hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
移植小腸腸管神経再生における神経ペプチドの分子生物学的作用の解析

平成18年度に引き続き、ラットを用いた異系同所性小腸移植モデル作成に取り組んだ。しかし、神経再生の評価、慢性拒絶反応の評価を行うための中期-長期生存が得られず、予定の研究実施期間中に目的とした研究結果が得られなかった。しかし、約1ヶ月の生存が得られたラットを対象に、抗c-kit抗体を用いたCajal細胞の検索を行ったところ、以下のような結果が得られた。Cajal細胞は腸管神経と同様に消化管運動に不可欠な細胞である。Cajal細胞はc-kitを発現しており、抗c-kit抗体を用いて、神経ペプチド投与群と非投与群について検索し、比較検討した。Cajal細胞は腸管神経節細胞と同様に、FK506の影響を受け、その数が減少していた。神経ペプチド・ボンベシンを投与した群においては、細胞数が維持されていた。FK506は腸管神経節のみならず、Cajal細胞に対しても障害性の影響をもたらし、ボンベシンはその影響を軽減し、細胞を維持することができる、という結果を得た。この要旨は平成19年9月にアメリカ・サンタモニカで開催された第10回国際小腸移植シンポジウムにおいて採用され、口演発表した。また、この実験結果内容をまとめ、Journal of Pediatric Surgeryに投稿。査読の上、論文採用され、平成20年度中に掲載される予定である。ラット異系同所性小腸移植については今後も継続して実験を行い、研究目的の神経再生についての評価を行う予定である。これまでの自実験結果をふまえ、強力な免疫抑制下においても消化管機能および腸管神経機能を低下させず、さらに神経再生を促す管理方法を開発するべく実験を開始した。ラット異系同所性小腸移植モデル作成の確立を行うべく、実験を開始した。これまでの血流再建方法はカフ法と呼ばれる簡易な方法を用いていたが、より臨床の移植方法に近づけるため、血管吻合法に変更したところ、約3日間の生存は得られるものの、虚血再灌流障害や急性拒絶反応により長期生存を得ることができなかった。このため、国内外研究者に助言を求め、FK506投与量や移植手技、移植後早期の管理方法に若干の変更を加え、実験を継続しているが、評価に値する移植腸管標本が未だ十分に得られていない状況である。平成19年度も継続して同所性小腸移植モデルの確立を行う予定であるが、現在は解析を進めるためにこれまでに研究成果を得ているカブ法による実験モデルを暫定的に平行して使用し、採取したグラフト腸管を解析に用いている。腸管神経と同様に消化管運動に不可欠な細胞であるカハール細胞についての検索をc-kit抗体を用いて行っている。神経ペプチドの投与によりカハール細胞も萎縮が予防され、維持されるという結果を得、現在、報告の準備中である。また、神経ペプチドが腸管を構成する組織・細胞のどの部分に作用しているのかを明らかにするべく、レセプターの分布領域につても現在解析中である。
てんかんおよび熱性けいれんの遺伝子解析

1 Severe myoclonic epilepsy in infancy (SMEI)の責任遺伝子としてNa+イオンチャネルSCN1Aにおける多数の変異(ナンセンスミュテーシヨン、フレームシフト、ミスセンスミュテーション)を発見し、GABA-A受容体γ2サブユニットの変異(GABRG2)も関連することを発見した。2常染色体優性夜間前頭葉てんかんで発見した遺伝子CHRNA4(Ser284Leu)機能を解析し、この変異によりAChに対するdesensitizationが速まることを見いだした。3良性家族性新生児けいれんの責任遺伝子CKNQ3についてKCNQ2の新たな変異を同定したが、この病態として生直後には興奮系のglutamateが機能しているが、抑制系であるGABAは機能していない。そのためM-currentを産生するKCNQ2、KCNQ3に変異があると発作が起こり、生後数週間してGABAが抑制機能を発揮し出す段階で発作が消退するという機序を見いだした。5 Lafora病の遺伝子EPM2Aの機能解析を行い、典型例はエクソン4に存在する変異が、非典型例ではエクソン1に存在する変異が主に関与することを明らかにし、さらにlaforinのcarbohydrate-binding domainとdual phosphate domainのそれぞれ異なった役割を明らかにした。6我々がSMEIに見いだした変異は患者の60%以上を説明するが、他の遺伝子の関与も否定できないため、熱性けいれん遺伝子探索と共にゲノムワイドスキャンを近く開始する。発見したヒト遺伝子変異を組み込んだタランスジェニックラットの機能は解析中である。多くの研究結果が得られたが、その重要な発見のみを以下にまとめる。1結論が得られていないJuvenile myoclonic epilepsy(JME)の遺伝子座位については、日本人JME患者15家系で検討し、6p21.1-p11(D6S294-D6S428)が最も原因遺伝子に近く、D6S294で最大lod score 2.953を得ており、15番染色体ではなく、6番染色体短腕上にその原因遺伝子が存在する可能性が高い。4熱性けいれんに全般発作を合併する家系(GEFS+)の新たな責任遺伝子としてSCNA1における新たなmissense mutationを発見し(投稿中)、さらに部分発作を合併する(FS+type2)家系の新たな遺伝子異常を発見した(投稿中)。5これらの結果に基づいて、少なくとも、本態性てんかんの一部はチャネル病であるとの作業仮説を提唱した。2.てんかん発作を伴うchorea acanthocytosisの責任遺伝子である新奇蛋白choreinを同定した。3.Severemyoclonic epilepsy in infancy(SMEI)の責任遺伝子として、Na+イオンチャネルSCN1Aにおける複数の変異を同定し、SMEIにはGABA-A受容体のγ2サブユニットの変異も関連することを発見し、投稿中である。5.良性家族性新生児けいれんの(BFNC)責任遺伝子であるKCNQ2,3が発作を起こすが、その発作発現と消失に関わる分子病態を明らかにした。6.以上のような研究の進展に伴い、2002年度は欠神発作などの頻度の高いてんかん類型の遺伝子座位を決定する目的で、ゲノムワイドスキャンを行う予定である。1 Severe myoclonic epilepsy in infancy (SMEI)の責任遺伝子としてNa^+イオンチャネルSCN1Aにおける多数の変異(ナンセンスミュテーション、フレームシフト、ミスセンスミュテーション)を発見し、GABA-A受容体γ2サブユニットの変異(GABRG2)も関連することを発見した。しかし、SCN2A, SCN1B, SCN2Bに変異はなかった。3良性家族性

新生児けいれんの責任遺伝子CKNQ3についでKCNQ2の新たな変異を同定したが、この病態として生直後には興奮系のglutamateが機能しているが、抑制系であるGABAは機能していない。そのためM-currentを産生するKCNQ2、KCNQ3に変異があると発作が起こり、生後数週間してGABAが抑制機能を発揮し出す段階で発作が消退するという機序を見いだした。5 Lafora病の遺伝子EPM2Aの機能解析を行い、典型例はエクソン4に存在する変異が、非典型例ではエクソン1に存在する変異が主に関与することを明らかにし、さらにlaforinのcarbohydrate-binding domainとdual phosphate domainのそれぞれ異なった役割を明らかにした。6同定したchorea acanthocytosis遺伝子choreinの遺伝子多型をさらに解析し、新たな変異を発見した。7我々がSMEIに見いだした変異は患者の60%以上を説明するが、他の遺伝子の関与も否定できないため、熱性けいれん遺伝子探索と共にゲノムワイドスキャンを近く開始する。発見したヒト遺伝子変異を組み込んだタランスジェニックラットの機能は解析中である。
遺伝子発現を指標にした卵質評価方法の開発

