hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
広東住血線虫症における髄液の好酸球増多と好酸球の役割に関する免疫学的研究

(1)まず, invivoでの解析の基礎的実験として, AF-nu/+に広東住血線虫を感染させ,感染後12,15,18日にと殺し,得られた脾細胞と頚部リンパ節リンパ球をAF-nu/nuの尾静脈から5×10^7個ずつ3回移入したところ,最終移入後6日から15日まで有意な末梢血好酸球増多(ピークは10日後で399±87/mm^3;対照=37±8)が認められた.ところが, BALB/C-+/+とnu/nuを用いて同様な実験を行ったところ,有意な好酸球増多は認められなかった.そこで,さらに,感染後89日のリンパ球を追加移入したが,やはり陰性であった.つまり,好酸球応答には系統差があると考えられる.(2)感染後17日のマウスの脾細胞ならびに頚部リンパ節リンパ球を,幼若成虫抗原と共に培養して得られたconditionedmediumを用いて,骨髄培養を行ったところ,培養後2日と4日にやや高い好酸球の増加が認められたものの,対照と有意差がみられなかった.現在,半固型寒天培養による検討ならびにその他の基礎的条件の検討を実施中である.2.髄液好酸球の殺虫機構と宿主組織障害性に関する検討:(1)感染マウスの髄液好酸球はPMA, digitoninの刺戟のみならず虫体抗原の刺戟によっても0_2を生成した.後者のレベルは前2者のそれより著しく低いが,髄液好酸球が虫体の障害に何らかの役割を果している可能性が示唆された.(2)感染モルモットの髄液好酸球はマウスのそれと同様に,著明な脱顆粒像を示し,殺虫への関与が示唆された.(3)感染マウスの小脳を組織学的に検査したところ,小脳白質に脱髄,プルキン工細胞の部分的消失,等の所見が認められた.これらはGordon現象の病理組織所見と一致しており,広東住血線虫症においてみられる神経障害に,虫体による機械的障害に加えて,髄液好酸球が関与している可能性が強く示唆された.本年度の研究成果は以下の通りである。1.骨髄培養:固有宿主のラット(Wistar)に広東住血線虫を感染後30日に縦隔リンパ節と腋下リンパ節のリンパ球を採取し、これを第1期幼虫(L1)抗原で刺激して得られるconditioned medium(CM)はラット骨髄好酸球のin vitroでの生存延長(少なくとも5日間)に有効である。また、非固有宿主のマウス(ddY)に本虫を感染させ、感染後517日に得られた脾細胞や頚部リンパ節リンパ球を幼若成虫(YA)抗原と共に培養して得られるCMは好酸球の産生、または生存延長に有効であった。感染後812日のマウスのリンパ球は抗原無添加でもこのような因子を遊離することがわかった。2.広東住血線虫由来の好産球遊走因子(ECF)に対するモルモットとラット好酸球の遊走能:(1)YAのECFは分子量が16900、熱に比較的安定で、pronase処理に抵抗し、periodateによる酸化に感受性を示した。つまり、活性は本分子の糖部分に存在すると推察される。(2)モルモット好酸球(GP-EO)はYAやL_1由来のECFに対するreceptorを有するが、ラット好酸球(R-EO)はL_1-ECFに対するreceptorを有するものの、YA-ECFに対するreceptorはこれを欠除するか、receptor保有好酸球が著しく少ない。この知見は、非固有宿主(モルモット、マウス)における髄液好酸球増多や外科的に移植されたモルモット肺動脈内虫体周囲への好酸球浸潤を理解する上で有用と考えられる。(3)GP-EOのYA-ECFに対するreceptorはtrypsin(5mg/ml)やpronase(5μg/ml)の処理で失活するがin vitroで24時間培養すると機能が回復する。3.ラットにおける再感染防御と好酸球の役割:3系統(ACI,AUG,Wistar)のラットに50隻のL_3を感染後6週に再感染(5070隻のL_3)させると、いずれの系統でも再感染防御が認められるが、ACIのそれは他の2系より弱い。再感染防御能を有するラットの腹腔へYAを移植すると好酸球が虫体に付着して、脱顆粒する。
心材成分の生合成過程の追跡による心材化機構の考察

心材化の機構を解明するには,心材成分の生合成過程に関する知見を深めることが重要である.本研究では細胞学的観察,成分分析に加え,心材成分生合成過程に関与すると考えられる酵素,ペルオキシダーゼについても調べた.試料木として心材成分の分析が進んでいるスギを用いた.またペルオキシダーゼは細胞化学的に検出した.方法はジアミノベンジジン(以下DABと略記)法を用いた.得られた結果は以下の通りである.1.光学顕微鏡によりDAB法でペルオキシダーゼの分布を観察した.ペルオキシダーゼは一般に辺材部の放射柔細胞中と仮道管内こうに存在した.軸方向柔細胞中には存在しなかった.放射柔細胞中では液胞中に存在し,また基質にも含まれた.2.放射方向にペルオキシダーゼを追跡したところ,放射柔細胞中のペルオキシダーゼを持った液胞は,辺材内層部から移行材にかけて消失した.ただし仮道管中のペルオキシダーゼはさらに内層部まで存在した.移行材内層部から心材においては, DAB反応は陰性を示した.3.放射柔細胞中のペルオキシダーゼを持つ液胞は,季節的に変化した.すなわち心材化の時期と考えられる秋期直前に最大となる傾向を示した.4.仮道管中のペルオキシダーゼが消失する部位で,放射柔細胞から仮道管へと油滴状物質が移動した.5.心材フェノール成分をTLCで調べたところ,油滴状物質の出現にやゝおくれて,心材フェノール成分が形成されることが判明した.以上の結果から,6.放射柔細胞中で形成され,主として液胞中に貯えられていたペルオキシダーゼが仮道管へと移動し,油滴状物質と強く関わる過程で,心材成分が生合成されたものと推定された.今後これらの部位について,さらなる検討を加える予定である.心材化の機構を解明するには,心材成分の生合成過程に関する知見を深めることが重要である.本研究では細胞学的観察,成分分析に加え,心材成分生合成過程に関与すると考えられる酵素,ペルオキシダーゼについても調べた.試料木として心材成分の分析が進んでいるスギを用いた.またペルオキシダーゼは細胞化学的に検出した.方法はジアミノベンジジン(以下DABと略記)法を用いた.得られた結果は以下の通りである.1.光学顕微鏡によりDAB法でペルオキシダーゼの分布を観察した.ペルオキシダーゼは一般に辺材部の放射柔細胞中と仮道管内こうに存在した.軸方向柔細胞中には存在しなかった.放射柔細胞中では液胞中に存在し,また基質にも含まれた.2.放射方向にペルオキシダーゼを追跡したところ,放射柔細胞中のペルオキシダーゼを持った液胞は,辺材内層部から移行材にかけて消失した.ただし仮道管中のペルオキシダーゼはさらに内層部まで存在した.移行材内層部から心材においては, DAB反応は陰性を示した.3.放射柔細胞中のペルオキシダーゼを持つ液胞は,季節的に変化した.すなわち心材化の時期と考えられる秋期直前に最大となる傾向を示した.4.仮道管中のペルオキシダーゼが消失する部位で,放射柔細胞から仮道管へと油滴状物質が移動した.5.心材フェノール成分をTLCで調べたところ,油滴状物質の出現にやゝおくれて,心材フェノール成分が形成されることが判明した.以上の結果から,6.放射柔細胞中で形成され,主として液胞中に貯えられていたペルオキシダーゼが仮道管へと移動し,油滴状物質と強く関わる過程で,心材成分が生合成されたものと推定された.今後これらの部位について,さらなる検討を加える予定である.
貧困の子どもの支援を目指した公私空間を橋渡しする第３空間の探索的開発

