hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
テトラスパニンＣＤ８１を標的とした新規リウマチ治療薬および診断薬の開発

CD81を標的とした、新たな抗体薬としてのリウマチ治療薬開発と早期リウマチ診断薬の開発が本研究の目的であるが、ほぼ予定通り、CD81の組換えタンパク質を大量生産し、これを抗原として免疫を行い、抗CD81モノクローナル抗体を得た。さらに、これらの抗体の性状についての解析も進んでおり、平成24年度には予定通り、モデルマウスを用いた治療実験に入る予定である。また、診断薬についても、今回樹立したモノクローナル抗体を用いたサンドイッチELISAの測定系確立が進んでおり、ほぼ測定は可能であるという結果を得ている。平成24年度は関節液を用いた実際の測定実験に入る予定である。(1)モデル動物抗体治療実験をさらに繰り返して、有効性を確認する。(2)抗体治療実験における毒性や組織への影響についてさらに詳細に解析する。(3)臨床試験に向けて、その準備を進める。(4)抗体の作用機序について、リガンド探索、Tgマウス作製など残っている課題を進める。(5)抗体の他の細胞に対する影響を引き続き解析する。治療薬開発については今年度モデル動物を用いた治療実験を開始する。また診断薬については、現在開発中のサンドイッチELISA系の改良を行って感度を上げ、実際の関節液を用いた測定試験を行う予定である。また、平成23年度計画の中で実施できなかった、トランスジェニックマウスの作製や組換えアデノウイルスの導入実験等を実施し、CD81の生体における生理機能についても基礎的解明を試みる予定である。細胞培養培地・器材費、DNA実験試薬、抗体費、動物実験費950,000円旅費100,000人件費100,000論文投稿費等50,000計1,200,000細胞培養、DNA実験試薬、器材費、抗体調製費、動物実験費850,000円旅費200,000人件費100,000論文投稿費等50,000計1,200,000
抑うつ状態と末梢の慢性炎症・酸化

[背景]うつ病または抑うつ状態は、健全な生活を阻害する大きな要因であり、その健康影響は増大している。うつ病の原因の1つが、神経炎症にあることが近年注目されている。[目的]一般集団における、慢性炎症・酸化と抑うつ度/幸福度の関係を精査し、うつ病予防の方策を探る。本年度は、詳細な統計解析を行い、各因子の関連性を、交絡因子を考慮した上で、炎症・酸化・抑うつ度について導き出すことが、目的であった。[対象と方法](1)地域住民約400名を対象とし、抑うつ度を測定し、炎症に関連するサイトカインの血清中濃度を測定し、それを抑うつ度と比較した。(2)さらに、神経炎症および神経酸化傷害に関する過去のデータ(女性労働者133名)を解析し、炎症性サイトカインおよび酸化LDL、n-3多価不飽和脂肪酸とうつ状態の関連性を解析した。[結果](1)IL-17Aは、女性においてのみ、抑うつ度と正の相関を示した(単相関p<.05)。これは、交絡因子で調整しても同様であった(偏相関p<.05)。ただし、IL-17Aを横軸とした抑うつ度(縦軸)との関連をプロットしてみると、両者は逆Jカーブを描き、抑うつ度をわずかに示す者で最も低いという結果となった。(2)133名の再解析では、パス解析を行ったところ、精神的ストレスが、IL-6から酸化を介しても抑うつ状態につながる経路も発見した。それらの関係から、n-3多価不飽和脂肪酸の血中濃度は独立していた。さらに、n-3多価不飽和脂肪酸の中のEPAはその機能に注目が集まっているが、幸福感の高さと特に関連した。[結論と課題]性差による違いを解決する課題は残るものの、慢性炎症の抑制とEPAが、うつ病予防に繋がる可能性を示した。[背景]うつ病または抑うつ状態は,健全な生活を阻害する大きな要因であり,その健康影響は増大している.また,うつ病の病態をセロトニン仮説および視床下部-下垂体-副腎仮説だけで説明することは困難である.[目的]一般集団における,慢性炎症と抑うつ度の関係を精査し,抑うつ予防のヒントを得る.[結果]女性のうち,The Center for Epidemiologic Studies Depression Scaleで測定した抑うつ度の高い者19名と低い者19名を選択し,その血清を測定した.それら2群において,血清サイトカイン濃度とカンナビノイド濃度を比較したところ(t検定),いずれも有意差はなかったが,炎症性サイトカインであるIL-6濃度とIL-17濃度は,高抑うつ度群で高い傾向にあった.[結論と課題]末梢の慢性炎症と精神的抑うつ度の関係は,予想に近い結果ではあるが,統計的に有意(p<0.05水準)でないため,さらに評価対象者を増やす必要がある.血清の測定が4月にずれ込んだため、全ての血清の測定が完了していない。[目的]一般集団における、慢性炎症・酸化と抑うつ度の関係を精査し、うつ病予防の方策を探る。[対象と方法]1地域住民約400名を対象とし、抑うつ度を測定し、抑うつ度の高い女性14名と低い女性10名を選択し、炎症に関連するサイトカインの血清中濃度を測定し、それを抑うつ度と比較した。2さらに、神経炎症および神経酸化傷害に関する過去のデータ(女性労働者133名)を解析し、炎症性サイトカインおよび、酸化LDL、n-3多価不飽和脂肪酸とうつ状態の関連性を解析した。[結果]1抑うつ度の高い者では、低い者と比較し、血中IL-17a濃度が有意に高かった(t検定p<.05)。これは、交絡因子で調整しても同様であっ(ANCOVA p <.05)。TNF-αにも同様の傾向が認められたが、外れ値によるものと考えられた。2133名の再解析では、IL-6およびLDLの酸化率が抑うつ状態と正の関連を示し(交絡因子を考慮した階層的回帰分析:いずれもp <0.05)、パス解析を行ったところ、精神的ストレスが最も抑うつ状態と直接関連していたものの、そのストレスが、酸化およびIL-6を介しても抑うつ状態につながる経路も発見した。[結論と課題]IL-17aについては、想定通りの結果であった。また、炎症・酸化・抑うつ状態およびn-3多価不飽和脂肪酸の関連について、新しい試験が得られた。今後の課題としては、データ量を増やし、再現性を確認することと、縦断調査をすることである。測定した血清データに、前年度のものが間違って混入していたため、被験者情報を元にその分類をすることに手間取っている。その反面、過去のデータ再解析により、新知見が得られた。これらのため、進行状況はおおむね予定通りと言える。[目的]

