hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
大腸鋸歯状病変の発癌過程における分子病理学的制御の解明と鑑別診断への応用

消化管癌の遺伝子データベースの中から見出したSPC18とBST2は大腸癌の約半数に発現し、臨床病期の高い症例や予後不良症例に特に頻度が高く、その発現は腫瘍の増殖能や浸潤能を亢進させた。いずれの分子も古典的発癌経路の大腸癌および前癌病変では高発現するものの、鋸歯状病変の発癌経路に関与するとされるMSI-H大腸癌やSSA/P、TSAなどでは発現はほとんど認められず、発癌メカニズムの違いを明らかにする重要な分子である可能性がある。また、790例の胃癌を用いた免疫組織学的検討で浸潤先進部は表層部と比べてMMP-7, lamininγ2, EGFRの発現が高く、腫瘍の悪性度に寄与することを見出した。現在までに、多くの胃癌細胞株や大腸癌細胞株を用いてCAST法による消化管癌の新規診断あるいは治療標的となる癌関連分子の候補を抽出してきた。本年度は、代表的な胃癌細胞株であるMKN-74のCASTライブラリーを作成し、その中でBone Marrow Stromal Antigen 2 (BST2)に注目して、大腸癌における発現とその意義に関する検討を行った。qRT-PCR法では大腸癌の約76%に非癌部組織と比較して2倍以上の高発現を認め、免疫染色でも140例の大腸癌のうち64例(46%)に陽性を示した。臨床病理学的因子との関連ではBST2の発現例は有意にT grade、N grade、M grade、Stageが高い傾向にあり、予後解析でも陽性例は有意に予後不良であった。siRNAを用いて大腸癌細胞株をノックダウンすると浸潤能の低下が認められた。更にBST2の発現はβカテニンの核内集積と有意な相関が見られたが、鋸歯状病変で特に高い発癌は見られなかった。また、一般に悪性腫瘍では浸潤先進部は中心部と比較して発現分子が異なることが知られているが、今年度は790例の胃癌を用いて3種類の分子の比較を行った。表層部と比較して浸潤先進部ではMMP-7, lamininγ2, EGFRの発現が高く、またそれらの発現はいずれもT grade, N grade, Stageが高い症例に多く、腫瘍の悪性度に大きく寄与していることも明らかにした。本研究では、これまで多くの消化管癌組織や細胞株を用いて作製した遺伝子データベースのうち、特に大腸鋸歯状病変から発生する大腸癌の制御機構を明らかにするための候補分子の探索を行っている。本年度は、signal peptidase complex 18 (SPC18)に注目して、大腸癌および前癌病変における発現とその意義について検討を行った。免疫組織化学的にSPC18の発現は正常大腸粘膜ではほとんど見られないのに対し、大腸癌では細胞質に染色性が認められ、大腸癌での陽性率は137例中77例(56%)であった。臨床病理学的因子との関連では、SPC18の陽性例は有意に高い病期を示し、予後解析でも陽性例は陰性例と比較して有意に予後不良で、多変量解析ではSPC18の発現はstageと同様、独立した予後不良因子であった。siRNAを用いて大腸癌細胞株(Lovo, DLD-1)のSPC18をノックダウンすると増殖能や浸潤能の有意な低下が認められた。またSPC18の発現はβカテニンの核内集積と有意な相関関係を示し、EGFRやAktのリン酸化に寄与することも明らかとなった。前癌病変である腺腫(conventional adenoma, traditional serrated adenoma, SSA/P)においても種々の程度にSPC18の発現が見られたが、鋸歯状病変であるtraditional serrated adenomaやSSA/Pで特に高い発現は認められなかった。最終年度である本年度は、CAST法で見出したBone Marrow Stromal Antigen (BST2)の発現が大腸癌のみならず、胃癌や食道癌でも同様に予後不良因子となる原因について生物学的機能解析を行い、EGFR経路の活性化を通じて増殖能を亢進させていることを明らかにした。また、分泌蛋白であるsignal peptidase complex 18 (SPC18)は大腸腫瘍において、特に古典的発癌経路の大腸癌および前癌病変で高発現し、鋸歯状病変の発癌経路に関与するとされるMSI-H大腸癌やSSA/P、TSAなどでは発現はほとんど認められず、発癌メカニズムの違いを明らかにする重要な分子である可能性が示唆された。更に、2種類の胃癌細胞株を用いたCAST法の比較で見出した福山型筋ジストロフィーの原因遺伝子の一つとして知られるFukutin (FKTN)が胃癌でも43%に発現し、T grade、N gradeの高いもの、分化度の高い組織型と有意な相関が見られることを明らかにした。更に粘液形質との比較ではCD10と有意な相関を示し、腸型粘液形質で頻度が高い傾向が見られた。FKTN-siRNAによるノックダウンによって細胞増殖能が抑制されたが、浸潤能には変化は見られなかった。EGFR経路の分子(EGFR, Akt, ERK1/2, p38およびそのリン酸化)の発現も検討したが有意な変化は認められなかった。またFukutinの発現は予後に有意な影響は及ぼさなかった。

いずれの分子も古典的発癌経路の大腸癌および前癌病変では高発現するものの、鋸歯状病変の発癌経路に関与するとされるMSI-H大腸癌やSSA/P、TSAなどでは発現はほとんど認められず、発癌メカニズムの違いを明らかにする重要な分子である可能性がある。また、790例の胃癌を用いた免疫組織学的検討で浸潤先進部は表層部と比べてMMP-7, lamininγ2, EGFRの発現が高く、腫瘍の悪性度に寄与することを見出した。本年度解析したSPC18は特にserrated pathwayに深く関与する分子ではなかったものの、大腸癌の進展に関わる種々の分子の制御を行う重要な蛋白であることが明らかとなり、大腸癌における新規治療標的分子としての応用が期待される。多数の消化管癌のサンプルを用いたトランスクリプトーム解析によって得られた候補遺伝子を実際の大腸癌や前癌病変を用いてその意義を検証する作業は、おおむね順調に進展しているものと考えられる。人体病理大腸鋸歯状病変から大腸癌へ進展するserratedpathwayでは、通常の大腸癌とは異なり胃型粘液形質を保持しているため、粘液形質を制御する分子の同定が必要と考える。これまで構築したデータベースの中から特に胃型粘液形質と関わる分子を候補とし、定量的RT-PCR法や免疫染色により多数症例の検証を行う予定である。さらに候補分子の生物学的機能解析や既知の分子との比較を行う予定である。現在までに収集した大腸鋸歯状病変と大腸鋸歯状腺癌を含む大腸腫瘍組織サンプルを用いてトランスクリプトーム解析によって得られた新たな消化管癌関連分子の発現とその意義について検討中である。本年度解析したBST2は特にserrated pathwayに深く関わる分子ではなかったものの、大腸癌における新規治療標的分子としての応用が期待される。複数の候補遺伝子について実際の大腸腫瘍サンプルを用いてその意義について検証する作業は、おおむね順調に進展しているものと考えられる。大腸鋸歯状病変とその癌への進展メカニズムを解明するために、既知の分子のみならず、これまで使用した細胞株以外のCASTライブラリーの構築を行い、定量的RT-PCR法による多数症例の検証を行いながら新規大腸癌関連遺伝子の探索を行う予定である。候補遺伝子が同定でき次第、臨床検体を用いて免疫組織化学的検討を行い、その臨床病理学的パラメーターの解析を行う。さらに候補分子の生物学的機能解析についても解析を進める予定である。
文化財3次元形状のディジタル化に関する研究

