hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
SHP-1とアダプター分子によるB細胞活性化・不活性化の制御機構

(1)これまでの報告とは異なり、SLP-76は種々の分化段階にあるマウスB細胞株および正常脾臓B細胞においてmRNA、タンパクとも発現していた。(2)SHP-1はSLP-76を脱リン酸化することによって、チロシンリン酸化を受けたSLP-76と結合するNck/NIK複合体の量を減少させる。その結果、BCR刺激によって誘導されるJNKの活性化をネガティブに、そして最終的な表現型の一つであるアポトーシスの過程をポジティブに制御していることが明らかとなった。(3)BLNK欠失B細胞株を用いた実験では、BLNKの機能を代替するためにはSLP-76に加えて膜結合型リンカー分子LATの発現が不可欠であることが報告されていた。しかし、今回実験に用いたWEHI-231にはLATが発現していないのにもかかわらず、SLP-76が機能していることが明らかになったことから、B細胞においてLATと同様の機能を有する別の分子の存在が想定された。この作業仮説を検証するために、BCR刺激前後の細胞可溶化タンパクを膜画分と細胞質画分とに分けて、それぞれからSLP-76を免疫沈降後、抗リン酸化チロシン抗体を用いたウエスタン解析を行った。すると、BCR刺激以前からSLP-76は膜画分に局在しており、その量はBCR刺激後に増加すること、BCR刺激後膜画分に局在するSLP-76のリン酸化の程度が細胞質画分のSLP-76と比較し減弱していること、そして細胞膜に局在するSLP-76はBCR刺激後にB細胞特異的に発現する膜分子であるCD22と結合することが明らかとなった。CD22の細胞内領域にはBCR刺激後リン酸化されるチロシン残基が6個存在し、SHP-1もここにリクルートされることが報告されていることから、今回の実験結果はCD22がSHP-1によるSLP-76の脱リン酸化反応をおこす足場を提供していることが想定された。以上の結果を論文にまとめ現在投稿中である細胞質型チロシンホスファターゼであるSHP-1が、B細胞抗原受容体(BCR)を介するシグナルをどのように制御しているのかについて解析を進め以下の結果を得た。(1)substrate trapping法を用いてマウス未熟B細胞株であるWEHI-231におけるSHP-1の基質を検索したところ、BLNKに加えて白血球特異的アダプター分子であるSLP-76が候補分子として同定できた。これまでにSLP-76のB細胞における発現は報告されていなかったため、種々の分化段階にあるマウスB細胞株、あるいは正常脾臓B細胞におけるSLP-76の発現を詳細に検討したところ、いずれの細胞においても発現が認められた。さらに、SLP-76の発現は未熟B細胞の段階で比較的多く、その後分化段階が進むにつれて漸減していることが確認された。(2)SHP-1がSLP-76を脱リン酸化することにより、SLP-76と会合するアダプター分子Nckの量が減少していた。NckはJNK活性化に関わる上流の酵素(MAPKKKK)に相当するNIKと恒常的に会合しており、SLP-76と結合するNck/NIK複合体量の減少はBCR刺激後に誘導されるJNK活性化を選択的に抑制していた。またJNK抑制とアポトーシスの程度には負の相関が認められることから、SHP-1はSLP-76を脱リン酸化することによって、BCR刺激後に誘導されるJNK活性化をネガティブに、アポトーシスをポジティブに制御していることが明らかとなった。(3)T細胞において、SLP-76が機能するためにはLATと結合して細胞膜に局在することが必要であることが知られている。
擬Riemann多様体の等長変換群の離散部分群の群作用について

本研究の目的は、擬Riemann多様体の等長変換群の離散部分群の群作用を調べ、作用の性質を明らかにすることである。今年度は、特に、Lorentz多様体の基本群を研究した。基本群はデッキ変換として普遍被覆Lorentz多様体に等長かつ固有不連続に作用するため、基本群が等長変換群の離散部分群として実現されることに注意する。小林俊行氏の予想に関連して、Riemann幾何におけるMyersの定理の類似がLorentz幾何で成り立つかを研究した。つまり、ある種の曲率の正値性から基本群の有限性が導かれないかを検討した。今年度は、必ずしも曲率が一定でない大域的双曲型Lorentz多様体のクラスにおいてMyersの定理の類似が成り立つかを検討した。Andersson--Howardが導入した曲率条件であるR≧k>0の条件下で考察した。このとき、R≧k>0が成り立つ3次元以上の完備大域的双曲型Lorentz多様体の基本群は有限群になるのではという予想を立てた。我々は、自ら立てた予想に対して部分的結果を与える事ができた。つまり、あるクラスのLorentz多様体のクラスに対して基本群が有限群になることを示す事ができた。(抄録なし)本研究の目的は、ローレンツ多様体をはじめとする擬リーマン多様体の等長変換群の離散部分群の作用の性質を調べることである。ローレンツ多様体の等長変換の離散部分群の固有不連続な作用に関して1968年にCalabiとMarkusによって次の興味深い現象が観察した:de Sitter空間の等長変換群の離散部分群で固有不連続にde Sitter空間に作用するものは有限群になる。前年度までの成果として、私はCalabiとMarkusの結果をローレンツ多様体のある種のクラスにまで一般化することができた。今年度、私の結果をより一般の擬リーマン多様体に一般化できるかどうかについて研究を行った。擬リーマン多様体の重要な例である擬リーマン捩れ積の場合から考察を行った。捩れ積の場合において、私の前の結果の類似の結果を得ることができた。CalabiとMarkusの結果が一般の擬Riemann多様体へ一般化できることの手がかりとなる結果である。まだ、CalabiとMarkusの結果を一般の擬Riemann多様体にまで一般化できていないので、研究はやや遅れているとした。今後であるが、もう一度、ローレンツ多様体の場合に戻って、私の論文で得た手法とは別の手法を開発することを試みる予定である。AnderssonとGallowayが2002年にある種の曲率条件を課したasymptotically simpleな時空へのクラスに対して、基本群の有限性を示した。この結果は、CalabiとMarkusの結果の一般化であり、私のすでに得ている結果とは全く違う方向性のものである。私は、AndessonとGallowayの与えた与法を参考に、別の新しい結果を与えれないかを考察し、研究している。(抄録なし)
ミトコンドリア蛋白MGARPが関わるステロイドホルモン産生細胞の恒常性維持機構

