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日本企業の海外事業の競争力と経営業績に関する総合的な実証研究

本研究では、日本企業の海外事業の競争力と経営業績を実証的に分析するために、グローバル競争力の評価指標を開発し、先進国市場だけでなく新興国市場における企業のフィールド調査を行った。製造業とサービス業における日本企業のグローバル競争力の相違、日本企業の海外事業の経営業績に影響し、海外市場での競争力の基盤になっている要素を明確にした。また、グローバル競争力の変化を財務指標による国際比較という分析手法で明らかにし、新興国市場、国際M&A、グローバル・マーケティング、グローバルSCMや現地営業活動などの側面から説明するための理論概念と分析枠組みを提示して、グローバル競争力に関する理論的説明を深めた。本研究は日本企業の競争力と海外事業の経営業績を実証的に分析することを目的としている。製造業とサービス業における日本企業のグローバル競争力の相違、そして、その違いを説明する要因、さらに日本企業の海外事業の経営業績に影響し、日本企業の海外市場での競争力の基盤になっている要素を明らかにするために、今年度はつぎのように研究を実施し、研究の成果を論文などに発表している。(1)上場した日本企業の財務データを収集して本研究の目的に沿ってデータベースを構築した。また、日本企業の海外事業と現地法人の財務会計データベースを構築するために、各種資料を収集して整理した。(2)先進国市場(EU)と新興国市場(中国・インド)における日本企業に関するフィールド調査を実施し、本研究の調査対象となる国・地域、産業と企業をリストアップした。中国の北京・上海・広州など沿海大都市に立地している日本企業の統括会社またはグループ中核となる現地法人を訪問し、面接調査を実施した。(3)現地でのフィールドワークに用いる現地法人の事業全般に関する質問調査票の素案を作成する。海外での訪問面接調査の対象企業を確定して、関連資料を整理してその内容分析を行った。(4)既存文献と資料を収集し、日本企業の海外事業展開に関する理論研究と実証分析の研究蓄積を整理した。日本語と中国語の日本企業の現地法人に関する記事を整理して、これと並行して企業の海外事業と経営業績に関する理論研究の研究成果を整理している。今年度の研究成果としては、グローバルSCMの理論発展、国際M&Aによる海外事業の展開、営業プロセスにおける知識マネジメント、サービス業(特に小売業)の競争力分析などの成果を発表している。また、日本企業の財務データによる財務指標分析、日米欧企業の財務指標の比較分析を試みている。本研究は日本企業の競争力と海外事業の経営業績を実証的に分析することを同的としている。グローバル競争力を評価するための指標を開発し、日本企業がグローバル競争力の低下を説明する要因、さらに日本企業の海外事業の経営業積に影響し、日本企業の海外市場での競争力の基盤になっている要素を明らかにするために、今年度はつぎのように研究を実施し、研究の成果を諭文などに発表している。1)場と非上場企業の海外M&Aデータを収集して本研究の同的に沿ってデータベースを構築した。また、M&Aを行った企業の海外事業と現地法人の財務会計データベースを構築するために、各種資料を収集して整理した。2)先進国市場(北欧、米国)と中国市場における日本企業に関するフィールド調査を実施し、本研究の調査対象となる企業をリストアップした。日本企業の統括会社またはグループ中核となる現地法人を訪問し、面接調査を突施した。3)JETRO現地事務所の協力を得て日本企業の現地法人へのヒアリングを実施し、欧州危機のアジア企業の投資行動に対する影響に関する分析を行った。4)既存文献と資料を収集し、M&Aによる海外事業展開に関する理論研究と実証分析の研究蓄積を整理した。これと並行して企業の海外事業と経営業績に関する理論研究の研究成果を整理している。アウトプットして、グローバルSCMの理論発展、M&Aによる海外事業の展開、チャネル政策と生産工程における組織学習プロセス、サービス業(特に地域ブランド)の分析などの研究成果を発表している。また、M&A企業の財務指標の動態分析を試みている。中心的な結論としては、1)GSCNの概念を提示し、それをマネジメントするために必要なアジリティ(俊敏さ)、延期型システムと組み合わせの経済の三つの編成原理を整理している。2)暗黙知の標準化、PDCA活動、権限委譲のOJT、批判的コミュニケーションが職場の知識創造を活性化している。本研究は、日本企業の競争力と海外事業の経営業績を多面的かつ実証的に分析することを目的とし、製造業とサービス業における日本企業のグローバル競争力の基盤、欧米市場と新興国市場での日本企業に関するフィールド調査とグローバルな比較分析によって日本企業のグローバル・ネットワークの新しい姿を明らかにしようとした。また、グローバル競争力を評価するための指標を開発し、日本企業がグローバル競争力の低下を説明する要因、さらに日本企業の海外事業の経営業績に影響し、日本企業の海外市場での競争力の基盤になっている要素を明らかした。平成22年から24年度までの日米欧と中国における現地調査の成果をベースに日本と米国でのフィールド調査を実施した。

また、海外事業と現地法人の財務会計データベースを拡張し、これまで収集したデータを統合して先進国と新興国(インド、中国)における日本企業の事業展開と市場行動に関する理論研究と実証分析を行った。フィールド調査で収集した対象企業の海外事業に関する内容分析を行い、既存研究の文献と資料を収集してグローバル統合と後発優位の概念拡張を行い、グローバル競争力に関する理論づくりを試みた。さらに、日本企業(製造業とサービス業)の海外事業に関する理論研究と実証分析の研究成果を整理すると同時に、インドや中国など新興国にある現地での日本企業の現地法人の財務会計データを入手して海外事業と現地法人の経営業績を実証的に分析した。欧米企業との国際比較分析によって日本企業だけでなく新興国企業の特徴も明らかにしている。日本企業のグローバル競争力および海外事業の経営業績に関する研究成果を日本商業学会の全国大会および韓国で開催された日中韓の国際学会において報告して研究の成果を論文にまとめて国内外で発表している。中国における調査の実施結果を基に、欧州と米国の現地法人に関する調査を実施し、その日本本社を訪問した。また、海外事業と現地法人の財務会計データベースを拡張した。現地法人の事業全般に関するヒアリング調査も実施した。これと並行して引き続き既存文献と資料を収集し、訪問面接調査のヒアリング資料を整理し、その内容分析を行った。欧州と米国における日本企業(製造業とサービス業)の海外事業に関する理論研究と実証分析の既存研究成果を整理した。さらに、アジア、欧州と北米における日本メーカーの海外事業と現地法人の経営業績データベースについて、多変量統計分析などの分析手法で定量的な分析を行った。中国、インド、欧州での調査結果と比較分析し、競争力および競争力基盤の相違、そして、原材料と部品の調達、物流、サプライチェーン、とくに生産プロセスでの製造工程をめぐる海外事業の戦略調整の実態と実証分析の成果をペーパーなどにまとめて学会と雑誌において発表している。1)当初計画では日本、中国、インドとEUに限定していたが、データ収集の努力により、G20及び主要新興国の約35か国における過去20年間の上場と非上場企業の海外M&Aに関するデータベースを完成した。2)日本と中国の海外M&A実施企業に関する財務データペースを構築した。3)米国と欧州での共同研究ネットワークの形成と協力体制の構築を計画以上に進んでいる。25年度が最終年度であるため、記入しない。中国、欧州と北米における調査の実施は計画通り進展している。また、欧州と北米の現地法人とその日本本社を訪問するとともに、海外事業と現地法人の財務会計データベースを拡張させることもできている。ただし、現地法人の事業全般に関する質問調査票調査、とくにインドの事業担当者にヒアリング調査を実施することは、調査時間の制約により来年度の課題とした。
ナノメートルオーダー非接触表面粗さ評価システムの開発

