hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヒト皮膚移植SCIDマウスを用いてのヒト皮膚幹細胞の同定

今回ヒト皮膚における幹細胞同定実験を行うにあたり、近隣の病院の協力を得てヒト皮膚を確保し、SCIDマウスに移植して実験に供する予定であった。しかし今年度は提供されたヒト皮膚が去年までと異なり極端に少なく、皮膚幹細胞の同定実験を行うことができなかった。そこでヒトの皮膚組織の代わりにヒトの頭髪を一本ずつ単離したものをSCIDマウスに移植し、その毛根部における幹細胞の同定を試みた。SCIDマウスに移植したヒト頭髪の毛根部における幹細胞を同定するために一本ずつ単離したヒト頭髪を6匹のSCIDマウスの背部に移植した。移植後56日目に^3H-Thymidineを封入した浸透圧ポンプをSCIDマウス腹腔内に移植することによって14日間連続標識した。15日目にポンプを摘出して、その時点で2匹のマウスよりヒト頭髪を回収してフォルマリン固定した。その後28日目、56日目に各々2匹のマウスより同様にヒト頭髪を回収した。回収した頭髪はJB-4包埋し薄切後、乳剤(コニカNR-M2)で処理し14日間露出した。その後現像、染色、封入したうえで細胞の様子を観察した。その結果、ヒト頭髪の周囲のマウス組織では多くのgrainが観察され^3H-Thymidine標識は適切に行われていたことが確認された。標識終了直後のヒト頭髪では毛包全体においてgrainが確認されたのに対し28日目の毛包では上端から1/3ほどの部分の外毛根鞘細胞が染色されていた。56日目の毛包では染色された細胞はほとんど認められなかった。以上の結果より今回のプロトコールでは必ずしも期待していたような染色結果が得られないことが明らかになったので、今後、標識する^3H-Thymidineの量を多くする、露出時間を延長するなどの点を改良したうえで次の機会にさらに検討する予定である。
救命救急センターにおける緑膿菌菌血症の疫学的検討

平成14年1月から6月までの救命センター入院患者のうち、血液培養から緑膿菌が検出されたものは2例であった。その2例とも6月に検出されていた。平成13年も6月から7月にかけて2例血液から検出された症例があり、この4例を中心に喀痰から緑膿菌が検出された例を含め23例を検討の対象とした。個々の症例については診療録を調査中である。特に、血管内カテーテル使用例が多く見られることが判明した。救命センターでは中心静脈カテーテルが多くの症例で使用されており、一度に複数本使用されるケースは他病棟では見られない特徴である。また、マルチルーメンの中心静脈カテーテルを使用する症例が多いが緑膿菌菌血症との関連は症例数が少ないために明らかにすることが困難であった。以前の調査と比較し、緑膿菌による菌血症症例が大幅に減少しているが、その原因については手洗いの頻度、医療従事者の交代、手袋、エプロンの使用など複数の条件が異なる時期に変化しており明らかにすることは困難であった。検出された緑膿菌に関して、分子生物学的検討を行った。平成13年度に予備実験を行い検討された条件でAP-PCR(Arbitrarily Primed Polymerase Chain Reaction)法を用いて検討したところ、多くの菌株は異なるバンドを示した。しかし、その中で同一のバンドをしめす菌株が一組認められた。そのため現在、分子疫学的方法としてスタンダードであるPFGE(Pulse Fielded Gel Electrophoresis)法により同一の菌株と判断できるかどうか検討を行っている。2つの方法で同一と判断されることは救命救急センターにおける緑膿菌水平感染の存在を明らかにすると考えられる。平成13年1月から12月までの救命センター入院患者のうち、緑膿菌が検出されたものはのべ158例であった。そのうち血液培養から菌が検出されたものは3名であり、症例が少ないため、肺炎等の他の部位の感染症の患者も同時に検索することとした。以前の調査と比較し、緑膿菌による菌血症症例が大幅に減少しているが、その原因についても調査を行う。特に、血管内カテーテル使用例について注目して調査を行っている。血管内カテーテルは救命センターの症例には多数用いられているが、一度に複数本使用されている例が、他の病棟より多いこと、マルチルーメンの中心静脈カテーテルを使用する割り合いが、他の病棟に比較し多い可能性があり調査中である。分子生物学的検討は、あらかじめ異なることが判明している2種類の株を用い、AP-PCR法で異なる株が異なるバンドとして認識できるように予備実験を行い、PCRの条件などの検討を行っている。得られた菌株についての検討はPCRの条件が決定され安定した結果が得られるようになった後に行う。平成14年度はさらに緑膿菌が検出される症例を蓄積し、症例数を増やして検討を行う予定である。蓄積したデータを平成13年度分とあわせて分析し、救命救急センターにおける緑膿菌菌血症症例の疫学的特徴を明らかにする予定である。
生活習慣病が人工関節用ポリエチレンの酸化劣化に及ぼす影響

