hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
血管造影を応用した脳損傷の法医放射線学的研究

法に触れる多くの傷害事件や複雑な交通事故を扱う法医学の領域では外力によって惹きおこされた脳損傷を調べるに当たり、その損傷の部位・広がり・程度・新旧の別などを的確につかみ、損傷の形態とその位置から考えて、損傷の成り立ちを外力との関連において捕らえながら鑑定していくことが要求される。しかし、脳は堅い骨組織に包まれているために、外力によって複数の部位に多彩な変化を生じやすく、また複雑な立体的構造を示す損傷が多いという特性を有している。したがって、脳損傷の検索には単に外表および組織のスライスによる観察では不十分であり、いろいろな角度からみた検討が必要である。私たちはこれらの問題を解決するために、従来行われてきた脳の肉眼的・組織学的観察に加えて剖検例の血管造影を行って脳損傷の検索を進めてきた。例えば、頭部損傷に合併することの多い「くも膜下出血」は、脳脊髄液のためにびまん性に広がりやすく、これまでびまん性に広がった「(外傷性)くも膜下出血」の出血源を確認することは不可能であるとされてきた。もしも、その出血源を絞り込むことができれば、その成因や損傷と加わった外力との相関を考えることができるので、平成8年度は法医鑑定例に血管造影法を応用して「くも膜下出血」の出血源を絞り込み、その成立機序を明らかにしようとした。司法解剖例119例について、その開頭前に左右の総頸動脈からバリウムを主剤とする造影剤を注入し、開頭の前後、及び脳の全体やスライスについてX線写真をとり検討した結果「くも膜下出血」の原型とも言うべき微小な病変を検出し得たし、また広範な「くも膜下出血」を示してその出血源の確認が難しかった例でも、造影剤の漏出によりその出血源を絞り込むことができ。損傷の成り立ちの解析に新しい展開を示した。これらは新しい知見であり、国際法科学会総会(1996東京)に報告することができた。法に触れる多くの傷害事件や複雑な交通事故を扱う法医学の領域では外力によって惹きおこされた脳損傷を調べるに当たり、その損傷の部位・広がり・程度・新旧の別などを的確につかみ、その結果高齢者に多く認められる内因性の疾患による脳病変と対比して鑑別し、損傷そのものの形態とその位置から考えて損傷の成り立ちを外力との関連において捕らえながら鑑定していくことが要求される。しかし、脳は堅い骨組織に包まれているために、外力によって複数の部位に多彩な変化を生じやすく、また複雑な立体的構造を示す損傷が多いと言う特性を有している。従って、脳損傷の検索には単に外表及び組織のスライスによる観察では不十分であり、いろいろな角度から見た検討が必要である。私たちはこれらの問題を解決するために、従来行われていた脳の肉眼的・組織学的観察に加えて、剖検例の血管造影を行って脳損傷の検索を進めてきた。その結果、外表の観察や脳スライスの検討によっては見落としがちであった微細な損傷も造影剤の漏出を追うことにより容易に発見できる様になった。既往歴の不明な多くの剖検例の検索において、出血部及び虚血部に明確に同定し、病変を予測しながら剖検を進めていくことが可能となった。これまでに経験した120例ほどの症例について検索した結果を法医学会及び国際法科学会議などを通して報告してきたが、更に検討方法の改良につとめながらデータを増している。

法に触れる多くの傷害事件や複雑な交通事故を扱う法医学の領域では外力によって惹きおこされた脳損傷を調べるに当たり、その損傷の部位・広がり・程度・新旧の別などを的確につかみ、損傷の形態とその位置から考えて、損傷の成り立ちを外力との関連において捕らえながら鑑定していくことが要求される。しかし、脳は堅い骨組織に包まれているために、外力によって複数の部位に多彩な変化を生じやすく、また複雑な立体的構造を示す損傷が多いという特性を有している。したがって、脳損傷の検索には単に外表および組織のスライスによる観察では不十分であり、いろいろな角度からみた検討が必要である。私たちはこれらの問題を解決するために、従来行われてきた脳の肉眼的・組織学的観察に加えて剖検例の血管造影を行って脳損傷の検索を進めてきた。例えば、頭部損傷に合併することの多い「くも膜下出血」は、脳脊髄液のためにびまん性に広がりやすく、これまでびまん性に広がった「(外傷性)くも膜下出血」の出血源を確認することは不可能であるとされてきた。もしも、その出血源を絞り込むことができれば、その成因や損傷と加わった外力との相関を考えることができるので、平成8年度は法医鑑定例に血管造影法を応用して「くも膜下出血」の出血源を絞り混み、その成立機序を明らかにしようとした。司法解剖例119例について、その開頭前に左右の総頚動脈からバリウムを主剤とする造影剤を注入し、開頭の前後、及び脳の全体やスライスについてX線写真をとり検討した結果「くも膜下出血」の原型とも言うべき微小な病変を検出し得たし、また広範な「くも膜下出血」を示してその出血源の確認が難しかった例でも、造影剤の漏出によりその出血源を絞り込むことができ。損傷の成り立ちの解析に新しい展開を示した。これらは新しい知見であり、国際法科学会総会(1996東京)に報告することができた。
振動フィードバック刺激を用いたブラキシズム治療法

