hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヒト鼻汁ムチンの生体防御機構に関する研究

1.ヒト鼻汁ムチンの精製・抽出慢性副鼻腔炎患者から採取した鼻汁に5mMEDTA添加リン酸緩衝食塩水を加えて超音波処理後、遠心し、この上清を可溶性画分として集めた。この可溶性画分をゲル濾過し、最も分子量の大きい画分、すなわち可溶性ムチンの溶出している画分を再度ゲル濾過して精製した。これを糖組成の解析、アミノ酸分析、蛋白質量の測定を行い、精製可溶性ムチンを得た。この方法で慢性副鼻腔炎鼻汁15mlから総糖蛋白質量10.17mgの精製したヒト鼻汁ムチンを得た。2.ムチンの細菌に対する付着性の検討管壁にムチンを被覆した試験管の管壁ムチン層への細菌の付着性を検討した。対照としては内腔をシリコン処理した試験管を使用した。S.aureus,E.coli,K.pneumoniaeではシリコン被覆群と比較してムチン被覆群の付着菌数が有意に多く、これら細菌に対するムチンの付着性が認められた。3.ムチンの細菌に対する障壁作用の検討ムチンを含有したソフト寒天とムチンを含有しないソフト寒天を各々培地上に重層し、各種細菌がこれらのソフト寒天を通過する状態や、ソフト寒天上のコロニー形成状態を観察してムチンの障壁作用を検討した。コントロール群(培地のみの群)と比較してS.aureus,E.coli,K.pneumoniae,P.aeruginosaに対してムチン層の障壁作用が認められた。4.ムチンの抗菌作用の検討ムチンを添加した培地と添加しない培地でS.aureus,E.coli,K,pneumoniae,P.aeruginosaを加えて35°Cで保温し、各々経時的に菌数を算定して比較検討した。これらの各菌に対してムチンの抗菌作用が認められたが、なかでもS.aureusとK.pneumoniaeに著しく抗菌作用がみられた。S.aureusについて各過程を走査電顕で観察した。ムチンが厚く覆っている菌ではそうでないものに比較して菌の増殖に乏しかった。ムチンが覆っている菌でも分裂増殖している所見が認められた。これらのことよりムチンの抗菌作用は殺菌作用ではなく、静菌作用であると考えられた。以上の検討より、ヒト鼻汁ムチンは鼻粘膜防御機構において重要な役割を果たしていることが認められた。慢性副鼻腔炎患者から採取した鼻汁に5mMEDTA添加リン酸緩衝食塩水を加えて超音波処理後、遠心し、この上清を可溶性画分として集めた。この方法で慢性副鼻腔炎鼻汁15〓から総蛋白質量15.04mgの精製したヒト鼻汁ムチンを得た。1.ムチンの細菌に対する付着性の検討

管壁にムチンを被覆した試験管の管壁ムチン層への各種細菌の菌付着を検討した。対照としては内腔をシリコン処理した試験管を使用した。S.aureus,E.coli,K.pneumoniaeではシリコン被覆群と比較してムチン被覆群の付着菌数が有意に多く、ムチンの細菌に対する付着性が認められた。2.ムチンの細菌に対する障壁作用についてムチンを入れたソフト寒天とムチンを入れないソフト寒天を各々培地上に重層し、各種細菌がこれらのソフト寒天を通過する状態や、ソフト寒天上のコロニー形成状態を観察してムチンの障壁作用を検討した。コントロール群(培地のみの群)に比較して、S.aureus,E.coli,K.pneumoniae,P.aeruginosaの各菌液ともソフト寒天の厚い層のものでは培地の色の変化が乏しかった。また比較的高濃度のムチンが入ったものでは細菌が通過しにくく、また培地の栄養分も通過しにくいことが示唆され、細菌に対するムチン層の障壁作用が認められた。慢性副鼻腔炎患者から採取した鼻汁からヒト鼻汁ムチンを精製・抽出した。ヒト鼻汁ムチンに抗菌作用が有るか否かについて検討した。アイソセンシ培地(Oxoid社)1.8mlに各菌液(10^4CFU/ml)0.2mlを入れたものをコントロールとし、これにさらにムチン液(10μg/ml、30μg/ml、100μg/ml、300μg/ml)0.2mlを入れ、35°Cで振盪培養し、直後、30分後、1時間後、4時間後、24時間後に各々100μl抽出し、培養菌数を算定して菌の増殖程度を検討した。S.aureusについて、各過程を走査電顕で観察した。ムチン100μg/ml群の24時間後のものではムチンが厚く覆っている菌ではそうでないものに比較して菌の増殖に乏しかった。ムチン30μg/ml群の24時間後のものではムチンが覆っている菌が分裂増殖しているのがみられ、ムチン塊の下でも菌が増殖しているのが認められた。これらのことから、ムチンの抗菌作用は殺菌作用ではなくて静菌作用であると考えられた。
共振現象を誘導する構造物制御による発電の可能性

本研究では,カルマン渦列による周期的な振動により共振現象を誘導することで発電が可能を探ることを研究目的とした.研究の最終年度である平成14年度には,次のような結果を得た.1)前年度の流水路実験装置を改良し構造体の取り替えを容易にすることを実現し,併せて流れの可視化実験も実現し,カルマン渦発生による励振現象を確認した.2)発電のもととなる構造体の形状と共振振幅の関係を調べ,大きな共振振幅を得るための形状設計に対する指針を得た.3)振幅量の拡大と発電装置の改良を行い,前年度発電量の約1000倍(0.1mW)を実現した.4)今後のさらなる発電量拡大とフィードバック制御適用のための考察を行った.5)本研究の報告を(社)日本機械学会の学術講演会で発表した.これら結果のうちで,1)カルマン渦による励振の確認と2)構造物形状と共振振幅の関係の解明は,この研究テーマを発展させてゆく上で非常に重要な結果であり,今後さらに発電量を拡大させる基礎となる結果である.平成13年度は,各分野の基礎的な知見の確認,実験装置の設計・製作,共振現象発現の確認と簡単に発電可能性を確認した.まず,建設・建築分野の資料をもとに,共振現象を誘発する構造体の断面形状を決定した.そして,流水中で共振現象を確認するための流水路の設計および製作を行った.あわせて,流体力学のカルマン渦に関する知見を深め,構造体の固有振動数とカルマン渦の発生周期を一致させるために必要な知見(ストローハル数)について調査した.それら実験装置および知見をもとに流水路中で構造体がカルマン渦を励振源として共振現象を起こすことを確認した.さらに,構造体に簡易的な発電装置を取り付け,非常に微弱ではあるが発電が可能であることを確認した.また,これら結果をまとめて,(社)計測自動制御学会システムインテグレーション部門学術講演会で発表した.本研究では,カルマン渦列による周期的な振動により共振現象を誘導することで発電が可能を探ることを研究目的とした.研究の最終年度である平成14年度には,次のような結果を得た.1)前年度の流水路実験装置を改良し構造体の取り替えを容易にすることを実現し,併せて流れの可視化実験も実現し,カルマン渦発生による励振現象を確認した.2)発電のもととなる構造体の形状と共振振幅の関係を調べ,大きな共振振幅を得るための形状設計に対する指針を得た.3)振幅量の拡大と発電装置の改良を行い,前年度発電量の約1000倍(0.1mW)を実現した.4)今後のさらなる発電量拡大とフィードバック制御適用のための考察を行った.5)本研究の報告を(社)日本機械学会の学術講演会で発表した.これら結果のうちで,1)カルマン渦による励振の確認と2)構造物形状と共振振幅の関係の解明は,この研究テーマを発展させてゆく上で非常に重要な結果であり,今後さらに発電量を拡大させる基礎となる結果である.
不要繊維及びその化学的改質材料による空気及び水の浄化システムの設計と実用化

