hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
陸上植物ー菌根菌共生の進化の原点を探る：モデル植物フタバネゼニゴケの基盤整備

陸上植物の大部分は、アーバスキュラー菌根菌(AM菌)と共生することでリン酸などの無機養分を効率的に獲得している。AM菌共生のメカニズムは主に被子植物で研究されているが、遺伝子の冗長性が大きいために解析が難航している。そこで我々は、遺伝子の冗長性が少ないと期待されるフタバネゼニゴケを共生の新たなモデルとして整備している。本研究では効率的な遺伝子導入系の確立を目指した。我々はアグロバクテリウムの感染条件を検討して効率的な遺伝子導入系を確立できた。実際にこの方法を用いて共同研究者らは、CRISPRによる遺伝子破壊にも成功している。植物と菌根菌の共生メカニズムは最初の陸上植物であるコケ植物で成立して、複雑な進化を遂げながら現代に至っていると考えられる。イネやマメ科植物などの被子植物における共生遺伝子の同定は難航しているが、本研究は遺伝子の冗長性(同じ機能の遺伝子の重複度合い)が低いコケ植物フタバネゼニゴケをモデルとして、効率の良い遺伝子導入系や標的遺伝子破壊系を確立することを目的としている。初年度は遺伝子導入の方法のために、無性芽を用いた形質転換の条件検討などを行った。植物育成のトラブルなどにより計画が遅れているが、共同研究者から譲渡された形質転換効率を上昇させる可能性のある物質などを使用しながら検討を続けている。またフタバネゼニゴケの二次代謝物質が形質転換や胞子形成に影響を与えている可能性を考えて、成分分析を行った。その結果、シソなどに多く含まれる抗菌性のペリルアルデヒドが大量に蓄積していることが判明した。今後はペリルアルデヒドの影響を抑えるために、アグロバクテリウムの共存培養の条件を検討していくなどの工夫をしながら研究を進めていく予定である。研究室の異動などの研究環境の変化により、形質転換の材料となるフタバネゼニゴケの確保が一時的に困難になるトラブルに見舞われた。現在は生産が回復しつつあり実験を再開している。植物とアーバスキュラー菌根菌(AM菌)の共生メカニズムは最初の陸上植物であるコケ植物で成立して、複雑な進化を遂げながら現代に至っていると考えられる。イネやマメ科植物などの被子植物における共生遺伝子の同定は難航しているが、ゼニゴケやヒメツリガネゴケにおける解析から、コケ植物は被子植物と比較して遺伝子の冗長性(同じ機能の遺伝子の重複度合い)が低い。一方でモデル植物として整備されているゼニゴケはヒメツリガネゴケは、AM菌共生を行わない例外的な植物である。そこで本研究は、AM菌共生を行うコケ植物フタバネゼニゴケをモデルとして、効率の良い遺伝子導入系や標的遺伝子破壊系を確立することを目的としている。本年度はフタバネゼニゴケの遺伝子導入法の改良を行った。形質転換に用いるフタバネゼニゴケの生育ステージや培地、アグロバクテリウムとの共存培養の条件などを検討することで、以前に我々が確立していた方法よりも飛躍的に効率の良い遺伝子導入が可能となった。この方法を用いて、近縁のゼニゴケで明らかになっている生殖成長の切り替えの役割を持つ遺伝子を過剰発現させたところ、これまで全く不可能だった生殖器の誘導が不完全ながらも達成できた。また蛍光タンパク質の発現などにも成功しており、安定な遺伝子導入が確率できたと考えられる。次年度は近縁のモデル植物であるゼニゴケで確立されているCRISPR-CAS9法を用いて、フタバネゼニゴケの共生関連遺伝子の破壊株の作製と、形質の評価を行っていく予定である。当初の目的であったフタバネゼニゴケの効率的な遺伝子導入法の確立が達成できたので、概ね順調であると考えている。昨年度までに遺伝子導入法を改良して効率的に形質転換が可能になった。本年度はゼニゴケで運用されているCRISPR-Cas9システムを用いて遺伝子破壊を試みた。その結果、共同研究先の研究室で1遺伝子の破壊に成功した。現在、さらなる遺伝子の破壊株作製を試みている。また、これまでフタバネゼニゴケを用いたAM菌の効率的な共存培養系は確立されていなかった。本年度は北海道農試の小八重善弘博士の協力を得ながら、土壌での効率的な感染ー観察系を確立した。また雑菌の入らないプレートの寒天培地上でも共生させて胞子を形成させることに成功した。これらの成果により、フタバネゼニゴケを用いた陸上植物の共生進化の研究が進められるだけではなく、AM菌胞子についても低コストで効率的な生産が可能になると期待される。

AM菌共生のメカニズムは主に被子植物で研究されているが、遺伝子の冗長性が大きいために解析が難航している。そこで我々は、遺伝子の冗長性が少ないと期待されるフタバネゼニゴケを共生の新たなモデルとして整備している。本研究では効率的な遺伝子導入系の確立を目指した。我々はアグロバクテリウムの感染条件を検討して効率的な遺伝子導入系を確立できた。実際にこの方法を用いて共同研究者らは、CRISPRによる遺伝子破壊にも成功している。二次代謝物の解析により、微生物の生育に悪影響を与える可能性のあるペリルアルデヒドが大量に蓄積されていることが明らかとなった。これを吸着や洗浄により除去するなどの工夫をすることで、形質転換の効率を上げられると期待される。また胞子形成の条件についても引き続き検討を行うことで遺伝子導入方法の確立を目指していく。今後は多くの植物で成功例が報告されているCRISPR-CAS9を用いて、フタバネゼニゴケの共生関連遺伝子の破壊株を作製して解析を行う予定である。これまでの形質転換法の検討から、世界的に広く普及し始めているゼニゴケ用のベクターがそのままフタバネゼニゴケでも使用できることが判明している。したがってCRISPRにおいても、ゼニゴケで開発されたものを用いる。
UHRF1によるマルチモノユビキチン化反応の構造基盤

DNAのメチル化修飾は細胞の遺伝子発現パターンを決める重要な情報です。DNAメチル化は細胞分裂を経て、次世代の細胞に正確に受け継がれます。このDNAメチル化が継承される過程で働くタンパク質UHRF1は、ヒストンH3やPAF15の複数のリジン残基をモノユビキチン(マルチモノユビキチン)化し、これがDNAメチル化酵素を呼び込むシグナルとして働きます。本研究では、UHRF1がどのような仕組みで基質タンパク質をマルチモノユビキチン化するのかを立体構造情報に基づいて明らかにしていきます。
反射性循環調節の複合作用-個人差とトレーニング効果-

