hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ソフトコンピューティング手法によるファジィ制御知識の獲得

ファジィ制御で使用されているファジィ規則は、従来、専門家の経験・勘に基づいて試行錯誤的に作成されるのが普通であったが、制御対象が複雑になり、入力・出力数が多くなると人問の経験的知識からだけではファジィ規則の作成は不可能なものとなり、ファジィ規則の自動獲得が急務となっている。本研究では、最も一般性のあるファジィ推論法として「適合度関数付き関数型推論法」を提案し、その特殊例である「ファジィシングルトン型推論法」を用いて、ファジィ規則表の学習に適したニューロファジィ学習法を提案した。また、ファジィ規則の初期パラメータの決定にファジィクラスタリング手法を用いることにより、学習精度や収束速度の向上を得ることができた。ファジィ規則を構成するファジィ集合に距離の概念を導入することにより、「距離型ファジィ推論法」という従来とはまったく異なるファジィ推論法を提案し、ロバスト連想記憶アルゴリズム、動的推論アルゴリズムなどを明らかにした。上記のファジィ推論に基づいたファジィ制御の概念をロボット制御に適用した。そのために、遺伝的アルゴリズムなど進化アルゴリズムを直接ハードウエアレベルで適応させることができる進化ハードウエアを用いて自律ロボットの制御を試み、満足すべき結果が得られた。この場合、遺伝的アルゴリズムの遺伝子として、木構造染色体コーディング法を新たに導入した。また、四足歩行ロボットを作成し、ファジィ制御の下での姿勢制御、立ち上がり、バランス制御等の実験を行い、満足すべき結果が得られた。ファジィ制御で使用されているファジィ規則は、従来、専門家の経験・勘に基づいて試行錯誤的に作成されるのが普通であったが、制御対象が複雑になり、入力・出力数が多くなると人間の経験的知識からだけではファジィ規則の作成は不可能なものとなり、ファジィ規則の自動獲得が急務となっている。本研究により、ファジィシングルトン型推論法の下で、ファジィ規則表の学習に適したニューロファジィ学習法を提案することができ、さらに、ファジィ規則の初期パラメータの決定にファジィクラスタリング手法を用いることにより、学習精度や収束速度の向上を得ることができた。(1)ファジィ規則の前件部および後件部を実際の入出力データを用いてチューニングする方法を与える。まず、前件部のファジィ集合の中心値、幅だけでなく、後件部の位置および重みをチューニングする方法を最急降下法を用いて実現する。ファジィ推論法としては申請者が提案している「ファジィシングルトン型推論法」を使用した。また、学習方式としては、ファジィ規則を独立に学習する従来法ではなく、学習後でもファジィ規則表の形が崩れないニューロ学習手法を考案した。これより、低発火現象や多数のファジィ集合の使用等の弊害が取り除け、またシミュレーション結果から、学習精度や収束速度も早く、ファジィ規則表の学習に最も適した手法であることが分かった。(2)一般に、初期ファジィ規則のパラメータの選び方によっては、学習がうまく進まないことがある。本研究では、ファジィクラスタリングアルゴリズムを用いることにより、入出力データをファジィ分割し、生成されたクラスタとその重要さから、ファジィ規則の前件部の中心と幅、後件部の実数値と重みを抽出することにより、初期ファジィ規則のパラメータの初期化を行った。その結果、学習がうまく行え、収束も早く、学習精度も良い結果が得られた。現在、このファジィ規則のチューニング手法を使って、関数近似、並列倒立振子、ロボットの障害物回避などへの応用を試みており、満足いく結果が得られている。ファジィ推論規則は、従来、専門家の経験・勘に基づいて試行錯誤的に作成されてきたが、対象が複雑になり、人間の経験的知識からだけではファジィ規則の作成は不可能なものとなり、ファジィ規則の自動獲得が急務となっている。

本研究では、最も一般性のあるファジィ推論法として「適合度関数付き関数型推論法」を提案しその特殊例である「ファジィシングルトン型推論法」を用いて、ファジィ規則表の学習に適したニューロファジィ学習法を提案した。また、ファジィ規則の初期パラメータの決定にファジィクラスタリング手法を用いることにより、学習精度や収束速度の向上を得ることができた。さらに、遺伝的アルゴリズムにおける淘汰率、交叉率、突然変異率をファジィ推論により調整し、特に、突然変異操作の改善を行い、収束期の探索性能の改善を図った。(1)一般的な関数型ファジィ推論法に適合度関数を導入することにより、最も一般的な推論法である「適合度関数付き関数型推論法」を提案した。この特殊例であるファジィシングルトン型推論法に対して、ファジィ規則のチューニング方法を与えた。まず、前件部のファジィ集合の中心値、幅だけでなく、後件部の位置および重みをチューニングする学習法を与えた。ファジィ規則を独立に学習する従来法ではなく、学習後でもファジィ規則表の形が崩れないニューロ学習手法を考案したこれより、低発火現象や多数のファジィ集合の使用等の弊害が取り除け、学習精度や収束速度も早く、ファジィ規則表の学習に最も適した手法であることが分かった。(2)一般に、初期ファジィ規則のパラメータの選び方によっては、学習がうまく進行しないことがある。本研究では、ファジィクラスタリングアルゴリズムを用いることにより、入出力データをファジィ分割し、生成されたクラスタとその重要さから、ファジィ規則の前件部の中心と幅、後件部の実数値と重みを抽出することにより、初期ファジィ規則のパラメータの初期化を行った。その結果、学習がうまく行え、収束も早く、学習精度も良い結果が得られた。(3)遺伝的アルゴリズムにおける淘汰率・交叉率・突然変異率を前述のファジィ推論法によってチューニングする方法を提案した。特に収束期における突然変異操作の改善を目指すために、平均適応度と1世代前の平均適応度から突然変異の変化量をファジィ推論することにより、収束期における探索性能の改善を実現することができた。ファジィ制御で使用されているファジィ規則は、従来、専門家の経験・勘に基づいて試行錯誤的に作成されるのが普通であったが、制御対象が複雑になり、入力・出力数が多くなると人間の経験的知識からだけではファジィ規則の作成は不可能なものとなり、ファジィ制御規則の自動獲得が急務となっている。本研究で得られた成果は以下の通りである。(1)提案した多入出力用の「ファジィシングルトン型推論法」を用いることにより、ファジィ規則の前件部、後件部および重みのチューニングをソフトコンピューティング手法によって行った。特に、ファジィクラスタリング手法を使うことによりファジィ規則の構成を行い、ファジィ推論の学習精度および収束時間の向上が得られた。(2)ファジィ規則を構成するファジィ集合に距離の概念を導入することにより、「距離型ファジィ推論法」という従来とはまったく異なるファジィ推論法を提案し、ロバスト連想記憶アルゴリズム動的推論アルゴリズムなどを明らかにした。(3)上記のファジィ推論に基づいたファジィ制御の概念をロボット制御に適用した。そのために、遺伝的アルゴリズムなど進化アルゴリズムを直接ハードウエアレベルで適応させることができる進化ハードウエアを用いて自律ロボットの制御を試み、満足すべき結果が得られた。この場合、遺伝的アルゴリズムの遺伝子として、木構造染色体コーディング法を新たに導入した。
妊婦の緊急地震速報後の揺れに備える姿勢と安全な行動の検討