セルロース繊維(木綿、レーヨン)にNNジメチルアミノプロピルアクリルアミド(DMAPAA)のようにアミノ基をもつ幾つかのモノマーをグラフト化させた材料によって、水中の陰イオン界面活性剤LASを効果的に吸着・除去できた。さらに、アクリル酸をグラフト化したレーヨン繊維またはポリエステル材料(カットしたPETボトル)を用いると、水中に存在するアンモニウムイオン、気相中のアンモニアをよく吸着できた。このように、繊維やプラスチックの化学的改質によって、目的の分子を効果的に吸着できる材料を設計できる可能性がみられた。衣料用繊維素材の再利用による空気と水に関する環境の浄化材料の設計を研究目的とする。セルロース繊維に、モノマー:メタクリル酸メチル(MMA)、N,N-ジメチルアミノエチルアクリレート(DMAEA:興人)、N,N-ジメチルアミノプロピルアクリルアミド(DMAPAA:興人)をグラフト化した材料の製造を検討した。グラフト化はモノマー混合物(溶剤:MMA、MMA+DMAEAとMMA+DMAPAA)の溶液(メタノール-水を溶剤)に光増感剤(過酸化水素(0.3%溶液))を加えた溶液に繊維試料を漬けた状態で、紫外線を2時間照射して行った。反応後、反応混合物をメタノール中に投下し、固形物を濾別後、水またはクロロホルムで抽出してホモポリマーを除去した。生成物を乾燥後、重量増加から「みかけのグラフト率」を求めた。吸着対象物質:直鎖アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム(LAS:陰イオン界面活性剤)、セチルトリメチルアンモニウムプロミド(陽イオン界面活性剤)、ポリオキシエチレンラウリルエーテル(非イオン界面活性剤)、クロロホルム、各種アルコール。繊維試料をステンレス製の筒(カラム)または、ガラス製カラムに充填して、吸着対象物質を含む水溶液をカラムに流し込み、溶離した液を時間ごとに採取し、ガスクロマトグラフィー(GC)、または紫外線スペクトルで分析し、計算により、吸着量を求めた。結果:水中含有のクロロホルム、各種アルコールは、各種繊維によって吸着除去することが可能であった。非イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤とも、各種繊維に吸着した。陰イオン界面活性剤については、セルロース繊維と各種改質繊維について比較した。その結果、DMAEAおよびDMAPAAをグラフト化したセルロース繊維によって効果的に吸着除去可能であった。特に、DMAPAA-MMA両モノマーをグラフト化した材料(グラフト率54.1%)は未処理セルロースの1450倍の吸着量を示した。繊維素材の再利用による空気と水に関する環境の浄化材料の設計を研究目的とする。各種繊維およびセルロース繊維(木綿とレーヨン)に、モノマー:メタクリル酸メチル(MMA)、N, N-ジメチルアミノエチルアクリレート(DMAEA:興人)、N, N-ジメチルアミノプロピルアクリルアミド(DMAPAA:興人)、アクリル酸を光照射グラフト化した材料の製造と吸着特性を検討した。また、アミノ酸NCAからポリペプチドを合成して、有機化合物蒸気の吸着を行い、高分子の分子構造と吸着の関係を考察した。水中の吸着:直鎖アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム(LAS)、セチルトリメチルアンモニウムブロマイド(陽イオン界面活性剤:CTAB)、各種アルコールの各水溶液を、繊維試料を詰めたカラムに流し、溶離液をガスクロマトグラフィー(GC)、または紫外線スペクトルで分析して吸着量を求めた。アンモニアの吸着は、改質繊維をアンモニア水溶液に浸け、アンモニアの濃度変化を測定した。空気中の有機化合物の吸着:ポリグリシン、ポリ(L-アラニン)、ポリ(L-バリン)に対するアセトニトリル、メタノール、エタノール、p-キシレンの蒸気圧と吸着の関係を検討した。結果:水中含有の各種アルコールは各種繊維によく吸着した。CTABは絹フィブロインに特によく吸着した。LASについては、DMAEAおよびDMAPAAをグラフト化したセルロース繊維によって効果的に吸着除去可能であった。特に、DMAPAA-MMA両モノマーをグラフト化した材料は効果的であった。水中のアンモニアはアクリル酸グラフトレーヨンでよく除去できた。ポリ(L-アラニン)に対する有機化合物の吸着量は極性の少ない順に多くなると見られた。空気中の吸着は水中の吸着と異なり、分子構造の影響が反映されるとみられた。吸着曲線に急激な折れ線が見られ、単分子層吸着から多層吸着への変化とみた。本年度は、これまでの検討から改質しやすいレーヨンを繊維素材とした。陰イオン吸着機能を付与するために、レーヨンに、モノーマー(メタクリル酸メチル(MMA)、N, N-ジメチルアミノエチルアクリレート(DMAEA)、N, N-ジメチルアミノプロピルアクリルアミド(DMAPAA))を紫外線照射でグラフト化させた。また、アクリルアミドをグラフト化してから、Hofmann転移させてアミド基をアミノ基に変えてから、塩酸塩として、陰イオン吸着機能をもつレーヨンを製造した。陽イオン吸着機能の付与を目指して、アクリル酸を効果的に光照射グラフト化する条件を検討した。

1.水中での吸着:(1) DMAPAAをグラフト化したレーヨン(グラフト: 15.4, 33.3, 41.0.54.4%)について、直鎖アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム(LAS)の吸着実験を行った。吸着量は2.03-3.71g/g-繊維となり、高い吸着機能性材料が製造された。(2) MMAとDMAPAAの混合モノマーのグラフト化によって、効果的な吸着性能をもつ材料が作られた。(3)アクリル酸グラフト化レーヨン(グラフト率: 56.7%、93.4%)による水中のアンモニウムイオンの吸着を検討した結果、61.0、92.5mg/g-繊維の吸着量が得られた。(4)アクリルアミドーHofmann処理レーヨンは水中のアンモニウムイオンを61.0、92.5mg/g-繊維の量で吸着除去できた。2.空気中のアンモニアの吸着:アクリル酸グラフト化レーヨン(グラフト率65.3%)をアンモニア気体を充満させたデシケータ内に置いて、アンモニアを吸着させた結果、132mg/g-繊維吸着量が得られた。未処理レーヨンへの吸着量は0mg/g-繊維であった。気体の吸着について継続的に検討している。
アドホックなスケールフリーネットワークの構築法

