hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
宿主因子ｐｐ３２のインフルエンザウイルス複製促進および感染種適合性の分子機構解明

これは、「ポリメラーゼのRNA複製第2段階特有の開始段階(“priming and realignment")をpp32が促進しているであろう」というこれまでの考察から、「複製第1/第2段階共通の開始メカニズムを促進している」という考察へと改新する実験事実である。pp32・ウイルスポリメラーゼの構造学的解析については、化学的修飾法を利用したプロテインフットプリンティング法によって「宿主因子pp32およびウイルスポリメラーゼ」複合体において各因子が結合・接触している領域を解析している。化学的修飾された(及び修飾されなかった)ペプチドの比較を質量分析(MSMS)によって解析していが、現在のところ良質な結果が得られていない。これについては、ポリメラーゼの精製度と化学修飾の効率に改善の必要性があると判明しているので、改良を試みている。本研究の鍵となるインフルエンザウイルスポリメラーゼについて、培養細胞発現系による組換え体の調整に難攻した。また、上述の「プロテインフットプリンティング法による「pp32・ウイルスポリメラーゼ複合体の構造学的解析」において、いささか試行錯誤があり、予定よりも時間が掛かってしまっている現状である。「研究実績の概要」に記載した一連の研究結果をまとめ、学術雑誌に発表することが目下の方策である。そのために現在のところ、pp32によって促進制御を受けるウイルスポリメラーゼにも着目した構造学的アプローチを試行中である。具体的には化学的修飾法を利用したプロテインフットプリンティング法によって「宿主因子pp32およびインフルエンザウイルスRNAポリメラーゼ」複合体において各因子が結合・接触している領域を立体構造学的に決定することで、pp32のウイルスゲノムRNA複製促進メカニズムをより深く考察することを目標とする。最終年度として「研究実績の概要」に記載した一連の研究結果をまとめ、学術雑誌に発表することが目下の方策である。このために、一昨年度(H29年度)で明らかにした「pp32変異体」を利用して得られた結果・考察について、上述の「宿主因子pp32・インフルエンザウイルスRNAポリメラーゼ」複合体の構造解析(フットプリンティング法)の結果が得られ次第、投稿する予定である。なお、「現在までの進捗状況」では割愛したが、ウイルスポリメラーゼ組換え体を利用することで「ウイルスゲノムRNA複製の各因子(pp32・ポリメラーゼ・鋳型RNA・基質)の関連性」について詳細に解析したことにより、pp32の複製促進作用機序について重要なヒントとなり得る非常に興味深い結果が得られている。これについても、今年度(H31年度・R元年度)の研究でよりデータを蓄積し、(長期に及ぶことなく本年度内に)相応の学術誌に報告することを目指している。研究計画の一部に「やや遅延」が生じ、当初予定していた研究・実験が未試行であるため。なお、次年度分として請求した助成金は当初の研究計画通りに使用する予定である。
モジュライ空間と低次元多様体

1.研究代表者は,曲面の写像類群の構造とリーマン面のモジュライ空間のトポロジーについて以下のような研究の進展をみた.以前構成していた,写像類群のある線形表現を用いて,任意の偶数を次数とする群コサイクルを大量に構成し,既知の安定特性類がすべてそのようにして表わされることを示した.さらにその後,北海道大学の河澄氏との共同研究において,上記のコサイクルの表わすコホモロジー類がすべてそれらの安定特性類の多項式となることを示し,具体的表示を得た.2.分担者の吉田朋好は,階数2のテ-タ関数の具体的構成に関する研究を推し進め,3次元多様体のウイッテン不変量のより幾何学的な定義を目指している.3.分担者の松本幸夫は.種数2以上のリーマン面の族の退化に関する位相的研究を行い,その分類を完成した.4.分担者の小島定吉は,3次元の錐をもつ双曲多様体について系統的な研究を行い,とくにその大局的な剛性を証明した.5.分担者の松元重則は,平面のシンプレクテイック微分同相の固定点の存在に関して,これまでに知られていない新しい結果を得た.6.二つの研究集会,「ゲージ理論と低次元多様体」「無限群と幾何学」において,以上の成果を発表し,また他の分野の研究者をも交えて活発な研究討論を行い,これからの進展の方向への展望および問題点を明らかにした.1.研究代表者は,曲面の写像類群の構造とリーマン面のモジュライ空間のトポロジーについて以下のような研究の進展をみた.以前構成していた,写像類群のある線形表現を用いて,任意の偶数を次数とする群コサイクルを大量に構成し,既知の安定特性類がすべてそのようにして表わされることを示した.さらにその後,北海道大学の河澄氏との共同研究において,上記のコサイクルの表わすコホモロジー類がすべてそれらの安定特性類の多項式となることを示し,具体的表示を得た.2.分担者の吉田朋好は,階数2のテ-タ関数の具体的構成に関する研究を推し進め,3次元多様体のウイッテン不変量のより幾何学的な定義を目指している.3.分担者の松本幸夫は.種数2以上のリーマン面の族の退化に関する位相的研究を行い,その分類を完成した.4.分担者の小島定吉は,3次元の錐をもつ双曲多様体について系統的な研究を行い,とくにその大局的な剛性を証明した.5.分担者の松元重則は,平面のシンプレクテイック微分同相の固定点の存在に関して,これまでに知られていない新しい結果を得た.6.二つの研究集会,「ゲージ理論と低次元多様体」「無限群と幾何学」において,以上の成果を発表し,また他の分野の研究者をも交えて活発な研究討論を行い,これからの進展の方向への展望および問題点を明らかにした.
文と文のつながりに基づく英文読解メカニズムの解明：因果的関連と意味的関連の比較