人工関節の摺動面を形成するポリエチレン(PE)の劣化に関する研究は,PE自体の酸化過程のみに着目したものであったが,PEは,加齢や生活習慣病,メタボリック症候群の罹患により全身性に産生が亢進するフリーラジカルや活性酸素にさらされており,こうした全身性の酸化ストレスもPE劣化に関与すると考えている.そこで,抗酸化をPE自体に求めるだけではなく,全身性の酸化ストレスがPE劣化に及ぼす影響を検証するために, 1)酸化ストレスが亢進するメタボリック症候群のラットと健常ラットモデルの皮下に架橋あるいは抗酸化処理を施したPEを埋植し経時的に劣化を観察する.2)人工関節置換術後に再置換術を余儀なくされた症例において,回収したPEの酸化劣化の解析ならびに血液・骨・人工関節周囲組織の酸化ストレスの程度を明らかにすることにある.メタボリック症候群のラットモデルである雌性SDTfattyラット(日本クレア)および,健常対照として雌性SDラットを用いる.SDTfattyラットは,生後2ヵ月で糖尿病,肥満,非アルコール性脂肪肝炎(NASH)といった多彩な生活習慣病を併発する「酸化ストレス亢進したモデル」である.(1)健常SDラット群(2)メタボSDTfatty群の2群を設定する.生後1ヵ月齢の1個体の背部にすでに臨床で用いられている5種のPE(5x5x2mm)を背部皮下・5ヵ所に埋植して,術後3,6,12,18,24ヵ月(各n=8,合計8x2群x5期間:n=90)でPEを皮下から採取し解析する.また同時に,血液,尿,皮膚,皮下脂肪組織,骨(椎体,下肢骨),関節軟骨,大動脈,肝臓を採取して酸化劣化の程度および組織学的な変化を解析した.屠殺時に皮膚を展開した結果,皮下組織にポリエチレンが存在した.これを採取し,FTIS法で観察したところ,明瞭なピークが確認できた.生活習慣病ラットと健常ラットの皮下に5種類のポリエチレン(人工関節用)を埋植した.雄性SPF(32匹):4週齢の自然発症糖尿病ラット(SDT/Jcl),雄性SPF(30匹):4週齢の健常ラット(SD),6日間の馴化した背部皮下に1回埋植した.背部の皮膚を3ヵ所切開後,左右の皮下組織を剥離して被験物質を1ヵ所に1検体ずつ,1個体に付き,計6ヵ所に埋植し,1ヵ所ずつの皮下組織をナイロン糸で,3ヵ所の皮膚を絹糸で縫合した.体液,組織の酸化ストレスの相関性を検証し,PEの劣化との相関を検証する.人工関節の摺動面を形成するポリエチレン(PE)の劣化に関する研究は,PE自体の酸化過程のみに着目したものであったが,PEは,加齢や生活習慣病,メタボリック症候群の罹患により全身性に産生が亢進するフリーラジカルや活性酸素にさらされており,こうした全身性の酸化ストレスもPE劣化に関与すると考えている.そこで,抗酸化をPE自体に求めるだけではなく,全身性の酸化ストレスがPE劣化に及ぼす影響を検証するために, 1)酸化ストレスが亢進するメタボリック症候群のラットと健常ラットモデルの皮下に架橋あるいは抗酸化処理を施したPEを埋植し経時的に劣化を観察する.2)人工関節置換術後に再置換術を余儀なくされた症例において,回収したPEの酸化劣化の解析ならびに血液・骨・人工関節周囲組織の酸化ストレスの程度を明らかにすることにある.メタボリック症候群のラットモデルである雌性SDTfattyラット(日本クレア)および,健常対照として雌性SDラットを用いる.SDTfattyラットは,生後2ヵ月で糖尿病,肥満,非アルコール性脂肪肝炎(NASH)といった多彩な生活習慣病を併発する「酸化ストレス亢進したモデル」である.(1)健常SDラット群(2)メタボSDTfatty群の2群を設定する.生後1ヵ月齢の1個体の背部に,すでに臨床で用いられている5種のPE(5x5x2mm)を背部皮下・5ヵ所に埋植して,術後3,6,12,18,24ヵ月(各n=8,合計8x2群x5期間:n=90)でPEを皮下から採取し解析する.また同時に,血液,尿,皮膚,皮下脂肪組織,骨(椎体,下肢骨),関節軟骨,大動脈,肝臓を採取して酸化劣化の程度および組織学的な変化を解析する.生後1ヵ月齢の1個体の背部に,すでに臨床で用いられている5種のPE(5x5x2mm)を背部皮下・5ヵ所に埋植する計画であったが,PEが予定通りにできず時間を要してしまった。そのため、モデル作製が実験計画より、かなり遅れて開始することとなった。人工関節の摺動面を形成するポリエチレン(PE)の劣化に関する研究は,PE自体の酸化過程のみに着目したものであったが,PEは,加齢や生活習慣病,メタボリック症候群の罹患により全身性に産生が亢進するフリーラジカルや活性酸素にさらされており,こうした全身性の酸化ストレスもPE劣化に関与すると考えている.そこで,抗酸化をPE自体に求めるだけではなく,全身性の酸化ストレスがPE劣化に及ぼす影響を検証するために, 1)酸化ストレスが亢進するメタボリック症候群のラットと健常ラットモデルの皮下に架橋あるいは抗酸化処理を施したPEを埋植し経時的に劣化を観察する.2)人工関節置換術後に再置換術を余儀なくされた症例において,回収したPEの酸化劣化の解析ならびに血液・骨・人工関節周囲組織の酸化ストレスの程度を明らかにすることにある.メタボリック症候群のラットモデルである雌性SDT

fattyラット(日本クレア)および,健常対照として雌性SDラットを用いる.SDTfattyラットは,生後2ヵ月で糖尿病,肥満,非アルコール性脂肪肝炎(NASH)といった多彩な生活習慣病を併発する「酸化ストレス亢進したモデル」である.(1)健常SDラット群(2)メタボSDTfatty群の2群を設定する.生後1ヵ月齢の1個体の背部にすでに臨床で用いられている5種のPE(5x5x2mm)を背部皮下・5ヵ所に埋植して,術後3,6,12,18,24ヵ月(各n=8,合計8x2群x5期間:n=90)でPEを皮下から採取し解析する.また同時に,血液,尿,皮膚,皮下脂肪組織,骨(椎体,下肢骨),関節軟骨,大動脈,肝臓を採取して酸化劣化の程度および組織学的な変化を解析した.屠殺時に皮膚を展開した結果,皮下組織にポリエチレンが存在した.これを採取し,FTIS法で観察したところ,明瞭なピークが確認できた.生活習慣病ラットと健常ラットの皮下に5種類のポリエチレン(人工関節用)を埋植した.雄性SPF(32匹):4週齢の自然発症糖尿病ラット(SDT/Jcl),雄性SPF(30匹):4週齢の健常ラット(SD),6日間の馴化した背部皮下に1回埋植した.背部の皮膚を3ヵ所切開後,左右の皮下組織を剥離して被験物質を1ヵ所に1検体ずつ,1個体に付き,計6ヵ所に埋植し,1ヵ所ずつの皮下組織をナイロン糸で,3ヵ所の皮膚を絹糸で縫合した.現在,術後3,6,12,18,24ヵ月(各n=8,合計8x2群x5期間:n=90)ごとに,PEを皮下から採取し解析する予定である.また同時に,血液,尿,皮膚,皮下脂肪組織,骨(椎体,下肢骨),関節軟骨,大動脈,肝臓を採取して酸化劣化の程度および組織学的な変化を解析する.体液,組織の酸化ストレスの相関性を検証し,PEの劣化との相関を検証する.
岩石変形実験に基づく稍深発地震の発生メカニズムの解明