筋代謝受容器反射や動脈圧受容器反射はともに運動時の循環調節に関与し、両反射がともに働く場合には相互作用を持つことが示唆されている。これら二つの末梢反射の相互作用に関して、筋代謝受容器への刺激強度の影響、異なる筋群での反応性の違いや、このような循環調節がトレーニングで変化するかを検討した。得られた結果は、1)筋代謝受容器反射による心臓副交感神経活動および動脈圧受容器反射感受性(BRS)の増加には刺激閾値が存在し、2)前腕筋群と下腿三頭筋において、上記反応が異なり、3)バドミントントレーニングによって、利き腕における筋代謝受容器反射の機能に変化は起こらないこと、が示唆された。近年我々は,運動後阻血による筋代謝受容器反射活性時には,動脈圧受容器反射の心拍(HR)調節の感受性および末梢血管抵抗の自発性変動が増加することを報告した.しかし,筋代謝受容器反射の活性レベルが異なる場合にこれらがどのように変化するか明らかではない.そこで、異なるレベルの筋代謝受容器刺激時における動脈圧受容器反射によるHR・心拍出量(CO)調節機能および末梢血管抵抗の反応を検討することを目的として以下の実験を行った.最大発揮張力の50%で異なる持続時間(15秒,30秒,45秒,60秒および疲労困憊まで)の静的ハンドグリップ運動後にそれぞれ前腕阻血を4分間行った.周波数伝達関数解析により動脈圧受容器反射によるHR・CO調節機能を評価し,スペクトル解析により末梢血管抵抗の自発性変動を定量化した.阻血時の動脈血圧および総末梢血管抵抗は,運動時間が45秒を超える条件において運動時間の増大に対し直線的に増加したが,阻血時のCOはいずれの条件においても安静との差はみられなかった.阻血時のHRは疲労困憊まで運動する条件でのみ安静より高い値を示し,他の条件においては安静との差はみられなかった.さらに,筋肉部位の差による筋代謝受容器反射の反応を調べるために,下腿三頭筋を用いての等尺性筋収縮ができる下腿運動負荷装置を製作した.この装置によって,被験者が座位姿勢にて膝上を固定した状態で,つま先立ちのような筋収縮を定量的に行うことが可能となった.そこで,前腕三頭筋をつかう運動であるハンドグリップ運動と下腿三頭筋をつかうつま先立ち運動をそれぞれ行い,その時の筋代謝受容器反射時に循環反応を比較する実験を開始した.本年度は、1)特殊下肢運動負荷装置を製作するとともに、2)上肢・下肢運動時及び筋代謝受容器刺激時における種々の部位での循環反応の違いを検討した。1)下肢において筋代謝受容器刺激実験用の運動装置を新たに開発した。従来からの下半身圧負荷装置内に設置・使用する必要があり、限られたスペースであること、仰臥位姿勢で行うこと、等張性(動的)運動に加えて等尺性(静的)運動が可能であり、精度良く、段階的にコンピューターにより自動的に負荷できる、ことが開発の条件である。本体は完成し単純な運動は可能となったが、運動パターンを精妙に制御するためのプログラムの開発が次年度の仮題として残った。2)健康な男性11名を被験者として、90秒間の静的運動後に5分間の前腕阻血(PEMI)を行い、運動は同じ相対強度の条件として30%MVCでの静的ハンドグリップ運動(F条件)および30%MVCでの静的足底屈運動(C条件)を行った。さらに筋代謝受容器反射による血圧上昇がF条件と同程度となる条件として70%MVCでの静的足底屈運動(Calf-matched条件)を行った。主な結果は以下の通りである。1)F条件のPEMIにおいては、心臓副交感神経活動および動脈圧受容器反射感受性(BRS)は安静時から増加した。一方、2)F条件と同じ相対強度で運動を行ったC条件のPEMIでは、F条件のPEMIと比べて血圧上昇などの循環反応は小さく、また、心臓副交感神経活動とBRSは安静時から変化しなかった。さらに、3)血圧上昇の程度がF条件のPEMIと同程度となるCalf-matched条件のPEMIにおいても心臓副交感神経活動およびBRSは安静時から変化しなかった。以上の結果から、前腕筋群と下腿三頭筋において、筋代謝受容器刺激時の心臓副交感神経活動やBRS反応が異なることが明らかとなった。筋代謝受容器と動脈圧受容器反射はともに運動時の心拍(HR)や血圧の調節に関与すると考えられている。両反射がともに働く場合には、それらは相互作用を持つことが示唆されているが、これら二つの末梢反射の相互作用と筋代謝受容器への刺激強度との対応関係や、このような循環調節がトレーニングで変化するかは明らかでない。

実験1では、筋代謝受容器刺激時においてその刺激強度の違いによる、BRSと動脈圧受容器反射による血管抵抗調節の感受性との関係を調べることを目的とした。その結果、筋代謝受容器反射による心臓副交感神経活動およびBRSの増加には閾値が存在すること、また、その閾値は血圧上昇などの循環反応が起こる閾値と同水準にあることが示唆された。さらに、閾値以上の刺激が加わった場合には、心臓副交感神経活動およびBRSはほぼ一定となり、刺激強度依存的な変化は起こらないことが示唆された。実験2では、大学バドミントン競技選手12名を被験者とし、50% MVCでの60秒間の静的ハンドグリップ運動後に4分間の前腕阻血を行うことで筋代謝受容器を刺激し、その時の心拍数、動脈血圧、心一回拍出量、心拍出量、総末梢血管抵抗などの循環パラメーターを評価した。利き腕と非利き腕の両条件において、静的ハンドグリップ運動時に心拍数および平均動脈圧は安静から増加し、運動後阻血時には心拍数は安静レベルに戻り、平均動脈圧は安静より高い状態に維持された。運動後阻血時の心拍数、平均動脈圧、心一回拍出量、心拍出量、総末梢血管抵抗は、利き腕と非利き腕の両条件間で差はみられなかった。運動後阻血時の循環反応は筋代謝受容器反射によるものと考えられることから、バドミントンのトレーニングを長期間行っても、利き腕における筋代謝受容器反射の機能に変化は起こらないことが示唆される。特殊下肢運動負荷装置製作に関して本体は完成し単純な運動は可能となったが、運動パターンを精妙に制御するためのプログラムの開発が次年度の仮題として残ったが、それ以外の実験仮題は当初の目的を達成し、かつ次年度に向けての予備実験もおこなっているため。24年度が最終年度であるため、記入しない。上記の運動負荷装置を完成させそれを用いた実験を行うとともに、循環反応の個人差を明確にするために、昨年、一昨年行った実験をさらに多くの被験者(50人程度)に対して行い、反応パターンの類型化を試みる。
中国江蘇省の胃・食道がんの高・低率地域における防御要因に関する比較疫学研究

