hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
システム自身の動的な適応に基づく環境変化にロバストな認識法の研究

最終年度である本年度は,認識処理に時間情報を積極的に導入し,自動的に環境に適応しながら認識を行う方法の研究を行った.まずはじめに,その基礎となる認識手法の研究を行った.実際の環境下では対象の向きは動的に変化するため,その対応が大きな問題となる.向きの変化では局所的な見えよりも局所パーツの配置が大きく変化するので,認識対象から切り出した局所特徴をうまく表現する特徴空間を作成すれば,向きにロバストな認識を行うことができる.しかし,認識対象から切り出した局所領域集合は一般に非線形となってしまう.これをうまく表現するために,カーネル主成分分析を用い,その空間とのマッチングにはCLAFICを用いた.これにより,正面と側面のような少ない枚数の学習サンプルだけから向きにロバストな認識が可能となった.提案手法では,局所特徴の重要度が基底の重みとして自動的に決まり,認識時に重みとして利用される.この成果を画像の認識・理解シンポジウム(MIRU2005)及び国際会議(ICIP2005)で発表した.次に,この方法を時系列での対象追跡問題に応用した.時間軸に沿って空間を更新していくことにより,認識に重要な局所特徴が自動的に変化する.そのため,隠れ等があった場合でもその部分の重要度が自動的に低くなり,対処できるのである.この成果を国際会議(ISOT2005)で発表した.また,顔認識の分野では,最近,時系列に沿って推論を深めていく方法の有効性が示されている.しかし,従来の時系列に基づく顔認識では向きの変化にうまく対処できないという問題点があった.そこで,カーネル判別分析を用いて向きの変化による非線形性を吸収し,得られた判別空間を用いて時系列画像の事後確率を推定した.これにより,向きの変化に依存しない時系列顔認識が実現した.この成果を国際会議(ICAPR2005)で発表した.本年度は今後の研究の基礎となる階層的な情報処理に基づく汎用的認識法の研究を行った.具体的には,脳の初期視覚を模倣した特徴抽出を行い,その出力に対して局所領域毎に主成分分析することにより階層的な特徴抽出を行った.さらに,局所的な主成分分析の出力値に対して局所的なガウシアンを適用し,対象の場所に特化した細胞を生成した.この考えを基にして向きと場所に特化した細胞を生成し,向きの変化にロバストな認識を実現した.この成果を国際会議(ICIAP2003)及び論文誌(JACIII)で発表した.この研究成果を更に発展させ,近年,汎化能力の高い識別器として注目を集めているサポートベクターマシンに局所カーネルの導入を行った.これにより,実環境下で問題となっていた部分的な隠れに頑健な認識を実現した.この成果を3月末に行われる電子情報通信学会の総合大会で発表する.また,グラフのクリークに基づく向きの変化にロバストな認識法の研究も行った.グラフの持つ柔軟性を利用することにより,少ない数のモデルだけで広範囲の向きに対応できるようになった.この成果を情報処理学会論文誌(数理モデル化と応用)で発表した.本年度は,前年度に行った脳の初期視覚を参考にした階層的な特徴抽出に基づく認識法を発展させ,近年,汎化能力の高い識別器として注目を集めているサポートベクターマシンに局所カーネルの導入を行った.局所カーネルという観点から従来手法を見ると,従来手法で頻繁に利用されている大局的Gaussianカーネルは局所Gaussianカーネルの積の特別な場合に一致することが分かる.積による統合は,1つの局所カーネルの出力値の変動に影響を受けやすい.具体的には,認識対象に部分的な隠れがある場合にはその影響を大きく受けてしまう.そこで,認識対象の局所領域に配置した局所カーネルの出力値を和で統合する方法を提案し,実環境下で問題となる部分的な隠れや光源方向の変化により生じる影にロバストな認識を実現した.この成果を画像の認識・理解シンポジウム(MIRU2004)及び国際会議(ICPR2004)で発表した.この方法をさらに発展させ,画像中から特定の種類の対象を探し出す対象検出の問題に適用した.この研究成果を情報技術フォーラム(FIT2004)及び国際会議(ICIP2004)で発表した.また,視覚情報だけから発話音声の認識を行うLip readingの問題にリカレントニューラルネットワークを適用し,従来手法と同等の性能が得られることを示した.この研究成果を国際会議(ICIAR2004)で発表した.最終年度である本年度は,認識処理に時間情報を積極的に導入し,自動的に環境に適応しながら認識を行う方法の研究を行った.まずはじめに,その基礎となる認識手法の研究を行った.実際の環境下では対象の向きは動的に変化するため,その対応が大きな問題となる.向きの変化では局所的な見えよりも局所パーツの配置が大きく変化するので,認識対象から切り出した局所特徴をうまく表現する特徴空間を作成すれば,向きにロバストな認識を行うことができる.しかし,認識対象から切り出した局所領域集合は一般に非線形となってしまう.これをうまく表現するために,カーネル主成分分析を用い,その空間とのマッチングにはCLAFICを用いた.

これにより,正面と側面のような少ない枚数の学習サンプルだけから向きにロバストな認識が可能となった.提案手法では,局所特徴の重要度が基底の重みとして自動的に決まり,認識時に重みとして利用される.この成果を画像の認識・理解シンポジウム(MIRU2005)及び国際会議(ICIP2005)で発表した.次に,この方法を時系列での対象追跡問題に応用した.時間軸に沿って空間を更新していくことにより,認識に重要な局所特徴が自動的に変化する.そのため,隠れ等があった場合でもその部分の重要度が自動的に低くなり,対処できるのである.この成果を国際会議(ISOT2005)で発表した.また,顔認識の分野では,最近,時系列に沿って推論を深めていく方法の有効性が示されている.しかし,従来の時系列に基づく顔認識では向きの変化にうまく対処できないという問題点があった.そこで,カーネル判別分析を用いて向きの変化による非線形性を吸収し,得られた判別空間を用いて時系列画像の事後確率を推定した.これにより,向きの変化に依存しない時系列顔認識が実現した.この成果を国際会議(ICAPR2005)で発表した.
現代エジプトにおけるコプト・キリスト教修道院の意味と役割