蛇紋岩の安定領域および脱水反応が生じる温度と圧力条件において、塑性変形と脱水反応に起因する断層が蛇紋岩に形成しうるかという問題を明らかにする目的で、1)三波川変成帯中に露出するアンチゴライト蛇紋岩(試料A)と2)長崎変成岩中のアンチゴライト蛇紋岩(試料B)を出発物質とした変形実験を行った。変形実験には、広島大学とカリフォルニア大学リバーサイド校の固体圧式変形実験装置を用いた。その結果、試料Aを用いた実験においては、塑性変形と脱水反応に起因する断層が形成しうることが分かった。塑性変形に起因する場合はアンチゴライトの格子選択配向の形成による弱面の形成が重要な要因であり、脱水反応に起因する場合は細粒な脱水反応生成物が関連した弱面の形成が重要な要因となっている。一方、試料Bを用いた実験は、現在のところ、その安定領域内における実験しか行っていないが、塑性変形に起因する断層の形成は確認できなかった。試料Aと試料Bを構成するアンチゴライトは、その形態が大きく異なっている。前者は板状で後者は針状である。この形態的特長が、塑性変形の特徴と断層形成に影響を与えていると考えている。また、試料Bを用いた実験からは、1GPaと3GPaの封圧、300°Cから700°Cの温度領域にわたる塑性変形の力学データーを得ることができた。その結果から、流動応力の温度と封圧の依存性を定量的に理解できつつある。これらのデーターのうち非常に重要な結果は、流動応力の温度依存性が封圧の増加にともなって著しく大きくなる事である。これは変形のメカニズムが、低い封圧条件ではパイエルス機構であり、大きな封圧条件では転位クリープとなっている為と考えられる。今後この事を明らかにする為に、回収試料の微細組織を透過型電子顕微鏡によって観察する予定である。本研究の目的は、固体圧式3軸変形試験機を用いた蛇紋岩の変形実験を通じて、稍深発地震の発生過程とその発生メカニズムを明らかにすることである。本年度に行った研究の概要は以下の通りである。A)変形実験について変形実験(定歪速度実験)は、広島大学の改良Griggs型変形実験装置を用いて行った。実験試料には、長崎県長崎市に分布する長崎変成岩中の長柱状のアンチゴライトを主成分とする蛇紋岩を用いた。この蛇紋岩は、粒径約10μmから100μmのマグネタイトを多量に含み、片理面が発達する。この片理面に対して、高角度で斜交する約500μm幅のオリビンから構成される脈がわずかに存在する。片理面に垂直な方向から直径約7mm、高さ約7mmの円柱をくりぬき実験試料とした。実験条件は、封圧:約1GPa、温度:450°C、500°C、550°C、600°C、ピストンの変位速度:時速約570μm610μmである。B)結果1)降伏点を越えて定常クリープに達する前に応力降下が生じた。また、いずれの実験の回収試料中においても、断層の形成が確認できた。断層沿いの蛇紋石は脆性的に破壊されていた。以上の事は、実験中に認められた応力降下が、断層形成に伴って生じた現象である事を示唆している。2)450°C、500°C、550°Cにおける試料の最高強度はそれぞれ約1080MPa、960MPa、1080MPaである。

これらの値は、Raleigh and Paterson(1965)の結果と調和的であり、封圧の増加によって蛇紋岩の最大強度が増加する事を示している。本研究の目的は、固体圧式3軸変形試験機を用いた蛇紋岩の変形実験を通じて、稍深発地震の発生過程とその発生メカニズムを明らかにすることである。本年度に行った研究の概要は以下の通りである。蛇紋岩の安定領域において定歪速度実験を行った。実験試料には長崎変成岩中のアンチゴライト蛇紋岩を用いた。この蛇紋岩には片理面が発達しており、片理面に垂直な方向から直径約7.0mm×高さ約7.0mm、および、直径約3.0mm×高さ8.0mmの大きさの円柱をくりぬき実験試料とした。実験条件は、封圧1 GPaと3GPa、温度は450°C-700°C、歪速度は2.0-2.4×10^-5/秒とした。得られてた流動応力は、1 GPaの封圧条件において、450°Cで約1070MPa、500°Cでは約960MPa及び約1200MPa、550°Cでは約830MPaと1080MPaである。また3GPaの封圧条件においては、600°Cでは約2100MPa、650°Cでは約1300MPa、700°Cでは約845MPaである。この結果は、封圧500MPa以下の条件で行ったRaleigh and Paterson(1965)の蛇紋岩の変形実験の結果と調和的である。すなわち、同じ温度条件では封圧の増加にともない流動応力は増加し、また、同じ封圧条件では、温度の上昇にともない流動応力は低下する。そして特徴的な事は、封圧が増加するに従って、流動応力の温度依存性が著しく大きくなる事である。これは、変形のメカニズムがパイエルス機構から転位クリープへ変化している為と考えられる。
環境化学物質が誘発するヘム代謝異常モデル動物における概日リズム障害の評価

化学物質誘発ポルフィリン症モデルマウスを作製し、その性状解析を行った。代謝生化学的な変化や臓器障害などを指標に、肝性ポルフィリン症モデルを確立したほか、急性ポルフィリン症と関係の深い精神神経症状について、本モデルを用いて発症を確認できることを明らかにした。また、神経作動性薬物に対する感受性が変化すること、薬物体内動態に変化が起きない状態で、神経系の可塑的変化が生じている可能性を見出した。さらに概日行動リズムおよび体温リズムを測定し、概日リズム位相の前進というリズム異常が現れること、またこれら概日リズム異常は、ポルフィリン症治療薬のヘムの投与により、改善することを明らかにした。結論として、我々はヘム代謝異常を示すポルフィリン症モデルマウスが、行動や体温で示される概日リズムの位相が前進するというリズム異常を呈することを証明した。(1)環境化学物質により誘発されるポルフィリン症モデル動物の作出及び病態の評価(2)ポルフィリン症モデル動物における概日リズム障害の評価(3)ポルフィリン症の発症または予防と治療における概日リズムの関与の解明化学物質誘発ポルフィリン症モデルマウスを作製し、その性状解析を行った。平成18年度は、主に摂餌を介してグリセオフルビン(GF)を摂取するマウスのヘム代謝異常に関する性状解析を中心に行った。GF含有食(0.5%,2.0%)を摂食したマウスは対照(高炭水化物食)マウスに比べて、7日目に最大値を示す糞中ポルフィリン(コプロポルフィリンIII、プロトポルフィリンIX)量の増大が観察された。また、GF用量依存的に肝肥大および肝障害が観察されたほか、高用量GFを摂取した群では顕著な体重の減少と耳介の炎症も観察された。ヘム前駆体の蓄積やそれに伴う肝障害の発現は、ポルフィリン症に特徴的な症状であり、マウスを用いたポルフィリン症モデルの作出ができたと考えている。GFによる急性障害と慢性障害では、糞中ポルフィリン量(急性期に著明な上昇)や肝障害マーカー活性(急性期には肝細胞傷害性、慢性期には胆汁うっ滞など)の変動に大きな違いがあることから、時期依存的な病態および症候を検討する必要性が考えられた。さらにこれらの動物を用いて、ポルフィリン症に見られる精神神経障害を評価する試みの一つとして、運動機能について検討した。その結果、GF摂取群では対照群に比べ、3-5週間で有意に自発運動量の低下が認められた。筋肉細胞の組織学的検討では、末梢神経系の脱落および筋肉細胞の変性などは確認されなかった。以上の結果は、ポルフィリン症モデルマウスにおいて、行動に対する中枢性制御の変化が起きていることを想起させるものである。今後は、これらの動物モデルを用いて概日リズム性の検討を行う予定である。平成19年度は、昨年度までに確立してきたグリセオフルビン(GF)誘発ポルフィリン症モデルマウスを用いて、ヘム代謝異常の性状解析をさらに詳細に検討した。加えて、ポルフィリン症患者で見られる精神神経機能の変化を評価するために行動薬理試験を実施した。また概日リズムを評価するために、輪回し行動装置を用いた、行動解析を行った。GF誘発ポルフィリン症モデルマウスを用いて、ヘム代謝異常について、さらなる検討を行った。肝臓中のヘム含量を評価するために、ヘムタンパク質であるミクロソーム中のP450量とヘムによるネガティブフィードバック制御を受けるδ-アミノレブリン酸合成酵素(ALAS1)のmRNAレベルを測定した。その結果、糞中ポルフィンリン体の蓄積が見られる以前のGF摂取3日目をピークに、ALAS1 mRNAの発現上昇が観察された。またP450量は、GF摂取後1週間目で最低値を取り、対照群の約70%程度にまで減少することがわかった。行動薬理試験では、GF摂取により不安様症状、うつ様症状などが観察された。概日行動リズムにおいても、日中の行動量が増えたり、夜間後半の行動量が減少するなど、リズム障害と思われる現象が観察された。グリセオフルビンにより誘発されるポルフィリン症モデル動物を用いて、ヘム代謝異常、肝障害・皮膚障害並びに精神神経障害を行動薬理学的に評価した内容について、学術雑誌に投稿し受理された。さらに同じ動物モデルを用いて、向精神薬に対する薬物作用を検討する中で、病態モデル動物において、ジアゼパムに対する感受性が著しく異なることを見出した。少し詳しく結果を示すと、グリセオフルビン摂取8日目において、ジアゼパムによる鎮静作用、抗けいれん作用は増大したにもかかわらず、アルコールによる催眠作用の延長効果は、著しく減弱した。この効果は、ジアゼパムの体内動態、すなわち血中濃度推移と脳内含量の変化とは、相関がみられなかった。

