hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
培養ヒト神経芽細胞腫におけるアミロイド前駆体蛋白mRNAの発現様式の変化

1.胎齢20日ラット脳より、分離、培養した、アストロサイトおよびミクログリアのconditioned mediumと、10%fetal calf serum(FCS)を含むDMEMとを1:1で混和したものを培地として、培養ヒト神経芽細胞腫SH-SY5Y細胞を3日間培養した後、RNAを抽出し、APPの全てのisoformを認識するprobeを用いて、Northern blotを行なった。その結果、グリア細胞conditioned mediumを加えた培地で培養した場合、同細胞における、APPmRNAの発現は、対照と比べて、明らかに増加している事が判明した。更に、逆転写酵素を用いて、先のRNAよりcDNAを作製し、PCR法により、各isoformの構成比を検討したところ、グリア細胞conditioned mediumを加えた培地で培養した場合、Kunitz-type protease inhibitor(KPI)領域を持つAPP(APP751、APP770)の著明な増加が認められた。一方、プラスミン、トロンビンといったserine proteaseを加えた1%FCS-DMEMにて培養したSH-SY5Y細胞についても、上記と同様に、APPmRNA発現様式の変化の有無を検討したが、明らかな差異は認められなかった。2.SH-SY5Y細胞を、1%FCS-DMEMにて24時間培養した後、ヒトAPPcDNAを導入したCOSサル細胞培養上清から得られた、分泌型APP695およびAPP770を加えて培養し、同時添加した^3H-thymidineの、同細胞への取り込み能を検討した。分泌型APP770には、SH-SY5Y細胞のthymidine取り込み能を促進する効果が認められた。
精神分裂症多発家系における6番染色体短腕遺伝子マーカーの解析

平成10年度までの研究では、6番染色体短腕に位置するHLA-locusと分裂病の発症と関連性を示す結果が、2つの患者群にわたって得られた。すなわち、以前の小規模研究で示唆されていた分裂病患者におけるHLA-DR1陽性者の頻度の増加が、より大きな対象で確認された。この結果は、American Journal of Psychiatry誌に発表した(vol156,1999,771-773)。平成11年度はこの結果を発展させるべく研究を行った。第一に、結果をさらに確認するため、新たな分裂病患者群ならびに対照群を用いてHLA-DR1ならびに、欧米の研究で注目されているDR4の頻度を調べた。対象のリクルートは、患者群、対照群ともに東京周辺で行った。その結果、DR1陽性者の頻度は対象群で9%であったのに対して患者群では22%で、患者群での有意な増加が認められた(p<0.05)。これに対してDR4の頻度は、平成10年度までの結果と同様に患者群と対照群とで差を認めなかった。以上はAmerican Journal of Medical Genetics誌に印刷中である。この結果を平成10年度までの結果を合わせると、日本人の分裂病患者ではHLA-DR1が発症に関連している可能性の高いことが示唆された。第二に、HLA-DR1が分裂病の発病と関連する場合、どのようなメカニズムで関与すると考えられるかを検討した。方法としては、分裂病患者をDR1をもつ群ともたない群とに分けて、遺伝負因、発症年齢、出生季節の分布等について比較した。その結果、DR1陽性群は陰性群に比較して有意に冬生まれ(特に2-3月生まれ)の多いことが示された(p<0.005)。また、5%有意には達しなかったが、DR1陽性者の方が発症年齢が低く、遺伝負因を有するものが少ない傾向にあることが示された(p<0.1)。これらの結果はいまだ予備的ではあるが、HLAと冬に特徴的な現象(低音によるストレス、インフルエンザ等の感染など)との相互反応が胎生期・周産期の神経発達等に作用して、後の分裂病発症に影響を及ぼしている可能性を示唆するものと解釈された。これらの結果は現在American Journal of Psychiatry誌に印刷中である。近年主に白人を対象としたデータから、6番染色体短腕領域が分裂病発病にかかわる遺伝子座の1つとして有力視されている。本研究の目的は、この領域と分裂病との関連性を日本人において調べることにある。ところで、分裂病においてはさまざまな免疫機能異常や慢性関節リューマチの合併率の減少が認められ、病気の成立に免疫系が関与している可能性がある。HLA(Human Leukocyte Antigen)は、その遺伝子が6番染色体短腕上に位置するが、免疫反応における重要な役割を果たし、かつ中枢神経疾患を含むさまざまな疾患との関連が知られている。以前我々は分裂病患者におけるHLA-DR座の多型を調べ、日本人の分裂病患者ではDR1(遺伝子のタイプ=alleleとしてはDRB1*0101)を有する割合が健常者よりも高い傾向にあることを見出した(Sasakiら1994)。

これは以前に血清学的方法を用いて調べたMiyanagaら(1984)と共通する結果であった。また最近、白人を対象とした研究で、慢性関節リューマチで頻度の高いDR4が分製病では減少していることが報告された(Wrightら1996)。このDR4の減少傾向は、以前の家々の結果でもある程度認められたが、対象数が限られていたせいか統計学的には明らかでなかった。今年度はこれらの結果を確認するため、新たに分裂病患者121例(男性50例、女性71例)を対象にHLA-DRB1遺伝子多型の分布を、近年確立されたPCR-MPH(Microtitre Plate Hybridization)法およびSSCP法を用いて調べた。対照には、同じ方法でタイピングを行った493例の健常者のデータを用いた。その結果、DR4を有する者の頻度は分裂病患者で41.3%、健常者で40.6%で差を認めなかった。今回のデータを以前のデータ(Sasakiら1994)と合わせても、分裂病患者におけるDR4の頻度の低下は認められなかった。それに対してDR1を有する者の頬度は分裂病患者で16.5%、健常者で10.5%で、患者におけるDR1の増加傾向が認められた(p<0.1)。DR1のalleleは患者、健常者ともにすべてDRB1*0101であった。今回の結果を、前回の我々の結果と合わせると、1%水準で分裂病患者におけるDRB1*0101の頻度の増加が認められた。来年度は、さらに例数を増まして結果の再現性を確認する。また他の遺伝子座の結果についても検討を行う予定である。なお今年度の結果についてはAmerican Journal of Psychiatry誌に投稿中である。近年、主に白人の家系を対象とした連鎖解析により、分裂病の遺伝子が6番染色体短腕領域に連鎖している可能性が示された。本研究は、その染色体領域における遺伝子マーカーを解析し分裂病と関連する可能性の高い遺伝子またはマーカーを同定することを目的に計画された。その後1996年の末に、この染色体領域に位置するHLAの遺伝子が分裂病と相関している可能性が、精神医学領域では最も信頼性の高い雑誌の1つであるAmerican Journal of Psychiatry誌に報告された。この報告は、以前にわれわれが観察した結果とも共通しており、また広く知られている分裂病と慢性関節リューマチとの相関関係とも一致した結果であったため、われわれも追試を開始した。その結果、以前にわれわれが観察した結果とも1996年の結果とも共通した知見が得られた。すなわち分裂病患者では健常者に比べてHLA-DR1の陽性率が有意に高く、DR4の陽性率が低い傾向が得られた。これは、同じ時期に筑波大のグループが発表した所見とも一致した結果であった。昨年度の報告では、この点を述べた。今年度はさらに例数を増やして知見の確認を進めている。また、この知見と慢性関節リューマチvs.分裂病の相関との関連性を調べるため、DR4のalleleをさらに詳しく解析した。その結果、慢性関節リューマチで増加しているalleleに関しては分裂病との相関が得られなかった。これについては、今後さらに例数を増やして検討する必要がある。
医療安全能力向上のための未固定遺体とシミュレータを用いた教育プログラムの研究

