hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
現代イランにおける女性の社会参加－親密圏に着目して

平成26年度の研究計画のうち、主な活動は博士論文を完成させることであったが、結果的に全ての章を執筆することができなかった。しかし以下三点の活動に加え、2014年5月と2015年1月にはそれぞれ2週間程度の臨地調査をイラン・テヘランで行った。一点目に、「イラン・イスラーム共和国書店案内ーイラン・テヘラン編ー」(『イスラーム世界研究』8、京都大学イスラーム地域研究センター、2015(3月発行予定))を執筆した。これは、これまでの臨地調査において資料収集を行ってきた際のデータをまとめ上げたものである。この書店案内の発行により、ペルシャ語を解する研究者・学生はもちろんのこと、ペルシャ語話者以外の研究者でもスムーズに資料を探すことが可能になった。二点目は、ペルシャ語字幕の翻訳・制作である(「イスラームとジェンダー」研究会2014年度第1回研究会:公開シンポジウム「革命後イランにおける映画と社会」、映画「聖木と井戸ーイランの地方小都市調査から」(撮影・監督鈴木均)インタビュー翻訳・字幕制作担当、早稲田大学、2014年7月5日上映)。この映画は、鈴木氏がイランの各地方で行ったインタビュー10時間分の翻訳と字幕制作を全て行ったものである。人口が比較的少ない町や村落で聞き取り調査を行ったデータは希少であり、その成果を日本語で公表したことは評価できるだろう。三点目に、京都造形芸術大学で講義を行ったことである(「地域学」講義、「女性をおおうベールとファッションーイランの事例からー」、京都造形芸術大学、2014年12月15日)。臨地調査で集めた写真データや動画を豊富に用い、臨場感あふれる講義を行った。授業後約60人程度の出席者に書いてもらった感想文から、イランや女性に関する単なる情報伝達に終わらず、地域研究の動態的な側面を感じてもらえる講義ができたことを実感した。26年度が最終年度であるため、記入しない。具体的内容:2012年6月2日に上智大学で行われたスーフィズム・聖者信仰研究会において、博士予備論文(修士論文に相当)の内容について発表した。また、同発表の内容を拡張させ、2012年7月21日には東京大学でのイスラーム地域研究・若手研究者の会でも発表を行った。さらに、2012年7月8日には、京都大学でのKIAS/SIAS Joint International Workshopに参加し、イランに限らず様々な地域における女性の日常実践を扱う研究についてのサーベイを行い、長期調査に向けての課題の洗い出しをした。2012年8月26日2013年2月21日にかけては、女性の日常生活における宗教実践についての聞き取りを中心に、イラン(テヘラン)で臨地調査を行った。帰国後は、データの整理と考察を行い、2013年度の臨地調査のための準備を取りかかっている。意義と重要性:6月から7月にかけて3回行った口頭発表は、博士予備論文の内容を発表するだけでなく、論文執筆中および執筆後に出てきた課題を整理し、博士論文の問いをより明確にするために不可欠であった。ここでの発表と議論を経て、8月から6ヶ月間遂行した臨地調査では、以下二点の結論を得た。一点目は、エマームザーデと呼ばれる墓廟への参詣を始めとして、宗教実践一般に対して若者の間で「時代遅れである」「誰が埋葬されているのか定かではなく、うさんくさい」といった不信感が見られることである。二点目は、そのような風潮があるにもかかわらず、実際にエマームザーデに足を運んでみると、宗教実践に関心がないように見える若者たちがしばしば参詣に来ていることである。そこで、具体的にはどのような女性たちがエマームザーデに来ているのかという点を手がかりとして、これらの結論の間に見られる矛盾を解明する必要性が新たに生じた。具体的内容:2013年5月6月および2013年10月11月の2回、宗教実践に従事する女性およびテヘランの市民への聞き取りと資料収集を中心に、イラン(テヘラン)で臨地調査を行なった。聞き取り調査では、テヘランの市民がエマームザーデと呼ばれる墓廟に対してどのようなイメージを抱いているのか、参詣する女性自身はどう考えているのかを質問の主な内容とした。これは、前年度の調査で感じた疑問点をもとにしたものである。帰国後はデータの整理と分析に専念し、その結果を2014年3月29日に上智大学で行なわれたKIAS/SIAS Joint International Workshopで発表した。この発表では、参詣する女性およびテヘラン市民の男女がエマームザーデに対してどのようなイメージを抱いているのか、そこから導きだされるエマームザーデのイラン社会における位置付けとは何かを描いた。意義と重要性:上記の発表では、エマームザーデ参詣をより包括的に捉えるうえで重要な「アーラーメシュ」(安らぎ、休養を意味するペルシャ語)という概念への着想を得た。この「アーラーメシュ」は、イスラーム世界の参詣を扱うこれまでの研究が用いてきた「公式の宗教・民衆の宗教」あるいは「大伝統・小伝統」といった二分法的な図式を超克するうえで非常に有用な概念であると言える。この概念を、親密圏と公共圏の議論に組み込むことで、イランにおける宗教実践や信仰のあり方をより多角的に捉え直すことが可能だと考えている。

平成26年度の研究計画のうち、主な活動は博士論文を完成させることであったが、結果的に全ての章を執筆することができなかった。しかし以下三点の活動に加え、2014年5月と2015年1月にはそれぞれ2週間程度の臨地調査をイラン・テヘランで行った。一点目に、「イラン・イスラーム共和国書店案内ーイラン・テヘラン編ー」(『イスラーム世界研究』8、京都大学イスラーム地域研究センター、2015(3月発行予定))を執筆した。これは、これまでの臨地調査において資料収集を行ってきた際のデータをまとめ上げたものである。この書店案内の発行により、ペルシャ語を解する研究者・学生はもちろんのこと、ペルシャ語話者以外の研究者でもスムーズに資料を探すことが可能になった。二点目は、ペルシャ語字幕の翻訳・制作である(「イスラームとジェンダー」研究会2014年度第1回研究会:公開シンポジウム「革命後イランにおける映画と社会」、映画「聖木と井戸ーイランの地方小都市調査から」(撮影・監督鈴木均)インタビュー翻訳・字幕制作担当、早稲田大学、2014年7月5日上映)。この映画は、鈴木氏がイランの各地方で行ったインタビュー10時間分の翻訳と字幕制作を全て行ったものである。人口が比較的少ない町や村落で聞き取り調査を行ったデータは希少であり、その成果を日本語で公表したことは評価できるだろう。三点目に、京都造形芸術大学で講義を行ったことである(「地域学」講義、「女性をおおうベールとファッションーイランの事例からー」、京都造形芸術大学、2014年12月15日)。臨地調査で集めた写真データや動画を豊富に用い、臨場感あふれる講義を行った。授業後約60人程度の出席者に書いてもらった感想文から、イランや女性に関する単なる情報伝達に終わらず、地域研究の動態的な側面を感じてもらえる講義ができたことを実感した。26年度が最終年度であるため、記入しない。平成24年度の研究計画にほぼ沿った形で、発表・調査ともに研究が進んでいるため。平成25年度の研究計画の内容全てを達成することはできていないガ、博士論文執筆のための準備は順調に進んでいるため。平成25年度は、5月8月の3ヶ月間イラン(テヘラン)で再び臨地調査を行う。この調査により、上記10に上げた課題を解決するとともに博士論文の中核部分に用いるデータを収集することが可能となる。帰国後はデータの整理を行い、2013年内に論文を執筆・投稿する予定である。さらに2014年2月には、京都大学と上智大学が合同で行う平威26年度は、5月にイラン(テヘラン)で再び臨地調査を行なう。前回の臨地調査で、研究に必要なインフォーマント(エマームザーデの管理者)と知り合ったが、時間の都合上ほとんど聞き取りができなかった。そのため、彼女への面巻取り調査を中心に、文献収集なども合わせて行なう。この調査の結果も合わせ、前年度から既に取り組んでいる博士論文の執筆を進めていく予定である。
グラフェンおよび関連ナノ物質の量子輸送現象に関する理論的研究

