hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
マイクロ磁気流体力学的効果によるキラル界面生成とキラル分子認識

界面キラリティの新しい簡便な制御法として応用が期待できる.研究代表者らは以前,磁場を印加しながら電析を行う磁気電析という手法で,金属の電析膜にキラル界面が生成することを発見した.本研究では様々な実験条件で銅の磁気電析を行い,キラル界面の生成機構の概要を明らかにし,磁気電析膜のキラル界面がアミノ酸の分子キラリティを認識することを見出した.また,回転磁気電析や磁気電解エッチングという新しい手法においても,キラル界面が生成することを発見した.今年度の研究計画とその達成度は以下のとおりである.計画1.キラル界面形成に適した磁気電析条件の探索から,キラル界面形成機構の解明に迫る.(達成度)銅の磁気電析の実験条件を精査し,キラル界面形成が電析電流に強く依存することを見出した.電極反応における律速過程と電析電流との解析から,律速過程とMHD渦流の方向によりキラリティの符号が決定されることを見出した.この結果から,界面キラリティの制御の一つの指針が得られた.計画2.初年度試みた回転磁気電析の手法を引き続き継続・発展させ,回転方向や回転周波数が,キラル界面形成におよぼす効果を調べる.(達成度)初年度に2Hzのみで行っていた回転磁気電析法の装置を,1 6Hzまでのより広い周波数範囲で安定に回転磁気電析を行えるように改良した.これにより銅の磁気電析において,キラリティの周波数と磁場方向依存性の研究を行い,最適な周波数と磁場を探索して,キラル選択性の高い界面を作製することに成功した.計画3.磁気電析とは逆の現象である磁気電解エッチングを試み,キラル界面形成が可能かどうかを調べる. (達成度)銅薄膜の磁気電解エッチングを試み,キラル界面形成に成功した.そのキラル挙動は,エッチング電流と磁場方向に依存することを見出し,最適な条件の探索に成功した.これにより酸化物などの酸化プロセスでの物質合成においても,キラル界面を作製する道が開けた.磁気科学,電気化学磁気電気化学手法によるキラル界面形成の研究をさらに推進する.1.より高選択性のキラル界面形成を目指して,電解溶液に添加剤を加えてキラル挙動への影響を調べる.2.マイクロMHD渦流とキラル界面形成との関係を解明するために,マイクロ電極において磁気電析を行い,キラル挙動を調べる.3.今年度改良に成功した回転磁気電析装置を用いて,キラル界面形成における回転と磁場,周波数の関係を明らかにし,その普遍性を確立する.今年度の研究計画とその達成度は以下のとおりである.計画1.キラリティの発現条件を探索する.具体的には,銅の磁気電析を,磁場強度,電極電位,電解電流,膜厚,電極径などの実験条件を変化させて行い,キラリティの有無を確認する.(達成度1)キラル界面が生成す条件の探索に多くの時間を割くことになると予想していた.幸い,超伝導マグネットのマシンタイムが多めに得られ,精力的に実験を行った結果,比較的早い時期に,キラル生成条件を探すことができ,次のステップに移行することができた.計画2.銅の磁気電析膜を種々の条件で作製し,それらを電極に用いて,グルコースやアミノ酸,酒石酸などの電極反応を調べてみる.(達成度2)アラニンをはじめ,代表的なアミノ酸や,代表的なキラル分子である酒石酸において,キラル挙動が確認でき,スムーズに研究が進んだ.
金属アレルギー発症機序に関する解析

金属アレルギーは、研究に有用な動物モデルが無かったこともあり、その詳細は未だ不明な点が多い。しかしながら、私達は近年、グラム陰性菌細胞壁成分であるlipopolysaccharide(LPS)がマウス金属アレルギーを著しく促進することを見いだし、再現性のよい金属アレルギーマウスモデルの作製に成功した〔Ni(+LPS)-allergyと呼称〕。興味深いことに、Ni(+LPS)-allergyはT細胞欠損ヌードマウスやマスト細胞欠損マウスにおいても発症する。近年、ヒスタミン供給細胞として知られる好塩基球が、抗原提示やelicitation stepでの炎症のイニシエーターとして、アレルギー反応の誘導に重要な働きをすることが明らかになってきている。私達はNi(+LPS)-allergyに好塩基球の関与を想定し、好塩基球枯渇実験等によりこれらを検討した。1)感作前またはNi-challenge前での好塩基球枯渇は、いずれもallergy反応を有意に低下させた。2)細胞移入実験において、感作前または感作成立後でのドナーの好塩基球枯渇は、いずれもレシピエントでのallergy反応を低下させた。3)感作マウス脾細胞から分離した好塩基球の移入は,allergy反応を部分的に再現した。また、面白いことに、好塩基球以外の細胞(T,NK,NKTを含む細胞分画)もallergy反応を部分的に再現した。これらの結果は、Niアレルギー発症には好塩基球に加えて、他の細胞(T,NK,NKTなど)も関与することを示唆し、これらの細胞が、メモリー細胞様の細胞として関与することを示唆する。以上のことより、本年度の研究は概ね計画通りに進行した。私達は近年lipopolysaccharide(LPS)がマウスNiアレルギーを促進、増強することを見いだし、これまで困難とされた実際に近いNiアレルギーモデルの作製に成功している〔Ni(+LPS)-allergyと呼称〕。LPSはヒスタミン合成酵素であるhistidine decarboxylase(HDC)誘導作用をもち、ヒスタミンは免疫反応調節因子である。私達は、Ni(+LPS)-allergy発症に、マスト細胞以外の細胞にてHDC誘導により新たに産生されるヒスタミンが重要であることも過去に報告している。アレルギー反応は、感作相と惹起相で構成される。本年度は、Ni(+LPS)-allergyにおいて、ヒスタミンが感作相および惹起相のいずれで関与するのかを検討した。1.HDCノックアウト(HDC-KO)マウス、およびヒスタミン受容体H1 receptorノックアウト(H1-KO)マウスにおいて、炎症は殆ど観察されなかった。2.感作マウス(HDC-KO、H1-KO、およびWTマウス)脾細胞の非感作WTマウスへの移入は、いずれも炎症を誘導した。一方、非感作HDC-KO、H1-KOマウスへの移入は、いずれも炎症の誘導に無効であった。これらの結果より、金属アレルギー発症過程において,ヒスタミンは感作相ではなく惹起相で関与し,HDC誘導により新たに合成されるヒスタミンがH1受容体を介して炎症の発現に関与することが示唆された。したがって,抗ヒスタミン薬が金属アレルギーの治療薬として有効である可能性が示唆された。また、これらの研究に加え、金属アレルギー発症に関与する免疫担当細胞の解析に関しても、枯渇抗体による各種細胞枯渇実験等により進めており、これらについては現在も検討しているところである。しかしながら、私達は近年、グラム陰性菌細胞壁成分であるlipopolysaccharideがマウス金属アレルギーを著しく促進することを見いだし、再現性のよい金属アレルギーマウスモデルの作製に成功した。金属アレルギー患者はしばしば複数金属に陽性反応を示すが、交差反応の詳細も未だ不明であるため、個々の金属に対する反応なのか、または交差反応なのかの判断が難しい。本年度は、上述のマウスモデルを用い、金属アレルギー交差反応について主に検討した。超高純度金属塩(>99.99%)を用いた実験において、検討した金属種(Ni, Pd, Co, Cr, Cu, Au)のなかで、NiとPd間にのみ交差反応が認められ、交差反応した金属の最少有効濃度は、真の抗原金属と同じレベルであった。低純度金属塩(93-99%)を用いた同様の検討では、驚くことに、用いた金属種全てに対する陽性反応が誘導され、これらは低純度金属塩中に含まれる微量コンタミ金属によるアレルギー反応であった。これらの結果は、Ni, Pd, Co, Cr, Cu, Auにおいて、NiとPdは互いに交差反応し、他の金属間には交差反応性はないこと、さらに、パッチテストなど感作金属の特定には高純度の金属の使用が不可欠であることを示唆する。これらの研究に加え、本年度は、金属アレルギー発症に関与する免疫担当細胞の解析に関しても、枯渇抗体による細胞枯渇実験などにより検討し、金属アレルギー発症過程において、その感作相および惹起相のいずれにおいても、好塩基球が重要に関与することを示唆する興味深い結果も得ている。