近年、腹腔鏡下手術に代表される低侵襲手術のトレーニングは特異な手技のために、術者を養成するテクニック中心のトレーニングに主眼が置かれ、開腹手術とは違った局所解剖の理解・指導トレーニングプログラムの開発は少ない。ホルマリン処理前の献体(未固定遺体)を用いた手術手技・局所解剖理解のトレーニングからシミュレータを用いたドライラボへのフィードバックした卒前卒後一貫トレーニングプログラムを構築し、腹腔鏡下低侵襲手術を担う医療人の育成を行うことを目的とし、そのプログラムが医療安全につながる全く新しい局所解剖教育に有効であることを明らかとする。今年度は研究分担者の教室で実習を行っているクリニカル・クラークシップ学生(医学科5年生)100名にトレーニングボックスで基本的タスクトレーニングを行った後に、バーチャルシミュレータを用いて腹腔鏡下胆嚢摘出術の模擬手術を行い、手技評価方法として、従来のDOPSにそれぞれ基準を言語化して、ルーブリック評価と融合したオリジナルの評価方法を用いて、自己評価と、指導医の評価を行った。胆嚢管の剥離露出操作で総肝管まで剥離してしまう学生が約80%を占める結果で、アンケートで臍からの視野と解剖学で学ぶ視野が違い、胆嚢頚部の牽引で総肝管の剥離まで行ってしまったことが判明した。今回予定している1-1.未固定遺体を用いた腹腔鏡下腹腔内画像とMDCT血管抽出画像の連動を意識して、今年度は実際の患者のMDCTから胆道系、脈管を抽出して、3D構築してMicrosoft社のHoloLensで胆嚢管周囲の解剖を回転させて腹腔鏡手術と同じ視野にして事前学習をして模擬手術を行ったところ、100%が胆嚢管周囲の解剖が理解でき、総肝管まで剥離露出する学生はなく、安全に手術を完遂することができた。また、評価表からもHoloLens実習前後で自己評価、指導医からの評価ともに点数が上昇した。未固定遺体のMDCT画像から脈管、胆道系画像を抽出し、3D構築して局所解剖理解のための教材の作成に関して、クリニカルアナトミー・ラボの未固定遺体の供給が滞っているために、遅れている。代替として、実際の患者から抽出した画像を3D構築して教材を作成し、バーチャルシミュレータで模擬手術を局所解剖をon timeで連動させたり、反転授業で予習させる実習を施行したところ、腹腔鏡からの視野による解剖理解が深まったことは成果があった。また、当初予定していた指導医からのルーブリック評価、バーチャルシミュレータの評価を施行し、局所解剖3D構築画像を併用した群は明らかに手術手技の評価が高い結果であった。平成31年度は未固定遺体のMDCT画像から脈管、胆道系画像を抽出し、3D構築して局所解剖理解のための教材の作成と、上級医が判断する腹腔鏡下視野における解剖学的・手技的ピットフォールと学修者が感じるピットフォールに主眼を置いたビデオコンテンツの作成を行い、現在の学生対象のクリニカル・クラークシップで解剖理解のための3D画像を用いた模擬手術を継続して行うとともに、レジデントにはビデオコンテンツ反転授業で見せたり、術中on timeナビゲーションとして見せるような、H30年度に行えなかったブタや未固定遺体を用いたより実践に近い模擬手術実習を行い、作成した教材の有用性を実証する予定である。ホルマリン処理前の献体(未固定遺体)を用いた手術手技・局所解剖理解のトレーニングからシミュレータを用いたドライラボトレーニングを連携させ、ドライラボへのフィードバックした卒前卒後一貫トレーニングプログラムを構築し、腹腔鏡下低侵襲手術を担う医療人の育成を行うことを目的とし、そのプログラムが医療安全につながる全く新しい局所解剖教育に有効であることを明らかとする。今回、我々は研究分担者の教室で実習を行っているクリニカル・クラークシップ学生(医学科5年生)106名にトレーニングボックスで基本的タスクトレーニングを行った後に、バーチャルシミュレータを用いて腹腔鏡下胆嚢摘出術の模擬手術を行った。基本的タスクトレーニングはモニターの2次元情報下における独特の鉗子操作の習熟、バーチャルシミュレータを用いた模擬手術では、術式説明のほかに、手術に必要な局所解剖と手術適応、病態生理までレクチャーを行っている。この模擬手術実習では胆嚢管の剥離露出操作で総肝管まで剥離してしまう学生が約80%を占める結果であった。アンケートで臍からの視野と解剖学で学ぶ視野が違い、胆嚢頚部の牽引で総肝管の剥離まで行ってしまったことが判明した。今回予定している未固定遺体を用いた腹腔鏡下腹腔内画像とMDCT血管抽出画像の連動を意識して、今年度は実際の患者のMDCTから胆道系、脈管を抽出して、3D構築してMicrosoft社のHoloLenzで胆嚢管周囲の解剖を回転させて腹腔鏡手術と同じ視野にして事前学習をして模擬手術を行ったところ、100%が胆嚢管周囲の解剖が理解でき、総肝管まで剥離露出する学生はなく、安全に手術を完遂することができた。

