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近代の繊維工場における女子寄宿舎・家庭寮・教育施設の形成過程に関する建築史研究

うち13号棟は北側片廊下式であるが、4号棟は階段室型で水廻りを4室が共有する型式である。女子寮舎の南端に女子寮事務所・家庭寮割烹室・教室が並び、西側廊下を隔てて食堂・浴場・診療所・客室が配されている。現在この工場は物流センターに変更され、女子寮としては使用されていないが、当初の建物がほぼ完璧に残っている。北側片廊下式の寮舎の中にはワンルーム型や水廻り共有型等に改装されたものがあり、試行錯誤の跡が見られる。また家庭寮は昭和49年に木造平屋建てとして新築されている。香川県にある東洋紡績株式會社三本松工場は昭和8(1933)年に完成した。平成8(1996)年5月に同工場は帝國製薬株式会社に売却されたが、旧女子寄宿舎は、外壁を残して丁寧に補修され、現在研究所として使用されている。この建物以外に東洋紡績の寄宿舎は他に残されておらず、しかもここでは建物が群として元の配置のままで残っていることは貴重である。京丹後市域の縮緬工場4機業14件の建物を実測調査し、昭和2(1927)年の北丹後震災後の復興策の影響を考慮しつつ、建築の特徴を分析・考察した。結果は次の通り。1全ての工場が木造下見板張り2震災直後建設の工場には屋根材の軽量化がみられるが、次第に瓦を使用するようになる3震災以降建設の工場の小屋組はトラス構造が大半を占める4採光を優先した結果、壁量は極端に少ない5震災以降建設の工場には火打梁・方杖・金物が採用されている今年度は綾部市にある郡是製絲本社本工場の女子寮舎と教育施設について平面構成と木造構法の変遷過程に注目した。本工場では、明治42年に教育部が発足し、大正初期頃までに最初の独立棟として教室が設置された。女子寮事務所棟にも教室が設置されたが、昭和14年の改築で1階に作法室や割烹室が設けられ、2階はほぼ教室となり教育施設が大幅に増床した。これは郡是青年学校の開設に伴う改築であったと推察される。大正6年、郡是女学校が開設し、女子寮舎2棟と教室棟1棟が建てられ、新人教育と教婦養成が行われた。研修用に繰糸工場や再繰工場等も建てられ、一つの小さな工場となっていた。本工場の女子寮舎については、戦後寮運営の自治が謳われて以降、昭和37、38年に2棟が新設された。木造2階建てであるものの、水回りや階段室をRC造にして防火壁と兼用していた。昭和39年にRC造の女子寮舎1棟が建てられ、水洗便所が各階に配置され、屋上には洗濯場や物干場が設置された。3棟とも寮室には床の間がなく、個人用物入・洋服入・布団入が壁面一杯に造り付けられた。着替え用のコーナーを設けた寮室もみられた。家庭寮は昭和23年に本工場に設置され、昭和24年には郡是女学院にも設置された。2寮とも幅1間の床の間と違い棚をもつ。少人数が寝食を共にしながら家事や作法の実習体験ができる家庭寮を女子寮舎外に持つことにより、起居を通して行われた「郡是教育」は、女子寮舎内から家庭寮や教室へと移ったことを意味する。次に女子寮舎の木造構法は、大正末頃まで筋違・火打材・金物が意識的に使われていたものの現場任せであった。大正末頃にそれらが図面上に具体的に示され、建設技術が一気に進化した。その背景に1大正14年の北但馬地震の復興策としての耐震対策2市街地建築物法適用地域への分工場の新設3昭和2年の寄宿舎取締規則に備えての安全・衛生対策がある。郡是製糸(株)では1925年頃女子寮舎の標準プランが確立されたが、1958年以降建設の女子寮舎の寮室には床の間がなく、収納棚が壁面一杯に造り付けられた。家庭寮の多くは1948年以降に建設され床の間をもっていた。寮舎内で起居を通して行われた「郡是教育」は、戦後の寮自治により寮舎外の家庭寮や教室へと場所を変えた。東洋紡績(株)では1922年には「自修寮」(家庭寮)が設置されていた。1929年の深夜業廃止に伴う余暇時間の増加により裁縫教室や割烹教室が充実した。1935年に工場付設の女
水源過疎山村における地域社会の変容と住民生活

本研究の目的は、大規模な公共事業として推進されるダム建設計画による水源過疎山村およびその河川流域における地域社会や住民生活への影響と変容過程について、自治体や住民の対応形態および公共事業と住民運動との関連性などを中心に実証的研究をおこなうことである。この目的にもとづいて、昨年度は、(1)すでにダム建設がおこなわれ、その結果地域振興に困難な状態を余儀なくされている愛知県富山村、豊根村、(2)ダム建設計画に反対しながら積極的に山村振興を推進している岐阜県板取村、(3)ダム建設計画が進行中の岐阜県徳山村と愛知県設楽町について現地調査をおこない、基礎的な資料の収集とその整理をすすめた。本年度は、これらの資料の整理を精細にすすめるとともに、各事例地域の特殊性に考慮し、問題の分析を行い比較研究のための理論化作業に努力した。しかし、上記各地域の実態や問題状況は、きわめて多様複雑である、また現実的に流動していることもあって、理論化、比較研究に手間どり、最終的な研究のとりまとめをするに至らず、なお若干の時間的裕余を必要とする。必要な資料の収集と基礎的な整理、分析の作業はほぼ終え、理論的作業の過程であるので、可能な限り早急に全体のまとめを行い、報告する予定である。本研究の目的は,大規模な公共事業として推進されるダム建設計画による水源過疎山村および流域における地域社会や住民生活への影響と変容過程について,自治体や住民の対応形態および公共事業と住民運動との関連性などを中心に実証的研究をおこなうことである.この目的にもとづいて,本年度は以下の対象について資料の収集と基礎的な分析をおこなった.1.すでにダム建設がおこなわれ地域振興に苦慮している地域である愛知県富山村と豊根村について現地調査をおこない,基礎的な資料収集をした.2.ダム建設計画に反対しながら積極的に地域振興を推進している岐阜県板取村について現地調査をおこない,基礎的な資料収集をした.3.ダム建設計画が進行中の岐阜県旧徳山村と愛知県設楽町について現地調査をおこない,収集した資料について基礎的な分析と中間的まとめをし,調査報告を公表した.上記の現地調査とその整理の過程で,ダム問題および小問題と関連する広域的な地域研究の課題についての理論的な検討をおこない,学会においてその試論を発表し,研究誌に公表する予定になっている.本研究の目的は、大規模な公共事業として推進されるダム建設計画による水源過疎山村およびその河川流域における地域社会や住民生活への影響と変容過程について、自治体や住民の対応形態および公共事業と住民運動との関連性などを中心に実証的研究をおこなうことである。
魚類ビテロゲニンの合成及び取り込み気候に関する免疫生化学的研究

