hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
バルク系ホスト－ゲスト化学が拓く次世代超分子マテリアルの創成（国際共同研究強化）

アムステルダム大学ファントホッフ機構A. M. Brouwer教授との国際共同研究を更に進展させ、光応答性ロタキサンシステムの構築、及びりん光発光複合材料に関する研究を行った。光応答性ロタキサンシステムの構築設計としては2つの等価なステーション、1つの輪成分であるピアーアレーン、2つのステーション間にゲートとしてアゾベンゼン基を導入した光応答性[2]ロタキサンを合成した。光照射前はアゾベンゼン部位がトランス体であり、輪成分であるピラーアレーンは、ステーション間を自由に往復するシャトリング現象が見られた。次に光照射を行い、アゾベンゼン部位をトランス体からシス体へと変化させたところ、ステーション間のシャトリングは阻害された。ステーション間のアゾベンゼンの嵩高さが変化したためである。興味深いことに、アゾベンゼンのシス体からトランス体への熱異性化は、非常に高速であり、室温でも瞬時に熱異性化反応が進行することを見出した。更にその熱異性化反応は、金属イオンの添加、極性溶媒の添加により、室温では非常に遅く、ほとんど起こらないことがわかった。ステーションに用いているトリアゾール部位に金属イオンが配位したためだと考えられる。りん光発光複合材料バルクのポリスチレンスルホン酸のりん光発光の応用例として、複合材料を合成した。ポリスチレンスルホン酸部位と他の高分子部位を有する共重合体を合成したところ、共重合体の構造が大きくりん光発光特性に影響することを見出した。内定年度:2015有機エレクトロニクス材料には、液晶ディスプレイなどの応用を見据えると、溶媒を用いないバルク状態において高蛍光発光を示す材料が望まれている。本研究では、研究代表者がこれまでに開発した、環状ホスト液体が100%近い高効率でホストーゲスト錯体形成が可能であることを利用して、π共役蛍光分子の高濃度溶液における強蛍光発光材料の創製を目指す。π共役蛍光分子は、希薄溶液においては非常に強い蛍光発光を示すが、濃厚溶液においては分子間同士で凝集してしまい、濃度消光を引きおこす。環状ホスト液体を用いれば、濃度を極限に高めたバルクにおいても、ゲスト分子であるπ共役分子はホスト分子に常に取り込まれた状態となる。それによりπ共役蛍光分子は、通常は濃度消光するような濃厚状態においても、孤立分散化され、非常に強い蛍光発光を示す液体材料となると期待される。これまでの実績として、室温で液体となる柔軟なトリエチレンオキシド鎖を導入した環状ホスト液体ピラー[n]アレーンの大量合成に成功した。さらに、π共役蛍光分子としてピラー[5]アレーンに取り込まれるオリゴフェニレンエチニレンを用い、環状ホスト液体に直接溶かし込み、蛍光測定を行った。その結果、通常は濃度消光するような高濃度状態においても、孤立分散化され、非常に強い蛍光発光を示す液体となることが分かった。渡航を行うH29年度に、渡航先のアムステルダム大学にてこの材料の光特性の詳細について測定を行う。室温で液体となる柔軟なトリエチレンオキシド鎖を導入した環状ホスト液体ピラー[n]アレーンの大量合成に成功した。さらに、予備的な実験として、π共役蛍光分子として、オリゴフェニレンエチニレンを用い、環状ホスト液体に直接溶かし込み、蛍光測定を行ったところ、通常は濃度消光するような高濃度状態においても、孤立分散化され、非常に強い蛍光発光を示す液体となることが分かった。このことから本研究は、当初の研究計画以上に順調に進んでいるといえる。オランダアムステルダムへと渡航し、アムステルダム大学ファントホッフ機構A. M. Brouwer教授との国際共同研究を8カ月間にわたり行った。バルク系ホストーゲスト化学を用いた発光材料に関する共同研究を行った。また、ロタキサン中におけるリング分子のシャトリング特性についても評価を行った。実験化学からは、温度変化NMRからステーション間のシャトリング速度を算出した。その結果、大変興味深いことにステーション間をつなぐリンカーの長さに依存しないシャトリング特性が見られた。この実験事実を解明するために、A. M. Brouwer教授がMolecular Dynamics計算を行った。その結果、ステーション間をシャトリングする障壁は非常に低く、リンカー末端に小さな障壁が存在していることが分かった。この障壁がステーション間をつなぐリンカーの長さに依存しないシャトリング特性につながっていることが分かった。またバルクのポリスチレンスルホン酸を高度に脱水すると、長寿命りん光を示すことを見出した。りん光寿命は室温大気下で1秒を超え、高分子系りん光材料の中では、最も長いものであった。高分子間でスルホン酸基を介した分子間水素結合が働き、それにより高分子鎖の運動性が低下し、りん光を示したことが明らかとなった。事実、水分子を吸着させると、水素結合が切断されるためにりん光発光は消光した。A. M. Brouwer教授とのディスカッションによりそのメカニズムを解明することができた。新たにバルクのポリスチレンスルホン酸を高度に脱水すると、長寿命りん光を示すことを見出した。これは当初には全く予想していなかった結果である。

光照射前はアゾベンゼン部位がトランス体であり、輪成分であるピラーアレーンは、ステーション間を自由に往復するシャトリング現象が見られた。次に光照射を行い、アゾベンゼン部位をトランス体からシス体へと変化させたところ、ステーション間のシャトリングは阻害された。ステーション間のアゾベンゼンの嵩高さが変化したためである。興味深いことに、アゾベンゼンのシス体からトランス体への熱異性化は、非常に高速であり、室温でも瞬時に熱異性化反応が進行することを見出した。更にその熱異性化反応は、金属イオンの添加、極性溶媒の添加により、室温では非常に遅く、ほとんど起こらないことがわかった。ステーションに用いているトリアゾール部位に金属イオンが配位したためだと考えられる。りん光発光複合材料バルクのポリスチレンスルホン酸のりん光発光の応用例として、複合材料を合成した。ポリスチレンスルホン酸部位と他の高分子部位を有する共重合体を合成したところ、共重合体の構造が大きくりん光発光特性に影響することを見出した。渡航を行うH29年度に、これまでに得られた材料の光特性の詳細について、渡航先のアムステルダム大学にて測定を行う。さらには得られた光物性に基づき、材料設計を再度行うといったフィードバックプロセスにより、革新的なバルク光材料を創出を目指す。1)バルクのポリスチレンスルホン酸のりん光発光の応用例として、複合材料を合成する。ガラスとの複合化、高分子との複合化を試みる。2)ステーション間に光により異性化するアゾベンゼンを導入する。アゾベンゼンの異性化により、シャトリング速度がどのように変化するかを明らかとする。
軸索路形成を調節する糖鎖chondroitin sulfateを受容する分子機構

