hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ベンチャー企業支援者のインセンティブ要因に関する研究

郵送法により調査を実施し、有効送付数287に対して95の回答を得た(回収率33.1%)。調査の結果分かったこととして、雇用形態については、嘱託や委嘱、業務委託等、正社員以外の雇用が約半数を占めている。業務権限について、日常的な運営は「任されている」、「ほぼ任されている」で約80%を占めており、支援業務に対しても、約80%の機関で何らかの評価が行われている。しかしながら、業務評価の結果と報酬の関連性については、「報酬は一定」、「評価結果は報酬には考慮されない」が80%超と大多数を占めており、インセンティブ要因が考慮されていない状況が明らかになった。また、一方で、支援者の「仕事のやりがいやモチベーション」という視点からみると、「支援企業の成功」や「支援企業からの感謝の言葉」、「担当業務の内容」等が上位にきており、支援者にとって、金銭的要因は必ずしもインセンティブになっていない状況も明らかになった。本研究では、ベンチャー企業支援者のインセンティブ要因を明らかにするため、「研究実績の概要」に記載の通り、平成23年度にはインキュベーション施設に配置されている企業支援専門家を対象とした質問票調査を実施し、平成24年度は調査結果の分析とヒアリング調査を進めてきたところである。本研究代表者は、研究開始段階での仮説として、支援者のインセンティブ要因に関して「金銭的要因」に注目していた。調査結果及びヒアリング調査等から示唆される「必ずしも左右されていない」という現状は、金銭的要因がプラスとマイナスに働く部分があることが新たな仮説として浮かび上がってきた。この点を解明するため、補助事業期間を平成25年度まで延長をいただいたところである。研究期間の変更はあるが、支援者のインセンティブ要因の解明に向けて、研究自体は進められており、以上から「おおむね順調に進展している」と判断するところである。平成23年度は、研究実績の概要に記載の通り、ベンチャー企業支援者が所属するビジネスインキュベーション施設に対して質問票調査を実施し、今後の研究活動をさらに精緻化する上で必要な現状把握という点で大きな成果を得た。申請時点で研究者が念頭においていた問題意識を再度確認し、また、具体的な数値データを得られたことから、平成24年度に予定していた研究計画の内容もよりクリアになった。以上から「おおむね順調に進展している」と判断するものである。研究の最終年度となる平成25年度は、支援者のインセンティブに関わる金銭的な要因について、より深堀りしたヒアリング調査を行う予定である。平成23年度の研究成果を踏まえ、ベンチャー企業支援に関わる支援者のインセンティブ要因の分析、成果との関連性の解明に向けて研究を行う。平成23年度に実施した質問票調査は、現状把握という点で、施設の運営機関に対して調査を実施したが、より支援者に迫った研究を行うためには、機関ではなく支援者個人を対象とした質問票調査が不可欠である。
ニューラルネットの収束能力と汎化能力に関する研究

本研究では階層型ニューラルネットの収束特性を解析するために,訓練データの正規化が学習収束にどのように影響するかを検討し,平均がゼロとなるように正規化した場合,著者らが先に提案した初期値設定法の中間層に対する初期値設定指針を自然に満たすため,初期値設定手順が簡略化されることを明らかにした.さらに,この正規化手順は学習終了後のネットの中間層荷重に簡単に埋め込むことができるため,認識対象データの正規化は不要となることを示した.アヤメ分類問題やMONK's分類問題,ソナー識別問題に対するシミュレーションの結果,提案法による場合,平均ゼロの一様乱数で荷重を初期化する通常の設定法に比べて,良好な収束結果が得られることを確認した.さらに,上述の初期値設定や正規化がネットの汎化能力に及ぼす影響についても考察し,両者を併用したときに最も良好な結果が得られることも確認した.正規化や特徴抽出などの前処理過程を埋め込んだ多層ネットで時系列信号を識別させる方法について,複数のサブモジュールから構成されるモジュール構造ネットを用い,サブモジュール毎に最適な前処理を個別に埋め込む方法を提案した.そして,睡眠脳波信号に対する認識実験の結果,通常のように複数の信号を1つのネットで学習させたり,全ての信号に同一の前処理をした場合に比べて良好な認識結果が得られた.また,実際の睡眠脳波信号系列をオンライン提示することで,対象信号のセグメンテーションが可能となることを示した.以上による成果を簡単に利用できるようにC言語用のライブラリ形式で公開し,初心者でも容易に操作できるようGtk+を使ったGUI環境も作成した.本研究では階層型ニューラルネットの収束特性を解析するために,訓練データの正規化が学習収束にどのように影響するかを検討し,平均がゼロとなるように正規化した場合,著者らが先に提案した初期値設定法の中間層に対する初期値設定指針を自然に満たすため,初期値設定手順が簡略化されることを明らかにした.さらに,この正規化手順は学習終了後のネットの中間層荷重に簡単に埋め込むことができるため,認識対象データの正規化は不要となることを示した.アヤメ分類問題やMONK's分類問題,ソナー識別問題に対するシミュレーションの結果,提案法による場合,平均ゼロの一様乱数で荷重を初期化する通常の設定法に比べて,良好な収束結果が得られることを確認した.さらに,上述の初期値設定や正規化がネットの汎化能力に及ぼす影響についても考察し,両者を併用したときに最も良好な結果が得られることも確認した.正規化や特徴抽出などの前処理過程を埋め込んだ多層ネットで時系列信号を識別させる方法について,複数のサブモジュールから構成されるモジュール構造ネットを用い,サブモジュール毎に最適な前処理を個別に埋め込む方法を提案した.そして,睡眠脳波信号に対する認識実験の結果,通常のように複数の信号を1つのネットで学習させたり,全ての信号に同一の前処理をした場合に比べて良好な認識結果が得られた.また,実際の睡眠脳波信号系列をオンライン提示することで,対象信号のセグメンテーションが可能となることを示した.本研究では階層型ニューラルネットの収束特性を解析するために,訓練データの正規化が学習収束にどのように影響するかを検討し,平均がゼロとなるように正規化した場合,著者らが先に提案した初期値設定法の中間層に対する初期値設定指針を自然に満たすため,初期値設定手順が簡略化されることを明らかにした.さらに,この正規化手順は学習終了後のネットの中間層荷重に簡単に埋め込むことができるため,認識対象データの正規化は不要となることを示した.アヤメ分類問題やMONK's分類問題,ソナー識別問題に対するシミュレーションの結果,提案法による場合,平均ゼロの一様乱数で荷重を初期化する通常の設定法に比べて,良好な収束結果が得られることを確認した.さらに,上述の初期値設定や正規化がネットの汎化能力に及ぼす影響についても考察し,両者を併用したときに最も良好な結果が得られることも確認した.正規化や特徴抽出などの前処理過程を埋め込んだ多層ネットで時系列信号を識別させる方法について,複数のサブモジュールから構成されるモジュール構造ネットを用い,サブモジュール毎に最適な前処理を個別に埋め込む方法を提案した.そして,睡眠脳波信号に対する認識実験の結果,通常のように複数の信号を1つのネットで学習させたり,全ての信号に同一の前処理をした場合に比べて良好な認識結果が得られた.また,実際の睡眠脳波信号系列をオンライン提示することで,対象信号のセグメンテーションが可能となることを示した.以上による成果を簡単に利用できるようにC言語用のライブラリ形式で公開し,初心者でも容易に操作できるようGtk+を使ったGUI環境も作成した.
情報ポテンシャルによる分散ネットワーク最適化

