hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
遺伝子改変マウスを用いた生理活性脂質S1P・Edg受容体システムの統合的研究

スフィンゴシン-1-リン酸(S1P)/Edg受容体システムの心血管における生理機能および心血管系および腫瘍における病態生理的役割を様々な遺伝子改変マウスを用いて解析し、さらにヒト疾患モデルを作成して治療法開発のための基礎研究を行った。S1P受容体のひとつであるEdg5は、血管壁では主に平滑筋に発現している。Edg5ノックアウト(KO)マウスは野生型マウスに比較して低血圧を示した。アンギオテンシンII・ACTH負荷、NO合成酵素阻害薬負荷に対する昇圧反応には差異が見られなかった。現在、マウス血管のRho経路の活性を検討中である。マウス後肢虚血モデルにおいて野生型マウス虚血局所へのS1Pの投与は虚血後血管新生を促進して血流回復を早めた。また、S1P産生が亢進しているスフィンゴシンキナーゼ(SphK)トランスジェニック(Tg)マウスでは野生型マウスに比して虚血後血管新生が促進していた。また、インビトロ管腔形成アッセイでEdg5受容体遮断はS1Pの血管新生作用を増強した。Edg1を過剰発現するEdg1-Tgマウスが生後3カ月より進行性の心肥大を呈することを見い出した。心筋細胞ではEdg1発現が亢進しており、ERKリン酸化も増加していた。また、心肥大はアンギオテンシンIIシグナルに依存していた。Edg5を介した癌(B16)細胞遊走抑制はRhoに依存していたがRhoキナーゼには依存せず、またPTENを必要としなかった。Edg5は同細胞のフィブロネクチンへの接着を強く抑制した。宿主Edg1受容体の活性化が癌細胞の尾静脈注入後肺転移を促進することを見いだした。以上の結果は、S1P/Edgシステムが血圧調節などの心血管ホメオスターシスや心肥大・血管新生・腫瘍転移などの病態生理において重要な役割を有していることを示して+おり、S1P/Edgシステムを標的とした治療が有効である可能性を示唆する。スフィンゴシン-1-リン酸(S1P)/Edg受容体システムの生理機能および病態生理的役割を遺伝子改変マウスを用いて解析した。アンギオテンシンII負荷、NO合成酵素阻害薬負荷に対する昇圧反応には差異が見られなかった。マウス後肢虚血モデルにおいて野生型マウス虚血局所へのS1Pの投与は血流回復を促進した。S1P投与に対する血流回復は野生型マウスに比較してEdg5-KOマウスでは促進していた。また、培養血管内皮細胞によるインビトロ管腔形成アッセイでEdg5受容体遮断はS1Pの血管新生作用を増強した。これらの結果から、Edg5がインビトロ、インビボにおいて血管新生に抑制的に作用することが明らかになった。血管透過性については現在検討中である。Edg1-Tgマウスが生後3カ月より進行性の心肥大を呈することを見い出した。

Edg5を介した癌(メラノーマ)細胞遊走抑制はRhoに依存していたがRhoキナーゼには依存せず、またPTENを必要としなかった。Edg5は同細胞のフィブロネクチンへの接着を強く抑制した。また、尾静注肺転移モデルでは、注入後10分の肺血管塞栓がEdg5活性化により低下した。Edg5-KOマウスにおいて腫瘍発生の差異を検討中である。スフィンゴシン-1-リン酸(S1P)/Edg受容体システムの心血管における生理機能および心血管系および腫瘍における病態生理的役割を様々な遺伝子改変マウスを用いて解析した。Edg5ノックアウト(Edg5-KO)マウスでは野生型マウスと比較して血圧の低下を認めるが、ACTH負荷による血圧上昇反応には両マウスの間で差異がなく、アルギニン負荷に対する血圧低下も同程度であった。粥状動脈硬化におけるS1P/Edgシステムの役割を、ApoE-/-マウスとS1P合成酵素SphK1トランスジェニック(SphK1-Tg)マウス及びEdg5-KOマウスとの交配により、二重遺伝子改変マウスを作成して検討した。野生型マウスに比較して、SphK1-Tgでは大動脈における粥状動脈硬化面積の増加傾向が見られた。Edg5-KOマウスについては、解析中である。腫瘍血管形成におけるS1P/Edgシステムの役割を、B16メラノーマ細胞及びルイス肺癌細胞をマウス皮下に同種移植して検討した。S1P分解酵素S1Pリアーゼ(SPL)トランスジェニック(SPL-Tg)マウスでは、腫瘍新生血管数の減少と血管周囲への平滑筋細胞動員の低下が観察された。マウス後肢虚血モデルにおけるS1Pの血管新生促進作用を検討した。ポリラクトン・グルコン酸(PLGA)を用いて、S1P徐放製剤を合成した。これを野生型マウスの虚血後肢筋肉局所へ投与すると、S1P溶液の連日投与と同様に虚血後肢の血流回復が促進した。これとともに、抗CD31染色により、筋毛細血管数の増加を認めた。
慢性疾患疾病管理とファミリーヘルスナースの導入に関する研究

本研究では、(1)慢性疾患疾病管理の視点に立ち、将来的には「看護師が一定の区域を受け持ち、アウトカム・マネジメントの手法を用いてその地域住民の健康管理に責任を持つ仕組み」を構築すること、及び(2)家族を含めた総合的な健康管理を行う機能をもつ看護師(Family Health Nurse:以下、FHN)を育成し、FHNに(1)を実施する機能を持たせることを目標に、その提言のための基礎研究(基盤作り)を行った。広島市基町団地内の高齢者立ち寄り所「ほのぼの基町」の中に「健康管理室」を設置し、看護師を配置し、週3日、活動を行った。慢性疾患管理の仕組みづくりについては、(1)4月5月にかけて住民を個別訪問し、疾病管理に関するニーズ調査を行った。また、(2)基町地区「高齢者見守り体制づくり事業運営委員会」と協働し、見守り個別訪問と閉じこもり者を拠点「健康管理室」に連れ出し、基町地域包括支援センターと連携してケアマネジメントと連動する形とした。さらに、(3)地域の開業医との連携体制を構築し、受診後、本拠点により保健指導を行い、それを開業医にフィードバックする仕組みも構築した。「健康管理室」を訪れた住民は、約400人で、COPD・慢性腎不全・狭心症・不整脈・高血圧症・肝炎・糖尿病・精神疾患・気分野落ち込みなど多岐にわたる疾患や状態に対して、ヘルスアセスメントの実施、定期的保健指導(病気の理解、服薬管理、療養管理、日常生活管理、栄養・運動指導、ストレスマネジメントなど)、また、家族間の調整やケースマネジメントを実施した。新しい仕組みであることから、地域住民の理解を得るための困難を克服しつつ、徐々にではあったが、拠点に対する住民のニーズは高く、今後、地域における新しい看護ケア提供の仕組みとなると考える。ただし、どのように運営経費を生み出す仕組みを構築するかは、政策提言も含めて今後の課題である。本研究は、(1)慢性疾患管理の視点に立ち、将来的には「看護師が一定の区域を受け持ち、アウトカム・マネジメントの手法を用いてその地域住民の健康管理に責任をもつ仕組み」を構築すること、及び(2)家族を含めた総合的な健康管理を行う機能をもつ看護師(FHN)を育成し、FHNに(1)を実施する機能を持たせることを目標としている。平成19年度前半は、担当する看護師の教育と拠点形成、住民の健康ニーズの把握で、後半は健康管理の実施である。拠点形成:基町団地に市及び社会福祉協議会及び関係団体が共同で高齢者立寄所「ほのぼの基町」を設置することが決まり、ここに配置してもらう(場所をもらう)ことを地域住民、市、社共、関係団体に粘り強く交渉し、立寄所が設置された9月中旬から、場所を確保し、活動を開始した。(19年前半に設置される計画であったが、開設が遅れた。)さらに、団地内の診療所2ヶ所、薬局、地域包括支援センター、訪問看護ステーション、民生委員等と関係構築のための宣伝活動、調整などを行った。担当看護師の教育:担当する看護師にヘルスアセスメントの技術、家族カウンセリング、disease management skillを教育するとともに、先行する他の慢性疾患管理での実施を経て、これらのスキルを強化した。住民の健康ニーズの把握:地域の見守り家庭訪問に同行し、調査を行う計画を立てていたが、関係団体や委員の意見の相違等により、見守り自体が実施できていない状況であり、調査にも着手できていない。現在、調整を進めている。健康管理の実施:地域包括支援センター、開業医からの紹介等で血圧管理186名、血糖管理55名、その他、栄養指導、健康相談(検査データ管理、医療相談等)を行っている。定期的な健康管理を推進しているが、相談者が継続管理のための通所をしないなどの問題点も浮かび上がり、電話指導等の方法を検討しているところである。
タンパク質の膜透過に伴う高次構造の制御に関する研究