中国江蘇省には胃・食道がんの罹患率がともに高い地域(揚中市、淮安市)と低い地域(?州市)とがあり、その両地域は食生活などライフスタイルが著しく異なる。本研究の目的は、両地域に焦点をあて胃・食道がんの同時比較疫学研究を実施し、両部位のがんに特異的、または共通した環境・宿主要因を解明することである。今年度は、環境要因と宿主要因の相互作用を解析する目的で、淮安市で113名を対象に質問票による環境要因情報の収集と末梢血からのDNA採取を同時に行い、これまでに採取された淮安市の50名の環境・宿主要因データと合わせ、性・年齢がマッチできた食道がん患者52例、胃がん患者19例、住民対照者50例に関して解析を行った。nitrosamineの代謝活性に関わる遺伝子多型を有するCYP2E1のRasI遺伝子と8-OH guanineの修復酵素に関わる遺伝子多型を有するhOGG1多型の解析では、胃・食道がんのリスクと有意な関連は認めず、昨年度までに解析されたデータを用いた症例や対照ごとの高率・低率地域比較においても差は明らかでなかった。しかし、環境・宿主要因の相互作用解析に対する症例数は未だ不十分であり、現在も質問票調査とDNA採取を継続している。今後、更に症例数を増やした上で両要因の相互作用を解析する予定だが、CYP2E1の活性を抑えるニンニク高頻度摂取群と低頻度摂取群ではオッズ比が逆の方向性を示す傾向があり、今後の興味ある課題である。環境要因に関しても、課題となっていた低率地域での症例・対照研究の症例数が200例に達し、今後、詳細な解析を行う予定である。また、来年度から同フィールドで新たに始まる大腸がんの環境・宿主要因の探索研究に関し、フィールドで使用可能な半定量食事質問票開発の準備も平行して行い、今年度内に作業を開始することができた。
アモルファス合金の骨接合材料への応用に関する実験的研究

アモルファス合金の力学的性質の報告によると、アモルファス合金は比強度に優れ、低ヤング率であり、骨により近い物理特性を有する。このため、同じ強度でサイズのより小さい骨接合材料が作成可能で、かつ荷重遮断の影響を受けにくく骨癒合に有利であると考えられ、骨接合材料として有望である。しかし、アモルファス合金の生体適合性、生体安全性、耐食性、耐久性といった生体への影響や、骨形成および骨癒合に対する効果については未知でありこれまで研究されていない。アモルファス合金を生体に一定期間埋入して、生体適合性、生体安全性、耐食性、耐久性、および骨形成や骨癒合への影響を分析し、アモルファス合金の臨床応用の可能性を検討することを本研究の目的とした。Zr65Al7.5Ni10Cu17.5アモルファス合金を使用し、動物モデルとしてWistar系ラットを使用した。(研究項目)(1)骨膜下骨外埋入アモルファス合金が生体組織に与える影響に関する研究(2)骨髄内挿入アモルファス合金が生体組織に与える影響に関する研究(3)アモルファス合金の生体内での耐食性、耐久性の評価(4)アモルファス合金骨接合材料が骨折の骨癒合におよぼす影響に関する研究(結果)組織学的検索、血中および組織中の組成元素含有量の測定で、生体組織に対する悪影響がみられなかった。抜去したアモルファス合金の評価をSEM、EDSにて行い、生体内で不活性であることが示唆された。ラット大腿骨骨折モデルに髄内釘として使用し、骨形成、骨癒合への影響を評価した。6週間でチタン合金、ステンレス鋼と同等以上の良好な骨形成が得られ、12週間で骨折部での皮質骨化がチタン合金より旺盛で骨強度が大きくなる傾向があった。以上よりアモルファス合金は骨接合材料として安全で骨折部の骨癒合に有利であることが示唆された。(考察)Zr-Al-Ni-Cuアモルファス合金は生体適合性があり、安定した不働態皮膜によって高い耐食性を示したと考えられる。チタン合金がリン酸カルシウムを表面に生成しやすいことが明らかとなった。リン酸カルシウムが材料表面に生成して骨と過度に接合すると抜去が困難となる可能性があり、骨接合材料として好ましくない。一方、アモルファス合金はほぼ不活性であることが示されたため、骨接合材料に適していると考えられる。骨折の骨癒合は、アモルファス合金髄内釘でチタン合金より皮質骨化が旺盛で骨強度が大きくなる傾向があった。剛性がチタン合金より骨に近いため、骨形成に必要な荷重が遮断されにくかったためと思われる。径2mm、長さ35mmのジルコニア基アモルファス合金(ZrAlNiCu)を物質・材料研究機構にて作成した。このアモルファス合金および径2mm、長さ35mmのチタン合金(Ti6A14V)を東京大学医学部整形外科にて14週齢オスWistar系ラットの大腿骨骨幹部骨折モデルの骨髄内にそれぞれ16匹、12週間挿入した。アモルファス合金の生体への影響の評価として、末梢血および周辺軟部組織を採取し、アモルファス合金の組成のうち毒性を示す可能性のある銅、ニッケルについて血中および組織中の金属イオンの定量を行った。アモルファス合金挿入群の銅、ニッケルの血中金属濃度および組織中金属含有量はいずれもチタン合金挿入群と比較して増加していなかった。この結果は、アモルファス合金成分の溶出による影響が少なく、安全に使用できる可能性を示唆している。また、骨折部の骨形成・骨癒合の定量評価を軟X線写真、pQCT、ねじり試験にて評価した。軟X線写真(N=16)で完全な骨癒合が得られたものはアモルファス合金群5匹、チタン合金群3匹であった。pQCT(N=7)では、骨折部の骨強度指標(Strength Strain Index)はアモルファス合金群21.5±5.6(平均±標準偏差)、チタン合金群15.7±9.6であった。ねじり試験(N=6)では、大腿骨の破断トルクはアモルファス合金群0.34±0.19Nm、チタン合金群0.18±0.16Nm、ねじり剛性はアモルファス合金群0.044±0.035Nm/°、チタン合金群0.020±0.021Nm/°、エネルギー吸収はアモルファス合金群2.2±2.2Nm°、チタン合金群1.0±0.9Nm°であった。アモルファス合金群はチタン合金群と比較して骨折部の骨癒合が旺盛に起こり、骨癒合部の強度、ねじり剛性、エネルギー吸収が大きい傾向があった。前年度に引き続きアモルファス合金の骨接合術材料への応用に関する基礎実験を行った。実験には、ウィスターラットラット12匹を用いた。今年度は今後大型の骨接合材料を開発できるようにアモルファス材料の作成方法を粉末個化法とした。前年度と同様の方法を用いてアモルファス化が完全であることを確認した。本材料を用いて2mm径の髄内釘を作成した。また今年度は骨きり部分に間隙を設け、より骨形成が遅延するモデルを採用し、骨形成を観察した。このため髄内釘にはスリットを作成し、スリットに挿入するピンを作成して、臨床に用いるロッキングネイルと同等とした。ラットの腹腔内麻酔により、大腿骨を骨幹部中央で骨きり後に髄内釘を挿入した。対側の大腿骨は無処置のコントロール群とした。

