hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
精子誘引物質を介する卵と精子の遠隔分子認証システムの解明

動植物を問わず多くの生物の受精時において、精子(雄性配偶子)は卵(雌性配偶子)から分泌される物質に対して走化性を示す。この卵に対する精子走化性現象は、体外受精をする多くの動物門において種特異的な反応であることが知られており、精子が最初に同種の卵を認識する分子認証システムである。さらに、この同種の卵を見いだした精子は走化性運動により卵へと誘導され、受精の確率を高めるシステムとして非常に興味深いシステムである。しかし、精子誘引物質に関しては一部の種で同定されているものの、精子-卵由来物質間の分子認証システムについてはまだほとんど何も分かっていないのが現状である。本研究では、精子誘引物質が同定され、その受容体の解明も進んでいるカタユウレイボヤでの成果を土台として、精子がどのように同種の卵由来の物質を認証し、卵の位置を特定し、精子運動制御をしているかを解明することを目的とする。今年度は、カタユウレイボヤと近縁なホヤ4種について、精子誘引に関する種特異性について詳細に検討し、一部には片方向性の種を超えた精子誘引活性があることが明らかとなった。また、マウスの受精において精嚢分泌タンパク質SVS2がメス体内における生存および機能の維持において必須であることを示し、SVS2が欠損するとin vivoでは子供ができないことが明らかとなった。さらに、それ以外の種における精子と卵の分子認証システムの基礎研究では、チョウザメおよびホタテ貝について基礎的な精子運動調節機構に関する知見を得ることに成功した。25年度が最終年度であるため、記入しない。今年度は、新たにカタユウレイボヤの近縁種であるスジキレボヤの精子誘引物質As-SAAFを同定した。さらにPhallusia mammillataの精子誘引物質Pm-SAAFについても精製を進めている。これにより、既知のカタユウレイボヤ精子誘引物質Ci-SAAFと分子構造を比較することで、精子走化性の分子認証は、ステロイド骨格につながるOH基の部位のみで決定されていることが明らかとなった。さらに、今年度は魚類における精子と卵の分子認証システムの基礎研究も開始し、クサフグおよびチョウザメについて基礎的な精子運動調節機構に関する知見を得ることに成功した。ホヤの精子ー卵の認証機構については、Phallusia精子誘引物質の精製・同定作業についてホヤの生育・採集状況の問題から一部遅延があり、3ヶ月間の年度繰り越しとなったが、それ以外についてはほぼとうしょのもくろみ通りの進展となっている。繰り越しを行った都合上、本報告書提出の際には本研究が終了している。2014年度当初は、2013年度の成果を踏まえて成果を一年でとりまとめるべく、論文作成のためのツメの実験を中心に行うことを目標とした。
モデフィコミクスによる歯周疾患のバイオマーカー開発

本研究ではモディフィコミクス(翻訳後修飾を特異的に検出する技術)を発展させ、歯周疾患に起こりうる代表的な翻訳後修飾である糖鎖修飾および最も広く研究されているリン酸化に焦点をあてて、歯周疾患における翻訳後修飾を網羅的探索により捉え、歯周疾患の早期診断および再発予測治療効果判定等に応用することを目的とした。これまで網羅的な探索が行われてこなかった歯周疾患の翻訳後修飾を最新の質量分析技術により検出し、診断マーカーの可能性を追及することが可能となった。しかし、歯周疾患特異的リン酸化ペプチドでのアレイ作製まで至らなかったため、実現化に向けて今後も検討を重ねる予定である。プロテオーム解析技術の発展により、歯周疾患のバイオマーカーの開発が盛んに行われている。申請者らも、発現プロテオーム解析を駆使して歯周疾患のバイオマーカー探索を続けてきた。しかし、大部分のタンパク質が何らかの翻訳後修飾を受けて初めてその本来の機能を獲得することを考慮すると、従来の発現プロテオミクスに頼る手法では限界がある。従ってタンパク質の翻訳後修飾にも注目する必要がある。本研究ではモディフィコミクス(翻訳後修飾を特異的に検出する技術)を発展させ、歯周疾患に起こりうる代表的な翻訳後修飾である糖鎖修飾および最も広く研究されているリン酸化に焦点をあてて、歯周疾患における翻訳後修飾を網羅的探索により捉え、歯周疾患の早期診断および再発予測治療効果判定等に応用することを目的としている。本年度は限外濾過装置を併用した抽出法により歯肉溝滲出液(Gingival Crevicular Fluid:以下GCF)からタンパク質を抽出した。ペプチド成分の抽出において最も大きな問題点はキャリアプロテインの影響である。従って、キャリアプロテインの影響を受けずに高効率で再現性が良い有機溶媒沈殿法を用いてGCFからペプチドの抽出を試みた。MB-LAC ConA, MB-LAC LCA(Bruker Daltonics社)を使用し、N型糖タンパク質を抽出し、逆相HPLCによりフラクション分画した。そして各フラクションを二次元電気泳動後、Progenesis(nonlinear社)解析ソフトウェアを用いて発現解析を行った。健常群・軽度中等度群あるいは重度歯周疾患群の間で有意に発現量の異なるスポットを切り出し、LC-MS/MS装置LT-Q(Thermo Fisher Scientific社)により現在、同定を進めている。タンパク質の翻訳後修飾のうち最も頻度が多い糖鎖修飾蛋白質網羅的解析について方法論応用の可能性が示唆された。本年度はiTRAQ法を用いたリン酸化タンパク質の網羅的解析を行う予定であった。iTRAQ法とは4種類または8種類の安定同位体試薬(AB Sciex社)で異なる生体試料中のすべてのタンパク質またはペプチドをin vitroで標識後,質量分析計で分析することにより、タンパク質の同定と定量を同時に行う解析方法である。iTRAQを用いる場合、リン酸化ペプチドのみを濃縮する必要がある。本年度は標識を濃縮前に行う際、iTRAQ試薬は全消化ペプチド分必要となるため労力がかかってしまいリン酸化タンパク質の網羅的解析まで至らなかった。発現プロテオーム解析を駆使して歯周疾患のバイオマーカー探索を続けてきた。本年度では歯周疾患マーカー候補N型糖タンパク質・ペプチドのバリディーションおよび歯周疾患特異的リン酸化ペプチドアレイの作製と多検体でのバリディーションを行った。歯周疾患マーカー候補N型糖タンパク質・ペプチドのバリディーションを行った歯周疾患のバイオマーカーN型糖タンパク質・ペプチド候補の妥当性を検討するため、健常者・軽度・中等度・重度歯周疾患患者を対象に行った。糖鎖及びタンパク質に特異的な抗体を購入し、Western blottingにより検証した。歯周疾患マーカー候補N型糖ペプチドにおいては糖鎖及びペプチドに特異的な抗体を購入し、免疫沈降を行い、MALDI-TOF MSで測定し検証を行った。本年度は歯周疾患マーカー候補N型糖ペプチドの糖鎖及びペプチドの免疫沈降およびMALDI-TOF MSでの検証に労力がかかったため、研究の進捗がやや遅れている。現在、歯周疾患で上昇傾向が示唆されたリン酸化ペプチドを合成し、アレイの作成中である。従ってタンパク質の翻訳後修飾にも注目する必要があった。

