hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
神経筋接合部特異的スプライシング機構の解明

Laser micro dissection法により、マウス骨格筋から神経筋接合部に存在する微量RNAを回収し、microarrayおよびRNA-seqなどの網羅的解析を行った。解析の結果、神経筋接合部には、従来知られていた遺伝子発現変化に加え、独特のスプライシング制御が行われていることが明らかになった。これらのRNA代謝制御は、筋芽細胞セルラインC2C12を筋幹細胞に分化させ、Agrin/Neuregulin刺激を加えることで再現でき、実験により、神経筋接合部特異的なRNA代謝制御因子として、スプライシング因子であるSRタンパクを同定した。前年度までの研究により、レーザーマイクロダイセクション法により神経筋接合部のtotalRNAを抽出することにより成功した。このRNAは平均10ngと極めて微量で、通常の方法では、網羅的発現解析が行うことが出来ない。このため、当該年度は、微量RNAからの網羅的解析法の検討を行った。RNA増幅によるmicroarray解析と、微量RNA-seq解析の2法について検討した。microarrayでは、Ovation RNA amplification kitを用いて、RNA増幅を行った後、exonarray解析を行った。発現解析では、神経筋接合部特異的に有意に発現変化する1598個(up1260/down338)の遺伝子を同定した。既報の10倍以上の数の遺伝子変化をとらえることに成功した。さらに、exonレベルでの発現変化を解析したところ、163個のexonで神経筋接合部特異的な発現変化が認められた。当初の推測通り、神経筋接合部特異的なスプライシング機構の存在が明らかとなった。RNA増幅に伴うdataの偏りを無くすため、RNA-seqでは増幅なしの、微量RNA解析に挑戦した。通常1ug程度のRNAが必要であるが、100, 10, 1ngのcontrol RNAでRNA-seq解析に挑戦した。RNA-seqの各ステップの改良により、read数の減少は見られるものの、1ngのRNAでもRNA-seqの解析が可能となった。この方法を用いて、神経筋接合部領域の微量RNA-seqを行ったところ、発現解析はexonarray解析と同様の傾向を示した。exonレベルの解析では、exonarrayで検出された変化に加えRNA-seqでのみ同定できた、スプライシング変化が多数検出された。本研究は神経筋接合部特異的なRNA代謝機構の同定およびその機能解析を目的とする。1: Laser microdissection法による、マウス切片より骨格筋-神経筋接合部および通常骨格筋部位-total RNA回収。2: Gene Chip(exon array)による、スプライシングパターンの網羅的解析3:神経筋接合部特異的RNA代謝機構の詳細の解析、その生体における意義の解明の3段階で研究を施行予定である。当該年度は、1について検討した。まず、マウス切片の染色条件について検討を行った。バンガロトキシン染色、アセチルコリンエステレース染色について染色能、染色後のRNA分解状況について検討した。後者の染色を4°C10分の条件で行うことにより、微量RNAの分解を防ぎつつ、神経筋接合部特異的な染色を得られることが判明した。次に、この染色下にLaser microdissection法を行い、RNAの回収法について検討したところ、約5000箇所の神経筋接合部に対しRNeasy micro columnを用いると、2-3 ng程度のtotal RNAが回収できることが判明した。GeneChip解析には、50ngのRNAが必要であるため、ovation kitを用いたRNA増幅を行うこととした。実際に増幅を行ったところ、GeneChip解析に十分な量のcDNAが合成された。rt-PCRにより、Ache、Muskなど神経筋接合部特異的な発現を示すmRNAの発現を確認したところ、control領域から得られたcDNAに比べ、神経筋接合部から増幅されたcDNAには、著しい発現が見られ、神経筋接合部RNAの回収成功を確認した。今後、GeneChip解析を行う予定である。前年度までの研究で、レーザーマイクロダイセクション法で採取した神経筋接合部(NMJ)特異的な微量RNAのExonarrayおよびRNA-seqに成功している。昨年度は、そのBioinformatics解析から、NMJ特異的に発現するRNA結合タンパクとして、RBMSファミリータンパクおよびMBNLファミリータンパクを同定した。RBMSファミリータンパクは、現在まで、ほとんど解析のなされていない機能未解明な分子であり、何らかの新発見につながることが期待される。MBNLファミリータンパクは、筋分化に関わる分子として広く知られているが、NMJ形成への関与については、断片的な知見しか得られていない。RT-PCR法、免疫染色法により、これら分子が神経筋接合部に高発現していることを確認した。さらに、マウス筋芽細胞株C2C12にAgrin刺激を加え、疑似的にNMJ形成を促したところ、期待通り、RBMSファミリータンパクとMBNLファミリータンパクの発現が上昇することを、RT-PCR法およびWestern blotting法で確認した。続いてRBMSファミリータンパクとMBNLファミリータンパクのsiRNAによるノックダウンの条件検討を行った。それぞれ、数個のsiRNA配列を試用し、少なくとも2個の配列でC2C12細胞における高効率なノックダウンを誘導できることを見出した。これらsiRNAによるMBNLノックダウンにより、C2C12細胞において既知の標的exonの選択的スプライシングが、変化することを見出した。当該年度の前年度までの研究で、神経筋接合部のRNA-seqおよびexonarray解析に成功しており、神経筋接合部特異的なスプライシングの存在が明らかとなった。今年度は、その分子機構を探るため、まず最初に、C2C12

