hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
会計倫理に対する事件史的アプローチ-不正会計の歴史的分析-

本研究では,不正会計・財務に関連する歴史的事件を取り上げ,それぞれの事件が持つ歴史的意義を分析した。対象となる国,時代はイギリス(南海泡沫事件,東インド会社),オランダ(チューリップ狂事件),フランス(ミシシッピ会社事件),アメリカ(公益事業会社規制)と様々で,それぞれ歴史的重大性を持つ事件である。それぞれの事件において会計の持つ役割は決して主導的なものではないが,不正会計の事件においては会計の持つ道具性が強調されたことを明らかとした。企業の不正会計という問題は,現在においても大きな問題であり,不正会計の問題の大きさもますます強く認識されるようになっている。現在,多くの不正防止のための手続きやルールが採用されているにもかかわらず,不正会計はやむことがない。それでは,現に存在している企業会計や企業統治の制度で不正会計を防止することができなかったのであろうか。また,現在の企業会計や企業統治の制度改革は今後の不正会計を防止するのに十分なのであろうか。本研究プロジェクトは,かかる不正会計に関連する諸問題について歴史的視角から国際比較分析に基づく研究を展開するものである。初年度である21年度は,計画通り分担者それぞれが担当する領域における文献の収集と分析に注力した。すなわち,代表者の中野はイギリス,橋本はネーデルラント(オランダ),清水はアメリカおよび日本,杉田はイギリス,三光寺はフランスの会計不正問題について取り上げられた文献を収集し,それを分析した。現状では,具体的な成果はまだ現れていないが,南海泡沫事件や日本の会計不正と複式簿記導入の関係などの検討が進行中で,次年度に研究分担者の間での協議を経て公表される予定である。本研究プロジェクトは、現在において、また過去においても大きな問題であり、企業会計の宿痾とも言うべき不正会計関連する諸問題について歴史的視角から国際比較分析に基づく研究を展開するものである。第2年目に当たる平成22年度は、それぞれの分担者が、第1年目に引き続き担当する領域における資料(史料)の収集を行うとともに、それらの文献について、既に読解・整理・分析が進んだものから、その成果を中間報告するという年度であった。すなわち、代表者の中野は1718世紀初頭のイギリスのバブル経済関連文献(一部オランダ関係を含む)の収集と分析を継続し、オランダ(ネーデルラント)担当の橋本はデン・ハーグの国立公文書館に出張し一次史料の収集に努めた。アメリカおよび日本を担当する清水は、Samuel Insull(公益事業会社の会計)について資料を収集した。研究の進展が比較的進んでいる杉田と三光寺のうち、イギリスを担当する杉田は、同国最古の株式会社であり、内部監査の起源もそこに見出されるロンドン東インド会社の監査に焦点を当て、出資者による監査が経営陣の不正疑惑に直面した時にどのような役割を果たしたのかについて、当時の議事録や会計報告書などに基づき検討し、その成果として、Discussion Paper(広島経済大学、No.42)を刊行した。他方、フランスを担当する三光寺は、18世紀初頭のフランスにバブル的な株式投機を引き起こす要因を作ったJohn Law(16711729)の会計倫理の検討を行い、とりわけ本年度は、この問題に深く結び付くインド会社(Compagnie des Indes)における収支予測に焦点を当てその変遷を考察した。なお、資料(史料)に関しては、国内のみならず、Bibliotheque Nationale de France(国立図書館、フランス)等にて会計記録を中心とする一次史料も収集した。また、その成果の一部を日本会計史学会第29回大会で報告し、『日本会計史学会年報』に投稿を行い査読付論文としてアクセプトされ、本年度号に掲載予定である。来年度(平成23年度)は本研究プロジェクトの最終年度であり、研究代表者と研究分担者の各々が研究成果を雑誌論文において公表するとともに、それぞれの研究成果の比較研究を行って、その共通性と特殊性を分析し、不正会計の歴史的重要性と現代の会計に対する知見と含意を集約して最終報告書としてまとめることとしている。最終年度はそれぞれの研究者が,各自のテーマをまとめ上げ,最終報告に向けて活動を行うという年度であった。研究代表者の中野は,古典的バブルの一つに数え上げられる18世紀前半に起こった南海泡沫事件について史料集を行い,その成果を「18世紀英国の金融不祥事と会計監査-「南海の泡沫」(1720)とスネルの「監査報告書」-」にとりまとめた。バブル崩壊後に提出された「監査報告書」を検討し,それが被疑者たる経営者を擁護するという役割を担うものであり,会計士という職業に対するネガティブな関与が古くから存在していたことを明らかにした。研究分担者の橋本は,前年度に引き続き,平成24年2月にオランダ国立公文書館に出張し関係史料の収集を行った。連合東インド会社とチューリップバブルの直接的関係は見出せなかったものの,株式会社の嚆矢たる同社において,会計不正がその初期から問題となっていたことを見出すことができた。

現在,本研究課題の研究成果の一部として,「株式会社の生成と会計不正(仮題)」と題する論文を,本年9月発刊予定の『商経論叢』(近畿大学)第59巻第1号に掲載すべく執筆中である。研究分担者の清水は,前年度に引き続き大恐慌に端を発するアメリカの会計規制の中で忘れられがちな公益事業会社の会計問題について史料の収集を行った。現在,「会針不正と1935年公益事業会社持株会社法(仮題)」と題する論文を,本年8月刊行予定の『国民経済雑誌』第206巻第2号に掲載すべく執筆中である。研究分担者の三光寺は過年度に提出した論文(「18世紀初頭フランス東インド会社の再建と収支予測の変遷」)の査読が完了し,ジョン・ロー・システム崩壊後のインド会社の再建についての論考が公刊された。また,研究者の杉田はイギリス東インド会社の内部管理の問題を,「資料:ロンドン東インド会社における棚卸資産評価の実態-1664-1713年の会計帳簿を対象として-」として刊行した。
作物の形態制御に関するIn vivoとIn vitroの比較研究

