hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
歯周組織構成細胞を介した高血糖・高飽和脂肪酸による炎症誘導と自然免疫の影響

糖尿病は罹患率の高い病気であり、歯周病のリスク因子として位置付けられ、病態の重症化に影響を及ぼしているといわれている。しかし、歯周病は感染症であり糖尿病は代謝異常の疾患であることから、両疾患を結び付ける病態メカニズムの詳細は十分には解明されていない。本研究では、歯肉上皮細胞を高グルコース条件下で培養することにより炎症性サイトカインやToll like receptorの発現が亢進し、酸化ストレスシグナルが関与していることを明らかにした。これらのことは基礎疾患として糖尿病を有する歯周病患者の病態分子メカニズムを明らかにする可能性を見出した。高血糖による炎症性サイトカインIL-8とTLR発現に対する影響...研究計画に則り歯肉上皮細胞株epi 4を用いて正常時(glucose 6 mM)と比較し、高血糖(25 mM)の作用により歯肉上皮細胞において好中球の遊走を促すIL-8とTLR2のmRNA発現が上昇した。このことより高血糖はそれだけで歯肉上皮細胞に対して炎症を惹起する作用を示すと考えられる。これは歯肉上皮細胞の培養上清中のIL-8タンパク量をELISA法にても有意に上昇していることが確認された。TLR2,4タンパク発現変化について免疫染色による観察とFACS法を用いて確認した結果TLR2について発現が上昇していることが確認された。正常時と比較した高血糖状態下での歯肉上皮細胞における遺伝子およびタンパク発現プロファイル変化について...歯肉上皮細胞を正常血糖状態下(6mM)と高血糖状態下(25mM)にて培養し、その時の遺伝子およびタンパク発現プロファイルについて炎症性のサイトカインであるCCL2、IL-6等のmRNA発現が上昇していることをreal time PCR法にて確認している。しかし、現段階にて炎症関連分子の発現変化について網羅的マイクロアレイを用いて測定はまだ行なっていない。歯肉上皮細胞において高血糖により誘導されるTLR内因性リガンドの検索について...細胞表面に存在するTall like receptor(TLR)の中でもTLR2と4については内因性リガンドにも応答することが報告されてきた。内因性リガンドとしてHSP60,HSP70などの細胞質タンパク質やHMGB1(high mobility group 1)、S100A8/A9、細胞外マトリックス分子であるヒアルロン酸,フィブロネクチン,ヘパラン硫酸などが報告されているが、歯肉上皮細胞において高血糖状態(25mM)により誘導されるそれらのmRNA発現をreal time PCR法にて定量解析を行った結果、発現に変化は見られなかった。慢性疾患である歯周病と糖尿病は相互的にリスク因子として位置付けられ、病態の複雑化と治療の困難性に影響を及ぼしているといわれている。しかし、両疾患を結び付ける病態メカニズムの詳細は十分には解明されていない。本研究では、歯肉上皮細胞株epi 4を用いて正常時(glucose 6 mM)と比較し、高血糖(25 mM)の作用により歯肉上皮細胞において好中球の遊走を促すIL-8のmRNA発現が培養48、72時間にて上昇することが明らかになった。同条件にて培養した歯肉上皮細胞の培養上清中のIL-8タンパク量をELISA法にて測定した結果、高血糖条件下において有意に発現上昇していることが確認された。この発現増強は他の2つの歯肉上皮のcell lineでも再現された。また同条件にて炎症性サイトカインとして知られているCCL2、TNF-aについても発現上昇が認められた。この現象は抗酸化物質であるN-アセチル-L-システイン(NAC)(N-acetylcysteine)とProtein kinase C (PKC)シグナル阻害薬であるRo31-8220によって解消されることも示され、酸化ストレスシグナルとPKCシグナルが関与していることを明らかにした。一方で、高血糖条件ではporphyromonas gingivalis菌のレセプターであるToll like receptor2 (TLR2)のmRNA発現も上昇した。TLR2タンパク発現変化についてウエスタンブロット法による観察とFACS法を用いて確認した結果、発現が上昇していることが確認された。これらのことは基礎疾患として糖尿病を有する歯周病患者の病態分子メカニズムを明らかにする可能性を示した。歯肉上皮細胞株epi 4を用いて正常時(glucose 6 mM)と比較し、高血糖状態(25 mM)ではmRNA、タンパク産生ともに有意な差をもって上昇していることが示された。この現象は口腔歯肉上皮で明らかにしたのは初めてであり細菌の感染のない状態でも高血糖であること自体が炎症を惹起している事が示唆された。また、この現象は抗酸化物質であるN-アセチル-L-システイン(NAC)(N-acetylcysteine)によって解消されることも示された。

これらのことは他の2つの歯肉上皮のcell lineでも再現された。これらのことをH24年第55回秋季歯周病学会学術大会にて発表した。また、TLR2,4タンパク発現変化について高血糖状態下(25 mM)ではmRNA発現が有意に上昇していることが確認された。また表面タンパク発現についてもFACS法を用いて確認した結果TLR2について発現が上昇していることが確認された。以上より当初計画の口腔歯肉上皮における高血糖状態による炎症惹起の可能性の確認とそのメカニズムにTLRが関与している可能性について着実に明らかにしてきており、概ね順調に研究が推移してきているものと考える。歯周病学ヒト細胞Cell lineにてTLRの関与に関して表面タンパクの発現上昇は確認したが、そのタンパクの実際の関与し機能しているのかについて検証していく予定である。また、自然発症高血糖マウスであるdb/dbマウスについて購入し飼育する準備は整っている。そこで実際にWTマウスと比較して硬組織についてマイクロCTによる観察をし、歯周軟組織に対しては免疫染色法にて観察を行うことにより歯周組織の炎症や破壊の程度を比較評価する予定としている。また、db/dbマウスにおいてもTLRの関与が疑われた場合は実験的歯周病モデルを構築しWild typeと比較し歯周組織の炎症や破壊の程度を観察する予定である。さらに研究を推進するため本年度に確認された現象を実験動物(マウス)にて検討していく予定である。マウス購入費と飼育費が必要であり、年度をまたぐ一貫したプロジェクトであることと、今後解析費等がさらに必要であることが予め予想されていたためである。高血糖実験モデル動物としてdb/dbマウスの購入、また高血糖状態が歯肉上皮の炎症状態に及ぼす影響とTLRの関与に関する解析のために実験試薬購入と解析費に使用する予定である。
「書く力」育成におけるBerieving Gameの有効性