網膜神経節細胞の軸索は視蓋へ投射するが、前方の終脳へ侵入することはない。研究代表者は終脳由来分泌型CSPGsの糖鎖、chondrotin sulfate glycosaminoglycans(CSs)が網膜神経節細胞の軸索伸長を抑制し、終脳へ侵入することを妨げ、軸索路形成に寄与することを示した。CSsは様々なタイプが区別されるが、その中でもD型CSは終脳間脳境界で帯状に分布した。培養実験において基質上に作成したD型CSのスポットはその境界で網膜軸索の侵入を効率よく阻止した。0%および4%のD型CSを含有するphosphacanスポットの網膜軸索伸長に及ぼす効果を比較した結果、D型CSが軸索侵入阻止効果を増強した。培地中に溶解したD型CSは軸索伸長に影響を与えなかったが、高濃度(1mg/ml)の培地中D型CSはD型CSスポットの軸索侵入阻止効果が抑制した。他方、培地中のA型CSはD型CSスポットの効果に影響しなかった。生体内でのD型CSの機能を調べるために孵卵6日ニワトリ胚にD型CS溶液5μgを脳室内投与し、網膜軸索路をHRPによって順行性にラベルし、検討した。D型CSの投与によって、視索の最前方を走行する網膜軸索束が終脳間脳境界を越えて前方の終脳へおよそ80μm変位したが、A型CSまたはPBSの脳室内投与は前方変位を誘導しなかった。以上の結果はCSの構造多様性が軸索路形成において機能特異性を担うことを示している。さらに網膜軸索は培養基質上のD型CSを他のタイプと識別し、成長円錐の振る舞いの違いに反映させることを示し、CSの構造多様性を受容する機構の存在を示唆する。CS-GAGsには複数のタイプがある。各タイプを認識する抗体を利用して、これらの免疫組織化学的分布様式をニワトリ胚において検討した。その結果、D型CS-GAGが終脳間境界で帯状に分布することが明らかになった。クジラやサメ軟骨などに由来する各タイプのCS-GAG標品(生化学工業)のspotを培養基質上に作成し、網膜軸索の伸長に及ぼすspotの境界の効果を検討した。その結果、D型CS-GAGが特異的に網膜軸索の侵入を阻止することが明らかになった。より生理的な条件でのCS-GAGの効果を検討するためにラット新生児大脳および小脳からph0spha-canを精製し、CS-GAG組成を検討した。それぞれ0%および4%のD型CS-GAGを含有したので、これらで作成したspotの網膜軸索伸長に及ぼす効果を比較検討した。その結果、D型CS-GAGが軸索侵入阻止効果を増強することが明らかになった。以上の結果は軸索路形成期の胚においてD型CS-GAGが網膜軸索の終脳への侵入阻止に機能していることを示している。今後、網膜神経節細胞軸索のCS-GAG受容機構の基礎を明らかにするために合成CS-GAGを調達し、軸索侵入阻止効果をin vitroおよびin vivoで検討する。研究代表者は終脳由来分泌型CSPGsの糖鎖、chondroitin sulfate glycosaminoglycans(CSs)が網膜神経節細胞の軸索伸長を抑制し、終脳へ侵入することを妨げ、軸索路形成に寄与することを示した。

0%および4%のD型CSを含有するphosphacanスポットの網膜軸索伸長に及ぼす効果を比較した結果、D型CSが軸索侵入阻止効果を増強した。培地中に溶解したD型CSは軸索伸長に影響を与えなかったが、高濃度(1mg/ml)の培地中D型CSはD型CSスポットの軸索侵入阻止効果が抑制した。他方、培地中のA型CSはD型CSスポットの効果に影響しなかった。生体内でのD型CSの機能を調べるために孵卵6日ニワトリ胚にD型CS溶液5μgを脳室内投与し、網膜軸索路をHRPによって順行性にラベルし、検討した。D型CSの投与によって、視索の最前方を走行する網膜軸索束が終脳間脳境界を越えて前方の終脳へおよそ80μm変位したが、A型CSまたはPBSの脳室内投与は前方変位を誘導しなかった。以上の結果はCSの構造多様性が軸索路形成において機能特異性を担うことを示している。さらに網膜軸索は培養基質上のD型CSを他のタイプと識別し、成長円錐の振る舞いの違いに反映させることを示し、CSの構造多様性を受容する機構の存在を示唆する。
プロジェクト型教育を通じたメンタルヘルス向上効果と心理教育モデルの構築

