hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
密集配置をした小形垂直軸風車のウインドファームに関する数値流体力学解析と風洞実験

米国の研究者らによって、高いアスペクト比(H/D)を持った小形垂直軸風車を密に配置することによって、単位面積当たりの発電出力が大形ウインドファーム以上に高くなる可能性が示されている。本研究では、一般的な低いアスペクト比(H/D = 0.868)のミニチュア・バタフライ風車を対象として、数値流体力学解析(CFD)と風洞実験によって、小形風車の密集配置の仕方による出力の違いと後流の挙動を調べ、最適な風車配置に関する知見を得ること、さらには小形風車の密集配置の有効性を明らかにすることを目的としている。平成30年度は、ロータ直径D = 50 mm、ロータ高さH = 43.4 mm、翼弦長20 mm、翼型NACA 0018、翼数3枚のミニチュア・バタフライ風車を3Dプリンターによって製作した。このミニチュア風車のトルク特性を風洞実験によって計測した。このミニチュア風車を2つ並べて、その間隔(gap)と主流方向に対する風車ペアの向きを任意に変更可能な装置を設計・試作した。数値解析としては、本年度は風車ペアが主流と垂直な方向に離れた設置状態を対象として2次元CFDを実施した。この場合、2つの風車が同方向に回転するCO状態(Co-rotating)と、互いに反対方向に回転し、風車間の流れが風車の翼の移動方向と同じとなるCD状態(Counter-Down)および風車間の流れが翼の移動方向と逆向きとなるCU状態(Counter-Up)がある。この3つの状態において、gapが10、15、25、50、100、200 mmとなる6ケースについて解析を行った。CFD解析結果として、大局的に見て、CD > CO > CUの順で出力が向上することが分かった。また、もし2方向の風向が支配的であり、その風速が均等であると仮定した場合には、gap/D = 1.0のCO状態が最良となる可能性が示された。ミニチュア風車の製作は、設計を鳥取大学が行い、3Dプリンターによる造形を香川高専が担当した。直径50mmの小さな風車モデルであるため、当初は苦労したが、何度かの試行の後、ほぼ同等の特性を持つ複数の風車モデルの製作に成功している。風車単体のトルク計測は鳥取大学が実施し、複数の風車を用いる風洞実験装置の設計・製作は香川高専が行った。当初計画にはなかったが、2つの風車の間隔(gap)を任意にかつ精度良く設定できる方法(スライド式)を香川高専が見出し、次年度以降に実施予定の風洞実験において、後流の影響を高い精度で計測する準備が整った。CFD解析は、市販のソフトウェアであるSTAR-CCM+を使用し、最近組み込まれた2次元の剛体運動予測モデルを利用して、複数風車の動的相互作用の計算実行を可能とした。このモデルでは、流れ場の計算と同時に風車の運動方程式も解くため、風車モデルは、計算の時間進行に伴い回転数が変化する。単体の風車モデルの予備的CFD解析によって、トルク特性を予測し、その最大出力状態から風車モデルの回転数に対応した負荷トルクを決定した。また、計算格子には、オーバーセットメッシュ(重合格子)を採用し、2つの風車ロータの密接配置を計算可能とした。ただし、2次元計算であるにも関わらず、動的な相互作用の計算であるため、回転状態がある程度一定の状態に収束するまでに、かなりの計算時間を要することが判明した。そのため、申請時に計画していた初年度の2次元計算におけるマルチペア配置の計算までは実施できず、1ペア配置についても、基本的な3状態(CO, CD, CU)の計算を実施するに留まった。
次世代シーケンサーを用いた胃癌・GIST患者末梢血中腫瘍由来浮遊DNAの検出

胃癌およびイマチニブ耐性GISTの持つ変異について、末梢血中に浮遊している腫瘍由来のDNA断片(ctDNA)として検出できるかどうか検討した。胃癌症例6例に対して血漿中に遊離しているDNAの抽出を行い、6例中3例で腫瘍と同一のTP53変異を持つctDNAを検出できた。これら3例におけるctDNAの存在比率は病勢を反映していた。一方、イマチニブ耐性GISTの4例中3例でC-KIT exon13、1例でexon18の1塩基置換が認められた。これら腫瘍と同一のC-KIT変異を持つctDNAの存在比率は0.010-9.385%であり、この存在比率は腫瘍量や病勢との相関を認めた。本研究は、胃癌患者およびGIST患者の末梢血を用いて次世代シーケンサーによる腫瘍由来遊離DNA (ctDNA)の検出を行い、早期発見法や再発診断法あるいは抗癌剤の効果判定法などの確立につなげることを目的とする。平成26年度は、当院で診療を行った胃癌患者およびGIST患者を対象に、組織の収集とDNAの抽出を行った。治療開始前の検体として、上部消化管内視鏡検査の際に生検組織を5例採取し凍結保存した。これとは別に、手術患者30例の切除標本から腫瘍組織と正常組織を採取し、ただちに凍結保存した。これらの組織のうち、今後研究対象となる可能性のある患者19例の組織からDNAを抽出した。特にイマチニブ耐性病変を持つGIST患者5例において、イマチニブに感受性を持つとされるCKITのexon11内の遺伝子変異と、イマチニブ耐性の原因であるとされるCKITのexon13、14、17、18内の遺伝子変異を検出する目的で、それらのexonの全coding領域を網羅するようなプライマーを作成し、初発病変およびイマチニブ耐性病変の腫瘍組織を用いてサンガーシーケンス法にて変異部位を検索した。初発病変については5例全てでexon11内に変異を認めたほか、イマチニブ耐性病変については5例中4例でexon13内に変異を認め、残りの1例でexon18の変異を認めた。この5例からは耐性病変の治療前後で血漿を採取しDNAを抽出した上で、腫瘍特異的なexon11、13、18の変異を血漿から検出するためのプライマーを新たに設計し、血漿DNAのシーケンシングを行い、血漿DNAにおけるctDNAの存在比率を算出した。各サンプルにおいて0.008-9.385%の割合でctDNAを認め、5例中3例で治療後にctDNAの割合が低下していた。特にGIST患者については、イマチニブ耐性病変を持つ患者5名から得た切除検体を用いてシーケンシングを行い、腫瘍特異的な変異を同定した。さらに耐性病変の治療前後での血漿を採取してcell-free DNA (cfDNA)を抽出し、腫瘍で同定した変異を血漿から検出するためのプライマーを新たに設計し、cfDNAのシーケンシングを行い、cfDNA中におけるctDNAの比率を算出することができた。平成27年度は、胃癌患者に対しても次世代シーケンサー用試薬であるCancer Panelを用いて胃癌原発巣42例における腫瘍特異的な変異を同定した。胃癌原発巣においてTP53の変異を同定した10例のうち6例の術前血液サンプルからcfDNAを抽出し、GIST患者に対して行ったものと同様の手法でシーケンシングを行ってctDNAの割合を算出し、腫瘍ボリューム、臨床病期などとの関連性について解析した。また、手術前後のサンプルについては、術後のctDNAの消失の有無と再発の関連性について検討し、ctDNAが術後の再発診断や再発後の化学療法効果判定を行うマーカーとして応用かどうかを検索した。平成27年度の計画としては、GIST患者だけでなく胃癌患者に対しても、次世代シーケンサー用試薬であるCancer Panelを用いて胃癌原発巣における腫瘍特異的な変異を同定し、シーケンシングを行うことでcfDNA中のctDNAの割合を算出し、腫瘍ボリューム、臨床病期、転移臓器などとの関連性について解析することを予定していた。本年度は、当科で手術された胃癌原発巣42例を用いて、TP53、APC、CDH1、KRASについて変異報告の多い箇所をはさむようなprimerを設計し、Sanger法を用いたシーケンスを行い、10例(24%)でTP53の変異を同定した。TP53の変異を同定した10例のうち、6例の術前血液サンプルを用いて、血漿中のcf DNAの抽出を行った。それぞれの症例において術前、術後の2サンプルずつから、14.1-58.9ngのcfDNAを回収することができた。回収したcfDNAのdeep sequencingを、次世代シーケンサーを用いて行い、3例で腫瘍と同一の変異を持つctDNAを血漿から検出した。検出例はいずれもStageIIICやIVの非常に進行した胃癌患者であった。再発を認めた際には術後3か月ごとに1年間血液を提供していただき、DNAを抽出した。