細胞培養系を用いたVg合成:ウナギ肝の初代培養系を用いてVg合成能の挙動を調べた結果,雄肝細胞ではE2に対するVg合成は見られず,雌肝では顕著なVg合成が確認された。E2とサケ下垂体,また成長ホルモン及びプロラクチンの添加も,E2の単独添加に比べ効果的であった。卵母細胞の生体外卵黄形成:ウナギ卵母細胞の生体外培養系を用いて,卵黄形成を進行させ,Vgの取り込み制御因子に関して解析を行った。培養系にサケ下垂体糖蛋白画分(SPG)を添加した結果,培養開始から短時間でVgの取り込みが開始され,未発達の卵母細胞にも卵黄形成が誘導された。海産魚Vgの成熱に伴う変動:カンパチ,キジハタ及びトラフグの雌またE2処理魚血清からVgを精製し,測定法を確立した。カンパチ血清及び体表粘液中のVgの周年変化を測定した結果から卵黄形成期を特定した。Vgの卵黄蛋白への分解過程及び胚発生に伴う卵黄蛋白の分解過程:(1)サクラマス卵巣からVg分解酵素の精製を行い,42kDaの蛋白を得た。この蛋白質は抗ヒトカテプシンD血清に反応した。(2)サケマス卵を用いて,発生に伴う卵黄蛋白の変化をSDSーPAGEにより観察した結果,発眼期以降にリボビテリン(Lv)H鎖の染色性の減少に伴い,新たに低分子の蛋白バンドが出現した。孵化以降これらのバンドは染色性を増し,浮上期以降にはH鎖は消失した。(3)Lv分解酵素を検索し,Pefabloc SCにより阻害されたことから,先の結果と併せVgの分子解裂にはカテプシンD様のアスパラギン酸プロテアーゼ,Lvの分解にはトリプシンまたはキモトリプシン様セリンプロテアーゼが関与することが示唆された。卵黄蛋白のポリペプタイドへの分解過程:マツカワの卵より2種のLvを精製し特異抗体を作製した。血清中に2種類のVgの存在が明らかとなり,Vgは卵に取り込まれると2種のLvと2種のβ'-component及びホスビチンに解裂されると推察され,その後最終成熟期を経ると1種のLvは部分分解し,他の卵黄蛋白はアミノ酸まで分解されることが示唆された。ビテロゲニン(Vg)は,エストラジオール-17β(E_2)の作用のもとに,卵黄形成期の雌肝臓で合成され血液中を介して卵内に取り込まれ卵黄蛋白質を構成する。近年,魚類におけるVgは早期雌雄判別,また環境水中のエストロゲン物質のバイオマーカーとして注目されている。水産魚種を対象種として,Vg合成の内分泌支配,成熟に伴う動態,及び取り込み並びに卵黄蛋白への分解過程を解析することにより,魚類の卵黄形成過程を解明することを研究目的とした。1.細胞培養系を用いたVg合成:ウナギ肝の初代培養系を用いてVg合成能の挙動を調べた結果,雄肝細胞ではE_2に対する顕著なVg合成は見られなかった。雌肝では高濃度E_2により,顕著なVg合成が確認された。

卵黄形成期雌肝細胞にE_2とサケ下垂体を複合添加した結果,E_2の単独添加に比べ,顕著なVg合成が確認された。また成長ホルモンおよびプロラクチンの添加も効果的であった。2.海産魚Vgの精製:海産魚カンパチ,キジハタ及びトラフグの雌血清またはE_2処理魚血清からVgを精製した。精製品を家兎に免疫しそれぞれ抗体を作製した。Vgの血中濃度はドットプロティング法あるいはマンシーニ法を確立し測定した。カンパチVgの周年変化を測定した結果から卵黄形成期を特定した。3.Vgの卵黄蛋白への分解過程及び分解酵素の精製:サクラマス卵巣からVg分解酵素の精製を行い,42kDaの精製品を得た。この蛋白質は抗ヒトカテプシンD血清に反応した。サケ科魚類のVg分子解裂は,カテプシンD様酵素の作用によることが示唆された。4.卵黄蛋白のポリペプタイドヘの分解過程:マツカワの卵より2種のリポビテリン(Lv)を精製し,それらに対する抗体を作製した。血清中に2種類のVgの存在が明らかとなり,Vgは卵に取り込まれると2種のLvと2種のβ^1-component及びホスビチンに解裂されると推察され,その後最終成熟期を経ると1種のLvは部分分解し,他の卵黄蛋白はアミノ酸まで分解されることが示唆された。1.器官培養法を用いた卵母細胞の生体外卵黄形成:ウナギ卵母細胞の生体外培養系を用いてVgの取り込み制御因子に関して解析を行った。培養系にサケ脳下垂体糖蛋白画分(SPG)を添加した結果,短時間でVgの取り込みが開始され,未発達の卵母細胞にも卵黄形成が誘導された。甲状腺ホルモン(T_3)添加の場合は,早期にVgの取り込みを誘導する効果はみられないものの細胞内に取り込まれるVg量は著しく増加した。T_3はSPGとは異なった作用により,卵母細胞へのVgの取り込みを促進する効果があることが示唆された。2.海産魚Vgの成熟に伴う変動:カンパチの血中ビテロゲニン(Vg)は12月から5月まで高値で推移し,6月から11月にはほとんど検出できなかった。12月からの半年間は卵黄形成期と考えられた。体表粘液中のVgは血中Vgの挙動とほぼ一致した。3. 2型のLv:マッカワの卵黄形成後期の卵から、2型のLvA及びLvBの精製を行い,2型のLvは、異なる遺伝子から発現する2型のVgA及びVgBに由来することを確認した。LvA及びLvBは、それぞれH鎖とL鎖から成るヘテロ2量体が2セット結合した構造と推定された。4.胚発生に伴う卵黄蛋白の分解過程:(1)イトウ・サクラマス卵を用いて,発生に伴う卵黄蛋白の変化を観察した結果,発眼期以降にリポビテリン(Lv)H鎖の染色性の減少に伴い,新たに低分子の蛋白バンドが出現した。孵化以降これらのバンドは染色性を増し,浮上期以降にはH鎖は消失した。
白血病髄外浸潤におけるＲＯＣＫの機能解析と新規標的戦略

ITD-Flt3変異はCXCL12/SDF1に対する過剰な細胞遊走を引き起こす。私たちは、そのメカニズムを解析した。ITD-Flt3の有無に依存して異なる制御を受ける遺伝子のひとつにRock1が存在し、ITD-Flt3変異は、CXCL12によるRock1発現の抑制を阻害することにより、過剰な細胞遊走をもたらしていると考えられた。以上より、ITD-Flt3変異によるSDF1への過剰な細胞遊走はRockの発現亢進によるものと示唆される。血液病学これまでのところ、研究実施計画での仮説に一致して、Rockの発現がITD-Flt3陽性細胞の過剰な遊走に関わる実験結果が得られている。今後、白血病髄外浸潤におけるRockの関与を検証するため、マウスを用いた移植実験を進めていくに値する実験結果と考えている。これまでのところ、研究実施計画での仮説に一致して、Rockの発現がITD-Flt3+細胞の過剰な遊走に関わっている実験結果が得られている。今後、白血病髄外浸潤におけるRockの関与を検証するための移植実験を進めていくに値する実験結果と考えている。造血細胞遊走異常に関して造詣が深い島根大学小児科学の福田誠司准教授とインディアナ大学小児科学のRuben Kapur准教授からの助言を賜りながら受け、白血病髄外浸潤におけるのRockの関与を検証するためのマウス移植実験を行う。造血細胞遊走異常に関して造詣が深い島根大学小児科学の福田誠司准教授とインディアナ大学小児科学のRuben Kapur准教授からの助言を賜りながら、白血病髄外浸潤におけるのRockの関与を検証するためのマウス移植実験を行う。今年度は、マウスを用いた実験は行わず、すでに保有している細胞を用いた実験を行ったことから、予定の支出をしたまわったため。次年度に、マウスを用いた実験を予定しており、マウス購入費・飼育費に使用する。Rock cDNAをインディアナ大学小児科学のRuben Kapur准教授から提供を受けることができたため、平成24年度未使用額(163,168円)が生じた。マウス購入費、飼育費:53万円。分子生物学的試薬、サイトカインなど消耗品:33万円。学会参加(アメリカ血液学会、日本血液学会)旅費:30万円。
下痢性貝毒原因プランクトンの増殖とその葉緑体起源生物の出現との関係

