hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ベンガル地域における多剤耐性菌と薬剤耐性遺伝子の解析と我が国のそれらとの比較

抗菌薬の多用によって従来、治療可能であった細菌感染症が、多剤耐性菌の出現によって臨床上大きな問題となっている。本研究では、ベンガル地域での重症下痢症患者及び環境から分離した下痢症原因菌がどの程度耐性化されているか、さらに、我が国での下痢症患者及び環境から分離された菌がどの程度耐性化しているか、さらに分離された薬剤耐性菌がどのような薬剤耐性遺伝子を保持しているか、特にインテグロンの関与を調べることを目的とした。2006年にインドカルカッタで分離されたコレラ菌は、そのほとんどがO1コレラ菌であり、また、稲葉型がドミナントであった。各種抗菌薬の感受性を調べたところ、そのほとんどが多剤耐性であり、約90%以上がABPC、ST、FRM、NA、EMに耐性であった。CPFXに対して約50%が耐性であり、一方、TCに対しては93%が感受性であった。一部のNAGビブリオが、V.fluvialisであることが明らかとなり、多剤耐性のV.fluvialis19株について調べたところ、9株でクラス1インテグロン陽性で、4株でSXTエレメント陽性であった。全てのキノロン耐性株はその耐性化機構に排出ポンプが関わっていた。環境中でのインテグラーゼ遺伝子の存在を調べたところ、河川、池及び食肉から高率でインテグラーゼ1及び2の遺伝子が、また若干のSXTエレメントも検出された。特にバングラデシュでは、SXTエレメントにコードされている抗菌薬を分離培地に添加することによりO1コレラ菌の分離率が上昇した。一方、我が国の下痢症患者から分離した下痢原性大腸菌やカンピロバクターの薬剤感受性を調べたところ多剤耐性の割合は低く、しかも、キノロン耐性菌は10%以下であった。環境中でのインテグラーゼ遺伝子を調べたところ、河川及び食肉からインテグラーゼ1及び2が検出されたが、SXTエレメントは検出されなかった。以上の結果より、インテグロンは我が国やベンガル地域においても環境及び食肉などに広く分布しているが、患者検体からはインドでの陽性率は高く日本の患者由来ではほとんど検出されなかった。また、患者分離株の多剤耐性やキノロン耐性もベンガル地域での分離株の方がその割合が高かった。このことは、インドでは抗菌薬が処方箋なしでも容易に購入できることに起因すると考えられた。従来は抗菌薬によって治療で可能であった細菌感染症が、多剤耐性菌の出現によって臨床上大きな問題となっている。本研究では、ベンガル地域での重症下痢症患者から分離しに下痢症原因菌がどの程度耐性化しているか、我が国で分離された下痢症原因菌がどの程度耐性化しているか、さらに分離された薬剤耐性菌にどのような薬剤耐性遺伝子が関与しているか、特にインテグロンの関与について調べることを目的とした。インドカルカッタで分離されたコレラ菌133株についてインテグロンの存在について調べた結果、クラス2及びクラス3は全ての株で陰性であったが、クラス1インテグロンは、14株で陽性あった。

その中には、トリメトプリム、アミノグリコシド、ベーターラクタムに耐性な遺伝子がコードされており、1990年代前半に分離されたO1コレラ菌で高頻度に存在していた。Non-O1,non-O139コレラ菌に関しては、年度に関係なく約20%の割合で陽性であった。O139コレラ菌で、1992年の分離株で初めてクラス1インテグロンが検出された。一方、赤痢菌に関しては2002年に分離されたShigella dysenteriae type1がフルオロキノロンを含む多剤耐性であり、クラス1とクラス2インテグロンが多剤耐性化に関与していた。クラス2インテグロンには、トリメトプリム及びアミノグリコシドに耐性な遺伝子がコードされていた。クラス1インテグロンは、3'-CSを欠く不完全型であり、S.flexneriで見つかっていたアンピシリン、ストレプトマイシン、クロラムフェニコール、テトラサイクリンに耐性な遺伝子を持つShigellaresistance locus(SRL)であった。SRLがS.dysenteriae type1で初めて見つかった。一方、我が国の小児下痢症患者から分離されたCampylobacter jejuniは、一部にマクロライド耐性菌が見つかったが、フルオロキノロンには感受性であり、その他の抗菌薬に対してもおおむね感受性であった。本研究では、ベンガル地域での重症下痢症患者及から下痢原因菌の分離を試み、分離菌がどの抗菌薬にどの程度耐性化されているか、また薬剤耐性遺伝子の分布を、インテグロンを指標に患者及び環境中での分布状況について調べることを目的とした。さらに、我が国についても同様のことを調べ、インドとの結果を比較することを目的とした。ベンガル地域での重症下痢症患者からコレラ菌を分離したところ、そのほとんどが稲葉型O1コレラ菌であった。分離菌のほとんどが多剤耐性であり、キノロン耐性も約50%存在した。インテグロンの関与はほとんど見られなかった。一方、fluvialisでは、約50%がクラス1インテグロン陽性で、20%でSXTエレメントが陽性であった。キノロン高度耐性に、排出ポンプが関わっていた。患者及び環境中でのインテグラーゼ遺伝子の存在を調べたところ、患者では1単独陽性と、1と2の両陽性が高率に、環境中、特に食肉では1及び2の遺伝子が高率に検出された。一方、我が国の下痢症患者から分離した下痢原性大腸菌やカンピロバクターの薬剤感受性を調べたところ多剤耐性割合は低く、しかも、キノロン耐性菌は10%以下であった。環境中でのインテグラーゼ遺伝子を調べたところ、河川及び食肉からインテグラーゼ1及び2が検出された。特に牛肉からは1が鶏肉からは1と2の両方が高率に検出された。以上の結果より、インテグロンは我が国やベンガル地域においても環境及び食肉などに広く分布しているが、患者検体からはインドでの陽性率が高く、日本の患者由来ではほとんど検出されなかった。また、患者分離株の多剤耐性やキノロン耐性もベンガル地域での分離株の方がその割合が高かった。薬剤耐性遺伝子は、環境中に広く分布しており、インドでは抗菌薬が処方箋なしでも容易に購入できるため、抗菌薬の多用によって患者に親和性の高い耐性菌が選択されてきている可能性が考えられた。
ラマン分光法を用いた腸管虚血に対するバイアビリティ診断方法の確立

