hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
セラミックス材料の最適な乾燥及び焼成条件の確立に関する研究

ファインセラミックス製造過程において結合剤、可塑剤、溶媒等をセラミックスから乾燥及び焼成により除去する際、亀裂の発生、変形、溶剤の炭素化を防ぎ、良い乾燥条件及び焼成条件を確立するため、以下の実験的および解析的な検討を行った。1)セラミックスの透水係数、オスモティック・サクション・プレッシャー等の物質移動に関する物性値及び有効熱伝導率、熱拡散率等の熱物性値の溶剤含有率に対する変化を測定し、乾燥速度、含水率分布の推定を可能にした。2)乾燥時及び焼成時における粘土の力学的諸物性の含水率に対する変化を測定し、上記の乾燥モデルと応力モデルを組み合わせて乾燥過程に生ずる応力の推算を可能にした。3)セラミックスと同様な挙動を示すコークス内の熱応力の発生モデルを提案し、コークスの力学的物性値を測定し、亀裂生成のメカニズムを明らかにした。4)動的最適化問題の手法を取入れ、亀裂が発生せず、変形量が小さな乾燥条件を計算し、実験により検証した。5)多孔質内の物質と熱の同時移動の解析を行い、物質に伴う熱移動量及び輻射伝熱量の全伝熱量に寄与する割合を明らかにした。
協同学習の実践的指導力を育成する教師教育用ケースメソッド教材の開発

本研究の目的は,理科を教える教員及び教員志望学生に対して,協同学習を実践的に指導する力を育成することである。現在までに開発した2編の学習プログラムが完成している。1つはAL学習上の問題点を取り上げたもので1マンガ教材:小学校理科の協同的な児童実験で発生する問題場面が描かれたメインストーリーと協同学習の理論を取り入れ改善された授業場面が描かれたサブストーリー。2テキスト:協同学習の5つの基本的構成要素ごとに設問が準備されている。3マンガテスト:協同学習の理解を判断するために異なった学習場面をマンガで描いた評価問題。4指導者用解説書:本プログラムを実施するための指導者用教本。5学びのバージョンアップとして協同学習の理論や実践を解説した予習・復習教材の5つである。本プログラムの特徴は,ジョンソンらの5つの基本的構成要素に沿った実践的指導力を獲得できることである。これに加えて2018年度は続編としてジグソー学習版を開発した。現在,マンガ教材とテキストの初期版が完成している。現在までの実験研究は,2017年度に小学校教員志望大学生86名,理科以外の中高等学校教員志望大学生157名,現職教員28名を対象に,(a)学習への参加状況・使用感や効果,(b)主体的で対話的な授業に対する自信や興味の変化,(c)協同学習の判断力評価を実施し,有効性が認められた。続いて2018年度に大阪府内の現職教員51名を対象に,(a)学習への参加状況・使用感や効果,(b)自由記述による感想による評価を実施し,有効性が認められた。Web版の開発においては,マンガ教材を閲覧できるホームページを開設すると同時に,双方向型教授システムのパイロット版として,Face Bookを用いた学習プログラムを試行した。本研究の目的の達成状況は,ほぼ80%に達しており,順調に研究は進んでいるものと判断する。マンガケースメソッド学習プログラムの開発に関しては,ジョンソンらの5つの基本的構成要素を実践的に学ぶための基礎教材と続編としてジグソー学習編が完成している。2017年度には初期版のマンガケースメソッドプログラムを用いて実験研究を行った。対象は教員志望大学生243名,現職教員28名である。その結果,本プログラムの有効性が認められた。これらの結果については2つの査読付き論文と学会発表を4か所で行い公表してきた。加えて審査中論文が2編ある。2018年度には,ジグソー編を用いて実験研究を行った。対象は現職教員51名である。本研究の成果は2019年度に発表に向けて作成中である。Web版の学習プログラムは,タブレット端末を用いた双方向型ポインティングシステムの実験研究を行い,査読付き論文として発表した。また,マンガ教材配信用のホームページを立ち上げ公開中である。マンガケースメソッド学習プログラムに関しては,続編となるジグソー学習の授業場面を取り入れたマンガ教材とテキストが完成し,実験研究を行っている。今後は指導者用教材と復習用教材を開発する予定である。Web版に関しては,Face Bookを中心に開発したプロトタイプの学習プログラムの実験から得られた知見を元に改良し,新たなWeb版学習プログラムの開発を検討してきたが,実現の可能性が低いことから,Webとペーパーを併用するハイブリッド版の開発を優先しようと考えている。新たに開発したマンガケースメソッド学習プログラム:ジグソー編は,教員養成系大学,専門職大学院,及び現職教員研修の場で評価を実施しさらなる改善を試みる予定である。これらの成果に関しては,第7回日本科学教育学会研究会(関西支部大会),日本理科教育学会全国大会,日本科学教育学会第43回年会,協同教育学会全国大会等で発表する予定である。また,これまでの研究の成果をまとめ,理科教育学会に総論として投稿する予定である。そのために,ナラティブアプローチを取り入れた教師教育用ケースメソッドプログラムを開発してきた。また,取り入れた協同学習の理論は,ジョンソンらが開発した5つの基本的構成要素である。現在までに開発した学習プログラムは1マンガ教材:小学校理科の協同的な児童実験で発生する問題場面が描かれたメインストーリーと協同学習の理論を取り入れ改善された授業場面が描かれたサブストーリーから構成されている。5学びのバージョンアップ:協同学習の理論や実践を解説した予習・復習教材の5つである。本プログラムの特徴は,ジョンソンらの5つの基本的構成要素に沿った課題をメインストーリーから読み取り,独自に対策を考え,他者と共有する。つづいて,サブストーリーから協同学習の理論に沿った改善方法を協力しながら読み取り相互に比較する。最後に個人の判断に協同学習の理論を適応させることで実践的指導力を獲得するというものである。現在までの実験研究は,実践研究は,小学校教員志望大学生86名,理科以外の中高等学校教員志望大学生157名,現職教員28名を対象に,(a)学習への参加状況・使用感や効果に関して,(b)主体的で対話的な授業に対する自信や興味の変化に関して,及び,(c)協同学習の判断力評価を実施し,有効性が認められてきた。Web版の開発においては,マンガ教材を閲覧できるホームページを開設すると同時に,双方向型教授システムのパイロット版として,Face Bookを用いた学習プログラムを試行している。