セルラインでのスプライシング再現に取り組み、スプライシング制御機構の解明を目指した。C2C12にAgrinおよびNeuregulinを添加培養することで、Achレセプターノクラスタリングを促し、疑似的に神経筋接合部を再現した。RT-PCR解析により、神経筋接合部RNA-seqで認められたCaシグナル分子のスプライシング変化がAgrin刺激で再現することができることを確認した。さらにACHEを始めとする神経筋接合部特異的発現分子のスプライシング変化も同定することができた。続いて、Agrin刺激によるスプライシング制御を担う、RNA結合タンパクの探索を進めた。Agrin刺激によりスプライシング変化が認められるエクソン周囲のRNA配列から、これらの領域に結合しうる分子をBioinformatics手法により推定したところ、SRプロテインファミリーの1つが顕著に結合することが明らかとなった。この分子をノックダウンしたC2C12細胞では、Agrin刺激によるスプライシング変化が減弱することから、この分子が神経筋接合部特異的なスプライシング変化に重要な機能を持つことが明らかとなった。また、RNA-seq解析で明らかとなった、神経筋接合部特異的に発現上昇するRNA結合タンパクRBMS3のノックアウト細胞を作成し、RBMS3がCHRNEの神経筋接合部での発現上昇に必須の役割を持つことを見出した。Laser micro dissection法により、マウス骨格筋から神経筋接合部に存在する微量RNAを回収し、microarrayおよびRNA-seqなどの網羅的解析を行った。解析の結果、神経筋接合部には、従来知られていた遺伝子発現変化に加え、独特のスプライシング制御が行われていることが明らかになった。これらのRNA代謝制御は、筋芽細胞セルラインC2C12を筋幹細胞に分化させ、Agrin/Neuregulin刺激を加えることで再現でき、実験により、神経筋接合部特異的なRNA代謝制御因子として、スプライシング因子であるSRタンパクを同定した。予定していたExonarray解析、RNA-seq解析に成功し、網羅的解析からNMJ特異的な発現を示すRNA結合タンパクとして、RBMSファミリーおよびMBNLファミリータンパクを見出した。昨年度は、これらの機能解析に取り組み、これらがNMJ特異的に発現していることを免疫染色やRT-PCR法により確認した。さらに、これらタンパクのNMJ形成における機能解明に取り組んでいる。RBMSファミリータンパクについては、既存の研究が行われていない分子であり、抗体、発現ベクター、ノックダウンの条件検討など、実験の基礎的段階の準備に通常より時間が必要であった。
行動・代謝の概日リズム安定性、同調性を制御する新規リン酸化シグナルの解明

Salt-inducible kinase 3 (Sik3)は、エネルギーセンサーとして知られるAMP kinase familyに属し、代謝や骨形成などに重要な役割を果たすことが知られている。本研究で我々は、SIK3が新たに概日リズム制御に必要不可欠であることを示した。ノックアウトマウスでは、活動リズムの有意な延長、周期の不安定化等の異常がまた、ノックアウトマウスから採取した培養細胞系や脳培養スライスでは、概日リズム周期の不安定化や細胞間同期の乱れが見出された。この原因を探る中で、時計タンパク質のひとつであるPER2タンパク質がSIK3のリン酸化によって不安定化することが示唆された。本年度は、我々が注目したリン酸化酵素SIK3の中枢神経系における基質候補の同定とSIK3の基質リン酸化を介した機能解析の一部達成を目標としてきたが、SIK3の基質として概日リズム制御に重要な役割を果たすことが知られるPER2が有力な候補として浮上した。まず、Sik3 KOマウスから採取し、樹立した細胞株の解析から、基質候補として発現量が変化しているタンパク質の同定を試みたが、その中に、KOマウスの表現型のひとつである行動の概日リズム異常に関連すると考えられる時計タンパク質PER2が見出された。PER2はSik3 KO細胞において、発現が野生型コントロールと比較して有意に上昇しており、また、MEFを用いた実験で、Sik3過剰発現細胞では発現低下が、Sik3ノックダウン(KD)細胞では発現上昇が観察された。同様に、過剰発現細胞ではPER2のリン酸化フォームが有意に増加し、KO, KD細胞では減少した。In vitro kinase assayではSIK3の強制発現下でPER2のリン酸化が亢進した。PER2のリン酸化の影響について検討する中で、SIK3の過剰発現によりPER2の分解速度が亢進し、KO, KD細胞では減弱することも明らかとなった。以上の結果から、SIK3はPER2をリン酸化し、PER2タンパク質の分解を促進していることが示唆された。PER2の分解に関しては、これまでにCKI (casein kinase I)によるリン酸化とプロテアソーム系による分解が報告されている。そこで、SIK3によるPER2リン酸化と分解促進がCKIと協調した現象か独立の事象かを確認するために、CKI阻害剤、プロテアソーム阻害剤等を用いてSIK3の作用への影響を調べた。その結果、SIK3のPER2リン酸化と分解促進は、CKIを介した分解経路とは独立であることが示唆された。現在SIK3によるPER2分解経路の特定とCKI, SIK3によるPER2分解という複数の経路の機能分担や各々の存在意義について詳細な解析を進めている。本年度は、昨年度の成果を基盤として、SIK3がPER2の分解を促進するメカニズムの詳細な解析を実施した。その結果、SIK3によるPER2のリン酸化をトリガーとして、オートファジー系が動き出す可能性が示唆された。PER2の分解には、別のリン酸化酵素であるCasein kinas I (CKI)の関与が示唆されているが、今回の研究結果から、CKIのリン酸化がプロテアソームを介したPER2分解に関与するのに対して、別のリン酸化酵素が別経路により同じたんぱく質の分解を促進するという、新たな知見が得られたことになる。現在、PER2のオートファジーによる分解に関わる分子の同定と詳細なメカニズム解析を進めている。と同時に、PER2が複数のリン酸酵素の作用により、異なる様式で分解される必然性を探るべく、両酵素によるPER2分解のタイミングや条件など、複数の分解経路の概日リズム形成過程における作用の違いについて明らかにすべき実験を実施している。もうひとつの今年度の成果として、コンディショナルノックアウト(KO)マウスの解析結果について報告する。肝臓特異的KOマウスとアストロサイト特異的KOマウスを作製したが、このうちアストロサイト特異的KOマウスでは、活動リズムに有意な異常が認められた。この結果から、SIK3はアストロサイトにおいて、概日リズム制御に積極的に寄与していることが示唆された。現在、アストロサイトにおいてSIK3の基質探索を行っており、リズム異常の原因となるSIK3の基質の同定を進めている。我々は近年、代謝機能に不可欠であるリン酸化酵素SIK3を同定し、SIK3の遺伝子KOマウスを解析する中で、酸素消費、摂食、深部体温等の概日リズム位相が正常と比較して約6時間後退していることを発見した。また、このマウスは活動リズム周期の有意な延長、光同調性の異常、更にはSCN神経間の同期率の低下、培養細胞における概日リズム周期の不安定性など、これまでに例を見ない劇的なリズム異常が観察された。そこで、SIK3を介した新規リン酸化シグナル伝達経路の解析を通して、リズム安定性、同調性を保持する概日時計駆動の分子基盤を明らかにすることを目的とした。同時に、本研究が未だ謎の多い代謝とリズムのリンクに重要な知見をもたらすことが期待された。平成27年度は、前年度までに明らかにした、PER2がSIK3の基質のひとつであるという発見をさらに発展させ、概日リズムおよび代謝を制御するSIK3シグナル伝達経路の詳細を明らかにすることを目的のひとつとした。また並行して、概日リズム、代謝、またはその両者を制御するSIK3のPER2以外の基質候補の同定する計画であった。前者のSIK3シグナル伝達経路に関しては、PER2をリン酸化し、概日リズム制御への重要な関与が示唆されているCKIとSIK3の相互作用の可能性について精査したが、CKIとSIK3はPER2を異なるタイミングで独立にリン酸化し、PER2の機能に関しても独立に制御していることが示唆された。

