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精神障がい者・知的障がい者と刑事手続き

同事件の控訴審判決を批判的に検討した中島宏「被告人の訴訟能力と刑事手続の打ち切り(名古屋高判平成27年11月16日」法学セミナー738号p126 (2016年)、最高裁判決の妥当性を論証した中島宏「被告人の訴訟能力と手続打切りの可否(最決平成28年12月19日LEX/DB25448338)」法学セミナー747号p126を公刊した。また、過去に発生した類似の事案についての検討として、中島宏「訴訟無能力による長期の公判停止ー訴訟からの解放と医療への接続」訴訟能力研究会編『訴訟能力を争う刑事弁護』pp172-178(2016年、有斐閣)を公刊した。平成27年度・28年度においては、1先行研究の調査と評価、2特定の具体的事案に対する調査と考察に取り組み、相当程度まで進行させることができた。とりわけ、訴訟能力については、わが国の判例法理をリードする最高裁判例が生成される過程を下級審の段階からリアルタイムでフォローアップし、研究成果を時機に即した情報として発信することができた。本研究は、最終的には、1精神障がい者・知的障がい者に対する取調べ方法や供述の信用性判断方法などの準則化や、2訴訟能力の存否の判断方法、3訴訟能力を欠く場合の法的処理のあり方についての具体的提言を目指すものであり、実務での有用性を強く意識したものである。そのためには、理論研究のみならず、実際に発生している事件を研究対象とし、多くの事例の訴訟記録や訴訟関係人への聞き取りなどを通じた実証的研究を行うことを不可欠なステップとしている。この点に鑑みたとき、現時点では、特定の事案に対する研究を深化させることには成功しているが、多数の事例を網羅的に分析することについては、未だ情報収集の段階に止まり、聞き取り調査等の実施を十分に行えていない。また、本研究の性質上不可欠な隣接分野の専門家との共同研究についても、そのためのプラットホームとして「鹿児島法と心理研究会」が存在するが、平成28年度は諸事情のため公開の研究会を開催できず、研究の深化が十分に達成できなかった。研究課題の最終年度を迎えるにあたって、これらの部分の成果が欠落した状況においては、研究全体の進捗が大きく遅れていると言わざるをえない。本研究は、精神障がい者や知的障がい者が被疑者・被告人や証人として刑事裁判に関与する際に生じる訴訟法上の諸問題を検討してその具体的な解決を示すことを目的としたものである。具体的な研究テーマを「精神障がい者・知的障がい者による供述の信用性と取調べ方法」(A群)と「訴訟能力の判断方法と手続き」(B群)に2つに分け、それぞれのケースの収集と分析を行い、隣接諸科学における最新の知見を踏まえた考察を行いつつ、具体的な提言を行うことを目指してきた。平成28年度に引き続き平成29年度においても、テーマA群については、知的障がい者による供述の信用性が問題となった再審事件を主たる素材として研究を進めた。同事件については、平成29年6月に地裁で再審開始決定が、また平成30年3月に高裁で即時抗告棄却決定が出たが、供述の信用性を弾劾する新証拠の評価を異にしているため、それぞれの妥当性を分析した。その成果は、平成30年5月に電子媒体で公開する予定である。また、これに関連して2017年9月23日、宮崎市において講演「第3次再審開始決定の意義」を行った。テーマB群については、平成28年12月に訴訟能力の回復可能性を否定して手続きを打ち切る最高裁決定が出た後、全国で公訴棄却や公訴取り消しによる手続き打ち切り事例が発生したため、これらについての聞き取りや資料整理を進めた。また、これとも関係する理論史の共同研究(松尾理論を担当)に参加した。以上を踏まえ、実務への具体的な提言を示すのが本研究のゴールであるが、最終年度中には成果を公刊できなかった。引き続き論考の執筆を進め、平成30年度中に成果を公にする予定である。
プリンヌクレオシドによる新規歯槽骨代謝制御機構のin vivo解析

本研究課題では、プリンヌクレオシドの一つであるアデノシン、(Ado)に着目し、骨代謝制御機構における役割について解析をすすめている。平成20年度の研究成果について下記に報告する。まず、骨芽細胞分化過程におけるAdoの濃度調節因子およびアデノシンレセプター(AdoR)の発現を解析した。マウス前骨芽細胞株MC3T3-E1、を石灰化誘導培地にて培養し、経時的にRNAを採取、Ado産生酵素であるCD73、Ado代謝に関与するアデノシンデアミナーゼ(ADA)及びアデノシンキナーゼ(AK)の両酵素、さらにはAdoRの遺伝子発現を解析した。その結果、CD73、A2aおよびA2bサブタイプAdoRは分化に伴い発現が上昇することが明らかとなった。一方で、ADAならびにAKは分化誘導初期に発現上昇を認めたが、後期にかけて抑制された。これらの結果は骨芽細胞分化誘導に伴い、内因性Adoのシグナルが増強されている可能性を示唆している。さらに内因性Ado産生に関与するCD73分子のin vivoにおける骨代謝への関与を明らかにするために、CD73ノックアウトマウス(以下CD73KO)の骨組織における表現型を解析した。まず、CD73KO及び野生型コントロールマウスから大腿骨、脛骨を採取し、μCT及びpQCTを用いて骨量の解析を行なった。その結果、CD73KOは野生型マウスに比べ、海綿骨、皮質骨において骨量が減少していることが明らかとなった。さらに頭蓋骨からRNAを採取し、骨芽細胞分化マーカーである骨シアロタンパク、オステオポンチン、オステオカルシンの遺伝子発現を解析したところ、CD73KO由来頭蓋骨では野生型に比べ、これら遺伝子発現が有意に低下していることが明らかとなった。以上の結果からCD73分子によって産生された内因性Adoが骨形成において重要な役割を担っていることが示唆された。
B細胞分化・多様化を制御する抗原受容体シグナルにおけるBASH/BLNKの役割

