hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ラジカル重合における構造制御に関する研究

近年、リビングラジカル重合法は急速な発展を遂げ、様々なモノマーのラジカル重合で分子量や分子量分布の制御が可能になっている。一方で、ラジカル重合における立体規則性(タクチシチー)の制御については、これまで有効な手法がほとんど知られていなかったが、最近、我々はアクリルアミド誘導体のラジカル重合で、希土類トリフルオロメタンスルホン酸塩(トリフラート)などのルイス酸を触媒量重合系に添加することにより、重合がイソタクチック特異的に進行する事を報告している。本研究では、ルイス酸による立体制御とリビングラジカル重合法を組み合わせることにより、ポリマーの分子量と立体化学の同時制御を試みた。付加開裂移動型(RAFT)重合法は、幅広いモノマーや様々な条件で高いリビング重合性を有することから、最近、注目を集めている重合法の一つである。ここでは、N-イソプロピルアクリルアミド(NIPAM)のRAFT重合をルイス酸存在下で行なうことにより、分子量分布の狭いイソタクチックなポリマーが得られた。また、生成ポリマーの分子量は、重合時間に比例し直線的に増加し、その分子量は仕込みのモノマー濃度から算出される理論分子量とほぼ一致し、分子量と立体規則性が同時に制御されたポリマーの合成に成功した。また、本手法は、N,N-ジメチルアクリルアミド等の他のアクリルアミド誘導体の重合制御に対して有効であった。さらに、ルイス酸を用いずにRAFT重合することにより合成した、アタクチック鎖を有するマクロ開始剤を用い、ルイス酸存在下でさらに重合を進行させることにより、アタクチック部分とイソタクチック部分からなるステレオブロックコポリマーの合成に成功した。本手法は、高度に構造の制御されたポリマーの合成を可能にし、ラジカル重合の新しい応用への道を開くものである。近年、リビングラジカル重合法は急速な発展を遂げ、様々なモノマーのラジカル重合で分子量や分子量分布の制御は可能になっている。しかし、これまで、ラジカル重合でポリマーの分子量と立体規則性を同時に制御した例は知られていない。我々は、これまでの研究でアクリルアミド誘導体のラジカル重合で、希土類トリフルオロメタンスルホン酸塩(トリフラート)などのルイス酸を触媒量重合系に添加することにより、重合がイソタクチック特異的に進行する事を見いだしている。そこで、本研究では、ルイス酸による立体制御とリビングラジカル重合法を組み合わせることにより、ポリマーの分子量と立体化学の同時制御を試みた。ルイス酸存在下、ジチオエステル化合物を用いて、N-イソプロピルアクリルアミド(NIPAM)の付加開裂移動型(RAFT)重合を行なった。その結果、60°C、トルエン-メタノール混合溶媒中、希土類トリフラート存在下でのRAFT重合で分子量分布1.8前後の比較的分子量分布の狭いイソタクチックなポリマーの合成に成功した。ポリマーの分子量は重合転化率の増加とともに直線的に増加し、その分子量は収率から換算される理論分子量とよく一致し、本手法により生成ポリマーの立体規則性と分子量の同時制御がある程度可能となった。また、RAFT重合によりステレオブロックコポリマーの合成を試みた。まず、ルイス酸不在下でNIPAMのRAFT重合し、アタクチックなポリマーを合成した。その後、ポリマーを単離することなく、重合系にルイス酸を添加することにより、アタクチック部分とイソタクチック部分からなるステレオブロックコポリマーのが得られた。
多発性硬化症の疾患関連遺伝子同定へのアプローチ

まずはじめに、視神経脊髄型多発性硬化症(OSMS)とその他の多発性硬化症(MS)に群類し、これまで日本人MSとの相関が示されているDRB1^*1501、DPB1^*0501、DPB1^*0301との関連を再検討した。その結果、OSMSではDPB1^*0501が対照に比して高頻度であったが、DPB1^*0301は1例もなかった。DPB1^*0301(-)の患者におけるDPB1^*0501の頻度はOSMSとそれ以外のMSとで同頻度であった。次に、脊髄MRIにて3椎体以上の病変(LESL)を有するMS患者の特徴を分析することによって、"attack-related severity (attack-related lesion expansion)"、臨床経過および病変分布の3つの要因(軸)に基づいた3次元的病像把握の重要性を検証し、それを規定する関連因子、特に遺伝的背景としてのHLA遺伝子多型およびCTLA-4遺伝子多型との関連の有無を検討した。その結果、LESLを有する群は、少なくとも一部、遺伝的に規定されたCTLA-4分子によるT細胞のdown-regulationが関与している可能性があり、病変分布の特異性はHLA-DP多型が関与している可能性があるという結果が得られた。さらに、通常型MSにおけるHLAを中心に解析した。その結果、オリゴクローナルバンド(OCB)陰性群ではHLA-DRB1^*1501ではなくHLA-DRB1^*0405を有することが多いという結果を得た。その他にOCB陰性DRB1^*0405陽性の群の発症年齢、病型、重症度等の臨床的特徴の有無を検討したが、今回のデータでは有意なものは見いだせなかった。今年度は主に以下に示す,2点に関して検討した.一つ目は,視神経脊髄型多発性硬化症(OSMS)とその他のMSに群類し,これまで日本人MSとの相関が示されているDRB1^*1501,DPB1^*0501,^*0301との関連を再検討した.その結果,OSMSではDPB1^*0501が対照に比して高頻度であったが,DPB1^*0301は1例もなかった.DPB1^*0301(-)の患者におけるDPB1^*0501の頻度はOSとそれ以外のMSとで同頻度であった.これらのことからOSMSとDPB1^*0501の相関は特異ではなく,OS以外のMSとDPB1^*0301との特異的な相関に起因すると考えられた.二点目は,脊髄MRIにて3椎体以上の病変(LESL)を有するMS患者の特徴を分析することによって,"attack-related severity(attack-related lesion expansion)",臨床経過および病変分布の3つの要因(軸)に基づいた3次元的病像把握の重要性を検証し,それを規定する関連因子,特に遺伝的背景としてのHLA遺伝子多型およびCTLA4遺伝子多型との関連の有無を検討した.その結果,LESLを有する群は,少なくとも一部,遺伝的に規定されたCTLL4分子によるT細胞のdown-regulationが関与している可能性があり,病変分布の特異性はHLA-DP多型が関与している可能性がある.LESLの形成に関わる病態が脊髄にのみ影響するとは考えにくく,視神経,大脳,小脳,脳幹における"attack-related severity(attack-related lesion expansion)"の標準化とそれを用いても多数例での検討が病態把握のみならず治療方法の発展・選択に重要であると思われる.今年度は、これまで多発性硬化症(MS)において疾患感受性遺伝子として注目されているHLAを中心に解析した。

