hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
身体像測定法としての身体描画法の開発と適用

今年度は身体描画法の量的指標以外のその他の指標を深層心理学的に分析する活用法について検討した。個別の事例を取り上げ、身体描画法により得られた描画の質的な分析結果と被検者との面接により聴取された情報との対応・一致の程度を吟味し、身体描画に表出した被検者の身体に対する感情や態度等を検討した。事例を挙げると、不安定な対人関係の経験があり、病的痩せにより無月経となり、婦人科の処方薬を飲んで月経を起こさせている被検者Aさんは、大きな頭、細く長い首、異常に長い脚を描いた。面接では「お腹が空いた感じがわからない。」「私は時間で食事をしている。」と話した。この事例は、自然に感じられる空腹感がわからず、大きな頭で食事をコントロールしているが、頭を支える首が細いために頭がグラグラとして、頭のコントロールも不安定になりがちなAさんの様子が描画に反映されたものと考察された。また、体重増加の懸念や痩身願望が強く、大食や自発嘔吐を繰り返すという非常に不安定な摂食態度を持つBさんは身体の輪郭が曖昧で、足部(正面画、横向き画の両方)と腕および手(横向き画)がない不完全な身体を描いた。面接では、「食べちゃいけない、という反動で食べちゃう。」「夜にたくさん食べてしまい、これではいけない、吐かなきゃ、と毎日のように吐くこともある。」と話した。先行研究より、腕なしは不適応感や無力感を表わし、足なしは自立心の欠如を表わすとされるが、Bさんの描画はBさんの摂食に対する不適応感や食欲に抵抗する無力感、摂食コントロールの自律性の無さを表わすものと推察された。このような事例より、描画には被検者が意識しているか、否かに関わらず、被検者の身体に対する感情や態度などの内面が表出していることが認められた。これにより一般的に身体像を測定するために身体描画法を用いるだけではなく、言語による自己表現能力が低い生徒や学生を理解するための方法、あるいは恣意的な回答を避けるための身体像測定方法として身体描画法が適用可能であることが確認された。摂食障害患者には身体像の歪み(身体サイズの認知に片寄りがある)が認められることは先行研究により明らかとなっている。また筆者が考案した身体描画法により抽出された身体像の歪み量は摂食障害傾向と関連があることが見出された。そこで健常者における身体像の歪み量と摂食態度との関連の有無を身体満足度や身体関心度など身体に纏わる概念との関連を考慮して検討した。対象は18歳23歳の青年期女性であった。本人の写真を基準としたときの自画像の描画の身体サイズを比率で表して身体像の歪みの指標として用いた。身体像の歪み量と摂食障害傾向を調べるEAT-26の得点、および身体満足度、身体関心度を調べる質問紙の得点を132名のデータを基に相関分析を行った。その結果、大腿幅や腰幅などを中心とした身体の幅の歪みと身体満足度が有意な負の相関を示し(相関係数;-0.35-0.20)、身体満足度が身体関心度と有意な負の相関関係にあり(相関係数;-0.62)、また身体関心度が摂食障害傾向と有意な正の相関がある(相関係数;0.34)ことが認められた。これらを総合的に考察すると、身体に対して満足度が低い対象は大腿を中心とする身体幅の認知を過大評価してしまい、実際よりも大きく描く傾向が窺われた。そして身体に対する不満感は、身体に対する強い関心を生み、それが摂食態度の混乱を招いているのではないかと推察される。ここで摂食障害患者の場合には摂食態度と身体像の歪みが直接的に関係していることと比較すると、健常者の場合には身体像の歪みと摂食態度とは直接的に関係しているのではなく、自身の体に対する低い満足度が幅の認知を過大評価させ、また低い満足度が体への関心度を強くさせ、それが摂食態度の混乱に繋がるという間接的な関係にあることが推察された。描画テストは描画者の情報を豊富に内包していると評価される反面で、テスト結果である描画は不安定で容易に変化する側面があると先行研究で指摘されている。そこで身体描画法の再検査信頼性が立証されるかどうかを検討した。同一の被検者21名に2週間の間隔をおいて、同一の手続きにより身体描画法を実施し、得られた2組の描画について描画の大きさ、描画の身体部位のサイズ、描画の偏差合計、用紙上の描画位置、描線の特徴、描画の形態上の特徴について分析、検討した〔偏差合計:身体部位11箇所について写真を基準にしたときの描画の偏差を算出し、それを加算したものを偏差合計として身体像の認知の歪みの指標として用いた〕。その結果、全42項目中38項目において1回目の描画と2回目の描画に差異が認められなかった。それに加え、ほとんどの相関係数が0.5、あるいはそれ以上の高い係数を示した。これは描写部分を量的に比較した場合、バウムテストや風景構成法などの他の描画テストに比して大変安定していると結論づけられる。身体描画法は描画を描く前に写真撮影を行い、その後「先ほどの写真撮影を思い浮かべて、自分のからだの全身をできるだけ正確に描いてください。」という教示により実施される。それゆえ自分のからだに対する現実的な検討力を引き出す設定となり、体という媒体があるために量化的な表出は安定しているものと考えられる。

これより身体描画法による描画の安定性は確保されるのではないかと考察され、身体描画法の再検査信頼性は立証されたと結論づけられる。今年度は身体描画法の量的指標以外のその他の指標を深層心理学的に分析する活用法について検討した。個別の事例を取り上げ、身体描画法により得られた描画の質的な分析結果と被検者との面接により聴取された情報との対応・一致の程度を吟味し、身体描画に表出した被検者の身体に対する感情や態度等を検討した。事例を挙げると、不安定な対人関係の経験があり、病的痩せにより無月経となり、婦人科の処方薬を飲んで月経を起こさせている被検者Aさんは、大きな頭、細く長い首、異常に長い脚を描いた。面接では「お腹が空いた感じがわからない。」「私は時間で食事をしている。」と話した。この事例は、自然に感じられる空腹感がわからず、大きな頭で食事をコントロールしているが、頭を支える首が細いために頭がグラグラとして、頭のコントロールも不安定になりがちなAさんの様子が描画に反映されたものと考察された。また、体重増加の懸念や痩身願望が強く、大食や自発嘔吐を繰り返すという非常に不安定な摂食態度を持つBさんは身体の輪郭が曖昧で、足部(正面画、横向き画の両方)と腕および手(横向き画)がない不完全な身体を描いた。面接では、「食べちゃいけない、という反動で食べちゃう。」「夜にたくさん食べてしまい、これではいけない、吐かなきゃ、と毎日のように吐くこともある。」と話した。先行研究より、腕なしは不適応感や無力感を表わし、足なしは自立心の欠如を表わすとされるが、Bさんの描画はBさんの摂食に対する不適応感や食欲に抵抗する無力感、摂食コントロールの自律性の無さを表わすものと推察された。このような事例より、描画には被検者が意識しているか、否かに関わらず、被検者の身体に対する感情や態度などの内面が表出していることが認められた。これにより一般的に身体像を測定するために身体描画法を用いるだけではなく、言語による自己表現能力が低い生徒や学生を理解するための方法、あるいは恣意的な回答を避けるための身体像測定方法として身体描画法が適用可能であることが確認された。
子宮内膜症からの発癌機序に寄与する候補分子の網羅的検索およびその機能解析