治療経過中の血液サンプルを追跡したところ、ctDNAの定量値が腫瘍量、治療効果、血清腫瘍抗原の推移と合致していた。以上より、胃癌症例に関しても平成27年度の計画は達成しており、研究全体としてはおおむね順調に進展していると考える。本研究は、胃癌患者およびGIST患者の末梢血を用いて次世代シーケンサーによる腫瘍由来遊離DNA (ctDNA)の検出を行い、早期発見法や再発診断法あるいは抗癌剤の効果判定法などの確立につなげることを目的とする。平成26年度は、当院で診療を行った胃癌患者およびGIST患者を対象に、組織の収集とDNAの抽出を行った。特にGIST患者については、イマチニブ耐性病変を持つ患者5名において、次世代シーケンサーを用いて、腫瘍で同定した変異を血漿から検出することができ、cell-freeDNA(cfDNA)中におけるctDNAの比率を算出することができた。平成27年度は、胃癌患者42例においてもGISTで行った方法と同様の方法で、胃癌原発巣に特異的なTP53の変異をcfDNAから検出することができ、cfDNAにおけるctDNAの比率が臨床病期や病勢と相関することを示した。平成28年度は、平成26年度に解析を行ったイマチニブ耐性GIST患者5例において、白血球ゲノムDNAを抽出し、血漿DNAにおける変異解析と同様の手法を用いてシーケンシングを行い、腫瘍に特異的な変異をgermline mutationとして認めないことを確認することを試みた。また、本研究で用いる変異検索法において、健常人では患者の腫瘍に特異的な変異を検出しないことを確認する目的で、健常人から白血球ゲノムDNAを抽出し、これまでと同様の手法を用いてシーケンシングを行い、腫瘍に特異的な変異の割合を検索し、ctDNAの検出感度を求めようと試みた。胃癌患者においては、平成27年度にTP53でctDNAを追跡しえた3例に関して、TP53に加えALKやEGFR、BRAF、KRASなどの48の癌関連遺伝子を一度に検索可能な次世代シーケンサー用のパネルを用いて原発巣の解析を追加し、TP53以外の遺伝子について変異を検索したところ、3例ともに1つ以上の別の遺伝子の変異を同定することができた。胃癌およびイマチニブ耐性GISTの持つ変異について、末梢血中に浮遊している腫瘍由来のDNA断片(ctDNA)として検出できるかどうか検討した。胃癌症例6例に対して血漿中に遊離しているDNAの抽出を行い、6例中3例で腫瘍と同一のTP53変異を持つctDNAを検出できた。これら3例におけるctDNAの存在比率は病勢を反映していた。一方、イマチニブ耐性GISTの4例中3例でC-KIT exon13、1例でexon18の1塩基置換が認められた。これら腫瘍と同一のC-KIT変異を持つctDNAの存在比率は0.010-9.385%であり、この存在比率は腫瘍量や病勢との相関を認めた。平成26年度の計画としては、組織の収集とDNAの抽出および原発巣のシーケンシングとその結果の解析を予定としていた。現在までに、胃癌およびGISTともに組織を収集し、今後シーケンシングの対象となる可能性のある患者の組織からはDNAを抽出することができた。またイマチニブ耐性GIST患者5例に関しては上記以外に、原発巣のシーケンシングを行い腫瘍特異的な変異を同定した。
教師の力量形成に及ぼす授業内容と学習者に対する教師の認知構造の研究