タンパク質のミトコンドリア膜透過に伴う高次構造変化を制御する因子である、熱ショックタンパク質hsp70の機能の局在部位特異性を、in vivoとin vitroで明らかにした。ミトコンドリアのhsp70(mhsp70)をサイトゾルに局在するように遺伝子レベルで改変し、サイトゾルのhsp70(chsp70)の発現を制御できるようにした酵母株に導入した。この形質転換株は、chsp70の発現を停止させると増殖できなくなり、mhsp70はたとえサイトゾルに局在させても、chsp70の機能を代替できないことが明らかになった。hsp70は二つのドメインからなるドメイン構造をとっているが、chsp70とmhsp70の各々二つのドメインのうち一つを入れ替えたキメラタンパク質でも、やはりchsp70の機能を代替することはできなかった。コムギ胚芽抽出液を用いた無細胞タンパク合成系で翻訳した前駆体タンパク質は、単離したミトコンドリアに加えても、chsp70が存在しないとミトコンドリア内部に取り込まれない。このin vitroの実験系を用いて、chsp70の代わりにmhsp70が取り込みを促進できるかどうか調べた。その結果、in vitroでもmhsp70はchsp70の代わりの働きをすることはできないことが分かった。したがって、mhsp70とchsp70は、各々ミトコンドリアの中と外と働くべき場所が決まっており、互いに交換はできないことが明らかになった。このhsp70の局在部位特異性を決めている因子として、例えばサイトゾルのYdjlp等の可能性があるので、大腸菌からYdjlpを大量に精製し、in vitroの実験系に加えて、その影響を検討している。
ベルグマン空間のポテンシャル論的解析

Laplace作用素と熱作用素を統一的に取り扱う目的で,上半空間に放物型作用素を導入し,その作用素が作るBergman空間を定義した.この空間に作用する様々な線形作用素を解析し,特に,Carleson埋め込みとToeplitz作用素の有界性とコンパクト性を示した.上半空間上の放物型作用素の作るベルグマン空間をポテンシャル論の手法で解析する.特にToeplitz作用素とCarleson埋め込みが有界作用素あるいはコンパクト作用素となるための特徴付けを行う.Laplace作用素と熱作用素を統一的に取り扱う目的で,上半空間に放物型作用素を導入し,その作用素が作るBergman空間を定義した.この空間に作用する様々な線形作用素を解析し,特に,Carleson埋め込みとToeplitz作用素の有界性とコンパクト性を示した.上半空間上のα-放物型作用素(0<α【less than or equal】1)に関するベルグマン空間を考察している.これはα=1/2のときは既存の調和ベルグマン空間と一致し,α=1のときは熱方程式の解からなるベルグマン空間になり,ラプラス作用素と熱作用素を同時に解析するものである.昨年度までに,この放物型ベルグマン空間におけるHuygens property,基本解の評価,双対空間の待徴付け,再生核の具体的表示などの基本的結果を得ていたが,そこでは空間次元が2以上という技術的な条件が課されていた.調和測度の回転不変性とα-放物型作用素のもつ同次性に注目してこの条件を取り除くことに成功した.さらに,帯状領域におけるベルグマン核の評価を行い,それらの結果をASPM誌に発表した.研究分担者との複数回のセミナーにおいて,Carleson測度を用いての,放物型ベルグマン空間におけるCabeson埋め込みおよびToeplitz作用素の有界性とコンパクト性について考察した.有界性についての結果(Toeplitz operators and Carleson measures on parabolic Bergman spaces)はHokkaido Math.J.に受理され掲載が予定されている.コンパクト性についての結果(Compact Toeplitz operators on parabolic Bergman spaces)もすでにまとめて投稿した.なお,ここで得られている結果はいずれも値域の指数が定義域の指数より大きい場合のみである.逆の場合の状況はかなり異なるようで,放物型ベルグマン空間における一種の補間問題の解決が必要であることがわかってきている.上半空間上のα-放物型作用素(0<α〓1)に関するBergman空間b^p_αを考察している.これはα=1/2のときは既存の調和Bergman空間と一致し,α=1のときは熱方程式の解からなるBergman空間になり,Laplace作用素と熱作用素を同時に解析するものである.放物型Bergma空間での研究をHardy空間上でも始めた.類似点もあるが,相違点も多い.上半空間上のα-放物型作用素L^<(α)>(0<α〓1)に関するBergman空間b^p_αに作用するToeplitz作用素の有界性とそれに密接に関連するCarleson埋め込みの有界性についての研究を進めた.この空間はα=1/2のときは既存の調和Bergman空間と一致し,α=1のときは熱方程式の解からなるBergman空間になり,Laplace作用素と熱作用素を同時に解析するものである.ユークッリド空間の上半空間において分数ベキのラプラシアンによる放物型作用素を考える.この作用素のp乗可積分な解の作る関数空間を放物型Bergman空間と呼んだ.本研究課題では,それらの空間上に自然に表れるCarleson埋め込みとToeplitz作用素についての有界性とコンパクト性を調べている.特に本年度は以下の2点について進展があった.(1)放物型相似変換の性質を利用して,正のRadon測度が定める平均関数と重み付きの一般化されたBerezin変換についての評価を発展させて,Toeplitz作用素の有界性についての新しい結果を得た.これは(3)p=2の場合のBergman空間はHilbert空間である.このHilbert空間におけるコンパクトなToeplitz作用素のSchatten-Herz族分類を行った.これについては「Schatten class Toeplitz operators on the parabolic Bergman space II」と題したプレプリントを整理中である
文学テクストによる論理的想像力の涵養ー英語教育の転換を図るための基礎研究