本研究ではモディフィコミクス(翻訳後修飾を特異的に検出する技術)を発展させ、歯周疾患に起こりうる代表的な翻訳後修飾である糖鎖修飾および最も広く研究されているリン酸化とユビキチン化にも焦点をあてて、歯周疾患における翻訳後修飾を網羅的探索により捉え、歯周疾患の早期診断および再発予測治療効果判定等に応用することを目的とした。歯周疾患マーカー候補N型糖タンパク質・ペプチドのバリディーションおよび歯周疾患特異的リン酸化ペプチドアレイの作製と多検体でのバリディーションを行った。免疫沈降とSDS-PAGEによりGCF中のユビキチン化タンパクのバンドを多数検出し、最終年度では質量分析技術とウエスタンブロットによりユビキチン化タンパク質をGCF中から検出した。従って、これまで網羅的な探索が行われてこなかった歯周疾患のユビキチン化を最新の質量分析技術により検出し、診断マーカーの可能性を追及することが可能となった。しかし、歯周疾患特異的リン酸化ペプチドでのアレイ作製まで至らなかったため、実現化に向けて今後も検討を重ねる。本研究ではモディフィコミクス(翻訳後修飾を特異的に検出する技術)を発展させ、歯周疾患に起こりうる代表的な翻訳後修飾である糖鎖修飾および最も広く研究されているリン酸化に焦点をあてて、歯周疾患における翻訳後修飾を網羅的探索により捉え、歯周疾患の早期診断および再発予測治療効果判定等に応用することを目的とした。これまで網羅的な探索が行われてこなかった歯周疾患の翻訳後修飾を最新の質量分析技術により検出し、診断マーカーの可能性を追及することが可能となった。しかし、歯周疾患特異的リン酸化ペプチドでのアレイ作製まで至らなかったため、実現化に向けて今後も検討を重ねる予定である。本年度の達成度はおおむね順調であったが、次年度以降の研究計画では歯周疾患マーカー候補N型糖タンパク質・ペプチドのバリディーションと歯周疾患特異的リン酸化ペプチドアレイの作製と多検体でのバリディーションを予定している。リン酸化タンパク質の網羅的解析まで至らなかったことは非常に大きい問題点である。今後はiTRAQ法を用いたリン酸化タンパク質の網羅的解析を急速に進める予定である。その他の検討については当初の研究計画にそって進めていく。本年度の達成度はやや遅れているが検討については当初の研究計画にそって進めていく。探索した歯周疾患特異的リン酸化ペプチドでのアレイ作製の前段階として、これまでに歯周疾患患者のGCFおよび歯周組織中で高発現していることが報告されているリン酸化タンパク質についてもリン酸化部位を含むペプチドを合成してアレイを作製する。また、既存のリン酸化ペプチドアレイの応用も行っていく。歯周疾患マーカーの質量分析計を用いた定量系の確立を目指す。バイオマーカー候補の中には抗体を作成できるものもあるが、既知タンパク質が疾患特異的なプロテアーゼ活性の変動により産生されたものや翻訳後修飾を受けていて、特異抗体の作成が困難な場合は、三連四重極型質量分析計を用いたSRM(Selected Reaction Monitoring)法を利用する。ペプチドをダイレクトに測定可能であり、分子選択性が高く、高感度(ng/ml以下の検出感度)・同時多項目定量分析が可能である。歯周治療系
気相反応における非断熱遷移についての理論的研究

本年度は以下に挙げる気相光化学反応機構及び表面吸着分子の脱離機構の理論的解明に取り組んだ。(1)基底状態(X)から第二励起状態(B)への励起(Hartleyバンド(230-311nm))によるオゾン分子の光解離は実験・理論の両面から詳細に研究されてきた。しかし、B状態における量子動力学によっても実験研究を再現できていない。この光解離では基底状態と3つの励起状態が関与する電子状態間遷移の重要性が指摘されてきた。そこで、非経験的分子軌道法により各状態間の非断熱相互作用行列要素を求め、非断熱遷移がオゾン分子の解離に与える影響を調べた。(2)常温においてスチルベンはcis-trans異性化反応を起こさないが光励起することにより容易に異性化する。スチルベンのエチレン部の捩れを反応座標として基底状態及び一重項第一・第二励起状態についてのポテンシャルエネルギー面を動的電子相関の効果を含んだ非経験的分子軌道法(多配置多体摂動法:MRMP)によって求め、異性化反応のメカニズムの解明を試みた。(3)電子励起状態が重要な役割を果たすプラチナ金属表面に吸着した一酸化窒素分子の光脱離機構は依然明らかにされていない。そこで、脱離機構全解明するための実験(電場の影響の観察等)を提案し、実験結果から帰結される脱離機構を理論的な観点から考察した。具体的にはAntoniewicz型及びMGR(Menzel-Gomer-Redhead)型モデルポテンシャルを用いて、DIET(Desorption Induced by Electronic Transition)やDIMET(Desorption Induced by Multiple Electronic Transition)での脱離速度を波束法と密度演算子法より求めた。その結果、電場の影響による脱離速度の変化から脱離のメカニズムが推定できることを示した。本年度は以下に挙げる気相光化学反応系及び固相気相界面反応の機構解明に取り組んだ。(1)1重項第1励起状態(S_1)に励起されたグリオキサールのアルゴン原子衝突による3重項第1励起状態(T_1)への誘起系間公差は分子内スピン-軌道相互作用と回転緩和によって起こると考えられてきた。そこで、非経験的分子軌道法及び半古典動力学法を用いてこの反応系を取り扱った結果、実際には分子間スピン-軌道相互作用が重要な役割を果たしていることがわかった。そこで、スチルベンのエチレン部の捩れを反応座標として基底状態及び一重項第一・第二励起状態についてのポテンシャルエネルギー面を非経験的分子軌道法によって求め、異性化反応のメカニズムを考察した。(3)化学気相成長は固相・気相界面での多くの素過程群から成り、反応機構の解明は容易でない。しかし、密度汎関数法などの進歩によりこの複雑な反応系も取り扱えるようになってきた。そこで、ジメチルアルミニウムハイドライド(DMAH)によるアルミニウムの化学気相成長を取り上げ、エピタキシャル成長の機構を量子化学的手法によって考察した。結果として、DMAHの解離性吸着によりメチル基が解離する、律速段階は表面上でのメチルアルミニウムハイドライドからの水素原子の解離である、等を明らかにした。
自己免疫性膵炎(IgG4関連膵炎)感受性遺伝子の検索

