hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
細胞遊走、細胞分裂時の極性形成におけるコフィリン制御機構とその役割

アクチン脱重合因子であるコフィリンは、アクチン骨格の再構築において中心的な役割を果たしており、リン酸化により活性が制御される。本研究では、生細胞内でのアクチン単量体の時空間的変化の測定系を開発し、細胞遊走時の仮足形成におけるコフィリンの重要性を解明した。また、細胞遊走時の極性形成、細胞分裂時の分裂軸決定、癌細胞浸潤、神経突起形成におけるコフィリンのリン酸化制御機構の重要性を明らかにした。アクチン細胞骨格の再構築は、細胞の運動、分裂、極性形成や、神経系構築、免疫応答、癌細胞転移などにおいて重要な役割を果たしている。アクチン脱重合因子であるコフィリンはLIMキナーゼ(LIMK)によりリン酸化、不活性化され、Slingshotによる脱リン酸化により活性化される。本研究では、細胞遊走時の極性(前後軸)形成過程や、細胞分裂時の分裂軸(分裂面)決定過程におけるコフィリン活性の時空間的制御機構を解明し、コフィリンを介したアクチン骨格の時空間的な制御経路が細胞遊走、分裂時の極性形成において果たす役割を解明することを目的として研究を行い、以下の結果を得た。1)細胞極性形成因子として知られるPar1がSlingshotのSer-978をリン酸化し、14-3-3との結合を促進し、活性を負に制御していることを見出した。さらに、Par1のノックダウンは、Slingshotの不活性型や非リン酸化型の過剰発現と同様に、アクチンの重合を誘導することを見出した。以上の結果から、Par1はSlingshotのアクチン結合活性、束化活性を阻害することが示唆された。2)Dronpa・アクチンの蛍光の減衰速度を測定することによって、細胞内アクチンモノマー量の測定に成功し、刺激依存的なアクチンモノマー量の変化を測定した。3)腹水肝癌細胞の浸潤アッセイにおいて、LIMキナーゼとSlingshotの両者の活性が必要であることを明らかにした。4)細胞分裂時におけるLIMキナーゼの活性化が、表層アクチンと星状体微小管の安定化ならびに紡錘体の安定な配置に必要であることを明らかにした。アクチン細胞骨格の再構築は、細胞の運動、分裂、極性形成や、神経系構築、癌細胞転移などにおいて重要である。アクチン脱重合因子であるコフィリンはLIMキナーゼ(HMIOにより不活性化され、Slingshotによる脱リン酸化により活性化される。本研究では、細胞遊走時の極性形成や細胞分裂時の分裂軸決定におけるコフィリンの時空間的制御機構とその役割を解明することを目的として研究を行い、以下の結果を得た。1)細胞極性形成因子Par1はSlingshotのSer-978をリン酸化し、14.3-3との結合を促進する。Par1の発現抑制は、Shngshoもの非リン酸化型の過剰発現と同様に、ストレスファイバ-の形成を促進する。2)カルシウムシグナルの下流でCaMKIVがLIMKを活性化、Shngshotを不活性化し、神経突起の形成に関与することを明らかにした。3)Dronpa-アクチンの蛍光の減衰速度を測定することによつて、生細胞内でのアクチンモノマー量の時空間的変化の測定に成功し、刺激依存的にアクチンモノマ-量が顕著に減少すること、ラメリポディア後方ではG一アクチン濃度が高いことを見出した。4)癌細胞の浸潤仮足の形成においてLIMキナーゼとShngshotの両者の活性が必要であること、3次元培養下での間葉系からアメーバ様運動への変換において.RhoによるLIMキナーゼの活性化が必須であることを明らかにした。5)細胞分裂時におけるLIMキナーゼの活性化が、細胞表層における細胞極性因子LGNの紡錘体極近傍への局在と紡錘体の底面に並行な配置に必要であること、LGNの局在は表層アクチンの重合に依存していることを明らかにした。
子どもを亡くした遺族のグリーフワークを支える社会的ネットワークに関する研究

子どもを亡くした遺族へのケアの実態を明らかにするために、全国の小児病棟の看護師を対象に質問紙調査を実施した。看護師は遺族ケアの必要性を認識しているが、遺族ケアを実践できない現状が明らかになった。また、遺族ケアを行っている看護師を対象とした面接調査を実施した。その結果、遺族ケアを始めた動機は、遺族からの要望や遺族ケアの必要性の認識などであり、看取りケア、葬儀参列、遺族会の運営などを行っていた。調査結果を参考に、子どもを亡くした遺族のサポートグループを設立し、支援者のあり方を検討した。本研究の目的は、子どもを亡くした遺族へのケアの実態およびそれらに関連した看護師の認識を調査し、遺族ケアの課題を明らかにすることである。研究方法は、全国の小児専門病院及び小児病棟526施設に勤務する看護師を調査対象に郵送法による質問紙調査を行い、131の回収があった(回収率24.9%)。遺族ケアには大きなケアニーズがある65.6%、大きくはないがケアニーズがある21.4%を合わせると87.0%の看護師が遺族のケアニーズの必要性を認識していた。遺族ケアとして行っているケアには、葬儀参列、知識や情報の提供、病院外の遺族会やサポートグループの紹介があったが、6090%の病院では今後も遺族ケアの実施予定なしとの回答であった。遺族ケアは、時間外のボランティアが最も多く、ほとんど勤務時間内であるが時間外はボランティアがそれに次ぐ結果だった。遺族ケアを行う上での問題や障害に関する自由記載では、「時間、場所、マンパワーが不足している」「遺族ケアを行うための予算が確保できない」「遺族ケアの必要性の認識が不十分である」「関わる看護師の心理的・身体的・時間的負担が大きい」「遺族ケアを行うための知識や能力が不足している」「遺族ケアの具体的方法やシステムが明確でない」「個々のケースにより求められる対応が異なる」「担当看護師の移動によるケアの継続がむずかしい」「子どもが亡くなるケースが少ないため遺族ケアが実践しにくい」の9のカテゴリーが抽出された。遺族ケアがボランティアで行われている場合は、看護師の時間的・精神的負担があることが推察できる。また、病院や病棟での遺族ケア対象者の数、遺族のニーズ、遺族ケアのシステム、実施コストと効果などを考慮した遺族ケアのあり方について検討していく必要がある。本研究の目的は、看護師が行っている子どもを亡くした遺族へのケアの具体的な内容を明らかにすることである。研究方法は、全国の小児専門病院及び小児病棟を有する各施設の看護師・助産師12名に半構成的面接を実施した。協力者の平均年齢は37歳、遺族ケア経験年数は、24年が6名、1年未満、56年、910年が各2名。所属は、小児病棟、新生児集中治療室(以下NICU)、産科病棟、救急救命センター。遺族会を運営している人2名、現在遺族会の立ち上げ準備中1名、子どもを亡くした遺族へのケアを必要としている状況には、小児病棟やNICUにおける小児がんや先天性疾患などだけではなく、産科病棟での死産、救命救急センターでの事故や乳児突然死症候群などがあった。遺族ケア実施の動機として、「遺族の希望」「遺族の病院訪問や手紙」「遺族会への参画の機会」「遺族ケアの必要性の気づき」「子どもの死の衝撃による遺族ケアへの関心」「子どもや家族との関係性ができていたことによる気がかり」があった。具体的内容には、「看取りケアの充実」「お通夜や葬儀への参列」「手紙やメール面談などによる遺族の思いの傾聴」「遺族の悲しみをいやすためのカードやパンフレットの送付」「理解者となる遺族の紹介」「医療者との子どもが生きていた証の共有」「遺族が安心して自由に話せる場の確保」が挙げられた。遺族ケア実施は、遺族の希望や遺族の病院訪問や手紙などの受け身的な動機がある一方、ケアへの不全感や研修会の参加による遺族ケアの必要性の気づき、子どもの死に対する看護師自身の衝撃を癒すためという自発的な動機の2つの側面があった。また、入院中の子どもや家族との関係の深さが遺族ケアの実施に影響していることが推察できた。本研究の目的は、子どもを亡くした遺族を支援するサポートグループの設立とその支援活動に参与したスタッフの体験から支援者のあり方について示唆を得ることである。子どもを亡くした遺族のサポートグループ設立を周知するために、子どもを亡くした遺族等によるシンポジウムを開催し、約30名が参加した。サポートグループは、2011年6月から隔月で実施し、自由に語り合う形式で行い、参加者の延べ人数は41名であった。サポートグループでの支援者のあり方について示唆を得るために、支援者5名に無記名自記式質問紙調査法で自由記載による回答を求め、データを意味内容ごとにカテゴリー分類して質的に分析した。