本研究は、エジプトの宗教的マイノリティであるコプト・キリスト教の修道院を事例とし、現代エジプトにおけるその意味と役割を明らかにすることを目的とした。具体的には、上エジプトの聖サミュエル修道院を事例とし、現地での参与観察およびインタビューを行うなかで、他のコプト修道院が多少なりとも観光の要素を持っているのに対し、同修道院は伝統的修道生活を極力維持していることが明らかになった。エジプトでは平成23年初頭に民衆革命が起こり、それまで通りの現地調査が難しい状況に陥った。これに伴い、調査対象をフランスとカナダへのコプト移民たちにシフトし、彼らが異国にいても熱心に宗教実践を行っていることを明らかにした。本研究は、エジプトの宗教的マイノリティであるコプト・キリスト教の修道院を事例とし、現代エジプトにおけるコプト修道院の意味と役割を明らかにすることを目的としている。平成24年度は7月と3月(25年)に聖サミュエル修道院および周辺農村で、8月と12月にはコプト移民の多いフランスで、それぞれインタビュー調査および参与観察を行なった。エジプトに点在するコプト修道院のなかで、他修道院が多少なりとも観光の要素を持っているのに対し、聖サミュエル修道院は伝統的修道生活を維持している点に独自性がある。この傾向は本年度の調査時にも変化はなかった。広大な敷地に関する調査により、育牛やオリーブおよびナツメヤシ栽培が修道院に現金収入をもたらすとともに、地元貧困層の雇用創出ともなっていることが明らかになった。パリのコプト教会では、日曜学校や各世代や性別ごとの勉強会に対する参与観察により、コプト語を中心としたコプト的伝統がそこで脈々と受け継がれていることが明らかになった。本年度は、現代のコプト共同体を40年にわたって牽引し、平成23年3月に逝去した第117代総主教シュヌーダIII世に関する聞き取り調査も行った。サーダート、ムバーラク、両元大統領と対立、協調を繰り返しながら、コプト・キリスト教徒とムスリムの共存に多大な努力を図ってきた彼は、聖サミュエル修道院でも修道士として生活をしていた。彼の人生とコプト共同体におけるその意味と役割については、8月の日本宗教学会第71回学術大会(皇學館大学)で学術発表を行なった。また、品川区主催の市民講座品川シルバー大学およびNHK文化センター主催NHKカルチャーでの講義を行なうことで、研究成果を社会に還元した。平成25年度は3月に聖サミュエル修道院でのインタビュー調査および参与観察を行なった。エジプトの他修道院が多少なりとも観光の要素を持っているのに対し、聖サミュエル修道院は伝統的修道生活を維持している点がこれまでに明らかになった。本年度の調査では、同修道院が、伝統的修道生活維持のために、一般信徒の力を借りて、河岸段丘の岩壁に洞窟を作り、修道士の瞑想のためのセルとしていることも明らかになった。エジプトでは平成23年初頭に民衆革命が起こった。そのため、エジプトでの調査がこれまで通りできないことが多くなった。これに伴い、当初の計画にはなかったが、エジプト国外に移民したコプト・キリスト教徒への調査も行うこととなった。これまで、革命の影響やエジプトとのつながりを調べるためのインタビュー調査をフランスで行ったが、本年度は、調査対象をカナダのコプト移民にも広げた。その成果は、国際会議で発表した(Maki Iwasaki “Coptic Egyptians and Migration: St. George and St. Joseph Coptic Orthodox Church in Montreal, Canada as a Case Study" at Tunisia-Japan Symposium on Society, Scienceand Technology (TJASSST)'13 at El Mouradi Hotel, Yasmin Hammamet, Republic of Tunisia on November 16, 2013)。また、これまでのコプト・キリスト教に関する研究も一部反映された業績以下にまとめた(岩崎真紀「アラブ諸国」山中弘・藤原聖子編『世界は宗教とこうしてつきあっているー社会人の宗教リテラシー入門』』弘文堂、212ー231頁、総ページ数264ページ、2013年12月)。平成23年度は7月と12月に聖サミュエル修道院でのインタビュー調査および参与観察を行なった。その結果、修道院長への聞き取りを通じて、エジプトに点在するコプト修道院のなかでの聖サミュエル修道院の独自性が明らかになった。すなわち、他修道院が多少なりとも観光の要素を持っているのに対し、聖サミュエル修道院は伝統的修道生活を維持している点である。そのため、当初の計画にはなかったが、革命の影響を調べるためのインタビュー調査を行ない、

学会発表(岩崎真紀「エジプト1月25日革命とコプト・キリスト教」於日本宗教学会第70回学術大会(関西学院大学))および論文出版(岩崎真紀「宗教的マイノリティからみた一月二五日革命ーコプト・キリスト教徒の不安と期待ー」『現代宗教2012』秋山書店、2012年4月出版予定)を行なった。ムバーラク前大統領による圧政の終焉は喜ばしいものの、イスラーム系政党が議会選挙で圧勝した結果、マイノリティであるコプト・キリスト教徒たちはエジプトの将来に多大な不安を抱いているということがインタビュー調査のなかから明らかになった。また、コプト・キリスト教徒の移民が多いフランスで活動するコプト修道士と平信徒の関係についての調査も7月と12月に実施した。これはエジプト本国のコプト・キリスト共同体においても、外国へ移民した者たちからの多額の送金などを通した移民たちの存在が非常に大きい存在であるため、コプト・キリスト教の全体像を知るためには意義のある調査である。また、エジプト以外の国も調査対象としたのは、革命の余波により社会が不安定になり調査が続行できないことも考慮している。本研究は、エジプトの宗教的マイノリティであるコプト・キリスト教の修道院を事例とし、現代エジプトにおけるコプト修道院の意味と役割を明らかにすることを目的とした。具体的には、上エジプトの聖サミュエル修道院を事例とし、参与観察およびインタビューを通して下記の点について明らかにすることを目的とした。(1)修道士の日常生活、(2)修道士のオーラル・ヒストリー、(3)修道士と平信徒の関係、(4)平信徒にとっての修道士、修道院の意味、(5)エジプト社会において修道院が担っている役割、(6)宗教間対話の実践、(7)宗教指導者レベル、民衆レベルでのイスラームとの関係。現地調査においては、聖サミュエル修道院のインタビューおよび参与観察を行なった。その過程で、エジプトの他の修道院が多少なりとも観光の要素を持っているのに対し、聖サミュエル修道院は伝統的修道生活を極力維持していることが明らかになった。例えば、修道士の一部は、参詣に訪れる一般信徒への対応を行ないつつ、週に数日は、河岸段丘の岸壁に自分たちで掘った洞窟で冥想を行なっている。エジプトでは平成23年初頭に民衆革命が起こり、その後、治安状況の大きな変化により、これまで通りの調査が難しい状況に陥った。これに伴い、当初の計画にはなかったが、エジプト国外に移民したディアスポラのコプト・キリスト教徒への調査も行うこととなった。具体的には、フランス・パリ郊外とカナダ・モントリオールにあるコプト正教会とそこに通う信徒たちへのインタビューと行事等への参与観察を行なった。H26年度はモントリオールのコプト教会の復活祭ミサの参与観察を行なった。
ヒエ属植物における栽培環境下で進化する生態的および遺伝的多様性の解析

