hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
脳腸相関制御による大腸運動の解明ー新規大腸運動機能改善剤の開発に向けてー

大腸運動の研究は主にイヌを用いて行われており、その収縮様式がcolonic motor complexes(CMCs)とgiant migrating contractions(GMCs)の2つに分類され、GMCsが遠位結腸及び直腸に伝播することで排便が起こることや、食事によって結腸運動及び排便が誘導される胃結腸反射の存在などが分かっている。平成30年度は、消化管運動研究小型モデル動物のスンクスを用いた胃及び大腸収縮運動同時測定系に加え、24時間連続行動観察実験系を確立した。24時間の消化管運動測定及び行動観察を行った結果、排便の際には必ずヒトやイヌで報告されているGiant migrating contractions(GMCs)様の強収縮が大腸において観察された。スンクスにおいては排便の前後に高確率で摂食や飲水が見られること、また、摂食や飲水が集中して起こり、その際には高確率で排便が起こることが分かった。従って、スンクスにおいて排便と食事及び飲水の間には深い関連があり、ヒトやイヌで報告されている胃結腸反射がスンクスでも見られる可能性が示された。胃と大腸収縮運動の同時測定系の確立に時間を要したが、現在、薬剤の投与方法についてはすでに確立しており、今後、各種神経伝達物質のアゴニストやアンタゴニストを用いた解析を行っている。本年度は、確立した胃と大腸収縮運動の同時測定系を用いて、アトロピンとヘキサメソニウムの投与を行い、GMCにコリン作動性神経が関与しているかを明らかにする。また、ヨヒンビンなどの薬剤を用いて交感神経の関与についても調べる。さらに、各種ホルモン(モチリン、グレリン、CGRP、セロトニン、サブスタンスP、GLP-1、CCK、PYY、ソマトスタチン)を投与して、GMCに及ぼす影響と排便との関連を明らかにする。In vivo実験に加えて、オーガンバスを用いた検討も行い、大腸収縮運動のメカニズムを解明する予定である。消化管運動は、交感神経や迷走神経などの神経系と栄養素やホルモンなどの液性因子の緻密な制御によって調節されている。胃・小腸運動は空腹期と食後期では全く異なったパターンを呈するが、大腸では空腹期と食後期でパターンは変わらずに収縮の頻度が増加することが知られており、大腸運動メカニズムの解明はヒトへの臨床応用に重要である。本研究は、トランスレーショナル研究に有用であり、ヒトと類似した胃運動様式を示すことが知られている食虫目スンクスを用いて大腸運動調節機構を明らかにすることを目的に研究を行った。平成29年度は、大腸組織片を用いたオーガンバス実験系と麻酔下と意識下スンクスの大腸に最適化したフォーストランスデューサーの作製及び大腸運動の測定系の確立を行い、セロトニンの効果を検討した。オーガンバス実験の結果、セロトニンの投与による大腸収縮効果は見られなかった。また、モチリンの投与も同様に大腸収縮運動には影響を及ぼさなかった。スンクス大腸用の小型フォーストランスデューサーを作成して大腸漿膜に逢着し、頸静脈に薬剤投与用カテーテルを留置して麻酔下及び意識下での大腸収縮運動の測定を行った。意識下スンクスにおいて空腹期の大腸収縮運動を測定することに成功し、現在はセロトニン、モチリンそしてグレリンなどのホルモン投与を行い、大腸収縮運動への効果を検討している。本年度は、スンクスでの大腸収縮運動調節機構を検討するためにin vitroオーガンバス実験の確立を行った。オーガンバス実験では、スンクス大腸を摘出しスンクスの自発性収縮運動を記録した。次に、セロトニンによるスンクス大腸収縮運動を検討した結果、アセチリコリン(10-5 M)は縦走筋方向に約10 gの収縮を惹起した一方で、セロトニン10-10から10-7 Mは大腸の収縮運動を刺激しなかった。セロトニン以外にもモチリンの投与を行ったが、現在まで収縮反応は見られていない。当初計画ではグレリンなどのホルモンの投与も計画していたが、実験系の確立に時間を要したので、次年度にグレリン及びコレシストキニンなどの投与を行う予定である。スンクス大腸収縮運動をin vivoで測定するために、スンクス小腸用のフォーストランスデューサーを大腸測定用に改良し小型化に成功した。作製したフォーストランスデューサーを大腸漿膜に逢着して大腸収縮運動を測定した結果、麻酔下の大腸収縮運動は低振幅で、30分から60分間隔で見られることを明らかにした。また、頚静脈カニューレへのセロトニン(10 μg/kg)投与の結果、自発性収縮と同程度の振幅の収縮が惹起された。現在、モチリンとグレリンの投与を行い、大腸収縮運動に及ぼす影響を検討している。スンクス大腸収縮運動に関与する受容体の網羅的解析は、生理学的実験を優先したため遅延しているが、次年度に行う予定である。

スンクスにおいては排便の前後に高確率で摂食や飲水が見られること、また、摂食や飲水が集中して起こり、その際には高確率で排便が起こることが分かった。従って、スンクスにおいて排便と食事及び飲水の間には深い関連があり、ヒトやイヌで報告されている胃結腸反射がスンクスでも見られる可能性が示された。胃と大腸収縮運動の同時測定系の確立に時間を要したが、現在、薬剤の投与方法についてはすでに確立しており、今後、各種神経伝達物質のアゴニストやアンタゴニストを用いた解析を行っている。本年度は、スンクスでの大腸収縮運動調節機構を検討するためにin vitroオーガンバス実験の確立を行った。オーガンバス実験では、スンクス大腸を摘出しスンクスの自発性収縮運動を記録した。次に、セロトニンによるスンクス大腸収縮運動を検討した結果、アセチリコリン(10-5 M)は縦走筋方向に約10 gの収縮を惹起した一方で、セロトニン10-10から10-7 Mは大腸の収縮運動を刺激しなかった。セロトニン以外にもモチリンの投与を行ったが、現在まで収縮反応は見られていない。当初計画ではグレリンなどのホルモンの投与も計画していたが、実験系の確立に時間を要したので、次年度にグレリン及びコレシストキニンなどの投与を行う予定である。スンクス大腸収縮運動をin vivoで測定するために、スンクス小腸用のフォーストランスデューサーを大腸測定用に改良し小型化に成功した。作製したフォーストランスデューサーを大腸漿膜に逢着して大腸収縮運動を測定した結果、麻酔下の大腸収縮運動は低振幅で、30分から60分間隔で見られることを明らかにした。また、頚静脈カニューレへのセロトニン(10 μg/kg)投与の結果、自発性収縮と同程度の振幅の収縮が惹起された。現在、モチリンとグレリンの投与を行い、大腸収縮運動に及ぼす影響を検討している。スンクス大腸収縮運動に関与する受容体の網羅的解析は、生理学的実験を優先したため遅延しているが、次年度に行う予定である。本年度は、確立した胃と大腸収縮運動の同時測定系を用いて、アトロピンとヘキサメソニウムの投与を行い、GMCにコリン作動性神経が関与しているかを明らかにする。また、ヨヒンビンなどの薬剤を用いて交感神経の関与についても調べる。さらに、各種ホルモン(モチリン、グレリン、CGRP、セロトニン、サブスタンスP、GLP-1、CCK、PYY、ソマトスタチン)を投与して、GMCに及ぼす影響と排便との関連を明らかにする。In vivo実験に加えて、オーガンバスを用いた検討も行い、大腸収縮運動のメカニズムを解明する予定である。物品費用、旅費共に申請金額よりも小額となり次年度使用額が生じた。これは計画よりも研究が若干遅れていることも影響している。平成30年度はこれらを物品費用、旅費として使用予定である。研究が予定よりも若干遅れ、その関係で購入予定だった薬剤等を購入しなかったため使用予算が予定額を下回った。今年度は、これらの薬剤購入や成果発表、調査旅費などで使用予定である。
銀河団高温ガスの運動学とSXI搭載X線CCDの開発研究