支援者の戸惑いには、「新しい活動への緊張や心配」「子どもを亡くした経験がないことによる遺族の気持ちの理解の難しさ」などがあり、「居心地のよい環境作り」「話してもよいと感じられる雰囲気作り」「遺族のニードの察知」「話したくない自由の尊重」などに配慮していた。遺族との関わりから得られたものとして「遺族が笑顔になり癒されていくことへのやりがいや喜び」「遺族との心の通じ合い」「人間らしい豊かで貴重な時間」などがあった。支援者の戸惑いを軽減するために、活動開始前からお互いに支え合える体制作りや学びの共有が必要である。また、物理的な場を提供するだけでなく、自然体で遺族を迎え入れるという雰囲気も大切であること、参加者のニードを察知することや話すきっかけを作ることなどファシリテーターとしての役割が適切に遂行できたか否かについて客観的に評価し、適宜修正していくことが重要である。さらに支援者が遺族支援を肯定的に意味付けることは、支援活動を継続する原動力になると考える。
統計的機械学習理論を用いるシステムの信頼性評価法とその応用に関する研究

多くの実際問題は相競合する目的関数をもつ多目的最適化問題として定式化される。多目的最適化問題ではすべての目的関数を同時に最適化する解は必ずしも存在せず、そのためパレート最適解が導入される。通常パレート最適解はたくさん存在し、その中から目的関数の間にバランスの取れた一つの最終解を選び出すことになる。しかし、工学設計などの実問題では種々の評価関数の形が陽にはわからず、構造解析、熱解析、流体解析等の数値解析によってはじめて設計変数の各値に対する評価関数値が定められることが多い。このような数値解析には多大の計算時間やコストがかかるため、満足のいく解を得るまでに必要とする解析回数は多くなり、従来からよく用いられた最適化手法の適用は現実的に困難である。したがって、最適設計などの問題においてはパレート最適解を求める際、要求される解析数を減らすことが非常に大事な課題である。一方、多点探索ができる進化型アルゴリズムを用いてパレート最適解の全体を生成する手法に関する研究が盛んになるが、得られた解の多様性の維持や最適性の評価法の解決すべき課題がある。そこで、本年度の研究では一般化包絡分析法(以下、GDEAという)による近似パレート曲面の生成法を提案した。意思決定体の効率性を分析するために提案された手法であるGDEAと遺伝的アルゴリズムを融合することにより、より少ない解析数で、より精度のいい近似パレート曲面を生成することができるようになった。さらに、GDEAから得られる解の情報を活用することで、多様性を維持することができるようになった。さらに、様々な数値例を通じて、本研究で提案した手法の有効性について検証した。そこで、本年度の研究ではサポートベクターマシン(以下、簡単にSVMという。)による近似パレート曲面の生成法を提案した。パターン分類や関数近似の手法として提案されたSVMは、非線形写像により各データを原入力空間から高次元の特徴空間に移し、そこで分類超平面を求める。特に、マージンを最大化することによって未知のデータの対する予測の精度が高くなることが証明されている。本研究では、種々のSVMの中から1-カテゴリーを対象とした教師値なしのSVMを利用することに着目し、それを近似パレート曲面の生成法として活用した。さらに、進化型アルゴリズムを兼ね備えることにより、より少ない解析数で、より精度のいい近似パレート曲面が得られることをいくつかの数値例を通じて検証した。
歯周病原性因子によるマクロファージのPGE_2産生と骨吸収

歯周疾患は、細菌およびその産生物あるいは分解産物を起因とする特異的あるいは非特異的な免疫応答や炎症反応に基づく疾患である。Porphyromonas gingivalisは、細菌内毒素(LPS)以外40種類近い水解酵素を放出し、歯周組織の破壊に大きく関与することから、歯周病原性菌の一つに挙げられている。しかしながら、この菌が放出する45kDa proteaseの歯周疾患への関与については未だ明らかにされていない。我々は歯周病の発症、進展と歯周病原性因子、マクロファージとの関連性を明らかにする為に、骨吸収に関与するモノカイン、PGE_2放出とキニン産生に対する45kDa proteaseの作用について研究した。その結果、次のことが明らかになった。(1)45kDa proteaseはPorphyromonas gingivalis培養液より、Bio-GelA-0.5,DEAE-Sephacel,SP-SepharoseFFを用いて電気泳動的に単一な標品を得ることに成功した。45kDa proteaseは10mM以上のSH基存在下で酵素活性を示すthiol proteaseの性質を有していた。そして、活性化した酵素はkininogenより炎症のケミカルメデイーター、キニンを遊離することはできなかった。(2)LPSはマクロファージ-に対して、濃度依存的にIL-1β,TNF-α,PGE_2を誘導、放出させたが、45kDa proteaseはこれらモノカイン、PGE_2産生に何んら作用を示さなかった。以上の結果から、歯周病原因子の一つとして考えられているPorphyromonas gingivalisより分離した45kDa proteaseはLPSのような強力なサイトカイン誘導作用を有していないこと、また45kDa proteaseはモノカイン、キニン、PGE_2を介した骨吸収に関与していないことが明らかとなった。Porphyromonas gingivalisは、細菌内毒素(LPS)以外に40種類近い水解酵素を放出し、歯周組織の破壊に大きく関与することから、歯周病原性菌の一つに挙げられている。我々は歯周病の発症、進展と歯周病原性因子、マクロファージとの関連性を明らかにする為に、骨吸収に関与するモノカイン放出とキニン産生に対する45kDa proteaseの作用について研究した。その結果、次のことが明らかとなった。(1)45kDa proteaseは10mM以上のSH基存在下で酵素活性を示すthiol proteaseの性質を有していた。以上の結果から、歯周病原因子の一つとして考えられているPorphromonas gingivalisより分離した45kDa proteaseはLPSのような強力なサイトカイン誘導作用を有していないこと、また45kDa proteaseはモノカイン、キニンを介した骨吸収に関与していないことが明らかとなった。
複合粘膜培養法を応用した口腔粘膜前癌病変の診断および口腔癌の早期浸潤モデルの開発