本研究は,英語学習者が文と文をつなげて文章を理解するメカニズムを,文間の因果的・意味的な関連に着目して明らかにすることを目的とした。因果的関連とは2つの文に原因と結果という関係があることを指し,意味的関連はコーパスと統計分析に基づく手法(潜在意味解析)によって算出される2つの文の意味の類似度を指す。実験では,因果的・意味的関連度が異なる2文1組の英文を用意し,日本人大学生がそれらの英文を読解した。その結果,学習者は因果的・意味的な関連が強いほど英文の内容が一貫していると判断しやすく,内容の記憶もしやすいことが明らかになったが,その影響は学習者の読解力によって変わる可能性が指摘された。本研究の目的は英語学習者が文と文をつなげてテキストを理解するメカニズムを,文間の因果的・意味的関連という2つの要素に着目して明らかにすることである。本年度ではまず,実験材料の作成と選定を行った。実験材料は,先行研究で用いられたものを英語学習者向けに作成した2文1組のテキストであり,因果的・意味的関連の高低が操作されている。文間の因果的関連の高低を確証するため,日本人英語学習者を対象として因果的な関連度について主観的な判断を行わせる予備実験を行った。また,意味的関連については,実験材料に対してウェブ上のアプリケーションを用いて潜在意味解析を行い,文間の意味的関連度の高低を数値により判断した。このような過程を経て,実験材料の作成と選定を行った。次に本年度では,作成・選定した実験材料を用いて2つの実験を行い,文間の因果的・意味的関連度が英語学習者のテキストの一貫性の知覚に与える影響を検証した。合計で約150名の日本人大学生が実験材料を読解し,それぞれのテキストがどの程度一貫性を持っているかを5段階で評定した。一貫性判断の評定値について統計的な分析を行った結果,従来指摘されてきた文間の因果的関連だけでなく,意味的関連も英語学習者のテキストの一貫性の知覚に影響していることが明らかになった。また,意味的関連度の影響は学習者の英語習熟度と関連しており,習熟度が低い学習者の一貫性判断は習熟度が高い学習者と比べて意味的な関連度に影響を受けやすいことが示された。この結果は,大学生レベルの学習者の英文理解においては文間の因果的な関連に加え,意味的な関連度に基づいた理解が行われている可能性を示唆するものである。文間の意味的関連度の影響を今後の研究で追及する意義を示した点で,本年度に得られた成果は重要である。申請時の計画どおり,実験材料の作成と選定,及び一貫性の知覚を検証する実験の実施を行うことができたため。本研究は,英語学習者が文と文をつなげてテキストを理解するメカニズムを,文間の因果的・意味的な関連という2つの要素に着目して明らかにすることを目的とした。前年度は,本研究に用いる実験材料の作成と,文間の因果的・意味的な関連がテキストの一貫性に対する英語学習者の知覚に与える影響を検証した。本年度では,文間の因果的・意味的な関連が英語学習者のテキスト内容の記憶に与える影響を検証する実験を新たに実施した。実験材料は前年度と同様のものであり,2文1組の英文を複数用いた。これらの英文は文と文の因果的・意味的な関連度が操作されている。因果的な関連度については英語に習熟した日本人学習者複数名による主観的評価,意味的な関連度については潜在意味解析(言語コーパスと統計解析に基づいて意味的な関連を評価する手法)によって算出された値に基づいている。実験では,日本人大学生47名が上記の2文1組の英文を読解し,全ての英文の読解後に,各英文の1文目を手がかりとしてペアとなっていた2文目の内容を日本語で想起する筆記再生課題を行った。2文目の内容の再生率を予測する統計モデルを検討した結果,文の因果的な関連度が高いほど2文目が再生されやすい傾向が示された。また,意味的な関連度が高いほど2文目の内容が再生されやすい傾向も見られたが,これは読解力が比較的高い学習者でのみ顕著であった。これまで文の因果的な関連の影響を報告した研究は多くあったものの,前年度も含めた本研究の結果によって文の意味的な関連も英語学習者の読解に影響することが新たに示された。つまり,英文読解において文と文のつながりを理解する際,因果的な関連とともに意味的な関連も一定の役割を果たしていると言えよう。本研究の成果は,日本人の英語習得や英文読解において,意味的な関連度が果たす役割を今後も検討していくことの意義を示すものである。

まず,前年度の研究成果について関連学会で発表し,論文の執筆・投稿も随時進めていく。さらに,英語学習者の文間のつながりの理解を直接的に検証するために,学習者の英文読解後のテキスト記憶を検証する実験を行い,前年度の研究結果と統合する。28年度が最終年度であるため、記入しない。人文学,言語学,外国語教育28年度が最終年度であるため、記入しない。
上咽頭がんをはじめとするEBV関連腫瘍におけるSiah1の分子生物学的解析

上咽頭癌の原因蛋白であるEBV-LMP1は上皮系細胞においてSeven in absentia human homolog(Siah)1を介し、低酸素誘導因子1α(HIF1α)を安定化する。ところがバーキットリンパ腫浮遊細胞系においてはLMP1によってSiah1は減少する。すなわちEBV-LMP1による上皮系および非上皮系におけるSiah1発現調節は未解明である。本研究ではEBV関連腫瘍におけるSiah1の機能を検討して発癌臓器ごとに異なるEBV関連腫瘍の生物学的特性との関連性の解明を目的とした。EBV関連腫瘍組織においてLMP1,Siah1,HIF1α、各種血管新生因子、癌抑制遺伝子の免疫組織学的検査をおこなったところ、上咽頭癌においてのみLMP1とVEGFやHIF1α、Siah1の因子には相関する傾向がみられた。他の鼻性NK/Tリンパ腫やポジキンリンパ腫では相関関係は認めなかった。臨床的パラメーターの解析において、上咽頭がん患者ではSiah1はその発現頻度は病期進行度があがれば高い傾向にあり、LMP1の発現は必ずしも病期進行度とは比例しなかった。LMP1導入上咽頭細胞を低酸素環境に暴露するとLMP1単独発現よりも高いSiah1とHIF1αの発現を認めた。そのため、LMP1、低酸素自身による誘導いずれにもSiah1は関与していることが判明した。またLMP1発現上咽頭上皮細胞をヌードマウス皮下に移植モデルにおいても同様の現象を認めた。この事から生体内では上咽頭癌が増殖する際にはLMP1の信号のみならず生体環境が形成する低酸素環境自身が腫瘍の形成に深く関与している事が示唆された。上咽頭癌は高転移性の癌でありその転移にはEpstein-Barr virus(EBV)が関与する。我々はEBV癌蛋白LMP1がいかにして発癌を誘導し転移を促進するかを報告してきた。最近我々はこのLMP1が低酸素誘導因子1α(HIF1α)を誘導し最終的には血管新生を誘導することを報告した。その機序はショウジョウバエの光覚受容体発生に必要とされる蛋白Seven in absentiaのヒト相同体Seven in absentia human homolog(Siah)1を介しHIF1αの安定化に寄与する事である。実際の上咽頭癌組織でLMP1,Siah1あるいはSiah1関連蛋白の発現量を確認、実際の転移能や生命予後に関する影響を明らかにする。またEBV関連腫瘍といわれるバーキットリンパ腫をはじめとするEBV関連リンパ腫でもそれらの発現を検討する。さらには、LMP1によるSiah1の誘導がこれまで論じられてきた血管新生、抗アポトーシス効果をはじめとして検討を行う。1)EBV関連腫瘍患者の生検ブロックの組織染色:EBV関連腫瘍と考えられている上咽頭がん、ホジキン病、鼻性NK/Tリンパ腫の生検パラフィンブロックを収集した。特に今回は長年当教室で研究が続けられている上咽頭がんに焦点をおき金沢大学症例のみならず北陸三県の主要病院の生検パラフィンブロックについても収集した。上咽頭ガン症例に関しては80例強収集が可能であった。ホジキン病および鼻性NK/Tリンパ腫に関しても当科で診断を確定した症例に関して10例以上の収集が可能であった。収集された症例は免疫組織学的検索を行った。LMP1、Siah1,HIF1α、VEGFなどの血管新生因子、DCCおよびp53(癌抑制遺伝子)カドヘリンの免疫組織学的検査をおこなったところLMP1とVEGFやHIF1α、Siah1の因子には相関する傾向がみられた。今後は症例数を増やし検討する予定である。またホジキン病や鼻性NK/Tリンパ腫についても必要症例数が蓄積した時点で免疫組織学的に解析予定である。