しかしながら、私達は近年、グラム陰性菌細胞壁成分であるlipopolysaccharide(LPS)がマウス金属アレルギーを著しく促進することを見いだし、再現性のよい金属アレルギーマウスモデルの作製に成功した〔Ni(+LPS)-allergyと呼称〕。興味深いことに、Ni(+LPS)-allergyはT細胞欠損ヌードマウスやマスト細胞欠損マウスにおいても発症する。近年、ヒスタミン供給細胞として知られる好塩基球が、抗原提示やelicitation stepでの炎症のイニシエーターとして、アレルギー反応の誘導に重要な働きをすることが明らかになってきている。私達はNi(+LPS)-allergyに好塩基球の関与を想定し、好塩基球枯渇実験等によりこれらを検討した。1)感作前またはNi-challenge前での好塩基球枯渇は、いずれもallergy反応を有意に低下させた。2)細胞移入実験において、感作前または感作成立後でのドナーの好塩基球枯渇は、いずれもレシピエントでのallergy反応を低下させた。3)感作マウス脾細胞から分離した好塩基球の移入は,allergy反応を部分的に再現した。また、面白いことに、好塩基球以外の細胞(T,NK,NKTを含む細胞分画)もallergy反応を部分的に再現した。これらの結果は、Niアレルギー発症には好塩基球に加えて、他の細胞(T,NK,NKTなど)も関与することを示唆し、これらの細胞が、メモリー細胞様の細胞として関与することを示唆する。以上のことより、本年度の研究は概ね計画通りに進行した。
遺伝性白内障ラットを用いた白内障発症過程における蛋白質分解機構とその意義の解析

白内障は水晶体が混濁化し、透明性を失った状態である。その原因は、タンパク質分子間で起こる架橋反応等で不溶性の高分子会合体が形成されるためと一般的には考えられている。しかし一方では、水晶体タンパク質の分解が混濁化(タンパク質の不溶化)の引き金になるとの見方もある。事実、老人性の白内障や種々の実験的白内障では水晶体タンパク質の分解の亢進が認められている。そこで本研究では遺伝性白内障ラット(SCR)を用い、水晶体タンパク質の分解に関与するプロテアーゼの検索並びにタンパク質分解とタンパク質不溶化との関連性を解析した。水晶体タンパク質の分解パターンや水晶体カルシウム濃度の変動等から、水晶体混濁過程で亢進するタンパク質分解にはカルシウム依存性プロテアーゼであるカルパインの関与が強く示唆された。そこで、カルパインの関与をより直接的に証明するためにカルパインによる分解産物(切断部位)のみを認識する特異抗体を作製し、解析を行った。その結果、少なくともα-クリスタリン(A及びB鎖)、βB1-クリスタリン並びに細胞骨格タンパク質であるフォドリンの分解にカルパインが関与することが確認された。これらのタンパク質の分解産物は、水晶体が混濁を発現するよりもかなり早い時期から検出され、経時的に増加することも明らかとなった。また、本来は可溶性であるβB1-クリスタリンがカルパインによる切断で不溶性に変化するが明らかとなった。これらの結果から、カルパインが白内障発症過程(タンパク質不溶化)で重要な役割を担っていることが強く示唆された。
メタボロームワイドな代謝プロファイリングに基づく生活習慣病予防の地域コホート研究