スプリント内蔵圧センサ(ピエゾフィルム)・振動子,検出装置,記録装置,刺激発生装置から構成されるブラキシズム抑制システムを開発し,その後,臨床応用を視野に入れて改良し,これを用いて以下の研究を行った.これらの被験者を対象に,ベースライン1週間,フィードバック刺激期間1週間,治療後1週間,各1週間の睡眠時ブラキシズムを測定し,各セッション間のブラキシズム持続時間を(sec/hour)を比較した.すべての被験者が問題なく自宅にて3つのセッションの測定を遂行することができた.振動刺激期間中のブラキシズム持続時間はその程度に個人差が認められるものの,短縮する傾向が認められた.本研究結果により振動刺激を用いた本システムは自宅環境において患者自身が使用することができ,ブラキシズム抑制システムとして有効である可能性が示唆された.スプリント内蔵圧センサ(ピエゾフィルム)・振動子,検出装置,記録装置,刺激発生装置から構成されるブラキシズム抑制システムを開発し,その後,臨床応用を視野に入れて改良し,これを用いて以下の研究を行った.これらの被験者を対象に,ベースライン1週間,フィードバック刺激期間1週間,治療後1週間,各1週間の睡眠時ブラキシズムを測定し,各セッション間のブラキシズム持続時間を(sec/hour)を比較した.すべての被験者が問題なく自宅にて3つのセッションの測定を遂行することができた.振動刺激期間中のブラキシズム持続時間はその程度に個人差が認められるものの,短縮する傾向が認められた.本研究結果により振動刺激を用いた本システムは自宅環境において患者自身が使用することができ,ブラキシズム抑制システムとして有効である可能性が示唆された.本年度は,スプリント内蔵圧センサ(ピエゾフィルム)・振動子,検出装置,記録装置,刺激発生装置から構成されるブラキシズム抑制システムを製作し,システムが稼働することを確認した後,振動子,内蔵圧センサの小型化を図った。さらに,終夜記録されるブラキシズム測定データ解析用の専用ソフトウェアの開発に着手した.また,本ソフトウェアの開発・動作確認のために設置した専用のパーソナルコンピュータとは別途,次年度以降に収集されるデータを蓄積し解析を行うパーソナルコンピュータも合わせて設置した.ソフトウェアの基本構造はブラキシズムイベントに関連した区間の咬筋EMGシグナルを自動選択しグラフィックディスプレー上に表示し,これらの区間の中でアーチファクトシグナルと判断される区間についてはツマニュアルで験者が除去することができる仕様となっている.また,個人情報を保護する観点から,ソフトウェアは前述のデータ処理専用PC上でのみ運用可能で,なおかつ験者はあらかじめ発行されたIDとパスワードを入力することによりデータにアクセスできる仕様を次年度に付加する予定である.ソフトウェアの基本構造が完成後,American Academy of Sleep Medicine,The International Classification of Sleep Disorders-2に従ってスクリーニングされた,睡眠時ブラキシズム患者2名に研究参加を依頼し,同意の得られた被験者に対してピエゾフィルムと振動子を内蔵したオクルーザル・スプリントを製作し,これらの被験者を対象に,自宅にてブラキシズム終夜記録を行い収集されたデータの解析を行った.本研究結果により振動刺激を用いた本システムは自宅環境において患者自身が使用することができることが確認され,また,ブラキシズム終夜記録1夜分のデータ解析時間は約5分であり,今後蓄積されて行く膨大なデータを効率よく解析できる可能性が示唆され,次年度以降の研究のために必要十分の業績が得られた.本年度は最終年度に行う,本システムのブラキシズム抑制効果についての臨床評価のため,1.システムの構築,2.被験者群の動員をおこなった.1.システムの構築スプリント内蔵圧センサ(ピエゾフィルム)・振動子,検出装置,記録装置,刺激発生装置から構成されるブラキシズム抑制システムの小型化と操作性の簡便化を図った.さらに,終夜記録されるブラキシズム測定データ解析用の専用ソフトウェアを作成した.ソフトウェアの基本構造はブラキシズムイベントに関連した区間の咬筋EMGシグナルを自動選択しグラフィックディスプレー上に表示し,これらの区間の中でアーチファクトシグナルと判断される区間についてはマニュアルで験者が除去することができる仕様となっている.なお,次年度にはアーチファクトシグナル認識部をパターン認識アルゴリズムを採用することにより自動化し,完全自動解析ソフトウェア完成を目指す予定である.2.被験者の動員・研究への参加の同意が得られ,顎口腔系に機能異常を認めない成人87名を被験者とした. Lavigne等による臨床的ブラキシズム診断基準,すなわち睡眠同伴者によるSBの指摘,咬耗,咬筋肥大,起床時症状を用いて睡眠時ブラキシズム評価を行い,睡眠時ブラキシズム群26名(男性16名,女性10名,平均年齢30.5±8.1歳),コントロール群61名(男性33名,女性28名,平均年齢34.1±12.1歳)を設定した.さらにこれらの被験者すべてを対象にバイトストリップを用いて3夜連続の睡眠時ブラキシズムレベル評価を行い,臨床評価結果の確認を行った.本システムのブラキシズム抑制効果についての臨床評価のため,1.システムの構築,2.被験者群の動員をおこなった.1.システムの構築スプリント内蔵圧センサ(ピエゾフィルム)・振動子,検出装置,記録装置,刺激発生装置から構成されるブラキシズム抑制システムの小型化と操作性の簡便化を図った.さらに,終夜記録されるブラキシズム測定データ解析用の専用ソフトウェアを作成した.ソフトウェアの基本構造はブラキシズムイベントに関連した区間の咬筋EMGシグナルを自動選択しグラフィックディスプレー上に表示し,これらの区間の中でアーチファクトシグナルと判断される区間についてはマニュアルで験者が除去することができる仕様となっている.

なお,次年度にはアーチファクトシグナル認識部をパターン認識アルゴリズムを採用することにより自動化し,完全自動解析ソフトウェア完成を目指す予定である.2.被験者の動員研究への参加の同意が得られ,顎口腔系に機能異常を認めない成人87名を被験者とした.Lavigne等による臨床的ブラキシズム診断基準すなわち睡眠同伴者によるSBの指摘,咬耗,咬筋肥大,起床時症状を用いて睡眠時ブラキシズム評価を行い,睡眠時ブラキシズム群26名(男性16名,女性10名,平均年齢30.5±8.1歳),コントロール群61名(男性33名,女性28名,平均年齢34.1±12.1歳)を設定した.さらにこれらの被験者すべてを対象にバイトストリップを用いて3夜連続の睡眠時ブラキシズムレベル評価を行い,臨床評価結果の確認を行った.
口腔領域における遊離皮弁移植後の機能回復に関する研究

口腔領域における遊離皮弁移植後の機能回復に関する研究に先立ち、血管柄付き遊離皮弁における基礎研究を行った。第38回日本口腔外科学会総会において移植後の初期における血行動態および治癒経過を検索し報告した。実験は、3.0kg前後の白色家兎20羽をペントバルビタール静脈内麻酔下に左側鼠径部に同側の浅下腹壁動静脈を血管柄とする3×3cmの円形の遊離皮弁を挙上し手術用顕微鏡下に、同動静脈を剖出切断後、10-0ナイロン糸にて端端吻合、皮弁を4-0ナイロン糸にて元の位置に縫着した。術前、術後1、2、3、7日後に静脈内麻酔下に血流測定をした。術後1、3、7日後に屠殺し、H-E染色にて観察した。血流計による測定値は、血流計による測定値は、術前値は25.0±5.2ml/min./100gであった。生着例ではほぼ一定の値を示していたが、皮弁壊死例では、術後1日例で、8.2±2.5であり、2日例以降では、ほぼ0となっていた。術後7日例で上皮の連続性および境界部において線維芽細胞、新生血管様の管腔構造物が認められた。
近世イングランド帰化制度の変遷とその重要性・近世的特徴

