hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
伝統薬のサステイナビリティと現地還元を指向したアジアの薬用植物の調査研究

調査で収集した植物・生薬について多様性解析研究及び薬理研究を行った。モンゴル産Gentiana macrophylla及びSaposhnikovia divaricataは中国産秦ギョウ及び防風に匹敵する品質であった。ミャンマーでは機能性食品となり得るSalacia属2種を見出した。中国のDrynariafortunei基原の骨砕補に記憶障害改善作用を見出し、脳内に移行する活性代謝物としてnaringeninを同定した。車前子はパクリタキセル誘発アロディニアを抑制し、活性成分としてaucubinとpedicularis-lactoneを同定した。以上の知見は産地国での生薬生産の促進に繋がる。1.学術調査:モンゴルで防風、黄ゴン、秦ギョウ、中国四川省及び湖北ー湖南ー江西省で秦ギョウ、骨砕補、車前子の資源調査と市場調査を行った。2.多様性解析3.薬理作用(1)抗認知症作用:マウス大脳皮質神経細胞におけるAβ(25-35)誘発軸索萎縮に対して再伸展作用を示した骨砕補の熱水抽出エキスから5化合物を単離、同定した。これらの内(2S)-neoeriocitrin及びcaffeic acid 4-O-glucosideが有意な軸索再伸展作用を示した。エゾウコギ葉から単離したトリテルペンサポニン9化合物も有意な軸索再伸展作用を示した。(2)抗アロデニア作用:パクリタキセル腹腔内投与翌日より車前子の熱水抽出エキスをマウスに1日1回13日間経口投与した結果、末梢神経障害性疼痛が抑制された。エキスを分画後、同実験を行った結果、20%メタノール溶出画分に抑制活性が集約された。含有される3化合物(i.p.)の内aucubinが濃度依存的な疼痛抑制活性を示した。(3)抗癌作用:大建中湯は胃癌細胞株に対し有意な細胞増殖阻害活性を示し、構成生薬のうち山椒エキスが濃度依存的な強い阻害活性を示した。胃癌モデルマウス及び腹膜播種転移モデルマウスに大建中湯を4週間経口投与した結果、腫瘍重量の減少及び腹膜播種数の有意な減少が認められた。計画を変更したが、以下のとおり関連研究を進行させた。・骨砕補の基原植物等が入手できず遺伝子解析を行えなかったが、これに代えて市場品の成分研究を行った。・モンゴル産防風と黄ゴンの多様性解析研究に関しては研究材料の同定に留まった。これに代えて、中国産防風と偽品の華山前胡を鑑別するためのITS配列に基づくARMS法を行った。1.学術調査:ミャンマーでサラシア、中国で骨砕補の資源植物の調査を行った。2.多様性解析3.薬理研究(1)抗認知症作用:骨砕補の熱水抽出エキスをddyマウスに経口投与した後の血中及び大脳皮質への移行成分としてnaringenin、naringenin-7-O-glucuronide等を同定した。2成分は大脳皮質神経細胞におけるAβ(1-42)誘発軸索萎縮を改善した。アルツハイマー病モデルマウスに熱水エキス及びnaringeninを経口投与すると記憶障害改善作用が認められた。エゾウコギ葉の温湯浸出エキスの経口投与後の大脳皮質移行成分としてトリテルペンサポニン5成分を同定した。3成分は神経細胞の軸索及び樹状突起を有意に伸展させた。(2)抗アロディニア作用:パクリタキセル誘発末梢神経障害性疼痛の憎悪を抑制した車前子成分のアウクビンは坐骨神経及びシュワン細胞におけるパクリタキセル誘発CHOP発現を抑制した。脊髄後角ニューロンの電気生理学的評価により、アウクビンの繰り返し投与は機械刺激誘発で増加した神経発火及び自発神経発火を抑制した。(3)抗癌作用:山椒のクロロホルムエキスに胃癌細胞増殖抑制作用が認められ、その活性画分にhydroxy-α-sanshoolとhydroxy-β-sanshoolを確認した。マウス大脳皮質神経細胞においてAβ(25-35)誘発神経突起萎縮に対する重楼メタノールエキスの作用を検討した結果、細胞毒性が強かった。そのため、これ以降の研究を断念した。1.学術調査ミャンマーでサラシア、中国南部で骨砕補の資源調査を行った。2.多様性解析(1)骨砕補:Drynariafortunei (Drf)とPseudodrynaria coronansの根茎のみnaringinを含有し、またDrfの同定に5,7-dihydroxychromone-7-O-neohesperidosideの検出が有用であることを見出した。中国南部及び台湾産市場品はDavallia formosana基原であることがtrnH-psbA IGS配列から判明した。(2)防風:モンゴル産Saposhnikovia divaricataの根に17種のクロメン類と13種のクマリン類を同定・推定し、LCMSデータの多変量解析からモンゴル産は中国産に比し4'-O-glucosyl-5-O-methylvisaminolの相対含量が高く、根の下部で高いことが示唆された。(3)サラシア:ミャンマーにはSalacia chinensisと、S. oblongaに類似するがITS配列が異なる別種が存在することを確認した。茎にsalacinol、kotalanol等が検出された。3.薬理作用

(1)抗認知症作用:骨砕補熱水抽出エキスを経口投与した後脳内に移行し神経細胞を活性化する化合物として同定したnaringeninの直接結合分子をDARTS法により解析し、CRMP2を同定した。結合によりCRMP2の脱リン酸化が亢進し、軸索伸長が進むことを見出した。同様に、エゾウコギ葉温湯浸漬エキスの経口投与後に脳内へ移行する活性化合物としてciwujianoside C3他2成分を同定し、これらが直接結合する候補分子を得た。(2)抗アロディニア作用:車前子の抗がん薬誘発末梢神経障害改善作用成分として、aucubin以外にpedicularis-lactoneを見出した。エキスの経口投与後の血漿中成分としてaucubin等を見出した。(3)抗腫瘍作用:山椒成分のγ-sanshoolに強い抗腫瘍活性を見出した。調査で収集した植物・生薬について多様性解析研究及び薬理研究を行った。モンゴル産Gentiana macrophylla及びSaposhnikovia divaricataは中国産秦ギョウ及び防風に匹敵する品質であった。ミャンマーでは機能性食品となり得るSalacia属2種を見出した。中国のDrynariafortunei基原の骨砕補に記憶障害改善作用を見出し、脳内に移行する活性代謝物としてnaringeninを同定した。車前子はパクリタキセル誘発アロディニアを抑制し、活性成分としてaucubinとpedicularis-lactoneを同定した。以上の知見は産地国での生薬生産の促進に繋がる。・骨砕補については中国の共同研究者と緊密に連絡をとり、平成28年度に湖南省で再度資源調査を実施する。・モンゴル産生薬に関する多様性解析研究では、研究を行う人的体制を整える。・モンゴルの防風、ミャンマーのサラシア、中国の骨砕補に集中して、それぞれの資源植物の品質に関する多様性解析研究を推進する。・薬理研究では、骨砕補等の抗認知症作用、車前子の抗アロディニア作用については有意な活性が認められ、その活性成分の同定まで進んでいるため、作用機序の解明を重点的に行う。抗癌作用については山椒エキスの活性画分に含まれる成分が不安定なため、安定化させる方策を講じて、活性成分を明らかにする。・学術調査では、現地での上記薬用植物の栽培化について研究協力者と協議して進める。29年度が最終年度であるため、記入しない。生薬学・天然物化学29年度が最終年度であるため、記入しない。
演算器構成を毎サイクル再構成可能なマイクロプロセッサの研究