昨年度、FITC標識したビテロゲニン(Vg)を用い、Vgの卵母細胞への取り込みを蛍光でモニターする技術を開発した。さらに培養条件下でFITC-Vgが取り込まれれば、卵母細胞を培養条件下で発生し、ビタミンA等の栄養素が卵成熟に及ぼす影響を培養条件下で解析できるのではと着想した。FITC-Vgを加えた培地でゼブラフィッシュの卵母細胞を培養したが、残念ながらFITC-Vgは濾胞細胞の表面で留まって卵母細胞には取り込まれず、想定した培養系は実現しなかった。環境水中の汚染物質が胚に及ぼす影響を調べることを目的として、ダイオキシンに代わる標準毒性化合物であるジクロロアニリン(DCA)に胚を曝露して、シトクロムP450系酵素(cyp1aとアリル炭化水素受容体ahrの発現を解析した。その結果、孵化前の胚ではDCAによってcyp1aの発現が体表の表皮細胞で強力に誘導され、ahrの発現は変動しないことが分かった。cyp1aの発現により、環境汚染物質の胚への影響をモニターできる可能性が考えられた。メダカ胚を用いた実験で、過剰なレチノイン酸(RA)は脊椎骨融合を起こし、RA欠乏は脊椎骨の低形成を起こすことが分かったので、RAの脊椎骨発生における役割を解析することを目的として、RA合成酵素raldh2、RA分解酵素qyp26a1、RA受容体rara1、RA応答遺伝子shhの発現をトラフグ仔魚で解析した。raldh2は脊椎骨に隣接する脊髄と腹大動脈で発現し、rara1は脊椎骨を形成する骨芽細胞で発現し、shhは権間靱帯および脊索鞘を挟んで位置する脊索細胞で発現することが分かった。これらの結果から、背骨の発生に必要なRAは脊髄と腹題動脈から供給され、主に椎体を形成する骨芽細胞と椎間板部分で利用されているものと考えられた。魚類増養殖の種苗生産では、良質な卵を安定的に生産する技術開発が必須である。卵の品質は卵質と呼ばれ、受精率、孵化率、浮上率、奇形率で表されている。魚類胚は卵黄中に蓄積された栄養素を使って発生することから、親魚飼料の栄養組成によって卵質が影響されることは疑いない。本年度は、受精卵の卵黄に各種栄養素を顕微注入し、胚発生への影響を解明することにより、栄養素と卵質との関係を生物学的側両から検討することを目的とした。発生研究により、レチノイン酸は発生に必須のシグナルであるが、実験的に胚をレチノイン酸に曝露すると脳、心臓、下顎に強い形態異常が発症することが分かっている。実際の受精卵では、レチノイン酸の前駆体であるレチノールが蓄積されているので、まずレチナールを受精卵の卵黄に注入することにより、レチナールが胚発生に影響するかどうかを検討した。顕微注入により卵黄中レチナール含量を正常値の4倍にすると、脳、心臓、下顎に強い形態異常が発症し、孵化率は5%程度に低下した。従って、卵黄中のレチナールの過剰な蓄積は、形態異常や孵化率の低下を起こすことによって、卵質を低下させる可能性が示唆された。レチナール以外にβ-カロテンからレチノイン酸が合成される経路も存在するが、卵黄中のβ-カロテン含量を正常値の20倍に過剰にしても、胚発生に異常は認められなかったことから、β-カロテンは高濃度に卵中に蓄積されても、卵質に悪影響をおよぼさないと考えられた。次に遺伝子発現を指標にして卵質を評価する技術開発を目的として、1個の胚からmRNAを精製し、個体別にリアルタイムPCRで遺伝子発現を定量できるかどうかを検討した。β-アクチン、レチノイン酸受容体(raraa, rarab, rarb)の発現を測定したところ、1個の胚でも、十分にりアルタイムPCRで遺伝子発現を定量できることが明らかになった。魚類増養殖の種苗生産の効率化には、孵化率と正常発生率が高い良質な卵を安定的に生産する技術開発が必須である。本研究は、母性由来で蓄積される卵黄中栄養素が卵質に及ぼす影響を分子・遺伝子レベルで解析することを目的とする。昨年度は、卵黄中レチノイド、カロテノイドが発生制御遺伝の発現やストレス耐性に及ぼす影響を解析した。本年度は、飼料中栄養素が母親の体内で起こる卵発生に及ぼす影響を解析することを目的として、ゼブラフィッシュを用いて卵巣におけるレチノイド代謝酵素とレチノイン酸受容体の発現をin situハイブリダイゼーション法によって解析した。卵黄蓄積初期の若い卵母細胞が、レチノイン酸分解酵素Cyp26a1、レチノイン酸受容体Rara-βおよびRarγを極めて強く発現し、レチノイン酸合成酵素raldh2も弱く発現することが明らかになった。卵巣におけるレチノイン酸関連遺伝子の発現に関する報告はこれまでになく、今回得られた結果は、ビタミンAが卵発生自体でも重要な役割を果たしており、餌中ビタミンAが卵形成を介して卵質に影響を及ぼす可能性を示唆するものである。本年度はさらにビタミンA等の栄養素が卵発生に及ぼす影響を解析するため、卵母細胞の新しい培養系の開発を試みた。エストロゲンを注射してビテロゲニン合成を促進した水疱眼の水疱からリンパ液を採取し、このリンパ液をゼブラフィッシュ卵巣の維持培地に添加することにより試験管内でビテロジェネシスを再現するというものである。

