hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
PD-1/PD-L1系のシグナル遮断による新規がん免疫療法の開発

本年度は、昨年度調製したPD-1およびPD-L1分子のテトラマニを用いた機能実験を行った、まず、PD-1陰性の細胞であるA20にPD-1を強制発現させ、A20/PD-1細胞株を樹立した。同様に、PD-L1陰性の細胞株であるP815にPD-L1を発現させ、P815/PD-L1を樹立した。これら細胞株をそれぞれPD-L1/FcおよびPD-1 Fcキメラタンパク質で染色すると、フローサイトメーター上でPD-1およびPD-L1の発現が確認された。この系に、それぞれ、PD-L1テトトラマーおよびPD-1テトラマーを添加すると、PD-L1/FcおよびPD-1/Fcによる染色性がテトラマータンパク量依存的に減退した。これは、PD-L1テトラマーおよびPD-1テトラマーが効率よくPD-1およびPD-L1に結合することを示している。すなわち、PD-1テトラマーおよびPD-L1テトラマーは物理的にPD-1/PD-L1相互作用を阻害できることが明らかになった。次に、この物理的阻害作用が実際の免疫系において作動するか検討するために、in vitroでの実験を行った。2CT細胞を用いたアロジェニックシステムにおいて、P815およびP815/PD-L1をターゲットとして用いると、P815に比べP815/PD-L1細胞に対しての2CT細胞のエフェクター作用が弱くなっていた。そして、その系にPD-1テトラマーあるいはPD-L1テトラマーを添加すると腫瘍細胞上のPD-L1の効果はなくなった。これは特にサイトカインの産生において顕著であった。次に、同様の検討をシンジェニックな系で行った結果、同様の結果が得られた。また、in vivoでもシンジェニックな系を用いて同様の結果が得られた。以上の結果より、αβT細胞の示す抗腫瘍作用において、PD-1/PD-L1相互作用を阻害することによって、効率的に抗腫瘍効果を増強させることが可能であることが明らかとなった。本年度は、マウスPD-1、マウスPD-L1、ヒトPD-1、ヒトPD-L1の細胞外領域四量体作成を試みた。まず、それぞれのタンパク質の細胞外領域をクローニングして、N末のシグナルペプチドをコードする塩基を除き、C末にBirA被認識塩基配列を挿入したものを大腸菌発現用ベクターに組み込んだ。いずれも、そのままでは発現が確認されなかったため、大腸菌用コドンインデックスの置換、ホルミルメチオニン除去、リボソーム可動性の改良、レアーコドンの除去の操作を行い、これらの組み替えタンパク質を大腸菌1リットル培養当たり100mgから300mgの収率で封入体として産生した。次に、これら封入体を界面活性剤で洗浄し、グアニジン緩衝液に溶解し、グルタチオン添加アルギニン緩衝液に迅速希釈してリフォールディングを行った。タンパク質の精製は陽イオン交換樹脂あるいは陰イオン交換樹脂を用いて行い、最後にゲル濾過にかけ精製標品とした。こうして得られたタンパク質をビオチン化するためにBirAを用いて酵素的にモノビオチン化を行った。次に、PE-標識をしたストレプトアビジンと混合させることにより四量体を作成した。この方法により、マウスPD-1、マウスPD-L1、ヒトPD-1は四量体になることが確かめられた。ヒトPD-L1に関しては、C末を改良したタンパク質を作成し、次年度に四量体を作成予定である。すでに作成された3種の四量体に関しては、次年度において、PEGと共有結合させたり、エピクロールヒドリンで重合させることにより安定化をはかり、PD-1/PD-L1シグナル遮断薬として用いることができるよう工夫する。

以上の結果より、αβT細胞の示す抗腫瘍作用において、PD-1/PD-L1相互作用を阻害することによって、効率的に抗腫瘍効果を増強させることが可能であることが明らかとなった。
沈み込む海洋地殻中の地震波速度異常のメカニズムの解明：室内実験によるアプローチ

海洋地殻の主要な構成岩石の一つであるドレライトを対象に,人工的に内部に亀裂を発生させた岩石試料を用いた室内弾性波速度測定実験を行うことで,岩石のVp/Vs比における応力条件(上載岩圧,間隙圧など),内部の空隙構造(間隙率,亀裂密度など)の依存性を明らかにし,間隙率がある値以上でないと,プレート沈み込み帯で観測されている高Vp/Vs比異常は説明できないことを示した.本研究の成果は,地震学的な観測結果から沈み込み帯深部での間隙水圧と空隙構造の状態を読み解く上で貢献することが期待される.沈み込みプレート境界の地震波速度異常域において発生するスロースリップ(通常の地震よりもゆっくりすべる)や低周波微動など非地震性現象は,海溝型巨大地震の発生と密接に関係しており,その発生メカニズムの解明が期待されている.そこで本研究では,海洋地殻の主要な構成岩石であるはんれい岩および玄武岩を対象に,人工的にダメージを与えた岩石試料について,応力と,P波・S波速度Vp,VsおよびVp/Vs比との関係を調べることにより,速度異常域がどういう状態の岩石で構成され,どのような応力条件にあるのかを明らかにすることを目的とする.この成果は,非地震性滑りの発生モデルを高度化させ,大地震の発生予測へとつながる一歩となると思われる.2015年度は,加熱により人工的に内部に微少亀裂を生じさせたはんれい岩試料について,応力条件下でVp・Vs・Vp/Vs比の測定を実施した.はんれい岩は,加熱温度が高いほど内部に生じる亀裂密度が異なることから,地震波速度における亀裂密度の影響を評価することを目的に,常温(加熱せず),500°C,700°Cの温度条件で加熱した試料の測定結果を比較した.測定は,封圧(岩石試料に外側から働く応力、深さに相当)を50 MPaで一定とし,間隙水圧を49 MPaから0 MPaまで下げ,その後49 MPaまで上昇させるという応力サイクルの過程の何点かで行った.その結果,加熱温度が上がるにつれて,Vp/Vs比が増加する傾向が見られた.また,加熱した試料については,間隙圧が高いほどVp/Vs比は高くなる傾向が見られ,条件によっては観測における速度異常域と同程度の値を示した.また,2015年度は,実験の手法に加え,加熱および軸変形した花崗岩試料について内部の微少亀裂の観察を実施し,その観察手法について検討を行った.さらに,天然の試料として,四万十帯中に見られる玄武岩試料の採取も行った.沈み込みプレート境界の地震波速度異常域において発生するスロースリップ(通常の地震よりもゆっくりすべる)や低周波微動などの現象は,海溝型巨大地震の発生と密接に関係することが指摘されており,その発生メカニズムの解明が期待されている.そこで本研究では,海洋地殻の主要な構成岩石を対象に,人工的にダメージを与えた岩石試料について,応力と,P波・S波速度Vp,VsおよびVp/Vs比との関係を調べることにより,速度異常域がどういう状態の岩石で構成され,どのような応力条件にあるのかを明らかにすることを目的とする.この成果は,非地震性滑りの発生モデルの高度化させ,大地震の発生予測へとつながる一歩となると期待される.2015年度までに実施した,応力下でのVp・Vs・Vp/Vs比の測定実験の結果と前年度までの結果を合わせることによって,本研究で用いたドレライト(粗粒玄武岩)試料について,Vp/Vs比が2.0以上を示す(スロースリップ発生領域での観測値に相当)ための,間隙圧(有効圧)・間隙率条件が明らかとなった.特に,間隙圧が高くてもVp/Vs比が2.0以上にならない間隙率の条件(臨界間隙率)が存在することが示された.このことは,観測されている高Vp/Vs比領域では,高間隙圧だけでなく,間隙率もある程度高いことを示唆する.また,実験試料について,薄片観察による亀裂分布の観察およびその密度の測定を行った.その結果,亀裂密度とVp/Vs比には正の相関が見られた.一方,500°Cと700°Cで加熱した試料を比較すると,間隙率はほぼ等しい(差は0.1%)が,亀裂分布の様子(基質部での網目状亀裂の発達や亀裂の連結性など)に明瞭な違いが見られた.これらの試料では弾性波速度やVp/Vs比には明瞭な違いが見られたことから,これらの性質は,間隙率の値だけでなく,亀裂分布の様子に依存することが確認された.2015年度は,微少亀裂を生成したドレライトについて,応力下でのVp・Vs測定および偏光顕微鏡による亀裂分布の観察および亀裂密度の測定を実施することで,Vp/Vs比と間隙圧・間隙率,および亀裂分布の関係性を明らかにした.これは,交付申請書に記載した「研究の目的」である「速度異常域がどういう状態の岩石で構成され,どのような応力条件にあるのかを明らかにする」に対して,ある一定の成果が得られたことを示す.また,天然の岩石との比較についても,高知県四万十帯で採取した変成玄武岩試料中の脈の観察を実施しており,順調に進んでいるといえる.

