hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
着床・初期胎盤形成における絨毛・子宮内膜幹細胞の維持機構とその破綻の病態の解明

まずヒト絨毛細胞株(HTR8-SVneo)より、SP細胞とnon-SP細胞を分離した。SP細胞はnon-SP細胞に比べて、幹細胞の特性であるSP再出現率・継代コロニー形成能・長期増殖能・絨毛幹細胞マーカー(CDX2)発現も亢進していた。Ly6D遺伝子は絨毛SP細胞の増殖、未分化性の維持、運動能に重要な遺伝子であることを示した。次に不妊治療中の採卵時に採取した子宮内膜を用いて、その後の着床率との関連を解析した。着床不成功例では成功例に比較し、老化細胞率・p21の発現・細胞周期でのG0/G1期の割合が有意に高く、両者の間で分泌が亢進しているサイトカインの種類に違いが見られた。本研究では、着床不全・流産の病態を幹細胞維持機構と周囲微小環境(ニッチ)の破綻、その結果としての細胞老化誘導という新しい視点でとらえ、着床・初期胎盤形成における絨毛・子宮内膜の幹細胞の果たす役割を解明することを目的とし、以下の研究計画をたてた。1)絨毛SP細胞の分離と特性の解析:ヒト絨毛外栄養膜細胞(EVT)より樹立された絨毛細胞株(HTR8-SVneo)を用いてSP細胞とnon-SP細胞を分離し、発現量の差がある遺伝子群や細胞増殖能・細胞分化・運動能・浸潤能を解析し、絨毛SP細胞が絨毛幹細胞の特性を持つかを検討する。2)ヒト子宮内膜細胞の幹細胞維持や細胞老化に関与するシグナルと着床との関連の解析:不妊治療中で着床の結果がわかっている患者の着床前に採取された子宮内膜の初代培養細胞を用いて、SP細胞の出現率や幹細胞・EMT・細胞老化やSASP(Senescence-associated secretory phenotype)関連シグナルを解析し、着床率との関与を解析する。また、同時期に採取された血液のサイトカインやホルモン濃度を測定し、着床率との関与を検討する。3)3次元培養による幹細胞と微小環境(ニッチ)の解析:コラーゲンビトリゲルを用いて1)で分離した絨毛SP細胞を上層に、2)で採取した着床成功例と不成功例の子宮内膜初代培養細胞を下層に培養し、絨毛細胞の増殖、浸潤度、それぞれの幹細胞マーカー・着床に関与する因子の発現、絨毛の浸潤におけるEMTや細胞老化の関与を解析する。絨毛SP細胞の分離と特性の解析1)ヒト絨毛細胞株(HTR8-SVneo)より、SP細胞とnon-SP細胞を分離し幹細胞の特性であるSP再出現率、継代コロニー形成能、長期増殖能、絨毛幹細胞マーカー(CDX2)発現を比較検討した。2)マイクロアレイやメチレーションアレイを用いて、HTR8-SVneo-SP細胞とnon-SP細胞の間で発現に差がある遺伝子を同定した。3)分化条件でSP細胞を培養し、栄養膜細胞に分化させ、2)で同定したSP細胞で発現が亢進している遺伝子群の中から、分化により発現が減少する幹細胞マーカーを同定した。本研究では、着床不全・流産の病態を幹細胞維持機構と周囲微小環境(ニッチ)の破綻、その結果としての細胞老化誘導という新しい視点でとらえ、着床・初期胎盤形成における絨毛・子宮内膜の幹細胞の果たす役割を解明することを目的とした。1)絨毛SP細胞の分離と特性の解析:ヒト絨毛外栄養膜細胞(EVT)より樹立された絨毛細胞株(HTR8-SVneo)を用いてSP細胞とnon-SP細胞を分離した。SP細胞は自己複製能を持り、nonSP細胞に比べて運動能の亢進がみられた。。マイクロアレイ解析にてSP細胞に発現量の増加がみられる遺伝子群やシグナル経路を同定した。リンパ球抗原であるLy6DがSP細胞において最も発現が亢進し、分化に伴い発現が低下した。siRNAによるLy6Dの発現抑制によりSP細胞の割合は低下した。2)ヒト子宮内膜細胞の幹細胞維持や細胞老化に関与するシグナルと着床との関連の解析:不妊治療中で着床の結果がわかっている患者の着床前に採取された子宮内膜の初代培養細胞を用いて、SP細胞の出現率や幹細胞・EMT・細胞老化やSASP(Senescence-associated secretory phenotype)関連シグナルを解析し、着床率との関与を解析した。着床不成功例では成功例に比較し、老化細胞率・p21の発現・細胞周期でのG0/G1期の割合が有意に高かった。また、両者の間で分泌が亢進しているサイトカインの種類に違いが見られた。興味深いことに、幹細胞マーカーの一つであるALDH1の発現はマウスでは老化により減少し、着床不成功例で老化細胞数増加とともに、減少していた。また、SASPに関連することが報告されている複数のサイトカインの発現や分泌が老化マウスや着床不成功例でそれぞれ亢進していた。

着床不成功例では成功例に比較し、老化細胞率・p21の発現・細胞周期でのG0/G1期の割合が有意に高く、両者の間で分泌が亢進しているサイトカインの種類に違いが見られた。ヒト子宮内膜細胞の幹細胞維持や細胞老化に関与するシグナルと着床との関連の解析1)同意を得た不妊治療中の患者から、診療の一環として採取された着床前の子宮内膜を初代培養し、SP細胞の出現率や我々の予備的実験で幹細胞に発現が亢進していたABCG2,ALDH1,IL-1R1,HER2の発現をmRNA,蛋白レベルで解析する。2)上記細胞を用いて細胞老化に関与するp21,p16,p53や細胞老化特異的βガラクトシダーゼ(SA-βgal)の発現、細胞と細胞培養液中、同時期に採取された血液を用いてSASP(Senescence-associated secretory phenotype)関連する炎症性サイトカイン(IL-6,IL-1)、炎症性ケモカイン(IL-8,CXCL9)、MMPsの発現を解析する。以上の発現と着床率との関与を検討する。3次元培養による幹細胞と微小環境(ニッチ)の解析1)コラーゲンビトリゲルを用いて分離した絨毛SP細胞を上層に、着床成功例と不成功例の子宮内膜初期培養細胞を下層に培養し、絨毛細胞の増殖、浸潤度を解析する2)上層の絨毛細胞に関しては前年度同定した幹細胞マーカーやEMT関連シグナル分子(Vimentin,Twist,Snail,fibronectin等)の発現や細胞老化シグナル(p21,p16,p53)を免疫染色法で解析するとともにSA-βgal染色を行う。3)下層の子宮内膜細胞に関しては、幹細胞シグナル(ABCG2,ALDH1,IL-1R1,HER2)の発現や細胞老化シグナル(p21,p16,p53)を免疫染色法で解析するとともにSA-βgal染色を行う。医歯薬学細胞株を用いた検討は順調に経過したが、ヒト絨毛組織、ヒト子宮内膜組織を用いた検討は、施設内倫理委員会の承認に時間を要し、解析に十分な検体数が集まっていない。そのため、解析を次年度に行うことに計画を変更した。細胞株を用いた解析に加え、ヒト絨毛・子宮内膜組織の検体を収集し、マイクロアレイや3次元培養の研究を行う予定である。
ファジィ理論に基づくフレ-ム・システムの作成

