hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
グルカゴン関連ペプチドによる新たな脳内摂食制御機構の解明

本研究はニワトリヒナにおけるグルカゴン関連ペプチド、特に血管作動性腸ペプチド(VIP)と下垂体アデニレートシクラーゼ活性化ポリペプチド(PACAP)の摂食抑制作用機構について調べることを目的としている。本年度はVIPの摂食抑制ネットワークについて調べた。1 VIPとストレスとの関係前年度の研究により、VIPおよびPACAPが脳内副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン(CRF)神経系を刺激していることを見出した。CRFはストレス反応に関わっているため、VIPとPACAPもストレス反応に関わっているかについて行動学的に検証してみたところ、両ペプチドを脳室内投与しても、CRFと同様の行動変化は観察されなかった。両ペプチドがCRFと関わりがあるが、ストレス反応自体はCRFとは異なることが明らかとなった。また、グルカゴン関連ペプチドであるグルカゴン様ペプチド-1の摂食抑制作用もCRFと関わりがある可能性を見出した。2 VIPとエネルギー代謝との関係脳内VIP、PACAPと末梢組織との関係を調べるため、両ペプチドの脳室投与によるエネルギー代謝の変化を調べたところ、VIPはエネルギー消費を抑え、PACAPは逆に刺激することを見出した。また、両ペプチドで作用が異なる原因として、PACAPがその独自のレセプターを活性化していることを挙げることができた。さらに、両ペプチドによりヒナの脂質代謝が変化することを明らかにした。3プロラクチン放出ペプチドの脳内作用鳥類において、VIPはプロラクチン分泌作用をもつ。前年度では、プロラクチン放出ペプチド(PrRP)がVIPと同様に摂食を抑制するかを調べたところ、予想とは逆に摂食を促進した。この原因を明らかにするべく、PrRPの脳室投与によって血中プロラクチン濃度が増加するかを確認したところ、PrRPはヒナのプロラクチン分泌を抑えることが明らかとなった。本研究は、ニワトリヒナにおけるグルカゴン関連ペプチド、特に血管作動性腸ペプチド(VIP)の摂食抑制作用機構について調べることを目的としている。本年度は「脳内VIPが実際に摂食を抑制しているのか」、「VIPが異常行動を誘発しているか」について研究を進めた。1脳内VIPが実際に摂食を抑制しているのか抗VIP抗体処理により脳内VIPの作用を抑えたところ、ニワトリヒナの摂食量が増加することを見出し、脳内VIPが摂食を抑制している可能性を示した。また、VIPとアミノ酸配列が類似している下垂体アデニレートシクラーゼ活性化ポリペプチド(PACAP)にも同様の摂食抑制作用があることを見出した。VIP受容体はPACAPにも親和性を示すため、両ペプチドの摂食抑制作用が共通の受容体を介している可能性があるが、PACAPの作用はPACAP特有の(VIPが結合しない)受容体を介していることを明らかにした。ヒナにおいて調査されているグルカゴン関連ペプチドは全て摂食を抑制するが、その作用機序については各々で異なると予想された。2 VIPが異常行動を誘発しているか異常行動の誘発に関する研究では、VIPまたはPACAPを脳室投与した後の血中コルチコステロン濃度を調べた。その結果、両ペプチドの投与によりコルチコステロン濃度が増加した(現在投稿中)ため、両ペプチドはストレスに関連している可能性を示すことができた。また、ストレスとの関係をより詳細に調べるため、ストレス関連ペプチドであるコカイン・アンフェタミン誘導転写産物(CART)の作用について調べたところ、CARTもヒナの摂食を抑制することを見出した。今後VIPおよびPACAPの作用とCARTとの関わりについて調べる予定である。本研究は、ニワトリヒナにおけるグルカゴン関連ペプチド、特に血管作動性腸ペプチド(VIP)と下垂体アデニレートシクラーゼ活性化ポリペプチド(PACAP)の摂食抑制作用機構について調べることを目的としている。本年度はVIPの摂食抑制ネットワークを明らかにすることを目的として研究を進めた。VIPおよびPACAPがCRFを刺激してコルチコステロン分泌を促すことを見出した。さらに、両ペプチドの摂食抑制作用についてもCRFと関わっていることを見出した。CRFはストレス反応の視床下部シグナルであるため、VIPとPACAPがストレス反応に関わっている可能性を見出した。2アルギニン・バソトシンの脳内作用VIP、PACAPの脳内投与によって引き起こされる行動がCRFのそれとは明らかに異なるため、両ペプチドにはCRF非依存性のネットワークがあると推測した。本研究では、CRFと同様に副腎皮質刺激ホルモン分泌作用を持つアルギニン・バソトシンに着目し、アルギニン・バソトシンの脳内投与により摂食が抑制されること、VIP、PACAPと同様の行動を引き起こすことを見出し、VIP、PACAPの作用にアルギニン・バソトシンが関わっている可能性を見出した。3プロラクチン放出ペプチドの脳内作用鳥類において、VIPはプロラクチン分泌作用があることが知られている。哺乳動物で同定されたプロラクチン放出ペプチドにも同様の作用があると考え、同ペプチドにもVIPと同じ摂食抑制作用があるかを調べたところ、予想とは逆に摂食促進作用があることが明らかとなった。この原因については今後調査する予定である。

CRFはストレス反応に関わっているため、VIPとPACAPもストレス反応に関わっているかについて行動学的に検証してみたところ、両ペプチドを脳室内投与しても、CRFと同様の行動変化は観察されなかった。両ペプチドがCRFと関わりがあるが、ストレス反応自体はCRFとは異なることが明らかとなった。また、グルカゴン関連ペプチドであるグルカゴン様ペプチド-1の摂食抑制作用もCRFと関わりがある可能性を見出した。2 VIPとエネルギー代謝との関係脳内VIP、PACAPと末梢組織との関係を調べるため、両ペプチドの脳室投与によるエネルギー代謝の変化を調べたところ、VIPはエネルギー消費を抑え、PACAPは逆に刺激することを見出した。また、両ペプチドで作用が異なる原因として、PACAPがその独自のレセプターを活性化していることを挙げることができた。さらに、両ペプチドによりヒナの脂質代謝が変化することを明らかにした。3プロラクチン放出ペプチドの脳内作用鳥類において、VIPはプロラクチン分泌作用をもつ。前年度では、プロラクチン放出ペプチド(PrRP)がVIPと同様に摂食を抑制するかを調べたところ、予想とは逆に摂食を促進した。この原因を明らかにするべく、PrRPの脳室投与によって血中プロラクチン濃度が増加するかを確認したところ、PrRPはヒナのプロラクチン分泌を抑えることが明らかとなった。
16SrRNA遺伝子を用いる海洋微生物コミュニティーの非培養解析