フェニックス銀河団は2011年にSouth Pole Telescopeにより発見され、z=0.596に位置する。その後の多波長観測から、この銀河団の中心に位置する銀河の中で、800M・/yrという非常に大きな星形成率を持つことが明らかになった。これほど大きな星形成率を持つ銀河団中心銀河は存在しない。先行研究では、銀河団高温ガスがX線放射により冷え、中心銀河に降着し(cooling flowと呼称)、そのガスが星形成を引き起こしているという主張がなされている。Cooling flowは本来全ての銀河団の中心領域で起きうる現象だが、冷えている途中のガスなどはいまだ未発見で、何らかのメカニズムで抑制されていると考えられていた。もしかするとフェニックス銀河団でのみ、cooling flowが抑制されていない可能性がある。抑制源として考えられているのが、中心銀河に存在する超巨大ブラックホール(SMBH)の活動である。我々は中心銀河に存在するSNBHの観測を通して、フェニックス銀河団の特異性を明らかに知るため、新たにX線観測を行った。高い分光性能とワイドバンド観測が可能なX線天文衛星「すざく」を用いて、我々はフェニックス銀河団の観測を行った。その結果、先行研究では未発見の中性鉄K輝線を初めて検出した。中心銀河の中に存在するSMBHの周囲に中性物質が大量に存在していることを示唆する。またX線スペクトルに強い吸収成分が存在し、埋もれたSMBHであることが判った。中性物質の柱密度と中性鉄K輝線の強度には相関が、SMBHのX線光度と輝線強度には反相関の関係があることが、銀河団に付随しない銀河のX線観測から示唆されている。このフェニックス銀河団の埋もれたSMBHの場合、柱密度と輝線強度には他の銀河と同様の相関を示すが、X線光度と輝線強度の関係は、他の銀河よりも大きい値を持つことが判った。この結果は、銀河団中心銀河と他の銀河で、SMBHの周辺環境が異なっていることを示唆する。その要因の1つがcooling flowかもしれない。これらの結果をまとめ、学術論文として出版した。(抄録なし)本年度は、銀河団研究の対象としてペルセウス銀河団を選び、この銀河団の中心から周辺部までの重元素分布を測定した。今回は、酸素、ネオン、マグネシウム、シリコン、硫黄、鉄に着目した解析を行った。日本のX線天文衛星「すざく」搭載X線CCDカメラの観測データを用いて、中心から1.3Mpc(銀河団の半径の0.8倍に対応)までの領域の重元素分布を測定した。世界で初めて、酸素などの比較的軽い元素の組成比を銀河団周辺部まで測定したことになる。解析の結果、どの元素も周辺部では一定の重元素量で存在していることがわかった。さらに元素ごとの組成比は、重力崩壊型超新星爆発により生成されると期待される組成比とほぼ等しいことを明らかにした。酸素などは初期宇宙(赤方偏移が24)に大量に生成・拡散したと考えられており、この結果と合わせて考慮すると、この時代に鉄も大量に生成され、酸素などと共に銀河団の周辺部へ拡散していくという描像が考えられる。この描像は周辺部まで解析を行った本研究で本年度は、マグネシウムと鉄の関係を学術論文としてまとめた。また、次期X線天文衛星ASTRO-Hに搭載される新型X線CCDカメラであるSXI用のCCD素子の開発を行った。高エネルギー加速器研究機構のシンクロトロン放射光施設にて軟X線(0.1-2keV)をCCDに照射し、応答の測定を行ったデータを解析した。測定したCCDはSXI用のプロトモデル素子に当たり、SXIがどのような応答を示すかを知るために重要なCCDである。測定結果は現在運用中のX線天文衛星XMM-Newtonと同程度かより単色の応答であることがわかり、実用観測に耐えうる応答であることを証明した。この結果は学術論文としてまとめており、すでに論文誌NIMAから出版されている。

中性物質の柱密度と中性鉄K輝線の強度には相関が、SMBHのX線光度と輝線強度には反相関の関係があることが、銀河団に付随しない銀河のX線観測から示唆されている。このフェニックス銀河団の埋もれたSMBHの場合、柱密度と輝線強度には他の銀河と同様の相関を示すが、X線光度と輝線強度の関係は、他の銀河よりも大きい値を持つことが判った。この結果は、銀河団中心銀河と他の銀河で、SMBHの周辺環境が異なっていることを示唆する。その要因の1つがcooling flowかもしれない。これらの結果をまとめ、学術論文として出版した。銀河団周辺部の重元素分布の測定について、最も観測データ量の多いペルセウス銀河団についてはすでに一通りの解析を終えている。本研究の成果を国際的な銀河団研究会にて口頭発表を行った。測定した重元素分布のうち、鉄とマグネシウムの結果については短い論文にまとめて学術論文誌に投稿し、受理されており、現在出版中である。また、SXI搭載X線CCDの開発については、プロトモデルCCD素子のX線応答関数の測定結果を学術論文としてまとめた。学術論文誌NIMAに投稿し、受理され、すでに印刷されている。測定した重元素分布のうち、酸素とネオンの結果についてはまだ学術論文としてまとめていない。今後これらをまとめ、学術論文誌に投稿する。一方、銀河団中へ重元素が拡散していくメカニズムの解明も必要である。本研究で得られた重元素分布やその総質量をもとに、重元素生成の時期や輸送方法を研究する。銀河の中心に存在する超巨大ブラックホール(太陽の1億倍以上の質量)が輸送の一端を担っている可能性もあり、銀河団と合わせて解析を進める。。SXIの開発は、実際に宇宙に打ち上げる筐体・部品の製造・試験が始まるフェーズに移行しつつある。実際に打ち上げられるX線CCDの選定や性能評価を行う必要がある。プロトモデルCCD素子で実際に性能評価を行い、それを学術論文化した経験を生かし、これらの作業を進める。(抄録なし)
肝-骨格筋臓器連関に着目したマルチモダリティによる生活習慣病の包括的病態評価