2)LMP1/Siah1をはじめとした組織染色結果と臨床的パラメーターの解析:上咽頭がん患者ではSiah1はその誘導因子であるHIF1α、VEGFと相関傾向がみられたがその発現頻度は病期進行度があがれば高い傾向にあった。LMP1の発現は必ずしも病期進行度とは比例しなかったため何らかのLMP1以外のSiah1を誘導する因子の関連がうかがわれ現在検討中である。治療予後との関連性については症例数の蓄積が必要であり現在検討中である。1)EBV関連腫瘍患者の生検ブロックの組織染色:平成19年度に引き続きEBV関連腫瘍と考えられている上咽頭がん、ホジキン病、鼻性NK/Tリンパ腫の生検組織を収集し収集された症例は免疫組織学的検索を行った。LMP1、Siah1,HIF1α、VEGFなどの血管新生因子、DCCおよびp53(癌抑制遺伝子)カドヘリンの免疫組織学的検査をおこなったところLMP1とVEGFやHIF1α、Siah1の因子には相関する傾向がみられた。3)LMP1導入細胞におけるSiah1を介した血管新生誘導の評価:LMP1発現プラスミドを上咽頭上皮不死化細胞にトランスフェクションにて導入しその後コントロール細胞との血管新生誘導因子の発現をウェスタンブロット法にて解析した。LMP1導入により無血清培地中に血管上皮成長因子(VEGF)が見られ、Siah1ドミナントネガティブの共発現によりその発現は抑制された。現在は、コラーゲン内に実際に血管管腔が形成されないかを検討中である。1) LMP1導入上咽頭細胞の分子生物学的検討平成19年,20年度の組織免疫染色の結果から上咽頭がん患者ではSiah1はその誘導因子であるHIF1α、VEGFと相関傾向がみられたがその発現頻度は病期進行度があがれば高い傾向にあった。LMP1の発現は必ずしも病期進行度とは比例しなかったため何らかのLMP1以外のSiah1を誘導する因子の関連がうかがわれたため、分子生物学的に解析を平成21年度に行った。すなわち、LMP1発現プラスミドを上咽頭上皮不死化細胞にトランスフェクションにて導入しその後コントロール細胞とウェスタンプロット法を用いて検討を行った。また低酸素自身によるSiah1の誘導が考えれたため、今回はLMP1導入した細胞とコントロール細胞を各々低酸素チェンバーで低酸素化を行った後にウェスタンブロット法により低酸素誘導因子の発現に相乗効果がみられるかを検討した。低酸素誘導とLMP1発現の間には相乗的な効果を認めた。2)低酸素およびLMP1発現による低酸素誘導因子発現のSiah1の関与次にSiah1の阻害プラスミドを共発現したところ、これらの低酸素誘導因子の発現増強は低下したため、LMP1による誘導、低酸素自身による誘導いずれにもSiah1は関与していることが判明した。3) LMP
NLRP3インフラマソームからみた前立腺炎症の病態解明と新規治療薬の開発

本研究は前立腺組織における炎症の病態をインフラマゾームの観点から解析し、前立腺の炎症に起因する前立腺肥大症に対しての新規治療法開発のための研究基盤を確立することを目的とする。具体的には1非細菌性前立腺炎における排尿機能障害の解析、2インフラマソームをターゲットとした非細菌性前立腺炎の病態解明、3NLRP3インフラマソーム阻害薬の非細菌性前立腺炎に対する有効性の検討、4セルニチンポーレンエキスのNLRP3阻害薬としての有効性の検討を行うことで、前立腺の炎症に起因する前立腺肥大症に対しての新規治療法開発研究を進める。
がん患者へのファーマシューティカルケアの質の向上を目指したCSTの開発

