hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
実験的精索静脈瘤による精巣内分泌障害の機序に関する研究

2.同じく精索静脈瘤群の左右精巣、およびsham群の精巣より得られたLeydig細胞に対してradioreceptor assayを行なったところ、精索静脈瘤群の左右精巣では、細胞当たりの^<125>I結合量がsham群精巣に比べて低下していた。3.分離Leydig細胞より得られた酵素液にて、テストステロン合成系の各酵素活性を測定したところ、精索静脈瘤群の左右精巣でsham群に比し、17α-hydroxylase活性の低下が認められた。今後さらに追加実験を行ない上記所見の確認に努めるとともに、dibutyryl c-AMPおよびプロスタグランヂン添加によるテストステロン分泌能の変化に関する検討を行なっていく予定である。Sprague-Dawley系雄性ラットに、左腎静脈部分結紮を行なうことにより実験的精索静脈瘤を作成し、その内分泌学的影響につき検討した。精巣内温度は、術後全経過を通して精索静脈瘤群とsham operation群の間に統計学的有意差を認めなかった。Johnsen score countを用いた精巣組織の造精機能評価においては、術後2週目よりすでに軽度の両側性の障害が認められた。術後2週目、4週目における血中各種ホルモン値には、いずれもsham operation群との間に差を認めなかった。精巣より分離したLeydig細胞を培養し、そのテストステロン産生能を見たところ、HCG非添加時には術後2および4週目とも培養液中のテストステロン濃度には、精索静脈瘤群とsham operation群の間に差がなかった。しかしHCG 100mIU/ml,1000mIU/mlを添加した場合には、術後4週目のみにおいて精索静脈瘤群で左右精巣ともsham operation群に比し有意に低いテストステロン濃度を示した。左右精巣間には差はなかった。術後4週目において精巣より分離したLeydig細胞を用いて行なった[^<125>I]HCG binding assayでは、精索静脈瘤群の左右精巣ともshamoperation群の精巣に比し有意に低い値を示した。また、同じく術後4週目で分離したLeydig細胞を用いて、dbc-AMP添加による培養液中へのテストステロン分泌能を検討したところ精索静脈瘤群左右精巣およびsham operation群精巣の間には差が見られなかった。以上の結果より、実験的左精索静脈瘤ラットでは、Leydig細胞におけるテストステロン産生のHCGに対する反応性が障害されることが判明した。また、この障害は左腎静脈結紮後4週目より出現し、精巣の造精機能障害がそれより早く出現していたことより考えて、このLeydig細胞機能障害が造精機能障害の原因ではないことが示唆された。テストステロン分泌のHCGに対する反応性低下の機序としては、HCGリセプター数の低下を介するものが示唆された。
プラズマプロセスによる有機-金属多層系高分子薄膜の構造制御とヘテロ界面機能

有機金属化合物をプラズマエネルギ-によって高分子化すると同時に金属との自己組織化、高次構造化を行ない、それに基づく新規な機能材料の合成を目的としている。筆者らは、プラスマ重合によって、10^<-10>10^4Scm^<-1>と電導度が大きく変化する金属-有機多層系高分子薄膜を合成し、その電導度が金属-高分子層交互の界面構造に密接に関係づけられることを明らかにした。このような金属-有機パ-コレ-ション構造は界面相転移に基づく種々の電気的、化学的特異性を発現する。昨年度プラズマ重合により、有機チタン化合物を用い高い電導性をもつn型半導体薄膜を合成し、その構造を解析した。又、特定の有機ガスを吸着してその伝導度を著しく変えることを見出した。本年度は、有機チタン薄膜の可燃性ガス吸着触媒機能に着目し、選択性と反応機構を解明してガスセンサ-としてのデバイス化を図った。半導体である重合膜表面で酸素は膜中の電子を奪いO^<2->の状態で吸着している。チタニウムテトライソプロポキシドのプラズマ重合膜を用い、表面温度T=100°Cにおいて、酸素ガス濃度化に対する電流値の変化を測定すると、濃度に応じて定量的に応答することが明らかとなった。この膜は四塩化炭素などの不燃性ガスには応答せず、メタノ-ル、エタノ-ル、ブタノ-ル、アセトンなど可燃性ガスに応答を示す。また、可燃性ガスの濃度の増加に伴い伝導度が直線的に増加しており、この重合膜はn型半導体センサとしての特性を持つ。また、ガス応答性は、温度にきわめて敏感であり、温度上昇に伴いその感度は増している。
金属箔の厚さ弁別を可能にする触感覚情報処理機構の解明

ヒトは,紙などの対象を指で挟むことにより,その厚さを容易に知ることが出来る。対象が厚い場合は,指関節の開き角度情報を用いて厚さ判断を行なっていると考えられるが,対象が薄い場合(例えば100μm以下)については,どのような感覚情報処理メカニズムによりこの判断が可能になるのか不明であった。そこで,本研究では,厚さ50μm以下の金属箔を刺激として用い,触覚系の厚さ弁別閾を測定し,その感覚情報処理メカニズムを明らかにすることを研究目的とした。実験1では,厚さ850μmのステンレス箔を刺激とし,それを利き手の示指と母指で挟んで,厚さ弁別を行なった。その結果,いずれの厚さの刺激も弁別が可能であることがわかった。ただし,刺激の厚さを弁別するためには指を動かして判断する必要があった。実験2では,実験1と同一の刺激を両手の示指で挟み,厚さ弁別を行なった。その結果,実験1で測定された弁別閾と実験2で測定されたWeber比は一致した。これらの結果から,金属箔の厚さ弁別には指関節の開き角度情報が用いられていないことが明らかとなった。次に,触覚系がどのような情報を用いて金属箔の厚さ弁別を行なっているかを調べるために,実験3を計画した。実験3では,厚さ1050μmのステンレス箔と銅箔を刺激として用いた。これらのステンレス箔と銅箔について,厚さ比較判断実験を行なった。その結果,ステンレス箔と銅箔の厚さが同じなら,ステンレス箔より銅箔の方が薄く感じられることがわかった。実験3のデータに基づき,ヒトが金属箔のバネ定数(たわみにくさ)に基づいて厚さ判断を行なっているとする数学モデルを作成した。その結果は,実験3の結果をうまく説明できるものとなった。最後に,金属箔または金属板の厚さ弁別を行なう際に,刺激のたわみ情報に基づく厚さ判断と,指関節の開き角度情報による判断がどの厚さで切り替わるのかを調べるために,実験4を実施した。実験4では,厚さ101000μmのステンレス箔(ステンレス板)を刺激として用い,厚さ弁別実験を行なった。その結果,刺激の厚さが1070μmの場合と刺激の厚さが3501000μmの場合は,刺激の厚さを相互に弁別することが出来たが,刺激の厚さが70350μmの範囲では弁別は不可能であった。実験4の結果は,1070μmでは,たわみ情報により厚さ弁別が行なわれ,3501000μmでは指関節角度情報により厚さ弁別が行なわれていることを示しているものと推定された。われわれは,紙などを2本の指で挟むことにより,触覚的にその厚さを知ることができる。通常,この厚さの判断は指関節の開き角度に基づいてなされていると考えられている。しかし,10100μm程度の対象の厚さを関節角度によって判断できるであろうか。本研究では,非常に薄い対象の厚さを弁別する感覚情報処理機構について明らかにすることを研究目的とした。本研究では,三つの実験を実施した。実験1では,円型リングに挟んだ厚さ850μmのステンレス箔を刺激として用い,厚さの弁別閾値を測定した。実験の際,被験者は刺激を利き手の示指と親指で挟んで厚さ弁別作業を行なった。その結果,弁別閾値は5.910.2μmとなり,極めて薄い対象の厚さを弁別できることがわかった。実験2では,厚さ1050μmの銅箔とステンレス箔を刺激として用い,銅箔とステンレス箔のどちらを厚いと判断するか測定した。その結果,例えば50μmの銅箔は30μmのステンレス箔とほぼ同じ厚さに感じられることがわかった。銅のヤング率はステンレス(SUS304)の0.6倍程度であり,このことから,被験者が金属箔のたわみの程度を手がかりとして厚さ弁別を行なっていることが示唆された。実験3では1050μmのステンレス箔を刺激とし,これを左右の示指で挟むことにより,厚さの弁別判断を行なった。実験の結果得られた弁別閾値は,実験1の結果とほぼ同一であった。この3種類の実験から,(1)非常に薄い対象に対して厚さ弁別が可能であること,(2)ヤング率が厚さ判断に影響し,ヤング率が高くなると厚く感じること,(3)刺激を利き手の示指と親指で挟んでも,両示指で挟んでも,厚さ弁別閾値に差はなかったこと,が明らかとなった。特に(2)と(3)から,非常に薄い対象の厚さ弁別作業では関節角度を用いず,対象のたわみ情報を厚さに変換して判断していると推測された。論文については,現在投稿準備中,著書は執筆中である。

