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芸術活動における「心」と「身」-マルブランシュ美学の可能性-

マルブランシュはデカルトの「コギト」を受け容れるが、ヴァールも指摘するように彼の関心は思惟の働きにではなくて思惟されたイデアのほうにあった。知性と信仰を峻別するデカルトに対し、マルブランシュのほうは、信仰が哲学の手助けになると考えたからである。思惟されるものである延長実体が叡智的延長に他ならず、神の一面がこの叡智的実体であると見なすマルブランシュにおいては、したがって、イデアはデカルトにおけるように神の意志に従うものではなく、神の悟性の一部そのものなのである。人間の身体は延長として神のうちにあり、同様に人間の精神も叡智的世界を生きるものとして神のうちにある。マルブランシュにおける「身」と「心」の関係はすべてその源泉を、知性であり秩序である神のうちに見出すこととなる。このとき、明晰判明なイデアを直観するのは「心」であるが、当の「心」自体は暗闇のなかで感情によって認識されるよりない。いっぽう延長的実体はすぐれて叡智的実体であるから人間という存在者において「心」は「身」と区別されない。こうして、本質を表現するイデアに対し、人間の感情がその存在を告知するものとして着目されるのである。心・身のあいだに何の因果関係もなく、しかも本質的なるもの即ち対象が、主観より以前に場所を占めるとすれば、人間の所産はまったく人間の自由な意志によって生み出されたものである。意志による産出の行為は、きわめて可塑的な身体の一部である想像力によって遂行される。想像力はイデアの残した痕跡の刻まれている身体的な要素である。神の自由意志による創造が啓示によって知られるように、人間の制作行為は作品における想像力の活動によって知られるよりない。想像されたものという対象において、制作者と亨受者の感情が混淆するからである。この点でマルブランシュの感情論をリクールの想像力による芸術論に接穂する可能性を開くことができる。本年度はマルブランシュの想像力論を中心に考察をまとめようと試みた。それは主として『真理の探究』第二巻第二部と第三部に窺うことができる。想像力は、はじめ誤謬の源と擬せられているが、結論においては、真理を強化するものと考えられるに至るのである。人間は、想像力という脳の働きによって、魂の奥深くに刻み込まれた「痕跡」をたどる。その結果、想像力は何よりもまず、文明化された社会をもたらすために欠かせないものとされる。つまり、人間は互いに繋がり合うためには、身体的にも精神的にも、相互に似たところがなくてはならないが、だれもが有している脳という身体的なものが、とりあえずは、人間相互の結びつきを可能にするのである。たとえば憐愍の情。身体という動物にも見られる物質に存在する精神活動は、動物と類似の行動を人間に保証する。だが、それだけではない。動物が被る傷までも、人間は想像力によって自らの身体に作り出す。人間は想像力を働かせ、その傷を通して、我が身を強く請け負うが故に、他者をも我が身において引き受ける。このように想像力は、他者というよりは、それが表象する像そのものに注意を向けることによって、理性に基づいた愛以上に、緊密に人間同士を結び付ける。それは「脳の働き」であり、なおかつ、原罪の結果「神的な愛」も「愛そのもの」も損なった人間をして、他者に繋がりを架けさせるものである。こうした身体から精神への連続的な一体性は、デカルトの心身二元論を乗り超えようとするマルブランシュの著しい特色をなす。一般に、彼の想像力は、「諸観念の残した痕跡」が刻まれてある身体的な要素、すぐれて可塑的な身体の一部である。その想像力論は、精神的な遺産を引き継ぐ機能という、古典古代の医学的かつ神学的な見方の集大成というべきあると同時に、現代の身体論の新たな展開を示唆する有効性さえ見出すことができるだろう。

想像力はイデアの残した痕跡の刻まれている身体的な要素である。神の自由意志による創造が啓示によって知られるように、人間の制作行為は作品における想像力の活動によって知られるよりない。想像されたものという対象において、制作者と亨受者の感情が混淆するからである。この点でマルブランシュの感情論をリクールの想像力による芸術論に接穂する可能性を開くことができる。
新規糖輸送促進蛋白CLIP170の機能解析

インスリン依存性の糖輸送は、インスリン作用の最も基本的ステップである。しかし、インスリンがこのステップをどのように調節しているか未だ良く分かっていない。今回は、微小管(細胞骨格の一つ)に結合する蛋白質の網羅的解析からCLIP170を同定し、糖輸送における役割を検討した。その結果、インスリン依存性糖輸送(GLUT4小胞の細胞膜へのトランスロケーション)を調節していることが判明した。CLIP170をノックダウンした脂肪細胞や、同蛋白質の微小管結合ドメインを欠失した変異体を過剰に発現した脂肪細胞を用いて、インスリン依存性糖輸送を検討した。その結果、糖輸送が60%程度まで減弱することを確認した。一方、CLIP170の変異体を発現した細胞では、糖輸送担体GLUT4は、細胞膜までトランスロケーションできず、GLUT4を含む小胞輸送の障害の結果、インスリン依存性糖輸送が抑制されていると考えられた。この結果は、GLUT4を含む小胞が微小管先端を通過することを示している。さらに、脂肪細胞に発現している蛋白質の網羅的検討から、CLIP170結合蛋白質(p190)を同定した。両蛋白質問の結合を競争阻害する目的で、CLIP170との結合領域にTAT蛋白トランスダクションシグナルを融合した人工蛋白質を合成・精製し、脂肪細胞へ添加した。この合成蛋白質が細胞内に移行することは蛍光顕微鏡で確認した。この細胞を用いて、再度インスリン依存性糖輸送を測定した。その結果、糖輸送は1020%抑制された。しかし、その抑制の程度は軽微であり、p190の他にCLIP170と協調して働く、重要な分子の存在が考えられた。H20年度の結果から、微小管先端蛋白にも小胞輸送を調節する機能が存在することが判明した。微小管先端に特異的に存在する蛋白質の存在は、過去10年注目されていたが、小胞輸送との関連は不明であった。しかるに今回の観察結果は、糖尿病に限らず、生物学全般においても重要な発見であると考える。脂肪細胞に発現するCLIP170蛋白質は、微小管の先端に位置し微小管先端と細胞膜間の相互作用に重要な役割が想定される。本年度、CLIP170を過剰に発現した細胞、ノックダウンした細胞、さらには微小管結合ドメインを欠落させた変異体を発現する培養脂肪細胞を用い、インスリン依存性糖輸送担体の細胞内局在の変化と糖輸送に及ぼす影響を検討した。その結果、CLIP170蛋白質が存在しないか、微小管に結合出来ない状態で正規の局在から外れた場所に存在すると、糖輸送担体が細胞膜まで移動出来ないこと、さらにインスリン依存性糖輸送が減弱することを確認した。次に、その作用機序を明らかにするため、CLIP170蛋白質に結合可能な蛋白質の網羅的解析を行った。特にインスリンによりその結合が強化・減弱する分子の同定を行った。アクリルアミドゲルで展開できる10300kDaの蛋白質をスクリーニングしたが、同定出来たのは1分子のみであった。この分子は、微小管の伸展に重要な役割が想定される蛋白質である。現在この分子がどのようにして微小管先端と細胞膜を連結するのか、糖輸送担体の細胞内移動への影響について、その詳細なメカニズムを検討中である。以前より、糖輸送蛋白質の細胞内移動にはアクチン繊維が重要であり、微小管の役割については曖昧であった。今回の結果は、細胞内小胞輸送における微小管の役割を確認することが出来ただけでなく、微小管と細胞膜の結合メカニズムの解明に向けて重要な知見が得られたと考える。現在までに、微小管と細胞膜を連結する分子が幾つか報告されているが、インスリンの作用はこれら分子との会合とは関係なく、新規メカニズムによるものと考えられる。脂肪細胞に発現するCLIP170蛋白質は、微小管の先端に位置し微小管先端と細胞膜間の小胞輸送に重要な役割が想定される。私は、過去2年間の本研究によりインスリン依存性の糖輸送にCLIPl70が重要な役割を果たしていることを突き止めた。即ち、CLIPl70は微小管を経由したGLUT4小胞膜の輸送にとって必須な分子であり、その調節機構がわかれば糖尿病の治療に応用できると思われる。そこで、H22年度は、CLIPl70とインスリンシグナルの関連を検討した。その結果、一般的によく知られたインスリンシグナルではなく、特異的なシグナル経路の存在が考えられた。そこでまず、この特異的シグナル経路を明らかにするため、CLIPl70蛋白質に結合可能な蛋白質を網羅的に解析した。この分子とCLIPl70との相互作用を通常のウエスタンブロット法により再検討したところ、インスリン依存性に結合することが判明した。さらに、その結合は、細胞内カルシウム依存性であることもわかった。

