hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
断面 縮小管を用いた音響圧縮機内有限振幅波動解析

正弦波状に振動するピストンによって駆動された音響圧縮機用断面縮小閉管内気柱の有限振幅波動について、前年度、安定な周期解を得ることの出来るスキームとして確立した、時間2次、空間4次精度の陽的マコーマック法に基づく数値解析法を適用し、断面積縮小比1100の範囲で詳細な解析を行った。特に今年度は、壁摩擦項を考慮すると共に、あらたに音響圧縮機実動作を考慮した吐出・吸入部におけるバルブ作動条件に基づく境界条件を設定し、実動作に近い条件の下で解析を行った。なお、壁摩擦項については、瞬時流速に基づくものと、非定常性に基づくものを考慮した。解析結果より、以下のことが明らかになった。断面縮小比の減少と共に管閉端部圧縮比が増加するが、断面縮小比16以下では、衝撃波の発生がみられ、圧縮比増加割合に限界が現れる。断面縮小比が大きくなるとショックレスの共振状態が得られ、閉端部圧縮比も増加するが、50以上では断面縮小比の効果は顕著でなくなる。吐出・吸入バルブの実際の動きに基づく境界条件を導入した解析結果においては、波動現象の不安定性がみられ、更なる境界条件の改良が必要であることが明らかになった。つぎに、実験的検証結果について述べる。初年度制作した、最も断面縮小効果が顕著に現れると予想される指数関数状断面縮小の軸対称音響管(断面縮小比100)と、断面一定音響管を用い、電磁駆動加振機でピストンを駆動して管内気柱を共振点近傍で励振し、管内波動状態を実測した。本年度は、駆動ピストンを新たに制作するとともに、系全体の剛性を高めて、測定精度の向上を図った。さらに、高精度変位計の導入により、ピストン変位計測の精度を1桁向上させた。得られた実測結果では、断面積一定の管内圧力変動における実測値と数値解析結果は、極めて良い一致を示したが、断面縮小管については、実測値と数値解析結果との一致が得られず、断面縮小比が大きいときの本解析法の問題点が明らかになった。
チトクロームP450の活性部位の設計原理-非天然型アミノ酸の部位特異的導入法を用いてアミノ酸残基の役割を解明する-

本研究では、細菌のチトクロームP450(P450)を用い、活性部位の設計原理を解明することを目的とする。このP450はカンファー水酸化酵素系(プチダレドキシン(Pb)、Pb還元酵素そしてP450から成る)の末端酸素添加酵素であり、次の反応を触媒する。この反応でP450はd-camphor+NADH+O_2+H^+→5-exo-hydroxycampor+NAD^++H_2OPdにより2度1電子還元される。最初は酸化型の、次は酸素化型反応中間体の還元である。P450の分子表面に位置するArg112が、この2度の還元反応に必須であることが本年度明らかになった。各種112変異酵素の反応動力学的な解析と酸化還元電位の測定から、Arg112の役割として、1)P450camとPdとの結合位であること、2)P450の酸化還元電位を調節する因子であることの2点が示唆された。P450camの活性部位に位置するThr252を水素基をもたない他のアミノ酸残基に置換すると、酵素反応で酸素は2電子還元された後、そのO-O結合が開裂されることなく過酸化水素として放出される。この結果から、我々はThrの水酸基がO-O結合開裂の酸触媒として働くと提唱した。今回このモデルを検証するためにThrの位置にThr-OCH_3を部位特異的に導入した。この標品は、P450に特徴的な紫外・可視の光吸収スペクトルを示し、従ってこの標品のたんぱく構造は野生型のそれにほぼ一致すると解釈された。次にPd還元酵素、PdそしてP450からなる再構成系でこの標品の酵素活性を測定したところ、酸素消費活性は野生型の3分の1に低下したが、消費された酸素のほぼ100%が1原子酸素添加反応に使われた。従ってこの人工アミノ酸をもつ変異酵素は、酸素のO-O結合開裂を効率よく触媒すると解釈され、従って我々の提唱したモデルと一致しなかった。本研究では、細菌のチトクロームP450(P450cam)を用い、活性部位の設計原理を解明することを目的とする。P450camはカンファー水酸化酵素系(プチダレドキシン(Pd)還元酵素、PdそしてP450camから成る)の末端酸素添加酵素であり、次の反応を触媒する。この反応のd-camphor+NADH+O_2+H^+→5-exo-hydroxycampor+NAD_++H_2O過程でP450camは、Pdにより2度1電子還元される。最初は酸化型の、次は中間体として生じた酸素化型の還元である。本年度はこの最初の還元反応に重要な役割を持つアミノ酸残基を明らかにした。P450camの分子表面に位置するArg112残基は、Pdとの結合に重要なだけでなく、Pdからの電子伝達に関わる残基であることを示した。この結果、活性部位への電子供給系の一端を初めて明らかにできた。また本酵素の活性部位に位置するThr252をAla等に置換すると、酸素消費速度にほとんど影響は認められないが、水酸化反応は起こらず酸素は過酸化水素になることを我々は既に報告している。

この過酸化水素は、反応過程で酸素が2電子還元された後、酸素のO-O結合が開裂してから生じた可能性が指摘されていた。しかし、本年度酸素の同位体を用いた実験を行いこの可能性を否定した。その結果ThrがO-O結合切断に必須である(酸触媒として働く)との従来の我々の見解が支持された。次に非天然型アミノ酸の導入について述べる。試験管内でのたんぱく合成を利用するSchutzらの方法は原理において正しく、我々はこの方法を用いる。この方法でP450camに応用する際、ヘムを持った、しかも分子量の大きい(45KDa)たんぱく質が活性を持った形で合成されるかどうかが問題であった。本年度は、まずこの問題を解決した。そして非天然型アミノ酸の導入に必要な材料を集め、そしてとThr252にThr-OCH_3が導入されたP450camの合成に成功した。本研究では、細菌のチトクロームP450(P450)を用い、活性部位の設計原理を解明することを目的とする。このP450はカンファー水酸化酵素系(プチダレドキシン(Pd)、Pd還元酵素そしてP450から成る)の末端酸素添加酵素であり、次の反応を触媒する。この反応でP450はd-camphor+NADH+O_2+H^+→5-exo-hydroxycampor+NAD^++H_2O Pdにより2度1電子還元される。最初は酸化型の、次は酸素化型反応中間体の還元である。P450の分子表面に位置するArg112が、この2度の還元反応に必須であることが本年度明らかになった。各種112変異酵素の反応動力学的な解析と酸化還元電位の測定から、Arg112の役割として、1)P450camとPdとの結合位であること、2)P450の酸化還元電位を調節する因子であることの2点が示唆された。P450camの活性部位に位置するThr252を水酸基をもたない他のアミノ酸残基に置換すると、酵素反応で酸素は2電子還元された後、そのO-O結合が開裂されることなく過酸化水素として放出される。この結果から、我々はThrの水酸基がO-O結合開裂の酸触媒として働くと提唱した。今回このモデルを検証するためにThrの位置にThr-OCH_3を部位特異的に導入した。この標品は、P450に特徴的な紫外・可視の光吸収スペクトルを示し、従ってこの標品のたんぱく構造は野生型のそれにほぼ一致すると解釈された。次にPd還元酵素、PdそしてP450からなる再構成系でこの標品の酵素活性を測定したところ、酸素消費活性は野生型の3分の1に低下したが、消費された酸素のほぼ100%が1原子酸素添加反応に使われた。従ってこの人工アミノ酸をもつ変異酵素は、酸素のO-O結合開裂を効率よく触媒すると解釈され、従って我々の提唱したモデルと一致しなかった。
ポ-ランド初期身分制議会とcorona regni概念-1333〜1454年-

