hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ウイルス特異酵素の選択的阻害にもとづく抗ウイルス剤の開発

抗腫瘍抗生物質ストレプトニグリンは種々のレトロウイルスに由来する逆転写酵素を選択的に障害するが,一方で細胞毒性も高い.レトロウイルスに対する化学療法剤の開発を目的として,この抗生物質のC環カルボキシル基における各種アミド・エステル誘導体及び活性中心と考えられるA-B環に構造の類似するキノリンキノン,イソキノリンキノン誘導体の合成を行った(論文:大古瀬ら).逆転写酵素に対する阻害のメカニズムはキノンによる酵素の酸化であり(大古瀬ら),標的部位として酵素分子上の非触媒部位にキノンポケットの存在が推定された(祝ら).エイズウイルス(HIV)とトリ骨髄芽球症ウイスル(AMV)由来の逆転写酵素を比較したところ,いずれもストレプトニグリンやキノン誘導体に高い感受性を示した(武ら).これは逆転写酵素がその由来の如何に係らずキノンポケットを共有しているためと考えられ,エイズウイスルに対する化学療法剤開発へのヒントを与えるものと期待する.ストレプトニグリン及びその誘導体,各種キノン誘導体のフレンド白血病ウイルス(FLV)に対するin vivoでの感染阻止活性を検討したところ,ストレプトニグリンにはそのエステル誘導体に比べてやや広い有効領域が認められた(中村ら).ヒトレプトニグリンの治療効果はウイルス感染直後に開始しても4日後から開始しても変わらず,ウイルス遺伝子の宿主DNAへの組み込みのみならず,既に感染の成立したウイルスの増殖をも阻害しているものと考えられる.これに対して, in vitroで細胞毒性の低いストレプトニグリンのアミド誘導体は抗ウイルス活性も副作用も認めず,これは体内での分解,排泄によるものと考えられる.一般にキノン誘導体は溶解性に問題があり,水溶性を高めるべく置換基の導入などを検討している.抗腫瘍抗生物質ストレプトニグリンは種々のレトロウイルスに由来する逆転写酵素を選択的に障害するが,一方で細胞毒性も高い.レトロウイルスに対する化学療法剤の開発を目的として,この抗生物質のC環カルボキシル基における各種アミド・エステル誘導体及び活性中心と考えられるA-B環に構造の類似するキノリンキノン,イソキノリンキノン誘導体の合成を行った(論文:大古瀬ら).逆転写酵素に対する阻害のメカニズムはキノンによる酵素の酸化であり(大古瀬ら),標的部位として酵素分子上の非触媒部位にキノンポケットの存在が推定された(祝ら).エイズウイルス(HIV)とトリ骨髄芽球症ウイスル(AMV)由来の逆転写酵素を比較したところ,いずれもストレプトニグリンやキノン誘導体に高い感受性を示した(武ら).これは逆転写酵素がその由来の如何に係らずキノンポケットを共有しているためと考えられ,エイズウイスルに対する化学療法剤開発へのヒントを与えるものと期待する.ストレプトニグリン及びその誘導体,各種キノン誘導体のフレンド白血病ウイルス(FLV)に対するin vivoでの感染阻止活性を検討したところ,ストレプトニグリンにはそのエステル誘導体に比べてやや広い有効領域が認められた(中村ら).ヒトレプトニグリンの治療効果はウイルス感染直後に開始しても4日後から開始しても変わらず,ウイルス遺伝子の宿主DNAへの組み込みのみならず,既に感染の成立したウイルスの増殖をも阻害しているものと考えられる.これに対して, in vitroで細胞毒性の低いストレプトニグリンのアミド誘導体は抗ウイルス活性も副作用も認めず,これは体内での分解,排泄によるものと考えられる.一般にキノン誘導体は溶解性に問題があり,水溶性を高めるべく置換基の導入などを検討している.
ヘパラン硫酸の修飾に関わる新規のエンドスルファターゼ遺伝子の生体内機能の解析

スルファターゼの人工基質4-methylumbelliferyl sulfateを用いてSulfataseFP2組換え蛋白質の酵素活性を解析した。その結果、既知のスルファターゼであるArylsulfatase A等が酸性溶液中で活性を示すのに対し、SulfataseFP2は中性溶液中で活性を示した。さらに、その酵素活性はSulfatase Modifying factor 1(SUMF1)によって増強された。次にヘパラン硫酸を基質として用いて、HPLCによる二糖組成解析を行った。その結果、SulfataseFP2はヘパラン硫酸中の6位の硫酸基を分解するエンドスルファターゼ活性を有していたが、N位または2位の硫酸基を化学的に除去したヘパラン硫酸に対しては活性を示さなかった。また、10糖以下の短いヘパラン硫酸に対してもほとんど活性を示さなかった。2、SulfataseFPノックアウトマウスの解析2、SulfataseFP2単独のノックアウトマウスでは脳神経系において著明な形態異常は見つかっていない。特に海馬については、錐体細胞や歯状回顆粒細胞の神経走行、および歯状回顆粒細胞の新生と細胞死についても異常は認められなかった。C57BL/6系統に戻し交配(5世代)させたSulfataseFP1/SulfataseEP2ダブルノックアウトマウスは、ほとんどが生後数日以内に死亡した。生後すぐに脳神経系の形態を調べると一部の個体で著明な脳室拡大が認められた。頭部拡大や中脳水道閉塞が認められないことから、髄液圧亢進によるものではなく大脳皮質の低形成によるものと考えられた。また、成獣まで成長したわずかな個体については、脳梁低形成や小脳皮質低形成が認められるものもいた。
海馬形成における、神経栄養因子としてのDraxinの機能解析

