hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
スギ材のセシウム濃度にサイト間差が生じる要因の解明：年輪生態学的アプローチ

スギの幹材のセシウム濃度に個体間差及びサイト間差を生じさせる要因を解明するため、福島県川内村のスギ林2サイトにおいて各サイト15個体を対象として過去の平均肥大成長量、幹材の生材含水率及び安定セシウム濃度を調べた。また、セシウムと同じアルカリ金属であり、森林生態系内の挙動が似ていることが知られているルビジウムの濃度もあわせて調べた。過去10年や20年の平均肥大成長量を算出するにあたっては正確を期すために年輪幅データを用いたクロスデーティングを行い、全ての個体で上手く年代を決定することができた。これにより同一林分内でも個体によって平均肥大成長量(年間の断面積増加量)が10倍以上異なっていることを把握することができた。幹材の生材含水率は個体によって2倍程度の差が見られた。そして幹材のルビジウム濃度は個体によって10倍ほど異なっていたが、セシウム濃度は個体によって50-100倍ほど異なっており非常にばらつきが大きいことが明らかになった。このような幹材のセシウム濃度やルビジウム濃度の個体間差と過去の平均肥大成長量や生材含水率との関連性を調べたところ、ルビジウム濃度は肥大成長量が多く生材含水率が高いほど高いという関連性が見られたが、セシウム濃度にはそのような明確な関連性は見られなかった。なお、セシウム濃度とルビジウム濃度の間には弱い正の相関が見られたが、その関係から大きく外れている場合も多いことがわかった。現段階では幹材のセシウム濃度の個体間差を説明する要因の特定には至っていないが、今後は幹材の炭素安定同位体比を測定することによって樹木の過去の平均的な水利用効率を推定し、セシウム濃度との関連性を調べる予定である。試料採取や過去の肥大成長量の分析、セシウム濃度等の元素分析を予定通り行うことができたが、水利用効率の分析が装置の不調やメンテナンスがあったためやや遅れている。しかし、分析試料の準備はできており、装置復旧の目処も立っているため、この遅れは次年度の早い段階で解消できる見込みである。当年度は主に幹材のセシウム濃度の個体間差を明らかにすることを目的とした研究設計であったが、次年度は新たに2サイトを対象に加え、個体間差だけでなくサイト間差を説明するための研究を行う。当年度計画していた水利用効率の分析が装置の不調・メンテナンスでやや遅れたため次年度使用額が生じた。水利用効率の分析に必要な消耗品費や人件費に使用する計画である。
新規な耐熱性酸性プロテアーゼ“クマモリシン"に関する研究

申請者らは酸性プロテアーゼ特異的阻害剤によって阻害を受けない酸性プロテアーゼを好熱菌にスクリーニングし,“クマモリシン"と命名した新規酵素を発見した。本研究課題はクマモリシンの基質特異性を始めとする諸性質の解析,タンパクおよび遺伝子レベルからの一次構造の解明等を目的としたもので,以下に示す研究成果を挙げた。1.クマモリシンは酸化インシュリンB鎖のLeu(15)-Tur(16)を特異的かつ高速で水解する(Km=9×10^<-5>M,Kcat=71S^<-1>)。この水解部位周辺のアミノ酸配列をモデルにして,種々のペプチドを合成し,それらに対する反応速度論的解析を行った。その結果,切断点よりサブサイトP_4位まで,またサブサイトP_2^1′を含むVEALYLなるヘキサペプチドが最小基質であることを明らかにした。このように長鎖のペプチドを要求する例は既知の酸性プロテアーゼにない。2.クマモリシンの一次構造解析:クマモリシンをトリプシン,リジルエンドペプチダーゼ等のプロテアーゼで限定分解し,ペプチド断片を逆相HPLCで分取後,それらのアミノ酸配列を約100残基決定した(残り300残基は解析中)。このアミノ酸配列データをもとにクマモリシン遺伝子のクローニングを行うDNAプローブを作成した。ハイブリダイゼーションにより,染色体DNAのSalI消化断片の約3Kbpに目的遺伝子が存在することを明らかにした。この断片をpUC18の同部位に挿入し,プラスミドpK1を構築した。次いで,サブクローニングを進め,pK1の詳細な制限酵素地図を作成後,断片のバイブリダイゼーションによって,BamH1断片(0.5Kbp)からプラスミドpKB1を構築した。その塩基配列を決定したところ,pKB1はクマモリシン遺伝子の一部分を含むことが分った。クマモリシンは、熊本県阿蘇地方の高熱泉より分離した好熱菌より生産される酸性プロテアーゼである。この酵素は酸性プロテアーゼとしては異常に耐熱性が高いばかりか、既知の各種プロテアーゼインヒビターに阻害を受けない、基質特異性が極めて高いなどのユニークな諸性質を持つている。本研究課題では本酵素の基質特異性の解析、蛋白及び遺伝子レベル両面からの一次構造の解明を行うことを目的に本年度は以下に示す実験結果を得た。1.基質特異性の解析:クマモリシンは酸化インスリンB鎖のLeu(15)-Tyr(16)の結合を特異的かつ高い反応速度(Km=9.0x10^<-5>M、Kcat=71S^<-1>、30°C)で水解した。そこで、このデータを基に種々の検討を加えたところ、この切断点よりC末端側へ4残基、N末端側に2残基よりなるヘキサペプチド(VEALYL)がクマモリシンの最小基質であることが明かとなった。現在、それぞれのサブサイト(P1-P4)に対応するアミノ酸残基を変えたヘキサペプチド類を多数合成し、クマモリシンとの反応を速度論的に解析している。2.クマモリシンの一次構造解析:クマモリシンをトリプシン、リジルエンドペプチダーゼ、サーモリシン等のプロテアーゼで限定分解し、逆相HPLCで各消化ペプチド断片を分離精製後、それらのアミノ酸配列を自動アミノ酸アナライザーにより100残基分決定した。残り300残基分については現在解析中である。一方、このアミノ酸配列データを基にクマモリシン遺伝子スクリニング用のDNAプローブを作成し、酵素遺伝子のクローニングを開始した。