無線やセンサシステム等におけるアドホック通信を含めた近未来のネットワークの基盤技術を探るため、1)地理的空間上で成長するスケールフリーモデル、2)連鎖的故障への防御法、3)災害時の協調的な信頼情報の収集、4)分析ツールの整備などに関して、自律分散処理やルーティングの効率化等のアルゴリズム的な観点から検討した。特に、故障や攻撃によるノード除去にも頑健でパケットの主要経路をなすショートカットの追加や応急処置的なリンク張り替えの効果が明らかとなった。災害時の故障やテロなどによる悪意な攻撃に対して分断されにくい通信インフラの構築と、被害拡大を防御しながら応急処置が施せる効果的な対策法を探ることは重要な研究課題である。本研究では、無線やセンサシステム等におけるアドホック通信への応用を念頭に、情報通信の基盤技術となり得る自律分散的なネットワークの設計原理を、トポロジー特性や耐故障性の観点から以下を中心に検討した。・人口分布に相当する、地理的空間上の疎密なノード配置で自己組織的に成長するネットワークモデルを考え、長距離リンクの発生を抑える等の地理的制約による結合耐性の脆弱化を、全く同じ次数分布でランダムにリンク張り替えして制約をなくした場合との比較からシミュレーション分析で明らかにした。国際会議を含めた国際学術雑誌等3件、電子情報通信学会の招待講演2件に発表。・災害発生時の情報収集を、住民から各地区の自治体への情報提供と、自治体間の伝達連携として捉え、石川県加賀地区における庁舎や役場の位置、及び、地震災害のハザードマップに従った発生頻度を想定して、迅速かつ信頼性の高い収集ができる連携結合の仕方を探った。研究会で発表。・初期故障源からの迂回路で過負荷が次々と起こるカスケード故障の防御策として、初期故障源に結合していたノード間の応急処置的なリンク張り替えが効果的なことを明らかにした。地理的空間上のネットワークにおけるカスケード伝搬特性の分析にも着手した。研究会で発表。これらの共通環境として、Javaのバージョンアップに伴うGUIの変更によって、これまで作成したプログラムにかなりの修正が必要となったことを契機に、入出力ファイル形式等のインターフェースを共通に定め、数値計算部分と描画関係部分を分けることにした。当初の予定には含まれてなかったが、分析ツールのプラットホーム化を整備する上で必要に応じて今後も継続的に実施する。災害時の故障やテロ等による悪意のある攻撃に対して,分断されにくい通信インフラの構築と,現実的な地理的空間上のネットワークに適した方策を探ることは重要な研究課題である。本研究では,近未来のアドホック通信への応用を念頭に,情報通信の基盤技術となり得る自律分散的なネットワークの設計原理を,トポロジー特性,耐故障性,ルーティングの効率性等に着目したアルゴリズム的な観点から検討し,本年度は以下の成果を得た。・地理的空間上に構築されるスケールフリーネットワークモデルを提案し,その地理的制約から生じる結合耐性の脆弱化が少量のランダムなショートカットの追加で劇的に改善できることを数値シミュレーションから明らかにした。また,この改善案がドロネー三角分割など他のネットワークにも現実的かつ効果的に適用できることを示唆した(学術論文や国際会議発表など)。・上記のショートカットがパケット転送に主要なバックボーンとなり得ることを定量的に分析したり,コミュニティ構造を考慮した情報伝搬の影響などについても着手した(国際会議各1件ずつ)。・災害発生時の情報収集を,住民から各地区の自治体への情報提供と,自治体間の伝達連携として捉えて,石川県加賀地区における庁舎や役場の位置,及び,地震災害のハザードマップに従った発生頻度を想定して,迅速かつ信頼性の高い収集ができる連携結合の仕方を探り,国際会議2件に発表した。さらに,加賀地区の人口分布データを上記に活用する準備を整え,過密過疎を招く県や市町村の人口分布を確率過程モデルのパラメータ推定から再現できることを示した(学術論文や国際会議発表など)。こうした成果を,書籍2冊,学会誌や科学雑誌2件,招待講演2件などにおいて積極的に公開した。災害時の故障やテロ攻撃でも分断されにくい通信網の構築と、現実的な地理的空間上のネットワークに適した方策を探るため、近未来のアドホック通信への応用を念頭とした基盤技術となり得る自律分散的なネットワークの設計原理を、トポロジー特性、耐故障性、ルーティングの効率性等に着目したアルゴリズム的な観点から検討した。・地理的空間上でのスケールフリー(SF)ネットワークの脆弱性の改善法として、少量のランダムなショートカットの追加がハブ攻撃で分断されたクラスタを橋渡しするのみならず、多くのパケットを流す主要経路としても寄与することを定量的に明らかにした(国際学術論文1件)。・上記よりも耐故障性が高い幾何学的なネットワーク構築法を新たに提案して、実際の人口分布に従ったノード(無線基地局)配置から、リンク長や最短経路長、及び、分散ルーテイング法に関する優れた特性を示した(国際学術論文1件+国内外研究会各1件)。・SFネットワーク上の局所情報による確率的ルーティング法に着目して、平均パケット転送時間や待ち時間を最小化する際のパラメータに依存した経路ホップ数とキューへのトラップに関するトレードオフを発見した。

特に、ノードの転送能力が低い時は、ハブを経由して経路を短くしても渋滞する反面、ハブ回避の長い迂回路でも時間がかかり、それらの中間的なランダムな経路選択がむしろ得策となることも示した(国際会議1件)。・既存ツールでは対処できない大規模複雑な分析について、独自のプラットホームを整備してきた。中でも、JavaRMI分散処理で計算の効率化が図れる点と、ネットワーク耐故障性やパケット転送特性などの解析が行える点がユニークで、今後は研究コミュニティを中心に共同開発していくことを検討中(国内研究発表2件)。また、この新分野の国内外の研究動向を学会誌や科学雑誌にも紹介して、最終年度のまとめを行った。
関節リウマチと骨粗鬆症の接点をなす分子複合体の機能解析