口腔癌の治療成績は向上してきたが、進展例では良好な予後を得られるとは限らず、重大な審美障害や機能障害を後遺し、社会復帰が困難になる場合も少なくない。口腔癌には大きく分けて水平的に広がる癌と垂直的に増殖をきたす癌がみられるが、その細胞学的な性質の相違を明らかにするべく、粘膜の上皮成分のみ分離した環境で口腔癌細胞の培養を行い、細胞学的解析につながる初期癌浸潤モデルの開発を行った。口腔扁平上皮癌の大多数は、比較的長期間の前癌状態を経て癌化すると言われており、口腔癌を前癌病変、上皮内癌、あるいは早期浸潤癌の段階で発見し治療ができれば、良好な予後と機能温存とを両立できることが予想される。また、口腔扁平上皮癌では基底膜を越えて浸潤しても筋層浸潤がなければリンパ節転移や遠隔を生じることはまれである。本研究は、口腔癌の予後の向上につながるものと期待し、口腔癌の基底膜浸潤や筋層浸潤の機序を解明することである。平成19年度は、AlloDermの入手が困難ということがあり、腫瘍細胞を培養する足場の製作から行うこととなった。その手順は6週BALB/cNACrj-nu/nuヌードマウスを安楽死させ、背部皮膚を摘出する。摘出皮膚1mol/1塩化ナトリウム溶液につけ18時間インキュベートし剥離した上皮細胞層をメスにて機械的に除去し、次いでPBSにつけ1週間インキュベートし無細胞化する。これにより無細胞真皮が完全する。作成した無細胞真皮の一不をHE染色および抗ラミニン抗体による免疫染色を施し、細胞が除去できていることや基底膜が温存されていることを確認する。ヌードマウスより作成された無細胞真皮上で腫瘍細胞を播種するも、生着が困難であり、腫瘍細胞が生着するまでに無細胞真皮が腐敗してしまうという問題が生じた。現在は、AlloDermを入手することができるようになったため、その上で腫瘍細胞HSC-2、HSC-3、HSC-4を培養仲である。Time Ragを設けて基底膜浸潤を捉えなれれば、HE染色およびp53、PCNA、Ki-67、MMPの免疫染色を行い、組織学的観察やp53遺伝子変異の有無、細胞増殖能、基底膜浸潤の検討を行い、採取元の組織と比較する予定としている。口腔癌の治療成績は近年めざましく向上したが、進展例では必ずしも良好な結果が得られるとは限らす、たとえ癌を制御したとしても重大な審美障害や機能障害を後遺し、社会復帰が困難となる場合も少なくない。また、口腔扁平上皮癌では基底膜を越えて浸潤しても筋層浸潤がなければリンパ節転移や遠隔転移を生じることは稀である。内容は、口腔癌の悪性化の初期像として量も重要な所見である癌細胞の基底膜への浸潤ということに着眼し、1)前癌病変や白板症、扁平苔癬などの粘膜病変上皮をAlloDerm上で複合粘膜培養し、得られた培養粘膜を観察すること、2)口腔癌患者から得られたさまざまな口腔癌組織(sequence癌およびnon-sequence癌)、および口腔癌由来細胞株をAlloDerm上で複合粘膜培養し、初期浸潤像を観察すること、3)得られた口腔癌由来培養複合粘膜をヌードマウスに移植することにより、in vivoにおける初期浸潤モデルを開発することを目的としている。平成20年度は、AlloDerm上で口腔扁平上皮癌細胞HSC-3を培養し、経時的に観察することで基底膜浸潤をすることが捉えられた。また、同細胞株をヌードマウスの皮下に移植し、リンパ節転移と肺転移について検討を行った。今後も継続して多種の細胞で検討を行い、また、インフォームドコンセントを行い文書による了解が得られた臨床検体につき、上記の手法で培養を行い、HE染色およびp53、MMPなどの免疫染色を行い、組織学的観察やp53遺伝子変異の有無、細胞増殖能、基底膜浸潤の検討を行い、採取元の組織と比較することを計画している。
青年期におけるインターネット依存と注意の障害に関する実験臨床心理学的研究