予備実験として、リンパ液中のビテロゲニンをFITCで標識して、ゼブラフィッシュ雌の腹腔に注入し蛍光観察したところ、FITC標識-ビテロゲニンが卵母細胞中に取り込まれることが観察された。水疱眼由来ビテロゲニンを添加した培地で、ゼブラフィッシュ卵巣を培養する実験系を開発できる可能が考えられた。昨年度、FITC標識したビテロゲニン(Vg)を用い、Vgの卵母細胞への取り込みを蛍光でモニターする技術を開発した。さらに培養条件下でFITC-Vgが取り込まれれば、卵母細胞を培養条件下で発生し、ビタミンA等の栄養素が卵成熟に及ぼす影響を培養条件下で解析できるのではと着想した。FITC-Vgを加えた培地でゼブラフィッシュの卵母細胞を培養したが、残念ながらFITC-Vgは濾胞細胞の表面で留まって卵母細胞には取り込まれず、想定した培養系は実現しなかった。環境水中の汚染物質が胚に及ぼす影響を調べることを目的として、ダイオキシンに代わる標準毒性化合物であるジクロロアニリン(DCA)に胚を曝露して、シトクロムP450系酵素(cyp1aとアリル炭化水素受容体ahrの発現を解析した。その結果、孵化前の胚ではDCAによってcyp1aの発現が体表の表皮細胞で強力に誘導され、ahrの発現は変動しないことが分かった。cyp1aの発現により、環境汚染物質の胚への影響をモニターできる可能性が考えられた。メダカ胚を用いた実験で、過剰なレチノイン酸(RA)は脊椎骨融合を起こし、RA欠乏は脊椎骨の低形成を起こすことが分かったので、RAの脊椎骨発生における役割を解析することを目的として、RA合成酵素raldh2、RA分解酵素qyp26a1、RA受容体rara1、RA応答遺伝子shhの発現をトラフグ仔魚で解析した。raldh2は脊椎骨に隣接する脊髄と腹大動脈で発現し、rara1は脊椎骨を形成する骨芽細胞で発現し、shhは権間靱帯および脊索鞘を挟んで位置する脊索細胞で発現することが分かった。これらの結果から、背骨の発生に必要なRAは脊髄と腹題動脈から供給され、主に椎体を形成する骨芽細胞と椎間板部分で利用されているものと考えられた。
単層グラフェン多孔質電極を用いた高容量・高電圧型電気二重層キャパシタの開発

鉛電池並の高いエネルギー密度をもつ電気二重層キャパシタを開発するためには、高い比表面積と黒鉛並みの高い導電性をもち、かつ高電圧下でも腐食しない炭素電極材料が必要である。とくにエネルギー密度は印過電圧の二乗に比例するので、4 V超級の耐電圧特性があれば、これだけで活性炭電極の約3倍のエネルギー密度の向上が見込める。従来の炭素材料では、比表面積と耐食性はトレードオフの関係にあり両立は不可能であった。しかし「エッジサイトの無い単層グラフェンの3次元連続体からなる多孔質炭素」は全ての条件を満たす。そこで鋳型炭素化法を用いてこの理想構造を実現し、高電圧電気二重層キャパシタの電極として応用する。鉛蓄電池並みの高いエネルギー密度を持つ電気二重層キャパシタを開発するためには、高い比表面積と高い導電性を持ち、なおかつ高電圧下でも腐食しない炭素電極材料が必要である。この条件を満たす材料として、エッジサイトのない単層グラフェンの三次元連続体からなるモノリス状多孔質炭素を開発する。エッジサイトのない単層グラフェンの新たな三次元構造を生み出す優れた方法論を開発するものであり学術的意義が高い。また、単層グラフェンのモノリス状多孔質炭素の開発により蓄電エネルギー密度の格段の向上が可能となり、炭素材料を利用した革新的電池の創製が期待できる。
強制外交と非強制外交の政策代替性

2018年度では、これまでの研究成果をまとめた論文を学術雑誌に投稿した。論文内容は以下の通りである。既存の実証的な戦争研究は、勢力均衡が戦争と結びつきやすく、平和はパワーの格差が顕著な2国間で維持されやすいことを明らかにしてきた。それでは、パワーの格差が顕著な2国間のうち、相対的に強い側は戦争以外のどのような方法を使い相手から自分の欲するものを獲得するのだろうか。可能性として2つの取引形態を考えることができる。1つは、暴力の脅しなどを利用し、相手から強制的に財を奪い取る強制外交(coercive diplomacy)である。もう1つは、相手から財を提供してもらう代わりに自分も相手にサイドペイメントを与えることでお互いが得をする自発的交換(voluntary exchange)である。既存の理論的な外交研究は、自発的交換の可能性を排除したモデルを使い強制外交の条件を分析するか、強制外交の可能性を排除したモデルを使い自発的交換の条件を分析するのみである。本論文の理論的な貢献は、強制外交と自発的交換の可能性を同時に考慮したモデルを使い、相対的なパワーと外交形態の関係を明らかにする点にある。また、本論文は理論的に導出された仮説を様々なデータを使い検証し、ある国が強制外交を使用するのはその国が相手より弱すぎず強すぎない場合であること、そして相手より顕著に強い国は強制外交ではなく自発的交換を通して相手と取引することを明らかにする。また本研究のテーマとも関連する、非対称的なパワー・バランス下での国家間紛争に関する別の論文を学術雑誌から出版した。今現在、パワーと外交形態の関係に関する論文をもう1つ執筆しており、今年度中にそれを完成させ学術雑誌に投稿する予定である。国際政治学、特に軍事紛争研究において、国家のパワーは強制力、そしてそれに対抗する抑止・防衛力の源泉として捉えられてきた。既存研究は、この伝統的な『パワー=強制力』モデルに従い、国家の相対的なパワーが増大すると当該国家が武力の脅しや使用を伴う強制外交を使用する確率は単調的に増加すると理論的・実証的に主張する。しかし、この見解には問題がある。なぜなら、伝統的な紛争モデルは、パワーの大きさが強制外交(ムチ)だけでなく非強制外交(アメ)の有効性にも影響を与える可能性を捨象しているからである。国家のパワーは、相手の行動をコントロールする能力としてしばしば定義され、それは主に戦争遂行に必要な軍事的・経済的資源の大きさによって測定される。したがって、強い国、すなわち軍事的・経済的資源を多くもつ国は、相手国の行動を強制的にコントロールできるだけでなく、その資源を安全保障や経済援助として他国に供与することで相手国の政策を非強制的な形で買収することもできるはずである。伝統的な『パワー=強制力』モデルの問題は、国家のパワーが非強制的な形で使用される可能性、つまり他国から譲歩を引き出す手段としてパワーの源泉となる資源を等価交換として与える可能性を予め排除する点にある。本研究は、パワーに内在する強制的・非強制的な側面を同時に考慮した外交理論を構築し、相対的なパワーの大きさが強制外交および非強制外交の選択にどう影響を与えるかを計量的なデータを使って実証する。具体的には、同盟や経済援助といった領域において、どの国がどの国に対していつ非強制外交を行ったかに関するデータを新しく収集し、強制外交が非強制外交によって代替される因果メカニズムを明らかにすることが本研究の目的である。科研費申請時に掲げた平成29年度の計画通りに、同盟の形成・維持を通じた他国への安全保障と金銭の供与や貸与を通じた他国への経済支援という二つの代表的な非強制外交に関するデータ・セットの構築を行った。そして、そのデータ・セットを用いて統計分析を行い、その結果をワーキング・ペーパーとしてまとめ、American Political Science Associationの年次総会において発表した。また、本研究と密接に関連する内戦暴力に関する代替性(内戦において反乱組織が特定の市民にターゲットを絞る差別的な暴力を使うか、それともターゲットを絞らずに無差別に暴力を使用するか)の共同研究結果を紛争研究における雑誌Journal of Peace Researchにおいて発表し、Nils Petter Gleditsch Article of the Year Award 2017を受賞した。

