hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
酸素分圧変化に応じて発現するラット新生仔肺遺伝子の検索

本プロジェクトの目的は、ラットの新生仔、あるいは、胎仔の肺から分離した間質細胞と上皮細胞を低酸素へ暴露しRNA量が変動する遺伝子を検索することである。大気酸素環境下(20%O2,5%CO2,75%N2)でほぼconfluentに達したラット胎仔肺線維芽細胞および肺胞2型細胞を、大気酸素環境あるいは低酸素環境(0-3% O2)でさらに16時間培養しRNAを分離後、蛍光標識オリゴマーを利用したDifferential Display(DD)法を用いて、低酸素条件により発現量が増減する遺伝子を検索した。その結果、lactate dehydrogenase A(LDH),phosphoglycerate mutase,cytochrome b,prolyl 4-hydroxylase等のmRNA量が低酸素暴露によって増加することが示された。LDHを除いた他の遺伝子は本研究によって初めて低酸素に応答することが明らかにされた。prolyl 4-hydroxylasemRNA量は、低酸素刺激16時間目に対象の約2倍に増加した。また、低酸素下に24時間培養後、通常の大気酸素環境下に戻し再酸素化すると4時間後にmRNA量は減少し始め、24時間後には対照値まで低下した。このように、prolyl 4-hydroxylaseは酸素分圧にreciprocalに応答した。また、prolyl 4-hydroxylaseのmRNA量の安定性に及ぼす低酸素刺激の影響をactinomycin Dを添加して検討した。そのmRNAの減少速度に低酸素刺激は影響なく、低酸素刺激によるprolyl 4-hydroxylaseのmRNAの増加はtranscription速度の亢進によることが示唆された。従って、本プロジェクトの初期の目的はほぼ達成されたと言える。動物実験は、時間経過による個体発達に依存した変化と、酸素刺激によってもたらされる変化とを判別し難い。この危険を回避するため、本実験では、ラット新生仔肺上皮由来の株化細胞、胎性末期の胎仔ラット肺から分離した間充織細胞、および、上皮細胞を用いた。そして、本研究の目的が「酸素刺激によって量的に変化する調節遺伝子の検索」であるので、酸素刺激116時間後の培養細胞を材料とした。細胞培養条件の検討新生仔ラット(10日齢)の肺から肺胞上皮2型細胞を分離しSV40によってトランスフォームした不死化細胞(SV40T2)を調整した。胎性末期のラット胎仔肺から分離した間充織細胞、および、SV40T2を培養し、各種酸素濃度下における増殖率及び培養液中へのLDH漏出試験を行った。間充織細胞は、1%という低酸素分圧かで、21%酸素分圧との同様の増殖率を示した。3%酸素分圧かでは21%酸素分圧に比較し20%高い細胞増殖率を示した。SV40T2細胞は1%酸素分圧で、培養2日目で増殖をほぼ停止した。3%酸素に1カ月間以上順化した間充織細胞を21%酸素環境下に培養開始後、1及び16時間後の細胞より全RNAを抽出した。RT-PCR法を応用したRT-Differential Display(RT-DD)法を用いて酸素分圧変化によって特異的に増加する遺伝子を検索した。T12AMとAP6のプライマーの組合せにより21%酸素暴露開始1時間目に特異的に現れるバンドが認められた。現在cDNAのクローニングを進行中である。

大気酸素環境下(20%O2,5%CO2,75%N2)でほぼconfluentに達したラット胎仔肺線維芽細胞および肺胞2型細胞を、大気酸素環境あるいは低酸素環境(0-3%O2)でさらに16時間培養しRNAを分離後、蛍光標識オリゴマーを利用したDifferential Display(DD)法を用いて、低酸素条件により発現量が増減する遺伝子を検索した。その結果、lactate dehydrogenase A(LDH), phosphoglycerate mutase, cytochrome b, prolyl 4-hydroxylase等のmRNA量が低酸素暴露によって増加することが示された。LDHを除いた他の遺伝子は本研究によって初めて低酸素に応答することが明らかにされた。prolyl 4-hydroxylase mRNA量は、低酸素刺激16時間目に対象の約2倍に増加した。また、低酸素下に24時間培養後、通常の大気酸素環境下に戻し再酸素化すると4時間後にmRNA量は減少し始め、24時間後には対照値まで低下した。このように、prolyl 4-hydroxylaseは酸素分圧にreciprocalに応答した。また、prolyl 4-hydroxylaseのmRNAの安定性に及ぼす低酸素刺激の影響をactinomycin Dを添加して検討した。そのmRNAの減少速度に低酸素刺激は影響なく、低酸素刺激によるprolyl 4-hydroxylaseのmRNAの増加はtranscription速度の亢進によることが示唆された。従って、本プロジェクトの初期の目的はほぼ達成されたと言える。
Al/CFRP多層積層ハイブリッド材料の残留応力制御による材質改善

本複合材料は極めて薄いアルミニウム(Al)合金とCFRPの積層材である。この材料は120°Cの硬化温度から室温まで冷却後構成材料の熱膨張率の差によりAl層には引張、CFRP層には圧縮の残留応力が生じる。これらの残留応力を二つの方法、すなわち繊維に張力を加えたまま硬化させる方法と、通常の方法で硬化させたハイブリッド材に、Al層に小さな塑性歪が生ずるまで、引張力を加える方法により制御した。第一の方法では未硬化のプリプレグ材の引っ張り強度が低いため制御限界応力はOMPa程度であり、Al層に圧縮応力を生じさせることは出来なかった。第二の方法は非常に簡単な方法でしかも正確に残留応力を制御できることがわかった。残留応力を低く制御された材料の引っ張り降伏応力は未制御材に比べ高くなるが破断歪は小さくなった。また圧縮降伏応力も低くなった。層間せん断強度は残留応力制御操作により低下する傾向を示した。第二の方法により制御するとAl層とCFRP層の界面の損傷が生じることがacoustic emission試験により示され、これが層間せん断強度低下の原因であると推定された。残留応力無制御材は低温度に長時間曝すと層間剥離を生ずるが、残留応力を制御することによってこれを完全に防止できる。疲労特性については残留応力制御の影響が特に顕著に現れ、き裂伸展速度はAl層の残留応力が引張から圧縮へ移行するにしたがい遅くなる。特に平均応力、応力振幅が低い条件下では、Al層の残留応力が圧縮応力に変えられたものは、き裂伸展が完全に停滞する。Al層の応力が全く等しくなるような条件下におけるAl積層材(アルミニウム単独材と考えてよい)と無制御のハイブリッド材の疲労特性を比べると、ハイブリッド材の方がはるかに優れた耐疲労性を示すことが明らかになり、このことからCFRP層の存在がAl層のき裂進展を妨げていることがわかった。本研究の目的の骨子は(1)残留応力制御法の確立、(2)製作した試料の残留応力と機械的性質の相関の究明、(3)最適積層条件の決定であるが、本年度の研究範囲は交付申請書に記した実施計画のように、1)試験材料製造装置の設計と製作、2)同装置を用いる製造方法の確立、3)製造した材料の残留応力の直接測定法の考案の3点を実施することにより前記(1)を明らかにすることである。試験材料製造装置を製作し実際に材料を製造したところ装置そのものは良好に作動したが、残留応力の制御上問題があることがわかった。それはプリプレグの引っ張り強さが幅と積層枚数の増加とともに幾何級数的に弱くなるため、本方法ではアルミニュウム層にかかる残留応力は、自由積層状態における88MPaから、0MPaまでが可能な制御範囲であることである。アルミニュウム層に圧縮の残留応力を生ぜしめるためには、幅方向に均等に分布する等しい張力を加えたプリプレグシ-トを多数積層するという複雑な方法をさらに開発しなければならないが、本研究の範囲内では(予算的に)実現できなかった。しかし筆者らの過去の研究結果によると自由積層硬化した積層板に張力を加えることによっても残留応力を制御することは可能である。この方法によればアルミニュウム層に大きい圧縮応力を生じせしめることは理論上可能である。そこでこの方法も含めて次年度における残留応力と材質の関係の検討のための試料製造方法とすることにした。