本研究ではインターネット依存と注意機能の関連性を検討した。成人を対象として,インターネット関連,ネガティブ,およびポジティブな刺激に注意を向ける傾向(注意バイアス)を測定する認知課題(ドットプローブ課題),注意機能を測定する神経心理検査(PASAT)を実施した。また,インターネット依存は自己評価式質問紙(IAT)を用いて測定した。その結果,インターネット依存はポジティブな刺激に対する注意バイアスと関連することが明らかになった。とくにポジティブな刺激に対して強い注意を向けたり、持続的に注意を向け続けることが,インターネット依存の発症と維持に関与している可能性が示唆された。青年期におけるインターネット依存の有病率は約10 %と高く、インターネット依存はうつ病、不眠症などの精神的健康状態と関連することが示されている。しかしながら、インターネット依存の認知的特徴に関してはまだ十分に明らかにされておらず、インターネット依存に対する心理療法を確立するために、インターネット依存の増悪、維持に関わる認知的要因を明らかにする必要がある。本研究では、インターネット依存に見られる認知的特徴を明らかにする試みの一環として、インターネット依存の有病率が特に高い青年期を対象とし、インターネット依存と注意の特徴の関連性を明らかにすることを目的とした。2016年度は、24名の実験参加者(平均年齢24歳、SD = 5.0、男性7名、女性14名)に実験を実施した。注意の測度としては、注意機能を測定する神経心理学的検査であるPASAT(Paced Auditory Serial Addition Test)、および注意バイアスを測定する認知課題であるドットプローブ課題を用いた。ドットプローブ課題では、インターネット関連刺激、ネガティブな刺激、ポジティブな刺激をそれぞれ中性刺激と対提示し、各カテゴリーの刺激に対する注意バイアスを測定した。さらに、依存症や注意バイアスはストレス状態において増強することが先行研究において報告されていることから、ストレス負荷課題を実施し、主観的、および生理的ストレス反応(唾液中コルチゾールなど)を測定した。併せて、実験参加者に、インターネット依存を測定するIAT(Internet Addiction Test)などの質問紙に回答を求めた。2016年に実施した実験では、当初予定したサンプルサイズをおおむね確保することができた。実験課題の妥当性を検証する予備実験を行い、本研究で使用する実験課題を作成したこと、また、本実験を開始し、当初予定したサンプルサイズをおおむね確保することができたことから、本研究課題の進捗状況をおおむね順調に進展していると評価した。注意機能、注意バイアスは、抑うつ、不安、依存などの精神症状と関連することが示されている。しかしながら、これまでは、インターネット依存と注意バイアスの関連性について、ほとんど研究が行われていなかった。そこで本研究では、インターネット関連刺激、ネガティブな刺激、ポジティブな刺激それぞれに対する注意バイアスを区別し、インターネット依存がそれらの注意バイアスと関連するかどうかを明らかにすることを目的とした。76名の実験参加者が本研究に参加した。注意の測度として、PASAT(Paced Auditory Serial Addition Test)、ドットプローブ課題を実施した。PASATは注意機能を測定する神経心理学的検査である。ドットプローブ課題は注意バイアスを測定する認知課題である。ドットプローブ課題では、インターネット関連刺激、ネガティブな刺激、ポジティブな刺激に対する注意バイアスを測定した。加えて、ストレス負荷課題を実施し、主観的ストレス反応(快・不快感情を測定するPANAS(Positive and Negative Affect Schedule))、生理的ストレス反応(心拍数、血圧、唾液中コルチゾールなど)を測定した。また、インターネット依存を測定するIAT(Internet Addiction Test)などの自己評価式質問紙に回答を求めた。本研究の結果から、インターネット依存はポジティブな刺激に対する高い注意バイアスと関連することが示された。一方で、インターネット依存と注意機能との関連は見られなかった。2017年度は、2016年度に開始した実験を継続し、引き続きデータの収集を行う。本年度内にデータの収集を完了し、次いで、唾液検体の分析、およびデータ解析を行う。最終的に、本研究の結果をとりまとめ、学会発表、学術雑誌で公表する予定である。臨床心理学2016年度に唾液試料の分析を行う予定にしていたが、当初予定していたサンプルサイズにやや届かず、2017年度に引き続きデータ収集を行うことになり、唾液試料の分析を実施できなかったため。2017年度に、2016年度収集した唾液試料も含め分析を行うための費用として用いる予定である。
レチノイドシグナルによる免疫寛容の誘導と制御のメカニズム

腸とその関連二次リンパ系器官に存在するレチノイン酸(RA)産生能を持つ樹状細胞(DC)は、T細胞活性化の際に、RAを与えることによってT細胞に小腸ホーミング特異性を刷り込み、さらにTGF-β依存性の制御性T細胞分化を促進し、炎症に関与するTh17細胞の分化を抑制する。従って、これらのDCによるRA産生の制御は、腸管免疫の構築ばかりでなく、経口免疫寛容の誘導にも関与すると考えられてきた。しかし、実際に経口免疫寛容がビタミンA由来シグナルに依存するかどうかの確たる証拠はなかった。本研究では、DCにおいてRA産生の鍵を握る酵素retinal dehydrogenase 2(RALDH2,ALDHIA2)発現の制御と免疫寛容の誘導について、レチノイドシグナルの役割を軸として解析した。その結果、ビタミンA欠乏マウスでは経口免疫寛容が正常に誘導されないことを明らかにした。さらにその原因として、特に腸間膜リンパ節DCの性質変化が大きな関与をしていることを見出した。これらのDCは、コントロールマウスのDCより成熟型であり、活性化によって主に炎症性サイトカインを産生した。また、効率良くTh17細胞など好炎症性ヘルパーT細胞の分化を誘導する能力を有していた。従って、レチノイドシグナルは、T細胞の機能分化に影響を与えるばかりでなく、腸間膜リンパ節DCの性質制御にも大きな役割を果たしていることが示唆された。我々は誘導型Foxp^<3+>制御性T細胞(iTreg)の分化誘導におけるレチノイドシグナルについても解析した。生理的な主要RAであるall-trans-RAは、生理的濃度で核内受容体ヘテロダイマーRAR/RXRのRARに結合するが、RXRからの刺激がiTreg誘導に影響を与えるかどうか不明であった。RARだけでなくRXRからの刺激を加えることによってiTreg誘導が促進されることを見出した。レチノイン酸(RA)産生能を持つ腸の樹状細胞(DC)は、RAによってリンパ球に小腸ホーミング特異性を刷り込み、TGF-β依存性の制御性T細胞分化を促進することから、そのRA産生能力の誘導と制御の機構を理解することは免疫系の確立と自己維持に重要である。我々は、DCにRA合成酵素RALDH2を発現誘導する主要因子としてGM-CSFを、必須補助因子としてRA自体を同定した。そこで、これらの刺激や細胞間相互作用によって生じるシグナルが、RALDH2発現とそれに必要な成熟化を誘導する分子メカニズムを解析するとともに、T細胞機能分化を制御するRAシグナルについても解析した。その結果、RALDH2発現誘導には、初期にタンパク質キナーゼの活性化と新たなタンパク質の生合成が必須であることを見出した。そしてビタミンA欠損マウスでは、経口免疫寛容が成立し難いこと、腸間膜リンパ節のconventional DCが種々の好炎症性T細胞を誘導する高い能力を持つことを見出した。一方、T細胞では、RAによるRA受容体(RAR)刺激に加えてレチノイドX受容体(RXR)からの共刺激が小腸特異的ホーミング受容体CCR9の発現を著しく促進することを見出した。これに基づき、naturally-occurring Tregに、Foxp3発現を維持したまま、小腸ホーミングに必要なα4β7とCCR9の発現を高率に誘導することに成功した。CCR9遺伝子プロモーター上での転写因子NFATc2とRAR/RXRヘテロダイマーの複合体形成がRAによるCCR9発現誘導に必要であることも見出した。さらに、RAがナイーブT細胞の活性化の際に作用してCYP26B1発現を誘導し、CCR9の発現を負に調節していること、そしてCYP26B1の発現はさらにTGF-βやTNF-αによって制御されることを見出した。
タクロリムス血中濃度用採血方法の検討