SIK3の下流については、網羅的遺伝子発現解析で転写被制御候補遺伝子の同定を試みたが、PER2を介して転写制御される遺伝子(群)の特定には至らなかった。もう一つの目的である、PER2以外のSIK3の基質については、代表者の異動により研究環境に劇的な変化があり、実験動物の移動や再繁殖等に時間を要したこともあって、年度内の実施には至らなかった。当該の研究計画を申請した平成26年度時点と、採択された平成27年度では、所属研究機関の変更に伴う研究環境の大きな変化があった。動物実験施設を含む実験関連の設備に劇的な違いがあったと同時に、実験動物の移動に半年以上の期間を要するなど、計画した研究を実施する上で、複数の実質的な制限があり、当初の計画通りに研究を実施することが難しい状況となった。また、連携研究者、研究補助員、大学院生など、人的な研究実施体制の変化もあって、以前の計画通りに研究を遂行することは非常に困難であったといえる。本研究では、SIK3 (salt-inducible kinase 3)の機能、中でも概日リズム制御への関与について解析を実施し、これまでに以下の知見を得ている。ノックアウトマウスは90%以上が生後すぐ死亡し、残りも骨形成異常、低脂血症、低血糖、胆汁鬱滞などの重篤な病状を呈する。加えて、このマウスは概日リズム異常も示し、代謝や摂食等の概日リズム位相が約6時間後退していた。また、夜行性は保持するが活動リズム位相は安定せず、明期の活動・摂食量の有意な上昇が観察された。恒暗条件下では活動周期に有意な延長を認め、恒暗から明暗条件に移すと、明暗サイクルに同調する活動リズムと自由継続するリズムの乖離も見られた。培養細胞では時計タンパク質PER2(ルシフェラーゼとの融合タンパク質PER2-lucとして計測)の発現に不安定な周期変動が見られ、SCNスライスでもPER2-lucの位相波に異常を認めた。さらに解析を進めた結果、SIK3KOマウスではPER2の発現レベルが有意に上昇していることから、SIK3によるリン酸化を介してPER2の分解が促進されことが示唆された。以上の結果から、SIK3はPER2の安定性に関与し、SIK3 KOマウスにおけるPER2レベルの異常が前述の概日リズム変異に関与することが示唆された。本研究は、KO個体・細胞におけるリズムの脆弱性および非同調性の発見から、リズム制御の鍵となる新規リン酸化シグナルの存在を示唆するものである。同時に、代謝恒常性の破綻と睡眠・覚醒、摂餌リズムの攪乱、SCN神経間相互作用(位相波)の乱れと概日リズム変容、といった知見から、リズム制御の新たな理解に向けた発展性を包含するものといえる。Salt-inducible kinase 3 (Sik3)は、エネルギーセンサーとして知られるAMP kinase familyに属し、代謝や骨形成などに重要な役割を果たすことが知られている。本研究で我々は、SIK3が新たに概日リズム制御に必要不可欠であることを示した。
舌痛症に発症する舌熱性痛覚過敏の分子メカニズムの解明

舌痛症は、舌に炎症や腫瘍などの器質的な変化が認められないにもかかわらず、舌に慢性的な痛みや痛覚過敏が生じる原因が不明な疾患である。舌へのTNBS投与により舌に組織学的変化のない舌痛症モデルの作成に成功した。TNBS投与により舌に発症する熱痛覚過敏は、舌上皮に発現するArteminによるGFR. 3を介したTRPV1陽性神経の増加が関与していることが示唆された。舌痛症は、舌に炎症や腫瘍などの器質的な変化が認められないにもかかわらず、舌に慢性的な痛みや痛覚過敏が生じる疾患である。女性に発症することが多く、痛む部位が移動する、食事中は痛みが緩和されるといった特徴があるが、原因はほとんどわかっていない。わが国においては約700万人の患者が存在すると考えられるが、舌に器質的な変化が認められず、血液検査等も正常値を示すことから、「気のせい」にされることが少なくなく、適切な診断と治療がされていないケースが非常に多い。舌痛症はBurning mouth syndromeと呼ばれているように、舌に焼かれたような灼熱感を呈することが多いことから、舌の侵害熱受容器のTRPV1がなんらかの変化おこしている可能性が非常に高い。そしてTRPV1の過敏化にはGDNFの一つであるArteminとその受容体であるGFRα3が重要であることが報告されている。本年度は舌へのzymosan投与による舌痛症モデルを作成し、舌の組織学的変化の解析を行った。深麻酔下ラットの舌にZymosan(30 mg/ml),TNBS(10mg/ml)を1時間塗布し経時的に舌への熱刺激に対する頭部逃避閾値を計測した。Zymosan塗布後7日目、TNBS塗布後1日目より熱刺激に対する逃避閾値が有意に低下したが、舌の組織学的変化は見られなかった。また、舌に発症する熱性痛覚過敏におけるArteminおよびtransient receptor potential vanilloid(TRPV)1の役割を解明するために、三叉神経節の舌投射GFRa3およびTRPV1陽性神経細胞の存在を免疫組織学的に確認した。舌痛症はBurning mouth syndromeと呼ばれているように、舌に焼かれたような灼熱感を呈することが多いことから、舌の侵害熱受容器のTRPV1がなんらかの変化をおこしている可能性が非常に高い。本研究では2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid(TNBS)舌投与により舌痛症モデルマウスを作製し、同モデルに生じる舌熱痛覚過敏に対するArteminの役割について検討した。C57/BL6雄性マウス(7w)の舌背にTNBS(10mg/ml,1h)を投与すると、投与後1日目より舌背に熱痛覚過敏が生じた。TNBS舌背投与後5日目、舌に組織学的変化は認められなかったが、舌背粘膜においてArtemin発現量が増加し、抗Artemin中和抗体およびTRPV1アンタゴニスト(SB366791)の投与により舌背の熱痛覚過敏が抑制された。また三叉神経節における舌投射Artemin受容体(GFRα3)陽性かつTRPV1陽性神経細胞数が増加した。さらにArtemin舌投与後5日目に舌背に熱痛覚過敏が生じ、SB366791の舌投与により舌背の熱痛覚過敏が抑制された。以上の結果から、TNBS舌背投与により生じる舌背の熱痛覚過敏は、舌背粘膜で増加するArteminによる舌投射ニューロンにおけるTRPV1の増加が関与していることが示唆された。
活性酸素不均化消去能および還元能を有する天然由来の金属錯体の合成と応用