次に本年度の課題のうち残留応力の測定に関しては電解研磨法による方法が確立され、前記の2方法により残留応力制御された材料に適用したところ、残留圧縮応力が200MPaもの大きさになるとCFRPとアルミニュウム層の接着層の応力緩和のため、実際には理論的に計算された応力よりも小さい応力であることがわかった。100MPa以下では理論どおりに制御されていることがわかった。本複合材料は極めて薄いアルミニウム(Al)合金とCFRPの積層材である。この材料は120°Cの硬化温度から室温まで冷却後構成材料の熱膨張率の差によりAl層には引張、CFRP層には圧縮の残留応力が生じる。これらの残留応力を二つの方法、すなわち繊維に張力を加えたまま硬化させる方法と、通常の方法で硬化させたハイブッド材に、Al層に小さな塑性歪が生ずるまで、引張力を加える方法により制御した。第一の方法では未硬化のプリプレグ材の引っ張り強度が低いため制御限界応力はOMPa程度であり、Al層に圧縮応力を生じさせることは出来なかった。第二の方法は非常に簡単な方法でしかも正確に残留応力を制御できることがわかった。残留応力を低く制御された材料の引っ張り降伏応力は未制御材に比べ高くなるが破断歪は小さくなった。また圧縮降伏応力も低くなった。層間せん断強度は残留応力制御操作により低下する傾向を示した。第二の方法により制御するとAl層とCFRP層の界面の損傷が生じることがacoustic emission試験により示され、これが層間せん断強度低下の原因であると推定された。残留応力無制御材は低温度に長時間曝すと層間剥離を生ずるが、残留応力を制御することによってこれを完全に防止できる。疲労特性については残留応力制御の影響が特に顕著に現れ、き裂伸展速度はAl層の残留応力が引張から圧縮へ移行するにしたがい遅くなる。特に平均応力、応力振幅が低い条件下では、Al層の残留応力が圧縮応力に変えられたものは、き裂伸展が完全に停滞する。Al層の応力が全く等しくなるような条件下におけるAl積層材(アルミニウム単独材と考えてよい)と無制御のハイブリッド材の疲労特性を比べると、ハイブリッド材の方がはるかに優れていた耐疲労性を示することが明らかになり、このことからCFRP層の存在がAl層のき裂進展を妨げていることがわかった。
変形性関節症患者における障害タイプ別理学療法システムの開発

変形性関節症患者の歩行分析により、1)歩行時の膝関節や股関節の運動により関節にかかる動的負荷が異なること、2)動的負荷に関連する筋力などの身体機能も歩容により異なっていることが明らかになった。これらの結果から、歩行の特徴ごとに介入を行うことが変形性関節症患者の治療に効果的である可能性が示唆された。また、不安定靴での歩行練習やスピードを速くした筋力トレーニングが変形性関節症患者に有効であることが明らかとなった。本研究の目的は、1.変形性関節症患者の歩容に影響を与える因子を明らかにすること、2.変形性関節症患者の歩行分析の結果からタイプ別に分類すること、3.どのようなトレーニングがどのような障害を持つ変形性関節症患者に効果的かを明らかにすることである。本年度は、変形性関節症患者の歩容に影響を与える因子に関して検討し、以下の結果を得た。1)人工股関節全置換術(THA)術後患者54名を対象として、歩行時の最大股関節伸展角度に関連する要因を分析した。重回帰分析の結果、股伸展可動域(ROM)と股外転筋力が、歩行時股伸展角度と関連する要因として抽出された。本研究の結果より、THA術後患者の歩行時股伸展制限に対する理学療法においては、股伸展ROMと外転筋力の改善が重要であることが示唆された。2)THA術後患者24名を対象として、歩行時股関節パワーに関連する要因を分析した。その結果、股関節パワーに対して、股・膝ROMと筋力はいずれも有意な関連を認めず、歩行時の股関節角度の増大と動的股関節スティフネスの減少が股関節パワーの増加と関連した。THA術後の歩行時股関節パワー増加に対しては、ROMや筋力よりも動作時パターンの改善が関連することが示唆された。3)変形性膝関節症患者19名を対象として、歩行時膝内反モーメントとその他の歩行変数との関連性を分析した。その結果、膝内反モーメントに対して膝内反角度が関連した。しかし、重症度別での分析では、軽症群においては膝内反角度が膝内反モーメントと関連したが、重症群では床反力が膝内反モーメントと関連した。この結果から、膝内反モーメントに影響する要因は疾患の重症度により異なる可能性があり、治療介入においても重症度に応じて介入内容を変化させる必要性が示唆された。本年度は、膝OA患者の歩行時の膝関節屈伸運動に着目し、矢状面での歩容の違いが動的負荷の様態や、動的負荷の大きさに関連する因子に与える影響を検討するため、以下の2つの研究を行った。1.立脚初期における矢状面での膝関節運動と動的負荷の関連を運動学的、運動力学的、及び筋電図学的に検討することを目的とし、膝OA患者13名の歩行分析を行った。その結果、立脚初期における膝関節屈曲角度の増加は矢状面での膝関節への動的負荷を増加させ、対して膝屈曲角度の減少は前額面での関節へのストレスを増加させると考えられた。この結果より、膝OA患者の矢状面での歩容によって着目すべき動的負荷は異なる可能性が示唆された。2.膝OA患者30名を歩行時の矢状面での運動学的特徴によって定量的に類型化し、分類された群毎で外的膝関節内反モーメントの積分値の大きさと関連する身体機能(関節可動域や下肢筋力、脊柱アライメントなど)を検討した。その結果、膝OA患者は歩行時の膝関節屈伸運動の少ない群、比較的膝関節の屈伸運動の十分な群、接地時より膝関節が屈曲し、膝伸展角度が少ない群の3群に分類することができた。また、それぞれの群において、外的膝関節内反モーメントの積分値と関連する身体機能を検討したところ、それぞれの群で異なる因子が動的負荷と関連することが示された。以上の結果より、歩行時の膝関節屈伸運動によって動的負荷の様態は異なり、また同一の動的負荷の指標についても、矢状面での歩容の異なる患者では、その負荷の大きさに関連する身体機能が異なっていることが明らかとなった。本研究より、歩行の特徴毎に異なる動的負荷あるいは異なる身体機能に対して介入を行うことが、膝OA患者の治療により効果的である可能性が示唆された。本年度は介入研究として3つの研究を行った。1.内側型変形性膝関節症患者17名を対象とし、Masai Barefoot Technology shoes (MBT靴)での歩行トレーニングの即時効果を検討した。MBT靴での歩行練習は約20分間行った。MBT靴と普通靴の2条件間で、床反力、膝関節角度、膝関節モーメント、体幹傾斜角度を比較した。その結果、床反力および歩行時膝関節角度には両条件間で差がなかったものの、外的膝関節屈曲モーメントは、MBT靴条件で有意に低下した。膝関節内反モーメントには変化を認めなかったものの、MBT靴では矢状面における膝関節への外的負荷を軽減できる可能性が示唆された。