自己免疫性膵炎は膵管の不整狭細像、膵腫大、閉塞性黄疸、血清IgG高値、リンパ球浸潤を伴う著明な線維化、ステロイドに対する良好な反応性によって特徴づけられる特異な慢性膵炎であり、その病因として自己免疫の関与が考えられる。われわれは本疾患患者で、血清IgG4値が高率(90%)かつ特異的に上昇し、HLA DRB1*0405-DQB1*0401haplotypeと強い相関を認めることを報告した。しかし、本症の病因は未だ不明であり、疾患責任遺伝子の解析は、本疾患の病態解析にとどまらず、それを端緒にIgG4関連疾患群の概要を明らかにすることができると考えられる。本研究では、自己免疫性膵炎、健常人を対象として、(1)HLA領域内のマイクロサテライト解析とHLA以外の疾患発症に関わる接着因子、サイトカイン、マトリックス蛋白を含む細胞間相互作用に関わる分子について、その遺伝子多型を発現制御領域を含めて体系的に検索し、(2)染色体をほぼ20cMでカバーするマイクロサテライトマーカー(Linkage Mapping Set-LD20)を用いて相関解析を行い、全染色体にわたるゲノムワイドな疾患責任遺伝子の解析を行った。その結果(1)HLA領域内にはDRB1*0405、DQB1*0401領域以外に有意な相関を認めず、接着因子、サイトカイン、マトリックス蛋白についても有意な相関を認めなかった。(2)ゲノムワイドな疾患責任遺伝子の解析の結果、有意な相関を示したアリル数(P<0.05)は全体で156、疾患感受性アリルが89、疾患抵抗性アリルが67であった。強い相関を示したアリル数(P<0.01,Pc<0.05)は全体で18、疾患感受性アリルが12、疾患抵抗性アリルが6であった。以上より本症の関連遺伝子はHLA領域では既報のDRB1*0405、DQB1*0401以外に認めなかった。今後は全染色体を対象として、強い相関を認めた18のアリル近傍に存在する疾患責任遺伝子を絞り込んで行く予定である。1994年から2002年までの間に診断した自己免疫性膵炎40例を対象とし、TNF-α遺伝子promoter多型、IκBL1遺伝子promoter多型についてそれぞれdirect sequencing,PCR-SSCPによるスニップ解析を行った。HLA領域における疾患感受性遺伝子の検索はHLA領域内に設定した19種類のマイクロサテライトマーカで相関解析を行った。慢性関節リューマチにおけるsecond susceptibility geneであるIκBL1遺伝子はHLA class III領域に存在する。promoter領域の5種類の多型との関連を検討したが、自己免疫性膵炎と有意な相関を認めなかった。また種々の自己免疫性疾患との関連が報告されているTNFαプロモーター領域多型との関連を検討したが、有意な相関を認めなかった。しかし、これらclass II抗原をもたない患者も存在することより、HLA領域におけるHLA遺伝子以外のsecond susceptible geneを検索する目的で、マイクロサテライトマーカーを用いてHLA領域の疾患感受性遺伝子マッピングを検討したが、DRB1*0405とDQB1*0401領域以外には、顕著な感受性を示すcandidate geneの存在は認められなかった。従って、自己免疫性膵炎ではHLA DRB1*0405-DQB1*0401haplotypeがHLA領域における疾患感受性遺伝子と考えられる。今後はHLA領域以外について、マイクロサテライトやSNPを用いたゲノムワイドな解析により疾患感受性遺伝子の検索を行っていく予定である。
電子顕微鏡による高分子接着機構の解析と接着制御

高分子-高分子の接着において,界面での分子鎖からみ合いが重要な役割を果たすことが知られている。接着剥離表面を低加速SEMにより高分解能観察すると,分子鎖の一部の絡み合いにより形成された接着強度の低い界面のはく離により形成された表面に,太さが1020nmの微細なフィブリルが形成することを見出した。このフィブリル構造を詳細に検討すると,界面における絡み合い構造に関する知見が得られることが明らかになった。本解析手法は,高分子の溶融接合のみならず,界面反応を伴う高分子接着やブロック共重合体による界面強化においても適用可能であり,多くの接着現象が,界面絡み合い構造の形成により説明できることを明らかにした。我々は,接着剥離表面を低加速SEMにより高分解能観察すると,分子鎖の一部の絡み合いにより形成された接着強度の低い界面のはく離により形成された表面に,太さが1020nmの微細なフィブリルが形成することを見出した。異なるタイプのブロック共重合体を介在させた界面の接着剥離面を解析し,界面に形成される分子鎖絡み合いのトポロジカル構造の識別の可能性を検討した。0.1wt%のPS-PMMAブロック共重合体のトルエン溶液を厚さ1.4mmのPMMAシートにスピンキャストし,2mm厚のPSシートを120°C,2時間貼り合わせた。非対称ダブルビームカンチレバー法により,接着強度を測定した後,はく離表面を低加速SEMにより観察したところ,ジブロック共重合体(PS-b-PMMA,)が界面に介在した系では,剥離面に形成するフィブリルはほぼ対称であるのに対し,トリブロック共重合体(PMMA-b-PS-b-PMMA)では,PS側から長いフィブリルが形成される。中間ブロックであるPSは,界面でPSホモポリマーと強固な絡み合いを形成し,一方,末端フリーなPMMAブロックは,分子鎖引き抜きが起こりやすいことが示唆される。以上の実験事実により、弱い接着界面の剥離面に形成するナノフィブリルは分子鎖の絡み合い構造を反映していることが明らかになり、フラクトグラフィーによる界面での高分子鎖絡み合いに関する知見を得るための新しい手法となり得ることを実証した。さらに、高分子と金属との接着界面の解析にエネルギーフィルターTEM法やTEM-レプリカ法を適用し、接着特性をナノレベルで解析する新しい手法の開発をおこなった。低加速高分解能SEMにより初めて明らかになった破面構造の特徴の定量的な解析を進めるため,白金-カーボンレプリカにより表面構造をカーボン薄膜に転写し,透過型顕微鏡(TEM)による電子線トモグラフィーにより,3次元構造の構築を検討した。特に,走査透過型電子顕微鏡(STEM)による環状暗視野像(ADF)により,SEMで見られた構造を再現することが可能となり,3次元立体構築化により,表面構造の定量的な解析が可能となった。今後は,本手法により,破面構造を系統的に解析し,高分子界面構造と接着破面構造との相関を詳細に検討する。さらに,真空紫外光により表面改質したシクロオレフィンポリマー(COP)の低温接着挙動の界面と接着の解析を検討したころ,溶融接着での剥離面と同様のフィブリル構造が得られることが明らかになった。このことから,ナノフィルリル構造と接着界面との相関は幅広い高分子系に適用することが可能であることが示唆され,接着機構の解明に役立つことが明らかになった。当該年度は,本解析手法を界面反応を伴う高分子接着機構に適用し,界面反応に伴う界面絡み合い構造の形成とその効果を明らかにした。

