hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
幼児期の子ども同士の模倣の分析による仲間関係の探究

幼稚園における自由遊び場面において仲間集団がどのように形成されるかを、幼児同士の模倣に注目して分析した。仲間集団内で模倣が意図的に行われ始めると、同じ集団ではない相手を排除するような行為も生じていた。これは社会的不確実性の中で小さな共通点により安心できる場の形成を試みるゆえに、排除行為が構成されていると考察された。仲間集団の形成は、集団のダイナミクスと相互構成的に行為の意味をよみとり、保育に活かす必要が示唆された。幼稚園における子どもたち同士の遊びを観察すると、そこには「模倣」という行為が大きく関わっている。子ども同士でともに遊ぶようになるプロセスを「模倣」という現象を手がかりに考察してみたとき、仲間との関係、仲間の理解の深まりを考察することができる。しかし、このように子ども同士で遊びの中で互いの行為を模倣することは、遊びをともにするようになる肯定的な側面のみが含まれているのだろうか。本年度の研究においては、子ども同士の模倣が見られる場面を微視的に分析することにより、幼児にとって他者の行為を真似る行為の意味の多様性となぜ子どもが他者の動きを模倣するのかの2点を探ることによって仲間関係の発達をとらえなおすことを目的とした。分析の結果、誰かが模倣するという行為はそこにいる他者と「ともに遊ぶこと」が生じるきっかけであると同時に、真似ない他者とは「ともに遊ばない」ことを示すことが生じていた。つまり、模倣という行為には他者とともに遊ぶ側面と仲間と遊ばない側面の両義性を見てとることができる。また、他者の行為を模倣することの機能を考察する中で、新たなことを学ぶ側面とコミュニケーションを促進する側面をみることができることを確認した。従来の幼児の遊び場面の研究でとらえられていた子ども同士の模倣は後者のコミュニケーション機能を中心に、関係の輪を広げ遊び仲間を見出す社会的な側面に焦点をあてたものだと言える。一方で模倣における学びの側面を考えたときに、自分自身が「なってみたい」相手を模倣するという側面を考えることができる。Chaiklin(2003)は、子どもは自ら「模倣したくなる」と同時に「模倣できる」対象を求めていることがVygotskyの主観的ZPDを構成していることを論じている。今後、この主観的ZPDの観点から、仲間を模倣することの発達的な意味、さらには幼児理解の方法を検討していきたい。幼稚園における子どもたち同士の遊びには「模倣」という行為が大きく関わっている。本年度の研究においては、子ども同士の模倣が見られる場面を微視的に分析することと、保育者とのカンファレンスを通して、下記の2点を探究した。1.幼児にとっての他者の行為を真似る行為の変容幼稚園の年少の初めの時期は、模倣や同調的な行為によって、ともに遊ぶことが成り立ちやすく、楽しい遊びが発見されると参加人数も大勢となる場面が多くみられた。やがて、ともに遊ぶ仲間が固定化してくるとともに、模倣は強まった2者の関係を維持し、共に遊ぶための機能とともに、2者の関係を他者に強調し誇示する働きを担うことも多くなった。2.模倣が仲間集団の形成に果たしている意味幼稚園で見られる仲間同士の模倣は、従来の研究でも見られていたように仲間とのやりとりを助け、仲間集団の形成を促進する大きな役割を果たしている。その一方で、模倣は、仲間集団を固定化し、境界を強くすることで他者が入り込みにくい集団を形成する役割を果たしている時期もある。今後の研究課題は、年少のときの大勢で同調的に楽しめた時期から、2者の親密なしかし他者を排除するような関係を経て、どのように本当に協調的な関係を形成することが可能になるのかを検討することである。幼稚園で見られる仲間同士の模倣は、従来の研究でも見られていたように仲間とのやりとりを助け、仲間集団の形成を促進する大きな役割を果たしている一方で、仲間集団を固定化し、境界を強くすることで他者が入り込みにくい集団を形成する役割を果たしている時期もあることが、昨年度までの分析からみえてきた。そこで本年度の研究においては、年少児のときの大勢で同調的に楽しめた時期から、2者の親密ではあるが他者を排除するような関係を経て、どのように協同的な関係を形成することが可能になるのかについて、子ども同士の模倣が見られる場面の分析と保育者へのインタビューによって検討した。1.模倣によって固定化された関係の変容模倣のありようから見えてきた共に遊ぶ仲間が固定化した関係は、内部での「いざこざ」や拒否の経験をきっかけに変容する可能性、また、幼稚園でのさまざまな行事や遊びの変化などと連動してそれぞれの子どもの関心が遊び内容へと変化してくることから変容する可能性が見えてきた。2.固定化された関係の変容と同時にみられる模倣と他者理解の変化

固定化した関係のときの模倣はお互いが同じであること、あるいは同じ集団であることを確認するかのような模倣が多く見られたが、この関係が変化しはじめ、互いの意図が異なることを理解した上での協同性が見られることと連動して、遊びの内容を主とした深層模倣がみられるように変化していった。3.模倣が仲間集団の形成に果たしている意味幼稚園で見られる仲間同士の模倣には、安心して遊びを展開することができる境界を強くすることで他者が入り込みにくい排他的な集団を形成する役割を果たしている時期もある。このような固定化した集団が発達の過渡的現象として見られ、協同的な関係へと変化するプロセスの多様性が示唆されたことは、今後の保育実践における幼児理解に寄与すると考えられる。
ラーニングデザインよるＩＣＴを活用した授業デザインの記述と一般化に関する研究