MSにおけるオリゴクローナルバンド(OCB)の意義は重要で、欧米でのデータではMSの9割以上に陽性を示すとされている。しかし、日本でのMSにおけるOCBの陽性率は50-70%と言われ、欧米に比べ有意に低い。これまでの研究では、MSでは、HLA-DRB1^*1501との関連が推測されているが、我々は、OCB陰性群ではHLA-DRB1^*1501ではなくHLA-DRB1^*0405を有することが多いことを報告した。最近、Swedenのグループが、OCB陰性群では、HLA-DRB1^*0404を有することが多いことを発表したが、HLA-DR4においては人種差がある。DRB1^*0405はアジア系民族に特有の対立遺伝子であり、白人では稀であるのに対して、白人ではDRB1^*0404は、頻度の高い対立遺伝子であり、日本人では極めて稀である。DRB1^*0405とDRB1^*0404は、DRβ鎖の第3多様性部分配列に、QRRAA motifを共通に持つとされ、抗原提示能が近い可能性があり、Swedenのグループと我々の結果の違いは、同じ意味を持っている可能性がある。更に、我々はOCB陰性DRB1^*0405陽性の群の発症年齢、病型、重症度等の臨床的特徴の有無を検討したが、今回のデータでは有意なものは見いだせなかった。
炎症抑制効果を有する乳清タンパク質分解ペプチドによるサルコペニアの予防と改善

サルコペニア(加齢性筋肉減弱症)の発症と進行を予防するためには、炎症を抑制し骨格筋のたんぱく質合成を促進する必要がある。筋損傷毒素を投与したマウス腓腹筋において、乳清たんぱく質分解ペプチドが損傷を軽減し、炎症を抑制することを、筋逸脱酵素、炎症性サイトカインを指標として検討し、効果を確認した。また、マウス骨格筋のたんぱく質合成についてたんぱく質合成制御因子であるmTORの遺伝子発現量とリン酸化mTOR量を指標とし検討し、同ペプチドのたんぱく質合成制御を正に促進する効果を確認した。これらの結果は、同ペプチドがサルコペニアの発症と予防に有効であることを示唆する科学的データを提供するものである。高齢者のサルコペニアは、加齢とたんぱく質低栄養により発症する。その際、高齢者特有の慢性炎症が症状を助長する。当研究の目的は、炎症抑制効果を有する食素材(乳清たんぱく質分解ペプチド(乳清ペプチド))が、骨格筋の炎症を抑制し、筋たんぱく質合成促進および筋肉量減少抑制を促進するかを動物モデルで確認することである。初年度は、筋損傷レベルをコントロールできる再現性の高い動物モデルを構築することを目的とする。カルディオトキシン(CT、コブラ毒に含まれる筋損傷ペプチド(分子量6,693))をマウス腓腹筋に筋注し(10mM溶液100μL)、筋損傷を誘発した。CT投与24時間後筋を摘出後の病理組織観察により、乳清ペプチド含有餌摂取群で筋損傷が軽度することが判明した(カゼイン投与群と比較)。また、炎症に伴う筋浮腫の程度を示す筋重量は、乳清ペプチド摂取により有意に軽減した。血漿中のIL-6(炎症性サイトカイン)濃度を測定した結果、乳清ペプチド摂取群で有意に低い結果を得た。次いで、CT投与後24時間以内の筋損傷の程度を観察した。CT投与2時間後に浮腫が形成され、24時間まで持続した。浮腫の程度は、乳清ペプチド投与により有意に軽減した。また、血漿中のIL-6濃度は、投与2時間後に最高値に達することが分かった。これらの結果は、CT投与による骨格筋損傷は数時間以内に成立する炎症により誘発されることを示す。これまで、CT投与による骨格筋損傷モデルは、CT投与数日後の損傷修復を観察した結果についての報告がある。CT投与後短時間の骨格筋の炎症および筋損傷成立が観察された例は今回が初めてと思われる。また、乳清ペプチドが骨格筋の炎症を抑制する効果を有することを示すのも初めてである。再現性についても問題なく、筋損傷モデル系の構築、および乳清ペプチドの骨格筋炎症・損傷抑制効果も確認できた。27年度は、乳清たんぱく質分解ペプチド(乳清ペプチド)摂取による骨格筋の炎症抑制を観察するために以下の3項目の検討を予定した。1)動物モデルの構築、2)乳清ペプチド摂取法の検討、3)13C呼気試験が骨格筋のたんぱく質代謝測定に利用可能かの検討。1)動物モデルの構築は、予定通りの検討を行い、期待通りの結果を得た。2)乳清ペプチド摂取法の検討は、標準餌であるAIN-93Gに含まれるたんぱく質を乳清ペプチドに置き換え摂取させることにより効果が確認できた。よって、乳清ペプチドの微細な摂取量の検討は必要であるが、骨格となる結果は得られた。3)13C呼気試験が骨格筋のたんぱく質代謝の測定に利用可能かを検討する課題は、13C標識アミノ酸を経口投与したラットの呼気を採取し、アミノ酸代謝を経時的に測定することが可能であることを確認でき、計画通りの進行となった。高齢者のサルコペニアは、たんぱく質摂取量の低下のみではなく加齢に付随する慢性炎症が原因となり発症・進行を促進する。良質なたんぱく質源である乳清たんぱく質(主成分はα-ラクトアルブミンおよびβ-ラクトグロビン)は、我々の研究により炎症抑制効果を有することが明らかになった。乳清たんぱく質を高齢者のサルコペニアの予防および進行抑制に応用するための科学的基盤の構築が当研究の目的である。初年度(2015年度)は、筋損傷モデルを作成し、このモデルの安定性および乳性たんぱく質の筋損傷抑制効果を病理標本レベルで確認した。次年度(2016年度)は、筋損傷モデルおける乳清たんぱく質の効果をより詳細に検討した。筋損傷レベルの比較は、筋逸脱酵素(クレアチンキナーゼ(CPK)、乳酸脱水素酵素(LDH))の活性測定により定量的に行った。乳清たんぱく質を配合した餌を与えたマウスでは、対照群(カゼインを配合した餌を摂取)と比較して、血中CPK、LDHは、有意に低い値を示し、筋損傷レベルが低いことを確認した。次いで、血中の炎症性サイトカイン(TNF-αおよびIL-6)の濃度を測定した。肝炎などの場合は、TNF-α、IL-6ともに上昇するが、骨格筋の場合は、TNF-α濃度は上昇せず、IL-6濃度のみが上昇し、他の臓器とは異なるパターンを示すことがわかった。さらに、乳清ペプチドを摂取したマウスの腸内細菌叢を解析した。乳清ペプチド摂取により、糞中の乳酸菌群が有意に増加しクロストリディウム群が有意に減少した。今年度の研究結果は、乳清ペプチド摂取により筋損傷が抑制されることを示すと同時に、他の臓器の炎症とは異なるサイトカインパターンを示し、乳清たんぱく質摂取により腸内細菌叢が顕著に変化することも示すものである。これらは、新規な結果である。