一原子層の炭素原子膜であるグラフェンの電子状態は、システムサイズやエッジの形状に大きな影響を受ける。特に、系のサイズがナノスケ-ルなると電子物性はバルクのものとは大きく異なることを受け入れ研究者のグループが理論的に解明してきた。本研究では、グラフェンにおけるナノスケール・エッジ効果に着目し、電子状態への量子多体効果を理論的に解明を進める。前年度、ナノグラフェンのエッジに現れる磁性状態に関して、配置間相互作用(Cl}の方法を用いて、電荷およびスピン励起エネルギースペクトラムを解析した。その結果、ホールドーピングに対して、電荷励起ギャップ、スピン励起ギャップ共に、急激に減少することを見出した。そこで本年度は、密度汎関数理論に基づく局所スピン密度近似による第一原理計算を、グラフェンナノリボンに適用し、さらなる解析を進めた。ジグザグナノリボンに、ホウ素終端を施すことで、系にホールが導入されトータルの磁化が有限になる得る強磁性状態を見いだした。さらに、この系はフェルミ準位近傍において線形分散を保持し、金属的になることもを明らかにした。この結果は、ナノグラフェンにおける金属強磁性体を設計する指針を与えるものである。さらに、グラフェンの他に、半導体原子膜であるBC3におけるナノスケール・エッジ効果についても、理論解析を実施した。BC3ナノリボンの電子状態を、第一原理計算によって行ない、エッジでの最安定構造を系の芳香族性の観点から明らかにした。また、リボン幅の増加に対してエネルギーギャップが減少する特異な振る舞いを指摘した。本年度は、ナノグラフェンにおける磁性状態に関して、配置間相互作用の方法と第一原理計算による解析を併用することで、ホールドーピング効果に対する理解を大きく進展させることに成功した。本成果は、既に幾つかの国内および国際会議において発表をおこなった。また、論文として出版された。これらのことから、研究計画は、概ね順調に進展していると言える。本研究課題で得られた理論成果と、実験との整合を図るのが今後の研究推進の一つの方針となる。さらには、計算手法の拡張も重要な課題として残されている。既存のCIプログラムをKineticMasterEquationのアプローチと組み合わせることで、相関が強い系での電子スピン輸送への問題へ適用することが期待される。一原子層の炭素原子膜であるグラフェンにおける、フェルミ準位近傍の電子状態は、質量のないディラック方程式に記述される。しかし、グラフェンの電子状態は、システムサイズやエッジの形状によって、大きな影響を受ける。特に、系のサイズがナノスケールなると電子物性はバルクのものとは大きく異なることを受け入れ研究者のグループが理論的に解明してきた。本研究では、グラフェンにおけるナノスケール効果や形状効果に着目し、電子状態や電子輸送特性への量子多体効果を理論的に解明することを主眼として研究を進める。本年度の研究実績は下記の通り。ナノグラフェンのエッジに現れる磁性状態に関して、配置間相互作用(CI)の方法を用いて、その多体効果を含めた電荷およびスピン励起エネルギースペクトラムを解析した。特に、ホールドーピングに対して、ナノグラフェンの磁性状態および伝導特性の変化を解析した。ホールドーピングのないHalf-fillingでは、平均場近似で得られている描像がある程度正しいことが示されたが、ホールドーピングによって、電荷励起ギャップ、スピン励起ギャップ共に、急激に減少することを見出した。さらに、励起ギャップの減少と共に、強磁性相関が発達することを示した。これらのことから、電荷量のコントロールによって磁性状態をスイッチング可能な、グラフェン磁気デバイスへの応用が理論的に期待されることを示した。本年度は、ナノグラフェンにおける磁性状態に関して、配置間相互作用の方法から解析をし、ホールドーピング効果に対する理解を進展させることに成功した。本成果は、既に幾つかの国内および国際会議において発表をおこなっており、現在論文出版に向けて最終の段階に入っている。

本成果は、既に幾つかの国内および国際会議において発表をおこなった。また、論文として出版された。これらのことから、研究計画は、概ね順調に進展していると言える。本研究課題で得られた理論成果と、実験との整合を図るのが今後の研究推進の一つの方針となる。具体的には、構造再構成の起きたエッジ構造での磁性状態の解明があげられる。エッジ構造の変化による磁気的相関関数の振る舞いを理論的に同定する。また、電子スピン共鳴の実験結果との比較を行う。さらに、当初の研究計画の一つである電子輸送特性解析プログラムの開発を次年度に、実施する計画である。さらには、計算手法の拡張も重要な課題として残されている。既存のCIプログラムをKineticMasterEquationのアプローチと組み合わせることで、相関が強い系での電子スピン輸送への問題へ適用することが期待される。
呼吸上皮細胞分化関連因子の遺伝子発現と鼻副鼻腔粘膜病態における関与