真空紫外光により表面改質したシクロオレフィンポリマー(COP)の低温接着挙動の界面と接着の解析を検討したころ,溶融接着での剥離面と同様のフィブリル構造が得られることが明らかになった。紫外線処理時間や水分の接着挙動に対する影響を検討し,低温接着においても界面反応に伴う絡み合い構造形成が接着の主たる要因であることが明らかになった。さらに,COP同士の接着界面断面を走査透過型電子顕微鏡(STEM)で解析することにより,COP表面の改質層の深さ分析が可能であることが明らかになった。高分子の接着において重要な役割を果たす界面での分子鎖絡み合い構造を,電子顕微鏡技法を駆使し,解析を進めた。"インレンズ検出方式のSEMによるナノフラクトグラフィー"により、相互拡散による溶融接着のみならず,界面反応による接着など様々な系を統一的に接着を解釈することが可能であることが明らかになってきた。得られた知見から接着制御技術へと展開するための実験を進めており,当所の計画をおおむね順調に進展している.24年度が最終年度であるため、記入しない。界面絡み合い構造と接着の相関に関する知見を基に,接着制御へと展開する。具体的には,相溶系高分子ブレンドは,相溶-非相溶の相図を有するため,熱処理温度により,界面厚みを制御することが可能になると考えられる。界面絡み合い構造を可逆的に変化させる相溶系高分子対を見出し,接着強度の転移を可逆的に起こす系を見出す。24年度が最終年度であるため、記入しない。
骨標的化高分子ミセルを利用したFGF23発現制御法の確立と腎線維症治療への展開

新たな国民病と言われる慢性腎臓病により惹起される腎線維化は、骨から分泌される線維化因子により誘発されるが、腎線維化を抑制可能な治療法は未だ開発されていない。本研究では、腎線維化症治療の新たな治療法の構築を目的として、骨における線維化因子の発現を抑制可能な発現抑制剤や核酸医薬の高効率な送達システムを開発する。すなわち、独自の標的化技術に基づき設計した骨標的化高分子ミセルを活用した線維化抑制剤の骨標的化法を構築することで新たな腎線維化症治療法を確立する。本研究は治療が困難とされる腎線維化症に対し画期的な診断・治療法が提唱できる可能性が高く、腎線維化症治療に大きく貢献できる研究と位置づけられる。
擬固体電解質とナノチタニア層との界面最適化による擬固体色素増感太陽電池の高性能化

色素増感太陽電池(DSSC)は揮発性有機溶剤を含んだ電解液を使用しており、耐久性を確保するには十分な封止技術が必要である。我々は不揮発性の室温溶融塩をゲル化することにより電解質を固体化する技術が耐久性向上に有効であることを実証してきた。しかし室温溶融塩は有機溶剤タイプの電解液に比較し粘度が高くイオンの拡散定数が低いという欠点があった。限界電流を大きくするため電荷輸送体であるヨウ素の濃度を有機溶剤系電解液より10倍程度高くする必要があった。このため暗電流が大きくなり太陽電池性能の低下がしばしば見られた。チタニア界面を修飾して逆電子移動を抑制する試みが従来の溶剤系電解液で試みられてきた。しかしSnO_2を半導体電極に使った場合には大きな性能向上効果が報告されているがチタニアを使った場合には効果は小さいと報告されている。我々は溶融塩を電解液とするDSSCのチタニアナノ界面を修飾しその効果を調べた。チタニアナノ界面は色素分子で覆われているが、その隙間から逆電子移動が起こる。色素の間を埋めるblocking materialとして、(1)チタニア表面と反応しやすい、(2)色素の間を埋めることができるように分子が小さいなどの理由から、カルボン酸を選んだ。チタニア界面を酢酸でブロックしたチタニア電極を用いたDSSCは、未処理のDSSCに比較し短絡電流が8mA/cm2から13mA/cm2と大きく向上した。界面修飾は室温溶融塩を使ったDSSCの効率向上に非常に有効である。
衣服設計システムを活用した高齢者用衣服の設計