発生部位の異なる(卵巣、子宮頸部、子宮内膜)明細胞腺癌およびそれらと類似した形態をなす妊娠時子宮内膜においてHNF1Bは高発現していたことから、HNF1Bが明細胞腺癌組織の形態を規定する因子であることが示唆された。また、卵巣明細胞腺癌におけるHNF1B発現量はその予後と比例していたことから、HNF1Bは明細胞腺癌における組織型特異的マーカーのみならずgrade分類マーカーとして利用できることが明らかとなった。明細胞腺癌の形態、および細胞質内にグリコーゲンを貯留するという病理組織学的特性が妊娠時の子宮内膜と類似するという事実は、Silverbergらによって提唱されて以来異論の余地のないところである.そこで、明細胞腺癌の組織型特異的マーカーである転写因子HNF1Bの子宮内膜における発現を免疫組織化学的に検索した.HNF1Bは非妊娠時子宮内膜ではほとんど発現が認められなかったが、妊娠子宮内膜の核内に高発現していることが明らかとなった。従って、HCGがHNF1Bの発現機構における上流因子であると予想された。HCGに対する受容体LHCGRの機能が正常に働くことが確認されている、高分化型類内膜腺癌由来培養細胞株Ishikawa株にHCG、estradiolおよびprogesteroneを曝露した結果、HCG曝露時のみにおいて核内HNF1Bおよび細胞質内グリコーゲンの発現増加を認め、さらにそれがHCG濃度依存的であることが確認された。以上のような反応は、Ishikawa株の替わりに低分化型類内膜腺癌由来培養細胞株SNG-S株を用いた場合には認められなかった。以上の研究成果から、HCG/LHCGRシグナル伝達系がHNF1Bの発現制御に影響を及ぼしていること、その結果としてのHNF1B高発現が明細胞腺癌と妊娠子宮内膜の形態的、病理組織学的特性を決定している可能性が高いことが明らかとなった。すなわち、HNF1Bが高発現することによって子宮内膜および内膜症細胞が明細胞腺癌の病理組織学的特性を獲得し得ることが示唆された。当該機関においてわれわれは、DNA microarrav、real time PCRの手法をもちいて卵巣癌中でも明細胞腺癌における核酸レベルにおけるHNF1Bの特異的な高発現を示してきた。さらに、免疫組織化学および免疫細胞化学的手法を用いてタンパクレベルにおいても明細胞腺癌におけるHNF1Bの特異的な高発現を確認し、前述のデータを支持する結論を得た。以上の事実は免疫組織化学によって卵巣癌のみならず、子宮頸部腺癌、子宮体癌においても確認された。卵巣明細胞腺癌の組織は妊娠時の子宮内膜と形態学的に類似することが一般的に知られており、妊娠時の子宮内膜においてもHNF1Bは高発現していることが明らかになった。このことから、HNF1Bが卵巣明細胞腺癌組織の形態を規定する因子であることが示唆された。また、卵巣明細胞腺癌をHNF1B高発現群、中発現群、低発現群に分類するとそれぞれ群の生存率および無病生存率は、高発現群が最も良好で、続いて中発現群となり、低発現群がもっとも不良となった!以上の結果から、HNF1Bが単に明細胞腺癌における組織型特異的マーカーとして利用できるばかりでなく、明細胞腺癌におけるgrade分類マーカーとして利用できることが明らかとなった。明細胞腺癌は、grade分類ができないことがその治療や予後予想を困難にしてきた経緯があり、大きな意義を持つといえる。また、卵巣癌細胞におけるHNF1B産生能が細胞の悪性度を規定することから、HNF1Bが卵巣明細胞腺癌の組織分化度を示している可能性が示唆された。
多文化世界における市民意識の動態-南北朝鮮の市民意識-

北朝鮮政治体制を「多元主義」の視角により分析し、学術雑誌に論文を投稿した。これまで同国の「多元化」や「多元主義」について真正面から検証が行なわれることはなかった。極端な独裁体制下では「多元主義」は不在であり、議論する必要さえないとの暗黙の了解ないし無意識の無関心があったことによる。しかしJ.Linzが指摘するように非民主的体制の分析にも「多元主義」の観点は看過できない。さらに、立法府・国会にあたる最高人民会議の機能について歴史的に検証し、学会発表を行なった。ここでは脱北者証言で得られた情報を新たに公開された法律で裏づけするという作業に拠った。また、外交交渉史の側面のみが注目されてきた日朝関係について、北朝鮮が日本人観光客をどのように受け入れてきたかという新たな観点から分析を行い学術雑誌に論文を投稿した。新たに発掘した日朝両国の資料を多用し、同国においては観光政策というものが政治政策に従属したものであることを確認した。さらに、金正日政権下の北朝鮮政治体制で重視されている「先軍」概念に着目し、金日成統治下で「唯一イデオロギー」として認知されてきた「主体思想」、「主体」概念と関連性を解明しつつその本質を探った論文を学術雑誌に投稿した。近年では「先軍」が単に軍重視という意味のみならず「主体」と双璧を成す象徴的な概念に昇華したことを明らかにし、その背景に第二次後継者問題があるとの仮説を提示した。平成17年度は、これまでに採り上げられることの少なかった北朝鮮住民の意識について、『労働新聞』等の第一次資料の検討をもとに、脱北者に対する聞き取り調査を行いつつ、その結果を学会の場で発表した。また、金日成死去後の北朝鮮政治体制について、住民社会の動態も交えて考察した論文を共著出版した。ここでは「苦難の行軍」と呼ばれる未曾有の経済難から「強盛大国」という新たな経済建設ビジョンを打ち立てた同国の変容ぶりを取り扱った。さらに、今後の研究の前提となる先行研究の整理に関する報告を学術雑誌に掲載した。ここでは従来の北朝鮮政治体制研究における問題点を挙げ、住民社会・意識の視点を織り交ぜながらいかに客観的な検証ができるかにつき、伝統的な全体主義論とともにJ.リンスの「スルタン主義」概念を導入することの意義について試論を行った。そのほか、今年度の研究について所属研究機関の報告書に三篇の論文を提出したほか、二回の国際シンポジウムで口頭発表を行った。テーマは北朝鮮社会において「多元主義」が抑制されてきた歴史的過程を振り返ったものや、現在キーワードとなっている「先軍政治」概念の検証を中心とした。いずれの成果も、特定の政治的社会的指導者層を主たる分析対象としてきた従来型研究に対する一つの問題提起であり、日本にとって隣国である北朝鮮の住民がいかなる政治意識を持っているかを把握することは北東アジア地域の平和と安定という観点から重要であるとの前提に立って行ったものである。
モデルベース的意思決定を可能にする神経回路