そこで,本研究では,厚さ50μm以下の金属箔を刺激として用い,触覚系の厚さ弁別閾を測定し,その感覚情報処理メカニズムを明らかにすることを研究目的とした。実験1では,厚さ850μmのステンレス箔を刺激とし,それを利き手の示指と母指で挟んで,厚さ弁別を行なった。その結果,いずれの厚さの刺激も弁別が可能であることがわかった。ただし,刺激の厚さを弁別するためには指を動かして判断する必要があった。実験2では,実験1と同一の刺激を両手の示指で挟み,厚さ弁別を行なった。その結果,実験1で測定された弁別閾と実験2で測定されたWeber比は一致した。これらの結果から,金属箔の厚さ弁別には指関節の開き角度情報が用いられていないことが明らかとなった。次に,触覚系がどのような情報を用いて金属箔の厚さ弁別を行なっているかを調べるために,実験3を計画した。実験3では,厚さ1050μmのステンレス箔と銅箔を刺激として用いた。これらのステンレス箔と銅箔について,厚さ比較判断実験を行なった。その結果,ステンレス箔と銅箔の厚さが同じなら,ステンレス箔より銅箔の方が薄く感じられることがわかった。実験3のデータに基づき,ヒトが金属箔のバネ定数(たわみにくさ)に基づいて厚さ判断を行なっているとする数学モデルを作成した。その結果は,実験3の結果をうまく説明できるものとなった。最後に,金属箔または金属板の厚さ弁別を行なう際に,刺激のたわみ情報に基づく厚さ判断と,指関節の開き角度情報による判断がどの厚さで切り替わるのかを調べるために,実験4を実施した。実験4では,厚さ101000μmのステンレス箔(ステンレス板)を刺激として用い,厚さ弁別実験を行なった。その結果,刺激の厚さが1070μmの場合と刺激の厚さが3501000μmの場合は,刺激の厚さを相互に弁別することが出来たが,刺激の厚さが70350μmの範囲では弁別は不可能であった。実験4の結果は,1070μmでは,たわみ情報により厚さ弁別が行なわれ,3501000μmでは指関節角度情報により厚さ弁別が行なわれていることを示しているものと推定された。
DNA合成系酵素mRNAによる癌細胞分化度の判定と治療法の開発

ピリミジン代謝のサルベージ経路に位置するDNA合成系酵素チミジン・キナーゼ(TK)は、胎児組織、腫瘍組織など増殖の盛んな細胞でその活性の増加していることが知られている。我々は、正常大腸には存在しない特異な胎児型のTKアイソザイムが家族性大腸ポリポージス・ポリープおよび大腸癌では高率に誘導されることを報告してきた。さらにヒトおよびラット実験大腸癌では、組織学的に分化度の高いもの程、TK活性が高く、また胎児型のアイソザイムの存在する傾向の強いことが認められた。また、デ・ノボ経路に位置するDNA合成系酵素チミジレート・シンセターゼ(TS)もTK同様増殖の盛んな細胞でその活性が増加しているが、ヒト胃癌ではTK/TS比の低いもの程分化度が低く、ヒト白血病でも骨髄細胞のTK/TS比の低いもの程、難治性である傾向が認められた。そこで今回、デ・ノボとサルベージの両経路から同一のdUMPへ転換させる酵素TSとTKの活性比と、褐細胞の組織型および分化度との関連を解析し、治療法の選択、治療効果判定、予後判定などにTK/TS比の臨床応用を試みた。尚、TS、TKのmRNAを各標本より検出し、PCR法で増幅する遺伝子レベルでの研究は現在進行中で、症例を重ねているところである。
インド神話の普遍性・独自性・文学性を解明する比較研究