平成10年度に白鳳丸航海の際にマリアナ海溝、伊豆小笠原海溝など8,000mを越す深海から採取された堆積物も冷凍保管されている。さらに今年度は白鳳丸による南太平洋、や淡青丸による伊豆小笠原海溝の堆積物も採取した。現場サンプルから直接抽出したDNAをTGGE法あるいはDGGE法によりアガロースゲル上に展開し、そこで得られたバンドに関し、遺伝的多様性解析システムを用いて解析した。その中では試料によって共通のバンドや共通性のないバンドに関し解析すると同時にそれらのシークエンスを調べ、これまでに得られているデータベースとコンピュータを通じてダイレクトに比較できるのが、新しく購入する遺伝的多様性解析システムの強みである。また、16SリボソームのRNA塩基配列のみでなく、キノンを用いる微生物群集解析に関しても並行して行い、両者を比較した。沿岸の堆積物に関しては、かなりの成果が得られたが、外洋の堆積物に関しての研究はまだまとまらなかった。本年度は初年度でもあり、まず海洋微生物群集解析法の立ち上げに力を入れる。まず沿岸の堆積物を用いて核酸抽出法の検討から始めたい。その後で予備試験としてTGGE法(温度勾配ゲル電気泳動法)やDGGE法(変性剤濃度勾配ゲル電気泳動法)を検討し、得られたデータとクローニング法やキノン分析結果との比較、検討を行う。海洋研究所の淡青丸航海(平成11年6月25日から7月2日)と白鳳丸航海(平成12年1月14日から3月10日)において日本の沿岸から外洋域、深海域にいたるさまざまな海域の海水、底泥のサンプリングを行い、海水、懸濁物、海底堆積物試料を集める。現場サンプルから直接抽出したDNAをTGGE法あるいはDGGE法によりアガロースゲル上に展開する。そこで得られたバンドに関し、遺伝的多様性解析システムを用いて解析する。その中では試料によって共通のバンドや共通性のないバンドに関し解析すると同時にそれらのシークエンスを調べ、これまでに得られているデーターベースとコンピュータを通じてダイレクトに比較できるのが、新しく購入する遺伝的多様性解析システムの強みである。当該年度には出来るだけ多くの試料について検討を行う。
日本語の数量詞を外国語として習得する際の実証的研究

本研究の目的は、日英語の数量詞の意味的・統語的違いを考察し、日本語を外国語として学ぶ学習者が、日本語の数量詞を正しく解釈できるかどうかを明らかにすることである。本年度取り組んだ研究内容は以下の通りである。(1)当初の計画通り、日本語の遊離数量詞の解釈に関する理論言語学の文献を整理し、その中から、意味論の立場から日英語の数量詞の解釈の違いを説明したNakanishi(2007)に基づき実験を行い、1(言語学者ではない)一般の日本人が、Nakanishiの指摘する通り、遊離数量詞の集合読みを否定すること、2英語を母語とする日本語学習者が、母語にはない遊離数量詞の解釈を習得できること、を明らかにした。この研究内容の一部は、2つの国際学会(Symposium on Second Language Acqusitionと、The 43th Annual Boston University Conference on Language Development (BUCLD43))で発表した。また、後者の発表内容は、2019年7月にProceedingsとしてCascadilla Press(USA)から出版予定である。計画通り、日英語の遊離数量詞の解釈に関する理論言語学の文献に目を通し、予備実験を通して実験手法を確立し、本実験を行うことで遊離数量詞の習得過程をある程度明らかにすることが出来た。今後は、理論言語学の文献を更に読み進めると共に、2018年度に行った実験結果を精査し、調査項目の習得過程の詳細の考察を進める。具体的には以下の2つを行う。(1)遊離数量詞の習得に関しては、日本人母語話者・日本語学習者共に解釈にばらつきがあり、理論言語学で指摘されている解釈とは異なるものがあった。このばらつきの原因を明らかにし、必要に応じて実験手法を修正し再実験を行う。また被験者毎の習得過程の考察を進め、先行研究と比較する。(2)数量詞を伴わない名詞句の解釈については、被験者を増やして再実験を行い、2018年度の結果の信頼性を調査する。上記の調査項目以外にも、研究を進めていく中で新たな課題が見つかった場合は、それについても随時検討を行う。研究が順調に進み(当初2018年度に予定していなかった)国際学会で2回発表したため、その旅費の支払いのために30万円を前倒し請求し、そのうち約24万円を使用した。残額約6万円は、2019年度に繰り越して、2019年度の旅費の一部として使用予定である。
超高圧実験による地球成層構造の起源の解明

大型放射光施設SPring-8において焼結ダイアモンドアンビル(SDA)により40GPa発生を確認してSnO2の高圧相の状態方程式を39GPa,1500Kまで決定した。さらに高い圧力を発生できるようにSDAの先端きり欠き長さ(TEL)を従来の2.0mmから1.5mmに縮小してFeの第5の固相、β相の探査を行った。ビームラインBL04B1ポートに設置されたDAI型プレスでSDA集合体を圧縮しFe試料のカプセルとしたPtとMgOの微細焼結体を圧力マーカーとして発生圧力をモニターした。荷重800トンにおいてPtで48.4GPa、MgOでは49.2GPaの圧力が記録された。除荷後のSDAに塑性変形が認められなかったこと、また荷重800トンにおいても圧力発生効率が顕著な低下を見せていないことから、さらに高い圧力の発生は可能であると思われる。現在までのところ43GPa,1600K程度の条件まではε相が安定でありβ相に相当する新しい多態は見つかっていない。ペリドタイトの溶融実験を35GPa程度まで行って、圧力にともなう溶融関係の変化を明らかにするとともに、液とリキダス相との間の元素分配を決定した。その結果、下部マントルで生ずるマグマは深さともにSiO2に欠乏してゆき、900kmより深いところはペリドタイトより塩基的な組成をもつ。また1000kmより深いマグマオーシャンではMg-ペロフスカイとCa-ペロフスカイトが優先的に沈降してマントル下部に高密度な物質リザーバーを形成した可能性がある。さらにC1コンドライトマントルと得られた元素分配係数からこのリザーバーは1500km程度の深さにまで達しアルカリ元素や希土類元素に富んだundepletedなものであることが指摘される。29GPaまで行った鉄-けい酸塩系の溶融実験の結果からマントルのNi,Co存在度は中心核(溶融鉄)が深さ1000kmのマグマオーシャンから分離したことを示す。放射光によるX線その場観察実験を中心に燒結ダイアモンドによる超高圧高温の発生技術の開発を行った。その結果、SnO_2のCaCl_2型からα-PbO_2型さらに立方晶(Pa3-)ヘの転移はそれぞれ15,17GPaで生ずることが判明した。立方晶についてP-V-T関係を29GPa、1400Kまで調べ、常圧下での単位胞体積と体積弾性率はそれぞれ130.6(3)Å^3,246(9)GPa、25GPaでの熱膨張率は1.7(4)×10^<-5>K^<-1>と決定された。また、鉄の状態を約40GPa,1600Kまで観察し、ε-γ相境界線の決定と30GPa以上において存在が主張されている第5番目の固相βの探査を行った。その存在を確認できなかったが、条件を拡大して継続している。(Mg,Fe)O-SiO_2系の溶融実験を40GPaまで行い、ペリドタイト組成において30GPa以上でペロフスカイトがリキダス相として晶出するためには少量のAl_2O_3の存在が必須であることが明らかになった。MORB組成の物質について相平衡関係を37GPaまで調べ、出現する相の化学組成とそれぞれの量比を決定した。