本研究課題の研究成果は次の3点である。第一に、近世イングランドにおける帰化制度の近世的特徴が、その複層性・可変性、信仰の重要性にあること、また複合国家としてのブリテンや帝国の存在がナショナリティ構築において重要な役割を果たしていたことを明らかにした。第二に、法的地位取得者の実態を明らかにした。17世紀中葉以降、海外出身者に対しても帰化が付与されるケースが増加しており、それは帰化が外国人を臣民化する装置として機能している証左であることを提示した。第三に、近世ロンドン在住の外国人の子どもについて、外国人調査の分析を通じて人数の増加と、彼らの出身地や年齢、家族背景などその特徴を明らかにした。研究計画に従い、平成24年度は17世紀前半における帰化制度の制度史的変遷と帰化・デニゼイション取得者の実態について、「複合国家ブリテン」内の人びとを対象に含めつつ、研究を進めた。その結果、帰化制度の複層性、可変性(柔軟性)にイギリス帰化制度の禁制的特徴が明らかになった。帰化制度におけるブリテンの影響、その重要性については、さらなく研究が必要である。研究成果の一部を岩井淳編『複合国家イギリスの宗教と社会』(ミネルヴァ書房、2012年刊行)所収論文「帰化システムと複合国家」として発表した。その研究成果を一部発展させた内容を七隈史学会で学会報告した。さらに、法的地位をめぐり当該時期の移民とホスト社会との関係に関する論文を執筆した。それについては近日刊行予定である。第2の課題でもあり、ナショナリティと差異化の問題の重要な対象であるユダヤ人については、ロンドンの大英図書館やイギリスのナショナル・アーカイヴスで17世紀前半を中心に文献・資料調査を昨年度に引き続いて行い、読解・分析を本格的に開始した。昨年度、分析をまとめた共和世期、王政復古期の帰化・デニゼイション取得者のなかにユダヤ人が存在することが明らかになった。この成果については、次年度韓国で開催される国際学会で報告予定である。最終年度である本年は、前年度までの研究成果をもとに、近世イングランドにおける帰化制度の歴史的変遷と法的地位取得者の実態について、17世紀前半を中心に総括を行った。17世紀前半がイギリス国籍史上極めて重要な時期であることを、帰化制度における近世的特徴として出生地主義や信仰、デニズンという地位の重要性を、制度の内容とその歴史的変遷と取得者の実態から明らかにした。その研究成果を、国際学会第5回日韓イギリス史会議(6月20日22日韓国釜山開催)にて報告した。報告原稿は抄録集に掲載された。その報告において、次の研究課題である、出生地主義に基づくナショナルなレベルのナショナリティの定義とはことなる草の根レベルのraceに基づく自己認識(国民意識)の有り様がみられることを提示した。年度後半は、学会報告で提示した草の根レベルの自己認識と他者に対する法的地位を明らかにするべく、16世紀後半のロンドンに在住する外国人の第二世代に焦点をあて、外国人調査を史料とし彼らの実態分析を行った。16世紀後半、イングランド出生の移民2世の人数が増加したが、そのような彼らは原則生まれながらのイングランド人同様であるにもかかわらず、外国人としてその存在と権利が問題視されていたことが明らかになった。その研究成果の一部は論文として刊行した。この間の研究を通じて、他者認識と法的地位の論理において、重要な概念としてraceに注目すべきことが明らかになったが、その現実的対象として外国人の第二世代に加えて、ユダヤ人や黒人の存在が挙げられる。それを踏まえてユダヤ人や黒人に関する基礎的な研究や資料調査を行った。研究計画に従い、平成23年度は、17世紀前半における帰化制度の制度史的変遷と帰化・デニズン取得者の実態について、「複合国家ブリテン」内の人々を対象に含めつつ、研究を進めた。16世紀後半の事情と比べたとき、イングランドのナショナリティ、他者と自国の画定に関しては、多層的であると同時に、「複合国家ブリテン」の存在が大きく関与していることが明らかになった。後者についは、これまでの帰化研究にはない、新たに明らかにされた点である。この課題については、すでに研究成果を脱稿し、論文集所収論文として刊行の準備が進んでいる。引き続いて、王政復古期における帰化制度と帰化・デにズン取得者について、『イングランドにおける外国人のためのデニズン許可証ならびに帰化法』の分析を進めた。1680ー1700年に関する先行研究はあるが、当該時期については、本研究の研究成果が領域初めてのものとなる。

取得者の特徴として、17世紀前半と比べて、共和政を経て、海外生まれのイングランド人の子どもの復権が急増すること、その一方で、大陸出身者にも帰化取得者が増加すること、デニゼイションが存続されることから、帰化との区別がますます進行することが明らかになった。結果として、ナショナリティの境界画定の論理が、体制や社会の変化により、「複合国家ブリテン」から大陸や帝国にシフトしていることが明らかになった。本研究成果についても、すでに論文として発表した。また、第2の研究課題であり、ナショナリティと差異化の問題の重要な対象であるユダヤ人については、ロンドンの大英図書館にて文献調査、史料収集を行った。また、ブリテン内外(北米を含む)の帰化についても、ナショナル・アーカイブスにおいて、史料調査・収集を実施した。それに先立ち、第16回ワークショップ西洋史・大阪において、17世紀における他者と差異化について、予備研究の成果報告を行った。昨年度の研究成果の一部を論集所収論文や論集合評会、学会報告などを通じて発表し、研究会などでも研究者と意見交換を行った。法的地位をめぐり当該時期の移民とホスト社会との関係に関する論文を執筆した。この論文が所収された書籍は次年度刊行予定である。ユダヤ人についても、昨年に引き続いて現在可能な限りの文献・資料を収集できた。現在それらの分析を行っており、現段階での内容をまとめて学会報告する準備を進めている。23年度の計画目標のひとつである、王政復古期に関する調査・分析は実施し、論文としてその成果を発表することができた。17世紀前半についても、これまでの研究に「複合国家ブリテン」という観点を加えて、研究成果を研究論文として成果を発表した。王政復古期については、史料分析、予備考察にとどまったので、今後社会的・歴史的背景に則したさらなる分析・考察の必要がある。ユダヤ人に関する史料調査もイギリスで行い、基本的な二次文献や刊行史料は収集できた。前者については、その成果のさらなる考察が、後者については収集した史料・文献の読み込みが課題となる。差異化の問題については、二次文献とこれまでの研究成果をベースに研究動向と研究成果の一部を、学会報告を行った。最終年度なので、これまで収集してきた文献・資料の分析を引き続き行う。その内容の一部を韓国で開催される国際学会等で報告し、そこでのディスカッションを踏まえて論文等で研究成果をまとめる予定である。未使用額が発生した理由は、全額支給が実施されない可能性を考え、夏休みの渡英を見送ったことと、23年度後半は担当した複数の学内委員業務が繁忙であったため、当初予定していたイギリスでの調査の日程を縮小しなければならなかったことにある。今年度は当初の計画に即しつつ、イギリスでの調査日程を延長することで、調査の遅れを取り戻す予定である。学内業務の調整と研究時間の確保が最大の課題である。使用計画に変更はない。昨年度の未使用額については国内外の研究会・学会参加旅費に充てる予定である。物品費30万円、旅費55万円、人件費・謝金0円、その他5万円の計90万円。昨年度の未使用額については、イギリスでの調査日程の延長に使用する。
センダイウイルス粒子による抗腫瘍獲得免疫活性化の新機構の解明