本研究の目的の達成状況は,ほぼ60%に達しており,順調に研究は進んでいるものと判断する。まず,マンガ教材の開発に関しては,ジョンソンらの5つの基本的構成要素を実践的に学ぶためのマンガ教材の初期版が完成し,そのマンガを用いてケースメソッドプログラムを作成した。今後はこのマンガ教材の改善を行うと同時に,新たにジグソー学習版のシナリオを作成している。初年度内に,完成した初期版のマンガケースメソッドプログラムを用いて実験研究を行った。対象は教員志望大学生243名,現職教員28名である。その結果,本プログラムの有効性が認められた。これらの結果については2つの査読付き論文と学会発表を4か所で行い公表してきた。現状ではペーパーベースの実験研究が中心であるが,Web版の学習プログラムを用いた実験研究も進行中である。具体的には,タブレット端末を用いた双方向型ポインティングシステムの実験研究を行い,査読付き論文として発表した。また,マンガ教材配信用のホームページを立ち上げテスト的に公開を開始すると同時にFace Bookを中心に開発したプロトタイプの学習プログラムを実験中である。本研究の目的は,理科を教える教員及び教員志望学生に対して,協同学習を実践的に指導する力を育成することである。現在までに開発した2編の学習プログラムが完成している。1つはAL学習上の問題点を取り上げたもので1マンガ教材:小学校理科の協同的な児童実験で発生する問題場面が描かれたメインストーリーと協同学習の理論を取り入れ改善された授業場面が描かれたサブストーリー。2テキスト:協同学習の5つの基本的構成要素ごとに設問が準備されている。3マンガテスト:協同学習の理解を判断するために異なった学習場面をマンガで描いた評価問題。4指導者用解説書:本プログラムを実施するための指導者用教本。5学びのバージョンアップとして協同学習の理論や実践を解説した予習・復習教材の5つである。本プログラムの特徴は,ジョンソンらの5つの基本的構成要素に沿った実践的指導力を獲得できることである。これに加えて2018年度は続編としてジグソー学習版を開発した。現在,マンガ教材とテキストの初期版が完成している。現在までの実験研究は,2017年度に小学校教員志望大学生86名,理科以外の中高等学校教員志望大学生157名,現職教員28名を対象に,(a)学習への参加状況・使用感や効果,(b)主体的で対話的な授業に対する自信や興味の変化,(c)協同学習の判断力評価を実施し,有効性が認められた。続いて2018年度に大阪府内の現職教員51名を対象に,(a)学習への参加状況・使用感や効果,(b)自由記述による感想による評価を実施し,有効性が認められた。Web版の開発においては,マンガ教材を閲覧できるホームページを開設すると同時に,双方向型教授システムのパイロット版として,Face Bookを用いた学習プログラムを試行した。
ウサギの脊髄局所冷却による脊髄保護効果と小胞体ストレス反応の関係についての検討

本研究では、ウサギの脊髄虚血モデルおよび脊髄冷却モデルを用い、脊髄虚血後の運動神経細胞死における小胞体ストレス反応の関わりと、冷却による脊髄保護のメカニズムの一部を解明することを目指した。しかしながら、小胞体ストレス関連蛋白は蛋白抽出が非常に不安定で、解析に足りうる試料の作成に至らなかった。このためオートファジー関連蛋白を併せて解析を行い、脊髄虚血によりオートファジー関連細胞死が起こっている可能性があることが示唆された。また脊髄保護モデルにおいてはオートファジー抑制因子であるBcl-2の発現が有意に高く遷延していることが確認できた。脊髄虚血による対麻痺は,下行大動脈瘤や胸腹部大動脈瘤手術時の合併症として最大20%の頻度で認められ,術後の患者のQOLを考える上で非常に大きな問題となっている.これまでにも,脊髄保護目的に,様々な薬物療法や低温療法,脊髄ドレナージ法が臨床応用されてきたが,いまだ確立された脊髄保護法はない.一方で,診断技術の進歩,高齢化の進行,生活様式の欧米化等により,大動脈瘤の患者は確実に増加しており,手術成績向上のために,脊髄虚血による対麻痺の進展に関するするメカニズムの解明や,その予防法の確立に対する重要性は増している.本研究の目的は,ウサギの脊髄虚血モデルおよび脊髄冷却モデルを用い,脊髄虚血後の運動神経細胞死における小胞体ストレス反応の関わりと,冷却による脊髄保護のメカニズムの一部を解明することである.平成24年度は前年度に引き続き脊髄虚血モデルおよび脊髄冷却モデルの作成と、得られた脊髄組織を用いてwesternblot analysis及び免疫染色による関連蛋白質の解析を行った。モデル作成は予定数に達し、Jhonson scoreによる後脚機能評価によれば脊髄冷却により対麻痺は良好に回避されることが改めて確認された。現時点では、得られたsampleを用いてwestern blot analysis及び免疫染色を行い、小胞体ストレス関連蛋白に加えAutophagy関連蛋白の解析を行っている。脊髄虚血による対麻痺は、下行大動脈瘤や胸腹部大動脈瘤手術時の合併症として最大20%の頻度で認められ、術後の患者のQOLを考える上で非常に大きな問題となっている。これまでにも、脊髄保護目的に様々な薬物療法や低温療法、脊髄ドレナージ法が臨床応用されてきたが、いまだ確立された脊髄保護法はない。一方で、診断技術の進歩、高齢化の進行、生活様式の欧米化等により、大動脈瘤の患者は確実に増加しており、手術成績向上のために、脊髄虚血による対麻痺の進展に関するするメカニズムの解明や、その予防法の確立に対する重要性は増している。本研究の目的は、ウサギの脊髄虚血モデルおよび脊髄冷却モデルを用い、脊髄虚血後の運動神経細胞死における小胞体ストレス反応の関わりと、冷却による脊髄保護のメカニズムの一部を解明することである。平成25年度は脊髄虚血モデルおよび脊髄冷却モデルからそれぞれ得られた脊髄組織を用いてwesternblot analysis及び免疫染色による関連蛋白質の解析を行った。平成23年度からは小胞体ストレス関連蛋白に加えオートファジー関連蛋白の解析も行っている。Johnson scoreによる後脚機能評価によれば脊髄冷却により対麻痺は良好に回避されることが改めて確認された。これには小胞体ストレスおよびオートファジー関連蛋白が関わっていると考えているが、小胞体ストレス関連蛋白は蛋白抽出が非常に不安定で、解析に足りうる試料の作成に至らなかった。一方で、オートファジー関連蛋白に関しては順調な解析が進み、現在論文執筆中の段階にある。脊髄虚血による対麻痺は,下行大動脈瘤や胸腹部大動脈瘤手術時の合併症として最大20%の頻度で認められ,術後の患者のQOLを考える上で非常に大きな問題となっている.これまでにも,脊髄保護目的に,様々な薬物療法や低温療法,脊髄ドレナージ法が臨床応用されてきたが,いまだ確立された脊髄保護法はない.一方で,診断技術の進歩,高齢化の進行,生活様式の欧米化等により,大動脈瘤の患者は確実に増加しており,手術成績向上のために,脊髄虚血による対麻痺の進展に関するするメカニズムの解明や,その予防法の確立に対する重要性は増している.本研究の目的は,ウサギの脊髄虚血モデルおよび脊髄冷却モデルを用い,脊髄虚血後の運動神経細胞死における小胞体ストレス反応の関わりと,冷却による脊髄保護のメカニズムの一部を解明することである.平成23年度は主に脊髄虚血モデルおよび脊髄冷却モデルの作成を行った。予定よりやや遅延しているものの順調にモデル作成を進めており、Jhonson scoreによる後脚機能評価によれば脊髄冷却により対麻痺は良好に回避されることが改めて確認された。現時点では得られたsampleを用いてwestern blot analysisを行い、小胞体ストレス関連蛋白に加えAutophagy関連蛋白の解析を行っている。モデル作製は予定より若干遅れたものの予定数に達した。術中のデータ、Jhonson score等のdataは解析が終了した。蛋白の解析においては蛋白抽出が若干不安定で予定より実験の遅れが生じている。免疫染色に関しては予定通り解析を行っている。