本年度は、4050歳代1003名分のメタボローム解析を行った。CE/MS法による測定は、本研究により計2503名となったことから、これまでに測定を完了していたものとあわせ8413名分のメタボロームデータベースが構築された。94代謝物について、10検体ごとに繰り返し測定した精度管理(QC)サンプルの結果を用い、データの信頼性を評価するための統計学的解析を行った結果、QCサンプルの変動係数は、64物質で20%未満、バッチ間変動係数81物質で20%未満であった。推定した級内相関係数の結果と併せ大規模コホート研究の検体を測定している他の3つのラボの結果と比肩しうるものであった。以上の成果をPLoSOne誌に投稿し、本年1月に採択・掲載された。そのsupplemental table 3(Table S3)には、性別・年齢階級別に整理した94代謝物質の平均値及び標準偏差値を記載して公開したことから、本研究の目標であった地域在住一般集団のメタボロームワイド代謝プロファイルのデータベース作成と公開について一定の成果が得られた。また、生活習慣病罹患パターンが異なる地域のメタボロームプロファイルの比較についても、順調に検体収集を進め、2コホート、各300検体が集まった。メタボロームワイド関連解析による動脈硬化、インスリン抵抗性バイオマーカーの検討については、血中分岐鎖アミノ酸(BCAA)と脂質代謝物及び脂質代謝異常症との関連性を解析、BCAAが脂質代謝にインスリン抵抗性とは独立して関連し、脂質代謝異常症の潜在的なバイオマーカーとなりうることが示唆された。糖尿病発症の前段階である空腹時血糖正常高値の代謝プロファイリングについても解析を行い、24物質で濃度変化が認められたことから、これらが糖尿病発症予測のバイオマーカーとなりうる可能性が示唆された。これらの研究成果は、現在投稿準備中である。29年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、研究計画に沿って、以下の研究を実施した。(1)地域在住一般集団のメタボロームワイドプロファイルのデータベース作成:市国保加入者(平均年齢63歳)500名分のメタボローム測定を実施した。これまでに測定を終えている血漿メタボローム約3000名分のデータおよび(2)のデータと統合してデータベース化を図ると共に、測定精度の観点から、測定値の変動について検討した。一部の測定物質について、測定バッチによる著しい変動が同定されたことから、その原因について検討を進めた。(2)メタボロームプロファイルとインスリン抵抗性との関連の検討:市国保加入者で、内臓脂肪測定およびインスリン抵抗性指標を測定済みの(1)とは異なる500名について、500名分のメタボローム測定を実施した。(3)生活習慣が異なる地域との尿中メタボロームプロファイルの比較滋賀県在住者集団50名について、尿中メタボローム測定を実施した。さらに、これまでの研究によって作成されたメタボローム測定データと疫学情報により、女性において閉経と共に有病率が増加し、心疾患リスク上昇の一因となっているメタボリック症候群(MetS)を取り上げ、閉経後Mets女性の血漿極性メタボロームを用いた代謝プロフィリングについて検討を行った。その結果、分岐鎖アミノ酸並びにTCAサイクルに関連した代謝物が、MetS群で有意に上昇していたことから、日本人においても、メタボリック症候群の罹患とこれらの代謝経路が関連していることが示唆された。この成果は、North America Menopause SocietyのMenopause誌に受理された。おおむね、当初の計画通りのメタボローム測定を進めるとともに、これまでのデータベースを活用したデータ解析も進めており、ベースラインデータを用いた原著論文がこれまでに二件アクセプト、一件投稿中となった。さらに、その意義を明らかにするために、3年後の健康情報の収集を進めている。本年度も研究計画に沿って、以下を実施した。(1)地域在住一般集団のメタボロームワイドな代謝プロファイルのデータベース作成:本年度は、40代、50代の男女のプロファイルを重点的に測定するため、本コホートの職域部分のコホート参加者1000名分のメタボローム測定を実施した。また、データベース作成に際しては、測定の質についての客観的評価が必要であることから、測定精度のバリデーションマニュアルを構築した。その上で、疫学における多数検体時の測定精度を検証するため、開始時より実施してきたQCサンプルの測定データ(10検体ごとに同一のプール血清サンプルを繰り返し測定)の変動について検討を行った。その結果、これまでに測定を行った全パッチのうちの数%に許容範囲を超える変動が認められたことから、再測定を実施、その結果、いずれも許容範囲内の変動となった。これら、データベース公開に不可欠な疫学におけるメタボローム測定の精度に関して、投稿準備中である。(2)生活習慣病罹患パターンが異なる地域のメタボロームプロファイルの比較については、連携研究コホートからの血漿および尿検体各50の測定を行った。(3)メタボロームワイド関連解析による代謝プロファイルとインスリン抵抗性等との関連の検討:閉経後メタボリック症候群女性における代謝プロファイル解析を行って、分岐鎖アミノ酸ならびにTCAサイクル関連代謝物との関連を明らかにした結果がMenopause誌に掲載された。さらに、これらの予防要因となる身体活動について、総身体活動量ならびに座位時間との関連を男性で検討した結果が、PLosOne誌に掲載された。

ここでは、総身体活動量と座位時間が、独立して、分岐鎖アミノ酸をはじめとする血漿極性代謝物と関連していた。日本人一般集団のメタボロームプロファイルのデータベース化について、予定を上回る数の検体測定によって、40代70代前半の男女についての測定データを収集するとともに、精度管理の評価・検証も進んだ。疫学研究におけるメタボローム測定の精度管理について投稿準備中であるとともに、本年度までで計3編の原著論文がアクセプトとなり、当初計画以上に進展している。本年度は、4050歳代1003名分のメタボローム解析を行った。CE/MS法による測定は、本研究により計2503名となったことから、これまでに測定を完了していたものとあわせ8413名分のメタボロームデータベースが構築された。94代謝物について、10検体ごとに繰り返し測定した精度管理(QC)サンプルの結果を用い、データの信頼性を評価するための統計学的解析を行った結果、QCサンプルの変動係数は、64物質で20%未満、バッチ間変動係数81物質で20%未満であった。推定した級内相関係数の結果と併せ大規模コホート研究の検体を測定している他の3つのラボの結果と比肩しうるものであった。以上の成果をPLoSOne誌に投稿し、本年1月に採択・掲載された。そのsupplemental table 3(Table S3)には、性別・年齢階級別に整理した94代謝物質の平均値及び標準偏差値を記載して公開したことから、本研究の目標であった地域在住一般集団のメタボロームワイド代謝プロファイルのデータベース作成と公開について一定の成果が得られた。また、生活習慣病罹患パターンが異なる地域のメタボロームプロファイルの比較についても、順調に検体収集を進め、2コホート、各300検体が集まった。メタボロームワイド関連解析による動脈硬化、インスリン抵抗性バイオマーカーの検討については、血中分岐鎖アミノ酸(BCAA)と脂質代謝物及び脂質代謝異常症との関連性を解析、BCAAが脂質代謝にインスリン抵抗性とは独立して関連し、脂質代謝異常症の潜在的なバイオマーカーとなりうることが示唆された。糖尿病発症の前段階である空腹時血糖正常高値の代謝プロファイリングについても解析を行い、24物質で濃度変化が認められたことから、これらが糖尿病発症予測のバイオマーカーとなりうる可能性が示唆された。これらの研究成果は、現在投稿準備中である。大規模疫学研究におけるメタボローム測定の精度の管理は、今後の研究推進のために最も重要な基礎データを提供することとなるので、現在構築中のメタボロームデータベースを活用して、さらに検討を続ける。他の点については、当初の計画に沿って、さらに研究を推進する。精度管理の論文化により、日本人のメタボローム・データベースの公開を進めるとともに、H29年度は、同一調査参加者の3年後のメタボロームプロファイルを明らかにし、加齢に伴う経年的なメタボロームプロファイルの変動についても検討し、研究を推進する。29年度が最終年度であるため、記入しない。
血管内皮接着因子、JCADによるプラーク不安定化機序の解明－血管新生に注目して－