2.人工股関節置換術後患者65名を対象に荷重位および非荷重位のエクササイズが人工股関節術後の運動機能・筋機能に及ぼす影響を調査した。荷重位エクササイズを行う群、非荷重位エクササイズを行う群および対照群に無作為に分け、8週間の介入を行った。エクササイズ介入により、運動能力や下肢筋力は対照群に比べて有意に改善した。運動能力の中でも特に立ち座り能力と歩行持久性は、荷重位エクササイズのほうが非荷重位エクササイズよりも高い改善が認められた。本研究の結果から、人工股関節置換術後の運動能力の改善には荷重位エクササイズが推奨されるべきであることが示唆された。3.変形性股関節症(股OA)患者46名を対象に高速度(HV)筋力トレーニングと低速度(LV)筋力トレーニングを比較した。HV群とLV群に無作為に群分けし、8週間在宅にて下肢筋力トレーニングを行った。トレーニング速度として、HV群では素早く、LV群ではゆっくりと実施した。介入前後に下肢筋力・筋パワー、運動能力、股関節機能、筋量と筋の質を評価し、介入による変化量を群間比較した。結果、HVトレーニングは運動能力と筋の質の改善に効果的であることが明らかとなった。26年度が最終年度であるため、記入しない。理学療法学26年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、変形性関節症患者の歩容に影響を与える因子を明らかにすることを目的に研究を行い、THA患者の歩行時の股関節伸展角度に影響する因子と股関節パワーに関連する因子を明確にできた。さらに変形性膝関節症患者の歩行時の内反モーメントに影響する因子も明確にでき、おおむね予定通り順調に進展している。本年度は、歩行時の矢状面での運動学的特徴によって膝OA患者の歩容を定量的に類型化した。その結果、膝OA患者は歩行時の膝関節屈伸運動の少ない群、比較的膝関節の屈伸運動の十分な群、接地時より膝関節が屈曲し、膝伸展角度が少ない群の3群に分類することができた。本研究より、歩行の特徴毎に異なる動的負荷あるいは異なる身体機能に対して介入を行うことが、膝OA患者の治療により効果的である可能性が示唆され、おおむね順調に進展している。本研究の目的は、1.変形性関節症患者の歩容に影響を与える因子を明らかにすること、2.変形性関節症患者の歩行分析の結果からタイプ別に分類すること、3.どのようなトレーニングがどのような障害を持つ変形性関節症患者に効果的かを明らかにすることである。目的の1は、今年度達成できたので、目的の2、3を達成するために今後研究を推進していく。まずは、クラスター分析を用い、変形性関節症患者を歩行タイプ別に分類することを目指す。さらに変形性関節症患者にトレーニングを行い、どのようなトレーニングが変形性関節症患者に効果的かを明らかにしていく予定である。目的1と2は昨年度と今年度で達成できたので、目的3を達成するために今後研究を推進していく。今後は、変形性膝関節症患者に介入を行い介入効果を明らかにする予定である。
カイコのクワ単食性の分子機構に関するゲノム科学的研究

カイコの食性は、クワの毒性の克服と、味覚の好みによって決定されている。糖類似アルカロイドの毒性を回避する機構として、カイコゲノムにコードされるβ-フルクトフラノシダーゼ(βFFase)に注目するて研究を進めた。βFFaseは、通常の動物には存在しないが、カイコ消化管には存在し、高い活性がある。カイコβFFaseのショ糖分解酵素活性は、糖類似アルカロイドに阻害されない。一方で、クワを摂食しないサクサンやエリサンでは、消化管のβFFase活性は非常に低いレベルである。その差は、βFFase遺伝子の転写量の差によるものである。βFFase遺伝子の転写調節機構を解明するため、カイコに近縁のイチジクカサン、テンオビシロカサン、エリサンなどの非クワ食蛾類と、クワノメイガなどクワ食蛾類におけるβFFase遺伝子の転写量を比較し、転写調節因子の結合配列を推定するとともに、種間で比較した。また、βFFase以外の二糖分解酵素に関してもクワ食の昆虫と非クワ食の昆虫の間の比較を試みた。とくにカイコには新規なトレハラーゼ遺伝子BmTre1Bが存在することを見いだし、クワ食との関係を検討した。BmTre1Bのアミノ酸配列は他の2つのトレハラーゼと、それぞれ49%と44%の相同性を示し、膜貫通ドメインを持たなかった。一方、カイコの食性変異体においては、味覚や嗅覚が異常となっている。本研究では次世代シーエンサーを用いて、変異体の感覚器のトランスクリプトームを解析し、触角や小願で広食性変異の影響を受ける遺伝子として、嗅覚受容体とイオノトロピック受容体の遺伝子や、ヘミセンチン遺伝子などを発見し、それらの機能を考察した。スクラーゼ遺伝子、とくにβ-フルクトフラノシダーゼ遺伝子の転写量がクワ食蛾類で高発現するメカニズムを瞬析し、ある程度それを明らかにすることができた。また、広食性変異体で発現量が変化する遺伝子を多数発見した。β-フルクトフラノシダーゼがクワ食蛾類においてどれほどの重要性を持つか、RNAiなどの直接的な手法で明らかにする必要がある。また、食性変異体で変動している遺伝子が、どのような機構で転写を調節されているか解明する必要がある。カイコが糖類似アルカロイドの毒性を回避する機構として、カイコゲノムにコードされるβ-フルクトフラノシダーゼ(βFFase)に注目して研究を実施した。この酵素は、通常の動物には存在しないが、カイコ消化管には存在し、高い活性がある。その差は、βFFase遺伝子の転写量の差によるものであることを、すでに知られている。カイコのβFFase遺伝子の転写調節領域を使ったDNAコンストラクトを培養細胞BmNへ導入し、転写調節に必要なシス因子を探索した。その結果、同遺伝子の上流に存在するGATA結合配列が、遺伝子発現に必須であることが明らかになった。GATA結合配列は、カイコのβFFase遺伝子だけでなく、近縁種のウスバクワコ、イチジクカサン、およびテンオビシロカサンのβFFase遺伝子の上流にも存在していたが、コピー数や位置が異なっていた。一方、カイコの食性変異体であるspliやBtにおいては、幼虫の小顋と触角のトランスクリプトームで正常とは異なる遺伝子発現が観察されている。本研究では、そのうち細胞外マトリクスの成分をコードすると予想されるhemicentin遺伝子に注目した。この遺伝子はspli変異体で過剰発現している。hemicentin遺伝子の全長をクローニングし、現在、転写調節領域の解析を進めている。