さらに、分子生物学的手法により、第2の結合蛋白の同定にも成功した。インスリン作用に重要なシグナル分子として知られている分子である。現在は、この分子がどのように微小管先端を介する小胞輸送に働くのか、細胞内カルシウムとの相互関係はどうか、インスリンシグナル経路における役割を詳細に検討している。成果は近く論文発表の予定である。
近世後期における江戸庶民の旅の費用-その費用の調達と必要経費に着目して-

本研究は、近世後期における江戸庶民の旅を、費用の調達と必要経費の側面から検討したものである。近世後期の江戸庶民にとって、旅は多額の金銭消費をともなう贅沢な娯楽であったが、日頃商工業に従事する江戸庶民は、近郊農村に暮らす庶民(農民)よりも、金銭的にみて豊かな旅をしていたことが確かめられた。また、江戸庶民の大半は旅費の全額を個人負担で賄うことが不可能であったため、彼らは「代参講」に加入して旅費を捻出していた。本研究は、近世後期における江戸庶民の旅を費用の調達と必要経費の側面から検討しようとするものであるが、江戸庶民の旅の実際を伝える「旅日記」は諸々の事情により蒐集が困難な状況にある。そこで、旅日記の蒐集範囲を関東地方一円にまで広げ、当該地域の庶民の旅を比較対象として設定することで、江戸庶民の旅の特徴を捉えようと試みる。今年度は、まず関東地方に残された庶民の旅日記の蒐集作業を実施し、現在までに100編余りの旅日記を入手することができた。これらの史料に基づき、江戸庶民の旅の費用に関して江戸近郊地の庶民の場合と比較しながら検討を行なった。その結果、庶民が旅に出るには1日に1人400文程度が必要とされたが、江戸及び江戸近郊地の庶民の収入から推して、一部の富裕層を除けば彼らが旅費を個人負担で賄うことは難しいことがわかった。そのため、庶民は講員から募った講金を旅費として用立てる「代参講」に加入し、旅の必要経費を捻出していた。講組織の存在と併せて、旅立ちに際しては有縁の人々から「餞別」を貰い受ける慣習があったことも確かめられた。また、江戸庶民と江戸近郊地の庶民の間に生じた旅費の金額や使い道の違いを探ってみると、金銭面からみて江戸庶民の旅の方が江戸近郊地の庶民の旅よりも豊かであったことが明確となった。この他、近世後期における旅の費用を「歩行」の問題と関連付けた研究を行なった。すると、旅の履物たる草鞋は街道筋で比較的安価で販売されていたが、値段によって質が異なっていたことがわかった。また、商家の女性と農家の女性の道中における歩行距離の違いを各々の経済事情と絡めて検討した結果、農家の女性は途中で路銀が尽きてしまわないようになるべく先を急いだため、1日あたりの歩行距離が商家の女性よりも長くなる傾向にあったことが示唆された。本研究は、近世後期における江戸庶民の旅を、費用の調達と必要経費の側面から検討するものであったが、庶民の旅の実際を伝える「旅日記」の蒐集範囲を関東地方一円にまで広げ、当該地域の庶民の旅を比較対象として設定することで、江戸庶民の旅の特徴を相対化しようと試みた。蒐集した100編余りの旅日記を基本的な歴史資料として、今年度は江戸庶民の旅費の傾向が近世後期の関東地方の中でどのように位置づけられるのかを検討した。すると、関東地方の庶民の中で特に経済的ゆとりを有していた江戸庶民は、道中においても比較的多額の金銭を消費する傾向にあったことが確かめられた。この現象は、商工業に従事して日常的に現金収入を得られた江戸庶民が、その他の関東地方の庶民(大半が農民)よりも多額の旅費を調達し得たために可能になったと推察される。したがって、近世後期における江戸庶民の旅は、費用の面からみて豊かな娯楽であったといえよう。また、当時代における庶民の多くが旅費の調達手段として用いた「講」組織について、近世において講の活動が活発であった地域(東京都板橋区)を中心に調査を試みた。その結果、近世後期の講組織は、宗教的色彩を醸しながらも、実際には庶民の娯楽的活動を担う組織として機能していたこと等が見出せたが、この点については今後も継続的に調査していく必要性が看取された。他にも、近世後期における庶民の旅費の問題を「近代性」を尺度として検討したところ、旅という行動において不可欠な現金を介して食事を得る行為が、貨幣経済を広範に流通させる契機となっていたことが明確となった。ゆえに、旅という娯楽は、「近代」という時代の到来を促進させる意味合いをもっていたといえよう。
18,19世紀ロシア文学における「旅」のイメ-ジについての研究

