hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
分子生理学的手法を用いた子宮平滑筋の収縮制御に関与するイオンチャネル特性の解明

本年度は研究の最終年度であり、これまで得られた以下の実験結果を行い、結果を総括した。実験1.ラット妊娠子宮におけるイオンチャネルmRNAの定量をサブタイプの解析:1)カルシウムチャネルであるイノシトール三リン酸(IP3)受容体およびリアノジン(Ry)受容体の解析。2)NaチャネルおよびKチャネルの解析。各々のイオンチャネルに対する特異的なプライマーを用いてRT-PCR法にてその発現を検討した。検討の結果、ラット妊娠子宮筋は、妊娠週数の経過と共にIP3受容体、Ry受容体の発現が増加することがわかった。実験2.ラット妊娠子宮筋におけるオキシトシンおよびβ受容体刺激薬の効果-イオンチャネル特性の変化に対する検討:ホールセルクランプ法を用いて、イオンチャネルの特性を解析した。妊娠子宮筋の細胞膜に微笑ガラス電極を接着させギガオーム・シールを形成しホールセルクランプを行い、オキシトシンおよびβ受容体刺激薬に対する変化を検討した。実験3.ラット妊娠子宮筋におけるオキシトシンおよびβ受容体刺激薬の効果-細胞内カルシウム濃度の変化に対する検討:実験1にて妊娠子宮筋にはIP3およびRy受容体が発現していることがわかったので、カルシウム感受性蛍光色素を用いて、細胞内カルシウム濃度の変化を解析した。オキシトシン刺激により細胞内カルシウム濃度は濃度依存性に増加することがわかった。一方、β刺激薬の単独投与では細胞内カルシウム濃度は変化しなかったが、オキシトシンによる細胞内カルシウム濃度の増加を濃度依存的に抑制した。イオンチャネルmRNAの定量とアイソフォームの解析を行うため,イノシトール三リン酸(IP3)受容体・リアノジン(Ry)受容体・Naチャネル・KチャネルcDNAの一部を規定するプライマーを作成し,妊娠ラット子宮筋から抽出されたRNAを用いてreverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)を行った.そして,アイソフォームの解析を行った.次に,PCR産物を電気泳動した後そのゲルを染色し,ゲルバンドをscanning densitometry systemを使って解析し相対的に比較定量した.さらに,β2受容体刺激剤とオキシトシンの影響を調べるため,ホールセルクランプによるチャネル特性の解析を行った.ラット子宮筋の組織片を子宮平滑筋細胞に単離した後,簡易培養をした.細胞膜に微小ガラス電極を接着させギガオーム・シールを形成しホールセルクランプを行った.電気刺激装置により細胞膜電位をある一定の保持電位から適度な脱分極側に変化させることで電圧勾配を作り,その結果発生する電流をホールセルクランプ用増幅器で測定した.その際,標準媒液にβ2受容体刺激剤(塩酸リトドリン,硫酸テルブタリン)やオキシトシンを添加しチャネル電流を経時的に測定した.また,細胞内Caイオン濃度の測定による解析を行った.蛍光顕微鏡画像処理装置を用いて子宮平滑筋の細胞内Caイオン濃度を測定した.まず,細胞外液Caイオン濃度とカルシウム拮抗剤ニフェジピンの影響を確認した.また,細胞外液にβ2受容体刺激剤(塩酸リトドリン,硫酸テルブタリン)やオキシトシンを添加し細胞内Caイオン濃度を経時的に測定した.子宮平滑筋の興奮収縮連関には,細胞内Caイオンの動員が必要不可欠であり,細胞内Caイオンの動員機構を理解するためには,筋小胞体膜上に存在するイノシトール三リン酸(IP3)受容体とリアノジン(Ry)受容体の役割を知ることも重要となる.さらに,平滑筋細胞の膜の安定化や電気的特性の理解には,NaイオンやKイオンの動員機構を解析することも重要である.本研究では,イオンチャネルmRNAの定量とアイソフォームの解析を行うため,P3受容体・Ry受容体・Naチャネル・KチャネルcDNAの一部を規定するプライマーを作成し,妊娠ラット子宮筋から抽出されたRNAを用いてreverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)を行った.そして,アイソフォームの解析を行った.次に,CR産物を電気泳動した後そのゲルを染色し,ゲルバンドをscanning densitome trysystemを使って解析し相対的に比較定量した.さらに,β2受容体刺激剤とオキシトシンの影響を調べるため,ホールセルクランプによるチャネル特性の解析を行った.

ラット子客筋の組織片を子宮平滑筋細胞に単離した後,簡易培養をした.細胞膜に微小ガラス電極を接着させギガオーム・シールを形成しホールセルクランプを行った.電気刺激装置により細胞膜電位をある一定の保持電位から適度な脱分極側に変化させることで電圧勾配を作り,その結果発生する電流をホールセルクランプ用増幅器で測定した.その際,標準媒液にβ2受容体刺激剤(塩酸リトドリン,硫酸テルブタリン)やオキシトシンを添加しチャネル電流を経時的に測定した.また,細胞内Caイオン濃度の測定による解析を行った.蛍光顕微鏡画像処理装置を用いて子宮平滑筋の細胞内Caイオン濃度を測定した.まず,細胞外液Caイオン濃度とカルシウム拮抗剤ニフェジピンの影響を確認した.また,細胞外液にβ2受容体刺激剤(塩酸リトドリン,硫酸テルブタリン)やオキシトシンを添加し細胞内Caイオン濃度を経時的に測定した.本年度は研究の最終年度であり、これまで得られた以下の実験結果を行い、結果を総括した。実験1.ラット妊娠子宮におけるイオンチャネルmRNAの定量をサブタイプの解析:1)カルシウムチャネルであるイノシトール三リン酸(IP3)受容体およびリアノジン(Ry)受容体の解析。2)NaチャネルおよびKチャネルの解析。各々のイオンチャネルに対する特異的なプライマーを用いてRT-PCR法にてその発現を検討した。検討の結果、ラット妊娠子宮筋は、妊娠週数の経過と共にIP3受容体、Ry受容体の発現が増加することがわかった。実験2.ラット妊娠子宮筋におけるオキシトシンおよびβ受容体刺激薬の効果-イオンチャネル特性の変化に対する検討:ホールセルクランプ法を用いて、イオンチャネルの特性を解析した。妊娠子宮筋の細胞膜に微笑ガラス電極を接着させギガオーム・シールを形成しホールセルクランプを行い、オキシトシンおよびβ受容体刺激薬に対する変化を検討した。実験3.ラット妊娠子宮筋におけるオキシトシンおよびβ受容体刺激薬の効果-細胞内カルシウム濃度の変化に対する検討:実験1にて妊娠子宮筋にはIP3およびRy受容体が発現していることがわかったので、カルシウム感受性蛍光色素を用いて、細胞内カルシウム濃度の変化を解析した。オキシトシン刺激により細胞内カルシウム濃度は濃度依存性に増加することがわかった。一方、β刺激薬の単独投与では細胞内カルシウム濃度は変化しなかったが、オキシトシンによる細胞内カルシウム濃度の増加を濃度依存的に抑制した。
未知の細胞不死化に関与する遺伝子のクロ-ニング