本研究は、「王国の王冠corona regni」概念の発達過程を通して、議会制を軸とするポ-ランドにおける国家構造の変容を跡付けるものである。以下、知見。(1)王冠という国家概念は、個人と職とは別者であり、不可譲渡としての権限は、個人にではなく、職に備わるという考え方をその基礎にもつ。つまり、王位という国家最高の職が王冠によって象徴されると同時に、国家自体も王冠が象徴する。したがって、王個人と王位=国家とを根本において分離するこの国王機関説は、ある条件下では、独自の権利をもつ国家が王と完全に分離し、なおかつ、その国権を社会(communitas=人民)の側が吸収し、取り込むということが起こる可能性を孕んでいる。(2)ガジミエシ大王(1333-70)時代。ル-シの併合を契機に多民俗国家としてのポ-ランドを表現する名称として王冠が導入される。(3)ル-ドヴィク(1370-82)時代。国家領土の不可譲渡性という王冠国家の基本的権利が確立すると伴に、国家が王と並ぶ主権の地位に達する。(4)空位期(1382-84)。王冠に象徴される国家とともに、身分制社会がcommunitasの名で国家の統治主体として登場する。(5)ヤギェウォとヤドヴィ-ガ(1386-99)時代。ヤドヴィ-ガ女王の親政とともに社会は統治主体の地位から脱落する。(6)1420年時代。王冠に臣従宣誓すればポ-ランドの臣民全体を君主として見做ざるをえないというマゾフシェ諸公の言葉に示されるように、王冠即ちポ-ランド国家とcommunitasとが同一視される。これは、ヤドヴィ-ガとアンナの相次ぐ死によってカジミエシ大王の血が途絶え、王位の世襲制が消滅したことと関連している。(7)14世紀末から15世紀前半のcommunitasは、概ね国王評議会によって主導されるものの、重要な案件については諸身分の代表がこの評議会に参加するという形のいわば拡大評議会が開かれており、これを初期身分制議会と見做すことができる。以下、知見。
拡散集団の食生態と時空分布(同位体による古栄養学、AMS法による年代測定)

本研究二年目の平成2年度は、出土人・獣骨の年代測定と食性分析を日本列島に限らず南洋諸島やチベットの試料に拡大した。さらに、古い年代の^<14>C年代測定と食性解析に必要な基礎研究も行なった。1.遺跡出土人骨の安定炭素・窒素同位体( ^<13>C・^<15>N)による食性解析ー(1)関東地方の縄文人は海岸近くに居住していても、陸上食物の依存度が高かった。(2)南洋諸島の住民は、海産物と海島を主な食資源としていた。(3)チベットでは、農耕民でもC4雑殻の利用は少なく、麦類のC3植物と乳製品など動物食品に依存していた。2.食資源に関する基礎同位体デ-タの集積ー木の実・海産物の収集とそれらの^<13>C・^<15>Nを測定した。(1)北海道・東北の近海魚類のこれらの同位体組成は、過去6,000年にわたり変化なかった。(2)日本列島産の堅果類の炭素同位体組成は、過去数千年間に変化がみられ、正確な食性解析のためには年代別の詳細な検討が必要であることが判明した。3.日本列島の7ケ所の遺跡から出土した人骨47試料の加速器^<14>C年代測定を行い、土器編年からの推定年代とほぼ一致すること、及び遺跡によっては千年以上も年代幅があり、長年の居住が証拠ずけられた。4.野尻湖層から出土したナウマンゾウ・オオツノシカの獣骨及び野尻湖人の木製生活用具の^<14>C年代測定を行なった。その結果、50,00035,000年前にナウマンゾウと野尻湖人が生活していたことが明らかになった。これは従来推定されていた年代よりも10,00015,000年も古い年代であり、氷河期の比較的暖かい亜氷期に入りつつある時期である。また、この頃のナウマンゾウの棲息から、日本列島と大陸間の陸橋の存在と、それを通じての人類・文化の交流が推測される。
自然肝発癌するNASHモデルマウスでのPPAR-αを介した発癌抑止の分子機構

自然肝発癌モデルマウスであるMC4R KOとMC4RとPPAR-αのdouble KOマウスは共に通常食の給餌下でも極めて強いインスリン抵抗性を示し、脂肪酸合成関連の遺伝子や炎症関連遺伝子、脂肪酸β酸化およびω酸化関連遺伝子群やスカベンジャー受容体遺伝子の発現は増強していた。また、炎症性細胞浸潤に伴いIL-6遺伝子の発現亢進も認められた。しかしながら、48週齢の検討では、MC4R KOマウスにおける肝腫瘍発生数に比べてMC4RとPPAR-αのdouble KOマウスでは腫瘍数が有意に少なく、このモデルにおいても肝発癌におけるPPAR-alphaを介した肝発癌促進系の関与が示唆された。肥満人口の増加に伴って非アルコール性脂肪性肝疾患が急増し、肝臓の線維化進展の速やかな非アルコール性脂肪肝炎(NASH)の増加が生じている(J Gastroenterol. 2012 ;47:586-595.)。このため10年後には肝硬変が1.3倍、肝細胞癌の3割弱がNASH由来となるのではないかと、危惧されている。NASHの予後を規定する因子としては肥満に伴う生活習慣病が最も重要であるが、無症候で慢性肝疾患が肝硬変・肝細胞癌へと進展するため肝疾患に対する配慮が不可欠である。摂食中枢に異常を有するヒトの遺伝性肥満症の一つであるMC4R欠損症でNASHが好発(J Pediatr Gastroenterol Nutr. 2014;58:155-159.)し、同遺伝子の欠損マウスでもNASH(Am J Pathol. 2011;179:2454-2463.)に伴う肝細胞癌が好発することに着目し、NASHからの肝発癌の分子機構を検討し、NASHからの肝発癌の抑制・予防に生かしたいと願っている。1(西原利治)...MC4R KO自然肝発癌モデルマウスは通常食の給餌下でも極めて強いインスリン抵抗性を示す。8週令に達すると空腹時血糖は正常であるが、野生型に比して高インスリン血症を示す。高脂肪負荷では顕著な高インスリン血症にも関わらず空腹時血糖の上昇も認められた。このような変化は20週令に至るまで持続した。また、MC4RとPPAR-αのdouble KOマウスでは通常食の給餌下では野生型に比してインスリン抵抗性が軽減されたが、20週令では野生型に比して耐糖能の低下がより顕著となり体重の減少を生じたためにインスリン感受性は野生型と同等であった。2(戸田勝巳)...8週令のMC4R KOマウスでは、既知の脂肪酸合成関連の遺伝子の発現が増強され、炎症関連遺伝子の発現も増強された。脂肪酸β酸化およびω酸化関連遺伝子群やスカベンジャー受容体の発現も継時的に増強された。3(耕﨑拓大、水田洋)...計画的にMC4R KO自然肝発癌モデルマウスの繁殖を進め、ノックアウト遺伝子のgenotypingを行い、安定的な供給に努める。また、PPAR-α遺伝子をKOすることにより、発癌抑止効果を検討するためにKO個体の集積に努めている。予備的検討では、炎症性細胞浸潤に伴いIL-6の発現亢進が認められ、このモデルにおける自然肝発癌に関与する可能性を考えている(Science 317(5834):121-124,2007)。MC4R KO自然肝発癌モデルマウスは通常食の給餌下でも極めて強いインスリン抵抗性を示す。しかし、16週令より尿糖が急激に増加し、体重の減少を認める個体が増加した。そこで、12週令よりインスリングラルギンを投与して尿糖を軽減したところ、その後の体重を維持することができ、48週令での検討を行った。また、MC4RとPPAR-αのdouble KOマウスでは通常食の給餌下では野生型に比してインスリン抵抗性が軽減されたが、20週令では野生型に比して耐糖能の低下がより顕著となり、多量の尿糖が続き体重の減少を生じたためにインスリン感受性は野生型と同等となった。そこで、12週令よりインスリングラルギンを投与して尿糖を軽減したところ、その後の体重を維持することができ、48週令でMC4R KOとの比較検討を行うことができた。8週令のMC4R KOマウスでは、既知の脂肪酸合成関連の遺伝子の発現が増強され、炎症関連遺伝子の発現も増強された。自然経過では体重の減少とともに、その発現が低下したが、インスリンを併用して体重を維持することにより高発現を維持することができた。炎症性細胞浸潤に伴いIL-6の発現亢進が認められたが、これもβ細胞の枯渇に伴いその発現が抑制されたが、インスリンを併用して体重を維持することにより炎症細胞浸潤を維持することができ、IL-6の発現亢進を継続することが可能であった。今回の研究の最大のネックはPPAR-alphaとMelanocortin receptorのdouble knockout mouseの作出であったが、順調にマウスが生まれ、統計解析が可能な疋数を確保できている。

