hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
IL-21のがん微小環境改善による抗腫瘍効果の増強

本研究は、より優れたがん治療薬の開発を目指すことを目標に始められた。悪性黒色腫などを始め幾つかの腫瘍においてインターロイキン21(IL-21)を標的とした臨床試験が行われているが、未だ十分な成績が収められていない。その理由として、IL-21はT細胞などのリンパ球を活性化するが、抗原提示を行う樹状細胞の働きを抑制してしまうからである。そのメカニズムを解明すべく申請者らはマウス骨髄細胞由来の樹状細胞において、IL-21の影響を調べた。その結果、これまでに骨髄細胞からBM-DCへの分化は5段階の過程を経ることを明らかにした。さらに、IL-21はある段階でBM-DCへの分化を停止させることを明らかにした。そこで、IL-21存在下、非存在下でGM-CSFで培養したBM-DCの細胞画分をセルソーターで単離後、RNA抽出を行い、マイクロアレイ解析を行った。この結果を踏まえ、当該年度ではマイクロアレイの結果得られたいくつかの候補遺伝子の発現について、解析を行った。まず最初にマイクロアレイで得られた結果を確認するために、同様のプロトコルで別に準備したBM-DCを用いて、定量PCR法を行った。この結果、マイクロアレイの結果は、再現性のあるものであることを明らかにし、幾つかの候補遺伝子について過剰発現、またはノックダウン細胞を樹立し解析していく予定である。さらに、IL-21により樹状細胞がどのような動向を示すのか、マイクロアレイで得られたデータを再度解析したところ、Type IIインターフェロンのシグナル経路に影響があることを明らかにした。現在、IL-21により発現が制御される分子とType IIインターフェロンのシグナル経路に対する影響について検討を進めている。申請者は当該年度の初めに異動になった。そのため実験系の立ち上げのために多くの時間を費やすこととなった。その間、研究分担者のグループは実験や解析を補助してくれたおかげで、時間のロスは最小限にすることができた。昨年の8月ころから、新たに実験を進めることができ、データを出しはじめることができたので評価は「やや遅れている」とした。まだ、十分に準備が整っていない部分も存在するが、最終年度には何とか遅れを取り戻したい。当初は、in vitroでIL-21の樹状細胞の成熟抑制機構に関与する分子を同定することを第1段階の目標としていた。その後、同定された分子の遺伝子改変マウスを作出し、腫瘍移植モデルにおいて、果たして腫瘍抑制効果が見られるかどうかを検討する予定であった。しかし、骨髄由来樹状細胞の分化を詳細に検討していく過程において、5つの段階を経て分化することを新たに見出し、その結果IL-21がその分化を途中で止めるということを明らかにした。ある分化過程で止まった骨髄由来細胞も明らかに樹状細胞特異的な分子を表出しており、IL-21は樹状細胞の"最終"分化を抑制し、それにより抗原提示能が低い状態が維持されるのであろうことが推測された。当初は漠然とIL-21添加により制御される遺伝子群を骨髄由来樹状細胞で探索するつもりであったが、そこで少し方針を変更し、IL-21により分化が停止する段階で発現の状態が変化する分子の探索に切り替えた。この間、時間的なロスが生じたが、より詳細を突き止めることに成功したと考えている。今後は、このようにして同定した分子の樹状細胞の分化に対する影響について検討していく予定である。そのために、マイクロアレイ解析の結果、明らかとなった分子群を過剰発現、または、ノックダウンさせることで、樹状細胞の分化マーカー因子の発現変化やT細胞への抗原提示能がどう変わっていくのか検討していく。悪性黒色腫などを始め幾つかの腫瘍において、IL-21を標的とした、悪臨床試験が行われているが、未だ十分な成績が収められていない。そのメカニズムを解明すべく、申請者らは、マウス骨髄細胞を、GM-CSFで培養し、樹状細胞マーカーであるCD11cや樹状細胞の成熟マーカーであるMHC class II、CD80、そして、PD-L1の発現を指標にマウス骨髄由来樹状細胞(Bone marrow derived dendritic cell, BM-DC)の分化を経時的に観察した。その結果、BM-DCは、5段階の分化過程を経て、成熟までに至ることを明らかにした。また、IL-21をこの分化過程において添加すると、BM-DCの分化は、ある未成熟の段階で停止することを突き止めた。さらに、GM-CSFのみで十分にBM-DCへの分化を誘導した後に、リポポリサッカライド(LPS)で活性化を誘導した際にも、IL-21の存在下では、BM-DCの活性化が抑制されることを明らかにした。このことは、IL-21は樹状細胞の分化成熟および活性化といった2つの相において、樹状細胞の働きを抑制することを示している。そこで、最初に骨髄細胞から樹状細胞への分化抑制に対するIL-21の働きを調べるために、IL-21存在下、非存在下でGM-CSFで培養したBM-DCの成熟細胞画分、非成熟細胞画分をそれぞれセルソーターを用いて単離、RNAを抽出し、マイクロアレイ解析を行った。その結果、幾つかの細胞画分での特異的遺伝子の発現が見られた。現在はその分子の機能解析に取りかかかっている。

これまではBM-DCの分化を観察するには、MHC class IIとCD80の発現のみが指標とされていた。この手法では培養されたBM-DCを1つの集団として、分化の様子を捉えることは出来ても、細胞個々の状態まではわからなかった。本研究の遂行過程において、BM-DCを5段階の分化の異なる亜集団に細分化することにより、樹状細胞の分化、活性化の様子を詳細に観察できるようになった。当初は、2年次からは、マウスを用いた実験を開始する予定であったが、この予想しなかった解析手法の発見により、in vitroでの解析が、より詳細に行えるようになったその反面、このin vitroでの解析に時間がかかり、マウスの実験にはまだ至っていない。本研究は、より優れたがん治療薬の開発を目指すことを目標に始められた。悪性黒色腫などを始め幾つかの腫瘍においてインターロイキン21(IL-21)を標的とした臨床試験が行われているが、未だ十分な成績が収められていない。その理由として、IL-21はT細胞などのリンパ球を活性化するが、抗原提示を行う樹状細胞の働きを抑制してしまうからである。そのメカニズムを解明すべく申請者らはマウス骨髄細胞由来の樹状細胞において、IL-21の影響を調べた。その結果、これまでに骨髄細胞からBM-DCへの分化は5段階の過程を経ることを明らかにした。さらに、IL-21はある段階でBM-DCへの分化を停止させることを明らかにした。そこで、IL-21存在下、非存在下でGM-CSFで培養したBM-DCの細胞画分をセルソーターで単離後、RNA抽出を行い、マイクロアレイ解析を行った。この結果を踏まえ、当該年度ではマイクロアレイの結果得られたいくつかの候補遺伝子の発現について、解析を行った。まず最初にマイクロアレイで得られた結果を確認するために、同様のプロトコルで別に準備したBM-DCを用いて、定量PCR法を行った。この結果、マイクロアレイの結果は、再現性のあるものであることを明らかにし、幾つかの候補遺伝子について過剰発現、またはノックダウン細胞を樹立し解析していく予定である。さらに、IL-21により樹状細胞がどのような動向を示すのか、マイクロアレイで得られたデータを再度解析したところ、Type IIインターフェロンのシグナル経路に影響があることを明らかにした。現在、IL-21により発現が制御される分子とType IIインターフェロンのシグナル経路に対する影響について検討を進めている。申請者は当該年度の初めに異動になった。そのため実験系の立ち上げのために多くの時間を費やすこととなった。その間、研究分担者のグループは実験や解析を補助してくれたおかげで、時間のロスは最小限にすることができた。昨年の8月ころから、新たに実験を進めることができ、データを出しはじめることができたので評価は「やや遅れている」とした。まだ、十分に準備が整っていない部分も存在するが、最終年度には何とか遅れを取り戻したい。前述の通り、BM-DCは骨髄からの分化過程において、5段階の過程を経ることを明らかにし、現在、分化段階の異なる細胞集団における遺伝子発現パターンを解析中である。
運動における日本人特有の感情不安と遺伝子多型との関連性