回転テーブルの周辺部に長さと位置が既知のロッドを多数設置し,テーブルを回転させながらこれらをTVカメラで観測することによってカメラの位置と方向を知り,それにより多重視角画像から対象物の3次元形状を計測するシステムを作成した.3次元形状を得るには,カメラの位置と方向を推定する標走処理とステレオ画像の仝画素マッチングが必要であるが,3次元位置が既知のロツドの多重視角画像を統計的に処理することにより精度よく標定が行える処理手法を開発した.全画素マッチングについても,格子点状の多数のレーザ輝点を用いることで処理システムに対する付加を低減するとともに,DPマッチングを2次元に拡張した高速マッチング手法を開発し,効率の良い処理が行えるようにした.当初,文化財は移動可能な小型のものを対象としていたが,壁面のレリーフなど移動不可能なものも多いため,ここで開発した手法をカメラヘッド(23台のカメラを互いの相村位置が不変となるように固定したもの)を用いて多重視角画像を観測する方式への拡張可能性について検討した.その結果,ヘッドを移動させながら対象物を観測してもそれぞれの観測画像間にオーバラップがあれば各観測におけるヘッドの位置を推定しながら対象物の3次元形状を推定できる見通しを得た.外部3次元形状データと内部CTデータとの融合処理については,CTデータが入手できなかったものの,理論的な検討を進め,基本的なアルゴリズム開発に着手できた.回転テーブルの周辺部に長さと位置が既知のロッドを多数設置し,テーブルを回転させながらこれらをTVカメラで観測することによってカメラの位置と方向を知り,それにより多重視角画像から対象物の3次元形状を計測するシステムを作成した.3次元形状を得るには,カメラの位置と方向を推定する標走処理とステレオ画像の仝画素マッチングが必要であるが,3次元位置が既知のロツドの多重視角画像を統計的に処理することにより精度よく標定が行える処理手法を開発した.全画素マッチングについても,格子点状の多数のレーザ輝点を用いることで処理システムに対する付加を低減するとともに,DPマッチングを2次元に拡張した高速マッチング手法を開発し,効率の良い処理が行えるようにした.当初,文化財は移動可能な小型のものを対象としていたが,壁面のレリーフなど移動不可能なものも多いため,ここで開発した手法をカメラヘッド(23台のカメラを互いの相村位置が不変となるように固定したもの)を用いて多重視角画像を観測する方式への拡張可能性について検討した.その結果,ヘッドを移動させながら対象物を観測してもそれぞれの観測画像間にオーバラップがあれば各観測におけるヘッドの位置を推定しながら対象物の3次元形状を推定できる見通しを得た.外部3次元形状データと内部CTデータとの融合処理については,CTデータが入手できなかったものの,理論的な検討を進め,基本的なアルゴリズム開発に着手できた.実験用回転ケーブルを製作し,回転コントロール,ロッド上のLEDの点滅,およびTVカメラの出力を取り込みなどを電子計算機で行えるようにシステム化した.取り込んだステレオペア画像から対象物の3次元形状を再構成するには,それぞれのカメラの位置と観測方向を定める必要があるが,再構成を安定化させるためには,対象物のおかれた3次元空間から2次元の観測画像への射影変換のそれぞれ11個のパラメータを精度よく決定することが必要である.1台のTVカメラを固定して,3次元位置が既知であるロッドをテーブルごと回転させて観測するすることにより,未知パラメータ数を増やさずに射影変換のパラメータが決定できる新しいパラメータ推定手法を開発した.一方,TVカメラのズ-ム機能を利用して,再構成の空間分解能を格段に向上させる手法も開発した.この手法では,カメラの位置や観測方向を知るために主にロッドを中心に観測し,次にズ-ム機能を使って対象物の拡大像を得る.これらの画像における拡大率を求めることにより拡大像観測時の射影変換パラメータを知ることができる.得られたステレオ画像間でPixel matchingを行って視差に基づく位置ずれを求めることは,非常に時間のかかる処理である.これについても,DPマッチングを2次元に拡張した手法を開発し,高速にマッチング処理を行える手法を開発した.実験では,従来手法の20倍程度の処理速度を有することがわかった.1.処理システムの改良(1)はじめに格子点状の対応点対を求めておき,次にそれぞれの点の周辺をスパイラル状に走査しながらマッチングを行う手法を開発した.また,マッチングできなかった領域に対する補間処理も開発した.(2)対応点対の生成においても,画像のピラミッド構造を利用することで1つ上の階層では位置ずれを1/2にすることができることを利用して探索範囲を小さし,処理の高速化を図る手法を開発した.(3)測定された3次元形状データと3次元内部CT画像との重ね合わせについては,CT画像が入手できなかったため,3次元曲面同士の重ね合わせアルゴリズムの検討を行った.2計測システムの改良(1)半導体レーザとファイバープレイトとを用いて格子状の多数の輝点を得,これを回転テーブル上の対象物に投影することにより,多重視覚画像のマッチング処理を行う場合の始点とした.これにより,これまでソフト的に行っていた対応点(始点)探索処理が不要となり,処理の高速化が図られた.(2)TVカメラを1台用いて回転テーブル上の対象物の多重視角画像を観測する現在の方式を拡張すると,カメラヘッドに2台のカメラを固定して得られるスレテオ画像に対しても同様の処理によって3次元形状を再構成できることがわかった.カメラヘッドの位置や観測方向を変化させてもそのときの視野にある程度の重なりがあれば得られた3次元形状の重ね合わせによって位置と方向が推定できることもわかった.
遺伝子増幅システムを用いた物質生産系の構築と次世代抗体への応用