授業の過程は、授業事象に対する教師の認知とそれによる教師の意思決定に基づく授業運営の過程である。従って授業過程に及ぼす教師の力量は直接的には、授業過程での授業事象の認知力と意思決定に基づく授業の運営力であるといえる。この授業認知過程に影響を及ぼす第一の要因である授業事象の認知力は,教授内容に対する教師の理解状態と子どもの学習状態の把握が大きく影響していると考えられる。本研究ではそこに着目し,子どもの学習成果を教師がどのように把握しているかを,目標準拠テストを利用して把握するとともに,子ども自身が自分の学習をどのように自己評価しているかを把握し,この両者から教師の授業認知とその力量の過程を検討した。その結果,次のことが明らかになった。1教師の力量形成はほぼ次の3段階を経て形成される。第1段階:「教授事象がよくみえないため,学習の成立,不成立の事態がよくみえず,適切な手をうたない状況」である。授業者は授業をした事実と子どもがが学んだことを同一視しがちで,教えたので学んでいるはずと受け取っているが,実際にはかなりの子どもが学んでいない状況である。第2段階「教授事象は見えるようになり学習不成立の事態は分るが,授業改善に有効な手がそれほどうてないまま授業が進行してしまう状況」である。第3段階:「教授事象がよくみえ,対応する手だてをうつことができ,成果もあがる状況である。2教師の授業認知は,教師の授業内容の理解状況によって異なること,また,成績上位と下位の子どもの見取りはできるが,中位の子どもの見取りが不得意である。教師の力量形成に関与する要因の内、本年度は授業内容に関する教師の認知と授業の関係を検討した。まず、教師の授業内容に対する認知を測るために、当該単元の授業内容(中学校理科)を抽出し、内容項目を試作した。これらの内容項目には、不要と思われるものや、内容的に不足なもの、改善が必要なもの、などが意図的に含まれている。教師に当該単元の授業を設計してもらい、目標と内容を記述してもらった後に、先の内容項目を示し、問題点を指摘してもらう。これを通して、その教師の単元に対する内容の理解度を評価した。この結果、熟達教師は、学習指導要領を踏まえて内容全体のバランスに眼が行き届き、かつ教授方法を念頭に内容を検討したが、初任者は、全体的な視野に欠け、項目の表現などにこだわり、一般的なところに留まり具体的な指摘ができない傾向が見られた。当然ながら授業設計には授業内容の理解が深く関わっているわけで、力量形成においては目標準拠による内容理解の自己評価が必要であることが指摘された。また、授業実践により学習成果に対する教師の予測を行った。熟達教師と初任者の教師の予測力に差があるのは明白であったが、授業内容との関連では、熟達教師も初任者の教師も、授業内容に対して理解が十分でない領域については、授業成果を過大に評価しかつ通過率も低く、インタビューによる聞き取りにおいてもこうした認識を持っていることを確かめることができた。授業認知とそれに基づく授業行為は多様であるが,授業事象がみえなく有効な手が打てない段階から,みえるが打てない段階を経て,よくみえて適切な手をうつ段階へと移行する。今回は教師と,子どもの認知を調べ,その違いを検討した。授業過程では,教師のみえかたと同時に,子どものみえかたが授業を決定づけるといえる。そこで,教師と子どものそれぞれの,学習成果に対する予測と,テスト結果の関係を分析した。取り上げた事例は,小学校6年生で算数の少数と分数の4,5,6年生の内容の総括である。プリテストでは121項目中26項目で,21.5%の項目に開きがあった。この他は,概して,教師のみとりと子どものみとりに大きな違いはなかったが,子どもの自己評価の正確さは予想以上である。教師は,教材構造の論理から、正答誤答の診断を行った。

ポストテストでは、児童の的中率が教師の的中率よりも低いということがあった。これはプリテストと異なっている。授業での困難な意識が残っていることと,計算ミスのみでなく,学ぶ過程で身に付いてしまった誤り方略ともいえることが,結局治らないまま子どもは出来たと思いこんでいることにも原因があるようである。また,プリテストにおいて、的中率でズレがあった項目の多くが、ポストテストにおいても残っており,似通っていた。やはり、教師側で難易度が高いと判断した項目は、予測が難しく,内容面での要因が大きいことが指摘される。
パルスレーザー堆積法による鉄薄膜の磁気配向制御

レーザー蒸発法により生成したFe原子をAl基板上に蒸着し、メスバウアー分光法による測定を行った。レーザー蒸着されたFe原子はAl基板と反応し、その反応は基板温度によって変化することが示された。10KのAl基板上に少量の鉄原子を蒸着した場合にはFeAlが生成するが、蒸着量が多い場合には面内配向した核スピンをもつα-Fe膜が生成した。293Kで生成すると内部磁場分布を持った成分が観測され、高温の573Kでは均一の環境をもつ成分が見られた。レーザー蒸着法は新しい薄膜材料を作るのに有用な手法であり、その核スピンの配向制御や、組成の制御の可能性が示された。また、蒸着中の基板温度が生成される薄膜の物性に重要な役割を果たすことが示された。また、マグネタイトFe_3O_4とヘマタイトFe_2O_3を様々な温度でAl基板上にレーザー蒸着させて生成した薄膜のメスバウアースペクトルを測定した。高温の基板温度で生成した試料ではFe_<3-x>O_4の化学組成を持っているが、低温の基板温度で生成した試料では欠陥の多いFe_<1-x>Oあるいはアモルファスの薄膜であることわかった。Fe_2O_3をレーザー蒸発した場合でも、Fe_2O_3の組成をもつ薄膜は得られず、Fe_3O_4の組成を持つものが得られた。SEM像観察からは高温の基板温度では粗い面が生成し、低温の基板温度では平滑な面であった。XRDではFe_3O_4とFeOが確認され、メスバウアースペクトルの結果と一致した。化合物のレーザー蒸着によって組成の異なる薄膜が得られ、基板温度によって薄膜の組成を制御できることが明らかとなった.レーザー蒸発法により生成したFe原子をAl基板上に蒸着し、メスバウアー分光法による測定を行った。化合物のレーザー蒸着によって組成の異なる薄膜が得られ、基板温度によって薄膜の組成を制御できることが明らかとなった.まず、レーザー蒸発による鉄薄膜生成を10^<-2>Pa以下の真空中で行うための装置を製作した。Nd:YAGレーザーの第2高調波(512nm,200mJ/pulse)を凸レンズで集光して金属試料をレーザーアブレーションし、薄膜生成基板の温度制御(10600K)が可能な装置とした。この装置を用いて^<57>Fe濃縮鉄を照射し、レーザー蒸発した鉄原子をアルミ基板上に堆積させて鉄薄膜を生成した。鉄蒸着量や基板温度を様々な条件で変化させて薄膜試料を製作し、メスバウアー分光法による測定を行った。また、薄膜の表面形状は走査型電子顕微鏡SEMにより観察した。レーザー堆積法と比較するために、鉄線の抵抗加熱によって基底状態の鉄原子を生成し、堆積させた薄膜も同様に測定した。鉄の蒸着量が多く、膜厚が十分に厚い場合にはα-Feの層が得られ、メスバウアースペクトルから鉄原子の磁気配向が見られた。抵抗加熱法により生成した鉄薄膜は基板に対して垂直に磁気配向するが、レーザー堆積法により得られた鉄薄膜は面内磁気配向となることがわかった。また、そのSEM画像から薄膜の結晶成長方向に差が見られ、抵抗加熱法では基板面に垂直方向に結晶成長するのに対して、レーザー堆積法では面内方向に結晶成長することがわかった。このことはレーザー蒸発した鉄原子の並進エネルギーが大きく、基板面上で十分に拡散しながら結晶成長するためと考えられ、磁気配向はα-Fe結晶の形状異方性によるものである。次に、レーザー堆積法による鉄薄膜生成時の基板との化学反応をしらべた。AlとSiを基板として用いた場合、蒸着量の少ない試料では、基板中に鉄原子が拡散して常磁性となり、蒸着量が増大するにつれて次第に磁気成分が現れて内部磁場分布を持つようになることがわかった。

