hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
咀嚼の神経機構におけるGABA、グリシン作動性ニューロンの重要性の解明(細胞内染色法と免役電顕法を併用して)

このうちの50%が、抑制性伝達物質であるGABAまたはグリシン陽性であり、48%が興奮性伝達物質であるグルタミン酸陽性であった。この抑制性と興奮性終末の比率は、樹状突起の近位部では60%対37%、中間部では46%対52%、遠位部では44%対53%であった。さらに、抑制性終末の内訳は、9%がGABAのみに陽性で、27%がグリシンのみに陽性で、27%はGABA、グリシンともに陽性であった。これらの結果は、三叉神経運動ニューロンの特徴を示すものである。しかしながら、抑制性シナプスはP型のシナプス小胞を、興奮性シナプスはS型のシナプス小胞を持ち、この点は他の脳神経系と同様であった。以上の研究成果は既に発表している(次項参照)。来年度は、本年度の成果を発展させ、口腔顔面感覚を中継する三叉神経感覚核、とくに吻側核のニューロンが、顎反射に及ぼす抑制効果について検討する予定である。昨年度は、HRP注入法によって標識された咬筋運動ニューロンの樹状突起上にシナプスする軸索膨瘤を観察した。その結果、軸索膨瘤の50%が抑制性伝達物質であるGABAまたはglycine陽性であり、48%が興奮性伝達物質であるglutamate陽性であった。また、抑制性終末の9%がGABAのみに、27%がglycineのみに、27%はGABA、glycineの両方に陽性であった。以上より、咬筋運動ニューロンへの抑制性入力の様態が、脊髄運動ニューロンとは異なることが明らかとなった。そこで本年度は研究を発展させ、三叉神経吻側核(Vo.r)に位置する運動前ニューロンを標識し,その軸索終末の微細構造を定性的及び定量的に分析した。その結果、Vo.rニューロンには、閉口筋運動ニューロンにシナプスするもの(Vo.r-dlニューロン)と、開口筋運動ニューロンにシナプスするもの(Vo.r-vmニューロン)が存在し、全てのVo.rニューロンの軸索瘤は、抑制性伝達物質を含有すると考えらる多形性シナプス小胞を含有し、細胞体もしくは幹樹状突起と対称型シナプスを形成していた。軸索瘤の体積と表面積、apposed surface area及びactive zoneの総面積は、Vo.r-dlニューロン、Vo.r-vmニューロン間には違いが認められなかった。しかし,シナプス小胞数とシナプス小胞密度は、Vo.r-dlニューロンの方がVo.r-vmニューロンよりも有意に高い値を示した。シナプス小胞密度を除く他の計測値は軸索瘤の体積と正の相関関係を示したが、小胞密度は負の相関関係を示した。また、glycine antagonistであるstrychnineとGABAA antagonistであるbicucullineの静脈内投与は、Vo.rの電気刺激によって閉口筋運動ニューロンに誘発されるIPSPを抑制した。一方、Vo.rの電気刺激により開口筋運動ニューロンに誘発されるEPSPは、NMDA antagonistであるAPVとnon-NMDA antagonistであるCNQXの開口筋運動ニューロン群内への投与により抑制され、IPSPが出現した。以上より、Vo.r運動前ニューロンが三叉神経運動ニューロンに対する抑制性介在ニューロンであり、伝達物質の放出に関与する軸索瘤の超微構造が、一次求心線維と同じ形態的特徴を持つことが明らかとなった。
インスリンは血中グルコース濃度を下げることのできる唯一のホルモンなのか?

インスリンは細胞増殖因子の一つであるが、血中グルコース濃度(血糖値)を下げることのできる生体内唯一のホルモンであると考えられている。インスリン刺激により骨格筋や脂肪組織に特異的に発現しているGLUT4(インスリン反応性グルコーストランスポーター)が、細胞内膜分画から細胞表面上へトランスロケーションし、細胞内へのグルコース取り込みを促進し、血糖値を下げる。申請者らはGLUT4のトランスロケーションは培養細胞レベルではインスリンのみならず三量体Gタンパク(Gq及びGi)と共役している受容体刺激でも起こされることを発見した。生体内で骨格筋、脂肪組織でGLUT4のトランスロケーションを引き起こす生理活性物質にはどのようなものがあるのか明らかにする。骨格筋に特異的に発現するmuscle creatinine kinase (MCK)の遺伝子プロモーター下流にGLUT4myc cDNAを結合し、トランスジェニックの手法で骨格筋でGLUT4mycを発現しているトランスジェニックマウスを作製中である。また脂肪組織でGLUT4mycを特異的に発現しているトランスジェニックラットは作製した。今後ラット副睾丸より脂肪細胞を単離しGLUT4mycのトランスロケーションas say系を確立する。そして脂肪組織で発現している生理活性物質のレセプターの中で三量体GタンパクGq、Giとカップルしているものを検索する。それら生理活性物質によるGLUT4mycのトランスロケーションとグルコースの取り込みを検討する。これら生理活性物質が直接的にGLUT4のトランスロケーションと細胞内へのグルコース取り込み促進を引き起こしていることを証明する。
地域福祉サ-ビス供給体制におけるマンパワ-問題についての総合的研究