このことから、薬物動態学的変化というよりは、薬物受容体などの発現変化が、薬物感受性の違いに寄与しているものと、考えられた。現在、このメカニズムの解明へ向けて検討中である。ポルフィリン症モデル動物における概日リズムを評価し、行動リズム、体温リズムに異常が見られることを見出した。今後、本研究成果について、学会発表等を行う予定である。ポルフィリン症モデル動物を用いた薬物感受性の変化並びに概日リズムの変化とヘム代謝との関係を明らかにすべく、治療薬であるヘム投与の効果を検討するべく、予備試験を検討中である。グリセオフルビンにより誘発されるポルフィリン症モデル動物を用いて、ヘム代謝異常と概日リズムの関係について、精査した。その結果、本ポルフィリン症マウスにおいて、概日行動リズムおよび概日体温リズムにおいて、位相の前進作用が確認された。この概日リズムの位相前進作用は、ヘムの投与により軽減されたことから、ヘム代謝異常のうち、ヘムの減少あるいはアミノレブリン酸の増大が体内時計あるいは概日リズムの位相に影響をもたらしていることが示唆された。また本ポルフィリン症マウスにおけるジアゼパムに対する感受性の違いにおいても、ヘムの投与により感受性の差異が消失することを明らかにした。以上の知見は、グリセオフルビン誘発ポルフィリン症モデル動物が、ヘム代謝異常により神経精神症状をもたらしていることを証明する価値ある知見である。また、ヘム代謝と概日リズム異常との関連を動物個体レベルで示した初めての知見であり、今後、データを集積することにより、ヘムによる概日リズム調節メカニズムを詳細に明らかにすることにつながると考えられる。
非特異平面代数曲線のルロ-ト半群について

さまざまな曲線のLuroth半群を求めるための手段として本研究では主に種数が正の代数曲線の3葉の被覆曲線上の不動点のないペンシルについて研究し1つの結果を得た.この成果はしかるべき専門雑誌に発表する予定である.詳しい内容については後述する.i)与えられた平面曲線が非特異になるためのLuroth半群の充分条件を求めること.ii)結節平面曲線のLuroth半群を決定すること.等についても様々な角度から研究し,一定の知見を得ることはできたが,発表に値する成果までには到達していない.今後の課題といて残されている.Weierstrass Pairの研究については,現在,特に力点をおいて進行中である.次年度以降の研究課題の1つとすべく問題点を整理中である.Cを種数h>0のBrill-Noetherの意味で一般な代数曲線,XをCの3葉の被覆でその種数をgとし,π:X→Cをその被覆射影とする.X上で定義された不動点をもたないペンシル(base point free pencil)は,その次数(degree)が比較的小さい(Castelnuovo-Severiの評価,後述)ときはつねにC上のペンシルのπによる引き戻しである.従って,X上のLuroth半群のうち比較的小さい部分はC上のLuroth半群によって規定される.そこで,C上のペンシルのπによる引き戻しでないX上の不動点をもたないペンシルが存在する次数を求めることがX上のLuroth半群の研究にとって重要である.ここで特にh>0で3葉の場合Luroth半群を研究理由は次による.i)h=0で2葉の場合は超楕円的でありLuroth半群はよく知られている.iv)h>0で2葉の場合はまだ完全ではないが殆ど解明されている.我々が得た主成果は次の通りである(記号は上記のものを踏襲する).先に引用したCastelnuovo-Severiの評価は次の通り:d【greater than or equal】(g-3h)/2ならばX上の不動点を持たない次数dのペンシルはつねにC上のペンシルの引き戻しである.この事実と我々の定理を比較するとまだ最良の評価には程遠いものと考えられる.そこで,比較的扱いが容易な巡回3葉被覆の場合について検証した結果,次のことが判明i)一般にはCastelnuovo-Severiの評価は最良であるが,特殊な3葉被覆ではかなり改良される.ii)巡回3葉被覆では我々の定理が改良可能である.上記i)の事実はMartens-Schreiyerによって有効に用いられたMaroni不変量と深く関係しているものと考えられる.従って,彼等の手法を深く分析し,我々の問題への適用をはかる方策をさぐることが今後の研究課題の1つになりうる.さまざまな曲線のLuroth半群を求めるための手段として本研究では主に種数が正の代数曲線の3葉の被覆曲線上の不動点のないペンシルについて研究し1つの結果を得た.この成果はしかるべき専門雑誌に発表する予定である.詳しい内容については後述する.i)与えられた平面曲線が非特異になるためのLuroth半群の充分条件を求めること.ii)結節平面曲線のLuroth半群を決定すること.等についても様々な角度から研究し,一定の知見を得ることはできたが,発表に値する成果までには到達していない.今後の課題といて残されている.Weierstrass Pairの研究については,現在,特に力点をおいて進行中である.次年度以降の研究課題の1つとすべく問題点を整理中である.Cを種数h>0のBrill-Noetherの意味で一般な代数曲線,XをCの3葉の被覆でその種数をgとし,π:X→Cをその被覆射影とする.X上で定義された不動点をもたないペンシル(base point free pencil)は,その次数(degree)が比較的小さい(Castelnuovo-Severiの評価,後述)ときはつねにC上のペンシルのπによる引き戻しである.従って,X上のLuroth半群のうち比較的小さい部分はC上のLuroth半群によって規定される.そこで,C上のペンシルのπによる引き戻しでないX上の不動点をもたないペンシルが存在する次数を求めることがX上のLuroth半群の研究にとって重要である.ここで特にh>0で3葉の場合Luroth半群を研究理由は次による.i)h=0で2葉の場合は超楕円的でありLuroth半群はよく知られている.iv)h>0で2葉の場合はまだ完全ではないが殆ど解明されている.我々が得た主成果は次の通りである(記号は上記のものを踏襲する).先に引用したCastelnuovo-Severiの評価は次の通り:d【greater than or equal】(g-3h)/2ならばX上の不動点を持たない次数dのペンシルはつねにC上のペンシルの引き戻しである.この事実と我々の定理を比較するとまだ最良の評価には程遠いものと考えられる.そこで,比較的扱いが容易な巡回3葉被覆の場合について検証した結果,次のことが判明i)一般にはCastelnuovo-Severiの評価は最良であるが,特殊な3葉被覆ではかなり改良される.ii)巡回3葉被覆では我々の定理が改良可能である.上記i)の事実はMartens-Schreiyerによって有効に用いられたMaroni不変量と深く関係しているものと考えられる.
記憶の概日リズムに関する生理心理学的研究