本研究において、5-HTTLPR遺伝子多型と環境(職業)的要因による心理状態への主効果がみられた。この成果より、事前に選手(例えばバレエダンサー)の普段の心理特性・状態を把握し、どういったストレス条件で心身ストレス反応になるかを予測しておくことは、選手のパフォーマンス発揮度を診断する客観的指標になると考えられた。5-HTTLPR遺伝子多型に関連があるあがりの心理特性は、少なからず感情表出・制御に影響を与えやすいという可能性はあるものの、日々の練習、経験を重ねることによる学習効果やプロになるという段階への長期的経験により、その遺伝子要因による個人差の隔たりはなくなることが示唆された。本年度は、まず人前でみられているというストレス条件下における局所・全身反応を測定し、性格特性で情緒不安定特性の高低群による相違についての成果報告を学会発表した。次に学生エリートダンサーおよびプロダンサーにおいて、ストレス条件による気分評価の縦断調査のデータ整理、評価・解析を行い、身体的・心理的負荷条件(練習日、集中日、公演間近日等)によって特性・状態不安の各高中低群別で気分の相違があるかを比較検討した。学生エリートダンサーにおいては、特性不安3群による気分の有意な違いはみられなかった。状態不安3群による気分評価は、公演間近日に有意差がみられた(p<0.05)。プロダンサーにおいては、特性不安3群による全条件日に有意差がみられた(p<0.05)。状態不安3群による気分評価は、出演者がほぼ全員集合したリハーサル初日にのみ相違があった(p<0.05)。学生エリートダンサーと違ってプロダンサーは、練習を重ねた公演間近日においては気分評価に有意差はなかった。プロダンサーは、特性不安の高低により普段の気分評価に違いがあるものの、公演間近の状態不安や感情変化が実力発揮度に関係する要因と考えると、状態不安には全く有意差が見られないという職業的プロ意識が感じられた。現在、これらの結果にセロトニン遺伝子多型がどの程度関連しているのか解析・評価を進めている。次年度にこの成果発表を行う予定である。本年度は、まず初年度までの成果報告を海外発表した。その後、セロトニントランスポーター遺伝子多型(5HTTLPR)の解析を終え、現在副次項目との関連性を検討している。また、マルチベースデザインで追加調査を行っている。現時点での5HTTLPR遺伝子多型解析は、20歳以上で同意を得て回収できた学生エリートダンサー(Univ)18名、プロダンサー(Pro)16名、計34名の女性ダンサーについて解析した。内訳は、l/l 0名(0%)、s/l 12名(35.3%)、s/s 22名(64.7%)であった。Univは、s/l 7名(20.5%)、s/s 11名(32.4%)、Proは、s/l 5名(14.7%)、s/s 11名(32.4%)であった。気分評価について、条件日を普段日、配役(合流)日、リハーサル日、公演間近日として2要因(5HTTLPR×Pro/Univ)の対応のある多変量分散分析を行ったところ、5HTT別、Pro/Univ別のそれぞれに主効果を認め、交互作用についても有意差があった。バレエダンサーにおいては、遺伝的要因もあるが、学生と職業的(環境)要因の相違が影響していることが強く認められた。次年度は成果発表を行い、引き続き追加検討をしていく予定である。平成27年度は、まず一昨年までの総合的データ解析・評価を行った。特性・状態不安高中低群での質的評価ではなく、精神系ゲノム多型(5-HTTLPR)に基づく量的解析による関係性を検討した。今回、簡便に事前質問紙チェックを行う方法により、日々の気分評価をして個々の情緒不安やストレスについて評価が出来るか試みたが、評価が可能であったのは、プロを目指しているエリートレベルの学生ダンサーのみであった。結果としては、感情表出・制御の個人差は環境・心理的要因を左右しやすく、遺伝子要因である5-HTTLPR多型による分類性の可能性は考えられた。しかしながら、日々の練習、経験を重ねることによる学習効果、年齢を追ってプロになるという段階を長期的に経験する間に、その遺伝子要因による個人差の隔たりはなくなり、様々な物事に対してポジティブに考えられる、いわゆる楽観的な性格特性へと傾向していくことが可能である、と示唆された。現在は、バレエにおける5-HTTLPR多型とストレス条件による感情表出との関連性について論文投稿中であり、次夏には国際学会にて発表予定である。平成27年1月4月末までは、プロバレエダンサーの観察研究を実施した。各ストレス条件測定日の前後に質問紙調査とゲノム多型(5-HTTLPR)調査を行い、時系列の心身状態と計測項目の関連性について調査した。副次的には練習日のストレッチ前後の4試技(左右別)の足底分布圧・重心動揺計測等を行い、動作と気分の関係性、およびストレッチ効果の観察を行った。また夏期においては、登山前後において質問紙調査とゲノム多型(5-HTTLPR)調査を行った。副次項目としては心拍、RPE、血圧、筋力、体重測定等であった。研究期間の延長によりこれらの解析・評価を引き続き行う。国際的社会情勢が不安定だったため、2月の国際学会参加を見送った。これまでの研究成果発表が次夏の国際学会(ICP2016)で受理され発表予定であり、論文投稿および引き続き解析・評価に時間を要することから、少々遅れていると評価した。

