hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
知識創造プロセスとしての管理会計変化に関する研究

本研究の成果は、管理会計変化における対象の概念規定に関する概念規定の曖昧性と多様性を明らかにしたこと、Burns and Scapens(2000)の制度的フレームワークとNonaka(1994)ほかの知識創造理論との統合的枠組みを示したこと、管理会計変化を促進する要因としてのクリエイティブ・ルーティンの有用性を示したことである。本研究では、複数のリサーチサイトにおける管理会計変化の事例を用いて、管理会計変化が、単純な経営者の意思決定やマクロ経済環境、様々な制度的環境によって規定されるだけではなく、ルールを変化させるルーティンによって大きく影響を受けていることを明らかにした。平成24年度は過去のフィールド調査から得られた成果について、学会および研究会での報告等を通じて、理論的な洗練に重点を置いた研究活動を行っている。このような研究活動を通じて、管理会計変化研究におけるルールとルーティンの相互作用を理解する上で、クリエイティブ・ルーティンという知識創造理論における概念を用いることが有用であることが示された。従来の管理会計研究では単発的な要因が主に検討されてきた中で、管理会計変化へ向けた組織能力、とりわけ、反復的行為として組織に存在する知識については十分に検討されてこなかった。クリエイティブ・ルーティンという概念を用いることで、このような知識の管理会計変化に与える影響を明らかにすることができる。とりわけ、多くの管理会計知識は、他のルーティンを淘汰するクリエイティブ・ルーティンとしての側面を有しており、このような概念の管理会計変化研究における意義は大きいと考えられる。当該研究活動の成果は学位申請論文に置いて盛り込むとともに、日本管理会計学会の学会誌である『管理会計学』に掲載されることとなった。また、フィンランドのヘルシンキで開催されたManufacturing Accounting Research Conference 2012、並びに横浜国立大学で開催された日本原価計算学会全国大会においてその成果を報告した。現在、これらの成果をさらに発展させて、国内外の学術誌への投稿に向けて執筆作業を継続している。平成25年度は、過年度の成果をもとに、管理会計知識の変化を促進する持続的組織能力に着目して研究活動を行っている。類似した環境変化に直面した企業について、異なった反応が観察されるとき、これを説明する概念としてクリエイティブ・ルーティンやダイナミック・ケイパビリティといった概念が、管理会計変化研究にもたらす貢献について先行研究の文献調査を通じて検討を行っている。経験的研究によって明らかとなったことは、リサーチ・サイトにおいては、長期的なスパンで観察されるクリエイティブ・ルーティンと、短期的なスパンで観察されるクリエイティブ・ルーティンがあり、これらが変化志向的組織文化を形成しているということである。さらに、これら2つのモードは、Grafton et al.(2010)が指摘する、業績評価情報のフィードバック的利用とフィードフォーワード的利用に対応しており、知識の探索と深化に関する彼女らの知見と補完的である可能性が示唆されている。平成23年度は企業に赴きインタビュー調査を主体とするフィールド調査を行った。調査の結果得られたデータをもとに、従来の制度的フレームワークの下で十分に説明されてこなかった管理会計のルールとルーティンとの相互作用プロセスを知識創造理論を用いてより精緻に理解することが可能となることを示した。また、管理会計変化を知識創造理論の視点から捉えることで、経済危機によって生じたかに見える管理会計変化の源泉(促進要因)が経済危機以前に培われた組織的文脈の中で生じていることが明らかとなった。このような成果を日本管理会計学会全国大会において報告するとともに、成果論文を学会誌『管理会計学』に投稿中である。またその成果である英語論文をポルトガルのリスボンで開催されたEuropean Network for Research in Organisational & Accounting Change 8th Annual Conference 2011で報告した。フィールド調査は、リサーチ・サイトの事情により必ずしも十分に実施できていない状況があるが、継続的にアクセスを試みている。また同時に、管理会計の知識がどのように定義されてきたか、その構成要素がどのようなものであるのか、そして変化のプロセスに影響を与える要素はどのようなものか、ということについて先行研究を検討する概念的研究を継続的に行っている。本年度は、このような問題に関する先行研究のレビューを通じて、管理会計変化の対象がどのように概念的に規定されてきたかについて、主要な理論枠組みごとに検討し、概念規定の曖昧性が見られる一方で、研究対象の理解に多様性があることを示した。その成果は、日本原価計算学会全国大会において報告するとともに、学会誌『原価計算研究』に投稿し掲載されている。前年度と同様にフィールド調査は、いまだ不十分と言わざるを得ない。リサーチサイトの協力を得つつ、さらなるフィールド調査の推進が必要であると考える。他方、概念的研究については、一定程度の進展がみられつつある。学会等での他の研究者との議論を通じて、さらなる発展へ向けた努力を続けたいと考えている。

本研究において明らかにすべきことは、第一に、企業内でどのような方法・メディアによって、管理会計の知識が伝達されたか、そしてこのような伝達された知識が現場の実践を通じてどのような新しい個人的・実践的理解を生み出し、また組織的な知識へと昇華されたかを、フィールド調査をもとに明らかにすることである。このような点についてのフィールド調査は、いまだ不十分と言わざるを得ない。リサーチサイトの協力を得つつ、さらなるフィールド調査の推進が必要であると考える。また本研究において明らかにすべき第二の点、すなわち、このような知識創造プロセスにおいて、管理会計に特殊的な要因としての計算構造がどのように変化したか、また組織的な知識に対して計算構造がどのように影響を与えたかを理解するための分析枠組みを、先行研究に基づいて発展させることは、一定程度の方向性を見出しつつある。さらなる経験的研究と概念的研究の推進が期待される。フィールド調査によるデータ収集が予定より遅れているため、今後も継続的にリサーチサイトへのアクセスを試みていく予定である。その他の研究計画については、交付申請書記載の通り遂行する予定である。研究成果をまとめるに当たり、追加的なフィールド調査や英文論文執筆のために相対的に多くの研究費をあてる予定である。次年度に使用する予定の研究費が生じたのは、本年度予定していたフィールド調査がリサーチサイトの都合により十分に実施できなかったことによる。次年度以降にこれを実施したいと考えている。
多元主義的存在論にもとづく批判的社会理論の基礎研究