教員間で授業実践を共有してそれを参考に自分の授業へ適用することを目的として,授業デザインを記述する方法を検討した.具体的な授業を対象として検討を重ね,他の教員が実践可能な程度に必要な記述項目を定めた.成果をあげている複数の授業実践について調査を行ない,提案した記述項目に従って授業デザインを文章で記述した.その結果,この記述を参考として,実践例を授業に適用できることが示唆された.成果をあげている授業には,全体のカリキュラムや補助指導員の活用など授業の枠を超える事柄が関わりがあることもわかった.本研究では,ICTを活用した効果的な授業のデザインを一般化して多くの教育分野で利用可能な状態にすることを目的としている.今年度はラーニングデザインを記述してその方法やツールを評価することと,授業の実践例をサーベイする計画であった.ラーニングデザインの記述にあたって,既存のツールについて調査した.国内では,授業ごとの学習シーケンスを直感的に作成し,共有することができる学習デザインツールの報告があるが,研究段階であり安定して利用に供されているものではない.そこで,昨年度に引き続き,統一モデリング言語(UML)を用いて授業実践を記述するとともに,LAMS( Learning Activity Management System )を用いてラーニングデザインの記述を試みた.LAMSは協調学習の活動の流れをオンライン上でデザイン,管理するためのツールであり,これを使って実際に協調学習活動を実施することもできる.まず,授業1回分の学習モジュールのうち,短時間のグループディスカッションについて記述した.次に授業1回分の学習モジュールを記述し,昨年度の成果であったモデルケースの記述と比較したところ,協調学習のほかに講義や個別学習を含めた形での学習活動の記述をすることや,学習活動以外の,学習目標や学習内容,授業計画といったシラバスを構成する要素について適切に記述することは難しいことがわかった.LAMSを用いた記述について,昨年度の成果に基づき比較を行うことができた点で今年度の成果は意義があるといえる.授業の実践例について,協調学習を取り入れた授業について事例をサーベイし,ラーニングデザインの記述の準備をした.教員間で授業実践を共有してそれを参考に自分の授業へ適用することを目的として,授業デザインを記述する方法を検討した.具体的な授業を対象として検討を重ね,他の教員が実践可能な程度に必要な記述項目を定めた.成果をあげている複数の授業実践について調査を行ない,提案した記述項目に従って授業デザインを文章で記述した.その結果,この記述を参考として,実践例を授業に適用できることが示唆された.成果をあげている授業には,全体のカリキュラムや補助指導員の活用など授業の枠を超える事柄が関わりがあることもわかった.本研究では,ICTを活用した効果的な授業のデザインを一般化して多くの教育分野で利用可能な状態にすることを目的としている.そのために,今年度はラーニングデザイン規格に着目し,記述の方法やツールを調査検討して評価する計画であった.ラーニングデザインの規格については国際標準規格であるIMSの"Learning Design Information Model,2003"を確認した.また,ラーニングデザインを記述する既存のツールについて調査し,多様な学習の形態に対応可能であるかどうかを検討した.これらの調査と検討の一方で,申請者らがこれまで行った授業実践をモデルケースとして記述し,各ツールによる充分な記述が可能かどうかの評価に用いることとした.モデルケースとして,まず統一モデリング言語(UML)を用いた記述を試みた.授業1回分のモジュールにおける学習者と教員の活動の記述方法を検討し,UMLのアクティビティ図で記述した.また,記述内容の妥当性は,申請者ら以外の教員を加えて検討した.記述の試みにより,ラーニングデザインの記述にあたって考慮すべき項目が明らかになった.たとえば,記述する活動の粒度や,活動相互の関係性の表現方法などである.また,学習目標や学習内容,授業計画といったシラバスを構成する要素の記述についても,UMLのダイアグラムを用いた表現方法を検討した.このように一つのケースについて記述したことにより,今後,各エディタツールによってどのように記述できるかを検討してツールの評価ができると考えられる.また,記述にあたって考慮すべき項目が明らかになったことから,これらの記述方法を定め,他のケースの記述を進めることができるという2点において今年度の成果は意義があるといえる.本研究では,ICTを活用した効果的な授業のデザインを一般化して多くの教育分野で利用可能な状態にすることを目的とした.他の教員が実践可能な程度に詳しく授業デザインを記述する方法を検討し,検討した結果の調査項目に沿っていくつかの授業実践について調査を行い,実際に記述したものを評価した.授業の設計を記述する方法としては, IMSが標準規格化したラーニングデザイン(LD)の規格があり,記述ツールもある.また,情報システムなどをモデルとして記述する標準化された言語を用いる方法もあるが,申請者らの実践を基に授業のデザインの記述を試みたところ,教員間で参照し合うことを目的とする場合は,記述項目を定義してその項目に沿って文章で記述する方法が適切と考えた.記述項目を整理し,調査項目を(1)授業設計のポイント,(2)学習・教授活動の構成,(3)実践の結果,(4)シラバス,参考にした理論や方法などの4項目とした.授業設計のポイントは,教授者が授業の設計にあたって問題点と考えた「状況」へどのような「方法」をもって対応しようとしたかを述べるものであり,授業実践例を参考にして何をどのように導入するのかを決めるために重要である.この調査項目に沿って複数の教員に対してインタビュー調査を行い,授業デザインとして記述してサーバーに蓄積した.

その結果,学習・教授活動については授業全体の流れを示すとともに細かな補足説明を必要とする場合があることと,授業の枠を超えるようなたとえば学生補助員の育成方法やカリキュラムの中での科目の位置づけなどが授業実践の成果に大きく関わる可能性があることがわかった.記述したものが実践の参考となるかについて自己評価を行った結果,参考になるものであると判断した.今後の課題として,さらに第三者による評価を行うことが必要と考える.総合領域今年度は,デザインの記述方法の検討と事例の収集の2点について進める予定であった.デザインの記述方法として,ラーニングデザインを記述するツールLAMSを用いて記述を試みた.LAMSの記述のための環境として,サーバを導入して環境を構築し,ラーニングデザインを記述した.昨年度に統一モデリング言語(UML)を用いてデザインを記述した,協調学習と個別学習を組み合わせた授業における学習活動について両者の記述を比較することができた.構築したLAMSの使用方法の調査がまだ不十分であるためツールの評価としては充分とは言えない点が,やや遅れているとした理由である.授業の実践事例の収集として,協調学習を取り入れた授業について事例をサーベイした.eラーニングと対面型の授業を組み合わせた授業や,ICTを効果的に活用した授業についてサーベイを行い,教員へのインタビュー等の調査を行って実践例の詳細を収集する予定であったが,教員へのインタビューをまだ行っていない.そのため,予定していた達成度よりやや遅れていると判断した.インタビュー等の調査に臨む前にラーニングデザインツールを用いた記述方法をあらかじめ検討して記述方法を固める必要があり,その作業が遅れたことが主な理由である.申請者らがこれまで行った授業実践をモデルケースとして記述するにあたって,ラーニングデザインの国際規格IMS Learning Designでキーとなる学習・教授シナリオの構成要素である,Role(参加者のロール),Activity/Activity-structure(各ロールによって実行される行為とその構造),Environment(Activityで用いられるリソース)を用いて記述することに留意したため,記述が煩雑になり,記述の検討に予定よりも多くの時間を要した.今年度は,ラーニングデザインを記述する具体的ツールとして,LAMS( Learning Activity Management System )の環境構築をし,ラーニングデザインツールとしての評価を行う予定であった.LAMSは協調学習の活動の流れをオンライン上でデザイン,管理するためのツールであり,LAMSを使って実際に協調学習活動を実施することもできる.一方で,我々は協調学習のほかに講義や個別学習を含めた形で学習活動をデザインしたいので,LAMSでは学習活動の全体を十分に記述することができない可能性がある.そこで,まず記述するデザインについての検討を行い,学習活動の全体の表現を試みたのちにLAMSで記述することとした.
オフキャンパス教育における学生支援サービス体制の構築-大学院教育と図書館サービス