ハイブリダイゼーション実験を繰り返し、染色体DNAのSalI消化断片約3kbpに目的遺伝子の存在が判明し、その断片をpUC18の同部位に挿入することに成功した。現在、得られたプラスミドpK1の詳細な制限酵素地図を作成し、塩基配列の解析を行っている。クマモリシンはこれまでに報告がないユニークな酸性プロテアーゼで、従来の酸性プロテアーゼ特異的阻害剤で全く阻害を受けないばかりか、酸性プロテアーゼとしてはめずらしく耐熱性が高いと同時に基質特異性が極めて高いという特徴がある。本研究課題では昨年度に引き続き、本酵素の基質特異性の解析、タンパクおよび遺伝子レベルからの一次構造解明について研究を進め、以下に示す成果を得た。基質特異性解析:酸化インスリンB鎖の水解部位Leu(15)-Tyr(16)周辺配列と同一構造の最小基質(VEAL-YL;-切断点)およびIns(12-18)(VEAL-YLV)のサブサイトP2位のAを塩基性アミノ酸(K、H、R)に置き換えたペプチド6種を合成し、速度論的解析を行ったところ最小基質がKcat=20.8s^<-1>で加水分解されるのに対し、いずれのペプチドも0.6s^<-1>程度の分解にとどまった。現在、さらにアナログペプチドの合成を進めている。クマモリシンの一次構造解析:本年度は遺伝子レベルからの検討を重点的に進めた。昨年度、染色体DNAのSall断片(3Kbp)をpUC18に挿入して得たプラスミドpK1を構築した。本年度はさらにサブクローニングを進めた。まずpK1の詳細な制限酵素地図を作成、ついでその断片のハイブリダイゼーションを試み、BamHI断片(0.5Kbp)を候補として選択した。これをpUC18の同部位に挿入しプラスミドpKB1を構築し、その塩基配列を決定した。しかしながら、クマモリシンのアミノ酸配列に該当する塩基配列を含むことが分かったが、クマモリシンのN-末端部分のアミノ酸配列に相当する塩基配列を含まず、pKB1はクマモリシンの一部分であることが判明した。現在、pK1の他の断片について検討を行っている。
古フランス語韻文物語における語りの研究

本年度は、研究目的の達成のため、大きく分けて二つの活動を行った。第一に、「古代物語」に分類される作品の読解に取り組んだ。具体的には、『テーベ物語』や『エネアス物語』、ブノワ・ド・サント=モールの『トロワ物語』やオウィディウス作品の古フランス語翻案等を対象とし、作品の内在的な読解を行った。「古代物語」は、ラテン語からの翻訳作品にすぎないと捉えられ、語りという側面から分析されることが少なかった。しかしながら同時にこれらのテクストは、ラテン語とフランス語、古代と中世、歴史と虚構、異教とキリスト教、翻訳と自律したエクリチュールという、幾重にも重なった緊張関係の中で生まれた作品群であり、中世のテクストの特徴を如実に伝えているとも言える。特に、古代物語においては、詳細精緻な描写(エクフラシス)への関心が認められるほか、語り手の主観性がより頻繁に表現されていることを確認した。第二に、アーサー王物語の実質的な創始者でもある、クレチアン・ド・トロワの作品における語りと時間性についての考察を行った。同時代の作品の時間性に関しては、一種の無時間性が指摘されていたが、クレチアンの第三作である『獅子の騎士』と第四作にあたる『荷車の騎士』には、当時の社会慣習に基づく計算された時間への配慮が見られる。この二作品では、キリスト教的な直線的時間と円環的かつ長期的な時間との融合により、同時進行で出来事が語られ、時間性は一人の作者による一つの物語世界に結び付けられている。さらに、同時代の他作品は基本的に過去の出来事を物語るのに対して、『荷車の騎士』は語りの未来志向性を示している。この研究成果は査読付き論文のかたちで発表した(『仏語仏文学研究』、第五十一号)。1年目となる本年度には、主に原典の読解に取り組み、古代物語の主要な作品の内在的な分析を完了したことによって、対象とした作品群全体に共通する問題の予備的な考察を行うことが可能となった。またクレチアンの二作品における語りについて、論文として発表した。ここで明らかにした点は、いずれも物語、ひいては中世文学全体でもきわめて稀有な例であり、クレチアンの自己作品への強い意識とその語りの独自性を裏付けるものである。一方、特に研究を開始した前半期には、当初の課題と計画に沿って進めるにあたって、研究計画に適宜修正を加える作業の必要性が感じられた。その一点目として挙げられるのは、課題とした「語り」の問題がきわめて広いものだったため、実際に研究成果として発表する際には、いくつかの問題に絞り込んだ上で議論を展開するべきであり、申請時に設定した諸々の問題に拘らず、原典の読解による分析結果を確認しつつ検討し直す必要がある。二点目としては、文学作品中の語りという内在的な側面への着眼は維持しつつも、十二世紀中盤から後半の時代状況を踏まえ、より社会的な側面をも考慮に入れることである。これは、当初の計画に沿って研究を進める場合、テクストが歴史的文脈や社会通念から切り離され、孤立した事物になりかねないと考えたためである。以上のことから、本年度はおおむね順調に進展したと言え、また今後の課題も明白になった。進捗状況の欄で述べた二点を念頭に、引き続き対象とした作品の読解と分析に取り組む。すなわち、今後は1語りのうちどのような側面に焦点を当てるのかを再検討しつつ、2時代背景を考慮に入れながら併せて論じることを目指す。物語では、「語り手」は出来事を語りながらも、主観的に驚きを表明することが特徴であり、驚きの対象はしばしば自身の語る物語世界全体へと及ぶ。そして、特に古代物語においては、本質的に「他者」である古代世界とキリスト教化された封建社会との対立、あるいは融合が常に見られる。そのため、語りと時代状況との関係の考察は、当時の文学的特徴を明らかにするに際しても有益と考えられる。現在のところ、クレチアンの『エレックとエニッド』と『聖杯の物語』における語りの関係について考察している。さらに『テーベ物語』の例をこの分析に加えることで、これらのテクストに見られる語り手の主観性を比較検討しつつ、父系社会における「罪」、あるいは「沈黙」や「言葉」といったキリスト教とも関連するテーマと併せて論じる予定である。今後は以上の点を考慮しつつ、分析を進める。

同時代の作品の時間性に関しては、一種の無時間性が指摘されていたが、クレチアンの第三作である『獅子の騎士』と第四作にあたる『荷車の騎士』には、当時の社会慣習に基づく計算された時間への配慮が見られる。この二作品では、キリスト教的な直線的時間と円環的かつ長期的な時間との融合により、同時進行で出来事が語られ、時間性は一人の作者による一つの物語世界に結び付けられている。さらに、同時代の他作品は基本的に過去の出来事を物語るのに対して、『荷車の騎士』は語りの未来志向性を示している。この研究成果は査読付き論文のかたちで発表した(『仏語仏文学研究』、第五十一号)。1年目となる本年度には、主に原典の読解に取り組み、古代物語の主要な作品の内在的な分析を完了したことによって、対象とした作品群全体に共通する問題の予備的な考察を行うことが可能となった。またクレチアンの二作品における語りについて、論文として発表した。ここで明らかにした点は、いずれも物語、ひいては中世文学全体でもきわめて稀有な例であり、クレチアンの自己作品への強い意識とその語りの独自性を裏付けるものである。一方、特に研究を開始した前半期には、当初の課題と計画に沿って進めるにあたって、研究計画に適宜修正を加える作業の必要性が感じられた。その一点目として挙げられるのは、課題とした「語り」の問題がきわめて広いものだったため、実際に研究成果として発表する際には、いくつかの問題に絞り込んだ上で議論を展開するべきであり、申請時に設定した諸々の問題に拘らず、原典の読解による分析結果を確認しつつ検討し直す必要がある。二点目としては、文学作品中の語りという内在的な側面への着眼は維持しつつも、十二世紀中盤から後半の時代状況を踏まえ、より社会的な側面をも考慮に入れることである。これは、当初の計画に沿って研究を進める場合、テクストが歴史的文脈や社会通念から切り離され、孤立した事物になりかねないと考えたためである。以上のことから、本年度はおおむね順調に進展したと言え、また今後の課題も明白になった。進捗状況の欄で述べた二点を念頭に、引き続き対象とした作品の読解と分析に取り組む。すなわち、今後は1語りのうちどのような側面に焦点を当てるのかを再検討しつつ、2時代背景を考慮に入れながら併せて論じることを目指す。物語では、「語り手」は出来事を語りながらも、主観的に驚きを表明することが特徴であり、驚きの対象はしばしば自身の語る物語世界全体へと及ぶ。そして、特に古代物語においては、本質的に「他者」である古代世界とキリスト教化された封建社会との対立、あるいは融合が常に見られる。そのため、語りと時代状況との関係の考察は、当時の文学的特徴を明らかにするに際しても有益と考えられる。現在のところ、クレチアンの『エレックとエニッド』と『聖杯の物語』における語りの関係について考察している。さらに『テーベ物語』の例をこの分析に加えることで、これらのテクストに見られる語り手の主観性を比較検討しつつ、父系社会における「罪」、あるいは「沈黙」や「言葉」といったキリスト教とも関連するテーマと併せて論じる予定である。今後は以上の点を考慮しつつ、分析を進める。
ミトコンドリア脱共役の心臓および全身に対する長期的影響の探索