指向性制御機能を持つ端末で構成された無線分散ネットワークにおいて,3つの検討を行った.(1)ネットワーク符号化においてチャネル容量の和を最大にするビームを近似的に求める手法を開発し,最もよい特性が得られることを明らかにした.(2)経路探索手法について検討し,指向性制御を考慮することで,同時に通信可能な端末数を増加させ,スループットを改善できることを明らかにした.(3)2ステップリレーにおいて送信ノードの最適ビームを近似的に導出する手法を開発し,最適解と同等の特性が得られることを明らかにした.指向性制御機能を持つ端末で構成された無線分散ネットワークにおいて,3つの検討を行った.(1)ネットワーク符号化においてチャネル容量の和を最大にするビームを近似的に求める手法を開発し,最もよい特性が得られることを明らかにした.(2)経路探索手法について検討し,指向性制御を考慮することで,同時に通信可能な端末数を増加させ,スループットを改善できることを明らかにした.(3)2ステップリレーにおいて送信ノードの最適ビームを近似的に導出する手法を開発し,最適解と同等の特性が得られることを明らかにした.分散ネットワークにおいて,最適ルーティングを行う場合,まずネットワーク全体のトラフィックを軽減することが重要となる.このため,ネットワークコーディングの適用をまず検討した.本研究課題では,各端末が複数のアンテナを有している.このとき,ユニキャストでは指向性制御が非常に簡単である.しかし,ネットワークコーディングでは,二つの端末にマルチキャストを行う必要がある.この場合,両端末への指向性利得をどのように制御するかが問題となる.ここでは,各端末のチャネル容量の和が最大となる基準に着目し,最適指向性の導出を図った.ただし,与えられた条件では解析的に求めることが困難であったため,SNRが十分大きいという近似を適用した.これにより,最適指向性が解析的に導出でき,非常に簡易な式で表せることがわかった.この最適指向性を用いた場合と,指向性制御を行わない無指向性の場合,並びに,各端末のSNRの和を最大とする指向性の場合について比較を行い,チャネル容量の和の最大化が最も高い性能を示すことを明らかにした.なお,両端末にビームを向ける自由度を考慮すると,本手法でも素子数分の送信ダイバーシチ利得が得られることは興味深い.これと並行して,指向性アンテナを有する端末によるメッシュネットワークを考慮し,互いに干渉を及ぼさないルーティングの可能性を評価するシミュレーションプログラムを整備した.また,FDTD解析ソフトウェアを導入し,情報ポテンシャル表現の基礎的検討を行った.分散ネットワークにおいて,最適ルーティングを行う場合,まずネットワーク全体のトラフィックを軽減することが重要となる.このため,ネットワークコーディングの適用を昨年に引き続き検討し,特にリレー,端末とも複数アンテナを有するMIMO無線中継システムに発展させた場合での,最適送信ビーム生成手法の導出を図った.ただし,与えられた条件では解析的に求めることが困難であったため,SNRが十分大きいことに加え,各MIMOチャネルの第2固有値が第1固有値よりも十分小さいという近似を適用した.これにより,最適指向性が解析的に導出でき,MISOの場合と同様に非常に簡易な式で表せることがわかった.この最適指向性を用いた場合と,他の手法との比較を行った結果,チャネル容量の和の最大化が最も高い性能を示すことを明らかにした.これと並行して,指向性アンテナを有する端末によるメッシュネットワークを考慮し,互いに干渉を及ぼさないルーティングの検討を開始した.具体的には,まず,指向性アンテナの使用を前提として終点までの通信時間を種々のルートで確認する.このとき,他の通信中ノードを経由するルートの場合は待ち時間も考慮に入れ,この中で到達時間最小となるルートを決定する.3x3のノードで構成されたメッシュネットワークにおいて,このルーティング手法を採用した場合,システムスループットが実際に増加することを確認した.本件は5月に発表予定である.情報ポテンシャル表現については引き続き基礎検討を継続中である.分散ネットワークにおいて,指向性アンテナを有する端末によるメッシュネットワークを考慮し,互いに干渉を及ぼさないルーティングの検討を行った.具体的には,まず,指向性アンテナの使用を前提として終点までの通信時間を種々のルートで確認する.このとき,他の通信中ノードを経由するルートの場合は待ち時間も考慮に入れ,この中で到達時間最小となるルートを決定する手法と,待ち時間を考慮せずに一意に決まる到達時間最小ルートをそのまま用いる手法を検討した.ただし,直ちに送信した場合に他のリンクに干渉を及ぼし,システムスループットが低下すると考えられる場合には,送信を中止しキューに入れることとする.キューから送信する順番は,到着順と,キューの中でシステムスループットを最大とするリンクから送信する場合とを考慮した.このような条件下で,飽和スループットを測定した.すべてのパケットサイズが同一の場合には,待ち時間を考慮して迂回ルートを選択する手法が最もよい特性を示し,アンテナ数を増加させるとともにほぼ比例的にスループットが改善できることがわかった.しかし,ftpやhttpなど様々なトラヒックが混在する場合,送信キュー内のスループットのみを考慮して迂回ルートを選択しても,より長期的には最適とはならず,結果的に迂回ルートを選択すべきではないことが明らかとなった.このように最適ルーティングが簡略化可能なことがわかったのは大きな成果である.今後は,リンク多重を積極的に実現できるスケジューリング手法の開発が必要であると言える.
ヒトβグロビン遺伝子の正確な転写開始に必要な蛋白因子とその遺伝子クローニング

