hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
吸入麻酔薬及び精神鎮静薬によるfos、グルタミン酸受容体発現に及ぼす老化の影響

麻酔薬は中枢神経系に作用しその効果が発現するが、いくつかの説が挙げられているにも関わらず解明には至っていない。また、中枢神経細胞の増殖能に及ぼす影響も報告が少なく不明である点が多い。そこで今回我々はヒト神経膠細胞を用い、静脈麻酔薬であるpropofolの増殖能に及ぼす影響について検討した。(方法)48穴の培養プレートにヒト神経膠細胞(CCF-STTG1)を約2.0×10^4個/穴となるよう分注し、5%CO_2、95%air、37°Cの条件下で12時間静置後、静脈麻酔薬であるpropofolを0.3、3.0、30μg/mlとなるよう培地を調整し、それぞれ12時間作用させた。propofolを作用させない群をコントロールとした。作用後各群で作用直後、12、24、48、72、96時間後1穴中の全細胞数をカウントし、細胞の増殖能をコントロール群と比較した。また、AlamarBlue【○!R】を用いてviabilityを測定し、コントロール群と比較した。測定は蛍光分光光度計を用いexcitation 560nm、emission 590nmにて測定した。(結果および考察)propofolを0.3μg/ml作用させた群では作用直後、48時間後においてコントロール群と比較し、増殖能およびviabilityの有意な低下が認められた。propofolを3.0μg/ml作用させた群では48時間後においてコントロール群と比較し、増殖能およびviabilityの有意な低下が認められた。propofolを30μg/ml作用させた群では経時的測定全てにおいてコントロール群と比較し、増殖能およびviabilityの有意な低下が認められた。今回の結果から静脈麻酔薬であるpropofolによって神経膠細胞の増殖能が抑制されることが示唆された。今後、吸入麻酔薬や低酸素状態での経時的変化について検討を進めていきたい。高齢者への麻酔薬投与(吸入麻酔)や神経組織の感受性、薬物動態に関しては不明な点が多く、とくに分子レベルでの解明が急がれている。最近麻酔の作用メカニズムの解明に向けて、分子生物学的アプローチが試みられており、今回吸入麻酔薬であるセボフルランによる老若齢マウスにおけるアポトーシス関連遺伝子の発現について研究を行った。【方法】老化促進マウス(SAM)の若齢マウス(生後3ヶ月)、老齢マウス(生後14ヶ月)を用意し、麻酔第3期(手術適応期)を得るようセボフルラン数%を吸入させた。30分維持後、各マウスより脳を摘出し、全RNAを抽出した。また、覚醒6時間後、同様に脳を摘出し、全RNAを抽出した。RT-PCRは既に報告されているアポトーシスの関連遺伝子であるLICE、Bcl-2、Bax、Bcl-XS、Bcl-XL、GAPDHをプローブとして用いて行った。得られたPCR産物は、2%アガロースゲルにて電気泳動を行い、その画像をコンピューターに取り込んだ後、各遺伝子の発現量をデンシトメトリーにて確認した。【結果および考察】アポトーシス関連遺伝子の1つであるBcl-XL遺伝子においてmRNAの発現量の差が認められた。Bcl-XL遺伝子は、アポトーシス抑制遺伝子の1つであり、今回の結果から吸入麻酔薬であるセボフルランによって老齢、若齢マウスとも脳細胞でBcl-XL遺伝子が変動している可能性が示唆された。今後、吸入麻酔時間、覚醒後の経時的変化についてさらに検討を進めていきたい。
芳香族系導電性高分子の触媒化学的合成

1)ポリピロールは安定で耐熱性にも優れた導電性高分子である。我々は、すでに分子状酸素を酸化剤とし、塩化銅(I)-塩化アルミニウムの錯体を触媒として、ピロールからポリピロールを触媒化学的に合成する手法を開発しているが、この触媒は水と反応するため、酸素が還元されて副生する水が触媒と反応し、触媒活性が低下するという欠点がある。そこで、塩化アルミニウムを含まない触媒系の開発に取り組み、種々の金属塩について検討した結果、塩化鉄(III)などの鉄(III)塩が有効であることを見出した。この反応に用いる溶媒は反応収率およびポリピロールの電導度に大きな影響を及ぼすが、溶媒として炭酸プロピレンが最も好ましいことを見出した。さらに合成ポリピロールの電導度を上げるためには、ドーパントとなるアニオンの共存下で触媒的酸化重合反応を進めると良いことが明らかになった。2)アニリンとその誘導体の酸化重合に塩化銅(II)-酸素系が有効であることを明らかにしたが、ポリアニリンは加工性が低いという欠点がある。そこで、この欠点を補うため、前駆体法でポリアニリンを合成することを検討した。ポリアニリンの前駆体となる可溶性の高分子として、ポリ(o-アミノ安息香酸)が考えられるが、従来の合成法では収率が低い。そこで、新しい合成法を開発し、アルカリ性で酸化重合をすることにより高収率で重合体を得ることに成功した。このポリ(o-アミノ安息香酸)を加熱すると脱炭酸が起こりポリアニリンが合成できる。また、アミノベンゼンスルホン酸を原料として、可溶性導電性高分子のスルホン化ポリアニリンを合成する方法も開発した。1)ポロピロールは安定で耐熱性にも優れた導電性高分子である。我々は、すでに、分子状酸素を酸化剤とし、塩化銅(I)-塩化アルミニウムの錯体を触媒として、ピロールからポリピロールを触媒化学的に合成する手法を開発しているが、この触媒は水と反応するため、酸素が還元されて副生する水が触媒と反応し、触媒活性が低下するという欠点がある。2)ピロールを原料にして、酸素を酸化剤とし、塩化鉄(III)を触媒として、ポリピロールを合成するとき、用いる溶媒は反応収率およびポリピロールの電導度に大きな影響を及ぼした。溶媒としては炭酸プロピレンが最も好ましく、炭酸プロピレンを溶媒として40°Cで36時間反応させると触媒当たり1024%のTONでポリピロールが得られた。このとき、電導度も3.3×10^<-2>Scm^<-1>と最も高かった。3)さらに合成ポリピロールの電導度を上げるためには、ドーパントとなるアニオンの共存下で触媒的酸化重合反応を進めると良いことが明らかになった。例えば過塩素酸テトラブチルアンモニウムの共存下でピロールの5分の1の塩化鉄(III)を用い、炭酸プロピレン中40°Cで4時間反応すると、収率は十数%と低いが、電導度は1.8Scm^<-1>という十分に高い電導度を持つポリピロールを得ることができた。本研究の目的は、電流を通すプラスチックとして興味をもたれている芳香族系導電性高分子の大量合成をめざして、従来の化学量論量の、従って大量の酸化剤を用いる方法に代わる、新しい触媒化学的な合成法の開発にある。本研究者らは、すでに、塩化銅(1)-塩化アルミニウム-酸素系の触媒を用いてベンゼンからポリフェニレンを、ピロールからポリピロールを合成する反応を開発している。この酸化重合触媒は、塩化アルミニウムを含んでいるため、酸素分子の還元で生成する水に対して鋭敏で、失活するという欠点を持っている。