エキスパ-ト・システムを作成するには、人間の専門家の知識を取り出し、それを計算機上で表現し、うまく利用しなければならない。本研究では、ファジィな構造とファジィな値を持つ知識やデ-タを記述できるフレ-ム(ファジィ・フレ-ム)を定式化し、それをインプリメントすることを目的とした。平成2年度においては、(1)ファジィ・フレ-ムの定式化、(2)ファジィ・フレ-ム・システムのプロトタイプのインプリメントを行なった。平成3年度においては、(3)平成2年度に作成したファジィ・フレ-ム・システムの評価・検討、(4)評価・検討に基づくシステムの改良、を行なった。(3)ファジィ・フレ-ム・システムの評価・検討:作成したファジィ・フレ-ム・システムにより具体的な対象を記述し、ファジィ・フレ-ム・システムの評価・検討を行なった。その結果、(a)上位クラスと下位クラスを表わすスロットの表記法を変更する、(b)ファジィ継承のしかたにモ-ドを入れる、(c)各フレ-ムごとに有効なファジィ集合名を定義できるようにする、ことにした。(4)評価・検討に基づくシステムの改良:(3)の評価・検討の結果に基づいて、システムの改良を行なった。なお、現在のところファジィ・フレ-ム・システムからの検索は、手続き的に書かれたコマンドにより行なっているが、いくつかの問題点が分かった。これについては、新たに検索用の非手続き言語を作成する必要があると思われるが、これは今後の課題である。このためには、普通、ル-ルが使われるが、ル-ルだけでは、複雑な構造を持った対象を記述するのは難しい。そこで、本研究では、ファジィな構造とファジィな値を持つ知識やデ-タを記述できるフレ-ム(ファジィ・フレ-ム)を定式化し、それをインプリメントすることを目的とする。平成2年度においては、(1)ファジィ・フレ-ムの定式化、(2)ファジィ・フレ-ム・システムのインプリメントを行なった。(1)ファジィ・フレ-ムの定式化:フレ-ムにあいまいな知識/デ-タを記述できるようにするための拡張として、(1)スロットの値としてファジィ集合を書くことができる、(2)スロット値に確信度を付けることができる、(3)フレ-ム間の継承や関係に度合いを付けることができる、(4)スロットに重要度をつけることができる、(5)これらの確信度、継承度、関連度、重要度は、ファジィ集合であってもよい、とした。そして、これらの度合いは、単なるスロット値の検索のときに参照されるだけでなく、継承や付加手続きの実行の際にも使用される。このとき、これらの度合いをどのように反映させればよいかについて検討した。(2)ファジィ・フレ-ム・システムのインプリメント:(1)の定式化を基にして、Common Lispを用いてワ-クステ-ション上にプロトタイプを実現した。本研究では、ファジイな構造とファジイな値を持つ知識やデ-タを記述できるフレ-ム(ファジィ・フレ-ム)を定式化し、それをインプリメントすることを目的とした。

(3)ファジィ・フレ-ム・システムの評価・検討:作成したファジィ・フレ-ム・システムにより具体的な対象を記述し、ファジィ・フレ-ム・システムの評価・検討を行なった。その結果、(a)上位クラスと下位クラスを表わすスロットの表記法を変更する、(b)ファジィ継承のしかたにモ-ドを入れる、(3)各フレ-ムごとに有効なファジィ集合名を定義できるようにする、ことにした。(4)評価・検討に基づくシステムの改良:(3)の評価・検討の結果に基づいて、システムの改良を行なった。なお、現在のところファジィ・フレ-ム・システムからの検索は、手続き的に書かれたコマンドにより行なっているが、手続き的であるための問題点もあることが分かった。これについては、新たに検索用の非手続き言語を作成する必要があると思われるが、これは今後の課題である。
有限要素法による鉄筋コンクリートの三次元ひび割れ分布解析手法の開発

プログラムの作成RC構造物内部の配筋情報に基づいて,補強材・コンクリート付着作用を解析し,ひび割れ発生判定と応力再配分を行うためのプログラムを作成した。昨年度は,要素サイズ・形状の影響を考慮し,三次元問題拡張への基礎作業を実施した。今年度は三次元問題解析の実用性を向上させ,静的単調載荷時問題プログラムを完成させた。ひび割れ進展検証に必要な実験構造物のひび割れ進展を検証するため,試験体を8体制作し,載荷試験に供した。実験パラメータは,横補量,補強材種類,配筋である。この実験により主な変位レベルでのひび割れ分布,ひび割れ開口幅,補強筋座屈,かぶり剥落進展を観察した。試験体は,補強材,治具,ひずみゲージおよびコンクリートから成る。この実験は既存設備(載荷容量正負1000kN)を用いて実施した。実験完了後,データ整理を行い,実験パラメータがひび割れ分布・開口幅に及ぼした影響を定量的に評価した。構造物のひび割れ進展を検証するため,柱試験体を2体制作し,逆対称せん断曲げ試験に供した。実験パラメータは,横補量である。また,主筋近傍の付着割裂ひび割れの進展を詳細に観察するため,要素試験体6体を制作し,繰り返し載荷実験を実施した。実験パラメータは,横補量,載荷パターンである。これらの実験により,主な変位レベルでのひび割れ分布,ひび割れ開口幅,補強筋座屈,かぶり剥落進展を観察した。載荷装置は既存設備を用いて実施した。実験データの採取は,荷重計,変位計,データロガー,スイッチボックス,パソコンおよび計測プログラムを用いて実施した。試験体の変形を観測する変位計は柱試験体で70個,要素試験体で20個使用した。実験完了後,データ整理を行い,実験パラメータがひび割れ分布・開口幅に及ぼした影響を定量的に評価する。実験に基づき定量化したひび割れ進展データを,開発中の解析プログラムの計算結果と照合し,精度検証を実施した。その結果,曲げおよびせん断に起因するひび割れの進展については,良好な精度で予測できることを確認した。現状の課題として,せん断と付着割裂など,複数の要因により生ずるひび割れの進展の解析精度がやや劣る点,要素数の増大にともなう計算時間の増加,の2点が挙げられる。このため,ひび割れ発生のメカニズムの再検証および再モデル化,プログラム内における収束計算等の最適化を実施中である。
言内・言外の意味を統合した知識フレームの獲得と言語理解への応用