物体表面の実際の粗さと人間が視覚で感じる粗さとは,物体の材質や色彩によって異なったものになることが,経験上わかっている.そこで,工業分野においては,塗装面,紙,金属板などの品質向上のため,人間の視覚に基づいてその表面粗さを非接触で評価することが注目されている.現在,一般的には被検面からの正反射光の光強度を検出することで,表面粗さの計測をおこなっているが,この手法だと,被検面の材質や色彩の影響を受けるため,人間の視覚に基づいた表面粗さの評価はできない.さらに,近年の微細加工技術の進展にともない,ナノメートルオーダーでの表面粗さの計測が要求されつつある.そこで,本研究では光強度のみでなく,回折現象やモアレトポグラフィ法を利用して,被検面の微細形状をナノメートルオーダーで計測するとともに,人間の視覚に基づき表面粗さの評価をおこなう新規的な非接触表面粗さ評価システムを開発する.視覚に基づいた表面粗さの評価をおこなうための基礎的な研究として,樹脂面を観察したところ,人間が視覚で感じる表面性状は,被検面の半透明さに依存しているようであることがわかった.ところで,三次元形状計測法の一種に,パターン投影法と呼ばれる手法がある.これはあるパターンの影を被検面に投影し,その変形具合から三次元形状を算出するものであるが,我々は人体の形状を計測する際,コントラストが著しく低下することを見出した.そこで,あるパターンの影を樹脂面に投影し,そのコントラストを測定することで樹脂面の表面粗さを評価することができるのではないかと考えた.様々な粗さの樹脂表面に対して実験をおこなった結果,樹脂面に投影されるコントラストを測定することで,樹脂の表面粗さを評価できることがわかった平成16年度は,測定サンプルとして表面粗さが異なった半透明の樹脂を用い,格子像を投影する際の入射角依存性を調べた.その結果,入射角を小さくするほど,表面粗さに対するコントラストは,大きく変化することがわかった.さらに,測定サンプルの表面から光を照射し,その透過光強度も測定した.この実験結果から,表面粗さの異なる樹脂表面に格子パターンを投影したとき,格子像のコントラストと樹脂面の透明度との間には関係があり,コントラストが大きいほどその樹脂の透明度は低いことが,実験的に確かめられた.物体表面の実際の粗さと人間が視覚で感じる粗さとは,物体の材質や色彩によって異なったものになることが,経験上わかっている.そこで,工業分野においては,塗装面,紙,金属板などの品質向上のため,人間の視覚に基づいてその表面粗さを非接触で評価することが注目されている.現在,一般的には被検面からの正反射光の光強度を検出することで,表面粗さの計測をおこなっているがこの手法だと,被検面の材質や色彩の影響を受けるため,人間の視覚に基づいた表面粗さの評価はできない.さらに,近年の微細加工技術の進展にともない,ナノメートルオーダーでの表面粗さの計測が要求されつつある.そこで,本研究では光強度のみでなく,回折現象を利用して被検面の微細形状をナノメートルオーダーで計測するとともに,人間の視覚に基づき表面粗さの評価をおこなう新規的な非接触表面粗さ評価システムを開発する.平成14年度までで,様々な被検面に対して,表面粗さと人間の視覚に基づく表面粗さとの関係を調べた結果,被検面の微細な表面形状が影響を及ぼしていることが分かった.そこで,光の回折現象を利用した微細形状の測定に関する研究をおこなった.研究の第一段階として,旋盤用スローアウェイチップの微細な欠損の有無を判定することにした.実際にチップの回折パターンをCCDカメラに取り込み,欠損の有無による比較をおこなった結果,数10μm程度の微細な欠損を検出することが可能でることがわかった.また,視覚に基づいた表面粗さの評価をおこなうための基礎的な研究として,樹脂面を観察したところ,人間が視覚で感じる表面性状は,被検面の半透明さに依存しているようであることがわかった.そこで,あるパターンの影を樹脂面に投影し,そのコントラストを測定することで樹脂面の表面粗さを評価することができるのではないかと考えた.様々な粗さの樹脂表面に対して実験をおこなった結果,樹脂表面の半透明さは表面粗さに依存しており,樹脂面に投影されるコントラストを測定することで,樹脂の表面粗さを評価できることがわかった.物体表面の実際の粗さと人間が視覚で感じる粗さとは,物体の材質や色彩によって異なったものになることが,経験上わかっている.そこで,工業分野においては,塗装面,紙,金属板などの品質向上のため,人間の視覚に基づいてその表面粗さを非接触で評価することが注目されている.現在,一般的には被検面からの正反射光の光強度を検出することで,表面粗さの計測をおこなっているが,この手法だと,被検面の材質や色彩の影響を受けるため,人間の視覚に基づいた表面粗さの評価はできない.さらに,近年の微細加工技術の進展にともない,ナノメートルオーダーでの表面粗さの計測が要求されつつある.そこで,本研究では光強度のみでなく,回折現象を利用して被検面の微細形状をナノメートルオーダーで計測するとともに,人間の視覚に基づき表面粗さの評価をおこなう新規的な非接触表面粗さ評価システムを開発する.