海馬は記憶や空間認知を司る重要な脳組織であるが、歯状回顆粒細胞がこれらの高次脳機能を担っている。以前我々は、軸索ガイダンス分子であるドラキシンを同定し、海馬形成に必須であることを明らかにした。ドラキシン遺伝子破壊マウスでは、死細胞が増加するとともに海馬が萎縮し、海馬機能にも異常をきたす。今回我々は、海馬神経新生におけるドラキシンの役割について解明を試み、以下の結論を得た。(1)ドラキシンはその受容体であるDCCを介し、新生神経細胞の分化の過程で起こり得る細胞死を抑制する、(2)強力な分化誘導能を有するWntの活性を減弱し、神経細胞の分化が適切な速度で進行するよう調節する。Nestin陽性の神経幹細胞および神経細胞前駆体(神経幹/前駆体細胞)を選択的に蛍光標識することが可能なトランスジェニック・マウスを作製し、標識細胞の分化過程を経時的に追跡した。その結果、Draxin KOマウスでは、野生型に比べて、神経幹/前駆体細胞の分化が促進されることが明らかになった。この結果は、Draxinが神経細胞の分化を抑制することを示唆しているが、他方、成体海馬由来の神経幹/前駆体細胞を用いたin vitroの実験においては、Draxinタンパクにより神経細胞の分化が促進された。このように、in vitroおよびin vivoでの実験結果から推察されるDraxinの機能は相反するものであり、今後、どのような解釈が可能か検討する必要がある。我々は、Draxin KOマウスにおいて生じるアポトーシスの増加、それに伴う歯状回顆粒細胞数の減少が、Draxin受容体の依存性受容体としての性質によるものであると予想した。そこで、現在までに報告されているDraxin受容体候補分子に関して、海馬での発現を調べたところ、DCC、Neogeninの2つの分子が歯状回顆粒細胞層周辺で発現していた。これらの分子がDraxin非存在下でその発現細胞に細胞死を引き起こす可能性について検討するため、単離した神経幹/前駆体細胞にDCC、Neogenin発現ベクターをトランスフェクションしたが、有意な細胞死の増加は認められなかった。海馬歯状回では、一生涯にわたって新たな神経細胞が産生される。これらの新生神経細胞は、海馬機能において重要な役割を果たしているが、神経新生の過程に関与する分子、およびその作用機序に関しては不明な点も多い。本研究において我々は、海馬神経新生において、新規反撥性軸索ガイダンス分子として同定されたdraxinが果たす役割について研究を行った。前年度には、draxinノックアウトマウスにおける表現型解析を主に行い、生後、海馬歯状回の発達不全が生じること、それに伴い、神経芽細胞の細胞死が増加することを見出した。以前我々が同定したDraxin受容体候補分子は、リガンド非存在下において、その発現細胞に細胞死を引き起こす「依存性受容体」に属する。よって我々は、draxinがこれらの分子に結合することにより、分化過程にある神経芽細胞の細胞死を抑制しているのではないかと考えた。そこで、本年度は、成体ラット海馬由来神経幹細胞を用いたin vitroの実験系を立ち上げ、その可能性について検討した。栄養物質を含む育成培地中では、細胞死はほとんど認められない。そこで、細胞死が起こりうる条件、つまり栄養物質無添加の培地中で、draxin受容体候補分子の強制発現実験を行った。しかし当初の予想に反し、有意な細胞死の増加は認められなかった。他方、外因性draxinタンパクを培地に添加したところ、顕著に細胞死が抑制されたことから、draxinが細胞生存促進機能を有することが示された。面白いことに、siRNAを用いてこれらの受容体候補分子の発現をノックダウンしたところ、draxinによる細胞生存促進活性が激減した。以上のことから、依存性受容体に属するdraxin受容体は、海馬神経細胞においては細胞死を誘導せず、むしろdraxinシグナルを受容して、同細胞の細胞死を抑制するというメカニズムの存在が明らかになった。神経発生科学研究計画書に挙げた実施予定の実験3項目のうち、1項目はすでに終了し、その他2項目についても結果が出始めている。よって研究は順調に進展していると判断した。Draxin受容体候補分子の中から、DCCおよびNeogeninを選択し、これらの分子が依存性受容体としての性質を示すかどうかin vitroで検証したが、結果はネガティブであった。他の受容体候補分子であるUnc5ファミリーも顆粒細胞系譜で発現していることから、今後、これらの分子に関しても検討を行う。in vitroの実験系では、細胞を様々な栄養物質を含む培地で培養するため、これらの物質が依存性受容体を強制発現させた細胞の細胞死を抑制している可能性がある。

そこで様々なDraxin受容体をコードするレトロウイルスを作製したのち、直接海馬に注入することで強制発現させ、過剰な細胞死が誘導されるかどうか、in vivoレベルでも調べる。当初の計画では、Amaxa社の遺伝子導入装置を新規に購入し、各種Draxin受容体候補分子をコードする発現ベクターを海馬由来神経幹細胞に導入する予定であったが、デモ機を用いた予備実験では、解析を進めるのに十分な遺伝子導入効率が得られなかった。そこで、代替となるその他のトランスフェクション方法を探す必要があったため、in vitroでのトランスフェクション実験に関しては、計画どおりに実験を進めることができなかった。それにより次年度使用額が生じることになった。効率よく海馬神経幹細胞に外来遺伝子を導入する方法を見出したので、昨年度中に行うことができなかったトランスフェクション実験の続きを今年度に行う予定である。昨年度の繰越金40万円は、この実験を実施するための消耗品に充てる。
定量脳波とP300による座禅の神経生理学的研究

曹洞宗の僧侶20人(修行歴1040年の10人と修行歴5年未満の10人;それぞれM、D群)と坐禅の経験のない医師10人(C群)を対象に、坐禅中の脳波およびP300の変化を検討した。視察脳波では、坐禅を開始すると開眼のままでalpha波が出現し、さらに瞑想が深まるにつれ、より遅いalpha波あるいは前頭部に優勢なtheta波が観察された。alpha波の変化が、修行歴に関係なくすべての群の大部分に認められたのに対し、theta波の出現はC群にはみられず、M群の6人とD群の4人に観察された。脳波定量分析では、坐禅開始前の開眼安静状態、坐禅開始5分後、25分後の各記録時期の脳波を解析した。修行歴とstateについて、2元配置ANOVAを行い、相互作用がtheta2(FP1,F3,T5)、theta3(FP1,F3,T6)、theta2(FP1)に認められた。さらに下位検定より、修行歴の長い僧侶ほど、坐禅が深まるにつれ、theta2、theta3が著しく増加し、alpha2の増加の程度が抑制されることが示された。theta波は傾眠・睡眠期以外にも、暗算・想起など課題遂行時の精神作業中に起こりやすく、無課題でも考え事に没頭した時や問題解決の時などに出現すると報告されている。坐禅は静坐して雑念を追わず、注意を内部へ集中させる努力を続け、無我の境地に自然に達するような修行である。本研究で観察されたtheta波は、修行歴の長い僧侶ほど、坐禅の時間的系かにつれて多く出現し、修行によってもたらされた坐禅の本質、すなわちリラックスしながらも過度な緊張の保たれ、かつ意識の集中の高まった精神状態を反映していることが示唆された。さらに、坐禅中の認知機能・注意力の高さなどについて、認知機能の客観的指標として注目されているP300を用いて検討した。瞑想を妨げずに坐禅中にも適用が可能と考えられる受動的課題(sequence課題)を用いた。P300の潜時と振幅は、3群とも坐禅前と坐禅中で差がなかった。以上により、P300の結果は、theta波が有意に増加した坐禅中にも認知機能は低下することなく、坐禅前と同じ一定のattentionが保たれることを反映していると考えられた。
Cdk5の活性制御機構及び機能の解析