本研究課題は、超大規模テキスト集合から抽出、集約した大量の言語使用に言内・言外の意味を与えることによって、知識フレームを漸進的に獲得する。2018年度において、言内(denotation)に関する知識獲得、言外(connotation)に関する知識獲得をそれぞれ開始した。denotationに関する知識については、京大格フレームと、英語版FrameNetの対応付けに取り組み、これまで独立したフレームとして扱われていた格フレーム間の意味的関係に関する知識を獲得した。具体的には、日本語と英語間の言語横断単語意味ベクトル用い、京大格フレームに含まれる用例情報と、FrameNetに含まれる注釈付き文から得られる用例情報の類似度を算出することで、京大格フレーム中の各フレームをFrameNetに対応付けた。さらに、日本語版FrameNetの注釈文を用いた評価実験を通し、およそ40%の精度でFrameNet中の望ましいフレームに対応付けられていることを示した。connotationに関する知識については、格フレームに対して、感情や感覚などの情報を付与することを検討した。connotationの体系として、応募者がこれまでに設計したものを用いる。これは、Plutchikの感情の輪や各種シソーラスを参考に設計したものであり、4クラス47素性からなる。感情や感覚の知識獲得については、まず、大規模コーパスから「腰痛が治って嬉しかった」のような共起パターンを用いて、格フレームと感情・感覚のペアを抽出した。このペアを訓練データとしてニューラルネットワークモデルを学習し、このモデルを用いて生コーパスに対して感情・感覚のタグ付けを行うという半教師有りの枠組みを構築した。研究計画に従い、2018年度に実施すべきことはおおむね実施することができたため、「おおむね順調に進展している。」と評価した。2019年度は、言内(denotation)に関する知識獲得、言外(connotation)に関する知識獲得を昨年度から継続して行う。2019年度後半には、獲得した知識を用いたテキスト解析・理解システムの開発に着手する。denotationに関する知識については、昨年度に引き続き、日本語100億文から自動獲得した大規模格フレームと、人手で整備された意味フレーム辞書である英語版FrameNetの対応付けに取り組む。具体的には、適切な言語横断的意味ベクトルの構築手法の検討、格ごとに異なる意味役割の取りやすさの傾向の考慮を行うことで、より高精度な対応付けの実現を目指す。さらに、昨年度は対応付け対象から外していた複合動詞や受身形に対する格フレームも対応付けの対象とし、よりカバレッジの高い対応付けを目指す。また、大規模格フレームと日本語版FrameNetの対応付けデータを用いた対応付けの評価を行う。connotationに関する知識については、昨年度に引き続き、格フレームに対して、感情や感覚などの情報を付与する。大規模コーパスから「腰痛が治って嬉しかった」のような共起パターンを用いて、格フレームと感情・感覚のペアを昨年度に抽出済みであり、これをシードとしてdenotation知識を利用することによって、よりカバレッジを高める手法を研究する。具体的には、同じdenotationを共有している格フレームについて、同じconnotation(感情・感覚)をもつ条件を探索し、クラウドソーシングによって検証する。次に、上記で獲得したdenotation・connotation知識に基づくテキスト解析・理解システムの開発を始める。このシステムは、格の正規化などでは認識することができない意味の同一性や含意関係を捉えることができ、さらに感情・感覚などの言外の意味を推定することができる。」と評価した。

具体的には、適切な言語横断的意味ベクトルの構築手法の検討、格ごとに異なる意味役割の取りやすさの傾向の考慮を行うことで、より高精度な対応付けの実現を目指す。さらに、昨年度は対応付け対象から外していた複合動詞や受身形に対する格フレームも対応付けの対象とし、よりカバレッジの高い対応付けを目指す。また、大規模格フレームと日本語版FrameNetの対応付けデータを用いた対応付けの評価を行う。connotationに関する知識については、昨年度に引き続き、格フレームに対して、感情や感覚などの情報を付与する。大規模コーパスから「腰痛が治って嬉しかった」のような共起パターンを用いて、格フレームと感情・感覚のペアを昨年度に抽出済みであり、これをシードとしてdenotation知識を利用することによって、よりカバレッジを高める手法を研究する。具体的には、同じdenotationを共有している格フレームについて、同じconnotation(感情・感覚)をもつ条件を探索し、クラウドソーシングによって検証する。次に、上記で獲得したdenotation・connotation知識に基づくテキスト解析・理解システムの開発を始める。このシステムは、格の正規化などでは認識することができない意味の同一性や含意関係を捉えることができ、さらに感情・感覚などの言外の意味を推定することができる。
子宮内膜症患者血清中に検出される機能的抗子宮内膜抗体とその対応抗原の解析

(1)子宮内膜組織特異的自己抗体の臨床的意義の検討:子宮内膜組織特異的な多様な抗子宮内膜抗体の存在から内膜症患者におけるポリクローナルなB細胞活性化状態の存在を証明した。特にIgM型自己抗体が内膜症患者に、より特異性が高いことを証明した。そこで患者血清のIgM分画を精製し、子宮内膜細胞に対する増殖刺激活性の有無を調べたところ、患者IgMは健常婦人に比較して、明らかに子宮内膜上皮細胞の増殖刺激効果が異なっていた。すなわち子宮内膜症患者の組織特異的IgM抗体は単なる子宮内膜細胞の破壊の結果ではなく、内膜症の病態発生に直接的に関与していることが示唆された。IgM自己抗体の多くがB1細胞で産生されていることから、現在はB1細胞とB1由来マクロファージ細胞の増殖分化に及ぼす抗子宮内膜抗体の影響について検討している。一方で各種子宮内膜症治療薬で治療中の患者血清における子宮内膜組織特異的自己抗体の推移と、同時に血清ホルモン値と子宮内膜症マーカーであるCA125値を比較検討した。その結果、組織特異的自己抗体レベルは漢方薬で治療した場合のみ漸減したが、GnRHアゴニストないしDanazol投与患者では子宮内膜抗体の低下は認められなかった。以上から、組織特異的自己抗体価は内分泌学的影響は受けにくく、漢方療法の治療指標のひとつになることが判明した。(2)特異抗体認識抗原の生化学的解析、抗原に対するモノクローナル抗体の作製ほか:自己抗体の認識抗原を明らかにするべく、血清から部分精製した抗体分画を用いて免疫沈降法を行ったが、共通した抗原の認識は認めなかった。またヒト子宮内膜組織を用いて中和活性を有するモノクローナル抗体の作製も試みたが、目的とする抗体は樹立できなかった。不成功の原因は抗子宮内膜抗体の多様性と考えられた。現在は非特異的抗体を吸収するための細胞を替えて解析し直している。研究実績の概要子宮内膜症患者血清中に認められる抗子宮内膜抗体の臨床免疫学的意義はいまだ不明である。我々は、細胞膜表面抗原に対する抗体に的を絞り、生細胞を用いたFlowcytometryによる検討を行い、子宮内膜上皮および間質細胞を認識する抗体の存在を証明した。しかも、内膜症患者血清の抗体価は有意に高く、これらの抗子宮内膜抗体にはγ鎖、μ鎖、κ鎖、λ鎖の全てが含まれており、子宮内膜症患者におけるポリクローナルB細胞活性化状態の反映が示唆された。特に内膜症患者ではlgM型抗子宮内膜抗体が異常高値を示すことが我々の研究で明らかとなった。もし抗子宮内膜抗体の中に、単なる結合ではなく子宮内膜組織の異常増殖や分化障害を誘発するlgM型抗体の存在が証明されれば、それは内膜症そのものの起因物質となりうる。また、子宮内膜組織特異的な抗原に対する抗子宮内膜抗体の存在もそれは子宮内膜症の原因ないし増悪に特異的免疫反応が関与している可能性を強く示唆する。そこで、我々は子宮内膜症患者血清からlgM型抗体をそれぞれ精製し、細胞への効果を検討し、一部の患者抗体に子宮内膜細胞増殖活性を検出した。一方で、内膜症患者血清を卵巣癌細胞もしくは子宮頚癌細胞で吸収した後に血清を子宮内膜上皮細胞および子宮内膜間質細胞と反応させることにより、患者血清中に内膜細胞特異的に反応するlgG型ないしlgM型自己抗体の存在をも証明した。これらの事実は、子宮内膜症患者血中の抗子宮内膜抗体が単なる非特異的B細胞活性化状態の反映だけでなく、その病因の一部に自己免疫的機序が存在することを示している。目下、子宮内膜症患者血清中の自己抗体の特異性や特異的対応抗原についての解析を行っている。また臨床的には特異的抗子宮内膜抗体価が漢方製剤の治療の指標になることを発見した。現在、このメカニズムについても解析中である。(2)特異抗体認識抗原の生化学的解析、抗原に対するモノクローナル抗体の作製ほか:自己抗体の認識