我々は、関節リウマチ(RA)の原因を解明するために研究を進め、滑膜細胞にちなんだ遺伝子シノビオリンのクローニングに成功した。シノビオリンは、小胞体関連分解で機能するE3ユビキチンリガーゼで、RA滑膜細胞に過剰発現しRAの発症因子となることを示した。さらに、シノビオリンはがん抑制遺伝子であるp53を基質とすること、シノビオリン遺伝子欠損マウスは肝臓でのアポトーシスの亢進により胎生期に致死となること、線維化形成にも深く関与することを明らかとした。シノビオリンの機能を考える上でp53以外の基質の同定が重要となるため、探索を行った結果Synovial antigen X-2(Sax2)と呼ぶ分子を同定した。Sax2遺伝子欠損マウス(Sax2-/-)は老化現象が加速した表現型を示すことが明らかとなり、その中でも今後の高齢化社会に重大な問題となると考えられる高代謝回転型の骨粗鬆症を呈していることが明らかとなった。詳細な解析のため、野生型、Sax2-/-より骨髄細胞を採取し、破骨細胞分化能の差を検討した結果、野生型に比べSax2-/-由来骨髄細胞では破骨細胞形成能が上昇していることが明らかとなった。また、マウスマクロファージ由来細胞株RAW264.7細胞が破骨細胞へ分化する条件下でSax2タンパク質を添加した結果、コントロールタンパク質を添加した場合と比較し破骨細胞形成能が減少していることが明らかとなった。さらに、卵巣摘除による骨粗鬆症モデルを作成し、このマウスにSax2タンパク質を投与した結果、コントロールタンパク質を投与した場合に比べ骨密度の低下が抑制されていることが明らかとなった。以上の結果から、Sax2は細胞レベル・個体レベルにおいて破骨細胞形成抑制効果を持つことが明らかとなり、Sax2タンパク質が骨粗鬆症治療に有効となる可能性を示すことができた。これまで我々は関節リウマチの原因解明のため研究を進めた結果、関節リウマチの発症因子となるE3ユビキチンリガーゼシノビオリンをクローニングした。シノビオリンの機能を考える上で基質の同定は非常に重要であるため、次にシノビオリン基質の探索を行った結果、Yeast two hybrid法によりSynovial antigen X-2(Sax2)とよぶ分子を同定した。そこで、Sax2の生体内における機能を明らかにする目的でSax2遺伝子欠損マウス(Sax2^<-/->)を作製し解析した結果、Sax2^<-/->は老化現象が加速した表現型を示すことを明らかとした。Sax2^<-/->が加齢に伴う疾患のうち、今後わが国にとって重大な問題になると考えられる骨粗鬆症を発症したことは特筆すべきことである。そこで、Sax2^<-/->の骨組織を予備的に解析したところ、Sax2^<-/->は破骨細胞の機能が亢進した高代謝回転型の骨粗鬆症を呈していることを確認した。そこで、本研究では老化に伴う疾患の中でも特に重大と考えられる骨粗鬆症に着目し、Sax2の破骨細胞形成抑制能の分子メカニズムを解明することを目的とした。はじめに野生型、Sax2^<-/->より骨髄細胞を採取し、M-CSF、RANKLを添加培養し破骨細胞へ分化誘導し、TRAP染色による形態観察を行い破骨細胞分化能の差を検討した。その結果、野生型より採取した骨髄細胞を用いた場合と比較し、Sax2^<-/->より採取した骨髄細胞を用いた場合では破骨細胞形成能が上昇していることが明らかとなった。また、マウスマクロファージ由来細胞株RAW264.7細胞にRANKLを添加し破骨細胞分化誘導条件下で、Sax2タンパク質を添加し破骨細胞分化能の差を検討した。その結果、コントロールタンパク質を添加した場合と比較しSax2タンパク質を添加した場合、破骨細胞形成能が減少していることが明らかとなった。

さらに、卵巣摘除による骨粗鬆症モデルを作成し、このマウスにSax2タンパク質を投与した結果、コントロールタンパク質を投与した場合に比べ骨密度の低下が抑制されていることが明らかとなった。以上の結果から、Sax2は細胞レベル・個体レベルにおいて破骨細胞形成抑制効果を持つことが明らかとなり、Sax2タンパク質が骨粗鬆症治療に有効となる可能性を示すことができた。
へーゲル及びドイツ観念論における生命論研究-生命倫理問題の哲学的基礎付けに向けて

本研究は、ヘーゲルにおける「生命(Leben)」論の研究から開始され、第二に、それをJ.W.v.Goethe、I.Kant、J.C.F. Hoelderlinら、ドイツ観念論者たちの「自然(Natur)」概念との相関関係から明らかにすることを目指す。第三に、いわゆる「ドイツ観念論哲学」の枠には収まらない、同時代の自然哲学者・生物学者たちとの思想的相互関係をも視野にいれ、L.Oken, J.F.Blumenbach、そして自然哲学者としてのF.W.J. v.Schellingの見解も研究対象としたものである。1基礎文献研究本研究は、ヘーゲルおよびドイツ観念論哲学にかかわる以下のような基礎的な文献研究が中心になる。今年度はヘーゲルの哲学文献研究が主となり、その周辺テキストにかかわる研究は次年度の課題である。(1)論文「健常者にとっての障害者と障害者にとっての健常者」(08年3月)(2)論文「排中律とは何か-ヘーゲルを手がかりにー」(08年4月予定)(3)デカルト『省察』についての一省察(口頭発表哲学研究会,学士会館08年2月)他。2生命倫理問題への実践的連携以上の基礎的な文献研究を踏まえ、その成果を実践的なフィールドに換言した成果は、主として以下のものになる。(1)東大グローバルCOE「死生学の展開と組織化」冬季セミナー「医療・介護者のための死生学」(東京大学、2008年1月)「死生学」教育という新たな分野を拓く本COEの冬季セミナーに参加。ホスピス、病院、介護施設など医療関連の現場のみならず、学校教育現場における「いのちの教育」の可能性を考えるセミナー。哲学、宗教学、社会学、医学など多方面のセミナーが開催され学際的な研修となる。(2)平成19年度治験・臨床研究倫理審査委員研修(国立がんセンター)治験審査委員会、臨床研究を審査する倫理審査委員会委員の役割、審査内容、審査資料等に関する研修会に参加(修了授与)。報告者は自治医科大学附属病院治験審査員、花王株式会社研究倫理審査委員その活動を研修会のワークショップで発表および討論。とりわけ外部委員としての役割や日本における治験、臨床研究の現状について、他の参加者との情報・意見交換などを通じ、新たな知見をえる。(他)1基礎文献研究本研究は、ヘーゲルおよびドイツ観念論哲学にかかわる以下のような基礎的な文献研究が中心になる。(1)論文「排中律とは何か-ヘーゲルを手がかりに-」(08年4月)(2)調査「ヘーゲル論理学に関する邦語文献の動向調査(二〇〇一二〇〇七年)(08年12月)2生命倫理問題への実践的連携以上の基礎的な文献研究を踏まえ、その成果を実践的なフィールドに換言した成果は、主として以下のものになる。(1)平成20年度治験・臨床研究倫理審査委員研修(厚生労働省)治験審査委員会、臨床研究を審査する倫理審査委員会委員の役割、審査内容、審査資料等に関する研修会に参加(修了証書授与)。
口コミに関する脳情報を用いた購買意思決定支援システムの開発