愛知県内の保険薬局薬剤師とがん患者とのコミュニケーションの問題点を質的に分析した。薬剤師はがん患者とのコミュニケーション不足や他職種連携による情報共有不足等の対人的要因を挙げ、コミュニケーションスキルも含めた教育支援を求めていた。がん患者は薬剤師に「分かりやすい服薬説明」「副作用への対応」等を期待したが、「配慮の欠ける対応」等の改善を求めていた。そのため保険薬局薬剤師の対象にSPIKESモデルを活用したコミュニケーションスキルトレーニング(CST)を構築した。CSTによって、薬剤師は一方的な情報提供ではなく、患者の話を傾聴し、気持ちを受け止め、患者のニーズに合った服薬説明の実施が可能となった。がん化学療法においては、効果、服薬状況、副作用、相互作用の確認等の薬物療法、また患者のQOLの向上など、薬剤師が責任もってファーマシューティカルケアを行う必要がある。患者が抱える問題や悩みを解決するために患者とのコミュニケーションが必要不可欠である。本研究は、保険薬局の薬剤師のがん患者へのケアの現状を明らかにするとともに、その結果を基に、薬剤師ががん患者の心理や背景を理解し、かつ、がん患者にケアを行うために薬剤師の意識・行動変容を促す支援基盤となる「薬剤師のがん患者へのケアを支援するためのコミュニケーションスキルトレーニングプログラム(CST)」を開発する。平成26年度は、現在の薬剤師とがん患者とのコミュニケーションの問題点を明らかにするために、保険薬局の薬剤師を対象にフォーカスグループの手法を用いて、グラウンデッド・セオリー法で分析した。また患者側の薬剤師に対するニーズ調査を行い、同様にグラウンデッド・セオリー法で分析した。また、「薬剤師のためのがん患者とのコミュニケーションの向上」を目指した」教育プログラムの構築のために、SPIKESのプロトコル、先行研究を基に作成したSPIKES-P35(仮)、及び上記のフォーカスグループでの結果を踏まえて、現場でがん患者と対応する薬剤師1名、連携研究者3名、報告者とSPIKES-P35(仮)の内容を再検討した。この結果を基に、平成27年度に実施するコミュニケーショントレーニングに使用するビデオ「SPIKESモデルを用いた薬剤師のがん患者へのコミュニケーション症例1)抗がん剤に不安を持つ患者への服薬説明」の原案を構築した。平成27年度は研究計画に従い以下の様に研究を進めた。(1)保険薬局薬剤師とがん患者とのコミュニケーションの問題点の探求1愛知県下のがん患者の会に所属する患者で薬物療法を受けた16名を対象に、「薬剤師及び薬物療法」に関してインタビューを実施しグラウンデッドセオリー法で分析した。がん患者は、薬剤師の職能に関する認識は低く、また薬物療法や薬剤師に対して様々な不安や悩みを抱いており、がん患者の支援には、患者会や、新薬の開発等、治療を取り巻く環境の構築の必要性が示唆された。2愛知県下の保険薬局薬剤師17名に関して「薬剤師のがん患者へのファーマシューティカルケアの問題点」についてインタビューを実施しグラウンデッドセオリー法で分析し、5項目の概念「がん患者対応における薬剤流通に対する薬剤師の認識」「保険薬局で入手できる情報による患者の治療への影響」「今後の薬局薬剤師の医療への関わり方」「薬剤師自身が認識するがん患者・患者家族に対する薬剤師の役割」「薬剤師のがん患者への対応を困難にする要因」を抽出した。(2)ビデオ「SPIKESモデルを用いた薬剤師のがん患者へのコミュニケーション症例1)抗がん剤に不安を持つ患者への服薬説明」を作成した。愛知県薬剤師会が主催したセミナーに参加した保険薬局薬剤師20名を対象に、がん患者とのコミュニケーションを支援するためにSPIKESを活用したCSTを行い、受講前後の薬剤師のコミュニケーション能力を分析した。CST受講により薬剤師の会話構造が変化し、情報提供だけではなく、情報収集、情緒的な発話を重視した服薬説明が実施された。(1)保険薬局薬剤師とがん患者とのコミュニケーションの問題点の探求1標記のがん患者の薬剤師への認識に関しては、内容を投稿し採択された(半谷眞七子,がん患者の薬剤師及び薬物療法に関するニーズを調査する質的研究,YAKUGAKU ASSHI,135,1387ー1395(2015).)2愛知県下の保険薬局薬剤師の薬剤師のがん患者へのファーマシューティカルケアの問題点については、構成概念を抽出し、現在論文投稿準備中である。CSTを受講前後の薬剤師のコミュニケーション能力を会話分析の1つであるRIASで分析した。この内容に関しては、現在論文投稿準備中である。現在の薬剤師とがん患者とのコミュニケーションの問題点を明らかにするために、保険薬局の薬剤師及び患者を対象にフォーカスグループの手法を用いてデータを収集し、その内容をグラウンデッド・セオリー法を用いて質的に分析した。薬剤師はがん患者との対応での抵抗感、患者・家族とのコミュニケーション不足、不十分な他職種連携による情報共有不足等の対人的な要因を課題として挙げ、知識だけでなくコミュニケーションスキルの強化も含めた教育支援が求めていた。一方、がん患者は薬剤師に「分かりやすい服薬説明」「副作用への対応」等を期待したが、薬剤師の「マニュアル化された服薬説明」「薬の説明が十分でないこと」「配慮の欠ける対応」を指摘し、更なる改善を求めていた。この内容を踏まえて保険薬局薬剤師の対象に、SPIKESモデルを活用した「薬剤師のためのがん患者とのコミュニケーションスキルトレーニンググラム(CST)」を構築した。

このプログラムでは、予め薬剤師ががん患者への具体的な対応がイメージできる教材として「SPIKESモデルを用いた薬剤師のがん患者へのコミュニケーション症例1)抗がん剤に不安を持つ患者への服薬説明」に関するDVDの作成を試みた。本CSTの有用性について、愛知県下の保険薬局に勤務する薬剤師20名を対象にCST受講前後で模擬患者とロールプレイを行い、薬剤師の患者対応、コミュニケーション能力を分析した。薬剤師のがん患者に対する会話構造は、CST受講前後で情報提供カテゴリが減少し、共感的カテゴリ、情報収集カテゴリが増加した。また患者評価および概略満足度と、共感的カテゴリおよび関係構築カテゴリの間で有意な相関がみられた。CST受講により、薬剤師の会話構造は一方的な情報提供ではなく、患者の話を傾聴し、気持ちを受け止め、患者のニーズに合った服薬説明実施が可能となることが示唆された。愛知県内の保険薬局薬剤師とがん患者とのコミュニケーションの問題点を質的に分析した。薬剤師はがん患者とのコミュニケーション不足や他職種連携による情報共有不足等の対人的要因を挙げ、コミュニケーションスキルも含めた教育支援を求めていた。がん患者は薬剤師に「分かりやすい服薬説明」「副作用への対応」等を期待したが、「配慮の欠ける対応」等の改善を求めていた。そのため保険薬局薬剤師の対象にSPIKESモデルを活用したコミュニケーションスキルトレーニング(CST)を構築した。CSTによって、薬剤師は一方的な情報提供ではなく、患者の話を傾聴し、気持ちを受け止め、患者のニーズに合った服薬説明の実施が可能となった。平成26年度は、研究計画に従い、以下の様に研究を進めた。(1)保険薬局に勤務する薬剤師とがん患者とのコミュニケーションの問題点の探求・愛知県下で保険薬局に勤務する薬剤師30名(がん関係の勉強会に出席した薬剤師)で同意を得た薬剤師に関して「薬剤師のがん患者へのファーマシューティカルケアの問題点」について半構造化グループインタビューを実施した。インタビューの内容は、調査者2名がグラウンデッド・セオリー法で現在分析中である。・愛知県下のがん患者の会に所属する患者で薬物療法を受けた16名を対象に、半構造化グループインタビューを実施した。インタビューの内容は、調査者2名がグラウンデッド・セオリー法で分析し、職種や状況・時系列毎にラベルのまとまりからカテゴリを抽出、カテゴリ関連図を作成し、全体の包括的な概念を抽出した。この内容に関しては、現在論文投稿準備中である。SPIKESのプロトコル、先行研究を基に作成したSPIKES-P35(仮)、及び上記(1)のフォーカスグループでの結果を踏まえて、現場でがん患者と対応する薬剤師1名、連携研究者3名、報告者とSPIKES-P35(仮)の内容を再検討した。この結果を基に、平成27年度に実施するコミュニケーショントレーニングに使用するビデオ「SPIKESモデルを用いた薬剤師のがん患者へのコミュニケーション症例
ロールシャッハ・テストにおける切断部分反応と潜在的自尊心の関係