遺伝子検索:differential display法を用い、floating後になって出現するバンドの抽出を行った。シーケンスされた25の中から5つを選択し、ノザンハイブリダイゼーションでfloating前後の発現量のチェックを行った。その結果、発現量に差は認めなかった。これはこのテクニックが持っている疑陽性の高さに起因するところが大きいと考えられる。細胞分化が生じている形態学的確認:サイトケラチンの発現を経時的に追った。サイトケラチン8、13、14をそれぞれの抗体を用いて検索した。その結果、floatingを行った時点ではいずれも発現を見なかったが、floating後徐々に出現し、それぞれ下記の分布を示した。・サイトケラチン8:中間層より上層に出現・サイトケラチン13:中間層のみ出現・サイトケラチン14:基底部の細胞と反応繊毛新生過程に特異的な物質の検索:単クローン抗体作製を行った。それらの単クローン抗体のうち、繊毛新生過程に特異と考えられる一種類の抗体(RPCS3a)の特性を調べた。RPCS3aはCellular ELISAにおいて、3日目以降で陽性反応を認めているが、10日目前後の細胞において発現強度のピークを認めた。この10日目前後の培養細胞には、表層部に分泌顆粒を有する細胞の中に多くの中心小体を持った細胞を多数認め、繊毛細胞の前駆細胞であることが伺われた。ELISAの結果、H type 3抗原という糖鎖抗原に対して高い特異性を示した。RPCS3aにて認識されるH type 3抗原の発現量は、培養細胞の繊毛新生過程により変化し、その分化レベルを反映していると考えられる。このことより、H type 3抗原は繊毛新生過程における一つの特異的なマーカーとして考えられる。このH type 3抗原の検索を進めることにより、今後、繊毛細胞の分化の機序を解明することが可能になると考えられる。鼻副鼻腔粘膜由来の呼吸上皮の初代培養は、扁平上皮化を生じやすいが、Floating culture法にて、高率に繊毛細胞への分化を誘導させることができる。筋芽細胞から筋管細胞への分化を制御するMyoDのように、この現象でも特異的遺伝子発現があり、それが形態変化をもたらすと考えられる。今回、Floating culture法を用いて繊毛細胞への分化の誘因となる遺伝子検索を目的としてDifferential Display法(DD法)を用いて研究を行った。慢性副鼻腔炎患者の手術時に摘出される鼻茸、副鼻腔粘膜から呼吸上皮細胞を分離し、floating culture法を用いて培養を行った。Floating前、Floating後3日目、5日目の細胞を用いRNAを抽出した。RNAをcDNAに変換し、DD法にてFloating後になって出現するバンドを抽出した。抽出したバンドは25個あり、これをシークエンスし、その中から5つを選択し、ノザンハイブリダイゼーションにてFloating前後で発現量に差があるかどうかを確認した。その結果、その発現量に差が認められなかった。DD法は疑陽性が多いといわれており、文献によっては70%にも上るという。期待した発現量の差が認められなかった理由の一つは、DD法の疑陽性率の高さにあるものと考えられる。そこで、DD法より疑陽性が少ないといわれるRAP法を用いて現在再検討中である。呼吸上皮において重要な機能を有する繊毛細胞は、一般には基底細胞や分泌細胞から最終的に分化した状態であると言われている。

高率に繊毛細胞への分化誘導が可能なfloating culture法を用いて、この細胞分化、繊毛新生過程の機序を解明すべく、この分化過程に特異的なH type3抗原を認識するマーカー作製を試みた。floating culture法での、繊毛新生開始3日目から5日目の培養細胞を抗原とした単クローン抗体作製を行った。それらの単クローン抗体のうち、floating後0日目の細胞に陰性で3日目に陽性であり、安定して産生される一種類の抗体(RPCS3a)の特性をCellular ELISA、免疫染色、Western blotting,.ELISAを用いて調べた。培養細胞のRPCS3a免疫染色においては、3日目から14日目において陽性細胞を認めた。また、Cellular ELISAにおいても3日目以降で陽性反応を認めているが、10日目前後の細胞において発現強度のピークを認めた。この10日目前後の培養細胞には、TEMで観察すると、表層部に分泌顆粒を有する細胞の中に多くの中心小体を持った細胞を多数認め、繊毛細胞の前駆細胞であることが伺われた。Western blottingでは、糖鎖に対する抗体であることを示唆するグローバルなbandを示し、EUSAではH type3抗原という糖鎖抗原に対して高い特異性を示した。RPCS3aにて認識されるH type3抗原の発現量はCellular ELISAによって、培養細胞の繊毛新生過程により変化し、その分化レベルを反映していることが示された。このことより、H type3抗原は繊毛新生過程における一つの特異的なマーカーとして考えられる。このH type3抗原の検索を進めることにより、今後、繊毛細胞の分化の機序を解明することが可能になると考えられる。
SLEの増悪に寄与する患者由来膜小胞の性状解析を基盤としたSLEの病態解明

全身性エリテマトーデス(SLE)は若年女性に好発する難治性の自己免疫疾患である。治療にはステロイドなどが用いられるが、様々な副作用が問題となり、病態生理にもとづく副作用の少ない治療が求められている。本研究では、type I IFNを誘導するApoptosis derived membrane vesiclesに注目し、type I IFNの産生メカニズムの解明と新規バイオマーカーとなる分子の同定を目指す。この研究により、SLEのtype I IFN過剰産生に関わる病態生理にもとづいた治療標的が明らかになり、より副作用の少ない新規治療薬の開発および新規バイオマーカーの樹立が期待できる。
家畜の卵胞発育・排卵制御に資するエストロゲンフィードバックの分子メカニズムの解明