本研究は、大学院教育に焦点をあて、オフキャンパス教育により学ぶ学生に対する学生支援サービスのあり方を探るとともに、その具体的な改善策を提言することを目的とする。なお広範な学生支援サービスのなかから、大学院レベルの研究・教育の遂行に不可欠な図書館サービスを取り上げ、新しい教育形態にふさわしい大学図書館のあり方についても検討を行うものである。具体的には、これまで大学図書館が提供してきた各種サービスのうち、大学院生にとって最も重要であるレファレンス・サービス、文献資料貸出しサービス、文献資料複写サービスの三種類に焦点をあて、図書館側のサービス提供の実態と、学生の利用実態等を明らかにする。これらの結果を横断的に分析することにより、図書館サービスの課題を探ることを目的とする。2004年度は、下記の点について研究を実施した。○我が国におけるオフキャンパス教育の現状と学生支援サービスに関する発表と意見交換2004年10月、カナダのヴィクトリア大学(ブリティッシユ・コロンビア州ヴィクトリア市)で開催された第18回Japan Studies Association of Canada (JSAC)において、本研究の成果について、一部とりまとめたものを発表した。なお、オフキャンパス教育先進国であるカナダが会場地であることから、多数の専門家も出席し、活発な意見交換と情報収集を行うことができた。この成果は2005年に刊行される。平成15年度は、オフキャンパス教育の先進的地域の1つであるイギリスについて、現地におけるインタビュー調査等により実情を把握した。イギリスでは、世界初の遠隔高等教育専門機関として公開大学(Open University)が、1980年より修士課程を、さらに1990年からは博士課程を設けている。こうした拡大基調のなかで、IT技術の発展にともない、公開大学の図書館サービスも大きく変化している。設立当初の公共図書館との連携を視野にいれた図書館サービスから、Webによる図書館サービスへと重点がかわっている。公開大学では、学部レベルでは教科書のほか、参考文献も概ねWeb上で全文検索ができるシステムが導入されている。さらにこうした図書館サービスの利用数育もWeb上で行うことが可能になっている。一方、他大学では、公開大学が学部レベルを中心に展開していることもあり、オフキャンパス教育は大学院レベルを中心に展開している。今回はそのうちリーズ大学とレスター大学の2大学を訪れたが、いずれの大学でも、大学院生はオンキャンパスの授業もオフキャンパスの授業も各自の都合で選択可能なシステムで運用されている。こうした大学院生に対しては、大学図書館では有料データベースについても多くは自宅からのアクセスを可能にしている。なかでも最も大きなサービスは、University-Library Plusという大学図書館サービスである。このサービスは、学生は1人につき所属大学を含めて5大学の図書館を事前に登録することにより、閲覧や複写サービスのみならず、貸出しサービスを享受できるもので、所属大学と同様のサービスをうけることができる。図書館サービスに関しては個別の大学の違いが極めて小さいものとなっているのがイギリスの特徴である。
フェルミ準位・バンドギャップの制御されたカーボンクラスターの創製と電子デバイス

1.化学的・物理的手法による価電子帯が制御されたC_<60>、C_<70>の創製1.1フレーレン薄膜の電解酸化によるフッ化物イオンドーピングフラーレン薄膜(250nm)のフッ化物イオン伝導性電解質溶液(1M-ET_4NF-4HF)中おける低電流密度電解酸化(0.11μA/cm^2)によって、フッ化物イオンがドープされ電荷移動錯体C_<60>F_<1-3>およびC_<70>F_<1-6>を作製することができた。1.2高圧合成法によるフラーレンポリマーの創製と電気化学的リチウムドーピングC_<60>粉末の5GPa、800Kの高圧・高温処理によって生成する菱面体晶ポリマー(rh-C_<60>)は、電解還元によってインターカレーション化合物Li_3(rh-C_<60>)を形成し、層状化合物の新たな二次元ホスト物質であることを明らかにした。1.3C_<60>F_xのxの値を制御することによって、C_<60>の電子状態をかなり制御することができることを明らかにした。2.フッ素修飾、ホウ素ドーピングによる多層カーボンナノチューブ(MWNTs)の電子構造と表面細孔構造の制御鋳型炭素化法によって作製したMWNTsの単体フッ素による表面修飾によって、MWNTs表面のメソ孔(2030μm)およびミクロ孔(<2nm)の分布および表面エネルギーをかなり制御できることを明らかにした。ホウ素ドーピングによっては、MWNTsのE_Fが深くなる等、金属的電子状態の実現を見いだした。3.応用を目指した物性と機能の評価3.1表面フッ素修飾MWNTsバルクのsp^2混成軌道やエネルギーバンド構造は、そのまま保存されており高い電子伝導性を示す。3.2表面フッ素修飾MWNTsを正極とするリチウム試験セルによって、表面フッ素修飾により、SEI形成が抑制され、クーロン効率が約90%に向上することを明らかにした。3.3B-dopingによって、MWNTsによるLi^+の電気化学的挿入のクーロン効率は90-95%と極めて高く安定する。3.4アーク放電法単層カーボンナノチューブの500mAh/g以上の電気化学的可逆なリチウム貯蔵を明らかにした。1.C_<60>薄膜の作製とキャラクタリゼーション薄膜モニター、蒸着源温度調節機能を組み込んだ真空蒸着装置を設計・試作した。真空度1.2-1.6×10^<-3>Pa、蒸着源温度600-800°Cの製膜条件で任意の膜厚(50-500nm)のfcc-C^<60>薄膜の作製条件を確立した。2.C_<60>薄膜への電気化学的フッ化物イオンドーピング3.菱面体晶フラーレンポリマーへのリチウムイオンの電気化学的ドーピング4.フッ素修飾多層カーボンナノチューブ(F-tube)によるリチウムイオン貯蔵鋳型炭素化法により生成した多層カーボンナノチューブのフッ素修飾を行い、リチウムセルLi/1M LiClO_4-(EC+DEC)/F-tubeを用いて、可逆的リチウムイオン貯蔵が確認された。