本研究は,研究代表者が世界に先駆けて見出した「下痢性貝毒の原因渦鞭毛藻であるDinophysisの葉緑体はクリプト藻に由来する」という意外な事実に基づき,葉緑体起源クリプト藻の出現がDinophysisの出現を左右するとの仮説の検証を目指したものである。クリプト藻の検出は,新たに開発した特異核酸蛍光プローブにより,また,電動ステージと蛍光・画像認識装置を備えた全自動蛍光顕微鏡によった。2年間の三陸海岸における調査により,同海域における優占的DinophysisであるD.fortiiの出現は,常に葉緑体起源となるクリプト藻(Teleaulax)のブルームの後に見られ,水温塩分による水塊分析により,同クリプト藻は,津軽暖水と沿岸表層水の混合水塊に出現することが明らかとなった。また,平成19年度には,定量PCRを用いた同クリプト藻の検出の試みを行った。以上の,葉緑体起源クリプト藻の出現のモニターにより,D.fortiiの出現が予知できる可能性が示された。本調査の過程で,イェッソトキシン産生性の渦鞭毛藻(Protoceratium reticulatum)の顕著な出現を見出し,その出現環境と,ホタテガイへの毒成分の蓄積状況を論文として報告した。また,Amylax属渦鞭毛藻がDinophysisと同じクリプト藻を葉緑体の起源に持つことを見出し,これに関しても論文として報告した。2005年4月より越喜来湾において通年の定点調査、および6月14日、29日に同湾の沖合15マイルにかけて定線調査を行った。本年は対象渦鞭毛藻であるD. fortiiの出現量が極めて少なく、6月21日に湾内定点において最大20cells/Lの出現量が検出されたのみであった。調査時に、光合成性Dinophysis spp.の葉緑体の起源となっているクリプト藻の検出を、その葉緑体ゲノム上の小サブユニットリボゾーマルRNA遺伝子(SSU rDNA)の特異塩基配列領域に対する蛍光核酸プローブを用いて実施した。この際、設備備品として購入したイメージング蛍光顕微鏡を用い、核酸プローブに結合したFITC蛍光、および核に対するDAPI蛍光を同時検出し、サイズ別ソーティング機能による自動計数を試みた。従来の直接検鏡による計数結果と、自動計数結果の間にはおおむね良い相関関係(R^2=0.898)が得られ、本システムの利用による大幅な省力化が図られた。葉緑体起源クリプト藻の湾内(湾奥、湾央、湾口部)の鉛直空間分布(水深0,10,20m)および沖合定線の水深20mの分布を調べた結果、湾央においては5月18日6月30日の期間中、10,000cells/L以上のオーダーで出現し、5月24日の水深10mにおいて29,600cells/L、6月15日の水深20mで28,000cells/Lの高密度出現を示した。湾奥部においては、5月24日水深0mにおいて104,400cells/Lの最大出現を、沖合域においてはSt B(湾口より5マイル沖)において6月14日に73,200cells/Lの出現を示した。以上の結果から、本クリプト藻は湾奥側で最初に出現し、湾央部、沖合へと分布域を広げている様子が観察された。D. fortiiも出現の初期には同様の出現動向を示すことから、本クリプト藻の出現によりD. fortiiが葉緑体を得、その後に増殖することが伺えた。仮説の普遍性を調べるために、D. fortiiの細胞を青森県陸奥湾と広島県瀬戸内海から得て、その葉緑体SSU rDNAの塩基配列を調べた。目下、結果を解析中である。なお、調査の過程でDinophysis mitraにハプト藻に由来する葉緑体が含まれること、さらに下痢性貝毒の一つに分類されるイェッソトキシンの原因渦鞭毛藻の出現を認め、これらの結果を論文として発表した。

さらに、本年度得られたD. fortii細胞の観察過程において、その有性生殖過程の詳細を確認し、本内容も論文として投稿した(受理済み)。前年度に引き続き,越喜来湾においてD.fortiiと,その葉緑体の起源クリプト藻の出現関係を調査した.起源クリプト藻は2006年には5月18日の水深10mに1.4×10^4cells・L^<-1>出現し,5月30日の水深0mに1.9×10^5cells・L^<-1>,10mに1.2×10^5cells・L^<-1>,20mに9.5×10^4cells・L^<-1>の密度で顕著に出現した後一旦減少し,また6月16日の0mに2.8×10^4cells・L^<-1>出現した.D.fortiiは6月16日水深15mにおいて50cells・L^<-1>の密度で出現し,この時は起源クリプト藻の最大出現時と同日であった.以上から,これまでに確認された事項,すなわち,D.fortiiとその起源クリプト藻の出現には高い相関が見られることを本年においても確認した.なお,本年度においては,定量PCR法を用いた葉緑体起源クリプト藻のモニター方法を開発にも着手した.GenBankより得たDinophysis5種,クリプト藻11種の葉緑体SSU rDNA配列より,Dinophysisおよびその起源クリプト藻と考えられるTeleaulax属クリプト藻に特有の配列を見出し,約20bpのTaqManプローブと,それを挟む100-200bpの領域の両端に約20bpのリアルタイムPCRプライマーセットを設計した.その特異増幅性を天然Dinophysis細胞およびクリプト藻培養株を用いて確認した後に,フィルターにトラップしたプランクトン試料からのDNA抽出法,定量PCR分析法のトライ&エラーを経て,天然海水中に出現する葉緑体起源クリプト藻を網羅的に検出できるシステムを開発した.このシステムを用いて,2006年度の試水を分析し,その結果を従来のFISHで求めたものと比較した.その結果,定量PCRシステムにおいても,起源クリプト藻を感度良く正確に求めることが可能であることを確認した.ただし定量PCR法で求めたクリプト藻の出現ピークは,FISH法のそれよりも若干遅れる傾向が見られた.これはクリプト藻を取り込んだ他の原生生物,おそらく微小繊毛虫などを捉えているものと考えられた.本年度は、岩手県におけるDinophysis fortiiの調査を論文にまとめ、それを発表した。また、Dinophysis以外に、Amylax triacanthaおよびA. buxusにもクリプト藻を起源とする葉緑体を見つけ、DNA解析と透過型電子顕微鏡による観察を実施し、それらがDinophysisと同じくクリプト藻のTeleaulaxに起源を持つことを見出した。ただしAmylaxの場合は、Dinophysisとは異なり、クリプト藻を丸ごと取り込み、その後クリプト藻の核のみを消化するという、特異な同化戦略を取っていた。その取り込み様式の違いによるものなのか、Amylaxの出現はTeleaulaxの出現と完全に一致する傾向にあった(Dinophysisの場合はTeleaulaxのそれよりも少し遅れる傾向にある)。AmylaxにしろDinophysisにしろ、どのような理由・機構により特定のクリプト藻(これらの場合はTeleaulax)を認識し、取り込みに至るのかは不明であるが、Teleaulax側に同化後に利用されやすい特異的な機能があると想像され、今後Teleaulaxを中心としたより詳細な研究の展開が期待される。このため、Teleaulaxの培養株を多数作成したが、それを用いた実験を行うには至っていない。
北海道で発生したウイルス性ダニ脳炎の診断法、予防法および疫学に関する研究

