hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
形態形成のロバスト性を維持するシグナルのファインチューニングシステム

多細胞生物の胚は、発生過程において外部環境からの撹乱にさらされているにもかかわらず、正確な形態形成が行われる。本研究ではせきつい動物の体節形成をモデルとして、形態形成過程におけるロバスト性維持機構を明らかにすることを試みた。体節原基である未分節中胚葉の細胞ではNotchシグナル依存的に一群の遺伝子の発現が振動し、それが細胞間で同調することによって分節化のタイミングが正確に制御されている。本研究でNotchシグナルの調節因子であるNrarpのノックアウトマウスの解析などにより、Notchシグナルの調節が形態形成のロバスト性維持機構に関与することを明らかにした。細胞生物の胚は発生過程において、温度変化や有害物質による外部環境からの攪乱にさらされており、さらに転写や細胞移動、細胞分裂などの素過程は、ゆらぎに満ちたものであると考えられる。それにもかかわらず、形態形成は正確におこなわれ、生物はきわめて正確に均整のとれたかたちに作られる。このことから生物の形態形成機構はロバスト性を維持する仕組みを備えていると考えられる。本研究ではせきつい動物の体節形成をモデルとして、シグナル伝達がフィードバックループによってファインチューニングされることが、形態形成のロバスト性機構を支えていることを明らかにする。これまでにNotchシグナル経路のフィードバックインヒビター因子であるNrarpをノックアウトしたマウス胚は、バルプロ酸などの催奇形性物質に対する感受性が野生型マウス胚に比べて高く、体軸骨格形成がバルプロ酸投与によって大きく乱されることを明らかにした。体軸骨格のもととなる体節における遺伝子発現のパターンもバルプロ酸によって大きく乱された。体節は、体節の原基で起こっている遺伝子発現の振動の周期性を利用して、周期的に形成されることで空間的な周期パターンが生み出される。バルプロ酸は遺伝子発現の振動を一過的に乱し、細胞間の振動の位相がバラバラになるが、野生型胚では速やかに進行が同調するが、Nrarpノックアウトマウス胚では同調させる力が弱いことを示唆するデータを得た。脊椎動物胚の体節形成機構について、外部環境からの撹乱に対してロバスト性維持機構が備わっていると仮定し、そのメカニズムを明らかにしようとしている。特にNotchシグナルに着目し、シグナル伝達がフィードバック制御によってファインチューニングされることがロバスト性維持機構に寄与していると考えている。Notchシグナルの抑制因子であるNrarpノックアウトマウス胚の未分節中胚葉においてHes7、Lfngなどの振動遺伝子の転写を細胞/遺伝子座レベルで検出した結果、野生型胚に比べてNrarpノックアウトマウス胚では、転写がOFFになっている領域/タイミングの細胞で転写が活性化されている割合が高かった。このことから、Nrarpノックアウトマウス胚では転写を同調させる能力が低くなっていることが示唆され、同調性機構にNrarpが関与していることが考えられた。また、転写がOnとOffになっている領域/タイミングの細胞では、野生型胚でも転写が活性化されていない細胞が存在していた。この結果から、転写は活性化される条件であっても確率的におこると考えられた。野生型胚およびNrarpノックアウトマウス胚をバルプロ酸に暴露することで環境の撹乱をおこなうと体節形成に異常が生じるが、タイムコースをとってバルプロ酸が体節形成のどのステップを妨げているかを検証している。現段階では遺伝子発現の振動を利用して分節化のプレパターンをつくるステップを撹乱しているという結果を得ている。Nrarpノックアウトマウスは体節形成のロバスト性維持機構が減弱していることを示唆するデータを既に得ていたが、そのことを定量的に示すことができた。また数理解析も進展が見られているので順調に進展していると判断した。Notchシグナルの抑制因子であるNrarpノックアウトマウス体軸骨格に、軽微であるが明らかな異常があることが観察されている。このことから、体軸骨格の原基である体節形成過程のロバスト性がNrarpノックアウトマウスで失われていることを作業仮説として研究をすすめた。胚の最尾部にある未分節中胚葉は、体節のもとになる組織であるが、ここでHes7、Lfngなどの振動遺伝子の転写が振動しており、それが体節形成を制御していることが知られている。未分節中胚葉分節中胚葉において細胞/遺伝子座レベルで検出した結果、野生型胚に比べてNrarpノックアウトマウス胚では、転写がOFFになっている領域/タイミングの細胞で転写が活性化されている割合が高かった。このことから、Nrarpノックアウトマウス胚では転写を同調させる能力が低くなっていることが示唆された。さらに野生型胚およびNrarpノックアウトマウス胚をバルプロ酸に暴露することで環境の撹乱をおこなうと体節形成に異常が生じるが、タイムコースをとってバルプロ酸が体節形成のどのステップを妨げているかを検証している。現段階では遺伝子発現の振動を利用して分節化のプレパターンをつくるステップを撹乱しているという結果を得た。このことからNrarpは未分節中胚葉において、分節化のプレかターンを作るステップで、Hes7、Lfngの転写を細胞間で同調させることにより、ロバスト性を維持していることが示唆された。

多細胞生物の胚は、発生過程において外部環境からの撹乱にさらされているにもかかわらず、正確な形態形成が行われる。本研究ではせきつい動物の体節形成をモデルとして、形態形成過程におけるロバスト性維持機構を明らかにすることを試みた。体節原基である未分節中胚葉の細胞ではNotchシグナル依存的に一群の遺伝子の発現が振動し、それが細胞間で同調することによって分節化のタイミングが正確に制御されている。本研究でNotchシグナルの調節因子であるNrarpのノックアウトマウスの解析などにより、Notchシグナルの調節が形態形成のロバスト性維持機構に関与することを明らかにした。Nrarpノックアウトマウスを利用して、Nrarpノックアウトマウス胚がバルプロ酸刺激に対して感受性が高いことをモデル系として、発生過程のロバスト性維持機構の解明を目的に研究を進めているが、Nrarpが細胞間の協調的ふるまいである遺伝子発現振動の同調性に関わることを既に明らかにしているので順調に進んでいると判断した。さらに研究を進める。振動遺伝子であるHes7の一方のアリルを欠失させると遺伝子発現振動が不安定になることを既に示しているので、これを内部ノイズのモデルとして用いて、ロバスト性維持機構をさらに解明していく。28年度が最終年度であるため、記入しない。発生生物学引き続き、計画通り進める。作製予定のトランスジェニックマウスに用いるコンストラクトを改善したために、作製開始を遅らせることにしたため。作製を予定していたトランスジェニックマウスの一部の作製が遅れているために、次年度に作製する。改善した計画に従って進める。遅れているトランスジェニックマウスの作製を早急に行う。
メタン・ダイマーの固相での回転状態の計算

