hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
中間サイズ・ナノワイヤーの非一様伝導の理論的研究

電子・正孔系の半導体ヘテロ界面としてInAsとGaSbの界面を考え、界面を透過する電子波束の時間発展を、時間に依存するシュレデインガー方程式を数値的に解くことにより求めた。その結果、初め電子系にあった波束は、界面を透過した後、相補媒質である正孔系中で再生することがわかった。波が界面を透過する際には透過による損失が必ず存在するが、相補媒質中での再生は透過損失による損失を上回り、その結果、波束は一様な媒質中を進む揚合よりも長く生き残ることがわかった。この結果は1次元系の計算により得られたものであり、InAsとGaSbのナノワイヤーのヘテロ接合系では、以上のような現象が見られるものと理論的に期待される。このような相補的半導体ナノワイヤー・ヘテロ接合系では電子波のパルスの振幅の減衰が抑えられ、より遠くヘシグナルを送ることができるものと期待される。平成20年度は、非一様なナノワイヤーとしてコアシェル型ナノワイヤーを対象とし、その電気伝導に関する理論的研究を行った。コアシェル型ナノワイヤーとは、コア部分を構成するナノワイヤーとそれを覆うチューブ状のシェルの部分からなる2層構造をしたナノワイヤーのことであり、最近、様々な物質の組み合わせによるナノワイヤーが作成されるようになりつつある。本研究では、半導体コアシェル型ナノワイヤーについて計算を行った。半導体ヘテロ構造には、さまざまなタイプがあるが、本研究では特にタイプIIIのヘテロ構造を対象とした。これは、2種類の半導体のエネルギーバンドのバンドギャップの位置がずれて重なりを持たないヘテロ構造であり、特定のエネルギー領域で、一つの半導体中では電子的な分散をもち、他方の半導体中ではホール的な部分をもつ状態が存在する。このようなヘテロ構造をもつコアシェル型ナノワイヤーのワイヤーの軸に沿った電気伝導を考えると、正の群速度をもつ部分と負の群速度をもつ部分とが共存するため、キャリアが電子として振舞うか、それとも、ホールとして振舞うかは、ナノワイヤーを構成するコアとシェルの部分の体積比率等に依存すると思われる。特に、体積比率が同程度の場合は、電気伝導がほとんど起こらないことが予想される。このことを確かめるために、自由電子的なモデルを用いて、タイプIIIのコアシェル型ナノワイヤーのエネルギーバンドを計算したところ、エネルギーバンドの中心付近に分散をほとんど持たない状態が存在することがわかった。この結果は、フェルミ・エネルギーがこのバンドの位置にある場合は、予想されたように電気伝導率が著しく低下することを意味する。このようなヘテロ構造をもつコアシェル型ナノワイヤーは現在のところ作成されていないが、今後、作成されれば、本研究で得られたような物性が得られることが期待される。
オリゴペプチドを検出する化学センサーアレイの開発

これまでに,蛍光ラベル化したカリックスアレーンライブラリーを構築し,オリゴペプチドに応答する化学センサーを見出している.この蛍光ラベル化したカリックスアレーンをスライドガラス基盤に固定化し,ゲストの結合によって基盤上でもスペクトル変化が確認できれば,DNAマイクロアレイのように多種類同時分析が可能となる.今回,基盤に固定化するために新たに設計したカリックスアレーンの合成法とゲストの結合による蛍光スペクトルの変化について検討した.カリックスアレーンのフェノール性水酸基側を修飾したホストでは,蛍光変化が鋭敏では無かったため,カリックス[4]アレーンのupper rim側を修飾したホストの合成を行った。まず,約20段階かけてカリックス[4]アレーンのupperrimを2種の異なる官能基(Boc基,Alloc基)で修飾した誘導体を合成した。まずは,消光剤と蛍光剤の組合せ,および距離が適切であるかを確認するために,Boc基を除去して消光剤であるダブシル基を導入した後,Alloc基を脱保護してダンシル基を導入したモデル化合物を合成した。モデル化合物はほとんど蛍光を示さず,ダンシル基由来の蛍光スペクトルは観測されなかった事から,蛍光剤と消光剤の距離は適切であること,組合せにも問題ないことが解った。現在,ペプチドを順次結合させたホストを合成し,リガンドライブラリーの中からホストと結合するリガンドを探索中である。これまでに,蛍光ラベル化したカリックスアレーンライブラリーを構築し,オリゴペプチドに応答する化学センサーを見出している.この蛍光ラベル化したカリックスアレーンをスライドガラス基盤に固定化し,ゲストの結合によって基盤上でもスペクトル変化が確認できれば,DNAマイクロアレイのように多種類同時分析が可能となる.今回,基盤に固定化するために新たに設計したカリックスアレーンの合成法とゲストの結合による蛍光スペクトルの変化について検討した.まず,カリックス[4]アレーンの向かい合う2つのフェノール性水酸基をメチル化し,残りの水酸基のペプチドを導入するリンカーとなるアミノメチル酢酸アミドユニットを導入した.続いて,リンカーのBoc基を除去した後,Fmoc法により,チロシン,スレオニン,グルタミン酸を結合させた.最後にFmoc基を除去し,蛍光剤とであるダンシル基,対応する消光剤であるダブシル基を導入して,ホストとなる蛍光ラベル化したカリックスアレーンの合成を完了した.続いて,合成したホストに結合するゲストを探索するため,3375種類からなる10種類のリガンドライブラリーとバインディングアッセイを行った.その結果,10種類のうち3種類のライブラリーとのバインディングアッセイから合成したホストと結合するいくつかのゲスト分子を見出すことができた.見出したゲスト分子のうち,3種類を別途合成し,ホストと混合してホストの蛍光スペクトルが変化するか調べた.しかし,ホストの蛍光スペクトルは大きく変化しなかった.現在,他のゲスト分子の合成,ホストの再設計を検討しているこれまでに,蛍光ラベル化したカリックスアレーンライブラリーを構築し,オリゴペプチドに応答する化学センサーを見出している.この蛍光ラベル化したカリックスアレーンをスライドガラス基盤に固定化し,ゲストの結合によって基盤上でもスペクトル変化が確認できれば,DNAマイクロアレイのように多種類同時分析が可能となる.今回,基盤に固定化するために新たに設計したカリックスアレーンの合成法とゲストの結合による蛍光スペクトルの変化について検討した.カリックスアレーンのフェノール性水酸基側を修飾したホストでは,蛍光変化が鋭敏では無かったため,カリックス[4]アレーンのupper rim側を修飾したホストの合成を行った。
平板形マイクロキャビティレーザーにおける強度揺らぎに関する研究