「旅」イメ-ジの研究は通時的・共時的な研究である。「旅」イメ-ジは時代によって変遷し、トポロジカルな意味論も時代によって変化するが、その意味論の構成要素は超時間的に次のようにまとめられる。1.ヨ-ロッパ東辺から中央アジア、東アジアにまでいたる、大部分が平坦な広大な国土に起因する独特な空間イメ-ジがあった。2.西欧との文化、文明交流においてはほとんどつねに受容一方の後発国であった。文物の受容・留学見聞のための旅行が貴族生活の重要な1部分となっていた。3.東方キリスト教に由来する非西欧的な文化伝統があり、国内・国外の聖地巡礼の旅が行なわれた。4.ロシア文化には、西欧から移植された都会的な貴族文化と農奴・農民の農村文化の乖離があった。5.抑圧的な政治体制からの逃避のための国内旅行、国外旅行が行なわれた。6.シベリア流刑という独特の処罰方法があった。18世紀末の旅行文学の2大作、カラムジ-ンの「ロシア人旅行者の手紙」は後世のロシア人に外国旅行のモデルを提出し、ラジ-シチェフの「ペテルブルグからモスクワへの旅」は農奴・農民との触れあいのための国内旅行のモデルを提出した。「旅」イメ-ジのドミナントは時代的に変化する。ロマン主義時代にはロマン主義時代独特の旅が行なわれた。バイロンの影響を受けたプ-シキンの南方詩群はロシア的な国内逃避の旅のヴァリアントであった。このように時代的に変化する面もあれば、時代的に変化しない面もある。ドストエフスキイの「未成年」には、庶民文化に命脈を保つ巡礼者イメ-ジと、ロシア的「大地」から切り離された知的精神的放浪者イメ-ジとが対立的に用いられている。啓蒙期から1830年代までの文献に基いた研究により、次の知見が得られた。「旅」のイメージの基低には、啓蒙開化の先覚者としてのビョートル大帝のヨーロッパ旅行のイメージ、フォークロアにおける神の人アレクセイの放浪のイメージなどが蓄積している。「旅」の詩学的契機として、ロレンス・スターンの既成の観念連合を破る「脱線」にその作品の「感傷旅行」に代表される感傷主義的思潮、バイロンの東方詩群などが、ロシアの外から刺激を与えたが、ロシア文学の伝統が築かれて行くにつれて、「旅」のイメージの実質もロシア的なものとして豊かになって行った。カラムジーン「ロシア人旅行者の手紙」は、西欧文化の批判的受容のための外国旅行のイメージを確立した。ラジーシチェフの「ペテルブルグからモスクワへの旅」は、退廃、虚飾、追従、権柄ずくの貴族と、辛酸を嘗めながらも他者への愛と信仰心、自負心を失なわないでいる農民との間の精神的対立の図式、抜け目のない小市民像、民衆の心に生きる聖者像等々の多様な対象を文学的素材として開拓した。プーシキンの南方詩の「旅」と、都会と自然(農村)という18世紀以来流行の対立図式に則って、その上に逃亡と復活というモチーフを重ねて形成された。虚飾と偽善の都会(権力中枢の周辺)を何らかの理由で逃れて「自然」の中に住む異民族の女性による精神的復活を願うというストーリーである。「カフカースの虜」、「ジプシー」がそのような主題の代表作であるが、「青銅の騎士」に至って、その逃亡モチーフは主人公の内面に内在化する。都会に縛りつけられるばかりか、「自然」によっても苦しめられる、悪夢の逃亡のみが可能である。

外在的な「旅」が内在化することによって、その悲劇性は凝縮する。ラジ-シチェフの「ペテルブルグからモスクワへの旅」は今日までその革命思想的側面があまりに強く強調されてきたが、19世紀ロシア文学を先どりしている面もある。ドストエフスキイ文学との繋がりについてもほとんど言及されることはなかったが、彼らは、「行者アレクセイ」という民間の形象に対して、起伏の激しいロシア人の感情に対して、ぬけ目のない小官吏のイメ-ジに対して、孤独な演説者像に対して、共通の関心を示している。ラジ-チェフは専制君主を中心に据えた独裁的世界モデルに対して、「豊かな感受性」と自然法思想に基く世界モデルを対置させるが、そのそれぞれの世界モデルの核になる絶対的1人称と自律的1人称の対立関係は、ドストエフスキイ文学の中で独自の展開を見、主人公の内面の絶対者コンプレックスとして造形化されるもとになる。ラジ-シチェフがわずかに触れただけの「危険な旅での人間の平等の目ざめ」というモチ-フはトルストイ文学の中で展開を見る。ロシア啓蒙主義文学を代表するカラムジ-ンとラジ-シチェフの旅行記はロシア人の旅人のイメ-ジに多大の影響を与えた。後世のロシア人はガラムジ-ンの旅によって自分の旅を検証し、自分の旅によってカラムジ-ンの旅を検証した。プ-シキンはラジ-シチェフの旅を逆にたどる旅行記を書いていた。ドフトエフスキイの「未成年」には、カラムジ-ンの「旅人」の派生形である(とソ連の学者Ju,ロ-トマンが考える〕、高い教養を持ちながらどこにも自分の魂のより所を見出すことができない放浪者と、信仰があるためにどこにいても自分の魂のやすらぎを見出すことのできる農奴出の巡礼とが登場する。このような個々の文学作品に登場する旅人とその旅の意味を理解するためにも「旅」イメ-ジの研究は不可欠なのである。
ジョージ・A・バーミンガムとグレン・パタソンを中心とする北アイルランド小説の研究