妊婦が耐震性のある建物の中で緊急地震速報を見聞きしたと仮定し、揺れに備える7つの姿勢を実際にとってもらった。各姿勢において安定感・移動のしやすさ・実施可能性について妊婦へ質問紙調査を行った。285名の結果から、安定感は、お尻をついてかがむであり、避難行動への移りやすさは、立ったまま机を支えにする、実施可能性は、膝をついてかがむ姿勢であった。起震車を用いた模擬妊婦の実験では、四つん這いの姿勢が、腰部の加速度は低く、負担の少ない姿勢であることが示唆された。2007年秋より気象庁による緊急地震速報の運用が始まった。この緊急地震速報は、速報から揺れが来るまでの猶予期間が数秒から数十秒と言われている。その時の行動は、「テーブルや机の下に身をかくす」という大原則がある。しかし、妊婦は机の下などに入ると次の避難行動がとりにくい。そもそも妊娠週数により机の下などにもぐることが難しくなる。また、落下物から頭部を守るために鞄や座布団で頭部を覆うという一般的な対策もあるが、腹部が大きくなった場合、両手を挙げることにより不安定になることも考えられる。本研究の目的は、緊急地震速報後に妊婦が地震の揺れに対して安全な姿勢をとり、スムーズに避難することで健康被害を最小限にする試みである。初年度である本年度は、建築学、災害看護や防災の最近の動向を把握することが中心となった。このことにより、耐震環境の整った建物であれば、緊急地震速報を確実に受信することにより、安全な姿勢をとることは有用であると考えられた。また、確実な情報を入手するには、多様なチャンネルを通じて複数の災害情報を入手することが必要となる。そして、避難に時間を必要とする場合は、その地域の正確な情報と当事者の判断(その場所が落下物やガラスの飛散のない安全な場所であるか等の判断)が重要と言われてきている。また同時に妊婦へのアンケート調査を実施するための調査項目の検討を行った。現在のところ、年齢や週数、身長・体重・腹囲・子宮底という妊婦の身体的状態、被災経験の有無、緊急地震速報を入手する手段、安全の確認行動、揺れをしのぐ姿勢、一般的な状況を仮定した行動テスト、楽観主義尺度を考えている。今後も検討を重ね、妊婦の身体的特徴をしっかり吟味し、地震という特殊な状況下での妊婦のとれる行動を考えていきたい。妊婦へのアンケート調査であり、負担にならぬよう調査項目を精選し、調査を実施する予定である。緊急地震速報は、本年度3月の大震災により頻回に耳にするようになった。この緊急地震速報は、揺れが来るまでの猶予期間が数秒から数十秒と言われている。その時の行動は、身の安全を確保するため「頭を保護し、丈夫な机の下など安全な場所に避難する」となっている。また地震後の津波が予測される場合などは、早急に避難が必要となる。2年目となった本年度は、姿勢や歩行などの視点から検討を重ねた。調査では、耐震性のある建物の中で緊急地震速報を見聞きしたと仮定し、揺れに備えるために1手をついてかがむ2膝をついてかがむ3お尻をついてかがむ4四つん這いになる5四つん這いで頭と胸を床に近づける6立ったまま机を支えにする7立ったまま壁を支えにするの7つの姿勢をとってもらう。妊娠による体型の変化により取りやすい姿勢や行動の変化を明らかにするため、さまざまな妊娠週数の被験者が集団指導の場で同じ姿勢をとり1)安定感2)移動のしやすさ(避難行動への移りやすさ)3)実施可能性(地震の時にこの姿勢をとろうと思うか)について回答できるよう、写真と姿勢の簡略図を調査票に入れた。調査項目を属性に加え、妊婦の身体的状態、大地震への遭遇の有無、緊急地震速報を入手する手段、安全の確認行動、揺れをしのぐ姿勢、家族からの支援希望とした。母親教室等の集団指導の場で調査を開始した。次年度は、アンケート調査に加え起震車を用い、震度の違いによる実験を実施する。妊婦体験ジャケットを着用した被験者の身体の不安定な部位や揺れによる影響を明らかにする。東日本大震災以降、国民の災害への関心は高くなっている。しかし、妊婦が緊急地震速報後、地震の揺れに対してどのような姿勢をとれば良いのか、まだ明らかになってはいない。

3年目となる本年度は、前年度に引き続き、耐震性のある建物の中で緊急地震速報を見聞きしたと仮定し、揺れに備えるために1手をついてかがむ2膝をついてかがむ3お尻をついてかがむ4四つん這いになる5四つん這いで頭と胸を床に近づける6立ったまま机を支えにする7立ったまま壁を支えにするの7つの姿勢をとってもらいアンケート調査を合計352名に実施した。妊娠による体型の変化により取りやすい姿勢や行動の変化を明らかにするため、1)安定感2)移動のしやすさ(避難行動への移りやすさ)3)実施可能性(地震の時にこの姿勢をとろうと思うか)について調査した。調査項目を属性に加え、妊婦の身体的状態、大地震への遭遇の有無、緊急地震速報を入手する手段、安全の確認行動、揺れをしのぐ姿勢、家族からの支援希望とした。同意が得られ、有効回答であった285名の結果が得られた。次に起震車を用いた実験(震度5弱)を妊娠経験のある健常女性19名に同意を得て実施した。妊婦体験ジャケットを着用し、7つの姿勢をとったときの身体の動揺をビデオにて撮影した。動揺の程度を評価、併せて内側広筋、腰部脊柱起立筋、腹筋、上腕三頭筋の筋活動を計測し、腰の加速度を評価することで、身体への負担を検討した。また、それぞれの姿勢をとるまでの動作時間を計測した。計測後に、模擬妊婦には、それぞれの姿勢の安定感・次の避難行動への移りやすさ・実施可能性と夫が一緒であった場合、夫にも起震車に同乗してもらい支援についてアンケートを用いた調査を実施した。
TNF遺伝子導入による腫瘍浸潤リンパ球(TIL)の抗腫瘍効果増強