高齢女性が自分自身の衣服を自作する。そしてその技術がビジネスとして成立すれば日本社会は活性化される。潜在能力は洋裁学校の経験である。阻害する可能性は衣服作りに欠かせないIT技術修得の困難性である。研究の結果、潜在能力は十分活用でき、またIT技術修得に困難はないことが判明した。その結果、高齢女性のマーケットを開拓する衣服ビジネスは十分な可能性を持つことが明らかであった。平成24年度は、本実験を行った。6名の高齢者を集め、8日間のCADトレーニングを行った。トレーニングは、アパレルCADと着装シミュレーションの販売企業から派遣したプロフェッショナルによるトレーニングを行った。きめ細かな指導のため、大学院生2名によるアシスタントをつけた。このアシスタントは昨年度にトレーニングを受け、独自のマニュアルを作成しつつ技能を高めた者である。毎日トレーニング終了後に、指導内容について理解できたかどうかと、理解しにくかったところのアンケートを行った。また、いくつかの衣服を提示して、自分自身が着用できる衣服であるかどうかの、アンケート実験も行った。高齢者と比較するために、若年者(学生)へのトレーニングを行い、同様のアンケートを実施した。また、高齢者と同様にいくつかの衣服を提示して、自分自身が着用できる衣服であるかどうかの、アンケート実験も行った。アンケート結果から、高齢者のCADトレーニングの理解度に関しては、若年層と遜色がないことが分かった。また、着用可能な衣服の種類では、若年層と違いが見られ、肌の露出が大きい衣服を敬遠することが明らかになった。最終年度においては、衣服設計システム(アパレルCAD)のトレーニングマニュアルを改善した。特に高齢者にとって分かりにくかった点を詳細にした。続いて、実際に高齢者用の衣服を作成した。作成方式として平面作図方式(アパレルCAD)と立体を平面に展開する方式(3次元平面展開CAD)の2方式を比較検討した。その結果、立体を平面展開する方式が優れていることが分かった。しかし、このソフトウエアは平面作成方式の10倍の価格であり、しかも高齢者にとって学習しにくいものであった。安価な平面作図方式で、どこまで品質を高めることができるかが次の課題となった。研究期間全体を通じて、(1)コンピュータ技術を駆使したプロ仕様のアパレルCADを高齢者は使いこなせるか?。(2)高齢者用衣服(高齢者の体型を考慮した衣服)は、現状のアパレルCADで質の高い設計ができるか?。という問題意識があった。(1)に関しては、習得には若者と比較して時間がかかるが、トレーニングマニュアルを工夫すれば十分使いこなせることが分かった。被験者の中には実際にCADを購入して使用し続けている者がいる。(2)に関しては、若者の体型とは異なるため、既存のアパレルCADでは質の高い設計は困難であった。しかし、より高級な(高価な)設計システムでは質の高い設計が可能であった。この点は今後の課題である。これらの研究成果によって、今後の少子高齢化社会を「高齢者による高齢者のための衣服設計技術」により、楽しく明るい社会に変化させることは、十分可能であるということを示唆できた。なお、本研究内容は、研究協力者である宮崎奈津紀の奈良女子大学大学院人間文化研究科平成25年度修士論文「フィット性評価を用いた高齢者用衣服作成法に関する研究」に詳細が記載されている。平成23年度は、まず実験用の衣服を決定した。高齢者にとって着易くするため、デザインは標準的なワンピースとした。次に高齢者のサイズ類型について研究し、2種類のボディを作成した。求めた2つの体型に対して、若者用の衣服パターンを変形して(グレーディングという)2種類の高齢者用のパターンを作成した。着装シミュレーションを行い、きつくもなくゆるくもなく、シルエットも満足いくことを確認した。この一連の研究内容は、高齢者のトレーニングの準備としての位置づけでもあり、パターン作成CADと着装シミュレーションそれぞれ違うメーカーのソフトが連動して使用できることを確認した。購入したCADソフトを学生が使いこなせるようにトレーニングしつつ、トレーニングにおける問題点を抽出した。この若者の意見は、平成24年度の本実験で高齢者が感じるトレーニングにおける問題点と対比するために使用できる。平成24年度に本実験を行うことができた。被験者数は6名と当初の10名を下回ったが、通勤可能な範囲に居住し、8日間の自由時間を見つけられる60歳代の女性を見つけることが大変であった。元気な多くの高齢者は、孫の子守やボランティアなどで、一種の仕事日をもっている方が多かった。しかし、8日間の連続実験(休日は休み)の被験者6名を確保できたことは、大変良かった。平成23年度に予定した事項である、平成24年度の本実験のための準備は順調に整った。夏休みを利用して主として3回生の学生にトレーニングを行ったが、その学生は4年生で研究代表者のゼミに入り、本実験のアシスタントとして活用できるため、当初計画より詳細な実験ができる可能性が出てきた。平成25年度は、主としてデータ整理を行い、冊子で保存する。また、CADトレーニングマニュアルの高齢者アンケートをふまえた修正版を作成する。

平成23年度は、衣服設計用CADの購入と学生への予備トレーニングを行った。さらに、平成24年度に行う本実験に用いる高齢者衣服を作成したが、予定していたより効率的に作成できた。平成24年度は本実験として、10名程度の高齢者に対して8日間のCADトレーニングを行う。毎日トレーニング方法や知識獲得に関するアンケート調査を行う。平成25年度はデータの整理を行う。まず、高齢者にとってCADを修得するうえでネックになっている点を明らかにする。また、高齢者が衣服をどのように評価するかを明らかにする。平成25年度は、まずデータの整理を行い、冊子として残す。同時に、CADトレーニングマニュアルの高齢者アンケートをふまえた修正版を作成する。これらの資料整理のために謝金を使う。また、平成23年度に購入した衣服設計CADが、大学の計算機のOSが変更になったため、プロテクターを入れ替える必要があり、その費用を考えている。平成24年度は、本実験として高齢者に対するCADのトレーニングを行う。トレーナーはCAD販売元のプロフェッショナルに依頼する。このため、研究費のほとんどは依頼トレーニング費用に使用する。被験者である高齢者への謝金はトレーニングを無料で受けれるという理由で考えていなかった。しかし、モチベーションを持続させる等のことを考え、小額でも謝金を支払うことを予定した。平成23年度使用しなかった予算をこの謝金として使用する予定である。
官能基選択的求核剤の開発と利用

カルボニル基のアリキリデン化反応にはWittig反応が広く用いられている。この反応はリンイリドを用いるが、官能基選択性に検討の余地がある。また、反応剤が塩基性を示すために、異性化反応が伴って進行する場合があり、塩基性を示さない反応剤の開拓も望まれていた。本研究では、官能基選択的アルキリデン化反応に取り組み、アルデヒドとケトンとを分子内に有する化合物に作用させて、アルデヒドのみメチレン化する反応剤を開拓した。ジヨードメタンに鉛触媒存在下にTHF中で亜鉛を作用させると、有機二亜鉛化合物であるbis(iodozincio)methaneが収率60%で得られること、このTHF溶液中にはこの二亜鉛化合物のみが含まれていることがNMR測定により明らかとなった。この反応剤は、アルデヒドと反応してメチレン化体を与えるが、ケトンとはほとんど反応せず、高い官能基選択性を示す。ケトンのメチレン化には、二塩化チタンを加えることで達成でき、高収率でケトンのメチレン化も可能である。同様に有機二亜鉛化合物は、1,1-ジヨードエタンからも得られ、またジブロモメチルトリアルキルシランと亜鉛との反応で、トリアルキルシリル置換体も調製することが出来る。これらの二亜鉛化合物とカルボニル基との反応は、二塩化チタン共存下に円滑に進行し、アルデヒドおよびケトンをアルキリデン化することが出来る。しかし、これらの場合には、官能基選択性は乏しい。有機二亜鉛化合物は、二種類の求電子剤と順次に反応させることも可能であり、一つの炭素原子に二種類の有機基を順次結合させる炭素鎖構築法が開拓できた。
ブロック型人工骨補填材を用いた垂直的骨欠損に対する骨造成法の確立