耐糖能の障害により20週令前より体重の減少するマウスが多発したことは想定外であったが、その克服に努めている。MC4R KO自然肝発癌モデルマウスは通常食の給餌下でも極めて強いインスリン抵抗性を示す。8週令に達すると空腹時血糖は正常であるが、野生型に比して高インスリン血症を示す。このような変化は20週令に至るまで持続した。しかし、16週令より尿糖が急激に増加し、体重の減少を認める個体が増加した。そこで、12週令よりインスリンを投与して尿糖を軽減したところ、その後の体重を維持することができた。他方、MC4RとPPAR-αのdouble KOマウスでは野生型に比してインスリン抵抗性が軽減されたが、20週令では野生型に比して耐糖能の低下がより顕著となり、多量の尿糖が続き体重の減少を生じてインスリン感受性は野生型と同等となった。そこで、MC4R KOと同様に12週令よりインスリンを投与して尿糖を軽減したところ、その後の体重を維持することができた。8週齢以降のMC4R KOマウスでは、既知の脂肪酸合成関連の遺伝子の発現が増強され、炎症関連遺伝子の発現も増強された。脂肪酸β酸化およびω酸化関連遺伝子群やスカベンジャー受容体の発現も継時的に増強された。自然経過では体重の減少とともに、その発現が低下したが、インスリンを併用して体重を維持することにより高発現を維持することができた。炎症性細胞浸潤に伴いIL-6の発現亢進が認められたが、これもβ細胞の枯渇に伴いその発現が抑制されたが、インスリンを併用して体重を維持することにより炎症細胞浸潤を維持することができ、IL-6の発現亢進を継続することが可能であった。このため48週齢の検討では、MC4R KOマウスにおける肝腫瘍発生数に比べてMC4RとPPAR-αのdouble KOマウスでは腫瘍数が有意に抑制できた。自然肝発癌モデルマウスであるMC4R KOとMC4RとPPAR-αのdouble KOマウスは共に通常食の給餌下でも極めて強いインスリン抵抗性を示し、脂肪酸合成関連の遺伝子や炎症関連遺伝子、脂肪酸β酸化およびω酸化関連遺伝子群やスカベンジャー受容体遺伝子の発現は増強していた。また、炎症性細胞浸潤に伴いIL-6遺伝子の発現亢進も認められた。しかしながら、48週齢の検討では、MC4R KOマウスにおける肝腫瘍発生数に比べてMC4RとPPAR-αのdouble KOマウスでは腫瘍数が有意に少なく、このモデルにおいても肝発癌におけるPPAR-alphaを介した肝発癌促進系の関与が示唆された。MC4R KOマウスは通常食の給餌下でも極めて強いインスリン抵抗性を示した。8週令に達すると空腹時血糖は正常であるが、野生型に比して高インスリン血症を示した。高脂肪負荷では顕著な高インスリン血症にも関わらず空腹時血糖の上昇も認められた。このような変化は20週令に至るまで持続することが明らかとなった。そこで、継時的な基礎的検討の詰めは今後随時行うとして、発癌頻度を評価するための実験が時間を要するため、こちらの実験を優先して行うことにする。MC4RとPPAR-αのdouble KOマウスでは通常食の給餌下では野生型に比してインスリン抵抗性が軽減されたが、20週令では野生型に比して耐糖能の低下がより顕著となり体重の減少を生じたためにインスリン感受性は野生型と同等であることが分かった。
半導体特殊材料ガスによる急性肺水腫発現メカニズムに対する生理学的機序の基礎的検討

1、半導体材料ガスとして新しく年次使用量の増加しているジボラン(B_2H_6)およびホスフィン(PH_3)に焦点を当て、前者に関して昨年に引き続き吸入曝露実験を行い、後者に関して心電図変化ならびに血圧等の生理学的指標の測定システムを検討した。2、ACGIH勧告のジボランのTLV-TWA,0.1ppmを目標に4週間、8週間曝露を行い、気管支肺胞洗浄液の解析を行ったところ有意な変動を観察した。3、ジボラン吸入曝露実験中の心電図変化をモニターするため、ホルター心電図の電極部分を改造したシステムを用意し、24時間記録の予備実験を行った。4、ホスフィンはヒトの中毒例では心電図異常を高頻度で来す事が知られているため3項で得られた知見をもとに非抑制下でラットの心電図を記録するシステムを検討した。この為の器材を購入準備した。5、同様に非抑制下でラットの血圧変動をモニターする埋め込み式の血圧測定システムを検討した。6、以上につき現在解析中、および以上の器材を活用した実験デザインを検討中である。
拡散光を用いた皮膚組織の近赤外分光