合成して得られたピリミン及びそのFe(II)錯体を用いて、そのSOD活性、in vitro及びin vivoにおける抗酸化作用を検討し、以下の結果を得た。1)ピリミン1mgのSODの様作用は、SODの約1400分の1の効力を示した(SOD3Uに相当)。2)ピリミン1mgでperoxynitriteによる過酸化作用をほぼ100%抑制し、SODの500Uより強い抗酸化作用を示した。このことは本品がSOD活性以外の抗酸化作用を有し、過酸化物による組織障害をより強く抑制することが示唆される。3)ピリミンの低比重リポ蛋白(LDL)の酸化変性に対する抑制作用は、10^<-5>Mの時にほぼ50%であった。これは、LDLの酸化変性に対し強い抑制作用を示し、in vivoにおいても抗動脈硬化作用を有することが報告されているプロブコールに匹敵するものであった。また、ピリミンのFe(II)錯体はさらに強い抑制作用を示した。4)1)3)で検討したin vitroの実験においてピリミン及びそのFe(II)錯体が強い抗酸化作用を有することが明かとなったので、in vivoでの抗酸化作用を検討した。マウスをリノール酸10%添加食で3週間飼育し、著明に上昇する血清過酸化脂質に対する抑制作用を検討した。ピリミンを連日経口投与したときの抑制作用は、約30%で、Fe(II)錯体では約50%で、いずれも皮下投与より経口投与のほうがより強い抑制作用を示した。この抑制作用は天然の抗酸化物質であるビタミンEや前述のプロブコールに比較すると弱いものであったが、天然の抗酸化物質で水溶性のビタミンCに比較してかなり強いものであった。
パ-キソン病におけるミトコンドリア神経毒の研究

パーキンソン病の発症は,遺伝的素因と環境因子の相互作用による可能性が高い.本研究においては,黒質に対する毒性が注目されているテトラハイドロイソキノリン類に注目し,その中からミトコンドリア毒性の高いものを抽出し,培養細胞並びに実験動物に対する毒性を検討した.ミトコンドリア呼吸に対する毒性は,カテコル環の3並びに4位の水酸基が共にメトキシ化された化合物が毒性が高いことが判明し,パパベリン,ついてテトラハイドロパパベリンの呼吸抑制作用が強いことが解った.両化合物はミトコンドリア電子伝達系複合体Iの抑制作用も強く,黒質の選択的変性を起こすMPP^+による抑制を上回った(掲載予定).次いでラット胎児から腹側被蓋野と線条体のco-cultureを確立し,培養細胞に対する毒性を検討した所,MPP^+が最も毒性が高く,またドーパミン性細胞と非ドーパミン性細胞に対する毒性の比較では,ドーパミン性神経細胞に対する毒性が有意に強かった.MPP^+についてパパベリンが強い毒性を示し,やはりドーパミン性神経細胞に対する毒性の方が強かった.一方テトラハイドロパパベリンの毒性はこれより弱く,ドーパミン性細胞と非ドーパミン性細胞の間で毒性に差はみられなかった(投稿中).以上の所見では,テトラハイドロキノリン類の中に,ミトコンドリア毒性,黒質毒性の高いものが存在することを示す.これらの物質は環境中に存在する可能性があり,パ-キソン病発症候補物質として今後も研究が重要なことを示している.また我々の確立したco-cultureは,神経毒の研究に適しており,広く応用が可能な培養系である。
1940・50年代のロサンゼルス近代建築における規格化と地域性の融合に関する研究