本プロジェクトは、貧困や格差を背景とする子ども・若者の私的空間から公共空間への移行困難と、この困難がもたらす社会情動スキルの未発達問題に挑戦する、教育心理学的なアクションリサーチである。1東京足立区における貧困の子ども達の発達支援場面、2茨城県北西部における若者就労支援、3トルコにおけるシリア難民の子弟への発達支援場面を取り上げて、調査研究を進めた。1東京足立区における貧困の子ども達の発達支援場面:子ども達が自ら企画実行するタレントショー(子ども達が普段ひとに見せない歌やダンス等のパフォーマンスを披露するショー)を実践した。2018年1月から8月まで合計15回の企画会議を行い、本番を2018年8月に開催した。2茨城県北西部における若者就労支援:当初は,利用者のやりたいことをクラウドファンドによって資金を集め実現するという目的で始まった。やりたいことの検討・吟味を行ったところ,障がい者就労支援と耕作放棄地問題の解消に対して取り組むという活動方針が決まった。主な活動として,上記のイベント以外に,グループの名称決めやグループのロゴ作り,広報用のチラシ作り,関係各所へのチラシ送付,SNSでの宣伝などを行なった。2018年1月から12月まで25回の企画ミーティングを行い、2019年1月に農家のみなさんと若者が集うイベントを実施した。3トルコにおけるシリア難民の子弟への発達支援場面(研究分担者岸担当):トルコにおけるシリア難民を対象とした第3空間を通した感情発達理論の実践を行なった。具体的には、シリア難民生徒とホストコミュニティのトルコ人生徒が即興劇を実践するものである。これらの活動には生徒の保護者を含む地域や現地NGO、社会福祉施設が関わるきっかけとなり、地域コミュニティネットワーク構築の可能性を確認することができた。本プロジェクトでは、(1)代替通貨部門(子どもが地域コミュニティへの貢献を代替通貨『ヒーローコイン』に交換する仕組み、(2)研修部門(ヒーロー(プロの大人、あこがれの職業人等)とともに学習・研修する仕組み)、(3)プロダクト発信部門(子ども・若者、そして大人の学習のプロダクトを第3空間のボランティアの支援を受けながら発信する仕組み)について検討することを目標にした。しかし、(1)についての議論ならびに試行が十分に出来なかったので、上記の自己評価をした。本年度は、(1)を可能にするために必要な環境特性の調査と(2)ならびに(3)に関するトライアルを中心に進めた。今年度(1)代替通貨部門(子どもが地域コミュニティへの貢献を代替通貨『ヒーローコイン』に交換する仕組み、(2)研修部門(ヒーロー(プロの大人、あこがれの職業人等)とともに学習・研修する仕組み)、(3)プロダクト発信部門(子ども・若者、そして大人の学習のプロダクトを第3空間のボランティアの支援を受けながら発信する仕組み)について検討することを目標にした。しかし、(1)についての議論ならびに思考が十分に出来なかったので、上記の自己評価をした。今年度(1)代替通貨部門(子どもが地域コミュニティへの貢献を代替通貨『ヒーローコイン』に交換する仕組み、(2)研修部門(ヒーロー(プロの大人、あこがれの職業人等)とともに学習・研修する仕組み)、

(3)プロダクト発信部門(子ども・若者、そして大人の学習のプロダクトを第3空間のボランティアの支援を受けながら発信する仕組み)について検討することを目標にした。しかし、(1)についての議論ならびに思考が十分に出来なかったので、上記の自己評価をした。本年度は、(1)を可能にするために必要な環境特性の調査と(2)ならびに(3)に関するトライアルを中心に進めた。本プロジェクトは(1)代替通貨部門(子どもが地域コミュニティへの貢献を代替通貨『ヒーローコイン』に交換する仕組み、(2)研修部門(ヒーロー(プロの大人、あこがれの職業人等)とともに学習・研修する仕組み)、(3)プロダクト発信部門(子ども・若者、そして大人の学習のプロダクトを第3空間のボランティアの支援を受けながら発信する仕組み)について検討することを目標にした。しかし、(1)についての議論ならびに試行が十分に出来なかった。そのため、次年度使用額が生じた。次年度では、地域通貨システムを早期に試行することで、プロの大人の雇用謝金、コインデザイン料、コインの交換システムの構築費用等で、早期に使用する計画である。
多段階運動負荷テスト時の二重積屈曲点に関する基礎的・応用的研究

種々の条件下でのカテコールアミン濃度が急増し始めるポイントとDPBPの関係を検証し、若年者から高齢者、更に運動療法が有効である各疾患患者に対して運動耐容能の評価法としてまた運動処方作成の際の運動強度の決定法としてのDPBPの有効性を追求することを目的として研究を推進し、以下のような主要な結論を得た。(1)低酸素吸入でカテコールアミン閾値を変化させると、それに伴ってDPBPが変化した。この結果から、DPBPが交感神経活動の亢進に伴って出現する可能性が示唆された。(2)有酸素性トレーニングによって、冠動脈疾患者のDPBPが有意に増加した。また、DPBPの変化がVTの変化と類似していた。これらの結果から、有疾患者を対象とした場合でも、DPBPが有酸素的作業能の評価法として、またトレーニング効果の判定に有用だと考えられた。(3)冠動脈疾患者でDPBPが心筋虚血閾値に先行して発現することが分かった。このことから、心筋虚血を誘発しないDPBP強度の運動処方は、冠動脈疾患者のために極めて安全で適切であると考えられた。(4)βブロッカーありとβブロッカーなしの両コンディションで、DPBPとVTの間によい相関関係が認められたことから、DPBPがVTの代わりに利用できるものと考えられた。(5)ランプ負荷テスト中に平均血圧は、VTまでほとんど変化せずVTを越えて急増することが明らかになった。VTとDPBPは近似しているので、DPBP相当の負荷であれば平均血圧はほとんど安静時と変わらないことになり、極めて安全な運動負荷であると考えられた。(6)自転車エルゴメーターを用いてハンドルの保持様式の違いがDPBPに影響するか否かを検討した結果、いずれの条件でもDPBPが検出され、3様式間に有意な差は認められなかった。従ってハンドル保持の有無はDPBPに影響しないと考えられた。3テーマについて研究を推進し以下のような結論を得た。1.筋交感神経活動を導出し、DPBPの出現と交感神経活動が亢進する強度がほぼ一致すること、また血漿カテコールアミン濃度が急増しはじめる強度とも近似することから、DPBPの出現は交感神経活動の亢進に伴う可能性が示唆された。2.筋グリコーゲンの枯渇状態ではDPBPはLTよりも低い強度で出現することを見い出した。このことからDPBPがLTと必ずしも一致しない可能性が示唆された。おそらく交感神経活動の亢進しはじめる強度がDPBPと対応するものと推察された。3.心筋硬塞、高血圧、糖尿病、肥満の患者にも安全にDPBPが測定できることが明らかになった。本年度はまず二重積屈曲点(DPBP)の発現機序が交感神経の活動亢進に由来するとの仮説を検証する目的で低酸素でカテコールアミンの閾値の低下を誘発しDPBPへの影響を調べた。健常男子8名に通常酸素濃度と低酸素濃度(12%O2)の空気を吸入しながら自転車エルゴメーターによるランプ負荷テストを行った。DPは15秒毎に測定し、採血は手背側部の静脈にカニューレーションし、連続的に採血した。その結果低酸素下ではエピネフリン、ノルエピネフリンともに閾値が低下した。DPBPはカテコールアミンの閾値と同程度に低下した。両条件下のDPBPとカテコールアミンの閾値間には有意な正相関が認められた。以上の結果からDPBPは交感神経活動亢進に関連する現象であることが示唆された。