MGARPはステロイドホルモン産生細胞のミトコンドリアに選択的に発現する。ミトコンドリアのコレステロール輸送への関与や、性腺や副腎の主要転写因子Ad4BP/SF-1の標的遺伝子であることなど、近年MGARPに関する重要な知見が示されてきており、本蛋白がステロイドホルモン産生に積極的に関与していることが示唆されるが、低酸素誘導性因子HIF-1の発現制御下にある意義や、ミトコンドリア自体の機能・形態の恒常性維持における役割は不明である。本研究では、こうした点などMGARPのステロイドホルモン産生細胞における機能とその制御機構を明らかにする。
ラジカル／イオン含有ブロック共重合体の自己組織化と有機デバイスへの展開

有機ラジカルの迅速かつ安定な「電荷授受」能と、イオン液体の「電荷補償」能に着眼し、(a)精密重合によるブロック共重合体の合成、および(b)イオン液体をキャリアとした機能分子の自己集積化、の2つの手法でミクロ相分離した高分子薄膜に機能部位を精密に配置、組み込むことに成功した。特にミクロ相分離構造(モルフォロジー、配向性)、ラジカル/イオン部位の配置とメモリ特性(一回or繰り返し書込み可)との相関を明らかにするとともに、On/Offスイッチングの発現機構を探るべく、走査プローブ顕微鏡を用いた局所的な印加電圧による表面電位およびI-V特性変化からドメイン内の電荷注入・輸送過程について描像した。(1)ラジカル/イオン置換ブロック共重合体の有機メモリ特性昨年度までに電荷授受能を有するラジカル、電荷補償能を有するイオン液体部位を各セグメントに置換した機能性ブロック型高分子の精密合成に成功している。本年度は、セグメント比、熱アニーリング、選択溶媒を用いたアニーリングの検討により、スフィア、ラメラ、逆スフィア型のミクロドメイン構造を生起させた。ITO, Al電極でミクロ相分離膜を挟んだ簡便な有機薄膜素子では、いずれも一回書込み(WORM)型のメモリ特性を示し、ミクロドメイン構造だけでなく、ラジカル/イオンなど機能部位のドメイン配置もメモリ特性の違いに寄与することを明らかにした。(2)ラジカル/イオン含有ミクロドメインへの電圧印加による表面電位変化昨年度までに、機能分子(例えばTEMPO)にイオン液体部位を導入することで、イオン液体がキャリアとして機能し、汎用ブロック共重合体(例: PS-b-PEO)の親イオンドメインへ選択的に集積・配置できることを、示差熱分析、固体NMR、各種電顕により明らかにした。本年度は、独・Max Planck高分子研究所との共同実験としてKelvin Probe Force Microscopyを実施した。サンプル下部電極と走査プローブ間に電圧を印加し、ミクロドメインの表面電位分布を計測した。書込み電圧を印加して走査することにより、走査(パターニング)領域の表面電位が他と比べ大きくなることを見出し、電荷注入のしやすさの変化を支持し、メモリ特性発現機構の手がかりを得た。(3)活性エステル導入ブロック共重合体の精密合成ラジカル/イオンを片側ドメインへ任意に導入できる利点を有する反応性高分子として、Click反応が可能なペンタフルオロフェニルエステルを持つブロック共重合体をRAFT重合により合成した。次年度にClick反応を検討する。(1)機能性ミクロドメイン薄膜の有機メモリ機構の考察昨年度までに繰り返しOn/Offスイッチングを示す機能性ミクロ相分離ドメインの要件を明らかにした。本年度は走査プローブ顕微鏡を用いて有機メモリ特性の発現機構について詳細に検討した。PS-b-PEO(Mn = 37k-b-6.5k)のPEOスフィアドメインにTEMPO置換イオン液体1を20 wt%選択的に導入したミクロ相分離薄膜を対象に、導電性プローブを用いて電位印加にともなうOn/Offスイッチング前後での表面電位変化をKelvin Probe Force Microscopy (KPFM)により測定した。書込みにともなう形状、位相像に大きな変化はなく、表面電位のみ1桁高くなり、電荷注入のしやすい状態へ変化したと考えられる。対照実験となるTEMPOイオン液体1を含まないPS-PEO薄膜では、書込み電圧印加後も表面電位変化は小さく、On/Offスイッチングには1の存在が不可欠であることを支持した。また、Conductive AFM測定より電位印加部の導電率が上がりパターニングできることを明らかにした。一方、導電性パターンは1つのスフィアドメイン上ではなく複数ドメインにわたり広がって現れ、非連続相を経由するOn/Offでは記録密度の限界もあることを示した。(2)クリック反応を用いた機能性ブロック共重合体の精密合成昨年度までに精密合成を確立した反応活性ブロック共重合体を元に、クリック反応でラジカル・イオン部位を同一ドメインに任意の割合で導入した機能性ブロック共重合体を合成した。得られた素子において1回書込み(WORM)型のメモリ挙動を明らかにした。1.精密ラジカル重合によるラジカル/イオン置換ブロック共重合体の合成反応性高いラジカル存在下でも進行する高分子合成化学の開拓を目的として、2つの精密重合法を検討した。DEPN系アルコキシアミン開始剤BlocBuilderを用いたニトロキシド媒介精密ラジカル重合(NMP)では、イミダゾリウム置換スチレン、ラジカル前駆モノマーであるピペリジニルアクリレートの順で精密重合した。また、Grubbs触媒を用いた開環メタセシス重合では、TEMPO置換ノルボルネン、イミダゾリウム置換ノルボルネンをワンポットで逐次重合することでラジカル/イオン含有ブロック共重合体を得ることに成功した。