生活習慣病の発生には、糖脂質代謝の異常が深く関与している。これら糖脂質代謝は、主に肝臓と骨格筋とが密接に関連しながらコントロールされていることが知られている。しかし、実際にどのような形で関連しているかという詳細な病態生理に関しては、依然不明な点が多い。これらの解明には、「肝臓のみ」あるいは「骨格筋のみ」といった縦断的な研究手法ではなく、「肝臓および骨格筋の機能を同時に評価する研究手法」が必要である。本研究の目的は、複数の生体機能情報をマルチモダリティ(MRI,超音波)により同時期に測定・解析し、血液や身体データといった血液生化学データと比較することによって、生体内の代謝機能を肝-骨格筋臓器連関という観点で捉え、生活習慣病における病態生理を解明するための正常データのライブラリを構築することである。肝臓および骨格筋において、安定的かつ正確にMRIデータ「MR spectroscopy :骨格筋の細胞内脂肪(IMCL)・細胞外脂肪(EMCL),肝臓内脂肪)/MR perfusion(骨格筋の微小循環), MR diffusion(骨格筋の拡散固有値)」と超音波データ「Controlled Attenuation Parameter (CAP) :肝臓内脂肪量/Fibroscan :肝臓の硬度)を取得するための撮像パラメータの最適化に成功した。さらに、本研究では、最適化した撮像パラメータにより、健常ボランティアの「MRI、超音波、血液および体組成(肝機能,筋酵素,血糖値,インスリン値,脂質,遊離脂肪酸,脂肪酸組成,身長,体重)データ」を取得し、正常データライブラリの構築に成功した。このライブラリは、今後、食事療法と運動療法を要する肥満者および慢性肝疾患患者等の疾患群と比較する際の基礎データとなるため、本研究の臨床的意義は大きい。国民的レベルで健康意識が高まりつつある中、生活習慣病は注目を集めている疾患である。しかし、その病態生理に関しては依然不明な点が多い。本申請者はこの原因をこれまでの研究が、特定の臓器のみに着目した縦断的な研究にとどまっていたためであると考えている。本申請者は、マルチモダリティ(MRI,超音波)を用いて複数の生体機能情報を同時期に測定・解析し、血液や身体データといった血液生化学データと比較することによって、生体内の代謝機能を肝-骨格筋臓器連関という観点で捉え、生活習慣病における病態生理を解明することを目的に研究を進めている。平成25年度は、肝臓および骨格筋において、安定的かつ正確にMRIデータ(MR spectroscopy、MR perfusion、MR diffusion)と超音波データ(硬度、脂肪量)を取得するための撮像パラメータを最適化に成功した。さらに、最適化した撮像パラメータにより、健常ボランティアの「MRI、超音波、血液および身体データ」を取得してライブラリ化した。測定および解析したデータは、下記の通りである。(血液)・(身体):肝機能検査、筋酵素、血糖値、インスリン値、脂質、遊離脂肪酸、脂肪酸組成/身長、体重、体組成(筋肉量、脂肪量)平成25年度の研究により、撮像パラメータの最適化と健常ボランティアデータのライブラリ化に成功した。この成果は、疾患群と比較する際の基礎データとなるため、その意義は大きい。本研究を実施するにあたっては、測定原理的に高磁場MRI装置を使用することが極めて有利である。当施設は、臨床機として国内最高磁場の3 Tesla MRI装置を備えており、本研究のために使用することが可能であった。本申請者並びに研究分担者は、肝臓と骨格筋を対象に、2007年よりMRI(MR spectroscopy、MR perfusion、MR diffusion)および超音波に関する技術的・臨床的研究を進め、その蓄積した知識と手法を本研究にも十分活用することができた。以上の理由により、本研究は申請通りに順調に進捗していると判断できる。本研究の対象数は、健常ボランティア、肥満者、慢性肝疾患患者、それぞれ50名(計150名)を目標にしている。

当初計画通り、平成26年度も平成25年度に引き続き、データ取得を実施する。これに加えて最終年度である平成26年度は、本手法の治療効果判定への応用を目指す。本検討は、内科医と密接に連携して進める。食事療法と運動療法を要する肥満者および慢性肝疾患患者を対象とし、これらの治療期間にMRI・超音波・身体・血液データを取得する。患者の選定および食事療法の内容に関しては、研究分担者の内科医が中心となり、運動療法の内容に関しては、専門家である本申請者が中心となって決定する。採取したデータから、前年度までに得られたデータに基づき、治療前後の変化(治療効果)に関して評価を行う。研究を進めるうえで必要な備品や消耗品を、計画額よりも低いコストで得られたことが主な理由である。また、臨床業務の調整が上手くいかず、情報収集のために予定していた学会へ参加できない事態になったことも理由の1つである。物品費(180千円):MRSおよびDTIのより詳細な解析を行う目的で解析ソフトを最新版へのアップグレードを行う。/旅費(550千円):国内学会および国外学会で研究成果発表と情報収集のための学会への参加に使用する。/人件費・謝金(300千円):MRIや超音波データの取得・解析にあたっては、専門的知識と技術が必要となるため、知識提供および技術指導へ謝金として使用する。また、健常ボラティアへの謝金にも使用する。/その他(300千円):論文校閲、資料収集、通信費などに使用する。上記で総額1330千円となる。直接経費として11410円の残額になるが、これは消耗品に充てる。以上の直接経費に間接経費360千円を加え、平成26年度の研究を進める。
免疫学的側面から見たハンセン病患者の歯周病の病態解析