栽培植物への栽培化と雑草としての特殊化の適応現象を解明するために,中国雲貴高原を中心として収集したヒエ属植物について世界各地産の系統と併せて遺伝的多様性を分析した。イヌビエ群E.crus-galli,タイヌビエ群E.oryzicolaおよびコヒメビエ群E.colonumという生物学的種のアイデンティティは,アイソザイム分析とRAPD分析によって確認され,trnT-L-F遺伝子の非コード領域の分析もそれを支持した。標本調査,比較栽培,DNA分析によって大量の系統について形態的特徴と遺伝的特徴の地理的・生態的分布を検討したところ,DNA変異は産地の距離に依存した変化を示した。栽培化症候は,イヌビエ群では地理的・生態的に広く分布する傾向を示し,タイヌビエ群では限られた分布を示した。雑草としての適応は,擬態化と難脱粒性の獲得に顕著であり,イヌビエ群とタイヌビエ群に平行してみられた。実生の擬態は両者にみられ,タイヌビエでは葉耳状の毛茸をも発達させた。難脱粒は天水田,灌漑田,陸稲田の打ち付け脱穀と並行してみられ,擬態型を含むタイヌビエはE.persistentia,難脱粒のイヌビエはE.oryzoidesと分類学的に扱われていたものに該当した。シーケンスとRAPD分析の結果を適切に統計処理することにより,アジアとアフリカのE.stagninaが異なった系譜をもつことなど,分類群の類縁関係を明瞭とし,自然群の認識とタイプ標本のアイデンティティを明確化し学名の扱いを再検討するのに必要な基盤情報を得た。報告書ではこれらの成果を線画を含む図16葉,表5葉,写真8葉を掲載し,20ページにまとめた。ヒエ属植物80系統を育成し、形態的特徴の調査と併せて葉身から全DNAを抽出した。すべての系統について証拠標本を作り、イヌビエ、ヒメイヌビエ、ヒメタイヌビエ、リコウビエ、ヒエの6倍体群、タイヌビエのC型とF型、非脱粒性擬態系統、穂擬態型の4倍体群とインドビエ、コヒメビエおよびE.oryizoidesを主とする国外産の種群を同定した。塩基配列の決定とITS-SSCP分析に用いる実験系統を絞り込むために、イヌビエ群とタイヌビエ群、インドビエ群についてRAPD法により系統間の相対的類似性を調べた。RAPD変異の多変量解析では主成分分析が有効で、分析した系統は、藪野が明らかとした従来の3群の生物学的種群に明瞭に分類された。これはアイソザイム変異による分析(中山ら、投稿中)によっても支持された。このことから当初分析予定としていた分類群と系統数を整理し、15分類群35系統についてtruK-F領域をPCRで増幅し、塩基配列を調べた。現在再確認作業を進めている。さらに、タイヌビエとイヌビエのそれぞれ5系統ついて、同じDNAを用い、ITS-SSCPの分析方法を検討し、さらに好適な分析条件を探索している。標本館における調査は、国内の標本館に加えて、中国北京および昆明の標本館において進めた。その結果、国内のヒエ属植物は東アジアの変異のうち、一部分のみを占めていることが明らかとなった。ニホンビエは中国の東北区を中心に西南、西北地区にも栽培され、原始的栽培種と推定されるリコウビエ(学名未定)は西南中国を中心に評高の高い地域に分布することが判った。4倍体の栽培ビエ、モゾビエ(学名未定)に明らかに該当する標本は保存されていなかった。擬態型のタイヌビエは中国からベトナムへ広く分布し、雲南省には穂型まで酷似する穂擬態型タイヌビエの存在も明瞭となった。ヒエ属植物15分類群について葉緑体DNAのtrnLとtrnF遺伝子間領域のシーケンスを決定し、それに基づいて系統樹を作成した。

タイヌビエとイヌビエおよびタイ産のE.stagninaは同じ配列を示し、相互に同じ配列を示すコヒメビエとインドビエとは3塩基の欠失・置換によって識別された。アフリカ産のE.stagnina,E.obtsudiflora,E.crus-pavonisはアジアのヒエ属植物と6塩基欠失の大きな違いを示し、それらの種間には22塩基または1塩基の欠失や置換が認められた。RAPD変異やアイソザイム変異に基づく類似性では倍数体の違いが明瞭に示唆され、タイヌビエとイヌビエは明瞭な群を形成するので、耕地雑草として進化した両種は母親を共有し、倍数化に伴う1回の跳躍的種分化によって成立したと推定された。しかし、決定した塩基配列の長さは340にすぎないため、倍数化や挿入・欠失の時期、種群の分岐時間を推定するには、さらに情報量の多い部位のシーケンスを得る必要があり、さらにtrnA-B、C-Dのスペーサー領域の塩基配列の決定を進めている。分析素材の整理と種向変異の実態解明を目的としたRAPDの分析では、3プライマーを用いた評価で生物学的種の確認・同定が出来ることを明らかにしたほか、15プライマー程度の分析で地理的変異が明瞭に示されることが明らかとなった。擬態やC,F型の分化、乾性地-湿性地への適応、栽培化に対応した変異は、地理的変異の大きさより小さかったので、このような適応的分化は比較的急速にすすみ、栽培化された栽培ヒエは人為的と伝播拡散されたと推定された。このような変化がどのような速度で進んだかを知る目的のITS-SSCP分析では、クローンニングの条件を検討し、安定した系を得るための解析を進めている。ヒエ属植物18分類群30系統について葉緑体DNAのtrnTとtrnLおよびtrnLとtrnF遺伝子間のスペーサー領域およびtrnLのイントロン領域についてシーケンスを決定し、それに基づいて合意系統樹を作成した。また、RAPD変異分析、アイソザイム分析、ITS領域のSSCP分析により得られた変異を種の違いや地理的生態的違いと関連ずけて解析考察した。分析した葉緑体DNAのスペーサー領域は長さ823から857および310から334bpであり、イントロンは長さ581から586bpであった。タイヌビエとイヌビエおよびタイ産のE.stagninaのクレード、ヒエ及びイヌビエを主とするクレード、コヒメビエとインドビエのクレードが明瞭に識別され、それらは1から3箇所のインデルおよび1から6箇所の塩基置換によって特徴づけられた。タイヌビエのC型、F型、非脱粒型、栽培型、穂擬態型は、1個の塩基置換が種内変異として認められたものの、共通したクレードに属した。イヌビエの変種、ヒメタイヌビエ、ヒメイヌビエは、栽培ヒエ、麗江ヒエ、E.oryzoidesは全く同じ塩基配列を示し、南米産のイヌビエには一個の置換が見られた。ヒメイヌビエとインドビエは全く同じ配列を示し、南米のヒメイヌビエは一個の塩基置換を示した。これらの結果は、藪野による交配親和性の分析結果を強く支持した。RAPD分析とアイソザイムによる分析結果と合わせると、ヒエ属植物は生態的適応の以前に大きな種群の分化を完了しており、複二倍体化による跳躍的種分化はすべて一回のみと推定された。
光合成機能統御におけるカルシウムシグナルの発生と伝達の分子生物学的研究

