hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
早産リスク評価における、エラストグラムの有用性の検討

正期産妊婦98例の、頸管長、エラストと内診所見の3つの指標を測定した。結果、陣痛発来予測において、10日以上の予測にはエラストが、3日程度の予測には頸管長が優れていた。また、入院を要した切迫早産妊婦と対照妊婦の頸管硬度を測定し520データを集積した。結果、2群間で硬度比(中間部/内子宮口)は有意に異なり、カットオフ値は1.5で、オッヅ比は2.48(95%信頼区間:1.28-4.79)であった。この成果は早産リスク評価に有用と考えられた。直接的に子宮頸管硬度を測定できる試作機を作成した。のべ100例の頸管硬度測定を行い、検者内誤差は0.650、検者間誤差は0.641、精度は中等度であった。本研究は、超音波のエラストグラフィー機能を用いて、内診にかわる客観的な子宮頸管硬度評価を行うことで、切迫早産例の予後判定に有用な診断法となりうるかを検討するものである。それにはまず、エラストグラフィーから得られる組織の硬度が相対評価である点を克服する必要がある。あらかじめ硬度のわかっているシリコンゴムを経膣超音波プローベ周囲に装着して、その物質と頸管の硬度の差を解析することにより硬度を絶対値として数値化することとした。はじめに、本研究の主旨を病院内倫理委員会に諮り承認を得た。婦人科疾患で摘出された子宮を用い、子宮頸管の硬度を、硬度計とエラストグラフィーで評価した。結果、二つの測定法には相関関係があることを確認した。次に、妊娠37週以降の妊婦50人程度を対象として、エラストグラフィーと内診を施行した。子宮頸管前唇、後唇、頸管腺の部位について得られた硬度値と内診での硬さの評価を比較したところ、頸管腺部分でのみ有意な傾向にあることが分かった。そのため、頸管腺をさらに、内子宮側、中間部、外子宮口の3つの部分に分けて評価することとした。この結果に基づいて、妊娠22週以降36週未満の切迫早産妊婦と対照群として同時期の切迫症状のない妊婦に対し、同様に頸管腺を3つの部分に分けて硬度を測定し症例の集積を行っている。これと並行して、経腟的に使用可能とするべく硬度計の試作機を作成している。直接的に子宮頸管硬度を測定できれば、エラストグラフィーによる硬度推定に勝ると考えられるが、臨床的に用いるにはまだいくつかの課題があるため、改良を重ねているところである。エラストグラフィーから得られる組織の硬度が相対評価であるため、硬度既知のシリコンゴムを経膣超音波プローベ周囲に装着して、その物質と頸管の硬度の差を解析することにより硬度を絶対値として数値化した(以後、補正硬度と呼ぶ)。婦人科疾患で摘出された子宮の頸管部の硬度を、硬度計とエラストグラフィーで評価したところ、二つの測定法には相関関係があることを確認した。子宮頸管前唇、後唇、頸管腺の部位について得られた補正硬度値と内診での硬さの評価を比較したところ、頸管腺部分でのみ有意な傾向にあることが分かった。そのため、頸管腺をさらに、外子宮側、中間部、内子宮口の3つの部分に分けて評価することとした。妊娠37週以降の妊婦に関して、上記3点の頸管腺の補正硬度を測定した。測定後の10日以内に分娩に至った群、至らなかった群に分けて検討したところ、3点とも有意差を持って異なった。このことは、硬度値から妊娠継続期間を予測できる可能性を示唆している。この結果に基づいて、妊娠22週以降36週未満の切迫早産妊婦と対照群として同時期の切迫症状のない妊婦に対し、同様に硬度を測定し症例の集積を行っている。これと並行して、直接的に子宮頸管硬度を測定できる、経腟的に使用可能な硬度計の試作機を作成する予定である。測定時の圧迫による頸管部の出血が予想されるため、最小限の圧で測定できるよう設計を変える予定である。安全かつ十分な再現性を持って測定できることが可能となれば、作製後に病院内倫理委員会に諮り承認を得ていく。はじめに、本研究は院内倫理委員会に承認を得た。次に、妊娠37週以降の妊婦95例を対象として、頸管長測定、エラストグラフィーと内診(ビショップスコア)の3つの指標を測定した。エラストグラフィーは、頸管腺部の内子宮側、中間部、外子宮口の3つの部分に分けて評価した。結果、陣痛発来予測において、10日以上の予測にはエラストグラフィーが、3日程度の予測には頸管長が優れていることが分かった。

この結果に基づいて、妊娠22週以降36週未満の切迫早産妊婦と対照群として同時期の切迫症状のない妊婦に対し、同様に頸管腺を3つの部分に分けて硬度を測定し症例の集積を行った。のべ700データを集積し、追跡不能やデータ欠損などを除き520データを解析に用いた。結果、入院を要した症例と対照群間で、硬度比(中間部/内子宮口)は有意に異なり、最適なカットオフ値は1.5で、オッヅ比は2.48(95%信頼区間: 1.28-4.79)であった。この成果は外来診療での早産リスクの評価に有用と考えられた。これと並行して、直接的に子宮頸管硬度を測定できればエラストグラフィーによる硬度推定に勝ると考えられ、経腟的に使用可能とするべく硬度計の試作機を作成した。病院内倫理委員会に諮り承認を得て、妊娠37週以降の妊婦に対し使用した。のべ100例の測定を行い、機器の精度を評価した。級内相関係数による検者内誤差は0.650、検者間誤差は0.641であり、検査精度はまずまずであった。臨床応用に向けて、新技術導入による改良も検討しつつ試行を重ねている。正期産妊婦98例の、頸管長、エラストと内診所見の3つの指標を測定した。結果、陣痛発来予測において、10日以上の予測にはエラストが、3日程度の予測には頸管長が優れていた。また、入院を要した切迫早産妊婦と対照妊婦の頸管硬度を測定し520データを集積した。結果、2群間で硬度比(中間部/内子宮口)は有意に異なり、カットオフ値は1.5で、オッヅ比は2.48(95%信頼区間:1.28-4.79)であった。この成果は早産リスク評価に有用と考えられた。直接的に子宮頸管硬度を測定できる試作機を作成した。のべ100例の頸管硬度測定を行い、検者内誤差は0.650、検者間誤差は0.641、精度は中等度であった。以下のように、実施計画に挙げた平成26年度に検討する課題は概ね達成された。超音波ビームの減衰を最小限に抑え、なおかつ頸管と異なる硬度の物質として、硬度が既知のシリコンゴムを用いた。シリコンゴムシートをプローベの先端に取り付けることとし、十分に客観的測定ができることを確認した。研究実施計画に従った内容で、患者の同意を得る方法および同意文書を病院内倫理委員会に諮り承認を得た。婦人科疾患で子宮摘出を要する症例に対し説明し同意を得て、子宮頸管の硬度を、筋硬度計とエラストグラフィー機能とで評価した。10例程度施行し、相関関係が認められることを確認した。次に、妊娠37週以降の妊婦50人程度を対象として、シリコンゴムシート装着下でエラストグラフィーを施行した。子宮頸管前唇、後唇、頸管腺の部位について、エラストグラフィーで得られた硬度値と内診での硬さの評価(5段階)を比較したところ、子宮頸管前唇ではプローベによる圧迫が強すぎて測定には適さないこと、子宮頸管後唇ではプローベからの距離があるため超音波ビームが届かず測定には適さないことが分かった。頸管腺部分と内診との相関関係は、有意な傾向を認めたが有意差は得られなかった。そのため、頸管腺をさらに、内子宮側、中間部、外子宮口の3つの部分に分けて評価することとした。この結果に基づいて、妊娠22週以降36週未満の切迫早産妊婦と対照群として同時期の切迫症状のない妊婦に対し、同様に頸管腺を3つの部分に分けて硬度を測定し症例の集積を行っている。産科婦人科学平成27年度も引き続き、妊娠22週以降36週未満の切迫早産妊婦と対照群として同時期の切迫症状のない妊婦に対し、同様に頸管腺を3つの部分に分けて硬度を測定し症例の集積を行う予定である。
関数体上の多重ゼータ値から見た無限素点と有限素点の関係