当施設のアニマルセンターにてウサギを飼育しているが、当科の使用できるケージ数が限られておりモデル作成にやや時間を要している。また、蛋白の解析においても淡泊抽出が不安定で予定より実験の遅れが生じている。Western blot analysisによる蛋白発現の解析を継続し、加えて免疫染色(光学および蛍光)による評価を行う。得られた結果を論文化する。モデル作製を継続して行うとともに、Western blot analysisによる蛋白発現の解析を継続し、加えて免疫染色(光学および蛍光)による評価を行っていく。解析用の試薬・消耗品の購入、データ解析を行うテクニカルスタッフの人件費に充てる予定としている。モデル作製用に実験動物(購入・飼育・廃棄)費、Western blot analysis解析用に試薬・抗体の購入費、テクニカルスタッフの人件費に充てたいと計画している。
分裂終期のタバコBY-2細胞より単離した190-KDaMAPの機能解析

SDS-PAGE後PVDF膜にブロットして切り出した190-KDaMAPをBrCNにより部分分解し、得られたペプチド断片をSDS-PAGEで分離後、PVD膜にブロットした。幾つかのバンドを切り出し、ペプチドシークエンサーによってアミノ酸配列を調べた。これにより、それぞれ23、20、16、13残基の長さに4箇所のアミノ酸配列を解読する事ができた。検索の結果、得られた配列はいずれも、既知の配列との相同性が低かったため、190-kDaMAPが全く未知のタンパク質である可能性が考えられた。アミノ酸配列の情報を基に、対応するcDNAの配列を予想し、縮重が小さくなる部分を選んで、PCRのための縮重プライマーをセンスプライマーとアンチセンスプライマーを合わせて14通り合成した。PCRのための鋳型DNAとして、アフィディコリンを用いて細胞周期をG2期から前期に同調化したBY-2細胞よりSDS-LiCl法により単離した全RNAを、ポリTカラムで精製して得たmRNAからAMV逆転写酵素を用いて合成したものを用いた。作成したプライマーの意味のあるすべての組み合わせについて、TaKaRaLATaqを用いてPCRを行ったところ、多くの組み合わせにおいて、複数の産物の増幅が見られたが、幾つかの組み合わせにおいて特異的と思われる産物が増幅されたため、現在これらをTAクローンニングし塩基配列の解読を行っている。また、一箇所の部分アミノ酸配列から、二つ作成したプライマーを用いて、nested PCRによる増幅も試みている。
窒化物半導体超薄膜“１分子層”量子井戸構造光素子の基盤科学技術開拓

本研究では、“1分子層"InN/GaN構造の高い構造完全性と特徴的な高温自己形成プロセスを高度化・展開し、InN/GaN擬似混晶の構造・物性制御への挑戦および太陽電池への応用について検討を行った。MBEでの構造制御では、(1分子層InN)/(4分子層GaN)まで超薄膜化された短周期超格子がコヒーレント成長され、電子系が連続バンド状態を示したことから、InN/GaN擬似混晶バンドエンジニアリングの可能性が実証された。一方、MOVPEでは擬似混晶プロセスを導入したInGaN太陽電池の接合特性が大幅に改善され、20 MΩ・cm2以上(測定系検知限界)の世界最高水準の接合リーク抵抗が達成された。本研究の目的は、窒化物半導体超薄膜"1分子層"InNの極めて高い構造完全性と優れた光学特性を活用した光素子創製の基盤科学技術開拓である。平成23年度は下記計画に基づいて研究を進めた。(1)"1分子層"InNの±c-GaN極性面上堆積過程と構造特性・光物性の精密評価、その展開分子線エピタキシで開拓した"1分子層"InN成長プロセスを、有機金属気相成長(MOVPE)から検討した。+c/-c極性での平坦GaN-MOVPE成長条件を確立し、それを下地層とした1分子層Inの表面吸着・脱離過程を分光エリプソメトリ実時間その場観察により解析した。下地GaNからの強いIn吸着作用が、基板温度800°Cより高温域でも発現し、吸着In原子の自己形成/停止層厚が、+c-GaN(-c-GaN)表面上では2原子(1原子)層との知見を得た。(2)"1分子層"InN井戸層構造のバンド間吸収、光励起・熱励起増感特性の理論解析光素子の最適適用例として、(InN)m/(GaN)n(m,n≦4分子層)短周期超格子(SPS)で構成されるタンデム型太陽電池をターゲットに据え、SPS実効バンドギャップ(Eg)の理論解析と太陽電池最適構造設計を行った。SPS層厚(m,n)比を一定、すなわち平均格子定数も一定、のまま(m,n),(2m,2n),(3m,3n)と整数倍に変化させると、200mV程度のEg減少が可能であり、中間バンド(増感型)太陽電池に利用できることが分かった。(3)"1分子層"InN井戸層構造内在GaNホモpn接合の電気的・光学的特性評価"1分子層"InNが螺旋転位の悪影響を不活性化する新機能を見出し、GaNホモダイオードでの接合特性改善を実証した。"1分子層"InNナノディスクの挿入より、電子線誘起電流(EBIC)像での暗点密度が1×1O^7cm^<-2>から3×10^6cm^<-2>に低減され、リーク電流抑制効果があることを示した。本研究の目的は、窒化物半導体超薄膜“1分子層"InNの極めて高い構造完全性を活用した光素子創製の基盤科学技術開拓である。平成25年度は、「InN/GaN=1分子層/4分子層」擬似混晶のMOVPEプロセス開拓と、これを光吸収層とした太陽電池の作製に注力し、下記成果を得た。1.「InN/GaN=1分子層/4分子層」擬似混晶のMOVPEプロセス開拓・構造精密制御:当グループの独自技術である1分子層InN高温成長・非平衡動的プロセスを、先行するMBEからMOVPEに展開し、太陽電池光吸収層に適用できる「実効In組成10 %以上、膜厚200 nm以上」の擬似混晶InGaN成長プロセス開拓に取り組んだ。分光エリプソメトリin-situ観察により成長表面を1分子層レベルで精密に制御し、InGaN擬似混晶の実効In組成を3-6 %から10.5 %まで増大できた。2.擬似混晶InGaN光吸収層/pn-GaN太陽電池の波長感度評価:窒化物半導体太陽電池の波長感度特性から、光励起キャリアの輸送特性を評価した。InGaN擬似混晶の厚膜化(266 nm)と実効In組成増大(10.5 %)により、波長420440 nm帯まで応答波長域が拡大された。また、受光面側のp-GaN層厚・ドープ密度の最適化によってキャリア輸送効率が向上され、短絡電流密度Jsc > 1 mA/cm2が得られるようになった。

