hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
重力変化を含む力学的ストレスに対するメカノセンシング機構

1.細胞の重力応答の観察:回転蛍光顕微鏡はほぼ完成し、現在小型化を目指している。Preliminary実験として回転中及び数十分程度の回転刺激に対する細胞形態変化のイメージングに成功した。解像度が未だ十分でないためにオルガネラの変位の観察までは至っていない。2.細胞の重力応答における機械刺激受容チャネルの役割:微小重力環境下でのそのYAPの活性低下に機械刺激受容チャネルとして機能する非選択的陽イオンチャネルTRPV4(Transient Receptor Potential Channel V4)活性が関与するのか、検討した。その結果、薬理学的にTRPV4を活性化させると模擬微小重力環境によるYAPシグナル活性の低下が抑えられた。一方、TRPV4発現を抑制すると、重力の強さに依らずYAPシグナル活性が低下した。それらの結果から間葉系幹細胞の重力感知においてYAPの上流でTRPV4が働いていることが示された。1gの重力環境ではTRPV4からカルシウムイオンが流入しYAPシグナルを活性化するのに対し、(模擬)微小重力環境ではTRPV4の活性が抑えられYAPシグナル活性も低下している可能性がある。3.心筋細胞における伸展刺激の感受機構:無重力環境において、心循環器系のデコンディショニングが起こることは広く知られている。我々は、ラット心筋細胞株H9c2を用い、伸展誘発性の細胞内カルシウムイオン濃度上昇に影響を及ぼす因子の特定を試みた。心筋細胞に一般に発現しているL型カルシウムチャネルの機能を薬理学的に阻害したところ、伸展誘発性カルシウム応答の著しい減弱が認められた。この現象は、RNAiにより同チャネルの発現を抑制した場合にも同様に認められた。さらに、ラットの摘出心臓標本においても、L型カルシウムチャネルの薬理学的阻害は心臓の機械感受性に影響を及ぼした。重力を感知する機構として、従来より知られていたYAP/TAZ系に加え、重力センサーの候補としてtransient receptor potential cation channel subfamily V member 4 (TRPV4)を見出したため。1.細胞の重力応答の観察細胞形態変化のイメージングに成功したが、核などのオルガネラ変位を観測するために解像度の更なる上昇とLEDの輝度向上、小型化に向けた光学系の見直しを行う。2.細胞の重力応答におけるストレス線維の影響微小重力環境感知に関する仮説の検証を進めるとともに、筋細胞など他の細胞種における重力感知におけるチャネルの関与を検討する。3.心筋細胞における伸展刺激の感受機構ラット心筋細胞株に見られたL型カルシウムチャネルを介した機械感受性応答が、ヒトにおいても見られるかをiPS心筋細胞を用いて検証する。細胞は単独で微小重力環境を感知応答すると考えられる。しかしながら、その際に誘導される細胞内シグナル伝達経路など、その本質的なメカニズムはまだよくわかっていない。本年度は、足場の硬さや細胞内骨格の張力に依存して活性制御を受けることが知られている転写調節因子YAPに注目し、模擬微小重力および過重力環境下においた培養細胞におけるYAP活性の変化を調べた。その結果、模擬微小重力環境下で24時間培養した間葉系幹細胞では、対照群と較べてYAP分子が核内に局在している細胞の割合が減少しており、YAP転写活性の低下が示唆された。実際、プロモーターアッセイにおいて、模擬微小重力環境においた間葉系幹細胞にYAP転写活性の低下が認められた。Western blotting法により、YAP量を解析したところほとんど変化は見られなかったことから、YAP転写活性は細胞内局在の変化に依存すると考えられた。YAPはHippo経路のLatsなどによりリン酸化を受け核外に移行するが、リン酸化にも変化は見られなかった。従って、間葉系幹細胞を模擬微小重力環境下におくと、リン酸化ではない制御によりYAPは核外へ移行しYAPシグナル活性が低下する、と考えられた。さらに過重力条件の実験では、ラット心筋培養細胞に対し過重力(50 G、12時間)を負荷したところYAPの核内移行が認められた。一方ヒト胎児由来腎臓細胞に同条件の重力を負荷したところ、YAPの局在変化は認められなかった。このことから、細胞種によって重力応答の仕方が異なることが示唆された。また、模擬微小重力/過重力環境下や、さらにそこに伸展やずり応力を負荷した状態においた細胞の動態を解析するために、3Dクリノスタット装置や遠心装置に搭載可能な高性能でコンパクトな蛍光顕微鏡システムを開発した。微小重力および過重力に対する細胞応答を、YAPの細胞内局在変化を指標としてとらえることに成功しているため。これを足掛かりとし、重力応答シグナル伝達経路の上流の解析が可能となる。また過重力負荷による細胞内小器官の位置変化をリアルタイムで観察する遠心顕微鏡の光学系はほぼ完成し、あとは像をよりクリアにするよう調整する段階にある。1.細胞の重力応答のリアルタイム観察細胞の重力応答をリアルタイムで観察するため、遠心力により重力を発生させる蛍光顕微鏡システムの開発を行った。遠心顕微鏡システムに20倍の対物レンズと緑色蛍光観察用フィルターを装着し、重力を付加しつつワイヤレスでリアルタイムの顕微鏡像が得られることを確認した。2.細胞の重力応答におけるストレス線維の影響これまで我々は、足場の硬さや細胞内骨格の張力に依存して活性制御を受けることが知られている転写調節因子YAPに注目し、模擬微小重力環境あるいは微小重力環境においた間葉系幹細胞におけるYAP活性が、リン酸化とは別の制御を受けて低下することを見出してきた。