またTi6Al4Vの髄内釘を比較対照とした。6週間飼育後大腿骨を摘出した。2週感覚でX線写真撮影を行い、摘出骨についてはDXAおよびpQCTにて骨形成を評価した。また摘出したアモルファス合金髄内釘は腐食、破損、磨耗を評価した。髄内釘表面の観察を走査型電子顕微鏡により、表面組織についてはエネルギー分散型X線分光法によって同定および定量した。髄内釘1本において2週でスリット基部の破損が明らかになった。この破損標本では基部にアモルファス化が一部不完全であった。そのほかの髄内釘においてはアモルファス化が完全であった。3匹においてピンがスリットから引き抜けた。他の8匹については引き抜けは起こらなかった。8匹においてX線写真では6週において仮骨形成は豊富であった。しかし骨癒合には至らなかった。大腿骨の骨量はDXAおよびpQCTでアモルファス髄内釘がチタン合金髄内釘よりも多い傾向にあったが優位差はなかった、表面分析では11検体では破損はなかった。またアモルファス表面は表面に生成する燐酸カルシウムは観察されなかったが、チタン合金では先行実験と同様に生成が確認された。結論として粉末個化によるアモルファス合金においても同様の結果となった。アモルファス合金の力学的性質の報告によると、アモルファス合金は比強度に優れ、低ヤング率であり、骨により近い物理特性を有する。このため、同じ強度でサイズのより小さい骨接合材料が作成可能で、かつ荷重遮断の影響を受けにくく骨癒合に有利であると考えられ、骨接合材料として有望である。しかし、アモルファス合金の生体適合性、生体安全性、耐食性、耐久性といった生体への影響や、骨形成および骨癒合に対する効果については未知でありこれまで研究されていない。アモルファス合金を生体に一定期間埋入して、生体適合性、生体安全性、耐食性、耐久性、および骨形成や骨癒合への影響を分析し、アモルファス合金の臨床応用の可能性を検討することを本研究の目的とした。Zr65Al7.5Ni10Cu17.5アモルファス合金を使用し、動物モデルとしてWistar系ラットを使用した。(研究項目)(1)骨膜下骨外埋入アモルファス合金が生体組織に与える影響に関する研究(2)骨髄内挿入アモルファス合金が生体組織に与える影響に関する研究(3)アモルファス合金の生体内での耐食性、耐久性の評価(4)アモルファス合金骨接合材料が骨折の骨癒合におよぼす影響に関する研究(結果)組織学的検索、血中および組織中の組成元素含有量の測定で、生体組織に対する悪影響がみられなかった。抜去したアモルファス合金の評価をSEM、EDSにて行い、生体内で不活性であることが示唆された。ラット大腿骨骨折モデルに髄内釘として使用し、骨形成、骨癒合への影響を評価した。6週間でチタン合金、ステンレス鋼と同等以上の良好な骨形成が得られ、12週間で骨折部での皮質骨化がチタン合金より旺盛で骨強度が大きくなる傾向があった。以上よりアモルファス合金は骨接合材料として安全で骨折部の骨癒合に有利であることが示唆された。(考察)Zr-Al-Ni-Cuアモルファス合金は生体適合性があり、安定した不働態皮膜によって高い耐食性を示したと考えられる。チタン合金がリン酸カルシウムを表面に生成しやすいことが明らかとなった。
小中一貫を図った音楽デジタル教科書を活用した日本の民謡の指導法開発

本研究では、小学校と中学校との一貫を図った音楽デジタル教科書を活用した日本の民謡の指導法を開発し、教員養成のプログラムとしても位置付け、普及を図ることを目的とする。第一に、小学校道徳教科書における「我が国や郷土の文化」に関する取り扱いを整理、検討した。具体的には全8社の教科書を日本の民謡に着目して分析し、《YOSAKOIソーラン》が掲載されていることが明らかとなった。検証結果については、『地域学論集』第15巻第2号において論文発表を行った。第二に、小中一貫を図った音楽デジタル教科書を活用した日本の民謡のカリキュラムを構築した。教科書分析の結果に基づき、附属学校園の協力も得ながら、カリキュラムを組んだ。また、小学校の総合的な学習の時間における日本の民謡のモデル指導案を作成した。検証結果については、『地域学論集』第15巻第1号、『教育研究論集』第9号において論文発表を行った。第三に、「郷土に伝わる民謡」を題材とした教材の開発を行った。具体的には鳥取市の浜村温泉と賀露の《貝殻節》を比較検証し、音楽的特徴と歌詞の特徴を解明し、これまでの教科書での掲載状況を明らかにした。他方、吉岡温泉の新民謡《吉岡小唄》の資料収集をし、学生参画により、音源が収録されたスライド教材を開発した。検証結果については、日本音楽表現学会第16回大会において口頭発表、『教育実践学研究』第20巻第2号において論文発表を行った。また、鳥取大学サイエンス・アカデミーにおいても発表した。第四に、教員養成のプログラムとして位置付けるために、師範学校の郷土教育における日本の民謡の実践について解明した。具体的には鳥取県師範学校を事例とし、一次資料に基づき、生徒や教員の意識にも着目しながら、実態を明らかにした。検証結果については、教育史学会第62回大会において口頭発表を行った。学生ならびに附属学校園の教諭の協力を得ながら、研究計画に沿って実施することができた。その成果については、口頭発表2件、論文発表4件あり、社会・国民に発信した。また、教員免許状更新講習においても音楽デジタル教科書を取り上げた。引き続き、音楽デジタル教科書を活用した日本の民謡の指導法を開発し、教員養成のプログラムとしても位置付け、指導法の波及を図る。また、鳥取県における野口雨情が作詞した新民謡についても解明し、「郷土に伝わる民謡」を題材とした、視聴覚教材を開発する。第一に、戦後以降の小学校、中学校、高等学校の教科書に掲載された日本の民謡のデータベース化を図るために、東京書籍株式会社附設教科書図書館東書文庫、東京学芸大学附属図書館等において資料収集を行った。第二に、音楽デジタル教科書を活用した日本の民謡の指導法を開発した。具体的には、音楽デジタル教科書の操作方法も明記したモデル指導案を作成した。鳥取大学附属中学校第1学年において、題材名「日本の民謡の音楽の特徴を感じ取って、その魅力を味わおう」の実践研究を行い、7月に開催された鳥取大学附属中学校研究発表大会において公開授業ならびに研究協議会を行った。実践の分析を質的、量的の両側面から行い、検証結果については、『地域学論集』第14巻第1号、第2号(2018)において成果発表を行った。第三に、音楽デジタル教科書を教員養成のプログラムとしても位置付けた。具体的には、学部の「音楽学習指導論」の授業や教員免許状更新講習において、音楽デジタル教科書を活用した日本の民謡の指導法について実践した。学生ならびに現職教員の音楽デジタル教科書や日本の民謡に対する意識調査を実施し、検証結果については、日本音楽教育学会第48回大会ならびに『教育研究論集』第9号(2018)において成果発表を行った。計画的に研究を進め、論文3件、学会でのパネルディスカッション1件、著書1件の成果発表を行えたから。