我々は癌患者胸腹水由来のリンパ球(以下腫瘍浸潤リンパ球:TIL)へhuman TNF発現ベクタ-(pcDVーTNF)をまずリポフェクション法にて遺伝子導入しその発現を検討したところ対照に比べ有意に高いTNFの発現を認めた。本法にてTNF遺伝子を導入したTILの細胞障害活性を検討したところK562細胞、自己腫瘍細胞に対する障害活性が対照に比べ強く増強されていた。このTNF遺伝子導入による細胞障害活性増強作用の機序を解析する目的で新たにTNF cDNAを組み込んだレトロウイルスベクタ-pLJーTNFを作製、パッケ-ジング細胞へリン酸カルシウム法で遺伝子導入した。また同時にneomycine耐性遺伝子(neo^R)を導入したクロ-ンを作製した。これらの培養上清を用いTILへTNF遺伝子を遺伝子導入し安定形質転換細胞を作製し、neo^R導入細胞と比較検討した。レトロウイルスベクタ-によりTNF遺伝子導入したTILはneo^R導入TILに比べ高濃度のTNFを産生しK562細胞に対する細胞障害活性は対照に比べ約5倍に増強された。この作用はアッセイ時に抗ヒトTNFモノクロ-ナル抗体の添加により抑制されなかった。またK562と同程度のTNF感受性を有するDaudi細胞ではこの細胞障害活性増強効果は認められなかった。細胞障害活性増強機構を解析する目的で細胞接着分子をFlowcytometryにより解析したところTNF遺伝子導入TILではLFAー1の発現が対照に比べ著明に増強され、CD2の発現増強も認められた。TNFにより発現が増強すると報告されているILー2receptor(ILー2R)はα鎖の発現増強を認めたがβ鎖に明かな変化を認めなかった。また細胞障害物質として近年報告されている膜型TNFの検出も試みたが明かではなかった。以上のことからTNF遺伝子導入によるTILの抗腫瘍活性の増強はTIL自身の細胞接着分子発現の増加とTILが産生するTNFによる腫瘍細胞表面の抗原発現増加による機序が示唆され、TNF遺伝子導入は癌免疫療法の効果増強に有用であると考えられた。
肝細胞癌の血管新生におけるAngiopoietin-1,-2,Tie-2の役割

平成十一年度より平成十三年度までinvivoの検討として56例の肝細胞癌組織を用いて肝細胞癌組織におけるAngiopoietin-1,Angiopoietin-2,およびそのレセプターであるTie-2の局在、癌部とその近接する非癌部肝組織での発現程度の違い、さらに、これらの発現程度と腫瘍分化度、血管新生との関係について検討した。その結果、9例を用いRT-PCRで検討を行ったAngiopoietin-1,Angiopoietin-2とTie-2の癌部と非癌部肝組織での発現程度の比較に関しては、Angiopoietin-1は9例の肝組織において癌部、非癌部肝組織いずれでも発現が認められたが、うち8例において癌部での発現が亢進していた。Angiopoietin-2は9例すべてにおいて癌部では強く発現されていたが、非癌部肝組織ではごく僅かにのみ発現を認めた。Tie-2に関しては癌部と非癌部肝組織での発現程度に差を認めなかった。また、47例を用い免疫組織学的に検討を行ったこれらの局在に関しては、Angiopoietin-1,Angiopoietin-2は共に肝癌細胞で最も強く発現され、その他内皮細胞や肝星細胞でも一部発現が認められた。Tie-2の発現は、内皮細胞と肝星細胞に認められた。同様に免疫組織学的に検討を行ったAngiopoietin-1とAngiopoietin-2の発現程度と腫瘍分化度の関係に関しては両者とも分化度が低くなるにつれて発現が増強したが特にAngiopoietin-2のほうが強い相関を示した。Angiopoietin-1とAngiopoietin-2の発現と血管新生の程度との関係についても腫瘍分化度の関係と同様にAngiopoietin-2のほうがより強い相関を示した。一方、in vitroの検討としてAngiopoietin-1,Angiopoietin-2のcDNAを肝癌細胞に遺伝子導入し、これらの肝癌の血管新生に及ぼす影響を明らかにしょうと試みたが、レトロウイルスベクターを用いた検討において肝癌細胞への遺伝子導入がうまくいかず失敗に終わった。ヒト肝細胞癌組織におけるangiopoietin-1(Ang-1)、angiopoietin-2(Ang-2)、Tie-2の局在、発現程度を免疫組織学的検討を行った。Ang-1蛋白はヒト肝細胞癌組織において肝癌細胞および間質の間葉系細胞(線維芽細胞)に局在を認めた。各症例間に発現程度の差は無かった。非癌部肝組織との比較では非癌部肝細胞にも同程度の発現を認め肝癌組織と差を認めなかった。Ang-2蛋白はヒト肝細胞癌組織において肝癌細胞に強く発現、局在を認め、分化度が低下するにつれて発現が強くなる傾向にあった。非癌部肝組織においても肝細胞に発現を認めるも、肝癌組織に比べその程度は弱かった。一方、Ang-1、Ang-2が結合する受容体であるTie-2はヒト肝細胞癌組織、特に分化度中分化以下の進行肝細胞癌において間質の細動脈内皮細胞、毛細血管内皮細胞に発現が見られた。また、間質組織の辺縁では肝癌組織内の血(類)洞内皮細胞の一部に発現が見られた。非癌部肝組織においては門脈域内動脈、門脈の内皮細胞に非常に弱く発現を認めた。