1.ダニ脳炎患者の発生と診断;1993年、道南の上磯町の酪農家の主婦が重篤な脳炎に羅患した。この症例につき中和抗体の測定を実施したところ急性期と回復期の組血清でダニ脳炎のロシア春夏脳炎ウイルスに有意の抗体価の上昇を示し、日本脳炎ウイルスには抗体価が低いままであった。このことから本症例はダニ脳炎ウイルスの感染によるものと診断された。2.イヌを歩哨動物にした疫学調査とウイルス分離;1995年4月から7月まで患者発生地区においてダニ脳炎ウイルス抗体陰性のイヌを歩哨動物として放し飼いにして抗体変動を調べ血液からのウイルス分離を試みた。10頭のイヌの中3頭の血液からウイルスが分離された。3.マダニからのウイルス分離;患者発生地区において1996年5月から6月にかけてマダニ類を植生上から旗ずり法にて採集し種に同定後、ウイルス分離を試みた。採集マダニの中ヤマトマダニが最優先種であった。600匹のヤマトマダニを20匹を1プールとしてウイルス分離に供したところ、2株のウイルスが分離されマダニの最小感染率は0.33%(2/600)と計算された。4.ノネズミからのウイルス分離;患者発生地区で1995年と1996年に捕獲したノネズミからウイルス分離を実施したところ、1995年のアカネズミ11匹中1匹と1996年のエゾヤチネズミ79匹中1匹から計2株のウイルスが分離された。5.分離ウイルスの性状解析;上記で分離されたウイルスは単クローン性抗体を用いた蛍光抗体法によりダニ脳炎ウイルスと同定された。さらにウイルスエンベロープ蛋白遺伝子の核酸塩基配列を解析した結果、北海道分離株はダニ脳炎のうちロシア春夏脳炎ウイルス型であることが判明した。6.ウマとイヌを用いた北海道におけるダニ脳炎ウイルス汚染地の特定;北海道の14支庁からウマとイヌの血清を集め抗体調査を実施したところ、ダニ脳炎の汚染地が渡島、檜山、後志及び胆振の4支庁に及んでいることが判明した。これらの成績からロシア春夏脳炎型のダニ脳炎ウイルスが北海道の南部に広範に分布していることが明らかなった。さらに本ウイルスがヤマトマダニとノネズミの間で維持されていることが判明した。ウイルス性ダニ脳炎の血清診断法を確立するとともに本法を用いダニ脳炎患者発生地区で疫学調査を実施し原因ウイルスの分離に成功した。1.血清診断法の開発:ダニ脳炎(TBE)ウイルス抗体を測定するために、中和試験とPAP染色を組み合わせて特異性の高い血清診断法を開発した。病原性の高いロシア春夏脳炎(RSSE)ウイルスに代え病原性の低いLangatウイルスを用いてダニ脳炎特異的抗体の測定が可能となり、血清疫学調査が進展した。2.1995年のイヌを用いた疫学調査:ダニ脳炎患者発生地区のU農家では1994年12月に10頭の子犬が生まれ、放し飼い状態で育てられていた。そこでこれらの子犬について1995年の4月22日から7月1日までほぼ1週間隔で採血し、Langatウイルスに対する中和抗体の産生をもとにTBEウイルス感染時期を観察した。

初回採血の4月22日の血清では中和抗体は全て20倍未満の陰性であったが、1週間後の4月29日には2頭が抗体陽性となり、採血終了の7月1日までに、10頭中6頭(60.0%)が抗体を保有した。従つてこれらのイヌは1995年の春から初夏にかけてTBEウイルスの初感染を受けたことが確認されるとともに、この調査地区にTBEウイルスの流行巣の存在することが明らかとなった。3.ウイルス分離と同定:次に定期的に採血した子犬の血液について、哺乳マウスの脳内接種法によるウイルス分離を試みた。抗体が陽転した日より1週間前の3検体の血液からウイルスが分離された。分離ウイルスの同定は抗TBE単クローン性抗体を用い、間接蛍光抗体法により行った。分離ウイルスはフラビウイルス属のTBEウイルス郡中のRSSE型ウイルスと同定された。ダニ脳炎患者発生地区および道内において疫学調査を実施するとともに、分離されたダニ脳炎ウイルスの性状を解析した。1.ダニからのウイルス分離1996年の4月と5月に、患者発生地区において植生上から旗ずり法にて採集したヤマトマダニのメス300匹、オス300匹をウイルス分離に供したところ、2株のダニ脳炎ウイルスが分離された。この成績から患者発生地区においてはヤマトダニが媒介種と推定され、さらにウイルスのマダニにおける最小感染率は0.33% (2/600)と計算された。2.ノネズミにおける抗体調査とウイルス分離1995年6月と10月に患者発生地区においてノネズミを捕獲し抗体調査を実施するとともに、ウイルス分離を実施した。抗体陽性率が6月では2.2% (1/45)であり、10月には18.2% (8/44)と有意に増加したことから、本地区でノネズミの間に夏から秋にかけてウイルスの伝播が活発に起こっていることが判明した。また10月に採集したアカネズミから1株のダニ脳炎ウイルスが分離された。3.ウイルスの性状解析分離されたウイルスは単クローン性抗体による解析と核酸塩基配列の解析からロシア春夏脳炎ウイルスであることが確認された。4.汚染地の特定イヌおよびノネズミの抗体調査の結果汚染地は患者発生地区周辺および道内各地に拡大していることが判明した。ダニ脳炎患者発生地区および北海道各地において疫学調査を実施した。1.患者発生地区における疫学調査成績ダニ脳炎ウイルスの病原巣動物を推定するため、野ネズミの抗体調査とウイルス分離を実施した。1995年に捕獲した野ネズミ44匹中7匹(15.9%)および1996年の125匹中14匹(11.2%)にダニ脳炎ウイルス抗体陽性例を確認した。1995年のエゾアカネズミ11匹中1匹および1996年のエゾヤチネズミ79匹中1匹から計2株のウイルスが分離された。分離されたウイルスは単クローン性抗体を用いた蛍光抗体法によりダニ脳炎ウイルスと同定された。また患者の発生した上磯町の8地点で野ネズミの抗体調査を実施したところ、患者発生地区以外の3地点で抗体陽性例が発見された。このことからダニ脳炎ウイルスは上磯町に広く分布していることが判明した。2.北海道各地における調査成績北海道の各支庁からウマの血清およびイヌの血清を集め血清疫学調査を実施した。ウマ血清は1992年に1支庁50例ずつ14支庁から計700検体を集めたものを対象とした。イヌ血清は8支庁から1994年から1997年に集めた193検体を用いた。ウマ血清では檜山支庁で50例中2例、後志支庁で50例中1例がダニ脳炎ウイルス抗体を保有していた。
中脳ドパミン神経細胞株の樹立と線条体由来神経栄養因子の探索

