hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
多職種連携による幼児の食塩管理を主眼とした科学的な食育法の確立

(1)幼児とその保護者の随時尿による食塩排泄量の現状と問題点に関する情報整備と食事調査および食行動アンケートによる幼児の食塩摂取量に関する規定因子の探索、(2)多職種連携による食塩管理を主眼とした食育の検討の2点である。(1)の研究は、平成29-30年度で実施することになっており、平成29年度は研究連携幼稚園との連携協定締結および研究対象者の同意取得を、当初の研究計画どおりに実施できた。さらに、平成30年度4月以降に実施する予定であった研究説明会および研究同意の取得を3月末までに、6園のうち3園で終了できており、計画よりも若干早いペースで研究が進んでいる。同意者数は、6園のうち3園の中間集計で165組(福岡県:86組、福島県:79組)であり、目標研究対象者数400組の到達は難しいと予想されるが、本研究を実施する上で十分な研究対象者数を確保できる見込みである。(2)の研究は、データ解析終了後の平成31年度に実施する予定である。本申請課題は、幼児(年中児:4-5歳)と保護者のナトリウム(Na)とカリウム(K)摂取量やその比(Na/K比)、変動量および地域差等を起床後第1尿による尿中排泄量から推定し、幼児と保護者間の尿中排泄量の関連や食行動等の規定因子ついて情報整備を行い、次にその結果に基づいて幼児を対象にした多職種連携による食塩管理を主眼とした科学的な食育のあり方を提案するものである。平成30年度は、保護者と幼児400組の登録を目指し、2地域(西日本:福岡県、東日本:福島県)で6園の研究連携幼稚園で研究説明会を実施した。研究説明会に出席した452名の幼児の保護者に研究の概要を説明し、同意が得られた365組の幼児と保護者を研究対象者として登録した。研究対象となった幼児とその保護者には、4-5月(春季)と10-11月(秋季)の各2日間(月・火曜日)における起床後第1尿(8検体/組)の提出を依頼した。なお、尿の採取は、保護者の非月経期間において、幼児と同日となるよう依頼した。また、食事調査として、妥当性が確認された食事調査票への回答を依頼した。全ての研究データを提出した研究対象者を最終解析対象者とし、次の3つの観点から解析を行い、研究成果を得た。ア)幼児338名を対象に春季の尿と食事調査を用い、幼児の尿Na/K比は、麺類、嗜好飲料類、調味料類が正に、果実類が負に影響していたことが示された。イ)母子297組の春・秋季の尿を用い、子の尿Na/K比は母の尿Na/K比に影響していることが示された。ウ)母子297組の春・秋季の尿を用い、子の尿Na/K比は地域差を認めなかったが、母の尿Na/K比は西日本の母に比較して東日本で有意に高値であった。この要因として、子の尿Na/K比が、両地域において母を凌ぐ高値となっており、ア)の研究成果である尿Na/K比に影響する食品を薦める食育の確立が急務であることが示された。本申請課題では、日本の複数地域において幼児とその保護者の複数日の起床後第1尿を採取することで、次のサブテーマについて研究を行うものである。すなわち、1)幼児とその保護者の随時尿による尿中排泄量の関連と問題点に関する情報整備を踏まえ、食事調査および食行動アンケートによる幼児のナトリウムとカリウム(ナトリウム/カリウム比)に関する食事因子の探索を行う(平成29-30年度)、2)多職種連携による食塩管理を主眼とした食育の検討を行う(平成31年度)の2点である。1)の研究については、目標であった400組の登録に届かなかったものの、複数地域において365組の幼児と保護者から同意を得て、季節毎の300組以上の尿検体(総数2400検体以上: 300組×連続2日×2季節)と食事調査データが収集できたことの研究価値は非常に高いと考えられる。現在、メインデータの解析が終了し、国内外の各種学会および学会誌に成果発表のエントリーを行っている。平成30年度は、本研究の2つのサブテーマのうち、
モルデナイト型チタノシリケート触媒を用いる液相酸化プロセスの開発

脱アルミニウムしたモルデナイトを、TiCl_4を用いたAtom-planting処理することにより、モルデナイト型チタノシリケートを調製した。UV拡散反射スペクトルにおいて220nmに強い吸収が現れたことから、導入されたチタンが4配位状態であることが明らかとなった。また、透過IRスペクトルにおいて963cm^<-1>に吸収が現れ、その吸光度とチタン含有量が比例することから、導入されたチタンがすべてモルデナイト骨格に組み込まれていると考えられる。チタンはモルデナイトの格子欠陥サイトと反応し、773K以上でAtom-plantingを行うとチタンは4本のTi-O-Si結合を形成することを見い出した。モルデナイト型チタノシリケートを触媒として、トルエンの過酸化水素による水酸化を行った。生成物は主にクレゾール異性体であり、選択率は99%以上であった。チタン当たりの反応速度(TON)は、脱アルミニウムにより触媒の疎水性を高めると向上した。反応物にベンゼン、トルエン、エチルベンゼン、クメン、t-ブチルベンゼンを用いると、TONはベンゼンからクメンまではあまり変化せず、t-ブチルベンゼンでは大きく低下した。一方、モルデナイトよりも細孔径が小さいMFI型チタノシリケートを触媒とすると、ベンゼンではモルデナイト型と同程度のTONであったが、トルエンでは半分程度に減少し、エチルベンゼン以上では大幅に減少した。このことは細孔径が大きいモルデナイト型チタノシリケートが従来のMFI型と比べ、嵩高い分子の水酸化に有利であることを示す。一方、アンモニアと過酸化水素を用いたケトン類のアンモオキシム化においては、963cm^<-1>のIR吸収バンド強度とアンモオキシム化反応速度が比例関係にあることから、水酸化と同様骨格チタンが活性点であることが明らかとなった。骨格中のアルミニウム含有量の減少とともにTONおよびオキシム選択率とも向上したことから、触媒の疎水性が活性だけでなく選択性にも影響を及ぼすと結論した。まずアトムプランティング法を用いたモルデナイト型チタノシリケートの調製について検討した。空気中での焼成および硝酸処理により脱アルミニウムした高シリカモルデナイトを、気相で四塩化チタンの蒸気と接触させチタンの導入を試みた。チタン導入の最適温度が673773Kであることおよび処理時間1h、四塩化チタン分圧1.7kPaで導入量が飽和に達することを明らかにした。この条件下で脱アルミニウムモルデナイト中に0.4mmol/gのTi^<4+>を導入することに成功した。次に、チタンが結晶骨格中に組み込まれているかどうかを検討した。紫外スペクトルから導入されたチタンは4配位の孤立したTi^<4+>であることが分かった。赤外スペクトルにおいて、ゼオライト結晶骨格に組み込まれたチタン種に帰属される963cm^<-1>の吸収バンド強度と導入チタン量が比例することを見出した。これらの結果から、アトムプランティング法を用いてモルデナイト骨格中に導入したチタンはほとんどすべて結晶骨格に組み込まれていることが明かとなった。次に、バッチ式反応法によりベンゼンおよび各種アルキルベンゼンの過酸化水素を酸化剤とする水酸化反応を行った。モルデナイト型チタノシリケートを触媒に用いると、反応温度90°C、反応時間2時間において、いずれの場合もベンゼン環への水酸化が起こった。