最終年度前半は前年度に続き、2018年4月1日から6月30日、京都大学文学研究科内地研究員として、7月1日から9月20日、ライデン大学Institute for Area Studiesのvisiting fellowとして研修を行った。こうした環境の中で科研費による研究とそれに深く関わる諸分野の研究について研鑽に励んだ。5月31日から6月4日、国際比較神話学会(東北大学)に出席し、比較神話学の最新の成果を知るとともに問題点をも知ることとなった。京都大学人文科学研究所・藤井正人教授による毎月の定例研究会「ブラフマニズムとヒンドゥイズム」、幾つもの読書会に参加。この間、今回の科研費の最大の成果とも言える単著『七仙人の名乗り』の最終作業を行い、出版を果たした。ライデン大学では、7月9日から20日、サマースクール(Languages and linguistics部)においてヴェーダ文献講読の稀有の機会を得た。7月27日から31日、ライデン大学・大英図書館等主催の学会、Asia beyond Boundariesに参加し、インド学とその周辺について広く新たな知見を得た。9月5日から7日、ライデン大学のピーター・ビショップ教授によるSkandapurana Seminarに参加し、インド神話の宝庫と言うべき文献の批判校訂作業を目の当たりにした。最終年度後半は、これまでの研究活動を振り返り、次の研究課題をどう設定するか構想することが主な仕事となった。第1の専門(日本の説話・神話研究)と第2の専門(インドの説話・神話研究)をつなぐ比較研究を考え始めた。12月20日から25日、京都大学において、「ブラフマニズムとヒンドゥイズム」、インド思想史学会、京都大学の横地優子教授によるReconsidering the Early History of Yoga and Samkhyaに出席。古代インド成立の巨大なサンスクリット叙事詩『マハーバーラタ』のうち、第13巻の文学研究、神話の研究を、当該年度には一区切りのところまで進めた。当該年度、具体的には、『マハーバーラタ』第13巻全166章(キンジャワデカル版による。批判版では全152章)の概観について、学会(日本印度学仏教学会)口頭発表、学会誌論文掲載、学内誌論文掲載を行なった。また、個別の1章の前半「七仙人の名乗り」(キンジャワデカル版・第93章、批判版・第95章に対応)和訳研究の学内誌論文掲載を行なった。そして、以上の当該年度の研究成果と、先立つ準備段階の数年間に蓄積していた『マハーバーラタ』第13巻の5(6)章分あるいは5(6)神話・説話分の考察、該当の5(6)章分あるいは5(6)神話・説話分の和訳研究を修正・加筆し、さらに序章・終章による総論を執筆して、博士論文『サンスクリット叙事詩『マハーバーラタ』第13巻の文学研究』を作成した。この博士論文を北海道大学文学研究科に提出し、インド哲学・仏教学他の専門家による審査に合格し、この博士論文によって「博士(文学)」の学位を授与された。『マハーバーラタ』第13巻については、これまでに本格的なまとまった研究はなかった。現代語訳も100年程前の古い英訳があるのみであり、鳥瞰や把握さえも困難であった。部分的にインド哲学(特にサーンキヤ哲学)の研究者が取り上げることがあるばかりであった。そのような研究状況の中で、今回の博士論文は、『マハーバーラタ』第13巻の全体的把握と、それのみならず、これをいかに文学(口承文芸・語り物)として理解するか、これによっていかにインド神話を研究するか等について新たな解釈やとらえ方を提示したものである。続く年度(平成27年度)には、この博士論文を改稿し、出版するために作業を続けている。平成27年度は、主として、研究対象のインド古典文学・叙事詩『マハーバーラタ』に関わって、研究会の主催、研究成果の公開準備、学会での口頭発表、を行い、また、関係の研究会・講演会・ワークショップに参加した。付随的に、研究成果の一部を一般向けの書物(共著)に書き下ろした。まず、研究会主催としてはー平成27年8月31日(月)9月2日(水)、研究代表者の勤務する小樽商科大学において、大正大学特任准教授・種村隆元博士を講師として「サンスクリット写本研究会」を行なった。基準的な写本に加えて『マハーバーラタ』写本の解説が行なわれ、読解作業が進められた。本研究会は、将来的に研究代表者の研究範囲を『マハーバーラタ』写本にまで広げる可能性を大いに高めるものであった。また、ご参加いただいた北海道在住研究者の方々にも益するところがあったのであれば幸いである。次に、研究成果の公開準備としてはー『マハーバーラタ』神話・説話についての博士論文(平成26年度・北海道大学大学院文学研究科受理・思想文化学専攻宗教学インド哲学講座)を出版公刊すべく、改稿作業を行なった。この作業は平成28年度も続行し、平成28年度中に出版することをめざしている。この著書(単著)は、インド学分野では未発達といえる、『マハーバーラタ』の文学研究の1つのありかたを構築することを目的とするものである。学会での口頭発表としてはー平成27年12月19日(土)、インド思想史学会第22回学術大会(於京都大学・楽友会館)において、口頭発表「語り物『マハーバーラタ』の構想・技巧・異伝ー「七仙人の名乗り」を例としてー」を行なった。

この発表内容は、上記博士論文の改稿作業の中で発展的に生まれたものである。『マハーバーラタ』神話の中に、種々の言語遊戯・語りの技法を多く見出した文学研究である。本研究課題の現在までの進捗状況については、当初の研究計画以上に進展していると言える。なぜならば、1つには「研究実績の概要」欄にも記したが、将来的に研究代表者の研究において、『マハーバーラタ』写本を用いる可能性が高まってきた。また、研究の展開に伴い、『マハーバーラタ』の中に、予想以上の文学的要素を見出して来ている。これらは、当初、本研究を計画した際には予期していなかった事柄である。さらには、研究の人的交流という点でも予測以上に実現できている。本研究の成果のかなりの部分を占める業績を博士論文にまとめ、既に平成26年度、学位請求のため北海道大学文学研究科に提出、審査の結果これによって博士(文学)の学位を取得していた。平成28年度はこの博士論文の改稿と新たな章の執筆にかなりの時間を費やすこととなった(なお、出版社との関係で出版が遅れていたが、ようやく平成29年度5月8日(月)に入稿し、前期中を目処に出版予定で、校正作業等を続ける。「今後の研究の推進方策」部分において述べる)。『マハーバーラタ』の文学作品として見る、これまでなかった手法を用いている。本研究の環境を整え、必要な情報を獲得し、国内外の研究者と交流するため、幾つもの研究会に参加し、また自ら主催もした。主なものを以下に挙げる。8月23日(火)、小樽商科大学に、インド古典写本の専門家である志田泰盛氏(筑波大学大学院文学研究科・准教授)を講師として招聘し、「インド古典写本研究会」を行なった。その場で道内外の研究者と交流を持つことができた。この研究会を機として、11月21日(日)23日(水)、筑波大学において行なわれた「Telugu文字サンスクリット写本翻刻ワークショップ」、及び、「写本・古文書・當案+人文情報学ワークショップ」に参加した。ここでフランス極東学院ポンディシェリ校のSatyanarayanan Sharma氏よりTelugu文字サンスクリット写本の読解を学んだ。海外の研究者と交流を持つことができた。また、7月15日(金)19日(火)、京都大学において横地優子氏(京都大学大学院文学研究科教授)主催のReconsidering the early history of Yoga and Samkhya, The third seminarに参加した。その場において海外の研究者とも交流を持つことができた。平成27年度に引き続き28年度も、本研究に写本を用いるための基盤作りが進んで来ている。そのために将来的に本研究に写本を用いることのできる可能性が高まっている。また、平成27年度に引き続き28年度も、インド学仏教学分野の研究者との交流が格段に進んだ。さらに、海外の研究者も招聘されている研究会に参加する機会が増えてきた。学術研究の国際交流が進んで来た最近の風潮の恩恵を蒙っている面もあるが、自らの研究の進展が予測以上であることにもよると考える。これによって今後は海外の学会・研究会への参加や研究発表の機会がより増え、海外の研究者と交流してゆくことがよりスムーズになっていくものと予測する。以上の事柄は、本研究計画・開始の段階には予測しなかったものであるので、本研究は当初の計画以上に進展していると判断している。
DNAメチル化に依らないゲノムインプリンティング機構