本研究は不活化センダイウイルス粒子(HVJ-E)のFタンパク質が刺激する新規受容体を同定し、その受容体刺激によるがんに対する獲得免疫活性化の分子機構を明らかにすることを目的としている。Fタンパク質新規受容体の同定には至っていないが、質量分析によっていくつかの候補遺伝子を得た。また、HVJ-Eによる抗腫瘍獲得免疫活性化メカニズムとして、Fタンパク質がマクロファージを刺激することでIL-18の分泌を促進し、IL-18がT細胞の活性化に重要な働きを示すことを明らかにした。1、センダイウイルス(HVJ)粒子からF、HNなどの膜タンパク質を分離し、それぞれを抗F抗体、抗HN抗体で免疫沈降する方法を確立した。本研究ではマクロファージ細胞株のFタンパク質認識受容体をFタンパク質との共沈によって同定することを目的としており、Fタンパク質免疫沈降法は研究目的を達成するためには必要不可欠な技術である。2、レンチウイルスベクターを利用したCRISPR-Cas9システムによるノックアウト技術を確立した。本研究ではFタンパク質認識受容体やその細胞内・細胞間シグナル伝達の関連遺伝子を同定するために、候補遺伝子をsiRNAによってノックダウンしたマクロファージ細胞株とT細胞を共培養し、そのHVJ-E刺激によるIFN-γ分泌を抑制するものを検討する計画であった。しかし近年、CRISPR-Cas9システムの開発によりノックアウト細胞の樹立が簡便化され、siRNAによるノックダウンよりも顕著なIFN-γ分泌抑制結果が予想されることから、本研究でもCRISPR-Cas9システムの技術習得を取り入れた。3、HVJエンベロープ(HVJ-E)刺激後のCD11b+細胞からT細胞へのシグナル伝達としてインターロイキン(IL) -18が関与していることを明らかにした。マウス脾細胞にHVJ-Eを投与することによりIL-18の遺伝子発現がmRNAレベルで増加し、CD11b+マウス脾細胞でも同様に増加することを明らかにした。そこで、抗IL-18中和抗体や抗IL-18受容体中和抗体をマウス脾細胞に投与すると、HVJ-EとIL-12の同時投与によって促進されるインターフェロン(IFN) -γの分泌が著しく抑制された。本研究の最終年度の計画では、不活化センダイウイルス粒子(HVJ-E) Fタンパク質によって活性化された抗原提示細胞がどのようにしてT細胞を活性化するのかを明らかにすることを目的としている。本研究によって、HVJ-EはCD11b+細胞を刺激することによりサイトカインであるIL-18の発現レベルを増加させ、IL-18がT細胞の活性化に重要な働きを示すことを明らかにした。これまで、HVJ-Eはがん組織における自然免疫と獲得免疫を活性化することにより、効果的に抗腫瘍免疫を活性化することを見出していた。HVJ-Eが自然免疫を活性化する機構はすでに明らかになっていたが、どのようにして獲得免疫活性化に関与するかは不明であった。本研究成果によって、HVJ-Eの示す抗腫瘍獲得免疫活性化の一部メカニズムが明らかになったと同時に、新たながん免疫療法開発の基盤となる可能性がある。また、マクロファージや樹状細胞などの抗原提示細胞におけるFタンパク質新規受容体を同定するために、マクロファージ細胞株膜画分タンパク質の溶解物とFタンパク質を混合し、抗Fタンパク質抗体によってFタンパク質を免疫沈降させた。それによって、Fタンパク質と共沈してきた膜タンパク質を質量分析で同定することにより、いくつかのFタンパク質受容体の候補遺伝子を得た。まだFタンパク質の新規受容体同定には至っていないが、今後CRISPR-Cas9システムを利用した候補遺伝子欠損細胞を作製することで、Fタンパク質新規受容体を同定する予定である。本研究の初年度の計画において、マクロファージ細胞株におけるFタンパク質認識受容体の同定を行う予定であったが、現在のところ新規受容体同定には至っていない。しかし、新規受容体の検討方法として計画していたsiRNAによるノックダウンに代わり、CRISPR-Cas9システムによるノックアウト技術を習得した。これにより、当初の計画より鮮明な結果を得られることが予想され、受容体同定も速やかに行われると考えている。さらに、HVJ-E刺激CD11b+細胞からT細胞への情報伝達因子として、サイトカインであるIL-18が関与していることを明らかにした。これは本研究の二年目の研究計画に挙げていたものである。以上より、本研究は研究計画どおりには進展してはいないものの、研究を速やかに遂行するための新規技術の習得や二年目に予定していた研究が進んでいる。従って、本研究の達成度の評価を「やや遅れている」とした。抗腫瘍免疫引き続き、Fタンパク質認識受容体の同定を行う。抗F抗体による免疫沈降法によってFタンパク質と共沈してきたマクロファージ膜タンパク質を質量分析によって同定する。質量分析によって得られた候補遺伝子に関してはレンチウイルスベクターを利用したCRISPR-Cas9システムによってノックアウト細胞株を樹立し、HVJ-E刺激後の反応が消失するかどうかでFタンパク質認識受容体を検討する。また、細胞内シグナル伝達経路の解明については研究計画通りに実施する。
高齢者の在宅ターミナルケアに関する研究-訪問看護の実態から-