Kを有限体上の一変数有理関数体とし,次数1の無限素点を固定する.また,vをKの有限素点とする.標数0における通常の多重ゼータ値,p進多重ゼータ値の関数体類似として,無限進多重ゼータ値およびv進多重ゼータ値が定義されている.標数0の世界では,多重ゼータ値がQ上張る空間からp進多重ゼータ値がQ上張る空間へのQ代数準同型で,多重ゼータ値をインデックスが同じp進多重ゼータ値に送るものが存在すると予想されているが,未解決である.私はこれまでにChieh-Yu Chang氏と共同で,この予想の関数体類似が成立することを示した.但し,得られた写像は線型写像で,積との可換性は未解決である.つまり,無限進多重ゼータ値がK上張る空間からv進多重ゼータ値がK上張る空間へのK線型写像で,同様の性質を満たすものが存在する(Kをその代数閉包にしても成立).本研究の目的は,この結果をさらに推し進めて,無限進多重ゼータ値とv進多重ゼータ値の間に成り立つ関係を解明することである.本年度の主な研究実績は以下の通りである.(1) Chang氏との結果の証明で重要となったのが,無限進・v進多重ゼータ値をあるt加群の対数関数で記述することである.これまでは,各ブロックの最後の座標にこれらの値が現れることしか分かっていなかった.しかし,本年度はChang氏とNathan Green氏と共同で,無限進のときに全ての座標を具体的に記述することに成功した.詳しく述べると,tモチヴィック多重ゼータ値およびtモチヴィックCarlitz多重スターポリログ値という自然な対象を定義し,それらをTaylor展開したときの係数が,上記の座標に現れることを示した.本結果は論文にまとめ,現在投稿中である.(2)整数論サマースクール「多重ゼータ値」の世話人の一人を務めた.本研究の大きな目的の一つは,無限進多重ゼータ値が張る空間からv進多重ゼータ値が張る空間への写像が積と可換であることを証明することと,その核の決定である.これらを達成するために,関連するt加群の対数関数を詳しく調べることは重要と考えられる.本年度は,無限進多重ゼータ値が現れる点におけるこの対数関数の値を完全に決定することができたことから,本区分とした.本年度の結果を踏まえて,問題の写像の積との可換性および核の決定を行っていく.但し,核の決定は難しい問題と思われるので,核の決定から帰結される主張についても,直接証明を試みる.特に,v進多重ゼータ値が張る空間の重みによる直和分解を与える.これにはJing Yu氏による部分t加群定理のv進版が必要と考えられるが,v進部分t加群定理については,Chang氏との最近の議論により証明の方針が定まっている.Kを有限体上の一変数有理関数体とし,次数1の無限素点を固定する.また,vをKの有限素点とする.標数0における通常の多重ゼータ値,p進多重ゼータ値の関数体類似として,無限進多重ゼータ値およびv進多重ゼータ値が定義されている.標数0の世界では,多重ゼータ値がQ上張る空間からp進多重ゼータ値がQ上張る空間へのQ代数準同型で,多重ゼータ値をインデックスが同じp進多重ゼータ値に送るものが存在すると予想されているが,未解決である.私はこれまでにChieh-Yu Chang氏と共同で,この予想の関数体類似が成立することを示した.但し,得られた写像は線型写像で,積との可換性は未解決である.つまり,無限進多重ゼータ値がK上張る空間からv進多重ゼータ値がK上張る空間へのK線型写像で,同様の性質を満たすものが存在する(Kをその代数閉包にしても成立).本研究の目的は,この結果をさらに推し進めて,無限進多重ゼータ値とv進多重ゼータ値の間に成り立つ関係を解明することである.本年度の主な研究実績は以下の通りである.(1) Chang氏との結果の証明で重要となったのが,無限進・v進多重ゼータ値をあるt加群の対数関数で記述することである.これまでは,各ブロックの最後の座標にこれらの値が現れることしか分かっていなかった.しかし,本年度はChang氏とNathan Green氏と共同で,無限進のときに全ての座標を具体的に記述することに成功した.詳しく述べると,tモチヴィック多重ゼータ値およびtモチヴィックCarlitz多重スターポリログ値という自然な対象を定義し,それらをTaylor展開したときの係数が,上記の座標に現れることを示した.本結果は論文にまとめ,現在投稿中である.(2)整数論サマースクール「多重ゼータ値」の世話人の一人を務めた.本研究の大きな目的の一つは,無限進多重ゼータ値が張る空間からv進多重ゼータ値が張る空間への写像が積と可換であることを証明することと,その核の決定である.