触媒活性を、細孔径の小さいMFI型チタノシリケートと比べると、反応物分子の大きさがトルエン、エチルベンゼン、t-ブチルベンゼンと大きくなるほど、モルデナイト型の活性がMFI型より著しく高くなった。このことから、モルデナイト型チタノシリケートが大きな分子の液相水酸化に有効であることが明かとなった。モルデナイト型チタノシリケートの合成法を確立するため、まず合成モルデナイトの脱アルミニウム法について検討した。硝酸での加熱還流及び600700°Cでの空気焼成を組み合わせることにより、結晶構造を破壊することなく、骨格からの脱アルミニウムを行った。骨格のSi/Al比は最大325となった。このように調製した脱アルミニウムモルデナイトを四塩化チタン蒸気と反応させるAtom-Planting法によりチタノシリケートを調製した。その際骨格へのチタンの組み込みに最適な条件は、脱アルミニウムモルデナイトのSi/Al比約120,Atom-Planting処理温度600°Cであり、四塩化チタン分圧は11kPa、処理時間1時間で組み込まれるチタン量が飽和することを明らかにした。導入したチタンのキャラクタリゼーションを以下のように行い、モルデナイト骨格へのチタン原子の組み込みメカニズムを明らかにした。すなわちIRスペクトルのOHバンドおよび^<29>Si MAS NMRスペクトルから、四塩化チタンがモルデナイトの格子欠陥のOHと反応して導入されることを示した。また、UVスペクトルにおいて220nmに吸収を示すことからチタンが酸化物粒子ではなく、分散した4配位種であることがわかった。この4配位チタン種をIRスペクトルの960cm^<-1>の吸収バンドにより定量することに成功した。C^<18>O_2とチタノシリケート格子中のO^<2->との酸素交換反応を速度論的に解析した結果,500°C以上の処理温度で組み込まれたチタン種がモルデナイトの4個の格子酸素と結合していることが定量的に証明された。モルデナイト型チタノシリケートを触媒として、芳香族炭化水素の過酸化水素による液用水酸化反応を行った。チタノシリケートは脱アルミニウムしたモルデナイトをTiCl_4を用いたAtom-planting処理することにより調整した。トルエンの水酸化におる反応生成物は主にクレゾール異性体であり、選択率は99%以上であった。チタン当たりの反応速度(TON)は、アルミニウム含有量の減少にともない向上した。脱アルミニウムにより触媒の疎水性を高めることが、触媒の高活性化に有効であると考えられる。反応物にベンゼン、トルエン、エチルベンゼン、クメン、t-ブチルベンゼンを用い、反応物分子の大きさによる立体的な影響を調べた。TONは、ベンゼンからクメンまであまり変化しないが、t-ブチルベンゼンでは大きく低下し。一方、モルデナイトよりも細孔径が小さいMFI型チタノシリケートを触媒とすると、ベンゼンではモルデナイト型と同程度のTONであったが、トルエンでは半分程度に減少し、エチルベンゼン以上では大幅に減少した。また、キシレンの3種の異性体を反応物とした場合、モルデナイト型では反応性が高いO-およびm-キシレンがp-キシレンより高いTONを与えたが、MFI型では逆にO-およびm-キシレンはほとんど反応しなかった。
水素吸蔵合金の触媒化的応用に関する研究

水素吸蔵台合金(Zr_2Ni,R_2Co_7,RFe_2など;R:希土類元素)の触媒への応用を目的として、合金の水素吸蔵能を利用したアルコ-ルや炭化水素類の脱水素反応を検討した。一般に脱水素反応は熱力学的に不利な反応であるが、水素吸蔵合金の吸蔵能を生かして脱離した水素をそのまま金属水素化物に転化することができれば、反応は金属水素化物の生成分だけエネルギ-的に有利となるため、低温でも進行可能になる。その上反応条件が温和となるため高選択性が期待できる。Zr_2Niによるシクロヘキサンの脱水素では、反応にともないシクロヘキサン圧は減少し、それに対応した脱水素生物成分であるベンセンが定量的に生成した。しかし水素ガスの生成はほとんど認められず、脱離した水素は気相に放出されることなくすべて合金中に金属水素化物として吸蔵された。すなわち反応は次のような量論式で表される。また脱水素速度はシクロヘキサン圧にはほとんど依存せず、合金の水素化に伴う水素吸蔵能の飽和とともに低下した。さらに、アルコ-ルの場合と同様に生成物による顕著な阻害の影響も認められた。メチルシクロヘキサンを用いた時はトルエンに脱水素され、やはり水素はすべて合金中に吸蔵された金属水素化物に転化された。しかし、その反応性は著しく異なり、メチルシクロヘキサン>シクロヘキサンの順に減少した。一方、合金の脱水素活性はFe系よりCo、Ni系合金のほうが著しく高かった。また、合金はPt処理により反応性の向上することがわかった。これらの結果より反応の律速段階は合金表面に吸着した炭化水素の脱水素過程であると結論した。水素吸蔵合金の水素吸蔵能を生かした合金上での脱水素反応について検討した。R_2Co_7、RFe_2(R:希土類元素)、Zr_2Niなどの水素吸蔵合金にアルコール(メタノール、エタノールまたは2-プロパノール)を接触させると、アルコールは効率良く脱離水素され脱水素はそのまま合金中に吸蔵されることがわかった。このタイプの脱水素反応では金属水素化物生成分だけエネルギー的に有利になるため、低温でも反応が進行するのが特徴である。Nd_2Co_7による2-プロパノールの脱水素では、反応にともない2-プロパノール圧は減少し、それに対応して脱水素生成物であるアセトンが定量的に生成した。また脱水素速度は2-プロパノール圧にはほとんど依存せず、合金の水素化に伴う水素吸蔵脳の飽和とともに、低下した。さらに生成アセトンによる顕著な阻害の影響も認められた。メタノール、エタノールを用いたときも同様な脱水素挙動を示した。合金上でメタノールは一酸化炭素に、エタノールはアセトアルデヒドにそれぞれほぼ100%の選択性で脱水素され、水素はすべて合金中に吸蔵された。しかし、その反応性は著しく異なり2-プロパノール>エタノール>メタノールの順に減少した。これらの結果より反応の律速段階は合金表面に吸着したアルコールの脱水素過程であると結論した。水素吸蔵合金(Zr_2Ni,R_2Co_7,RFe_2など;R:希土類元素)の触媒への応用を目的として、合金の水素吸蔵能を利用したアルコ-ルや炭化水素類の脱水素反応を検討した。