目的:CyAにおいてTDMのために必要な採血を行う際、中心静脈カテーテル(IVH)からのルート採血を行った場合、末梢血中の濃度に比べ血中濃度が高くなるという報告があり、添付文書上においても注意喚起がなされているが、FK506はその明記がない。そこで今回FK506におけるカテーテルへの吸着と溶出について、in vitroで影響を検討した。方法:ヘパリンロックされている状態のカテーテルに対し、20ng/mlに調整したFK506含有血液・800ug/mlに調整したCyA含有血液を10ml流し、その前後において測定を行った。また、小児科において実際に骨髄移植後のGVHD予防にFK506を使用している2症例の末梢血とIVHからのルート採血を同時に行い、その血中濃度の違いについて検討を行った(採血は専用ルートで行っている)。結果:30日間(10回)測定をしたが、in vitroでの実験系においてFK506・CyAとも有意差は生じなかった。症例(1):FK506はルート採血には影響しない経口投与中であり、また今回の採血までに生化学検査などでFK506含有血液を7回採血されている。IVHは移植前から差し替えられてない。その結果、IVHからの採血では12.5ng/ml、末梢からの採血では7.35ng/mlとその値に解離を認めた。さらに、2週間前に投与中止をしたCyAもルート採血では108ug/mlの値を認めた。末梢採血中にはCyAは認められなかった。症例(2):今回は2回、ルート採血と末梢からの採血を比較できたが、値は同じであり、差を認めなかった。今回は移植直前にIVHを新しいルートに挿し替えられている。成果:(1)の場合において再現性を確認することは出来なかったが、値に差を認めた。(2)や実験系に関しては、ルートは新品の状態に近く、吸着・剥離があまり見られなかった可能性がある。今後も吸着する機序・条件に関して解明していきたい。
戦間期日本の外務省「連盟派」の国際連盟外交－その法解釈の再考

本研究は、戦間期日本の国際連盟外交の実態を、外務省内の「連盟派」と呼ばれた外交官たちの活動を通じて明らかにするものである。国際法・条約解釈に関し、「連盟派」たちはいかにして日本の国際協調と満蒙権益の維持という重大な外交目標を両立しようとしたのか。本研究はこれまで本格的な検証がなされることのなかった「連盟派」を、国際情勢の変化にいかなる法理論でもって対応しようとしたのか考察し、当該時期の日本の「国際協調」の実態をとらえなおす。
数量化法第3類の性能のコンピュータ側面からの検討

数量化法第3類(対応分析)の人工的データに関し一連の研究を行った.1.複数個の線形特性を含む人工的データにおいて,固有値問題の各解はどれかの線形特性のガットマン系列に属する.それらの役割を同定する方法を提案し,雑誌Math.Japon.(1994)に発表した.2.円形特性に半径を表す線形特性をつけ加えるため,同心相似な数個の円をもつ円盤データを提案し,固有値問題を解放的に解いた.円周上の点の数が増すと円形特性が,円の個数が増すと線形特性が強くなる.雑誌J.Japan Statist.Soc.(1994)に発表した.3.円形特性に長さを表す線形特性をつけ加えた円筒データ,さらに半径を表す線形特性を加えた円柱データを提案し,固有値問題を解析的に解いて,Statist.& Prob.Letters(1994)に発表した.4.2つの円形特性をもつtorusデータ,さらに半径を表す線形特性を加えた実体torusデータを提案し,固有値問題を解析的に解いて,Behaviormetrika(1994)に発表した.5.上記の4論文は線が2つの点を通る状況を扱っているが,線が3個以上の点を通る場合(多重度2以上)も扱うことができる.円形データについて考察し,Math.Japon(1995)に発表した.6.線形特性と円形特性の他に幾何学的な典型的な特性はないであろうかと考えて,球面特性を思いついた.5種類の正多面体のそれぞれから構成したデータは固有値問題を解析的に解くことができ,球面特性の次元は常に3であること,頂点の数が増すほど特性が強くなることなどがわかった.J.Japan Statist.Soc.(1995)に発表した.数量化法第3類(対応分析)の人工的データに関し一連の研究を行った.1.複数個の線形特性を含む人工的データにおいて,固有値問題の各解はどれかの線形特性のガットマン系列に属する.それらの役割を同定する方法を提案し,雑誌Math.Japon.(1994)に発表した.2.円形特性に半径を表す線形特性をつけ加えるため,同心相似な数個の円をもつ円盤データを提案し,固有値問題を解放的に解いた.円周上の点の数が増すと円形特性が,円の個数が増すと線形特性が強くなる.雑誌J.Japan Statist.Soc.(1994)に発表した.3.円形特性に長さを表す線形特性をつけ加えた円筒データ,さらに半径を表す線形特性を加えた円柱データを提案し,固有値問題を解析的に解いて,Statist.& Prob.Letters(1994)に発表した.4.2つの円形特性をもつtorusデータ,さらに半径を表す線形特性を加えた実体torusデータを提案し,固有値問題を解析的に解いて,Behaviormetrika(1994)に発表した.5.上記の4論文は線が2つの点を通る状況を扱っているが,線が3個以上の点を通る場合(多重度2以上)も扱うことができる.円形データについて考察し,Math.Japon(1995)に発表した.6.線形特性と円形特性の他に幾何学的な典型的な特性はないであろうかと考えて,球面特性を思いついた.5種類の正多面体のそれぞれから構成したデータは固有値問題を解析的に解くことができ,球面特性の次元は常に3であること,頂点の数が増すほど特性が強くなることなどがわかった.J.Japan Statist.Soc.(1995)に発表した.1.数量化法第3類における人工的データ.第3類の方法論としての性能を検討するためには人工的モデルの利用が有用である.平成6年度の計画調書を提出した段階で,Iwatsubo(1984)の円形構造を持つ人工的データを一般化した円筒データ,円柱データ,円盤データについて,解析的な解(固有値とスコア)の研究は一段落して,学会における口頭発表はすんでいたが,始めの2つのデータはStatist.& Prob.Letters(1994)に,最後のデータはJ.Japan Statist.Soc.(1994)に論文として発表した.また,これらのデータに1次元または2次元の線形構造を持つデータを含めたサーベイ論文が追手門経済・経営研究(1994)に発表した.2.第3類における線形特性のガットマン効果.1次元,2次元または3次元の線形構造を持つデータに第3類を適用すれば,各次元の主効果の他に,次元ごとに強度(2次効果),クロージュア(3次効果),インボルーション(4次効果)など,いわゆるガットマン系列が現れる.回帰分析の手法を用い,ガットマン系列を除いて主効果を取り出す方法(計算スキームをMath.Japon.(1994)に発表した。3.第3類における人工的torusデータの解析.torusデータは2つの円形特性を持ち,実体torusデータはこれに円の中心を付け加えて半径を表す1つの線形特性をも持つ.このようなデータの解析において,各特性の解析的な解(固有値とスコア)を求めた.円周上の点の個数が増加するにつれて各円形特性は強くなり,固有値は増大して,ガットマン系列が弱い方の主効果を圧倒する可能性があることを見出した.1.数量化法第3類(対応分析)の人工的データに関して一連の研究を行った.