これらを達成するために,関連するt加群の対数関数を詳しく調べることは重要と考えられる.本年度は,無限進多重ゼータ値が現れる点におけるこの対数関数の値を完全に決定することができたことから,本区分とした.本年度の結果を踏まえて,問題の写像の積との可換性および核の決定を行っていく.但し,核の決定は難しい問題と思われるので,核の決定から帰結される主張についても,直接証明を試みる.特に,v進多重ゼータ値が張る空間の重みによる直和分解を与える.これにはJing Yu氏による部分t加群定理のv進版が必要と考えられるが,v進部分t加群定理については,Chang氏との最近の議論により証明の方針が定まっている.講演者として参加予定であった香港での研究集会が中止となり,出張をキャンセルしたため.繰り越し分と合わせた予算は,共同研究と研究集会参加のための旅費,およびPCと図書の購入に充てる.2019年度より琉球大学に異動したため,交通費が当初の予定よりも多く掛かる見込みである.
放射線治療における経時的線量最適化治療技術に関する研究

kVCBCTは,画像誘導放射線治療(IGRT : image guided radiation therapy)において欠かせないツールである一方,計画に用いられるFan-Beam CTに比べ画質が劣化しているため,線量計算に用いるのは困難であることが知られている.kV CBCTにおいて画質が劣化する原因の一つは,一度に大容積が撮影されるため, kV投影画像に被写体からの散乱成分が多く含まれるためである.この散乱線の影響は,再構成画像において,アーチファクトや画素値の不確かさを生む原因となり,線量計算において誤差を生じる.近年さかんに研究,開発が進められている適応型放射線治療(ART : adaptive radiotherapy)は,治療毎に撮影されるkV CBCTを用いて,治療毎に変化する患者さんの臓器の移動や変形の情報を考慮した高精度な線量評価を行い,治療計画を経時的に最適化する治療法である.本研究では、ARTにおける更なる高精度な線量評価に向けて、kV CBCTの画質改善に取り組んだ。近年, kV CBCTの画質改善のために行われている取り組みは大きく分けて2つ挙げられる.一つは,散乱補正であり,もう一つは,逐次近似再構成法の利用である.本研究では両者を組み合わせた散乱補正アルゴリズムを構築した.正確な散乱分布の見積もりが可能なMonte Carloシミュレーションは,計算コストの増大が懸念される.そこで,本研究では,散乱補正においては,鉛コリメータを用いた散乱成分の実測と, Klein-Nishinaの散乱公式に基づく解析的な散乱シミュレーションを相補的に組み合わせることにより,計算コストを抑え,簡便かつ正確に二次元検出器(FPD : Flat panel detector)上での散乱分布を取得する方法を提案した.鉛コリメータを用いた散乱成分の実測と, Klein-Nishinaの散乱公式に基づく解析的な散乱シミュレーションを相補的に組み合わせることによる,逐次最適化散乱補正アルゴリズムを構築し,線量計算への利用可能性が示唆されるkVCBCT画像の画質改善に成功した.本研究では、方法論の構築とファントムによる定量解析に留まったが、今後、患者のkV CBCTに対して応用する予定である。この技術により,患者の日々の臓器変化も考慮したkV CBCTを用いた線量評価と,それに基づくARTの発展に寄与することが期待される.本研究では、肺定位放射線治療において、WAT中に撮影された4次元コーンビームCT(4D-CBCT)を用いた、治療中の腫瘍の動きの検証や、実際の投与線量分布の再構成等、より高精度な放射線治療に向けた検証システムの確立を目指す。4D-CTの各位相で照射されるべきビームをインバースプランニングにより最適化し、位相に同期して照射するという治療法は、すでに準備段階を終えており、ここ数年内での実用化が期待される。こうした治療法は複雑であるがゆえに、治療ごとの検証システムを確立しておくことが、安全で確実な治療を提供する上できわめて大事である。また、治療中の腫瘍の動きや線量分布取得のシステムの確立は、治療ごとに実際に投与された線量分布を積算することによる、adaptiveradiationtherapy(経時的線量最適化放射線治療)に向けての重要なSTEPである。放射線治療においては、何日かに分けて分割照射を行うことが多い。日々の治療毎に、変化する臓器の位置形状がCBCTで撮影され、位置合わせに用いられている。私たちの最終的な目標は、この日々撮影されるCBCTの画像を用いて、真の積算処方線量を見積もることである。CBCTの画質向上は、CBCT上でのimage registrationによる臓器の移動変形や、それに合わせた線量計算を可能にし、真の積算処方線量を得ることができる。また、それに対応した、適切な治療計画の変更も可能となる。CBCTの画質の低下の主要な原因の一つとして、光子の散乱が考えられ、散乱補正による画質改善が様々に試みられている。本研究では、CBCT再構成方法や投影画像枚数の違いによる画質の違いを検討した。従来用いていたFBP (Filtered Back Projection)と呼ばれる手法iterative再構成法の一つであるML-Convex法において、再構成画像の画質を比較評価した。またML-Convex法により、より少ない投影枚数での画質改善を図ることによって、撮影による被ばく量の低減の可能性を検討した。ML-Convex法によって、FBPと比べて少ない投影枚数でも画質の均一性、画素値の正確性ともに向上することが確認できた。これは、CBCT撮影における被ばく低減と共に、CBCT上での線量計算の可能性を示唆している。また、以上の結果をふまえ、ML-convex法を用いて4DCBCT再構成を行い、従来の再構成法であるFeldkamp法(FDK)との比較により、画質改善の評価を行った。4DCBCTにおいて、従来のFDK法では、位相分けによる投影枚数の減少(1 projection/5゚)により、ストリークアーチファクトが顕著に観測されたが、ML-Convex法では同じ投影枚数でもストリークアーチファクトが減少し、画質のコントラストや均一性、画素値(減衰係数)において改善が認められた。再構成時間においては、FBPの方がまだまだ優位にあるが、GPUに対応させる等の工夫により、さらに高速化を図ることができると考えられる。kV CBCTは,画像誘導放射線治療(IGRT : image guided radiation therapy)において欠かせないツールである一方,計画に用いられるFan-Beam CTに比べ画質が劣化しているため,線量計算に用いるのは困難であることが知られている.