一般集団における、慢性炎症・酸化と抑うつ度/幸福度の関係を精査し、うつ病予防の方策を探る。本年度は、詳細な統計解析を行い、各因子の関連性を、交絡因子を考慮した上で、炎症・酸化・抑うつ度について導き出すことが、目的であった。[対象と方法](1)地域住民約400名を対象とし、抑うつ度を測定し、炎症に関連するサイトカインの血清中濃度を測定し、それを抑うつ度と比較した。(2)さらに、神経炎症および神経酸化傷害に関する過去のデータ(女性労働者133名)を解析し、炎症性サイトカインおよび酸化LDL、n-3多価不飽和脂肪酸とうつ状態の関連性を解析した。[結果](1)IL-17Aは、女性においてのみ、抑うつ度と正の相関を示した(単相関p<.05)。これは、交絡因子で調整しても同様であった(偏相関p<.05)。ただし、IL-17Aを横軸とした抑うつ度(縦軸)との関連をプロットしてみると、両者は逆Jカーブを描き、抑うつ度をわずかに示す者で最も低いという結果となった。(2)133名の再解析では、パス解析を行ったところ、精神的ストレスが、IL-6から酸化を介しても抑うつ状態につながる経路も発見した。それらの関係から、n-3多価不飽和脂肪酸の血中濃度は独立していた。さらに、n-3多価不飽和脂肪酸の中のEPAはその機能に注目が集まっているが、幸福感の高さと特に関連した。[結論と課題]性差による違いを解決する課題は残るものの、慢性炎症の抑制とEPAが、うつ病予防に繋がる可能性を示した。全ての血清の測定を終え、交絡因子(年齢・性・BMI・生活習慣)を変数に入れた上で、抑うつ度と血清指標の関係を求める。上述した研究1の論文化(短報)と2の論文化を行う。また、間違って混入したサンプルの除外作業を完了する。さらに、本年度の血清をすべて測定完了する。血清サイトカイン測定において、2016年度にある程度の目安をつけた上で残りの血清を測定することが、ミスを少なくすると考え、測定のためのキットプレートの購入を少な目にしたから。サイトカイン測定キットを購入するに当たって、別途資金で入手できたため、その分を使用しなかった。この差額分は、カンナビノイドまたはサイトカイン測定キットおよびその解析に必要な物品に使用する予定である。繰越予算で、残りの血清サイトカインを測定する。
情報処理を伴う非平衡定常系における統計力学の理論的研究

測定やフィードバックを含む情報処理過程に適用できる形に,非平衡関係式や熱力学第二法則を一般化する統一的な枠組みを構築することに成功した.それを用いて,情報処理を行う分子機械のモデルの非平衡定常状態におけるエントロピーと情報の生成を求め,両者の関係を明らかにした.測定やフィードバックを含む情報処理過程に適用できる形に,非平衡関係式や熱力学第二法則を一般化する統一的な枠組みを構築することに成功した.それを用いて,情報処理を行う分子機械のモデルの非平衡定常状態におけるエントロピーと情報の生成を求め,両者の関係を明らかにした.本研究の目的は,情報の流れを伴う非平衡定常系における,情報処理の熱力学的性質を理論的に解析することである.平成23年度においては,主に下記のような研究を行い,成果を得た.(1)フィードバックがある状況での非平衡等式と応答理論多数回の測定・フィードバック(連続測定・フィードバックを含む)された非平衡系において,非平衡等式(ゆらぎの定理・ジャルジンスキー等式)の拡張と,それを展開して得られる線形応答関係式について,理論的に研究した.その際,情報量の尺度として,entropy transferとして知られる相互情報量の一般化が重要な役割を果たすことを明らかにした.(2)非平衡定常状態間の遷移において,どのような熱力学ポテンシャルがダイナミクスを特徴づけるかについては,測定やフィードバックを含まない場合についてさえ,線形応答を超えた領域では,これまであまり明らかになっていなかった.そこで,情報との関係を研究するための準備として,まずは測定やフィードバックを含まない場合の,非平衡定常状態間の遷移について研究した.その結果,平衡状態間の遷移とは対照的に,準静的過程でのエントロピー生成を特徴づけるスカラーポテンシャルは一般には存在しないことを明らかにした.そして,ベクトルポテンシャルが非平衡定常状態間の準静的遷移を特徴づけることを明らかにした.得られた結果は,従来なされてきたスカラーポテンシャルに基づく研究が一般には適用できないことを明らかにした意義も持つ.さらに,量子力学におけるベリー位相と共通の数学的構造をもっているという点でも興味深い.この研究は,これまで知られていなかった非平衡ダイナミクスに特有の性質を明らかにする第一歩であり,情報との関係を研究するうえで重要な役割を果たすことが期待される.平成24年度において、当研究課題に関して、主として以下の研究を行って成果を得た。(1)測定やフィードバックなどの情報交換プロセスにおいて、普遍的に成立する「揺らぎの定理」の一般化と、熱力学第二法則の一般化を導出した。これらの一般化においては、情報交換プロセスにおけるエントロピー生成と、交換された相互情報量が対等に扱われる形になっている。またこの結果を導出する際、測定とフィードバックを統一的に扱う枠組みを定式化した。これによって、測定とフィードバックは、お互いにいわば「双対的」なプロセスであることが明らかになった。さらに、この結果は、測定とフィードバックに限らない一般的な情報交換プロセスにおいて成立する。この成果はPhysical ReviewLetters 109, 180602 (2012)から出版された。また、この成果は、下記の研究を行う上で、基礎となる理論的枠組みとなった。(2)自律的な情報処理を行う分子マシンが形成する、情報の流れを伴う非平衡状態についての研究を行った。その結果、定常状態における相互情報量(相関)の生成レートやエントロピーの生成レートを明らかにした。そして、通常の(情報処理を行わない)分子機械の場合と異なり、有限速度で動いているときにエントロピー生成がゼロになることを発見した。これは情報処理を伴う非平衡定常系に特有の、顕著な性質であると考えられる。この成果は論文にまとめられて、現在Physical Review Lettersに投稿中である。非平衡定常系における情報処理を研究するうえで,そもそも非平衡定常系に特有な性質の解明が,,フィードバックがない場合でも困難であるという問題があった平成23年度においては,非平衡定常状態間の遷移の特徴付けについて,これまでの研究とは大きく異なるベクトルポテンシャルを用いた定式化に成功した.これは,平成24年度の研究の基礎となる,大きな成果であると考えられる.一方で,フィードバックがある状況での非平衡関係式・応答理論については,まだ形式的表現しか得られておらず,具体的な系での性質を研究することは平成24年度の課題である.24年度が最終年度であるため、記入しない。平成24年度においては,まず当初の計画通り,情報処理の素過程について理論的研究を行う.また,上記のようた平成23年度においては十分に研究することが出来なかった,フィードバックがある状況での非平衡関係式・応答理論の具体的な系への適用や,最適制御理論との関係を研究する予定である.さうに,平成23年度の成果である非平衡定常状態間の遷移の新たな特徴付けを応用することで,非平衡定常系に特有の情報処理の性質を明らかにしたい.24年度が最終年度であるため、記入しない。
造血器腫瘍の遺伝子診断法の開発と実用化