歯科インプラント治療において、垂直的な歯槽骨欠損部位に対しての骨造成方法は確立されておらず、骨造成に用いる骨移植材の選択も解決すべき大きな課題となっている。垂直的歯槽骨欠損に対する骨造成には自家骨が多く用いられるが、十分な厚みを持つ骨の採取部位の確保が難しい等、いくつかの欠点がある。そのため本研究では、リン酸カルシウム系のブロック型骨補填材に注目し、研究を行っている。29年度は、6匹のビーグル犬の両側下顎前臼歯と第一後臼歯を抜去し、3か月の治癒期間経過後、抜歯部位に形成した2種類の垂直的骨欠損(直径約8mm、深さ約3.5 mmもしくは約1.5 mm)に欠損と同サイズのブロック型骨補填材を挿入した動物モデルを作製した。骨補填材はα型リン酸三カルシウム(α-TCP)にハイドロキシアパタイト(HAp)を補強材として混合したブロック型骨補填材と、β型リン酸三カルシウム(β-TCP)にHApを混合したブロック型骨補填材を用いた。今年度は、この動物モデルを用いて、以下のように解析のための試料作製を行った。すべての動物は骨造成後6か月で安楽死させた。骨のリモデリングを観察するため、これらの動物には安楽死の1、3週前にカルセインとアリザリンによる骨ラベリングを行った。採取した試料は固定後、マイクロCT撮影した。その後、組織学的観察のため、樹脂包埋し、研磨切片を作製した。次年度は、研磨切片を用いて組織学的解析を進める予定である。同時にマイクロCTの解析も並行して行い、骨移植材を用いた骨造成法の検証を進めていきたいと考えている。また今年度は、共同研究を行っているスイスベルン大学において、解析に関するミーティングを行い、今後研究をまとめる上で有用な助言を得ることができた。垂直的な骨欠損症例に対しての人工骨移植材の至適サイズを詳細に検証するため、最も有効であると考えられる骨造成実験を行った。そのための動物モデルの作製と試料作製には多くの時間が必要であり、昨年度までの若干の遅れを取り戻すことは困難であった。現在、試料の切片作製は終えているが、次年度に組織学的観察、組織形態計測およびマイクロCTの解析を行う必要があるため、このように判断した。マイクロCT解析と組織学的解析を行う。解析では、使用した2種類の移植材の比較をするとともに、2種類の深さを設定した垂直的骨欠損部の結果をもとにそれぞれの骨移植材の骨造成における至適サイズを検討したい。マイクロCT解析では、マイクロCTのデータから、移植材や骨吸収の状態を三次元的に観察するとともに、骨量や骨密度などを計測する予定である。これまで我々が行ってきた研究と同様に、この結果と組織形態計測とを照らし合わせ、より詳細な検討を行うことを考えている。組織学的解析としては、骨ラベリング像の観察と骨造成部の組織学的観察および組織形態計測を行いたいと考えている。骨移植材の結合、残存状態をみるために、既存骨と境界部分、移植部位内部を観察する。移植部位の新生骨や骨移植材の残存状態を計測し、移植材自体の変化も解析する予定である。次年度はできる限り解析を進め、国際誌への投稿にむけて研究をまとめていく予定である。歯科インプラント治療において、垂直的歯槽骨欠損に対しての骨造成方法や骨移植材の選択は非常に大きな問題である。現在、自家骨移植が垂直的骨欠損部位に対する治療の中心であるが、自家骨採取に関する欠点を補うため、ブロック型の人工骨移植も注目されている。しかしながら、ブロック型人工骨に関する情報は多くない。そこで本研究では、ブロック型人工骨補填材の有用性を検証するため、α型リン酸三カルシウム(α-TCP)、β型リン酸三カルシウム(β-TCP)にハイドロキシアパタイト(HAp)を補強材として混合したブロック型の人工骨補填材を用いて、垂直的な骨欠損症例に対しての人工骨ブロックの至適サイズを検討することとした。29年度は、そのための動物モデルを以下のように作製した。10か月齢のビーグル犬6匹(平均12.3kg)を用いて、すべての両側下顎前臼歯と第一後臼歯を抜去し、3か月の治癒期間経過後、抜歯部位に片側2箇所の垂直的骨欠損を作製した。これまで直径約8mm、深さ約5mmの歯槽骨欠損モデルを用いた研究を行ってきたため、その結果と比較することを考慮し、本研究では、ほぼ同様の直径で深さを約2/3(3.5 mm)、1/3(1.5 mm)とした2種類の骨欠損を作製した。これらの骨欠損部に、欠損部と同サイズのα-TCP+HAp、β-TCP+HApのブロックを挿入した。今年度は、以上のように、深さの違う2種類の骨欠損に対しての人工骨補填材の有用性を検証する実験を具体的に計画し、動物モデル作製までを行った。次年度は、骨造成後6か月で安楽死させ、採取した試料のマイクロCT撮影および組織学的観察のための試料作製を行う予定である。今年度は、垂直的歯槽骨欠損に対して、ブロック型骨移植材の有用性を詳細に検証するため、前述のように骨造成した動物実験モデルを作製した。概ね予定通りに研究は進んでいるが、ビーグル犬入手の手続きが若干遅れ、次年度に試料を採取することとなったため、このように判断した。

垂直的歯槽骨欠損に対する骨造成には自家骨が多く用いられるが、十分な厚みを持つ骨の採取部位の確保が難しい等、いくつかの欠点がある。そのため本研究では、リン酸カルシウム系のブロック型骨補填材に注目し、研究を行っている。29年度は、6匹のビーグル犬の両側下顎前臼歯と第一後臼歯を抜去し、3か月の治癒期間経過後、抜歯部位に形成した2種類の垂直的骨欠損(直径約8mm、深さ約3.5 mmもしくは約1.5 mm)に欠損と同サイズのブロック型骨補填材を挿入した動物モデルを作製した。骨補填材はα型リン酸三カルシウム(α-TCP)にハイドロキシアパタイト(HAp)を補強材として混合したブロック型骨補填材と、β型リン酸三カルシウム(β-TCP)にHApを混合したブロック型骨補填材を用いた。今年度は、この動物モデルを用いて、以下のように解析のための試料作製を行った。すべての動物は骨造成後6か月で安楽死させた。骨のリモデリングを観察するため、これらの動物には安楽死の1、3週前にカルセインとアリザリンによる骨ラベリングを行った。採取した試料は固定後、マイクロCT撮影した。その後、組織学的観察のため、樹脂包埋し、研磨切片を作製した。次年度は、研磨切片を用いて組織学的解析を進める予定である。同時にマイクロCTの解析も並行して行い、骨移植材を用いた骨造成法の検証を進めていきたいと考えている。また今年度は、共同研究を行っているスイスベルン大学において、解析に関するミーティングを行い、今後研究をまとめる上で有用な助言を得ることができた。垂直的な骨欠損症例に対しての人工骨移植材の至適サイズを詳細に検証するため、最も有効であると考えられる骨造成実験を行った。そのための動物モデルの作製と試料作製には多くの時間が必要であり、昨年度までの若干の遅れを取り戻すことは困難であった。現在、試料の切片作製は終えているが、次年度に組織学的観察、組織形態計測およびマイクロCTの解析を行う必要があるため、このように判断した。骨造成後6か月で安楽死させ、試料を採取する。その際に、骨のリモデリングを確認するため、安楽死3週前にアリザリンレッド、1週前にカルセインの2種類の骨ラベリング剤を生体内投与する。採取した試料は固定後、マイクロCT撮影を行う。その後、試料を樹脂包埋し、作製した研磨切片を用いて、組織学的に観察する。その際、組織形態計測も行い、厚みの違う2種類の材料の骨移植部位内部における新生骨や残存している骨移植材の観察、移植部位周囲の組織変化を検討する。また、マイクロCTのデータから、骨量や骨密度などを解析し、組織形態計測の結果との照合も行う予定である。垂直的骨欠損に対しての、サイズの異なる2種類のブロック型人工骨補填材の比較検討を行うことで、それぞれの人工骨ブロックを使用したインプラント治療のための骨造成への指標となる情報を得たいと考えている。さらに次年度は、国際学会での発表、国際誌へ投稿を見据え、研究結果をまとめるための解析を進めていく予定である。マイクロCT解析と組織学的解析を行う。解析では、使用した2種類の移植材の比較をするとともに、2種類の深さを設定した垂直的骨欠損部の結果をもとにそれぞれの骨移植材の骨造成における至適サイズを検討したい。マイクロCT解析では、マイクロCTのデータから、移植材や骨吸収の状態を三次元的に観察するとともに、骨量や骨密度などを計測する予定である。
ペロブスカイト型3d遷移金属酸化物の微視的磁性とスピン状態

