hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
心停止下ドナーによる肝移植のための新規保存液を用いたグラフト灌流保存法の開発

しかも冷保存にあるということが判明した。すなわち温阻血のみ150分完全阻血状態の肝臓でも、虚血再灌流後、循環不全は発症するものの生存においては120分とも有意差なく、その原因も明らかとはならなかった。従って、心停止ドナーの肝臓を有効利用するためには温阻血のみならず、その後の冷阻血障害を克服しなければならないと考えるに至った。一方、我々は肝臓体外灌流保存装置を研究用試作機として完成させ、温度条件、酸素供給条件を検討していた。その中で冷温から22°Cまでのsubnormothermiaが代謝の面から良好であり、かつ酸素消費も増加する事実を見出しており。新規灌流液のためには、酸素運搬体などを含んだ灌流液、さらに22°C程度で薬物代謝をおこなえる薬剤を応用すること、老廃物の除去なで心停止ドナーからの阻血障害(温阻血+冷阻血障害)を克服することができると考えている。現在、共同研究として人工赤血球を用いた研究、人工肺を用いた研究、除去フィルターを用いることを念頭にした研究を推し進めているため計画通りと考えている。心停止ドナー肝に対する灌流保存液のHESに関する基礎的検討を行った。[目的]欧米において心停止ドナーからの臓器移植は活発になり、マージナルドナーからの臓器移植において心臓、肺、肝臓、腎臓において灌流保存方法が行われている。一方、心停止ドナーに適した灌流液の開発は行われてはいない。世界に普及したUW液は、単純冷却用および機械灌流用ともに、膠質浸透圧を維持するためにHESが含まれているものの、HESそのものの効果は疑問視されている。今回、我々はブタを使った心停止ドナー肝臓の室温保存(22°C&copy;前後)においてHESの効果について検討したので報告する。【方法]ブタ(体重20kg)を用いた、Group1:心停止後60分(WIIT60)で肝臓を摘出し作製した灌流液modifyUWーgluconate液(HESを含まないでPEGに置き換えた灌流液)(Group1)および欧米で市販されているHESを含む灌流用保存液Belzer machine UW液(UW-gluconste)( Group2 )を比較した。灌流時間は4時間で行った。【結果】保存中、門脈圧、肝動脈圧力は両群ともに低下傾向であったが、有意差は見られなかった。保存中の逸脱酵素AST, LDHはともにGroup 1において低値であり、特にASTにおいては有意差がみられた。Viscosityに関しては,両群ともに温度上昇に従い低下したが、有意差は見られなかった。【結語]心停止ドナーからの臓器灌流保存においてHESを含んだ灌流保存液は、肝臓においては必ずしも適切な保存液とはいえず、新たな発想でのかん流液の開発が必要であることが示唆された。深刻な臓器提供者不足の中で期待のかかる心停止ドナー肝の還流保存に関してブタを用い、最適な灌流液、温度や灌流条件の検討を行った。成果としては、保存温度上昇とともに、酸素消費量は上昇し、門脈圧、動脈圧が低下する傾向が見られた。灌流液中AST,LDH,ヒアルロン酸と負の相関のあることが判明し、shear strssの軽減が示唆された。また、臓器灌流保存のHESを含んだ灌流保存液は、心停止肝においては必ずしも良好な保存組成成分とは言えないことが判明した。
フランス現代詩の詩空間の生成に対する〈俳句〉の影響の比較的総合研究

本年度は3年計画の最後の年にあたる。これまでの2年間に、芭蕉の俳句、現代詩の一般的問題、フランス現代詩人のChar, du Bouchet, Dupin等にあたって、俳句的なるものの対照研究を行ってきたが、3年目の本年度は、以上をベースとして、フランスにおける戦後の俳句の受容が、どのようにフランスの詩人たちにおいて内在化されていったかを検証した。フランス人は俳句の受容にあたって、最小限の字句しかつかわない俳句の形式にとりわけ関心を寄せた。それは一見、20世紀前半のエキゾチスム的関心と同傾向とも見えるが、しかし第二次大戦後の詩人たちはむしろそこに、自らの詩とはまったく異なる詩世界の本質を探り当てることで、その邂逅を自らの詩作に反映させようと試みたといえる。彼らは俳句を「清澄な世界」、「超然とした世界」と呼び、この最小限の形式により人と世界の関係は一種の根本的な中立状態におかれるとみなした。そういった判断が、どのように西洋の詩人たちの価値観に内在化されどのような詩作品を生んだかを、本年はおもに、1924年生まれのフランス詩人アンドレ・デュ・ブシェ(Andre du Bouchet)と1930年生まれのフランス語圏スイスの詩人ピエール・シャピュイ(Pierre Chappuis)という2人の現代詩人をとおして考察し、論文としてまとめた。すなわち、"Poesie Moderne etemotion : lyrisme etparoleenergie"(シンポジウムLe langage, ce particulier, ce singulier, Universite de Tsukuba,2004,での発表をもとにした論文、2005年度刊行予定)であって、上記ふたりの詩人たちのともに断片性を主調とする作品のうちに、最小限詩形がどのような情動の世界を現出しているかを明らかにしたものである。本年度は本科研の初牟度であり、まずはフランス20世紀の詩に関する書籍・文献を、とくにChar, Du Bouchet, Bonnefoy, Jaccottet, Jouveを中心に収集した。また、フランスよりDominique Villart招き、Dupinの詩空間をテーマとしてセミナーを開いて討論と意見交換の場をもった。こういった研究活動を通して、20世紀におげる"je"に統べられた言語世界の崩壊を予感しつつ詩人たちがいかに自らの言葉を詩言語の限界へと追い詰め、そこにいわばひとつのseuilとも呼ぶべき境界の場を創ろうと努力していたかを考察した。フランク・ヴィランは、とりわけ上述の点についてChar, Du Bouchet,さらにCharと山村暮鳥のポエジーの対照分析(両者の詩世界のseuil性)をとおして考究し、有吉豊太郎はBonnefoyのポエティックが俳句と結び合う場の確定を試み、川那部保明はP.J.Jouveの詩において超越性に統べられてきた言語が無意識性へと降りてくる現場を考察した。これらの考察は現在のところ個別に行われているが、次年度はその結果を、20世紀フランス詩のカタストロフをいかに超え出るかの方向を示すものとして総合的に捉え、その方向がどのように俳句や禅との出会いと響きあっているかに論を進めていくことになろう。本年度の研究は、20世紀という時間の流れのなかで、俳句がどのようにフランスに影響を与えてきたかを確認し、そこに生じる問題点を浮き彫りにすることであった。20世紀当初のフランスにおいては、俳句はさまざまなかたちで紹介され、またフランス語での俳句製作も試みられはしたが、総体としてはたんなるエキゾチスムの域をでていなかった。この状態が第二次大戦期まで続いたあと、俳句へのあたらしいアプローチがなされ始めたのが、1960年代であった。俳句は、とくに<自己消去><言葉の消去