目的:不死化に関係する遺伝子(群)、特にDNA腫瘍ウイルスの不死化癌遺伝子(アデノウイルスE1A遺伝子)と一部同等の機能を持つ遺伝子(群)が未分化な胎児性癌細胞(Teratocarcinoma)で発現していることが既に示唆されており、またこの様な遺伝子が口腔癌の発生にも重要な役割を果たしている可能性は充分に考えられる。一般に不死化癌遺伝子は、ラット初代培養細胞を不死化するが、単独では樹立化培養細胞をトランスホ-ムできないため検出が困難である。そこで本研究では既知の不死化癌遺伝子E1Aの機能を一部欠失した変異遺伝子を用い、ラット初代培養細胞における不死化能を相補する未知の遺伝子をヒト胎児性癌細胞のcDNAライブラリ-からクロ-ニングすることを目的とした。結果:1、E1A蛋白質のC末領域を欠失した変異遺伝子はrasとの協同作用は野生型と同様に示したが、ラット新生仔腎初代培養細胞(BRK)の不死化能を全く示さなかった。2、前記のE1A変異遺伝子を動物細胞で発現可能なベクタ-に組み込んだヒト胎児性癌細胞のcDNAライブラリ-と共にBRK細胞に導入した結果、不死化したと考えられる細胞株を一株単離した。3.単離した細胞株からDNAを抽出し、サザンブロットをおこなった結果、cDNAライブラリ-由来のDNAが2コピ-組み込まれていることが確認された。4、細胞のDNAを適当な制限酵素で切断、環状化した後、大腸菌に導入し、大腸菌ベクタ-と共にcDNAを回収する事を試みた(プラスミドレスキュウ-法)。組み込まれている2コピ-のcDNAのうち1つを回収したが、E1A変異遺伝子と共にBRK細胞に再導入しても細胞の不死化は起こさなかった。残りの1コピ-については約10種類の制限酵素を用いてプラスミドレスキュウ-を行ったが、まだcDNAの回収には成功していない。
戦争文学／表象にみるジェンダーと記憶の政治

本年度は、1960年前後の青年を描いた大江健三郎の長編小説「われらの時代」を通して、在日朝鮮人青年に割り当てられた戦争の記憶語りとホモエロティックな表象が果たす役割について、分析を行った。そのうえで、同時代の「怒れる若者たち」言説や戦争体験語りを、世代で区分しようとする言説の流通を調査し、小説テクストと同時代言説の交錯する地点の考察を行った。それによって、戦争と自らを切り離して語り得る者/語り得ない者という表象上の差異が、1960年前後の戦後処理の問題に通底するものであることを浮かび上がらせることができた。これらの調査分析から見えてきたのは、1960年前後の大江健三郎や石原慎太郎らの「怒れる若者」論が内包する政治運動に対する絶望感や命をかける対象を持ち得ないことへの焦燥感が、歴史と切断された地点に足場を置くことで可能になっているという点である。大江らは「戦争体験」を共有する年長世代への違和感を示しつつ、自分たち若者世代を「停滞」する世代として語るが、こうした語りは過去や未来との切断を強調することで、戦後処理/戦後責任という同時代で進行しているはずの問題をも覆い隠す。また、日本のファシズム形成の追及に大きく貢献した同時期の橋川文三等の「戦争体験」論も、「日本の思想伝統」の中に「歴史意識」の創出を見ようとする点で、他者との回路を閉じたものとなっている。このようにみていくと、両者ともこの時期に戦争責任/戦後処理の対象として存在し続けていたはずの他者を不在にするかたちで「戦争体験」を問題化していることが分かる。これらのことから「戦争責任」をめぐる問題と戦争の集団的記憶の編成との関わりについて調査分析する必要性がより明瞭に見えてきた。勤務先の変更とそれに伴う教育・校務量の増加により、調査研究に配分できる時間が予定よりも少なくなってしまったため。これまでの成果を踏まえつつ、引き続き戦争の記憶をめぐる文学/表象とジェンダー・セクシュアリティについて、調査研究を進める予定である。本年度は、1950年代前半の戦争に関する文学/表象がどのように集団的記憶の生成に関与してきたかについて考えるために、継続的に考察を続けている生活記録運動とジェンダーの問題や、松田解子の長編小説「地底の人々」について調査研究を進めた。1.共編著『「サークルの時代」を読むー戦後文化運動研究への招待』影書房20162.「戦争への抵抗と責任ー1950年代の労働と文学」社会文学会2016年度三重大会、2016/11/123.「「アジアの連帯」と強制連行の記憶/記録ー松田解子『地底の人々』」ワークショップ「東アジア冷戦と〈移動〉ー〈強制労働〉の経験と記憶」淡江大学(台湾)2017/3/141は、敗戦後占領期からサンフランシスコ講和条約を経て、日本が冷戦体制に組み込まれていく時期の抵抗運動として、サークル文化運動を取り上げた論集である。戦争の記憶を生々しく抱えた運動主体が、朝鮮戦争を始めとする熱戦/冷戦の顕在化と逆コースの渦中で、どのように時代と切り結び抵抗の言葉を編み出していったのか、また彼/彼女らはどのように表象され、どのような政治的社会的言説や運動と接続されていくのかについて論じたものである。2と3では、1950年代前半の左派言説における戦争の記憶、特に花岡事件に代表される戦時下の強制連行/労働を題材とする松田解子の長編小説「地底の人々」について論じた。労働者の国際的連帯を訴える左派言説の基盤のうえに戦時の帝国日本の暴力をいち早く訴えるこの作品が描かれ得たことと、しかし戦時の中国人強制連行/労働という題材の小説にまでも、日本人労働者の抵抗という要素を求める声が存在したことなどについて、当時の中国・台湾政府と日本政府との交渉を背景としながら考察した。労働者文学の観点から強制連行を題材にして書かれた長編小説「地底の人々」(松田解子)の調査研究を通して、1950年代前半の左派による国際連帯志向と戦前戦時の記憶がどのように絡み合っていたのかについて考察を進めることができた。またこれらの問題と「国民文学論」や女性ジェンダー化された抵抗運動としての生活記録運動の隆盛との同時代性を確認することができた。今年度は、以下の調査研究を進めた。1、「戦争への抵抗と責任ー松田解子『地底の人々』と強制労働の記憶ー」『社会文学』第46号、2017年2、『〈原爆〉を読む文化事典』(川口隆行編、青弓社、2017)において「核をめぐる運動とジェンダー」「原爆乙女」「核・原爆を演じる」を担当3、日本近代文学会(2017年10月)にて「空白の「文学史」を読むー“政治と文学"にみるジェンダー・ポリティクス」を発表、また国際シンポジウム「1930年前後の文化生産とジェンダー」(2018年1月)にて「階級闘争と女性解放の夢」を発表4、大江健三郎「われらの時代」における戦争表象とセクシュアリティについて調査分析1は昨年度の調査研究を活字化したものである。2では、戦後日本における反核運動において女性がどのように関わってきたのかについて、表象をめぐるフェミニズム批評との衝突や交渉を含めて整理した。

