓半島からも収集した.海生動物では,軟体動物のハマグリ,カキ類,カサガイ類,アワビ類,エゾバイ類の分析試料を日本およびアジア大陸沿岸から収集した.これらの分析試料からDNAを抽出し,PCRによるDNA断片の増幅と塩基配列決定を進めた.系統解析が進んだハマグリ類,エゾバイ類については,その系統進化について8月にウィーンで開催された国際軟体動物学会で発表した.また,琉球列島の生物相を代表するハブ類については,祖先種の渡来と琉球列島における固有化の過程を,6月の日本古生物学会のミレニアムシンポジウムで発表した.また,日本の脊椎動物相の起源を古生物学的に究明するため,中国安徽省の新第三系-第四系の洞窟堆積物中のげっ歯類を中心とした小型脊椎動物化石の発掘調査を行い,種の時空分布に関するデータの収集を行った.この調査の過程で,琉球列島の生物相の起源の有力な候補者と考えられる淮南大居山の前期更新世の哺乳類・は虫類

動物群が発見された.今後の詳細な検討が期待される.日本の動物相の起源と系統進化を解明するため,陸生および海生の代表的動物種とそのアジアにおける近縁種の分析試料の収集を中心に研究を進めた.陸生動物では,哺乳類のツキノワグマ,ニホンジカ,ニホンイノシシ,は虫類としては,マムシ類,ハブ類,両生類としては,イモリ類,軟体動物としてはカワニナ類を重点的に日本各地のみならず,中国大陸,韓半島からも収集した.海生動物では,軟体動物のカキ類,アカガイ類,カサガイ類,アワビ類の分析試料を日本およびアジア大陸沿岸から収集した.これらの分析試料からDNAを抽出し,PCRによるDNA断片の増幅と塩基配列決定を進めた.系統解析が進んだツキノワグマの分子系統についてはアジアのクマに関する国際会議で発表した.海生軟体動物のアワビ類,カサガイ類については,その分子系統進化について日本貝類学会で,また3月にイギリスで開催されたカサガイ類の国際会議(Limpet 2003)で発表した.また,琉球列島の固有生物相の起源を解明するために下部更新統の含脊椎動物化石層の発掘を行い現生種の祖先種を含む多様な化石動物群を発見した.また,日本の脊椎動物相の起源を究明するため,ロシア科学アカデミー極東支部の研究者と沿海州の哺乳動物の分子系統学的研究を共同で実施し,日本の集団との比較を行った.一方,中国の新第三系-第四系の哺乳動物化石の発掘および標本調査を行い,日本の化石・現生種との比較研究の為の基礎データの収集を行った.日本の動物相の起源と系統進化を解明するために収集された日本の陸生および海生の代表的動物種とそのアジアにおける近縁種の分子系統解析を中心に研究を進めた.陸生動物では,哺乳類のツキノワグマ,ニホンジカ,イノシシ類,は虫類としては,マムシ類,ハブ類,両生類としてはイモリ類,魚類のオヤニラミ類,軟体動物のカワニナ類を,また海生動物では哺乳類のカマイルカ類,軟体動物のカキ類,アカガイ類,カサガイ類,アワビ類の分子系統解析を重点的に行った.系統解析が進んだニホンジカをはじめとした5分類群については論文をとりまとめ,国際誌に投稿した.海生軟体動物のカサガイ類については,その分子系統進化について国際誌上で公表した.また,琉球列島の固有生物相の起源を解明するために下部および中部更新統の含脊椎動物化石層の発掘を昨年度に引き続き行い,現生種の祖先種を含む多様な化石動物群の分類学的検討をすすめ,陸ガメについては最初の論文としてとりまとめた.また,本州で発掘を実施してきた上部更新統の哺乳類化石群について,その一部を論文として公表した.日本の脊椎動物相の起源を究明するため,中国科学院古脊椎古人類研究所,ロシア科学アカデミー極東支部,フィリピン大学などの研究者とアジアの哺乳類の系統学的研究を共同で実施し,日本の在来種との比較を行った.日本の動物相の起源と系統進化を解明するために収集された日本の陸生および海生の代表的動物種とそのアジアにおける近縁種の分子系統解析を中心に研究を進めた.陸生動物では,哺乳類のツキノワグマ,ニホンジカ,イノシシ類,は虫類としては,マムシ類,ハブ類,両生類としてはイモリ類,魚類のオヤニラミ類,軟体動物のカワニナ類を,また海生動物では哺乳類のカマイルカ類,軟体動物のカキ類,アカガイ類,カサガイ類,アワビ類,ウミニナ類の分子系統解析を重点的に行った.系統解析が進んだニホンジカをはじめとした5分類群については論文をとりまとめた.海生軟体動物のカサガイ類については,その分子系統進化について国際誌上で公表した.また,琉球列島の固有生物相の起源を解明するために下部および中部更新統の含
ラットウイルス(RV)感染の遺伝子診断に関する研究