本研究の研究成果として次のようなものが得られた.(1)PARSアーキテクチャに基づくプロトタイププロセッサをSTARC製の0.13umテクノロジ,および,日立製0.18umテクノロジを用いてLSI化を行い,実際のLSIとしてプロトタイプPARSプロセッサが十分インプリメント可能であることを示した.また,各テクノロジで実際に必要な設計に必要なチップ面積,および,実現可能な動作速度が明確になった.その結果,同チップ面積の従来型プロセッサと比較して奇遇ソート,FEAL暗号化処理,DCT計算などで1桁以上の性能向上が得られることが明らかになった.(2)粗粒度と細粒度の両方の演算を可能にする再構成型実行ユニットとして,(1)で設計した演算機ベースの再構成型と異なる,LUTベース再構成可能な再構成実行ユニットを設計した.ただし,従来のLUTベースの再構成実行ユニットと異なり,2段階の再構成を導入することにより毎サイクルの再構成を可能にした.その結果,(1)で設計評価した演算機ベースのプロトタイププロセッサでは苦手だったビット演算処理にも効率よく対応可能な再構成実行ユニットを実現できた.そして実際にビット演算を多用するアプリケーションであるDES暗号化処理を用いて具体的に性能評価を行った結果NECで開発された再構成型計算機DRLの数倍の性能が得られることが明らかになった.(3)PARSアーキテクチャに基づくプロセッサ用ソフトウェア開発環境の研究を試作したプロトタイププロセッサ向けに行った.研究の結果,アプリケーションのデータフローグラフから自動的にプロトタイププロセッサにマッピングする一連のアルゴリズムを明確にした.小規模なアプリケーションに対する評価実験では手動でアプリケーションのマッピングした場合とほぼ同程度の効率でマッピングが可能であることが明らかになった.本年度は,演算器構成を毎サイクル再構成可能なマイクロプロセッサとして最適なアーキテクチャの検討を行った.その結果,次の2つの要件を満たさなければ,実用的な再構成型アーキテクチャにならないという結論に到達した.(1)従来のマイクロプロセッサ以上の性能を達成するにはアルゴリズムの並列性を有効利用できるアーキテクチャである必要がある.(2)ソフトウェア開発が容易なプログラミングモデルを持つアーキテクチャである必要がある.そして,これらの要件を満たすアーキテクチャとして新たにPARSアーキテクチャを提案した.PARSアーキテクチャでは(1),(2)の要件を満たすため,並列アルゴリズムを直接マッピング可能にすると同時に,実ハードウェアへのマッピングの適合性を考慮したPARSプログラミングモデルを導入している.さらに,再構成型アーキテクチャを実現する上で鍵となる再構成速度の高速化を実現するため,再構成部の機能ユニット化を行って再構成情報を最適化した.その結果,広く使われている半導体テクノロジーを用いて100MHz以上の動作速度で数百万ゲート規模のロジックを毎サイクル再構成できる見込を得ることができた.さらに,C言語でかかれた既存のプロセッサ向けプログラムをそのままPARSアーキテクチャにマッピングすることで得られる性能向上を詳細な評価により測定し,その結果に基づいて再構成情報として使われる機能ユニット部の命令の最適化をおこなった.本研究の研究成果として次のようなものが得られた.(1)PARSアーキテクチャに基づくプロトタイププロセッサをSTARC製の0.13umテクノロジ,および,日立製0.18umテクノロジを用いてLSI化を行い,実際のLSIとしてプロトタイプPARSプロセッサが十分インプリメント可能であることを示した.また,各テクノロジで実際に必要な設計に必要なチップ面積,および,実現可能な動作速度が明確になった.その結果,同チップ面積の従来型プロセッサと比較して奇遇ソート,FEAL暗号化処理,DCT計算などで1桁以上の性能向上が得られることが明らかになった.(2)粗粒度と細粒度の両方の演算を可能にする再構成型実行ユニットとして,(1)で設計した演算機ベースの再構成型と異なる,LUTベース再構成可能な再構成実行ユニットを設計した.ただし,従来のLUTベースの再構成実行ユニットと異なり,2段階の再構成を導入することにより毎サイクルの再構成を可能にした.その結果,(1)で設計評価した演算機ベースのプロトタイププロセッサでは苦手だったビット演算処理にも効率よく対応可能な再構成実行ユニットを実現できた.そして実際にビット演算を多用するアプリケーションであるDES暗号化処理を用いて具体的に性能評価を行った結果NECで開発された再構成型計算機DRLの数倍の性能が得られることが明らかになった.(3)PARSアーキテクチャに基づくプロセッサ用ソフトウェア開発環境の研究を試作したプロトタイププロセッサ向けに行った.研究の結果,アプリケーションのデータフローグラフから自動的にプロトタイププロセッサにマッピングする一連のアルゴリズムを明確にした.小規模なアプリケーションに対する評価実験では手動でアプリケーションのマッピングした場合とほぼ同程度の効率でマッピングが可能であることが明らかになった.
新規エステラーゼ及びアミドヒドロラーゼの構造・機能解析