研究目的アメリカにおける書くことの教育の専門家ピーター・エルボウの理論、ビリービング・ゲームについての研究。ビリービング・ゲームとは、集団の中で自分の意見・書く内容を発見し、さらに自分への信頼を育てていくものだ。「日本語で書くこと」におけるビリービング・ゲームの効果を明らかにすることが目的である。研究方法(1)大学生における自己効力感と「書くことへの抵抗感」の関連性(2)大学生におけるビリービング・ゲームによる「書くことへの抵抗感」の軽減(3)大学生におけるビリービング・ゲームによる「自分や他人に対する信頼」の変化(4)高校生における自己効力感と「書くことへの抵抗感」の関連性上記4点について研究をおこなった。(1)と(4)は質問紙法による量的研究。(2)はビリービング・ゲームと対象的な手法であるダウティング・ゲームとの比較を質問紙法によりおこなった量的研究。(3)はPAC分析による質的研究。研究成果大学生も高校生も、効力感が低い人は書くことが苦手であることが数値的に明らかになった(書くことへ意識と効力感には正の相関がある)。効力感が低い人ほど書くことに抵抗があり、文章を人に見られたくないと感じている。また、批判したり教えたりするダウティング・ゲームに比べて、ビリービング・ゲームでは書くことへの抵抗感を軽減することが明らかになった。特に効力感が低いグループにおいては、書くことへの意識の上昇が、統計的に有意な変化として顕著な形であらわれた。さらに、質的研究によりビリービング・ゲームの「自分や他人に対する信頼」を高める効果が確認できた。結論として、教えたり批判したりするよりも、「自分や他人に対する信頼」を高めるビリービング・ゲームを行うことが書く力の育成に有効だと言える。
人工現実感VR空間モデルの生成とパラレルマニピュレータの双方向協調制御

近年,危険な環境下での産業機械等の高度な遠隔作業が求められており,操作者に対して視覚情報だけでなく臨場感のある作業感覚を提示することが必要となっている.本研究ではパラレルマニピュレータを対象とし,人間が仮想空間による視覚だけでなく,人工現実感(Virtual Reality : VR)によって力覚をも体感可能なシステムを開発する.これらの双方向協調制御の基本技術課題を確立することができれば,遠隔操作支援の実現,およびパラレルマニピュレータの多様な用途への応用展開が可能となる.研究方法本研究はパラレルマニピュレータを対象として,位置情報と力覚情報の双方向協調制御システムを構築し,操作者に視覚と力感覚をリアルタイムで提示できるようにする.研究成果・多自由度パラレル機構の動力学解析を行い,6本の空気圧シリンダ推力とプラットフォームが発生する力の関係を解析・計算機演算した.これによりVR空間上からパラレルマニピュレータへの力覚提示を実現可能となった.・シリンダ長からプラットフォームの6自由度運動を演算し,これを3次元VR空間上における移動物体の動作として表示した.プラットフォームの動作と同期して高速に描画できるようにするため,高速リアルタイム表示が可能な3次元グラフィックライブラリであるOpen GLを用いた.・空気圧式6自由度パラレルマニピュレータを試作した.平成18年度に試作したパラレルマニピュレータをもとに,ハード部品の再検討や設計等の見直しにより装置の改良試作を行い,動作範囲,発生力ともに大幅に改善した.・3次元VR空間での移動物体と試作した空気圧パラレルマニピュレータの動作をリアルタイムで連動させ,位置・力覚の双方向協調制御が実現可能であることを確認した.近年,危険な環境下での産業機械等の高度な遠隔作業が求められており,操作者に対して視覚情報だけでなく臨場感のある作業感覚を提示することが必要となっている.本研究ではパラレルマニピュレータを対象とし,人間が仮想空間による視覚だけでなく,人工現実感(Virtual Reality : VR)によって力覚をも体感可能なシステムを開発する.これらの双方向協調制御の基本技術課題を確立することができれば,遠隔操作支援の実現,およびパラレルマニピュレータの多様な用途への応用展開が可能となる.研究方法本研究はパラレルマニピュレータを対象として,位置情報と力覚情報の双方向協調制御システムを構築し,操作者に視覚と力感覚をリアルタイムで提示できるようにする.研究成果・多自由度パラレル機構の動力学解析を行い,6本の空気圧シリンダ推力とプラットフォームが発生する力の関係を解析・計算機演算した.これによりVR空間上からパラレルマニピュレータへの力覚提示を実現可能となった.・シリンダ長からプラットフォームの6自由度運動を演算し,これを3次元VR空間上における移動物体の動作として表示した.プラットフォームの動作と同期して高速に描画できるようにするため,高速リアルタイム表示が可能な3次元グラフィックライブラリであるOpen GLを用いた.・空気圧式6自由度パラレルマニピュレータを試作した.平成18年度に試作したパラレルマニピュレータをもとに,ハード部品の再検討や設計等の見直しにより装置の改良試作を行い,動作範囲,発生力ともに大幅に改善した.・3次元VR空間での移動物体と試作した空気圧パラレルマニピュレータの動作をリアルタイムで連動させ,位置・力覚の双方向協調制御が実現可能であることを確認した.
本邦ではまれな肝細胞腺腫の疫学調査、および臨床病理学的、免疫・分子病理学的研究