前年度に作成、検討した遺伝子増幅用Primerおよび反応条件をもとに、2種のPrimerセットによるウイルス型別、臨床材料への応用を試み、以下のような成果が得られた。1)ウイルス型別への応用:NSコード領域はH-1,RV-13,MVM等いずれの齧歯類パルボウイルスでも同程度のシグナルが得られたが、VP領域はシグナルの強さおよびHaeIII切断部位の有無によりウイルス株の型別が可能であった。2)齧歯類パルボウイルス汚染腫瘍細胞の検出:マウス、ラットで継代された腫瘍細胞、in vitroで継代されたマウスおよびラット由来細胞、計31株のパルボウイルス汚染を本方法で調べた結果、2検体からNS領域の増幅が認められた。これらはいずれもVP領域の増幅が弱くRVによる汚染と推定された。3)RV垂直感染におけるウイルスDNAの証明:RV感染雌ラットから胚および胎児へのウイルス伝播について酵素抗体法、ウイルス分離、PCR法により検討した。妊娠中期に感染した場合に胎児への影響が最大で感染性ウイルス、ウイルス抗原、ウイルスDNAが検出され、胎児死亡率も高かった。妊娠後期でもウイルス抗原、DNAともに検出されたが、死亡率は低く、また、感染後に妊娠した場合も胚へのウイルス伝播は認められなかった。4)Orphan parvovirusとの交差性:研究の過程で、ラットに既知のパルボウイルスと異なるOrphan parvovirusの存在を発見し、ラットでの継代に成功した。この新たなウイルスも本方法でNS領域の増幅が認められた。以上の結果から、本法が臨床材料での齧歯類パルボウイルスの検査に有用であること、新たな齧歯類パルボウイルス(Orphan parvovirus)の基礎研究にも利用できると考えられる。本研究は、高多型反復DNA配列を用いて、ラットにおける連鎖解析のためのマーカー遺伝子を確立し、これらのマーカー遺伝子を用いて、ラット染色体の連鎖地図を作製することを目的としている。DNAデーターベースを用いて(CA)nおよび(GA)nの反復配列を検索したところ、331の配列が、ラットにおいて検出された。このうち23の配列についてPCR用のプライマーを作製し、近交系ラットの系統間での多型性の有無について調べたところ、いづれも系統間で多型性を示すことが明らかとなった。また、同一の系統に由来する亜系統の間で比較したところ、いづれの配列も、亜系統間では同一であり、これらの配列は世代間で安定して遺伝することが示唆された。したがって、これの反復配列はラットの高多型なマーカー遺伝子として有用であることが明らかとなった。つぎに、これらのマーカー遺伝子、および従来より明らかとなっているマーカー遺伝子を用いて、ラット染色体の連鎖地図の作製を試みた。その結果、ラットの第5、7、8、10染色体上のいくつかのマーカー遺伝子の連鎖地図が明らかとなった。具体的には、第5染色体上では、A8、Aco-1、Mup-1、Jun、Glut-1、Ahd-2、Pudの7遺伝子座が、第7染色体上ではIgf-1、Myc、Cyp2d2、Ela-1/Perif、Lalbaの6遺伝子座が、第8染色体上ではEs-6、Apoc-3、Ncamの3遺伝子座が、第10染色体上ではIL-3、Ngfrr、Ghの4遺伝子座が各々この順で連鎖していることが明らかとなった。以上の結果は、ラットの遺伝的解析のための有用な知見を与えるものと考える。現在、これらのマーカー遺伝子を用いて、いくつかの病態モデルラットの疾患原因遺伝子の染色体上へのマッピングを継続中である。
勅撰和歌集と中国古代礼楽思想の和漢比較研究

中華人民共和国北京日本学研究センター創立20周年記念シンポジウム「中国における日本文化,日本文学研究の現状と行方」(2005年10月)に参加し,中国国内各地より参集した中国人日本古典文学研究者と和歌の翻訳論を含む文化受容に関する討議を行うとともに,情報交換をし,併せて中国古代礼楽論関連の資料の収集に努めた。また、大韓民国ソウル大学校附属図書館(奎章閣)において資料収集に当たり(2006年3月),朝鮮王朝時代の勅撰歌集『龍飛御天歌(ヨンビオチョンガ)』の最古の版本(零冊)の調査を行い、当該歌集の現代韓国語の全訳を完成させた高麗史研究の権威,朴菖熙(パク・チャンヒ)博士との討議を通じ,李氏朝鮮第4代世宗(セジョン)大王のもとでのハングル文字創成と勅撰歌集編纂に関わる歴史的・文化論的経緯,背景その他についてのさまざまな知見を深めることにより,『古今和歌集』成立問題との比較研究にとって,大きな指針を得ることができた(17年度)。