固相中で2個の3次元回転分子が、かなり強くカップルされたダイマー系における各分子の回転状態の詳しい計算が、簡略化されたモデルであるがはじめて行われた。その結果、Asmussenらによる希ガスマトリックス中のメタン分子に対する中性子非弾性散乱の実験と対応しうることがわかった。まず、回転ハミルトニアンを設定した。それは回転運動エネルギーと2種類のポテンシャルから成る。1つ目のポテンシャルは、2分子間の相互作用として用いた八重極-八重極型である。ただし、すべての成分を取り入れると複雑であり、重要と考えられる部分のみを取り扱った。2つ目のポテンシャルは、1分子型の結晶場でありその影響を調べた。さて、結晶場のないときでの計算では、八重極による相互作用が強くなるに従って、分子の対称性に対応した形でトンネル回転準位が作られることが確かめられた。しかし、この場合、通常得られている八重極モーメントの値では、観測値と比較してやや強すぎるポテンシャルを与えることがわかった。そこで、結晶場の効果として、結晶場が八重極型の相互作用に対してお互いに打ち消し合う方向にあれば、結晶場がより現実的な場を与えているといえる。実際、そのような傾向を生み出す場合があることが結晶場の導入により見出された。ただし、ここで取り入れている結晶場は1分子に対する近似的なものであり、対称性からより正確な形で書き直す必要がある。また、2分子間の八重極型の相互作用が、平均的な場として互いに自己矛盾を起こしていないかのチェックがいる。さらに、今後の課題として、実験で観測されておりダイマーの存在を示唆する不純物濃度依存性の再現があげられる。
パン酵母の細胞内トレハロース量の調節と冷凍耐性の改善

パン酵母の細胞内貯蔵物質であるトレハロースが、酵母の冷凍耐性因子の一つとして重要な役割を持つことが明らかにされている。われわれは、冷凍生地製パンに適した冷凍耐性酵母の開発と、冷凍耐性機構の解明研究の一環として、実用的な冷凍耐性酵母の簡便な取得方法を開発することを目的として本研究を実施した。平成14年度平成15年度にわたって得られた研究実績を要約すると以下のようである。1.パン酵母の細胞内トレハロース含量を高める方法として、0.5M1Mトレハロース水溶液に供試酵母(市販圧搾パン酵母、培養酵母)を430°Cで一定時間浸漬することによって細胞内にトレハロースを取り込ませ、その結果得られた酵母の冷凍耐性がどのように変化するかを検討した。2.圧搾パン酵母を供試酵母とした場合、その細胞内トレハロース量は、浸漬時間の経過にともなって著しく増加し、また、トレハロース濃度が高くなるほど細胞内濃度が上昇した。また酵母の浸漬温度の影響も大きく、温度が高いほどトレハロースの細胞内への取り込み速度が増大した。3.細胞内トレハロース濃度が増加した供試酵母(圧搾パン酵母)の冷凍耐性は、トレハロース含量の増加とともに上昇した。1Mトレハロース溶液に415°Cで酵母を浸漬した場合、浸漬3日後に冷凍耐性が最大となった。また、30°C浸漬では、12時問の浸漬によって最大の冷凍耐性を持つようになった。4.細胞内トレハロース量の増加は、酵母のパン生地の発酵力に対して大きな影響を与えなかった。5.数種のパン酵母から分離した保存菌株を同一の条件で培養し、得られた菌体についてトレハロースの取り込み実験を行った結果、圧搾酵母と同様に細胞内トレハロース量は増加したがそれらの冷凍耐性は必ずしも改善されなかった。パン酵母の冷凍耐性に関わる要因の一つとして,酵母の細胞内貯蔵炭水化物であるトレハロースが重要な役割を持つこと、とくにその細胞内濃度と冷凍耐性との関連が注目されている。本研究は、パン酵母の冷凍耐性機構を解明する研究の一環として、実用的に優れた冷凍耐性酵母の簡便な取得方法を開発することを最終の目的とするものであり、平成14年度の研究実績を要約すると以下の通りである。1.市販パン酵母の冷凍耐性を高め、冷凍生地製パンに適した酵母を取得するために、酵母の細胞内トレハロース含量を調節する方法を検討した。パン酵母のトレハロース含量を高める方法として、高濃度のトレハロース溶液に供試酵母を一定条件下で浸漬して細胞内にトレハロースを取り込ませ、トレハロースを負荷した酵母の冷凍耐性がどのように変化するかを調べた。2.市販パン酵母(冷凍感受性株および冷凍耐性株)を、0.51Mのトレハロース溶液に懸濁し、430°Cで浸漬した時、細胞内のトレハロース濃度が時間とともにどのように変化するかを検討した。その結果、供試酵母の細胞内トレハロース量は浸漬時間とともに増加し、トレハロース濃度が高いほどトレハロースの細胞内への取り込み量は増大した。また、浸漬温度が高いほどトレハロースの取り込み速度は増大した。3.供試酵母の冷凍耐性は、細胞内トレハロース量の増加にともなって増大した。1Mトレハロース溶液に415°Cで酵母を浸漬した場合、3日後冷凍耐性が最大となった。また、30°Cでは12時間の浸漬で冷凍耐性は最大となった。4.酵母の種類によっては、トレハロース含量の増加にともなってパン生地の発酵力が増加する傾向が認められたが、冷凍耐性株はトレハロース溶液中での浸漬条件に関係なく、冷凍耐性株の方が冷凍感受性株よりも常に高かった。