推移的推論(三段論法)機能の神経メカニズムを明らかにするために、推論課題遂行中のサル前頭前野と大脳基底核(尾状核)から神経活動を記録した。前頭前野には、尾状核とは異なり、カテゴリー形成メカニズムがあり、これが推移的推論を可能にしていることを明らかにした。また、ウイルスベクターを使って人工受容体(DREADDs)を発現させることにより、前頭前野から尾状核への情報伝達を遮断する実験も行った。この神経回路の選択的遮断により、長期的報酬予測を行う能力が低下することが明らかになった。意思決定は、事象と報酬の経験的関係を客観的・確率的に結び付けて価値を計算するモデルフリーシステムと、直接経験によって獲得された知識をカテゴリーや論理によって結びつけ、直接経験していない価値の予測を可能にするモデルベースシステムの協調と競合によって成り立っている。本提案では、意思決定課題を訓練したサルの前頭前野ネットワークに複数の電極を刺入し、神経活動を記録、相互作用の解析を行うことにより、前頭前野においてどのように内部モデルがコードされ、それがどのように脳内シミュレーションに使われるのかを明らかにする。同様の解析を前頭前野ネットワークと大脳基底核ネットワークの間で行うことにより、2つのシステムの間の相互作用を調べる。平成23年度は、以下にあげる成果を得た。1.推移的推論課題を訓練したサルの前頭前野外側部と大脳基底核線条体それぞれに、単一ニューロン活動と局所場電位が記録できる電極を刺入し、同時記録を行った。単一ニューロン活動の記録から、推移的推論に関わる前頭前野と大脳基底核の機能的役割の違いを明らかにするとともに、局所場電位の相関解析・因果分析から、報酬予測に関する情報は、前頭前野外側部から大脳基底核線条体に伝えられていることを明らかにした。この成果は、北米神経科学学会や日本心理学会大会や、各種シンポジウム・講演で発表した。2.報酬の自由選択vs.強制選択課題については、昨年度中にサルの訓練が完了し、課題遂行中の単一ニューロン活動と局所場電位の記録を始めた。ここでは、前頭前野外側部から最大合計128チャンネルの同時記録を行った。平成25年度は、推論課題遂行中のサルからの単一ニューロン記録実験の結果をまとめ、Journal of Neuroscienceに発表した(Pan et al., 2014)。モデルフリー機能は、経験したことだけを再現する機能であり、モデルベース機能は経験に基づきながらも、経験によって得られた情報を組み合わせることにより、全く新しい環境にも柔軟に適応できる機能であると定義されてきた。これまで、前頭前野外側部がモデルベース機能を、大脳基底核がモデルフリー機能を担っていると考えられてきた。確かに、推移的推論機能は前頭前野ニューロンには見られるが、大脳基底核(特に線条体)ニューロンには見られなかった。しかし、大脳基底核線条体ニューロンは、選言的推論(exclusive or)機能を持つことが示され、上で定義されたようなモデルベースvs.モデルフリーという機能の違いで、前頭前野機能と大脳基底核機能を説明し得るという考え方には、修正が必要であることが、示唆された。さらに、意思決定に関わり、前頭前野の情報と大脳基底核の情報が、どのように統合されるかを調べるために、ウイルスベクターの2重感染実験を開始した。サルの前頭前野に、Cre依存的な人工受容体(DREADD)を発現させるウイルスベクターを感染させ、その投射先である大脳基底核線条体に、逆行性に軸索をさかのぼってCreを運ぶ別のウイルスベクターを感染させた。その結果、前頭前野にCre依存的にDREADDが発現した証拠となるマーカー(RFP)が発現したことを確認した。これまで、マカクザルでこのような2重感染法が有効に働くことを示した報告はない。今後は、発現したDREADDに作用し、この回路の活動を選択的に遮断する薬物を使用して、前頭前野ー大脳基底核回路機能が情報統合に果たす役割を明らかにする予定である。モデルフリー機能は、経験したことを再現する機能であり、モデルベース機能は経験に基づきながらも、それらを組み合わせることにより、全く新しい環境にも柔軟に適応できる機能であると定義されてきた。平成25年度までに、推論課題遂行中のサル前頭前野外側部、並びに大脳基底核線条体から、単一ニューロン活動の記録を行い、上記仮説を実証的に検証するとともに、前頭前野と線条体の本質的違いは、情報の抽象化にあるという仮説を提唱した。平成26年度は、この仮説を検証するための研究を行い、前頭前野外側部ニューロンは、刺激情報のカテゴリー化を行うことにより、カテゴリー推論を可能にしていることを見出した。このようなカテゴリー化は、線条体には見られなかった。加えて、このような機能的な違いのある報酬の予測に関わる2つの領域が、解剖学的連結を介して、どのように相互作用しているのかを調べるために、ウイルスベクターを使って2つの領域間の情報伝達を遮断するための実験を始めた。平成26年度は、サルの前頭前野に、Cre依存的な人工受容体(DREADD)を発現させるAAVベクターを感染させ、その投射先である線条体に、逆行性に軸索をさかのぼってCreを運ぶ別のレンチウイルスベクターを感染させた。その結果、前頭前野にCre依存的にDREADDが発現した証拠となるマーカー(RFP)が発現したことを確認した(論文投稿中)。