B細胞特異的アダプターBASH/BLNKを欠損するマウスを作製し解析したところ、キメラマウスの解析結果と一致して、成熟B細胞の減少、BCR刺激に対する低反応、腹腔B1細胞の欠如、抗体産生低下、骨髄大型プレB細胞の蓄積などがみられた。脾臓B細胞のL鎖は、正常では約6%がλ鎖陽性であったが、BASH-/-B細胞では約1-2%にすぎなかった。また、κ鎖遺伝子のRS組換えがBASH-/-B細胞では減少していた。これより、BASH-/-B細胞は分化過程でreceptor editingを起こす頻度が低下していると考えられた。従って、BASH-/-マウスでは自己抗原に対するトレランスが不十分である可能性がある。一方、IgH a/b両アレルを有するBASH-/-マウスを作製して、H鎖対立遺伝子排除を調べたが、両アレルを同時に発現するB細胞は骨髄にも脾臓にもなく、H鎖対立遺伝子排除は正常であった。また、BASH-/-未熟B細胞は正常B細胞と比べて培養中にアポトーシスを起こしやすかった。以上の結果より、BASHは1)骨髄未熟B細胞において自己抗原認識によって誘導されるreceptor editing、2)末梢B細胞の定常状態での生存、を誘導するBCRからのシグナル伝達に重要であるが、H鎖対立遺伝子排除を誘導するpreBCRシグナル伝達には必要でないことが新たに明らかになった。BASHのC末端に位置するSH2ドメインの機能を理解するために、SH2ドメインに結合する蛋白を探索した。その結果、BCR刺激後チロシンリン酸化されたHPK1が直接このSH2ドメインに結合することを見出した。HPK1はMAP4Kに属するSer/Thrキナーゼで、造血系細胞に選択的に発現するが、その役割は不明であった。さらに我々は、BCR刺激によりHPK1キナーゼ活性が誘導され、この活性化にはBASHのSH2ドメインとの結合が必要であることを明らかにした。
古代伊勢神宮に関する基本文献の総合的研究

皇學館大学附属図書館所蔵の『荒木田久老校合内宮儀式帳』・『黒瀬益弘書写外宮儀式帳』を底本として、これまでに刊行された『群書類従』・『日本祭礼行事集成』・『神道体系』の各校訂本の成果を整理統合し、中川経雅の『大神宮儀式解』、静嘉堂文庫所蔵『谷川士清・士逸書入内外太神宮儀式帳』、橋本正兌の『外宮儀式解』、村主政方の『等由気宮儀式帳鈔』を比校に用いて、『「皇太神宮儀式帳」校訂試案』・『「止由宮儀式帳」校訂試案』を作成した。この校訂本の作成によって、これまで蓄積された校訂の成果を整理統合するとともに、新たに近世以来の神宮祀官・研究者の成果をも吸収した現在までの学術水準による緻密な校訂を提供できた。1皇學館大学所蔵『荒木田久老校合内宮儀式帳』を底本として『皇太神宮儀式帳』の校訂試案を作成した(佐野真人〔研究分担者〕「『皇太神宮儀式帳』校訂試案〔『皇學館大学研究開発推進センター紀要』第2号、平成28年3月1日発行〕)。この校訂試案は、これまでに刊行されていた『群書類従』・『新訂群書類従』・『日本祭礼行事集成』・『神道大系』の校訂本の研究成果を整理統合し、さらに中川経雅の『大神宮儀式解』、静嘉堂文庫所蔵『谷川士清・士逸自筆書入内外太神宮儀式帳』を比校に用いている。この研究成果は、これまでに蓄積された校訂の成果を整理統合するとともに、新たに近世以来の神宮祀官・研究者の成果をも吸収した現在の学術水準による緻密な校訂を提供できた。2『延暦儀式帳』の写本調査として、大倉精神文化研究所附属図書館貴重コレクション『大名榊原家文庫』所蔵の『大神宮儀式帳(内宮・外宮)』全2冊(請求番号ウア1 109-12)・『大神宮儀式帳』全2冊(請求番号ウア1 110-12)、金沢大学附属図書館暁烏文庫所蔵の『儀式帳外宮全』(請求番号A175.82/G532)、富山市立図書館山田孝雄文庫所蔵の『皇太神宮儀式帳』・『止由気宮儀式帳』の調査を実施し、複写物等を入手した。3國學院大學が所蔵する『皇太神宮儀式帳』・『止由気宮儀式帳』の写本合計6本の複写物を入手した。4「古代伊勢神宮に関する基本文献の総合的研究」研究会において、研究分担者・連携研究者とともに『皇太神宮儀式帳』の輪読を行った(第8回5月13日・第9回6月24日・第10回7月29日・第11回10月7日・第12回11月18日・第13回2月12日・第15回3月23に開催)。全国に所蔵される『延暦儀式記帳』の写本及び注釈書の調査を担当するはずであった研究分担者の山口剛史氏(皇學館大学研究開発推進センター助教)が、当該研究申請後の平成26年12月30日急逝し、各所蔵機関への調査等は佐野真人氏(皇學館大学研究開発推進センター助教)が一人で担当することとなったため、当該計画よりも写本及び注釈書の調査の部分で遅れが生じてしまった。1.皇學館大学所蔵『黒瀬益弘写外宮儀式帳』を底本として『止由気宮儀式帳』の校訂試案を作成した(佐野真人〔研究分担者〕「『止由気宮儀式帳』校訂試案」〔『皇學館大学研究開発推進センター紀要』第3号、平成29年3月1日発行〕)。この校訂試案は、これまでに刊行されていた『群書類従』・『日本祭礼行事集成の』・『神道大系』の各校訂本の成果を整理統合し、さらに橋本正兌『外宮儀式解』、静嘉堂文庫所蔵『谷川士清・士逸自筆書入内外儀式帳』を比校に用いている。この研究成果は、これまでに蓄積された校訂の成果を整理統合するとともに、新たに近世以来の神宮祀官・研究者の成果をも吸収した現在までの学術水準による緻密な校訂を提供できた。2.「古代伊勢神宮に関する基本文献の総合的研究」研究会において、研究分担者・連携研究者とともに『皇太神宮儀式帳』の輪読を行った(第15回4月27日、第16回6月1日、第17回6月22日、第18回7月27日、第19回10月5日、第20回11月16日、第21回12月21日、第22回2月1日、第23回3月15日に開催)。平成28年度は『皇太神宮儀式帳』のうち、神宮式年遷宮諸祭に関する事項を訓読し、注解原稿の草案を作成した。3.静嘉堂文庫・筑波大学付属図書館・宮内庁書陵部・津山郷土博物館・愛媛大学附属図書館・大洲市立図書館・前田育徳会尊経閣文庫・島原市立図書館松平文庫・国立国会図書館(東京本館)・鶴舞中央図書館において、『延暦儀式帳』・『延喜式』をはじめ神宮関係古典籍の調査を実施し複写物・写真を入手をした。