マイクロキャビティレーザーにおける二次のコヒーレンスすなわち強度相関の程度を知ることを本年度の目的とした。平板形マイクロキャビティレーザーにおいては、その有効モード半径よりポング光ビーム半径が小さければ単一モード動作が起き、出力揺らぎは閾値以下ではボース・アインシュタイン分布、閾値以上ではポアソン分布となると予想される。他方有効モード半径よりポンプ光ビーム半径が大きければ複数モード動作が起き、出力揺らぎは常にガウス的であると予想される。昨年度は一定入力に対して100ショットで揺らぎを調べたが、本年はディジタルオシロスコープを活用して1000ショットで揺らぎを調べ、より詳細なデータを得た。使用発光媒体は色素ローダミン6G、励起光源はパルス幅0,9nsの窒素レーザー励起色素レーザーを用いた。色素濃度5×10^<-3>mol/1の場合は、単一モードの場合はほぼ予想どうりであったが、複数モードでは閾値以下で出力零の頻度が予想以上に多く、頻度分布が双峰性となることが観測された。これは何らかの原因で双安定性が生じているものと考えられ、更に検討する必要がある。色素濃度5×10^<-4>mol/1としたときは、単一モードにおいても複数モードにおいても定性的に予想と合致する結果が得られた。なお、色素濃度が5×10^<-4>mol/1のときは5×10^<-3>mol/1のときに比較して閾値が上昇したが、同時に閾におけるlog-logプロットのジャンプは減少した。これは、通常の4準位マイクロキャビティレーザーの予想とは逆の傾向である。通常の理論にはモル濃度の影響は取り入れられてはおらず、閾値の上昇に伴ってジャンプは増大するとされる。この矛盾を解決するため、有限の原・分子濃度を考慮した速度方程式を導入し、実験結果を説明し得ることを示した。
NiAs型強磁性/反強磁性人工格子の磁性に関する研究

NiAs型人工格子として、強磁性であるMnSbと反強磁性であるCrSbとを組み合わせた人工格子を、2元rfスパッタ法で作製した。タ-ゲットとしては、MnSb側にMnSb熔解タ-ゲットをCrSb側にCrタ-ゲット上にSbテップを適当な枚数載せたものを使用し、基板はスライドガラスを用いた。MnSb層とCrSb層の各々の層厚を常に等しくしたまま、人工周期は50【.Angstrom】から200【.Angstrom】まで変化させた。X線回折の結果から、作製された全ての人工格子は、MnSb、CrSbともにNiAs型構造の〔110〕が膜面垂直に強く配向した繊維構造となっていることがわかった。しかしMnとCrの原子散乱因子が非常に近いため、人工周期性の確認はできなかった。また人工格子の磁化の温度依存性を測定したところ、低温での磁化がMnSb単層膜よりわずかに増加し、キュリ-点は人工周期の減少とともに減少する傾向がみられた。これらの現象の一つの原因として、相互拡散による界面での合金化が考えられる。また、100K及び180K付近で磁化の温度依存性に折れ曲がりが観測され人工格子化の効果として注目されるが、今のところ原因ははっきりせずその究明は今後に残された課題である。NiAs型強磁性/反強磁性人工格子と比較する意味で、ホイスラ-化合物どうしの組合わせであるPtMnSb(強磁性)/CuMnSb(反強磁性)人工格子も2元rfスパッタ法で作製された。そしてその磁気特性として、低温での磁化がPtMnSb単層膜に比べ著しい増大を示し、また50K付近で磁化の温度依存性に折れ曲がりが見られる、というMnSb/CrSb人工格子の場合と類似した特徴が見られた。しかしPtMnSb/CuMnSb人工格子の場合、磁化の温度依存性に折れ曲がりが見られる温度がちょうどCuMnSbのネ-ル点(55K)に対応するのに対し、MnSb/CrSb人工格子の場合はCrSbのネ-ル点(720K)は折れ曲がりの見られる温度に比べはるかに高く、そのメカニズムは両者で異っていることが示唆される。NiAs型化合物の中から強磁性体としてMnSbを反強磁性体としてCrSbを選び、MnSb/CrSb人工格子をRFスパッタ法で石英基板上に作製した。ターゲットとしては、MnSb側はMnSb熔解ターゲットを用いCrSb側はCrターゲット上にSbチップを適当な枚数載せるという複合ターゲットの方法を用いた。参照用として作製したMnSb及びCrSb単層薄膜では、X線回析の結果から〔110〕が膜面垂直に優先配向することがわかった。またCr-Sb系薄膜ではNiAs型のCrSbが生成する組成範囲がMnSbに比べて狭く、Sb組成が過少でも過剰でもアモルファス的になる。

更にSb組成が多くなると〔120〕配向したCrSb_2相が生成されることがわかった。作製されたMnSb/CrSb人工格子は、MnSb層の層厚を等しくしたまま人工周期を200〓から25〓まで変化させ、総膜厚を7000〓になるように繰り返し数を設定したものである。X線回析を用いて構造評価を行ったが、MnとCrの原子散乱因子が非常に近く更にMnSbとCrSbの格子定数に大きな差異が無いため、人工周期性の確認はできなかった。但し高角領域に於ける回析パターンから、人工格子も単層薄膜と同様に〔110〕が膜面垂直に優先配向した繊維構造を持つことがわかった。また人工格子に於ける平均の(110)格子面間隔は、人工周期とともに増大する傾向を持っている。この原因は今のところ明らかでないが、構造上の特徴として注目される。磁気特性の評価としては、VSMを用いて磁化の温度依存性を4.2Kから各々の人工格子のキュリー点まで測定した。磁化の大きさ及びキュリー点は人工周期の減少とともに減少する傾向が見られた。このことは界面合金層の効果として定性的に理解される。また磁化の温度依存性に於て、90K付近と190K付近で磁化の折れ曲がりが見られ、その傾向は人工周期が短い程顕著である。このことは何らかの多層効果の表れとして注目され、今後更に研究を要するところである。NiAs型人工格子として、強磁性であるMnSbと反強磁性であるCrSbとを組み合わせた人工格子を2元rfスパッタ法で作製した。タ-ゲットとしては、MuSb側にMnSb溶解タ-ゲットをCrSb側にCrタ-ゲット上にSbチップを適当な枚数載せたものを使用し、基板にはスライドガラスを用いた。MnSb層とCrSb層の各々の層厚を常に等しくしたまま、人工周期は50Aから200Aまで変化させた。X線回折の結果から、作製された全ての人工格子は、MnSb,CrSbともNiAs型構造の〔110〕が膜面垂直に強く配向した繊維構造となっていることがわかった。しかしMnとCrの原子散乱因子が非常に近いため、人工周期性の確認はできなかった。また人工格子の磁化の温度依存性を測定したところ、低温での磁化がMnSb単属膜よりわずかに増加し、キュリ-点は一つの原因として、相互拡散による界面での合金化が考えられる。また、100K及び180K付近で磁化の温度依存性に折れ曲がりが観測され人工格子の効果として注目されるが、今のところ原因ははっきりせず、その究明は今後に残された課題である。NiAs型強磁性/反強磁性人工格子と比較する意味で、ホイスラ-化合物どうしの組み合わせである。PtMnSb(強磁性)/CuMnSb(反強磁性)人工格子も2元rfスパッタ法で作製された。そしてその磁気特性として、低温での磁化がPtMnSb単層膜に比べ著しい増大を示し、また50K付近で磁化の温度依存性に折れ曲がりが見られる、というMnSb/CrSb人工格子の場合と類似した特徴が得られた。しかしPtMnSb/CuMnSb人工格子の場合、磁化の温度依存性に折れ曲がりが見られる温度がちょうどCuMnSbのネ-ル点(55K)に対応するのに対し、MnSb/CrSb人工こうしの場合はCrSbのネ-ル点(720K)は折れ曲がりの見られる温度に比べはるかに高く、そのメカニズムは両者で異なっていることが示唆される。
アルカリ骨材反応で損傷を受けたコンクリート構造物の健全度の評価方法に関する研究