Evi-1は2つのcluster(第1 zinc finger領域、第2 zinc finger領域)に分かれた10個のzincfinger構造を持つ核内蛋白質をコードし、ヒトでは染色体の3q26上に存在する。Evi-1は正常骨髄細胞ではほとんど発現が認められないが、ヒトの白血病において高発現をすることが知られている。これらのことから、Evi-1は造血細胞の悪性化に深く関与する遺伝子であり、その機能を明らかにすることは造血細胞の悪性化の機構を解明する上で重要である。本研究ではヒトの白血病発症に深く関わるEvi-1遺伝子産物の機能についてさらに解析を進め、以下のことを明らかとした。Evi-1はTGFβの細胞内シグナル伝達分子の一つであるSmad3と核内で結合してTGFβシグナルを阻害するが、この機序には、転写抑制因子であるCtBPがヒストン脱アセチル化酵素(HDAC1)をリクルートしてEvi-1に会合する機構が関与することが明らかとなった。また、Evi-1は、種々のストレスシグナルによるJNKの活性化を特異的に抑制することを明らかにした。Evi-1はJNKと結合し、この結合がEvi-1によるJNKの抑制に必須であった。Evi-1は、JNKによるFasLの発現誘導や細胞のアポトーシスの誘導を抑制した。これらの結果から、Evi-1はJNKと結合し、その機能を不活化することによってアポトーシスを抑制し、細胞の悪性化に関わることが明らかになった。このようにEvi-1は種々のメカニズムを通して細胞の増殖制御を破綻させ、造血細胞を悪性化に導くと考えられる。本研究では染色体転座としてt(3;21)転座を、および癌抑制遺伝子としてp16CDK4抑制遺伝子の解析を行った。その概要は以下の如くである。(1)t(3;21)染色体転座の分子解析の結果、t(3;21)による染色体切断点の遺伝子の再構成によりAML1/Evi-1キメラ蛋白質が産生されることが判明した.生物学的解析によりAML1/Evi-1キメラ蛋白質は造血細胞の分化抑制と増殖促進に作用する可能性が示された.AML1/Evi-1の転写制御因子としての機能を解析した結果、AML1/Evi-1は、(1)AML1と同様にPEBP2部位に結合し、AML1によるPEBP2部位に対する転写活性をdominantに抑制する、(2)AP-1活性を上昇させる、ことが明らかになった.さらに、AML1/Evi-1の転写制御因子としての機能ドメインの欠失変異体を構築して検討したところ、(1)の機能は、AML1のDNA結合領域であるruntドメインに依存し、(2)の機能はEvi-1と同様に第2zincフィンガー・ドメインに依存していることがわかった.以上の結果は、AML1/Evi-1が互いに独立した2つの機能を有する転写制御因子であることを示す.(2)p16遺伝子の血液系悪性腫瘍発症への関与を検討する目的で、種々の血液系悪性腫瘍患者検体におけるp16遺伝子の変異解析を検討した。その結果、410症例中59症例にp16遺伝子の欠損をみとめ、うち47症例(80%)にhomozygous欠損が存在した。p16遺伝子の欠損はリンパ系悪性腫瘍に極めて特異的であり、ほぼ全てのリンパ系悪性腫瘍にp16遺伝子の欠損を認めた。ALLにおける欠損の頻度は40%と極めて高頻度であったが、AML,CMLおよびMDSにおける欠損は希であった。AML1遺伝子は慢性骨髄性白血病の急性転化や骨髄異形成症候群の白血化時に出現するt(3;21)染色体転座により再構成され、AML1/Evi-1融合蛋白質が産生される.AML1/EVI-1キメラ蛋白質は造血細胞の分化抑制と増殖促進に作用する.すなわち、AML1/EVI-1は、(1)AML1と同様にAML1の特異的結合配列(PEBP2配列)に結合し、AML1によるPEBP2部位に対する転写活性をdominantに抑制する、(2)AP-1活性を上昇させる.これらの機能が、それぞれ造血細胞の分化抑制と増殖促進に関与し、leukemic transformationに至るのではないかと推定される。転写因子の中にはリン酸化によってその活性が制御を受けているものが知られる.我々はEGFでCOS細胞を刺激する実験系を用いて、AML1蛋白質がERKによってリン酸化を受けることを見出した.主要なリン酸化部位はPST領域内のS249であり、付加的なリン酸化部位はS266であることが判明した.AML1蛋白質のERKによるリン酸化は、DNA結合能には影響しないが、転写活性を明らかに上昇させること、およびHIH3T3細胞における足場非依存性増殖に必須であることが示された.さらに、AML1蛋白質はERKに構成的に会合し、この物理的会合はERKのキナーゼ活性およびAML1のリン酸化には影響されないことが判明した.以上のことから、AML1の生物学的活性の少なくとも一部はERKによって制御されていると考えられた.これまでに造血器腫瘍に伴う様々な染色体異常が報告されており、特に転座型の異常については転座切断部位に存在する遺伝子の異常と腫瘍化との関連が注目されている。