特に津山郷土博物館で江戸時代の有職研究家である藤原貞幹自筆の『延暦儀式帳考注』を、静嘉堂文庫ではその附録図と考えられる藤原貞幹自筆の『新修太神宮図』・『新修豊受太神宮図』を発見したことは、特筆すべき成果である。当初の計画どおりに、平成27年度に『皇太神宮儀式帳』の校訂(佐野真人〔研究分担者〕「『皇太神宮儀式帳』校訂試案」〔『皇學館大学研究開発推進センター紀要』第2号、平成28年3月1日発行〕)、平成28年度に『止由宮儀式帳』の校訂(佐野真人「『止由気宮儀式帳』校訂試案」〔『皇學館大学研究開発推進センター紀要』第3号、平成29年3月1日発行〕)を完了したことが、順調に当該研究が進展している理由である。1佐野真人『「皇太神宮儀式帳」校訂試案』(『皇學館大学研究開発推進センター紀要』第2号、平成28年3月1日刊行)をもとににして、『皇太神宮儀式帳』の訓読文原案を作成した。2「古代伊勢神宮に関する基本文献の総合的研究」研究会において、研究分担者・連携研究者とともに『皇太神宮儀式帳』の輪読を行った(第24回4月26日、第25回5月24日、第26回6月28日、第27回7月26日、第28回11月22日、第29回12月27日、第30回2月1日)。平成29年度は、神宮式年遷宮諸祭に関する事項のうち、「新宮造奉時行事並用物事」(山口祭・木本祭・鎮地祭・御船代祭などの事項)を終了し、「新宮遷奉御装束用物事」(御装束・御神宝の調製に関する事項)の訓読を開始し、注解原稿の草案を作成した。3東京都立中央図書館5点、神宮文庫所蔵9点、東洋文庫2点、玉川大学2点、国文学研究資料館8点の「延暦儀式帳」古写本及び「延暦儀式帳」注釈書を調査・蒐集をおこなった。特に主要な「延暦儀式帳」に関する注釈書の調査のみならず、御装束・御神宝に関する文献の調査などを実施し、古代伊勢神宮に関する基本文献の総合的に活用した研究に展開することができた。皇學館大学附属図書館所蔵の『荒木田久老校合内宮儀式帳』・『黒瀬益弘書写外宮儀式帳』を底本として、これまでに刊行された『群書類従』・『日本祭礼行事集成』・『神道体系』の各校訂本の成果を整理統合し、中川経雅の『大神宮儀式解』、静嘉堂文庫所蔵『谷川士清・士逸書入内外太神宮儀式帳』、橋本正兌の『外宮儀式解』、村主政方の『等由気宮儀式帳鈔』を比校に用いて、『「皇太神宮儀式帳」校訂試案』・『「止由宮儀式帳」校訂試案』を作成した。この校訂本の作成によって、これまで蓄積された校訂の成果を整理統合するとともに、新たに近世以来の神宮祀官・研究者の成果をも吸収した現在までの学術水準による緻密な校訂を提供できた。1「『止由気宮儀式帳』校訂試案」を『皇學館大学研究開発推進センター紀要』第3号(平成29年3月刊行予定)に掲載する予定である。2連携研究者として小林郁氏(皇學館大学研究開発推進センター助手)を加え、全国の所蔵機関への写本調査・複製の収集体制を強化する。3「古代伊勢神宮に関する基本文献の総合的研究」研究会において、『皇太神宮儀式帳』の輪読を継続する。1「古代伊勢神宮に関する基本文献の総合的研究」研究会において、『皇太神宮儀式帳』の輪読を継続する。特に平成29年度は神宮式年遷宮に関わる御装束神宝の調進が主な輪読項目である(担当者:岡田芳幸〔研究分担者〕)。2『皇太神宮儀式帳』の輪読項目が御装束神宝であることから、注解原稿作成の手がかりとして、全国にある神宮関係古典籍の所蔵機関において、『御装束神宝図』の調査を精力的にすすめ、その複製の収集を強化する。日本古代史研究分担者であった山口剛史氏(皇學館大学研究開発推進センター助教)が当該研究申請後の平成26年12月30日に急逝したために、山口氏に配分予定であった物品購入費、写本調査のための出張経費、複写のための費用等が使用できずに残ってしまったため。1津山郷土博物館所蔵『伊勢太神宮儀式帳考註』の複写が、所蔵機関の指定業者による撮影ではなく、閲覧者が調査時に自身が持参したカメラで撮影することになっていたため複写に関する費用が発生しなかったため。
海馬神経回路シ-タリズム発現による関係記憶の生成機構

海馬が担う記憶は、陳述記憶や空間認知に関連しており知覚入力をそのまま固定するのでなく、入力情報相互の関係、さらに入力情報と内部的な記憶との関係を作り出すことによって生成される記憶である。本研究では、海馬固有の関係性としての記憶生成機能を、「振動同期仮説」の上にたって、神経回路モデル上での情報処理原理として明らかにすることを目的としている。数理的なツールとして、位相で神経ユニットを記述する方法を提案した。活動は固定点型とリミットサイクル型のアトラクターのいずれかにより現れ、種々アトラクターの相互作用として記憶相互の関係としてダイナミックスが生成される。このユニットを用いて海馬体の神経構造とシ-タリズム特性を簡単化した学習モデルを提案した。シナプス可塑性ルールとしてコバリアンスルールを用いる。教師は回路における同期性を境界条件として制御する。境界での振動の同期性が遠達的に働いて、層間結合が選択的に成長して同期が得られ、相関学習が達成されることを示した。学習後の記憶想起は各ユニットの同期として現れ、複雑な入力が入った場合には位相による図と地の分離能力を示した。本来の海馬体神経回路においては境界が再帰的に結合することにより教師シグナルが回路から分離できない構造になっており、海馬体への2種の入力の整合性を拘束条件として海馬内の回路への関係生成が起きることになる。これらの知見は、海馬と新皮質での相互作用としての記憶生成を解明するための手掛かりとなる。
海洋神話の比較研究