本研究の主な目的は(1)想像力やクリティカルシンキングに関する文献研究を行い、この結果を実践面で応用し、論理的に機能させる方法論を検討すること、(2)思考力の評価の観点から、文学テクストの翻訳の可能性を探ること、(3)推量発問を研究・開発することで文学テクストを用いた論理的想像力の涵養を目指すことにある。2018年度はこのうち(2)に重点を置き、実績を重ねた。文芸翻訳の講演会等に参加し、翻訳の実務者による実践に触れ、翻訳の概念や方法など考察する機会を得た。また日本メディア英語学会西日本地区研究例会において、シンポジウム「教育と翻通訳ーどのメディアをいかに教育に応用するかー」を開き、「思考の軌跡をたどるー文学テクストの翻訳の可能性ー」(杉村)「理系学生X翻訳読みを深めるための取り組み」(工藤)を発表した。また九州英語教育学会にて、物語翻訳を語用論の観点から分析し、学習者の思考の軌跡を探った「TILTによる訳出をめぐる語用論的プロセス分析と論理的思考力の涵養」を発表した(南津)。その他、翻訳を導入するための予備演習の教材を作成し、試行授業で使用しつつ、改訂を重ねた。翻訳に適する文学テクスト(物語あるいは短編小説)を選定し、活用可能であるかどうか検討を行った。(1)の文献研究に関しては、Robert Fisherなどに当たり、文学テクストとクリティカルシンキングの関係に関する知見を得ることができた。想像力に関する文献収集および研究が予定していたようには取り組めていない。2019年度は想像力に関して文献渉猟を積極的に努め、理論の枠組を固めたい。翻訳や推量発問に関する理論書を読み、実際に選定した文学テクスト(主に短編小説)を基に教材開発を進めていく。関連する文献の検索および収集ができなかったためと、予定していた物品の購入が次年度に持ち越されたため。
格子ロトカボルテラ法による進化の研究

個体ベースのシミュレーションモデルとして、「格子ロトカボルテラ模型」を開発し、格子上で生物の出生と死亡プロセスを行ってきた。とくに、1.共生系の個体群動態を記述する試み。発散が回避でき、基本モデルが開発できた。2.酵母菌密度効果のin vivo研究。シミュレーションによって密度効果を研究した。その結果、密度効果の開始時に、「娘細胞の増殖停止」と「母細胞の集団破裂」が一斉に起きることを発見した。本研究は、モデリングと格子上のモンテカルロ・シミュレーションによって生物進化および生態学の絶滅問題や適応(最適化)問題を研究する。研究代表者は、これまで生物間の相互作用が有限の範囲で起きると仮定し、「格子ロトカボルテラ模型」という格子上の確率模型を開発し、それによって生物の個体群動態や生物進化の問題を研究してきた。具体的な研究方法では、やはりこの格子確率模型を使う。「格子ロトカボルテラ模型」という確率模型での研究を通じて、集団レベルでのリダンダンシー(ムダ、いいかげんさ)の重要性に着目するようになった。生物進化における最適化を考えるとき、単なる目先の最適化だけでなく、ゆとりやリダンダンシーを考慮しなくてはいけない。多くの長い間未解明のリダンダンシーが、理論的および統一的に取り扱えることが分かってきた。長期的なスパンでの最適化や、生態系というシステム全体の中での個々の生物を捉えることの重要性が分かってきた。今年度はとくに、性比の研究は特化している。我々の研究が、オスとメスの比率が1:1になることを世界ではじめてうまく説明した。この理論は、従来のフィッシャーの性比理論の困難・弱点を解決できる。これまで多くの生態学者は、出生性比と実効性比(実際の繁殖に係わるオストメスの比率)の関連が明確では無かった。このモデルでは、両者の関連が明確となる。最適性のためには、実効性比または出生性比が重要なのか?実際に産まれる子供の数を最大にする要素は何か?を考えた。当然ではあるが、最適化のためには適応度(次世代に引き継がれる子孫の数)が重要であることが分かった。モデリングとシミュレーションによって動物や植物の相互作用や進化の問題を研究してきた。格子模型を使ってフラクタルの解析や棲み分けパターンの形成の研究を行った。近接相互作用の影響を調べ、またそれがどのように進化や絶滅プロセスなどの個体群動態に影響するかを研究した。これまで代表者らは、個体ベースのシミュレーションモデルとして、「格子ロトカボルテラ模型」を開発し、格子上で生物の出生と死亡プロセスを行ってきた。本年度は、新しい生態系動態予測手法の研究開発を目的としてきた。近年の気候変動や人間による開発は、生物の適応に大きな影響を及ぼしている。生物の適応プロセスを正しく把握するためには、個体群動態を正しく記述する必要がある。しかし、現状の生態系動態予測手法を使うと、共生系に対して、個体数が無限大に発散してしまう。格子上の生物を想定し、個体ベースの第一原理から出発すると、発散が回避でき、基本モデルが開発できることが分かった。共生系の基本方程式は、現実の共生系の個体群動態をうまく説明する。また過去の共生系方程式よりも、はるかにシンプルである。ただし、もっと多くのデータによって検証する必要がある。共生系は、シミュレーションの収束までに長い時間がかかる。代表者らは「有限サイズ安定解析法」を開発した。この解析法は、格子のサイズLを変化させて、サイズLが無限大の場合を予測する方法である。この解析法の利点は、シミュレーションによって生物の共存(パーマネンス)を判定する方法であり、どんなモデルにも適用できる。1996年Europhys.Lett.に発表したこの手法は、論文5編で使われている。この論文の内容は、3度の国際会議招待講演によって紹介した。今年度はとくに、イースト菌の培養時における年齢構成ダイナミックスを研究した。我々の研究によって次のことが分かった。1)培養の変局点で娘細胞が、母細胞よりも先に出産をストップさせること。2)同じく変局点で、高齢の母細胞が一斉に爆発死(アポトーシス)すること。これらの成果はPlos Oneという雑誌に掲載される予定である。一斉爆発死=アポトーシスは、実験的に確認する前に、シミュレーションで予測した。この研究によって、格子ロトカボルテラ模型(シミュレーション)が重要であることが分かった。