軸載荷過程によって微少亀裂を生成した岩石のVp・Vs測定については,軸載荷用のプレスシステムについては構築の目処が立った一方で,軸方向の弾性波速度測定システムについてはいまだ検討中である.以上述べたように,本研究の目的に対しある一定の成果が得られた一方で,翌年度に持ち越しとなった課題もあるという状況を鑑み,全体としてはおおむね順調に進展していると評価する.沈み込みプレート境界の地震波速度異常域において発生するスロースリップ(通常の地震よりもゆっくりすべる現象)や低周波微動などの現象は,海溝型巨大地震の発生と関係する可能性が指摘されており,その発生メカニズムの解明が期待されている.本研究では,海洋地殻の主要な構成岩石のひとつであるドレライト(粗粒玄武岩)を対象に,加熱により人工的に微小亀裂を与えた岩石試料について,応力条件(封圧,間隙圧)と,P波・S波速度Vp, Vs,およびそれらの比Vp/Vsとの関係を調べることにより,速度異常域にどういう状態の岩石が分布し,どのような応力状態(間隙圧)にあるのかを明らかにすることを目的とした.室内実験および試料内部の亀裂の観察,亀裂密度の測定から得られた主な成果は以下の通り:(1) Vp/Vs比が2.0以上(スロースリップ発生領域での観測値に相当)を示すための間隙圧(有効圧)・間隙率条件が明らかとなった.特に,間隙圧が高くても,Vp/Vs比が2.0以上にならない間隙率の条件(臨界間隙率)が存在することが示された.このことは,高Vp/Vs比領域では,間隙率もある程度大きいことが示唆される.(2)亀裂密度とVp/Vs比には正の相関が見られた.一方,500°Cと700°Cで加熱した試料については,間隙率はほぼ等しいがVp/Vs比には差がみられた.これは,亀裂の連続性などの特徴もVp/Vs比に影響を与える可能性を示唆している.最終年度は,主に,亀裂密度データの補充,天然の付加体中の玄武岩中の脈の観察から沈み込み帯プレート境界の地震発生領域付近での海洋地殻内の亀裂分布の特徴の推定(継続中),亀裂分布とVp,Vsの関係に関するモデル(O'Connell & Budiansky, 1974)に基づいた考察に取り組み,成果の最終的なとりまとめを行った.本研究の成果は,近日中に論文投稿する予定である.海洋地殻の主要な構成岩石の一つであるドレライトを対象に,人工的に内部に亀裂を発生させた岩石試料を用いた室内弾性波速度測定実験を行うことで,岩石のVp/Vs比における応力条件(上載岩圧,間隙圧など),内部の空隙構造(間隙率,亀裂密度など)の依存性を明らかにし,間隙率がある値以上でないと,プレート沈み込み帯で観測されている高Vp/Vs比異常は説明できないことを示した.本研究の成果は,地震学的な観測結果から沈み込み帯深部での間隙水圧と空隙構造の状態を読み解く上で貢献することが期待される.2014年度は,(1)加熱および軸載荷過程によって微少亀裂を生成したはんれい岩・玄武岩のVp・Vs測定,(2)微少亀裂分布の観察手法の確立および特徴の把握,(3)応力下でのVp・Vs測定システムの構築を計画していた.このうち,主なものである(1)の加熱した試料による実験の実施,(2)の観察手法の確立および(3)の試料半径方向の測定システムの確立に関しては達成できた.また,計画では翌年度以降に計画していた応力下での測定実験および天然試料の採取も2014年度にある程度実施することができた.一方で,(1)の軸載荷過程による亀裂生成試料の実験については,2014年度は実施できなかった.この原因には主に次の2つが挙げられる.1つは,測定システムの確立も含めて,加熱試料の実験に当初想定していた以上に時間がかかったことである.もう一つの理由は,想定していた軸載荷用のプレスでは,対象の岩石中に十分な亀裂を発生させることが困難である可能性が出てきたため,軸載荷方法から検討し直すことになったことである.
磁気軸受による加振とモード解析を用いたロータクラックの検出とその位置・深さの特定