得られたブロック共重合体はセグメント長によりランダム配向したシリンダー構造を形成したが、汎用ブロック共重合体(PS-b-PEO)ほどの制御された相分離構造の構築は困難であった。2.ラジカル置換イオン液体の合成とミクロ相分離構造への選択的導入汎用ブロック共重合体、例えばポリ(スチレン-b-ポリエチレンオキシド)(PS-b-PEO)が自己組織化により形成するミクロ相分離構造のPEO相への選択的な機能分子の集積化を試みた。2,2,6,6-テトラメチルピペリジニル-N-オキシ(TEMPO)をイミダゾリウム系イオン液体に連結させた分子を合成、PS-b-PEOに加えると、PEOの融点ピークが消失し、PEOのガラス転移温度Tgがシフトしたのに対し、PSのTgがシフトしないことから、イオン液体をキャリアとしたPEO相への機能部位の選択的取り込みを明らかにした。TEM観察および磁気力顕微鏡(MFM)像におけるPEO相の膨潤、固体NMRによるPEOピークのブロード化などからラジカル連結イオン液体のPEO相への取り込みを支持した。昨年度精密合成に成功したラジカル/イオン置換ブロック共重合体を用いて有機メモリ素子を作製した。別ドメインにラジカル、イオンを配置することで1回書き込み型(WORM)型のメモリ特性を示し、これまでに明らかにしたドメイン構造、配向性に加え、機能部位の配置の重要性を明らかにした。また、メモリ特性発現機構の解明に踏み込むべく、独Max Planck高分子研究所に2週間滞在し、走査プローブ顕微鏡を用いた印加電圧と表面電位、局所的な導電性評価について予備検討を行った。初年度に計画したラジカル/イオン含有ブロック共重合体の精密合成法を2つ確立済みである。特にラジカルモノマー自身の重合が可能である開環メタセシス重合を適用したブロック共重合体の精密合成を明らかにした点が大きい。また、汎用ブロック共重合体とイオン液体の相互作用に基づくミクロドメインの選択的な機能化については、有機メモリ素子として実デバイスへと展開した。モルフォロジーによるメモリ特性の発現制御など、モルフォロジーと電子物性の相関について明らかにした結果はAdvanced Materials誌に掲載され、インパクト高く成果報告することができた。本年度はメモリ特性発現機構の解明に踏み込むべくconducting AFMなどの共同実験を計画している。本年度精密合成した活性エステル含有ブロック共重合体を元に、ラジカル、イオンを共存かつ任意の割合で片側ドメインに導入したブロック共重合体を合成する。固体NMRや小角X線散乱、TEM等によりイオン液体とミクロドメインとの相互作用を、機能分子のキャリア能として定量化する予定である。また、導電性の走査プローブを用いて電圧印加し、On/Offスイッチング時の、表面電位、電流密度分布を可視化し、メモリ特性発現の機構について考察を深める。初年度に得られたラジカル/イオン含有ブロック共重合体が形成するミクロ相分離構造の解析に注力する。
次世代技術を活用した異体類体色の左右差形成の分子ネットワークへのアプローチ

ヒラメ・カレイ類は魚類一般と同じく胚発生で外見的に左右対称に発生した後、変態期に片側の眼球が体の反対側に移動し、続いて有眼側皮膚に色素胞が分化することにより体全体が左右非対称を形成する。増養殖用人工種苗では、体色異常(無眼側黒化、有眼側白化)が多発するために、その発生機序の解明が望まれている。本研究では、体色の左右差形成の制御システム、および体色異常の発生機序を解明した。ヒラメ・カレイ類は変態期に有眼側皮膚が褐色に着色することにより体色が左右非対称となるが、体色の左右差形成の分子基盤は不明である。養殖種苗では、無眼側皮膚が着色する体色異常(黒化)が高頻度に起こり、その原因解明が望まれている。そこで本年度は、体色の左右差形成の分子機構と黒化の発生機構の解明を目指した。次世代シーケンス解析により、ビタミンA(VA)の活性体、レチノイン酸(RA)への暴露によりヒラメ仔魚に発現誘導される遺伝子を網羅的に同定した。RAにより発現量が10倍以上に誘導される遺伝子が14種類見つかった。その中にはRA分解酵素cyp26bが含まれていた。皮膚におけるcyp26b発現強度は有眼側よりも無眼側で有意に高く、発現量に左右差があることが、qPCR解析により明らかになった。cyp26bが無眼側でRAを分解することにより、色素胞分化を抑制して体色の左右差を形成すること、RA過剰は無眼側でも色素胞分化を起こすことで黒化を誘導することが示唆された。種苗生産では日照時間は種苗の生残や成長に深く関わるが、光と生残・成長との関係は不明な点が多い。本研究では、体色形成に加えて、ヒラメ胚と仔魚を使って概日リズムの発生についても検討した。時計遺伝子の主要メンバーであるperod2 (per2)の発現をin situハイブリダイゼーション法で調べた。LDからLLに移しても視交叉上核(SCN)は昼ON/夜OFFのper2の発現リズムを維持することが明らかになり、ヒラメではSCNが概日リズムを発信する中枢時計として機能することが示された。胚をLL、DDで飼育すると、SCNの概日リズム形成が抑制され、明暗の刺激がSCNの概日リズム形成に必須であることが示された。ヒラメ・カレイ類の体色は、有眼側が褐色、無眼側が白色で左右非対称であり、この体色の左右非対称性は変態期に黒色素胞が有眼側の皮膚だけに分化することで形成される。本研究では体色の左右差形成の制御機構の解明をめざす。本年度、変態期仔魚の有眼側と無眼側の皮膚をレチノイン酸(RA)存在・非存在下で培養し、色素前駆細胞への影響を調べた。RA非存在下では無眼側皮膚片に色素前駆細胞は出現しないが、RA存在下では24時間培養するだけでdhfr陽性の色素前駆細胞が大量に出現した。これまでの成果を総合すると、色素幹細胞は仔魚期には身体の正中部に分布し、それらは変態期に左右皮膚に遊走する。この時点では、左右差はないが、色素幹細胞から色素前駆細胞への分化誘導因子であるRAが、無眼側皮膚では高発現するcyp26bにより分解される事で、色素前駆細胞の分化が抑制され、体色の左右差が形成されるものと結論される。種苗生産で高率に発生する無眼側の部分黒化についても解析した。天然で変態したヌマガレイ稚魚でも水槽飼育すると、部分黒化が発生した。従って、部分黒化は、変態の異常に起因するのではなく、無眼側皮膚には何らかの刺激により黒色素胞を分化する性質があることが推定された。また黒色素前駆細胞が鱗を覆う上皮組織と表皮との間に分化することが明らかになった。概日リズムについて、昨年度までに、海産大型魚類では視交叉上核に時計遺伝子per2による24時間のリズム発信機構が存在することを明らかにした。本年度は、末梢組織でのリズム発信を解析し、末梢組織でもper2の24時間のリズムが発信している事を明らかにした。また末梢組織に、光受容タンパク質であるmelanopsinが発現している事を観察した。melanopsinが末梢のリズム形成に関与し、またその発現が無眼側の部分黒化と関係する可能性が推定された。当初の予想よりも1年早く、ヒラメ・カレイ類における体色の左右非対称性形成の制御機構の全貌をほぼ解明する事ができた。また本研究により、種苗生産で問題となっている体色異常(無眼側の黒化、有眼側の白化)にクリティカルな時期が、白化は変態初期、黒化は変態クライマックス期にあることが明らかになった。これらの成果は、ヒラメ・カレイ類の種苗生産技術の高度化に貢献するものと期待され、成果は基礎生物学だけでなく、養殖業産業へも貢献できる点で達成度が高いと自己評価している。成果はまとめて、今年度の水産学会のシンポジウムで講演し、その内容は、他の講演とともに単行書として出版される予定である。変態後に起こるヒラメ・カレイ類の部分黒化は、種苗生産では100%の個体に起こるため、その原因究明が求められている。本年度、黒化を起こす黒色素胞が分化する場所が、鱗と表皮の間にあることを特定する事ができた。