日本では北アイルランドの小説は演劇と詩に比べて研究されることが少ないが、ジョージ・A・バーミンガムとグレン・パタソンを中心に北アイルランド小説の研究を続け、その普遍的な意義と価値を解明した。バーミンガムの多くの作品は、深い意味を持たない軽いユーモア小説と見なされる傾向にあるが、実際には彼の深いキリスト教的寛容と博愛に基づいて、人間同士の融和に必要なものは何かを訴えかけている。一方、パタソンの小説は、北アイルランドのナショナリスト(アイルランド派)とユニオニスト(イギリス派)の対立というローカルな問題を描く一方で、北アイルランドの持つコズモポリタン的な普遍性を示しているということを実証した。ジョージ・A・バーミンガムのユーモア小説は軽くて深い意味がないとみなされがちである。しかし、彼が歩んできたキリスト教聖職者としての人生及びキリスト教に関する彼の著作と照らし合わせながら、時代を超え、国を越え彼の小説が持つ普遍的意義を証明することが本研究の目的である。例年通り、8月下旬にはダブリン大学トリニティカレッジ旧図書館に所蔵されてあるJ.O.Hannay Papers(バーミンガムの手紙、新聞雑誌記事、家族写真等)の調査に当たった。バーミンガムは1934年1月に、当時司祭を務めていた英国メルズの教会で、旧約聖書中の預言者イザヤに関する講話を行い、それがラジオを通して国中に流された。この講話を聴いた数多くの人々が勇気づけられ、彼のもとに感謝の手紙を出した。旧図書館に保管されてあるこれらの手紙を読むことにより、彼がいかに敬虔なキリスト教信者であったが実感できた。この調査に基づき、『スペインの黄金』(Spanish Gold, 1908)と『海の戦い』(A Sea Battle, 1948)を取り上げ、この2作品に現れたバーミンガムのキリスト教精神を学会で口頭発表し、短期大学部の紀要の中で論じた。グレン・パタソンに関しては、8月下旬にベルファーストで実際に彼に会い、最新作『三次会』(The Third Party)を本人から入手した。今までのパタソンの小説は、北アイルランド紛争を描く一方で、未来への希望を描いてきた。しかし今回の作品は、北アイルランド紛争が終結した中で主人公の心の葛藤を描いた。これは北アイルランドは表面的には平静を保っているものの、実際には対立が根深く存在することを示唆しているのだろうか。さらに深く読むことにより、著者の意図を探り、本年10月の国際アイルランド文学研究協会日本支部大会で研究発表する予定である。ジョージ・A・バーミンガムに関しては、オリニティー・カレッジ・ダブリン所蔵の書簡集(J.O.Hannay Papers)の調査とクイーンズ大学ベルファースト校図書館所蔵の短編小説集Minnie's Bishop(1915)とLove or Money(1939)を読むことを通じて、彼のキリスト教信仰が彼の小説と密接に結びついていることをさらに実感した。1934年1月にバーミンガムがイギリスのメルズ教会で行った旧約聖書の中の預言者イザヤに関する講話はBBCラジオで放送され、人々に感動を与え、彼は数多くの視聴者から感謝の手紙を受け取った。これらの手紙はバーミンガムがいかに人々を勇気づけるキリスト聖職者であったかを如実に示している。そして2冊の短編小説集中の多くの作品は、人々の対立をユーモアで解決しようとするものであり、その背後にはバーミンガムの心に深く根付いたキリスト教の寛容と博愛の精神がうかがえる。バーミンガムに関しては8月に放送大学の面接授業で講義を行った。グレン・パタソンに関しては8月にベルファーストで実際に会って、主にThat Which Was(2004)とThe Third Party(2007)に関する話を聞いた。彼の全ての作品は、メタファーを効果的に用い、幾通りもの解釈が可能であり、それゆえに深みを備えている。そのことを、この2作を読むことにより、そしてパタソンの話を聴くことにより、さらに深く実感した。そして彼の最新作エッセイOnce Upon a Hill(2008)は、北アイルランドは紛争の地とはいえそこに住む多くの人々はごく普通の人々であることを教えてくれる。北アイルランドのコズモポリタン性を伝えているという点でパタソンは重要な作家である。ジョージ・A・バーミンガムとグレン・パタソンを中心に北アイルランド小説の研究を行った。パタソンに関しては、5月9日、日本アイルランド協会文学研究会(立教大学)において「Glenn Pattersonの小説と北アイルランド」と題して口頭研究発表を行い、パタソンの小説がいかに北アイルランドの現実を正確に描き、それがグローバルな普遍性を帯びているかを論じた。8月には北アイルランドで実際に彼に会い、最新作The Third Party(2007)について話を聞いた。これは北アイルランド、日本、世界のかかわりを描いた小説であり、この作品の意義と重要性については平成22年度に論文を書くことによって示す予定である。バーミンガムに関しては、ロンドンの大英図書館、ダブリンのアイルランド国立図書館、ベルファーストのクイーンズ大学図書館で資料収集を行った。

そして11月29日の日本アイルランド協会年次大会では、「"The Captain and the Enemy"-George A.BirminghamとGraham Greene-」と題して、バーミンガムがグリーンに与えた影響に関して口頭研究発表を行った。グリーンのThe Captain and the Enemy(1988)は、そのタイトルはバーミンガムのHyacinth(1906)の中に出てくる一節に由来している。バーミンガムもグリーンも信仰心の深いキリスト教信者として、何が善で何が悪かを追究した。今日ではバーミンガムはあまり読まれることはないが、グリーンやW.B.イエイツのような後世に名を残した作家たちに与えた影響を探ることによってバーミンガムの再評価を試みている。平成22年3月には『別府大学短期大学部紀要』第29号にバーミンガムの短篇小説「結婚式への招待」を、『大分県アイルランド研究協会会報』第24号に「クリスマスプレゼント」を翻訳発表した。2篇ともバーミンガムの深いキリスト教信仰に基づいた寛容と博愛の精神を示すものであり、本邦初訳という点で意義がある。
卵巣中卵子の遺伝子変異と不妊症との相関モデル系の開発

平成13年度までのMTH1遺伝子欠損マウスの解析の結果、体細胞におけるmutation frequencyが高くなることが明らかとなった。しかし、同時に行ったスペクトラム解析において、従来のHITECマウスがrun配列と呼ばれる繰り返し配列の欠失を特異的に検出する問題点も明らかとなった。平成13年度は(1)non-run HITECマウスの樹立、さらには新たに(2)mutation frequencyを測定する方法としてGFP遺伝子に変異を導入し復帰変異によって発色する細胞数の測定から遺伝子変異を測定する系の開発、を行った。(1)に関しては新規のトランスジェニックマウスを3ライン樹立しMTH1 KOマウスにnon-run rpsL遺伝子を導入した個体を多数作出し、照射実験に入る準備が整った。また一方でMTH1及びミスマッチ修復に関与するMSH2-/-マウスそれぞれにおいて4Gy照射後の♂マウスの妊孕性を調べた結果、MSH2-/-において照射後1週間後から著しい妊孕性の低下を検出している。(2)に関しても、全身での観察が可能なようにpol IIプロモーターを付けたEGFP遺伝子のトランスジェニックマウスを作出した。現在、発色基団に変異を導入しG→Aの復帰変異が起こると発色が確認されるプラスミドコンストラクトを完了し、トランスジェニックマウス作出に入っている。平成12年度はMTH1遺伝子欠損においては野生型マウスと比較して、肝臓など体細胞におけるmutation frequencyが高くなることが明らかとなった。この結果を受けつつ本研究課題の目標である"卵巣中卵子の遺伝子変異と不妊症との相関モデル系の開発"へ向けての準備が整った。ミューテーションを測定する方法として、従来の(1)大腸菌rpsL遺伝子の導入(HITECマウスバックグラウンドの導入)に加えて、新しく(2)mutation frequencyを測定する方法としてGFP遺伝子に変異を導入し復帰変異によって発色する細胞数の測定から遺伝子変異を測定する系の開発、を平成12年度は計画していた。(1)に関してはMTH1ノックアウトマウスに掛け合わせでrpsL遺伝子を導入した個体を多数作出し、rpsLを持ちMTH1^<+/+、+/-、-/->のマウスをそれぞれ約20匹ずつそろえ、平成13年度より照射実験に入る準備が整った。また、肝臓などに於いてmutation frequencyの測定を行った(2)に関してもEGFP遺伝子の発色基団に変異を導入し、G→Aの復帰変異が起こると発色が確認されるプラスミドコンストラクトを完了した。さらに、このプラスミドには全身での観察が可能なようにpol IIプロモーターを付けた。平成12年度末よりトランスジェニックマウス作出に入っている。(1)に関しては新規のトフンスジェニックマウスを3ライン樹立しMTH1KOマウスにnon-run rpsL遺伝子を導入した固体を多数作出し、照射実験に入る準備が整った。(2)に関しても、全身で観察が可能なようにpol IIプロモーターを付けたEGFP遺伝子のトランスジェニックマウスを作出した。現在、発色基団に変異を導入しG→Aの復帰変異が起こると発色が確認されるプラスミドコントラクトを完了し、トランスジェニックマウス作出に入っている。
盲学校理科工の指導用モジュール教材と学習材の開発とその実践化