2)ES46.5Kは、アセチルアミノフルオレン、フタル酸エステル、コカイン、ヘロイン等を効率よく水解し、生体異物の解毒機能を有することが明らかとなった。3)ES46.5Kについては、構造類似性が知られているヒトのアセチルアミノフルオレン脱アセチル化酵素(AAF-DAC)cDNAを鋳型としてPCRを行い、その生成物を解析、これを利用してES46.5Kのクローニングを行っている。6)マウス肝anandamide amidohydrolaseのアミノ酸配列に対応するペプチドフラグメントを合成し、ウサギに免役し、抗体を得た。調製した抗体は、マウス脳及び肝ミクロソームの酵素を認識し、本酵素の機能解析に用いる有用なプローブになることが明らかとなった。7)マウス肝cDNAライブラリーを2)で調製した抗体を用いてスクリーニングを行い、陽性クローンを得た。現在解析中である。8)AnandamideとTHC及び活性代謝物(11-OH-THC,11-oxo-THC)の薬理作用(カタレプシー惹起及び体温下降作用)において、耐性、交叉耐性並びに相互作用が認められた。現在解析中である。2) ES46.5Kは、アセチルアミオフルオレン、フタル酸エステル、コカイン、ヘロイン等を効率よく水解し、生体異物の解毒機能を有することが明らかとなった。3) ES46.5Kのクローニングについては、現在進行中である。4) Cannabinoids(cannabidiol,THC,cannabinol)がマウス脳ミクロソームのanandamideamidohydrolaseを阻害することが明らかとなった。5) Anandamide amidohydrolaseをマウス肝より部分精製し、その触媒活性(脂肪酸エタノールアミド類)、阻害剤(フェニルメチルスルフォニルフルオリド等)等を検討した。また、阻害剤を用いたin vivo(マウス)での薬理効果の検討から、anandamide amidohydrolaseが生体内においてanandamideの作用発現を調節している重要な酵素であることを明らかにした。現在、本酵素の抗体を作成中である。6) Anandamideとcannabinoidsとの相互作用、特に交叉耐性の発現についてマウスを用いて検討した。その結果、anandamideとTHCの体温下降作用において交叉耐性の発現が認められた。1)ES46.65Kについては、構造類似性が知られているヒトのアセチルアミノフルオレン脱アセチル化酵素(AAF-DAC)cDNAを鋳型としてPCRを行い、その生成物を解析、これを利用してES46.5Kのクローニングを行っている。2)delta-8-及びdelta-9-tetrahydrocannabinol(THC)の12種の酸化的代謝物について、マウス脳ミクロソームanandamide amidohydrolaseの阻害作用を検討した。11-OH-delta-8-及びdelta-9-THC,11-oxo-delta-9-THC等がTHCよりも弱いものの阻害作用を示した。また、cannabigerol及びdelta-9,11-THCはTHCと同等の阻害作用を示した。3)マウス肝anandamide amidohydrolaseのアミノ酸配列に対応するペプチドフラグメントを合成し、ウサギに免役し、抗体を得た。4)マウス肝cDNAライブラリーを2)で調製した抗体を用いてスクリーニングを行い、陽性クローンを得た。現在解析中である。5)anandamideとdelta-8-THC活性代謝物(11-OH-delta-8-THC,11-oxo-delta-8-THC)の薬理的相互作用を検討した。その結果、体温下降作用及びカタレプシー惹起作用に交叉耐性が認められた。活性代謝物による耐性獲得は、THCよりも強いものであった。6)delta-8-THC活性代謝物の体温下降作用について、anandamide及び関連化合物の相互作用を検討した。anandamide,oleoylethanolamine及びlinoleoylethanolamineは、それ自身マウス体温に影響しない用量で(0.1mg/kgi.v.)、delta-8-THC及び活性代謝物の体温下降作用を有意に減弱することが明らかとなった。この結果は、THC等のカンナビノイドと内因性カンナビノイドが生体内で相互作用をすることを示すものである。
ソーラーセイル衛星搭載ガンマ線偏光検出器のプリフライトモデルの製作

本年度はGRB偏光検出器の回路部分について集中的に開発した。多チャンネルの信号に対してプリアンプ、波形整形アンプ、A/Dコンバータ等のアナログ回路を独立に設けた。これまではVA-TAと呼ばれる集積回路を用いて読み出していたが、人工衛星に搭載することを念頭に、安全に動作するように設計した。デジタル信号を扱うFPGA基板やCPU基板の設計はほぼ終了している。今回はプリフライトモデルなので、民生品チップを使って構成するが、実際に衛星搭載品でも採用する8051型のCPUを用いている。現在はCPU/FPGAに関するプログラムを開発している段階であるが、これらの回路系が1組となって駆動できれば衛星搭載レベルの装置に達することになる。これらの開発と並行して、ロケット打ち上げ時の振動対策や温度環境についても考察した。H2Aロケットの打ち上げ振動条件と同レベルの加振機を用いて、光電子増倍管の性能の変化などを調べた結果、20%程度の変化はあるものの安心して使えることが実証できている。本検出器は2010年5月に打ち上げが予定されている小型ソーラーセイル実証機への搭載が決まったので、本研究計画で予定していたスケジュールよりも急ピッチでフライト品を製作することになる。モンテカルロシミュレーションを用いて検出器モデルを検討し、その設計に基づいたプリフライトモデルの製作を行った。直径10cm、高さ5cm相当の12角柱プラスチックシンチレータと、5×3×0.3cmのCsIシンチレータ12枚を組み合わせ、それぞれのシンチレータに光電子増倍管を装着している。高圧、信号出力、テストパルスなどの回路基盤を自作し、検出器と一体化して組み込んでいる。信号はVA-TAと呼ばれるASICアンプで並列に読み出しているため、非常に小型で軽量なアナログ・デジタル回路を実現することができた。ただし、光電子増倍管からのパルス信号と、VA-TAの特性周波数が整合していないため、一般的なアンプを使用した場合と比べてS/Nが悪くなっている。この点の改善に取り組んでいる。また、実験室内に全長5mのビームラインを製作した。100keVまで放射できるX線発生装置を装着し、外部に漏れないように全体を鉛シートで遮蔽している。これによって、擬似平行光源を検出器全面に照射できるようになり、宇宙での天体観測に類似した環境で実験が行えるようになった。ビームラインを用いて検出器応答を調べた結果、偏光ガンマ線の検出感度として検出効率20%、モジュレーション因子O.36程度であることを実験的に示した。これは、当初のシミュレーションで予想された性能とかなり良い一致を示しており、正しい検出器を製作できたと言えよう。本研究で製作した検出器は広い視野を有しており、あらゆる方向でランダムに発生するGRBを待ち受ける。実際の観測では、ガンマ線は検出器に対して斜めに入射してくることになるので、その応答関数を把握することが重要になる。ビームラインを用いることで、斜め入射の実験も行えるようになり、モジュレーションパターンの入射角度依存性が把握できるようになってきた。ただし、斜め入射の実験において、正しい偏光度を求める手段は調査中であり、来年度の実験で方法を確立したい。
卒業生と就労先への調査に基づく知的障害特別支援学校のカリキュラム開発に関する研究