ホ-ムヘルプサ-ビスは、地域福祉型社会福祉のなかで居宅福祉サ-ビスの軸芯に位置するサ-ビスとみなされ、老人福祉の領域を中心に伝統的な社会福祉施設にかわりうる施策として期待されている。しかしながら、ホ-ムヘルプサ-ビスは、福祉サ-ビスのなかでももっとも労働集約的で、逆にいえば規模の経済性を期待することのできないサ-ビスである。すなわち、このタイプの福祉サ-ビスが成功するかどうかは、もっぱらそのマンパワ-であるホ-ムヘルパ-を、いかにすれば、必要とされる質と量において、確保しうるかにかかっているのである。この研究では、上越市、川崎市、横浜市の、それぞれに異なったタイプをとるホ-ムヘルプサ-ビスについてのヒヤリングとともに、長野市社会福祉協議会の経営する民間のホ-ムヘルパ-制度である「地域福祉サ-ピス」の協力会員(ホ-ムヘルパ-)の実態調査を実施した。その結果の一部を示せば、協力会員がヘルパ-制度についての知識を得た経路については、長野市の広報や社会福祉協議会の機関紙によるものが合計32%であった。協力会員のリクル-トの方法として広報活動がかなりの役割を果たしているようである。他方、民生委員や協力会員、さらには利用会員から情報を得たものも合計すると23%であり、事業関係者による勧誘も有効性をもっているようである。協力会員による仕事の内容は、食事、衣類の世話、掃除などが中心である。協力会員はホ-ムヘルパ-としての仕事に基本的には満足している。協力会員の年齢は、60歳台38%、50歳台26%、40歳台18%、70歳台10%の順で多く、会員制民間非常利のホ-ムヘルパ-事業は全体の44%にあため60歳以上74歳までの高齢者がそれ以上の後期高齢者のケアに従事するという状態にある。ホ-ムヘルプサ-ビスの将来を左右するマンパワ-問題としてみたとき、留意すべき傾向であろう。初年度の課題は、分析方法について検討すること、制度と運用の実態についてある程度の情報をえ、整理すること、の二点であった。第一の課題については、サ-ビス労働論あるいはサ-ビス経済論、家事労働論の先行研究にまなび、ホ-ムヘルプ・サ-ビス分析の枠組みの検討をこころみ、試論的な枠組みを設定した。枠組みは、ホ-ムヘルプ・サ-ビスの供給組織の分析を目的にしたものとホ-ムヘルプ・サ-ビスのサ-ビス労働の内容についての分析を目的にしたものとから構成されている。第二の課題については、東京、北海道、長野、鹿児島、新潟における制度の実態についてのヒヤリング(現地および研究会での)を試みた結果、供給体制そのものについてもヘルパ-の属性、意識、サ-ビス労働にたいする態度等についても、地域によって、また供給主体の性格によって、共通性と同時に相当の多様性のあることが明らかになった。そこで、つぎの段階として、そうした共通性と地域や供給主体による相違を明らかにするためホ-ムヘルプ・サ-ビスとホ-ムヘルパ-の実態および意識の調査を実施することになった。しかし、本年度は資金および時間の不足により、調査票の作製・印刷の段階で中断せざるをえなかった。したがって、平成三年度は、実態調査を実施し、その結果について取りまとめ、さらにその成果について理論的な検討を加えることが課題となる。

ホ-ムヘルプサ-ビスは、地域福祉型社会福祉のなかで居宅福祉サ-ビスの要になるサ-ビスとみなされ、老人福祉の領域を中心に社会福祉施設に建設に代位しうる施策として期待されている。しかし、ホ-ムへルプ・サ-ビスは、ホ-ムへルパ-1人について1日に3件というのが一般的とされ、規模の経済性を期待することのできない福祉サ-ビスであり、したがってホ-ムヘルパ-をいかにして確保するかが極めて重要な意味をもっている。本年度は、長野市社会福祉協議会の経営する民間のホ-ムヘルパ-制度である「地域福祉サ-ビス」の協力会員(ヘルパ-)の実態調査を実施した。有効回答数196、回収率70%の結果を得た。ヘルパ-制度についての知識を得た経路で多いのは、長野市の広報や社会福祉協議会の機関紙によるものが合計32%である。リクル-トの方法として広報活動がかなりの役割を果たしている。他方、民生委員や協力会員、さらには利用会員から情報を得たものも合計すると23%あり、事業関係者の口コミによる勧誘も有効性をもっているようである。協力会員のヘルパ-活動による収入は1万円未満が83%であり、使途は小遣いというのが56%と過半数になっているが、家計の一部というものも10%ある。仕事の内容は、食事、衣類の世話、掃除などであるが、協力会員はボランティアとしての仕事に基本的には満足しているようである。しかし、重要なのは協力会員の年齢で、60歳台38%、50歳台26%、40歳台18%、70歳台10%の順である。民間非営利のホ-ムヘルパ-事業は、年齢構造からいうと協力会員全体の44%にあたる60歳以上74歳までの高齢者が高齢者のケアに従事する状態にあり、将来のマンパワ-問題としてみたとき極めて重要な意味をもつのではないかと思えるような結果を得たことになる。
キニノーゲン遺伝子ノックアウトマウスの作製と、その血圧調節系に関する研究

申請者は、キニノーゲンを完全に欠損したマウスを用いてカリクレイン・キニン系の生理的役割を解明すべく、ジーンターゲティング法によるキニノーゲン遺伝子欠失マウスの作製を、以下のように進めてきている。1.マウスキニノーゲン遺伝子の構造解析マウスゲノムDNAをテンプレートとし、cDNA情報から設計したプライマーを用いて、LA-PCR法により各エクソン間のDNAを増幅した。この増幅産物をサブクローニングし配列を決定した。その結果、キニノーゲン遺伝子は全長約24kbで、11個のエクソンから構成され、第10エクソンにブラジキニン領域と、3'側に高分子キニノーゲン軽鎖に対応する構造が確認され、また第11エクソンに低分子キニノーゲンの軽鎖に対応する構造を認めた。2.マウスブラジキニンターゲッティングベクターの構築ターゲッテイング用ベクターとしてpPNTを用いた。マウスキニノーゲンゲノムDNAの第3エクソン下流のイントロンから、第10エクソンのブラジキニン配列上流までの約7.5kb(Long arm)、また第10エクソンから第11エクソン上流までの約2.4kb(Short arm)に対してプライマーを設計し、LA-PCR法によってこれら領域を増幅した。次に、このLong armとShort armが、Neomycin耐性遺伝子を挟むようにベクターに順次挿入した。その結果、ブラジキニン配列を含む144bpのDNAが欠失したマウスブラジキニンターゲッティングベクターを構築することができた。このベクターのマウスES細胞への導入、そのクローニング、ES細胞の胚細胞への導入とキメラマウス作製を現在行っている。キニノーゲンは血圧調節や炎症に重要な役割を果たす生理活性ペプチド、キニン類の前駆体蛋白質であり、同時に内因系血液凝固因子あるいは内在性システインプロテアーゼインヒビターとしての機能も保持する多機能蛋白質である。哺乳類には少なくとも2種類のキニノーゲン(高分子ならびに低分子キニノーゲン)が存在し、単一遺伝子からalternative splicingにより2種類のキニノーゲンmRNA生成が起こる。キニンの生理・病態での役割を明らかにする目的で、キニノーゲンノックアウトマウスの作製をgenetargetting法により行うため、平成10年度はマウスキニノーゲンのgenomic DNA構造解析を目標として研究を進めた。その結果、129系マウスキニノーゲンgenomiccDNAの全長約90%の塩基配列を決定し、既に得ているcDNA配列の情報から、この遺伝子は11のexonより構成され、全長約24kbであった。構造上の特徴として次のことが判明した。(l)Exonlから9までは高分子及び低分子キニノーゲンmRNAに共通な部分に対応していた。(2)Exon10は分割され、Exon10の5'側のブラジキニン配列を含む78bpは高分子及び低分子キニノーゲンmRNAに共通な部分に対応し、一方、3'側953bpは高分子キニノーゲンmRNAの3'側特異的領域に対応した。(3)Exon11は、高分子キニノーゲンmRNAのポリA付加部位より下流に約1500bpをはさんで存在し、低分子キニノーゲンの3'側特異的領域に対応した。以上の結果は、高分子キニノーゲンmRNAの3'側特異的構造の生成は、ブラジキニン配列を含むExon10の先頭から連続的にExon10のポリA付加部位までの転写により、一方、低分子キニノーゲンmRNAの3'側特異的構造の生成は、ブラジキニン配列を含むExon10の5'側78bpとExon11との間のスプライシングにより生成されることを示す。以上の解析結果を基に、現在キニン欠失のためのtargetting vector構築を行っている。申請者は、キニノーゲンを完全に欠損したマウスを用い、カリクレイン・キニン系の生理的役割を解明すべく、ジーンターゲティング法によるキニノーゲン遺伝子欠失マウスの作製を、以下のように進めてきている。