サイクリン依存性キナーゼ5(Cdk5)は分裂を停止した神経細胞でのみ活性が検出される特異的なサイクリン依存性キナーゼであり、近年同定された活性化サブユニットであるp35によって主に活性は制御されている。しかし、どのような細胞シグナル伝達経路でp35の発現が制御されているかについてはほとんどわかっていなかった。我々は最近、ラット副腎髄質褐色細胞腫由来細胞株PC12細胞を用いた研究により、ERKが早期応答遺伝子の一つEgr1の発現を介してp35の発現を誘導することを明らかにした。しかし、突起伸長においてCdk5が果たす役割に関しては依然として明らかになっていない。本年度我々は、Cdk5の標的遺伝子のクローニングを目的として、Cdk5とp35をベイトとしたThree-hybrid screeningを行った。しかしながら、これまでのところ、興味深いクローンを得ることができなかった。そこで新たにJNK経路に関する研究を行った。JNKは様々な物理化学的ストレスまたは炎症性サイトカインによって活性化することが知られているMAPキナーゼファミリーの一員である。JNK経路の活性化機構には依然として不明な点も多い。本年度我々は、JNK経路の新規活性化因子としてAKRL1及びAKRL2(Akr1p like 1 and 2)を同定した。AKRL1及びAKRL2はN端に5つのアンキリンリピートとC端に6つの膜貫通ドメインとDHHC型のシステインリッチドメインをもち、分裂酵母のエンドサイトーシスに関わる遺伝子であるAkr1Pとアミノ酸配列上で約30%の相同性を示した。AKRL1及びAKRL2を細胞に発現させると、MAPキナーゼファミリーのうちJNKが特異的に強く活性化した。またAKRL1及びAKRL2はJNKの活性化因子であるMKK4及びMKK7を活性化し、AKRL1及びAKRL2によるJNKの活性化はMAPKKKファミリーの一員であるTAK1のキナーゼネガティブ変異体の共発現によって抑制された。さらにAKRL1及びAKRL2はゴルジ体に局在し、この局在にはC端の膜貫通ドメインが重要であることを示した。そしてAKRL1及びAKRL2によるJNKの活性化には、N端及びC端の膜貫通ドメインが必要であることを示した。
マイクロ波を使用した瞬間湯沸かし器の試作

○研究目的:電子レンジ等でその熱源として用いられているマイクロ波を、瞬間湯沸かし器の熱媒体として使用することで、環境にやさしい省エネルギーな新しいタイプの瞬間湯沸かし器を作製する.○研究方法:まずマイクロ波を安全に制御できる構造をもつ、マイクロ波誘電加熱装置を構築する。次に導波管内に冷水を入れたポリプロピレン(以下、PPと称す)製の容器を挿入し、一定電力下で一定時間マイクロ波を発生させて水の温度上昇を測定し、加熱の理論式を用いて加熱効率を導出する。さらに導波管にチューブを通す穴を設け、チューブに水を一定時間流して、水の温度上昇を測定し、加熱効率を求める。実験は、流水量一定のもとでマイクロ波電源の電力量と加熱時間を変化させて行い、より短時間で温度上昇が見込める最適値を決定する。○研究成果:マイクロ波誘電加熱装置はマイクロ波電源部とマイクロ波発振器からなっている。発振器は発振部から方向性結合器(入射電力観測用)、アイソレータ、方向性結合器(反射電力観測用)、EHチューナー、導波管の順につなぎ、終端はプランジャーを用いた構成とした。また導波管に作製する穴の位置は、電場の最も大きいところに非加熱物を設置すれば瞬間的な加熱が可能だと考えられるので、計算から導波管の中央部とした。最初の加熱実験での加熱効率は、PP容器と四フッ化エチレン樹脂(以下、PTFEと称す)製のチューブとでは共に60%程度であった。しかし実際の上昇温度は、PP容器は水が溜まっている状態なので任意に制御できるのに対し、PTFEチューブは水が流れているため、最大でも8°Cと低い値に止まった。PTFEチューブでの実験では、穴と穴との間を直線すなわち最短距離で通していた。この場合、マイクロ波の照射面積が少ないために反射波が多くなったと思われる。そこで導波管内のチューブの面積をより大きくするために、PTFEチューブのかわりに柔軟度の高いナイロンチューブを管内に巻き入れて、実験を行った。しかし加熱効率は約50%と逆に低下し、温度上昇は最大75°Cであった。その原因として、マイクロ波エネルギーの吸収が多すぎたことなどが考えられる。研究は緒についたばかりである。今後より適切なチューブの材質および直径等に検討を加えて、水の温度上昇が高い条件を確立していく予定である。
言語・感情・運動反応を持つロボットとの言語習得:対話相手に理解される事は必要か