本研究の目的は高齢者の在宅ターミナルケアの実態を明らかにし、今後の末期医療のあり方を展望することである。平成10年度はY市の6施設の訪問看護婦11名に、実際に在宅ターミナルケアが行われた13名の高齢者(67歳93歳)の訪問看護の実態を聞き取り調査した。その結果得られた現状の問題点や今後の課題、訪問看護婦自身の死生観や終末期医療への希望を枠組みに質問紙を作成した。平成11年度はその質問紙を用いて、Y県内のすべての訪問看護ステーション56箇所168名を対象に質問紙調査を実施した。回収数は122名(72.6%)で、看護婦の経験年数が5年以上が78.7%、訪問看護婦としての経験年数が1年以上が75.3%、高齢者の在宅ターミナルケアに携わった経験のある人が80.3%であった。在宅ターミナルケアの経験のある看護婦に、患者へのケア、家族へのケア、医師や他職種への連携について質問したところ、急変の可能性のある患者の入浴介助や患者の臨終時の医療職と家族の役割調整などの経験を持たない看護婦の割合が半数以上あり、在宅ターミナルケアの介入の深さに検討課題が見いだされた。122名全員を対象とした質問では、疼痛コントロールについては、医師がモルヒネなどの麻薬を処方できることが必要と回答した人77%、医師の往診体制の確立が必要79.5%、看護職の知識・技術の向上が必要と回答した人93.4%で、在宅における疼痛緩和の重要性が示された。訪問看護婦自身が望む今後の末期医療は、在宅医療システムの拡大が69.7%と最も多かったが、本人の希望する死に場所はホスピスや緩和ケア施設が45.1%と自宅より多く、在宅における症状緩和の困難さが示唆された。以上の結果より、今後は訪問看護婦のさらなる力量と、患者が個々のニーズに応じて自己決定できる多様なターミナルケアの在り方が望まれる。山口県における高齢者の在宅ターミナルケアの実態を明らかにする目的で、訪問看護婦を対象に面接を行った。対象となった訪問看護婦は、山口県内の訪問看護ステーションおよび医療機関の訪問看護部で高齢者の在宅ターミナルケアに携わっている6施設11名であった。面接は(1)対象となる疾患の状況(2)看護婦が行っているケア(3)看護婦が行いたいと思っているが実行できないケアの3点に焦点をあてて行った。調査結果の概要は以下のとおりである。実際に在宅ターミナルケアが行なわれた、あるいは現在行なわれている13名の患者(男性6名・女性7名)の様子を聞き取った。年齢は67歳から93歳まで分散しており、平均年齢は84.2歳であった。癌の患者は6名で、7名は呼吸器疾患や心不全、脳梗塞の後遺症等であった。13名のうち3名に痴呆が見られた。訪問看護の内容は生活全般にわたるサービスが提供されていたが、特に目立ったのは排泄(浣腸・摘便・ポータブルトイレへの介助・おむつ交換・バルーンカテーテル管理等)の援助、清潔・寝衣交換(清拭・足浴・更衣・洗髪・入浴等)の援助であった。診療の補助業務(酸素療法の援助、蓐瘡の手当て、疼痛コントロール等)も重要な役割をしめていた。面接では医師との連携の重要性が語られた。一方創傷の手当ての一部分でも、看護婦の独自の判断で行えることができれば、患者のニードに素早く対応できるのに、といったジレンマも語られた。この結果を基に、次年度は質問紙を作成し、調査を行う予定である。
地層の粒度組成から水理条件を推定するための実験的研究

地層を構成する砕屑物の粒度組成から堆積環境,特に水理条件や運搬様式が推定できるという研究報告は,古くから多い.水路実験で砕屑物をさまざまな様式で運搬させ,その過程での粒度組成の変化を明らかにし,過去の堆積物から水理条件や運搬様式を推定することが,この研究の目的である.この研究で行った水路実験では,高精度の流速計の導入で,さまざまな水理条件での質の高い実験結果が得られた.その結果は,砕屑物の粒度組成から堆積時の運搬様式が推定できるというこれまでの研究結果が,一面的なもので,本質的には間違った理解であったことを強く示している.すなわち,堆積物の粒度組成は,オリジナルな物質(実験に使用した砂)の粒度組成によって基本的に支配されるのである.この研究の過程で,オリジナルの物質の粒度組成で堆積物の組成を規格化すると,同じパターンになることを発見した.特に,浮流する粒子群では,特定の粒度のものが選択的に多く含まれることはなく,ある粒度より細かいものが同じ割合で水流中に存在すること,さらに,なだれ落ちる粒子群や躍動する粒子群はごく短い移動でも,粒度分布を変化させること,乱泥流の堆積物の粒度組成は浮流によるものと同じであること等がわかった.地層となった堆積物の粒度組成から,堆積当時の水理条件を推定することは,非常に難しいということである.また,自然界でのオリジナルな物質とは何かを知る試みは,砕屑物の粒度組成を新しい面から理解することにつながる次のステップと思われる.地層を構成する砕屑物の粒度組成から堆積環境,特に水理条件や運搬様式が推定できるという研究報告は,古くから多い.水路実験で砕屑物をさまざまな様式で運搬させ,その過程での粒度組成の変化を明らかにし,過去の堆積物から水理条件や運搬様式を推定することが,この研究の目的である.この研究で行った水路実験では,高精度の流速計の導入で,さまざまな水理条件での質の高い実験結果が得られた.その結果は,砕屑物の粒度組成から堆積時の運搬様式が推定できるというこれまでの研究結果が,一面的なもので,本質的には間違った理解であったことを強く示している.すなわち,堆積物の粒度組成は,オリジナルな物質(実験に使用した砂)の粒度組成によって基本的に支配されるのである.この研究の過程で,オリジナルの物質の粒度組成で堆積物の組成を規格化すると,同じパターンになることを発見した.特に,浮流する粒子群では,特定の粒度のものが選択的に多く含まれることはなく,ある粒度より細かいものが同じ割合で水流中に存在すること,さらに,なだれ落ちる粒子群や躍動する粒子群はごく短い移動でも,粒度分布を変化させること,乱泥流の堆積物の粒度組成は浮流によるものと同じであること等がわかった.地層となった堆積物の粒度組成から,堆積当時の水理条件を推定することは,非常に難しいということである.また,自然界でのオリジナルな物質とは何かを知る試みは,砕屑物の粒度組成を新しい面から理解することにつながる次のステップと思われる.砕屑物の粒度組成を決定する水理条件や,同じ運搬様式で運ばれる砕屑物集団の粒度組成を,大阪大学にある造波装置付循環水路や粒度分析装置を用いて実験的に解明することを目的としている.そしてこの実験結果を,砕屑物に適用して,地層から水理条件を推定する.7年度の実験では,一方向流のマイクロデルタ,リップル,平滑床で行った.高精度の流速計の導入で,質の高い実験が可能になった.その結果,オリナルな物質(実験に使用した砂)の粒度組成が,堆積物の粒度組成を基本的には支配していること,オリジナルの組成で堆積物の組成を規格化すると,同じパターンになることなどが確認できた.特に,浮流する粒子群では,特定の粒度のものが選択的に多く含まれることはなく,粒度の存在比は初めの粒度分布と同じであること,さらに,なだれ落ちる粒子群や躍動する粒子群はごく短い移動でも,粒度分布を変化させることがわかった.また,7年度には乱泥流についても同じ実験を行った.乱泥流の中での粒度分布を知ることは,大きな意味がある.それは,乱泥流の堆積物であるタ-ビダイトが世界各地の造山帯に厚く分布し,わが国でもさまざまな時代の地層から広く見られるからである.乱泥流でも一般の流れ同様のことが成り立つ場合と,そうでない場合があることがわかった.今後,データの集積をしてさらなる解析を試みる.砕屑物の粒度組成を決定する水理条件や,同じ運搬様式で運ばれる砕屑物集団の粒度組成を,実験水路や粒度分析装置を用いて実験的に解明することを目的としている.本年度の実験では,高精度の流速計の導入で,さまざまな水理条件での質の高い実験結果が得られた.その結果は,砕屑物の粒度組成から堆積時の運搬様式が推定できるというこれまでの多くの研究結果が,一面的で,本質的には間違った理解であったことを強く示唆している。すなわち,堆積物の粒度組成は,オリジナルな物質(実験に使用した砂)の粒度組成によって基本的に支配されていること,オリジナルの組成で堆積物の組成を規格化すると,同じパターンになることなどが分かった.特に,浮流する粒子群では,特定の粒度のものが選択的に多く含まれることはなく,ある粒度より細かいものが同じ割合で水流中に存在すること,そして,なだれ落ちる粒子群や躍動する粒子群はごく短い移動でも,粒度分布を変化させることがわかった.