今年度は、核やミトコンドリアとストレス線維を結ぶアダプター分子の発現抑制により核やミトコンドリアとストレス線維の相互作用を修飾し、細胞の模擬微小重力環境の感知への応答を解析した。その結果、間葉系幹細胞において、アダプター分子の発現抑制により、模擬微小重力依存的な細胞内シグナルが失われることを見出した。従って、核やミトコンドリアとストレス線維の相互作用が、細胞の模擬微小重力環境感知に関与している可能性が示唆された。さらに、ストレス線維の張力変化も細胞の模擬微小重力環境感知に重要である知見も得ており上記仮説を支持する。3.ヒト人工多能性幹細胞(iPS細胞)細胞における重力の影響長期の重力負荷に対する細胞の応答を調べるためCO2インキュベータ内で重力を付加するシステムを開発した。このシステムを用いてiPS細胞を心筋細胞に分化誘導したところ、重力負荷群は無負荷群と比べ心筋マーカーである心臓トロポニンの発現が高い傾向が見られた。遠心顕微鏡システムは、重力を付加しつつワイヤレスでリアルタイムの顕微鏡像が得られる状態に達した。今後は重力負荷中にフォーカスがずれる問題を解決し、細胞の重力応答のリアルタイム観察につなげる。またバイオイメージングによる細胞の重力応答機構の解明に関しては、間葉系幹細胞における微小重力の感知機構が、核やミトコンドリアとストレス線維を結ぶアダプター分子に依存していることを突き止めた他、重力がiPS細胞の分化誘導に影響を及ぼすことを明らかにしつつある。生物のメカニクス・システムでは適度な力学的ストレス負荷の中、機能維持が図られている。しかし、微小重力環境ではそのバランスが崩れ機能が低下していると考えられる。本研究では、細胞レベルのメカニクス・システムに注目し、1)重力を含む力学的ストレスに対するメカノセンシング機構の解明、及び、2)その制御方法の開発を目指す。1.細胞の重力応答の観察:細胞の重力応答をリアルタイムで観察するため、遠心力により重力を発生させる蛍光顕微鏡システムの開発を実施してきた。リモート制御が可能となり、インキュベータ内での長時間細胞観察が実現できる見込みとなった。2.細胞の重力応答におけるストレス線維の影響:間葉系幹細胞の微小重力環境に対する感知・応答反応においてYAP活性の低下がどのような役割を果たしているのか解析した。その結果、分解を抑えるよう遺伝子改変したYAPを過剰発現した細胞では、骨分化マーカーであるRunx2の発現やアルカリホスファターゼ活性に対する模擬微小重力環境の効果(抑制作用)が見られなかった。これらの結果は、間葉系幹細胞の骨分化が模擬微小重力環境下で抑えられる過程で、YAP活性の低下が必要なステップであり重要な役割を果たしている可能性を示唆している。3.模擬微小重力の負荷方法の違いが遺伝子発現に与える影響の解析:微小重力負荷およびクリノスタットによる模擬微小重力負荷が血管内皮細胞の遺伝子発現に及ぼす影響を、spaceflightおよびクリノスタット両条件に共通して発現量変化を示す遺伝子のリストを得た。
PHAIIにおけるKLHL3/Cullin3の役割の検討

最近、偽性低アルドステロン症II型( PHAII)の新たな原因遺伝子としてKelch-like 3( KLHL3)とCullin3 (Cul3)が明らかになった。KLHL3 / Cul3とWNKシグナル経路との関連を検討するため、培養細胞での強制発現系とCul3遺伝子変異ノックインマウスの解析を行った。その結果、KLHL3はWNK1/4のユビキチン化にかかわっており、変異KLHL3ではWNKのユビキチン化が障害されWNKシグナル系の亢進が起こり、高血圧を呈することがわかった。Cul3変異ノックインマウスではCullin3蛋白発現量の減少がみられ、PHAII様の形質は確認できなかった。PHAIIの患者コホートでの遺伝子解析によりKelch-like 3(KLHL3)、Cullin3の変異が初めて報告されたが、これまでKLHL3/Cullin3とWNKシグナル経路に関しての病態検討は報告されておらず、この変異KLHL3/Cullin3におけるPHAIIへの病態生理は全く不明であったため本研究の対象となった。PHAII患者で報告のあったKLHL3/Cullin3変異を持つ安定発現細胞株を作製し、蛋白を精製し質量分析にかけ、野生型KLHL3/Cullin3と変異KLHL3/Cullin3での複合体を比較検討した。具体的にはKLHL3がWNK-OSR1/SPAK-NCCシグナルにおいてどのような役割をもつのかを解析するために、まず報告のあった複数の変異KLHL3安定発現細胞株を作製し、蛋白精製し質量分析にてKLHL3複合体を解析した。あるKLHL3の変異体ではKLHL3とユビキチンリガーゼ複合体を構成するCullin3との結合が欠落しており、また他のKLHL3変異体ではWNKキナーゼとの結合が欠落していることも判明した。またCullin3ノックダウンにてWNK1の発現増加が認められた。次にKLHL3-Cullin3蛋白を精製し、WNK1を基質としてユビキチンアッセイを行ったところ、WNK1のユビキチン化が確認されWNK1がKLHL3の基質であることが判明、また変異KLHL3ではこのユビキチン化が阻害されていた。またGordon症候群で報告されているWNK4変異発現細胞ではKLHL3との結合も阻害されていることを確認した。これらの結果からKLHL3はWNK1/4のユビキチン化に直接かかわっており、変異KLHL3ではWNKキナーゼのユビキチン化が障害され、結果WNK蛋白の発現増加が下流のシグナルを亢進し、高血圧を呈することを想定された。偽性アルドステロン血症II型(PHAII)は塩分感受性高血圧、高カリウム血症、代謝性アシドースを呈する遺伝性疾患である。平成25年度までに、KLHL3-Cullin3複合体によるWNKキナーゼの分解不全でNaCl共輸送体(NCC)が塩分再吸収を亢進させる事がPHAIIの原因である事を明らかにした。WNKシグナルの生理的な調節因子は明らかになってきたものの、KLHL3-Cullin複合体によるWNKキナーゼ分解の生理的な制御についてはいまだ不明であった。平成26年度においては質量分析を用いてKLHL3のリン酸化サイトを同定し、その部位に対するリン酸化抗体を作成し検討した。その結果、KLHL3のkelch-repeat内のS433がリン酸化サイトであると同定された。WNK4によって免疫沈降されたKLHL3はS433リン酸化が減少しており、S433リン酸化によってKLHL3はWNK4との結合が減少することがわかった。In vitro kinase assayではPKAとAktによるKLHL3 S433のリン酸化が確認され、さらに培養細胞ではforskolinとinsulinの刺激でKLHL3 S433リン酸化が各々亢進した。このことからPKAとAktによるKLHL3リン酸化がWNK4との結合を制御することが明らかになり、インスリンやバゾプレシンによるWNKシグナル制御の生理的メカニズムの1つであると考えられた。また、生体内におけるKLHL3の生理的な基質と、KLHL3の遺伝子変異によるPHAIIの発症メカニズムを解明するため、疾患起因性KLHL3遺伝子変異(R528/+)をノックインした遺伝子改変マウスを作成した。