>というかたちで当時の詩人たちに理解され始める。しかしその理解は多分に、フランス現代詩の問題意識に引きつけたかたちでなされたものであり、俳句固有の世界の理解がまずあったうえでなされたものとはいえない。たとえば季語等を核とする俳句の詩的世界の緊張を十分に理解したうえで、そこから彼らの詩作への影響を得るというものではなかった。この点をふまえ、俳句とフランス現代詩それぞれの詩世界の本質をいまいちど根本から比較検討するために、2003年12月6-7日東京日仏会館においてEcriture du peu et le haiku(微少のエクリチュールと俳句)と題する国際学会を開催し、フランスからの招待を含め4名のフランス人研究者と、8名の日本人研究者の研究発表をとおして、研究交流をおこなった。そこで扱われたテーマは、ボンヌフォア、ジャコテ、デュパン等の現代詩人たちにおける<微少性>、俳句における<微少性>、俳句と禅の関係、空の考え方と芸術の関係、等であった。本年度は3年計画の最後の年にあたる。フランスにおける戦後の俳句の受容が、どのようにフランスの詩人たちにおいて内在化されていったかを検証した。フランス人は俳句の受容にあたって、最小限の字句しかつかわない俳句の形式にとりわけ関心を寄せた。それは一見、20世紀前半のエキゾチスム的関心と同傾向とも見えるが、しかし第二次大戦後の詩人たちはむしろそこに、自らの詩とはまったく異なる詩世界の本質を探り当てることで、その邂逅を自らの詩作に反映させようと試みたといえる。彼らは俳句を「清澄な世界」、「超然とした世界」と呼び、この最小限の形式により人と世界の関係は一種の根本的な中立状態におかれるとみなした。そういった判断が、どのように西洋の詩人たちの価値観に内在化されどのような詩作品を生んだかを、本年はおもに、1924年生まれのフランス詩人アンドレ・デュ・ブシェ(Andre du Bouchet)と1930年生まれのフランス語圏スイスの詩人ピエール・シャピュイ(Pierre Chappuis)という2人の現代詩人をとおして考察し、論文としてまとめた。すなわち、"Poesie Moderne etemotion : lyrisme etparoleenergie"(シンポジウムLe langage, ce particulier, ce singulier, Universite de Tsukuba, 2004,での発表をもとにした論文、2005年度刊行予定)であって、上記ふたりの詩人たちのともに断片性を主調とする作品のうちに、最小限詩形がどのような情動の世界を現出しているかを明らかにしたものである。
医療デザインにおけるデザイン方法論の確立とその応用

本研究は、医工連携に対してデザインでの実務性をより具体的にすることを目的に、3D-Printerの方式である光造形STL法と熱溶解積層法FDM法式の造形機を用いて、医工デザイン技術=3D-Printingをめざし開発研究を行った。医工デザインによる人工臓器の基礎形態、その造形化を国内初として取り組んだ。重粒子イオン治療に代表される新たな放射線治療法の調査を行い,そのデザイン方法論をまとめた.具体的には,ホウ素を用いた中性子捕捉療法および重粒子イオン治療法を対象とした.これは,がん細胞に選択的に蓄積されるホウ素(10B)化合物を用い,原子炉を用いて中性子を患部へ照射し,中性子を補足したホウ素(10B)がアルファ粒子(4He)を放出し,がん細胞を破壊するものである.このプロセスは原子炉から治療室までトータルにデザインされるべきである.本研究者はこれまでに,核分裂反応を用いた小型バッテリの開発を行なってきたが,本バッテリは電子を放出するものであったのに対し,中性子を放出するようにデザインを行い,患者の患部へ直接中性子照射できるようなメカニズムと形態のデザインを行った.また,重粒子イオン治療法に関して,がん病巣をピンポイントに狙って重粒子イオンビームを打ち込む部分に関して,患者の体型(表面形状)および体内の物理成分の分布を考慮したイオンビームマスクのデザイン手法を研究した.平成22年6月までに従来の医療デザイン俯瞰と予備調査を行い,平成22年8月までに「ドライパウダーワクチン吸引システム」,10月までに「心筋再生支援デバイス」,12月までに「スマートトリアージ」について分析を完了する予定であったが,平成22年10月に心筋再生支援デバイスの分析を行なっていたところ,重粒子イオン治療に代表される新たな放射性治療が実用段階を迎え,これらの新治療法は本研究のデザイン方法論の確立に重要となるため,新治療法の調査が必要となり,3ヶ月の遅延を生じたものである.本研究提案は医療デザインにおけるデザイン方法論の確立とその応用に関するものである.具体的には,本研究提案者がこれまでデザインを行ってきた人工心臓,ワクチンシリンジ(注射器),トリアージタグ(被災者選別指標)などの個別のデザイン事案を高所から俯瞰し,医療デザインにおける方法論を確立し,本方法論に基づいて新たな医療デザインを生み出し,かつ本方法論に基づいて形成された集合知から次世代のデザイナ教育へと引き継ぐことである.本研究提案は医療デザインにおけるデザイン方法論の確立とその応用に関するものである.以下の目標を掲げる.【目標1】本研究提案者が従来行ってきた医療デザインをより高所から俯瞰し,デザイン方法論を確立すること.【目標2】本デザイン方法論に基づき新たな医療デザインを生み出すこと.【目標3】本デザイン方法論による集合知によって次世代のデザイナ教育へと引き継ぐこと.目標1のために,次の要請を満たすデザイン記述言語を定義した.(I)シンボルは一般的な形態および機能(医療行為に絞る)を包含する.(II)シンタックスは形態と機能を同時に記述可能である.(II)セマンティクスとしてミクロ事象とマクロ事象を包摂する.また本デザイン言語(目標1)に基づき,新たな医療デザインを創出した.具体的には(a)パンデミック対策のためのドライパウダーワクチン吸引システムの開発,(b)心筋細胞の再生を支援する体内埋め込み型デバイスの開発,(c)スマートトリアージシステムの開発を行った.本研究は、3D-PRINTINGプロセスを用いた医療デザインにおける人工臓器のデザイン方法論を模索することを目的とする。■結果と考察・3Dプリンターの一つ種類である、光造形機のSTL法によって作られるトポロジー空間の形態化と可視化をもとにクラインボトルを制作することができた。また、クラインボトルの位相空間論を用いた実質的提案として人工心臓の新たな概念的モデルである機能形態を作成することができた。CADシステムとデータベース、3Dプリンターを用いた3D-PRINTINGプロセスの定義を行った。STL法と大きく類似している熱溶解積層方式FDM法を用いている3D-PRINTERは専門家でなくともSTLデータの知識を持っていれば誰でも使用が可能である。こうした3D-PRINTERを用いたプロセスでも研究的な試作が可能であることが立証できた。3D-PRINTINGプロセスを元にトポロジーを例証として人工臓器デザインの制作とSTLデータを基盤とする医療研究機関におけるオーダーメイドでの人工臓器の可能性、その3D-PRINTINGプロセスを検討した。■結論と展開いま話題になっている3D-PRINTERで研究機関での試作を十分に検討することができた。問題は3D-PRINTINGという技術によって、人工臓器デザインの試作を試みることができるかどうかであった。この研究によって、未来的な医療のために患者のオーダーメイド的な人工臓器づくりへの可能性を求めることにつながった。STLデータを医療技術への応用を3D-PRINTINGN=技術によって図る事の研究を果たすことで、次世代の医療技術項目をつくることができたと考えている。本研究の成果はINTERMOLD2014(2014年4月16日19日)/試作・デザイン・解析&3Dプリンティングフェアにて展示会を行った。