本研究は元来の目的は、第一義的には、従来の多くのL1,L2学習用教材が、認知面を中心とするコンピュータソフトであるのに対し、喜怒哀楽の情意面の反応が相対的に豊かで、音声による対話と実際の移動や四肢の上下運動が可能であるロボットを使用することの可能性を探求することである。第2は、インプットと並んで、L1・L2習得に重要とされてきた(対話相手に)理解可能なアウトプットに関して、ロボットの使用で、真の意味ではアウトプットを理解しえない相手の場合を設定することでより重要なのは対話相手に理解されたと学習者が認識することではないのかという仮説を検証することである。しかし、試験的運用の結果から、幼児や児童を中心とした実験参加者に対して、ロボットの移動や運動による不慮の事故の可能性が否定しきれないため、対象を暫定的に大学生以上の学習者とし、目的も、L2学習へのロボットの応用の基礎研究とし、人間を相手とした場合との比較により、ロボットを対象とすることの特徴を探求することにシフトした。昨年度、学習者の反応を、主として、視線行動を中心に分析した結果、ロボットを擬人化する程度により、視線行動に対人・対ロボットで異同が見られた。本年度は、同様の実験を、主として脳血流にみられる違いから探求した。また、擬人化の度合いも昨年度同様に調査した。しかし、データの分析は脳血流測定装置の調達の都合、および、実験参加者、協力者の動員の便宜から、本年度3月に主たる実験を行わざるをえなかったので、現在進行中である。予備的分析からは、擬人化の程度は、昨年度と比較してやや弱く、自分の発話をロボットが理解していると認識する度合いも低い傾向が見られる。また、視線行動と同様、擬人化の程度により、対人コミュニケーションに類似するパターンと、その逆のパターンの存在が示唆される。ただし、詳細は今後のデータ解析の結果による。初年度は、想定外の事態として、本研究で、最も主要な装備の一つである国内仕様(日本語対応)のロボットの内、自走・運動機能を含むものが、安全上の潜在的危険性への配慮からメーカーによる販売が中止されるという状況が発生した。そのため、その対応に苦慮したが、種々の交渉の結果、ようやく年度の後半に入り、研究用に特別に注文するという形でメーカに受注生産してもらい、入手することができた。そのため、年度後半は、実験計画の練り直しと、研究者の関係者をパイロットスタディでの実験参加者として、安全性の確認を主として行った。その結果、1つには、実験風景の全景と実験参加者の表情を同時に計測するには、特に、移動型の場合、一台のカメラだけでは限界があることが判明した。従って、この点については、平成19年度に追加してビデオカメラを購入する予定である。また、言語認識機能については、現行機種は音声認識は、実験参加者の発話のタイミングとロボットの音声認識のスタンバイがずれることがあり、それにより、音声認識率が変動するので、場合によっては実験参加者にその点への注意を促す必要があることも判明した。また、ロボットが対応出来る語彙の内、移動系の動詞が必ずしも十分とは言えない可能性もあるが、これに関しては、対応可能語を研究者側が変更できる可能性もメーカー側より示唆されたので、この点も継続交渉中である。なお、実験参加者募集についても、安全面での配慮を当初の想定より、なお、慎重にする必要がでてきたため、当初計画を修正し、自宅への貸与の部分を縮小し、本学に定期的に来校できるということも、新たな条件にして再募集をかけ、複数の候補者と予備的な交渉を始め、現在も折衝中である。本研究は、根本的には、言語習得の一環として、自らのアウトプットが理解されることの意義の解明を目指している。その、一ステップとして、本年度は、コミュニケーションの対象がロボットである場合、対象が人間である場合と比較して、どのような違いがあるかを、視線行動における対象への注視点を中心に、分析を試みた。具体的には、視点記録用のモニター上に、対話の相手として、ロボットが提示される場合と、人間が出現する場合の2種類を用意した。使用言語は日本語、会話の内容は、ロボットの発話を、文字化したものを、対象が人間のときも、共通に使用した。また、実験参加者は、年齢(学部学生)、性別(女性)、専攻分野(人文社会系)等で、可能な限り統制した。そのうえで、注視点の領域を、対象の目、口、それ以外の顔、その他に大別して、各領域の集中度を測定した。あわせて、ロボットに関する実験協力者の主観的認識も調査した。当初の予想では、対象の違いにより、各領域への集中度に差がでること、および、日本語でも、目(およびその周辺)は、相対的に最も、注視されるものと想定していた。しかし、結果は、ロボットに対する実験参加者間の擬人化の度合いが大きく影響した。即ち、ロボットに対する擬人化の度合いが強い場合は、対象が人間であるときと、注視点の領域については、あまり差がみられないのに対し、擬人化が弱い場合は、ロボットに対する視線行動は、対象が人間である場合とは、異なる様相を呈した。このことから、今後は、擬人化の程度も統制するべき変数として、一層、配慮する必要があることが示唆された。また、領域間においては、予想に反して、総じて、目の領域よりも、口の領域の方が、対人・対ロボットとも、相対的集中度が高かった。このことは音声認識におけるマガーク効果の存在を支持するものと解釈される。

本研究は元来の目的は、第一義的には、従来の多くのL1,L2学習用教材が、認知面を中心とするコンピュータソフトであるのに対し、喜怒哀楽の情意面の反応が相対的に豊かで、音声による対話と実際の移動や四肢の上下運動が可能であるロボットを使用することの可能性を探求することである。第2は、インプットと並んで、L1・L2習得に重要とされてきた(対話相手に)理解可能なアウトプットに関して、ロボットの使用で、真の意味ではアウトプットを理解しえない相手の場合を設定することでより重要なのは対話相手に理解されたと学習者が認識することではないのかという仮説を検証することである。しかし、試験的運用の結果から、幼児や児童を中心とした実験参加者に対して、ロボットの移動や運動による不慮の事故の可能性が否定しきれないため、対象を暫定的に大学生以上の学習者とし、目的も、L2学習へのロボットの応用の基礎研究とし、人間を相手とした場合との比較により、ロボットを対象とすることの特徴を探求することにシフトした。昨年度、学習者の反応を、主として、視線行動を中心に分析した結果、ロボットを擬人化する程度により、視線行動に対人・対ロボットで異同が見られた。本年度は、同様の実験を、主として脳血流にみられる違いから探求した。また、擬人化の度合いも昨年度同様に調査した。しかし、データの分析は脳血流測定装置の調達の都合、および、実験参加者、協力者の動員の便宜から、本年度3月に主たる実験を行わざるをえなかったので、現在進行中である。予備的分析からは、擬人化の程度は、昨年度と比較してやや弱く、自分の発話をロボットが理解していると認識する度合いも低い傾向が見られる。また、視線行動と同様、擬人化の程度により、対人コミュニケーションに類似するパターンと、その逆のパターンの存在が示唆される。ただし、詳細は今後のデータ解析の結果による。
Affect burst―音声対話における無意識な感情表出の分析および合成