KLHL3(R528/+)ノックインマウスは塩分感受性高血圧、高カリウム血症、代謝性アシドースを呈し、PHAII疾患モデルマウスとして適していることを確認した。遺伝性高血圧症であるPHAIIは,塩分感受性高血圧、高カリウム血症、代謝性アシドーシスを呈する遺伝性疾患である。その原因遺伝子として最近WNK4, WNK1以外にKLHL3,Cullin3が同定された。平成26年にはKLHL3がCullin3と複合体を形成しWNKに対するE3リガーゼを形成する事を明らかにし、KLHL3-Cullin3複合体によるWNKキナーゼの分解不全に起因するNaCl共輸送体(NCC)による塩分再吸収の亢進がPHAIIの病態の本質である事を明らかにした。Cullin3に報告されている病原性変異はexon9周囲に位置し,変異を有する患者の白血球ではexon9のskippingが起きている事が確認されている.しかしながらこの変異がPHAIIを引き起こす分子病態は明らかでない。

平成27年度では、PHAII起因性であるCullin3のexon9のsplice acceptorの変異G(-1)Aをもつノックインマウスを作製しその解析を行った。その結果、変異ノックインマウスは、ヒトでの白血球での結果と異なり、その変異アレルからexon9のskippingが確認できず、ヘテロ変異マウスでの腎臓Cullin3蛋白発現量は正常の約50%であり、変異アレルからは正常の転写翻訳はおきていない事が推測された。同時にこのヘテロ変異マウスではPHAII様の形質は確認できなかった。すなわち、本マウスモデルではexon9のskippingを再現できなかったが、単なるCullin3のheterozygous deletionではPHAIIが発症しない事が確認され、exon9がskipされた変異Cullin3は単なる非機能蛋白でなく、数あるCullin3ベースのE3リガーゼ中でKLHL3に対して特異的に作用する機能を持っている事が示唆された。最近、偽性低アルドステロン症II型( PHAII)の新たな原因遺伝子としてKelch-like 3( KLHL3)とCullin3 (Cul3)が明らかになった。KLHL3 / Cul3とWNKシグナル経路との関連を検討するため、培養細胞での強制発現系とCul3遺伝子変異ノックインマウスの解析を行った。その結果、KLHL3はWNK1/4のユビキチン化にかかわっており、変異KLHL3ではWNKのユビキチン化が障害されWNKシグナル系の亢進が起こり、高血圧を呈することがわかった。Cul3変異ノックインマウスではCullin3蛋白発現量の減少がみられ、PHAII様の形質は確認できなかった。平成26年度当初、研究計画として、新規WNKキナーゼ制御系であるKLHL3-Cullin3ユビキチンリガーゼの病態生理学的役割を明らかにするため、KLHL3/Cullin3複合体のin vitroでの解析をあげた。平成26年度においては研究実績の概要で記した通り、質量分析を用いてKLHL3のリン酸化サイトを同定し、WNKシグナル制御の生理的メカニズムの一つを明らかにすることができた。腎臓内科学WNKの分解障害が関わる病態を生体内で全身臓器にて明らかにするため、病態モデルの作成と解析に取り組む。PHAII疾患起因性変異を持つKLHL3およびCullin3ノックインマウスの作成、解析を行う。研究計画で挙げたin vitroでの解析によって有意義な結果が得られており、平成25年度の進捗はおおむね順調と考えられる。
デルヴェニ・パピルスの解読・翻訳―古代ギリシアにおける多神教と一神教の関係

過去3年間にDPのテクストの暫定訳を済ませたが、復元についての検討はもちろん、語彙についても、より高度な精査が必要であると認識している。他方、「オルフェウス教」に関する最近の研究動向が、本研究の姿勢と一致することを確認でき、それが研究を進めていく際の後押しとなった。そのようななかでDPの翻訳作業を続けたのだが、「オルフェウス教」の儀礼の形成に、エレウシスの秘儀からの影響とともに、ペルシアの影響も無視できない。その結果、前5世紀の「オルフェウス教」を古代ギリシア宗教全体のなかで位置づけるにも、当時のギリシアとペルシアの関係が深く関わっているという前提の下に研究を進めるべきである、との結論を得た。デルヴェニ・パピルスの解読については、秘儀の儀礼への参加者の姿勢に関連する記述がある第XXコラムに検討を加えた。その記述とプラトン『国家』364b,eの記述を比較検討しながら両者の類似と相違を明確にした。同コラムにはポリスの公的祭儀一つであるエレウシスの秘儀とオルフェウスの秘儀との相違が述べられているのか否か、研究者の意見は分かれるが、オルフェウスの秘儀とその信者たちがポリス(国家)とどのような関係を築いていたのか解明可能であろう。初年度の研究成果については、本年(平成26年)4月下旬にアテネの英国考古学研究所にて開催される第3回日欧古代地中海世界コロキアムで報告する予定である。第2年目の平成26年度は、平成26年4月にギリシア共和国アテネに所在する英国考古学研究所(BritishSchool of Archaeology at Athens)における第3回日欧古代地中海世界コロキアムにおいてOrphikoi in Athens and in Derveni Papyrus (「アテナイとデルヴェニパピルスにおけるオルフェウス信者」)を口頭報告した。さらに、デルヴェニパピルスの解読作業を継続している。最近の文献を入手し,前5世紀のオルフェウスの秘儀に限定した本研究課題が適切であったことを確認できたので、最終年度も同じ研究姿勢を維持し,秋のテッサロニキ博物館での史料の実見に臨む予定である。2015年10月にテッサロニキの考古学博物館で当該パピルスの調査を行った。予想していたよりも残存状態が悪く、パピルス断片はいずれも炭化し、特殊カメラで撮影することでようやく判読可能だった。こうして読み取った断片266枚を照合し、それぞれの断片の文字の解読と、断片相互の位置関係の検討を続けて、最初の校訂テキストが刊行されたのだった。266断片中位置不明のままである113断片がいずれも極小の断片であるため、校訂の大幅な改変はないであろう。巻子本は外側の方が焼失の度合いが高いため、コラムも数字が若いコラムの損傷がはなはだしく、小さな断片のほとんどがこの冒頭数コラムに属する断片であるので、損傷がはなはだしい最初の数コラムの復元が特に難しく、研究代表者桜井はDPの前半部の解読により多くの時間を割いた。