一般に脱水素反応は熱力学的に不利な反応であるが、水素吸蔵合金の吸蔵能を生かして脱離した水素をそのまま金属水素化物に転化することができれば、反応は金属水素化物の生成分だけエネルギ-的に有利となるため、低温でも進行可能になる。その上反応条件が温和となるため高選択性が期待できる。Zr_2Niによるシクロヘキサンの脱水素では、反応にともないシクロヘキサン圧は減少し、それに対応して脱水素生成物であるベンゼンが定量的に生成した。しかし水素ガスの生成はほとんど認められず、脱離した水素は気相に放出されることなくすべて合金中に金属水素化物として吸蔵された。すなわち反応は次のような量論式で表される。また脱水素速度はシクロヘキサン圧にはほとんど依存せず、合金の水素化に伴う水素吸蔵能の飽和とともに低下した。さらに、アルコ-ルの場合と同様に生成物による顕著な阻害の影響も認められた。メチルシクロヘキサンを用いた時はトルエンに脱水素され、やはり水素はすべて合金中に吸蔵された金属水素化物に転化された。しかし、その反応性は著しく異なりメチルシクロヘキサン>シクロヘキサンの順に減少した。一方、合金の脱水素活性はFe系よりCo、Ni系合金のほうが著しく高かった。また、合金はPt処理により反応性の向上することがわかった。これらの結果より反応の律速段階は合金表面に吸着した炭化水素の脱水素過程であると結論した。
社会相互作用の機序とその障害の理解のための包括的アプローチ

社会相互作用の基盤となるメカニズムを明らかにすることを目標として、研究を進めてきた。昨年度までは乳幼児の表情模倣反応(無意識のうちに他者と同一の表情を表出する現象)に着目し、発達初期過程において、他者の表情や意図を理解する機能の獲得には、表情模倣を介した、他者の状態を自身の身体で体現するシステムが関与していることを明らかにした。一方で、上記のシステムには、表情模倣の結果として自己の身体に生じた変化を分析し、それを意味づける機能も必要であると考えられる。それを調べるにあたり、内受容感覚と呼ばれる、心拍や内臓等の身体の生理状態を知覚する感覚機能に着目した。そこで本年度は、内受容感覚に関する研究の第一人者である英国ロンドン大学ロイヤルホロウェイ校のManos Tsakiris教授と共同で、内受容感覚が表情認知に果たす役割についての研究を実施した。まず、内受容感覚の鋭敏性の個人差に着目し、それが表情認知の正確性や覚醒度の知覚にどのように影響するのかを調べた。他の研究プロジェクトと共同で約150名の被験者(成人)を対象に実験を実施し、各個人の内受容感覚への鋭敏性の特性を得た。その後、得られたプールから内受容感覚が特に鋭敏な被験者と、特に鈍感な被験者を選択し、微弱で曖昧な表情に対する表情認知課題を実施した。その結果、内受容感覚が鋭敏な被験者群は、鈍感な被験者群に比べて、微弱な表情をより正確に判断し、それらに対して強い覚醒度を知覚することがわかった。この結果から、他者の表情、特に微弱な表情の認知には自身の身体の生理状態を知覚・分析するプロセスが関与することが示された。今度は、他者の表情を認知する過程において、誘起された身体変化と、それを知覚する能力が、それぞれどのように作用しているのかを具体的に調べていく予定である。29年度が最終年度であるため、記入しない。社会相互作用の基盤となるメカニズムを探るため、「表情模倣」という現象に着目した。成人や児童では他者の表情を無意識的に模倣することが知られており、時には目には見えないような非常に微細な表情筋の模倣反応が、他者の感情状態を理解するのに役立っていると考えられている。今年度は、乳児を対象に表情模倣の初期発達について調べた。自然状態の他者の表情・情動に対していくらか弁別ができるようになると言われている生後45か月の乳児を対象に、他者の情動表出に対する乳児の表情筋の活動を筋電図計により計測・分析した。その結果、動的な視聴覚表情(表情と音声)を呈示した際に、対応する表情筋(泣き刺激に対して眉毛の筋肉、笑い刺激に対して頬の筋肉)の活動の上昇が見られた。つまり、45か月齢の乳児は他者の表情に対して自発的な模倣反応を示すことが明らかになった。一方、成人や児童で知られている結果とは異なり、視覚(表情)または聴覚(音声)のみの情動刺激に対しては表情筋の活動を示さなかった。これらの結果から、表情模倣は自然状態の刺激(表情と音声がそろっている状態)に対しては遅くても5か月時点で出現し始め、視覚のみ・聴覚のみの刺激に対してはその後の発達段階で獲得され得るだろうことが示唆された。この結果は、乳児の表情認知能力におけるモダリティに応じた発達過程と一致しており、表情模倣と表情認知は生後の早い段階で相互的に発達している可能性が示唆された。初年度のためセットアップに時間を要したが、その後は刺激作成、本実験、解析を計画どおり進め、得られた結果は論文にまとめて国際誌に投稿中である。社会相互作用の基盤となるメカニズムを探るため、「表情模倣」に着目し、研究を進めている。昨年度は、他者の表情観察時の乳児の表情筋活動を計測することで表情模倣の初期発達について調べ、遅くとも5か月齢までに表情模倣反応が見られることが明らかになった。本結果は、今年度12月にRoyal Society Proceedings B誌にて掲載・発表された。今年度は、表情模倣が高次の社会認知機能の発達にどのように関与しているのかという疑問に着目した。視覚的な視点取得(他者が見ているものは自分が見ているものとは異なることへの理解)が出来るようになると言われている1824ヶ月齢に焦点をあて、表情模倣の反応性と、他者視点に基づいた行為の意図理解についてそれぞれ調べ、それらの関連性を分析した。表情模倣については、昨年度と同様に、女性が笑っている映像(laugh)や泣いている映像(cry)を見ている際の幼児の表情筋(口角を引き上げる頬部の筋肉〈laughに対応〉と、眉をしかめる眉上部の筋肉〈cryに対応〉)の活動を表面筋電図によって計測した。視点取得に関しては、女性がおもちゃにむかって手を伸ばすような映像を作成し、それを見ている際の幼児の視線を計測することで、他者視点に基づいて相手の行為を予測できているかどうかを判断した。それらを合わせて分析した結果、相手の視点に基づいた行為予測の成績がよい幼児群では、同成績が悪い幼児群に比べ、他者の表情に対して模倣反応を示しやすいことがわかった。これらの結果から、表情模倣は視点取得や意図理解などの社会認知機能の発達と正の相関性をもつことが示された。初年度の研究成果を原著論文として国際学術誌にて発表することができた。また、今年度に入って始めた実験も結果をまとめ現在論文を準備している段階であり、おおむね計画通りに進めることが出来ている。