真核生物において最小のプロモーターをもつ遺伝子の正確な転写開始には、RNA polymeraseIIに加えていくつかの蛋白因子が必須である。我々はカラムクロマトグラフィーによりこれら蛋白因子をHeLa細胞核抽出液から精製することを試みた。6つの蛋白因子(FA、FB、FC、FD、FEおよびFF)がヒトβグロビンプロモーターによる正確な転写開始に必要であった。つまりFA、FB、FC、FD、FE及びFFはゲル濾過において52K、540K、285K、700K、185K及び130Kの分子量領域にそれぞれ活性をもち、お互いに特異的な蛋白であることを示唆した。またSarkosyl Block実験において6つの蛋白因子は0.2%Sarkosylを加える前に反応液中に存在しないと転写活性を示さなかった。従ってInitiation complex形成に関与していることが明らかとなった。我々はこれら蛋白因子のうちFA、FC及びFEを高度に精製することに成功した。FAはDIP^2よりSpTOYO、ゲル濾過及びCM-HPLCにより精製された。最終標品はSDS-PAGE後の銀染色により分子量27Kと推定され、80%以上の精製度であった。精製トリプチックペプタイドのアミノ酸配列はAIKVEQATKであった。これより演繹されるオリゴDNAでつり上げられたクローンの1つについてコーディング部分のDNA配列を解析した結果、チロシン及びプロリンの含有量が高く塩基性の強い蛋白が推定された。FCはD2P2よりDEAE-TOYO、ゲル濾過、DEAE-HPLC、及びTATAカラムクロマトグラフィーにより精製された。最終標品では転写活性はDNA結合活性とは分離し、SDS-PAGE上80Kと55Kのバンドが転写活性と、また120KのバンドがDNA結合活性と関連していた。FEはD2P2よりDEAE-TOYO、ゲル濾過、DEAE-HPLC、さらにグアニジン塩酸を含むバッファー中でのゲル濾過により精製された。Renaturation後、転写活性を測定すると、SDS-PAGE上33Kのバンドに活性が認められた。FEの最終標品は銀染色において80%以上の精製度を示した。ヒトβ-グロビン遺伝子の正確な転写開始に関与する蛋白因子を分離・精製するため、我々はHeLa細胞抽出液のカラム・クロマトグラフィーを行なった。フォスフォセルローズカラムで0.25MKClの1.0MNaClの間で溶出する分画(Fr.2)は正確な転写に対する活性をもっていた。上と同じカラムで0.1MKClで通過し、DEAE-セルローズカラムで0.1MKClと0.5MNaClの間で溶出する分画(Fr.1)をFr.2に加えると、活性は非常に上昇した。DEAE-HPLCカラム上、Fr.2は0.1MNaClを通過する分画、0.21M及び0.26MNaClで溶出する分画、合計3つの分画に分かれた。さらにに各分画をそれぞれHPLCゲル濾過にかけ、第1及び第3の分画はそれぞれ2つの分画に分かれた。

これら5つの分画(A,B,C,D及びE分画)はそれぞれ52,000、540,000、285,000、700,000及び185,000の分子量領域に活性をもち、お互いに特異的な蛋白であることを示唆している。もし忠実な転写がこれら5つの分画と再合成される時、DEAE-HPLCカラムでさらに精製されたFr.1は転写活性に対して必須となった。以上の結果によりRNAポリメレース【II】に加えて6つの分画がヒトβ-グロビン遺伝子の正確な転写に必要なことが示唆される。これらの分画はいずれもSDS電気泳動上多数のバンドからなっている。量的にも少ないため完全精製は困難であろう。転写開始に必要な蛋白因子の機能を明らかにするため、またそのクローニングに必要な情報を得るため、各因子に対するモノクロナール抗体の作製を試みる。抗原が均一でないのでスクリーニングを多数しなければならないことが予想される。アッセイ法は簡単で感度が良いものでなければならぬので、現在Gのない合成DNAを持つ鋳型を作製中である。ヒトβーグロビン遺伝子の正確な転写開始に関与する6つの蛋白因子のうちFr.AおよびFr.Cについて更に精製を試みた. Fr.AについてHeLa細胞核抽出液よりDEAーセファローズ,フォスホセルローズ,SPーTOYO,ゲル瀘過及びCMーHPLCカラムにより,銀染色上90%以上の純度の標品約20μgを得た.分子量はSOSーPAGEより2.7万と推定され,ゲル瀘過法で得られた5.2万の分子量と比較する時,ダイマーで存在することが示唆された.一方Fr.Cについて核抽出液よりDEAEーセファローズ,フォスホセルローズ,DEAEーTOYO,ゲル瀘過,DEAEーHPLCおよびゲル瀘過により銀染色上80%以上の純度の標品約20μgを得た.SDSーPAGE上約12万と4万の2つのバンドからなっていた.βーグロビンのTATA領域のDNA配列をもつオリゴDNAを合成し,プローブとしてゲルシフト法によりアッセイすると,Fr.Cはそれに結合することが明らかとなった.ウエスターンブロッティング法により,2つのバンドのうち12万のそれがDNAとの結合に関与していることが判明した.現在Fr.CのDNAへの結合がTATAボックスに特異的か否かフットプリンティング法などの方法で検討している.またこの合成DNAのポリマーを作った後,BrCN活性化セファローズに結合させアフィニティーメディアを作製し,Fr.Cの精製を試みた.その結果Fr.Cを精製することができたたが,その標品はDNA結合能をもっていたが転写活性が認められなかった.現在この理由は不明である.転写開始に必要な蛋白因子,Fr.AおよびFr.Cについて精製法が確立したので,それらのクローニングに必要な情報を得るために精製標品の蓄積およびアミノ酸配列の沢定に着手した.本年度までにヒトβグロビン遺伝子の正確な転写開始に6つの蛋白因子(FA、FB、FC、FD、FE及びFF)が必要なことが明らかとなった。FAはSDS電気泳動後の銀染色において80%以上の精製度を示す標品を得られたので、アミノ酸配列を精製トリプチック・ペプタイドについて決定した。それより演繹されるオリゴDNAを合成し、HeLa細胞cDNAライブラリーからハイブリダイゼーションにより陽性のクローンを得た。コーディング部分についてDNA配列を解析した結果、イオンを交換カラムクロマトグラフィーから予想される如く塩基性の強い蛋白が推定された。
内生的交渉決裂点の下での繰り返し交渉