日本視覚障害理科教育研究会(JASEB)のメンバー(研究協力者)と連絡を密にして研究を推進した結果,下記のような盲学校理科Iの指導用モジュール教材と学習材を開発することができた.1.昭和60年度金属,洗う,小麦粉から食物をつくる.大豆から食物をつくる.2.昭和61年度物理(位置エネルギー,人間の運動,落下運動,音の共鳴,光の干渉)生物(カエルの解剖,動物の骨格標本の触察,卵を使った細胞の指導,光合成の実験)地学地層模型の製作,太陽高度の観測,雨粒の大きさの測定, 3.昭和62年度科学史上の実験の再現植物の成分植物繊維炭灰以上のモジュール教材と学習材は,理科Iのみならず理科IIにも十分適用できることが明らかになった.日本視覚障害理科教育研究会(JASEB)のメンバー(研究協力者)と連絡を密にして研究を推進した結果,下記のような盲学校理科Iの指導用モジュール教材と学習材を開発することができた.1.昭和60年度金属,洗う,小麦粉から食物をつくる.大豆から食物をつくる.2.昭和61年度物理(位置エネルギー,人間の運動,落下運動,音の共鳴,光の干渉)生物(カエルの解剖,動物の骨格標本の触察,卵を使った細胞の指導,光合成の実験)地学地層模型の製作,太陽高度の観測,雨粒の大きさの測定, 3.昭和62年度科学史上の実験の再現植物の成分植物繊維炭灰以上のモジュール教材と学習材は,理科Iのみならず理科IIにも十分適用できることが明らかになった.日本視覚障害理科教育研究会(JASEB)のメンバーたち(研究協力者)との連絡を密にして研究を推進した結果、下記のような理科工の指導用モジュール教材と学習材を開発することができた。1.物理位置エネルギー,人間の運動,落下運動,音の共鳴,音・光の干渉2.生物カエルの解剖,動物の骨格標本の触察,卵を使った細胞の指導、光合成の実験3,地学地層模型の製作,太陽高度の観測,雨粒の大きさの測定以上のモジュール教材と学習材は理科【I】のみならず、理科【II】にも十分適用できる。反省点としては、1.協力者の学校の事情により、実践化を十分に行えなかったが、来年度は研究の最終年度に当るので、実践化に重点をおきたい。2.本年度は物理,生物,地学のモジュール教材と学習材の開発に重点をおいたが、来年度は研究の最終年度に当るので、物理,化学,生物,地学の集大成を図りたい。
異文化間コミュニケーションにおける言語行動と言語意識に関する社会言語学的研究

本研究は,「多文化共生社会」における「外国人支援」の一環として,外国人と日本人の異文化間コミュニケーション場面において,両者の言語行動と言語意識にどういう共通点や相違点があるかを調査により明らかにし,外国人が抱える異文化間コミュニケーション問題の実態を究明することを目的とした。中でも,丁寧体が期待される会話場面で遭遇する普通体使用について調査を行った結果,「日本人は親疎関係に対して,韓国人は年齢差に対してより敏感である」という従来の敬語研究の結果とは裏腹に,韓国人20-30代からは相手との親密度により評価が左右される傾向が窺え,年齢差の影響が思ったより絶対的要因として働いていないことが示唆された。最終年度には,現在日本で高齢化がますます深刻化する中,高齢者に対する介護問題が社会的に重要な課題となってくることが予想されるため,介護場面における医療従事者と高齢の患者間の効果的なコミュニケーションスタイルを探ることを目的にする質問紙調査を行った。最終的には日本と韓国の介護場面で用いられるコミュニケーションスタイルを比較することで,多文化共生社会における外国人(韓国人)高齢者への対応も併せて考えることを目標としている。そのため,まず日本人高齢者と介護従事者を対象に,128歳の介護福祉士と70歳の入居者との会話、228歳の介護福祉士と70歳の入居者(関係:祖母)との会話、364歳の介護福祉士と70歳の入居者との会話、464歳の介護福祉士と70歳の入居者(関係:姉)との会話という4つの場面を設定して、普通体が使われる場面と丁寧体が使われる場面,それぞれの会話から受ける印象についての調査を行った(SD法、12尺度提示)。その結果については,目下分析中である。本研究は,「多文化共生社会」における「外国人支援」の一環として,外国人が「文化と言葉の壁」を乗り越え,日本人とお互いを理解し合ってより良い関係を築いていくために必要な言語ストラテジーの習得を手助けするために行うものである。外国人と日本人との異文化間コミュニケーション場面において,両者の言語行動と言語意識にどういう共通点や相違点があるかを調査により明らかにし,外国人が抱える異文化間コミュニケーション問題の実態を究明することを目的とする。外国人と日本人の言語行動の相違(例:依頼・断りなど)については数多くの研究がなされており,特に敬語については多くの研究者がその成果を報告している。しかし,いわゆる「タメ口」と呼ばれる日本人の言語行動についての研究は未だ少なく,ましてや外国人を対象とした研究はほぼ見当たらない。そこで,本研究ではまず,「タメ口」に対する日本人と韓国人の言語行動と言語意識を明らかにするため,日本人412名と韓国人421名を対象に,インターネットによる質問紙調査を実施した。調査場面設定にあたっては,入社同期間でコピーを依頼する場面を取り上げた。性別と年齢による影響をコントロールするため,会話の相手は「同性・年下」に指定した。また,相手との親疎関係による違いをみるため,「親しくしている入社同期/たまに挨拶を交わすだけの入社同期」と設定し,会話の相手の国籍による違いをみるため,相手を「外国人/内国人」に分けて調査を行った。さらに,自分が話し手になったとき(コピーを依頼する側)と聞き手になったとき(コピーを依頼される側)の違いが調べられるよう工夫した。現在,データ分析を行っており,結果の分析が終わり次第,順次学会発表や論文等の形でその成果を発表していく予定である。「タメ口」に対する日本人と韓国人の言語行動と言語意識を明らかにするためのインターネットによる質問紙調査を実施し,日本人412名と韓国人421名のデータが得られた。調査会社の選定等の問題で当初の予定より調査が少し遅れたが,今現在,分析は順調に進んでいる。その結果については分析が終わり次第,秋の学会で発表し,論文としてまとめて公表する予定である。【研究目的】本研究では,丁寧表現不使用に対する日本人と韓国人の行動と意識の違いを探るため,日本人412名と韓国人421名を対象に,(1)話し手と聞き手という立場の相違が,丁寧表現の使用/不使用の選択と評価にどう影響するのか,(2)丁寧表現の使用/不使用の選択と評価に,会話の相手(日本人・韓国人/外国人),相手との関係(親/疎),表現への認識がどのように関係するのか,の2つの観点から調査を行った。その結果を分析し,韓国人が日本人との異文化間コミュニケーションで遭遇する困難を予測し、その解決策を提示することを目的とした。【分析結果】(1)日韓ともに依頼する場合と依頼される場合で,丁寧表現使用/不使用の判断が異なっていることがわかった。つまり,依頼される場合には,丁寧表現の使用が選好されるが,依頼する場合には,相手と親しい関係にあると,丁寧表現の不使用が選好される。特に,依頼する場面において,日本人は相手(外国人か日本人か)よりも,相手との親疎関係をより重視して表現を選択する傾向がみられたが,韓国人は依頼する相手と相手との親疎関係,両方を考慮し表現を選択する傾向がみられ,違いをみせた。(2)丁寧表現使用/不使用の選択確率に関係する要因として「自然さ(違和感)」の認識が影響していることが明らかになった。「親しい人に依頼する」場合は,依頼者,被依頼者が日本人・韓国人か外国人かにかかわらず,丁寧表現使用に対する「よそよそしさ」の認識が表現の選択に影響する共通する要因として働いていた。