昨年度までは乳幼児の表情模倣反応(無意識のうちに他者と同一の表情を表出する現象)に着目し、発達初期過程において、他者の表情や意図を理解する機能の獲得には、表情模倣を介した、他者の状態を自身の身体で体現するシステムが関与していることを明らかにした。一方で、上記のシステムには、表情模倣の結果として自己の身体に生じた変化を分析し、それを意味づける機能も必要であると考えられる。それを調べるにあたり、内受容感覚と呼ばれる、心拍や内臓等の身体の生理状態を知覚する感覚機能に着目した。そこで本年度は、内受容感覚に関する研究の第一人者である英国ロンドン大学ロイヤルホロウェイ校のManos Tsakiris教授と共同で、内受容感覚が表情認知に果たす役割についての研究を実施した。まず、内受容感覚の鋭敏性の個人差に着目し、それが表情認知の正確性や覚醒度の知覚にどのように影響するのかを調べた。他の研究プロジェクトと共同で約150名の被験者(成人)を対象に実験を実施し、各個人の内受容感覚への鋭敏性の特性を得た。その後、得られたプールから内受容感覚が特に鋭敏な被験者と、特に鈍感な被験者を選択し、微弱で曖昧な表情に対する表情認知課題を実施した。その結果、内受容感覚が鋭敏な被験者群は、鈍感な被験者群に比べて、微弱な表情をより正確に判断し、それらに対して強い覚醒度を知覚することがわかった。この結果から、他者の表情、特に微弱な表情の認知には自身の身体の生理状態を知覚・分析するプロセスが関与することが示された。今度は、他者の表情を認知する過程において、誘起された身体変化と、それを知覚する能力が、それぞれどのように作用しているのかを具体的に調べていく予定である。引き続き、表情模倣に着目してその機能と発達について更に掘り下げていく予定である。特に、発達初期の社会的シグナルに対する反応性が、その後の社会的認知能力の発達にどのように関係するのかを明らかにしたい。自閉症スペクトラム者を対象とした研究の展開も検討する。今回表情模倣と他者視点取得との相互関係を明らかにしたが、この関係性が視点取得の機能がまさに獲得される過程である幼児期特有のものなのか、成人においても同様の関係性を維持しているのかを検証する。また、今後は「自己」の形成過程と模倣発達の関係性に焦点を当てて研究に取り組む予定である。29年度が最終年度であるため、記入しない。
ノンアスベスト鋳造用リングライナーに関する基礎的研究

ノンアスベストタイプの鋳造用リングライナーを分類して特性を明らかとし,これらの特性から使用方法を確立するための一環として,基礎的資料の収集を企図した.まず、15種のセラミック系ライナーを組成分析して5群(A群:ロックウ-ル系,B群:セラミックファイバー低温系,C群:セラミックファイバー標準系,D群:セラミックファイバー低温標準系およびE群:カオリン系)に分類し,ライナーのテクスチュア,空隙率および吸水性について検討した.その結果,ライナーの主繊維はA-D群では丸棒状であり,E群では不定形であった.また,ライナーは,アスベストリボンと比較して,A群は空隙率が比較的高く吸水量は大きく,B-D群は空隙率が高く吸水量は小さく,E群は空隙率が低く吸水量が小さかった.さらに,D群のNA14(リボンウ-ル)は空隙率が高くかつ特異に吸水量の大きいものであった.次に,埋没材スラリーを減圧下で注入した鋳造用リング内でのライナーの吸水挙動について,埋没材スラリー注入量および埋没材の操作時間を測定して検討した.その結果,ライナー15種およびアスベストリボン3種のδV(ライナーが吸水しないと仮定した場合より増加した埋没材スラリー体積)は,0.962.85cm^3であり,それぞれのライナーの空隙量の77106%であった.したがって,減圧下でスラリーを鋳造用リングに注入した場合,スラリーからライナーに移行する水分量は,ライナーの空隙量でおおよそ表現可能であった.操作時間は,A,B,C,DおよびE群でそれぞれ順に,703964,746919,831879,653835および794秒を示し,アスベストリボンでは789854秒を示した.一方,ライナー内張りなしでは836秒を示した.したがって,多種類のライナーの吸水挙動を検討する場合には,操作時間をもとにして求めた実効混水比で検討する方法は不適当と判断された.ノンアスベストタイプの鋳造用リングライナーを分類して特性を明らかとし,これらの特性から使用方法を確立するための一環として,基礎的資料の収集を企図した.まず、15種のセラミック系ライナーを組成分析して5群(A群:ロックウ-ル系,B群:セラミックファイバー低温系,C群:セラミックファイバー標準系,D群:セラミックファイバー低温標準系およびE群:カオリン系)に分類し,ライナーのテクスチュア,空隙率および吸水性について検討した.その結果,ライナーの主繊維はA-D群では丸棒状であり,E群では不定形であった.また,ライナーは,アスベストリボンと比較して,A群は空隙率が比較的高く吸水量は大きく,B-D群は空隙率が高く吸水量は小さく,E群は空隙率が低く吸水量が小さかった.さらに,D群のNA14(リボンウ-ル)は空隙率が高くかつ特異に吸水量の大きいものであった.次に,埋没材スラリーを減圧下で注入した鋳造用リング内でのライナーの吸水挙動について,埋没材スラリー注入量および埋没材の操作時間を測定して検討した.その結果,ライナー15種およびアスベストリボン3種のδV(ライナーが吸水しないと仮定した場合より増加した埋没材スラリー体積)は,0.962.85cm^3であり,それぞれのライナーの空隙量の77106%であった.したがって,減圧下でスラリーを鋳造用リングに注入した場合,スラリーからライナーに移行する水分量は,ライナーの空隙量でおおよそ表現可能であった.操作時間は,A,B,C,DおよびE群でそれぞれ順に,703964,746919,831879,653835および794秒を示し,アスベストリボンでは789854秒を示した.一方,ライナー内張りなしでは836秒を示した.したがって,多種類のライナーの吸水挙動を検討する場合には,操作時間をもとにして求めた実効混水比で検討する方法は不適当と判断された.歯科鋳造で鋳造用リングライナーとして従来使用されていたアスベストリボンは,その粉塵による塵肺や発癌性などの為害性が指摘され姿を消した.その代替品として,ノンアスベストタイプのライナーが多数開発・販売され使用されている.本研究は,まず,ノンアスベストリングライナーの組成分析を行って細分類し,分類別の特性を明らかにするとともに,分類報の使用方法を明らかにしようとするものである.当初の研究計画では,(1)ライナーの組成分析,(2)吸水時のライナーの厚さおよび重量増加,(3)加熱時のライナーの厚さ,重量減少および緩衝性,(4)テクスチュアの検討,(5)ライナーの使用方法と鋳造体の適合性の検討を挙げたが,(1)は平成6年度中に繰り上げて終了し,その成果を誌上発表(歯科材料・器械14巻2号)した.(2)および(4)に関しては本実績報告書作成時までに検討を終了し,歯科材料器械14巻5号に誌上発表した.現在,(5)に関し,格子状ワックスパターンを用いて,リング内での鋳型の変形挙動,およびリング内でのライナーの吸水挙動について鋭意検討中であり,リング内でのライナーの吸水挙動については本年4月に開催される日本歯科理工学会でその検討の成果を口頭発表の予定である.