本研究では次世代シーエンサーを用いて、変異体の感覚器のトランスクリプトームを解析し、触角や小願で広食性変異の影響を受ける遺伝子として、嗅覚受容体とイオノトロピック受容体の遺伝子や、ヘミセンチン遺伝子などを発見し、それらの機能を考察した。RNA-seqのデータのもとづき、β-フルクトフラノシダーゼ遺伝子の発現制御機構を解析している。培養細胞を用いた結果は得られており順調であるが、中腸の培養は想定より困難であり、中腸細胞でのプロモーター機能の解析はできていない。王華兵博士自身が学会発表をすでに3回行い、分析や考察も深まっている。スクラーゼ遺伝子、とくにβ-フルクトフラノシダーゼ遺伝子の転写量がクワ食蛾類で高発現するメカニズムを瞬析し、ある程度それを明らかにすることができた。また、広食性変異体で発現量が変化する遺伝子を多数発見した。スクラーゼ遺伝子に関しては、培養細胞でのレポーターアッセイにより、シス因子を特定する。また、種間でプロモーターの比較を進める。また、hemicentin遺伝子および嗅覚受容体遺伝子など、splfの支配下にある遺伝子群の転写調節機構を解析する。β-フルクトフラノシダーゼがクワ食蛾類においてどれほどの重要性を持つか、RNAiなどの直接的な手法で明らかにする必要がある。また、食性変異体で変動している遺伝子が、どのような機構で転写を調節されているか解明する必要がある。
実生サンブスギをベースにしたスギ品種の地域別着花量の比較

〈目的〉現在、日本人の10%が、スギ花粉症で悩んでいるといわれ、スギ花粉の飛散時期になると、花粉情報が報道されるが、昔から現在も建築用材として重要な樹種である。そこで、花粉飛散の少ないスギ優良品種の開発が急務である。本研究では花粉の飛散の少ないサンブスギをベースとして材質の優れた着花の少ないスギ品種の、挿し木苗を使用し、植栽地の気温の違いによる着花量の違いを検討し、花粉飛散の少ない品種の開発を行う。〈方法〉東京大学千葉演習林では非赤枯性溝腐病の対策として1961年にサンブスギにジベレリン処理を行い着花した雌花に人工交配を行い本病に抵抗性の実生サンブスギの開発が試みられ、着花が少なく、本病の発病の見られない個体を確認した。本研究は、着花が非常に少ない品種より採取した挿し穂を苗畑で育苗したものを用い、環境の違いによる着花量の比較を〓う。着花量は、夏期の最高気温の平均と、日射量とのつながりがあるとされているため、当該苗木を東京大学愛知演習林(白坂)、東京大学千葉演習林(郷台)、東京大学富士演習林(山中湖)に植栽する。当該苗木と、千葉演習林産地スギを環境の違いによる着花の違いを確認する。また、別に、雄花の着花状況を調査するために、当該品種を植栽し、6月にジベレリンを剥皮接種し、雄花の着花状況を確認する。〈結果〉各試験地における7月の最高気温の平均気温が白坂31.8°C郷台28.3°C山中湖26.0度であり、各試験地でジベレリン接種した地スギ・当該苗木共に雄花の確認ができたが、ジベレリン接種の無い当該苗木については、雄花の着花は確認できなかった。当該苗木で種子による生産が各地で可能であることがわかったが、地スギに比べ当該苗木は雄花の着花が非常に少ないため、雄花の着花を促す作業が必要になる。また、気温が高いほど、雄花の着花が多いことが確認できた。
高等学校教科情報における科学的理解促進のための簡易型二足歩行ロボット教材研究

目的:高等学校教科「情報B」の主たる目標である情報の科学的理解を深めるために、生徒が興味を持つロボットを教材として使って、アルゴリズムとフローチャートの単元でどのように活用すれば科学的理解を深めることができるかを考察する。方法:フローチャートの表現方法と同じように命令のブロックを画面上に置いて動作の流れを矢印で結びロボットを動かせるプログラムを用いて、パソコン上で、歩行のアルゴリズムを考えさせ、具体的に動かすための手順を作り、それを使って実際にロボットを動かすことで、アルゴリズムとフローチャートの必要性を理解させる。成果:二足歩行ロボットをスムーズに動かすには、人間の動きを分割し順にシミュレートして、それを詳しく記述する必要があり、そのことからアルゴリズムとフローチャートの必要性を理解させることができた。ブロックを画面上に置いて動作の流れを矢印で結びロボットを動かせるプログラムを使って、まったくアルゴリズムやプログラムを学んでいない生徒にも直感的に理解できて、短時問で実際にロボットを動かせることができた。それ故、1つの単元であまり時間がとれない情報の授業で、アルゴリズムとフローチャートの単元の教材として簡易型二足歩行ロボットとそのフローチャート型のプログラムは効果的に利用できることがわかった。また、考えて作ったプログラム(フローチャート)をロボットに転送し実際に命令どおりに動くことで、論理的な誤りに自分で気づくことができ、ロボットを実際に動かすプログラムを体験した生徒の多くは積極的にプログラムを作り、順次処理、繰り返し処理、条件分岐などの工夫ができた。
アルツハイマー病アミロイド前駆体タンパク質代謝酵素の解析