当初の計画が正確であったため.25年度が最終年度であるため、記入しない。本研究提案のデザイン方法論に基づいた集合知によるデザイン教育を確立する.より実効性のあるものにするために,主に理工系研究者,医学系研究者,デザイン系研究者からなるネットワークを設立し,集合知によるナレッジベースを構築する.本研究の将来展望として,デザインガイドラインのみならず,デザインそのものが集合知としてクラウドに蓄積され,クラウドによる新たなデザインの創造が考えられる.25年度が最終年度であるため、記入しない。
有機結晶の微細加工技術を用いた波長変換用非線形光学微小素子の開発

1.素子設計Cerenkov放射型SHG素子を中心に各種の波長変換素子の基本特性に関して詳細な理論解析をおこない,高効率素子を実現するための設計指針を示した。有機結晶の潜在能力を最大限に引き出して利用するためには,擬似位相整合を達成する必要があることがあきらかとなった。2.素子作製技術の開発各種の有機非線形光学結晶に対して加工をおこない、有機結晶に適した微細加工技術を確立した。水溶性無機レジスト材料HPAを遠紫外線で露光し,酸素プラズマによる反応性イオンビームエッチングをおこなうことにより,高い精度での加工を実現できることを示した。また,半導体レーザ光の高効率結合を実現するために素子端面の処理法について検討を加え,基板の破断を利用することで良好な入射端面を確保できることを見出した。3.新規波長変換素子の提案共振器内の定在波を利用した新しい方式のSHG素子を提案し,その設計をおこなった。また,擬似位相整合方式の最大の弱点である安定性の問題を克服する手段として,シミュレーテド・アニーリングによって最適化した非等周期分極反転構造の導入による広帯域化の手法を新たに提案し,その有用性を実証した。有機結晶を用いた素子にこれらの技術を適用することで,極めて高性能な素子が実現できるものと考えている。以上の研究を通じて,高性能な波長変換素子を実現するための具体的な戦略を示すことができた。今後は,これらの研究成果に基づいて,実際に素子を作製しその特性評価をおこなっていく予定である。平成4年度は、主に有機非線形光学結晶の微細加工工程の各技術を確立することを目指した。加工対象としてはMBANPとDANを選んだ。1.水溶性無機レジストHPAの特性とリソグラフィ-露光に用いるdeep UV光源に改良を加えるとともに、溶液濃度・塗布条件、露光条件や露光後の保存条件や現像条件などの最適化をおこなった。その結果、有機結晶状に再現性良くレジスト膜を塗布しパタ-ニングをおこなうことが可能となった。また、レジスト膜厚を0.1μm程度にすることによってイオン照射時の損傷が避けられることも示した。さらに、HPAの複素屈折率スペクトルの測定をおこない、その経年変化や露光・イオン照射による変化などを初めて明らかにした。これはHPAの重合の度合いを知るために簡便なプロ-ブとなるだけでなく、HPAを保護膜として素子に残す場合に重要なパラメ-タとなる基礎デ-タである。ECRイオンシャワ-装置を用いて酸素プラズマ反応性イオンビ-ムエッチングによる有機結晶の微細加工を試みた。イオンの加速電圧と酸素ガス圧とを最適化することによって良好な結果が得られるようになった。従来のウェットエッチングや反応性イオンエッチングで問題となっていた結晶の剥離や残さなどの問題が解決され、厚さ3μm程度まで非常に異方性の良いエッチングが可能となった。前年度に引き続きECRイオンシャワー装置を用いた有機結晶の微細構造エッチング工程の最適化をおこない,素子作製に着手した。1.リソグラフィー工程の最適化おもに有機非線形光学結晶MBANPとDANを加工対象物質としてリソグラフィー工程の最適化を図った。(1)水溶性無機レジストHPAを用いたリソグラフィー:露光光源に改良を加えるとともに、レジスト塗布前の有機結晶の表面処理や現像条件の最適化をおこなった結果、再現性の良いHPA膜のパターニングが可能となった。(2)エッチング:O_2-RIBE工程の最適化をおこない,線幅3μm以下,結晶厚2μm以上の異方性の良いエッチングが実現できることを確認した。2.DMNP波長変換用導波路素子の作製チェレンコフ放射型波長変換方式について理論解析をおこなったところ,有機非線形光学結晶DMNPを用いると変換効率が最も高くなることが判明した。そこで、DMNP導波路波長変換素子の作製を試みた。

(1)結晶成長:融液・溶液からの結晶成長をおこない,実用上十分なサイズの簿膜単結晶の育成に成功した。(3)端面処理:半導体レーザ光の高効率結合を実現するために素子の入射端面の処理法について検討を加えた結果,基板の破断を利用することで良好な入射端面が確保できることがわかった。現在、作製した導波路素子を用いて半導体レーザ光の波長変換の実験をおこなっている。本年度は,有機結晶の持つ高い潜在能力をフルに引き出して利用できる新しい素子構成を考察するとともに,広帯域化のための非周期構造の導入について検討を加えた。また,こうしたデバイスを有機結晶を用いて実現することを目標として,実現の素子作製に必要となる周辺技術の開発をおこなった。1.新しい位相整合法に基づいた新規デバイスの提案共振器内の定在波を利用した新しい擬似位相整合方式のSHG素子を提案し,その設計をおこなった。これは本来は半導体材料を対象に設計をおこなってきたものだが,有機結晶にもそのまま適用可能である。2.ランダム周期構造の導入による広帯域化の検討擬似位相整合方式の最大の弱点である安定性の問題を克服する手段として,シミュレーテド・アニーリングによって最適化した非等周期分極反転構造の導入による広帯域化の手法を新たに提案し,その有用性を実証した。上述の素子構成と組み合わせることで,極めて高性能な素子が実現できる。3.有機結晶・有機高分子へテロ構造素子の作製上記のデバイスを有機結晶を用いて実現するために微細加工技術と結晶成長法の検討をおこない,有機結晶(MNA)・有機高分子(ポリイミド)ヘテロ構造の作製に成功した。以上の研究を通じて,高性能な波長変換素子を実現するための具体的な戦略を示すことができたと考えている。今後は,これらの研究成果に基づいて,実際に素子を作製しその特性評価をおこなっていく予定である。
フミン質共存下における非イオン界面活性剤の活性炭吸着能の診断と予測