ポーランド国ワルシャワ大学東洋学研究所における国際会議「"Japanese Studies in the 21st Century - Beyond Borders"- International Conference on Japanese Studies in Memory of Wieslaw Kotanski Warsaw,19-21 May 2006」に参加し、「中国古代音楽論と目本の和歌文学」と題した発表を行った。そして中央ヨーロッパを中心とする世界各国の日本文学・語学、文化・社会研究者との研究交流を通じ、多くの知見を得ることが出来た。さらに同年12月24日30日まで、中華人民共和国北京日本学研究センターにおける「異文化の中の日本文学」と題する研究集会(2006年12月)で「古代音楽思想と日本の和歌文学」と題する基調講演発表を行うと共に、中国国内の日本古典研究者との研究交流及び科研題目に関わる文献調査を行い、古代中国の音楽理論・礼楽関連の研究情報・資料収集に努めた(18年度)。この調査研究により、日本の勅撰和歌集編纂の思想基盤に、中国古代礼楽思想が深く関与していることが認められた。なお、これらの調査研究結果の一部は「研究成果報告書勅撰和歌集と中国古代礼楽思想の和漢比較研究」(2007年5月)にまとめた。海外における調査研究平成17年10月12日18日まで,中華人民共和国へ出張し,北京日本学研究センター創立20周年記念シンポジウム「中国における日本文化,日本文学研究の現状と行方」に参加し,中国国内各地より参集した中国人日本古典文学研究者と和歌の翻訳論を含む文化受容に関する討議を行うとともに,河南師範大学・北京師範大学・北京外国語大学他の学者と情報交換をし,併せて中国古代礼楽論関連の資料の収集に努めた。平成18年3,月22日24日まで,大韓民国に出張し,ソウル大学校附属の奎章閣において,朝鮮王朝時代,15世紀の勅撰歌集『龍飛御天歌』の現存最古の版本の零冊及び,関連資料の調査収集に当たるとともに,9世紀の新羅時代の勅撰歌集『三代目』(今逸)に関する情報収集に努めた。

また,ソウル市内において,当該歌集の現代韓国語の全訳を完成させたばかりの高麗史研究の権威,元韓国外国語大学人文大学学長朴菖煕博士との討議を通じ,李氏朝鮮第4代世宗大王のもとでのハングル文字創成と勅撰歌集選定に関わる歴史的・文化論的経緯,背景その他についてのさまざまな知見を深めることを通じ,日本におけるかな文字による初めての勅撰和歌集『古今和歌集』成立問題との比較研究にとって,大きな指針を得ることができた。国内における調査研究国立公文書館・国文学研究資料館他において,二十一代集の序文を中心とした書誌調査及び資料収集等を行うとともに,和漢両序の全文にわたる注釈的研究のうち,『続古今和歌集』『新続古今和歌集』に関する比較対照作業を進めた。○海外における調査・研究平成18年5月18日25日まで、ポーランド国へ出張し、ワルシャワ大学東洋学研究所における国際会議「"Japanese Studiesin the 21st Century - Beyond Borders" - International Conference on Japanese Studies Wiesl aw Kotan ski in Memoriam Warsaw,19-21 May 2006(21世紀の日本研究-国境を越えて-)」に参加し、「中国古代音楽論と日本の和歌文学-礼楽思想と勅撰和歌集-」と題した招待講演発表を行った。また、中央ヨーロッパを中心とする世界各国(ポーランド・ドイツ・フランス・ロシア・ウクライナ・アメリカその他)の日本文学・語学、文化・社会研究者との研究交流を通じ、多くの知見を得ることが出来た。又、同年12月24日30日まで、中華人民共和国へ出張し、北京日本学研究センターにおいて、「異文化の中の日本文学」と題する研究集会で「中国古代音楽思想と日本の和歌文学」と題する基調講演発表を行うと共に、科研題目に関わる、調査・検証を、中国国内の日本古典研究者との研究交流及び、古代中国の音楽理論・礼楽関連の研究情報・資料収集に努め、新しい学術情報を得ることができた。○国内における調査・研究国文学研究資料館・国立公文書館・蓬左文庫その他において、勅撰21代集の本文テキストに関する文献調査・関連資料収集等を行い、一定の成果を得た。※これらの調査研究成果の一端は、既発表論文「宮廷和歌の確立-勅撰集としての『古今和歌集』」・「中国古代音楽論と日本の和歌文学-礼楽思想と勅撰和歌集-」及び、「古代『楽論』と和歌発生論-礼楽と歌-『古今集』序をめぐって-」(未刊)のほか、「勅撰和歌集真名序文段・構成対照一覧稿・付略注」として公表予定である。5月末刊行予定の「研究成果報告書」(冊子体)参照。