また、基板温度が上昇するにつれて鉄原子の基板中への拡散が大きくなることが明らかとなった。レーザー蒸発法により生成したFe原子をAl基板上に蒸着し、メスバウアー分光法による測定を行った。レーザー蒸着されたFe原子はAl基板と反応し、その反応は基板温度によって変化することが示された。10KのAl基板上に少量の鉄原子を蒸着した場合にはFeAlが生成するが、蒸着量が多い場合には面内配向した核スピンをもつα-Fe膜が生成した。293Kで生成すると内部磁場分布を持った成分が観測され、高温の573Kでは均一の環境をもつ成分が見られた。レーザー蒸着法は新しい薄膜材料を作るのに有用な手法であり、その核スピンの配向制御や、組成の制御の可能性が示された。また、蒸着中の基板温度が生成される薄膜の物性に重要な役割を果たすことが示された。また、マグネタイトFe_3O_4とヘマタイトFe_2O_3を様々な温度でAl基板上にレーザー蒸着させて生成した薄膜のメスバウアースペクトルを測定した。高温の基板温度で生成した試料ではFe_<3-x>O_4の化学組成を持っているが、低温の基板温度で生成した試料では欠陥の多いFe_<1-x>Oあるいはアモルファスの薄膜であることわかった。Fe_2O_3をレーザー蒸発した場合でも、Fe_2O_3の組成をもつ薄膜は得られず、Fe_3O_4の組成を持つものが得られた。SEM像観察からは高温の基板温度では粗い面が生成し、低温の基板温度では平滑な面であった。XRDではFe_3O_4とFeOが確認され、メスバウアースペクトルの結果と一致した。化合物のレーザー蒸着によって組成の異なる薄膜が得られ、基板温度によって薄膜の組成を制御できることが明らかとなった。
半導体ナノ粒子を用いた網羅的細胞情報解析システムの開発に関する研究

半導体ナノ粒子(Quantum dots、以下QD)は優れた光安定性、強い蛍光強度といったユニークな特徴を有しており、医学、生物学分野での応用をめざした研究が進んでいる。中でも粒子径を変化させることによって単一の励起波長で多種類の蛍光波長を発する性質は一度に観察可能となる細胞内物質の種類を飛躍的に増加させると予想される。そこで、我々は本研究においてQDを用いた細胞内物質検出法の確立を目指して検討を重ねてきた。まず、QDによる蛍光免疫染色であるが、細胞質内、核内の様々の物質に関して検討を行ってきた。対象物質によって従来の蛍光免疫染色法とほぼ同様の方法で良好な蛍光像が得られるものもあれば、マイクロウェーブや界面活性剤などによる処理が必要なものもあった。したがって、多重染色を行うには現状では固定、染色条件が同じであるもののみが可能であり、実用的なQDを用いた多種類細胞内物質に対する蛍光免疫染色法についてはさらに検討が必要である。QD蛍光の定量性に関する検討を、proliferation cell nuclear antigen(PCNA)やサイクリンB1を対象として行った。PCNAに関しては既存色素であるAlexa 488とほぼ同様の結果をレーザースキャニングサイトメーター(LSC)で測定し、得ることが出来た。サイクリンB1については蛍光顕微鏡の観察ではAlexa 488と同様に染色されているように見えたが、LSCでもフローサイトメーターでも測定が困難であった。原因としては蛍光免疫染色が不十分であることと同時に機器側の問題(現有のフローサイトメーターでは至適波長の励起光が得られない、検出フィルターが最適化されていないなど)も考えられた。しかしながらこれらの課題を解決できれば、QDを用いた多重染色においてもサイトメーターで定量が可能であり、今後も検討を続けていく予定である。ポストシークエンス時代を迎えて、医学生物学研究の主眼は遺伝子産物の機能解析へと移ってきており、蛍光物質、GFP等の蛍光蛋白を用いた細胞内での物質相互作用を解析するバイオイメージング技術が必要とされている。そのためには同時に複数の分子を可視化することが必要であり、それに応じることができる新しい蛍光物質として半導体ナノ粒子(quantum dots,以下QD)が注目されている。本助成研究では、このQDを用いた網羅的細胞情報解析システムの開発を試みている。QDを用いた細胞情報解析システムの開発のためには、まずQDを利用した細胞内物質の蛍光免疫染色が必要である。既にQDをラベリングした2次抗体などは市販されており、これを利用すれば従来の蛍光色素と同様の方法で免疫染色が可能であると当初は考えていた。しかしながら細胞質内、核内に存在する主要な遺伝子産物について蛍光免疫染色を行ったところ、いくつかの遺伝子産物に関しては従来の蛍光色素と同様の染色結果を得ることができなかった。特に核内物質に関しては、QDではその染色性が有意に低下していた。この理由としてQDの粒子径が従来の蛍光物質と比較して大きいため、核内へのQDの移行が困難である可能性が考えられた。そこで、マイクロウェーブ処理を行う、界面活性剤で細胞を処理するなどのQDの核内への移行性を高める操作を加えてみたところ、既存蛍光物質と同様の染色結果を得ることができた。この様に、QDを用いた蛍光免疫染色法は対象物質によっては工夫が必要であることが確認され、複数物質の同時解析のためには、まずより多数の細胞内物質について至適条件の検討が必要であると考えられた。