その要旨は,鋳造用リングにライナーを裏装し,埋没材を注入した場合のリング内でのライナーの吸水挙動を埋没材の操作時間から検討したもので,1)埋没材の注入量から,ロックウ-ル系ライナー(3種),セラミックファイバー標準用の1種(リボンウ-ル)およびアスベストリボン(3種)の吸水量が大きいこと.2)操作時間から求めた実効混水比が,理論実効混水比(ライナー単体の吸水量から換算した)と比較的良く一致するライナー群と一致しないライナー群の2群に大別されることを明らかとした.ノンアスベストタイプの鋳造用リングライナーを分類して特性を明らかとし,これらの特性から使用方法を確立するための一環として,基礎的資料の収集を企図した.まず、15種のセラミック系ライナーを組成分析して5群(A群:ロックウ-ル系,B群:セラミックファイバー低温系,C群:セラミックファイバー標準系,D群:セラミックファイバー低温標準系およびE群:カオリン系)に分類し,ライナーのテクスチュア,空隙率および吸水性について検討した.その結果,ライナーの主繊維はA-D群では丸棒状であり,E群では不定形であった.また,ライナーは,アスベストリボンと比較して,A群は空隙率が比較的高く吸水量は大きく,B-D群は空隙率が高く吸水量は小さく,E群は空隙率が低く吸水量が小さかった.さらに,D群のNA14(リボンウ-ル)は空隙率が高くかつ特異に吸水量の大きいものであった.次に、埋没材スラリーを減圧下で注入した鋳造用リング内でのライナーの吸水挙動について,埋没材スラリー注入量および埋没材の操作時間を測定して検討した.その結果,ライナー15種およびアスベストリボン3種のδV(ライナーが吸水しないと仮定した場合より増加した埋没材スラリー体積)は,0.962.85cmであり,それぞれのライナーの空隙量の77106%であった.したがって,減圧下でスラリーを鋳造用リングに注入した場合,スラリーからライナーに移行する水分量は,ライナーの空隙量でおおよそ表現可能であった.操作時間は,A,B,C,DおよびE群でそれぞれ順に,703964,746919,831879,653835および794秒を示し,アスベストリボンでは789854秒を示した.一方,ライナー内張りなしでは836秒を示した.したがって,多種類のライナーの吸水挙動を検討する場合には,操作時間をもとにして求めた実効混水比で検討する方法は不適当と判断された.
胸腺細胞のアポトーシスにおけるSdi1の関与の検討

1.目的:マウスよりダブルポジティブ胸腺細胞を調製し、TPAによるアポトーシス誘導時のCDK活性阻害因子の発現変化をimmunoblot法により解析し,その関連を検討した。2.結果:a.マウスのダブルポジティブ胸腺細胞ではTPAによるアポトーシス誘導時にはSdilの発現は観察されなかった。b.同細胞では、p27/KIP1の発現が観察されたが、アポトーシス誘導とのとの相関は観察されなかった。c.同細胞では、RBタンパク質リン酸化活性は観察されなかった。3.考察:マウスダブルポジティブ胸腺細胞のTPAによるアポトーシス誘導において、CDK阻害因子の発現変化はアポトーシス誘導とは無関係であると考えられる。また最近、他グループにより、sdi1遺伝子欠損マウスにおいて正常な胸腺細胞の選択が行われていることが報告され、Sdi1はネガティブセレクションに何ら機能していないことが示唆された。しかし、この研究とは別に、私はヒト白血病由来の細胞株であるHL-60がCDK阻害剤であるbutyrolactone Iによりアポトーシスを起こすことを観察している。この事実は、アポトーシス誘導とサイクリン活性の間に何らかの関連が存在する場合があることを示唆しており、今後この機構を解明するつもりである。
金属基複合材料における疲労損傷の非破壊計測