これまで代表者らは、個体ベースのシミュレーションモデルとして、「格子ロトカボルテラ模型」を開発し、格子上で生物の出生と死亡プロセスを行ってきた。本年度は、新しい生態系動態予測手法の研究開発を目的としてきた。近年の気候変動や人間による開発は、生物の適応に大きな影響を及ぼしている。生物の適応プロセスを正しく把握するためには、個体群動態を正しく記述する必要がある。しかし、現状の生態系動態予測手法を使うと、共生系に対して、個体数が無限大に発散してしまう。格子上の生物を想定し、個体ベースの第一原理から出発すると、発散が回避でき、基本モデルが開発できることが分かった。共生系の基本方程式は、現実の共生系の個体群動態をうまく説明する。また過去の共生系方程式よりも、はるかにシンプルである。ただし、もっと多くのデータによって検証する必要がある。とくに酵母菌(yeast)の研究について述べる。酵母菌をフラスコの中で培養すると、指数増殖の後、密度が高くなると増殖が停止する(密度効果)。最近我々は、シミュレーションによって密度効果を研究した。すなわち、細胞を単離すること無く、高密度状態を調べた。その結果、密度効果の開始時に、「娘細胞の増殖停止」と「母細胞の集団破裂」が同時(一斉)に起きることを発見した。これらの2種類の増殖停止現象を、はじめ格子シミュレーションによって予測した。その後、実験によって、「母細胞の集団破裂」が確認された(PLoS One,2011)。この論文の内容は、国際会議招待講演によって紹介した。
環境ストレスに対する生体応答の分子機構

1)今回、我々は、新規のPP2CファミリーメンバーであるPP2Cεが、IL-1依存性SAPKシグナル伝達路の制御に関わる可能性について検討したところ、PP2Cεの細胞内発現がSAPKの活性化を抑制することを見出した。我々はすでに、PP2CβがSAPKシグナル伝達路の負の制御因子であることを報告したが、PP2Cεの標的分子が、PP2Cβと同様、MAP3KのTAK1であるという結果を得た。PP2CεはTAK1およびその下流に位置するMKK4やMKK6と複合体を形成するが、IL-1の添加に伴いPP2Cεが複合体からの解離し、続いてTAK1の不活性化に伴い、再会合することが観察された。これらの結果は、PP2Cεが単にTAK1の不活性化状態を維持するというよりもむしろIL-1依存性SAPKシグナルの活性化機構の重要な因子であることを示唆している。2)我々はSAPK経路制御因子としてのPP2Cβの生理的意義を明らかにするため、この遺伝子ノックアウトマウスの作製と解析を行った。PP2Cβ(-/+)ヘテロマウス間の交配の結果、PP2C遺伝子破壊部位をホモにもつ胚は、第1卵割から第3卵割の過程で致死となった。さらにES細胞を用いたsiRNA解析の結果、PP2Cβの発現量の下により、血清処理によるp38の活性化がさらに亢進することから、PP2CβがSAPK経路の生理的な制御因子であることが、強く示唆された。3)最近、我々はTGF-βファミリー受容体の一種である2型BMP受容体(BMPRII)の長いC末端tail部分が、JNK、MKK4/7及びASK1と結合することを見出した。細胞をBMP2で処理すると、JNK及びASK1がBMPRIIにリクルートされ、同時にJNK、ASK1が活性化された。これらの結果は、BMPRIIがSAPKシステムの細胞膜局在性の足場タンパク質としての機能を担うことを示唆している。目的SAPKシグナル伝達路は、細胞の分化、アポトーシス、ストレス応答に関わる重要な情報伝達経路である。MAP3K, MAP2K, JNK/p38の3段階のプロテインキナーゼにより構成されるSAPKシステムは、各段階におけるリン酸化による活性化とプロテインホスファターゼによる負の制御がうまくバランスを取ることにより精密に調節されている。我々はプロテインホスファターゼ2Cβ(PP2Cβ)がMAP3KのひとつであるTAK1の活性調節に関わることを明らかにしてきた。本研究では、プロティンホスファターゼ2C(PP2C)の同経路における制御因子としての役割を更に詳細に解明することを目的とする。結果(1)PP2CεのIL1依存性のSAPK活性化制御への関与最近我々は、ESTクローニングにより、3種類の新規のPP2Cファミリーメンバー(PP2Cε,PP2Cζ,PP2Cη)をコードするcDNAを単離した。これらの過剰発現がIL-1依存性のSAPKシグナル活性化に影響を与えるかどうか検討したところ、PP2Cεが抑制効果を有することが明らかとなった。293細胞における解析の結果、PP2CεはPP2Cβと同様MAP3KであるTAK1の活性化を抑制していることが判明した。

PP2CεはTAK1およびその下流に位置するMKK4、MKK6と複合体を形成していたが、IL-1の添加に伴い複合体からの遊離が見られ、続いてTAK1の不活性化に伴い、複合体の再形成が観察された。これらの結果は、PP2Cεが単にTAK1の不活性化状態を維持するというよりもむしろIL-1依存性SAPKシグナルの活性化機構の重要な因子であることを示唆している。PP2CβのSAPKシステムの制御因子としての生理的意義を明らかとする目的で同遺伝子のノックアウトマウスの作製を進めてきた。現在までに遺伝子破壊部位をヘテロに持つマウスを得ることができ、現在、遺伝子破壊部位をホモに持つマウスを作製中である。(1)PP2CβおよびPP2CεのTAK1不活性化機構の解明われわれはこれまで、PP2CβとPP2Cεがともに、IL-1依存性のTAK1の活性化を抑制していることを明らかにしてきたがその機構は不明であった。TAK1の活性化にはその活性化ループに存在するSer192の自己リン酸化と、その近傍に存在するThr187のリン酸化が必須である。我々は、リン酸化状態に特異的な抗体を用いて、PP2Cβが前者を、PP2Cεが後者を脱リン酸化してTAK1を不活性化していることを明らかにし、両者が異なったメカニズムでTAK1の活性化を制御していることを明らかにした。(2)PP2CεにょるASK1の活性制御PP2CεのTAK1以外のMAP3Kの活性制御の可能性を探るため細胞内での相互作用を検討したところPP2CεがASK1と強固に結合することを見出した。この相互作用は内在性のタンパク同士でも観察された。PP2CεはASK1の活性化に必要なthreonine残基(Thr845)を細胞内において脱リン酸化できることからin vivoでASK1の活性制御に関わっていることが考えられる。PP2CβのSAPKシステムの制御因子としての生理的意義を明らかとする目的で、同遺伝子のノックアウトマウスの作製を進めてきた。現在までに遺伝子破壊部位をホモにもつ胚は第1卵割から第3卵割の過程で致死となり、出生しないことが明らかとなった。現在、人工授精の手法を用いて詳細に検討中である。我々はSAPK経路制御因子としてのPP2Cβの生理的意義を明らかにするため、この遺伝子のノックアウトマウスの作製を進めている。PP2Cβ-/+ヘテロマウス間の交配の結果、PP2Cβ遺伝子破壊部位をホモにもつ胚は、第1卵割から第3卵割の過程で致死となり、出生しないことが明らかとなった。PP2Cεの生理的意義を明らかにするため、PP2Cεのノックアウトマウスの作製を試み、すでに、同遺伝子座を破壊したキメラマウスを得ている。PP2Cδを細胞に過剰発現させると、TNFαやIL-1依存性のAP-1活性を増強させることから、SAPKシグナル伝達経路のポジティブ制御因子として機能することが示唆された。JNKの新規の基質を探索する過程で、PP2CζのSer92及びThr205がJNKによりin vitroでリン酸化されることを見出した。このリン酸化は細胞のanisomycin処理(タンパク質合成阻害ストレス)、またはソルビトール処理(高浸透圧ストレス)によって増強するので、in vivoでもSAPKによりリン酸化されていると考えられる。2.SAPKシグナル伝達路の足場タンパク質としてのBMPRIIの機能の解明。
縄紋晩期前葉-中葉の広域編年