これはIwatsubo(1984)の円形データ,Otsu(1990)の線形データを発展させて平成6年度に行い,それぞれの雑誌に発表した次の研究の継続である.2.上記の4論文は個体を表す線が2つの点(項目を表す)を通る状況を扱っているが,線が3個以上の点を通る場合(多重度2以上)も扱うことができる.円形データについて考察し,Math. Japon. (1995)に発表した.3.遠藤秀機氏(研究協力者)とともに線形特性と円形特性の他に幾何学的な典型的な特性はないであろうかと考えて,球面特性を思いついた.5種類の正多面体のそれぞれから構成した球面データは固有値問題を解析的に解くことができ,球面特性の次元は常に3であること,頂点の数が増すほど特性が強くなることなどがわかった.さらに半径を表す線形特性をつけ加えた実体球面データとあわせて,J. Japan Statist. Soc. (1995)に発表した.
ES細胞を用いた細胞記憶の改変技術の開発

メチオニン・アデノシル基転移酵素(MAT)は、S-アデノシルメチオニン(SAM)の生合成に必須の酵素である。合成されたSAMはメチル基転移酵素(MT)の基質として利用され、そのメチル基はDNA中のシトシンやヒストンのリジン残基などへ転移され、クロマチンレベルでの細胞記憶を支配する。本研究の主題は、MATに着目してヒストンやDNAのメチル化を包括的に低下させる方法を開拓し、細胞記憶を消去することによりクロマチンと細胞の可塑性を高める技術を開発することにある。まず、MATのアイソザイムの一つMATIIを様々な培養細胞でノックダウンを行い、ヘテロクロマチン構造やヒストンメチル化状態の変化を調べた。さらに、MATII結合因子をプロテオミクス技術を駆使して特定し、MATII以外の標的分子の探索を行った。肝臓細胞株、マクロファージ株で効率よくMATIIをノックダウンする条件を決めた。このノックダウン下ではヘテロクロマチン構造により抑制されている遺伝子発現が亢進すること、また、ヘテロクロマチン構造に重要なヒストンメチル化やユビキチン化が低下することを見いだした。同様の実験をES細胞で行うために、種々条件検討を行ったが、肝臓細胞株等と同等のノックダウン効率を達成することはできていない。現在、効率改善の検討、および、この不完全なノックダウン下でもヘテロクロマチン構造が変化する可能性を検討している。最終的には転写因子とMATIIノックダウンを組み合わせることによりES細胞分化能を変換させることを目指したが、ここまでは到達できなかった。しかし、その基盤技術開発には成功しており、今後も発展を目指したい。また、MATII結合因子の探索よりヘテロクロマチン化への関与が予想される新規因子を複数見いだしており、これらも細胞記憶改変の標的となる可能性があり、さらに研究を継続する。合成されたSAMはメチル基転移酵素(MT)の基質として利用され、そのメチル基はDNA中のシトシンやピストンのリジン残基などへ転移され、クロマチンレベルでの細胞記憶を支配する。20年度は、Hepal細胞(肝臓由来)、MEF(線維芽細胞)、MEL(赤白血病)などの細胞を用いて、MATIIを効率よくノックダウンする系を開発した。これまでに、HepalおよびMEFでノックダウンに成功しているが、ノックダウン後、細胞は徐々に死ぬことも見いだしており、今後、誘導性のノックダウンなど、実験系の調節性を高めていくことが必要と考えている。Hepalでノックダウンすると、ヘテロクロマチン領域のDNAメチル化が数日のうちに失われ、同領域で抑制されているはずの遺伝子群が高発現することを確認した。また、ヒストン全体でメチル化が低下しており、これもヘテロクロマチン領域の脱抑制に関わる可能性がある。次年度に向けてMATIIノックダウンと転写因子遺伝子導入とを同時に行う実験系も立ち上げた。転写因子の組み合わせなどを検討し、ある系列の細胞を全く別系列の細胞へ一挙に分化させるシステムの樹立を目指すメチオニン・アデノシル基転移酵素(MAT)は、S-アデノシルメチオニン(SAM)の生合成に必須の酵素である。
ニワトリにおける生殖幹細胞の同定

ニワトリにおける生殖幹細胞の同定は、未だその存在すら同定されていないのが現状で、本研究課題では、生殖細胞に特異的な分子指標であるVasa抗体を用いて、免疫組織化学的にその存在の有無について、個体発生過程を通じて精査した。その結果、精祖細胞ならびに卵祖細胞が、これまでの報告にはみられない異所的な局在を見いだすことができた。その培養を試みたが、一時的な培養に留まり、培養液のさらなる改良が必要と考えられた。これまでのところ、複数の研究機関において、マウスの生殖幹細胞が同定されている。生殖幹細胞のファウンダーとなる細胞は、特定の時期に限られると推察されていることから、本研究課題の遂行にあたり、ニワトリ生殖幹細胞の候補となる細胞の分布様式を詳細に調べた。先ず、生殖細胞を特異的に標識する抗ニワトリVasaホモログ抗体を用い、免疫組織化学的手法により、詳細な解析を行った。本抗体は、既に調整済みであり、体細胞への免疫反応が一切認められないことをこれまでに示している。個体発生過程の様々なステージ、具体的には性分化後の孵卵6日胚から初生雛までの雌雄生殖腺を主な材料とした。常法に従ってブアン固定の後、パラフィン切片を作成して免疫染色を施し、主に光学顕微鏡で観察を行った。生殖幹細胞として機能すると考えられるのは、雄個体では精祖細胞、雌個体では卵祖細胞であることから、平成19年度ではそれらの生殖腺組織内における分布情報を得ることができ、生殖幹細胞の単離に適した時期と部位を絞り込むことができた。続いて、至適培養条件を検討するため、培養を行った。摘出された雌雄生殖腺組織をそれぞれコラゲナーゼならびにトリプシンによって酵素処理を施し、解離した細胞の培養を試みた。現在のところ、一過性の培養が可能であり、盛んに増殖する生殖細胞を確認している。このとき用いた分子マーカーは、抗ニワトリVasaホモログ抗体の他、複数の生殖細胞特異的な遺伝子産物である。今後、長期培養に適した基本培地や添加物などのさらなる比較検討が必要であり、それが平成20年度の最重要課題となる。平成19年度ではそれらの生殖腺組織内における分布情報を得ることができ、生殖幹細胞の単離に適した時期と部位を絞り込むことができた。平成20年度では、培養方法の確立をめざし、その至適培養条件を検討した。現在のところ、一過性の培養が可能であり、盛んに増殖する生殖細胞を確認しており、それらは生殖細胞の分子マーカーであるニワトリVasaホモログ蛋白質の他、複数の生殖細胞特異的な遺伝子産物の発現を確認している。一方、体細胞の増殖も盛んであるため、目的の生殖幹細胞の単離には必ずしも好ましい環境ではないため、培養を開始する段階で生殖細胞を分離し、長期培養に適した基本培地や添加物などのさらなる比較検討を加える。それが平成21年度の最重要課題となる。生殖幹細胞のファウンダーとなる細胞は、特定の時期に限られると推察されていることから、ニワトリ生殖幹細胞の候補となる細胞の分布様式を免疫組織化学的手法により詳細に調べた。先ず、生殖細胞を特異的に標識する抗ニワトリVasaホモログ抗体を用いた。本抗体は、本研究課題の遂行に先立って調整済みであり、体細胞への免疫反応が一切認められないことをこれまでに示している(Tsunekawa et al.,1999 Development)。常法に従ってブアン固定の後、パラフィン切片を作成して免疫染色を施し、光学顕微鏡ならびに蛍光顕微鏡を用いて観察を行った。雄では、生殖腺の外に位置する生殖細胞が、孵卵6日胚から初生雛まで観察された。これらの細胞は、アポトーシスで死滅するという定説とは異なる新たな結果が得られた。雌においても同様、生殖腺の外部に生殖細胞が観察されるが、その存在場所は雄とはやや異なる。