近赤外光を照射して皮膚下細胞内外の液中の健康指標のグルコース、アルブミンなどの測定のための光ビームの侵入深さ、伝搬長、偏光の変化、ビーム広がり等をモンテカルロ計算で明らかにした。次に水に溶解したグルコースの測定を行い、低濃度グルコース量の測定は難しいことを明らかにした。その過程で超音波的発生したバブルにより、重い水の水素結合を切断することを試みた。この実験結果からグルコースそのものではなくグルコースの安定状態に移行する過程により濃度が測定できることを利用した測定法を提案した。更に拡散光を用いた生体測定においてイオントフォレシスができるよう、電圧を加えながら分光測定ができる透明電極を開発した。また活性酸素計測のための表面波プラズモンセンサを開発した。本年度前半はハロゲン光源からの近赤外光の偏光の変化と反射光に含まれる情報の変化について調べるため偏光板の0.01度間隔で偏光板を回転するステッピングモータ駆動ステージロッドを試作した。また測定時の通電時間に対してハロゲン光源のスペクトルが変動しこれを抑える光源の空冷ファン制御システムも付与した。本年度最初の実験では、入射光の偏光を偏光子の回転角によって制御し、手皮膚の反射特性を測定した。皮膚からの反射光は、表皮の角質層、コラーゲン、メラニン、水分子、グルコースなどの偏光方向の選択によって特性が異なる事が分かった。角質層の反射やコラーゲンの散乱では偏光状態の変化は余り生じず、細胞液水分子では偏光の変化が大きいことが分かった。また非接触で皮膚の温度を測り、特定のスペクトルと関係があるが否か調べた。次に水溶液に溶解したグルコース、卵白(タンパク質)量を、その濃度が同定できるか否か調べた。グルコース、アルブミンは15001600nm1450nm付近に吸収ピークを持ち検出され易いといわれているが、前者は濃度が0.1Wt%程度になると測定できなかった。水分子や水クラスター分子よる熱的移動や振動が測定値を変動させた。更に、細胞液の中に電解質、グルコースが溶かした水溶液で水クラスター分子の切断により電気双極子を増やす実験を行った。切断手段として超音波マイクロバブルを用いた。OH基発生の指標となる波長970nm、1300nmの吸収を観察してOH基の増加を確認した。水分子を切断して水クラスターが再構成される過程でグルコースがどのように働くかを調べた。水分子切断後の分光吸収の過渡特性では、変動が数分に渡り極めて遅く、分子量の大きいクラスター分子の運動と解釈された。卵白ではタンパク質が関与することが推定された。実験結果の一部は、2007OPTICS JAPANやソノケミストリーの国際会議で報告した。モンテカルロ計算により、皮膚内部へ入射角を変化したとき、後方散乱光から近赤外光の侵入深さ、平均拡散距離、深さに対する偏光情報などを計算した。斜入射でも平均侵入深さは垂直入射より長く約0.5mmで平均拡散距離は2.1mm程度となった。表皮(<0.2mm)からの散乱は入射の元の偏光状態をかなり残しているが、真皮(0.22mm)では偏光は殆どランダムになり、生体情報に必要な細胞間液に含まれる、イオン、グルコース、アルブミンなどは十分測定できることが分かった。手の甲について、斜入射角を変えたときの後方散乱光の情報が異なることや細胞間液内の水分の現われ方に大きな違いがあることを見出した。次に細胞間液中に浮遊するイオンなどの吸収を検知するため、特にグルコースが溶けた場合を調べた。その結果、人体の溶解グルコース濃度付近(70mg/dl)では、ランバート・ベールの法則から外れて測定できないことが分かった。これは、水の水素結合によるクラスターが色々な結合状態を作り吸収が変化するためと推測された。これを回避するためマイクロバブルを照射して水素結合を切断し、バブル消滅後、水素結合が再構築される時間変化から、グルコース濃度を±25mg/dlの精度で測定できる方法を考案した。グルコースは大きな分子であり、水素結合のネットワークの構成時間がその量移動が異なるからである。更に皮膚表面に弱い電圧を加えて内部のイオンを集めるためイオントフォレシスを行うため透明電極の開発を試みた。誘電体薄膜ZnOと銀薄膜Agで透過率90以上の透明薄膜を作成することに成功した。この膜ではサーフェイスプラズモンが励起でき、局在電場による増強を計られることも確認できた。
脂肪組織の可塑性とアドレナリン受容体・グルココルチコイド受容体発現との関連

β_2アゴニスト・clenbuterol(CLE)と合成グルココルチコイド・dexamethasone(DEX)が白色脂肪、褐色脂肪の各種アドレナリン受容体、グルココルチコイド受容体、各種脱共益型蛋白質(UCP) mRNA発現に及ぼす影響を検討した。また、これら受容体発現と脂肪組織の可塑性との関連を合わせて検討した。CLE投与により白色脂肪のみ減少したが、DEX投与では白色脂肪組織である腎周囲脂肪と褐色脂肪の重量は減少した一方で白色脂肪組織の精巣周囲脂肪の重量は増加した。これら応答性の違いと各種アドレナリン受容体,グルココルチコイド受容体、UCP mRNA発現パターンは脂肪タイプに依存していることが明らかとなった。[結果]CLE投与によりPED,PRE各重量は減少したが、β_<1-3>-AR、GRの発現は変化がなかった。Brownの重量は変化がなかったがβ_3-ARとGRの発現量が優位に上昇した。一方、DEX投与によりPED重量は増加、PRE重量は減少した。DEX投与による受容体遺伝子発現はPEDではβ_1-ARの発現が上昇、β_2-ARは減少、PREではβ_1-AR、GRが上昇、Brownではβ_1-,β_3-AR、GRが上昇し、β_2-ARは減少した。[考察]CLE、DEX投与による脂肪組織重量と各種AR、GRの遺伝子発現は脂肪組織ごとに異なることが明らかとなった。今後、脂肪分解反応を考えるうえで肥満ラットを用いて同様の検討を行うことが必要であり、脱共益型タンパク質(uncoupling protein)との関わりも検討する必要がある。また、CLE,DEXが脂肪組織の可塑性に及ぼす影響を検討することは体力科学、運動生理学、予防医学の観点からみても重要であると考える。[結果]高脂肪食を与えたラットはDEX投与によりPED重量は増加、PRE重量は減少した。この現象は通常食を与えたラットと同様であった。[考察]DEX投与による脂肪組織重量と各種AR、GRの遺伝子発現は脂肪組織ごとに異なることが明らかとなった。今後、脂肪分解反応を考えるうえで脱共益型タンパク質(uncoupling protein)との関わりも検討する必要がある。またDEXと同様に脂肪分解を惹起することが知られているClenbuterol(CLE)をラットに投与した際の応答性も確認していく必要がある。CLE,DEXが脂肪組織の可塑性に及ぼす影響を検討することは体力科学、運動生理学、予防医学の観点からみても重要であると考える。
理想化モデルを用いた，　竜巻を模した渦の力学に関する研究