その結果、最近報告されている沈み込むスラブの下方900-1100kmに存在する地震学的不連続に対応する相変化は認められなかった。しかし、この物質の下部マントル上半部における密度は平均的な密度より高く下部マントルにおいてもスラブは沈み込み得ることが示された。大型放射光施設SPring-8においてFeの第5の固相、β相の探査を行いながら焼結ダイアモンドアンビル(SDA)の圧力校正を行った。さらに高い圧力を発生できるようにSDAの先端きり欠き長さ(TEL)を従来の2.0mmから1.5mmに縮小した。ビームラインBL04B1ポートに設置されたDAI型プレスでSAD集合体を圧縮しFe試料のカプセルとしたPtとMgOの微細焼結体を圧力マーカーとして発生圧力をモニターした。荷重800トンにおいてPtで48.4GPa、MgOでは49.2GPaの圧力が記録された。この圧力はTEL2.0mmで発生させた約40GPaを大きく上回った。除荷後のSDAに塑性変形が認められなかったこと、また荷重800トンにおいても圧力発生効率が顕著な低下を見せていないことから、さらに高い圧力の発生は可能であると思われる。現在までのところ43GPa,1600K程度の条件まではε相が安定でありβ相に相当する新しい多態は見つかっていない。ペリドタイトの溶融実験を33GPa程度まで行って、圧力にともなう溶融関係の変化を明らかにするとともに、液とリキダス相との間の元素分配を決定した。その結果、下部マントルで生ずるマグマは深さともにSiO2に欠乏してゆき、900kmより深いところはペリドタイトより塩基的な組成をもつと考えられる。また1000kmより深いマグマオーシャンではMg-ペロフスカイとCa-ペロフスカイトが優先的に沈降してマントル下部に高密度な物質リザーバーを形成した可能性がある。さらにC1コンドライトマントルと得られた元素分配係数からこのリザーバーは1500km程度の深さにまで達しアルカリ元素や希土類元素に富んだundepletedなものであることが指摘される。
遺伝子治療による眼内増殖の制御と網膜神経細胞保護、その分子機構の解明

1.レーザー光凝固実験1)培養網膜色素上皮の汎光凝固実験:光凝固後、血管新生抑制因子である形質転換増殖因子やPEDF(Pigment epithelium derived factor)の発現は増加していた。一方、血管新生因子の塩基性線維芽細胞増殖因子、血管内皮細胞増殖因子(VEGF)、IL-8の発現は一時的に上昇したがすぐに低下した。血管新生抑制因子の増加や血管新生因子の低下が光凝固後の血管新生抑制効果をもたらすと考えられた。2)ラット網膜光凝固実験:光凝後、PEDFの発現が上昇しており、PEDFが血管新生を抑制していると考えられた。2.ラット実験的脈絡膜新生血管モデル1)HVJ-リポソーム法による遺伝子治療。HVJ-リポソーム法で、脈絡膜新生血管に遺伝子が導入された。NFk-Bに対する2重鎖デコイ型核酸を導入し、血管新生因子誘導の抑制を試みた結果、脈絡膜新生血管からの透過性が抑制され、血管新生が抑制できた。2)PEDFの発現。血管新生の早期にPEDFの発現がみられ、退縮期には増殖した網膜色素上皮にPEDFの発現が強くみられた。網膜色素上皮から産生されるPEDFが退縮を促進すると考えられた。PEDFを遺伝子導入することで新生血管の発生を阻止できる可能性が示唆された。3.眼圧上昇一網膜虚血灌流障害モデル実験。神経保護因子でもあるPEDFを投与し、その変化を検討した。その結果PEDFの投与で網膜神経細胞が保護されることがわかった4.臨床症例の検討糖尿病網膜症の手術時に採取した眼内液のVEGF、PEDF濃度を検討した。その結果、糖尿病網膜症はVEGF濃度が高くPEDFが低かった。このことから眼内PEDFは血管新生抑制に働いており、PEpFが低下すると眼内血管新生を促進すると考えられた。PEDFを遺伝子導入することで血管新生を抑制し糖尿病網膜症展を阻止できる可能性が示唆された。2)PEDFの発現。1.レーザー光凝固実験1)培養網膜色素上皮の汎光凝固実験。光凝固後、形質転換増殖因子(TGFβ)の発現は増加していた。塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)、血管内皮細胞増殖因子(VEGF)、およびIL-8の発現も一時的に上昇するがすぐに低下した。血管新生因子の転写因子であるETS-1,nuclear factor kappa B(NF-kB)も、72時間後には光凝固前のレベルより低下していた。網膜色素上皮の産生する血管新生抑制因子の増加や血管新生因子の低下が、光凝固後の血管新生抑制効果をもたらすと考えられた。2)PEDF(Pigment epithelium derived factor)の発現。PEDFは、強力な血管新生抑制作用もつ。培養網膜色素上皮やラット網膜を光凝固するとPEDFの発現が上昇していた。光凝固後、網膜色素上皮から産生されるPEDFが血管新生を抑制していると考えられた。HVJ-リポソーム法で、NFk-Bに対する2重鎖デコイ型核酸を導入し、血管新生因子誘導の抑制を試みた。その結果、脈絡膜新生血管からの透過性が抑制され、血管新生が抑制できた。遺伝子導入でサイトカインの発現を制御し、脈絡膜新生血管の治療ができることをがわかった。

2)PEDFの発現。新生血管発生の早期に新生血管組織でPEDFの発現が強くみられ、退縮期には発現が弱まるものの、増殖した網膜色素上皮にはPEDFmRNAの発現が強くみられた。脈絡膜新生血管は、血管新生因子と抑制因子のバランスで発生し、網膜色素上皮から産生されるPEDFが退縮を促進すると考えられた。3.眼圧上昇-網膜虚血灌流障害モデル実験。神経保護因子でもあるPEDFを投与し、その変化を検討した。その結果PEDFの投与で網膜神経細胞が保護されることがわかった。1.臨床症例の検討糖尿病網膜症、裂孔原性網膜剥離の手術時に採取した眼内液の血管内皮細胞増殖因子(VEGF)、PEDF(Pigment epithelium derived factor)の濃度を検討した。その結果、糖尿病網膜症は硝子体内VEGF濃度が高くPEDFが低かった。なかでも活動性の高い増殖型糖尿病網膜症では硝子体内VEGF濃度が高くPEDFが低かった。しかし、非増殖型糖尿病網膜症ではコントロール群とPEDF濃度に差がなかった。このことから眼内PEDFは血管新生抑制に働いており、PEDFが低下すると血管新生抑制効果に乏しく眼内血管新生を促進し、増殖型糖尿病網膜症への進展をもたらすと考えられた。さらに裂孔原性網膜剥離では硝子体内VEGF濃度が低くPEDFが高かった。高濃度の硝子体内PEDFは剥離網膜の神経保護に働いていると考えられた。眼内にPEDFを遺伝子導入することで血管新生を抑制し糖尿病網膜症の進展を阻止できる可能性が示唆された。2.脈絡膜新生血管モデルでの検討ラット眼底に強度光凝固を行い、脈絡膜新生血管モデルを作成し新生血管組織におけるPEDFおよびVEGFの発現を検討した。PEDFおよびVEGFともに新生血管発生の早期に強く発現が見られた。しかし、その後新生血管組織内のPEDF、VEGFの発現はともに減弱したが脈絡膜新生血管をおおい囲むように増殖した網膜色素上皮細胞にはPEDFの発現が強くみられた。このことから、脈絡膜新生血管の発生、進展には血管新生因子のVEGFと血管新生抑制因子のPEDFが関与することがわかった。そして新生血管組織にPEDFを遺伝子導入することで新生血管の発生を阻止できる可能性が示唆された。
絵本の読み合い遊びが育てる子どもの関係発達－その実証的研究－