○研究目的:知的障害特別支援学校では、児童・生徒の自立と社会参加および卒業後のより豊かな生活を念頭に置き、就労、余暇、生活に関する学習の指導が展開されている。では、生徒自身は学校教育についてどう感じたのか、また卒業後もなお生徒の中に有り続けるものは何なのか。これらを明らかにし、その結果から学習内容や教育課程を再検討することを目的とした。○研究方法:研究代表者の勤務する特別支援学校を昭和38年度から平成20年度までに卒業した者57名(1861歳)を対象として、インタビュー調査を実施した。承諾書にて協力の同意を得た上で、本校の面談室もしくは日中活動の場、生活の場にてインタビューを行った。調査内容は「学校時代のこと、現在の仕事・お金について、現在の自分について、現在の人間関係について」であった。○研究成果:「今、頑張っていること」では仕事が、「学校時代に勉強してよかったこと」では作業学習や現場実習が最も多く挙げられた。働くことは知的障害者の生活の中で大きな位置を占めており、本校で力を入れてきた取り組みが卒業生の現在の仕事を支えていると考えられた。「今、楽しいこと」では、友達と遊ぶことや作業所の旅行、青年学級での活動等、他者と行う余暇活動が最多であった。「学校時代に嫌だったこと」や「今、嫌なこと」では他者とのトラブルが最多であった。他者との楽しみ方やトラブル回避など人間関係の形成に関する在学中の教育と卒業後の支援の必要性が示唆された。「学校時代の思い出」には、運動会や宿泊学習等の行事が最も多く挙げられ、行事は思い出に残りやすい特性があると考えられる。行事単元における教育内容の再考と指導方法の開発が今後の課題である。本調査で得られた結果は卒業生の具体的な体験であり、それらを伝える機会を教育課程に盛り込むことで、在学生に将来や人生の見通しを持たせることができる可能性が示唆された。
アグマール行列、ブロックデザイン、誤り訂正符号の代数的研究

二重正則有効グラフDRADはブロックデザインの特殊なものと考えられるが、μ,κ,λ,がブロックデザインのパラメタならば、そのパラメタのDRADが存在することが予想されるし、アダマールトーナメントHT (DRADの1種)の存在問題の肯定的解決はただちにアダマール行列の存在問題の解決になる。DRADは充分一般な対象であり、従来のブロックデザインやアダマール行列の理論に、新見地を開くものとして期待される。(1)大きな自己同型群を持つDRADについては、階数3のものはKantorにより平方剰余型のHTであることが示されていたが、伊藤は階数4のものは(1,6,6,2)Kummerデザインから得られる、階数5のものは、ある条件の下で、特定のGF (b)の4次剰余の作る定差集合から得られるものであることを示した。DRADの自己同型群Gについての最大の問題はGの可解性を決定することであろう。(2)直径4とかガース4とかのDRADの存在は未解決である。伊藤はDRADにNグラフという概念を導入し、その連結性により正則アダマール行列から得られるDRADを特徴づけた。(3) HTの存在問題については現在考究中である。HTのパラメタをμ=4λ+3,κに2λ+1とする。λが偶数のときは限られる。このとき問題はGF(2)上μ次の直行行列群Ωμ(2)の中の位数3で、そのスペクトラムが1 ┣D4Ι┫D4κ┣D4ω┫D4κ┣D4ω2┫D4 ωはGF (4)の原始元、というものの共役類の話であることが解明された。Ωμ(2)の行列で、各行のHamming重みが4を法として1に合同になるものは、指数2┣D1κ-1┫D1 (2┣D1κ┫D1-1)の部分群H (μ)を作り、H (μ)中では上の位数3の元の対角線はOであり、ラウンドロビントーナメントとの結び付きも明らかになった。田口からHTの構成プログラムの計算機利用環境の設定について、北條からはDRADの幾何的構造について引続き助言を得ている。1.伊藤は前年度後半から引続き2重正則有向グラフDRADの解明に従事している.(1)DRADの自己同型群の1点安定部分群は対応するブロック上で忠実なこと,アダマールトーナメントの2倍化では自己同型群は非可移なこと,正則アダマール型のDRADは4倍化出来ること等を示した.(2)DRADにはNグラフという位数v,次数v-2k-1の正則グラフが相伴するが,それが空でなく連結でもないのはDRADが正則アダマール型のときであることを示した. (3)(16, 6, 2)型のDRADの同値類の個数が4であることを示した.

これには中森(甲南大)等の協力があった. (4)(13, 4, 1)型のDRADの同値類の個数も4であることを示した.金田(東大),山本(阪大)の助力により, 3個に対応する位数13,次数4の正則グラフであるNグラフのガロア群が6次の対称群であることが判明した.残り1個のガロア群は位数6の巡回群である.(5)ランク5の自己同型群を持つDRADを決定する研究を逐行中である.安定部分群の対可移域の個数が2のときは, GF(q),q〓3(16)の4次剰余の作る定差集合から出て来るものに限られていることが示されている. kが平方数なら, v=qは素数となり, DRADは実際に存在する.2.北條(1)伊藤のDRADの幾何構造について引続き助言した.(2)フインスラー空間,ラグランジュ空間についての研究を続け,或る種のテンソル野に対し,之に随伴する接続があり,その曲率捩率テンソルがOである空間では,このテンソル野が分解することを示した. 3.田口(1)伊藤のアダマール行列プログラムの計算機利用環境を設定する作業で助力した.(2)計算機による音楽演奏の研究を続行している.1.伊藤は引続き2重正則有向グラフDRADの解明に従事している。(1)ランク5の自己同系群を持つDRADで、その1点の安定部分群の対可移域の個数が2であるものは、##3(16)という素数について、GF(#)の4次剰余の作る定差集合から出て来るものに限られ、かつその有向グラフとしての構造はサイクロトミーから計算出来る-このことは昭和63年8月韓国釜山で開かれた国際群論会議での招待講演として発表した。(2)アダマールトーナメントHTをDRADとして考察している。最大の問題は存在問題であるがそれに挑戦している。これが肯定的に解決されるとアダマール行列の存在問題も同時に肯定的に解決される。HTのパラメタをv=4λ+3,k=2λ+1,λとする。まずλが偶数のときに限れることを注意した。λが偶数のときには、2を法として考察することにより、GF(2)上の位数3の直行行列Bで、そのスペクトラムが(###)、WはGF(4)の原始元、となるものが得られる。その様なB達は直交群Ωv(2)のなかで1つの共役類を作る。Ωv(2)の行列のうち各行のハミング重さが4を法として1に合同であるものは指数2^<k-1>(2^k-1)の部分群H(v)を作る。H(v)のなかでBに共役な元の対角線は0である。したがってそれを(0.1)行列と見放すとラウンドロビントーナメントである。ともかくHTの存在問題はH(v)の特定の位数3の元の作る共役類の問題であることが確立された。2.北條(1)伊藤のDRADの幾何構造について引続き助言した。(2)フィンスラー空間ラグランジュ空間についてその研究を続け、エネルギー積分の変分の利用を考究中である。3.田口(1)伊藤のアダマールトーナメントプログラムの計算機利用環境を設定する作業で助力した。(2)計算機による音楽演奏の研究を続行している。
有明海再生を可能にするフルボ酸鉄シリカ資材による干潟浄化実証研究