本研究は、平和・文化的活動を軸にした地域活動が学生およびそれに関わる地域住民のメンタルヘルス向上にどのように寄与するかを検討したものである。プロジェクト型学習と心理教育の視点から解明することを目指した。平和活動の企画を学生自らが企画し地域住民がこれを支援した。その効果を共同体感覚尺度(高坂,2011)で測定した。さらに参加者の感想文を質的に分析した。その結果、平和活動後に「所属感・信頼感・貢献感」と「.平和と人権について理解できたという感覚」の向上が示された。またメンタルヘルスの向上に平和活動の必要性と有効性が議論された。社会の平和や健康を実現するには、まず身近な目前のスモールコミュニティー(小さな共同体)を平和に健康にすることこそが近道であり王道であると考えられる。そしてこの法則そのものを学生が体験的に学ぶのが本研究の心理教育モデルの中心課題である従って初年度(平成22年度)は実際に身近なスケールから「平和と文化プロジェクト」を立案・実行・振り返りを行った。具体的実行内容は以下である。1、「太鼓と平和を考える学生連絡協議会」設立。会長校:北九州市立大学。副会長校:日本赤十字九州国際看護大学。監事校:西日本工業大学。総勢15名で設立。2、北九州市立大学の中に「小倉祇園太鼓部北方キャンパスチーム」を発足させ文化サークルとして活動を開始。3、「自転車リレー」の実行。原爆被害地である広島(8月6日)と長崎(8月9日)、そしてその帰結としての終戦日(8月15日)を、原爆投下予定地であった北九州市がつなぐ活動として「エイトテン(8月の10日間)運動」と命名して、その啓発活動として、広島平和公園の灯を長崎街道の起点である北九州小倉の常盤橋から自転車リレーで長崎の平和公園まで学生メンバーが運んだ。4、「第一回平和太鼓フェスティバル」の実行。8月9日長崎原爆の日に大学の太鼓サークルが集まり、平和太鼓の演技を行った。市民など含め80名の集会となり、核兵器の関心を啓発し、地域のメンタルヘルス問題の議論のきっかけとなった。(新聞3紙掲載)学生を含めた地域住民のメンタルヘルス(心の健康)を保持・向上させるには、平和活動を積極的に行うことである。これが本研究の基本的な仮説である。そしてこの仮説を学生が体験的に学ぶのが本研究の心理教育モデルの中心課題である従って二年目(平成23年度)は初年度に立ち上げた「平和と文化プロジェクト」をさらに充実させて活動を深化・拡大させた。内容は以下である。1、初年度に立ちあげた「太鼓と平和を考える学生連絡協議会;会長校:北九州市立大学。監事校:西日本工業大学」を軸にエイトテン運動(8月6日から15日までの"8月の10日間"の平和活動)を実行した。具体的には、(1)小倉原爆投下予定地での「学生平和太鼓フエスティバル」開催。(2)小倉長崎間の長崎街道220キロを広島の灯を運ぶ「自転車リレー」の実行。(3)長崎平和公園での小倉祗園太鼓の演奏による平和アピール。2、本年はさらに初年度の活動に加えて長崎街道上の拠点活動を拡大し展開した。具体的には(1)北九州市八幡において「広島の灯」を持参し「八幡大空襲を語る会」に参加。(2)鳥栖市のフッペルのピアノ(映画"月光の夏"で特攻隊員が弾いたピアノ)前に広島の灯を献灯してピアノ演奏会実施。(3)鳥栖空襲の日に鳥栖区役所前で学生による小倉祗園太鼓の演奏。その後、市役所前から長崎自転車リレー押し出し。以上の結果、昨年度に加え多くの市民が参加(80名から200名に増加)。NHKテレビニュースや新聞紙上で取り上げられ地域の核利用の議論のきっかけとなった。地域全体のメンタルヘルスを向上させるには地域を構成する個人一人一人のメンタルを健康にすることこそが近道であり王道であると考えられる。そしてその原理・法則を学生と地域住民が連携して体験的に学ぶのが本研究の心理教育モデル構築の中心課題である。本年度は地域全体の心理ー社会的な健康に関わるであろう共同体感覚尺度を用いて具体的なメンタルヘルスの向上する側面を明らかにできた。それは以下の本年度のプロジェクトの立案・実行・振り返りが効果的であったからであると思われる。具体的なプロジェクト型教育の実行内容は以下である。1.初年度の設立した平和活動プロジェクト「太鼓と平和を考える学生連絡協議会」会長校;北九州市立大学。副会長校;西日本工業大学。幹事校;日本赤十字九州国際看護大学。九州共立大学。九州女子大学。が3年目になり、活動が洗練され機能を十分に発揮した。

特に8月9日(ナガサキ原爆の日)に行われた各大学の太鼓チームの演技(小倉祇園太鼓、沖縄エイサー)の協演は観客も多く、地域の平和に関する意識発展の向上に貢献した。2.ヒロシマ原爆の火が保存されている(唯一ここのみ)福岡県八女市星ノ村より採火した「平和の灯」をヒロシマに続く原爆投下予定地であった小倉に運び、8月9日のナガサキ原爆の日に小倉で毎年行われる北九州市と原爆被害者の会協賛の平和式典に献灯することができた。メディアにて大きく報道された(新聞5紙)。その火を長崎街道の起点である北九州市小倉の常盤橋から自転車リレーで長崎の平和公園まで運び、小倉祇園太鼓の音と共に献灯・献音し地域に核兵器問題をアペールした。3.太鼓文化を主なツールとして展開した1連の文化的平和活動プロジェクトを「平和の駅」の名称で確立して広範囲な活動の礎を創ることができた。今後学生及び地域住民がこの「平和の駅」活動でさらなるメンタルヘルスの向上が見込まれる。設定したプロジェクト活動は、当初の計画以上にその活動領域を広げ活発化して意義をふかめている。この点は大いに評価できると考えている。一方研究成果の示し方についてメンタルヘルス向上効果を目に見える形にするための評価尺度に関する資料の収集と選定に手間取り、質的研究と並行して進める量的研究が遅れ気味であった。24年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では「太鼓と平和を考える学生連絡協議会」「小倉祗園太鼓北九大北方チーム」というまったくそれまでになかった新しい組織が研究上必要であった。このため組織メンバーの募集をはじめ、軌道に乗るための諸活動運営に多大のエネルギーが求められ、二年間多くの労力をこのことに振り向けた。その結果、両組織とも当初の計画通りの機能を果たすまでになり、今後の研究推進の役割を充分果たすと期待される。一方で太鼓イベントの開催や自転車リレーの実施など、仮説実証のための諸行事に多くの資金を必要とすることがわかった。しかしながらこの平和活動は研究終了後も継続すること自体が研究成果の地域への還元であると思われる。このためには毎年の運営資金の安定した資金の調達方法を確定するのが最終年度の大きな課題である。このためさらなる市民広報の充実と関連諸機関との連携強化を図りたいと考えている。
モンゴル・中央アジアにおける社会主義的近代化に関する比較研究