ペロブスカイト型3d遷移金属酸化物にキャリヤ-・ドープした時に現れる異常金属相の物理,特に,スピンが特異な磁気的性質に関連した興味ある物理現象として,(1)LaCoO_3のスピン転移,(2)Y_<1-X>Ca_XTiO_3とLa_<1-X>Sr_XTiO_3系のモット転移を取り上げ,核磁気共鳴法(NMR)を用いてそれらの機構および起源の解明を目指した研究を行った。LaCoO_3のスピン状態について従来言われていた低スピン高スピンのモデルでナイトシフトと磁化過程を理論的に計算した結果,このモデルではLaCoO_3のスピン状態を正しく記述できないことを明確に示し,さらに,最近バンド計算から示唆されている低スピン中間スピンのモデルで説明できる可能性を指摘した。また,この中間スピン状態をとる為には,酸素とコバルトの波動関数の強い混成が必要とされており,その混成度を調べる為に,一部の酸素を^<17>Oに置換した試料を用いて,^<17>O核のNMRを行った。その結果,LaCoO_3では,確かにバナジュウム酸化物と銅酸化物の中間程度の波動関数の混成があることを見いだした。一方,モット転移については,金属相での電子相関がどのような物であるかを解明することが最も重要である。この観点から電子相関の効果を調べる為に,Y_<1-X>Ca_XTiO_3とLa_<1-X>Sr_XTiO_3を取り上げ,その金属相のTi核に対して核スピン格子緩和率の温度変化の測定を行った。その結果,これらの系の金属相は,波数q=0が増強されたフェルミ液体モデルで記述できる常磁性金属であることを,スピン系の動的側面から明らかにした。また,母物質のYTiO_3とLaTiO_3の微視的な磁気的性質を調べ,軌道整列の問題との関連を議論した。
骨格筋由来分泌因子を用いた新規心不全治療法の開発とその臨床応用研究

骨格筋は様々な臓器保護作用を有するタンパク質を分泌することが明らかとなってきている。私たちは骨格筋肥大に伴い発現が増加する遺伝子をプロテオミクス解析し、いくつかのタンパクが筋肉肥大に伴い分泌が亢進することを見出した。それらの中には血管新生作用を有するものや、慢性心不全の重症度や生命予後のバイオマーカーになる可能性があることが明らかとなった。また、骨格筋からはタンパク質だけでなくマイクロRNAと呼ばれる遺伝子発現の調節に重要な役割を果たす物質が分泌されることが明らかとなってきた。私たちは骨格筋肥大に伴い増加するマイクロRNAも探索し、いくつかの骨格筋由来マイクロRNA候補を同定した。プロテオミクス解析による新規骨格筋由来分泌因子網羅的検索:骨格筋特異的誘導型Akt1遺伝子過剰発現マウスの骨格筋サンプルをマイクロアレイとプロテインアレイ解析し分泌タンパクのスクリーニングを行った。本年度は骨格筋特異的にAkt1遺伝子を2週間過剰発現した後のサンプルを解析に使用した。マイクロアレイ上はAkt1の過剰発現により数多くのmRNAの発現亢進が認められたが、タンパクレベルで十分なレベルでの発現亢進を認めるものは少なく、現在のところ6つの候補分子がAkt1の過剰発現によりタンパクレベルで増加することを確認している。これらの因子の生理的機能を培養心筋細胞、培養線維芽細胞を用いたin vitroの実験系で検討した。低酸素刺激やドキソルビシンによる心筋細胞障害に対し候補遺伝子が保護作用を有するか検討したところ、2つの候補分子に心保護作用が認められた。新規骨格筋由来分泌因子のバイオマーカーとしての可能性検討:スクリーニングをクリアした分子のうちGrowth differentiation factor-15 (GDF-15)のELISAは商品化されているものがあったため、慢性心不全患者の血清サンプルを用いて血中濃度を測定することができた。体内動態を検討し論文として報告した。GDF-15の拡張不全心不全患者における動態に関する検討は論文化しCan J Cardiol.誌に報告した。プロテオミクス解析による新規骨格筋由来分泌因子の網羅的検索:骨格筋肥大マウス(骨格筋特異的Akt1過剰発現マウス)の骨格筋サンプルを使用しプロテオミクス解析を行い、骨格筋肥大に伴い分泌が亢進するタンパクのスクリーニングを継続して行った。現在のところ昨年度選択した候補遺伝子に加えて、合計9つの候補遺伝子をリストアップしている。培養骨格筋細胞においてアデノウイルスを用いてAkt1を過剰発現し、候補遺伝子の細胞培地中への分泌も確認することができた。候補遺伝子の中のFactor-1に関しては、cre-loxPシステムを用いた骨格筋特異的ノックアウトマウスをすでに作成済みである。現在繁殖を行っており、実験に使用できる個体数が確保でき次第、心筋梗塞モデル、圧負荷心不全モデル、腎疾患モデルなど我々がこれまで報告してきた病態モデルを作成し、Factor-1の生体における役割を解析する予定としている。これらの結果はまだ論文化できていないため、学会での発表も行っていない。骨格筋由来分泌因子のバイオマーカーとしての可能性検討:上記9つの候補遺伝子のうち、ELISAが市販されているものはすでに心不全患者における血中濃度測定を開始している。また、我々は現在入院患者で簡易サルコペニアインデックスによる心不全患者のリスク評価を行っており、候補遺伝子との相関についても検討を開始している。簡易サルコペニアインデックスによる心不全患者のリスク評価に関しては、現在論文作成中である。平成26年度に作成した骨格筋由来分泌因子候補であるFactor-1の骨格筋特異的ノックアウトマウスを使用し、Factor-1の生体における役割を解析した。下肢動脈結紮による下肢虚血モデルを作成したところ、ノックアウトマウスはコントロールマウスと比較して血流改善が遅延した。しかしながらその減弱効果は薬理学的に全身のFactor-1を阻害した場合の半分程度であったことから、骨格筋以外のFactor-1の血流改善への寄与が示唆された。我々はマクロファージ由来のFactor-1の寄与を考えており、骨格筋肥大マウス(骨格筋特異的Akt1過剰発現マウス)のマクロファージを除去する実験系にて下肢血流改善効果を評価している。またFactor-1のバイオマーカーとしての可能性を検討するため心血管リスクを有する患者での血中濃度測定を行い、サルコペニアの指標との相関についても検討したが、有意な相関関係は認めなかった。本研究結果は平成28年度の米国心臓病学会で発表を行う予定である。平成26年度に同定した残る8つの候補遺伝子のうち2つ(Factor-2, -3)は培養骨格筋細胞のみならず、骨格筋特異的Akt1過剰発現マウスの血中濃度も上昇していることが確認された。Factor-2に関しては組織特異的ノックアウトマウスを作成するための準備を進めている。Factor-3に関してはELISAが市販されていたため、入院患者における血中濃度測定を行った。Factor-3の血中濃度は冠動脈疾患患者で有意に高値であり、動脈硬化のパラメーターとも有意な相関を認めた。これらの結果から、骨格筋由来の分泌因子であるFactor-3が動脈硬化病変を制御している可能性が示唆された。今後、Factor-3に関しても組織特異的ノックアウトマウスを作成し、動脈硬化モデルマウスと交配することで、Factor-3による動脈硬化制御の分子機序を解明する方針である。