(B-1) JCAD-/-マウスの生理的脈管形成への影響作製されたJCAD-/-マウスは少なくとも胎生致死はおこらず、肉眼上は野生型と変化を認めなかった。生理的な血管発生に異常がないことを確認するために、マウス網膜血管の解剖をFITCの静脈投与後の摘出眼球において組織学的に検討したが、明らかな差を認めなかった。(B-2)tumor growthmodelによる生体内での腫瘍血管新生能JCAD-/-マウスと野生型マウスに対してメラノーマ癌細胞(B16F10)及び肺腺癌細胞株(LL/2)を皮下注し、その増殖を経時的に2日毎に観察し、その増殖速度を比較する。2週間後に安楽死させ、腫瘍組織を取り出し、血管内皮細胞のマーカーであるCD31染色によって腫瘍内の血管新生の程度を評価する。。成熟した新生血管は血管周囲をSMAにより覆われているが、逆に未成熟なものはSMA陰性となることが知られており、JCADのノックアウトマウスでは血管新生が減少し、さらにSMA陰性の未熟な血管新生がおこることを解明した。培養ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)に対してsiRNAやtransfection法を用いたJCADのノックダウンや過剰発現を誘導し、(1)WST-1アッセイによる細胞増殖能、(2)wound healingmodelによる細胞遊走能、(3)tube formationによる血管新生能を比較検討したところ、いずれにおいてもJCADの特異的ノックダウンにより増殖能、遊走能、血管新生能が低下した。(B)JCAD-/-マウスの生理的脈管形成への影響作製されたJCAD-/-マウスは少なくとも胎生致死はおこらず、肉眼上は野生型と変化を認めなかった。生理的な血管発生に異常がないことを確認するために、マウス網膜血管の解剖をFITCの静脈投与後の摘出眼球において組織学的に明らかにしたが、解剖学的には明らかな差は認められなかった。11月からの中途採択であったにもかかわらず、当初予定の8割り程度は進行しており、順調に進展していると言える。1)JCAD-/-マウスの生理的脈管形成への影響作製されたJCAD-/-マウスは少なくとも胎生致死はおこらず、肉眼上は野生型と変化を認めなかった。生理的な血管発生に異常がないことを確認するために、マウス網膜血管の解剖をFITCの静脈投与後の摘出眼球において組織学的に明らかにする。マウスにFITCデキストランを静注し、マウス網膜血管をJCADノックアウトマウスと野生型マウスで比較検討したが、特に解剖学的な差は認めなかった。JCAD-/-マウスと野生型マウスに対してメラノーマ癌細胞(B16F10)及び肺腺癌細胞株(LL/2)を皮下注し、その増殖を経時的に2日毎に観察し、その増殖速度を比較する。新生血管の成熟度を比較するために、α平滑筋アクチン(SMA)との二重染色も行い、SMAを伴わない未熟な血管新生の割合も比較検討する。JCADノックアウトマウスと野生型マウスにメラノーマ癌細胞と肺腺癌細胞を背部に皮下注し、その増殖を比較検討した。結果、JCADノックアウトマウスでは腫瘍増殖速度が低下していることが明らかとなった。免疫染色では、JCADノックアウトマウスの腫瘍はCD31陽性の血管新生が少なく、血管新生依存性に腫瘍増殖が抑制されたと考えられる。当初の計画どおり、JCADノックアウトマウスの網膜血管の評価を行い、腫瘍増殖モデルと血管新生の評価を行い、JCADのノックアウトマウスでは生理的血管新生は抑制されないが、病的血管新生が抑制されているとの結果を得た。。

新生血管の成熟度を比較するために、α平滑筋アクチン(SMA)との二重染色も行い、SMAを伴わない未熟な血管新生の割合も比較検討する。成熟した新生血管は血管周囲をSMAにより覆われているが、逆に未成熟なものはSMA陰性となることが知られている。(A)-(B)のin vitro及びin vivoの解析によってJCADが血管新生を制御することが明らかになれば、血管内皮の接着因子であるJCADがどのような分子機序で血管新生を制御しているかを検討する。VEGF刺激によるtube formationがJCADのノックダウンにより低下したという予備実験の結果からJCADはVEGF刺激による血管新生のシグナルカスケードを制御している可能性が高く、VEGFを介した血管新生の制御機構に焦点をあてて解析を行う。1.HUVECに対してJCADをsiRNAによりノックダウンする。VEGF刺激後のシグナル伝達には種々の経路があるが、Rap1等のsmall G蛋白、Akt、ERKやeNOSの活性化の変化を解析することによって、どのシグナル伝達経路が傷害されるのかを明らかにする。2.VE-カドヘリンやインテグリン等の血管新生を制御する分子はVEGF受容体の活性化を制御する。JCADのVEGF受容体活性化への影響を明らかにする。siRNAによるJCADのノックダウンによるVEGFRの活性化の変化を解析し、JCADによるVEGFR活性の制御機構を解明する。1) ApoE/JCADダブルノックアウトマウスにおけるvasa vasorumの評価プラーク内の未熟な新生血管がプラーク内出血やプラークの不安定性に影響する。それゆえ、JCADはこのvasa vasorumを制御することで、心筋梗塞発症に関与すると考えられる。それゆえ、ApoE/JCADダブルノックアウトマウスを掛けあわせにより作製し、同週齢のApoE-/-マウスと比較して、血管周囲のvasa vasorumの数をCD31の染色を用いて病理学的に評価し、成熟度をα平滑筋アクチン(SMA)染色において比較検討する。これらにより、JCADがvasa vasorumの進展と成熟を制御していることを証明する(2) JCADが血管新生を制御する分子メカニズムの解明(A)-(B)のin vitro及びin vivoの解析によってJCADが血管新生を制御することが明らかになれば、血管内皮の接着因子であるJCADがどのような分子機序で血管新生を制御しているかを検討する。2.VE-カドヘリンやインテグリン等の血管新生を制御する分施はVEGF受容体の活性化を制御する。siRNAによるJCADのノックダウンによるVEGFRの活性化の変化を解析し、JCADによるVEGFR活性の制御を解明する。
電気的スイッチにより制御されたπ共役系分子の集積的構築法の開発

