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近世町家の形成と多様な形式の発生要因-オランダ商館長などの記録を基礎史料に-

本研究は、長崎出島のオランダ商館長などが遺した記録(模型、日誌など)を基に、日本の町家の地域的特質を、従来とは異なる目で分析する。オランダ商館長らが製作させた模型は、長崎の町家等をモデルとした。それらは、外観の特徴ばかりではなく、部屋の格式や用途によって室内意匠が異なることを正確に伝えている。また、その様相は、1822年1828年代の状況を示している。本研究は、西欧人の目という新たな視点から、多様な形式をもつ近世町家の形成要因を明らかにすることを目的とする。具体的には、長崎出島のオランダ商館長などが遺した記録を基に、日本の町家の地方的・地域的特質を、従来とは異なる目で分析する。なかでもシーボルトは、日本の民家を細部まで丁寧に観察しており、それを分析することにより、日本人では見えなかった町家の地域的特質を明らかにすることができる。平成21年度は、オランダのライデン国立民族学博物館においてシーボルト『日本』(以下『日本』)の初版本や日本人に製作させた「フロヤ」と墨書のある模型(模型(1))を調査した。また、長崎のシーボルト記念館のマイクロフィルムによりシーボルト関係文書を分析し、『日本』や模型との関連性を検討した。シーボルト関係文書の分析シーボルトの「1826年9月15日小瀬戸への調査旅行」(以下旅行記)には、2軒の民家(以下民家A、民家B)について詳しく記されている。民家Aの外観から、庇は雨や日差しを除けるためであり、雨のよく当たる外壁は葦で作ったマット状材料で覆われているとし、気候風土との関係について着目している。内部は、一つの部屋しかないが、畳の敷かれている場所は居間、その反対側は、控え室、台所、食料の貯蔵場所であるとし、一室空間に複数の機能があることを理解していた。いっぽう、民家Bは、屋根に煙突代わりの煙抜きがあり、雨除けの引き戸が付けられているとしている。旅行記と『日本』、模型との比較旅行記には、『日本』の挿図と対応する図版番号が記載され、民家Aは外観図、平面図、断面図、民家Bは外観図が対応する。民家Aの外観図等は、平成18年に調査した「農家」の模型とよく一致し、民家Bの外観図は、模型(1)とよく一致した。つまり、この2つの模型は、1826年の長崎市小瀬戸に存在していた民家をモデルとした。本研究は、西欧人の目という新たな視点から、近世町家の多様な形式の形成要因を明らかにすることを目的とする。なかでもシーボルトは、日本の民家を細部まで丁寧に観察しており、それを分析することにより、日本人ではみえなかった町家の地域的特質を明らかにすることができる。平成22年度は、オランダのライデン国立民族学博物館においてオランダ商館長らが遺した記録などの調査を実施した。具体的な調査対象は、昨年の調査で新たに発見した町家等の模型である。また、シーボルトが遺した「1826年9月15日小瀬戸への調査旅行」(以下日誌)とシーボルト著『日本』、および模型との関連性を検討した。新たに発見した模型調査対象の模型は20棟で、そのうち特徴的な7棟の模型について実測調査を実施した。なかには、室内に人形の入った模型や天井一面に絵が描かれている模型など、これまで調査した模型とは異なる仕様の模型があった。また、これまで調査した模型を含め、屋根の制作方法に着目すると、いくつかに分類でき、そこから制作者を特定できる可能性がある。日誌と『日本』および模型との関連日誌には、小瀬戸の二つの民家について詳しく記されており、『日本』に掲載されている二つの民家の挿図を示し、「農家」と「フロヤ」の模型と一致する。「農家」のモデルとなった地域は、小瀬戸の可能性が高い。しかし、「フロヤ」については別の地域の可能性もある。例えば、町場で利用する共同風呂や乙名のような身分の高い人物の民家に付属する建物である。また、これまで挿図は、模型を見てオランダで描いたと報告してきた。しかし、この二つの民家に関しては、調査に同行した画家が下絵を描き、日本で模型が制作された後に、オランダで石版画が制作された可能性が高い。具体的には、長崎出島のオランダ商館長などが遺した記録(日誌、模型など)を基に、日本の町家の地方的・地域的特質を、従来とは異なる目で分析する。オランダのライデン国立民族学博物館に所蔵されている日本の町家等の模型は、実際の町並みを切り取ったのではなく、代表的な町家を組み合わせていた(1820年度科学研究費)。

21、22年度は、シーボルト関係文書の一つである「1826年9月15日小瀬戸への調査旅行」(以下、日誌)を分析・検討した。また、日誌に関連する模型を調査した。日誌は、シーボルト『日本』の挿図(以下、『日本』)、模型と対応関係にあった。また、日誌に記録された民家の一つは、長崎市小瀬戸に存在していた漁業と農業を営む民家で、「農家」模型と一致した。23年度は、これまでの成果を基に模型のモデルとなった地域を検討した。モデルとなった地域の検討「農家」模型以外に、『日本』と対応関係にある模型は10件ある。これらの模型の特徴を、『長崎県の民家』に掲載されている民家や長崎市内に現存する遺構、古写真等と比較し、模型の特徴とよく一致することを確認した。また、「名主の住まい」模型は、かつて長崎市内に存在したオランダ通詞の町家と酷似した。シーボルトの見た長崎の町家『日本』と対応関係にある模型は、長崎の町家をモデルとした。それらは、シーボルトが実見した町家である。模型は、日本人の職人によって正確に製作され、外観の特徴ばかりでなく、正式な部屋には長押を廻し、襖の仕上を唐紙と襖絵に使い分けるなど、部屋の格式や用途によって室内意匠が異なることを正確に表現している。現存町家遺構が歴史的な増改築の結果であるのに対して、模型からは19世紀初頭の長崎の町家の正確な様相を理解することができる。
アクションリサーチによる保育実践研究法の検討