また被爆者表象が女性に割り当てられる際に見られる受動的主体の前景化が、戦争被害をめぐる記憶の形成に加担してしまうものであること、またそれが冷戦における日本の国際的地位を忘却させるものであることなどについて論じた。また受動的主体として語られがちだった女性被爆者像に亀裂を走らせるような女性像が近年の作品では見られることなどについて、被爆の問題を描いた戦後の文学/表象作品を取り上げて論じた。3は、戦前のプロレタリア運動におけるジェンダーの問題を調査分析したものの報告であり、抵抗運動におけるジェンダーやセクシュアリティの表象を考えるとともに戦後の集団的記憶におけるジェンダーとの連続性/断絶性をみるための基盤となる研究である。4については、大江健三郎の長編小説「われらの時代」の登場人物たちについて、過去・現在・未来という時間表象の観点から分析を試みることで、戦争をめぐる語りと同性愛表象について考察を行っているところである。戦争文学/表象におけるジェンダー・セクシュアリティ表象について、調査分析を進めることができている。本年度は、1960年前後の青年を描いた大江健三郎の長編小説「われらの時代」を通して、在日朝鮮人青年に割り当てられた戦争の記憶語りとホモエロティックな表象が果たす役割について、分析を行った。そのうえで、同時代の「怒れる若者たち」言説や戦争体験語りを、世代で区分しようとする言説の流通を調査し、小説テクストと同時代言説の交錯する地点の考察を行った。それによって、戦争と自らを切り離して語り得る者/語り得ない者という表象上の差異が、1960年前後の戦後処理の問題に通底するものであることを浮かび上がらせることができた。これらの調査分析から見えてきたのは、1960年前後の大江健三郎や石原慎太郎らの「怒れる若者」論が内包する政治運動に対する絶望感や命をかける対象を持ち得ないことへの焦燥感が、歴史と切断された地点に足場を置くことで可能になっているという点である。大江らは「戦争体験」を共有する年長世代への違和感を示しつつ、自分たち若者世代を「停滞」する世代として語るが、こうした語りは過去や未来との切断を強調することで、戦後処理/戦後責任という同時代で進行しているはずの問題をも覆い隠す。また、日本のファシズム形成の追及に大きく貢献した同時期の橋川文三等の「戦争体験」論も、「日本の思想伝統」の中に「歴史意識」の創出を見ようとする点で、他者との回路を閉じたものとなっている。このようにみていくと、両者ともこの時期に戦争責任/戦後処理の対象として存在し続けていたはずの他者を不在にするかたちで「戦争体験」を問題化していることが分かる。これらのことから「戦争責任」をめぐる問題と戦争の集団的記憶の編成との関わりについて調査分析する必要性がより明瞭に見えてきた。勤務先の変更とそれに伴う教育・校務量の増加により、調査研究に配分できる時間が予定よりも少なくなってしまったため。本年度の成果を踏まえつつ、ジェンダー規範や異性愛規範、ホモソーシャル等の観点から戦争の記憶/表象や戦争責任の問題について調査分析を進めることとする。これまでの成果を踏まえつつ、ひきつづき戦争をめぐる記憶の問題として文学/表象におけるジェンダー・セクシュアリティの調査分析を行う予定である。これまでの成果を踏まえつつ、引き続き戦争の記憶をめぐる文学/表象とジェンダー・セクシュアリティについて、調査研究を進める予定である。購入予定だった関連書籍の刊行が遅れたため。今年度末に職場異動が生じ、その準備等のために予定していた調査出張を行わなかったことで残額が生じた。今年度は海外調査を予定しているのでそれに充てる計画である。
グラフェン上への触媒単原子・クラスターの合成と電子顕微鏡を用いた解析

貴金属触媒は工業的に重要性が高いが、希少で高価であるため、使用量の低減化技術が研究されている。本研究では、燃料電池の触媒として使用される白金-カーボン系材料に注目し、真空中加熱により、白金ナノ粒子をクラスター、単原子に微細化させた。加熱温度や時間などの条件を変えて試料を作製し、TEM観察により、微細化の最適条件を探索した。また、触媒反応過程の理解を深めるために、触媒その場TEM観察に向けた、ガス雰囲気で加熱ができるTEM試料ホルダーを開発した。さらに、これを利用して、作製したグラフェン上の白金ナノ粒子のその場観察を行い、ガス雰囲気高温下でのナノ粒子の構造や挙動について調べた。昨今の地球規模の環境問題やエネルギー問題の解決策として、触媒技術が注目されている。特に、貴金属触媒は工業的重要性が高い触媒であるが、非常に希少で高価であるため、使用量の低減化技術などの研究や開発が盛んに行われている。そこで、本研究では、触媒の使用量低減のために微細化ークラスターや原子化された触媒の構造とその触媒反応特性との関係を理解するために、透過型電子顕微鏡(TEM)を用いた分析・解析を行う。観察は、収差補正機構付きTEMを使用し、TEMおよび走査型透過電子顕微鏡(STEM)観察を行った。電子線照射によるダメージの軽減と像コントラストの向上のために、加速電圧80 kVとした。今年度は、グラフェン上に分散させた白金ナノ粒子をTEM内および加熱チャンバー内で加熱させて、白金クラスターや単原子が生成することを確認し、ナノ粒子の微細化条件を探索した。400°C以上で加熱した場合に微細化が確認でき、時間とともに微細化は進んだ。また、白金ナノ粒子の濃度が高いと凝集化が起こりやすく、微細化には低濃度が適していた。真空や水素中などの加熱雰囲気も変えたが、顕著な違いは今のところ見られていない。大気や酸素中での加熱処理はグラフェンを酸化させ、加速電圧80 kVでも電子線照射ダメージが見られた。得られたクラスターや単原子は、グラフェンのエッジ部分に多く存在し、欠陥の多いグラフェンには多数の単原子が存在することをTEMで観察した。地球規模の環境問題やエネルギー問題の解決策として、近年、触媒技術が再注目されている。触媒は、従来から他分野において、反応の促進という重要な役割を担ってきた。特に、貴金属触媒は、石油精製、ファインケミカル、排ガス処理などの広範囲な分野で使用され、工業的重要性が非常に高い。しかしながら、資源として非常に希少で、高価であるため、使用量を低減化させる技術などの研究や開発が盛んに行われている。そこで、本研究では、触媒の使用量低減のために微細化ーナノ粒子やクラスター化された白金触媒の構造やその触媒反応特性との関係を理解するために、透過型電子顕微鏡(TEM)を用いた分析・解析を行う。今年度は、特に、反応過程の基礎的な理解を深めるために、ガス雰囲気で加熱ができるTEM試料ホルダーを開発し、グラフェン上の分散させた白金ナノ粒子のその場TEM観察を行った。差動排気効果を利用して、1X10-4 PaのTEM内でも、試料近傍を1 Pa雰囲気にして観察することができた。白金ナノ粒子がグラフェン表面上をエッチングする現象(チャネリング現象)を0.5 Pa空気雰囲気、400 oC以上で観察することができた。温度が上昇するとともに、チャネリング速度は増大することを確認した。触媒は、昨今の環境問題やエネルギー問題を解決する一つの方法として重要性が高まり、国内外を問わず、益々、注目を集めている。中でも、白金をはじめとする貴金属触媒は、工業的重要性が非常に高い。しかし、資源として希少で高価であるため、触媒活性の向上や新規の触媒活性の発現を目指した研究・開発が盛んに行われている。そこで、本研究では、使用量を低減させるために微細化させた触媒の構造と触媒反応特性との関係を明らかにするため、透過型電子顕微鏡(TEM)を用いた観察および分析を行う。昨年度は、反応中の触媒ナノ粒子の構造や挙動をより深く理解するために、ガス雰囲気で加熱ができるTEM試料ホルダーを開発した。今年度は、そのホルダーの改良を行い、ガスの導入が安定的に行えるようになった。また、白金触媒ナノ粒子の特異性を調べるため、他の触媒ナノ粒子においても、ガス雰囲気加熱TEM試料ホルダーを用いて、その場TEM観察を試みた。しかしながら、顕著なコンタミネーションが問題となり、グラフェン上の触媒ナノ粒子のTEM試料の調整を再検討する必要が生じた。産前産後の休暇および育児休業の取得に伴い、平成27年8月より本科学研究費助成事業の補助事業を中断し、補助事業期間を来年度末まで延長したため、研究の進捗状況は予定より大幅に遅れた。触媒は、従来から石油化学など各分野において、反応の促進という重要な役割を担ってきたが、近年の環境問題やエネルギー問題の解決策としても注目されている。しかし、貴金属触媒のように、資源として非常に希少で高価であるものあり、使用量を低減化させる技術などの研究・開発が進められている。本研究では、透過型電子顕微鏡(TEM)を用いて、触媒の使用量低減のために微細化ーナノ粒子やクラスター化された触媒の構造や触媒反応の理解を深めることを目的とする。触媒反応中の構造や挙動をその場観察するために開発していた、ガス雰囲気中で加熱が行えるTEM試料ホルダーの改良を行った。具体的には、試料近傍の圧力を測定する微小な真空計のコントローラを改良し、測定範囲を拡大させた。