非イオン界面活性剤化合物の単成分系水溶液の吸着特性については,まず,ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル(APE)系とポリオキシエチレンアルキルエーテル(AE)系の計21種類の化合物を対象にした吸着容量実験を行い,1)APE系とAE系化合物の活性炭への吸着性が高く,吸着等温線はFreundlich式によって表されること;2)付加EOモル数の増加に伴う分子量とH.L.Bの増加につれてモル濃度基準のFreundlich係数Kの値は減少するが、質量濃度基準のKの値は殆ど変化しないこと;3)平衡濃度が低い領域(<1mg/L)における吸着容量はOPE>C_<16>AE>NPE>C_<12>AE>C_<10>AEの順となること;などの知見を得た.次いで,非イオン界面活性剤の混合水溶液における吸着容量特性を調べるため,NPE系の化合物5種類(NPE_2,NPE_5,NPE_<10>,NPE_<15>,NPE_<20>)を用いた吸着実験と数値解析を行い,1)質量濃度基準による混合化合物の合計吸着等温線は構成化合物の初期濃度や混合条件によらず対数プロット上でほぼ一本の直線に収束し,単成分系のFreundlich吸着等温式により評価できること;2)質量濃度基準による吸着容量特性は各々の化合物のモル濃度基準による吸着強度の大小と混合水溶液での初期質量濃度割合に支配されること;などを明らかにした.さらに,NPE系の化合物5種類(NPE_2,NPE_5,NPE_<10>,NPE_<15>,NPE_<20>)を対象に,非イオン界面活性剤の固定層吸着における破過特性を検討し,1)陰イオン系のDBSに比べて,NPE系の方が破過開始時間が遅く,吸着されやすいこと;2)流入濃度や通水速度などの操作条件がほぼ同じの場合,NPE系化合物の破過挙動は付加EOモル数にあまり依存しないこと;3)液境膜物質移動・表面拡散と細孔拡散の並列拡散モデルは検討した界面活性剤の破過挙動を表現・予測する上で有効であること;などを示した.非イオン界面活性剤の吸着除去に与えるフミン質などの天然有機物(NOM)の影響をNPE_<10>を用いた吸着実験より検討し,1)NPE_<10>の吸着容量の低下は混合溶液におけるNPE_<10>とNOMの存在割合に左右されること;2)吸着性の強いNPE_<10>の影響を受けて,BOMの吸着容量も低下し,その度合はNPE_<10>の濃度が高くなるにつれて大きくなること;3)カラム吸着におけるNPE_<10>の破過がNOMの影響を受けて早くなり,その影響は凝集処理後に残存するNOMの方が大きいこと;などを明らかにした.また,NOMの影響機構を検討するため,細孔分布の異なる活性炭を用いた吸着実験と数値解析を行い,1)フミン質を中心としたNOMの吸着効果は細孔径が3-10nmの細孔容積が多い活性炭の方が高いこと;2)フミン質の影響は吸着サイドの競合とフミン質による細孔閉塞の両機構の働きによること;3-10nmの細孔容積が多い活性炭を用いること;などを明らかにした.ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル(APE)系とポリオキシエチレンアルキルエーテル(AE)系の計21個の非イオン界面活性剤化合物の単成分系水溶液における平衡吸着特性を検討し,1)APE系とAE系化合物の活性炭への吸着性が高く,吸着等温線はFreundlich式によって表されること;2)付加EOモル数の増加に伴う分子量とH.L.Bの増加につれてモル濃度基準のFreundlich係数Kの値は減少するが,質量濃度基準のKの値は殆ど変化しないこと;3)平衡濃度が低い領域(<1mg/L)における吸着容量はOPE>C_<16>AE>NPE>C_<12>AE>C_<10>AEの順となること;などの知見を得た.非イオン界面活性剤の混合水溶液における平衡吸着特性をNPE系の化合物5種類(NPE_2, NPE_5, NPE_<10>, NPE_<15>, NPE_<20>)を用いて検討し,1)質量濃度基準による混合化合物の合計吸着等温線は構成化合物の初期濃度や混合条件によらず対数プロット上でほぼ一本の直線に収束し,単成分系のFreundlich吸着等温式により評価できること;2)質量濃度基準による吸着容量特性は各々の化合物のモル濃度基準による吸着強度の大小と混合水溶液での初期質量濃度割合に支配されること;などを明らかにした.非イオン界面活性剤の固定層吸着特性をNPE系の化合物5種類(NPE_2, NPE_5, NPE_<10>, NPE_<15>, NPE_<20>)により検討し,1)陰イオン系のDBSに比べて,NPE系の方が破過開始時間が遅く,吸着されやすいこと;2)流入濃度や通水速度の操作条件がほぼ同じの場合,NPE系化合物の破過挙動は付加EOモル数にあまり依存しないこと;