研究期間延長により、2016年度国際心理学会(ICP2016)にてこれまでの研究結果を国際発表し、その後論文発表にて成果報告を終えた。また前年度に行ったプロバレエダンサーの観察研究について、気分と重心動揺の関係性についても臨床スポーツ医学会において口頭発表することができた。対象は女性ダンサー5名、通常練習日、リハーサル日、公演直前日において、日課として行われているウォーミングアップ時間前後に計6回、立位およびバレエ基本姿勢6種の重心動揺・足底圧分布測定を行い比較検討した。結果としては、公演前までに大きな外傷・障害はなく、調子や気分について条件日毎に個人差があったが、全体としては公演前に向けての精神的ストレス反応の影響が増加していた。しかしながら、経時的には立位、第1ポジション、第5ポジション、軸足立ちともに、バランス、重心動揺の安定性がみられた。その後5-HTTLPR遺伝子多型を解析したところ全員がs/sであった。これはプロとエリート学生ダンサーにおける調査でみられた遺伝子要因よりも職業的(環境)要因による相違を裏付ける結果であった。以上により、プロバレエダンサーは基本姿勢のバランス能力維持、重心動揺の安定性が確認され、心身のストレス調整が出来ていることが示唆された。本研究において、5-HTTLPR遺伝子多型と環境(職業)的要因による心理状態への主効果がみられた。この成果より、事前に選手(例えばバレエダンサー)の普段の心理特性・状態を把握し、どういったストレス条件で心身ストレス反応になるかを予測しておくことは、選手のパフォーマンス発揮度を診断する客観的指標になると考えられた。5-HTTLPR遺伝子多型に関連があるあがりの心理特性は、少なからず感情表出・制御に影響を与えやすいという可能性はあるものの、日々の練習、経験を重ねることによる学習効果やプロになるという段階への長期的経験により、その遺伝子要因による個人差の隔たりはなくなることが示唆された。実験条件をマルチベースデザインに組み、追加被験者の調査を行っている。また、一部生体情報の計測が競技特性上省くことになったので、別の母集団で調査を立て直す予定である。研究期間中に調査した内容について、引き続き解析・評価を行い、最終フィードバックも行う。スポーツ心理学追加調査が終わり次第、追加解析を行う。また追加調査においては、レッスン前後で重心動揺と足底分布圧計測をしたので、出来れば個別解析を行いフィードバックを行う。また並行して次の調査準備に入りたい。PCR法であるが、DNA採取量が少なかったためPCR cycle settingの条件設定に少々時間がかかっている。それ以外の特性・状態不安と気分評価については、おおむね順調に進展している。また本年度以降実施内容の臨床研究倫理変更承認と関係機器の準備が整いつつあり、現在被験者募集中であり、本年中に実験開始が出来るように進めている。成果発表について次年度開催の国際学会に変更したため。また、論文投稿が次年度になってしまったため。当初予定していた調査日の調整をしたところ、年度越しの調査日が増えたため。また、初年度購入予定だった解析ソフトについて再検討しており、実質購入出来ていないため。
ナノ球リソグラフィーとシャドーコーン法によるナノロッド配列の作製と光学特性評価

Si基板上にZnOのナノロッド群を作製すると非常に鋭いレーザー発振スペクトルを示すという報告がなされている。しかし、ナノロッドを簡便に等間隔に配列する方法は確立されているとはいえない。ナノロッドを等間隔に配列すると、より鋭いレーザー発振スペクトルが得られたり、新規の光学特性が現れたりする可能性が期待できる。そこで、本研究ではナノ球リソグラフィーとシャドーコーン法によるナノロッド配列の作製とその光学特性評価を行なってきた。昨年までは表面拡散がほとんどないPtを用いてナノロッドを作製してきたが、本年はZnOを用いて作製を試みた。ZnOをシャドーコーン法で蒸着した場合、Ptに比べて表面拡散が大きく隣り合うロッド同士が完全に融合してしまい、もともとナノ球が存在したところのみ空洞が出来て、まわりがZnOになるというポーラス状になってしまった。この結果は偶然得られたものであるが、微粒子や分子をキャプチャーするような目的に利用できると考えられる。さて、本題のロッド配列を得るには蒸着の直線性を得る必要があるために、蒸着パスを250mmから400mmに伸ばすように蒸着装置の改造を行い、同様にシャドーコーン法を使用した。すると、ZnOはロッドとして成長し、先端部分でロッド同士が接着する部分が多少見られたが、ほぼロッドが独立して存在するような目的の構造を得た。この構造は以前に報告されているZnOロッド群と同等の密度でロッドが存在し、かつ等間隔に配列しているものである。次に光学特性を調べるために、紫外-可視光スペクトルを測定した。ロッドの高さを50nmから1μmまで変化させてスペクトルを測定したところ、400nm付近の吸収スペクトルが徐々に減少していった。このことがレーザー発振スペクトルに影響を与えるものと考えられるが、今後更なる検証が必要と考えられる。以上により本研究は初期の計画通り目的は達成された。ナノロッドを等間隔に配列すれば、より鋭いレーザー発振スペクトルが得られたり、新規の光学特性が現れる可能性が期待できる。本研究の目的は、新しい蒸着法であるシャドウコーン法を用いて等間隔に配列するナノロッドを作製する方法を開発することである。われわれはまず、等間隔ロッド配列の作製法を確立するために比較的表面拡散速度の低いPtによるロッド作製を目指した。Ptロッド配列は蒸着パスが長いときには隣接するロッド同士接着することがなかったが、蒸着パスを短くすると隣接ロッド同士が接着した。これはパスが短いと蒸着の平行性が保たれないためである。その際、ナノ球リソグラフィーの球のあった部分のみ何も蒸着されることがなく穴として残った。つまり、蒸着パスを変化させることにより、得られるナノ構造が制御できることが明らかとなった。また、この穴はハニカム構造で配列していることから、磁性微粒子配列など今後の応用に期待ができる。次に光学デバイスを目指してZnOのロッド配列作製を試みるが、表面拡散速度が速いために基板に到達後に広がることが考えられ、そのままではシャドウコーン法の利用が困難である。今後、表面拡散を減少させるためにさまざまな物質を蒸着源にドープし、シャドウコーン法によるZnOロッド配列を実現を目指す予定である。
ルーイーパーダ流「成就」実践の研究－チベットにおける受容と展開の解明－