染色体11q23領域に関連した染色体転座は造血器腫瘍においてしばしば認められ、その腫瘍化のメカニズムに重要な役割を担っていることが示唆される。11q23転座の中で最も頻度の高い染色体転座t(11;19)(q23;p13)は、19番染色体側の切断点によって、t(11;19)(q23;p13.3)とt(11;19)(q23;p13.1)に分類することができる。前者は小児白血病に多く認められ、他の11q23転座と同様にリンパ系の腫瘍やリンパ系と骨髄系の両方の性質を有した腫瘍が認められるが、後者においては骨髄系の腫瘍のみが認められることが特徴的である。前者の染色体転座ではMLL遺伝子と19番染色体上のMLLT1(LTG19,ENL)遺伝子が融合遺伝子を形成することが既に知られているが、後者については、転座の相手方遺伝子は不明である。我々はt(11;19)(q23;p13.1)転座の分子機構を明らかにするとともに、t(11;19)(q23;p13.3)とt(11;19)(q23;p13.1)で引き起こされる白血病のタイプが異なる理由を知る目的で研究を行った。本研究ではt(11;19)(q23;p13.1)転座に関わる19番染色体転座部位の遺伝子を同定することを試み、MLLと新規遺伝子MENが融合遺伝子を形成していることを明らかにした。得られたMLL/MEN融合cDNAクローンには、MLLのexon1からexon7ないしexon8までの塩基配列にMENのほぼ全長の塩基配列が連続するMLL/MEN融合蛋白質をコードするものと、MLLとMENの配列の間にin-frameの停止コドンを含む120塩基の配列の挿入があり、MLLのN末側の約1400のアミノ酸に30アミノ酸が加わった蛋白質(truncated MLL)をコードするものが存在した。MENおよびMLL蛋白質に対する抗体を作成し、MEN、MLL/MEN、truncated MLL遺伝子が実際に細胞内に予想されるサイズの蛋白質として翻訳され、さらに免疫染色でこれらはすべて核内に存在することを証明した。最近、Conawayらは、Ratの肝臓の核蛋白から転写伸長活性を有する蛋白質を精製してアミノ酸配列を決定し、MENのRatホモログであることを示した。転写伸長活性の亢進が癌化に関与する可能性を考え、MEN、MLL/MEN、truncated MLLをRat-1細胞に強制発現させたところ、いずれも軟寒天培地で多数のコロニーを形成し、足場非依存性増殖能の獲得が認められた。以上より、細胞内での転写伸長活性の亢進と細胞癌化との関連が示唆された。t(3;21)染色体転座は、慢性骨髄性白血病の急性転化時ならびに骨髄異形成症候群の白血化時に出現する染色体転座で、AML1/EVI-1キメラ遺伝子を形成することを明らかにした.AML1/EVI-1は、(1)AML1と同様にPEBP2部位に結合し、AML1によるPEBP2部位に対する転写活性をdominantに抑制する、(2)AP-1活性を上昇させる、ことが明らかになった.(1)の機能は、AML1のDNA結合領域であるruntドメインに依存し、(2)の機能はEVI-1の第2zincフィンガー・ドメインに依存することから、AML1/EVI-1が互いに独立した2つの機能を有する転写因子であることが示された.これらの機能が、それぞれ造血細胞の分化抑制と増殖促進に関与し、白血病化に至ると推定された.AML1遺伝子の生物学的および生化学的機能については以下のことが明らかになった.
写像類群の部分群のコホモロジー群と3次元多様体の研究

本年度は2件の研究を行った。写像類群には符号数コサイクルとよばれる整数係数2次コサイクルがあるが、これを適切な部分群に制限するとコバウンダリになることが知られている。これをコバウンドする関数はMeyer関数と呼ばれ、これは代数幾何などの分野で研究されている符号数の局所化という現象と関わっており、位相幾何の分野でしばしば研究されている。この1つとして、3次元ハンドル体の写像類群上におけるMeyer関数について調べた。これは久野雄介氏との共同研究である。具体的にはまず4次元多様体である円周上のハンドル体束の交叉形式の明示的な公式を与えた。またこれを利用し、超楕円的ハンドル体写像類群上の整係数1次コホモロジー類を構成した。本研究内容はプレプリントとして既に公開し、雑誌に投稿中である。写像類群の部分群であるラグランジアン写像類群にはLMO関手と呼ばれるJacobi図のなす空間への準同型が存在する。この準同型は、Johnson写像やLMO不変量などの情報を含む非常に強力な準同型である。これについて、写像類群の部分群列であるJohnsonフィルトレーションにおいてLMO関手の計算を行った。これは鈴木正明氏、野崎雄太氏との共同研究である。現在は計算プログラムを作成している段階であり結果は出ていないが、本研究を進めることにより、Johnsonフィルトレーションのアーベル化と3次元多様体の不変量について新しい情報が得られることが期待される。研究1年目について久野雄介氏との共同研究としてハンドル体写像類群上のMeyer関数について結果を得ることができた。これは当初予想していなかったことであり、計画以上に進展していると考える。まずは、LMO関手についてJohnson核上で値を調べることを考えている。またHeapによりTorelli群上に構成された準同型と同様の構成をJohnsonフィルトレーションで行うことによりJohnson核のアーベル化の情報が得られないか調べることを予定している。当初の予定より研究が進展したため、資料収集等などの時間と費用が減少したため、当初の予定使用額よりも実際の使用額が少なくなった。
欧米史上における教育・文化の比較史的研究