1)肥満モデル動物における慢性的なミトコンドリア脱共役剤投与が心臓および全身へ与える影響を明らかにする事については、脱共役薬投与により、高脂肪食を摂取していてもそれを打ち消し、肥満に至らないのは高濃度を投与したときであり、低濃度ではレプチンを介さない食欲増進により体重増加が示唆された。心重量が変化する機序については検討中であるが、心機能への影響は明らかでなかった。2)生理的な老化にミトコンドリア脱共役剤が与える影響を検討する事を目的として、通常餌投与と上記低容量のDNPを6か月投与した。生存率に変化を認めなかった。体重増加をDNP群で認め、老化マーカーについて検討中である。平成27年度はミトコンドリア脱共役剤慢性投与による心臓および全身への影響を明らかにすることを目的に実験を行った。本研究では、経口投与可能なミトコンドリア脱共役剤2,4-dinitrophenolを飲水にとかし投与を行った。投与量の設定は、SDラットに高脂肪餌投与を4週間続け、肥満ラット(HFD群)を作成した後、2,4-dinitrophenolをいくつかのdoseで1週間投与し、体重増加が打ち消される最低投与量を同定し、それを慢性投与の基準とした。高脂肪食投与による体重増加は、低濃度投与群、中濃度投与群では抑制ざれず、高濃度(320mg/L)投与群で抑制された。次に、短期的投与がミトコンドリア脱共役を引き起こすことを、体温を測定したところ脱共役剤投与群で体温の上昇を認めた。次に、6週間投与を行い生理的パラメーター・安楽死後の病理的変化を解析中である。また、ミトコンドリア脱共役薬の超短期的な心機能への影響を見る為、CCCPという脱共役剤の腹腔内単回投与の実験系を用いて観察し、投与直後の心機能の抑制と時間経過に従った心機能の回復を観察し得た。また、長期にわたる継続投与が、寿命や体温、ROSや老化マーカーや代謝活性の高い臓器や組織をどのように修飾するかを検討する目的の実験の前段階として、低濃度の脱共役薬を継続的に投与し、継続投与した場合の体重減少度をモニタリング中である。本研究における薬剤投与設定を行い、短期投与実験の効果について観察・データ収集を行った。長期投与実験を準備中である。平成28年度は、ミトコンドリア脱共役薬(2,4dinitrophenol: DNP)の慢性投与実験を行った。平成27年度の短期投与実験に引き続き、コントロール群、高脂肪食投与群、高脂肪食+低濃度DNP群、高脂肪食+高濃度DNP群に6週間の投与を行い、生理的パラメーター・安楽死後の病理変化の比較を行った。体重増加は、高濃度DNP群で抑制されたが、食事量は増加した。体温は、高濃度投与群で上昇を認めた。血圧・脈拍に4群で差がなく、心収縮能は保たれていた。臓器重量は、高濃度DNP群で肝重量の増加を認めた。体重あたりの心重量は、DNP投与群(低濃度・高濃度とも)で低値であった。現在、酸化ストレスマーカーの定量を行っている。平成27年度に、短期投与実験における、心機能の抑制と時間経過に従った心機能の回復を観察し得たが、本年度はそのメカニズムとして心筋のエネルギー不足が惹起されていることを、PCr/ATPのin situおよびin vitroでの計測により確認した。また、長期にわたる継続投与が、寿命や体温、ROSや老化マーカーや代謝活性の高い臓器や組織をどのように修飾するかを検討し、長期投与の意義・投与期間の目安を明らかにするための、少量長期投与実験を開始している。この実験については平成29年度に主に解析を予定している。また、心不全ラット(ダールラット)モデルへの慢性少量投与を計画中である。上記の実験の結果などから投与量の設定を検討中である。本研究における、比較的長期投与の実験を行い、観察・データ収集を行った。当初の計画通り、長期の少量投与実験を開始している。本年度において、1)肥満モデル動物における慢性的なミトコンドリア脱共役剤投与が心臓および全身へ与える影響を明らかにする事、2)生理的な老化にミトコンドリア脱共役剤が与える影響を検討する事を目的として研究を実施した。肥満モデルとして、高脂肪食投与モデルを用いた。脱共役薬2,4-dinitrophenol(DNP)の自由飲水形式による経口投与下(616mg/kg/day DNP)で、高容量と低容量、プラセボ、の3群で高脂肪食分と通常食ラットで検討した。DNP投与ラットは高脂肪食を摂取していても体重増加不良と肝重量の増加抑制が認められ、体温は上昇していた。血行動態に変化はなく、心エコーのパラメーターでは、左室拡張末期径、Fractional Shortening、壁厚に各群に有意差をみとめなかった。逆に、少量のDNP投与では食事摂取量が増加していた。種差が関係している可能性を考え、マウスでも実験を実施した。マウスでは、3.4 mg/kg/dayのDNP投与により体重増加不良、肝重量の増加抑制が認められたが。体温の変化は認めなかった。一方、体重あたりの心重量は高脂肪食のみの群よりも有意に重かった。マウスでは、食事摂取量の差はなく、レプチンにも差は認めなかった。High fat diet群において、LowDNPを投与すると、ASTは有意に上昇した。腎機能や脂質関連項目、血糖値に差は無かった。