ロールシャッハ・テストの新しい分類法である,インク模様に含まれる色彩領域の一部が切り取られた部分反応(Cut D)が協力者の潜在的自尊心を反映すると仮説が立てられた。しかし,Cut Dとネームレターテスト間に関連は見出されず,仮説は確かめられなかった。しかし一方で,検証の過程で日本人用のひらがなを用いた新しいネームレターテストやロールシャッハ・テストのデータベースを作成するためのAndroidアプリケーション(RAPID ν)が作成された。後者は無料で公開されたため,研究にかかるコストの軽減に貢献すると考えられる。平成21年度は,平成22年度以降に行う予定の本調査においてロールシャッハ・テストと共に実施する潜在的自尊心尺度について模索・検討することを目的とした調査を行った。検討するために施行した測定法は自尊心用のImplicit Association Test(IAT),ネームレターテストの二つである。特にIATは潜在的態度を測定できる方法として実証的な知見が集まっており,近年注目が向けられていることから,その特性について実証的な調査を行うことは臨床心理学にとっても利益をもたらす可能性が考えられる。しかし一方で,その施行順や指標の算出方法によっては得られる結果が臨床心理学において問題になりやすい実行機能の高低や感情生起のしやすさ(アレキシサイミア)などから影響を受ける可能性が考えられたため,これらとの関係について調査を行う必要があると思われた。ネームレターテストと共に,関東・甲信越地方のある大学の学生に対して研究協力に関する説明が行われ,その上で同意を得られた112名に対して上記であげた課題がそれぞれ個別式で行われた。その結果は現在分析中であり,詳細について述べられる段階ではないが,IATの指標の算出方法によっては上記の影響を受ける可能性とネームレターテストの改良可能性が示唆されている。よって,これらの結果に注意することで今後より実証的に調査を行うことが可能となるかもしれない。平成22年度は,昨年度に行ったネームレター・テスト研究の結果から日本人により適した形式にするための研究と,(本調査とも関連した)ロールシャッハ・テストにおけるインクプロット外の空白領域を用いた反応に関する研究を行った。また,ロールシャッハ・テストのデータを入力・集計するためのアプリケーション(動作OS : Android)を作成し,無料で公開した。ネームレター・テスト研究においては一般的に用いられるアルファベットよりも日本人の多くにとって身近なひらがなを用いた方がより適切に潜在的な自尊心を測定できるであろうという考えから調査を行った。その結果,新しい形式による尺度の得点と他の自尊心に関する潜在的測定法の得点間の関連を調べた一つの調査で妥当な結果が得られた。一つの研究だけでは妥当性が十分でないと思われるため,来年度引き続き調査を行う予定である。ロールシャッハ・テスト研究においては,現在ほとんど注目されていない,把握型に属する,インクプロット外の空白領域が用いられた反応に被検査者の隠された図形に対する発見能力が反映されるかについて調査を行った。現段階では有効な協力者数が17名と少ないため追加の調査が必要だが,今のところは良好な結果が得られている。また,後者の研究の過程で収集したデータを効率的に入力・集計するためのデータベースが必要となったため,近年その利用が多くなっているAndroid OS上で動作するデータベースアプリケーションを作成し,Android Marketにおいて無料で公開した。本研究課題における最終的な目的のために,潜在的自尊心を測定する尺度であるネームレター・テストを利用することを決定した。現在利用されているネームレター・テストは回答者のイニシャルとその他のアルファベットの好悪を比較することによって自己への肯定感の強さについて推測がなされる。しかし,多くの日本人にとってはイニシャルよりもひらがなの方が身近であると思われるため,アルファベットよりもひらがなにこそ回答者自身の感情や好悪が反映される可能性が考えられ,ネームレター・テストは回答者が所属する地域で用いられる言語を利用するという改良の余地があると思われる。以上から,ネームレター・テストのひらがな版(日本人用)を作成し,その信頼性・妥当性について大学生を調査対象として調査を行った。その結果,78名の大学生から協力が得られ,ひらがな一覧型のネームレター・テストの信頼性はアルファベットを用いたネームレター・テストの原版や代表的な潜在的自尊心の測定法であるImplicit Association Testと同程度の再検査信頼性が認められた。また,205名の大学生から協力が得られ,同テストは原版よりも様々な自尊心尺度(潜在的自尊心を含む)と相関が認められる自己の氏名への選好と強い正の相関が認められた。これらの結果から,(日本人に対する)ひらがな一覧型ネームレター・テストの有効性や可能性が示唆された。また,ロールシャッハ・テストにおける,インクブロット外の空白領域を用いた反応が持つ特徴について予備的な調査を行った。