視覚に基づいた表面粗さの評価をおこなうための基礎的な研究として,樹脂面を観察したところ,人間が視覚で感じる表面性状は,被検面の半透明さに依存しているようであることがわかった.ところで,三次元形状計測法の一種に,パターン投影法と呼ばれる手法がある.これはあるパターンの影を被検面に投影し,その変形具合から三次元形状を算出するものであるが,我々は人体の形状を計測する際,コントラストが著しく低下することを見出した.そこで,あるパターンの影を樹脂面に投影し,そのコントラストを測定することで樹脂面の表面粗さを評価することができるのではないかと考えた.様々な粗さの樹脂表面に対して実験をおこなった結果,樹脂表面の半透明さは表面粗さに依存しており,樹脂面に投影されるコントラストを測定することで,樹脂の表面粗さを評価できることがわかった.平成15年度は,被検面として表面粗さが等しく色が異なる半透明の樹脂を用い,格子像を投影した際のコントラストを測定する実験をおこなった.その結果,本手法は披検面の色の影響を受けにくいことが,実験的に確認できた.物体表面の実際の粗さと人間が視覚で感じる粗さとは,物体の材質や色彩によって異なったものになることが,経験上わかっている.そこで,工業分野においては,塗装面,紙,金属板などの品質向上のため,人間の視覚に基づいてその表面粗さを非接触で評価することが注目されている.現在,一般的には被検面からの正反射光の光強度を検出することで,表面粗さの計測をおこなっているが,この手法だと,被検面の材質や色彩の影響を受けるため,人間の視覚に基づいた表面粗さの評価はできない.さらに,近年の微細加工技術の進展にともない,ナノメートルオーダーでの表面粗さの計測が要求されつつある.そこで,本研究では光強度のみでなく,回折現象やモアレトポグラフィ法を利用して,被検面の微細形状をナノメートルオーダーで計測するとともに,人間の視覚に基づき表面粗さの評価をおこなう新規的な非接触表面粗さ評価システムを開発する.視覚に基づいた表面粗さの評価をおこなうための基礎的な研究として,樹脂面を観察したところ,人間が視覚で感じる表面性状は,被検面の半透明さに依存しているようであることがわかった.ところで,三次元形状計測法の一種に,パターン投影法と呼ばれる手法がある.これはあるパターンの影を被検面に投影し,その変形具合から三次元形状を算出するものであるが,我々は人体の形状を計測する際,コントラストが著しく低下することを見出した.そこで,あるパターンの影を樹脂面に投影し,そのコントラストを測定することで樹脂面の表面粗さを評価することができるのではないかと考えた.様々な粗さの樹脂表面に対して実験をおこなった結果,樹脂面に投影されるコントラストを測定することで,樹脂の表面粗さを評価できることがわかった平成16年度は,測定サンプルとして表面粗さが異なった半透明の樹脂を用い,格子像を投影する際の入射角依存性を調べた.その結果,入射角を小さくするほど,表面粗さに対するコントラストは,大きく変化することがわかった.さらに,測定サンプルの表面から光を照射し,その透過光強度も測定した.この実験結果から,表面粗さの異なる樹脂表面に格子パターンを投影したとき,格子像のコントラストと樹脂面の透明度との間には関係があり,コントラストが大きいほどその樹脂の透明度は低いことが,実験的に確かめられた.
活性化ミクログリアの神経保護作用誘導を活用するアルツハイマー病新治療薬の開発

我々は、アルツハイマー病(AD)の新しい治療方策として生体に備わった抗炎症能力を誘導・賦活化すること、特に抗炎症性の神経保護型ミクログリア(2型MG)を積極的に活用する戦略と、これを実現する薬物シーズの開発を行った。(1) in vitroにおける2型MGによる・アミロイド(A・)クリアランスの分子機構を解明した(J. Immunol., 2008)。(2) (1)のA・クリアランス能がin vivoでも作動するかを、本病態モデルの一つAPP23マウスを用い、脳内にサイトカインを微量注入して調べた結果、A・蓄積が有意に認められる4.5月齢では、蓄積A・の減少とこれに伴う記憶学習能の有意な改善を認めることができた。(3) IL-4分泌促進能をもつある種の薬物候補化合物(経口投与)を用いても、APP23における脳内Aβ_42量が減少するとの予備知見も得た。1.In vitroで見い出した抗炎症性サイトカイン(IL-4、IL-13)で活性化された2型MGのAβ(オリゴマー状)クリアランス能誘導とその効果をin vivoで評価するために、アルツハイマー病モデルマウスの一つAPP23マウスを用い、Aβ蓄積量が異なる月齢(4.5、6、9ケ月齢)でAβクリアランス能とその記憶学習能力改善効果を比較した。その結果、Aβ繊維化が進行していない4.5月齢では有意に、また6月齢でも効果を認めた。しかし、繊維化が進んだ9月齢では効果がみられなかった。注入側でAβ蓄積量が減少したAPP23マウスの多くでは、行動に改善が見られた。IL-4/IL-13で誘導されるミクログリアでのAβクリアランスは、AD新規治療法の一つとなる可能性が示された。2.上記の知見をAD治療法にまで展開するには、上記クリアランス能を誘導できる薬物候補がほしい。この観点からいくつかの薬物を検討したところ、ある種のレチノイド類がCD36や分解酵素neprilysinの発現量を上昇する結果を得た。これらの分子の発現には転写因子PPARγを介していることがわかっているが、レチノイドの効果は、このPPARγとヘテロ二量体を形成するRXRを活性化したことによるものと考察される。この考察を敷衍すると、naiveT細胞からIL-4分泌型のTh2細胞への分化促進能が判明しているRARアゴニストと併用すれば、上記クリアランス能を大きく向上させることが期待できる。アルツハイマー病(AD)治療の創薬において、現行の対症療法(ドネペジル)に代わる根本的治療法の開発研究が国内外で精力的に取り組まれているが、未だに有望なものはない。このような現状から新しい方法論の開発・提案が待たれている。我々は、ADの新しい治療方策として生体に備わった抗炎症能力を誘導・賦活化すること、特に抗炎症性の神経保護型ミクログリア(2型MG)を積極的に活用する戦略と、これを実現する薬物シーズの開発を行った。1.ラット脳から単離した2種のMG初代培養系でβアミロイド(Aβ)のクリアランス効果を調べると,抗炎症性サイトカインIL-4(IL-13でも)で処理したオリゴマー状Aβ(o-Aβ)の取り込み・分解は、2型MGに選択的に認められること,このときスカベンジャー受容体のCD36やAβ分解酵素であるネプリライシンやインスリン分解酵素酵素の発現が誘導されること,これらの全てを誘導するのはIL-4とIL-13であることを見出した(J.Immunol.,2008)。2.1.のAβクリアランス能がin vivoでも作動するかを、本病態モデルの一つAPP23マウスを用い、脳内にサイトカインを微量注入して調べた結果、Aβ蓄積が有意に認められる4.5月齢では、蓄積Aβの減少とこれに伴う記憶学習能の有意な改善を認めることができた。3.上記の知見をAD治療法にまで展開するには、上記クリアランス能を誘導できる薬物候補がほしい。この観点からいくつかの薬物を検討したところ、ある種のレチノイド類がCD36やネプリライシンの発現量を上昇する結果を得た。またIL-4分泌促進能をもつある種の薬物候補化合物(経口投与)を用いても、APP23マウスにおける脳内Aβ_<42>量が減少するとの予備知見も得た。これらの結果は,更なる展開に弾みがつくものとして期待される。
超音波援用加工による高速・微細機能性インターフェース創成