また、当初予定していた指導医からのルーブリック評価、バーチャルシミュレータの評価を施行し、局所解剖3D構築画像を反転授業として受けた群や術中on time群は、画像を事前に反転授業として見なかった群と比較して明らかに手術手技の評価が高い結果であった。近年、腹腔鏡下手術に代表される低侵襲手術のトレーニングは特異な手技のために、術者を養成するテクニック中心のトレーニングに主眼が置かれ、開腹手術とは違った局所解剖の理解・指導トレーニングプログラムの開発は少ない。ホルマリン処理前の献体(未固定遺体)を用いた手術手技・局所解剖理解のトレーニングからシミュレータを用いたドライラボへのフィードバックした卒前卒後一貫トレーニングプログラムを構築し、腹腔鏡下低侵襲手術を担う医療人の育成を行うことを目的とし、そのプログラムが医療安全につながる全く新しい局所解剖教育に有効であることを明らかとする。今年度は研究分担者の教室で実習を行っているクリニカル・クラークシップ学生(医学科5年生)100名にトレーニングボックスで基本的タスクトレーニングを行った後に、バーチャルシミュレータを用いて腹腔鏡下胆嚢摘出術の模擬手術を行い、手技評価方法として、従来のDOPSにそれぞれ基準を言語化して、ルーブリック評価と融合したオリジナルの評価方法を用いて、自己評価と、指導医の評価を行った。胆嚢管の剥離露出操作で総肝管まで剥離してしまう学生が約80%を占める結果で、アンケートで臍からの視野と解剖学で学ぶ視野が違い、胆嚢頚部の牽引で総肝管の剥離まで行ってしまったことが判明した。今回予定している1-1.未固定遺体を用いた腹腔鏡下腹腔内画像とMDCT血管抽出画像の連動を意識して、今年度は実際の患者のMDCTから胆道系、脈管を抽出して、3D構築してMicrosoft社のHoloLensで胆嚢管周囲の解剖を回転させて腹腔鏡手術と同じ視野にして事前学習をして模擬手術を行ったところ、100%が胆嚢管周囲の解剖が理解でき、総肝管まで剥離露出する学生はなく、安全に手術を完遂することができた。また、評価表からもHoloLens実習前後で自己評価、指導医からの評価ともに点数が上昇した。未固定遺体のMDCT画像から脈管、胆道系画像を抽出し、3D構築して局所解剖理解のための教材の作成に関して、クリニカルアナトミー・ラボの未固定遺体の供給が滞っているために、遅れている。代替として、実際の患者から抽出した画像を3D構築して教材を作成し、バーチャルシミュレータで模擬手術を局所解剖をon timeで連動させたり、反転授業で予習させる実習を施行したところ、腹腔鏡からの視野による解剖理解が深まったことは成果があった。また、当初予定していた指導医からのルーブリック評価、バーチャルシミュレータの評価を施行し、局所解剖3D構築画像を併用した群は明らかに手術手技の評価が高い結果であった。
生物学の哲学における遺伝子還元主義的思考の対案としての階層論的思考の可能性の研究

生物学の哲学における「自然選択の単位の問題」と「人間行動の適応主義的説明の問題」の両面において、遺伝子還元的な方法論に対して批判的な立場から考察を深めた。特に後者の問題に関しては、「進化的機能分析」と呼ばれる進化心理学の方法論の批判的分析という形で、多くの機会に国際的にも発信することができた。この成果を然るべき国際ジャーナルに論文として掲載することが、今後の当面の課題となる。今年度は、交付申請書の「研究計画・方法」のところに記載したように、7月にオーストラリアのブリスベンで開催されたInternational Society for the History, Philosophy, and Social Studies of Biology(ISHPSSB)の大会におけるセッション・オーガナイザーとして、われわれの生物学哲学研究の成果を世界に向けて発信した。セッションタイトルは、"The Relevance of Psychological (Cognitive) Perspectives to Biology"というもので、生物学における対象レベルの経験的研究と、メタレベルの方法論的研究の両面において、心理学的・認知的アプローチがどのように貢献しうるかという大枠の下で、合計6人(日本人4人、米国人2人)がそれぞれ異なる角度から話題を提供するというものである。私自身の報告タイトルは"Evolutionary Functional Analysis and Its Methodological Pitfall"というもので、現代人の心を進化的な過去からリバース・エンジニアリングするという進化心理学の「進化的機能分析」と呼ばれる方法論の妥当性を批判的に検討するという趣旨のものである。また、昨年度の11月に神戸大学で開催された"ISHPSSBOff-Year Workshop in Kobe 2008"において、私が生物学の哲学セッションのオーガナイザーとして海外から招待した研究者から逆招待を受け、9月にソウル大学(韓国)、嶺南大学(香港)、復旦大学(上海)の3ヵ所でセミナー講演を行なった。講演の内容は、ソウル大学と嶺南大学では、ISHPSSBブリスベン大会での報告を発展させたもの、そして復旦大学では、2008年の8月にソウル大学で開催された世界哲学会議で私が行なった一般報告を発展させたものである。・今年度の最大の成果としては、私が編著者となって、合計9人の執筆者を擁し、3年越しで企画・編集してきた単行本『進化論はなぜ哲学の問題となるのか-生物学の哲学の現在』が、ようやく7月に勁草書房から出版の運びとなったことである。この本はある程度の評判を呼び、8月29日の朝日新聞の書評欄で作家の高村薫氏にも取り上げていただき、また同氏には同新聞2010年末の「今年の3冊」の中の1冊にも挙げていただいた。・さらに、9月には私が中心となって企画した「第4回生物学基礎論研究会」を、八王子セミナーハウスにおいて成功裡に開催することができた。今回は参加発表者を広く公募することにし、日本進化学会や科学基礎論学会、日本科学史学会などのメーリングリストを通じて希望者を募ったところ、11人の発表希望者を含む合計19名の参加者が集まった。また日本進化学会会長である斎藤成也氏にも、ゲストスピーカーとしてお越しいただけた。合宿形式で行われた二日間の研究会は盛況の内に閉会し、来年は慶応大学で開催することが早々と決定された。ちなみに私は、「Massive Modularity Hypothesisについて」と題する、進化心理学のモジュール集合体仮説を批判的に検討する報告を行った。当研究会は、主として文系出身の科学哲学者が中心メンバーになってこれまで年一回開催してきたものであるが、今回の企画の成功を通して、特に進化学会に集う理系の研究者の間にも、生物学をめぐる哲学的・方法論的・概念的問題に深い関心を持った方々が多数おられるということを発見でき、彼らとのネットワークを築くことができたことが、最大の収穫であった。(この研究会の詳しい情報は、この報告書の項目13に掲げた当研究会のHPで見ることができる。)・6月4日に愛媛大学で開催された科学基礎論学会でのシンポジウム「情報の科学としての生物学」においてコメンテータを務め、主としてパネリストの一人である理化学研究所の藤井直敬氏の「社会脳」に関するご研究に対して、生物学の哲学の観点から、特に「モジュール集合体仮説」との関連で、コメントさせていただいた。・春秋社から出版予定の『進化という謎-生物学の哲学の根本問題』の執筆を継続中。全三章立てのうち、第二章「適応主義」をほぼ完成した。・アメリカ科学哲学会(PSA)の隔年の大会が2012年11月にサンディエゴで開催されるが、そこで報告するための論文"Evolutionary Functional Analysis Revisited"を、2012年3月1日にオンラインでPSA事務局に提出した。採択の可否は5月に、Proceedingへの掲載の可否は6月に連絡が来ることになっている。・日本組織適合性学会のシンポジウムに招かれ「遺伝子の決定性」に関する考察を開陳した。