近年,コンクリート構造物には種々の原因によって著しいひびわれ損傷を招いている事例が多く見られ,構造物の維持管理上極めて重大な問題となっている.ことに,わが国には皆無に近いと考えられていたアルカリ骨材反応に起因したコンクリートのひびわれ損傷は,その認識と経験の不足とも相まって,重大な社会問題の様相を呈するようになった.本研究は,アルカリ骨材反応のメカニズムおよび骨材の反応性やコンクリートの膨脹量の測定,評価試験法の確立,反応の進行とコンクリート構造部材の保有耐荷力との関係,反応によってひびわれ損傷が生じた構造部材の終局状態における静的,動的挙動と変形性状や耐久性などの使用状態における構造性能との両面からひびわれ損傷と健全度との関係を明確にする.さらに損傷構造部材の合理的な補修,補強方法を確立する.これら得られた結果をもとにして,コンクリート構造物の設計,施工,維持管理,補修,補強技術のシステム化を図ることを目的としている.アルカリ骨材反応のメカニズムの解明においては,基本的な反応機構の把握を図るとともに,高炉スラグの反応抑制機構と効果について検討を加えた.アルカリ骨材反応の試験法とその評価においては,高圧高温による促進試験と乾湿の繰返し試験を試み,モルタルバー法や化学法で得られた結果との関連性,膨脹とひびわれあるいは物性の変化との関係をもとにして,反応の評価法を提案した.モデル鉄筋コンクリート部材を製作し,鉄筋量やかぶりとアルカリ骨材反応による膨脹応力やひびわれ形式との関係を明らかにするとともに,静的ならびに動的繰返し載荷試験を実施し,結果の解析をもとにして,ひびわれ損傷構造部材の保有耐力,健全度の評価方法について種々の検討を行った.近年,コンクリート構造物には種々の原因によって著しいひびわれ損傷を招いている事例が多く見られ,構造物の維持管理上極めて重大な問題となっている.ことに,わが国には皆無に近いと考えられていたアルカリ骨材反応に起因したコンクリートのひびわれ損傷は,その認識と経験の不足とも相まって,重大な社会問題の様相を呈するようになった.本研究は,アルカリ骨材反応のメカニズムおよび骨材の反応性やコンクリートの膨脹量の測定,評価試験法の確立,反応の進行とコンクリート構造部材の保有耐荷力との関係,反応によってひびわれ損傷が生じた構造部材の終局状態における静的,動的挙動と変形性状や耐久性などの使用状態における構造性能との両面からひびわれ損傷と健全度との関係を明確にする.さらに損傷構造部材の合理的な補修,補強方法を確立する.これら得られた結果をもとにして,コンクリート構造物の設計,施工,維持管理,補修,補強技術のシステム化を図ることを目的としている.アルカリ骨材反応のメカニズムの解明においては,基本的な反応機構の把握を図るとともに,高炉スラグの反応抑制機構と効果について検討を加えた.アルカリ骨材反応の試験法とその評価においては,高圧高温による促進試験と乾湿の繰返し試験を試み,モルタルバー法や化学法で得られた結果との関連性,膨脹とひびわれあるいは物性の変化との関係をもとにして,反応の評価法を提案した.モデル鉄筋コンクリート部材を製作し,鉄筋量やかぶりとアルカリ骨材反応による膨脹応力やひびわれ形式との関係を明らかにするとともに,静的ならびに動的繰返し載荷試験を実施し,結果の解析をもとにして,ひびわれ損傷構造部材の保有耐力,健全度の評価方法について種々の検討を行った.近年、コンクリート構造物には種々の原因によって著しいひびわれ損傷を招いている事例が多く見られ、管理上極めて重大な問題となっている。ことに、最近のわが国では皆無に近いと考えられていたコンクリートの膨張現象を伴うアルカリ骨材反応に起因したコンクリートのひびわれ損傷は、その認識と経験の不足とも相まって重大な社会問題化の様相を呈するようになった。本研究は、コンクリート中におけるアルカリ骨材反応のメカニズム及びその判定試験法,評価法を確立するとともに、反応の進行と構造部材の保有耐荷力との関係、反応によってひびわれ損傷を受けたコンクリート構造部材の終局状態における静的,動的挙動と変形性状や耐久性などの使用状態における構造機能の両面からひびわれ損傷と健全度との関係を明確にし、さらにその合理的な補修,補強方法の確立など、総合的見地から検討を加え、得られた結果をもとにして、コンクリート構造物の設計,施工,維持管理,補修技術のシステム化を図ることを目的とするものである。本年度に実施した主要な研究は以下の通りである。(1)アルオリ骨材反応のメカニズムの検討においては、反応に及ぼす種々の要因のペシマム量,配合,保存条件等基本的反応メカニズムの把握を図った。(2)アルカリ骨材反応の試験法とその評価法の検討においては、モルタル・コンクリートを対象として、各種試験条件の膨張に及ぼす影響の検討、コンクリート構造物から搾取したコアーあるいはコンクリート部材の残存膨張量の測定方法の確立、アルカリ骨材反応の判定・評価方法の確立のための種々の試験を実施した。(3)アルカリ骨材反応による損傷評価の検討では、モデルRC部材の静的並びに繰返し耐荷試験を実施し、結果の解析をもとに、保有耐力,健全度の評価方法について種々の検討を行った。
外部刺激応答性ＤＮＡアプタマーの抗がん剤展開と発がんタンパク質結晶化への応用