本研究は、存在論(実在論)をベースにした多元主義的存在論を構想し、存在諸次元の媒介によって社会諸関係が成立するという理解のもとに、新たな社会理論の基礎研究をめざすものである。このことによって、倫理問題の社会的構成をとらえ、同時に、歴史法則主義によって歪曲されてきたマルクス的な社会批判と実践理論を克服し、社会的行為実践における倫理的問題を同時に扱う視野を開こうとするものである。02年度は、倫理的な行為論にかかわって、アーレントの公共空間論の思想を検討し、論文「H.アーレントの公共空間の思想」を執筆した。この過程で、「現れの空間」における倫理問題についての、アーレントの思想理解を深めた。03年度は、ヴェーバーの多元主義的社会理論構成の構造理解についての検討を行い、論文執筆の展望を得たが、彼の認識論をめぐって検討課題が見つかり、計画を変更した。なお、同年度は、文化論の基礎的理解を解説した論文「人間と文化を考える」を執筆し、文化現象を多元主義的存在論をモチーフに理解する試みをおこなった。04年度は、研究成果報告を延期していただき、二つの論文を執筆した。まず、アーレントとマルクス思想の比較検討を行い、「ハンナ・アーレントはなぜ見直されているのか」を執筆し、その思想全体の評価の基本点を大まかに整理することができた。また、M.ヴェーバーに関する論文「M.ヴェーバーの価値自由論とその世界観的前提-多元主義的存在論の視点による読解の試み-」を、年度末に執筆した。本論文は、M.ヴェーバーの価値自由論に焦点を据えて、その「世界観的な了解構造」を「多元主義的存在論」という視点から、解読する試みである。本論文は、多元主義的存在論の理論構造を考察したものであり、本研究構想全体の基礎がためとなるものである。なお、上記論文に続いて、ヴェーバー社会科学論の全体を扱う続編の執筆を想定しており、継続的な研究の深化をはかっていく予定である。当初、計画した、マルクス、ヴェーバー、ハルトマン、ポッパー、アーレントらの思想を批判的に継承した総合的な多元主義的存在論にもとづく社会理論の構築という構想は、なお引き続き時間を要する仕事とならざるをえない。当初の計画通りには進まなかったが、これまでの研究で、その全体的な研究の展開に確かな見通しを得たものと自負している。本研究は、存在論(実在論)をベースにして、多元的な価値と存在の次元(存在位相)を行為と認識が媒介することによって社会諸関係が成立するという基礎理解にたち、社会諸関係の多元的構成の基礎理論の構築をめざすものである。また、このような基礎理論の理解のもとに、従来社会科学では欠けていた人間の行為が遭遇する倫理的な問題領域の社会的構成をとらえることが可能となるという見通しをもって研究を進めている。これによって、歴史法則主義によって歪曲されてきたマルクス的な社会批判と実践理論(労働ならびにコミュニケーション的政治的行為)において不在となっている行為における倫理的な判断や自由という問題を同時に扱う視野を開こうとするものである。

そこで、本年度の研究は、多元主義的存在論の理論構築のための基礎的な研究を、特にアーチャー、パスカーらの実在論的な社会学(社会科学)の基礎理論の研究とヴェーバーの価値次元と存在次元、主観的認識次元の多元主義的構成の構造理解、アーレントの複数制による現れの世界と思考次元の多元性理解にもとづく公共空間論ならびに彼女の活動、仕事、労働などの行為論がもつ多元主義的倫理学につながる構想の検討を中心に行った。アーチャーらの実在論の構想についての研究はなお引き続き来年度の研究課題として継読する予定である。また、ヴェーバーの研究は、現在「M・ヴェーバーの世界観的前提と多元主義-その批判的継承をめざして」を執筆途上である。本年度は、特にアーレントの公共空間論の思想を検討し、彼女のマルクス批判の論理の批判的検討を行うとともに、現れの思想の実在論的性格とずれ、現れの空間における行為と思考活動との多元主義的理解、行為と言論の公共的世界における倫理問題の発生論などについて研究し、これまで手つかずだった分野についての新たな知見を得た。本年度は、「H.アーレントと公共空間の思想」を執筆し、2003年3月発行の本学人文科学研究所の叢書第16輯『新しい公共性-そのフロンティア』(有斐閣)の第1章として掲載した。なお、現在、ヴェーバーに関する上記論文の執筆作業をすすめつつ、ある出版企画に参加しマルクスとの関連でアーレントの行為論と現れの世界に関して主題的に論ずる論文を構想中である。本研究は、存在論(実在論)をベースにして、多元的な価値と存在の次元(存在位相)を行為と認識が媒介することによって社会諸関係が成立するという基礎理解にたち、社会諸関係の多元的構成の基礎理論の構築をめざすものである。また、このような基礎理論の理解のもとに、従来社会科学では欠けていた人間の行為が遭遇する倫理的な問題領域の社会的構成をとらえることが可能となるという見通しをもって研究を進めている。これによって、歴史法則主義によって歪曲されてきたマルクス的な社会批判と実践理論(労働ならびにコミュニケーション的・政治的行為)において不在となっている行為における倫理的な判断や自由という問題を同時に扱う視野を開こうとするものである。昨年度は、特に倫理的な行為論にかかわって、「H.アーレントと公共空間の思想」(『新しい公共性-そのフロンティア』有斐閣)を執筆したが、その研究過程で、「現れの空間」における行為のリアリズム、その多元主義的理解、公共的世界における倫理問題の発生論などについて研究し、これまで手つかずだった分野についての新たな知見を得た。本年度は、多元主義的存在論の理論構築のための基礎的な研究として、特にアーチャー、バスカーらの実在論的な社会学(社会科学)の基礎理論の研究の継続、ヴェーバーの価値次元と存在次元の多元主義的構成の構造理解について検討を行い、マルクス思想との微妙な交錯をみせているアーレントの思想とマルクス思想との比較検討をおこなってきた。なお、この間、実在論的世界観の基礎的な諸問題に関連して、J.J.ギブソンの「生態学的実在論」に新たに触発を受けた。彼の知覚研究に始まアフォーダンス論るにおける実在論が、本研究で構想中の実在論的な行為論に有力な示唆を与えているとの見通しをもつことができた。マックス・ヴェーバーに関する研究は、来年度の遅くない次期に本学『産業社会論集』に掲載する予定である。なお、アーチャーらの実在論の構想について時間要素の導入の意義について重要な論点提示がなされており、引き続き研究を継続する予定である。
ヘテロ五員環拡張型ビピリジン系機能性化合物の創製