またmelanopsinが、黒色素胞が分化する領域に発現している事を観察し、光が黒色素胞分化に関わっている可能性が推定された。また色素分化に伴い、円鱗が櫛鱗に変化することから、色素胞の分化が鱗の形態形成に関わっている可能性が考えられた。これらの現象は色素胞の異所的な分化、骨組織の形態形成への関わりなど、これまで知られていなかった新しい色素胞の機能解明に結びつく可能性が考えられる。ブラジル産アルテミア(BA)をヒラメ・カレイ類の初期仔魚に給餌すると、変態後、全個体に有眼側白化が発生することが知られている。この時期にはまだ成体型色素胞は幹細胞の状態で分布することから、BAに含まれる何らかの成分が作用して、色素幹細胞を死滅させていることが推定される。色素幹細胞の維持に機能する遺伝子を探索することを目的として、白化を起こさないユタ産アルテミア(UA)、BAをそれぞれ初期仔魚に投与し、次世代シーケンサーによるRNA-Seq解析を行い、BA給餌によりに発現量が低下する遺伝子をスクリーニングした。そのうち、betain-homocysteine S-methyltransferase 1 (bhmt1)は、ヒトでは機能抑制型変異により皮膚・毛髪の白化が起こることが知られており、ヒラメでも色素胞の機能維持に働いていることが予想された。変態後に起こる無眼側の着色型黒化の発生機序を解明するために、黒化を起こす色素胞の起源について検討した。黒化発生初期の皮膚における色素前駆細胞マーカーgch2の発現を観察したところ、体表の粘液細胞の基部に反応が検出された。色素幹細胞あるいは幹細胞に分化しうる細胞が、体表の粘液細胞の基部に存在し、水槽内飼育の何らかの環境刺激によりそれらが色素胞に分化し、着色型黒化が起こることが予想された。概日リズムについて、末梢組織のリズム発信は、中枢時計の制御によりオシレートされていることが明らかになり、コルチゾルが中枢時計と末梢両者を連絡する液性因子であることを明らかにした。ヒラメ・カレイ類は魚類一般と同じく胚発生で外見的に左右対称に発生した後、変態期に片側の眼球が体の反対側に移動し、続いて有眼側皮膚に色素胞が分化することにより体全体が左右非対称を形成する。増養殖用人工種苗では、体色異常(無眼側黒化、有眼側白化)が多発するために、その発生機序の解明が望まれている。本研究では、体色の左右差形成の制御システム、および体色異常の発生機序を解明した。本年の研究により、色素幹細胞の色素胞への分化にはRAが必要であり、無眼側ではcyp26bがRAを分解することで、幹細胞の色素胞への分化が抑制されることなど、RAとその分解酵素cyp26bを介したシステムが体色の左右差形成で機能することが明らかになった。このように体色左右差形成の分子基盤の全貌解明に向けて大きな足がかりが得られたものと考えている。また黒化発生に関し、RAが過剰に供給されると、無眼側でのRA分解が追いつかずに、幹細胞が色素胞に分化して黒化を起こすと言うメカニズムが示された。飼料中のVA過剰は、RA過剰を起こして黒化を誘起する可能性が考えられる。マウスなどの母体内で発生する哺乳類では、中枢時計の発生におよぼす光条件の影響を解析することは困難である。今回、ヒラメ胚を使うことで始めて、脳内SCNにおける中枢時計の正常発生に光の明暗刺激が必須であることが明らかになった。モデル生物のゼブラフィッシュでは、SCNに時計遺伝子のリズムは認められないことが分かっており、ヒラメ胚を使った実験系は、各種薬剤が中枢時計の発生におよぼす影響の解析にも利用できるなど、概日リズム研究に広く応用可能だと期待される。2つの成果とも当初の計画を超えるものであり、本年度については想定以上の達成度であったと考えている。
非コンパクトリーマン面上の平坦接続のモジュライ空間