平成30年度は発がんタンパク質PPM1Dに対する特異的阻害剤として当研究室で同定しているイオン応答性DNAアプタマー(IRDAptamer)の化学的性質基盤の解明を行った。イオン応答性DNAアプタマーとは、イオン濃度に応答し構造がG-quadruplex構造に変化し、標的への特異的な結合を示す一本鎖DNAである。まず、アプタマーのイオン応答性をCDスペクトルにより測定し、構造変化におけるイオン濃度の閾値を解析した。その結果、カリウムイオン存在下とナトリウムイオン存在下で生体内のイオン濃度レンジである5-140 mMの範囲で構造がダイナミックに変化することが明らかとなったため、本アプタマーが生体内でイオン濃度変化に応答しPPM1Dの活性を制御できる阻害剤である可能性が示唆された。次にこれまで同定したアプタマーの低分子量化を実施した。構造活性相関解析により全長80塩基のDNAからなるアプタマーの構造をもとに、全長50塩基でさらに強力なPPM1D阻害効果を持つアプタマーの同定に成功した。CDスペクトル解析の結果、低分子量化を行ったアプタマーに関してもイオン応答性を維持していることが明らかとなったため、より低分子量かつイオン応答性を維持したPPM1D標的IRDAptamerの同定に至った。また、新たに細胞内での機能制御やPPM1Dの結晶化剤として使用可能なアプタマー候補を探索するために、これまで同定していたナトリウムイオン依存的にPPM1Dを阻害するアプタマーとは逆の作用を示すカリウムイオン依存的にPPM1Dに結合新規IRDAptamerの探索と機能解析を行った。その結果カリウムイオン依存的にPPM1Dを特異的に阻害する新規アプタマーを2種類同定することに成功した。当初の計画どおり、アプタマーの化学的構造基盤の解明を行うことができ、外部刺激を用いた生体内におけるアプタマーの制御法の確立やPPM1Dの結晶構造解明への展開につながる結果を得ることができた。また、学会での研究成果発表も行っている。今後の研究の推進方策としては、これまで同定したイオン応答性アプタマーを機能性抗がん剤、およびPPM1D結晶化剤へと展開する。機能性抗がん剤への展開としては、細胞内制御法ならびに細胞内導入法の開発を行う。細胞内制御法の開発においては、細胞内のイオン濃度を変化させる物質とアプタマーのがん細胞への併用投与を行い、細胞内におけるアプタマーの機能を外部刺激により制御する系を確立する。また、光応答性分子をアプタマーに修飾し光によりアプタマーの機能を制御する系を確立する。細胞内導入法の開発においては、細胞膜透過ペプチドとアプタマーを融合させた細胞導入型アプタマーを作製し、細胞導入効率と細胞への毒性、PPM1Dに対する阻害効果の相関を解析する。これらにより副作用の少ないがん治療の開発ならびにアプタマー医薬の細胞内導入効率の向上を目指す。PPM1D結晶化剤への展開としては、アプタマーのPPM1Dに対する高親和性を活かし、PPM1Dの構造安定化剤として使用し、PPM1Dの結晶構造解明を行う。

また、光応答性分子をアプタマーに修飾し光によりアプタマーの機能を制御する系を確立する。細胞内導入法の開発においては、細胞膜透過ペプチドとアプタマーを融合させた細胞導入型アプタマーを作製し、細胞導入効率と細胞への毒性、PPM1Dに対する阻害効果の相関を解析する。これらにより副作用の少ないがん治療の開発ならびにアプタマー医薬の細胞内導入効率の向上を目指す。PPM1D結晶化剤への展開としては、アプタマーのPPM1Dに対する高親和性を活かし、PPM1Dの構造安定化剤として使用し、PPM1Dの結晶構造解明を行う。
飛行溶滴診断に基づく反応性溶射のプロセスコントロール

反応性溶射における成膜素過程には,熱・運動工ネルギーの溶射材料への移行,液滴の衝突偏平化,凝固などに加え,インプロセス反応が関与している.インプロセス反応を伴わない溶射では,溶滴の衝突直前から凝固完了までの数μsの間に生じる衝突,偏平化,凝固が全成膜過程を通じて中心的役割を果たしている.しかしながら,本研究で取扱う反応性溶射では,溶滴の飛行過程における反応およびスプラット積層過程における反応の進行を考慮する必要がある.本研究において,発熱/吸熱反応が進行しつつある飛行中の溶滴温度,速度をその場計測した.得られた温度,速度データを直接溶射パラメータ(プラズマ電流,1次ガス・2次ガス流量)にフィードバックし,飛行中の溶滴上で進行するインプロセス反応を制御することを試みた.得られた研究成果は以下のように要約される:(1)プラズマ溶射飛行溶滴の温度,速度のその場計測における測定精度には,溶滴の放射率が大きく影響する.(2)溶射パラメータによる溶滴温度,速度のフィードバック制御は十分可能である.(3)黒鉛を含む鋳鉄皮膜のミクロ組織,インプロセス反応の進行度別の溶射パラメータの効果はほぼ一定である.(4)生成複合皮膜の組織制御を飛行溶滴温度と速度のインプロセス測定から実施した結果,鋳鉄皮膜中の黒鉛化率制御には,速度の影響(高温フレーム中の滞在時間)が支配的である.反応性溶射における成膜素過程には,熱・運動工ネルギーの溶射材料への移行,液滴の衝突偏平化,凝固などに加え,インプロセス反応が関与している.インプロセス反応を伴わない溶射では,溶滴の衝突直前から凝固完了までの数μsの間に生じる衝突,偏平化,凝固が全成膜過程を通じて中心的役割を果たしている.しかしながら,本研究で取扱う反応性溶射では,溶滴の飛行過程における反応およびスプラット積層過程における反応の進行を考慮する必要がある.本研究において,発熱/吸熱反応が進行しつつある飛行中の溶滴温度,速度をその場計測した.得られた温度,速度データを直接溶射パラメータ(プラズマ電流,1次ガス・2次ガス流量)にフィードバックし,飛行中の溶滴上で進行するインプロセス反応を制御することを試みた.得られた研究成果は以下のように要約される:(1)プラズマ溶射飛行溶滴の温度,速度のその場計測における測定精度には,溶滴の放射率が大きく影響する.(2)溶射パラメータによる溶滴温度,速度のフィードバック制御は十分可能である.(3)黒鉛を含む鋳鉄皮膜のミクロ組織,インプロセス反応の進行度別の溶射パラメータの効果はほぼ一定である.(4)生成複合皮膜の組織制御を飛行溶滴温度と速度のインプロセス測定から実施した結果,鋳鉄皮膜中の黒鉛化率制御には,速度の影響(高温フレーム中の滞在時間)が支配的である.アルミニウム合金の表面硬化として、自己潤滑作用のある黒鉛が析出している鋳鉄皮膜をプラズマ溶射によって形成する。溶射プロセスでは、基材上で衝突した溶融スプラットの急冷を伴うため、黒鉛を析出した溶射皮膜の形成は難しい。したがって、予め黒鉛を含む焼鈍鋳鉄粉末を用いる。黒鉛は高温状態が続けば、溶鉄中に溶解するか、飛行中に酸化して消滅する。本研究では、黒鉛のインプロセスにおける減少を抑えつつ、希望の黒鉛量を析出させた皮膜にすべく、飛行溶滴診断によって溶射プロセスコントロールを実現することを目的とする。平成17年度に導入したプラズマ溶射装置及び既設の飛行溶滴診断装置により、溶射パラメータと飛行溶滴温度、速度との関係について以下の基本となる知見を得た:(1)溶射距離の増加とともに(60-140mm)、飛行溶滴温度は低下する(2)1次プラズマガス(アルゴン)の増加とともに(40-55 NLPM)、飛行溶滴温度と速度は上昇する(3)2次プラズマガス(水素)の添加量増加とともに(3.5-6.5 NLPM)、飛行溶滴温度は低下する(4)プラズマ電流の増加とともに(450-600 A)、飛行溶滴温度は低下し、速度は上昇する反応性溶射における成膜素過程には,熱・運動エネルギーの溶射材料への移行,液滴の衝突偏平化,凝固など多くの現象が関与している.インプロセス反応を伴わない溶射では,溶滴の衝突直前から凝固完了までの数μsの間に生じる衝突,偏平化,凝固が全成膜過程を通じて中心的役割を果たしている.しかしながら,本研究で取扱う反応性溶射では,溶滴の飛行過程における反応およびスプラット積層過程における反応の進行を考慮する必要がある.本研究において,発熱/吸熱反応が進行しつつある飛行中の溶滴温度,速度をその場計測した.得られた温度,速度データを直接溶射パラメータ(プラズマ電流,1次ガス・2次ガス流量)にフィードバックし,飛行中の溶滴上で進行するインプロセス反応を制御することを試みた.本年度得られた研究成果は以下の通りである:(1)プラズマ溶射飛行溶滴の温度、速度のその場計測における測定精度には,溶滴の放射率が大きく影響する(2)溶射パラメータの変化による溶滴温度,速度のフィードバック制御は十分可能である.(3)黒鉛を含む鋳鉄のミクロ組織インプロセス反応の進行度別の溶射パラメータの効果はほぼ一定であることが判明した.(4)生成複合皮膜の組織制御を飛行溶滴温度と速度のインプロセス測定から実施した結果,鋳鉄の黒鉛化率制御には,速度の影響(高温フレーム中の滞在時間)が大きい.
合成糖鎖-タンパク質複合体のNMR手法による酵素基質切断部位解析