kV CBCTにおいて画質が劣化する原因の一つは,一度に大容積が撮影されるため, kV投影画像に被写体からの散乱成分が多く含まれるためである.この散乱線の影響は,再構成画像において,アーチファクトや画素値の不確かさを生む原因となり,線量計算において誤差を生じる.近年さかんに研究,開発が進められている適応型放射線治療(ART : adaptive radiotherapy)は,治療毎に撮影されるkV CBCTを用いて,治療毎に変化する患者さんの臓器の移動や変形の情報を考慮した高精度な線量評価を行い,治療計画を経時的に最適化する治療法である.本研究では、ARTにおける更なる高精度な線量評価に向けて、kV CBCTの画質改善に取り組んだ。近年, kV CBCTの画質改善のために行われている取り組みは大きく分けて2つ挙げられる.一つは,散乱補正であり,もう一つは,逐次近似再構成法の利用である.本研究では両者を組み合わせた散乱補正アルゴリズムを構築した.正確な散乱分布の見積もりが可能なMonte Carloシミュレーションは,計算コストの増大が懸念される.そこで,本研究では,散乱補正においては,鉛コリメータを用いた散乱成分の実測と, Klein-Nishinaの散乱公式に基づく解析的な散乱シミュレーションを相補的に組み合わせることにより,計算コストを抑え,簡便かつ正確に二次元検出器(FPD : Flat panel detector)上での散乱分布を取得する方法を提案した.WAT中に診断用のkVコーンビームと同時に治療ビームによる投影画像から呼吸波形を取得し、kV 4D-CBCTと同様に、位相ごとの再構成画像を得ることも可能であることを示すことができた(VMAT 4D-CT)。この治療ビームによる再構成画像から、照射野と腫瘍の相対位置関係を直接把握でき、それぞれの呼吸位相において腫瘍が照射野内に入っていたことをより精度よく簡便に確認することが可能となった。原体照射を基盤としたVMATであるため、ガントリー角度間での照射野内の情報量の欠陥が最小限にとどまり、治療ビームでも再構成に成功する。このVMAT 4D-CTは、治療中の腫瘍の動きのモニタリングを治療ビームそのもので行うことができ、kV CBCTによる余計な被曝を低減できる可能性を示唆している。また、治療中に取得されたガントリー角、MLCとJAWの配置、線量率の情報とCBCTにより、実際の線量分布の評価も行った。このような治療中の検証は、動きを伴う場合には特に重要であることが明確になった。経時的線量最適化治療技術において4DCBCTの画質改善は必須技術であり、来年度に予定しているDeformable Image Registrationを伴った研究の発展の土台を造ったという意味で、今年度の研究成果は大きい。鉛コリメータを用いた散乱成分の実測と, Klein-Nishinaの散乱公式に基づく解析的な散乱シミュレーションを相補的に組み合わせることによる,逐次最適化散乱補正アルゴリズムを構築し,線量計算への利用可能性が示唆されるkVCBCT画像の画質改善に成功した.
眼グリア細胞の緑内障性網膜神経節障害への関与機序解明と治療法の探索

RGCとグリア細胞の共培養に対してストレス負荷を与えるとRGCの生存率の低下と神経突起の伸長の低下が見られた。マイクロアレイを用いてストレス負荷に対する網膜グリア細胞の遺伝子発現の変化について解析し、差異の大きかった甲状腺ホルモン受容体遺伝子(TR)につき、データベースを参照してATF4、EIF2αに着目した。TRのsiRNAを遺伝子導入したグリア細胞では、ATF4の発現誘導が抑制され、RGCと共培養するとRGC死が増加した。RGC網膜グリア細胞では内因性のTR発現を介した、RGCに対する抗ストレス作用抗アポトーシス作用が存在する可能性が示唆された。種々のストレス下にある網膜神経節細胞(RGC)に対する眼グリア細胞の抗ストレス作用につき検討した。単離培養によって初期培養系を構築したRGCとグリア細胞をミリセルを用いて共培養下で培養を行うことで、細胞間のパラクリン経路等の相互伝達が可能となる。これらの共培養下にあるRGCと網膜グリア細胞に対してストレス負荷を与えるとRGCの生存率の低下と神経突起の伸長の低下が見られた。マイクロアレイを用いてストレス負荷に対する眼グリア細胞における遺伝子発現の変化について網羅的に解析した。マイクロアレイにおいてcDNA発現量の差異が特に大きかった甲状腺ホルモン受容体遺伝子(TRα)について、データベースを参照にアノニテーションの検討を行い関連性が高いと考えられる候補遺伝子としてATF4、EIF2αについて着目した。RGCにTRαのsiRNAを遺伝子導入して内因性のTRの発現をノックアウトし、thapsigarginによる小胞体ストレスを与えると、コントロールと比較して生存率が高く、小胞体ストレスはRGCのTRαを介してアポトーシスを誘導する可能性が示唆された。網膜グリア細胞に対しても同様にTRαのsiRNAを遺伝子導入し、小胞体ストレスを与えると生存率が高いことがわかった。TRαの発現をsiRNAで抑制した網膜グリア細胞では、ATF4の発現誘導が認められ、ATF4がRGCアポトーシスや、網膜グリア細胞死を抑制した可能性が示唆された。一方でTRαのsiRNAを遺伝子導入網膜グリア細胞とRGCとの共培養を行った結果、コントロールと比較して、共培養下のRGCアポトーシスが増加した。RGCおよび網膜グリア細胞では、内因性のTR発現を介しアポトーシスに関与していることが示唆され、TRの発現調節また、TR/ATF4の経路に着目した新たな治療法の開発への応用の可能性が考えられた。ラット網膜よりRGCならびに眼グリア細胞(ミュラー細胞、視神経アストロサイト)を単離培養し初代共培養系を構築し、その際のRGCの生存、神経突起伸長に関する検討を行いミュラー細胞と視神経アストロサイトのRGCの生存および神経突起伸長に対する効果を比較検討した。それぞれのグリア細胞との共培養下でRGCの生存率が改善、神経突起の伸長も増加した。特に、アストロサイトとの共培養下では、RGCの神経突起はより伸びる傾向が認められた。2種の眼グリア細胞を培養してそれぞれのmRNAを抽出し、マイクロアレイを用いて網羅的な遺伝子発現の差異を検討し、2種のグリア細胞間で、差異の大きな遺伝子を抽出、RGCの生存、神経突起伸長に関連性が高いと思われる候補遺伝子を選択した。各候補遺伝子について、眼グリア細胞にsiRNAを導入してRGCと共培養を行い、RGCの生存率、神経突起伸長の変化を確認した。また、遺伝子間の相互作用を確認するために、複数の候補遺伝子を同時にsiRNA導入し発現を抑制した場合のRGCの生存、神経突起伸長の効果を検討した。マイクロアレイによる網羅的遺伝子検索により、網膜神経節細胞の生存および突起伸長に関与する眼グリア細胞の遺伝子について検討しているが、眼グリア細胞へのsiRNAの導入の評価、遺伝子が発現抑制されているかがまだ十分に確認できていない。複数の候補遺伝子を組み合わせることで、突起伸長が抑制されることも分かったが、いかにお互いの遺伝子が影響を及ぼしているかについて十分考察ができていない。1.平成24年度で選択されたRGCに影響する遺伝子のsiRNAをThy1-CFPマウスの硝子体中に注入し該当遺伝子の発現抑制を行う。その後、網膜を摘出し、組織培養でCFP発現RGC数の経時的変化をコントロール眼と比較し、該当遺伝子のRGCへの影響を確認する。2.上記実験で影響が確認された遺伝子について、その発現や機能を調整する可能性のある候補薬剤を探索する。3.上記候補薬剤を単離培養RGCに添加し、有効性と有効濃度の決定を行う。4.上記候補薬剤について上記で確定された投与濃度を参照にしてThy1-CFPマウスから単離した培養網膜組織に投与してその有効性を確認する。5.さらに上記候補薬剤について眼内移行性を考慮して移行性の良い薬剤の場合は点眼で、不良な薬剤の場合は腹腔内投与もしくは食餌としてThy1-CFPマウスに投与する。RGC障害の評価には、強膜血管焼灼による眼圧上昇