本研究は、哺乳類において、卵胞発育と排卵を制御するエストロゲン(E2)の正と負のフィードバック機構の解明を目的とした。本研究では、遺伝子改変ラットやマウス、ブタ、反芻動物モデルのヤギ、サルを用い、視床下部弓状核および前腹側室周囲核/視索前野に局在するキスペプチン(Kiss)神経が、それぞれE2の負および正のフィードバック中枢であることを示し、家畜やヒトの生殖障害の課題解決に資する基礎的知見を得た。また、各神経核のKiss神経に共発現する転写因子Aを発見した。さらに、E2のフィードバック効果の分子機構の検討に資するラットの両神経核由来のKiss神経不死化細胞株を樹立した。本研究は、哺乳類のメスの卵胞発育と排卵を制御するエストロゲンのフィードバック機構に着目し、エストロゲンの負および正のフィードバックによる性腺刺激ホルモン分泌制御の分子メカニズムの解明とその応用の検証を目的としている。26年度は、動物の生殖機能を最上位から支配するキスペプチンニューロンのうち、視床下部弓状核のキスペプチンニューロンに発現するGタンパク共役型受容体のうちGPR101に着目して研究を行った。GPR101のリガンドである性腺刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)部分ペプチドの脳内投与が、エストロゲン依存性に黄体形成ホルモン(LH)分泌を亢進することを明らかとし、この促進効果がキスペプチンKOラットで見られなかったことから、GnRH部分ペプチドがキスペプチンニューロンに直接作用し、これら両ニューロンによるショートループポジティブフィードバックによりGnRH分泌を促進することを示し、この成果をEndocrinology誌に投稿した。さらに、弓状核および前腹側室周囲核(AVPV)に局在するキスペプチンニューロンに発現する遺伝子を、次世代シーケンサーによりリスト化したことも、大きな成果であった。現在は、この遺伝子リストを元に、エストロゲンによるKiss1遺伝子発現に関わる転写因子をin vitro系にて検討する準備を行っているところである。本研究は、ほ乳類のメスの卵胞発育と排卵を制御するエストロジェンのフィードバック機構に着目し、エストロジェンの負および正のフィードバックによる性腺刺激ホルモン分泌制御の分子メカニズムの解明とその応用の検証を目的としている。平成27年度は動物の生殖機能を最上位から支配し、エストロジェンのフィードバック作用を仲介すると考えられるキスペプチンニューロンにおける、エストロジェンのキスペプチン遺伝子発現に対する効果を明らかにする為、キスペプチンニューロン由来の不死化化細胞株の作製の為の研究を実施した。成熟雌ラットより視床下部を採取し、キスペプチンニューロンが局在する前腹側室周囲核および弓状核を含む領域に二分した後に、細胞を単離培養した。続いて、SV40 T-antigenとネオマイシン耐性遺伝子を含むレンチウイルスベクターを感染させた後に、抗生物質(G418)を含む培養液で選抜し、キスペプチンニューロンの不死化細胞を作製を試みた。前腹側室周囲核あるいは弓状核を含む視床下部組織よりそれぞれ85個、91個の候補細胞株を得た。リアルタイムPCRにより、Kiss1、Tac3、Pdyn、Esr1などのキスペプチンニューロンに発現することが明らかとなっている遺伝子の発現を解析し、現在までに、前腹側室周囲核あるいは弓状核に由来するキスペプチンニューロン不死化細胞候補株を複数得た。今後は、これらの不死化細胞を用いて、in vitro系にてエストロジェンの負および正のフィードバックによるKiss1発現およびキスペプチン分泌制御の分子メカニズムを検討する。さらに、本年度は、可視化キスペプチンニューロンのトランスクリプトーム解析によって得られたデータを詳細に解析した。概要に記したように、本年度は、ほ乳類のメスの卵胞発育と排卵を制御するエストロジェンのフィードバック機構を仲介するキスペプチンニューロンの不死化細胞株の作製をすすめ、順調に、複数の候補細胞株を見いだした。正のフィードバックを仲介すると考えられる前腹側室周囲核と、負のフィードバック作用を仲介すると考えられる弓状核の両組織からキスペプチンニューロン不死化細胞株の候補が複数得られたことは、今後の研究の発展に大きく寄与すると考えている。なお、これまでに、可視化キスペプチンニューロンのトランスクリプトーム解析により前腹側室周囲核および弓状核キスペプチンニューロンに発現する転写因子群を明らかにしており、その知見と本年度確立した不死化細胞株を用いたIn vitroの実験系において、エストロジェンのフィードバック機構の分子メカニズムを明らかにできることが期待される。本研究は、ほ乳類のメスの卵胞発育と排卵を制御するエストロゲン(E2)の負および正のフィードバックによる性腺刺激ホルモン分泌制御の分子メカニズムの解明とその応用の検証を目的としている。本年度はE2のフィードバック作用を仲介すると考えられるキスペプチンニューロンにおける、E2のキスペプチン遺伝子(Kiss1)発現に対する効果を明らかにすることを目的とし、次のin vitroおよびin vivo実験を実施した。In vitro実験:キスペプチンニューロン由来の不死化細胞株の作製およびスクリーニングを実施した。雌ラットより採取した前腹側室周囲核(AVPV)あるいは弓状核(ARC)をから得た細胞をSV40 T-antigenにより不死化し、AVPVあるいはARCよりそれぞれ85個、91個の候補細胞株を得た後、リアルタイムPCRにより、Kiss1、neurokinin B(NKB)遺伝子、dynorphine A (Dyn)遺伝子、E2受容体遺伝子(Esr1)などのキスペプチンニューロンに特徴的に発現する遺伝子群の発現を指標とし絞り込みを行った。

その結果、有力なARC候補株としてrR49、rR60株を、AVPV候補株としてrV7、rV73、rV79を得た。さらに、ARC候補株rR49に、キスペプチン、NKB、Dynが発現することを免疫組織化学により確かめた。その後、本株のE2添加によるKiss1発現量の変化を解析した所、E2による有意な変化は得られなかった。In vivo実験:性成熟前ラットを用いて、E2依存性にKiss1発現が抑制されることを明らにした。一方で、NKBおよびDyn遺伝子については、性成熟前後で大きな違いは認められなかった。このことから、性成熟前にはKiss1特異的にE2が発現抑制効果を有することを明らかにしたIn vitro実験:エストロゲンによるキスペプチン遺伝子発現制御(正および負のフィードバック)の分子機構を明らかにするためのツールとして、当初の目的のとおり、有力な不死化細胞培養株を得た。一方で、最有力株を用いてエストロゲン添加実験をした結果、予想と異なり、残念ながら、ARCあるいはAVPV由来不死化株で、キスペプチン遺伝子発現が、抑制(ARC)あるいは促進(AVPV)されなかったため、現在進行形で、新たな他の候補株により同様の実験を実施している。In vivo実験:性成熟前のラットを用いて、E2依存性にキスペプチン遺伝子発現が抑制されることを明らにした。一方で、NKBおよびDyn遺伝子については、性成熟前後でそれら遺伝子発現に大きな違いは認められなかった。このことから、性成熟前にはキスペプチン遺伝子特異的にE2が発現抑制効果を有することを明らかにした。また、昨年度までに得た、Kiss1発現制御に関わる可能性が高い転写因子群のsiRNA投与実験の為の、脳手術の実験計画もたてつつあり、総合として、概ね順調に進展していると自己評価できる。本年度の本研究で得られた成果の概要は以下の通りである。1)神経核特異的にキスペプチンニューロンに発現する転写因子・コファクター,ヒストン修飾蛋白,SNARE蛋白の探索と絞り込み本年度の研究により、申請者は、正および負のフィードバックを担うエストロゲンの作用部位と想定した2つの神経核、すなわち前腹側室周囲核(AVPV)および視床下部弓状核(ARC)それぞれに局在するキスペプチンニューロンに特異的に発現する転写因子、コファクター、ヒストン修飾蛋白、SNARE蛋白質があることを発見し、リストを作成し、そのプロット解析を実施した。さらに、2つの神経核に局在するキスペプチンニューロンにそれぞれ特異的に発現する候補因子を絞り込みをおこなった。その結果、両神経核の同ニューロンには、キスペプチン遺伝子(Kiss1)の発現が高い時に、共通のヒストン修飾蛋白Aが発現することを発見した。さらにヒストン修飾蛋白AとKiss1との共存をdouble in situ hybridization法により確認したところ、そのキスペプチンニューロンとの共存率が、それぞれの神経核で80%を越えることを明らかにした。2)候補因子の生理的な役割を解明するための実験系の整備
マウス胚性幹細胞を用いたジーントラップ法によるゲノム欠失型疾患モデルマウスの作出