初年度の検討において、注目しているアラビナン分解酵素の基質オリゴアラビのフラノシド誘導体の調製、合成したオリゴ糖誘導体の構造解析、およびオリゴ糖誘導体を基質として用いた分解酵素による分解物の解析をおこなった。本年度は直鎖、分岐構造を有するオリゴα-Lーアラビノフラノシドを、既に開発済みのフラグメント宿合法を利用した手法により立体選択的かつ効率的に調製した。プローブの還元末端には質量分析においてタグとなるアセトニド基を導入している。そのため、NMR解析においても分岐構造に加え両末端残基は容易に帰属可能であったが、予想した通り、直鎖オリゴα-Lーアラビノフラノシドの内部構造の区別は困難であることが明らかとなった。さらにエンド型アラビナン分解酵素切断結果より切断部位を解析し考察したところ、酵素の基質特異性に関する知見を得ると同時に、切断メカニズムについての推測ができた。また、糖鎖合成を簡便に行うために、反応条件によって立体選択性をスイッチできる官能基を導入した保護基を有する糖供与体の開発に成功した。また高磁場NMRを利用したSTD法を鍵手法として糖鎖リガンド側のピーク分解能を最大限にあげた構造解析を行うこと計画しており、まずアルブミンを用いたモデル系にて、代表的な2糖のスクロースとの結合を検証した。アルブミンに特異的に結合するトリプトファンのSTDは観測されたのに対し、非結合性のスクロース存在下ではタンパク質表面への非特異的結合由来の優位なシグナルは確認されず、リガンドシグナルのみが観測される系であることを確認できた。今後、確立したSTD実験系を用いて、既知のendo型オリゴ糖加水分解酵素と結合性の糖受容体基質等との組み合わせで結合部位解析の検討へ展開する。還元末端N-アセチルグルコサミンのLーフコシル化体の調製は完了済みで、Lーフコシル化の影響についても検討する予定である。初年度は、化合物の調整検討や測定条件の設定検討がメインとなり、及び、予定していた分子モデリングによる分子解析は計算機の故障により進んでおらず、別手段を考えざるを得ない状況であるが、懸案であるリガンド分子の調製は進んでいる状況である。主に高磁場NMRを相互作用・結合ー切断位置解析に利用したいと考えているが、結合が強すぎる場合等は、STD法ではシグナルが観測されない場合があり、結合しないプローブとの差を判断できない場合がある。その場合1次元NMRでの滴定やITC等で結合を確認し、特異的な結合を区別して観測したいと考えており、詳細を検討していく。このアラビナン分解酵素の構造解析は進んでおらず、結合位置に関する知見はまだ得られていないので、活性中心を含むアラビナン結合サイトは未確定である。野生型酵素及び推定している触媒残基及び結合に関与する残基の変異体との結合について、糖側の結合情報を得たいと考えている。そのためのプローブ合成を引き続き行って行く計画である。さらに結合に重要な位置以外の近傍での化学修飾により、アフィニティータグ等を導入したプローブの調製、共有結合形成、質量分析による位置解析、分子モデリングでの結合サイトの検証を進めたいと考えている。分析・測定に関しては、確立したSTD実験系を用いて、糖分子や既に研究代表者が合成を達成しているヒト由来糖タンパク質糖鎖フラグメントと関連タンパク質の相互作用などを例に検討すると共に、T1緩和の影響を抑えた反転回転実験から得られるDIRECTION法によるリガンドエピトープマッピングへのアプローチや15N-HSQCによる化学シフト摂動値マッピングなどによるタンパク質の結合部位の解明についての検討を計画している。本年度の進行具合によっては、連携研究者より調達予定の実際の結核菌endo型酵素およびその変異体を用いた、合成糖鎖基質群との相互作用解析を行い、切断位置特異性についての構造化学的知見を得る計画である。糖残基が単一なオリゴ糖であるので、構造解析はより困難になると予想しているが、結果次第で結合解析用のプローブを設計しなおすことも必要になると予想している。