パン酵母の細胞内炭水化物であるトレハロースが、酵母の冷凍耐性因子の一つとして重要な役割を持つことが明らかにされているが、とくにその細胞内濃度と冷凍耐性との相関性が注目されている。われわれは、冷凍生地製パンに適した冷凍耐性酵母の開発と冷凍耐性機構の解明を目指して研究を行っており、本研究はその一環として、実用的な冷凍耐性酵母の簡便な取得方法を開発することを目的とするものである。平成14年度に引き続き、平成15年度においても研究を継続し、その結果を要約すると以下の通りである。1.パン酵母の細胞内トレハロース含量を調節することにより、普通パン酵母の冷凍耐性を高め、冷凍生地法に適した酵母を取得できるか否かを、平成14年度に引き続き検討した。2.酵母の細胞内トレハロース含量を高める方法として、0.51Mのトレハロース水溶液に供試酵母を一定条件下で浸漬して細胞内にトレハロースを取り込ませ、その結果得られた酵母の冷凍耐性がどのように変化するかを調べた。3.市販圧搾パン酵母を供試酵母とした場合、その細胞内トレハロース量は浸漬時間の経過とともに著しく増加し、浸漬溶液のトレハロース濃度が高くなるほど細胞内濃度も増大した。また、浸漬温度が高いほどトレハロースの取り込み速度も増大した。4.トレハロースを負荷した供試酵母の冷凍耐性は、対照の非負荷酵母に比べて増加し、細胞内トレハロース濃度の増加とともに増大した。1Mトレハロース溶液に415°Cで酵母を浸漬した場合、3日後冷凍耐性が最大となった。また、30°Cでは12時間の浸漬で冷凍耐性は最大となった。5.トレハロース含量の増加にともなってパン生地の発酵力が増加するパン酵母も数株あったが、冷凍耐性はトレハロース溶液中での浸漬条件に関係なく、冷凍耐性株の方が冷凍感受性株よりも高い傾向が見られた。6.数種のパン酵母から純粋分離した保存菌株を同一の培養条件で培養し、得られた菌体についてトレハロース負荷実験を行った結果、細胞内トレハロース量は増加したが、それらの冷凍耐性は必ずしも改善されなかった。7.トレハロース負荷酵母の凍結貯蔵後の生存率は、細胞内トレハロース含量の多い菌体ほど高く、トレハロース含量と生存率との間に正の相関が観察された。
分子整形技術を用いたRNAの動的構造-機能相関の研究

本研究は、極微量にしか得られないRNAの高次構造変化を追跡するために、RNAの特定部位に蛍光プローブや光化学反応性官能基等の「分子レポーター」を導入する方法を開発することを目指している。今年度得られた成果は以下の通りである。1.酵母チロシンtRNAのD-ループ内に光反応性4-チオウリジンを導入した分子を作成した。この分子はUV照射でクロスリンクする前は元の天然型tRNAと同程度のアミノ酸受容能を保持していた。2.上記tRNAに365nmのUVを照射すると分子内でクロスリンクを起こし、D-ループとT-ループが共有結合で連結されたtRNA分子が作成できた。配列解析の結果、クロスリンク先のヌクレオチドはT-ループ内のC59であることが確認された。3.分子内架橋を持つ上記分子は通常のアミノアシル化反応条件下で正常にチロシンを受容することができた。従って、少なくとも酵母チロシンtRNAに関する限り、アミノアシル化の過程で酵素との相互作用によりD-ループとT-ループが一時的に解離する必要はないことが示された。この分子がタンパク質生合成過程(EF-Tu/GTPとの三重複合体形成やリボソーム上でのペプチド鎖形成反応)でどのように挙動するかに興味が持たれる。4.酵母チロシルtRNA合成酵素によるチロシンtRNAのアミノアシル化反応は低KC1濃度では起りにくいことが以前から知られていたが、昨年度から継続している蛍光偏光解消法を用いた測定から、両者(酵素とtRNA)はこのKC1濃度でも結合はしているという興味深い結果が得られた。
マルチプロセッサシステムのためのリアルタイムカーネル実装技術の研究

本年度の研究では,機能分散(非対称)マルチプロセッサシステムのためのリアルタイムカーネルの実装ならびに評価を行った.具体的にはまず,これまでの研究で提案を行ってきたリアルタイムカーネル仕様の内,ローカルクラスとプライベートクラスの2つのタスクのクラスを実現したマルチプロセッサ用リアルタイムカーネルの基本部分(タスク管理部分)実装を行った.その際に,これまでの研究で提案を行ったアルゴリズムを使用した.また,性能比較のために,従来の方法を使ったものも用意し,合計で4種類のリアルタイムカーネルを実装した.次に,実装した4種類のリアルタイムを用いて,プロセッサ間の同期・通信にかかる時間など,カーネルの基本的な性能の測定を行った.性能評価を通じて,従来の方法では得られなかった性能が,これまでの研究で我々が提案してきた仕様およびアルゴリズムを用いることで可能になっていることを示すことができ,その結果,これまでの研究の提案の有効性を検証・評価することができた.また,これらの実装・評価作業の中で,これまでの研究で提案してきたアルゴリズムだけでは不十分であることが明らかになった.そこで,新たに必要とわかったアルゴリズムについても研究を行った.そのため,リアルタイムカーネルの完成は,来年度の課題として残りことになった.本年度の研究では,機能分散(非対称)マルチプロセッサシステムのためのリアルタイムカーネルの実装ならびに評価を行った.具体的にはまず,これまでの研究で提案を行ってきたリアルタイムカーネル仕様の内,ローカルクラスとプライベートクラスの2つのタスクのクラスを実現したマルチプロセッサ用リアルタイムカーネルの基本部分(タスク管理部分)実装を行った.その際に,これまでの研究で提案を行ったアルゴリズムを使用した.また,性能比較のために,従来の方法を使ったものも用意し,合計で4種類のリアルタイムカーネルを実装した.次に,実装した4種類のリアルタイムを用いて,プロセッサ間の同期・通信にかかる時間など,カーネルの基本的な性能の測定を行った.性能評価を通じて,従来の方法では得られなかった性能が,これまでの研究で我々が提案してきた仕様およびアルゴリズムを用いることで可能になっていることを示すことができ,その結果,これまでの研究の提案の有効性を検証・評価することができた.また,これらの実装・評価作業の中で,これまでの研究で提案してきたアルゴリズムだけでは不十分であることが明らかになった.そこで,新たに必要とわかったアルゴリズムについても研究を行った.そのため,リアルタイムカーネルの完成は,来年度の課題として残りことになった.
チリ沿岸に貝毒原因藻と薬剤耐性菌はいつ出現し、どう分布を拡大させたのか？