以上、電子デバイスやエネルギー貯蔵・変換等の応用研究へ発展可能な炭素クラスター系物質群の作製とキャラクタリゼーションを行なった。1.化学的・物理的手法による価電子帯が制御されたC_<60>、C_<70>の創製1.1フラーレン薄膜の電解酸化によるフッ化物イオンドーピングフラーレン薄膜(250nm)のフッ化物イオン伝導性電解質溶液(1M-Et_4NF・4HF)中における低電流密度電解酸化(0.11μA/cm^2)によって、フッ化物イオンがドープされ電荷移動錯体C_<60>FおよびC_<60>F_3を作製することができた。1.2高圧合成法によるフラーレンポリマーの創製と電気化学的リチウムドーピングC_<60>粉末の5GPa、800Kの高圧・高温処理によって生成する菱面体晶ポリマー(rh-C_<60>)は、電解還元によってインターカレーション化合物Li_3(rh-C_<60>)を形成し、層状化合物の新たな二次元ホスト物質であることを明らかにした。さらに、C_<70>粉末の高温高圧処理(12GPa、950K)によって、C_<70>ダイマーが生成することも見出した。リチウムイオンの電気化学的可逆な挿入も確認された。2.フッ素修飾による多層カーボンナノチューブ(MWNTs)の電子構造と表面細孔構造の制御鋳型炭素化法によって作製したMWNTsの単体フッ素による表面修飾によって、MWNTs表面のメソ孔(2030μm)およびミクロ孔(<2nm)の分布および表面エネルギーをかなり制御できることを明らかにした。このMWNTsは選択的な気体・液体透過性を有している。3.応用を目指した物性と機能の評価3.1表面フッ素修飾MWNTsバルクのsp^2混成軌道やエネルギーバンド構造は、そのまま保存されており高い電子伝導性を示す。3.2表面フッ素修飾MWNTsを正極とするリチウム試験セルによって、表面フッ素修飾により、SEI形成が抑制され、クーロン効率が約90%に向上することを明らかにした。3.3菱面体晶ポリマ(rh-C_<60>)の価電子帯はC K-V XESスペクトルで見るかぎり、C_<60>のそれと類似しており、新規なホスト物質である。1.化学的・物理的手法による価電子帯が制御されたC_<70>の創製、SWNTの表面フツ素修飾、MWNTsのホウ素ドーピング1.1 C_<70>薄膜(250nm)のフッ化物伝導性電解質溶液(1M-Et_4NF・4HF)中における低電流密度(0.11μA/cm^2)電解酸化によって、フッ化物イオンがドープされた電荷移動錯体C_<70>F_<1-6>の生成を明らかにした。1.2 F_21atm, 100°Cでフッ素化したアーク放電法SWNTsのエタノール中への分散性を、分散液の紫外一可視光吸収スペクトルで調べた結果、フッ素修飾SWNTsは48時間以上安定に分散しておりSWNTsの溶液反応、分離精製等が期待できる結果を得た。1.3ホウ素ドーピングによって電子状態が制御されたMWNTsを創製した。2.応用を目指した物性と機能評価2.1 BN粉末を充填したグラファイトのアーク放電で生成するB-dopingでは,可逆容量が著しく増加する可逆容量自体は,180mAh/gと小さいが,クーロン効率は9095%と極めて高く安定するのが特徴である。2.2 MWNTs(外径30nm,内径22nm)は900-3000°Cの熱処理で結晶性が著しく向上するが,可逆容量とクーロン効率から評価すると,最適な熱処理温度は1000°Cであった。
多様な顧客価値を実現するプラットフォームコンセプトのデザインと創成支援

本研究では、カスタマイゼーションにおける顧客ニーズ・技術的可能性・経済的合理性のトレードオフを的確に見定めたプロダクトコンセプトを合理的に展開するために、顧客ニーズ・物理機能・実体構造のそれぞれについてのシステム構造と相互関係(=プラットフォーム)を俯瞰し、整合性を持ってデザインすることの意義を明確にするとともに、そのようなプラットフォームコンセプトのデザインを創成するための支援手法を提案することを目的とした。それに向け、(1)顧客ニーズ・技術的可能性・経済的合理性を横断するモデリングフレームワークの構築、(2)物理構造やコスト構造の制約のもとで個別の顧客価値を最大化するプラットフォームコンセプトを大量の顧客情報を起点として探索する手法の開発、(3)具体のプロダクトデザインでの実装と各手法へのフィードバックの、3つを具体的な研究課題に設定し、プラットフォームコンセプトのデザイン創成支援の考え方を提唱することを目指して研究を進めた。平成30年度においては、平成29年度までの成果を踏まえて、(1)についてのフレームワークの拡張と(3)についての実装を通じた成果の洗練化に取り組んだ。具体的には、モデリングフレームワークに関しては、顧客ニーズ・物理機能・実体構造を越えてカスタマイゼーションのもとで複雑さが増すサプライチェーンや生産工程に関する事項にまで拡大させた。実装および成果の洗練化に関しては、平成29年度までの成果であった顧客ニーズ・物理機能・実体構造を統合し俯瞰するデザインの様相を受発注適正化の観点から体系的に整理した。また、モデリングフレームワークの拡張を受けて、平成29年度までの研究において対象としていた産業機器ではなく民生用機器に一連の枠組みを適用することによって、より普遍的な視点からフレームワークの検証と洗練化に取り組んだ。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では,カスタマイゼーションにおける顧客ニーズ・技術的可能性・経済的合理性のトレードオフを的確に見定めたプロダクトコンセプトを合理的に展開するために,顧客ニーズ・物理機能・実体構造のそれぞれについてのシステム構造と相互関係(=プラットフォーム)を俯瞰し,整合性を持ってデザインすることの意義を明確にするとともに,そのようなプラットフォームコンセプトのデザインを創成するための支援手法を提案することを目的とする.それに向け,(1)顧客ニーズ・技術的可能性・経済的合理性を横断するモデリングフレームワークの構築,(2)物理構造やコスト構造の制約のもとで個別の顧客価値を最大化するプラットフォームコンセプトを大量の顧客情報を起点として探索する手法の開発,(3)具体のプロダクトデザインでの実装と各手法へのフィードバックの,3つを具体的な研究課題に設定し,プラットフォームコンセプトのデザイン創成支援の考え方を提唱することを目指して研究を進めている.平成28年度においては,3つの課題の中でも,(1)についてのフレームワーク開発を進めるとともに,(3)について,その具体のプロダクトへの展開を行った.具体的には,モデリングフレームワークの構築,産業機器を題材とするプラットフォームコンセプトのモデリングを行った.また,同機器のプラットフォームコンセプトのデザイン、および支援フレームワークの順次実装と部分的検証を進めた.それらと連係しながら,産業機器の顧客情報の分析を進め,(2)についての大量の顧客情報からの顧客価値の抽出の可能性について検討を進めた.その過程で,顧客情報の整理に当初の想定以上の時間を要することが判明したため,計画を変更し,平成28年度の研究計画の一部を平成29年度に繰り越して実施することとした.当初の予定では,平成29年3月までに,課題(1)および(3)について,産業機器を題材とするプラットフォームコンセプトのモデリングと同機器の顧客情報の分析・ビッグデータ処理を実施し,同機器のプラットフォームコンセプトのデザインおよび支援フレームワークの順次実装と部分的検証を終える予定であった.しかしながら,題材として取り上げる産業機器の顧客情報の分析を開始したところ,当該情報がほとんど構造化されておらず,そのままではビッグデータ処理を実施できないことが判明した.そこで,当該機器の専門家を交えて顧客情報を整理し,構造化する作業を新たに計画し,平成29年2月までに実施した.それにより,平成28年度の当初の目標を平成29年7月まで繰り越すこととした.繰り越した計画は十分に達成可能なものであり,全体としてみればおおむね順調に進展している.本研究では,カスタマイゼーションにおける顧客ニーズ・技術的可能性・経済的合理性のトレードオフを的確に見定めたプロダクトコンセプトを合理的に展開するために,顧客ニーズ・物理機能・実体構造のそれぞれについてのシステム構造と相互関係(=プラットフォーム)を俯瞰し,整合性を持ってデザインすることの意義を明確にするとともに,そのようなプラットフォームコンセプトのデザインを創成するための支援手法を提案することを目的とする.それに向け,(1)顧客ニーズ・技術的可能性・経済的合理性を横断するモデリングフレームワークの構築,(2)物理構造やコスト構造の制約のもとで個別の顧客価値を最大化するプラットフォームコンセプトを大量の顧客情報を起点として探索する手法の開発,(3)具体のプロダクトデザインでの実装と各手法へのフィードバックの,3つを具体的な研究課題に設定し,プラットフォームコンセプトのデザイン創成支援の考え方を提唱することを目指して研究を進めている.平成29年度においては,平成28年度から継続して,(1)についてのフレームワーク開発と(3)についての実装の成果の洗練化を進めた.具体的には,モデリングフレームワークの構築,産業機器を題材とするプラットフォームコンセプトのモデリングを行った.また,同機器のプラットフォームコンセプトのデザイン、および支援フレームワークの順次実装と部分的検証を進めた.