抗原を明らかにするべく、血清から部分精製した抗体分画を用いて免疫沈降法を行ったが、共通した抗原の認識は認めなかった。またヒト子宮内膜組織を用いて中和活性を有するモノクローナル抗体の作製も試みたが、目的とする抗体は樹立できなかった。不成功の原因は抗子宮内膜抗体の多様性と考えられた。現在は非特異的抗体を吸収するための細胞を替えて解析し直している。
在宅療養生活支援窓口としての小児外来におけるアドヒアランス向上を目指す看護の検討

本研究では、子育てしている親、外来やクリニックで勤務している看護師、外来やクリニックと連携している医療従事者を対象としてアンケート調査やインタビュー調査を実施し、地域と医療機関をつなぐ場としての小児外来における看護の実態を把握し、家族のアドヒアランス向上、すなわち家族が子どもの日常的な病気体験に向き合い、子育ての過程で主体的に療養支援できるような看護のあり様を検討することを目的とする。分析結果は、家族のアドヒアランス向上を目指す外来・クリニックにおける看護実践方法を見出すための基礎資料とする。
多自由度相関電子系における光誘起ダイナミクスの理論

スピン、軌道などの多自由度を有する強相関電子系の光誘起現象や光誘起相転移現象の微視的機構を理論解析により明らかにする。特に、スピン秩序や軌道秩序、スピン状態(高スピン状態、低スピン状態)などの複数の自由度や秩序の変化を伴った光誘起現象の実時間ダイナミクスを、数値的ならびに解析的手法を用いて多角的に解析する。得られた結果を用いて実験の解釈を行うと共に、実験の指針を与える。本研究課題では、光誘起相転移や光誘起現象において光照射による複数の自由度や秩序の変化が生じることで,劇的でかつ興味のある現象に着目し、その特異な光物性とミクロな機構の解明を目指す。本年度は特に「光誘起反強磁性絶縁体-強磁性金属転移におけるスピンの役割」について以下のことを実施した。マンガン酸化物における光照射による反強磁性絶縁体-強磁性金属相転移現象を動機として、スピンと伝導電子が強く結合した系における光誘起現象について理論的に調べた。理論模型として伝導電子と局在スピンが強く強磁性的に結合した拡張された二重交換模型を設定し、電荷秩序反強磁性絶縁相を再現するために、局在スピン間の反強磁性超交換相互作用と隣り合う伝導電子間のクーロン相互作用を導入した。この模型を有限サイトのクラスターにおいて密度行列繰り込み群法ならびにランチョス法による厳密対角化法を用いることで、電子構造とその時間発展を計算した。得られた結果を以下にまとめる。(1)光照射の初期過程において、反強磁性相関の変化、一電子状態密度の変化、光学スペクトルのギャップ内構造の変化が強く相関していることを見出した。これらが伝導電子のサイト間トランスファーにより支配されていることを明らかにした。(2)電子構造のポンプ光強度依存性を調べた。これを調べるための電子・光子相互作用の定式化を行った。ポンプ光強度の増大とともに、初期状態の電荷相関と反強磁性相関は減少すること、後者の変化は特に弱励起の場合に顕著となることを見出した。これは電荷秩序がポンプ光の導入により直接崩壊するのに対して、反強磁性相関は電子の運動により減少することに起因している。この結果は、二重交換模型の平衡状態において従来から認識されている電荷スピン間の強い相関の概念を超えたものであると言える。特に一次元クラスターの数値計算により得られた結果は、光の導入により生成される電荷ソリトン対の運動と、この運動に影響を与える局在スピン相関の効果として解釈できることを示した。本研究では,スピン,軌道などの多自由度を有する強相関電子系を対象とし、その光誘起相転移現象の微視的機構を明らかにする.特にスピンや軌道秩序,誘電秩序,スピン状態(高スピン状態,低スピン状態等)など,複数の自由度の変化を伴った光誘起相転移現象や光励起現象を対象として取り上げる.平成23年度の繰り越し分による研究課題として以下の研究を実行した。"軌道縮退系のフラストレーション効果と光応答"。軌道縮退系の光誘起現象を解析する前段階として、軌道自由度が本質的に持つフラストレーション効果とその光応答について調べた。特に幾何学的なフラストレーションと軌道フラストレーションの両者が存在するときの両者の競合と協力現象について詳細に解析を行った。具体的には2次元チェッカーボード格子上に2重縮退した軌道自由度を配置し、格子の[10]方向と[11]方向で交換相互作用とそれに関与する軌道擬スピン成分が異なる軌道コンパス模型を設定した。これを古典・量子モンテカルロ法、平均場近似法、スピン波近似法、厳密対角化法を用いて総合的に解析を行い、計算手法によらない解析結果を得ることに成功した。これにより二つのフラストレーション効果の競争により、軌道秩序に関して3重臨界点が存在することを示した。また軌道励起状態(軌道波)の分散係について広いパラメータ範囲で解析を行い、その特徴と光による観測の可能性を指摘した。これらの結果は、量子コンピュータ等への応用で注目されている軌道コンパス模型において、有限温度における初めての量子計算である。今後、軌道自由度のある系に対する光照射効果を調べる上で基礎となる結果を得ることができた。本研究では,スピン,軌道などの多自由度を有する強相関電子系を対象とし、その光誘起相転移現象の微視的機構を明らかにする.特にスピンや軌道秩序,誘電秩序,スピン状態(高スピン状態,低スピン状態等)など,複数の自由度の変化を伴った光誘起相転移現象や光励起現象を対象として取り上げる.本年度は特に以下の研究を実施した。[1]スピン電荷結合系における、光強度依存性。拡張された2重交換模型を用いて、電荷秩序反強磁性絶縁相に光照射する際の、光強度依存性を詳細に解析した。光励起状態が強度に強く依存することを見出し、弱励起では強磁性金属状態へ、強励起では反強磁性の強まった電荷無秩序状態に移行することが明らかとなった。