パーキンソン病の細胞移植治療をめざして、本研究ではチロシン水酸化酵素(TH)遺伝子プロモーターと細胞を不死化させるための癌遺伝子としてSV40T抗原(温度感受性変異株)を導入したトランスジェニック(Tg)マウスからカテコールアミン細胞の株化を試みた。これまでに作成したTgマウスは数カ月以内に副腎に腫瘍を形成することが見出されている。平成11年度は、このTgマウスにおいて内在性THと導入したSV40T抗原の発現を検討した。その結果、SV40T抗原タンパク質は副腎髄質では強く発現するにもかかわらず、中脳黒質ではタンパク質の発現を検出できなかった。一方、胎齢13.5日の胎仔では中脳腹側部にTHの発現とほぼ一致してSV40T抗原タンパク質の発現が見られた。平成12年度は、腫瘍化した副腎髄質から細胞を単離し、培養するための条件を検討した。その結果、コラーゲンが最もよい細胞接着基質であることを見いだし、ドパミンのみを合成・分泌するクロマフィン細胞株tsAM5Dを単離した。tsAM5D細胞は33°CではTHとSV40T抗原を共発現するが、39°CではSV40T抗原の発現は消失した。平成13年度は、tsAM5D細胞について、栄養因子依存性を検討した。その結果、tsAM5D細胞はNGFやNT-3にはほとんど栄養因子依存性を示さないのに対し、CNTFとFGF-2に強く反応し、両者の存在下、33°Cで培養すると活発に増殖することを見いだした。また、39°Cでは栄養因子非存在下では細胞は3日以内に死滅するのに対し、CNTFとFGF-2存在下では、3日間、増殖した後、著しい突起の伸長が見られ、神経細胞様に分化することが明らかになった。今後、tsAM5D細胞を用いて、線条体由来神経栄養因子についてのスクリーニングを行う一方、MPTP誘発パーキンソンモデルマウスの線条体への脳内移植をこころみる予定である。パーキンソン病は中脳黒質から線条体に投射するドパミン神経の選択的な変性、脱落に伴うドパミン代謝異常であるが、この選択的細胞死のメカニズムを明らかにするためには黒質ドパミン神経の表現型を保持した細胞株の樹立が極めて重要である。黒質のドパミン神経は数も少なくこれを特異的に株化することは一般に困難であるが、本研究ではドパミン神経細胞特異的な遺伝子プロモーターと細胞を不死化させるための癌遺伝子の発現を組み合わせた発生工学的手法による神経細胞の株化を試みている。これまでにヒトチロシン水酸化酵素(TH)遺伝子プロモーター領域2.5kbに癌遺伝子であるSV40T抗原温度感受性変異株の遺伝子を連結したDNAを導入したトランスジェニック(Tg)マウスを作製しているが、このTgマウスは数カ月内に副腎に腫瘍を形成することを見出した。平成11年度は、このTgマウスにおいて内在性THと導入したSV40T抗原の発現をmRNAおよびタンパク質レベルから検討した。その結果、成体マウスでは中脳黒質部および副腎髄質部に内在性THのmRNAの発現と同じ部位にSV40T抗原のmRNAが発現していることが明らかとなった。しかし、SV40T抗原タンパク質は副腎髄質では強く発現するにもかかわらず、中脳黒質ではタンパク質の発現を検出できなかった。

細胞培養については、これまでに腫瘍化した副腎髄質部から細胞を単離し、培養を行っている。33°CではTHタンパク質とSV40T抗原を共発現する細胞が認められたことから、TH陽性細胞が不死化していると考えられる。また39°CではSV40T抗原の発現は消失したことから、SV40T抗原が温度感受性であることが確認された。しかし、この副腎髄質細胞は凝集して増殖するため、現在、単層培養できるよう試みている。パーキンソン病は中脳黒質から線条体に投射するドパミン神経の選択的な変性、脱落に伴うドパミン代謝異常であるが、この選択的細胞死のメカニズムを明らかにするためには黒質ドパミン神経の表現型を保持した細胞株の樹立が極めて重要である。黒質のドパミン神経は数も少なくこれを特異的に株化することは一般に困難であるが、本研究ではドパミン神経細胞特異的な遺伝子プロモーターと細胞を不死化させるための癌遺伝子の発現を組み合わせた発生工学的手法による神経細胞の株化を試みている。これまでにヒトチロシン水酸化酵素(TH)遺伝子プロモーター領域2.5kbに癌遺伝子であるSV40T抗原温度感受性変異株の遺伝子を連結したDNAを導入したトランスジェニック(Tg)マウスを作製しているが、このTgマウスは数カ月以内に副腎に腫瘍を形成することを見出している。また、このTgマウスでは胎仔の中脳腹側部と成体の副腎髄質部において、THタンパク質とSV40T抗原を共発現していることが認められた。平成12年度は、腫瘍化した副腎髄質部から細胞を単離し、培養するための条件を検討した。組織をトリプシンで消化し、細胞分散液を調製し、コラーゲンコートしたプラスチックディッシュにまき、33°Cで培養をつづけ、数個のクローンを単離した。細胞のカテコールアミン含量から、これらの細胞はドパミンを主に合成・分泌するものと、ノルエピネフリンを主に合成・分泌するものに分かれることを見出した。さらにこれらの細胞はある種の因子の存在下で39°Cで培養すると、細胞の生存・維持活性を高めるだけでなく、多数の突起を形成することを見出した。黒質のドパミン神経は数も少なくこれを特異的に株化することは一般に困難であるが、本研究ではカテコールアミン細胞特異的な遺伝子プロモーターと細胞を不死化させるための癌遺伝子の発現を組み合わせた発生工学的手法によるカテコールアミン細胞の株化を試みた。これまでにヒトチロシン水酸化酵素(TH)遺伝子プロモーター領域に癌遺伝子であるSV40T抗原温度感受性変異株の遺伝子を連結したDNAを導入したトランスジェニック(Tg)マウスを作製し、このTgマウスは数カ月以内に副腎に腫瘍を形成することを見出している。平成11、12年度は、この腫瘍組織からクロマフィン細胞を株化すること、ならびに培養条件の検討を行った。このようにして単離したtsAM5D細胞はドパミンのみを産生するドパミン産生細胞であり、33°CでではTHと導入したSV40T抗原を共発現していることが明らかとなった。平成13年度は、tsAM5D細胞について、栄養因子依存性を検討した。
持続可能な環境循環型食糧資源としての海藻アカモクの有効活用；機能性食品の開発