「遺伝的決定論」の表現に込められた肯定的/否定的含意の歴史的変遷、特権的なマスターコードとしての遺伝子の概念の現代の生命科学における相対化、「遺伝子」概念の多義性に由来する生命科学の異なる分野間(たとえば進化生物学と分子遺伝学)に見られる一種の「通約不可能性」、といった問題を哲学的に分析した。・“Conceptual Problems in EvolutionaryBiology: Adaptation, Human Culture, and Units of Selection"と題する英語博士論文で、慶應大学文学部から博士号を取得した。その中で私は、進化論的説明によって人間本性(ヒト種固有の文化的行動や心理メカニズム)を「自然化」しようとする(人間)社会生物学や進化心理学などの研究プログラム、またドーキンス流の「利己的遺伝子」の視点だけでどこまで生物界の多様性や階層性が説明できるかという自然選択の単位の問題を詳細に検討しながら、自然選択に訴えて形質の進化を説明する進化生物学における適応主義的な方法論の強みと弱み、有効性と適用限界を明らかにするという作業に取り組んだ。・ドイツ科学哲学会(GWP)の設立記念国際会議の一般発表に応募していた“Evolutionary Functional Analysis Revisited"と題する論文が採択されたため、3月にライプニッツ・ハノーファー大学で開催された会議で報告した。そこで私は、「進化心理学は、進化的機能分析という科学的な方法論を採用しているがゆえに、反証不可能な“just-so story"(なぜなぜ物語)を弄するかつての社会生物学とは異なり、まっとうな科学的研究プログラムである」という進化心理学者の主張を批判的に検討した。昨年度の最大の課題であった、春秋社から出版予定の単著の執筆がまだ3分の1程度にとどまっている。24年度が最終年度であるため、記入しない。・春秋社から出版予定の著書を今年度中に出版する。・本助成研究が今年度で終了するので、今度は共同研究のチームを組んで、来年度以降の科研費助成に申請する。・9月に組織適合性学会という医療技術者の学会におけるシンポジウム「異分野研究が拓くMHC研究の新しい展開」に講演者として招かれている。異分野との対話の推進のためにも、是非ともこれを成功させたい。
PCR法を用いた新しいエイズ関連ウイルスの検出とその系統発生学的研究

エイズウイルスの起源と伝播を解明するため前年度に確立した簡便な系統解析法を中心に、種々の地域のヒトやサルから分離されたエイズ関連ウイルスの解析を進めた。1.前年度ガ-ナから分離したHIVー2b(従来報告されているものと系統的に異なる)の分子クロ-ニングを行ない感染性DNAクロ-ンを作製した。このクロ-ンのenv遺伝子中に存在する機能的配列、rev反応領域(RRE)について、他のエイズ関連ウイルス及び成人T細胞白血病ウイルスのrexに対する反応性を調べたところ、従来型のHIVー2のものと同様の結果が得られ、機能的差異は検出されなかった。2.ケニア及びガ-ナのエイズ患者より分離したHIVー1について系統解析を行なったところ、欧米のような互いによく似た、すなわち最近分かれた株とは異なり、それぞれ系統樹上で独自の位置を占め、他のアフリカ株と同様比較的以前に分かれた株であった。日本の血友病の患者から分離した2株はいずれも欧米株の系統に属し、かなり最近分かれたウイルスであった。3.ケニアの霊長類センタ-で飼育されているアフリカミドリザルより新たに分離したSIV_<AGM>数株及び白王冠マンガベイより分離したウイルスSIV_<WCM>について系統解析を行なった。SIV_<AGM>は、HIVー1やHIVー2に比べて個々の株間の違いが大きいが、それでもSIV_<AGM>として1つの独立した群を形成していることが示された。SIV_<WCM>は、SIV_<AGM>の大きな群内にあって小さな亜群を形成するものと考えられた。アフリカには、この他にもまだまだ多くの異なるタイプのウイルスが存在するものと考えられ、エイズウイルスの起源と伝播の問題を解明するためには、今後も同様の解析を地道に続けてゆかなければならない。
植物アポプラストにおける病原菌に対する防御メカニズム

植物病原菌は多種の多糖分解酵素を植物のアポプラス(細胞膜より外側)に分泌し、細胞壁の分解を促進している。特に多糖分解酵素の構成部位であるCBM1は植物の細胞壁多糖の効率的分解、および細胞壁の力学的性質の低下に大きく寄与している。これに対して、植物はCBM1の作用を抑制するシステムを有していることが推測された。そこで、いもち病菌のCBM1を有するキシラナーゼ(以下MoCel10A_CBM1と示す)に作用するイネ由来のタンパク質の同定および機能解析を行うこととした。MoCel10A_CBM1と強固に結合するイネ由来のタンパク質の探索を行なったところ、システインリッチリピート分泌タンパク質に分類されるタンパク質の単離・同定に成功した。このタンパク質はCBM1と特異的に結合するためOsCBMIP(Oryza sativa CBM1 Interacting Protein)とした。OsCBMIPの機能を明らかにするため、イネ培養細胞を宿主としてリコンビナントOsCBMIPを作製し、その性質を調べた。その結果、(1) OsCBMIPはCBM1を有する多種の多糖分解酵素と結合する、(2) OsCBMIPとMoCel10A_CBM1との結合解離定数を決定した、(3) OsCBMIPがCBM1に結合することにより多糖分解酵素の酵素活性を阻害する、ことを明らかにした。CBM1は広く糸状菌が有するドメインであるため、植物はCBMIPを用いてCBM1を有する多糖分解酵素の酵素活性を阻害し、糸状菌に対する耐病性を向上させていることが推察された。さらに、植物由来のThaumatinと結合するいもち病菌由来の3種類のタンパク質の同定に成功した。Thaumatinおよびいもち病菌由来の3種類のタンパク質のリコンビナントタンパク質の作製に成功したため、今後、これらのタンパク質レベルでの機能解析を行う。平成30年度(2018年度)の研究目標は、(1) OsCBMIPのタンパク質レベルでの機能解析(CBM1タンパク質との結合や酵素活性への影響)、(2) OsCBMIPの遺伝子変異イネの作製、(3)イネ由来のThaumatinと結合するいもち病菌由来のタンパク質の単離・同定、としていた。OsCBMIPのタンパク質レベルでの機能解析は終了し、今後、作製した遺伝子変異イネへのいもち病菌の感染実験を行い、OsCBMIPの耐病性への関与について明らかにする。また、イネ由来のThaumatinと結合するいもち病菌由来の3種類のタンパク質の同定にも成功した。これら3種類のタンパク質は機能未知のタンパク質であるため、機能解析を進めることにより新規な情報が得られると大いに期待している。これらの状況をふまえ、「おおむね順調に進展している」と判断した。平成30年度(2018年度)の研究は計画通りに進展したため、2019年度は計画通りに研究を実施する。2019年度においては、(1)作製したOsCBMIPの遺伝子変異イネの解析、(2)イネの外国品種やイネ以外の植物におけるCBMIP (CBM1と結合するタンパク質)の同定および機能解析、(3)イネ由来のThaumatinと結合するいもち病菌由来の3種類のタンパク質(Thaumatin-binding proteins)の解析を実施する。平成30年度(2018年度)に実施したOsCBMIPの機能解析と本年度の(1)作製したOsCBMIPの遺伝子変異イネの解析、の結果を学術論文として公表することを目標とする。また、Thaumatin-binding proteinsの機能解析の結果を学術論文として公表することを目標とする。