第四に、教員養成のプログラムとして位置付けるために、師範学校の郷土教育における日本の民謡の実践について解明した。具体的には鳥取県師範学校を事例とし、一次資料に基づき、生徒や教員の意識にも着目しながら、実態を明らかにした。検証結果については、教育史学会第62回大会において口頭発表を行った。学生ならびに附属学校園の教諭の協力を得ながら、研究計画に沿って実施することができた。その成果については、口頭発表2件、論文発表4件あり、社会・国民に発信した。また、教員免許状更新講習においても音楽デジタル教科書を取り上げた。モデル指導案は作成したが、小学校における実験授業をまだ行っていないため、実施し、指導法の開発を行う。教科書には掲載されていない「郷土に伝わる民謡」の収集を行い、DVD教材の開発する。上記の成果に基づき、音楽デジタル教科書ならびにDVD教材を活用した教員養成のプログラムを開発する。引き続き、音楽デジタル教科書を活用した日本の民謡の指導法を開発し、教員養成のプログラムとしても位置付け、指導法の波及を図る。また、鳥取県における野口雨情が作詞した新民謡についても解明し、「郷土に伝わる民謡」を題材とした、視聴覚教材を開発する。申請当初計画をしていた、教師用指導書の購入を別の研究費で購入することができたため、次年度使用額が生じた。アンケート調査の配付・回収作業のための学生アルバイトの人件費等で使用する計画である。成果発表として計画していた国際学会への参加を見合わせたため。新民謡の研究の際、必要となる野口雨情関連図書の購入を計画している。
ヒト肝癌細胞のインテグリンの発現と合成オリゴペプチドを用いた転移抑制の試み

1.ヒト肝癌細胞のインテグリン発現の検索、肝細胞癌悪性度、転移能の評価インテグリンの発現を免疫組織学的方法と分子生物学的方法により検討した。肝癌細胞にはconstitutiveなインテグリンが発現している他、その組織学的分化度に従ってインテグリン発現のパターンが異なることを見い出した。肝癌細胞のインテグリン発現パターンと組織学的特徴およびおよび臨床的背景を多因子解析した結果、肝癌細胞の遠隔転移と最も良く相関したのは血管浸潤能であり、組織学的には脈管浸潤であった。細胞外基質との相関では、血管内皮および基底膜の基質分子と相互作用するインテグリンの発現が認められた。これらの成績により、肝癌細胞に特異的あるいは選択的に発現したインテグリンは遠隔転移の臨床的なマーカーになり得る可能性が示唆された。また、肝癌細胞の悪性度の評価はAgNOR数およびその形態の観察が従来の方法よりも有用であるとの結論を得た。AgNORは肝癌細胞の増殖能をより良く反映し、また患者の臨床的背景(特に転移と予後の因子)と良く相関した。2.合成オリゴペプチドによる肝癌細胞の転移抑制の実験的検討樹立された培養肝癌細胞株(3株)のインテグリンサブユニットの発現を検討したところ細胞株による相違が見い出され、細胞外基質(ECM)への接着活性が異なった。各細胞株のadhesion assayの結果や実験的転移モデルにおける実験成績から、合成オリゴペプチドにより癌細胞の転移能を修飾し得ることを確認した。今後は、肝癌細胞のみならず他の消化器癌細胞についても検討し、臨床応用に向け多くの知見を蓄積させる予定である。1.生検、手術あるいは剖検によって得られた肝癌組織を材料とし、抗インテグリンサブユニット抗体を用いた免疫組織化学的方法によりインテグリンの発現を観察した。肝癌原発巣および転移巣にそれぞれ質的、量的に異なるサブユニットが検出されたが、非特異的反応による結果を除外する必要性があると考えられた。インテグリン遺伝子の発現については、各サブユニットに特異的なcDNAプローブを作製しmRNAの発現を検索した。さらにPCR法による追加実験も行い、肝癌細胞に選択的なインテグリンが発現している可能性が示唆された。肝癌細胞の悪性度の評価は、AgNOR数およびその形態の観察が従来法よりも有用であるとの結論を得た。2.血行性転移モデルの作製のため、樹立された培養肝癌細胞株のインテグリンサブユニットの発現を検討したところ、細胞株による若干の相違が見い出された。またこれらの細胞株の転移様式は複雑に異なっていた。adhesion assayの結果も、細胞株のインテグリン発現パターンの相違により細胞外基質(ECM)への反応性が異なっていることを示した。オリゴペプチドを用いた転移抑制実験により、肝癌細胞の実験的血行性転移を抑制するにはlinearよりもcyclicなオリゴペプチドが強力であることが示唆された。しかしながら、試みたオリゴペプチドでは転移を完全阻止することは不可能であった。以上の実験結果により、インテグリンが癌細胞の転移に複雑に関与していることが明らかにされ、転移能のマーカーとしてインテグリンが有用である可能性が示唆された。1.ヒト肝癌細胞のインテグリン発現の検索、肝細胞癌悪性度、転移能の評価インテグリンの発現を免疫組織学的に、またそれらの遺伝子の発現を検討した。肝癌細胞にはconstituutiveなインテグリンが発現している他、その組織学的分化度に従ってインテグリン発現のパターンが異なることを見い出した。

肝癌細胞のインテグリン発現パターンと組織学的特徴および臨床的背景を多因子解析した結果、肝癌細胞の遠隔転移と最も良く相関したのは血管浸潤能であり、組織学的には脈管浸潤であった。細胞外基質との相関では、血管内皮および基底膜の基質分子と相互作用するインテグリンの発現が認められた。これらの成績により、肝癌細胞に特異的あるいは選択的に発現したインテグリンは遠隔転移の臨床的なマーカーになり得る可能性が示唆された。また、肝癌細胞の悪性度の評価はAgNOR数およびその形態の観察が従来の方法よりも有用であるとの結論を得た。AgNORは肝癌細胞の増殖能をより良く反映し、また患者に臨床的背景(特に転移と予後の因子)と良く相関した。2.合成オリゴペプチドによる肝癌細胞の転移抑制の実験的検討樹立された培養肝癌細胞株(3株)のインテグリンサブユニットの発現を検討したところ細胞株による若干の相違が見い出され、細胞外基質(ECM)への接着活性が異なった。各細胞株のadhesion assayの結果および実験的転移モデルにおける成績から、合成オリゴペプチドにより癌細胞の転移を抑制し得た。今後は、肝癌細胞のみならず他の消化器癌細胞についても検討し、臨床応用に向け多くの知見を蓄積させる予定である。
mRNA核外輸送の分子機構