また、その圧力値に応じて、ピエゾ駆動のバルブを開閉できるように、制御ソフトウェアを導入した。これにより、今まで懸念事項であった、バルブを開ける際の急激な圧力上昇や観察中の圧力の不安定性を改善できるようになった。また、ex-situ用真空チャンバやガス供給システムを整備した。その一方で、基礎的な知見を得るために、真空中でのグラフェン上の金属ナノ粒子の高分解能TEM観察も行った。それにより、グラフェン上でのナノ粒子の構造や挙動を原子レベルで捕らえることにも成功した。電子線照射という環境下ではあるが、グラフェンと金属原子の結合の強さにより、金属原子の挙動が異なることを明らかにした。貴金属触媒は工業的に重要性が高いが、希少で高価であるため、使用量の低減化技術が研究されている。本研究では、燃料電池の触媒として使用される白金-カーボン系材料に注目し、真空中加熱により、白金ナノ粒子をクラスター、単原子に微細化させた。加熱温度や時間などの条件を変えて試料を作製し、TEM観察により、微細化の最適条件を探索した。また、触媒反応過程の理解を深めるために、触媒その場TEM観察に向けた、ガス雰囲気で加熱ができるTEM試料ホルダーを開発した。さらに、これを利用して、作製したグラフェン上の白金ナノ粒子のその場観察を行い、ガス雰囲気高温下でのナノ粒子の構造や挙動について調べた。昨年度は、その場観察のためのTEM試料ホルダーの開発に問題が生じて、遅れを取ったが、今年度は前半には出来上がり、実際にその場観察を行えるようになった。今年度、産前産後の休暇および育児休業の取得に伴い、本補助事業を中断したため、来年度は、今年度の研究計画を引き継ぐ予定である。今年度、白金触媒の特異性を調べるため、開発したTEM試料ホルダーを用いて、他の触媒ナノ粒子のその場TEM観察を試みたが、コンタミネーションの問題が生じ、観察が行えなかった。そこで、今後、触媒ナノ粒子のTEM試料調整を再検討する。また、エネルギー分散型X線分光法などの分析と併用させながら、TEM観察を進める。触媒の反応過程や劣化過程を調べるため、今後も、ガス雰囲気中、高温下でのグラフェン上触媒ナノ粒子の構造および挙動を観察していく。そして、これらの結果から、触媒活性サイトやメカニズムについて考察していきたい。電子顕微鏡学今年度は、開発したTEM試料ホルダーを用いて、ガス雰囲気中、高温下でのグラフェン上の分散させた白金ナノ粒子の挙動を観察した。触媒反応過程や劣化過程を解明するため、今後も、作製した触媒複合体のさらなるその場観察とその解析を行う。特に、反応中のグラフェン担持体の変化、触媒ナノ粒子、クラスターの動的挙動をTEMを用いて調べる。また、他のカーボン担持体や触媒についてもその場観察を行い、比較検討を行う。これら結果から、触媒活性サイトやメカニズムについて考察していきたい。触媒反応過程を調べるために開発中のTEM試料ホルダー(最終年度で使用する予定)に問題が生じ、その修正・改良を行っていた。そのため、通常のTEMやSTEM観察は行ったが、高分解能観察に遅れが生じてしまった。来年度、早急に、電子線エネルギー損失分光法による分析も含め、高分解能な白金ーカーボン触媒の観察を行いたい。
B中間子の物理