干潟がヘドロ化して来た要因としては,有明海湾内の水質汚濁が原因である可能性が指摘されているが,下水道および合併浄化槽などの水質浄化施設の整備率が90%程度になっている現状から推察すると,水質汚濁によるヘドロ化は的外れである可能性が高いと考えられる.有明海に流れ込む多くの河川では196070年代には河川からの川砂採取,1975年以降のダム建設による堆砂によって,海への砂流出量が減少し、有明海沿岸域ではヘドロ化した泥混じり干潟が増加していると言われている.本申請研究では,干潟のヘドロ化によって二枚貝類が大きな影響を受け,その生息量が激減していると考え,ヘドロ浄化実証研究に着手した.また,砂防・ダム施設では,砂だけではなくその他の有機物などもトラップされていることが指摘されており,これにより沿岸域へのフルボ酸鉄の供給が減少していることも十分に考えられる.本申請研究では,従来,砂干潟であった箇所がヘドロ化する要因として,フルボ酸鉄の供給不足を主要因として考え,研究スキームを組み立て,この手法による浄化機構の定量化を目指して,研究を実施してきた.その結果,この資材を用いることによって研究計画に記載している内容を実証することがほぼ達成され,今後の干潟浄化に関して有益な基礎情報を収集することが出来たと考えられる.問題点としては,この手法をより大きな実証地において施工した場合に,本申請研究と同等の効果が期待できるかどうかを確認する必要性が挙げられる.この点に関しては,今後も継続して研究を行っていく予定である.また,この資材を用いることで干潟表面部分で現れる効果に関しても今回の分析によってかなり明らかになってきた.有明海に流れ込む河川では高度経済成長期以降,治水事業として砂利採取やダム建設が相次ぎ,アサリが育つうえで必要な砂の流入が減少し,有明海はヘドロ化した泥混じりの干潟が増加した.加えて,豪雨により河川から大量の泥が流れ込んだことも影響を与えていると言われている.特に2012年7月の九州北部豪雨では大量の淡水と泥が川から流れ込み,福岡県でもアサリの生息密度が高い矢部川河口の沖合23kmに10cm以上の泥が堆積した.熊本県でも白川や菊池川の河口の一部で,2070cmの泥が堆積したと言われている.アサリの漁獲量は有明海を囲む4県で1983年の約90,000tから近年では10,000tを下回っており,タイラギ漁は福岡県と佐賀県で5季連続の休漁となった.有明海のアサリの漁獲量の激減は有明海の環境問題の1つとして社会的問題となっている.対策として,別の場所から採取した海砂を海底にまく覆砂事業があるが,莫大なコストがかかる上,砂の量にも限りがあるため永続的に実施することは難しい.また,底泥を除去する浚渫事業もあるが,こちらもコストが莫大になってしまうことに加え,作業により巻き上がった底泥によって濁水を生じさせる可能性がある.そこで,本研究では,覆砂・浚渫事業よりも安価に入手でき,微生物の分解反応を促進する効果が期待されている「フルボ酸鉄シリカ資材」の投入によるヘドロ浄化効果について検証を行っている.この実証的な検証によって、フルボ酸鉄シリカ資材投入区においては、アサリの生息環境が大幅に改善されることが明らかになって来ている。現在、熊本県玉名郡長洲町干潟で行っている現地実証実験により、フルボ酸鉄シリカ資材を設置した試験区においてアサリの生息状況が大幅に改善していることと、本申請研究内容に関して干潟再生工法として特許申請を行っている。これまでに得られた観測および分析結果より、本手法を用いることによって有明海干潟の環境改善が進むことが確認されている。有明海に位置する長洲町干潟において、フルボ酸鉄シリカ資材を用いた干潟浄化に関する実証実験を実施している。これまでに得られている成果として、(1)フルボ酸鉄シリカ資材を投入することによって、干潟に堆積したヘドロの分解効果が促進すること。(2)フルボ酸鉄シリカ資材の投入間隔に応じて、浄化の進み具合が異なること。(3)フルボ酸鉄シリカ資材の効果継続期間を設定できるデータを得ることが出来たことの三点が挙げられる。昨年度までに実施した実証実験成果より、フルボ酸鉄シリカの溶出濃度を測定する分析方法を開発し、その溶出濃度に応じたラボスケールでの実験も同時に実施し、これまでに実証現場において観察された事象を再現し、今後の実証研究に活かすことが可能になった。また、有明海内および豊後水道の別の干潟においても実証研究を開始しており、今回の実証地である長洲町干潟と同様な効果が発揮されていることを確認している。今年度は、研究最終年度となるため、長洲町干潟での実証観測データを蓄積すると同時に、これまでに得られた基礎データに基づいて、同場所における再現性を最終確認していく方向である。これまでに得られている研究成果より、当初の干潟を浄化可能な能力に関しては実測することが出来たと考えられる。最終年度では、有明海での具体的な干潟再生計画の中で、どのような手法を用いて今回の研究成果を活かしていくかに関して研究を継続する中で確認し、来年度以降のより具体性を持った干潟再生法に関して知見を深めていく予定である。当初計画していた研究計画は概ね順調に達成されてきていると考えられる。特に、フルボ酸鉄シリカ資材の投入間隔および効果継続期間に関しては新たな知見が十分に得られていると判断した。また、マスコミでも大きく取り上げられ、NHKおよび福岡毎日放送等で広く紹介されている。