(1)叫び声を誘発しやすいオンラインゲームをプレイする状況のコーパスを開発した。このコーパスには既存コーパスの10倍以上の頻度で叫び声が含まれている。叫び声の音響分析により、通常語彙や感動詞との音響的特性の違いを明らかにした。(2)感情表出系感動詞の形態を分類し、多様な形態を持つ「あ」を合成した。合成音声を用いた知覚実験により、形態とパラ言語情報との関係を明らかにした。(3)自然対話コーパスから笑い声の構成要素の変動要因を明らかにするとともに、コーパスベース音声合成を応用した多様な笑い声合成を実現した。知覚実験により、定義した変動要因を考慮することにより自然性が向上することがわかった。(1)感情表出系感動詞感情表出系感動詞に対する概念的/操作的定義を与えた。1)認知・感情状態の変化を示す2)非語彙的3)オプショナルではない4)多くは発話先頭に来る-この定義を基に、UUDB 4840発話に対して766の感情表出系感動詞を同定した。書き起こしレベルでの出現頻度を調べた結果、「あ」「え」「ああ」「ん」だけで全体の80%を占めていた。これは、感情表出系感動詞と統語的に類似した性質を持つフィラーと比べ、顕著に多様性が低いという結果であった。次に、基本的な音響的特性の検討のため、UUDB中の感情表出系感動詞766、およびフィラー585に対し、時間情報のアノテーションを実施した。基本周波数および強度は、全体として感情表出系感動詞の方がフィラーに比べ平均値が有意に大きかった。母音性の感情表出系感動詞のフォルマント周波数を分析したところ、/a/がほかの母音と異なり知覚される感情状態との相関が有意であった。これは、「あ」が感情表出系感動詞の中でもパラ言語情報伝達に関与する特異な表現であることを示唆した結果と解釈できる。(2)笑い声笑い声の基本的な音響的特性の検討のため、UUDB中の笑い215に対し、以下のアノテーションを実施した。1)Boutおよび吸気音ラベル2)Boutの音声学的転記-これらのデータを基に、UUDB中の笑い声の特性を検討した。その結果は以下のようにまとめられる。1)ほとんどの笑いは単一boutからなる。最も長い笑いは4個のboutからなる。2)Boutを構成するcall数は、1から4までが多い。3)30%強を占める単一callから成るboutのうち、半数以上は全体が無声であった。これに対し、複数callからなるboutのほとんどは有声callを含んでいた。すなわち、boutの構造に関する非対称性が存在していた。4)callの素性としては、90%以上が口音であり、80%が有声であり、u系、a系、e系の順に多かった。(2) UUDBおよびOGVCに対するaffect burstのアノテーションUUDBについては、感情表出系感動詞(765箇所)、笑い声(280箇所)、叫び声(4箇所)を同定した。また、OGVCについては、笑い声(1593箇所)、叫び声(53箇所)を同定した。当初の予想に反して、これらのコーパスに含まれる叫び声が少なく統計処理が困難であることがわかった。このため、叫び声を誘発しやすいタスク設定、および対話の収録を行った。具体的には、分離された防音室内で学生同士がオンラインゲームをプレイする状況のコーパスを収録した。対話参加者は女性12名男性4名で、収録された対話は15セッション計8時間22分である。新たに構築したコーパスに対するアノテーションの結果、302箇所の叫び声を同定することができ、構築したコーパスにより叫び声を収集することが有効であることがわかった。感情表出系感動詞を聴覚的に分類し、強-弱、長-短、口音-鼻音の各軸により形態的特徴を記述した。次に、これらの分類と音響的特徴との関連を統計的に分析した。その結果、継続時間、強度およびF0に関して、音響的特徴の分布が聴覚的分類の違いを反映していることが明らかとなった。また、笑い声については1 bout (ひと続きの笑い)あたりのcall(音節)数、およびそれらと有声/無声の分布の関係、各callの素性の分布などの観点から形態的分類を行い、単一callからなるboutは無声の割合が多いことを明らかにした。27年度に叫び声のサンプルに関する予期しない事態が発生したため、28年度に研究を繰り越した。この点を除けば、当初の計画はほぼ達成された。対話中に生じる笑い声の統計モデルを構築するため、UUDBおよびOGVCに含まれる笑い声の詳細なセグメンテーションを行った。笑い声の構造は、音節に対応するcall, 1つ以上のcallから成り1回の呼気に対応するbout, boutおよび吸気の連続からなる1連の笑いエピソードのように、階層的に理解される。本年度は、各笑いエピソードに対してbout/吸気およびcallレベルのセグメンテーションを行った。各boutの特徴は、「ハ」「フ」などの日本語の音節による表記を基本にし、有声/無声、鼻音、引き伸ばしなどのバリエーションを補助記号で記述することにより行った。笑い声の合成方式にはHMM音声合成を採用し、先行/後続セグメントやcallの位置などの情報からなるコンテキストを定義してモデル化を行った。

UUDBおよびOGVCに含まれる3名の笑い声109 boutsを用いてモデル学習を行い、笑い声合成を行った。合成された笑い声の品質は9名の学生による自然性評価実験によって確認した。その結果、5段階のMean Opinion Scoreによる評価で2.83が得られた。また、位置の情報を考慮したコンテキストが自然性の向上に有効であることがわかった。笑い声の特徴の違いが笑い声を含む発話に印象に与える影響を調べるため、(5)で実現したHMM笑い声合成のコンテキスト情報を操作した刺激を作成し、そこから知覚されるパラ言語情報の違いを調べる知覚実験を行った。操作したコンテキストは、母音種の違い(/a/ vs /u/)、およびピッチの変化パターン(下降後に低、上昇後に高、高、低)である。実験の結果、/a/系の笑い声は/u/系の笑い声と比べ快寄りかつ覚醒寄りに知覚される傾向が得られた。ピッチの変化パターンについては、/a/系では影響がなく、/u/系では低パターンが他のパターンに比べ不快寄りに知覚される傾向が得られた。以下の計画は、今年度中に十分に達成できなかった。(i)今年度は27年度計画を繰り越して叫び声コーパスの収録を実施したが、収録および基本的なコーパス整備が遅れている。このため、叫び声の音声学的分析に至らなかった。(ii)Affect burst音声の知覚実験について、合成笑い声を使った実験は実施したが、自然音声を使った実験の良い方策が見つからなかった。(iii)感情表出系感動詞の合成については、モデル化の方法に問題があり、高品質な合成音声が得られなかった。(1)感情表出系感動詞の形態と知覚の関係昨年度までにUUDBに付与した感情表出系感動詞の形態ラベル(強-弱,短-長-超長,口-鼻)に基づき、女性話者1名のデータから感情表出系感動詞「あ」を合成するためのモデルを構築した。次に、感動詞の合成音声から知覚されるパラ言語情報、および文脈への適合性を評価する知覚実験を行った。被験者8名に合成音から知覚されるパラ言語情報を「気づき」「理解・同意」「驚き」「意外」「戸惑い」「落胆」「聞き返し」「否定的態度」「フィラー」から選択させる知覚実験の結果、「あ」からは全般に「気づき」「理解・同意」が知覚されやすいこと、短-長に関する形態の違いが「気づき」「理解・同意」の知覚に影響を与えていること、「驚き」の知覚には強の形態であることが必要なこと、などがわかった。また、元の文脈におけるパラ言語情報と非整合的な形態の合成音は整合的な場合に比べ自然性が低いと知覚されることがわかった。(2)叫び声研究のためのコーパス構築および分析叫び声がコミュニケーション場面の中でどのような役割を果たしているかを明らかにすることを目的とし、ゲーム中の音声チャットを収録した対話コーパスを構築した。コーパスの規模は男性12名女性12名で、のべ収録時間は888分である。収録した音声に対し書き起こしを行うとともに、昨年度までに検討した定義に基づいて叫び声の同定を行った。収録したコーパスが含む14124発話の中に叫び声は1427個出現していた。これはOGVCの10倍以上の頻度であり、本研究におけるコーパス設計が叫び声の誘発に有効であったことを確認した。
有機炭素資源の高付加価値化合物への変換のための高選択的酸素酸化反応システムの開発