1.2-ブロモチオフェンおよび2-ブロモフランにPd触媒の存在下、4-トリメチルスタニルピリジンを作用させ、2-ピリジルチオフェンおよび2-ピリジルフランを合成し、これをリチオ化し、CuCl_2を作用させ、5.5'-ビス(ピリジル)ビチオフェン(1)および5.5'-ビス(ピリジル)ビフラン(2)を合成した。2.1および2にヨウ化メチルを作用させて、それぞれからN,N'-ジメチルジカオン(3)および(4)を合成した。3.3および4は400-480nmに強い吸収極大を示し、ヘテロ五員環一個の場合よりも70nm長波長シフトしている。4.3および4の電気化学的性質をサイクリックボルタンメトリー法で調べた結果、3は-0.84V,4は-0.91Vで可逆的に二電子還元された。ヘテロ五員環一個の場合より還元電位は低下するが、可逆性は非常に良い。5.3および4の蛍光発光スペクトルを測定し、共に強い蛍光発光体である事を明きらかにした。特に、4の蛍光量子収率は0.81であり、フラン環一個で拡張したビオロゲンの蛍光量子収率とほぼ同じであった。3が4より量子収率が低いのは重原紙効果である。即ち3や4の分子の平面性は非常に良いことがわかった。6.3および4を発光層または電荷輸送層としたEL素子を作製して、青色発光を観察した。現在、素子のタイプをいろいろ変えて発光輝度やEL特性を調べている。7.1および2にペンタアンミンソルテニウムを作用させて、それぞれからRu錯体5および6を合成し、次いでそれぞれをヨ-ソ酸化してRu(II),Ru(III)混合原子価錯体を生成させ、Ru-リガンド間のCT遷移とRu(II)-Ru(III)のcoupling bandを観察した。現在、スペクトルを解析して、混合原子価間の有効結合定数を求め、リガンドの構造との相関を考察している。
子宮内膜症患者血清・腹水中の抗子宮内膜抗体に関する研究

子宮内膜症の病因、病態を免疫学的観点より検討するため、自己免疫疾患で認められる標的臓器に対する自己抗体に相当する抗子宮内膜抗体の存在を患者血清・腹水を用いて検索した。ヒト子宮内膜蛋白の抽出は、摘出子宮よりの正常内膜をホモゲナイズ、2回遠心後1%TritonX100にて溶解、超遠心後の上清をとり、可溶蛋白成分とした。ELISA法による血清・腹水中免疫グロブリンの子宮内膜抽出蛋白に対する結合性は、200倍希釈血清で吸光度は0.414±0.120、対照群で0.249±0.103と有意差を認めたがr-AFS分類によるstage間で相違はなかった。子宮内膜症患者でGnRH agonist投与11症例の治療前後の抗体価を比較すると治療前吸光度0.791、治療後0.656と低下する傾向を認めた。腹腔鏡にてstage分類で1ランク以上の改善を確認した予後良好群では83.3%に吸光度の低下を認めた。Western blotting法による抗子宮内膜抗体に対応する子宮内膜蛋白抗原の同定を行うと、子宮内膜症患者血清中13例(72.2%)、14例(77.8%)、15例(83.3%)は子宮内膜蛋白抗原のそれぞれ26kd、34kd、42kdに対する抗子宮内膜抗体活性を示した。一方、非子宮内膜症婦人では6例(33.3%)、8例(44.4%)、8例(44.4%)が上記抗原に反応した。子宮内膜蛋白に対する抗体活性の差は両群間で有意であった。有意に低率ではあるが非内膜症患者でも26kd、34kd、42kdに抗体活性を認めたことは今後これら陽性患者を厳重にフォローするとともに、これら対応抗原の子宮内膜症発症における意義をさらに追究することが必要と思われた。子宮内膜症婦人の血清15例(r-AFS stageでI期3例、II期1例、III期5例、IV期5例、不明1例)、腹水8例(I期1例、II期1例、III期2例、IV期4例)および非子宮内膜症の対照婦人の血清14例、腹水8例を採取した。ヒト子宮内膜蛋白の抽出は子宮摘出時に得られた正常子宮内膜をhomogenization後結合織成分を除去し、5,000rpm,15分、2回遠心後の沈査を1%TritonX100にて溶解、100,000×g、1時間超遠心後の上清をとり、可溶蛋白成分とした。ELISA法による血清・腹水中免疫グロブリンの子宮内膜抽出蛋白に対する結合性の測定では血清の各希釈倍率における吸光度は100倍(p<0.01)、200倍(p<0.001)、400倍(p<0.001)、のいずれの希釈倍率においても子宮内膜症群は対照群と比較して有意に高値を示した。200倍希釈血清での比較をみると吸光度の平均値は子宮内膜症群で0.414±0.120、対照群で0.249±0.103と子宮内膜症群で有意に高く、またcut off値を0.350とすると陽性率は子宮内膜症群で10例、66.7%、対照群で1例、7.1%とやはり子宮内膜症群で有意(p<0.001)に高値を示した。

r-AFS分類によるstage別の吸光度の比較では各stage間の相違は認められなかったが、今回は症例数が少なく今後症例を集め検討する必要があると思われた。不妊症の有無による吸光度の比較では100倍希釈血清において不妊症群で0.651±0.198、非不妊症群で0.670±0.121と両者間に有意差は認めなかった。治療前後の比較では吸光度が減少したものは3例、増加したものは2例と多様な傾向を示した。子宮内膜症発症における抗子宮内膜抗体の意義を解明するためにも治療前後の検体数を増加し抗体価の推移と子宮内膜症の病勢との関係を詳細に検討することは重要と考えられた。一方腹水における同様の検討では100倍、200倍、400倍のいずれの希釈倍率においても子宮内膜症群と対照群の間に有意差は認められなかった。子宮内膜症婦人の血清15例(r-AFS stageでI期3例、II期1例、III期5例、IV期5例、不明1例)、腹水8例(I期1例、II期1例、III期2例、IV期4例)および非子宮内膜症の対照婦人の血清14例、腹水8例を採取した。ヒト正常子宮内膜蛋白をとり、可溶蛋白成分とした。ELISA法による血清・腹水中免疫グロブリンの子宮内膜抽出蛋白に対する結合性の測定では血清の各希釈倍率における吸光度は100倍(p<0.001)、200倍(p<0.001)、400倍(p<0.001)、のいずれもの希釈倍率においても子宮内膜症群は対照群と比較して有意に高値を示した。100倍希釈血清では子宮内膜症群の平均吸光度は、0.765±0.206、対照群で0.562±0.140、200倍希釈血清では子宮内膜症群で0.414±0.120、対照群で0.249±0.103と子宮内膜症群で有意に高く、またcut off値を0.350とすると陽性率は子宮内膜症群で10例、66.7%、対照群で1例、7.1%とやはり子宮内膜症群で有意(p<0.001)に高値を示した。r-AFS分類によるstage別の吸光度の比較では各stage間の相違は認められなかった。GnRH agonistであるTAP-144-SR投与症例11例の治療前後の抗子内膜抗体値の比較をすると治療前の平均吸光度0.791に対し治療後は0.656と低下する傾向が認められた。さらに治療後腹腔鏡によりstage分類で1ランク以上の改善を認めたもの、あるいは治療によりチョコレート嚢腫の著明な縮小を超音波検査で確認し得たgood prognosis群では6例中5例(83.3%)に吸光度の低下が認められた。
ポール・ヴァレリーの初期詩篇の総合的研究