そこで、我々は本研究においてQDを用いた細胞内物質検出法の確立を目指して検討を重ねてきた。まず、QDによる蛍光免疫染色であるが、細胞質内、核内の様々の物質に関して検討を行ってきた。対象物質によって従来の蛍光免疫染色法とほぼ同様の方法で良好な蛍光像が得られるものもあれば、マイクロウェーブや界面活性剤などによる処理が必要なものもあった。したがって、多重染色を行うには現状では固定、染色条件が同じであるもののみが可能であり、実用的なQDを用いた多種類細胞内物質に対する蛍光免疫染色法についてはさらに検討が必要である。QD蛍光の定量性に関する検討を、proliferation cell nuclear antigen (PCNA)やサイクリンB1を対象として行った。PCNAに関しては既存色素であるAlexa 488とほぼ同様の結果をレーザースキャニングサイトメーター(LSC)で測定し、得ることが出来た。サイクリンB1については蛍光顕微鏡の観察ではAlexa 488と同様に染色されているように見えたが、LSCでもフローサイトメーターでも測定が困難であった。原因としては蛍光免疫染色が不十分であることと同時に機器側の問題(現有のフローサイトメーターでは至適波長の励起光が得られない、検出フィルターが最適化されていないなど)も考えられた。しかしながらこれらの課題を解決できれば、QDを用いた多重染色においてもサイトメーターで定量が可能であることが示唆されると考えている。
水と生体分子が織り成す生命現象の化学に関する研究の総括

特定領域研究「水と生体分子が織り成す生命現象の化学」(領域代表:桑島邦博)は、「分子レベルの生命現象を第一原理より化学と物理学の立場から解き明かす」ことを目的として平成15年度から19年度までの5年間実施された。本研究では、この特定領域研究の成果とりまとめを行うことを目的とした。以下の研究が実施された。(1)成果とりまとめのための書籍出版特定領域研究の研究成果を書籍(題名:Water and Biomolecules-The Physical Chemistry of Life Phenomena)にまとめた。本研究の研究代表者(桑島)と研究分担者・連携研究者(後藤、平田、寺嶋、片岡)が編集者となり、特定領域研究の計画班班員と5回開催された特定領域研究公開国際シンポジウムの招待講演者の中から執筆者15名を選び、「水と生体分子」を中心テーマとしたモノグラフ・スタイルの英文書籍をSpringer社から出版した。研究体制は、研究代表者の桑島と特定領域研究総括班メンバーであった後藤、平田、寺嶋、片岡の4名が研究分担者または連携研究者として加わった。分子科学研究所の平田は、研究分担者と同等の責務を負うが、研究代表者の桑島と実質上同じ研究機関に属するので、研究費の配分は行わず、連携研究者として研究に参画した。本総括班の目印とするところは、特定領域研究「水と生体分子が織り成す生命現象の化学」に関する研究の総括を行い、各研究間の企画調整と領域全体の広報活動を通して特定領域研究が円滑かつ効果的に推進されるよう取りはからうことである。以下の成果が得られた。本特定領域研究の全体的な研究方針の策定と各研究項目間の連絡調整を行うため、平成15年8月6日(大阪大学・たんぱく質研究所セミナー室)と平成16年1月10日(千里ライフサイエンスセンター,大阪)の2回総括班会議を開催した。1月の総括班会議には総括班班員5名のほか、研究評価委員である吉原(北陸先端大)、北川(岡崎研究機構)、中原(京大)、和達(東大)、Levy(Lutgers大)、Dobson(Cambridge大)が参加した。これらの総括班会議では、公開ワークショップの企画実施、特定領域研究全体の研究方針の策定、各研究項目間と各計画研究や公募研究間の連絡調整に関して討議した。1月の総括班会議の前に第1回公開ワークショップを開催した。このワークショップでは、水と生体分子の物理化学に関する分野で指導的役割を果たしている外国人研究者4名とともに、特定領域班員を中心として5名の日本人研究者が講演を行った。公開ワークショップは、広く国内外の関連分野の研究者に開かれたワークショップ形式であり、180名の参加を得て大変盛会であった。本特定領域研究の研究成果を広く国内外に発信するため、インターネットのホームページや電子メールによる情報公開を行い、特定領域研究のニュースレターを発行した。また、分子構造討論会などの学会におけるシンポジウムの企画実施も行った。本総括班の目的とするところは、特定領域研究「水と生体分子が織り成す生命現象の化学」に関する研究の総括を行い、各研究間の企画調整と領域全体の広報活動を通して特定領域研究が円滑かつ効果的に推進されるよう取りはからうことである。本年度より公募研究が始まり、計画研究班員13名に公募研究班員50名が加わり総勢63名となった。さらに、18名の班友も加わり、研究活動を行った。本特定領域研究の全体的な研究方針の策定と各研究項目間の連絡調整を行うため、平成16年5月19日と10月30日(岡崎分子研・平田教授室)の2回総括班会議を開催した。平成16年度第3回の総括班会議を平成17年3月19日(東京,品川プリンスホテル)開催の予定である。この総括班会議には総括班班員5名のほか、研究評価委員である北川(岡崎研究機構)、中原(京大)、郷(原研)、和達(東大)、Levy (Lutgers大)、Dobson (Cambridge大)が参加し、次年度公開ワークショップの企画実施、特定領域研究全体の研究方針の策定、各研究項目間と各計画研究や公募研究間の連絡調整に関して討議するとともに、本特定領域研究に関する評価についても話し合う予定である。6月1-2日大津市いこいの村琵琶湖にて計画班員・公募班員全員が集まり合同班会議を開催した。9月11日には特定領域研究「タンパク質の一生」(領域代表:吉田賢右(東工大))との共同主催公開シンポジウムを開催した(東京、日本科学未来館)。177名の参加者があった。3月の総括班会議の前に第2回公開ワークショップを開催の予定である。このワークショップでは、この分野で指導的役割を果たしている外国人研究者6名を含む12名の招待講演とともに、班員・班友によるポスター発表を予定している。ポスター発表の総件数は159件であり、特定領域研究全体の活動と成果を示すものとなる。16年度より計各班13名、公募班50名の総勢63名で研究活動を行っているが、本年度は3年目で、9月14日に科学技術・学術審議会学術分科会科学研究費補助金審査部会による中間ヒアリングが実施された。