記憶の生理学的基礎である海馬長期増強は、分泌が概日リズムを示すメラトニンにより抑制される。本研究では、メラトニンが長期増強を抑制する機序について電気生理学的手法により検討した。一酸化窒素合成酵素抑制剤およびメラトニンによる長期増強抑制は共通の機序を介し、また一酸化窒素供与体により長期増強抑制がなくなったことから、メラトニンによる長期増強抑制が一酸化窒素信号経路を介したものであることが示された。記憶機能の日内変動(概日リズム)機構を明らかにするため、分泌が概日リズムを示すホルモンの代表例であるメラトニンと海馬シナプス可塑性との関係について、本年度は電気生理学的実験を中心に検討した。ラット脳スライス標本を作製し、シャファー側枝にテスト刺激を0.1Hzの頻度で与えつつ、テタヌス刺激(100Hz、1秒間)後の海馬CA1領域におけるシナプス応答の長期増強を記録した。その結果、(1)メラトニン(100nM)はテタヌス刺激誘導性の長期増強の大きさを減弱させた。また、この100倍濃度のメラトニンでもほぼ同程度の抑制となり、メラトニンは100nMの濃度で長期増強に最大の抑制効果をもたらすことを確認した。(2)一酸化窒素合成阻害薬L-NAME存在下において長期増強の大きさの減弱が有意に見られ、この減弱効果は、別の一酸化窒素合成阻害薬L-NMMAを用いた場合にも同程度に観察された。したがって、今回の実験条件下では一酸化窒素信号系が長期増強の誘導に関与していることが示された。(3)メラトニンと一酸化窒素合成阻害薬を同時に投与した場合、減弱の程度はどちらか一方を投与した場合以上には大きくならなかった。つまり、両者の遮蔽効果がみられた。(4)一酸化窒素のドナーDEA/NOを投与することにより、メラトニンとL-NAME存在下の長期増強の大きさは通常となった(生理溶液のみの存在下と同程度であった)。なお、DEA/NOのみの投与では、シナプス応答の大きさやテタヌス刺激後の長期増強の大きさの程度には影響がなかった。以上の結果より、メラトニンによる長期増強抑制効果は、一酸化窒素信号経路に作用して生じていることが明らかになった。松果体ホルモンであるメラトニンの分泌量は日内変動を示し、またメラトニンによって海馬長期増強が減弱することから、メラトニンの分泌が長期増強の日内変動を引き起こす生体内要因である可能性が考えられる。その作用機序として従来メラトニンによるPKA經路の抑制が考えられていたが、昨年度の本研究により、一酸化窒素経路(NO)の抑制を介してメラトニンが海馬長期増強を減弱していることが示された。本年度は、メラトニンによる長期増強減弱効果におけるNO経路とPKA経路の相互作用の有無について検討した。ラット脳より海馬スライス標本を作製し、シャファー側枝に刺激電極をおき0.1Hzの頻度でテスト刺激を与え、海馬CA1領域の放線層においた記録電極から、テスト刺激に対するシナプス応答を細胞外記録した。高頻度刺激後5560分のシナプス応答の大きさの平均値を長期増強の大きさの指標として用いた。投与する薬物に従い、統制群、メラトニン群、L-NAME(NO合成酵素阻害薬)群、L-NAME+メラトニン群、L-NAME+メラトニン+DEA/NO(NO供与体)群、H-89(PKA阻害薬)群、L-NAME+メラトニン+H-89群を設け、長期増強の程度を比較した。その結果、すべての群において高頻度刺激により長期増強が引き起こされたが、H-89群における長期増強は統制群よりも減弱していた。メラトニン+L-NAME+H-89群で生じた長期増強の大きさは、H-89群と比較して有意な差は認められず、統制群との間にも有意差は認められなかった。メラトニンによる海馬長期増強の減弱効果においてNO経路とPKA経路が全く別の経路ならばL-NAME+メラトニン+H-89群においてH-89群よりも減弱効果が大きいことが予測されたが、長期増強の程度に有意差が認められず、このことからNO経路とPKA経路は全く独立したものではないことが示唆された。本研究課題において前年度までに、松果体ホルモンであるメラトニン存在下で海馬CA1シナプスにおける長期増強の大きさが抑制されることと、その抑制には細胞内の一酸化窒素カスケードへの作用が関係することを電気生理学的手法により明らかにした。これらの結果を受け平成23年度は行動実験に着手し、メラトニン分泌の多い夜間と分泌の少ない日中とでラットの学習成績に差が見られるかどうかを、海馬依存性の空間学習課題の一つである物体再認課題を用いて検討した。物体再認課題における物体には、これまでの先行研究の多くで用いられているような任意に選ばれた物体ではなく、世界で広く流通している玩具ブロックを組み合わせた再現性のある物体を用いた。