『若きパルク』や『魅惑』といった中期以降に書かれた詩集とちがい、ポール・ヴァレリーの青年時の詩はあまり研究対象とはなっていないように思われる。このような研究状況の中で、フランスのファタ・モルガナ社が2009年に初めて公刊した彼の中学生時代に書いた詩をまとめた手帖を集約的に研究した。その結果、彼がヴィクトール・ユゴーやジェラール・ド・ネルヴァルの詩学に学びつつ、さまざまな詩型や韻律ならびに脚韻を試みていることを明らかにした。ポール・ヴァレリーの初期詩編を研究するために、昨年度にひきつづき、パリのフランス国立図書館、ならびにブリュッセルのアルベールII世王立図書館を訪れて、資料の収集にあたった。この作業を通して、フランス象徴主義の詩人たちの多様な活動が明らかになるとともに、『旧詩帖』に収録されている詩編の構想段階から雑誌発表段階にいたる詩編の変遷を確実に追い求めることができるようになった。それらの分析の結果、ヴァレリーがこれらの詩編の構想にあたって、19世紀後半においてパリの詩壇でなおも有力であったユゴーやジョゼ・マリア・ド・エレディア、マラルメなどに多くを学んでいることが明らかになった。また、『旧詩帖』以前の詩編についての研究も進めることができた。セットの中学生時代に書かれた詩編は、現在活字版とファクシミレ版で発行されているが、ここに書かれた詩編の分析を通して、将来大きく展開されていくことになるヴァレリーの詩学の根本部分を確認することができた。そこには大作家の作品の模倣とパロディーを繰り返しつつ、独自の作家へと成長していくヴァレリーの姿を発見することができた。また、現代フランスの作家エリック・ファーユ氏との対談(2013年11月1日、東京池袋、リブロ)において、ヴァレリー的な詩学が現代フランスの作家たちにどのような影響を与えているのかも確認することができた。それは、安定的な自我の保証のないところで、言語というきわめて粗雑な道具がどのように働きうるのかという問題として提起されていることを再確認する場でもあった。本研究は、ポール・ヴァレリーの初期詩篇の研究を推し進め、それらを翻訳し、注解することを主たる目的としている。フランス本国でも、それらの詩篇はきちんとしたテキスト・クリチックがなされていない状況にあるが、本研究では、今後の研究に耐える校訂版を作成し、それをもとにした翻訳、註解をする予定である。その意味で、平成25年2月にパリのフランス国立図書館でおこなった資料調査はきわめて有意義であった。初期詩篇の草稿、ならびに異稿(ヴァリアント)も合わせて、収集することができた。詩篇の翻訳にあたっては、まず『旧詩帖』(Album de vers anciens)に焦点をあてて研究を推し進めた。ここには22編の詩が収録されているが、ヴァレリーの主要作品とされる『若きパルク』や『魅惑』とくらべてフランス本土でも研究が遅れているようにおもわれる。日本でも鈴木信太郎による翻訳以降、めぼしい研究がなされていないのが実情である。現段階で、『旧詩帖』に収録されているほぼすべての詩篇の翻訳ができている。この作業のなかで、ヴァレリーの詩作における新たな発見もいくつかあった。そうした発見を論文の形で発表していくつもりである。今年度は、ヴァレリーにおける書くこと(エクリチュール)と官能との関係からヴァレリーの詩学を読み解くために、論文「ヴァレリーあるいは二匹の蛇」を筑摩書房の『ヴァレリー集成』第6巻に発表するとともに、ヴァレリーの翻訳家としても著名な精神科医・中井久夫のヴァレリーの詩にたいする態度を分析するエッセイ「ヴァレリーを読む中井久夫」をちくま学芸文庫に発表した。ポール・ヴァレリーの詩集の中で『若きパルク』や『魅惑』といったヴァレリー成熟期の作品は、すでに何度か日本でも翻訳され、さらには改訳もされてきたし、その研究もかなりの程度進んでいるといえる。しかし、ヴァレリーの初期の詩編のなかには、まだきちんとした校訂がなされていないものも多く、ヴァレリー研究のなかでは一番遅れた分野だと考えられてきた。今回の科研費を受けて、わたしはパリのフランス国立図書館、ならびにブリュッセルのアルベール1世王立図書館、さらにはコペンハーゲン大学の附属図書館を訪れ、そこに保存されている資料をもとに、2009年にフランスで公刊されたヴァレリーの中学生から高校生の時期に書かれた詩編を集めたCahier de Cette(セット手帖)がまず資料として信用するに足るものかどうかを確認いたしました。そして、その作業をもとに、この詩編に含まれている詩27編をすべて日本語に移し替えるとともに、詩集の解題をおこないました。もちろんこの詩集が原語のフランス語から外国語に移されたのは世界で初めてでありますし、今後のヴァレリー研究に大いに寄与するものと思われます。

この詩集翻訳の一番大きな意義は、これまでほとんど解明されてこなかった、ヴァレリーの青年期の読書の内容、さらには影響関係を明らかにした点、そして、ヴァレリーが作家として成長していくために、ヴィクトル・ユゴーやジェラール・ド・ネルヴァルといった先人たちの詩の文体研究をするとともに模作までしていたことを証明した点にあると思われます。仏文学過去二年にわたってパリのフランス国立図書館で資料の収集を行った結果、論文執筆に必要と思われる資料をほぼすべて収集することができたし、それらを整理分類することができた。今年の夏にはそれらをもとにした論文執筆が可能な状態にまでこぎつけていると判断する。また、必ずしもヴァレリーを専門としているわけではない現代作家のエリック・ファーユとの対談や聴衆との意見交換を通して、ヴァレリーの初期の詩編の書き方の特徴をあきらかにすることができたことも大きな収穫であったと判断している。フランス国立図書館で平成25年2月に研究課題に関する資料の収集をおこない、課題達成に必要となるものをほぼすべて入手することができた。これらの資料をもとに、ヴァレリーの初期詩篇の全体像を確認した上で、テキスト・クリチックを行い、個々の詩篇の翻訳、ならびに註解をしていく予定であるが、翻訳作業は順調に進んでいるし、出版社のめどもある程度ついている。今年度は最終年度にあたるので、さらにもう一度のフランス滞在を経て、収集した資料の再確認の作業などをおこなったうえで、論文執筆にあたるとともに、各種学会での研究発表を行う予定である。研究の中心課題になるのは、これまで象徴主義の美学という系譜の中で一般的に理解されてきたヴァレリーの詩学がどのような過程を経て成立していったのかということを初期詩編の分析を通して明らかにしていくことにあるが、草稿や未公刊資料の分析を通して、そうした理解に修正を加えていきたいと思っている。平成25年2月にパリのフランス国立図書館で入手した資料をもとに、ヴァレリーの初期詩篇の翻訳、ならびに註解の作業を続けていく。この研究に必要となる資料のいくつかは、ヴァレリーの生地セットの図書館に保存されているので、それもあわせて収集し、研究をより充実させる予定である。フランス国立図書館(パリ)ならびにセット市立図書館で2週間程度の資料収集を行う。日本ヴァレリー研究センター(本部:一橋大学)に集まる研究者たちとの会談のために東京出張を計画している。
口腔内に混在する各種有機酸の相互作用からみた歯科用金属の耐腐食性評価