今回使用するDREADD(Gタンパク質結合受容体)は、特定のリガンド(クロザピン-N-オキシド(CNO))を静脈ないしは腹腔より全身投与することによって、その働きをコントロールできるものであり、セッション前に当該薬物を投与することで、課題遂行中にその経路の活動を抑制し続けることができると考えられる。我々はこれまで、経験したことを再現するモデルフリー機能と、経験に基づきながらも、それらを組み合わせることにより、全く新しい環境にも柔軟に適応できるモデルベース機能が、脳でどのように実現されているかについて調べてきた。そのために、推論課題遂行中のサル前頭前野外側部、並びに大脳基底核線条体から、単一ニューロン活動の記録を行い、前者が大脳基底核線条体、後者が前頭前野で実現されていることを明らかにした。平成27年度は、このような機能的な違いのある2つの領域が、どのように相互作用しているのかを調べるために、ウイルスベクターの2重感染を使って2つの領域間の情報伝達を遮断するための実験を行った。この実験では、サルの前頭前野に、Cre依存的な人工受容体(DREADD)を発現させるAAVウイルスベクターを感染させ、その投射先である大脳基底核線条体に、逆行性に軸索をさかのぼってCreを運ぶ別のレンチウイルスベクターを感染させた。その結果、前頭前野にCre依存的にDREADDが発現した証拠となるマーカー(RFP)が発現したことを確認した(Oguchi et al., 2015)。DREADDを発現したサルが、非対称性報酬遅延反応課題を遂行している最中に、クロザピン-N-オキシド(CNO)を静脈から全身投与することにより、前頭前野外側部-線条体回路の活動を選択的に遮断し、その行動の変化を調べるとともに、神経活動の記録を行った。行動的には、CNOの投与は、短期記憶には影響が見られなかったが、特に、小報酬試行での正答率に有意な低下が見られた。運動自体には変化が見られなかったことから、この回路が遮断されることによって、報酬予測に伴う行動の適切な制御ができなくなったと考えられる。神経活動の記録からも、このような結論が裏付けられた。推移的推論(三段論法)機能の神経メカニズムを明らかにするために、推論課題遂行中のサル前頭前野と大脳基底核(尾状核)から神経活動を記録した。前頭前野には、尾状核とは異なり、カテゴリー形成メカニズムがあり、これが推移的推論を可能にしていることを明らかにした。また、ウイルスベクターを使って人工受容体(DREADDs)を発現させることにより、前頭前野から尾状核への情報伝達を遮断する実験も行った。この神経回路の選択的遮断により、長期的報酬予測を行う能力が低下することが明らかになった。私たちの意思決定は、事象と報酬の経験的関係を客観的・確率的に結び付けて価値を計算するモデルフリーシステムと、直接経験によって形成された連合をカテゴリーや論理によって結びつけ、直接経験していない価値の予測を可能にするモデルベースシステムの協調と競合によって成り立っている。特に、ヒトを特徴づける複雑な思考能力は、モデルベースシステムが持つ内部モデルを使ったシミュレーション能力にあると考えられる。この機能の理解は、ヒトの意思決定や思考の特徴の理解につながり、ひいては人間の科学的理解にもつながる。
痒み治療薬の開発に向けたGPR83と痒み伝達分子の役割

末梢組織における痒み伝達機構は解明されていることから、塗布薬としての痒み治療薬は一般的に普及している。しかしながら、アトピー性皮膚炎といった、難治で全身性の痒みに対する有効な治療薬がないことが、臨床における問題点である。そこで、中枢神経系に作用する痒み治療薬の開発が望まれていることから、中枢神経系における痒み関連分子について研究がされているが、病態との機能的関連性の全容は明らかとされていない。そこで、本研究により、痒み伝達経路の一端を解明する。
農漁業関連施設の近代化に公的機関の標準仕様が及ぼした影響について　愛媛県を例に

本研究は、特に第二次世界大戦前に公的機関(主に農林省、農商務省)が示した標準的な建築仕様が農業関係の施設にどのような影響を与えたのかを明らかにすることで、標準仕様に則って建てられた類似施設を文化財とする上で、どの部分を見れば差別化や特徴を見出すことができるのかということ目的として取り組んできた。特徴を浮き立たせる上で、類似施設の場合は、一見それを把握するのが難しい。近隣のものと比較検討することで一定の違いは出せるが、ビルディングタイプが同じというだけでの比較にはあまり意味があるとはいえない。また、それは相互比較による違いであって、ある一つの基準、或いは総体に対して、どのような特徴を持つかということにはならない。その意味で、本研究で実施した、農業倉庫、稚蚕施設、製茶工場は、標準的な仕様をどのようにして踏襲するか、標準仕様に記載のない部分はどのように対応するのか、地域性はどの部分に表れやすいのかといった点を示すことができた。このことは、文化財としての一定の評価を考えたときには、有用な視点であると考えている。柑橘貯蔵庫では、地域には群として現存し、かつて地域で仕様を研究していたとされながらもその詳細は不明であった。そのため、現存物からある程度の共通仕様を把握する作業を行い、それによって一定の基準を見出す作業も実施した。農林省茶業試験場の審査室では、建築技術者でない人物が設計を主体的に行い、敷地内の他施設の図面を真似て、図面を描いていた可能性を指摘し、このことで試験研究機関の小規模施設は、標準的な仕様に加えて、構法や部材寸法等については敷地内の他施設との関係を見ることで違った視点での特徴を見出せそうだという可能性を示唆することができた。こうした点から、研究としては一定の成果を得られたと考えている。特に第二次世界大戦前に公的機関(主に農林省、農商務省を対象)が示した標準仕様が農業関係の施設にどのような影響を与えたのか、標準仕様に則って建てられた類似するものを文化財とするときに、どの部分を見れば差別化できる可能性があり、それを物件個別の特徴や価値として浮き彫りにできるかということを目的として本研究を進めている。初年度は予定では用途の違う複数の建物を調査し、並列的に分析を試みる予定であったが、昭和前期の稚蚕共同施設と農業倉庫を複数棟調べる方向とし、一定の新たな知見を得ることができた。まず、標準仕様では基準寸法は田舎間や尺貫法のきりのいい寸法で示され、計画ではこの点は特に注目していなかった。調査を進めると、畳のある稚蚕共同施設では京間、農業倉庫では田舎間が使用されていた。特に稚蚕共同施設は廊下は田舎間で、基準寸法が混在していた。この点が当地で標準的か否かを知るため、同時代の住宅2例の調査も実施した。当地で普段使用する畳に注目すれば、標準仕様でも地域性が謳える可能性があることが示唆された。この点は、これから更に検分する予定である。稚蚕共同施設のように仕様が大雑把な例は、細かく検証することで違いが浮き立ってくることは想定していた。その中で農業倉庫の標準仕様で判明したことは、比較的仕様が細かく示される場合は庇や軒など細かな部位による選択肢が増加するため、立地環境と建物配置と方位との関係で、標準仕様の選択方法は多岐に渡ることになり、一定の違いが生じてくることがわかってきた。この点も引き続き進めて行く。初年度の成果として、似たような外観を持つ建物同士を個別にどのように文化財として価値付け、評価していくかということを想定したときには、本研究による成果はその一助とすることができる重要な意義を示しつつあるものと考えている。実測調査を伴う研究の性質上、初年度から分析を進めるというよりは、初年度は実測調査を進めて次年度以降に分析しやすくなるよう事例を蓄積していくことを想定していたので、特に基準寸法の用い方に関して一定の知見を得られたことは、計画以上に進展していると考えている。アポイントの問題も難しいことが想定されていたが、現地で調整をしてくれる協力者もおり、この点もスムーズに進んだことの大きな要因である。特に第二次世界大戦前に公的機関(主に農林省、農商務省を対象)が示した標準仕様が農業関係の施設にどのように影響を与えたのか、標準仕様に即して建てられた類似する農業関係の施設を文化財とするときに、どのポイントを見れば差別化が可能で、それを個別の特徴や価値として浮き立たせることができるのかということを目的として本研究を進めている。本年度は、初年度に課題として残された基準寸法の問題を主な視点として、現地にて明治後期の住宅の調査を行った。また、農林省から経済的単位工場という標準仕様の示されている茶工場について、奈良県の例の実地調査を行った。並行して、愛媛県下の船倉群、納屋群等の現地調査を実施した。分析検討としては、農業倉庫の標準仕様には同一人物によるものが複数確認されたため、複数の仕様の記述内容の共通点、相違点を明らかとし、相違点の理由について比較検討を実施した。また、奈良県の茶工場の例では、基準寸法と標準仕様との関係性について分析を行い、その中で与条件となる敷地条件が示される中で、標準仕様に即すためにどのように配置を工夫するのかという点について一定の成果を得ることができた。