マイクロメートル・サブマイクロメートルオーダの微細形状を創成するために超音波振動援用加工を適用した。開発した超音波振動援用装置では工具の軸方向とたわみ方向に援用でき、工具の回転運動と工作物送りを重畳することにより運動軌跡を工作物に転写して微細構造を創成する。軸方向振動を援用した場合、回転運動と振動により正弦波状の切削軌跡をとるために、切れ刃に対して2枚のすくい面を持つ形状がバリを抑制して良好な構造体を創成することに有効であることを明らかとした。またたわみ振動による切削では切れ刃の干渉により構造体は破壊される場合があり、また微細構造創成の機構がインデンテーション作用であることを明らかとした。平成25年度における本テーマの研究概要については以下の通りである.加工原理は,工具に対してモータによる回転運動と圧電振動子による超音波振動運動を組み合わせることにより,工具軌跡を正弦波状やトロコイド曲線状にし,その運動軌跡の一部を材料表面に残存させて微細なパターンを創成するものである.これまでは多数の切れ刃を有する砥石を用いて実験していたが,単粒ダイヤモンド砥粒を超硬合金のシャンクに電着した工具の作製を依頼し,この工具を用いて加工することで,加工現象の解明を進めた.その結果,軸方向に振動させた場合,微細構造の創成機構は想定されたとおりであることが確認され,また斜め方向への送りを重畳することで効率よく微細構造を残存させることについて確認できた.一方,たわみ方向に振動させた場合,砥粒を連続的に押し込んだ形状が材料表面で確認された.しかしこの振動方式の場合,砥粒に対して作用する負荷が大きくなり,砥粒側が損傷することも明らかとなった.さらに軸方向とたわみ方向を同時に負荷した場合には,無秩序な表面が得られることが確認された.単粒工具の実験においては,実用上の問題点として,加工時のバリの発生の確認できたことが大きい.特に本加工法では正弦波状に運動した場合の上下の切返し点で材料の盛上りが顕著となる.このような材料の変形・除去の特性に関しては切削加工専用の有限要素解析ソフトウェアを用いて検証している.工具端面に単粒ダイヤモンド砥粒を電着した新しい工具を依頼しており,この工具を用いることで,新たなパターンを創成することを行う予定である.本研究は超音波振動援用研削において工作物を砥石回転方向に対して斜めに送る研削(スラントフィード研削)を行った際に,工作物表面にマイクロサブマイクロメートルオーダの微細構造が創成されることを用いた加工法である.パターン創成の規則性について検証を行った.砥粒をシャンク円筒面に配置した場合の実験では砥粒の形状の微細構造創成に対する影響について検証した.その結果,軸方向振動による微細形状創成の場合には回転切削方向に対して傾いた2面を有する砥粒の場合にバリの生成が抑制されること,および2軸たわみ振動による回転振動を用いた場合には工具の逃げ面となる箇所の干渉を避けないと微細構造が創成できないことを明らかにした.また軸方向と回転方向の超音波振動を重畳させた3軸超音波振動を与えた場合には規則性の見られないランダムな加工面が創成されるが,切れ刃形状による影響は受けづらいことがわかった.砥粒を用いた実験から得られた知見に基づきダイヤモンド切削工具を設計・創成し,微細構造創成実験を行った.被削材としてアルミニウム,ニッケルリンめっきおよびジルコニアを用いた結果,いずれの材料に対してもバリの生成を抑制し,微細構造を創成できることが確認できた.また創成した面に対する濡れ性の評価を行い,微細構造との傾向は明らかではないものの接触角が変化すること,またパターンの方向に依存し液滴の形状が楕円形になることが観察された.砥粒をシャンク端面に配置した工具による実験においては,軸方向振動による実験の結果から初めに材料除去が生じ,切り残りの分に対して打痕が残される形となり,フィードマークにマイクロメートルオーダの打痕が重畳される形態となった.生産工学・加工学単粒工具の製作を依頼し,それを用いて実験を行うことで超音波振動援用加工における微細構造創成について検証できた点,新たな工具について依頼し本年度より実験を行える点,FEM解析について着手して切削機構を検証することができている点から,本研究に関しては計画に対して順調に進展している.砥石端面に砥粒を電着した工具を用いて加工を行う.原理上,軸振動を援用した場合には連続押込みを行った状態となるため,回転数と振動数に応じた加工痕が残存し,たわみ振動を援用した場合にはトロコイド曲線状の加工痕が残存する.

これらの効果に関して検証を行う.また表面機能性の評価として,接触角計を用いて表面の濡れ性の評価を行う.新規設計した砥石の納品が遅れたため.延期となった品目は次年度(平成26年度)に納入されるため,使用年度以外は当初計画と同様に予算を使用する予定である.
BelousovーZhabotinsky反応における波動伝播の実験的研究

三年間にわたる本研究において.BelousovーZhabotinsky反応に代表される反応拡散系の波動伝播に関して、実験的・理論的・および数値計算の方法により研究を行った。以下得られたいくつかの成果に関して述べる。1まず始めに挙げられることは、ペ-スメ-カ-の径を変えることにより、タ-ゲットパタ-ンの波長を変化させる方法が開発されたことである。これは実験的な観点からすると波の発生にまかせていた今までの実験方法に比べて格段の進歩である。さらにこの方法の機構が、一般の反応拡散系より導びいた簡単化された方程式で、定性的によく説明されたことである。また更に波長とペ-スメ-カ-径の関係に極小点を有することが、計算機実験によりファンデルボ-ル方程式を用いて示された点である。2次には波の爆発的消滅現象の発見がある。これはパタ-ンを観測中偶然に発見したもので、タ-ゲットパタ-ン全体が一瞬にして消滅してしまうもので、余りにも激しい現象であり、今までの反応拡散系の概念の枠内だけで理解され得るものか不明である。3としては、計算機シミュレ-ションによる新しい波の発見である。その一つとして、尺取り虫波の発見がある、この波は波面が時間とともに連続的に変化するものではなくて、不連続的に変化するものである。4最後にカオス振動子を有する反応拡散系の結果につき述べる。振動子としてはレスラ-モデルを用いた。結果としては予想外にもペ-スメ-カ-の振動数が媒質の振動数よりも小さな場合にタ-ゲットパタ-ンが形成されるのを観測した。なお計算は半径r方向の一次元と、二次元の双方の場合につき行った。このように反応拡散系において新しい波,新しい現象,新しい波の制御方法が発見されたことが本研究の成果である。本年度は研究計画にもとずき、画像処理の装置を整備し、そのプログラムを開発した。この装置を使用し、BZ反応の実験結果の解析を行った。今年度は、次の点における新たな知見を得、研究は大きく前進したと言える。それは、ペースメーカーにより、BZ反応の波長をコントロールする実験において、結果の説明が、定性的に理論によりなされたことである。すなわち、ペースメーカー(セルロース)の半径をRとし、それより発生する波の波長をλとする。反応に関与するイオンの拡散係数をD、ペースメーカーの強さをΓαとする。振動状態より出発し、拡散の影響を摂動として扱った理論により、摂動の第1次近似として次の固有値方程式を得る。ここで系を実験に即して2次元(γ、σ)として、γ≦Rの場合には、α(γ、σ)=α、その他の場合には0とし、固有値ωを求め、このωのうち実験の時空関係より、最大固有値ω_Mに着目する。これと発生波長λとの関係は、λ=2π√<D/ω>である。このようにして、理論的にRとλの関係を求めると、次の二点で実験結果をよく説明することが分かった。すなわちλは、ペースメーカーの半径Rと、方位量子数lの関数としてλ(R、l)と書ける。1)Rに対して、λは減少関数であり、R→∞でλは一定値に近ずく2)Rの大のとこで、実験的にはλはまた増え、かつ円形同心円波でなくなるが、これはlが2以上の固有値の影響としてうまく説明できる。以上の成果をふまえて研究を継続している。本年度は研究計画に基づきI)BZ反応の実験、および次年度に予定していたII)BZ反応の計算機シミュレ-