まとめとして、脱共役薬投与により、やせが起こるのは高濃度を投与したときであり、低濃度ではレプチンを介さない食欲増進により体重増加や肝機能上昇が示唆された。心重量が変化する機序、食欲増進の機序について検討中である。1)肥満モデル動物における慢性的なミトコンドリア脱共役剤投与が心臓および全身へ与える影響を明らかにする事については、脱共役薬投与により、高脂肪食を摂取していてもそれを打ち消し、肥満に至らないのは高濃度を投与したときであり、低濃度ではレプチンを介さない食欲増進により体重増加が示唆された。心重量が変化する機序については検討中であるが、心機能への影響は明らかでなかった。2)生理的な老化にミトコンドリア脱共役剤が与える影響を検討する事を目的として、通常餌投与と上記低容量のDNPを6か月投与した。生存率に変化を認めなかった。体重増加をDNP群で認め、老化マーカーについて検討中である。以下の平成28年度以降に予定する2つの目的に沿って実験を行う。心不全モデル動物(ダール食塩感受性ラット)における慢性的なミトコンドリア脱共役の心臓および全身に与える影響を明らかにする。長期にわたる継続投与が、寿命や体温、ROSや老化マーカーや代謝活性の高い臓器や組織をどのように修飾するかを検討し、長期投与の意義・投与期間の目安を明らかにする。以下の平成29年度以降の予定する2つの目的に沿って実験を行う。心不全モデル動物における慢性的なミトコンドリア脱共役の影響を明らかにする。H27年度は消耗品費(ラット・マウス購入および飼育)が中心であり、既に購入済みの試薬を中心に消費したため、H27年度使用額が少なかった。H28年度は消耗品費(ラット購入、飼料購入)が中心であり、試薬の節減につとめ使用額が少なかった。次年度は、放射性薬品、および多量の検体処理のための試薬を要する予定であり、来年度予定分と併せて使用予定。次年度は、さらにラット検体の処理、マウス検体の処理に試薬を多量に要する予定であり、次年度予定分と併せて使用予定。
ブラシカのエピゲノム解析及び、植物形質に関わる後天的な転写制御の解明に向けて

本研究では、日本及びアジア地域で主要な野菜であるハクサイ(Brassica rapa)を用いて、ゲノム全体のエピジェネティックな修飾状態を明らかにすることを目的として研究を行った。ゲノム全体のDNAのメチル化状態とヒストンの化学修飾状態について調べた。また、春化処理後や、病原菌感染時にみられるゲノムワイドなエピジェネティックな修飾状態を明らかにすることを目的に研究を行った。春化処理後には、鍵遺伝子であるFLCにH3K27me3の修飾が蓄積し、FLCの転写レベルが下がることを明らかにした。昨年度は、ゲノム全体のDNAのメチル化状態をMethylated DNA Immunoprecipitation sequencing (MeDIP-seq)で、ヒストンH3の9番目のリジン残基のトリメチル化(H3K27me3)の修飾状態をChromatin Immunoprecipitation sequencing (ChIP-seq)で、明らかにした。今年度は、H3K4me3、H3K9me2、H3K36me3の修飾状態を明らかにする為に、ChIP-seqを行い、それぞれ2000万から4000万リード、700Mbpから1400Mbpのシークエンスを決定した。ChIP-seqを行う際にはそれぞれの修飾を有するDNA断片の濃縮を確認する必要があるが、B. rapaでは、濃縮を確認できる領域の報告がほとんどないことから、ChIP-PCR、ChIP-qPCRにより、H3K4me3、H3K9me2、H3K27me3、H3K36me3の修飾を有する領域のスクリーニングを行い、それぞれの修飾の濃縮を確認できる領域を3箇所以上揃えることができた。また、春化処理後や病原菌感染時にみられるゲノムワイドなエピジェネティックな修飾状態を明らかにすることを目的に研究を行い、春化処理後には、鍵遺伝子であるFLCにH3K27me3の修飾が蓄積し、FLCの転写レベルが下がることを明らかにし、さらに春化処理後のH3K27me3のChIP-seqを行った。また、病原菌感染では、フザリウム菌に着目し、エピゲノム解析を行うのに最適なステージの検討を行った。本研究は、日本及びアジア地域で主要な野菜であるハクサイ(Brassica rapa)を用いて、ゲノム全体のエピジェネティックな修飾状態を明らかにすることを目的としている。今年度は、転写抑制のマークである、DNAのメチル化とH3K27me3 (ヒストンH3の27番目のリジン残基のトリメチル化)についてそれぞれ、Methylated DNA Immunoprecipitation sequencing (MeDIP-seq)とChromatin Immunoprecipitation sequencing (ChIP-seq)を行った。MeDIP及びChIPにより、それぞれの修飾状態を有するDNA断片が得られているかをquantitative PCR (qPCR)による確認を行った。qPCR用のプライマーは、DNAのメチル化修飾を持っていることが、自身の以前の研究で明らかにしたトランスポゾン配列中に作成した。H3K27me3においては、シロイヌナズナでH3K27me3を有していることが示されている遺伝子のオーソログ遺伝子内にプライマーを作成した。両方ともに、免疫沈降によりそれぞれの修飾を有するDNA断片の濃縮に成功していることを確認した。そこで、次世代シークエンサーを用いて、DNA断片のシークエンスを行った。MeDIP-seqにおいては、現在シークエンスを依頼中である。ChIP-seq (H3K27me3)においては、およそ2200万リード、750Mbpのシークエンス断片を決定した。現在、得られたシークエンスをリファレンス配列にマップしている。全てで、DNAのメチル化と4つのヒストン修飾を調べる予定であり、今年度はその内の2つを行うことができた。今年度に実験技術を習得できたことから、平成25年度に残り3つのヒストン修飾においても迅速に行うことができると考える。残りのエピジェネティクス修飾について、ChIP解析を行う。これらの結果を既に解析が進んでいるシロイヌナズナの結果と比較することで、エピジェネティック修飾の種間での相違点が明らかにできる。低温条件下や、病害感染時のエピジェネティックな修飾変化をMeDIP-seq、ChIP-seqを用いてゲノムワイドに調べる予定である。分子生物学研究用試薬
減数分裂誘導因子の研究

(1)セルトリ細胞による精原細胞の増殖促進作用:イモリ(Cynops pyrrhogaster)精原細胞ステージの精巣を解離し、密度勾配遠心によって精原細胞とセルトリ細胞を分離し、精原細胞のみ、あるいは、精原細胞とセルトリ細胞を混ぜたものを旋回培養し、[^3H]チミジンの取り込みによって増殖活性を測定した。精原細胞のみを±FSHで培養しても差はみられないが、セルトリ細胞を混ぜると+FSHの場合のみ増殖を活性化する。また、第一精母細胞ステージのセルトリ細胞を精原細胞に加えても+FSHで増殖を活性化しない。また、ミリセルを用いて精原細胞と同一ステージのセルトリ細胞をフィルターで隔てて培養してもFSHによる増殖促進効果はみられない。この結果は、セルトリ細胞の精原細胞に対する増殖促進作用はステージ特異的であり、互いの接着が必要であることを示唆する。(2)ペレット培養による減数分裂の開始:(1)の旋回培養系では精原細胞が1週間目に死んでしまったので、精原細胞ステージの精巣を解離し、再び遠心してペレットにし、コラーゲンマトリックスに埋め込んでフィルター上で培養した。-FSHでは大部分の精原細胞が死んでしまい、第一精母細胞へ分化しないが、+FSHでは2週間目で多くの細胞が第一精母細胞へ分化した。このような系は哺乳類では実現されていない。(3)イモリ精原細胞の増殖関連分子の検索:チロシンキナーゼの保存配列のプライマーを用いてイモリ精原細胞から抽出したRNAを鋳型としてRT-PCRを行ったところ、マウスのJAK1と88%の相同性を示すクローンを得た。in situ hybridizationを行ったところ、精原細胞の細胞質でシグナルが検出された。この結果は、イモリJAKが精原細胞の増殖機構において重要な役割を果たしていることを示唆する。今後このJAKを手がかりにして精原細胞の増殖機構を分子レベルで明らかにできる可能性がある。
免疫回避機能を有するPEG骨再生材料の開発