近年,脳機能計測技術が発展し,ニューロマーケティングへと応用されている.本研究では,購買意思決定要因の1つである口コミに着目し,NIRSを用いて口コミ閲覧時の脳活動を計測し,計測結果を用いて,オフラインにて判別を行った.分類手法には線形判別,隠れマルコフモデル,サポートベクターマシンを用いた.解析の結果,判別精度は約70%となり,脳活動を利用した新しい購買意思決定支援システムの可能性を示すことができた.近年,急速に発展している非侵襲的脳機能計測技術は福祉分野をはじめ様々な分野に応用されているが,本研究では,脳活動から消費者心理などを明らかにし,これを応用するニューロマーケティングに着目し,特に消費者の購買意思決定に影響を与えると考えられる口コミが脳活動に与える影響に関する研究を行った.本研究では,脳活動の計測機器としてNIRS(OEG-16)を用いた.本研究で用いたNIRSは小型かつ拘束性が低いため,このような機器で十分な精度を得ることができれば,日常的な脳活動を用いたシステムの構築が可能になることが期待できる.本研究における実験では,口コミに対する脳活動を対象とするため,口コミ以外の要因を排除するために価格が統一されている映画の口コミを対象とした.実験は被験者30名に対して行い,1被験者は口コミを78件閲覧する.実験ではポジティブな口コミとネガティブな口コミを用意し,被験者はこれらの口コミに対して,「良い」,「どちらでもない」,「悪い」の3択の評価を行う.前年度の研究において,「良い」と「悪い」,「良い」「悪い」と「どちらでもない」の脳活動には有意差が見られたため,さらに判別が可能であるかの検討を行った.判別のための特徴量として,時間領域,周波数領域の両方を検討し,さらに,口コミ閲覧時のどの時間帯を用いるかも複数のパターンを用いるなどの工夫を行った.判別器にはLDA,HMM,SVMを用いた.検証の結果,「良い」と「悪い」の口コミの判別率,「良い」「悪い」と「どちらでもない」の判別率は共におよそ70%の精度を得ることができた.十分な精度であるとは言い難いが,購買意思決定の補助として利用できる可能性を示すことができたと考えられる.また,これらの研究成果は,福祉分野,口コミ以外の購買意思決定要因(価格)にも応用することができた.近年,脳機能計測技術が発展し,ニューロマーケティングへと応用されている.本研究では,購買意思決定要因の1つである口コミに着目し,NIRSを用いて口コミ閲覧時の脳活動を計測し,計測結果を用いて,オフラインにて判別を行った.分類手法には線形判別,隠れマルコフモデル,サポートベクターマシンを用いた.解析の結果,判別精度は約70%となり,脳活動を利用した新しい購買意思決定支援システムの可能性を示すことができた.本研究では,近年急速に発展している非侵襲的脳機能計測技術をニューロマーケティングに応用することを主目的とし,その1つとして口コミが脳活動に与える影響に関する基礎研究を行った.本年度は口コミ閲覧時の脳活動をNIRS(OEG-16)を用いて計測する実験を行った.本実験で用いたNIRSは小型であり,この小型計測機器で十分な精度を得ることができれば,システムの小型化にも貢献することができると考えられる.まず,実験タスクに関して検討を行った.実験を行う際には商品に関する口コミ閲覧時に口コミ以外の要因(例えば、選好や価格)を排除しなければならない.そこで,実験用の商品として,映画を対象とした.映画はすべて価格が統一されているため,価格に関する影響が少なくなると考えられる.また,選好を排除するために,最初に映画のポスターを提示することで,予めどのような映画であるかを提示し,この時に選好に関する脳活動が現れるように工夫した.まず,予備実験として被験者は5名に対して実験を行った.この際口コミに関する評価を6段階にしたが,分析の結果,このような細かい評価では脳活動への影響がわかりにくいことが分かった.そこで,本実験では評価は「悪い(ネガティブ)」,「どちらでもない」,「良い(ポジティブ)」の3段階とした.被験者30名に対して実験を行い分析を行った.分析では,時間領域ではローパスフィルタによりノイズ除去を行った.また,周波数領域では低周波成分に着目した.評価が「良い」と「悪い」,「良い」「悪い」と「どちらでもない」の脳活動データ群に対してt検定を用いて分析した結果,個人差はあるものの有意な差がある部位があることが分かった.次年度はさらに,これらを判別することができるかの検討を行う予定である.本年度は,口コミ閲覧時の脳活動を測定し,ポジティブな感情とネガティブな感情がどの部位に現れるかを特定することを主目的として研究を行った.実験計画では,商品として映画を対象とすることで,価格に関する要因を排除することができたと考えられる.また,商品の提示方法を工夫することで,選好に関する要因を排除することができたと考えられる.また,口コミも1,2文程度を対象とするように要約を作成した.以上より,実験タスクとしては十分な検討を行い,実験用のプログラムを作成することができたと考えられる.実験に関しては,まず予備実験によって,上記で作成した実験計画の検討を行った.その結果,口コミの評価を多くすると分析が難しくなる可能性があることが分かったため,口コミの評価を6段階から3段階に減らした.3段階の口コミ評価に対して被験者30名に対して実験を行った.

当初の予定では50名であったが,予備実験をいれると35名に対して実験を行うことができたため,十分なデータが取得できたと考えられる.分析に関しては,時間領域,周波数領域の2つの領域に関して分析を行った.どちらの領域もノイズと考えられる高周波成分を除去した.分析では良い口コミと悪い口コミなどに対してt検定を行った.その結果,有意な差がある部位があることが分かった.しかし,個人差などがあり,共通する特定の部位があるかについては十分な検討を行うことができなかった.以上より,本年度の研究は研究目的に対して,おおむね順調に進展していると考えられる.今後の研究計画として,本年度の研究により,良い口コミと悪い口コミを閲覧している時には脳活動に違いがある可能性があることが分かったため,システムとして構築するためには,これらをシステムが自動で判別する必要があると考えられる.そのため,今後は脳活動から,口コミを閲覧した時に被験者が口コミに対してポジティブに感じているか,ネガティブに感じているかを判別するシステムを構築することを目的とする.まず,判別するためには,脳活動から特徴量を抽出する必要があるが,本年度に行ったt検定のほかに,主成分分析や感覚概念の導入など複数の特徴量について検討する予定である.さらに,時間領域,周波数領域の両方の領域について検討する.また,判別手法として,Support Vector Machine,隠れマルコフモデル,線形判別モデルなど複数のモデルにより検討する予定である.さらに,口コミに対する評価の度合いと脳活動に関する関係を再度検証し,ニューラルネットワークを用いて,評価の度合いも推定できるかを検討する予定である.以上の検討に基づき,口コミ閲覧時の評価から,その被験者に対して他の商品を推薦したり,閲覧した商品群に対して順位づけを行うようなBrain-computer Interfaceの開発を行うことを最終的な目標として研究を行う予定である.本年度は実験被験者が予定より15名少なかったため,今後はできる限り多くの被験者に対して実験を行いたいと考えている.多くの実験を行うに伴い,NIRSの頭部につけるヘッドバンドやセンサの劣化が考えられるため,ヘッドバンドやセンサを新たに購入することを検討したいと考えている.また,研究成果をより多くの学会で発表したいと考えている.以上の項目に対して研究費を使用する予定である.
ネフローゼ症候群における蛋白尿発症機構への遺伝学的アプローチと機能的解明