イネについて、in vivoにおける受精胚の発達様式と、in vitroであるカルスの再分化過程を詳細に比較したが、in vitroでの不定胚形成は認められなかった。アブサイシン酸(ABA)や高濃度の糖はカルスの再分化を促進した。数種イネ科作物を異なった土壌水分条件下で生育させ、根の形態を比較した結果、乾燥条件下で皮層内厚壁組織の発達が顕著であった。+ABAやブラシノライドがイネ科作物やマメ科牧草の老化種子の発芽促進効果を持つことを明らかにした。熱量計を用いて種子の活性を迅速かつ非破壊的に判別する方法を開発した。高温・乾燥などの異常環境下で生育させたイネの生殖器官に現れる形態異常を明らかにし、ジベレリン(GA)とABAの関与を推察した。イネの花粉と葯内緒組織の発達過程を調べ、タペ-ト肥大が発生する際には、当初は小胞子の細胞も活性化することを明らかにした。リンゴの胚珠内胚培養、葯培養からの不定胚発生、葉カルスからの再分化について最適条件を明らかにした。またリンゴ台木マルバカイドウの胚珠内胚培養を行い、高蔗糖濃度の培地で胚の生長が起こり、GAを含む培地に移すことにより実生を得ることができた。イネカルスやダイズ懸濁培養からプロトプラストを分離し、電気的に融合させ、融合過程の微細構造を明らかにした。レ-ザ光による植物細胞への色素導入を行い、生細胞に色素が導入されていることを確認した。マツバボタンの緑色カルスにおける葉緑体のグラナ構造を観察し、カルス内に維管策鞘が分化するとそこではグラナ形成が抑制されることを明らかにした。シコクビエのジャイアントド-ムからの花芽形成に成功した。またジャイアントド-ムとバミュ-ダグラスの体細胞胚の微細構造を明らかにした。Nicotiana glutinosaのカルスより分化能を持つ細胞のみを分離して継代培養することに成功した。このカルス系統の組織構造と遊離アミノ酸含量の特徴を明らかにした。最近バイオテクノロジ-に関する研究で不定胚発生がイネ科作物にも見られるとされている。真に不定胚が存在するか否か明らかでない。それ故に、In vivoとIn vitroの形態形成の比較が必要となり、本研究をすすめている。側根における異型性の発現に対する地上部の関与を、インタクト植物の種子根と根端培養系で調べた結果、異型性は根固有の性質であるが、L型とS型側根の発生割合には地上部の関与が強いことを認めた。穂ばらみ期のイネの穂を10°C冷暗室で30日間処理しても、小胞子中期以後の細胞の一部は少くとも1ヶ月間生存できた。小胞子母細胞から成熟花粉にいたるまで、これらの細胞は葯室内においてタペ-ト層付近に存在したが、小胞子後期には小胞子細胞がタペ-ト層に押しつけられたような状態になった。ストレス環境下における生殖器官形成の変動に規則性があり、両極性ストレス要因(低温と高温、冠水と干ばつ)下で変動に共通性が認められた。また、ストレス環境下で内生ジベレリン等の変動があった。イネ種子の発芽時の微小熱量を測定したところ、発芽活性の高い個体は発生熱量が多かった。

シコクビエのジャイアントド-ム低窒素・高サイトカイニンの条件で多数の花芽を形成し、ジャイアントド-ムから直接multiple tloralbudが形成した。さらに、本植物の緑色カルスを誘導したところ、カルス塊はド-ム状をなし、小型の葉緑体を含んでいた。Nicotiana glntinosaのカルスを培養して2つのcell lineを得た。大きな集塊は倍地を変えると緑化し、幼芽を形成したが、小さな集塊はカルス増殖のみであった。両cell lineの可溶タンパクに差異があった。リンゴの矮性台木Mg樹から花叢を採取し低温処理をしたところ、分離期のものは胚形成がよくなかった。イネカルスからプロトプラストを分離し、電気的に細胞融合したところ、大きな融合体の中にもとのプロトプラスが球型のままで存在することが認められた。最近,植物培養組織または培養細胞を用いた研究で,不定胚の発生がイネ科作物にも形成されるといわれている。しかし,真に不定胚が存在するか否かは明らかでない。それ故にIn vivoとIn vitroの形態形成の比較が必要となり,本研究をすすめている.インタクト植物と培養根における根系形質の発現の個体間変異を比較した結果,前者で小さくなることを認め,根の形質発現に対する地上部の形態制御効果を認めた.しかし,暗黒下のめばえと,明条件のものとを比較すると,明らかに後者で変異は小さくなり,根の形態制御に対する地上部の働きには,光が必須のものであることを確認した.異常高温下におけるイネの内生ジベレリンは,高温により発育抑制を受けた穂では減少した.黄化萎縮病イネに発生する小穂の形態変化は,遺伝子突然変異による形質転換と類似し,茎頂の構造生理と形質発現に両者の共通性を認めた.6年間室温で貯蔵したオマセコムギをブラシノライドとフィガロンの両者で処理すると,64%の種子が正常に発芽した.種子1ヶ体づつの発芽時の発熱量を測定することにより,種子の活性を定量化することができた.リンゴの台木マルバカイドウの培養シュ-トの葉を用い,これから誘導したカルスからの高頻度の再分化条件を明らかにした.また,リンゴ矮性台木の胚珠起源のカルスから再分化能の高いカルスを選抜した.シコクビエジアイアントド-ムには,クチクラ層が発達した均質な組織構造の表皮系が認められた.マツバボタン幼植物から緑色のカルスを誘導した.この内部には仮導管が多数分化していた.Nicotiana glutinosaの再分化能の高い細胞株の代謝生理的特性を明らかにし,またプロトプラストからの再分化系の確立をおこなった.暗処理レタス子葉のプロトプラストと明条件のプロトプラストを電気融合し培養した.クロロプラストは細胞中心部への集中傾向があった.以上のようにin vivoとin vitroの系の比較をした.イネカルス表面を走査電顕で調べた後再固定し、組織観察する方法を確立したが、in vitroでの不定胚形成は認められなかった。In vivoの受精胚では、開花4日後で子葉鞘が観察され、茎頂部分が定まることを明らかにした。数種作物を異なった土壌水分条件下で生育させ、第1節根における皮層内厚壁組織の発達を調べた結果、何れの種でも乾燥条件下で向頂的発達が優れることを認めた。+アブサイシン酸(ABA)処理は水稲およびマメ科牧草老化種子の発芽を促進した。±ABAは効果が弱く、-ABAが+ABAの作用を弱めているものと推察した。組織内珪素とABA含量を簡便に測定する方法を開発し、生殖器官形成の環境・遺伝的変異の発生機構を、茎頂の構造生理の面から解明する端緒を得た。
16世紀から現代の中国江南地域における医療と環境をめぐる社会史