1.マウスキニノーゲン遺伝子の構造解析マウスゲノムDNAをテンプレートとして、cDNA情報から設計したプライマーを用いて、LA-PCR法により各エクソン間のDNAを増幅した。この増幅産物をサブクローニングし配列を決定した。その結果、キニノーゲン遺伝子は全長約24kbで、11個のエクソンから構成され、第10エクソンにブラジキニン領域と、3'側に高分子キニノーゲン軽鎖に対応する構造が確認され、また第11エクソンに低分子キニノーゲンの軽鎖に対応する構造を認めた。2.マウスブラジキニンターゲッティングベクターの構築ターゲッティング用ベクターとしてpPNTを用いた。マウスキニノーゲンゲノムDNAの第3エクソン下流のイントロンから、第10エクソンのブラジキニン配列上流までの約7.5kb(Long arm)、また第10エクソンから第11エクソン上流までの約2.4kb(Short arm)に対してプライマーを設計し、LA-PCR法によってこれら領域を増幅した。次に、このLong armとShort armが、Neomycin耐性遺伝子を挟むようにベクターに順次挿入した。その結果、ブラジキニン配列を含む144bpのDNAが欠失したマウスブラジキニンターゲッティングペクターを構築することができた。このベクターのマウスES細胞への導入、そのクローニング、ES細胞の胚細胞への導入とキメラマウス作製を現在行っている。
分類空間,写像空間,配置空間とファイバーワイズホモロジー

主G束のゲージ群はその主束の随伴束の切断全体のなす群と同一視され,ゲージ群を空間として局所化したものは,その随伴束をファイバーワイズに局所化したものの切断全体のなす空間とみなすことが出来る.したがって随伴束及びそのファイバーワイズな局所化の構造を理解することはゲージ群のトポロジーを調べるために重要である.ゲージ群の分類空間に関して,4次元スピン多様体上の主Sp(n)束のゲージ群の分類空間のmod2コホモロジー群を計算し,さらにその手法及びK理論を利用してS^4上の主Sp(1)束のゲージ群の分類空間のmod2コホモロジーの環構造の,多項式環の剰余環としてのある表示を与えた.この系として,環構造はインスタントン数が奇数,mod 4で2,mod 4で0のいずれであるかで決まり,これら3つは同型ではないという興味深い結果を得た.またこの表示を用いてSteenrod代数の作用を調べ,Steenrod代数上の加群としての構造もインスタントン数が奇数,mod 4で2,mod 4で0のいずれであるかで決まり,これら3つは同型ではないということが分かった.この結果の応用としてあるファイブレーションの非自明性を示すことが出来た.以上の研究はpreprint "On the mod2 cohomology of Map(X, BSp(n))"にまとめ,8月に北京で開かれた代数的位相幾何学国際会議および、12月にメキシコで開かれたIII JOINT MEETING JAPAN-MEXICO IN TOPOLOGY AND ITS APPLICATIONSで発表したが,さらなる研究を継続中である.主G束のゲージ群はその主束の随伴束の切断全体のなす群と同一視され,ゲージ群を空間として局所化したものは,その随伴束をファイバーワイズに局所化したものの切断全体のなす空間とみなすことが出来る.したがって随伴束及びそのファイバーワイズな局所化の構造を理解することはゲージ群のトポロジーを調べるために重要である.Crabb等は普遍随伴束をファイバーワイズに有理化したものはファイバーワイズホップ空間として自明であることを示した.私は京都大学の河野氏と共同でこの別証明を与えた.また底空間がコンパクトである場合には随伴束は十分大きな素数Pでファイバーワイズに局所化するとファイバーワイズホップ空間として自明であることを示し,構造群がP正則である場合には,随伴束をファイバーワイズにPで局所化したものがファイバー空間として自明になるための底空間の次元についての十分条件を与えた.さらに随伴束の自明性と構造群の高位ホモトピー可換性は密接な関係がありこれについても調べた.以上の研究はpreprint "Notes on the triviality of adjoint bundles"としてまとめたが,現在もなお研究を継続中である.ゲージ群の分類空間に関しては,4次元スピン多様体上の主Sp(n)束のゲージ群の分類空間のmod2コホモロジー群を計算し,さらにその手法及びK理論を利用してS^4上の主Sp(1)束のゲージ群の分類空間のmod2コホモロジーの環構造の,多項式環の剰余環としてのある表示を与えた.この系として,環構造はインスタントン数が奇数,mod4で2,mod4で0のいずれであるかで決まり,これら3つは同型ではないという興味深い結果を得たが,さらなる研究を継続中である.主G束のゲージ群はその主束の随伴束の切断全体のなす群と同一視され,ゲージ群を空間として局所化したものは,その随伴束をファイバーワイズに局所化したものの切断全体のなす空間とみなすことが出来る.したがって随伴束及びそのファイバーワイズな局所化の構造を理解することはゲージ群のトポロジーを調べるために重要である.私は京都大学の河野氏と共同で普遍随伴束をファイバーワイズに局所化したものの構造を調べ随伴束がファイバー空間として自明になるための様々な条件を与えた.これには障害理論を用いたが,通常の障害理論では見通しが悪いため,現在ファイバーワイズホモロジーを用いたファイバーワイズな障害理論を構築することにより,より精度の高い結果を得るための研究を行っている.また随伴束の自明性と構造群の高位ホモトピー可換性は密接な関係があるが,これについても調べpreprintとしてまとめた.高位のホモトピー可換性については自然な定義が2種類知られているが,随伴束の自明性を記述するものはこの2種の中間にあたるものであると思われ,現在もなお研究を継続中である.ゲージ群の分類空間に関しては、4次元球面上の主Sp(1)束のゲージ群の分類空間のmod2コホモロジーの環構造はインスタントン数が奇数,mod4で2,mod4で0のいずれであるかで決まりこれら3つは同型ではないという興味深い結果を得たが,この背景となる幾何学的状況を調べるべく,さらなる研究を継続中である.主G束のゲージ群はその主束の随伴束の切断全体のなす群と同一視され,ゲージ群を空間として局所化したものは,その随伴束をファイバーワイズに局所化したものの切断全体のなす空間とみなすことが出来る.したがって随伴束及びそのファイバーワイズな局所化の構造を理解することはゲージ群のトポロジーを調べるために重要である.ゲージ群の分類空間に関して,4次元スピン多様体上の主Sp(n)束のゲージ群の分類空間のmod2コホモロジー群を計算し,さらにその手法及びK理論を利用してS^4上の主Sp(1)束のゲージ群の分類空間のmod2コホモロジーの環構造の,多項式環の剰余環としてのある表示を与えた.この系として,環構造はインスタントン数が奇数,mod 4で2,mod 4で0のいずれであるかで決まり,これら3つは同型ではないという興味深い結果を得た.