世界の海洋神話をオセアニアから北海まで、瀬戸内海や黒海などの内海もふくめてひろく検討した。最初は沖縄で海の神話についてシンポジウムを行い、ついで竜宮神話、補陀落渡海神話、洪水神話、海の怪獣、海神と妖怪などについて海外の研究者の参加ももとめてシンポジウムをおこなった。最後に2005年1月には鳥取でイナバノシロウサギ神話を海洋神話の文脈で考えるシンポジウムを鳥取大学との共催でおこなった。因幡のシロウサギ伝承はインドネシアから揚子江流域、アムール川流域にまで分布する国際話形で、渡海の意味と機能が問題となっているものである。海洋神話の比較研究はこのように、いままで海の神話とは考えられてこなかったものも海の文化があることをあきらかにするという発見もあった。また、それまで犂や織機などの技術の伝播にともなう説話の分布を考えていて、技術文化のとぼしいオセアニアやアメリカ先住民、シベリア諸部族の伝承にあまり目をくばらなかったが、この4年間は、より基本的な技術としての航海や旅行、農耕、漁労などの「技術」の伝播を考えることによって、オセアニアやシベリアに重要な神話伝承の文化があることがわかった。竜宮や観音浄土などの信仰は世界に共通して存在し、それは洪水伝承の裏返しともなることもわかった。この成果は単行本として発表した「世界の洪水神話」(勉誠社)や、雑誌「アジア遊学」の特集号、あるいはフランスの学術雑誌IRISや、ソルボンヌ出版局の学術書「水の神話」などでも公表された。また丸山の「古代文学と琉球説話」はこの間のわれわれの海洋神話研究の集大成ともみなされるものであり、水野の「生と死の北欧神話」とともに成果としてほこりうるものである。あるいは、「神話・象徴・文学」23においても全メンバーの研究論文が公表されているほか、シンポジウムは毎回、プロシーディングが刊行され、その総ページ数は1000ページをこえている。七月-九月にかけて、篠田、松村、水野、山本吉田がそれぞれフランス、イタリア、ギリシャ、北欧へおもむき、調査および情報交換、シンポジウムでの報告などをおこなった。丸山は沖縄へ長期調査に赴いた。九月には名古屋で比較神話学シンポジウムを開催、グルノーブルのワルテル、ヴァモール、シュネのほか、ソルボンヌのトマセなどをむかえ、国内からは内藤正敏、鎌田東二、山本ひろ子、廣田律子などの参加を得て「鬼」のテーマの東西の比較をした。そこでは海より来る鬼の形象がとくに注目された。その後、十月には、篠田が別経費(大学校費)でインド洋のレユニオン島へおもむき、シンポジウムに参加、島内の庶民信仰の実態を調査した。一月には水野を除く全員で、沖縄に調査に赴き、沖縄国際大学の民俗調査グループと情報交換をし、シンポジウムを開いた。篠田は『龍宮』神話について、目崎は沖縄と伊勢に共通して見られる「海のおおわらじ」の祭礼と伝承について、松村はロビンソン物語の孤島のテーマ、山本は浦島について、吉田はギリシャの海の神話について発表、ワルテルはヨーロッパの海の神話を総括した。また、最後に目崎がミクロネシア調査におもむき、松村は京都の2月の田植え祭りを調査した。この間、世界の海洋神話および海洋文化について文献調査および共同討議によって問題点をほりおこし、日本では瀬戸内海の神話を主としてとりあげること、そこでは厳島信仰、金毘羅信仰、住吉信仰を宗像伝承や、「平家物語」などとの関連をたどりながら調べること、地中海では、ギリシャのアルゴー船神話やオデュセイアのほか、エジプト、オリエント、小アジアの神話を調べることが確認され、そのほか、インド洋の調査の必要性も確認された。

インド洋についてはレユニオン大学の研究チームとも接触して手がかりをつかんだが、ペルシャ湾に近いあたりではイランの「緑の島」伝承も注目された。そして、今後、この方面をさぐるために、インド洋圏文化をしらべている鈴木正崇、重松伸司などの協力ももとめることになり、鈴木とは十月の「サルタヒコフォーラム」で情報交換をした。このフォーラムに招聘したエジプト学のトロネッケル・ストラスブール大学教授、ギリシャ考古学のレヴェック教授とは、ともに伊勢二見の興玉神社の調査などをした。世界の海洋神話を比較するために、吉田、松村がギリシャほかへ、山本、篠田がフランスほかへ、丸山、水野が沖縄へ、不破、目崎がイギリスほかへ調査におもむいた。不破はケルト学会で海洋神話について発表した。9月5-6日には和光大学で国際シンポジウムを開催(テーマ。竜宮神話)フランスからワルテル、ヴィーニュ・ブルミエ、ボセットほか、オーストラリアからデュトン、カナダからモリセらが参加した。このシンポジウムの報告書は300ページにのぼる大部なもので、25名の報告がのっている。国内の参加者では学習院の諏訪春雄、和光の山本ひろこ、などの発表が注目された。ここでは世界中に日本の伝承ときわめて類似した竜宮伝承があることが確認されたが、ヨーロッパではそれがアトランティス伝承に吸収されてゆく傾向にあることが注目された。カナダではもちろんイヌイトの海の女神セドナをめぐる伝承が紹介分析された。ほかにラテンアメリカの文学的伝承としてカサレスの「モレルの発明」がとりあげられ、活発な討諭がなされた。その後、1月に花園大学で国内シンポジウムを「洪水神話」をテーマとして開催、京都大学の小南一郎、関西外語大の三原幸久、摂南大学の依田千百子らの参加をえてアジア、大洋州の伝承などもふくめて討論をした。そこでは沖縄の遠藤庄治から、とくに大洋州の伝承をモンゴロイド神話の文脈で集中的に調査するよう要請があり、その方向で議論がなされた。この成果は近く勉誠出版から刊行される予定である。さらに1月末にはメルボルンのデュトンをむかえ、アポリジニが伝える幻の海についての報告をめぐって討論した。世界の海洋神話の比較研究において、本年度はとりわけ、大洋州についての視野が広がったことが特筆される。この領域の専門家である同志社女子大の後藤明を研究協力者としてむかえ、7月の奈良でのシンポジウム「補陀落渡海」,一月の同志社大でのシンポジウム「海の怪物神話」において、従来のユーラシア大陸中心の比較を全地球的レベルにひろげることができた。7月のシンポジウムでは、海外からフィリップ・ワルテルほかの参加を得、国内では昨年にひきつづき中南米研究の三原幸久、朝鮮研究の依田千百子などの参加もえて、充実した討議ができた。この結果は200ページの報告書として印刷刊行している。なお、補陀落渡海を専門に研究する根井浄にも報告はなかったが、討議には参加してもらうことができた。ここでは世界の諸民族における海洋他界観の概要があきらかになった。一月は『海の怪物神話』として、中国研究の百田弥栄子らの参加もえた。分担者は松村,山本、篠田、目崎がヨーロッパへ、丸山が沖縄,中国へ調査に赴き,とくに丸山は沖縄で,巨魚神話についていままで記録されていなかった伝承を発見するなどおおきな成果をあげた。
骨誘導因子BMP-2による未分化間葉細胞から軟骨細胞への分化誘導機序の解明