ラマン分光法とは、ラマン散乱光が分子構造に固有であることを利用して得られたラマンスペクトラムを用いて、物質の分子構造を知る手法である。腸管虚血症は腸管血流が阻害された状態であり,手術による広範囲の腸切除が余儀なくされる.また,その治療時期を逸すると多臓器不全に陥り,生命予後を悪化させる.腸管虚血症に対する,迅速かつ適切な腸管のviabilityの把握と虚血範囲の同定は生命予後と機能予後に大きく寄与する.虚血に陥った細胞は,正常細胞と異なる特有のラマンスペクトルを呈することが知られているが,腸管虚血細胞特有のラマンスペクトルは明らかになっていない.我々はラットを用いた腸管虚血モデルに対して,ラマン分光法により,腸管虚血細胞特有のラマンスペクトルを同定することにより非侵襲的に虚血腸管の同定およびviabilityの把握が可能となると仮説を立てた。現在、まず、ラット腸管のラマンスペクトルを測定することに成功し、さらに、作成したラットを用いた腸管虚血モデルから虚血腸管を取り出し、虚血腸管と健常腸管のラマンスペクトルを比較して、腸管虚血特有のラマンスペクトルの同定をし得た。虚血腸管のラマンスペクラムの同定は未だ報告がなく、新しい知見である。さらに、腸管虚血より得られたラマンスペクトルが何を反映しているのかを病理学的検索を追加して、検討する方針としている。また、同時に、測定できるラマンスペクトルをより広く、迅速に測定可能となるように、機器開発を進めていく。ラット腸管のラマンスペクトルを測定することに成功し、さらに、作成したラットを用いた腸管虚血モデルから虚血腸管を取り出し、虚血腸管と健常腸管のラマンスペクトルを比較して、腸管虚血特有のラマンスペクトルの同定をし得た。腸管虚血より得られたラマンスペクトルが何を反映しているのかを病理学的検索を追加している。新鮮凍結切片を用いて、免疫染色を追加し検討している。ラットの使用数の変更および学会への出張の変更があったため
立法過程における行政府の役割

本研究は、平成3年度および4年度の2ヵ年にわたって行われたものである。日本においては、他の先進諸国と同様に、政府の提案によって成立する政府立法が量的にも(約85%)、また質的にも(国の政策を実現するための法律)、立法過程において重要な役割を果たしている。本共同研究の成果は、政府立法を取りあげ、1.研究分担者による総論的研究、2.研究分担者による事例研究、3.立法・行政実務家による事例研究に分けられる。今回の共同研究は2年間であったため、半数の研究は完成しているが、残りの半数の研究は中間報告の形をとっている。今後も研究を継続して一冊の著書にまとめる予定である。1.総論的研究では、日本の立法過程では法律案の作成段階で官僚機構を通じて意見調整がなされ、国会審議の段階で修正によって野党が重要な役割を果たし得ること(江口論文)、法律案の公案過程における行政機関間の調整の在り方(加藤報告)、行政部内政策過程の枠付けの手法としての“基本法"の役割(小早川論文)、日本とアメリカの1980年代における財政政策をめぐる政治と行政の相互関係の比較検討(山口論文)、アメリカ公法学の立法過程モデル(常本論文)、イギリスにおける政府立法の生成(前田報告)、日本の立法過程論の論争点(清水報告)が明らかにされている。2.政府立法の事例研究では、PKO協力法(牧野報告)、難民条約への加入に伴う関係法令の改正(渡辺報告)、育児休業法(小野報告)、大学審議会設置法(稲報告)、元号法(高見報告)、地方自治法改正(神原報告)および選挙法(岡田報告)が扱われている。3.事例研究は、立法・行政実務家を研究会に招いての報告と質疑の記録で、老人保健法(渡邉論文・岡光論文)、個人情報保護法(松村論文)、大店法(古田論文)および暴力団対策法(吉田論文)を取り上げている。1.1991年8月20日および21日、北海道大学に共同研究のメンバ-全員が集まり、次のような研究会を行った。まず、共同研究の共通の研究課題に関する総論的な報告として、山口二郎「日本政治学における政策決定過程論」、加藤幸嗣「国会の役割と議員立法の将来について」が行われ、全員で討論した。つぎに、立法・行政実務家として、松村雅生総務庁行政管理局管理官、古田肇通産省産業政策局流通産業課長、渡辺芳樹厚生省保険局保険医療企画調査室長き招き、それぞれ、「個人情報保護法制定の立法過程」、「平成三年度大店法改正の立法過程」、「老人保健法制定の立法過程」の報告を受け、政府立法の具体的事例に政府立法としてどのような特色があるか、政治家、官僚、審議会、圧力団体等が立法にあたってどのような役割を果たしたかという問題を検討した。さらに、各研究分担者の研究進行状況の説明がなされた。2.1992年1月21日に、岡光序治厚生省老人保健福祉部長を研究会に招き、「平成3年度老人保健法改正の立法過程」の報告を受け、老人保健法改正の立法過程の実態を解明した。3.各研究分担者は、東京に出張し、立法・行政実務家の協力を得ながら、議会や行政官庁の担当者にインタビュ-を行ったり、資料を集めて、事例研究を行った。4.1、2の立法・行政実務家を招いての共同研究の成果は、「北大法学論集」に掲載のため印刷中である。1.1992年8月19日および20日、北海道大学に共同研究のメンバー全員が集まり次のような研究会を行った。まず本研究の共通の研究課題に関する総論的な報告として、清水睦「戦後〈立法過程〉論に関する考察ー立法過程における政府の役割論議にもふれてー」、

前田英昭「政府が立法過程に関与する必要性とその実態」、小早川光郎「政策過程と枠組」、加藤幸嗣「政府立法における行政機関間調整」、常本照樹「アメリカにおける立法過程モデルについて」、江口隆裕「立法過程における国会修正の役割」が行われ、全員が討論した。つぎに、政府立法の事例研究の報告として、神原勝「地方自治法改正の事例研究」、小野善康「新育児休業法の立法過程」、牧野忠則「PKO法案の立法過程」、稲正樹「大学審議会法の立法過程」、岡田信弘「政府提出法(案)としての選挙立法」、高見勝利「元号法制定の事例研究」、渡辺賢「難民条約加入に伴う関連法令改正をめぐる事例研究」が行われた。さらに、実務家として吉田英法警察庁刑事局刑事企画課法令指導室長を招き、暴力団対策法の立法過程の報告を受けた。2.上記の報告について、一部は論文として公刊され、他のものは、現在、論文しとて執筆ないし印刷中である。
IL-36シグナルを介した表皮細胞-樹状細胞間クロストークによる乾癬発症機序解明