我々は宿主防御機能に着目した新しい歯周病診断を確立するためのモデルとしてハンセン病患者の歯周病病態を把握することを目的に,1)ハンセン病病型を考慮した上でハンセン病患者の歯周病の病状を整理すること,2)EOP患者および健常者の歯周病細菌(A.actinomycetemcomitans,P.gingivalis,P.intermedia,C.ochracea,F.nucleatum)およびM.lepraeに対する末梢血単核球の応答性を評価することを行った。その結果は以下のとおりである。1) L型患者349名およびT型患者86名について歯周病の病状を検診した結果,両病型の患者群間において平均ポケット深さ,plaque index,gingival indexおよび骨吸収率において有意な差は見られなかった。2) T型患者のP.gingivalisに対する血清IgG抗体価はL型患者のそれに比べ,またL型患者のF.nucleatumに対する抗体価はT型患者のそれに比べ高い傾向にあった。3) EOP患者由来末梢血単核球は健常者のそれに比べて,C.ochraceaに対して低い増殖応答性を示す傾向にあった。IFN-γはすべての患者において若干ながらも検出された。また,IL-6はEOP患者,健常者に関わらず高い産生性が認められた。IL-4はすべてにおいてまったく検出されなかった。また,患者および健常者のTNF-a産生について調べた結果,抗CD3抗体による非特異的な刺激時において,健常者に比べ患者の方がより多くのTNF-α産生を示すのに対し,歯周病細菌およびM.lepraeに対する特異的な応答においてはその逆であった。この結果は歯周病細菌とM.lepraeに対する応答の共通性をTNF-α産生性によって示すことができる可能性を示唆するものである。1)L型患者349名およびT型患者86名について歯周病の病状を検診した結果,両病型の患者群間において平均ポケット深さ,plaque index,gingival indexおよび骨吸収率において有意な差は見られなかった。2)T型患者のP.gingivalisに対する血清IgG抗体価はL型患者のそれに比べ,またL型患者のF.nucleatumに対する抗体価はT型患者のそれに比べ高い傾向にあった。3)EOP患者由来末梢血単核球は健常者のそれに比べて,C.ochraceaに対して低い増殖応答性を示す傾向にあった。タイプ1サイトカインに属するIFN-gはすべての患者において若干ながらも検出された。また,タイプ2サイトカインにおいて,IL-6はEOP患者,健常者に関わらず高い産生性が認められた。また,M.lepraeに対する応答性はEOP患者,健常者間で調べる限りにおいて差はなかった。以上のことから,今年度はハンセン病患者由来末梢血単核球の歯周病細菌およびM.lepraeに対する応答性を評価する予定である。
電気化学的脱塩手法がPC部材の力学的挙動に与える影響

デサリネーションはコンクリート中の塩化物イオン(Cl^-)の除去を目的とする電気化学的手法である。デサリネーションはこれまで塩害により劣化したRC構造物への適用が検討されており、PC構造物への適用は見送られてきた。これは、デサリネーションをPC部材に適用する際の最大の問題点として、PC鋼材の水素脆化の可能性があるためである。そこで、本研究ではあらかじめ塩化物を混入したプレテンションPC角柱供試体およびPCはり部材にデサリネーションを施した時の、PC鋼材の水素脆化程度が部材としての力学的挙動に与える影響を検討した。本研究から、得られた結果をまとめると次のようになる。1.熱処理材であるPC鋼棒と冷間加工材であるPC鋼線の水素脆化挙動を比較した結果、本実験で用いた鋼材に関しては、冷間加工材の方が厳しい水素脆化挙動を示した。この様な傾向は鋼材の引張強度により、統一的に解釈することができた。2.通電処理後のPCはり供試体に対する静的曲げ載荷試験の結果、水素脆化に起因するPC鋼材の破断などの脆性的な破壊状況は見られず、無処理の供試体と比較して、耐荷力や変形性能が低下する現象も見られなかった。3.通電処理を行ったPCはり供試体の主筋位置における平均ひび割れ幅は、同一荷重における無通電の供試体の平均ひび割れ幅よりも若干小さい傾向を示した。これにより、はり全体としてのたわみも通電処理により若干抑制される傾向を示した。以上より、デサリネーションによるPC鋼材の水素脆化がPC部材としての力学的挙動に与える影響は、本研究の範囲では小さいと言えるが、より安全な運用を目指して今後のさらなる検討が必要であろう。そこで、本研究ではあらかじめ塩化物を混入したプレテンションPC角柱供試体にデサリネーションを施した時の、PC鋼材の力学的および化学的性状の変化を検討することとした。本研究から、現在得られている結果をまとめると次のようになる。(1)8.0kg/m^3のCl^-を混入したプレテンション型PC供試体に通電処理を施し、低ひずみ速度引張試験を行ったところ、PC鋼材の弾性挙動と引張強度に到るまでの塑性挙動に大きな影響は見られなかったが、破断強度、絞りなどに水素脆化の影響が現れた。(2)通電処理を行った供試体のPC鋼材の吸蔵水素量測定の結果、拡散性水素の放出ピークが検出された。(3)通電処理後に1ヶ月までの静置を行ったところ、拡散性水素の第1ピーク(470K付近)が消失し、水素脆化による鋼材の破断挙動の変化も回復改善された。以上より、デサリネーションをPC構造物に適用することにより、通電期間中および処理後数週間程度において、水素脆化に起因する遅れ破壊の可能性があるが、比較的短期間でこの様な状況は改善され、さらに、塩害による劣化対策としても有効であることから、デサリネーションのPC構造物への適用は有効であると判断できる。
新たな内耳疾患予防・治療法-HSP誘導剤による内耳保護作用の検討-

難聴・めまいの原因となる末梢性内耳障害は臨床上頻度も多く、重要な疾患である。その原因は様々なものが考えられているが、その治療法となると確立されたものは少ない。そのため新たな治療法の開発が求められている。近年新たなに様々なメカニズムを有する薬剤が開発されているが、その中で我々はHSP誘導剤に着目して研究を行ってきた。HSPは熱ショックなどのストレスの他に、薬剤などによっても誘導される蛋白であり、様々な障害因子に対し、細胞内で非特異的に防御を行なうことが知られている。なかでも、GGA(Geranylgeranylgeranylacetone:テプレノン)は日本で最も多く使用されている胃粘膜保護薬であるとともに、最近ストレス蛋白HSPを安全に誘導できるHSP誘導剤としての作用があることが報告された。このHSP誘導剤である、GGAの内耳障害に対する保護効果をみるため、モルモットを用い、薬物障害(カナマイシン)モデルによる検討を行なった。その結果、GGA非投与群に比べ、GGA投与群ではABR上有意差は認められなかったが、外有毛細胞の欠損率を比較するとGGA投与群は優位にこれを抑制した。この結果は他の報告と矛盾しない結果であった。GGAによる内耳保護効果は、薬物障害モデル以外に音響外傷モデルの実験系において十分とは言えないまでも、組織学的に内耳保護効果があることが報告されている。しかしいずれの実験系においても、障害前の投与が障害後に比べてより効果が高いと言われている。すなわち、発症後の治療薬というより、予防的投与により障害を軽減する役割のある薬剤である考えられた。推測であるが、アブミ骨手術や人工内耳挿入術など内耳に侵襲のある手術に際して、予防投与を行なうことで、術後の感音難聴もしくはめまいの軽減につながる可能性があるのではないかと考えられた。難聴、めまいの原因となる末梢性内耳障害は臨床上重要な疾患である。その原因は様々なものが考えられているが、その治療法となると確立されたものは数少ない。このため新たな治療法の開発が必要であり、近年様々なメカニズムを有する薬剤が開発されている。その中で我々はHSP誘導剤に着目した。その中でも組織障害の無い、非毒性の物質によるHSP誘導剤としてGeranylgeranyl acetone(GGA)、Bimoclomol(BRLP-42)を用いる。これらHSP誘導剤を用いて内耳障害に対する保護効果を見るわけであるが、それにはまず内耳障害モデルの作成が必要となる。内耳障害モデルとして実験動物:プライエル反射正常のモルモット障害方法:1.カナマイシン(400mg/kg)皮下注2時間後にエタクリン酸(50mg)を静注するモデル。2.カナマイシン(400mg/kg)皮下注を2週間連日で行うモデル上記2つの障害モデルを用いる。内耳障害の評価はABRおよび免疫染色で行っている。このため新たな治療法の開発が求められている。近年、あらたに様々なメカニズムを有する薬剤が開発されているが、その中で我々はHSP誘導剤に着目して研究を行っている。HSPとは熱ショックなどのストレスや、薬剤などにより細胞内に誘導される蛋白であり、様々な攻撃因子に対し、細胞内で非特異的な防御を担うものである。なかでもGGA (Geranylgeranylacetone:テプレノン)は、日本で最も多く使用されている胃粘膜保護薬であるが、最近ストレス蛋白HSPを安全に誘導する作用があることが報告されている。このHSP誘導剤であるGGAの内耳障害に対する保護効果をみるため、モルモットを用い、(1)薬物障害モデル(カナマイシン、エタクリン酸投与)(2)音響外傷モデル(強大音負荷;115dB 4時間負荷もしくは130dB 3時間負荷)などの内耳障害モデルを作成し、GGAの内耳保護効果について検討を行っている。