近年バイオマテリアルの研究分野において炎症・抗炎症などの生体反応を積極的に制御可能な新たな材料開発が試みられている.一般に,組織,臓器の欠損あるいは障害が生じた場合,修復の有無に関係なく,最初に起こる反応は炎症である.炎症がなければ再生修復は起らないと考えられる.一方,過度の炎症は,再生・治癒を抑制することが広く知られている.従って,免疫応答をうまく制御することは,直接病気を治療するという戦略だけでなく,従来のバイオマテリアルの効果をより促進する戦略としても有用となる.本研究では免疫制御機能に着目し,免疫調節機能を有する骨再生材料を開発することである.本研究の遂行により,「患者を治す」という再生医療の最終目的を達成し,体に移植処置を行った時に必ず起こる炎症を調節し,迅速な治療や優れた骨増生が可能となれば,バイオマテリアルの適応範囲が大幅に広がり高齢化社会の質的向上に対し極めて大きな貢献が出来ると考えられる.H30年度は,主に基準物質として用いた牛骨由来アパタイトと免疫調節機能を持ちうる多孔体材料の骨形成能,材料学的性質,その免疫応答反応を評価した.その結果特に,生体材料埋入時における炎症性サイトカインの放出挙動に関する知見を得た.助成期間を通しては,ラット頭蓋冠骨欠損内において生体材料埋入時の免疫応答の調節が骨再生を高める結果を得ており,同制御が骨再生の成否に重要な影響を及ぼすことを改めて証明した.近年バイオマテリアルの研究分野において炎症・抗炎症などの生体反応を積極的に制御可能な新たな材料開発が試みられている.一般に,組織,臓器の欠損あるいは障害が生じた場合,修復の有無に関係なく,最初に起こる反応は炎症である.炎症がなければ再生修復は起らないと考えられる.一方,過度の炎症は,再生・治癒を抑制することが広く知られている.従って,免疫応答をうまく制御することは,直接病気を治療するという戦略だけでなく,従来のバイオマテリアルの効果をより促進する戦略としても有用となる.本研究ではインターフェロン-γとポリエチレングリコール(PEG)の免疫制御機能に着目し,免疫回避機能を有する骨再生材料を開発することである.本研究の遂行により,「患者を治す」という再生医療の最終目的を達成し,体に移植処置を行った時に必ず起こる炎症を回避し,迅速な治療や優れた骨増生が可能となれば,バイオマテリアルの適応範囲が大幅に広がり高齢化社会の質的向上に対し極めて大きな貢献が出来ると考えられる.H29年度は主に,対照群の多孔体材料の合成を進めた.免疫制御機能が強いと予想されるPEGおよびインターフェロンγの利用に先んじて,基準材料として用いる細胞接着能の高いゼラチンと牛骨由来のハイドロキシアパタイトを複合させた担体の調製に関する予備的検討を行った.ゼラチンとハイドロキシアパタイトを種々の濃度で配合し,凍結乾燥することで多孔体状の試料を得た.更に,同材料の材料学的評価をX線回折法,フーリエ変換赤外分光光度計を用いて評価した.今回の研究は骨吸収モデルを利用し,PEG固定した材料について免疫反応抑制効果を効率的に評価する.1PEGによって多孔質体に化学的に結合した担体を作製した.2フィブラストスプレー溶液に浸漬した担体からのインターフェロン-γの徐放量を定量した.近年バイオマテリアルの研究分野において炎症・抗炎症などの生体反応を積極的に制御可能な新たな材料開発が試みられている.一般に,組織,臓器の欠損あるいは障害が生じた場合,修復の有無に関係なく,最初に起こる反応は炎症である.炎症がなければ再生修復は起らないと考えられる.一方,過度の炎症は,再生・治癒を抑制することが広く知られている.従って,免疫応答をうまく制御することは,直接病気を治療するという戦略だけでなく,従来のバイオマテリアルの効果をより促進する戦略としても有用となる.本研究では免疫制御機能に着目し,免疫調節機能を有する骨再生材料を開発することである.本研究の遂行により,「患者を治す」という再生医療の最終目的を達成し,体に移植処置を行った時に必ず起こる炎症を調節し,迅速な治療や優れた骨増生が可能となれば,バイオマテリアルの適応範囲が大幅に広がり高齢化社会の質的向上に対し極めて大きな貢献が出来ると考えられる.H30年度は,主に基準物質として用いた牛骨由来アパタイトと免疫調節機能を持ちうる多孔体材料の骨形成能,材料学的性質,その免疫応答反応を評価した.その結果特に,生体材料埋入時における炎症性サイトカインの放出挙動に関する知見を得た.助成期間を通しては,ラット頭蓋冠骨欠損内において生体材料埋入時の免疫応答の調節が骨再生を高める結果を得ており,同制御が骨再生の成否に重要な影響を及ぼすことを改めて証明した.研究協力者は大阪歯科大学の大学院生であるので,連絡体系がすでにできあがっており,今後の研究の推進が可能な状況にある.H30年度も引き続き脱分化脂肪細胞の培養,分子生物学実験,移植実験を行うことからそれらに関連した試薬,消耗器具,実験動物費用,飼育費に研究経費を充てる
膠芽腫及びその幹細胞の浸潤機構解明と臨床応用