またこの表示を用いてSteenrod代数の作用を調べ,Steenrod代数上の加群としての構造もインスタントン数が奇数,mod 4で2,mod 4で0のいずれであるかで決まり,これら3つは同型ではないということが分かった.この結果の応用としてあるファイブレーションの非自明性を示すことが出来た.以上の研究はpreprint "On the mod2 cohomology of Map(X, BSp(n))"にまとめ,8月に北京で開かれた代数的位相幾何学国際会議および、12月にメキシコで開かれたIII JOINT MEETING JAPAN-MEXICO IN TOPOLOGY AND ITS APPLICATIONSで発表したが,さらなる研究を継続中である.
メタボロミクスを用いた食欲調節ペプチド自己抗体症候群の総合的解析

摂食障害における食欲調節ペプチド自己抗体の解析と精製を行った。神経性食欲不振症患者のグレリン自己抗体は減少し、グレリン抵抗性の一翼を担う可能性が考えられた。神経性食欲不振症患者の血中グレリン自己抗体をIgA、IgM、IgG型に分類・精製し、げっ歯類の脳内投与による食行動への影響を検討したが、グレリン作用を阻害する自己抗体を見出すことはできなかった。新規ペプチド-受容体に関してはグレリン様ペプチドの新規受容体のクローニングに成功した(未発表)。メタボローム解析に関しては神経性食欲不振症のメタボロームプロファイリングを確定すべく解析を進め、病態特異的な低分子代謝物の同定に成功した(論文作製中)。食欲調節ペプチド自己抗体症候群を明らかにすることが本研究の目的であった。(1)神経性食欲不振症における食欲調節ペプチド自己抗体の精製、解析と構造決定患者血中の食欲促進ペプチド(グレリン-神経ペプチドY(NPY)/アグーチ関連ペプチド(AgRP))や食欲抑制ペプチド(メラノコルチン(POMC)、ペプチドYY(PYY)、コレシストキニン(CCK)、グルカゴン様ペプチド1(GLP-1))などの内、グレリンファミリーペプチド、POMCなどの自己抗体の存在を確認した。食欲調節ペプチド自己抗体はELISA法で同定し、IgA、IgG、IgM型に分別、精製し、その一部に関しては構造決定を進めている。食行動や情動・認知との関連に関しては、心理学的解析を中心に検討を行っている。メタボローム解析が少し遅れているが、今春より測定開始予定である。(2)ストレス・悪液質モデル動物における食欲調節ペプチド自己抗体の解析精製食欲調節ペプチド自己抗体を、マウスに腹腔内投与し、食欲・体重調節やエネルギー代謝、不安等の情動、認知・学習に及ぼす影響に関して解析を進めている。肥満モデルの自己抗体の研究は進展しており、現在Nature Communicationにリバイズ中であり、興味深い知見が得られている。悪液質モデル(吉田肝癌細胞株腹腔内移植)動物を用いて、食欲調節ペプチド自己抗体を同定する研究も進展している。(3)マーモセットを用いた食欲調節ペプチド自己抗体の解析マーモセットの食行動解析系は確立し、ペプチドリガントの作用を解析し、論文投稿準備中である。げっ歯類よりも、ヒトの食行動に近いパターンを示すことを確認している。(4)新規ペプチド-受容体のクローニングと解析アフィニティーカラムにグレリンファミリーを吸着させ、食欲調節に関わる新規ペプチド-受容体のクローニングを行っている。(734文字)本年度は、神経性過食症、癌性悪液質における食欲調節ペプチド自己抗体の解析と精製を行い、動物モデルを用いて、その意義を確認した。過食症や肥満症における自己抗体の病態生理学的意義を検討し、神経性食欲不振症と比較検討した。ペプチド性食欲調節因子の検討からは、過食症は拒食症と鏡面関係にある自己抗体プロファイルを示すと予想されるが、検討成績は我々のグループを除き、皆無に等しい。バクテリオファージライブラリーを用いて、患者個人の抗体ライブラリーを作製し、食欲調節ペプチド自己抗体、特に空腹ホルモングレリンの自己抗体を詳細に解析した。患者血中自己抗体を精製し、IgA、IgM、IgG型に分類した精製自己抗体を、マウスもしくはラット脳内に投与し、食行動や情動・認知に及ぼす影響を検討した。新規ペプチド-受容体のクローニングに関しては、グレリンや新規脳腸ペプチドを対象に、精力的に検討を行っている。とりわけ、食欲・体重調節における意義を検討する予定である。メタボローム解析に関しては、神経性食欲不振症のメタボロミクスプロファイリングを確定すべく、解析中である。自己抗体と低分子代謝物の相関を解析し、自己抗体関連および非関連の疾患バイオマーカーの同定を予定している。疾患特異的メタボロームプロファイリングを構築することにより、神経性食欲不振症を始めとする摂食障害の病態生理学的意義を、新たな観点から検討する。本年度は、(1)食欲調節ペプチド自己抗体の解析と精製、(2)新規ペプチド、新規受容体のクローニングと、(3)摂食障害患者のメタボローム解析を中心に、研究を推進した。(1)食欲調節ペプチド自己抗体の解析と精製:神経性食欲不振症患者から精製したポリクローナルなグレリン自己抗体は、カイネテイクスの異常にもかかわらず、動物実験ではグレリン作用を修飾しえず、モノクーローナル化を行うことができなかった。肥満症患者からのグレリン自己抗体は、グレリン作用を増強することを証明し(Takagi K, Nature Commun. 2013)、構造決定、単離のプロセスを進めている。