そこで本研究では、水に対して強い新しい酸化重合触媒系を開発することを目指した。その結果、ピロールとその誘導体の酸化重合に塩化鉄(III)-酸素系が、アニリンとその誘導体の酸化重合に塩化銅(II)-酸素系が、それぞれ有効であることを明らかにした。一方、導電性高分子の加工性が低いという欠点を補うため、前駆体法で前駆体となる高分子として、ポリ(o-アミノ安息香酸)の新しい合成法を開発した。このポリ(o-アミノ安息香酸)を加熱すると脱炭酸が起こりポリアニリンになる。また、o-アミノベンゼンスルホン酸を原料として、可溶性導電性高分子のスルホン化ポリアニリンを合成する方法を開発した。本研究の触媒化学的重合法は、地球環境にやさしい方法であり、製品の低コスト化にもつながり、高分子合成の進むべき方向を示唆する重要な研究であると考える。
華厳経入法界品の文献学的研究

本研究は、『華厳経入法界品』梵文テキストの全面的な改訂を目指すものである。このための準備作業として、梵文・蔵文テキストのワ-プロへの入力を終え、和訳作業もほぼ完成している。その一部(第12,42,45ー53章)を試訳の形で「研究報告書」としてまとめた。大方の批判を受けたい。テキスト校訂は、整理になお時間を必要とするので、公表は今後の課題としたい。なお、校訂作業中に気が付いた点をいくつか列挙しておく。(1)漢訳に三種あるが、いずれも現存する梵文テキストと比較するとき、多くの異同・欠落が見られる。漢訳は確かに『華厳経』の明確な解釈を提示してくれるが、それが果たして梵文原典の真の意味であるがどうか疑わしい場合が少なくない。三訳は、それぞれ先行する訳をよく参照しており、同意できる訳語はそのまま採用し、理解を異にするものは修正し、欠落部分は増補している。従って、最も新しいと考えられる般若訳『四十華厳』が、他の二訳と比較すれば、概して梵文テキストとよく一致すると言える。しかし、時には現存梵文テキストが現存梵文テキストと大きく相違していたのか、判断に苦しむ。(2)通常逐語訳的性格が強いチベット語訳は、現存梵文テキストとほぼ対応するものの、本経特有の長大な複合語の翻訳に際して、その一部を省略するなど、不備がめだつ。但、現行梵文校訂版の字句を修正するのに、しばしば有力なヒントを与えてくれることは、いうまでもない。(3)漢訳・蔵訳の以上のような問題点は、とりもなおさず、本経典の内容の難解性を示すものである。samavasaranaなど『華厳経』特有の術語、ないし、本経で特別の意味で用いられているvijn^^ーaptiなどの術語がある。いずれ、これらの術語の内容を大乗思想発展史の中で正しく把握できるように努力していきたいと思っている。本研究は、『華厳経入法界品(Gandaryuha-sutra)の梵文原典の全面的な改訂を目指している。そのためには、Suzuki、Vaidya両氏の現行刊本二種により梵文原典をパソコン上で動く欧文ワ-プロ、ソフトによって入力し、テキスト・デ-タベ-スを作成する必要がある。本年度は予定通り『入法界品』前半部分の入力を終えた。来年度は、後半部分の入力を完了する予定である。厳密な校訂作業には、時代も訳者も異にする三種の漢訳とチベット語訳との比較対照が必須である。これまでの比較の結果、漢訳三種は現存梵文原典と多数の異同、欠落があることが判明した。また、漢訳者たちは、それぞれ先行する漢訳をよく参照し、同意できる訳例はそのまま採用し、見解を異にする場合は従来の訳語を修正したり、欠落部分を増補している。一方、通常逐語訳的性格の強いチベット語訳も、本経の場合は、『華厳経』特有の長大な複合語の一部を省略するなど、不備が目立つ。これら四訳の不完全さは、とりもなおさず『入法界品』梵文原典の難解性を示すものである。校訂作業は、原典の正確な理解に基づかなければならない。このため梵文原典の和訳をひきつづき行なっている。未だ不十分な理解ではあるが、本年度に前半部分の和訳をほぼ完了し、来年度中には後半部分の和訳完了を目指している。

この間、samavasarana(相即相入)など『華厳経』特有の難解な術語について思いをめぐらしているが、いずれは『入法界品』の描こうとする「不可思議」の世界を我々の言葉で表現してみたいと考えている。本研究は、『華厳経入法界品』(Gan__・d__・avyu^^ーhaーsu^^ーtra)の梵文テキストの全面的な改訂を目指すものである。そのため、以下のような研究を行った。(1)前年度に引続き、テキスト後半部分(Vaidya本pp.220436)をパソコン上で動く欧文ワ-プロによって入力した。それをSuzuki本と校合し、異同を逐一注記した。(2)さらに、チベット語訳(ジナミトラ、スレ-ンドラボ-ディ他訳、Peking Vol.26)テキストも、MsーDosにより入力し、梵文テキストとの比較対照の便に資するようにした。(3)三種ある漢訳、(1)東晋・仏駄跋陀羅訳『大方広仏華厳経』(略称『六十華厳』大正9巻)、(2)唐・実叉難陀訳『大方広仏華厳経』(略称『八十華厳』大正10巻)、(3)唐・般若訳『大方広仏華厳経』(略称『四十華厳』大正10巻)とチベット語訳を綿密に参照して、現行梵文テキストを改訂しつつ、後半部分の和訳を試み、ほぼ完了した。予算の都合で、その一部(第12,42,45ー53章)のみ「研究成果報告書」として公表し、大方の批判を受けるつもりである。いずれ全訳を公刊したいと考えている。(4)和訳研究の成果に基づいて、現在望みうる最上の梵文テキストを校訂するという仕事は、なお進行中の作業であるが、近い将来完成して、公表したいと念願している。『華厳経入法界品』の大部分をまがりなりにも読みおえたが、おそらく深い暝想体験を文学的にあらわしたと思われる、その内容は極めて難解であり、その真意を理解するには、まだ日時を要すると考えられる。いずれ本経典を仏教思想史上に正しく位置づけたいと思っている。
運動で誘導される小胞体からのｅＩＦ２αリン酸化の骨格筋機能制御における役割