uPARAPはmRNAレベル、タンパクレベルにおいて正常脳に比べて神経膠腫で高発現していた。uPARAPを特異的にknock downするsiRNAをデザインし、神経膠腫cell lineにおけるuPARAPの機能解析を行った結果、同分子が神経膠腫の移動及び浸潤に関与している事が明らかになった。以上より同分子が浸潤能抑制による治療標的となる可能性が示唆された。また、腫瘍幹細胞でもその発現が確認されたため、腫瘍幹細胞を標的とした治療に対する可能性も示唆された。(目的)細胞外マトリックスのタンパク融解に関与するUrokinaseplasminogen activator (uPA)systemを構成するuPARAP (uPA receptor associated protein)が悪性脳腫瘍であるグリオーマにおいて高発現し、またその浸潤能に関与しているという仮説に基づいて研究を行った。(方法)SYBRgreenを用いたquantative PCRで組織間、腫瘍間でuPARAPの発現を評価した。siRNAの手法を用いて、グリオーマ細胞株T98GにおいてuPARAPの発現をknock downする系を確立し、wild typeとknock downしたものの浸潤能を比較検討した。(結果)mRNAレベルでのuPARAPの発現は正常脳に比べて、グリオーマ検体において高い傾向が認められた。正常組織の中では心臓、精巣で高い発現を示した。グリオーマ細胞株(Marcus, U87, U251, T98G)の中では、T98G細胞株で最も発現が高く、正常脳の約5倍であった。uPARAPに対してデザインしたsiRNAを用いてmRNAレベルでT98G細胞株におけるuPARAPの発現を約25%までknock downすることができた。siRNAを用いてuPARAPをknock downしたT98G細胞株は、wild typeに比べて浸潤能が下がる傾向が認められたが、現段階でそれぞれの群の間に有意差を認めていない。(結論と展望)uPARAPはグリオーマ組織において、正常脳及びその他の組織に比べて高発現していることが分かった。またuPARAPをknock downすることでグリオーマの浸潤能を抑制できる可能性が示唆された。uPARAPの発現を評価するためにqPCRを施行、uPARAPmRNAは正常脳に比べて神経膠腫組織において高発現している事を明らかにした。特に発現は悪性度に比例して発現が高くなる傾向があった。正常組織の中では心臓、腎臓、精巣、前立腺、膵臓において発現が脳より高いことが明らかになった。また、3種類のGhoma cell lineにおいてuPARAPが高発現していることがわかった。タンパクレベルでのuPARAPの発現を評価するためにWestern blottingを施行、uPARAPは正常脳には発現していない一方、ghoma組織、ghoma幹細胞、神経幹細胞、そしてghomacell line細胞に発現していることが明らかになった。uPARAPに対してdesignした2種類のsiRNAは、それぞれ48時間後に2種類のghoma cell lineeにおけるuPARAPの発現を抑制した。in vitroにてmigration及びinvasion assayを施行、wild type ghoma cell lineはsfRNAtreatedgliomacelllineに比べて高い移動能及び浸潤能を示す可能性がある事がわかった。本研究はuPARAPが神経膠腫の浸潤に関与している事を示唆しており、浸潤能抑制による治療標的となる可能性を示唆している。また、腫瘍幹細胞でもその発現が確認されているため、腫瘍幹細胞を標的とした治療に対する可能性も示唆された。
穴があいても漏れない空気入りパンクレスタイヤの開発とその走行安定性

本研究では、格子内に吸水ポリマーを充填し、その中に水を混入して格子内圧力を発生させ、その圧力で穴があいた場合に、穴を自動的に自己修復させる方式の「穴があいても空気漏れのない自己修復型のパンクレスタイヤ」を開発した。その内容を要約すると(1)製造が容易な特殊な複合格子構造を有するシーラント層を開発した。(2)膨潤液による坊錆効果の実験を行い、クーラント液と水の最適混合割合を明らかにした。(3)シーラント層を透過して水分が熱の作用下でどの程度外に漏れるかの実験的検討を行ったところ、水分の蒸発はほとんどないことを確認した。(4)本シーラントは、一般に自動車の使用される温度下で安定であることを確認した。(5)上記で製作した試験片に穴をあけ、空気漏洩遮断特性を検討したところ、シーラント層の厚みを4mmとしたとき、5.2mm直径の釘(5寸釘)で本シーラント層を有するタイヤに穴をあけても瞬時に穴が自己修復し、空気漏洩の無いことを確認した。(6)タイヤ圧力はトラック用タイヤの4気圧までとし、その圧力までは漏れないことを確認した。(7)本パンクレスタイヤの振動伝達率を求める解析式を示し、それを用いて安定な走行限界を求めたところ、300Km/h以上の走行スピードまでタイヤの走行安定性が確保さていることを確認した。(8)本タイヤによる突起乗り越し実験を行ったところ、本タイヤは通常のタイヤに比べて減衰効果が大きく、通常タイヤより伝達率を下げることができ、かつロードノイズも低減できることを確認した。本研究では、格子内に吸水ポリマーを充填し、その中に水を混入して格子内圧力を発生させ、その圧力で穴があいた場合に、穴を自己修復させる方式の「穴があいても空気漏れのない自己修復型のパンクレスタイヤ」を開発し、その走行安定性を確認することを目的としている。この目的を達成するため、平成16年度は下記のような研究を行い、それに対する成果を得た。(1)製造が容易な特殊な格子構造を有するシーラント層を開発した。(2)上記で製作した試験片に穴をあけ、空気漏洩遮断特性を検討したところ、シーラント層の厚みを4mmとしたとき、5.2mm直径の釘(5寸釘)で本シーラント層を有するタイヤに穴をあけても瞬時に穴が自己修復し、空気漏洩の無いことを確認した。(3)水の混入されたクーラント液(膨潤液として使用)による坊錆効果の実験を行い、クーラント液と水の最適混合割合を明らかにした。(4)シーラント層を透過して水分が熱の作用下でどの程度外に漏れるかの実験的検討を行ったところ、水分の蒸発はほとんどないことを確認した。(5)本タイヤによる突起乗り越し実験を行ったところ、本タイヤは通常のタイヤに比べて減衰効果が大きく、通常タイヤより伝達率を下げることができ、かつロードノイズも低減できることが確認できた。

(5)上記で製作した試験片に穴をあけ、空気漏洩遮断特性を検討したところ、シーラント層の厚みを4mmとしたとき、5.2mm直径の釘(5寸釘)で本シーラント層を有するタイヤに穴をあけても瞬時に穴が自己修復し、空気漏洩の無いことを確認した。(6)タイヤ圧力はトラック用タイヤの4気圧までとし、その圧力までは漏れないことを確認した。(7)本パンクレスタイヤの振動伝達率を求める解析式を示し、それを用いて安定な走行限界を求めたところ、300Km/h以上の走行スピードまでタイヤの走行安定性が確保されていることを確認した。(8)本タイヤによる突起乗り越し実験を行ったところ、本タイヤは通常のタイヤに比べて減衰効果が大きく、通常タイヤより伝達率を下げることができ、かつロードノイズも低減できることを確認した。
わが国における都市史学の確立と展開にむけての基盤的研究