GS系をBAC-FISHを用いて染色体を分析した結果、殆ど変化が起こらない安定したB染色体で増幅が集中している事が判明された。これがDHFR系よりGS系の方が細胞の構築まで短時間で完了出来る原因の一つであるのが示唆された。また、糖鎖の単純化は遺伝子増幅をかけるほどより進行して行く事が判明された。つまり、抗体生産性と糖鎖修飾は反比例する事を確認した。次世代ヒト型モノクローナル抗体のChinese hamster ovary(CHO)cellによる生産の産業応用を目指し、設定した目標としては、'(1)グルタミン合成酵素遺伝子(GS)系の抗体発現ベクター製作と共にCHO細胞での高発現と阻害剤であるmethionine sulfoximine(MSX)との相関関係を解明する。'事と'(2)構築した細胞を用い、無血清浮遊培養方法の開発と、それによりBAC-PAC systemを完成する。'事である。各研究実績を以下に示す。(1)GS遺伝子を導入した抗体生産株を構築し、MSX遺伝子増幅による高発現株をクローニングする事に成功した。500μMのMSX濃度で最も優れた抗体生産株が得られ、それ以上の濃度ではMSXの阻害で細胞生存率が急減した。又、BAC libraryを使った染色体解析実験を行い、GS系の染色体内の増幅領域と抗体生産性増加との関係の解析のため、比較対象であるジヒドロ葉酸還元酵素(DHFR)系の抗体産生株の増幅領域を分析し、13番目の染色体で増幅が起こるのを確認した。(2)上記でクローニングされた抗体生産株を用い、血清成分を必要としない無血清培地に馴化し、浮遊培養を可能にした。通常、接着培養は10%の血清を含む培地で培養するのが一般的であるが、産業化するのには欠点が多く、特に、今回開発するBAC-PAC方法に用いられるためには、浮遊化させる必要がある。血清の濃度が10%、8%、6%、4%、2%、1%、0%の培地で徐々に馴化させた細胞を浮遊用の三角フラスコで培養し、目的の抗体の生産が確認された。尚、BAC-PAC方法にはレクチンが用いられており、抗体と糖鎖との反応条件を確立する必要がある。抗体の糖鎖に特異性を持つレクチンを用い、その反応条件を確立した。次世代ヒト型モノクーローナル抗体のChinese hamster ovary(CHO)cellによる生産の産業応用を目指し、設定した目標としては、`(1)BAC libraryを用いた染色体内のGS遺伝子の位置を解明する。'事とまた、それを踏まえた、糖鎖品質と細胞株の性質の関係を解明し`(2)品質管理改善を提示し、さらに安定的な生産システムを構築する。'事である。(1)CHO細胞において、染色体増幅機構を解明するために先行した実験の結果、DHFR系では遺伝子増幅がP染色体に集中して起こり、他の染色体で増幅が起こった場合と比べ、比較的に高コピの細胞株が得られる。しかし、P染色体は変化が起こりやすい不安定な性質を持っているため、均一の生産性を持つ細胞をcloningするまで長い時間がかかる原因である。(2)GS系細胞で生産し、BAC-PAC方法で選別された抗体において、その修飾糖鎖をさらにヒトに近いものに絞るために、様々な生産条件と糖鎖変化の関係を検討した。ヒト由来の抗体に比べ、遺伝子組み換え技術を用いCHO細胞で生産された抗体の場合はその糖鎖構造がヒト由来の抗体より単純化されている。その中でもADCCやCDC活性などに大きく影響すると言われているgalactoseが付いた糖鎖の比率はヒト由来の抗体と比べ15%以上低い事を確認した。このような糖鎖の単純化は遺伝子増幅をかけるほどより進行して行く事が判明された。また、培養の条件を変化した場合でも、生産性が一番高かった時の抗体の糖鎖構造が一番未熟である事が判明された。
生体を模倣する試験管内アミロイド線維形成反応系の構築と反応機構の解析

難治性疾患であるアミロイド症を引きおこす各種アミロイド線維、特にアルツハイマー病βアミロイド(Aβ)およびβ2-ミクログロブリン(β2-m)アミロイド(透析アミロイド)に焦点を当て、生体内環境を忠実に模倣した試験管内アミロイド線維形成反応系を構築する。これを用いて、生体内のアミロイド線維形成過程での前駆体蛋白質や生体分子等の相互作用を再現して反応機構全体を解明し、治療法の探索に用いることを目的とする。特にAβアミロイドでは生理濃度(nM)に近いAβ蛋白質(ペプチド)モノマー濃度で重合反応を行う開放型反応系を構築する。従来の重合反応系ではμMレベルの高濃度のAβ蛋白質を用いていた。より生理的なAβ蛋白質濃度で共存蛋白質等との相互作用を解析することを現在の課題としている。成果:Aβアミロイド。開放型反応系の基礎構築の更なる検討を行った。アミロイド線維形成の素過程としては、重合核形成、アミロイド線維伸長および二次核形成がある。本年度はこの3過程のうち、アミロイド線維伸長を検出する開放型反応系の改良を行い、測定感度を向上することができた。アミロイド線維が試験管内で伸長する最低濃度である臨界モノマー濃度(20 nM)程度の測定を可能としつつある。β2-mアミロイド。線維の伸長反応・核形成反応に当たって、前駆体蛋白質のβ2-mの立体構造が部分変性する必要があることが示されている。従来の閉鎖型アミロイド重合反応系では、臨界ミセル濃度程度の界面活性剤を添加してβ2-mを部分変性させ、アミロイド線維を伸長させている。この条件の閉鎖型反応系で重合核形成反応を試みたが、核形成を誘起する生体因子を探索することは難しい可能性がある。そこで、生理的条件下で線維伸長を観測できる開放型反応系の構築を計画した。(a) Aβアミロイド線維形成反応系の検討。開放型Aβアミロイド線維形成反応系の構築;現在構築中の反応系では、反応容器に評価したい蛋白質を固定化した担体を入れ、低濃度のAβ40蛋白質モノマーを連続的に添加する。アミロイド線維に特異的な蛍光物質であるチオフラビンTを添加しその蛍光を測定することで、線維を定量している。本年度は主に、線維伸長測定のための反応系の改良を試みた。この測定系ではAβアミロイド線維(fAβ)を担体に固定して、Aβ蛋白質モノマーを連続的に添加し、線維の伸長反応を観察している。非特異吸着の改善や、素材の改良により、感度を向上させた。Aβ40のアミロイド線維が試験管内で伸長する最低濃度である臨界モノマー濃度(20 nM)レベルまで測定可能となりつつある。(b) β2-mアミロイドの検討。β2-mアミロイドでは、線維形成・伸長の際に前駆体蛋白質β2-mの立体構造を脂肪酸、リゾリン脂質などにより部分変性する必要がある。重合核の形成を誘起する生体物質を試験管内で探索する反応系を、閉鎖型反応系を用いて構築を試みた。しかし十分な条件を満たすことが難しいことが判明した。そこで開放型反応系を応用し、生理濃度の脂肪酸、リゾリン脂質などによる線維伸長を観測できる反応系の構築を計画した。これまでに、脳内での生理濃度に相当する低濃度のAβ蛋白質の重合挙動を観測できる開放型Aβアミロイド線維形成反応系について、2通りの構築を試みた。すなわち、線維伸長反応のみを測定する方法と、核形成反応と線維伸長反応を含む線維形成反応全体を測定する方法である。平成30年度においては、線維伸長反応の測定を優先的に検討する。最初に、臨界モノマー濃度を実測可能な感度を有する線維伸長反応系を確立する。次いで、下記の検討を行う。すなわち、1脳脊髄液中の蛋白質群である血清アルブミン(HSA)、トランスサイレチン(TTR)、アポリポ蛋白質E(apoE)等の線維伸長に対する効果を解析する。2低濃度Aβ蛋白質モノマーとHSA、TTR、apoEなどの各種蛋白質の結合と競合する生理的リガンドの検出を行う。3Aβ蛋白質モノマーの凝集を生体内において阻止しうる薬剤の探索等を行う。(b) β2-mアミロイド線維形成反応系の検討。β2-mアミロイドについて生体を模倣する開放型反応系試験管内アミロイド線維形成反応系を構築する。また、沈着局所の細胞外マトリックス成分(プロテオグリカン等)等が線維形成の相乗効果を示すかを検討し、その結果を反応系に組み込む。これにより、生体内でβ2-mを部分変性させる線維伸長因子の確定を試みる。特にAβアミロイドでは生理濃度(nM)に近いAβ蛋白質(ペプチド)モノマー濃度で重合反応を行う開放型反応系を構築し、従来の高濃度の前駆体蛋白質を用いたのではわからない共存蛋白質などとの相互作用を直接解析することを現在の課題としている。