近年,研究者は日本人ネ症のGWAS解析を行い,GPC5とSULF2を初めて同定し,マウスのネフローゼ症候群(ネ症)モデルを樹立して機能的な証明を行った.PLA2R1とHLA-DQ1は膜性腎症で疾患感受性遺伝子として欧米より報告されている.本検討では,SULF2遺伝子欠損マウスのネ症でSULF2は保護的に働くことを見いだした.次に,膜性腎症でPLA2R1を網羅的解析し,日本人特有なSNPを初めて発見した.HLAの感受性領域と同SNPの交互作用は,リスクを17倍以上にすることが初めてわかった.本検討では,日本人固有なネ症の発症様式を見いだすと共に,ネ症に共通な経路を明らかにすることができた.近年,研究者は日本人ネ症のGWAS解析を行い,GPC5とSULF2を初めて同定し,マウスのネフローゼ症候群(ネ症)モデルを樹立して機能的な証明を行った.PLA2R1とHLA-DQ1は膜性腎症で疾患感受性遺伝子として欧米より報告されている.本検討では,SULF2遺伝子欠損マウスのネ症でSULF2は保護的に働くことを見いだした.次に,膜性腎症でPLA2R1を網羅的解析し,日本人特有なSNPを初めて発見した.HLAの感受性領域と同SNPの交互作用は,リスクを17倍以上にすることが初めてわかった.本検討では,日本人固有なネ症の発症様式を見いだすと共に,ネ症に共通な経路を明らかにすることができた.難治性疾患の中でネフローゼ症候群は本邦では頻度の高い疾患であり(推定患者数約3万),種々の病態生理により最終共通経路である大量の蛋白尿を呈するに至る.ネフローゼ症候群の発症様式を解明するには,大量蛋白尿制御と疾患発症成因の制御の2方向からのアプローチが必要である.本研究チームは,前者の観点からネフローゼ症候群の症例を対象にゲノムワイド関連解析(GWAS)を行い,fibroblast growthfactor(FGF)作用を修飾する遺伝子のグリピカン[GPC]を疾患感受性遺伝子として同定した.特に,糸球体上皮細胞特異的にGPC5遺伝子発現を減弱させると,マウスネフローゼ症候群モデルにおいて蛋白尿を大幅に低減できることが判明し,膜型機能性ヘパラン硫酸プロテオグリカン(HSPG)の一つであるGPC5の重要性を世界で初めて証明した(Nat Genet 43 : 459, 2011).この研究では,GPC以外にもSULF及び疾患感受性遺伝子GeneX(オッズ比3以上,genome-wide significance)を得ており,さらに研究を進める必要がある.また,疾患発症の観点からは,近年PLA2RとHLA-DQ1がネ症の一角を占める膜性腎症発症に強く関与することが欧米より報告されたことを踏まえ,本研究では研究チームの保有するゲノム検体を用いて検討を加える.次世代遺伝子解析装置ionPGMにより,国際的にも精確な疾患感受性領域の絞り込みの手法を本学より発信する.本研究によりネ症の発症様式への理解を深め,最適な蛋白尿制御法,疾患制御に結びつく診断指標の発見を最終目標とする.難治性ネフローゼ症候群(ネ症)は本邦では頻度の高い疾患であり(推定患者数約3万),種々の病態生理により最終共通経路である大量の蛋白尿を呈するに至る.従って,ネ症には大量蛋白尿制御と疾患発症制御の2方向からのアプローチが必要である.研究チームは,前者の観点からネ症患者を対象にゲノムワイド関連解析(GWAS)を行い,fibroblast growth factor(FGF)作用を修飾する2遺伝子(グリピカン[GPC],スルファターゼ[SULF])を疾患感受性遺伝子として同定した.さらに,糸球体上皮細胞特異的にGPC5遺伝子発現を減弱させると,マウスネ症モデルにおいて蛋白尿を大幅に低減できることが判明し,膜型機能性ヘパラン硫酸プロテオグリカン(HSPG)の一つであるGPC5の重要性を世界で初めて証明した(Nat Genet 43:459, 2011).更に,SULF及び疾患感受性遺伝子Gene X(オッズ比3以上,genomewide significance)を得ておりさらに研究を進める必要がある.疾患発症の観点からは,近年PLA2RとHLA-DQ1がネ症の一角を占める膜性腎症発症に強く関与することが欧米より報告されたことを踏まえ,本研究では研究チームの保有するゲノム検体を用いて遺伝子多様性を検討し,本邦でのネ症疾患感受性遺伝子,重症化や組織学的変容を惹起する多様性を検証する.本研究によりネ症の発症様式への理解を深め,最適な蛋白尿制御法,疾患制御に結びつく診断指標の発見を最終目標とする.我が国におけるネフローゼ症候群(ネ症)罹患患者は,約3万人である.ネ症は,腎病理診断によらず基準により診断が賦与されてきた.近年,研究者グループでは日本人ネ症のGWAS解析を行い,GPC5とSULF2を初めて同定し,GPC5ではその機能を抑えることにより,マウスネ症のタンパク尿減弱を認め,機能的な証明を得た.そして,PLA2R1とHLA-DQ1は,ネ症の中の膜性腎症で,疾患発症に関与する遺伝子として欧米より報告されている.

本年度は,膜性腎症でPLA2R1を網羅的に解析することで,日本人に特有なSNPを初めて発見した.HLAの網羅的なタイピングで見いだした感受性領域と同SNPの交互作用は,膜性腎症発症のリスクを17倍以上にも押し上げることが初めてわかった.2nd. Cohortを確保しており,現在validation中である.この研究成果により,研究期間内に提案したほぼ全てにおいて,プログレスを示すことができたと思われ,全容については最終報告を参照されたい.26年度が最終年度であるため、記入しない。腎臓病学26年度が最終年度であるため、記入しない。DBF1によるネフローゼモデルを開発した.そのモデルを用いてSULFを検討する.DBF1は,C57B/6とDBAの2系統のマウスのF1を用いる必要がある.C57B/6とDBAのSULF遺伝子欠損マウスを作製し,2系統においてバッククロスを行った.その過程で,SULF遺伝子欠損マウスでの生後の致死率が30%と予想以上に高く増仔に時間を要しているため.また,これにより施設管理費等が増大している.SULFに関するゲノム解析を終了し、疾患感受性遺伝子であることを突き止め、更に機能解析としてSULFの遺伝子欠損動物によるデータが集積しつつあるから。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究申請時に,次世代遺伝子解析装置を用いて重症化や組織学的変容を惹起する多様性を検証すると提案した.一方で,次世代遺伝子解析装置は一つ一つの塩基を確率論的に決定する手法をとるが,精度の点で多様性を論ずるには本研究の枠内では困難である.これはビジネス判断とアカデミア判断の乖離でもある.SULFの遺伝子上流部分の解析によりGenome wide significanceを満たす候補遺伝子をハプロ解析により見いだしたことを受けて、機能解析へと進んでいる。昨年度末にSULFのBDF1系統での遺伝子欠損マウスの樹立に成功した。BDF1はC57/B6及びDBA2において7世代の交配の後にF1としする手間を充分にかけた手法で樹立した。この動物を用いたマウスネフローゼモデルの解析が現在進行しており、一定の結果を得つつある。また、SULFの下流のシグナルに関する解析も進みつつある。一方、日本人のネフローゼ症候群のなかでも、PLA2が関与しているのは膜性腎症のみであることを確認した。膜性腎症ではHLAの関わりが深いことが以前より知られているが、HLAの充分なタイピングはこれまで実施・報告されたことがないため、本年度その点について検討を深める方針である。一方,次世代遺伝子解析装置を本研究を精確に進めるために用いることは,より理に叶っており,その手法を国際的に示すことは極めて価値が高い.SULFについてこれまでのハプロ解析で得られた領域を詳細に解析をすすめる.
扁桃病巣疾患における口蓋扁桃摘出術の基礎・臨床的エビデンスの構築