それらの中には血管新生作用を有するものや、慢性心不全の重症度や生命予後のバイオマーカーになる可能性があることが明らかとなった。また、骨格筋からはタンパク質だけでなくマイクロRNAと呼ばれる遺伝子発現の調節に重要な役割を果たす物質が分泌されることが明らかとなってきた。私たちは骨格筋肥大に伴い増加するマイクロRNAも探索し、いくつかの骨格筋由来マイクロRNA候補を同定した。平成26年度の実施目標としていた分泌タンパクのスクリーニングと機能解析は候補遺伝子を9つリストアップできたことからおおむね順調に進んでいると考えられる。また候補遺伝子のうちの一つは組織特異的ノックアウトマウスの作製も順調に進行しており、本年度はそれらを用いた実験を完成できる見込みである。臨床検体における検討に関しては、既知の分泌因子は平成25年度に結果を論文として4報報告した。現在は我々が現在候補としてスクリーニングした9つの新規骨格筋由来分泌と簡易サルコペニアインデックスの相関について検討を進めている。以上より、本研究はおおむね予定通り進行していると考えられる。27年度が最終年度であるため、記入しない。循環器内科Factor-1の骨格筋特異的ノックアウトマウスに対し、心筋梗塞モデル、圧負荷心不全モデル、腎疾患モデルなどの病態モデルを作成し、Factor-1の生体における役割を解析する予定としている。その他の候補遺伝子も随時ノックアウトマウスの作製を行い、生体における役割を検討する予定である。バイオマーカーの検討に関しては、現在候補としてスクリーニングした9つの新規骨格筋由来分泌のうち市販のELISAがないものについては、ペプチド抗体を作製しELISAシステムを構築する。抗体作製,ELISAシステムの構築は高度な専門的技術が必要であり迅速に実験計画を遂行するために抗体作製受託サービスを利用する予定である.平成25年度の実施目標としていた分泌タンパクのスクリーニングと機能解析は順調に進んでいると考えられる。本年度も異なるタイムポイントでのスクリーニングを継続して行い、分泌因子候補の経時的変化につき検討を行う予定である。臨床検体における検討は平成27年度に行う予定であったが、すでに商品化されたELISAキットがある分泌因子については平成25年度に測定を終了し、結果を論文として報告した。新規分泌因子のスクリーニングと実験の再現性確認に時間を要したため、抗体作成とELISAの構築が平成27年度にずれ込むこととなった。また残る候補遺伝子の遺伝子改変マウスの作製も平成27年度に随時進めていく予定となったため。
わが国六大企業集団の非経済的ビジネス活動についての実証的研究

株式の相互所有、企業系列間の資金融資、役員の相互派遣などを通じて相互に結合するとされるわが国六大企業集団は、集団としての結合の強さ、活動様式などにおいて必ずしも一義的に規定可能というわけではない。とりわけ旧財閥系のグループとそうでないグループとの間には若干の相違があるように思われる。にも拘らず各グループの集団としての統一性を求めんとする諸活動が存在する。企業がそのビジネス活動の一環として、利益集団(interest group)を形成しようとすることは必ずしもわが国だけの特徴というわけではないが、相互連繋の根幹がinterestのみに基づいていないところに日本的グルーピングの特性が見てとれる。たとえば、共通の商号や商標を用い、その管理についてもグループ内に審査機関を設けたりすることである。企業集団の中枢は、グループメンバーの社長から成る社長会であるが、定期的に会合し、グループの共通問題の討議をするものとされている。社長会の機能は大きく二つに分けられる。ひとつは、調整者としての役割である。グループ内における投資の重複、あるいは競合する製品の生産を話し合うこと。ふたつには、情報ネットワークとしての役割がある。グループ全体としての利益増大のために必要なビジネス上、非経済的ビジネス上の情報の交換である。共同事業、M&G、新規プロジェクトの企業化など異業種間の持てるノウハウの相互交換はますます重要性を高めている。社長会は、その関連したグループ組織として広報委員会、懇談会、研究会、連絡会などの名称をもつ補佐機関があるが、その内容を見ると、グループ内での情報交換がとりわけ新規プロジェクトの開発、展開に如何に重要であるかと見ているかがよくわかる。各グループの近年の関心は将来的な可能性としての環境、バイオ、中国への投資などがあり、すでにビジネス化しつつあるものに関西新空港、テレコミュニケーションがある。