特に後者の状態は通常の2重交換相互作用の考えでは予想されない状態であり、時間とともにバンド幅が狭くなり、キャリアの運動エネルギーが減少していることが示された。これは強い光のために、一種の反転分布状態が生じているものと解釈された。[2]電子強誘電体の集団運動と、光による励起。電子が電気分極を担う電子強誘電体において、特にダイマーモット系と呼ばれる低次元有機錯体を対象とした。電気分極の反転が系全体に伝播する集団運動が存在することを理論的に予想し、これが光学電気伝導度で観測可能であることを指摘した。これがダイマーモット相と電荷秩序強誘電相の境界近傍でソフト化することを見出した。またその偏光依存性について解析し、光学電気伝導度の実験と詳細な比較を行うことで、実験により指摘されているピーク構造の解釈を行った。
血管新生が起点となる瘢痕なき創傷治癒のダイナミズム

皮膚の創傷治癒に関連して、「傷をいかにきれいに治すか(quality of wound healing)」という問題は皮膚科・形成外科領域における最大の関心事のひとつである。申請者らは、これまでに独自に開発したマウス胎仔創傷治癒モデルを用いて、瘢痕を残さない皮膚創傷治癒のメカニズムがどのように達成されるのかについて継続的に検討を行ってきた。本研究では創傷治癒過程の血管新生に注目して皮膚再生の実現を目指すものである。皮膚創傷部位の血管網を三次元的に可視化することを第一の目標として研究を進め、これまでにホールマウント免疫染色標本を用いて、その全容を可視化することがほぼ可能となった。本モデルを用いた検討を行ったところ、皮膚の再生が可能な胎生13日目までの創部においては、創傷作成後24時間という早期の時点から、創表層へ旺盛な血管新生が認められるのに対して、胎生14日目以降になると様相が全く異なり、血管の創内への侵入がほとんど認められない、という現象が再現性を持って観察されることが分かった。創傷治癒や発生過程の血管新生においてはVEGFが圧倒的に重要な役割を果たすことが知られているため、本研究の血管新生モデルでVEGFの時空間的配置がどのように変化するのかについて現在検討を行っている。in situ hybridizationによってVEGFの発現が胎齢ごとに創部でどのような配置がなされているかについて検討を行っている。胎生13日目創部においては中央に特徴的な「胎生マクロファージ」の集積が観察されることから、本細胞が血管新生と深く関与するとの仮説をたててこれを検証するべく実験を進めている。研究開始当初に立てた作業仮説の検証を行い、再現性を持って有意な結果が観察されている。遺伝子発現の時空間的検討は手間と時間を要する作業であり、今後も継続的に解析していく予定である。当初計画通りに研究を進める予定である。次年度は遺伝子改変マウスを用いた解析を取り入れ、多方面から血管新生と皮膚の再生の関連について検討していく。本研究はマウス生体を用いた実験を主体として進められるものであり、その交配や出産の状況によって進捗が前後する可能性が高いものである。前年度は手持ちのマウスを用いた地道な検討が中心となり比較的予算が抑えられたが、次年度は遺伝子改変マウスを中心に多種類の動物を扱う実験が中心となるため比較的多額の予算が必要となる見込みである。当初計画通りの配分で助成金を使用する計画に変わりはない。
構成的プログラミングの新局面の研究

1.PXのcatch/throw論理による拡張とnon-informative quantifier : catch/throw論理を構成的プログラミングに適用する場合に生じる問題をPXのCIG帰納法がもつframeの概念を利用して解決した。また、この帰納法を用いてPXを拡張し使用実験を行った。また、PXはLispに基づくシステムであるが、Lispのcatch/throwでは、catchが返す値が正常終了による値であるか、throwが発生し、それがcatchされたものなのかは判定することができない。この事実を反映する推論規則をnon-informative quantifierを使い定式化した。2.非決定的キャッチアンドスロー機構:キャッチアンドスロー機構により自然に非決定的な計算が導入されることを示し、その非決定性を許しても、この機構を導入した構成的プログラミングが破綻しないことを理論面から保証することに成功した。4.その他: Common Lispの多値メカニズムに基づく実現可能性解釈を持つPXであるmvPXと、ユーザーインターフェースを飛躍的に改良したP2Xの二つを実現した。また、PXの基礎をなすFefermanの理論を改良する方法を提唱し、Frege構造との関連を明らかにした。2.catch/throwニカニズムの論理の意味論を、項書き換えシステムにより、再度基礎づけた。これにより非決定的計算を取り込める。(中野)MoggiのMonadを記述するEvaluation Logicのconstuctiveversionの定義とrealizability。(小林)4.PXのCommonLispへの移植と、その拡張。拡張1.プログラムに完全な仕様がattachされていることを利用し、不必要なリストの生成を自動的に削除する方法を与えた。そして、このアイデアをもとに、mvPXを作成した。mvPXはリストを多値でおきかえる。これにより、24倍の効率の向上が得られた。(林)拡張2.PXに中野のcatch/throw論理のメカニズムを追加した。そして、そのアイデアをもとにctPXを作成した。これにより構成的プログラミングの枠内で、非局所的脱出を行なうプログラムの初の合成に成功した。また、PXのような型のないシステムの場合、ATTTのnon-informative演算子が、非局所的脱出(catch/throw)の仕様記述に役立つことを発見した。(林,中野,小林)本年度は、PXの再設計・再実現を行い、新しいPXのversion P2Xをほぼ完成するとともに、evaluation modalityについての研究を進めた。PXはLisp上の基本推論関数の集合として定義され、また、Lisp readerの変更と動的型チェックにより基本推論関数以外は新しいオブジェクトを生産させないようにすることにより証明を安全に構築していた。これをMIZARやICOT-PDLなどと同様に、独自の証明記述言語を設計し、そのインタプリタを実現する方式に改めた。以前の方式は拡張性に優れている半面、マクロの展開が多発するため、エラー発生時にエラーの原因を同定することが困難であった。新しい方式においては、エラーへの対処が極めて的確かつ簡単に行えるようになった。また、P2Xは、AUC-TeX, ispellなどのEMACS環境と類似の使用環境を持ち、これにより構成的プログラミングに不可欠の証明開発の工程が非常に楽に行えるようになった。また、構成的プログラミングに応用可能で、なおかつできるだけ表現力の高い様相論理を開発するため、A. Pittsのevaluation modalityについて研究した。その結果、Pittsによるもともとのevaluation logicの体系は真に構成的とは言えず、構成的プログラミングに応用するには修正を要することが判明した。そこで修正法を探るうちに、evaluation modalityをnon-informative quantifierの自然な拡張ととらえられることがわかった。これによって、林によるnon-informative quantifierの理論と小林によるmonadに基づくプログラム抽出の理論が全く自然に融合できることがわかった。
分子間水素結合における異方性と対掌体選択性