本特定領域研究の全体的な研究方針の策定と各研究項目間の連絡調整を行うため、平成17年5月15日(京都)、8月8日(白馬)、12月24日(京都)、平成18年1月7日(岡崎)の4回総括班会議を開催した。次年度公開ワークショップの企画実施、特定領域研究全体の研究方針の策定、各研究項目間と各計画研究や公募研究間の連絡調整、中間評価に向けた準備に関して討議した。中間評価の結果はA-で以下の評価を受けた。水とタンパク-質の相互作用を分子レベルで解明しようとする本課題は着実に進展していると判断できる。「水溶液・溶媒和の化学」と「生体分子の化学」の各班における個々の研究は順調に進展し、それぞれの分野で個別の成果は多数得られ成果は上がっている。また、コア研究プロジェクトを有機的連携の取り組みとして設定して、意識的に班間の共同研究を促している努力は大いに評価できる。但し、実験とシミュレーションのつながりに代表されるように水とタンパク質をつなぐ研究成果については今後の課題であり親展を期待する。8月6-10日長野県白馬のシエラリゾート白馬にて計画班員・公募班員全員が集まり合同班会議を開催した。1月6-7日には岡崎コンファレンスセンターにて第3回公開ワークショップを開催した。(愛知県岡崎市)。このワークショップでは、この分野で指導的役割を果たしている外国人研究者6名を含む12名の招待講演とともに、班員・班友によるポスター発表をした。ポスター発表の総件数は168件であり、特定領域研究全体の活動と成果を示すものである。本総括班の目的とするところは、特定領域研究「水と生体分子が織り成す生命現象の化学」に関する研究の総括を行い、各研究間の企画調整と領域全体の広報活動を通して特定領域研究が円滑かつ効果的に推進されるよう取りはからうことである。16年度より計各班13名、公募班50名の総勢63名で研究活動を行っている。さらに、23名の班友も加わり、研究活動を行った。以下の成果が得られた。本特定領域研究の全体的な研究方針の策定と各研究項目間の連絡調整を行うため、平成18年8月1日(シェラリゾート白馬、長野)と12月2日(京都テルサ)の2回総括班会議を開催した。平成18年度第3回の総括班会議を平成18年12月19日(京都テルサ)に開催した。この総括班会議には総括班班員5名のほか、研究評価委員である北川(豊田理研)、中原(京大)、Levy(Rutgers大)、Dobson(Cambridge大)が参加し、次年度公開ワークショップの企画実施、特定領域研究全体の研究方針の策定、各研究項目間と各計画研究や公募研究間の連絡調整に関して討議するとともに、本特定領域研究に関する評価について討議した。7月31-8月3日長野県白馬のシエラリゾート白馬にて計画班員・公募班員全員が集まり合同班会議を開催した。12月18-19日には京都テルサにて第4回公開ワークショップを開催した(京都市)。ポスター発表の総件数は160件であり、特定領域研究全体の活動と成果を示すものである。
海洋無脊椎動物からの血管新生阻害剤の探索

海洋無脊椎動物の抽出物、について管腔形成阻害および酵素阻害アッセイを行った。酵素は血管新生に深く関与するとされている膜型マトリックスメタロプロテアーゼ1(MT1-MMP)およびマトリックスメタロプロテアーゼ2(MMP2)を用い、阻害物質の選択性もあわせて検討した。その結果、三重県五ヶ所湾産の末同定ホヤおよび鹿児島県口之永良部島産の末同定海綿に強力かつ選択的なMMP2阻害活性が認められた。冷凍保存されていたホヤ検体800gを抽出後、MM2阻害活性を指標に溶媒分画、各種クロマトグラフィーを用いて阻害物質を単離した。阻害物質の構造は各種スペクトルデータからその平面構造を新規化合物である12-hydroxystearyl-1-sulfateと決定した。絶対立体化学は改良Mosher法および合成標品との比較より、鏡像異性体の混合物であることが明らかになった。新規MMP2阻害物質12-hydroxystearyl-1-sulfateはMMP2をIC_<50>値9.0μg/mLで阻害した。鹿児島産海綿を有機溶媒で抽出後、生物活性を指標に分画をすすめ、鮮やかな青色蛍光を示す物質を活性本体として5.0mg単離した。阻害物質の分子量は356と決定されたが、プロトンNMRにおいて低磁場領域に3つのシグナルを与えるのみで、スペクトル解析による構造決定は困難であった。現在化学構造を検討中である。
ロシア・アムール河流域におけるツングース族に関する言語学及び民族学的研究