絵本の読み合い遊びが子どもの関係性の発達および理解,表出,概念の育ちおよび運動・操作といった育ちに影響してくることが示唆されている。本研究では,読み合い遊びの継続的な実践を行いつつ,KIDS乳幼児発達スケール,fNIRS計測を主な指標として,先述の育ちへの影響を実証することを主な目的としている。30年度は,当初は予定していなかったがNIRS課題として作成した3内容の絵本課題刺激に対する成人の脳血流活動をベースラインとして12名のデータを収集した。また,読み合い活動を実施している幼児・児童,特別支援学校10名,知的障害学級3名,保育園で2歳から5歳児31名を現在までに計測している。また,29年度から引き続き読み合い活動に参加している子どものKIDS乳幼児発達スケールおよび本年度新たに参加した幼児・児童のKIDS乳幼児発達スケールの発達変化を継続的に収集している。現在までに収取されたデータの解析と分析を順次行っている現状である。従来利用していたNIRSでは幼児,児童にスムーズに装着できない動きに対応できにくいという問題点があったため,本年度から日立製の簡便に装着できるNIRSでの計測となったが,その手配がなかなかできなかったこともあり,読み合い実践前の個々の子どもの計測ができなかった。また,実際の学校や保育現場での読み合い活動の実践を行いつつの計測や調査であるため,当初考えていたほど計測ができないという問題も生じた。今後は,研究計画を見直し,当初の目的へ向かって実践から得られる実証的データを蓄積したいと考えている。解析途中ではあるが,fNIRSの幼児の分析結果から関係を描く3内容の絵本で,左右の前頭葉脳機能に差が出るのではないかと考えられる。31年度は継続してデータ収集を進めていきたい。加えてKIDSデータでも読み合いの効果についての分析を進めていく。機材の調達が遅れたことにより,計測開始が遅れたことも影響し,30年度当初の予定からは若干の遅れが生じたことは否めない。また読み合い遊び実践を系統的に行っていくことが必要な研究であるため,生理データのみを得る研究と同様なスピードではすすめられないという困難さがある。また、どんなに改善や改良がなされている機材であっても,子どもの計測用を想定しているわけではないので,子どもの計測という部分での工夫が必要であるということも本年度の計測で明確となった。単純に数を増やすことは,実践と並行している研究であるため難しいが,KIDSスケール等のデータでデメリットを補えるのではないかと考えている。読み合い実践自体の環境へのアドバイスは共同研究者からいただき,現在はその環境での保育者や子どもの動きの分析も並行して行っている。子どもの実際の動きと計測との関係も分析できるのではないかと考えている。31年度も継続してKIDS尺度およびfNIRSのデータ収取を行っていく。また,上述したような問題点も明確になってきたため,研究デザインの修正をしつつ研究目的の達成に努める。具体的には,読み合い群とそれ以外の群間差を中心にデザインを考えていたが,共同研究者との話し合いかた,個人の継続データを詳細に検討していくことおよび,共同研究者が行っているアンケート調査等も有効に利用できないか検討する。また,KIDSのデータをfNIRSの結果を補うものとして結果の利用の仕方を工夫していきたい。さらに上述した読み合い環境とその中での保育者や子どもの活動についても共同研究者と分析を進めたい。

また、どんなに改善や改良がなされている機材であっても,子どもの計測用を想定しているわけではないので,子どもの計測という部分での工夫が必要であるということも本年度の計測で明確となった。単純に数を増やすことは,実践と並行している研究であるため難しいが,KIDSスケール等のデータでデメリットを補えるのではないかと考えている。読み合い実践自体の環境へのアドバイスは共同研究者からいただき,現在はその環境での保育者や子どもの動きの分析も並行して行っている。子どもの実際の動きと計測との関係も分析できるのではないかと考えている。31年度も継続してKIDS尺度およびfNIRSのデータ収取を行っていく。また,上述したような問題点も明確になってきたため,研究デザインの修正をしつつ研究目的の達成に努める。具体的には,読み合い群とそれ以外の群間差を中心にデザインを考えていたが,共同研究者との話し合いかた,個人の継続データを詳細に検討していくことおよび,共同研究者が行っているアンケート調査等も有効に利用できないか検討する。また,KIDSのデータをfNIRSの結果を補うものとして結果の利用の仕方を工夫していきたい。さらに上述した読み合い環境とその中での保育者や子どもの活動についても共同研究者と分析を進めたい。当初予定した時期に計測器具の手配ができなかったことなどが要因となり,読み合い実践計画とNIRS計測の開始等の時期が遅れ,初年度の研究参加者の募集と計測が予定よりも少なくなってしまった。そのため,昨年度は,研究成果を発表することが難しくなってしまった。本年度は,できる限り研究参加者を募り,昨年の遅れを取り戻して行く必要がある。概ね計測のための参加者の謝礼,研究補助および分析補助者への謝礼等で使用することとなる。また、解析や成果発表に利用できるノートパソコン等も整備したい。さらに本年度まとめられた成果についての打ち合わせ,発表を共同研究者と行う費用として充てる予定である。
共生性二枚貝における寄主転換による多様化と寄主特異性の成立メカニズムの解明