雌の生殖腺は、右側が優位に発達し、最終的に右側生殖腺だけが機能する。生殖腺の発達に伴い、生殖細胞は位置的な差異を生じていることを見いだした。卵巣皮質に存在する生殖細胞は、連続切片で観察する限りすべて卵母細胞に分化していると考えられたが、髄質側に存在する生殖細胞は、卵祖細胞の状態を維持し、その細胞が初生雛においても観察された。初生雛では、卵巣内のすべての細胞が卵母細胞に分化しているという定説に反する結果となり、こちらにおいても新たな知見を得た。続いて、生体の卵巣での検出を試みたところ、初生雛の卵祖細胞に類似した細胞の特定ができた。今回新たに同定された異所的な精祖細胞や髄質内卵祖細胞は、生殖幹細胞の候補として考えられた。これらの成果を元に、様々な発生ステージの生殖腺を材料にして、生殖細胞の培養を試みた。摘出された雌雄生殖腺組織をコラゲナーゼならびにトリプシンによって酵素処理を施し、解離された細胞を対象にして、胚性幹細胞や生殖管細胞の樹立に用いられる一般的な培地にニワトリ血清を加えて行われた。その結果、初代培養は可能であり、盛んに増殖する生殖細胞を確認することができた。長期培養に適した基本培地や添加物などのさらなる比較検討が必要と考えられた。
骨形成因子(BMP)に応答する間葉系細胞を分離し, 骨再生に利用する試み

Uristは脱灰骨基質中に異所性骨形成を誘導する蛋白性因子をBone morphogeneticprotein(BMP)と命名した(1971年)。この発見は筋肉内や皮下組織にはBMPに応答して骨芽細胞へ分化できる細胞が存在していることを示している。その後、1988年にヒトBMP cDNAがクローニングされ、現在までに15種類以上のBMP遺伝子がクローニングされており、遺伝子組み替え型のヒトBMP(recombinant human BMP:rhBMP)も作製されている。さらに、最近BMP受容体の遺伝子もクローニングされ、BMPの作用メカニズムも明らかにされつつある。我々は種々の培養細胞を用いて骨格を構成する間葉系細胞の分化過程におけるBMP-2の役割を解析してきた。本研究ではこれらの経験をいかして、効率よい骨再生法を開発することを目的として種々の実験を行い、以下の結果を得た。1)骨組織および骨由来の初代培養細胞ではBMP受容体IA,IB,IIが発現していることがin situ hybridization法および免疫組織化学的検索で確認できた。2)種々の培養細胞を用いてBMP-2の作用を検討したところ、BMP-2によって誘導される骨芽細胞への分化能は各細胞株によって異なることが明かとなった。3)ヒトの骨、皮膚に由来する初代培養細胞もBMP-2によって骨芽細胞へ分化する可能性が示峻された。4)骨欠損部をBMP-2で修復する場合にBMP-2のキャリアーに骨原性細胞を混ぜて移植するとより効率良く骨再生が進行することが明かとなった。5) BMP受容体IAに対する抗体の作成を試みたが、特異的な抗体を得ることが困難であった。以上の結果より、BMPは骨再生を促す強力な因子で、移植時に骨原性細胞を同時に移植すると効率良い骨再生が怒ることが明かとなった。また、本研究の培養実験からヒトの細胞でも同様な方法が有効であることが示竣された。rhBMP-2は強力な骨誘導作用を有するため、骨欠損部修復への臨床応用が期待されている。現在、BMPの適用法としては、BMPと担体の複合体を直接骨欠損部へ移植する方法が主流だが、担体上でBMPによって骨芽細胞への分化を方向づけた細胞を、担体とともに骨欠損部に移植できれば、従来の方法に比べ骨組織をより効率良く誘導できる可能性がある。本研究ではこの可能性を検討するために、実験を行い以下の結果を得た。(1)BMP(-)PGSで培養した場合、MC3T3-E1細胞ではALP陽性細胞が散在性にみられ、C3H10T1/2細胞ではALP陽性細胞はほとんど認められなかったが、これらの細胞をBMP(+)PGSで培養すると多数のALP陽性細胞が認められた。また、MC3T3-E1細胞をBMP(+)PGSで1週間培養するとBMP(-)PGSの場合に比べてオステオカルシンmRNAの発現が上昇していたが、2週間の培養では両者の差がなくなった。C3H10T1/2細胞ではBMP(-)PGSで2週間まで培養してもオステオカルシンmRNAの発現は検出できなかったが、BMP(+)PGSで培養すると培養1週間から発現が認められた。(2)BMP(-)PGSとBMP(+)PGSにROB細胞を付着させ、各々をラット頭蓋冠骨欠損部へ移植すると、BMP(+)

PGSの方がBMP(-)PGSよりX線不透過性が亢進し、組織学的にもより多くの新生骨が形成されていた。以上結果より、rhBMP-2/PGSを用いて生体外で骨芽細胞前駆細胞を培養し、骨芽細胞へ分化を誘導させ、それを骨欠損部に移植することにより、従来の方法より効率良く骨欠損の修復ができる可能性が示唆された。Uristは脱灰骨基質中に異所性骨形成を誘導する蛋白性因子をBone morphogeneticprotein(BMP)と命名した(1971年)。この発見は筋肉内や皮下組織にはBMPに応答して骨芽細胞へ分化できる細胞が存在していることを示している。その後、1988年にヒトBMP cDNAがクローニングされ、現在までに15種類以上のBMP遺伝子がクローニングされており、遺伝子組み替え型のヒトBMP(recombinant human BMP:rhBMP)も作製されている。さらに、最近BMP受容体の遺伝子もクローニングされ、BMPの作用メカニズムも明らかにされつつある。我々は種々の培養細胞を用いて骨格を構成する間葉系細胞の分化過程におけるBMP-2の役割を解析してきた。本研究ではこれらの経験をいかして、効率よい骨再生法を開発することを目的として種々の実験を行い、以下の結果を得た。1)骨組織および骨由来の初代培養細胞ではBMP受容体IA,IB,IIが発現していることがin situ hybridization法及び免疫組織化学的検索で確認できた。2)種々の培養細胞を用いてBMP-2の作用を検討したところ、BMP-2によって誘導される骨芽細胞への分化能は各細胞株によって異なることが明かとなった。3)ヒトの骨、皮膚に由来する初代培養細胞もBMP-2によって骨芽細胞へ分化する可能性が示唆された。4)骨欠損部をBMP-2で修復する場合にBMP-2のキャリアーに骨原性細胞を混ぜて移植するとより効率良く骨再生が進行することが明かとなった。5) BMP受容体IAに対する抗体の作成を試みたが、特異的な抗体を得ることが困難であった。以上の結果より、BMPは骨再生を促す強力な因子で、移植時に骨原性細胞を同時に移植すると効率良い骨再生が怒ることが明かとなった。また、本研究の培養実験からヒトの細胞でも同様な方法が有効であることが示唆された。
生理活性脂質リゾホスファチジン酸によるがん細胞の増殖・浸潤制御とその意義