【本研究の意義】丁寧表現の不使用については,他の対人コミュニケーション場面においてさらに検討を重ねていく必要があるが,話し手と聞き手の立場による認識の違いがあることと,丁寧表現の使用/不使用への認識を分析することにより,少なくとも規範の意識に基づいた丁寧表現の不使用があることを示すことができたと考えている。第38回社会言語科学会では,日本人の結果をまとめて発表したが,そこでいただいたコメントを参考に,日本人と韓国人の傾向を比較する内容を論文としてまとめて,近々投稿する予定であるため,本研究はおおむね順調に進展していると評価できる。【研究目的】本研究では,日本人と韓国人を対象に,年齢・組織での関係を固定して,1立場の相違(依頼する話し手の立場/依頼される聞き手の立場),2相手との関係(親/疎),3会話の相手(外国人/同国人)の組み合わせによる丁寧表現の使用/不使用の選好と認識の違いを調べた。【分析結果】(1)表現の選好:日韓ともに,依頼される場合には,丁寧表現の使用が選好されるが,依頼する場合には,相手と親しい関係にあると,丁寧表現の不使用が選好される。(2)丁寧表現の使用/不使用の選好に関係する認識:日本人は依頼する場合でも依頼される場合でも,主に「自然さ」への認識により表現の選好が変わるが,韓国人は「自然さ」「フレンドリーさ」「丁寧さ」への認識により表現の選好が変わる傾向が確認できた。韓国人の方が表現について多面的な認識により選好が行われていた。(3)丁寧表現の不使用に対する全般的認識:日韓ともに,タメ口は親しい相手に対して使うべきであるという認識は共通しているが,韓国人の方が,丁寧すぎる言い方よりはタメ口の方がお互いの心理的距離を縮めるとともに,丁寧すぎる言い方は親しい人間関係を築くことの障害になるという認識が強かった。また,外国人でも敬語の使い方をきちんと学ぶべきという認識は共通しているが,韓国人の方が外国人の敬語の間違いは気にならないが,タメ口を使われると不快と思っていた。【結論】日韓ともに,丁寧表現の不使用には親しい関係というのが前提条件となり,特に日本人よりも韓国人の場合がその傾向が強いことから,韓国人は親しくない人から使われる丁寧表現の不使用に対して,不快に思う割合が日本人より高いことが推測できる。また,本研究の結果から,コミュニケーション場面において,タメ口が「誤用」と評価されてしまう理由の一つが,話し手と聞き手の立場による認識の違いにあることが示唆された。前回の調査から,1日本人も韓国人も丁寧表現の不使用には親しい関係というのが前提条件となり,特に日本人よりも韓国人の方がその傾向が強いことが確認できた。このことから,異文化間コミュニケーション場面においても,韓国人は親しくない関係の人から使われる丁寧表現の不使用に対しては不快に思う可能性が高いことと,2立場の違い(話し手/聞き手)による表現の選好(丁寧表現の使用/不使用)が異なることが示唆された。次回の調査では,異文化間コミュニケーション場面において,このことの追検証を行っていくつもりである。本研究は,「多文化共生社会」における「外国人支援」の一環として,外国人と日本人の異文化間コミュニケーション場面において,両者の言語行動と言語意識にどういう共通点や相違点があるかを調査により明らかにし,外国人が抱える異文化間コミュニケーション問題の実態を究明することを目的とした。
メカノケミカル現象を利用したゼオライト硬化体の創製と環境浄化への応用

水ガラス、水酸化アルミニウムから合成される無機硬化体が、バルク状ゼオライトの前駆体になりうる可能性を明らかにすると共に、水酸化アルミニウムへのメカノケミカル処理がゼオライト生成に及ぼす影響を調べ、得られた硬化体の重金属除去特性を調べた。カリウム系のゼオライトでは、140°C以上の熱処理温度でゼオライトF型の生成が認められた。この生成温度は、カリウムの添加量に大きく依存し、カリウムの添加の増加と共に、生成温度は著しく低下することが明らかになった。カリウムの添加量が、K:Al:Si=1:1:1の組成ではゼオライトの生成に140°C以上必要であったのに対し、K:Al:Si=1.5:1:1、K:Al:Si=2:1:1の組成では、それぞれ80°C、60°Cでゼオライトが生成した。また、いずれの組成においても析出したゼオライトはゼオライトF型であった。ただし、カリウムを過度に添加した場合は、合成されたゼオライト硬化体は耐水性を示さず、水の中で崩壊した。一方、ナトリウム系では、ゼオライトA単一相(Si:Al:Na=1:1:1)からなる硬化体を合成できた。また、出発原料である水酸化アルミニウムの結晶粒子径を変化させ、ゼオライトを合成すると、粒子径が大きいとFaujasite型ゼオライト、粒子径を小さくするにつれてゼオライトAの生成が確認されたが、メカノケミカル処理した水酸化アルミニウムと同程度の粒子径でもゼオライト単一相からなる硬化体を合成することができなかった。すなわちメカノケミカル処理がゼオライトA単一相の合成に有効であることが明らかになった。さらにメカノケミカル処理した水酸化アルミニウムを用いた場合には60°Cの熱処理温度でもゼオライトAが生成し、メカノケミカル処理が、ゼオライトの生成温度にも大きく影響を与えていることが分かった。さらに、いずれのゼオライト硬化体も優れた重金属除去性能を示した。水ガラス、水酸化アルミニウムから合成される無機硬化体が、バルク状ゼオライトの前駆体になりうる可能性を明らかにすると共に、水酸化アルミニウムへのメカノケミカル処理がゼオライト生成に及ぼす影響を調べた。さらに、バルク状ゼオライトを合成するための組成の検討を行った。出発原料には、カリウムシリケート溶液(水ガラス)、水酸化アルミニウムを用いた。水酸化アルミニウムにはあらかじめ乾式で媒体攪拌型粉砕機を用いてメカノケミカル処理を行った。これらの原料をゼオライト組成(K:Al:Si=1:1:1)となるように秤量・混合し、ゼオライト前駆体を合成した。得られた前駆体を40・200・Cの範囲で熱処理し、結晶相を同定した。140・C以上の熱処理温度でゼオライトF型の生成が認められた。カリウムの添加量が、K:Al:Si=1:1:1の組成ではゼオライトの生成に140・C以上必要であったのに対し、K:Al:Si=1.5:1:1、K:Al:Si=1.5:1:2の組成では、それぞれ80・C、60・Cでゼオライトが生成した。