チトクロームP-450は、分子状酸素を直接活性化して酸素分子を基質に導入し、種々の重要な生体内酸化反応に関与している。その広範な触媒作用は有機炭素資源の高付加価値化合物への変換にとって極めて重要である。このP-450の系では酸素分子活性化のため二電子を必要とし、天然系ではフラボ蛋白が電子移動触媒として機能している。そこで従来から開発してきた「水溶性ポルフィリン-マンガン錯体-還元剤」から成る人工P-450システムにおける最も遅い反応であるマンガン(【III】)のマンガン(【II】)へのメチルニコチンアミドによる還元反応に対するフラビンモノヌクレオチドの触媒活性を検討し、1600培の加速効果を見出し、天然のP-450酵素の必須成分と1:1に対応する完全人工触媒系を構築することに成功した。このニコチンアミド-フラビンモノヌクレオチドから成る新しい電子伝達システムを用いて、シクロヘキセン,ネロールに対するエポキシ化反応を検討し、人工酸素活性化システムについて従来報告されている値の最高の触媒循環数と循環速度を達成した。本研究で開発した触媒システムの最も重要な特徴は、生成物生産に寄与しない触媒の非生産的還元に対するエポキシ化反応の割合が格段に増大した点で、これは第一番目の電子移動によって生成したマンガン(【II】)酸素錯体への第二番目の電子移動(律速段階)が溶媒ケージの中で非常に速やかに起っていると共に、生成してマンガン(【V】)オキセンへの第三番目の電子移動が、ケージ外から別のニコチンアミド分子の拡散を必要とし抑えられることによるもので、触媒効率を高める原理を見出した。また酸素活性化に隣接して、基質認識点を有するさらに高度の触媒系を構築するために、α-シクロデキストリンの隣接グルコースユニットに、ポルフィリンとフラビンのそれぞれ酸化触媒及び還元触媒中心を有する化合物の合成を行った。
妊娠末期に起こる発熱抑制メカニズムの解明-脳内プロスタグランジン系を中心として-

出産直前の妊娠動物では発熱が起こりにくい事が知られている。実験的に外因性或いは内因性発熱物質を出産直前のヒツジ、ギニピッグ、ラットに投与しても、発熱は起こらない。発熱は発熱物質が脳内でプロスタグランジン(PG)Eの産生を促進し、そのPGEを体温調節系の神経細胞が受容し、体温調節遠心路を介して末梢器官で熱産生を促進し、かつ熱放散を抑制することによって起こる。しかし、妊娠末期の動物で、これらの発熱発現過程のどの段階が抑制されるのかは明らかとされていない。そこで本研究では、妊娠ラットをモデルとして、妊娠末期におこる発熱抑制が発熱過程のどの段階に原因があるのかを明らかにする目的で研究を行った。妊娠末期のラットにLPSを投与したが、発熱が抑制された。その時の脳脊髄液中のPGE_2を測定すると、LPSによる増加が非妊娠ラットと比べて少なかった。さらに、PCE_2合成に関与するシクロオキシゲナーゼ2(COX-2)の視束前野及びその近傍のくも膜下腔での発現を調べたところ、LPSにより誘導されたCOX-2陽性細胞の数が非妊娠ラットの場合と比べて有意に減少していた。また妊娠ラットでは、細菌性発熱の減弱反応と同様に、カラゲニン皮下注射による炎症性発熱も抑制された。この時の妊娠ラットの脳脊髄液中のPGE_2の増加は非妊娠ラットと比べて少なかった。一方、妊娠ラットと非妊娠ラットの脳内PGE_2受容体の密度には差は認められなかった。妊娠ラットの脳内にPGE_2を投与すると発熱が起きることを考え合わせると、PGE_2受容体以降には妊娠、非妊娠ラットで差がないことが明らかとなった。従って、妊娠末期ラットにおける発熱反応の減弱はPG産生系の抑制が関与しているといえる。また妊娠末期に発熱が起こらないことが、胎児の生存に有利に働いている事が示唆されている。その時の脳脊髄液中のプロスタグランジンE_2(PGE_2)を測定すると、LPSによる増加が非妊娠ラットと比べて少なかった。さらに、PGE_2合成に関与するシクロオキシゲナーゼ2(COX-2)の視束前野及びその近傍のくも膜下腔での発現を調べたところ、LPSにより誘導されたCOX-2陽性細胞の数が非妊娠ラットの場合と比べて有意に減少していた。以上のことから、妊娠末期ラットにおける発熱反応の減弱は、PG産生系の抑制が関与していることが明らかとなった。実験的には外因性或いは内因性発熱物質を出産直前のヒツジ、ギニピッグ、ラットに投与しても、発熱は起こらない。

発熱は発熱物質が脳内でプロスタグランジン(PG)Eの産生を促進し、そのPGEを体温調整系の神経細胞が受容し、体温調整遠心路を介して末梢器官で熱産生を促進し、かつ熱放散を抑制することによって起こる。しかし、妊娠末期の動物で、これらの発熱発現過程のどの段階が抑制されるのかは明らかとされていない。そこで、本研究では、妊娠ラットをモデルとして、妊娠末期におこる発熱抑制が発熱過程のどの段階に原因があるのかを明らかにする目的で研究を行った。妊娠末期のラットにLPSを投与したが、発熱が抑制された。その時の脳脊髄液中のPGE_2を測定すると、LPSによる増加が非妊娠ラットと比べて少なかった。さらに、PGE_2合成に関与するシクロオキシゲナーゼ2(COX-2)の視束前野およびその近傍のくも膜下腔での発現を調べたところ、LPSにより誘導されたCOX-2陽性細胞の数が非妊娠ラットの場合と比べて有意に減少していた。また妊娠ラットでは、細菌性発熱の減弱反応と同様に、カラゲニン皮下注射による炎症性発熱も抑制された。この時の妊娠ラットの脳脊髄液中のPGE_2の増加は非妊娠ラットと比べて少なかった。一方、妊娠ラットと非妊娠ラットの脳内PGE_2の受容体の密度には差は認められなかった。妊娠ラットの脳内にPGE_2を投与すると発熱が起きることを考え合わせると、PGE_2受容体以降には、妊娠、非妊娠ラットで差がないことが明らかとなった。従って、妊娠末期ラットにおける発熱反応の減弱はPG産生系の抑制が関与しているといえる。
生活排水への負荷低減のための洗浄システムの開発