戦後日本における沖縄像の思想史的分析

本研究は戦後日本における沖縄像の思想史的な変遷をたどり、戦後思想史における沖縄像の抑出を試みるものである。沖縄像の形成と展開にかかわる諸問題は、遠くは近世・近代へとさかのぼりうるものであるが、本研究がとりわけ戦後期を対象としたのは、この時期は日本の敗戦の結果、約30年にわたって沖縄が米国の異例の統治下にあったという事実にもとづいている。この結果、沖縄問題は戦後日本のナショナリズムの中心的な課題として、広範な人々の関心の焦点となり、その解決をめぐって政治・思想・文学などの分野で白熱的な議論が展開された。とりわけ,50年代の米軍による軍用地接収問題は、「朝日新聞」によって全国に報道され、これを契機に沖縄問題は、国民的課題として急速に注目をあびることとなった。こうして60年代に入ると、沖縄の日本復帰を求める運動は、大きな盛り上がりをみせ,言論ジャ-ナリズムの中心的な課題となった。以上のような経緯をふまえ,平成元年度は主要に60年代を中心とする沖縄像の分析作業に着手した。その方法は(1)全国主要新聞、雑誌における沖縄論の調査(2)沖縄現地の新聞社説の分析検討(3)政党レベルの沖縄論の検討(4)大衆団体レベルの資料収集(5)知識人における沖縄論の調査分析-というものであった。こうした分析作業の結果、新聞、政党、大衆団体、知識人など諸々のレベルで多種多様な沖縄がまさに噴出している様相が如実にみてとれるようになった。とりわけ、50年代との相違は,大衆運動の高揚とともに著明な知識人達の発言が目立つことである。中野好夫、近江健三郎、島尾敏雄らの沖縄論は、十国主義論、道義立国論、ヤポネシア論などとなって結実し、一方、沖縄現地側からも大田昌秀、大城立裕、新川明らによる沖縄の文化的、思想的な独自性、個有性が強調され、60年に入って沖縄像は豊かな思想像へと深化をみせ、それらはやがて70年代へと継承されていくことになる。本研究は戦後日本における沖縄像の思想史的な変遷をたどり、戦後思想史における沖縄像の析出を試みるものである。周知のように対日講和条約の締結から1972年の沖縄返還に至る過程は、日本戦後史の中での沖縄の位置をいちじるしく異なった位相におくことになった。何よりも日本近代百年を通じて日本の国土の一部がほぼ30年に及ぶ長期間にわたって異民俗(米国)の統治下にあったということは、それ自体まさに異例の事態であった。このような中で沖縄問題は、日本の思想・文化・社会の諸領域できわめて重要な課題として、さまざまな角度から議論された。以上のような問題意識にたって63年度は、主要に1950年代を中心とする沖縄像の分析作業に着手した。その着手の手順は、(1)全国主要新聞における沖縄論の調査(2)沖縄現地の新聞社説の分析検討(3)全国主要雑誌における沖縄論の調査(4)オピニオン・リーダーの沖縄論の検討-というものである。この結果、ほぼ以上の4領域にわたって資料の収集・復写作業を完了し、目下、鋭意分析中である。これまでの分析によって明らかになったことは、戦後日本における沖縄像の形成にもっとも大きな影響を与えたのは、中央の言論ジャーナリズムの役割であった。1950年代の沖縄における土地接収問題を報道したいわゆる『朝日報道』は、そうした重要な事例である。この問題を契機に沖縄問題は、総合雑誌、オピニオン・リーダーなどがとり上げることとなり、一挙に国民的な関心を集めるに至る。矢内原忠雄、竹内好らは、この問題を民俗主義と国際主義の結節点としてとらえ、戦後日本における民主主義の試金石とみなした。こうした中央論壇における沖縄論の噴出は、やがて現地沖縄へも波及し、沖縄における復帰思想の形成にも大きな影響を及ぼすものとなる。そして、やがて50年代の沖縄問題は、日本における一連の戦後改革のあり方の議論とも連動しつつ、1960年代へと向う。

とりわけ、50年代との相違は,大衆運動の高揚とともに著明な知識人達の発言が目立つことである。中野好夫、近江健三郎、島尾敏雄らの沖縄論は、十国主義論、道義立国論、ヤポネシア論などとなって結実し、一方、沖縄現地側からも大田昌秀、大城立裕、新川明らによる沖縄の文化的、思想的な独自性、個有性が強調され、60年に入って沖縄像は豊かな思想像へと深化をみせ、それらはやがて70年代へと継承されていくことになる。
太陽光圧を利用した大型・柔軟宇宙構造物の能動的姿勢制御に関する研究