30年度の研究計画として、Alexandrium catenellaの集団遺伝学解析に関しては、1)チリ沿岸の9地点の海底泥の鉛直コアを採集し、2 cm毎にコアを切り出す。2)切り出した泥中のA. catenellaシストの密度計数を行う。3) 5地点3層の泥の培養を行い、クローン培養株を確立(n = 5 x 3 x 40)し、集藻後、各培養株からDNAを抽出する。4)確立した培養株の毒分析を実施する。一方、薬剤耐性菌の検出と定量に関しては、1) 3本のコアを用いて2-3 cm毎に切り出したコアサンプルのDNAを抽出。ショットガンライブラリーを作製し、NGSにより配列取得する。2) NGSデータを解析し、薬剤耐性遺伝子の網羅検出を行い、各コアの年代と多様性との関係について解析する、である。30地点で採泥が終了し、本研究に必要な採泥は終了した。A. catenellaに関しては、各コアサンプルを各20層の画分に切り分け、冷蔵保存している。現在、耐久性シストの鉛直プロファイルを明らかにするため、倒立型蛍光顕微鏡を用いた計数を実施中であり、5地点において計数が終了した。申請時当初は、長井が開発したAlexandrium tamarense用のマイクロサテライト(MS)マーカーを使用予定でいたが、チリ産のA. catenellaは、他海域の集団と比べ独自性が高く、既存のMSマーカーを用いたジェノタイピングが難航する可能性が考えられたため、チリの単離株を用いて、新たにMSマーカーを開発することにし、現在、MS領域の配列を取得中である。開発されたMSマーカーの評価を行うために使用予定の40のクローン株の単離・培養株の確立は終了した。薬剤耐性菌の検出に関しては、サケ養殖漁場付近の採泥地点は完了した状況にあり、冷凍保存済みである。本申請は、昨年度10月に採択され、約半年しか研究実施期間が取れず、丸1年間の予定で計画した研究内容が実施できたわけではないが、採泥に関しては、有毒渦鞭毛藻Alexandrium catenellaの集団遺伝学研究と薬剤耐性菌の研究に必要なコアサンプルの採集はほぼ完了したと思われる。A. catenellaの集団遺伝学研究を計画通りに進捗させるためには、多数の培養株の確立が必須であるが、チリの共同研究者のグループが体制を確立したため、本年度、スムースに培養株の単離、DNA抽出のための集藻、DNA抽出が完了すると予想される。高度多型性を示すマイクロサテライトマーカーの開発も、研究代表者の長井は、20種類で開発した経験があり、本年度中にマーカーの開発が完了し、解析を開始できると想定している。ゲノムワイドな多型解析(SNPs検出)手法として知られるMIG-seg解析も、長井・研究分担者の安田は解析経験があること、また、本法の開発者である東北大学の陶山准教授も連携研究者として協力いただくことになっている。従って、DNA抽出が完了次第、NGSによる配列収集と解析が進められると予想している。薬剤耐性菌の検出と解析に関しては、コアの各画分からDNA抽出し、NGSによる配列収集を行うところまでは、本年度の前半に完了すると予想している。以上の内容から、予想通りの進捗と自己評価とした。既に本研究に必要な泥コアの採集は完了したと思われるが、A. catenellaの集団遺伝学解析を遂行するためには、クローン培養株の効率的な確立が、本研究の律速となる。どの海域のどのコアサンプルのどの層にどのくらいの耐久性シストが存在するのかは、計数の結果を待たないと不明である。このため、計数が終了しない限り、培養株確立のための培養も開始できず、この部分の進捗が本研究の実施に影響を及ぼすと考えている。シストの計数は、比較的時間のかかる作業であり、かつショートカットできない部分なので、とにかく効率良く進められるよう、努力必要がある。薬剤耐性菌の検出・解析に関しては、京都大学準教授、魚類養殖が実施されていないメキシコの海域で泥コアを本年7月に採集予定であり、メキシコ大学のグループにより、DNA抽出が行われる予定となっている。ただし、メキシコにおける生物遺伝資源の持ち出し(ABS)に関する規制が厳しく、DNAを持ち出しすることができないため、メキシコの共同研究者により、シーケンシング外部委託してもらい、支出は長井の所属研究機関を通して行う方法を検討している。以上、メキシコのコアサンプルをネガティブコントロールとして比較することで、チリにおける薬剤汚染状況の実態が把握できるものと期待している。

A. catenellaに関しては、各コアサンプルを各20層の画分に切り分け、冷蔵保存している。現在、耐久性シストの鉛直プロファイルを明らかにするため、倒立型蛍光顕微鏡を用いた計数を実施中であり、5地点において計数が終了した。申請時当初は、長井が開発したAlexandrium tamarense用のマイクロサテライト(MS)マーカーを使用予定でいたが、チリ産のA. catenellaは、他海域の集団と比べ独自性が高く、既存のMSマーカーを用いたジェノタイピングが難航する可能性が考えられたため、チリの単離株を用いて、新たにMSマーカーを開発することにし、現在、MS領域の配列を取得中である。開発されたMSマーカーの評価を行うために使用予定の40のクローン株の単離・培養株の確立は終了した。薬剤耐性菌の検出に関しては、サケ養殖漁場付近の採泥地点は完了した状況にあり、冷凍保存済みである。本申請は、昨年度10月に採択され、約半年しか研究実施期間が取れず、丸1年間の予定で計画した研究内容が実施できたわけではないが、採泥に関しては、有毒渦鞭毛藻Alexandrium catenellaの集団遺伝学研究と薬剤耐性菌の研究に必要なコアサンプルの採集はほぼ完了したと思われる。A. catenellaの集団遺伝学研究を計画通りに進捗させるためには、多数の培養株の確立が必須であるが、チリの共同研究者のグループが体制を確立したため、本年度、スムースに培養株の単離、DNA抽出のための集藻、DNA抽出が完了すると予想される。高度多型性を示すマイクロサテライトマーカーの開発も、研究代表者の長井は、20種類で開発した経験があり、本年度中にマーカーの開発が完了し、解析を開始できると想定している。ゲノムワイドな多型解析(SNPs検出)手法として知られるMIG-seg解析も、長井・研究分担者の安田は解析経験があること、また、本法の開発者である東北大学の陶山准教授も連携研究者として協力いただくことになっている。従って、DNA抽出が完了次第、NGSによる配列収集と解析が進められると予想している。薬剤耐性菌の検出と解析に関しては、コアの各画分からDNA抽出し、NGSによる配列収集を行うところまでは、本年度の前半に完了すると予想している。以上の内容から、予想通りの進捗と自己評価とした。既に本研究に必要な泥コアの採集は完了したと思われるが、A. catenellaの集団遺伝学解析を遂行するためには、クローン培養株の効率的な確立が、本研究の律速となる。どの海域のどのコアサンプルのどの層にどのくらいの耐久性シストが存在するのかは、計数の結果を待たないと不明である。このため、計数が終了しない限り、培養株確立のための培養も開始できず、この部分の進捗が本研究の実施に影響を及ぼすと考えている。シストの計数は、比較的時間のかかる作業であり、かつショートカットできない部分なので、とにかく効率良く進められるよう、努力必要がある。薬剤耐性菌の検出・解析に関しては、京都大学準教授、魚類養殖が実施されていないメキシコの海域で泥コアを本年7月に採集予定であり、メキシコ大学のグループにより、DNA抽出が行われる予定となっている。
糖尿病血管壁細胞におけるPDGF刺激によるp38活性亢進機序及び生物活性の解析