マウス骨格筋において運動など生理的な条件下においてPERK-eIF2αリン酸化シグナルの活性化を確認した。PERKを薬剤依存的に活性化できるFv2E-PERKを骨格筋特異的に発現したトランスジェニック(TG)マウスを作製した。高脂肪食を給餌したところTGマウスは、インスリン抵抗性の改善や基礎代謝の上昇を認め肥満抵抗性であり、骨格筋代謝に差はなかったが褐色脂肪組織においてエネルギー代謝関連遺伝子発現が上昇していた。PERK-eIF2αリン酸化シグナルは骨格筋で抗肥満ホルモンであるFGF21発現を誘導し、FGF21が褐色脂肪細胞に作用してエネルギー代謝を上昇させていることが示唆された。本研究の目的は小胞体の内部環境の変化(小胞体ストレス)に適応するための応答シグナルのうちPERK-eIF2αリン酸化シグナルの骨格筋における役割を明らかにすることである。昨年度までに作製したPERKシグナル活性化トランスジェニックマウス(TGマウス)において食事性肥満に抵抗性を持っていることが観察されたことから本年度はその分子メカニズムの解明を試みた。まず、野生型マウスとTGマウスの骨格筋においてマイクロアレイ解析を行い発現変化している遺伝子の同定を試みた。過去の培養細胞での報告と一致してTGマウスにおいてアミノ酸代謝、特にシステイン代謝経路を触媒する酵素の遺伝子発現が上昇していた。また、肥満軽減作用をもつ内分泌ホルモンFgf21の発現がTGマウスで上昇していた。Fgf21は、褐色脂肪細胞での熱産生関連遺伝子の発現を上昇させることが知られており、昨年度に得られた結果と一致しているためさらにPERK経路によるFgf21遺伝子発現制御のメカニズムを解析した。その結果、PERK経路の下流転写因子として知られているAtf4がFgf21のプロモーター領域に結合し発現制御していることをルシフェラーゼアッセイ法とクロマチン免疫沈降法から明らかにした。さらにFgf21は小胞体ストレスの誘導によって発現上昇し、Atf4を欠損したマウス胎児繊維芽細胞においては発現上昇がほとんど見られなくなることから小胞体ストレスによるPERK-eIF2αリン酸化-ATF4という経路がFgf21発現制御に重要であることがわかった。以上のことから、骨格筋におけるPERK-eIF2αリン酸化シグナルは骨格筋においてはアミノ酸代謝を変化させ、一方で内分泌ホルモンFgf21発現を誘導し褐色脂肪細胞でのエネルギー消費を亢進させて肥満を防ぐことが明らかとなった。小胞体の内部環境の変化(小胞体ストレス)に適応するための応答シグナルは生体機能の制御や疾患発症に直接関与することが明らかとなってきている。本研究では小胞体ストレスによる小胞体ストレス応答シグナルのなかでも特にPERK-eIF2αリン酸化シグナルに着目して、骨格筋機能における役割を明らかにすることを目的とする。本年度はまずマウスに運動負荷を与えたときの骨格筋での小胞体ストレスの発生について解析を行い、eIF2αのリン酸化が上昇することが確認され、小胞体ストレスが発生することを明らかにした。さらに薬剤(AP20187)依存的にPERK-eIF2αリン酸化シグナルを活性化できるFv2E-PERKを骨格筋特異的に発現させたトランスジェニック(TG)マウスを作製し、筋機能、肥満糖尿病に与える影響について解析を行った。TGマウスは無刺激でも野生型マウスよりeIF2αリン酸化が高かったため無刺激のTGマウスと野生型マウスを用いて検討した。TGマウスは野生型マウスと比べ体重、骨格筋重量、握力がわずかに低かった。トレッドミルトレーニングを用いた持久力試験を行ったところTGマウスと野生型マウスで差はなかった。これらマウスに高脂肪食を与えたところTGマウスは野生型マウスより体重、体脂肪率が低く、インスリン抵抗性の改善、血中脂質の低下、基礎代謝の上昇が見られ肥満抵抗性であった。骨格筋において筋線維型やミトコンドリア量、代謝関連遺伝子の発現などに差は無かったが、一方で褐色脂肪細胞での熱産生関連遺伝子の発現が上昇することがわかった。以上のことから、PERK-eIF2αリン酸化シグナルは筋機能に明らかな影響を与えていないが、骨格筋からの分泌因子などによる何らかのシグナルを介して褐色脂肪細胞を活性化していることが示唆された。研究目的の一つである運動負荷による骨格筋の小胞体ストレスの発生について順調に解析を行い、小胞体ストレスの発生を確認し当初の目的を達成できた。またトランスジェニックマウスを用いたPERK-eIF2αリン酸化シグナルの筋機能に与える影響についても運動、代謝に対する表現系の解析を順調に行い、結果を得ることが出来た。予想に反して骨格筋機能の変化は見られなかったもののその中で褐色脂肪細胞が活性化し基礎代謝が上昇した結果、肥満抵抗性となるという興味深い現象を発見することが出来た。

さらに、本年度の内に来年度に行う予定であった表現系を担う分子メカニズムについての研究に着手しており、すでに予備的な結果はすでに得られている。以上のことから計画以上に研究が進展していると考えている。来年度は、本年度であきらかとなったTGマウスの食事性肥満抵抗性の分子メカニズムについて解析を行う。まず、当初の研究計画に従ってマイクロアレイ解析を行う。用いるサンプルとして野生型マウス、TGマウス、AP20187を投与したTGマウスの骨格筋に加えて、筋芽細胞株C2C12にFv2E-PERK遺伝子を導入しAP20187で刺激したサンプルを用意する。本年度の結果より骨格筋の代謝に関連する遺伝子のみならず、PERK-eIF2αリン酸化シグナルで発現誘導される褐色脂肪細胞機能に関与する分泌因子などの遺伝子に着目し、解析を行う。得られた候補因子についてTGマウス骨格筋における発現や血漿濃度を調べる。また同時に得られた候補遺伝子の発現制御機構を明らかにするため、PERK-eIF2αリン酸化シグナルの下流で上昇することが知られている転写因子ATF4に着目し、候補遺伝子のプロモーターについて直接的に制御しうるかどうかをin silicoにて検討する。その結果得られた遺伝子についてルシフェラーゼアッセイ、クロマチン免疫沈降を行うことでATF4による直接の制御が存在することを確認する。また、骨格筋におけるアミノ酸代謝についての解析を進める。まず、TGマウス骨格筋や血漿においてアミノ酸濃度を測定する。さらにマイクロ解析などから得られた結果をもとにアミノ酸変動を誘導する主要な制御遺伝子群を同定する。さらに骨格筋の分化、萎縮に対する機能を解析するためにTGマウスに対して、神経毒の投与による筋再生モデル、講師懸垂による廃用性筋萎縮モデルを作製し骨格筋を組織学的に解析することでPERK-eIF2αリン酸化シグナルの機能を評価する。以上よりPERK-eIF2αリン酸化シグナルの筋機能における役割を明らかにする。分子メカニズムを解明するためのマイクロアレイ解析、マウスでの発現解析のためのRT-PCRやELISA、制御機構の解明のためのルシフェラーゼアッセイやクロマチン免疫沈降などの実験のための消耗品を購入するための費用として約70%を使用する。さらに本研究の成果を発表するための国内学会、海外学会の参加費用として20%を使用する。同様に論文公表のため英文校閲や投稿料として約10%を使用する予定である。
現存する「アイヌ絵」とその分類のための研究