Western blot、RNaseprotectionassayを用いた検討では非癌部肝組織に比べ肝細胞癌組織において種々の程度でAng-2蛋白、mRNA発現の亢進が認められた。Ang-1発現では差が無かった。Tie-2は全体に発現強度が弱く比較が困難であった。Ang-2の発現程度と肝細胞癌の臨床・病理組織学データとの関係を検討すると相関するのは肝細胞癌の分化度(分化度が低下するにつれて発現亢進)であった。腫瘍径、各種画像診断における血管新生度、再発率、予後との関係は、さらに検討症例を増やす必要があり現在進行中である。ヒト肝細胞癌組織におけるangiopoietin-1(Ang-1)、angiopoietn-2(Ang-2)の発現程度と臨床・病理組織学データとの関係を検討するため検討症例数を増やした。より詳細な検討のためには早期の微小肝細胞癌組織を用いる必要があり、症例数豊富なホルマリン固定組織を用いた。発現程度の比較にはAng-1およびAng-2に対する抗体を用いた免疫蛍光染色を行い、安定した結果の得られる共焦点レーザー顕微鏡を用いて観察、比較検討した。結果、Ang-1の発現程度は臨床的血管新生度と相関関係を認めた(p=0.03)。また、Ang-2の発現程度は肝細胞癌の分化度と相関関係を認め、分化度か低下するにつれて発現が強い傾向にあった(p=0.003)。さらに、臨床的血管新生度とは非常に強い相関関係を示した(p<0.001)。以上より、ヒト肝細胞癌の血管新生にはAng-1、Ang-2ともに強く関与しており、特にAng-1が重要な因子であると考えられた。また、Ang-2はヒト肝細胞癌の脱分化と関係があることから、ヒト肝細胞癌の増殖、浸潤、転移の過程において何らかの役割を担っている可能性が考えられた。次に、ヒト肝癌細胞株(Huh7,Hep3B,KYN-2)におけるAng-1、Ang-2の産生および最も強い血管新生誘導刺激の一つである低酸素状態での産生変化をWestern blot、RNase protection assayを用いて検討した。結果、Ang-1は全てのヒト肝癌細胞株に発現していた。Ang-2は高分化型肝癌細胞株であるHuh7には発現が見られず、分化度の低いHep3B、KYN-2には発現が見られた。低酸素条件ではAng-2の産生を認めたHep3B、KYN-2においてAng-2の発現が増強した。Ang-1の発現に差は無かった。Ang-1、Ang-2を過剰発現したヒト肝癌細胞株作製は、現在Ang-1、Ang-2のcDNAを作製しretrovirus vectorに組み込む段階であり進行中である。平成十三年度はin vivoでの検討としてヒト肝細胞癌組織におけるAngiopoietin-1,Angiopoietin-2およびそのレセプターであるTie-2の発現細胞、これらの発現程度と腫瘍分化度、血管新生の程度との関係を免疫組織化学的に検討し、さらにAngiopoietin-1,Angiopoietin-2とTie-2の癌部と非癌部肝組織での発現程度の比較をRT-PCRにて検討した。肝細胞癌組織56例につき検討し、このうち47例で免疫組織学的検討を行い、9例においてRT-PCRで検討した。その結果、Angiopoietin-1は9例の肝組織において癌部、非癌部肝組織いずれでも発現が認められたが、うち8例において癌部での発現が亢進していた。
PRMT5の口腔癌EMT機構における役割の解析

本研究の目的は,前研究課題の結果で示唆された口腔扁平上皮癌(OSCC)の浸潤先進部におけるPRMT5とEMTの関連を明らかにすることである.OSCCにおけるPRMT5の機能解析は皆無である.本研究課題を遂行することにより, PRMT5のEMTを介したOSCCにおける進展過程が明らかになれば, OSCCの新たなepigenetic drugとしての治療標的となり,意義深いトランスレーショーナルリサーチとなり得る.本研究の目的は,前研究課題の結果で示唆された口腔扁平上皮癌(OSCC)の浸潤先進部におけるPRMT5とEMTの関連を明らかにすることである.OSCCにおけるPRMT5の機能解析は皆無である.本研究課題を遂行することにより, PRMT5のEMTを介したOSCCにおける進展過程が明らかになれば, OSCCの新たなepigenetic drugとしての治療標的となり,意義深いトランスレーショーナルリサーチとなり得る.
発達性「読み」障害に関する臨床的、計算論的、脳機能研究

本研究の結果、ひらがなの習得には、過去に報告されていた音韻認識能力だけでなく、記号や意味から素早く音韻に変換する自動化能力が重要であることが分かった。そして、良好な認知能力を活用することにより、3条件を満たす場合には、かなをほぼ完璧に習得できる方法を開発できた。このような発達性読み書き障害のある方の多くが習得困難である漢字の脳内処理部位に関して、非言語的図形から漢字という言語的図形に変化するにつれて、処理する部位が連続的に移動することが分かった。そして、トライアングルモデルにて、子ども達の仮名の習得や、習得困難さが計算論的研究によりシミュレイションされた。1.臨床的研究に関して1)4歳児:すでに6歳児用として特異的言語障害児や発達性読み書き障害児の検出に有効であった検査を修正し、追跡率の高い地域の200名の4歳児を対象とし5年間追跡の初年度の調査を開始した。2)小学5年生:対象は5歳時から追跡できている約120名のデータに関して収集した。6歳、小学1、2、3年生時の検査結果との関連について分析中である。3)応用行動分析的手法による訓練効果研究漢字書字の訓練と同様、ひらがな、カタカナの単一事例実験計画法により、方法別の効果を検討した論文を作成中である。2.計算論的研究に関して児童では世界的にもまだ構築されていない二重回路モデル作成のために、世界で唯一作成に成功しているオーストラリアのマコーリ大学Coltheart教授を招待し指導を受けた。成人の音読モデルを70%完成させた。3.脳機能研究に関して2)国内初となる動物実験では手法を確実にするため、文献研究にて方法論を確立し、実験を開始したところである。1.臨床的研究に関して1)4歳児(年中児):すでに6歳児用として特異的言語障害児や発達性読み書き障害児の検出に有効であった検査を修正し、追跡率の高い地域での5年間追跡の第三年目(小学1年生)の調査を開始した。なお、下記の論文が雑誌に掲載された。猪俣朋恵、宇野彰、春原則子:年長児におけるひらがなの読み書きに影響する認知要因の検討.音声言語医学, 54(2), 122-128, 2013. 2)中学1年生:小学5年生から調査を始め、中学1年生のデータを収集した。夏休み中にデータを収集したが、英語の読み書きに関しては、まだ調査ができるほどの授業がまだ進んでいないため、まだアルファベットの習得に関してのみ調べることができた段階である。来年の中学2年生での調査により、明確になると思われる。2.生理心理学的研究に関して単語に対して特異的に増強する初期視覚誘発電位,および文字列に対して特異的に増強するERP反応について,発達性読み書き障害(DD)との関連性を検討した。読み書きに困難のない成人参加者を対象として,読み速度と上記のERP反応の相関分析を行い,ERP反応とDD特性の関連性を検討した。その結果、読み速度と初期視覚誘発電位成分の振幅が対応しており、かなり初期の視覚処理段階で既に読みに関連する処理が開始されていることが示唆された。この結果は、音韻と正書法の相互作用不全が、文字単語認知過程のどのような段階から始まっているかについて示唆する重要な知見であると思われた。3.脳科学的研究fMRIを用いて漢字処理についての実験が終了し論文も作成済みである。しかし、まだジャーナルに受理されていない段階である。4.動物モデル研究microgyriを脳内に作成する実験方法は確立できた。しかし、正常ラットも視覚記憶実験で十分な成績を残さないという問題があり、解決すべき問題点と思われる。1.臨床的研究に関して1)4歳児:すでに6歳児用として特異的言語障害児や発達性読み書き障害児の検出に有効であった検査を修正し、追跡率の高い地域の200名の年中児を対象とし5年間追跡の第2年目の調査を開始した。2)小学6年生:対象は5歳時から追跡できている約120名のデータに関して収集した。3)応用行動分析的手法による訓練効果研究:漢字書字の訓練方法について2012年に論文が発表された。ひらがな、カタカナの症例シリーズ研究法による訓練効果を検討した論文を投稿し現在審査中である。2.計算論的研究に関して児童では世界的にもまだ構築されていない二重回路モデル作成のために、世界で唯一作成に成功しているオーストラリアのマコーリ大学Coltheart教授を招待し指導を受け続けている。成人の音読モデルを80%完成させた。3.脳機能研究に関して1)機能的MRIを用い漢字の視覚認知に関する階層的な処理過程が解明できた。英文論文執筆中である。2)国内初となる2回にわたる動物実験にて手法が確立したところである。臨床的研究:就学前のひらがなの「読み」の習得には、自動化能力と音韻認識能力が強くかかわり、有意な予測因子であった(猪俣ら2014)。また、音読潜時を指標に、語彙性効果と文字長効果を検討した結果、小学1年生と2年生での間で、一文字ずつ読む非語彙方略から、文字列全体を処理する語彙方略に大きく音読方略が変化したことが分かった(三盃ら2014)。