本年度の成果:Aβアミロイド。測定の濃度範囲・感度を向上するための検出器の改善を行った。また、開放型反応系に、脳脊髄液中の生理濃度の血清アルブミンを共存させたところ、血清アルブミンは従来の文献で報告されているよりも強くAβ蛋白質と相互作用している可能性が示された。今後検証を行う。β2-mアミロイド。アミロイド線維形成が重合核依存重合機構で行われるとすれば、重合核の形成を誘起する生体物質が存在するはずであり、それを試験管内で探索する反応系の構築を開始した。今回は閉鎖型反応系を用いて検討した。開放型Aβアミロイド線維形成反応系の基本型の構築;現在構築中の反応系では、反応容器に評価したい蛋白質を固定化した担体を入れ、低濃度のAβ40蛋白質溶液を添加する。アミロイド線維に特異的な蛍光物質であるチオフラビンTの蛍光を測定し、線維を定量している。現在は基本反応系を検討するため、Aβアミロイド線維(fAβ)を担体に固定して、そこにAβ蛋白質を添加し、線維の伸長反応を観察した。今回、従来よりも高性能の測定器を用いることで測定の安定度が改善された。また、この際に共存させた血清アルブミンはAβ蛋白質と予想より強く結合している可能性が示された。この現象は、開放型反応系を用いて反応させるAβ蛋白質濃度を低下させたために初めて顕在化したものと考えられる。(b) β2-mアミロイドの検討。β2-mアミロイドでは、線維形成・伸長の際に前駆体蛋白質β2-mを脂肪酸、リゾリン脂質などにより部分変性する必要がある。平成29年度に行う予定にしていた脂肪酸などの作用機序を解析する一環として、Aβアミロイドに用いたと同様な閉鎖型反応系を構築した。生体分子により核形成が誘起されることを検出するための反応系である。この結果、生体分子間相互作用を検出するためには、反応条件などに関して、より詳細な検討が必要であることが示唆された。難治性疾患であるアミロイド症を引きおこす各種アミロイド線維、特にアルツハイマー病βアミロイド(Aβ)およびβ2-ミクログロブリン(β2-m)アミロイド(透析アミロイド)に焦点を当て、生体内環境を忠実に模倣した試験管内アミロイド線維形成反応系を構築する。これを用いて、生体内のアミロイド線維形成過程での前駆体蛋白質や生体分子等の相互作用を再現して反応機構全体を解明し、治療法の探索に用いることを目的とする。特にAβアミロイドでは生理濃度(nM)に近いAβ蛋白質(ペプチド)モノマー濃度で重合反応を行う開放型反応系を構築し、従来の高濃度の前駆体蛋白質を用いたのではわからない共存蛋白質などとの相互作用を直接解析することを現在の課題としている。開放型反応系の基礎構築のために更なる検討を行った。アミロイド線維形成の素過程としては、重合核形成、アミロイド線維伸長および二次核形成がある。複数の形式の開放型反応系を開発し、この3過程のうち、線維伸長反応を正確に測定する方法を検討した。その結果、生理濃度に近い低濃度のAβ蛋白質による線維伸長反応の観察が可能となりつつある。β2-mアミロイド。アミロイド線維形成が重合核依存性重合機構で行われるとすれば、重合核の形成を誘起する生体物質が存在するはずであり、それを試験管内で探索する反応系の構築を開始した。
帝王切開分娩を経験した女性のための出産選択への支援：看護職者による決定援助の評価

本研究の目的は、帝王切開(帝切)を経験した女性の次子の出産選択を支援するための決定援助の介入効果を評価をすることである。3施設39名の研究協力者に、看護職4名の研究協力を得て、決定援助が提供された結果、出産選択に関する知識の向上と決定上の葛藤の軽減が有意に確認された。VBAC成功者は、予定帝切の女性と比較し出産満足が高かった。出産後女性は、「自分自身の意思決定に向き合い」、「支えられているという安心感」をもっていたことが確認された。本研究は看護職者による意思決定支援の有効性を示唆するものである。今後さらに女性の意思決定を支援する戦略について、医師との連携を図りながら検討していく必要がある。本研究の目的は、帝王切開分娩を経験した女性が、次子の出産選択における意思決定において、看護職者による決定援助を提供し、その介入効果について評価することである。研究の2年目である平成24年度の計画は、研究協力者に対し、研究代表者の作成した決定援助プログラムへの参加を依頼し、看護職者による意思決定支援を実施することであった。2か所の研究協力施設で、2名の看護職者(助産師)によって、11名の研究協力者に対し決定援助プログラムの提供がなされ、7名の産後1か月のインタビューが終了した。統計学的分析には、十分な数が確保されていないが、現在のところ以下のような結果が確認されている。の平均値は、2.73から1.95へと有意に軽減した(t値:-5.201, p< .0001)。2)知識:知識スコアの平均値は、6から9.64へと有意に増加した(t値:5.072, p< .0001)3)7名の産後のインタビューから、助産師の意思決定支援については、「医師に尋ねられないことも気軽に質問できてよかった」「助産師との面接を通して、自信をもって出産に臨むことができた」などの感想がきかれた。出産に対する満足については、自らの最終決定を含めて、満足度の平均は7.7点(SD 2.2)と高値を示した。しかしながら、望みどおりの選択とならず、術後の麻酔の副作用で頭重感、嘔吐が継続した女性から、自然出産できなかったという失望感が語られた。平成25年度は、引き続き研究協力者を増やしながら、介入研究を継続していく予定である。本研究の目的は、帝王切開分娩を経験した女性が、次子の出産選択における意思決定において、看護職者による決定援助を提供し、その介入効果について評価をすることである。研究3年目となる平成25年度は、引き続き研究協力施設の協力を得ながら、看護職者による意思決定支援を実施した。現在まで、32名の研究協力者に対し決定援助プログラムが提供され、31名の産後1か月のインタビューが終了した。統計学的分析には、あと数名の対象者の確保が必要であるが、現在のところ以下のような結果が確認されている。1)決定に関する葛藤の軽減:決定に関する葛藤スコア(Decisional Conflict Score)の平均値は、2.73から2.03へと有意に低下した(t値:-7.37,p<.0001)。2)知識:知識スコアの平均値は、7.1から9.75へと有意に上昇した(値:6.16,p<.0001)。3)出産結果ならびに出産に対する満足度:出産の結果として、VBAC14名、予定帝王切開分娩14名、緊急帝王切開分娩2名(帝王切開予定)であり、出産満足度の平均値は、8.7点(SD 1.45)/10点であった。分娩様式による満足度の平均は、VBAC:9.14、予定帝王切開分娩:8.29、緊急帝王切開分娩:9.50であった。分娩様式による出産満足度においては、有意な差は認められていない。産後のインタビューにおける看護職者の意思決定支援の評価においては、「助産師に医師に尋ねられないことも気軽に質問することができた」「自分で意思決定できたという実感があり、出産に臨めた」などの感想がきかれている。平成23年度の計画は、1).決定援助の必要性について理解を深めてもらうための看護職者を対象としたセミナー開催、2).看護職者による決定援助のための支援ガイド作成および決定援助介入のためのプロトコールの見直し・検討であった。1)については、平成24年3月に看護職者のための帝王切開後の出産選択について考えるセミナーを開催した。セミナーでは、産科医師、意思決定支援の研究者、海外共同研究者3名の講師の講演、そして研究者自身も講師として講演を行い、その後現場で問題を抱える74名の参加者とともに討論を行った。終了後のアンケートから、帝王切開後の分娩方法選択についての理解が深まり、看護職者による意思決定支援の必要性について認識できたとの感想を得ることができた。今後参加者とコンタクトをとり、病院施設における意思決定支援状況についての情報を得ながら、研究協力の依頼をしたいと考える。2)の看護職者による決定援助のための支援ガイドおよびプロトコール作成に向けて、平成23年度は、全国の産科を標榜する病院施設を対象として、帝王切開後の出産選択の現状および看護職者による意思決定支援の実態調査を実施した。