本研究の成果は次の2点に纏められる:(1)サチェン以下のサキャ派五祖及びプトゥンの著した〈ルーイーパーダ流〉関連7文献の校訂テクスト及び訳註を整定し,その一部は雑誌掲載論文として発表した。(2)(1)に基づき,チベットにおける同流の相承経過に関する伝承内容を確認すると共に,主に曼荼羅観想法の内容から看取される各書の特徴を明確化して3編の雑誌論文に纏め,チベット密教界における〈ルーイーパーダ流〉の伝承と展開を探る一助とした。(1)研究計画に沿って,サキャ派師資による「チャクラサンヴァラアビサマヤ関連文献」のうち,1Grags pa rgyal mtshanによる註釈,2Sa pangによる解説の2書,及び3Bu stonによる成就法の計3書についてPC上への入力による電子ファイル化を行い,併せて日本語訳の整定と引用文の典拠遡及を行った。これは,平成26年度以降に行う'Phags pa及びTsong kha paによる「チャクラサンヴァラアビサマヤ関連文献」の解析に際して,内容理解の上で基盤を提供する重要な資料であって,その作業の効率的進捗に便宜を与えるものである。同時にまた,著作者達がチベットにおける〈ルーイーパーダ流〉相承系譜の中心を担ってきた人々であることから,そのテクストと翻訳の整定は本研究課題全体の中心目的であるチベットにおける同流伝承系統とその変容を解明することにとっても欠くことの出来ない資料である。(1)研究計画に沿って,サキャ派師資による「チャクラサンヴァラアビサマヤ関連文献」のうち'Phagspaの著した「成就法」2本について邦訳の整定と引用,並行文の遡及を行った。(2)前年度読解作業を行ったSa pang著『サンヴァラ・ルーイーパーダの十万粒』の第2部分を構成しているルーイーパーダ流相承師資伝のより詳細な考究を進めるために,Grags pa rgyal mtshan著『サンヴァラ・ルーイーパーダ流の相承上師の史伝』及びBu ston Rin chen grub著『サンヴァラ概論』を新たに参照文献に加え,前者の全文解読及び解析を行った。(3)これまでの研究成果の公表を意図して11月開催日本密教学会において「Sa skya派師資のCakrasamvarabhisamaya理解を巡って」と題して,また12月開催密教図像学会において「サパンのルーイーパーダ流理解」と題してそれぞれ研究発表を行った。(1)前年度における考察の過程で「ルーイーパーダ流」の伝承に連関を有することが明らかとなったSa chen Kun dga' sning poの著作『チャクラサンヴァラタントラ註』を新たに考察対象に加えて,その電子ファイル化,現行『チャクラサンヴァラタントラ』本文との校合及び翻訳を進めながら,引用されているナーローパなどルーイーパーダ流に関わる人物の所説の確認を進めることで,Sa chenに伝わった「ルーイーパーダ流」の具体像を考察する基礎資料の収集を図った。(2)前年度新たに参照文献に加えたBu ston Rin chen grub著『サンヴァラ概論』の後半部の読解を進め,その「ルーイーパーダ流相承師資伝」の内容を明らかにすると共に,同内容を扱っているSa pang著『サンヴァラ・ルーイーパーダの十万粒』の第2部分との比較対照を行って,両資料間の影響関係等を考察した。(3)平成26年11月に行った日本密教学会における研究発表の内容,及び同12月に行った密教図像学会におけるそれに,上記(2)の成果を含めこれまでに得られた新たな知見をも併せて,「サキャパンディタの〈ルーイーパーダ流〉理解ー『サンヴァラ・ルーイーパーダの十万粒』を中心にー」及び「Bu stonの示すCakrasamvara観想法ーrNal 'byor bshi ldanを中心にー」という2篇の論文に纏めて,それぞれ『密教図像』,『智山学報』上で公表した。Sa chen著『チャクラサンヴァラタントラ註』の考察を主に実施したため,本年度予定していたTsong kha paの著した「ルーイーパーダ流」所属諸書の読解に取り組めなかった,という事情に基づく判断である。但し本研究課題の目的が「サキャ派に端を発する同流儀伝承の明確化」であることからするならば,「サキャ派五祖」初代である彼の著作中に同流に関わる内容を見出しその詳細を明らかにすることは非常に重要であり,課題全体の深化を齎す手続きと判断されるため,それに起因する本遅延はやむを得ないものと考える。(1)前年度に引き続いてSa chen Kun dga' sning poの著した『チャクラサンヴァラタントラ註』の電子ファイル化及び現行『チャクラサンヴァラタントラ』本文との校合・翻訳を進めると共に,同書に引用された「ルーイーパーダ流」に関わる人物の所説を確認して,Sa chenに伝わった同流の具体像を考察する基礎資料の収集を図った。(2)一昨年度の研究において新たに「ルーイーパーダ流」の伝承を基盤に有する文献であることが明らかとなったbSodnams rtse mo著『サンヴァラ供養儀軌』を参照資料に加えて,そのテクスト整定及び読解を行った。

テクストについては『東北大学文学研究科研究年報』第66号上において「bSod nams rtse mo著dPal 'Khhor lo sdom pa'i mchod pa'i cho gaの原典研究」と題して,同書に引用された文献典拠を明らかにする註記を付して公表した。(3)当該年度末になって,中国蔵学出版社より『薩迦五祖文集』と題する新たな「サキャ派全書」が刊行されたため研究備品として入手して参照を進め,これまでに整定したサキャ派師資の「ルーイーパーダ流」関連諸テクストの内容により正確を期すべく,東洋文庫刊行の同「デルゲ版」が示す読みとの異同の確認を開始した。同作業は本年も引き続き続行する予定であり,整定テクストへの異同追記のほか,同書の頁数を付記して利用者の便宜を図る。前年度と同様,Tsong kha paの著した「ルーイーパーダ流」所属諸書の読解を行えなかったことによる。しかし新に加えた『チャクラサンヴァラタントラ註』及び『チャクラサンヴァラ供養儀軌』の2資料の検討は,本研究課題が目指す「サキャ派に端を発する同流儀伝承の明確化」をより深化させるものとなっており,本遅延はやむを得ないものと考える。昨年1月に中国より刊行された活字版サキャ派五祖全集『薩迦五祖文集』全25巻のうち,当該研究課題対象5書中の一書サチェンクンガニンポ著『チャクラサンヴァラ註』を取り上げて,既に整訂したテクストの読みと比較対照し,異同の有無を確認した。本『薩迦五祖文集』のテクストにはデルゲ版の葉数が記載されており,また校註が付されてもいないため,基本的には「デルゲ版の活字化」として扱うべきかと思われる。しかしその一方で同版と異なった読みが一部で取られているため,それらの読みを新たに加えた校訂テクストを公刊する予定であり,現在準備を進めている。更に,成果公表の一環として,タクパギェンツェン著『チャクラサンヴァラアビサマヤ註』のうち全体の四分の一程の校訂テクスト,及び和訳・訳註を作成し,同書の内容構成を主に実修儀礼の枠組みに注目して纏めた序文を付したうえで『東北大学文学研究科研究年報』第67号に「Grags pa rgyal mtshan著bDe mchog Lu hi pahi lugs kyi mnon par rtogs pahi rim paの原典研究(1)」と題して収載,公表した。本書の提示する儀礼は「等至の瑜伽」,「威儀の瑜伽」,「施食の瑜伽」,「食事の瑜伽」という4種類のユニットを基本的構成要素として,1日4回実践することを特徴としており,『チャクラサンヴァラアビサマヤ』自体の記載からその全体を予想することは困難な遥かに複雑なものであって,タクパギェンツェンに到る迄の伝承経過において構築されてきたものと考えられる。なお本年度も引き続き「同(2)」として,残余部のうち次の四分の一程度を公刊する予定である。本研究の成果は次の2点に纏められる:(1)サチェン以下のサキャ派五祖及びプトゥンの著した〈ルーイーパーダ流〉関連7文献の校訂テクスト及び訳註を整定し,その一部は雑誌掲載論文として発表した。(2)(1)に基づき,チベットにおける同流の相承経過に関する伝承内容を確認すると共に,主に曼荼羅観想法の内容から看取される各書の特徴を明確化して3編の雑誌論文に纏め,チベット密教界における〈ルーイーパーダ流〉の伝承と展開を探る一助とした。前年度解読に当たったSa pang著『サンヴァラ・ルーイーパーダ流の十万粒』第2部分のより正確な理解に資するため,Grags pa rgyal mtshan著『サンヴァラ・ルーイーパーダ流の相承上師の史伝』全文の読解・検討を新たな課題として付け加えて,その作業に取り組んだことにより,当初予定していたTsong kha paの著作の検討に進めなかったため。
デジタル光情報に基づく新規化学分析法の提案と化学センシングへの展開