本研究の目的は,大型・柔軟宇宙構造物の姿勢を,太陽光圧を積極的に利用して能動的・安定的に制御する手法を確立することである.提案する姿勢制御手法の具体的な適用対象として,宇宙空間で数10m以上の大面積の薄膜を遠心力で展開し,膜面に対する太陽光圧を推進力として利用して宇宙空間を航行するスピン型ソーラーセイルを選定した.本研究では,電気的に光学パラメータを制御し太陽光圧によって姿勢制御トルクを発生可能な軽量薄膜デバイスを開発し,太陽光圧を利用した姿勢制御手法を構築した.さらに,本研究で開発した姿勢制御デバイスを,ソーラーセイル実証探査機「イカロス」に搭載し,2010年度に打ち上げた.2010年度中に惑星間軌道上でのソーラーセイルの姿勢制御実験を行い,本研究成果を宇宙実証する予定である.本研究の目的は,大型・柔軟宇宙構造物の姿勢を,太陽光圧を積極的に利用して能動的・安定的に制御する手法を確立することである.提案する姿勢制御手法の具体的な適用対象として,宇宙空間で数10m以上の大面積の薄膜を遠心力で展開し,膜面に対する太陽光圧を推進力として利用して宇宙空間を航行するスピン型ソーラーセイルを選定した.本研究では,電気的に光学パラメータを制御し太陽光圧によって姿勢制御トルクを発生可能な軽量薄膜デバイスを開発し,太陽光圧を利用した姿勢制御手法を構築した.さらに,本研究で開発した姿勢制御デバイスを,ソーラーセイル実証探査機「イカロス」に搭載し,2010年度に打ち上げた.2010年度中に惑星間軌道上でのソーラーセイルの姿勢制御実験を行い,本研究成果を宇宙実証する予定である.本研究の目的は,大型・柔軟宇宙構造物の姿勢を,太陽光圧を積極的に利用して能動的・安定的に制御する手法を確立することである.平成20年度は,まず,電気的に光学パラメータを制御し太陽光圧によって姿勢制御トルクを発生可能な軽量薄膜デバイスとして,液晶を利用したデバイスを開発した.電源印加時と非印加時の光学パラメータ(鏡面/拡散反射率・吸収率・直線/拡散透過率)を計測し,電源ON時とOFF時に太陽光から受ける単位面積あたりの光圧の差としてデバイスの性能値を計測した.次に,デバイスの宇宙環境耐性の検証として,熱・真空・放射線環境に対する耐性を評価した.具体的には,デバイスの電源ON時/OFF時双方の太陽光吸収率(α)/赤外放射率(ε)を計測することで軌道上での温度環境を解析し,デバイスの軌道上での性能について恒温槽を用いて評価した.宇宙空間での真空環境対策として,デバイスを改良して液晶が宇宙空間に露出しない構造とし,高真空チャンバを利用して真空中でのデバイスの動作やアウトガス特性を評価した.放射線耐性については,電子線・陽子線照射試験を行い,試験前後の評価結果から,軌道上環境耐性を確認した.最後に,スピン型ソーラーセイルの姿勢制御を例として,姿勢制御システムとしての性能評価を開始した.具体的には,柔軟構造物である薄膜の力学的挙動を巨視的に模擬でき,かつ計算負荷の比較的小さい多粒子モデルをベースに膜面のダイナミクスモデルを構築し,開発したデバイスを搭載した際の姿勢制御則を設計した.本研究の目的は,大型・柔軟宇宙構造物の姿勢を,太陽光圧を積極的に利用して能動的・安定的に制御する手法を確立することである.具体的な適用対象として,宇宙空間で数10m以上の大面積の薄膜を遠心力で展開し,膜面に対する太陽光圧を推進力として利用して宇宙空間を航行するソーラーセイルを選定し,太陽光圧を利用した姿勢制御手法について研究を進めている.平成21年度は,まず,平成20年度に試作した太陽光圧の反射率を電気的に制御する姿勢制御デバイスの宇宙環境耐性評価をより詳細に行った.具体的には,昨年度実施できなかった紫外線照射試験を実施し,外観・性能面での劣化を評価し,昨年度に実施したその他の耐環境性試験も含めて,本デバイスの宇宙環境耐性を確認することができた.次に,本研究で提案する姿勢制御手法の性能評価を行った.まず,昨年度に構築したソーラーセイルの数値モデルに対して,姿勢制御デバイスの電源ON時/OFF時双方の太陽光吸収率(α)/赤外放射率(ε)によって発生する熱輻射に起因する面圧や,セイル膜面のたわみによる寒効的な反射率の変化,材料の反射率の入射角依存性などの観点からモデルを詳細化し,セイルの展張状態での形状をより詳細に解析した.その上で,本研究で開発した姿勢制御デバイスを用いた姿勢制御手法のより現実的な性能評価として,上記モデルを用いた姿勢制御シミュレーションを行い,ソーラーセイルとして十分な姿勢制御性能を有することを確認した.さらに,本研究で提案する姿勢制御デバイスを,2010年度打ち上げ予定のソーラーセイル実証探査機「イカロス」に搭載し,姿勢制御実験を実施することとした.打ち上げ前の各種環境試験を昨年度に無事完了しており,2010年度中に惑星間軌道上でのソーラーセイルの姿勢制御実験を行い,本研究成果を実証する予定である.