本年度は,昨年度の,(1)「アーツ・アンド・アーキテクチャー(以下,AA)」誌の特徴の把握,(2)3.1940年代・50年代におけるロサンゼルス近代建築の空間構成に関する分析予備的分析をふまえ,特に,1940年代・50年代のロサンゼルス近代建築を先導した建築家ピエール・コーニッグの住宅作品の空間構成に関する調査・分析とその考察を行った.まず,彼の住宅作品の,空間構成材と架構の類型とその移行を考察し,以下の諸点を明らかにしている.空間構成材については,特に内部空間において,素材の統一化により空間の均質化と一体性がつくり出されていたこととともに,架構については,様々な試行を重ねた結果,鉄骨造の特性をいかした長大なスパンの簡潔な架構システムへと移行したこと示した.ついで,配置構成と平面・立体構成の類型とその移行を考察し,以下の諸点を明らかにした.配置構成では,敷地の形状をいかして簡潔な導入をおこない,様々なプライバシーの確保法を用いて居室の開放性を保持している.公・私室の配置では,住宅の階数に関係なく,それらの形態や配置は簡潔な分離をとり,公室も私室も一体的な空間を創出していた.主公室の構成では,主公室により全体の一体性を持たせる傾向にあり,特に居間的空間で,配置構成の試行により一体的な空間をつくりだしている.立体構成については,立体的にも立面的にもやや複雑なものから,より簡潔,または天井面を延長した外部への志向性の高い立体構成と簡潔な立面構成を持つ作品へと移行していく.さらに,外部空間の構成と自然との融合手法の類型とその移行について,階数に関係なく外部への指向性が高く,外部空間に中間領域を持たせたものから,内部空間との一体化を意識した外部空間へと変化していることを導いた.以上の調査分析から,コーニッグは地域性をいかすために直接的に外部に働きかける規格化された住宅から,簡潔な規格化された形態のなかに地域性をとり入れることを内部空間で展開している,コーニッグの住宅作品における規格化と地域性の融合を論じ,彼の現代的意義を明らかした.2年間の研究課題の初年度に当たる本年度は,以下の予備的検討を中心とする研究を行った.1.既往研究の整理2.「アーツ・アンド・アーキテクチャー(以下,AA)」誌の特徴の把握AA誌の1930年代終盤から廃刊となる60年代終盤までの全号の複写を用いて,エンテンザ氏が編集を行っていた期間にAA誌に掲載された全ての作品の特徴を,(1)建築家,(2)立地,(3)建物種別を,掲載年や掲載ページ数を中心に整理し,その特徴を実証的に確認した.さらに,ニューヨークで発行されていた「アーキテクチュラル・レコード」誌に,40・50年代に掲載された独立住宅作品を対象に,上記と同様の分析を行い,その結果をアメリカ西部と東部の主要な建築雑誌の掲載作品という観点で比較しAA誌の特徴を明らかにした.3.1940年代・50年代におけるロサンゼルス近代建築の空間構成に関する分析AA誌に掲載された建築家について掲載ページ数から作品を抽出し,これらの作品の図面(配置,平面・断面図)をCADデーター化し1次資料とし,ついで,配置構成,内部空間構成,外部空間構成,空間構成材に関する基礎的分析をふまえ,建築家ごとの共通点や差異について以下の点を導いた.71件の住宅作品を対象に,空間構成材とモデュールによる空間構成法の類型的把握を行い,特性を示す軸として自然と人工,小スパンと大スパンの2軸を導き,その軸を中心に,5つの期に移行していることとともに,それらを特徴づける建築家を明らかにした.さらに,公・私室の構成,外部空間構成,立体構成の分析項目ごとにその特性を示す2軸を抽出し,その移行とおのおのを特徴づける建築家を示した.特性を示す軸として,公私室の構成では領域性と断面形態を,外部空間構成では開放性と全体形態における外部空間の配置,立体構成では,ヴォリュームと立面を導いた.本年度は,昨年度の,(1)「アーツ・アンド・アーキテクチャー(以下,AA)」誌の特徴の把握,(2)3.1940年代・50年代におけるロサンゼルス近代建築の空間構成に関する分析予備的分析をふまえ,特に,1940年代・50年代のロサンゼルス近代建築を先導した建築家ピエール・コーニッグの住宅作品の空間構成に関する調査・分析とその考察を行った.まず,彼の住宅作品の,空間構成材と架構の類型とその移行を考察し,以下の諸点を明らかにしている.空間構成材については,特に内部空間において,素材の統一化により空間の均質化と一体性がつくり出されていたこととともに,架構については,様々な試行を重ねた結果,鉄骨造の特性をいかした長大なスパンの簡潔な架構システムへと移行したこと示した.ついで,配置構成と平面・立体構成の類型とその移行を考察し,以下の諸点を明らかにした.配置構成では,敷地の形状をいかして簡潔な導入をおこない,様々なプライバシーの確保法を用いて居室の開放性を保持している.公・私室の配置では,住宅の階数に関係なく,それらの形態や配置は簡潔な分離をとり,公室も私室も一体的な空間を創出していた.主公室の構成では,主公室により全体の一体性を持たせる傾向にあり,特に居間的空間で,配置構成の試行により一体的な空間をつくりだしている.立体構成については,立体的にも立面的にもやや複雑なものから,より簡潔,または天井面を延長した外部への志向性の高い立体構成と簡潔な立面構成を持つ作品へと移行していく.

さらに,外部空間の構成と自然との融合手法の類型とその移行について,階数に関係なく外部への指向性が高く,外部空間に中間領域を持たせたものから,内部空間との一体化を意識した外部空間へと変化していることを導いた.以上の調査分析から,コーニッグは地域性をいかすために直接的に外部に働きかける規格化された住宅から,簡潔な規格化された形態のなかに地域性をとり入れることを内部空間で展開している,コーニッグの住宅作品における規格化と地域性の融合を論じ,彼の現代的意義を明らかした.
ヒトにも活性な昆虫成長因子GBPを受容するレセプターの蛋白質構造解析

早川らは、寄生蜂が宿主に卵を産みつける際、宿主に誘導するペプチドであるGBPを発見した。GBPは高濃度で宿主幼虫の成長を抑制し、寄生蜂幼虫の成育環境を守るが、低濃度では逆に細胞成長因子他いくつかの機能を示すサイトカインでもあることが分かってきた。またGBPはヒトケラチノサイトに対してもEGFと同等の増殖活性を有していることが分かっているが、分子量がEGFの半分しかないGBPがEGFレセプターと結合し信号を細胞内に伝えることは驚くべきことである。本研究の目的は、GBPとレセプターの結合状態の立体構造解析を行い、その作用メカニズムを明らかにすることである。GBPレセプターについては、全長配列の決定を行った。現在、発現系を構築している。EGFレセプターの膜外ドメインについては、海外の共同研究者を得て発現精製のメドがたった事から、GBPとの相互作用解析を行なう。宿主体液中には、GBPと結合する可溶性の蛋白質が発見されており、この蛋白質とGBPの結合もGBPレセプター系のモデルとして興味深いので構造解析を行う。現在大腸菌による発現系を構築して蛋白質を得ており、BiacoreによるGBPとの相互作用解析を行なっている。リガンドの残基置換による活性変化からもレセプターとの相互作用を検討している。N末端およびC末端数残基をdeletionすることにより、細胞増殖促進活性と血球活性化活性が各々異なった影響を受けることから、両活性を発現するレセプターは別の分子であることが推定された(J. Biol. Chem.,24,31813-31818(2001))。またGBPのY11A変異体が2次構造をもたないにもかかわらず活性を有することから、TFE中ではGBPと同じ構造をもつ事を明らかにし、レセプター結合によるリガンド構造の誘導を示唆した(J. Biol. Chem.,in press)。GBPレセプターについては、ペプチドの部分アミノ酸配列からプライマーを設計し、レセプターの全長配列の決定を行っている。EGFレセプターの膜外ドメインについては、バキュロウイルスを用いた昆虫細胞による発現系を構築しており、現在その発現量を向上させるべく条件検討を行っている。現在大腸菌による発現系を構築しており、インクルージョンボディとして蛋白質を得ている。まきもどし条件を検討中である。N末端およびC末端数残基をdeletionすることにより、細胞増殖促進活性と血球活性化活性が各々異なった影響を受けることから、両活性を発現するレセプターは別の分子であることが推定された(J.Biol.Chem.24,31813-31818(2001))。またGBPのY11

A変異体が2次構造をもたないにもかかわらず活性を有することから、TFE中ではGBPと同じ構造をもつ事を明らかにし、レセプター結合によるリガンド構造の誘導を示唆した(J. Biol. Chem.,in press)。
Micronucleus Testによる放射線療法の個別化の研究