結果を論文にまとめ,査読誌に投稿した.2017年度に引き続き,「応答者にとって諾否それぞれの利得が無差別になる配分が提案され,それが受諾される定常部分ゲーム完全均衡」以外の定常部分ゲーム完全均衡が存在しないことを示そうと努めた.しかし,示すことができず,断念した.最終年度であることから,これまで得られた結果を論文としてまとめた.論文は,名城大学経済学部ディスカッション・ペーパーとして公表するとともに,査読誌に投稿した.論文の内容は次のようなものである.交渉決裂点が内生的に決まる繰り返し交渉モデルを構築した.2人のプレイヤーが毎期毎期余剰の配分について交渉する.各期において,まず,一方のプレイヤー(提案者)が余剰の配分を提案し,続いて,他方のプレイヤー(応答者)が提案への諾否を表明する.提案が受諾されれば,提案通りの配分が実現して次の期に移り(提案者は変わらない),拒否されれば,ある確率で交渉決裂点の配分が実現して次の期に移り(提案者が変わる),残りの確率で2人の関係は解消される.交渉決裂点の配分は,前の期に実現した配分である.各プレイヤーの利得は,各期で実現する配分での自身の取り分の割引現在価値の和である.「応答者にとって諾否それぞれの利得が無差別になる配分が提案され,それが受諾される定常部分ゲーム完全均衡」が唯一存在することを示した.さらに,この均衡利得と交互提案交渉ゲーム(Rubinsteinモデル)の均衡利得との関係を明らかにした.交渉決裂点が内生的に決まる繰り返し交渉モデルを構築した.モデルの概要は次のようである.2人のプレイヤーが毎期毎期余剰の配分について交渉する.各期において,まず,一方のプレイヤー(提案者)が余剰の配分を提案し,続いて,他方のプレイヤー(応答者)が提案への諾否を表明する.提案が受諾されれば,提案通りの配分が実現して次の期に移り(提案者は変わらない),拒否されれば,ある確率で交渉決裂点の配分が実現して次の期に移り(提案者が変わる),残りの確率で2人の関係は解消される.交渉決裂点の配分は,前の期に実現した配分である.したがって,交渉決裂点は,内生的に決まる.各プレイヤーの利得は,各期で実現する配分での自身の取り分の割引現在価値の和である.また,応答者にとって諾否の利得が無差別になるような配分が提案され,その提案が受諾される定常的な均衡を導出し,均衡経路上で実現する配分の列を求めた.構築したモデルおよび導出した均衡について,学外の交渉理論の専門家と学内のゲーム理論の専門家に説明し,コメントを得た.均衡の導出や関連文献について,有益なコメントを得た.既存の繰り返し交渉モデル(余剰の配分が実現したあと,次の期に移り新たな余剰についての交渉がなされるモデル)では,交渉が決裂すると何も分配されず,したがって,交渉決裂点は外生である.一方で,本研究では,交渉決裂点が内生的であり,ここに本研究の新規性がある.集中して研究を進める時間をとることができた.2015年度に構築した内生的交渉決裂点のもとで交渉を行う展開形ゲームについて,同じく2015年に導出した定常部分ゲーム完全均衡(応答者にとって諾否の利得が無差別になる提案が提案され,それが受諾される定常部分ゲーム完全均衡)以外の定常部分ゲーム完全均衡が存在するかを検討した.そうした定常部分ゲーム完全均衡が存在しないことを予想した.このことを示そうと努めたが,示すことができなかった.今期の合意が,次期の交渉決裂点になるため,将来の利得に影響するが,今期の利得が将来の利得に正の影響を与えることを示すことができたら,所望の結果が示せるであろうというところまで,見通せてきた.しかし,今期の利得が将来の利得に正の影響を与えることが示せていない(直観的には当然のようなことであるが).2015年度に構築した展開形ゲームおよび導出した定常部分ゲーム完全均衡について,ゲーム理論を用いた研究をする応用分野の研究者に説明し,応用できる例がないか質問した.国際政治において,本研究が着目する内生的交渉決裂点が重要になるという指摘を受けた.また,本研究に関連した論文2編を査読誌に公刊した.1つは,割引シャプレイ値と呼ばれる協力ゲームの解を非協力ゲームの定常部分ゲーム完全均衡の利得として基礎づける研究であり,もう1つは,外部性が存在するもとでのナッシュ交渉解を非協力ゲームの定常部分ゲーム完全均衡の利得として基礎付ける研究である.予想していた結果を示すことが,難しかったためである.2016年度に続き,2015年度に構築した内生的交渉決裂点のもとで交渉を行う展開形ゲームについて,同じく2015年に導出した定常部分ゲーム完全均衡(応答者にとって諾否それぞれの利得が無差別になる提案が提案され,それが受諾される定常部分ゲーム完全均衡)以外の定常部分ゲーム完全均衡が存在しないことを示そうと努めた.しかし,それを示すのは困難であることが分かった.そこで,モデルを修正し,修正したモデルで,「応答者にとって諾否それぞれの利得が無差別になる提案が提案され,それが受諾される定常部分ゲーム完全均衡」のみが定常部分ゲーム完全均衡であることを示そうと考えた.当初のモデルでは,提案が受諾されたら今期の提案者が次期でも提案者になり,提案が拒否されたら拒否したプレイヤーが次期の提案者になるというものであった.

このモデルの1つの特徴である,提案の諾否によって次期の提案者が決まることが,均衡で提案が受諾されることを示すことを困難にしていると思われた.そこで,提案の諾否によらず提案者が決まるモデルに修正することを検討した.具体的には,次の2つの修正モデルを検討した.提案の諾否に関わらず,無作為に提案者が選ばれるというモデルと提案の諾否に関わらず提案者が交代するモデルである.何れのモデルでも,いまだ,所望の結果を示せていない.また,本研究に関連した論文1編を査読誌に公刊した.提携形成に外部性があるばあいの提携交渉で,効率的な均衡が存在するための必要十分条件を示した研究である.応答者にとって諾否それぞれの利得が無差別になる提案が提案され,それが受諾される定常部分ゲーム完全均衡以外の定常部分ゲーム完全均衡が存在しないことが予想以上に困難であった.結果を論文にまとめ,査読誌に投稿した.2017年度に引き続き,「応答者にとって諾否それぞれの利得が無差別になる配分が提案され,それが受諾される定常部分ゲーム完全均衡」以外の定常部分ゲーム完全均衡が存在しないことを示そうと努めた.しかし,示すことができず,断念した.最終年度であることから,これまで得られた結果を論文としてまとめた.論文は,名城大学経済学部ディスカッション・ペーパーとして公表するとともに,査読誌に投稿した.論文の内容は次のようなものである.交渉決裂点が内生的に決まる繰り返し交渉モデルを構築した.2人のプレイヤーが毎期毎期余剰の配分について交渉する.各期において,まず,一方のプレイヤー(提案者)が余剰の配分を提案し,続いて,他方のプレイヤー(応答者)が提案への諾否を表明する.提案が受諾されれば,提案通りの配分が実現して次の期に移り(提案者は変わらない),拒否されれば,ある確率で交渉決裂点の配分が実現して次の期に移り(提案者が変わる),残りの確率で2人の関係は解消される.交渉決裂点の配分は,前の期に実現した配分である.各プレイヤーの利得は,各期で実現する配分での自身の取り分の割引現在価値の和である.「応答者にとって諾否それぞれの利得が無差別になる配分が提案され,それが受諾される定常部分ゲーム完全均衡」が唯一存在することを示した.さらに,この均衡利得と交互提案交渉ゲーム(Rubinsteinモデル)の均衡利得との関係を明らかにした.定常的な均衡をすべて求める.応用例を考える.論文にまとめる.応答者にとって諾否の利得が無差別になる提案が提案され,それが受諾される定常部分ゲーム完全均衡以外の定常部分ゲーム完全均衡が存在しないことを示す.応答者にとって諾否それぞれの利得が無差別になる提案が提案され,それが受諾される定常部分ゲーム完全均衡以外の定常部分ゲーム完全均衡が存在しないことを示すことをあきらめることも含めて検討する.モデルの構築と均衡の導出に集中したため,関連図書やコンピューターの選定に時間を割くことができなかった.予想していた結果を示すことが想定より難しかったからである.示したい結果をななかな示すことができず,研究が滞ったため,次年度使用額が発生した.次年度は,本研究の理論の応用を考えるために応用分野の関連図書の購入したり,研究を論文にまとめた後に論文を英文校正に出すなどして,研究費を使用する.関連図書やコンピューターを選択し,購入する.時間をかけ予想を示し,次の段階に進み,物品等を購入することにする.
超微小硬度計と原子間力顕微鏡を一体化した固体表面力学計測装置の試作