モンゴルおよび中央アジア諸国において20世紀に人びとが経験した社会主義時代の生活上の大きな変化について理解を深めるために、写真やポスターなどの公的な画像記録と、それらによって喚起される人びとの私的な記憶を収集した。とくに、高齢者の語りを人生史として収集した。公的な記録と私的な記憶のずれや、地域による違いなどから、社会主義的近代化プログラムの画一性と、地域によって異なる文化的な多様性とを明らかにした。ユーラシアの現在を理解するうえで欠かすことのできない、社会主義時代の近代的変容について把握するために、過去の公的な記録写真や新聞記事(プロパガンダ・ナラティブ)、それらに関する人びとの思い出の想起(記憶ナラティブ)など多角的な語りを収集し、比較考察した。平成21年度は初年度として、以下のような作業を行った。(1)モンゴルについては、学術文化行政に関する口述史を集め、テキスト化し、翻訳した。(2)ブリヤートモンゴルについては、資料の所在等を把握するために、現地調査を行った。その結果に基づき、2010年度に資料を収集する予定である。(3)ウズベキスタンについては、既存の調査結果に基づいて、別途費用を工面し、写真資料を入手した。また、写真資料に対応する新聞記事等の文献史料に関して現地調査を行った。(4)カザフスタンについては、連携研究者に依頼して資料を収集してもらい、研究代表者が分析に寄与した。なお、キルギスタンについては2010年度より資料の収集と分析を行う予定である。(6)先年度の国際会議の口頭発表を論文として投稿し、査読を経た。2010年度上半期に刊行される予定である。中央および東北アジアのポスト社会主義諸国が現在抱えている問題は、社会主義時代の変容ときわめて密接な関係があり、かつ地域によって明確な違いがある。ほぼ同一の社会主義的近代化プログラムが国境を越えて実施されていたにもかかわらず、それらの実施時点で地域的偏差があり、その多様性が現在の差異の源となっていることが具体的に明らかになった。ユーラシアの現在を理解するうえで欠かすことのできない、社会主義時代の近代的変容について把握するために、過去の公的な記録写真や新聞記事(プロパガンダ・ナラティブ)、それらに関する人々の思い出の想起(記憶ナラティブ)など多角的な語りを収集し、比較考察した。平成22年度は、以下のような作業を行った。(1)モンゴルについては、初年度に引き続き、学術文化行政に関する口述史を集め、テキスト化し、翻訳した。(2)ブリヤートモンゴルについては、初年度、ロシア・ブリヤート共和国で収集した社会主義時代の写真資料と文献資料について分析した。また、モンゴル国ウランバートル市において補足的な資料収集の調査も行った。(3)ウズベキスタンについては、1920年代の女性解放運動を具体的な素材として社会主義的近代化について考察するため、この運動に関する先行研究のレビューを主たる目的として、論文執筆した。また、ウズベキスタンにおいて写真資料についての現状調査ならびに女性解放運動の記憶をめぐる試験的なインタビューを継続し、インタビューのテープ起こしを行い、その一部の翻訳を行った。(4)キルギスタンについては、連携研究者に依頼し社会主義時代からポスト社会主義時代への移行に伴う農村地域の変容に関する社会人類学的な調査を行った。ほぼ同一の社会主義的近代化プログラムが国境を越えて実施されていたにもかかわらず、それらの実施時点で地域的偏差があり、その多様性が現在の際の源になっていることが具体的に明らかになった。ユーラシアの現在を理解するうえで欠かすことのできない、社会主義時代の近代的変容について把握するために、過去の公的な記録写真や新聞記事(プロパガンダ・ナラティブ)と、それらに関する人びとの思い出の想起(記憶ナラティブ)など多角的な「語り」を収集し、比較考察した。平成23年度は第3年度として以下のような作業を行った。(1)モンゴルについては、学術文化行政に関する口述史に加えて、宗教に関する口述史を収集し、モンゴル語をテキスト化し、日本語に翻訳した。平成24年度ならびに平成25年度内に刊行する予定である。(2)ブリヤートモンゴルについては、宗教に関する資料を分析し、論文を発表し、著書に反映させた。(3)ウズベキスタンについては、写真資料に関する資料を分析し、論文、著書を英語でも発表した。(4)カザフスタンについては、口述史を活用し、モンゴルと比較して、論文を発表した。(5)キルギスタンについては、生活変容に関する資料を分析した。また、映画「明かりを灯す人」の解説を担当して学術的成果の普及につとめた。(6)これらの研究成果の一部を、学術一般書にまとめて刊行した。(7)別途、費用を得て、中国内蒙古に関する口述史を英訳して刊行した。また、モンゴルに関する口述史の英訳作業を続行した。平成24年度内に刊行する予定である。中央アジアおよび東北アジアでは、すでにポスト移行期とよびうる段階に入り、社会主義時代の記憶も具体的かつ個別的なナラティブから抽象化された支配的言説(マスター・ナラティブ)に変容しつつあることがわかった。

そのため、現段階で収集しうる口述史はおそらく社会主義時代に関する最後のものとして現代史の貴重な資料となるだろう。本研究は、社会主義のもとで近代化が進められたユーラシア中央部を理解するために、公的な図像記録と私的な記憶を対比的に分析して、地域間比較をおこないつつ、地域研究の新たな手法を確立することを目標とした。本年度はその最終年度にあたるため、国際会議での発表等、研究成果の発信に努めた。モンゴルについては、昨年度に引き続き農業部門の社会主義的近代化に焦点をあて、新たにオーラルヒストリーをモンゴル語、日本語、英語の3カ国語版で刊行するとともに、一般書でも解説論文を刊行した。当該資料によって、社会主義時代にどのように環境が破壊されたか、ならびに、どのようにチベット仏教が生き延びたかが明らかになった。また、広義のモンゴルのうち、西のトルグートや東のブリヤートを対象にして国境をまたぐ移動に関して収集したオーラルヒストリーを用い、エスニシティや国際関係を国際会議で論じることによって、当該資料のもつ学際的価値を証明した。ウズベキスタンについては、新聞『東方の真実』に掲載された写真約500点を整理し、社会主義下の女性に関する表象データベースを構築した。一方、すでに収集したオーラルヒストリー資料を用いて、現代における社会主義時代との連続性と断続性を国際会議や国際学術誌で明らかにした。クルグズスタン(キルギス)については農村コミュニティを対象に収集した口述資料を用いて、社会主義時代への評価の二面性について国内の招待講演で明らかにした。以上のように、これまで収集した資料を公開し、それらを利用して成果を国際的に発信した。とくに、文化人類学、宗教学、国際政治学、生態学などへの貢献によって地域研究に本来内包されている学際性を強化することができたことは、方法論の構築という点で重要である。モンゴルについては、社会主義的近代化を代表する典型的な分野として国営農場に焦点をあて、その実態に関する資料を整理して基礎データとして刊行するとともに、農業に関連する口述資料の分析を進めた。とりわけ農業と寺院との親和性、伝統的農業との差異、環境上の問題点などに焦点をあてて、国際会議で発表し、論文を英語、モンゴル語で刊行した。なお、現代においてシャマニズムが再興されている地域もまた国営農場地帯であり、現代の文化現象がいかに社会主義時代の近代化と密接に結びついているかという歴史的関係性があきらかになった。ウズベキスタンについては、新聞、雑誌、論文等の記事を利用し、モスクワからの政策的まなざしとその現地化を分析し、社会主義的近代化の支配的言説ならびにその現地化や現地での言説との齟齬をあきらかにした。一方、伝統的な都市コミュニティが、支配的な言説に内包された画一的な近代化に対して、柔軟な適応力を発揮したことも、オーラルヒストリーからあきらかになった。
難治性神経代謝疾患に対するトランスレーショナルリサーチ