軟骨細胞の分化は1)未分化間葉細胞の凝集、2)軟骨細胞への分化・成熟、3)肥大軟骨細胞への分化・石灰化、の3つの過程に分けられる。骨形成因子BMPはin vivoにおいて非骨原性の細胞を軟骨細胞・骨芽細胞へと分化させ、上記の3過程を模倣することができる。そこで我々はBMP-2を用いて未分化間葉細胞から軟骨細胞への分化誘導系を開発し、その分化過程を検討した。ラット胎児筋肉組織から分離した未分化間葉細胞株RMD-1,RME-1細胞は脂肪細胞への分化能を有し、I型コラーゲン、α-smooth muscle actinを発現する未分化間葉細胞細胞である。本細胞I型コラーゲン基質上に高密度に培養しBMP-2を添加すると高率に軟骨細胞に分化したが、このBMP-2刺激により細胞は一過性に増殖し、ノーザンブロットにより刺激後2時間からc-jun mRNAの発現増大が観察された。BMP-2と同時に細胞増殖阻害剤(ハイドロキシウレア)を添加しても細胞分化は起こることからBMP-2刺激による細胞増殖は細胞分化に伴う結果であることが示唆された。本細胞の分化過程に起こる細胞変化をノーザンブロット及びRT-PCRによるmRNAの発現、あるいは免疫細胞染色による蛋白の産生で検討すると、まず刺激後2日目からの副甲状腺ホルモン受容体mRNAの発現に始まり、4日目からII型コラーゲン、IX型コラーゲン、アグリカン、アルカリホスファターゼmRNAの発現が増大した。これに反しI型コラーゲンmRNAは細胞分化につれて減少し消失した。また蛋白レベルでは刺激後3日目にはテネイシン、VI型コラーゲンの発現増強が観察された。本細胞はビタミンCを培養液に添加することでX型コラーゲンを産生する肥大軟骨細胞へと分化したが、このX型コラーゲン産生は甲状腺ホルモンにより増強された。本細胞の軟骨細胞への分化はTGF-β1,2、インスリンにより若干の正の制御を受けるものの、BMP-2依存性であった。このBMP-2刺激は細胞分化を引き起こしつつ、c-Junを介し細胞を増殖させることが示唆された。この後に細胞は分化、成熟するが、分化マーカーとしてのII型コラーゲンの発現より副甲状腺ホルモン受容体、テネイシン、VI型コラーゲンの発現増強がより早かった。またいくつかのホルモンにより制御される肥大軟骨細胞へと分化する頃には副甲状腺ホルモン受容体、テネイシン、VI型コラーゲンの発現が減弱、消失することから初期の細胞分化に何らかの影響を及ぼしていることが考えられた。
太陽光エネルギーを駆動力とする波長応答型重合触媒の開発と高分子構造制御

本研究では、太陽光エネルギーを触媒的有機分子変換反応へと利用可能な反応システムの構築を目指して、種々のクロモフォアを有する有機金属錯体の反応性調査、および新規な可視光吸収クロモフォアの開発を行った。本年度は、1有機及び遷移金属ユニットを組み合わせたバイクロモフォアを有する有機パラジウム錯体を用いた光触媒的重合反応の調査、2π共役系を有する有機ロジウム錯体の合成と光物性に関する研究を進めた。1では、ナフチル基とシクロメタル化イリジウム錯体とを組み合わせたバイクロモフオアに、架橋配位子を介して有機パラジウム錯体を連結したIr-Pd二核錯体(1)を合成し、その光触媒活性を調査した。前年度までに1は可視光照射下でスチレン基質に対し高い重合活性を示すことを明らかにしている。今年度はこの光照射のON/OFFによる反応スイッチング能を利用して、スチレンとビニルエーテル類との共重合反応制御へと展開した。1はビニルエーテル類に対し光照射条件とは無関係に重合活性を示す。そこで同共重合条件を試みたところ、光照射のON/OFFに応じて1の触媒活性が両基質の共重合とビニルエーテルの単重合との間で可逆的に切り替わることを見出した。すなわち本反応系では、光照射した間にのみビニルエーテル重合鎖にスチレンユニットを挿入するポリマー配列の制御が可能である。さらに生成する共重合体のガラス転移温度が光照射条件によって変化することも見出した。これらの成果は、遷移金属触媒による共重合反応制御に光を用いた初めての例として重要な意義を持つと考えている。2の研究はユリウス・マクシミリアン大学ヴュルツブルク(ドイツ)のT. B. Marder研究室に於いて遂行した。種々の有機ロジウム錯体と1,3-ブタジインとの反応を試みた結果、ローダサイクル骨格を形成する新奇な付加環化反応の開発に成功した。これらの錯体は配位子のπ共役系により可視光吸収クロモフォアとして機能することも分かった。(抄録なし)本研究では、太陽光エネルギーを触媒的有機分子変換反応へと利用し得る反応システムの構築を目指して、光増感部位に種々のクロモフォアを有する有機金属錯体の合成とその反応開発を行っている。本年度は、(1)ナフタレン-シクロメタル化イリジウムバイクロモフォア、及び(2)亜鉛ポルフィリンクロモフォアを含む有機パラジウム錯体の合成とその物性および光反応性の調査を行った。(1)では、フェニルピリジン配位子の異なる置換位置に2-ナフチル基を導入した種々のバイクロモフォリックイリジウム-パラジウム二核錯体を合成した。これらの錯体ではいずれも、ナフチル基を持たないユニクロモフォリック錯体に比べ紫外可視部における光吸収特性が向上し、励起三重項状態の寿命が大幅に伸長した。同錯体のスチレン基質に対する反応性について調べたところ、暗所下では触媒的二量化が進行するのに対し、可視光或いは紫外光照射下では触媒的重合が進行したことから、光照射のON/OFFによる反応のスイッチングが可能であることが分かった。特にフェニルピリジン配位子のフェニル環上にナフチル基を導入した錯体は光照射下で高い重合活性を示し、高分子量のスチレン重合体を与えた。さらに生成する重合体の分子量は照射時間に対して一次的に増加することを見出した。これらの結果は、均一系触媒反応において光エネルギーを駆動力且つ外部刺激として用いる新しい反応制御の可能性を示している。(2)では、種々の連結様式により亜鉛ポルフィリンユニットを導入した2,2'-ビピリジル配位子を有するパラジウム錯体を合成した。種々のスペクトル測定から、これらの錯体ではカチオン性パラジウムフラグメントの導入に伴うビピリジル配位子の電子密度低下に伴い、亜鉛ポルフィリンの励起一重項状態からビピリジル配位子への光誘起電子移動が進行し電荷分離状態を生成することが分かった。すなわち亜鉛ポルフィリンの光励起により、その外周部に連結した金属フラグメントに電子的な摂動を与えることが出来る。したがって亜鉛ポルフィリンユニットを有するビピリジル配位子は適切な金属フラグメントと組み合わせることにより光酸化還元反応に広く展開可能であることが示唆された。