さらに,実験水路で堆積させた乱泥流堆積物の粒度組成は,そのオリジナルの粒度組成での規格化によって,浮流によるものと同じパターンであることが新しくわかった.この実験結果は地層となった堆積物の粒度組成から当時の水理条件を推定することは,非常に難しいということを示している.また,さまざまな環境毎の粒度組成の特徴を,オリジナルの物質での規格化というパターンで眺めることは,今後の課題であり,自然界でのオリジナルな物質とは何かを知る試みは,砕屑物の粒度組成を新しい面から理解することにつながると思われる.
原始太陽系の解剖学

同位体顕微鏡による隕石の解剖学を実施し,隕石のいわゆる『解体新書』を作成した.その成果に基づき,太陽系創世時代とそれに直接つながる先太陽系時代の物質進化を解明し,物質に刻まれた証拠に立脚する宇宙における太陽系の特殊性と一般性を区分した新しい太陽系起源論を構築した.太陽系形成以前に宇宙空間に存在していた物質が隕石中に現存している事が特定されたことにより,我々の自然史を太陽系創世時代を越え先太陽系時代に至るまで実証できる可能性が大きくなっている.本研究では,我々により推進してきた同位体顕微鏡による隕石の微細解剖学をさらに発展させ,隕石のいわゆる『解体新書』を作成する。その成果に基づき,太陽系創世時代とそれに直接つながる先太陽系時代の物質進化を解明し,宇宙における太陽系の特殊性と一般性を区分した新しい太陽系起源論を構築する。そして物質に刻まれた証拠に立脚した汎惑星系起源の構築に挑戦する。具体的には,以下の課題を研究する.(1)隕石中の先太陽系時代の物質を系統的に探索し,その物質の同位体組成と形成年代を分析し,銀河内の物質循環を解析する.(2)太陽系における酸素同位体異常とその他元素の同位体的均質性の起源と進化の解明を行い,分子雲時代から太陽系創成時代に至る物質進化のダイナミックスを解析する.(3)太陽系創世時代における物質大循環に伴う物質進化とそのメカニズムを解析する.同位体顕微鏡による隕石の解剖学を実施し,隕石のいわゆる『解体新書』を作成した.その成果に基づき,太陽系創世時代とそれに直接つながる先太陽系時代の物質進化を解明し,物質に刻まれた証拠に立脚する宇宙における太陽系の特殊性と一般性を区分した新しい太陽系起源論を構築した.本研究では,我々により推進してきた同位体顕微鏡による隕石の解剖学をさらに発展させ,隕石のいわゆる『解体新書』を作成する。具体的には「始原隕石中にのこる先太陽系時代の物質の系統的な研究」,「太陽系における酸素同位体異常とその他元素の同位体的均質性の起源と進化の解明」,「太陽系創世時代の物質進化」の課題に取り組み目的を達成する。本年度は以下の研究成果が得られた。1.始原的隕石の中から,すなわち,炭素質隕石・普通隕石・エンスタタイト隕石から,より始原状態を維持しているものを高輝度高分能走査電子顕微鏡を用いて選定し,分析試料を作成した。2.太陽系を作った原材料物質の起源と種類を解明するため,隕石中において先太陽系時代に形成した物質の広域探索を行い,隕石の種類毎に先太陽系物質の特徴・存在度についてデータベース作成を開始した。3.太陽系の平均酸素同位体組成を解明するため,太陽系創世時代の太陽風の酸素同位体組成の測定に着手した。4.同位体異常の起源と進化を解明するために,隕石マトリックスに存在する鉱物の^<16>Oに富む物質と,その逆に, ^<17, 18>Oに富む物質の存在度と分布をサブミクロン分解能をもつその場同位体イメージ分析により決定した。5.太陽系創世期の物質進化を解明するため,短寿命核種^<26>Alを用いた年代測定をより精密に行う事が可能となる様に同位体顕微鏡のセクターマグネット磁場強度安定制御のハードウェア開発を行った。本研究では,我々により推進してきた同位体顕微鏡による限石の解剖学をさらに発展させ,隕石のいわゆる『解体新書』を作成する。1.始原隕石は地球に落下する三大隕石種,すなわち,炭素質限石・普通隕石・エンスタタイト隕石から始原状態を維持しているものを高輝度高分能走査電子顕微鏡を用いて選定し,分析試料の作成をした。2.太陽系を作った原材料物質の起源と種類を解明するため,隕石中において先太陽系時代に形成した物質の広域探索を行い,隕石の種類毎に先太陽系物質の特徴・存在度についてデータベース作成を行った。3.太陽系の平均酸素同位体組成を解明するため,太陽系創世時代の太陽風の酸素同位体組成の測定に成功した。4.同位体異常の起源と進化を解明するために,金属元素の同位体異常の空間分布についてその場同位体イメージ分析を開始した。5.同位体ナノスコープの要素技術である試料観察用光学顕微鏡を開発した。6.同位体ナノスコープの要素技術である試料分析時のチャージアップを軽減するチャージニュートラライザを開発した。7.隕石母天体上に存在した太陽系形成当時の水を直接分析するためコールドステージの開発を開始した。本研究では,我々により推進してきた同位体顕微鏡による隕石の解剖学をさらに発展させ,隕石のいわゆる『解体新書』を作成する。