超微小硬度計を用いて鉱物表面の力学的性質を調べた。押し込み変位を正確に測定するために、超鋼合金を試料とし、圧子には平坦ダイヤモンドを使用して荷重-変位曲線を作成した。そして、ダイヤモンドと超鋼合金が変形をしないと仮定して、すべての変位を超微小硬度計の装置本体が弾性変形していると考えると、従来の測定で得られる荷重-変位曲線の意味がより正確に把握できるようになった。すなわち、従来の測定では試料の変形だけでなく超微小硬度計の装置本体の変形も加算されていたことになる。今後は対象試料の正確な押し込み深さが読みとれることになる。定荷重保持状態でバーコビッチ圧子を石英試料に押しつけてその押し込み深さの変位を調べることで、石英のレオロジーのパラメータが測定できることがわかった。実際に行ってみた結果、応力べき指数は100を超えることがわかった。通常の変形実験では応力べき指数は45程度の値を採ることが知られているので、この100以上という値をどのようにとらえればいいのか検討中である。ヤング率の圧力依存性について検討を行っている。圧力が高くなるとヤング率は一定の割合で高くなることがわかった。かかった圧力の最高の値は約200ギガパスカルである。通常のヤング率の実験ではこの圧力は出せないので、超微小硬度計を利用したヤング率測定は、新しい高圧力学物性に関する情報を獲得する手段として利用できることがわかった。ノルウェーのビグディン礫岩について、石英粒子にあけた圧痕の大きさについて検討を行い、大きく歪んでいる試料の方があまり歪んでいない試料よりも圧痕の大きさが小さいことがわかった。本年度は、原子間力顕微鏡と超微小硬度計を一体化した新装置の試作を行った。それとともに、この装置を使用するときに問題になるであろう点を、既存の超微小硬度計と原子間力顕微鏡を使用しながら検討した。新装置の技術的な点で特に重要と考えられる点が二つ浮かび上がってきた。一つは優秀な防震システムを備えられるのかどうか、という点、もう一つは圧痕の深さの測定精度である。優秀な防震システムの必要性は、圧子に加わる荷重が1グラム重以下になったときに顕著に現れる。荷重-深さ曲線がノイズで正確に読みとれなくなるのである。これは、現在の超微小硬度計の防震システムが優秀でない結果起こると考えられる。すなわち、建物はいつでも少しは揺れているということが障害になっている。例えばエレベータや、屋上の給水タンクのモーター、誰かが歩く振動等は確実に影響している。場合によっては東名高速道路を走るトラックの影響などもあると想像される。軽い荷重でテストを行う必要性はますます大きくなってきた。軽い荷重の方が高い圧力状態を実現できることがわかったからである。圧痕の深さの読みとりの問題も重要である。一つの圧痕に対して、別々に超微小硬度計で測定した深さと、原子間力顕微鏡で測定した深さが異なることが一般的であることがわかった。これは、両方の装置を一体化したときには重要な問題になってくるはずである。すなわち、どちらの装置の深さの値を信用するのかと言うことである。この問題に関しては、測定方法・技術の改良を要することなので、単なる装置の利用者としての大学研究者では対応できない。装置改良を担当するアカシ(株)の技術陣が検討している最中である。この部分の問題が解決されれば、新装置の威力は相当なものとなり、理想的な固体表面力学試験装置となるはずである。本年度は、超微小硬度計と原子間力顕微鏡を一体化した試作力学装置(ライダー2)の使用法に関して種々の情報を集めた。

特に、原子間力顕微鏡と超微小硬度計の制御コンピュータにいろいろ問題があることが判明し、製作側のアカシの技術者にその問題点を指摘した。問題点は以下の通り。1.格子点で硬度を連続的に測定するプログラミングに問題があり、碁盤の目のような測定点にならなかった。このプログラムの不調は研究能率を大いに阻害したので、改良を強く要求した。プログラム上の問題なので、解決は比較的容易の見込みである。2.原子間力顕微鏡を使用しているときには、超微小硬度計のデータを処理・加工するすることができないことがわかった。これも作業能率が著しく落ちるので、改良を要求した。これもプログラム上の問題である。解決は容易の見込み。3.ライダー2のカバーが重たくて、取っ手がないと持ち上げにくいことがわかった。これは体裁上の問題であり、昨日とは直接関係がないが、意外と不便である。4.深度-荷重関係のスタンダード試料を使用して、詳細に深度-荷重カーブを調べたが、厳密な意味で2乗のカーブに乗っていなかった。これは、ライダー2自体が歪んでいるからかも知れない。さらなる検討が必要である。この問題はライダー2にとって非常に重要で、これがはっきりしないと、結局は何を測っているのか分からなくなる。まだ検討が足りないことは明白であり、今後この問題の解決が焦点となる。超微小硬度計と原子間力顕微鏡を合体させた固体表面力学計測装置は、改良が施され9月下旬に静岡大学に設置された。それ以来実験を重ねて、以下の点が明らかになった。1.装置自体のチェックを行った。一部プログラムにバグがあり、不具合が生じるケースもあることが分かったが、ほぼ我々の要求どおりの装置として改良されていることを確認した。2.超硬合金をテストピースとして、フラットパンチテストを行い、超硬合金を剛体と仮定して装置そのものの硬さを計測し、再現性を含めて、然るべきデータを把握した。今後、試料を点接触変形させて変位-荷重曲線を得た場合に、装置そのものの変位を補正することで、正しい値を知ることができる見通しが立った。3.ノルウェーのビグディン礫岩中の珪岩起源の礫の石英は、塑性変形が進行し動的再結晶によって細粒化するにつれ硬度が(ビッカース硬度)が高くなる、という予察結果を得た。これは、塑性変形の進行過程を考えると逆説的な変化であり、今後正しく確認する必要があるものである。4.従来、ほとんど考慮していなかった保荷重持時の変形について、変位-時間曲線を出すことに成功した。これによって、荷重保持をしている間にどのような変形が進行するのか埜手がかりを得た。5.ヤング率の計測を開始し、石英に関して妥当な値ではない値が見積もられた。目下原因を調査中である。押し込み変位を正確に測定するために、超鋼合金を試料とし、圧子には平坦ダイヤモンドを使用して荷重-変位曲線を作成した。そして、ダイヤモンドと超鋼合金が変形をしないと仮定して、すべての変位を超微小硬度計の装置本体が弾性変形していると考えると、従来の測定で得られる荷重-変位曲線の意味がより正確に把握できるようになった。すなわち、従来の測定では試料の変形だけでなく超微小硬度計の装置本体の変形も加算されていたことになる。今後は正確な押し込み深さが読みとれることになる。これによりヤング率や塑性変形のデータ解釈の精度が上がった。
液状家畜ふん尿の好気性発酵による堆肥化に関する研究