(2)新規ペプチド、新規受容体のクローニング:現在特許取得を進めているが、グレリンの新たな受容体のクローニングに成功し、大きな成果と期待している。そのシグナリング機構や病態生理学的意義に関し、現在研究を進めている。(3)摂食障害患者のメタボローム解析:神経性食欲不振症患者を中心に、メタボローム解析を施行した。メタボローム解析は、ガスクロマトグラフィー質量分析計(GC-MS)により水溶性低分子代謝物を、また液体クロマトグラフィー質量分析計(LC-MS)により脂質、極性水溶性代謝物の解析を行った。現在研究は終了し、論文作製中であり、世界的にも報告されていない貴重な成果が得られるものと期待している。その後、食欲調節ペプチド自己抗体や臨床病態とメタボロームプロファイリングを比較検討する予定である。26年度が最終年度であるため、記入しない。心身医学、心療内科学26年度が最終年度であるため、記入しない。食欲調節ペプチド自己抗体の同定とその病態生理学的意義に関する研究は、予想を上回る進捗状況であるが、メタボローム解析が少し遅れている。その理由は、メタボローム採血用の患者血清の採取の遅れと機器の更新および外注化のプロセスの遅れによるが、今春より鋭意進めているところである。サンプルの集積に時間を要し、また測定機器の修理など、測定に時間を要したことが理由である。今春より、大学院生をフランスルーエン大学に送り、食欲調節ペプチド自己抗体研究を一層加速させる予定である。神経性食欲不振症以外の悪液質、とりわけがん悪液質におけるグレリンその他の自己抗体の意義を検討する。
マイクロプロセッサにおける高命令レベル並列処理のための投機実行方式に関する研究

近年値予測を用いたデータ依存の投機的実行が注目されているが,値予測のためのハードウェア量が問題となっている.本研究では,値予測機構のハードウエア量を削減することを検討した.具体的には,頻繁な値の局所性に着目し.予測値を0と1だけに限定している.SPECべンチマークではレジスタに書き込まれる値の平均で20%以上が0と1で占められているので,予測値を制限しても有意義なパフォーマンスが得られる.シミュレーションの結果,提案した予測器は2倍以上のハードウエア規模を必要とする従来の最終値型予測器よりも,性能が高いことが確認された.近年値予測を用いたデータ依存の投機的実行が注目されているが,値予測のためのハードウエア量が問題となっている.本研究では,値予測機構のハードウエア量を削減することを検討している.具体的には,第1に,タグアレイ部に保持されるアドレスのビット幅削減を検討している.キャッシュとは異なり,値予測では得られた値が必ずしも正しくなくて構わない.なぜなら値予測に失敗した場合のための機構が備わっているからである.したがって,タグアレイ部に保持されるアドレスのビット幅を削減しても,プログラムの実行結果には問題無い.シミュレーションの結果,タグアレイ部は2ビットあれば十分で,プロセッサの性能に悪影響を及ぼさないことが確認された.これは,標準的な4096エントリの値予測機構の場合で8Kバイトのハードウエア量削減に相当する.第2に,演算結果の有効なデータ幅の特徴を利用して,データ値予測機構のハードウエア量を削減することを検討する.単純に予測機構に保持されるデータ幅を削減すると予測精度は著しく低下するが,提案する2モード値予測機構を用いることで予測精度の低下を抑えつつハードウエア量削減を達成できる.プロセッサ性能の評価では,用いたベンチマークプログラムのほとんどで,わずかに低下した予測精度の影響はほとんど無いことが確認できている.第3に,頻繁な値の局所性に着目し,予測値を0だけに限定している.SPECint95ベンチマークではレジスタに書き込まれる値の平均で15%が0であるので,予測値を制限しても有意義なパフォーマンスが得られると予想される.シミュレーションの結果,提案する予測器は,ハードウエア規模が約4倍の最終値型予測器と匹敵することが確認された.近年値予測を用いたデータ依存の投機的実行が注目されているが,値予測のためのハードウェア量が問題となっている.本研究では,値予測機構のハードウエア量を削減することを検討した.具体的には,頻繁な値の局所性に着目し.予測値を0と1だけに限定している.SPECべンチマークではレジスタに書き込まれる値の平均で20%以上が0と1で占められているので,予測値を制限しても有意義なパフォーマンスが得られる.シミュレーションの結果,提案した予測器は2倍以上のハードウエア規模を必要とする従来の最終値型予測器よりも,性能が高いことが確認された.
教育現象の解釈過程の明示化に関する実証的研究

本研究は、学校におけるいろいろな授業を中心とした教育現象の解釈過程を明示化することを目的としている。本研究の成果として、授業における発言について解釈者が解釈した意味は多様なパーレンで表現できることが明らかになった。1)解釈者が概念と解釈した発言は、(パーレン)で明示化できる。2)発言者が構想構想と解釈した発言は〔亀甲括弧〕で明示できる。そして、3解釈者の解釈を明示化するために40以上の記号が開発され、開発した記号の形式に解釈者の解釈が明示化される。発言に内在し、その背後にある諸概念は記号の関係を記述した形式の中間項に明示化される。本研究は、以下の6の課題の解明を通して、解釈過程を明示化し、記述言語の構築を試みる実験にもとづく理論研究である。1)記述言語の記号のグループ化と構造化である。2)記述言語としての記号の機能の解明、3)新しい記号を必要とする新しい思考形式を含む授業の設計と実施、4)元の記録への再現性・可逆性及び妥当性の検証、5)概念化に対する語と語の関係を示す記号の機能の解明、6)記述言語による解釈の明示性の解明である。平成25年度の重点研究は、1)開発された45の記号の構造化、2)記号の妥当性の検証、3)新しい記号の開発である。課題1:すでに、1事例、概念、構想を示す記号、2事例、概念、構想の包含、差異、同一など関係を示す記号、3論理関係を示す記号、4限定を示す記号、5事例、概念、構想の変容や変化を示す記号、6付帯的な状況を示す記号、7社会的人間関係を示す記号に分類してきた。各グループの包摂関係は、5が3、2、1を包括する。3と4は相対的に独立しているが、4の限定を示す記号は2に関係し、包摂される。他のグループの基礎になる記号は、1の事例[A]、概念(A)、構想〔A〕を示す記号でこれは基本括弧と呼ぶことができる。3のプループとして文と文の関係を示す記号の開発が必要である。課題2:同一性を示す記号(=)は包含(⊃)や属性と混同されること、変容や変化を示す記号の解釈の順序性に解釈者で相違が生じるなど問題がある。課題3:46番目の記号として、2009年に開発途中であった『A』/(人物)〔B〕を再吟味した。ある人物がAという概念、アイディア、構想についてBというイメージを持つという発言を記号で関係づけたものである。概念・活動を示す記号を( )、構想は〔〕として確定してきたが、『A』の『』は特定の概念、アイディア、構想を示す記号であり、基本括弧に新しく加えた。授業研究における授業の解釈は、1)授業の録画・録音記録をもとに文字記録を作成する局面における転記情報など解釈、2)授業記録における発言の意味を理解する局面での解釈、3)概念化する局面での解釈でなされる。本研究は、この3局面における解釈過程を明示化し、記述言語の構築を試みる実験にもとづく理論研究である。平成26年度の重点研究は、平成25年度の到達目標である転記情報の記号による明示化を基礎に、転記情報などの解釈、意味の解釈及び事例の参照性の関係とそれぞれの機能を、解釈学の視点から理論的に考察することに置いた。これまでの授業研究の事例と具体的な授業記録の分析結果、次のことを解明した。第1に、発話者、指示語の内容などの転記情報の中で、割り込みや子ども同士の関わりを明示化する記号の解釈と判定には幅があり、その妥当性の検討が必要とされる。第2に、記述形式で使用される記号には、例えば[ ]は事例を示す、〔〕で示された部分は構想が示されている等、設定された記号の形式には一定の概念づけがなされている。また複数の記号からなる記号の関係は、概念と概念の関係が示されている。第3に、記号の選択と記述形式に解釈者の解釈が明示化されている。第4に、記号形式に概念づけがされているので、発言に明示化されている諸要因を抽出することが可能である。第5に、発言に内在し背後にある諸概念は発言内の前後、前後の発言を解釈して抽出しなければならい。解釈を通して抽出されたそのような概諸概念は『』で示されている。解釈の特徴の1つは再編集である。さらに別な解釈がなされた場合には、その解釈は再編集される。だからこそ、ある段階で示した解釈を明示する必要がある。第6に、解釈は、情報の圧縮と抽象化を伴うが、常にもとの解釈資料への参照性を必要とする。その参照性は発言番号と分析の手順の明確化によって担保されている。本研究は、授業研究における転記情報など解釈(第1場面)、授業記録における発言の意味の解釈(第2場面)、そして概念化の解釈過程(第3場面)を明示化し、記述言語の構築を試みる実験にもとづく理論研究である。その研究のために5つの課題を解明することである。平成27年度では、重点研究として、新しく開発した記号を含め記号全体の記述形式の論理的関係の考察を行った。大きくは、記述された発言(第1と第2の場面)の解釈のための記号と概念化のために解釈者が投入した記号に分類される。