本研究主題に対し、理論的整理、調査研究、実践研究の3つのアプローチによる研究を行った。第1には、理論的にアクションリサーチの歴史的展開の議論的検討、保育実践研究における記録のあり方についてこれまで保育学の中で発表されてきた研究や近年のレッジョ・エミリアアプローチやプロジェクトアプローチにおける記録論をレビューし、そこから個別の実践記録の検討を行うだけではなく、インスクリプションとして園文化を記録システムからとらえるという水準での課題を新たな方向性として抽出し研究論文にまとめ発表した。第2には、幼小における学び、知的発達に対する教師の実践の見方の共通性と相違を検討するために、保育者に対して保育の映像記録視聴してその思考をとられる多声的エスノグラフィーを実施するためのビデオクリップを作成し、実際に幼稚園の熟練教師と初任教師12名のプロトコルから知的発達、学びに対する軸を抽出することを実施した。またより大きなサンプルで知的発達への意識をとらえるために、比喩生成課題と重み付け課題を用いて熟練教師と初任教師のあり方を検討した。ビデオクリップ研究からは知的発達をとらえる軸には、個対集団、指導的と遊びの支援の2軸を明確にとりだすことができるが、熟練教師の方が個の一人の活動も大切にし集団での共同性の質を高めるに至る過程がより自覚的であること、熟練教師ほど新規性よりも経験の繰り返しの中での育ちに着目した実践的思考様式をもつことが明らかになった。第3には、保育実践に実際にかかわりながら、記録から遊びにおける学びの過程を抽出していくための園内研修に実際にかかわりアクションリサーチを行ってきた。2人の幼児の記録から発達的意味を読み取るカンファレンスから何を教師が保育の中で読み取るのか、小学校の教師とは異なる視点として、言語化されない行動の解釈の厚さが明らかになった。本年度は以下の3点について研究を実施した。第1に、アクション・リサーチ研究手法に関して、先行文献をまとめその手法や意義を整理し論文化を行った。その成果は「教育・発達における実践研究」(東大出版会)や「教室におけるアクション・リサーチ」(金子書房)に発表した。またさらにこの手法が幼児教育における意味については、現在整理を行なっており次年度以降に論文化し報告する予定ある。第2に、本年度最も精力的に行ったことは、公立1幼稚園において実際に幼少連携の実践研究を行い、その理論化を行った.連携の理論として「互恵性、継続性、名づけあう関係性、物語り性」の4原則を導き、連携カリキュラム、人的組織システム、実践の記録システムの開発の必要性を指摘するとともに、実践を通してその実証化を図った。この実践研究に関しては、年度後半に「幼少連携のカリキュラムづくりと実践事例」という著書にまとめた。第3には、第2の研究の中心が幼稚園に合ったのに対し、小学校の授業におけるアクションリサーチとそこでのカンファレンスのあり方について実践を行いその結果を「アクション・リサーチによる学級内関係性の形成課程」に論文化した。当該論文では道具やカンファレンスの視点は十分には整理できなかったため、さらに分析検討をすすめている。昨年度に引き続き、本年度も継続的に以下の観点について検討した。第1にアクションリサーチの研究手法について文献研究を深め、その成果は教育心理学会での発表や「心理学研究法」(放送大学)に発表した。なお本年アクションリサーチに関する歴史的資料等を収集し、アクションリサーチのリサーチクエッションの次元とデータ収集方法・分析方法と循環サイクルのありかたによって、現在までに実施してきた教師教育分野のアクションリサーチを整理することを試みた。その成果は、レビューとして次年度に論文化し発表する予定である。第2には研究時におけるアクションリサーチの記録と道具の使い方を検討するために1箇所の場所での縦断的研究の持つ意味、短期場面再生刺激法を用いる意味について検討した。前者で実際に実施したごっこコーナーでの役の生成・成立に関する研究については、「東京大学教育学研究科紀要」と「保育学研究」に発表し、同一箇所で縦断的研究をすることで幼児の対入的な関係と遊びのスタイルが記述可能となることを実証した。第3には、実際に幼小連携の実践研究に関与するとともに、そこで実際に行った実践事例の検討をもとに、研究知見を保育学研究や初等教育資料に発表した。幼小の園児・児童の交流のみではなく、教師間の事前の計画とビデオを用いた研究協議によって実際にどのような会話がなされるかを記録におさめると同時に、それらの事例から幼小教師の差異を検討した。

ビデオクリップ研究からは知的発達をとらえる軸には、個対集団、指導的と遊びの支援の2軸を明確にとりだすことができるが、熟練教師の方が個の一人の活動も大切にし集団での共同性の質を高めるに至る過程がより自覚的であること、熟練教師ほど新規性よりも経験の繰り返しの中での育ちに着目した実践的思考様式をもつことが明らかになった。第3には、保育実践に実際にかかわりながら、記録から遊びにおける学びの過程を抽出していくための園内研修に実際にかかわりアクションリサーチを行ってきた。2人の幼児の記録から発達的意味を読み取るカンファレンスから何を教師が保育の中で読み取るのか、小学校の教師とは異なる視点として、言語化されない行動の解釈の厚さが明らかになった。
第2次世界大戦後の占領改革に関する国際比較研究

本年度は、5月、7月、12月の3回にわたり研究会を実施した他、関係資料の収集につとめた。収集した資料は、ドイツのアメリカ占領軍政府報告書をマイクロフィルムで購入した他、第2次大戦直後の国際政治史や西欧外交史、とりわけ、フランス外交関係の文献を収集した。また、アメリカ政府の対フィリピン関係外交文書のマイクロフィルムによる収集を行った他、日本占領関係の博士論文も若干収集できた。研究会においては、メンバーが刊行した著書(中村政則『戦後史と象徴天皇』岩波書店、1991年や豊下楢彦『日本占領管理体制の成立-比較占領史序説』岩波書店、1992年)の合評会を実施した。その他、共同研究の成果を刊行すべく、執筆計画の相互交流を積み重ね、共通の視角の確認につとめて来た。具体的には、(1)「外からの改革」としての占領改革と被占領地域での自主改革の相関関係の解明、それを通じての「失われた改革コース」の発掘、(2)連合国側の戦後世界構想がもっていた勢力圏分割的性格(1944年10月のチャーチルとスターリンによるバルカン合意や占領軍を派遣した国が排他的な占領政治を実施するとしたイタリア方式の意味)の解明、(3)比較の対象としては、旧枢軸国(ドイツ・イタリア・日本)だけではなく、その併合・植民地(オーストリア・フィリピン・朝鮮)をも含めて行うが、前者においては占領が比較的改革的であったのに対して、後者、特に旧植民地においては改革よりも反動化の傾向が強く存在したことの意味の掘り下げが大切となる。(4)従来の占領改革研究は、冷戦によるその成果の停止=逆コースの始まりとして、初期の占領を評価し、冷戦以降で否定的に評価する傾向が強かったが、本研究では、初期の占領改革がもっていた限界(民族・人種問題等)にも目を向け、ポスト近代の始まりとしても注目したい。本年度は、7月、9月、12月、3月の4回にわたり研究会を実施した他、関係資料の収集につとめた。収集した資料は、第2次大戦直後期の米国の対ソ、対仏、対比政策関係に関する一次史料をマイクロフィルムにより収集した他、各国の占領期に関する博士論文や研究書を幅広く集めることができた。研究会においては、比較占領史研究の方法論的検討を行った他、ソ連軍に占領された東欧諸国と北朝鮮の比較や日本における占領改革の諸側面の検討も行った。その結果、以下の諸点が明らかになった。第一に、連合国側は、大西洋憲章などで領十不拡大や民族自決の原則を公約しながらも、被占領国に主として軍隊を派遺した国がその国の改革に主たる責任をもつ(イタリア方式)という形で、事実上の「勢力圏分割|を行っていたこと。第二に、連合国は、ファシズム諸国に対しては、非ファシズム化の一環として民主化政策を推進したが、朝鮮やフィリピン等の旧植民地地域の場合には、ほとんど改革に逆行した政策をとったという対照的関係がみられたこと。第三に、日本やドイツの場合、「冷戦|の始まりと共に、連合国の改革政策は後退し、経済復興を優先させるという「逆コ-ス|の進展がみられるが、その結果、旧勢力が復活し、占領下で旧体制との連続件が残ることになった。と同時に、旧勢力の一部が初期の占領下で追放される一方、自己変身をとげ、占領軍に協力してゆく部分も存在したため、戦後の保守勢力には戦前とは異なる性格も発生した。それ故、旧勢力の連続性と断続性の統一的把握が比較占領史研究の重要な課題となる。以上の諸点をふまえて、今後の研究では、占領軍と被占領地の自主的な変革勢力との関係や占領という「異民族統治|下での民族主義の動向などが検討課題となろう。
腎糸球体上皮細胞障害による蛋白尿発現機序の解析