さらに有酸素的作業能力の指標である最大酸素摂取量や乳酸閾値の低下とも関連していることがわかり、DPBPは有酸素的作業能力の指標としての有用性も示唆された。DPBPの年齢基準値を作成する基礎実験を開始した。本年度は60歳以上の高齢者30名について測定を終了し、高齢者のDPBPの分布が明らかになった。その外、トレッドミル負荷中に約10%DPBPが測定できなかったがその理由に身体を支えるためにバ-をつかむため血圧が正確に測れないとの仮説が浮上したので、自転車エルゴメーターを用いてハンドルの保持様式の違いがDPBPの測定に影響するか否かを検討した。方法は10名の被検者に両手保持、片手保持、手放しの3様式をランダムオーダーで行った。しかしいずれの条件でもDPBPは検出され、3様式間に有意な差は認められなかった。従って少なくとも自転車エルゴメーターを用いて測定するかぎりはハンドル保持の有無はDPBPに影響しないと結論した。本年度の研究では次のようなことが明らかになった。1. LT強度で1時間週3-5回、6-10週間のトレーニングにより、同一負荷中のDPの低下が起こり、LTと同様DPBPも増加することを確認した。2. DPBPの加齢に伴う変化を横断的手法で調査した。平均的には男でl.0/10年の、女で0.8/10年のスピードで加齢とともに低下し、70歳で12ml/kg.minまで低下する。3. DPBPの構成要素である血圧についてランプ負荷中の拍動毎の血圧変化を調べた。その結果、平均血圧はVTまでほとんど変化せず、VTを越えて急増することが明らかになった。VTとDPBPは近似しているので、DPBP相当の負荷であればほどんと平均血圧は安静時と変わらないことになり、きわめて安全な運動負荷であると考えられた。4.体力の評価と安全で有効な運動処方を行うためVo2maxの推定とDPBPの判定を同時に行える運動負荷テスト法を開発した。この方法は高齢者にも適用できることを確認した。以上の結果から運動負荷テストでモニタリングする必要性のきわめて高い血圧と心拍数を連続的に測定するだけで検出できるDPBPを基に体力の評価と安全で効果的な運動処方さらにはトレーニング効果の判定に有効であることが明らかになった。
網羅的培養条件を備えた対向型多次元培養法の開発と発酵生産への応用

昨年度の研究成果を踏まえ、自作した培養装置の改良開発,各種因子の一次元での濃度勾配を達成させることを目標とした。分担は研究総括が緒方,各種因子は以下に示すように、それぞれの担当者が担当した。16SrDNAによる菌層解析のためには赤松,田口で,濃度勾配のデータ解析は厚山が担当した。1)対向型多次元培養装置の開発:現在作製済みの装置は3次元の箱型で,それぞれの因子は,側面に取り付けた部分と仕切りにより仕切られている。この仕切り面は寒天が固まった後,取り外せるようになっている。この面数を増やすことにより多次元に展開できる。この装置の改良開発、ならびに試作には丸菱バイオエンジ(株)との共同研究として進めた。その結果、装置の濃度勾配のデータ解析とコントロールの仕方の数値解析を実施し、水溶液中の拡散定数とよい一致することを明らかにした。2)濃度勾配を付ける因子:(1)溶存酸素濃度と溶存炭酸ガス濃度:(2)酸化還元電位:(3)温度:(4)培地濃度:(5)塩濃度:(6)pH等について、寒天内での拡散の様子を明らかにした。これらの結果から一般的に微生物培養に使用されるシャーレの形状の培養容器を試作し、これを用いて自然界からの微生物の分離を試み、その有効性を検討し所期の成果を挙げることができた。本年度(平成18年3月31日)の研究実績:最終目的は対向型多次元培養装置で増殖した微生物の内,新規なアミノペプチダーゼ生産菌を探索することであるが,まず初年度は装置の改良開発,各種因子の一次元での濃度勾配を達成させることを目標とした。1)対向型多次元培養装置の開発:現在作製済みの装置は研究目的の項で述べた3次元の箱型で,それぞれの因子は,側面に取り付けた部分と仕切りにより仕切られている。この面数を増やすことにより多次元に展開できるものである。この装置の改良開発には丸菱バイオエンジ(株)との共同研究し、円筒型の改良培養装置を製作した。現在、射出成型のための金型の設計中である。2)濃度勾配を付ける因子、すなわち(1)溶存酸素濃度と溶存炭酸ガス濃度(2)酸化還元電位(3)培地濃度(4)塩濃度(5)pHについて、基礎的なデータを得ることができた。所期の構想が実現可能であることを確認した。3)試料:スクリーニング源として,土壌やサイレージなどを用いて,本培養装置の有効性を確認し、良好な結果を得た。4)微生物層の解析:コロニーPCR法を用いて16S rRNA遺伝子領域を増幅し,変成ゲル勾配電気泳動法を用いて分離する方法論について検討した。
家族支援のための家族の抱く信念アセスメント指標の開発