疲労の初期損傷を明かにするため、SEMに組込んだ電気油圧サーボ式疲労試験機を用いて、平滑材表面に発生する微小疲労き裂の伝ぱ特性を明かにした。粒径3μmの複合材料においては粒子リッチ領域のマトリックス部よりき裂が発生し、粒子リッチ領域からマトリックスリッチ領域にき裂伝ぱする段階で、先行き裂が発生し、強化粒子荷より架橋効果が作用することを明かにした。一方、粒径30μmの複合材料においては、複数の強化粒子の割れが疲労初期に発生し、また主き裂近傍の粒子割れによる先行き裂が認められた。き裂伝ぱは、これら先行き裂と主き裂との合体によって特徴付けられた。X線法を用いて、本複合材料のアルミニウム相および強化粒子相の応力測定を試みた。一軸負荷作用下における各相の応力は負荷応力に線形で、粒径が大きいほどSiC粒子の応力負担分が増加することを示した。また炭化ケイ素とアルミニウム合金では線膨張係数が異なるため、製造過程において残留応力が導入される。アルミニウム相ではT6処理によって主応力差(σ1-σ3)および(σ2-σ3)が-50-100MPa程度、またSiC相では-150-200MPa程度圧縮残留応力が検出され、本手法を用いて非破壊損傷評価が可能であることを示した。ついで、SCS-6/Ti-15-3複合材料を用いて疲労過程の残留応力の変化を検討した。母材の初期残留応力は150MPa程度の引張であり、応力繰り返しにともない残留応力が急激に減少することを示した。本手法を用いて、残留応力から疲労損傷の程度が推察可能であることが分かった。
神経障害性疼痛の分子診断系開発の基礎的研究

申請者らの見い出したCRPS患者の障害末梢神経におけるメタロチオネイン(MT)の欠損は、当該分野において初めて発見された分子レベルの変化である。この発見を契機として分子レベルの理解がほとんど無いといってもいいNPの分子レベルの病態解析を可能にする入口に立つことができた。客観診断が存在しなかった神経障害性疼痛を客観診断できる可能性がある。このことは、神経障害性疼痛という難病に対する初めての分子レベルでの情報である。いまだに不明な点が多いCRPS障害神経の解析を契機としMTという分子のウインドウからNPの疼痛に関わるタンパク質群のパスウエイを観察する分子レベルの疼痛病理学的解析が可能となった。神経障害性疼痛(NP:neuropathic pain)は、慢性持続する高度の疼痛を主徴とする難治疾患である。臨床所見からかけ離れた高度な痛みが主症状であることから客観的な診断が困難であり、診断が困難な症例では詐病との鑑別が必要など、医療者・患者双方にとって多大の困難をもたらし、患者本人、家族、社会に深刻な問題を与えている。NPは、がん性疼痛、糖尿病性神経障害に伴う痛みや複合性局所疼痛症候群(CRPS)など、多くの疾患を含むことが明らかとなりつつあり、近年その重要性が増している。現在まで、まったく客観診断の方法が存在しなかった神経障害性疼痛を客観診断できる可能性がある。本研究が成功した場合、単に診断体系の確立が可能となるばかりでなく、NPの疾病概念の整理にも大いに貢献することが可能となる。さらに、直接MTをまたは重要な分子パスウエイ中の標的を同定する道を目指して網羅的な抗体アレイを用いた発現タンパク質解析を実施し、新な分子標的診断および治療系への発展を期した取り組みを行った。これらの成果は、がん性疼痛、糖尿病性神経障害に伴う痛みなどの多くの機序不明の神経障害性疼痛の分子レベルでの理解を可能にする大きな発展が期待される。この成果は、がん性疼痛、糖尿病性神経障害に伴う痛みなどの多くの機序不明の神経障害性疼痛の分子レベルでの理解を可能にする大きな発展が期待される。本発見を契機として分子レベルの理解がほとんど無いといってもいいNPの分子レベルの病態解析を可能にする入口に立つことができた。いまだに不明な点が多いCRPS障害神経の解析を契機としMTのウインドウからNPの疼痛に関わるタンパク質群のパスウエイを観察する分子レベルの疼痛病理学的解析が可能となった。本研究では、単に診断体系の確立が可能となるばかりでなく、NPの疾病概念の整理にも大いに貢献することが可能となる。加えて、直接MTをまたは重要な分子パスウエイ中の標的を同定する道を目指して網羅的な抗体アレイを用いた発現タンパク質解析を実施し、神経成長因子関連の新な分子パスウエイの関与の可能性を検出し、分子標的診断および治療系への発展を期した取り組みを継続している。

いまだに不明な点が多いCRPS障害神経の解析を契機としMTという分子のウインドウからNPの疼痛に関わるタンパク質群のパスウエイを観察する分子レベルの疼痛病理学的解析が可能となった。本研究により、単に診断体系の確立の可能性が示されたばかりでなく、NPの疾病概念のなかに酸化ストレスとスキャベンジャーとしてのMTの関わりが分子レベルで示された。さらに、タンパク質アレイの同時解析により重要な分子パスウエイの同定および診断治療標的候補分子を複数同定できた。今後は本研究の成果を発展させ、がん性疼痛、糖尿病性神経障害に伴う痛みなどの多くの機序不明の神経障害性疼痛の分子レベルでの理解に取り組むことを可能とする分子基盤の活用による大きな発展が期待される。申請者らの見い出したCRPS患者の障害末梢神経におけるメタロチオネイン(MT)の欠損は、当該分野において初めて発見された分子レベルの変化である。この発見を契機として分子レベルの理解がほとんど無いといってもいいNPの分子レベルの病態解析を可能にする入口に立つことができた。客観診断が存在しなかった神経障害性疼痛を客観診断できる可能性がある。このことは、神経障害性疼痛という難病に対する初めての分子レベルでの情報である。新たに解析を開始した人末梢神経を用いたタンパク質アレイによる、CRPS神経と正常神経の比較より、神経成長因子および関連パスウエイと疼痛神経の関与が検出された。初年度の解析から、特定の分子パスウエイの候補への絞込みに成功した。この成果は、おおむね順調な研究に伸展と考えられる。病理学神経障害性疼痛(NP:neuropathic pain)は、慢性持続する高度の疼痛を主徴とする難治疾患である。臨床所見からかけ離れた高度な痛みが主症状であることから客観的な診断が困難であり、診断が困難な症例では詐病との鑑別が必要など、医療者・患者双方にとって多大の困難をもたらし、患者本人、家族、社会に深刻な問題を与えている。NPは、がん性疼痛、糖尿病性神経障害に伴う痛みや複合性局所疼痛症候群(CRPS)など、多くの疾患を含むことが明らかとなりつつあり、近年その重要性が増している。この成果は、がん性疼痛、糖尿病性神経障害に伴う痛みなどの多くの機序不明の神経障害性疼痛の分子レベルでの理解を可能にする大きな発展が期待される。本発見を契機として分子レベルの理解がほとんど無いといってもいいNPの分子レベルの病態解析を可能にする入口に立つことができた。現在まで、まったく客観診断の方法が存在しなかった神経障害性疼痛を客観診断できる可能性がある。いまだに不明な点が多いCRPS
新たながんプロファイリング診断としての超臨界流体質量分析システムの検証