3. MBE・MOVPE成長した窒化物半導体太陽電池の接合特性改善:成長表面の精密制御が特徴である1分子層形成技術を基板表面処理・界面制御に適用することで、太陽電池の接合特性が改善されることを実証した。MBEでは、接合リーク抵抗が2.6k・Ωcm2 →59 k・Ωcm2に1桁高抵抗化された。MOVPEでは、大幅に接合リーク抵抗が改善され、156 k・Ωcm2 →20 M・Ωcm2以上となった。本研究の目的は、窒化物半導体超薄膜“1分子層"InNの極めて高い構造完全性と優れた光学特性を活用した光素子創製の基盤科学技術開拓である。平成24年度は下記計画に基づいて研究を進めた。(1) “1分子層"InN/GaN短周期超格子の成長プロセス開拓・構造精密制御:その場観察を駆使した“1分子層"InN高温・自己形成/停止成長プロセスを発展させ、“1分子層"InN/GaN短周期超格子の構造精密制御プロセス開拓に注力した。MBE法では、非平衡・動的表面堆積プロセスを分光エリプソ/電子線回折から把握し、成長表面のドライ化を精密に制御することで、InN/GaN = 1分子層/4分子層短周期超格子のコヒーレント成長を達成することができた。高分解能透過電子顕微鏡観察からも界面揺らぎが1分子層程度まで制御されていることを確認した。(2) “1分子層"InN/GaN短周期超格子の光電子物性の精密解析:“1分子層"InN/GaN短周期超格子(GaN = 1 - 20分子層)の光電子物性に関して、フォトルミネッセンス法による評価を行った。現状の超格子では、実効的In組成が設計値より低く、例えば、InN/GaN = 1分子層/4分子層では10 %であることが分かった。また、短周期化に伴い、バンド端以外にも深い準位からの発光が観測され、格子歪によって遷移経路が影響を受ける可能性が示唆された。(3) “1分子層"InN/GaN短周期超格子内在GaNホモpn接合の電気的・光学的特性評価:“1分子層"InN/GaN短周期超格子を挿入したGaNダイオードの接合特性・光電変換特性を評価した。MOVPE成長したデバイスでは、Xeランプ照射下での開放端電圧2 V以上が実証され、“1分子層"InN/GaN短周期超格子が太陽電池に有用であることが実証された。本研究の目的は、窒化物半導体超薄膜“1分子層"InNの特徴を活用した新規光素子の基盤科学技術開拓であった。平成26年度は最終年度であるため、これまでの集大成として、高In組成(> 20 %)InGaN太陽電池に向けた課題解決のために「格子緩和InGaN上InN/GaN短周期超格子の実効In組成増大」と「接合リーク源の自己終端化プロセス」の検討を行った。1. MBE成長InGaN窒化物太陽電池での実効In組成増大(20-30 %):“1分子層"InNを素構造とする太陽電池光吸収層に関して、格子歪マネージメントの観点から、GaN上よりも格子緩和InGaN上成長とした方が、“1分子層"InN/GaN短周期超格子の実効In組成の増大化が期待できる。これにより、“1分子層"InN/3分子層GaN短周期超格子が、設計通りの実効In組成=21 %を示すことができた。また、実効In組成29 %のInGaN/pn-GaN太陽電池では、波長530 nmまでの応答が実証され、AM-1.5変換効率向上の見通しが得られた。2.接合リーク源/欠陥の自己終端・修復化ナノパッチプロセス:窒化物太陽電池の巨大な接合漏れ電流の起源は、貫通転位に限定されない成長プロセス誘起の欠陥群だと判断される。この終端化に、“1分子層"InN自己組織化プロセスを高度化させたin-situ欠陥終端ナノパッチを発案し、ワイドギャップ酸窒化物ナノパッチ形成プロセスを検討した。MBE成長pn-
宮廷風恋愛詩における説得のレトリック分析を通じた「至純の愛」理念の再検討

オイル語宮廷風恋愛詩(12ー14世紀)について、これが比喩として婦人に付与された封主の地位に付随する義務や属性を暗黙の前提として出発し、そこからの類推によって婦人は話者の愛の要求に承諾を与えてしかるべきと結論する、二種の省略三段論法を主幹とする一種の要求弁論のテクストであるとの新しい解釈モデルを提唱する。さらに、説得弁論という文脈において浮上する、婦人を主君になぞらえる詩的操作および「至純の恋人」という表現の戦略的側面と、そこに交錯するさまざまな思考様式を明らかにしつつ、「至純の愛」というキーワードに見いだすべき意味作用の拡大を提案する。本年度は分析対象を14世紀まで拡大し、より網羅的なトピックの収集・分類に努めるとともに、前年度の研究成果もふまえつつ、宮廷風恋愛詩における論理構造の解明に取り組んだ。すなわち、個々のモチーフを「よってあなたは私に愛を与えるのが正当である」というひとつの結論へ導く小前提として機能せしめる、省略大前提の特定作業を、武勲詩や物語(ロマン)、物語詩(ディ)等の周辺諸ジャンルや同時代の君主教育論・処世術指南書との照合、さらにM.ブロックやH.ラシュドールらの中世社会史研究への参照を通じて行い、このジャンルが、封主に仮構した女性ー彼女には、その地位に由来する種々の義務が、暗黙のうちに設定されるーを被告とし、あらゆる反論を封じ込める技量を競う、「報酬を求める法廷弁論」を模した知的遊戯であったと結論した。さらに、かくのごとき知的遊戯の発想が、女という性に対するいかなる認識の表れであるのか、中世の恋愛論・恋愛指南書に関する前年度の分析結果にも照らし合わせながら考察を重ねるとともに、従来の「至純の愛(フィナモール)」観を改めて批判的に検討し、これが一般的解釈に反して前世紀までの文学において表明される女性観や同時代の女性嫌悪(ミゾジニー)文学の記述と通底すること、また、女性の地位に何らかの変化・上昇が認められるとすれば、それは君主に仮構されることそれ自体にではなく、合理的思考を有しうる存在として前提されていることにおいてである、との新たな解釈を提唱する準備に着手した。最終年度である本年度は、前年度までの分析結果を取り纏めながら考察を押し進めるとともに、コーパス及び周辺的資料の参照範囲を拡大したうえでその考察の妥当性を検証し、さらには当時の修辞学教育の実践の実態とも関連づけることによって、オイル(古フランス)語宮廷風恋愛詩の再定義に成功した。すなわち、1<封主は封臣の奉仕に対して「誠実義務」を負う>という暗黙の大前提に立脚する<貴女は封主であるから私=封臣に報酬を与えてしかるべきである>という論法、2<臣下の鑑たる主君はあらゆる美徳を具えてしかるべきである>というもうひとつの省略大前提に立脚する<貴女は封主であるから私=封臣に慈悲をかけてしかるべきである>という論法の、二種類の省略三段論法(エンテュメーマ)から成り立つ、要求の法廷的類弁論を模した知的遊戯のテクスト、との定義である。また、上の二種の論法において帰結を構成する二つのキーワード(「報酬」と「慈悲」)は、恋愛という文脈では共に肉体的欲望の充足を指示する同義語に他ならず、「至純の愛」や「至純の恋人」といった詩的表現は、従来そう解釈されてきたような昇華された情愛の理想を表すものなどではなく、むしろ『創世記』のエヴァに由来する「劣った性」としての女性観に基づく、籠絡のための美称であることが明らかになった。そのうえ詩人たちは、こうした彼らの知的営為がキリスト教的道徳規範に背反しているという意識のもとに創作していたのである。ここから、「至純の愛」の本質は籠絡の意図と罪悪感を隠蔽する修辞的韜晦であり、女性に対する崇敬の比喩と理解されてきたジャンル最大の特徴、すなわち封建的主従関係のアナロジーは、俗世における正義の論理ーその論理に照らすかぎり、情欲の充足も、努力を通じた獲得物という様相をまとわせれば正義に変わるーを介した自己正当化の装置であると結論づけるに至った。最も古い年代に属するオイル語宮廷風恋愛詩群、すなわちクレチヤン・ド・トロワ、ブロンデル・ドゥ・ネール、ガース・ブリュレ、ギヨー・ド・プロヴァンスといった、12世紀後半から13世紀初めにかけての詩人たちのテクストについて、主要なモチーフとそれらの作品中における配列の特徴を抽出するとともに、それらの詩的効果をR.ドラゴネッティらの研究成果を踏まえながら整理した。