日本における家族のビリーフの根底には、おもなビリーフとして、【人と人との関係性に関するビリーフ】、【死と病に関するビリーフ】、【役割規範に関するビリーフ】、【介護者としての自己に関するビリーフ】があった。また、看護各専門領域特有のビリーフはこのおもなビリーフの下位カテゴリーとして構造化されることも分かった。このビリーフの表し方は、カナダカルガリ大学のWright博士とBell博士が提唱してきたモデルとは異なる観点を含んでいる。それは、その社会的にありがちなビリーフの背景を念頭に置く内容となっていることであり、日本文化的な側面を表現しているともいえる。Wright博士とBell博士のイルネスービリーフモデルは素晴らしいが、日本で看護実践するには日本文化への翻訳が必要である。この研究はイルネスービリーフモデルを日本で活用するための橋渡しになるものと考えている。今後はこのおもなビリーフを基盤としたビリーフの解説書を作り、現場への適応可能性を検証してさらに精錬していく予定である。計画に沿い、文献検討及び退院支援看護師からの聞き取り調査結果を分析した。また、家族信念の著者であるカナダのライト博士、ベル博士とこられの結果を討議した。その結果、以下のような信念が導かれた。障害を持つ小児を抱える家族においては、「緊急事態に対処することが困難である」、「児と一緒に家で暮らすのは家族の役割である」、「生活の中で治療することによって親子の結びつきや子の発達が促される」。要介護高齢者を抱える家族においては、「前向きな姿勢は免疫力を高め病気からの回復を助ける」、「子は親を家で介護しなくてはならない」、「要介護高齢者は介護者に遠慮しなくてはならない」。精神障害者を抱える家族においては、「病気や症状の理解に関する信念」、「地域での生活能力に関する」、「親戚関係に関する」、「受療や社会サービスを受けることに関する」、「家族員と社会との関係に関する」信念、「育児や兄弟環境などについての自責の念」、「病気にさせたことを恥じ、そしてもう回復しないと思い込み、症状が激しかった時の経験のもとに自分たちは精神障害を持つ自分の家族のケアには無力である」。病気を持つ子供を抱える家族においては、「家族メンバーそれぞれに関する信念(あの世に関すること、病気の原因に関することなど)」、「家族全体に関する信念(家族の未来に関すること、家族の危機に関することなど))、「社会に対する信念(拡大家族に関する事など)」。看護師からの聞き取り調査では看護師自身の信念を通じた印象が語られることが分かり、次年度の調査では家族直接の聞き取りが必要であることが判明した。家族の信念アセスメント表として平成20年度に作成したたたき台のうち、計画に従って、小児(障害・慢性疾患)・高齢者・精神疾患・難病患者の7領域の結果を国際学会にて発表し(国際家族看護学会:2009,6,月,アイスランド)、国際研究者の討議にかけた。海外の研究者からは関心とコメントが寄せられた。発表内容には、家族が抱く信念のほかに看護師が抱く家族や退院に対する信念が大きく出現しており、そのことへの注目が集まった。1983年から2008年までの文献のメタ統合という手法に加え、退院支援部署の看護師からデータを得たことによる当然の帰結と思われた。帰国してからは、国際学会で得たことを共有し、以下の方針で研究を進めることにした。すなわち、家族から直接データを得ている文献のメタ統合、ないしは家族から直接データを得るという方法を強化することにした。そして各班が、看護師からの聞き取り、文献検討、家族からの聞き取りという3点セットのデータをもとにアセスメント指標を検討することにした。上記のように研究を重ねた結果、各領域ごとに得られた信念がほぼ固まってきており、例えば高齢者を介護する家族の場合は、家族には家族員間で迷惑をかけるかどうかに関する信念、家族規範の変化の度合いとのバランスに関する信念、介護の困難さに関する信念などがあり、看護師には望ましい家族像に関する信念、看護師の家族看護役割に関する信念、長期入院の弊害に関する信念などが挙がっている。年度末現在、各領域で新たに得たデータとこれまでに得た信念とのの整理を行っており、H21年に計画した7領域のアセスメント指標を統合する作業は、平成22年度に持ち越した。家族の抱く拘束的信念が、家族看護実践場面でこう着状態をもたらすことに鑑み、家族の信念のアセスメント指標(以下、信念アセスメント指標)を開発し、日本の臨床の場での適用性を確かめることを目的とする。

複数の看護専門領域のデータを統合した統合バージョンと専門領域固有バージョンのアセスメント指標を得る。(以下信念をビリーフと表現する)取り上げる看護専門領域は、老年看護(認知症高齢者、非認知症高齢者)、精神看護、小児看護(障害児、患児)、がん看護、難病看護とした。各看護専門領域ごとに、既存の文献のメタ統合、および退院支援部署の看護師からの聞き取り、家族からの聞き取りを行って、ビリーフを導出した。次にそれを統合して看護専門領域を通底するビリーフと領域に特徴的なビリーフを明らかにした。結論として、日本における家族のビリーフの根底には、おもなビリーフとして、【人と人との関係性に関するビリーフ】、【死と病に関するビリーフ】、【役割規範に関するビリーフ】、【介護者としての自己に関するビリーフ】があった。また、看護各専門領域特有のビリーフはこのおもなビリーフの下位カテゴリーとして構造化されることも分かった。このビリーフの表し方は、カナダカルガリ大学のWright博士とBell博士が提唱してきたモデルとは異なる観点を含んでいる。それは、その社会的にありがちなビリーフの背景を念頭に置く内容となっていることであり、日本文化的な側面を表現しているともいえる。Wright博士とBell博士のイルネスービリーフモデルは優れているが、日本で看護実践するには日本文化への翻訳が必要である。この研究はイルネスービリーフモデルを日本で活用するための橋渡しになるものと考えている。今後はこのおもなビリーフを基盤としたビリーフの解説書を作り、現場への適応可能性を検証してさらに精錬していく予定である。
胞胚腔の液成分の同定と胚発生における役割