今年度は,クラックを有するロータの有限要素モデルを構築し,クラックロータの特性を明らかにした.また,振動データからクラック位置および深さを検出する1手法を提案し,シミュレーションと実験による検討を行った.FEMを用いたシミュレーション解析では,まず,これまでの集中定数モデルの場合のクラックロータの特性(非線形共振の発生の有無およびその発生周波数の特徴)と比較検討し,FEMモデルの妥当性を確認した.そして,このFEMモデルを用い,集中定数モデルでは不可能であった加振位置やクラック位置の影響を調べ,その特徴を明らかにした.さらに,FEM解析により得られる周期加振時の振動データに現れるロータクラックの位置の特徴をデータベース化し,実験振動データからクラック位置および深さを検出する方法を検討した.そして,シミュレーション的に模擬実験データを作成し,上記の検出方法を用いてクラックの位置および深さを検出することを検討し,方法の改良を繰り返し行った.実験装置は,メインロータ1つを取り付けた弾性軸を玉軸受で支持した回転軸装置を製作した.加振装置としてボイスコイルモータを作成し,危険速度から離れた回転速度で運転中の回転軸に,ボイスコイルモータから微小な周期的外力を加え,その加振周波数の変化に対する回転軸の振動振幅を計測した.本手法による実験をクラックロータとクラックの無い正常ロータについて行い,その結果をFEMモデルのシミュレーション結果と比較・検討し,FEM解析結果と同様に実験結果でもクラックに起因する非線形共振現象が発生することを確認した.そして,その実験データのスペクトル分布もFEM解析結果と一致することを確かめ,周期外力印可によるクラック検出の有効性を確認した.また,FEM解析で構築したデータベースと実験振動データを比較検討し,クラックの位置および深さの検出を試みた.今年度は,ロータクラックの検出に関する集中定数モデルと有限要素モデルを用いた理論解析,および実験装置の製作と実験を行った.理論解析においては,まず集中定数モデルを用いて,クラックが入ったロータに周期的に加振したときに発生することが予想される共振現象を数値シミュレーションで調べた.そして,それらのクラックに起因する非線形共振を一般的な形で表現し,その発生の有無および振動振幅や位相などの定性的特性を,非線形振動の近似解法であるVan der Polの方法を用いて解析し,その発生原因を体系的にまとめた.つぎに,クラックが入ったロータの有限要素モデルを構築し,集中定数モデルと同様に解析を進めている.現在は,加振位置とクラック位置の関係等を検討中である.実験装置は,1つのメインロータを取り付けた弾性軸の両端を玉軸受で支持した回転軸装置を製作した.加振装置としてまずはボイスコイルモータを選択し,メインロータ以外の位置にボイスコイルモータを設置した.そして,危険速度から離れた回転速度で運転中の回転軸に,ボイスコイルモータから微小な周期的外力を加え,その周波数を変化させ,その周波数の変化に対する回転軸の振動振幅を計測した.本手法による実験を,弾性軸の中央付近に模擬クラックを加工したものとクラックを入れていないものについて行い,その結果を,集中定数モデルを用いて得られた理論解析結果と比較・検討した.理論解析でクラックに起因する非線形共振が発生すると予想した周波数の外力を印可したときに,実験においてもクラックロータでは小さな共振現象が発生することを確認した.そして,そのときの実験データのスペクトル分布も理論解析結果と一致することを確かめ,理論解析で予想したように,外力の周波数の印可によりクラックの有無が確かめられることを実験的にも明らかにした.現在,加振装置を磁気軸受に変更すべく製作中である.今年度は,クラックを有するロータの有限要素モデルを構築し,クラックロータの特性を明らかにした.また,振動データからクラック位置および深さを検出する1手法を提案し,シミュレーションと実験による検討を行った.FEMを用いたシミュレーション解析では,まず,これまでの集中定数モデルの場合のクラックロータの特性(非線形共振の発生の有無およびその発生周波数の特徴)と比較検討し,FEMモデルの妥当性を確認した.そして,このFEMモデルを用い,集中定数モデルでは不可能であった加振位置やクラック位置の影響を調べ,その特徴を明らかにした.さらに,FEM解析により得られる周期加振時の振動データに現れるロータクラックの位置の特徴をデータベース化し,実験振動データからクラック位置および深さを検出する方法を検討した.そして,シミュレーション的に模擬実験データを作成し,上記の検出方法を用いてクラックの位置および深さを検出することを検討し,方法の改良を繰り返し行った.実験装置は,メインロータ1つを取り付けた弾性軸を玉軸受で支持した回転軸装置を製作した.加振装置としてボイスコイルモータを作成し,危険速度から離れた回転速度で運転中の回転軸に,ボイスコイルモータから微小な周期的外力を加え,その加振周波数の変化に対する回転軸の振動振幅を計測した.本手法による実験をクラックロータとクラックの無い正常ロータについて行い,その結果をFEMモデルのシミュレーション結果と比較・検討し,FEM解析結果と同様に実験結果でもクラックに起因する非線形共振現象が発生することを確認した.そして,その実験データのスペクトル分布もFEM解析結果と一致することを確かめ,周期外力印可によるクラック検出の有効性を確認した.また,FEM解析で構築したデータベースと実験振動データを比較検討し,クラックの位置および深さの検出を試みた.
ヘビ類における帰る捕食への適応と進化の比較研究

調査地域でのシマヘビとヤマカガシの食性は主にカエル類で、共にシュレ-ゲルアオガエルとモリアオガエルが中心であった。このほかに胃内容物からアマガエル、トノサマガエルが少数発見されたほか、ヤマカガシではタゴガエルやヒキガエルを捕食していることもあり、シマヘビに比べてヤマカガシは食べているカエルの種類が多かった。一方、シマヘビはカエル以外にトカゲや小型哺乳類も食していた。捕食していたカモルの大きさを2種のヘビの間で比較したところ、ヤマカガシの方がシマヘビよりも相対的に大きなカエルを食べていた。さらに、呑み込んだ方向を調べたところ、シマヘビは大きなカエルの場合は頭部から呑む傾向が強かったのに対し、ヤマカガシではその様な傾向は見られなかった。しかしながら、ヤマカガシはカエルを後肢から呑み込むときは、両後肢をそろえて呑むという、シマヘビには見られない傾向が観察された。呑み込む方向の違いが、どのような理由から起こっているかを確認するため、飼育下で両者の捕食行動をビデオを用いて詳細に観察し比較した。この結果、シマヘビは大きなカエルを捕食する場合には、最初に咬み付いた場所に関わらず、ほとんど頭部から呑み込んだのに対し、ヤマカガシでは呑み込む方向は最初に咬み付いた場所に大きく依存することがわかった。しかしながら、ヤマカガシは、最初に片方の後肢のみに咬み付いた場合、まず両後肢を呑み込んで続いて胴体へとうつっていき、片方の後肢だけを先に呑んでしまうことはほとんどなかった。このように、ヤマカガシは顎を用いてのカエルの扱い方においてシマヘビよりも器用であることが示唆された。一方、野外での電波発信機を用いた採餌行動の調査は現在も継続中であり、特にヤマカガシについて、さらにデータを追加していく必要がある。
多バンドリモートセンシング画像を用いた耕作放棄地の抽出

耕作放棄地は1975年以降増え続けているが、耕作放棄地は様々な形態があり、センサスなどを用いて、耕作放棄地の分布を把握し、その発生要因を分析することは困難である。もし、耕作放棄地の分布が正確に把握できれば、その発生要因の分析が可能となる。このような耕作放棄地の空間的な分布の把握にはリモートセンシングが有効な手法と考えられるが、実用的な方法は開発されていない。本研究では、近年急速に普及が進むハイパースペクトル画像等を用いて、耕作放棄地の抽出方法を開発することを目的とする。ハイパースペクトル画像は、取り扱いが困難であるが、これまでは抽出不可能であった土地被覆の分類も可能となる可能性を持っている。
生体制御機構における対向流輸送システムの機能形態学的研究