報告者らは科学研究費の補助を受けながら、フィンランド型先天性ネフローゼ症候群の責任遺伝子産物であるネフリンのラットhomologueのクローニングに成功し、報告者らが作成した蛋白尿惹起抗ラット腎糸球体上皮細胞足突起間スリット膜単クローン抗体(mAb)5-1-6はネフリンの細胞外部位を認識していると結論づけた。MAb5-1-6静注により惹起される5-1-6腎症やネフローゼ症候群のラットモデルとして多用されるPAN腎症においても、蛋白尿惹起に先立って、ネフリンの発現が早期に低下していることから、ネフリンの発現低下が蛋白尿の原因であり、ネフリンの異常は後天的な腎疾患にも関与することを示唆した。また報告者らは急速進行性ネフローゼ症侯群を呈する巣状糸球体硬化症の責任遺伝子産物として新しく報告されたポドシンのラットhomologueのクローニングにも成功した。5-1-6腎症、PAN腎症においてはネフリン同様、蛋白尿に関連して蛍光抗体法陽性所見がほぼ線状から顆粒状となる局在変化が観察された。5-1-6腎症ではネフリンと一致した局在変化を示したが、PAN腎症では両者の局在は必ずしも一致しなかった。また5-1-6腎症ではポドシンのmRNAレベルでの発現低下が認められた。以上、ポドシンはネフリン同様、正常糸球体透過性の保持に重要な役割を演じており、蛋白尿制御の為の治療戦略対象とされるべき主要分子の一つであることが明らかにされた。腎糸球体上皮細胞足突起間スリット膜(SM)構成各分子(ネフリン、ZO-1、FAT)に対する特異抗体は、ネフリンについては細胞内局在部位中21個のアミノ酸からなるペプチド部分に対するウサギ抗体を、またFATについてはC末端近くの20個のアミノ酸からなるペプチドに対する同じくウサギ抗体を作成した。このFAT細胞内部位に対する特異抗体と、ネフリン細胞外部位認識単クローン抗体(mAb)5-1-6とを用いた二重免疫電顕法(5, 10nm径金コロイド粒子の併用)により、両者が共にSM底部で糸球体上皮細胞(足突起)細胞内(抗FAT抗体)外(mAb 5-1-6)に局在することが明らかとなった。また市販の抗ZO-1 mAbと上記抗FAT抗体による二重免疫電顕法では、両抗体に由来する二種の径の金コロイド粒子が共々SMに面した細胞質内に局在していることも判明した。腎糸球体障害モデルとして抗SM mAb 5-1-6静注により5-1-6腎症を、Puromycin Aminonucleoside静注によるPAN腎症を、また抗Fx1A抗体静注により受身Heymann腎炎を各々ラットに惹起して各構成分子の動態を検索した。ネフリンの蛋白レベル、mRNAレベルとも、5-1-6腎症、PAN腎症にて蛋白尿発現以前の極早期にその発現が砥下していることが明らかとなった。また前者モデルでネフリン局在の量的質的変化に関連してZO-1の発現低下とその局在変化が再確認された。これら蛋白尿惹起モデルにおけるSM構成3分子の動態検索は、3分子局在の近接性に加えて機能的にも相互に密接に関連しあってSMの構造・機能の維持に重要な役割を演じていることを明らかにしつつある。極最近明らかにされたSM関連分子(ポドシン、CD2AP)も加えた統合的な検索が来年度に向けて進行中である。前年度のネフリン、FATに引き続き、最近明らかにされたスリット膜関連分子(ポドシン、CD2AP)に対する特異抗体の作成に成功した。ポドシンのラットホモローグのクローニングにも成功し、アミノ酸数383で、ヒトポドシンとの間に84.3%のidentityを認めた。ポドシンは腎糸球体以外には神経組織にもその局在が証明された。腎糸球体における局在は免疫蛍光法で、糸球体毛細管壁に沿って連続したほぼ線状(微細顆粒状)陽性所見を呈した。

光顕レベルではネフリンとほぼ同一の陽性所見を呈し、二重染色法により光顕レベルでの同一局在が確認された。前年度同様、典型的な糸球体上皮細胞障害モデル(5-1-6腎症、PAN腎症)における主としてポドシンの動態をmRNA(RT-PCR、一部リアルタイムRT-PCR)、蛋白レベル(免疫蛍光法、Western blot法)にて検索した。5-1-6腎症ではポドシンのmRNAレベルでの発現低下が認められた。5-1-6腎症、PAN腎症においてはネフリン同様蛋白尿に関連して顆粒状への局在変化が観察された。5-1-6腎症ではネフリンと一致した局在変化を示したが、PAN腎症では両者の局在は必ずしも一致しなかった。以上、ポドシンはネフリン同様、正常糸球体透過性の保持に重要な役割を演じており、蛋白尿制御の為の治療戦略対象とされるべき分子であることが明らかにされた。
評価者の個人特性を考慮した環境評価モデルに関する研究