訓練試行では同一の物体を2つ設置した装置内をラットに探索させ、その後のテスト試行時には訓練試行で呈示した物体のうち片方を新奇物体に変え装置内を探索させた。新奇物体を探索した時間が総探索時間に占める割合を弁別指標として算出し学習成績として評価した。その結果、訓練試行から1時間後に短期記憶テストを行った際には、どの時間帯においても既知物体よりも新奇物体を長く探索していた。しかし、訓練試行から24時間後に行った長期記憶テストでは、明期前半群でのみ既知物体と新奇物体の探索時間に差がなく、すなわち両者を弁別できていなかった。訓練試行時の総探索時間は各群で同程度であったため、長期記憶テスト時に明期前半群でのみ長期記憶が保持されなかった結果が活動量の違いによるものではなく、口内の時間帯に起因すると考えられた。以上の結果から、記憶の符号化に関してはすべての時間帯において可能であるが、明期前半に実験を行った群では長期記憶の保持が困難であったことが示唆された。
p53の変異による放射線感受性とシグナル伝達の変化

いくつかの突然変異したp53遺伝子を人工的に作成し、Saos-2細胞(p53遺伝子が欠失している骨肉腫細胞)に導入した。また、コントロールとして正常p53遺伝子をLacSwitchの系を用いて細胞に導入した。これらのp53遺伝子導入細胞の放射線感受性を測定したところ、正常p53遺伝子導入細胞では、放射線感受性が高くなった。また、143A、175H、273H変異細胞では、放射線抵抗性であったが、123A変異細胞では、放射線感受性が高くなった。このことより、p53遺伝子の変異部位によって放射線感受性が異なることが分かった。また、放射線に感受性であった正常p53細胞と123A変異細胞では、放射線照射後のアポトーシスの誘導が観察されたが、放射線に抵抗性であった143A、175H、273H変異細胞では見られなかった。さらに、ウエスタンブロット法でp53を調べると、正常p53細胞と123A変異細胞において放射線によるp53の蓄積が見られが、143A、175H、273H変異細胞では、放射線によるp53の蓄積が見られなかった。そこで、正常p53細胞と123A変異細胞で、Waf-1の誘導を調べたところ正常p53細胞ではWaf-1の誘導が観察されたが、123A変異細胞では見られなかった。また、123A変異細胞では、G1停止が見られなかった。しかし、BaxとMDM2の誘導とBcl-2の減少は正常p53細胞と123A変異細胞共に観察された。また123A変異細胞ではアポトーシスが早期に起こったがこの時期に対応してFasの誘導が見られた。このことより、Waf-1はFasの誘導を制御しているのではないかと考えられた。いくつかの突然変異したp53遺伝子を人工的に作成し、SaOS-2細胞(p53遺伝子が欠失している骨肉腫細胞)に導入した。放射線感受性であった正常p53細胞と123A変異細胞において、ウエスタンブロット法でp53のタンパク量を調べると、放射線によるp53の蓄積が見られた。一方、放射線に抵抗性であった143A、175H、273H変異細胞では、放射線によるp53の蓄積が見られなかった。そこで、正常p53細胞と123A変異細胞で、放射線によるp53依存性のWaf-1の誘導をウエスタンブロット法で調べた。正常p53細胞ではWaf-1の誘導が観察されたが、123A変異細胞では見られなかった。このことより、123A変異はWaf-1の誘導調節機能が失われている突然変異であることが分かった。次に、放射線によるアポトーシス誘導を電気泳動法で調べた。放射線に感受性であった正常p53細胞と123A変異細胞では、放射線照射後のアポトーシスのラダーが観察された。一方、放射線に抵抗性であった143A、175H、273H変異細胞ではラダーが見られなかった。今回の研究において、p53変異細胞での放射線感受性は、アポトーシスと対応していた。

いくつかの突然変異したp53遺伝子を人工的に作成し、Saos-2細胞(p53遺伝子が欠失している骨肉腫細胞)に導入した。また、コントロールとして正常p53遺伝子をLacSwitchの系を用いて細胞に導入した。これらのp53遺伝子導入細胞の放射線感受性を測定したところ、正常p53遺伝子導入細胞では、放射線感受性が高くなった。また、143A、157H、273H変異細胞では、放射線抵抗性であったが、123A変異細胞では、放射線感受性が高くなった。このことより、p53遺伝子の変異部位によって放射線感受性が異なることが分かった。次に、放射線によるアポトーシス誘導をで調べた。放射線に感受性であった正常p53細胞と123A変異細胞では、放射線照射後のアポトーシスのラダーが観察されたが、放射線に抵抗性であった143A、157H、273H変異細胞ではラダーが見られなかった。さらに、ウエスタンブロット法でp53のタンパク量を調べると、正常p53細胞と123A変異細胞において放射線によるp53の蓄積が見られが、143A、175H、273H変異細胞では、放射線によるp53の蓄積が見られなかった。そこで、正常p53細胞と123A変異細胞で、放射線によるp53依存性のWaf-1の誘導を調べたところ正常p53細胞ではWaf-1の誘導が観察されたが、123A変異細胞では見られなかった。また、123A変異細胞では、G1停止が見られなかった。しかし、BaxとMDM2の誘導とBcl-2の減少は正常p53細胞と123A変異細胞共に観察された。このことより、細胞を放射線感受性にする123A変異は、Waf-1によるG1停止の誘導機能が失われているがBaxとBcl-2の調節によるアポトーシス誘導や、MDM2の誘導によるp53タンパク質の調節機能は持っている突然変異であることが分かった。また、143A、175H、273H変異細胞では、放射線抵抗性であったが、123A変異細胞では、放射線感受性が高くなった。また、放射線に感受性であった正常p53細胞と123A変異細胞では、放射線照射後のアポトーシスの誘導が観察されたが、放射線に抵抗性であった143A、175H、273H変異細胞では見られなかった。さらに、ウエスタンブロット法でp53を調べると、正常p53細胞と123A変異細胞において放射線によるp53の蓄積が見られが、143A、175H、273H変異細胞では、放射線によるp53の蓄積が見られなかった。そこで、正常p53細胞と123A変異細胞で、Waf-1の誘導を調べたところ正常p53細胞ではWaf-1の誘導が観察されたが、123A変異細胞では見られなかった。また、123A変異細胞ではアポトーシスが早期に起こったがこの時期に対応してFasの誘導が見られた。このことより、Waf-1はFasの誘導を制御しているのではないかと考えられた。
ストレス条件下における高等植物の花成制御機構の情報伝達メカニズム解析