緑内障モデルと、SRC遺伝子改変マウスをThy1-CFPマウスを交配させた正常眼圧緑内障モデルを作成し、2つの緑内障モデルで有用性を検討する。該当なし
特定保健指導該当者の支援体制の確立に向けた利用促進ガイドラインの作成

本研究は,「特定保健指導該当者の利用行動評価尺度」及び動機の特徴別の支援を提供するための利用促進ガイドラインを作成することを目的とする.研究は第3段階からなり,第1段階は,特定保健指導該当者の利用行動に関する動機の特徴を把握するための利用行動評価尺度を作成する.第2段階は,利用行動評価尺度の得点結果により,特定保健指導該当者を利用行動の動機の特徴別に分類し,分類別による保健指導の利用に向けた勧奨方法を用いて介入するための利用促進ガイドラインを作成する.第3段階は,利用行動評価尺度と利用促進ガイドラインを市町村で実施し,利用行動評価尺度及び利用促進ガイドラインの有効性を検証する.本研究は,「特定保健指導該当者の利用行動評価尺度」及び動機の特徴別の支援を提供するための利用促進ガイドラインを作成することを目的とする.研究は第3段階からなり,第1段階は,特定保健指導該当者の利用行動に関する動機の特徴を把握するための利用行動評価尺度を作成する.第2段階は,利用行動評価尺度の得点結果により,特定保健指導該当者を利用行動の動機の特徴別に分類し,分類別による保健指導の利用に向けた勧奨方法を用いて介入するための利用促進ガイドラインを作成する.第3段階は,利用行動評価尺度と利用促進ガイドラインを市町村で実施し,利用行動評価尺度及び利用促進ガイドラインの有効性を検証する.
RNA・DNA雑種分子の形成と除去機構の研究

生体内での2本鎖DNA上でのRNA・DNA雑種分子の形成と除去機構それと相互作用するタンパク質の動的関係については充分判明していない。本研究は、この雑種分子を特異的に分解するRNaseHを生化学的,遺伝学的に利用し、この問題にアプローチしようとした。具体的には、大腸菌のRNaseH欠損変異(【rnh^-】)株を分離し、それを解析してきた。その結果、RNaseHを欠損した場合、野生株内で分離除去されてきたRNA・DNA分子が分離を免れそれが新しい複製開始点のプライマーRNAになる可能性がでてきた。もしこれが正しいとすると、この開始点はRNA・DNA分子の形成と除去機構の一つのモデルになりうる。そこで我々はまず、このRNaseH欠損下で自律複製能を示すDNA断片のクローニングを試み、これらが真の複製起点を有すすか否かの検討を行った。まず大腸菌染色体DNAをEcoRIで切断し、それと複製能を有しないカナマイシン抵抗性(【Km^r】)のDNA断片とを結合した後RNaseH欠損株に形質転換し、生じた【Km^r】の形質転換株より閉環状2本鎖DNAが回収されるものを選択し、それらを一応oriHプラスミドと名付けた。結局oriHプラスミドは特異的な8種に分離され、その染色体上の位置も決定した。しかしoriHプラスミドをさらに詳しく調べるうち、それが染色体上の相同部位にも同時に組み込まれていることを見出した。このことから、これは自律複製以外に染色体への組み込みと切り出しによって生じる可能性がでてきた。この組み込みを完全に抑えるため、染色体の相同部位を欠失したRNaseH欠損株を作製し、それにoriHプラスミドを形質転換したところ、形質転換株は得られなかった。このことから、oriHプラスミドは少なくともプラスミドとしては自律複製起点は持たないが、組換えの活性化部位を有するらしいことが判明した。
国際比較による我が国の「看護組織における組織文化」の明確化と変革のリーダーシップ

平成26年10月12月に、ニュージーランドで働く日本人看護師9名を対象に面接調査を行い、日本とニュージーランドの看護職集団の文化特性の違いについて明らかにした。その結果、両国の看護職集団の文化特性には4つの異なる文脈「Authority(権威)」「Cooperation(協働)」「Duty(義務)」「Nursing(看護)」があることが明らかになった。そしてさらに平成28年に複数の英語圏での看護師の経験がある日本人看護師に面接し結果の妥当性を検証した。また、平成28年1月には、1総合病院の看護師868名を対象にアンケート調査をし、看護職のワークライフ・バランスと組織文化の関係を明らかにした。日本とニュージーランドの看護組織の文化的特性の比較調査-ニュージーランドで働く日本人看護師から見た、日本とニュージーランドの看護職集団の違いや看護ケアの違いについて、文化の違いから明らかにすることを目的に研究を行った。平成26年10月下旬12月下旬と平成27年2月初末まで、約3ヶ月間、オークランド工科大学健康科学学科に滞在し、研究協力者と一緒に調査・研究を行った。9月にオークランド工科大学の「研究倫理審査委員会」に書類を提出し、10月に承認を受けた後、当該大学に行き調査を行った。1調査時期は平成26年10月下旬12月下旬で、オークランド市内の日本人看護師のSupport Groupを通して、研究参加者を募集し、RN(Registered Nurse)として病院で働いている日本人看護師9名から参加の同意を得た。調査は、半構成的面接調査法で、研究協力者と一緒に個別に行った。面接場所はオークランド工科大学内の個室或いは病院内の個室を利用し、面接時間は1人90分程度、言語は英語と一部日本語であった。面接内容は許可を得てボイスレコーダーに録音し逐語録にし、日本語部分は英語に翻訳した。逐語録をもとに、研究協力者とディスカッションをしながら、質的・帰納的に分析を行った。22月初末まで、再度オークランド工科大学に行き、12月の帰国直前の面接調査で得られた3人のデータを加えて、さらに分析を進め、日本人看護師からみた両国の看護職の文化的特徴の抽出を行った。大学内で文献検索を加え、研究協力者と一緒に考察をして論文作成に着手した。帰国後は、さらに文献検索をし、Skypeを介してディスカッションをしながら論文を加筆修正している。近く、2つの論文にまとまり次第、ジャーナル誌に投稿予定である。平成26年度に、ニュージーランドで日本人看護師9名を対象に日本とニュージーランドの看護師の文化特性の違いについての面接調査を行ったところ、両国の間のワークライフバランス(以下、WLB)の意識が随分と異なることに気付いた。そしてそのことが働きやすさの違いになって表れており、日本の看護師の組織の問題点と捉えられた。そこで、平成27年度は、日本の看護師のWLB組織文化特性の関連性を調べる研究を行った。平成27年11月にプレテストを行い、平成28年1月に本調査を行った。測定尺度は村上の「看護職の仕事と生活の調和実現度尺度」(28項目、5段階評定尺度)を用い、組織文化の測定尺度は稲田の「看護組織における組織文化の測定尺度」(40項目、7段階評定尺度)を用いた。本調査の対象は1000床程度の1総合病院に勤務する看護職868名で、病院内に設置の投函箱に無記名で投函してもらって回収した。尚、調査を開始するにあたって、四国大学研究倫理審査委員会の承認を得た。回収率76%、有効回答653であった。WLBの全項目を主因子法、プロマックス回転にて因子分析したところ、村上の結果と同様、5因子が抽出され、因子項目も一致したため、各因子名を村上と同様とした。WLBの各因子と組織文化の全項目の相関係数を求めた結果、第2因子「仕事のやりがい・職場の支援」のみが組織文化の項目の多くと相関がみられた。そこで、第2因子を目的変数に組織文化の項目を説明変数にして重回帰分析を行った結果、14項目の説明変数が抽出された(R2=0.55)。WLBの5因子のうち、第2因子のみに組織文化項目が関係していたことは、この因子が組織活動と関係が深いことを示している。抽出された説明変数は、個人の尊重、異質さの受容、集団としてのまとまりのよさや仕事への奉仕に関するもので、こうした文化特性が仕事のしやすさに影響していると考える。平成26年度に予定通りニュージーランドに行き、オークランド工科大学の研究者と一緒に調査を行うことができた。平成27年度も引き続き調査を行う予定であったが、大学での仕事の関係でニュージーランドへの長期出張が難しくなり、日本国内で調査を行うこととした。国内での調査は順調に行われ、結果を出すことができた。平成26年10月下旬12月下旬にニュージーランドのオークランド市内で働く日本人看護師9名を対象に半構成的面接を行い、日本とニュージーランドの看護職集団のワークカルチャーの違いを調査した。その結果、両者の文化の違いには「Authority(権威)」「Cooperation(協働)」「Duty(義務)」「Nursing(看護)」の4つの文脈があることがわかった。そしてその根底には、「全体を見る日本人と個人を見る西洋人」、「情緒的で曖昧さを好む日本人と合理的で明瞭さを好む西洋人」、「年上を敬うべきとする日本人と意見は平等とすべきとする西洋人」という国の文化の違いがあるように思われた。