生理学的研究:高速提示される文字列としてひらがなで構成される単語及び非語、並びに記号列を用い、これらについては無視させる数種類の課題を設定して、刺激提示後約170ミリ秒に出現するERP成分であるN170のふるまいについて検討した。その結果、ひらがな表記に対しては、言語的処理の有無にかかわらず、初期的段階で自動的な知覚的カテゴリー化処理が行われるものと考えられた。しかし文字列に対して自動的に言語的処理が開始されるのではなく、視覚的注意が言語的処理の進行に密接に関与することが示された。これらの結果から、読みの困難には視覚的注意のありかたが強く影響しているものと想定される。脳機能研究:fMRIを用いた実験により、漢字を視覚的にとらえて、徐々に文字として処理する順序性に従って、左大脳の後部から徐々に前方へ処理する場所が移動することが分かった。一方、右大脳半球では、図形と文字を処理する場所に差がなかった。現在Brain&Behaviorという英文誌にて審査中である。【臨床的研究】:幼稚園で文字を教わっていない年長児100名以上を対象に、就学前の認知能力と家庭での環境要因が、小学校入学後のひらがなの「読み」の習得にどのように影響するのかを縦断的に検討した。その結果、認知能力としては自動化能力と音韻認識能力が強くかかわり、有意な予測因子であった。一方、環境要因は「読み」の正確性には影響しなかった。貢献度は認知能力に比べ小さいが流暢性には、読書体験が影響を与えることがわかった(「音声言語医学」2016印刷中)。「書字」については、「読み」よりも、練習したかどうかという環境要因が強く影響していたが、それでも認知能力に比べての貢献度は低く、ひらがなの習得には、もともとの認知能力が大きく影響することが分かった。ひらがなやカタカナは、文字列と音韻列との関係が規則的な文字体系であることが、習得が容易であることにつながり、もともとの認知能力の影響が強くなることにつながるのではないかと考える。漢字や英語など不規則な文字体系とは異なる可能性が考えられる。【生理学的研究】:生理学的研究を担当している分担研究者が定年退官により担当者が不在であるため、本年は研究を進めなかった。【脳科学研究】:機能的MRIを用いた研究により、漢字をはじめに視覚的に形態をとらえて、徐々に言語としての文字を処理していくプロセスに関して、処理する場所が、左大脳の後部から徐々に前方へ移動していくことが分かった。英文誌に論文が受理された(「Brain&Behavior」2016印刷中)。本研究の結果、ひらがなの習得には、過去に報告されていた音韻認識能力だけでなく、記号や意味から素早く音韻に変換する自動化能力が重要であることが分かった。そして、良好な認知能力を活用することにより、3条件を満たす場合には、かなをほぼ完璧に習得できる方法を開発できた。このような発達性読み書き障害のある方の多くが習得困難である漢字の脳内処理部位に関して、非言語的図形から漢字という言語的図形に変化するにつれて、処理する部位が連続的に移動することが分かった。そして、トライアングルモデルにて、子ども達の仮名の習得や、習得困難さが計算論的研究によりシミュレイションされた。臨床的研究に関しては、調査によるデータ収集は順調に進んでいる。データをまとめ原著論文として完成させる作業については、日本語では順調にすすんでいるが英文では、まだ十分な成果が出せていない。
マクロファージ細胞死に誘導されるサルモネラ腸炎発症機構の解析

サルモネラは食中毒の原因菌として胃腸炎や敗血症を引き起こす。このようなサルモネラの病原性発現には独立した2つのIII型分泌装置とこれら分泌装置から分泌され、宿主タンパク質と直接相互作用を示すIII型エフェクターが重要な役割を果たす。本研究では、サルモネラの増殖の場であるマクロファージに着目し、III型エフェクターによるマクロファージの細胞死誘導機構または制御機構を解明することで、サルモネラ腸炎発症機構との関連性を明らかにする。今年度はまず、マクロファージの細胞傷害性に関わるエフェクターを同定することを試みた。マウスマクロファージ様細胞RAW264.7に29種類のIII型エフェクター発現プラスミドをそれぞれトランスフェクションしたが、RAW264.7においてエフェクターの発現がほとんど認められなかった。そこで、S. Typhimuriumの29種類のエフェクター欠失株を作成し、RAW264.7細胞に感染し、20時間後の細胞傷害性をLDH release assayにより調べた。その結果、5つのエフェクター欠失株において、親株よりも細胞傷害性が低下した。このことから、欠失したこれら5つのエフェクターが細胞傷害性すなわち細胞死を誘導することが示唆された。一方、親株よりも細胞傷害性が高い欠失株が認められなかったことから、本条件ではS. TyphimuriumはIII型エフェクターの作用により、RAW264.7細胞に対し、細胞死を抑制しないことが示唆された。2018年度はサルモネラ感染によりマクロファージに細胞死が誘導されるか、または抑制されるのかを明らかにし、これらの表現系に関与するIII型エフェクターを同定する予定であった。これまでにサルモネラがRAW264.7細胞に対し細胞傷害性を示すこと、また5つのエフェクターが細胞傷害性に関わることを明らかにできた。III型エフェクターによる細胞死誘導機構を確認するために、RAW264.7細胞を各種細胞死阻害剤で処理したのち、細胞死への影響を確認する。また、カスパーゼ、サイトカイン、HMGB1などのタンパク質発現量やmRNA発現量をウエスタンブロット法及びリアルタイムPCR法により定量解析する。さらに同定されたIII型エフェクターに関しては、宿主標的分子の探索と作用機序の解明を行い、エフェクターが機能する標的経路を明らかにする。宿主標的分子の探索は、まず、カスパーゼに直接結合するエフェクターの有無を確認する。カスパーゼとの結合性がないエフェクターについては、培養細胞溶解液からPull-downassayまたは免疫沈降反応によりエフェクター分子と結合するタンパク質分子を質量分析により同定する。標的分子が決定したエフェクターについては、その作用機序を解明することを試みる。標的分子のCRISPR/Cas9法による遺伝子欠損によるエフェクターの機能を解析する。