リアノジン受容体分子内のＫ２０１結合コアをターゲットとした不整脈治療の実用化

K201 binding coreの構造について、S2246Lのmutation部位とK201 binding siteがloop状になっている構造についての解析ができた。さらにK201 binding coreの下流にあるcalmodulinの結合解離という新たなシグナルを解析し、K201 binding coreのシグナルがcalmodulinの解離を経てチャネル孔へ伝えられることがわかった。これによって治療ターゲット分子としてのリアノジン受容体のなかで治療ターゲットドメインを2つ同定できた。1.リアノジン受容体のK201結合コアに結合する多数のコンパウンドの中からリアノジン受容体からのカルシウムリークを抑制するコンパウンドのスクリーニングをSR vesicleを用いたカルシウムリーク実験およびマウス心筋細胞を用いたCa spark実験の2つのvitro実験にて行い、いくつかの候補物質を絞り込みを引き続きおこなった。2.現在in vivo実験の準備の経口投与時の血中動態のモニター、容量の設定がいくつかのコンパウンドについて終了した。3.リアノジン受容体のK201結合コアの下流にカルモジュリン結合ドメインが存在し、このカルモジュリン結合ドメインにカルモジュリンが結合することがリアノジン受容体からのカルシウムリークを抑制する手段として非常に有用であることがわかった。4.カルモジュリンの親和性を高めることで致死的不整脈の治療を可能にできるか、R2474S KI-mouseを用い、単離心筋細胞で検討し、after transientの抑制など、DADによる不整脈を抑えることが期待される結果が出ている。5.リアノジン受容体のカルモジュリン結合ドメインの1つのアミノ酸を変異させ、カルモジュリン高親和性リアノジン受容体をもつKIマウスの作成を開始した。25年度はR2474S KIマウスにおいてDantroleneがRyR2に対するcalmodulinの親和性に与える影響について検討した。蛍光ラベルしたcalmodulin(F-CaM)の親和性はcAMP投与で低下したが、domain zipperであるdantroleneの投与でほぼ正常化した。催不整脈性をwhole cell patch clampを用いて解析し、悪性高熱症の治療薬であるDantroleneがCalmodulinのRyR2に対するaffinityを高めることでDADやTAを抑制し、抗不整脈効果を発揮することがわかった。以上の結果は不整脈における新しい治療ターゲットとしてRyR2に対するCalmodulinの親和性という全く新しいターゲットを設定できた点で非常に意義深い。1.リアノジン受容体のK201結合コアに結合する多数のコンパウンドの中からリアノジン受容体からのカルシウムリークを抑制するコンパウンドのスクリーニングをSR vesicleを用いたカルシウムリーク実験およびマウス心筋細胞を用いたCa spark実験の2つのvitro実験にて行い、いくつかの候補物質を絞り込みを行った。2.現在in vivo実験をめざし、経口投与時の血中動態のモニター、容量の設定のための準備を進めている。4.リアノジン受容体のカルモジュリンバインディングドメインに対して様々な点突然変異を行い、スクリーニングの結果カルモジュリンが結合しやすい変異を2つ発見した。5.カルモジュリンの親和性を高めることで致死的不整脈の治療を可能にできるか、R2474S KI-mouseを用い、単離心筋細胞で検討し、after transientの抑制など、DADによる不整脈を抑えることが期待される結果が出ている。6.K201結合コアの動きを可視化するため蛍光をK201結合コアにラベルする実験を行っているが、現在のところFRET可能なほどの良好なラベルを得るにはに至ってない。高親和性カルモジュリンでのafter transientの抑制の確認やカルモジュリン高親和性リアノジン受容体をもつKIマウスの作成を開始するなど、おおむね順調に進展している。おおむね予定したとおりのことを行って成果を得ている。1.リアノジン受容体のk201結合コアに結合しリアノジン受容体からのカルシウムリークを抑制するコンパウンドについて、in vivoでのスクリーニングを続ける。2.1つ下流のカルモジュリン結合ドメインについてそのk201結合ドメインとの連関について解明する。3.カルモジュリンの結合親和性を高めることが致死的不整脈の治療につながる可能性について、モデル動物で検討する。1.リアノジン受容体のK201結合コアに結合しリアノジン受容体からのカルシウムリークを抑制するコンパウンドについて、in vitroでのスクリーニングからin vivoでのスクリーニングに移る。2.1つ下流のカルモジュリン結合ドメインについてそのK201結合ドメインとの連関について解明する。実験のための薬品、研究を進めるための解析コンピュータなどの研究用消耗品。研究成果発表のための旅費に使う予定。
古代エジプト新王国時代の「ディール・アル=マディーナ遺跡」の墓地編年に関する研究