D_<sJ>(2700)粒子の研究を引き続き行った。このcsクォークの束縛状態はD^0K^+終状態へと崩壊するが、B^+→D^0D^<*+>K^0反応の中に発見された。この粒子の質量と崩壊幅は、の普遍質量分布から極めて正確に測定されている。一方この粒子のヘリシティ分布からそのスピン・パリディは1-と決定された。この粒子はcsクォーク束縛状態の最初の動径励起状態と考えられる。データの解析は終息し、フィジカルレビューレター誌に掲載された。また最終結果は、Jolanta Brodzickaにより国際会議(Charm2007, QWG5)において発表された。さらに研究を深めるため、B^+→D^0D^<*+>K^0反応におけるダリッツ解析も行った。この反応はDK終状態へ崩壊するさらに新しい共鳴状態を探索するに好適な場所といえる。その結果質量が2.65GeV/c^2のところに極めて明確で比較的崩壊幅の狭い新しい状態を発見した。現在系統誤差についての解析を続けている。この結果は2008年夏の国際会議に発表される予定である。これらの研究の傍らBelle実験グループのチャームクォーク研究グループのリーダーとして、D反D混合、チャーム粒子、チャームバリオンの生成などの研究において、指導的役割を果たした。今年度は以下の3つのテーマについて研究を深めた。1.B→D*D*K崩壊モード:このモードを通じて、新しいチャームハドロン粒子DsJ(2700)の観測とその性質の解明が、大きなデータサンプルを使ってより詳細に行われた。その研究結果は、モスクワで行われたICHEP06国際会議において、Jolanta Brozickaにより報告されさらに、hep-ex/0608031としてもまとめられた。2006年秋ハワイで開催された、日米合同の物理学会においても、"New charmed particles at Belle"という講演として同人によって報告された。研究の総仕上げにあたる学術論文への投稿は、DsJ(2700)粒子についての各種理論モデルから来る不定性についての最終評価を終えてからとなる。この研究と平行して、B→D*D*K崩壊におけるDalitzスペクトルの研究をはじめた。この研究では、低運動量π中間子の検出効率の評価が重要であり、集中的な研究が行われつつある。2.Belle実験全体の枠組みの中で、新粒子探索の総合的なコーディネーションを通じて、新たなハドロン粒子の発見をシステマティックに行う体制を強化しつつある。3.B中間子の実験的研究において、測定器の性能向上とその性能の正しい理解は欠かすことのできない要件である。今年度は主として、検出器システムの中心部に置かれたシリコンバーテックス検出器(SVD)の崩壊点検出分解能の向上に関わる研究を行った。B-ファクトリーにおける大強度のビームがもたらすバックグラウンドの分解能への影響を定量的に評価し、崩壊点再構成のアルゴリズムの改良によって、その低減を計ることを目標とする。
オーガナイザー特異的転写因子Xlim-1の機能ドメインの解析

LIMホメオドメイン蛋白質Xlim-1はアフリカツメガエルのシュペーマン・オーガナイザー領域に特異的に発現する。LIMドメイン変異体の活性型Xlim-1を異所発現させると神経誘導などのオーガナイザー活性を現わす。そこで、Xlim-1のオーガナイザーにおける役割がどの機能ドメインによって担われているのかを明らかにすることを目的とし、C末領域の機能解析を行った。Xlim-1のパラログ遺伝子Xlim-5との比較により、C末領域を5つの保存領域CCR(C-terminal conserved region)1から5に分けそれぞれの役割を解析した。CCR1あるいはCCR2の欠失体を腹側帯域で高発現(mRNA量で1ng/embryo)させると単独で2次軸形成能が現れることを見い出した。この活性はLIMドメインの変異体の活性と類似していることより、CCR1からCCR2にかけての領域がXlim-1の活性を負に制御していることが示唆された。次にXlim-1の活性化共役因子Ldb1との共発現の系で検討したところ、CCR2とCCR4の領域が2次軸形成能に必要な領域であることが明かとなった。特にCCR2を欠失させるとほとんど活性が消失したことより、CCR2が主要な転写活性化ドメインであり、CCR4がそれに対して補助的に働くことが予想された。CCR2の進化上保存された5つのチロシンをアラニンに置換してたところ活性が完全に消失したことより、これらのチロシンは転写活性化補助因子(co-activator)との相互作用に必須であることを示唆している。しかし既知の転写活性化補助因子であるCBP,SRC-1,TIF2との結合は認められたかったこと、および転写活性化に不可欠なチロシンの存在は、我々の知る限りにおいて報告例がないことより、新規な転写活性化ドメインであると予想している。今後はこれらの領域と相互作用する蛋白質を同定することで、オーガナイザーにおけるXlim-1の活性化機構が明らかになると期待される。
筋肉の機能と構造の調節機構

本年度は本研究も最終年次の3年目になり、前年にひき続いて筋肉の調節蛋白及び骨格蛋白に関する4つのプロジェクトにつき以下の通り研究が進展した。(1)横紋筋Ca調節蛋白質。CATA処理によりトロポニンCを完全に除いたグリセリン筋張力がトロポニンC添加によって元に戻ることを証明し、CDTA処理が生理的なCa調節研究のための良い手法であることが明らかになった。またこのCDTA処理筋原線維を用いて筋原線維内のトロポニンCに特異的なCa結合を測定し、1分子当たり4個のCa結合部位のすべてにCaが結合してはじめてATPoise活性化がおこることを見出だした。その他筋原線維のトロポニン・トロポミオシンの除去と再感作の条件も確立され諸種トロポニン標品の作用を筋原線維を用いて比較できるようになった。さらにカエル骨格筋トロポニンCのCa結合に伴うエンダルピー変化および各サブユニット間の相互作用による熱力学的変化を検討した。また蛋白質予測三次元構造について立体図形として書き出す簡便法を開発した。また蛋白コンフォメーションの安定性に対する水和の重要性についても検討を加えた。(2)細胞骨格蛋白質の研究。コネクチン抗体の免疫電子顕微鏡法によりカエル骨格筋内の局在を検討し、A帯上のコネクチンは伸長されていくし、I帯上では伸長され易いことをみた。またゲルゾリンでアクチンを破壊後にものこるフィラメントとしてコネクチンを直接観察することができた。パラトロポミオシンについても精製法の改良が行なわれた。(3)構造調節蛋白質。平滑筋、胚骨格筋α-アクチンの一次構造が決定され高次構造と機能の関係の議論がなされた。その他幼若筋の大日方の見出したアクチン重合調節蛋白についても研究が進められた。(4)平滑筋調節蛋白質。平滑筋収縮蛋白調整法について生理活性を保つ見地から再検討を行ない、天然アクトミオシン及びそのCa脱感作法が開発された。筋肉の調節蛋白及び骨格蛋白に関する4つのプロジェクトについて以下の通り研究が進展した。骨格筋筋原線維をCDTA処理することによってトロポニンCのみを完全に取り除くことができた。この標本を用いて骨格筋と心筋に特有なCa,Sr感受性曲線がトロポニンCに依存していることが明らかになった。カエル骨格筋トロポニンCについてカルシウムによる熱滴定を行ったところウサギ骨格筋の場合と本質的に同じ特微を示すことが判明した。Ca調節蛋白の一次構造から高次構造を予測する研究については、その基礎となる原子座標決定法について検討を進めているところである。(2)細胞骨格蛋白質。コネクチンについてははトヨパール・バイオゲルなど各種ゲル濾過を試みたが、未だβ-コネクチンを分別するまでに至っていない。またアクチンとの結合については50分子のアクチンに1分子のコネクチンが結合することが見出された。パラトロポミオシンは合成アクトミオシンATPaseに対して、トロポミオシンに比べて約2倍の阻害作用を示した。この作用はトロポミオシンを添加しても変わらなかった。硬直グリセリン筋にパラトロポミオシンを加えると荷重負荷に弱くなることも判明した。平滑筋α-アクチンについてモノクローン抗体作製、CDTA構造決定などの研究が進展中である。ニワトリ胚骨格筋のアクチン結合蛋白については19Kと20Kの2種がそれぞれ分離精製された。