従来の光分析においては、光スペクトルや吸光度などの光学的なシグナルを分光機器で測定し、精度の高い定量に用いるのが一般的である。本研究では、このようなスペクトロフォトメトリーではなく、色をデジタル情報として扱い、観測される色そのものをデジタルカラーアナライザーで測定する新たな分析法(Digital Color Analysis;DCA)を提案した。デジタルカラーアナライザーは簡便に色測定を行うことができる分析ツールであり、色を様々な方法で数値化したり、カラーライブラリー化したりすることができる。このため、スペクトロフォトメトリーよりも多くの情報を利用した多様な定量が可能となると同時に、色変化をシミュレートしてセンサー構築の最適化に用いることもできる。本年度の研究では、昨年のDCAに基づくオプトードデバイスの開発を目的とし、DCAに関するさまざまな基礎研究の結果をふまえ、最終的にナトリウムイオンセンサーへの応用を行った。ナトリウムイオノフォア(DD16C6)、脂溶性カチオン性色素(KD-M11)、脂溶性アニオン(TFPB)、膜溶媒(NPOE)をテトラヒドロフラン(THF)に溶解させてコート紙上でスピンキャストし、試験紙状のオプトード(光化学センサー)を作製し、このセンシシグペーパーに10^<-5>M1MのNa^+溶液を滴下して一定時間後に水分を拭い、デジタルカラーアナライザーにより反射スペクトルを測定した。メロシアニン系の変色色素であるKD-M11のみを含む試験紙の反射スペクトルを測定した結果より、試験紙の色変化と、さらにKD-M11および赤色のアゾ系遮蔽色素KD-S1を含む試験紙の色変化の数値処理を種々検討した。その結果、色度座標のひとつであるQxQy色座標が最適であり、この場合10^<-5>10^<-1>MNa^+の範囲での直線的検量線が得られた。また、デジタルカラーアナライザーを用いれば、1mMの濃度差で判別できることが分かった。本研究ではデジタル光情報を化学センシングに利用する目的で、デジタルカラーアナライザーで測定する新しい分析方法を提案した。デジタルカラーアナライザーは簡便、安易に色測定を行える分析ツールであり、測定されたスペクトルデータから三刺激値(X,Y,Z)を算出し、これをもとに数種の方法で色を数値化するあるいはデジタルカラーライブラリー化することができる。本年度は、デジタル色情報を利用して人間の目に鮮やかな色変化を作り出し、より正確な目視定量が可能となるNa+定量用のイオンセンシングプレートを作製した。このフィルムの色変化をデジタルカラーアナライザーで測定し、有効性を評価した。用いた化合物は、Na+選択性イオノフォアDD16C5、脂溶性アニオン性色素KD-A4又はKD-A5、脂溶性遮蔽色素KD-S1であり、これらを包括した可塑化PVC膜をスピンキャスト法によって作製し、イオンセンシングプレートを作製した。遮蔽色素を含まないセンシングプレートはNa+濃度が大きくなるに従ってyellowgreenblueと変色した。一方、遮蔽色素を含むセンシングプレートはorangegraypurpleと変色の途中で色味のないgrayを呈し、コントラストの大きい鮮やかな色変化をした。これら2つのプレートをスペクトロフォトメトリーでの最大吸収波長の吸光度変化により得られた応答曲線で比較すると差はほとんどみられなかったが、デジタルカラーアナリシスでの色差DEでこれらの応答を比較すると遮蔽色素を含むセンシングプレートではDEを増大(感度を増大)することができる。このため、遮蔽色素を加えることで、より正確な目視定量が可能なセンシングプレートを作製できることがわかった。
マルチメディア携帯情報機器向け固体撮像素子搭載の動画像符号化プロセッサLSI