平成30年度(2018年度)の研究目標は、(1) OsCBMIPのタンパク質レベルでの機能解析(CBM1タンパク質との結合や酵素活性への影響)、(2) OsCBMIPの遺伝子変異イネの作製、(3)イネ由来のThaumatinと結合するいもち病菌由来のタンパク質の単離・同定、としていた。OsCBMIPのタンパク質レベルでの機能解析は終了し、今後、作製した遺伝子変異イネへのいもち病菌の感染実験を行い、OsCBMIPの耐病性への関与について明らかにする。また、イネ由来のThaumatinと結合するいもち病菌由来の3種類のタンパク質の同定にも成功した。これら3種類のタンパク質は機能未知のタンパク質であるため、機能解析を進めることにより新規な情報が得られると大いに期待している。これらの状況をふまえ、「おおむね順調に進展している」と判断した。平成30年度(2018年度)の研究は計画通りに進展したため、2019年度は計画通りに研究を実施する。2019年度においては、(1)作製したOsCBMIPの遺伝子変異イネの解析、(2)イネの外国品種やイネ以外の植物におけるCBMIP (CBM1と結合するタンパク質)の同定および機能解析、(3)イネ由来のThaumatinと結合するいもち病菌由来の3種類のタンパク質(Thaumatin-binding proteins)の解析を実施する。平成30年度(2018年度)に実施したOsCBMIPの機能解析と本年度の(1)作製したOsCBMIPの遺伝子変異イネの解析、の結果を学術論文として公表することを目標とする。また、Thaumatin-binding proteinsの機能解析の結果を学術論文として公表することを目標とする。平成30年度において、補助金の大部分を試薬の購入および謝金(技術員の雇用)に費やした。年度末において購入が必要な試薬がなく、残額22,427円を次年度(2019年度)の試薬購入に使用することが適切である、と判断した。
アメリカおよびイギリスの現代教育改革における教師の位置とその地位に関する比較研究

本年度の研究実施計画に基づいて、1、1980年代を中心としたアメリカおよびイギリスにおける教育改革、ならびに教師の地位に関する資料を収集するとともに、本研究課題に関係のあるわが国における資料も収集した。2、アメリカにおける教育改革、教師の資格付与、教師のメリット・ペイ、教員センター等、およびイギリスの1988年教育改革法に基づく地域教育経営、学校理事会への父母参加等に関するわが国の先行研究を整理した。いずれも本研究課題に即した研究ではないので、本研究からは一定の距離があり、それぞれの分野の紹介が中心であるが、現在までに行われてきている研究の方法、範囲等を知るとともに、教育改革の展開のなかで、教師の位置も、その地位も相当に揺れていることを知ることができた。3、到着が遅くなった資料もかなりあり、収集した資料を十分に分析するにはなお時間が必要であるが、現在までの分析によれば、アメリカおよびイギリスの教育改革において、従来主導的役割を果す分野も多くあり、すなわち多くの分野で主要な位置を占めていたが、最近は教師の専門的事項にまで父母・住民の発言を認めるとともに、教育行政や教育経営への父母・住民の参加を保障しようとする傾向が現れており、改めて教職の専門職性はいかにあるべきかが問われている。そのなかで教師の権限がときに不当に狭められたり、教師の賃金・労働条件が必ずしも向上せず、ときには低下したりしている。他方、その他の国の状況についても知見を得るように努めた。今後は、収集した資料の分析を十分なものにするとともに、その他の国の状況とも比較して、アメリカおよびイギリスの教育改革における教師の位置とその地位保障の内容の意義・問題を解明し、それに照らし、わが国の場合の課題を考察する予定である。
癌幹細胞を標的とする腫瘍根絶技術の新構築の総括班