肝細胞腺腫(HCA)は肝に発生する良性の腫瘍で、日本での頻度は少なく、疫学的なデータも明らかではない。高分化肝癌とHCAの鑑別は組織像のみでは困難で、また、ある種のHCA亜型は悪性化と関連し、HCA研究の重要性は増している。本研究では、肝切除手術が多数の全国の病院にアンケートを送付し、日本での頻度および亜型分類を調査した。回答率は約80%であった。回答の中の30%弱が「HCA症例あり」、70%強は「HCA症例なし」の回答であった。手術検体で病理学的にHCAの診断が確認された症例は117例で、性別、年齢や臨床的背景等を検討した。収集したHCAに対して亜分類を検討し、一部は遺伝子異常を検索した。本邦における肝腫瘍の大部分は肝細胞癌で、肝細胞腺腫は非常に少ない。欧米では日本よりも肝細胞腺腫は多く、研究が進んでいるが、本邦における肝細胞腺腫の研究は乏しい。まだ報告されていない日本における肝細胞腺腫の発生頻度を調査する目的で、アンケート調査を施行した。送付先は、全国の大学病院81施設、独立行政法人国立病院機構101施設、日本赤十字社の赤十字病院85施設、および、肝切除を比較的多数施行している上記以外の病院127施設、合計394施設の、消化器・肝胆膵外科と病理診断科の部科長宛てに、総数788通である。回答をいただいた施設は約60%である。それらの施設のうち、「肝細胞腺腫症例の経験はない」と回答された施設は約70%、「確定症例あるいは疑い症例がある」と回答された施設は約30%で、確定症例あるいは疑い症例のアンケートでの合計は約130症例である。各施設での調査年数や病床規模等が異なり、アンケートの詳しい結果は解析中である。残り約40%の未回答施設に対して、調査の精度を上げる目的で、現在更に2度目の連絡を実施中である。2010年にWHO分類が改訂され、免疫染色によるsubtype分類が提唱された。高分化肝細胞癌と肝細胞腺腫の鑑別は組織像のみでは困難であるが、この分類は確定診断法の一つとして有用である。その分類がどの程度用いられているかの調査を上記アンケートで行っている。組織学的に肝細胞腺腫の確定症例、あるいは疑い症例に対して、免疫染色が施行されず、かつ施設からの希望があれば、当方に組織標本を送付していただき、免疫染色を施行した。また、上記アンケート施設以外でも、全国の病院より免疫染色による肝細胞腺腫の診断確定とsubtype分類の依頼を受けていて、現在検討中である。本邦における肝腫瘍の大部分は肝細胞癌で、肝細胞腺腫HCAは非常に少なく日本における肝細胞腺腫の発生頻度についてはは未だ報告がなされていない。大学病院81施設、独立行政法人国立病院機構101施設、日本赤十字社の赤十字病院85施設、および、肝切除を比較的多数施行している上記以外の病院127施設、合計394施設の、消化器・肝胆膵外科と病理診断科の部科長宛てに、総数788通のアンケートを送付し、協力をお願いした。回答率は約80%で、アンケート用紙に部分的に未回答の欄が残っている症例に対する問い合わせがいまだ完全でなく、正確な集計にもうしばらく時間を要するが、概ね次のような結果である。回答施設の平均病床数は約585床。HCAの診断は1986年から2014年までの間になされているが、回答いただいた施設により調査の年数が異なっており、この点に関しては統計的な処理が難しい。HCA確信例、および、確定は難しいがその施設ではHCAと考えた症例の合計は157例、男/女比はおおよそ3/2、年齢は14歳から87歳まで、平均39.3歳。症例の結節数は、1個が76.6%, 29個が17.2%, 10個以上が6.2%、糖原病合併症例は約9%、糖尿病合併症例は約7%、肥満合併症例は約10%、高脂血症合併症例は約5%、アルコール歴を有する症例は約6.5%、HBsAg陽性症例は約0.6%であった。157例中、subtypeが決定された症例は約36%、その中では、Inflammatory HCA, 40.9%; HNF1α-inactivated HCA, 38.6%, β-cateninactivatedHCA, 4.5%; unclassifiedHCA,16%であった。現時点でのアンケートの空欄を追加調査し、精度を高める計画をたてている。達成度の自己評価としては、おおむね順調に進展している、と考える。本課題の目的の一つが、未だ報告がない本邦の肝細胞腺腫に関する疫学調査であるが、全国アンケートの回答率が2016年末時点で80%を越えた事は大きな成果で、また昨年国際学会で発表した当研究班および協力者で収集したHCA 37例と全国アンケートによるHCA症例におけるsubtypeの内訳は、数値の細かな差異はあるが、類似した傾向である事が大きな理由で、さらに本研究に関連した論文や学会発表がなされた事、等による。1)肝切除術を多数施行している基幹病院402施設にアンケートを送付し2014年から2016年に調査を施行した。327施設より回答があり、回答率は81.3%で、高い数値と考えられた。

回答いただいた病院の病床数合計は約185,000で、平均病床数は約566である。厚生労働省の2014年の統計報告を基にすると、回答施設の日本の総病院数に対する割合は約4%、病床数の割合は約12%になる。各病院での調査年数の平均は12年であった。30%弱の施設が「肝細胞腺腫(HCA)症例あり」、70%強の施設は「HCA症例なし」の回答であった。針生検や画像診断でHCAと診断された症例をのぞき、手術切除検体で病理組織学的にHCAの診断が確定された症例は117例であった。詳しい報告を現在まとめている。2)症例の収集の継続、およびそれら症例に対して免疫組織学的方法でsubtypeの解析を継続施行している。3)免疫組織学的検討で他の3型の決定的な所見が得られなかったHCA症例のsubtypeはUnclassified HCA (U-HCA)に分類せざるを得ない。それが遺伝子学的にも正しいかどうかを確認する目的で、U-HCAの2症例を用いて検討した。ホルマリン固定パラフィン包埋組織標本からマクロダイセクション法にてHCA組織を切り出し、DNAを抽出した。PCRダイレクトシーケンス法で、HNF1α-inactivated HCAとInflammatory HCAの代表的な原因遺伝子であるHNF1A, IL6ST遺伝子の突然変異をhot spotを中心に検索した。今回調べた範囲ではそれらの突然変異は認められなかった。β-catenin遺伝子の突然変異に関しては現在検索中であるためにまだ断定はできないが、検索したU-HCAの2症例は免疫組織学的にも、遺伝子学的にもU-HCAに分類される可能性が示唆された。肝細胞腺腫(HCA)は肝に発生する良性の腫瘍で、日本での頻度は少なく、疫学的なデータも明らかではない。高分化肝癌とHCAの鑑別は組織像のみでは困難で、また、ある種のHCA亜型は悪性化と関連し、HCA研究の重要性は増している。本研究では、肝切除手術が多数の全国の病院にアンケートを送付し、日本での頻度および亜型分類を調査した。回答率は約80%であった。回答の中の30%弱が「HCA症例あり」、70%強は「HCA症例なし」の回答であった。手術検体で病理学的にHCAの診断が確認された症例は117例で、性別、年齢や臨床的背景等を検討した。収集したHCAに対して亜分類を検討し、一部は遺伝子異常を検索した。達成度の自己評価としては、おおむね順調に進展している、と考える。それは、初年度の最大の目標である本邦の肝細胞腺腫に関する疫学調査の全国アンケートの回答率が2015年3月時点で62%に達成した事、また当研究班および協力者で収集した肝細胞腺腫が40症例を越えた事、本研究に関連した論文や学会発表が報告された事、等による。今後の研究として、次のことを考えている。1.アンケートの空欄を埋める連絡を協力施設に対して行い、精度を上げる事を目標とする。2.今回のアンケートや我々が収拾したHCA症例の背景を調べると、欧米に於けるHCAと本邦におけるHCAの背景に差があることが明らかになった。他の成因の可能性についても検討が必要で解析を進める予定である。3.我々はこれまでに観察できた症例において、門脈域の線維組織の分解・消失が共通して特徴的なことに着目しているが、この事に関する研究はまれで、進めてゆく。人体病理学、実験病理学今後の研究の推進方策として、次のことが考えられる1.アンケートの施設回答率を100%近くに上げる努力をする。2.本邦における肝細胞腺腫の成因に関する検索を施行する。
自己再生脂肪組織をキャリアーとするリソゾーム病のexvivo遺伝子治療