【背景及び目的】p38 mitogen-activated protein kinase(p38)は,従来TNF-αやIL-1などのサイトカインにより活性が亢進しアポトーシスを惹起するが,ホルモンや成長因子などでは活性亢進が起こらないと報告されてきた.それに対して,我々はp38が血管壁細胞において高血糖や糖尿病により濃度依存性にprotein kinase C(PKC)を介して活性化されアラキドン酸遊離を制御することや,培養血管平滑筋細胞(VSMC)においてインスリンによっても活性化され細胞増殖に関与することを明らかにしてきた.そこで,本研究では動脈硬化症の発症や進展に重要な影響を及ぼすことが知られているplatelet-derived growth factor-BB(BB)に対するp38活性化の有無とそのシグナル伝達機構及び生物活性(biological effect)について,正常と糖尿病由来のラットVSMCを使って検討した.【方法】正常(N)とSTZ糖尿病(DM)の雄Sprague-Dawleyラット大動脈よりexplant法にてそれぞれVSMCを採取した.そして,starvation後にBBで刺激し,1)p38活性の有無,2)上流と下流のシグナル伝達機構の変化や他のMAP kinase(MAPK)カスケードとのシグナルのクロストーク,3)p38により制御される生物活性について検討を行なった.【結果】1)N細胞においてp38活性はBB刺激により濃度依存性に亢進し,DM細胞ではさらに40%亢進した.また,この活性は,p38の特異的阻害剤SB203580で濃度依存性に抑制された.2)p38は,PKCδ及びMAPK kinase(MKK)3/6を介し,ERKなどとは独立したカスケードで活性化されることが明らかになった.また,その制御にはsmall G蛋白のなかのRho Aが関与していた.3)p38は,細胞増殖や遊走能,さらにアラキドン酸遊離やCOX-2の発現に影響を及ぼすことが明らかにされた.さらに,DM細胞においてさらにこれらの亢進が認められた.しかし,VSMCにおいては,BBにより活性化されたp38はアポトーシスを惹起しなかった.【結論】糖尿病による慢性的な炎症過程を伴う動脈硬化病変の形成に対してp38が重要な影響を及ぼしていることが示唆された.【背景及び目的】p38 mitogen-activated protein kinase(p38)は,従来TNF-αやIL-1などのサイトカインにより活性が亢進しアポトーシスを惹起するが,ホルモンや成長因子などでは活性亢進が起こらないと報告されてきた.それに対して,我々はp38が血管壁細胞において高血糖や糖尿病により濃度依存性にprotein kinase C(PKC)を介して活性化されアラキドン酸遊離を制御することや,培養血管平滑筋細胞(VSMC)においてインスリンによっても活性化され細胞増殖に関与することを明らかにしてきた.そこで,本研究では動脈硬化症の発症や進展に重要な影響を及ぼすことが知られているplatelet-derived growth factor-BB(BB)に対するp38活性化の有無とそのシグナル伝達機構及び生物活性(biological effect)について,正常と糖尿病由来のラットVSMCを使って検討した.【方法】正常(N)とSTZ糖尿病(DM)の雄Sprague-Dawleyラット大動脈よりexplant法にてそれぞれVSMCを採取した.そして,starvation後にBBで刺激し,1)p38活性の有無,2)上流と下流のシグナル伝達機構の変化や他のMAP kinase(MAPK)カスケードとのシグナルのクロストーク,3)p38により制御される生物活性について検討を行なった.【結果】1)N細胞においてp38活性はBB刺激により濃度依存性に亢進し,DM細胞ではさらに40%亢進した.また,この活性は,p38の特異的阻害剤SB203580で濃度依存性に抑制された.2)p38は,PKCδ及びMAPK kinase(MKK)3/6を介し,ERKなどとは独立したカスケードで活性化されることが明らかになった.また,その制御にはsmall G蛋白のなかのRho Aが関与していた.3)p38は,細胞増殖や遊走能,さらにアラキドン酸遊離やCOX-2の発現に影響を及ぼすことが明らかにされた.さらに,DM細胞においてさらにこれらの亢進が認められた.しかし,VSMCにおいては,BBにより活性化されたp38はアポトーシスを惹起しなかった.【結論】糖尿病による慢性的な炎症過程を伴う動脈硬化病変の形成に対してp38が重要な影響を及ぼしていることが示唆された.【目的】正常と糖尿病由来ラット血管平滑筋細胞(VSMC)におけるPDGF-BB (BB)刺激によるp38 MAP kinase (MAPK)のシグナル伝達機構及び生物活性について検討した.【方法】正常(N)とSTZ50mg/kg注射後6週間飼育した糖尿病(DM)の雄SDラット大動脈よりexplant法にて採取したVSMCを用い,starvation後BBで刺激し,1)時間や濃度に対するp38活性,2)MAPK kinase (MKK)活性,3)他のカスケードとのクロストーク,4)転写因子,5)プロスタノイド産生に対する影響を検討した.【結果】1)Nにおいて,p38活性はBB濃度依存性に亢進し刺激510分で頂値となり持続した.

DMにおけるp38活性は,Nに比べ約50%亢進した.2)MKK3/6とMEK1/2は活性化されDMではさらに亢進した.SEK1/MKK4は無変化だった.3)p38活性亢進は,特異的阻害剤SB-203580(SB)添加で濃度依存性に抑制され,MEK1/2特異的阻害剤であるPD-98059では無変化だった.JNKはNとDMにおいて無変化だった.4)72時間のBB刺激によりNのPPAR-γ蛋白発現量が亢進しDMではさらに増加したが,SB1μM添加により有意に抑制された.PPAR-αは無変化だった.5)BB刺激によりCOX-2の蛋白発現量が亢進しDMではさらに亢進したが,SB1μM添加により有意に抑制され.COX-1は無変化だった.【結論】BB刺激により,p38はextracellular-regulated protein kinaseとは独立したカスケードで活性化され,PPAR-γを介しCOX-2の発現に影響を及ぼすことが明らかにされた.さらに,このカカケードはDMにおいてさらに亢進しており,糖尿病による慢性的な炎症過程を伴う動脈硬化病変の形成に対してp38が重要な影響を及ぼしていることが示唆された.【結果】<1>BB刺激でリン酸化p38はNに比べDMで40%亢進しており,YとHA,両群とも影響を受けずGFXで濃度依存性に抑制された.さらに,CGPではわずかに抑制傾向が認められたが,むしろLotにより濃度依存性に抑制された.また,p38リン酸化はδAS添加でも抑制された.<2>膜と細胞質分画による検討では,NとDMにおいて共にBB刺激によりRho Aは変化しなかった.PKC isoformでは,無刺激でDMでβIIが膜分画で亢進していたがBB刺激では変化が見られなかった.むしろ,NとDM共に膜分画でδが亢進しておりDMでより増強が認められた.αとβIはいずれにおいても変化が見られなかった.<3>遊走能は,BB刺激でDMにおいてより亢進し,YとHA,CGPでは両群とも影響を受けなかったが,SBとGFX,LotではNとDMそれぞれで濃度依存性に抑制された.また,δAS添加でも遊走能は抑制された.【結論】これらの検討により,VSMCにおいてBBによるp38活性化及び遊走能には,ROCKやPKCβIIは影響を及ぼさず,PKCδが関与していることが明らかにされた.さらに,PKCδはDMにおいて亢進しており,糖尿病による慢性的な炎症過程を伴う動脈硬化病変の形成に対して重要な影響を及ぼしていることが示唆された.【方法】正常(N)とSTZ糠尿病(DM)の雄Sprague-Dawleyラット大動脈よりexplant法にてそれぞれVSMCを採取した.<1>VSMCをROCK阻害剤のY-27632(Y)とPKC阻害剤のGF109203X(GFX), PKCβII阻害剤CGP53353(CGP), PKCδ阻害剤Lotterilin(Lot), PKCδアンチセンス(δAS)で前処置後BBで刺激し,p38リン酸化をimmunoblot法で検討した.
慢性疼痛・痛覚過敏発現機構におけるNO-cyclicGMP系の役割に関する研究