また、本論文は理論的に導出された仮説を様々なデータを使い検証し、ある国が強制外交を使用するのはその国が相手より弱すぎず強すぎない場合であること、そして相手より顕著に強い国は強制外交ではなく自発的交換を通して相手と取引することを明らかにする。2018年度では、これまでの研究成果をまとめた論文を学術雑誌に投稿した。また本研究のテーマとも関連する、非対称的なパワー・バランス下での国家間紛争に関する別の論文を学術雑誌から出版した。平成30年度における基本的な方針は、まず様々な研究者からのコメントやフィードバックをもとに、昨年度発表したワーキングペーパーを加筆修正した後すみやかに雑誌へ投稿する。また、目に見えない強制外交(暗黙的な脅し)を考察するために、regime-switchingモデルを使った新たな計量分析を行い、その結果を別のワーキングペーパーにまとめ学会で発表する。今現在、パワーと外交形態の関係に関する論文をもう1つ執筆しており、今年度中にそれを完成させ学術雑誌に投稿する予定である。主に、当初予定していたコンピューターなどの購入(物品費)やRAによるデータ収集(人件費)を次年度以降に見送ったため。当初予定していたコンピューターなどの購入(物品費)やRAによるデータ収集(人件費)を次年度以降に見送ったため。
マイクロ接合を用いたメディカル電子デバイスの作製

各マスメディアで頻繁に取り上げられる少子高齢化社会問題.総務庁統計局国勢調査によると21世紀初頭には我が国における65歳以上の高齢者人口は総人口の25%以上になると予想されている.この高齢化社会の到来にともない,機能低下あるいは喪失した生体組織を人口材料で補完する機会が益々増加すると予測される.加えて,近年の電子デバイス関連のマーケット成長は目覚しく,その規模はわが国の基幹産業である自動車,鉄鋼産業をも凌駕すると予測されている.この両分野およびその境界領域が本研究のターゲットである.本研究の目的は心臓ペースメーカー,カテーテル,ステントを代表とする医療用デバイスにおける安全で信頼性の高いマイクロ接合技術の確立である.溶接プロセスにはマイクロ抵抗スポット溶接を適用した.被接合材としては,電子デバイスに使われるニッケル細線および金メッキニッケル細線,加えて医療用インプラント材によく使用されるSUS304ステンレス鋼細線を用いた.各種材料のマイクロ抵抗クロスワイヤ溶接において電流,通電時間,電極荷重の3大溶接パラメータが微細組織および機械的性質におよぼす影響について調べた.その結果,クロスワイヤ溶接メカニズムは以下の4つのステージで構成されていることが明らかになった.(1)通電前のワイヤの冷間変形,(2)通電開始直後のワイヤ表面層の溶融,(3)ワイヤの変形にともなう初期液相の排出(酸化皮膜の除去,(4)ワイヤ変形をともなう固相接合.これを元に通電開始時の電極荷重を制御することで接合部の組織を最適化することに成功した.また電気配線でよく使用される金メッキの影響についても調べた.金メッキがフィレットを形成することにより,継手性能が向上することを明らかにした.ステンレス鋼ワイヤについても同様のメカニズムであることを明らかにし,溶接後のδフェライトの生成が抑制されることを示した.以上より,マイクロ抵抗クロスワイヤ溶接が医療用(電子)デバイス作製の基礎技術のひとつとして十分適用可能であることを示した.各マスメディアで頻繁に取り上げられる少子高齢化社会問題.総務庁統計局国勢調査によると21世紀初頭には我が国における65歳以上の高齢者人口は総人口の25%以上になると予想されている.この高齢化社会の到来にともない,機能低下あるいは喪失した生体組織を人口材料で補完する機会が益々増加すると予測される.加えて,近年の電子デバイス関連のマーケット成長は目覚しく,その規模はわが国の基幹産業である自動車,鉄鋼産業をも凌駕すると予測されている.この両分野およびその境界領域が本研究のターゲットである.本研究の目的は心臓ペースメーカー,カテーテル,ステントを代表とする医療用デバイスにおける安全で信頼性の高いマイクロ接合技術の確立である.溶接プロセスにはマイクロ抵抗スポット溶接を適用した.被接合材としては,電子デバイスに使われるニッケル細線および金メッキニッケル細線,加えて医療用インプラント材によく使用されるSUS304ステンレス鋼細線を用いた.各種材料のマイクロ抵抗クロスワイヤ溶接において電流,通電時間,電極荷重の3大溶接パラメータが微細組織および機械的性質におよぼす影響について調べた.その結果,クロスワイヤ溶接メカニズムは以下の4つのステージで構成されていることが明らかになった.(1)通電前のワイヤの冷間変形,(2)通電開始直後のワイヤ表面層の溶融,(3)ワイヤの変形にともなう初期液相の排出(酸化皮膜の除去,(4)ワイヤ変形をともなう固相接合.これを元に通電開始時の電極荷重を制御することで接合部の組織を最適化することに成功した.また電気配線でよく使用される金メッキの影響についても調べた.金メッキがフィレットを形成することにより,継手性能が向上することを明らかにした.ステンレス鋼ワイヤについても同様のメカニズムであることを明らかにし,溶接後のδフェライトの生成が抑制されることを示した.以上より,マイクロ抵抗クロスワイヤ溶接が医療用(電子)デバイス作製の基礎技術のひとつとして十分適用可能であることを示した.21世紀の初頭には我が国の人口の25%以上が65歳以上の高齢化社会になることが予測されている.そのため,安全に長期間使用できるインプラント材の開発が進められている.メディカル電子デバイスの小型化は年々進んでおり,それと並行してマイクロ接合の必要性が高まってきている.たとえば心臓ペースメーカにおける電気回路にはNiやPt線の配線が必要な場合もある.本研究では,メディカルデバイスとして古くから使用されているSUS304ステンレス鋼ワイヤおよびNiワイヤを抵抗マイクロ溶接し,その接合メカニズムを明らかにし,それに基づいてプロセスおよび継手性能の最適化を図ることを目的とした.ステンレス鋼ワイヤおよびNiワイヤともに接合界面にナゲットは形成されず,固相接合が基本であることが分かった.継手強度は溶接電流が増加するとともに上昇し,過電流条件では母材強度が劣化した.また,継手強度は溶接時間に対してはあまり大きな依存性は認められなかった.電極荷重はワイヤ間の接触電気抵抗と密接な関係があり,接合面のジュール熱を利用する抵抗溶接にとっては溶接条件の中でもっとも重要視すべきはパラメータであった.接合メカニズムは,(1)ワイヤの冷間変形,(2)通電開始直後の局部溶融,(3)ワイヤの温間変形にともなう液相の排出,(4)固相接合,で構成されることが明らかになった.またラージスケールの抵抗クロスワイヤ溶接では,セットダウンを継手性能評価パラメータとして使用する場合が多いが,セットダウンだけでは継手性能を正確に評価できないことを上の接合メカニズムに基づいて明らかにした.最適条件で接合したSUS304クロス