また、これを中世の知識階層に直接的あるいは間接的に影響を及ぼしたとみなしうる、古典古代の弁論術の著作物と照合する作業を通じて、このジャンルが心情吐露ではなく、聴衆(読者)の心理をも操作しながら、意中の女性に愛人としての契約を結ばせるという明確な目的のもとに構成された、説得の演説としての性格を有することが明らかになった。そのかたわら、同時代の恋愛術指南書に数多くあたり、上の解釈の裏付けがなされた。すなわち、求愛という言表行為について、同時代の知識人たちは、世の非難を受けずして自らの性的欲望を充足させるための合理的手段であり、女性の身分や性向に応じて戦略的に行われなければならない、と認識していたこと、また、この理念の実践例として挙げられるテクストが、宮廷風恋愛詩のテクストと、あらゆる面で著しい類似性を有することが観察されたのである。さらに、問答歌や愚歌といった、13世紀にさかんに創作されるようになった宮廷風恋愛詩のメタテクストの分析ーそこでは、詩人たちがこのジャンルのレトリック性にいかに関心を寄せていたか、浮き彫りになったーも、宮廷風恋愛詩を説得の技量を競う知的遊戯として認識することの妥当性を補強することになった。宮廷風恋愛詩というひとつの文学的現象に対する新たな解釈法の妥当性を、計画どおり、中世フランス詩人たちの創作活動をとりまくさまざまな領域から多角的に検証することができた。また、分析の対象とする作品の時代をさらに拡大したことによって、仮説を補強し得たのみならず、例外やジャンル衰退の表れ等と認識されてきた13世紀末から観察される宮廷風恋愛詩の変化についても、社会とこれに連動する心性の変化に応じた説得力強化の模索、という観点から、積極的な意義を付与し得たことにおいても、本年度の研究は実り多いものであったと評し得る。本年度末に分析結果をとりまとめ、成果を学会に問う予定であったが、総括作業の過程で、当時の知識人たちが共有していた修辞学的理論の文学的応用に対する嗜好と実践の慣習の浸透状況も検証し、提唱される新しい解釈の妥当性を裏付ける必要性が生じた。このための文献調査と解析、および研究成果の発表を、次年度に繰り越すこととなった。絶版や入荷待ち等の事由で入手が遅れている資料があり、コーパスの分析の進度にやや遅れが生じたものの、宮廷風恋愛詩の周辺的作品・ジャンルへの参照を予定以上に拡大し得たことによって、堅固な理論的基盤の構築が可能になった。前項にも述べたように、これまでの研究成果を総括する作業の過程で、当時の知識人たちが共有していた修辞学的理論の文学的応用に対する嗜好と実践の慣習の浸透状況を検証し、提唱される新しい解釈の妥当性を強化する必要性が生じた。したがって、次年度は、まずJ.J.マーフィー『中世における修辞学』とそこに挙がる文献資料を手がかりに、1214世紀におけるレトリック教育の状況を検討する。この作業と平行して、コーパスの各詩人のキャリアについてH.ペテルセン=ディグヴらを始めとする先行研究にあたりながら確認し、宮廷風恋愛詩を伝統的修辞学理論の文学的実践の一形態と認識することの妥当性を検証する。そのうえで、平成23、24年度における研究結果をとりまとめ、成果を学会に発表する準備を進める。本年度の成果をもとに、エンチュメーマの小前提を構成する各モチーフが前提としている理念の抽出に着手する。これと平行して、騎士道物語や教化詩、君主教育の書等の記述から封主の義務の体系を読み取り、われわれのコーパスとの対応関係を検証する。以上の作業から得られる結果に基づいて、「至純の愛」の再定義を試みる。次年度の研究費は、主として、文献調査・購入のための費用、ならびに学会参加にあたっての旅費や書類送付料に充てられる。また、分析結果を総括する作業の過程で、いっそう効果的にデータの整理と解析を行うために必要と判断される物品があれば、その購入費用にも充てられることになる。
国立大学外国語サイバー・ユニバーシティ用コンテンツ開発研究