1.痛覚過敏に関与するレセプターのサブタイプの同定:圧刺激に対する末梢性痛覚過敏発現を誘発するchemical mediatorsが働くレセプターサブタイプを調べたところ,次のような結果が得られた。すなわち,bradykininはB_2レセプター,adenosineはA_<2A>レセプター,prostaglandinE_2はEP_3レセプター,serotoninは5HT_<1A>と5HT_3レセプターに作用して痛覚過敏を発現していることが明らかとなった。慢性疼痛・痛覚過敏モデルの作製と慢性の痛覚過敏発現に関与するchemical mediatorsの同定:モデルとしてはまずカラゲニン誘発炎症モデルを作製した。このカラゲニンによる痛覚過敏発現にはbradykininのほかadenosineも関与していることが明らかとなった。慢性の痛覚過敏発現へのnitric oxide(NO)の関与について:炎症モデルとして用いたカラゲニンおよび尿酸誘発痛覚過敏にもnitric oxide(NO)が関与していることが明らかとなった。したがって,慢性炎症時においてもNO-cyclicGMP系が痛覚過敏の発現に関与していることが示唆された。
非対称コーディネーション問題における認知プロセスの神経経済学的研究

本研究は、シェリングの非対称コーディネーション・ゲームを題材に、焦点形成による均衡選択のプロセスを解明することが目的である。研究では、アイカメラによる被験者の視線追跡の手法を用いてその認知過程を調べ、強化学習によるモデル化を行った。初めに、一度に1人の被験者がアイカメラを装着して意思決定を行ったが、1回限りの実験では十分な協調が見られなかった。そこで、3人の被験者が同時に選択を行う実験を繰り返したところ、協調に向かう行動が観察され、そのプロセスは強化学習によってモデル化可能であることが分かった。さらに、強化学習に従って選択する2台のコンピュータと1名の被験者が対戦する実験環境を構築した。本年度はまず、課題であるシェリングの非対称コーディネーション・ゲームのモデル化を行い、実験室実験を実施した。実験では、3人のプレーヤーにアルファベットA, B, Cのラベルを振った場合と、無意味な記号$, #, *のラベルを振った場合とを実施し、それぞれの場合において均衡が達成される比率を比較した。実験課題は、ABC, ACB, BAC,...といったそれぞれのプレーヤーのラベルの順列の中から1つを選び、全員が一致した時のみ利得が発生するというもので、この際、全員一致した順列の先頭文字に当たるプレーヤーから順に高い利得になるという非対称性がある。実験仮説では、アルファベット課題の場合にはアルファベット順の順列ABCが自然な焦点(フォーカル・ポイント)になると考えられるので、それに向かってプレーヤー間のコーディネーションが進むが、無意味記号課題の場合には自明な焦点がないため、コーディネーションは達成されずらいと考えた。また、アルファベット課題で選ばれると予想される順列ではCが最後尾なので低い利得となるため、プレーヤーCにはこの均衡をプレーする際に大きな葛藤が生じるものと予想された。実験結果によれば、アルファベット課題では予想通り、順列ABCに向かって素早くコーディネーションが行われた。またその際、プレーヤーCが最もその順列を選択を選択する比率が低いことも分かった。無意味記号課題ではなかなかコーディネーションが達成されなかったが、8回繰り返しの後半では均衡への収束が見られた。この実験結果をもとに被験者の行動を強化学習モデルで推定を行った。現在、この推定モデルを、アイカメラおよび脳波計とを用いて被験者の認知過程を調べるための実験装置に組み入れる作業を行っている。本年度は、課題であるシェリングの非対称コーディネーション・ゲームに関する昨年度の実験結果をふまえて、アイカメラを通じて被験者の認知過程を調べる神経経済学的実験の基礎となるシステムの開発を行った。本年度は、この課題を実施している際の被験者の視線をアイカメラで追跡することにより、葛藤が多いと予想されるプレーヤーは、全員一致しやすい順列と、自分のラベルが先頭に来る順列との間で、視線が揺れ動くといった証拠を得ることが期待された。ただ、既存の研究では、本研究課題におけるように3人1組で実施されるような実験は皆無であったので、被験者に一人ずつアイカメラを装着して測定と意思決定をさせた後、3人の決定を照合してゲームの結果を決めるという方式で実験を実施したところ、先の実験結果をうまく再現できなかった。また、装置の着脱や準備作業には時間がかかるため、複数回の繰り返し実験は不可能であった。そこで、すでに実施した実験のデータを下に、強化学習モデルによるモデル推計を行い、それに基づいて確率的に選択を行うプログラムを作成し、1人の被験者と2台のコンピュータによってゲームを行わせる形で、繰り返し実験を可能にするシステムを開発した。もう1つは、アイカメラによる測定装置を精度の高い固定式ではなく、被験者が頭部に装着するような簡易型にした。これにより、3人が同時にアイカメラを装着した状態でゲームをプレーできる。前者の実験では、コンピュータが全員一致した後に別の選択に変える頻度が高く、全員一致の頻度が下がってしまう結果となった。その後、パラメータを色々と変更したものの、昨年度の実験結果を十分に再現するには至っていない。また、後者のシステムについては、被験者の頭のブレが予想よりも大きく、まだ実験実施に十分なほどの測定精度が得られていない。いずれも、今後システムの調整作業を続ける必要があることが分かった。実験経済学本研究課題であるシェリングの非対称コーディネーション・ゲームについて、実験室実験を実施し、その結果がおおむね実験仮説通りであったことから、研究が順調に進んでいると判断している。また、ここからさらに進んで、被験者にアイカメラおよび脳波計を装着してもらい、この実験課題遂行中の被験者の認知プロセスを解明する神経経済学の課題についても、基本となるシステムの開発は終了している。具体的には、アイカメラおよび脳波計を連動させて測定する機器およびそのコントロール・システムは開発が終了している。現在、実験室実験における被験者行動を強化学習によってモデル化し、それを上記のシステムに組み入れる。