前者は、概念、構想、例示、論理関係、限定など発言の論理的関係を表す記号とある人物への肯定、否定、疑問、ある自分のイメージなど人物と人物の関係を表す記号がある。後者は特定の発言の背後に想定される概念を表す記号、発言と発言を関連づけて導かれる概念を表す記号である。これらは解釈者が投入した記号として『』で表記した。これらの成果は日本教師教育学会、日本教育方法学会で公表した。検証研究として、再現性、可逆性、論理的関係から発言の解釈を記号の形式に明示化する妥当性を総合的に検証した。その結果、事例、概念、構想など基本的な記号や論理的関係、基本的記号の変化や変容を表す記号は再現性が高いが、基本的記号の同一(=)、差異(≠)を表す記号は数学的意味と相違があり、再現性の幅が大きいことが分かった。達成目標のために研究として非言語活動の記述可能性と教育理論における概念の再概念化の可能性を考察した。前者の可能性は非言語の言語記述を記号を使用して記述することで非言語活動の解釈が明示化されることが分かった。後者の再概念化は到達できなかった。本研究は、学校におけるいろいろな授業を中心とした教育現象の解釈過程を明示化することを目的としている。本研究の成果として、授業における発言について解釈者が解釈した意味は多様なパーレンで表現できることが明らかになった。1)解釈者が概念と解釈した発言は、(パーレン)で明示化できる。2)発言者が構想構想と解釈した発言は〔亀甲括弧〕で明示できる。そして、3解釈者の解釈を明示化するために40以上の記号が開発され、開発した記号の形式に解釈者の解釈が明示化される。発言に内在し、その背後にある諸概念は記号の関係を記述した形式の中間項に明示化される。各年度ごとに、重点研究と到達目標を掲げている。平成26年度の到達目標は、開発された記号による発言の再構成の形式に解釈がどのように明示されるかを、検証研究と重点研究を通して解明するである。研究実績内容の成果として述べたように、解釈者が授業記録を記号で表現する場合、1)記号の選択と2)記号と記号の関係をどのように定式化するか、3)意味単位を語、語句、文のどの単位に設定するかという形式に解釈者の解釈が明示化されていることを解明した。設定した達成目標が達成されているので、本研究はおおむね順調に進展していると判断できる。教育方法学今後の研究の推進方策と課題は以下のようである。第1に、国際学会において、転記情報をいくつかのレベルで視覚化する提案を具体事例で示した。この研究を基礎に、今後の研究の推進方策として、1)解釈する資料の視覚化の範囲と程度、そして、2)それらが解釈にどのように影響を与えるかという問題を実証的に検証する。第2に、事例に則した新しい記号の開発としては、解釈者が想定した概念を、例えば、公共の場合、『公共』という記号で表してきた。概念間の階層と関係を示す記号の開発が課題となってきている。この問題を最終年度には解明する。第1の課題は記号の構造化であるが、46の記号を7のグループに分類し、その関係をある程度解明できた。第2の課題は、新しい記号の解明であるが、46番目に開発した記号を、解釈との関係のなかでも分析単位との関係で考察できた。但し、第3の課題である各記号の妥当性の検証は、研究を開始する前から、記号で表記された発言を解釈する場合に、例えば、同一性を示す記号(=)は包含関係を示す記号(⊃)と混同するなど、問題が生じることは経験してきた。しかし、これを実験的に検証することができなかった。しかし、これについては、問題点を明確にしている。
細胞周期におけるサイクリンの機能ドメインに関する共同研究