発達した竜巻やダストデビルは、渦の中心に下端境界まで到達する下降流域の存在する2セル構造や多重渦構造を持つことが知られている。本研究の目的は、そのような渦に関する数値実験を柔軟な条件設定のもとで行うことを可能にする、平面の上方に広がる半無限領域においてナヴィエ・ストークス方程式を解くスペクトル法モデルの新しい手法に基づいた開発と、開発した数値モデルを用いて竜巻を模した渦の数値実験および渦の構造に関する解析を行い、竜巻やダストデビルのもつ渦の力学を明らかにすることである。本年度は、まず昨年度に行った、渦度の積分制約条件を利用した高精度半無限領域のスペクトル法による数値モデルの開発と、その検証のために行った高レイノルズ数での渦輪の壁衝突に関する数値実験についての研究を論文にまとめて投稿し、受理・掲載された。次に、開発した半無限領域のスペクトル法モデルを用いて竜巻を模した渦の二次元および三次元の数値実験を行った。その結果、二次元の数値実験では、開発した数値モデルの定式化に基づいた解析を行うことによって、竜巻を模した渦の2セル構造の軸対称力学が非常に明快に理解できることを明らかにした。また、三次元の数値実験では、開発した数値モデルを用いることで、竜巻を模した多重渦構造をもつ数値解が得られることを示した。最後に、これまでに行った研究を博士論文「大気中の微細渦の力学に関する数値的研究」にまとめた。28年度が最終年度であるため、記入しない。竜巻を模した渦の数値実験を行う上で必要となる,下端境界条件に柔軟な半無限領域の高精度スペクトル法モデルを開発した.非圧縮ナヴィエ-ストークス方程式を地面に粘着境界条件を課して解くとき,粘性項の時間積分に陰解法を用いると4階の偏微分方程式を解く必要があるが,水平方向あるいは鉛直方向に変数分離できないため大規模な問題を解かなければならない問題があった.本研究では, 4階の偏微分方程式を2つの2階の偏微分方程式方程式に分解し,水平方向の基底関数をうまく構築することで,各スペクトルについて, 2つの2階の常微分方程式に帰着させることに成功した.また, 2つの2階の常微分方程式それぞれ独立に求解できるように,渦度の積分制約条件を導出した.鉛直方向の展開にはチェビシェフ項式を用いるが,異なる境界条件についても柔軟に解くことを可能にするため,展開に工夫を施し,さらに境界値の精度を改善する手法を開発した.開発した数値モデルは従来の手法に比べ高解像度の数値実験では劇的に精度が改善されており,軸対称の数値計算においては10240(水平)×2560(鉛直)の格子点を確保した高解像度の数値計算が可能となった.また,開発した数値モデルの検証として,渦輪の壁衝突の数値実験も行った.以上の成果は,現在投稿論文として執筆中である.竜巻を模した渦の数値実験については遅れているが,数値モデルの開発については期待以上の進展が見られたため.発達した竜巻やダストデビルは、渦の中心に下端境界まで到達する下降流域の存在する2セル構造や多重渦構造を持つことが知られている。速度場の境界条件の代わりに渦度場の積分条件を導入したことにより,渦に対する粘着境界条件の影響について研究の新たな方向性が見えてきているため,竜巻を模した渦の数値実験の進捗によっては,そちらを優先して行う可能性がある.28年度が最終年度であるため、記入しない。
脂肪幹細胞と低酸素プレコンディショニング法を用いた血管・皮膚再生療法の開発

脂肪幹細胞(ASCs)は脂肪組織から精製される成体幹細胞で、再生医療において骨髄間葉系幹細胞に代わる幹細胞として注目されている。本研究では、脂肪幹細胞に対する低酸素の影響を検討した。脂肪組織をコラゲナーゼ処理することにより、脂肪幹細胞を得た。ASCsの細胞増殖は低酸素培養にて有意に促進した。低酸素下515分で、MAPキナーゼの中でも、ERK1/2のリン酸化が亢進した。HIF-1αの発現も認められた。低酸素培養下にてERK阻害剤、Akt阻害剤を添加したところ、増殖活性は抑制された。低酸素培養はASCsの増殖に影響を与え、その調節機構にはERK1/2、Akt経路とHIF-1αの関与が示唆された。近年、ヒト皮下脂肪組織中に存在する脂肪組織由来幹細胞(Adipose-derived Stem Cells: ASCs)の存在が報告され,骨髄由来幹細胞に代わる幹細胞として再生医療への応用が期待されている。一方、酸素濃度の変化が幹細胞の増殖性をはじめとする生理活性に影響を与えることが報告されているが、そのASCsへの影響については不明な点が多い。今年度は、我々は低酸素培養におけるASCsの増殖効果を検討した。方法:ヒト下腹部の正常脂肪組織を採取し、コラゲナーゼ処理によりASCsを調整した。低酸素下(1%)、通常酸素下(20%)にて培養を行い、ERK1/2阻害剤(PD98059)存在下・非存在下での細胞増殖度を検討した。低酸素培養におけるHIF-1αの発現とMAPキナーゼのリン酸化をWestern blot法で測定した。また、低酸素下(1%)、通常酸素下(20%)でのVEGFとFGF-2のmRNAの発現と産生量をそれぞれReal-time RT-PCRを用いて測定した。それぞれの増殖因子がASCsに与える増殖効果を検討した。結果:ASCsの細胞増殖は低酸素培養にて有意に促進し、その増殖効果はERK阻害剤の添加で抑制された。低酸素下515分で、MAPキナーゼの中でもERK1/2のリン酸化が亢進し、HIF-1αの発現も認められた。低酸素培養下でASCsにおけるVEGFとFGF-2のmRNA発現と産生量は有意に促進したが、両者のうちでASCsの増殖に影響を与えたのはFGF-2であった。結論:低酸素培養によりASCsの増殖は促進し、その調節機構にはFGF-2産生とERK1/2経路の関与が示唆された。近年、ヒト皮下脂肪組織中に存在する脂肪幹細胞( Adipose-derived Stem Cells: ASCs)の存在が知られるようになり,骨髄由来幹細胞に代わる幹細胞として再生医療への応用が期待されています。少量のドナーサイトから多量の幹細胞を得るためには、細胞の大量生産技術が求められているとともに、その増殖分化制御システムを解明することは科学の進歩に貢献するだけでなく、治療の効果や安全性を高めるのにも役立ちます。一方、酸素濃度の変化が種々の細胞の増殖性をはじめとする生理活性に影響を与えることが報告されていますが、そのASCsへの影響については未解明でした。本研究では低酸素培養におけるASCsの増殖効果を検討し、そのメカニズムについて解明を試みました。ASCsの細胞増殖は低酸素培養にて促進し、培養7日目では通常培養の1.6倍の細胞数に増加しました。その増殖効果はシグナル伝達系の阻害剤で抑制される一方、低酸素下ではこれらの活性化に伴う、HIF-1αの増加が認められました。低酸素培養下ではVEGFとFGF-2のmRNA発現と細胞外分泌量は促進しましたが、両者の増殖因子のうちでASCsの増殖に影響を与えたのはFGF-2であることを明らかにしました。FGF-2遺伝子のHIF-1α結合部位を明らかにして、HIF-1αのノックダウンはFGF-2のmRNAを低下させることをみつけました。従って、脂肪幹細胞の低酸素下の増殖促進機構にはHIF-1αの発現を介したFGF-2の作用が関与することを解明しました。低酸素が種々の細胞の増殖性をはじめとする生理活性に影響を与えることが報告されているが、そのASCsへの影響は不明であった。今回、その増殖効果とメカニズムの一部が明らかになり、論文報告もできたため、おおむね順調に進展していると考えられる。本研究では低酸素培養における脂肪幹細胞の増殖効果を検討し、そのメカニズムについて解明を試みた。脂肪幹細胞の細胞増殖は低酸素培養にて促進し、その増殖効果はシグナル伝達系の阻害剤で抑制される一方、低酸素下ではこれらの活性化に伴う、HIF-1aの増加が認められた。低酸素培養下ではVEGFとFGF-2のmRNA発現と細胞外分泌量は促進したが、両者の増殖因子のうちでASCsの増殖に影響を与えたのはFGF-2であることを明らかにした。FGF-2遺伝子のHIF-1α結合部位をCHIPAssayにより明らかにして、HIF-1aのノックダウンはFGF-2のmRNAを低下させることを発見した。従って、脂肪幹細胞の低酸素下の増殖促進機構にはHIF-1aの発現を介したFGF-2の作用が関与することを解明した。本研究から、低酸素下における脂肪幹細胞の増殖促進機構が明らかになった。