1.有効容積101の断熱発酵槽を用い,スラリーポンプ及びイジェクタによって攪拌曝気を行った。投入試料は7kg,曝気量0.7/min/D.M.とし曝気:休止=1:3の間欠曝気を行い,その間の溶存酸素濃度(DO)を連続測定した。曝気開始とともにDOは上昇するが曝気停止すると検出できない程度に急速に低下した。したがって曝気高率を向上させるためには間欠運転よりも,固形物濃度(TS)を最適化してDOを確保することが重要であると考えられた。そこで以下の実験を行った。2.乳牛ふんスラリーのとTSとDOとの関係を知る目的で、TSを30.46%d.b.に調製したスラリー1.3kgに0.041/minの空気を30分間攪拌しながら曝気を行って,その間のDO値を連続測定した。スラリーの温度は20°C一定とした。得られた結果は以下の通りである。(1)曝気開始DO値は急激に上昇するが,10分後には安定し平衡に達した。(2)TSが3%以上では,DOは検出できなかった。(3)平衡に達したときのDOはTSの減少に伴って直線的に上昇した。3.実験1.で用いた発酵槽でTS濃度の異なるスラリーに96時間連続曝気を行って発行状態を測定した。有機物(VS)除去率,COD除去率などの測定値から,DOの検出されないTS濃度では,好気性発酵があまり進まず,TS濃度が2%程度のとき最も発酵が進行した。したがって、実用的には,TS濃度を2%程度となるように希釈することが望ましいと言える。
トルコをめぐる国際ツーリズムと都市発展との相互作用に関する社会地理学的研究

トルコへの外国からの訪問者は、1990年で539万人に急増し、その40%をドイツ、イギリス、フランスで占め、87%が観光目的である。しかも、1992年時点で外国人ツ-リストが世界で17番目に多い国であるにも拘らず、その増加率では、世界で最も高いのである。彼らの到着先ではイスタンブル、エディルネ、アンタリヤ、イズミル、ム-ラの西部・沿岸地域で約80%を占めているが、これらは、近年人口増加が顕著で、成長が著しく変容が激しい都市を含む地域である。このように、トルコへの外国人観光客の急増は、観光産業としての急成長とともに、トルコの都市開発と地域経済にも多大な影響を与えている。本研究では、1980年代以降に顕在化した国際ツーリズムを基調とする内外の人口流動の状況と、それがトルコの都市発達と地域経済に与えた影響を明らかにすることを主目的に、その地中海地域における中心都市であるアンタリヤを主対象として調査した。具体的には(1)トルコの近年の観光政策の変遷を明らかにし、(2)外国からの観光客の意識と行動をアンケート調査で分析したうえで、(3)トルコ-ヨーロッパ間のツーリズムの仕組みと実態を、ドイツとフランスからのパッケージツアーを通して把握した。そして、(4)都市発展・都市開発と地域経済へのツーリズムへの影響をアンタリヤ市とその周辺地域で明らかにした。トルコ政府は、1957年には報道・情報・ツーリズム省を設立したが、1970年代に入ってから国際ツーリズムに向けての計画を策定して世界銀行からの融資を目指し、アンタリヤ県でのインフラ整備を開始したのは1970年代中期からであった。しかし、急激なインフレの進行は、インフラ整備も充分には行き届かず、さらに、ホテルの整備は遅れた。1980年に文化・ツーリズム省を設立し、1983年以降の新政権は、エ-ゲ海から地中海にかけての諸地域で59万床の宿泊施設開発を計画し、内外の民間資本の観光開発への参加を積極的に展開した。ようやく1980年代半ばから宿泊施設の整備は急進展し、ベッド数の急増をもたらし、その結果として1994年にはこの地域には16万を超えるベット数が達成され、さらに増加傾向にある。それにともなってトルコへの観光客も急増し、トルコの国際ツーリズム収入は、1990年代になると、国外のトルコ労働者からの送金額を上回り、輸出総額の20%を超えるようになった。いまや、トルコの国際ツーリズムは、国家経済上も重大な意味を持つに至った。外国からの観光客の、観光地としてのトルコに対する評価は、決して低くはない。さらに、豊かな自然環境と相対的な価格の安さは、その大きな魅力となっている。こうした観光客は、各国での旅行業から送り出されてきたが、今日では、トルコへのパッケージツアーの過半はトルコ出身者が経営するオペレータによって取り扱われる状況となり、トルコを中心に諸外国をネットする国際ツーリズム産業の成長期にいたり、系列的な企業組織化の動きも著しい。こうした、観光産業の成長とインフラ整備の状況がトルコ国内における観光地間の競争に大きな影響力を持つようになってきている。トルコの国際ツーリズムの急成長と期を一にして、エ-ゲ海・地中海地域の都市発展は著しいものがあるが、そこには、この莫大な観光投資とインフレ経済を背景にして、都市計画の枠を超えた都市成長が進行している。さらに、リゾート地での観光開発と既存都市を中心とする都市発展の進行は、環境への負荷を大きくし、インフラ整備における下水やゴミなどの処理系の整備の相対的な遅れとも重なって、最大の観光資源の一つでもある自然環境の保全問題も、現実的には大きな課題となりつつある。

1980年に文化・ツーリズム省を設立し、1983年以降の新政権は、エ-ゲ海から地中海にかけての諸地域で59万床の宿泊施設開発を計画し、内外の民間資本の観光開発への参加を積極的に展開した。ようやく1980年代半ばから宿泊施設の整備は急進展し、ベッド数の急増をもたらし、その結果として1994年にはこの地域には16万を超えるベット数が達成され、さらに増加傾向にある。それにともなってトルコへの観光客も急増し、トルコの国際ツーリズム収入は、1990年代になると、国外のトルコ労働者からの送金額を上回り、輸出総額の20%を超えるようになった。いまや、トルコの国際ツーリズムは、国家経済上も重大な意味を持つに至った。外国からの観光客の、観光地としてのトルコに対する評価は、決して低くはない。さらに、豊かな自然環境と相対的な価格の安さは、その大きな魅力となっている。こうした観光客は、各国での旅行業から送り出されてきたが、今日では、トルコへのパッケージツアーの過半はトルコ出身者が経営するオペレータによって取り扱われる状況となり、トルコを中心に諸外国をネットする国際ツーリズム産業の成長期にいたり、系列的な企業組織化の動きも著しい。こうした、観光産業の成長とインフラ整備の状況がトルコ国内における観光地間の競争に大きな影響力を持つようになってきている。トルコの国際ツーリズムの急成長と期を一にして、エ-ゲ海・地中海地域の都市発展は著しいものがあるが、そこには、この莫大な観光投資とインフレ経済を背景にして、都市計画の枠を超えた都市成長が進行している。さらに、リゾート地での観光開発と既存都市を中心とする都市発展の進行は、環境への負荷を大きくし、インフラ整備における下水やゴミなどの処理系の整備の相対的な遅れとも重なって、最大の観光資源の一つでもある自然環境の保全問題も、現実的には大きな課題となりつつある。産業構造の世界的な変化の中で、ヨーロッパの中心と周辺をめぐる国際ツーリズムの動向が、中心としてのフランス・ドイツおよび周辺としてのトルコの都市発展にどのような変化を与えているかを明らかにすることが目的である。トルコでは、10年前から国家プロジェクトとして観光開発を進めてきた地中海沿岸地域の中心都市であるアンタリアを中心に、観光開発計画とそれに基づく観光産業の実情と都市開発の実態を、関係機関へのヒアリング、各種統計資料・計画文書の収集によって把握した。同時に、アンタリアおよび周辺のケメル、カシュ、フェティエのリゾート都市を訪問し、外国からの観光客を対象とする観光行動と意識、観光地の評価に関するアンケート調査を実施した。国家プロジェクトとしての観光開発は、急速な観光産業の成長をもたらし、夏期を中心に半年間の観光シ-ズンには地域人口が2倍に増加させるまでになり、海岸部での観光施設を中心とする都市開発を急進させている。それに伴う水問題や海岸汚染問題などの課題も顕在化しつつあることが明らかになった。外国観光客はドイツを中心にヨーロッパ各国から訪れているが、アンケート調査によるとトルコでは、遺跡・自然環境の魅力とともに、国民性も評価が高く、経済的負担の少ない地中海沿岸旅行が可能であるとしている。1995年は、世界的に経済の停滞傾向がある中で、トルコの国際観光は空前の業績をあげたようである。中心としてのフランス・ドイツは、周辺への観光客の送り出し地域であるため、受け入れ地域との間での観光産業の国際的な組織化が明確化しつつあるようであるが、本年度は、十分には捕捉できなかった。
哺乳子牛における第四胃凝乳機構の生理的意義と消化器疾患との因果関係の解明