すなわち本反応系では、光照射した間にのみビニルエーテル重合鎖にスチレンユニットを挿入するポリマー配列の制御が可能である。さらに生成する共重合体のガラス転移温度が光照射条件によって変化することも見出した。これらの成果は、遷移金属触媒による共重合反応制御に光を用いた初めての例として重要な意義を持つと考えている。2の研究はユリウス・マクシミリアン大学ヴュルツブルク(ドイツ)のT. B. Marder研究室に於いて遂行した。種々の有機ロジウム錯体と1,3-ブタジインとの反応を試みた結果、ローダサイクル骨格を形成する新奇な付加環化反応の開発に成功した。これらの錯体は配位子のπ共役系により可視光吸収クロモフォアとして機能することも分かった。本年度は、種々のクロモフォアを有する有機パラジウム錯体の合成に成功し、特にナフタレンとイリジウム錯体を組み合わせたバイクロモフォアを有する錯体が光照射下でスチレン類の触媒的重合に高い活性を示すこと、またその照射時間により重合体の分子量制御が可能であることを見出した。本研究の最終目標は光触媒的重合反応における高分子構造制御の達成であり、反応開発と重合体の分子量制御の点では概ね順調に進展していると考えられる。今後はより多様な反応制御の実現を目指し共重合反応等への展開を行いたいと考えている。次年度はバイクロモフォリックイリジウム-パラジウム触媒のユニークな光反応性に着目し、オレフィン共重合における反応制御へ展開したいと考えている。重合及び二量化の光スイッチングが可能なスチレン基質と、これと反応性の異なる他の基質とを組み合わせることで光照射条件による共重合体の配列制御を達成できる可能性がある。また架橋配位子への置換基導入により、併せて重合体の立体制御を試みる。一方、亜鉛ポルフィリンクロモフォアを有するパラジウム錯体は光励起に伴い亜鉛ポルフィリンユニットから金属フラグメントへの電子移動を起こすことから光酸化還元反応系に適すると予想される。そこで導入する金属フラグメントを再検討しながら新規反応開発に取り組む予定である。(抄録なし)
弾性表面波デバイスを用いた薄膜作成法の基礎研究

圧電結晶である128YX-LiNbO3上に櫛形電極(IDT)を作成し霧化実験を行った.昨年度の研究で,表面を親水性にするため設けた金属膜(Au/Cr)が破壊される現象が生じた.そこで,長時間霧化により電極がどのようになるか検討を行った.導電性の低い水の場合,電極が破壊されることはない.しかし,導電性が含まれることにより電極破壊が生じた.生体分子を成膜する場合,水ではなくリン酸バッファ水溶液(PBS)を利用する.PBSは導電性をもつため,電極破壊の原因を知ることは重要である.そこで,詳細な観察を行った.その結果,(1)弾性表面波(SAW)伝搬面上の薄い液膜がIDTの方向に引っ張られること,(2)霧化した液滴がIDT上に付着することにより生じることが明らかになった.通常,SAW伝搬面に液体をのせるとSAW伝搬方向に液体が搬送されたり飛翔したりする.一方,粉などをのせるとIDTの方向(SAW伝搬方向と逆)に移動する.霧化現象で見られた液膜は非常に薄いため,液体中への縦波放射が起こらず固体をのせたときと同じ現象が生じているのではないかと考えている.膜材料を変更するたびにSAW素子も交換するのは効率的ではない.そこで,(1)と(2)の解決策として,電極用金属の変更とIDTへのカバーの装着が考えられる.前者は下地に用いているクロムをチタンに交換することである.ただし,研究室内の設備ではチタン膜を形成できないので,外部委託で素子を作成する必要がある.後者はIDT上に閉じた空間を設けることである.これにより,外部の影響を避けることができる.しかし,SAW伝搬面上にカバーを固定すると波が減衰し,霧化効率が低下する.これを解決しなければ薄膜塗布として利用できない.今後の課題である.本年度は,薄膜作成のための最適条件を見いだすため,購入したハイスピードディジタルカメラにより霧化現象メカニズムについて観察を行った。これまで,安定した霧化現象を起こすには,弾性表面波(SAW)デバイスへの印可電圧が30V_<p-p>以上かつSAW伝搬面に薄い液膜をもうける必要があると考えてきた。このため,湿らせた濾紙を用いてきた。ハイスピードカメラによる観察の結果,霧化が生じているのは濾紙からしみ出した部分であることを明らかにすることができた。そこで,1μ1以下の液滴をSAW伝搬面上にのせて観察を行った。印可電圧が33V_<p-p>の場合,SAW印可から5ms秒後に液滴飛翔現象が生じた。液量が少なくなった15ms秒後に,飛翔から霧化になることが分かった。霧化は数十μm以下の薄い液膜からのみ生じることが明らかになったので,予め薄い液膜をもうければ低電力霧化が可能と考え,電圧依存性を調べた。得られた結果より,4.1V_<p.p>という従来よりも低い電圧で霧化が発生していることが明らかになった。霧化発生効率は電圧低下により低くなる。しかし,低電圧であるほど液体の温度上昇は少ない。薄膜作成に用いる材料により最適な電圧を選べばいいことをこの結果は示唆している。さらに,霧化のメカニズムを調べるため,入出力電圧について調べた結果,従来,霧化のメカニズムとして考えてきたSAWストリーミング以外の力も寄与している可能性が強いことを明らかにした。1.霧化メカニズムの検討弾性表面波(SAW)により生じる霧化のメカニズムについて,検討した.ハイスピードカメラ,オシロスコープによる観察結果に基づいて実験的に検討した.SAW伝搬面にある液滴が僅かな場合,縦波中へ放射されるSAWのエネルギは数dBである.この放射したエネルギにより表面張力に打ち勝って極微小液滴を発生することは困難である.一般的な超音波霧化の原理と対応させることにより,液滴表面に生じる表面張力波(キャピラリー波)が霧化の原因ではないかと推測した.また,液体中への縦波放射現象の詳細を理論的に調べるため,数値解析による変位分布からリサージュ図形を作成した.その結果,後方楕円回転している軌跡が縦波になる変換される距離は0.005波長であることが分かった.つまり,この膜厚以上なければ縦波放射とならないといえる.2.液体供給法の検討これまでの濾紙による液体供給法に変わる素材,方法について検討を行った.当初,圧電結晶に穴を開ける方法を考えた.しかし,素子の耐久性や寿命を考慮すると,本手法は適さないことが明らかになった.霧化を安定して生じさせるには,SAW伝搬面に薄い液膜を保てればよい.金は親水性なため,SAW伝搬面に金膜を蒸着し霧化実験を行った.その結果,エレクトロマイグレーションにより金の下地層として用いたクロムが剥がれることが明らかになった.親水性膜を設けるというのは良いアイデアなので,今後工夫をしたい.圧電結晶である128YX-LiNbO3上に櫛形電極(IDT)を作成し霧化実験を行った.昨年度の研究で,表面を親水性にするため設けた金属膜(Au/Cr)が破壊される現象が生じた.そこで,長時間霧化により電極がどのようになるか検討を行った.導電性の低い水の場合,電極が破壊されることはない.