今後、これらの結果を精査し乳清ペプチドの作用機作の解析を進める予定である。27年度は、骨格筋の炎症状態を観察し、乳清たんぱく質摂取による炎症抑制効果を確認するための「動物モデルの構築」を主体に研究を進め、安定した筋損傷モデルを構築することができた。28年度は、構築した動物モデルを用い、「骨格筋の損傷、炎症、再生に対する乳清たんぱく質の作用」についての解析を行う計画とした。乳清たんぱく質の作用機作についての検討が進み、新規な結果を得ることができた。特に下記は特筆すべき点である。1.筋損傷レベルの判定には、筋逸脱酵素(クレアチンキナーゼ、乳酸脱水素酵素)の血中レベルにより判定した。その結果、27年度に構築した筋損傷動物モデルを用い、筋損傷レベルの比較が可能であることがわかった。27年度は、病理標本(パラフィン切片)の観察により行ったが、筋逸脱酵素により、定量的な損傷の観察が可能となった。2.血中の炎症性サイトカインレベルを観察することにより、筋損傷形成における炎症性サイトカインの役割について検討した。他の組織の炎症とは異なりTNF-αの血中レベルは上昇しないが、顕著なIL-6の上昇が見られた。これは、他の臓器とは異なる炎症性サイトカインパターンである。このパターンの相違を生じさせる骨格筋の特性、特に免疫細胞の種類等が異なると思われる。3.乳清たんぱく質を摂取したマウスの糞便中の細菌叢が顕著に変化した。乳酸菌群の構成割合が有意に増加し、クロストリディウム群の構成割合が有意に減少した。乳清たんぱく質摂取による腸内細菌叢の変化は、これまで報告されていない結果である。乳清ペプチドの作用機作に関する検討に関しては、計画は順調に進展したと考えられる。計画の中で、筋再生時のたんぱく質代謝の測定についての進展は得られていない。この面での計画の再検討が必要と思われる。高齢者のたんぱく質合成能低下と慢性炎症が、サルコペニアを進行させると考えられている。たんぱく質合成促進と慢性炎症抑制が、サルコペニア予防に必要である。20152015年度は、乳清たんぱく質が骨格筋の炎症抑制効果を示すことを確認した。2017年度は、乳清たんぱく質のたんぱく質合成促進効果について検討した。カゼインを摂取したマウス群(CP群)と比較し、乳清たんぱく質摂取群(WP群)では、腓腹筋のmTOR本体の遺伝子発現レベルは、有意に高い結果となった。Raptorの遺伝子発現レベルの比較により、CP群と比較し、WP群ではmTORC1のレベルが有意に高い結果となった。一方、Rictorの遺伝子発現レベルは、CP群とWP群との間で差は認められなかった。乳清たんぱく質摂取によりmTORC1レベルが上昇しておりたんぱく質合成が促進されていることを示す。また、腓腹筋のmTORのリン酸化レベルを、Western blotting法により検出した。CP群と比較しWP群でmTORのリン酸化レベルが有意に高い結果であった。この結果は、mTORのリン酸化のレベルでも骨格筋のたんぱく質合成が促進されていることを示す。今回の結果は、乳清たんぱく質は、骨格筋の炎症抑制効果(20152015年度の成果)に加えたんぱく質合成促進効果を持つことを示し、サルコペニア対応食品の開発の基盤を提供するものである。
発生工学的手法を用いた転写因子Runx1の造血幹細胞発生における機能の解析

転写因子Runx1(AML1)の造血幹細胞発生における機能を解析する目的で、AML1の磯能をドミナントに抑制するAML1/EVI1キメラ遺伝子をマウスAML1 locusにノックインしたAML1/EVI1ノックインマウスを作製し解析した。1.AML1/EVI1ヘテロノックインマウスは胎生致死であった。2.胎仔肝での成体型造血の欠如を認めた。3.造血コロニーアッセイでは、ヘテロマウス胎仔肝では赤芽球系のコロニーは全く観察されなかった。また、ヘテロマウス胎仔肝にはより高い自己複製能を持つ造血前駆細胞の存在が碓認された。4.胎仔肝における造血系転写因子の発現について、半定量的RT-PCRにて解析した。AML1/EVI1ヘテロマウスの胎仔肝において、AML1ノックアウトマウスと異なり、Pu.1の発現が維持されることにより、自己複製能の高い造血前駆細胞が増加している可能性が示唆された。今回我々は、6匹のAML1EVI1ノックインキメラマウスを作製したが、いずれも寿命より早期の突然死が観察された。7ケ月以降に死亡した5匹マウスは明らかな解剖学的異常を認めなかったが、5ケ月で死亡した1匹のマウスは著明な肝脾腫を呈していた。脾臓のスタンプ標本では、大型の異型細胞の著明な浸潤が認められ、その一部は多核を有する大小様々な巨核芽球様細胞であった。脾臓の病理学的な検討では、巨核球様の多核細胞を含む大型の異型細胞の浸潤とそれに伴う脾髄構造の破壊が認められ、肝臓では好中球を主体とした門脈域への高度な細胞浸潤と、DICに伴うと思われる門脈内の多数のフィブリン血栓を認めた。さらに電子顕微鏡検査(PPO染色)にて、脾臓に浸潤した多核細胞が巨核球系細胞であることが確認された。以上より、このキメラマウスは急性巨核芽球性白血病を発症したと考えられ、白血病発症におけるAML1/EVI1の重要性が確認された。転写囚子Runx1(AML1)の造血幹細胞発生における機能を解析する目的で、AML1の機能をドミナントに抑制するAML1/EVI1キメラ遺伝子をマウスAML1 locusにノックインしたAML1/EVI1ノックインマウスを作製し解析した。1.AML1/EVI-1ヘテロノックインマウスは胎生致死であった。2.中枢神経系の出血および胎仔肝での成体型造血の欠如を認めた。ヘテロマウス胎仔肝において赤芽球系細胞および骨髄球系細胞の著明な減少と、異形成のある巨核球系細胞を認めた。また、末梢血塗沫標本では有核赤血球のみを認めた。3.造血コロニーアッセイでは、ヘテロマウス胎仔肝では多系統の細胞からなるCFU-Mixを含むコロニーが多数得られたが、赤芽球系のコロニーは全く観察されなかった。コロニーアッセイ10日目のサイトスピン標本では顆粒球への分化傾向は示すものの顆粒形成はほとんど認められず、分化の抑制および形態異常が認められた。また、継代培養実験にて、AML1/EVI-1胎仔肝にはより高い自己複製能を持つ造血前駆細胞の存在が確認された。4.胎仔肝細胞における造血系転写因子の発現について、半定量的RT-PCRにて解析した。AML1/EVI-1ヘテロマウスおよびAML1ノックアウトマウスでは、CEBPαは野生型マウスの約4倍の発現増加が認められたのに対し、Lmo2およびSCLは1/10程度と著明な低下が認められた。一方、AML1ノックアウトマウスでは、Pu.1は野生型マウスと比べ著明な発現低下が認められたのに対し、AML1/EVI-1ヘテロマウスでは野生型マウスと同等のPu.1の発現が認められた。AML1/EVI-1ヘテロマウスの胎仔肝において、AML1ノックアウトマウスと異なり、Pu.1の発現が維持されることにより、自己複製能の高い造血前駆細胞が増加している可能性が示唆された。Runx1-EvilはAML(M7)やCMLの巨核芽球性急性転化に出現が認められる融合遺伝子である。Runx1-Evilは、RUNX1に対するドミナントネガティブ効果を有するとともに、EVI1部分に由来する造腫瘍活性(TGFβシグナルの抑制、AP-1活性の刺激、JNKの抑制)を有するため、白血病発症に重要な役割を持つと考えられる。そこで、平成17年度に作製した6匹のRunx1-Evi1ノックインキメラマウスについて、白血病発症の有無につき解析した。6匹のキメラマウスは、いずれも寿命より早期の突然死が観察された。7ヶ月以降に死亡した5匹のマウスには明らかな解剖学的異常を認めなかったが、5ヶ月で死亡した1匹のマウスは著明な肝脾腫を呈していた。