高等植物のシロイヌナズナにおいて、概日時計からの時間情報と、光受容体からの光情報を統合し、日長の情報を定量的に遺伝子発現情報へと変換する転写因子CONSTANS(CO)と、COに転写誘導され花成を導く花成因子FLOWERING LOCUST(FT)の情報伝達経路が花成制御に非常に重要である。申請者はCO遺伝子のプロモーターに結合する転写因子候補を生化学的アプローチによって取得した。いくつかの転写因子が様々なストレスによって発現誘導されることも見出した。本年度は、COの遺伝子発現を制御すると考えられるこれら候補転写因子の絞り込みを行った。スクリーニングには1.5KbpのCO遺伝子の5'上流領域を用いたが、更に短く断片化したCO遺伝子の上流配列をレポーター遺伝子と融合させ、酵母One-Hybrid法でさらに結合部位・cis配列を詳細に絞り込む事ができた。これらの転写因子群の過剰発現植物体と機能欠損植物体の作出をもほぼ完了した。本年度に行った予備実験では、ストレスによって遺伝子発現量が変化するだけでなく、ある転写因子群はストレス条件においてのみ核内に局在できることがわかってきた。今後はどのようにこれらの転写因子のタンパク質が細胞質と核内の細胞内局在を変化させているのか詳細な解析を進めていく。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
腎尿細管細胞のマグネシウム輸送担体のクローニング

1.マグネシウム(Mg)輸送蛋白質の候補遺伝子のスクリーニング:作製したMg耐性細胞と対照野性株細胞より各々mRNAを抽出してcDNAを合成した。これらを用いてDNAマイクロアレイを用いて両細胞の遺伝子を比較し、Mg耐性細胞に特異的に発現が増加している遺伝子を選出した。200個近くの候補遺伝子が認められた。その中で、既知の遺伝子が52個ほど同定された。残りは機能未知の遺伝子であった。現在各々の遺伝子について機能・発現を検討しているところである。2.Mg輸送蛋白質の同定:上記遺伝子の中から、Mg輸送活性を示す可能性がある膜タンパク質を選出した。CRR-9(Cisplatin-resitance related genes)遺伝子のcDNAを動物細胞一過性発現ベクターに組み込み、リポフェクチン法を用いて野生体細胞に遺伝子導入した。各々の細胞内Mgイオン濃度測定を行った。Mgイオン濃度は蛍光Mg指示薬furaptraのAM体を細胞に導入し、その350nm励起及び380nm励起蛍光の強度比から細胞内Mgイオン濃度を求めた。遺伝子導入した細胞でのMg輸送活性は野性株と比して変化を示さなかった。しかしながら、ノザンブロット法によるmRNA量を耐性細胞と野性株を比較すると、明らかに耐性細胞ではmRNAの増加を認めた。そのため、間接的にCRR-9はMg輸送活性に影響を与えている可能性が示唆された。1.マグネシウム(Mg)輸送蛋白質の候補遺伝子のスクリーニング:マウス尿細管細胞由来MCT細胞、及びヒト胎児尿細管細胞HEK293細胞から樹立したMg耐性株細胞と対照野性株細胞それぞれから、poly(A)+RNAを抽出した。これらよりcDNAを合成し、DNAマイクロアレイ(Affymetryx製GeneChip)を用いて両細胞株の包括的な発現比較を行い、Mg耐性細胞に特異的に発現が増加している遺伝子を選出した。ヒト、マウス両種のMg耐性株細胞で特異的に発現している遺伝子は、約200個近く認め、これらの中にMg輸送タンパク質の候補遺伝子が含まれていると思われた。その中で、既知の遺伝子が52個程存在した。同定された残りは、機能未知の遺伝子であった。現在各々の遺伝子について機能・発現について検討しているところである。CRR-9 (Cisplatin-resitance related genes)遺伝子のcDNAを動物細胞一過性発現ベクターに組み込み、リポフェクチン法を用いて野生体細胞に遺伝子導入した。
セルロースハイドロコロイドの創生と機能解析

インドネシア産の10種のメボウキ属のkemangiあるいはselasihと呼ばれる植物の種子について、水中に浸漬したところ、tenuiflorumとgratissimumを除く7種のOcimumの種子の表層が吸水して膨潤することがわかった。そこで、これらの7種の種子のサイズ、膨潤して生成したセルロースハイドロコロイドの含量等を分析した結果、西スマトラ産とO.basilicum green以外の種子についてはセルロースハイドロコロイドの含量がほぼ2728%の範囲であり、化学的性質もアラビノガラクタンに富むヘミセルロースをもつという共通点があることがわかった。また、種子表層をLVSEMで観察した結果、exocarp、mesocarp、endocarpの三層からなり、最外層のexocarpのみが吸水・膨潤することがわかった。この層は円筒状の細胞とそれを支持するロート状の細胞からなり、円筒状の細胞のみが膨潤することもわかった。また、吸水時に直径が数ミクロンのデンプン粒が円筒状細胞の内孔に飛び出してくることもわかった。さちに、Bandungにて市販されており比較的安価で利用が可能な二種の種子(大サイズと小サイズ)についてグラムオーダーでセルロースハイドロコロイドを分取し、その化学的性質を分析した。その結果、セルロース(大サイズ、30.6%;小サイズ、29.2%)及びヘミセルロース(大サイズ、43.6%;小サイズ、63.6%)からなるコンポジットであり、セルラーゼ製剤による分解性が高いことを証明した。また、保水性も20.8ml/g(大サイズ)及び20.6ml/g(小サイズ)と高いことを示した。一方、11種のアキギリ属のサルビアの種子について水中に浸漬すると種子の表層が吸水して膨潤することをみいだした。また、膨潤の原因が、メボウキ属と同様にexocarp、mesocarp、endocarpの三層からなる表皮の最外層のexocarpのみの吸水に伴うセルロース・ヘミセルロースコンポジットの水層への突出にあることをLVSEMでの観察により示した。メボウキ属との差は、デンプン粒が存在せず、円筒状細胞を支持するロート状細胞の発達が未熟であることにあった。また、SEM-EDAXにより、mesocarp領域に円盤状のカルシウムに富む成分が整然と並んでいることも見出した。セルロースハイドロコロイドの含量は4.015.5%と種による変異が大きく、含まれているヘミセルロースの種類・量が多様であった。しかし、両ハイドロコロイドは共にセルラーゼ製剤により良好に生分解された。さらに、セルロースハイドロコロイドを生産するヤドリギの果実からmRNA及びDNAの解析の結果、セルロースを生合成する遺伝子のクローニングに成功した。直径が3nm以下のナノセルロースミクロフィブリルを含むハイドロコロイドがヨーロッパヤドリギ、Viscumalbum L.、我国産の黄色ヤドリギ及びアカミヤドリギの果実及びバジルの種子の外珠皮に存在していることを確認した。ヤドリギの場合では、セルロースミクロフィブリルはviscinと呼ばれる組織中に存在するロープ状の細胞中に細胞の長軸に対して直角の方向にコイル状にパックされていた。ヨーロッパヤドリギと我国産のヤドリギでは、ハイドロコロイドの化学組成は似ているが、viscin組織の果実内の分布と形態が異なることを明らかにした。一方、バジルの場合では、Ocimum属に共通して種子の外珠皮に存在する筒形の細胞内にコイル状にパックされている。これらの細胞が含水するに伴ってセルロースミクロフィブリルはほどけて周囲に広がっていくことを見出した。ハイドロコロイドは一種のセルロース-ヘミセルロース性の多糖のコンポジットであった。両ハイドロコロイドには(1,4)-結合したキシランとグルコマンナンの他に高度に分岐したアラビノガラクタンが含まれていることがメチル化分析の結果明らかとなった。ハイドロコロイドの部分酸加水分解によりグルコマンナンタイプのヘミセルロースがセルロースと密接な関係にあり、酸性の多糖が水不溶性のセルロースをコロイド状態に保つ役割をしていると考えられた。さらに、バジルの品種によりハイドロコロイドの形成時における種子表層の構造変化及び、ハイドロコロイドの化学組成に差があることをも見出した。今年度の研究により、初めてシソ科のサルビヤの種子には水に浸漬すると膨潤し、ゲル状のセルロース・ヘミセルロースコンポジットを形成するものがあることを見出した。62種のサルビヤ種子を水に浸したところ、53種のサルビヤにおいてゲル状物質が形成された。乾燥種子重量に対するゲル状物質の含有率は、種子のサイズとは関係なく14.30%と多様であった。ゲル状物質の形成には種子の外種皮の一層の細胞が関与していた。化学成分分析と固体CP/MAS^<13>C-NMRスペクトル分析の結果より、ゲル状物質はセルロースと酸性のヘミセルロース系多糖からなることがわかった。また、単離・精製したセルロースのFT-IRスペクトル分析より、セルロース部分のIαの成分は62%と一次細胞壁に存在するセルロースと似ていることが分かった。さらに、中性糖が全体の33.757.1%を占めており、構成多糖の主な成分は、キシロース、グルコース、ガラクトースであったが、構成比は種によって多様で、その傾向より6つのグループに分類できた。また、ウロン酸の含量は10.334.0%と多様で、その主成分はガラクツロン酸であった。