リソゾーム病はリソゾーム酵素の欠損により起こる遺伝病であるが、リソゾーム酵素が細胞外からレセプター経由に取り込まれるため理論的には外部からの酵素補充療法が可能である。通常の酵素補充療法やin vivo遺伝子治療の問題点を解決し、欠損酵素を長期間、安全に全身組織に供給するために、多能性幹細胞をキャリアーとする新しい遺伝子治療法を提案する。具体的な実験としてはFabry病モデルマウスを対象に、レンチウイルスベクターによりα-galactosidase遺伝子を導入した脂肪組織由来幹細胞の移植実験を行い、安全性や治療効果の評価を目指した。脂肪組織由来間葉系幹細胞は、我々の確立した方法によりマウス或いはラットの鼡径部脂肪組織から採取し、コラゲナーゼ処理および遠心分離操作により調整した。脂肪組織由来幹細胞は骨髓由来幹細胞に比べて増殖率が5倍から10倍であり、形態学的には線維芽細胞様の形態を呈していた。表面マーカーに関しては、骨髄由来のものと脂肪組織由来のものでは、大差を認めなかった。分化誘導実験では、ラットおよびマウスから採取した脂肪組織由来間葉系幹細胞が、脂肪細胞・軟骨芽細胞・骨芽細胞・神経細胞・筋肉線維芽細胞・骨髓細胞の各細胞へ分化することが確認できた。またウイルスベクターの導入効率においては骨髓由来幹細胞よりも良好であった。in vivo実験では、移植した脂肪組織由来幹細胞と、それを播種した鋳型から、脂肪組織、骨組織、骨髓組織の再生が確認された。レンチウィルスベクターにより遺伝子導入した脂肪組織由来幹細胞をcollagen gelと混合し、マウスの皮下に移植し、細胞と遺伝子発現の時間的経過を追っている。これらの実験系から新規ex vivo遺伝子治療の可能性を検討したい。
複合施設の最適配置と圏域構成に関する研究

平成12年度は,以下の研究成果を得た.1.空間複合の意味での複合施設を取り上げ,複数のサービスを提供する施設がサービスを選択的に提供する場合に,総体としてどのようにサービスを施設に配分するかという最適化問題を連続立地モデルとして定式化し,サービスの最適混合と最適配置パターンを求めた.その結果,一様需要のもとで互いに対等なサービスを前提とした場合でも,一般に中心集中立地と均等分散立地の中間的な配置が得られ,最適配置パターンは正確にシステマティックな均等配置にはならないことが明らかとなった.これは,公園施設と幼稚園・保育所・高齢者福祉施設との複合のように施設を複合化させる場合,利用者の平均距離最小化を目的とするならば,従来の近隣住区論に基づいた施設配置パターンに代わる一様でない配置を検討する必要があることを示唆するものである.2.空間複合型施設の配置決定を離散立地モデルとしても定式化し,土地代の上昇に伴って空間複合型施設が出現する仕組みを最適配置モデルに基づき導出し,その解の性質を明らかにした.施設数所与の場合および施設数内生の場合の空間複合型施設配置問題を線形0-1計画問題として定式化し,東京都心区から抽出したネットワークを対象に幼稚園・小学校・児童館・図書館の4種の施設を設置する問題の解を求めた結果,施設数所与のモデルでは,土地代が上昇するのに伴って,移動費用よりも複合化による土地費用の節約が優先され,施設同士が空間的に複合化していく過程が再現された.一方,施設数内生のモデルでは,土地代の上昇に伴って,施設数はあまり減少させずに複合化を進行させ,施設設置場所数を減らしていくことが明らかとなった.3.利用複合の意味での複合施設の最適配置や競争立地を考える準備として,2次元平面において,利用者がいくつかの施設を総移動距離が最小になるように周遊するという前提の下で,利用する施設の組を明らかにする周遊距離Voronoi図の概念を提示し,高次Voronoi図や重ね合わせVoronoi図との比較を行った.これを用いて,今後,競争立地モデルへの展開,公共施設を想定した社会的最適配置モデルへの応用,個人属性により異なるであろう現実の周遊行動を取り入れた施設配置の評価への応用を考えていく.平成12年度は,以下の研究成果を得た.1.空間複合の意味での複合施設を取り上げ,複数のサービスを提供する施設がサービスを選択的に提供する場合に,総体としてどのようにサービスを施設に配分するかという最適化問題を連続立地モデルとして定式化し,サービスの最適混合と最適配置パターンを求めた.その結果,一様需要のもとで互いに対等なサービスを前提とした場合でも,一般に中心集中立地と均等分散立地の中間的な配置が得られ,最適配置パターンは正確にシステマティックな均等配置にはならないことが明らかとなった.これは,公園施設と幼稚園・保育所・高齢者福祉施設との複合のように施設を複合化させる場合,利用者の平均距離最小化を目的とするならば,従来の近隣住区論に基づいた施設配置パターンに代わる一様でない配置を検討する必要があることを示唆するものである.2.空間複合型施設の配置決定を離散立地モデルとしても定式化し,土地代の上昇に伴って空間複合型施設が出現する仕組みを最適配置モデルに基づき導出し,その解の性質を明らかにした.施設数所与の場合および施設数内生の場合の空間複合型施設配置問題を線形0-1計画問題として定式化し,東京都心区から抽出したネットワークを対象に幼稚園・小学校・児童館・図書館の4種の施設を設置する問題の解を求めた結果,施設数所与のモデルでは,土地代が上昇するのに伴って,移動費用よりも複合化による土地費用の節約が優先され,施設同士が空間的に複合化していく過程が再現された.一方,施設数内生のモデルでは,土地代の上昇に伴って,施設数はあまり減少させずに複合化を進行させ,施設設置場所数を減らしていくことが明らかとなった.3.利用複合の意味での複合施設の最適配置や競争立地を考える準備として,2次元平面において,利用者がいくつかの施設を総移動距離が最小になるように周遊するという前提の下で,利用する施設の組を明らかにする周遊距離Voronoi図の概念を提示し,高次Voronoi図や重ね合わせVoronoi図との比較を行った.これを用いて,今後,競争立地モデルへの展開,公共施設を想定した社会的最適配置モデルへの応用,個人属性により異なるであろう現実の周遊行動を取り入れた施設配置の評価への応用を考えていく.
リニアモータ駆動スピードストローク検索の基礎研究