健常ヒト皮膚および、乾癬患者の非病変部/病変部皮膚を用いた定量RT-PCRでは乾癬皮膚では、IL-36γの発現が有意に亢進しており、IL-36αと、IL-36RNの発現も上昇傾向にあった。乾癬モデルマウスの1つであるK5.Stat3Cマウスに誘導した乾癬様皮疹でも、IL-36リガンドの発現が亢進していた。IL-36受容体ノックアウトマウスとK5.Stat3Cマウスを交配したマウスでは有意に耳介肥厚と表皮肥厚が抑制されており、乾癬遺伝子の発現が抑制されていた。ケラチノサイト、樹状細胞それぞれにIL-36で誘導したところ、抗菌ペプチドと、IL-23/Th17軸サイトカインの発現誘導が得られた。まず,ヒトの乾癬病変でIL-36シグナル発現が亢進しているかどうかを検討した.健常ヒト皮膚および,乾癬患者の非病変部と病変部皮膚を用いた定量RT-PCRを行った結果,乾癬皮疹ではIL-36γの発現が有意に亢進しており,更に,IL-36αとIL-36RaをコードするIL-36RNの発現も上昇傾向にあることを確認した.続いて,乾癬モデルマウスでのIL36シグナルの発現を検討した.我々の研究室で開発した乾癬のモデルマウスであるK5.Stat3Cマウスでは、表皮細胞特異的に活性型Stat3(Stat3C)を発現しているトランスジェニックマウスであり、このマウスは、ホルボールエステル外用後に乾癬様皮疹を呈することを見出している.さらに、このマウスはヒト同様IL-23/Th17軸に依存した皮疹を発症し、この軸を標的とする抗体療法(抗IL-12/23p40,抗IL-23p19、抗IL-17A)によって皮疹形成が抑制されることを報告しているが,このマウスに誘導した皮疹ではヒト乾癬同様、IL-36α/β/γ及びRaの遺伝子が高発現することを確認した.続いて,IL-36受容体ノックアウトマウス(以下IL-36R(-/-))をK5.Stat3Cマウスと交配した。IL-36R(-/-):K5.Stat3Cマウスの耳介にホルボールエステル刺激を加えたところ、有意に耳介肥厚が抑制され,表皮の肥厚も抑制されていた.このときIL-17Aをはじめとする乾癬関連遺伝子の発現が抑制されていた。以上の結果から本動物モデルにおいて,IL-36シグナルの阻害が乾癬病変の発症が抑制されることを示され,本動物モデルは乾癬の発症メカニズムの解明のみならず新たな治療薬開発の基盤としての利用も期待できる。まず,ヒトの乾癬病変でIL-36シグナル発現が亢進しているかどうかを検討した.健常ヒト皮膚および,乾癬患者の非病変部と病変部皮膚を用い,定量RT-PCRを行った.その結果,乾癬皮疹ではIL-36γの発現が有意に亢進しており,更に,IL-36αとIL-36RaをコードするIL-36RNの発現も上昇傾向にあった.続いて,乾癬モデルマウスでのIL36シグナルの発現を検討した.我々の研究室で開発した乾癬のモデルマウスであるK5.Stat3Cマウスは.表皮細胞特異的に活性型Stat3(Stat3C)を発現しているトランスジェニックマウスであり.このマウスは.ホルボールエステル外用後に乾癬様皮疹を呈することを見出した.さらに.このマウスはヒト同様IL-23/Th17軸に依存した皮疹を発症し.この軸を標的とする抗体療法(抗IL-12/23p40,抗IL-23p19.抗IL-17A)によって皮疹形成が抑制されることを報告している.このマウスに誘導した皮疹ではヒト乾癬同様.IL-36α/β/γ及びRaの遺伝子が高発現することを確認した.IL-36受容体ノックアウトマウス(以下IL-36R(-/-))をK5.Stat3Cマウスと交配した.IL-36R(-/-):K5.Stat3Cマウスの耳介にホルボールエステル刺激を加えたところ.有意に耳介肥厚.表皮の肥厚が抑制されていた.IL-17Aをはじめとする乾癬関連遺伝子の発現が抑制されていた.この結果は.IL-36シグナルの阻害が乾癬病変の発症を抑制することを示す.現在,ケラチノサイトでのIL-36シグナルの働きについて,培養ケラチノサイトを用いた系で検討を行ったところ.抗菌ペプチドをはじめとした発現誘導が得られた.平成27年度は.骨髄キメラマウスを作成した.関与する細胞それぞれにおいての.IL-36シグナルの変調を.定量RT-PCR法を用いて解析を行った.まず、ヒトの乾癬病変でIL-36シグナルが亢進しているかを検討した。健常ヒト皮膚および、乾癬患者の非病変部/病変部皮膚を用い、定量RT-PCRを行ったところ、乾癬皮膚では、IL-36γの発現が有意に亢進していた。更に、Il-36αと、IL-36RaをコードするIL-36RNの発現も上昇傾向にあった。続いて、乾癬モデルマウスでのIL-36シグナルの発現を検討した。

我々の研究室で開発した、乾癬モデルマウスであるK5.Stat3Cマウスは、表皮細胞特異的に活性型Stat3(Stat3C)を発現しているトランスジェニックマウスで有り、このマウスは、ホルボールエステル外用語に乾癬様皮疹を呈する。更に、このマウスは、ヒト乾癬同様IL-23/Th17軸に依存した皮疹を発症し、この軸を標的とする抗体療法(抗IL-12/23p40抗体、抗IL-23p19抗体、抗IL-17A抗体)によって、非神経性が抑制されることを報告している。このマウスに誘導した乾癬様皮疹では、ヒト乾癬同様、IL-36リガンドの発現が亢進していた。続いて、IL-36受容体ノックアウトマウス(以下、IL-36RKO)とK5.Stat3Cマウスを交配したマウスを作成した。このマウスでは、有意に耳介肥厚、表皮肥厚が抑制されていた。IL-17Aをはじめとする、乾癬遺伝子の発現が抑制されていた。続いて、ケラチノサイト、樹状細胞それぞれを分離し、IL-36リガンドでサイトカイン誘導をかけたところ、それぞれ、抗菌ペプチドと、IL-23/Th17軸サイトカインの発現誘導が得られた。骨髄キメラマウスを作成し、ケラチノサイト/樹状細胞それぞれでのIL-36シグナルの動態を観察した。健常ヒト皮膚および、乾癬患者の非病変部/病変部皮膚を用いた定量RT-PCRでは乾癬皮膚では、IL-36γの発現が有意に亢進しており、IL-36αと、IL-36RNの発現も上昇傾向にあった。乾癬モデルマウスの1つであるK5.Stat3Cマウスに誘導した乾癬様皮疹でも、IL-36リガンドの発現が亢進していた。IL-36受容体ノックアウトマウスとK5.Stat3Cマウスを交配したマウスでは有意に耳介肥厚と表皮肥厚が抑制されており、乾癬遺伝子の発現が抑制されていた。ケラチノサイト、樹状細胞それぞれにIL-36で誘導したところ、抗菌ペプチドと、IL-23/Th17軸サイトカインの発現誘導が得られた。乾癬モデルマウスにIL-36受容体ノックアウトマウスを交配したマウスが完成し,そのサイトカイン環境の評価について、qRT-PCRによる定量的評価,組織学的評価を行い,IL-36シグナルが乾癬様皮疹の進展に関与することが確認できた。ほぼ実験は完了し,現在論文作成中である.乾癬平成27年度は、IL-36R(-/-):K5.Stat3Cマウスを用い、IL-36シグナルが、樹状細胞からのシグナルを介し乾癬様皮疹を形成する経路に必要であることの証明する。1) IL-36R(+/+):K5.Stat3Cマウスに、前処置として致死量の放射線照射を行う。2)その後、IL-36R(-/-)マウス由来の(I)骨髄、(II)骨髄+樹状細胞、を尾静脈から静脈注射し移植する。3)移植後のマウスに、TPA塗布による刺激を行い、耳介の腫脹が抑制され得るかを観察する。皮疹部、所属リンパ節、脾臓へ集積するT細胞及び樹状細胞の変化を、FACS解析、real time PCR解析によるリンフォカインプロファイリングで対照群と比較検討する。加えて,in vitroの系での解析を進める.具体的には,培養ケラチノサイトにおいて,各種サイトカイン刺激を行った際に,IL-36シグナルの変調を,qRT-PCRおよび,ELISA法を用いて評価する予定である.
先天性臍帯ヘルニアの病因－分子機構の解明