1.東北・関東・北陸・近畿の各地域の土器型式の併行関係はつぎのようになることを確認した。a.東北地方の大洞B_1・B_2式は安行3a式に併行し、北陸地方の八日市新保式に併行する。たゞし、近畿地方との併行関係は、滋賀里1式の内容が不明確なため、確定できない。b.大洞B-C式に併行する型式は、関東の安行3b式,北陸の勝木原一御〓塚1・2式,近畿の滋賀里3b式古段階(篠原式)である。c.大洞C_1式に併行するのは、関東地方の安行3c式・北陸の中屋1-3式・近畿の滋賀里3b式新段階である。2.従来、縄紋晩期の各地域の土器型式の影響について、東北地方からの一方的な影響が指摘されてきたが、東海・北陸・中部高地系の土器が、関東・東北地方に搬入されていることが確認された。3.北関東内陸部から越後地方にかけて、地域性のつよい亀ヶ岡系土器を製作する地域がひろがっていることが確認された。大宮台地・西関東などの地域に分布している亀ヶ岡系土器の給源はこの地域にもとめることができる。4.亀ヶ岡系土器・滋賀里系土器ともに、原産地から直接搬入された事例はきわめて少数で、大部分は隣接地域からの搬入品もしくは現地製作の模〓品であることが確認できた。5.以上の事実から、従来の単一の中心からの波及という単純なモデルでは晩期の土器型式の相互の交渉を説明することはできず、隣接する地域のあいだでの交渉・遠隔地のあいだでの交渉の二種類の動きを〓摂する多中心モデルを構築する必要が確認された。本年度は、東北(第一回:青森・岩手・第二回:宮城・福島)北陸(第三回:新潟・富山・石川)近畿(第四回:三重・奈良・大阪・滋賀・京都)の資料を対象として、検討会を開催した。これらの検討の結果、大洞BC新段階(BC_2)の資料はかなり広い範囲に分布しており、北陸地方の中屋式の前半、近畿地方の滋賀里IIIb中段階(篠原式)に対比できることが明らかになった。中屋式の後半・滋賀里IIIb新段階は、大洞C_1式に対比される。これは、錦織南・竹之内で在地の土器に伴出する東北系の土器からも裏づけられる。各地域の型式がそれぞれ対応するとすれば、滋賀里IIIb古段階・中屋式前半は大洞BC古段階に、滋賀里IIIa式・御経塚式は大洞B式に対比するものと推測できよう。しかし、この裏づけとなる資料は、未発見である。大形波状口縁・二段につよくくびれた胴を特徴とする厚手の深鉢は、北陸地方では典型的では典型的な滋賀里系の深鉢と考えられてきた。しかしこの種の土器は、琵琶湖東岸・北岸の地域で派生した地域的なヴァリエイションである。近畿地方で出土している「東北系」の土器は、ほとんど例外なく新潟系統の土器である。これらの事実は、地域のあいだの型式の伝はん・影響の波及のメカニズムを理解するうえで、「周辺地域」がはたす弥割が大きいことをしめしている。このような観点から、中部高地・北関東の土器を観察することが来年度の課題となる。北陸系の土器の分布が近畿地方におよんでいることは、これまでも知られていた。検討の結果、福島県羽白C・同大日向・岩手県雨滝などからも、北陸系の土器が出土していることが確認された。しかしその中間の仙台湾沿岸には波及していないようである。新潟方面の土器組成は、福島県内陸部よりも、東北中部・北部に近い。

各地域の型式の交渉とその内容は、これまで考えられていたところより複雑なものがある。今年度は資料検討会を四回開催し、東関東(立木・法堂・多古田)・大宮台地(真福寺・後谷)・西関東(下布田)・甲府盆地(尾崎原・金生)・中部高地(宮崎・円光坊)・北関東(茅野・千網谷戸・寺野東・藤岡神社)の資料を検討した。その結果1.従来東海地方を中心として分布していると考えられた清水天王山式土器は、甲府盆地を中心として分布しており、中部高地・北関東西部にまで分布がひろがることきその東限は栃木県にまで及ぶことがあきらかになった。2.関東地方北部(特に群馬)には地方色のきわめて強い安行系土器が分布する。その特色は安行2式の段階までは顕著ではないが、安行3a併行期にはいると顕著になる。3.この地域では同時に、東北地方とは違ってはいるが、共通の意匠構成・文様描出技法、器種構成をしめす、独得の亀ヶ岡系土器をつくり出す。この種の亀ヶ岡系土器が大宮台地・関東西部に搬出され、あるいはこれらの地域のいわゆる亀ヶ岡系土器のモデルとなることが確認された。
学習障害児の類型鑑別とコミュニケーションプログラムの開発

本研究では、中枢神経系の発達やかたよりから、コミュニケーション能力の遅れ、種々の知的学習能力の習得困難、さらには行動面での不適応症状をもちやすいことなどから、近年注目されている学習障害(LD)児を対象とし、その実態解明と具体的な指導方法探究のために、主として二つの側面からの研究を行なった。1.LDに関する心理学的能力のデータベースの作成と、それにもとづく能力分析による類型判別の試み。5才12才のLD及びボーダラインLDに関する200例のWISCーR、ITPA、TKビネーの心理検査結果によるデータベースを作成した。WISCーRを中心とした群得点分析から、全体的能力水準と処理能力の欠陥特性を考慮した3つの典型類型及び3つの重複類型からなる類型モデル図を作成し、その臨床的妥当性についての検証を試みた。同時に、12のWISCーR、10のITPAの各下位検査変量、計22の変数データについての多変量解析を試み、類型判別と診断基準の因子的妥当性についても知見を得た。2.感覚様相の処理特性からくるコミュニケーション行動中の受容能力および表出能力の発達のかたよりにたいする具体的援助の一方法として、同時提示法によるサイン言語法の開発とその適用研究。現在、英国の障害児教育現場で広く普及しているMAKATON法の日本版作成作業を進めた。この方法は、キーワード法によるサインシステムを採用し、話しことばとサインとシンボルの同時提示による言語発達プログラムである。現在、第1から第9ステージにおける約330の核語集の選定、基本的サインの作成作業を終え、類型分類によるLD児の指導グループ適用研究から、顕著な指導効果が認められた。
難燃性マグネシウム合金と亜鉛めっき鋼板の摩擦攪拌点接合における界面制御と最適化