最終年度は、研究成果の総まとめとして2018年3月に大規模な国際集会を開催し、本基盤研究で得られた「都市史から領域史へ」という重要課題について諸外国の都市史研究者およびわが国の都市史研究者を招聘して成果の発信および共有をはかった。またさまざまなプロジェクトの形のある成果物として、伊藤毅編『フエーベトナム都城と建築』(中央公論美術出版、2018年)、伊藤毅企画編集・樺山紘一他著『東京大学が文京区になかったら』(NTT出版、2018年)、本研究で創設された都市史学会の総力を挙げて編集に取り組んできた都市史学会編(編集委員会委員長伊藤毅)『日本都市史・建築史事典』(丸善出版、2018年)などの書籍が目白押しで刊行された。また上記の出版物以外にも伊藤毅編『オランダ・フリースラントの建築・都市・領域』(中央公論美術出版、2019年度中刊行予定)、同『イタリアの中世都市ーアゾロの建築・都市・領域』(鹿島出版会、2019年度中刊行予定)、『都市空間史入門』(東京大学出版会、2020年度刊行予定)などの成果物の編集も順調に進んでいる。また最終年度における「都市史から領域史へ」という新テーマの準備作業にも布石を打ち、領域史研究のための島嶼研究、荒涼地研究の具体的な素材として、アイスランド調査、アンティル諸島について研究情報を収集し分析を加えた。この成果は2019年度日本建築学会大会(北陸)建築歴史意匠委員会研究協議会にて、伊藤毅が「領域史と都市」というテーマで論ずる予定である。以上を要するに過去5年度に及ぶ都市史学の確立・展開を目指した総合研究は大きな成果をあげ、次なるステップへと移行しつつある。平成29年度が最終年度であるため、記入しない。2013年度は本研究の初年度にあたるために、それぞれのプロジェクトのスタート基盤を整えることを主眼として以下のような活動実績を残した。【海外都市史関係学会との交流と都市史学会の設立】2013年5月2224日韓国ソウル市ソウル学研究所で行われた中国・日本・韓国の首都を比較するシンポジウムに参加し、日本の首都について報告を行った。11月21日24日フランス・パリ市ソルボンヌ大学において、日仏二国間の研究交流を目的としたシンポジウムを開催した。12月14、15日の両日、東京大学本郷キャンパスにて都市史学会の設立総会および記念行事が開催された。本研究のひとつの目標であり、スタート地点でもあるプラットフォームがここに実現することになった。【国内プロジェクト】東京都葛飾区柴又地域文化的景観調査を継続的に実施し、毎月柴又研究会と称する研究会を立ち上げ他分野領域の研究者と積極的な協同を実施した。【海外プロジェクト】2013年9月4日14日イタリア・ヴェネト州アゾロ調査を実施。アゾロ市の住宅建築、都市断面、史料調査、インタビューなどを行う。現地で最終日に成果報告会を開催した。9月15日24日オランダ・フリースラント州ハーリンゲン調査を実施。西側の港町として繁栄した都市の住宅・倉庫・都市組織を中心に現地調査を行った。11月25日29日フランス・ラングドックの予備調査。2014年3月8日16日に本調査を実施した。主としてカペスタン、ナルボンヌの都市・住宅調査を行った。平行して南仏の中世史、近世史の専門家との研究交流を行う予定であったが、日程調整が難航し2014年度へと繰り越すことになった。本研究はテリトリオ研究の一部をなすものであり、具体的にはイタリア・ヴェネト地方を対象とした調査研究の成果を踏まえ、イタリアの中世史学、歴史地理学、建築学で第一線の研究者をわが国に招き、ヴェネトおよび中世都市アゾロに焦点を絞って二日間にわたるシンポジウムを開催することが主要な目的である。具体的には2015年2月20日、21日の両日、東京大学本郷キャンパス・法文1号館講堂にて、「Territorial History of Veneto : during the Medieval and Modern Periods」と題したシンポジウムを開催し、イタリアからマッシモ・ロッシ教授(ベネトン財団、歴史地理学)、ダリオ・カンツィアン教授(パドヴァ大学、中世史学)、マウリッツィオ・トレヴィザン氏(建築家、建築学)、マッテオ・ダリオ・パウルッチ講師(ヴェネツィア建築大学、建築学)の4人の専門家を招聘し、それぞれの専門の立場から中近世ヴェネトの領域史(テリトリオ)について報告が行われた。日本側からは研究代表者の伊藤毅をはじめとして、陣内秀信(法政大学教授、建築史)、片山伸也(日本大学准教授、建築史)、赤松加寿江(京都工芸繊維大学講師、建築史)ほか数名が報告および討論に加わった。この成果は、「Proceedings of Italy-Japan Internatonal Symposium, Territorial History of Veneto」にまとめられ、すでに公刊されている。本研究は本来、2014年度中に実施する計画であったが、開催日程の設定が不調に終わったため、2015年度へ予算の繰越を行い、繰越計画どおり2015年度中に実現した。イタリアから招聘した4人の専門家はいずれも斯界の第一人者であり、彼らの予定調整と事前の打ち合わせにかなりの労力が費やされたが、結果的には十分な準備が整ったうえで国際シンポジウムが開催できて、大成功であったと自己評価できる。その実績は上記のプロシーディングズの充実した内容に反映されている。

本研究はフランスにおける都市史研究者との学的交流および現地調査にもとづくテリトリオおよびインフラ研究、都市文化、都市社会史の研究深化を目的とするものである。具体的には2017年3月6日より16日の10日間、研究代表者伊藤毅ほか10名によって、現地研究者ジャン・ルー・アベ教授(トゥールーズ大学フランス中世史)、モニク・ブーラン教授(パリ第一大学中世史)、ジルベール・ラルギエ教授(ペルピニアン大学)の3名との学術交流を行った。また現地滞在中、継続して実施している南フランスの都市・集落のフィールド調査を行った。具体的には南フランスのナルボンヌ、カペスタン、クリュジーの都市・建築調査を実施するとともに、中近世の史料をカルカッソンヌに所在する公文書館、ナルボンヌ文書館にて収集した。今回の渡仏によって本研究課題全体にかかわる重要な論点が多数獲得できた。本研究は平成27年度中に実施するはずであったフランス都市史研究者との学的交流および現地調査がテロによるフランスの非常事態宣言による実現できなかったプロジェクトを翌年度に繰り越して行ったものである。このプロジェクトが実施できることになり、その成果は2018年3月に刊行される『南フランスの建築と都市(仮)』に反映する予定である。現地訪問が1年遅れたため、そのキャッチアップのため、頻繁に研究会を開催し、成果のアウトプットに全力を注いでいる。したがって進捗状況において大きな問題はないと考えている。平成28年度からの繰越予算は都市史学の確立と展開に向けて必要不可欠と考えている「島嶼論」が主体となった。具体的にはアイルランドおよびアイスランドにおける都市・建築現地調査および文献調査を行い、大きな成果と知見を得た。まずアイスランドについては、首都ダブリンにおける都市形成と建築調査を実施し、ジョージアン・ダブリンの成立背景を探った。アイルランドにおける18世紀の建築・都市動向はイングランドからの影響は認められるものの、アイルランド独自の発展を明らかにすることができた。イングランドからの有名建築家の作品はいくつか存在するが、アイルランドで力量を発揮した地元建築家の存在や建築を下支えするさまざまな職人の活躍が明らかになり、従来指摘されてこなかった側面を見いだすことができた。島国という立地条件が大きく影響している。アイスランドは人口わずか33万人の小国であるが、そのほとんどが首都レイキャビクに集中している。一方、地方には9世紀以降のノルウェーからの入植に応じて小さな集落が多数形成され、彼らはターフハウスと呼ぶ独自の建築形式を採用した。一方、アイスランドは国の中央にユーラシア大陸と北米大陸を分かつプレートの裂け目(ギャウ)が縦断しており、初期アイスランドの議会はこのギャウという特異な場を中心に発展した。アイスランドは火山がいまなお活動しており、地熱発電、間欠泉などが存在する一方、巨大な氷河がいまなお国の東側一帯に横たわっており、さまざまな地形・地質条件を下敷きとした領域形成、集落形成、都市形成が実現したことを本フィールドから明らかになったことは特筆すべき成果である。この成果は現在論文化すべき準備中である。
児童の積極的授業参加行動の規定要因とその発達的変化に関する研究