前年度は乗法的中間畳み込みを点付き射影直線上のフィルター付き局所系に対する変換操作として拡張する試みを行い,また不確定特異点型線型常微分方程式系のナイーブなモジュライ空間を箙多様体のある種の一般化として記述する研究を行っていたが,後者の研究の延長として,今年度は加法的中間畳み込みに着目し,これを不確定特異点型線型常微分方程式系に対して拡張する試みを行い,成功した.拡張の際用いた手法は,全く新しいものである.先ず,Dettweiler-Reiterによる中間畳み込みの初等的な記述を,Adams-Harnad-Hurtubise-Previatoによるスペクトル保存変形の研究を用いて再解釈した.これによって,中間畳み込みのより簡明な記述を得た.そして得られた記述を観察すると,拡張問題は自然に箙の表現論とその不変式論に関する基本的な問題に帰着された.こうして最終的に中間畳み込みの不確定特異点型線型常微分方程式系に対する拡張を得る事に成功し,更に元の中間畳み込みが持っていた基本的な性質が,拡張されても保持されている事が直ちに従った.次の課題は,今回得られた拡張がモノドロミー保存変形の方程式を保つ事を示す問題であり,これが解決されれば,モノドロミー保存変形の方程式として得られる種々の重要な非線形微分方程式の理論に重要な応用が見いだされ,これによって可積分系の分野に大きく貢献する事ができると考えている.また,今回の研究で中間畳み込みとAdams達の研究との関連が初めて見いだされた事も意義深い事と思われる.申請者はこれまでの研究において乗法的箙多様体を導入し、その幾何学的性質や他分野との繋がりを研究していた。当該年度では、研究計画に基づき、星型箙に付随する乗法的箙多様体と点付き射影直線上の放物接続のモジュライ空間との間の全単射が複素解析的シンプレクティック同型写像である事を、比較的緩い技術的仮定の下で証明した。この結果はそれまでの乗法的箙多様体に関する一連の研究結果と共に論文としてInternational Mathematics Research Papersに掲載された。次に、乗法的肢多様体の族が持つ対称性である乗法的鏡映関手と、穴あき射影直線上の局所系にはたらく中間畳み込みの関係を明らかにし、また上述の論文にて証明した、乗法的箙多様体と点付き射影直線上のフィルター付き局所系のモジュライ空間との間の同型写像の存在定理において、乗法的箙多様体の実パラメータに関する仮定を緩める事に成功した。そしてこれら2つの結果を合わせた応用として、中間畳み込みの操作を点付き射影直線上のフィルター付き局所系に対して拡張する事に成功した。フィルター付き局所系は非コンパクト代数曲線上の非アーベル・ホッジ理論を展開する上で基本的な対象であり、また一方、中間畳み込みはそれ自身が古典解析の分野において有用な道具であるだけでなく、モノドロミー保存変形によってパンルヴェ方程式のベックルンド変換と関係する等、大変興味深い概念である。申請者の導入した乗法的箙多様体とそれに関する今回の研究結果により、両者に関する理解がより深まり、理論の発展をみたと考えている。前年度は乗法的中間畳み込みを点付き射影直線上のフィルター付き局所系に対する変換操作として拡張する試みを行い,また不確定特異点型線型常微分方程式系のナイーブなモジュライ空間を箙多様体のある種の一般化として記述する研究を行っていたが,後者の研究の延長として,今年度は加法的中間畳み込みに着目し,これを不確定特異点型線型常微分方程式系に対して拡張する試みを行い,成功した.拡張の際用いた手法は,全く新しいものである.先ず,Dettweiler-Reiterによる中間畳み込みの初等的な記述を,Adams-Harnad-Hurtubise-Previatoによるスペクトル保存変形の研究を用いて再解釈した.これによって,中間畳み込みのより簡明な記述を得た.そして得られた記述を観察すると,拡張問題は自然に箙の表現論とその不変式論に関する基本的な問題に帰着された.こうして最終的に中間畳み込みの不確定特異点型線型常微分方程式系に対する拡張を得る事に成功し,更に元の中間畳み込みが持っていた基本的な性質が,拡張されても保持されている事が直ちに従った.次の課題は,今回得られた拡張がモノドロミー保存変形の方程式を保つ事を示す問題であり,これが解決されれば,モノドロミー保存変形の方程式として得られる種々の重要な非線形微分方程式の理論に重要な応用が見いだされ,これによって可積分系の分野に大きく貢献する事ができると考えている.また,今回の研究で中間畳み込みとAdams達の研究との関連が初めて見いだされた事も意義深い事と思われる.
シナプス形式の遺伝解析

シナプス伝達に異常を持つ突然変異体MY7919の原因遺伝子をクローニングしたところ、新規な遺伝子であることが判明した。この遺伝子の発現パターンを調べるため、in situ hybridizationを行ったところ、中枢神経を含む組織で発現がみられ、このパターンはreporter geneの発現と一致した。さらに、細胞内局在を調べるために、この分子に対する抗体を作製し、免疫組織化学的な解析を行ったところ、中枢神経の核にこのタンパクが局在する事がわかった。さらに遺伝学的な解析を進めるため、この突然変異体のalleleを多数単離した。nullと思われるものを電気生理学的に解析したところ、やはりシナプス伝達に異常があることがわかった。本研究期間中においては以下二つのテーマで研究成果が得られた。1)ショウジョウバエ幼生における神経筋シナプスの形成幼生におけるシナプス形成過程を共焦点顕微鏡と電子顕微鏡を用いて詳細に追跡した。その結果、成長錘が標的である筋細胞に接触して2-3時間たった時に、pre varicosityという比較的大きな構造を作ることがわかった。この構造はその後縮小してvaricosityになる。機能的シナプス伝達はこのpre varicosityの時から始る。二つまたはそれ以上の神経が一つの筋細胞を支配している場合はそれらは始めから絡み合って形成される。2)シナプス伝達におけるシナプトブレビンの役割シナプトブレビンはシナプス小胞上にある主要な蛋白で、シナプス小胞の融合に重要な役割をはたしていると考えられている。我々はその機能を解明するためにシナプトブレビンの欠失突然変異体を用いてシナプス伝達を調べた。この変異体は幼生において致死であるために幼生における神経筋シナプスにおいてパッチクランプ法を用いて調べた。神経を刺激してでる誘発性シナプス電流は、出なかったが、自発性微小シナプス電流は残存していた。さらに微小シナプス電流の頻度は外液中のCa濃度に依存することもわかった。またCaイオノフォアやBlack Widow Spider Venomによっても自発性微小シナプス電流は誘発された。このことからシナプトブレビンは誘発性シナプス電流のためには不可欠であるが、自発性シナプス小胞の触合には必須ではないことがわかった。
国際裁判における宣言判決の意義と機能

本研究は、国際裁判所が判決において当事国に「何を」与え得るのか(司法的救済)に着目することで、国際裁判所判決が国家間関係に如何なる影響を与え得るのか、そして、如何にして現実の紛争を解決に至らしめるのか、という学術的問いを考察する。司法的救済のあり方は当該裁判所の機能理解を反映するため、各裁判所実行の検討が不可欠であり、本研究は主たる救済方法である「宣言判決」を対象として、徹底した判例分析を行う。
血液細胞系譜に特異的なc-kit遺伝子の発現調節

血液細胞系譜の発生において、最も初期に発現が確認される受容体チロシンキナーゼc-kitの遺伝子発現を、レチノイン酸とcAMPで誘導できる胚性奇形癌腫F9細胞を用いてc-kit遺伝子の転写調節領域を検索した。EMBL3マウスゲノミックライブラリーよりc-kit遺伝子第1エクソン5'上流20kbから第21エクソン3'下流10kb間約120kbを回収し、pCATbasic(エンハンサー、プロモーターなし)ベクターに各ファージ内に挿入されていた断片をc-kit遺伝子の5'プロモーターを含む2.7kbの領域(pCATb-kit-NS6)の上流につなぎ、各断片のCAT活性を検討した。22断片の中で第9イントロンから第13イントロンを含む断片(pCATb-kit-NS6-K111)にF9細胞をレチノイン酸とcAMPで刺激した際に活性が出現することを確認した。この活性を検出するには3-4日の持続した刺激を必要とした。制限酵素を用いてK111を3'側より削っていくと、第9イントロン内のSacI-ApaI断片(SA4、573bp)と第13イントロン内のXhoI-KpnI断片(XK1、268bp)が欠落するとCAT活性が激減した。各々の断片内にはc-Myb,b-HLH-Zip(M-box),Ets,AP-1とGATA,Ets,C/EBP,c-Myb,b-HLH-Zipの結合コンセンサス配列がみられたが、レチノイン酸反応性領域配列は検出されなかった。SA4、XK1、SA4-XK1各断片をpCAT-kit-NS6ベクターに組み込むと夫々弱いながらもCAT活性を示した。さらに、タンデムにXK1断片を3つ挿入するとその活性は上昇した。以上のことからXK1断片には転写調節配列が存在すると考えられその制御配列を明らかにするための検索を行っている。この領域ではc-kit陽性のマスト細胞腫P815ではCAT活性は認められなかった。すべてのc-kit陽性細胞がCAT活性を示すのではないので、F9細胞で見いだした領域が、どの細胞系譜の発現調節を司るのか検討している。最近、c-kitの発現異常マウスW^<sh>,W^<pen>,W^<57>の遺伝子変異が5'上流数100kbに確認され、この領域にもc-kit遺伝子の制御領域が存在することが示唆されているので、各領域の機能について検討してみたい。
光受容イオンチャネルを発現した神経細胞を探索可能にする多電極独立微動装置の開発