なかでも第6コラムが本研究の最終的課題である「古代ギリシアにおける多新教と一神教の関係」への大きな示唆を含むと考えられるため、最終年度はこのコラムを集中的に検討した。以下はその試訳である。「祈りと供儀は魂を宥める。そして、マゴスたちの魅惑的な歌は、道を遮りダイモンたちを排除することができる。道を遮るダイモンたちは魂に対し敵対する。供儀をマゴスたちがするのはこのためである、あたかも代償金を支払うように。そして、彼らは聖なるもの(供物)に対して水と乳を注ぐ。そこから彼らは(死者への)献酒も行う。(以下略)」ここにあるマゴスについて、それがペルシアの供儀を担当する神職か、あるいはギリシアの神々の系譜を朗唱する者や巡回する占い師に対する名称か、明らかにするにはさらに検討を加える必要があり、本年3月に新アクロポリス博物館で前6、5世紀のアテナイとペルシアとの関係について調査した。今後はこの成果を論文「デルヴェニ・パピルスの歴史的背景」としてまとめ、その中に同パピルスの翻訳も含める予定である。研究分担者として参加した他の研究課題(パルテノン調査)の研究成果報告論文作成に予定以上に時間がとられた(当初の予定とは異なり英文の論文を作成)ため、また、必要な文献入手が遅れたため、当該研究課題の遂行が順調に進まなかった。入手できた参考文献については,大半は読了し,研究の方向性をこれまで以上に明確に定めることができた。しかし、デルヴェニパピルスの読解、翻訳は予定よりもやや遅れている。したがって、当該年度はテッサロニキ博物館での実見は見送り、最終年度に行なうこととした。

西洋史,古代ギリシア史最終年度には、最近になって刊行されていることを知った文献を入手したので,それらを含め、必要文献を読み、そこで得た知見も駆使して,デルヴェニパピルスの読解,翻訳を加速させる。秋にはテッサロニキ博物館を訪問し、パピルスを実見し,それまでの研究成果と比較対照させ、研究のまとめを行なう。初年度の計画で挙げた関連文献収集はほぼ達成できた。他方、デルヴェニ・パピルスのテクスト読解については、第XXコラムおよび関連の第VI,VIIコラムについて終了したのみである。これまでに収集した文献の中から上記のコロキアム報告と関連する研究テーマについて、これまでの成果を参照し、それらに検討吟味を加えて、コロキアムの報告原稿作成にその成果を反映させた。しかし、その研究に予定以上の時間が費やされてしまったことが、その理由である。デルヴェニパピルスを所蔵するテッサロニキ博物館における当該史料の実見を、当該年度に実施する当初の計画を見送り、次年度に実施することにし、当該年度はアテネの英国考古学研究所で研究の中間報告を行なうにとどめたため、旅費およびその他の経費の支出額が予定を下回ったことによる。本年4月下旬のアテネにおけるコロキアムで行なう予定の報告に関して、参加研究者たちと意見交換を行なう。さらに、その結果を参考にしながら、これまでの研究を整理し、同時に、デルヴェニ・パピルスの未読解部分について予定の作業を進める。今年度中を予定していたテッサロニキ博物館所蔵のデルヴェニ・パピルス本体の実見は、全体の解読作業を終えた後でなければ意義も成果も低いため、予定を繰り下げて、最終年度に行なう。次年度は、テッサロニキ博物館を訪問して、史料を実見するための旅費と、その後に英国に立ち寄り,問題意識を共有する研究者たちとの意見を交換をするための旅費を併せ、当初の計画よりも上乗せして使用する計画である。当該年度に遂行した研究の成果を報告し、意見交換をする場として予定していた第3回日欧古代地中海世界コロキアムの開催が予定より遅れ、2014年4月下旬に開催となったため。上記の第3回日欧古代地中海世界コロキアムが在アテネ英国考古学研究所で2014年4月25,26日に開催されることが決定したため、4月20日過ぎにアテネに出張し、現地に8日間ほど滞在し、25,26にちのコロキアムにて報告する。また、関連の遺跡も調査し、以後の研究活動の準備をする。
高エネルギー宇宙線による太陽磁場変動の研究

太陽の影の変動を観測して11年周期の太陽活動に伴う太陽周辺磁場の時間変動を明らかにするため、チベット実験グループはこれまで15m間隔に並べていた検出器アレイに1999年秋と2002年秋に計約500台、2003年に周辺にも検出器を増設して7.5m間隔の濃密アレイで観測している。199697年頃は太陽活動極小期で太陽双極子磁場は地磁気と逆方向で、10TeV宇宙線による"太陽の影"は丁度太陽の方向にあったことがチベット実験で確認された。これらは、COSPAR、ICRCなどの国際会議で報告し、ApJにも掲載され、シミュレーションでも再現できている。1998年と1999年のデータからは、太陽は1998年に活動期(サイクル23)に入り、面白いことに"太陽の影"が10TeVで浅くなり始めた。1999年には更に浅くなり、2000年には影が殆ど消え、2001年には少し現われた。2002年前半のデータでは再び影が浅くなったが、後半からは太陽活動が下降に転じて影が現われはじめた。2003年以降は下降期が続いていて、影の消長は濃密アレイによって可能になった3TeV宇宙線では強調されて観測されている。太陽磁場の反転は2000年から2001年に起きたと思われる。影の消長は黒点数の変化とよい相関がある。当初、少なくとも3ケ月毎に影の位置が定まり、その移動の様子が分かると考えていたが、影が非常に薄れたため68カ月間のデータを蓄積しないと捉えられないのは予想外であった。しかし、逆に太陽活動の最盛期に伴う磁場の逆転期には双極子磁場は大きく崩れることが判明した。最盛期にはGnevyshev Gapと呼ばれる黒点数の極小が現われ、年毎の解析では"太陽の影"が深くなって良い相関があるが、3カ月単位での解析では相関は微妙である。現在の状況からすると2006年2007年の静穏期には太陽双極子磁場と地磁気の極性がそろうと予想され、19961997年と対照的に"太陽の影"は地磁気効果の倍ほど西にずれることが予想される。その時間的移動の様子が数カ月単位で見えてくると期待している。11年周期の太陽活動が、西暦2000年から2003年にかけて活発化することが予想されており、太陽双極子磁場の極性がこの期間に逆転する。これに伴って10TeV領域の銀河宇宙線が太陽によって遮られて生じる"太陽の影"の位置が見かけの太陽の中心に対して時間的に変動することが期待される。