後生動物の初期胚における胞胚腔の役割は未だ不明である。本研究では、胞胚腔が細胞増殖や胚の組織間の情報伝達の場となっているのではないかという仮説を立て、アフリカツメガエル胚を用い、プロテオーム解析による胞胚腔液に含まれる成分の同定によって、検証することを目的とした。胞胚腔液を解析した結果、鉄イオンの恒常性に関わるタンパク質やタンパク質分解酵素などが見つかった。しかし、予想と異なり、シグナル伝達に関わるリガンドタンパク質は同定できず、仮説を支持するデータは得られなかった。すなわち、胞胚腔は初期発生で不要となったタンパク質を処理する場として機能していることが示唆された。本研究課題ではカエルの初期胚に存在する胞胚腔の役割を解明することを目的としている。胞胚腔が存在する理由は胚の形や構造の維持や、細胞増殖や胚の組織間の情報伝達の場となっていることにあるのではないかと考えられる。今年度はアフリカツメガエル(Xenopus laevis)胚の胞胚腔液成分の解析を目標に、胞胚腔液の採取や解析方法について準備を行った。本研究ではX. laevisの近交系であるJ系統を材料に使う予定だが、条件検討は野生型個体を用いることとした。アフリカツメガエルの胞胚の容積は約1マイクロリットルとすると、胞胚腔はstage 9ではその1/5から1/6の容積に、stage 10では1/4から1/5の容積に相当するので、200から250ナノリットルの胞胚腔液があると推測した。採取は通常の卵へのインジェクションに用いる系を利用し、胚をフィコール溶液中に置き、針で吸い取る方法を採用した。胞胚腔液を採取しても他の細胞を吸わないように、1つの胚あたりの液量は100ナノリットルを目安にして実施し、ほぼ期待通りの液量が得られた。また、胚を培養する溶液の塩濃度を変えることによって胞胚腔液の量が変動することがわかっている。実際に低張にすると胚の容積が大きくなるので、今後の採取の際にはやや低張の溶液中に胚を置き、タンパク質濃度が低下しても収量を多くすることにした。プロテオミクスに用いるゲノム情報の整備も同時に行っており、アセンブルされたゲノム情報をもとに作成されたgene modelの検証や配列の修正も行った。胞胚腔液の調製が想定以上に困難でやや滞っているが、パイロット実験をおこなった限りでは胞胚腔液の採取ができている。また、採取方法を最適化するための方策についても研究分担者と連絡を取り合い、技術の向上を図っている。胞胚腔液以外の細胞が採取されてしまうため、解析に使用できる試料の量が限られるところが現状での問題点であることがわかった。Xenopus初期胚に存在する胞胚腔の発生における役割は不明である。それを解析するため、胞胚腔液のプロテオーム解析を行い、そこに分泌されているタンパク質を同定し、その意義を検討することを目標に研究を進めた。解析のもととなるアフリカツメガエルXenopus laevisの全ゲノム配列については2016年10月に論文として発表した。昨年度に引き続き、野生型X. laevisの胚を発生させ、ステージ9の胞胚から胞胚腔液を採取した。採取用のガラス針はmRNA顕微注入実験に用いるものと同じものを使用し、インジェクター(Narishige IM-300)を用いてガラス針にmRNAを吸引で充填するのと同じ要領で、ガラス針を胞胚腔に挿入してからゆっくりと吸引した。以前は1つの胞胚から100ナノリットルを目標に採取をおこなったが、卵黄成分が混入していることが明らかとなったので、方法を改善し、吸引の速度をゆっくりにし、1個の胞胚から吸引する液量を減らすことにした。採取した微量の液を、ミネラルオイルを入れたプラスチックシャーレの底にあらかじめ付着させておいたプロテアーゼ阻害剤カクテル2 μlの液の中に入れることで、40個の胞胚の胞胚腔液を一つにまとめることとした。この方法で、1つの胚から50ナノリットルの胞胚腔液を採取できることがわかった。現在これらのサンプルについてはタンパク質量の測定などの解析を進めているところである。カエル胚の胞胚腔液を用いてプロテオーム解析を行う計画であるが、試料の採取が非常に困難であることが判明し、試行錯誤している状況であるため、研究の進行が遅延している。また、試料の採取の協力を依頼していた研究分担者が病気のため長期の入院をしていて復帰の目処が立たず、協力が得られなくなったことも遅れの大きな要因であった。本研究では、胞胚腔が細胞増殖や胚の組織間の情報伝達の場となっているのではないかという仮説を立て、アフリカツメガエル胚を用い、胞胚腔液に含まれる成分の同定とそれらの遺伝子オントロジー解析によって、検証することを目的とした。胞胚腔液のタンパク質の構成を質量分析とアフリカツメガエルのゲノム情報を用いて解明することは前例がなく、胞胚腔の役割と機能の解明にせまることは大変意義がある。そこで、最終年度までに検討した方法で胞胚腔液を採取し、基礎生物学研究所の重信博士のグループの協力を得て、胞胚腔液に含まれるタンパク質をLC-MSで解析したところ、複数のタンパク質の存在が予測された。その中には卵黄成分の前駆体タンパク質がみられたことから、完全に細胞の混入は防げなかったことが予測された。

他には、セロトトランスフェリンなど鉄の恒常性に関与するタンパク質、トリプシンやロイシンアミノペプチダーゼなどタンパク質の分解に関わる分子が同定された。後者のタンパク質が見つかったことは、胞胚腔がタンパク質の分解の場になっている可能性を示唆している。一方、シグナル伝達に関わるリガンドタンパク質は同定できず、胞胚腔がリガンドの通り道の場として機能するという申請者の予想(仮説)を支持するデータは得られなかった。まだ機能未知のタンパク質が数多く同定されたため、今後、それらを詳しく調べる必要があると考えられる。さらに、発生の途中で不要となった細胞がアポトーシスをおこし、それを処理する場として胞胚腔が使われるとすると、本解析でケラチン、E3ユビキチンリガーゼ、エノラーゼなど細胞内で機能するタンパク質も同定されることが説明できる。胞胚腔液に濃縮されて存在するタンパク質を同定するための解析が必要であると考えられる。後生動物の初期胚における胞胚腔の役割は未だ不明である。本研究では、胞胚腔が細胞増殖や胚の組織間の情報伝達の場となっているのではないかという仮説を立て、アフリカツメガエル胚を用い、プロテオーム解析による胞胚腔液に含まれる成分の同定によって、検証することを目的とした。胞胚腔液を解析した結果、鉄イオンの恒常性に関わるタンパク質やタンパク質分解酵素などが見つかった。しかし、予想と異なり、シグナル伝達に関わるリガンドタンパク質は同定できず、仮説を支持するデータは得られなかった。すなわち、胞胚腔は初期発生で不要となったタンパク質を処理する場として機能していることが示唆された。引き続き胞胚腔液の採取をおこない、平成28年度の前半までにプロテオミクス解析を行う予定である。試料の採取については、ツメガエル胚を扱った経験のある研究員の協力をうけ、早急に行う予定である。胞胚腔液成分のみの解析を行うためには、解析に使用できる試料とできないものとの判別を厳密に行う必要があるので、今後の採取は慎重に行い試料の質を精査する方法も考えつつ行うことにする。これに関しては少量ずつ何回かにわけて採取することで克服が可能と考えている。当初の予定ではアフリカツメガエル(Xenopus laevis)の近交系を使うことにしていたが、継続的な入手が困難なため、野生型でも実験を行うことにした。また、アフリカツメガエルは異質4倍体のゲノムを持つが、プロテオームの解析には2倍体であるネッタイツメガエル(X. tropicalis)を使った方がいいのではないかとも考えられる。ただし、ネッタイツメガエルの胚はアフリカツメガエルの1/3程度の容積であるため、試料の採取は難しい。進捗状況によってはこの種を用いたプロテオミクス解析も検討したい。プロテオミクス解析に用いるゲノム情報の整備がどちらの種でも完了したので、その使用に関しては問題が無い。胞胚腔液に含まれる可能性のあるタンパク質の抗体を作成し、胞胚腔液に存在するかどうかを確認するなど、逆のアプローチも検討している。現在集めている試料は野生型であるが、ゲノム情報が整備されたJ系統のカエルを入手し、同様の方法で胞胚腔液を採取する予定である。J系統はワタナベ増殖から購入する予定である。すでに基礎生物学研究所の重信秀治博士と打ち合わせを行って、具体的にプロテオーム解析を行う準備を整えた。
校庭の芝生化が下肢の筋骨格系の機能に及ぼす影響