いずれもアクチンの重合を抑制する他にF-アクチンをフラグメント化することも判明した。20K蛋白はユフィリンと類似した性質を示した。両者とも成熟筋には見出されなかった。(4)平滑筋調節蛋白質。アクチン長の調節蛋白である84K蛋白とゲルゾリン、ブレビンとの関係について免疫的に異なることを示した。平滑筋天然アクトミオシン調製法について種々の条件を検討中である。筋肉の調査蛋白及び骨格蛋白に関する4つのプロジェクトについて以下の通り研究が進展した.(1)横紋筋Ca調節蛋白質.選択的にトロポニンCを除去した筋原線維標本(CDTA処理筋原線維)を用いて,これまで知られていなかった筋原線維内におけるトロポニンCのCa結合を測定することに成功した.その結果,トロポニンCの4番目のCa結合と収縮反応が連関することが明らかになった.回転シャドー法を用いてトロポニン及びその成分の分子構造が可視化された.トロポニンは状況に応じて種々の形状を呈することが明らかになった.トロポニンを構成するサブユニットについてもトロポニンTが17μmのフィラメント状を呈すること,そしてフラグメントの26kフラグメントとトロポニンTについてもそれぞれ14μm,11μmの分子長をもつことが示された.カエル骨格筋トロポニンCについてカルシウムによる熱滴定を行った.Ca調節蛋白の一次構造からの高次構造予測について原子座標決定法について検討を進めた.(2)細胞骨格筋蛋白質.コネクチンの筋原線維上での局在について蛍光抗体法による検討を行った.またコネクチンの比較動物学的な分布についても意味ある知見が得られている.パラトロポミオシンについては大量に分布する必要上調製法の改良に今年度は主眼をおき相応の成果を収めた.(3)構造調節蛋白質.遺伝子工学的にαーアクチンの全一次構造の決定に成功した.ニワトリ幼若筋のアクチン調節蛋白質C蛋白質のアイソフォームについては二次元電気泳動法による解析が進展した.(4)平滑筋調節蛋白質.平滑筋収縮のCa調節蛋白であるライトニンの調製について,ジメチルスルフキサイド中で行う改良法が示された.アクチン調節蛋白のゲルゾリンの性質について腸筋上皮を用いて解析した.本年度は本研究も最終年次の3年目になり、前年にひき続いて筋肉の調節蛋白及び骨格蛋白に関する4つのプロジェクトにつき以下の通り研究が進展した。(1)構紋筋Ca調節蛋白質。CDTA処理によりトロポニンCを完全に除いたグリセリン筋張力がトロポニンC添加によって元に戻ることを証明し、CDTA処理が生理的んCa調節研究のための良い手法であることが明らかになった。またこのCDTA処理筋原線維を用いて筋原線維内のトロポニンCに特異的なCa結合を測定し、1分子当り4個のCa結合部位のすべてにCaが結合してはじめてATPase活性化がおこることを見出した。その他筋原線維のトロポニン・トロポミオシンの除法と再感作の条件も確立され諸種トロポニン標品の作用を筋原線維を用いて比較できるようになった。さらにカエル骨格筋トロポニンCのCa結合に伴うエンタルピー変化及び各サブユニット間の相互作用による熱力学的変化を検討した。また蛋白質予測三次元構造について立体図形として書き出す簡便法を開発した。
水中の粒状体構造の耐震性に関する実験的研究

水中に構築される粒状体構造物の地震時の安定性や動的挙動を模型実験で検討するためには模型内部で進行する変形、破壊を的確に把握する必要がある。このため研究代表者等はLAT(Laser-Aided Tomography)という新しい可視化実験法を開発した。これはガラス粒子を積んで作った3次元の粒状体構造模型を同じ屈折率の液体に浸し透明にしたうえで、ここにシート状のレーザー光を透過させ、ガラス表面での光の散乱を利用して断面上のあらゆる粒子の形状と動きを観測するものである。粒子が粗ければ全ての粒子の輪郭と他の粒子との接触状況を容易に観測することができる。粒子が細かい場合には粒子個々の形状の可視化は困難になるが、ガラス粉末を格子状に模型内部に挿入することで容易に三次元の変形観測が可能になり、またレーザーの散乱光を利用して内部に埋められた構造に生ずる応力の可視化も可能であることが示された。この手法を用いて粗粒からなる堤体模型の振動破壊実験を行った。振動台の加速度がある敷居値を越えると、堤体斜面の滑落が急速に進行するが、この加速度の値は振動数が高いほど大きくなる傾向が認められた。これは従来の設計で取り入れられている乾性摩擦の概念だけでは説明できない現象である。この機構を検討するため、離散楕円要素法を用いて、楕円粒子あるいは円形粒子からなる堤体構造の破壊シミュレーションを行った。その結果、これらの構造の破壊に粒子の回転と粒子間の滑りのそれぞれが占める割合が、破壊過程とその周波数依存性に与える影響が大きいこと、粒子の形状とその骨格構造によってそれらの割合は大きく影響を受けることなどが示された。ウォ-タ-フロントなどに建設される様々な重要構造物は軟弱、あるいは不安定な水底に基礎を置き、しかも大きな静荷重、動荷重をうけることになる。従ってこれらの基礎として、砕石、砂利などで水底に構築された粒状構造などの内部で進行する変形過程を研究することは、これら構造物の耐震性を検討するため重要である。研究代表者らは、基礎・地盤系の三次元模型を粉砕したガラス粒子を積み上げて作製し、これを屈析率の等しい液体中に浸漬して透明にしたうえで、この模型の任意断面にレ-ザ-光シ-トを照射し、ガラス粒子の表面で発生する散乱光により内部の粒子の形状や動き、噛み合い具合などを可視化する手法を開発した。本年度はまず光学的に均質なガラスの造粒、CCDラインセンサ-を用いた高精細な画像入力など基本的な技術の構築を行なった。これまでに、1mm2mmまでの脈理、失透およびひびなどの極めて少ない清澄な細粒を得て、2048×2048×8bitの分解能で入力した画像に対するノイズの除去、輸郭抽出などの基本的処理のアルゴリズムを開発し、さらに粒度分布、間隙比、凹部も含んだ粒子形状に関わる統計的な指標の抽出などのシステムの構築を進めている。また堤体状に積み上げられた粒状体構造の破壊過程に関する基本的な検討を行ない、破砕し角張った粒子を積んだ構造模型の内部で、表層がある厚みをもって滑落すること、その厚み、および破壊時の加速度が周波数の増加とともに増えることなどを確認している。屈折率の等しい液体に浸したガラス粒子からなる粒状体構造模型にレ-ザ-光シ-トを透過させ、シ-ト上のあらゆる粒子の形状と動きを可視化するレ-ザ-トモグラフィ-を開発し、その手法の拡張と、これを利用した解析を進めている。本年度は1mmあるいはこれより小さいサイズの粒子からなる地盤模型を作製し、その変形挙動の可視化実験を行なった。粒子のサイズが小さくなるにつれ、本手法の適用範囲は大きく広がるが、反面、個々の粒子の動きの追跡は技術的に困難になる。