ロールシャッハ・テストにおいて,色彩領域の一部を切り落とした部分反応(切断部分反応)は被検査者自らの判断で自主的にインクブロットの取捨選択を行ったことによって生じることから,その背景,より深い部分に自分の判断への信頼感があると仮説を立てた。前年度までは,以上の仮説を検証すべく,潜在的自尊心を測定する方法の改良などについて模索と検討を行ってきた。本年度は本課題の最終年度であり,本課題の目的である切断部分反応と潜在的自尊心間の関連を調べるために,30名の大学生協力者に対してロールシャッハ・テストと(一般的なものと独自に作成したひらがな一覧版の)ネームレターテストが施行した。その結果,切断部分反応と潜在的自尊心との間に有意な関連は見られず,仮説は実証されなかった。また,以上とは異なる実績として,課題期間内に作成したAndroidスマートフォン上で動作するロールシャッハ・テストの包括システム用のデータベース作成アプリケーション(RAPID)をスマートフォンなら片手で,タブレットならば反応一覧を見渡せるように,他にも操作性の向上などの改良を行い,無料で公開した(RAPID ν:https://play.google.com/store/apps/details?id=com.qreap.rapidnu)。なお,これまで市販されているアプリケーションでデータベースを作成しようとすると67万円程度の費用が必要であった。当初予想していた研究結果は得られなかったが,以上のような新しい研究知見が得られ,またアプリケーションを無料で公開したことによって今後のロールシャッハ研究あるいは実践において安価・容易にコンピューター環境を整えることができるようになった点で社会的に貢献できたと思われる。当初は本研究課題の本調査においてImplicit Association Test(IAT)を用いる予定であったが,採択後に公刊された研究概観からIATは一時的な気分に影響されている可能性があり,その使用は特性に関心を持つ本調査の目的にそぐわない可能性が出てきたため,ネームレター・テストを使用することにし,その改良に調査期間を割いたため。24年度が最終年度であるため、記入しない。上述の通りであるが,当初考えていた尺度(IAT)とは異なる尺度(ネームレター・テスト)を使用するという変更を行った。また,既に開始しているが,ロールシャッハ・テストとひらがな一覧型ネームレター・テストを実施する本調査を継続し,統計的分析に十分な調査協力者数を確保することを目指す。
糖尿病性錐体路障害に対応する新しい糖尿病運動療法の開発

皮質脊髄路(錐体路)は大脳皮質から脊髄に運動指令を伝える伝導路で、その損傷によって筋力低下や運動麻痺が生じることから、随意運動の発現に極めて重要な役割を果たしていると考えられている。この錐体路の障害とその症状、治療法などは脳卒中などを中心に研究が進められてきたが、我々は最近、皮質脊髄路を構成する軸索が糖尿病によって損傷することを発見し、糖尿病患者において観察される運動障害にも皮質脊髄路障害が関与する可能性を示した(Muramatsu et al., 2018)。我々はこの報告の中で皮質脊髄路軸索損傷の兆候の一つとして伝導速度低下を示したが、末梢神経では伝導速度の低下と糖尿病性神経障害の進展に強い相関が認められるため、その詳細を調べることは極めて重要である。そこで、平成30年度は糖尿病モデル動物の皮質脊髄路軸索について伝導路全体の伝導速度ではなく、単一細胞の活動電位を指標に伝導路を構成する単一軸索の伝導速度を計測することにした。その結果、伝導速度の低下度合いは軸索毎に相当なばらつきがあり、ほとんど影響を受けず伝導速度が正常の範囲内に留まるような軸索もあれば、大きく伝導速度を低下させている軸索が混在して存在していることが明らかとなった。このようなまだらな伝導速度低下は同じ皮質脊髄路細胞の中に糖尿病の影響を受けやすい細胞と糖尿病の影響を受けにくい細胞が存在する可能性を調べている。これらの特徴を形作る原因についてさらなる解析を加えることによって、糖尿病性錐体路障害のメカニズムやその治療方法の開発などに役立たせることができる可能性がある。昨年度に所属機関が変わり、研究室の整備に時間を要したため多少の遅れが生じている。当該年度は皮質脊髄路軸索の伝導速度の計測と同軸索の超微形態について電子顕微鏡を用いた解析を行う予定でいたが、伝導速度計測は予定通り終えたものの、軸索の超微形態の観察はできなかった。ただし、すでに組織標本などの採取は終わり、形態観察を残すのみの状態であるため、次年度以降に遅れを取り返せると考えている。平成30年度に実施予定だった皮質脊髄路軸索の形態観察を年度の初頭に行い、それ以後は研究計画に従って皮質脊髄路の損傷が糖尿病モデルラットの身体運動に与える影響を調べる目的で、筋電図学的解析を行う予定である。予定していた調達価格よりも安価な値段で必要物品が購入ができたことと、所属機関の異動により研究環境に変化が生じ、研究を実行するために必要な実験機材、消耗品が変更となった結果、次年度使用額が生じた。これらの予算については次年度の実施予定の免疫組織化学関係の消耗品購入費用に充てる計画である。
新規ストレス誘導性細胞の機能解析とストレスバイオマーカーの確立

「病は気から」というように我々は日々様々なストレスに暴露されており、これらのストレスは胃痛などの症状を引き起こすことを経験的に知っている。これまでストレスがどのように健康を害するのかは不明であったが、我々はこの「病は気から」のメカニズムの一端を明らかにしてきた。本申請では慢性的なストレスにより体内で増加する細胞に焦点を当て、その機能解析を施行する。予備実験にて、ストレスが受容体Aを発現する細胞集団を増加させることを見出している。本研究によりこれまでになかったストレスに対する治療という概念が確立されるだけでなく、未だ明確となっていない「ストレスとは何か?」という問いにも答えられると確信している。
海洋環境生態系との調和が可能な高耐久電気防食工法の開発

アミノ酸の一種であるアルギニンを添加したコンクリートは、その表面における藻類の生成が促進され海洋生態系の形成に効果が高いことが報告されている。そこで本研究では、陽極システムの酸劣化対策および海洋生態系との調和を目的として、高塩基性のアルギニンを添加した陽極システムを用いた、新しい電気防食工法の開発を目的とする。提案するシステムを適用した時の防食性能、陽極システム耐久性および生態系への影響を供試体を用いた室内実験および暴露実験により確認する。
立木用X線検査装置による国産主要造林樹種の非破壊的材質および水分特性の評価