新規ジーントラップベクターの構築と機能確認マウス胚性幹(ES)細胞ゲノムに欠失(数kb数百kb)を引き起こすための新規ジーントラップベクターを4種類構築した(GT-a、-b、-c、-d)。レポーター遺伝子としてはLacZとEGFPを用い、薬剤耐性遺伝子としてはネオマイシン耐性遺伝子neoとハイグロマイシン耐性遺伝子Hygを用いた。Neo-LacZでセンス転写ユニット(IRESを介したdicistron)を成し、Hyg-EGFP(融合遺伝子)でアンチセンス転写ユニットを構成している。本研究では、シングルジーントラップのみならず、ダブルジーントラップも想定している。従って、上記4種類のベクターの1つ『GT-a』にはneo-LacZユニットとHyg-EGFPユニットのどちらにもプロモーターを付していない。『GT-b』『GT-d』は『GT-a』のコントロールベクターである。『GT-b』と『GT-c』については片方のユニットそれぞれにプロモーターを付けてあり、『GT-d』にはどちらのユニットにもプロモーターを付けてある。マウスES細胞へ遺伝子導入する前に、構築したベクターが細胞内できちんと機能するかどうかを調べるための実験を行った。ラットアストログリオーマ由来のC6細胞に、リポフェクション法によって一過性及び永久的にそれぞれ遺伝子導入した。その結果、『GT-b』『GT-c』のベクターを用いた実験から、センス及びアンチセンス転写ユニットはどちらも機能的であることが分かった。また、『GT-d』を用いた実験から、両ユニットが各プロモーターでダブルドライブされた場合にもセンス-アンチセンス転写ユニットは同時に独立して機能することが分かった。また、ノーザン解析、鎖特異的RT-PCR解析によっても、両ユニットの適切な転写を確認した。従って、本研究の遂行に必要なベクターの構築が確認され、レポーター遺伝子(LacZ、EGFP)や薬剤耐性遺伝子(neo、Hyg)が機能することが分かった。これらベクターを用いて実際にES細胞に遺伝子導入し、ゲノム欠失を伴った細胞株の樹立を目指す。1.新規ジーントラップベクターの構築マウス胚性幹(ES)細胞ゲノムに欠失(数kb数百kb)を引き起こすための新規ジーントラップベクターを4種類構築した(GT-a、-b、-c、-d)。2.新規ジーントラツプの機能確認マウスES細胞へ遺伝子導入する前に、構築したベクターが細胞内できちんと機能するかどうかを調べるための実験を行った。今後はマウスES細胞へ効率良くベクターを導入するための条件を検討し、ゲノム欠失したマウスES細胞株を樹立する。

従って、本研究の遂行に必要なベクターの構築が確認され、レポーター遺伝子(LacZ、EGFP)や薬剤耐性遺伝子(neo、Hyg)が機能することが分かった。これらベクターを用いて実際にES細胞に遺伝子導入し、ゲノム欠失を伴った細胞株の樹立を目指す。
F因子DNA―タンパク質高次複合体構造のモジュレーションと分配機能

I.sop遺伝子産物とF因子DNAとの相互作用1.SopAとF因子DNAとの相互作用の解析:sop遺伝子のプロモータオペレータ領域にある、SopAの結合配列4つは、ほぼ同等の抑制効果をもっていることが明らかになった。SopAタンパク質の結晶化に成功した。2.SopBとF因子DNAとの相互作用の解析:SopBによるサイレンシングは、このDNA結合タンパク質が高密度に存在するために、非特異的DNA結合が起こることが原因であることを示した。II.sop遺伝子産物と相互作用するホスト因子の検索1.SopAと相互作用するホスト因子の検索:Far Western法によって、ATP特異的にSopAと相互作用するタンパク質を検索したところ、4つのリボゾームタンパク質が検出された。2.SopBと相互作用するホスト因子の検索:架橋を行いた実験により、SopBに相互作用する約60KDaのバンドが銀染色で検出された。pIの異なるSopBのminor speciesを発見した。BrCN分解産物のMS解析の結果、両末端の近くに未知の修飾のなされていることが明らかになった。III.染色体分離とDNA-タンパク質相互作用1.染色体分離に関与するタンパク質の細胞内局在:ヒトDNAトポイソメラーゼIIIβの細胞内局在は核に局在し、M期に染色体と結合することが分かった。2.染色体分離に関与するタンパク質と相互作用するタンパク質の解析:ヒトDNAトポイソメラーゼIIIαを餌としてTwo-Hybridスクリーニングによって発見されたHSJ2について、Alternative Splicingによって作られる短い方の産物は細胞全体に、長い方は核に局在することが明らかになった。F因子DNAと分配遺伝子産物SopAタンパク質、SopBタンパク質の相互作用による高次複合体構造、および、そのモジュレーションによる分配機能の達成のメカニズムを解明することが研究の目標である。本年度の実績は以下の通りである。(1)SopBタンパク質にはpIの異なる2つの分子種のあることが、2次元電気泳動の結果明らかになった。どのような違いによるのかを明らかにするために、トリプシン処理したタンパク質をMALDI-TOF-MSで解析したが、塩基性残基が非常に多いため短いペプチドが多くなり、有効なスペクトルを得ることができず、結論を出すに至っていない。(2)Far Western法による解析によって、SopAタンパク質に相互作用する大腸菌タンパク質が数種あることが明らかになった。しかもその相互作用はATPに依存していた。相互作用するタンパク質のうちの3つはリボソームタンパク質であることがN末解析の結果わかった。現在、残りのタンパク質を解析中である。なお、SopAを固定化したカラムを用いた場合、可溶成分には相互作用するものが見られないため、膜成分に相互作用の重要なタンパク質がある可能性が高い。(3)SopAタンパク質はpH6付近において硫安を沈殿剤として針状に結晶化することがわかった。現在、結晶解析ができる質のものを得るための結晶化条件を探索中である。(4)SopAタンパク質とDNAの結合はATPの存在に依存することを確認した。結合モードの詳細を解析中である。本研究の目的は、大腸菌のF因子DNA分配遺伝子産物、SopAとSopBとF因子DNAとの高次複合体の構造、および、そのモジュレーションによる分配の遂行過程を解明することにある。本年度の成果は次の通りである。(1)等電点電気泳動により、SopBには2つの分子種の存在することが明らかになった。消化酵素による分解産物をHPLCで分離してTOF-MSをおこなった結果、遺伝子によってコードされているアミノ酸配列からは予測されないペプチドが2種検出された。修飾部位は、N末とC末に存在することが分かったが、分子量の差は、既知の修飾によってもアミノ酸置換によっても説明できない。