ただし、カリウムを過度に入れた場合(K:Al:Si=1.5:1:2)には、合成されたゼオライト硬化体は耐水性を示さず、水の中で崩壊した。また、メカノケミカル処理を行わなかった場合には、ゼオライト単一相が合成できず、出発原料である水酸化アルミニウムが残存し、耐水性にも劣った硬化体となった。以上、本年度の研究では水酸化アルミニウムへメカノケミカル処理が、比較的低い温度で単一相のバルク状ゼオライトを合成することに重要であることが明らかになった。昨年度の研究でメカにオケミカル現象を利用することによって、比較的低い温度で単一相からなるバルク状ゼオライト硬化体(カリウム系)を合成できることを明らかにした。本年度は、ゼオライトの系をナトリウム系にも拡げると共に、得られたゼオライト硬化体の重金属除去能力を評価した。昨年度に確立したゼオライト硬化体の合成技術をナトリウム系組成に応用した結果、ゼオライトA (Si : Al : Na=1:1:1)単一相からなる硬化体を合成できることが明らかになった。また、出発原料である水酸化アルミニウムの結晶粒子径を変化させ、ゼオライトを合成すると、粒子径が大きいとFaujasite型ゼオライト、粒子径を小さくするにつれてゼオライトAの生成が確認されたが、メカノケミカル処理した水酸化アルミニウムと同程度の粒子径でもゼオライト単一相からなる硬化体を合成することができず、メカノケミカル処理がゼオライトA単一相の合成に有効であることが明らかになった。さらにメカノケミカル処理した水酸化アルミニウムを用いた場合には60°Cの熱処理温度でもオライトAが生成したのに対し、処理しなかった場合にはゼオライトの生成温度が高くなることが明らかになり、メカノケミカル処理が、ゼオライトの生成温度にも大きく影響を与えていることが分かった。得られたバルク状ゼオライト硬化体が環境浄化材料として、適応するか否か検討するために、鉛,カドミニウムの除去評価を行った。また比較のために、天然ゼオライト,合成ゼオライトについても同様の実験を行った結果、鉛,カドミニウム除去に関して,ナトリウム系、カリウム系いずれの場合においても除去されていること確認された。得られたバルク状ゼオライトは天然ゼオライトより、はるかに高い重金属除能力を示し、合成ゼオライトと比べても重金属除去速度の点で劣っているが、ほぼ同等の性能が示された。
特異な「直交性骨配向化現象」の解明と骨配向化を自在に制御可能な新規生体材料の創製

研究代表者は、材料工学に細胞生物学を導入することで、「骨配向性」が骨芽細胞配列度合いに応じて決定されることを初めて見出した。本研究課題では、材料工学をベースにして初めて見出された、材料表面形状に応じて発現する「直交性骨配向化」機構解明とその原理に基づく生体材料創製に取り組んでいる。具体的には、以下の項目について研究を実施した。(A)直交性骨配向化機構解明前年度までに明らかとなった、材料表面形状(ナノメートルオーダーマイクロメートルオーダー)に依存した平行性/直交性の骨基質形成について、マイクロアレイを用いた網羅的遺伝子発現解析に基づき、材料表面の粗さや形状に応じた細胞骨格・接着斑関連遺伝子の発現変化が見いだされるとともに、骨基質配向化方向決定に関与する候補遺伝子の同定に成功した。(B)自在な骨配向化誘導のための生体材料創製レーザ照射による金属材料表面への微細周期構造形成のための制御パラメータ(レーザ波長・パルス幅等)の最適化により、接着斑制御による骨配向化誘導のための形状設計指針を得た。「研究実績の概要」に記載のとおり、本年度(平成30年度)に計画していた項目は、当初の計画以上に進展し、特に骨配向化方向(平行性/直交性)を決定する遺伝子メカニズムの候補因子を同定したことは極めて意義深い。以下に、代表的な項目ごとの進捗を示す。なお、記号の意味は、◎:当初の計画以上に進展、〇:計画通り進展、とする。1材料表面形状に応じた細胞接着様式の定量的理解(〇)、2材料表面の溝サイズに応じた「平行性/直交性」の骨基質形成メカニズムの解明(◎;マイクロアレイ解析に基づき、制御遺伝子の候補を見出した)、3骨配向化促進材料創製のための表面形状設計・制御(〇)平成30年度に計画していた研究項目は一部計画を前倒ししつつ進展し、材料表面形状サイズに応じて平行性/直交性の骨基質形成を制御する候補遺伝子の同定に成功した。今後は表面形状ー細胞間相互作用に着目しつつ、骨配向化を制御する生物学的シグナル同定を目指し、骨配向化促進材料創製と相補的に研究を進める。(A)直交性骨配向化機構解明(A1)リソグラフィやレーザ加工などの微細加工技術を駆使し、ナノメートルオーダーマイクロメートルオーダーまでの溝パターン制御基板を作製した。材料表面の溝サイズに応じて、骨芽細胞は異なる接着・細胞配列化応答を示すことを明らかにした。(A2)細胞ー材料表面における接着斑を介した相互作用に着目し、溝サイズに応じた細胞接着様式を定量的に明らかにした。接着斑形態は溝サイズに応じて変化し、さらにはその機能発現を調整することが見出された。(A3)材料工学的手法(微小領域X線回折法、特殊仕様レーザラマン顕微鏡等)および生物学的手法(免疫細胞化学)に基づき、アパタイトおよびコラーゲン配向性を定量解析した。骨配向化方向(平行性/直交性)を決定する材料表面の溝サイズ閾値が明らかになった。(B)自在な骨配向化誘導のための生体材料創製レーザ照射による自己組織化反応を利用し、ナノメートルオーダーの表面起伏を形成・制御した。材料組成および照射レーザ波長に応じて、異なる表面形状が形成されることを見出した。「研究実績の概要」に記載のとおり、本年度(平成29年度)に計画していた項目は、一部計画を前倒ししつつ遂行した。特に、骨配向化方向(平行or直交)を決定する基板表面の溝サイズ同定に成功したことは極めて意義深い。1材料表面の溝パターン制御(〇)、2細胞配列化と接着斑形態の相関解明(〇)、3材料表面の溝サイズに応じて「平行性」or「直交性」骨配向化が転換する閾値の解明(◎)、4骨配向化誘導のための材料創製(〇)研究代表者は、材料工学に細胞生物学を導入することで、「骨配向性」が骨芽細胞配列度合いに応じて決定されることを初めて見出した。(B)自在な骨配向化誘導のための生体材料創製