1動画圧圧縮アルゴリズム、固体撮像素子の構成、LSIの低消費電力化・高性能化技術、等を調査し、長所・短所を洗いだした。2平成11年度は、平成10年度に開発した「中断法動きベクトル検出(ME)アルゴリズム」に改良を加えた。つまり、誤差の減少率がゼロとなるときに検出停止する、時前のベクトル情報を活用し探索範囲を最適化する、と言う二つの条件を加えた「改良中断法MEアルゴリズム」を開発した。この結果、動きベクトル検出の処理量をさらに削減し、画質のさらなる向上を図ることができた。平成12年度は動きベクトル検出を停止するしきい値として前フレームで求めた平均差分絶対値和を適応的に用いると言う条件を新たに加えた「改良中断法MEアルゴリズム」を開発した。この結果、シーンチェンジに対応でき、ME速度をさらに向上することができた。3処理量をさらに削減するために、画質探索(2画素、半画素検索)を「改良中断法MEアルゴリズム」と組み合わせ、その効果を高めた。4 ME探索回数を制限し、画質劣化を押さえた「強制中断法MEアルゴリズム」を開発した。5上述したMEアルゴリズムの開発により、信号処理量を20%以下に削減できた。この結果、従来技術に比べ、MEアレイの回路規模を1/2以下に、その消費電力を1/250以下に、それぞれ削減できる見通しを得た。6設計・試作・評価:「中断法・低ビットMEアルゴリズム」をハード化するための各種TEG(MEアレイ、差分絶対値和回路、メモリ、等)を0.5μmCMOS技術を用いて試作した。(1)動画像圧縮アルゴリズム、固体撮像素子の構成、LSIの低消費電力化・高性能化技術、等を調査し、長所・短所を洗いだした.(2)我々が開発した「中断法動きベクトル検出(ME)アルゴリズム」に、誤差の減少率がゼロとなる時に検出を停止する、時前のベクトル情報を活用し探索範囲を最適化する、と言う二つの条件を加えた「改良中断法MEアルゴリズム」を開発した.この結果、動きベクトル検出の処理量をさらに削減し、画質のさらなる向上を図ることができた.(3)処理量を削減する既存の技術(サブサンプリング法、ハーフペル検索)を「改良中断法碓アルゴリズム」と組み合わせ、その効果を高めた.(4) 8ビット画素データを4ビットおよび1ビットに削減した「低ビットMBアルゴリズム」を開発し、信号処理量を大幅に低減した.これと「改良中断法MEアルゴリズム」と組み合わせて、「中断法・低ビットMEアルゴリズム」を開発した.(5)上述したMEアルゴリズムの開発により、信号処理量を20%以下に削減できた.この結果、従来技術に比べ、MEアレイの回路規模を1/2以下に、その消費電力を1/250以下に、それぞれ削減できる見通しを得た.(6)設計・試作・評価:「中断法・低ビットMEアルゴリズム」をハード化するための各種TEG(MEアレイ、差分絶対値和回路、メモリ、等)を0.5μmCMOS技術を用いて設計した.(1)動画像圧縮アルゴリズム、固体撮像素子の構成、LSIの低消費電力化・高性能化技術、等を調査し、長所・短所を洗いだした.(2)昨年度開発した「中断法動きベクトル検出(ME)アルゴリズム」に、動きベクトル検出を停止するしきい値として前フレームで求めた平均差分絶対値和を適応的に用いると言う条件を加えた「改良中断法MEアルゴリズム」を開発した.この結果、シーンチェンジに対応でき、動きベクトル検出速度をさらに向上することができた.(3)処理量をさらに削減するために、階層探索(2画素、半画素検索)を「改良中断法MEアルゴリズム」と組み合せ、その効果を高めた.(4)ME探索回数を制限し、画質劣化を押さえた「強制中断法MEアルゴリズム」を開発した.(5)上述したMEアルゴリズムの開発により、信号処理量を20%以下に削減できた.この結果、従来技術に比べ、MEアレイの回路規模を1/2以下に、その消費電力を1/250以下に、それぞれ削減できる見通しを得た.

(6)設計・試作・評価:「中断法・低ビットMEアルゴリズム」をハード化するための各種TEG(MEアレイ、差分絶対値和回路、メモリ、等)を0.5μmCMOS技術を用いて試作した.
網膜色素上皮細胞とマイクログリアの相互作用と眼内増殖膜への影響に関する研究

増殖硝子体網膜症における牽引性網膜剥離を生じる病態は、網膜下または網膜上に生じた増殖膜が収縮することで網膜が牽引されることによる。マイクログリアの収縮能を検討するためにコラーゲン収縮アッセイを用いて検討した。コラーゲン収縮能アッセイは、まず細胞をコラーゲンゲル溶液に混和し、その後ゲル化させ、ゲルの情報には培養液を添加し培養する。その後、ゲルをwellの壁から剥がすとゲルが収縮するため、その径を測定することにより収縮能を解析する方法である。マイクログリアは生後1ー3日のラット脳より単離した。混合グリア細胞としてまず培養し、EDTA処理で1型、2型マイクログリアを単離し、また、トリプシン処理により混合グリア細胞を回収した。5x106細胞/mlでコラーゲンゲル溶液へ混和し37度でゲル化を行った。その後、固まったゲルの上部へ細胞培養液をウシ胎児血清、LPS、MCP-1をそれぞれ添加し収縮能の違いについて検討した。EDTA処理を行い回収したマイクログリアはウシ胎児血清未添加下ではコラーゲン収縮能は示さなかった。ウシ胎児血清添加下ではわずかに収縮能を示す傾向にあり、LSP添加で収縮能が増強される傾向にあった。一方、トリプシンによって回収した混和グリア細胞では、ウシ胎児血清フリーでLPS、MCP-1への反応性が良く、よりゲル収縮能が高かった。これらの結果より、コラーゲン収縮に関しては、混合グリアのうち、asutrocyte、2型マイクログリアがより寄与している可能性が考えられた。マイクログリアの単離に時間が想定より要しているためRPEとマイクログリアの共培養もすすめながら、マイクログリアの分泌する液性因子とRPEのEMTへの影響について検討する。網膜色素上皮細胞はその活性化により様々な液性因子を分泌すると考えられ、その結果、血管新生や眼内の線維化の一要因であると考えられている。また、その活性化状態により様々な炎症細胞、グリア細胞が活性化、遊走すると考えられる。網膜色素上皮細胞が分泌する液性因子として、特にエキソソームに注目をした。エキソソームはそのvesicle内にタンパクやmRNA、miRNAなど多くの情報を内包し、異種細胞間の情報伝達に大きな役割を担っているとして、近年注目されている。我々は網膜色素上皮細胞(ARPE-19)にTNF-α、TGF-β2刺激(単独刺激、共刺激)を行い、上皮間葉転換(EMT)を誘導した後、その培養上清を回収し、EXOQUIC試薬を用いてエキソソーム抽出を試みた。無血清培地での培養下ではエキソソームを抽出できず、10%FBS(エキソソーム無添加)下、TNFーα、TGF-β2刺激を行い、培養上清を回収し、エキソソームを抽出した。ウエスタンブロットにより、抽出したペレットはエキソソームマーカーであるCD9,HSP70の発現を認め、細胞成分であるGM130は認めなかったことから、エキソソームが抽出されていると考えられる。さらに、エキソソームELISAを用いたところ、TNF-α存在下に特にエキソソーム分泌が亢進することがわかった。抽出したエキソソームについてはさらに今後、particleの直径、数ともに解析予定である。今回使用したARPE-19細胞に加え、primaryRPE細胞でも同様の実験を行い確認予定である。そのうえで。抽出したエキソソームに関してはマイクロアレイにより、上皮系、間葉系の状態による内包する情報の違いを解析していきたい。液性因子同定に想定以上の時間がかかり、マイクログリアとの共培養まで至っていない増殖硝子体網膜症における牽引性網膜剥離を生じる病態は、網膜下または網膜上に生じた増殖膜が収縮することで網膜が牽引されることによる。マイクログリアの単離に時間が想定より要しているためエキソソームの解析をすすめ、線維化に関連する、特にmiRNAを同定する。また、エキソソームのenvelopの解析も行い、構成タンパクの違いによるマイクログリアのエキソソームの取り込みの違い等の検討を行う予定である。