GGAによる内耳保護効果は、薬物障害モデル以外に音響外傷モデルの実験系において十分とは言えないまでも、組織学的に内耳保護効果があることが報告されている。しかしいずれの実験系においても、障害前の投与が障害後に比べてより効果が高いと言われている。すなわち、発症後の治療薬というより、予防的投与により障害を軽減する役割のある薬剤である考えられた。推測であるが、アブミ骨手術や人工内耳挿入術など内耳に侵襲のある手術に際して、予防投与を行なうことで、術後の感音難聴もしくはめまいの軽減につながる可能性があるのではないかと考えられた。
微生物感染レセプターヌクレオリンを利用した抗腫瘍物質の細胞内導入法の探索

多機能性分子ヌクレオリンの新しい結合分子として細胞増殖に関連する分であるHABP4、NUDT5、HMGB1を見出した。また老化関連分子である糖化最終産物(AGEs)の中で毒性のAGEとして知られるグリセルアルデヒド(GCA)とグリコールアルデヒド(GOA)由来のAGEsがヌクレオリンを介して腹腔マクロファージによって認識されることを見出した。さらにアルツハイマー病と関連のある分子であるベータアミロイドとヌクレオリンを介してミクログリアが認識する受容体であることを示した。2、nucleolin結合候補分子のSPR法による解析多機能性分子ヌクレオリンの新しい結合分子として細胞増殖に関連する分であるHABP4、NUDT5、HMGB1を見出した。本研究では、シャトルタンパク質であるnucleolinに相互作用する分子、細胞外から細胞内への移行に関与する分子、シグナル伝達に関与する、新たな分子(タンパク質)を見出すために「nucleolin結合性の機能分子の探索」を行う。まず、1)「nucleolinの細胞内外の結合性機能分子の探索」について、1酵母two-hybrid法、2免疫沈降法、3SPR法などの手法で、スクリーニングを行った。1)-1酵母two-hybrid法による解析;nucleolinおよびnucleolin変異体のcDNAをbait側ベクターに導入し、prey側ベクターにヒト細胞cDNAを導入したライブラリー(調製品あるいは市販品)を用いて、nucleolinの細胞表面局在および細胞内移行に関与する細胞膜関連分子(タンパク質)の検出・同定を行なったところ、数種の候補分子を見いだした。1)-2,3免疫沈降法、SPR法によるタンパク質間の結合性、相互作用の解析現在までに、免疫沈降法、およびSPR法により、見出された候補分子について、直接的にnucleolinとの結合性、結合親和性を調べており、多くの候補分子は、直接的結合が確認された。H25年度はさらに、、スクリーニングを行うとともに、候補分子とnucleolinとの結合性、や相互作用について解析を進める予定である。また、候補分子の中で、相互作用の結果、機能に変化を生じる分子があるかどうかにつて、検討しているところである。また、糖化最終産物(AGEs)の中で毒性のAGEとして知られるグリセルアルデヒド(GCA)とグリコールアルデヒド(GOA)由来のAGEsがチオグリコレート刺激マウス腹腔マクロファージによって認識されることを見出し、SPR法により、nucleolinがGCA-BSAとGOA-BSAの認識に関連することを明らかにした。また、モノマーおよびフィブリルAβ42がマウスミクログリアのEOC2細胞によって貪食されたが、ペプチド1-40(Aβ40)βアミロイドは弱く貪食されたこと、さらにSPR法により、nucleolinが強くAβ42と会合するが、弱くしかAβ40と関連付けることから、nucleolinは、ミクログリアが単量体および原線維Aβ42を認識することを可能にする受容体であることを示した。衛生化学、生化学1)当初の予定通り、ツーハイブリッドシステムにより、予想を上回る数の候補分子が見いだされた。その点は大きな成果である。それらの個々の候補分子について、SPR法などによる解析を行うことに時間を使ったため、次のステップに進む段階に至っていない。2)私(研究代表者)が、平成25年度中に、東京薬科大学から高崎健康福祉大学に異動することになったため、研究室の整理、引っ越し、立ち上げなどで、本課題の進行を、一時中断せざるを得ない時期があった。平成26年度4月から現在までは新しい研究環境の構築を行っているところである。すでに、two-hybrid法は確立しており、進めるにつれて、次々とnucleolin結合候補分子が見出されているところである。その後の解析が律速になっているが、ここまでは、おおむね順調に進展しているといえる。新しい研究環境の構築ができ次第、引き続き、課題の研究を推進する予定である。研究代表者の移動と新研究室の立ち上げに伴い、予定より遅れてしまっている点は、ご配慮いただけたらとお願い申し上げます。また既にnucleolinの細胞外リガンドとして知られている物質(ポリラクトサミン糖鎖、糖タンパク質、変性糖タンパク質、核酸)あるいは薬物(nucleolin結合性アプタマーAS1411およびペプチド性antagonist HB19等)とnucleolinが結合するのに必要なドメインについては、ほとんど不明である。そこでnucleolin変異体を各種作製し、nucleolin分子中の各リガンドとの結合に必要なドメインをフローサイトメトリ-法、SPR法(surface plasmon resonance法)を用いて同定する。1)研究代表者、所属機関が変わることとなったため、研究室の移動にともない、計画全体を遅らせざるを得なかった。また、2)新しく移動した先では、より多くの物品の購入が予想されたため、次年度にできるだけ本助成金を残した方が適切であると判断した。新しい所属機関で、研究環境のセットアップや、その後の研究遂行に使用する予定である。見い出された、nucleolin結合性タンパク質について、多面的に検討を加えた後、注目すべき分子(新規分子)については、さらに詳細なタンパク質相互作用についての解析を実施する。