前年度に電気的スイッチングに基づいた集積的連続反応を進行させることには成功していたが、目的物の収率は不十分であった。本年度は3種類に反応パターンについて更に種々の条件検討を行った。すなわち、(i)アルキンの電気化学的なホモカップリングによるジイン合成(スイッチオン)を行ったのちに鈴木-宮浦反応によるテトラアリールブタジインへの変換(スイッチオフ)する反応と(ii)アリールボロン酸の酸化的ホモカップリングによるジイン合成(スイッチオン)の後に鈴木-*宮浦反応を行いテトラアレーンを合成するパターン、そして(iii)鈴木-宮浦反応(スイッチオフ)を行った後にアリールボロン酸との電気化学的なクロスカップリング反応(スイッチオン)を行う反応パターンの三種である。前者二者は(スイッチオン)→(スイッチオフ)の反応パターンであり、三つ目は(スイッチオフ)→(スイッチオン)の反応パターンである。なかでも前者二種類の反応パターンに関しては集積化プロセスが効率的に進行する系を確立することに成功し、目的とする拡張π電子系分子を基質一般性良く得ている。三つ目の反応パターンも中程度の収率ではあるものの反応自体は進行し、目的物を得ることに成功している。三つ目の反応パターンの収率低下の原因について精査したところ、本連続反応のそれぞれのステップのみを行うと高収率で目的物が得られることと、二段階目の反応にホウ酸を添加すると著しく反応性が低下することから、鈴木-宮浦反応の際に発生するホウ酸塩が続く電気化学的クロスカップリング反応を阻害しているらしいことが示唆された。ホウ酸塩を除去するかあるいはホウ酸塩の影響を受けない反応系の設計が今後の課題となる。今回合成したπ拡張ジインの一部はX線結晶構造解析にも成功しており、置換基によって結晶構造が大きく異なることも分かった。また、得られたジインの更なる分子変換も行った。本研究では、電解酸化において電気を流すと系が酸化条件になり、通電を止めるだけで系を容易に非酸化条件にスイッチできることに着目し、電気化学的カップリング反応プロセスと通常のカップリング反応との集積化による拡張π電子系化合物の効率的合成法の確立を目的としている。電気的スイッチのオン/オフで反応点を切り替えることができれば、電気的スイッチのオン/オフを繰り返しながら逐次的に反応を行うことで高速連続的分子変換システムが構築可能になると期待される。まず、ハロフェニルボロン酸の電気化学的ホモカップリング反応の開発に着手した。我々は既にTEMPOをメディエータに用いたアリールボロン酸のホモカップリング反応を報告しているが、本法では目的物はわずかしか得られなかった。そこでさらに条件を精査し、メディエータとしてパラベンゾキノン(pbq)を用い、70°Cに加温することで収率を42%にまで向上させることができた。次に末端アルキンの電気化学的ホモカップリング反応に着手した。まず銅触媒を用いて、系中での銅アセチリド発生を経るGlaser型カップリング反応を試みたが反応はほとんど進行しなかった。そこで種々条件検討した結果、Pd/Cu複合触媒系において、目的とするカップリング反応が効率よく進行することを見出した。電気化学的カップリング反応としてアリールボロン酸と末端アルキンを基質とした酸化的薗頭型反応も行った。種々条件検討した結果、陽極に銀板を用いると効率よく反応が進行することを見出した。これは系中で発生した銀イオンとアルキンが反応することで銀アセチリドが系中で発生し、これが鍵中間体として反応が進行しているものと思われる。次にこれらのカップリング生成物を用いて鈴木-宮浦反応を行った(電気オフのステップ)。いずれの場合も収率よくカップリング生成物を与えた。そこで、最後に電気オン・オフのステップを続けて行った。いずれの場合も二ステップ目(電気オフ)が単独に行った場合と比べて収率が低下するものの、反応は進行し、電気的スイッチングが可能であることが明らかとなった。収率の向上が今後の課題となる。

今回合成したπ拡張ジインの一部はX線結晶構造解析にも成功しており、置換基によって結晶構造が大きく異なることも分かった。また、得られたジインの更なる分子変換も行った。
西南中国からヒマラヤ地域のチベット・ビルマ系少数言語の記述研究

(1)中国四川省・雲南省およびヒマラヤ地域の分布するチベット・ビルマ系諸語の分布と現状を明らかにすべく、基礎的資料の収集を行ない、最新情報に基づく言語分布図を作成する基盤を整備した。(2)個別言語の記述研究としては、代表者がギャロン語とチアン語の記述調査を行なった。いずれも消滅の危機に瀕した言語であるが、基本的な文法と基礎語彙を収集できた。(3)調査対象地域の諸語の状況に柔軟に対応するため、研究協力者を現地に派遣し、イ語、キナウル語に関して、情報蒐集と基本的文法の記述を行なった。(4)前項と平行して、海外の協力者を調査地に派遣し、カチン語、羌語、ギャロン語に関して、分布状況・中国語との接触の現状を把握し、基本的文法の記述と基礎語彙の蒐集を行なった。(5)上記の業績はすべて「消滅の危機に瀕した言語の緊急調査研究」報告書の一部として公刊される。西南中国の〈川西民族走廊〉と呼ばれる地域の言語について現在までに公表されている調査報告と諸資料を幅広く収集し,言語分布図を作成した。また同地域の少数言語にかんする資料にアクセスするためのレファランスを作成し,言語地図と相互参照ができるようにリンクをさせている。今後はこのデータを核として,順次新たな情報を加え充実させていきたい。少数言語の一次資料の収集では,研究代表者の池田が2000年7月26日から9月1日まで中華人民共和国四川省甘孜チベット族自治州に赴き,カンディン県にてムニャ語タングー方言の基本構文を調査し,約400の例文について文法構造を記述したほか,ダオフ県ではジョーラー村にてダウ地方の伝統的チベット建築の語彙の収集を行なった。後者は建築学の専門家の協力を得て図面資料を作成していただき,また研究協力者として同行いただいたプロのビデオジャーナリストの撮影になる映像資料および写真資料と相互参照の可能な語彙資料集を作成中である。このほか8月には海外研究協力者のRandy LaPolla準教授(香港城市大学)がチアン語およびドロン語,Marielle Paris講師(西南民族学院)がギャロン語,戴慶厦教授(中央民族大学)がトゥージア語について,それぞれ中国国内にて調査を行なった。いずれも語彙資料の収集が中心であるが,整理のできた部分より順次データとして公開し,専門家ばかりでなく広く一般の利用に供する予定で準備をすすめている。昨年度にひきつづき西南中国の<川西民族走廊>と呼ばれる地域の言語について,現在までに公表されている調査報告と諸資料を幅広く収集しデータの蓄積に務めた。同地域のチベット系少数言語はヒマラヤからネパールに分布するチベット系諸語と密接な関係があることから、データの参照と一次資料の収集をより充実させるべく研究協力者の長野泰彦国立民族学博物館教授に依頼して平成13年10月より新たに研究分担者となっていただき,調査研究の推進にあたり調整とサポートをお願いした。研究対象の少数言語の一次資料の収集では,研究代表者の池田が2000年7月25日から9月1日まで中華人民共和国四川省甘孜チベット族自治州に赴き,カンディン県にてムニャ語タングー方言を調査し,チベット文化語彙および文法構造の記述研究を行ない,昨年度の現地調査資料の補充と充実に務めた。8月には池田の調査と同時期に海外研究協力者のRandy LaPolla準教授(香港城市大学)が四川省にてチアン語,Marielle Paris講師(西南民族学院)がギャロン語,戴慶厦教授(中央民族大学)が湖南省のトゥージア語について,それぞれ中国国内にて調査を行なった。いずれも語彙資料および基本的な例文の収集が中心であるが,調査結果は整理ので来た部分よりA03東・東南アジア調整班で編集中の『論集:東・東南アジアの少数言語調査2』に掲載予定。そのほか研究代表者の池田は8月に香港理工大学において,本特定領域研究の活動の概要を紹介する学術講演を行なった。
監査制度の有効性に関する実験的検証