摩擦攪拌点接合により,接合条件を同一として,組織観察用と強度試験用の継手を作成した.接合部断面を観察し,引張せん断および十字引張強度を評価した後に鋼板側破面の観察も行った.引張せん断強度は,難燃性マグネシウム合金と溶融亜鉛めっき鋼板SGCC(GI)との組合せが最も高く,破断は接合部周辺からアルミニウムと鉄の化合物に沿って進むことが分かった.接合は,接合時の入熱でマグネシウム,アルミニウム,亜鉛が三元共晶融解を起こして接合界面外へ排出され,その後アルミニウムと鉄の化合物が生成することで達成すること,接合ツールや固定治具の形状変更により強度が改善する可能性があることが分かった.輸送機器の軽量化部材として注目されている難燃性マグネシウム合金と,自動車用鋼板SPCC,及びめっき皮膜作成法が異なる3種類の亜鉛めっき鋼板(SGCC,GA,SECC)との摩擦攪拌点接合(FSSW)を行い,めっき皮膜の状態が接合状態及び機械的性質に及ぼす影響を調査した.また,接合中の接合パラメータ,ツール先端部温度,接合部近傍温度の動的変化を計測・解析するシステムを構築した.FSSW装置のツール回転数,旋回軸モータ電流値,押込み荷重,押込み量の4つの電圧出力を接合パラメータ,ツール回転軸に固定したテレメータを通じて得たツール中心に挿入したR熱電対の起電力をツール先端部温度,試料の接合界面近傍に挿入したK熱電対の起電力を接合部近傍温度として,高速電圧/温度ロガーに接続して10kHzで測定可能なシステムを構築した.また,パーソナルコンピュータを用い,この計測データを統合化し解析を行うソフトウェアを自作した.市販マグネシウム合金AM60に難燃性を付与するカルシウムを添加した難燃性マグネシウム合金と,自動車用鋼板SPCC,並びに溶融亜鉛めっきSGCC,合金化溶融亜鉛めっきGA,電気亜鉛めっきSECCの3種類の亜鉛めっき鋼板との重ねFSSWを,ツール回転数と押込み荷重をパラメータとして実施し,重ね継手形成範囲を調査した.得られた重ね継手の接合部断面観察により接合部形成組織調査を行い,また同一条件で再度接合した重ね継手の引張せん断試験により強度評価を行った.輸送機器の軽量化部材として注目されている難燃性マグネシウム(Mg)合金と,自動車用鋼板SPCC,およびめっき皮膜作成法が異なる3種類の亜鉛めっき鋼板(溶融亜鉛めっきSGCC,合金化溶融亜鉛めっきGA,電気亜鉛めっきSECC)との摩擦攪拌点接合(FSSW)を行なった.研究代表者の所属研究機関変更により,主要実験装置が変更となった.このため,新たな実験装置で,ツール回転数,押込み深さ,押込み速度を接合パラメータとして接合試験を再度実施し,得られた重ね継手の引張せん断強度の評価結果から,以前と同等な重ね継手形成条件の選定を行なった.また,引張せん断試験後の破面観察により,接合部破断面の組織調査を行った.その結果,同一接合条件での引張せん断強度は,難燃性Mg合金とSGCCの組合せが最も高い値を示すこと,破断は,接合部周辺の界面からMg合金中に含まれるアルミニウムと鉄の金属間化合物層に沿って中心部に向かって進み,中央のキーホールに向かい難燃性Mg合金内を進むことが分かった.また,切削動力計を用いて接合試験中のツール押込み荷重を計測した結果,難燃性Mg合金とSGCCの組合せとそれ以外とで押込み力の安定性に差がある事が分かった.摩擦攪拌点接合により,接合条件を同一として,組織観察用と強度試験用の継手を作成した.接合部断面を観察し,引張せん断および十字引張強度を評価した後に鋼板側破面の観察も行った.引張せん断強度は,難燃性マグネシウム合金と溶融亜鉛めっき鋼板SGCC(GI)との組合せが最も高く,破断は接合部周辺からアルミニウムと鉄の化合物に沿って進むことが分かった.接合は,接合時の入熱でマグネシウム,アルミニウム,亜鉛が三元共晶融解を起こして接合界面外へ排出され,その後アルミニウムと鉄の化合物が生成することで達成すること,接合ツールや固定治具の形状変更により強度が改善する可能性があることが分かった.輸送機器の軽量化部材として注目されている難燃性マグネシウム合金と,めっき皮膜作成法が異なる3種類の亜鉛めっき鋼板(SGCC,GA,SECC)及び自動車用鋼板SPCCとの摩擦攪拌点接合(FSSW)を行い,めっき皮膜の状態が接合状態及び機械的性質に及ぼす影響を調査した.また,接合中の接合パラメータ,ツール先端部温度,接合部近傍温度の動的変化を計測・解析するシステムを構築した.FSSW装置のツール回転数,旋回軸モータ電流値,押込み荷重,押込み量の4つの電圧出力を接合パラメータ,ツール回転軸に固定したテレメータを通じて得たツール中心に挿入したR熱電対の起電力をツール先端部温度,試料の接合界面近傍に挿入したK熱電対の起電力を接合部近傍温度として,高速電圧/温度ロガーに接続して10kHzで測定可能なシステムを構築した.また,パーソナルコンピュータを用い,この計測データを統合化し解析を行うソフトウェアを自作した.

市販マグネシウム合金AM60に難燃性を付与するカルシウムを添加した難燃性マグネシウム合金と,溶融亜鉛めっきSGCC,合金化溶融亜鉛めっきGA,電気亜鉛めっきSECCの3種類の亜鉛めっき鋼板及び自動車用鋼板SPCCとの重ねFSSWを,ツール回転数と押込み荷重をパラメータとして実施し,重ね継手形成範囲を調査した.得られた重ね継手の接合部断面観察により接合部形成組織調査を行い,また同一条件で再度接合した重ね継手の引張せん断試験により強度評価を行った.輸送機器の軽量化部材として注目されている難燃性マグネシウム(Mg)合金と,自動車用鋼板SPCC,およびめっき皮膜作成法が異なる溶融亜鉛めっき鋼SGCC(GI),合金化溶融亜鉛めっき鋼板SGCC(GA),電気亜鉛めっきSECCとの摩擦攪拌点接合(FSSW)を行った.接合試験時の固定治具形状を,接合ツール直下部分で圧力が抜けにくく治具側への抜熱がしにくい形状へと変更し,以前と同等な重ね継手が得られる接合条件の下で,引張せん断試験用,十字引張試験用,断面組織観察用の接合継手を作成した。また引張せん断強度および十字引張強度の評価を行い,強度試験後の鋼板側破面観察により接合部破断面の組織観察を行うとともに,得られた接合部断面のSEM観察および接合界面のTEM観察を行い接合部の形成組織調査を行なった.昨年度と同一接合条件で十字引張強度を測定した結果,難燃性Mg合金とSPCCとの組合せ以外で高い強度値を示す継手が得られる場合があること,破断は昨年度の引張せん断試験片の場合と同様に進展すること,接合界面近傍でアルミニウム(Al)-Mg-亜鉛(Zn)の三元共晶と,Alと鉄(Fe)の金属間化合物が存在することなどが確認された。これらから,Mg合金と亜鉛めっき鋼板のFSSWでは,FSSWによる入熱でMgとMg母材の合金元素であるAlおよびZnが三元共晶融解を起こし,FSSWの圧力と塑性流動で亜鉛めっき層が接合界面外へ排出され,鋼板の新生面でMg母材の合金元素であるAlとFeの化合物が生成することで接合継手が得られる事,接合ツールおよび固定治具の形状により接合強度が改善する可能性が示唆されるなどの結果が得られた。溶接・接合工学昨年度計画のうち,接合因子の抽出,最適な亜鉛めっき皮膜作成法の選定を行う予定に到達しておらず,本年度計画のうちで抽出した接合因子よるFSSW施工の最適スステム構築,並びに最適な亜鉛めっき皮膜厚さの検討,に到達していないため.昨年度計画のうち,接合因子の抽出,最適な亜鉛めっき皮膜作成法の選定を行う予定に到達していない.また,本年度計画のうち,抽出した接合因子よるFSSW施工の最適システム構築,ならびに最適な亜鉛めっき皮膜厚さの検討に到達しておらず,追加で実施を予定していた,接合部断面のSEM観察と接合界面のTEM観察,ならびにこれら観察結果の評価,関連学協会での成果発表に到達していないため.本年度計画のうち,計測データの解析結果と接合部形成組織調査及び強度評価結果をまとめ,最高強度が得られる接合条件と接合部形成組織の状態の特定,接合因子の抽出,最適な亜鉛めっき皮膜作成法の選定を行う予定に到達していないため.パーソナルコンピュータを用いて計測データを統合化し,自作ソフトウェアにて解析を行う.この結果と接合部形成組織調査及び強度評価結果をまとめ,最高強度が得られる接合条件と接合部形成組織の状態を特定し,接合界面をこの状態にするための接合因子の抽出と,最適な亜鉛めっき皮膜作成法を選定する.抽出した接合因子によるFSSW施工の最適化を行うとともに,見いだしためっき皮膜作成法による最適
好温性ラン藻P,lapideum酵素に関する基礎的,応用的研究