低酸素下の脂肪幹細胞は増殖が促進し、FGF-2やVEGFなどの増殖因子も多量に分泌することが分かった。これらの低酸素培養法や増殖因子が分泌された培養上清は、今後の再生医療応用への利用に役立つものと考えられ、研究成果はPLoS Oneにて論文発表し、日経新聞、他、共同通信ら電子版メディア25紙に掲載された。さらに、近年あらたに報告された低酸素誘導因子活性化剤であるn-propylgallate (nPG)を脂肪幹細胞に添加し、nPG投与により低酸素誘導因子が活性化して、脂肪幹細胞の増殖が促進するというパイロットデータを得た。脂肪幹細胞(ASCs)は脂肪組織から精製される成体幹細胞で、再生医療において骨髄間葉系幹細胞に代わる幹細胞として注目されている。本研究では、脂肪幹細胞に対する低酸素の影響を検討した。脂肪組織をコラゲナーゼ処理することにより、脂肪幹細胞を得た。ASCsの細胞増殖は低酸素培養にて有意に促進した。低酸素下515分で、MAPキナーゼの中でも、ERK1/2のリン酸化が亢進した。HIF-1αの発現も認められた。低酸素培養下にてERK阻害剤、Akt阻害剤を添加したところ、増殖活性は抑制された。低酸素培養はASCsの増殖に影響を与え、その調節機構にはERK1/2、Akt経路とHIF-1αの関与が示唆された。研究計画に沿った実験をおこない、成果をあげることができた。来年度はこの結果をふまえて、さらに脂肪幹細胞の増殖とHIFの関連について研究する予定である。本研究から、低酸素下における脂肪幹細胞の増殖促進機構が明らかになった。低酸素下の脂肪幹細胞は増殖が促進し、FGF-2やVEGFなどの増殖因子も多量に分泌することが明らかになった。これらの培養法や増殖因子が分泌された培養上清は、今後の再生医療応用への利用に役立つものと考えられる。今後、研究をさらに発展させ、低酸素環境が脂肪幹細胞形質の維持や分化の調節などにおいて影響を与えるかどうかを検討していく予定である。形成外科来年度はsiRNAを用いたHIFのノックダウンをおこない、低酸素下におけるHIFの役割について検討する予定である。購入予定であった試薬が海外受注製品であるため、3月に発注したが、納品が3月中に間に合いそうになかったため、来年度の購入に廻したから。執行率は98.7%であり、ほとんど当該年度内に執行できている。金額に端数分を次年度に繰り越した。実験用試薬(細胞外基質:ラミニン、エンタクチン等)次年度の消耗品の購入に充当する。
神社資料の多面性に関する総合的研究-古社の伝存資料と神社機能の分析を中心に-

本研究で得られた知見の一部をあげれば以下のとおりである。第一に、古代の神社の多くが原初について不明であるがその点自体が重要な意味をもつ。出雲大社の場合でも、記紀神話によるイメージが広く流通しているが、歴史的にその存在が確認できる最初期の文献史料は天平神護元年(765)に神封61戸を充てたとする『新抄格勅符抄』の記事である。神話解釈とは別の次元で歴史考古学的な実証研究が不可欠である。第二に、通史的にみて、14世紀(南北朝期)と16世紀(戦国期)に衰退や退転を経験し17世紀になって復興が行われた歴史をもつ神社が多い。その大きな衰退を経験しなかった神杜の所蔵資料の価値は高く、厳島神社の例など貴重である。奉納銘のある遺品や関連の古文書を添える遺品もあり、武器武具の編年、兵杖と儀杖との関係論、神宝論などの上で貴重な資料情報となる。また、膨大な近代の社務日誌類は、海浜に立地する特別な条件下で如何に自然災害に対処し克服して神社を維持してきたか、修復技術をはじめ歴史情報が得られて貴重である。第三に、神社の杜、社叢は象徴的な意味をもたされやすいが、その植生の変遷史は確実であり、老木に見える場合でも樹齢は比較的若いという事実も重要である。祇園八坂1神社の場合でも、近世の文献や絵図からは祇園といえば松林が一般的であったことがわかるが、現在ではそれに代わって常緑広葉樹のクスノキが主要な樹種となってきている。そうした中で注連縄を張られた老木は枯木の巨株も含めて落葉広葉樹のムクノキかエノキで、それらはかつて松とともに重要な位置を占めていた樹種であったと考えられる。しかし、それらも近世には若木であり樹齢も近世初期以前に遡れる可能性は少ない。祇園の杜は今後ますます害虫や病気に強いクスノキを主体とする照葉樹林となっていくものと予想される。このような神社の杜の樹木調査の重要性が再認識された。平成15(2003)年度は、主として次の三つの作業を行った。第一は、厳島神社の資料調査の継続である。とくに近代の自然災害と神社の防災修復の歴史に関する所蔵文書の写真撮影と解読の作業を継続した。また神社周辺の植生調査も維続した。とくに、本研究成果の社会還元のひとつの方法として、研究論文集の刊行や資料集の刊行とは別に、勤務先の博物館における平成17年度の特別企画展示「日本の神々と祭り」(仮題)を構想しており、その準備的な資料情報研究を厳島神社と出雲大社、祇園八坂神社について実施した。記紀神話に登場して日本の神社の代表的なものと位置づけられている出雲大社、また平氏の篤い信仰をあつめて寝殿造りの建築様式を今日まで伝えるとともに、海上交通の要衝に立地して、多くの神社が衰亡する南北朝期、戦国期においても、社殿を維持して多くの奉納品を保存し貴重な文化財として今日まで伝世させたいわば歴史を超えた典型的な神社としての厳島神社、そして古代都市における疫病や怨霊を鎮める信仰を基盤とする幅広い神仏習合の信仰と華美な都市祭礼とでその典型的な例とされる祇園八坂神社、という三社について、研究成果の展示へむけての準備を進めた。