理論モデルの構築に関しては,まずもっともよく知られた「囚人のジレンマ」ゲームを応用して、資本市場がレモン市場になる危険を常にはらんでいることを示した。また繰り返しゲームの概念を応用して、企業のゴーイング・コンサーンと会計の情報開示の問題点についても考察を加えた。次にシグナリング・ゲームを応用して、経営者の監査の購買が、資本市場のレモン市場化を防ぐことができることを示した。また取得原価主義会計や低監査報酬が、監査のシグナリング機能の阻害要因になることも指摘した。さらにこれらのモデルを基に、実際の市場を実験的に再現して監査の経済的役割を検証した。その結果経営者による監査の購買が、粉飾決算の防止と投資家の投資意欲を引き出すことに効果があることが示された。最後に前の実験とほぼ同様の設定で、経営者が監査を購買するコストが異なる市場を追加して実験的検証を行った。監査の購買コストの相違が、経営者の粉飾決算の防止と投資家の投資の誘引に及ぼす影響を探った。理論モデルの予想に反して、監査の購買コストの大きな市場では小さな市場より、経営者は努力を選択せずに監査を買って投資家に騙まし討ちをかける行為が多くなった。その結果投資家も守りに入り投資の選択は減少し、両者の獲得報酬も減少してしまった。これは、監査のコストが高くなると、監査の信頼性を利用して経営が努力自体を回避してしまう行動をとったと解釈できる。経営者は、努力と監査のコストの合計をシグナリングのコストと考えてしまい、直接観察できる監査の購買にはコストをかけるが、観察できない肝心の努力のコストを節約した可能性がある。監査の需要に関して、次のようにモデルの精緻化を進めた。監査を受けることが誠実な経営者を示すというシグナルリング機能を基礎としたモデルに、チープトーク・モデルの要素を加えて拡張を試みた。その結果実験の設定の理論的基礎が明確にできた。実験は売り手(経営者)買い手(投資家)の一対一のゲームとして試みたかったため、被実験者の覆面化が非常に重要であった。従来の実験ではこれが不十分であったが、VB(ビジュアル・ベイシック)を用いたゲームの完全プログラミング化によってこの問題はかなり解消された。ただし大学における実験設備の不備のために、覆面化の問題の完全解消は難しかった。しかし実験要領を工夫することによって、ほぼこの問題は解消されたと考えている。もう1つの重要な問題として被実験者のやる気をどのように引き出すかという問題があったが、報酬の与え方に工夫を凝らすことにより、かなり現実に近づけたゲームができたと考えている。実験は監査の買えるマーケットと買えないマーケットにおける売り手(経営者)と買い手(投資家)の行動を比較して、どのような変化が見られるかを検証するものである。条件を変えた2度の実験の結果は、いずれも監査の存在が売り手(経営者)の誠実な行動を引き出すことを検証できた。しかしいずれの実験でも買い手(投資家)の購買(投資)意欲を十分に引き出すことはできなかった。買い手(投資家)の購買(投資)意欲を引き出すには、監査コストを重くすることが必要であるということが考えられる。これはすでに1度実験で検証されているが、もう1度厳密な設定で再検証することが来年度の最大の課題と考えている。なお研究の成果は、今年度だけで2つの英文論文を含めた6つの論文と5つの国内外学会の報告にまとめられている。本年度は監査の購買コストと監査の信頼性の関係を中心に実験的に考察した。検証は、監査の購買コストの大小が、経営者と投資家の行動にどのような影響を及ぼすかに焦点を当てた。監査のシグナリング・モデルから、監査コストが小さくなるほど、経営者が努力を選択せずに監査を買った時の一時的利益が大きくなり、騙まし討ちの誘惑が大きくなる。

ところが監査コストが大きくなるにつれて、騙まし討ちの一時的利益が小さくなり、完全に努力回避的な経営者が監査を買うことが無意味になる瞬間が早く訪れる。この結果、監査の購買が努力を撰択した誠実な経営者を示すシグナルとして機能し、投資家も投資を選択することが最適な選択となるはずであった。ところが監査の購買コストの大きな市場では小さな市場より、経営者は努力をせずに監査を買って投資家に騙まし討ちをかける行為が多くなった。その結果投資家も守りに入り投資の選択は減少し、両者の獲得報酬も減少してしまっている。このことは、監査のコストが高くなると、監査の信頼性を利用して経営者が努力自体を回避してしまう行動をとることを示唆している。経営者は,努力と監査のコストを合計したものをシグナリングのコストとして考えてしまい、直接観察できる監査の購買にはコストをかけるが、観察できない肝心の努力のコストを節約した可能性がある。ゲームでは監査の購買コストが大きくなった分だけ、経営者の獲得報酬も少なくなる。経営者は、この減少分を理不尽なものと考え、投資家にも同じ理不尽を経験させるために、騙まし討ちをかけたという可能性も排除できない。現実に日本の経営者は、監査報酬の増大を理不尽なものと考えている可能性があり、経営者の本音を代弁した行動が実験でも表れた可能性がある。
重度の知的障害を呈する3疾患の病因遺伝子の同定と機能解析