ションの双方を行なった。II)の実施を早めたのは、I)で示されている。ペ-スメ-カ-によるタ-ゲットパタ-ンの波長の制御および、新たに発見された“波全体の消滅現象"の機構を知るには、計算機シミュレ-ションを急いだ方が良いと判断した為である。この理由により本年度の研究の半分位の労力をプログラム開発およびそのテストに費やした。BZ反応の基本となる式は、オレゴンのクル-プのField、KorosおよびNoyesらの化学反応過程より導出したスキ-ム(オレゴネ-タ-)に拡散項を付加したものである。およびα={(1-η)+〔(1-η)^2+4qη〕^<1/2>}/2qである。本来のオレゴネ-タ-は三変数であるが、計算時間を短縮する為に二変数近似を用いた。また、オレゴネ-タ-はいわゆる“固い"(stiff)方程式であり、通常用いられるルンゲ・クッタ法では積分できず、ここでは陰解法であるゲア-法を用いた。プログラムは現在、実際の受験結果と比較し得る段階になりつつあり、現在ペ-スメ-カ-の径に対する発生波長の変化を調べているが、ほぼ実験と同様な傾向が得られていることが注目される。今後再にプログラムの信頼性を高め、波長変化の機構や、更に実験で発見した。波の消滅現象の機構解明に役立てたい。本年度は従来の予定通り計算機実験を行った。その内容を箇条書きにすると、1ペ-スメ-カ-の径と発生するタ-ゲットパタ-ンの波長の関係を調べること。2新しい種類の波を見つけること。3カオス振動子による反応拡散系を研究すること、の三点である。この結果として次のような成果を得た。1に関しては、振動子として主にファンデルポ-ル振動子x^^ ̈ーε(1ーx^2)x^^'+x=0を用い、また計算を一次元(半径方向のみ)と二次元の双方にわたって行った.この成果の最大のものは、ペ-スメ-カの径と発生する波の波長との関係において、ある径に対して波長の極小点が表われたことである。この結果は実験結果とよく一致し、この現象が普遍性を持つものであることを示している。次に2に関してはいくつかの新しい発見があった。そのうちの一つは`尺取り虫'波の発見である。この波はファンデルポ-ル方程式のεの大きな緩和振動の場合に起るもので、波面が時間とともに連続的に進むのではなく、尺取り虫の歩みのように不連続的に進行するものである。この種の波は実際の実験において観測されてはいないが、反応拡散系に対して新たな知見を与えるものである。3として、カオス振動子の反応拡散系のシミュレ-ションであるが、カオス振動子としては、最も簡単なレスラ-モデルを選んだ。この系において、ペ-スメ-カ-領域の振動数が他の領域の振動数のfr倍であるように設定した.得られた結果としては、fr<1の場合において、実に振動子があたかもリミット・サイクルであるようなタ-ゲットパタ-ンが観測されたことである。恐らくこの発見は始めてのものであろう。この発見は、カオス的反応拡散系に関する新たな概念の形成につながるかも知れず、今後振動子の種類を変えるなどして、この現象の一般性を追求することが必要であろう。
新規分子ディスプレイ技術を用いた二重特異性抗体の開発