16世紀以降、江南地方は、開発にともなう人口過密化と生態環境の変化によって、断続的な疫病の流行を経験し、今日に至っている。中国の伝統医学は江南の自然環境を重視する理論の創出によって対処し、近代以降も伝統医学は西洋医学を参考にする形で革新を遂げている。また、江南の風土病と言える住血吸虫病に対して、近代日本は国内での疫学研究の成果を中国に適用する形で政治的影響を行使しようとした。伝統医学の革新と継承、感染症の連動とそれへの社会的対応の問題を東アジア規模で考察することが重要である。16世紀から現代に至る中国江南地域における医療とヒトをめぐる諸相の長期的変容を、生態環境および社会環境の変化との関連において考察する本研究の初年度では、まず研究代表者と分担者がそれぞれ個別テーマに関する文献および史料収集を行った。帆刈は、中国史上における医学地理、生気象学に関する文献を収集し、また江南地域の医療社会史の研究状況に関して上海の研究者と意見交換を行った。飯島は日本住血吸虫病に関する史料収集、現地調査などを国内および中国にて行い、成果の一部を2005年11月の東洋史研究会大会において報告した。また、東郷は、江戸期の伝統医学文献のデータベースから温病学関連文献を抽出し、中国における温病学との関係について基礎的な研究を行った。また、学術交流としては、2006年1月に東京で開催された国際ワークショップ「歴史的視点から見た東アジアの伝統医学」("Traditional Medicine in East Asia from a Historical Perspective")に代表者と分担者が参加。韓国・台湾の著名な医学史研究者の参加のもと、東アジアにおける伝統医学の歴史研究に関する研究発表、および意見交換を行った。さらに東郷は、国際東洋医学会(International Conference of Oriental Medicine・韓国大邱2005年10月)に参加し、朝鮮半島における温病学説の受容と展開について意見交換を行った。研究二年目にあたる18年度は、昨年度に策定した研究計画にもとづき、研究代表者および分担者がそれぞれ個別テーマに関する資料調査を行い、また学術会議などにおいて研究報告を行った。帆刈は、引き続き国内外において、医療社会史関係の文献を収集し、さらに上海および香港の研究者との間で医療社会史に関する情報交換をはかった。飯島は、昨年度に引き続き、日本住血吸虫病対策関係の基本的な資料の収集につとめた。そして、上海や台湾において、医療史関係の文献収集につとめ、あわせて同地の研究者との意見交換を行った。東郷は、北京において江南地域の医学資料について調査を行い、また鍼灸分野における老中医の医療技術伝承に関して、情報の収集を行った。研究成果発表、学術交流として、帆刈と飯島は2006年8月、中国南開大学主催による医療史の国際会議に参加し、それぞれ研究成果を発表し、学術交流を行った。東郷は、2006年9月、日韓科学史セミナーに参加、「東アジアにおける統合医療とWHO Project」という発表を行った。2007年3月、医療社会史班主催で連続研究会を開催。東郷が「中国伝統医学における技術の伝承と国際標準化の今」を報告、討論を行った。このように、中国医療社会史研究において、東アジアにおける研究交流のネットワーク形成のための土台づくりを着実にすすめることができた。三年目にあたる19年度は、これまでの研究・調査をもとに論文や学会報告などの成果として公表し、また国際会議を主催し、他の研究者と交流を深めることに重点を置いた。具体的には、2008年3月に国際シンポジウム「東アジアにおける近代化と伝統医学の変容:環境変化とグローバル化の視点から」を大阪で開催し、台湾・韓国・アメリカ・ベルギーから医学史の気鋭の研究者を招き、研究交流を行った。生化学の最新の成果を参照したものや鍼灸の多様性を歴史的に探究したものなど、斬新な研究発表がなされた。総じて東アジアにおける伝統医学の歴史を長期的な視野から、環境や社会との関係から捉えることの重要性が確認された。個別の研究としては、帆刈は、20世紀初頭における医学の近代化過程において、中医薬知識が一定程度の影響を有したことを当時の雑誌の分析を通して検討した。また、中医薬と地域との関わりについての調査研究を行った。飯島は、引き続き「感染症の流行と環境変化の関係」に関する研究を進め、継続して感染症の歴史データの整理を行った。また上海において現地調査を行い、台湾から研究者(鄭麗玲、欧素瑛)を招聘して関連の研究会を開催し、研究交流をはかった。東郷は、18年度に続いて中国の鍼灸分野の老中医達の臨床技術をビデオ記録し、その分析を行った。併せて、19世紀から20世紀に至る中医臨床技術の伝承のあり方について一部分析を行った。そして、スウェーデンにおける中国医学関連文献について前年度に引き続き、資料蒐集と分析を行った。平成20年度は、特定領域研究全体の重点項目の一つとして挙げられた、現地調査部門の企画による医療・環境に関する国際シンポジウム「環境との対話-

東アジア海域世界と疾病-」を2008年12月21日に開催し、その中心的な役割を担った。この会議においては、他研究班(海域地域班、茶文化班)の関連する研究者や海外の研究者との討論や意見交換を通して、領域全体としての研究の質的一体化に貢献した。また、主に自然科学の分野から環境の問題を研究している総合環境学研究所の研究者との学術交流の構築を通して、より広い視野から中国の環境を研究する可能性が開かれた。具体的には熱帯感染症の研究プロジェクトとの協力により、疫学的な視点からの検討が行われた。個別研究では、帆刈は引き続き、中国伝統医学における環境認識の変容を江南地域について研究調査を行った。とくに医学理論における南北の地域的差異の認識を問題にした。また、飯島は、江南における日本住血吸虫病の流行と環境変化の関係を引き続き調査した。とくに江蘇省の各県レベルでの状況を確認し、データの整理を行った。その研究成果は英文の論文として発表した。東郷は、19世紀から20世紀に至る中医臨床技術の伝承のあり方について分析を進めてきたが、新設大学への異動のため、8月末に分担者を辞退した。最終年度にあたる21年度は、引き続き調査研究を進めつつ、これまでの研究をもとに学術会議での発表など研究成果を公表し、学術交流の一層の促進に重点をおいた。帆刈は第54回国際東方学者会議(5月15日)に参加し、特定領域研究の研究活動の一環として開設されたパネルにおいて、コメンテーターとして、海外の研究者と研究交流をはかった。また、中国医学における環境認識に関して、中国医学の「南北問題」という視点を提起し、移住と環境変容をめぐって地域性がどのように顕在化してきたかを問題にした。飯島は、総合地球環境学研究所の研究プロジェクトと共同して、国際ワークショップ「雲南の環境と疾病」の企画を中心的に担い、自然科学分野からの知見との比較・融合を試みた。さらに江南地方の感染症について、聞き取り調査を実施した。そして、これまでの研究を一般向けの概説書として公刊した。東郷は、近代(特に戦後)の日本、中国における中国伝統医学理論および実践の展開について検討した。また、これに関連して現代中国老中医の臨床実践およびその基礎となる理論について、WHOによる伝統医学の標準化の展開について研究した。
オーラルフレイルのバイオマーカーの探索と補綴治療戦略