哺乳類には父また母由来のアリルからのみ発現するインプリント遺伝子がある。この片親性発現はゲノム上に散在するDMR (Differentially methylated region)のメチル化によって制御されると考えられてきたが、近年DNAメチル化非依存的に片親性発現を維持するインプリント遺伝子が報告された。そこで私はゲノムインプリンティング確立にも、DNAメチル化非依存的機構が存在するのではないかと考えた。新規メチル化酵素(Dnmt3a, Dnmt3b)、メチル化活性はないものの新規メチル化酵素と共に働きDNAメチル化インプリント確立に不可欠な因子であるDnmt3L、それぞれを欠損する雌マウスを用いて[Dnmt3a^<-/+>,Dnmt3b^<-/+>]、[Dnmt3L^<-/+>]胎生9.5日胚を得た。これらの胚でインプリント遺伝子のアリル特異的発現を調べたところ、その多くで異常が見られた。しかしKcnq1, Cd81では母親由来の発現を維持していた。これはゲノムインプリンティング確立にはDNAメチル化非依存的な機構が存在することを示している。これにヒストン修飾が関わっている可能性を鑑み、インプリント遺伝子のアリル特異的ヒストン修飾状態をChIP assayで調べた。しかしKcnq1,Cd81領域ではヒストン修飾のアリル間の差は見られなかった。このため研究計画で記載していた「成長期卵を用いたCarrier ChIP」はポジティブな結果が得られないであろうこと、また技術的に困難であることなどから断念した。興味深いことに[Dnmt3a^<-/+>,Dnmt3b^<-/+>]ではインプリントが破綻するPeg10が[Dnmt3L^<-/+>]では父親由来の発現を維持していた。また[Dnmt3L^<-/+>]のPeg10 DMRはメチル化を欠損していた。このことは新規メチル化酵素によるDNAメチル化非依存的なゲノムインプリンティングの存在を示唆している。哺乳類には父親または母親由来どちらか一方の相同染色体からのみ発現するインプリント遺伝子がある。この片親性発現はゲノム上に散在するDMR(Differentially methylated region)のメチル化によって制御されると考えられてきたが、近年発生過程でDNAメチル化を消失しても、いくつかのインプリント遺伝子は片親性発現を維持するという報告がなされた。そこで私はゲノムインプリンティング確立にも、DNAメチル化非依存的な機構が存在するのではないかと考えた。交付申請書の研究計画に記載した通り、成長期卵特異的にDnmt3a,Dnmt3bを欠損する雌マウスと野生型の雄マウス交配させ、[Dnmt3a^<-/+>,Dnmt3b^<-/+>]胎生9.5日胚を得た。この胚は卵由来のDNAメチル化インプリントを欠損しており、インプリント遺伝子の片親性発現が異常になっているはずである。これを確かめるために胚のmRNAを抽出し、両アリル間のSMP(単塩基置換)を調べることで、インプリント遺伝子がどちらのアリル由来の発現なのかを判別した。マウスのゲノム上では現在15箇所のDMRが確認されており、そのうち12箇所は卵で、3箇所は精子でメチル化されている。卵でメチル化されるDMRが発現を制御するインプリント遺伝子を解析したところ、インプリントを保つ3つの遺伝子(Kcnq1,Cd81,Dcn)が見つかった。これはゲノムインプリンティング確立にはDNAメチル化に非依存的な機構が存在することを示している。またこれらの遺伝子の発現量はReal-time PCRで定量したところ、野生型に比べ[Dnmt3a^<-/+>,Dnmt3b^<-/+>]胚では低かったことから、DNAメチル化依存的・非依存的なメカニズムが両方存在することを示唆している。

興味深いことに[Dnmt3a^<-/+>,Dnmt3b^<-/+>]ではインプリントが破綻するPeg10が[Dnmt3L^<-/+>]では父親由来の発現を維持していた。また[Dnmt3L^<-/+>]のPeg10 DMRはメチル化を欠損していた。このことは新規メチル化酵素によるDNAメチル化非依存的なゲノムインプリンティングの存在を示唆している。
抗癌剤耐性関連タンパク質HSPB1の構造機能相関の解明とその臨床応用

抗癌剤による化学療法は多くの癌の治療法として重要であるが,抗癌剤に対する感受性の低下(耐性獲得)が治療上の問題となる。申請者は,抗癌剤である5-フルオロウラシル(5-FU)耐性大腸癌細胞のプロテオーム解析によって,5-FU感受性の低下と関連するタンパク質の一つとしてheat shock protein β-1(HSPB1)を見出した。HSPB1は種々の分子量のオリゴマーとして存在すること,それぞれのオリゴマーでリン酸化状態が異なること,HSPB1と相互作用するタンパク質の1つが細胞骨格タンパク質のcytokeratinであることを確認した。5-FUとは異なる作用機序をもつ抗癌剤であるpaclitaxel (PTX)耐性株におけるHSPB1の発現レベル,リン酸化やオリゴマー化,他のタンパク質との相互作用を調べ,両耐性株で異なっていることを見いだした。本研究の目的は,抗癌剤耐性獲得におけるHSPB1の機能を,翻訳後修飾・オリゴマー構造・他のタンパク質との相互作用を解析することで明らかにし,及び耐性獲得マーカーとして有用性を検討することである。HSPB1の抗癌剤耐性における役割を探るために,5-FUやPTXとは異なる作用機序をもつ抗癌剤の耐性株を用いたプロテオーム解析や,HSPB1のオリゴマー構造の解析を行おうとしているが,さまざまな理由で遅れている。複数の抗癌剤耐性株でのHSPB1のオリゴマー構造の解析を行う。5-FU以外の抗癌剤耐性株におけるHSPB1のオリゴマー化とリン酸化の詳細な検討を行い,その相違点を明らかにし,これらが抗癌剤特異的であるのかを明らかにする予定である。また,プロテオーム解析を進める予定である。多くの癌の治療法として抗癌剤による化学療法が重要であるが,抗癌剤に対する感受性の低下(耐性獲得)が治療上の問題となる。申請者は,抗癌剤である5-フルオロウラシル(5-FU)耐性大腸癌細胞のプロテオーム解析によって,5-FU感受性の低下と関連するタンパク質の一つとしてheat shock protein β-1 (HSPB1)を見出した。耐性株で増加したHSPB1のリン酸化されたアミノ酸残基を決定し,種々の分子量のオリゴマーが存在すること,それぞれのオリゴマーでリン酸化状態が異なること,HSPB1と相互作用するタンパク質の1つが細胞骨格タンパク質のcytokeratinであることを確認した。5-FUとは異なる作用機序をもつ抗癌剤であるpaclitaxel (PTX)耐性株におけるHSPB1の発現レベルは,PTX感受性株において既に5-FU耐性株より高く,PTX耐性株ではそれが減少していることを確認した。本年度は,5-FU耐性株とPTX耐性株におけるHSPB1のリン酸化やオリゴマー化,cytokeratinサブタイプとの相互作用の状態を調べた所,これらが異なっていることを見いだした。また,HSPB1と相互作用するタンパク質として,cytokeratin以外に同じ低分子熱ショック蛋白質であるHSPB6やアクチンの可能性が示唆された。5-FU耐性株で注目したHSPB1は,リン酸化や様々な高分子量のオリゴマーを形成することがその活性発現に関与していると考えられている。HSPB1と相互作用するタンパク質として同定した複数のcytokeratinサブタイプとHSPB1オリゴマーとの会合状態やHSPB1の構造変化を調べ,これらが5-FU耐性株と他の抗癌剤耐性株では異なることを見いだした。また,cytokeratin以外の相互作用タンパク質としてHSPB6などを同定した。しかし本年度は研究に割く時間が少なくやや遅れている。また,cytokeratin以外の相互作用タンパク質についても今年度得られた予備的結果を元に解析を行う予定である。