さらに、かつて現地調査した柑橘貯蔵庫群の再検証を行い、どのような点が仕様として共通するのかということについて、検討を実施した。2年目の成果として、類似する構成要素を持つ農業関係施設の差別化において、敷地との関係は施設配置の工夫を把握する大きな要素となることを示唆することができ、文化財として価値を評価する際に、成果はその一助とすることができる視点を例示できつつあるものと考えている。2年目は現地調査と文献資料の検討、過去の調査の再検証を並行して実施した。住宅を例とした基準寸法については検討中だが、その過程で近世から近代への封建的な性格の間取りへの影響とその展開の一例を把握することができたことは、愛媛県下では成果の少ない住宅史研究の側面では貴重な例となった。本年度も、農業関係の施設は類似する施設が多く、標準仕様に示されている内容に即している施設が多いので、その中で特徴を把握することは難しいと考えていた。けれども、与えられた敷地にどう工夫して配置するのかという点で、標準仕様に即しながらもそのことに特徴を見いだせるということが示唆されたことは、期待以上の成果であり、順調な進捗であると考えている。前年に続き難航が予測された現地でのアポイントについては、現地で調整を行っていただける協力者もおり、日程調整、物件選定も比較的スムーズに進められている。本研究は、特に第二次世界大戦前に公的機関(主に農林省、農商務省)が示した標準的な建築仕様が農業関係の施設にどのような影響を与えたのかを明らかにすることで、標準仕様に則って建てられた類似施設を文化財とする上で、どの部分を見れば差別化や特徴を見出すことができるのかということ目的として取り組んできた。特徴を浮き立たせる上で、類似施設の場合は、一見それを把握するのが難しい。近隣のものと比較検討することで一定の違いは出せるが、ビルディングタイプが同じというだけでの比較にはあまり意味があるとはいえない。また、それは相互比較による違いであって、ある一つの基準、或いは総体に対して、どのような特徴を持つかということにはならない。その意味で、本研究で実施した、農業倉庫、稚蚕施設、製茶工場は、標準的な仕様をどのようにして踏襲するか、標準仕様に記載のない部分はどのように対応するのか、地域性はどの部分に表れやすいのかといった点を示すことができた。このことは、文化財としての一定の評価を考えたときには、有用な視点であると考えている。柑橘貯蔵庫では、地域には群として現存し、かつて地域で仕様を研究していたとされながらもその詳細は不明であった。そのため、現存物からある程度の共通仕様を把握する作業を行い、それによって一定の基準を見出す作業も実施した。農林省茶業試験場の審査室では、建築技術者でない人物が設計を主体的に行い、敷地内の他施設の図面を真似て、図面を描いていた可能性を指摘し、このことで試験研究機関の小規模施設は、標準的な仕様に加えて、構法や部材寸法等については敷地内の他施設との関係を見ることで違った視点での特徴を見出せそうだという可能性を示唆することができた。こうした点から、研究としては一定の成果を得られたと考えている。まだ漁業関係の施設に取り組んでいないので、船倉の標準仕様は確認できていないが、数多く現存するので、このにも注目していきたいと考えている。また、農漁業施設の標準仕様は、すでに存在したものの事例の収集から整備されていったという背景があり、みかん小屋などはその過程の資料が確認できている。
心臓発生における細胞内イノシトール三リン酸-カルシウム系の役割

1.1型・2型IP_3RDKOと同腹の正常対照において、胎仔心臓全体のマーカーであるNkx2.5,MLC2a, MLC2v,右心室のマーカーであるdHAND,左心室のマーカーであるeHAND,房室管のマーカーであるTbx2の発現を比較した。Digラベルしたプローブを用いたWISH法を行い、すべてのマーカーで発現様式に差は認められなかった。2.房室接合部心内膜細胞のマーカーであるNFATc1の発現を免疫組織化学法によって観察した。また、酸性ムコ多糖類を青染するアルシアンブルー染色で心ゼリーの形成を確認した。同腹の正常対照と比較して1型・2型IP_3RDKOにおいても、心内膜細胞にはNFATclの発現が認められ、アルシアンブルー染色の染色強度も同程度であった。しかし、心内膜細胞におけるNFATclの発現は経時的に低下し、心内膜細胞から形質転換し心ゼリー内に侵入する間葉系細胞の数は1型・2型IP_3RDKOにおいて有意に低かった。以上の結果および昨年度の結果より、1型・2型IP_3RDKOの胎仔心臓は、初期ルーピングまでは正常に発生し、心房、房室管、心室の領域化はほぼ完成しているが、心内膜床の形成不全をきたしていること、心内膜床の間葉系細胞の減少から心内膜上皮一間葉転換に異常があることが示唆された。1型イノシトール三リン酸受容体(IP_3R)ヘテロ接合体・2型IP_3Rホモ接合体ノックアウトマウス同士を交配し、胎生9.0日から10.5日にわたり経時的に胎仔を取り出し、1型・2型IP_3Rダブルノックアウト(DKO)マウスの形態を観察した。胎仔の遺伝子型はyolk sacの溶解液をPCRにかけることで確認した。以下全て、1型・2型IP_3RDKOマウスについて、同腹の1型IP_3Rヘテロ接合体・2型IP_3Rホモ接合体ノックアウトマウスと比較した。個体レベルで形態を観察した後、パラフィン切片のヘマトキシリン・エオジン染色を行い、心臓の構築を詳細に観察した。特にNFATcノックアウトマウスで認められる心筋壁の菲薄化や弁の異常の有無に注目した。心筋細胞の分化の指標として収縮蛋白(βMHC, MLC2a, MLC2v等)や心臓部位・時期特異的転写因子群(Nkx2.5,Tbx5,eHAND, dHAND等)をプローブとして用いたwhole mount in situ hybridization (ISH)を行った。心筋壁厚は一定領域の心筋壁内の細胞数で定量化した。更に、Ki-67やリン酸化Histone H3に対する抗体を用いた免疫組織化学を行い、一定領域内の陽性細胞数の割合から細胞増殖能を定量化した。また、TUNEL法で陽性細胞数を計測することによってapoptosisの定量を行った。次に、IP_3Rの下流シグナルの候補であるNFATc1の活性化の有無を観察した。すなわち、抗NFATc1抗体による蛍光免疫組織化学を行い、共焦点顕微鏡下に心内膜細胞におけるNFATc1の核移行の有無を観察した。ISHの確立には、プローブ濃度やHybridization温度、proteinase K処理の濃度と時間などの条件検討を行い、免疫組織化学の確立には抗体の種類や濃度、熱処理や酵素処理などの抗原賦活法の検討を要した。
自立型脂質二分子膜に基づくシングルチャネル操作法の開発