今後、確立したSTD実験系を用いて、既知のendo型オリゴ糖加水分解酵素と結合性の糖受容体基質等との組み合わせで結合部位解析の検討へ展開する。還元末端N-アセチルグルコサミンのLーフコシル化体の調製は完了済みで、Lーフコシル化の影響についても検討する予定である。初年度は、化合物の調整検討や測定条件の設定検討がメインとなり、及び、予定していた分子モデリングによる分子解析は計算機の故障により進んでおらず、別手段を考えざるを得ない状況であるが、懸案であるリガンド分子の調製は進んでいる状況である。主に高磁場NMRを相互作用・結合ー切断位置解析に利用したいと考えているが、結合が強すぎる場合等は、STD法ではシグナルが観測されない場合があり、結合しないプローブとの差を判断できない場合がある。その場合1次元NMRでの滴定やITC等で結合を確認し、特異的な結合を区別して観測したいと考えており、詳細を検討していく。このアラビナン分解酵素の構造解析は進んでおらず、結合位置に関する知見はまだ得られていないので、活性中心を含むアラビナン結合サイトは未確定である。野生型酵素及び推定している触媒残基及び結合に関与する残基の変異体との結合について、糖側の結合情報を得たいと考えている。そのためのプローブ合成を引き続き行って行く計画である。さらに結合に重要な位置以外の近傍での化学修飾により、アフィニティータグ等を導入したプローブの調製、共有結合形成、質量分析による位置解析、分子モデリングでの結合サイトの検証を進めたいと考えている。分析・測定に関しては、確立したSTD実験系を用いて、糖分子や既に研究代表者が合成を達成しているヒト由来糖タンパク質糖鎖フラグメントと関連タンパク質の相互作用などを例に検討すると共に、T1緩和の影響を抑えた反転回転実験から得られるDIRECTION法によるリガンドエピトープマッピングへのアプローチや15N-HSQCによる化学シフト摂動値マッピングなどによるタンパク質の結合部位の解明についての検討を計画している。本年度の進行具合によっては、連携研究者より調達予定の実際の結核菌endo型酵素およびその変異体を用いた、合成糖鎖基質群との相互作用解析を行い、切断位置特異性についての構造化学的知見を得る計画である。糖残基が単一なオリゴ糖であるので、構造解析はより困難になると予想しているが、結果次第で結合解析用のプローブを設計しなおすことも必要になると予想している。基質としてのサンプル調整及び、酵素切断による検証を少し時間をかけて行い、そのため、実際のNMR測定用の基質の特定までに至っておらず、測定が次年度以降にずれ込んだため。本年度以降に、本格的に測定をスタートしたいと考えており、そのための装置利用の受益者負担費として使用したいと考えている。また、リガンド特定に関する成果も国際学会などでの報告を行う計画であり、その参加費用として使用したいと、考えている。
アコースティックエミッション法による岩石の熱風化機構の解明

日射によって大きい温度変化を被る岩石の風化(日射風化,熱風化)は,明確な裏付けがないとしてコンセンサスが得られていない風化プロセスの一つである。そこで本研究では,アコースティックエミッション(AE)法を利用して,温度変化に伴う微小亀裂の発生をとらえ,岩石の日射風化について室内実験と野外実験をもとに解明することを目指している。2018年度の室内実験は,環境試験機を利用して80°Cの温度変化を繰り返し岩石供試体(砂岩,花崗岩)に与え,岩石表面の温度,表面ひずみおよびAEなどを測定した。また,野外実験はカンボジア・シェムリアップ(A)とオーストラリア・ダンピア(B)において,岩石供試体を野外に暴露させる形式でそれぞれ実施した。岩石と野外実験地の選定は,Aでは世界遺産となっている石造寺院が砂岩からなり,日射風化による損傷が懸念されているためである。またBは,国内において最も気温変化の大きい場所で,砂漠ワニスを伴う風化岩塊(斑レイ岩,斑岩)に剥離作用が認められることによる。室内実験の結果,2種類の岩石供試体の表面温度は設定温度に繰り返し到達し,最大の温度変化速度は2°C/分以上となり,AE信号がカウントされた。一方,Aにおける野外実験では,砂岩供試体の表面温度は約51°C20°Cに変化し,AE信号がとらえられた。この測定時の温度変化速度は,+1.50ー1.88°C/分と大きい。またBでは,砂岩供試体の表面温度は約56°C30°Cに変化したが,温度降下速度はー0.22°C/分程度でAE信号はとらえられなかった。これらの結果から,80°C以下の温度変化に伴って,供試体にAEが発生することは確認された。しかし,室内・野外ともにAEカウント数は低く,微小亀裂の発生を裏付けるに十分なカウント数には達していないと思われる。今後,実験事例を増やすとともに,露岩を対象とした野外実験を企画して実施したい。当初,想定したように室内・野外における実験はそれぞれ進んだ。しかし,室内・野外実験では,AEは1/100秒,岩石表面温度は1秒間隔でデータを計測している。このため,1回の実験で取得するデータ量は膨大で,解析に時間を要することやAEカウント数の閾値を決定することに手間がかかっている。また,これら実験に用いている機器の納品が遅れ,実験期間が十分に確保できなかったことも原因の一つである。環境試験機を用いた室内実験は,温度条件を様々に変化させることが可能である。このため,今年度とは異なる温度条件,異なる岩型を用いた室内実験を進める。また,野外では先述したA,Bの実験地で供試体を用いた野外実験を継続して行うだけでなく,露岩を対象にした岩石表面の温度,表面ひずみおよびAEなどの測定を検討する。また,取得したデータは,適切なデータ処理法のもとで迅速に解析することを目指す。いっぽう,現在行っている野外でのAEやひずみ測定では,長時間測定ができない。これは,現有のAEとひずみの計測システム,およびパーソナルコンピュータの駆動が内部バッテリーに依存しているためである。また,これら機材の表面温度は野外実験時に60°C以上の高温状態を持続するため,耐久性に不安がある。そこで,AEとひずみを計測するとともにそのデータを保持可能な単体のシステムの導入を検討したい。

しかし,室内・野外実験では,AEは1/100秒,岩石表面温度は1秒間隔でデータを計測している。このため,1回の実験で取得するデータ量は膨大で,解析に時間を要することやAEカウント数の閾値を決定することに手間がかかっている。また,これら実験に用いている機器の納品が遅れ,実験期間が十分に確保できなかったことも原因の一つである。環境試験機を用いた室内実験は,温度条件を様々に変化させることが可能である。このため,今年度とは異なる温度条件,異なる岩型を用いた室内実験を進める。また,野外では先述したA,Bの実験地で供試体を用いた野外実験を継続して行うだけでなく,露岩を対象にした岩石表面の温度,表面ひずみおよびAEなどの測定を検討する。また,取得したデータは,適切なデータ処理法のもとで迅速に解析することを目指す。いっぽう,現在行っている野外でのAEやひずみ測定では,長時間測定ができない。これは,現有のAEとひずみの計測システム,およびパーソナルコンピュータの駆動が内部バッテリーに依存しているためである。また,これら機材の表面温度は野外実験時に60°C以上の高温状態を持続するため,耐久性に不安がある。そこで,AEとひずみを計測するとともにそのデータを保持可能な単体のシステムの導入を検討したい。進捗状況で触れたように,実験に必要な機器の納入が遅れたことから,この機器の動作特性や環境試験機とのマッチングの検討などに時間を要した。これら実験補助者を導入することなく進めた準備作業のため,次年度使用が生じた。今後,実験手順を整えてルーティーン化し使用したいと考えている。また,今後の研究の推進方策で述べたように,現状のシステムでは長期間の野外測定には向かない。今後,単体で駆動するAE・ひずみ測定システムの導入も検討し,効率的に活用を目指す。
発癌過程におけるp16^<INK4a>遺伝子プロモーターのメチル化機構の解明