本研究では,児童にみられる授業への積極的な参加行動を「積極的授業参加行動」とし,「注視・傾聴」,「挙手・発言」,「準備・宿題」の3つに分類した上で,社会的・人格的要因の影響とその発達的変化について検討を行った。5因子性格特性・自己意識・学級適応・学級内での友人関係を取り上げ,検討した結果,全ての積極的授業参加行動に共通する関連も示されたが,3つの行動に特徴的な影響も見られた。我々は,児童にみられる授業への積極的な参加行動を「積極的授業参加行動」とし,「注視・傾聴」,「挙手・発言」,「準備・宿題」の3つを抽出したうえで,その様相や加齢に伴う変化を検討してきた(布施・小平・安藤,2006)など。積極的授業参加行動と動機づけの関連について自己決定理論(Ryan & Deci,2000)に基づいて調査を行った(安藤・布施・小平,2008)ところ,「注視・傾聴」と「準備・宿題」は,自律性の高い外発的動機付け(高自律的外発的動機づけ),内発的動機づけのいずれとも関連をしていた。一方,「挙手・発言」は内発的動機づけとは関連していたが,高自律的外発的動機づけとの関連はほとんど見られなかった。このことから,高自律的外発的動機づけを持っており,「注視・傾聴」を行うものの「挙手・発言」を行わないという児童がいることが示唆された。このことから,積極的授業参加行動を促進するためには,動機づけ要因に害の規定因についても検討を進める必要があると考えられる。そこで,本研究では動機づけ要因以外の社会的・人格的な要因が積極的授業参加行動に及ぼす影響について検討する。まず,どのような社会的・人格的要因が積極的授業参加行動に影響するのかについて検討する。さらに,それらの社会的・人格的要因の発達的な変化と,積極的授業参加行動の変化との関連について明らかにする。そのために,社会的・人格的要因と積極的授業参加行動の変化に関して縦断的に調査を実施する。本研究により,児童の学習行動のより深い理解のみならず,クラス内での人間関係や学級経営といった教師の指導に関しても有効な知見を提供することができると考えられる。我々は,児童にみられる授業への積極的な参加行動を「積極的授業参加行動」とし,「注視・傾聴」,「挙手・発言」,「宿題・準備」の3つを抽出したうえで,その様相や加齢に伴う変化を検討してきた(布施・小平・安藤,2006など)。積極的授業参加行動と動機づけの関連について自己決定理論( Ryan & Deci, 2000)に基づいて調査を行った(安藤・布施・小平,2008)ところ,「注視・傾聴」と「準備・宿題」は,自律性の高い外発的動機づけ(高自律的外発的動機づけ),内発的動機づけのいずれとも関連をしていた。このことから,積極的授業参加行動を促進するためには,動機づけ要因以外の規定因についても検討を進める必要があると考えられる。そこで,本研究では動機づけ要因以外の社会的・人格的な要因が積極的授業参加行動に及ぼす影響について検討した。

具体的には,児童の学級内での対人関係および自己意識の発達的変化が積極的授業参加行動に及ぼす影響を検討するために,小学校3年生から6年生を対象とした,縦断調査を実施した。また,現職の小学校教員および教職志望の大学生を対象としたインタビュー調査結果を分析し,積極的授業参加行動の規定因と対処について,検討した。我々は児童にみられる授業への積極的な参加行動を「積極的授業参加行動」とし,「注視・傾聴」,「挙手・発言」,「準備・宿題」の3つを抽出し,その様相や加齢に伴う変化を検討してきた(布施・小平・安藤,2006など)。過去の研究では,児童の動機づけが積極的授業参加行動に及ぼす影響について検討を行ったが(安藤・布施・小平,2008など),本研究では動機づけ要因以外の社会的・人格的な要因が積極的授業参加行動に及ぼす影響について検討した。まず,現職の小学校教員および教職志望の大学生を対象としたインタビュー調査結果を分析し,積極的授業参加行動の規定因と対処について検討した。その結果,教師の考える積極的授業参加行動の規定因は大きく2つに分類された。1つは,児童の個人に帰せられる要因であり,性格・認知・能力・動機づけなどが挙げられる。もう一つは,児童以外の要因であり,教師・他の児童・家庭などであった。3つの積極的授業参加行動によって多少の違いは見られるものの,これらに要因が相互に影響しあって,児童の授業参加に影響していると考えられた。これらの要因の中から,人格的要因として,5因子性格特性と自己意識,社会的要因として学級適応と学級内での友人関係を取り上げ,積極的授業参加行動との関連を検討した。性格特性においては,良識性と知的好奇心が積極的授業参加行動全体と関連していた。自己意識は,私的自己意識とは正の関連が,公的自己意識とは負の関連が示された。また,学級適応との関連は,男女で異なる結果であったが,「居心地の良さの感覚」が「挙手・発言」を促進するという傾向は,一貫して見られた。さらに,学級内の友人関係を測るために,ソシオメトリック・テストを実施した結果,他の児童からの多く選択されるほど,積極的授業参加行動を多く行っていた。さらに,調査を縦断的に行い,発達的変化が及ぼす影響について,検討を行った。本研究では,児童にみられる授業への積極的な参加行動を「積極的授業参加行動」とし,「注視・傾聴」,「挙手・発言」,「準備・宿題」の3つに分類した上で,社会的・人格的要因の影響とその発達的変化について検討を行った。5因子性格特性・自己意識・学級適応・学級内での友人関係を取り上げ,検討した結果,全ての積極的授業参加行動に共通する関連も示されたが,3つの行動に特徴的な影響も見られた。当初の補助事業期間は,平成26年度までであったが,調査協力校の都合により,調査実施時期が平成26年度末になってしまった。そのため,補助事業期間の延長申請をし,調査結果の分析および報告書の作成を平成27年度に行う予定である。ただし,調査自体は完了しているため,報告については予定通り実施可能であると考えている。教育心理学平成27年度には,昨年度までに実施した調査について分析を行い,報告書の作成と研究成果の発表を行う予定である。平成25年度には,まず24年度に未達であった小学校教員および教職を志望する大学生・大学院生に対する面接調査を実施した。予定している調査対象数をやや満たしていないため,今後も調査を継続して行う予定であるが,おおむね順調に進展している。また,面接調査に基づき,積極的授業参加行動に影響すると考えられた自己意識および学級内での対人関係を取り上げ,積極的授業参加行動との関連について検討を行った。対象としては小学校3年生から6年生を対象とし,学年差について横断的な検討を行った。