RPEとマイクログリアの共培養もすすめながら、マイクログリアの分泌する液性因子とRPEのEMTへの影響について検討する。学会参加がなかったことと、確認実験が多く新規の試薬を購入する必要が少なかったため。次年度使用としては、学会に参加予定であること、また、必要な新たな解析を行う予定である。
チャネル蛋白の細胞内動態とその制御機構の解明

1.AQP2遺伝子異常による常染色体優性腎性尿崩症の原因となっている変異AQP2を3例解析した。これらの変異はいずれもC末端近傍に認められ、いわゆるドミナントネガティブ効果によって形質膜へのトラフィッキング障害をきたしていることが示唆された。したがってAQP2のC末端は細胞内トラフィッキングを制御していると推定された。さらに、同じ変異AQP2を腎由来培養細胞であるMDCK細胞に遺伝子導入して発現させたところ、この変異AQP2は本来の頂側膜ではなく、側底側膜にトラフィッキングされていることが判明した。以上よりAQP2はC末端にソーティングシグナルがあることがほぼ確実であり、このシグナルを同定するとともにシグナルに結合する因子を同定するため、さらなる研究を行っている。2.従来、常染色体劣性腎性尿崩症の原因となっている変異AQP2は単体のまま小胞体にとどまるとされていたが、免疫沈降法によって変異AQP2と野生型AQP2は4量体を形成していることを示した。したがって、変異型と野生型AQP2の混合4量体は、ゴルジ装置まで輸送されている可能性が示唆された。3.線虫C. elegansの遺伝子F40F9.9がコードする蛋白は水チャネルであり、発現実験で形質膜への発現を確認した。この蛋白はC. elegansにおいて同定された2番目の水チャネルであることから、AQP-CE2と名付けた。4.野生型AQP3を腎由来培養細胞であるMDCK細胞に遺伝子導入して発現させたところ、in vivoと同様に側底側膜に発現していた。AQP2より得られた知見からAQP3もC末端に側底側膜へのソーティングシグナルがあると推定され、さらなる研究を行っている。5.細胞内蛋白動態と関連した細胞内シグナリングにおいても若干の知見を得た。今年度は、細胞内における蛋白の動態やシグナリングの研究から、以下のような結果が得られた。1.線虫C.elegansの遺伝子であるF40F9.9のコードする蛋白は、アクアポリン水チャネル(AQP)に特有なアミノ酸配列(2箇所のNPA配列)を有している。そこで、この蛋白がAQPであるかどうかを、アフリカツメガエル卵母細胞を用いて検討した。この蛋白を発現させた卵母細胞では、免疫細胞化学的検討から形質膜上に蛋白が発現していることが確認された。また、蛋白発現によって水透過性は10倍以上に増加していた。よってわれわれは、この蛋白をAQP-CE2(C.elegansで同定された2番目のAQPという意味)と名づけた(論文1)。2.STAT1が細胞増殖に与える影響を培養ラットメサンジウム細胞を用いて検討した。インターフェロンγを加えた細胞では、JAK1,KAK2,STAT1が同定され、JAK-STAT系がインターフェロンγによって活性化していることが示唆された。また、thymidine取り込みや、変異STAT1を用いた一連の実験から、インターフェロンγによって活性化されたSTAT1がメサンジウム細胞の増殖を抑制することが示唆された(論文2)。3.常染色体優性遺伝の腎性尿崩症を呈する3家系から、3種のAQP2遺伝子異常を見出した。これらの変異AQP2は、野生型AQP2と4量体を形成するものの、形質膜上への発現はほとんど認められなかった。免疫細胞化学的等の検討から、変異AQP2は細胞内蛋白輸送が障害されているため小胞体ないしはゴルジ装置にとどまることが示唆された。この結果は論文にまとめて投稿準備中である。1.AQP2遺伝子異常による常

染色体優性腎性尿崩症の原因となっている変異AQP2を3例解析した。これらの変異はいずれもC末端近傍に認められ、いわゆるドミナントネガティブ効果によって形質膜へのトラフィッキング障害をきたしていることが示唆された。したがってAQP2のC末端は細胞内トラフィッキングを制御していると推定された。さらに、同じ変異AQP2を腎由来培養細胞であるMDCK細胞に遺伝子導入して発現させたところ、この変異AQP2は本来の頂側膜ではなく、側底側膜にトラフィッキングされていることが判明した。以上よりAQP2はC末端にソーティングシグナルがあることがほぼ確実であり、このシグナルを同定するとともにシグナルに結合する因子を同定するため、さらなる研究を行っている。2.従来、常染色体劣性腎性尿崩症の原因となっている変異AQP2は単体のまま小胞体にとどまるとされていたが、免疫沈降法によって変異AQP2と野生型AQP2は4量体を形成していることを示した、したがって、変異型と野生型AQP2の混合4量体は、ゴルジ装置まで輸送されている可能性が示唆された。3.線虫C. elegansの遺伝子F40F9.9がコードする蛋白は水チャネルであり、発現実験で形質膜への発現を確認した。この蛋白はC. elegansにおいて同定された2番目の水チャネルであることから、AQP-CE2と名付けた。4.野生型AQP3を腎由来培養細胞であるMDCK細胞に遺伝子導入して発現させたところ、in vivoと同様に側底側膜に発現していた。AQP2より得られた知見からAQP3もC末端に側底側膜へのソーテイングシグナルがあると推定され、さらなる研究を行っている。5.細胞内蛋白動態と関連した細胞内シグナリングにおいても若干の知見を得た。
パーキンソン病のストレスに対する鍼治療の臨床的意義に関する検討