1990年から93年の前回の活動期にはチベット空気シャワーアレイは小検出器アレイであったため、1年間データを蓄積して解析したが、"太陽の影"は年毎に激しく変動するのが観測された。今回は、この影の変動を1ヶ月単位で観測して太陽磁場の大局的変動の詳細を明らかにするため、われわれチベット実験グループは1999年にこれまで15m間隔で並べていた検出器アレイをぼぼ全面7.5m間隔の濃密検出器アレイにして1999年12月から観測を続けている。199697年頃は太陽活動極小期で太陽磁場は地磁気と逆方向で安定していたため、"太陽の影"は丁度見かけの太陽の方向にあったことがチベット実験で確認された。これらは、COSPARやICRCなどの国際会議で報告し、シュミレーションでも再現できている。人工衛星及び地上からの他の観測による太陽双極子磁場の極性の逆転との詳細な関連だけでなく、太陽風が作る惑星間磁場の変動との関連についても新しい知見が得られるものと期待している。現時点では黒点数は増加傾向にあるものの、大きなフレアを伴うような活動は見られないが、2000年中には活発化するものと思われる。11年周期の太陽活動が、西暦200102年に最盛期に達する(サイクル23)ことが予想されており、太陽双極子磁場の極性がこの期間に逆転する。1990年から93年の前回の活動期(サイクル22)には、"太陽の影"は年毎に激しく揺れ動くのがチベットの小空気シャワーアレイで観測された。今回は、この影の変動を1ケ月単位で観測して太陽周辺磁場の時間変動を明らかにするため、われわれチベット実験グループは1999年にこれまで15m間隔に並べていた検出器アレイをほぼ全面7.5m間隔の濃密アレイにして1999年12月から観測を続けている。199697年頃は太陽活動極小期で太陽双極子磁場は地磁気と逆方向で、"太陽の影"は丁度見かけの太陽の方向にあったことがチベット実験で確認された。これらは、COSPARやICRCなどの国際会議で報告し、シミュレーションでも再現できている。最近ApJにも掲載された。2000年中に得られたデータを用いて"月の影"の解析を行なったが、観測地点(チベット)から月までの距離に依存して見かけのサイズが変動し、それに合わせで"影の深さ"が変動するのが観測され、アレイの感度及び角度分解能の向上が実証された。

2000年の太陽の影は20TeV以上では予想位置にあるが、15TeV以下では影がかき消えている。太陽磁場の変動によるものかどうか解析途中でり、まだ結論に達していない。2000年中はチベットの視野内ではなかったが大きなフレアも生じた。2001年以降はもっとフレア頻度は活発化すると思われるが、磁極の逆転が何時起きるか見守り続ける。11年周期の太陽活動が、西暦200002年に最盛期(サイクル23)に達すると予想されていたが、2000年後半01年前半に極大に達し、太陽双極子磁場の極性が逆転した模様である。10TeV領域の銀河宇宙線が太陽によって遮られて生じる"太陽の影"の位置の時間変動を観測するのがこの研究課題である。1990年から93年の前回(サイクル22)の活動期に、"太陽の影"は年毎に激しく揺れ動くのがチベットの小空気シャワーアレイで観測されたからである。今回は、この影の変動を1ケ月単位で観測して太陽周辺磁場の時間変動を明らかにするため、われわれチベット実験グループは1999年にこれまで15m間隔に並べていた検出器アレイをほぼ全面7.5m間隔の濃密アレイにして1999年12月から観測を続けてきた。199697年頃は太陽活動極小期で太陽双極子磁場は地磁気と逆方向で、"太陽の影,は丁度見かけの太陽の方向にあったことがチベット実験で確認された。これらは、COSPARやICRCなどの国際会議で報告し、シミュレーションでも再現できている。2000年にApJにも掲載された。2000年中に得られたデータを用いて"月の影"の解析を行なったが、観測地点(チベット)から月までの距離に依存して見かけのサイズが変動し、それに合わせて"影の深さ"が変動するのが観測され、アレイの感度及び角度分解能の向上が実証された。2000年の太陽の影は20TeV以上では予想位置にあるが、15TeV以下では影がかき消えた。横倒しの双極子磁場が太陽の自転で回転するシミュレーションを行ったが、影は完全には消えない。この間の太陽双極子磁場が著しく弱まり乱雑磁場が支配的であったと考えられる。(2001年ICRCで報告)2002年以降は逆転した太陽双極子磁場が顕著になり始めるので、それが何時起きるか見守り続ける。また地磁気の効果とも相まって影はかなり西方にずれて観測されるはずである。太陽の影の変動を観測して11年周期の太陽活動に伴う太陽周辺磁場の時間変動を明らかにするため、チベット実験グループはこれまで15m間隔に並べていた検出器アレイに1999年秋と2002年秋に計約500台の検出器を増設して7.5m間隔の濃密アレイにして観測を続けている。199697年頃は太陽活動極小期で太陽双極子磁場は地磁気と逆方向で、"太陽の影"は丁度見かけの太陽の方向にあったことがチベット実験で確認された。最近ApJにも掲載された。1998年と1999年のデータからは、太陽は1998年に活動期(サイクル23)に入り、面白いこと、に"太陽の影"が浅くなり始めた。1999年には更に浅くなり、2000年には影が殆ど消え、2001年には少し現われはじめた。2002年7月初めまでのデータでは影が僅かしか見えない。その後は下降に転じて2002年を通してゆっくりとした下降期が続いている。太陽磁場の反転は2000年から2001年に起きたと思われる。影の消長は黒点数の変化とよい相関がある。当初、1ケ月毎に影の位置が定まり、その移動の様子が分かると考えていたが、影が非常に薄れたため68ヵ月間のデータを蓄積しないと捉えられないのは全く予想外であった。
地方独立系小規模映画館の顧客価値創造メカニズムに関する日・英比較研究