本研究は,テクノポリス指定や広島大学の統合移転など地域環境の変容の著しい東広島市を対象に実施した各種調査結果の分析から,個人特性を考慮した環境評価モデルを提案し,その妥当性の検証を行ったものである。はじめに,東広島市における環境変容の過程について,現在から過去10年位までを目途に,文献・資料等を収集・整理し社会的指標から概括するとともに,有識者に対する面接調査から意識的な変容についても把握した。次に,既に実施して東広島市に新たに転入してきた大学生に対するパネル調査についてデータ解析を進め,行動範囲やみどりの認識場所の分布を白地図に記入させた結果から,時間経過による両者の変化傾向を明示した。また,生活環境評価,みどりの認識・評価に関して意識構造を把握した上で共分散構造分析を適用し,個別評価が総合評価を規定し,両者に個人の価値観が影響を及ぼすという想定で,それぞれ環境評価モデルを作成した。上述した調査結果を考慮して調査票を設計し,東広島市を構成する西条,八本松,高屋,志和町を対象地区として,一般住民に対する意識調査を行った。以前と現在の評価結果の比較から,各地区ごとの環境変容の特徴を示すとともに,大学生との比較から居住歴による意識構造の差異を把握した。また,生活環境,みどりの認識・評価に関する環境評価モデルを大学生と同様に作成し,地区別や都市化の程度によって詳細な検討を行った。さらに,東広島市の地域景観とCGによる合成景観を呈示して評価を求める住民意識調査を,対象地域と回答者を同じくして実施した。伝統的な農村景観とそれに人工的な要素が付加された景観との評価構造の差異を示すとともに,景観評価についても環境評価モデルを作成し,生活環境,みどりの認識・評価の各モデルとの比較を行い,価値観による影響などの共通性から,個人特性を考慮した環境評価モデルの妥当性を確認した。平成7年度に実施した事項と得られた知見を以下に示す。1.大学生に対するパネル調査結果の解析平成6年度に実施した東広島市に新たに転入してきた大学生に対するぱねる調査についてデータ解析を進め,特にみどりの認識・評価に関しては個人特性の影響を確認した。また,東広島市域を示す白地図に記入させた結果をデジタイザーによりデータ入力し,自然的な要素の地理的分布について検討を進め,みどりの指摘数が入学当初から経時的に増加していることを把握した。2.東広島市における環境変容の実態調査東広島市における工場立地や地域開発,土地区画整理等による環境変容の過程について,現在から過去10年位までを目安として官公庁等から文献・資料を収集し,環境変容の概略を把握し,東広島市を構成する西条,高屋,志和,八本松の4町についてその差異を明らかにした。3.有識者・行政担当者・一般住民等に対する面接調査1.の調査結果は転入後間もない学生が評価者であり,一般性を欠く恐れがあるため,地域に対する意識や考え方が異なる有識者や行政担当者,一般住民等から32名の対象者を選出し,アンケート調査及び面接調査を10月に実施した。その結果,上述の4町によって,近年の環境変容とその効果に対する認識に差異が認められた。4.環境変容に関する住民意識調査の実施と結果の分析1.3.で得られた知見を整理して住民意識調査を設計し,平成8年3月上中旬に調査を実施した。4町の比較を行うことも考え,各町300票ずつ計1200票を配布し,1181票を回収した。平成7年度の研究成果に基づき,平成8年度に実施した事項と得られた知見を以下に示す。1.環境評価モデルの構成平成7年度に実施した住民意識調査結果のデータ解析を進め,[環境要素-個人特性-評価]

間の因果関係を説明する仮説を統合化するモデルを,共分散構造分析を用いていくつか構成し,相互の比較を通してそれらの有効性を検証した上で最も妥協性の高いモデルを採択した。2.地域景観に関する被験者評価実験の実施地域の環境状況を表す視覚的媒体として景観を取り上げ,住民による評価の分析から環境評価モデルの妥当性を検証する前段階として,学生を被験者とするスライド映像呈示による評価実験を実施し,東広島市の地域景観の一般的な評価傾向を把握した。また,属性が比較的均質な学生被験者においても個人特性が評価に影響を及ぼすことを指摘した。3.環境評価モデルの整合性の検証1.2.で得られた知見を整理し,東広島市の地域環境を示す景観写真と,CGによって作成した環境の改変を伴う景観写真をそれぞれ呈示して評価を求める住民意識調査を,1.の調査と対象地域,回答者を同じくして平成8年11月に実施し,有効回答592票を得た。調査結果に基づき,地域景観の総合評価を個別的な個人特性によって説明する評価モデルを1.と同様に作成し,特に「個人特性-評価」間の関係に構造的な同質性を確認し,環境評価モデルの妥当性の検証を行った。
ＦＧＦシグナル制御によるＡｐｅｒｔ症候群頭蓋冠縫合部早期癒合の治療法開発

Apert症候群は、線維芽細胞増殖因子2型受容体(FGFR2)のリガンド(FGF)依存的機能亢進型の点変異(S252W)を原因とし、頭蓋冠縫合部早期癒合症や合指症を示す。本研究の目的は、Apert症候群モデルマウスを用いてApert症候群の病態発症メカニズムを解明するとともに、可溶型FGFR2やヘパラン硫酸分解酵素によるFGFシグナル抑制が頭蓋冠縫合部早期癒合に対して与える効果を明らかにし、非侵襲的な新規治療法開発への糸口を見つけることである。本研究では、ナノゲルを担体とすることで、ヘパラン硫酸分解酵素を胎児期マウス頭蓋冠縫合部に局所作用させる実験系を計画し、施行した。以前にFGFR2IIIc-S252Wと、その細胞外ドメインのみ(可溶型)を発現するトランスジェニックマウスの頭蓋冠由来骨芽細胞の解析により、可溶型を用いたFGFシグナル抑制が、S252W変異による増殖・分化能の異常な亢進を抑制する可能性を示した。これらの結果に関しての研究論文が海外誌にて発刊となった。本研究の目的は、in vivoでの頭蓋冠冠状縫合部早期癒合のフェノタイプを持つ、前研究とは異なったApert症候群モデルマウス(FGFR2-S252W knock-inマウス)を用いて、Apert症候群の病態発症メカニズムを解明するとともに、FGFシグナル抑制が頭蓋冠縫合部早期癒合に対して与える効果を明らかにし、非侵襲的な新規治療法開発への糸口を見つけることである。はじめに、FGFR2-S252W knock-inマウスの頭蓋冠骨芽細胞を単離、分化誘導を行ない、異常な分化能を持つことを確認した。ヘパラン硫酸分解酵素を担体によりFGFR2-S252W knock-inマウスの縫合部へ局所的に作用させる系を確立させ、FGFR2機能低下状態を作り出し、縫合部早期癒合に対する阻害効果とシグナル反応性を評価する。ヘパラン硫酸特異的分解酵素として細菌由来酵素で市販されているheparitinaseを用いることを選定したとともに、担体として用いる物質の選定として徐放性のあるナノゲルを用いることとし、試験的にマウス胎仔の頭蓋冠縫合部に作用可能であるかについて質的・量的な検討を行った。また、頭蓋冠縫合部にも異常をきたす先天異常疾患である、鎖骨頭蓋異形成症に関して臨床的データを学会にて発表を行った。本研究の目的は、in vivoで頭蓋冠冠状縫合部早期癒合症のフェノタイプを持つ、Apert症候群モデルマウス(FGFR2-S252W knock-inマウス)を用い、病態発症メカニズムの解明を行なうとともに、受容体とリガンドの結合に必須であるヘパラン硫酸(HS)を制御しFGFシグナルを効果的に抑制することで、頭蓋冠縫合部早期癒合症が改善されるかを検討し、非侵襲的な治療法開発への糸口を見つけることである。昨年度にFGFR2-S252W knock-inマウスの頭蓋冠骨芽細胞を単離・分化誘導を行い、異常な分化能を示すことを確認し、今年度さらに抽出したタンパク質から代表的なFGFシグナル分子であるERKのリン酸化亢進を確認した。具体的には、頭蓋冠縫合部癒合前のFGFR2-S252W knock-inマウス胎仔を対象とし、ex utero実験系で頭蓋冠縫合部へパラン硫酸分解酵素を局所作用させ、FGFR2機能低下状態を作り出すことで、縫合部閉鎖に対する阻害効果をシグナル反応性とともに評価する実験計画とした。担体としてナノゲル、酵素としてはheparitinaseを使用することを昨年度選定した。今年度は主に野生型マウスを用い、heparitinaseの量の検討、複数種類あるため最適な種類の選定、ナノゲルの量的な検討を行った。また、頭蓋冠縫合部にも異常をきたし顔面口腔領域に影響を与える、先天異常疾患である鎖骨頭蓋異形成症に関して臨床的データを発表予定である。FGFR2-S252W knock-inマウスの頭蓋冠骨芽細胞を単離し、解析することにより、分化能が野生型(WT)マウスよりも亢進していることが確認できた。これは過去の報告と一致した。