昭和62年度の調査は,帯広百年記念館および東京国立博物館所蔵のアイヌ絵,北尾義一氏所蔵の「夷酋列像」(模写)について調査を実施した.その概要は次のとおりである.帯広百年記念館所蔵の資料は「蝦夷島奇観」(全2巻,安政5年,伊藤五郎治写本)のうちの1巻である.北尾義一氏(札幌市)所蔵の「夷酋列像」は,寛政2年,蛎崎波響原作のものを天保14年に小島貞喜が模写したもので,絹本着色,たて41.5cm×よこ33.0cmである.東京国立博物館所蔵の資料は,「礬野採製漫録」(寛政元年,秦憶丸考察, 26×40cm),「蝦夷風俗書」(折帖,竹迺舎倉女, 27.7×20cm),「北蝦夷地部」(27×17.8cm),「蝦夷島奇観」(全13巻,折帖,秦憶丸=村上島之丞, 27.3×19.5cm),「蝦夷人熊祭図」(巻子本, 26.5×347cm),「蝦夷古船図解」(巻子本),「蝦夷武器之図」,「蝦夷志」全(和綴, 26.8×18.8cm),「山靼人並ヲロッコ人図」(和綴,墨書無彩色, 24×17cm)の9種である.調査は内容確認のうえ,計測,写真撮影を実施した.写真撮影は6×7判カラーリバーサルフィルムを用い,約480カット分を実施,現在分類・整理中である.東京国立博物館所蔵の「蝦夷島奇観」は全13巻で,その構成は, 1・古説部, 2・禮部, 3・禮部(婚禮飲酒法制部), 4・居家部, 5・器械部, 6・熊祭部, 7・漁猟部・地図部, 8・膃肭漁部, 9・写生部, 10・雑図部, 11・諸外島部, 12・唐太部, 13・三邑図になっている.数多くの写本を生み,アイヌ絵の代表というべき「蝦夷島奇観」の原本を調査できたことは,関連資料の調査研究,考証,比較等にとって貴重なものとなった.昭和62年度の調査は,帯広百年記念館および東京国立博物館所蔵のアイヌ絵,北尾義一氏所蔵の「夷酋列像」(模写)について調査を実施した.その概要は次のとおりである.帯広百年記念館所蔵の資料は「蝦夷島奇観」(全2巻,安政5年,伊藤五郎治写本)のうちの1巻である.北尾義一氏(札幌市)所蔵の「夷酋列像」は,寛政2年,蛎崎波響原作のものを天保14年に小島貞喜が模写したもので,絹本着色,たて41.5cm×よこ33.0cmである.東京国立博物館所蔵の資料は,「礬野採製漫録」(寛政元年,秦憶丸考察, 26×40cm),「蝦夷風俗書」(折帖,竹迺舎倉女, 27.7×20cm),「北蝦夷地部」(27×17.8cm),「蝦夷島奇観」(全13巻,折帖,秦憶丸=村上島之丞, 27.3×19.5cm),「蝦夷人熊祭図」(巻子本, 26.5×347cm),「蝦夷古船図解」(巻子本),「蝦夷武器之図」,「蝦夷志」全(和綴, 26.8×18.8cm),「山靼人並ヲロッコ人図」(和綴,墨書無彩色, 24×17cm)の9種である.調査は内容確認のうえ,計測,写真撮影を実施した.写真撮影は6×7判カラーリバーサルフィルムを用い,約480カット分を実施,現在分類・整理中である.東京国立博物館所蔵の「蝦夷島奇観」は全13巻で,その構成は, 1・古説部, 2・禮部, 3・禮部(婚禮飲酒法制部), 4・居家部, 5・器械部, 6・熊祭部, 7・漁猟部・地図部, 8・膃肭漁部, 9・写生部, 10・雑図部, 11・諸外島部, 12・唐太部, 13・三邑図になっている.数多くの写本を生み,アイヌ絵の代表というべき「蝦夷島奇観」の原本を調査できたことは,関連資料の調査研究,考証,比較等にとって貴重なものとなった.昭和61年度における調査、研究の概要は、白老民族博物館および市立函館図書館において、約94種類のアイヌ絵について、調査を実施した。その概要は次のとおりである。白老民族博物館所蔵のアイヌ絵は、「蝦夷国風図絵」(写本),「アイヌ絵巻」(「蝦夷島奇観」をベースにした写本),軸物(木に登る小熊捕獲の図)の3種である。市立函館図書館所蔵のアイヌ絵および関係資料の調査は、同館資料目録にもとづき、内容確認のうえ、計測、写真撮影(複写)を実施した。調査資料のそれは、約91種類で、そのうち35種について撮影を行なった。写真撮影は6×7判のカラーリバーサルフィルムを用い、約250カット分を実施し、分類、整理を終えた。そのアイヌ絵の主なものは次のとおりである。「蝦夷島奇観」(村上島之丞著)

写和美濃14丁,「蝦夷島奇観」附録並増補(村上島之丞著)写和折本1冊,「蝦夷島奇観」乾・坤(秦檍丸著)寛政12和...折帖2冊1帙,「蝦夷島奇観」前・後編(秦檍丸著)寛政12写和2冊1帙上原邦書入本,「蝦夷島奇観」目録・巻111(秦檍丸著)上原昌邦写和折帖13帖1帙,「アイヌ絵巻」1巻3×125cm,「アイヌ絵巻」彩色27×605.5cm1巻,「蝦夷及赤蝦図絵」彩色28×605cm1巻,「蝦夷国風図絵」天保3加藤義繁芝川再写彩色27×1783cm1巻,「夷酋列像伝粉本」(蠣崎波響筆)原和、特大、折帖13枚張1帙,「アイヌ画」平沢屏山画彩色額60×136cm,「蝦夷国図説」(秦檍丸稿,間宮林蔵増補)写和菊倍折帖8冊遠山景晋旧蔵本,「アイヌ熊送の図」平沢屏山筆などである。なお、上記の「蝦夷島奇観」は写本が多いため、東京国立博物館所蔵の「蝦夷島奇観」(秦檍麿自筆本)と比較研究する必要が生じた。
ノンパラメトリックな回帰分析の研究