本研究は、哺乳子牛特有の第四胃における乳汁の凝乳機構の生理的意義と消化器疾患との因果関係を解明することを目的に研究を進めてきた。初乳成分のうち、免疫グロブリン(IgG)は健康な子牛の育成に必要不可欠だということが常識となっている。H27年度までに第四胃の凝乳機構が効率的なIgG吸収に関与していることを明らかにし、初乳成分の代謝の解明に研究を発展させてきた。H28年度は初乳摂取前後の子牛の血清低分子化合物を二次元ガスクロマトグラフ質量分析計を用いて網羅的に解析し、得られたデータを多変量解析した。子牛の血清からは約1400の低分子化合物が代謝物として同定され、多変量解析の結果、血清の低分子化合物のプロファイルの特徴としては、第一に個体を、第二に初乳摂取後の変化を示すことがわかった。また相関分析を用いてIgGと同様に変動する化合物を抽出した。これは、初乳からのIgGの吸収は非特異的な吸収と考えられてきたため、もし非特異的であれば、IgGよりも小さい低分子化合物の多くがIgGと共に吸収され、血中濃度が増加することが予想された。しかし結果は予想に反し、初乳摂取後IgGと同様に増加する低分子化合物は乳糖をはじめとするオリゴ糖など数種に限られていた。この結果は、これまで考えられてきた生後24時間に限られた腸管でのIgGの非特異的な吸収を否定し、選択的な吸収の可能性を示唆した。さらに相関分析を用いて、初乳摂取後の時間経過と相関する化合物を抽出した結果、アミノ酸がIgGとは異なる増加様式で血中濃度が増えることがわかり、初乳成分の吸収機構の多様性を示唆することができた。以上の成果を7月の世界牛病学会、9月の日本獣医学会、1月には畜産分野では知名度の高い国際誌Journal of Dairy Scinceにて発表した。28年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、哺乳子牛特有の第四胃の凝乳機構の生理的意義と消化器疾患との因果関係を解明することを目的に研究を進めてきた。最初に、健康な新生子牛4頭における初乳哺乳後の第四胃内凝乳状態を精査した。全頭で、第四胃の超音波検査により初乳が良好なカード形成を示すことが明らかになった。また哺乳後4時間の平均免疫グロブリンG(IgG)濃度が、22.4g/Lに達していることが明らかになった。次に、新生子牛に無処置の初乳と調整したホエーを給与して比較した。初乳に凝乳酵素を加えると、乳タンパク質であるカゼインと脂肪を主体とした固体と、カゼイン以外のタンパク質やミネラルを含む液体に分かれる。ホエーはその液体部分を指し、初乳中のIgGは移行しているが、カゼインが消失しているため、さらに凝乳することはない。このホエーと初乳を哺乳した子牛を比較することで、カード形成の有無による影響を明らかにできると考えた。そこで11頭の新生子を、無作為に2群に分け、7頭に凝乳する初乳を、4頭に凝乳しないホエーを、生後3時間以内に2リットル哺乳させた。哺乳後6時間に採血し、IgG濃度を測定した。給与した初乳のIgG濃度は、初乳で54.54g/Lで、ホエーで59.42g/Lで差はなかったが、哺乳後6時間の血液中IgG濃度は、凝乳する初乳を哺乳した子牛では3.94±0.65g/Lで、凝乳しないホエーを哺乳した子牛で1.91±0.24g/Lで、有意な差があった。以上の結果から、初乳が新生子牛の第四胃内でカード形成することと、カード形成の有無が初乳からのIgGの吸収に影響していることが明らかになった。本試験で得られた新知見は、健康な子牛の育成には欠かせない初乳からのIgG吸収に影響する因子を明らかにし、子牛の消化生理を理解した上で、効果的な初乳給与を実現し、子牛の育成技術を向上するものと考える。第四胃における凝乳、すなわちカード形成の生理的意義を解明するために、初回初乳摂取時の新生子牛のカード形成に着目し、カードを形成する初乳と形成しないホエーを哺乳した子牛を比較し、第四胃のカード形成の有無が初乳からのIgGの吸収に影響していることを明らかにした。またカード形成した子牛について、大きな一塊のカードを形成した子牛の方が、小さい複数のカードを形成した子牛よりもIgGの吸収が高いことがわかった。IgGの吸収は、健康な子牛の育成に必要不可欠で、生後24時間以内の子牛は、初乳に含まれるIgGを腸管から吸収し、血液循環に移行することが出来ることがわかっている。しかしIgGは分子量約15万の巨大分子であり、腸管での吸収機構についての詳細はわかっていない。このような巨大分子が腸管上皮から吸収され、血液循環に移行されるのであれば、低分子化合物も同様に吸収され、血液中の低分子化合物がIgGと同様に増加することが考えられた。