レーザ照射による金属材料表面への微細周期構造形成のための制御パラメータ(レーザ波長・パルス幅等)の最適化により、接着斑制御による骨配向化誘導のための形状設計指針を得た。「研究実績の概要」に記載のとおり、本年度(平成30年度)に計画していた項目は、当初の計画以上に進展し、特に骨配向化方向(平行性/直交性)を決定する遺伝子メカニズムの候補因子を同定したことは極めて意義深い。以下に、代表的な項目ごとの進捗を示す。なお、記号の意味は、◎:当初の計画以上に進展、〇:計画通り進展、とする。1材料表面形状に応じた細胞接着様式の定量的理解(〇)、2材料表面の溝サイズに応じた「平行性/直交性」の骨基質形成メカニズムの解明(◎;マイクロアレイ解析に基づき、制御遺伝子の候補を見出した)、3骨配向化促進材料創製のための表面形状設計・制御(〇)平成29年度に計画していた研究項目は、一部計画を前倒ししつつ進展し、骨配向化方向を決定する材料表面形状サイズの閾値が同定されたことから、今後は、材料表面形状ー細胞間の相互作用を介して骨配向化を決定する分子メカニズム解明および新規生体材料創製に重点を置きつつ、研究を推進する。平成30年度に計画していた研究項目は一部計画を前倒ししつつ進展し、材料表面形状サイズに応じて平行性/直交性の骨基質形成を制御する候補遺伝子の同定に成功した。今後は表面形状ー細胞間相互作用に着目しつつ、骨配向化を制御する生物学的シグナル同定を目指し、骨配向化促進材料創製と相補的に研究を進める。
造精過程における染色体構造蛋白に対するアンドロゲンの影響に関する検討

本研究ではandrogenreceptor(AR)を介したandorgenのTransition protein 1(TP1)への影響、ARのglutamine repeatの多寡がTP1の発現にどのような影響を与えるかを中心に検討した。1)TP1遺伝子の5'上流領域の単離遺伝子バンクデータベースを元にtransition protein 1(TP1)の5'上流領域を含む塩基配列を検索した。これを元に920bpまでの上流を含むDNA断片をヒトDNAをもとにPCR法により単離した。単離したDNAを細断片化して塩基配列を決定した。その結果単離した遺伝子では塩基配列は一部ことなっていることが判明した。ホモロジーは97%であった。さらにTable 1に示すように現在までに報告されている明らかなandrogen-androgenreceptor complexが結合するsteroid hormone responsiveelement(SRE)及びandrogenresponsive element(ARE)は、認められていない。しかし、類似の配列を114-130(GGCTTCCCAATGTACTT)に認めた。この配列が実際にandrogen-androgenrcepter complexの結合領域かどうかはさらに検討が必要である。2)発現系を用いたARのTP 1への影響の検討COS7細胞にCAGrepeatの異なったandrogenreceptor gene(AR gene)を導入して、DHT添加非添加での発現活性を検討したところ、CAG repeat 22のAR geneを導入した細胞ではluciferace語性の上昇が認められた。これは、TP 1遺伝子の5'上流領域に少なくともDHT及びARにより発現に影響を受ける領域が存在していることを示している。一方で、CAGrepeat12および15のAR geneを導入した場合は、活性の上昇は認めなかった。このことは、CAGrepeaの減少はTP 1遺伝子の発現の減少を引き起こす可能性を示している。今回の検討にて、androgenがTP 1蛋白の発現に影響していることが、はじめて明かになった。さらに、ARのCAGrepeatが22から15及び12へと減少することによりその発現に及ぼす影響が減弱することも明らかになった。以前に我々が、乏精子症の患者にはandrogenのCAG repeatの減少した割合が多いという報告をした。また、TP 1及びTP 2蛋白自体の異常が精子形成能および運動能に影響を与えることが報告されている(Steger, K et al. Mol Hum Reprod.Vol 4,p939,1998)。今回の結果より、androgenのCAGrepeatの減少TP 1の発現への影響が減弱することも一つのメカニズムであることが示唆された。1)ARと染色体構造蛋白のゲノム遺伝子との関連の検討histone、TP1、TP2とprotamineのゲノム遺伝子のプロモーター領域を用いてARとの結合の有無をgel shift mobility assayにて検討する。現在、すでにこれら遺伝子をベクターに組込んだ上で遺伝子の単離を行った。

正常のARを発現ベクターに組み込みCos7細胞にelectroporation法にて導入し、この細胞より核蛋白を抽出して上記ゲノム遺伝子の断片と反応させる。この反応系にヒトARに対するモノクローナル抗体を添加する。これらを、変性ポリアクリルアミドゲルにて電気泳動してgel shift mobility assayを行う。この際に、DHT添加の有無および添加濃度による差異も検討する。現在、細胞より核蛋白を抽出し、泳動条件を検討としている。また、すでに、histone、TP1、TP2とprotamineのそれぞれのゲノム遺伝子のプロモーター領域を5'上流領域より欠失された断片を作成している。今後、上記の発現系を用いて、AR遺伝子と結合する領域を検索する予定である。本研究ではandrogen receptor(AR)を介したandorgenのTransition protein 1(TP1)への影響、ARのglutamine repeatの多寡がTP1の発現にどのような影響を与えるかを中心に検討した。1)TP1遺伝子の5'上流領域の単離遺伝子バンクデータベースを元にtransition protein 1(TP1)の5'上流領域を含む塩基配列を検索した。これを元に920bpまでの上流を含むDNA断片をヒトDNAをもとにPCR法により単離した。単離したDNAを細断片化して塩基配列を決定した。その結果単離した遺伝子では塩基配列は一部ことなっていることが判明した。ホモロジーは97%であった。さらにTable 1に示すように現在までに報告されている明らかなandrogen-androgerreceptor complexが結合するsteroid hormone resposive element(SRE)及びandrogen responsive element(ARE)は、認められていない。しかし、類似の配列を114-130(GGCTTCCCAATGTACTT)に認めた。この配列が実際にandrogen-androgerrcepter complexの結合領域かどうかはさらに検討が必要である。それ以外にCAT box, TATA boxを認めた。2)発現系を用いたARのTP1への影響の検討COS