ノンパラメトリック回帰分析では目的変数の説明変数への関連の仕方に対する仮定が緩い。その中で、本研究では説明変数の一部xには線形模型、残りのtに対しては関連の仕方が未知と仮定したセミパラメトリック回帰分析、すなわちy=βx+g(t)なるモデルを扱った。ノンパラメトリック回帰分析では偏差平方和と連続性に対する罰則を加えた値を最小にすることによって推定量が導かれ、スプライン関数を用いて構成される。また偏差平方和と罰則のバランスをとる平滑化パラメータがある。標準的推定量は部分平滑化法であるが、回帰パラメータの推定量に偏りが発生し、それを小さくするために、tに従属する部分を除いて考える偏回帰推定量や連続性への罰則をxのtに関連する部分にも付ける2段階平滑化推定量が提案されてきた。本研究では、これらの3方式で漸近的には正規性・不偏性が成立し、その偏りのオーダーもすべて一致することを示した。さらに、偏りをより詳細に検討し、偏回帰推定量の偏りは実際に部分平滑化推定量より小さくなることが期待できることを示した。また2段階平滑化推定量には2つの平滑化パラメータが必要であるが、うまく選択できれば部分平滑化推定量より偏りを小さくできることを示した。さらに、うまく選択できれば部分平滑化推定量より偏りを小さくできることを示した。さらにこれらの理論的・漸近的結果を確認するためのコンピュータ・シミュレーションを行った。部分平滑化推定量では想定するg(t)によって偏りは大きく変化する。一方、偏回帰推定量でもそれと同じ傾向がある強くない。2段階平滑化推定では確かに平滑化パラメータをうまく選べば偏りを小さくできるが、実際にそれらを求めるのは難しいことが分かった。さらに最適な平滑化パラメータを求めるアルゴリズムとして交差確認法が一般に推奨されるが、偏りに対してはは必ずしも良い結果を与えるとは限らないことが示された。これらの結果はとりまとめて現在学術雑誌に投稿中である。
新しいがんのソマトスタチン遺伝子治療併用内部照射ターゲッティング療法の開発

ソマトスタチンの類似物質であるオクトレオチド(合成ソマトスタチン)は、ソマトスタチン受容体と特異的に結合するため、細胞傷害性の強い放射性同位元素(RI)で標識すると、がんの特異的な治療法(ターゲッティング治療法)となり得る。本研究は担がん動物モデルと遺伝子導入の手法を用い、がん細胞表面にソマトスタチン受容体を発現させ、β線放出RI標識オクトレオチドを用いたソマトスタチン遺伝子治療併用内部照射ターゲッティング治療法の開発の可能性を検討した。さらに、γ線放出RI標識オクトレオチドを用いることで、ソマトスタチン受容体を画像化し、治療効果の定量的視覚的評価法の開発の可能性も検討した。最も重要な部分である遺伝子組換えアデノウィルスは、様々な入手可能性を検討した上で、組換えアデノウィルス(AxCA-SSTR2)を獲得した。これをベクターとしてがん細胞表面ソマトスタチン受容体を発現させることを検討した。アデノウイルスベクターにHA-ヒトソマトスタチン受容体2型遺伝子を組み込んだAdex-HAhSStr2を構築し、がん細胞このウィルスを感染させることにより、高効率にソマトスタチン受容体を発現する細胞を作製する方法を検討した。この過程は、複雑な実験手技も含めて、種々検討したが、現時点では、十分満足できる結果が得られるに至っていない。また、β線やγ線放出RIをオクトレオチドに標識する技術について、本法に最適な標識技術開発のために、基礎的検討を重ねてきたが、安定的な標識率が得られるに至っておらず、引き続き検討を重ねる必要があることが判明した。一方、がん診療には欠かせない画像診断技術も併せて開発することは、様々なRI内用治療を正しく評価する上で極めて重要であり、陽電子断層撮影(PET)を含めて、診断や放射線治療などによる治療効果の判定や、予後評価について最適な画像診断法の開発も検討した。また、RI内用治療のために不可欠なβ線放出RIの体内挙動の検討も行った。ソマトスタチン(成長ホルモン分泌抑制ホルモン)の類似物質であるオクトレオチド(合成ソマトスタチン)は、生体内で対応するソマトスタチン受容体と特異的に結合することが知られている。また、ラジオアイソトープ(RI)標識オクトレオチドは癌の画像診断の臨床研究に用いられており、細胞障害性の強いRIを用いると癌の特異的な治療法(ターゲッティング治療法)となり得る。そこで、本研究は担がん動物モデルを作成することと、遺伝子導入の手法を用い、肺がんと前立腺がんのがん細胞表面にソマトスタチン受容体を発現させ、β線放出RI標識オクトレオチドを用いたソマトスタチン遺伝子治療併用内部照射ターゲッティング治療法の開発を目指すものである。さらに,線放出RI標識オクトレオチドを用い、がん細胞表面に存在するソマトスタチン受容体を画像化するとともに、受容体量を定量測定することで治療効果の定量的評価法も併せて開発するものである。既に、平成16年度においてN末端にHAタグをつけたヒトソマトスタチン受容体2型は、ソマトスタチンと結合することを確認しており、アデノウイルスベクターにHA-ヒトソマトスタチン受容体2型遺伝子を組み込んだAdex-HAhSStr2を構築し、HEK293細胞にリポフェクション法により遺伝子導入することによりアデノウイルスを産生する。そのアデノウイルスを肺がん細胞A-427と前立腺がん細胞CA20948に感染させることにより、高効率にソマトスタチン受容体を発現する細胞を作成しつつある。

導入されたソマトスタチン受容体発現効率はHAに対する抗体を用いることにより、ウェスタンブロット法および細胞染色にて評価し、RI標識したオクトレチドを用いて、競合法で結合能を確認しているところである。本研究では、ソマトスタチン(成長ホルモン分泌抑制ホルモン)の類似物質であるオクトレオチド(合成ソマトスタチン)は、生体内で対応するソマトスタチン受容体と特異的に結合することにより、遺伝子導入の手法を用い、肺がんと前立腺がんのがん細胞表面に強制的にソマトスタチン受容体を発現させ、β線放出RI標識オクトレオチドを用いたソマトスタチン遺伝子治療併用内部照射ターゲッティング治療法の開発を目指すものであって、さらにγ線放出RI標識オクトレオチドを用い、がん細胞表面に存在するソマトスタチン受容体を画像化するとともに、受容体量を定量測定することで、治療効果の定量的評価法の開発の可能性も併せて研究した。まず、アデノウイルスベクターにHA-ヒトソマトスタチン受容体2型遺伝子を組み込んだAdex-HAhSStr2を構築し、HEK293細胞にリポフェクション法により遺伝子導入することによりアデノウイルスを産生し、それを肺がん細胞A-427と前立腺がん細胞CA20948に感染させることにより、高効率にソマトスタチン受容体を発現する細胞を作成した。導入されたソマトスタチン受容体発現効率はHAに対する抗体を用いることにより、ウェスタンブロット法および細胞染色にて評価し、^<111>In標識したオクトレチドを用いて、競合法で高い結合能を確認した。担がん動物モデルで治療実験を行い,腫瘍縮小効果や微小転移の抑制効果を検討し、^<111>In標識オクトレチドの投入量と依存的に腫瘍増殖抑制効果の増加が認められた。また、^<18>F標識オクトレチドを用いて、担がん動物モデルのPETイメージングも行い、高いコントラストの画像が得られ、定量化できることも確認でき、治療効果の定量的評価も可能であることが示唆された。本研究では、^<111>In標識オクトレオチドによる体内動態測定より、β線放出核種標識オクトレオチドによる腫瘍治療の可能性と、^<18>F標識オクトレチを用いることで、β線放出RI標識オクトレオチドによる治療効果の定量的評価も可能であることが示唆された。
加速器BNCTシステムの包括的かつ実用的なQAプログラムの確立に向けた研究