本研究は、ウロコガイ上科二枚貝類を対象として、寄主転換による多様化パターンの解明と寄主特異性の成立メカニズムの解明を目的として行った。ウロコガイ上科二枚貝類の多くは、他の動物の体表や巣穴をすみかとして利用する片利共生者である。昨年度に引き続き、多様な寄主からウロコガイ類を採集し分子系統解析を行うことで、詳細な寄主転換パターンの把握を目指した。国内では奄美大島などの南西諸島を中心に調査を行った。また、大西洋産のウロコガイ類の採集のために、バハマ国サンサルバドル島においても調査を行った。深海性の種も系統解析に加えることで、浅海域に多様性の中心をもつウロコガイ上科貝類がどのように深海環境へ進出したかについても検証した。一方、ウロコガイ上科の1種チリハギガイを対象として、どのような要因(寄主、地理的構造、海流、水温)が種内の遺伝的分化をもたらしているかについて検証した。北海道から南西諸島まで広い範囲でサンプリングし、得られた標本を用いて分子系統解析を行った。その結果、日本に分布するチリハギガイには系統的に離れた2種が含まれており、多くの集団で共存していることが明らかになった。それぞれの種で地理的な遺伝的分化が観察されたが、寄主の違いよりむしろ水温の違いや地理的構造が遺伝的分化に寄与している可能性が高いことが示唆された。ウロコガイ上科の共生性二枚貝類の主要な寄主であるユムシ類やシャミセンガイ類を対象にDNAバーコーディングや分子系統解析を行い、国内における種の多様性や系統関係を把握した。この結果に基づき寄主利用範囲を見直すことで、ウロコガイ類には、同系統の寄主を幅広く利用するタイプの種(ジェネラリスト型)と、特定の種や近縁種のみを利用するタイプの種(スペシャリスト型)が存在することが明らかになった。26年度が最終年度であるため、記入しない。寄主転換に伴う種分化は、寄生-共生生物の多様化において非常に重要な役割を果たしていると考えられてきた。しかしながら、その知見は、陸上における植物と植食性昆虫の系をモデルとした研究にもとづくものに偏っており、海洋での知見は非常に限られている。そこで、本研究では、浅海域で著しい多様化を遂げたウロコガイ上科の共生性二枚貝類をモデル系として、この課題に取り組もうと考えた。この二枚貝類は様々なベントスの体表や巣孔にすみこみ共生を行う。本年度は、瀬戸内海、奄美大島、パプアニューギニアにおいて、ウロコガイ類の標本収集及び生態調査を行った。さらに、得られた標本を用いて分子系統解析を行った。その結果、ウロコガイ類において、(1)自由生活性から共生生活性への進化が繰り返し起こったこと(2)系統的に近い寄主間だけでなく、系統的に非常に離れた寄主間でも頻繁に寄主転換が起こっていること(3)同じ分類群の寄主に対して複数回独立に進出していること、などが明らかとなった。このような共生様式の進化パターン・寄主転換パターンは、これまでにほとんど例がないユニークなものであり、海洋の寄生・共生生物の多様化パターンを考える上で非常に有用なモデルケースとなると考えている。また、寄主転換パターンや寄主特異性の維持を考える上で、寄主の系統関係の理解は重要である。海底に巣孔を形成して暮らすユムシ類は、ウロコガイ類の主要な寄主の一つであるが、科間・属間の系統関係を類推するために必要な形態的特徴に乏しく、これまでその系統分類は混乱していた。そこで、分子系統解析を行うことで、ユムシ類の科間・属間の系統関係を明らかにした。この知見はウロコガイ類の寄主利用や寄主特異性を理解する上で非常に役立つものと考えている。寄主転換による種分化は、寄生者や共生者の多様化を促進する重要な多様化機構の一つである。しかし、海洋における寄主転換の知見は限られる。そこで本研究では、ウロコガイ上科の共生性二枚貝類を対象として、寄主転換による多様化や寄主利用様式の進化の解明を目指す。この二枚貝類は海底に生息する様々な無脊椎動物の体表や巣穴をすみかとして生活するユニークな習性を持つ。本年度は、北海道厚岸から沖縄県石垣島まで、各地の干潟・アマモ場・岩礁において、ウロコガイ類の標本収集および生態調査を行った。その結果、これまでの知見に加えて、(1)主要な自由生活性の系統が共生性の系統から派生的に進化してきたこと、(2)刺胞動物から腕足動物への寄主転換が起こったこと、(3)日本周辺のみに生息するPseudopythina属では系統的に離れた寄主間での乗り換えが高い頻度で起こっていること、などが新たに明らかになった。これらの知見は、海洋にすむ寄生者や共生者の進化や多様化を理解する上で重要な示唆を与える。また、鹿児島県奄美大島において季節を通じたウロコガイ類のサンプリングを行った。定期的に採集した標本を今後解析することで、寄主の違いによって、近縁種間で繁殖スケジュールが異なるかどうかを検証する。さらに、腕足動物の1種ミドリシャミセンガイに共生するウロコガイ上科の新種記載を行った。本種の殻形態は、シャミセンガイ類を寄主とする同属の近縁種の殻形態とは大きく異なっていた。

生態観察から、この殻形態の違いは寄主利用様式の違いに起因することが明らかになった。共生性のウロコガイ類では殻形態の多様化が促進されていることが指摘されているが、その要因として寄主の利用様式に応じた形態適応があることが示唆された。本研究は、ウロコガイ上科二枚貝類を対象として、寄主転換による多様化パターンの解明と寄主特異性の成立メカニズムの解明を目的として行った。ウロコガイ上科二枚貝類の多くは、他の動物の体表や巣穴をすみかとして利用する片利共生者である。昨年度に引き続き、多様な寄主からウロコガイ類を採集し分子系統解析を行うことで、詳細な寄主転換パターンの把握を目指した。国内では奄美大島などの南西諸島を中心に調査を行った。また、大西洋産のウロコガイ類の採集のために、バハマ国サンサルバドル島においても調査を行った。深海性の種も系統解析に加えることで、浅海域に多様性の中心をもつウロコガイ上科貝類がどのように深海環境へ進出したかについても検証した。一方、ウロコガイ上科の1種チリハギガイを対象として、どのような要因(寄主、地理的構造、海流、水温)が種内の遺伝的分化をもたらしているかについて検証した。北海道から南西諸島まで広い範囲でサンプリングし、得られた標本を用いて分子系統解析を行った。その結果、日本に分布するチリハギガイには系統的に離れた2種が含まれており、多くの集団で共存していることが明らかになった。それぞれの種で地理的な遺伝的分化が観察されたが、寄主の違いよりむしろ水温の違いや地理的構造が遺伝的分化に寄与している可能性が高いことが示唆された。ウロコガイ上科の共生性二枚貝類の主要な寄主であるユムシ類やシャミセンガイ類を対象にDNAバーコーディングや分子系統解析を行い、国内における種の多様性や系統関係を把握した。この結果に基づき寄主利用範囲を見直すことで、ウロコガイ類には、同系統の寄主を幅広く利用するタイプの種(ジェネラリスト型)と、特定の種や近縁種のみを利用するタイプの種(スペシャリスト型)が存在することが明らかになった。26年度が最終年度であるため、記入しない。交付申請書に記載した研究の目的:ウロコガイ上科二枚貝類の寄主転換による多様化パターンと寄主特異性の成立機構の解明研究達成度:DNA実験・分子系統解析が非常に順調に進み、ウロコガイ類の寄主転換を介した多様化パターンについて論文をまとめて投稿・出版することができた。研究の目的:ウロコガイ上科二枚貝類の寄主転換による多様化パターンと寄主特異性の成立機構の解明研究達成度:精力的な野外調査によって、多くのウロコガイ類の生態が新たに明らかになった。さらに、分子系統解析によって、Pseudopythiha属の寄主転換による多様化パターンがより詳細に明らかになった。今後、解析に用いるウロコガイ類の種数と分子マーカーの数を増やす予定である。それによって、寄主転換による多様化パターンをより詳細に明らかにできると考えている。また、寄主選択実験などを行うことで、寄主転換が実際に進行するメカニズムや高い寄主特異性が維持されるメカニズムについても検討して行く予定である。ウロコガイ上科には、複数の寄主を利用する種が知られている(マゴコロガイなど)。今後、これらの種を対象に分子実験を行うことで、寄主間で遺伝的に分化した寄主レースが存在するかどうか検証する予定である。
歯髄・歯根膜細胞を用いた顎骨再生医療を目指した基礎研究