1.ハムスタ-、ラット、ツパイ、リス、ウシ、ヤギ、およびブタの精索血管複合体の血管構築について、光顕法、透過型光顕法、走査型電顕法およびレジン鋳型法を用い、形態学的研究を行った。1)ツパイとリスを除いて、精巣動脈と精巣静脈(蔓状静脈叢)の間には、直接の吻合は認められてないが、動脈と静脈の壁は、外膜を共有することによって薄層化されている。2)動静脈壁の疎性結合組織には、リンパ管と自由結合組織性細胞、すなわち肥満細胞とマクロファ-ジが多数存在している。これらの細胞は動静脈壁の透過性を増し、対向流輸送に重要な役割を果たしていると考えられる。3)豚の精索の精巣静脈は4つの型に区分される。これらのなかで、4型静脈は精巣動脈中脈内に門脈を形成し、その内皮は有窓性である。この門脈は動静脈間の物質輸送に最も重要な役割を担うものである。2.ヤギとウシの脳底血管複合体(硬膜上怪網ー海綿静脈洞複合体)の構築とその神経分布を比較検討した。1)ヤギの前硬膜上怪網には頚動脈小体様構造が認められ、その細胞の超微構造は、頚動脈小体のそれと一致した。この構造は本来の頚動脈小体の役割を補完しているものと考えられる。2)硬膜上怪網の動脈内には孤立した神経節細胞が認められる。これらの神経節細胞は近位の滑車神経枝と連絡すると考えられる。3)脳底血管血管複合体の神経分布を明らかにするために、怪網の外側に接して走る三又神経(第V脳神経)と滑車神経(第IV脳神経)にHRPOを順行性に注入したところ、滑車神経に注入した場合のみ、動静脈壁に陽性神経線維と神経細胞体が認められた。しかしながら、これら神経要素の起源はなお不明である。代表的な生体内対向流輸送システムとして、脳底血管複合体(怪網と海綿静脈洞間)および精索血管複合体(精単動脈と蔓状静脈叢間)の動静脈間にみられる形態学的相互関係を検討し、つぎの結果をえた。1.有袋類(オオネズミクイ)、食虫類(スンクス、ツパイ)、げっ歯類(ハムスタ-、ラット、マウス)、有蹄類(シバヤギ、ブタ)、霊長類(カニクイザル)の精索血管複合体では、ツパイを覗き、これまで常存するといわれてきた動静脈間吻合は認められず、これらの同複合体における対向流輸送は、動静脈間の組織間隙によって行われている。2.動静脈間の組織間隙による対向流輸送を効率的に行うために、以下のような対応がなされている。(1)動静脈は接近し、それらの外膜を共有し、中膜は薄層化している。(2)中膜の組織間隙には多数の肥満細胞と大食細胞が存在する。これらの肥満細胞が脱果粒し、そのヒスタミンなどが血管の透過性を増進させ、大食細胞が余剰放出果粒と老化肥満細胞の収集に当ると考えられる。(3)動静脈吻合をもつ唯一の例であるツパイにおいても、精巣動静そのものと蔓状静脈叢間に動静脈吻合はみられず、迂曲部から分枝した精巣動脈の細枝から出された小動脈が形成する小動脈網に動静脈吻合がみられる。この部分の血管壁の中層のうち内皮直下の平滑筋細胞は、特殊な分泌性細胞に分化し、血流制御に重要な役割を果すものと考えられる。

3.シバヤギの硬膜上怪網の動脈壁には、複数の頚頸動脈小体様構造が認められた。これらの小体は透過方電顕所見より、内頚動脈基部に存在するといわれる頚動脈小体と同定される。対向流輸送システムノ代表的なものとして、精索血管複合体および脳底血管複合体の動静脈間にみられる形態学的相互関係を検討し、次の結果をえた。1.精索血管複合体の動静脈壁の疎性結合組織には、リンパ管と自由結合組織性細胞、すなわち肥満細胞とマクロファ-ジが多数存在している。これらの細胞は動静脈壁の透過性を増し、対向流輸送に重要な役割を果たしていると考えられる。2.ツパイとリスの精索には動静脈吻合が認められ、その中膜の平滑筋細胞は分泌小胞を産生し、上皮様配列を示す。この構造は、ヒトの指頭の動脈吻合において、1877年に発見され、1902年に再確認されたHoyerーGrosserの器官に類似した構造である。本器官は動静脈吻合の血流を制御し、精索血管複合体における対向流輸送に関与していると考えられる。3.ヤギの前硬膜上怪網には頚著脈小体様構造が認められ、その細胞の超微構造は、頚動脈小体のそれと一致した。この構造は本来の頚動脈小体の役割を補完しているものと考えられる。4.硬膜上怪網の動脈内には孤立した神経節細胞が認められる。これらの神経節細胞は近位の滑車神経枝と連絡している。5.脳底血管血管複合体の神経分布を明らかにするために、怪網の外側に接して走る三又神経(第V脳神経)と滑車神経(第IV脳神経)にHRPOを順行性に注入したところ、滑車神経に注入した場合のみ、動静脈壁に陽性神経線維と神経細胞体が認められた。しかしながら、これら神経要素の起源はなお不明である。
悪性高熱症の発症予防に関する実験的研究