その結果、全体的な傾向として、分娩方法選択に関する情報提供の内容は、帝王切開分娩に関する内容に偏っており、分娩方法選択の機会が提供されていないことが明らかになった。その傾向は、VBAC希望の女性を受け入れていない施設に多く認められた。また一部の看護職者は、施設との方針の中で、女性のVBACをしたいという思いを受け止められず、その対応に困っていることも確認された。、本研究の目的は、帝王切開分娩を経験した女性が、次子の出産選択における意思決定において、看護職者による決定援助を提供し、その介入効果について評価をすることである。研究4年目となる平成26年度は、引き続き研究協力施設(3カ所)の協力を得ながら、看護職者による意思決定支援を実施した。最終的に38名の研究協力者に対し決定援助プログラムが提供され、全員の産後1か月のインタビューが終了し、以下のような結果が得られた。2)知識:知識スコアの平均値は、7.18から10.00へと有意に増加した(t値:6.96,p<.0001)。3)出産結果ならびに出産に対する満足度:出産結果は、予定帝王切開分娩19名、VBAC15名、緊急帝王切開分娩4名であった。出産に対する満足度の平均値は、8.55(SD 1.38)/10であり、分娩様式による出産満足度の平均値は、予定帝王切開分娩:8.11、VBAC:9.13、緊急帝王切開分娩:8.50であった。今後産後のインタビューデータの逐語録の質的分析を進めるとともに、看護職者の意思決定支援の評価を行い、看護職者に求められる意思決定支援について検討を重ねていく予定である。本研究の目的は、帝王切開分娩を経験した女性が、次子の出産選択の意思決定に直面する際に、看護職による決定援助を提供し、その介入効果について評価することである。最終年度となる平成27年度は、平成2426年度において,介入研究を実施したデータ(N=39)の分析を行い、以下のような評価が得られた。1)決定に関する葛藤の軽減と知識の向上:決定に関する葛藤スコアの平均値は、2.75から2.03へと有意に低下し(t値:-8.89, p<.0001)、知識スコアの平均値は7.28から10.00へと有意に増加した(t値:6.98,p<.0001)。2)介入前後の出産選択と最終の出産結果:介入前は、24名/39名(61.5%)が、VBACを希望していたが、介入後20名、最終的にVBACに成功した女性は、15名(38.4%)であった(試験的経腟分娩後に緊急帝切となった女性は、4名であった)。一方、介入前に帝王切開(帝切)を希望していた女性は、5名/39名(12.8%)であったが、介入後16名、最終的に帝切での出産となった女性は20名(51.2%)であった。その理由として、妊娠経過に伴う女性自身の意向の変化、医学的な適用(切迫早産、妊娠性糖尿病、骨盤位)、そして予定日超過に対する病院の方針などが挙げられた。3)出産に対する満足度と意思決定プロセスの質的分析の結果:VBACに成功した女性は、帝切出産の女性と比較し出産満足度が有意に高かった(VBAC:9.13 vs帝切:8.04 )(p<0.05)。また産後1か月後のインタビューの分析から、意思決定プロセスにおける女性の経験として、「出産選択について情報を得る」、「自分自身の意思決定に向き合う」、「支援されているという思い」の3つのカテゴリーが抽出された。本研究の目的は、帝王切開(帝切)を経験した女性の次子の出産選択を支援するための決定援助の介入効果を評価をすることである。
希土類原子加熱法によるパノスコピック形態制御光学機能ガラスの創製と光波制御