細胞周期の過程はG1-S-G2-M期の各時期でcdc2キナーゼの活性により調節されている。本研究では、細胞周期におけるcdc2キナーゼの活性調節を担うサイクリンの機能をサイクリン蛋白質の機能ドメインを解析することにより明らかにすることを目的としている。本研究の研究期間は2年間(平成4年-5年)で、昨年(平成4年度)では、サイクリンAの各種のサイクリン変異体を作成してその機能を調べ、cdc2キナーゼ活性化に関わるサイクリンのドメイン構造の同定とその機能を解析した。本年度(平成5年度)は、(1)cdc2キナーゼ不活性化に関わるサイクリンのドメイン解析、(2)Xenopusサイクリンの酵母への導入とその発現、(3)サイクリン/cdc2蛋白質複合体の安定性、に関する研究を行なった。(1)サイクリンの分解(Destruction)に関与するドメイン。M期の終了にはcdc2キナーゼの不活性化が必要である。cdc2キナーゼの不活性化はサイクリンのM期特異的分解により引き起こされる。XenopusサイクリンA、およびサイクリンBにin vitro mutagenesisによって各種の置換変異、欠失変異を導入し、Xenopus卵抽出液をもちいてサイクリンのM期特異的分解に必要なアミノ酸配列を同定した。その結果、サイクリンAの41番目から50番目の保存アミノ酸配列RTVLGVIGDNが分解に必要なデストラクションボックスであることが明らかになった。更にサイクリンボックス変異の解析から、デストラクションボックスの存在に加えて、cdc2キナーゼ活性化に必要なサイクリンボックスも分解に必須なドメインであることが示され、サイクリンの分解にとってはcdc2とサイクリンの結合が必要なこと、即ち、cdc2/サイクリン複合体が、M期特異的にcdc2キナーゼにより活性化されるサイクリンプロテアーゼ(現在のところ未同定)の基質になることが本研究により始めて明らかにされた。この解析結果は、EMBOJ(1994)に発表された。更に現在、N末端側のデストラクションボックスと中央領域のサイクリンボックスの間に新たな必須モチーフを変異サイイクリンの解析から見つけだし、現在その領域の同定とサイクリン分解におけるその役割を解析している。(2)XenopusサイクリンAの酵母への導入実験。in vivoでのサイクリン機能を解析するため、XenopusサイクリンA及びin vitro解析で明らかになったサイクリンボックス変異体および分解ボックス変異体をそれぞれ出芽酵母の発現ベクターにつないでガラクトース誘導により酵母内で発現させた。XenopusサイクリンAの発現により酵母はG2-delayを起こした。分解をおこさないデストラクションボックス変異により酵母はG2/Mで完全にの成育を停止した。変異cdc2と結合できない変異体を過剰に発現させても成育阻止は見られないことから、XenopusサイクリンAが酵母CDC28と結合して細胞周期が止っていることが示唆される。現在、サイクリンAと相互作用する未知の遺伝子の同定するため、成育阻止を抑制する酵母のサプレッサーを分離を行なっている。(3)サイクリン/cdc2蛋白質複合体の半減期。cdc2キナーゼの本体であるサイクリン/cdc2複合体の生化学的性質を知るために、サイクリンとcdc2蛋白質複合体のサイクリン分子交換速度を測定した。サイクリンA/cdc2は半減期4時間、サイクリンB/cdc2は15時間で細胞周期を通じて安定であった。本研究を進めるに当たり、平成5年度に小林が英国王立癌研究所を3回訪問し、上記に実験、とくに(1)と(3)を行なった。(2)項の実験に関しては、日本で小林と西本の協力により行なわれた。更に本研究に関する研究討議のため、Hunt博士を日本に招聘しセミナーを開催するとともに、細胞周期シンボジウムで本研究成果を発表した。本共同研究によりサイクリン機能ドメインに関して重要な成果が得られ、且つ本研究成果を基にした細胞周期に於けるサイクリンの機能研究に今後の発展が大いに期待できることを報告する。

更にサイクリンボックス変異の解析から、デストラクションボックスの存在に加えて、cdc2キナーゼ活性化に必要なサイクリンボックスも分解に必須なドメインであることが示され、サイクリンの分解にとってはcdc2とサイクリンの結合が必要なこと、即ち、cdc2/サイクリン複合体が、M期特異的にcdc2キナーゼにより活性化されるサイクリンプロテアーゼ(現在のところ未同定)の基質になることが本研究により始めて明らかにされた。この解析結果は、EMBOJ(1994)に発表された。更に現在、N末端側のデストラクションボックスと中央領域のサイクリンボックスの間に新たな必須モチーフを変異サイイクリンの解析から見つけだし、現在その領域の同定とサイクリン分解におけるその役割を解析している。(2)XenopusサイクリンAの酵母への導入実験。in vivoでのサイクリン機能を解析するため、XenopusサイクリンA及びin vitro解析で明らかになったサイクリンボックス変異体および分解ボックス変異体をそれぞれ出芽酵母の発現ベクターにつないでガラクトース誘導により酵母内で発現させた。XenopusサイクリンAの発現により酵母はG2-delayを起こした。分解をおこさないデストラクションボックス変異により酵母はG2/Mで完全にの成育を停止した。変異cdc2と結合できない変異体を過剰に発現させても成育阻止は見られないことから、XenopusサイクリンAが酵母CDC28と結合して細胞周期が止っていることが示唆される。現在、サイクリンAと相互作用する未知の遺伝子の同定するため、成育阻止を抑制する酵母のサプレッサーを分離を行なっている。(3)サイクリン/cdc2蛋白質複合体の半減期。cdc2キナーゼの本体であるサイクリン/cdc2複合体の生化学的性質を知るために、サイクリンとcdc2蛋白質複合体のサイクリン分子交換速度を測定した。サイクリンA/cdc2は半減期4時間、サイクリンB/cdc2は15時間で細胞周期を通じて安定であった。本研究を進めるに当たり、平成5年度に小林が英国王立癌研究所を3回訪問し、上記に実験、とくに(1)と(3)を行なった。(2)項の実験に関しては、日本で小林と西本の協力により行なわれた。更に本研究に関する研究討議のため、Hunt博士を日本に招聘しセミナーを開催するとともに、細胞周期シンボジウムで本研究成果を発表した。本共同研究によりサイクリン機能ドメインに関して重要な成果が得られ、且つ本研究成果を基にした細胞周期に於けるサイクリンの機能研究に今後の発展が大いに期待できることを報告する。細胞周期におけるサイクリンの機能を,サイクリンタンパクのドメイン構造と対応づけて解析した。サイクリンは,cdc2と複合体を形成して細胞周期におけるcdc2キナーゼの活性を調節しているタンパク質である。サイクリンとcdc2が結合したサイクリン/cdc2複合体は,cdc2プロテインキナーゼ活性をもち,M期の開始に必要である。
生物活性アルカロイド類合成のための新合成ユニットの開発