標的分子のCRISPR/Cas9法による遺伝子欠損によるエフェクターの機能を解析する。研究開始時にはマクロファージの細胞死に関わるIII型エフェクターを同定するため、エフェクター発現プラスミドをトランスフェクションによりRAW264.7に導入する予定であったため、この実験に使用する試薬および細胞培養関連試薬を主に消耗品費として計上していた。しかしながら、プラスミドの導入効率が極端に悪かったため、実験を中止した。一方で、サルモネラ感染によってRAW264.7細胞に細胞死を誘導すること、またこの表現系に5つのエフェクターが関与することが明らかとなったことから、今後、腸炎モデルマウスにサルモネラを感染させることで、細胞死と炎症の関係を明らかにする予定である。このため、実験動物および動物実験後のサイトカイン発現解析や病理解析に必要な試薬を購入する予定である。
第二帝制期ドイツにおける地域政策の形成

平成13年度までに本研究は、まず第一に、1886年のプロイセン内地植民法が、同時代の税制体系改革問題や農村地方制度改革問題の推移と連動する積極的な農村自治体創出政策として成立したことを解明した。また第二に、同法の施行局面に検討を加えた結果、同政策が、単なる土地分割・自治体創設政策にとどまらずに、新たに創出された農村地域経済と村自治の持続的発展を支援する総合的な農村地域開発政策として、いわば施行実務のレベルにおいて発展的に展開されたことを把握した。以上の成果を踏まえ、平成14年度は、Geheimes Staatsarchiv PreuBischer Kulturbesitz(ベルリン)を訪問して旧プロイセン王国農業省・農業審議会関連の未刊行文書等を閲覧・収集しつつ、上記政策を農政の政策形成過程全体の中に位置づけようと試みた。その結果・主として以下の点が判明した:(1)1870/72年の農業審議会制度の近代的再編に伴って、農政の政策形成過程は甚だしく混乱した。政府と審議会の緊張関係は、税制改革問題と農会の議会選挙活動問題を巡って頂点に達し、農相は審議会の事実上の閉鎖(75-77年)をもってこれに対応した。この間、議会側の内地植民政策への要望に対し、農業省・内閣はその法制化を試みなかった。(2)税制改革に関する政府の議会戦術の転換(77-79年)に伴って、農業省と審議会の関係も一定の範囲で改善された。ここにおいて農業省は内地植民政策のための法制化実務に着手したが、同省が注視したのは必ずしも審議会=大規模農業利害ではなく、むしろ議会でキャスティング・ヴォートを握る農民層と、これに関わる農村地域金融問題であり、そのために特に社会政策学会を調査・立案実務に参加させた。(3)86年法の総合的地域開発政策としての施行は、議会や法律テキスト以上に、(2)の行政実務レベルの政策合意に質的に対応するものであったといえる。
哺乳類の卵巣の自然発症的な雄性化の分子基盤

申請者らは、マウス胎齢13.0日(E13.0)のXX卵巣を父性環境下で発生させた場合、移植後10日目以降から、鳥類、魚類に類似した順で精巣化因子の発現が開始し、自然発症的なXX精巣化が進行することを見出した(父性環境下= AMH/精巣形成= DMRT1 = SOX9)。昨年度の課題により、父性環境下でのXX精巣化における既存の卵巣化遺伝子群(FOXL2, DAX1等)の発現変化をリアルタイムRT-PCR法により解析した結果(移植前のE13.0卵巣、移植後4,7,10日後),FOXL2以外の幾つかの卵巣化遺伝子の発現が未分化期のレベルまで有意に低下している事が明らかとなった。そこで本年度は、この父性環境下によるXX精巣化での網羅的なトランスクリプトーム解析を行い、XY精巣化のカスケードとの共通で、かつ支持細胞系譜で性特異的に発現変化する遺伝子群を同定した。その結果、父性環境下によるXX精巣化誘導において、E12.5 XY,XX支持細胞での各々約1/3の精巣,卵巣特異的遺伝子が、移植後14-18日目までに雌雄逆転することが判明した。その概要は、移植初期ではSRY依存的なSOX9誘導能(性的未分化性)の再獲得に伴い、DAX1などの転写因子を含む398個の卵巣化(E12.5 XX顆粒膜細胞特異的な)遺伝子の発現が減少し、引き続き、SOX9発現が誘導される移植18日までにE12.5XYセルトリ細胞と共通した619個の精巣遺伝子が発現上昇することが明らかとなった。以上の成果は,父性環境下での自然発症的なXX精巣化の分子基盤の役者を全て捉えることが可能となり、今度、これらの個々の性分化関連遺伝子の発現プロファイル解析を行うことにより、自然発症的なXX精巣化の分子基盤の全貌解明に繋がる。24年度が最終年度であるため、記入しない。申請者らは、マウス胎齢13.0日(E13.0)のXX卵巣を父性環境(雄ヌードマウスの腎被膜下への移植)下で発生させた場合、移植後10日目以降から、鳥類、魚類に類似した順で精巣化因子の発現が開始し、自然発症的なXX精巣化が進行することを見出した(父性環境下=>AMH/精巣形成=>DMRT1=>SOX9)。本研究課題は、父性環境下での自然発症的なXX精巣化の分子基盤の全貌を明らかにすることを計画した。本年度は、まず、初めに、SRYによるXY精巣化と父性環境下でのXX精巣化の両方の過程におけるGDNF(精原幹細胞ニッチ因子)発現の開始時期を検討した。両精巣化の過程において、SOX9の発現開始直後からSOX9陽性細胞においてのみGDNF発現の開始が認められた。そのため、SOX9の直下でのGDNF発現の活性化は、精巣化のコア・カスケードの第一候補として考えられた。さらに、Wnt4-null胎子卵巣においてもGDNF発現量が上昇する事から、このSOX9=>GDNFのカスケードにWNT4シグナルが抑制的に作用していることも示唆された。次に、父性環境下でのXX精巣化(自然発症的なXX精巣化)における既存の卵巣化遺伝子群(FOXL2,DAX1等)の発現変化をリアルタイムRT-PCR法により解析した結果(移植前のE13.0卵巣、移植後4,7,10日後),非常に興味深い事に、FOXL2以外の幾つかの卵巣化遺伝子の発現が未分化期のレベルまで有意に低下している事が明らかとなった。本結果は、移植後10日目までに、卵巣化遺伝子群が低下し、性的に未分化な状態に逆戻りしていることが示唆された。本結果は、哺乳類独自の性分化システム(SRY=>SOX9の遺伝的スイッチの獲得と性ステロイド感受性の消失)の生物学的意義の解明の鍵となると考えられた。