近年、加速器を用いたホウ素中性子捕捉療法(加速器BNCT)の開発が進み、病院内への導入が国内外で進められている。大型専用装置が利用される放射線治療では定期的な物理的品質管理(QA)を実施することが重要視されており、広く普及している光子線治療や粒子線治療では各種学会よりガイドラインが提示され、すでに標準化が図られている。しかし、加速器BNCTにおいては病院内で日常的に治療を提供することを前提としたQA手法は未だ整備が進んでいない状況にある。そこで本研究では線量および幾何学的QAに各種インターロックの動作試験などの安全機構のQAも併せた包括的かつ実用的なQAプログラムを構築する。
グラフト重合による酸化チタン超微粒子の表面改質と乳化作用及び薬理活性作用の付与

クリームやローションなどの化粧品の白色顔料として用いられている酸化チタン微粒子表面に、界面活性作用を有する高分子や薬理活性高分子をグラフトして固定化することにより、それらの経皮吸収性の問題点を解決すると同時に、酸化チタン粒子自身の分散性を向上させることを目的として、グラフト鎖の、構造・分子量・グラフト量、及びグラフトする界面活性高分子と薬理活性高分子との割合が、酸化チタン超微粒子の様々な媒体中への分散安定性や薬理活性にどのように影響するかについて究明した。用いた界面活性ポリマーは、ポリアクリル酸ナトリウム及びポリエチレングリコールであり、また、薬理活性ポリマーは、ジビニルエーテルと無水マレイン酸とのコポリマーである。本研究で得られた成果は、以下の通りである。1.アゾ基を導入した酸化チタンを用いてラジカルグラフト重合を行うことにより、あるいは、ポリマー鎖中に導入した官能基との反応により、(1)主鎖に界面活性ポリマーを有し側鎖に薬理活性ポリマーを有するグラフトコポリマー、(2)主鎖に薬理活性ポリマーを有し側鎖に界面活性ポリマーを有するグラフトコポリマー、(3)界面活性ポリマーと薬理活性ポリマーとのブロックポリマー、以上3種の構造の異なるコポリマーを、それぞれ酸化チタン粒子表面にグラフトできる。同一のグラフト量で比較すると、界面活性作用及び酸化チタン粒子の分散安定性に対しては、主鎖に界面活性ポリマーを有し側鎖に薬理活性ポリマーを有するグラフトコポリマーが、最も良好であった。3.薬理活性作用は、グラフト量やグラフトコポリマーの構造の差異よりも、グラフトコポリマーに占める薬理活性ポリマーの割合(含有量)に依存する傾向が認められ、且つ、その分子量が大きいもの程高活性を示した。
形質細胞様樹状細胞におけるI型インターフェロン産生制御機構の解明

形質細胞様樹状細胞(PDC)は、大量のI型インターフェロン(IFN-I)を産生することで、種々のウイルスに対する生体防御反応の中心を担っている。PDCはウイルスや細菌の核酸に対するセンサーであるTLR7やTLR9を高発現しているものの、大量のIFN-Iを産生する分子機構については不明な点が多い。本研究では、活性化PDC特異的細胞表面分子PDC-TREMの発見を契機として、本分子がSema6DのリガンドであるPlxnA1と相互作用し、DAP12を介してIFN-I産生調節を行っていることを明らかにした。申請者はPDC-TREMが活性化PDC形質細胞様樹状細胞特異的膜分子であること、PDC-TREMがTLR刺激後のIFN産生調節に重要な役割を担っていること、を明らかにした。すなわちPDC-TREMに対する特異的モノクローナル抗体を複数樹立することに成功し、形質細胞様樹状細胞をToll様受容体活性化物質で刺激し抗体存在下、非存在下におけるI型IFN産生量をELISA法によって確認したところ、著しい産生抑制が見られた。一方、リガンドであるSemaphorinを作用させることにより、PDC-TREM依存的にI型IFNが産生されることも見出した。以上の結果から、PDC-TREMは形質細胞様樹状細胞のI型IFN産生増強に重要な分子であることが明らかとなった。今年度は研究実施計画に則り、下流のシグナル伝達分子とI型IFN産生性との関連について焦点をあてて詳細な検討を行い、Phosphoinositide 3-Kinase並びにExtracellular signal-regulated kinase1/2がPDC-TREM依存的にリン酸化されることを見出し、さらに各々の特異的リン酸化阻害剤を作用させることにより、I型IFN産生が抑制されることも見出した。本研究成果については、"PDC-TREM, a plasmacytoid dendritic cell-specific receptor, is responsible for augmented production of type I interferon"というタイトルでPNAS誌(105巻、8号、2993-2998頁)に論文として発表するとともに、プレスリリースを行い、20紙を超える新聞さらに100件を越えるインターネット記事として紹介された。さらに、PDC-TREM遺伝子欠損マウスの作製に成功し、PDCにおけるToll様受容体認識後のI型インターフェロン産生増幅に必須の分子機構を担っていることを明らかとした。また、PDC-TREMが形質細胞様樹状細胞特異的分子であることから、形質細胞様樹状細胞の生体内での動態を観察するために、PDCモニターマウスを開発中である。申請者はPDC-TREMが活性化形質細胞様樹状細胞(PDC)特異的膜分子であること、PDC-TREMがTLR刺激後のIFN産生調節に重要な役割を担っていること、を明らかにした。今年度は研究実施計画に則り、下流のシグナル伝達分子とI型IFN産生性との関連について焦点をあてて詳細な検討を行い、Phosphoinositide 3-Kinase並びにExtracellular signal-regulated kinase 1/2がPDC-TREM依存的にリン酸化されることを見出し、さらに各々の特異的リン酸化阻害剤を作用させることにより、I型IFN産生が抑制されることも見出した。本研究成果については、PNAS誌(105巻、8号、2993-2998頁)に論文として発表するとともに、プレスリリースを行い、20紙を超える新聞さらに100件を越えるインターネット記事として紹介された。申請者はウイルスに対する生体防御反応に必須のI型インターフェロン(IFN)産生細胞として知られる形質細胞様樹状細胞(PDC)が活性化した際に発現する特異的細胞表面分子PDC-TREMを発見し、PDC-TREMがToll様受容体(TLR)刺激後のIFN産生の調節に重要な役割を担っていることを明らかにした。