野外に生育する立木の樹幹内を非破壊的に検査・観察することができるX線装置の開発を目指し研究を進めている.本研究では,平成25年度に製作した試作機の結果を踏まえ,より高品位の画像を取得できるように改良した装置を製作するとともに,その装置を用い立木状態の針葉樹や広葉樹の樹幹を撮像し,材質学的および水分生理学的見地から考察し,新たな知見を得ることを目的としている.本年度は主に以下の内容について実施した.1.線源と検出器の改良と装置全体の評価と調整:画像解像度の向上と大径木への対応を図るためX線源の改良を行った.また,短時間での連続照射による線源の高温化問題への対策を講じた.高品位3次元CT画像が得られるよう検出器の調整および画像処理方法について検討した.平成29年度末に製作した改良型X線検査装置を対象にX線評価システムによるX線源・検出器・制御部のバラック試験を行い,その評価結果に基づき装置全体の調整を行った.2.平成29年度末に製作した改良型装置による室内での撮像実験:生材状態にある針葉樹4種(スギ,ヒノキ,カラマツ,アカマツ)および広葉樹3種(クリ,ミズナラ,シラカンバ)各1本の丸太(直径8cm20cm)を改良型X線検査装置で撮像した.その結果、平成25年度に製作した試作機で得られた画像よりも高品位の3次元のX線CT画像が得られ,心材と辺材の水分状態の違い,節,腐朽,心材の年輪が明確に区分できることを確認できた.さらに,得られた画像をもとにターゲットとする測定項目・観察内容に適した最適検知条件等についても検討を行った.3.安全対策:野外での立木を対象にした撮像実験に向け放射線障害防止等の法的規制や安全対策について情報収集を行った.上記の研究実績概要で述べたように,改良型のX線装置を平成29年度末に製作し,その装置のX線源や検出器等の部分的および全体的改良や調整に取り組みつつ,室内でしかも生材状態の丸太ではあるが,数種の個体の撮像実験を行い,前回の試作機よりも高品位の3次元CT画像が得られてる.これらの成果の一部は第69回日本木材学会大会で発表した.このように一定レベルの成果が得られており,おおむね順調に進展している.1.昨年度に引き続き,画像解像度の向上と大径木への対応を図るため,X線源の管電圧の高エネルギー化,管電流の高出力化,焦点サイズの縮小,連続照射への対応等に取り組む.幹軸方向への撮影範囲の拡大およびより高品位CT画像が得られるよう検出器の改良および画像処理方法について検討する.2.昨年度に引き続き,平成29年度末に製作した改良型X線装置を対象に,X線評価システムによるX線源・検出器・制御部のバラック試験と装置全体の評価を行うとともに,ターゲットとする測定項目・観察内容に適した最適検知条件の探索実験を行い装置全般の機能向上に向け,繰り返し改良・調整の作業を行う.3.室内において,土壌の水分条件が異なる苗木数種・数個体を対象に一定間隔を明けて撮像実験を行う.また,マツノザイセンチュウ接種木の撮像実験,腐朽木の撮像実験等,小径の生立木を対象にした撮像実験等を行う.得られたCT画像を材質学的および水分生理学的見地から考察し,新たな知見を得る.4.野外での実験に向け放射線障害防止等の安全対策について検討する.5.今年度は研究期間の最終年度であることから研究成果をまとめ,一部は公表する.本年度は,平成25年度に試作したX線検査装置の改良型検査装置の製作を目的として,主に以下の6項目について実施した.(1)画像解像度の向上およびより太い樹木に対応を図るために,X線源の管電圧の高エネルギー化,管電流の高出力化にむけ技術的検討を行った.また焦点サイズの縮小化および軽量化にむけた技術的検討も実施した.(2)装置全体の重量の軽量化および撮影範囲を幹軸方向へ拡大させ3D化を図るために,平成25年度の試作機に使用していたX線検出器を市販のデジタルX線センサーへの交換について検討した.交換にあたり市販のデジタルX線センサーを用い実際に生材状態のスギ1個体を用いてCT撮像実験を行い,画像処理方法の再検討,とくにCT画像構築時におけるノイズ処理について技術的な検討を行なうととももに,得られた画像の解像度,画像上での木材内の心材と辺材における水分状態の違いの評価,木材内の節,腐朽,年輪,密度の違いなどが抽出できるかどうかの評価を行った.その結果,3D-CT画像を再構築でき,心材と辺材の水分状態の違い,節,腐朽,年輪の抽出が十分可能であることが分かった.(3)軽量で精密な自動回転台座,脚等の部材等の探索を行い,特注により改良型の検査装置を製作した.(4)本装置の今後の応用研究を考慮し,生葉に潜伏する虫,スギ乾燥丸太を対象にX線による撮影を行った.(5)野外での立木を対象にした撮像実験に向け放射線障害防止等の法的規制や安全対策について情報収集した.

(6)これまでに得られた研究成果の一部を国内学会および国際学会にて公表した.当初の計画では,改良型のX線検査装置を年度内の早い時期に製作し,その装置を用いてターゲットとする測定項目・観察内容に適した最適検知条件の再探索を行いながら装置全般の改良・調整までを行う予定であったが,精密で軽量な自動回転台座および脚の部材探索および設計・製作に時間がかかり,改良型の検査装置全体の納品が前年度末となり,若干遅れているため.野外に生育する立木の樹幹内を非破壊的に検査・観察することができるX線装置の開発を目指し研究を進めている.本研究では,平成25年度に製作した試作機の結果を踏まえ,より高品位の画像を取得できるように改良した装置を製作するとともに,その装置を用い立木状態の針葉樹や広葉樹の樹幹を撮像し,材質学的および水分生理学的見地から考察し,新たな知見を得ることを目的としている.本年度は主に以下の内容について実施した.1.線源と検出器の改良と装置全体の評価と調整:画像解像度の向上と大径木への対応を図るためX線源の改良を行った.また,短時間での連続照射による線源の高温化問題への対策を講じた.高品位3次元CT画像が得られるよう検出器の調整および画像処理方法について検討した.平成29年度末に製作した改良型X線検査装置を対象にX線評価システムによるX線源・検出器・制御部のバラック試験を行い,その評価結果に基づき装置全体の調整を行った.2.平成29年度末に製作した改良型装置による室内での撮像実験:生材状態にある針葉樹4種(スギ,ヒノキ,カラマツ,アカマツ)および広葉樹3種(クリ,ミズナラ,シラカンバ)各1本の丸太(直径8cm20cm)を改良型X線検査装置で撮像した.その結果、平成25年度に製作した試作機で得られた画像よりも高品位の3次元のX線CT画像が得られ,心材と辺材の水分状態の違い,節,腐朽,心材の年輪が明確に区分できることを確認できた.さらに,得られた画像をもとにターゲットとする測定項目・観察内容に適した最適検知条件等についても検討を行った.3.安全対策:野外での立木を対象にした撮像実験に向け放射線障害防止等の法的規制や安全対策について情報収集を行った.上記の研究実績概要で述べたように,改良型のX線装置を平成29年度末に製作し,その装置のX線源や検出器等の部分的および全体的改良や調整に取り組みつつ,室内でしかも生材状態の丸太ではあるが,数種の個体の撮像実験を行い,前回の試作機よりも高品位の3次元CT画像が得られてる.これらの成果の一部は第69回日本木材学会大会で発表した.このように一定レベルの成果が得られており,おおむね順調に進展している.前年度末の製作した改良型のX線検査装置を用いた様々な実験を中心に実施する.具体的には,(1)改良型のX線検査装置の微修正・調整を行うとともに野外使用に耐えうる保護器具等を検討する.(2)画像解像度の向上およびより太い樹木への対応を図るため,X線源の管電圧の高エネルギー化,管電流の高出力化および焦点サイズの縮小について技術的検討を行う.(3)高品位CT画像が得られるよう画像処理方法について技術的検討を行う.(4)X線評価システムによるX線源・検出器・制御部のバラック試験を行い改良型装置全体の調整を行う.(5)産業技術総合研究所の実験室内で,樹種,直径,水分状態,節の状態,腐朽具合,成長状態,マツ材線虫病罹病木等の異なる材料を対象に撮像を行い,ターゲットにする測定項目・観察内容に適した検知条件を探索する.(6)野外での立木を対象にしたX線撮像実験に向け放射線障害防止等の法的規制や安全対策について情報収集を行う.1.昨年度に引き続き,画像解像度の向上と大径木への対応を図るため,X線源の管電圧の高エネルギー化,管電流の高出力化,焦点サイズの縮小,連続照射への対応等に取り組む.幹軸方向への撮影範囲の拡大およびより高品位CT画像が得られるよう検出器の改良および画像処理方法について検討する.
フィトクロムA分子のAFMイメージング