3)液境膜物質移動・表面拡散と細孔拡散の並列拡散モデルは検討した界面活性剤の破過挙動を表現・予測する上で有効であること;などを示した.非イオン界面活性剤の吸着除去に与えるフミン質などの天然有機物(NOM)の影響をNPE_<10>を用いた吸着実験より検討し,1)NPE_<10>の吸着容量の低下は混合溶液におけるNPE_<10>とNOMの存在割合に左右されること;2)吸着性の強いNPE_<10>の影響を受けて,BOMの吸着容量も低下し,その度合はNPE_<10>の濃度が高くなるにつれて大きくなること;3)カラム吸着におけるNPE_<10>の破過がNOMの影響を受けて早くなり,その影響は凝集処理後に残存するNOMの方が大きいこと;などを明らかにした.非イオン界面活性剤化合物の単成分系水溶液の吸着特性については,まず,ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル(APE)系とポリオキシエチレンアルキルエーテル(AE)系の計21種類の化合物を対象にした吸着容量実験を行い,1)APE系とAE系化合物の活性炭への吸着性が高く,吸着等温線はFreundlich式によって表されること;2)付加EOモル数の増加に伴う分子量とH.L.Bの増加につれてモル濃度基準のFreundlich係数Kの値は減少するが、質量濃度基準のKの値は殆ど変化しないこと;3)平衡濃度が低い領域(<1mg/L)における吸着容量はOPE>C_<16>AE>NPE>C_<12>AE>C_<10>AEの順となること;などの知見を得た.次いで,非イオン界面活性剤の混合水溶液における吸着容量特性を調べるため,NPE系の化合物5種類(NPE_2,NPE_5,NPE_<10>,NPE_<15>,NPE_<20>)を用いた吸着実験と数値解析を行い,1)質量濃度基準による混合化合物の合計吸着等温線は構成化合物の初期濃度や混合条件によらず対数プロット上でほぼ一本の直線に収束し,単成分系のFreundlich吸着等温式により評価できること;2)質量濃度基準による吸着容量特性は各々の化合物のモル濃度基準による吸着強度の大小と混合水溶液での初期質量濃度割合に支配されること;などを明らかにした.さらに,NPE系の化合物5種類(NPE_2,NPE_5,NPE_<10>,NPE_<15>,NPE_<20>)を対象に,非イオン界面活性剤の固定層吸着における破過特性を検討し,1)陰イオン系のDBSに比べて,NPE系の方が破過開始時間が遅く,吸着されやすいこと;2)流入濃度や通水速度などの操作条件がほぼ同じの場合,NPE系化合物の破過挙動は付加EOモル数にあまり依存しないこと;3)液境膜物質移動・表面拡散と細孔拡散の並列拡散モデルは検討した界面活性剤の破過挙動を表現・予測する上で有効であること;などを示した.非イオン界面活性剤の吸着除去に与えるフミン質などの天然有機物(NOM)の影響をNPE_<10>を用いた吸着実験より検討し,1)NPE_<10>の吸着容量の低下は混合溶液におけるNPE_<10>とNOMの存在割合に左右されること;2)吸着性の強いNPE_<10>の影響を受けて,BOMの吸着容量も低下し,その度合はNPE_<10>の濃度が高くなるにつれて大きくなること;3)カラム吸着におけるNPE_<10>の破過がNOMの影響を受けて早くなり,その影響は凝集処理後に残存するNOMの方が大きいこと;などを明らかにした.また,NOMの影響機構を検討するため,細孔分布の異なる活性炭を用いた吸着実験と数値解析を行い,1)フミン質を中心としたNOMの吸着効果は細孔径が3-10nmの細孔容積が多い活性炭の方が高いこと;2)フミン質の影響は吸着サイドの競合とフミン質による細孔閉塞の両機構の働きによること;3-10nmの細孔容積が多い活性炭を用いること;などを明らかにした.
オリゴデンドロサイトによる神経回路調節機能

本研究ではオリゴデンドロサイトを単に神経伝導を速めるだけの絶縁体とみなすのではなく、神経活動量に応じて伝導速度を調節し神経回路と行動を制御しうる動的な構成要素であるとの仮説にのっとった。オリゴデンドロサイトは神経活動に伴って脱分極性の応答をすることが知られている。光遺伝学をオリゴデンドロサイトに駆使して神経活動にともなう脱分極性変化を模倣したところ、10分間程度の伝導速度の増加と、その後におこる数時間の軸索の興奮性増加が見られた。オリゴデンドロサイトが軸索機能を短期、長期に制御することが明らかになった。オリゴデンドロサイトが神経伝導を調節する新しい機能、すなわちこれまで明らかになっていなかったオリゴデンドロサイト-神経細胞相互作用をin vivoで理解するためには、ある特定の神経回路に着目したうえでその相互作用に介入を加え、介入の結果を行動の変化としてとらえる必要がある。本研究では線条体有棘中型細胞軸索と、それを取り囲むオリゴデンドロサイトに焦点を当てて実験系を構築した。線条体有棘中型細胞をチャネルロドプシンと光照射の組み合わせで選択的に活性化させると刺激と反対側で振戦が生じることを見いだした。次にオリゴデンドロサイト特異的にチャネルロドプシンを発現するマゥスに変えて、同じ部位へ光を照射したところ、程度は異なるものの刺激と反対側で振戦が生じることがわかった。これはオリゴデンドロサイトの光操作が線条体有棘中型細胞の活動性を亢進させた可能性を示唆する結果であり、どのようなオリゴデンドロサイト-神経細胞相互作用によるものか、in vitro電気生理実験や組織学実験へと研究を展開させるうえで重要な結果である。c-fos mRNA ISHで神経活動を組織学的にマッピングすることを予定していたが、チャネルロドプシンを発現させたオリゴデンドロサイトに光照射するとオリゴデンドロサイト自身にc-fos遺伝子が誘導されることが明らかになった。神経活動をマッピングするには不利であるが、光応答したオリゴデンドロサイトを組織学的に同定するには有用なツールになることが期待される。オリゴデンドロサイト-神経細胞相互作用によるオリゴデンドロサイト側の応答をカルシウム動態から理解するために、オリゴデンドロサイト特異的にカルシウム動態を観察できるマウス、tet0改良カメレオンマウスの作成にとりかかった。組み換えES細胞を得ることが出来、キメラマウス作成への準備が整った。線条体有棘中型細胞には中脳黒質に投射する直接路と淡蒼球に投射する間接路があるので、直接路軸索を実験の対象とした。軸索に発現するチャネルロドプシンに光を導くと、刺激と反対方向にマウスが回転した。次に、オリゴデンドロサイト特異的にチャネルロドプシンを発現するマウスに変えて、同じ部位へ光を照射したところ、回転に加えてジストニア様行動が生じることがわかった。チャネルロドプシンが開くと、それに引き続いて細胞内から細胞外へKイオンが流出することが知られているが、上述した行動変化は細胞外K濃度の上昇による神経興奮の可能性が考えられた。ただし、この興奮は一過性であること、スライス電気生理で明らかになったオリゴデンドロサイトから神経伝導修飾作用は刺激後1時間経過することから、一過性の興奮後におこる神経活動変化を捉えうることを示した。オリゴデンドロサイト-神経細胞相互作用によるオリゴデンドロサイト側の応答をカルシウム動態から理解するために、オリゴデンドロサイト特異的にカルシウム動態を観察できるマウス、tet0改良カメレオンマウスを作出した。PLP-tTAマウスとの交配により、オリゴデンドロサイトに改良カメレオンを発現することができたが、残念なことに1%のオリゴデンドロサイトしかラベルすることができなかった。副次的な成果として、アストロサイト特異的に改良カメレオンを発現することに成功した。オリゴデンドロサイトから神経細胞への一方向性の作用を模倣するため、光遺伝学を用いてオリゴデンドロサイトを脱分極させた。光による脱分極は15 mV程度であり、それが10分程度持続した。この場合、パッチ電極を用いたオリゴデンドロサイトの脱分極と同じように、神経軸索伝導速度が一過性に増加した。更に興味深いことに、電気刺激によって発火する軸索の本数が増える、すなわち軸索の興奮性が高まることが分かった。