脾臓の病理学的な検討では、巨核球様の多核細胞を含む大型の異型細胞の浸潤とそれに伴う脾髄構造の破壊が認められ、肝臓では反応性好中球を主体とした門脈域への高度な細胞浸潤と、DICに伴うと思われる門扉内の多数のフィブリン血栓を認めた。さらに電子顕微鏡検査(PPO染色)にて、脾臓に浸潤した多核細胞が巨核球系細胞であることが確認された。以上の結果より、このキメラマウスは急性巨核芽球性白血病を発症したと考えられた。このことは、Runx1-Evi1はRux1-ETOとは異なりone hitで白血病を発症しうることを示唆している。また、Runx1-Evi1は白血病の表現型を巨核球系統に決定している可能性がある。Runx1-Evi1型白血病においてはEvil部分もその発症に重要な役割を担っていると考えられた。転写因子Runx1(AML1)の造血幹細胞発生における機能を解析する目的で、AML1の磯能をドミナントに抑制するAML1/EVI1キメラ遺伝子をマウスAML1 locusにノックインしたAML1/EVI1ノックインマウスを作製し解析した。1.AML1/EVI1ヘテロノックインマウスは胎生致死であった。2.胎仔肝での成体型造血の欠如を認めた。3.造血コロニーアッセイでは、ヘテロマウス胎仔肝では赤芽球系のコロニーは全く観察されなかった。また、ヘテロマウス胎仔肝にはより高い自己複製能を持つ造血前駆細胞の存在が碓認された。4.胎仔肝における造血系転写因子の発現について、半定量的RT-PCRにて解析した。AML1/EVI1ヘテロマウスの胎仔肝において、AML1ノックアウトマウスと異なり、Pu.1の発現が維持されることにより、自己複製能の高い造血前駆細胞が増加している可能性が示唆された。今回我々は、6匹のAML1EVI1ノックインキメラマウスを作製したが、いずれも寿命より早期の突然死が観察された。7ケ月以降に死亡した5匹マウスは明らかな解剖学的異常を認めなかったが、5ケ月で死亡した1匹のマウスは著明な肝脾腫を呈していた。脾臓のスタンプ標本では、大型の異型細胞の著明な浸潤が認められ、その一部は多核を有する大小様々な巨核芽球様細胞であった。脾臓の病理学的な検討では、巨核球様の多核細胞を含む大型の異型細胞の浸潤とそれに伴う脾髄構造の破壊が認められ、肝臓では好中球を主体とした門脈域への高度な細胞浸潤と、DICに伴うと思われる門脈内の多数のフィブリン血栓を認めた。以上より、このキメラマウスは急性巨核芽球性白血病を発症したと考えられ、白血病発症におけるAML1/EVI1の重要性が確認された。
日本語グレイディド・リーダー「JGRさくら」を利用した多読支援システムの開発

本研究では、日本語多読教材「JGRさくら」を電子書籍化し、日本語多読支援システムで公開した。このシステムは、教室外の日本語学習者がe-ラーニングで日本語多読教材を読むことにより、自律的に学ぶために開発された。事後アンケートとシステムの利用ログから、コメント掲示板で他の学習者の感想が読めること、個人ページで自分の進捗を知ることによって、読むことが楽しくなり、もっと読もうという動機付けになっていることがわかった。また、教師が介在しなくても、ビデオ教材を使うことによって、学習者が多読を始めることができることが示された。日本語学習者の多読支援を目的とし、多読教材「JGRさくら」を利用した多読支援システムの開発を進めている。既に開発したブレンド型授業支援サイトを土台として、教室外の学習者が自律学習として多読を行うための支援サイトを作成した。「JGRさくら」の短編11作品をサイト上で読む場合と、電子書籍用アプリで読む場合のそれぞれの形式で電子書籍化し、多読支援システムのライブラリに置いた。同時に、これらに対応した、一言紹介、内容質問などを設けた。多読支援システムの新たな機能として、「多読とは」と「JGRさくらの読み方」を説明するビデオを作成した。システムの使い方を説明するビデオも作成中である。これらは、自律学習で多読を始める初級の学習者の理解を助けるために必要な機能である。その他の機能として、学習者のモチベーションを維持するために、多読ランキング、コメント掲示板を作成した。コメント掲示板は、多読フォーラム構築の準備段階として試用する。多読フォーラム構築のための予備調査として、Facebookを使って読んだ本の感想を交換する多読コミュニティの実践報告を行った。また、既存のブレンド型多読支援システムを使った多読授業の応用として、多読教材の原作の文学作品を使った実践を論文とした。システム開発の他、JGRさくらの語彙表をデータベースとした「多読のための語彙レベルテスト」の開発を進めている。現在、Gレベルまで作成し、改良のための試行を行っている。次年度にシステムの試行を行うことが可能な状態まで試作が進んでいる。28年度は、「JGRさくら」の長編6作品をサイト上で読む場合と、電子書籍用アプリで読む場合のそれぞれの形式で電子書籍化し、多読支援システムのライブラリに置いた。多読支援システムの自律学習支援サイトの新たな機能として、「多読ラボの使い方」を説明するビデオを作成した。これらは、自律学習支援サイトで多読を始める初級の学習者の理解を助けるために必要な機能である。教室外の個別の学習者が独学で多読を行う際、他の学習者の存在を感じ、モチベーションを維持できるよう、多読ランキング、コメント掲示板を作成した。このコメント掲示板とFacebookを用い、多読フォーラム構築のための予備調査を行なった結果、他者の存在が多読の進捗に良い影響を与えることが明らかになった。しかし、その際、ディスカッション機能を備えたフォーラムは必ずしも必要ではないことがわかった。コメント掲示板を通して他の学習者の進捗を知ることで、多読が促進されることがわかったため、コメント掲示板を設置した。この自律学習支援サイトの評価を、国際学会で発表した。また、学習者が本システムを利用した際のログを利用し、読書行動を分析する方法を検討するため、既存のデジタル教材配信・閲覧システムを利用し、調査を行なった。さらに、JGRさくらの語彙表をデータベースとした「多読のための語彙レベルテスト」の開発を進め、Gレベルまでの試行テストを実施した。最終レベルのHを作成中であり、これで全レベルのテストが揃う。多読支援システムの自律学習支援サイトを試作し、評価実験を行なった。この結果を学会で発表した。28年3月に国際学会で発表した論文がselected paperに選ばれたため、追実験を行い、extended paperを投稿した。システム利用者を対象としたアンケート調査の結果、多読支援システムの個人ページで自分の進捗を知ることが読みの動機付けになっていることがわかった。電子書籍の利点は、いつでもどこでも本が読める点だが、紙の本では読む時間がなかった人に読む機会を与える可能性があることもわかった。多読教材の有用性と多読のための語彙レベルテストの必要性も示された。この論文が、International Journal on Advances in Intelligent Systemsに掲載された。8月に「さくら多読ラボ」を公開し、The 7th International Conference on Computer Assisted Systems for Teaching & Learning Japaneseでポスター発表を行った。学会発表により、今後の開発・改善へのフィードバックが得られた。現在、本システムは国内外の日本語学習者に利用されている。研究は概ね順調に進展したが、予算の関係で教師用の利用サイトを別に設けることはできなかった。これらの他、システムのログの利用方法を検討するため、既存のデジタル教材配信・閲覧システムを利用し、読書行動と語彙習得に関する調査を行った。システムの開発と同時に、JGRさくらの語彙表をデータベースとした「多読のための語彙レベルテスト」の開発を進めた。最終レベルであるHレベルまでテスト問題を作成した。日本語母語話者を対象とした試行を行い、この結果から、問題のあるアイテムの差し替えを行った。日本語学習者を対象とした試行の後、オンラインでの公開するための準備を行っている。また、コロケーション学習サイトを設計するための予備調査として、JGRさくらコーパスからコロケーションを抽出し、教材としての利用方法を検討した。