本研究では、FGFシグナル抑制が与える、胎仔マウス頭蓋冠縫合部での影響を観察するin vivoでの実験を主体に考えている。FGFシグナル抑制の物質としてヘパラン硫酸分解酵素体としてheparitinaseを用いるとともに、担体として徐放性がある点でその他の材料より優れているナノゲルを、非常に小さくして用いることが可能であることが確認できた。しかし、FGFシグナル低下に効果的な濃度、作用範囲、作用時間などの探索に関して、今後更なる研究が必要である。現時点ではApert症候群モデルマウスとしてFGFR2-S252W knock-inマウスを用いた実験を行う段階ではなく、その前段階としてWTマウスを用いた基礎データの収集を先行すべきであると考え、取り組んでいる。さらに、FGFシグナル抑制による頭蓋冠縫合部早期癒合の治療と、それに伴い明らかにされるであろう頭蓋縫合部(頭蓋骨及び硬膜や骨膜など周囲組織を含めた複合体)の組織間の相互作用含めたシグナル解析に関しては、今後の課題である。25年度が最終年度であるため、記入しない。サンプル数を多く実験可能である、野生型(WT)マウスを用い、FGFシグナル低下に効果的なヘパラン硫酸分解酵素の種類、濃度、作用範囲、作用時間の探索を行う。胎仔マウスの頭蓋冠縫合部へのナノゲルの投与実験は、顕微鏡下での手術が必要となるため、手技的にも熟練するように努め、実験結果の人為的な誤差を減らし精度を向上させたいと考えている。さらに、WTマウスの頭蓋冠縫合部への影響を観察する。WTマウスを用いた実験結果から蓄積されたデータに基づいて、Apert症候群モデルマウス(FGFR2-S252W knock-inマウス)を用いた実験を行うことで、FGFシグナル抑制による頭蓋冠縫合部早期癒合の治療効果に関して解明がより円滑に推進すると考えている。また、同実験の組織切片を用い免疫組織学的染色、in situ hybridization法を行うことで、頭蓋冠縫合部を頭蓋骨及び硬膜や骨膜など周囲組織を含めた複合体として捉え、その組織間の相互作用含めたシグナル解析に関して行う予定である。
量化子と照応の動的意味論

英語におけるE-typeの複数形代名詞の意味論について,次のことを明らかにした.1.いわゆるろば文において,単数形代名詞は次の点で複数形代名詞とは明らかに異なるふるまいを示す.(1)集合的(collective)な解釈,cumulativeな解釈など,複数形名詞句が通常持ちうる解釈が単数形代名詞にはない.(2)存在量化的な解釈と全称量化的な解釈のどちらが優先されるかが複数形代名詞と単数形代名詞の場合と異なる.2.E-typeの複数形代名詞は先行詞の量化表現の種類によって二通りの解釈のされ方がある.先行詞がtwo donkeysのような裸の数量詞を持つ名詞句の場合は,単数形代名詞の場合のように,可能ないくつかの値(この場合は2匹のろばからなるグループ)のうちのひとつを値とするが,先行詞がat least two donkeysのような場合は先行詞を含む節が表す条件を満たすすべての対象からなるグループを値とする.前者の場合,ろば文の中では,単数代名詞の場合と同じような解釈のゆれが生じるが,存在量化的な解釈と全称量化的な解釈のどちらが優先されるかは,単数代名詞の場合と同様,文全体の主語を導く限定子の性質によって決まるところが大きい.上のような性質は,動的意味論の枠組を使ってうまく説明できると考えられ,このことは大筋において示すことができたが,2の性質の厳密な取り扱いはこれからの課題である.複数代名詞一般の動的意味論を展開する準備として,英語のいわゆる「ろば文」における単数形の代名詞が,意味的には数について中立であるという,以外に多くの言語学者の主張を検討した.その結果,この主張は,次の三つの理由で棄却されるべきものであることが明らかになった.1.動機となっている仮定が正しくない.代名詞と先行詞のあいだの統語的な数の一致は必ずしも必須ではない.2.文の解釈について間違った予測をする.単数代名詞が環境によってはcollectiveな解釈を持ちうるという事実に反する予測をする.3.その意図しているところも十分達成できていない.このような決定的な証拠から,単数形の代名詞は,Kanazawa(1994),Weak vs.strong readings of donkey sentencesand monotonicityinference ina dynamic settingでの扱いのように,意味的にも単数の指示対象しかとりえないと考えるのが正しいのである.現在このテーマで論文をまとめているが,まだ投稿するには至っていない.「ろば文」における複数形代名詞の意味論もカバーした論文に膨らませる予定である.英語におけるE-typeの複数形代名詞の意味論について,次のことを明らかにした.1.いわゆるろば文において,単数形代名詞は次の点で複数形代名詞とは明らかに異なるふるまいを示す.(1)集合的(collective)な解釈,cumulativeな解釈など,複数形名詞句が通常持ちうる解釈が単数形代名詞にはない.(2)存在量化的な解釈と全称量化的な解釈のどちらが優先されるかが複数形代名詞と単数形代名詞の場合と異なる.2.E-typeの複数形代名詞は先行詞の量化表現の種類によって二通りの解釈のされ方がある.先行詞がtwo donkeysのような裸の数量詞を持つ名詞句の場合は,単数形代名詞の場合のように,可能ないくつかの値(この場合は2匹のろばからなるグループ)のうちのひとつを値とするが,先行詞がat least two donkeysのような場合は先行詞を含む節が表す条件を満たすすべての対象からなるグループを値とする.前者の場合,ろば文の中では,単数代名詞の場合と同じような解釈のゆれが生じるが,存在量化的な解釈と全称量化的な解釈のどちらが優先されるかは,単数代名詞の場合と同様,文全体の主語を導く限定子の性質によって決まるところが大きい.上のような性質は,動的意味論の枠組を使ってうまく説明できると考えられ,このことは大筋において示すことができたが,2の性質の厳密な取り扱いはこれからの課題である.
フィラグリン変異マウスを用いた新規アトピー性皮膚炎マウスモデルの作製