ヒト全唾液に含まれる有機酸およびそれらの混合有機酸溶液を用いて歯科用金属材料の浸漬試験を行い、歯科材料の生体適合性を検討し、加えて歯科材料アレルギーの臨床で観察される事項の理解に必要な情報を集積した。得られた結果は、以下の通りであった。1.安静時全唾液から、クエン酸、ピルビン酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸および炭酸が検出された。それらの平均濃度は順に3.29,0.07,0.03,0.02,0.49,0.27,1.88,0.17,7.91mMであった。2.81化粧品中60製品(74%)および50家庭用品中39製品(78%)から金属元素を検出した。金属元素検出率が100%の化粧品は髪染,メークアップ,口唇,爪化粧品、そして家庭用品はクリーナー(スポンジ),市販布巾,ブラシ,クリーニングパッド,ゴム手袋であった。化粧品にはSi(65%),Fe(56%),Ti(51%),K(49%),Ca(44%),Al(41%),Zn(30%)が,家庭用品にはCa(70%),Fe(42%),Si(34%),Ti(34%)が含まれていた。3.30年近く使用した義歯床部レジンからメタクリル酸メチル、ハイドロキノン、ホルムアルデヒド、過酸化ベンゾイル、安息香酸、安息香酸メチルなどレジンアレルギー原因物質が抽出された。4.ICP-MSを用いた溶出試験で、歯科用金合金(TypeIV : Ptを含有)および金銀パラジュウム合金製試料を3週間浸漬した混合有機酸溶液(7.13mM)からPtおよびPd元素を検出した。平成14年度は研究期間の初年度に当たり,本実験の準備と実験方法の確度を補強するため情報収集およぴ口腔内に混在する有機酸の平均濃度比を再現した試験溶液の調整と浸漬試験用金属試料の作成作業を進めて,現在予備実験が進行中である。情報の収集は,主に口腔内環境すなわち常在細菌と唾液含有成分および金属修復物変色の関係するもので,さらに採取後のヒト安静時唾液に含まれる有機酸の経時的変化を把握する必要から,口腔内金属修復物の変色や安静時唾液に関する情報の収集・整理にも努めた。我々は口腔内に存在する数種類の単独の有機酸の中でチタンが腐食することを確認し、平成15年11月には腐食反応が顕著なシュウ酸に対する浸漬試験の結果を報告した(黒木他:2003).本年度はこれに加えて,より口腔内に近い環境を考慮して,ヒト全唾液に含まれる9種類の有機酸で調整した有機酸混合溶液中におけるチタンの腐食挙動を検討し,以下の結果を得た.モリタ社製純チタンA(JIS第2種)をメーカーの指示に従い鋳造し,800番の耐水研磨紙まで仕上げ研磨し試料とした.浸漬液は,前回の科研で報告した健常者の安静時唾液における有機酸9種類の濃度を参考に,1)有機酸総濃度7.13mmol/lの溶液(7.13有機酸),2)有機酸の比率は同じで1%乳酸溶液のモル濃度に相当する128mmol/lに調整した溶液(128有機酸),および,3)1%乳酸溶液(コントロール;128乳酸)の3種類とした.浸漬試料には37°C,80回/minの浸盪を加えた.浸漬3週間後,浸漬液へのチタン溶出量測定,重量測定,および色差測定を行った.

さらに,浸漬前後のチタン表面性状の変化も観察した.全浸漬後溶液に色の変化や沈殿物は視認しなかった.浸漬液中のチタン溶出量は,128有機酸中で最も大きかった.試料重量変化は,128有機酸,7.13有機酸および128乳酸の順に少なくなる傾向が見られた.すべての浸漬後試料では肉眼的に差は認められなかった.試料表面色の変化ΔE*abは,溶液間で有意差はなかった.また,SEM像では、すべての試料において明らかな変化は認められなかった.以上の結果は,同じモル濃度では乳酸溶液よりも有機酸混合溶液が,約2倍の溶出量を示し,重量変化も認められたことから,唾液に含まれる有機酸によって口腔内のチタン製修復物が腐食変化をおこすことを示唆している.(平成16年5月発表予定)研究目的:本研究の主目的は、ヒト全唾液に含まれる有機酸および混合有機酸溶液を用いて歯科用金属材料の浸漬試験を行い、生体材料の安全性の検討や歯科材料アレルギーの臨床に係わる関連情報を集積することであった。以下の結果は、歯科材料アレルギーの臨床および溶出試験法の検討に有用な示唆を与えると考えた。1.安静時全唾液から、リン酸(1.66)、クエン酸(2.85)、ピルビン酸(0.06)、リンゴ酸(0.03)、コハク酸、乳酸、ギ酸、酢酸、およびプロピオン酸(1.66,2.85,0.06,0.03,0.02,0.43,0.23,1.71,0.14μmol/ml)を検出した。2.81化粧品の60製品(74%)および50家庭用品の39製品(78%)から金属元素を検出している。化粧品のうち,髪染,メークアップ,口唇,爪化粧品などの金属元素検出率は100%で,検出率が最も低い化粧品は基礎化粧品(13%)であった。家庭用品で金属含有率が100%の製品はクリーナー(スポンジ),市販布巾,ブラシ,クリーニングパッド,ゴム手袋などで,検出率が最も低かったのは消臭剤の40%であった。また,化粧品にはSi(65%),Fe(56%),Ti(51%),K(49%),Ca(44%),Al(41%),Zn(30%)を,家庭用品にはCa(70%),Fe(42%),Si(34%),Ti(34%)を含む製品が多かった。3.いわゆる純チタン試料を128mMのギ酸およびシュウ酸溶液に3週間浸漬して測定したTi溶出量は、それぞれ0.0009/cm^2および0.0262mg/cm^2で、後者では浸漬後の試料の表面あれを肉眼で観察できた。チタン浸漬後試料表面の酸化チタン層は,ギ酸浸漬試料の方が厚かった。4.歯科用金合金試料(TypeIV)および金銀パラジュウム合金を3週間浸漬した混合有機酸溶液(7.13mmol/l)から、ICP-MSの検出限界を超える微量のPtおよびPdが検出された。
肺癌患者における潜在癌細胞の分子生物学的検出-リアルタイム定量的検出システムと肺癌治療への応用-