正常細胞が分裂寿命に達した場合や、Ras遺伝子のような癌遺伝子が活性化され細胞が癌化の危険にさらされた場合に発現が誘導される16^<INK4a>は、癌全体の約20%でプロモーターのメチル化により失活しエピジェネティックな発現抑制がおこっている。そこで、p16^<INK4a>のプロモーターメチル化のメカニズムを明らかにするために、ヒト正常線維芽細胞に各種発癌ストレス(DNAダメージ、癌遺伝子の過剰発現、酸化的ストレスなど)を加え、p16^<INK4a>の発現制御の解析を行った。またp16^<INK4a>の発現が抑制されている癌細胞にアデノウイルスを用いてp16^<INK4a>の過剰発現を行ったところ、細胞老化様の増殖停止をおこし、昨年我々が報告した細胞分裂の阻害も起こっていることを発見した。また、脱メチル化剤をヒト正常線維芽細胞や各種癌細胞に作用させることにより、維持持型メチル化酵素Dnmt1(DNA methyltransferase 1)の発現が抑制され、p16<INK4a>の発現が誘導される分子メカニズムに着目し、現在新しい知見を検討中である。p16^<INK4a>遺伝子は正常細胞が分裂寿命に達した場合や、Ras遺伝子のようながん遺伝子が活性化され細胞ががん化の危険にさらされた場合に発現が誘導され、サイクリン依存性キナーゼ(CDK4/6)のインヒビターとしてRBのリン酸化を阻害する。その結果、細胞周期はG1期で停止し細胞老化(Cellular senescenece)がおこることから、p16^<INK4a>は癌抑制遺伝子として機能することが知られている。本年度はヒトの多くのがんで失活しているp16^<INK4a>遺伝子の発現調節機構(特にメチル化のおこる機構)とp16^<INK4a>蛋白のがん抑制機能について、SV40のLT抗原の活性を温度依存的に調節できるヒト正常線維芽細胞株(SVts8)を用いて解析を行った。その結果、p16^<INK4a>-RB pathwayが十分に活性化することによって、従来報告されてきたようなG1/S期のチェックポイントだけではなく、G2/M期においても新たな細胞周期のチェックポイントが活性化されることを明らかにした。このことから、ヒトの正常細胞において細胞老化がおこると、複数のポイントで細胞周期の進行を遮断するメカニズムが働くことが示唆された。一方、癌細胞においてはこれらの増殖停止メカニズムに異常がおきていると考えられる。現在、このp16^<INK4a>-RB pathwayの下流に存在する増殖停止機構の実体解明を目指し研究を継続している。その結果、細胞周期はG1期で停止し細胞老化(Cellular senescence)がおこることから、p16^<INK4a>は癌抑制遺伝子として機能することが知られている。昨年度に引き続きp16^<INK4a>蛋白のがん抑制機能について、SV40のLT抗原の活性を温度依存的に調節できるヒト正常線維芽細胞株(SVts8)やヒト正常線維芽細胞株(TIG-3,TIG-1,Hs68)を用いて解析を行った。その結果、p16^<INK4a>-RB pathwayが十分に活性化することによって、増殖刺激と協調的に活性酸素(ROS)/PKCδpathwayが活性化されることを発見した。このことから、p16^<INK4a>蛋白は従来報告されてきたDNAの合成阻害能に加え、細胞分裂を阻害することで細胞老化の増殖停止状態の維持に関わることが示唆されたため、本年度はその成果をNature Cell Biology誌に報告した。
微生物学的指標による重症患者へのポビドンヨード口腔清拭の有効性の検討

効果的な口腔ケアを明らかにするため(1)溶剤は水を用いて電動ブラシ・歯ブラシ・スポンジブラシの3種類の用具の比較と(2)用具は電動ブラシを用いて水・液体歯磨き・イソジンの3種類の溶剤の比較を行なった。前年度に菌種を調べたが明確な差がみられず、今年度は一指標としてP.gingivalis、B.forsythus等の酵素に反応するペリオチェックを用いた。寝たきりで自力で口腔ケアができない気管切開や胃瘻・胃チューブのある患者を対象とし、実施前に容体が不安定な場合は実施を中止した。同一事例の長期追跡のため療養型病床群の患者4事例に1週間毎に実施および測定をした。口腔ケア実施時間は10分前後とした。残歯ありが2名、無しが2名であった。舌上、頬の裏側、口蓋の3個所を滅菌綿棒をケア実施の前後に一回転し採取した。特記すべき結果として、どの器具および溶剤を用いても必ず舌上の部位が強陽性に判定された1名があり、通常の口腔ケア以上の対策が必要であることが示唆された。そのほかは実施前後ともに陽性となり口腔ケアの効果判定には至らなかった。そして、イソジンを用いても水と比べて反応が陰性になることはなかった。今後も他の指標を用いて口腔ケアの評価法の検討が必要だが、その他の指標としてデントカルトがある。これはは唾液採取のためパラフィンを数分かませる過程が必要で意識障害患者には不可能である。これはlactobacillusの存在を明らかにするもので4日間の培養が必要だが、実際のコロニー数がわかるので唾液の確保可能な患者には評価測定にも用いられうると考える。継続して同一患者に適応し本研究との比較を行ないたい。また前年度より本年度研究を依頼した施設の方が丁寧に普段の口腔ケアを実施していた。このような要素も評価に影響を与えることが予測されるため、幾つかの施設の患者を対象として施設間の比較を行ない検討する予定である。重度の疾患のために自力で口腔ケアを行えない患者に対する口腔ケアを、より効果的なものへ発展させるため、口腔ケアの効果を微生物学的指標を用いて評価することを試みた。今回は、その効果的な口腔ケアの視点として、口腔ケアの際に用いる「溶剤」と「用具」に着目した。まず、「溶剤」としては、ポビドンヨード剤(以下イソジン液)と水道水による口腔ケアを、どちらの溶剤が口腔内の細菌数を減少させるかを比較した。「用具」は、歯ブラシとスワブ(以下スポンジブラシ)を用い、どちらの口腔ケア用具が口腔内の細菌数を減少させるかを比較した。本研究の対象者は、経管栄養のため経鼻チューブ挿入中の患者、長期にわたり意識障害や寝たきりの状態にある患者5例である。研究者自身が実施した口腔ケアの前後に口腔、舌上、咽頭の各3箇所から検体を採取し、細菌数を調査した。同時に、緑膿菌・MRSAなどの病原菌と、口腔内常在細菌についての同定を行った。これらの細菌数と同定された細菌の種類から、それぞれの口腔ケアの効果を検討した。1.口腔、舌上、咽頭の3箇所とも、イソジン液による口腔ケアと水道水による口腔ケアでは、細菌数の減少に明らかな差はみられなかった。2.口腔、舌上、咽頭の各3箇所とも、歯ブラシによる口腔ケアとスポンジブラシによる口腔ケアでは、細菌数の減少に明らかな差はみられなかった。3.緑膿菌が2例から検出され、そのうち1例からはα-streptococcusが検出されなかった。以上の成績から、どの溶剤や口腔ケア器具を用いても、細菌数や検出細菌に明らかな差がないことが示唆された。また、常在細菌叢が撹乱していることが示唆された。このことから、場合によっては、より対象に負担が少なく爽快感の得られる方法として、ヨードを含むイソジン液を用いず、水道水とブラシによる口腔ケアの選択も考慮されるべきであると考える。