1)分裂酵母S.pombeの成長の温度感受性変異株約900について、oligo dTによるin situ hybridizationを行い、制限温度において核にポリA-RNAが蓄積する株を新たに少なくとも7株、計11株見出した。これらの中で5株は特に有望である。2)これらの変異株につき、成長のts性の相補性検定を行った。この結果少なくとも3つのグループがあることが示された。グループ1(ts60,S2)、グループ2(S22)、その他(H1,H6)。H1とH6相互については調べていない。3)pDB248をベクターとする野生型ゲノムライブラリーにより、H6株のts欠損を回復する形質転換体が得られた。これから得られたDNAを大腸菌でクローン化し解析したが、結局確かに形質転換を行うプラスミドが回収できなかった。欠失、再編成等が起こってしまったためかも知れない。しかし、コスミドpSS10をベクターとするライブラリーによっては形質転換を行うコスミド(C-5)が得られて、マッピングを行った。H1については同じコスミドライブラリーから形質転換体は得られたが、コスミドが回収できなかった。4)成長及びポリA-RNAの蓄積についてS22を野生型にもどすコスミドクローン#2(インサート32kb)が得られた。この中の8kb断片が少なくとも成長のts性を相補することがわかった。含まれる遺伝子を解析する予定である。5)S22,ts60、WTにつき全RNAを調製し、これに含まれるポリAの長さの分布を調べたが、これらの間で有意な差はなかった。1)分裂酵母S.pombe leu(-)株から、EMS処理等により、約1000株の成長の温度感受性変異株(tsまたはcs)を得た。2)これらの中の約500株につき、digoxigeninで標識したoligodT30をプローブとしてin situ hybridizationを行い、制限温度において親株よりも強いhybridizationを核に示すもの約10株を同定した。3)これらの中の2株(A-H1,A-H6)について核と細胞質のRNAを調整し、逆転写-PCR法によって解析した結果、少なくともA-H6は制限温度においてβチュブリン成熟mRNAを核に蓄積することが示された。4)野性株のゲノムライブラリーより、A-H6株のLeu-及び高温での成長不能とポリA-RNAの核への蓄積の表現型が野性型に回復した形質転換株12個が得られた。これらから回収したプラスミドはA-H6を再び形質転換可能であり、またその多くは共通部分を含む10kb程度以上のDNAを含んでいた。これらは、A-H6株の成長及びポリA-RNAの核への蓄積をもたらす温度感受性変異を相補するものと考えられる。1)oligo dTのin situ hybridizationにより、制限温度においてポリA-RNA(またはその前駆体)が核に蓄積することが見出されていた数種類の変異株につき、成長のts性の相補性検定を行った。2)pDB248をベクターとする野性型ゲノムライブラリーにより、H6株のts欠損を回復する形質転換体が昨年度得られていた。これから得られたDNAを大腸菌でクローン化し、長期間に渡って解析したが、結局確かに形質転換を行うプラスミドが回収できなかった。

H1については同じコスミドライブラリーから形質転換体は得られたが、コスミドが回収できなかった。3)成長及びポリA-RNAの蓄積についてS22を野性型にもどすコスミドクローン♯(インサート32kb)が得られた。この中の8kb断片が少なくとも成長のts性を相補することがわかった。含まれる遺伝子を解析する予定である。4)S22、ts60、WTにつきポリAの長さの分布を調べたが、これらの間で有意な差はなかった。
脳内分子動態解析による認知症発症機序の解明と早期診断への応用

高齢化社会において認知症診療は最重要課題の一つである。近年アミロイド、タウイメージングの普及により、早期認知症診断が高精度で可能となったが、脳の虚血性変化や酸化ストレスも認知症の発症と深く関わっている。本研究では、変性タンパクの凝集・蓄積や酸化ストレスなど脳内環境変化と、認知症に至る神経変性の発生機序との関わりを、PET分子イメージングで詳細に検討する。また、最新のPET/MRI技術で、各種MRIとPET画像を組み合わせ、汎用性の高い超早期診断法の開発を目指した。1臨床研究:高齢健常者およびMCI早期認知症患者を登録し、アミロイドイメージング([C-11]PiB-PET)に加え、酸化ストレスイメージング([Cu-64]ATSM)を行った。PET/MRI装置で同時に撮像した安静時fMRI画像(rs-fMRI)や拡散画像(DTI等)をPET画像と同様に解析し、脳機能や構造指標の変化を病理学・生理学的変化とともに評価した。これまでに早期アルツハイマー病20症例、その他の認知症30症例、正常被験者14症例程度のデータが登録され、臨床症状、認知機能等の臨床データとともに解析中である。さらに、[C-11]PK11195等の神経炎症イメージングや、カナダMcGill大学との共同研究予定の[F-18]MK6240を用いたタウイメージングについても準備を進めている。登録患者は定期的に経過観察し、認知機能、脳機能画像、およびその他の画像指標で異常が認められた場合は、再検査により経時的変化を評価し、原因の特定と疾患の鑑別を進める。2基礎研究:病理学的な裏付けを本基礎研究で確認するため、新規プローブ開発およびモデル動物による基礎実験を進めた。詳細は割愛するが、酸化ストレス、炎症性変化等の各種プローブ集積を、病理学的手法による各指標と比較する予定で準備を進めている。アミロイドイメージング研究に早期アルツハイマー病20症例、その他の認知症30症例、正常被験者14症例程度のデータが登録されるなど、臨床研究は比較的順調に進められている。酸化ストレスイメージングへの登録も同様に進めており、これまでのところ10症例程度の登録ができた。アミロイドイメージングより登録数が少ない原因の一つは原材料が高価であるため、アミロイドイメージングの結果により対象被験者を選定しているためである。神経変性疾患の病態解析を開始する前にPET/MRI画像の定量性に関する検討を行い、2編の英文論文として発表した。さらに脳機能イメージングに関するPET, MRIを用いた研究論文は他に7編(うち英文6編)であった。また、PET/MRIに関する学会発表も並行して行っており、2018年度の発表は国内外で13件、うち11件は招待講演であった。一体型PET/MRI装置導入施設は国内に11施設あるものの、臨床研究は大学等の限られた施設のみで行われている。2018年度には脳画像研究が可能な三大学(福井大学、福島県立医大、神戸大学)が神経変性疾患に関する多施設共同研究を開始し、本学が代表施設となった研究課題「画像による脳の老化と神経変性発症過程の解明」は、日本脳循環代謝学会エビデンス創出委員会認定研究に選定された。基礎研究については、既に確立された酸化ストレスイメージング等の研究は進められているものの、新規変性タンパク描出用PET薬剤の開発がやや滞っている。現在疾患モデルラットによる[Cu-64]ATSM脳オートラジオグラフィー研究の準備を進め、2019年の本格始動を予定しているところである。2018年度に引き続き、今年度も臨床研究、基礎研究を並行して進める。1臨床研究:[C-11]PiB (Pittsburgh compound-B)PETによるアミロイドイメージングのみでなく、[Cu-64]ATSMによる酸化ストレスイメージングPET/MRI検査への参加協力を要請し、できるだけ同程度の症例数が確保できるように努める。また、[F-18]THK-5351あるいは[F-18]MK-6240によるタウイメージングの臨床導入を図り、各種PET分子イメージング、機能的MRIのマルチモダリティーによる認知症性神経変性疾患の脳画像データベース構築を目指す。PET/MRI装置によりPETとMRIデータの同時収集が可能であるため、同数のMRIデータ確保は容易に可能であり、2018年度に行ったresting-state fMRI解析のみでなく、DTI(diffusion tensor imaging)データ等の解析を進める。また、各種機能的MRI, PET分子イメージング画像をデータベース化し、多面的に解析するマルチモダリティー解析を進める予定である。2基礎研究:既に臨床研究導入済みのPETプローブをモデル動物に応用し、オートラジオグラフィ(ARG)による脳内集積の基礎検討を行う。認知症モデルマウス脳内の変性タンパクや、酸化ストレス、炎症性変化等の各種プローブ集積を、免疫染色等病理学的手法による各指標と比較する。また、α-Synイメージングを目指し、京都大学小野博士(連携研究者)との連携により、最適なプローブを開発して脳内移行性や体内動態を確認する。さらに、CEST画像(MRI)用ファントムの開発など、臨床研究で用いる機能的MRI画像の最適化および標準化等も検討する。