本研究では,まず,エマルジョンPCRとmRNAディスプレイ法を組み合わせた手法でFabライブラリーから目的の抗体が取得されるかどうかの確認を行った.前年度,モデルとして抗p53Fabにランダム変異を導入したライブラリーから結合活性が上昇した変異体を取得することを目指した結果,野生型より高い結合活性が持つ変異体を取得することができた.今年度は,得られた変異体の解離定数の算出や変異の影響などの詳細な解析を行い,研究成果をまとめた.次に,分子センサーとして機能する二重特異性抗体の元となる抗体を作製した.前年度に作製した抗CEA抗体を基にCEAとフルオレセインを認識する抗体の変異体ライブラリーを作製した.H鎖を抗CEA由来,L鎖を抗フルオレセイン由来のキメラ抗体をまず作製し,そのキメラ抗体を基にエラープローンPCRによってランダム変異を導入することで変異体ライブラリーを作製した,現在は,前年度に作製したエストラジオールとフルオレセインのキメラ抗体の変異体ライブラリーと共に,分子センサーとして機能する二重特異性抗体のセレクションを試みている.また,エマルジョンPCRとmRNAディスプレイ法を組み合わせたセレクション手法を発展させることによって,新たにタンパク質/RNA複合体のセレクション系の構築に着手した.タンパク質C5とRNA M1の複合体である大腸菌RNasePをモデルとして系の確立を目指した,まず,mRNAディスプレイされたC5とM1の複合体がtRNA前駆体に結合し,5'側を切断してRNasePの機能を有することを確認した.次いで,C5に結合するアプタマーであるW2がmRNAディスプレイされたC5と結合することを確認した.C5/W2の複合体をネガティブコントロールとして用いたところ,C5/M1複合体をアフィニティセレクションによって100倍以上濃縮することができた.本研究では,まず,エマルジョンPCRとmRNAディスプレイ法を組み合わせた試験管内進化法でFab抗体ライブラリーから目的の抗体が取得されるかどうかの確認を行った.抗p53Fab抗体にランダム変異を導入したライブラリーから結合活性が上昇した変異体を取得することを目指した結果,野生型の抗p53Fab抗体より高い結合活性が持っていた変異体を得ることができ,ライブラリーからでも目的抗体が取得できることがわかった.次に,分子センサーとして機能する二重特異性抗体の元となる抗体を作製した。抗フルオレセインFab抗体は既に作製済みだったので,残る2つの抗エストラジオールおよび抗CEAのFab抗体遺伝子を作製した.抗エストラジオールと抗CEAのV_HとV_Lドメインをコードする遺伝子を化学合成により作製し,PCRによりCH_1とC_Lドメインの遺伝子を連結させることで,Fab抗体の遺伝子を作製した.続いて,分子センサーとして機能する二重特異性を取得するために,2)で述べた抗体を基にキメラ抗体を作製し,ランダム変異を導入した変異体ライブラリーを作製した.立体構造情報を元に各抗体の抗原との結合の仕方を考慮し,H鎖を抗エストラジオールまたはCEA由来,L鎖を抗フルオレセイン由来のキメラ抗体を作製した.そのキメラ抗体を基にランダム変異を導入して,変異体ライブラリーを作製した.現在,このライブラリーを用いて,フルオレセインに結合しエストラジオールによって競合的に溶出される抗体のセレクションを行っている.また,確立したエマルジョンPCRとmRNAディスプレイ法を組み合わせたセレクション手法を発展させることによって,新たにタンパク質/RNA複合体のセレクション系の構築に着手した.分子ディスプレイ技術によってタンパク質/RNA複合体のセレクションを行うのは本研究が初めての事例である.本研究では,まず,エマルジョンPCRとmRNAディスプレイ法を組み合わせた手法でFabライブラリーから目的の抗体が取得されるかどうかの確認を行った.前年度,モデルとして抗p53Fabにランダム変異を導入したライブラリーから結合活性が上昇した変異体を取得することを目指した結果,野生型より高い結合活性が持つ変異体を取得することができた.今年度は,得られた変異体の解離定数の算出や変異の影響などの詳細な解析を行い,研究成果をまとめた.次に,分子センサーとして機能する二重特異性抗体の元となる抗体を作製した.前年度に作製した抗CEA抗体を基にCEAとフルオレセインを認識する抗体の変異体ライブラリーを作製した.H鎖を抗CEA由来,L鎖を抗フルオレセイン由来のキメラ抗体をまず作製し,そのキメラ抗体を基にエラープローンPCRによってランダム変異を導入することで変異体ライブラリーを作製した,現在は,前年度に作製したエストラジオールとフルオレセインのキメラ抗体の変異体ライブラリーと共に,分子センサーとして機能する二重特異性抗体のセレクションを試みている.また,エマルジョンPCRとmRNAディスプレイ法を組み合わせたセレクション手法を発展させることによって,新たにタンパク質/RNA複合体のセレクション系の構築に着手した.タンパク質C5とRNA M1の複合体である大腸菌RNasePをモデルとして系の確立を目指した,まず,mRNAディスプレイされたC5とM1の複合体がtRNA前駆体に結合し,5'側を切断してRNasePの機能を有することを確認した.次いで,C5に結合するアプタマーであるW2がmRNAディスプレイされたC5と結合することを確認した.C5/W2の複合体をネガティブコントロールとして用いたところ,C5/M1複合体をアフィニティセレクションによって100倍以上濃縮することができた.エマルジョンPCRとmRNAディスプレイ法を組み合わせた試験管内進化法でFab抗体ライブラリーから目的の抗体を取得できる条件を確立させるのに時間がかかり,分子センサーとして機能する二重特異性のセレクションが現在まだ進行中であるから.

ライブラリー作製方法やセレクション方法を検討しながら,現在進行中の分子センサーとして機能する二重特異性のセレクションを引き続き進める.また,エマルジョンPCRとmRNAディスプレイ法を組み合わせたセレクション手法を発展させることによって,新たにタンパク質/RNA複合体がセレクションできることを見出したので,とちらの方も研究を進める.
腎症状を呈する新規ファブリー病モデルマウスの病態の解析と応用

ファブリー病は、α-ガラクトシダーゼA遺伝子(Gla)の変異により、グロボトリアオシルセラミド(Gb3)が全身に蓄積し、慢性腎臓病、心不全、脳血管障害などを来たす疾患である。申請者らは、無症状であるGLA欠損マウスにGb3合成系酵素(G3S)を過剰発現させて、ファブリー腎症の早期症状である多尿を呈するマウス(G3stg/Glako)を作出した。これを解析し、Gb3がヘンレの太い上行脚(TAL)に過剰に蓄積し、水・電解質バランスに関わるTAL特異的分子であるウロモジュリン(UMOD)とNa-K-2Cl共輸送体(NKCC2)の発現低下が電解質喪失、尿濃縮能障害などの原因であることを明らかにした。1)腎障害が発症して進行する過程の研究(1)腎組織の解析:20週齢を対象とした電顕で、髄質集合管・遠位尿細管、近位尿細管の上皮細胞にlamellar bodyを含む多数のvacuoleとミトコンドリア異常を認めた。これらは、本症の発症に深く関わっている可能性を強く疑わせる所見である。電顕でもポドサイトには少数のlamellar bodyが認められるだけであった。免疫染色ではp62が髄質集合管・遠位尿細管、近位尿細管の上皮細胞に認められた。ポドサイトには認められなかった。これらは、オートファジー不全の関与を示すものであった。(2)腎機能、尿異常の解析:尿蛋白として、アルブミン、β_2-ミクログロブリン、膵アミラーゼが認められた。腎組織では糸球体障害が認められないことから、近位尿細管障害による蛋白尿と考えられる。集合管・遠位尿細管障害による尿浸透圧低下、多尿も認められた。2)その他の重要な標的臓器と早期老化症候群の解析(1)骨の解析:大腿骨遠位部のCTでは、20週齢で海綿骨骨量と全骨骨量が低値を示し、30週齢でさらに皮質骨骨量も低値を示し、骨粗鬆症を認めた。20週齢の大腿骨遠位部の骨形態計測では、骨吸収の亢進、類骨形成の亢進、骨量の低下が認められた。骨の石灰化障害は認められなかった。類骨の増加、類骨成熟時間の増加を伴う骨粗鬆症と診断された。(2)心の解析:心カテーテル検査、心エコーで、20週齢でファブリー病の早期心障害である拡張障害を認めた。さらに、30週齢では、収縮障害も認めた。心肥大は認められなかった。ドブタミン負荷試験で、β刺激に対する反応の低下を認めた。G3STg/GLAKoマウスの特徴は以下の通りである。成長障害(体重増加不良)、血圧低下が認められた。血液検査では、アシドーシス、電解質異常(高Ca血症、高P血症)、高窒素血症、高Cr血症、高ALP血症が認められた。尿検査では、多飲、多尿、尿浸透圧低下、主要電解質(Na、K、Cl、Mg、Ca、P)の尿中への排泄増加、CrClの低下が認められた。腎組織検査では、PAS染色で空胞変性が髄質外層のTAL細胞に5週齢までに出現し、進行性である。次第に、核と細胞質の膨化、細胞浸潤、管腔の狭小化が出現した。EM染色で線維化が髄質外層のTAL周囲に10週齢までに出現し、進行性であった。GLAKoマウスでは線維化の発症は認められていない。電顕では、TAL細胞にlamellar bodyを認められた。トルイジンブルー染色でTAL細胞内にドット状の陽性所見が認められ、Gb3の蓄積を示した。免疫染色ではp62の蓄積増加がTAL細胞に認められ、オートファジー不全の関与を示すものであった。骨QCTではBMDの減少、骨形態計測では、骨吸収の亢進、類骨形成の亢進、骨量の低下が認められた。TAL障害による尿中電解質異常、尿濃縮力低下、血圧低下、腎機能障害、骨障害による血中電解質異常、成長障害であると考えられた。1)腎障害が発症して進行する過程の研究1腎組織の解析:20週齢を対象とした光顕で髄質集合管・遠位尿細管障害、電顕で髄質集合管・遠位尿細管、近位尿細管の上皮細胞にlamellar bodyを含む多数のvacuoleとミトコンドリア異常を認めた。