アルツハイマー病(AD)の病因の一つとして、アミロイド前駆体タンパク質(APP)の代謝異常によるβ/A4タンパク質(Aβ)の蓄積が考えられている。神経毒性を持ったAβによって、神経細胞が変成するというものである。このAPPの特徴的な代謝系として分泌系が存在する。以前よりの研究により、APPの分泌系は単純な水溶性プロテアーゼではなく、膜に埋め込まれた複合体であることが明らかになりつつある。このような複雑な複合体の同定は、通常の蛋白質生化学的方法では非常に困難である。そこでAPPのAβを含むC末側を発現させ、Two-hybrid法による結合タンパク質のクローニングを試みた。確実な結合の確認にはさらに実験が必要であるが、アニオントランスポーターが弱い結合を示すクローンとして得られた。このタンパク質は膜貫領域を数個もち、立体構造はpresenilinと類似している。しかし、APPとCOS細胞での共発現では、その代謝に影響を及ぼさなかった。Two-Hybrid法におけるタンパク質の結合は細胞質(核質)で行われるものであり、水溶性タンパク質の結合の検定に適している。膜タンパク質間の相互作用の検定は困難と考えられた。家族性ADで見いだされているVal717変異はAβ42を増やすことが報告されている。そこでVal717をCys,Glu,Serなどに変異してAPPの代謝を検討した。Aβ42を増やすのは家族性ADで見いだされている変異のみだった。しかし、他の変異はα分泌に影響を及ぼした。
低速反陽子と薄膜の衝突における放出2次電子の研究

本研究は,平成元年,2年の2年間にわたっておこなわれ,CERNのLEARで総計約200時間,デンマ-クオ-フス大学で約400時間(タンデム加速器)のビ-ムタイムを獲得してなされた。特に低速反陽子と薄膜の相互作用における2次電子放出実験としては世界で最初のものであり,我々にとっても未知の部分の多い研究であったが,いくつかの非常に興味ある結果を得て研究を終ることができた。以下にその概要を記す。1.低速反陽子の生成と検出:LEARから供給される反陽子ビ-ムは5.9MeVであり,我々は1MeV以下に興味があるため、薄いAl板を用いて減速した。このため反陽子ビ-ムは数百keVのエネルギ-巾を持つことになる。我々は、2次電子を生成した反陽子のエネルギ-をTOF法により決定した。このため,電子分光器に用いられている位置敏感型電子検出部に工夫をこらし、速いタイミングパルス(【less than or similar】1ns)と波高精度のよいエネルギ-パルスが得られ2.この方法により,300keV1MeV程度の巾広いエネルギ-スペクトルをもつ反陽子により生成される2次電子を,数10eVから2keV程度のエネルギ-領域にわたって効率よく測定することができた。3.入射粒子とほぼ等速の電子:荷電粒子が誘電媒貭中を運動するとプラズモンを励起し,結果として,振動する電荷の粗密波が荷電粒子のあとをついて走ることが知られている。この粗密波に伴ってウェィクポテンシャルと呼ばれる振動型のポテンシャルが形成される。ウェィクポテンシャルには電子に対して引力的になる部分があり,そこへ電子が捕獲され,荷電粒子と等速で固体中を運動する可能性が古くから指摘されていた。(ウェイクライディング電子)我々はウェイクライディング電子の検出には,荷電粒子自身は電子に対しては引力的でないものが本貭的であることを指摘し,本研究を開始した。1,2で述べた手法により,荷電粒子とほぼ等速の電子を検出した所,(1)陽子に対しては,よく知られたカスプ状のピ-クが観測されたが,(2)反陽子は比較的なだらかな,起伏にとぼしいスペクトルになった,(3)ただし反陽子と等速の電子エネルギ-より約50eV下に“肩"が確認された。我々と協力関係にある米国オ-クリッジ研究所のJ.Burgdoerferによる理論計算では,我々の観測とほぼ同じエネルギ-位置に,同程度の強度のウェイクライディング電子を予想している。エネルギ-巾,形状等についても互いに無矛盾であるため,我々は観測された“肩"がウェイクライディング電子によるものと考えている。4.2体衝突ピ-ク:2次電子スペクトルの示すもう一つの顕著な構造は,入射粒子と標的内電子の2体的相互作用により,ほぼ入射粒子の2倍の速度で放出される2体衝突ピ-クである。これは第1次の近似ではラザフォ-ド散乱そのものであって,入射粒子の電荷符号には依存しない。しかし、標的内電子は束縛されており,入射粒子がこの束縛状態を変化させながら衝突に関与する時(2次の摂動)には違いの生ずることが予想される。特に内殼電子についてこれは顕著である。我々は,300keV1MeV程度のエネルギ-領域について,この2体衝突ピ-クの強度,形状を測定した。陽子との定量的な比較については現在進行中である。我々は,この2年間の研究を通じて,低速反陽子ビ-ムを物性研究に応用する足がかりを得たと感えている。今後は,上に述べた原子物理学的側面に加えて,(1)低速反陽子と清浄表面の相互作用,(2)特殊な形状をしたクラスタ-による反陽子トラップ,(3)アルカリライドなどにおける損傷形成の電荷符号依存性等の興味深いテ-マを追求する予定である。

3.入射粒子とほぼ等速の電子:荷電粒子が誘電媒貭中を運動するとプラズモンを励起し,結果として,振動する電荷の粗密波が荷電粒子のあとをついて走ることが知られている。この粗密波に伴ってウェィクポテンシャルと呼ばれる振動型のポテンシャルが形成される。ウェィクポテンシャルには電子に対して引力的になる部分があり,そこへ電子が捕獲され,荷電粒子と等速で固体中を運動する可能性が古くから指摘されていた。(ウェイクライディング電子)我々はウェイクライディング電子の検出には,荷電粒子自身は電子に対しては引力的でないものが本貭的であることを指摘し,本研究を開始した。1,2で述べた手法により,荷電粒子とほぼ等速の電子を検出した所,(1)陽子に対しては,よく知られたカスプ状のピ-クが観測されたが,(2)反陽子は比較的なだらかな,起伏にとぼしいスペクトルになった,(3)ただし反陽子と等速の電子エネルギ-より約50eV下に“肩"が確認された。我々と協力関係にある米国オ-クリッジ研究所のJ.Burgdoerferによる理論計算では,我々の観測とほぼ同じエネルギ-位置に,同程度の強度のウェイクライディング電子を予想している。エネルギ-巾,形状等についても互いに無矛盾であるため,我々は観測された“肩"がウェイクライディング電子によるものと考えている。4.2体衝突ピ-ク:2次電子スペクトルの示すもう一つの顕著な構造は,入射粒子と標的内電子の2体的相互作用により,ほぼ入射粒子の2倍の速度で放出される2体衝突ピ-クである。これは第1次の近似ではラザフォ-ド散乱そのものであって,入射粒子の電荷符号には依存しない。しかし、標的内電子は束縛されており,入射粒子がこの束縛状態を変化させながら衝突に関与する時(2次の摂動)には違いの生ずることが予想される。特に内殼電子についてこれは顕著である。我々は,300keV1MeV程度のエネルギ-領域について,この2体衝突ピ-クの強度,形状を測定した。陽子との定量的な比較については現在進行中である。我々は,この2年間の研究を通じて,低速反陽子ビ-ムを物性研究に応用する足がかりを得たと感えている。今後は,上に述べた原子物理学的側面に加えて,(1)低速反陽子と清浄表面の相互作用,(2)特殊な形状をしたクラスタ-による反陽子トラップ,(3)アルカリライドなどにおける損傷形成の電荷符号依存性等の興味深いテ-マを追求する予定である。
カリキュラム評価に活きるスタンダードの設定に関する国際比較調査