王家の谷の王墓造りに携わった職人達が居住し、埋葬された「ディール・アル=マディーナ遺跡」では、研究の基礎となる墓地編年にいくつかの問題点があることが指摘されている。また、20世紀前半に発掘され、これまで詳細な報告がされていない点も研究の停滞の一因となっている。本研究では、これらの問題点をふまえ、ディール・アル=マディーナ遺跡から出土した土器資料の資料化を行い、墓地編年を再構築することを目的とした。今年度は2月16日から3月29日にかけてカイロ・エジプト博物館でのディール・アル=マディーナ遺跡出土土器の資料調査に加え、編年の重要な比較資料となるルクソール、王家の谷・アメンヘテプ3世王墓出土土器の調査を実施した。今年度のカイロ・エジプト博物館における調査では、主に過去2年間の資料調査で対象とした土器の最終的な確認を行った。現物を再観察すると共に、遺物台帳にて出土情報などを収集した。また、ルクソール、王家の谷・アメンヘテプ3世王墓周辺には、ディール・アル=マディーナの職人が使用した土器が残されている。これらの土器の整理、実測、写真記録を行い、墓地編年を考察する上で重要な比較資料を得た。資料調査をもとに、日本国内において、両者の比較考察を行うことで、更に精度の高い墓地編年の構築が可能となった。更に、彩色技法、製作技法、胎土の観察から、土器の生産体制に関する新たな知見を得た。これらの成果に関しては、来年度、日本オリエント学会などにおける研究発表を予定している。今年度は11月16日から12月17日にかけてカイロ・エジプト博物館に所蔵されているディール・アル=マディーナ遺跡出土の土器資料を対象に資料調査を実施した。今年度の調査では、まず、収蔵状況を把握するため遺物登録台帳にて土器資料の確認を行った。そして、収蔵資料のうち、彩色に特徴があり、残存状況の良好な土器について実測、観察および写真撮影を行った。現物資料の観察によって、表面の調整、顔料の塗布の方法等、これまでに十分に報告されていない点が明らかとなった。また、ルーペによる胎土観察を行うことで、現在エジプトの土器研究で構築されている胎土分類システム(ウィーン・システム)に組み込むことが可能となった。今年度の資料調査によって、従来の簡易的な報告に加え、新たに土器の器形、胎土や製作技法等に関する詳細なデータを得ることが出来た。資料調査をもとに、日本国内において、エジプトの他の遺跡から出土した土器資料との比較考察を行い、ディール・アル=マディーナ遺跡の墓地編年の基礎データを得る事が出来た。更に、彩色技法の観察から、土器の生産体制に関する新たな知見を得た。これらの成果に関しては、今年度、『エジプト学研究』第14号に投稿し、成果報告を行った。また、来年度は日本オリエント学会における研究発表を予定している。今年度は2006年11月10日から年11月30日にかけてカイロ・エジプト博物館に所蔵されているディール・アル=マディーナ遺跡出土の土器資料を対象に資料調査を実施した。今年度の調査でも、昨年に引き続き、収蔵資料料の実測、鰹および写真撮影を行った.現物資料の観察によって、表面の調整、顔料の塗布の方法等、これまでに十分に報告されていない点が明らかとなった。また、2006年12月1日から2007年1月10日にかけて、エジプト、アメンヘテプ3世王墓において新王国時代の土器資料の調査を行った。この遺跡周辺からは、ディール・アル=マディーナの職人が残した土器が出土しており、今回の調査によって、重要な比較資料を得る事が出来た。更に、他遺跡出土土器との比較分析から、ディール・アル=マディーナの職人の活動についても言及した。これらの成果に関しては、今年度、『オリエント』に投稿を行った。また、来年度、日本オリエント学会における研究発表を予定している。

王家の谷の王墓造りに携わった職人達が居住し、埋葬された「ディール・アル=マディーナ遺跡」では、研究の基礎となる墓地編年にいくつかの問題点があることが指摘されている。また、20世紀前半に発掘され、これまで詳細な報告がされていない点も研究の停滞の一因となっている。本研究では、これらの問題点をふまえ、ディール・アル=マディーナ遺跡から出土した土器資料の資料化を行い、墓地編年を再構築することを目的とした。今年度は2月16日から3月29日にかけてカイロ・エジプト博物館でのディール・アル=マディーナ遺跡出土土器の資料調査に加え、編年の重要な比較資料となるルクソール、王家の谷・アメンヘテプ3世王墓出土土器の調査を実施した。今年度のカイロ・エジプト博物館における調査では、主に過去2年間の資料調査で対象とした土器の最終的な確認を行った。現物を再観察すると共に、遺物台帳にて出土情報などを収集した。また、ルクソール、王家の谷・アメンヘテプ3世王墓周辺には、ディール・アル=マディーナの職人が使用した土器が残されている。これらの土器の整理、実測、写真記録を行い、墓地編年を考察する上で重要な比較資料を得た。資料調査をもとに、日本国内において、両者の比較考察を行うことで、更に精度の高い墓地編年の構築が可能となった。更に、彩色技法、製作技法、胎土の観察から、土器の生産体制に関する新たな知見を得た。これらの成果に関しては、来年度、日本オリエント学会などにおける研究発表を予定している。
植物における時計関連タンパク質の生化学的解析