免疫染色ではp62が髄質集合管・遠位尿細管、近位尿細管の上皮細胞に認められた。これらは、オートファジー不全の関与を示すものであった。2腎機能、尿異常の解析:多尿、低浸透圧尿であった。尿蛋白として、アルブミン、β2-ミクログロブリンが認められた。腎組織では糸球体障害が認められないことから、近位尿細管障害による蛋白尿と考えられる。real-time PCRで線維化に関わる遺伝子の発現増加を認めた。濃縮力障害に関わる遺伝子群の関与を検討してきたが、見い出せていない。2)その他の重要な標的臓器と早期老化症候群の解析1骨の解析:大腿骨遠位部のCTでは、20週齢で海綿骨骨量と全骨骨量が低値を示し、30週齢でさらに皮質骨骨量も低値を示し、骨粗鬆症を認めた。20週齢の大腿骨遠位部の骨形態計測では、骨吸収の亢進、類骨形成の亢進、骨量の低下が認められた。骨の石灰化障害は認められなかった。類骨の増加、類骨成熟時間の増加を伴う骨粗鬆症と診断された。2心の解析:心カテーテル検査、心エコーで、20週齢でファブリー病の早期心障害である拡張障害を認めた。さらに、30週齢では、収縮障害も認めた。心肥大は認められなかった。ドブタミン負荷試験で、β刺激に対する反応の低下を認めた。これは新たな知見であった。心不全に関わる遺伝子群の関与をreal-time PCRで検討してきたが、炎症性サイトカイン、線維化に関わる因子の関与は認められなかった。神経性因子の関与について検討する。多尿を呈するG3stg/Glakoマウスを作出し、Gb3の蓄積過剰が発症に関わることを証明した(Biochem J.2013)。野生型マウスと比べて、進行する以下の所見を得た。1ヘンレ上行脚太い部(TAL)再吸収低下:Na、K、Cl、Caの排泄分画高値、尿中排泄量高値。2尿濃縮能障害:低尿浸透圧。3糸球体濾過量低下: TALでのNaCl再吸収が低下して、尿細管糸球体フィードバックを作動。4細胞外液量減少:血圧低下。5成長障害:低体重、短脛骨長。6骨粗鬆症:血漿ALP高値、副甲状腺機能亢進症。PTHが近位尿細管でのP再吸収抑制(Pの排泄分画高値)。大腿骨骨量減少。骨形計測で高骨回転。7組織障害:TALの組織障害の出現時期と強さには部位により異なる。髄質外層内帯のmTALから始まり、外帯のmTAL、最後に皮質cTALに広がる。TAL細胞の空胞変性(Gb3蓄積)、胞体と核の膨化、細胞浸潤を認める。TALの間質線維化の出現時期と強さの部位による差違もTAL障害と同じ順である。電子顕微鏡でTAL細胞に層状構造物。糸球体、近位尿細管:異常なし。8免疫組織化学染色:UMODの腎臓内分布の異常は、7組織障害のパターンと一致した。障害部位では本来の細胞内局在(管腔側に発現)が消失。NKCC2の染色が低下。9腎の遺伝子発現、蛋白産生の異常:リアルタイムPCRでUMODとNKCC2のmRNA発現は有意な相関。G3stg/Glakoマウスでは、両遺伝子の発現が減弱。線維化、炎症に関わるサイトカイン、ケモカインとそのレセプターのmRNA発現が増強し、いずれもUMODmRNA発現と有意な逆相関。ウエスタンブロットでUMODとNKCC2の蛋白産生低下。TAL障害による尿中電解質異常、尿濃縮力低下、血圧低下、腎機能障害、骨障害による血中電解質異常、成長障害であると考えられた。26年度が最終年度であるため、記入しない。腎臓内科26年度が最終年度であるため、記入しない。
地域包括ケア推進のための医療介護総合ニーズ評価手法の開発

今後地域包括ケアを計画的に展開していくためには、医療・介護・予防・生活支援のニーズを包括的に評価する分類の開発が不可欠である。すでに諸外国ではNew YorkのMonte Fiore Groupなどが大学病院を中核施設としてそのような包括的サービスを提供するAccountable care organization (ACO)を組織し、保険加入者全体の健康管理を行うという事業を展開している。これは我が国の地域包括ケアに対応するプログラムである。そして、この事業を効果的に展開するために、集団の傷病構造及びヘルスニーズの把握を行う診断群分類の開発が行われている。具体的にはボストン大学の開発したDiagnostic cost group- Hierarchical Clinical Categories (DCG-HCC)などがある。このDCG-HCCについてはドイツのリスク構造調整においても利用されている。そこで、本研究においては、諸外国における先行研究を参考としながら我々がこれまで構築してきた医療介護の総合的なデータベースを用いて、地域の傷病構造を記述する新しい診断群分類(これをPopulation based DPC: PB-DPCと仮称する)の開発を試みている。2018年度研究では、協力自治体から約200万件の医療・介護データを入手するための手続き(守秘義務を含めた契約書の締結、倫理委員会での初認)を行った後、データを収集しそのデータベース化を行った。市町村別、性別、年齢階級別にみた傷病の有病率および要介護度の状況を記述的に分析し、時系列変化を加味して階層構造的な分析手法の在り方について、検討した。協力自治体からのデータを予定通り入手し、データベース化を行った。また、諸外国の先行事例に関する資料についても網羅的に収集することができた。現在、急性期病院の患者分類で用いられているDPCのロジックや諸外国の先行研究を参考に、急性期以外の医療・介護に対応した患者分類手法を開発する。分類作成の具体的な手法としては、傷病、診療行為、介護サービスなどの組み合わせをNa&iuml;ve Bayesian modelやAssociation分析を用いて検討する。既存の仕組みとの連結可能性に配慮し、用いるデータはレセプト(医療、介護)、認定調査票を主体とする。なお、認定調査票については同意の得られた自治体から、ハッシュ化された個人ID(このツールについてはすでに開発しており、上述のデータベース構築に用いている)を付与した情報として入手し、他のデータと連結する。また、医療のコード化についてはICD10、医療行為についてはレセ電算コード、介護や生活支援ニーズのコード化についてはICF分類との対応性に配慮する。上記で開発した分類ロジックをN年度のデータに適用し、その適合性を評価し、適宜修正を行う。N年度のデータで作成した医療介護予防ニーズの予測モデルをN+1年度、N+2年度、N+3年度、N+4年度に適用し、傷病構造及び要介護度の構造、医療介護の総給付費の予測精度を検討する。この結果を踏まえて必要な修正を行い、分類のβ版とそれを用いた予測モデルを試行的に作成する。