PDC-TREMに対する特異的モノクローナル抗体を複数樹立することに成功し、PDCをTLR9刺激物質であるCpGで刺激し、特異抗体存在下および非存在下あるいはRNAiによるノックダウンにおけるI型IFN産生量をELISA法によって確認したところ、著しい産生抑制が見られた。またPdc-trem遺伝子欠損マウスを樹立し、本マウスにおいてはPDCの生体内における発生及び分化には異常は認められないものの、TLR刺激後のIFN産生が著しく減じることを見出した。これらの結果は、TLRを介したウイルスに対する生体防御反応において、PDC-TREM分子がIFN産生調節、特に増幅において重要な役割を担っていることを示している。PDC-TREM分子はPDCに特異的に発現が見られることから生体内でのPDCのモニタリングに有用な分子でもある。脾臓に存在するPDCは定常状態においてmarginal zoneに散在して存在し、ウイルス感染やCpG刺激によってPDC自身でクラスターをつくりながらT cell zoneに移行することが明らかとなった。PDCクラスター形成が自身の機能獲得にどのような影響を与えているのか、またクラスター形成機構について研究を継続している。
室温以下での単結晶高融点酸化物薄膜の合成

ナノオーダーで異種原子層の膜厚を制御しながら、良好な界面を持つ酸化物人工格子を積上げていくには、できるだけ低温において島状成長させずに原子層(あるいは分子層)単位で2次元的に層状成長させ、それを成長中にその場観察することが必要である。我々が独自に開発したレーザーMBE法(レーザー分子線エピタキシ-)により、種々の酸化物において、室温という低温で2次元的に単結晶薄膜成長することに成功した。2次元成長は反射高速電子線回折(RHEED)の強度振動のその場観察から確認した。具体的には以下の通りである。(1)原子レベルで超平坦なサファイア基板上(R面)でのサファイア単結晶薄膜成長において初めて明瞭なRHEED振動を観察した。しかも、室温という低温でも、酸化アルミニウムは単結晶化し、しかもRHEED振動しながら2次元的に層状成長することが明らかになった。振動周期は1分子層(約0.3nm)の成長に対応している。RHEED振動を観察しながら成膜することによって室温でも膜厚を分子層オーダーで制御できることが実証された。(2)岩塩型のBaO薄膜において、室温という低温で分子層状毎に単結晶薄膜成長することが明らかとなった。また、酸化物高温超伝導体の一つであるNdBa2Cu3Ox薄膜の上でも、室温でBaO薄膜を単結晶薄膜成長させることに成功した。室温成膜であるために界面での相互拡散や界面層の形成は抑制され、シャープな界面が形成された。これにより、未だ実現していないトンネル型高温超伝導ジョセフソン接合(SIS型)形成において、極薄絶縁バリア層(I層)と超伝導層(S層)間でのシャープな界面形成が可能になることが期待される。
住宅等の施設と複合する保育所及び児童館の環境整備について

都市部では用地確保の難しさから保育所を集合住宅や他の公共施設と複合させて設置する事例が多く見られる。施設複合にあたっては、併設施設との交流が図れる、住民サービスの向上が図れる等のメリットがある一方、十分な専用の園庭が取れない、落下物の心配がある等のデメリットもある。本研究では東京23区の公私立認可保育所・認証保育所を対象に調査を実施し、複合型保育所の形態の類型化を行い、課題を抽出した。施設複合のメリットである相互交流を活性化させるには、複合施設問で交流の機会を設けるなどソフト面での対応や施設問の自然な交流が図れる空間設計が重要と考えられていること、施設複合のデメリットである落下物の防止には、住宅との複合の場合は張り出し部分を設けるなどの対策を図るべきことなどが課題として明らかになった。しかしながら、こうした複合型保育所の多くが公的住宅と複合されているが、実際には住民と保育所の交流は活発でないことも明らかになった。そこで保育所と住宅団地の関係性を検討するため、保育所を複合施設として有する住宅団地の全住民を対象とし、保育所を含む団地内施設環境に関する意識調査を行ったところ、住民の約1/3が保育所について団地の住環境を考える上で重要な施設であるとの認識を持っていることが明らかになり、住民と園児との交流行事を実施することにより保育所と地域住民との関係性を良好にできるという可能性が示された。また、住宅団地内にある保育所等の子どもの施設・施設利用者・保護者・団地自治会を対象に、団地という環境の子ども施設への適合性、団地住民および自治会と子ども施設との関係性について調査1を行った結果、団地空間は子どもの遊び空間として優れているという評価が得られ、子ども施設の設置場所として団地が有効であること、子ども施設と団地自治会の連携により団地に賑わいを創出できる可能性が確認された。現代では、女性の社会進出や少子高齢化に伴う世帯規模の縮小等により、行政による子育て支援機能に対するニーズが多様化している。少子化の進行にもかかわらず都市部では待機児章が増加しており、保育所の質的および量的充足が急務となっている。都市部では保育所の用地確保が困難であることから、住宅や児童館その他の地域施設との複合により保育所整備が進められている。こうした都市部の複合型保育所の現状を子どもの保育環境という視点から分析し、形態が及ぼす影響から今後の保育所整備のあり方についての考察を行うことを目的として、東京23区の公私立認可保育所・認証保育所を対象にアンケート調査・ヒアリング調査を実施した。その結果から、複合型保育所の形態の類型化を行い、課題を抽出した。施設複合のメリットである相互交流を活性化させるには、複合施設間で交流の機会を設けて相互理解を深めるなどソフト面での対応や施設間の自然な交流が図れる空間設計が重要なこと、施設複合のデメリットである落下物の防止には、住宅との複合の場合は張り出し部分を設けるなどの対策を図るべきことなどが課題として明らかになった。保育所の複合施設として多く見られる児童館は、民間委託化や学童保育機能の切り離しなど変革期にあり、子育て支援機能へのシフトも見られた。施設上は特別なものを持たない館であっても子育て支援の場として積極的に活用されており、母親からの評価も高いことがわかり、児童館を核とした地域における有効なネットワークを形成できる可能性を有していることが推察された。