島根県松江市千鳥町の松江温泉源より単離された好温性ラン藻Phormidium lapideum、とりわけその酵素類について、平成元年度よりの3年間にわたる研究によって、下記のように多くの成果が得られた。1。アスパラギン酸トランスフェラ-ゼ(AAT)に関しては、本酵素がきわめて高い耐熱性を有することと、等電点がかなり低いことを除けば、分子量、Km値、基質特異性など多くの点で哺乳動物サイトゾル由来のAATによく似た特性を有していることが解った。またNー末端部アミノ酸配列の比較検討を行った結果、本酵素がBacillus属由来の耐熱性AATときわめて高い相同性を示した。2。アラニン脱水素酵素(ADH)を均一になるまで精製し、アミノ基末端側アミノ酸配列の分析を行った。またP.lapideum染色体DNAを単離抽出し、常法により本酵素のクロ-ニングにも成功した。P.lapideum由来のAAT酵素と、クロ-ニングされたAATとは、ほぼ等しい酵素化学的性質を示した。3。P.lapideumの制限酵素Pla I,Pla IIを分離精製し、その諸性質を明らかにした。即ち、Pla Iは既知のHae IIIの、Pla IIはNsp(7524)Vの、それぞれアイソシゾマ-であった。しかしながら蛋白化学的にPla I,Pla IIは、それぞれのアイソシゾマ-よりは高い耐熱性を有していた。4。P.lapideumの形質転換を目的として、まずP.foveolarumよりその小プラスミドpPF1を単離し、その完全塩基配列の決定を行った。pPF1は1509bpであり、デ-タ検索の結果は、本プラスミドがReplication Associated Proteinの情報を有している可能性を示した。5。pPF1ーpBR322のハイブリドベクタ-を構築し、エレクトロポレイション法により、本ベクタ-による糸状性ラン藻P.lapideumの形質転換に成功した。6。上述のように有用な性質を有する好温性、糸状性ラン藻P.lapideumの迅速培養方法の開発を進め、酢酸バリウムの添加が有効なことを示した。この際、バリウムイオンがDNAポリメラ-ゼ、RNAポリメラ-ゼをそれぞれ活性化している事実を証明した。1.P.lapideumのアスパラギン酸アミノトランスフェラ-ゼ(AAT、GOT)に関する研究成果:共存する水溶性色素タンパク質フィコビリンを完全に除去することの出来る当該酵素AATの精製法を確立し、AATの諸性質について調べた。本酵素は補酵素ピリドキサ-ル燐酸の共存下では、実に85°Cの高温下でも安定であると言う耐熱性を示した。なお本酵素の分子量は92Kダルトンで、2個の均一なサブユニット(47Kダルトン)から構成されている。その他本酵素は好温性ラン藻特有の興味深いタンパク質と考えられるので、比較生化学、タンパク質工学的立場からの研究を進めるべく現在本酵素のクロ-ニングを進めている。2.レプリカ-ゼ、トランスクリプタ-ゼに関する研究:(1)レプリカ-ゼについて精製し検討したところ、2種類のDNAポリメラ-ゼの存在を確認した。それぞれをPla Pol(1)、Pla Pol(2)と名づけ、それぞれを精製してそれらの諸性質を調べた。1050倍にまで精製されたPla Pol(1)は分子量520Kダルトンであり、興味あることに真核性生物由来のDNAポリメラ-ゼαに対する特異的阻害剤であるべきアフィデイコデインによって阻害された。これに対してPla Pol(2)は分子量42Kダルトンで大腸菌DNAポリメラ-ゼIに相当するものと考えられるが、本酵素は興味あることにバリウムイオンの共存によってその活性が倍加された。ちなみに大腸菌DNAポリメラ-ゼIはバリウムイオンによって強烈に阻害される。(2)本ラン藻のトランスクリプタ-ゼ(RNAポリメラ-ゼ)を均一標品(2200倍)にまで精製してその諸性質を調べたところ、分子量は489Kダルトンであり、興味あることに本酵素活性もバリウムイオンの共存によって3倍近くにまで上昇した。(3)バリウムイオンの本ラン藻酵素に対する活性化現象は極めてユニ-クなものであり、この事実に基づいて本ラン藻の培地に3mM濃度の酢酸バリウムを添加したところ、同一条件下で増殖が倍加するとの事実をも確認した。1。2。3。