目的:パーキンソン病のストレスに対する鍼治療効果を検討すること。方法:対象患者は16名であり、全患者が標準的な薬物治療を受療していた。鍼治療は先行研究を参考とした経穴に対して施術した。評価は、唾液アミラーゼ、コルチゾール、オキシトシンと、携帯型歩行計を用いて10m歩行を行い、平均歩行加速度、歩幅、歩行速度を記録した。これらの評価を鍼治療の施術前後に行った。結果:鍼治療によって唾液アミラーゼ、歩幅、歩行速度、平均歩行加速度の有意な改善がみられた。まとめ:本研究はパーキンソン病のストレスに対する短期的な鍼治療効果を示した。今後は症例数を増やし、長期間の鍼治療効果の検討が必要と考えた。研究のpilot studyとして、パーキンソン病患者のストレス軽減に対する効果を検討するために、22名のパーキンソン病患者を対象に唾液アミラーゼを指標として鍼治療を行った。その結果、鍼治療の直後に唾液アミラーゼ値が有意に低下し、鍼治療の本疾患に対するストレス軽減の可能性が示唆された。大学内の事情によって、研究拠点が変更となった。このため、引越し作業等で研究が中断したために研究計画に遅れがでている。パーキンソン病患者22名(その内6名は除外基準に該当したため脱落症例として扱った)に対して5週間(毎週1回の鍼治療×5回)の鍼治療を行い、歩行機能(歩行速度、歩幅、平均歩行加速度、歩行率)、歩行バランス機能(Timed Up and Go test)の有意な改善がみられた(p<0.05)。また、ストレス関連物質である唾液アミラーゼは軽減する傾向がみられた(p=0.06)が、コルチゾールやオキシトシン、クロモグラニンAには変化がみられなかった。ストレスに対する鍼治療効果は、唾液アミラーゼのみが減少する傾向がみられた。唾液アミラーゼの分泌は他のストレス関連物質とは異なり、交感神経-副腎髄質系(ホルモン作用)と直接神経作用(神経作用)により分泌され、急性および慢性ストレスによって濃度が高くなる。このため、唾液アミラーゼは鍼治療によるストレスの変化を感度高く反応した可能性が考えられた。歩行機能に関してはこれまで鍼治療直後の効果のみが報告されていたが、鍼治療の累積的な効果もみられることが示された。今年度中に鍼治療期間における各ストレス関連物質の変化とパーキンソン症状の変化の関連性について追加の解析を行い、研究成果を発表する予定である。大学内の諸事情により研究拠点が変更となり当初の予定より研究スケジュールが遅れてしまったため。本研究の目的は、これまで行われていなかったパーキンソン病のストレスに対する鍼治療の臨床的効果を検討することである。本研究では、唾液中のアミラーゼ、コルチゾール、オキシトシンを指標として探索的に検討した。また、同時にパーキンソン症状である歩行機能もあわせて測定した。平成27年度よりパーキンソン病患者をリクルートし、鍼治療期間(5週間)の前後における効果を比較した。本研究にパーキンソン病患者20例が参加したが、4例が薬物治療の変更や骨折などでdropoutし、16例の結果を解析した。鍼治療期間の前後において、唾液中のアミラーゼが有意に低下し、ストレスの緩和作用が認められた。また、パーキンソン症状の変化としてTimed Up and Goや、歩行速度、歩幅、平均歩行加速度である歩行機能が有意に改善した。本研究で得られた結果から、ストレス関連物質においては、唾液アミラーゼのみが鍼治療期間の前後で減少する傾向がみられた(p=0.06)。今後は鍼治療期間における各ストレス関連物質の変化とパーキンソン症状の変化の関連性について追加の解析を行う。また、症例数をさらに増やして、プラセボ効果を除外した鍼治療効果を検討することも検討している。本実験の患者リクルートを患者会や大学附属病院神経内科外来で始めている。平成28年度7月までに患者のリクルートを終えて研究を開始し11月までに研究期間を終了し、データを解析する予定である。研究にエントリーした患者のスケジュールが終了し、結果が全て得られた。今後は詳細な解析を行い、論文作成等の研究成果につなげる予定である。鍼灸学研究実施の拠点が定まらなかったことにより、研究開始が遅れている。このため、ストレス関連物質の解析が行えなかったために前年度の使用額が予定よりも少なくなっている。大学内の諸事情により研究拠点の変更があり、一時研究を中断したため研究計画に遅れが生じたため。ストレス関連物質(アミラーゼ、クロモグラニンA、コルチゾール)の解析費用として使用する予定である。

研究成果の学会発表や、学会投稿料などの成果発表に使用する予定である。本疾患に対する鍼治療効果の啓蒙活動としてホームページを作成している。患者リクルートと研究結果を掲載する予定である。HP名:「パーキンソン病に対する鍼灸治療について」
点うち課題アプリによる注意制御能力評価に基づく活動能力スクリーニングテストの開発

2018年度においては、研究計画書に示した予定通り、検査の標準化を図るための、点うちテストと関連検査成績の高齢者データのデータ収集とモデル症例の作成のための失調症およびパーキンソニズムを示す疾患データの収集を行った。高齢者データは約60症例、若年者20症例、疾患データはおよそ6症例を収集した。健常および症状による誤反応のカテゴライズなどの質的分析を行いつつ、そのデータ処理の方法について検討中である。本検査は刺激音に合わせて同心円ターゲットの中心点を的に点を打つ、点うちテストの開発であるが、刺激音について一定リズムの課題では、刺激音よりも早く点を打つ行動が観察される。そのほかの誤反応としては、お手付きと刺激音の聞き落としが健常でも観察される。これらは観察や内観情報によってカテゴライズすることが可能であるが、数量的な処理に関して、詳細な検討を必要をした。健常者の反応と疾患群での反応を分析するための基本として、病的な誤反応を含めてすべての誤反応を網羅していく必要があるため、多彩な高齢者データを60症例収集し、疾患データ6例を追加収集し、点うちテストに影響する因子を分析するために疾患群との対比を行い健常の定義を明確にしようと今年度検討を進めてきた。疾患データは症状とその重症度がバラバラなため、より多くのデータを収集中である。ビデオ画像の観察も含めて、典型的なデータをもとに誤反応を洗い出している。開発中の点うちテストの新規性は、一定間隔の刺激音に対する反応と、特定の刺激音にのみ反応する両課題の乖離をどのようにし評価するかであり、誤反応処理を行った後のデータで解析するため、生データのパターンを視覚分析しその特徴を検討中である。誤反応処理の質的分析を行うため、ビデオ撮影での検討や疾患データの分析を追加する必要から、医の倫理審査の追加変更等の事務処理を行う必要があり、その間データ分析や収集に滞りが生じ、時間を要した。今後標準化のため健常者データ等の補強を行っていく予定である。また疾患群については対象コントロールを用い、その比較により症状の影響を分析し、検査としてのカットオフを求めていくことを考えている。テストに含まれる2課題の成績の乖離をどのようにし評価するかを探索しつつ、認知機能と関連があるのか検討していく予定である。誤反応処理の方法が確立したら、基本統計が行えるので次の分析に進展できる予定である。分析方法までが確立した時点で、関連学会での公表を予定している。年度末3月に行った研究打合せの参加者が、予定より1人減ったため、次年度使用額が生じた。次年度の旅費あるいは、研究成果発表のための学会参加旅費及び参加費に使用する予定である。