(2)SopBと細胞内で結合するタンパク質を、アミノ酸特異的な可逆な架橋反応と、抗SopB抗体カラムを用いて単離できることが明らかになった。結合の化学量論数はほぼ1:1である。(3)SopAを精製して結晶化を試みた。その結果、1.4-1.7M硫安、0.1Mクエン酸pH5.8、20°Cで板状結晶が集積したものが得られた。(4)SopAのDNA結合部位は自分の遺伝子のプロモータ領域に4つあることが報告されているが、結合様式は不明である。それぞれの塩基配列を改変したところ次のことが明らかになった。(1)ミニF因子DNAのコピー数に変化はない。(2)最上流の結合部位に変異を入れたものでは、SopAの生産量が約2倍、その他のものでは約2.8倍に増大した。(3)SopBの生産量は約1-1.3倍であった。
モバイル共有空間における多元アクセス方式の実現

本研究では,モバイルコンピューティングでの利用を前提に,無線通信の弱点を補い快適な通信環境を実現する手段のひとつとして,複数のモバイル端末を有機的に連携させてアドホックネットワークを構築し,そのネットワークと固定通信網との通信品質の向上を図る「通信回線共有方式(SHAring multiple paths procedure for cluster network Environment)」を開発し,モバイルコンピューティング環境におけるサービス品質の向上を目指して研究を行った.通信回線共有方式は,一時的なグループに属する近接した複数のモバイル端末それぞれがもつグループ外への複数の無線通信路をグループ内の端末が共有することで通信品質を向上する.これら複数の通信路へトラフィックを適切に分配することが本方式の根幹技術となるが,この処理はネットワークプロトコル階層におけるアプリケーション層,トランスポート層ネットワーク層のいずれでも行うことができる.そこで,本研究では通信回線共有方式をこれら各層で実現することを試みた.具体的成果として,WWWのトラフィックに特化したアプリケーション層での実現であるWeb SHAKE,マルチメディア伝送アプリケーション,Mobile IPを応用したネットワーク層での実現であるMobile IPv4 SHAKEおよびMobile IPv6 SHAKEをそれぞれ開発した.なお,本研究ではTCPの応用によるトランスポート層における同方式の実現も進め,現在更なる研究を推進している.本研究では,モバイルコンピューティングでの利用を前提に,無線通信の弱点を補い快適な通信環境を実現する手段のひとつとして,複数のモバイル端末を有機的に連携させてアドホックネットワークを構築し,そのネットワークと固定通信網との通信品質の向上を図る「通信回線共有方式(SHAring multiple paths procedure for cluster network Environment)」を開発し,モバイルコンピューティング環境におけるサービス品質の向上を目指して研究を行った.通信回線共有方式は,一時的なグループに属する近接した複数のモバイル端末それぞれがもつグループ外への複数の無線通信路をグループ内の端末が共有することで通信品質を向上する.これら複数の通信路へトラフィックを適切に分配することが本方式の根幹技術となるが,この処理はネットワークプロトコル階層におけるアプリケーション層,トランスポート層ネットワーク層のいずれでも行うことができる.そこで,本研究では通信回線共有方式をこれら各層で実現することを試みた.具体的成果として,WWWのトラフィックに特化したアプリケーション層での実現であるWeb SHAKE,マルチメディア伝送アプリケーション,Mobile IPを応用したネットワーク層での実現であるMobile IPv4 SHAKEおよびMobile IPv6 SHAKEをそれぞれ開発した.なお,本研究ではTCPの応用によるトランスポート層における同方式の実現も進め,現在更なる研究を推進している.下記2つのサブテーマに沿って研究を行った。A.通信回線共有方式通信回線共有方式は,各々が無線などによる外部通信路を具備した複数のモバイル端末どうしが,無線LANなどにより一時的なネットワーク(クラスタ)を構成することを想定し,このクラスタとクラスタ外部の固定ネットワーク間での通信時に個々のモバイル端末が持つ外部通信路を同時に使用することで,個々の端末の持つ通信能力が小さくても擬似的に高速な通信を可能とする通信手法である。本年度は通信プロトコルの各階層(ネットワーク層,データリンク層,アプリケーション層)での実現手法の検討と,シミュレーションならびにプロトタイプによる性能評価を行った。また,クラスタ内のモバイル端末の通信資源を管理するプロトコルを設計し,実システム上での性能評価を行った。B.集中無線制御方式集中無線制御方式は,個々のモバイル端末の無線通信機能に代えて高速無線通信機能をクラスタを代表する装置に持たせ,固定網との通信を効果的に行う手法である。固定網とクラスタの代表機器との間は比較的高速な通信が可能であることを利用して個々のモバイル端末にない通信機能を代用させることを狙っている。本年度は通信回線共有方式でのクラスタ内端末管理方式を応用し,クラスタ外部への通信手段を持たない端末がクラスタ代表装置に通信を委託するための基本方式について検討した。下記2つのサブテーマに沿って研究を行った。A.通信回線共有方式通信回線共有方式は、各々が無線などによる外部通信路を具備した複数のモバイル端末どうしが、無線LANなどにより一時的なネットワーク(クラスタ)を構成することを想定し、このクラスタとクラスタ外部の固定ネットワーク間での通信時に個々のモバイル端末が持つ外部通信路を同時に使用することで、個々の端末の持つ通信能力が小さくても擬似的に高速な通信を可能とする通信手法である。通信回線共有方式は複数の異なるプロトコル階層で実現可能であるが、本年度は昨年度にプロトタイプが完成しているアプリケーション層での実現方式の実環境での試験、動的な環境変化への適応、および問題点であった転送データサイズが小さい場合の効率低下を防ぐ機能改善を進めた。また通信回線共有方式のIP層での実現方式としてMobile IPを応用した方式を設計し実装を進めた。さらに、通信回線共有方式の応用として、マルチメディアデータのストリーミング転送時の基礎的な特性評価と、効率的なストリーミング転送のためのアプリケーション設計を行った。B.集中無線制御方式集中無線制御方式は、個々のモバイル端末の無線通信機能に代えて高速無線通信機能を、クラスタを代表する装置に持たせ、固定網との通信を効果的に行う手法である。本年度は通信回線共有方式でのクラスタを無線アドホックネットワークで構成した場合のクラスタ内端末の管理方式を設計し、プロトタイプによりその効果を確認した。