早期と考えられる固形癌においても、流血中、骨髄中などにしばしば癌細胞が存在することは以前から指摘されていました。肺癌や乳癌患者においては、早期に発見し根治手術を施行したと判断される場合においても、再発死亡に至る症例がしばしば経験されます。われわれは変異遺伝子のみを特異的に増幅する方法として3'末端に変異した遺伝子の配列に相当する塩基を持つプライマーを用いてPCRを行うプロセスを開発しました。この方法によりリンパ節や血液中に散布された癌細胞を鋭敏に検出することができます。臨床病期早期の末梢性小型肺癌においても、術前、術中、術後の末梢血中には高頻度に癌細胞を検出できることが判明しました。これにより、肺癌や乳癌は発見の段階ですでに全身病としてとらえねばならない病態が存在することを証明することができました。このように癌特異的遺伝子変異やmRNAを指標としたPCR法による潜在癌細胞の検出法の確立は、坦癌患者における血液やリンパ節中の潜在癌細胞の検出を可能とし、治療のstrategyを構築する新たな手段となりました。現在、当科では自動核酸抽出器、Light Cyclerを導入し、迅速かつ定量的な遺伝子診断を行い、そのさらなる臨床応用をめざしています。自動核酸抽出器を用いる事により、一度に32検体から純度の高い核酸を1時間以内で抽出する事ができます。抽出した核酸を鋳型にしてLight Cyclerを用いた増幅を行うと、45サイクルのPCR解析まで約45分しか要せずゲル電気泳動も不要であるため、現時点では検体採取後3時間以内での結果報告も可能になりました。本研究において、肺癌患者の末梢血中癌細胞の分子生物学的存在診断の臨床的意義と問題点について明らかにすることができました。変異遺伝子のみを特異的に増幅する方法として3'末端に変異した遺伝子の配列に相当する塩基を持つプライマーを用いてPCRを行うプロセスを開発しました。

臨床病期早期の末梢性小型肺癌においても、術前、術中、術後の末梢血中には高頻度に癌細胞を検出できることが判明しました。これにより、肺癌や乳癌は発見の段階ですでに全身病としてとらえねばならない病態が存在することを証明することができました。このように癌特異的遺伝子変異やmRNAを指標としたPCR法による潜在癌細胞の検出法の確立は、坦癌患者における血液やリンパ節中の潜在癌細胞の検出を可能とし、治療のstrategyを構築する薪たな手段となりました。現在、当科では自動核酸抽出器、Light Cyclerを導入し、迅速かつ定量的な遺伝子診断を行い、そのさらなる臨床応用をめざしています。自動核酸抽出器を用いる事により、一度に32検体から純度の高い核酸を1時間以内で抽出する事ができます。抽出した核酸を鋳型にしてLight Cyclerを用いた増幅を行うと、45サイクルのPCR解析まで約45分しか要せずゲル電気泳動も不要であるため、現時点では検体採取後3時間以内での結果報告も可能になりました。
非可換幾何・特異点・幾何学的漸近解析学の研究

4つのことについて研究を行った。一つ目はスキームの構造層のポアソン構造方向への非可換化の定義を与え、複素射影空間を用いて具体例を構成し、新たな積について指数写像を計算した。二つ目は大森英樹氏、前田吉昭氏、吉岡朗氏らとの共同で平坦な空間における量子化のオーダーリング問題について考察し、またパラメーターhについて収束するスター積について考察を行った。三つ目は本間泰史氏、楯辰哉氏との共同で3次元多様体(ハイゼンベルグやレンズ空間など)におけるディラック作用素から定義されるエータ関数の性質を調べた。四つ目は谷口正氏との共同で、スーパーポアソン構造を付ツイスターについてその量子化について考察を行った。本年度は昨年までの研究に引き続き・空間(微分可能多様体や代数多様体)のシンプレクティックまたはポアソン構造方向への変形量子化について考察・3次元冪零多様体のディラック作用素の固有値に同伴するエータ関数の特殊値と指数定理に関する考察をおこなった。また後者については、共同研究であり、これまでのところ3次元ハイゼンベルグ多様体について、概ね計算を終えて現在preprintに纏めている最中である。これらの計算をより一般の場合に進めていくことを今後の課題としたい。本年度は高次元の射影空間さらには重みつき射影空間(これは所謂射影トーリック代数多様体の例である)などについてそれらの構造層に作用するある条件を持つ双微分とそれに対応する構造層の環構造の変形理論について考察を行い、付随してあらわれる非可換積の指数関数について計算を行った。射影空間の場合には構造層の変形や非可換積の指数関数の計算において構造層のコホモロジーが受け皿としての大切な役割を演じている。重みつき射影空間の場合にもおなじようなことが期待され、非可換積の指数関数の値が変形する方向によっているあり様がコホモロジー(環)に影響を与えると思われる。重みつき射影空間の構造は対応するpolytopeに反映されており、コホモロジーの構造がpolytopeを用いて記述できることが知られており、構造層の変形も対応するpolytopeからの制約を受けると想像される。上の話題と並行して、前年度までねじれたベクトリアルバンドルにおけるディラック作用素や指数などについても考察を行ってきたが、本年度はハイセンベルグ多様体におけるスピン構造、ディラック作用素その固有値、そしてエータ関数などについても研究してきた。具体的には3次元の場合にハイゼンベルグ多様体の固有値を使って定義されるエータ関数を考えそれを直接計算するというものでる。これらの値はAtiyah-Patodi-Singerの指数定理にも密接に関連している話題であり、位相的な方法・特性類の積分によって得られる値との比較を行いつつあり今後の課題とするつもりでいる。これらを実際に行うに際しては、固有値に依存するエータ関数がどのような性質を有しているかを詳しく調べていく必要があり、幾何学的漸近解析学などでもちいられるEuler-Maclaurinの定理、Taylorの定理、またゼータ関数とBernoulli多項式などが大切な役割を演ずることになると考えられる。これらの詳細についても調べていくことも今後の課題である。本年度の研究においては昨年度まで行ってきた射影スキームの構造層のhphic Poisson structure方向への量子化(非可換結合環構造の導入)や射影空間での具体的な計算に加えて,あらたに,Courant algebroid,generalized geometryzed complex geometry, generalized Kaehler geometry, bi-hermitian ture等といった分野との関係において果たすholomorphic Poisson structureの役割を認識したこと,とくに変形パラメータ(これは量子化の際に現れるプランク定数とは異なる)を持つファミリ-holomorphic Pisson structureから得られることを認識することにより,それに対応して,量子化された構造がファミリーをなすことが解った.これにより,変形パラメータを持つ非可換結合環構造のファミリーが得られることになる.これについては後に挙げる「Quantization of Holomorphic Poisson structure---related to Generalized Kaehler structure---」arXiv:submit/0945317[math.DG]30.Mar.2014において発表されたものである.付記:2013年11月20日,慶應義塾大学日吉来往舎において研究会「非可換幾何学と数理物理学2013」を本科研費援助のもと開催した.本年度までの進捗状況では、考察の対象を滑らかな多様体だけでなく特異点を許す代数多様体、スキームにまで広げその対象の上の関数環ならびに構造層についてのPoisson構造方向への変形を行い、その結果として関数環ならびに構造層の代数構造を可換結合的なものから非可換結合的なものへと「量子化」をおこなっている.