そこで本研究では、初乳摂取前後の子牛の血清の低分子化合物を解析した。その結果、子牛の血清からは約2000の低分子化合物が検出され、その中から統計学的な手法を用いてIgGと同様の変動を示す化合物を抽出し、グリシン、スレオニン、αケトグルタル酸が初乳摂取後、経過時間とともに増加していることが明らかになった。しかし、IgGと同様に初乳摂取後増加する低分子化合物はかなり限られており、初乳成分は選択的に吸収されている可能性が示唆された。以上の結果から、初乳からのIgGの吸収に第四胃のカード形成状態が関与していることと、IgGを含む初乳成分の腸管からの吸収と血液循環への移行は選択的に行われていることが示唆された。カード形成の生理的意義を解明するために、初回初乳摂取時の新生子牛のカード形成に着目した。平成26年度までに初乳とホエーを哺乳した子牛を比較することで、第四胃のカード形成の有無が初乳からのIgGの吸収に影響していることを明らかにした。平成27年度は、カード形成した子牛について、さらに詳細に調べた結果、大きな一塊のカードを形成した子牛と、小さい複数のカードを形成した子牛が存在した。それらを比較すると、大きな一塊のカードを形成した子牛の方が、小さい複数のカードを形成した子牛よりもIgGの吸収が高いことがわかった。IgGの吸収は、健康な子牛の育成に必要不可欠だということが、生産者、農業関係者、研究者の間で常識となっている。また長年の研究から、生後24時間以内の子牛は、初乳に含まれるIgGを腸管から吸収し、血液循環に移行することが出来ることがわかっている。そのため、新生子牛は、できるだけ早くIgGを豊富に含む良質な初乳を摂取し、生後48時間までに血中IgG濃度を10mg/mL以上にすることが、その後の疾病率や致死率を低減するために重要とされている。カード形成の生理的意義を初乳からのIgGの吸収と関連付けるためには、初乳からのIgGの吸収および血液循環への移行機構の解明が必須と考えた。そこで初乳摂取前後の新生子牛血清の低分子化合物を解析した結果、血清に移行する低分子化合物は限られていて、かなり選択性が高い可能性を示すことができた。以上のように、当初の研究計画には記載していなかったが、カード形成の生理的意義の解明から初乳成分の代謝へと研究を発展させることができ、学会発表が可能となるまでデータ解析を進めたという点で、研究はおおむね順調に進展したと評価した。本研究は、哺乳子牛特有の第四胃における乳汁の凝乳機構の生理的意義と消化器疾患との因果関係を解明することを目的に研究を進めてきた。初乳成分のうち、免疫グロブリン(IgG)は健康な子牛の育成に必要不可欠だということが常識となっている。H27年度までに第四胃の凝乳機構が効率的なIgG吸収に関与していることを明らかにし、初乳成分の代謝の解明に研究を発展させてきた。H28年度は初乳摂取前後の子牛の血清低分子化合物を二次元ガスクロマトグラフ質量分析計を用いて網羅的に解析し、得られたデータを多変量解析した。子牛の血清からは約1400の低分子化合物が代謝物として同定され、多変量解析の結果、血清の低分子化合物のプロファイルの特徴としては、第一に個体を、第二に初乳摂取後の変化を示すことがわかった。また相関分析を用いてIgGと同様に変動する化合物を抽出した。これは、初乳からのIgGの吸収は非特異的な吸収と考えられてきたため、もし非特異的であれば、IgGよりも小さい低分子化合物の多くがIgGと共に吸収され、血中濃度が増加することが予想された。しかし結果は予想に反し、初乳摂取後IgGと同様に増加する低分子化合物は乳糖をはじめとするオリゴ糖など数種に限られていた。この結果は、これまで考えられてきた生後24時間に限られた腸管でのIgGの非特異的な吸収を否定し、選択的な吸収の可能性を示唆した。
遺伝子組換え体のスクリーニング法およびLC/MSを用いた迅速、簡便な検出法の確立

遺伝子組換え食品のうち、とうもろこし、大豆、じゃがいも加工品からのDNA抽出法の検討を行った。また、じゃがいも加工品でPCR増幅産物のシークエンスをおこなった。1.DNA抽出法の検討大豆加工品ではCTAB法を、とうもろこし加工品ではCTAB法とキアゲン社のDNA抽出キットを、じゃがいも加工品では、キアゲン社のDNA抽出キットとキットを改変した抽出法を用いて検討した。大豆、とうもろこし加工品の抽出法の評価は、DNAの定量(定量PCR)によりおこなった。じゃがいも加工品には通常のPCR法を用いた。大豆加工品についてCTAB法を用いたところ、とうふ、うすあげ、あつあげ、おから、凍豆腐では十分な量のDNAが抽出されており、一方きな粉ではDNA量が不十分であった。また、とうもろこし加工品ではスナック菓子に対してCTAB法とキアゲン社キットを適用したところ、ほとんどCTAB法が良い結果を示した。しかしキットが結果が良い場合もあり、製品ごとに抽出法を検討する必要があると考えられた。CTAB法のみを用いてポップコーン、スイートコーン、コーンスターチについて検討したところ、前2者は良い結果を示した。コーンスターチではDNA量が少ない製品があったがDNA溶液を濃縮することでよい結果を得られた。じゃがいも加工品ではスナック菓子に対してキアゲン社キットを用いたところ、製品によってはDNAが検出されなかった。そこで、大容量のキットに変更し、さらにDNA精製操作を加えることにより、検討したすべてのスナック菓子からじゃがいもDNAを検出することができた。2.シークエンス遺伝子組換えじゃがいも検出プライマーを用いて増幅したバンドからダイレクトシークエンスをおこない、現在公表されていない遺伝子組換えじゃがいもの塩基配列の一部を明らかにした。今後、組換えじゃがいもの検出に役立つと考えられる。遺伝子組換え作物、組換え食品について、大豆および大豆製品のDNA抽出法、遺伝子組換え大豆の検出法の検討を行った。1.DNA抽出法の検討大豆および大豆製品からのDNA抽出法に関しては、Proteinase K法およびCTAB(Cetyltrimethylammonium bromide)法、DNA抽出キットを用いたWizard法の3つについて検討を行った。DNAが抽出されていることをすべての大豆に含まれるレクチン遺伝子を検出するPCR法で確認した。その結果、大豆および以下の大豆製品(とうふ、うすあげ、あつあげ、きな粉、高野豆腐、湯葉、おから、みそ)からDNAが抽出可能であった。しかしながら、試料によっては特定の抽出法を用いた場合のみ抽出可能となる場合があるため、試料の種類に応じて抽出法を使い分けることが必要であった。また、今回の方法ではDNAの抽出が不可能な試料もあり、今後、他のDNA抽出法についても検討する必要があると考えられた。2.遺伝子組換え大豆の検出法の検討国内に流通する遺伝子組換え大豆のラウンドアップレディー大豆について、導入遺伝子を構成するCaMV(Cauliflower Mosaic Virus)35Spromoter、EPSPS(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase)遺伝子、NOS(nopaline synthase)terminatorのそれぞれに特異的なプライマーを設計し、検出法の検討を行った。まず、検出限界について検討したところ、CTAB法で0.50.1%程度、Proteinase K法で0.005%であった。次に、大豆製品に適用したところ、とうふ、うすあげ、あつあげ、きな粉、湯葉からラウンドアップレディー大豆の遺伝子を検出することができた。