研究費は、酵母twohybrid系、候補タンパク質(レコンビナント体)、それらタンパク質に対するモノクローナル抗体、SPR法の固定チップ、哺乳動物細胞培養系その他それらの実験を遂行するために物品の購入、あるいは培養関連機器に充てる予定である。
材料の初期損傷と閉じたき裂の計測評価を遠隔から行える非線形レーザ超音波法

材料・構造物の安全と安心のため、閉じたき裂を評価できる非線形超音波法が期待されているが、レーザ超音波法による遠隔からの非線形超音波法は実現していない。そこで、一定出力のレーザパルスを繰り返し照射して、被験体上の複数点で受信したレーザ干渉計波形のフィルタ出力を用いて、シフト加算を行って映像を形成し、異なるレーザエネルギーの映像の差分を取る非線形レーザ超音波法を開発した。研究代表者らの減衰2重節点モデルを用いて、実験のパラメータを用いるシミュレーションを行って、10MPaの閉口応力で閉じた縦き裂を近接して配置されたボイドから識別して検出できることを示し、開発法の有効性を検証した。材料・構造物の安全と安心のため、閉じたき裂を評価できる非線形超音波法が期待されている。一方、遠隔からの非破壊検査にはパルスレーザで発生した超音波を用いるレーザ超音波法が有用であるが、非線形超音波は実現していない。そこで、振幅差分を用いた非線形レーザ超音波法を定式化し、その可能性を検証する。最初に定式化を行った。すなわち、一定出力のレーザパルスを繰り返し照射して、被験体上の複数点で受信したレーザ干渉計波形のフィルタ出力を用いて、シフト加算を行って映像を形成する。次に送信レーザのパルスエネルギーをa倍した場合の映像から元の映像のa倍を引くことで、線形応答の映像を消去し、き裂の開閉振動による非線形超音波映像を抽出する。次に、研究代表者らが提案した減衰2重節点モデル(山中ら:Applied Physics Express, 4, (2011),076601)を用いて、10MPaの閉口応力で閉じた縦き裂とボイドを近接して配置して、シミュレーションを行った。音源から1 mm伝搬した時の変位振幅が100 nmと設定した結果、振幅差分法によりき裂をボイドの映像と独立に映像化できた。さらに、送信レーザのパルスエネルギーが100mJのレーザ超音波装置を用いて、シミュレーションと同じプロセスで推定した通りの信号対雑音比で、ボイドの映像化を行うことができた。一方、パルスエネルギーが50 mJ以上あれば、100MPa程度の応力が必要な薄膜の剥離が可能である(荒井等;計算数理工学論文集、9(2009)No.05-091211.])。従って本装置のパルスエネルギーはこの2倍あるため、シミュレーションと同様にき裂を開口して映像化できると推定される。以上の理論及び実験結果から、材料の初期損傷と閉じたき裂の計測評価を遠隔から行える非線形レーザ超音波法の可能性が検証でき、本研究の目的が達成された。超音波
5-FUによる効果・有害事象を規定する薬理遺伝学的バイオマーカーの同定と機能解析

5-FUを投与した胃癌、大腸癌患者の末梢血を用い5-FU代謝関連遺伝子の遺伝子多型と副作用の関連を解析した。結果、DPYDc.496G>A, C.1905+1G>A, C.2303C>Aのいずれかを有する患者(5.3%)に有意に有害事象が発現していた。その中でも全身倦怠感の発症と有意に相関していた。さらに、MTHFRのc.1298A>Cをもつ患者(17%)は有意に好中球減少症を発症していた。今回同定した遺伝子多型を、5-FU投与前にスクリーニングすることで有害事象の発現を予測できることが示唆された。本研究は、5-FUによる効果・有害事象を規定する薬理遺伝学的バイオマーカーの同定と機能解析を行うことを目的としている。1) DPYD遺伝子(5-FU分解酵素であるDPDをコード)のスプライシングバリアントをもたらすと考えられる遺伝子多型を生命情報科学データベースより予測した。SNPデータベース:dbSNP(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/ SNP/)を用いてDPYDの総SNPsを抽出したところ計5,645個であった。その中でpre-mRNA splicingに影響を及ぼしうるコンセンサス配列(エクソン内,及びエクソン近傍50bpのイントロン)内のSNPsは計148個であり、in silicoツール(Human Splicing Finder;http://www.umd.be/HSF/)を用いてsplicingへの有害性が示唆される計4個のSNPsを拾い上げた。また過去の報告から副作用増強に関わる3個のSNPsを合わせ、計7個のSNPsを解析対象として抽出した。2) 5-FUの投与を受けた胃癌・大腸癌患者末梢血よりDNAを抽出(現在100名)、PCR、sequencingを行っている。これまでのところ、2種、8例の対象SNPsを同定した。以上の結果をもとに、今後対象SNPのvalidationを行っていく予定である。また、5-FUの投与を受けた胃癌・大腸癌患者からの末梢血DNA抽出をさらに進めていく予定である。1) DPYD遺伝子(5-FU分解酵素であるDPDをコード)のスプライシングバリアントをもたらすと考えられる遺伝子多型を生命情報科学データベースより予測可能であった。2) 5-FUの投与を受けた胃癌・大腸癌患者末梢血からのDNA抽出も可能であった。3)抽出DNAを用い、PCR, sequencingを行い、目標のSNPを同定できた。1. DPYD遺伝子(5-FU分解酵素であるDPDをコード)のスプラシングバリアンを生じる原因となる遺伝子多型を生命科学情報データベースより予測した。遺伝子多型の一つであるSingle nucleotide polymorphism (SNP)のデータベース(http://www.nlm.nih.gov/projects/SNP/)を用いてDPYDの総SNPを抽出したところ5645個であった。その中でpre-mRNA splicingに影響をきたし得るコンセンサス配列(エクソン内、及びエクソン近傍50bp以内のイントロン)内のSNPは計148個であり、さらに、in silicoツール(Human Splicing Finder; www.umd.be/HSF/)を用いてsplicingに影響を及ぼすと考えられる計4個のSNPを同定した。また、過去の報告から5-FUの副作用に関連する3個のSNPをも合わせ、計7個のSNPを解析対象とした。さらに5-FUの代謝に関連する他の遺伝子、MTHFR, OPRT, TYMSについても解析対象とし、4遺伝子、33の遺伝子多型を解析した。2. 5-FUの投与を受けた胃癌・大腸癌患者末梢血よりRNAを抽出(103名)し、4遺伝子、33の遺伝子多型に対し、Direct Sequence法、PCR-RFLP法、MassARRAYのいずれかを用い遺伝子多型を同定した。結果、3種の遺伝子で、6つのSNPを同定できた。3.同定した遺伝子多型と5-FUの投与を受けた胃癌・大腸癌患者における有害事象(CTCAE 3.0グレード3以上)の発現頻度を統計学的に解析した。、副作用発現に関連する遺伝子多型を同定した。DPYDのc.496G>A, c.1905+1G>A, c.2303C>Aのいずれかを有する患者(5.3%)には有意に有害事象が発現していた(p = 0.003, OR = 4.68, 95% CI: 1.71-12.8)。また、特に全身倦怠感の発症と有意に相関していた(p = 0.007, OR = 6.68, 95% CI: 1.87-23.9)。4遺伝子、33の遺伝子多型に対し、PCRやSequencingを行った結果、3種の遺伝子で、6つのSNPを同定できた。さらに、それらを、5-FUの投与を受けた胃癌・大腸癌患者の副作用情報と照らし合わせ、副作用発現に関連する遺伝子多型を同定した。結果、DPYDc.496G>A, C.1905+1G>A, C.2303C>