本研究の目的は、光合成機能発現におけるカルシウムシグナル発生の分子機構を明らかにする一環として、出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)のCa^<2+>流入欠損株(midl変異株)の致死性を相補する高等植物のcDNAをスクリーニングし、その機能を解析することである。本重点領域研究により、出芽酵母のmidl変異株の条件致死性を部分的に相補するcDNAを、シロイヌナズナ実生のcDNAライブラリーから6個、タバコ培養細胞BY-2のcDNAライブラリーから6個を単離することができた。それらの塩基配列を決定した結果、シロイヌナズナ実生のcDNAライブラリー由来のクローンには、Ca^<2+>チャネルのcDNAは含まれていなかったが、低分子量Gタンパク質の一種であるADP-リボシレーションファクター1(ARF1)のアラビドプシスホモログ、UDP-グルコースエピメラーゼ、セルラーゼ、グルタルレドキシン(superoxide scavenging system)および機能不明のタンパク質(2種)のcDNAが含まれていた。また、タバコ培養細胞BY-2のcDNAライブラリーからは、β-チューブリン、UDP-グルコースエピメラーゼ、システインプロテアーゼインヒビター(シスタチン)、25SrRNA(2個)および機能不明のタンパク質(1種)のcDNAが得られた。来年度も同様のスクリーニングを継続し、目的の完遂を目指す。
大学生が主体的に学べるICTを用いた心と体の健康教育の試み

現在、メンタルヘルスの予防はこれまで以上に重視されてきている.しかしながら,いかに多くの人々に予防的な活動を行いメンタルヘルスの悪化を防ぐか,人々のストレス耐性を向上させるか,ということについてはまだ十分な実践が開発されていないのが現状である.本研究では学生が主体的に学べるICTを活用した心と体の教育プログラムの開発とその効果について明らかにすることを目的とする.具体的には,学生が求めるコンテンツの拡充,コンテンツの配信の工夫,授業やワークショップなどの実体験と連動させて学びを深める機会の提供を新たな実践として考えている.現在、メンタルヘルスの予防はこれまで以上に重視されてきている.しかしながら,いかに多くの人々に予防的な活動を行いメンタルヘルスの悪化を防ぐか,人々のストレス耐性を向上させるか,ということについてはまだ十分な実践が開発されていないのが現状である.本研究では学生が主体的に学べるICTを活用した心と体の教育プログラムの開発とその効果について明らかにすることを目的とする.具体的には,学生が求めるコンテンツの拡充,コンテンツの配信の工夫,授業やワークショップなどの実体験と連動させて学びを深める機会の提供を新たな実践として考えている.
降雨時および降雨後の斜面安定度評価システムに関する研究

豪雨時の斜面崩壊による災害を軽減するためには,降雨時の斜面の安定性を経時的かつ定量的に評価することが必要である。また,道路管理者へのヒアリングから,"規制解除を行う際の判断が非常に難しい"という意見を得た。本研究では,降雨時および降雨後の斜面の安定性の定量的な評価手法について検討を行った。特に,蒸発量の計測方法,現地計測データの分析手法および数値シミュレーションの精度向上のための土槽試験に関して検討を行った。平成19年度では,これまで現地斜面に設置してきた現地モニタリングシステム(テンシオメータ,雨量計,温度計で構成)に,蒸発量の算定に必要な気象計測装置(気温,相対湿度,露点温度,降雨量,気圧,日射量,風向,風速計で構成)を導入し,計測を実施した。また,得られた計測データを分析することにより,間隙水圧などの各種データと雨量の関係について,分析・評価を行った。分析として,重回帰分析を行うことで,地表面変位に対する間隙水圧の影響について明らかにした。また,数値シミュレーションの妥当性の検討を行うために,盛土を作成し,降雨条件や盛土形状を変えた複数回の室内土槽試験を実施した。特に,降雨時の斜面崩壊のメカニズムを明らかにするために,盛土に人工的なすべり面を作成して実験を行い,すべり面付近が湿潤したときに崩壊が生じる現象を表現することができた。さらに,数値シミュレーションにおいて,蒸発を考慮した2次元不飽和浸透解析の精度向上を目指し,プログラムの改良を行った。室内土槽試験および現地斜面における2次元浸透解析を実施し,妥当性の検討を行った。検討の結果,比較的浅い層については,実験結果を数値シミュレーションで再現できたが,深くなるにつれ差異が見られた。今後,初期条件および材料条件の設定方法について検討する必要がある。以上の研究を有機的に組み合わせることにより,降雨時および降雨後の斜面安定度を定量的に評価することが可能なシステムの確立を目指す。本研究では, (1)これまで現地斜面に設置してきた現地モニタリングシステム(テンシオメータ,雨量計,温度計で構成)に,気象計測装置(気温,相対湿度,露点温度,降雨量,気圧,日射量,風向,風速計で構成)を導入し,雨量および蒸発量の計測を可能にすること,(2)得られた計測データを分析することにより,間隙水圧などの各種データと雨量の関係について,分析・評価を行うこと,(3)数値シミュレーションにおいて,蒸発を考慮した2次元不飽和浸透解析の精度向上を目指し,降雨時・降雨後の斜面の安定度評価を可能にすること,(4)数値シミュレーションの妥当性の検討を行うために,盛土を作成し,室内土槽試験を行うことを目的としている。これらの研究を有機的に組み合わせることにより,降雨時および降雨後の斜面安定度を定量的に評価することが可能となると考えられる。そこで,昨年度の成果を踏まえ,本年度は以下のないようについて研究を実施した。現地モニタリング結果の降雨量と各種データについての関連性について,重回帰分析および主成分分析を実施し,降雨-間隙水圧-地表面変位の関係および降雨量,間隙水圧と斜面の安全度について検討を行った。また,テンシオメータで得られた計測データにおいて,間隙空気圧の影響を考慮する必要があることがわかった。次に,気象計測装置を用いた蒸発量の推定方法について検討を行つた。土槽試験により,蒸発量を測定し,数値モデルにより蒸発量をおおよそ推定することができた。しかし,蒸発効率と土質条件などについての検討が今後必要である。現地計測モニタリングデータおよび室内土槽試験結果を用いて,不飽和浸透および安定性に関する数値シミュレーションを実施した。地表面から深くなるほど,実験値との妥当性が低くなった。数値解析の境界条件や材料条件および計測におけるテンシオメータへの間隙空気圧の影響などを検討していく必要があることがわかった。
抗体cDNA導入細胞の移植によるin vivo受容体機能の特異的阻害法の開発