実際、射影的なスキームについて「量子化」の定義をあたえ、複素射影空間の場合には具体的な正則Poisson構造を用いてその構成例をあたえた.また同様な例の構成は特異点を許す代数多様体である重みつきの射影空間などにも適用が可能と思われ、現時点でその構成をおこない、証明などの正当性を検証している状態にある.通常の代数幾何学においては構造層の構造がわかるとその底空間の構造に関する情報が得られるが、それに同伴する(準)連接層の研究も同時に行われるのがふつうである.我々の場合には環構造が変化を受けているので同伴する(準)連接層の研究にはかなりの影響を与えることが予想されるが、現段階ではそれほどの進展はない.以上は個人的な研究の概観であるが、それ以外に共同研究においてと3次元の多様体についてそのスピン構造、スピノール構造ならびにディラック作用素を具体的に記述して考察の対象とし、さらにディラック作用素に同伴するエータ関数の特殊値やresidueについて計算を行っており現在進行中のところである.これらの研究は奇数次元多様体の指数定理と関連してきわめて興味深いものと思われる.付記;科研費の援助のもと「非可換幾何学と数理物理学2012」(日程:2012年9月14日(金曜日)-9月15日(土曜日)、場所:慶應義塾大学日吉キャンパス来往舎)を開催した.本年度は昨年度に引き続き高次元の射影空間さらには重みつき射影空間(これは所謂射影トーリック代数多様体の例である)などについてそれらの構造層に作用するある条件を持つ双微分とそれに対応する構造層の環構造の変形理論について考察をおこなった。また所謂古典的な複素構造の変形理論に伴うケーラー構造の変形に付随する量子化の考察を始めた。射影空間の構造層の変形や非可換積の指数関数の計算において構造層のコホモロジーが受け皿としての大切な役割を演じていることは既に分かっていた。重みつき射影空間の場合にもおなじようなことが期待され、非可換積の指数関数の値が変形する方向によっているあり様がコホモロジー(環)に影響を与えると思われる。重みつき射影空間の構造は対応するpolytopeに反映されており、コホモロジーの構造がpolytopeを用いて記述できることが知られており、構造層の変形も対応するpolytopeからの制約を受けると想像される。上の話題と並行して、前年度までねじれたベクトリアルバンドルにおけるディラック作用素や指数などについても考察を行ってきたが、本年度はハイセンベルグ多様体におけるスピン構造、ディラック作用素その固有値、そしてエータ関数などについても研究してきた。具体的には3次元の場合にハイゼンベルグ多様体の固有値を使って定義されるエータ関数を考えそれを直接計算するというものでる。これらの値はAtiyah-Patodi-Singerの指数定理にも密接に関連している話題であり、位相的な方法・特性類の積分によって得られる値との比較を行いつつあり今後の課題とするつもりでいる。
メタゲノム解析に基づくウイルスと宿主細菌の動態解明

琵琶湖に生息する細菌とそれに感染するウイルスは他の生物を圧倒する数(細菌:百万細胞/mL,ウイルス:一千万粒子/mL)で存在している。ウイルスと細菌の相互作用は琵琶湖の生態系プロセスに大きな影響を及ぼすことが明らかになっている。しかし、季節や水深ごとにどの種の細菌やウイルスが重要かまでは明らかになっておらず、ウイルスを組み込んだ琵琶湖生態系モデルの構築に至っていない。本研究ではメタゲノム解析を駆使してウイルスと細菌群集の時空間的なダイナミクスを明らかにし、琵琶湖において重要度の高いウイルスー細菌の感染系を抽出する。そして重要な感染系に対して、琵琶湖物質循環への寄与を個々に明らかにする。
伸展・圧迫ストレスに対する3次元培養脊髄神経細胞の生存活性に関する遺伝子発現解析

細胞の機械的ストレスにはFX-3000TM-Flexercell Strain Unit(Flexorcell International Corporation, Hillsborough, NC)を使用した。細胞は3x104/wellにてFlex I flexiblebottomed plate(ストレス処置群)、Flex II flexible control plateに播種し、5%CO2 incubator内で機械的刺激を行った。Neuron somaの縮小、細胞膜の肥厚、細胞間質の拡大が6時間以上のストレスで観察された。LDH、NO値もその形態変化とほぼ一致して6時間以降で高値を示した。MAP2陽性細胞数は、時間と友に減少するのに対し、GFAP陽性細は比較的ストレスに対してその数は比較的保たれていた。MAP2細胞同様にBDNF陽性細胞も減少し、double stainの結果では、抗MAP2/BDNF抗体陽性細胞はストレス時問に伴い数は減少していた。Astrocyteについては、抗GFAP/BDNF抗体陽性細胞はストレス時間に伴い比較的その数は保たれていたが、経時的な観察により、残存する抗GFAP陽性細胞のimmunoreactivity(IR)は高かった。抗GFAP/NT-3抗体陽性細胞の変化も同様であり、6時間でIRがピークに達していた。一方ニューロンの標識では、BDNF同様、抗MAP2/NT-3抗体陽性細胞数は減少していったが残存するMAP2は高率でNT-3陽性であった。我々は予備実験の結果より伸縮率15%、伸縮回数が毎秒1回程度の比較的軽度なストレス条件を設定した。その結果ストレス開始後6時間で形態変化、神経細胞より放出されるLDH活性の増加、NO活性の増加が観察された。今回の結果より培養細胞下での機械的ストレスに対するアストロサイトが生存維持、機能修復に関与している可能性が示唆された。
新規てんかんモデルラットの開発および分子病態解明研究