本研究は、地方独立系小規模映画館の顧客価値創造メカニズムについて、日英の比較を通じて経営資源の観点から明らかにすることを目的とする。地方の独立系小規模映画館経営に関する包括的な研究は限られている。しかし、同種の映画館は映画産業の多様性保持において重要な存在である。大規模映画館(シネコン)の隆盛に比して減少を続ける独立系小規模映画館の中でも、顧客から支持され、地方で安定経営を続ける映画館の顧客価値創造メカニズムを解明する。当該年度の研究実績としては、主に以下の4点である。1)現行研究対象先での研究進行:現行研究対象先(熊本電気館、大分シネマ5、札幌シアターキノ)に対しては、追加取材として、主にインタビューと参与観察を実行した。2)新規研究対象先の発掘:有力な研究対象先として中国地方、および北関東地方の映画館を発見することが出来た。どちらも国内では有数の経営能力を有しているのみならず、世界においても有力な事例として研究価値の高いものと思われる。3)先行研究の整理:研究の進展に伴って、従来の経営学関連の先行研究に加えて、フィルムスタディーズなど学際的先行研究との関連性からのアプローチを行った。イギリスの映画館経営の先行研究ではシネコンなど大規模映画館に加えて、独立系小規模映画館のその地域社会における価値研究が本研究においても意味を持つ。4)研究方法の再整備:まず、ケースの整理としてa)映画館の規模(小規模映画館か大規模映画館、シネコンか)、b)映画館経営オペレーション(全国規模か地方か)を軸に4分類し、地方独立系小規模映画館を再定義した。(小規模映画館かつ全国規模経営オペレーションの映画館もイギリスには存在する。)次にデータ収集ではエスノグラフィーによる参与観察と半構造化インタビューを主体に行う。そしてデータ分析から理論構築までをグラウンデッドセオリーによって実行することとした。1)フィールドリサーチ:2018年8月に広島県広島市の八丁座の調査を行った。経営者2名へのインタビューと、参与観察を実行した。地方小規模映画館としては珍しくエンタテインメント主体の顧客価値創造を行っている映画館として、本研究の主要ケースとして取り扱うことにした。2018年8月に熊本県熊本市電気館の調査を行った。経営者へのインタビューを実施した。この映画館は利益を上げていることから研究対象としていたが、参与観察の難しさが存在すること、映画館以外の事業(不動産事業)が経営の大きな部分を占めていることから、主要ケースとしては扱わない方向へと修正を行った。2018年9月に北海道札幌市のシアターキノの調査を行った。経営者へのインタビューと参与観察を行った。本年度の継続調査からこの映画館は利益を継続して上げている映画館であることに加えて、多数のアルバイトや共同出資者を巻き込んで顧客価値を創造する独自の特徴を持つことが分かってきており、主要ケースとしている。(札幌での調査中に北海道地震に遭遇し、参与観察部分は途中で中断している。)2019年1月に大分シネマ5のオーナーを本学(立命館アジア太平洋大学)に招聘し、講演セミナーを実施した。2019年3月に群馬県高崎市のシネマテークたかさきの調査を実施した。今回は同映画館オーナーが主催する高崎映画祭を中心に予備的調査を行った結果、本研究との親和性が高いことが判明した。2)研究方法論:2018年9月に質的研究法、特にエスノグラフィーの第一人者である北海道大学大学院小田博志教授にお会いし、本研究の研究方法についてアドバイスをいただいた。さらに同年11月に小田先生を本学に招聘し、質的研究法についてのご講義とさらなるアドバイスをいただいた。1)フィールドリサーチ:2019年4月、5月、6月、7月に、大分県大分市のシネマ5にて、非常に珍しいイベントである浪曲講座への参与観察を予定している。この講座は10月の同映画館による浪曲師へのイベントへとつながることから本研究の主要研究対象として重要な位置を占めている。2019年5月下旬に群馬県高崎市のシネマテークたかさきの研究を実施する予定。この際に同映画館オーナーへのインタビューが予定されている。同映画館に対しては、本年度さらに映画イベント等への調査を依頼する予定である。2019年8月に広島県広島市の八丁座への調査を予定している。映画館オーナーへの取材に加えて、主要イベントの参与観察を予定している。同時に同映画館の顧客調査実施を予定している。2019年9月に北海道札幌市のシアターキノへの調査を予定している。同映画館オーナーへの追加取材、映画イベントへの参与観察、および顧客調査を予定している。2019年9月にイギリスの映画館現地調査を予定している。2)先行研究:顧客価値に関する理論研究と日本とイギリスにおける地方独立系小規模映画館の顧客価値に関する実証研究の比較研究を行う。3)研究方法論:2019年5月にM-GTA研究会第86回定例研究会への参加を予定している。本研究の主要分析方法として、実際に即した分析へとつなげる。2019年9月に北海道大学大学院教授の小田博志先生とのミーティングを予定している。エスノグラフィーを使用した本研究の実際に即した分析へとつなげる。4)学会発表:2019年6月に日本文化経済学会での発表を予定している。平成29年度の研究実績は以下の4点である。(先行研究の整理)論文、文献の分析から本研究が果たすべき学術貢献を明確にすることに努めた。主なポイントは以下の通り。

1)地方独立系小規模映画館に関する文献や資料の詳細な検討。特に注目している点は、地方映画館がどのようなコンテクストの中で価値創造を行っているのか。またそのコンテクストの変遷の在り方。顧客が考える価値の変遷。顧客の価値創造への参加、その他を俯瞰的に検討することを目指した。2)研究方法の見直しと精緻化の検討。先行研究の掘り下げと地方独立系小規模映画館の社会的コンテクストの変遷の整理から、事例研究方法についてより詳細なアプローチの検討を重ねた。具体的には、より少数の事例に絞り込み、組織エスノグラフィー手法によりコンテクストから顧客価値創造プロセスを導出することとした。(事例研究のプログラム)事例研究として地方独立系小規模映画館、シネマ5(大分)とのミーティングにより、事例研究の在り方の打ち合わせを行った。具体的には、同映画館オーナーを招聘してのセミナーを実施する(2018年度夏ー秋)計画の検討のほか、同映画館における約5か月の参与観察の実施計画の打ち合わせ実施。(学会報告)15thAsia Pacific Conference(2017年11月)にて地方独立系小規模映画館の価値創造に関する研究発表を実施。(インタビュー資料の整理と分析)これまでに実施した地方独立系小規模映画館10館のインタビューの整理と分析を実施。その中から価値創造がコンテクスト依存的に共創されることを中心概念として位置づけ、それに基づいた研究手法へと修正を行った。なお、研究目的についてはいささかの変更も行っていない。なお、実地取材、およびアンケートについては、上記4点の主要研究実施と並行して準備を進めており、本年度実施を予定している。先行研究の詳細な分析と検討、および整理から、これまでの研究には見られない、地方独立系小規模映画館についてエスノグラフィーの手法で事例研究を行い、コンテクストの中からの顧客価値創造メカニズムを浮き彫りにすることを、研究上の貢献に位置づけることができた。