本研究開発は、以下のプロセスにおいて計画され、実行された。1)国立七大学外国語CU委員会において、「コンテンツ開発の指針」を作成する。2)コンテンツ開発指針は各大学の教務内容を調整し、「国立大学標準化コンテンツ」の作成を目指す。3)英語、独語、仏語の各言語コンテンツ、及びシステム上への実装を想定してシステム開発に関する開発WGの設置。(WGはワーキング・グループ)4)その他の大学、NIME(メディア教育開発センター)、関連学会等との連携により、WGによるコンテンツ開発を行う。5)コンテンツの流通・再利用システムである「教材オブジェクト・レポジトリー」に対応させるため、コンテンツ構造の標準化を目指す。6)国立五大学により共同開発された「WebOCM」に実装する。本研究のコンテンツ作成及びCMSへの実装により、完成した英・独・仏のコンテンツは現在実験授業が繰り返されており、H18年度の後期からは、細部の調整の後、本格的な大規模授業展開が行われる予定。なお、コンテンツの概要、CMSの概要に関しては、以下のURLを参照のこと。また、本コンテンツはコースウェアとして開発されたが、教育効果を妨げない範囲でコンポーネント化を行い、モジュールコンテンツとして広く公開していく予定である。NIMEが推進する教材オブジェクト・デポジトリー構想とも連動していく予定である。本年度は、研究計画に従い、以下の項目の研究開発に着手した。1.英語リーディング教材コンテンツ開発2.英語リスニング教材コンテンツ開発3.英語発音矯正教材コンテンツ開発4.英語初男運矯正用音声認識システム開発5.ドイツ語総合教材コンテンツ開発6.フランス語総合教材コンテンツ開発なお、研究計画書に記載されていた中国語教材コンテンツ開発に関しては、履修管理用プラットフォーム(WebOCM)とのシステムマッチングが問題となり、搭載可能性の検証実験が行われた。この実験結果をもとに、中国語教材コンテンツを開発するかどうかの決断は、平成17年度の最初の研究開発ミーティングで決定される予定。以上の開発着手教材コンテンツは、Web型のコンテンツとなるため、履修管理プラットフォームとWeb型コンテンツ搭載部分との整合性の調整が行われた。具体的には、1.Web型コンテンツとプラットフォームテスティング機能との調整2.Web型コンテンツとプラットフォーム辞書検索機能との調整3.Web型コンテンツと履修管理システムとの調整4.Web型コンテンツのコンテンツ自動付加機能の開発以上のWeb型コンテンツとプラットフォーム側の調整により、以降開発されるコンテンツは、プラットフォーム側に自動的に付加され、認識される体制が整えられている。平成17年度は、上記のコンテンツ開発を終了させ、後期より実験授業に入り、コンテンツとプラットフォームの再調整に入る予定である。最終年度である本年度は、以下の項目の研究開発を終了し、サーバに実装した。1.英語発音矯正教材コンテンツ開発2.英語発音矯正用音声認識システム開発3.英語リスニング教材コンテンツ開発4.ドイツ語総合教材コンテンツ開発5.フランス語総合教材コンテンツ開発上記外国語コンテンツ、及び音声認識エンジンは、履修管理用プラットホーム(WebOCM)に連動されるかたちで実装されていたが、全ての教材・システムは、Webコンテンツとして自律しており、Webとして単独使用も可能な状態になっている。上記に関しては、クライアントマシンの依存は一切なく、全てActive XによるWeb拡張機能によって処理される。なお、サーバ上では、SQLデータベースにより、履修・成績管理が行われる。単体型Web教材は、今後、CD-ROM配布等により、ネットワークを用いない教材としての利用も可能となっている。以上の本年度の開発により、更なる今後の課題、進展の方向性も明らかになってきた。以下に、その具体的な点を述べておく。1.今後、授業評価等を行い、コンテンツそのものの教育効果測定だけではなく、履修管理用のプラットフォーム(WebOCM)を用いた授業評価も必要となる。2.現在、上記を目的とした実験授業がH17年度後期に行われているが、ネットワークの特性を生かした大学間授業に関する実験授業が、H18年度以降、行われる予定。3.Web型コンテンツの蓄積が行われ始めたので、今後、コンテンツのオブジェクト化を実現し、データベースで管理するコンテンツ・デポジトリーの実現が課題である。4.コンテンツ・デポジトリーをはじめてとして、NIMEコンテンツサイトとの連携が必要となる。
大気中における含窒素有機エアロゾルの化学的挙動の解明

本研究では元素分析/同位体質量分析計及びイオンクロマトグラフ等を用いることで、エアロゾル中の有機態窒素化合物の分析手法を確立した。これら手法を用いて海洋エアロゾル中に生物起源トレーサーとなるジエチルアミン等を検出し、微小粒子に多く存在することや高緯度帯で高濃度を示すなどの特徴を明らかにした。さらに夏季西太平洋亜寒帯の海洋エアロゾルは有機態窒素に富み、その化学組成の多くはこれまで見過ごされてきた海洋生物由来の非水溶性成分であることを明らかにした。本年度はガスクロマトグラフ(GC)・イオンクロマトグラフ(IC)を用いることで、エアロゾル中の含窒素有機化合物の分析手法を確立し、その精度・確度について評価するための実験を行った。エアロゾル中のアミノ酸を中心とする含窒素有機物の標準物質についてMTBSTFAを用いて誘導体化し、GCにて測定する手法の構築を試みた。アミノ酸はフリーの化合物とアミド結合した化合物の両方の分析法についての検討を行なった。標準物質については、高感度で検出することに成功したが、ブランク値が実サンプル中の値に比べて有意に高いため、このブランク値の低減については様々な角度から検討・分析条件の改善を行なっている。低分子アミンについてはICによって検出を試みた結果、海洋エアロゾル中にジメチルアミンおよびジエチルアミンを検出することに成功し、微小粒子に多く存在するなどの特徴を明らかにした。全有機態窒素についても元素分析等を行なうことで、海洋大気中では質量粒径分布が二山分布を示すことを明らかにした。海洋生物の影響をより強く受けたエアロゾルでは全有機態窒素濃度は影響の小さいエアロゾルの値と比べて約2倍高いという結果が得られた。これらと後方流跡線解析の結果から、夏季の北太平洋外洋域での有機エアロゾルの放出源として海洋生物の影響が大きく、その組成は有機態窒素に富むことが明らかになった。さらに窒素同位体比・安定炭素同位体比の分析等も行ない、夏季外洋域でのエアロゾル全炭素に占める海洋生物起源の割合は46-72%と見積もられた。これらの研究成果は有機エアロゾルの極性決定プロセスに関わる窒素の役割や、海洋・陸上生物起源の有機エアロゾルが大気-生態系における窒素・炭素循環に果たす役割を明らかにしていく上で重要であると考えられる。本年度は2008年7-8月に西部北太平洋上、学術研究船・白鳳丸にて取得した海洋大気エアロゾルサンプルについて海洋生物起源のトレーサーとなる化合物も含む有機態窒素の分析を行った。元素分析計による全窒素濃度(TN)及び純水抽出したサンプルを用いて水溶性全窒素(WSTN)を溶存窒素分析装置で測定した。この際、エアロゾル中の窒素の収支をより正確に評価するため、有機態窒素化合物の標準物質を用いて化学蛍光法によるWSTNの検出効率を求めた。さらにイオンクロマトグラフを用いて無機態窒素も分析することで無機態窒素(WSIN)全量を測定し、水溶性有機窒素(WSON=WSN-WSIN)濃度を導出した。前年度に確立した手法を用いて分析を行った低分子アルキルアミンについては、海洋エアロゾル中にジエチルアミンを検出することに成功し、その緯度分布は北緯40度以北の高緯度亜寒帯に多く存在するなどの特徴を明らかにした。さらに上記の測定により有機態窒素を水溶性・非水溶性成分に分画し、安定炭素同位体比および窒素同位体比と併せて分析を行った。メタンスルホン酸などの海洋生物トレーサーを併用して解析した結果、エアロゾル中の有機態窒素の多くはこれまで見過ごされてきた海洋生物(植物プランクトン、バクテリア)由来の非水溶性成分(WION)であることを明らかにした。また海面風速との相関から、海面から海洋大気中への一次放出がWIONの生成に大きく寄与していることを初めて指摘した。従来、汚染物質を中心とする大気から海洋への供給という観点でのみ考えられてきた窒素循環について、海洋生態系からの窒素を含む有機エアロゾルの供給が大気化学・雲生成へ及ぼす影響を指摘した。これらの研究成果は、海洋生物起源の有機エアロゾルが大気-生態系における窒素・炭素循環に果たす役割を明らかにしていく上で重要であると考えられる。
急速減圧時発生気泡による脳障害と高気圧酸素の影響