これにより、他のプレーヤーの行動をコントロールしつつ、注目したいプレーヤーの行動に焦点を当てて調べていくことができる。次年度はこのシステムを用いて、神経経済学的実験を実施する予定である。このように、ほぼ研究計画通りに研究が進められている。本年度は、本研究課題であるシェリングの非対称コーディネーション・ゲームについて、実験室実験のデータをもとに、強化学習によるモデル化を行っている。次年度は、それをアイカメラおよび脳波計を連動させて測定するシステムに組み入れ、それをもとに神経経済学的実験を実施する予定である。この実験ではまず、アルファベット課題において、順列ABCでコーディネートすることに一番強い葛藤をもつと予想されるプレーヤーCの認知プロセスを詳細に把握することが課題である。次に、自明な焦点をもたない無意味記号課題において、プレーヤーたちが何に着目して互いの行動を調整しているのか、その認知的基盤を解明する。こうした神経経済学的実験を通じて、コーディネーション問題および均衡選択理論について、有益な知見を得ることを次年度の目標としている。2013年度に予定していた通りにシェリングの非対称的なコーディネーション・ゲームの実験を行ったが、計画していたよりも募集できた被験者の数が若干少なくなってしまったため残額が発生した。
職場環境の情報開示が求職者の応募に与える影響

職場環境は組織の労働生産性にどのような影響を与えるのだろうか。本研究はこの大きな問いを以下の2つの問いに分け、それぞれに答える。第1に、職場環境の情報が企業に入社する前の求職者の職探し行動にどのように影響するのだろうか。企業は職場環境の情報を開示することで多くの応募者を引き付け、結果として質の高い労働者を引き付けられるのか。第2に、そもそも職場環境はどの程度労働者にとって重要なのか。すなわち、職場環境の改善は個々の労働者の生産性や満足度を本当に改善するのだろうか。本研究はこれらの互いに密接に関係した2つの問いに経済学の視点で実証的に答えることを目的とする。
世界中緯度地域における環境保全のための化石燃料燃焼時排出成分の実態調査

本年度はルーマニア(ブカレスト市)と日本(徳島市)で大気から採取された採取された粉じん試料の分析を行った。その結果、大気粉じんに含まれる重金属の組成に明瞭な地域差が確認された。特徴は鉛の濃度がブカレストで高く、日本で低いものであった。本試料採取時には、ルーマニアは欧州で残された数少ない有鉛ガソリン消費国の一つであったため(2005年1月より全面使用禁止)高くなったものと思われる。また、日本では貴金属元素が相対的に高い結果が得られている。これは、ガソリンの無鉛化とともに、排ガス浄化用の貴金属触媒起因と考えられる。また、得られた大気環境のデータの解析に利用するためルーマニアにおける環境調査および行政の対応等の精密な調査を行った。とくに化石燃料を大量に消費し、温暖化ガスを排出する産業であるセメント産業の環境改善に関する取り組みに対して調査を実施した。これに加え、環境試料からの金属抽出に関する論文を提出した。これは、低揮発性かつ高イオン伝導性を有するイオン性液体を金属抽出用溶媒として利用するものである。さらに、窒素酸化物および大気富裕粒子状物質の削減を指向した貴金属触媒を開発した。以上の成果は、複数の国際学会(内一つはルーマニアで開催された国際会議の基調講演に選出)および国際誌への掲載がなされた。本研究は、環境水試料(雨水等)を採取するフィールドワークを主とするものである。平成15年度は、徳島でのサンプリングとルーマニアでのサンプリングを行った。ルーマニアでの環境水試料採取については、現地(ブカレスト)在住の研究分但者である大垣を中心として実施した。平成15年9月にブカレストに赴いた本仲、中林、金崎及び薮谷らが大垣と共に、JICAブカレスト出張所、現地の監督官庁及びルーマニア工科大学の研究者らの協力を得て実施した。サンプリングには、ルーマニア工科大学構内に固定採取装置(アンダーセン型サンプラー)を設置し、現在継続してサンプリング中である。この実施のために、ブカレストにおいて、上記各機関と連携し、日本及びルーマニア双方の研究者が参加した講演会(一回)と実行委員会(一回)を開催した。特に、後者においては、ルーマニア工科大学の研究者に対する固定採取装置の説明会も併せて開催した。ブカレストにおける活動に先立ち、在ブカレスト日本大使館訪問を行い事情を説明し、協力を求めた。ルーマニア工科大学とは継続して連絡をとっている。又、平成15年度と同様、平成16年度にも、徳島大学の研究者を派遣し、現地での講演会や委員会等を開催し、分析結果などについての意見交換を実施する予定である。対照試料として、徳島でも雨水のサンプリングを実施した。徳島でサンプリングした雨水は現在解析中である。本研究は、化石燃料排出成分(自動車排出粒子、石炭、石炭灰、雨水、湖沼水等)を採取するフィールドワークを主とするものである。平成15年度は徳島におけるサンプリングとルーマニアにおけるサンプリングを実施した。平成16年度も、前年度に引き続いてサンプリングを実施しながら、採取した試料の定量とその分析結果の解析を行った。ルーマニアでのサンプリングはルーマニア工科大学の協力を得た。平成16年7月6日から23日までの間、藪谷と村井がルーマニアに出張し、サンプリング状況の確認とサンプルの持ち帰りを行なった。現地での大気中浮遊粒子のサンプリングにはアンダーセンサンプラーを用いた。なお、サンプル中の粒子状物質は、10μm,1μm、0.4μmフィルターで分画した。サンプル分析は徳島で行なった。サンプルの前処理として、マイクロウエーブ試料前処理装置を用い、高温-高圧条件下での分解の促進を図った。4種類の方法で酸分解を試みた結果、密閉系で硝酸/過塩素酸を用いたマイクロ波分解法が最もよいことが明らかになった。成分測定には誘導結合プラズマ発光分析法と誘導結合プラズマ質量分析法を用いた。その結果、日本では、鉛,ロジウム、および白金の定量値並びに環境濃縮係数が大きくなった。これは自動車排ガス処理用触媒にこれらの化合物が使用されているためであると考える。