本研究では、日本語多読教材「JGRさくら」を電子書籍化し、日本語多読支援システムで公開した。このシステムは、教室外の日本語学習者がe-ラーニングで日本語多読教材を読むことにより、自律的に学ぶために開発された。事後アンケートとシステムの利用ログから、コメント掲示板で他の学習者の感想が読めること、個人ページで自分の進捗を知ることによって、読むことが楽しくなり、もっと読もうという動機付けになっていることがわかった。また、教師が介在しなくても、ビデオ教材を使うことによって、学習者が多読を始めることができることが示された。試作したシステムの評価を行い、改善すべき点を検討する。多読の方法を説明するビデオ教材は、自律学習支援サイトにおいて教室外の初級の学習者の理解を助けるために利用する他、ブレンド型授業支援サイトで反転授業のツールとしての利用を検討する。多読フォーラムは、自律学習支援サイトにおいて、学習者同士で感想等を共有できるようにするものである。予備調査を行い、フォーラムの構築と運営方法を検討する。「多読のための語彙レベルテスト」は、試行の結果からテストの質を向上させ、テストを最終レベルのHまで作成する。母語話者でテストの確認を行った上で、非母語話者に試行し、テストの信頼性を確認する。その上で、多読支援システム上で学習者の語彙レベルに合ったJGRさくらのレベル判定をする機能の設置を検討する。「多読のための語彙レベルテスト」の妥当性を確認するためには、データベースであるJGR語彙表をBCCWJなどのコーパスにおける語彙の出現頻度との比較し、分析することを検討している。以上の他、多読の継続、語彙学習へのモチベーションを高めるためのe-learning教材として、「JGRさくら」の作品に出現する共起表現を使ったコロケーション学習サイトなどを検討している。開発した多読支援システムの自律学習支援サイトを8月に公開し、国際学会において発表を行う。国内外の日本語学習者に本システムを利用してもらい、今後の開発・改善へのフィードバックを得る。また、利用者のログを利用した学習分析の方法を検討する。さらに今後、学習者の語彙レベルに合ったJGRさくらのレベルを判定する機能をシステムに設置するため、「多読のための語彙レベルテスト」を試行する。また、コロケーション学習サイトを設計するため、JGRさくらのコーパスで語彙調査を行う。日本語教育今年度の予算では、電子書籍化の費用の半分しか支払えなかったため、次年度に繰り越した。業者に委託しているシステム開発と電子書籍化の納期に遅れが生じたため。次年度の予算と合わせて一括で電子書籍化の費用を支払う。次年度に支払う。
転移RNAの硫黄修飾システムの解明

好熱性真正細菌のtRNAを耐熱化する硫黄修飾塩基の生合成機構を解析した。組換えタンパク質のみを用いて試験管内での硫黄化反応の再構成に成功した。また好熱菌内で反応を解析し、硫黄化酵素TtuAの反応機構を推定した。さらに生合成因子の一つTtuBが翻訳後修飾因子としても働き、tRNAの硫黄化を制御していることが示唆された。これは原核生物(真正細菌)の新規なタンパク質機能制御機構であり真核生物ユビキチン系の祖先系であると考えられ興味深い。RNAは転写後にスプライシングやRNA修飾などを経て成熟し、その本来の機能を発揮する。転移RNA(tRNA)はコドンとアミノ酸を対応させる機能をになうタンパク質合成系における中心的な分子であるが、このtRNAが機能するのに必要な硫黄化修飾がどう生合成されているかは未解明である。試験管内での再構成系により生合成のメカニズムを詳細に解析し、また細胞での解析から転写後修飾の機能を明らかにすることを目的とし研究を進めた。本年度は高度好熱菌(Thermus thermophilus)をモデルとして4つの組換えタンパク質(SufS、TtuA、TtuB、TtuC)を用いて、システインの硫黄原子がtRNAへ効率的に転移される反応系の構築を試みた。補酵素が結合した生合成因子の調製法を確立し、反応条件(反応組成・温度など)の検討により90%以上という高効率でtRNAへの硫黄転移が起こる系を構築することに成功した。これにより今後詳細な生化学的解析をおこなう基盤を固めることができた。また好熱菌の細胞内で、生合成因子同士が共有結合することを見出した。生合成因子の構造および反応機構の点から真核生物のユビキチン化系に類似していることを明らかにした。これは真正細菌では初めての発見である。真核生物の場合、この共有結合の代表的な機能はタンパク質分解であるが、好熱菌においては生合成因子の分解には関与していないことが示唆された。今後は硫黄修飾の生合成における役割を含め好熱菌における生物学的な意義について明らかにすることを目指す。本研究の成果は招待講演等で発表するとともに、日本生化学会誌「生化学」に総説として発表した。本年度は高度好熱菌(Thermus thermophilus)内で硫黄化修飾塩基の生合成効率を鋭敏に検出できる系を構築することに成功した。この系を用いて修飾酵素TtuAの種間で保存されたアミノ酸残基(10か所程度)の生合成反応における重要性について検討した。その結果、反応に重要なアミノ酸残基を特定し反応機構を推定することができた。また好熱菌の細胞内で、生合成因子同士が共有結合することを前年度までに見出していた。生合成タンパク質の1つTtuBは真核生物翻訳後修飾タンパク質ユビキチンに類似しており、実際に好熱菌内でTtuBは多数のタンパク質を修飾していた。硫黄修飾塩基の生合成タンパク質群もTtuB修飾されていた。脱TtuB化酵素を同定し、人為的に生合成タンパク質群のTtuB修飾状態を変化させると、硫黄修飾塩基の量も変動した。つまりTtuB修飾が生合成反応を制御していることが示唆された。これは原核生物における新規なタンパク質機能制御機構であるとともに真核生物ユビキチン系の祖先系であると考えられ興味深い。
発がん過程におけるM期分裂異常招来の分子機構研究