汚れのない清潔な生活は、われわれに快適さと健康をもたらすが、「洗う」という行為によって排出された水が環境を汚染しているのは非常に残念な現象である。衣服の洗浄もまた生活排水を汚染し、環境に負荷を与えることになる。本研究はこれらの目的に沿って、生活排水への負荷を低減するために、衣服の洗浄システムの見直しと新システムの開発を行うものである。各研究者がこの目的に向かって、洗浄に関わる主要素である、洗浄剤、洗浄助剤、被洗物、洗浄用水、洗浄溶剤について分担研究を行い次の結果を得た。まず、環境負荷の低減のための洗浄剤と洗浄助剤の開発および有効利用について、酵素の効果を確認した。また高分子ビルダー、漂白剤を配合させることにより界面活性剤を減量することができた。その折の触媒の開発についても研究を行った。次に被洗物の改良に注目し、各種防縮加工を行った羊毛の水系洗浄について効果を得た。また、洗浄用水および洗浄溶液の改良により油性汚れに対して洗浄効果を上げることができた。これらの総合的な研究プロジェクトの成果により、洗浄による生活排水への負荷を低減することが可能となった。目的衣服の洗浄が生活排水を汚染し、環境に負荷を与えているという問題の解決のため、本研究は、衣服の洗浄システムを見直し、新システムの開発を行うことにより、生活排水への負荷を低減するために総合的に行った。洗浄機構を捉え直し、洗浄に関わる主要素(洗浄剤、洗浄用水、被洗物、漂白剤、非水洗浄)の再構築を図ることを目的とした。方法洗剤の開発に於いては、従来の合成洗剤に変わる環境負荷の少ない酵素を利用した洗剤の開発のために、水晶振動子を用いて酵素の洗浄への寄与を検討した。また、生分解性に優れる機能性高分子ビルダーを開発し、そのカルシウム補足能および油性汚れ、固体粒子汚れに対する乳化・分散能について研究した。洗浄用水の改良については、洗剤を用いない水系洗浄の油性汚れの除去について、新型洗濯機及び水質分析計により水質改善、超音波の使用、浸透イオン洗浄等を通して検討した。一方、洗浄用水の改良の点からは、水洗い対応加工を付与した諸種の羊毛加工布を用いて汚染性、洗浄性の検討を行った。さらに漂白剤の有効利用として、洗剤に漂白剤を配合することにより、洗剤の使用量を低下させ、その場合の排水への影響を調べた。また、酵素の有効利用についても検討した。加えて、非水系洗浄溶剤の改良については、水系に近い新規な洗浄溶剤として各種、水/アルコール系混合溶剤廃液の浄化を検討した。結果酵素を使用した洗浄、高分子ビルダーの開発、素および触媒を併用した殺菌、色素汚れ除去、脂質二分子膜の利用、水質の改良、超音波、浸透イオン洗浄、各種加工を施した羊毛の水系洗浄、水/アルコール系混合溶剤を用いた洗浄について、それぞれ生活排水への負荷を小さくする結果を得た。さらに次年度により詳細な検討を行い、洗浄による生活排水への負荷を低減する方策を提案する計画である。
ディフィシル菌の毒素産生を増強させる菌体内制御因子の解明

ディフィシル菌の毒素産生が著しく増強するビオチン欠乏条件下では,毒素タンパクの他に140kDaタンパクの発現が増強する。このタンパクをコードする遺伝子をクローニングして塩基配列を解析したところ,本タンパクはプリン生合成経路のある段階を触媒する酵素であることが判明した。サザン解析の結果,本酵素の遺伝子は1ゲノムにつき1コピーのみ存在することが分かった。また,ディフィシル菌の有毒株および無毒株合計104株についてPCR法にて当該遺伝子の有無を調べたところ,毒素産生性とは無関係に全ての菌株が本酵素の遺伝子を保有していることが分かった。本酵素タンパクのN末側部分に相当する組換えポリペプチドをマウスに免疫してポリクローナル抗体を取得し,菌体タンパクに対してウエスタンブロッティングを行ったところ,予想された140kDaタンパクのみが認識された。また,本酵素はビオチンが十分に存在する培養条件下では,対数増殖期にわずかに発現しているのみであったが,ビオチン欠乏下では定常期以降も高発現していることが分かった。細胞分裂時にはゲノムの複製やリボソームの分配などの目的のために多量の核酸が必要であるため,対数増殖期にプリン生合成が活性化されることは理に適っている。しかしビオチン欠乏条件下では,それ以外の時期にも本酵素が高発現しており,何か特別な意味を有しているものと考えられた。そこで,当該酵素の活性を特異的に阻害する薬剤を培地に加えたところ,ビオチン濃度とは無関係に毒素産生の増強が見られた。以上の結果から,ビオチン欠乏条件下では何らかの原因で本酵素の活性が抑制され,その結果毒素産生の増強が起こっているものと考えられた。また,本酵素の抑制に抵抗するために本酵素の発現量が上昇したものと考えられた。ビオチン欠乏時の毒素産生増強効果(ビオチン効果)が最も顕著な菌株であるClostridiumdifficile KZ1647を用いて毒素産生増強機序の解析を行った。1.通常のビオチン濃度(50nM)とビオチン効果発現条件である1/1,000倍濃度(0.05nM)に調整した合成培地を用いてそれぞれ培養した菌体内タンパクを、SDS-PAGEにより比較した結果、ビオチン0.05nMの場合にはトキシンAおよびB以外に、少なくとも2種類のタンパク(130kDaおよび145kDa)がより強く発現していることが分った。2.これら二つのタンパクを電気泳動ゲルから抽出、精製し、N末端アミノ酸配列を解析し、130kDaタンパクについては20残基、14kDaタンパクについては19残基を決定した。3.得られたアミノ酸配列を基に、遺伝子のクローニングと塩基配列の決定を行った。130kDAタンパクの遺伝子は、塩基数3537であり、計算上のアミノ酸数1179、分子量は128887であった。一方、145kDaタンパクの遺伝子は、3804塩基から成り、計算上のアミノ酸数1268、分子量は140645であった。いずれの分子量もSDS-PAGEの結果とほぼ一致していた。また、各遺伝子の5'末端側の塩基配列は、N末端アミノ酸配列解析の結果と完全に一致した。4.ホモロジー検索の結果、130kDaタンパクは、ある酸化還元酵素に対して極めて高い相同性を有していた。また、145kDaタンパクは、ある転位反応に関与する酵素に対して高い相同性を有していることが分った。これらのタンパクと、ビオチン欠乏および毒素産生増強現象との関係について、今後さらに解析を進める。
母子栄養環境の客観的評価法の開発と食育による生活習慣病の萌芽期予防に関する研究