本研究課題は、超臨界流体抽出(SFE)と超臨界流体クロマトグラフィー(SFC)、そして、タンデム四重極型質量分析計(MS)を接続した新たな分析システムを構築し、そのシステムを用いてヒト検体中の生体内代謝物を分析することで、新たながん診断法として応用できるのか否かを検討することを目的としている。平成29年度は、まず、構築したオンラインSFE-SFC-MS装置によるヒト検体の分析手法のバリデーションを行い、網羅的に代謝物が分析できる手法を決定した。また、オンラインSFE-SFC-MS装置による代謝物バイオマーカー測定、ならびに、代謝物バイオマーカー分析システムの確立に先立ち、その代謝物バイオマーカー候補を見出すため、液体クロマトグラフ質量分析計によるがん患者、ならびに、健常者検体の血中代謝物分析を実施した。がん種としては、大腸がん、膵がんなどを対象とし、いくつかの代謝物バイオマーカー候補を決定することができた。なお、代謝物バイオマーカー候補の選別の際には、その対象代謝物の分析安定性など分析面での問題点や、がん種間の比較による特異性の高いバイオマーカーの検討などを考慮した。次に、オンラインSFE-SFC-MS装置に基づいた手法を用いて、代謝物バイオマーカー候補の分析を開始した。なお、がん患者検体、ならびに、健常検体分析に先立ち、ヒト検体を用いた分析バリデーションを実施し、分析面での問題がないことを確認している。現在、大腸がんや膵がんなどのがん患者検体、ならびに、健常検体の分析を進めている。平成29年度の段階で、オンラインSFE-SFC-MS装置を用いた分析システムの構築、ならびに、その分析システムを用いた代謝物バイオマーカー候補の分析を開始できており、おおむね順調に、研究課題が進展していると判断している。平成29年度に引き続き、平成30年度もオンラインSFE-SFC-MS装置を用いた分析システムによるがん患者検体の分析を進め、平成30年度前半までに、その分析を終了し、この実用化に向けた検討、評価を進めていく計画にしている。本研究は、超臨界流体抽出と超臨界流体クロマトグラフィーにタンデム四重極型質量分析計を接続した新しい分析系を構築し、その分析系の「がんプロファイリング診断システム」への適用の可能性について検証することを目的とした。はじめに、オンライン超臨界流体抽出(SFE)-超臨界流体クロマトグラフィー(SFC)-質量分析(MS)装置を用いることで、ヒト血清中に存在する代謝物が、より感度よく分析できるのか否かについて検討した。本検討では、血清をスポットした乾燥血清スポット(DSS)を使用した。まず、SFC-MSによる血中代謝物分析において、最適なカラムの選定を行った。続けて、SFCにおいてモディファイヤーとして使用する溶媒、ならびに、そのグラジエント条件など、最適条件の検討を実施した。次に、SFE-SFC-MSの状態での血中代謝物分析の最適条件の検討を実施した。これらの順で分析条件の検討を実施し、SFE-SFC-MS装置において、ヒト血清中に存在する代謝物をより感度よく分析できる最適条件を決定した。また、本研究課題の最終目標であるオンラインSFE-SFC-MS装置によるバイオマーカー測定、ならびに、そのバイオマーカー分析システムの構築に先駆け、代謝物バイオマーカー候補を見出すため、液体クロマトグラフ質量分析計(LC/MS)を用いて、がん患者、ならびに、健常者の血中代謝物分析を開始した。はじめに、対象としたがん種は、口腔がん、膵がん、大腸がんで、平成29年度での代謝物バイオマーカー候補選定に向けて、現在、血液検体の分析を進めている。平成28年度に実施した研究により、SFE-SFC-MS装置において、ヒト血清中に存在する代謝物をより感度よく分析できる最適条件を決定でき、また、本研究で対象とする代謝物バイオマーカー候補の選定に目途もつきつつあるので、ほぼ計画通りに研究が進んでいると判断している。

平成29年度の段階で、オンラインSFE-SFC-MS装置を用いた分析システムの構築、ならびに、その分析システムを用いた代謝物バイオマーカー候補の分析を開始できており、おおむね順調に、研究課題が進展していると判断している。平成29年度も、平成28年度に引き続き、本研究で対象とする代謝物バイオマーカー候補の探索を実施し、平成29年度中にその選定を終了する。また、選定された代謝物バイオマーカー候補を対象として、SFE-SFC-MS装置における分析条件の再検証等を実施し、オンラインSFE-SFC-MS装置による代謝物バイオマーカー分析システムの構築に向けたデータ収集を進める。平成29年度に引き続き、平成30年度もオンラインSFE-SFC-MS装置を用いた分析システムによるがん患者検体の分析を進め、平成30年度前半までに、その分析を終了し、この実用化に向けた検討、評価を進めていく計画にしている。
全結腸以上広範無神経節症根治術後の水分・電解質代謝に関する実験的研究

全結腸以上広範無神経節症ラットに対し、ileoendorectal pull through手術を行うとともに、腸管温存の部位別優劣を検討した。すなわち、無神経節腸管をパッチとして用いるが、部位により無パッチ群、右側結腸パッチ群、横行結腸パッチ群、左側結腸パッチ群、sham手術群の5群に分け、便性・便量、腸管通過時間、体重増加率、血液一般検査、血清総蛋白値、血清電解質およびCoopersteinの方法によりパッチ部位における水分・電解質吸収能を比較検討した。便性ではsham手術群以外は軟便で、便量では無パッチ群が他の群に比べ有意に多く、また会陰部に膿瘍形成などの病変を示した。腸管通過時間でも無パッチ群が他の群に比べ短かった。術後4週間の体重増加率では、無パッチ群ー30.9±3.7%、右側結腸パッチ群が+5.1±1.7%、横行結腸パッチ群で-3.4±4.0%、左側結腸パッチ群で-1.8±4.2%、sham手術群で+12.7±1.5%で無パッチ群に対し、他の群が有意に良好であった。血液検査では、ヘモグロビン値は各群に有意差はなく、またNa濃度は無パッチ群で139.8±1.8mEq/Lで右側結腸パッチ群に比べ有意に低値を示した。K濃度、C1濃度については各群間に有意差はなかった。血清総蛋白濃度ではやはり無パッチ群で低値を示し、右側結腸パッチ群、横行結腸パッチ群、sham手術群との間に有意差を示した。次にパッチ部位における水分・電解質吸収能の測定の結果、無パッチ群に比しパッチ群で吸収率は良好で、パッチ群の中でも右側結腸パッチ群の吸収率が良好であった。以上のように今回の検討から、右側結腸温存が他の部位の温在に比べ優れていることが示唆された。
消化管GLP-1産生細胞におけるペプチドセンシング機構の解析