本研究は、Gd_2(MoO_4)_3、LiNbO_3結晶等の光非線形性を示す単結晶ラインをガラス表面に希土類/遷移金属原子加熱法で書き込み、形態、配向、光機能(伝搬特性等)を明らかにすると共に次世代光波制御デバイスへと展開することを目的とする。本研究を通して物質、デバイス創製における希土類イオンの全く新しい展開を図る。希土類原子加熱法におけるガラスの結晶化機構、強弾性体/強誘電体β'-Sm_xGd_<2-x>(MoO_4)_3結晶ラインにおける周期的な屈折率変化現象の発見とその発現機構を解明し、さらに、パターニングされた高配向を示すLiNbO_3結晶ラインは光導波路として機能することを実証した。また、レーザー照射と簡便な化学エッチングの組合せによる精密なガラスの微細加工法を提案した。本研究は、Sm_2(MoO_4)_3、HNbO_3結晶等の光非線形性を示す単結晶ラインをガラス表面に希土類/遷移金属原子加熱法で書き込み、形態、配向、光機能(伝搬特性等)を明らかにすると共に次世代光波制御デバイスへと展開することを目的とする。得られた結果を以下に示す。○希土類原子加熱法におけるガラスの結晶化機構の解明:酸化物ガラスの結晶化(通常の電気炉)においてこれまで最も詳しく調べられ、核形成速度と結晶成長速度の温度依存性が解明されているLi_2O2SiO_2ガラスにレーザー照射を行い、高いc-軸配向をしたLi_2Si_2O_5結晶ラインのパターニングに成功した。最適なライン形成速度から、レーザー照射領域の温度を提案した。○強弾性体/強誘電体β'-Sm_xGd_<2-x>(MoO_4)_3結晶ラインにおける周期的な屈折率変化現象の解明:強弾性、強誘電性、二次光非線形性を示す極めて特異な結晶であるβ'-RE_2(MoO_4)_3のラインパターニングを行い、屈折率の周期的変化を示すドメイン構造をマイクロラマン散乱スペクトルや第二高調波強度測定から、その発現機構を提案した。○LiNbO_3結晶ラインの高品質化と光制御デバイスへの展開: Cuo-Li_2O-Nb_2O_5-SiO_2系ガラス表面上に、レーザー誘起結晶化法でパターニングされた高配向を示すLiNbO_3結晶ラインは、光導波路として機能することを明らかにした。また、Er^<3+>イオンをガラスにドープすることによりはLiNbO_3結晶ラインに固溶することをマイクロ蛍光スペクトルから実証した。さらに、還元雰囲気下、ガラス転移温度以下での熱処理によってガラスを結晶化させることなく、ガラス表面上に金属銅の層を形成することを見出した。この金属銅の層は電極として利用することが可能であることを提案した。機能ガラス工学
高圧変形実験技術の革新による地球内核の複雑な地震波構造の起源とダイナミクスの解明

我々のグループによって開発・高度化が進められ、現在までに約300GPa、1200 Kにおよぶ超高圧高温環境下での変形実験が可能な回転式ダイヤモンドアンビル装置と放射光X線測定系のさらなる高度化を行い、地球内核圧力温度までの定量的変形実験を可能にする。地球内核を構成する金属鉄の粘性と変形誘起結晶方位選択配向を実験で制約し、内核の複雑な地震波構造の起源とダイナミクスの解明を目指す。回転式ダイヤモンドアンビルセルと放射光を組み合わせ、放射光ビームの極小化とボロン添加ダイヤモンドヒーターの開発により、地球中心部に匹敵する超高温高圧条件下における変形実験を実現し、固体金属鉄の地球内核条件下での粘性や変形による結晶配向を求める挑戦的な課題である。地震学等による地球内核探査データの解釈に本質的に貢献し、惑星中心部のダイナミクスや構造の理解を大きく前進させる成果が期待される。開発する変形実験手法は、既存の実験条件を大幅に凌駕しようとするものであり、地球のみならず、他の惑星の多様な深部環境にも応用が期待できる。
目的物質の高精度分離・誘導が可能な単分散磁性ポリマー複合粒子の新規合成法の開発

磁性ナノ粒子(マグネタイト)をサブミクロンサイズのポリマー粒子内部に包含した「磁性ポリマー複合粒子」を、水相中での界面活性剤を用いない重合反応(ソープフリー乳化重合)により合成した。ソープフリー乳化重合を利用して、粒径均一性が高く(単分散)、磁性ナノ粒子含有率が高い複合粒子を合成するためには、系内に磁性ナノ粒子が共存してもポリマー粒子の分散安定性が維持される重合法を確立することが必要となる。そこで本研究では、重合pHによってイオン基の解離状態を調整可能な弱電解質性の重合開始剤を導入し、重合中のポリマー粒子の表面電荷を制御した。その上で、ポリマー粒子形成機構に基づき、成長過程にある単分散なポリマー粒子に磁性粒子を取り込ませ、その後もポリマー粒子を静電的に安定な状態で成長させることによって、単分散な複合粒子の合成に成功した。さらに、複合粒子の応用の領域を広めるためには、対象物質の種類や分離条件などに応じ、様々なサイズの複合粒子を合成することが望まれる。ソープフリー乳化重合は、一般的にサブミクロンサイズのポリマー粒子合成法であるが、弱電解質性開始剤を導入することにより、ポリマー粒子の粒径をミクロンサイズまで大きくできることが報告されている。そこで、本重合系法を用いて、複合粒子の合成においても、これまでの500nm程度から、さらに粒径を大きくすることを試みた。複合粒子の大粒径化のために、モノマー濃度および磁性ナノ粒子の添加量を増大させて検討した。得られた粒子は、磁性ナノ粒子がポリマー粒子中に取り込まれ、ポリマー粒子中に取り込まれない遊離の磁性ナノ粒子はほとんどなかった。複合粒子の平均粒径は984nm、粒径分散度は5.7%であり、単分散であった。本重合法を利用して、複合粒子の大粒径化を達成可能であることがわかった。磁性粒子(マグネタイト)をサブミクロンサイズのポリマー粒子内部に包含した「磁性ポリマー複合粒子」を、ソープフリー乳化重合により合成した。ソープフリー乳化重合を利用して、粒径均一性が高く(単分散)、磁性粒子含有率が高い複合粒子を合成するためには、系内に磁性粒子が共存してもポリマー粒子の分散安定性が維持される重合法を確立することが必要となる。その上で、ポリマー粒子形成機構に基づき、成長過程にある単分散なポリマー粒子に磁性粒子を取り込ませ、その後もポリマー粒子を静電的に安定な状態で成長させることによって、高単分散な複合粒子の合成に成功した。このとき、ポリマー粒子と磁性粒子の複合化過程を検討するため、重合中の複合粒子の表面電位(ゼータ電位)も測定した。その結果、粒子形成過程にあるポリマー粒子の表面電位を低下させることなく、添加した磁性粒子がポリマー粒子に取り込まれることを実証した。磁性粒子の添加方法に関しては、一括添加よりも少量ずつ連続的に添加する方が、単分散性を損なうことなく複合化できることがわかった。また、磁性粒子を連続的に添加する重合系に邪魔板を導入することで、添加後の磁性粒子の分散混合が促進され、複合粒子中の磁性粒子含有量の均一性を高めることができた。さらに、各試薬濃度や磁性粒子の添加時期などを検討し、これまでサブミクロンサイズであった複合粒子の粒径を1μmまで大きくすることを可能にした。また、蛍光色素(ピレン)をモノマーに溶解した重合系に、磁性ナノ粒子を連続添加しながら重合を進めたところ、磁性と蛍光の両特性を併せ持つ単分散なポリマー複合粒子が得られた。
オセアニア南部首長制諸社会の持続と変容に関する文化認識論的研究