それらと連係しながら平成29年度においては,(2)についての大量の顧客情報からの顧客価値の抽出の手法の開発を重点的に進め,産業機器の顧客情報の分析・ビッグデータ処理を実施した.産業用機器のプラットフォームデザインを題材としてフレームワークの検討を進めた.前述の通り,本研究では3つの具体的な研究課題を設定し,年度ごとに各課題の達成目標を定め,相互に連携させながら進めている.当初の予定では,平成29年3月までに,課題(1)および(3)について,産業機器を題材とするプラットフォームコンセプトのモデリングと同機器の顧客情報の分析・ビッグデータ処理を実施し,同機器のプラットフォームコンセプトのデザインおよび支援フレームワークの順次実装と部分的検証を終える予定であった.しかしながら,平成28年10月,題材として取り上げる産業機器の顧客情報の分析を開始したところ,当該情報がほとんど構造化されておらず,そのままではビッグデータ処理を実施できないことが判明した.そこで,当該機器の専門家を交えて顧客情報を整理し,構造化する作業を新たに計画し,平成29年2月までに実施した.それにより,平成28年度の当初の目標を平成29年7月に繰り越したが,目標通りに達成することができた.それらの成果を踏まえ,平成29年8月以降は主に課題(2)について重点的に研究を実施した.具体的にはまず,構造化した顧客要求情報に対して,相関ルール分析を適用し,Aというニーズを持つ顧客はBというニーズも持つ,といった顧客ニーズ間に存在する傾向を抽出する手法を開発した.顧客ニーズの傾向分析を行ったうえで,その傾向を素直には物理構造や製造プロセスへと転写できないことを具体的にかつ個別的に確認したうえで,技術的可能性や経済的合理性を傾向分析に反映させる際の論点を抽出した.さらに,それらによる知見をもとに,課題(1)に対応する支援フレームワークの洗練化を行い,順次,その実装に取り組んだ.併せて,課題(3)に対応して,産業用機器のプラットフォームデザインを題材としてフレームワークの検討を進めた.上記の成果を,学術雑誌掲載論文1件,国際学会講演1件,国内学会講演1件により発表した.本研究では、カスタマイゼーションにおける顧客ニーズ・技術的可能性・経済的合理性のトレードオフを的確に見定めたプロダクトコンセプトを合理的に展開するために、顧客ニーズ・物理機能・実体構造のそれぞれについてのシステム構造と相互関係(=プラットフォーム)を俯瞰し、整合性を持ってデザインすることの意義を明確にするとともに、そのようなプラットフォームコンセプトのデザインを創成するための支援手法を提案することを目的とした。それに向け、(1)顧客ニーズ・技術的可能性・経済的合理性を
クロレラに鞭毛はあるのか?