悪性高熱症(MH)の遺伝子解析ではRYR1の47エクソンp.Arg2508Cys変異が多い.この変異のある培養骨格筋細胞のCa動態はRYR1刺激薬に対する感受性が高い.MHの素因があり,RYR1刺激薬への感受性も高く静止時のCa2+が上昇しているヒト培養骨格筋細胞で,MH素因はあるがCa2+濃度が正常な骨格筋培養細胞と,MHの素因がなく正常な細胞について,Ca2+動態とダントロレンの影響を検討した.MH素因がある細胞では,15μMダントロレンの前投与によりカフェインの用量反応曲線が右方に偏位し,EC50は上昇したことから,ダントロレンの予防投与が有効である可能性が示唆された.1培養骨格筋細胞の研究p.Arg2508Cys変異ヒト培養骨格筋細胞を使用し,Ca動態とダントロレンの影響を検討した.測定はカルシウム蛍光指示薬Fura2/AM5μMを負荷後,HBSSで洗浄した後,340,380nmの2波長で励起し,測定は510nm,37°Cで行い,340/380波長比からCa2+濃度へ換算した.1)ダントロレンの骨格筋細胞のカルシウム濃度抑制効果についてカルシウム濃度低下は32.2±13.6nM(n=27)で、悪性高熱症の素因がない患者に比較して有意に高値であった.2)CaffeineのEC50に対するダントロレン2分間前処置の抑制効果ダントロレン5μMでは1.31倍,15μMでは1.55倍であった.3)Caffeine刺激によるratio-時間曲線の面積について,HBSSのCa2.5mMの時に対するCa freeの比は,MH素因があり静止時Ca2+濃度が高い細胞では0.376±0.122,MH素因がない正常ヒト培養骨格筋細胞にくらべSRコンテントの減少が認められた.4)Caffeine刺激のratio-時間曲線の面積に対するダントロレン50μMの作用は1.93±0.24, MH素因がない正常ヒト培養骨格筋細胞では0.94±0.28で,ダントロレン50μMにより,SRのカルシウムコンテントが増加した可能性が示唆された.(値はmean±SD)2HEK細胞の研究p.Arg2508Cys変異RYR1遺伝子導入HEK293細胞(RYR1だけでDHPRは存在しない)細胞でも同様にカルシウム動態とダントロレンの作用の検討を行った.培養骨格筋細胞と同じように、RYR1刺激薬であるCaffeineや4-CMCに対する感受性の亢進が確認された.ダントロレンの抑制作用は,10μM2分間の前投与でCaffeineのEC50を増加させた.悪性高熱症(MH)の遺伝子解析ではRYR1の47エクソンp.Arg2508Cys変異が多い.この変異のある培養骨格筋細胞のCa動態はRYR1刺激薬に対する感受性が高い.MHの素因があり,RYR1刺激薬への感受性も高く静止時のCa2+が上昇しているヒト培養骨格筋細胞で,MH素因はあるがCa2+濃度が正常な骨格筋培養細胞と,MHの素因がなく正常な細胞について,Ca2+動態とダントロレンの影響を検討した.MH素因がある細胞では,15μMダントロレンの前投与によりカフェインの用量反応曲線が右方に偏位し,EC50は上昇したことから,ダントロレンの予防投与が有効である可能性が示唆された.1培養骨格筋細胞の研究: p.Arg2508Cys変異ヒト培養骨格筋細胞と同様にMH素因があり静止時Ca2+濃度が高い細胞,MH素因があるが静止時Ca2+濃度が正常である細胞,MH素因がない正常ヒト培養骨格筋細胞を解凍し,培養後,測定用の35mmのノンコートガラスボトムディッシュに撒き,80%コンフルエントの状態で培地を2%FBS加DMEN/F12に変更しmyotubesへの分化を誘導した.培地変更後710日で測定を行った.その結果,MH素因があり静止時Ca2+濃度が高い細胞はダントロレン50μMにより,SRのカルシウムコンテントが増加した可能性が示唆された.(2013年のヨーロッパ麻酔学会で発表予定)2スキンドファイバーによる研究:骨格筋線維からサポニンによりスキンドファイバーを作成し,CICR(Ca-induced Ca release)速度を測定した.その結果,MH素因があるCICR亢進症例ではダントロレン50μMのCICR速度抑制比率は0.767で,CICR速度を正常閾にするだけの作用ではなかった.(2013年の日本麻酔科学会で発表予定)今後の研究の推進方策等: p.Arg2508Cys変異RYR1遺伝子導入HEK293細胞(RYR1だけでDHPRは存在しない)細胞でも同様にカルシウム動態とダントロレンの作用について測定を行う予定である.本邦の悪性高熱症(MH)の素因の遺伝子解析では,RYR1の47エクソンp.Arg2508Cys変異が多くの症例で発見されている.この変異を持った培養骨格筋細胞のカルシウム動態はRYR1刺激薬に対する感受性の亢進が認められ,静止時の骨格筋細胞内のCa2+濃度も高く,SRのCa2+濃度の減少も示唆される.MHの素因があり,RYR1刺激薬への感受性も高く静止時のCa2+が上昇しているヒト培養骨格

筋細胞で,MH素因はあるがCa2+濃度が正常な骨格筋培養細胞と,MHの素因がなく正常な細胞について,Ca2+動態とダントロレンの影響を検討した.その結果,ダントロレンはすべての細胞でCa2+濃度を低下させたが,低下率は静止時のCa2+濃度が高いp.Arg2508Cys変異細胞で大きく,ダントロレン投与により,一時的にCa2+濃度が増加した.またMH素因がある細胞では,15μMダントロレンの前投与によりカフェインの用量反応曲線が右方に偏位し,EC50は上昇した.MHの素因がある患者由来の細胞の一部では,ダントロレンの予防投与が有効である可能性が示唆された.医歯薬学昨年度は,この研究のメインテーマであるp.Arg2508Cys変異RYR1遺伝子の培養骨格筋細胞とp.Arg2508Cys変異RYR1遺伝子導入HEK293細胞のCa動態とそれに対するダントロレンの抑制作用について検討を行った.実験が順調に進捗したため,計画以上に順調である.順調に進捗している.ヒト培養骨格筋を使用した細胞(RYR1とDHPRの相互採用が存在する)のカルシウム動態の研究はSOCE(storeoperatedCa2+entry)に対する検討を残している.今年度は,SOCEに対するダントロレンの抑制作用の有無とp.Arg2508Cys変異RYR1遺伝子の培養骨格筋細胞についての研究を行う予定である.p.Arg2508Cys変異ヒト培養骨格筋細胞(RYR1とDHPRが存在)とp.Arg2508Cys変異RYR1遺伝子導入HEK293細胞(RYR1だけでDHPRは存在しない)細胞でSOCE (store operated Ca2+entry)とそれに対するダントロレンの作用について検討を行う予定である.p.Arg2508Cys変異RYR1遺伝子導入HEK293細胞(RYR1だけでDHPRは存在しない)細胞でも同様にカルシウム動態とダントロレンの作用について測定を行う予定である.HEK細胞とヒト培養骨格筋細胞とで比較することで,DHPRとRYR1の相互作用とダントロレンとの関連について研究を行い,ダントロレンの作用機序の解明を試みる.また,MH素因者に対するダントロレンの予防投与の有用性について検討を行う.昨年度購入予定の消耗品費が予想外に少額で済んだためで,今年度は昨年予定のものも含めて購入するので収支は釣り合う予定.消耗品費に充当予定.経費については前年度とほぼ同様の支出を行う予定である.すなわち,経費の使途としてはほとんどが実験に必要な消耗品関係である.初年度には当初必要と見込んだ消耗品の消費量が予想外に少なかったためにやや経費支出が少なかったが本年度はほぼ予想通り推移すると思われる.
致死的疾患における有効な心理的取り組み方(コーピング)に関する研究-prospective study-