第二は、その祇園八坂神社を中心として、日本各地に展開している祇園信仰の全国的な分布実態に関する情報について、神社本庁が作成している「全国神社祭祀祭礼総合調査」の成果を活用しながら、あらためて確認と追跡の作業を進めた。第三は、新しく八幡信仰に関する資料調査を開始して、宇佐八幡宮、石清水八幡宮、鶴岡八幡宮、およびその他全国各地に広がる八幡信仰に関する研究文献目録の作成を進めており、それは現在進行中である。今年度は、主として次の三つの作業を行った。第一は、昨年度から開始した八幡信仰に関する資料調査を継続し、宇佐八幡宮、石清水八幡宮、鶴岡八幡宮、およびその他全国各地に広がる八幡信仰に関する研究文献目録の作成を行い、その成果を『文献目録-宇佐八幡宮・石清水八幡宮・鶴岡八幡宮-』(166頁、2005年3月)として刊行した。第二は、本研究成果の社会還元のひとつの方法として、研究論文集の刊行や資料集の刊行とは別に、勤務先の国立歴史民俗博物館における2005年度の特別企画展示「日本の神々と祭り」を構想しており、その準備的な資料情報研究を厳島神社と出雲大社、祇園八坂神社そして伊勢神宮について実施した。記紀神話に登場して日本の神社の代表的なものと位置づけられている出雲大社、また平氏の篤い信仰をあつめて寝殿造りの建築様式を今日まで伝えるとともに、海上交通の要衝に立地して、多くの神社が衰亡する南北朝期、戦国期においても、社殿を維持して多くの奉納品を保存し貴重な文化財として今日まで伝世させた典型的な神社としての厳島神社、古代都市における疫病や怨霊を鎮める信仰を基盤とする幅広い神仏習合の信仰と華麗な都市祭礼とでその典型的な神社である祇園八坂神社、そして20年に一度の式年遷宮を現在にいたるまで伝え、その度ごとに御神宝の奉納が繰り返し行われている伊勢神宮、という四社について、研究成果の展示へむけての準備を進めた。これに関連して、継続中の厳島神社の資料調査の成果の一つとして仁治2年(1241)再建当時の社殿復元図の作成を行った。それに基づいて建築模型を製作し展示する予定である。第三に、祇園八坂神社を中心として日本各地に展開している祇園信仰の全国的な分布に関する情報について、神社本庁が作成している「全国神社祭祀祭礼総合調査」の成果を活用しながら、詳細な資料調査を継続している。今年度は,第一に,昨年度作成した『文献目録-宇佐八幡宮・石清水八幡宮・鶴岡八幡宮-』をもとに八幡信仰に関する補遺の集成と研究動向の分析作業を行った。第二は,勤務先である国立歴史民俗博物館の特別企画展示「日本の神々と祭り-神社とは何か?-」(平成18年3月5月)における,出雲大社,厳島神社,祇園八坂神社そして伊勢神宮のケーススタディを中心として本研究成果の具体的社会還元を試み,図録(247頁)の作成もあわせ行った。本研究の特色としては神社を信仰や宗教の歴史的文化的施設とみると同時に,その立地や環境から環境保存機能や公園的機能,自然動植物園的機能,また,建築構造物維持の上では建築工芸技能の保存伝承機能,美術工芸品や古文書・古記録類の所蔵と保存の上では美術館・博物館・資料館・図書館などの諸機能,伝統的な祭礼からは儀礼や芸能の保存伝承機能などきわめて多面的な機能を有する文化的有機的な構造物と見る視点に立って歴史学,考古学,民俗学をはじめ,建築工芸史,植生変遷史などの分野の共同研究を行ってきたが,展示および図録において次のような点を成果としてあらわすことができた。建築史学の見地からは,厳島神社の防災の知識と技能,植生変遷史の見地からは,神社の森の樹種の大きな変遷,有職故実の見地からは,狭義の神宝とは武具,紡績具,琴を中心とした宝物であることなどが確認された。他に,祇園信仰の広がりや各神社の古伝祭についてなど各分野の調査結果を得ることができた。
ガスハイドレート分解および生成に伴う地盤の環境変動予測手法の開発

南海トラフ海底におけるハイドレート含有地盤を模擬するため,CO2ハイドレートを含有する模擬試料を作製し,減圧法による分解実験を実施し,地盤変形挙動および温度変化を計測した.また分解-変形連成解析手法を開発し,これにより分解実験のシミュレーションを行い解析手法について検証した.その結果,提案した解析手法により分解時の温度変化,沈下挙動等についてよく再現できることを確認した.南海トラフ海底におけるハイドレート含有地盤を模擬するため,CO2ハイドレートを含有する模擬試料を作製し,減圧法による分解実験を実施し,地盤変形挙動および温度変化を計測した.また分解-変形連成解析手法を開発し,これにより分解実験のシミュレーションを行い解析手法について検証した.その結果,提案した解析手法により分解時の温度変化,沈下挙動等についてよく再現できることを確認した.CO2ハイドレート含有試料を用いた分解実験を実施し、減圧法による分解挙動について考察した。特に地盤材料の間隙率およびハイドレート飽和度が沈下挙動に及ぼす影響について検討するため、これらの条件を変えて実験を実施した。ハイドレート試料作製および分解実験については,研究協力者である清水建設技術研究所の所有するハイドレート作製装置を使用した。母材とする土試料として豊浦砂を使用し、氷置換法によりCO2ハイドレート含有試料を作成した。氷置換法は、含水比を調整した試料を一旦冷凍した後、供試体中にガスを封入した状態で温度を0度以上に上昇させ、間隙中の氷を融解させるとともにハイドレートに置き換える方法である。分解試験装置は、高圧セル内にアクリル製の一次元圧密容器を設置したものを用い、容器内に試料を設置した。軸荷重制御と外部に付属している圧力発生装置により間隙圧制御が可能である.圧密容器内の間隙圧を初期状態(3MPa)から設定圧力(1.5MPa)まで一定速度で低下させることにより、供試体内のハイドレートを分解させ、分解中の軸変位,圧力発生装置変位、および圧密リング内の上部,中部,下部の3点で温度を測定した.実験結果より、減圧開始後より沈下が進行するが、分解開始後は沈下速度が増加することが分かった。また、間隙比が大きいほど沈下が大きく生じた。さらに、分解-変形連成解析手法を開発し、これにより分解実験のシミュレーションを行い解析手法について検証した。今回は実験と解析で温度境界条件が異なり,また実験は一次元変形であるのに対し,解析は平面ひずみ条件であることなど条件の違いはあるものの、提案した解析手法により分解時の温度変化、沈下挙動等について定性的によく再現できることを確認した。南海トラフ海底におけるハイドレート含有地盤を模擬するため、CO2ハイドレートを含有する模擬試料を作製し、減圧法による分解実験を実施した。特に減圧速度と地盤材料の間隙率が沈下挙動に及ぼす影響について検討するため、これらの条件を変えて実施した。軸荷重制御と外部に付属している圧力発生装置により間隙圧制御が可能である.圧密容器内の間隙圧を初期状態(3MPa)から設定圧力(1.5MPa)まで3種類の速度で低下させることにより、供試体内のハイドレートを分解させ、分解中の軸変位,圧力発生装置変位、および圧密リング内の上部,中部,下部の3点で温度を測定した.実験結果より、沈下速度は減圧速度が大きいほど大きくなるが、最終的な沈下量は減圧速度によらずほぼ一定となることが分かった。間隙比については、大きいほど最終的な沈下量が大きくなった。今回は実験と解析で温度境界条件が異なり,また実験は一次元変形であるのに対し,解析は平面ひずみ条件であることなど条件の違いはあるものの、提案した解析手法により分解時の温度変化、沈下挙動等についてよく再現できることを確認した。
いじめに関わる人物の行動に影響する要因の研究