そこで、地盤模型内部に、レ-ザ-光をより強く散乱するガラスの微粉末を薄層状に挿入することで立体的な光の格子を模型内に作製し、この格子の変形を計測することで三次元地盤模型内部の変形を可視化することに成功した(文献1、2)。この手法を用いて円筒基礎を押し込んだときの地盤模型の挙動を観測し、地盤反力の変化と地盤挙動の関係に詳細な検討を加えている。また前年度の研究で、粗粒からなる堤体構造模型の破壊時の加速度が、構造を加振する周波数の増加とともに大きくなるという周波数依存性が現れることを確認したが(文献2、3)、楕円形の粒子の要素からなる粒状体構造の破壊過程の数値シミュレ-ションプログラム(Discrete Elliptic Element Method)を開発し、これを用いて実験で確認された周波数依存性が粒子の扁平度、大きさに大きな影響を受け、粒径が大きくなるにつれ破壊時の加速度が大きくなる傾向が顕著になることなどを示した(文献4)。さらにレ-ザ-光シ-トの散乱光が直線偏光状態になっていることを利用して、光弾性による内部応力の可視化が可能であることが示されたが、ガラス粒子では光弾性感度が小さく、次年度も引き続き技術開発を進める予定である。屈折率の等しい液体にガラス粒子からなる粒状体構造模型を浸し、ここにレーザー光シートを透過させ、シート上のあらゆる粒子の形状と動きを可視化するレーザートモグラフィー(LAT:Laser-Aided Tomography)を開発し、その手法の拡張と、これを利用した解析を進めてきた。本年度はこの一連の研究の最終年度にあたり、(1)前年度に引き続き細粒に関する実験へのLATの拡張をさらに推し進めるとともに、(2)粗粒からなる水中粒状体構造の動的破壊を引き起こす加速度に周波数依存性が現れるという従来の乾性摩擦を想定したモデルでは解釈できない現象について、離散楕円要素法による数値シミュレーションで検討を加えた。(1)については模型内部に生ずる応力を散乱光弾性で検出しえること、そのためにはガラス粒子より光弾性感度の高いポリカーボネートやアクリルの粒子を用いると効果的なことなど技術上の改良が可能であることが示された。(2)については粗粒構造の破壊に、粒子間の摩擦と粒子の回転が定量的にどの程度の割合で寄与しているかが周波数依存性の大きな決定要因になること、その寄与率は粒子の形状と骨格構造によって支配され、加振波形の変化にはあまり左右されないことなどが示された。これらの研究成果は研究成果報告書に取りまとめられた。また年度後半で得られた最新の成果は平成5年6月に行なわれるヨーロッパ動力学会議などで発表される予定である。
中枢神経系の病態発症におけるミクログリアの役割

3年間の研究の基本的な柱は(1)ミロクグリアの本態へのアプローチ、(2)サイカインネットワークの解明とその中でのミクログリアの役割、(3)病態でのサイトカインおよびミクログリアの動態の検討であり、(2)について幾つかの新しい知見が得られ、ミクログリアを中心とした神経系のサイトカインネットワークの詳細が明らかになりつつある。ミクログリアの本態は不明であるが、我々は単求・マクロファージ系の細胞がミクログリアの起源と考えている。しかしながら、マクロファージの抑制因子であるIL-4、IL-10、TGFβの効果はマクロファージにたいする効果とはかなり異なっており、IL-4はミクログリアの増殖を促進させ、IL-10はサイトカインレセプターの表現も抑制した。これれの抑制性サイトカインが神経系のサイトカインネットワークにおいて別々に働いている事が明かになった。末梢のマクロファージが欠如しているop/opマウスにおいても脳内のミクログリアが存在する事が明かになり、このマウスを用いてミクログリアの起源についてアプローチ中である。ミクログリアとアストロサイトがIL-5やIL-10も産生する事が明かになった。ミクログリアはアストロサイトに比して迅速かつ大量にサイトカインを産生し、かつミクログリア由来のサイトカインがアストロサイトにサイトカイン産生を誘導する事も明らかになり、この細胞がサイトカインネットワークの中心的細胞であると考えられる。これら種々のサイトカインは成熟動物の正常脳ではほとんど認められず、発達段階および病態で誘導される事も明かになった。神経系でのサイトカインの動態を解明は病態の機序並びに今後治療にも応用されうる重要な課題と考えられた。我々はグリア細胞の一つであるミクログリアが周産期に脳内へ移行した単球系細胞であり、マクロファージと近似する特性をもつことを示し、この細胞が中枢神経系の病態発症に重要な働きをする可能性を示して来た。またミクログリアはアストロサイトとともに免疫系と同様のサイトカインを産生し、神経ー免疫相互作用にも重要な働きをしている。本年度はミクログリアとアストロサイトのサイトカイン産生の差異を検討し、IL-1とTNFがアストロサイトにはIL-6産生を誘導するが、ミクログリアには作用しないこと、リポ多糖(LPS)は両者にIL-6産生を誘導するが、ミクログリアの方が迅速に反応することを示した。ミクログリアが遊送能をもつこと、IL-1、TNFを産生することを考えあわせると、脳のサイトカインネットワークを作動させる最も重要な細胞がミクログリアである可能性が示唆される。さらに、ミクログリアとアストロサイトがIL-5を産生すること(投稿中)、IL-4は産生しないがミクログリアにIL-4レセプターが存在することも判明した。IL-4容量依存性にミクログリアを増殖させ、これは抗IL-4レセプター抗体により抑制された。IL-4のこの増殖促進効果はGM-CSFやM-CSFと協調的に働き、炎症その他でミクログリアの増殖する病態の機序に関与していると考えられた。さらに多くのサイトカインが脳内で産生され、より複雑なサイトカインネットワークが形成されていることが推測された。この他、ミクログリアはHIV感染の脳内での標的と考えられているが、今回、ミクログリアがHIVの受容体となるCD4を表現していること、およびある種の免疫抑制剤がこのCD4の表現を抑制することをつきとめた。今後HIVの中枢内での病態発症機序やその治療に関する研究に有用な実験系であると考えられる。ミクログリアは周産期に脳内に移行した単球系の細胞と考えられており、脳内での炎症細胞、免疫調節細胞として働くことが示唆されている。さらに我々は、この細胞が種々のサイトカインを、迅速に産生することや、ミクログリア