本研究で採用したリニアモータは永久磁石型リニア同期モータである。平面研削盤のテーブル駆動として使用することを想定すると、発生できる推力、剛性、ストローク等の観点からこの方式が最も適していると判断した。永久磁石を固定(ベッド側)し、テーブル(可動側)にコイルを配置する構造のリニアモータ駆動平面研削盤を実際に試作し、その基本的運動性と研削実験を通し、提案した方式の有効性を実証することができた。研究開発成果の概要は以下の通りである。1.リニアモータの設計と研削盤への実装平面研削盤の運動精度として最も重要なのは、テーブル運動の真直度と位置決め繰り返し精度である。そこで、レーザ干渉計でヨーイング、ピッチングの計測、変位センサによる位置決め繰り返し精度の評価を行った。その結果、初期の目的が達成されていることが確認された。リニアモータ駆動で期待されるもう一つの特長は、高速運転時におけテーブル反転運動に伴う振動の抑制である。加減速特性を容易に制御出来る利点を生かし、最適な加減速パターンを設定することによって振動を効果的に抑制することが出来た。3.研削試験研削試験の目的は、加工精度の評価と加工能率の評価である。前者に関する重要な評価項目として加工面の平坦度と粗さを取り上げた。加工能率に関しては、高加工物速度・微少切り込み研削方式(スピードストローク研削)の効果を難作材料(エンジニアリングセラミックス)を対象にして検証した。評価項目は研削抵抗と砥石寿命である。評価実験の結果、スピードストローク研削は研削抵抗の減少と研削温度の低減に極めて有効であることが実写され、本研究開発の初期の目的を達成することが出来た。本研究は、従来油圧あるいは送りねじ駆動されていた平面研削盤のテーブル駆動を、リニアモータに置き換え、高速、高加速度研削を可能とし、その効果を実験的に確認することを目的としている。本年度は、リニアモータ部の設計・製作とこれを組み込んだ研削盤の運動性能評価をすることが当初の目的であった。磁右の吸引力によるテーブルと案内面間の摩擦力増大を回避するため、リニアモータは垂直方向に対抗して設置された。案内面は、加工精度を維持するためにV型の滑り案内とした。最大推力:1500N、最大加速度:1G、最大速度:60m/minのもとで、300mmのストロークが可能なリニアモータ駆動テーブルが完成した。コイル部の発熱を押さえるために冷却水の循環パイプ、また、位置制御用にリニアスケールを装備した。運動性能を評価するために、テニブル運動に伴うヨーイングとピッチング、テニブル位置決め精度、高速運動に伴うテーブルの浮き上がりなどを測定した。最終位置決め精度は±0.1μmであるが、高速になると若干のオーバーシュートが認められた。テーブルの反転に伴う衝撃で生ずる振動は、加減速度のパターンを適切に制御することで抑制することができた。これはリニアモータ駆動の大きなメリットである。動圧効果によるテーブルの浮き上がりは、最大20μm程度で、速度20m/min以上では飽和している。発熱による温度上昇も冷却水の循環で効果的に抑制されることが確認された。以上の基礎的な評価実験を通し、開発した平面研削盤がスピードストローク研削を実行する上で十分な運動性能を持つでいることが確認された。以上の成果に立脚し、2年度目は研削実験を開始する予定である。永久磁石を固定(ベッド側)し、テーブル(可動側)にコイルを配置する構造のリニアモータ

駆動平面研削盤を実際に試作し、その基本的運動特性と研削実験を通し、提案した方式の有効性を実証することが出来た。研究開発成果の概要は以下の通りである。1.リニアモータの設計と研削盤への実装本研究で目標とする性能を達成するリニアモータを設計・製作し、平面研削盤に装備した。2.運動精度の評価平面研削盤の運動精度として最も重要なのは、テーブル運動の真直度と位置決め繰り返し精度である。そこで、レーザ干渉計でヨーイング、ピッチングの計測、変位センサによる位置決め繰り返し精度の評価を行った。その結果、初期の目的が達成されていることが確認された。リニアモータ駆動で期待されるもう一つの特長は、高速運転時におけるテーブル反転運動に伴う振動の抑制である。加減速特性を容易に制御出来る利点を生かし、最適な加減速パターンを設定することによって振動を効果的に抑制することが出来た。3.研削試験研削試験の目的は、加工精度の評価と加工能率の評価である。前者に関する重要な評価項目として加工面の平坦度と粗さを取り上げた。加工能率に関しては、高加工物速度・微少切り込み研削方式(スピードストローク研削)の効果を難削材料(エンジニアリングセラミックス)を対象にして検証した。評価項目は研削抵抗と砥石寿命である。評価実験の結果、スピードストローク研削は研削抵抗の減少と研削温度の低減に極めて有効であることが実写され、本研究開発の初期の目的を達成することが出来た。
イヌ梗塞モデルにおけるIII群抗不整脈薬が左室貫壁性再分極に及ぼす検討

【背景と目的】ニフェカラント(NIF)およびアミオダロン(AMD)はともにIII群抗不整脈薬であるが、薬理作用は大きく異なる。本研究ではイヌ梗塞心を用いて、心肺蘇生(CPR)時の心室頻拍・細動(VT/VF)に対する両者の電気生理学的特徴を明らかにする。【方法】イヌ梗塞モデル(n=16)に対して高頻度連続刺激によるVT/VF誘発とCPRを繰り返し、高度循環不全の状態を維持した。高乳酸血症および代謝性アシドーシスに至った時点で再度VT/VFを誘発し、NIFあるいはAMDを静脈内緩徐投与した。薬剤投与前後で計測した項目は以下である:体表面12誘導心電図Y誘導におけるQT時間, 64誘導心表面マッピングによる左室のActivation time (AT)およびactivation-recovery interval (ARI), ARIのばらつき(ARID),プランジ電極を用いた左室貫壁性のばらつき(TDR)。【結果】1) 12誘導心電を用いたNIFおよびAMDのQT延長作用は明らかではなかった。2)左室心表面のAT, ARID計測では、NIFはCPRにより増大したATには変化を与えず、ARIDを縮小した。AMDはCPRにより増大したATをさらに増大させたが、ARIDは縮小した。3)左室貫壁性のばらつきの評価では、CPRにより心外膜層と心内膜層の不応期が延長しTDRが増大した。NIFおよびAMDは心筋中層の不応期を延長させることでTDRを縮小させた。不応期の延長率はNIFでより高値であった。【結語】いずれのIII群不整脈薬にも左室心表面および左室貫壁性のばらつきの改善作用があることを明らかにした。その結果、左室の電気的不均一を改善し、抗不整脈効果を発揮する機序が示唆される。結果)(1)体表面Y誘導心電図によるQT時間計これまでの実験では、NIFおよびAMDともに体表面心電図におけるQTc間隔の有意な延長は認めなかった。(2)64誘導心表面マッピング電極による左室心表面の活動電位回復時間薬剤投与前後での、64誘導心表面マッピング電極による左室心表面の活動電位回復時間の計測では、梗塞作成直後、CPR後、NIF投与後における再分極時間の変化については、CPR中のNIF投与により最小ARIは27-62%延長したが、最大ARIの延長は認められず、その結果ARIDは42-87%縮小した。これより左室心表面の電気的不均一性は改善した。いっぽうAMD投与後は最小ARIは12-48%延長し、最大ARIは8-30%延長し、その結果ARIDは23-42%縮小した。これにより、NIF/AMDともに左室心表面の電気的不均一を改善することが明らかとなった。目的)アミオダロン(AMD)は致死性心室性不整脈の第一選択薬である。我々は心肺蘇生時のAMDの薬理効果を明らかにするため、初年度はイヌ梗塞心を用いた生体実験において体表面QT時間、64誘導心表面マッピング電極による左室心表面の活動電位回復時間(ARI)を明らかにした。今年度はAMDによる左室貫壁性の影響を明らかにするため、健當心におけるプランジ電極を用いた再分極時間の検討を行った。方法)ビーグル成犬(Bw z10kg±1.6)を用いて、チアミラール(15mg/kg,i.v.)+αクロラロース(50mg/kg,i.v.+Div)麻酔下で側方開胸とし、左室心表面を露出させた(n=4)。