近年、脳内の特定の神経細胞において、遺伝子工学的手法により光の照射により興奮性が変化する特性を発現させることが可能である。自由行動下動物において光の照射を断続的に行いながら遠隔操作により複数の電極を独立して移動させ、この特定の神経細胞を探索するシステムを構築している。これにより脳機能解明のために目的の神経細胞やそれに連絡を持つ細胞を選択して、自由行動中の当該神経細胞の活動の全貌を明らかにすることが期待できる。近年われわれが独自に開発した電極ワイヤを用いることで、自由行動中の動物において神経細胞の発火をこれまでの10倍の振幅で観察することが可能となった。その発火様式を基に脳機能を解明するためには、当該の神経細胞を特定する情報が重要であるが、その発火パターンを除いてはほぼ皆無である。これを打開する一つの方法としてあらかじめチャネルロドプシンなどを特定の神経細胞に発現させておき、電極ワイヤを移動させならが光ファイバによる照射に応答する神経細胞を選択して記録することが可能なシステムを確立したい。小動物でも利用可能とするためにはモーターやギアを用いた駆動方法では大きさ、重量において不利である。そこで小さく、軽量で数十マイクロメータ単位で駆動可能なアクチュエータを選択し、駆動する構造を独自に考案した。この駆動システムの特許出願を予定しているので詳細は控えたいが、概略のみを説明すると最低でも8本分の駆動装置を直径30mm、厚さ7mmの円柱状構造の内部に配置できるようにした。これは将来ブレインマシンインターフェースとしてヒトでの応用も視野に入れ、皮下に埋没可能な厚さを想定している。またその駆動装置を制御するのに高電圧を用いることは危険であるので、数ボルトの低電圧で駆動できるものとした。最低でも8本の電極ワイヤを保持し、脳内に刺入することが可能な構造で、それぞれのワイヤとアクチュエータの間の位置関係を正確に保持するハウジングを作成することが重要である。そのために熱可塑性プラスチックを成型する三次元加工装置も開発した。このハウジングに、はめ込むことが可能であり、アクチュエータを保持しその制御のための電子回路をも含む一体化したものを基板加工装置を用いて作成した。電極駆動システムとしてはほば完成したが、動物を用いた実証実験までには至らなかった。今後、動物実験を行いながら改善していく予定である。
近世文芸と医学に関する総合的研究

本研究は医療および医学に関係する近世文芸を対象とした。研究成果の一つ目は重要な資料の翻刻である。『当世医者風流解』初編・二編と『笑談医者質気』の翻刻と解題作成を行った。二つ目は文学作品の中での医者や医療関係の用例をジャンルごとに全集や事典や研究書を援用しつつ大規模に収集し、「医学関連作品年表」を作成したことである。三つ目は竹斎物を中心とした近世医学小説の紹介である。仮名草子『竹斎』とその影響を受けた作品を竹斎物と定義し、関係した13点について梗概を中心とした解題を記した。今年度は近世医学小説のなかで重要な価値をもつ横谷南海『当世医者風流解』初編・二編(文政四年・五年刊)の翻刻を行った。『当世医者風流解』初編二編は医者志願の医生厚釜敷安に流行医者気転頓作先生が患者との応接や診察の方法を指南する内容である。それ以前の物の考え方と当世風の考え方が比較されており、江戸時代の良医とやぶ医者の考え方、患者や病家の考え方などを知るうえで重要な資料である。続編が出ているように滑稽本としても見所のある作品であり、医者や病人のさまがよく描けている作品である。重要作品であるにもかかわらず、翻刻が存在しなかったため、今年度の翻刻作業は意味があった。また概本は諸本が存在し、国会図書館蔵本、蓬左文庫蔵本、津市図書館井田文庫本、架蔵本を調査し、不明瞭であった書誌関係を明らかにした。長編のため、翻刻は二度に分けて公開の予定である。『三重大学日本語学文学』第27号(平成28年6月下旬発行予定)に初編を、同28号(平成29年6月下旬発行予定)に二編の翻字を掲載する予定である。内容解説と考察は二編の翻刻とともに詳細なものを付す予定である。研究計画内の「医学関連作品年表」作成に関しては、仮名草子・浮世草子・談義本のグループ、戯作本でのグループ、芸能でのグループ、俳諧・川柳でのグループにわけて、順次調査を遂行している。最終年度での公開にむけていよいよの拡充と準備を進めている状態である。(1)「医学関連作品年表」作成のための資料調査も格別に進んでいるわけではないが、遅れているわけではない。小説群に関しては調査が進んでいる。次年度以降、俳諧や川柳など韻文にも調査を進める予定である。(2)今年度は『当世医者風流解』初・二編といった重要作品の翻刻を行ったので、これに関しては順調といえよう。(3)痘瘡にまつわる作品の事例の収集と分析に関しては、やや遅れている。(1)「医学関連作品年表」の素稿が充実すれば、そこから事例を収集して分析の段階に入れると考えている。(4)谷川士清を中心とした医者作家の研究であるが、今年度は谷川士清の和歌に関する研究を行った(谷川士清の会「まなびの栞」5号、平成28年度5月発行に掲載予定)が、医学に関しては遅れている。(5)研究成果の発表であるが、今年度は準備段階なので行っておらず、次年度より行う予定である。総合的に判断してやや遅れている状態である。研究計画の「医学関連作品年表」作成について、前年度に引き続き、仮名草子・浮世草子・談義本のグループ、戯作本でのグループ、芸能でのグループ、俳諧・川柳でのグループにわけて、順次調査を遂行している。最終年度での公開にむけていよいよの拡充とデータ整理を進めている状態である。代表的医学小説に関しては解題を作成しており、翌年度には医学小説史として紹介する予定である。今年度は近世医学小説のなかで重要な価値をもつ横谷南海『当世医者風流解』二編(文政四年・五年刊)は前年度より翻刻作業を行っていたが、今年度は初版本を手に入れたためそれにもとづき、前年度の原稿に書誌情報を解題を増補したものを作成した。『三重大学日本語学文学』28号(平成29年6月下旬発行予定)に二編を掲載の予定である。著者の横谷南海の正体は解明できなかったが作中の狂歌を詠んでいる四穂園金英、南陽館草陽、蓑笠坊案山子らとの関係から推測すると、横谷南海は小説の舞台の京都に住み、四穂園金英のその交友圏内にいた人物であろう。また初版本の形態や諸本に関して詳しい考察ができた。初編・二編あわせて当時の医者の事情が見えてくる江戸時代の医者小説の秀作といえる『当世医者風流解』の紹介ができた。また『笑談医者質気』に関して調査と翻刻作業を進めている。これは最終年度に内容を確認のうえ『三重大学日本語学文学』28号(平成30年6月下旬発行予定)での公開を予定している。(1)「医学関連作品年表」作成のための資料調査を前年度に引き続き行っている。データの状態で整っていないので、本年度は調査を継続しつつ公開のためのデータの整形を試みたい。(2)今年度は『当世医者風流解』二編について善本を手に入れ、書誌と解題を充実させて公開に到ったので幸いだったといえよう。また『笑談医者質気』の翻字も進めてある。(3)痘瘡にまつわる作品の事例の収集と分析に関しては、分析に関して遅れている。