複数のモバイル端末を有機的に連携させてアドホックネットワークを構築し,そのネットワークと固定通信網との通信品質の向上を図る通信方式(A)通信回線共有方式と(B)集中無線制御方式の2つについて研究を進めた.(A)通信回線共有方式とは,各々が無線などによる外部通信路を備えた複数のモバイル端末同士が無線LANなどによってつくる一時的なネットワークと固定通信網との間の通信を,各端末の持つ通信路を同時に使用して行う方式であり,この通信方式を異なるネットワークプロトコル階層で実現することを検討してきた.これまでの研究ではアプリケーション層における実現ソフトウェアの実環境での利用により,動的に変化する通信状況への対応が必要不可欠であることが明らかとなった.昨年度は,アプリケーション層での実現ソフトウェアによって周囲のモバイル端末の状態が変化しても対応できるような管理機構を組み込み評価を行った.また,これまで基本設計を終えたモバイルIP対応型システムのプロトタイプを実装し,通信環境の変化に応じてトラフィックの分配率を動的に変更する機構を組み込んだ.小規模計算機ネットワークによって擬似的に移動環境を構築しエミュレートされた通信環境のもとで本機構の動作検証と分配アルゴリズムの評価を行った.(B)集中無線制御方式とは,一時的なネットワークに含まれる一部の携帯端末の通信機能を用いて,外部のネットワーク間と効率的な通信を行う方式である.昨年度は,自分以外の端末から無断に自分の通信機能を利用され,その端末の電力や通信リソースがその端末のユーザの意図に反して無駄に使用されてしまわないように制御する端末間の強調機構の検討とプロトタイプの実装を行った.有線に比べて通信速度が遅く,通信品質の変動が大きな無線通信路を使わざるを得ない移動体通信において,複数の移動端末を連携させて高速,高信頼な通信を実現する通信回線共有方式に関する研究を行った.通信回線共有方式とは,各々が無線などによる外部通信路を具備した複数のモバイル端末どうしが,無線LANなどにより一時的なネットワーク(クラスタ)を構成することを想定し,このクラスタとクラスタ外部の固定ネットワーク間での通信時に個々の移動端末が持つ外部通信路を複数同時に使用することで,個々の端末の持つ通信能力が小さくても高速な通信を可能とする通信手法である。本年度までの研究により,インターネットの標準プロトコルであるTCP/IPを用いる環境で,移動端末とそれに関連する最低限の機器のみへの機能追加によって,通信回線共有方式による通信を現実的な環境で実現できる見通しを得た.通信回線共有方式は複数の異なるプロトコル階層で実現可能であるが,本年度はIP層での実現を中心に検討を進めた.
ウェアラブルな呼吸センサ開発と実践応用に関する研究

提案している呼吸センサ信号の周波数特性を考察し、信号はほぼ容量性でありその値は皮膚周辺で決まっていること、容量そのものが変化していることが分かり、電気的な皮膚の厚み変化が信号発生の主原因であると考えられた。そこで、皮膚に密着する電極により、体の信号を正確に測定する方針で進めた。電極貼り付けが安定すると、長時間計測が可能で、食事による体のふくらみの変化も静電容量の変化となって表れる。また運動しながらの呼吸計測を行い、ノイズは生じるものの、歩行、走行、上半身ねじり、前後屈の動きの中で被験者の呼吸信号を継続計測できた。提案検出方式で、容量が呼吸に合わせて変化する原理解明が、実践応用やデータ解析には不可欠との指摘を受け、原理検証を意識したモデル実験、様々な被験者条件での実験を行った。手作りの容量計測センサユニットについて、出力信号の時定数がダイオードのON/OFFで変わってしまうことが昨年度問題と分かったため、市販の容量測定装置を利用することとした。周波数特性(安全基準を照らし合わせて50k-5MHzの範囲)では、位相も合わせて測定した。Tシャツ裏側に固定した電極では体由来の信号ではなく、体-衣服間ギャップが信号源ともなり紛らわしいため、検証実験は導電性布電極を伸縮性スポーツテープで体に密着して貼り付けて測定した。(1)体を単純に水や空気として電極配置から計算した容量と比較すると、計測容量値は大きく異なることから、電極間の平均的な比誘電率を測定している訳ではないことを示唆した。(2)体動や姿勢の変化が、容量信号を変化させることを確認した。電極から離れた部分の動きは影響がほぼ無いことも分かった。(3)空気の出入りを止め、肺-腹間で空気を移動させると、位相に明確な変化が現れた。(4)ほぼ1/fの周波数依存性が複数の被験者で観察され、信号は主として容量性であることを確認した。(5)周波数がMHz以上に高くなると、容量性から誘導性(利用したケーブル類の性質とも考えられる)に変化することが多く(被験者にも依存)、呼吸測定は数100kHzで行うことが好ましい。(6)測定の際に全身を導電性布で覆うと、測定値が安定し易い。原理解明には至っていないが、センサ構成を改良する機器類のノウハウも得られた。また、齊藤教授グループは佐々木らが提供したセンサ(部品を一部修正)を使って、運動時の呼吸信号測定実験を進めた。人体を挟んだ電極で形成する容量計測式のセンサの研究を以下のように進めた。(1)製作したウェアラブル呼吸センサの設備としての高度化を進めた。まず、容量検出が胸部と腹部の2箇所で可能となるように2チャンネル化した。測定データが同時に得られるようになり、波形が異なるなど、別の信号が得られていることを確認した。特に、胸部と腹部とでは変化の仕方が逆になることが分かった。また、バッテリ駆動でZigbeeを利用した無線による信号転送を実現した。パソコン画面上にデータ値が表示されて流れる状態であるが、それを記録してグラフ化し、有線の場合と同じように得られることを確認した。有線タイプのセンサユニットを齊藤満教授に提供した(不具合の修理に1度対応した)。実際に製作したセンサを着て、ある学生に3時間睡眠をとってもらったところ、無呼吸になっていると思われる様子もデータから判断が付いた。(2)スパイロメータで得られるFlow-Volumeカーブにどれだけ近いカーブを本方式で出せるかを調べた。Flowについては、容量信号の時間変化に該当させた。衣服ではなく、皮膚に直接電極を貼り付けた(サロンパスのような電極固定)。6分間の呼吸信号測定前後で、深呼吸した際の信号ベースがほぼ同じで信号ドリフトが少ないことを見出した。さらに、腹よりも胸に貼り付けた電極から得られる信号の方が、Flow-Volumeカーブに近いものを示すことを見出した。その際には、現在の自作回路の時定数が最適ではないことも明らかとなり(今後改良していく)、購入設備であるインピーダンスアナライザを用いて容量信号測定を行った。並行して、学会発表と雑誌論文投稿を進めた。科研費申請時点で、静電容量による呼吸計測方式を見出していたが、信号発生の原因や、実践応用に必要な運動中の計測は実現できていなかった。昨年度得られた周波数特性を考察し、信号はほぼ容量性で皮膚周辺で値が決まっていること、容量そのものが変化していることが分かり、皮膚の電気的な厚み変化が信号発生の主原因であると考えられた。電極貼り付けに、スポーツテープやジェルシート(傷口カバー用)を利用するのに比べて、エアウォール(厚さ7μmのドレッシングフィルム)を電極下地とカバーに貼る方法が良いと分かった。容量信号が大きく、汗による計測不良を回避し、安定固定により再現性が向上した。