新学術領域研究「癌幹細胞を標的とする腫瘍根絶技術の新構築」(平成22-26年度)の研究成果と波及効果を、多面的に評価することを目的として、成果の取りまとめを行った。本領域研究から創出された学術論文や知的財産をもとに、計画研究および公募研究の達成度を評価し、さらに領域内での有機的な連携が計れていたかについて検証した。特に、がん幹細胞標的治療を実現するシーズ探索における成果を精査し、がん幹細胞研究が新しい学術領域として広く社会に認知されたことへの貢献を評価した。具体的には、以下の項目について調査・評価を行った。(1)計画研究8題と公募研究23題について、研究期間内に発表あるいは発表予定の学術論文および知的財産を調査した。(2)(1)をもとに、それぞれの研究課題の達成度を評価した。特に、今後の課題を明確にすることに重点を置いて精査した。(3)領域内共同研究の実施状況、研究資源共有の状況を調査し、領域内連携の達成度を評価した。(4)本領域研究によって、がん幹細胞標的治療を可能にするシーズ探索がどの程度進んだかを調査した。(5)国内外におけるがん幹細胞研究の成果を調査し、本領域研究の貢献度を評価した。(6)関連学会において、がん幹細胞研究が取り上げられた状況、テレビ・新聞等での報道状況を調査し、本領域研究の認知度と波及効果について評価した。27年度が最終年度であるため、記入しない。総括班は9名の計画研究代表者と7名の連携研究者で構成した。年2回開催の総括班会議では、領域全体の進捗状況の把握、各研究の発展性への助言等を行った。また、研究資源を領域内で共有するシステムを構築し、共同研究を推進することで、公募研究を含めた領域全体の有機的結合とそれによる高い生産性の維持に貢献した。研究成果は領域ホームページで随時紹介すると共に、社会へのアウトリーチ活動や若手研究者育成のためのシンポジウムの開催にも積極的に取り組んだ。このような活動によって、癌幹細胞研究が専門家のみならず広く社会に認知されるに至った。総括班では、各計画研究の有機的連携を促すためのハブ機能を重視して、領域全体の方向性確認を目的としたミーティングの開催を行った。また、公開シンポジウムやwebページを通した情報発信に積極的に取り組んだ。平成22年度の主な取り組みとしては、(1)領域ホームページの開設(7月)、(2)第1回総括班会議の開催(9月15日、福岡)、(3)研究成果の取りまとめとweb公開(10月)、(4)国際幹細胞シンポジウムのジョイント開催(2月、シンガポール)、(5)第2回総括班会議の開催(3月、福岡)、(6)公開シンポジウムの開催(3月、福岡)、(7)公募研究の募集と評価などである。総括班会議では、各計画研究の進捗状況を評価し、領域全体における位置づけと他の計画研究との連携可能性について検討を重ねた。また、シンガポール幹細胞シンポジウムでは、海外研究協力者であるDaniel G.Tenen博士をはじめとする海外の幹細胞研究者との意見交換の場を提供し、班員のモチベーションを高めるよい機会となった。さらに、3月の公開シンポジウムでは、話題のエピジェネティクス分野から九州大学の大川恭行先生、癌幹細胞分野から班員の佐谷秀行先生に最新知見の講演をいただき、70名を越す若手研究者による熱心な議論の場となった。また、シンポジウム参加者を対象としたアンケート調査を実施し、当該研究領域が学術的にも社会的にも極めて重要な分野であるとの調査結果を得た。班員からの新着論文のうち主要な業績に関しては、解りやすい解説をつけてwebページに公開し、社会への貢献に努めている。総括班では、各計画研究および公募研究の有機的連携を促すためのハブ機能を重視して、領域全体の方向性確認を目的としたミーティングの開催を行った。また、webページを通した情報発信に積極的に取り組んだ。平成23年度の主な取り組みとしては、(1)領域ホームページの充実と研究成果の取りまとめおよびweb公開、(2)第3回総括班会議の開催(9月10日、福岡)、(3)領域内で共有可能な資源の構築などである。総括班会議では、8題の計画研究と新たに加わった13題の公募研究を含むすべての研究課題について進捗状況を評価し、領域全体における位置づけと他の計画研究との連携可能性について検討を重ねた。共有可能な資源の具体例としては、(1)各班員が保有する様々なマイクロアレイデータを東京大学医科学研究所後藤典子准教授の教室で一元管理・解析し、領域横断的に利用可能な包括的データベースを構築すること、(2)マウス異種移植モデルをもちいた研究に不可欠な高度免疫不全マウスとして、九州大学で開発した新規BRGSマウスを班員に提供することで、共通のプラットホームをもちいた互換性の高い移植データを共有可能にすること、(3)タンパク質量分析および修飾解析については、国立がん研究センター研究所北林一生先生の教室で集中的に解析を行うことで、データの質と汎用性を担保することなどである。このような取り組みを通して、領域全体としての質および効率の向上が計られたと考えられ、今後益々の成果が期待できる。総括班では、各計画研究と公募研究の有機的連携を促すためのハブ機能に重点を置いて、領域全体の方向性確認を目的としたミーティングの開催、webページを通した情報発信に取り組んできた。

平成25年度の主な取り組みとしては、(1)公募研究のリニューアル、(2)領域ホームページの充実と研究成果の公開、(3)第6回総括班会議の開催(6月7日、福岡)、(4)第7回総括班会議の開催(11月14-15日、福岡)、(5)領域内での共有可能な研究資源の構築などである。2回の総括班会議において領域内連携の強化を図り、共同研究の実績も上がってきた。特に、新規採択された公募研究との連携に力を入れた。また、ハードとソフト両面において、研究資源を共有するシステムがほぼ完成した。具体的には、(1)癌幹細胞可視化技術(東京医科歯科大学)の共有、(2)遺伝子発現プロファイリングデータの共有(東京大学医科学研究所)、(3)次世代免疫不全マウスをもちいた異種移植技術の共有(九州大学)、(4)タンパク質量分析および修飾解析技術の共有(国立がん研究センター)などを推進した。総括班では、各計画研究と公募研究の有機的連携を促すためのハブ機能に重点を置いて、領域全体の方向性確認を目的としたミーティングの開催、webページを通した情報発信に取り組んできた。平成26年度の主な取り組みとしては、(1)領域ホームページの充実と研究成果の公開、(2)第8回総括班会議の開催(平成26年5月29日、福岡)、(4)第9回総括班会議の開催(平成26年11月20-21日、福岡)、(5)領域内での共有可能な研究資源の構築などである。計画研究間での共同研究推進のみならず公募研究との連携に力を入れた。また、ハードとソフト両面において研究資源を共有するシステムをもちいることで、高い生産性を維持することができきた。具体的には、(1)癌幹細胞可視化技術(東京医科歯科大学)の共有、(2)遺伝子発現プロファイリングデータの共有(東京大学医科学研究所)、(3)次世代免疫不全マウスをもちいた異種移植技術の共有(九州大学)、(4)タンパク質量分析および修飾解析技術の共有(国立がん研究センター)などが特に有効に機能した。新学術領域研究「癌幹細胞を標的とする腫瘍根絶技術の新構築」(平成22-26年度)の研究成果と波及効果を、多面的に評価することを目的として、成果の取りまとめを行った。本領域研究から創出された学術論文や知的財産をもとに、計画研究および公募研究の達成度を評価し、さらに領域内での有機的な連携が計れていたかについて検証した。特に、がん幹細胞標的治療を実現するシーズ探索における成果を精査し、がん幹細胞研究が新しい学術領域として広く社会に認知されたことへの貢献を評価した。具体的には、以下の項目について調査・評価を行った。(1)計画研究8題と公募研究23題について、研究期間内に発表あるいは発表予定の学術論文および知的財産を調査した。(2)(1)をもとに、それぞれの研究課題の達成度を評価した。特に、今後の課題を明確にすることに重点を置いて精査した。(3)領域内共同研究の実施状況、研究資源共有の状況を調査し、領域内連携の達成度を評価した。(4)本領域研究によって、がん幹細胞標的治療を可能にするシーズ探索がどの程度進んだかを調査した。
翼間干渉が水中翼船の動揺性能に与える影響に関する研究