難治性神経代謝疾患として、カルニチン輸送体(OCTN2)欠損症、シトリン欠損症、有棘赤血球舞踏病等の先天性代謝疾患や、癌性悪液質、神経性食欲不振症、うつ病等の多因子性疾患を取り上げ、トランスレーショナルな立場から研究を行った。JVSマウスやシトリン欠損症、癌性悪液質モデル動物等を作製し、病態解析を行い、アセチルカルニチン、ピルビン酸、グレリンアゴニスト、六君子湯などの新たな治療法を創出し、臨床応用を試みた。本研究の目的は、難治性神経代謝疾患の遺伝的基盤の解明、遺伝子改変モデル動物の作製などに従事し、国際的な業績をあげてきた研究者が、部局・講座横断的チームを結成し、この分野の飛躍的進歩を図ることにある。難治性神経代謝疾患の遺伝的基盤を解明し、その遺伝子改変マウスを作製して、一生涯という時間軸に立った治療・予防法を開発する。さらに、病態関連遺伝子を同定することにより、病態解析や創薬のターゲットとなる機能分子を解明し、ヒトの神経代謝に関わる基盤的調節機能を明らかにすることを目的とした。今年度はカルニチン輸送体(OCTN2)欠損症を念頭に、その自然のKOマウスであるJVSマウスを用いて検討を行った。JVSマウスは著明な高FFA血症を呈し、絶食(飢え)に対する摂食反応が欠如していることを見出した。このメカニズムはFFA上昇による視床下部CRFの上昇がその主因であり、CRF系を抑制することにより摂食行動促進が見られることを明らかにした。このCRFの上昇は神経性食欲不振症の特徴でもあり、このCRFの上昇が飢えに対する摂食応答に重要であることを明らかにした。また有棘赤血球舞踏病におけるmodifier遺伝子を同定しつつあり、GABA系の関与を明らかにした。本研究は、難治性神経代謝疾患の遺伝的基盤を解明し、その遺伝子改変マウスを作製して、一生涯という時間軸に立った治療・予防法を開発する。今年度はカルニチン輸送体(OCTN2)欠損症を念頭に、その自然のKOマウスであるJVSマウスを用いて、前年度に引き続き詳細な検討を行った。このCRFの上昇は、胃から分泌される空腹ホルモンのグレリンを抑制することにより、飢えに対する摂食応答を阻害することを明らかにした。また癌性悪液質モデル動物を用いて、癌に伴う高カルシウム血症の原因物質である副甲状腺ホルモン関連ペプチド(PTHrP)がCRF系を充進させ、高カルシウムに依らず悪液質を発現することを証明し、臨床的に重要な知見を得た。シトリン欠損症の遺伝子診断に関しては、多くの遺伝子多型を同定した。また病態モデル動物の開発として、aralar欠損症や末梢神経障害のモデル動物を開発し、病態解析を行っている。今年度は癌性悪液質を念頭に、グレリン及びグレリン放出促進薬としての漢方薬、六君子湯の検討を行った。グレリンアゴニストのGHRP2は、Yoshida肝癌細胞と腹腔内に播腫した癌性悪液質モデルにおいて、食欲を有意に促進し、抗癌剤5FUによる治療効果を増強し、寿命の延長傾向が認められた。また、慢性腎不全モデルにおいて、グレリン及びグレリンアゴニスト投与により、摂食のみならず筋肉量(Lean Body Mass)を増加させることを明らかにした。さらに、六君子湯は担癌動物で亢進しているセロトニン系、特にその2c受容体を阻害し、グレリン分泌を促進することで、癌性悪液質モデルの食欲、体重、筋肉量を増加することを証明した。六君子湯のこの作用は、8つの構成生薬のうちチンピ及びソウジュツが重要な役割を担っていることを明らかにした。三次元HPLC解析を用いた生薬構成成分解析により、チンピにはフラボノイド(ヘスペリジン)が、この作用の少なくとも一部を担うことを明らかにした。神経性食欲不振症では、その患者血中にグレリンの自己抗体が存在することを明らかにし、現在解析をすすめている。我々はすでに神経性食欲不振症患者血中に強力な食欲抑制系メラノコルチン自己抗体が存在し、その自己抗体が神経性食欲不振症の病態の一翼を担う可能性を報告してきた。
高強度フェムト秒レーザーによるダイオキシン類の高感度計測

高強度フェムト秒レーザーを用いると、親イオンが高効率で生成する場合があることがわかってきた。しかし、フラグメント化する場合も多いことが知られている。昨年度は高強度フェムト秒レーザーを用いたイオン化に着目し、親イオン生成のキーファクターを明らかにした。今年度は多種の有機塩素化合物(ペンタクロロベンゼン、ペンタクロロフェノール等22種)のイオン化を測定しからさらにメタン、ハロゲン化メタン(15種)発展させた。さらに新しい実験として、波長可変赤外レーザー(1400nm中心)励起についても調べた。有効なダイオキシン類高感度検出法に発展できる見通しを得た。1.励起波長が800nmの場合:レーザー波長がカチオンの吸収と共鳴すると分解が起こりやすい。このことは塩化、フッ化ベンゼン、ハロゲン化メタンでも確認できた。ジベンゾ-p-ダイオキシンはバラバラに分解したが予想通りであった。2.励起波長が1400nmの場合:2,3-ジメチル-1,3-ブタジエンでは800nm励起ではフラグメントイオンが観測された。800nmに親イオンの吸収を持つためである。しかし、1400nm励起の場合フラグメントイオンとともに親イオンが観測された。この分子カチオンは1400nm吸収を持たないからである。同一の分子で励起波長を変えることにより、親イオンを生成できることを示すことに成功した。3.ダイオキシン親イオン:励起波長が1400nmの場合、フラグメントイオンとともに親イオンを観測することに成功した。この波長に親イオンの吸収がないものと推定される。高強度フェムト秒レーザーを用い、カチオンの吸収と重ならない波長で励起ることにより、親イオンを生成できることを見い出した。ダイオキシン親イオンを非共鳴多光子イオン化法では今回初めて観測することに成功した。更に研究を展開すれば、有効なダイオキシン類高感度検出法に発展できる見通しを得た。実際、この研究は実用の機器を製作する計画が持ち上がっている。関連した論文を発表し、または発表準備中である。しかし、フラグメント化するものもあることがわかってきた。そこで、本研究ではまず、高強度フェムト秒レーザーを用いたイオン化に着目し、親イオン生成のキーファクターを明らかにすることを試みた。また有機塩素化合物(ペンタクロロベンゼン、ペンタクロロフェノール等)についても調べた。これまで高強度フェムト秒レーザーを用いた有機塩素化合物のイオン化の例はなく、もしこれに成功すれば、極めて有効なダイオキシン類高感度検出法に発展できる。親イオン生成のキーファクターを明らかにするため、よく似た分子ペアである1,3-シクロヘキサジエン、1,4-シクロヘキサジエンと2,5-ジメチル-2,4-ヘキサジエン、2,3-ジメチル-1,3-ブタジエンのイオン化を行った。レーザーの励起波長である800nmに親イオンの吸収をもたない1,3-シクロヘキサジエン、2,5-ジメチル-2,4-ヘキサジエンでは、親イオンが大きく観測された。一方、800nmに親イオンの吸収をもつ1,4-シクロヘキサジエン、2,3-ジメチル-1,3-ブタジエンでは、フラグメントイオンが大きく観測された。また近年多数報告された炭化水素についても、レーザー波長における親イオンの吸収で同様に親イオン生成/フラグメント化を説明することができた。これらにより、レーザー波長における親イオンの吸収が親イオン生成のキーファクターであることが明らかにした。次に有機塩素化合物のイオン化を試みた。高強度フェムト秒レーザーを用いることで、ベンタクロロペンゼン、ペンタクロロフェノールのような多塩素置換体でも、親イオンが比較的高効率で生成することを見い出した。今回初めて高強度フェムト秒レーザーによる有機塩素化合物(多塩素置換体)のイオン化に成功し、有効なダイオキシン類高感度検出法に発展できる見通しを得た。論文に発表し、特許を申請した。