干潟がヘドロ化して来た要因としては,有明海湾内の水質汚濁が原因である可能性が指摘されているが,下水道および合併浄化槽などの水質浄化施設の整備率が90%程度になっている現状から推察すると,水質汚濁によるヘドロ化は的外れである可能性が高いと考えられる.有明海に流れ込む多くの河川では196070年代には河川からの川砂採取,1975年以降のダム建設による堆砂によって,海への砂流出量が減少し、有明海沿岸域ではヘドロ化した泥混じり干潟が増加していると言われている.本申請研究では,干潟のヘドロ化によって二枚貝類が大きな影響を受け,その生息量が激減していると考え,ヘドロ浄化実証研究に着手した.また,砂防・ダム施設では,砂だけではなくその他の有機物などもトラップされていることが指摘されており,これにより沿岸域へのフルボ酸鉄の供給が減少していることも十分に考えられる.本申請研究では,従来,砂干潟であった箇所がヘドロ化する要因として,フルボ酸鉄の供給不足を主要因として考え,研究スキームを組み立て,この手法による浄化機構の定量化を目指して,研究を実施してきた.その結果,この資材を用いることによって研究計画に記載している内容を実証することがほぼ達成され,今後の干潟浄化に関して有益な基礎情報を収集することが出来たと考えられる.問題点としては,この手法をより大きな実証地において施工した場合に,本申請研究と同等の効果が期待できるかどうかを確認する必要性が挙げられる.この点に関しては,今後も継続して研究を行っていく予定である.また,この資材を用いることで干潟表面部分で現れる効果に関しても今回の分析によってかなり明らかになってきた.今後、1年目に成果を引き続き確認し、工法の技術レベルを更に向上させるとともに、フルボ酸鉄シリカ資材の濃度実測などを行い、本工法の更なる普及を目指して、研究活動を当初の予定通り進行させていく。また、前年度購入した水槽を継続的に使用して、室内実験による理論的な意味づけを深めていく予定である。今年度の継続的な実証研究の中から、次年度以降に実施する予定である具体性を持った干潟再生手法を導き出す方向性を持って、今後の研究を進めていく予定である。また、現在、実証研究を実施している長洲町干潟に加えて、新たに2か所での実証研究に既に取り組んでおり、研究最終年度では、これらの結果も含めた総括を行った行く予定である。本年度、フルボ酸鉄シリカ資材を現場の干潟に投入し、実証研究を実施している段階で、2回目の資材の投入時期に関して、得られた観測データから検証を行ったところ、次年度の7月に追加投入を行うことが妥当であると判断されたため、追加資材購入費分を次年度に繰り越した。現在実施している実証試験区において、今年度もフルボ酸鉄シリカの効果的な投入方法に関して試行実験を繰り返している。このため、前年度に使用計画を立てていた分を今年度に追加投入した方がより効果的かつ効率的であると判断したため。本年度、使用しなかった391,375円を次年度の追加資材購入費として、資材を2017年7月を目途に購入する。
CD82によるWnt経路・細胞外基質の制御機構解明と癌転移抑制薬の開発

癌治療における重要課題は、癌の転移、抗癌剤耐性などの制御である。我々は先行実験でCD82の発現制御をするカスケードを見出した。細胞接着機構のうち、CD82は非常に重要であり、Wnt経路を介してtarget genesに作用し、細胞の接着、移動、浸潤に必要な因子の産生を調整している。本研究では細胞接着機構のうち独自に同定した経路を制御することでin vitro, in vivoでの癌転移を抑制できることを明らかにした。さらに、抑制薬剤としてchlorogenic acidを同定し転移抑制治療薬の可能性を明らかにした。本結果は、転移抑制治療薬の新規開発にとって非常に有益なデータと考えられる。癌治療における現在の重要課題は、癌の転移、抗癌剤耐性、放射線耐性などの制御である。実際の臨床でこれらの課題を解決・改善できれば飛躍的な治療成績の向上が見込まれる。しかし、未だに癌転移抑制薬は開発されていない。細胞接着機構のうち、CD82は非常に重要であり、Wnt経路を介してTarget Genes(Myc, Cyclin D1, TCF-1, PPAR-δ, MMP-7, Axin-2, CD44等々)に作用し、細胞の接着、移動、浸潤に必要な様々な因子の産生を調整している。さらに、我々は先行研究でCD82の発現制御をするAly-RRP1B-CD82カスケードを独自に見出した。このカスケードの異常は、細胞外基質の産生にも影響を与えることが分かり、癌転移機構に重要な役割を果たしている。本研究では、細胞接着機構のうち独自に同定したAly-RRP1B-CD82-Wnt-target genes/ECMの経路に関し、本経路を制御することで癌転移機構を解明できるだけでなく、この経路上の遺伝子に対する抑制薬剤/増強薬剤を検索・同定できれば、転移抑制治療薬の新規開発へ重要な役割を果たすものと考えた。Aly-RRP1B-CD82-Wnt-target genes/ECM経路の制御に関し研究を行い、ALYの阻害薬であるchlorogenic acidを同定し、その効果をin vitroおよびin vivoにおいて、癌転移能の制御について解析を行った。その結果、口腔癌において、Aly-RRP1B-CD82カスケードは癌転移機能に重要な役割を果たしていることを明らかにしただけでなく、chlorogenic acidは、ALYを阻害することで上記経路を制御し、口腔癌の転移機能を抑制することを示した。これらの結果は、転移抑制薬創薬への貴重なデータであり、さらに実験を進めれば口腔癌転移に対する抑制治療に対する有益なデータと考えられる。本年度に予定していた研究計画には十分到達することができた。ALY形質転換細胞株とコントロール株を作製し、遊走能、細胞浸潤能を評価し、βカテニンの発現および核内移行の動態を確認した。またALY遺伝子の阻害薬を検索・同定した。これまでの研究成果は、次年度以降の研究計画に大きく寄与できる内容であり、本年度の実績としては順調に進展している医歯薬学ヌードマウスに移植したshALY株およびMockにおける、マウス各臓器への癌転移の有無を病理学的かつ遺伝子学的に明らかにし、ALY遺伝子の発現状態と癌転移との相関関係の有無を検討する。また、転移抑制剤の開発シーズとして、ALYに作用する薬剤を文献と遺伝子パスウェイ解析ソフト(IPA)を用いて検索、同定した候補薬を用いて遊走能試験、浸潤能試験を行い、ヌードマウスへの移植癌に対する候補薬剤の転移抑制能を確認する予定としている。
高強度運動時の呼吸亢進が下肢筋の皮質脊髄路興奮性に及ぼす影響