プラチナ電極を3mm毎に3個配した単極プランジ電極を4本用意し、中隔基部・中隔心尖部・前側壁基部・前側壁心尖部の心外膜より挿入した。心内膜(end)・中層(mid)・心外膜(epi)のプランジ電位をAMD(3mg/kg,div,2回まで追加投与)投与前後で計測し、4電極の平均を算出した。QRSの開始から最小のdv/dtをactivation time(AT),T波の最大dv/dtをARI,丁波の頂点をTpeak,T波の終点をTendとし解析を行った。結語)AMDによる伝導時間延長作用は軽度で、貫壁性のばらつきを変化させることなく作用した。いっぽう活動電位回復時間の延長は用量依存性であり、少量では逆に貫壁性のばらつきを増加させた。再分極時間延長作用はT波の前半成分に有意な変化であり、後半部分の延長は認めなかった。【背景と目的】ニフェカラント(NIF)およびアミオダロン(AMD)はIII群抗不整脈薬であるが、静注射薬の薬理作用は大きく異なる。本研究ではイヌ梗塞心を用いて、心肺蘇生(CPR)時の心室頻拍・細動(VT/VF)に対する両者の電気生理学的特徴を明らかにする。【方法】ビーグル成犬を用いて、チアミラール+αクロラロース麻酔下に左側方開胸下で、左前下行枝結紮による急性心筋梗塞を作成。高頻度連続刺激によるVT/VF誘発とCPRを繰り返し、高度循環不全の状態を維持した。高乳酸血症(>50),代謝性アシドーシス(pH<7.3)に至った時点で再度VT/VFを誘発し、薬理学的除細動目的にNIF(0.15mg/kg)あるいはAMD(5mg/kg)を静脈内緩徐投与した(各n=4)。計測項目は、薬剤投与前後で体表面心電図四肢誘導におけるQT時間(Fridericia補正式)および、64誘導心表面マッピングによる左室の活動電位回復時間のばらつき(ARID:最大と最小ARIの差分)とした。【結果】QTc intervalは、NIF投与群で290±26msec(投与前より2.7%増), AMD投与群で289±22msec(投与前より2.9%増)と、両群ともに有意なQT延長はなかった。ARIDは梗塞作成後において70±5msecと作成前に比し63.2%延長し、CPR直後は98±13msecと更なる延長を認めた。薬剤投与後、NIF投与群は51±16msecに減少(p<0.05 vs pre NIF),AMD投与群は49±17msecに減少した(p=<0.05 vs pre AMD)。NIF群とAMD群の群間差異は認めなかった。【結果】CPRにおけるIII群抗不整脈薬は左室心表面の電気的不均一を改善し、抗不整脈効果を発揮する機序が示唆された。今年度はAMDによる左室貫壁性の影響を明らかにするため、健常心におけるプランジ電極を用いた再分極時間の検討を行った。実験はおおむね順調に進展しているが、プランジ電極の時系列解析がやや遅れている。未解析データがあり、研究発表が出来ていないため、研究計画がやや遅れていると評価する。24年度が最終年度であるため、記入しない。プランジ電極の時系列解析を速やかにおこない、次年度はさらなる実験として、梗塞モデルに対するAMDによる左室貫壁性の影響を明らかにする。また最終年度には研究発表を行えるよう準備をする。
最適トルク・電流分配による電気自動車用SRモータの高精度・高効率ドライブ

SRモータは,構造が単純で堅牢,安価,悪環境下で運転可能,高効率などの特徴があり,電気自動車への応用が期待されるが,高精度なトルク制御法が確立されていない。そこで,電気自動車用SRモータの高精度・高効率駆動を目的として,最適トルク・電流分配をベースとした新しい制御方法を提案し,シミュレーションと小型モータを用いた実験により基本的なアルゴリズムの考案と検証を行い,最終的に実車へ制御を適用し,良好な結果を得た。スイッチトリラクタンスモータ(SRモーター)は,構造が単純で堅牢,安価,悪環境下で運転可能,高効率などの特徴があり,電気自動車への応用が期待される。しかし,トルクリプル,回転子位置検出が必要などの欠点も有する。特に,電気自動車においては,回生制動や後退を含む四象限可変速運転が必要であり,また,トラクションコントロールなどの高度運動制御への応用の観点から,高精度なトルク制御が重要な課題である。従来のトルク制御法では,モータ全体の発生トルクや磁束ベクトルのみに着目するため,各相のトルクや電流については適切に分配されず,各相トルクが打ち消しあい,大きなロスとなっていた。本研究課題では,電気自動車用SRモータの高精度・高効率駆動を目的として,各相の最適トルク・電流分配をベースとした新しい制御方法の提案と実現を行うことを目的とする。平成19年度は,シミュレーションと小型モータを用いた実験により基本的なアルゴリズムの考案と検証を行い,また小型電気自動車への適用のためのシミュレーションによる基本的な検討を行った。1.計算機シミュレーションによりアルゴリズムの開発と検証を行い,提案制御法の有用性を確認した。2.小型モータを用いた実験を行い,トルク制御精度や効率が従来手法より優れていることを確認した。3.小型電気自動車駆動への適用シミュレーションモデルを構築し,基本的な制御アルゴリズム適用を行った。その結果,予測される良好な結果を得たほか,本制御アルゴリズムの万能性が明らかになった。以上により,本年度の研究目標を十分に達成したほか,来年度の研究に対する準備も進めることができと考える。最終年度である平成20年度においては,実車へ制御の適用と制御パラメータの最適化を行い,また,センサレス化の基礎検討を行った。1.電気自動車駆動への適用シミュレーションを行い,最適な制御パラメータを選定した。2.制御回路を設計・製作し,実際に実走行試験を行い,トルクリップルが実際に減少していることを確認した。さらに,回生制動を含む四象限駆への拡張を行い,すべての象限においてトルクの高精度な制御が実現できていることを確認した。3.センサレス化の基礎検討を行い,電気自動車の始動やトルクの制御が可能であることを確認した。以上により,本年度の研究目標を十分に達成したほか,全体の研究目標も十分に達成することができた。
線虫の遺伝学と哺乳動物実験系を用いた新規エネルギー代謝鍵分子の同定と機能解析