全没型の水中翼船の前部翼による吹き下ろしが後部翼の流体力に与える影響と、船体運動に対して与える影響を主に模型実験により調べた。供試模型とし新規に設計製作を行ったモーターによって精密に駆動される後縁フラップを装備した翼幅350mm、翼弦長75mmの全没型水中翼2個を、翼間距離1200mmの状態で曳航水槽において平水中で流体力の計測を行い、前翼と後翼の没水深度の違いによる影響と、前翼の揚力変化に対する後翼の変化について調べた結果、1後翼の没水深度が前翼とほぼ等しい場合には前翼の揚力変化の約30%程度の揚力の変化がある2翼間距離と速度に応じて、前翼の揚力変化と後翼の変化の間に時間差が生じることが確認された。このことから翼間干渉が水中翼船に働く流体力に対して与える影響は大きいことがわかった。さらに縦揺れ、上下揺の平水中での姿勢制御実験を行い運動を計測し、上記で計測された流体力を用いた数値シミュレーションと比較検討し、1翼間干渉の影響を後翼の零揚力角の変化及び前翼の揚力係数の変化に対する後翼の揚力係数の変化との間の関係を速度と翼間距離によって決まるムダ時間と振幅比で表現した運動方程式を導いた2上記の運動方程式による運動の推定は結果は実験とよく一致する結果を得た。
ベトナムにおける小児Ｈｉｂワクチンの臨床的効果と罹患率の推移に関する研究

インフルエンザ桿菌b型(Hib)は小児の肺炎を含む重症感染症の主要な原因である。欧米諸国では(Hib)結合型ワクチンの有用性が実証されているが、東南アジアでの小児肺炎に対する効果は明らかでなかった。研究代表者らは、ベトナムで行っている小児呼吸器感染症サーベイランスのデータを活用し、2010年に国家ワクチン計画に導入されたHib結合型ワクチンの効果を検討した。その結果、ワクチンの導入により5歳未満小児の肺炎発生率が39%減少したことが明らかとなった。本研究により、東南アジアの小児に対するHib結合型ワクチンの有用性が明らかとなった。小児のインフルエンザ桿菌b型(Hib)感染症に対する、ポリサッカライド結合ワクチン(Hib-CV)の有効性は欧米先進国で確立された。しかし、アジア人においてはインフルエンザ桿菌感染症に占めるHibの割合が低いことが知られており、特に東南アジア低中所得国におけるHib-CVの効果は十分に明らかでない。いっぽう近年、Hib-CV導入後に、ワクチンが無効なインフルエンザ桿菌による感染症が増加する現象(血清型交代)が報告されている。本研究では、ベトナム中部ニャチャン市において実施されている疫学研究、ベトナム人小児におけるHib-CVの効果を解明する。また実際の接触行動パターンに基づくシミュレーションモデルを用いて、今後のベトナムにおけるHib感染症の罹患率の推移を推定し、血清型交代がもたらすインパクトを検証する計画である。平成25年度は、ベトナムで2010年6月に国家予防接種計画に導入されたDTP-HepB-Hibcombination vaccineの効果を推定するために、2つの研究を行った。ひとつは、サーベイランスデータを活用したワクチン効果推定である。呼吸器感染症で病院に入院した5歳未満小児のレントゲン写真約3000枚を、WHOの基準に基づいて再読影を行った。このデータを用いて、Hib-CV導入前における小児肺炎の発生率の推定(J Pediatr. 2013)、インフルエンザパンデミックが小児肺炎に及ぼした影響について評価し(Influenza Other Respiratory Viruses. 2014)、導入後の発生率の減少率については、数理モデルを用いて算出した。もうひとつは、2009年より開始した出生コホート研究のデータを使って、ワクチンの効果を推定することを試みた。しかし、東南アジア低中所得国におけるHib-CVの効果は十分に明らかでない。本研究では、ベトナム中部ニャチャン市でケース・コントロール研究を行い、ベトナム人小児におけるHib-CVの効果を解明する。また実際の接触行動パターンに基づく最新のシミュレーションモデルを使って、今後のベトナムにおけるHib感染症の罹患率の推移を推定し、血清型交代がもたらすインパクトを検証する計画である。平成24年度は、現在進行中の疫学調査データを用いて解析を行った。ベトナムでは2010年6月に、DTP-HepB-Hibcombinationvaccineが国家予防接種計画に導入された。われわれの研究グループは、2007年よりベトナム中部ニャチャン市で小児呼吸器感染症サーベイランスを実施している。このサーベイランスデータを用いて、2010年6月のHib-CV導入前後で、小児呼肺炎の発生率の変化を検討した。解析には時系列分析モデルを用い、短期的な呼吸器ウイルスの季節変動、および長期的な衛生状態の改善による肺炎発生率の減少傾向を考慮した。その結果、Hib-CV導入により、小児肺炎の発生率が14.9%減少していることが明らかとなった。これは東南アジアにおけるHib-CVの小児肺炎に対する効果を示した最初の研究である。本研究では、ベトナム中部ニャチャン市において実施されている小児呼吸器感染症サーベイランスを活用することで、ベトナム人小児におけるHib-CVの効果を解明する。また実際の接触行動パターンに基づくシミュレーションモデルを用いて、今後のベトナムにおけるHib感染症の罹患率の推移を推定し、血清型抗体がもたらすインパクトを検証する計画である。平成25年度は、ベトナムで2010年6月に国家ワクチン計画に導入されたDTP-HepB-Hibcombination vaccineの効果を判定するための基礎データとして、ベトナムにおける小児肺炎の発生率を推定し(J Pediatr. 2013 Jul;163(1 Suppl):S38-43.)、インフルエンザウイルスが小児肺炎の発生に及ぼす影響を明らかにした(Influenza Other Respir Viruses. 2014 Jul;8(4):389-396.)。