本研究の目的は、校庭の芝生化が下肢の骨格筋系の機能に及ぼす影響を明らかにすることであった。芝生および土グラウンドでの全力走における走動作、足底圧および下肢の筋活動がそれぞれ測定された。その結果、芝生の校庭では、より高い足底圧および筋活動が観察されたが、走速度および動作に関する変数には、土グラウンドにおける測定値との間に有意な差は見られなかった。したがって、土グラウンドでの走行と比較して、芝地では、より高い筋力と足底圧を発揮させる必要があることが示唆された。校庭の芝生化は、下肢の筋骨格系を強化する可能性が考えられた。校庭の芝生化が下肢の骨格筋機能に及ぼす影響を調査する目的で、昨年度は小中学生男女を対象とした横断的調査を実施した。研究計画では、校庭の芝生化を実施した学校と芝生化していない学校を対象とした調査を実施する予定であったが、調査受け入れ予定の学校の都合により、本年は芝生化していない学校3校を対象とした調査のみを行った。被験者は、芝生化していない学校の児童生徒、約350名であった。これらの被験者を対象として、足部の形状(足型)、足趾把持力、下肢3関節(股・膝・足関節)のトルク、短距離疾走能力およびフォーム、持久走能力(シャトルランテスト)などの下肢骨格筋機能の測定を実施した。現在、これらの測定値における発育発達の状況を横断的に分析しているところである。本年度は、校庭が芝生化されている学校の児童・生徒を対象として同様の調査を実施する予定であるが、昨年度の測定値は今年度実施予定の児童生徒の値に対する比較対象値となると考えられる。すなわち、校庭芝生化の意義として掲げられている、子供の下肢の発育と発達に有効であるという仮説を検証するための基準値として用いることができると考えられる。また、ランニングフォームの分析では、ランニングにおける接地時間と滞空時間などから、地面から足に作用する地面反力を推定することが可能である。本年度の測定により、芝生ではないグラウンドにおける地面反力を推定できているが、同様の分析を芝生化している学校において実施することで、ランニング中に子供の脚に作用する影響を力学的に分析することが可能であると考えられる。これらの結果は、校庭の芝生化が子供の脚の発育発達に有効であるかを検討するのに有効な材料となり得ると考えられる。本研究では、校庭を芝生化することによる児童の下肢筋機能の変化について明らかにすることを目的とした。これまでに、校庭を芝生化した小学校および幼稚園を対象として、芝生化した意図・ねらい、芝生化後のグラウンドの使用状況および芝生化前とのグラウンド利用状況の変化について聞き取り調査を行った。また、昨年度は子どもの足趾把持力および走能力などについての測定を実施した。ただし、様々な理由により、芝生化導入校の被験者の数が不足しているため、本年も継続して測定を実施することで、芝生化導入による効果を明らかにする予定である。校庭の芝生化が下肢の骨格筋機能に及ぼす影響を調査する目的で、芝生グラウンドおよび土グラウンドにおけるランニング時の筋活動量および筋活動パターン、ランニングフォームの相違を実験により検討した。その結果、芝生グラウンドでは、土グラウンドに比較して、一定距離の短距離疾走をする際のランニングタイムの増加、ランニング時の接地時間の延長、加速度の低下などが確認された。また、それに伴い、接地により筋が活動する時間が延長する傾向が確認された。また、安定した土グラウンドに比較して芝生グラウンドでは、直走のランニングにおいて発揮される筋が増加する傾向が確認された。従来の見解は、芝生グラウンドにおける身体運動では、下肢の骨格筋における活動量が増大することにより、下肢の発育発達が期待されるということであった。しかしながら、これに関するエビデンスはこれまで得られていなかったため、本研究はこれについて検証することに意義および研究の重要性を有するわけであるが、本研究の結果により、芝生グランドにおけるランニングでは、姿勢を安定させたり、より速く走るために、より多くの筋をより長い時間発揮させる傾向があるため、仮説(従来の見解)通りの傾向が示されたことにより、下肢の骨格筋の発育発達が期待できる可能性が示された。ただし、これらの実験は大学生を被験者として実施したものであった。本テーマは校庭の芝生化を想定したものであるため、今後は子どもを被験者とした検討も必要であると考えた。本研究も目的は、校庭の芝生化が筋骨格筋機能に及ぼす影響について調べることであった。したがって、研究計画には芝生化の影響を横断的のみならず縦断的に調べることも計画されていたが、研究調査の実施を予定していた学校との調整不足および芝生の維持ができなかったことなどから縦断的研究を実施することが出来なかった。本研究は、校庭の芝生化が下肢の骨格筋機能に及ぼす影響を調査することを目的として研究を行った。研究は主に、土グラウンドと芝生グラウンドにおける走運動を中心とした運動機能の比較に関する実験研究を行ったが、実験研究の実施に先立ち、首都圏において校庭の芝生化を実施している学校において実施調査およびヒアリングを実施した。また、芝生化を実施していない学校および芝生化を実施している学校の双方において、子どもたちが校庭で遊んでいる様子と体育の授業の様子を観察およびビデオ撮影して分析評価した。また、子どもたちの足部形状をフットプリントを用いて撮影して分析評価した。実験研究では、土グラウンドと芝生グラウンドにおける走行時の下肢骨格筋機能について比較を行った。被験者は、男子大学生24名であった。比較した項目は、走運動のタイ,走動作,足圧パターンおよび筋活動などであった。