5-FU以外の抗癌剤耐性株におけるHSPB1のオリゴマー化とリン酸化の詳細な検討を行い,その相違点を明らかにし,これらが抗癌剤特異的であるのかを明らかにする予定である。また,プロテオーム解析を進める予定である。本年度の計画が遅れているため次年度使用額が生じた。次年度の研究計画を行うため必要となる物品費用に充てる予定である。
21世紀の新しい治療としての慢性疾患に対する温熱療法の確立

慢性心不全・閉塞性動脈硬化症・慢性疲労症候群・慢性疼痛・慢性呼吸不全に対して、60°Cの遠赤外線乾式サウナ装置を用いた温熱療法の効果を検討した。心不全に関しては、2週間の温熱療法は心室性期外収縮総数、連発性心室性期外収縮、心室頻拍を有意に減少させた。ノルエピネフリン濃度は有意に低下し、24時間ホルター心電図による心拍変動解析(SDNN)は30%有意に増加した。さらに、2週間の温熱療法で、グレリン及び成長ホルモンは有意に増加し、質問表による食欲の改善が認められた。温熱療法は慢性心不全患者で増加した酸化ストレスを減少させることも明らかにした。心不全発症ハムスターを用いた実験において、温熱療法非施行群と比較し、温熱療法群では、生存率を35%有意に改善し、eNOSのmRNA及び蛋白の発現や血清nitrate濃度を有意に増加した。温熱療法による血管新生に関する検討では、アポ蛋白E欠損マウスの下肢虚血モデルにおいて、5週間の温熱療法は下肢血流と血管密度を増加させた。L-NAMEやeNOS欠損マウスを用いた実験により、温熱療法の血流改善作用にeNOSとNOが重要な役割を果たしていることを明らかにした。さらに、10週間の温熱療法により、閉塞性動脈硬化症(ASO)患者の下肢疼痛、6分間歩行距離、ABI、体表温度、レーザードプラ血流計による下肢血流、下肢血管造影、皮膚潰瘍に関して有意な改善を認めた。4週間の温熱療法は、軽症うつ患者の愁訴や食欲低下を改善させた。また、慢性疼痛患者の疼痛を軽減し、その後の社会復帰率を高めた。さらに、2名の慢性疲労症候群患者に対して温熱療法を施行し症状の改善を認め、社会生活に復帰した。温熱療法は慢性閉塞性肺疾患患者におけるRV dP/dt、運動中の肺高血圧、運動耐容能、QOLを改善することが示された。温熱療法は、これらの疾患に対する新しい治療法として期待される。温熱療法の不整脈に対する影響について検討した。心不全患者で心室性不整脈を有する30名を、温熱療法施行群20名と、温熱療法非施行群10名とに分け、2週間後に両群を比較検討した。その結果、温熱療法施行群において、心拍数に影響なく心室性期外収縮総数が有意に減少し、また、温熱療法は、連発性心室性期外収縮や心室頻拍に関しても、治療前と比較し約80%その出現を軽減した。この結果は、Circulation Journalに掲載した。さらに、心不全患者で低下している食欲に関しても温熱療法の効果を検討した。心不全患者24名を温熱療法群13名、対照群11名に割付けた。その結果、2週間の温熱療法で、左室拡張末期径の縮小、左室駆出率及び左室Tei indexの改善、血中心房性利尿ペプチド、脳性利尿ペプチド及びノルアドレナリンの低下に加え、グレリン及び成長ホルモンは有意に増加し、質問表による食欲の改善が認められた。対照群では、いずれも有意な変化を認めなかった。この結果は、アメリカ心臓病学会(ACC)で発表した。軽症うつ病患者28名を温熱治療群14名と非温熱治療群14名に分け、軽症うつ病に対する温熱療法の効果を検討した。この結果をまとめた論文は、Psychosomatic Medicineに掲載受理された。

また、慢性疼痛患者46名を温熱治療群22名と非温熱治療群24名に分け、慢性疼痛に対する温熱療法の効果を検討した。温熱療法群では、疼痛が軽減し、その後の社会復帰率が有意に高かった。この結果は、Psychotherapy and Psychosomaticsに掲載受理された。さらに、2名の慢性疲労症候群患者に対して温熱療法を施行し症状の改善を認め、社会生活に復帰した。この症例報告は、J Psychosom Resに掲載受理された。温熱療法は、これらの疾患に対する新しい治療法として期待できる。心不全患者において温熱療法の自律神経に対する作用について検討した。温熱療法施行群20名では非施行群10名に比べ、ノルエピネフリン濃度は有意に低下し、24時間ホルター心電図による心拍変動解析(SDNN)は約30%有意に増加した。温熱療法は、慢性心不全によって異常亢進している交感神経活性を改善することを明らかにした。心不全発症ハムスター(TO-2)を用い温熱療法の効果とその発現機序を検討した。温熱療法施行群では非施行群と比較し、生存率が35%と有意に改善した。4週間の温熱療法施行群では非施行群と比較し、eNOSのmRNA及び蛋白の発現が有意に増強し、血清nitrate濃度も有意に上昇した。この結果はCirculation Journalに掲載され、2005年度の基礎部門最優秀論文賞を受賞した。軽症うつ病、慢性疲労、慢性疼痛患者に対して温熱療法を施行し、いずれも症状が改善することを各々論文掲載した。温熱療法は、心身症の新しい治療法として有効であることを示した。温熱療法による血管新生に関する検討では、アポ蛋白E欠損マウスの下肢虚血モデルにおいて、5週間の温熱療法は下肢血流と血管密度を増加させた。L-NAMEやeNOS欠損マウスを用いた実験により、温熱療法の血流改善作用にeNOSとNOが重要な役割を果たしていることを明らかにした。この結果は、Circulation Journal誌の2006年4月号に掲載予定である。さらに、閉塞性動脈硬化症(ASO)に対する温熱療法の効果をASO患者13名で検討した。10週間の温熱療法により、下肢疼痛、6分間歩行距離、ABI、体表温度、レーザードプラ血流計による下肢血流、下肢血管造影に関して有意な改善を認めた。また、皮膚潰瘍を有した5例で潰瘍が縮小・治癒した。2005年のAmerican Heart Associationで発表し、ASOの新しい治療法として今後期待できる。心不全患者において温熱療法の酸化ストレスに及ぼす効果を検討した。慢性心不全患者20名に対し温熱療法を施行し、初回温熱療法の前後、温熱療法2週・4週後のそれぞれで、酸化ストレスのマーカーである血中ヒドロペルオキシドを測定し比較検討した。慢性心不全患者での血中ヒドロペルオキシドは正常値より増大しており、24週の温熱療法により血漿中ヒドロペルオキシド濃度の有意な経時的減少を認めた。温熱療法は慢性心不全患者で増加した酸化ストレスを減少させることを明らかにした。この結果は、Circulation Journal誌に掲載された。
鉄系高活性酸素還元触媒と酸素イオン移動層を組み合わせた固体高分子形燃料電池の開発