(1)「医学関連作品年表」の素稿が充実すれば、そこから事例を収集して分析の段階に入れると考えている。(4)谷川士清を中心とした医者作家の研究であるが、本年度は十分な調査ができなかった。(5)研究成果の発表であるが、最終年度にあたる次年度より行う予定である。本研究は医療および医学に関係する近世文芸を対象とした。研究成果は大きく三つに分けられる。一つ目は重要な資料の翻刻である。『当世医者風流解』初編・二編と『笑談医者質気』の翻刻と解題作成を行った。これらは近世における医者および医学について重要な見方や知識を教えてくれる貴重な資料にもかかわらず、信頼のおける底本にもとづいた正確な翻刻や解題が存在しなかった。二つ目は文学作品の中での医者や医療関係の用例をジャンルごとに全集や事典や研究書を援用しつつ大規模に収集し、「医学関連作品年表」を作成したことである。仮名草子、八文字屋本、その他の浮世草子、談義本・滑稽本、黄表紙、噺本、落語について年代順に用例収集した。収集した用例の数は594にのぼり、近世文芸と医学の関係を知る基礎資料として活用されるはずである。三つ目は竹斎物を中心とした近世医学小説の紹介である。仮名草子『竹斎』とその影響を受けた作品を竹斎物と定義し、11点について梗概を中心とした解題を記した。加えて、重要な医学小説である『笑談医者質気』と『医者談義』の解題も加えた。これらの作品は言及されることが多いにもかかわらず、その内容を手短に確認できない状況にあった。本成果により近世文芸の中の医学について、格段に論究しやすくなったはずである。以上により近世小説を通じて、江戸時代の医学状況について学ぶことが容易になった。研究成果に関しては、「三重大学日本語学文学」誌に翻刻を掲載したほか、2018年3月に研究成果報告書を作成、印刷し、残りすべてを収録した。研究成果の一つ目は重要な資料の翻刻である。仮名草子『竹斎』とその影響を受けた作品を竹斎物と定義し、関係した13点について梗概を中心とした解題を記した。予定していた研究はやや遅れぎみであるが、鋭意努力することによって、進行の遅れを取り戻すことは十分可能であると思われる。必要資料に関して、収集ができているので、資料を活用したうえで、次年度より成果をあげていくつもりである。予定していた研究は今年度も遅れぎみであるが、鋭意努力することによって、進行の遅れを取り戻すことは十分可能であると思われる。収集したデータや下翻字してある翻刻をうまく整えて公開に備えたい。日本文学
FR167653を灌流、保存、再灌流に用いた心停止ドナーからの膵・腎同時移植

1)雑種成犬を用いて、in vivoの虚血・再潅流実権を行い、FR167653の効果を確かめた。膵体尾部を剥離・露出し、脾動静脈にクランプをかけて90分潅の温疎血を行うとサイトカインの生産によって局所および全身遠隔臓器に障害が起こり、FR176653でそれが軽減されることを証明した。コントロール群FR群で組織血流IVGTT、血中アミラーゼ、リパーゼ、クレアチニン、GOT、GPT末梢血流のIL-1βRNA、動脈血ガスの計時的変化を術後3日目まで計測し、術後3日目にsacrificeして膵、腎、肺、肝の組織を採取し、組織学的検討も加えた。FR群は虚血・再潅流障害を受けた直接臓器のみならず、サイトカインの生産を抑制することによって、遠隔臓器の障害を軽減することを証明し、学会発表と論文掲載した(SURGERY,129(3),309-317)。2)膵体尾部を頚部に自家移植すること成功し、同様に温疎血を加え、サイトカイン生産とFRによる効果を証明し学会発表した。現在、英文で投稿中である。3)左腎のみの虚血・再潅流モデルを作成し、膵と同様にFRの効果を確かめ、移植学会発表した。現在SURGERYに投稿し、reviseを返送したところで、accept間近の回答をうけている。4)左腎を左腸骨窩に自家移植し、60分温疎血をかけてFRの効果を同様に確認している。現在、頚部に自己膵移植、腸骨窩に自己腎移の膵腎同時移植モデルの作成に成功し、引き続き実験を行っている。1)雑種成犬を用いて、in vivoの虚血・再潅流実験を行い、FR167653の効果を確かめた。膵体尾部を剥離、露出して脾動静脈のクランプをかけて60分虚血を行い、再潅流を行う。コントロール群とFR167653を加えた群で組織血流、IVGTT、血中アミラーゼ、クレアチニン、グルコース、動脈血ガス、GOT/GPT、IL-1βmRNAの経時的変化を術後3日目まで計測し、3日目にsacrificeして膵、腎、肝、肺の組織を採取し、組織学的検討も加えた。FR群は虚血・再潅流障害を受けた直接臓器のみならずサイトカインの産生を抑制することによって遠隔臓器の障害を軽減することが証明された(Surgery in press)。2)雑種成犬を用いて、左腎のみの虚血・再潅流モデルを作り同様の実験を行い、FRの有効性を証明し、本年の外科学会で発表予定である。3)膵体尾部の自家移植モデルにFRを用い、同様の実験を行い、外科学会の口演に予定されている。4)膵体尾部と左腎の同時虚血・再潅流モデルの作成に成功し、モデルの妥当性とFRの有効性を示すデータが得られている。5)ビーグル犬を用いて、膵腎同時移植モデルの実験を行い、まずは脳死ドナー、つづいて心停止ドナーを予定している。1)雑種成犬を用いて、in vivoの虚血・再灌流実験を行い、FR167653の効果を確かめた。膵体尾部を剥離・露出し、脾動静脈にクランプをかけて90分間の温疎血を行うと、サイトカインの産生によって局所および全身遠隔臓器に障害が起こり、FR167653でそれが軽減されることを証明した。