発がん過程における染色体異常招来の原因のひとつとして「M期細胞分裂の機能的な破綻」が重要な要因であると考えられる。本研究の目的は、今まで不明の点の多かった動物細胞のM期進行の制御に関する分子機構を明らかにし、その機構の機能的な破綻が発がん過程で起こっているか否かを検証することにある。その目的のために研究を行ない、次のような成果を得た。1)動物細胞において、M期で機能すると考えられるカイネース遺伝子をクローニングし、その機能を明かとした。この遺伝子(AIM-1)は、分裂異常を生じる酵母のIpl1変異原因遺伝子ipl1(gene for increased ploidy mutant-1)ならびにハエで分裂異常の結果胎生致死となるAurora変異の原因遺伝子auroraと相同性を有する新規の遺伝子であり、分裂期後期にmidbodyに局在して、細胞質分裂を制御する。2)我々は最初、AIM-1をラットで見つげたが、ヒトにも構造的ならびに機能的に似た遺伝子(Human AIM-1)が存在することを見つけた。3)Human AIM-1はp53癌抑制遺伝子近傍の染色体17p13にマップされた。4)大腸癌を初めとする多くの癌細胞株において、AIM-1の高発現が観察され、また、強制的な高発現により細胞が多核化を起こし染色体の量的異常が招来することを見出した。5)AIM-1に関連する類縁のカイネース遺伝子がAIM-1にも存在し(AIM-3までクローニングしている)、AIM-1関連遺伝子が動物細胞におけるセリン/スレオニン.カイネースの新しいファミリー(遺伝子群)であることを見つけた。
最短経路プログラムを用いて地域防災拠点を巡る最適解を探索する数学的学習活動

1.研究目的東日本大震災以降、伊勢志摩地域においても東海・南海・東南海地震の脅威は依然として存在しており、災害時の避難経路や防災拠点を巡る人間の行動パターンについて研究し学習することは大きな意味がある。最短経路問題は定められた複数の地点をいかに最短の経路で巡回し、目的地に到達するかを探索する最適化問題である。本研究は高等学校数学の学習において「最短経路問題」を取り上げ、地域の防災拠点を結ぶ最短経路を探索する数学的学習活動を行うとともに、地域の防災教育を推進するための研究である。2.研究方法と内容課題を現実的な問題として捉えるために、地域の防災拠点を結ぶ最短経路の探索を課題として設定した。鳥羽市の防災拠点について地域の現状を把握し、実測データを収集した。最短経路を探索するプログラムとしてC言語を利用し、ダイクストラ法を用いた。プログラムは数学の学習に利用しやすいように工夫した。現実的で真正な問題を解くことにより、数学的な思考を実践に活かす力を育てることを目的とした。本研究の主要な内容は次の3点である。1順列・組み合わせ、最適化問題の研究2最短経路問題の近似解を求めるプログラムの研究3数学的学習を防災学習に活かす学習計画の構築3.研究成果地域の防災拠点について生徒とともに現地調査を行い、自分たちの問題として捉えさせ、そのデータをもとにいかに数学的に問題解決するかという課題設定を行った。また、プログラムによる最適解と人間のヒューリスティックな方法による最適解の比較を行い、生徒の探究心を高めるような工夫をした。プログラムによる最適解と人間の判断による最適解の違いについて検討し、地域防災のために最適な避難経路はどうあるべきかについて議論を行った。これにより数学的な問題解決を行うと同時に、地域防災に関わる防災教育の推進につながる授業を展開することができた。
地域住民コホートに基づく酸化ストレスと２型糖尿病に関する分子疫学研究

地域一般住民を対象としたコホート研究の追跡調査に基づき、ビリルビン値ならびにビリルビン代謝と抗酸化系酵素の遺伝子多型と糖尿病罹患リスクとの関連を前向きに検討した。糖尿病新規罹患とビリルビン値ならびにビリルビン代謝関連酵素(UGT1A1, HMOX1)の機能的遺伝子多型には有意な関連を認めなかったが、抗酸化系酵素の1つの多型で糖尿病リスクとの関連を認めた。またゲノムワイド関連解析で報告された複数の遺伝子多型で、本コホートでも糖尿病罹患と有意な関連が認められた。糖尿病罹患と米の摂取量には正の、緑茶摂取量とは負の関連を認め、緑茶の摂取は米の摂取による糖尿病リスク上昇を軽減する可能性が示唆された。本研究の目的は、福岡市東区住民約13,000名からなる「生活習慣病予防を目指したコホート研究(九州大学福岡コホート研究)」の基礎調査および追跡調査に基づき、(1)ビリルビンと2型糖尿病リスクとの予防的関連を前向き研究によって検証するとともに、(2)ビリルビン代謝と抗酸化酵素系の機能的遺伝子多型と糖尿病リスクとの関連を検討することである。本年度は、2型糖尿病およびその他の主要疾病の罹患把握を目的とした九州大学福岡コホート研究の5年後二次調査を完了した。調査対象12,694名のうち11,730名(92,4%)の協力があり、さらに非回答者に対して罹患把握のために簡易健康調査を別途実施した。548名(4.3%)から簡易健康調査への回答があり、合計で12,278名(96.7%)の回答が得られた。また、10,427名(82.1%)がヘモグロビンAlc及び血清ビリルビン測定のための採血検査に協力した。ビリルビン関連遺伝子多型に関する研究では、九州大学福岡コホート研究の基礎調査でDNA提供を受けた12,628名を対象に、ビリルビン抱合化酵素であるUGT1A1遺伝子のTAリピート多型とG211A(Gly74Arg)多型、ヘムオキシゲナーゼ1(HMOX1)遺伝子のGTリピート多型と-413T>A多型のタイピングを行い、基礎調査時のビリルビン値との関連を横断的に検討した。血清ビリルビン値はUGT1A1のTAリピート多型およびG211A多型と強い関連(P<0.0001)を認めた。一方、HMOX1は女性では-413T>A多型との関連を認めたが、男性では関連がみられなかった。また、ビリルビン値の規定因子について横断研究を行い、肥満、喫煙、コーヒー飲用が血清ビリルビンの低値と関連していた。本研究の目的は、福岡市東区住民約13,000名からなる「生活習慣病予防を目指したコホート研究(九州大学福岡コホート研究)」の基礎調査および追跡調査に基づき、1ビリルビンと2型糖尿病リスクとの予防的関連を前向き研究によって検証するとともに、2ビリルビン代謝と抗酸化酵素系の機能的遺伝子多型と糖尿病リスクとの関連を検討することである。本年度は、2型糖尿病およびその他の主要疾病の罹患把握を目的とした九州大学福岡コホート研究の5年後二次調査を完了し、そのデータ整備を行った。調査対象12,694名のうち11,730名(92.4%)の協力と、別途実施した簡易健康調査による548名(4.3%)の回答を合わせ、合計12,278名(96.7%)の回答が得られた。また、10,427名(82.1%)がヘモグロビンA1c及び血清ビリルビン測定のための採血検査に協力し、その測定を完了した。これらの情報をもとに、新規発症の2型糖尿病(HbA1c 6.5%以上または糖尿病治療薬の新規開始)491例と、性・年齢階級を合わせたHbA1c5.6%未満の健常対照群(982例)を抽出した。これらの症例群と対象群について、SOD2、カタラーゼおよびセレン含有蛋白などの抗酸化酵素遺伝子多型と2型糖尿病リスクについて検討を行った。その結果、抗酸化酵素遺伝子の一部の一塩基多型(SNP1)と2型糖尿病リスクに関連性を示唆する成績が得られた。すなわちBMI 25以上の肥満者では、新規糖尿病発症がSNP1リスクアレルの保有者では年齢、飲酒、喫煙、身体活動度などで調整後もそのオッズ比が1.9倍と上昇していた。