本研究の目的は、固体高分子形燃料電池のカソード用触媒として、低コストで白金に匹敵する活性を示すが耐酸性が低い鉄錯体を電極触媒として使用可能とする電極構造を構築することである。そのために、鉄錯体触媒と耐酸性が高い触媒を電極内に適切に配置することを試みる計画である。そのために、まず、申請者らが開発した溶液を用いる金属錯体触媒結晶相の制御法である界面析出法を発展させて、複合錯体結晶や種々の結晶相形成を行った。金属錯体の触媒特性や電気的特性は結晶相中の金属間距離に依存しているために、結晶相制御は需要である。特に、化学的に高い安定性を示すために注目している金属フタロシアニンは中心金属によって結晶相の安定性が異なり、複合系の特性は未知数である。2018年度は、主に界面析出法による鉄フタロシアニンの複合化を試みた。界面析出法では、疎水性の錯体分子が溶解している有機溶液を水溶液に滴下する。有機溶液が水溶液に接触した時に疎水性の錯体分子は析出し、その時に疎水性相互作用を駆動力として形成される錯体分子の結晶相は有機相中と水溶液中の化学種の組み合わせで安定な相が選択的に得られることを見い出している。そのため、種々の溶液組成を組み合わせることで、様々な錯体結晶が得られるだけでなく、得られた物質の安定性が高く電極材料としての応用が期待できる。鉄フタロシアニンのみでは、酸素還元反応中に分子からの中心金属の鉄の離脱による触媒活性喪失が起こっていたが、コバルトフタロシアニンと複合系とすることで、失活が見られなくなった。しかし、フタロシアニン分子のみの積層体では、コバルトと複合系とすると鉄のみより初期の活性が低かったが、ヨウ素イオンとの分離積層体とすることで、活性の向上が見られた。計画当初は、鉄錯体の電極反応時の失活は克服不可と考えていたために、電極内の酸性雰囲気にならない場所に鉄錯体を配置し、主に、鉄錯体には酸素分子の吸着速度が大きな解離吸着の場としての働きを期待していた。それによって、白金以外の触媒で問題となっている低い酸素吸着速度と大きな過電圧という課題を解決できると期待していた。しかしながら、界面析出法によって、鉄以外の金属を中心に持つ金属フタロシアニンと複合化を行ったところ、耐久性の向上が見られる複合系が見つかった。一方、、紫外可視吸収スペクトルから、鉄フタロシアニンとの複合系触媒の第1遷移エネルギーを示すQバンドは鉄フタロシアニンと同様に他の金属フタロシアニンよりも長波長側にあり、遷移エネルギーが小さいことが示唆され、また、サイクリックボルタンメトリーの結果から、低過電圧域に還元電流が見られるようになることからも、鉄フタロシアニン複合触媒上での電気化学反応は活性化エネルギーが小さいことが示唆された。つまり、複合化が鉄フタロシアニンの活性は維持しつつ、耐久性が向上するという結果が得られた。そのために、耐酸性のルテニウム系のパイロクロア型酸化物との複合化を先送りにして、複合金属錯体結晶の触媒特性を詳細に検討した。界面析出法は、有機溶液と水溶液中の成分の組み合わせで結晶相形成を行うために、親水性のイオンや疎水性の錯体や有機分子を構成化学種とする物質が構築可能である。これを利用して、多様な金属錯体結晶を形成し、実用的な非白金系燃料電池のカソードを開発する。計画作成時の目的の、耐酸性酸化物触媒とのコンポジット化を電気泳動析出法と界面析出法を応用した手法で行う。金属錯体結晶の種類としては、鉄フタロシアニンとそれ以外の遷移金属を中心金属に持つフタロシアニンとの複合化結晶と金属フタロシアニンとヨウ素イオンの分離積層体が安定に得られている。まずは、これらの複合状態と触媒活性との相関を明らかにすることと、それらの知見に基づいて白金に匹敵する活性を示す触媒を構築する。また耐久性の向上が見られる系の構築と、その耐久性発現の理由を考察し、触媒設計の指針とする。さらに、電極内の物質移動をスムーズにすることで、三相界面構築にとらわれない電極反応場の構築が電極反応に適当な電極構造になり得るか検討する。

有機溶液が水溶液に接触した時に疎水性の錯体分子は析出し、その時に疎水性相互作用を駆動力として形成される錯体分子の結晶相は有機相中と水溶液中の化学種の組み合わせで安定な相が選択的に得られることを見い出している。そのため、種々の溶液組成を組み合わせることで、様々な錯体結晶が得られるだけでなく、得られた物質の安定性が高く電極材料としての応用が期待できる。鉄フタロシアニンのみでは、酸素還元反応中に分子からの中心金属の鉄の離脱による触媒活性喪失が起こっていたが、コバルトフタロシアニンと複合系とすることで、失活が見られなくなった。しかし、フタロシアニン分子のみの積層体では、コバルトと複合系とすると鉄のみより初期の活性が低かったが、ヨウ素イオンとの分離積層体とすることで、活性の向上が見られた。計画当初は、鉄錯体の電極反応時の失活は克服不可と考えていたために、電極内の酸性雰囲気にならない場所に鉄錯体を配置し、主に、鉄錯体には酸素分子の吸着速度が大きな解離吸着の場としての働きを期待していた。それによって、白金以外の触媒で問題となっている低い酸素吸着速度と大きな過電圧という課題を解決できると期待していた。しかしながら、界面析出法によって、鉄以外の金属を中心に持つ金属フタロシアニンと複合化を行ったところ、耐久性の向上が見られる複合系が見つかった。一方、、紫外可視吸収スペクトルから、鉄フタロシアニンとの複合系触媒の第1遷移エネルギーを示すQバンドは鉄フタロシアニンと同様に他の金属フタロシアニンよりも長波長側にあり、遷移エネルギーが小さいことが示唆され、また、サイクリックボルタンメトリーの結果から、低過電圧域に還元電流が見られるようになることからも、鉄フタロシアニン複合触媒上での電気化学反応は活性化エネルギーが小さいことが示唆された。つまり、複合化が鉄フタロシアニンの活性は維持しつつ、耐久性が向上するという結果が得られた。そのために、耐酸性のルテニウム系のパイロクロア型酸化物との複合化を先送りにして、複合金属錯体結晶の触媒特性を詳細に検討した。界面析出法は、有機溶液と水溶液中の成分の組み合わせで結晶相形成を行うために、親水性のイオンや疎水性の錯体や有機分子を構成化学種とする物質が構築可能である。これを利用して、多様な金属錯体結晶を形成し、実用的な非白金系燃料電池のカソードを開発する。計画作成時の目的の、耐酸性酸化物触媒とのコンポジット化を電気泳動析出法と界面析出法を応用した手法で行う。金属錯体結晶の種類としては、鉄フタロシアニンとそれ以外の遷移金属を中心金属に持つフタロシアニンとの複合化結晶と金属フタロシアニンとヨウ素イオンの分離積層体が安定に得られている。まずは、これらの複合状態と触媒活性との相関を明らかにすることと、それらの知見に基づいて白金に匹敵する活性を示す触媒を構築する。また耐久性の向上が見られる系の構築と、その耐久性発現の理由を考察し、触媒設計の指針とする。さらに、電極内の物質移動をスムーズにすることで、三相界面構築にとらわれない電極反応場の構築が電極反応に適当な電極構造になり得るか検討する。予定していた国際会議(国際電気化学会イタリア)の発表申込み締切が本科研費の交付決定より早かったために、参加できなかった。また、合成装置としてマイクロ波合成装置の購入を挙げていたが、2018年度は溶液を混合するのみの合成手法を広く応用し、多様な溶液を用いることで様々な触媒合成を行うことができたために、予定していた装置の購入は見送った。合成手法に電析していることと、電池作製と反応解析を予定していることから、電源または電気化学測定装置の購入を現段階では、検討している。また、国際会議として、2020年に開催される、アメリカ電気化学会か国際電気化学会に参加し、発表する予定とした。
肝移植／臓器移植における凝固・線溶系異常の病態解明と新規治療法の開発