最終年度の計画に基づき、ビ-β-ナフトールの類縁体として6,6'位に置換基を有する2,2'-ビフェノール誘導体の合成を前年度に引き続き行った。これらの誘導体の中で、6,6'-ジメチル-2,2'ビフェノール(DMBP)については申請者の開発した酒右酸ジアミド型光学活性固定相を充墳した分取スケールHPLCカラムを用いて光学分割を行った。得られた光学活性体について、芳香族アミジン誘導体(1)ならびに脂肪族アミジン誘導体(2)との錯体化平衡を1DNMRを用いた滴定実験により調査した。さらに、2DNOE相関スペクトルを測定し錯体構造を詳細に解析することを試みた。その結果、DMBPの各対掌体はアミジン誘導体1および2と二本のN...HO水素結合に基づく化学両論1:1の錯体化を行い、ビ-β-ナフトールを標的対掌体とした場合と同等の会合定数と対掌体選択性を与えることが明らかになった。さらに、DMBPのメチル基との分子間NOE相関から、不安定系の錯体化における会合構造の二相性が強く示唆された。これまでに、アミジン型セレクターとビ-β-ナフトールとの対掌体選択的な会合系については,溶液中でのスペクトルデータとX線結晶解析ならびに計算機化学によるシミュレーションの結果から会合構造を推定レてきた。DMBPについて得られた知見は、推定された会合構造の正当性を支持するだけでなく、対掌体選択性に関わる錯体化の動的な側面をも示すものでアミジン誘導体の不斉識別機構を洞察する上で意義があるものと考えられる。また、アミジン基と酸性度の異なる水酸基との間の水素結合について分子軌道法計算を用いたシミュレーションを行った。二つの官能基フラグメントの相対位置を系統的に変化させて得られたポテンシャル曲線に、会合構造における水素結合の幾何パラメータを当てはめ、水素結合強度のジアステレオマー錯体間での差異を評価した。計画書に従い、ビ-β-ナフトールに対して高い対掌体認識能を示す芳香族アミジン誘導体(1)の大量合成を行った。その際に合成経路の再検討を行い、アミジン誘導体(1)のより効率的な合成法を確立することに成功した。得られたアミジン誘導体(1)とビ-β-ナフトールとの体掌体選択的な会合過程の熱力学的パラメータ(エントロピー及びエンタルピー変化)を求めるために、263Kから298Kの間で温度を変化させて、NMRを用いた滴定実験を行い各温度における会合定数を求めた。van't Hoffプロットからジアステレオマ-錯体化に関するエンタルピー変化を求めると、安定系では約13Kcal/mol、不安定系に対しては8.5Kcal/molが得られた。これらのパラメータは、アミジン誘導体(1)とビ-β-ナフトールとの分子間水素結合の強度としてとらえることが出来る。また、会合の化学量論を正確に決定するために、IRスペクトルを用いて、Jobプロットを行った。その結果、可逆的な錯体化に対して1:1の化学量論を決定することが出来た。このことから、先に求めたエンタルピー変化は、二本の分子間水素結合に対応することが確認され、アミジン基とフェノール性水酸基間の水素結合強度に対する基本的なパラメータを確立することに成功した。また、芳香族アミジン誘導体(1)の類縁体としてより水素結合能が高いと期待される脂肪族アミジン誘導体(2)を設計し、その効率的な合成経路を確立した。計画書に従い、脂肪族アミジン誘導体(1)及びその芳香族類縁体(2)とビ-β-ナフトール対掌体との錯体構造を解析し、体掌体選択性を担うジアステレオマー錯体における構成分子間の立体的な相互作用ならびに水素結合の幾何パラメータの差異を明らかにすることを試みた。まず、脂肪族アミジン誘導体(1)の大量合成を行い、次に(1)および(2)とビ-β-ナフトールの各対掌体との混合物について分子間核オーバーハウザー効果の有無を調査した。その結果、水酸基プロトンとアミジン基との間の分子間水素結合に基づく錯体化を支持する幾つかのオーバーハウザー効果が観測された。セレクタ-(1)および(2)はいずれもビ-β-ナフトールに対して(S)-選択性を示すことが既に確認されている。これらのジアステレオマー錯体化における安定系については、セレクター分子と(S)-ビ-β-ナフトールからなる組成1:1の共結晶を調製することに成功した。得られた共結晶のX線解析から、セレクター(1)および(2)はいずれも(S)-ビ-β-ナフトールと二本のN...HO結合による錯体を形成していることが判明した。また錯体の構造特性は先に確認された分子間核オーバーハウザー効果を良く説明するものであり、結晶構造が溶液中でも再現されていることが確認された。一方、不安定系における錯体構造については、分子動力学ならびに分子軌道法計算などの計算機化学の手法によりシミュレーションを行なった。その結果、溶液中のNMRスペクトルに観測されるシフト変化と矛盾しない錯体構造を得ることが出来た。以上より、ジアステレオマー錯体の構造特性ならびに水素結合の幾何パラメータを得ることに成功した。また、酸性度の異なるビフェノール誘導体の合成も併せて行った。

これらの誘導体の中で、6,6'-ジメチル-2,2'ビフェノール(DMBP)については申請者の開発した酒右酸ジアミド型光学活性固定相を充墳した分取スケールHPLCカラムを用いて光学分割を行った。得られた光学活性体について、芳香族アミジン誘導体(1)ならびに脂肪族アミジン誘導体(2)との錯体化平衡を1DNMRを用いた滴定実験により調査した。さらに、2DNOE相関スペクトルを測定し錯体構造を詳細に解析することを試みた。その結果、DMBPの各対掌体はアミジン誘導体1および2と二本のN...HO水素結合に基づく化学両論1:1の錯体化を行い、ビ-β-ナフトールを標的対掌体とした場合と同等の会合定数と対掌体選択性を与えることが明らかになった。さらに、DMBPのメチル基との分子間NOE相関から、不安定系の錯体化における会合構造の二相性が強く示唆された。これまでに、アミジン型セレクターとビ-β-ナフトールとの対掌体選択的な会合系については,溶液中でのスペクトルデータとX線結晶解析ならびに計算機化学によるシミュレーションの結果から会合構造を推定レてきた。DMBPについて得られた知見は、推定された会合構造の正当性を支持するだけでなく、対掌体選択性に関わる錯体化の動的な側面をも示すものでアミジン誘導体の不斉識別機構を洞察する上で意義があるものと考えられる。また、アミジン基と酸性度の異なる水酸基との間の水素結合について分子軌道法計算を用いたシミュレーションを行った。二つの官能基フラグメントの相対位置を系統的に変化させて得られたポテンシャル曲線に、会合構造における水素結合の幾何パラメータを当てはめ、水素結合強度のジアステレオマー錯体間での差異を評価した。
延性/脆性/延性サンドイッチ構造を有する脆性薄膜層の靭性化機構