カドミウムトリモデルの切片標本をヘマトキシリン-エオジン染色し、組織学的に主に体節の発生におけるカドミウム投与群と対象群との相違点を比較観察した。次にRNAを抽出し主に体節の発生に重要な標的遺伝子の発現を統計学的に解析した。また標的蛋白に対する抗体を用いて蛍光免疫染色したものを多焦点顕微鏡を用いてその分布と発現強度を二重盲検法により客観的に比較した。最後にカドミウムトリモデルにおけるNーアセチルシステインの予防投与による酸化ストレス抑制に伴うさまざまな分子機構の変化を解析した。これらの研究成果はヨーロッパ小児外科学会を中心に、様々な国際学会での発表を通して発信することができた。カドミウムトリモデルの体節の分化・発生において、一番早期に組織学的な変化が見られたのが保温4時間後以降であったことがこれまでの研究で分かっているため、その分子機構の解明のために保温から1時間、4時間、8時間後にトリ胎児を摘出し、膜を取り除いた上で、Trizol保存(RT-PCR用)とホルマリン保存(免疫染色用)の両方を作成した。Trizol保存したものからはRNAを抽出し、逆転写酵素によるcDNA検体を作製した後、あらかじめ自らデザインしておいた標的遺伝子(Paraxis, SIX1, SIX4)に対する特異的なプライマーを用いてリアルタイムPCRを行い、結果を対象遺伝子のGAPDHとの反応生成物の濃度を比較することにより、比較的発現度を統計学的にまとめた。またホルマリン保存のトリ胎児からパラフィンブロックを作製した後、マイクロトームを用いて厚さ5μmで体幹の下肢レベルにて切片標本を作り。上記標的蛋白対するポリクローナル抗体を100倍希釈して一次抗体として用いてその一次抗体と4°Cの冷蔵庫内で一晩寝かせた切片標本を、今度は蛍光(テキサスレッド)でラベルされた二次抗体と常温で20分間反応させ蛍光染色を行った。封入には核酸に対するDAPI染色を含んだ親水性のシーリング材を用い、最後に多焦点顕微鏡を使用し高解像度の蛍光染色画像を記録した。標的蛋白の分布と発現の程度を二重盲検法により客観的に比較し、欧州小児外科学会(Leipzig, Germany)および世界小児外科学会(Berlin, Germany)において口演および座長をする機会を得て、昨年に引き続き世界中の研究者に貴重な情報を発信できたことは、この助成事業の成果として大きいものと判断する。器内温度38°C、湿度65ー75%に設定した孵卵器を用いて有性鶏卵を温めハミルトン-ハンバーガー分類で17ー18に達したトリ胎児を、発泡スチロール製の容器と食品用ラップにて作製した移植装置を用いて卵殻内から殻外に移植し(ex-ovo explantatnion technique)、50μM・50μlのCdAcをトリ胎児の直上からピペットにて直接滴下した。対象群には50μlのNaAcを同様に滴下したものを使用した。その後孵卵器に再び戻し、その腹壁形成への影響が確認できる、保温開始から24時間後、48時間後の時点でにトリ胎児を摘出し、形態学的にその催奇形性を評価し、記録した。またホルマリン保存のトリ胎児からパラフィンブロックを作製した後、厚さ5μmで体幹の下肢レベルにて切片標本を作り、ヘマトキシリン-エオジン染色にて組織学的に主に体節の発生におけるカドミウム群と対象群との相違点を観察した。カドミウムトリモデルの体節の分化・発生において、一番早期に組織学的な変化が見られたのが保温4時間後以降であったことがこれまでの研究で分かっているため、その分子機構の解明のために保温から1時間、4時間、8時間後にトリ胎児を摘出し、Trizol保存(RT-PCR用)とホルマリン保存(免疫染色用)の両方を作成することに成功した。今年度はまずこのTrizol保存したものからRNAを抽出し、逆転写酵素によるcDNA検体を作製した後、あらかじめ自らデザインしておいた標的遺伝子に対する特異的なプライマーを用いてリアルタイムPCRを行い、結果を対象遺伝子のGAPDHとの反応生成物の濃度を比較することにより、比較的発現度を統計学的にまとめた。結果は欧州小児外科学会および国際小児外科研究会において口演発表する機会を得て、世界中の研究者に貴重な情報を発信できたことは、この助成事業の成果として大きいものと判断する。カドミウムは抗酸化酵素を抑制することが知られており、過酸化水素のような反応性酸化物質の産生をもたらす。これまでの研究によりN-アセチルシステインがカドミウムトリモデルにおける酸化ストレスレベルを正常値まで引き下げる効果があることが分かっているが、その分子機構は明らかではない。