そこで、平成28年10月12月に、英語圏の国で看護師の経験のある日本在住の日本人看護師2名と日本の看護職の文化特性に関心のある日本在住の日本人看護師2名に、調査の結果を提示して意見を聞き、許可を得てボイスレコーダーに録音した。録音したデータは逐語録にし、何度も読んでニュージーランドでの調査の結果の妥当性を検証した。その結果、「Authority(権威)」「Cooperation(協働)」「Duty(義務)」「Nursing(看護)」の4つの文脈の裏付けがなされ、ある程度の妥当性が検証できた。今後はこの4つの文脈をより洗練化していきたいと考える。平成26年10月12月に、ニュージーランドで働く日本人看護師9名を対象に面接調査を行い、日本とニュージーランドの看護職集団の文化特性の違いについて明らかにした。その結果、両国の看護職集団の文化特性には4つの異なる文脈「Authority(権威)」「Cooperation(協働)」「Duty(義務)」「Nursing(看護)」があることが明らかになった。そしてさらに平成28年に複数の英語圏での看護師の経験がある日本人看護師に面接し結果の妥当性を検証した。また、平成28年1月には、1総合病院の看護師868名を対象にアンケート調査をし、看護職のワークライフ・バランスと組織文化の関係を明らかにした。主の研究協力者であるAnita Bamford-Wade博士が、科研申請後の2月にオーストラリアに転職したため、5月に研究対象国の変更するかどうかについて検討せざるを得ない状況になった。6月に渡豪し、調査の可能性を2人で検討したが、ビザの関係でオーストラリアでの調査が難しいことが判明した。そこで、もう一人のニュージーランド工科大学の研究協力者David Healee博士に協力を求め、ニュージーランドで無事に調査を行うことができた。9名の面接参加者を得られ、参加者から貴重で充分なデータを得ることができた。しかも、全ての面接が、David Healee博士も加わっての(英語での)面接となったため、互いにデータの共有化ができたことで、日本とニュージーランドの看護職の文化的比較の分析がしやすくなり、論文作成も2人で順調に進めることができている。平成28年度もニュージーランドへ長期出張をして調査をすることは難しいため、日本国内において、平成26年度のニュージーランドでの調査結果を検証する調査を行う。また、平成26年度の調査結果を公表し、フィードバックを得ることとする。看護管理学平成27年度の予定は、ニュージーランドでの調査結果を日本の病院看護管理者提示し、日本の看護職の文化との違いについてのデータを得る。調査はフォーカス・グループ・インタビューを用い、ボイスレコーダーに録音後、逐語録にする。逐語録は英語に翻訳をし、オークランド工科大学の研究協力者と一緒に、質的・帰納的に分析をして、両国の看護職の文化特性の違いを、特にリーダーシップの視点より明確にする。平成27年度は大学の仕事の関係でニュージーランドに長期出張をして調査を行うことができず、日本国内で調査を行った。そのため、当初予定よりも助成金使用額が少なくなった。平成26年度に、平成27年度予算から100万円の前倒し支払請求をしたが使いきらなかったため、残金は、平成27年度の研究予算としたい。
インフルエンザウイルス感染カニクイザルを用いたサイトカインストーム発生機序の解明

本研究では、免疫抑制因子および抑制性サイトカインに着目し、インフルエンザの重篤化に関与する寄与因子を同定することを目的としている。まず2017年に分離された高病原性H7N9鳥インフルエンザウイルスを12頭のカニクイザルに感染させた。感染1日後に抗インフルエンザ薬であるOseltamivir, Zanamivir, Baloxavir及びコントロールとして蒸留水をそれぞれ3頭のカニクイザルに5日間投与した(Baloxavirのみ感染後1日目のみ投与)。感染8日目に安楽殺したが、コントロール群の1頭のみ感染3日目でエンドポイントに達し安楽殺した。コントロール群のウイルス量が最も多く検出され、Oseltamivir>Zanamivir>Baloxavirの順に検出されたウイルス量が少なくなる結果となった。感染後0、1、3、8日目のサルの末梢血サンプルを用いて、フローサイトメトリーにて免疫抑制因子の発現を解析したところ、どの群も感染3日目でCD4T細胞が多く動員されていた。またPD-1、CTLA-4、TIGIT、LAG-3は感染前と比べて感染後に発現の増加が見られ、コントロール群において顕著だった。さらに、CD8T細胞中のPD-1及びTIGITに関しては、エンドポイント個体における発現量が特に高く、薬剤投与群はこれらの免疫抑制因子は感染8日目には感染前と同程度の発現まで低下していた。サイトカイン産生量では、エンドポイント個体のIFNa, IFNb, IFNg及びIL-6の産生が他個体より多かったが、IL-10に関しては同程度だった。この結果より、PD-1, TIGIT, IFNs及びIL-6が重篤化因子もしくは重篤化因子と相互作用していることが示唆された。今後は、非感染サル及び低病原性インフルエンザウイルス感染サルの免疫抑制因子発現量とサイトカイン産生量を含め比較する予定である。高病原性鳥インフルエンザウイルスの入手及びカニクイザルのフローサイトメトリー実験系がスムーズに確立したため、順調に免疫抑制因子における重篤化因子の候補を絞ることができた。ただ、制御性T細胞のマーカーとなるFoxp3の解析がうまくできなかったので今後改良が必要である。今後は、インフルエンザウイルスに対する感受性が確認済みであるサル気管上皮細胞株「SAEC」及びヒト気管上皮細胞株「BEAS」を用いて、候補因子をCRISPRゲノム編集技術により欠損した細胞を作製する予定であるが、2019年度から海外における研究滞在により研究中断を申請しているため、一時的に研究が中断する予定である。海外における研究滞在により、一時的に研究を中断する。
脈絡叢上衣細胞を用いた内在性神経幹細胞の賦活化-中枢神経損傷治療応用を目指して-