自動車ボディパネルや建材などに幅広く使用されている合金化溶融亜鉛めっき(GA:Galvannealed)鋼板は,成形加工時にめっき皮膜が剥離する場合があるが,その詳細は不明であった.研究代表者らは,めっき皮膜を構成する5種類のFe-Zn系金属間化合物の各相単相の多結晶・単結晶および異相界面を含む複相の微小試験片の変形試験法を系統的に行うことにより,めっき皮膜の変形および破壊挙動の素機構を明らかにし,耐皮膜剥離特性を向上させるための指針を得た.自動車ボディパネルや建材などに幅広く使用されている合金化溶融亜鉛めっき(GA:Galvannealed)鋼板は,成形加工時にめっき皮膜が剥離する場合があるが,その詳細は不明であった.研究代表者らは,めっき皮膜を構成する5種類のFe-Zn系金属間化合物の各相単相の多結晶・単結晶および異相界面を含む複相の微小試験片の変形試験法を系統的に行うことにより,めっき皮膜の変形および破壊挙動の素機構を明らかにし,耐皮膜剥離特性を向上させるための指針を得た.最近,合金化溶融亜鉛めっき(GA)鋼板のめっき被膜において,単体バルク状では脆性的な化合物が,薄膜状でかつ延性相に挟まれた形態をとる場合に室温靭性を有することを示唆する実験結果が得られた.本研究では,単純なモデル材料を用いてミクロン/サブミクロンサイズ試料のSEM内その場微小変形試験を行うことにより,延性相にサンドイッチされた脆性相の靭性化機構を解明することを目指す.まずGA鋼板のめっき被膜を構成する一連のFe-Zn系金属間化合物相の各単相多結晶マイクロピラーの圧縮試験を行った結果,塑性変形能を有することが明らかとなったΓ相(Fe基板に隣接)およびζ相(最表面)の変形の素機構(すべり系,転位組織)を明らかにすべく,各化合物相の単結晶の圧縮変形試験を行った.本来ならバルクサイズの単結晶を使用して変形試験を行うべきであるが,フラックス法により単結晶の作製を試みたものの,最大でも数百μmの微細な結晶しか得られなかったため,マイクロピラー圧縮試験を行った.さまざまな圧縮軸方位で圧縮を行った結果,Γ相では{110}<111>すべりが,ζ相では{110}<112>および(100)[001]すべりが活動することが明らかとなった.Γ相は立方晶系の対称性を有するため,{110}<111>すべりのみで5つの独立な歪成分を生じることができるためvon Misesの条件を満たすが,ζ相は単斜晶系の低い対称性を有するため,2つのすべり系が働いてもvon Misesの条件を満たさず,多結晶での変形は困難であることがわかった.平成26年度に実施するSEM内その場微小変形試験に供するためのモデル材料として,浮遊式帯域溶融法により脆性・延性相から構成される共晶ラメラ二相合金を作製した.さらに,熱処理時間を変えることにより,種々のラメラ間隔に制御できることが確認している.最近,合金化溶融亜鉛めっき(GA)鋼板のめっき被膜において,単体バルク状では脆性的な化合物が,薄膜状でかつ延性相に挟まれた形態をとる場合に室温靭性を有することを示唆する実験結果が得られた.本研究では,ミクロン/サブミクロンサイズ試料のSEM内その場微小変形試験を行うことにより,延性相と脆性相が共存する場合の脆性相の靭性化機構を解明することを目指す.まずGA鋼板のめっき被膜を構成する一連のFe-Zn系金属間化合物相のうち多結晶マイクロピラー圧縮試験において塑性変形能を示したΓ相(Fe基板に隣接)およびζ相(最表面)についてさまざまな圧縮軸方位で単結晶マイクロピラー圧縮試験を行った結果,Γ相では{110}<111>すべりが,ζ相では{110}<112>および(100)[001]すべりが活動することを明らかにした.さらに,各異相界面での剥離挙動を調べるために,異相界面を含む複相マイクロピラーのSEM内その場圧縮試験を行った結果,脆性/脆性相の組合せでは脆性的破壊を起こしたが,延性/脆性相の組合せでは塑性変形を全く示さずに脆性的破壊を起こす場合と,10%以上もの塑性変形を示した後に脆性的破壊を起こす場合があることを見出した.これは,脆性相中にクラックが発生した場合にクラック先端にかかる局所応力と降伏応力の大小関係および試料サイズに依存していると考えられる.実際,延性相の厚さを一定にしたまま脆性相の厚さを増加させるに従い,脆性的破壊に至るまでの塑性変形量が低下することを確認した.クラック進展に必要な応力は破壊靭性値と密接な関係にあるため,延性相と脆性相が共存する場合の脆性相の靭性化には,(i)各相のスケールファクター(厚さ), (ii)結晶粒径,(iii)破壊靭性値の3つが,最も重要な物理的因子であると示唆される.26年度が最終年度であるため、記入しない。金属材料26年度が最終年度であるため、記入しない。研究計画通り,初年度(平成25年度)に各Fe-Zn系化合物相の基礎物性を調査することができた.

また,浮遊式帯域溶融法により脆性・延性相から構成される共晶ラメラ二相合金を作製しており,平成26年度に実施するSEM内その場微小変形試験に供することができ,大方の事前準備は整っている.26年度が最終年度であるため、記入しない。まず,SEM内その場微小変形試験を可能にするために,as-receivedのダイヤモンド冶具を集束イオンビームにより適当な形状に加工する.適当な単相試料を用いて引張試験の軸調整などを最適化する.さらに,脆性相の厚さが異なる種々のモデル材料マイクロ試料を作製し,その場観察圧縮および引張試験を行う予定である.26年度が最終年度であるため、記入しない。当初SEM内その場観察変形試験装置をレンタルする予定であったが,別予算により装置を購入することができたため,計上していた機器レンタル料を平成26年度に繰越すことにした.次年度予算との合算使用により,熱分析装置を購入する予定である.また,得られた成果を学術会議などで研究発表する際の旅費などにも使用する予定である.
同種培養表皮の保存とHLA抗原遺伝子のタイピング