平成26年度は、これらのデータを基に時系列解析を行うことで、2010年のHib-CV導入により小児肺炎が39%減少したことを明らかにした(Vaccine. 2014 Dec 5;32(51):6963-6970.)。小児のインフルエンザ桿菌b型(Hib)感染症に対する、ポリサッカライド結合ワクチン(Hib-CV)の有効性は欧米先進国で確立された。しかし、アジア人においてはインフルエンザ桿菌感染症に占めるHibの割合が低いことが知られており、特に東南アジア低中所得国におけるHib-CVの効果は十分に明らかでない。一方近年、Hib-CV導入後に、ワクチンが無効なインフルエンザ桿菌による感染症が増加する現象(血清型置換)が報告されている。本研究では、ベトナム中部ニャチャン市において実施されている小児呼吸器感染症サーベイランスを活用することで、ベトナム人小児におけるHib-CVの効果を解明する。また実際の接触行動パターンに基づくシミュレーションモデルを用いて、今後のベトナムにおけるHib感染症の罹患率の推移を推定し、血清型置換がもたらすインパクトを検証する。平成25年度は、ベトナムで2010年6月に国家ワクチン計画に導入されたDTP-HepB-Hibcombination vaccineの効果を判定するための基礎データとして、ベトナムにおける小児肺炎の発生率を推定し(J Pediatr. 2013 Jul;163(1 Suppl):S38-43.)、インフルエンザウイルスが小児肺炎の発生に及ぼす影響を明らかにした(Influenza Other Respir Viruses, 2014 Jul;8(4):389-396)。平成26年度は、これらのデータをもとに時系列解析を行うことで、2010年のワクチン導入により小児肺炎が39%減少したことを明らかにした(Vaccine. 2014 Dec 5;32(51):6963-6970; Trop Med Health. 2014Jun;42(2 Suppl):47-58.)。平成27年度は、シミュレーションモデルを用いてベトナムにおけるHib性小児肺炎の発生数の推移を推定し、それが減少傾向にあることを示した。インフルエンザ桿菌b型(Hib)は小児の肺炎を含む重症感染症の主要な原因である。欧米諸国では(Hib)結合型ワクチンの有用性が実証されているが、東南アジアでの小児肺炎に対する効果は明らかでなかった。研究代表者らは、ベトナムで行っている小児呼吸器感染症サーベイランスのデータを活用し、2010年に国家ワクチン計画に導入されたHib結合型ワクチンの効果を検討した。その結果、ワクチンの導入により5歳未満小児の肺炎発生率が39%減少したことが明らかとなった。本研究により、東南アジアの小児に対するHib結合型ワクチンの有用性が明らかとなった。ベトナム人小児におけるHib-CVの小児肺炎に対する効果を評価するという当初の研究目的の一つを達成することができた。一方で、もう一つの目的である血清型交代現象の予測については、コミュニティーレベルのデータ収集が遅れたため、当初の計画通りに進んでいないため、「やや遅れている」と評価した。感染症疫学
がん細胞から分泌されるT細胞の機能抑制因子の同定

本研究では、がん局所においてがん細胞から分泌され、T細胞の機能を抑制する分子を、T細胞におけるXBP1sの発現をマーカーに用いて、同定することを目的とする。そのために、1)マウスのがん細胞株を用いて、がん細胞から分泌され、T細胞にXBP1sを発現させるように働く分子の同定を目指す。さらに、2)同定した因子が実際にマウスのT細胞の機能を抑制するかを明らかにする。最後に、3)同定した因子に対する抗ヒト抗体を作製し、抗体添加によりT細胞のXBP1sの発現上昇が抑制されるかを検討する。
膜処理プロセスにおける廃棄物処分場浸出水中プラスチック添加剤の挙動

まず、浸出水中のプラスチック添加剤の濃度を3箇所の処分場の浸出水及びその処理水について分析をおこなった。GC/MSによる分析からは、多くの種類のプラスチック添加剤などが浸出水から検出された。今回検出された物質は、プラスチック添加剤としては、フタル酸エステル,リン酸トリエステル,N-buthyl benzensulfonamide,2(3H)-Benzothiazolone,Camphor,Bis phenole Aであり、特にBis phenole Aは、1ppm以上の高濃度で検出された。次にナノろ過膜を用いて、浸出水の処理を試み、NaCl阻止率などナノろ過膜の基本的性能パラメーターと微量有機物質および重金属の阻止率の関係を求めた。重金属については、塩化物イオンの阻止率に比べて非常に高く、ヒ素を除いて比較的よく除去されていたが、個々の有機物質については、物質ごとに阻止率が大きく異なった。ベンゼン環にヒドロキシル基が結合した構造を持つフェノール系の化合物の阻止率が低いことなど、溶質の分子量以外にも阻止率に影響を与える因子があることがわかった。ただし、純物質の溶液系では、浸出水のろ過の場合は比較して、分子量と阻止率の相関が比較的よかった。ナノろ過膜を用いて浸出水が地下水にはいった場合を想定し、稀薄な溶液中に含まれる有機微量化合物の阻止性能を調べた。1気圧の低圧運転でも0.1m/dのフラックスと硝酸の阻止率で85%の阻止率を得た。C1イオンの阻止率を膜の標準脱塩率と考えると、硝酸イオン,有機塩素化合物の阻止率は標準値よりも小さく、重金属の阻止率は標準値に比べて大きくなることがわかった。
X線照射による歯胚組織細胞の動態学的研究

X線照射による歯胚組織細胞の障害効果を検討するために、in【r! ́】tso系のモデルとしてラット切歯歯胚組織より上皮様細胞の培養系を確立した。次にマウス線維芽細胞由来のL株細胞と歯胚組織由来の上皮様細胞のX線感受性について比較検討した。1.歯胚組織由来上皮様細胞の培養系の確立。ラット歯胚組織片より得られた遊出細胞から形態的に異なる3種類の細胞系を分離し、これらをRTG(rat tooth ge【r! ́】m cell)13とした。これらの細胞系のうち上皮細胞の形態を示すRTG-2が最も高い増殖能を示し倍化時間は約70時間であった。また細胞周期は【G_1】期,S期および【G_2】+M期がそれぞれ66%,28%および6%の割合を示した。2.L株細胞の細胞周期におけるX線照射の影響非同調L細胞にX線照射をおこなった場合、照射線量および時間的経過に従いDNA分布に変化がみられ細胞周期の変動が伺われた。照射線量を2,5および10Gyと増加するに従い、【G_2】+M期への細胞の蓄積(【G_2】block)が大きくなり10Gy照射においては30時間後でもcontrol levelまでの回復はみられなかった。M期に同調したL細胞にX線照射をおこなった場合、【G_1】期からS期への移行が線量に依存して遅延した。一方S期から【G_2】期への移行も、照射群で遅延がみられたが、これには【G_1】blockが反映していると考えられた。3.ラット歯胚由来細胞(RTG-2)に対するX線照射の影響ラット歯胚組織より分離したRTG-2細胞に2GyのX線照射をおこなった場合【G_1】期の減少とS期の増加が認められたが、S期への蓄積は照射後2日目で最大となった。このS期への蓄積は【G_1】blockとS期から【G_2】期への移行の抑制によるものと考えられ、放射線感受性において株細胞とは異なる機構が関与している可能性を示唆するものであった。