本研究では、まず、カリキュラム評価に活きるスタンダードの設定を論じている理論として、アメリカの代表的な教育評価研究者であるウィギンズとマクタイが提唱する「逆向き設計」論について検討した。また、特に社会科と理科に焦点をあてて、日英米で実際に開発されているスタンダードについて調査した。さらに、これらの知見を活かしつつ、日本の学校や教師たちと、実際にパフォーマンス課題やルーブリックを開発するアクション・リサーチを行った。平成18年度は、主としてスタンダードとカリキュラム評価の関係づけ方に焦点をあてた研究を進めた。具体的には、次の活動を行った。1)米国における現地調査ウィギンズとマクタイは、学校カリキュラムの評価とスタンダードの設定とを対応させながら行っていくためのカリキュラム編成論として、「逆向き設計」論を提唱している。本年度は、ウィギンズが教員研修者の力量向上を図るために実施するワークショップに参加するとともに、ウィギンズや参加者に対するインタビュー調査を実施した。また、並行して、「逆向き設計」論の理論書(Wiggins, G. & McTighe, J.,Understanging by Design,2nd ed.,ASCD,2005)の翻訳を進めた。2)日本の実践校におけるアクション・リサーチ京都市立衣笠中学校、加西市立下里小学校などとの共同研究を進めた。これらの学校においては、既に平成17年度より「逆向き設計」論にもとづくカリキュラム開発の共同研究を行っている。平成18年度は、各教科においてパフォーマンス課題を開発するとともに、指導案の改善や単元間の系統化に関する研究を進めた。3)研究の中間報告上記の研究成果の一部を、自由研究発表「『逆向き設計』論を活かしたカリキュラム・マネジメント-京都市立衣笠中学校における研究開発-」(北原琢也・西岡加名恵、日本カリキュラム学会第17回大会、於奈良教育大学、2006年7月9日)、及びシンポジストとしての報告「『逆向き設計』論にもとづくカリキュラム編成」(単独、教育目標・評価学会第17回大会、公開シンポジウム「教育実践における評価のまなざし」、於慶応義塾大学、2006年11月18日)として発表した。平成19年度は、下記の通り、主としてスタンダードの内容に焦点をあてた比較調査を進めた。(1)日英米のスタンダードについての比較調査:諸外国(主として英米)において実際に成文化されているスタンダードや国際学力比較調査の内容と、日本における学習指導要領や学力調査の内容に関して、とりわけ理科と社会科に焦点をあてて比較調査を行った。また並行して、米国におけるカリキュラム評価の理論書(Wiggins, G. & McTighe, J., Understanding by Design, 2nd ed., ASCD, 2005)の翻訳作業を進めている。(2)日本の実践校におけるアクション・リサーチ:引き続き、京都市立衣笠中学校との共同研究を進めた。平成19年度は、学校ぐるみでルーブリックの作成に取り組み、さらに評価結果に基づいて指導を改善することに焦点をあてた。また、新たに京都府乙訓教育局の小・中学校との共同研究を開始した。さらに、京都大学大学院教育学研究科E.FORUMが開設している「カリキュラム設計データベース(CDDB)」の掲示板上で、会員となっている教員に対し、実践開発への助言や実践交流を日常的に行った。(3)成果の中間報告:加西市立下里小学校・京都市立衣笠中学校の先生方との研究開発の成果をまとめた(明治図書より、西岡加名恵編著『「逆向き設計」で確かな学力を保障する』として近刊予定)。衣笠中学校での研究成果については、公開研究会においても報告した。また、E.FORUM「カリキュラム設計データベース」での活動について、学会において報告した。平成20年度は、下記の通り、主としてスタンダードの内容と開発方法に焦点をあてた比較調査を進め、成果の発表を行った。(2)日本の実践校におけるアクション・リサーチ:引き続き、京都市立衣笠中学校、及び京都府乙訓教育局の小学校との共同研究を行った。また、京都大学大学院教育学研究科E.FORUMの研修の場を用いて、動画を用いたルーブリック作りや、学校階梯を超えたルーブリック作りの取り組みを行い、スタンダードの具体的な開発方法についての研究を進めた。(3)成果の発表:加西市立下里小学校・京都市立衣笠中学校の先生方との共同研究開発の成果を、西岡加名恵編著『「逆向き設計」で確かな学力を保障する』(明治図書)として刊行した。また研究成果を踏まえ、日本教育学会の自由研究発表、日本教育方法学会の公開シンポジウムにおいて、カリキュラム改善の在り方について報告するとともに、雑誌『指導と評価』において「各教科の学習の記録」の在り方を提案した。さらに、日本の学習指導要領改訂の動向について、日本教育学会の英文紀要Educational Studies in Japanにおいて論説した。京都府乙訓教育局との共同で、学力評価の基本的な用語について解説する動画サイトも作成した。
磁気分離を利用したバイオセンシング用実試料前処理法の開発