IgA腎症、掌蹠膿疱症、胸肋鎖骨過形成症は典型的な扁桃病巣疾患とされ、扁桃摘出術で症状、所見が改善する。しかし、本疾患概念は他科の医師には浸透していない。我々は扁桃病巣疾患における扁桃摘出術の有効性を基礎的、臨床的に証明し、他科医師への疾患概念の啓蒙、扁桃摘出の有効性を予測する因子の解明を目指している。今回の検討では掌蹠膿疱症において客観的な皮疹スコア(PPPASI)での評価でもその有効性が証明された。また、APRILが病因となる扁桃のIgA過剰産生に寄与していること、扁桃T細胞がCXCR3、CX3CR1を介して腎糸球体へ移行し腎炎を増悪させていることを明らかにした。1臨床学的検討扁桃病巣疾患患者にて当科にて扁桃摘出術(以下扁摘)を施行した患者(掌蹠膿疱症100例、IgA腎症100例)をデーターベース化し、その有効性を検討した。その結果、掌蹠膿疱症では8割以上の患者に皮疹の改善を認め、IgA腎症ではその6割の患者に尿異常所見の寛解を認めた。今後はさらにその効果に影響を与える因子等、検討を続ける予定である。2ホーミングレセプターを介した病巣へのT細胞の浸潤IgA腎症における扁桃T細胞上のCXCR3やCX3CR1の発現解析を続けている。IgA腎症群では扁桃や末梢血CXCR3陽性T細胞数は他の扁桃疾患にて扁摘を施行した群と比較し増加していた。さらに、末梢血での陽性細胞数は扁摘後低下を認めた。さらに、免疫染色においてIgA腎症糸球体周囲に浸潤したCXCR3陽性細胞、CX3CR1陽性細胞を確認した。現在、口腔内常在細菌(掌蹠膿疱症:α溶連菌、IgA腎症:パラインフルエンザ菌)や細菌由来DNA(CpG-ODN)で扁桃単核球を刺激し、T細胞上のCXCR3、CX3CR1の発現変化を検討している。さらに機能解析としてトランスウェルを使用してマイグレショーンアッセイを施行している。3IgA腎症扁桃におけるIgA過剰産生IgA腎症におけるAPRIL(A ProlifeRation-Inducing Ligand)の発現について検討を続けている。IgA腎症扁桃リンパ球はCpG-ODN刺激にてAPRILを過剰産生し、またそのB細胞は同刺激にてAPRIL受容体であるTACI(Transmembrane activator/calcium modulator and cyclophilin ligand interactor)の発現を亢進することが明らかとなった。さらにTACI阻害抗体添加にて扁桃リンパ球のIgA産生低下が認められた。現在APRILにて刺激し、IgAの産生が亢進するかどうか、また患者血清での発現、術後変化などを検討している。2ホーミングレセプターを介した病巣へのT細胞の浸潤IgA腎症における扁桃T細胞上のCXCR3、CX3CR1発現解析を行った。IgA腎症群では扁桃や末梢血のCXCR3陽性CD3陽性T細胞数、CX3CR1陽性CD8陽性T細胞数は他の扁桃疾患にて扁摘を施行した群と比較し増加していた。さらに、免疫染色においてIgA腎症糸球体周囲に浸潤したCXCR3陽性、CX3CR1陽性細胞を確認した。細菌由来DNA(CpG-ODN)における扁桃単核球の刺激実験では、CXCR3陽性CD3陽性T細胞数は増加し、CX3CR1陽性CD8陽性T細胞数は低下を認めなかった。トランスウェルでのマイグレショーン実験では、そのリガンドであるIP-10、フラクタルカインにてIgA腎症扁桃単核球では遊走細胞数が増加した。3IgA腎症扁桃におけるIgA過剰産生IgA腎症におけるAPRIL(A ProlifeRation-Inducing Ligand)の発現について検討を行った。また、APRIL刺激実験では、CpG-ODN存在下で非存在下に比較して、IgA腎症扁桃におけるIgAの産生が亢進していた。また患者血清での発現、術後変化の検討では、IgA腎症群にて習慣性扁桃炎群と比較して、血清APRIL値が高く、術後低下を認めた。今回の科研申請において申請した平成27年度の計画はおおむね順調に進んでいる。

結果が我々の予想にほぼ沿ったものだったため、迷わず次の実験に移行できたのが最大の理由と考えられる。また、本研究は扁桃摘出術がないと検体が得られず、研究自体が滞るが、長年の演題発表や総説執筆などの効果が現れたのか、各施設より紹介して頂く症例が増え、検体が得られる機会が増加した。1臨床学的検討扁桃病巣疾患患者にて当科にて扁桃摘出術(以下扁摘)を施行した。その結果、掌蹠膿疱症9割以上の患者に皮疹の改善を認め、IgA腎症ではその6割の患者に尿異常所見の寛解を認めた。2ホーミングレセプターを介した病巣へのT細胞の浸潤IgA腎症群では扁桃や末梢血のCXCR3陽性、CX3CR1陽性T細胞数は他の扁桃疾患にて扁摘を施行した群と比較し増加していた。さらに、末梢血での陽性細胞数は扁摘後低下を認めた。さらに、免疫染色においてIgA腎症糸球体に浸潤した陽性細胞を確認した。細菌由来DNA(CpG-ODN)における扁桃単核球の刺激にて陽性細胞数は増加していた。マイグレショーン実験では、各リガンドにて遊走細胞数が増加した。3IgA腎症扁桃におけるIgA過剰産生IgA腎症扁桃リンパ球はCpG-ODN刺激にてAPRIL(A ProlifeRation-Inducing Ligand)を過剰産生し、またそのB細胞は同刺激にてAPRIL受容体の発現を亢進していた。さらに阻害抗体にてIgA産生低下が認められた。また、APRIL、CpG-ODN共刺激実験では、IgAの産生がより亢進した。また患者血清では、IgA腎症群にて血清APRIL値が高く、術後低下を認めた。4IgA腎症扁桃における糖鎖不全IgA産生新発売された糖鎖不全IgAエライザキットを購入し、扁桃リンパ球培養後の上清の糖鎖不全IgAを測定している。5CD25+CD4+制御性T細胞の機能異常IgA腎症扁桃のCD25+CD4+ T細胞の出現頻度、FoxP3遺伝子の発現は、習慣性扁桃炎扁桃に比較し低値であったが、有意差はみられなかった。IgA腎症扁桃においてFoxP3の発現低下と血清IgA値に関連性があった。6病巣扁桃におけるTh17細胞扁桃リンパ球でのTh17細胞(CD4+IL-17+細胞)数を解析している。IgA腎症、掌蹠膿疱症、胸肋鎖骨過形成症は典型的な扁桃病巣疾患とされ、扁桃摘出術で症状、所見が改善する。しかし、本疾患概念は他科の医師には浸透していない。我々は扁桃病巣疾患における扁桃摘出術の有効性を基礎的、臨床的に証明し、他科医師への疾患概念の啓蒙、扁桃摘出の有効性を予測する因子の解明を目指している。今回の検討では掌蹠膿疱症において客観的な皮疹スコア(PPPASI)での評価でもその有効性が証明された。また、APRILが病因となる扁桃のIgA過剰産生に寄与していること、扁桃T細胞がCXCR3、CX3CR1を介して腎糸球体へ移行し腎炎を増悪させていることを明らかにした。今回の科研申請において申請した平成26年度の計画はおおむね順調に進んでいる。予備実験などを申請前に十分に行なっていたので、予想にほぼ沿った結果が得られた。その結果、迷わず次の実験に移行できたのが最大の理由と考えられる。1臨床学的検討更なる症例を蓄積し、データーベース化を行い、扁桃摘出の効果とそれに影響を与える因子などを解析する。2ホーミング
充実した生活の信念の観点からの留学生の異文化適応ー滞在文化の学生への影響を中心に