ワイヤ継手は擬似体液中で1ヶ月浸漬した後も,強度が劣化することはなかった.現在の高齢化社会を背景に,安全に長期間使用できるインプラント材の開発が進められている,メディカル電子デバイスの小型化は年々進んでおり,それと並行してマイクロ接合の必要性が高まってきている.たとえば心臓ペースメーカにおける電気回路にはNiやPt線の配線が必要な場合もある.昨年度は,メディカルデバイスとして古くから使用されているSUS304ステンレス鋼ワイヤおよびNiワイヤを抵抗マイクロ溶接し,その接合メカニズムを明らかにし,それに基づいてプロセスおよび継手性能の最適化を図った.本年度はメッキされた材料のマイクロ抵抗溶接性について検討した.メディカル電子デバイスにおいて使用される電気配線材料はメッキされることが多く,その溶接性に及ぼすメッキの影響は無視できないほど大きい.金メッキNiワイヤのマイクロクロスワイヤ接合においてもメッキなしの場合と同様にナゲットは形成しない.接合プロセスは,(1)金めっき層の溶融または金/ニッケルのブレージング,(2)液相の排出,(3)固相接合,の3つの段階を経ることが明らかになった.また金メッキの溶接条件に及ぼす影響として,ブレージング効果が明らかになった.Au-Niがブレージングすることにより,継手の得られる最小臨界溶接電流を低下させることに成功した.また,機械的性質に及ぼす影響としては,フィレット効果が認められた.これは排出した液相が継手端部にフィレットを形成することにより,継手形状が非常になめらかになる.そのため,応力集中が緩和され,金メッキしていないニッケルワイヤ継手に比べて継手強度が大幅に改善された.
日本近世の都市近郊農村における経済情報とその管理に関する基礎的研究

近世の都市近郊農村が収集する経済情報は、中央市場における各種の相場や売買の情報だけではなく、その地域の市場における様々な情報に関心が高いことが伺えた。それは自らの農業経営や年貢納入の際に関係してくる、地方市場における相場等への対応であった。様々なネットワークを活用しその情報を個別的な家や村自体に収集することがなされたわけである。このような事例が確認できたことは、大きな成果と言えるだろう。1,初年度である20年度は、研究責任者がこれまで収集してきた村方文書史料の整理調査をおこなう計画であった。この計画に基づき、これまで収集してきた多摩郡梅坪村「谷津英一家伝来文書群」の整理と調査をおこなった。谷津家に残存する全史料の目録化作業を進め、すべての調査を完了した。その上で、冊子形態の目録を作製した。また、破損が甚大な史料を除いたすべての史料について、デジタルカメラを利用して画像化した。さらにそれを用いて史料データのDVDを作製した。今後の解読・翻刻作業は、この画像データを用いて実施していく。また、データベース化をはかっていくことにしたい。2,公開されている史料の利用については、「都市近郊農村」という範疇に入るものを中心として調査をおこなった。当初の計画通り、人間文化研究機構国文学研究資料館や山梨県立博物館、八王子市立郷土資料館蔵の史料群調査を実施した。さらには、秋田県立公文書館、秋田市立図書館蔵の史料のなかに、いくつか有効な「都市近郊農村」における経済情報を含んだ文書が残存していることから、当該地において、基礎的な調査をおこなった。今後は、対象史料を絞り込み、その収集にあたっていくこととする。1.21年度は、研究責任者がこれまで収集してきた村方文書史料の整理調査をおこなうとともに経済情報を抽出する計画であった。この計画に基づき、これまで収集してきた多摩郡梅坪村「谷津英一家伝来文書群」の調査をおこなった。谷津家に残存する全史料のうち、近世八王子の市に関する史料の翻刻作業を行った。そのうえで、八王子市立郷土資料館所蔵の資料との照合を行い、その記述内容の差異を検討した。また、同史料館所蔵の「小野家文書」の調査を開始した。この「小野家文書」も千点を超える文書群で、これまでにも同市『八王子千人同心史』編纂の折に調査がなされており、その成果を取り込みつつ紙焼き史料を収集し、データベース化をはかっていくことにした。2.公開されている史料の利用については、「都市近郊農村」という範疇に入るものを中心として調査をおこなった。さらには、姫路市立「城郭史研究室」所蔵の酒井忠恭日記にも、有効な「都市近郊農村」における経済情報の記載がみられることから、当該地において、基礎的な調査をおこない、その画像データを収集した。今後は、この史料の翻刻を行い経済情報の抽出をはかっていく。1,平成22年度は、2年間にわたり収取した史料の分析作業を進める。特に経済情報という視点から地方都市を取り上げたのであるから、その差異や特色などもここで分析していく予定であった。いくつか比較検討する地域が存在したが、特に、本年度は、近世八王子宿の米相場についての分析を重点的に行った。浅草蔵前に毎年掲示される「御張紙値段」との比較を中心に、そうした経済情報が、どの程度近郊農村に蓄積されていくのかというプロセスを研究した。2,収集した史料群の翻刻作業も適宜行ったが、その分量が余りにも多かったため、すべてを正確な翻刻史料として整えていくことができなかった。これらの作業を引き続き実施していくことで、これまで発見されてこなかった事実を見いだしうる可能性がある。3,中央市場での経済情報もさることながら、都市近郊農村の場合、その地域で行われる売買から生ずる相場の変動等に対する関心が高いことが理解しうる。これは当然のことであるが、自らの農業経営や年貢納入の際に関係してくるのが、こうした地方市場における相場ある。従って、それらの情報を得るために、様々なネットワークを活用し、その情報を個別的な家や村自体に収集することがなされたわけである。
骨髄細胞の分化に伴う糖脂質生合成系の変換と細胞膜へのアッセンブリ

骨髄細胞が骨髄中で分化を括げ、体内に流れ出てゆくまでに、細胞膜はどの様な変化をするのか、について糖脂質分析とその生合成酵素の変動に焦点をしぼって研究することを目的とした。我々の今までの研究から、ラット骨髄細胞では糖脂質生合成経路に2つの主な系があることを明らかにしてきた。1つはアシアロガングリオシドを経由して【GM_(1b)】を合成する系、もう1つは【GM_3】を経由して【GM_(1a)】や【GD_(1a)】を合成する系である。今回、アシアロガングリオシドがどの様な分化成熟の過程で細胞膜に表現されてくるのかを抗糖脂質抗体を用いて調べた。用いた抗体はアシアロ【GM_1】,アシアロ【GM_2】,フコシルアシアロ【GM_1】、それに最近我々が骨髄中に発見した血液型B型糖脂質に対する抗体である。これらの抗体と骨髄細胞とを反応させた後、螢光標識第二次抗体で細胞を螢光染色し、これをフローサイトメトリーによって分析する方法をとった。この結果、これらの4つの糖脂質は、細胞分化のある特定の段階に細胞膜に表現されることが明らかとなった。赤血球系の細胞では、多染性赤芽球の段階にのみ強く表現され、それ以前や、成熟赤血球にはこれらの糖脂質はほとんど表わされていないことが判った。好中球および好酸球系の顆粒球では骨髄球と前骨髄球に強く表現されることがわかった。これらの事実は、アシアロがングリオシドが分化成熟のある特定な段階で細胞表面に現われ、分化の進むのに従って糖脂質生合成や細胞膜のアッセンブリがダイナミックに変化していることを示すものであった。
移動体通信における高速データ伝送のための多相並列組合せCDMA変複調技術の研究