1.まず時代別にいえば、古代に関してはロ-マの弁論術とギリシア都市国家における市民教育について研究され、修辞学と詩・文学の素養を身につけさすことが重視されたが、その目的を達成するためのアカデミ-と民間の教育施設が果たした役割の重要性が解明された。2.中世に関しては教育・文化における聖書の意義および都市における市民の実学教育の比重の重さに着目し、エリ-ト教育における前者の、民衆教育における後者の重要性が解明された。3.近世に関してはイタリア・ルネサンス期における貴族と市民それぞれにおける教養目録が吟味され、両者の異質性が解明された。4.近代に関しては、イギリスについてパブリックスク-ルにおけるエリ-ト教育とともに、民衆の識字率が、ドイツについてはギムナジウムにおけるエリ-ト教育とともに、ジャ-ナリズムと民衆教育の関係が、さらに大学における歴史教育が、フランスについては教育におけるカトリック教会の役割および政府の教育政策の労働者への影響が、ロシアについては中等教員を事例として特有の語感をもつインテリゲンチャの形成が、アメリカについてはハイスク-ルと社会移動の関係、エリ-ト教育における私立学校アカデミ-の役割、プランタ-における周辺的ジェントルマン教育が、それぞれ解明された。5.総じて時代・国すべてを網羅しえなかったとはいえ、歴史における教育の果たした役割ならびにそれの文化への影響について一定の解明をなしえ、今後は、この成果をもとに各時代・各国における教養文化の特質の研究にむかいたいと考えている。1.まず「古代中世」関係でいえば、古代ギリシアにおける民主政治に対応して「よき市民の育成」の問題を大戸が、ドイツ中世における聖書的知識の内容分析を井上が、さらに同じくドイツ中世における初等教育の様相を瀬原が追及した。「近代」関係では、永井がルネサンス期ヴェネツィアにおける識字率の上昇を、宮沢は1870年のイギリス基礎教育法を、末川はドイツ三月革命期における民衆教育制度に関して、民主派が新聞・パンフレットを通じていかに批判していたかを、中谷はフランス第二帝政期における農村の司祭と小学校教師との知的ヘゲモニー争いについて、アメリカに関しては大下がフィリップス・アカデミーの成立事情を、池本がプランター家系における家庭教育について、それぞれ検討を行なった。「現代」関係では望田が世紀転換期の英独仏における中等教育の比較史的考察を、中村が帝政期ドイツにおける歴史教育について、松本はロシア・シンテリゲンツィヤの形成とその特質を、山田は20世紀前半アメリカにおけるイタリア系エリートの創出過程を追究した。全体として個別の研究の深化は行われたが、比較史的視座をどう設定するかが重い課題となっている。2.今後の研究の方向としては、望田が提起している比較史的視座を起点として、古代や中世に関して古典語教育を設定したい。これによって本研究のまとめに着手してい。1.まず時代別にいえば、古代に関してはロ-マ弁論術とギリシア都市国家における市民教育について研究され、修辞学と詩・文学の素養を身につけさすことが重視されたが、その目的を達成するためのアカデミ-と民間の教育施設が果した役割の重要性が解明された。2.中世に関しては教育・文化における聖書の意義および都市における市民の実学教育の比重さに着目し、エリ-ト教育における前者の、民衆教育における後者の重要性が解明された。4.近代に関しては、イギリスについてパブリックスク-ルにおけるエリ-ト教育とともに、民衆の識字率が、ドイツについてはギムナジウムにおけるエリ-ト教育とともに、ジャ-ナリズムと民衆教育の関係が、さらに大学における歴史教育が、フランスについては教育におけるカトリック教会の役割および政府の教育政策の労働者への影響が、ロシアについては中等教員を事例としてロシア特有の語感をもつインテリゲンチャの形成が、アメリカについてはハイスク-ルと社会移動の関係、エリ-ト教育における私立学校アカデミ-の役割、プランタ-における周辺的ジェントルマン教育が、それぞれ解明された。

5.総じて時代・国すべてを網羅しえなかったとはいえ、歴史における教育の果たした役割ならびにそれの文化への影響について一定の解明をなしえ、今後は、この成果をもとに各時代・各国における教養文化の特質の研究にむかいたいと考えている。
両眼視運動処理過程の解明と弱視研究への応用

採用3年目となる平成23年度は、査読付国際誌において5編の学術論文が公表された。また、国際学会で1件のポスター発表、国内学会で1件の口頭発表を行った。Maehara,Thompson,Mansouri,Farivar,&Hess(2011)は、弱視眼を通して見た刺激の明るさが健常眼と異なるかを検討し、強力な眼間抑制の結果として弱視眼で知覚される明るさが低下していることを示唆している。Hess&Maehara(2012)は、遅れて点滅する光点を検出するのに必要な時間は、中心窩では67ms、周辺視野では91msであることを明らかにした。視覚野の細胞は、1030msの時間差があれば、それぞれの刺激に応答することができる。これに比較すると、出来事の時間差を意識的に知覚するためには、極めて長い時間差が必要であると言えるだろう。Li,Thompson,Lam,Deng,Chan,Maehara,Woo,Yu,&Hess(2011)の研究では、以前に開発した利き目テストを、弱視患者を対象として行った。測定された眼間抑制の程度は、弱視による視力低下と相関していた。斜視群、不同視群、複合障害群との間に、測定値の違いは見られなかった。Huang,Maehara,May,&Hess(2012)は、パターンマスキングにおける刺激の空間周波数と位相の効果について検討を行った。ターゲットコントラストの弁別閾を計測したところ、マスクの空間周波数がターゲットのそれよりも3倍以上離れていても、ターゲットの閾値は上昇した。採用1年目となる平成21年度において、3編の学術論文を査読付学術雑誌において公表した。うち2編は派遣先であるマギル大学で行われた研究をまとめたもので、残る1編は以前勤務していた金沢大学で行われた研究をまとめたものである。また、日本基礎心理学会第28回大会において、弱視患者の明るさ知覚に障害が存在することを報告するポスター発表を行い、優秀発表賞を獲得した。マギル大学で行った研究の特色は、左右の眼それぞれに対する処理がどのように統合されるかについて検討した点にある。初期視覚情報処理において、左右の眼それぞれに対する処理はある程度独立していることが知られており、これら2つの処理は相互に抑制しあっていると言われている。Maehara, Huang, & Hess(2009)は、視覚刺激に含まれる空間周波数成分の位相が一致するとき、眼間抑制が極端に大きくなることを発見した。空間周波数成分の位相が一致するとき、視覚刺激内には強い輝度コントラストを持った境界(edge)が生じる。本実験結果から、境界の検出は単眼性情報処理過程において行われており、境界が検出されたとき他方の眼に対する処理を抑制するメカニズムが存在することが示唆された。この成果はVision Researchにおいて公表された。現在、運動情報処理における両眼統合過程について検討する実験を実施している。今後は、こうした研究の成果を弱視研究に応用していくことが課題である。また、弱視患者の明るさ知覚に関する論文を執筆し、学術雑誌に投稿する予定である。採用2年目となる平成22年度において、2編の学術論文を査読付学術雑誌において公表した。初期視覚系においては、視野全体を単一のメカニズムが処理するのではなく、視野の部分(受容野)ごとに異なるメカニズムが処理を担当していることが知られている。しかし、これらのメカニズムは完全に独立しておらず、相互作用があることが示唆されている。Journal of Visionに公表した論文では、こうした空間的相互作用が、単眼からの情報を処理している段階で生じているのか、それとも左右眼からの情報が統合された後に生じているのかについて検討した。両眼呈示条件において、刺激の輝度コントラストが低いとき、フランカーは弁別閾を低下させた。単眼呈示条件においても同様の効果が見られたが、弁別閾の低下は比較的小さかった。両眼分離呈示条件では、フランカーの効果は失われた。このデータに対する両眼視輝度コントラスト増幅調整モデルの当てはめから、フランカーは単眼情報処理過程において空間フィルタからの出力を変動させていることが示唆された。Investigative Ophthalmology & Visual Scienceに公表した論文では、効き目を測定する6つの標準的なテストと、我々の開発した新しいテストとを比較した。新しいテストでは、特定方向に大域運動するドット群を単眼に呈示し、もう一方の眼にランダムに運動するドット群を呈示した条件で、大域運動を知覚することにできるドット比率が計測された。新しいテストの結果は、健常者には強い眼間抑制を示す群と、弱い眼間抑制を示す群とが存在することを示唆していた。こうした視覚情報処理における両眼相互作用の知見に基づいて、今後は弱視のメカニズムを明らかにしていく。