本課題では,我々が提案した高い安定化自立型脂質二分子膜と原子間力顕微鏡(AFM)を組み合わせることにより,イオンチャネルの単離から脂質二分子膜への包埋までの全工程をAFMで行うチャネル操作法の開発を目指した.まず,測定チャンバーの設計とチャネル発現細胞の構築について検討を行った.また,安定化脂質二分子膜の更なる改良についても検討し,作製したシリコンチップを熱酸化膜(SiO_2層)およびテフロン層で被覆することにより,ノイズ電流および過渡電流を抑制することに成功した.これは,生体チャネルの単一チャネル電流記録に適した電気特性と機械的安定性とを兼ね備えた人工脂質二分子膜系の構築に成功したことを意味する.本課題では,我々が提案した高い安定化自立型脂質二分子膜と原子間力顕微鏡(AFM)を組み合わせることにより,イオンチャネルの単離から脂質二分子膜への包埋までの全工程をAFMで行うチャネル操作法の開発を目指した.まず,測定チャンバーの設計とチャネル発現細胞の構築について検討を行った.また,安定化脂質二分子膜の更なる改良についても検討し,作製したシリコンチップを熱酸化膜(SiO_2層)およびテフロン層で被覆することにより,ノイズ電流および過渡電流を抑制することに成功した.これは,生体チャネルの単一チャネル電流記録に適した電気特性と機械的安定性とを兼ね備えた人工脂質二分子膜系の構築に成功したことを意味する.本研究では,原子間力顕微鏡(AFM)を,チャネルタンパク質1分子を操作するためのツールとして用い,我々が提案した高い膜強度を有する自立型脂質二分子膜と組み合わせることにより,イオンチャネルタンパク質の単離から脂質二分子膜への位置を制御した包埋,さらにはチャネル開閉の制御までの全工程をAFMで行うシングルチャネルのマニピュレーション法の開発を目指している.平成22年度は,形成した二分子膜をAFM溶液セルにトランスファーできるようなチャンバー設計に着手した.また,創薬分野への応用を視野に入れ,throughput性を高めるためのアレイ測定用チャンバーの設計も開始した.一方,安定化脂質二分子膜の更なる改良についても引き続き検討を行った.個々の膜面積をナノスケールに下げることによる膜安定性の向上と同時に,大きな総膜面積を保つことによるチャネル包埋確率の向上の2つを兼ね備えた膜系の構築を目指し,ナノポーラスアルミナを支持体として脂質二分子膜を形成し,その二分子膜の安定性について検討した.構築した膜系は,耐電圧±1V以上,最長寿命30時間であり,従来の二分子膜に比べて著しく強度の高い二分子膜の形成に成功した(Applied Physics Letters 2010,96,213706.)また,前年度に報告したシリコン微細加工に基づく安定化脂質二分子膜について,その電気特性の改善を行った.作製したシリコンチップを絶縁層で被覆してチップ全体の電気容量を結果,ノイズ電流幅を1-2pA,過渡電流を0.5ms以下にまで下げることに成功した(投稿中).本研究では,原子間力顕微鏡(AFM)を,チャネルタンパク質1分子を操作するためのツールとして用い,我々が提案した高い膜強度を有する自立型脂質二分子膜と組み合わせることにより,イオンチャネルタンパク質の単離から脂質二分子膜への位置を制御した包埋,さらにはチャネル開閉の制御までの全工程をAFMで行うシングルチャネルのマニピュレーション法の開発を目指している.平成23年度は,形成した二分子膜をAFM溶液セルにトランスファーできるようなチャンバーの設計,および,創薬分野への応用を目指したhighthroughput測定のためのアレイチャンバーの設計についても引き続き検討を行い,モデルチャネルを用いて,複数の二分子膜から同時にチャネル電流を記録することに成功した(投稿準備中).また,チャネルタンパク質の操作に必要となるチャネル発現細胞の構築についても検討を開始し,創薬に重要な2種のイオンチャネルを対象に大量発現細胞系の立ち上げを行った.一方,安定化脂質二分子膜の更なる改良についても検討を行った.シリコン微細加工に基づく安定化脂質二分子膜では,シリコン由来の大きな電気容量のためノイズ電流と過渡電流が大きいという問題があったが,熱酸化膜(SiO_2層)およびテフロン層を用いた絶縁層被覆を行いシリコンチップの電気容量を下げることにより,ノイズ電流幅を1-2pA(peak-to-peak),過渡電流を1ms以下にまで下げることに成功した(Micro and Nanosystems, 2012, 4, 2-7.).これは,生体チャネルの単一チャネル電流記録に適した電気特性と機械的安定性とを兼ね備えた人工脂質二分子膜系の構築に成功したことを意味する.
人工衛星による分光スペクトル観測を用いた大気成分導出アルゴリズムの開発