癌細胞の放射線感受性の検討に,判定の簡単なMicronucleus Assayを使うべく,MN頻度曲線と細胞生存率曲線の関係を調べた。Cytokinesisーblocked Methodで求めた頻度曲線と,生存率曲線をLinearーQuadratic Modelで解析すると両曲線のパラメ-タ-はよく関連し,頻度曲線からα/β値を推定出来る事が解った。また,2Gyの生存率の高低はこのα/β値と良く関連する。そこで,人食道癌の手術材料から14系の癌細胞を得て,Micronucleus Assayで感受性を調べた。酵素処理によって単離腫瘍細胞を得た後、培地を含むペトリ皿にて培養する。数日を経て、腫瘍細胞が増殖を開始したのを確認した後、50kVpのX線にて照射を行い、照射後に分裂した細胞を特定すべく,Cytochalasin Bを加えた、48、72時間後に細胞を回収し、エタノ-ル,カルノア液にて固定し、スライドガラス上に展開固定し、核酸染色を施して,蛍光顕微鏡でMicronucleusを観察、計数した。線量頻度曲線はLinearーQuadratic Modelで解析した。α/β値、酸素増感比を調べた。α/β値は無限大から1.5まで分布し、酸素増感比は2.7から1.3まで分布した。この様に、細胞レベルで腫瘍の放射線感受性は大きく異なることが解った。正常組織の放射線感受性の個体差を調べる試みの基礎実験を3系統の純系マウス(A/J,Bal b/c,C3H/He)を用いて行った。Micronucleus頻度で評価したリンパ球の放射線感受性には顕著な系統差を認めた。感受性の系統差は、他の正常組織(小腸上皮,線維芽細胞)においても,同じ順序で認められた。これはリンパ球の放射線感受性を調べることにより、耐容線量の個体差を推定し得る事を示している。10人の患者についてリンパ球の放射線感受性を調べた。感受性の明らかに低い患者2名については,皮膚の放射線反応も極めて軽微であった。Micronucleus Assayの有用性を示唆するものと考えられる。低LET放射線による癌の治療成績を更に向上させるには、患者毎の治療方法を個別化しなければならない。そのためには、個々の患者の癌細胞の放射線感受性を調べる簡便、確実な方法を確立せねばならない。我々は細胞の増殖死と深く関係しているMicronucleus形成をこれに応用することを考えその基礎的検討を行った。マウス腫瘍細胞株SCC VII、EMT6/KUについて、放射線照射後の細胞生存率曲線と、Cytochalasin Bを併用して求めたMicronucleusの頻度曲線を共にLinear-quadratic modelで解析し、両曲線のパラメタ-の関連を調べた。両曲線のα値、β値はそれぞれ深く関係しており、放射線増感剤BUdRで細胞を前処理し生存率曲線のα値が大きくなると、Micronucleusの頻度曲線のα値も同じ程度大きくなった。またこの時、β値はどちらの曲線においても変化しなかった。そして両曲線のα/βは大変良く一致した。次に、この関係を人癌の初代培養細胞において検討した。10人の腎臓癌患者の手術材料より得た癌細胞を使い、細胞生存率曲線、Micronucleusの頻度曲線を求め、マウス腫瘍細胞のデ-タと同様の分析を行った。細胞生存率(対数でプロット)とMicronucleus頻度との間には直線関係があり、両曲線のα/β値はよく一致した。

また放射線感受性にはかなりのばらつきのあることも分かった。そこで、同じく人の食道癌手術材料より樹立された5細胞株についてMicronucleusの線量頻度曲線を調べるとα/β値は広く分布しており、最適線量分割が症例によりかなり異なることが分かった。正常組織の放射線反応の個体差を調べる方法を確立するため、Micronucleus頻度で求めた末梢血リンパ球の放射線感受性と、腸上皮細胞の放射線感受性の関連を3系統のマウスについて調べた。両組織の感受性の順位は一致した。癌の放射線治療においては、癌細胞の放射線感受性のわずかな差が腫瘍局所の最終制御の成否に影響する。従って、事前に腫瘍の放射線感受性を放射線生物学的に予測し、最適一回線量、総線量を個々の症例に於て決定した上で照射を行う事が望ましい。更に、正常組織についても感受性の個体差を知り、耐容線量個体差を推定できればより適切な放射線治療が出来る。人食道癌の手術材料から14系の癌細胞を得て、Micron ucleus Assayで感受性を調べた。酵素処理によって単離腫瘍細胞を得た後、培地を含むペトリ皿にて培養する。数日を経て、腫瘍細胞が増殖を開始したのを確認した後、50KVpのX線にて照射を行い、照射後に分裂した細胞を特定すべく、CytochalasinBを加えた、48、72時間後に細胞を回収し、エタノ-ル、カルノア液にて固定し、スライドガラス上に展開固定し、核酸染色を施して、蛍光顕微鏡でMicronucleusを観察、計数した。線量頻度曲線はLinear Quadratic Modelで解析した。α/β値、酸素増感比を調べた。α/β値は無限大から1.5まで分布し、酸素増感比は2.7から1.3まで分布した。この様に、細胞レベルで腫瘍の放射線感受性は大きく異なることが解った。正常組織の放射線感受性の個体差を調べる試みの基礎実験を3系統の純系マウス(CA/J,Ba1b/C,C3H/He)を用いて行った。Micronucleus頻度で評価したリンパ球の放射線感受性には顕著な系統差を認めた。感受性の系統差は、他の正常組織(小腸上皮、線維芽細胞)においても、同じ順序で認められた。これはリンパ球の放射線感受性を調べることにより、耐溶線量の個体差を推定し得る事を示している。10人の患者についてリンパ球の放射線感受性を調べた。感受性の明らかに低い患者2名については、皮膚の放射線反応も極めて軽微であった。Micronucleus Assayの有用性を示唆するものと考えられる。
子宮頸がんワクチン接種の導入における「boundary work（境界作業）」