この軸索の興奮性の増加は、1時間以上持続する長期可塑性であることがわかった。神経伝達のみならず神経伝導にも長期可塑性が生じることを発見した。オリゴデンドロサイトの細胞内カルシウム濃度変化を調べるために、tetO-カルシウムセンサーマウスを作出した。このマウスとオリゴデンドロサイト特異的tTAマウス(PLP-tTA)を交配させたところ、非常に小数のオリゴデンドロサイトだけでカルシウムセンサーが発現することが分かった。同じ遺伝子座を用いたtetO-チャネルロドプシンではこのような制限は起こらなかった。beta-actin遺伝子座を用いたtetOマウスで、なぜこのような発現誘導の差が起こるのか、次の課題として残った。しかし、少数とはいえオリゴデンドロサイト選択的にカルシウムセンサーが発現するので、当初の目的を達成できたと言える。オリゴデンドロサイトの細胞内カルシウムの増加を抑制するために、tetO-5ppaseマウスの作成にかかり、キメラマウスを得ることが出来た。オリゴデンドロサイト-神経相互作用のダイナミックな活動を計測するために、オリゴデンドロサイト特異的にカルシウムセンサー:yellow cameleonを発現するマウスを再度作成した。同じくactb遺伝子座を用いたが、前年度に報告した場所とはわずかにずらした場所で作成した。キメラマウスの作出まで行うことが出来た。同時に、他のカルシウムセンサー:GGaMP6を発現するマウスも作出した。これもキメラマウスの作出まで行うことが出来た。オリゴデンドロサイトの脱分極により神経伝導が促進されることを海馬スライス標本を用いて明らかにした。神経伝導の促進が、神経伝達にどのような影響を与えるか、海馬CA1錐体細胞ー海馬台シナプスを対象に実験を行った。海馬台のより遠位に存在する錐体細胞は、海馬CA1錐体細胞から距離が遠いため、その髄鞘軸索が長い。海馬台錐体細胞へのシナプス伝達修飾は、遠位錐体細胞において見られる傾向があった。軸索が長い分、伝導速度増加による時間変化が大きくなり、入力の同期性が増えたせいと考えられた。プレリミナリーな結果ではあるものの、オリゴデンドロサイトの活動変化が、神経伝導を調節し、それによって神経伝達まで変化させうるという興味深い結果を得ることが出来た。オリゴデンドロサイト-神経相互作用をin vivoで観察する方法として、MRIを用いた研究にも着手した。オリゴデンドロサイトをチャネルルドプシンをもちいて1週間にわたって光刺激し、白質の構造をDiffusion tensor imagingによって観察するという手法である。opto-DTIとよぶこの手法を今後は洗練させていきたい。26年度が最終年度であるため、記入しない。神経化学26年度が最終年度であるため、記入しない。オプトジェネティクスを用いin vivoでオリゴデンドロサイトや線条体中型有棘細胞の機能を操作する実験系が構築できた。検出しやすい表現型を扱うことが可能になったので今後の研究推進に大きく貢献する。カルシウムセンサーのtetO改良マウスの組み換えES細胞を順調に得ることが出来た。
訪問看護倫理の基礎的研究

未邦訳文献による海外のケーススタディの検討や、訪問看護ステーションおよび介護事業所へのヒアリング等を通じて、現在取得中の科研費ですでに立ち上げているホームページの拡充を図ると共に、事例データベースをより豊富にすることができた。上記の研究内容を、在宅ケア従事者を対象とした雑誌やホームページ上のブログ欄、講演等を通じて、一般人(非専門家、公衆)にも発信することができた。また、看護学生を対象とした雑誌への寄稿を通じて、訪問看護の倫理問題の特徴を、倫理原則を用いながら、分かりやすく伝えることができた。、研究計画で予定した通り、事例データベース拡充やブログ欄の積極的な活用を通じて、訪問看護特有の倫理問題の特徴を、哲学・倫理学の研究者、ケア従事者および一般の人びとに向けて発信することができた。また、ホームページのフォーラム欄を通じて、新たな施設との交流や海外からの閲覧者との情報交換を図ることができた。ホームページの更新や事例データベースの一層の拡充を図り、在宅ケアにおける意思決定の問題や訪問看護師が直面する倫理的ジレンマを、在宅医療に特徴的な問題の構造とは何かという視点から列挙し、ホームページ上に公開する。また、上記の内容を、ブログ欄において分かりやすく説明し、一般人にも発信する。国内外の文献および訪問看護ステーションや介護事業所のスタッフなどの協力を得て、これまでの科研費ですでに立ち上げているホームページの拡充を図ることができた。訪問看護師や他のケアスタッフが在宅での療養者の医療の決定に対してモラルジレンマを感じた事例を、在宅でのターミナルケア、障がい者のケア、難病患者のケア、認知症高齢者の医療選択などのカテゴリーごとに分類・収集し、その典型的な問題点を抽出することができた。また、これらの事例を、ホームページ上でデータベースとして公表することができた。上記の研究内容を、ホームページ上ブログ欄を積極的に活用して、一般人(非専門家、公衆)にも発信することができた。在宅ケアで大きな役割を果たす療養者本人やその家族にも「看取り」や訪問看護の諸問題を理解してもらえるように、「けあNews」などで報じられているタイムリーなトピックを取り上げながら、分かりやすく伝えることができた。研究計画で予定した通り、事例データベースの拡充を図り、すでに立ち上げているホームページ上で公開した。ホームページは、閲覧者からの書き込みやフォーラムへの参加を呼び掛けられるように設定しており、日本国内だけでなく、海外からの閲覧者や、新たな施設との交流をすることもできた。著書『QOLって何だろうー医療とケアの生命倫理ー』(ちくまプリマー新書、2018年2月)を上梓することにより、在宅ケアにおけるQOL(生活の質)や、訪問看護の直面する典型的な倫理的ジレンマについて、生命倫理の倫理原則からアプローチを試み、それを専門家だけではなく、高校生から一般の人にまで分かりやすい言葉で紹介することができた。ホームページのブログ欄を積極的に活用し、「宗教とQOL」や「リハビリ(理学療法士)からみたQOL」など、医療における自己決定の背後にある日本と欧米の宗教的バックグランドの相違や、在宅ケアに関わる訪問看護職以外の職種にとっての生活の質やケアについての考え方を紹介し、問題の射程を広げると共に、それを一般の閲覧者にも伝えることができた。当初の計画通り、在宅療養におけるキュアとケアの問題を取り上げた著書『QOLって何だろうー医療とケアの生命倫理ー』を世に問うことができた。また、科研費のために立ち上げたホームページ上のブログ欄を積極的に活用することを通じて、在宅療養の場面における倫理問題について、主にQOL(生活の質)という観点からのアプローチが可能であることを、専門家から一般人まで、幅広い読者、閲覧者に知ってもらうことができた。国内だけでなく、海外の「訪問看護倫理」の事例も積極的に収集し、事例データベースの充実を図る。また、これらをもとに、在宅ケアにおけるモラル・ジレンマの全体像についての見通しを得て、次年度に作成予定の命題集の基礎とする。これらをもとに、在宅ケアにおけるモラル・ジレンマの全体像についての見通しを得て、生命倫理学者および医療・ケア関係者に、在宅ケア特有の倫理問題の構造を知らしめ、解決に向けた展望を見定める。上記の研究内容、ホームページ上のブログ欄を活用して、一般の人にもわかりやすく発信する。購入を予定していてた図書の刊行が遅れ、次年度にずれたため。