Aのいずれかを有する患者(5.3%)に有意に有害事象が発現していた。その中でも全身倦怠感の発症と有意に相関していた。さらに、MTHFRのc.1298A>Cをもつ患者(17%)は有意に好中球減少症を発症していた。今回同定した遺伝子多型を、5-FU投与前にスクリーニングすることで有害事象の発現を予測できることが示唆された。1) 5-FUの投与を受けた胃癌・大腸癌患者末梢血よりDNAを抽出を進める。3)スプライシングをきたすSNPを同定できれば、固有のスプライシングバリアントの感受性、薬効、有害事象におよぼす役割を明らかにする3)-1:遺伝子多型の配列を胃癌あるいは大腸癌細胞にtransfectionし、目的のスプライシングバリアントが産生されることを確認する3)-2: transfectionされた細胞株の機能解析を行う。また、siRNAにより固有のスプライシングバリアントのみをknock downし、in vtroにおける感受性、および有害事象(細胞増殖能など、血球細胞にて)の表現型を明らかにする。研究で得られた遺伝子多型情報を、5-FU投与を受けた103名の胃癌・大腸癌患者の副作用情報と照らし合わせ、副作用発現に関連する遺伝子多型を同定できた。本結果について論文作成を行っていく。消化器外科
James Joyce作品における談話的主題化の問題

本研究ではJames JoyceのUlyssesで、どのように二人の主人公であるDedalusとBloomが二人別々の登場をし(談話的主題)、その二人が徐々に近づいていくという、いわば死に行くダブリンの枕頭に立てられた「歩く二本のキャンドル」(談話的題術)ということを中心に研究をした。このUlyssesに現れた二人の主人公が離ればなれに語られ始め(主題)、徐々に近づくという媒介を経て最終的に二人が並び立つ(題術)という形は彼の作品群の底流に流れる「主題ー題術構造」であって、他のあらゆる作品がこの形を取り、テクスト内で語られる発話は二次的意味として、この構造に則したものとなる。初年度に当たる平成25年度はDubliners等、James Joyceの初期の作品の機能主義的分析を行う予定であったので、それに則って以下の実績があった:(1)研究の機能主義的なテクスト分析理論に関する論文1編の執筆(共編著書籍として発行済み)(2)具体的なテクスト分析(Dubliners)の論文1編の執筆(共著書籍として現在2校まで校正)(3) James Joyceのテクストを読む上で重要な「意識の流れ」の具体例を、国際学会(スイスのチューリッヒ大学)で口頭発表した平成26年度には、前年度の分析および海外(スイス)での研究発表に続いて、次の実績があった:(2)上記の発表を論文化したものをイギリスのジャーナルに投稿した(3)上記の発表をもとにしたものを含む形で菊池繁夫・上利政彦(共編)『英語文学テクストの語学的研究法』(九州大学出版会)を完成させた(現在初校の段階)本研究は談話分析における主題(theme)と題術(rheme)の関係を、文を超えたテクスト、それも文学という虚構テクストに求め、発話者つまり作者の意図に迫ろうというものである。業績として、外国での口頭発表が1回、国内シンポジウム講師としての発表が1回、論文としては国際ジャーナルで1本(確定)、書籍の共著として1冊(確定)がある。文体論今年の平成27年度(2015年度)は、前年度のJames Joyceの中期・後期の作品の分析で明らかになった、機能主義の枠組みから見た、テクストの談話的主題(私がdiscoursethemeと呼ぶもの)が媒介(Prague学派の言うtransition、私の言うmediation)の部分を経てテクストの談話的コメントに当たる部分(私がdiscourse rhemeと呼ぶもの)に変換されている、その様式をさらに精査し、「作者の意図」(author's intent)に迫りたい。初期作品の機能主義的分析が順調に行われたためである。これにより、中期、後期の作品への展開が容易となった。参考図書として古書の入手に時間がかかり残金が生じた。今年の2014年度は、前年度のJames Joyceの初期の作品で明らかとなった機能主義の枠組みから見た、「作者の意図」(author's intent)のもとに構成された、テクストの主題(私がdiscourse themeと呼ぶもの)が媒介(Prague学派の言うtransition、私の言うmediation)の部分を経てテクストの機能上のコメントに当たる部分(私がdiscourse rhemeと呼ぶもの)が、中期の作品でも継続しても見られるのか明らかにしたい。初期の作品で明らかとなったこれらの枠組みを、推論的に延長することにより中期の作品の中での展開を見ることができると思われる。昨年度分の未使用分を今年度に消化する予定である。書籍の購入に際して、古書の購入を予定していたため取り扱い業者の選定に時間がかかったため残金が生じた。昨年度の未使用分を今年度に消化する予定である。
縦断的調査による中学生における自己概念の発達