抗腫瘍性海洋アルカロイドディスコハブディン類およびその類縁体、ステモナアルカロイド類の主成分であるステニン、チュベロステモニン、含窒素スピロアルカロイドのスピロトリプロスタテン類等を合成標的化合物として放り上げ、そのために必要な種々の基盤技術の開発とその応用を行っている。含硫黄ディスコハブディン類に関しては、既に天然型及び非天然型の絶対配置を有するディスコハブディンAを各々光学活性体として得、不斉全合成を完成させた。現在、その類縁体の合成ならびに他のディスコハブディン類の合成を検討している。ステモナアルカロイド類の合成研究として、現在、ステニン合成の最終段時にある。また、そこで見出した方法論を応用して、新しいタイプの鎮痛薬として期待されるスキホスタチンのエポキシシクロヘキセノン部のモデル化合物の合成にも成功していたが、さらに検討を加え、スキホスタチンのヒドロキシアミノ側鎖を加えたエポキシシクロヘキセノン部の合成に成功した。また加水分解酵素リパーゼを用いる対称性1,2-ジオール、1,3-ジオール類のエステル化、ならびに対応するジエステルの加水分解による非対称化の優れた方法を開発し、種々の生物活性を示すインドールアルカロイドの合成鍵中間体として有用な3位に不斉四級炭素を有する様々なオキシインドール類の簡便合成法を開発した。従来、本非対称化法は、生成物の分子内アシル基転位によるラセミ化が問題となっているが、エステル化には、新規アシル化剤1-エトキシビニル2-フロアートを用い、また、加水分解には対応するジフロアートの加水分解反応が高光学純度の不斉四級炭素化合物を与えることを初めて明らかにし、問題解決に至った。これら2通りの方法は両エナンチオマーの作り分けを可能にした。更に、本法を応用し、フィゾスチグミンなどの生物活性天然物の不斉全合成を行った。抗腫瘍性海洋アルカロイドディスコハブディン類およびその類縁体、ステモナアルカロイド類の主成分であるステニン、チュベロステモニン、含窒素スピロアルカロイドのスピロトリプロスタチン類等を合成標的化合物として取り上げ、そのために必要な種々の基盤技術の開発とその応用を行った。含硫黄ディスコハブディン類の合成に関しては、まず、Munroらにより提唱された生合成仮説に従い、マカルバミンFからのスピロ環形成反応を超原子価ヨウ素試薬をはじめ、種々の酸化剤を用いて検討したが、ディスコハブディンA、Bは全く生成しなかった。そこで合成ルートを変更し、硫黄官能基導入の足がかりとなる置換基を予め組み込んだ基質を用いてスピロジエノン構築後、N, O-アセタールを経て、硫黄求核種と反応させることにより架橋スルフィドを含む特異な縮環型スピロコア構造の合成に初めて成功した。この手法を利用して抗腫瘍性海洋アルカロイド、ディスコハブディンAの世界最初の全合成を達成することができた。また、ステモナアルカロイド類の合成研究として、光学活性なヒドロベンゾインとシクロヘキサジエンアルデヒドから合成したシクロヘキサジエンアセタールの分子内ハロエーテル化反応により2個の二重結合の識別に成功し、さらにアセタールによる固定と立体反発を利用して立体選択的な反応を行い、天然のステニンと同じ立体化学を持つ炭素骨格を合成した。このものから天然のステニンとC-N結合の立体化学だけが異なる9a-エピ体の合成に成功した。現在ステニンの合成を目的として更なる検討を行っている。また、ごく最近開発した1-エトキシビニルエステルを用いるプロキラルジオール類の酵素触媒非対称化法を応用して、スピロトリプロスタチン類などの重要な生物活性インドールアルカロイドの中心構造となる3位に不斉四級炭素を有するオキシインドールの短工程不斉合成法を開発した。抗腫瘍性海洋アルカロイドディスコハブディン類およびその類縁体、ステモナアルカロイド類の主成分であるステニン、チュベロステモニン、含窒素スピロアルカロイドのスピロトリプロスタチン類等を合成標的化合物として取り上げ、そのために必要な種々の基盤技術の開発とその応用を行っている。含硫黄ディスコハブディン類に関しては、既にジアステレオマー混合物ではあるが、ディスコハブディンAの全合成を達成したので、今回、その光学活性体合成を検討した。まず本合成の鍵反応である超原子価ヨウ素試薬によるスピロ環形成反応の際に生成する2つのジアステレオマーを分離し、先の合成ルートに従い天然物へと導き、天然型及び非天然型の絶対配置を有するディスコハブディンAを各々光学活性体として得ることができ、不斉全合成を完成させた。現在、スピロ環形成時の選択性向上による立体選択的全合成に向け検討中である。ステモナアルカロイド類の合成研究として、既に天然のステニンの9a-エピ体の合成に成功したので、現在、ステニンそのものの合成研究を行っている。また、そこで見出した方法論を応用して、SMase阻害剤スキホスタチンのエポキシシクロヘキセノン部のモデル化合物の立体選択的合成に成功した。また、p-スルフィニルアニリン誘導体の芳香族Pummerer型反応によって発生させたp-キノンスルホニウム中間体に種々のオレフィン類が求核反応を起こし、一挙にインドールやインドリン骨格を与えることを見出した。更に生成物上のスルフィニル基のリガンド交換反応でアリールアニオンを発生させてその位置に炭素鎖を導入した。本手法は、一つの芳香族スルフィニル基を2通りの炭素炭素結合形成に利用し、種々のインドールアルカロイドの核構造となる2,3,5-置換インドール類の汎用合成法になった。

抗腫瘍性海洋アルカロイドディスコハブディン類およびその類縁体、ステモナアルカロイド類の主成分であるステニン、チュベロステモニン、含窒素スピロアルカロイドのスピロトリプロスタテン類等を合成標的化合物として放り上げ、そのために必要な種々の基盤技術の開発とその応用を行っている。含硫黄ディスコハブディン類に関しては、既に天然型及び非天然型の絶対配置を有するディスコハブディンAを各々光学活性体として得、不斉全合成を完成させた。現在、その類縁体の合成ならびに他のディスコハブディン類の合成を検討している。ステモナアルカロイド類の合成研究として、現在、ステニン合成の最終段時にある。また、そこで見出した方法論を応用して、新しいタイプの鎮痛薬として期待されるスキホスタチンのエポキシシクロヘキセノン部のモデル化合物の合成にも成功していたが、さらに検討を加え、スキホスタチンのヒドロキシアミノ側鎖を加えたエポキシシクロヘキセノン部の合成に成功した。また加水分解酵素リパーゼを用いる対称性1,2-ジオール、1,3-ジオール類のエステル化、ならびに対応するジエステルの加水分解による非対称化の優れた方法を開発し、種々の生物活性を示すインドールアルカロイドの合成鍵中間体として有用な3位に不斉四級炭素を有する様々なオキシインドール類の簡便合成法を開発した。従来、本非対称化法は、生成物の分子内アシル基転位によるラセミ化が問題となっているが、エステル化には、新規アシル化剤1-エトキシビニル2-フロアートを用い、また、加水分解には対応するジフロアートの加水分解反応が高光学純度の不斉四級炭素化合物を与えることを初めて明らかにし、問題解決に至った。これら2通りの方法は両エナンチオマーの作り分けを可能にした。更に、本法を応用し、フィゾスチグミンなどの生物活性天然物の不斉全合成を行った。