フィラグリンの発現が著しく低下しているflakytailマウスを用い、フィラグリンの機能を正しく評価すると共に、アトピー性皮膚炎発症機序の解明を可能とする新しいマウスモデルの作製を目指す。Flakytailマウスは外から内への物質透過性の亢進を認めたが、フィラグリン変異それ自体ではTEWLの上昇を起こさないことが示唆された。Flakytailマウスは野生型マウスに比べ、経皮免疫反応の亢進が認められた。今年度は1、フィラグリンの関与する皮膚バリア機能の詳細に関する検討と2、新規アトピー性皮膚炎マウスモデルの作製という二つの柱に基づき研究を進めた。1、フィラグリンの関与するバリア機能の詳細の解明従来皮膚バリア機能の指標として報告されているTEWL(trans epidermal water loss:経皮的水分蒸散量)を測定したところ、flaky tailマウスと野生型マウス間で有意差を認めなかった。一方、アトピー性皮膚炎の発症に最も影響する皮膚のバリア機能は、外界の物質の経皮的透過を防ぐ物質移動の障壁としての役割である。胎児マウスにトルイジンブルーを塗布し、その浸透性を評価したところ、flaky tailマウスでは野生型マウスに比べ明らかな色素透過性の亢進を認めた。本研究より、フィラグリンは外から内への物質透過を防ぐ角層のバリア形成に重要であり、TEWLのみでは体外から表皮内への物質透過能を評価することはできないことが示唆された。来年度も引き続き、フィラグリンの関与する皮膚バリア機能の詳細を検討していく予定であり、本研究は今後の皮膚バリア機能に関する考え方・評価法を大きく変える可能性があるため、重要である。2、新規アトピー性皮膚炎マウスモデルの作製tape strippingや有機溶媒を使用するなどの人為的手段による皮膚バリア機能の破壊を用いずに、アトピー性皮膚炎様の病態を安定して誘導できるモデルを確立することを目指す。現在、各種抗原を反復塗布することでアトピー性皮膚炎様の病態を作製しうる最適条件を検討中である。今年度はフィラグリンの発現が著しく低下しているflaky tailマウスを用い、1、フィラグリンの関与する皮膚バリア機能の詳細に関する検討と2、新規アトピー性皮膚炎マウスモデルの作製という二つの柱に基づき研究を進めた。1、フィラグリンの関与するバリア機能の詳細の解明flakytailマウスはSPF下で長期間飼育すると肉眼的・組織学的皮膚炎を自然発症することを報告したが(Moniaga CS, et al. Am J Pathol, 2010)、皮疹部では皮膚バリア機能の指標として報告されているTEWL(trans epidermal water loss)が上昇しているのに対し、無疹部ではTEWLの上昇がみられないことがわかった。つまり、フィラグリン変異それ自体ではTEWLの上昇を起こさないことが示唆された。また、詳細なtape-strippingを用いた解析から、flaky tailマウスでは物理的刺激により角層が障害されやすい可能性が示唆された。2、新規アトピー性皮膚炎マウスモデルの作製刺激物質、ハプテン(DNFB)、蛋白抗原(OVA)の各物質を経皮的に塗布した後の経皮免疫応答を、flaky tailマウスと野生型マウス間で比較した。その結果、刺激性接触皮膚炎反応、ハプテン誘導性接触過敏反応、液性免疫応答のいずれにおいても、flaky tailマウスで有意に反応の亢進が観察された。本結果は、フィラグリン変異に伴う角層バリア機能異常に基づくものである可能性を示唆する。今後は抗原の種類、曝露方法を十分に検討することで、安定して皮膚炎を誘導できるアトピー性皮膚炎マウスモデルの作製を目指す。本研究は、フィラグリンの機能を正しく評価すると共に、皮膚バリア機能異常を有する皮膚への経皮的抗原曝露から疾患が発症するまでのアトピー性皮膚炎発症機序の解明を可能とするマウスモデルの作製につながるものである。
固相中での元素の拡散

固相中の元素の拡散について地球内部の物質移動と変化の問題に適用するのに重要である問題のうち,転位亜粒界に沿っての高速拡散,高圧下における拡散係数の変化などを重点的に研究するとともに,イオンマイクロプローブ(SIMS)を用いた拡散定数の測定,転移による元素移動の研究も行った.1.ペロブスカイト型MgSiO3の高圧下での元素の拡散この物質は地球下部マントルの主要鉱物であり,その元素の拡散は固体の流動とりわけクリープと深い関係をもっている.本研究では96kbまでの高圧下でダイアモンドアンビルを用いた単結晶X線回析法でその結晶構造を精密化した.これらのデータを用い拡散係路に沿って静電エネルギーを計算し,これより推定した高圧下での活性化体積からこの相では酸素の拡散が主導的であることが判明した.この結果は空席を導入したMD法でのシミュレーションの結果とも一致する.さらに高圧でのホタル石型構造を持つ相での酸素のイオン電導の問題もこれと関連してX線分光法などで研究された.2.カンラン石および石英の転位亜粒界に沿った高速拡散に関連する研究.11度の傾斜角を持つ(100)小傾角粒界における〔001〕方向のMg-Fe相互拡散係数は, 900°Cで拡散させた試料をイオンミリング装置で薄片をつくり,分析電顕で解析したところ体積拡散係数より千倍程大きいことが判明した.3.SIMSを用いてMgO中の微量元素の拡散係数を,深さ方向分析法で測定し,一回の実験で格子拡散と転位粒界拡散を同時に測定できることが判明した.本年度購入したYAGレーザーとダイアモンドアンビルを用い,高温高圧下でカンラン石-スピネル転移を起こさせ,この時に元素がどう移動するかの基礎的実験も行った.これらは地球深部における相転移と物質移動について,有用な情報を提供してくれるので,元素分配の問題とも関連し今後研究して行かねばならぬ問題である.固相中の元素の拡散について地球内部の物質移動と変化の問題に適用するのに重要である問題のうち,転位亜粒界に沿っての高速拡散,高圧下における拡散係数の変化などを重点的に研究するとともに,イオンマイクロプローブ(SIMS)を用いた拡散定数の測定,転移による元素移動の研究も行った.1.ペロブスカイト型MgSiO3の高圧下での元素の拡散この物質は地球下部マントルの主要鉱物であり,その元素の拡散は固体の流動とりわけクリープと深い関係をもっている.本研究では96kbまでの高圧下でダイアモンドアンビルを用いた単結晶X線回析法でその結晶構造を精密化した.これらのデータを用い拡散係路に沿って静電エネルギーを計算し,これより推定した高圧下での活性化体積からこの相では酸素の拡散が主導的であることが判明した.この結果は空席を導入したMD法でのシミュレーションの結果とも一致する.さらに高圧でのホタル石型構造を持つ相での酸素のイオン電導の問題もこれと関連してX線分光法などで研究された.2.カンラン石および石英の転位亜粒界に沿った高速拡散に関連する研究.11度の傾斜角を持つ(100)小傾角粒界における〔001〕方向のMg-Fe相互拡散係数は, 900°Cで拡散させた試料をイオンミリング装置で薄片をつくり,分析電顕で解析したところ体積拡散係数より千倍程大きいことが判明した.3.SIMSを用いてMgO中の微量元素の拡散係数を,深さ方向分析法で測定し,一回の実験で格子拡散と転位粒界拡散を同時に測定できることが判明した.本年度購入したYAGレーザーとダイアモンドアンビルを用い,高温高圧下でカンラン石-スピネル転移を起こさせ,この時に元素がどう移動するかの基礎的実験も行った.これらは地球深部における相転移と物質移動について,有用な情報を提供してくれるので,元素分配の問題とも関連し今後研究して行かねばならぬ問題である.
脳血管障害患者の三次元平均顔の質的解析による看護アセスメントと評価手法の開発