(1)長時間計測:電極を腹部に貼り付けたまま、朝、昼食前、昼食中、昼食後、15時、16時の計6回、姿勢を安定させて平常呼吸を測定した。息を吸ったときは容量が増加し、吐いた時は減少する(約10pF)に加えて、空腹時は静電容量のベースラインが減少し、満腹時は増加した。(2)運動中の計測:無線ユニットにより被験者の運動を可能にした。(a)上半身を約110°ひねった条件、(b)前後屈の条件で平常呼吸を計測した。体動は多少のノイズを生じたが、呼吸信号が観察できた。皮膚がたるんだり伸びたりすると変化の割合が小さくなることから、静電容量の変化は皮膚の変化に相関があると再確認した。容量値の最大/最小は4倍程度で、センサが用意すべき計測範囲の問題にならないと考える。以上、提案方式の呼吸センサは、皮膚の伸び縮みを主として測定しているという知見に至った。電極貼り付けが安定すると、長時間計測が可能で、食事による体のふくらみのような変化も静電容量の変化となって表れる。数例であるが、歩行、走行、上半身ねじり、前後屈の動きの中で被験者の呼吸信号を継続計測できた。高校生向け研究紹介の記事が掲載予定(理工、生命系学部・学科進学ブック「テクノ・コム'16」西北出版株式会社(発刊部数10万部)。豊田工業大学難環境作業スマート機械技術研究センター第1回シンポジウム(2014.11.6)にてポスター発表。愛知学院大学論叢心身科学部紀要第11号2015年12月に紹介予定。第62回応用物理学会春季学術講演会11p-A29-9は注目論文に選出された。センサおよび微細加工技術本研究テーマを進める予定の学生が完全に不登校となり、PD研究員も該当者が無い状態が続き、豊田工業大学の教員が実務に時間を割く対処法では、研究遂行の人的資源が不足した。年度後半には、学生の復帰による研究再開を図る方針から、別予算にてアルバイトの方を雇用して研究を進める方針に切り替えた。これによりデータの蓄積が進み、方針が得られるようになった。センサの高度化を進めることができた。デモンストレーションも行え、藤満教授に1つを提供することもできた。また、無線タイプのセンサユニットもできた。実践的な計測は、睡眠時の無呼吸チェックを行った程度であるが、様々な計測ができる下地はできてきた。また、雑誌論文も掲載された。2013年春の応用物理学会に投稿したところ、注目論文として取り上げられた。以上から、おおむね順調に進んでいると判断する。H26年度5月現在、人的資源に問題は無く研究を進めている。昨年度蓄積したデータの一部を学会発表するべく投稿したところである。今後は、様々な信号の傾向を基に、測定原理を解明し、センサのハードウェアに反映させる。体動の影響を少なくすると同時に、適用範囲を明確にした、ウェアラブルセンサを実現する。このために、衣類と組み合わせる部品類や構成の仕方を明確にする。実践的な応用を齊藤教授グループと相談しつつ検討する。様々な運動時の呼吸信号を測定していく。無線化したシステムも積極的に利用する。
情報処理系としての神経系進化の分子生物学的研究

1.長期記憶と遺伝子発現小脳プルキンエ細胞への共刺激特異的に遺伝子発現が誘導される可能性を検討し、小脳スライス、及びin vivo動物に於て薬理学的に共刺激条件を代替した実験条件下で、最初期遺伝子の中でも特に、jun-B遺伝子の発現が誘導されることが解った。2.視聴覚弁別学習課題下での遺伝子発現坂田・木津川等は、櫻井芳雄博士(現京都大学文学部)と共同でラットにおける視聴覚課題弁別課題遂行下での脳内におけるc-fos遺伝子発現を調べ、聴覚学習下で聴覚野に有意にc-Fos発現が促進されることを明らかにした。3.ラット脳特異的に発現する新規反復配列遺伝子の発現小峰等は、生理的意味が不明ではあるが、その遺伝子がラット属にのみ存在し、且つ、脳に特異的に発現している新規反復配列遺伝子(Brain Specific Repetitive :一ゲノムあたり凡そ150コピー程度存在する)を発見した。4.色覚異常ザルの発見色覚異常は、ヒトに於ては、数%近く観察され、その殆どは、伴性遺伝によるものである。しかし、ヒトに近い旧世界ザルでは、色覚異常は知られてなかった。大西、小池等は、3153頭のマカカ属サルDNAを解析することにより、3頭の二色性色覚異常ザルを発見し、サルに於ける色覚異常の出現頻度がヒトに比べ有意に近いことを明らかにした。5.大脳皮質領域特異的に発現する遺伝子の発見大脳皮質は、哺乳類において発達し、高次脳機能発現の重要な座であるが、領野と呼ばれる幾つもの機能的領域に分けられることが明らかになっている。しかし、大脳皮質領野がどの程度まで遺伝的にプログラムされ、どの程度まで環境入力によって決定されているのかは、なお解明されていない。我々は、大脳皮質領野に特異的に発現する遺伝子を分離・同定することによりこの問題解決にアプローチした。栃谷等は、視覚野に特異的に発現する遺伝子(OCC-1)を、渡我部等は、運動野において他の領野より有意に多く発現する遺伝子(GDF7)を見出した。小脳プルキンエ細胞への主要入力である平行線維と登上線維を共刺激した時に生じる平行線維からプルキンエ細胞への伝達効率の長期にわたる低下(長期抑圧:LTD)は、小脳学習のモデルと考えられている。研究代表者等は、これを薬理学的に代替したAMPAと膜透過性の8-Br-cGMPの共投与によっても、c-FosとJunBの共発現が促進されることを発見した。このことは、LTD条件下においても、共刺激特異的に、c-FosとJunBの発現が誘導され、その結果c-Fos/JunBのAP-1複合体が形成され、引き続く新たな遺伝子群の転写を活性化し長期記憶へと導く可能性を示唆する。1)薬理学的条件をより生理学的な刺激条件に引き戻すべく、8-Br-cGMPを下オリーブ核刺激による登上線維刺激に置き換えて、AMPAと共刺激すると、AMPAを投与した周りに局所的にJunBの顕著な発現を確認した(平成7年度に発表済み)。現在、平行線維側刺激を構成するAMPA以外の薬理学的条件を更に、検討中である。2)こうしたc-Fos/JunB複合体により活性化される遺伝子群を明かにしつつある。