今年度は,これまで本研究代表者のフィールドワークによって蓄積されてきた言語資料が整理され,3冊の図書及び1編の論文として刊行されたことが,まず最も大きな成果として挙げられる。特に,図書のうち,2冊のオロチ語,ウルチャ語の言語資料については,これまで日本国内で発表されたこれらの言語の資料はほとんど皆無であり,その価値は極めて高い。本資料の整理,作成にあたっては,近隣の諸言語の資料との比較・参照をその基とし,その際には,今回の科研の出張により,北海道大学,東京外国語大学等の資料の利用が十分に行えたことが大きな役割を果たした。また,論文の「ヘジェン語の系統的位置」は,これまで長いことナーナイ語の一方言と考えられてきたヘジェン語の正確な位置づけを行ったものである。これによって,ツングース諸語全体の歴史的な形成に光があてられた。日本におけるアイヌ語の例を持ち出すまでもなく,消滅の危機にある少数民族の言語及び文化の記録,記述研究は,絶対的な急務である。日本語の歴史や系統を明らかにするためにも,日本周辺の少数民族言語の記述の進展は,極めて重要な意味を持っている。
固相表面上の局所環境反応制御による抗体の部位特異的修飾

我々が独自に開発したRu光触媒を用いたタンパク質修飾技術は触媒の周辺数nmという限定された空間で選択的に反応が進行する。Ru / dcbpy錯体と標的タンパク質に対するリガンド分子の2種類の低分子構造をビーズに担持させることで、タンパク質の非特異的吸着を抑制しつつ、リガンド結合タンパク質を精製すると同時に、共有結合形成による化学修飾を達成した。また、1タンパク質混在系からリガンド結合タンパク質を高感度に検出する技術、2従来のアフィニティークロマトグラフィー法では解析が困難な低親和性のリガンド結合タンパク質を解析する手法、3抗体を精製して機能化する手法を見出した。申請者が独自に見出したRu光触媒を用いたタンパク質修飾技術をアフィニティービーズ固相担体上で行うことで、タンパク質親和性リガンドに対する結合タンパク質の高感度検出、部位選択的な機能性タンパク質のラベル化を目標に研究を開始した。容易に回収可能な磁気分離特性、光反応条件に好都合な分散性の高さ、非特異的吸着の少なさ等の理由より、多摩川精機社製のFG beadsを固相担体として選択した。第一段階の目標として、既存の親和性リガンドMTXと光触媒を固定化したときに固相表面上でMTXの標的タンパク質DHFRが細胞破砕液の中から、選択的にラベル化できるかを検討した。初めに、光触媒部位に相当するRu(bpy)3-linkerをFG beadsに導入したところ、予想外にもRu(bpy)3構造に由来する多くの非特異的結合が観測された。そこで、非特異的吸着性、タンパク質のラベル化効率に焦点を当てて、本研究に最適な固相表面構造を構築することを目的とした。種々のリンカー構造、固相表面のキャッピング剤構造、光触媒の構造を検討した結果、ラベル化効率を保持しつつ、非特異的吸着を大幅に低減させることに成功した。また、MTXと触媒を同時に担持した固相担体を用いることで、細胞破砕液中の標的タンパク質DHFRをビオチンでラベル化、ウエスタンブロットによってラベル化タンパク質を発光検出した。その結果、DHFRと思われるタンパク質の電気泳動バンドを従来の銀染色より高感度に検出することに成功した。本年度開始時のH27年度目標として、本研究目的を達成する上で重要な課題である、タンパク質ラベル化機能を持つアフィニティービーズ固相表面の化学構造の精査、創成を目標とした。その上で、タンパク質混在系の中でもアフィニティーリガンドの標的タンパク質のみを選択的に固相に結合できるような技術が必要不可欠であった。そこで、より非特異的吸着性の少ない固相担体としてFG beadsを選定し、FG beads表面を修飾することで、タンパク質ラベル機能を持たせることを計画した。研究開始後すぐに、当初計画していたRu(bpy)3錯体構造では細胞破砕液のタンパク質混在系に対して多くの非特異的吸着が生じてしまうことが判明し、研究概念が危ぶまれたが、種々のリンカー構造、固相表面のキャッピング剤構造、光触媒の構造を検討した結果、ラベル化効率を保持しつつ、非特異的吸着を大幅に低減させることに成功した。よって、本年度の目的であるタンパク質ラベル化機能を持つアフィニティービーズの創成については、概ね計画通りに進行していると判断した。申請者が独自に見出したRu光触媒を用いたタンパク質修飾技術をアフィニティービーズ固相担体上で行うことを計画した。本タンパク質修飾法はRu光触媒のごく近傍で選択的に進行するため、触媒が担持されたビーズ表面に特異的なタンパク質修飾の反応場の創出を目指した。また、それを用いたビーズ結合タンパク質の高感度検出や、機能性タンパク質の部位特異的なラベル化を目標に研究を開始した。容易に回収可能な磁気分離特性、光反応条件に好都合な分散性の高さ、非特異的吸着の少なさ等の理由により、多摩川精機社製のFGビーズを固相担体として選択した。また、初年度からの検討結果より、Ru / dcbpy触媒とリガンドを同時にビーズに担持することによって非特異的吸着性を抑え、リガンド結合タンパク質を選択的にビーズに結合・精製・ラベル化できることを見出した。炭酸脱水酵素を基質タンパク質として精製・ラベル化したところ、酵素活性を保持したまま、ラベル化できる条件を見出すに至った。また、葉酸代謝拮抗薬メトトレキサートの細胞内在性標的タンパク質解析をモデルにアフィニティービーズ上でのタンパク質ラベル化を行ったところ、ジヒドロ葉酸還元酵素を精製・ラベル化することにも成功した。ビオチンでのラベル化に続く、ストレプトアビジン-HRPでの検出により、従来法の銀染色よりも高感度に標的タンパク質を検出できることが分かった。さらに、ラベル化剤の最適化にも取り組み、Ru光触媒担持ビーズの表面でより選択的に機能するラベル化剤を見出すに至った。昨年度、当初想定していたRu錯体ではタンパク質混在系での非特異的吸着を増加させてしまうという問題点についてはRu錯体構造を変換することで解決でき、望みのタンパク質ラベル化触媒能を有していることを明らかにしている。抗体の部位特異的修飾に向けたモデル実験と研究概念の立証について、おおむね計画通りに進行しており、期待通りのタンパク質ラベル化の有用性を示せたと考えている。当初は平成28年度より、抗体の部位特異的修飾に向けた抗体の特定の部位に結合するリガンドの合成を計画していたが、着手できていない。しかし、以下のような知見は当初想定したよりもハードルの高いものであったが、課題を達成できている。