高強度運動時の呼吸亢進と下肢筋皮質脊髄路興奮性の関係を検討した。皮質脊髄路興奮性は経頭蓋磁気刺激による運動誘発電位(MEP)によって評価した。低強度(30%VO2max)運動では随意呼吸(VB)によってMEPが増加した。しかし高強度(70-80%VO2max)運動では自然呼吸(NB)時とVB時のMEPに有意差はなかった。持久性鍛錬者において、NBでは運動前半から後半にかけてMEPが有意に低下したが、VBでは前後半のMEPに有意差はなかった。これらの結果は、高強度運動時の呼吸には皮質呼吸筋領域の活性を伴う随意性の高い呼吸が含まれており、それが下肢筋皮質脊髄路興奮性を高めている可能性を示唆する。随意呼吸によって非呼吸筋(手指や四肢)の皮質脊髄路興奮性が増大することが報告されている。先行研究による報告では、非呼吸筋の安静条件と静的運動(等尺性収縮)条件に限定されるが、随意呼吸時の呼吸筋を制御する一次運動野領域の活性化が非呼吸筋を制御する一次運動野領域の興奮性を高めるというメカニズムが提案されている。一方、このような現象あるいは神経機構が、不随意的な呼吸活動が中心となる動的筋収縮時にも発現するのか否かは不明である。したがって本研究では、動的運動中の呼吸亢進と四肢筋皮質脊髄路興奮性の関連を検討することを目的とした。初年度においては、一次運動野(下肢筋領域)への経頭蓋磁気刺激によって下肢筋(外側広筋)に誘発される活動電位(MEP)を皮質脊髄路興奮性の指標とし、随意呼吸が高強度動的運動中の下肢筋皮質脊髄路興奮性に及ぼす影響を検討した。すなわち、脚ペダリング運動中のMEPを自然呼吸条件と随意呼吸条件で比較検討する実験を行った。運動に伴う脚筋疲労がMEPに影響することが予想されたので、運動負荷試験は2種類の強度(最大酸素摂取量の30%と80%、各24分)で行った。測定項目として、MEPに加え、MEP直後のサイレントピリオド(抑制性の指標)と最大吸気および最大呼気口腔内圧(呼吸筋疲労の指標)の評価を行い、現在、データ分析を進めている。また、呼吸筋疲労の影響を確認するため、呼吸筋疲労が外側広筋の皮質脊髄路興奮性に及ぼす影響を検討する実験を追加的に行った。その結果、呼吸筋疲労によって外側広筋の皮質脊髄路興奮性が増加する可能性を示唆するデータが得られた。現在、論文執筆を進めている。経頭蓋磁気刺激を用いた最近の研究は、手指筋や四肢筋(=非呼吸筋)を支配する皮質脊髄路の興奮性が随意呼吸時に増大することを報告している。そこでは、非呼吸筋の安静あるいは静的運動条件に限定されるが、随意呼吸時の呼吸筋を制御する一次運動野領域の活性化が非呼吸筋を制御する一次運動野領域の興奮性を高めるというメカニズムが提案されている。一方、このような現象あるいは神経機構が、不随意的な呼吸活動が活発となる動的運動時にも発現するのか否かは不明である。そこで本研究では、動的運動中の呼吸亢進と下肢筋皮質脊髄路興奮性の関連を検討することを目的とした。初年度は、健常者(n=7)を対象に、脚ペダリング運動中の下肢筋皮質脊髄路興奮性(=経頭蓋磁気刺激による運動誘発電位(MEP))を不随意呼吸条件と随意呼吸条件で比較検討する実験を行った。低強度運動(24分、最大酸素摂取量の30%)と異なり高強度運動(24分、最大酸素摂取量の80%)ではMEPの評価自体が困難であった。したがって、当該年度はMEPの安定的な記録を期待して上肢による律動的ハンドグリップを動的運動課題として採用し実験を行った(継続中)。加えて、呼吸筋疲労および呼吸努力の下肢筋MEPへの影響も検討した。前者に関しては、呼吸筋疲労が下肢筋皮質脊髄路興奮性に及ぼす影響は、呼吸筋疲労の進行に伴って興奮性から抑制性に変化する可能性が示唆された(n=8)。後者に関しては、呼吸の主観的努力度の違いによって下肢筋皮質脊髄路興奮性は変化しない可能性が示唆された(n=8)。現段階においては、動的運動時における呼吸亢進と下肢筋皮質脊髄路興奮性の関係は不明であり、次年度に計画されている研究でのより詳細な検討が必要であると考えている。研究実績の概要で述べたように、上肢筋での検討を追加し、さらに高強度運動時に生じていた可能性のある呼吸筋疲労と皮質脊髄路興奮性の関係を追加実験的に確認する必要が生じたため。経頭蓋磁気刺激法を用いた最近の研究により、等尺性収縮時における非呼吸筋(手指筋や四肢筋)の皮質脊髄路興奮性(=運動誘発電位(MEP)による評価)が随意呼吸によって増大することが報告された。そこでは、呼吸筋を制御する一次運動野領域の活性化が非呼吸筋を制御する一次運動野領域の興奮性を高めるという仮説が提案されている。一方、このような現象あるいは神経機構が、不随意的な呼吸が活発となる動的運動時にも発現するのか否かは不明である。本研究では、高強度動的運動中の呼吸亢進と下肢筋MEPの関連を検討することを目的として、以下の課題を検討することとした。