Phenotype-driven ENUミュータジェネシス法により、ヒト発作性運動失調EA1の原因遺伝子である電位依存性カリウムチャネルKcna1にミスセンス変異を有するモデルラット、酸化ストレス遺伝子に変異を有するけいれん発作モデルラットを開発した。Gene-driven法では、ヒト常染色体性優性外側側頭葉てんかんADLTEの原因遺伝子Lgi1変異ラットを開発し、てんかん焦点形成機序の一端を明らかにした。てんかんモデルラットは、ナショナルバイオリソースプロジェクト「ラット」から利用可能である。本研究では、Phenotype-drivenとGene-drivenの二つのENUミュータジェネシスアプローチにより、てんかん関連遺伝子に突然変異を有するてんかんモデルラットを作製している。E0739とE1897の二つの自然発症てんかんラットにういて、ポジショナルクローニングアプローチを行っている。二つのラット系統にういてBN/SsNSlcとの交配によりそれぞれ約100匹の戻し交雑仔(BC1)を作製した。作製した戻し交雑仔において、てんかん様発作あるいはその病態特性を評価し、全染色体上の約50個の多型SSLPマーカーを用いてゲノムスキャンを行った。E0739系統についてはラット第4染色体上に、E1897系統については第5染色体上にマッピングすることに成功した。現在、候補遺伝子の検索を行っている。LGI1とMASS1の二つのてんかん遺伝子にういて、ラットENUミュータントアーカイブから標的遺伝子変異ラットの作製を行っている。既にL385Rミスセンス変異を発見しているLGI1遺伝子については、対応するENUミュータントアーカイブの凍結精子をF344/NS1c未授精卵に顕微授精し、Wistarラット偽妊娠雌に移植することにより産仔を得た。得られた産仔の約半数にLGI1遺伝子L385Rミスセンス変異を確認した。現在戻し交配および兄妹交配により本ラットの系統化を行っている。MASS1遺伝子については、EARドメインや、ラミニンGドメイン領域を増幅する10個のプライマーを合成した。KURMA 5000頭分のゲノムDNAを対象に、MuT-POWER法によりスクリーニングを行い、点突然変異を検索した結果、T3336CとC10066Aの二つの変異を発見した。MASS1遺伝子の塩基配列情報から、これら変異はサイレント変異とミスセンス変異を引き起こしており、コンピュータ解析からはミスセンス変異は蛋白質機能に影響を及ぼさないと予測された。E0739とE1897の二つの自然発症てんかんラットについて、ポジショナルクローニングアプローチを行った。BN/SsNSlcとの交配により作製した約100匹の戻し交雑仔における連鎖解析の結果、E0739系統についてはラット第4染色体上に、E1897系統については第5染色体上に原因遺伝子をマッピングした。E0739については、候補領域内に存在する遺伝子の中で、電位依存性カリウムチャネルKcna1遺伝子にS309Tのミスセンス変異を同定した。ヒトKCNA1遺伝子の変異は、小脳性の運動失調症状とミオキミアが特徴的に認められるEpisodic ataxia type1(EA1)で報告されている。EA1患者はてんかん発症率が高いことも報告されている。現在、E0739ラットの筋不随意運動とてんかん様発作の詳細な特性解析および病理学的解析を行っている。また、S309T変異型Kcna1チャネルの電気生理学的機能解析も行っている。E1897系統については、約2M-bpにまで候補領域を狭め、現在次世代シークエンサーによるゲノムシークエンスを実施している。LGI1遺伝子について、L385Rミスセンス変異を発見し、ENUミュータントアーカイブの凍結精子をF344/NSlc未授精卵に顕微授精することにより、LGI1遺伝子変異ラットを作製することに成功した。Lgi1変異ラットの大脳皮質においてはLGI1が発現していたが、COS7細胞においてはL385R変異型LGI1の分泌不全が認められた。作製されたホモ型変異ラットは10日齢より脳波異常を伴う自発性けいれん発作を発症し、17日齢以内に全個体が死亡した。ヒトLGI1遺伝子の優性遺伝変異により起こる常染色体優性外側側頭葉てんかん(ADLTE)は、電話の音刺激等でけいれん発作が誘発される。現在、ヘテロ型L385R変異ラットにおいて音刺激誘発けいれん(AGS)試験を行っている。本研究ではいPhenotype-drivenとGene-drivenの二つのENUミュータジェネシスアプローチにょり、てんかん関連遺伝子に突然変異を有するてんかんモデルラットを作製している。1)Phenotype-driven ENU mutagenesis : E0739とE1897の二つの自然発症てんかんラットについて、ポジショナルクローニングアプローチを行った。E0739

系統では、ラット第4染色体上の電位依存性カリウムチャネルKcna1遺伝子において、S309Tのミスセンス変異を同定した。ヒトKCNAI遺伝子変異は、小脳性の運動失調症状とミオキミアが特徴的に認められるEpisodic ataxia typel (EA1)で報告されている。筋電図EMG解析の結果、筋自発運動twitchingに伴う異常棘波ミオクローヌスと周期性の棘波ミオキミアを確認した。脳波EEG解析では、てんかん様発作に伴い多棘複合及び多棘徐波複合波形の異常脳波を確認した。17°C冷水刺激により振戦、運動失調、てんかん様発作が誘発されることを発見した。これら神経症状は、抗てんかん薬カルバマゼピン投与により抑制された。電気生理学的解析の結果、S309T変異型Kv1.1チャネルは電流応答が欠失していた。以上の結果は、S309T変異によるKv1.1チャネル機能異常および個体レベルでの神経病態発症メカニズムの一端を明らかにしたものであり、国際脳科学誌Brain Researchに報告し、ナショナルバイオリソースプロジェクト「ラット」に動物を寄託した。E1897系統については、第5染色体上に約2M-bpにまで候補領域を狭め、次世代シークエンサーによるゲノムシークエンスを実施した結果、酸化ストレスに関与する遺伝子においてアミノ酸置換を発見した。2)Gene-driven ENU mutagenesis : LGI1遺伝子について、ENUミュータントアーカイブKURMAにおいてL385Rミスセンス変異を発見し、顕微授精法によりLGI1遺伝子変異ラットを作製した。ヒトLGI1遺伝子変異は、発作の前兆として認められる幻聴等の聴覚症状が特徴的な常染色体優性外側側頭葉てんかん(ADLTE)で報告されている。ラットL385R変異型LGI1は、細胞からの分泌不全が確認された。ホモ型変異ラットは10日齢より脳波異常を伴う自発性けいれん発作を発症し、17日齢以内に全個体が死亡した。ヘテロ型L385R変異ラットにおいてプライミング音刺激を用いた音刺激誘発けいれん試験を実施した結果、L385R変異ラットは有意に強直間代けいれんを発症することを発見した。この音刺激誘発けいれんは、抗てんかん薬投与により有意に抑制された。Phenotype-drivenおよびGene-driven二つのENUミュータジェネシスアプローチから、てんかんモデルラット系統の作製を行った。1) Phenotype-driven ENU mutagenesis:E0739とE1897の二つの自然発症てんかんラットについて、ポジショナルクローニングアプローチにより原因遺伝子の同定を行った。E0739