磁性微粒子を用いて測定試料を前処理することによりバイオセンシングの高感度化を目的に検討を行なった。磁性微粒子での前処理は、測定対象のタンパク質、遺伝子の分離、濃縮に有効であった。磁性微粒子とバイオチップ技術を用いることによって遠心分離機を使わず濃縮、分離が可能であり、測定試料の前処理行程を短縮でき、さらに、イムノクロマト法を用いることで迅速で高感度の検出が可能であることが明らかとなった。だ液中のストレスマーカーの一種である分泌型免疫グロブリンA(s-IgA)を磁性微粒子で分離し、分離バイオチップの諸条件の検討を行なった。プロテインAで被覆された磁性微粒子に抗s-IgAを抗体を標識した磁性微粒子で分離を行ない、イムノクロマト法、タンパク質濃度測定、電気化学測定にて分離の確認、検出を行なった。イムノクロマト法の金ナノ粒子の代用としてs-IgAを捕獲した磁性微粒子での検討を行なったが、金ナノ粒子の様な発色は見られなかった。磁性微粒子でs-IgAを分離後の溶液中のタンパク質濃度は、加えた磁性微粒の量に応じて減少するのをタンパク質濃度測定にて確認した。抗体と金ナノ粒子を用いた高感度の電気化学測定によって分離前後でs-IgAの濃度を測定したところ、同様に加えた磁性微粒子の量に応じて分離後のs-IgAが減少しているのを確認した。5'末端にFITC(fluorescein isothiocyanate)、Biotinを標識したプライマーにてウイルス、細菌(インフルエンザウイルス、大腸菌、ウェルシュ菌)の増幅遺伝子を増幅し、ストレプトアビジンで被覆された磁性微粒によって増幅遺伝子の分離を行ない、イムノクロマト法、電気化学測定、蛍光測定によって分離バイオチップの諸条件の検討を行なった。インフルエンザ遺伝子では、磁性微粒子での分離前ではあるが、増幅遺伝子のイムノクロマト法での確認を行ないPCR用バイオチップを用いることで短時間で高感度に検出が可能であることを見いだした(Analyst, 2012, 137,3422-3426)。増幅遺伝子の分離の確認は、イムノクロマト法、電気化学測定、蛍光測定によって確認を行なった。これらの結果より分離バイオチップ作製のための諸条件が得られた。磁気分離を利用したバイオセンシングの一例として食品中のアレルゲンである小麦、病原菌のモデルとして大腸菌の濃縮を目的とした実試料前処理用のバイオチップの作製を行なった。試作したバイオチップは、アクリル樹脂性でスライドガラスと同等の大きさ(76mm ×26mm)であり、バイオチップ中央に流路(1mm ×1mm)、流路内に磁性微粒子を捕捉する為の流路幅2mm ×10mm、1.5mm ×10mmのトラップゾーンを二カ所設けた構造となっている。このバイオチップを用いてビスケット中のDNAをシリカ磁性微粒子によって分離後、遺伝子増幅(PCR)によって小麦の検出を行なった。その結果、ビスケットに含まれるDNAの分離が可能であり、PCRによってビスケットに含まれている小麦の検出が可能であった。また、抗大腸菌抗体を標識した磁性微粒子とバイオチップを用いて大腸菌を濃縮後にPCRによって大腸菌の検出が可能であった。バイオチップを用いない場合、ビスケット中のDNAの分離、大腸菌の濃縮には遠心分離機を必要とするが、バイオチップと磁性微粒子を用いれば、遠心分離機を使わずに分離、濃縮が可能となる。小麦のDNAの検出では5'末端にFITC(fluorescein isothiocyanate)、Biotinを標識したプライマーを用いてPCR後に抗FITC抗体標識金ナノ粒子を用いて抗Biotin抗体を固定したイムノクロマトテストストリップによる目視での検出も可能であった。実試料前処理用のバイオチップとPCR用バイオチップ(Analyst, 2012, 137, 3422ー3426)を組み合わせることによって遠心操作を必要としない前処理が可能であり、迅速可能なバイオセンシングが可能であることを見いだした。インフルエンザ迅速診断、妊娠検査薬で使用されているイムノクロマト法は、簡便で迅速な測定が可能であり、食品中のアレルギー物質の検出などにも利用されている。しかしながら、だ液や血清からストレスマーカー、ガンマーカーを検出する場合、測定感度のばらつきが問題となる。これは、だ液、血清などの実試料では、個人によって試料中に含まれる夾雑物が非特異的に吸着することや試料間での粘土等が異なり溶液の展開速度が異なっているためと考えられる。そこで、だ液をモデルケースとしてだ液中に最も多く含まれるタンパク質であり粘性にも関係するムチンを磁気分離によって除去し、ストレスマーカーとしても測定されている分泌型IgAの検出をイムノクロマト法にて行った。抗ムチン抗体をプロテインA被覆

磁性微粒と反応させ、ムチン分離用磁性微粒子を作製し、一定量のだ液に対してムチン分離用磁性微粒を加える量を増やしてムチンの分離を行い、イムノクロマト法にて検出を行ったところ、ムチン分離用磁性微粒の量を多くして、ムチンの分離を行なうほど、イムノクロマト法での検出結果を示すテストラインが濃くなった。この結果より、だ液中の最も含まれる夾雑物であるムチンを分離することによってイムノクロマト法による検出の高感度化が期待できる。今回の結果ではだ液中の夾雑物を磁気分離することによってイムノクロマト法による高感度の検出が可能であることが分かったが、夾雑物を分離し高感度化を行うには、多量の抗体と磁性微粒子が必要であることも明らかとなった。測定対象を磁性微粒によって分離し、検出する方法を検討する必要があることが明らかとなった。24年度は測定対象を磁性微粒子にて分離することによる測定感度の影響の検討を目標として行った。計画書通りに測定対象をタンパク質の系、増幅遺伝子の系と二種類の検討を行った。タンパク質の系では、測定対象の抗体を標識した磁性微粒子によって分離を行ない、イムノクロマト法、電気化学測定法、タンパク質濃度測定にて分離効率の測定を行った。増幅遺伝子の系では、イムノクロマト法、蛍光、電気化学測定にて分離効率の測定を行い、タンパク質の系と同様に分離効率の測定を行った。しかしながら、計画書で危惧していたようにイムノクロマト法では、磁性微粒子による測定対象の分離、磁性微粒子を発色素材とする検討は、イムノクロマト法で発色素材として使用される金ナノ粒子と異なり十分な効果が得られなかった。タンパク質の系では、電気化学測定、タンパク質濃度測定にて分離効率が得られた。増幅遺伝子の系では、蛍光では測定感度の問題で分離前後で僅かな差しか見られなかったが、電気化学測定にて分離効率が得られた。これらの結果は、25年度に試作する測定対象分離バイオチップの基礎データとなる。また、磁性微粒子で分離する前の検出系での結果であるが、インフルエンザのウイルスをPCRチップで増幅し、イムノクロマト法で検出を行なった結果を専門誌に投稿したところ表紙として採用された(Analyst, 2012, 137,3422-3426)。また、同様の検出方法で大腸菌、ウェルシュ菌の高感度の検出も可能とした。これらの結果より、研究は、おおむね順調に進展していると評価した。23年度は、血清、だ液をモデルケースとして試料中の夾雑物を磁性微粒子によって磁気分離し、イムノクロマト法での高感度の検出を検討する予定であったが、だ液のみしか検討できていない。これは、当初想定していたよりムチンの抗体が高価であり、試料中の夾雑物の分離には、多量の抗体、磁性微粒子が必要であったためである。しかしながら、24年度に実施予定の磁性微粒子を金ナノ粒子の代用としてイムノクロマト法での測定結果を表わす、テストラインの検証を行い、金ナノ粒子-タンパク質(測定対象)-磁性微粒子の様な複合体を用いる必要性があることも既に明らかにしている。また、24年度は、当初より試料中の測定対象を磁気分離後に検出を行う計画であり、夾雑物を分離することよりも、測定対象を分離した後に検出する方法の重要性が本年度の結果で明らかとなっており、おおむね順調に進展している。23年度、24年度で得られたデータを基にして測定対象分離バイオチップの試作を行なう。
新型ホール推進機の作動特性とビーム発散に関する実験的研究