平成30年度は、厚生労働省厚生科学審議会感染症分科会予防接種部会ー以下、審議会と略記ーにおいて、HPV(ヒトパピローマウイルス)、子宮頸がん、そしてHPVワクチン・接種がいかに語られ、どのように正当化されたのかを、「boundary work(境界作業)」の視点から明らかにした。その成果として、中間報告を日本社会学会(第91回大会、甲南大学)にておこなった。HPVワクチンが定期接種のA類(旧1類)疾病指定されたのは、2013年の予防接種法改正においてである。2013年改正の基軸となったのが、2009年12月に設置された審議会である。審議会は「第二次提言(2012年5月)」をとりまとめ、そのなかでHPVワクチン接種の定期化を具申した。厚生労働省は当初、HPVを2類疾病に分類してみてはどうかと審議会に提案していた。しかしながら、健康被害が起った場合の補償額の点から、審議会で異論が出た。そのため、厚労省はHPVを1類疾病に再分類すべく、1類疾病概念自体の変更をおこなった。この1類疾病概念の変更はboundary workの結果である。厚労省自体は、HPVは2類疾病でもよかった。しかしながら、審議会でとくに補償の点で異論が出たがゆえに、厚労省は1類疾病概念の変更をおこなってまで、HPVを1類疾病に該当させた。まさに審議会がboundary workの場であったことを明らかにすることができた。また、これまでの成果を冊子形態の報告書にもまとめた。章立ては以下の通りである。序論問題の所在、第1章基本的知識、第2章がん統計とその見せ方・読み方の差異、第3章医学論文におけるHPVワクチンと当該ワクチン接種の語られ方、第4章審議会におけるboundary work、終章「HPVワクチン問題」について、注釈、参考文献。平成28年度は子宮頸がんと当該ワクチンを題材とした医学論文と一般雑誌記を中心として資料収集と整理をおこなった。HPV(感染)の表象は二転三転した。HPV感染は、当初、いわゆる「性病」あるいは「STD(sexually transmitted diseases)」と表象された。しかしながら、HPV感染は子宮頸がんの発生の必要条件でしかない。HPV感染のほとんどが一過性で、感染者の約9割はHPVが体内から自然と消えていく。そのため、HPV感染を「性病」・「STD」とするのではなく、「STI(sexually transmitted infections)」として捉え直そうする動きが現れた(HPV感染は「性器の風邪」であると表現されるようになった)。こうした捉え直しのもう一つ別の背景は、子宮頸がん検診率の低さがあったと思われる。すなわち、HPV感染=「性病」・「STD」としてしまうと、HPV感染のイメージが悪くなってしまい、肝心の検診に二の足を踏むということを招くと、考えられたからであるようにも思われる。また、当該ワクチンとの関連で言えば、誰もが感染するリスクがあるのだから、ワクチン接種をおこなうべきであるという議論を導くことになったように思われる(当然、逆の議論ー誰もが感染するのだから、そして一過性だから、接種を受けなくともいいーも可能であることに留意する必要があろう)。統計データから、2000年代前半、子宮頸がんがとくに若い女性に増えていたのは確かである。そして、この増加が、当該ワクチン接種導入に対する主要な理由となっている。しかしながら、留意すべきことがある。この2000年代前半、子宮(頸)がんの「定義」が変更されていた(分類方法の変更がなされていた)。この定義の変更という事実が、がんの増加にどのような影響をおよぼしたのかということを、平成29年度以降の課題とする。ほぼ順調に、資料収集は進んでいる。平成29年度はとくに資料の整理・分析に重点を置く。また、その成果(中間報告)を、日本社会学会などの場で報告する。懸念があるとすれば、平成28年度、HPVワクチンによる健康被害が、ついに訴訟にいたった(紛争期に入った)ことであろう。このことによって、関係者への聞き取りは容易ではなくなった。あるいは、関係者へのアクセスは可能であるけれども、訴訟化したことで(原告被告双方とも)、自分たちに不利なことは話さなくなるということが起こると思われる。したがって、当時の文献資料などを中心にして、今後も資料収集をはかる。ただ、本研究はもともとHPVワクチン接種がいかに正当化され導入にいたったのかを捉えようとするものであり、関係者への聞き取りがなくても、当時の文献資料などによって完遂でき、この点でHPVワクチンによる健康被害の訴訟化は、問題はないと思われる。平成29年度は、子宮頸がんと当該ワクチンを題材とした医学論文と一般雑誌記を中心として資料収集・整理と分析をおこなった。その成果として、中間報告を日本社会学会(第90回大会、東京大学)にておこなった。分析は、「boundary work(境界作業)」の視点からおこなった。その主旨は、医学論文において、定期接種化される以前の2010年までの間、子宮頸がん・HPV感染・HPVワクチンがいかに語られ、当該ワクチンがどのように正当化されたのかを、ということである。2000年代前半、子宮頸がんの若年化と検診率低下が見られ、「危機感」が語られた。これを「臨床」の視点とする。

HPVの検査が容易にできるようになったことで、異常が見られない女性も感染していることが判明した。これを受け、HPV感染は特別なことではなく、誰でも感染しうることになった。しかしながら、「臨床」の視点では、がんは増えていた。そうした状況でのHPVワクチンの実用化・市販化であった。だが、すべての医療者が諸手を挙げて当該ワクチンを迎え入れたというわけではなかった。つまり、「ワクチン接種は望ましい」という境界線が確固として「あった」わけではなかった。というのは、当該ワクチンには、価格や、免疫の有効期間・日本特有のHPVなどのいくつかの限界ないし不確実性があったからである。したがって、当該ワクチン接種を推進したい医療者は、がん患者が増えているとする「臨床」の視点を前提として、大きく二つの点から正当化を図ろうとした。一つが「医療経済学」的視点であり、当該ワクチン接種の導入によって医療費などを削減できるとした。もう一つが「公衆衛生」の視点より推奨や他の国々のワクチン政策からの正当化である。こうして、10代前半の接種については望ましいとする境界線が引かれることになった.ほぼ順調に進んでいる。平成30年度はとくに資料の分析に重点を置く。また、その成果(中間報告)を、日本社会学会などの場で報告する。懸念があるとすれば、平成28年度、HPVワクチンによる健康被害が、ついに訴訟にいたった(紛争期に入った)ことを挙げることができるかもしれない。しかしながら、本研究はもともとHPVワクチン接種がいかに正当化され導入にいたったのかを捉えようとするものであるので、HPVワクチンによる健康被害の訴訟化は問題ないと思われる。平成30年度は、厚生労働省厚生科学審議会感染症分科会予防接種部会ー以下、審議会と略記ーにおいて、HPV(ヒトパピローマウイルス)、子宮頸がん、そしてHPVワクチン・接種がいかに語られ、どのように正当化されたのかを、「boundary work(境界作業)」の視点から明らかにした。その成果として、中間報告を日本社会学会(第91回大会、甲南大学)にておこなった。HPVワクチンが定期接種のA類(旧1類)疾病指定されたのは、2013年の予防接種法改正においてである。2013年改正の基軸となったのが、2009年12月に設置された審議会である。審議会は「第二次提言(2012年5月)」をとりまとめ、そのなかでHPVワクチン接種の定期化を具申した。厚生労働省は当初、HPVを2類疾病に分類してみてはどうかと審議会に提案していた。しかしながら、健康被害が起った場合の補償額の点から、審議会で異論が出た。そのため、厚労省はHPVを1類疾病に再分類すべく、1類疾病概念自体の変更をおこなった。この1類疾病概念の変更はboundary workの結果である。厚労省自体は、HPVは2類疾病でもよかった。しかしながら、審議会でとくに補償の点で異論が出たがゆえに、厚労省は1類疾病概念の変更をおこなってまで、HPVを1類疾病に該当させた。まさに審議会がboundary workの場であったことを明らかにすることができた。また、これまでの成果を冊子形態の報告書にもまとめた。
増殖糖尿病網膜症における血管新生の前骨髄性白血病腫瘍抑制因子による制御