近年、線維芽細胞成長因子(FGF)あるいは神経成長因子(NGF)などいわゆる成長因子が神経細胞の発生、増殖分化、損傷修復、生存維持に重要な役割を果たすことがin vitro培養系において示されつつある。しかしin vivo生体内でもこれら成長因子が同様な役割を果たしているか否かは不明で、これを証明するためには各因子の作用を特異性高くかつ毒性少なく阻害する物質を、生体内で目的とする部位に局所的かつ持続的に投与することが望まれる。そこで本研究はFGFを例として活性物質の生体内機能研究のための新手法開発を目的とし、FGF受容体の機能を特異性高く阻害できる物質としてFGF受容体のdominant negative変異分子種(受容体のチロシンキナーゼ部位を欠失させたもの)を考えた。これを投与するモデル系として、神経系が発生分化しつつあるツメガエル胚を選んだので、先ずツメガエル嚢胚cDNAライブラリーを作成しスクリーニングを行った結果、まだ報告のない3種を含め、計5種のFGF受容体cDNA(野生型)をクローニングすることができた。(それぞれXL-15と命名した)。各々の全長の塩基配列を決定した後、チロシンキナーゼ部位を含む細胞質側の配列を完全に欠失させたdominant negative変異分子種を作成した。現在、各変異cDNA分子種からin vitroでmRNAを合成させ、これをツメガエル初期胚に与えて変異蛋白を発現させ、FGF受容体の機能を阻害した時、神経系の発生にどのような影響があるのか解析中である。しかしin vivo生体内でもこれら成長因子が同様な役割を果たしているか否かについては不明な点が多い。そこで本研究はFGFを例として成長因子の生体内機能研究のための新手法開発を目的とし、FGFの機能を特異性高く阻害できる物質として作用中和性の単クローン抗体、或はFGF受容体のdominant negative変異分子種(受容体のチロシンキナーゼ部位を欠失させたもの)を考え、これらをin vivoで局所的に投与してその阻害効果を検索する手法を、神経系が発生分化しつつあるツメガエル胚をモデル系として、新たに開発する事を目指した。本年度の実績は以下の通りである。(1)ツメガエルFGFに対する単クローン抗体作製については現在進行中であるが、作用中和性の抗体はまだ得られていない。この点は残念であるが、単クローン抗体作製技術に伴う蓋然性から止むを得ない面もあると思われる。(2)一方FGF受容体については、嚢胚mRNAから5種類のFGF受容体cDNAをクローン化することに成功した。部分的ではあるがそれらの塩基配列の解析から、得られたうち2種のcDNAクローンは、すでに報告されたものに対応したが、残りの3種は未報告のものであった。従来哺乳類では4種類のFGF受容体しか知られておらず、我々の得た5種のうち1種は全く新しいタイプのFGF受容体分子に対応する可能性がある。またFGF受容体については、嚢胚期、神経誘導の時点で5種類ものFGF受容体が発現していることが明らかにされたわけであるが、このことはFGFによる神経誘導といってもその内容は一様ではなく、例えば中枢〓末梢、或は頭〓尾に沿った部域化が、FGF受容体の多様性によりもたらされる可能性を提起し、今後は各FGF受容体cDNAからdominant negative変異分子種を作成して、この問題についても解析して行きたい。

しかしin vivo生体内でもこれら成長因子が同様な役割を果たしているか否かは不明で、これを証明するためには各因子の作用を特異性高くかつ毒性少なく阻害する物質を、生体内で目的とする部位に局所的かつ持続的に投与することが望まれる。そこで本研究はFGFを例として活性物質の生体内機能研究のための新手法開発を目的とし、FGF受容体の機能を特異性高く阻害できる物質としてFGF受容体のdominant negative変異分子種(受容体のチロシンキナーゼ部位を欠失させたもの)を考えた。これを投与するモデル系として、神経系が発生分化しつつあるツメガエル胚を選んだので、先ずツメガエル嚢胚cDNAライブラリーを作成しスクリーニングを行った結果、まだ報告のない3種を含め、計5種のFGF受容体cDNA(野生型)をクローニングすることができた。(それぞれXL-15と命名した)。各々の全長の塩基配列を決定した後、チロシンキナーゼ部位を含む細胞質側の配列を完全に欠失させたdominant negative変異分子種を作成した。現在、各変異cDNA分子種からin vitroでmRNAを合成させ、これをツメガエル初期胚に与えて変異蛋白を発現させ、FGF受容体の機能を阻害した時、神経系の発生にどの様な影響があるのか解析中である。
膜内切断プロテアーゼの活性制御と基質導入機構の解明

膜内切断プロテアーゼは、水が存在しない膜内で加水分解を行う特殊なタンパク分解酵素で、どのようにして反応を遂行するのかについて、よく分かっていません。代表的な膜内切断プロテアーゼであるγセクレターゼ複合体は、アルツハイマー病の原因となる脳内アミロイドを作り出す、認知症治療において重要なターゲット分子です。本研究では、モデル生物である出芽酵母を使った独創的な解析手法をとり入れ、γセクレターゼ複合体とそのモデルとなる単量体膜内切断プロテアーゼによる分解のメカニズムを明らかにします。認知症治療薬の開発への戦略を提案する成果が期待されます。
天疱瘡抗体によるデスモグレイン3結合型p120ctn関連シグナル伝達機構の解析