1:随意呼吸が高強度自転車運動中のMEPに及ぼす影響、2:呼吸と下肢筋活動の同調がMEPに及ぼす影響、3:呼吸とMEPの関係性に対する運動経験の影響。初年度は課題1について、一般健常者(n=7)を対象に検討したが、呼吸亢進とMEPの間に明確な関係性は見出せていない。当該年度は、自転車選手(n=8)を被験者とし、運動経験の影響(課題3)を検討した(データ分析中)。また、運動経験と運動時呼吸の関係性を把握するために、一般健常者(n=17)を対象に、呼吸亢進を伴う運動の繰り返し(8回/2週間)が運動時呼吸に及ぼす影響を調査する実験を行った(データ分析中)。さらに、初年度の実験結果がMEP記録の精度に関係している可能性があるため、一般健常者(n=6)を対象に、MEPのより安定的な記録が期待される前腕による律動的ハンドグリップを動的運動課題とする実験を行った。その結果、ハンドグリップ(20%MVC)と呼気のタイミングを随意的に合わせることで、尺側手根屈筋のMEPが増加する傾向を示し、ハンドグリップ時の力のピーク値が有意に増加した。これは、冒頭に述べた現象と仮説が上肢の動的運動にも適合する可能性を示唆するが、下肢についての結論はまだ出ていない。高強度運動時の呼吸亢進が下肢筋の皮質脊髄路興奮性に及ぼす影響を検討することを目的に、経頭蓋磁気刺激法によって得られる運動誘発電位(MEP)を皮質脊髄路興奮性の指標として計画した実験を実施してきているが、その過程で、MEPの評価の妥当性に関して、当初実験計画の部分的修正、再現実験、追加実験の必要が生じた。経頭蓋磁気刺激法を用いた近年の研究により、等尺性筋収縮時における非呼吸筋(手指や下肢)の皮質脊髄路興奮性(=運動誘発電位(MEP)による評価)が随意呼吸によって増大することが報告されている。本研究の初年度に、動的運動(自転車運動)においては、随意呼気による下肢筋(外側広筋)MEPの増大が、低強度(30%VO2max、24分)では生じたが、高強度(80%VO2max、24分)では生じなかったことを、一般健常者(n=7)を対象にした実験で明らかにした。最終年度は、その原因として、呼吸筋疲労は影響しないこと、そして、下肢筋の活動レベルに依存する可能性があること、を等尺性収縮課題により確認した実験データを報告した(運動生理学会発表)。さらに、当該年度においては、持久的鍛錬者(自転車選手、n=8)を対象に、高強度(70%VO2max)の自転車運動(30分)時の外側広筋MEPに随意呼気が及ぼす影響を検討した。その結果、1)全体として、初年度の非鍛錬者同様、随意呼気による外側広筋MEPの増加は認められなかった、しかしながら、2)自然呼吸条件では、MEPは前半(10分)に比べて後半(10分)で有意に低い値を示したのに対して、随意呼気条件のMEPに前後半の差は認められなかった。3)前半および後半のMEPに呼吸条件間の差はなかった。先行研究では、疲労困憊に至る高強度自転車運動時に下肢筋MEPが低下する可能性が報告されている。したがって、本研究の結果は、随意呼吸は高強度運動時に生じるMEPの低下(中枢性疲労)を抑制する作用を有している可能性があることを示唆する。また、持久性鍛錬後の換気応答には学習的要素が関与する(体力医学会発表)。よって、持久的鍛錬者(上述の自転車選手)では呼気と下肢運動の同期が下肢MEPに影響する可能性を予想したが、同期時と非同期時のMEPに有意差は認められなかった。高強度運動時の呼吸亢進と下肢筋皮質脊髄路興奮性の関係を検討した。皮質脊髄路興奮性は経頭蓋磁気刺激による運動誘発電位(MEP)によって評価した。低強度(30%VO2max)運動では随意呼吸(VB)によってMEPが増加した。しかし高強度(70-80%VO2max)
子宮内膜癌細胞のホルモン依存性増殖へのPTENの関与

(1)遺伝子組み替えアデノウイルスはまずpcDNA3のPcmvの下流にPTEN cDNAをサブクローニングし、発現カセットをpShuttleベクターを経由してpAdenoXベクターにサブクローニングした。HEK293パッケージング細胞に形質転換し、遺伝子組み替えアデノウイルスDNAを導入し、遺伝子組み替えウイルス粒子を作成した。このウイルスを、PTEN-nullの子宮内膜癌細胞イシカワ株に感染させ、遺伝子導入した。導入細胞ではウイルス濃度依存性にPTEN発現の増強が見られたが、高濃度ではアポトーシスに陥る傾向が強かった。(2)遺伝子導入細胞を用いて、増殖因子感受性の変化を検討した。増殖因子のうちEGF,IGF-IではPTEN発現細胞で明らかな感受性の増強が見られ、50-100ng/mlの濃度で細胞増殖を180%増強した。これらの細胞では、PTEN遺伝子導入によって一旦燐酸化Aktのダウンレギュレーションが観察されたが、EGFの培地添加によって燐酸化Aktの増加が観察され、PIP3/Aktのシグナル伝達系がEGFによって活性化された結果と考えられた。(3)PTEN遺伝子導入によるエストロゲン受容体の変化をウエスタンブロットで検討した。PTEN遺伝子導入によってERbetaのアップレギュレーションが観察されたが、燐酸化ERbetaの発現量には変化がなかった。一方ERalphaはPTEN導入によって総量の変化はないものの、燐酸化ERalphaは減少し、PTENがエストロゲン受容体の機能や発現量に影響を与えていることが明らかとなった。(4)エストロゲン代謝酵素のうち、Aromatase, Estrone sulfatase, 17beta hydroxysteroid dehydrogenase type1,type2,estrone sulfotransferaseの発現変化をreal-time-PCRで解析したところestrone sulfatase,17beta-hydroxysteroid dehydeogenase type1の発現量の増加が見られ、PTENは細胞内でE1の合成に関与していることが示唆された。遺伝子組み替えアデノウイルスはまずpcDNA3のPcmvの下流にPTEN cDNAをサブクローニングし、発現カセットをpShuttleベクターを経由してpAdenoXベクターにサブクローニングした。導入細胞ではウイルス濃度依存性にPTEN発現の増強が見られたが、高濃度ではアポトーシスに陥る傾向が強くかった。まず、遺伝子導入細胞を用いて、増殖因子感受性の変化を検討した。増殖因子のうちEGF, IGF-IではPTEN発現細胞で明らかな感受性の増強が見られ、50-100ng/mlの濃度で細胞増殖を180%増強した。次に、PTEN遺伝子導入によるエストロゲン受容体の変化をウエスタンブロットで検討した。遺伝子組み替えアデノウイルスを作成しPTEN

-nullの子宮内膜癌細胞イシカワ株に感染させ、遺伝子導入しPTEN発現亜株を作成した。PTEN導入細胞では増殖因子のうちEGF, IGF-1ではPTEN発現細胞で明らかな感受性の増強が見られ、EGFの培地添加によって燐酸化Aktの増加が観察され、PIP3/Aktのシグナル伝達系がEGFによって活性化された結果であること、ERbetaの発現の増加は観察されるものの、燐酸化ERbetaの発現量には変化はなく、一方ERalphaはPTEN導入によって総量の変化はないものの、燐酸化ERalphaは減少し、PTENがエストロゲン受容体の機能や発現量に影響を与えていることが明らかとなった。我々は遺伝子組み替えアデノウイルスを作成しPTEN導入細胞では増殖因子のうちEGF,IGF-IではPTEN発現細胞で明らかな感受性の増強が見られ、EGFの培地添加によって燐酸化Aktの増加が観察され、PIP3/Aktのシグナル伝達系がEGFによって活性化された結果であること、ERbetaの発現の増加は観察されるものの、燐酸化ERbetaの発現量には変化はなく、一方ERalphaはPTEN導入によって総量の変化はないものの、燐酸化ERalphaは減少し、PTENがエストロゲン受容体の機能や発現量に影響を与えていることが明らかにした。またエストロゲン代謝酵素のうちaromatase, estrone sulfatase,17beta-hydroxysteroid dehydeogenase type 1の発現量の増加が見られ、PTENは細胞内でE1の合成に関与していることが示唆された。一旦作製した遺伝子組み換えアデノウイルスが失活したため、今年度に作製しなおした。新たなアデノウイルスベクターも同様に強いアポトーシスを認めた。