視覚野の細胞は、1030msの時間差があれば、それぞれの刺激に応答することができる。これに比較すると、出来事の時間差を意識的に知覚するためには、極めて長い時間差が必要であると言えるだろう。Li,Thompson,Lam,Deng,Chan,Maehara,Woo,Yu,&Hess(2011)の研究では、以前に開発した利き目テストを、弱視患者を対象として行った。測定された眼間抑制の程度は、弱視による視力低下と相関していた。斜視群、不同視群、複合障害群との間に、測定値の違いは見られなかった。Huang,Maehara,May,&Hess(2012)は、パターンマスキングにおける刺激の空間周波数と位相の効果について検討を行った。ターゲットコントラストの弁別閾を計測したところ、マスクの空間周波数がターゲットのそれよりも3倍以上離れていても、ターゲットの閾値は上昇した。
卵巣明細胞腺癌におけるChIPシークエンスを用いた網羅的解析と新規エピゲノム創薬

卵巣癌は婦人科癌の中で最も予後不良である。特に明細胞腺癌(Ovarian Clear Cell carcinoma : OCCC )は欧米で5%と低頻度であるのに対し、日本では卵巣癌の約24%を占め、抗癌剤耐性であり予後不良である。ヒストンメチル化はエピジェネティックスの主要因子であり、ヒストンメチル化酵素/脱メチル化酵素がそれを司り、遺伝子発現を調節している。様々な癌腫でヒストンメチル化酵素/脱メチル化酵素の発現の亢進が報告され、ヒストンメチル化酵素と脱メチル化酵素の均衡の破壊が癌の進展と密接に関わっていることが明らかとなった。上記よりヒストンメチル化酵素、脱メチル化酵素が卵巣癌、特にOCCCを対象とした新規治療法となり得ると考えた。臨床検体において発現解析を行い、発現が亢進しているヒストンメチル化酵素を同定した所、卵巣明細胞癌では2種類、卵巣漿液性癌においては8種類のヒストンメチル化酵素の発現亢進が認められた。その中で卵巣明細胞癌はヒストンメチル化酵素WHSC1、卵巣漿液性癌はSMYD2に着目した。卵巣明細胞癌においてWHSC1をノックダウンするとヒストンメチル化の減少とともに、細胞増殖抑制が認められた。またヒストンメチル化酵素EZH2をノックダウンするとWHSC1が抑制されることから、ヒストンメチル化酵素同士の関連も明らかとなった。上記研究は現在論文投稿中である(BMC cancerin revision).また卵巣漿液性癌細胞株においてSMYD2をノックダウンするとアポトーシス誘導とともに細胞増殖抑制が認められた。またSMYD2選択的阻害剤を添加すると細胞増殖抑制が認められ、SMYD2が卵巣漿液性癌の治療標的であることが示された(Biochemical and Biophysical Research Communications,2019)。卵巣明細胞癌、卵巣漿液性癌における治療標的となりうるヒストンメチル化酵素を同定し、現在その下流遺伝子を同定するためChIP-seq法の準備中である。エピジェネティックスは遺伝子制御機構の最上層で機能しているため、1つのエピゲノム発現亢進や変異が多くの遺伝子の発現様式に影響を与える。癌化においてヒストンメチル化がどのように多くの遺伝子の発現に作用しているか未だ解明されていない。ChIP(Chromatin immunoprecipitation:クロマチン免疫沈降)シークエンス法を用いてOCCC細胞株及び臨床検体双方から網羅的に調べることにより、OCCCにおけるエピジェネティックから見た発癌メカニズムを包括的に解明する。WHSC1の標的であるH3K36メチル化にてChIPシークエンス法をRNA-seqとともに行い、WHSC1が作用する下流遺伝子、パスウエイを解析する。OCCA細胞株、臨床検体双方から解析し、相関するかどうかを検討する。また卵巣漿液性癌においても同様の検討を行う。ARID1A変異におけるEZH2阻害剤のように、メチル化酵素/脱メチル化酵素の発現異常以外にもバイオマーカーが存在する可能性がある。次世代高速シークエンサーによりエピゲノムをターゲットとした合成致死作用をもたらすバイオマーカーを同定する。またエピゲノム創薬がどのような下流遺伝子、パスウェイに作用し薬効を示すかも、はっきりわかっていない。これについてもChIPシークエンス法により網羅的解析を行うことにより解明を目指す。卵巣明細胞腺癌(Ovarian Clear Cell Adenocarcinoma : OCCA )におけるヒストンメチル化酵素の治療標的の可能性について検討を行った。治療標的遺伝子の絞り込み:ヒストンメチル化酵素の中で様々な癌腫において、発現の亢進が報告されている計10種類の遺伝子を候補遺伝子とし以下の研究を行った。(1)OCCA臨床組織検体におけるヒストンメチル化酵素の発現解析:OCCA手術検体23検体において上記の遺伝子に関する発現解析を行う。解析方法はリアルタイムPCR、正常卵巣検体3検体との比較を行う。(結果)ヒストンメチル化酵素10種類の中でヒストンメチル化酵素WHSC1,SMYD2の発現が正常卵巣組織と比較し、有意に上昇していた。また卵巣漿液性癌においても同様の解析を行った所、10種類のヒストンメチル化酵素で有意に発現が上昇していた。(2)ノックダウン法を用いたOCCA細胞株における細胞増殖試験:OCCA細胞株15種類に対してsiRNA法によりWHSC1とSMYD2のノックダウンを行った所、有意に細胞増殖抑制が認められた。またFACS法にて細胞周期を検討した所、WHSC1をノックダウンした細胞株ではG1/S期停止が認められた。またSMYD2をノックダウンした細胞株ではアポトーシス細胞であるsubG1細胞の増加が認められた。上記よりOCCAにおいてWHSC1、SMYD2が新規治療標的になりうると事が示された。(3)ヒストンメチル化酵素WHSC1の機能解析:卵巣明細胞癌の細胞株においてEZH2のノックダウンをした所、WHSC1の発現低下と、そのヒストンマークであるH3K27me2の発現低下が認められた。またOCCA臨床検体においてEZH2とWHSC1の発現が有意に相関していた。この事からWHSC1はEZH2の下流遺伝子である事が示唆された。申請書に記載した平成29年度の研究計画、OCCAにおける治療標的としての遺伝子(ヒストンンメチル化酵素)の絞り込みについてはWHSC1とSMYD2の2遺伝子を同定し,その機能解析も進めているので概ね順調に進展している考える。