昨年度までの研究により、こうした複合型の保育所には公営住宅・公団住宅などの公的住宅と複合されているものが多いこと、住宅との複合は保育園側から見てメリットを見出しにくいということなどが明らかになった。この結果を受け、本年度は保育所を複合施設として有する住宅団地の全住民を対象とし、保育所を含む団地内施設環境に関する意識調査を行った。調査対象団地は東京都江東区内の都市機構(旧住宅公団)の賃貸住宅で、敷地内に7の高層住棟(7階建14階建)があり、そのうちの1棟の1階部分に保育所が複合されている。調査結果より、住民の35.1%が保育所について団地の住環境を考える上で重要な施設であるとの認識を持っていることが明らかになった。保育所の存在は「団地に活気がもたらされる(68.2%)」「団地に小さな子どものいる若い世代の入居が期待できる(61.4%)と評価されている。また、67.8%が保育所の地域住民への開放を「良いこと」と認識しており、34.2%が行事などに参加することで子どもたちと交流を持ちたいと考えていることが明らかになった。現状では住民と園児との交流行事は行われていないが、こうした行事を実施することにより保育所と地域住民との関係性を良好にしていくことができるという可能性が示された。都市部では用地確保の難しさから保育所を集合住宅や他の公共施設と複合させて設置する事例が多く見られる。施設複合にあたっては、併設施設との交流が図れる、住民サービスの向上が図れる等のメリットがある一方、十分な専用の園庭が取れない、落下物の心配がある等のデメリットもある。一昨年度までの研究により、こうした複合型の保育所には公営住宅・公団住宅などの公的住宅と複合されているものが多いこと、住宅との複合は保育園側から見てメリットを見出しにくいということなどが明らかになった。この結果を受け、昨年度は保育所を複合施設として有する住宅団地の全住民を対象とし、保育所を含む団地内施設環境に関する意識調査を行った。保育所の存在は「団地に活気がもたらされる」「小さな子どものいる若い世代の入居が期待できる」と評価されている。本年度はこれらの結果をもとに、住宅団地内にある保育所等の子どもの施設・施設利用者・保護者・団地自治会に対しヒアリング調査・訪問観察調査を行い、団地という環境の子ども施設への適合性、団地住民および自治会と子ども施設との関係性について検証を行った。その結果、団地空間は子どもの遊び空間として優れているという評価が得られ、子ども施設の設置場所として団地が有効であること、子ども施設と団地自治会の連携により団地に賑わいを創出できることが確認された。
慢性移植腎症の病態解明と早期診断を目的としたバイオマーカーの開発

移植腎機能喪失の主要な原因である慢性移植腎症(CAN)の臨床的診断は困難で、小児患者にも安全で非侵襲的な診断法はない。我々は、これまでに活性化マクロファージ(Mφ)の亜型であるCD163陽性Mφが組織の慢性化病変の形成に関与することを報告してきた。今回は、患者尿でCD163抗原の定量を行い、組織所見、臨床所見との関連を検討した。腎生検組織において、間質のCD163陽性Mφ数と線維化が正の相関を示し、尿中CD163の値は急性期を過ぎた安定期の移植腎機能および間質の線維化と相関を認めた。CANの進展に、CD163陽性Mφが深く関わっており、尿中CD163はCAN早期診断のための非侵襲的なマーカーとして使用できる可能性が示唆された。腎移植の急性期生着率の向上に伴い問題となっている慢性期の移植腎機能障害(慢性移植腎症)の成因として、マクロファージの関与を考え、検討を進めている。腎生検材料による検討当院ならびに関連病院にて行った30件の移植腎生検組織を用い、マクロファーシ(Mφ)"浸潤と生検時の組織所見、腎機能を解析したところ、明らかな拒絶症状がなくとも腎移植後経過が長いほど腎機能は低下する傾向があり、組織所見上の尿細管間質の線維化と有意な相関が認められた。また、間質線維化の程度はマクロファージ浸潤度と有意に相関しており、その局在は線維化部(αSMA陽性部)と一致していた。浸潤マクロファーシは、組織修復に関わるM2型活性Mφの特異マーカーであるCD163抗原を表出していた。以上の所見から、慢性移植腎症の進展には、CD163陽性Mφが関与している可能性が示唆され、日本小児腎不全学会で発表した。尿検体による検討各種慢性腎疾患患者の尿検体を用いた検討から、尿中の可溶性CD163抗原がELISAシステムにより検出が可能であることを確認しており、さらに腎機能や組織所見との関連を検討している。今後CAN患者の尿検体を用いて同様の検討を行い、CANの早期発見あるいは進展をモニターするバイオマーカーとしての利用の可能性を検討する予定である。明らかな拒絶所見を伴わずに慢性に進行する移植腎の腎機能障害(慢性移植腎症)の成因として、CD163陽性のM2型活性化マクロファージの関与を考え、検討を進めている。腎生検材料による検討当院ならびに関連病院にて行った30件の移植腎生検組織を用い、マクロファーシ(Mφ)浸潤と生検時の組織所見、腎機能を解析したところ、明らかな拒絶症状がなくとも腎移植後経過が長いほど腎機能は低下する傾向があり、組織所見上の尿細管間質の線維化と有意な相関が認められた。同様の所見は小児ネフローゼ症候群に対するシクロスポリンの長期投与により生じるシクロスポリン腎毒性にもみられ、腎尿細管間質の線維化にM2型な黒ファージが関与する可能性を見出し、第43回アメリカ腎臓学会にて発表した。慢性移植腎症を含む、慢性腎疾患患者の尿検体を用いて同様の検討を行い、慢性腎疾患の間質障害(線維化)の進展をモニターするバイオマーカーとしての利用の可能性を検討を続けている。腎移植の急性期生着率の向上に伴い、現在問題となっている慢性期の移植腎機能障害(慢性移植腎症)の成因として、マクロファージの関与を考え、検討を進めている。腎生検材料による検討30件の移植腎生検組織を用い検討したところ、明らかな拒絶症状がなくとも腎移植後経過が長いほど腎機能は低下する傾向があり、尿細管間質の線維化と有意な相関が認められた。さらに間質線維化の程度はマクロファージ浸潤度と有意に相関しており、組織修復に関わるM2型活性Mφの特異マーカーであるCD163抗原を表出していた。以上の所見から、慢性移植腎症の進展には、CD163陽性Mφが関与していると考えた。尿検体による検討尿中CD163がELISAシステムにより検出が可能であることを確認できたので、今年度はCAN患者の尿検体を用いて検討を行い、CANの早期発見あるいは進展をモニターするバイオマーカーとしての利用の可能性を検討した。

尿中CD163の値と移植腎の推定GFRの間には負の相関があった。移植後、長期経過していても、移植腎機能が良好な症例では尿中CD163の上昇が認められず、移植後年数との間には相関がみられなかった。今回の検討では、尿中CD163の値は急性期を過ぎた安定期の移植腎機能と相関があり、移植腎の線維化進行の程度を示し、尿中CD163が、CANの非侵襲的なマーカーとして使用できる可能性が示唆され、これを小児腎不全学会で発表した。