並列組合せスペクトル拡散(以下PC/SSと略す)通信方式に多相変調を組合わせることで,高速なデータ伝送を可能にした,多相並列組合せスペクトル拡散(MPC/SS)通信方式の変複調技術の研究を行った.本年度は,雑音のみの伝送路における基本的な特性を明らかにし,今後の研究への手掛かりを得ることに重点をおいた.(1)多相変調を用いたPC/SS方式の1ユーザ当りの周波数利用効率について検討した. PC/SS方式は,あらかじめ用意された複数の拡散系列の組の中からいくつかの拡散系列を選び,その組合せを送信することで,1ユーザ当りの周波数利用効率を高くできることがこれまでに分かっている.本研究において,送信する拡散系列に多相変調を併用することにより,1ユーザ当りの周波数利用効率を高めることができ,従来の多相PSK方式よりも高い周波数利用効率を得られることがわかった.(2)送信された拡散系列の位相を推定する際に,受信側で同期検波を用いた場合における記号誤り率およびビット誤り率特性の解析を行った.データ伝送速度と占有周波数帯域が同一の場合の多相PSK変調を用いた直接拡散SS方式と比べて、良好な誤り率特性が得られることを確認した.(3)多相差動PSK(DPSK)を適用し,受信側で遅延検波を用いることで,受信側における搬送波の位相再生を不要にした差動MPS/SS方式について誤り率特性の解析を行った.その結果,従来の差動多相変調を併用した直接拡散SS方式よりも良好な誤り率特性を示すことがわかった.特に,4相DPSKを用いたMPC/SS方式が,データ伝送速度と占有周波数帯域が同一の場合の4相DPSK変調を用いた直接拡散SS方式と比べて,誤り率特性の改善効果が大きいことがわかった.並列組合せスペクトル拡散(以下PC/SSと略す)通信方式に多相変調を組合わせることで,高速なデータ伝送を可能にした,多相並列組合せスペクトル拡散(MPC/SS)通信方式の変複調技術の研究を行った.本年度は,雑音のみの伝送路における基本的な特性を明らかにし,今後の研究への手掛かりを得ることに重点をおいた.(1)多相変調を用いたPC/SS方式の1ユーザ当りの周波数利用効率について検討した. PC/SS方式は,あらかじめ用意された複数の拡散系列の組の中からいくつかの拡散系列を選び,その組合せを送信することで,1ユーザ当りの周波数利用効率を高くできることがこれまでに分かっている.本研究において,送信する拡散系列に多相変調を併用することにより,1ユーザ当りの周波数利用効率を高めることができ,従来の多相PSK方式よりも高い周波数利用効率を得られることがわかった.(2)送信された拡散系列の位相を推定する際に,受信側で同期検波を用いた場合における記号誤り率およびビット誤り率特性の解析を行った.データ伝送速度と占有周波数帯域が同一の場合の多相PSK変調を用いた直接拡散SS方式と比べて、良好な誤り率特性が得られることを確認した.(3)多相差動PSK(DPSK)を適用し,受信側で遅延検波を用いることで,受信側における搬送波の位相再生を不要にした差動MPS/SS方式について誤り率特性の解析を行った.その結果,従来の差動多相変調を併用した直接拡散SS方式よりも良好な誤り率特性を示すことがわかった.特に,4相DPSKを用いたMPC/SS方式が,データ伝送速度と占有周波数帯域が同一の場合の4相DPSK変調を用いた直接拡散SS方式と比べて,誤り率特性の改善効果が大きいことがわかった.
新タイプの高血圧、動脈硬化治療薬としてのCNP関連薬剤の開発

CNPがヒトの脳背髄液中でANP,BNPに比較して有意に高く,また血漿中のCNPと比較しても高値であること,CNPによりアンジオテンシンIIによる抗利尿ホルモン分泌刺激が抑制されることを証明した。また中枢神経系以外に末梢組織においてもCNPが産生されることを明らかにした。更に血管内皮細胞から分泌されるCNPは,インターロイキンIα,Iβ,TNF-α,LPSによって有意に亢進することを明らかにし,動脈硬化,粥状硬化とCNPの関連を示唆した。また敗血症ショックの患者血漿中のCNP濃度が著明に上昇していることを証明した。腎臓上皮由来のLLC・PK_1培養細胞においてはGC・A受容体が主要でCNP受容体であるGC・B受容体はむしろ少ないことを観察した。妊娠子宮においてはGC・A受容体,GC・B受容体共に脱落膜,絨毛膜,子宮筋,胎盤に認められたがGC・A受容体が優位と判断された。一方,羊膜においてはGC・B受容体のみが発現していることが明らかとなった。培養血管平滑筋肉細胞にANP,BNP,CNPを添加すると,C受容体のみがダウンレギュレーションされ,その程度はCNPが最も強力であることが観察された。C受容体のダウンレギュレーションはGC・D受容体/cGMP経路の賦活化によって生じることが証明された。更にノルエピネフリン、イソプロテレノールにる培養血管平滑筋細胞のC受容体のダウンレギュレーションを証明し,C受容体mRNAの減少は遺伝子の転写速度の減少によることも解明した。CNPモノクローナル抗体を開発し高感度のRIAを確立した。この抗体はCNP中和実験に有用であることも確認された。マウスCNP遺伝子は少なくとも2つのエクソンと1つのイントロンより成り5'隣接領域にはcisエレメント,CAリピートが認められた。ヒトのCNP遺伝子は染色体2番に存在するのに対してマウスCNP遺伝子は染色体1番に存在することも明らかにした。1.CNP遺伝子構造の決定:ヒト遺伝子ライブラリーより15kbのヒトCNP遺伝子断片をクローニングし、3kb BamHI-SalI断片の塩基配列を決定した。その結果、ヒトCNP遺伝子は少なくとも2つのエクソンと1つのイントロンより成ると考えられ、その5'隣接領域(1360 base pair)には、inverted CCAATボックス、GCボックス、cAMP応答因子様配列等を認めた。また、human-rodent hybrid DNA解析よりヒトCNP遺伝子が第2染色体に位置することが明らかとなった。更に、BALB/cマウスgenomic DNAより11kbのマウスCNP遺伝子断片を得、現在その構造決定を行っている。2.培養血管内皮細胞からのCNP分泌調節因子の検討:血管内皮細胞からのCNP分泌はtransforming growthfactor-β(TGF-β)等の増殖因子に加え、種々のサイトカインにより調節を受け、特にtumor necrosis factor-α(TNF-α)により基礎値の100倍以上の分泌の亢進を認めた。またエンドトキシンそのものであるlipopolysaccharideも強力なCNP分泌刺激作用を示すことが明らかとなり、新しいペプチド性血管内皮由来弛緩因子としてのCNPの意義が示唆された。