アカモク原藻可食部の水溶性食物繊維含量は成熟に伴い増加し、成熟のピーク時は食物繊維の摂取に最適であった。一方、配偶子放出後の衰退期アカモクにも食物繊維が豊富に含まれており、持続可能な環境循環型食糧資源として活用が可能であることが示された。ラットへのアカモクの経口投与により、糞量・胆汁酸の増加と腸内細菌叢の変化が確認され、腸内環境改善が示唆された。さらに、血中総コレステロール(T-CHO)上昇モデルラットへの衰退期アカモクの調理・加工品の経口投与は、T-CHO上昇を90%抑制し、HDL-CHOを上昇させ、組織から肝臓へのCHO輸送を促進する脂質代謝への良好な影響が示唆された。アカモク経口摂取による高脂血症モデル動物への影響I高コレステロール含有飼料およびアカモク経口摂取によるラットの脂肪重量や血中コレステロール増加抑制効果および腸内細菌叢への影響について調べた。Sprague-Dawly系の雄ラットを1高コレステロール食群、2高コレステロール+アカモク調理・加工品食群の2群に分けて、28日間本飼育されたラットの盲腸内容物および糞便を用いて腸内菌叢解析を行った。各群間に体重増加量は有意差はみなれなかったが、糞量、各消化器重量(胃、小腸、大腸)はアカモク食群が有意に高かった。血中コレステロールおよびHDLコレステロールはアカモク食群が、トリグリセリドはコレステロール食群が高い傾向がみられたが、有意差はなかった。ラットの盲腸内容物および糞便からDNAを抽出して、PCRにより増幅した。PCR産物をD-Codeシステム(Bio-Rad社製)を用いて変性剤濃度勾配ゲル電気泳動法(DGGE)で分析した。コレステロール食群と比較して、アカモク食群で1種のDNAバンドが減少または消失、さらに、1種のDNAバンドの出現が確認された。この研究により、高濃度のコレステロールと一緒にアカモクを摂取した場合も、腸内細菌叢への影響があることが確認された。この成果は国際機能性食品学会で報告した。1.アカモク経口摂取による血中コレステロールへの影響5週齢のWistar系雄性ラットを用いてコレステロール負荷食(0.5%コレステロール、0.25%コール酸ナトリウム添加)を摂取させ2週間飼育して、血中脂質等への影響を調べた。なお、アカモクは配偶子放出後の老いた株を塩ゆで後、凍結乾燥、粉砕し、飼料はアカモクまたはコンニャクマンナン(ポジティブコントロール)をセルロースと置き換えた。その結果、血しょう中の総コレステロールは標準飼料へのコレステロール・コール酸ナトリウムの添加により標準食群の5倍に上昇した。一方、アカモクおよびマンナンの添加により、それぞれ約90%、110%上昇を抑制していた。特に、アカモク食群ではHDL-コレステロールの上昇が確認されたことから、末梢組織から肝臓へのコレステロール輸送を促進する、脂質代謝に好ましい影響を与える可能性が示唆された。2.アカモクの調理・加工による有用ミネラルおよびヒ素含量への影響アカモク原藻可食部を5倍量の超純水で3回洗浄後、5倍量の2.2%NaClで1分間茹でて、5倍量の超純水で1回冷却して、凍結乾燥した。凍結乾燥アカモク試料を粉砕混合均質化したものを試料として、酸分解法で湿式灰化後、原子吸光分析器でヒ素および有用ミネラルを測定した。アカモクのヒ素含量(湿重量)は、塩ゆで加工によりに84-88%軽減した。特に、ゆで汁に多くのヒ素が流出していた(加工処理水の84-91%)。また、アカモク可食部のミネラル含量は、塩ゆで加工により、ナトリウム濃度が増加したのに対して、カリウム、カルシウム、マグネシウム、銅、マンガンは減少していた。特にカリウムの減少率は高く(65-78%)、カルシムの減少率は低かった(16-27%)。さらに、アカモク調理・加工品の有用ミネラル含量は他の食用海藻と比較して同等もしくはそれ以上であった。1.水溶性および不溶性食物繊維の測定;経口投与実験に用いる時期の決定海藻はフコイダンやアルギン酸などの粘質多糖類をはじめとして食物繊維が豊富に含まれるため、その生理作用が期待されている。一般的に海藻の食品成分分析では総食物繊維(TDF)のみが測定されるが、不溶性食物繊維(IDF)と水溶性食物繊維(SDF)ではその生理作用が異なる。したがって、本研究では各ライフステージのアカモク原藻可食部のSDFおよびIDFをプロスキー法で測定した。IDFでは未成熟期から衰退期まで雄株にはあまり変化がみられなかったが、雌株では成長期以降に減少傾向がみられた。また、SDFでは成熟にともなう増加がみられ、雄株では3月、雌株では2月がピークであった。

これらの結果より、成熟のピークに達したアカモクはTDFおよびSDFが豊富であり、食物繊維摂取に適していることが示唆された。2.アカモク経口摂取による実験動物への影響ラットへのアカモク経口投与実験Sprague-Dawly系の雄ラットを(1)コントロール群、(2)アカモク原藻投与群、(3)アカモク調理・加工品投与群の3群に分けて、4日間本飼育し、体重の変遷、糞便の形状・成分の変化、血液成分や臓器などの相違を調べた。体重増加量、飲水量、尿量、各消化器重量、大腸の長さに標準食群とアカモク原藻食群および加工食群に有意差はほとんど見られなかった。一方、糞量はアカモク原藻食群と加工食群が、糞中の胆汁酸量は加工食群が標準食群と比べて有意に多かった。腸内細菌叢解析アカモク経口投与実験の際に採取したラットの糞便からDNAを抽出して、PCRにより増幅した。PCR産物をD-Codeシステム(Bio-Rad社製)を用いて変性剤濃度勾配ゲル電気泳動法(DGGE)で分析した。コントロール群と比較して変化のあったDNAバンドについて塩基配列を決定して菌を同定した。盲腸内容物および糞便の腸内菌総解析に着手し、当初予定よりも進んでいる部分もあるが、血中コレステロールへの影響については再度検討する必要がある。高コレステロール食群ラットの血中コレステロール値に顕著な上昇が認められなかった理由に、高コレステロール食群飼料のコレステロール含有率15%は高すぎたこと、胆汁酸等を添加していなかったことが考えられた。そのため、コレステロール上昇モデルラット調整のために飼料条件を変えて、再度、実験する必要がある。23年度実施予定の実験はおおむね完了して、24年度実施予定の菌叢解析に着手している。高コレステロール食群ラットの血中コレステロール値に顕著な上昇が認められなかった理由に、高コレステロール飼料のコレステロール含有率が15%と高すぎたこと、胆汁酸等を添加していなかったことが考えられた。そこで、高コレステロール添加量を0.53.0%として、胆汁酸を添加する群をコレステロール上昇モデル群、同飼料の食物繊維の代わりにアカモク加工乾燥試料を添加するアカモク添加群、および、標準食群の3群に分けて動物実験を実施する。飼育中のラット血中コレステロール値については採血して確認し、飼育期間を決定する。アカモク経口摂取による高脂血症モデル動物への影響Iその2アカモクによるラットの脂肪重量や血中コレステロール増加抑制効果について調べる。コレステロール上昇モデルラットへのアカモク経口投与実験;Sprague-Dawly系の雄ラットを1スタンダード群、2コレステロール上昇モデル群、3アカモク調理・加工品投与群の3群に分けて飼育する。体重および血中コレステロール値の変遷、糞便、尿重量の変化、糞便の形状・成分の変化、血液成分や臓器などの相違を調べる。また、持続可能な環境循環型食糧資源としての海藻アカモクの有効活用のために、栄養成分である主要ミネラルおよび有毒重金属の含量の季節変動を調べる。さらに、アカモク調理・加工による主要ミネラルおよび有毒重金属含量の変化についても測定する。1.アカモク経口摂取による実験動物への影響;腸内細菌叢解析平成23年度同定した菌について、腸内環境を改善につながるものかどうか解析する。2.アカモク経口摂取による高脂血症モデル動物への影響
内皮由来膜過分極因子を標的とした血管内膜肥厚抑制のための探索研究