その意味で研究はおおむね順調に進展しているといえる。本研究は、地方独立系小規模映画館の顧客価値創造メカニズムについて、日英の比較を通じて経営資源の観点から明らかにすることを目的とする。地方の独立系小規模映画館経営に関する包括的な研究は限られている。しかし、同種の映画館は映画産業の多様性保持において重要な存在である。大規模映画館(シネコン)の隆盛に比して減少を続ける独立系小規模映画館の中でも、顧客から支持され、地方で安定経営を続ける映画館の顧客価値創造メカニズムを解明する。当該年度の研究実績としては、主に以下の4点である。1)現行研究対象先での研究進行:現行研究対象先(熊本電気館、大分シネマ5、札幌シアターキノ)に対しては、追加取材として、主にインタビューと参与観察を実行した。2)新規研究対象先の発掘:有力な研究対象先として中国地方、および北関東地方の映画館を発見することが出来た。どちらも国内では有数の経営能力を有しているのみならず、世界においても有力な事例として研究価値の高いものと思われる。
血管内皮細胞の増殖・分化におけるvav3遺伝子の機能の解析

我々は自己リン酸化したVEGF受容体に結合する分子を、酵母two-hybrid systemによりスクリーニングする過程で、vav遺伝子ファミリーの新規の遺伝子vav3、アダプター分子Nckと相同性を有するNck2を単離し、特にvav3に関する解析を行った。vavは低分子量Gタンパク質に対するGDP/GTP交換活性を有するDb1 homology domainの他、Calponin homology domain、SH3 domain、SH2 domainなど多数のモチーフ構造を有するタンパク質であり、血球系の細胞内シグナル伝達において機能することが示されてきたが、近年vav2が単離され、遺伝子ファミリーを構成し、様々な細胞で働きうると推測されてきた。我々が単離したvav3はアミノ酸配列においてvav1、vav2とそれぞれ58%、53%同一であり、そのmRNAは血球系に主に発現する6kbのvav3α、および胎盤、腎臓、膵臓などに高いレベルで発現する3kbのvav3βが観察される。タンパク質の発現の詳細な解析の結果、vav3αはvav遺伝子ファミリーに見られるすべてのモチーフ構造を含み、多くの血球系細胞において発現するのに対し、vav3βはSH3-SH2-SH3の構造だけを含み、そのタンパク質の発現は非常に低いレベルであることが、明らかになった。vav3 mRNAの発現は血管内皮細胞では低くVEGF受容体と共役して機能するとは考えにくい。そこでVav3タンパク質のの生理的機能を探るため、血球系細胞のシグナル伝達における役割を調べたところ、Vav1が細胞の増殖刺激によりチロシン残基のリン酸化を受けるのに対し、Vav3は非刺激時のリン酸化レベルが低く、増殖刺激によってもリン酸化の亢進は観察されなかった。Vav1とVav3はともに血球系に主に発現するにもかかわらず、異なる活性化の制御を受けていると考えられ、現在その詳細な機構を検討している。内皮細胞特異的な増殖因子VEGFの受容体KDRと相互作用する因子を探索する過程で、私はVav遺伝子ファミリーの新規のメンバーであるVav3を単離した。本年度は、Vav3が実際に血管内皮細胞でシグナル伝達に関与するかどうかを検討するため、Vav3を特異的に認識し、Vavを認識しないようなペプチド抗体を作製し、Vav3タンパク質の発現を観察した。その結果p95Vav3はヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)では発現が見られないのに対し、血球系細鉋において広範な発現が認められ、Vav3は内皮細胞よりもむしろ血球系細胞において、Vavと同様に抗原受容体の下流のシグナル伝達などに関与するのではないかと考えられた。Vav3遺伝子はp95をコードする6kbのmRNAの他に、SH3-SH2-SH3のドメイン構造からなるp29をコードしうるような3kbのmRNAにも転写される。3kbのmRNAの発現は6kbのmRNAを発現しない多くの組織、細胞系(胎盤、Hela細胞など)に見られるが、こうした細胞系においてp29ポリペプチドの発現は観察されず、どのような発現制御が行われているのか、現在検討中である。一方vav3遺伝子が他のvav遺伝子ファミリーとどのような生理的機能の差異をもつかを調べるため、マウスvav3のcDNAを単離してその発現を解析した。マウスにおいてもvav3は6kbと3kbの2種のmRNAが観察されたが、6kbのmRNAの発現パターンはヒトとは異なっていた。またマウスの胚においてもこれらのmRNAの発現が観察され、Vav3が発生の過程においてもなんらかの役割を持つことが推測された。
固形癌分子標的治療の早期客観的治療効果判定法の確立

肝細胞癌の分子標的治療開始後の腫瘍血管の拡張所見が治療有効例の予測に応用可能と考えられた。Perfusion CTによる治療後早期の血流パラメータ値の変化と長期経過後の腫瘍の画像上変化との間には有意な相関は得られなかった。一方、Dual-Energy CTによる腫瘍内ヨード量定量値は腫瘍の血流と関連があることが示され、早期治療効果判定のバイオマーカーとして使用できる可能性が示唆された。本年度は、肝細胞癌の分子標的治療薬であるソラフェニブ投与例を対象に投与前と投与後の腫瘍の変化をCT画像で解析した。総症例数26例。ソラフェニブ投与日数は平均58日の患者群で30日以上の投与例で最終的に画像上PDと判断され投与が中止された例は15例、SDは3例であった、腫瘤サイズの縮小は4%のみで、他は不変増大を呈した。腫瘤内部濃染の低下あるいは不染部を呈する病変が42%に見られた。腫瘍血管の拡張(腫瘤内の動脈性血管の顕在化偽動脈瘤様所見)を呈する病変が23%に見られ、うち15%は経過中に出現していた。腫瘍血管の拡張は投与期間30日以上の群で認められたが30日未満の群では確認されなかった。30日以上投与されたSD例の全例で腫瘍血管の拡張が観察された。また,PD例において腫瘍血管の拡張が観察された腫瘤では腫瘤サイズの増大は見られたが比較的広範な内部壊死も伴っていた。以上から造影CT上、ソラフェニブ投与後30日以上経過例で観察された腫瘍血管の拡張所見はSD例で見られる頻度が高く、PD例でも内部壊死を呈した病変に認められており治療効果予測に応用できる可能性があることが判明した。