本研究は、メラネシア、ポリネシアといった地理的区分の枠を捨象し、オセアニア南部諸島の調査と比較研究を通して、この地域の首長制の持続と変容に関する理解を推進することを目的として計画された。その際、世界観、隠喩表現、生命観、身体観、空間認識など、従来論じられることの少なかった文化的側面からの理解を共通の視点としている。平成7年度と8年度の2回にわたる調査は、予定どおり順調に実施された。その調査研究の成果は、以下のように要約できる。1.基礎資料の収集各調査者は、それぞれの担当地域において野外調査を行い、首長制の持続と変容の研究のために、親族関係、首長権の継承システム、村落構成のような社会的地位と役割に関するデータの他、世界観、生命観、身体観等の文化的側面に関するデータを収集した。各調査地域における基礎資料に関しては、すでにかなりの蓄積がある。2.首長制の持続と変容に関する問題当初の予想どおり、各地域の伝統的システムと近代的政治制度の共存を、持続と変容の視点から研究することは有益である。主な成果を挙げれば、以下の通りである。1)クック諸島-伝統的首長位継承をめぐる訴訟事例と土地相続の価値観の持続と変容2)トンガ諸島-トンガ・ダンスにみられる三元的身体カテゴリー分類と三元的政治構造の対応関係3)西サモア-近代化と選挙制度改変による社会状況の変化における伝統的首長制の持続と変容過程の分析4)フィジ-西部-近代的政治制度の整備された村落社会における首長の霊的権威の持続性の問題5)フィジ-中部諸島-篭(容器)や人体の隠喩で理解されていた伝統的首長制の認識枠組の持続と変容の問題6)フィジ-東部諸島-人類学者の文字記録を根拠に固定化されてきた「伝統的」首長の系譜を揺るがすような新たな系譜記録の発見と混乱の問題。伝統的首長制の意義をそこに考察できる。以上は一部にすぎないが、一見したところ大きく変容した政治システムが、伝統文化の枠組の中で再構築されている各調査地域の実態が、かなりの程度明確になった。3.首長制の文化認識論的研究調査期間の制約もあり、この側面に関してはまだ充分とは言えないが、空間構成、方位観、身体観、生命観等に関する興味深い資料が収集されつつある。例えば、トンガでは伝統的ダンスの世界観に観察される身体イメージが現代の政治構造の基礎にもあり、またフィジ-中部諸島では伝統的首長制を支えていた篭や身体の隠喩的理解が、近代的政治制度の基本的認識枠組ともなっている等の、興味深い事実が明らかになった。2度にわたる調査を通して、特に基礎資料収集と各調査地域の実態を明らかにする面で大きな成果があった。この成果は、現地への成果還元の意味もあり、日本オセアニア交流協会の資金的助成を得て、平成9年度内に英文報告書として刊行される予定である。また、5月に開催される日本民族学会では、シンポジュウム形式のグループ発表を行い、メンバーの6人全員が「首長制の持続と変容」に関する報告を行う予定である。これらは中間発表として行うものであり、都市化された地域を含む持続と変容過程の研究、オセアニア南部地域全体を視野に収めた比較研究、首長制の文化認識論的側面の研究の充実など、首長制の持続と変容過程に関する多くの課題が、今後の問題として残されている。

3.首長制の文化認識論的研究調査期間の制約もあり、この側面に関してはまだ充分とは言えないが、空間構成、方位観、身体観、生命観等に関する興味深い資料が収集されつつある。例えば、トンガでは伝統的ダンスの世界観に観察される身体イメージが現代の政治構造の基礎にもあり、またフィジ-中部諸島では伝統的首長制を支えていた篭や身体の隠喩的理解が、近代的政治制度の基本的認識枠組ともなっている等の、興味深い事実が明らかになった。2度にわたる調査を通して、特に基礎資料収集と各調査地域の実態を明らかにする面で大きな成果があった。この成果は、現地への成果還元の意味もあり、日本オセアニア交流協会の資金的助成を得て、平成9年度内に英文報告書として刊行される予定である。また、5月に開催される日本民族学会では、シンポジュウム形式のグループ発表を行い、メンバーの6人全員が「首長制の持続と変容」に関する報告を行う予定である。これらは中間発表として行うものであり、都市化された地域を含む持続と変容過程の研究、オセアニア南部地域全体を視野に収めた比較研究、首長制の文化認識論的側面の研究の充実など、首長制の持続と変容過程に関する多くの課題が、今後の問題として残されている。本年度の調査はほぼ予定どおり順調に実施され、次回の調査の下準備が整えられた。今回は、広く基礎的データの収集につとめたが、調査研究を通して明確になった成果は、以下のように要約できる。1.伝統的首長制の変容の度合いは地域毎に大きな差があるが、その外観の変化にも拘らず、いずれの地域にも双分的な家屋空間と地域構成、四分割的方位観、伝統的リーダーシップ継承の理念など、伝統的首長制の背景となる文化との連続性が確認される。2.フィジ-を中心とする南部オセアニア地域を、一つの文化的連続地域とみなして比較することは、当初の予想どおり有益である。制度論的に見ると形態が異なる地域(ヴァヌア等)でも、他地域との、生命観、世界観等の基本的な文化的連続性を確認できる。3.どの地域でも、伝統的政治システムと近代的政治制度が共存するが、その両者の調和は共通の伝統的な文化的認識枠組と理解体系に支えられているとみられる。この点はそれぞれの地域で確認されたが、その詳細については次回の調査でさらに追求すべき課題でもある。首長制の持続と変容の理解のためには、特に地域社会レベルの認識体系、理解体系のデータの収集を不可欠とする。そのため次回の調査でも引き続き基礎的データの収集を重ねるが、それに基づき、この地域のリーダーシップの持続と変容過程に関する共同討議を行うことにしたい。平成7年度と8年度の2回にわたる調査は、予定どおり順調に実施された。その調査研究の成果は、以下のように要約できる。1.基礎資料の収集各調査者は、それぞれの担当地域において野外調査を行い、首長制の持続と変容の研究のために、親族関係、首長権の継承システム、村落構成のような社会的地位と役割に関するデータの他、世界観、生命観、身体観等のデータを収集した。基礎資料に関しては、すでにかなりの資料が蓄積されている。2.首長制の持続と変容に関する問題当初の予想どおり、各地域の伝統的システムと近代的政治制度の共存を、持続と変容の視点から研究することは有益である。
肥満合併食道癌における癌細胞-脂肪細胞間相互作用の解明と新規治療法の開発

本研究では、高BMIと標準BMIの食道癌・正常組織ペアを用い、131遺伝子targeted-resequencingと網羅的遺伝子発現解析から肥満症例に特徴的な遺伝子・遺伝子発現変化を同定する。次いで、これまで取り組んできた肥満食道癌症例の内臓脂肪組織の網羅的遺伝子発現解析結果から、肥満症例における癌組織と脂肪組織で互いにリンクする遺伝子変化・発現変化を絞り込む。さらにその候補因子をこれまで集積した231例のサンプルで解析し、患者の内臓脂肪量やBMI等の代謝因子の層別化解析を行い、肥満症例における癌細胞-脂肪細胞のinteraction(相互関係)を明らかにする。
C型肝炎ウイルス蛋白質の構造と機能の多様性についての解析