走スピード変化は、レーザー式速度測定装置を用いて計測した。走動作は、被験者の側方からビデオカメラを用いて、加速局面および中間疾走局面の疾走動作を高速度撮影し分析した。また、両条件における足圧パターンと下肢筋活動量を無線型足圧センサーおよび無線型筋活動量計を用いて計測した。筋活動量は下肢8筋の筋活動を計測し、その活動パターンおよび活動量を計測した。実験の結果、全力疾走では、加速・中間局面におけるスピードや疾走動作には差は見られなかったが、50m以降のスピード変化には差が見られた。また、両条件において足圧の発揮パターンには差が見られないものの、足底屈力や筋活動は、芝生条件で高値を示す傾向が見られた。結果から、芝生条件における全力走では、走速度には差が見られないものの、被験者はそのスピードを発揮するために、より高い筋力の発揮が必要となる可能性が示唆された。すなわち、校庭の芝生化は、子どもの下肢筋活動を高める可能性が示唆された。本研究の目的は、校庭の芝生化が下肢の骨格筋系の機能に及ぼす影響を明らかにすることであった。芝生および土グラウンドでの全力走における走動作、足底圧および下肢の筋活動がそれぞれ測定された。その結果、芝生の校庭では、より高い足底圧および筋活動が観察されたが、走速度および動作に関する変数には、土グラウンドにおける測定値との間に有意な差は見られなかった。したがって、土グラウンドでの走行と比較して、芝地では、より高い筋力と足底圧を発揮させる必要があることが示唆された。校庭の芝生化は、下肢の筋骨格系を強化する可能性が考えられた。これまでに、幼稚園および学校を対象として、足趾把持力や下肢筋機能および走能力の測定および調査を実施してきた。しかしながら、諸事情により、実験調査を予定通りに実施することが出来なかった。具体的には、予定していた学校とのスケジュール調整が上手く行かなかったことや、調査を予定していた学校が、校庭を芝生化したものの、体育授業や業間体育の運用をしていなかったために、子ども達の運動能力をたかめるような利用が出来ていないと判断した。そのため、これらの学校については、「芝生化を導入した学校」からは省いたことにより、現時点ではサンプル数が当初の予定を下回っており、被験者の正規性を確保することが難しいと判断した。そのため、3年目である今年度もさらにサンプル数の確保を試みたいと考えている。縦断的な研究の実施は難しいと判断したため、当初の研究目的を達成することが出来るように、横断的研究のデザインを広げ、これまでに実施してきた実験の規模を拡大することとした。具体的には、これまでの期間では、芝生およびグラウンドにおけるランニング時の骨格筋活動を調査してきたわけであるが、今後はランニングに限らず、様々な身体運動における下肢骨格筋活動を観察することを予定する。また、児童の体力について、芝生化の有無による差を横断的に比較する検討する実験も、これまでよりも規模を拡大して実施する予定である。
胸腺皮質上皮細胞特異的β5tの発現を指標にした胸腺上皮細胞分化機構の研究

胸腺髄質上皮細胞は皮質上皮細胞分子β5tを一過性に発現する皮質髄質共通前駆細胞に由来する。私たちは、特定時期のβ5t発現前駆細胞が、髄質上皮細胞の維持・再生にどのように寄与しているのか検討した。その結果、髄質上皮幹細胞を含む髄質上皮細胞は、胎生期から生後1週齢までのβ5t発現前駆細胞由来の細胞によって維持されており、生後1週齢以降のβ5t発現前駆細胞の寄与は、正常時だけでなく胸腺退縮後の再生時もわずかであった。これらの結果から、成体期の髄質上皮細胞はβ5t発現前駆細胞から新たに作り続けられているのではなく、新生仔期までに産生された髄質系列の細胞によって維持・再生されることが明らかになった。胸腺上皮細胞は、皮質と髄質二分類され、胸腺微小環境を形成しT細胞の抗原認識特異性レパトアの形成を担っている。皮質、髄質上皮細胞は共通の前駆細胞から分化するが、そのメカニズムは不明な点が多い。我々は、皮質上皮細胞で特異的に発現する胸腺プロテアソーム構成鎖β5tの発現を指標とした細胞の分化能解析から、髄質上皮細胞はβ5tを発現した前駆細胞から分化することを明らかにしてきた。当該年度は、この研究結果をもとに、ドキシサイクリンによる発現誘導で、特定の時期におけるβ5t発現をEGFP発現にてトレースできるレポーターマウスを作製し解析をおこなった。その結果、成獣胸腺の髄質上皮細胞の60%は胎生期β5t陽性前駆細胞由来、30%は新生仔期β5t陽性前駆細胞由来であり、これらの割合は、週齢を経ても大きな変動は見られなかった。一方、成獣期β5t陽性前駆細胞由来の髄質上皮細胞の割合は4%以下だった。この結果から、成獣胸腺の髄質上皮細胞の多くは、胎生期および新生仔期に存在するβ5t陽性前駆細胞から分化した細胞であり、細胞の入れ替わりが少ない細胞であることが明らかになった。また、β5tの発現制御の観点から、髄質および皮質上皮細胞への分岐を担う分子機構を解明するために、β5t遺伝子の5'ゲノム領域下にEGFP遺伝子をつないだレポータープラスミドを作製した。さらに、β5tの転写を調節する候補転写因子として、β5t遺伝子5'ゲノム領域に結合可能な配列が存在し、胸腺上皮細分化に重要な機能を担っている転写因子の発現プラスミドを作製した。これらのプラスミドをHEK293T細胞株に共発現させたところ、EGFP発現の増加がみられた。また、胸腺皮質上皮細胞由来の細胞株に候補転写因子を強発現させたところ、β5tの発現増加がみられた。これらの結果から、β5tの発現はこの転写因子によって正に制御されている可能性が示された。胸腺上皮細胞は皮質上皮細胞と髄質上皮細胞に分類され、胸腺微小環境を形成しT細胞の抗原認識特異性レパトアの形成を担う。皮質、髄質両上皮細胞は、共通の前駆上皮細胞から分化するが、そのメカニズムは不明な点が多い。我々はこれまでに、皮質上皮細胞で特異的に発現する胸腺プロテアソーム構成鎖β5tの発現を指標とした細胞分化能解析から、随質上皮細胞はβ5tを発現した前駆細胞から分化することを明らかにした。この研究結果をもとに、ドキシサイクリンによる発現誘導により、特定の時期におけるβ5t発現をEGFP発現でトレース可能なマウスを作製し、特定時期のβ5t発現前駆細胞が、髄質上皮の形成・維持・再生にどのように寄与しているのか解析した。その結果、成体マウスの胸腺髄質上皮細胞は胎生期から生後1週齢までのβ5t発現前駆細胞によって維持されており、生後1週齢以降のβ5t発現前駆細胞の寄与は、正常時だけでなく、X線照射やpoly I:C投与による傷害からの再生時においてもわずかであった。また、髄質上皮幹細胞はβ5t発現前駆細胞に由来することが示された。興味深いことに、髄質上皮細胞系列のなかでは最も幼若と考えられる胎生期の髄質上皮幹細胞には、β5tの現在発現が検出された。以上の結果から、β5tを発現する皮質髄質共通前駆細胞は、生後まもなくまでに髄質上皮幹細胞を含む髄質系列上皮細胞を産生すること、成体期の胸腺髄質