今回我々は、細胞レベルでの様々なストレスの緩和に重要な役割を果たしている、金属反応性転写因子-1(metal-responsive transcription factor(MTF)-1)に着目し、N-アセチルシステインの予防投与がカドミウムトリモデルにおいてMTF-1を増幅させているのではないかという仮説を立て、その遺伝子発現レベルと蛋白の分布および発現レベルを検証した。60時間温めた有性鶏卵からトリ胎児を卵殻の外に移植し、N-アセチルシステインの予防投与後にCdまたは血清を直接投与した。その後1、4、8時間後にトリ胎児を摘出し、Trizol保存とホルマリン保存の両方を作成した。Trizol保存検体からはRNAを抽出、cDNAを作製した後、MTF-1遺伝子に対するプライマーを用いてリアルタイムPCRを行い、結果を対象遺伝子のGAPDHと比較し、比較的発現度を統計学的に分析した。その結果、統計学的優位差をもってN-アセチルシステインの予防投与群でMTF-1遺伝子の発現が増幅されていることが確認された。また一方でホルマリン保存したトリ胎児を用いて免疫蛍光染色を行い、多焦点顕微鏡を使用し、その分布と発現を二重盲検法にて客観的に比較した。その結果、N-アセチルシステインの予防投与群でMTF-1蛋白の発現が著しく増強されていた。これらの結果を第15回ヨーロッパ小児外科学会にて口演発表する機会を得て、全世界に我々の研究成果を発信することができたことはこの助成事業の成果として大きいものと判断する。発生学申請当初の研究の目的通りに成果が得られており、2つの大きな国際学会にて発表する機会も得たため。当初の研究計画通りに研究が軌道にのっており、成果を2つの国際学会で発表できたため。今年度までの実験方法に準じて、さらなるほかの標的遺伝子および蛋白の解析を継続して行い、最終的にはこの先天性臍帯ヘルニアの病因となりえる分子シグナル機構の詳細を解明していく予定である。ホルマリン保存のトリ胎児からパラフィンブロックを作製した後、マイクロトームを用いて厚さ5μmで体幹の下肢レベルにて切片標本を作る。PAX3とMRFs蛋白対するポリクローナル抗体を100倍希釈して一次抗体として用いる。一次抗体と4°Cの冷蔵庫内で一晩寝かせた切片標本を、今度は蛍光(テキサスレッド)でラベルされた二次抗体と常温で20分間反応させ蛍光染色を行う。封入には核酸に対するDAPI染色を含んだ親水性のシーリング材を用いる。最後に多焦点顕微鏡を使用し、高解像度の蛍光染色画像を記録し、その分布と発現の程度を二重盲検法により客観的に比較する。平成24年度平成25年度のPAX3およびMRFsを標的とした分子学的研究の成果を基に、さらに他の関連遺伝子や蛋白を同じ方法で調査し比較・統合することにより、さらに総合的に、この先天性臍帯ヘルニアの病因となり得る分子シグナル機構の詳細を解明していく物品(主に実験材料、試薬)600,000旅費(国際学会発表) 600,000その他100,000
射影多様体の代数幾何的・複素解析的及び位相幾何的諸性質

1.断面種数による偏極多様体による分類については、随伴直線束の研究が有効であることが判明し、原理的には分類が可能であることが示された。しかし現実に分類を完成するには多くの具体的課題を解決していかねばならず、そのための方法論はかなり強力になってきてはいるが未だ万能ではない。本年度の現状では、断面種数が2以下の場合については、若干の未解決問題もあるとは言えほぼ満足すべき結果を得るに至ったが、断面種数3以上の場合はほとんど未開拓なままである。ただ、線繊面にのみ限れば、上記の方法論によりコンピュータープログラムが作成でき分類表を得ることができるようになっている。2.多様体として特異点をもつものも含めて考えることにすると、さらにいろいろの問題や困難が生ずる。代表者はそこで偏極構造を一般化して概偏極構造、つまり必ずしも豊富とは限らぬ直線束による構造をも考えることを試みた。このように視野を広げることにより双有理同値、双有理モデルなどの双有理幾何の方法論が移値できるようになる。こうして、3次元での双有理幾何の近年の華々しい成功の一つの帰結として、偏極多様体ないしは概偏極多様体に関するいろいろな問題が少くとも3次元以下では解決した。高次元でも双有理幾何の極小モデルの理論が完成すれば概偏極多様体の研究も進むことが確かめられている。3.射影多様体は一つには偏極構造をもつ偏極多様体と把握することが重要な見方であるが、他にも多くの立場があり、互いに関連しあっている。双有理幾何の方法論が上記のように偏極構造の研究に有効であるのはその一例である。こうした関連分野の情報の相互交流は、本年度に於いても将来においても重要である。
日本植民地・占領地教科書にみる植民地経営の「近代化」と産業政策に関する総合的研究

これまでの植民地教科書研究は、様々な植民地及び占領地教育の特徴を示してきた。本研究は、これらの特徴に対する産業政策や植民地経営の「近代化」政策による影響を究明しようとするものである。第一の方法は、教科書及び教育実践からその影響を抽出した。そして第二に、それらの異同を考察した。しかし、われわれは、次の問題での基本的共通理解が困難であった。一つはそもそも「近代化」とはなにかということであり、もう一つは、産業政策の影響とは何かということであった。さらに地域的な特性やその「異同性」の究明は、地域や教科などを網羅できなかった限界から分析不十分であった。今後の研究課題である。平成25年度の研究実績・成果の概要は以下の通り。1.日本植民地・占領地各地域及び各科目グループ担当者(研究分担者・研究協力者)の教科書比較研究に必要な教科書資料を収集して整理を行った。また内外の他の機関所蔵の教科書資料や教育実態に関するインタビュー等も行った。2.全体研究会及びグループ別研究会を3回開催し、研究中間報告及び進捗状況の報告を行った。第1回は、平成25年6月22日(土)23日(日)にユニコムプラザ相模原で、第2回は、平成25年10月19日(土)20日(日)にこども教育宝仙大学で、第3回は、平成26年3月22日(土)23日(日)にユニコムプラザ相模原で実施した。3.最初の全体研究会では、科研の目的、方法に関する了解とグループ別研究方法に関する打合せを行い、そこで出された、植民地における近代化とは何か、という点での共通理解を得ることをその後の全体研究会で検討していくこととし、講演会及びシンポジウムを計画実施した。グループ別研究会では、1)国語、2)修身、3)歴史・地理、4)実業(農業、技術)・実技(体育、音楽、図画)の研究計画の確認と進捗状況、中間報告を行った。まだ十分な教科書分析には至っておらず、その作業は次年度以降の課題である。1.教科グループ(国語、地理・歴史、修身、実業・実技)ごとに日本植民地・占領地の担当者を決め、論文構想を検討してきた。国語グループでは、台湾、朝鮮、南方の「教科書」について、産業化のキーワードを抽出し、時期、分野にそって検討するとともに、必要な資料調査も行った。歴史・地理グループでは、「教科書」における「近代化」分析について、朝鮮を中心にシンガポールと比較しながら、論文構想を検討した。修身グループでは、修身教科書に見られる「近代化」と「産業化」について1910年代から30年代の台湾、朝鮮、満州を対象に論文構想を検討し、国内外の資料調査を行った。実業・実技グループでは、「近代化」と「産業化」の教科書への影響について、朝鮮・台湾の農業・職業と理科、青島の商業、台湾・朝鮮の図画と音楽、朝鮮の体操、国定・植民地・占領地教科書を対象に論文を構想し検討するとともに、必要な資料の収集を行った。2.全体研究会及びグループ研究会を3回開催し、研究中間報告及び進捗状況の報告を行った。本年度第1回は、平成26年6月14日(土)15日(日)に都内で行った。第2回は、平成26年10月25日(土)26日(日)に都内で行った。第3回は、平成27年3月14日(土)15日(日)に兵庫県伊丹市で実施した。3.全体研究会では、論文執筆に向けての諸注意を含めて打ち合わせを行い、終了後、1人2人の研究発表及び質疑討論を行った。グループ別研究会では、それぞれの進捗状況の報告及び討議を行い、論文執筆に向けた日程、執筆要領の確認を行った。今年度は、最終年度としてこれまでの活動のまとめと報告書作成を行った。第1回研究会は、平成27年6月27日(土)午後1:305:00に相模女子大学で、第2回研究会は、平成27年6月28日(日)午前9:00午後3:00に相模女子大学で実施した。第3回研究会は、平成27年10月31日(土)午後1:305:00にこども教育宝仙大学で、第4回研究会は、平成27年11月1日(日)午前10:00午後1:00にこども教育宝仙大学で実施した。第5回研究会は、平成28年3月5日(土)午後1:305:00に東京家政学院大学で、第6回研究会は、午前10:00午後1:00に東京家政学院大学で実施した。編集会議は、平成27年12月25日(金) 10:0013:00に東京家政学院大学およびメールにて数回実施した。研究会では、平成27年6月までは各自の論文構想の報告を主として行い、10月以降は、成果報告会として実施した。12月に報告書の目次を確定し、翌平成28年2月上旬に上梓し3月中旬に発行した。グループごとに査読を行い、22本の論文を掲載した。