1、HCV遺伝子発現系の構築:HCV遺伝子を動物細胞で効率よく発現させるために、組み換えワクチニアウイルスおよびアデノウイルスを使用した。さらにスイッチング発現のためにCre/loxPシステムにHCV遺伝子を組み込んだ発現ベクターを構築した。2、HCV蛋白質の発現:培養細胞でHCVcDNAからHCV蛋白質を発現させモノクローナル抗体で染色した。共焦点レーザー顕微鏡下で観察するとコア蛋白質は細胞質と核の両方に局在した。免疫電顕でも同様の結果だった。E1、E2は細胞質にのみ存在した。さらにマウスを免疫して得られた抗コアモノクローナル抗体は3種類にわけられ、細胞質コア蛋白のみを染色する、核内コア蛋白のみを染色する、または両方同時に染色するものが存在した。さらに細胞質内と核内のコア蛋白の構造変化を知るためにHCV蛋白を強制発現させた培養細胞を分画しコア蛋白の分子量を比べたが、すべて21kdで差はなかった。また、コア蛋白質の成熟過程を解析すると23kdと21kdのコア蛋白が存在することがわかり、HCV感染患者血清中のコア蛋白と比較して21kdのコア蛋白がウイルス粒子を構成していると考えられた。3、コア蛋白質の機能解析:コア蛋白質を構成的に発現するCHO細胞はコントロールに比べて細胞増殖が遅延する傾向を示した。さらにコア蛋白質の培養細胞における持続的な発現がプロモーターに依存することがわかった。4、NS3の機能解析:NS3を構成的に発現する線維芽細胞は増殖を速める傾向が見られた。しかし、スイッチング発現系での解析では有意な差は見られなかった。5、IMY細胞を用いた試験管内HCV感染系でのHCV蛋白質の解析:HCVが感染可能なIMY細胞にHCV遺伝子を組み込みHCVの全領域の蛋白質の発現に成功した。この細胞を利用して従来培養系では低複製効率を示すHCVの複製増強を試みる。
RhD血液型Del型の検出頻度とDel型輸血の安全性に関する検証

日本人の0.5%はRhD抗原が陰性であるが,吸着解離試験を実施することで抗原性が確認できるDel型が存在する.吸着解離試験は, 4倍希釈抗D血清を吸着後,ジクロロメタン・ジクロロプロパン解離液で解離する改良を実施した.一方, RhD血液型の高速DNAタイピングは,日本赤十字社より情報提供を受けたシステムを一部改変しRHD欠損と日本人で頻度の高いDel変異アリル(1227G>A, K409K)を同時に増幅可能なmultiplex-PCRを用いた.血清学的検査でRhD陰性と判定した170例のうち140例に吸着解離試験を実施して14症例のDel型を検出した.全例がC抗原陽性で, 27症例のC抗原陽性の約52%であった.さらに,血清学的検査でRhD陰性と判定した59症例を対象に高速DNAタイピングを実施した.このうち8例(13%)が血清学的にDel型と判定され, multiplex-PCRによる高速DNAタイピングの結果は,全てで1227G>A変異のアリル特異的PCRのバンドが陽性であり, 1227G>Aの遺伝子型であると判定された.血清学的にRhD陰性でありながらPCRでRHD陽性バンドを認めたケースはsingleplex-PCRによりRHDの全エクソンを確認した.血清学的にRhD陰性型51例中、49例はRHD欠損型、2例はRHD-CE-DハイブリッドであるRHD (1-2)-CE (3-9)-D (10)であった.臨床的には血清学的にRhD陰性と判定された患者にDel型血液を輸血した場合の不規則抗体産生のリスク,および輸血が実施されたDel型の患者に抗体産生が起きていないかを明確にする必要があった.今回, Del型と判定された14患者のうち1患者でRh陰性赤血球4本, Rh陰性血小板2本,およびRh陽性血小板2本が輸血されたが抗体の産生は確認されなかった.日本人の0.5%はRhD抗原が陰性であるが,吸着解離試験を実施することで抗原性が確認できるDel型が存在する.吸着解離試験は, 4倍希釈抗D血清を吸着後,ジクロロメタン・ジクロロプロパン解離液で解離する改良を実施した.一方, RhD血液型の高速DNAタイピングは,日本赤十字社より情報提供を受けたシステムを一部改変しRHD欠損と日本人で頻度の高いDel変異アリル(1227G>A, K409K)を同時に増幅可能なmultiplex-PCRを用いた.血清学的検査でRhD陰性と判定した170例のうち140例に吸着解離試験を実施して14症例のDel型を検出した.全例がC抗原陽性で, 27症例のC抗原陽性の約52%であった.さらに,血清学的検査でRhD陰性と判定した59症例を対象に高速DNAタイピングを実施した.このうち8例(13%)が血清学的にDel型と判定され, multiplex-PCRによる高速DNAタイピングの結果は,全てで1227G>A変異のアリル特異的PCRのバンドが陽性であり, 1227G>Aの遺伝子型であると判定された.血清学的にRhD陰性でありながらPCRでRHD陽性バンドを認めたケースはsingleplex-PCRによりRHDの全エクソンを確認した.血清学的にRhD陰性型51例中、49例はRHD欠損型、2例はRHD-CE-DハイブリッドであるRHD (1-2)-CE (3-9)-D (10)であった.臨床的には血清学的にRhD陰性と判定された患者にDel型血液を輸血した場合の不規則抗体産生のリスク,および輸血が実施されたDel型の患者に抗体産生が起きていないかを明確にする必要があった.今回, Del型と判定された14患者のうち1患者でRh陰性赤血球4本, Rh陰性血小板2本,およびRh陽性血小板2本が輸血されたが抗体の産生は確認されなかった.
対話型証明の新展開－古典から量子まで

今日の量子計算量理論において,対話型証明の概念は非常に大きな存在となっている.一方で,近年その実装へ向けて社会的注目を集める量子コンピュータはまだ小規模であり,量子メモリや量子通信は依然として高コストである.この状況を鑑みて,本研究では量子計算や量子通信が制限された量子対話型証明や量子計算に動機づけられた古典対話型証明,さらにはその中間的な対話型証明モデルに着目し,それらの対話型証明モデルについての計算量理論を展開する.これにより量子コンピュータの検証問題に対する新しい解決法を提案し,既存の量子対話型証明モデルや量子多項式階層理論を俯瞰的に捉えることができるような包括的成果を得ることを目指す.今日の量子計算量理論において,対話型証明の概念は非常に大きな存在となっている.一方で,近年その実装へ向けて社会的注目を集める量子コンピュータはまだ小規模であり,量子メモリや量子通信は依然として高コストである.この状況を鑑みて,本研究では量子計算や量子通信が制限された量子対話型証明や量子計算に動機づけられた古典対話型証明,さらにはその中間的な対話型証明モデルに着目し,それらの対話型証明モデルについての計算量理論を展開する.これにより量子コンピュータの検証問題に対する新しい解決法を提案し,既存の量子対話型証明モデルや量子多項式階層理論を俯瞰的に捉えることができるような包括的成果を得ることを目指す.
急性心不全に対する補助循環治療成績を改善する新規グレリン皮下投与法の開発研究

29年度が最終年度であるため、記入しない。