本研究の目的は、福岡市東区住民約13,000名からなる「生活習慣病予防を目指したコホート研究(九州大学福岡コホート研究)」の基礎調査および追跡調査に基づき、1ビリルビンと2型糖尿病リスクとの予防的関連を前向き研究によって検証するとともに、2ビリルビン代謝と抗酸化酵素系の機能的遺伝子などの遺伝子多型と糖尿病リスクとの関連を検討することである。糖尿病を含む主要疾病の罹患把握を目的とした九州大学福岡コホート研究の5年後二次調査のデータ整備を完了し、その情報をもとに新規発症の2型糖尿病(HbA1c 6.5%以上または糖尿病治療薬の新規開始)491例と、性・年齢階級を合わせたHbA1c 5.6%未満の健常対照群(982例)を抽出した。これらの症例群と対象群について、SOD2、カタラーゼおよびセレン含有蛋白などの抗酸化酵素遺伝子多型と2型糖尿病リスクについて検討を行い、糖尿病リスクと関連する多型を認めた。主要な食物および緑茶、コーヒー摂取の糖尿病リスクへの影響を前向きに検討した結果、白米摂取量とは正の、緑茶摂取量とは負の関連を認めた。抗酸化作用が報告されている緑茶の摂取は、特に女性において白米摂取による糖尿病リスク上昇を軽減する可能性が示唆された。ゲノムワイド関連解析等で2型糖尿病との関連が報告された遺伝子多型に関して本コホートおいて糖尿病発症リスクとの関連を前向きに検討したところ、複数のSNPにて糖尿病新規発症と有意な関連を認め、特にKCNQ1、CKDAL1の遺伝子多型とは強い関連が認められた。年齢、性別や肥満の有無などにより関連する遺伝子多型に相違が認められ、複数の遺伝子のSNPにて肥満による交互作用を認めた。これらの情報を基にした糖尿病発症予測プログラムの開発は中・高年者でのオーダーメイドの糖尿病予防・治療に有用と考えられた。26年度が最終年度であるため、記入しない。2型糖尿病の罹患把握に必要な調査を終了し、データベースを完成させた。ビリルビン関連遺伝子多型に関する研究では、遺伝子解析を終了し、統計解析が可能な状態である。ビリルビン関連遺伝子および抗酸化酵素遺伝子多型に関する研究では、遺伝子解析を終了し、統計解析が可能な状態である。統計解析に必要なデータベースが完備しており、基礎調査時点の血清ビリルビン値及びビリルビン関連遺伝子多型と2型糖尿病の罹患リスクとの関連を計画通りに検討する。統計解析に必要なデータベースが完備しており、基礎調査時点の血清ビリルビン値、ビリルビン関連遺伝子および抗酸化酵素遺伝子の遺伝子多型と2型糖尿病の罹患リスクとの関連を計画通りに検討し、成果の取りまとめを行う。二次調査での血清についてもビリルビン等の測定を継続して行い、2型罹患リスクとの関連について多面的に検討する。今回、関連が見いだされた遺伝子に関して、同遺伝子内の他のSNPならびに関連する遺伝子のSNPについて追加のタイピングを行う必要が生じたため。SNPタイピング用のTaqMan probeおよびPCR試薬、プレート等の物品を購入する。
がんのケアの質の評価およびケアの質の向上に関する研究

目的:放射線治療中の患者において、がんのケアの現状を評価し、改善に役立つ介入を検討する結果:がん患者ががんのケアにおいて重要だと思う点は、がんについてのわかり易い情報提供、治療を受けないとどうなるかの説明、それぞれの治療選択肢の短期的な副作用の説明、治療の間治療を受ける病院を選択できること等で、実際に自身が受けたケアの中で改善の余地があると思っている点は、病院に近い宿泊施設を探す時の援助、経済的支援を受ける時の援助、がんの経験について語れる他のがん患者を捜す時の援助、霊的なニードについて対処する時の援助等であった。今後これらの結果を用い、がんのケアの改善に役立つ介入を検討予定である。【結果】名古屋市立大学病院と京都大学医学部付属病院の放射線科外来において、連続サンプリングを行い、282名より同意を得、259名より有効回答を得た。患者背景は、年齢は平均63.6歳、中央値は66歳、性別は男性が49%女性が51%、がん種は乳がんが40%、前立腺がんが28%、肺がんが14%、大腸がんが2%、その他が13%、放射線療法開始後1週目の人が44%、2週目の人が23%、3週目の人が12%、4週目の人が6%、それ以外が15%、婚姻状況は既婚が80.3%、教育歴は平均13.4年、就労状況はフルタイムが16%、パートタイムが7%、病気休暇中が11%であった。HADSによる適応障害の診断基準を満たす人(HADS総スコア11点以上)は41.5%、HADSによるうつ病の診断基準を満たす人(HADS総スコアは20点以上)は10.7%であった。CFSで臨床的な倦怠感ありと診断された人は39.7%であった。実際に受けたケアと比較して、改善の余地がありそうな項目として、1不必要な検査や治療を受けていないか確かめる2治療が終わった後に、家での私のケアをどのようにするか私の家族や友人に説明してくれる、3治療が終了した後、私のケアについて聞きたい事があるときに問い合わせる相手先を私に説明してくれる、4治療が終了した時、健康でいる為に私が出来る事を私に説明してくれる、5各予約時に私を診察する医師を選択できる、6治療をする医師を選択する事が出来る、等が上がった。【意義・重要性】これまでがん患者が主観的にケアや治療について評価する尺度は存在しておらず、本研究において、患者視点でのケアの質の評価が得られた事とその結果に基づいた介入を開発する事が出来れば、がんのケアの質が改善され、がん患者の精神的・身体的ストレス予防あるいは緩和を通じて、QOL向上に資する事が想定される。【目的】本研究では、放射線治療中の患者において、我が国のがんのケアの現状を評価し、改善に役立つ介入を検討することを目的としている。プライマリーエンドポイントは我が国のがん患者ががんのケアについて重要だと思う点と、実際に自身が受けたケアで改善の余地があると思っている点について現状を把握すること、セカンダリーエンドポイントは、重要でかつ改善の余地ありと思われている点について介入を検討することである。【進捗状況】平成24年8月よりサンプリングを開始し、平成25年3月末までに、145名が適格となり、うち91名から同意が得られ、87名から郵送による返答が得られている。尚、現時点での中間解析は行っていない。【研究の意義と重要性】これまでがん患者が主観的にケアや治療について評価する尺度は存在しておらず、本研究においては患者視点でのケアの質の評価が得られることとそれに伴う介入の開発を念頭においていることに本研究の意義がある。本研究の結果、患者視点でのケアの質の把握に基づいた介入を開発することができればケアの質が改善され、がん患者の精神的・身体的ストレス予防あるいは緩和を通じてQOL向上に資することが想定される。当初の予定では、目標サンプル数は100名であり、平成25年3月末までに91名の参加が得られたため、やや目標よりサンプリングのペースは遅いがほぼ目標数に到達した。しかし、平成24年度半ばに同研究の6カ国間(オーストラリア、ベトナム、香港、ヨルダン、韓国、日本)との国際比較研究が計画され、先行研究の結果から国際比較に必要なサンプルサイズを300名と見積もったため、調査期間を延長し平成25年度も調査を継続することとした。今後も名古屋市立大学病院放射線科外来にてサンプリングを継続していく。サンプルサイズの増加に関しては、名古屋市立大学放射線科外来での調査期間の延長と京都大学付属病院放射線科外来での調査を追加することで対応していく。サンプリングが終了した時点で、得られたデータを解析し、我が国のがん患者におけるがんのケアの実態およびがんのケアに改善の余地があると考えているがん患者群を同定し、国際比較する。