(理由)購入を予定していた図書の刊行が遅れ、次年度にずれたため。(使用計画)購入を予定していた図書が刊行され次第、購入する。体調不良により、出張等の予定を見合わせたため。また、海外から取り寄せようとした図書の刊行が遅れたため。出張等の計画を改めて検討し直し、図書については、刊行され次第購入する。購入を予定していた図書が刊行され次第、購入する。雑誌原稿「特集:医療倫理を考える」『看護学生』12月号、メヂカルフレンド社、2018年11月、7-17頁。インタビュー「命がときめく時って?QOLの視点から見た在宅ケアの倫理」『ケアマネジャー』2018年7月号、1-4頁。講演「延命医療とQOL」町田市民大学、2018年10月17日。
海洋生物由来の抗痴呆作用物質の探索と合成

我々は海洋生物由来の抗痴呆活性(ChAT活性化作用)物質の探索とその合成研究を行い、次に挙げる2点の成果を得ることができた。海洋生物からの抗痴呆活性物質の単離およびその構造決定沖縄産軟体サンゴとClavularia sp.より得られるドラベラン型ジテルペノイドstolonidiolは、1μg/mlの濃度で、中隔野初代培養細胞のChAT活性を230%(コントロール比)に増強させる作用を有することを見出した。さらに、stolonidiolから誘導体の合成を行ない、構造活性相関についても検討を行った。また、沖縄産海綿Dactylospongiaelegansから6種の新規セスキテルペノイドキノンであるdactyloquinones A-Fとγ-ラクトンを有する4種の新規セスキテルペノイドキノン関連化合物であるdactylolactones A-Dを単離しそれらの構造を決定した。ChAT活性化作用を有するStolonidiolの合成シクロペンテノン誘導体と光学活性なα,β-不飽和エステルとの連続Michael反応により、ビシクロ[2.2.1]ヘプタン誘導体を立体選択的に得、それをβ-ヒドロキシケトンに誘導後、レトロアルドール反応により位置選択的な炭素-炭素結合の切断反応および12位のメチルケトンの異性化を行い、四置換シクロペンタン誘導体を立体選択的に合成した。側鎖部の炭素鎖を延長した後、分子内Horner-Wadsworth-Emmons反応により11員環の構築を行い、ドラベラン型ジテルペノイドstolonitrieneを合成した。Stolonitrieneの7位および10位のオレフィンを順次、立体選択的にエポキシ化することによりstolonidiolの全合成を達成することができた。沖縄産軟体サンゴからの抗痴呆活性物質沖縄産軟体サンゴClavularia sp.より得たドラベラン型ジテルペノイドstolonidiolは、1μg/mlの濃度で、中隔野初代培養細胞のChAT活性を230%(コントロール比)に増強させる作用を有することを明かにした。このようにstolonidiolはニューロトロフィン様作用を示すことから、抗痴呆薬のリード化合物として期待される。また、stolonidiolの誘導体の合成も行ない、そのChAT活性も検討した。Stolonidiolの合成Stolonidiolの合成を行う上で、四置換シクロペンタン誘導体の合成と2つのエポキシドの立体選択的な構築が重要である。そこで本年度は、四置換シクロペンタン誘導体の立体選択的合成の検討を行なった。シクロペンテノンとアスコルビン酸から合成した光学活性α,β-不飽和エステルとの連続Michael反応により、立体選択的にビシクロ〔2.2.1〕ヘプタン誘導体を合成した。次いでケトンを還元後、生じた二級水酸基を保護した後、エステルのα位を立体選択的にメチル化した。これをβ-ヒドロキシケトンに誘導後、メタノール中炭酸カリウムを作用させることにより、レトロアルドール反応による位置選択的な炭素-炭素結合の切断とstolonidiolのC-12位に相当する位置の異性化を行い、stolonidiol合成の1つのkeyポイントである四置換シクロペンタン誘導体の立体選択的合成に成功した。現在、本化合物より11員環の構築を経るstolonidiolの合成を検討中である。沖縄産海洋生物からの抗痴呆活性物質の単離構造決定昨年度までに,沖縄産軟体サンゴClavularia sp.由来のドラベラン型ジテルペノイドstolonidiolは中隔野培養細胞に対して,ChAT活性を増強させる作用を有することを見い出している。今年度は,同軟体サンゴからstolonidiol関連化合物の探索を行い,いくつかの関連化合物を単離することができた。また,沖縄産の軟体サンゴあるいは海綿からもいくつかの新規化合物を単離することができた。現在,その構造の確認を行っている。

Stolonidiolの合成昨年度は,連続Michael反応により得られるビシクロ[2.2.1]ヘプタン誘導体をβ-ヒドロキシケトンに誘導後、レトロアルドール反応により位置選択的な炭素-炭素結合の切断とstolonidiolのC-12位に相当する位置の異性化を行い、四置換シクロペンタン誘導体を立体選択的に合成した。本年度はそれに引き続き合成計画に従った検討を行った。四置換シクロペンタン誘導体をメチルアセタールとした後,C-14位のケトンをWolff-Kishner還元しメチレンに変換し,C-10位の酸素官能基を脱離させることにより,立体選択的にE-オレフィンを合成した。メチルアセタールを加水分解して得たヘミアセタールにメチルリチウムを作用させ,生じた一級水酸基をTBSで,三級水酸基をMOMで保護し,C-2位のベンジル基を脱保護した後,フェニルスルホニル基に変換しstolonidiolのシクロペンタン部に相当する化合物を効率良く合成することができた。さらに,別途合成したアリルヨーダイドとのカップリングを行い,脱スルホン化,リン酸エステルとのカップリング,分子内Horner-Emmons反応により11員環の構築を行い,stolonidiolの全ての炭素骨格を備える化合物の合成に成功した。現在,本化合物から,位置選択的および立体選択的なエポキシドの導入を経るstolonidiolの全合成を検討中である。沖縄産海洋生物からの抗痴呆活性物質の単離構造決定本年度は、沖縄産海綿からの新規化合物の探索を行った。沖縄県小浜島近海で採集した海綿Dactylospongiaelegansのメタノールおよびアセトン抽出物について、各種クロマトグラフィーを繰り返し行うことにより、6種の新規セスキテルペノイドキノンであるdactyloquinones A-Fとγ-ラクトンを有する4種の新規セスキテルペノイドキノン関連化合物であるdactylolactones A-Dを単離することができた。これら化合物の構造は、IRスペクトル、UVスペクトルおよびNMRスペクトルの解析から決定した。Stolonidiolの合成連続Michael反応によりビシクロ[2.2.1]ヘプタン誘導体を立体選択的に得、それをβ-ヒドロキシケトンに誘導後、レトロアルドール反応により位置選択的な炭素-炭素結合の切断反応およびstolonidiolの12位に相当する位置の異性化を行い、四置換シクロペンタン誘導体を立体選択的に合成した。ついで14位のケトンをWolff-Kishner還元しメチレンに変換後、アルキルスルホンに導き、別途合成したアリルヨーダイドとのカップリングを行い、脱スルホン化、リン酸エステルとのカップリング、分子内Horner-Emmons反応により11員環の構築を行い、stolonidiolの全ての炭素骨格を備えた化合物を合成した。次いで本化合物のエステルをDIBAHにより還元し、MOM基を脱保護することにより、dolabellaneジテルペノイドであるstolonitrieneを合成することができた。
マラリア原虫転写因子を手掛かりとした「ゲノムワイド」な宿主侵入関連遺伝子群の探索