消化管の粘膜上皮には内分泌細胞(L細胞など)が散在し、管腔内に流入してきた食品成分(栄養素)を感知することで、様々なホルモンを血液中に分泌する。インスリンの合成促進作用、いわゆるインクレチン作用を持つGLP-1(Glucagon-like peptide-1)は、L細胞から分泌される。このL細胞が消化の過程で生じたペプチドを感知している可能性があることから、本研究では、内分泌細胞であるL細胞がどのようなメカニズムでペプチドを感知するのかを解明することを目的としている。NCI-H716 (L細胞)を用いて、プレプログルカゴンの発現量を指標に、GLP-1の発現制御を解析した。これまでに報告されているEPA(eicosapentaenoic acid)、DHA(docosahexaenoic acid)によるGLP-1誘導に関しては、定量PCR法にてGLP-1(pre-proglucagonのmRNA)の発現誘導を確認した。トウモロコシに含まれる難消化性タンパク質であるZeinのアミノ酸のコンセンサス配列をもとにデータベース解析を行い、複数の候補となる合成ペプチドを用いて効果を検討した。合成ペプチド1 (PYLPSIIASVCENPTLQPYRL、純度93.39%)、合成ペプチド2 (LQQQLLPFSQLATAYSQQQQFLPFNQL、純度82.76%)、合成ペプチド3 (YQQFAANPATLLQLQQLLTFVQLAL、純度95.1%) (ペプチド1,2,3は北海道システム・サイエンスにて合成)。それぞれのペプチドを50%EtOHで溶解し、1 h細胞を刺激した。合成ペプチドを用いた場合、ペプチド1及びペプチド3はZein同様にGLP-1(pre-proglucagonのmRNA)の発現を強く誘導した。肉加水分解物への応答の場合、ERK(extracellular signal-regulated kinase1/2)とp38MAPK(mitogen-activated protein kinases)のシグナルが関与することが報告されているが、Zeinおよび合成ペプチドでは、これらのタンパク質の活性化に影響を与えなかった。ZeinによるGLP-1誘導には、既存のカスケードとは異なる可能性を得た。そこで、Zeinおよび合成ペプチドで刺激した細胞のRNAを抽出し、マイクロアレイ法を用いて候補遺伝子の探索を行い、複数の候補遺伝子を得た。現在、これらの上流遺伝子および下流遺伝子の活性化等の影響を解析中である。NCI-H716 (L細胞)が浮遊細胞であるので、3次元培養などを用いて免疫染色を検討中である。研究計画にしたがって、ファーウエスタンブロット解析、プロテオーム解析の準備を進めている。これまでに報告されているEPA(eicosapentaenoic acid)、DHA(docosahexaenoic acid)によるGLP-1誘導に関しては、半定量PCR法では確認できず、定量PCR法にて解析を行っている。トウモロコシの加水分解物ZeinHのアミノ酸のコンセンサス配列をもとにデータベース解析を行い、複数の候補となる合成ペプチドを用いて、効果を現在解析中である。また、ペプチド以外による新規活性化因子として、5,7,3',4'-テトラメトキシフラボン、7,8, 3',4'-テトラメトキシフラボン、タンゲレチン、ノビレチン、ヘプタメトキシフラボン等のフラボノイドによる効果も検討中である。また、骨芽細胞が分泌するリポカリン2によるGLP-1誘導の可能性に関しても解析を進めている。これまでにGLP-1を誘導すると報告されている因子を用いて検討したが、mRNAの変化がわずかであることから、精度の高い検出法を用いて解析を進める必要がある。この点で、解析が予想していたよりも遅れている。研究計画書の当初計画どおりに進まない時の対応に従って、新規分子の同定を試みる。

合成ペプチド1 (PYLPSIIASVCENPTLQPYRL、純度93.39%)、合成ペプチド2 (LQQQLLPFSQLATAYSQQQQFLPFNQL、純度82.76%)、合成ペプチド3 (YQQFAANPATLLQLQQLLTFVQLAL、純度95.1%) (ペプチド1,2,3は北海道システム・サイエンスにて合成)。それぞれのペプチドを50%EtOHで溶解し、1 h細胞を刺激した。合成ペプチドを用いた場合、ペプチド1及びペプチド3はZein同様にGLP-1(pre-proglucagonのmRNA)の発現を強く誘導した。肉加水分解物への応答の場合、ERK(extracellular signal-regulated kinase1/2)とp38MAPK(mitogen-activated protein kinases)のシグナルが関与することが報告されているが、Zeinおよび合成ペプチドでは、これらのタンパク質の活性化に影響を与えなかった。ZeinによるGLP-1誘導には、既存のカスケードとは異なる可能性を得た。そこで、Zeinおよび合成ペプチドで刺激した細胞のRNAを抽出し、マイクロアレイ法を用いて候補遺伝子の探索を行い、複数の候補遺伝子を得た。現在、これらの上流遺伝子および下流遺伝子の活性化等の影響を解析中である。種々のペプチドの効果を、定量PCR法を用いてすばやく確認するとともに、ウエスタンブロット方、エライザ法などにより検討する。また、データベースのみではなく、食物繊維を含む難消化性成分にも着目し、多面的なスクリーニングを進めていく予定である。合成ぺプチ以外に、加水分解物ZeinHを標識するなどの工夫を行い解析する必要がある。NCI-H716 (L細胞)が浮遊細胞であるので、3次元培養などを用いて免疫染色を検討中である。研究計画にしたがって、ファーウエスタンブロット解析、プロテオーム解析の準備を進めている。消耗品の購入にて3円の端数が生じました。ファーウエスタンブロット解析ならびにプロテオーム解析を今年度行う予定であったが、次年度に変更したため。