本研究のねらいは、これまでの植民地教科書研究で示されてきた「現地適応主義」「実験的性格」「新教育の受容」等の特徴が、産業政策や「近代化」政策による影響を受けたものと捉え、その影響を多様な教科の教科書、教授書、教授要目のほか、具体的実践等から抽出し、教科書及びその実践における産業化・近代化の影響の異同について地域的個別性と全地域に共通する特性を究明しようとするものであった。しかし、そもそも「近代化」とはなにか、何をもって産業政策の影響と言いうるのかという基本的認識での共通理解が中々困難であった。さらに地域的「異同性」の究明とその「異同性」が何を意味するかの全体的な考察には、地域や教科などを網羅できなかった限界を含め、分析不十分な点が残された。これらは今後の研究課題である。これまでの植民地教科書研究は、様々な植民地及び占領地教育の特徴を示してきた。本研究は、これらの特徴に対する産業政策や植民地経営の「近代化」政策による影響を究明しようとするものである。第一の方法は、教科書及び教育実践からその影響を抽出した。そして第二に、それらの異同を考察した。しかし、われわれは、次の問題での基本的共通理解が困難であった。一つはそもそも「近代化」とはなにかということであり、もう一つは、産業政策の影響とは何かということであった。さらに地域的な特性やその「異同性」の究明は、地域や教科などを網羅できなかった限界から分析不十分であった。今後の研究課題である。予定した研究計画に従って、3回の全体研究会とグループ別研究会を開き、ほぼ予定した共同研究者が出席し、報告会を実施した。27年度が最終年度であるため、記入しない。身体教育学最終年度であるので、これまでの収集資料を基に論文を執筆し、報告書を発刊する予定である。全体研究会及びグループ別研究会を2回開催する。全体研究会では、グループ別の進捗状況を報告し、全体状況を把握すると共に、個別発表を12題行う。グループ別研究会では、2回の研究会で全員が報告を行う予定である。研究会への参加予定が都合により参加できなかったこと、及び海外調査の計画が予定通り執行できなかったことによる。昨年度同様に、3回の全体研究会及びグループ別研究会を開催し、中間報告及び進捗状況を報告しながら進めていきたい。科研の成果を一般に公開するために、講演会及びシンポジウムは公開で実施する予定である。予定の海外調査及び追加の国内外の調査を実施し、研究会あるいは関連学会での成果報告を促進したい。海外調査旅行(台湾)を予定していたが、都合により実施できなかった。前年度実施できなかった海外調査旅行(台湾)を実施する予定である。
細胞内過酸化水素誘発剤による口腔癌の放射線・温熱治療の増感と分子機構

細胞はU937細胞を使用し、温熱処理は、44°Cで20分間、6-FPの濃度は300μMに設定。処理後6時間の時点で増感効果を評価した。形態学的変化では、クロマチン凝集、核断片化は、6-FP併用温熱処理により著明に増強されていた。DNA断片化率は、6-FP併用温熱処理により有意な増加を認めた。ミトコンドリア膜電位の低下した細胞の割合は、6-FP併用温熱処理により有意な増加を認めた。カスパーゼ-3,-8の活性はおよび細胞内カルシウムイオン濃度は、6-FP併用温熱処理で有意な増加を認めた。また細胞増殖は、6-FP併用温熱処理により著明に抑制されていた。蛋白解析では、Bidの発現量が6-FP併用温熱処理により抑制されていた。さらに温熱処理に6-FPを併用することによって、チトクロムCのcytosolへの遊離の増強、PKCδおよび活性化型PKCδのミトコンドリアへのtranslocationが確認された。放射線処理(10Gy)においても、この実験結果と同様の傾向が確認された。マイクロアレイ法による遺伝子解析では、温熱単独処理により39個の遺伝子が上向き調整され、3個の遺伝子が下向き調整されていた。上向き調整された遺伝子はHSP群の他に、抗酸化的機能を有するSEPW1、抗アポトーシス分子であるBAG3が検知された。下向き調整された遺伝子として、アポトーシス抑制作用を有するCCLが検知された。6-FP併用温熱処理では、LOC219962およびNEUROD4が上向き調節される以外に、著明な遺伝子変化は観察されなかった。リアルタイム定量的PCR法による検討では、温熱単独処理によりc-junおよびHO遺伝子の発現はともに上昇していたが、6-FP併用温熱処理ではc-junが上昇し、HO-1は減少していた。処理後6時間の時点で、形態学的変化、DNA断片化、フローサイトメトリーを指標としたアポトーシス、ミトコンドリア膜電位の変化、カスパーゼ3および8活性、細胞内カルシウム濃度、細胞増殖、蛋白解析に関する検討を行った。ギムザ染色による形態学的変化では、温熱単独処理で認められたクロマチン凝集、核断片化は、6-FP併用温熱処理により著明に増強されていた。apoptosisを呈する細胞の割合は、6-FP併用温熱処理により有意な増加を認めた。ミトコンドリア膜電位の低下した細胞の割合は、温熱単独処理と比べて6-FP併用温熱処理により有意な増加を認めた。カスパーゼ-3,-8の活性は、温熱単独処理に比べて6-FP併用温熱処理で有意な増加を認めた。細胞内カルシウムイオン濃度は温熱単独処理により増加し、6-FP併用温熱処理によりさらに増加していた。蛋白解析では、Bidの発現量が温熱処理により抑制され、6-FP併用温熱処理によりさらに抑制されていた。また、温熱処理により誘導されたHSP70の発現量は、6-FP併用により著明に抑制されていた。