インスリン/IGFシグナリング(IIS)経路とAMP活性化キナーゼ(AMPK)経路は、糖尿病や腫瘍形成に深く関与し、mTOR経路においてクロストークすることが示唆されてきた。これらの情報伝達経路は動物間で高度に保存されているが、mTORの活性制御やその下流因子は不明な点が多い。これまでに、我々は線虫のIIS経路とAMPK経路は飢餓時の生存維持や細胞増殖の抑制に重要である知見を得てきた。そこで今回の研究では線虫の順遺伝学を駆使して、IIS経路とAMPK経路の下流で働く新規遺伝子の探索を試みた。まず、IIS経路が恒常的に活性化しているPTEN(daf-18遺伝子)とAMPKのαアイソフォームをコードする二つの遺伝子(aak-1,2)がmTORやそれと相互作用するraptorやrhebと遺伝学的相互作用することを認め、哺乳動物と同様に線虫でもIIS経路とAMPK経路の下流でmTOR経路が機能することが示唆された。しかしながら、mTORの重要な下流因子であると考えられているS6キナーゼのnull変異はPTENやAMPK変異体の表現型を抑制しなかった。S6キナーゼ以外にmTORの下流因子として4E-BPが他の動物では存在するが、線虫には保存されておらず、mTORは未知の基質を介して細胞増殖を制御している可能性が示唆された。そこで、mTORの近傍や下流で機能する未知の因子を同定するべく、飢餓時の生存率を指標として幾種類かの順遺伝学スクリーニングを行った。その中で、AMPK変異体の飢餓時の生存率を抑制する変異体としてtd81が単離された。現在td81のポジショナルクローニングを進めており、その原因遺伝子は既知のmTOR経路の遺伝子でない知見が得られている。今後原因遺伝子を同定し、哺乳培養細胞実験系で機能解析を進めていく予定である。本研究は、線虫を用いて、インスリン経路やLKB1-AMPK経路に関わる遺伝子の変異体の表現型を指標として順遺伝学的スクリーニングを行い、それらの経路の新規遺伝子を単離し、哺乳動物実験系を用いて機能解析をするという研究方針で展開している。以下に交付申請書の「研究実施計画」と対応させて、本研究の進捗状況や、得られた新たな知見を記す。1アミノ酸や炭素源を検知し、発生を始動するシグナル伝達に関与する遺伝子の順遺伝学を用いた同定。インスリン・IGF経路を負に抑制するPTEN(線虫ではDAF-18)やFoxo(線虫ではDAF-18)、またLKB1-AMPK経路の変異体の線虫の表現型を指標とし、変異誘発剤であるEMSを使ってスクリーニングを行い、現在のところ一変異体を単離した。また、EMSなどの化学的な変異誘発処理の代わりに、トランスポゾンを用いたスクリーニングも現在準備中である。2哺乳培養細胞系やin vitro実験系で示唆されている、インスリン経路やLKB1-AMPK経路の上流や下流因子がin vivoにおいて線虫の栄養認識に関与する可能性の検討。哺乳動物実験系によりAMPKの上流因子として提唱されているATMキナーゼの線虫ホモログの変異体atl-1とatm-1がAMPKホモログaak-1とaak-2の二重変異体と同様の表現型を示すか検討したが、atl-1とatm-1の両者において表現型は認められなかった。また、上記の実施計画1と2に加えて、線虫のAMPKとPTENが飢餓時の生存維持に必須であることを見いだした。またその表現型を利用して抑圧変異体スクリーニングを行ったところ、複数の変異体が同定された。現在これらの変異体の責任遺伝子のマッピングを行っており、その遺伝子の同定と哺乳動物実験系での機能解析を今年度に目指している。

現在td81のポジショナルクローニングを進めており、その原因遺伝子は既知のmTOR経路の遺伝子でない知見が得られている。今後原因遺伝子を同定し、哺乳培養細胞実験系で機能解析を進めていく予定である。
同種肺移植拒絶反応における臓器特異的抗原の基礎的研究

【方法】体重710kgの日本猿を実験動物として用い、同種同所性左肺移植を3例施行した。この時、ドナー(D)およびレシピエント(R)の抹消血リンパ球(PBL)を採取した。移植3日目に移植肺の一部を切除するとともに、レシピエントのPBLを採取した。いずれの場合も、免疫抑制剤は使用しなかった。D-PBLをstimulatorとして、移植前はR-PBLをeffetorとして、また移植3日目の標本で、R-PBLおよびレシピエントの肺内細胞(R-PUL)をeffetorとして、one-way混合培養をおこなった。またコントロールとして、別の日本猿のリンパ球(3-PBL)もstimulatorとした。培養後3日目にMTTアッセイを施行し、レシピエントのリンパ球の活性度を測定した。【結果および考察】移植前はR-PBL単独培養を1とした時に、R-PBL*D-PBL : 2.6、R-PBL*3-PBL : 1.2であったが、遺書3日後では、R-PBL*D-PBL : 3.3、R-PUL*D-PBL : 21.1、R-PBL*3-PBL : 1.2であった。以上より、移植3日後には、ドナー特異的なリンパ球活性の上昇がみられ、特に移植肺に浸潤したリンパ球の活性化が著しかった。レシピエントの免疫担当細胞が移植肺のどの細胞を認識して、強い拒絶を引き起こしているのかは、今回の実験では、明らかにできなかった。
メヒルギ胎生芽の根原基および根の形態形成と植物ホルモン作用機構の解析