マラリア原虫オオキネートはマラリア原虫がベクターであるハマダラ蚊の中腸に侵入するステージである。本研究はオオキネートの転写因子AP2-Oが制御する遺伝子を同定し、その機能を解明することを目的として行われた。ChIP-seq法による「ゲノムワイド」な探索によりAP2-Oの結合領域はゲノム上に2000以上存在することが判明した。さらにこれらの結合領域から約400の遺伝子が標的遺伝子として同定された。この結果はAP2-Oが全遺伝子の10%近くを直接誘導していることを意味した。またこれらの遺伝子はオオキネート期に特異的に発現していることが知られている全ての遺伝子を含んでいた。さらに個々の標的遺伝子の機能を遺伝子ターゲティング法で解析したところ、標的遺伝子は中腸侵入に関与する遺伝子ばかりでなく、形態形成に関わる遺伝子、中腸侵入後に機能する遺伝子を含んでいることが分った。以上の結果は、AP2-Oがオオキネートのマスター転写因子として機能していることを示唆した。マラリア原虫のステージ特異的遺伝子発現機構の解明は、感染の分子基盤を理解するための重要な手掛かりとなる。我々は、ネズミマラリア原虫Plasmodium bergheiを用いた研究により、マラリア原虫のライフサイクルの各ステージにAP2関連転写因子が発現していること、これらの転写因子はステージ特異的な遺伝子発現において中心的な役割を果たしていることを見出した。蚊の中腸に侵入するステージであるオオキネートでは、転写因子AP2-0(AP2 in ookinetes)が、これまで報告されている全てのオオキネート期特異的な遺伝子の発現を制御していること、したがってオオキネート期のマスター転写因子である可能性が高いことを報告した。また。ChIP-seq法用いAP2-0の標的遺伝子を「ゲノムワイド」に探索し、200以上の標的遺伝子を制御していることを証明した。また肝臓に侵入するステージであるスポロゾイトの転写因子AP2-Sp(AP2 in sporozoites)を同定し、AP2-0と同様にこの時期の侵入、感染に必要な遺伝子群のほぼすべてを誘導するマスター転写因子であることを報告した。またAP2-SpのDNA結合ドメインを有するキメラ転写因子を蚊侵入ステージであるオオキネートに発現させることで、30以上のAP2-Sp標的遺伝子をオオキネート期に誘導することに成功した。さらに新たに血液感染ステージでも複数の転写因子を同定しそれらの転写因子がライフサイクルの維持に重要な役割を持っていることを見出した。現在それらの遺伝子の詳細な発現ステージと標的遺伝子について解析を進めている。すなわち、蚊の中腸に侵入するステージであるオオキネートでは、転写因子AP2-O(AP2 in ookinetes)がこれまで報告されている全てのオオキネート期特異的な遺伝子の発現を制御していること、したがってオオキネート期のマスター転写因子である可能性が高いことを報告した。また。ChIP-seq法用いAP2-Oの標的遺伝子を「ゲノムワイド」に探索し、200以上の標的遺伝子を制御していることを証明した。また肝臓に侵入するステージであるスポロゾイトの転写因子AP2-Sp(AP2 in sporozoites)を同定し、AP2-Oと同様にこの時期の侵入、感染に必要な遺伝子群のほぼすべてを誘導するマスター転写因子であることを報告した。本年度は新たに血液感染ステージで複数の転写因子を同定した。そのうちAP2-G(AP2 in gametocytes)はsexual stageである生殖母体に特異的に発現し生殖母体の成熟に必須な転写因子であった。また雌生殖母体にはこれとは異なる転写因子AP2-G2が発現し、雌生殖母体の成熟に必須であることを証明した。AP2-G、AP2-G2の標的遺伝子を同定するため、DNAマイクロアレイ解析及びChIP-seq解析を行った。現在それらのデータについて詳細な解析を進めている。

我々は、ネズミマラリア原虫Plasmodium bergheiを用いた研究により、マラリア原虫のライフサイクルの各ステージにAP2関連転写因子が発現していること、これらの転写因子はステージ特異的な遺伝子発現において中心的な役割を果たしていることを見出した。蚊の中腸に侵入するステージであるオオキネートでは、転写因子AP2-0(AP2 in ookinetes)が、これまで報告されている全てのオオキネート期特異的な遺伝子の発現を制御していること、したがってオオキネート期のマスター転写因子である可能性が高いことを報告した。また。ChIP-seq法用いAP2-0の標的遺伝子を「ゲノムワイド」に探索し、200以上の標的遺伝子を制御していることを証明した。また肝臓に侵入するステージであるスポロゾイトの転写因子AP2-Sp(AP2 in sporozoites)を同定し、AP2-0と同様にこの時期の侵入、感染に必要な遺伝子群のほぼすべてを誘導するマスター転写因子であることを報告した。またAP2-SpのDNA結合ドメインを有するキメラ転写因子を蚊侵入ステージであるオオキネートに発現させることで、30以上のAP2-Sp標的遺伝子をオオキネート期に誘導することに成功した。本年度は新たに血液感染ステージで複数の転写因子を同定した。そのうちAP2-G(AP2 in gametocytes)はsexual stageである生殖母体に特異的に発現し生殖母体の成熟に必須な転写因子であった。また雌生殖母体にはこれとは異なる転写因子AP2-G2が発現し、雌生殖母体の成熟に必須であることを証明した。現在それらの標的遺伝子について詳細な解析を進めている。