2006年4月より2013年3月にかけて当院で施行した290例の成人部分肝移植患者を対象とし、肝移植における凝固・線溶系因子の発現解析から、肝局所及び全身循環におけるTMAの発症機序・病態解明を目指すと同時に、新たなる予防・治療戦略の考案を目指した。成人生体部分肝移植においては程度の差こそあれ、ほぼ全例でADAMTS13活性が著減し、類洞/血管内皮障害による微小循環障害が生じている事、TMA重症例では類洞に特異的な補体の沈着を認める事が明らかとなった。ADAMTS13補充による血小板血栓形成の抑制もしくは抗補体抗体投与よる補体活性化のコントロールにより肝移植後TMAを軽減出来る可能性がある。【目的】近年、肝移植を始めとする臓器移植後の致死的合併症として、血栓性微小血管障害(thrombotic microangio pathy : TMA)が注目されている。これは血管内皮細胞で合成される止血因子vonWillebrand因子マルチマー(vWF)と、その特異的切断酵素であるADAMTS13とのバランスが崩れた結果、血小板が過剰凝集し、微小循環障害から多臓器不全を引き起こす疾患であるとされるが、特に臓器移植後TMA発症におけるその詳細なメカニズムは解明されていない。一方で、トロンビン存在下で強力に凝固系を腑活するHMGB1なる核蛋白とその制御因子であるトロンボモジュリンの存在が明らかにされている。本研究では、肝移植におけるこれら凝固-線溶系因子の発現解析から、肝局所及び全身循環におけるTMAの発症機序・病態解明を目指すと同時に、新たなる予防・治療戦略を考案することを目的とする。【研究方法】2011年度に施行した70例の肝移植症例の門脈圧、グラフト肝重量/レシピエント体重比とADAMTS13、vWF、HMGB1、TMとの相関を解析し、TMA発症や血小板減少に関わる因子を抽出した。並行して基礎研究としては、摘出したラット全肝グラフトをrecipientには移植せず、HTK/UW液を用いた4°Cの単純浸透冷保存の後、IPRLを用いて血流再開後(温再灌流後)の各種凝固・線溶系因子の変化を解析した。【本年度の成果】肝移植後早期の血漿ADAMTS13およびHMGB1の動態が明らかとなった。これらの原因としてグラフト肝の冷阻血温再灌流が深く関与している可能性があると考えられた。【目的】近年、肝移植を始めとする臓器移植後の致死的合併症として、血栓性微小血管障害(thrombotic microangiopathy: TMA)が注目されている。これは血管内皮細胞で合成される止血因子von Willebrand因子マルチマー(vWF)と、その特異的切断酵素であるADAMTS13とのバランスが崩れた結果、血小板が過剰凝集し、微小循環障害から多臓器不全を引き起こす疾患であるとされるが、特に臓器移植後TMA発症におけるその詳細なメカニズムは解明されていない。本研究では、肝移植におけるこれら凝固・線溶系因子の発現解析から、肝局所及び全身循環におけるTMAの発症機序・病態解明を目指すと同時に、新たなる予防・治療戦略を考案することを目的とする。【研究方法】2006年4月より2013年3月にかけて当院で施行した成人生体肝移植症例290例を対象として、TMA発症および血小板減少に関わる因子を抽出した。更に肝移植周術期における補体の変動に関しても解析を行った。【本年度の成果】成人生体肝移植後早期の血小板変動はTMAの一亜系である非典型溶血性尿毒症症候群(Atypical hemolytic-uremic syndrome: aHUS)のそれと類似しており、ほぼ全例でTMA様の病態(TMA-like syndrome: TMALS)を生じている可能性が示唆された。また、TMALS進行症例では肝類洞に広範なC4d沈着を認め、補体による類洞傷害が強く関与している事が明らかとなった。これらの成果をもとに、現在、肝移植における微小血管障害の予防と治療を目的とした医師主導型治験を準備中である。【目的】近年、肝移植を始めとする臓器移植後の致死的合併症として、血栓性微小血管障害( thrombotic microangiopathy: TMA)が注目されている。これは血管内皮細胞で合成される止血因子von Willebrand因子