一方、ルーマニアで採取したサンプルには、チタン、カドミウム、および鉛が日本の5倍以上、銅が10倍以上含まれていることが明らかになった。尚、平成16年8月16日から24日にかけては、本仲と村上がニュージーランドのオークランド大学を訪れ、情報収集とサンプリング実施の検討を行なった。本年度はルーマニア(ブカレスト市)と日本(徳島市)で大気から採取された粉じん試料の分析を行った。その結果、大気粉じんに含まれる重金属の組成に明瞭な地域差が確認された。特徴は鉛の濃度がブカレストで高く、日本で低いものであった。本試料採取時には、ルーマニアは欧州で残された数少ない有鉛ガソリン消費国の一つであったため(2005年1月より全面使用禁止)高くなったものと思われる。また、日本では貴金属元素が相対的に高い結果が得られている。これは、ガソリンの無鉛化とともに、排ガス浄化用の貴金属触媒起因と考えられる。また、得られた大気環境のデータの解析に利用するためルーマニアにおける環境調査および行政の対応等の精密な調査を行った。とくに化石燃料を大量に消費し、温暖化ガスを排出する産業であるセメント産業の環境改善に関する取り組みに対して調査を実施した。これに加え、環境試料からの金属抽出に関する論文を提出した。これは、低揮発性かつ高イオン伝導性を有するイオン性液体を金属抽出用溶媒として利用するものである。さらに、窒素酸化物および大気浮遊粒子状物質の削減を指向した貴金属触媒を開発した。以上の成果は、複数の国際学会(内一つはルーマニアで開催された国際会議の基調講演に選出)および国際誌への掲載がなされた。
有効性と経済性から観た大学病院における職場環境アレルゲン削減への取り組みの評価

当院医療者を対象に院内e-learningシステムを利用して「ラテックスアレルギー」に対する認知度およびサージカルグラブを含む医療材料の非ラテックス化に対するアンケート調査を実施した。その結果、知っているが正しく説明ができない者が56%であった。ラテックスアレルギーを有する患者と接したことがある者は25%あり、医療材料の非ラテックス化に対しては、56%が賛成であった。この結果を踏まえて、研究期間を1年延長し、平成28年度には手術室内で非ラテックス製サージカルグラブを全て非ラテックス製に変更したが、その前後でのラテックスアレルギー発症事例数検討が出来ないまま研究期間を終了した。平成25年度は、職場環境アレルゲンの中でも特に削減の必要性が高いと考えられる手術用サージカルグラブの非ラテックス化推進に関して検討を始めた。附属病院の電子カルテシステムを利用して、全職員対象のアンケートを実施して、ラテックスアレルギーの有病率や業務などへの影響について調査した。同時にラテックスアレルギーに対する認知度と理解度についても調査を行った。次に、附属病院中央手術室において、最近製品化された非ラテックス製加硫促進剤(接触性皮膚炎などのアレルギー性疾患の誘発物質)非含有のサージカルグラブに関して、1週間の期間で試用調査を実施した。試用期間後に実施した聞き取り調査の結果、現行のラテックス製サージカルグラブから非ラテックス製品への変更に対して、大半の職員は許容できる(変更可能)との回答をえたが、一部の職員からは従来品(非ラテックス製)の継続使用を希望する回答が合った。この群は臨床経験が20年以上の医師から成っていることが判明した。一方、すでにラテックスアレルギーならびにサージカルグラブ誘因の接触性皮膚炎に罹患している職員からは、出きるだけ早期の導入を希望する回答がほとんどであった。今年度の予備調査より、臨床業務に支障を来すことなく非ラテックス製サージカルグラブのより長期間の臨床試用が可能であると判断できたので、平成26年度以降は、長期的な臨床試用を実施し、それが職員および患者での有害事象発生頻度や重症度に対してどのような影響を有するかを検証する予定である。平成26年度は、前年度の調査で臨床使用に支障がないと実地調査で確認できた非ラテックス性サージカルグラブを実際に手術室にて使用してもらい、ラテックスアレルギーの発生有無および接触性皮膚炎の発生について調査を行った。患者および医療従事者の両群で、新たなラテックスアレルギーの発症は認めなかった。ラテックスと交叉反応が示唆されているラテックスフルーツ症候群患者での使用においても有害事象は認めなかった。また、既にサージカルグラブ誘発の接触性皮膚炎を有する医療従事者において、非ラテックス性サージカルグラブ使用により、症状の増悪を認めた者はなかった。一方、非ラテックス性サージカルグラブ使用により新たに接触性皮膚炎を発症した医療従事者をわずかながら認めた。なお、昨年度の事前調査を行った時点以降に、今回採用した非ラテックス性サージカルグラブが仕様変更を行ったために、一部の医療従事者から手術時の操作性は低下し実務に支障があるとの理由で、やむを得ず従来のラテックス性サージカルグラブに戻す事態が発生しており、その対応を検討中である。平成26年度までに、院内電子カルテ上に導入されているe-learningシステムに付属しているアンケート調査機能を利用して、全ての医療従事者を対象として、「ラテックスアレルギー」に関する認知度や非ラテックス化への理解度を分析し、非ラテックス化に対する障壁を抽出した。さらに、ラテックスアレルギー罹患の有無と日常業務への影響に関してもアンケート調査を実施した。また、手術室において、非ラテックス製サージカルグラブを設置して、実際の手術室業務における支障の有無,操作性、快適性などに関して、アンケート調査を実施した。平成27年度は、新たに他社製の非ラテックス製サージカルグラブを導入して研究を再開する予定であったが、当初予定していた非ラテックス製サージカルグラブよりさらに低アレルゲン性の製品が入手可能となるとの情報があり、その入手を待って、まず少人数によるモニター調査を行うなどの導入までの期間が長くなってしまった。その結果、全体の進行が約1年遅れることになっている。この期間中は、各学術集会や研究会で、最新の情報、知見を学習し、また、他施設の医師と情報交換することで、今後の研究計画に有用な情報を得ることが出来た。平成26年度に導入した非ラテックス製サージカルグラブが仕様変更により操作性に問題が発生したため、一旦従来のラテックス製品に戻していた。その結果、全体の進行が約1年遅れることになっっている。平成27年度には、あらたに加硫促進剤(非ラテックス製サージカルグラブの製造において、柔軟性を高める目的で添加される物質で接触性皮膚炎の原因物質の一つとされる)を使用していないあらたな非ラテックス製サージカルグラブが使用可能となることが判ったため、サージカルグラブの非ラテックス化を保留していたが、平成28年度は、それまでの年度に実施した職員対象のアンケート調査および手術室での非ラテックス製サージカルグラブのモニター調査結果に基づき、院内の医療材料委員会へ申請して、非ラテックス製サージカルグラブの定数配置(正式購入)を行うことが出来た。