アンケート調査でフレイル得点もオーラルフレイル得点も年齢とともに一様の増加傾向を示した.歯が悪いこと,唾液,食べこぼしがフレイル得点に関係していた.食生活と摂食行動は40歳以降で適正な方向に推移した.オトガイ舌骨筋断面積と開口力,舌圧,嚥下の持続時間に比例し,筋量と咀嚼・嚥下機能との関連性が示された.咬合支持喪失群においては,速筋化が見られた.生体電気インピーダンス分析で,上腕と咬合力に相関が,舌圧は認められなかった.以上の結果,筋量関係が最も有効であり,バイオマーカーとしても筋量を示す指標が重要であり,当初予想した速筋,遅筋等の運動速度については指標になり得る知見は得られなかった.本研究の目的は、疾病の予備段階(虚弱、フレイル)の前段階にオーラルフレイルがあるという仮説に基づき、オーラルフレイルをより定量的に、より客観的に示すバイオマーカーを設定することにある。そこで、オーラルフレイルのバイオマーカーの予備的探索のために、「フレイル」関連の質問項目、オーラルフレイル関連の質問項目、食行動関連の質問項目を含めた31項目からなる質問票を作成し、壮年者から高齢者を対象に横断的な調査を行い、食行動、フレイル、オーラルフレイルの状況,相互関係から、オーラルフレイル関連の有益なバイオマーカーとなりうる項目の探索を行っている。また,下顎皮膚上に設置した超音波診断装置によって、オトガイ舌骨筋量とその運動速度を測定する方法を確立し、壮年期から高齢期からの嚥下関連筋の動態を検討するとともに、口腔サルコペニアの状況を調査した。その結果、オトガイ舌骨筋断面積と開口力が比例し、筋量と嚥下機能との関連性が示された。しかし、運動速度については現在、関連性が認められていない。フィールドの検査として、皮下脂肪厚,握力、歩行速度、咬合力、口腔乾燥度、嚥下音測定を高齢者を対象に測定を開始した。これに加えて、MRIによる筋の筋線維タイプ(速筋/遅筋比)の推定法および発音嚥下における運動の時系列分析の可能性について,予備的調査を行っている。現在のところ、研究進行中であり、速筋/遅筋比を推定する方法を検討し、オーラルフレイルの状態を推定する予定である。オーラルフレイルという新しい概念のバイオマーカーを設定するためには、もう少しより臨床的な面からその特徴を把握する重要性を鑑み、質問表による調査を加えた。その結果を元にバイオマーカーを設定することにより,より有意義なマーカーを見いだせることを期待している。併せて、MR撮像が病院の状況により使用が難しい期間があったため、より容易に撮像できる超音波診断装置による嚥下関連筋の筋量測定を加えた。いずれの研究も順調に進捗していると考えられる。フィールド研究も測定を開始しているものの、まだ被験者数はわずかであり、急ぐ必要がある。しかしながら、当初の実験計画である筋線維タイプ(速筋/遅筋比)からのフレイル評価の研究は,測定・分析方法が難解であり、また上記を加えた分、少し遅れている。現在試行錯誤で基礎的な検討を進めており、今後早急にヒトを使った研究に着手する予定である。本研究の目的は,疾病のフレイルの前段階にオーラルフレイルがあるという仮説に基づき,オーラルフレイルをより定量的に,より客観的に示すバイオマー力ーを設定することにある.その仮説がまず正しいかを1214名を対象としたアンケート調査を用いて検討した.フレイル関連項目として,体重,疲労感,握力,活動量,歩行速度に関する5項目を,オーラルフレイル関項目として,咀嚼や嚥下機能に加えて,残存歯,唾液,舌の機能に関する7項目を,食行動としては,「食認知」「食生活」「摂食行動」各6項目を設定した.フレイル関連項目は,5060代で一旦減少した後,再度上昇するパターンを示し,50代,60代,70代においては男性よりも女性の得点が有意に高い値を示した.筋力低下,歩行速度の低下を示す得点は年齢の上昇とともに高くなる傾向が認められた.オーラルフレイル関連項目は,男性で50代,70代,90代でわずかな得点の減少はあったものの,年齢の上昇とともに一様の増加傾向を示した.とくに歯が悪いこと,唾液,食べこぼしにはその傾向が強く認められた.食行動については,「食認知」の得点はほぼ年齢変化は認められれず,「食生活」「摂食行動」は, 40歳以降で徐々に減少し,適正な食生活の方向に推移した.超音波測定と各種口腔機能測定によって,オトガイ舌骨の筋断面積と開口力,舌圧,嚥下の持続時間がそれぞれ比例し,筋量と咀嚼・嚥下機能との関連性が示された.筋線維タイプ(速筋/遅筋比)はサルコペニアは速筋から遅筋化へ,廃用性萎縮は遅筋化から速筋化に変位すると言われているが,咬合支持喪失群においては,速筋化が見られた.生体電気インピーダンスを用いた体成分分析において,体成分と握力との関係を調査した.筋関係の評価とフレイル・オーラルフレイルとの関係が示され,オーラルフレイルのバイオマーカーについても筋評価が重要であることが示唆された.アンケート調査でフレイル得点もオーラルフレイル得点も年齢とともに一様の増加傾向を示した.歯が悪いこと,唾液,食べこぼしがフレイル得点に関係していた.

食生活と摂食行動は40歳以降で適正な方向に推移した.オトガイ舌骨筋断面積と開口力,舌圧,嚥下の持続時間に比例し,筋量と咀嚼・嚥下機能との関連性が示された.咬合支持喪失群においては,速筋化が見られた.生体電気インピーダンス分析で,上腕と咬合力に相関が,舌圧は認められなかった.以上の結果,筋量関係が最も有効であり,バイオマーカーとしても筋量を示す指標が重要であり,当初予想した速筋,遅筋等の運動速度については指標になり得る知見は得られなかった.「フレイル」、オーラルフレイル、食行動の質問票から、オーラルフレイルの状態をより明らかにし、その状況をより明確にするバイオマーカーを推定する。さらに、MRIの各種強調画像、口腔顎顔面の運動計測データにより筋線維タイプ(速筋/遅筋比)を推定する方法を探索する。超音波とMRIによる筋量測定、およびフィールドデータの測定によるフレイルとオーラルフレイルの測定を平行して行う。併せて、口腔内の補綴の状況等を検討し、補綴治療の臨床決断について確立する。オーラルフレイルのバイオマーカーの予備的探索のために、現在は質問票による調査を行っており、生体インピーダンス解析装置の購入には至っていないため。また、MR撮像が病院の状況により使用が難しい期間があった。したがって現在は超音波診断装置による嚥下関連筋の筋量測定を行っており、MRI画像解析ソフトの購入には至っていないため。次年度では、今年度の予備的探索結果をもとに、超音波とMRIによる筋量測定、およびフィールドデータの測定によるフレイルとオーラルフレイルの測定を平行して行うため、生体インピーダンス解析装置、MRI画像解析ソフトを追加購入予定である。
TDP-43の凝集体形成が与える転写後制御への影響の解析