マウスの歯髄から採取した細胞は、骨芽細胞と比較して著しく高いアルカリホスファターゼ活性を有しており、in vitro(細胞培養実験)およびin vivo(動物細胞移植実験)において強力な石灰化能を有していることが明らかとなった。また、ヒト歯髄細胞と歯根膜細胞の細胞培養系を確立し、強いアルカリホスファターゼ活性と石灰化能を保持していることを明らかにした。現在、再生医療の材料としては、胚性幹細胞(ES細胞)や人工多能性幹細胞(iPs細胞)に注目が集まっている。しかしながら、これらの細胞を用いた再生医療においては、実用化に際して乗り越えなければならない壁が存在する。一方、歯髄は、脱落乳歯や歯科矯正治療における便宜抜去歯などから容易に採取可能であり、自己移植材料として有用と考えられる。我々はこれまでに、マウスの下顎切歯から採取した歯髄および歯根膜組織を用いた簡便な培養方法の確立を目指してきた。その結果、マウス歯髄から採取した細胞は高いアルカリホスファターゼ活性を有しており、in vitroおよびin vivoにおいて強力な石灰化能を有していることが明らかとなった。これらの培養系をさらに発展させ、ヒト由来の歯髄細胞および歯根膜細胞の培養系を確立し、これらの細胞の有用性を明らかにすることを目的として、臨床応用に向けた橋渡し研究として遂行する。我々は最近、マウスの歯髄細胞をアスコルビン酸とβグリセロリン酸の存在下で培養することにより、骨誘導因子(BMP-2)の非存在下において、著しい石灰化活性を有していることを見いだした。この石灰化は、BMPシグナルとWntシグナルに対するそれぞれの特異的阻害剤の添加によっても全く阻害されなかった。以上の現象は、骨芽細胞では全く認められず、歯髄細胞の大きな特徴と考えられる。我々は現在、自己血清を用いたヒト骨髄細胞由来間葉系細胞の培養系を確立中である。この研究は、信州大学医学部附属病院先端細胞治療センター(Cell Processing Center : CPC)との共同研究である。そこで、このCPCを用いた細胞調製システムをさらに発展させ、歯髄や歯根膜組織を材料にした細胞培養システムを完成させたい。歯髄は、脱落乳歯や歯科矯正治療における便宜抜去歯などから容易に採取可能であり、自己移植材料として有用と考えられる。我々は、マウスの下顎切歯から採取した歯髄および歯根膜組織を用いた簡便な培養方法の確立を目指してきた。その結果マウス歯髄から採取した細胞は高いアルカリホスファターゼ活性を有しており、in vitroおよびin vivoにおいて強力な石灰化能を有していることが明らかとなった。マイクロアレイ解析の結果より、培養歯髄細胞は骨芽細胞に比べて、カルシウムおよびリン酸の濃度調節因子(annexin A8及びSlc20a2)のmRNA発現が高く、石灰化に有利であることが示唆された。骨芽細胞の石灰化はBMPに依存していた。一方、歯髄細胞はBMP非添加およびBMPアンタゴニストであるNoggin存在下においても、高い石灰化能を示した。そこで、骨芽細胞にannexin A8及びSlc20a2をそれぞれ過剰発現させたところ、BMP非存在下においても著しく石灰化するようになった。特にannexin A8の過剰発現による石灰化亢進が顕著であった。一方、培養歯髄細胞においてsiRNAによりannexin A8及びSlc20a2の発現をそれぞれ抑制すると、石灰化能が著しく低下した。厚生労働省の「ヒト幹細胞指針」承認を得たこの研究は、信州大学医学部附属病院先端細胞治療センター(Cell Processing Center : CPC)との共同研究であり現在までに6名の患者への細胞移植を行うことが出来た。現在までの我々の実験結果から、マウス由来の骨芽細胞培養系に多層カーボンナノチューブ:MWCNT(VGCF-Sを使用)を添加すると、通常より早期に石灰化が起こることを明らかにした。さらに、NWCNTはin vivoにおいても、石灰化に対して促進的に作用することも実証した。また我々は、マウスの下顎前歯から採取した歯髄および歯根膜組織を用いた簡便な培養方法を確立した。その結果、マウス歯髄から採取した細胞は、骨芽細胞と比較して著しく高いアルカリホスファターゼ活性を有しており、in vitroおよびin vivoにおいて強力な石灰化能を有していることを明らかとした。歯髄細胞の有する高い石灰化能は、BMPシグナルとWntシグナルに対するそれぞれの特異的阻害剤の添加によっても全く阻害されなかった。この現象は、骨芽細胞では全く認められず、歯髄細胞の大きな特徴と考えられる。

そこで、多層カーボンナノチューブの石灰化に対する影響について検討するために、ヒト抜去歯由来の歯髄細胞培養系の確立を行った。ヒト抜去歯由来の歯髄細胞と歯根膜細胞および胎児由来の間葉系細胞を各種条件(コラーゲンやビトロネクチンをコートしたディッシュ)で3週間培養した結果、ヒト歯髄細胞において強いアルカリホスファターゼ活性を示すことが明らかとなった。アルカリホスファターゼに対するコラーゲンやビトロネクチンコートの効果は認められなかった。ウシ胎児血清(FBS)のみならず、無血清培地(STEM PRO)においても歯髄細胞の強いアルカリホスファターゼ活性が認められた。さらに、石灰化能を検討するために、βグリセロリン酸とアスコルビン酸を添加した培養液にて4週間培養したそれぞれの細胞に対してアリザリンレッド染色を行った。その結果、ヒト歯髄細胞のみならず歯根膜細胞においても強い石灰化が認められた。
現代フランス語アルジェリア文学の諸相―女性・移民・戦争からの考察と分析