Poor distalrunoff兎自家静脈グラフトでは内膜が著しく肥厚し、内皮由来一酸化窒素(EDNO)および内皮由来膜過分極因子(EDHF)の機能が障害された。コレステロール吸収阻害薬エゼチミブとDPP-4阻害薬ビルダグリプチンはEDNOの機能を改善し、内膜肥厚を抑制した。しかしながら、これらの薬物は静脈グラフトのEDHFの機能障害を改善しなかった。兎自家頸動脈グラフトではEDNOの機能が亢進し、内膜肥厚はほとんど認められなかった。動脈グラフトで、EDHFの機能はわずかに抑制された。これらの結果は、自家グラフト血管での内膜肥厚抑制にEDNOが重要な役割を果たしている可能性を示唆する。ウサギ総頸動脈に外頸静脈をグラフト後、外頚動脈の第一分枝を除き内頚動脈を含めた全ての分枝を結紮することにより作成した自家静脈poorrunoffグラフトモデルを作成した。内皮細胞アゴニストであるアセチルコリン(ACh)の弛緩反応変化と平滑筋細胞の膜電位変化を正常外頸静脈と静脈グラフトで比較検討した。全ての標本には、プロスタグランジンの生成を阻害するため、シクロオキシゲナーゼ阻害薬ジクロフェナクを処理した。【内皮依存性弛緩反応】正常ウサギ内皮温存外頸静脈で、AChは濃度依存性に血管を弛緩させたが、内皮除去外頸静脈標本では弛緩させなかった。正常ウサギ内皮温存外頸静脈で、NO合成阻害薬ニトロアルギニン(L-NNA)はAChによる弛緩反応を右へシフトさせた。また、L-NNA存在下、apamin(SKCa阻害薬)とcharybdotoxin (IKCa、BKCaおよびKV1阻害薬)の共存によりAChによる弛緩反応は消失した。一方、内皮を温存した静脈グラフト血管において、AChは血管を弛緩させなかった。【内皮依存性膜過分極反応】内皮を温存したウサギ正常外頸静脈の平滑筋細胞の膜電位は-50 mVであり、AChは濃度依存性に平滑筋細胞膜を過分極させた。内皮除去外頸静脈の平滑筋細胞の膜電位も-50 mVであったが、AChは膜電位に影響を与えなかった。内皮温存ウサギ外頸静脈でのAChによる平滑筋細胞膜過分極は、L-NNAによって影響を受けなかったが、apamin+charybdotoxinで遮断された。また、apamin存在下、TRAM 34(IKCa阻害薬)はAChの過分極反応を部分的に抑制し、残余の過分極反応はmargatoxin(KV1.3阻害薬)で遮断された。一方、AChは静脈グラフト血管の平滑筋細胞の膜電位に影響を与えなかった。ウサギ異常血流下の静脈グラフト血管の平滑筋細胞における内皮依存性膜電位変化と内皮細胞膜過分極因子(EDHF)の役割に関する検討を行った。実験は日本白色ウサギを用いて行い、異常血流グラフトモデルは右外頚静脈を右総頚動脈に移植後、その末梢の動脈の3分枝を結紮することにより作成した(poor runoffモデル)。移植28日後にグラフト血管を摘出し、実験に供した。対照は、正常ウサギの非グラフト外頚静脈とした。正常外頚静脈において、アセチルコリン(3 μM)やカルシウムイオノフォアA23187 (1 μM)は、平滑筋細胞を過分極させた。この過分極は内皮除去により消失し、また、Ca2+-activated K+ channel inhibitorであるapamin+charybdotoxinで抑制された。異常血流グラフト血管において、アセチルコリンは内皮の存在にかかわらず平滑筋細胞と内皮細胞の膜電位に影響を与えなかった。一方、A23187 (1 μM)は持続性に平滑筋細胞を脱分極させた。また、A23187 (1 μM)は内皮細胞に対して、一過性に膜を過分極させるとともに、それに引き続く脱分極を発生させた。A23187による平滑筋細胞と内皮細胞の膜脱分極はCa2+-activated Cl- channel inhibitorであるniflumic acidにより抑制された。このことより、平滑筋細胞と内皮細胞の間の電気的カップリングは静脈グラフト血管では消失している可能性が示唆された。自家静脈グラフト血管における内膜肥厚と内皮由来膜過分極因子(EDHF)の機能変化に対するDPP4阻害薬慢性投与の効果を検討した。静脈グラフト血管では、内皮由来NOおよびEDHFの両機能の障害が発生しており、アセチルコリンによる内皮依存性弛緩反応が消失していた。後者の機能障害より、静脈グラフトでは平滑筋細胞と内皮細胞間の電気的カップリングが消失していると考えられた。DPP-4阻害薬は血糖低下作用だけでなく、GLP-1依存性および非依存性の抗動脈硬化作用を有することが報告されている。しかしながら、DPP-4阻害薬の静脈グラフトの内膜肥厚抑制効果は不明である。我々は、DPP-4阻害薬ビルダグリプチンをグラフト移植1週間前から、グラフト採取(術後28日目)まで慢性飲水投与し、その静脈グラフト内膜肥厚抑制効果を検討した。ビルダグリプチン投与は、血漿中のGLP-1濃度を増加させたが、血糖値には影響を与えなかった。