本研究では、変性タンパクの凝集・蓄積や酸化ストレスなど脳内環境変化と、認知症に至る神経変性の発生機序との関わりを、PET分子イメージングで詳細に検討する。また、最新のPET/MRI技術で、各種MRIとPET画像を組み合わせ、汎用性の高い超早期診断法の開発を目指した。1臨床研究:高齢健常者およびMCI早期認知症患者を登録し、アミロイドイメージング([C-11]PiB-PET)に加え、酸化ストレスイメージング([Cu-64]ATSM)を行った。PET/MRI装置で同時に撮像した安静時fMRI画像(rs-fMRI)や拡散画像(DTI等)をPET画像と同様に解析し、脳機能や構造指標の変化を病理学・生理学的変化とともに評価した。これまでに早期アルツハイマー病20症例、その他の認知症30症例、正常被験者14症例程度のデータが登録され、臨床症状、認知機能等の臨床データとともに解析中である。さらに、[C-11]PK11195等の神経炎症イメージングや、カナダMcGill大学との共同研究予定の[F-18]MK6240を用いたタウイメージングについても準備を進めている。登録患者は定期的に経過観察し、認知機能、脳機能画像、およびその他の画像指標で異常が認められた場合は、再検査により経時的変化を評価し、原因の特定と疾患の鑑別を進める。2基礎研究:病理学的な裏付けを本基礎研究で確認するため、新規プローブ開発およびモデル動物による基礎実験を進めた。詳細は割愛するが、酸化ストレス、炎症性変化等の各種プローブ集積を、病理学的手法による各指標と比較する予定で準備を進めている。アミロイドイメージング研究に早期アルツハイマー病20症例、その他の認知症30症例、正常被験者14症例程度のデータが登録されるなど、臨床研究は比較的順調に進められている。酸化ストレスイメージングへの登録も同様に進めており、これまでのところ10症例程度の登録ができた。アミロイドイメージングより登録数が少ない原因の一つは原材料が高価であるため、アミロイドイメージングの結果により対象被験者を選定しているためである。神経変性疾患の病態解析を開始する前にPET/MRI画像の定量性に関する検討を行い、2編の英文論文として発表した。さらに脳機能イメージングに関するPET, MRIを用いた研究論文は他に7編(うち英文6編)であった。また、PET/MRIに関する学会発表も並行して行っており、2018年度の発表は国内外で13件、うち11件は招待講演であった。一体型PET/MRI装置導入施設は国内に11施設あるものの、臨床研究は大学等の限られた施設のみで行われている。2018年度には脳画像研究が可能な三大学(福井大学、福島県立医大、神戸大学)が神経変性疾患に関する多施設共同研究を開始し、本学が代表施設となった研究課題「画像による脳の老化と神経変性発症過程の解明」は、日本脳循環代謝学会エビデンス創出委員会認定研究に選定された。基礎研究については、既に確立された酸化ストレスイメージング等の研究は進められているものの、新規変性タンパク描出用PET薬剤の開発がやや滞っている。
組織リモデリング増悪化分子としての内因性ＡＧＥの病態生理と根治的制御法の創成

生活習慣病をはじめとする組織リモデリング病態の発症や増悪化にDampsと称される一連の分子群が重要な役割を果たすことが明らかにされつつある。代表的DampsとしてAGEsやHMGB1が知られ,これらはパターン認識受容体を過剰刺激することで様々な炎症応答を惹起し,病態形成に関与することが示唆されている。組織リモデリングは慢性炎症に起因する疾患病態であり,生活習慣病などの様々な加齢・炎症関連疾患の形成・増悪化に深く関与し,高い再発リスクと重度後遺症に伴う医療負担を強いるにもかかわらず,有効な治療法は未確立のままであることから,その克服は我が国における医療政策上の最重要課題の一つに掲げられる。申請者らは,組織リモデリングの病巣部位に出現し,炎症を過剰亢進させることによって病態の増悪化をもたらす因子(Damps)を見出した。Dampsに対する中和抗体の投与は様々な加齢・炎症関連疾患モデルに対して治療効果を発揮することから,Damps遮断が病態の治療や予防に直結していることを示唆するものであった。しかしながら,炎症局所におけるDamp分子の存在様式については,新たな創薬シーズとしての有用性が予想されるにも関わらず,殆ど明らかにされていないのが現状であった。本研究では,AGEs等のDamps分子を特異的リガンドに見立てた様々な評価系を構築することで,Damps親和性因子の探索と起炎性複合体の有無,更には病態生理学的意義を明らかにすると共に,親和性因子を創薬シーズにしたDamps遮断に基づく新規治療効果の検討を行った。AGEsを特異的リガンドに持ったアフィニティ担体を新規に調製し,これを用いてAGEsと相互作用し得る新たなAGEs結合因子の探索研究を展開した。AGEs化担体と組織抽出液を反応させ,塩濃度勾配を用いて段階的に溶出し,AGEs結合因子画分を得た。本画分の分離後,質量分析にて分子同定をはかったところ,免疫系細胞の細胞内顆粒に含まれるタンパク質性因子を見出すことができた。本知見は,Damps分子と他因子との機能的複合体形成の可能性を意味するものであり,これによって新たな創薬標的の突破口を導き出すことができた。新たに見出したAGEs結合因子の起炎性複合体形成の病態生理学的意義を更に追求していく。実際には,結合に必要な最小単位の同定や簡便な結合評価系の構築,細胞レベルでの起炎性活性の検討,生活習慣病をはじめとする組織リモデリング病態への関与に関する検討を行うこととする。更に,炎症病巣での複合体形成の実体解明のために,特異抗体の作製と免疫組織科学的検討も併せて遂行していく予定である。

(理由)結合因子の単離と同定に必要と考えていた詳細な条件検討を短期間で済ますことができ,当初の計画よりも研究計画が円滑に支障なく実施することができたこと,更には購入品の値引きなども加わり,これらによって次年度使用額が生じることとなった。(使用計画)次年度の研究費と合わせて、次年度の主たる研究課題である起炎性複合体の機能解析と創薬標的としての可能性の検討について,薬品や抗体類の購入を充実させ,より活発に研究活動を進めていく予定である。
温度可変顕微赤外分光法による液晶性物質結晶多形の相転移挙動の解明