空気により6絶対気圧迄加圧-90分間保圧後急速減圧したラット脳で、減圧後15分から72時間迄の脳障害として血管透過性の変化(Evans blue漏出によるBBBの破綻)、微小循環障害(Indian inkの非充えい状態)及び組織学的所見を経時的に検討した後、減圧後の高気圧酸素再圧の効果を比較検討した。その結果:1.経時的変化1)Evansblueの漏出が減圧直後より発現し減圧後60分迄に可逆性に正常化したが、48時間以後再び発現した。2)脳血管の非充えい部も減圧直後より発現し減圧後3時間迄に可逆的に正常化したが、72時間後に再び広範囲に発現した。3)減圧直後より発現した大脳皮質の浮腫、血管周囲腔の拡大及び神経細胞の変性(dark neuron)は減圧後3時間迄に正常化したが、48時間以後再び増加した。2急速減圧直後の高気圧酸素再圧の効果1)Evansblueの漏出は出現しなかった。2)墨汁の非充えい部は72時間後まで認められた。3)組織学的観察でも高気圧酸素再圧48-72時間後に微小循環障害を示す血管周囲腔の拡大とdard neuronが出現した。以上より減圧後早期の可逆性の変化は血管内微小気泡による影響が考えられたが、48時間以後の変化は減圧直後の一過性脳虚血によるmaturation現象の可能性が示唆され、更に高気圧酸素再圧後も微小循環の障害が残存することが示唆された。更にmaturation現象の原因としての一過性脳虚血の、脳血流と脳内glutamateに関与するnitric oxide (NO)の影響を脳虚血-再灌流モデルで検討し、不完全脳虚血-再灌流後の一過性の脳血流量増加は早期に回復するが、NOS inhibitor投与では動脈圧は上昇するに対し脳血流量は低下し、glutamatelevelも減少した。完全前脳虚血-再灌流後では、対照群と比較してNOS inhibitorにより再灌流後の反応性充血は抑制されたが、再灌流後は脳血流量の低下とglutamatelevelの高値が認められた。急速減圧直後のラット脳で発現する血管透過性の増加、微小循環障害及び組織学的所見の経時的経過を検討することを目的とした。ラットを動物用小型高気圧治療装置により6絶対気圧まで空気加圧し、90分間保圧後に急速減圧し、急速減圧後の経過時間により減圧後15分、30分、1、3、6、12、24、48、72時間の群に分け、無減圧を対照群として以下の項目を検討した。1.血管透過性の変化をEvans blueを静注後、ラット脳を還流・固定し、摘出脳でのEvansblueの漏出による血液脳関門(BBB)の破綻、2.微小循環の変化を潅流・固定後、indian ink注入による脳血管の充えい状態、3.潅流・固定後にEpoxy樹脂包埋、トルイジン・サフラニン染色またはセロイジン包埋、ニッスル染色をした組織切片で組織学的変化「結果」1.血管透過性の変化

(BBBの破綻、Evans blueの漏出)が減圧直後より発現し、減圧後60分迄に可逆性に正常化したが、48時間以後再び発現した。2.微小循環の変化(脳血管の非充えい)が減圧直後より発現したが、減圧後3時間迄に可逆性に正常化した。しかし72時間後に再び非充えい部が広範囲に発現した。3.組織学的変化としては、減圧直後より発現した神経細胞の変性(ダ-クニューロン)が減圧後3時間迄に正常化したが、48時間以降再び増加した。以上より減圧後早期の可逆性の変化は急速減圧時に発生する血管内微小気泡による影響が考えられたが、48時間以降に発現する変化は減圧直後の一過性脳虚血によるmaturation phenomenonの可能性が示唆された。空気により6絶対気圧迄加圧-90分間保圧後急速減圧したラット脳で、減圧後15分から72時間迄の脳障害として血管透過性の変化(Evans blue漏出によるBBBの破綻)、微小循環障害(Indian inkの非充えい状態)及び組織学的所見を経時的に検討した後、減圧後の高気圧酸素再圧の効果を比較検討した。その結果:1.経時的変化1)Evansblueの漏出が減圧直後より発現し減圧後60分迄に可逆性に正常化したが、48時間以後再び発現した。2)脳血管の非充えい部も減圧直後より発現し減圧後3時間迄に可逆的に正常化したが、72時間後に再び広範囲に発現した。3)減圧直後より発現した大脳皮質の浮腫、血管周囲腔の拡大及び神経細胞の変性(dark neuron)は減圧後3時間迄に正常化したが、48時間以後再び増加した。2急速減圧直後の高気圧酸素再圧の効果1)Evansblueの漏出は出現しなかった。2)墨汁の非充えい部は72時間後まで認められた。3)組織学的観察でも高気圧酸素再圧48-72時間後に微小循環障害を示す血管周囲腔の拡大とdark neuronが出現した。以上より減圧後早期の可逆性の変化は血管内微小気泡による影響が考えられたが、48時間以後の変化は減圧直後の一過性脳虚血によるmaturation現象の可能性が示唆され、更に高気圧酸素再圧後も微小循環の障害が残存することが示唆された。更にmaturation現象の原因としての一過性脳虚血の、脳内glutamateと脳血流に関与するnitric oxide(NO)の影響を脳虚血-再灌流モデルで検討し、不完全脳虚血-再灌流後の一過性の脳血流量増加は早期に回復するが、NOS inhibitor投与では動脈圧は上昇するに対し脳血流量は低下し、glutamate levelも減少した。完全前脳虚血-再灌流後では、対照群と比較してNOS inhibitorにより再灌流後の反応性充血は抑制されたが、再灌流後は脳血流量の低下とglutamate levelの高値が認められた。
アルファ2-アゴニスト・デクスメデトミジンの延髄呼吸中枢への作用メカニズムの解明

ラット脳幹脊髄摘出標本モデルを用い、本研究の実験群であるデクスメデトミジンを投与し呼吸中枢の活動を調査。標本は潅流槽におき、95%O_2, 5%CO_2で飽和した人工脳脊髄液で潅流。呼吸性ニューロンの呼吸性活動出力モニターとして、C4前根から吸息性活動を吸引電極を用い記録。デクスメデトミジンを潅流液中に投与し、呼吸抑制および呼吸変化が生じるときの呼吸性ニューロンの活動性出力を連続的に記録。結果は用量依存生にデクスメデトミジンによる呼吸中枢の呼吸性ニューロン活動出力が抑制された。しかしながら一般的な臨床使用濃度では呼吸性ニューロンの活動性には明らかな影響は認められなかった。高濃度での呼吸性ニューロン活動の抑制はα受容体の刺激による間接的な影響が示唆され、呼吸性ニューロンへのデクスメデトミジンの直接的影響は少ないと思われた。ラット脳幹脊髄摘出標本モデルを用い、本研究の対照群であるベンゾジアゼピン系麻酔薬を投与し呼吸中枢の活動を調査。標本は潅流槽におき、95%O_2,5%CO_2で飽和した人工脳脊髄液で潅流。ベンゾジアゼピン系麻酔薬を潅流液中に投与し、呼吸抑制および呼吸変化が生じるときの呼吸性ニューロンの活動性出力を連続的に記録。結果は予測どおり、すべての研究でベンゾジアゼピン系麻酔薬による呼吸中枢の呼吸性ニューロン活動出力が抑制された。今後は実験群であるデクスメデトミジンを投与し、その反応を調査する。呼吸性ニューンの呼吸性活動出力モニターとして、C4前根から吸息性活動を吸引電極を用い記録。結果は予測に反し、すべての研究でデクスメデトミジンによる呼吸中枢の呼吸性ニューロン活動出力が抑制された。今後はデクスメデトミジンを投与し、生じる呼吸抑制の原因を調査する。デクスメデトンミジンを潅流液中に投与し、呼吸抑制および呼吸変化が生じるときの呼吸性ニューロンの活動性出力を連続的に記録。
死体尿中スペルミン検出の意義づけに関する研究