その概要は、移植初期ではSRY依存的なSOX9誘導能(性的未分化性)の再獲得に伴い、DAX1などの転写因子を含む398個の卵巣化(E12.5 XX顆粒膜細胞特異的な)遺伝子の発現が減少し、引き続き、SOX9発現が誘導される移植18日までにE12.5XYセルトリ細胞と共通した619個の精巣遺伝子が発現上昇することが明らかとなった。以上の成果は,父性環境下での自然発症的なXX精巣化の分子基盤の役者を全て捉えることが可能となり、今度、これらの個々の性分化関連遺伝子の発現プロファイル解析を行うことにより、自然発症的なXX精巣化の分子基盤の全貌解明に繋がる。24年度が最終年度であるため、記入しない。父性環境下での自然発症的なXX精巣化の分子基盤が、一部の卵巣化遺伝子群の低下により性的な未分化性を再獲得することが判明した。これは、我々の"脊椎動物間で保存された性分化のコアカスケード"が存在するという仮説を裏図ける結果であり,今後のマイクロアレイ解析等により卵巣化から未分化性の再獲得の分子基盤解明できる可能性が高まった。また、既に、マイクロアレイ解析用のサンプルの準備も整っており、次年度もスムーズな研究の実施が期待できる。今後、計画どおり、Busulfan処理により生殖細胞を除去したE13.0胎子の卵巣と腎臓被膜下に移植した卵巣片の遺伝子発現の動態を、経時的(移植前のE13.0マウス卵巣、移植後4,7,10日後)にマイクロアレイにより網羅的に解析する。候補遺伝子の中で発現量に有意な2倍以上の変化が認められた遺伝子に対し、リアルタイムRT-PCR法により発現量の差異を網羅的に定量化し、卵巣から未分化性に戻る遺伝子のコアカスケードを同定する。また、精巣化のコア・カスケードの第一候補として見出されたSOX9=>GDNFカスケードに関しては、マウスGdnf promoter領域のcis配列の機能解析を試みる。
口腔機能低下がメタボリックシンドロームおよびその構成因子の発症に及ぼす影響

本研究では,都市部一般住民のランダムサンプルを対象とした大規模な前向きコホート研究により,歯周病および咀嚼能力の低下がメタボリックシンドロームとその構成因子に及ぼす影響を縦断解析によって明らかにすることを目的とした.まずは,メタボリックシンドロームや動脈硬化が進行した結果として,循環器病の発症をアウトカムとした縦断解析を行った.分析対象者を国立循環器病研究センター予防健診部の健康診査を受診した1547名とし(平均追跡期間:4年),循環器病としては脳卒中および心筋梗塞とした.口腔機能としては,咀嚼機能の客観的指標として最大咬合力を測定した.最大咬合力と循環器病の発症との関連を解析したところ,ベースライン時に最大咬合力が低い者ほど,約4年後の循環器病発症のリスクが高いことが明らかとなった.また,口腔機能の一つとして咀嚼能力に関する基礎資料の構築も進めており,口腔健康状態が不良な場合に,咀嚼能力が経年的にどの程度低下するのかを検討した.本研究では,ベースライン時および5年後の再評価時の両方の歯科検診を受診した1201名を分析対象者とし,咀嚼能力を評価した.対象者における咀嚼能力の経年的低下に対して,どのような因子が影響を及ぼすかを検討し,それを用いて予測モデルを構築した.本研究で開発した予測モデルは,約5年後の咀嚼能力低下を定量的に予測し,そのリスクの高い者を同定して咀嚼能力低下を予防する上で有用なツールになると考えられる.平成30年4月から平成31年3月までの歯科検診にて,212名の再評価対象者のうち,同意の得られた187名に対して再評価を行った.また,13名の初回歯科検診対象者のうち,同意の得られた11名に対して初回歯科検診を行った.平成30-31年度内で400名の歯科検診再評価,および100名の初回歯科検診を目標としていたことから,データ収集の進捗状況としてはやや遅れていると思われる.縦断解析として,ベースライン時の最大咬合力と循環器病発症との関連を見出せたことから,口腔機能と生活習慣病との関連について,今後の前向きコホート研究の基礎資料を得ることができたと考えている.平成30年4月から平成31年3月までの,ベースラインおよび再評価を含めた全225名の対象者のうち、同意の得られた者は198名(88%)であった.同意の得られなかった理由のうち最も多いものは「時間がない」という理由であったため,検診の円滑な進行を推進できるよう見直しを図りたい.また,「歯科医院に定期受診に通っているため必要ない」との理由も見られたため,研究の意義を同意取得の際に明確に伝えるようにする.本研究では,都市部一般住民のランダムサンプルを対象とした大規模な前向きコホート研究により,歯周病および咀嚼能力の低下がメタボリックシンドロームとその構成因子に及ぼす影響を縦断解析によって明らかにすることを目的とした.まずは,メタボリックシンドロームや動脈硬化が進行した結果として,循環器病の発症をアウトカムとした縦断解析を行った.分析対象者を国立循環器病研究センター予防健診部の健康診査を受診した1547名とし(平均追跡期間:4年),循環器病としては脳卒中および心筋梗塞とした.口腔機能としては,咀嚼機能の客観的指標として最大咬合力を測定した.最大咬合力と循環器病の発症との関連を解析したところ,ベースライン時に最大咬合力が低い者ほど,約4年後の循環器病発症のリスクが高いことが明らかとなった.また,口腔機能の一つとして咀嚼能力に関する基礎資料の構築も進めており,口腔健康状態が不良な場合に,咀嚼能力が経年的にどの程度低下するのかを検討した.本研究では,ベースライン時および5年後の再評価時の両方の歯科検診を受診した1201名を分析対象者とし,咀嚼能力を評価した.対象者における咀嚼能力の経年的低下に対して,どのような因子が影響を及ぼすかを検討し,それを用いて予測モデルを構築した.本研究で開発した予測モデルは,約5年後の咀嚼能力低下を定量的に予測し,そのリスクの高い者を同定して咀嚼能力低下を予防する上で有用なツールになると考えられる.平成30年4月から平成31年3月までの歯科検診にて,212名の再評価対象者のうち,同意の得られた187名に対して再評価を行った.また,13名の初回歯科検診対象者のうち,同意の得られた11名に対して初回歯科検診を行った.平成30-31年度内で400名の歯科検診再評価,および100名の初回歯科検診を目標としていたことから,データ収集の進捗状況としてはやや遅れていると思われる.縦断解析として,ベースライン時の最大咬合力と循環器病発症との関連を見出せたことから,口腔機能と生活習慣病との関連について,今後の前向きコホート研究の基礎資料を得ることができたと考えている.平成30年4月から平成31年3月までの,ベースラインおよび再評価を含めた全225名の対象者のうち、同意の得られた者は198名(88%)であった.同意の得られなかった理由のうち最も多いものは「時間がない」という理由であったため,検診の円滑な進行を推進できるよう見直しを図りたい.