増殖糖尿病網膜症の病因にはサイトカインVEGFが主要な役割を担い、その発現には転写因子HIFが関与しているが、前骨髄球性白血病腫瘍抑制因子(PML)はHIFの発現低下、血管新生の抑制を引き起こすとされている。今回、増殖糖尿病網膜症や血管新生を伴わない疾患の増殖膜を採取し、HIF、PMLの発現をmRNAレベル、蛋白レベルで検索し、増殖糖尿病網膜症においてHIFの発現亢進とPMLの発現低下が起こっていることを示した。今回の研究結果は、将来的にPMLの増殖糖尿病網膜症の血管新生を抑制する治療薬としての可能性を模索する第一歩となると思われる。増殖糖尿病網膜症の病因には血管内皮増殖因子(VEGF)が関与している。VEGFはHIF転写因子によって転写が促進されること,さらにHIF発現はmTORによって制御されていることが知られている。最近,前骨髄球性白血病腫瘍抑制因子(PML)がmTOR活性を阻害して転写因子HIFの発現低下,血管新生の抑制を引き起こすことが報告された。このことから,増殖糖尿病網膜症の増殖膜など血管新生が促進されている組織ではHIFの増加とともにPMLの発現低下が予想される。今回,増殖糖尿病網膜症や特発性黄斑上膜などの血管新生を伴わない疾患の増殖膜を採取し,HIF,PMLの発現をmRNAレベル,蛋白レベルで検索した。増殖糖尿病網膜症は19検体中13検体(68%)と高率にHIF-1 mRNAが検出されたのに対して,特発性黄斑上膜では12検体中2検体(17%)にしか検出されず,両群の検出率には有意差が認められた(P=0.0050)。また,humanとmouse両種のPMLmRNAを検出することが可能なPMLプライマーを用いてマウスwholeretinaでRT-PCRを行ったところ,PMLの発現が確認でき,PMLが眼内においてなんらかの役割を担っている可能性が推測された。一方,同条件でヒト増殖糖尿病網膜症症例の増殖膜検体7例もRT-PCRを行ったがPMLの発現が確認できなかった。以上のことから増殖糖尿病網膜症においてはHIFの発現亢進とPMLの発現低下が起こっている可能性がある。今後,手術検体を増やしてPML発現の検討を進めてゆく予定である。これまでPMLの眼内での発現は報告がなく,我々の研究結果は,将来的にPMLの増殖糖尿病網膜症の血管新生を抑制する治療薬としての可能性を模索する第一歩となると思われる。VEGFはHIF転写因子によって転写が促進されること、さらにHIF発現はmTORによって制御されていることが知られている。最近、前骨髄球性白血病腫瘍抑制因子(PML)がmTOR活性を阻害して転写因子HIFの発現低下、血管新生の抑制を引き起こすことが報告された。このことから、増殖糖尿病網膜症の増殖膜など血管新生が促進されている組織ではHIFの増加とともにPMLの発現低下が予想される。今回、増殖糖尿病網膜症や特発性黄斑上膜などの血管新生を伴わない疾患の増殖膜を採取し、HIF、PMLの発現をmRNAレベル、蛋白レベルで検索した。増殖糖尿病網膜症は19検体中13検体(68%)と高率にHIF-1 mRNAが検出されたのに対して、特発性黄斑上膜では12検体中2検体(17%)にしか検出されず、両群の検出率には有意差が認められた(P=0.0050)。また、humanとmouse両種のPML mRNAを検出することが可能なPMLプライマーを用いてマウスwhole retinaでRT-PCRを行ったところ、PMLの発現が確認でき、PMLが眼内においてなんらかの役割を担っている可能性が推測された。一方、ヒト増殖糖尿病網膜症症例の増殖膜3検体の免疫染色を行ったところ、特発性黄斑上膜の3検体と比べてHIFの発現が明らかに亢進しPMLの発現が低下する傾向がみられた。以上のことから増殖糖尿病網膜症においてはHIFの発現亢進とPMLの発現低下が起こっていると考えられる。これまでPMLの眼内での発現は報告がなく、我々の研究結果は、将来的にPMLの増殖糖尿病網膜症の血管新生を抑制する治療薬としての可能性を模索する第一歩となると思われる。
心臓・大血管手術の術後長期予後を基にしたサルコペニアの診断基準に関する検討

近年サルコぺニアが生命予後に影響すると注目されているが、心臓血管外科領域における術後長期予後への影響は明らかではない.心臓・大血管手術患者において従来の腸腰筋面積の測定に加え、サルコぺニアに関連するマイオカイン(骨格筋から放出されるサイトカイン)の測定、MRIによる腸腰筋の質的異常の診断および術前運動機能を調べ、術後長期予後に及ぼす影響を明らかにする.本研究は、サルコぺニアの未だ解明されていない基礎的研究を完成し、術後長期予後を予測するサルコぺニアの新たな診断基準の確立および治療への臨床応用に展開するための基盤となる研究を行う.近年サルコぺニアが生命予後に影響すると注目されているが、心臓血管外科領域における術後長期予後への影響は明らかではない.心臓・大血管手術患者において従来の腸腰筋面積の測定に加え、サルコぺニアに関連するマイオカイン(骨格筋から放出されるサイトカイン)の測定、MRIによる腸腰筋の質的異常の診断および術前運動機能を調べ、術後長期予後に及ぼす影響を明らかにする.本研究は、サルコぺニアの未だ解明されていない基礎的研究を完成し、術後長期予後を予測するサルコぺニアの新たな診断基準の確立および治療への臨床応用に展開するための基盤となる研究を行う.