アルジェリアに出自をもつ作家のフランス語による文学作品を「女性」「移民」「戦争」というキーワードのもとに読解、分析した。1980年以降の作品、とりわけアシア・ジェバール、レイラ・セバール、ヤミナ・ベンギギなど、戦後のアルジェリア移民と関係が深い女性作家たちの作品を対象とし、マグレブ仏語文学のなかでの当該文学の特異性、アルジェリアとフランスの歴史的・文化的相関関係、「正史」の周縁に置かれた記憶の記録化の諸相を読み解き、論文発表や口頭発表を行なった。今年度は本研究課題の初年度で、主に以下の研究活動を行った。1)国際シンポジウムでの発表。アルジェリア、オランで開催されたアシア・ジェバールの国際シンポにおいて作家の初期小説の詳細な読みを提示した。初期作品は言及される機会が少ないのでジェバール研究に貢献できたと自負する。プロシーディングは2015年5月刊行予定。2)国内研究会での発表。中東現代文学研究会において、ヤミナ・ベンギギ諸作品(映画と書籍)のマグレブ移民の娘世代が見た母世代を「祖国」という側面から考察した。マグレブ文学研究会では、パリにおけるマグレブの存在という視点から、グットドールとバルベスというマグレブからの移民と密接に関わるパリの一区域に焦点をあて「記憶」というキーワードを頼りに複数の資料を考察した。また、1)と2)から研究者間のより緊密なネットワークを確保した。3)夏のパリでの調査と資料収集をもとに、グットドール地区の文化的表象を論文にした。戦後のマグレブ/フランスの複雑な関係を主に文学作品において考察することができ、さらにそこから発展して掘り下げるべき可能性も見えた。4)アシア・ジェバール研究にとって2015年2月のその死は惜しまれるが、オマージュとしてノーベル文学賞候補者としての紹介文を書籍に掲載できた。また、昨年のジェバール国際シンポジウムの発表をもとにした論文や、そのシンポのリポートを活字として発表した。フランス(語圏)文学、及び女性による文学の代表的作家として、この作家は総合的評価の段階に入って行くだろう。2年目に当たる今年度はマグレブ仏語文学の「女性・戦争・移民」のテーマについて、以下の研究を行った。1)昨年逝去したアシア・ジェバールの作品見直し開始。没後の追悼イベントが数多く行われ、自身もパリのアルジェリア文化センターで行われた翻訳をテーマにした会に発表者として参加した。作家の急逝で全体の研究計画がずれる気はするが、その評価が固定し始めるとも言える。その他、ジェバール追悼の意味で研究会や学会での発表、講演、エッセイ寄稿など、この作家の作品全体を見直し、さらにいくつかのものは読み直す機会を得た。これをもとに、ジェバール作品の全体像を粗描していくことが重要だろう。本研究のテーマに照らし合わせ、十分意義のあることと判断する。2)ヤミナ・ベンギギのテキスト作品と映像作品から見る、フランスにおけるアルジェリア系移民一世と二世の女性たちの表象を考察した。本務校の紀要にベンギギのこのテーマをめぐって論文を執筆した。映画『移民の記憶』とそのテキスト版の相違の意義を考え、さらに敷衍してベンギギ初期三部作(映画)とテキスト化の振幅の大きい営為を詳細に考察した。3)ベンギギのテキスト作品翻訳を具体的に進めている。これは1)におけるジェバールの翻訳とも連携してくる。翻訳(ある[人の]言葉を別の[人の]言葉に置き換えること)とはまた、異なる時空、異なるアイデンティティーを獲得しつつ、他者の土地・言語に根を降ろし、そこで自らを確立し生存していくことである。ベンギギ『移民の記憶』の映画、テキストともに、マグレブ移民全体の「翻訳」であると言える。当初の目標にあげていたヤミナ・ベンギギ作品のテキストに深く入ることができた。映画監督の面だけが強調される人物だが、ベンギギのテキストを文学として読むことを試みており、論文という形に残せた。また、翻訳のおおまかな下地を作ることができた。最終年度に当たる今年度はアルジェリア仏語文学の「女性・戦争・移民」のテーマについて、以下の研究を行った。1)マグレブ文学翻訳のシリーズ刊行として、自分の翻訳希望作品(ヤミナ・ベンギギ、レイラ・セバール、アシア・ジェバール)を選び、かつシリーズ全体の構成を日本マグレブ文学研究会メンバーで検討し、刊行が開始された。また、中東現代文学会編の文学選集で、本研究の対象作家であるベンギギの抄訳を掲載した。2)学会やシンポジウムでの発表:昨年3月末のシンポジウムも含めて、ヨーロッパの移民・難民というアクチュアルなテーマでのシンポジウムの発表を複数回行なった。いずれも現在のフランスにおける北アフリカ出身フランス人の来歴と文学創造を論じたものであり、ヨーロッパ全体を俯瞰する際にフランスからの視点を提供できた。5月には、フランス語圏研究国際評議会CIEFの大会で発表を行ない、日本人研究者4名でセッションを組んだ。自分はアルジェリア文学からアシア・ジェバールの作品受容をとりあげたが、セッション全体としてカリブ海・ケベック・セネガル・マグレブがとりあげられ、日本におけるフランス語圏文学研究の現状報告にもなった有意義な機会だった。3)勤務校の公開講座でパリのエスニシティマップを取りあげ、移民、外国人が根づいて醸成するパリの文化について紹介した。4)日本マグレブ文学研究会主催で、アルジェリア文学国際シンポジウムを開催した。

アルジェリア文学の祖、ムルド・フェラウンと女性作家の草分け、アシア・ジェバールを中心に据え、アルジェリア、韓国、日本からの研究者が集う、専門性に重点を置きつつ研究者間の活発な情報交換が行なえた時空間となった。今年度が本研究の最終年となるが、翻訳刊行の目処がつき、国際シンポジウムという特別な場が設定できたことで、大きな収穫があったと言える。アルジェリアに出自をもつ作家のフランス語による文学作品を「女性」「移民」「戦争」というキーワードのもとに読解、分析した。1980年以降の作品、とりわけアシア・ジェバール、レイラ・セバール、ヤミナ・ベンギギなど、戦後のアルジェリア移民と関係が深い女性作家たちの作品を対象とし、マグレブ仏語文学のなかでの当該文学の特異性、アルジェリアとフランスの歴史的・文化的相関関係、「正史」の周縁に置かれた記憶の記録化の諸相を読み解き、論文発表や口頭発表を行なった。論文、国際シンポジウム、国内研究会での発表など初年度に予定していたことができた。主に女性作家の作品を考察することで、本研究のテーマとするアルジェリア仏語文学の特性(女性・移民・戦争)を確認し、以降の研究を方向づけることができた。ヤミナ・ベンギギ『移民の記憶』(同題の映画とは別のインタビューとエッセイを合わせた単行本となった)を中心に据えて、女性・移民・戦争の3テーマから連鎖的に導き出される複数作品の共通性と個々の独自性を考察する。次いで、アルジェリア戦争、90年代内戦に関わる作品に目配りして、本テーマの発展性を考える。さらに、それらの具体的発表手段として、研究会メンバーによるシンポジウムを行い海外研究者とのネットワークを作り、次いで、自身の研究を国内で知ってもらうために翻訳刊行の目処をつける。より大きな目標として、これまで書いてきた論文を一冊の本にまとめる準備に取りかかりたい。フランス語圏文学ヤミナ・ベンギギの営為に注目し、その映像・文学作品双方について、移民と女性という視点からアルジェリア/フランスの関係性を全般的にとらえて行きたい。また、ジェバール死去に伴って、記念的行事も含めてこの作家の総括や再発見といった研究活動が世界的に行われるはずである。その動向を大きく意識したい。ジェバールを中心に据え、より若い世代の作家(マイッサ・ベイ、レイラ・マルアーヌ、カメル・ダウードなど)の作品も考察する予定である。資料選定の時間的余裕がなく、書籍・定期刊行物・視聴覚資料(CD、DVD)を購入できなかった。パソコンと書籍購入を予定していたが、パソコン機種選定、書籍選定の時間的余裕がなかったため。今年度余裕がなかった上記資料を選定し、購入する。特に視聴覚資料に重点を置く。国際シンポジウム発表(2015年6月)と資料収集、現地調査のための数回の海外渡航費をはじめ、国内学会・研究会参加の旅費にあてる。パソコン及びその周辺機器購入予定。フランス語書籍を系統立てて収集予定。また英・米・仏・カナダで発行する雑誌バックナンバー購入も考えている。
ダウン症候群児の歯周疾患発症における細胞接着因子の役割