TDP-43は筋委縮側索硬化症や前頭側頭葉変性症の患者脳で不溶化.リン酸化し、凝集体を形成して発症に寄与すると考えられている。今回我々は細胞障害を引き起こす強度の酸化ストレスはTDP-43を不可逆性に不溶化.リン酸化し、翻訳停止したリボソームとのmRNAを介した結合にも変化をもたらすことを見いだした。また、今回の結果ではTDP-43はストレス環境下でmRNA安定化や細胞生存に関与していた。これらの結果よりTDP-43はストレス下で転写後のmRNAや翻訳機構の機能に関与していることが示唆された。TDP-43は筋委縮側索硬化症や前頭側頭葉変性症の患者脳で不溶化、リン酸化し、凝集体を形成して発症に寄与すると考えられている。そこで今回我々はTDP-43の凝集体形成が細胞障害や転写後の翻訳制御にどのように関与しているかを研究した。TDP-43はストレス刺激によって不溶化、リン酸化することが知られているが、今回我々はストレス刺激の強度の違いにより、これらのTDP-43の生化学的特徴にも違いがみられることを見いだした。細胞障害を引き起こすストレス強度ではTDP-43の不溶化が不可逆性となり、リン酸化が生じるが、細胞障害を引き起こす閾値以下の弱いストレス条件下では不溶化は可逆性の一過性のものであり、リン酸化も生じていなかった。また、ストレス条件下でのTDP-43の翻訳機構への関与も調査した。ポリソームプロファイル解析で、TDP-43は上述の弱いストレス条件下では翻訳停止したリボソームとmRNAを介して一過性の結合をしていた。しかし、ストレス強度があがるとこの一過性の結合にも変化が生じることを見いだした。また、TDP-43がノックダウンされた細胞を使用した実験では、TDP-43はストレス環境下での翻訳停止したmRNAやポリA+RNAの安定化や細胞生存に関与しているとの結果が得られた。これらの我々の結果より、TDP-43はストレス下では翻訳の場であるポリソームに結合することと、転写後のmRNAの安定化や細胞生存に関与していることが示唆された。筋委縮性側索硬化症や前頭側頭葉変性症の患者脳内の凝集体の主要構成タンパク質として同定されたTDP-43 (TAR DNA binding protein)は主に転写やスプライシング、翻訳などの遺伝子発現の調整に関与していると考えられている。上記神経変性疾患では酸化ストレスなどの環境要因が病態機序に関与していると考えられている。培養細胞に亜ヒ酸ナトリウムによって酸化ストレスを与えると、TDP-43はストレス顆粒と呼ばれる凝集体に局在した。ストレス顆粒はストレス条件下における翻訳抑制を司り、mRNAの安定性や細胞障害下での遺伝子発現の調整に関係していると考えられている。そこで定常環境下とストレス環境下の細胞のポリソーム解析を行い、翻訳機構との関連を調査した。定常状態の細胞内ではTDP-43は翻訳機構に関連していなかったが、ストレス環境下の細胞内でTDP-43は翻訳が停止されているリボソームと結合していた。RNaseによりこのTDP-43-リボソーム結合は部分的に切断されたことから、この結合形成にmRNAが関与していることが想定された。またTDP-43はストレス環境下では界面活性物質に不溶性となる性質を獲得するが、ストレス刺激を与える時間が細胞毒性を示さない短時間である場合は、この不溶性は一時的な可逆性のものであった。反面、神経毒性を示すような長期のストレス暴露はTDP-43の不溶化を非可逆性なものにした。この細胞内ではRNase処理で切断できるTDP-43-リボソーム結合の割合は減少しており、TDP-43の凝集体形成により翻訳機構に影響を与えていることが想定された。これらの我々の結果はTDP-43はストレス環境下で翻訳機構に直接的に働きかけるストレス応答性機能を有するたんぱく質であることを示しており、上記神経変性疾患の病態機序を理解するうえで重要な示唆に富むものと考えられた。神経変性疾患関連タンパク質であるTDP-43の現在までに報告されていない新規の特性であるストレス応答性のTDP-43-リボソーム結合を同定した。これはTDP-43がストレス環境下で機能するRNA-結合タンパク質であり、翻訳機構に直接的に働きかける可能性を強く示唆するものであり、筋委縮性側索硬化症や前頭側頭葉変性症の神経変性過程における病態機序を理解する上で重要な所見であると考えている。またさらにTDP-43の非可逆性の不溶化を引き起こす環境下では、TDP-43-リボソーム結合に変化が生じることを明らかにした。不溶化形成の過程の詳細とそれが与える影響を細胞レベルで明らかにしたという意味において意義深い知見であると考えている。

ここまでに得られた結果はTDP-43の凝集体形成が転写後制御に与える影響を同定するという本研究のテーマに沿っており、現在までに報告されていない新しい現象をとらえられたという点からみても、達成度は高いと評価できる。本研究の最終的な目標はTDP-43が翻訳などの転写後制御にどのように関わり、それが最終的に細胞へどのような影響を与えるのかを知ることで、筋委縮性側索硬化症や前頭側頭葉変性症の神経変性疾患の病態機序を解明していくことである。そこで今回得られたストレス応答性のTDP-43-リボソーム結合が実際にどのような影響を細胞の翻訳機構に与え、それにより細胞がどのように変化するのかを実験により明らかにすることを目標とする。そのため上記ストレス環境下でTDP-43の遺伝子発現の抑制細胞におけるmRNAの安定性や細胞生存率がどのように変化するのかをポリソーム解析やLDH細胞毒性アッセイなどを使用して調査する。またTDP-43のドメイン削除遺伝子の発現細胞などを使用して、これらの機能変化に寄与しているTDP-43内のドメイン部位を同定することで、相互作用物質の同定につなげられる知見を得ていく予定である。これらの結果によりさらに深い疾患の病態機序への理解が得られるものと考えている。上記研究に必要な抗体や試薬など、実験に実際使用する消耗品の購入に使用する予定である。またこれらの実験によって得られた知見を発表するために、論文投稿や学会参加を予定している。論文作成に必要な備品の購入、雑誌への投稿、掲載にかかる費用や、学会発表のために参加費、旅費など、研究成果を報告していくための費用にも使用する予定である。
心血管系力学的機能解析と脳血流計測による胎児白質傷害発生メカニズムに関する研究

周産期脳傷害の原因に胎児・新生児の脳低還流が関与していることが明らかされつつある。その原因として体循環の血圧低下、脳血管抵抗の増大が考えられ、我々は前者に深く関わる胎児心機能低下に注目し、胎児に大量急速輸血を行い、それが胎児の心機能に及ぼす影響について検討した。妊娠135日の妊娠ヒツジを対象とし、ハロセン麻酔下に帝王切開し胎児の上半身を子宮外に露出させた状態で、頚動脈より左心室腔にコンダクタンスカテーテルおよび圧トランスジューサを先端が心尖部にくるように、超音波で調節しながら挿入した。採血用に右腋窩動脈に、輸血用に右頚静脈にそれぞれカテーテルを挿入した。麻酔をハロセンからケタミンに切り替え状態が安定したところで、インヒュージョンポンプを用いて20分間に200mlの血液を輸血し、左心室の圧容量曲線を連続的に記録した。輸血によりヘモグロビン値は有意に増加したが、血液ガス所見には有意な変化は見られなかった。左室の拡張末期圧は上昇するのに対し、拡張末期容量は有意に減少した。下大静脈からの同様な輸血では、左室の拡張末期容量は有意に増加することが報告されている。本実験では上大静脈からの輸血を行い、逆の結果が得られた。(1)胎児では下大静脈の血行は主として、卵円孔を通って左室に向かうのに対し、上大静脈の血行は主として右室に向かうこと、(2)胎児には心臓周囲の組織のコンプライアンスが低く拡張しにくいこと、(3)心室中隔は左右の心室が共有しているため、その位置の変化により両心室は互いに影響を及ぼすこと、などが結果の違いに関与しているものと思われた。胎児の心臓は周囲のコンプライアンスの高い組織により保護され、循環系の中に複数の左右短絡路を有することから、拡張しにくいため、本実験で行った急性輸血負荷は胎児心機能の低下および脳傷害をもたらすには十分でないことが示唆された。本年度は胎児に対する負荷として大量輸血に注目し、ヒツジ胎仔の左心室内にコンダクタンスカテーテルを留置することにより、大量輸血が胎児の心機能に及ぼす影響について検討した。胎齢135日のヒツジ胎仔5頭を対象とし、ハロセン麻酔下に帝王切開し胎児の上半身を子宮外に露出させた状態で、頚動脈より左心室腔にコンダクタンスカテーテルおよび圧トランスジューサを先端が心尖部にくるように、超音波で調節しながら挿入した。胎児心臓では輸血のルートにより左心室に及ぼす影響が異なることが明らかとなった。(1)胎児では下大静脈の血行は主として、卵円孔を通って左室に向かうのに対し、上大静脈の血行は主として右室に向かうこと、(2)胎児には心臓周囲の組織のコンプライアンスが低く拡張しにくいこと、