これはは唾液採取のためパラフィンを数分かませる過程が必要で意識障害患者には不可能である。これはlactobacillusの存在を明らかにするもので4日間の培養が必要だが、実際のコロニー数がわかるので唾液の確保可能な患者には評価測定にも用いられうると考える。継続して同一患者に適応し本研究との比較を行ないたい。また前年度より本年度研究を依頼した施設の方が丁寧に普段の口腔ケアを実施していた。このような要素も評価に影響を与えることが予測されるため、幾つかの施設の患者を対象として施設間の比較を行ない検討する予定である。
胚、子宮内膜相互作用の解析

これまで成功していなかった、マウス子宮内膜間質細胞を、高純度に回収し、培養条件を設定して増殖曲線を描き、ついでエストロゲン、プロゲステロンを添加したのち、脱落膜化の指標であるデスミン陽性大型細胞を得る事に成功した。ついで、これに同種胚盤胞を添加培養し、その発生経過がフィーダー細胞である脱落膜細胞の存在の有無によって如何なる影響を受けるかについて検討した。その結果、プラスチックシャーレや、子宮上皮、あるいは卵管上皮との共培養ではみられない高度の発生促進効果を認めた。この脱落膜化細胞との共培養が、如何なる分子機構によってもたらされたかについては現在検討中である。本年度は、まず第1の実験として、マウス子宮内膜間質細胞の回収法の開発を試み、alpha-MEM+10%FCSを培養液として用い、これにestradiol 20pg/mlおよびprogesterone 10ng/mlを添加し、37度5%CO2 in airの条件にて培養を試みた。具体的には、4週令の未熟マウス10匹の子宮を切除しこれを細切したあと1%トリプシン、4度Cで60分、ついで1%コラ-ゲナーゼにて4度C、60分の処理を行い、グラスウ-ルのフィルターによる処理を2度行い、ついてパーコールによる遠心分離によって、およそ95%の純度のendometrial stromal cellを得る事に成功した。これを上記条件下で培養を続ける事によって、培養後7日で細胞はおよそ5倍に増加した。またestradiolおよびprogesteroneを前記濃度で添加する事によって、培養開始後4日後から大型の細胞が出現するようになり、培養後7日頃にはおよそ70%の細胞が大型のものに変化した。これは更に詳細に検討をする事が必要であるが、in vitroで脱落膜化が誘導されたと解して良いと考えている。現在電顕による超微形態がどの様なものであるのか検討中であるが、更に脱落膜化にともなって表現される各種マーカーについてもその出現を免疫組織学的に検討する必要があると考えている。ついで第2の実験として、着床後の最初の72時間に進行する胎盤形成過程におけるヒロフォブラストの増殖と胎盤形成過程の形態的変化を経時的に観察し、その際に脱落膜に表現される機能的変化をPCNAの陽性率で検討したところ、子宮内膜の間膜側で陽性細胞が多く観察され、トロフォブラストの増殖の盛んな部位がこれを取り巻く脱落膜に影響を与えている事が解った。今後此の部位の脱落膜を採取し、どの様なマーカーが表現されているかを検討する予定である。
ブラジル日系社会における幼児期および義務教育段階の音楽教育に関する調査研究

1伯国の教科書から、民族音楽の掲載状況を調べるここ20年ほど新刊の歌のテキストは不況のため発行されていない。また、音楽の授業の必要性を強調され、実践されようとしたが、知育教育が優先されて行われていない学校が多い。そこで、使用済みまたは使用中の教科書2社から、資料となる曲目を拾い出した。内容はポ語の判読を含め整理中である。教育内容に特色をもたせた私立学校の音楽に関する教材は収集したがまだ調べていない。2日本の歌や音楽への関心度については、世代別、年齢別、音楽の学習者、一般人にわけ、調査・分析した。回収率は現在32%、1000名弱のおデーターをパソコン処理した。日系就労者については、面接したが、こちらの調査内容より先方の質問・相談ごとで時間をとられ、アンケートをすることは不可能と判断した。アンケートに不慣れな方もおられ、地域なども考慮して内容をチェックした。3日本語学校での音楽指導内容については、前年集めた各種行事のプログラムを分析した。指導時間、方法、行事の持ち方、その他特記事項などを担当日本語教師に尋ねた。なお、本年3月に私費渡伯予定があり、その際、現地で報告をし、疑問点を再確認したいと考えている。4調査内容の考察ウネスピJ・B・ボウドレール学部長ほか3名から民族音楽の概要と特徴などについて専門的知識の提供を受けた情報をもとにまとめたい。現地日系教師ネイダ・コクボ氏、フロリンダ・カヨコ・ノモト氏(サンパウロ教育局勤務)から伯国教科書事情や教科書の活用状況について受けた情報をもとに、ブラジル学校での様子をまとめた。5研究結果をまとめソフト「桐Ver.4」を活用、日系人の音楽行動・嗜好などについてまとめた。関心や興味のある方にはデーターを提供できるよう準備している。3月渡伯して、研修させて頂いたサンパウロ州立大学・現地邦字新聞に一部でも紹介したいと考えている1岐阜県内(2地区)に滞在している就労者を対象に予備調査をした。その結果、言葉の面で質問内容の理解に欠ける点があり、ポルトガル語訳の必要を感じた。またポルトガル語に直しても、用語が誰に理解できる適切な語を選ぶことが必要と感じた。そのため、就労者に対する調査は次年度に、本年は留学生・研修生を中心にすることとした2留学生の場合、各大学に知人を頼りに調査予定であったが、その届け出、留学生と出会う難しさ等大変煩雑な問題があった。前ブラジル総領事の鈴木康之氏のアドバイスを受け、海外日系人協会で年2回行われる研修会の折に調査をさせて頂き、労力・時間とも節約できた。3渡伯時(1992年7月3週間)に、日伯文化連盟事務局長R・M・H氏の尽力により、教科書出版社2社を訪問でき、ブラジルの教科書事情について詳しく説明を受けた。「総合教科書」に載録されている「歌」に関する内容について、取り上げる過程、執筆者の意図、現場の意見などもわかり多いに参考になった。幸い私の先の研究(平成2.3年度の科研)で得た日本の資料を持参していたので比較でき今後の示唆が得られた。4当初は国内での調査を基本に考えていたが、勤務校から学外海外研修(1992.12.201993.4.10)を認められ、現地調査ができるようになった。これで疑問点の追求や幅広い調査結果が得られるのと思う。現地調査は、毎年1月に行われている集中研修会で日本語教師300名、日本へ研修生・留学生150名余、サンタ・カタリーナ地区、ミナス地区、サンパウロ地区各100名を調査予定である。5調査は、音楽堪能者および学習者、留学生および研修生、一般を出稼ぎ就労者と一般人に区分し、結果をまとめて考察することにした。

5研究結果をまとめソフト「桐Ver.4」を活用、日系人の音楽行動・嗜好などについてまとめた。関心や興味のある方にはデーターを提供できるよう準備している。3月渡伯して、研修させて頂いたサンパウロ州立大学・現地邦字新聞に一部でも紹介したいと考えている