これらのことから、新規に見出したサルビヤのゲル状物質は、酸性ヘミセルロースがセルロースとコンポジットを形成しており、セルロースの結晶化を阻害していること、それによって保水性やゲル特性といった性質を持つことが示唆された。また、ゲル状物質の保水力を4品種について測定した結果、19.523.0mL/gの範囲でよく似ており、市販のセルロースの値3.2mL/gと比較すると高かった。このことから、ゲル状物質の水和ゲルとしての用途が示唆された。インドネシア産の10種のメボウキ属のkemangiあるいはselasihと呼ばれる植物の種子について、水中に浸漬したところ、tenuiflorumとgratissimumを除く7種のOcimumの種子の表層が吸水して膨潤することがわかった。そこで、これらの7種の種子のサイズ、膨潤して生成したセルロースハイドロコロイドの含量等を分析した結果、西スマトラ産とO.basilicum green以外の種子についてはセルロースハイドロコロイドの含量がほぼ2728%の範囲であり、化学的性質もアラビノガラクタンに富むヘミセルロースをもつという共通点があることがわかった。また、種子表層をLVSEMで観察した結果、exocarp、mesocarp、endocarpの三層からなり、最外層のexocarpのみが吸水・膨潤することがわかった。この層は円筒状の細胞とそれを支持するロート状の細胞からなり、円筒状の細胞のみが膨潤することもわかった。また、吸水時に直径が数ミクロンのデンプン粒が円筒状細胞の内孔に飛び出してくることもわかった。さちに、Bandungにて市販されており比較的安価で利用が可能な二種の種子(大サイズと小サイズ)についてグラムオーダーでセルロースハイドロコロイドを分取し、その化学的性質を分析した。その結果、セルロース(大サイズ、30.6%;小サイズ、29.2%)及びヘミセルロース(大サイズ、43.6%;小サイズ、63.6%)からなるコンポジットであり、セルラーゼ製剤による分解性が高いことを証明した。また、保水性も20.8ml/g(大サイズ)及び20.6ml/g(小サイズ)と高いことを示した。一方、11種のアキギリ属のサルビアの種子について水中に浸漬すると種子の表層が吸水して膨潤することをみいだした。また、膨潤の原因が、メボウキ属と同様にexocarp、mesocarp、endocarpの三層からなる表皮の最外層のexocarpのみの吸水に伴うセルロース・ヘミセルロースコンポジットの水層への突出にあることをLVSEMでの観察により示した。メボウキ属との差は、デンプン粒が存在せず、円筒状細胞を支持するロート状細胞の発達が未熟であることにあった。また、SEM-EDAXにより、mesocarp領域に円盤状のカルシウムに富む成分が整然と並んでいることも見出した。セルロースハイドロコロイドの含量は4.015.5%と種による変異が大きく、含まれているヘミセルロースの種類・量が多様であった。しかし、両ハイドロコロイドは共にセルラーゼ製剤により良好に生分解された。さらに、セルロースハイドロコロイドを生産するヤドリギの果実からmRNA及びDNAの解析の結果、セルロースを生合成する遺伝子のクローニングに成功した。
フェミニズム黎明期におけるジャ-ナリズムを通した女性作家の社会参加の今日的意義

市民革命並びに産業革命に起因した激動の社会的精神的状況の中で、高い理想を掲げて生涯を通じ、その人生および著作で個としての女性の真のありようを激しく、かつ執拗に追求した3人の、異なった社会階層に属する女性作家(ダニエル・ステルン,ジョルジュ・サンド,フロ-ラ・トリスタン)に照準をあて、彼女たちが社会改革思想に献身するにいたった契機と、その行動の展開を詳細にたどり、析しも興隆期にあったジャ-ナリズムとフェミニズムとのかかわりの中で社会参加の姿を浮き彫りにする、そして、彼女たちの思想と生涯が持つ現代的意義を解明することが本研究の目的である。今年度は、19世紀に輩出した女性作家の中で、ヨ-ロッパ社会に最も大きな思想的影響を及ぼしたジョルジュ・サンドに焦点をあて、1^。)やがてジョルジュ・サンドとなるデュドゥヴァン男爵夫人がいかなる契機でジャ-ナリズムと関わりを持つことになったか。2^。)ジャ-ナリズムを媒体として社会のかかえる政治的諸問題について、時機を逸せず、最も直接的・効果的に発言し、大衆の意識向上、思想形成のために自ら、雑誌を創刊した経緯3^。)フェミニズムの広がりにもかかわらず、『ナポレオン法典』のもとに女性への抑圧・差別が決して軽減されてはいない、精神史的状況の中で、ジョルジュ・サンドが如何なるメッセ-ジを送ろうとしたか、を考察した。2^。