(3)心室中隔は左右の心室が共有しているため、その位置の変化により両心室は互いに影響を及ぼすこと、などが関与しているものと思われた。周産期脳傷害の原因に胎児・新生児の脳低還流が関与していることが明らかされつつある。その原因として体循環の血圧低下、脳血管抵抗の増大が考えられ、我々は前者に深く関わる胎児心機能低下に注目し、胎児に大量急速輸血を行い、それが胎児の心機能に及ぼす影響について検討した。妊娠135日の妊娠ヒツジを対象とし、ハロセン麻酔下に帝王切開し胎児の上半身を子宮外に露出させた状態で、頚動脈より左心室腔にコンダクタンスカテーテルおよび圧トランスジューサを先端が心尖部にくるように、超音波で調節しながら挿入した。採血用に右腋窩動脈に、輸血用に右頚静脈にそれぞれカテーテルを挿入した。麻酔をハロセンからケタミンに切り替え状態が安定したところで、インヒュージョンポンプを用いて20分間に200mlの血液を輸血し、左心室の圧容量曲線を連続的に記録した。輸血によりヘモグロビン値は有意に増加したが、血液ガス所見には有意な変化は見られなかった。左室の拡張末期圧は上昇するのに対し、拡張末期容量は有意に減少した。下大静脈からの同様な輸血では、左室の拡張末期容量は有意に増加することが報告されている。本実験では上大静脈からの輸血を行い、逆の結果が得られた。(1)胎児では下大静脈の血行は主として、卵円孔を通って左室に向かうのに対し、上大静脈の血行は主として右室に向かうこと、(2)胎児には心臓周囲の組織のコンプライアンスが低く拡張しにくいこと、(3)心室中隔は左右の心室が共有しているため、その位置の変化により両心室は互いに影響を及ぼすこと、などが結果の違いに関与しているものと思われた。胎児の心臓は周囲のコンプライアンスの高い組織により保護され、循環系の中に複数の左右短絡路を有することから、拡張しにくいため、本実験で行った急性輸血負荷は胎児心機能の低下および脳傷害をもたらすには十分でないことが示唆された。
嚥下障害発生に関する中枢機構・神経支配・味覚の基礎的研究

本研究では生理学的手法を応用し、正常嚥下機能に焦点を絞って次のような多角的な研究を行い、嚥下障害発生の解明の一助たらんとした。1.自由行動および電気的に嚥下誘発が可能なウサギを用い、嚥下中枢とそれより上位の中枢、および咀嚼中枢との相互作用について実験を行い、非麻酔下の自然な動物における中枢間の相互作用について検討した。2.ウサギにおける嚥下関連筋の神経支配について電気生理学的実験を行った。嚥下時の喉頭挙上に働く最大の筋は甲状舌骨筋である。この筋の運動神経支配および働きを生理的・組織的側面より検索し、その支配と走行を従来の解剖学的所見との違いなどについてかなりの部分まで明らかにした。また、咽頭から食道への食塊移送に重要な役割を果たす咽頭食道接合部の内圧変化に関与する神経支配についても、新たに解明した。3.ラットにおける味覚の嚥下反射誘発に果たす役割に関して実験を行った。この実験では喉咽頭部粘膜を選択的に溶液刺激することにより、咽喉頭領域における各種味溶液による喋下誘発の比較を行うと同時に、礁下反射へのSubstance Pの関与や新たに脂肪酸への応答性などを明らかにした.4.出生直後から成熟までのウサギを用いて、咽喉頭部溶液刺激による嚥下誘発性め生後発達について明らかにした。5.小児を被験者として新たな観点から摂食嚥下機能の成長発育変化を解明した。最新の研究成果としては、カプサイシン投与が飲水行動に及ぼす影響、さらに一酸化窒素(NO)の反射性嚥下誘発への関与を解明した。本年度は自由行動および電気的に嚥下誘発が可能なウサギを実験動物として用い、嚥下中枢とそれより上位の中枢、および咀嚼中枢との相互作用を調べた。なお、ラットを用いて嚥下関連筋の神経支配ならび味覚の嚥下反射誘発に果たす役割についても一部検討した。その結果、以下の結論を得た。1.自由行動下で食物を咀嚼中のウサギの上喉頭神経を電気刺激した結果、単位時間あたりの嚥下の回数が増加した。下顎運動と筋電図をあわせて検討したところ、電気刺激により、食物を食べているときに起こる自然嚥下とほぼ同等の時間的パターンを有する嚥下を誘発できることがわかった。2.下顎運動と嚥下との相互関係についてそれぞれの回数や時間的関係にっいて検討した結果、両者の関係は単なる抑制関係ではなく、かつほぼ一定の時間的関係を持っていることかわかった。このことから脳幹に存在する咀嚼と嚥下それぞれのリズムジェネレーター間でinteractionがあることが示唆された。3.嚥下時の咽頭から食道への食物移送には、喉頭挙上と輪状咽頭筋の弛緩による咽頭食道接合部内圧の低下と,その後の輪状咽頭筋の収縮による内圧の上昇が生じる。内圧低下には反回神経が、内圧上昇には迷走神経咽頭枝が大きく関与していることを明らかにした。4.嚥下障害者に酸味刺激を与えると、嚥下誘発が促進するといわれている。この効果を実験的に検討したところ、酢酸刺激によって嚥下誘発回数が増加し、誘発までの潜時が短縮するという結果を得た。また、この効果は濃度依存性であり、酢酸ナトリウムでは効果が認められないことから、純粋に酸味刺激による嚥下誘発促進効果であることが明らかになった。次年度以降は、本年度の研究結果をもとにさらに詳細な研究を行う予定である。本年度はラットにおける嚥下関連筋の神経支配を詳細に解明する目的で実験を行った。