宇宙用電気推進機の一種であるホール推進機は、静電場と静磁場を用いてイオンを加速し推力を得る機構を持つ。電気推進機の中で現在までに最高の推進効率を示しているイオン推進磯と比較すると、ホテル推進機は推力が大きく、より地球近傍での使用に適していると考えられるため、近年各国で注目を集めている。ホール推進機はSPT型とTAL型という二種類大別されているが、双方の特性の定量的な比較が十分に行われていないために、性能や作動の安定性を考慮した場合にどちらがより実用に適しているかということが不明確である。また本研究以前には、日本国内においてTAL型についての実験的研究が行われたことはない。したがって、将来的に両者の長所を取り入れた最適なホテル推進機を設計する準備として、本研究ではTAL型の作動特性やビーム発散などを調べることとし、TAL型に近い新型ホール推進機を設計及び製作した。ホール推進機の排気プラズマは低密度で圧力が低いため、地上で実験を行うためには、適した真空条件を作り出す真空チャンバが必要である。本研究機関が所有していた真空チャンバの気密性を上げ、また作動に必要な電力・推進剤をチャンバ内に導入するため、新たなフランジを製作し、推進剤供給系・電力供給系を整えた。その後、新型ホール推進機の作動を行った結果、磁場の強度が作動に影響を与えることが確認された。また、ビームの発散角や推力を測定するための機器を製作していた段階であり、今後、定量的に作動特性やビーム発散、それらへの磁場形状の影響等を評価する予定である。
Asp fI(18kDa)検出のためのELISAとPCR法の開発とその臨床応用

検体中の18kDa抗原(Aspf1)検出のためcapture antibodyとしてヴァージニア大学のDr.Arrhudaから供与を受けたモノクローナル抗体4A6を使用して,detector antibodyとして抗mitogillin(Asp f1と抗原性が共通)あるいは抗Aspf1家兎ポリク-ナル抗体を用いたELISAを組み立てたが,検体処理に問題があるのか非特異的な結果が得られた.一方患者尿を濃縮後SDS-PAGEでながしたのち転写しモノクローナル抗体4A6をprobeとしてウェスタン・ブロット法で観察する方法では侵入性アスペルギルス症(確定例+疑診例)10例中4例が陽性で検出可能であった.諸家の指摘のごとくELISAによる抗原検出法には限界があることが判明したので,PCRを用いてAspf1 geneの断片を検出するDNA診断の方向で検討を始めた.たまたま凍結保存されていた菌球が2個(剖検時と手術時に採取)あり,それからDNAを抽出して,PCRにかけた所,予想どおりのPCR産物が得られ,A.fumigatusが原因であることが判明した.Aspf1はA.fumigatusのvirulence factorの候補とされているのが.英国のグループはalkaline protease(ALP)をvirulence factorとして提唱していたので,ALPについてもPCRによる検出を試み,同様の結果が得られた.さらにこれらvirulence factorをtargetとしたPCR診断を肺アスペルギローマを中心にした患者から得られた喀痰をもとに検討をしており,95年日本胸部疾患学会総会(名古屋)ならびに95年ATSmeeting(シアトル)で発表の予定である。今後症例を増やして論文にする予定である.検体中の18kDa抗原(Aspf1)検出のためcapture antibodyとしてヴァージニア大学のDr.Arrhudaから供与を受けたモノクローナル抗体4A6を使用して,detector antibodyとして抗mitogillin(Asp f1と抗原性が共通)あるいは抗Aspf1家兎ポリク-ナル抗体を用いたELISAを組み立てたが,検体処理に問題があるのか非特異的な結果が得られた.一方患者尿を濃縮後SDS-PAGEでながしたのち転写しモノクローナル抗体4A6をprobeとしてウェスタン・ブロット法で観察する方法では侵入性アスペルギルス症(確定例+疑診例)10例中4例が陽性で検出可能であった.諸家の指摘のごとくELISAによる抗原検出法には限界があることが判明したので,PCRを用いてAspf1 geneの断片を検出するDNA診断の方向で検討を始めた.たまたま凍結保存されていた菌球が2個(剖検時と手術時に採取)あり,それからDNAを抽出して,PCRにかけた所,予想どおりのPCR産物が得られ,A.fumigatusが原因であることが判明した.Aspf1はA.fumigatusのvirulence factorの候補とされているのが.英国のグループはalkaline protease(ALP)をvirulence factorとして提唱していたので,ALPについてもPCRによる検出を試み,同様の結果が得られた.さらにこれらvirulence factorをtargetとしたPCR診断を肺アスペルギローマを中心にした患者から得られた喀痰をもとに検討をしており,95年日本胸部疾患学会総会(名古屋)ならびに95年ATSmeeting(シアトル)で発表の予定である。今後症例を増やして論文にする予定である.
我が国大学におけるマネジメントゲームを用いた経営学教育の効果測定

インターネットマネジメントゲームの教育目的はダイナミックな競争的局面で会社を模擬的に経営し、その経営成果を競う中で、意化の3点を学習することである。(a)経営の長期的視点、(b)部門間の資源配分、(c)部門内での資源配分、の3つである。この研究の目的は、今回、(株)サンモアテックの凪開発部長と大阪大学尼子研究室を中心に開発された、インターネットマネジメントゲームBスクエアが、上記の目的を達成し得たかどうかを実験的に把握することである。また、インターネットで国内外からプロバイダーを経由してゲームを行うことによって上記目的を達成することが阻害されるかどうかを確認することである。(1)大阪、上海、台北、ソウル間でのダイヤルアップ接続によるゲームでは、上記目的は阻害されることなく、かえって対戦者間のコミュニケーションは向上することが分かった。(2)代理変数として、経営会計用語テスト、参加者記入によるアンケートを分析した結果、2人で1社を構成する場合、意思決定制限時間を1回とする場合に効果が最大となることが分かった。(3)日本語、英語の言語切替状態は外国人チームの参加を違和感なく促せることが分かった。その他本ゲームを用いることによって、文化による戦略の好みの違い、チーム内のグループダイナミックスの違いの研究に非常に有用、強力な実験室的データを収集できることが分かった。(本研究は情報処理振興事業協会IRAの実験データの一部も利用して行った。)インターネットマネジメントゲームの教育目的はダイナミックな競争的局面で会社を模擬的に経営し、その経営成果を競う中で、意化の3点を学習することである。)