マルチマー(vWF)と、その特異的切断酵素であるADAMTS13とのバランスが崩れた結果、血小板が過剰凝集し、微小循環障害から多臓器不全を引き起こす疾患であるとされるが、特に臓器移植後TMA発症におけるその詳細なメカニズムは解明されていない。一方で、トロンビン存在下で強力に凝固系を腑活するHMGB1なる核蛋白とその制御因子であるトロンボモジュリンの存在が明らかにされている。本研究では、肝移植におけるこれら凝固・線溶系因子の発現解析から、肝局所及び全身循環におけるTMAの発症機序・病態解明を目指すと同時に、新たなる予防・治療戦略を考案することを目的とする。【研究方法】2011年度に施行した70例の肝移植症例の門脈圧、グラフト肝重量/レシピエント体重比とADAMTS13、vWF、HMGB1、TMとの相関を解析し、TMA発症や血小板減少に関わる因子を抽出した。並行して基礎研究としては、摘出したラット全肝グラフトをrecipientには移植せず、HTK/ UW液を用いた4°Cの単純浸透冷保存の後、IPRLを用いて血流再開後(温再灌流後)の各種凝固・線溶系因子の変化を解析した。【本年度の成果】肝移植後早期の血漿ADAMTS13の動態が明らかとなった。ラット肝を用いたIPRLにより、グラフト肝の冷阻血温再灌流が類洞/血管内皮障害を引き起こし、ADAMTS13活性の低下に深く関与している事、および常温灌流保存により障害を軽減出来る可能性がある事が示された。本年度は薬剤投与等の介入をしない状態でのデータ収集が主であり、ほぼ予定通りの症例数を臨床および基礎実験でこなす事が出来た。25年度が最終年度であるため、記入しない。IPRLによる、現状の保存法である単純冷保存によるグラフト肝の評価は順調に進行している。常温灌流保存システムの作成も予定通りである。本年度に集積したデータを基に、TMAをはじめとする肝移植後の凝固線溶系異常に対して、出来る限り早期に補充療法や抗体除去を施行する前向き介入研究を行うべく、現在倫理委員会等に申請中である。基礎研究においては、本年度より自作した臓器保存液を用いた本格的なラット肝温灌流保存-移植実験を開始する予定である。臨床研究においては、一般的な血栓性微小血管障害の原因として補体系がクローズアップされている事に着目し、計画していた研究に加え、過去の検体を用いて、肝移植後の微小血管障害における補体の関与を検証していく予定である。
MRI所見に着想を得た肛門管の縦走平滑筋の解剖学的解析

MRIは肛門壁の筋層構造を詳細に描出できる。MRIでは縦走筋層に低信号域と高信号域の共在像が描出されるが、どのような解剖学的構造を反映しているか解明されていない。私たちはこれまでの研究成果から、消化管と骨盤底筋が空間的に近接する肛門管領域では平滑筋が骨格筋との位置関係や機能に応じて多様な構造を持つのではないか、またMRI所見に基づき、縦走筋層に性状の異なる平滑筋線維が共在するのではないかと考えた。本研究の目的は、肛門縦走筋層における平滑筋の構造を解剖学的手法によって解明することである。将来的には、最先端画像検査や内視鏡下手術の精度向上に必要な直腸肛門管の解剖学的基盤の確立を目ざす。
α-アミノ置換有機希土類金属錯体の調製と有機合成への展開

二ヨウ化サマリウムを利用し、以下に述べる二つの新規な含窒素化合物合成に利用できる炭素-炭素結合生成反応を見いだした。(1)α-ブロモアミド化合物を用いたReformatsky型反応:不斉炭素をもたない種々のアルデヒドを用い、Barbier型で反応を行ったところ、いずれの場合にも高い収率でerythro体が選択的に得られた。この反応で得られる反応剤自身についても検討を加えるために^1H NMRの測定を行った。ハロゲン化物と二ヨウ化サマリウムをテトラヒドロフラン中、0°Cで反応させると、6.5ppm付近にビニルプロトンが現れ、重水で処理するとこのビニルプロトンは消失し、新たに重水素化生成物のピークが現れた。このことから、この反応剤がエノラートの形で生成していることが確認された。(2)ピロリジン誘導体の合成:ジブロモエタンとヒドラゾンとの混合物に1,2-ジヨードエタンと金属サマリウムとから調製した二ヨウ化サマリウムを作用させるとピロリジン誘導体が得られるという、含チッ素化合物合成の新規な方法を見いだした。この反応では1,2-ジヨードエタンとSm金属より二ヨウ化サマリウムを調製する際に生じるエテンが途中で取り込まれて生成物を与えている。なお生成物はトランス体が選択的に得られている。例えば、1,1-ジブロモエタンと3-フェニルプロパナ-ルのジメチルヒドラゾンとの混合物に対し先に述べたエテンを含む二ヨウ化サマリウムを作用させると、trans-N-ジメチルアミノ-2-(2-フェニルエチル)-5-メチルピロリジンが24%の収率で得られた。
近世都市の人口と家族　－飛騨高山の宗門改帳を史料として－

本研究の目的は、近世都市飛騨高山の歴史人口学・家族社会学・歴史社会学の学際的研究を行うことである。これまで、歴史人口学は精力的に研究を進めてきたが、そのほとんどが農村の史料を用いた研究である。近世都市飛騨高山には約100年にわたる、しかも欠年のない最良の宗門改帳が残存している。すでにこの史料は1960年代に速水融を中心とする慶應義塾大学古文書室において撮影され、マイクロフィルム化されている。その数は70巻に及ぶ。この貴重な史料は故千葉大学名誉教授佐々木陽一郎氏により研究が進められてきたが、氏は2017年急逝され、氏の遺志により申請者の研究室に氏が作成した基礎シート(BDS)が移された。この貴重な資料を整理、データベース化し、近世都市の研究を完成させることが本研究の最終目的となる。本研究の一連の流れは、以下のとおりである。まず、デジタル化された宗門改帳から歴史人口学の手法にのっとり基礎シート(BDS)を作成し、次に基礎シートをパソコンに入力し、データベースを作成する。本研究では、デジタル化された飛騨高山の宗門改帳から基礎シートを作成するという、基本的な作業を3年間で行うことを計画している。初年度である本年は、まず故佐々木陽一郎先生が作成された基礎シートがすでに劣化し始めているので、これのコピーをとり利用可能な状態にした。この作業と同時に、デジタル化された宗門改帳の目録を作成し、目録に従って宗門改帳の紙焼きおよび簡易製本(504冊)を行った。宗門改帳の残存期間は、壱之町54年間、弐之町99年間、三之町7年間である。史料の中で最も残存期間の長い弐之町の宗門改帳から基礎シートを作成することにし、作業を開始している。作業は、故佐々木先生作成の基礎シートと照らし合わせながら、現在歴史人口学で共通のフォーマットの基礎シート(BDS)を新たに作成する形で進めている。デジタルデータを紙焼き,仮製本するのに当初予定していたよりも時間がかかったため,基礎シート作成開始が遅れた。また、高山の宗門改帳の記載方法がかなり複雑なため、基礎シートの作成に時間がかかっている。史料の紙焼きが終わり、仮製本が完成したので、ピッチを上げて基礎シートの作成を行いたい。史料である高山の宗門改帳は、申請者がこれまで扱ってきた史料と異なり、記載方法が複雑で、基礎シート作成にはかなり高度な古文書解読能力と慎重さが要求される。当初予定していたよりもかなり多くの時間を費やさなくてはならないことを覚悟して取り組みたい。また、古文書解読に関して、専門的知識の提供(古文書解読指導)に予算を回し、正確さを担保し、作業効率を図りたい。

デジタルデータの紙焼きおよび仮製本にいくつかの工夫をすることにより、当初計上していた予算よりも低額な金額に抑えることができた。そのため、紙焼きおよび仮製本に充てていた予算を次年度に繰り越すことが可能になった。次年度は、基礎シート作成のための費用にこの予算を計上する。具体的には、史料である高山の宗門改帳の記載方法が複雑であるため、高度な古文書解読知識を必要とする。専門的知識の提供(古文書解読指導)に繰り越し分を充て、正確さを担保しつつ、効率よく作業を進めていきたい。