具体的には「始原隕石中にのこる先太陽系時代の物質の系統的な研究」,「太陽系における酸素同位体異常とその他元素の同位体的均質性の起源と進化の解明」,「太陽系創世時代の物質進化」の課題に取り組み目的を達成する。本年度は以下の研究成果が得られた。1.隕石から始原状態を維持しているものを高輝度高分能走査電子顕微鏡を用いて選定し,分析試料の作成を継続した。2.太陽系を作った原材料物質の起源と種類を解明するため,隕石の種類毎に先太陽系物質の特徴・存在度についてデータベース作成を継続した。3.太陽系の平均酸素同位体組成を解明するため,太陽系創世時代の太陽風の酸素同位体組成の測定を継続した。4.同位体異常の起源と進化を解明する鍵は,マトリックス鉱物の同位体の空間分布を測定することである。16Oに富む物質と,逆に17,18Oに富む物質の存在度と分布の測定を継続した。又,金属元素の同位体異常の空間分布についての分析を継続した。5.太陽系創世期の物質進化を解明するため,短寿命核種26Alを用いた年代測定を適用し,太陽系創世時代の物質進化タイムスケール解明研究を継続した。6.同位体ナノスコープの要素技術である飛行時間型質量分析部に周回同期イオンゲートを開発した。7.小型同位体顕微鏡を組立て,隕石分析体制を強化した。8.隕石母天体上に存在した太陽系形成当時の水を直接分析するためコールドステージを開発した。9.太陽系形成初期の熱環境を再現する実験を開始した。本研究では,我々により推進してきた同位体顕微鏡による隕石の解剖学をさらに発展させ,隕石のいわゆる『解体新書』を作成する。その成果に基づき,太陽系創世時代とそれに直接つながる先太陽系時代の物質進化を解明し,宇宙における太陽系の特殊性と一般性を区分した新しい太陽系起源論を構築する。そして物質に刻まれた証拠に立脚した汎惑星系起源の構築に挑戦する。1.始原隕石は地球に落下する三大隕石種から始原状態を維持しているものを選定し,分析試料の作成を継続した。3.太陽系の平均酸素同位体組成を解明するため,太陽系創世時代の太陽風と小惑星上の流体包有物の酸素同位体組成の測定を継続した。4.サブミクロン分解能をもつ同位体イメージングを用いて16Oに富む物質と,逆に17,18Oに富む物質の存在度と分布の測定を継続した。5.太陽系創世期の物質進化を解明するため,隕石中のCAIとコンドリュールの短寿命核種26Alを用いた年代測定を適用を行い,太陽系創世時代の物質進化タイムスケール解明研究を継続した。6.同位体ナノスコープを組み上げ隕石分析体制を強化した。7.酸素同位体交換反応の基礎
薄膜形状記憶材料としての鉄系合金の可能性

非鉄合金の熱弾性型マルテンサイト変態や鉄系形状記憶合金の一つであるFe-Mn-Si合金のオーステナイト(γ,FCC)-ε(HCP)マルテンサイト変態では、薄膜材とバルク材において生成するマルテンサイトの形態や結晶学等の変態挙動はほとんど同じであるとされている。一方、鉄系合金での形状記憶効果を示すもう一つのマルテンサイトである薄板状α'(BCC or BCT)マルテンサイトについては薄膜試料からの変態挙動に関する研究はない。本研究は鉄系形状記憶合金であるFe-Ni-Co-Ti合金の薄板状α'マルテンサイトについて、試料膜厚を変化させたときマルテンサイトの形態、内部組織及び結晶方位関係の変化を明らかにすることを目的として行った。供試材としてMs点が83KであるFe-31Ni-10Co-3Ti(mass%)合金を用いた。試料を1473Kでそれぞれy化した後,厚さ5mm,0.5mm,30μm,l00nm-1(透過型電子顕微鏡用試料)の試料を作製した。これらの試料に液体窒素温度で深冷処理を行いマルテンサイトを得た。マルテンサイトの形態および生成挙動は昨年度購入した光学顕微鏡用加熱冷却ホルダを使用し観察を行った。また、内部組織観察、結晶方位関係の解析には透過型電子顕微鏡を使用した。以下に今年度の研究成果を示す.5mm及び0.5mm厚の試料では従来の報告通り{112}α'双晶がマルテンサイト内を貫通した薄板状の形態であった。このマルテンサイトのオーステナイトに対する結晶方位関係はほぼN関係であり,現象的理論による計算結果とも良く一致していた。30μmの試料では薄板状のマルテンサイトに加えて,従来報告のない曲面を持った形態を見いだした。一方100nm厚のTEM薄膜では、試片周縁部ではマルテンサイト変態が起こらない領域が存在し,マルテンサイトの界面は直線的ではなく複雑に曲がった形態を示していた。このマルテンサイトの内部組織を観察したところ、5mm厚のバルク材及び0.5mm厚の試料の場合と同様に{112}α'双晶が観察されたが、双晶比はバルクと異なりばらついていた。またマルテンサイトとオーステナイトの結晶方位関係は,5mm厚のバルク材及び0.5mm厚の試料の場合と異なりN関係からのばらつきが大きいものであった。種々の厚さのFe-31Ni-10Co-3Ti合金薄膜(オーステナイト粒径約700ミクロン)において生成したα'マルテンサイトの形態,内部組織および結晶学を透過型電子顕微鏡観察により調べた.その結果以下のことが明らかとなった.(1)100ミクロン以上の厚さの薄膜試料では,バルク材(厚さ5mm)と同様に博板状のマルテンサイトが生成する.その内部組織は完全双晶である.マルテンサイトがオーステナイト母相に対してNishiyamaの関係に近い方位関係を満たす.厚さが約0.1ミクロンの薄膜におけるマルテンサイトの生成量は,100ミクロン以上の厚さの薄膜やバルク材と比べて非常に多い.マルテンサイトの形態は不定形で明確な晶癖面を持たない.またマルテンサイトとオーステナイトの間の結晶方位関係は,K-S,NishiyamaもしくはG-T関係とも5度程度異なる.非鉄合金の熱弾性型マルテンサイト変態や鉄系形状記憶合金の一つであるFe-Mn-Si合金のオーステナイト(γ,FCC)-ε(HCP)マルテンサイト変態では、薄膜材とバルク材において生成するマルテンサイトの形態や結晶学等の変態挙動はほとんど同じであるとされている。このマルテンサイトの内部組織を観察したところ、5mm厚のバルク材及び0.5mm厚の試料の場合と同様に{

112}α'双晶が観察されたが、双晶比はバルクと異なりばらついていた。またマルテンサイトとオーステナイトの結晶方位関係は,5mm厚のバルク材及び0.5mm厚の試料の場合と異なりN関係からのばらつきが大きいものであった。
修復象牙質形成におけるBMP-1のプロテアーゼ活性非依存的機能の解明