天疱瘡は、表皮細胞間接着構造であるデスモソームの構成成分であるデスモグレイン3に対する自己抗体により、表皮細胞間の接着が低下し全身の粘膜と皮膚にびらん水疱を形成する自己免疫性水疱症である。抗体が表皮細胞に結合後細胞内で生じる細胞生物学的反応の解析を、p120ctn関連キナーゼ(Src, EGF, RhoA, Fer, Fyn)に着目して解析した。結果1, Srcキナーゼがデスモソーム構成分子の比率に影響を与えることが解明された。2.Dsg3の細胞外ドメインのsheddingが生じMMP-9の関連が示唆された。3.Rho Aの活性型の増加が刺激直後に見られるが、Dsg3の早期の分解には直接関与しないことが解明された。4.Dsg3の早期の分解過程にp120ctnの結合性の変化が関与することが解明された。本研究では、天庖瘡患者lgGによって生じる細胞反応の中で、特に抗Desmoglein(Dsg3)抗体による反応を解析する目的で、抗Dsg3モノクロナル抗体(mAb)を用いて培養表皮細胞を刺激したとき、Dsg3の分解を調節するp120-cateninのリン酸化とDsg3に対する結合性を検討した。病原性の強いAK23mAbがDsg3の細胞外ドメインに結合するとDsg3の細胞内ドメインとp120-cateninの結合は10分以内に低下する。その後、Dsg3はインタナリゼーションし、細胞外ドメインでの分解が生じることがわかった。また、病原性の低いAK18mAbやAK20mAbはp120ctnとの結合が亢進した。なおこの反応は、病原性の程度とDsg3の分解速度と平行して生じているため、病原性シグナルの可能性が極めて高いと考えられる。この過程に対するチロシンキナーゼ阻害剤(PP1,genistein)の影響を検討し、関連キナーゼを同定中である。さらにSrcによるp120-cateninのリン酸化誘導とDsg3の安定性の関連性と、さらにp120-cateninに結合するキナーゼの同定を行っている。また、Dsg3の分解部位をアミノ酸解析で同定を試みたが、キャップ構造を形成するためアミノ酸配列を解析することができなかった。そのため、方法を変更し、細胞外ドメインを認識するさまざまな抗体でウエスタンブロッティングを行い、切断部位を推定中である。当該年度に実施した研究の成果について、その具体的内容、意義、重要性等尋常性天疱瘡患者由来IgGおよび抗デスモグレイン(Dsg)3モノクロナル抗体(mAb)による表皮細胞内に生じる細胞内シグナル伝達機構、特にDsg3の消失とDsg3欠損デスモソーム形成に着目して検討した。これまでの研究経過から、この系に関与している可能性のある候補キナーゼは、Src, EGF, RhoA, Fer, Fynなどであると考える。我々は本年これらのキナーゼの活性化や、Dsg3との結合性、また阻害剤によるDsg3の分解を検討した。その結果以下に示すような知見が得られた。Src kinaseの関与に関する検討抗体刺激後にSrcキナーゼの活性化の報告がある。さらに我々は培養表皮細胞にwound scratchをすると細胞の消失した空間に細胞が移動を開始した細胞で特異的にSrcの活性が観察され、天疱瘡抗体誘導Dsg3の分解が著明に増加することを確認している。そこで、Srcキナーゼの活性型を表皮細胞にTransfectionして、デスモソーム構成蛋白質の比率の変化を検討した。結果Dsg3は軽度減少、Dsg2が著明に減少した。Dsg3とDsg2の細胞外ドメインの分解機構が異なることが示唆された。RhoAの関与に関する検討抗体刺激後10から30分後にRhoAの活性型が増加し120分後に刺激前の状態に回復した。これまでに我々はDsg3の細胞膜からの分解にp120ctnが関与し、p120ctnはRhoAを不活化することが知られていたので、RhoA活性を阻害した状態で抗体刺激を加えDsg3の量をウエスタンブロッティングで検討した。Dsg3はRhoAの活性の変化に拘わらず抗体刺激により分解した。さらにRhoAの野生型、活性型、不活性型を細胞内に導入しRhoAの活性の変化によるDsg3の発現の変化を検討したところ、不活性型RhoAN19によりDsg3とβcateninの発現低下を観察した。

RhoAの活性化はDsg3の分解に関与せず、長時間の不活性化はアクチン細胞骨格のリモデリングの阻害を介してアドヘレンスジャンクションとデスモソームに影響を与えている可能性が高い。これらの結果から、デスモソームの形成分解にSrcとRhoAの直接もしくは間接的な関与が示唆される。さらに天疱瘡の新規治療開発に向け、解析を続ける予定である。
Rhoキナーゼ阻害薬と、BMP/コラーゲン複合体による新規骨形成治療の開発