我々の覚せい剤検査法で、ポリアミンが検出されることが分かった。細胞の生長に重要なスペルミンが、時折、尿から大量に検出されるということから、死に関して何か意味するものがあるかを研究することにした。この研究には、多くの試料を分析する必要があり、尿中ポリアミンの迅速かつ正確な定量法を開発する必要があった。この迅速な方法の開発は、以前に我々が開発していた覚せい剤分析の試料処理法、すなわち、固相抽出管に詰めたケイソウ土に、アルカリ性とした試料をしみ込ませた後、誘導体化(ヘプタフルオロブチリル化)抽出を行い、ガスクロマトグラフィー/質量分析法(GC/MS)を、一部改良し、作製した。初期的な研究になるが、法医剖検尿にはポストカラム誘導体化蛍光検出高速液体クロマトグラフィー(HPLC)、救命救急患者尿には開発したGC/MSを用いて、スペルミンの(濃度を求める)定量を行った。尿中スペルミン濃度の平均は、死体では、男性の方が女性よりかなり高かった。また、死体と患者を比較すると、死体の方が、比較的高かった。尿中スペルミンが高濃度である判定基準は、便宜上、死体で、80nmol/mL、患者で20nmol/mLとした。尿中スペルミンが高いスコアを示したものは、死体では心疾患、脳障害、肝障害などに関連した男性に、患者では、心肺停止(心機能障害などを原因とする)、脳障害、肝障害のある男性に特徴的であった。高スコアの患者は、全員、入院後数時間内に死亡している。現在までの結果において、死に至る過程で、スペルミンが大量に放出されるメカニズムが男性に存在することが示唆される。スペルミン(SP)は、細胞の増殖・分化に重要な役割を果たしているといわれている。しかし、その役割には未だに不明な点が多い。また、ARDS(成人性呼吸停止症候群)、火傷の皮膚の再生期に、SPが尿に極めて大量に排泄されたという報告もあるが、確信的ではない。一方、我々は法医剖検等の試料から薬物スクリーニングを行っているが、時折SPが尿中に非常に高レベルで検出されることがわかった。そこで、剖検尿のSP検出を行い、生体の障害との関連を調査するために、本研究を計画した。平成13年度は、我々の薬毒物スクリーニング法(アミン類のガスクロマトグラフィー・質量分析法GC/MS)により、剖検尿試料ならびに重体患者尿試料(検査依頼を受けたもの)を分析し、検出の頻度並びに死因等について調査した。また、この検出を基準化する必要があるので、簡素な定量法作成の基礎的研究に取り掛かった。剖検尿63例を測定した結果を解析した。障害発生後死亡までの時間が短時間であった例ではSPはほとんど検出されなかったが、死亡まである程度以上の時間を経過したものにSPが検出されたものが多く、その中には疾病によるクモ膜下出血、急性心不全、熱傷、有機リン農薬中毒、覚せい剤中毒などがあった。重体患者の尿分析(25例)では、検出の割合が高く、肺炎、喘息発作の低酸素脳症、アナフィラキシーショック、溺水、クモ膜下出血などがあった。上のような結果を得たので、この方法の定量性を調べたところ、分析を標準化するのには再現性が悪く、今後GC/MS分析を行うためには試料調製の検討が必要であることがわかった。また、通常のポリアミン分析の高速液体クロマトグラフィー分析も試みたが、SPの分析精度はよくないことがわかった。検出できるものには、酸素欠乏、多臓器不全等に関わる意味があるようであり、今後、その実験的証明の検討ならびに分析の精度の向上を行っていく。

昨年度の研究において、尿試料を分析し、スペルミン検出が酸素欠乏などの障害を示す因子になるのではないかという所見を得ていたが、分析の再現性がなく、分析法の見直しが、本年度の重要課題となっていた。この検出には、大きな意味があると思われ、その方法の簡素化は重要である。そこで、本年度は、ガスクロマトグラフィー・質量分析法GC/MSを中心に、分析の問題点を推考し、その改善を検討した。また、高性能液体クロマトグラフィーHPLCでは、その精度を調べた。スペルミンはガラス器具などへの吸着性が高いと報告があるので、そのことについて調べたが、明確な所見を得ることができなかった。また、誘導体化も、触媒や試薬等の条件を、いろいろ検討したが、ほとんど改善は観られなかった。スペルミンを検出した試料を数人で、同法で処理し、分析し、問題調査を行った。この調査から、当初の方法において、スペルミンは抽出されるが、濃縮時に、スペルミンが消失しやすいことが判明し、その対策を熟考した。スペルミンの誘導体が極めて揮発し易いか、溶媒に溶け難いかであることが考えられたので、抽出の溶媒を変更し、濃縮は攪拌を加えて窒素気流下で行うようにしたことで、改善の兆しがでた。この点を改善することで、スペルミンの分析法において、最も簡易な方法を作製できると考えられる。HPLCでは、装置のパンフレットに準じて、ポストカラム蛍光誘導体化法により検討した。おおよその定量が可能であるが、定量値の再現性に問題があることがわかった。スペルミン分析の明確な論文は少なく、本年度は、試行錯誤の連続であったが、GC/MSによる簡易分析法の開発の糸口をつかむことができたので、来年度は、定量的な分析が可能になり、本研究の本質にいることができる結果となった。初年度は、既存のガスクロマトグラフィー・質量分析法(GC/MS)覚せい剤分析用誘導体化抽出法を使って、剖検尿中スペルミン分析を試み、傷害・死因に何らかの関連がある可能性を示唆していた。しかし、分析の精度が極めて低いことがわかり、昨年度は、その問題点を追求した結果、抽出の溶媒、固相カラムの素材を変えたことで、スペルミンの検出精度が向上した。今年度、蛍光検出高速液体クロマトグラフィー(HPLC)により、スペルミンの定量が可能になり、検出されるスペルミンの異常濃度設定、傷害・死因の関係について調べた。一方、GC/MSによる方法も、より簡素化が行われ、精度の高い分析法を異常濃度域で確立することができた。両方法での測定値はほぼ同値で、GC/MSでは簡素で迅速に測定できるので、実用化が可能になった。スペルミンを高濃度で検出する症例は肝傷害、脳障害、心臓疾病による死と関連が窺われた。スペルミン高濃度例は、全例男性であったが、死後の精液の浸入とは考えがたい濃度ではあった。スペルミンが検出される例が限定されていることから、臨床へこの検出が応用できると考え、救命救急患者尿の分析も救命救急センターの協力を得て行つた。その結果、心肺停止例に特徴があり、剖検例と同様の傾向があり、尿中スペルミンの検出に大きな意義が潜んでいることがはっきりしてきた。これの成果より、今後、測定例を集め、また、動物実験系を検討し、尿中スペルミンが細胞・組織の重度障害を示すファクターになることを実証する研究に発展させたい。