本年度は、大気汚染物質の濃度データ解析と、その結果を受けたりトリーバルアルゴリズムの改良・開発を行った。大気汚染物質の濃度データ解析については、GOMEセンサによるオゾン、二酸化窒素データを解析した。昨年度に入手したGOMEオゾンデータの検証を、気象庁のオゾンゾンデ観測データによって行った。得られた結果は日本気象学会SOLA誌に投稿し、受理された。また、二酸化窒素データは国内の大気汚染監視局の地表観測データ及び数値モデル計算結果との比較を行った結果、定性的には季節変化が一致するなどよい結果が得られたものの、定量的には違いが見られた。また、太平洋上に二酸化窒素の濃度増大が見られる事例について、数値計算結果と比較するなどの解析を行った。このような濃度データ解析と平行して、特に二酸化窒素のリトリーバルアルゴリズムの改良開発に取り組んだ。地表データ・数値計算結果とGOME観測データが定量的に異なる問題については、リトリーバルの中で用いられているエアマスファクターを変更し精度の高いものに改め、実装することを目指した。データフォーマットを一致させるなどの技術的な課題をほぼクリアし、試験的に新しいアルゴリズムを用いてリトリーバルを行うことに成功した。また、海洋上のリトリーバルについては、パラメータ設定の不良など人為的な要因がないかをチェックした。その結果、観測原理的に解決が難しい対流圏量と成層圏量の分離において、当初想定していたよりも大きな不確定性が生じている可能性が明らかになった。本年度は、データ・ツールの整備、初期解析及び情報収集を行なった。データの整備については、まずGOMEならびにSCIAMACHYセンサの分光スペクトルデータ(L1データ)、ならびに微量成分の分光データを収集し、リトリーバルの準備作業を行なった。また、検証用のデータセットとして、世界中のオゾンゾンデデータならびに日本の大気汚染監視局のデータの収集・整備を行なった。ツールとしては、リトリーバル並びにリトリーバルの際に必要となる光路上の大気量係数(エアマスファクター)を計算するソフトウエアをそれぞれ入手し、整備を行なった。並行して、先行して出されているリトリーバル済のデータ(L2データ)を参考データとして入手し、検証・比較ならびに時空間分布の調査などの初期解析を行なった。特に、オゾンや二酸化窒素については、先進的な研究を行なっている米国ならびにドイツの研究者とそれぞれ共同研究を立ち上げた。そのような研究者から直接L1・L2データの供給を受けデータ解析を行なうことでリトリーバルの問題点を指摘し、今後自前でリトリーバルを行なう際に必要となるであろう情報を得た。米国の研究者とは平成17年12月、ドイツの研究者とは平成17年5月及び7月に直接会い、議論を行なった。特に、ドイツの研究者に関しては、7月に一週間ほど相手研究機関に滞在し、今後の研究方針に関する議論を行なうとともに必要なデータを直接入手することができた。
温室効果ガス、メタンの水田からの発生量測定

メタン発生量として大きな割合を占める稲作期間の水田からのCH_4発生量について、実際の水田で測定するとともに発生量に及ぼす肥料の影響を調査した。(1)肥料の影響測定は研究所内の実験圃場で行った。牛糞堆肥の施肥レベルの異なる8区画の有底枠水田(6.8m^2)と4区画の試験水田(100m^2)を設定し、それぞれについて水稲のある小区画について測定を行った。水田から大気へのCH_4の発生量は、水田の水面上にアクリル製のチャンバ-をかぶせて、その内部のCH_4の濃度の増加速度を求めることにより得た。Aは窒素系の化成肥料のみ、BHはそれに牛糞堆肥を施したものである。C・B・E(F)・G・Hの順に6,5,13,26,39,65frkg/m^2の施肥レベルのものであるが、CH_4放出速度は、ほぼ施肥レベルに比例していた。(2)実際の水田での測定福岡県総合農業試験場の試験水田で、6月21日から9月12日まで10日に1回程度で9回調査を実施した。調査は13:3014:30に行い、CH_4発生速度、酸化環元電位、稲高、気温、田面水温度、土壌温度を測定した。6月21日から7月18日までは水田は湛水状態にあったが、7月25日から中干しで土壌は乾き、湛水状態になることが少なかった。CH_4発生速度の平均値は4.2mg/m^2・hr(0.1g/m^2・d)で、湛水状態が続いた7月18日までの平均値は8.88mg/m^2・hr(0.21g/m^2・d)であった。最高値は田植からほぼ1ヶ月の7月10日の20.5mg/m^2・hrで、この日は気温、土壌温度が高く、酸化環元電位も低かった。7月18日9:0019日9:00にCH_4発生速度を3時間毎に測定した。CH_4発生速度は10.2ー12.9mg/m_2・hrの範囲にあり、15時にわずかに高くなっているが、気温、土壌温度、田面水温度の変化にかかわらず、日内変化はほとんど見られなかった。
走査型電子顕微鏡内マニピュレーションによるカーボンナノチューブの電子物性測定

カーボンナノチューブの電気伝導は非常に特異であるが実験的に明らかにされていない点が多い。このような、多層ナノチューブの伝導機構を解明するにあたり、電極とナノチューブの界面の影響をしらべ最適な電極形成法を探索すること、応力をナノチューブに加えた時の伝導状態の変化について調べることを目的とし、走査型電子顕微鏡(SEM)に独立した3つのマニピュレータをもつナノファクトリーにより実験を行った。1.ナノチューブと電極界面の最適化ナノチューブの電極との接触は以下のようなプロセスで著しく向上することを見出した。1)ナノファクトリー内で、ナノチューブを電極に接触した後、2)その界面に電子ビーム照射による非晶質カーボン薄膜を局所的に堆積する。この時点では2端子抵抗は数百kΩである。3)2端子間に数Vの電圧を印加し、数μAの電流を流す。これにより、接触部での電力消費による発熱ために接触が改善する。この時点で2端子抵抗は数十kΩである。4)3)のプロセス中に電子ビームをスポット照射する。カーボン薄膜堆積中の温度が高いために高品質なカーボン薄膜の堆積が期待できる。これにより、2端子抵抗は13kΩとほぼ量子化コンダクタンスと同等の良好な接触を形成することに成功した。2.外部応力下における伝導測定真空中で多層ナノチューブに100μA以上の過剰電流を流すと電極中央部付近のナノチューブ外層から制御良く一層ずつ剥離し、ラジオの伸縮するアンテナのような形状にすることに成功した。この状態で、両端の電極を遠ざける方向に移動(ナノチューブ両端を引っ張る)すると多層ナノチューブの内層が外層から引き抜けることを見出した。さらに、引き抜き時の力の測定から内層と外層界面が理想的な状態を保つことがわかった。また、伸縮時の抵抗はのびに比例することを実験的に明らかにし、ナノ変位測定器としての可能性を示した。
放線菌における新規窒素代謝の解析