平成15年-17年に以下の研究成果を得た。1)染色体6q16と12p12の相互転座、点頭てんかんと著明な精神運動発達遅滞が見られる症例FISH法、サザン解析と塩基配列の決定により、12p12の転座断点部位にPLEKHA5が局在することを明らかにした。一方、6q16の転座断点部位には遺伝子は存在せず、PLEKHA5が本症の病因遺伝子と考えられた。同遺伝子の神経細胞における作用を明らかにするために、マウスNeuro2a細胞にsiRNAを投与し特異的Plekha5をノックダウンし、20μMのビタミンA(RA)の存在下で3日間培養した。その結果、中等度の神経突起伸長障害が見られた。また、Plekha5の局在が細胞質であることを明らかにした。さらにアフィニティーカラムを用いて、約130kDaのPLEKHA5を精製した。2)伴性劣性疾患と考えられ、重度の精神運動発達遅滞が見られる症例家系員11名(内3名患者)の連鎖解析を行い、病因遺伝子座をXq27-terに限局した(DXS1205-ter、最大ロッド値1.10)。現在までにFMR1、SLC6A8など15種類の遺伝子ついて変異解析を行ったが、変異は同定していない。3)常染色体劣性遺伝の疾患と考えられ、出生後に著明な脳萎縮が進行する症例家系員10名(内4名が患者)の連鎖解析を行い、病因遺伝子座を2q36近傍に限局した(D2S163-D2S2344、最大ロッド値4.75)。脳で発現している16種類の遺伝子の変異解析を行い、家系内の全症例でSLC19A3にE320Qミスセンス変異をホモ接合体として認め、同変異が病因であると考えられた(正常コントロールには、同変異は認められなかった)。本遺伝子は膜蛋白質をコードしており、thiamineとbiotinのトランスポーターであると考えられている。そこで、同変異を含むSLC19A3を作製し、HEK293細胞に導入しトランスポーター活性を測定した。その結果、SLC19A3(E320Q)は野生型に比べて、[^3H]thiamineの細胞内への取り込みが軽度減少していたが、[^<14>C]biotinはSLC19A3自体に細胞内への取り込み作用が見られず、in vitroの実験では変異のあるSLC19A3の機能解析が不可能であった。現在、Slc19a3(E320Q)を脳神経で特異的に発現するトランスジェニックマウスの作製を行っている。

重度の知的障害を呈する症例の病因遺伝子を同定することは、同疾患の診断に寄与するだけでなく、胎生期の脳形成における同遺伝子の役割を解明する上で重要である。我々は以下の3疾患の病因遺伝子の同定を行っており、本年度の研究成果は以下のとおりである。1)染色体6q16と12p12に相互転座のみられる超重度精神運動発達遅滞の症例FISH法、サザン解析、PCRを用いて症例のゲノム遺伝子を解析した。6q16の断点部位は、BACクローン98I9の中のDKFZp564B0769から約9-kb上流であり、12p12の断点部位は、PEPP2 (Phosphoinositol-three-phosphate-binding PH-domain protein-2)の第16イントロン内にあることを明らかにした。PEPP2はフォスファチジルイノシトール三リン酸を結合するPHドメインを持つ約130kDaのタンパク質をコードし、全ての臓器で発現が見られた。2)伴性劣性遺伝を呈し重度の精神運動発達遅滞と易感染性が見られる症例3家系、11名のゲノムDNAを用いて連鎖解析を行い、DXS1205でmaximumtwo-pointlod score 1.10を得た。さらに、2q28のDXS8045からtelomeaにかけて0.92から1.01の同scoreを得た。同領域内の2個の遺伝子についてDNA解析を行ったが変異は同定できなかった。3)出生直後より著明な脳萎縮が見られ常染色体劣性遺伝と考えられる疾患重度の知的障害の病因遺伝子を同定し、同疾患の早期診断と病態解明を行う目的で、昨年に引き続いて以下の3疾患の解析を行った。1)染色体6q16と12P12に相互転座がみられ最重度精神運動発達遅滞を呈する疾患昨年、症例では12p12のPLEKHA5(pleckstrin homology domain containing, family A member、旧名PEPP2)の第16イントロン内で転座が起こっていることを明らかにした。本年度は、マウスおよびヒトのPLEKHA5に対する様々なsiRNAを作製し、その中の1個が293細胞においてPLEKHA5の発現量を70%以上低下させることを明らかにした。同siRNAを用いて、神経細胞におけるPLEKHA5の機能解析を行っている。2)伴性劣性遺伝を呈し、重度の精神運動発達遅滞と易感染性が見られる疾患昨年、家系内の全ゲノムの連鎖解析で病因遺伝子座と確認したXq28-ter領域内の12個の遺伝子(ARFGAP4、GDI1など)について変異解析を行ったが、変異は同定できなかった。3)出生直後より著明な脳萎縮が見られ、常染色体劣性遺伝を呈する疾患家系内の全ゲノムの連鎖解析を行い、病因遺伝子座を2q36近傍に同定した。最大ロッドスコアは4.15であった。同領域の15個の遺伝子(DNER、WDFY1など)について変異解析を行ったが、変異は同定できなかった。知的障害の病因遺伝子に関して、平成17年度は以下の研究実績を得た。1.染色体6q16と12p12の相互転座、点頭てんかんと著明な精神運動発達遅滞が見られる症例昨年までの研究により、12p12の転座断点部位にあるPLEKHA5が本症の病因遺伝子と考えられたので、同遺伝子の神経細胞における作用を解析した。方法:マウスNeuro2aにPlekha5に特異なsiRNAを導入し、20μMのビタミンA(RA)の存在下で3日間培養した。結果:神経突起の見られる細胞のうち、長径の2倍以上の突起が見られたのは約40%(siRNA投与のないコントロールでは約70%)であり、中等度の神経突起伸長障害が見られた。また、蛍光(pAcGFP)で標識したPlekha5をNeuro2aで発現させて、同蛋白質の細胞質局在を明らかにした。
高強度コンクリートを用いた薄層ホワイトトッピングの構造設計法の開発