難治がん患者の有効なコーピングを明らかにする目的で、国立がんセンター東病院呼吸器科に新規入院した進行非小細胞肺がん患者を対象として、コーピングと感情状態の関連をprospectiveに検討した。適格症例のうち129名から初回調査参加への同意が得られたが、告知後6ヶ月時点の追跡調査が施行できた症例は84名であった。84症例の背景(告知後の初回調査時)は、平均年齢61+9(SD)歳、男性69%、10年以上の教育経験を有するもの54%、雇用状況は退職者が30%と最も多く、91%が既婚・再婚者であった。医学的背景(告知後の初回調査時)は、腺がんが71%と最も多く、臨床病期はIV期が51%、performance Statusは1以上(何らかの身体的機能障害を有する)の患者が88%で、痛みを有する患者が54%、呼吸困難感を有する患者が52%であった。初回調査は告知後初期治療前に行われ、病名告知から初回調査までの平均期間は18+12(SD)日であった。病名告知から2ヶ月後追跡調査までの平均期間は71+15(SD)日、6ヶ月後追跡調査までの平均期間は177+16(SD)日であった。初回調査時のコーピングと2ヶ月後追跡調査時の感情状態との関連を検討したところ、Fighting spirit(前向き)のみが抑うつおよび不安と有意な逆相関p<0.01)を示した一方で、抑うつ、不安と最も高い正相関を示したコーピングはHelplessness/Hopelessness(悲観)であった(p<0.05)。同様に、初回調査時のコーピングと6ヶ月後追跡調査時の感情状態との関連を検討しても同様の結果が得られた。また、初回調査時における年齢、教育経験、日常生活上の身体的機能の状態(Performance status)、疼痛の程度および呼吸困難感の程度を調整しても、これらの結果はほぼ同様であった。155名の適格症例のうち134名から調査参加への同意が得られた(参加率86%)。対象症例の背景は、平均年齢62±9(SD)歳、男性75%、10年以上の教育経験を有するもの51%、雇用状況は退職者が34%と最も多く、87%が既婚・再婚者であった。医学的背景は、腺がんが64%と最も多く、臨床病期はIV期が49%、Performance statusは1以上(何らかの身体的機能障害を有する)の患者が90%で、痛みを有する患者が50%、呼吸困難感を有する患者が49%であった。初回調査は入院後初期治療前に行われ、病名告知から初回調査までの平均期間は19±19(SD)日であった。継続調査の拒否、全身状態の悪化、死亡、転院などのために21名が脱落したため、113名が追跡調査に参加した。病名告知から追跡調査までの平均期間は71±15(SD)日であった。初回調査時のコーピングと追跡調査時の感情状態との関連を検討したところ、Fighting spirit(前向き)のみが抑うつおよび不安と有意な逆相関(p<0.01)を示した一方で、抑うつ、不安と最も高い正相関を示したコーピングはHelplessness/Hopelessness(悲観)であった(p<0.01)。また、年齢、教育経験、日常生活上の身体的機能の状態(Performance status)、疼痛の程度および呼吸困難感の程度を調整しても、結果は同様であった。これらの結果より、進行非小細胞肺がん患者においては、Fighting spiritが高く、Helplessness/Hopelessnessが低いコーピングが安定した感情状態と関連していることが示され、がん告知後のコーピングはその後の精神的苦痛の予測因子となりうることが示唆された。

初回調査時のコーピングと2ヶ月後追跡調査時の感情状態との関連を検討したところ、Fighting spirit(前向き)のみが抑うつおよび不安と有意な逆相関p<0.01)を示した一方で、抑うつ、不安と最も高い正相関を示したコーピングはHelplessness/Hopelessness(悲観)であった(p<0.05)。同様に、初回調査時のコーピングと6ヶ月後追跡調査時の感情状態との関連を検討しても同様の結果が得られた。また、初回調査時における年齢、教育経験、日常生活上の身体的機能の状態(Performance status)、疼痛の程度および呼吸困難感の程度を調整しても、これらの結果はほぼ同様であった。
ケモテクノロジーが拓くユビキチンニューフロンティア

ユビキチン系はタンパク質の分解、細胞内局在、相互作用を調節することで多彩な生命現象を時空間的に制御する可逆的な翻訳後修飾系である。近年、ユビキチン修飾の様式が想定外に多様かつダイナミックであることが明らかになり、各修飾様式が制御する生命現象の理解のために、遺伝学的手法に依らない新機軸の解析・介入手法が渇望されている。本領域ではユビキチン研究者と生命科学指向の有機化学者を結集し、ケモテクノロジーを利用したユビキチン系制御ツールを開発することにより、ユビキチン研究を革新するとともに、新しい細胞機能制御技術の創出に挑戦する。本領域は異分野研究者の連携が重要となるため、総括班は領域全体の研究体制を整備し、領域の円滑かつ効率的な運営を進める。2018年度は以下の活動を実施した。(1)総括班会議:2019年1月14日に開催し、それまでの活動報告と以後のスケジュールを確認し、研究支援体制、国際活動支援や総括班予算の使途などについて協議することで今後の領域の運営方針を決定した。(2)領域全体会議:キックオフシンポジウム(2018年9月18日)では、本領域が目指す有機化学と連携した新時代のユビキチン研究について紹介し、公募研究を幅広く募った。第1回領域班会議はユビキチン研究会、若手の会と共催(2019年1月14日16日)し、ユビキチン研究者と有機化学者の交流の場とするとともに、次世代を担う若手研究者の発掘の場とした。(3)共同研究推進活動:各計画研究が参加する3つ共同研究を設定し、質量分析解析、低分子化合物スクリーニング、ペプチド合成、構造解析など各研究支援拠点の立ち上げと連携体制を確立した。(4)広報活動:本領域のホームページを開設し、領域の研究活動を紹介した。日本分子生物学会年会、日本生化学会、日本薬学会において本領域の関連シンポジウム・ワークショップを開催した。当初計画していた班会議・総括班会議開催、ホームページの開設、研究支援用の質量分析計の設置、領域内共同研究はいずれも予定通り実施した。特に、ユビキチン研究者とケミカルバイオロジーの研究者が連携した異分野融合研究の推進に留意して活動した。第1回領域班会議はユビキチン研究会および若手の会と共催とした結果、計131名の参加者(領域外70名)があり、ユビキチン研究者と有機化学者が密な議論を交わすことができ、新たな共同研究の種が多々産まれたという点で大変有意義だった。また、先だって開催した領域キックオフミーティングは計123名の参加者のうち、企業の研究者が21名含まれており、ユビキチン創薬への期待が高いことが改めて確認された。一方、第41回日本分子生物学会年会、第91回日本生化学会、日本薬学会139回年会において本領域の関連シンポジウム・ワークショップを開催し、いずれも盛況であった。総括班が指揮する領域内共同研究は、ユビキチン関連分子のリガンドスクリーニング・阻害剤開発・構造解析・プロテオーム解析・タンパク質化学合成など、計14件の連携研究が実施され、研究成果も得られつつある。このように総括班の活動はおおむね順調に進展していると判断される。公募研究が開始する2019年度は、4月にホームページを更新、6月に領域班会議を開催することで、計画研究との連携を迅速に進める。一方、若手研究者の海外派遣を含む国際活動支援を開始するとともに、関連学会においてシンポジウム・ワークショップを企画し本領域の研究活動を宣伝する。具体的には以下の項目を遂行する。(1)領域運営会議:6月と12月に総括班会議を実施するほか、計画研究班員が3ヶ月ごとに会し、各自の研究成果と研究方法を共有すると共に、国内外の学術動向を議論し、以降の研究計画の調整および研究・運営方針の策定を行う。(2)領域班会議:本年度は6月と12月に領域班会議を開催する。6月の領域班会議は公募研究紹介を主とし、本領域の方針と共同研究推進活動などについて連絡する。12月の領域班会議は3日間の日程で計画研究班員、公募研究班員が成果発表を行い、個々の研究計画について議論する。(3)共同研究推進活動:各計画研究が参加する3つ共同研究を引き続き実施するとともに、質量分析解析、低分子化合物スクリーニング、ペプチド合成、構造解析などの研究支援を班員に周知、領域内共同研究活動を斡旋する。(4)若手育成支援:2019年度は12月の領域班会議に先だち「若手の会」を開催し、次世代研究者の交流・育成を図る。(5)国際活動支援:若手研究者の短期海外派遣(12か月程度、3名)を実施する。また、若手研究者の国際学会参加を促進させるため海外旅費支援を実施する(6名程度)。(6)広報活動:本領域のホームページ(HP)を充実させるとともに、本領域の研究活動を網羅したニュースレターを発刊する。また、国内の主要学会(日本ケミカルバイオロジー学会や日本分子生物学会など)において共催シンポジウムを開催し、本領域の研究活動を宣伝する。