顔貌の変化の観察から回復期リハビリテーション期にある患者の回復の程度を評価する看護アセスメント指標の活用を検討した。筆者らの研究からDB構築している脳血管障害の発症時点から912週目の各4枚の正面顔写真から三次元平均顔画像を作成た。149名の医療従事者がランダムに提示された4枚の刺激画像(平均顔)を回復過程の順序に沿って並べ、その順序にした理由を質的記述した。Text Mining Studioのことばネットワーク解析と対応バブルチャート解析の結果、回復レベルとの関連が強いのは、目の焦点が合う、目力、口角挙上等であり、回復順序を再現できない医療者は、目のクマ、ほうれい線等を指摘していた。脳卒中患者の身体精神機能の回復過程において、顔貌の観察結果は障害の回復に伴って変化することを示している。顔貌の変化の観察を通して、回復期リハビリテーション期に移行する患者の障害の改善の程度を客観的に評価できれば、顔貌の変化は新しい神経科学看護アセスメント指標の1つとして利用可能である。そこで、CGの手法を用いて回復期リハビリテーション期にある脳卒中患者の三次元平均顔を合成し、障害の回復過程に伴う顔貌の変化をテキストマイニングを用いて質的に解析することを目的とした。研究対象者は医師・看護師等149名。方法は、男女別の脳血管障害患者の4枚の平均顔画像を刺激画像として対象者にランダムに提示し、回復過程の順序の並び替理由を記述してもらった。次に、画像の再現順序を記述した数値データを説明変数とするクラスター分析を用いて、4段階の回復順序を再現できた群(全正解群)から、再現ができなかった群(全不正解群)まで対象者を分類した。更に、Text Mining Studio Ver 6.0を用いて、ことばネットワーク解析と対応バブルチャート解析を実施した。解析の結果、全正解群と関連が深い印象変化のことばネットワークは、目、口角、及び表情の3点が強く連結していた。目では【目の焦点が合う】【目力】、口角では、【口角が引き締まる】【口角が挙上する】、及び表情は、【表情が柔らかくなる】【顔色】であった。一方、全不正解群と関連が深い印象変化のことばのネットワークは、目と顔全体の2点が強く連結していた。すなわち、目では、【目元】【目のクマ】【瞼】であり、表情では、【ほうれい線】【顔の輪郭】【肌】【顔の張り】であった。顔印象記述の結果から、研究者等による質的解析とTMSによる解析結果は類似した傾向を示したことも踏まえて、顔印象変化による神経科学看護アセスメント指標を作成できると考える。在宅看護学地域看護学
呼吸鎖複合体の細菌型とミトコンドリア型の比較と後者に固有のサブユニットの役割

1.好熱菌PS3のチトクロム酸化酵素の光散乱とX腺小角散乱(阪大蛋白研での出張研究)の結果は、この酵素が非イオン性界面活性剤溶液中でモノマーで存在していることを示した。また蛋白質の分子量は両方法共に12-13万の値となり良い一致を示した。また、この酵素には蛋白質の1.6倍という多量の脂質および界面活性剤が結合している。同じくこの菌のbC_1複合体は同様の条件でダイマーとなっている。なお、牛ミトコンドリアの酵素ではいずれの酵素もダイマーとして存在することが知られている。2.好熱菌PS3のチトクロムbC_1複合体の精製を行い、得られた標品の性質を調べた。4つのサブユニットから構成されているが、それらはチトクロムC_1(29kDa)、ヘム蛋白質(23kDa)、テトクロムbの前半(21kDa)とサブユニットIV(14kDa=チトクロムbの後半)からなる。これらのサブユニット構成や、その他この酵素の性質は、この酵素が全体としてクロロプラストのb_6f複合体との類似性が高いことが明らかとなった。すなわちチトクロム酸化酵素と同様に牛ミトコンドリア酵素と異なり単純なサブユニット構成となっている。3.ヒト白血球細胞HL60にレチノール酸を与えると顆粒球状に分化し、同時に増殖を停止するが、この時核のDNAの複製停止に先だちミトコンドリアDNAの複製が停止した。そして次に核にコードされたミトコンドリアタン白質の転写が停止した。またこれらの蛋白質(H^+-ATP合成酵素β、テトクロウムC_1、ピルビン酸脱水素酵素α)をコードする遺伝子の上流に共通のエンハンサー構造があることを見出した。
基質非結合状態のプロトン輸送性ピロホスファターゼのＸ線結晶解析と作動機構の解明