申請者は、オストラシズム目撃課題を用いて、オストラシズム(仲間はずれ)に遭遇した場合に、オストラシズムの目撃に関連する「状況」が個人差に拘わらず、参加者がオストラシズムに加担するか否かに影響を及ぼすかどうかを検討することによって、いじめに遭遇した時の状況要因の影響について検討した。いじめではオストラシズム発生後にも集団の関係が持続するという点に着目し、課題後に相互作用があることを期待させるかどうかという要因について(事後の相互作用の有無)その影響を検討した。また、協同作業で足を引っ張るものが被害に遭うといういじめ研究の知見から、オストラシズムの被害者が集団の協同作業を妨害するという状況についても(妨害)検討した。計画はオストラシズム発生(有無)、事後の相互作用(有無)、妨害(有無)の8要因被験者間計画で、女子大学生を対象に実験を実施した。その結果、事後の相互作用の有無、妨害の有無はいずれも主効果を持たなかった。交互作用は見られなかった。オストラシズムの有意な主効果が見られたが、オストラシズム有群の方が有意に被害者を助けるという援助的な結果が得られた。よって、本研究ではいじめ研究で指摘されてきた状況的要因によっていじめに加担するという結果は得られなかった。この結果がパラダイムの不備によるものかは今後の検討が必要であるが、本研究はいじめの目撃者の行動について検討するパラダイムを提案したものであった。26年度が最終年度であるため、記入しない。従来のいじめに関する研究では、いじめの集団における生起という特徴が反映された量的な研究は少なく、主に加害者の攻撃性や情緒的共感性などの個人差が扱われてきた。一方、社会心理学の分野で検討されてきたオストラシズムという現象がある。オストラシズムとは、個人や集団によって社会的に排除や無視されることである。オストラシズムに遭遇した際に、人がどのような行動をとるかどうかを検討することで、いじめの集団的な性質について検討することが可能となる。そこで、本研究は、オストラシズムの実験パラダイム(Williams, 2009)を元に、オストラシズムに遭遇した人物の行動及び感情への影響を検討した。本年度は、本研究の一環として実験1を実施した。実験1では、女子大学生を対象に、5人で行うボールトスゲームにおいて、1人が仲間外れにされるかどうか(オストラシズムの有無)、及び集団の要因として試行の後の凝集性の高低(2)×対人相互作用の予期の有無(2)の3要因被験者間計画であった。その結果、オストラシズムの主効果が有意に見られ、オストラシズムに遭遇した場合、オストラシズムに加担しないという結果が見られた。そして、対人相互作用の予期との交互作用が傾向差で見られ、期待がある場合のほうが被害者を助けなかった。また、参加者の感情に与える影響としては、小川ら(2000)を用いて、事前事後の感情を測定したところ、オストラシズムが安静状態を傾向差で低下させたが、肯定的感情と否定的感情には影響を及ぼさなかった。オストラシズムの被害を受けることについては、自動的な処理が行われ、ネガティブな感情が引き起こされることが指摘されているが(Williams, 2009)、オストラシズムへの加担ではこのような結果は見られなかった。引き続き、どのような状況が加担につながるかを検討する。予定通り、実験1を実施し、平成26年の社会心理学会にて発表予定である。研究計画では、プログラムをより「人間の存在」を感じさせないことでオストラシズムの目撃時の行動がどう変わるかを検討する予定であったが、「いじめ」の場面での応用可能性を高めるために、「いじめ」場面で多く指摘される集団のもつ特徴などを、条件として検討する予定である。実験1で交互作用が傾向差で見られた対人相互作用の期待についてより深く取り上げ、より「いじめ」のシミュレーション状況に近づける方向で研究計画を修正する。
赤痢菌virF遺伝子のcpxA-R2コンポーネント制御系による発現制御の研究

赤痢菌の宿主細胞への侵入能を直接担うipaBCD等の遺伝子群は本菌の保持する大プラスミドにコードされ、その発現には同プラスミド上の2つの正の制御遺伝子virF,invEが必要である。われわれはこのうち、1st regulatorであるvirFの発現がpHによる制御をうけること、その制御には染色体にコードされるtwo-componet regulatorysystemの1つであるcpxR-cpxA遺伝子が関与すること、とくにcpxRはvirF発現に必須なファクターであることを遺伝学的データによって示してきた。われわれはCpxRのMalE fusionvectorを用いた大量発現、精製系を確立し、生化学的解析の一環としてvirF上流域への結合能をGel shift assayで検討してみた。virF転写開始点より102bp上流までを含む213bpのプローブでバンドシフトが認められたが、下流端が同一で、転写開始点37bp上流までのプローブ(プロモーター配列を含む)ではシフトが観察できなかった。また、このシフトは精製CpxR標品をAcetylphosphateとプレインキュベーションした場合に増強された。これらの結果は、CpxRがvirFプロモーター上流に直接結合して転写の活性化をおこなうことを示唆するとともに、多くのresponse regulatorと同様にリン酸化したCpxRが認識配列へ結合する活性化型であると理解できる。現在、CpxR結合部位のminimizationのためさらにプローブの種類を増やしてGel shift assayをおこなっている。また、CpxRの結合による転写の活性化を試験管内転写系を用いて確認したい。
運動によるストレスタンパク質の形質発現誘導

本研究は、外部刺激による細胞内の環境変化に対して応答するストレスタンパク質[HSP(熱ショックタンパク質)]に着目し、運動負荷時の生体にかかるストレスを定量化することを目的とした。すなわち、シドマン型回避学習により、自発的にランニング運動することを訓練されたラットに2時間のランニング運動を行わせ、運動終了後、0、30、60、120、240分に筋肉を含む8臓器を摘出し、各細胞内に発現誘導したHSP(熱ショックタンパク質)72をウエスタンブロッティング法を用い測定することにより、運動ストレスの生体負担度を明らかにしようとした。得られた結果の要約は以下の通りである。1)本研究でのラットの総走行距離は、およそ3、800mであり、運動量としては中等度以上であった。2)今回の実験条件で発現のみられた臓器は肝臓、副腎であり、筋肉や心臓、脳での発現は見られなかった。3)今回発現のみられた臓器のうち、肝臓は運動終了後30、60分に大きな発現傾向がみられたのに対し、副腎は240分後に最も大きな発現傾向がみられた。4)運動ストレスに対する反応は各臓器によって異なり、肝臓での反応性が最も早い傾向が伺えることを示唆するものであった。今後、実験条件等を変え検討していく必要がある。