本研究は、中学生を対象に、自己概念の内容や評価に関する質問紙調査およびインタビュー調査を、縦断的に実施することを通して、青年期前期の自己概念の発達的変化を検討したものである。結果として、発達にともない自己を否定的に捉えるという傾向は、横断的および縦断的分析において、あまり明確には見られなかったこと、また自己描出の内容については、すべての学年で外向性に関する言及の割合が高いことが明らかになった。本研究は、3年間の研究期間にわたり、中学生を対象に、自己概念の内容や評価に関する質問紙調査およびインタビュー調査を横断的・縦断的に実施することを通じて、青年期前期の自己概念の発達的変化を明らかにすることを目的としている。平成25年度は、25年3月に中学校4校の13年生合計614名を対象に実施した第1回質問紙調査(項目内容:1自分がどの程度好きか(4段階)をたずね、好きな・嫌いなところについて具体的に自由記述、2特性語リスト評定(外向性、協調性、勤勉性について肯定・否定各4項目の合計24項目)、3自分に関する意識、4児童用コンピテンス測定尺度)の分析を進め、学年差および性差を検討した(日本発達心理学会第25回大会にてポスター発表)。学年による差は、3年生の方が自己を好き嫌いの両面から捉えるという点のみだけで見られた。一方、性別による差は、女子の方が「きらいのみ」が多く、コンピテンス得点が低いことから、女子が男子よりも自己をより否定的に捉えていることが明らかになった。また他者との関係に応じた自己の変化や本当やにせの自分について、男子よりも女子の方がより意識していることが明らかになった。第2回のアンケート調査は、平成26年23月に行った。継続で調査を実施できたのは1校のみであり、継続調査として2年生と3年生約150名、新規調査として1年生約70名を対象に実施した。さらに新たに1校に調査を依頼し、2年生と3年生約200名を対象に実施した。インタビュー調査は、質問紙調査回答者のうち中学1年生55名を対象として、第1回調査を25年3月に実施した。これらのインタビュー調査の内容を逐語記録としておこし、整理した。さらに26年3月に中学2年生になった第1回対象者55名を対象に、第2回のインタビューを行った。今後は、縦断データに基づき、第1回、第2回の調査を比較分析する予定である。平成24年度は、中学校4校に協力を依頼し、25年3月に第1回質問紙調査を実施した。対象は、中学1年生263名(男性138名、女性122名、不明3名)、2年生233名(男性106名、女性124名、不明3名)、3年生119名(男性50名、女性58名、不明11名)、合計615名であった。質問紙の項目は、1自分がどの程度好きかをたずね、好きなところ・嫌いなところについて具体的に自由記述、2佐久間(2006)で用いた特性語リスト評定(外向性、協調性、勤勉性について肯定・否定各4項目の合計24項目)、3本当の自分、偽の自分に関する意識、4児童用コンピテンス尺度である。1と4に関して、学年差および性差を検討するために分散分析を行ったが、1好きな程度については、学年と性別ともに有意な差は見られなかった。4コンピテンスは、性別による有意な差が見られ、男性よりも女性の方が得点が低いことがわかった。いずれも学年による差は見られず、好きな程度とコンピテンスにおいては、学年が上がるにつれて、自己評価が否定的になるとはいえなかった。第1回インタビュー調査は、質問紙調査回答者のうち中学1年生55名を対象として、25年3月に対象校の空き教室で、面接者と生徒と1対1で実施した。インタビューでは、質問紙調査でたずねた項目を中心に、好きなところ、いいところ、1年前からの変化、本当・偽の自分に関する意識などについて詳細にたずねた。インタビューは逐語記録としておこし、今後佐久間ら(2000)に基づき分類整理を行う予定である。これらの結果が平成25年度以降の縦断調査の基礎データとなる。質問紙調査は、1自分がどの程度好きか(4段階)をたずね、好きなところ・嫌いなところについて具体的に自由記述、2特性語リスト評定(外向性、協調性、勤勉性の肯定・否定各4項目の合計24項目)、3本当の自分、偽の自分に関する意識、4児童用コンピテンス測定尺度という項目を含む。

第1回質問紙調査(平成25年3月)は、4校の中学生約600名を対象に、第2回質問紙調査(平成26年23月)は、継続対象校1校と新規対象校1校の中学生約400名を対象に、第3回質問紙調査(新規対象1年生のみ平成26年6月、その他平成27年1月3月)は、継続対象校2校の中学生約400名を対象に実施した。インタビュー調査は、質問紙調査回答者のうちの中学1年生55名を対象として、各年度の3月に3年間に渡り縦断的に行った。インタビューでは、好きなところ、いいところ、1年前からの変化、本当・偽の自分に関する意識などについて詳細にたずねた。アンケート調査の結果からは、発達にともない自己を否定的に捉えるという傾向は、1年生の6月と1月を比較するとみられたものの、その他の縦断的な比較においては、あまり明確には見られなかった。また本当の自分やにせの自分を意識したことがある人は、ない人よりもコンピテンス得点が低いという結果が明らかになった。インタビュー調査では、回答内容を分析したところ、1年時は能力に関する言及が多く、2年時以降では能力と協調的行動の言及が多かった。また各学年時で外向性への言及の割合が非常に高かった。縦断的な比較結果を踏まえ、今後は文化的特徴を含めた考察の必要性が示唆された。教育心理学本年度は、縦断調査の2年目にあたり、第1回目の調査協力者を対象に質問紙調査及びインタビュー調査を実施する予定であったが、質問紙調査については、調査を継続することができたのが1校のみであり、縦断的な調査への協力者を確保することが困難であった。本年度から新規に1校の協力を得ることができたため、来年度は2校を対象に調査をする予定である。インタビュー調査については、継続して協力してもらうことができ、縦断的データを蓄積しているところである。しかし調査実施が3月であったため、データを収集することはできたが、年度内にすべての分析を行うことができなかった。以上より、本年の達成度はやや遅れているといえる。本年度は調査依頼の遅れと協力校の予定の関係で、調査実施が25年3月になってしまった。アンケート調査は、中学校4校を対象に行ったが、対象人数は615名であり、予定していた人数の約半数であった。一方、インタビュー調査は、予定通り中学校1年生55名を対象に実施することができた。しかし調査実施が3月であったため、年度内にすべての分析を行うことができなかった。以上より、本年度は平成25年度以降の縦断調査の基礎となるデータを収集することはできたが、分析途中ということもあり、研究の達成度はやや遅れているといえる。最終年度である平成26年度は、第3回の調査を実施するとともに、縦断的比較結果をまとめること目標とする。第1回および第2回調査は、調査依頼の遅れと協力校の予定の関係で、実施が3月になってしまった。年度内に縦断的分析結果をまとめるためには、10月頃に調査を実施する必要がある。今年度は早めに調査の依頼をし、早期の実施にむけて円滑に進めることを目指す。調査内容は、第1,2回と同様の予定である。回収したデータは迅速に入力し、学年間の横断的比較と、これまでの調査との縦断的比較分析を進める。研究のまとめに際しては、研究分担者と検討を重ね、平成27年3月の日本発達心理学会で発表するともに、学術論文として投稿することを目指す。1年目に行った調査の分析を進め、横断的比較結果をまとめる。