プロトン輸送性ピロホスファターゼは、ピロリン酸を分解することによって得られたエネルギーを利用し、膜を横切ったプロトンの輸送を行なう膜タンパク質である。本研究ではピロリン酸を結合していない状態の構造をX線結晶解析によって明らかにするため、植物の液胞膜から精製した酵素を用いてピロリン酸を加えない条件下で結晶化を行なった。結晶は、ピロリン酸を結合していない状態の酵素を特異的に認識する抗体断片を用いることにより、抗体断片が酵素に結合した複合体で得られた。最初の結晶はX線を4.1Å分解能まで反射した。結晶化条件とクライオ条件を最適化することにより、得られる分解能を3.2Åまで向上させることに成功した。(1)基質非結合状態におけるH+-PPaseとFabの複合体の結晶化。計画がスタートした当初に得られていた結晶は、分子置換法による構造決定は可能であったが、得られた分解能は4.1Å程度であった。現在までに、結晶化条件とクライオ条件の検討を行なったところ、分解能は3.2Å程度まで改善された。しかしながら、水分子が見える程度の分解能を目標としており、それを目指して今後も条件検討を進める。(2)基質非結合状態におけるH+-PPase単体の結晶化。これまでのところ、計画以前から得られていたものよりも良質の結晶を得るまでには至っていない。そのため、構造的な視点から結晶化条件に対するヒントを得るため、H+-PPaseと同じグループに属するNa+-PPaseのこれまでに報告されている基質非結合状態の結晶構造を参考にし、H+-PPaseの基質非結合状態における構造をホモロジーモデリングした。得られた構造からは、基質非結合状態では基質結合部位を覆うループが不安定な構造をとり、基質結合部位には2個の金属イオンが結合すると推測された。それらを考慮し、またNa+-PPaseの結晶化条件を参考にしつつ、今後も結晶化条件のスクリーニングを進める。一方、ホモロジーモデリングにより得られた構造を、これまでに決定された構造と比較することにより、反応サイクルの推測が可能になった。これまでには知られていない、まったく新規の基質分解と共役したイオン輸送のメカニズムの存在が明らかとなった。(3)発現系の構築。高等植物のH+-PPaseに加え、マラリア原虫等の病原性原生動物のH+-PPaseや高熱性細菌等のNa+-PPaseをX線結晶解析の対象とするため、大量発現系の構築を目指している。重要なものを幾つか選び、遺伝子合成を行った。プロトン輸送性ピロホスファターゼ(H+-PPase)は膜蛋白質であり、ピロ燐酸(PPi)を分解し、H+の能動輸送を行なうイオンポンプである。植物に広く分布し、真正細菌や古細菌の一部、マラリア原虫等の寄生性原生動物に存在する。高等植物では主に液胞膜に局在し、液胞型ATPaseと共に液胞内腔を酸性化し、液胞膜の二次輸送体にH+駆動力を供給する。そのため、H+-PPaseは液胞における物質の輸送と蓄積機能を支える重要な一次能動輸送体と言える。加えて、細胞代謝の副産物として生じる細胞質PPiの分解においても主要な役割を果たすことが最近になり明らかにされている。H+-PPaseの分子構造は分子量約8万の単一ポリペプチドがホモ2量体を形成し、単量体は16本の膜貫通ヘリックスを含む。本研究はX線結晶解析によるH+-PPaseの原子構造の解明と、それに基づく作動機構の理解を目指している。これまでに、高等植物由来のH+-PPaseについて、数種の基質アナログ結合状態の構造決定に成功している。また、基質非結合状態について、抗体断片との複合体として4.1Å分解能の構造を、H+-PPase単体としては3.5Åの回折点を示す結晶を得ている。平成24年度は主に、前者の複合体について、結晶化条件とクライオ条件の検討を行なった。その結果、分解能は3.5Åまで改善された。しかしながら、目標とする水が見える程度の分解能に達するまでには至っていない。今後も引き続き検討が必要である。当初の予定通りに実験計画を遂行しており、Fabとの複合体については目標とする分解能に到達するには至っていないものの、分解能は着実に改善されている。平成25年度からは、高等植物以外のH+-PPaseあるいは同族のNa+-PPaseを研究対象とするため、発現系を構築する計画である。平成25年度に行なう予定の実験に向けての準備も順当に行なわれており、いくつかの候補を選び、遺伝子の合成を行なった。現在の研究方針は適切であり、実験計画は順調に遂行されている。このまま推進すれば良いと考えられる。
ヒトの言語ー運動連関のメカニズムの磁気刺激を用いた解明および機能回復への応用

ヒトの一次運動野を刺激すると同時に言語活動を賦活し左右大脳半球優位性を明らかにする手法を確立した。左利き被験者においてこの方法を用いたところ、左利き被験者においては言語中枢が左側優位、右側優位、両側優位のものが混在していることが判明した。これは幼少時には右半球優位であったものが、利き手交換により大脳半球の活動に影響を与え優位性が変化したものであると考えられた。脳神経外科患者においてこの手法による大脳半球優位性を評価し、同じ患者でアミタールテストによる大脳半球優位性を評価し両者を比較したところ、良い相関が得られた。これらの結果から本法はヒトの大脳半球優位性を判定できる新しい手法と考えられた。昨年明らかにした左利き被験者における本法の有用性と、利き手交換の影響、並びに患者における本法の信頼性を中心に、九州地区および全国学会において講演を行った。ヒトの一次運動野を刺激すると同時に言語活動を賦活し左右大脳半球優位性を明らかにする手法を確立している。左利き被験者においてこの言語性優位半球優位性を明らかにすることを試みた。優位半球の賦活により同側の手の運動野の興奮性が上昇するが、左利き被験者においては言語中枢が左側優位、右側優位、両側優位のものが混在していることが判明した。これは幼少時には右半球優位であったものが、利き手交換により大脳半球の活動に影響を与え優位性が変化すると考えられた。経頭蓋磁気刺激法、針も刺さず、電極も付けずに脳を操る手法。本研究は、正に活動している脳神経系機能を解明する生理学的手法である。本研究では本法を応用し、更に一見関連がないと思われる言語と手の運動との解剖学的線維連絡、機能的結合を明らかにしてきた。運動性、感覚性言語野を刺激しこれらの賦活あるいは抑制と手の運動野を刺激した場合の運動電位の変化を捉えた。これを応用することにより、左利き健常人における左右大脳半球優位性は、右利きとは異なり右半球に優位性が多く存在していることが判明した。これは従来言われている結果と異なっていたが、その理由としてこの優位性には利き手の矯正等、手の運動使用が影響していることが考えられた。次にヒトの言語活動における重要な役割を果たす顔面運動について検討した。健常成人において側頭部前頭部皮下を走行する顔面神経の走行について、末梢神経電気刺激装置を用いてその走行を明らかにし、脳動脈瘤における前頭側頭開頭術における顔面神経温存法を確立した。次に顔面運動野、顔面神経、顔面筋の連携による顔面運動について検討した。経頭蓋磁気刺激法および経頭蓋電気刺激法により大脳半球一次運動野内の顔面運動野を刺激後、顔面筋から運動電位を記録し頭皮上から対応する領域を明らかにした。この結果に基づいて小脳橋角部疾患に対する手術において、本機能をモニタリングすることにより、機能を温存する方法を確立した。これにより手術後の顔面麻痺、言語障害を軽減し、手術後のリハビリテーションを促進することに貢献した。脳神経外科学確立した手法を用いて左利き被験者について検討し、左利き被験者の大脳半球優位性が幼少時の利き手交換により変化することが示唆された。脳神経外科患者において、本法とアミタールテストを比較し良い相関が得られた現在左右側言語中枢の刺激を行い相互作用についての知見が期待されており、おおむね次年度の予定通り進展している。確立した手法を用いて左利き被験者について検討した。左利き被験者の大脳半球優位性が幼少時の利き手交換により変化することが示唆された。現在言語中枢の刺激による大脳半球の活動について検討中であり、おおむね初年度の予定通り進展している。健常成人および失語症患者に対し運動性言語中枢、感覚性言語中枢を刺激し、左右大脳半球言語中枢の相互作用を明らかにする。これを機能画像においても証明を試み、種々のタスクによる脳の賦活、大脳半球優位性を検討し比較する。これらの結果を学会報告、論文発表する予定である。健常成人に対し運動性言語中枢、感覚性言語中枢を刺激し、促通効果の得られる刺激頻度、強度を明らかにする。その結果を踏まえて脳神経外科患者においても検討する予定である。各種試薬、学会出張費用、英文校正料などを予定している。