本研究から得られた知見をもとに、日本のがん患者に適したがんのケアを改善する介入を検討していく。本研究の実施にあたっては、質問票などの物品の整備、患者サンプリング支援、データ管理等の為に研究支援者が必要であるため、その謝金を計上した。繰越金については、本年度の研究支援者雇用時期の遅れにより生じたものであり、次年度での謝金に充てる予定である。また、研究成果を日本サイコオンコロジー学会、International Psycho-oncology Society等の各年次総会での発表を予定しており、その学会参加費を旅費として計上した。その他として、研究実施において必要な印刷費、会議費を計上した。
偏見の発達とその進化的基盤の解明－比較認知科学のアプローチからの検討

28年度が最終年度であるため、記入しない。
炎症性腸疾患におけるシグナル伝達とCIS/SOCSfamilyについての検討

(2)チロシンリン酸化阻害薬の実験腸炎で炎症抑制効果の検討チロシンリン酸化阻害薬のA9をマウスに0.01mg/day、0.1mg/day,7日間連続で腹腔内注射し、DSS4%を飲用させ腸炎誘導させた。A9の炎症抑制効果を検討したが、臨床学的スコア(下痢、下血、体重減少の程度)、組織学的スコアに有意な差は認めなかった。DSS腸炎モデルは化学的に上皮細胞傷害を起こし腸炎を誘導するため、JAK/STAT経路の阻害薬では効果が認められない可能性が考えられた。今後はTNBS誘発腸炎モデルやCD4T細胞を移入した細胞免疫がより関係するモデル腸炎マウスを用い検討する予定である。【目的】炎症性腸疾患の原因ははサイトカインの不均衡が一因と考えられている。炎症性腸疾患におけるサイトカインの細胞膜上のレセプターから、核内のシグナル伝達経路を調べること(JAK/STAT経路、MAPK経路)、シグナル伝達阻害剤を治療に応用できるかを検討することは大腸炎の病態解明や治療に大きな進歩をもたらすことが示唆される。【方法】(2)IBD患者での腸粘膜でのphospho-STAT3の局在を免疫染色により検討し、UCHL1(T細胞),L26(B細胞),CD68(マクロファージ)抗体を用いた免疫二重染色により、phospho-STAT3陽性細胞の種類を解析した.【結果】(1)各種腸炎マウスの腸管では主にSTAT3,STAT1,P38MAPK, EAK, JNKの活性化を認め、JAK-STATの抑制因子であるCIS3の高発現を認めた。特にSTAT3の著明な活性化を認めたが、CD45RBhigh transferマウスの腸管ではSTAT1の活性化が認められるなどモデルマウス間において発現パターンの違いが認められた。(2)IBD患者の腸粘膜では活性化STAT3の高発現がみられ、その局在は上皮細胞と浸潤単核球(T-cell, B-cell, Mφ)に一致していた.SAMP1/Yitマウスでは、hyperIL-6投与によりSTAT3活性化の促進とともに腸炎が増悪し、可溶性gpl30投与によりSTAT3活性化の抑制とともに腸炎が軽快した.【結語】腸炎組織において様々なシグナルが活性化しており、そのバランスが腸炎の特異性に関係していることが考えられた。その中でも、STAT3シグナルが、リンパ球,上皮細胞において、腸炎の病態に重要な役割を果たしており、その制御が治療に応用し得る可能性が示唆された.方法腸上皮細胞株CMTにCIS3遺伝子をトランスフェクトさせ、セレクションによりCIS3を安定発現しているCMT(CMT-CIS3)を作成する。LIF,IL6刺激によりSTAT3を活性化させ増殖能を比較した。結果SAMP1/Yit腸炎マウスの腸粘膜組織のSTAT3の染色により、STAT3は浸潤単核球、上皮細胞に存在し、炎症部において活性化の増加を認めた。(2)CIS3を上皮細胞に導入する事により、CMT細胞の増殖能の低下を認め、サイトカイン産生能も低下傾向を認めた。結語SAMP1/Yit腸炎マウスにおいて様々なシグナルが活性化しているが、腸炎発症前においてIL-6の増加、STAT3の著明な活性化を認めており、リンハ球、上皮細胞においてのSTAT3の活性化やCIS/SOCSfamilyは、リンハ球、上皮の増殖能などを介し、腸炎の病態に重要な役割を果たしていることが示唆された。
分子配向したポリ(p-ヒドロキシベンゾエ-ト)の合成

可視領域に色のない、p-ヒドロキシベンゾエ-ト誘導体が、大きな2次非線形光学効果を有することが報告され、繰り返し単位が小さいときには、非線形感受率は分子量の増加とともに上昇し、これは計算結果とも合致するが、ある程度の分子量になるとp-ヒドロキシベンゾエ-トは有機溶媒に不溶となり、かつ、高融点となるため、非線形感受率の測定ができなくなる。本研究では、種々の分子量のt-ブチル基を導入したポリ(p-ヒドロキシベンゾエ-ト)を合成した。p-ヒドロキシ安息香酸とtブチルクロリドを塩化アルミニウムの存在下に反応させて、3-tブチル-4-ヒドロキシ安息香酸および3、5-ジtブチル-4-ヒドロキシ安息香酸を合成した。これらにp-ヒドロキシ安息香酸を加えた3種類のモノマーを用いて重合を行った。まず、ホモポリマーを合成したところ、いずれも有機溶媒に不溶となった。つぎに共重合を行い、t-ブチル基が一つおよび二つ入ったモノマー同士での共重合で、良好な溶解性を持ったポリマーが得られた。しかし、得られた共重合体からtブチル基を脱離させることはできなかった。非線形光学効果の測定は、東北大学中西八郎教授に依頼して行った。