培養して増殖させた脈絡叢上衣細胞を,ラット脳梗塞モデルに脳脊髄液内投与をすると,脳梗塞巣の進展が抑制されることを証明した。この機序に,抗炎症作用,抗アポトーシス作用,抗酸化作用が関与していることが明らかとなった。脈絡叢上衣細胞から様々な神経栄養・成長因子が脳脊髄液内に放出され,脳虚血損傷修復に関与しているものと考えられた。また,脈絡叢上衣細胞移植により神経幹細胞が賦活化され,ニューロンへの分化を促進していることがわかった。培養系の実験により,低酸素侵襲そのものが,脈絡叢上衣細胞の持つ脳保護・再生促進作用を引き出すことが示唆された。脈絡叢上衣細胞の神経幹細胞に対する直接作用を検索するため,今年度は特にin vitroにおける評価を中心に行った。Transwellsystemを用いて,脈絡叢上衣細胞と神経幹細胞を共培養したところ,神経幹細胞の増殖が有意に促進されることがわかった。また,脈絡叢上衣細胞の存在下で,神経幹細胞の分化誘導を図った所,ニューロン,グリアへと分化する細胞数が有意に増加することが判明した。一方で,ニューロン対グリアへの分化誘導率が特に変化しているわけでないことが明らかとなった。TUNEL染色をしてみると,脈絡叢上衣細胞が存在すると,神経幹細胞の分化誘導時における細胞死が有意に抑制されることがわかった。以上より,脈絡叢上衣細胞は神経幹細胞を保護,増殖させると共に,ニューロン及びグリアへの分化誘導時に細胞死を抑制する効果を担っていることが明らかとなった。In vivoにおいても,同様のメカニズムにて,脈絡叢上衣細胞が神経幹細胞に作用して,中枢神経維持を図っているのではないかと考えられた。今後は,脈絡叢上衣細胞から分泌される神経幹細胞増殖・保護因子を同定するために,脈絡叢上衣細胞培養の上清を用いてプロテオミクス解析を行う。同時に,ラット両総頸動脈閉塞モデルを用いて,脳虚血損傷下,脈絡叢においてどのような遺伝子が応答しているのかを,DNAアレイにて評価すると共に,脳脊髄液を採取して含有される神経幹細胞増殖・保護因子に変化を来していないか解析を行う。また,ラット脳虚血損傷に対する側脳室への脈絡叢上衣細胞移植法におけるモデルの安定性の評価を行う。脳虚血損傷に対し,脈絡叢内において,神経栄養因子・成長因子の分泌に関与する転写因子がどのように反応するかを評価した。ラット両総頚動脈の結紮後に,脈絡叢からmRNAを抽出し,sham群をコントロールとして,HIF-1alphaの発現量をRT-PCRにて解析した所,虚血に応答して,脈絡叢内におけるHIF-1alphaの発現が上昇していることがわかった。脳虚血損傷下に,脈絡叢内にHIF-1alphaを強制発現させることにより,脳脊髄液中内に各種の神経栄養因子・成長因子が分泌され,内在性神経幹細胞の賦活化が図れるのではないかと考え,脈絡叢に特異的にHIF-1alphaを導入する方法を模索した。また,TET-offシステムを用いて,脳虚血下において,脈絡叢内でのHIF-1alphaの発現をコントロールする方法を開発することとした。このため,中枢神経系において,脈絡叢上衣細胞に特異的に感染するバキュロウイルスをベクターとして使用することにした。ラットHIF-1alphaをクローニングした上,Bacurovirus Expression Systemを用いて,CAG-TET-Off, TRE-HIF1alphaのベクターについて,組換えバキュロウイルスを作製した。また,遺伝子導入効率を検討するため,HIF-1alphaの代わりにEGFP用のバキュロウイルスベクターも作製した。今後,このベクターを用いて,脳虚血において,脈絡叢におけるHIF-1alphaの遺伝子導入を図り,実際に神経幹細胞の増殖,分化を含めた神経再生が促進されるかを検討する予定である。培養して増殖させた脈絡叢上衣細胞を,中大脳動脈閉塞にて作成したラット脳梗塞モデルに脳脊髄液内投与をすると,脳梗塞巣の進展が抑制されることが明らかとなったが,この機序に,IL-6やTNF-alphaの発現を抑制する抗炎症作用,bcl-2やCREBの発現を増強させる抗アポトーシス作用,iNosの発現を抑制する抗酸化作用が関与している。脈絡叢上衣細胞は,bFGF,NT-4,HGF,GDNF等の様々な神経栄養・成長因子を発現している。移植された細胞は,脳梗塞巣には局在せず,投与された脳室内に留まっていることから,脈絡叢上衣細胞からこれらの神経栄養・成長因子群が脳脊髄液内に放出され,脳虚血損傷修復に関与しているのではないかと考えられた。同様なメカニズムで,脈絡叢上衣細胞が神経幹細胞を賦活化し,神経再生を促進するのではないかと推測された。

BrdUを腹腔内投与したラットを用いた脳梗塞モデルへの脈絡上衣細胞移植では,BrdU陽性細胞が増殖し,一部の細胞はニューロンのマーカーであるbeta-tubulinと二重染色され,脈絡叢上衣細胞の分泌性因子が,神経幹細胞へ作用し,ニューロンへの分化・再生を促進していることが明らかとなった。低酸素という環境そのものが,神経幹細胞へ作用する脈絡叢上衣細胞の分泌性因子発現を増強しているのではないかと考え,低酸素下における脈絡叢上衣細胞自体の細胞応答を評価した。脈絡叢上衣細胞を,正常酸素下および低酸素下の二群に分けて培養し,total RNAを抽出しRT-PCRを行ったところ,低酸素群でHIF-1alphaの発現が上昇すると共に,様々な神経栄養・成長因子の遺伝子群の発現が増強されることがわかった。低酸素侵襲そのものが,脈絡叢上衣細胞の持つ脳保護・再生促進作用を引き出すと考えられた。
サルコペニアを可視化する -拡散テンソル法を用いた骨格筋の機能描出-