さらに温熱処理に6-FPを併用することよって、チトクロムCのcytosolへの遊離の増強、PKCδおよびtruncateされたPKCδのミトコンドリアへのtranslocationが確認された。この実験結果は、放射線処理(10Gy)においても同様の傾向が確認された。次年度は温熱抵抗性を有する細胞種やp53-statusの異なる細胞種における本剤のアポトーシス増強を確認しつつ、DNAマイクロアレーを用い網羅的に関与する遺伝子の検索を行い、増強機序を詳細に解明する。前年度の実験結果から、生体の代謝産物である6-ホルミルプテリンが放射線および温熱の殺細胞効果を増強することを確認し、その増感機構にミトコンドリア-カスパーゼ経路の活性化、細胞内カルシウム濃度の増加、PKCδおよびtruncateされたPKCδのミトコンドリアへのtranslocationが関与していることを明らかにした。今年度は、U937細胞において、温熱処理により30%DNA断片化率を引き起こす条件設定(44°C10分間、6-FPの濃度は300μM)の下で、mRNAを抽出しマイクロアレイ法により関連する遺伝子を網羅的に調べた。温熱単独処理では、39個の遺伝子が上向き調整され、3個の遺伝子が下向き調整されていた。上向き調整されていた遺伝子にはHO-1(HSP32)、DNAJA1、HSPA1B、HSPH1、DNAJB1などのHeat shock proteinの他に、抗酸化的フリーラジカルスキャベンジャー機能を有するSEPW1、抗アポトーシス分子として働くBAG3が検知された。下向き調整された遺伝子としては、アポトーシス抑制作用を有するCCLが検知された。6-FP併用温熱処理では、温熱単独処理をコントロールとし遺伝子発現変化を検索したが、LOC219962およびNEUROD4が上向き調節される以外に、著明な遺伝子変化は観察されなかった。リアルタイム定量的PCR法による検討では、前述の遺伝子変化の確認に加えて、アポトーシス促進遺伝子であるc-junと抗酸化ストレス遺伝子であるHO-1の発現変化を調べた。温熱単独処理では、両遺伝子の発現はともに上昇していたが、6-FP併用温熱処理ではc-junが上昇し、HO-1は減少していた。
嗅覚中枢ニューロンの同期活動と嗅覚学習の解析

前脳の神経回路のコンピューターモデルを作成し,匂い刺激時の神経活動パターンのダイナミクスを再現した.前脳では局所場電位の振動が定常的に生じている.これは前脳の全体でほぼ同期しているが,先端部と基部でわずかに時間差がある.匂い刺激は局所場電位の振動数を増加させ,先端部と基部の時間差を減少させる.また局所場電位はバースティングニューロンの自発活動とその相互作用によって作られると考えられ,その修飾は一酸化窒素によると考えられている.バースティングニューロンのモデルは,ボルテージクランプによる電位依存性チャネルのデータを取り入れたHodgkin-Huxleyタイプのモデルとして,ニューロンどうしの結合は電気シナプスによると仮定した.一酸化窒素は電位依存性カルシウムチャネルを活性化すると考えた.自発発火頻度をニューロンごとに少しずつ変え,それらを1列に並べることで,先端部と基部における活動の時間差を再現することができた.匂い刺激時の振動数と時間差の変化のタイムコースは,一酸化窒素の放出が基部に限局しているモデルでは再現できたが,先端部や前脳全体で一酸化窒素が放出されるモデルでは再現できないことがわかった.また前脳をカルシウム感受性色素(rhod-2AM)で染色し,ディスク共焦点レーザー顕微鏡を用いて測定することで,多数のニューロンの活動を高い解像度で高速に測定することが可能であることが明らかになった.これにより自発活動を持つニューロンや,匂い刺激に応答するニューロンの分布を明らかにすることが可能であることが示された。軟体動物であるチャコウラナメクジの嗅覚中枢である前脳で局所場電位の規則的な振動がみられる.電位振動は匂いの情報処理の正確さや記憶に関わっていると考えられている.触角の嗅上皮に匂い刺激を与えると,電位振動の振動数が一過的に変化することが知られているが,電位振動の修飾には何らかの神経修飾メカニズムが働いていると考えられるため,そのメカニズムを薬理学的手法によって解明することを試みた.脳-触角標本を作製し,前脳の表面からガラス電極を用いて局所場電位を測定し,触角に匂い物質を与えて反応を測定した.匂い物質としてオクタノールなどのアルコールを与えると,一過的に局所場電位の振動数が上昇した.次に神経修飾物質として知られる一酸化窒素の阻害薬を前脳に局所投与してから匂い刺激を行った。その結果,一酸化窒素合成阻害薬であるL-NAMEと,グアニル酸シクラーゼの阻害薬であるODQはいずれも電位振動の振動数の増加を抑制した.次に学習による電位振動の応答の変化について,匂いを条件刺激,苦味物質(キニジン)を無条件刺激に用いる嗅覚嫌悪学習を用いて調べた.条件付けの1日後に脳-触角標本を作製して匂い刺激の効果を測定すると,条件付けを行った個体では,小触角に匂いを与えたときに,振動数の上昇が抑制されることがわかった.これには,一酸化窒素による神経修飾効果の抑制が関わっている可能性が示唆された.これらの結果から,前脳においては学習依存的に局所場電位振動の振動数変化が生じ,これは一酸化窒素-グアニル酸シクラーゼの経路によって担われていることが示唆された.前脳の神経回路のコンピューターモデルを作成し,匂い刺激時の神経活動パターンのダイナミクスを再現した.前脳では局所場電位の振動が定常的に生じている.これは前脳の全体でほぼ同期しているが,先端部と基部でわずかに時間差がある.匂い刺激は局所場電位の振動数を増加させ,先端部と基部の時間差を減少させる.また局所場電位はバースティングニューロンの自発活動とその相互作用によって作られると考えられ,その修飾は一酸化窒素によると考えられている.バースティングニューロンのモデルは,ボルテージクランプによる電位依存性チャネルのデータを取り入れたHodgkin-Huxleyタイプのモデルとして,ニューロンどうしの結合は電気シナプスによると仮定した.一酸化窒素は電位依存性カルシウムチャネルを活性化すると考えた.自発発火頻度をニューロンごとに少しずつ変え,それらを1列に並べることで,先端部と基部における活動の時間差を再現することができた.匂い刺激時の振動数と時間差の変化のタイムコースは,一酸化窒素の放出が基部に限局しているモデルでは再現できたが,先端部や前脳全体で一酸化窒素が放出されるモデルでは再現できないことがわかった.また前脳をカルシウム感受性色素(rhod-2AM)で染色し,ディスク共焦点レーザー顕微鏡を用いて測定することで,多数のニューロンの活動を高い解像度で高速に測定することが可能であることが明らかになった.これにより自発活動を持つニューロンや,匂い刺激に応答するニューロンの分布を明らかにすることが可能であることが示された。
高密度プラズマ輸送解析に向けた電子バーンスタイン放射計測に関する研究