由来のサイトカインがアストロサイトのサイトカイン産生や神経成長因子の産生を調節していることから、脳内のサイトカインネットワークの重要な調節細胞であると考えている。本年度は、ミクログリアの各種サイトカイン受容体の表現を検討し、この細胞が、IL-2,IL-3,IL-4,IL-6,IL-7,GM-CSF,M-CSF受容体を表現していることを明らかにした。また、これらの受容体のほとんどのものについて機能も明らかになっている。さらにミクログリアはTGFbetaによりそのサイトカイン産生、Ia抗原の発現や酵素活性を抑制されることが判明し、TGFbetaはミクログリアの活性化されるような病態には抑制性に働くことが示唆された。同様にマクロファージ系の抑制因子であるIL-4やIL-10もIa抗原の発現を抑制し、サイトカイン産生も抑制したが、増殖、活性化に対する効果は3者3様であり、TGFbetaがすべてを抑制するのにたいし、IL-4は増殖、活性化に対して促進性に働くがサイトカインの産生抑制は弱く、IL-10は増殖にたいしては変化を及ぼさず、サイトカイン産生にたいしては強力に抑制した。これらのミクログリアの機能の抑制因子は種々の病態を抑制する可能性があり、今後疾患の治療という観点からも検討する必要があると考えられた。ミクログリアは種々のサイトカインを産生し、中枢神経系におけるサイトカインネットワークの中で重要な働きをしていると考えられる。このサイトカインネットワークにおけるミクログリアの役割を検討する目的で、昨年度までに、抑制性のサイトカイン、IL-4、IL-10およびTGFβのミクログリアにたいする作用を検討し、それぞれ特有にミクログリアの機能を抑制する事を報告してきた。このうちIL-10は最も強力にミクログリアのサイトカイン産生を抑制し、もし中枢神経系に存在するならば、サイトカインネットワークの調節因子として重要であると考えられた。そこで、各グリア細胞について、IL-10の産生、IL-10受容体の表現を検索したところ、ミクログリア、アストロサイトがともにIL-10を産生する事が判明した。この両者はIL-10受容体も表現しており、神経系においてもIL-10がサイトカインネットワークの負の調節因子として重要な働きをしている事が示唆された。これらのサイトカインの生理、病態生理学的意義について検討する目的で、正常発育段階でのサイトカインの発現、マウスレトロウイルス(LP-BM5)感染の際のサイトカイン産生を検討した。この結果、正常発育段階でみられるサイトカインの発現はIL-1、M-CSFとTNFαなど限られたもののみで、神経栄養因子として働く可能性のあるIL-6やGM-CSFの発現は認められなかった。しかしながらLP-BM5感染の際にはIL-6の発現が認められ、病態において発現するサイトカインと正常発育段階において作用しているサイトカインがあることが明かになった。ミクログリアが生後1-2週で脳内に増えてくるが、ここで働いているのはGM-CSFではなくて、M-CSFであると推測された。
日本農業の担い手の将来像に関する総合的研究

日本農業の担い手の将来像を考究した本研究では、理論面、制度・政策面、そして実証面の3側面から包括的にアプローチしたが、その結果、とくに次の諸点を明らかにすることができた。まず、第1は、農業の担い手を議論する場合、地域的視点と経営体的視点とが不可欠で、したがって、地域農業の担い手という視角がきわめて重要となってくること、そして、第2は、担い手を経営体と“人"の両面で捉える必要があるが、人として担い手を捉える場合は、その人がその経営体の構成員・経営者・労働者としてどうかかわっているかを、つねに問題にしなければならないことである。次に第3は、農業の担い手の最適形態は、社会経済的な時代的背景と作目特性に規定されるため、これらの要因を踏まえて最適形態形成のメカニズムを明らかしなければならないことである。また、第4は、とくに土地利用型農業の場合には、農場的な規模と形態に経営耕地をまとめあげることが大切になるが、このとき土地結合型の集団的生産組織の形成と具体化が、結果的に土地利用型農業における個別農業経営発展の糸口になるであろうことである。そして、農業の法人化問題との関連で、第5は、法人化問題に対処するにあたっては、「農業構造変革の手段としての法人経営」という視角が非常に大切になってきていること、そして、第6は、農業経営の発展・展開は、経営の実体としての経済形態の発展・展開として押えることがまず先にあって、次いでその実体の発展・展開を受け止める容器として法律形態を思考するという順序に従うことを忘れてはならないということである。日本農業の担い手の将来像を考究するため、本研究においては、理論面、制度・政策面、そして実証面の3側面から包括的にアプローチしてきた。その結果、担い手のあり方を考えるうえでの留意点として、次の5点ないしは6点を見落としてはならないことが明らかとなった。すなわち、第1は、農業の担い手問題は、その量的・質的劣弱化という農業労働力問題から、例えば家族農業経営の適否を問うような農業経営(体)問題へとシフトしていること、第2は、農業経営とは、農産物の生産を営むことを資本に、経営を主宰することにあると理解すべきこと、第3は、とくに日本の農業では、各農業経営機能間の適正規模格差の拡大のため、農業経営機能の外部化が著しく、農業の担い手の総合的・体系的認識がますます重要となってきていること、第4は、農業経営機能の外部化には、「組織化の方向」と「市場化の方向」の2つの方向があるが、それが地域的・作目的に相違していること、そして、第5は、農業の担い手の最適形態は、社会経済的な時代的背景と作目特性に規定されるため、これらの要因を踏まえて最適形態形成のメカニズムを解明すべきこと、以上の5点である。加えて、6点目として、とくに土地利用型農業の場合には、農場的な規模と形態に経営耕地をまとめあげることが大切になるが、このとき土地結合型の集団的生産組織すなわち地域営農集団の形成・具体化が、結果的に土地利用型農業における個別農業経営発展の糸口になるであろうことも明らかとなった。その結果、とくに本年度は、次の諸点を明らかにすることができた。まず、担い手の実体的側面に関しては、第1に、農業の担い手を議論する場合、地域農業の担い手という視角がきわめて大切で、かつ、担い手を経営体とヒトの両面で捉える必要があること、第2に、ヒトとして担い手をみる場合、そのヒトがその経営体の構成員・経営者・労働者としてどうかかわっているかを、つねに問題にしなければならないこと、第3に、農業の担い手の最適形態は、労働市場要因・土地市場要因・資本市場要因・法制度的要因といった社会経済的要因と、生産技術要因・経営管理技術要因・生産資材市場要因

・生産物市場要因などの作目的要因に規定されるため、これらの要因を踏まえて担い手のあり方を考察する必要があること、第4に、とくに土地利用型農業の場合には、農場的な規模と形態に経営耕地をまとめあげることが大切になるが、このとき土地結合型の集団的生産組織の形成と具体化が、結果的に土地利用型農業における個別農業経営発展の糸口になるであろうこと、以上の4点である。次に、農業の法人化問題との関連では、第1に、農業経営の発展・展開は、上述したような経営の実体としての経済形態の発展・展開として押えることがまず先にあって、次いでその実体の発展・展開を受け止める容器として法律形態を思考するという順序に従うことを忘れてはならないこと、そして、第2に、農業における法人化問題に対処するにあたっては、「農業構造変革の手段としての法人経営」という視角が非常に大切になってきていること、以上の2点である。