7日目の黄化エンドウ芽生えから抽出し、ほぼ純粋になるまで精製したフィトクロムA分子を原子間力顕微鏡によって観察した。生の溶液試料をマイカ板に載せ窒素パージによって軽い乾燥状態にしたフィトクロムを観察した結果、像が時間的に変化するので余りはっきりした像は得られなかった。これはAFMのプローブの位置検出に用いている赤色レーザーが試料のフィトクロムの光変換をもたらす結果と考え、軽く固定した分子を観察することにした。Pfr状態で0.1%グルタルアルデヒドにより固定した試料は碁石のような円盤が2個つながった全体として上から見れば雪だるま、あるいは殻つきピーナッツのような像を与えた。像の大きさプローブの大きさが10nmと仮定して計算すると約250kDaになり、フィトクロム・ダイマーの分子量と一致するし、水力学的に測定した値とも矛盾しない。一方Prの状態で固定した試料は碁石状の円盤が2つ重なった、全体として1つの厚い球に近い楕円体の像を与えた。PfrにフィトクロムのN末端から354番目からのDAVLという配列に結合することが分かっている抗エンドウフィトクロムA単クローン性抗体Mep-1をつけてAFM観察した。雪だるま像に1個の抗体が付いた像は観察されたが2個同時に付いたものは観察されなかった。これは抗原に1個の抗体が付いた状態ではもう1個は立体的に結合できなくなっているものと推定される。IgGでなくMep-1のFab'断片を用いた場合も同様に1個しか付かなかった。以上より、フィトクロムAはPrでは薄いほぼ円盤型のものが2個重なった形を形成し、Pfrになるとその円盤が開き、雪だるま型になる。雪だるまを構成する個々の円盤はフィトクロムの単量体に対応するのではなく、2つの円の付け根付近にエピトープ部分が2つ存在する可能性が大きいと解釈している。植物の光形態形成の受容色素蛋白質フィトクロムは光を吸収すると赤色光吸収型Prと近赤外光吸収型Pfrの間を可逆的に光変換する。生理的にはPfrが活性型と考えられ種々の形態形成反応を誘導している。本研究ではフィトクロムの光変換に伴う構造変化を原子間力顕微鏡(AFM)で観察した。エンドウから精製したフィトクロムAをそのままマイカの劈開面に乗せ生乾きのまま観察すると,球形と雪だるま型の像が得られたが,像の安定性は良くなく,プローブの位置検出に用いている赤色光のレーザーの影響ではないかと思われた。そこで,Pr,Pfrの像をより安定な条件で詳細に見るために,なるべく低濃度のグルタルアルデヒド(GA)で固定して見ることにした。0.10.2%のGA固定した試料では,Prでは厚い球形型,Pfrでは大部分を占める薄い雪だるま型の像に加えて少数の厚い球形の像が主に観察された。すなわち,厚い球のPrは実は2つの半球が重なったもので,Prが光を吸収して構造変換すると2つの半球が開いて雪だるま型に見えると解釈される。フィトクロムはホモダイマーで,各モノマーは色素団を含むN末端側半分と色素団を含まないC末端側半分のドメインとがヒンジ領域でつながっている構造を取ることが分かっている。Pfrの形であると思われる雪だるまのどの部分が,どのドメインに対応するかを,色素団ドメインの既知の領域に結合することが知られている単クローン性抗体を使って現在検定している。

7日目の黄化エンドウ芽生えから抽出し、ほぼ純粋になるまで精製したフィトクロムA分子を原子間力顕微鏡によって観察した。生の試料をマイカ板に載せ窒素パージによって軽い乾燥状態にしたフィトクロムを観察した結果、像が時間的に変化するので余りはっきりした像は得られなかった。これはAFMのプローブの位置検出に用いている赤色レーザーがフィトクロムの光変換をもたらす結果と考え、軽く固定した分子を観察することにした。Pfr状態で0.1%グルタルアルデヒド固定した試料は厚みの薄い雪だるま型の像を与えた。像の大きさは水力学的に測定した値と矛盾しない。一方Prの状態で固定した試料は1つの厚い球に近い楕円体の像を与えた。PfrにフィトクロムのN末端から354番目からのDAVLという配列に結合することが分かっている抗エンドウフィトクロムA単クローン性抗体Mep-1をつけてAFM観察した。雪だるま像に1個のY字型の抗体が付いた像は観察されたが2個同時に付いたものは観察されなかった。これは抗原に1個の抗体が付いた状態ではもう1個は立体的に結合できなくなっているものと推定される。IgGでなくMep-1のFab'断片を用いた場合も同様に1個しか付かなかった。以上より、フィトクロムAはPrでは薄いほぼ円盤型のものが2個重なった形を形成し、Pfrになるとその円盤が開き、雪だるま型になる。雪だるまを構成する個々の円盤はフィトクロムの単量体に対応するのではなく、2つの円の付け根付近にエピトープ部分が2つ存在する可能性が大きいと解釈している。結果についてはもう少し裏付け観察してから投稿する予定である。