高密度核融合プラズマにおけるエネルギー閉じ込めの物理機構を解明するためには、炉心領域での詳細な分布計測による輸送解析が必要不可欠である。電子サイクロトロン波を用いた従来の電磁波計測では、カットオフ密度と呼ばれる密度上限が存在するため、カットオフ密度以上のプラズマ(オーバーデンスプラズマ)での電子温度分布計測が困難となっている。近年、電子バーンスタイン波放射(EBE)計測システムを開発し、LHD、Heliotron J装置においてオーバーデンスプラズマでの有意なEBE検出に成功した。しかしながら、EBEが得られるモード変換過程は未解明のままであり、計測システムへの適用を妨げている。本研究の目的は、EBEと電磁波間のモード変換過程を実験的に明らかにするとともに、高密度エネルギー閉じ込め改善時の熱輸送解析によってEBE計測の有用性を示すことである。平成30年度は、これまで開発してきたEBE計測用ヘテロダイン・ラジオメータの動作実績を基盤とし、分布計測のため検出チャンネル数を8チャンネルから16チャンネルに向上させた。Ka-band(26-42GHz)マイクロ波を中間周波数信号へ変換し、パワー分割器、帯域通過フィルタを新たに導入し16チャンネルに分割、RF検出器によって検出するシステムとした。ノイズソースを用いてシステムの動作確認を行い、全チャンネルが正常に動作していることを確認した。空間分解能は1cmで、磁気軸から最外殻磁気面までの閉じ込め領域をほぼカバー(r/a=0.0-0.95)する。Heliotron J、LHD装置への適用を行い、初期データとしてオーバーデンスプラズマでの信号の有意な上昇が得られている。当初の予定通り、EBE計測用のマルチチャンネルラジオメータを設計・構築し、詳細な電子温度分布が得られるようチャンネル数を増強した。ノイズソースを用いた動作確認も行い、相対感度構成データを取得できている。プラズマ実験への適用まで進み、初期データが得られていることから、概ね順調に進展していると判断した。平成31年3月に開催された日本物理学会において、本研究の進捗状況についての講演を行った。EBEは直接測定できないものの、3次元磁場構造を考慮に入れたレイトレーシング計算コードの結果から放射・変換過程について理論的な特定を行うことが可能である。この理論計算と実験での磁場強度制御によるEBE周波数スペクトルの変化から、共鳴放射のドップラーシフト効果、衝突減衰による非共鳴放射について解析する。また、非線形相互作用を介した低域混成波の励起を既存の2.45GHzアンテナ系を用いて計測し、BXモード変換を評価する。XOモード変換については、加熱・電流駆動用アンテナ系を活用することでモード変換「窓」位置を特定し、準光学近似を用いた線形解析の適用性と限界を明らかにする。Heliotron J装置では、高強度ガスパフ粒子補給によりH-mode遷移といったエネルギー閉じ込め改善が観測されている。高密度領域における電子温度分布をEBEを用いて計測し、熱輸送解析からエネルギー閉じ込め特性と局所輸送との関連性を調べる。特に、周辺領域への粒子補給の効果が如何にコアプラズマへと伝搬してゆくのか、非拡散現象も視野に入れつつ、ラジオメータシステムの長所である高時間分解能(1μsec)を利用して径方向輸送を解析する。LHD装置への適用も進め、オーバーデンスプラズマでの電子温度分布計測を行う。

また、非線形相互作用を介した低域混成波の励起を既存の2.45GHzアンテナ系を用いて計測し、BXモード変換を評価する。XOモード変換については、加熱・電流駆動用アンテナ系を活用することでモード変換「窓」位置を特定し、準光学近似を用いた線形解析の適用性と限界を明らかにする。Heliotron J装置では、高強度ガスパフ粒子補給によりH-mode遷移といったエネルギー閉じ込め改善が観測されている。高密度領域における電子温度分布をEBEを用いて計測し、熱輸送解析からエネルギー閉じ込め特性と局所輸送との関連性を調べる。特に、周辺領域への粒子補給の効果が如何にコアプラズマへと伝搬してゆくのか、非拡散現象も視野に入れつつ、ラジオメータシステムの長所である高時間分解能(1μsec)を利用して径方向輸送を解析する。LHD装置への適用も進め、オーバーデンスプラズマでの電子温度分布計測を行う。
造血器腫瘍細胞における転写因子異常が発症及び進行に及ぼす影響

【目的】cAMPresponseelementbindind protein(CREB)は細胞外の種々の刺激によって活性化される転写因子であり、細胞の増殖や分化、適応の過程などにおいて重要な役割を果たす。また、CREBはTリンパ球の分化増殖などにも重要な働きがある事も報告されている。造血器腫瘍の生命予後は、化学療法の進歩や造血幹細胞移植の導入により飛躍的に改善している。現在、造血器腫瘍は形態学的な特徴等に基づいて分類され、療法が選択されている。しかし、同じタイプの病型であっても、化学療法剤の反応性、副作用、骨髄移植の定着率、再発における個人差が非常に大きい。しかし、こうした個人差をもたらす要因については、十分に解明されていない。そこで今回我々は、造血器腫瘍の細胞株及び白血病患者を対象にCREB遺伝子の発現を調べた。【対象及び方法】造血器腫瘍の細胞株であるJCRB、K562、CIRF、RAJI、THP1(急性単球性白血病)、SKMI(骨髄異型性症由来急性骨髄性白血病)とインフォームドコンセントを得ている白血病患者の骨髄血中のCBRE遺伝子の発現をreal time PCR法により定量的に解析を行った。【結果及び考察】造血器腫瘍の細胞株では、CREB遺伝子の発現は細胞種によって特異的な発現をすることが確認できた。また、急性骨髄性白血病(AMLM2)では、発症時に比べ寛解時では低値傾向を示し、一方、急性前骨髄性白血病(AML M3)では、発症時に比べ寛解時では高値傾向を示した。また、発症時では、AML M2がAML M3より高値傾向を示したが、寛解時では差は見られなかった。これらの事より、CREB遺伝子は白血病では病型特異的な発現を示し、治療により遺伝子の発現は変化することが確認できた。【目的】cAMP response elementbindind protein(CREB)は細胞外の種々の刺激によって活性化される転写因子であり、細胞の増殖や分化、適応の過程などにおいて重要な役割を果たす。
高血圧関連遺伝子ATP2B1の腎機能および尿細管における意義に関する研究

我々は、ミレニアムゲノムプロジェクトにおいて、ATP2B1遺伝子が高血圧との関連で重要であることを発見した。ATP2B1は、カルシウムポンプであるPMCA1をコードしているが、血圧との関連は不明であった。そこで我々は、血管壁特異的ノックアウト(KO)マウスを作成し、血圧上昇メカニズムを明らかにした。しかし、高血圧の成因としては、腎臓への影響を明らかにすることが重要である。そこで、本研究では、これらのマウスにおける腎臓の働きを検討するとともに、尿細管特異的KOマウスを用いて、血圧や電解質への影響とともに食塩負荷に対する反応を解析し、ATP2B1の腎臓における意義を明らかにする。