留学生比率の高い(10%以上)大学(A)、留学生のビジビリティーの高い(西洋人留学生の多い)大学(B)、および留学生の少ない大学(C)の学生を対象に、3つの研究を実施した。研究1では、学生の1異文化間コンピテンス、2文化的感受性、3潜在的連合テスト(IAT)による人種偏見などを調べた。その結果、異文化間コンピテンスにおいて大学Cに比べてAとBは有意に高かったことが判明した。研究2では、上記の3大学に於いて、日本人学生が特に強い偏見を持つと思われる中国人を刺激対象とした想定された接触(imagined contact)のエピソードを読ませ、上記2および3の事前事後の変化を追った。その結果、全体的に中国人に対する偏見は傾向差として軽減されたものの、文化的感受性には有意な変化は確認されなかった。また、各大学の比較において特に有意な結果はなかった。最後に、現在進行中の研究3では、留学生と日本人学生がワークショップ形式で毎週授業に参加する科目において、学期始めと学期末の間で、どの程度上記の1、2、3が変化するのかを、縦断的に調査を実施している(7月末完了予定)。これらの研究から次の結論に至った。1)留学生の比率が高くても、日本人学生との交流の質と量が確保されないと、大学の国際化としての効果は見込めない2)実際の留学生との交流よりも、想定された交流(Imagined Contact)のほうがより顕著な効果をもたらす。留学生受入よりも国際教育の実践のほうが日本人学生の国際化に貢献するということが示唆される。27年度が最終年度であるため、記入しない。研究目的は、日本人学生の「充実した生活観」を明らかにし、同様に留学生(特にこれまでの研究で扱ってきた中国・インド・東南アジア・北米出身者中心に)との違いを検討することであった。これにあたり、「充実した生活観」に関する価値観の違いがコミュニケーションや相互理解、また留学生の異文化適応にどのような影響を持つかを質問紙調査および面接調査を行った。縦断研究のため、複数回追跡調査が必要のため、留学生の調査協力が得にくく、サンプリングが十分に取れていない状況にある。今後サンプリング方法を再検討し、調査協力への動機づけを上げることを工夫する。引き続き初年度予定の調査を継続し、同時に日本人学生を対象として第2の研究に着手する。この研究では留学生が日本人学生にどのような影響を与えるのかを調べる。国立大学の学生を対象に、留学生が多数在籍する大学と少数の大学を比較し、留学生との交流頻度、関わり方、交流満足度など、国際交流の量および質の両観点日本人学生の文化的感受性、多様な価値観の受容力、グローバル・パースペクティブ、異文化コミュニケーション・コンピテンスなどへの影響を質問紙調査によって検討する。また、それぞれの大学の留学生・日本人の交流の実態やそれを促進するための取組や合同授業などの実践についての聞き取り調査を行い、単なる受入数による量的な指数ではなく、質的な問題についても言及する。本研究の成果も国内外の学会において発表し、海外のジャーナルに論文として投稿する。
植物の細胞周期関連因子による細胞質分裂の制御機構

細胞板の形成を伴う細胞質分裂は植物に特徴的なプロセスであり、分裂の方向性を決定する上でも重要である。そこで、本研究ではM期に働くサイクリン依存性キナーゼ(CDK)とサイクリンの特異的な複合体を解析し、その基質の単離を通して細胞質分裂における生理的役割を明らかにすることを目指した。本年度はG2M期で発現するCdc2Os3と特異的に結合するサイクリンとして、CycOs4の他にCycOs2を同定した。CycOs2はCycOs4と同様にB2タイプのサイクリンに属する。しかし、CycOs4を酵母で発現させると生育阻害を起こすのに対し、CycOs2は生育阻害を起こさなかった。したがって、植物細胞のG2M期においても機能的な役割分担をしていることが考えられる。これらのCDK/サイクリン複合体が活性型か否かを解析するために、昆虫細胞で組換えタンパク質を発現させ、ヒストンに対するキナーゼ活性を調べている。一方、G2M期で発現するCDKの制御機構をさらに解析する目的で、アラビドプシスのB2タイプのCDK(CDKB2)を単離し、これをbaitとして用いてCDKB2と相互作用する因子をアラビドプシスのcDNAライブラリーから酵母two-hybrid法により探索した。その結果、Cks1の他にDタイプのサイクリンがCDKB2と相互作用することが明らかになった。アラビドプシスには複数種のサイクリンDが存在するが、今回のスクリーニングで単離されたものは1種類のサイクリンに限られていた。この結果は、CDKB2が特定のサイクリンDと結合しG2M期を制御していることを示している。一般に、サイクリンDは外的刺激を感受する細胞周期因子としてG1S期で主に機能することが知られている。したがって、今回の結果は植物のサイクリンDがG2M期にも機能していることを示すものであり、全く新たな知見である。現在、CDKB2の野生型・ドミナントネガティブ型、およびサイクリンDを過剰発現する形質転換植物を作成中である。そこで本研究では、M期に働くサイクリン依存性キナーゼ(CDK)とサイクリンの特異的な複合体を解析し、その基質の単離を通して細胞質分裂における生理的役割を明らかにすることを目指している。本年度は、G2M期で発現するCdc2Os3と特異的に結合するサイクリンを検索した。サイクリンのin vitro翻訳産物を用いたGST-pull downアッセイにより結合性を検討したところ、B型サイクリンの一つがCdc2Os3と特異的に結合することが明らかになった。酵母のtwo-hybrid法でもその結合性が確認された。そこで、昆虫細胞を用いてCdc2Os3とB型サイクリンを共発現させたところ、両者はin vivoで複合体を形成することが示された。この複合体をマイクロインジェクションによりタバコBY-2細胞に導入することにより、M期特異的に発現するCDK/サイクリン複合体の機能を解析できるものと期待される。一方、これらの細胞内局在性も生理機能を類推する上で重要である。そこで、GFPと連結した融合タンパク質をBY-2細胞で発現させるべく、遺伝子導入を行なっている。またCdcOs3の分子機能を明らかにするため、dominant negative型の変異体を作成し、同様にBY-2細胞に導入している。