N年度のデータで作成した医療介護予防ニーズの予測モデルをN+1年度、N+2年度、N+3年度、N+4年度に適用し、傷病構造及び要介護度の構造、医療介護の総給付費の予測精度を検討する。この結果を踏まえて必要な修正を行い、分類のβ版とそれを用いた予測モデルを試行的に作成する。
転写・DNA修復関連蛋白YB-1の消化器癌の進展・悪性化、抗癌剤耐性における役割

抗癌剤でMDR1プロモーターが誘導され、P-糖蛋白質の発現が亢進されること、MDR1遺伝子の近位プロモーター近傍に存在する逆行CCAAT配列とそれに結合するYB-1が薬剤応答による遺伝子発現に重要な鍵を握ることが明らかにされてきた。YB-1は多くの増殖細胞で発現するユピキタス蛋白であり、(1)逆行CCAAT配列をプロモーター領域にもつ遺伝子の発現に関与する転写因子としての機能だけではなく、(2)RNAと結合して観訳を調節していること、(3)障害DNAを認識してDNA修復に関与していることが報告され、YB-1は細胞の外界ストレスに対する防御基点としての役割が明らかにされつつある。YB-1は犠々な癌腫での細胞増穂、進展、悪性化、さらには抗癒剤に対する耐性化に深く関わる。抗癌剤でMDRIプロモーターが誘導され、P-糖蛋白質の発現が亢進されること、MDRI遺伝子の近位プロモーター近傍に存在する逆行CCAAT配列とそれに結合するYB-1が薬剤応答による遺伝子発現に重要な鍵を握ることが明らかにされてきた。YB-1は多くの増殖細胞で発現するユピキタス蛋白であり、(1)逆行CCAAT配列をプロモーター領域にもつ遺伝子の発現に関与する転写因子としての機能だけではなく、(1)RNAと結合して観訳を調節していること、(3)障害DNAを認識してDNA修復に関与していることが報告され、YB-1は細胞の外界ストレスに対する防御基点としての役割が明らかにされっつある。YB-1の消化器癌(食道癌、胃癌、大腸癌)での発現や細胞内局在を臨床検体を用いて解析した。消化器癌におけるYB-1の核内発現の意義を明らかにすることを目的に、食道癌、胃癌、大腸癌臨床検体のホルマリン固定パラフィン包埋薄切切片を用いた免疫化学組織染色にてYB-1蛋白の細胞内局在を同定した。YB-1の核移行率は、食道癌(n=30)、胃癌(n=0)、大腸癌(n=5)で各々、43%,50%,40%であった。今後、各癌腫別の抗癌剤治療前後の核移行について検討を重ねる。消化器癌(食道癌、胃癌、大腸癌)におけるYB-1の発現、細胞内局在と悪性度、病態や抗癌剤感受性との関連を明らかにすることで、抗癌剤治療に対する感受性や抵抗性のメカニズムの一端が明らかになり、治療効果の予測や治療戦略の構築への展開が期待される。YB-1蛋白は核酸結合を通じて多機能性を有しているが、その分子機構を明らかにするため、YB-1に関連する蛋白を網羅的に解析し分子間相互ネットワーク構造を同定する。すでにYB-1に分子会合する分子種(PCNA, p53など)を多数同定、報告している。YB-1と他の蛋白の蛋白質間相互作用による詳細な分子機構の解明をすることで、癌におけるYB-1の生物学的機能が明らかになり、消化器癌での診断、進展、マーカーとしての有効性を証明することができると考えている。これら細胞レベル、個体レベルでの解析により、癌におけるYB-1の生物学的機能や生態防御に果たす分子基盤を解明することができれば、新たな診断マーカーに有用であることを証明し新たな分子標的の可能性を明らかにする。YB-1の核移行率は、食道癌(n=30)、胃癌(n=10)、大腸癌(n=5)で各々、43%,50%,40%であった。消化器癌(食道癌、胃癌、大腸癌)におけるYB-1の発現、細胞内局在と浸潤・転移や抗癌剤感受性との関連を調べる予定である。抗癌剤治療に対する感受性や抵抗性のメカニズムの一端が明らかになり、治療効果の予測や治療戦略の構築への展開が期待される。

抗癌剤でMDRIプロモーターが誘導され、P-糖蛋白質の発現が亢進されること、MDR1遺伝子の近位プロモーター近傍に存在する逆行CCAAT配列とそれに結合するYB-1が薬剤応答による遺伝子発現に重要な鍵を握ることが明らかにされてきた。YB-1は多くの増殖細胞で発現するユピキタス蛋白であり、(1)逆行CCAAT配列をプロモーター領域にもつ遺伝子の発現に関与する転写因子としての機能だけではなく、(2)RNAと結合して観訳を調節していること、(3)障害DNAを認識してDNA修復に関与していることが報告され、YB-1は細胞の外界ストレスに対する防御基点としての役割が明らかにされつつある。YB-1は犠々な癌腫での細胞増穂、進展、悪性化、さらには抗癒剤に対する耐性化に深く関わる。YB-1の消化器癌(食道癌、胃癌、大腸癌)での発現や細胞内局在を臨床検体を用いて解析した。消化器癌におけるYB-1の核内発現の意義を明らかにすることを目的に、食道癌、胃癌、大腸癌臨床検体のホルマリン固定パラフィン包埋薄切切片を用いた免疫化学組織染色にてYB-1蛋白の細胞内局在を同定した。YB-1の核移行率は、食道癌(n=30)、胃癌(n=10)、大腸癌(n=5)で各々、43%,50%,40%であった。癌細胞の核における発現とともに、間質の血管内皮細胞においてもYB-1の発現がみられた。