サルコペニアは,超高齢社会に突入しているわが国において健康長寿の妨げになる要因として注目されている.サルコペニアでは,骨格筋に脂肪浸潤,浮腫,線維化,筋線維の質・サイズ・配向の変化などが生じているとの報告があるが,このような筋の内部構造の変化を非侵襲的かつ定量的に評価し,筋機能との関連性を明らかにする方法を確立することができれば,今後のサルコペニアに対する研究に役立つものと考えられる.本研究の最終目的は,MRIを用いた画像評価法である拡散テンソル法を骨格筋に用いて,骨格筋の機能を画像により描出することで,サルコペニアを可視化するというものである.そのために,まず健常成人(非サルコペニア高齢者)における筋力・身体能力を測定し,拡散テンソル画像との関連を検討する必要があり,現在対象者を選定しているところである.現在,医学倫理審査の申請をすすめながら,健常成人(非サルコペニア高齢者)のデータを収集している.健常成人としては,京都先端科学大学で例年施行されている地域在住高齢者を対象とした体力測定会に参加しているものの中から,非サルコペニア高齢者を選定し,拡散テンソル画像の撮像に対する協力者を募集していく.その筋力・身体能力のデータを拡散テンソル画像と比較し,その関連性を明らかにしていく.現在,京都先端科学大学においても倫理審査の申請が進められている.またサルコペニア高齢者については,当大学附属病院整形外科を受診中の患者の中から該当者を選定中である.倫理審査において研究が承認されれば,直ちに対象者を募集し,拡散テンソル画像を撮像し情報を解析することが可能である.また,筋力・身体機能の測定方法についても統一した手技で行えるよう準備が整えられている.バイオインピーダンス法による筋肉量を測定するための体組成計を購入し,準備している.サルコペニアは,超高齢社会に突入しているわが国において健康長寿の妨げになる要因として注目されている.サルコペニアでは,骨格筋に脂肪浸潤,浮腫,線維化,筋線維の質・サイズ・配向の変化などが生じているとの報告があるが,このような筋の内部構造の変化を非侵襲的かつ定量的に評価し,筋機能との関連性を明らかにする方法を確立することができれば,今後のサルコペニアに対する研究に役立つものと考えられる.本研究の最終目的は,MRIを用いた画像評価法である拡散テンソル法を骨格筋に用いて,骨格筋の機能を画像により描出することで,サルコペニアを可視化するというものである.そのために,まず健常成人(非サルコペニア高齢者)における筋力・身体能力を測定し,拡散テンソル画像との関連を検討する必要があり,現在対象者を選定しているところである.現在,医学倫理審査の申請をすすめながら,健常成人(非サルコペニア高齢者)のデータを収集している.健常成人としては,京都先端科学大学で例年施行されている地域在住高齢者を対象とした体力測定会に参加しているものの中から,非サルコペニア高齢者を選定し,拡散テンソル画像の撮像に対する協力者を募集していく.その筋力・身体能力のデータを拡散テンソル画像と比較し,その関連性を明らかにしていく.現在,京都先端科学大学においても倫理審査の申請が進められている.またサルコペニア高齢者については,当大学附属病院整形外科を受診中の患者の中から該当者を選定中である.倫理審査において研究が承認されれば,直ちに対象者を募集し,拡散テンソル画像を撮像し情報を解析することが可能である.また,筋力・身体機能の測定方法についても統一した手技で行えるよう準備が整えられている.バイオインピーダンス法による筋肉量を測定するための体組成計を購入し,準備している.昨年度内に拡散テンソル画像の撮像を行うことができなかったため,それに関係する費用などを請求することができなかっため.
火山灰耕地土壌におけるVAミコリザの生態と作物生育に及ぼす影響

1.耕種来歴の異なる本学農場(腐植質黒ボク土)を対象として、生息するVAミコリザ菌の種類と数を追いつつあるが、トウモロコシ,ムギ,カブ輪作の飼料畑では、厩肥連用の有無に拘らず、45620ケ/100g風乾土(径>53μm)の胞子が計測されるが、その大部分はGlomus属であり、他にGigaspora morganta及びScutellosporag regariaが見い出されるが数ケ10数ケにすぎなかった。多施肥の野菜畑の場合Glamus属の存在比率は低まり、後2者の高まる傾向があった。なお、Glonus属には数種のタイプが確認されたが、その同定はなお未確立である。2.厩肥及び化成Ρ連用圃場におけるトウモロコシ及び冬コムギの生育に伴うVAミコリザの感染推移をみると、前者で最高40%、後者で50%レベルであった。茎葉部Ρ%との正相関は観察されるが、shoots乾重との相関が有意な場合、すべて負であり、両作物の圃場におけるミコリザ形成は"寿生的"と評価された。なお厩肥及びΡ共給は、全体としてVAミコリザ感染率を低下させた。3.ポリマルチによるダイズの初期生育促進には、地温上昇→VAミコリザ形成促進→Ρ吸収著増→根粒形成促進の因果推関性の働いている可能性が示された。また、粉状木炭の作土への混入は、初中期のVAミコリザ形成を促進し、陰実期における継続的Ρ吸収を保証することによって、後期落葉を遅らせる実生産に貢献する。4.上記圃場から分離したGlomus属の中で最多の種(黄褐色胞子、Y)を接種源としたポット実験によると、ダイズ、ヒヨコマメに対しては高い感染性と36倍ものΡ吸収及び生育(とくに子実)促進をもたらしたが、トウモロコシ、コムギへの感染性は低く、生育への影響もわずかにすぎないという顕著な宿主特異性を示した。5.過去3年6作の除草剤連用(有無)圃場において、非ミコリザ作物(キャベツ)の連作下ではVAミコリザ菌の衰退がみられたが、ミコリザ作物(トウモロコシ、カンショ、ラッカセイ)との輪作下では、連用圃場であったも、衰退は観察されず、むしろ増大(1050%)する場合のあることが示された。1.本学の管理された果樹園,飼料畑,野菜畑(いずれも黒ボク土)の作土層から分離されたVAミコリザ菌の胞子は、Gigaspora属2種(G.Margarita,G.Gregaria)及びGlomus属数種(未同定)であり、その分布、生態は、利用方式によって若干異なるようであった。