卵巣癌は婦人科癌の中で最も予後不良である。特に明細胞腺癌(Ovarian Clear Cell carcinoma : OCCC )は欧米で5%と低頻度であるのに対し、日本では卵巣癌の約24%を占め、抗癌剤耐性であり予後不良である。ヒストンメチル化はエピジェネティックスの主要因子であり、ヒストンメチル化酵素/脱メチル化酵素がそれを司り、遺伝子発現を調節している。様々な癌腫でヒストンメチル化酵素/脱メチル化酵素の発現の亢進が報告され、ヒストンメチル化酵素と脱メチル化酵素の均衡の破壊が癌の進展と密接に関わっていることが明らかとなった。上記よりヒストンメチル化酵素、脱メチル化酵素が卵巣癌、特にOCCCを対象とした新規治療法となり得ると考えた。臨床検体において発現解析を行い、発現が亢進しているヒストンメチル化酵素を同定した所、卵巣明細胞癌では2種類、卵巣漿液性癌においては8種類のヒストンメチル化酵素の発現亢進が認められた。その中で卵巣明細胞癌はヒストンメチル化酵素WHSC1、卵巣漿液性癌はSMYD2に着目した。卵巣明細胞癌においてWHSC1をノックダウンするとヒストンメチル化の減少とともに、細胞増殖抑制が認められた。またヒストンメチル化酵素EZH2をノックダウンするとWHSC1が抑制されることから、ヒストンメチル化酵素同士の関連も明らかとなった。上記研究は現在論文投稿中である(BMC cancerin revision).また卵巣漿液性癌細胞株においてSMYD2をノックダウンするとアポトーシス誘導とともに細胞増殖抑制が認められた。またSMYD2選択的阻害剤を添加すると細胞増殖抑制が認められ、SMYD2が卵巣漿液性癌の治療標的であることが示された(Biochemical and Biophysical Research Communications,2019)。卵巣明細胞癌、卵巣漿液性癌における治療標的となりうるヒストンメチル化酵素を同定し、現在その下流遺伝子を同定するためChIP-seq法の準備中である。OCCAの癌化においてヒストンメチル化がどのように多くの遺伝子の発現に作用しているか解明するために以下の研究を行う。(1)OCCA細胞株におけるChIPシークエンス法による網羅的解析:OCCA細胞株15種類に対して、WHSC1とSMYD2をノックダウンする。ノックダウン後に得られたサンプルを抗ヒストンメチル化抗体、抗ヒストンメチル化酵素抗体にてクロマチン免疫沈降を行う。その後、次世代シークセンサーを用いたChIPシークエンス法にて網羅的解析を行い、OCCA細胞株においてヒストンメチル化が作用する下流遺伝子およびパスウェイを探索する。つまりノックダウン後のサンプルにおいて発現が抑えられている遺伝子やパスウェイがWHSC1,SMYD2が作用している対象と言える。
原子の2電子高励起状態における協同運動効果のレーザー分光学的研究

原子の2電子励起状態は量子力学的3体問題の好例として電子の協同運動効果に注目して様々な理論的研究がなされているが、それ等の実験的証明の例は極めて数が少ない。本研究ではCa原子を用いて2電子励起状態の中でもより協同運動効果の影響が強いと考えられている高い励起状態の挙動をレーザーの多光子多段励起により調べる実験を行なった。実験では可視域の色素レーザー2台を用いて4S4P状態を中間状態とする2段励起で4Sns或いは4Sndのリドベルグ状態へCa原子を励起し、更にその状態から色素レーザーの2倍波である紫外レーザー光を用いて2電子高励起状態へ2光子遷移させる方法をとった。生成された状態の観測は、その状態から自動電離してできる1価のCaイオンが更に紫外光を吸収して2価のCaイオンとなったものを飛行時間型質量分析システムを用いて分別受信することにより行なった。この実験システムには以上のように色素レーザー3台を使用するが本科学研究補助金はこのうちの1台の自作のための光学部品購入のために主に使用した。この実験では主としてmsns^1S^e(m=610、n=m+122)及びmdns^1D^e(m=59、n=m+122)の準位を100余り観測することができたが、とりわけ電子相関が特に重要となってくると考えられるn≦m+2なる準位の観測はこのような高励起状態においてはこの実験が初めてであり重要である。観測された共鳴状態には異なるチャンネル間の相互作用による強い干渉効果により著しく分裂したものや自動電離確立が大きく減じられたものがいくつか見られたが、これ等は多チャンネル量子欠損理論によってかなり良く説明することができた。又、一般に2電子がほとんど独立であると信じられているn》mの状態でも独立電子による取扱いから相当はずれていることがわかった。n【approximately equal】mの状態ではスペクトルは電子相関により非常に複雑になってくるが、この解析が今後の重要な課題である。
食道腺癌発生に及ぼす胃液/十二指腸液逆流と胃酸分泌抑制剤の影響に関する研究

本研究は、1.胃液あるいは十二指腸液の逆流が上部消化管(食道・胃)の発癌に関与しているかどうか。2.最近臨床で頻用されている胃酸分泌抑制剤が発癌に関与しているのかどうかを確かめることを目的とした。1.十二指腸液の胃内逆流の影響8週齢Sprague-Dawley ratn 16匹に胃空腸吻合を行い発癌剤を投与せず58週にてSecrificeしたところ、2/16(12.5%)にInvasive adenocarcinomaの発生を確認した。しかし、Sham operationのRatsには癌の発生をみなかった。食道に関しては、胃食道逆流のおこしていないため組織学的にもなんら変化は見られなかった。そこで、胃・十二指腸液ラットを作り、食道内逆流の食道癌発生に及ぼす影響について検討した。2.胃液/十二指腸液逆流の食道腺癌発生に及ぼす影響8週齢Sprague-Dawley ratsに胃液/十二指腸液逆流手術を施行し、10,11,12週齢にLow doseの食道発癌性(60%MNAN)を投与し、29週齢目にsacrificeした。この際、Tableに示した如くコントロールをおいた。逆流手術を施行したratには食道内のpHがやや低値となり、いずれのratにも、肉眼的・組織学的にも食道炎を認めた。さらにlow doseの発癌剤を投与すると逆流がないratでは癌の発生を見なかったが、逆流ラットではDysplasiaが1/15(7%),squamous cell carcinomaが5/15(33%),adenocarcinonmaが1/15(7%)に発生していた。当初、胃酸とアルカリの逆流でBarrett上皮が発生し食道腺癌の発生が増加するのではないかと考えていたが、むしろ腺癌よりも扁平上皮癌の発生率が高かった。いずれにしても、逆流によって発癌率が高くなるが、胃酸分泌抑制剤によって胃酸のみの分泌を抑えるとこの発癌状態がいかに変化するのかを検討した。3.胃酸分泌抑制剤の影響以上のようにこの投与法にて胃内のpHが有為に上昇することを確認した。現在、この量にて逆流ラットに投与し食道発癌について検討中である。
ミクログリア活性化による神経保護作用の機序解明と神経変性疾患への細胞治療応用