1.1992年4月から1996年2月現在までの自家及び凍結同種培養表皮移植例は、158例となった。その内訳は自家培養表皮移植例37例、凍結同種培養表皮移植例が121例である。治療の対象は新鮮熱傷、熱傷後瘢痕拘縮、難治性慢性潰瘍であった。2.凍結同種培養表皮の凍結保存は100例となり全例-180°Cの凍結庫へ保存した。うち50例の保存サンプルについてDNAを純化抽出し、PCR-RFLP法を用いたHLA抗原遺伝子のパターンによるHLAのタイピングを行った。3.凍結同種培養表皮移植後の組織片のDNAを検出し、HLAのパターンによるdonorの生着期間、recipientに置き換わる時期を判定した結果は、最長4ヵ月の生着を確認した。4.同種培養表皮の保存法は、(1)段階的凍結法(-4°C→-20°C→-80°C→-130°C)(2)プログラミングフリーザ-による凍結法に加えて、(3)簡易法(-80°Covernight→-135°C)を行ったところ、1年以上の保存でも約80%のviabilityが得られた。この方法を用いることで凍結同種培養表皮は簡便に臨床応用が可能となった。本研究の結果から、凍結同種培養表皮は凍結保存できるので、緊急時の熱傷の治療にも有用であると考えられた。また将来的にはHLA DR(classII)のタイピングを合わせて移植できればさらに、凍結同種培養表皮の移植率は向上すると思われる。本研究で培養もしくは凍結保存したサンプルは全例、感染症、virus(HIV,HC,HB,ATLA)の検査を実施しており、安全性の確認を行ってきた。今後もこの方針を続けていく所存である。1)1992年4月より1995年2月現在までの自家及び同種培養表皮移植例は、98例となった。その内訳は自家培養表皮移植例23例、同種培養表皮75例である。我々は主として自家培養表皮、同種培養表皮を、新鮮熱傷、熱傷後瘢痕拘縮、慢性潰瘍の治療に用いている。2)同種培養表皮の凍結保存は40例となり、すべての保存サンプルについてDNAを純化抽出し、PCR-RFLP法を用いたHLA抗原遺伝子のパターンよりHLAのタイピングを行った。3)同種培養表皮移植後の組織片のDNAを検出し、HLAのパターンによりdonorの生着の期間、recipientに置き換わる時期を判定した結果、3カ月間は培養表皮が拒絶されることなく生着することがわかった。4)同種培養表皮の保存法は、(1)段階的凍結法(-4°C→-20°C→-80°C→-135°C)(2)プログラミングフリーザ-による凍結法に加えて、(3)簡易法(-80°Covernight-135°C)を行ったところ、6ケ月保存でも医薬80%のviabilityが得られた。熱傷の治療では、新鮮同種培養表皮の治療効果と凍結同種培養表皮の治療効果に差はほとんどみられなかった。この結果から、今後凍結同種培養表皮移植は有用な治療法となると考えられた。また、凍結保存している同種培養表皮は感染症のcheck(HB,HCV,HIV,ATLA,その他細菌等)を全例行っており、安全性についても十分考慮している。以上が、当該年度の研究の結果とまとめである。1) 1992年4月から1996年2月現在までの自家及び凍結同種表皮移植例は、158例となった。

その内訳は自家培養表皮移植例37例、凍結同種培養移植例が121例である。治療の対象は新鮮熱傷、熱傷後瘢痕拘縮、難治性慢性潰瘍であった。2)凍結同種培養表皮の凍結保存は100例となり全例-180°Cの凍結庫へ保存した。うち50例の保存サンプルについてDNAを純化抽出し、PCR-RFLP法を用いたHLA抗原遺伝子のパターンによるHLAのタイピングを行った。3)凍結同種培養表皮移植後の組織片のDNAを抽出し、HLAのパターンによるdonorの生着期間、recipientに置き換わる時期を判定した結果は、最長4カ月の生着を確認した。4)同種培養表皮の保存法は、(1)段階的凍結法(-4°C→-20°C→-80°C→-135°C)(2)プログラミングフリーザ-による凍結法に加えて、(3)簡易法(-80°Covernight→-135°C)を行ったところ、1年以上の保存でも約80%のviabilityが得られた。この方法を用いることで凍結同種培養表皮は簡便に臨床応用が可能となった。本研究の結果から、凍結同種培養表皮は凍結保存できるので、緊急時の熱傷の治療にも有用であると考えられた。また将来的にはHLA DR (class II)のタイピングを合わせて移植できればさらに、凍結同種培養表皮の移植率は向上すると思われる。本研究で培養もしくは凍結保存したサンプルは全例、感染症virus (HIV, HC, HB, ATLA)の検査を実施しており、安全性の確認を行ってきた。今後もこの方針を続けていく所存である。
曖昧性の本質の解明(実例の読みと,その由来,また関連概念の考察を通じて)

曖昧性という概念は言語の意味の研究の最も重要なテーマの1つであることは多くの言語学者の一致した見解である。しかしながら、曖昧性について本格的に研究している学者の数は多くはない。私は当該研究期間に英語で書かれた数多くの論文や本を丹念に読んで、これらの文献の中から数多くの曖昧な語句や文の実例を発掘した。そして、発掘した実例を基にして6つの論文を執筆し、(すなわち、「曖昧文のさらなる実例を求めて」、「疑問命令文と曖昧性」、「曖昧性と関連概念について」、「曖昧性、不明確性と意味解釈」、「統語的曖昧性と音律情報」と「曖昧性、不確定性と発語内の力」で、いずれも、岐阜大学教育学部研究報告:人文科学)、『曖昧性をめぐって』(2000:英宝社)という専門書を一冊出版した。私が発掘して、これらの論文や著書の中で紹介した先行研究は豊富なデータと深い思索に裏打ちされたものであるので、英語の本質の解明に役立つばかりでなく,高い資料的価値をも持つものである。また、私は現在、曖昧性に関する研究の次のテーマとして、「曖昧性と発語内の力の類似点と相違点」、「発語内の力の種類と数の問題」や「意味論的曖昧性と語用論的曖昧性と不明確性の相違」などを考えている。私の曖昧性についての研究が進むにつれて、関連概念である意味論、語用論、類義性、不明確性、ファジー性、一般性、袋小路文、音律情報や発語内の力などの特性も明らかになってきた。曖昧性と同じくらいに重要な意味論の概念は類義性である。そして、類義語辞典は国内外に数多くある。しかし、曖昧性に関する辞典は、私の知る限り、世界に一冊もない。私の研究の最終の目的は『曖昧文用例辞典』の出版である。曖昧性は学際的なテーマであるので、私の研究は学界のみならず広く世の中に貢献するものである。私は平成10年度の研究実施計画に記した計画に基づき、計画を進め、すでに公刊された論文は「曖昧文のさらなる実例を求めて」岐阜大学教育学部研究報告(人文科学)47巻1号(1998)PP.173-197である。現在投稿中の論文には「疑問命令文と曖昧性」岐阜大学教育学部研究報告(人文科学)47巻2号がある。さらに、『曖昧性と関連諸問題』と言う書名の著書を出版するための準備をしている。そのために、私は現在「ジョークとイディオムの曖昧性」と言う題目の論文を執筆しているところである。私はジョークやイディオムと曖昧性の間には密接な結びつきがあると確信しているが、曖昧性に関する論文で、ジョークやイディオムの問題と本格的に取り組んでいる研究は皆無に等しい。そこでこの論文を加えて、前記の本を平成11年夏までに発行させたいと思っている。また、曖昧性や類義性に関するさらなる研究も順調に進んでいるので、平成11年度にも著書とは別に論文を発表出来ると思う。私の研究が現在大変順調に進んでいるのは、科学研究費補助金交付を受けたおかげで、たびたび他大学へ資料収集に出掛ける事が出来、パソコンも購入し資料整理等のスピードアップがなされたためである。私の曖昧性に関する研究は、研究が進むにつれて対象とすべき領域が広がり、考察も最初の予測以上に深くなってきている。