平成19年度に実施いた研究の成果は以下のようである.1.HSCパネルとグラウトの接着性向上これまでの研究結果より,HSC-WTの力学的な挙動はHSCパネルとグラウトの接着にあることが明らかとなった.そこでの接着が失われると,HSCパネルにひび割れが発生する恐れがある.そこで,その接着性を高めるために,HSCパネル下面のテクスチャの改良とその面へのプライマ処理を試みた.その結果,接着性が改良され,舗装全体の長期供用性も改善された.走行実験における長期供用性の確認および3DFEMによる応力解析結果から,パネルとグラウトの接着が完全であれば,パネルに発生する荷重応力は強度に比べて非常に小さいことが判明した.このことから,そのような条件下ではパネル自体の疲労ひび割れは問題とならない.すると,アスファルト層自体の疲労が問題となる.そこで,本年度では,アスファルト層の力学的な応答を調べた.その結果,パネルの間の目地直上に車輪が作用した場合,縦断方向に大きな引張ひずみが発生することがわかった.その引張ひずみは,車輪の速度が低いほど,アスファルト層の粘性係数が小さいほど大きくなる.この引張ひずみを用いて疲労解析を行った結果,10,000,000輪以上に対応する寿命があることを確認した.これらのことから,パネルおよびアスファルト層は交通荷重に対して十分な構造的耐久性を持つことを確認した.平成19年度に実施いた研究の成果は以下のようである.1.HSCパネルとグラウトの接着性向上これまでの研究結果より,HSC-WTの力学的な挙動はHSCパネルとグラウトの接着にあることが明らかとなった.そこでの接着が失われると,HSCパネルにひび割れが発生する恐れがある.そこで,その接着性を高めるために,HSCパネル下面のテクスチャの改良とその面へのプライマ処理を試みた.その結果,接着性が改良され,舗装全体の長期供用性も改善された.走行実験における長期供用性の確認および3DFEMによる応力解析結果から,パネルとグラウトの接着が完全であれば,パネルに発生する荷重応力は強度に比べて非常に小さいことが判明した.このことから,そのような条件下ではパネル自体の疲労ひび割れは問題とならない.すると,アスファルト層自体の疲労が問題となる.そこで,本年度では,アスファルト層の力学的な応答を調べた.その結果,パネルの間の目地直上に車輪が作用した場合,縦断方向に大きな引張ひずみが発生することがわかった.その引張ひずみは,車輪の速度が低いほど,アスファルト層の粘性係数が小さいほど大きくなる.この引張ひずみを用いて疲労解析を行った結果,10,000,000輪以上に対応する寿命があることを確認した.これらのことから,パネルおよびアスファルト層は交通荷重に対して十分な構造的耐久性を持つことを確認した.本研究においては,既存のアスファルト舗装の補修工法として高強度コンクリートを用いた薄層ホワイトトッピングの構造設計法を開発する.そのために今年度は以下のような研究を実施した.すでに実施した走行試験においては,走行に伴うプレキャスト版の曲げひずみ,目地の補強版のひずみが測定されている.さらに今年度においては,目地に補強版を用いず,グラウトの種類やプレキャスト版下面のテクスチャさらにはプレキャスト版の長さを変えた試験舗装を建設し,そこで同様の繰返し走行試験を実施した.走行試験開始直後,1万輪,5万輪においてひずみ測定試験,路面観測を行って,長期パフォーマンスを観測した.これらの応答について,動的3DFEMによる数値シミュレーションを実施した.その結果,プレキャスト版の挙動にアスファルト層の粘弾性効果が強く現れることが判明した.シミュレーションの結果に基づいて,アスファルト層のモデルに必要な粘弾性パラメータを同定した.本研究で目指している設計法は,交通の繰返しによるコンクリート版の疲労とアスファルト層の疲労および流動変形を考慮するものである.そのようなホワイトトッピングの設計法について,本年アメリカ合衆国で開催されたコンクリート舗装の国際会議に参加し研究に必要な情報収集を行った.グラウト材およびプレキャスト版下面のテクスチャが接着に及ぼす影響について,室内試験による検討を行った.まず,過去の研究成果を検索して,適用可能な無機系,有機系および瀝青材料を含むいろいろなグラウト材料を選定した.これらについて施工性や付着実験を実施し,引張試験による接着性を調べた.その結果から接着性の良好なものを選択した.本研究においては,既存のアスファルト舗装の補修工法として高強度コンクリートを用いた薄層ホワイトトッピングの構造設計法を開発する.そのために今年度は以下のような研究を実施した.高強度ホワイトトッピング舗装の夏場における挙動を確認するために,試験舗装において載荷実験を実施した.舗装表面にひずみゲージを貼り,モデル車両を載荷して動的なひずみを測定した.その結果を3DFEMで解析した.これらの結果に基づいてアスファルト層の粘弾性パラメータを同定し,構造モデルを構築した.モデルを用いて応力解析を行い,パネルに生ずる応力について検討した.その結果をまとめると次のとおりである.(a)アスファルト層の粘弾性現象の影響が少ない.(b)高強度コンクリートパネルとグラウトが接着,非接着での状態で検討した結果,二層が接着状態にあることにより,パネル下面に発生する引張ひずみは減少する.(c)応力解析の結果,パネルに発生する応力はその曲げ応力より十分に小さい.

(d)パネルとグラウトが接着されることにより,パネル下面に発生する引張応力が小さくなる.(e)パネル下面に発生する引張応力は速度が速くなると応力は小さくなる.さらに,高強度ホワイトトッピング舗装の構造評価を小型FWDによって行うことが可能なのかどうかを検討した.そのために,試験補装においてたわみ波形を計測し,3DFEMによる計算結果と比較した.小型FWDによって測定したたわみ波形を3DFEMによってシミュレートした.実測したたわみ波形は計算されたものと傾向は似ているが,値自体は完全に一致しない.この原因については現在検討中である.ホワイトトッピング工法においては,パネルとグラウトの付着が非常に重要な役割を果たす.そこで,UFCパネルの凹凸キャラクタや打設方法およびプライマ処理などが付着強度に与える影響を検討した.パネルと無機系グラウト材の付着試験を行った結果,各要因が付着強度に与える影響を把握できるとともに,目標とする強度が得られることが確認された.平成19年度に実施いた研究の成果は以下のようである.1.HSCパネルとグラウトの接着性向上これまでの研究結果より,HSC-WTの力学的な挙動はHSCパネルとグラウトの接着にあることが明らかとなった.そこでの接着が失われると,HSCパネルにひび割れが発生する恐れがある.そこで,その接着性を高めるために,HSCパネル下面のテクスチャの改良とその面へのプライマ処理を試みた.その結果,接着性が改良され,舗装全体の長期供用性も改善された.走行実験における長期供用性の確認および3DFEMによる応力解析結果から,パネルとグラウトの接着が完全であれば,パネルに発生する荷重応力は強度に比べて非常に小さいことが判明した.このことから,そのような条件下ではパネル自体の疲労ひび割れは問題とならない.すると,アスファルト層自体の疲労が問題となる.そこで,本年度では,アスファルト層の力学的な応答を調べた.その結果,パネルの間の目地直上に車輪が作用した場合,縦断方向に大きな引張ひずみが発生することがわかった.その引張ひずみは,車輪の速度が低いほど,アスファルト層の粘性係数が小さいほど大きくなる.この引張ひずみを用いて疲労解析を行った結果,10,000,000輪以上に対応する寿命があることを確認した.これらのことから,パネルおよびアスファルト層は交通荷重に対して十分な構造的耐久性を持つことを確認した.