3.ダイオキシン親イオン:励起波長が1400nmの場合、フラグメントイオンとともに親イオンを観測することに成功した。この波長に親イオンの吸収がないものと推定される。高強度フェムト秒レーザーを用い、カチオンの吸収と重ならない波長で励起ることにより、親イオンを生成できることを見い出した。ダイオキシン親イオンを非共鳴多光子イオン化法では今回初めて観測することに成功した。更に研究を展開すれば、有効なダイオキシン類高感度検出法に発展できる見通しを得た。実際、この研究は実用の機器を製作する計画が持ち上がっている。関連した論文を発表し、または発表準備中である。
教育病院の臨床教育における検査計画法の標準化に関する研究

(1)昨年度と同様の方法で東海大学病院を昭和61年3月に退院した患者のうち644名を60年6月に退院した631名と併せて検討した.いづれも在院日数7日以上, 60日以内の患者に限定した.(2)我々は臨床検査を検体検査と生理検査にわけ,又,スクリーニング検査,鑑別診断(病名と重症度),経過観察のための検査及び合併症,併発症の検査に分類した.(3)上記退院患者の夫々の1入院期間中で同一検査が7日間に3回以上あるものについて病名,病状,検査所見をカルテにより検討し,必要あれば主治医をまねいて検討し,妥当,不必要の疑い,調査不能の三群に分けた.(4)上記退院患者を主病名により, 17分類し,検討した.又,手術例,死亡例,未熟児例を抽出して検討した.(5)同一検査のあった症例は60年6月, 61年3月の上記退院患者のうち夫々48.3%, 45.3%であった.(6)同一検査のあった症例のうち,いづれの同一検査も妥当と判断された症例は両月夫々64.9%, 63.4%であった.(7)両月の同一検査のうち不必要の疑いのある比率の高い検査項目はマルチスティック,デキストロスティックス,血沈,血液生化学および未血検査なのでこれらの検査はその頻度に注意する必要がある.即ち検体検査で経過観察用検査に同一検査が多く行われる.(8)同一検査の起こり易いと考えられる手術例,死亡例,未熟児例について夫々検討した.(9)臨床検査に関して病名,病状による検査項目についての成書論文は多くあるが,検査の頻度についての発表は殆どない.臨床検査の標準化はこの両者の組み合わせによるものである.(1)昨年度と同様の方法で東海大学病院を昭和61年3月に退院した患者のうち644名を60年6月に退院した631名と併せて検討した.いづれも在院日数7日以上, 60日以内の患者に限定した.(2)我々は臨床検査を検体検査と生理検査にわけ,又,スクリーニング検査,鑑別診断(病名と重症度),経過観察のための検査及び合併症,併発症の検査に分類した.(3)上記退院患者の夫々の1入院期間中で同一検査が7日間に3回以上あるものについて病名,病状,検査所見をカルテにより検討し,必要あれば主治医をまねいて検討し,妥当,不必要の疑い,調査不能の三群に分けた.(4)上記退院患者を主病名により, 17分類し,検討した.又,手術例,死亡例,未熟児例を抽出して検討した.(5)同一検査のあった症例は60年6月, 61年3月の上記退院患者のうち夫々48.3%, 45.3%であった.(6)同一検査のあった症例のうち,いづれの同一検査も妥当と判断された症例は両月夫々64.9%, 63.4%であった.(7)両月の同一検査のうち不必要の疑いのある比率の高い検査項目はマルチスティック,デキストロスティックス,血沈,血液生化学および未血検査なのでこれらの検査はその頻度に注意する必要がある.即ち検体検査で経過観察用検査に同一検査が多く行われる.(8)同一検査の起こり易いと考えられる手術例,死亡例,未熟児例について夫々検討した.(9)臨床検査に関して病名,病状による検査項目についての成書論文は多くあるが,検査の頻度についての発表は殆どない.臨床検査の標準化はこの両者の組み合わせによるものである.著者らはペンシルバニア大学病院の不必要な検査件数に関する調査および対策の研究発表に準拠して、科研費により東海大学病院における重複検査について検討したので報告した。調査方法は対象者の患者別カレンダー方式外来入院会計診療リストより、原法に従い、外来、入院期間中の連続7日間に同一検査を3回以上行ったことのある患者を抽出し、その患者の外来、入院カルテを取り出し、その検査の頻度について当教室の医師4名と随時主治医を招いて検討し、妥当、不必要の疑いおよび不明に分類した。今回の調査で外来では糖尿病の検査以外には上記重複検査はみられなかったので除外した。対象は1985年6月1日より6月30日までに退院した1030名の内、在院日数が7日以上60日以内の719名の中からICD分類の新生物、内分泌,循環器系,呼吸器系,消化器系の327名につき調査を行った。327名のうち上記重複検査の行われたのは176症例で死亡退院は20名であり、重複検査件数は404件であった。この404件のうち不必要の疑いのあるものは78件で約19.3%であった。不明の件数はカルテが発見できなかったものであった。本研究は医学的に必要かつ妥当な検査の頻度を研究するものである。その目的は、各種臨床検査法の特性を生かし適切で合理的な臨床検査計画法の標準化を行い教育に使用することであり加えて医療資源の効率的な活用をはかるものである。本研究は初年度で妥当、不必要の疑いの判定に充分には各診療科医師の意見を聞いていないので来年はこの点に留意して現時点における判断の標準を定めるよう努力したい。
超高齢化時代のコミニティにおける生活のサステナビリテイをめぐる総合的な研究