妊娠期の栄養状態が児の健康リスクと関係があることから、妊娠期の栄養状態を客観的に評価する方法が重要である。そこで、出産時の胎盤サンプルの脂肪酸に着目し、妊娠期の脂肪酸摂取の客観的な評価から栄養摂取状況の世代間比較を行った結果、胎児期の客観的な栄養状況把握に活用し得る可能性が明らかになったため、リスクのある児での胎児期の栄養環境の評価により、母子に適した栄養環境改善に将来的に寄与すると期待できる。初年度は、産婦人科で出産される母親に同意を頂き、出産時の胎盤サンプルおよび、出産前の母体血を採取し、出産後に妊娠中の食事調査などのアンケートに協力を頂き、特に脂肪酸に着目し、胎盤サンプルや母体血の脂肪酸分析結果と妊娠中の食事との関連について検討を行った。脂肪酸は特に食事の影響が考えられる飽和脂肪酸(S)多価不飽和脂肪酸(P)を中心にS/P比、n-3/n-6比、EPA/S比、DHA/S比、アラキドン酸/S比など比率で評価し、トランス脂肪酸については検出割合について評価した。9月からサンプル回収を行い、協力の得られた100名のうち、全てのデータが揃った98名(31.9±4.4歳)の内訳は、10代1名、20代27名、30代65名、40歳5名であった。出生時体重の平均は3092±392gで、低出生体重児(2500g未満)は5名、2500-3000gは33名、3000-3500gは50名、3500g以上は10名であった。出生時体重や母親の年齢によるグループ分けを行い、血液データとの関係を解析したが、それらとの関係では顕著な差は認められなかった。つわりは98名中85名で起っており、つわりがあった群は有意(p<0.01)に出生時体重が低値を示した。次に、母体血および臍帯サンプルの脂肪酸分析では、トランス脂肪酸が検出出来たのは98名中1名の母体血のみであった。簡易食事評価得点で脂肪酸との相関関係では、妊娠安定期、後期で血中のn-6/Sと有意(p<0.05)の負の相関を認め、胎盤のEPA/Sで妊娠初期、安定期、後期で有意(p<0.05)の正相関を認めた。その他、つわりを強度で評価した数値との関係では、血中、胎盤サンプルのDHA/S比と有意(p<0.05)の負の相関を認めた。以上のことから、胎盤サンプルの脂肪酸が妊娠時の食習慣や状況と少なからず関係があることが示唆された。引き続き、様々な状況下におけるサンプル回収を行い、胎児期の栄養状態(特に脂肪酸)が出生後の児に及ぼす影響について確認できればと期待している。本研究では、母子栄養環境の客観的評価法として臍帯の栄養成分分析を世界に先駆けて企画し、本年と来年の2年をかけて、ご協力頂ける方から生まれた時の臍帯の一部を採取し、本人が胎児期に摂取していたと推定される栄養状態を脂肪酸組成の分析で評価を試みた。このようなデータの集積により母子栄養に影響する時代的、社会的、食環境の変化を明らかにし、将来的に食環境改善による母子栄養環境の改善に貢献することを視野にいれている。本年度、本研究にご協力頂けるよう兵庫県の教育委員会へお願いにあがり、兵庫県下の学校校長へ本研究の説明会開催の依頼書を送付し、開催許可が得られた学校や個人的な関係で説明会が実施できた集団が8か所、研究内容協力依頼のお手紙を保護者へ配布できた学校が3校であった。最終的にアンケート調査およびサンプル採取にご協力頂いた方はのは93名であり、そのうち2名の回収が遅れため脂肪酸分析の実施は91名であった。昨年回収したサンプルと合わせて、現在、解析可能な対象者は141名(平均年齢25.5±14.0歳)、在胎期間39.2±1.5週、出生時体重3075±414.3gであり、低出生体重児は10名(7%)であった。分析した脂肪酸15種類について、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、t-パルミトエライジン酸、パルミトレイン酸、マルガリン酸、ステアリン酸、エライジン酸、t-バクセン酸、オレイン酸、t-リノエライジン酸、リノール酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸の15種類であり、それぞれの脂肪酸について統計解析を進めている段階である。【研究の目的】本研究は、胎児期栄養を科学的に把握できる全く新しい方法として臍帯による分析法を開発し、特に胎児の脳の発生・発達に関わる妊娠期の脂肪酸の摂取状況を把握する方法の検討及び、妊娠期の脂肪酸の栄養状態と児のリスクとの関係を検討し、母子栄養環境改善のための食環境整備や妊産婦への食育に貢献することを目的としている。【方法】前年から引き続き、同意を得た対象者からアンケートとサンプルの一部採取の協力を得、脂肪酸組成の分析を行った。

【結果】2年間かけ、359歳までの男女172名(24.7±14.0歳)の協力を得ることができ、うち26名(21.5±11.6歳)が自閉症スペクトラムと診断されていた.昨年同様、対象者を30歳代以下(Y群)と40歳以上(O群)で比較したところ、検出できた3種のトランス脂肪酸でC16:1、C18:2で世代間の差は認められず、加工段階で作られ一番問題とされるC18:1についてのみY群がO群と比較し、有意(p<0.05)に高値を示した.その他の脂肪酸ではn6、多価不飽和脂肪酸合計、飽和脂肪酸合計で、有意(p<0.001)にY群が高値を示した.次に、自閉症(J群)とそれ以外の群(N群)の比較で、J群で有意に在胎期間(p<0.05)が短く、妊娠中の母親の体重増加(p<0.01)章、少なく、脂肪酸の比較では、トランスの16:1 (p<0.001)とその合計(p<0.001)、EPA (p<0.001)、n6 (p<0.05)でJ群が有意の低値を示し、飽和脂肪酸では自閉症群で高値の傾向(p=0.09)を示した。【考察】出産時保存される臍帯の脂肪酸を分析したところ、食品加工段階で作られるトランス18:1が若い世代で有意に高く、時代的背景の影響を受けていることが考えられ、自閉症スペクトラムではEPA、n6が有意に低く、妊娠期にそのような脂肪酸摂取が少ない可能性が示唆された。多くの方にご協力頂き、研究計画の説明会を幾度となく実施し、中々協力者が得られないながらも、当年度に予定していたサンプル数の回収はできた。しかし、対象者に偏りがあり、特定の疾患保持者からのサンプル回収率が少なめなところが、次年度の課題として残っている。今年度では、昨年回収率の少なかった特定疾患保持者からのサンプル回収を中心に、説明会などを実施予定であるが、中々協力が得られにくいことが考えられる。そこで、今年度は新たに学識経験者でサンプル回収に協力頂ける方にお声かけをし、その方を介して、目標サンプル数の回収および結果の解析が順調に進むようにしていきたい。(抄録なし)