コントロール群とFR群で組織血流、IVGTT、血中アミラーゼ、リパーゼ、クレアチニン、GOT、GPT、末梢血中のIL-1βmRNA、動脈血ガスの計時的変化を術後3日目まで計測し、術後3日目にsacrificeして膵、腎、肺、肝の組織を採取し、組織学的検討も加えた。FR群は虚血・再灌流障害を受けた直接臓器のみならず、サイトカインの産生を抑制することによって、遠隔臓器の障害を軽減することを証明し、学会発表と論文掲載をした(SURGERY,129(3),309-317)。2)膵体尾部を頸部に自家移植することに成功し、同様に温疎血を加え、サイトカイン産生とFRによる効果を証明し学会発表した。現在、英文で投稿中である。3)左腎のみの虚血・再灌流モデルを作成し、膵と同様にFRの効果を確かめ、移植学会で発表した。現在、SURGERYに投稿し、reviseを返送したところで、accept間近の回答をうけている。4)左腎を左腸骨窩に自家移植し、60分の温疎血をかけてFRの効果を同様に確認している。現在、頸部に自己膵移植、腸骨窩に自己腎移植の膵腎同時移植モデルの作成に成功し、引き続き実験を行っている。
談話における指定文に関する総合的研究-関連性理論,認知言語学による考察

it分裂文の焦点に生起する副詞について,「制限下接詞onlyによって焦点化することができる付加詞,下接詞は,モダリティ領域から命題領域への認知転換が可能である」ことを実証的に検証し,分裂文の総記的含意と認知転換について新たな提案を行った.日本語のガ分裂文の研究では,報道文から収集した後項焦点のガ分裂文を関連性理論の観点から分析し、後項焦点文のB項は、先行文脈の話題を断ち切り、新しい話題を導入する機能を持つことを新たに提案した.it分裂文の焦点に生起する副詞について,「制限下接詞onlyによって焦点化することができる付加詞,下接詞は,モダリティ領域から命題領域への認知転換が可能である」ことを実証的に検証し,分裂文の総記的含意と認知転換について新たな提案を行った.日本語のガ分裂文の研究では,報道文から収集した後項焦点のガ分裂文を関連性理論の観点から分析し、後項焦点文のB項は、先行文脈の話題を断ち切り、新しい話題を導入する機能を持つことを新たに提案した.本年度は,英語の分裂文を取り上げ、談話における認知的、語用論的機能と特性について考察した。とくに,分裂文の焦点に生起する要素に着目し,副詞相当語句(adverbial)のうち付加詞と下接詞をとりあげ,どのような条件の下にit分裂文の焦点として生起できるのか,意味論,とくに中右(1994)の階層意味論の立場,及び認知語用論の立場から考察を進めた。中右(1994)は「焦点化されうる要素,つまり焦点部位は,命題内容成分であって,モダリティではない」という一般化を提唱している。しかし,頻度副詞がモダリティ成分としてit分裂文の焦点位置に生じている例が存在することが知られており,この一般化の反例となるが,中右(1994)は「理論的には,命題領域からモダリティ領域への認知転換が起こっている」と述べている。しかしながら,中右(1994)は,命題領域からモダリティ領域への認知転換について,これ以上踏み込んで議論をしていない。本研究では,分裂文の焦点に生じる付加詞,下接詞の分布を詳細に検討することによって,領域の認知転換について,命題領域からモダリティ領域への認知転換だけでなく,モダリティ領域から命題領域への認知転換が存在することを明らかにし,「制限下接詞onlyによって焦点化することができる付加詞,あるいは下接詞は,発話内でモダリティ成分(モダリティ領域)から命題内容成分(命題領域)への認知転換が可能である。」ことを実証的に検証した。さらに分裂文の総記的含意と認知転換について新たな提案を行った。本研究は,分裂文の焦点に生じる副詞相当語句をめぐって,これまで明らかにされてこなかった命題領域とモダリティ領域の認知転換について,双方向に認知転換が可能であること,及びその意味論的・認知論的メカニズムを実証的に検証したという点で意義のある研究であるといえる。本年度は、日本語のガ分裂文を取り上げ、談話における認知的、語用論的機能と特性について考察した。天野(1995b)は、ガ分裂文はA項に焦点があるものと、B項に焦点があるものの二種類がある、と主張し、前者を前項焦点文、後者を後項焦点文と規定している。これに対して砂川(2005)は、(i)プロソディックな強勢を置けるか、(ii)「だけ」による限定ができるか、(iii)否定文にできるか、という3つの観点から、ガ分裂文を分析し、天野(1995b)の後項焦点文を認めず、ガ分裂文は前項焦点文と全体焦点文の2種類に分類できると主張している。これに対し、(1)「プロソディックな強勢を置けるか」という観点からの議論は、誤った事実認定に基づくものであること、(2)ガ分裂文と限定詞「だけ」をめぐる論拠は妥当性を欠くこと、(3)否定分裂文を巡る砂川(2005)の議論は、自らの分裂文の定義に抵触し、否定分裂文の成立条件と当該の分裂文の情報構造がどのような関わりを持っているのか明らかにしていないこと、から砂川(2005)の主張は妥当性を欠くものであることを明らかにした。日本語報道文から収集した後項焦点のガ分裂文を関連性理論の観点から分析し、(i)後項焦点文のA項には、代用表現(語彙的繰り返しを含む)の出現率が比較的高いこと、(ii)後項焦点文のA項は、先行文脈の話題と何らかの意味的関係を持つ傾向がきわめて高いことを明らかにし、(iii)後項焦点文のB項は、先行文脈の話題を断ち切り、新しい話題を導入する機能を持つこと(話題転換機能(topic shift))を新たに提案した。