上皮は髄質系列皮質髄質共通前駆細胞から新たに作り続けられているのではなく、新生仔期までに産生された髄質上皮系列の細胞によって維持・再生されることが明らかになった。免疫学当該年度は、β5発現細胞の分化能解析とβ5t発現制御分子機構解析を研究目的に掲げて研究を遂行してきた。分化能解析においては、ドキシサイクリンによる発現誘導で、特定の時期におけるβ5t発現をEGFP発現にてトレースできるレポーターマウスを作製し、そのマウスの解析によりそれぞれの時期にβ5tを発現した細胞がどのような分化運命をたどるのか解析するとともに、β5t発現細胞の入れ替わりについての検討をおこなった。当該年度は、当初の計画通り研究を遂行することができ、研究実績の概要に記載したような結果が得られた。β5t発現制御分子機構解析に関しては、レトロウイルスベクターを用い、β5tの発現を蛍光タンパク発現にてモニターすることが可能であるレポータープラスミドを作製し、胸腺上皮細胞に感染させ、β5t発現制御を担うβ5tゲノム領域の同定、および制御転写因子の検討を行う計画であった。しかし、胸腺上皮細胞へのレトロウイルス感染は困難であることが明らかになったため、計画を変更し、哺乳類細胞発現プラスミドをベースとしたレポータープラスミドを作製し、細胞株を用いての検討をおこなった。その結果、β5t発現の制御を担う転写因子、およびゲノム領域の解明に近づきつつある。当初の計画とは異なったアプローチになったものの、研究目的に随じた研究を遂行し、結果を得ることができている。以上のことより、本研究課題は、おおむね順調に進展していると評価した。β5発現細胞の分化能解析に関しての研究推進方策は、当初の計画通り、ドキシサイクリンによる発現誘導で、特定の時期におけるβ5t発現をEGFP発現にてトレースできるレポーターマウスを用い、放射線照射などのによる胸腺萎縮後の細胞回復時における胸腺上皮細胞分化についての検討をおこなう。すでに、放射線照射したマウスの解析は進めており、放射線照射以外では、ウイルスRNAを模倣する合成二本鎖RNAアナログのであるPoly I:Cの投与により胸腺の萎縮を誘導し、回復時におけるβ5t陽性前駆細胞の寄与についての検討をおこなう。β5t発現制御分子機構解析に関しては、候補となった転写因子のβ5t発現制御への寄与についてさらに検討をおこなう。具体的には、β5遺伝子5'ゲノム領域上にある候補転写因子が結合しうる領域に変異を生じさせたレポータープラスミドを作製し、変異により発現制御に変化がみられるのかを検討する。また、胸腺皮質上皮細胞および髄質上皮細胞での遺伝子発現比較をしたマイクロアレイデータをもとに、発現の差がみられた他の転写因子にも着目し、β5t発現制御の有無について検討する。β5t発現制御分子機構解析において、当初計画していた実験方法では成果が得られないことが判明したため、当初の研究計画を変更する必要が生じたことにより、年度内の完了が困難となった。β5tの発現制御解析に必要な試薬、および細胞株の購入に使用する。
家兎動脈の内膜剥離後の内皮再生機序と内膜肥厚機序に関する研究

【目的】頚動脈内膜剥離後の内膜再生機序について家兎の標準食投与群とコレステロール食投与群とを対比させて実験的に検討した。【方法】対象は日本白色雄家兎30羽。このうち標準食投与群20羽をA群、1カ月間コレステロール負荷群10羽をB群とした。方法は顕微鏡下で総頚動脈に小切開を加え、微小鑷子により血管の全周にわたり長さ4mmに内膜層及び内弾性板を剥離除去し血管を縫合した。術後1時間より2ケ月後まで種々の時点で、潅流固定を行い屠殺し、病理組織標本を作成した。検討項目は光顕、走査電顕、透過電顕、また二重免疫染色として、FactorXIII、CD31、抗平滑筋抗体(HHF35)、抗マクロファージ抗体(RAM11)を用いた。【結果】A群では、走査電顕で、3日後にはspindle type、ovoid typeの混在した再生細胞を認めた。4週以降では低ずり応力領域にovoid typeの細胞群が存在していた。このovoid cellは、透過電顕でtight junctionを認め、免疫染色ではfactorVIIIに陽性であった。またB群では走査電顕で再生速度に差はなかったが、A群に比べspindle cellは膨化し、ovoid cellは大小不同を示した。透過電顕ではspindle type、ovoid typeのいずれの細胞も胞体内に空胞が認められた。免疫染色ではovoid cellはCD31に陽性で、内膜下にマクロファージ抗体陽性の泡沫細胞が増加し内膜は肥厚していた。【結論】内膜再生過程ではspindle typeとovoid typeの再生細胞が認められ正常群でのovoid type cellは内皮細胞由来と考えられ、低ずり応力の関与が示唆された。またコレステロール負荷群ではspindle type cellの膨化やovoid type cellの大小不同の所見を認めた。目的として頚動脈内膜剥離後の内膜再生機序について家兎を用いて実験的に検討した.対象は日本白色雄家兎20羽.顕微鏡下で一側の総頚動脈に小切開を加え,微小鑷子により血管の全周にわたり長さ4mmに内膜層及び内弾性板を剥離除去し血管を縫合した.controlとして対側は小切開のみで縫合した.術後1時間より2ヶ月後まで種々の時点で,潅流固定を行い屠殺し,病理組織標本を作成した.検討項目は走査電顕,透過電顕,免疫染色として,FactorVIII,抗平滑筋抗体(HHF35),抗マクロファージ抗体(RAM11)を用いた.結果として走査電顕において,1週後に剥離辺縁より血流方向に向かうspindle typeの細胞を認め,4週後にはspindle typeとは明らかに形態の異なるovoid typeの細胞が認められ,6週後にはovoid typeおよびspindle typeの細胞群で剥離部全面が覆われた.免疫染色ではspindle type,ovoid typeの細胞はいずれも,内皮細胞に特異的なFactorVIIIに陽性であった.透過電顕でもovoid typeの細胞は,内皮細胞に特徴的なtight junction,pinocytic vesicle等を認めた.またovoid type cellの発現は血管壁縫合部や剥離により生じた陥凹部など血流が乱れ易い,低ずり応力領域に認められる傾向にあった.結論として内皮再生過程ではspindle typeとovoid typeの2種類の再生細胞が認められた.

これまでにovoid type cellは平滑筋細胞由来との説があるが,今回の実験結果ではむしろ内皮細胞由来と考えるのが妥当であると思われた.【目的】頚動脈内膜剥離後の内膜再生機序について家兎のコレステロール食投与群を用いて実験的に検討した。【方法】対象は日本白色雄家兎10羽で、1カ月間コレステロールを負荷した。方法は顕微鏡下で総頚動脈に小切開を加え、微小鑷子により血管の全周にわたり長さ4mmに内膜層及び内弾性板を剥離除去し血管を縫合した。術後1時間より2ヶ月後まで種々の時点で、潅流固定を行い屠殺し、病理組織標本を作成した。検討項目は光顕、走査電顕、透過電顕、また二重免疫染色として、Factor XIII、CD31、抗平滑筋抗体(HHF35)、抗マクロファージ抗体(RAM11)を用いた。【結果】走査電顕で再生速度に差はなかったが、spindle cellは膨化し、ovoid cellは大小不同を示した。透過電顕ではspindle type、ovoid typeのいずれの細胞も胞体内に空胞が認められた。免疫染色ではovoid cellはCD31に陽性で、内膜下にマクロファージ抗体陽性の泡沫細胞が増加し内膜は肥厚していた。【結論】内膜再生過程ではspindle typeとovoid typeの再生細胞が認められ、コレステロール負荷群ではspindle type cellの膨化やovoid type cellの大小不同の所見を認めた。