ダウン症候群(DS)においては一般に歯周疾患の罹患率が高いといわれている。一方,細胞接着因子のひとつであるLFA-1(lymphocyte function associated antigen-1)のβ_2鎖は21番染色体上にコードされており,Talorらは21トリソミ-であるDSではその発現が増大していると報告している。また,LFA-1の欠損症である白血球粘着異常症においてはその臨床的特徴として小児期からの重篤な歯周疾患の発症が認められる。本研究ではこのLFA-1とDS児における歯周疾患との関連について検討した。[試料および方法]北海道大学歯学部付属病院小児歯科外来に通院中のDS児についてその末梢血を採取し,フローサイトメトリーにて解析した。抗体としてはLFA-1のβ鎖を認識するCD18およびα鎖を認識するCDlla,それぞれのモノクローナル抗体を用い,リンパ球,好中球のフローサイトメトリーのパターンについてCoulter社製EPIC ELITE Flocytometry Systemにより検討した。またそれぞれの患児について下顎前歯部のデンタルX線写真を撮影し,歯槽骨の状態について検討した。[結果]DS児から採取したリンパ球のCD18についてフローサイトメトリーを実施した結果,健常児のものと比較してそのパターンに変異が認められた。つまり健常児ではa,b,2つの明らかなピークをもつ二峰性のパターンが認められたが,DS児ではaのピークの低下によりbのみの1ピークに近いパターンとなった。これらのピークの変化はT細胞のサブセット比の変化と相関するとの報告もあるが、本研究ではa/b比とTh/Ts比の明らかな相関は認められず,下顎前歯部のbone lossとの関連も明確ではなかった。一方,好中球についてはDS児,健常児ともに1つのピークでこのような変異は認められなかった。今後はこの2峰性のピークの違いとDS児における免疫機構との関連について検討する予定である。
ＳＦ６代替ガスとしての自然ガスの有効性の検証

窒素は放電によって内部エネルギーを長時間にわたり蓄積する性質がある。そのため、窒素を含む雰囲気中で放電を繰り返すと、放電を停止した後も空間に電子が供給され続ける。したがって、電力機器では事故後の電圧復帰時に問題が生じる危険性がある。そこで、電子を付着するガスや内部エネルギーを解放するガスを微量混合して、電子の発生を抑制する効果を確かめた。その結果、脱励起させるガスは危険性が増すのに対して、付着性のガスが有効であり、SF6の効果が大きかった。また、高気圧の空間で長時間にわたり内部エネルギーを蓄積するのは、放電で発生した窒素原子である可能性が高いことが推測できた。地球温暖化の対策として、電力機器の絶縁ガスとして不可欠になっている六フッ化硫黄(SF6)の使用量削減のため、窒素を主体とする混合ガスの使用を提言してきた。しかし、窒素には内部エネルギーを長期間蓄積する性質があり、一度密閉空間で放電が発生すると、内部エネルギーを蓄積した粒子が長時間残留することが原因で、放電後長い時間が経過した後にも放電の引き金となる電子を供給する危険性がある。これまでの研究で高気圧中においても10秒程度は電子の供給が無視できない状態を継続することが明らかになっている。そこで、電子供給を抑制するための対策としては、発生した電子をトラップするか内部エネルギーを蓄積している粒子を脱励起する方法が考えられる。そこで、内部エネルギーの解放を期待して、一酸化窒素(NO)を窒素中に微量混入したところ、数秒以上経過した後では脱励起の効果は顕著であるが、内部エネルギーを短時間で開放する結果、1秒以下の時間領域では、むしろ窒素単独の場合よりも多くの電子が発生することが明らかになった。次に、発生した電子を付着する効果を期待して電子付着を期待できる酸素(O2)や炭酸ガス(CO2)などを用いたところ、発生電子数を抑制する効果は認められたが、その効果はわずかであることが分かった。そこで、付着断面積の大きさの違うガスを用いて比較したところが、断面積の大きなガスのほうが効果は大きく、N2Oが有効であることが実験的に示された。さらに、断面積の大きさと合わせて、断面積が大きくなるエネルギー領域が重要な要因になることが示唆される結果が得られた。地球の温暖化の対策として、電力機器の絶縁ガスとして不可欠となっている六フッ化硫黄(SF6)ガスの使用低減のため、窒素を主体とした混合ガスの使用を提言している。しかし、窒素は一度放電が発生すると多くの内部エネルギーを長時間保持する活性種が発生し、空間に蓄積する性質がある。その結果、放電が停止した後、長時間経過しても空間から電子が発生してしまい、電圧の印加によって放電が誘発されてしまう危険性が高い。そこで、活性種を短時間で効率的に脱励起するために微量のガスを混合してその効果を確かめる取り組みを行っている。これまでの研究では、窒素に一酸化窒素(NO)や二酸化炭素(CO2)あるいはSF6を混合すると、窒素中に比べて発生する電子数を大幅に低減できることが確かめられている。しかし、発生する電子数の減少するメカニズムは十分に把握できていない。そこで、本研究では、電圧を印加した後に放電が発生するまでの放電遅れ時間を測定することによって、発生する電子数を算出し、放電停止後に発生する電子数の減少の推移を測定した。また、混合するガスの粒子数をパラメータにして同様の特性を得た。その結果、電子を付着する性質の大きいSF6と内部エネルギーを開放する作用の大きいNOあるいはCO2とでは発生電子数の抑制機構に違いがあることを実験的に明らかにすることができた。さらに、NOは秒オーダ以上の時間領域においては電子数の抑制効果は非常に大きいが、1秒以下の時間領域ではむしろ電子数が多くなることが明らかとなった。以上の結果から、内部エネルギーの解放による効果は電力機器の絶縁ガスに使用するには適さないことが明らかとなった。以上の結果から、初年度の成果として窒素を主体とする絶縁ガスを利用する場合には、窒素の脱励起を促す分子の混合は適さず、電子を付着する性質を有するガスの選定が有用であることが示された。地球温暖化の対策として、絶縁ガスとして不可欠の六フッ化硫黄(SF6)の使用量削減のため、窒素を主体とする混合ガスの使用を提言している。これまでの研究で、混合するガスとして、自然ガスは発生する電子を付着するための断面積が小さく、大きな効果を期待できないことが明らかとなった。また、窒素は放電が発生すると内部エネルギーを蓄積しやすいため、内部エネルギーの解放に有効なガスを用いたところ、そのための断面積の大きさに依存するが、放電直後ミリ秒程度の時間領域では、後続の放電を誘発する電子の発生量が多くなることが明らかとなった。