本領域ではユビキチン研究者と生命科学指向の有機化学者を結集し、ケモテクノロジーを利用したユビキチン系制御ツールを開発することにより、ユビキチン研究を革新するとともに、新しい細胞機能制御技術の創出に挑戦する。本領域は異分野研究者の連携が重要となるため、総括班は領域全体の研究体制を整備し、領域の円滑かつ効率的な運営を進める。2018年度は以下の活動を実施した。(1)総括班会議:2019年1月14日に開催し、それまでの活動報告と以後のスケジュールを確認し、研究支援体制、国際活動支援や総括班予算の使途などについて協議することで今後の領域の運営方針を決定した。(2)領域全体会議:キックオフシンポジウム(2018年9月18日)では、本領域が目指す有機化学と連携した新時代のユビキチン研究について紹介し、公募研究を幅広く募った。第1回領域班会議はユビキチン研究会、若手の会と共催(2019年1月14日16日)し、ユビキチン研究者と有機化学者の交流の場とするとともに、次世代を担う若手研究者の発掘の場とした。(3)共同研究推進活動:各計画研究が参加する3つ共同研究を設定し、質量分析解析、低分子化合物スクリーニング、ペプチド合成、構造解析など各研究支援拠点の立ち上げと連携体制を確立した。(4)広報活動:本領域のホームページを開設し、領域の研究活動を紹介した。日本分子生物学会年会、日本生化学会、日本薬学会において本領域の関連シンポジウム・ワークショップを開催した。当初計画していた班会議・総括班会議開催、ホームページの開設、研究支援用の質量分析計の設置、領域内共同研究はいずれも予定通り実施した。特に、ユビキチン研究者とケミカルバイオロジーの研究者が連携した異分野融合研究の推進に留意して活動した。第1回領域班会議はユビキチン研究会および若手の会と共催とした結果、計131名の参加者(領域外70名)があり、ユビキチン研究者と有機化学者が密な議論を交わすことができ、新たな共同研究の種が多々産まれたという点で大変有意義だった。また、先だって開催した領域キックオフミーティングは計123名の参加者のうち、企業の研究者が21名含まれており、ユビキチン創薬への期待が高いことが改めて確認された。一方、第41回日本分子生物学会年会、第91回日本生化学会、日本薬学会139回年会において本領域の関連シンポジウム・ワークショップを開催し、いずれも盛況であった。総括班が指揮する領域内共同研究は、ユビキチン関連分子のリガンドスクリーニング・阻害剤開発・構造解析・プロテオーム解析・タンパク質化学合成など、計14件の連携研究が実施され、研究成果も得られつつある。このように総括班の活動はおおむね順調に進展していると判断される。公募研究が開始する2019年度は、4月にホームページを更新、6月に領域班会議を開催することで、計画研究との連携を迅速に進める。一方、若手研究者の海外派遣を含む国際活動支援を開始するとともに、関連学会においてシンポジウム・ワークショップを企画し本領域の研究活動を宣伝する。具体的には以下の項目を遂行する。(1)領域運営会議:6月と12月に総括班会議を実施するほか、計画研究班員が3ヶ月ごとに会し、各自の研究成果と研究方法を共有すると共に、国内外の学術動向を議論し、以降の研究計画の調整および研究・運営方針の策定を行う。(2)領域班会議:本年度は6月と12月に領域班会議を開催する。
電磁界を考慮した半導体デバイス解析による郡遅延特性の改善

群遅延特性の均一化はUWB(3.110.6GHz帯)など超広帯域無線システムの実現において重要な課題である。そこでまず、群遅延解析を行うため電磁界を考慮した半導体デバイス解析を、FDTD法をベースにした電磁界・半導体同時シミュレーションおよび実験に基づいて行った。開発した手法の有効性を確認するため、表面波導波路の一種であるPDTL線路とHEMT素子が実装された60GHz帯増幅器モジュールの解析を行い、解析結果と実験結果が良く一致することを確認した。そこで、長ゲートフィンガー構造のInGaP/GaAs HBTならびにAlGaN/GaN HEMTに対する電磁界・半導体同時シミュレーションを実施し、この結果と実験結果を比較した。これにより、高精度で電磁界・半導体同時解析を行うことができ、群遅延を含めて能動素子のマイクロ波ミリ波諸特性が精度良く解析できることが実証された。さらに、集中定数型回路ならびに分布定数形回路の有する群遅延特性を把握し、群遅延特性に優れる完全分布定数形回路によりミリ波帯スイッチMMICを実現した。また平面自己補対アンテナの最小寸法と超広帯域特性との関係を明らかにした。これらの知見を総合し、UWB用自己補対アンテナを駆動するアクティブバラン付きInGaP/GaAs HBT超広帯域MMIC増幅器ならびに群遅延補償器を設計試作し、良好な群遅延補償特性を得た。なおこの群遅延補償器は右手・左手混成系回路と右手系回路の並列接続回路から実現されている。FDTD法によりマックスウェル方程式と半導体方程式群を組み合わせた統合電磁界・半導体解析手法を開発した。この解析手法の精度確認のため、種々のフィンガー長を有するInGaP/GaAsHBT素子を試作し、オンウエハー計測による実験結果と開発した統合電磁界・半導体解析手法によるシミュレーション結果とを比較した。この結果、有能電力利得と最大安定利得との転換周波数など半導体デバイスの超高周波特性を把握する上で重要なパラメータが正確にシミュレーションにより再現できることが明らかとなった。同様な実験とシミュレーションをGaNHEMTについても実施し、両者が良く一致していることを確認した。一方超広帯域能動素子回路と超広帯域受動素子回路の群遅延特性を把握するため、UWB用InGaP/GaAsHBT MMIC超広帯域増幅器ならびにUWB用ブロードサイド4結合線路超広帯域バンドパスフィルタを試作し、群遅延特性を評価した。これらの群遅延を求める簡易計算式を導出し、フィルタに関して解析を実施した結果、測定Sパラメータから得られた実験値と良い一致を得た。このような群遅延特性は凹型の周波数特性を有するが、これを補償するための凸型の周波数特性を有する群遅延補償回路を、パスバンドとストップバンドを有する右手・左手系複合回路に並列にインダクタを設けることにより実現する方法を提案した。一例としてアクティブバラン付きMMIC増幅器の群遅延補償MMICを設計試作し、良好な群遅延補償特性を実現した。今年度は群遅延解析を行うため電磁界を考慮した半導体デバイス解析を、TDFD法をベースにした電磁界・半導体同時シミュレーションならびに実験に基づき行った。開発した手法の有効性を確認するため、先ず、表面波導波路の一種であるPDTL線路とHEMT素子が実装された60GHz帯増幅器モジュールのシミュレーションを行い、解析結果が実験結果を良く説明できることを確認した。これに基づき、長グートフィンガー構造のInGaP/GaAsHBTならびにAlGaN/GaN HEMTに対する電磁界・半導体同時シミュレーションを実施し、この結果と実験結果を比較した。加えて、集中定数型回路ならびに分布定数形回路の有する群遅延特性を把握し、群遅延特性に優れる完全分布定数形回路によりミリ波帯スイッチを実現した。また受動素子であるアンテナの最小寸法と超広帯域特性との関係を明らかにし、今後のアンテナ素子による群遅延特性発生メカニズム解明の糸口を見出した。
植物性食品中の血栓症予防物質の検索に関する研究