また,「歯科医院に定期受診に通っているため必要ない」との理由も見られたため,研究の意義を同意取得の際に明確に伝えるようにする.予定していたよりも歯科検診対象者が少なかったため,物品費の使用が少なかったと考えられる.翌年度では,収集したデータを解析するためのパソコンの購入,および唾液解析のための外注委託検査費用として支出する予定である.
ポリオウイルスの運動神経細胞での増殖制御機構の解明

急性灰白髄炎の原因ウイルスであるポリオウイルス(PV)は神経指向性を持つ.PVは脊髄や脳幹の神経細胞で選択的に増殖し、非神経組織ではウイルスが到達しても顕著な病変を生ずることがない.我々はヒトPVレセプター遺伝子を発現するtgマウスモデル(PVR-tg)を用いてこのPVの組織特異性の解明を目指してきた.PVR-tgとIFNα/βレセプターノックアウトマウス(Ifnar KO)を交配し、I型IFN応答のないtgマウスにPVを感染させると本来は標的とならないはずの肝臓、脾臓、膵臓などの組織でもPVが効率良く増殖し、病変を生じた.すなわちPVの増殖はIFN応答によって大きく左右される.PVR-tgマウスのIFN応答を調べると非神経組織ではウイルス感染前から2',5'-OAS,RIG-I,MDA5,IRF-7などの発現レベルが比較的高く保たれており、ウイルス感染に際し速やかで強いIFN応答が可能であった.逆に神経組織においてはウイルス感染前からこれらの遺伝子の発現レベルが低く、ウイルス感染直後に速やかで十分なIFN応答ができない.すなわちPVの組織特異的感染はIFN応答が組織によって不均一であるために生じていることが判明した.さらにOAS,RIG-I,MDA5などはIfnar KOマウスにおいても非神経系より多く発現していること、つまりIFNシグナリングに依らない発現制御により非神経系でより高レベルで発現することが判明した。さらに体内の一部でウイルス感染やpolyI:polyC刺激によってIFNを誘導してもおそらく血液・脳関門をIFNが通過しにくいために神経系にはIFN刺激が伝わり難いことが判明した。これの原因でIFN応答は組織によって異なった程度の反応をし、それがPVの組織特異性をもたらす原因であることが判明した。急性灰白髄炎の原因ウイルスであるポリオウイルス(PV)は神経指向性を持つ.経口感染によりヒトの体内にはいったPVは脊髄や脳幹の神経細胞で増殖、破壊することにより四肢のマヒなどに至る.しかし非神経組織ではウイルスが到達しても顕著な病変を生ずることがない.このような神経系に選択的な病原性はウイルスの吸着、侵入のレベルやウイルス遺伝子の発現レベルで制御されていると考えられてきたが、ポリオウイルスレセプター(PVR)やその他の宿主因子が同定されてみるとこれらは非標的組織でも広く発現が認められ、「複製に必須の宿主因子が揃っている組織が標的になる」という考え方では説明できないことが分かってきた.我々はヒトPVR遺伝子を発現するトランスジェニック(tg)マウスモデルを用いて組織特異性の解明を目指してきた.新たに自然免疫によるウイルス複製の阻害を考慮にいれる必要があると発想を転換し、I型IFN応答と特異性の関係をマウスモデルで調べた.まずIFNα/βレセプターをノックアウトしたPVR-tgマウスでは標的とならないはずの肝臓、脾臓、膵臓などの組織でもウイルスが効率良く増殖し、病変を生じた.すなわちPVは潜在的に増殖可能であるがIFN応答によって抑制されていたと考えられた.次に、正常なIFN応答をもつPVR-tgマウスのIFN応答を調べた.するとマウス個体においては非神経組織ではウイルス感染前から2',5'-OAS, PKR, RIG-Iなどの発現レベルが比較的高く保たれており、ウイルス感染に際し速やかで強いIFN応答が可能であった.逆に神経組織においてはウイルス感染前からこれらの遺伝子の発現レベルが低く、ウイルス感染直後に速やかで十分なIFN応答ができない.このようにPV感染の組織特異性はIFN応答が組織によって不均一であるために生じていることが判明した.急性灰白髄炎の原因ウイルスであるポリオウイルス(PV)は神経指向性を持つ.PVは脊髄や脳幹の神経細胞で選択的に増殖し、非神経組織ではウイルスが到達しても顕著な病変を生ずることがない.我々はヒトPVレセプター遺伝子を発現するtgマウスモデル(PVR-tg)を用いてこのPVの組織特異性の解明を目指してきた.PVR-tgとIFNα/βレセプターノックアウトマウス(Ifnar KO)を交配し、I型IFN応答のないtgマウスにPVを感染させると本来は標的とならないはずの肝臓、脾臓、膵臓などの組織でもPVが効率良く増殖し、病変を生じた.すなわちPVの増殖はIFN応答によって大きく左右される.PVR-tgマウスのIFN応答を調べると非神経組織ではウイルス感染前から2',5'-OAS,RIG-I,MDA5,IRF-7などの発現レベルが比較的高く保たれており、ウイルス感染に際し速やかで強いIFN応答が可能であった.逆に神経組織においてはウイルス感染前からこれらの遺伝子の発現レベルが低く、ウイルス感染直後に速やかで十分なIFN応答ができない.すなわちPVの組織特異的感染はIFN応答が組織によって不均一であるために生じていることが判明した.さらにOAS,RIG-I,MDA5などはIfnar KOマウスにおいても非神経系より多く発現していること、つまりIFNシグナリングに依らない発現制御により非神経系でより高レベルで発現することが判明した。