しかし,導電性が含まれることにより電極破壊が生じた.生体分子を成膜する場合,水ではなくリン酸バッファ水溶液(PBS)を利用する.PBSは導電性をもつため,電極破壊の原因を知ることは重要である.そこで,詳細な観察を行った.その結果,(1)弾性表面波(SAW)伝搬面上の薄い液膜がIDTの方向に引っ張られること,(2)霧化した液滴がIDT上に付着することにより生じることが明らかになった.通常,SAW伝搬面に液体をのせるとSAW伝搬方向に液体が搬送されたり飛翔したりする.一方,粉などをのせるとIDTの方向(SAW伝搬方向と逆)に移動する.霧化現象で見られた液膜は非常に薄いため,液体中への縦波放射が起こらず固体をのせたときと同じ現象が生じているのではないかと考えている.膜材料を変更するたびにSAW素子も交換するのは効率的ではない.そこで,(1)と(2)の解決策として,電極用金属の変更とIDTへのカバーの装着が考えられる.前者は下地に用いているクロムをチタンに交換することである.ただし,研究室内の設備ではチタン膜を形成できないので,外部委託で素子を作成する必要がある.後者はIDT上に閉じた空間を設けることである.これにより,外部の影響を避けることができる.しかし,SAW伝搬面上にカバーを固定すると波が減衰し,霧化効率が低下する.これを解決しなければ薄膜塗布として利用できない.今後の課題である.
遺伝子デリバリーのためのインテリジェント高分子ミセル型ナノカプセルの創製

本研究では、内核に遺伝子DNAを保持し、表層部に標的細胞による認識と取込みを促進させるパイロット分子を結合させた生体適合型高分子ミセルを創製し、新規遺伝子ベクターとしての有用性を検証した。高分子ミセルの構築には、ポリアニオンである遺伝子(プラスミドDNA)の性質に着目し、ポリカチオン連鎖を持つマルチ機能化ブロック共重合体との静電相互作用による会合体形成を活用した。すなわち親水性で生体適合性に優れ、α-末端に各種パイロット分子を結合可能なポリエチレングリコール連鎖とDNAとの静電相互作用が可能なポリアミン連鎖が連結したマルチ機能化ブロック共重合体とプラスミドDNA間の自己会合プロセスに基づき高分子ミセルを調製し、その表層にパイロット分子を連結する方法論を確立した。本研究で創製した高分子ミセルは、ウイルスと同等のサイズで、遺伝子を保持する内核が親水性外殻で覆われる明確な二層構造をとる為、(1)溶解性や安定性等の製剤学的特性の向上、(2)体内での非特異的異物認識を免れ半減期が延長、(3)血管壁透過性を含めた組織浸透性の向上、(4)パイロット分子を介する標的細胞への取込み増大など、in vivo遺伝子ベクターが具備すべき基本的用件を充分に満足する。また内包遺伝子の大きさを任意に選択でき、細胞内環境応答機能団の組込みにより遺伝子の細胞内移行も制御できるなど、ウイルスを凌駕する特色を備えている。この高分子ミセルは培養細胞における優れた遺伝子発現効率を有すると共に、細胞内還元環境に応答して内包遺伝子を放出する高いインテリジェント機能を発現する。またマウス血中投与により、肝臓に一様に遺伝子発現を導く事にも成功した。本研究で創製した高分子ミセル型遺伝子ベクターは従来型ベクターの欠点を克服しており、普遍的な人工ウイルス型ベクターとして遺伝子治療分野の進展に多大な貢献をもたらすと確信される。本研究は、内核に遺伝子DNAを保持し、かつ表層部に標的細胞による認識と取り込みを促進させるためのパイロット分子を結合させた生体適合型高分子ナノカプセル(高分子ミセル)を創製し、その新規遺伝子ベクターとしての有用性を明らかにすることを目的として検討を行う。本年度は、以下の2項目を中心に検討した。(1)末端官能基を有するポリエチレングリコール(PEG)/ポリアミンブロック共重合体の合成とパイロット分子の導入:酸処理によって容易にアルデヒド基へ変換可能であるアセタール(3,3-diethoxy-1-propanol)のカリウムアルコキシドを開始剤としてエチレンオキシドの開環重合を行った後、ジメチルアミノニチルメタクリレート(DMAEMA)を添加し、逐次重合させ、末端にアセタール基を有するPEG-PDMAEMAブロック共重合体を得た。PEG末端からの重合の確認は、GPC測定により行い、最終的に得られたブロック共重合体の構造の確認は、^1HNMR測定より行った。また、得られたPEG-PDMAEMAの末端のアセタール基を酸処理(pH2のHCl溶液中で撹拌)することによりアルデヒド基へ変換した。この末端アルデヒド基へ1級アミノ基を有するラクトース誘導体を反応させる事によってシッフ塩基を形成させ、さらに、還元剤を添加することによって、ラクトース残基を末端に有するPEG-PDMAEMAを得た。(2)遺伝子DNA内包高分子ミセルの調製と特性解析:遺伝子DNAとPEG-PDMAEMAブロック共重合体からの高分子ミセル形成を行った。ゲル電気泳動、エチジウムブロマイドの消光アッセイ、光散乱測定により、混合荷電比と形成される高分子ミセルの粒径の関係を評価した。混合荷電比を最適化することにより、平均粒径90nm程度の単分散なミセルが形成されることが確認された。

さらに、ポリアニオン添加による遺伝子DNAの放出に関して、ゲル電気泳動により評価した結果、PEG-PDMAEMAとDNAから形成されたミセルは、静電相互作用だけでなく、ポリマー鎖の化学構造に起因する疎水性相互作用による安定化があることが示唆された。本研究は、内核に遺伝子DNAを保持し、かつ表層部に標的細胞による認識と取り込みを促進させるためのパイロット分子を結合させた生体適合型高分子ナノカプセル(高分子ミセル)を創製し、その新規遺伝子ベクターとしての有用性を明らかにすることを目的として検討を行う。本年度は、以下の2項目を中心に検討した。(1)表層にリガンド分子を装着した高分子ミセル型ベクターの創製を目指し、α-末端に各種のパイロット分子を結合可能なブロック共重合体の新規合成ルートの確立を行った。ブロック共重合体の合成は数種類の化学反応による修飾を段階毎に重ねていかなければならず、この制約によりリガンドを担持したブロック共重合体の合成は一般には困難を伴うものであったが、本年度は既に確立していた合成経路を抜本的に見直し、各々の反応操作が互いに干渉しない新しい経路を探索することにより、リガンド分子が導入されたブロック共重合体を調整することに成功した。具体的には、ベンジルアセタール基とアミノ基を反応性官能基として有するヘテロ二感応性PECを合成し、このアミノ基末端をボリカチオン連鎖の重合開始点としてブロック共通合体が調整され得る。その後、ベンジルアセタール基を酸性条件下でリガンドとの結合が可能な官能基であるアルデヒド基に置換し、リガンド分子であるラクトースを導入した。その後は、アルカリ条件下でポリカチオン連鎖の脱保護を行い、リガンド導入型ブロック共重合体を調整した。(2)ジスルフィド結合導入系に関しては、各種細胞における遺伝子発現効率を系統的に評価し、本システムの遺伝子治療における有用性を明らかとした。非ウイルス性遺伝子ベクターは、血中送達時においてはDNAを高度に凝縮させ核酸分解酵素耐性を向上させるとともに非性異吸着を妨げることにより内包DNAの血中安定性を向上させ、細胞内においては複合体の解離によりDNAを放出し遺伝子を発現させる、相反する機能を持ち合わせていなければならない。本研究では、これらの相反する機能を遺伝子ベクターに担持させるにあたり、PEG-PLLブロック共通合体に、ミセル形成時に架橋構造を生起するチオール基を導入することにより、高分子ミセル内核にジスルフィド結合による架橋構造を生起させ、高分子ミセル型遺伝子ベクターの可逆的安定化を図ることに成功した。架橋ミセルは血中送達時においては架橋形成によりその構造が安定化されるが、細胞内還元環境下ではジスルフィド結合の開裂によりミセルが不安定化され、生体内環境に応じて内包DNAの放出制御か可能なインテリジェントベクターとして機能していることを明らかとした。
下部尿路通過障害における膀胱α1アドレナリン受容体サブタイプの役割:ノックアウトマウスを用いた解析