クロレラNC64A株ゲノムに検出した鞭毛関連遺伝子103個、減数分裂関連遺伝子4個に加えて対照としてハウスキーピング遺伝子22個を設定し、DNAマイクロアレイを作成した。遺伝子発現誘導条件として、窒素源飢餓、乾燥処理,低温処理を行い、アレイ解析を行った結果、対照と比べて誘導条件下で有意に高発現する2つの鞭毛関連遺伝子を検出した。qRT-PCR法を用いて、この2つの遺伝子の特異的な発現パターンを特定した。最適条件における他の複数遺伝子の発現を検討している。当初の目標・計画に従い、最終年度は、検出した2つの高発現鞭毛関連遺伝子Ig174, eG176を指標にqRT-PCRを用いて鞭毛誘導条件の検討を行った。(1)窒素源飢餓条件においては、Ig174の高度の発現がみられたものの、eG176は有意な発現を示さなかった。(2)アブシジン酸添加条件では,両遺伝子発現レベルとも低かった。(3)低温条件(4&#730;C処理)では、6-12時間後、両遺伝子とも高い発現を示した。このように、クロレラの鞭毛関連遺伝子には、その発現を特異的に誘導する環境条件が存在することが判明した。クロレラは単細胞緑藻として最も広く認識され、光合成生化学・生理学においてモデル生物として長い研究の歴史(数十年)を持ち、その特性は多くの学術論文、書籍等の文献に記載されてきた。その中で従来否定されてきたクロレラの運動性(鞭毛形成)と有性生殖プロセスについて、ゲノム情報から得られた関連遺伝子が実際に発現するという本研究からの新知見の意義は大きい。類似の事例として、配偶子形成の際に特殊な運動性鞭毛形成し有性生殖を行う淡水性珪藻タラシオシラが知られている。さらに、クロレラをはじめ他の単細胞藻類との系統学的な比較を含めて、光合成生物全般(運動性、有性生殖プロセスを含めて)のより普遍的な進化体系を構築する必要がある。鞭毛形成遺伝子の発現が誘導される条件確定後、その条件で処理した細胞に対して、抗鞭毛タンパク質抗体を用いた免疫染色と蛍光顕微鏡観察による鞭毛構造解析を行う事を計画していたが、時間切れとなってしまった。当初の目標・計画通り、クロレラNC64A株ゲノムに検出した鞭毛関連遺伝子103個、減数分裂関連遺伝子4個、に加えて対照としてハウスキーピング遺伝子22個(含植物ホルモン関係遺伝子群、キチン分解関連遺伝子群等)を設定し、各遺伝子について1015カ所、2325塩基の配列を設計しDNAマイクロアレイを作成した。遺伝子発現誘導条件としては、(1)窒素源飢餓処理(12 h, 48h),(2)乾燥条件処理(0.1 mMアブシジン酸処理6h, 40h),(3)低温処理(4C, 6h)を行い、クロレラ細胞より全RNAを抽出しcDNA標識化した。対照としては通常培養条件下、対数増殖期の細胞より全DNAを抽出し同様に標識した。これらプローブを用いて、DNAマイクロアレイ解析を行った結果、対照と比べて誘導条件下で有意に高発現する2つの鞭毛関連遺伝子を検出した。この2つの遺伝子の検出は極めて重要で、今後これら遺伝子の発現を指標により簡便なqRT-PCR法等を用いて鞭毛形成誘導条件を追究する事が可能となった。これら遺伝子の発現を最適化する条件下で、他の鞭毛関連遺伝子、減数分裂関連遺伝子等の発現を解析でき、さらに生理的変化、細胞構造変化、細胞表面変化等を詳細に調べることができる。方法は、微分干渉顕微鏡観察、電子顕微鏡観察(透過型、走査型)、特殊鞭毛抗体を用いた蛍光顕微鏡観察、免疫電顕等を行うことができる。当初の目標・計画に従いDNAマイクロアレイ解析を行った結果、対照と比べて誘導条件下で有意に高発現する2つの鞭毛関連遺伝子を検出した。鞭毛誘導条件として(1)アルカリ処理、(2)塩ストレス、(3)光ストレス、(4)ウイルス感染については、DNAマイクロアレイ解析コストの都合から行わなかったが、これらは2つの遺伝子を対象としたqRT-PCR解析により容易に検討することができる。さらに、クロレラが生育する多様な自然環境の諸条件についても幅広く検討解析する道が開けた。当初の目標・計画に従い、検出した2つの遺伝子を指標に、今後簡便なqRT-PCR法等を用いて鞭毛形成誘導条件を追究する。鞭毛誘導条件として(1)アルカリ処理、(2)塩ストレス、(3)光ストレス、(4)ウイルス感染に加えて、クロレラが生育する多様な自然環境の諸条件についても幅広く検討解析する。これら2つの遺伝子の発現を最適化する条件下で、他の鞭毛関連遺伝子、減数分裂関連遺伝子等の発現をqRT

-PCR法で定量評価する。さらに生理的変化、細胞構造変化、細胞表面変化等を詳細に調べる。方法は、微分干渉顕微鏡観察、電子顕微鏡観察(透過型、走査型)、特殊鞭毛抗体を用いた蛍光顕微鏡観察、免疫電顕等を行う。補助金額130万円のうち、消耗品費110万円(うち10万円は分担者藤江誠に配分),その他20万円(施設機器使用料、10万円、論文投稿料10万円)の使用予定である。消耗品費内訳は試薬酵素類80万円、PCRプライマー10万円、プラスチック器具10万円、ガラス器具10万円である。
二, 三の金属金属間結合を持つ多核錯体の光化学的挙動

発光性クラスタ-錯体、[Mo_6Cl_<14>]^<2->(Mo_6と略す)および[Pt_2(H_2P_2O_5)_4]^<4->(Pt_2と略す)の溶液内での光化学的挙動を溶媒効果、添加塩効果に主眼をおいて調べた。1.Mo6に関する研究成果.760nmにみられる巾広い発光ピ-クの寿命(N_2レ-ザ-、337.1nm励起)は著しい溶媒効果を示した(CH_3CN、180μs;0.1M塩酸、3.5μs)。また水溶液中ではHCl濃度に大きく依存した(6M塩酸、13.5μs)。また発光強度も著しい溶媒依存性を示した。これらの結果を合わせ解析すると、発光過程の速度(1×10^3s^<-1>は溶媒によらずほぼ一定であるが、無輻射過程の速度が著しい溶媒効果を示すことが明らかとなった。発光の[IrCl_6]^<2->による消光速度はCH_3CN中で3×10^6M^<-1>s^<-1>、0.6M塩酸中で4.5×10^9M^<-1>s^<-1>であった。添加塩効果は、前者で著しいのに対し後者ではほとんどみられず、圧力効果(2500Mpaまで)も前者だけにみられた。2.Pt_2に関する研究結果、溶解度の関数で溶媒効果は調べていない。515nmにみられる発光の[Mo(CN)_8]^<4->による水溶液中での消光反応([H^+]=0.01M)は著しい添加陽イオンによる影響を受けた。Mo_6の場合と同様、アルカリ金属イオンに対してはStokes半径と消光速度との間に良好な相関関係が認められた。以上Mo_6、Pt_2の光化学的挙動についてみられた著しい溶媒効果はいずれも他の錯体について知られているものに比べ桁違いに大きい。このような重要な手がかりを基に今後温度依存性などを含めた系統的な実験を進めることにより、錯体の励起状態と媒質との相互作用について重要な結論が得られるものと期待される。3.その他の結果.非発光性のMo、Wクラスタ-錯体、〔M_2O_4(H_2O)_6〕^<2+>、M_3O_4(H_2O)_9〕^<4+>(M=Mo、W)について紫外光照射下での反応性を調べた。これらは予期したより紫外光に対し安定であったが、HClO_4溶液中では光触媒により錯体がClO_4^-で酸化され分解することが明らかとなり興味深い。これらは予期したより紫外光に対し安定であったが、HClO_
深海性甲殻類複眼に関する比較生理学的研究