加えてBMP-1がヒト歯髄培養細胞の膜タンパク質の糖鎖修飾を促進することを見出した。以上の結果は、修復象牙質形成におけるBMP-1の新たな役割を明らかにした。本研究は、齲蝕に対する象牙質・歯髄複合体の防御反応のひとつである修復象牙質形成の機序を歯髄細胞が産生する分泌タンパク質およびプロテアーゼに着目して解明し、歯髄保存療法へと応用することを目的としている。CCN2/CTGFはosteogenesis / chondrogenesisの際に発現が亢進することが報告されており、歯髄でのCCN2/CTGF発現亢進は骨様の修復象牙質形成と密接な関連があると考えられる。また、BMP-1は象牙質の基質となるtypeI collagenやdentin phosphoprotein (DPP)、dentin sialoprotein (DSP)、dentin matrix protein-1 (DMP-1)の成熟にプロテアーゼとして関与することが報告されている。しかし前述の通り、BMP-1にはプロテアーゼ活性に依存しない新たな働きがあるものと予想された。そこで本研究ではさらに、BMP-1がCCN2/CTGFの発現を誘導する機序について検討を行ったところ、BMP-1がエンドサイトーシスによってヒト歯髄培養細胞に取り込まれCCN2/CTGFの発現を促進することを明らかにした。またこの際にBMP-1はCCN2/CTGFの発現を促進するが、DSPやDMP-1の発現には関与しないことを明らかにした。前年度までの研究では、astacinファミリーに属するメタロプロテアーゼであるbone morphogenetic protein-1 (BMP-1)がCCN family 2/connective tissuegrowthfactor (CCN2/CTGF)の発現を誘導する機序について検討を行い、BMP-1がエンドサイトーシスを経てヒト歯髄培養細胞に取り込まれCCN2/CTGFの発現を促進することを明らかにした。またこの際にBMP-1はCCN2/CTGFの発現を促進するが、dentin sialoprotein (DSP)やdentin matrix protein-1 (DMP-1)の発現には関与しないことを明らかにした。本年度はさらにCCN2/CTGFがヒト歯髄sidepopulation (SP)細胞に及ぼす作用について検討を行うため、まずSP細胞の分取に取り組んだ。現在、1歯から安定して細胞数を分取する方法について検討中である。また並行してヒト歯髄における未分化間葉系幹細胞の局在についても検討を行い、齲蝕歯において象牙芽細胞様細胞層の直下に未分化間葉系幹細胞マーカーのひとつであるThy-1/CD90を発現する細胞が層状に集積することを明らかにした。本年度は、BMP-1がCCN2/CTGFの発現を促進する機序の解明を目的とし、1Dynamin依存性のendocytosisによるBMP-1の細胞内への移行、2BMP-1の細胞における局在、3BMP-1とTRENDICとの結合、の3点について検討を行う計画であった。1、2については推測される結果とほぼ同じ結果が得られた。また、3については現在研究が進行中である。従って、本研究はおおむね順調に進展しているものと考える。医歯薬学前年度までの研究結果から、修復象牙質形成時に出現する象牙芽細胞様細胞の分化にBMP-1およびCCN2/CTGFが関与する可能性が推測される。そこで詳細を明らかにするために、BMP-1およびCCN2/CTGFがヒト歯髄SP細胞に及ぼす働き、特に象牙芽細胞マーカーと骨芽細胞マーカーの発現を比較し、修復象牙質が骨様な性質を有する組織であることの裏付けを検討する。1ヒト歯髄SP細胞の分取ヒト抜去歯から歯髄を無菌的に分離、培養した細胞をhoechst33342で標識し、FACSを用いてhoechst-blue (450 nm)およびhoechst-red (675 nm)ともに陰性である分画の細胞集団をヒト歯髄SP細胞として分取する。2BMP-1およびCCN2/CTGFがヒト歯髄SP細胞の分化に及ぼす作用の検討ヒト歯髄SP細胞をBMP-1およびCCN2/CTGFで刺激後、total RNAを抽出し、Real-time PCR反応を行う。象牙芽細胞マーカーとしてDSPPやnestin、HSP25を、骨芽細胞マーカーとしてosteocalcinやosteopontinを、硬組織の基質となるtypeI collagenなどを標的として検索を行う。特に、修復象牙質は象牙質より骨組織に類似した特徴を示すことから象牙芽細胞マーカーと比較して骨芽細胞マーカーの発現が亢進するとの推測のもと検討を行う。次年度使用額は、当初計画していた論文の受理が次年度になったことにより生じており(平成27年5月に受理)、論文掲載に必要な経費として平成27年度請求額とあわせて使用する予定である。本研究計画を遂行するにあたり抗体や培地に添加する血清などの購入を予定している。

組換えタンパク質は主としてCCN2/CTGFやBMP-1のリコンビナントタンパク質を、ヒト歯髄SP細胞に及ぼす作用について検討するために購入する。抗体はrabbit anti-human DSPPantibodyならびにrabbit anti human nestin antibodyをwestern blottingによるSP細胞の分化の検討のために購入する。なお、osteocalcinやosteopontin抗体はすでに購入しているものを使用する。そのほかに細胞培養に用いるウシ胎児血清や培地、western blottingに用いるECL Primeなどを購入する予定である。本研究で得られた結果は、国内では日本歯科保存学会(春季・秋季の年2回開催)、日本歯内療法学会、日本CCNファミリー研究会、海外ではIADR、The World Endodontic Congressでの発表を予定しており、これを実現するために研究費を使用する。
乳用牛の暑熱適応に関する研究

ホルスタイン種(H)と、ホルスタイン種と黒毛和種の一代雑種(F_1)育成種の暑熱に対する生理反応の相違を明らかにするために、本学附属農場に設置された環境制御室にこれらの牛を収容し、適温(20°C)から高温(30°C)に環境温度を上げた時の直腸温、心肺機能、自律神経機能および血液、胃液性状にあらわれる変化を調べた。高温条件において、Hは採食量の減少、呼吸数の増加、心拍数の減少を来たし、直腸温は高値を示した。一方、F_1では採食量の減少、呼吸数の増加がみられたが、心拍数の減少はみられず、直腸温はホルスタイン種に比べて低かった。すなわち、どちらも採食量の減少による熱産生の抑制ならびに呼吸数増加による気道からの熱放散の促進を示していたが、心拍数と直腸温の変化にHとF_1で明らかな相違がみとめられた。代謝量の指標と考えられる心拍数が、Hで明らかに減少したことは代謝が抑制されたことを示している。しかし、Hでは直腸温が明らかに上昇していたが、F_1のでは軽度で、心拍数は減少せず、むしろ増加する傾向にあった。この両者にみられた反応の違いは、30°Cへの高温負荷条件はHにとっては厳しいもので、心拍数を減らして代謝抑制をはかっても直腸温の上昇を抑えきれない状態にあったが、F_1は採食量の減少と呼吸数増加で対応でき、心拍数を減らさなくても直腸温の上昇を防ぐことができたことによると考えられる。またこのようなH種とF_1にみられた反応の違いは採食後に顕著にみとめられたことから、採食に伴って産生される発酵熱に対する反応の相違も示唆されるところであり、F_1に比べてHは耐暑性に劣る性質を有するものと考えられた。血液のヘマトクリット値、ヘモグロビン濃度、赤血球数、自血球数、総タンパク質濃度、グルコース濃度および遊離脂肪酸濃度のいずれにも遺伝的差異の影響は明らかでなく、血漿3-メチルヒスチジン濃度のみが高温負荷後に上昇し、しかもその変化はHの方が顕著であった。このことは高温により筋肉タンパク質の分解が促進されるが、その度合いはF_1に比べてHの方が大きく、暑熱の影響を受けやすいものと考えられた。胃液の性状では差が認められなかった。高温負荷条件での生理諸元において、暑熱の影響を評価する指標をスクリーニングできた。今年度は、ホルスタイン種(H)とホルスタイン種と黒毛和種の一代雑種(F1)の暑熱に対する生理反応の違いを明らかにするための実験を行った。本学の附属農場に設置された環境制御質にHとF1の育成牛4頭(8か月齢、平均体重150kg)を収容し、適温(20°C)条件で3日間飼育したのち、高温(30°C)条件に換えて、2日間飼育した。