高齢者の生活の自立と労働をめぐる問題をコミュニティにおける生活の自立システムを構築するという観点から研究を行い、次のような成果が得られた。コミュニティにおける生活のサステナビリティの構築には、(1)多様な人と連帯できる労働の場の確保をめざした地域の自立が重要である。(2)持続的再生産可能な地域資源作りとそれを活かしたコミュニティの再生が重要である。(3)福山市ではその一つとして市街地農業の活性化が重要な役割を担っていると考えられる。本研究は超高齢化時代において高齢者の自立した生活をコミュニティにおいてどのように支えていくのかを探るために、2008年度はスペイン・モンドラゴンの協同組合企業体の訪問調査や劇団「あしぶえ」の実地調査などを行い、次のような点を明らかにした。1福山市のような地方都市にあっては、いわゆるコンパクトシティではなく農業、商業、住宅等が混在する郊外の方がサステナビリティが高くなっていた。こうしたモザイク状の郊外で域内経済を活性化させ、多角的町づくりを進めることが地域のサステナビリティを高めることになる。2日本各地での取り組みから、コミュニティにおける生活のサステナビリティは農業も含めた持続的再生産可能な地域資源づくり、それを活かした地域作りが大切である。3スペインのモンドラゴン協同組合企業体(以下MCCと略)は参加と一体となった自主管理、連帯の思想をもとに運営され、モンドラゴンの地域再生に成功していた。創設者アリスメンディエリタ神父の、労働が自然、社会、人間を変革する基本的要素であるとの考え方が貫かれていた。1) MCCは技術専門学校からスタートし、現在は工業生産だけでなく、銀行や大学、独自の社会保障制度、流通部門も設け、いずれも協同組合として運営している。2) MCCで働く多くの人は半年間の試行期間を経て出資金を出した組合員である。3)純利益の10%は社会プロジェクト基金への拠出が義務づけられている。4松江市にある「劇団あしぶえ」は、演劇活動を通じて八雲地域の活性化につないでいた。その演劇活動をさらに発展させてコミュニケーション能力の育成にも取り組まれ、こうした創造的表現活動は地域の人々の人間関係構築に有効であると言える。本研究は超高齢化時代において高齢者の自立した生活をコミュニティにおいてどのように支えていくのかを探るものである。2009年度は福山の都市構造の分析やロンドンの社会的企業傘下の事業体の訪問調査などを行い、次のような点を明らかにした。1介護職をめざす学生のレポートから、(1)社会に役立つ生き方、(2)どんなヒトにもそれぞれ役割がある、(3)介護を通じたまちづくり、をしたい等の高齢者観を知ることが出来た。2コウノトリと共生する豊岡などの調査から、コミュニティにおける生活のサステナビリティには、野生の生物との共生(ともいき)や農業も含めた持続的再生産可能な地域資源づくりとそれを活かした地域作りが大切である。3(1)江戸時代以来「自助・自立」で殖産開発を行い、綿織物などの特産物を生み出し、今日これらの産業から間接的に派生した多様な地場産業を生み出している。多様性に富んだ産業構造は都市のサステナビリティにとって必要な要件である。(2)都市構造は、旧城下町と郊外の専用住宅地およびロードサイドに広がる「商工農住混在地」(と名付ける)からなる。「モザイクサバーブ」は有機的な多様性を持ち、生活のサステナビリティを維持する可能性を持つ。4イギリスのソーシャルエンタープライズ・ロンドンに参加する事業所では、障害者など社会的に排除されてきた人々が自立した生活が送れるように、個々人の個性にあわせた職業訓練に努め、多様なヒトと連帯できる労働の場の確保に努めていた。こうした努力を重ねることで、コミュニティにおけるサステナビリティを高めていた。2010年度はそのまとめとして、これまでの研究で明らかにしてきた福山の都市構造の特徴や国内外の支え合いと自立をめざした取り組み例を参考にしながら福山市における実践的指針を考察した。1コミュニティにおける生活のサステナビリティの構築には地域の自立が重要である。また、国内外の支え合いと自立をめざした実践例は、多様な人と連帯できる労働の場の確保をめざしたものであった。2コミュニティにおける生活のサステナビリティは持続的再生産可能な地域資源作りとそれを活かしたコミュニティの再生が重要である。福山市ではその一つとして市街地農業の活性化が重要な役割を担っていると考えられる。しかも今日、市街化区域内の農地に対する国の施策は、消滅させる方向から食料の生産の他にも様々な効用があることを認め、まちづくりに行かす方向で捉えられるようになってきた。3以上のような点をふまえ、高齢者の持つ農業知識や技術を活かし、コミュニティ再生を視野に入れた体験農園型市民農園(コミュニティ・ガーデン)の振興は、福山市のコミュニティにおける高齢者の生活の自立システムの一つになると考えた。4コミュニティにおける高齢者の生活のサステナビリティをめざして、コミュニティガーデン実施の課題を明らかにし、その取り組みを始めたところである。
バンコマイシンよりも優れた治療効果を示すトリプロペプチンＣの作用機序解析

トリプロペプチン(TPPC)は、院内感染で問題となっている薬剤耐性菌MRSAに対し、動物実験においても非常に優れた治療効果を示す。我々は、どのような機構でTPPCが、耐性菌MRSAに作用するかを明らかにすることを目的に検討を行った。その結果、TPPCの分子内のカルボン酸が抗菌活性に必須であること、ならびに既に明らかにしている標的分子とTPPCの結合の強さを明らかにした。さらに固体NMRを利用して詳細な分子レベルでの作用機序を明らかにするため、安定同位体でラベルしたTPPCなどを発酵生産した。本研究は、微生物生産物として我々の発見した新規化合物トリプロペプチンC (TPPC)の作用機序を明らかにすることを目的に行なった。TPPCはマウスのメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)全身感染モデルにおいて、特効薬であるバンコマイシンよりも優れた治療効果を示したため、臨床応用が期待されている。TPPCはいずれの既存抗MRSA薬とも交差耐性を示さず、新規な作用機序を持っていることが示唆され、また実験室レベルの検討で耐性菌が極めて生じにくいというデータがあるため、作用機序を詳細に解析することは、新薬創製において重要な知見が得られるものと考えている。我々はこれまで、TPPCが細胞壁合成の重要な中間体であるウンデカプレニルピロリン酸と相互作用することを明らかにしてきた。そこで、MRSAに対するTPPCと標的分子の相互作用様式を固体NMRにより分子レベルで明らかにするべく、そのプローブとなりうるTPPCの13C置換体、重窒素置換体ならびにフッ素導入体の発酵生産を試みた。培地検討ならびに添加する前駆体の検討を経て、13C(U)グルコース、重窒素置換アンモニア、ならびに4ーフルオロプロリンを前駆体とすることで目的のプローブを生産した(論文未報告)。現在共同研究先にサンプルを送付し解析を進めているところである。相互作用部位の解明などを進めたい。このほか、表面プラズモン共鳴解析や等温滴定型カロリメーターを利用して、TPPCと標的分子であるプレニルピロリン酸の生物物理学的相互作用解析を行い、結合定数を明らかにした。本結果に関しては、日本蛋白質化学会にて報告した。現在、多面的な相互作用の検討を進めている。この他、TPPCと他剤との併用でMRSAに対して優れた相乗性が認められることを見出し、特許出願した。平成24年度は、実験計画に沿った検討を行った。トリプロペプチン(TPPC)はウンデカプレニルピロリン酸(C55-PP)を標的とすることを明らかにしているが、TPPCはC55-PPと複合体形成後に別の作用を示すことが示唆されていた。そこで、TPPCの作用機序をより詳細を明らかにするために他に関与が想定される遺伝子の過剰発現株ならびに発現抑制株を黄色ブドウ球菌での構築を目指した。発現抑制株は構築には至らなかったが、過剰発現株の構築は達成された。関連遺伝子過剰発現株に対するTPPCの感受性を調べたところ、変化が見られす、TPPCが直接lipid IIを相互作用する可能性が示唆された。その後、lipid IIとTPPCが直接相互作用することを示唆するデータが得られたので、現在詳細を解析中である。また、固体NMRを利用して構造学的作用機序解析を進めるため、安定同位体ならびにフッ素ラベルしたTPPC発酵生産の条件検討ならびに生産を行なった。これまで13Cマルチラベル体および15Nマルチラベル体を調製し、共同研究者のワシントン大学へ送付した。目的のデータを得るには充分な量とは言えないため、現在さらに発酵生産を進めている。この他、脂肪側鎖をフッ素ラベルすることを目指していたが、予備検討から取り込み効率が悪く、解析に十分量を得ることは困難と判断したため、本検討はペンディングとした。平成24年度は、次の二つを計画していた。1、関連が予想される細胞壁合成遺伝子の過剰発現株および発現抑制株を作成し、感受性変化を指標にTPPC複合体の標的分子を絞り込む。2、固相NMRを利用した構造学的作用機序解析用にラベル(19F, 13C, 15N)TPPC生産のための培地検討ならびに発酵生産を行う。前者に関しては、過剰発現株構築を達成し、その感受性変化からTPPCがlipid IIと直接相互作用することを示唆するデータを得た。後者は、13Cならびに15Nマルチラベル体の発酵条件の確立とラベル体の精製を達成しており、当初必要とされるサンプルの確保が完了した。ただし、一回の測定で目的の相互作用部位が明らかになるとは言い難いため、現在サンプルの発酵生産を継続し、次の測定に必要なサンプルの確保を進めている。以上のように、計画に沿って研究が進展しているものと判断している。一方で、TPPCがlipid IIと直接相互作用するという当初予期していなかったデータが得られたので、今後の方針に関しては変更を加えるつもりでおります。平成25年度は、主に次の3点の検討を進める。