嚥下時の喉頭挙上に働く最大の筋は甲状舌骨筋である。この筋の神経支配および働きを生理的側面より検索し、その支配と走行を明らかにした。なお、ラットにおける味覚の嚥下反射誘発に畢たす役割についても実験を行った。1.嚥下時の咽頭から食道への食物移送は、喉頭挙上と輪状咽頭筋の弛緩による咽頭食道接合部の一過性の内圧低下と、その後の輪状咽頭筋の収縮による内圧上昇によって円滑に遂行される。喉頭挙上には甲状舌骨筋の収縮が大きく関与しくいるが、甲状舌骨筋の運動神経は迷走神経咽頭枝であることを切断実験により明確にした。さらに、迷走神経咽頭枝は輪状咽頭筋の自発活動と活動停止後の一過性バースト発火にも関与することを明らかにした。2.咽頭食道接合部の内圧変化に及ぼす効果を、神経切断前後の比較ならびに神経末梢端電気刺激によって調べたところ、迷走神経咽頭枝は内圧低下とその後の内圧上昇に関与すること、反回神経は声門閉鎖と同時に披裂軟骨を内転させることで内圧低下に関与することを明らかにした。3.嚥下障害者に酸味刺激を与えると、嚥下誘発が促進するといわれている。この効果を実験的に検討したところ、酢酸刺激によって嚥下誘発回数が増加し、誘発までの潜時が短縮するという結果を得た。また、この効果は濃度依存性であり、酢酸ナトリウムでは効果が認められないことから、純粋に酸味刺激による嚥下誘発促進効果であることが明らかになった。また、この効果にはSubstancePの関与が強く示唆された。次年度は、本年度までの研究結果をもとにさらに詳細な研究を行う予定である。本年度は、麻酔ラットを用いて嚥下関連筋の神経支配ならび味覚の嚥下反射誘発に果たす役割について実験を行い検討した。さらに、ヒト小児の咀嚼行動についても観察を行った。その結果、以下の結論を得た。1.嚥下時の咽頭から食道への食物移送には、喉頭挙上と輪状咽頭筋の弛緩による咽頭食道接合部内圧の低下と、その後の輪状咽頭筋の収縮による内圧の上昇が生じる。内圧低下には反回神経が、内圧上昇には迷走神経咽頭枝が大きく関与していることを明らかにした。2.嚥下障害者に酸味刺激を与えると、嚥下誘発が促進するといわれている。3.カプサイシン処置を行ったラットでは、飲水量が増加するという結果から、渇き感覚には咽喉頭部の無随神経、あるいは細い有髄神経が関与していることを明らかにした。4.麻酔ラットの舌咽神経咽頭枝は脂肪酸によく応答することを明らかにした。5.レプチンは脂肪細胞から分泌され、食欲の抑制やエネルギー代謝の増大を介して体脂肪量の調節、飢餓への適応をつかさどるホルモンである。Zucker fattyラットではレプチン静注により脂肪酸応答が抑制されるが、Wistar fattyラットでは逆に応答抑制が認められなかった。このことから、同じ肥満を呈する動物であっても、レプチン応答には種差のある可能性が示唆された。6.ヒト小児を被験者に、咀嚼回数などについて発育変化を明らかにした。
消化管腫瘍における変異GNASの解析

十二指腸における胃上皮化生、異所性胃粘膜および腺癌に高頻度の活性型GNASおよびKRAS変異を同定した。腺癌ではGNAS変異は胃型上皮形質を示す腫瘍に特徴的であり、胃上皮化生、異所性胃粘膜がこれらの胃型腺癌の前駆病変である可能性が示唆された。家族性大腸腺腫症に伴う胃病変として幽門腺腺腫が提唱されているが、この病変がGNAS変異を含む特徴的な遺伝子変異を有しており、疾患背景が異なるにもかかわらず、散発例と同様の分子異常を有する病変であることが明らかになった。大腸鋸歯状腺腫において低頻度のGNAS変異の存在を確認するとともに、特徴的な変異としてRSPO融合遺伝子およびRNF43変異を同定した。十二指腸における胃上皮化生、異所性胃粘膜および腺癌計177病変を対象に遺伝子変異解析を行い、活性型GNAS変異を胃上皮化生の41%、異所性胃粘膜の28%、腺癌の17%に同定した。また、活性化型KRAS変異を胃上皮化生の26%、異所性胃粘膜の2%、腺癌の37%に認めた。さらに、腺癌を対象として免疫染色を行ったところ、活性化型GNAS変異を有する腫瘍は全てMUC5ACをびまん性に発現していた。MUC5ACは胃腺窩上皮に特徴的な分泌型粘液であり、正常の十二指腸では認められないこと、さらにGNAS変異を共通の遺伝子異常として有している事から、胃上皮化生および異所性胃粘膜は十二指腸における胃型腺癌の前駆病変である可能性が示唆された(Br J Cancer. 2015 112, 1384-1404).近年、幽門腺腺腫が家族性大腸腺腫症(FAP)における胃病変として新たに提唱されている。しかしながら、散発性の幽門腺腺腫は炎症や萎縮を伴う粘膜に発生するのに対して、FAPに伴う幽門腺腺腫は炎症や萎縮の無い粘膜に発生するという異なる背景を有している。本研究ではFAPに伴う胃病変を対象として遺伝子変異解析を行い、活性化型GNAS, KRAS変異を高頻度に同定し、これら異なる背景に伴う幽門腺腺腫が共通の遺伝子変異を有している事を明らかにした。さらに、FAPの原因遺伝子であるAPCの変異を解析し、散発性およびFAPに伴う幽門腺腺腫がともに高頻度に不活化型変異を有している事を示した(Histopathology. in press)。以前の研究で234例の大腸腫瘍においてGNAS変異を検索し、GNAS変異は絨毛腺腫に高頻度かつ特異的に認められるという結果を得ていた(Yamada M. J Pathol. 2012)。しかし、その後、変異GNASが鋸歯状腺腫の一部(8%)にも認められるという報告がされた(Wiland HO. 4th Am J Surg Pathol. 2014)。今回、より多くの症例でこの所見を確認するため、70例の鋸歯状腺腫を含む計188例の大腸ポリープを対象として、次世代シークエンサーを用いた変異検索を行った。GNAS変異は8例(11%)の鋸歯状腺腫で認められたが、過形成性ポリープ、sessile serrated adenoma/polyp、管状腺腫、管状絨毛腺腫では全く認められなかった。これらの結果から、GNAS変異は大腸腫瘍において絨毛腺腫のみならず、低頻度では有るが鋸歯状腺腫の一部にも認められる事が確認された。大腸ポリープのうち鋸歯状病変は高頻度に胃型粘液の発現を伴っており、他の消化器においても胃型粘液を発現する病変にGNAS変異を多く認める点から、興味深い所見と考えられた。GNAS変異とその他の遺伝子変異の相関について明らかなものは認められなかった.また、この変異検索の中で、鋸歯状腺腫に特徴的な遺伝子変異として、PTPRK-RSPO3融合遺伝子およびRNF43の不活化型変異が存在する事を見いだした(Sekine S. J Pathol. 2016)。臨床検体の解析を中心として解析を進めており、特に大腸腫瘍を中心として新たな知見が得られている。昨年度までの解析で大腸ポリープのうち鋸歯状腺腫の一部にGNAS変異の存在することが明らかとなった。しかしながら、GNAS変異を有する鋸歯状腺腫は特徴的な形態やその他の臨床病理学的特徴を示さず、その腫瘍発生における意義は不明である。そこで、120例程度の鋸歯状腺腫を対象として、大腸発癌に関わる他の遺伝子の解析を並行して行い、GNASと他の遺伝子変異との相関の有無を確認することとした。現在までにこれらの検体で、RSPO融合遺伝子や大腸発癌の早期に関わる遺伝子の解析をおおむね終了している。また、この過程で新規のRSPO融合遺伝子を同定した(投稿中)。今後、GNAS遺伝子変異を有する鋸歯状腺腫が特定の分子病理学的特徴を示すかを検討し、何らかの特徴が認められた場合、その特徴が浸潤癌においても共通するかを検索する。また、異型を伴うSSA/Pの解析を行い、少数のGNAS変異陽性例を同定した。一方、通常型の管状腺腫や管状絨毛腺腫には全く変異が見られないことから、GNAS変異が鋸歯状病変に特徴的な変異である可能性が考えられた。その他の消化管におけるGNAS変異陽性腫瘍を用いて、病変内におけるGNAS変異の不均一性についての検索を行っており、特に腫瘍の進展との関連を中心として検討を進めている。