生理活性脂質リゾホスファチジン酸(LPA)によるがん細胞の増殖・浸潤の制御とその意義を明らかにするために、今年度はLPA産生酵素オートタキシンのノックアウトマウスの作製とその解析を行った。オートタキシンノックアウトマウスマウスは予想に反し胎生致死であった。すべてのホモ個体は胎生10.5日頃までに死亡した。ホモの胎児を観察すると、血管の形成に異常があることが分かった。8.5日のホモ個体では、初期の血管が形成されていた。しかし、9.5日の時点で血管の成熟がまったく観察されなかった。以上のことから、LPA産生酵素オートタキシンには血管を安定化あるいは血管の維持に関与する可能性が初めて示唆された。これまで3種類のLPA受容体のノックアウトマウスが報告されているが、オートタキシンノックアウトマウスの表現型はどのノックアウトマウスの表現型よりも重篤である。今回の結果は、LPA受容体の重複性あるいは、未知のLPA受容体の存在を示しているものと考えられる。オートタキシンは悪性がんに高発現していることがこれまで知られている。オートタキシンはLPAを産生することにより細胞増殖、細胞運動性の亢進を通じがんの進展に関与しているものと考えたれてきたが、今回の結果から、オートタキシンはがん組織の周辺の血管を安定化することによりがんの進展を促進している可能性がある。
農業集落カードの計量的研究

1.1980年農業集落カードからの約3%の無作為抽出標本4167集落について, 7項目の主成分分析を行った.その結果,農業従事性成分と離農性成分の2主成分で累積寄与率73%となった.約1%の標本を用いても類似した結果が得られ, 1400集落程度の標本でも全国のかなりよい縮図をなしていることがわかった.2.任意の集落の主成分得点を,各項目の平均・標準偏差および各主成分係数ベクトリを用いて算出し,それらの集落が全国農業集落の縮図のどの辺に位置するかを視覚的に示すことができる.この分析を,宮城県鹿島台町29集落について行った.3.主成分分析に用いた7項目のうち5項目を用いた潜在プロフィール分析で解を得ることができた.その結果,農業集落を(1)農業が盛んなクラス,(2)農業の程度が中間的なクラス,(3)農業が盛んでないクラスという3つの異質な層に分類できた.個々の標本集落がどの潜在クラスに属するかを判定するために,判別関数を利用した.4.標本4167集落の判別関数の係数を利用すれば,任意の集落の2種類の判別値が計算できる.判別値で作られる空間においてこの集落の判別値の座標と各潜在クラスの重心の座標とのユークリッド距離をもとめ,この距離が最小のクラスにその集落が属すると判断することを提案した.5.潜在クラス間で「あとつぎ男子専従者のいる農家率」の平均には有為な差があった.この率が0%の集落の比率にも,違いが見られた.各クラスごとに「あとつぎ男子専従者のいる農家率」を目的変数とした重回帰分析を行ったが,用いた6説明変数ではこの目的変数を十分に説明できなかった.6.「あとづき男子専従者のいる農家率」に寄与する要因の解明, 1985年データとの比較が今後の課題である.1.1980年農業集落カードからの約3%の無作為抽出標本4167集落について, 7項目の主成分分析を行った.その結果,農業従事性成分と離農性成分の2主成分で累積寄与率73%となった.約1%の標本を用いても類似した結果が得られ, 1400集落程度の標本でも全国のかなりよい縮図をなしていることがわかった.2.任意の集落の主成分得点を,各項目の平均・標準偏差および各主成分係数ベクトリを用いて算出し,それらの集落が全国農業集落の縮図のどの辺に位置するかを視覚的に示すことができる.この分析を,宮城県鹿島台町29集落について行った.3.主成分分析に用いた7項目のうち5項目を用いた潜在プロフィール分析で解を得ることができた.その結果,農業集落を(1)農業が盛んなクラス,(2)農業の程度が中間的なクラス,(3)農業が盛んでないクラスという3つの異質な層に分類できた.個々の標本集落がどの潜在クラスに属するかを判定するために,判別関数を利用した.4.標本4167集落の判別関数の係数を利用すれば,任意の集落の2種類の判別値が計算できる.判別値で作られる空間においてこの集落の判別値の座標と各潜在クラスの重心の座標とのユークリッド距離をもとめ,この距離が最小のクラスにその集落が属すると判断することを提案した.5.潜在クラス間で「あとつぎ男子専従者のいる農家率」の平均には有為な差があった.この率が0%の集落の比率にも,違いが見られた.各クラスごとに「あとつぎ男子専従者のいる農家率」を目的変数とした重回帰分析を行ったが,用いた6説明変数ではこの目的変数を十分に説明できなかった.6.「あとづき男子専従者のいる農家率」に寄与する要因の解明, 1985年データとの比較が今後の課題である.1.1980年世界農林業センサス農業集落カード(142,377集落)の索引から2,797集落をランダムに抽出、その集落カードを購入昭和61年7月に、単純無作為抽出法(複合標本方式を併用)によるサンプリングを実施し、抽出された集落のリストを作成した。このリストに従い、昭和61年11月に標本集落の農業集落カードを購入した。この間に、1970年、1975年の農業集落カードの分折をふまえ、既存の分析で用いた40項目に6項目(主に複合経営,労働力構成)を加えた46項目を使用することを決定した。2.データ入力とミスの修正昭和62年1月までに、必要なデータを集落カードから読み取り、大型計算機の端末より入力し、計算機の磁気ディスク上および磁気テープ上に記憶させた。入力結果を点検し、ミスの修正を行なったが、データ点検作業は今後も継続して行く予定である。3.主成分分析の実施データ・チェックの済んだ副標本のうち1副標本(138集落)について、既存の分析で用いた項目に含まれる7項目を用いて主成分分析を試行的に行なった。その結果、農業従事性を表す主成分と離農性を表す主成分の2つで、7項目に含まれる情報の約80%を説明できることがわかった。この結果は既存の分析結果と一致しているが、標本数を増やしたり項目を入れかえた上で再度分析し、結果の安定性を確認する予定である。さらに、主成分分析の結果を基礎として、潜在プロフィール分析により農業集落の特色ないし類型を明確にすることが今後の課題である。