血栓症を予防する物質の検索を、広く植物性食品関連の物質を対照として行った。スクリーニングは、ヒト血液のPRP(多血小板血漿)のinvitro系における血小板凝集作用を、惹起物質としてコラーゲンまたはADPを用い、試料による凝集の阻害効果を調べた。供試試料は、野菜ジュース48種および食品香気の成分であるピラジン類緑化合物30種を用いた。1.野菜ジュース類の血小板凝集阻害作用(1)強い血小板凝集阻害効果を示した野菜(10倍希釈で50%以上阻害)ニンニク,シシトウ,サヤインゲン,ホウレン草,カブ,アスパラガス,セロリー,アシタバ,ニラ,パセリ,トマト,ネギ,シソ(2)ホウレン草の血小板凝集阻害作用効果の強かったホウレン草については、品種および部位による阻害効果を調べた所、東洋種>洋種,葉身>葉柄であった。これは蓚酸含有量と相関する傾向であり、今後検討を要するものと考えられた。またホウレン草の摂食による血小板凝集への影響を調べた所、4名の被検者のうち3名で効果が認められた。2.ピラジン類縁体の血小板凝集阻害作用(1)置換アルキル基の数は、多い方が強く、1置換<2置換<3置換であるが、4置換は3置換と同等か、あるいはやや弱い。(2)置換位置に関しては、3置換体また2置換体にあってもあまり違わない。(3)アルキル基の違いでは、大きい程強い。(4)6員環のピラジンの方が5員環のピラゾールより強い。(5)置換基は、O-アルキルはアルキルと余り変らないが、S-アルキル,カルボン酸,ケトンなどはむしろ弱める。
小口径交互配列静磁場人工血管の開発に関する基礎的研究

1)交互配列静磁場が血管内皮細胞および血管平滑筋へ与える影響を検討した.雑種成犬の頸動脈および大腿動脈を用い,air-dry法にて内皮傷害を作成した.{実験1}縞状にN,S極が配列した磁化シートを2種類(磁場の強さは280と360ガウス)使用し,内皮傷害の長さを40mmとした.この磁化シートの血管への充て方で磁場の配向による影響をみた.即ち,磁場の配向が血管長軸方向と平行,あるいは垂直方向となるように充てた.対照として非磁化シートを使用した.{実験2}3種類の異なった配向を有するリング状マグネット(内径6mm,外径8mm,幅3.5mm)を作成し,磁場の配向の相違による影響を検討した.リング内に血管を通した時の血流方向をZ軸とし,血流に直交する平面をXY平面とすると,No.1のリングはZ軸方向に着磁,No.2はXY平面に水平に方向に着磁(円周上にS,N極が1極ずつ,合計2極配列),No.3はXY平面方向円周上に10極着磁させた.対照として同質の非磁化リングを使用した.内皮傷害の長さは17.5mmとした.{結果}実験1では,有意差を認めなかったものの,マグネット群が対照群より内皮の再生が良好であった.磁場の配向による影響にも有意差を認めなかったが,S,N極が血管円周上に配列している群のほうが,S,N極が血管の長軸方向に配列している群より,内皮の再生が良好であった.実験2ではNo.1群は対照群とNo.3群に比して有意に内皮再生が良好であった.有意差を認めなかったが,他のマグネット群も対照群より内皮の再生が良好であった.組織DNA濃度はマグネット群が対照群より少ない傾向にあった.これは,マグネット群の内皮再生が速いため,平滑筋の増殖が抑制された結果と考えられた.2)交互配列静磁場人工血管の開発およびその評価は一般研究B(研究代表者:阿部正紀,東京工業大学))で検討中である.1)交互配列静磁場が血管内皮細胞および血管平滑筋へ与える影響を検討した.雑種成犬の頸動脈および大腿動脈を用い,air-dry法にて内皮傷害を作成した.{実験1}縞状にN,S極が配列した磁化シートを2種類(磁場の強さは280と360ガウス)使用し,内皮傷害の長さを40mmとした.この磁化シートの血管への充て方で磁場の配向による影響をみた.即ち,磁場の配向が血管長軸方向と平行,あるいは垂直方向となるように充てた.対照として非磁化シートを使用した.{実験2}3種類の異なった配向を有するリング状マグネット(内径6mm,外径8mm,幅3.5mm)を作成し,磁場の配向の相違による影響を検討した.リング内に血管を通した時の血流方向をZ軸とし,血流に直交する平面をXY平面とすると,No.1のリングはZ軸方向に着磁,No.2はXY平面に水平に方向に着磁(円周上にS,N極が1極ずつ,合計2極配列),No.3はXY平面方向円周上に10極着磁させた.対照として同質の非磁化リングを使用した.内皮傷害の長さは17.5mmとした.{結果}実験1では,有意差を認めなかったものの,マグネット群が対照群より内皮の再生が良好であった.磁場の配向による影響にも有意差を認めなかったが,S,N極が血管円周上に配列している群のほうが,S,N極が血管の長軸方向に配列している群より,内皮の再生が良好であった.実験2ではNo.1群は対照群とNo.3群に比して有意に内皮再生が良好であった.有意差を認めなかったが,他のマグネット群も対照群より内皮の再生が良好であった.組織DNA濃度はマグネット群が対照群より少ない傾向にあった.これは,マグネット群の内皮再生が速いため,平滑筋の増殖が抑制された結果と考えられた.2)交互配列静磁場人工血管の開発およびその評価は一般研究B(研究代表者:阿部正紀,東京工業大学))で検討中である.交互配列静磁場の動脈内皮細胞再生促進能を検討した。〔方法〕16頭の雑種成犬の両側頸動脈(N=32)を用い,頸動脈の末梢側に作成した穿通孔から剥離子を挿入し,長さ5cmにわたって合計6回血管内腔を擦過し,内皮細胞を剥離した.一側の頸動脈を静磁場プラスチックフィルム(0.2μの多数の微小磁性体が交互かつ多層に配列,垂直磁場は平均約250ガウス)で巻き(実験群:N=20),他側はそのままとした(対照群:N=12).内皮損傷後1,2,4,5,6,8週後に頸動脈を摘出し,光顕(HE染色,フォンヴィルブランド因子染色)および走査電顕にて動脈内腔を観察した.各検体の内皮損傷部分両端から1cmの部分を近位部および遠位部とし,それぞれ1cm離した中央部1cmの部分を中央部とし,部位別の内皮の再生状態を検討した.〔結果〕a.損傷直後(N=2):損傷を加えた直後の内皮が全面にわたって完全に剥離していることを確認した。