その他の遺伝子変異との関連から、多段階腫瘍発生におけるそれぞれの遺伝子変異の関与の違いを示唆する所見が得られている。十二指腸における胃上皮化生、異所性胃粘膜および腺癌に高頻度の活性型GNASおよびKRAS変異を同定した。腺癌ではGNAS変異は胃型上皮形質を示す腫瘍に特徴的であり、胃上皮化生、異所性胃粘膜がこれらの胃型腺癌の前駆病変である可能性が示唆された。家族性大腸腺腫症に伴う胃病変として幽門腺腺腫が提唱されているが、この病変がGNAS変異を含む特徴的な遺伝子変異を有しており、疾患背景が異なるにもかかわらず、散発例と同様の分子異常を有する病変であることが明らかになった。大腸鋸歯状腺腫において低頻度のGNAS変異の存在を確認するとともに、特徴的な変異としてRSPO融合遺伝子およびRNF43変異を同定した。臨床検体解析から、GNAS変異の消化器腫瘍発生における新たな役割を示し、これらを報告した。機能解析に関しても平行して進めている。臨床検体の解析においては発がん過程における関わりを明らかにする視点から、解析を進めていく。また、培養細胞を用いた機能解析についても平行して進めていく。病理学臨床検体解析を継続するとともに、平行して機能解析を進めていく。特に臨床検体解析においては、より後半は変異解析を用いて、GNASと他のがん関連遺伝子との関連について解析を進める。購入した物品の値引き等による差額および入荷の遅れのため生じた差額は少額で物品購入の結果の端数である。消耗品の購入に充当する差額は少額で物品費の一部とする。
サンゴを殺すテルピオス海綿の動態解析

サンゴを覆い殺すテルピオス海綿は、サンゴ礁の脅威であり、世界中のサンゴ礁でその拡大が懸念されている。一方、国内においては、分布や成長を始め情報が少ないのが現状である。本研究では、テルピオス海綿の国内における分布状況を蓄積し、また沖縄県瀬底島を拠点として、海綿の成長速度測定、共生シアノバクテリア・骨片・表面粒子の密度測定を行う。更に、様々な環境条件下(光量、栄養塩類、微量元素、餌等)にセットした水槽飼育実験により、テルピオス海綿の成長維持機構を明らかにする。
海洋性病原ビブリオの病原因子

本課題では当初の目標としていくつかのサブテーマを設定したが、このうち、Vibrio vulnificusに関する研究に大きな進展がみられた。62年度においてはこの菌が宿主体内で血清の殺菌力に抵抗して増殖するために必要な因子として莢膜の役割を示し、溶血毒素の作用機構、プロテアーゼの精製と病原性における意義についても成果をあげることができた。溶血毒素については溶血機構の解析を行ない、これがいわゆる浸透圧溶血の機構により進行することを証明した。また、この毒素のコレステロールへの特異的な結合性を利用して、毒素を結合したコレステロール・リポソームを用いて免疫することによって容易に特異性の高い抗血清を調製する方法を開発した。プロテアーゼに関してはその酵素化学的性質を検討してZnを含む金属プロテアーゼであることを示し、生体内で肥満細胞からのヒスタミン遊離および血清カリクレイン・キニン系の活性化によるブラジキニン生成の両経路により皮膚血管透過性を亢進させることを明らかにした。63年度においては、プロテアーゼの皮膚血管透過性の亢進作用が一過性で速やかに消失する原因が血漿中α_2ーマクログロブリンによるプロテアーゼの阻害に基づくと考え、その相互作用について検討を行った。プロテアーゼはin vitroでα_2ーマクログロブリンを切断して構造変化をもたらし、結果としてα_2ーマクログロブリン分子内に取り込まれて失活することが示された。またヒト血漿中にはα_2ーマクログロブリン以外には本菌のプロテアーゼを阻害する因子は検出されなかった。このことは、α_2ーマクログロブリンの不足などをもたらすような基礎疾患ではプロテアーゼ作用による症状が強く現われることを示唆した。ヘモリジンについてもラット皮膚を用いて、ヒスタミン遊離による血管透過性亢進作用を示すことを認め、in vitroでの検討でこれが肥満細胞の膜破壊に基づくヒスタミンの遊離であることを示した。本課題では当初の目標としていくつかのサブテーマを設定した.すなわち,病原ビブリオの宿主への定着機構に関する問題として,腸炎ビブリオおよびV.fluvialisの培養動物細胞への付着因子,定着・増殖における鞭毛の役割, V.vulnificusの血清抵抗性における莢膜の役割.毒素に関する問題としては,腸炎ビブリオの間接溶血毒素(phospholipase A_2)およびV.vulnificusの溶血毒素およびタンパク分解酵素などである.このうち, V.vulnificusに関する研究に大きな進展がみられた.すなわち,この菌が宿主体内で血清の殺菌力に抵抗して増殖するために必要な因子として莢膜の役割を示し,溶血毒素の作用機構,プロテアーゼの精製と病原性における意義についても成果をあげることができた.これらは別掲のように原著論文として報告されている.本菌は創症感染による皮膚の炎症,あるいは日和見感染的に重篤な敗血症を起こすことがあるが,その病原因子として溶血毒素およびプロテアーゼが重要である.溶血毒素については溶血機構の解析を行ない,これがいわゆる浸透圧溶血の機構により進行することを証明した.また,この毒素のコレステロールへの特異的な結合性を利用して,毒素を結合したコレステロール・リボソームを用いて免疫することによって容易に特性性の高い抗血清を調製する方法を開発した.プロテアーゼに関してはその酵素化学的性質を検討してZnを含む金属プロテアーゼであることを示し,生体内で肥満細胞からのヒスタミン遊離および血清カリクレイン・キニン系の活性化によるブラジキニン生成の両経路により皮膚血管透過性を亢進させることを明らかにした.腸炎ビブリオおよびV.