P.lapideumの制限酵素Pla I,Pla IIを分離精製し、その諸性質を明らかにした。即ち、Pla Iは既知のHae IIIの、Pla IIはNsp(7524)Vの、それぞれアイソシゾマ-であった。しかしながら蛋白化学的にPla I,Pla IIは、それぞれのアイソシゾマ-よりは高い耐熱性を有していた。4。P.lapideumの形質転換を目的として、まずP.foveolarumよりその小プラスミドpPF1を単離し、その完全塩基配列の決定を行った。pPF1は1509bpであり、デ-タ検索の結果は、本プラスミドがReplication Associated Proteinの情報を有している可能性を示した。5。pPF1ーpBR322のハイブリドベクタ-を構築し、エレクトロポレイション法により、本ベクタ-による糸状性ラン藻P.lapideumの形質転換に成功した。6。上述のように有用な性質を有する好温性、糸状性ラン藻P.lapideumの迅速培養方法の開発を進め、酢酸バリウムの添加が有効なことを示した。この際、バリウムイオンがDNAポリメラ-ゼ、RNAポリメラ-ゼをそれぞれ活性化している事実を証明した。1.アラニン脱水素酵素(ADH).好温性ラン藻<Phormidium>___ー<lapideum>___ーのADHを均一になるまで精製し、SDSーPAGE後,PVDF膜にブロッテイングさせアミノ基末端側アミノ酸配列の分析を行った。また<P.lapideum>___ーの染色体DNAを常法により調製し、制限酵素<Hind>___ーIIIで処理後その4ー6Kb断片を集めて,pUC19ベクタ-に挿入した。得られたrecombinant DNAを<E.coli>___ーMV 1190株に形質転換し、Amp,IPTG,Xgalを含むLBプレ-トで培養した。クロ-ン選択のためにNitroBlue Tetrazoliumの発色を利用した,レプリカプリンテイングアッセイを行い、その結果約3500個のコロニ-より2個のクロ-ンが得られた。このクロ-ン化ADHを各種クロマトグラフィ-により均一にまで精製し、<P.lapideum>___ー由来ADHと酵素化学的性質の面から比較、検討を行ったところ,(1)耐熱性:50°Cまで安定、55°Cで約40%失活、65°Cで完全に失活(3)最適pH:アミノ化反応ではpH8付近脱アミノ化反応ではpH9付近となりほぼ等しい値を示した。2.アスパラギン酸アミノトランスフェラ-ゼ(AAT).有効利用が期待される糸状性好温性ラン藻Phormidium lapideumは、これまで詳細に調べられた結果、P.lapideum自体はプラスミドDNAを保有していないことが認められた。従って、本ラン藻を宿主とするベクタ-系を開発するために、同属のPhormidium foveolarumが有する小プラスミドpPF1を利用した。今回は糸状性ラン藻用ベクタ-となるべきpPF1の細胞内における役割を解明する目的で、その全塩基配列を決定した。pPF1は1509bpより成り立っている。Adenineは461塩基、Cytosineは316塩基,Guanineは349塩基そしてThymineは338塩基という組成であった。
英米文学作品における歴史的文体研究としての英語表現史研究：身体表現の機能の解明

本研究の目的は、顔・目・手・視線・動作などの身体に関する英米文学作品における描写の慣習と創造性を共時的・通時的視点から追求し、英語表現史研究の体系的な枠組みと身体表現の機能を明らかにすることである。本研究は、14世紀から19世紀までの英米文学史上の主要な作家を専門とする研究者による協働研究であり、文学作品の読みを中心に据えながら、言語学に基づいた文体論の知見を援用し、また用例の収集や分析にはコーパス言語学の方法論に沿ってコンピュータやコンコーダンサー等のソフトウェアを利用した研究である。
アフリカ低所得国の地方都市・農村部における生活習慣病の実態と危険因子の学際的解析

エチオピア北部ティグレイ県、メケレ市の公務員(地方都市部)およびキルテアウラエロ郡住民(農村部)から、男女、職種、年齢で分けた、計8グループのフォーカスグループディスカッションを行なった。同意を得た後、ティグレイ語で、健康に関する意識・行動、食習慣をはじめとする生活習慣、伝統的慣習、家庭での意思決定などについて話しあってもらい、録音を書き起し、逐語的に英訳した。平成26年度に実施した、キーインフォーマントインタビューで得られたデータと合わせて、英語のテキストデータを質的分析した。当初は、都市部と農村部において、各1000名を対象とした疫学調査を行なう計画であったが、旱魃により農村が困窮しており、農村での調査協力を得ることが困難となったため、都市部公務員のみを対象とすることに変更した。メケレ市内の省庁を訪問して調査目的等を説明し、同意の得られた者を対象として、WHO-STEPSに準じた方法で疫学調査を行なった。一部改訂した標準質問票による面接調査の後、省庁の会議室や講堂にポータブル機器を設置して、標準化された方法で、身長、体重、腹囲、腰囲、血圧測定した。末梢血を採血して、空腹時血糖、コレステロール、HDLコレステロール、中性脂肪、HbA1cを測定した。最終的に、1527名が調査に参加した。得られたデータを匿名化して入力し、データベース化した。27年度が最終年度であるため、記入しない。平成26年度は、横断疫学調査の準備、質的調査の一部、対象地域の医療施設の観察調査を行った。エチオピア出張、及び海外共同研究者招聘により、調査準備を進めた。まず、本研究計画について、名古屋大学の生命倫理委員会、及びエチオピアのメケレ大学、ティグレイ州保健局の承認を得た。調査対象地は、これまで生活習慣病(NCD)に関する調査がなされていない、エチオピア北部のティグレイ州メケレ市(人口約28万)と、周辺農村地域である。横断疫学調査の対象は、メケレ市の公務員(約3万)と、市の北方45kmに位置するキルテアウラエロ郡住民(約5万)から、1864歳の男女各500人、計2,000人を抽出する。海外共同研究者とともに対象地域を訪問して、調査の進め方について打合せし、地域の医療施設を観察調査した。その結果、以下のように疫学調査方法を定めた。公務員は職員登録をもとに、農村住民はメケレ大学が行っている人口動態調査の登録者から、男女別無作為に抽出する。質問票は、WHOの標準質問票をもとに、質的調査結果や現地関係者からの情報を参考にして、食習慣や社会経済的因子について追加・訂正し、現地語(アムハラ語・ティグレイ語)に翻訳して使用する。健診を実施する場所として、公務員は各省庁の1室を借り、農村では保健ポストで実施する。測定には、日本からポータブル機器と試薬を持っていき使用する。実際の調査は、平成27年度、28年度に実施する。質的調査については、職域の管理職、地域の長老・女性リーダー、医療関係者等を対象に、キー・インフォーマント・インタビューを実施して、健康に関する意識、生活習慣、伝統的慣習等に関する情報を収集した。ティグレイ語の録音を文書化して逐語的に英語に翻訳し、英語テキストデータとして入力し、質的分析を進めている。交付申請時に計画したとおり、エチオピア出張、及び海外共同研究者の招聘により研究打合せを進めて、疫学調査の準備を進め、質的調査の一部を実施した。平成27年度は、予定対象者数の7割にあたる1,400人を目標として、疫学調査を実施する。また、都市部、農村部において、フォーカスグループディスカッションを実施する。あわせて、医療サービスの状況について調査する。また、ティグレイ州保健局から共同研究者を日本に招聘して、保健政策に関する情報を入手する。

平成26年度は、初年度のため、海外共同研究者ともに具体的な調査計画を策定した。その結果、疫学調査に要する費用が研究計画申請時の想定より高額であり、また測定機器・試薬等を日本で調達して持っていかなくてはならないことが判明した。そのため、平成26年度の基金助成金を平成27年度に繰り越して、疫学調査に使用することとした。27年度が最終年度であるため、記入しない。平成26年度から繰り越した基金助成金、及び平成27年度の補助金・基金助成金をあわせて、予定対象者数の7割の疫学調査を実施し、また質的調査を完了する。