未分化間葉系細胞から骨芽細胞への分化には多くの過程が存在し、生物が高等になれば再生能力が低下し骨形成にも時間がかかることが再生医療の大きな問題となっている。現在臨床使用されている骨量減少を抑制する薬剤には積極的に骨形成を促進させる作用を持つものは殆どなく、唯一骨形成を目指すものとして骨形成因子(BMP)そのものがあるがヒトでは大量に必要なこともあり、臨床レベルで使用するには至っていない。今回単独であるいはBMPとの組み合わせで骨形成を促進する低分子化合物をスクリーニングした結果、以下の3つの薬物が骨形成を促進させることが判明した。(報告論文)1.低分子量GTP結合蛋白質Rho関連キナーゼ(ROCK)阻害薬3.抗リューマチ薬(T0614)3の作用機序はCbfa-1の発現に関与することなくosterixの発現を上昇させることで現在osterix promotorの解析を計画している。一方1,2の作用を検討するために阻害薬で処理した細胞やkinaseのactive formやdominant negative formのcDNAを導入発現した細胞を注意深く検討したところ、actin細胞骨格のdynamicsが大きく変化していることが示唆された。そこで直接actin dynamicsを調節するcytochalacin DやlatrunculinB等を用いて骨芽細胞であるMC3T3-E1における骨分化を詳細に検討してところ、actin細胞骨格を一度バラバラにしてfocal adhesionが消失し再構築が起こるときにBMPを作用させると、きわめて高い骨分化が観察された。このことは細胞骨格を調節することで有効な骨分化、骨形成を起こさせる可能性を示唆させるもので、今後細胞骨格の調節による骨形成再生治療の臨床応用をめざしたい。平成12,13年度の科学研究費補助金による研究(基盤研究C,課題番号12680648,低分子量G蛋白質Rho-Rho kinaseを介した細胞内情報伝達機構の解析)の結果から、ROCK阻害薬が宿主の骨代謝に殆ど影響することなく、BMP-2により誘導される異所性骨形成を亢進することが明らかとなった。培養細胞を用いた実験から、ROCKが骨芽細胞のBMP-4発現、骨形成を負に制御することが明らかとなり、ROCK阻害薬はその抑制を解除することにより骨形成を促進することが示唆された(発表論文1)。さらに、骨形成に関する他の細胞内シグナルを解析したところ、MEK-MAP kinase系も骨芽細胞を負に制御していること、特異的なMEK1阻害薬(PD98059,U0126)が骨形成促進作用を有すること等が、MEK1のcDNAのC2C12細胞への発現実験などから明らかとなった(発表論文2)。又、研究の発展として、骨吸収を抑制することが報告されている臨床開発中の新規抗リューマチ薬(T-614)にも、サイトカインシグナル抑制による骨吸収抑制作用以外に骨形成促進作用があること、又その機序として、骨分化に不可欠な転写因子であるOsterixの発現をT-614が亢進させること等が判明した(発表論文3)。今後さらに臨床応用に向けて、動物実験を通して阻害薬の投与方法などを検討したい。未分化の間葉系細胞から骨芽細胞への分化過程には種々のステップが存在し、又生物が高等になればなるほど再生能力が低下し骨形成にも時間がかかることが再生医療の大きな問題となっている。現在市販されている骨量の減少を抑制する薬剤にも積極的に骨形成を促進させる機能を持つものは殆どない。唯一骨形成をめざすものとして骨形成因子(BMP)そのものがあるが、発見以来10年以上が経過するにもかかわらず、臨床試験においてヒトでは大量に必要なこともあり未だ臨床レベルで使用するには至っていない。これらのことから本研究においては、単独であるいはBMPとの組み合わせで骨形成を促進する低分子化合物をスクリーニングし、その細胞内の作用機序に関して検討を行った。(報告論文)

1.低分子量GTP結合蛋白質Rho関連キナーゼ(ROCK)阻害薬3.抗リューマチ薬(T0614)3の作用機序はCbfa-1の発現に関与することなくosterixの発現を上昇させることで現在osterix promotorの解析を計画している。一方1,2の作用を検討するために阻害薬で処理した細胞やkinaseのactive formやdominant negative formのcDNAを導入発現した細胞を注意深く検討したところ、actin細胞骨格のdynamicsが大きく変化していることが示唆された。そこで直接actin dynamicsを調節するcytochalacin Dやlatrunculin B等を用いて骨芽細胞であるMC3T3-E1における骨分化を詳細に検討してところ、actin細胞骨格を一度バラバラにしてfocal adhesionが消失し再構築が起こるときにBMPを作用させると、きわめて高い骨分化が観察された。このことは細胞骨格を調節することで有効な骨分化、骨形成を起こさせる可能性を示唆させるものであった。
MFS型多剤排出タンパク質の結晶構造解析

多剤排出系タンパク質の結晶構造解析を目指し,2年間で合計29種類のMFS,SMR,MATEタンパク質について大量発現系の構築を行った.単独発現系では黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)由来の多剤排出系QacAとNorA,コリネ菌(Corynebacterium glutamicum)由来CGL2611の3つについて発現,精製系を確立した.また本研究では単独発現の困難なものに対してMistic融合発現系の適用を試み,膜貫通ヘリックスが少ない小型のEbrA,EbrBの他に,13本のTetB,14本のLmrBについても発現を確認することが出来た.大量発現系を確立したQacA,NorA,CGL2611の3つについて詳細な条件検討を行なった.QacAの場合,透過電子顕微鏡観察からは,基質であるローダミン6G(R6G)の存在下で抽出・精製を行うとアグリゲーションを避けることが出来ることが分った.また,CD測定および示差走査熱量分析(DSC)の結果からはR6Gによって立体構造も安定化される傾向があることが示唆された.しかし,CGL2611に関しては,有意に構造を安定化する基質の情報が得られず,さらに,試料濃縮の際に界面活性剤DDMが問題となることが判明したため中断した.結晶化条件スクーニング実験はQacAとNorAに絞って実施し,これらの立体構造を壊さない5種類の界面活性剤と2種類の結晶化剤PEG400およびPEG3350の相分離点を決定し,初期スクリーニングの実施条件を決定した.蒸気拡散法の温度条件の変更やリピディックキュービックフェイズ法による結晶化を試みた結果,結晶様の析出物は得られたが,X線回折能を示す結晶を得ることは出来なかった.多剤排出系タンパク質の結晶構造解析を目指し,2年間で合計29種類のMFS,SMR,MATEタンパク質について大量発現系の構築を行った.単独発現系では黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)由来の多剤排出系QacAとNorA,コリネ菌(Corynebacterium glutamicum)由来CGL2611の3つについて発現,精製系を確立した.また本研究では単独発現の困難なものに対してMistic融合発現系の適用を試み,膜貫通ヘリックスが少ない小型のEbrA,EbrBの他に,13本のTetB,14本のLmrBについても発現を確認することが出来た.大量発現系を確立したQacA,NorA,CGL2611の3つについて詳細な条件検討を行なった.QacAの場合,透過電子顕微鏡観察からは,基質であるローダミン6G(R6G)の存在下で抽出・精製を行うとアグリゲーションを避けることが出来ることが分った.また,CD測定および示差走査熱量分析(DSC)の結果からはR6Gによって立体構造も安定化される傾向があることが示唆された.しかし,CGL2611に関しては,有意に構造を安定化する基質の情報が得られず,さらに,試料濃縮の際に界面活性剤DDMが問題となることが判明したため中断した.結晶化条件スクーニング実験はQacAとNorAに絞って実施し,これらの立体構造を壊さない5種類の界面活性剤と2種類の結晶化剤PEG400およびPEG3350の相分離点を決定し,初期スクリーニングの実施条件を決定した.蒸気拡散法の温度条件の変更やリピディックキュービックフェイズ法による結晶化を試みた結果,結晶様の析出物は得られたが,X線回折能を示す結晶を得ることは出来なかった.MFSファミリーに属する多剤排出系タンパク質の結晶構造解析を目指し,今年度は13種類のタンパク質について大量発現系の構築を行った.これらのうち2種類については大腸菌株の選択や発現誘導法の検討によって比較的十分な発現量を得ることに成功し,続いて界面活性剤による可溶化条件の検討を行った.可溶化したタンパク質についてFiske & SubbaRow法を用いてリン脂質の定量を行なった結果,ほぼ適正な可溶化が行われていることを確認した.また,示差熱分析とCD測定により精製標品のフォールディング状態を確認した.さらに,結晶化に際して構造をより安定化させることを目的として基質結合状態の構造を形成させるため,基質候補と考えられる数種類の薬剤と精製タンパク質との結合の有無を示差熱分析で評価した.続いて結晶化条件の検討のため,これら2種類のタンパク質の可溶化に最適であった界面活性剤と結晶化剤の混合状態の相図を作成し,結晶化に適していると考えられる界面活性剤濃度と結晶化剤濃度を決定した.現在蒸気拡散法とリピディックキュービックフェーズ法の2種類の方法で結晶化条件の初期スクリーニングを実施している.また,通常の方法で発現量の少なかった6種類の多剤排出タンパク質について,Bacillus subtilis由来の膜タンパク質であるMisticとの融合タンパク質としての発現系の構築を行なった.その結果,6種類中4つについて大腸菌C41あるいはC43株で融合タンパク質として大量発現させることに成功した.年度途中で名古屋大学に移籍したため,昨年度大腸菌による組換え大量発現系を確立した黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)由来の多剤排出系QacAとNorA,コリネ菌(Corynebacterium glutamicum)由来CGL2611の3つに絞り,精製タンパク質試料調整法の検討と結晶化実験を行なった.QacAの場合,透過電子顕微鏡観察からは,基質であるローダミン6G(R6G)の存在下で抽出・精製を行うとアグリゲーションを避けることが出来ることが分った.