3.血管平滑筋細胞/血管内皮細胞共存培養系の確立とCNP分泌機構の解明及び内皮由来CNPの意義の検討:血管平滑筋細胞と血管内皮細胞の共存培養において、内皮細胞からのCNP分泌は著しく亢進し、分泌亢進した内皮由来CNPにより、血管平滑筋細胞でのcyclic GMP産生も上昇した。更にこの内因性CNPが血管平滑筋増殖に対し抑制的に作用することも明らかとなった。現在血管平滑筋細胞/内皮細胞連関におけるCNP分泌刺激因子を同定中である。4.ヒト及びラット血中におけるCNPの検出:CNPに対し高親和性を有する抗CNPモノクローナル抗体の作製に成功した。これらの抗体を用いて、CNPに対する高感度ラジオイムノアッセイを確立し、ヒト及びラット血中にCNPが存在すること(各々1.4±0.6fmol/ml及び1.2±0.2fmol/ml)を初めて明らかにした。現在各種病態におけるCNPの分泌動態とその臨床的意義を検討中である。1.CNP関連薬剤の開発にあたって、CNPの病態における役割を明らかにする目的で、心血管疾患患者血漿中のCNPを測定した。心不全、高血圧症患者では変化がなかったが、敗血症患者において正常の10倍に達する上昇が認められ、内皮由来のCNPがヒトの病態に密接に関わっていることが明らかになった。2.CNPの生理的役割を知る目的で、脳背髄液中のCNP濃度、妊娠子宮におけるCNP受容体であるGC・B受容体、および培養腎上皮細胞LLC・PK_1におけるGC・B受容体の発現を検討した。ヒト髄液中のCNP濃度は、ANP,BNPに比較して有意に高く、中枢神経系におけるCNPの重要性が示唆された。一方、妊娠子宮、腎上皮細胞では、GC・BよりもGC・A受容体が多く発現しており、ANPが主要な働きをしていると考えられた。3.CNP関連薬剤開発のモデルとして、トランスジェニックマウスを作製する目的で、マウスCNP遺伝子構造を解明した。マウスCNP遺伝子は染色体1番に存在し、少なくとも2個のエクソンと1個のイントロンから成ることを明らかにした。更にCNP中和モノクローナル抗体を開発し、モデル動物における有用性を確認した。4.動脈硬化治療におけるCNP関連薬剤の作用機構を解明する目的で、血管壁におけるGC・A,GC・B,C受容体のカテコラミンによる調節を検討した。その結果、β_2受容体刺激によりC受容体のみがダウンレギュレーションを受けることを見出し、交感神経系と血管壁ナトリウム利尿ペプチド系の関連が明らかとなった。
向社会性の個人差の多面性を探る進化心理学・行動遺伝学的アプローチ

向社会性の個人差の源泉を進化と遺伝の視点から検討した。双生児を対象とした経済ゲーム実験により、利他性を反映すると考えられる独裁者ゲームにおける提案額と、公平性を加味すると考えられる最後通牒ゲームにおける提案額では卵性によるペア内相関に差が見られず、遺伝の影響は小さいものと考えられた。一方で最後通牒ゲームにおける最低受入金額では遺伝の影響が示唆された。大学生を対象とした最後通牒ゲームおよび独裁者ゲームの結果からは、対人操作傾向(マキャベリ的傾向)などが戦略的な対人行動変化を予測することが示された。また両ゲームで態度を変える者ほど、ゲームの選択が可能である場合、独裁者ゲームを好むことが示唆された。利他性についての個人差とその起源を探るために、一般サンプルを対象としたWeb調査を実施した。当初計画では、利他行動にかかわる網羅的リストの作成を予定していたが、大学生を対象とした実用的な利他行動尺度が開発された(SRAS-DR;小田ら, 2013,印刷中;申請者も共著者の一名)ことを受け、本尺度の一般成人サンプルへの適用可能性を検討することが、当初の研究目標の達成のために適当であると判断した。SRAS-DRをパーソナリティ、社会的態度と同時に成人対象者に実施した。調査結果から、大学生を対象とした時とは、SRAS-DRとBig 5パーソナリティ次元との相関パターンが異なることが示唆されている。本データには年齢や性別、居住地域などの人口動態的データが含まれていることから、これらとの関連を見ることで、大学生データと一般成人サンプルの違いをもたらした要因を探り、一般成人対象により適した項目の選別を行うことを予定している。初年度に収集したデータについては、研究会における報告などを通じて分析・検討をすすめているが、論文化に至っていない。大学生を対象とした最後通牒ゲーム・独裁者ゲームの選択ゲーム(場面想定法および現金を用いた戦略法実験)については、Big 5パーソナリティとの関連について分析を進めている。双生児を対象とした最後通牒ゲームおよび独裁者ゲームについては、遺伝環境分析を進め、弱いながらも遺伝の影響が見られることが示されつつある。しかし他国で行われたデータとは異なる結果であり、実験手続きの違いによるものか、文化的な差異が見られるのかについて、検討している。これらについては平成25年度に論文を投稿する予定である。初年度においては経済ゲーム上における個人差の起源を探ることを目的とし、双生児研究協力サフォ対象とした独裁者ゲームと最後通牒ゲームを実施し、小さいながらも遺伝の影響が見られることを示した。また大学生サンプルを対象に独裁者ゲームと最後通牒ゲームの間でゲームを選択可能である場合にいずれが好まれるか検討したところ、場面想定法においては最後通牒ゲームを選択する者がいる一方で、実際に金銭的報酬の含まれるゲームでは合理的な選択(独裁者ゲーム)の選択が重視されることを示した。これらと平行して利他行動傾向の個人差を測定する尺度の開発に携わった。第二年度は初年度において開発された「対象別利他行動傾向尺度」(SRAS-DR)について、この尺度とパーソナリティとの相関を一般サンプルにおいて検討した。また、社会的インパクトの大きな問題(福島第一原発事故)への態度に、SRAS-DR得点がどのように関連しているかを同時に検討した。最終年度においては、前年度までの研究成果として得られた(SRAS-DR)を用いて、向社会性における個人差の構造について調査研究を行った。これまで、血縁個体への利他性を説明する血縁淘汰理論、非血縁個体への利他性を説明する(広義の)互恵的利他主義理論が、向社会性の起源としては中心的に扱われてきた。加えて近年、向社会性が社会的・配偶パートナーを獲得するための方略として持ちられる競争的利他主義の視点が注目を浴びている。最終年度ではSRAS-DRと競争的利他主義傾向との関連について場面想定法を用いたWeb調査を実施した。利他性および公平感についての個人差と、その起源を探るために、大学生を対象とした実験(実験1および実験2)および双生児を対象とした実験(実験2および実験3)を実施した。実験1では、独裁者ゲームと最後通牒ゲームのどちらを選好するか、ゲーム選択を場面想定法質問紙により調べた。いずれのゲームにおいても一定金額を匿名他者一名と自分の相手で配分することを求められるが、独裁者ゲームでは自分が配分額を一方的に決めることができるのに対し、最後通牒ゲームでは相手に配分提案への拒否権が存在する。相手に拒否権を渡さない独裁者ゲームを選ぶことが経済合理的と考えられるが、約半数の参加者が最後通牒ゲームを選択することが示された。