水深約1、200mに生息しているエゾイバラガニ(異尾類)の複眼の微細構造を電子顕微鏡で観察した。ヒトの眼では水深800mほどで完全に暗黒になるが、水深1200mでも極めて少ないが物理的には光は到達している。その僅かの光をみるためには眼の感度を生物学的限界まで上げることが必要になる。エゾイバラガニの複眼では、光受容膜であるラブドームが極端に発達し視細胞の全容積の90%近くを占めているのである。視細胞の核は隅に押しやられている。昼行性の昆虫では5%、夜行性の蛾で70%程度であるので、この数値はラブドームの大きさに関しては究極の大きさではないかと思われる。極端に発達したのはラブドームだけではない。個眼の網膜の周りに存在し、光をラブドームに反射する作用を持っている反射色素細胞は発達するほど眼の感度は良くなる事が期待されるが、このエゾイバラガニではラブドームと同様に、極めてて良く発達していた。浅海性のイソガニなどと比較すると容積で約10倍ほで大きい。相模湾初島沖の約1200mの深海から採集された硫黄酸化型細菌と共生している深海性二枚貝のシロウリガイ(Calyptogena soyoae)の鰓、足、介筋(貝柱)の組織の脂質を薄層クロマトグラフで定性、定量し、その脂肪酸の組成をガスクロで分析した。また浅海性の貝であるハマグリについて同様の分析を行い比較検討した。シロウリガイの主要な燐脂質はフォスファチジルエタノールアミンで次にフォスファチジルコリンが多かった。また共生細菌を細胞内に有する鰓にはリゾ体の燐脂質が顕著に多く検出された。ハマグリに多く含まれている20:5(エイコサペンタエン酸)や22:6(ドコサヘキサエン酸)などの高度不飽和脂肪酸はシロウリガイでは殆ど存在せず、代わりに20:2(エイコサジエン酸)が多く見られた。不飽和脂肪酸/飽和脂肪酸の割合はシロウリガイの方が顕著に高かった。科学技術庁の海洋科学技術センター(横須賀市)の深海潜行挺“しんかい2、000"により、相模湾沖の1、200メートルの深海底から深海性のエゾイバラガニを採集し、コントロールとして浅海性のイソカニダマシを平潟湾で採集し、両者の複眼の微細形態を観察し比較した。外見では両種の複眼には顕著な差は認められない。エゾイバラガニの個眼の角膜や円錐晶体などの光学的装置はイソガニのそれに比べて約2-3倍ほど大きい。特徴的なことはイソガニの円錐晶体は円柱状になっており、網膜と接する部分でもほとんど小さくなっていない。視細胞は個眼の網膜を構成する主要な細胞で、光を吸収し、光のエネルギーを生体情報に変換する感覚受容細胞である。一個眼の網膜は8個の視細胞からなり、光受容部位として特別に分化した光受容膜(ラブドーム、rhabdom)を持つ。ラブドームは細胞学でいう微絨毛(microvilli)の構造を示し、視物質を含み視覚興奮の初発反応の場である。エゾイバラガニの視細胞の最大の特徴は異常に発達したラブドームである。個眼の網膜層の90%以上がラブドームの膜で占められていることである。

網膜全体の容積に体してラブドーム占める割合は、イソカニダマシでは15-30%程度であるのに対して、エゾイバラガニでは90%と圧倒的に大きくなっている。深海でエゾイバラガニが眼の感度を高めるためにラブドームを異常に発達させたことが分かる。形態学的なデーターから視細胞の感度を推定する理論的な数式、即ちM.Lundの式により、両種の感度を比較してみるとエゾイバラガニの方がイソカニダマシより約50-100倍感度がよい。これは反射色素細胞の影響は考慮していないので実際はこれよりさらに感度は高いと思われる。海では100m毎に1/30ずつ明るさが減少し、10m毎に一気圧ずつ水圧が増加する。変温動物において、膜機能は環境の変化に対して維持されなければならないが、これは生体膜を構成する膜脂質の主要素、リン脂質、殊に脂肪酸の組成を変化させることで、膜の流動性を保ち達成していると言われている。タカアシガニ(Macrocheira kaempferi)は、一属一種のカニで、日本沿岸の特産であり、全節足動物の中で世界最大の動物であるが、生態学的にもまだ分からないことが多いやや深海性(50300m)のカニである。本研究では、タカアシガニ複眼の、膜の生化学的特徴と形態学的特徴を調べ、浅海性のイソガニと比較することで、タカアシガニの生息環境との関係を考察した。その結果、電子顕微鏡観察から、タカアシガニの複眼は薄暗い海底に肥大する方向で適応していることが分かった。また、U/S ratio(不飽和脂肪酸量/飽和脂肪酸量)が、イソガニもタカアシガニも同じ3.0前後であったことから、タカアシガニの生息している水温が、黒潮の影響で一年を通して1619°Cという比較的高い水温であることによると思われる。今回の実験では予期せず、一般に動物組織の脂質組成では1%以下の微量成分であるフォスファチジン酸が、タカアシガニでは512%、イソガニでは強い光(2000lux)で飼育した方に6.4%と多量に検出された。フォスファチジン酸と他のリン脂質との脂肪酸組成の比較から、フォスファチジン酸がPhospholipase Dにより生成されたと仮定した場合、強い光があたる前に存在する微量のフォスファチジン酸はフォスファチジルイノシトール由来であり、強い光が長くにあたった際、多量にできたフォスファチジン酸はフォスファチジルコリン由来のものであるだろうということが推測される。変温動物において、膜機能は環境の変化に対して維持されないければならないが、これは生体膜を構成する膜脂質の主要素、リン脂質、殊に脂肪酸の組成を変化させることで、膜の流動性を保ち達成していると言われている。
進行卵巣癌に対する新しい戦略的腫瘍溶解性ウイルス療法の開発