液晶相を規定する分子間相互作用を解明するために、液晶物質の系統的な結晶構造解析を行なう過程で、見いだした結晶多形について、以下の研究を行なった。1.1-メチルアルコキシ基をもつキラルなビフェニルエステルに異性体の単結晶作成を行ない、一部の化合物について結晶多形の存在を見いだし、構造解析をおこなった。さらに、結晶相から液晶相への転移挙動を示差走査熱量測定および温度可変顕微赤外分光法によって追跡し、今回解析ができた結晶形は、より、液晶相に近い高温安定形であることを見いだした。また、一連のキラルなどビフェニルエステルの結晶構造と液晶挙動の関連を検討する中で、キラル基のかさ高さがスメクチック相の安定性に決定的な影響を及ぼすことを明らかにした。2.1-メチルアルコキシカルボニル基をもつ反強誘電性液晶化合物で見いだした結晶多形の、異常な融解挙動を解明するために、スキャン速度を変化させて示差走査熱量測定を行なった。3.1-メチルアルコキシカルボニル基をもつ反強誘電性液晶化合物の温度可変顕微赤外測定を行ない、相転移における分子構造の変化を検討している。4.アルコキシシアノビフェニルの同族列について見いだした結晶多形は、いずれも室温で素早く劣化するので、高速スキャンの温度可変顕微赤外分光法による測定条件を検討した。5.1.および3.の赤外分光測定は、KBr錠剤を用いたが、今後は、単結晶について偏光による測定を行ない、相転移における構造変化を解析済みの結晶構造と対応させて、詳細な知見を得る予定である。
文学作品間の影響関係のコンピュータによる解析方法の確立

本研究の目的とするところは次の諸点であった。(1)ディケンズ、カーライルを中心として、その他の19世紀イギリス文学の電子テキストの収集。(2)上記電子テキスト分析のための統計ソフトの製作。(3)上記統計ソフトを用いた、ディケンズとカーライルの作品の比較、影響関係の探索。(4)この手法の一般化、すなわち、その他の作家の作品への応用。(1)電子テキストについては、有料、無償のものを含めて、概算で1000点の作品等を収集することができた。さまざまな形式のものが混じっているので、(3)の統計ソフトに直ちにかけられるような形式とするため、なおも整理作業の継続を要する。(2)統計ソフトtokeiがC言語によって製作された。tokeiとは、山本によってすでに開発されている、活用形を含む複数単語同時検索ソフトSEARCHを利用しながら、今回の研究に必要となる資料を集めるための統計ソフトである。これは文学テクストにおける特定の語の使用例を検索し、その後の前後を囲む文脈を、任意語数(センテンスでも可)で指定し、その部分の統計をとるためのものである。(3)tokeiを用いながら、blood、hope、など20程度の単語を用いながら、ディケンズとカーライルの間に影響関係が見られるかどうかを調査した。それを示唆するようなデータは出ているが、今回の研究ではそれを数値的に証明し、結論づけるところまで突き詰めることはできなかった。(4)(3)を発展させた精密な研究は今後に期待されるが、tokeiを用いることにより(a)テクスト間の類似性(模倣、盗作などを含む)の検出、(b)特定の作家の心にひそむコンプレックスの検出などへの応用が可能であることが判明した。本研究の目的はディケンズの『二都物語』及びカ-ライルの『フランス革命』の電子テキストをコンピュータ処理することにより、両者の間の影響関係を探ろうとするものであるが、初年度の本年はその作業を行うための基礎作業を行うことが目標である。この基礎作業は二つの異なった活動から成り立っている。第一は、ディケンズおよびカ-ライルの当該の電子版テキストの入手、もしくは作成である。ディケンズに関しては市販のものが用意に入手可能なので、問題ないが、カ-ライルに関しては調査の結果、既成のものが発見されなかったので、OCRの利用により作成作業を開始した。それにより、『フランス革命』の電子テキストはほぼ完成に近づきつつある。また、カ-ライルの他の作品、さらに他の作家の電子テキストとの比較が不可欠であるが、カ-ライルに関しては、さらに『衣装哲学』などの電子化の準備を進めている。第二は、影響関係を研究するためのコンピュータプログラムの作成であるが、これは、山本がすでに作成した、動詞、名詞、形容詞などを自動的に活用させる複数語同時検索プログラムSEARCHを土台として、特定の語彙(複数)の前後数百語の範囲の語彙統計をとる方向に改良するのが至当という結論に達し、そのインプリメンテーションを鋭意検討中である。本研究の目的はディケンズの『二都物語』及びカーライルの『フランス革命』の電子テクストをコンピュータ処理することにより、両者の間の影響関係を探ろうとするものであるが、初年度につづいてさらにディケンズ及びカーライルの電子テクストの入手、もしくは作成に努めた。さらに本年度はヴィクトリア朝作家全体にまで範囲を拡大し、ヴィクトリア朝作家全体に関する膨大な電子テクスト・アーカイヴの構築をめざして、精力的に電子テクストの収集を行った。収集したテクストはおおまかにいって、数千の規模になったと思う(これは現在、世界的な規模で急激な勢いで進展している文学作品の電子テクスト化のお蔭である)。

これによってたんに『二都物語』と『フランス革命』の比較研究にかぎらず、ヴィクトリア朝文学全体のなかで『二都物語』が占める位置を研究することも、可能になったのではないかと考える(しかしこれは本研究の範囲をこえるので、今後の課題としたい)。そしてその作成・収集した電子テクストを材料にして、山本が独自に開発した複数語同時検索プログラム(Search)を活用しながら、任意の二つのテクストの影響関係を語彙的に探るためのいくつかの基礎的作業を行い、検索プログラムのブラッシュアップに努めた。その作業のなかでいくつかの特定の語彙をピックアップし(数百語)、それぞれについて語彙統計をとってみた。そのうえでそれらの語の一つ一つついて丹念にコンテクストを考慮しながら、実際にどういうかたちの影響関係が認められるかをチェックした。その成果は、最終年度にまとめるつもりである。本研究の目的とするところは次の諸点であった。(1)ディケンズ、カーライルを中心として、その他の19世紀イギリス文学の電子テキストの収集。(2)上記電子テキスト分析のための統計ソフトの製作。(3)上記統計ソフトを用いた、ディケンズとカーライルの作品の比較、影響関係の探索。(4)この手法の一般化、すなわち、その他の作家の作品への応用。(1)電子テキストについては、有料、無償のものを含めて、概算で1000点の作品等を収集することができた。さまざまの形式のものが混じっているので、(3)の統計ソフトに直ちにかけられるような形式とするため、なおも整理作業の継続を要する。(2)統計ソフトtokeiがC言語によって製作された。tokeiとは、山本によってすでに開発されている、活用形を含む複数単語同時検索ソフトSEARCHを利用しながら、今回の研究に必要となる資料を集めるための統計ソフトである。これは文学テクストにおける特定の語の使用例を検索し、その語の前後を囲む文脈を、任意語数(センテンスでも可)で指定し、その部分の統計をとるためのものである。(3)tokeiを用いながら、blood、hope、など20程度の単語を用いながら、ディケンズとカーライルの間に影響関係が見られるかどうかを調査した。それを示唆するようなデータは出ているが、今回の研究ではそれを数値的に証明し、結論づけるところまで突き詰めることはできなかった。(4) (3)を発展させた精密な研究は今後に期待されるが、tokeiを用いることにより(a)テクスト間の類似性(模倣、盗作などを含む)の検出、(b)特定の作家の心にひそむコンプレックスの検出などへの応用が可能であることが判明した。