実験2では、実験1の枠組みを実際に金銭をやり取りする経済学実験として実施した。場面想定質問紙であった実験1とは異なり、実験2は集団実験であり、ゲームの相手は匿名とされたものの、同室にいる誰かであることが明らかであったにもかかわらず、最後通牒の選択者は1割未満に減った。こうした選択ゲーム実験は先例がなく、二つの実験の相違が何から生じたのか含め、さらに検討が必要である。実験3は、慶應義塾双生児研究プロジェクトに登録のある257名の双生児研究協力者(三つ子を1組含む)を対象に、慶應義塾大学キャンパスにおいて、独裁者ゲームおよび最後通牒ゲームを、戦略法により実施した。他者への利他性をより純粋に反映すると考えられる独裁者ゲームと、相手からの反発(罰)を考慮した上での行動を反映すると考えられる最後通牒ゲームを同一の参加者に実施することで、社会関係構造の違いに応じた"戦略的利他性"の個人差について、その個人差への遺伝要因および環境要因(家庭環境・家庭外環境)の相対的な影響力を明らかにすることが期待される。データについては現在、分析中である。「実績の概要」で述べたように。向社会性については、個人差を測定する尺度(SRAS-DR)が別に開発されたことから、その多様性について検討するための大きな手がかりが得られた。本尺度について700名からのデータを既に収集済みであり、かつこのサンプルには再アプローチが可能であることから、SRAS-DRを基準として個人差の多様性について検討する調査を実施することは比較的容易と考えられる。一方で、収集済みデータの論文化については遅れている面が否定できない。この背景に申請者の所属変更の影響があったことは影響が否定できないが、1年間をかけて研究体制の整備に務めたので、計画最終年度については予定されていたデータを収集し、論文化を進められるものと考えている。以上から、若干の遅れはあるものの、おおむね順調に進展していると自己評価する。当初の計画では双生児を対象とした実験データの収集は2年目以降に予定していたが、慶應義塾双生児研究プロジェクト自体の今後の計画を検討し、大学キャンパスにおいて実験実施が可能となった初年度に前倒しして、経済ゲーム実験を実施した。もっとも収集が困難と予測された双生児データについて、現時点で300名程度のデータが集められた。今後、データ分析結果によって、2年目、3年目の追加実験を可能とできた点で、前向きに評価している。双生児データ収集を前倒しした分、本来1年目に計画していた利他性のあり方の多様性についての調査は2年目の実施となる。これらについても最終的には双生児データの収集を予定しているが、質問紙調査を予定していることから、その収集は比較的容易と考えられる。以上の観点から「おおむね順調に進展している」と評価する。上述のように、向社会性についての基準となる尺度(SRAS-DR)をベースに、同一サンプルへの追加調査により、個人差をもたらす要因について検討することが一つとなる。また双生児を対象とした調査によりSRAS-DRのデータを収集する予定である。これらに加えて収集済みのデータについて論文化を進めることが計画最終年度の重要な仕事となる。大学生による選択ゲーム(最後通牒ゲームと独裁者ゲームの選択)で1本、双生児を対象とした最後通牒ゲームおよび独裁者ゲーム実験で1本を執筆し投稿する予定である。
ウシおよびマウス卵母細胞のガラス化超低温保存

卵子を耐凍剤液に導入し,その直後から体積の変化を測定する方法を考案した。PB1液中の卵子をマイクロマニピュレーターのホールディングピペットに保定し,カバーピペットを用いて、耐凍剤液へ導入した。耐凍剤液は、1.5M-Acetamide(AA),あるいは1020%(v/v)のEthyleneglycol(EG),Glycerol(GL),Propylene glycol(PG),またはDimethylsulfoxide(DMSO)を含むPB1液とした。卵子の顕微鏡像をタイムラピスビデオに録画し,経時的にプリントした画像から細胞質の相対的面積を測定して卵子の相対的体積を計算し,耐凍剤透過性を比較した。マウス未受精卵の細胞膜透過性はPGが最も高く,次いでDMSO,AA,EGの順で,GL透過性は極めて低かった。いずれの耐凍剤透過性も,温度の上昇と共に高まった。PB1液を蒸留水で薄めた種々の低調液で卵子を処理した結果,未受精卵は受精卵に比べ傷害を受けやすいことが判明した。FicollとSucroseを含む溶液で各耐凍剤を2040%に希釈したガラス化溶液でマウス卵子を超低温保存した結果,細胞膜の透過性の低いGLでは全く生存せず,EGでも生存率は低かった。これに対し,20%AAを含む溶液では保存後の生存性(形態)は高く維持された。しかし,AA液では透過性の測定過程に細胞質の異常がみられ毒性の高いことが示唆されたため,溶液の耐凍剤組成を10%AA+10%EGに改変した結果,保存後の正常形態率はさらに高まった。この方法でガラス化保存した卵子を体外受精した結果,受精率は低かったが,透明帯を除去すると高率に受精したことから,細胞質は正常に維持されたと考えられた。屠場の卵巣由来の牛未受精卵を同じ方法でガラス化保存した結果,形態は正常に維持された。しかし,体外受精後の発育率は低かった。以上の結果,未受精卵のガラス化保存には透過性の高い耐凍剤,中でもAAが適しているが,AAは細胞毒性が高く,透明帯に作用して受精を阻害することが示唆された。
雲南地域の植物性抗がん剤に関する研究

中国大陸各地方における希少生薬植物の採集を行なった。特に雲南省昆明ならびに広西省南寧地方を中心として少数民族居住地域を対象に、雲南省39種、広西省102種の70%エタノール抽出物を調製した。これらにつきP388/ADM、K562/ADMに対する細胞増殖阻害活性を検討し、Gleditsia sinessis Lam(猪牙皀)およびPellionia repens Mer.(吐烟花)から活性成分の分離を進めた。また、Pterocarya tonkinensis Dode(東京楓〓)の皮のアルコール抽出物よりダイアイオンHP20吸着、酢酸エチル抽出、セファデックス・カラムクロマトグラフィー、HPLC(ODS)により結晶性の抗酸化物質を分離した。さらに、Carthamus tinctorius L.(紅花)の熱水抽出物よりエタノール沈殿、ゲル濾過法により中性糖を主成分とする高分子成分を調製した。この成分はマウス脾臓細胞に対する幼若化活性を有し、各種サイトカインの生産を誘導する。FM3A細胞のマウス移植実験ならびにB16メラノーマ細胞の転移モデルにおいて抑制作用を示し、また免疫抑制マウスで真菌感染に対する抵抗性を誘起した。本物質には脂質成分が検出されないが、リポポリサッカライド(LPS)と類似する活性を示すことから作用機構につき比較検討したところ、Tol like receptor4(TLR4)を共通の受容体として持つことが示された。しかし、本物質はLPSに対する感受性の低下したマウスにも有意な活性を示すことからTLR4以外の受容体を経由する活性化過程も存在することが示唆された。