1、TPPCとlipid IIの相互作用解析、2、固体NMR測定用のサンプル調製、3、関連が想定される遺伝子発現抑制株の確立である。1、所属する機関で昨年度購入した相互作用解析機器(SPR, ProteOn)やiTCを駆使し、相互作用の強度を客観的に数値化して、もう一つの標的であるC55-PPとの関係を明らかにする。2、生産方法は確立しているため、培養条件の最適化とともにラベル体の調製を進め、共同研究者のワシントン大学にて測定を行う。3、Staph. xylosus由来のキシロース依存性プロモータがうまく機能せずに確立に至っていないため、その原因究明を行ないつつ、代替方法を検討する。この他、作用機序解析の有用なツールとして細菌の代謝産物を網羅的に解析するメタボロミクス解析の条件検討も進めているが、現在のところクエンチングの方法が確立されておらず、クエンチングの条件検討を行なっている。本年度は上述の検討から得られた結果を総合的に利用して、次の創薬に繋がる探索系の構築も行なって行きたい。平成25年度は、次のようなものに研究費を使用する予定である。なお、昨年度予算で計上したフッ素ラベルロイシンは、予備検討から達成の実現性が乏しいことが示唆されたため、実施を見送った経緯があるが、新たにTPPCとの相互作用が示唆されたlipid IIの合成外注費に充てる予定である。前項1の目的を達成するために、lipid IIの合成外注費に50万円、相互作用解析における消耗品費35万円。前項2の達成のために、ラベル体作成前駆体費25万円、培地成分5万円、サンプル輸送費1万円。前項3に関しては、遺伝子操作キット、シーケンス費等20万円、消耗品費30万円。この他、学会参加費30万円を予定している。
多因子による肛門直腸奇形症の遺伝解析

♀DDD×♂DH-Dh/+F_1雄Dh/+マウスに生じる多因子性肛門直腸奇形症に関与する独立3遺伝子座(1番、X、およびY染色体上)における原因遺伝子を同定すべく遺伝解析を行った。結果的に、候補遺伝子Gli2, Midl, Sryらには、塩基配列上特別な変異は見出せず、候補遺伝子からは除外された。しかしながら、本研究のために樹立した17系統のY染色体コンソミック系統を用いることにより、Dhが雄の生殖機構に果たす役割などが解明され、精巣重量・性決定などの解析に成果を得た。2.X染色体座Grdhq1について、候補遺伝子のうちMidlは排除された。4.これらYコンソミック系統間には体重・精巣重量の差が確かに存在した。しかしながら、本研究結果から、これまで多くの文献で示唆されてきたように、精巣重量に及ぼすY染色体遺伝子の効果については過大に評価される傾向があり、実際には精巣重量決定の主要因子は常染色体にあることが強く示唆された。1.RT-PCRにより、Mki67ip,Gli2,Inhbb,Tmem185b,Ptpn4,Epb41l5,Ralb,Tfcp2l1,Clasp1等のDh候補遺伝子の発現を+/+,Dh/+,Dh/Dh間で比較したが、発現パターンに差は認められなかった。最も有力な候補であるGli2遺伝子について、全エキソンの塩基配列を+/+およびDh/Dhの両者において決定したが、塩基配列は同一であり、候補遺伝子からは除外された。2.♀(♀DDD×♂CAST/EiJ)×♂DH-Dh/+および♀(♀DDD×♂SPRET/EiJ)×♂DH-Dh/+の交配により、X染色体Grdhq1座の詳細マッピングを試みた。前者においては,♂Dh/+はほぼ全ての産仔が生存したため、生存個体のX染色体Grdhq1座近傍のマイクロサテライトマーカーをタイプしたが、DDD alleleを持つ個体とCASTalleleを持つ個体がほぼ1:1であった。従って、致死性を救出する第4の遺伝子座の存在が想定された。生存♂Dh/+産仔のうち、Grdhq1^<DDD>alleleを持つものを利用し、ゲノムワイドサーチを実施した。結果的に致死性救出を示す有意な連鎖は認められなかった。3.ARM発症を相関するY染色体遺伝子SNPを解析しており、現在も継続中である。Y染色体コンソミックマウス系統において、精巣重量等の系統間差が存在した。Y染色体には従来から精巣重量決定の主要な遺伝子が存在すると考えられているが、これら一連のYコンソミック系統によりこれを検証した。Yコンソミック中、DDD系統はマウス近交系中最大の精巣重量を、またCBA系統は最軽量の精巣を持つ(DDDの精巣重量はCBAの約3倍)。精巣重量に及ぼすY染色体の貢献は考えられたほど大きくなく、主要因は常染色体性であり、実際に常染色体に複数遺伝子座を同定した。