放線菌の好気的に生産する膜結合型硝酸還元酵素(dNar)の生理的意義について解析した。作成したdNar破壊株は野生型と比較して抗生物質生産に異常をきたした。また一酸化窒素(NO)ジオキシゲナーゼであるフラボヘモグロビン破壊株でも同様に二次代謝に影響が表れた。異化型硝酸塩還元酵素(dNar)は、嫌気条件かつ硝酸塩存在時において発現、生産されることが既知の知見であった。しかし、これまでに、我々は、いくつかのStreptomyces属細菌に好気的かつ硝酸非添加にも関わらず、dNarを生産することを見出し、また本培養条件で有機体窒素から生産される亜硝酸とdNarの関連性を見出した。そこでS.coelicolorについて本亜硝酸代謝系の生理的意義について解析を行った。今年度は本菌中にはゲノム上に3つのdNar遺伝子の、それぞれの破壊株および、同時破壊株を作成し、発現条件、表現型を調べた結果、それぞれのdNar生産時期が異なることを見出た。また、dNar破壊株(亜硝酸生産能欠損株)では菌の増殖の他に幾つかの顕著に影響が見られ、本亜硝酸生産系が放線菌にとって重要な代謝系であることが示唆された。また、本亜硝酸生産系に関与していると考えているflavohemoglobinの破壊株の作成を試みたが、取得に至らなかったため(致死遺伝子であろうと考えている)、過剰発現株を作成した。さらに、抗flavohemoglobin抗体を使用し、発現解析を行った。今年度研究では、人類にとって極めて重要な放線菌の新規な代謝系について、新たな発見があり、本研究の十分な進展が見られた。本研究は抗生物質、抗癌剤、免疫抑制剤など人類にとって非常に有用な微生物である放線菌の新規な窒素代謝系を分子レベルで明らかにし、各種発酵生産において本菌群の通気制御などの生育制御や、また本代謝系を利用した排水処理技術の開発などの応用面での目的と、さらには地球上の窒素サイクルの新たなが記述的知見を得ることを目的としている。放線菌の3つの異化型硝酸塩還元酵素(dNar)の同時破壊株について調べた結果、抗生物質生産能に顕著に影響があることが示唆された。また、本新規代謝系に関与すると考えられるFlavohemoglobinは、一般的には一酸化窒素を硝酸に酸化する酵素でnitrosative stressに対する防御酵素であることが知られているが、本菌では恒常的に発現しており、その生理的意義に注目した。そこで、遺伝子破壊株を作成し結果、遺伝子破壊株では野生株と比べて顕著に生育に影響が見られ、生育に遅れを生じた。さらに、二次代謝に影響が見られた。またFlavohemoglobin過剰発現株では、抗生物質生産能が上昇した。放線菌に見出した新規窒素代謝系について前年度までにいくつかを明らかとしたが、さらに本年度では、以上のように、本代謝系においてこれまで例のない新規な発見をいくつかできた。これらの結果は、放線菌の持つdNar及びFlavohemoglobinの新規生理機能を十分示唆しており、今後の興味深い課題を提供した。
有棘赤血球舞踏病における遺伝子変異と表現型に関する研究

ChAc患者とその家系構成員の臨床症状について詳細に評価し、更にVPS13A遺伝子をはじめとして、神経有棘赤血球症や他の神経変性疾患の遺伝子解析を行った。【結果】発端者37歳女性は、VPS13A遺伝子にホモ接合性ナンセンス変異(3889C>T、R1297X)を有していた。当初、情動不安定、妄想気分、強迫症状など多彩な精神症状を認めていたが、神経心理学的検査で前頭葉機能障害が認められ、進行性にfrontosubcortical dementiaの病像を呈した。また、てんかん、筋緊張低下、四肢・躯幹・口腔の舞踏運動などの神経症状もみられ、不随意運動の進行に伴い誤嚥や自咬症なども認められた。画像検査においては、頭部MRIにて進行性に尾状核頭部の萎縮と白質病変を認め、脳血流SPECTでは大脳基底核から前頭葉へと血流低下領域が拡大していく経過が明らかとなった。さらに、患者以外の家系構成員8名中5名は3889C>T変異をヘテロ接合性に有しており、そのうちの4名にChAcの部分症状を認めた。これら4名に認められた部分症状は様々であり、また重症度においても個人差が認められた。この家系において、線条体の神経変性を伴う他の遺伝性疾患の原因遺伝子の多形解析を行ったが、ChAcの部分症状の発現との間に有意な関係は認められなかった。【結論及び考察】ChAcは劣性遺伝病であるが、ヘテロ接合性にVPS13A遺伝子の変異を持つキャリアにもChAcの部分症状が生じており、その症状や重症度には個人差が認められた。同じ変異のキャリアにおける表現型が様々であることから、病態発現に関わる修飾因子が存在する可能性を考え、他の遺伝性神経変性疾患の原因遺伝子について多形解析を行ったが、表現型との有意な連鎖は認められなかった。未知の修飾因子が関与する可能性は高く、今後も解析を行う必要があると考えられた。ヒト有棘赤血球舞踏病(ChAc)の疾患遺伝子であるVPS13Aに変異を導入したモデルマウスを作成する際、VPS13Aに配列が類似するVPS13C遺伝子も検出した。これらマウスVPS13AとVPS13Cの5'および3'末端には数種の転写variantsが認められChAcの表現型に関与する可能性が推測されたため、この転写variantsについて研究した。【研究結果】マウスVPS13Aの5'末端領域には6つの転写開始点を認め、各々の上流に転写因子結合配列を認めた。各転写variantsは非翻訳領域長のみでなく翻訳開始点にも違いが認められた。主に脳にみられた転写variantsはexon1から転写が開始され翻訳されていると考えられた。転写variantsによっては翻訳開始点がexon5やexon9に存在する可能性があり、この場合、それぞれ107、221アミノ酸残基分短い蛋白が産生され、VPS13Aがコードする蛋白choreinのcoiled-coil構造が欠失すると予想された。マウスVPS13Aの3'末端ではヒトで報告されているtranscriptA,B,Cに相当する配列が同定され、このうちtranscriptBに相当する転写variantが脳に特異的であった。マウスVPS13Cの5'末端については、脳ではexon1-9全てで構成される配列が主で、末梢組織では組織間で転写開始点に違いがあり、exon1以外から転写開始されるものは翻訳開始点がexon11に存在し、生成物は294アミノ酸残基分短いと予想された。ヒトChAc症例、モデルマウスいずれにおいても線条体など幾つかの組織、細胞が特異的に障害されるため、今後は上記の特異的な転写variantsを重点的に研究する必要がある。

同じ変異のキャリアにおける表現型が様々であることから、病態発現に関わる修飾因子が存在する可能性を考え、他の遺伝性神経変性疾患の原因遺伝子について多形解析を行ったが、表現型との有意な連鎖は認められなかった。未知の修飾因子が関与する可能性は高く、今後も解析を行う必要があると考えられた。