本年度、私は、時計変異体セットの中でも最も厳しい時計形質(概日リズムの無周期)を示すprr9prr7prr5三重変異体(以下、d975と略す)のDNAアレイ解析を行い、1)d975では時計出力遺伝子のほぼ全てのリズム成分が無くなる事、2)d975では体内時間の位相が主観的昼で止まっている事を発見、報告した(発表論文1)。つまりPRR9、PRR7、PRR5は植物ゲノムの転写レベルの日内の時間変遷(朝から夕)に必須であると強く示唆された。また野生型に比べて、d975で発現異常を示す遺伝子をおよそ600個見つけた。この研究により、PRRタンパクは生理的に昼ごろに機能する事と、PRRタンパクのゲノムワイドなターゲット遺伝子の候補が見つかった。これらは、今後のPRRタンパク質機能の同定にたいして有用な情報である。またPRRタンパクの主要な細胞内局在を核内と決定する事ができた(未発表)。さらにPRRタンパクのターゲット候補の遺伝子のプロモーター活性を、過剰なPRR遺伝子の発現により、抑制あるいは誘導できるかを確認する実験が完了している。これらの結果はPRRタンパクが転写調節因子の働きを持つ事を示唆している。本年度、私は、生化学的機能が未知であったシロイヌナズナの生物時計関連タンパク質PSEUDO-RESPONSE REGULATOR9(PRR9),PRR7,PRR5の解析を行い、これらはCIRCADIAN CLOCK ASSOCIATED 1(CCA1)とLATE ELONGATED HYPOCOTYL(LHY)遺伝子への転写抑制因子として機能する事を見いだした。グルココルチコイドで機能誘導されるPRR5-GRは、その他のタンパク質の翻訳が存在しない条件においてもCCA1とLHYの発現を抑制した。一方、シロイヌナズナの一過的遺伝子発現系によって、PRR9,PRR7,PRR5のCCA1とLHYのプロモーター活性に対する抑制効果を発見した。さらにその抑制機能を担う新規なモチーフがPRR9,PRR7,PRR5に存在することも分かった。このモチーフは様々な植物に存在しているため、PRR9,PRR7,PRR5の転写抑制能は植物に普遍的な機能であると考えられる。またクロマチン免疫沈降法によって、PRR9,PRR7,PRR5タンパク質が植物体内でCCA1とLHYのプロモーター上に存在していることが分かった。これらPRRがCCA1とLHYプロモーターに存在している時間帯と、CCA1とLHYの転写抑制が見られる時間帯は一致(午前から夜半)していた。これら一連の解析により、PRRはCCA1とLHYの転写抑制を担う主要な因子であることが示唆された。
超高磁場装置による拡散磁気共鳴スペクトル画像法を用いた脳内在性アミノ酸動態解析

本研究の目標は超高磁場装置による脳内在性アミノ酸動態解析を確立することである。MRS法の持つ非侵襲的に生体からアミノ酸を測定する能力に、超高磁場磁気共鳴装置を用いてアミノ酸の拡散・緩和時間・化学反応時間などの情報を付加して実用的レベルで測定方法を確立し、動態を明らかにすることを目標としている。超高磁場装置による拡散磁気共鳴スペクトル画像法を実現するために、これまでに開発・実用化してきた磁気共鳴スペクトル画像法の改善を実験用装置を用いてはかった。これまでに実用化してきたスピンエコー(SE)法・グラディエントエコー(GRE)法による励起を含めて総合的な最適化を図った。これらを超高磁場装置においても実用的なものとするため、基礎的な検討を現有する実験用装置および臨床装置の磁場を利用して測定できるマイクロイメージング装置(MR mics:城南電子)を用いて行った。MRS法は高速化が望まれるが、超高速画像法の応用であるEPI法やGRE法を用いた方法における拡散測定は現状では問題点が多く、SE法を用いた拡散測定が合理的であると考えられた。さらに、測定条件異なる装置での処理ソフトウェアーの開発・移植を同時並行的に行って、超高磁場装置に移植する方法を検討した。超高磁場装置ではSE法を用いて、超高磁場人体用装置による測定を行った。超高磁場装置とこれまでの臨床用装置の能力の比較を行い、超高磁場装置の測定能力の確認を行った。また、拡散強調画像法を応用して脳内の神経走行を描出するテンソル画像を得ることができた。生体から拡散スペクトルを得るためには、生理的な動きを補正する必要があるが、現時点では十分な補正ができなかった。しかし、超高磁場装置ではスペクトルの分離がよく、かつ十分な信号が得られることがわかり、画像法での描出能の高さと組み合わせることによって、超高磁場磁気共鳴装置による拡散強調スペクトロスコピーの実現の目処を得ることができた。目標は超高磁場装置による拡散磁気共鳴スペクトル画像法を用いた脳内在性アミノ酸動態解析を確立することである。今回立案した超高磁場装置による拡散磁気共鳴スペクトル画像法を実現するために、これまでに開発・実用化してきた磁気共鳴スペクトル画像法の改善を実験用装置を用いてはかった。これまでに実用化してきたSE法・GRE法を含めて総合的な最適化を図った。これらを超高磁場装置においても実用的なものとするため、基礎的な検討を現有する実験用装置で行った。MRS法としては高速化が望まれるものの、超高速画像法の応用であるEPI-CSI法やGRE法を用いた方法における拡散測定は現状では問題点も多く、SE法を用いた拡散測定が合理的であろうと考えられた。超高磁場装置ではSpin Echo法を用いて、超高磁場人体用装置による測定を行った。これにより、超高磁場装置とこれまでの臨床用装置の能力の比較を行い、超高磁場装置の測定能力の確認を行った。この結果、次年度の研究遂行に必要な能力を備えていることを確認しており、引き続き研究を遂行していく予定である。