脳内のマクロファージ様免疫細胞であるミクログリアは、脳虚血や脳傷害時に速やかに活性化される。また、アルツハイマー病やパーキンソン病などの神経変性疾患においてもミクログリアの病巣部への蓄積と活性化が認められている。しかし、ミクログリアの活性化が神経変性の原因なのか結果なのかいまだに一致した結論は得られていない。これまでに研究代表者らは、神経障害時に細胞から大量に放出されるATPがミクログリアを活性化し、腫瘍壊死因子(TNF)を放出させることを報告してきた。本研究では、まずその細胞内シグナルの詳細を検討し、TNF産生・放出制御におけるP2X_7受容体とMAPキナーゼの役割を明らかにした。また、この系においてP2X_7受容体のイオンチャネルとは独立したチロシンキナーゼを解する新しい情報伝達の可能性も示した。さらに、ATPにより活性化されたミクログリアが神経に対して果たす役割(傷害的なのか保護的なのか)を明らかにする目的で、ミクログリアと神経細胞の共培養を用いて検討した結果、P2X_7受容体の活性化を受けたミクログリアはグルタミン酸神経毒性から神経細胞を保護すること、さらにこの効果はTNF変換酵素阻害薬TAPI-2やTNF中和抗体により有意に抑制されたことから、TNFが中心的役割を果たすことが示された。また、リコンビナントTNFにも神経保護効果が確認された。一方、LPS刺激ではミクログリアから大量のTNFを放出するにもかかわらず神経保護効果は全く認められなかった。さらに、このミクログリアの神経保護効果をin vivoにおいて検討する目的で、ラット脳虚血モデルへのミクログリアの脳室内移植を試みた。ミクログリアの移植により虚血による神経細胞死ならびに運動障害が抑制され、この効果はミクログリアのP2X_7受容体活性化により強まる傾向も認められた。従って、ミクログリアのP2X_7受容体は神経変性治療の新たな標的になりうる可能性が示唆された。ミクログリアは脳虚血や脳傷害時に速やかに活性化され、また、アルツハイマー病やパーキンソン病などの神経変性疾患においても病巣部へ集積し活性化されることが認められている。しかし、ミクログリアの活性化が神経変性の原因なのか結果なのか、つまり傷害的役割を果たすのか保護的なのかいまだに一致した答えは得られていない。一方、ATPは神経傷害時に大量に細胞外へと放出されミクログリアを活性化することが知られている。研究代表者は、ラット新生児脳初代培養から調製したミクログリアと神経細胞の共培養系を確立し、ATPで活性化されたミクログリアはグルタミン酸誘発細胞死から神経細胞を保護すること、その効果はイオンチャネル型P2X_7受容体活性化を介することを明らかにした。研究代表者はすでにミクログリアのP2X_7受容体刺激により腫瘍壊死因子(TNF)が放出されることを報告しているが、今回明らかとなったATP活性化ミクログリアの神経保護作用は、TNF変換酵素阻害薬TAPI-2やTNF中和抗体により有意に抑制されたことから、TNFが中心的役割を果たすことが示された。また、リコンビナントTNF蛋白そのものに神経保護効果があることも確認された。しかし、ミクログリアの神経保護作用はTNFの阻害によって完全には消失しないこと、TNF単独では効果を発揮するためにより高濃度が必要とされることなどから、TNFはミクログリアからともに放出される他の液性因子と協力して神経保護効果を発揮する可能性が考えられる。

現在までに、IL-6の役割を検討したがIL-6中和抗体には抑制効果は認められなかった。一方、LPS刺激はミクログリアから大量のTNFを放出するにも関わらず、神経保護効果は示さなかった。現在、ミクログリアからATPあるいはLPS刺激に応じて放出される因子の同定とその役割について、詳細に検討を行っている。脳に定住するミクログリアは死細胞や異物を貪食することから脳の`掃除屋'と考えられてきたが、近年神経細胞の生存を決定づける極めて重要な役割を果たす可能性が明らかとなってきた。これまでに私たちはミクログリアと神経細胞の共培養系を用いて、ATP刺激を受けたミクログリアはグルタミン酸誘発神経細胞死に対して神経保護効果を発揮すること、この効果はP2X_7受容体活性化とそれによって誘導される腫瘍壊死因子(TNF)の放出が必須であること、一方、大量のTNFを放出するリポポリサッカライド(LPS)刺激には神経保護効果は認められずむしろ神経傷害を促進することなどを明らかにしてきた。さらに、P2X_7活性化ミクログリアはその後LPS刺激を受けても神経保護活性を維持すること、さらに、TNF遊離はATP単独刺激にほぼ匹敵する程度に抑えられていることから、少なくともTNFの量がミクログリアの神経保護および神経傷害の2面性に相関する可能性が考えられた。一方、ミクログリアに発現する新規α7ニコチン性アセチルコリン受容体の活性化もLPSによるTNF遊離を抑制し、かつ神経保護活性のあるATP誘発TNF遊離を有意に増強した。さちに、ミクログリアの神経保護活性をin vivoで確認するため、中大脳動脈閉塞(MCAO)モデルラットを用いて検討した。MCAOラットには運動機能に著しい低下と梗塞側の大脳皮質、特に線条体において強い神経細胞死が認められた。ミクログリアの脳内移植により運動機能の低下・神経細胞死ともに抑制され、さらに、P2X_7受容体活性化ミクログリアではその保護効果はより強まる傾向が認められた。これらの知見は、今後増加が懸念される脳血管障害や神経変性疾患の新しいミクログリア細胞治療の基礎を形作るとともに、P2X_7およびα7受容体も治療薬の標的となりうる可能性を示唆するものと考えられた。