シクロデキストリン(CyD)は食品分野にも応用されている易溶性の環状オリゴ糖で、その内部空洞において疎水性化合物と結合して可溶化する性質から、抗癌剤の新たなキャリアとして期待されている。他方、上皮性卵巣癌の80%以上で葉酸受容体FOLR1が高発現していることから、葉酸が癌標的化リガンドとして注目されているが、CyDに関連した知見は限られている。本研究では、卵巣癌由来細胞株を対象として、葉酸付加したCyD化合物(FA-CyD)によるFOLR1標的化の可否について検討を行う。A2780、ES2、HEY、SKOV3、TOV21G細胞などの卵巣癌由来細胞株について検討を行った。パクリタキセル(PTX)は上記の細胞株すべてを傷害したが、FA-CyDと結合させたPTX(PTX/FA-CyD)はA2780、SKOV3、TOV21G細胞のみ傷害した。SKOV3及びTOV21G細胞についてはFOLR1の発現を検出できたが、A2780及びES2、HEY細胞ではできなかった。FOLR1以外の葉酸トランスポーターについて発現解析を行った結果、A2780細胞においてはProton-coupled Folate Transporter (PCFT)発現がES2及びHEY細胞より顕著に高かった。A2780細胞においては、PCFT発現をノックダウンするとPTX/FA-CyDによる傷害が有意に減弱したが、FOLR1発現をノックダウンしても変化が見られなかった。SKOV3細胞においては、PCFT及びFOLR1のいずれをノックダウンしても傷害が有意に減弱した。また、A2780細胞では中性pHと比較して酸性pHにおいてPTX/FA-CyDによる傷害が有意に増強したが、SKOV3細胞では変化が見られなかった。以上より、葉酸コンジュゲート薬であるPTX/FA-CyDについて、PCFT依存的な標的化が新たに示唆された。1)宿主免疫回避,卵巣がん特異的ウイルス粒子の開発:デキストランに注目し被膜用として選択した.また卵巣がん細胞への標的分子として葉酸受容体(FOLR1)に注目し,卵巣がん細胞株でのFOLR1発現をRT-PCRを用いて解析した.解析した7種の卵巣がん細胞株の内4種においてFOLR1の発現が確認された.またFOLR1に対するsiRNAを2種合成し葉酸受容体陽性細胞株に導入した結果,どちらのsiRNAにおいてもFOLR1の発現が抑制されていた.デキストランに葉酸(FOL)の修飾を試みたがデキストラン-葉酸修飾体は得られなかった.2)腫瘍微小環境クロストークの解明とその応用:腫瘍微小環境クロストークの解析のため,ヒト初代中皮細胞の培養系の構築し,卵巣がん由来細胞株との共培養系構築を行った.3)in vivo評価:マウス腹腔内へのがん細胞の投与は簡便であり腹膜播種のモデルとしてよく用いられている.しかし原発巣(卵巣部)からの様態は反映できない.我々はマウス卵巣部へのがん細胞同所移植系を構築した.本方法はマウスへの侵襲性が低く,卵巣部への接種も低容量のため負担も少ない方法である.また接種する細胞にluciferase遺伝子を導入しin vivoイメージング装置を用いることにより,個体内における原発巣からの動態観察を可能としている.ウイルス療法においてウイルス-宿主免疫系の解析は必須であるが,卵巣がんにおける良いモデルは無い.ID8はマウス卵巣上皮由来細胞であるが,個体内での造腫瘍能は低い. in vivo継代し得られたID8-t5を更に継代しID8-t6を得た.ID8-t6は親株に比べ造腫瘍能が著明に高く,免疫正常マウス個体内での解析に非常に有用な細胞である.1)宿主免疫回避,卵巣がん特異的ウイルス粒子の開発:宿主免疫回避とターゲッティングの両立を期待し,デキストランに葉酸の修飾を検討.実施したがデキストラン-葉酸修飾体は得られなかった.条件,方法の検討が必要と思われるが,我々は有機合成を日常的に行っていないため,その解決に時間がかかっている.腫瘍溶解性メカニズムの主担当であった研究協力者の離職により,メカニズムの解明に遅延が生じた.2)腫瘍微小環境クロストークの解明とその応用:実際の解析には至っていないが,解析のための培養系・共培養系は構築できたのでやや遅れていると判断する.上記と同様,研究協力者の離職により遅延が生じた.3)in vivo評価:実際の解析には至っていないが,in vivo解析用の腹膜播種モデル及び同所移植モデル系の構築は完了した.腹膜播種癌のような進行卵巣癌の5年生存率は長年に渡って30%程度で推移しており、従来の化学療法とは一線を画した治療戦略が求められている。近年、腫瘍組織特異的に増殖する腫瘍溶解性ウイルスを用いた治療法が注目を集めているが、卵巣癌に関する知見はまだ少ない。本研究では、腹膜播種卵巣癌同系マウスモデルを用いた腫瘍溶解性ウイルス療法による抗腫瘍効果の検討を行いつつ、従来の腫瘍溶解性ウイルスよりも高い抗腫瘍効果、並びに、卵巣癌選択性を持つような新規腫瘍溶解性ウイルスを検討していき、腫瘍溶解性ウイルスによる新たな卵巣癌治療法開発の為の基盤を構築する。平成29年度は宿主免疫回避、卵巣癌特異的ウイルス粒子開発の為の検討を中心的に行った。

卵巣癌細胞の標的分子として葉酸受容体(FOLR1)に着目し、卵巣癌細胞株でのFOLR1発現をRT-PCR並びにウェスタンブロットを用いて解析した。解析した12種の卵巣癌細胞株のうち、ID8-t6、NOS3、SKOV3、TOV-21Gの4種においてFOLR1発現が確認された。FOLR1のアミノ酸配列と高い相同性を示し、葉酸結合において拮抗しうるFOLRファミリータンパクであるFOLR2はこれらの細胞において発現が見られないことも確認した。細胞葉酸修飾したシクロデキストリン(ND201)とパクリタキセル(PTX)とを結合させたND201-PTX包接体は、FOLR1発現が確認された卵巣癌株のみに殺細胞効果を示した。FOLR1発現が確認されず、ND201-PTXに非感受性であった卵巣癌細胞株にFOLR1を強制発現させると、ND201-PTXに対して感受性を示した。本研究の実験担当者が離職し、新たな実験担当者を確保するのに時間がかかった。また、研究に使用する予定であったHF10株を入手することが出来なくなった為に、代替株の選定及び予備的検討をやり直すことになった。シクロデキストリン(CyD)は食品分野にも応用されている易溶性の環状オリゴ糖で、その内部空洞において疎水性化合物と結合して可溶化する性質から、抗癌剤の新たなキャリアとして期待されている。他方、上皮性卵巣癌の80%以上で葉酸受容体FOLR1が高発現していることから、葉酸が癌標的化リガンドとして注目されているが、CyDに関連した知見は限られている。本研究では、卵巣癌由来細胞株を対象として、葉酸付加したCyD化合物(FA-CyD)によるFOLR1標的化の可否について検討を行う。A2780、ES2、HEY、SKOV3、TOV21G細胞などの卵巣癌由来細胞株について検討を行った。パクリタキセル(PTX)は上記の細胞株すべてを傷害したが、FA-CyDと結合させたPTX(PTX/FA-CyD)はA2780、SKOV3、TOV21G細胞のみ傷害した。SKOV3及びTOV21G細胞についてはFOLR1の発現を検出できたが、A2780及びES2、HEY細胞ではできなかった。FOLR1以外の葉酸トランスポーターについて発現解析を行った結果、A2780細胞においてはProton-coupled Folate Transporter (PCFT)発現がES2及びHEY細胞より顕著に高かった。A2780細胞においては、PCFT発現をノックダウンするとPTX/FA-CyDによる傷害が有意に減弱したが、FOLR1発現をノックダウンしても変化が見られなかった。SKOV3細胞においては、PCFT及びFOLR1のいずれをノックダウンしても傷害が有意に減弱した。また、A2780細胞では中性pHと比較して酸性pHにおいてPTX/FA-CyDによる傷害が有意に増強したが、SKOV3細胞では変化が見られなかった。以上より、葉酸コンジュゲート薬であるPTX/FA-CyDについて、PCFT依存的な標的化が新たに示唆された。1)宿主免疫回避,卵巣がん特異的ウイルス粒子の開発:デキストラン-