本研究は排尿機能におけるα1-アドレナリン受容体-過活動膀胱における役割を検討するために、尿道部分閉塞(BOO)ラットのモデルを作成し、α1A/1D受容体遮断薬であるタムスロシンの膀胱機能に対する影響を検討した。さらにα1D受容体ノックアウトマウスにおける膀胱機能を解析し、下記の結果を得ている。1.前立腺肥大症における排尿障害を再現する目的でラットのBOOモデルを作成し、48時間排尿動態および無麻酔下膀胱内圧を検討した。BOOラットはcontrol群およびsham手術群ラットに比べ、膀胱重量、膀胱容量、残尿量、一日排尿回数の著明な増加を認めた。以上より、適切なBOOラットモデルを作成し得たと考えられた。2.BOOラットを用いて、α1A/1D受容体遮断薬であるタムスロシンのラット膀胱機能への影響を検討した。α1A/1D受容体遮断薬タムスロシンの投与に伴い、sham手術群およびBOOラットともに用量依存的に排尿回数が有意に減少し、膀胱容量、排尿量が有意に増大した。また、BOOラットはsham手術群ラットに比較して、その変化率が有意に大きかった。タムスロシンはBOOラットにおける排尿筋過活動を改善させた。3.α1D-knockout(α1D-KO)およびwild-typeマウスを用いて、48時間排尿動態および膀胱内圧測定にて膀胱機能を検討した。α1D-KOマウスはWild-typeマウスに比べ、1日排尿回数が有意に少なく、膀胱容量および1回排尿量は有意に多かった。一方、最大排尿時圧や膀胱排尿筋、尿道組織の変化には明らかな差異を認めなかった。以上、α1A/1D受容体遮断薬タムスロシンはBOOラットにおける排尿筋過活動を改善させた。また、α1D-KOはwild-typeマウスに比べ、排尿回数の減少、膀胱容量や排尿量の増大が認められた。以上より、詳細な作用部位はまだ不明なものの、α1D受容体は蓄尿期における膀胱機能に影響を及ぼしていることが示唆され、BOOにおける過活動症状の発生に関与している可能性が示唆された.本研究は排尿機能におけるα1-アドレナリン受容体-過活動膀胱における役割を検討するために、尿道部分閉塞(BOO)ラットのモデルを作成し、α1A/1D受容体遮断薬であるタムスロシンの膀胱機能に対する影響を検討した。以上より、詳細な作用部位はまだ不明なものの、α1D受容体は蓄尿期における膀胱機能に影響を及ぼしていることが示唆され、BOOにおける過活動症状の発生に関与している可能性が示唆された.本研究以前から作成しつつあったα1dノックアウトマウスの作成を完了し、さらに循環動態に関する検討をしつつある。尿路機能に関する検討については以下のごとくである。2)下部尿路狭窄マウスモデルの作成雌性マウスを麻酔下に尿道にラジフォーカスカテーテルを留置。それに被せるかたちで22ゲージプラスチックカテーテルを尿道に挿入。マウス恥骨上を縦切開し骨盤内で尿道を露出。尿道の周囲を極力損傷しないように注意し、カテーテルを入れたまま尿道を3-0絹糸で適度に結紮する。これまでの検討で腹腔を大きく開けると膀胱機能に影響が出ることが確認できたためこのような方法に変更した。4)24時間尿量測定装置の開発24時間マウスを代謝ケージで飼育し、その尿量を高精度天秤で連続測定した。データはコンピュータ処理により計測した。マウス尿量の日内変動が観察され、1回尿量は日中はやく0.1ml前後と少ないが、夜間は1回量、頻度とも増加した。1.【研究目的】

ラットでは、尿道部分閉塞(BOO)により処置数週間後に膀胱重量が顕著に増加することが知られている。今回、この膀胱重量増加にα1D受容体が関与しているかどうか調べるための評価系として、α1D-KOマウスおよびそのWild typeマウスを用いて尿道部分閉塞(BOO)モデルの検討を行った。2.【研究方法】雌性のα1D-KOマウスおよぴそのWild typeマウスを入手し、尿道部分閉塞を作成し膀胱重量の測定、膀胱内圧測定を行なった。また期間をあけて試験を2回行い、再現性も調べた。3.【結果および考察】無処置のWild typeマウスおよびα1D-KOマウスの膀胱重量は、それぞれ19.7mgと19.8mgであった。尿道部分閉塞処置群では処置後1週間の間に、それぞれ4匹ずつ死亡した。尿道結紮が強すぎたために排尿困難となって死亡したと考えられた。Wild typeマウスおよぴα1D-KOマウスの1週間後の摘出した膀胱重量は、それぞれ30.1mgと27.4mgであった。Wild typeマウスでは、処置1週間後に、無処置群群に比して1.5倍の膀胱重量増加が認められた。α1D-KOマウスは1匹(No.4)を除くと、対照群の膀胱重量と同程度であった。2回目の試験では1週間後の摘出した膀胱重量は、それぞれ22.8mgと36.3mgであった。今回、Wild typeマウスで、処置1週間後に、膀胱重量増加が認められなかったため、試験1の再現性が確認できなかった。今回の検討では、BOO処置を行なったWild typeマウスとα1D-KOマウスを比較し、下部尿路通過障害のα-1Dレセプターに及ぼす影響を検討する予定であったが、試験1と試験2において再現性のある結果を得ることができなかった。今後、BOO処置条件について更に検討を加える必要があると考えられる。