マングローブ植物であるメヒルギの発根機構について胎生芽の根源基形成過程と発根過程に関与する植物内生ホルモンを明らかにすることを目的とした。1メヒルギ胎生芽における根原基形成は、胎生芽の長さが33mm以上に成長すると根原基が形成された。2メヒルギの成長段階が異なる胎生芽の発根は、胎生芽の長さが30mm以上の個体から認められた。また、シュートの伸長成長は胎生芽の長さ60mm以上では成長したが、40mm以下では枯死した。3メヒルギ胎生芽にジベレリン処理をした結果、発根が促進され、メヒルギの発根にジベレリンが関与する可能性が示唆された。4成熟した胎生芽に含まれる内生ジベレリン(GA_s)は、GA_4の活性が見られた。5メヒルギ胎生芽の発根過程に関与する内生ジベレリン(GA_s)は、GA_4の活性が見られた。6メヒルギ胎生芽にGA生合成阻害剤処理した結果、発根や根の伸長成長が抑制され、内生GA_sが関与している可能性が示唆された。7メヒルギ胎生芽にGA生合成阻害剤処理した後に、GA_3処理した結果、発根や根伸長成長の抑制が回復し促進された。以上の結果からメヒルギの発根にはジベレリンが関与していることが解明された。1メヒルギの胎生芽(胎生種子)における根原基形成は、果実と胎生芽の長さが0-20mmまでは根原基が認められず、長さが33mmの胎生芽で初めて観察され、この時期より根原基が分化してくるものと考えられる。胎生芽の長さ41mm以上に成長した全ての個体で根原基が見られた。2メヒルギ胎生芽の成長段階が異なる胎生芽の発根は、成熟した胎生芽の平均長は185mmで植栽後11日で100%の発根率を示した。胎生芽の長さが101-120mmの個体では植栽後19日に、長さ81mm100mmの個体は33日までに発根し、発根率はl00%に達した。しかし、胎生芽の長さが短くなるに従い発根率は低下し、4180mmの個体では41日目に80%以上の発根率を示し、2140mmnの個体では約20%と極端に低下した。また、29mm以下の個体および果実では発根が全く認められなかった。発根した胎生芽のシュートの伸長成長は胎生芽の長さが40mm以下の個体では正常におこなわれず枯死したが、担根体の長さが61mm以上の個体では成長量は少ないが正常な伸長成長を示した。3成熟した胎生芽に含まれる内生植物ホルモンはジベレリンの検索を行った。メヒルギの胎生芽を80%アセトンで抽出し、これをBondo Elut DEAカラムで精製後、ODS-HPLCより精製分画を行い、得られた分画について、短銀坊主イネ幼苗テストをおこない、内生GA_sの検索を行った。その結果、胎生芽の下部ではODS-HPLCによる保持時間35-36minには明瞭な活性が見られ、41-43minには微弱な活性が認められた。この41-43minの分画はGA_4の分画と一致した。1メヒルギ胎生芽の発根過程に関与する内生ジベレリン(GA_S)の検索を行った。メヒルギ胎生芽の発根過程を下部根発根直前と発根直後・上部根発根直前と発根直後・太根発根直後の5過程に区分し、各過程の胎生芽の地下部を4部位に区分して試料とした。区分した部位を80%アセトで抽出し、これをBondo Elut DEAカラムで精製後、ODS-HPLCより精製分画を行い、得られた分画について、短銀坊主イネ幼苗テストをおこない、内生GA_Sの検索を行った。

その結果、胎生芽の発根全過程でGA_Sの活性が見られ、ODS-HPLCによる保持時間32-35minには明瞭な活性が見られ、39-41minに活性が認められた。この39-40minの分画はGA_4の分画と一致した。下部根発根直前太根発根直後の全過程におけるGA_Sが活性化する胎生芽の部位は発根過程の時期により活性部位が変動して推移し、GA_Sは胎生芽全体に存在しているのではなく、発根過程に合わせて集約・拡散していると推察された。2 GA_Sがメヒルギの発根に関与しているか否かの情報を得ることを目的として、胎生芽にGA生合成阻害剤処理を行いメヒルギの発根および根の成長に及ぼす効果について検討した。GA生合成阻害剤処理はウニコナゾール-p、AMO1618、プロヘキサジオンカルシュウムを50%アセトン(V/V)に溶解し、濃度を5段階に区分し処理に用いた。ウニコナゾール処理した胎生芽の発根率は100ppmと1000ppmでは発根が抑制される傾向を示した。また、シュートの伸長成長量は高濃度のものほど伸長成長量が低下した。プロヘキサジオン処理もウニコナゾール処理と同じような傾向を示したが、AMO1618では抑制効果は見られなかった。胎生芽の根の伸長成長量(根長)は、ウニコナゾールが最も抑制効果が表れ、根の伸長成長量は濃度が高くなるほど伸長成長量が少なく、抑制効果が認められた。以上のことからメヒルギの発根および根の成長には内生GAが関与している可能性が示唆された。ジベレリン(GA_s)がメヒルギの発根機構に関与しているか否かの情報を得ることを目的として、メヒルギの胎生芽にGA生合成阻害剤を処理した後にGA_3の処理をおこない、GA_3がメヒルギの発根及び根の成長に関与しているかを検討した。GA生合成阻害剤処理は、ウニコナゾール-p、AMO1618、プロヘキサジオンカルシウムを用いた。GA生合成阻害剤+GA_3処理は、各GA生合成阻害剤100ppm溶液で処理した後、GA_3100ppm溶液で処理した。ウニコナゾール-p処理の発根率は、処理濃度の高いものほど発根が遅れ、低下し抑制された。また、GA生合成阻剤の抑制はウニコナゾール-pが最も顕著であった。GA_3処理区では、阻害剤処理区よりも発根が早く、発根率も高く、促進された。GA生合成阻害剤処理の発根本数は、処理濃度に関係なくほぼ同数の値を示し、GA処理区の発根本数も同様の値で、促進効果は見られなかった。ウニコナゾール-p処理区の根の伸長成長量は、処理濃度の高いものほど低下し抑制され、GA_3処理区では、阻害剤処理区や対照区よりも大きく、抑制が回復され促進された。胎生芽のシュート伸長成長量はウニコナゾール-p処理区では、処理濃度の高いものほど低下し抑制された。これらの値は、他のGA生合成阻害剤よりも低い値であった。GA_3処理区のシュート伸長成長量は、阻害剤処理区よりも伸長したが、対照区よりも低い値であった。これらの結果から発根本数はGA生合成阻害剤やGA_3の影響を受けなかったが、メヒルギの発根や根の伸長成長にはGA_3が関与している事が明らかになった。