また,CD測定および示差走査熱量分析(DSC)の結果からはR6Gによって立体構造も安定化される傾向があることが示唆された.しかし,CGL2611に関しては,有意に構造を安定化する基質の情報が得られなかった.さらに,試料濃縮の際に界面活性剤DDMが問題となることが判明したため中断した.結晶化条件スクーニング実験はQacAとNorAに絞って実施し,これらの立体構造を壊さない5種類の界面活性剤と2種類の結晶化剤PEG400およびPEG3350の相分離点を決定し,初期スクリーニングの実施条件を決定した.蒸気拡散法の温度条件の変更やリピディックキュービックフェイズ法による結晶化を試みた結果,結晶様の析出物は得られたが,X線回折能を示す結晶を得ることは出来なかった.Mistic融合発現系では,膜貫通ヘリックスが少ない小型のEbrA,EbrBの他に,13本のTetB,14本のLmrBについても発現を確認することが出来た.
歯科医学教育・研修における臨床能力評価の現状と展望についての調査

本企画調査は,将来の歯科医療者となるべき歯学部学生,歯科衛生士学校学生,歯科技工士学校学生に対する卒前から卒後そして生涯にわたる一貫した臨床教育・研修システムの構築,その中で学習および研修者の臨床能力の到達度についての客観的評価システムの開発・整備のために実施するものであり,現在研究している客観的臨床能力試験(Objective Structured Clinical Examination, OSCE)とStructured Clinical Operative Examination(SCOT)のシステム開発に役立てる目的で実施した。方法としては臨床能力評価法としてのOSCEとSCOTの実施状況と展望についてを,国内の医学,歯科医学教育機関,および欧米とくに米国を中心とする国外の医学,歯科医学教育機関についてアンケート,資料収集,聞き取り調査を採用し実施した。その結果,我が国における医学,歯科医学教育機関の大多数でOSCEを導入済みであったものの,内容の充実度についてはかなりのばらつきが認められた。特に医学部や歯学部学生については近い将来導入予定の共用試験との関連でかなり標準化された臨床能力評価方法が普及していたが,歯科衛生士学校学生,歯科技工士学校学生に対する能力測定法は,施設によってまちまちであり,OSCE導入の端緒についたところであった。一方,SCOTについては導入実績の認められた施設はごく少数に限られており,今後は本来の臨床能力を客観的に測定する手法について検討すべきであることが問題点として浮き彫りとなった。海外,特に米国では,臨床能力評価方法として我が国に先駆けてOSCEを導入しており各種認定医試験などに用いられている。また現在もカナダでは歯科医師国家試験にOSCEが導入されているなど総括評価としての信頼性や精度はきわめて高いものであった。
今日の日系アメリカ文学研究

ここ数年の間、特に1987年から1990年にかけて、かってないほどの日系アメリカ人による優れた文学作品、及び収容所での生活体験を記録に留めようとする本が出版された。それに呼応して、カリフォルニア州を中心に日系アメリカ人を含むアジア系アメリカ人の文学者をパネラ-にしたカンファレンスが何回か開催されている。近年のこうした顕著な動向は、アジア系、及び日系文学を評価し、アメリカ文学史のなかで正当に位置づけていこうとする作家や研究者の要請を反映するものである。報告者は、1989年度、全米で最も注目された作家の一人であるシンシア・カドハタにインタビュ-を行い、彼女の小説『フロ-ティング・ワ-ルド』の作品の意義を紹介した。また、収容所の生活を詠い、現代の社会問題に関しても積極的に発言しているミツエ・ヤマダの問題意識を明らかにするエッセイをまとめ、ついで、日系の作品を編纂し、編集者としても日系の文学の地歩作りを固めようとしているジャニス・ミリキタニの生の声を資料として残すべくインタビュ-記事にまとめた。日系の短編小説家として高い評価を受けているヒサエ・ヤマモトや劇作家として注目されつつあるワカコ・ヤマウチ、優れた詩人として著名な批評家から高い評価を受けながら広く知られる機会のなかったトヨ・スエモトに直接会い、体験談を聞き、資料を集めてきたので彼女達に関する本格的な文学評価を行う。また、サンフランシスコ州立大学のジェフ・チャン教授、日系新聞に評論を発表して波紋を投げかけている中国系作家のフランク・チンや、ニッケイ・レビュ-誌のヨ-イチ・シマツ氏、1930年代に日系二世の文学運動を推進したドクタ-・ヤスオ・ササキ達から見解を聞き、今日の日系文学研究に必要な歴史的背景を学んだ。