ビルダグリプチン投与は、グラフト血管の管腔を拡大させ、内膜肥厚を抑制した。コントロール(ビルダグリプチン非投与)群の静脈グラフト血管において、アセチルコリンは血管を弛緩させなかった。一方、ビルダグリプチン投与群の静脈グラフト血管において、アセチルコリンは内皮由来NO依存性弛緩反応を発現させた。ビルダグリプチン投与群の静脈グラフト血管において、アセチルコリンは内皮細胞の細胞内カルシウム濃度や平滑筋細胞の膜電位に影響を与えなかった。このことより、DPP4阻害薬は静脈グラフト血管でのアセチルコリンによるEDHFの機能を改善できないことが明らかとなった。本研究は、自家静脈グラフト血管における内膜肥厚と内皮由来膜過分極因子(EDHF)の機能変化との関連を検討し、EDHFの機能改善を標的とした血管内膜肥厚抑制のための新たなる治療戦略の探索を目的としたものである。DPP4阻害薬慢性投与は、アゴニストによるNOの遊離・放出機能は改善するが、EDHのF機能障害に効果がないことを明らかにすることができた。外科手術によって発生する自家動脈グラフト血管における内膜肥厚と内皮由来一酸化窒素(EDNO)および内皮由来膜過分極因子(EDHF)の機能変化について、ウサギ動物モデルを作成し検討した。動脈グラフト血管では、コントロール血管(正常総頸動脈血管)と比較し、アセチルコリン(ACh)による内皮依存性弛緩反応が有意に増大し、血管吻合術によって発生する内膜肥厚は僅かであった。動脈グラフト血管におけるサイクロオキシゲナーゼ阻害薬ジクロフェナック存在下でのAChによる内皮依存性弛緩反応では、EDNO依存性弛緩反応が増加し、逆に、EDHF依存性弛緩反応は減少した。後者の反応変化の詳細は、1動脈グラフト血管内皮細胞でのAChによる内皮細胞[Ca2+]i上昇が減少するとともに、2平滑筋細胞の内皮依存性過分極が減少した。一方、コントロール血管と比較して、3Ca2+イオノフォアであるA23187による内皮細胞[Ca2+]i上昇と平滑筋細胞の内皮依存性過分極に有意な変化は認められなかった。以上の結果より、動脈グラフト血管でのEDHFの機能障害は、アゴニストによる内皮細胞の[Ca2+]i増加機序の障害に起因した内皮細胞-平滑筋細胞間の電気的カップリング機序の異常によるものと考えられた。このことより、動脈グラフト血管では、内皮細胞での[Ca2+]i-非依存性NO生成の増加によりEDHFの機能障害をカバーするとともに、自家動脈グラフトの内膜肥厚を最小化している可能性が示唆された。Poor distalrunoff兎自家静脈グラフトでは内膜が著しく肥厚し、内皮由来一酸化窒素(EDNO)および内皮由来膜過分極因子(EDHF)の機能が障害された。コレステロール吸収阻害薬エゼチミブとDPP-4阻害薬ビルダグリプチンはEDNOの機能を改善し、内膜肥厚を抑制した。しかしながら、これらの薬物は静脈グラフトのEDHFの機能障害を改善しなかった。兎自家頸動脈グラフトではEDNOの機能が亢進し、内膜肥厚はほとんど認められなかった。動脈グラフトで、EDHFの機能はわずかに抑制された。これらの結果は、自家グラフト血管での内膜肥厚抑制にEDNOが重要な役割を果たしている可能性を示唆する。
非線形偏微分方程式の適切性に関する統一理論の構築

3次元Navier-Stokes方程式の大きな初期値に対する時間大域的滑らかな解の存在問題は,2000年にクレイ研究所からミレニアムにおける数学の7つの難題のひとつとして提唱された.本研究では,Lerayによる時間大域的な弱解の存在からはじめて,Serrinによる一意正則な弱解のクラスL^s(0,T;L^r(R^n)),2/s+n/γ【less than or equal】-1を中心に総合的な解説を行った.とくに,スケール不変則に対する藤田-加藤の原理を紹介し,同方程式の時間局所的な強解C([0,T);L^n(R^n))の果たした重要性を指摘した.解の特異点集合のHausdorff次元の評価,除去可能孤立特異点の特徴付け,後進自己相似解による爆発解の非存在についても触れた.調和解析学における最近の研究成果が,Navier-Stokes方程式の考察に寄与した例を2,3挙げ,今後の研究の指針を与えた.流体力学サイドにおいては,今日,計算機能力の飛躍的な進歩に伴ってNavier-Stokes方程式の解を数値実験によって求め,乱流をも含む様々な流れの場を矛盾なく説明しているようである.一方,コンピューターを用いる以前に,まずは解析計算によって解の性質を調べようと試みる古典的な純粋数学の立場もある.本研究では,Navier-Stokes方程式の数学サイドから研究を紹介し,ミレニアム問題を中心とした同方程式に関する課題を解説した.とくに,「乱流の発生が解の正則性の崩壊と対応している」との数学者の見解と,多くの流体力学者によって指示されている「乱流の発生にはの解の特異性の議論は必要ない」との知見との比較を行った.渦度が有限でとどまる限り,解の正則性が保証されることに注目し,乱流発生が渦度の挙動と密接な関係にあることを偏微分方程式の適切性に関する研究から解き明かした.非圧縮性理想流体の運動を支配するEuler方程式に関しては,初期条件がSobolev空間W^<s,p>(R^n),s(8184)16n/p+1に属するとき,古典解の時間局所存在が示されている.その古典解が実際は大域的に延長可能なのか,あるいは有限時刻でその滑らかを失うのかはn【greater than or equal】3に関しては未解決問題である.Beale-kato-Majda(BKM),Kato-Ponce(KP)は解uの渦度ω≡rot μに着目し,時刻t=Tでu(t)がW^<s,p>(R^n)に属する解として延長不能ならば,∫^T_O‖ω(t)‖_<L∞>dt=∞であることを示した.研究代表者の研究においては,彼らの爆発の基準(blow-up criterion)が,実際にはL^∞より広い空間であるBMOで成立することを証明した.キーとなる議論は,仮定∫^T_O‖ω(t)‖BMO^<dt>(8183)16∞なるもとで,解u(t)のL^∞(0,T;W^<s,p>(R^n))におけるアプリオリ評価を得ることである.BKM,KPらは,ソレノイダルベクトル場uにおける勾配▽uのL^∞-評価を渦度ωのL^∞-ノルムとu自身の対数型W^<s,p>-ノルム不等式によって確立し,アプリオリ評価を示した.ここに,s(8184)16n/p+1.本研究では,関数f自身に対して彼らの対数型不等式をBMO-空間へと一般化した:更に上記の不等式は,BMO-空間から斉次Besov空間B^^・^0_<∞,∞>へと拡張可能である:3次元Navier-Stokes方程式の大きな初期値に対する時間大域的滑らかな解の存在問題は,2000年にクレイ研究所からミレニアムにおける数学の7つの難題のひとつとして提唱された.本研究では,Lerayによる時間大域的な弱解の存在からはじめて,Serrinによる一意正則な弱解のクラスL^s(0,T;L^r(R^n)),2/s+n/γ【less than or equal】-1を中心に総合的な解説を行った.とくに,スケール不変則に対する藤田-加藤の原理を紹介し,同方程式の時間局所的な強解C([0,T);L^n(R^n))の果たした重要性を指摘した.解の特異点集合のHausdorff次元の評価,除去可能孤立特異点の特徴付け,後進自己相似解による爆発解の非存在についても触れた.調和解析学における最近の研究成果が,Navier-Stokes方程式の考察に寄与した例を2,3挙げ,今後の研究の指針を与えた.流体力学サイドにおいては,今日,計算機能力の飛躍的な進歩に伴ってNavier-Stokes方程式の解を数値実験によって求め,乱流をも含む様々な流れの場を矛盾なく説明しているようである.一方,コンピューターを用いる以前に,まずは解析計算によって解の性質を調べようと試みる古典的な純粋数学の立場もある.本研究では,Navier-Stokes方程式の数学サイドから研究を紹介し,ミレニアム問題を中心とした同方程式に関する課題を解説した.とくに,「乱流の発生が解の正則性の崩壊と対応している」との数学者の見解と,多くの流体力学者によって指示されている「乱流の発生にはの解の特異性の議論は必要ない」との知見との比較を行った.