これまで分子標的治療後の腫瘍内部の形態学的変化に関するまとまった報告はなく観察母数を増やした上で今回着目した所見と治療効果との問に有意な相関が確認されれば早期治療効果判定のメルクマールとなる可能性があり意義深い新知見である。来年度は、ラットを用いてCT潅流画像で得られる血流パラメータとDual-Energy CT(DE-CT)装置を用いた肝造影CT画像で得られる腫瘍内ヨード量定量値との関係を解析し、いずれの手法がより簡便で有用性の高い手法であるかを検討する予定である。平成23年度は肝細胞癌に対するソラフェニブ治療前後におけるperfusion CTパラメータの変化に関する検討を行った。具体的には肝細胞癌に対するソラフェニブ投与前後に腫瘍部をターゲットとしたperfusion CTを施行し、血流パラメータ値の変化を評価した。対象は進行肝細胞癌に対してソラフェニブ投与を施行した7例10病変。ソラフェニブ投与開始前及び開始後超早期(約1週間後)にSiemens社製SOMATOM Definition flashに搭載されたAdaptive 4D Spiralを使用し全肝のperfusion CTを施行し腫瘍部位の血流パラメータ(Blood flow (BF, ml/100ml/min), Blood volume (BV, ml/100ml))を測定した。全病変の平均BF値は治療前33.8±9.8(average±SD)、治療後27.7±12.5、BV値は治療前7.6±1.6、治療後6.6±2.2であった。治療開始後1-6ヶ月の画像と治療開始前の画像を比較し、観察病変を腫瘍サイズの増大がみられず、かつ腫瘍部分の濃染低下を示している群(濃染低下群;n=4)とそれ以外の所見群(非濃染低下群;N=6)の2群に大別し、治療前後のパラメータ変化の比[(治療前値-治療開始後値)/治療前値]を比較したがBFでは濃染低下群0.24に対し非濃染低下群0.13(p=.57)、BVでは濃染低下群0.25に対し非濃染低下群0.09(p=.18)といずれも濃染低下群においてより大きな値の減少を認めたが有意差は得られなかった。シーメンス社製DE-CTで肝臓の3相造影CTを施行した176例のうち血管造影、動注CTを行って腫瘤性病変の血流解析を行った8例(男性5例、女性3例;平均年齢71±9歳)に観察された直径1cm以上の結節14結節(平均3.0±3.6cm)を対象とし、動脈相、門脈相、平衡相のヨードマップ上で腫瘤部、背景肝、大動脈のROIのヨード量を測定し比較したところ、動注CT上、多血性肝細胞癌と診断された10結節(平均径2.0±0.8cm)の動脈相、門脈相、平衡相のヨード量(mg/ml)は2.5±0.8、2.3±0.4、1.7±0.4、乏血性肝細胞性腫瘤と診断された4結節(平均径5.7±6.3cm)のヨード量(mg/ml)は、1.1±0.8、1.8±1.2、1.4±0.8であった。

背景肝のヨード量(mg/ml)は、1.0±0.5、2.3±0.5、1.8±0.3、大動脈のヨード量(mg/ml)は、12.5±2.8、5.3±1.0、4.0±0.6であった。多血性肝細胞癌と乏血性肝腫瘤の間では動脈相のヨード量において有意差が認められた(p=0.01)。以上のようにDE-CTのヨードマップでヨード量を定量的に解析した結果、動脈相において多血性肝癌、乏血性肝腫瘤のヨード量に有意差が認められDE-CTによるヨードマップ画像が分子標的治療の早期効果判定のバイオマーカーとして使用できる可能性が示唆された。平成22年度の検討に引き続き実際の臨床例における分子標的治療例のCT灌流画像の血流パラメータ解析を施行し、治療後早期の検討では各種血流パラメータの変動を観察した。症例数が少ない点、臨床例での検討であり病理学的裏付けが得られない点が問題であるが治療効果を予測させるような血流パラメータの優位な変動は乏しいことからCT灌流画像による分子標的治療の超早期効果判定は難しいことが判明した。24年度が最終年度であるため、記入しない。平成23年度の検討で分子標的治療直後の超急性期に行ったCT灌流画像では血流パラメータの変動は治療効果を予測させるほど有意な変化がみられにくいことが判明した。平成24年度は、血流解析のもう一つの柱であるDual-Energy CT (DE-CT)装置を用いた肝造影CT画像で得られる腫瘍内ヨード量定量値の検討がどの程度腫瘍血流の評価に有用であるかを検討し、DE-CTによるヨードマップ画像の応用が分子標的治療の早期効果判定のバイオマーカーとして使用可能かどうか判断する予定である。
メタロチオネインなど制御可能な生体要因の量的質的調節による各種制癌剤の副作用軽減

我々は金属結合蛋白質メタロチオネイン(MT)がシスプラチン、アドリアマイシン、シクロフォスファミドなど作用機作の異なる数種の制癌剤および放射線の細胞毒性を軽減することを見いだし報告した。今年度はまず、放射線障害軽減機構について検討し、MT合成誘導剤の前投与によって骨髄中で増加したMTが放射線照射によって生じるフリーラジカルを除去して骨髄を保護する可能性が示唆された。また、我々はすでにMT合成誘導剤の1種であるビスマス化合物をマウスに前投与することによって、上述した制癌剤や放射線の抗腫瘍作用を損うことなく副作用のみを効率良く軽減できることを報告したが、これはビスマスが正常組織中でのみMTの合成を誘導し、腫瘍組織中のMT濃度には影響しないためと考えられる。そこで3種のマウス由来癌細胞をそれぞれ皮下移植したマウスを用いてこの可能性を検討し、ビスマスがこれら癌細胞中にMTをほとんど誘導合成しないことが確かめられた。一方、ビスマスとは異なり、腫瘍組織中でもMTを誘導合成する亜鉛を担がんマウスに前投与した場合にはシスプラチン、ブレオマイシン、アドリアマイシン、シクロフォスファミドなどの骨髄毒性のみならず抗腫瘍作用も著しく抑制された。なお、この実験条件下においても、ビスマス化合物はこれら制癌剤の抗腫瘍効果に影響を与えることなく骨髄毒性を顕著に軽減した。この結果から、癌細胞中のMT濃度の上昇は、その癌細胞に複数の制癌剤に対する抵抗性を与えると考えられ、耐性獲得因子の1つとしてMTが重要である可能性が示唆された。また、別の検討によってこれら制癌剤自身も比較的強いMT誘導能を有し、癌組織中のMT濃度を有意に上昇させることが判明した。この事実は、制癌剤の投与によって癌細胞が制癌剤に対する耐性を獲得する可能性を示しており、癌化学療法における重大な課題となろう。