1.アフィニティー精製・ラベル化後にもタンパク質の活性化保持されていること2.部位特的修飾に繋がるビーズの表面で選択的に機能するラベル化剤の創出特に、2.項目においては“タンパク質部位特異的修飾"という観点では今後重要な基盤技術になると考えられる。よって、全体計画はおおむね計画通りに進行していると判断した。我々が独自に開発したRu光触媒を用いたタンパク質修飾技術は触媒の周辺数nmという限定された空間で選択的に反応が進行する。Ru光触媒と抗体と結合するリガンド分子をアフィニティービーズ固相担体の表面に担持させた。このビーズ表面では抗体とRu光触媒が近接するため、抗体を修飾することが可能である。さらに、リガンド分子に抗体の部位特異的に結合するものを選定すれば、「触媒が担持されたビーズ表面から数nmの範囲で起きる反応」という特性を活かし、抗体(大きさ約10 nm)の部位特異的修飾が可能であると考えた。初年度の検討の結果、これまで用いてきたRu(bpy)3錯体を用いると、ビーズへのタンパク質の非特異的吸着が顕著に増大してしまうという問題があったが、光触媒構造をRu / dcbpy錯体に変更することで、この問題を改善し、モデル基質を使ったタンパク質混在系でのリガンド結合タンパク質の選択的修飾に成功した。さらに、修飾剤構造を検討することで、触媒の近接空間で選択的かつ効率的な修飾が可能であった。これにより、従来用いていた修飾剤よりも効率と標的選択性を改善することにも成功した。リガンド分子に抗体の特定の部位に結合する分子を用いて、抗体を修飾したところ、抗体の部位選択的な機能性修飾が示唆され、上記の研究概念を立証することに成功した。また、アフィニティービーズを用いた本技術は、これまで私たちが用いてきたリガンド連結型の光触媒よりも、効率的かつ標的選択的にリガンド結合タンパク質を化学修飾することが可能であり、修飾されたタンパク質の高感度検出が可能であった。これを応用し、従来のアフィニティークロマトグラフィーでは精製が困難な低親和性のタンパク質や発現量の少ないタンパク質を検出・同定する手法を開発することにも成功した。Ru / dcbpy錯体と標的タンパク質に対するリガンド分子の2種類の低分子構造をビーズに担持させることで、タンパク質の非特異的吸着を抑制しつつ、リガンド結合タンパク質を精製すると同時に、共有結合形成による化学修飾を達成した。また、1タンパク質混在系からリガンド結合タンパク質を高感度に検出する技術、2従来のアフィニティークロマトグラフィー法では解析が困難な低親和性のリガンド結合タンパク質を解析する手法、3抗体を精製して機能化する手法を見出した。上記の様に、現在までにタンパク質ラベル化機能を持つアフィニティービーズの固相表面構造に関する知見を得ている。現在は研究概念実証のため、既存のアフィニティーリガンドを用いた実験を行っているが、今後は、本固相担体を用いた応用展開に着手する。具体的には、従来のアフィニティークロマトグラフィー技術では解析が困難であった、低発現量のタンパク質解析、結合力が弱い/結合解離が速い標的の解析に応用する。
曲面π共役上に高度に非局在化したスピンを有する開設分子の合成

C_<60>等の曲面π共役系化合物の存在とその物性がクローズアップされている。これらの性質を分子レベルで理解し発展させるためには、曲面π共役電子系における曲面芳香族性やConcave-ConvexおよびConvex-Convex相互作用等の分子間相互作用の解明が重要である。我々は、曲面π共役上に非局在化した電子スピンを有する空気中でも安定な開殻有機分子を設計・合成し、溶液状態および固体状態における性質を詳細に調査する手法を発案した。これまでに曲面π共役系閉殻有機分子であるコラヌレンに着目し、6-オキソフェルダジルラジカルやイミノニトロキシドをコラヌレンに結合させた開殻有機分子を設計・合成・単離し、曲面π共役上にスピンが非局在化した安定な開殻有機分子の研究の端緒を開いた。本年度は、フェノキシルラジカル部位をコラヌレンに結合させた開殻有機分子を設計・合成・単離した。電子スピン密度分布のトポロジー的対称性からフェノキシルラジカル結合体では、それまでの分子システムに比べてより多くの電子スピンが曲面π共役系上に非局在化していることが判明した。また、曲面π共役型の中性ラジカルとしては初めての単結晶X線構造解析に成功し、磁気測定を行うことで、分子間の磁気的な相互作用について明らかにした。さらに我々は、フェノキシルラジカル部位を二つコラヌレンに結合させた中性ジラジカルの合成と単離に成功した。そして、分子内のスピン間相互作用や電子スピン密度分布、および単結晶X線構造解析による結晶構造の解明にも成功した。このような成果は、今後の分子設計および当初の研究目標の遂行に大いに貢献した。これらの性質を分子レベルで理解し発展させるためには、曲面π共役電子系における球状芳香族性や、Concave-ConvexおよびConvex-Convex相互作用等の解明が重要である。我々は、曲面π共役上に非局在化した電子スピンを有する閉殻有機分子を設計・合成し、溶液状態および固体状態における性質を詳細に調査する手法を最近発案した。これまでに曲面π共役系閉殻有機分子であるコラヌレンに着目し、6-オキソフェルダジルラジカル骨格をコラヌレンに結合させた開殻有機分子を設計・合成・単離し、曲面π共役上にスピンが非局在化した安定な開殻有機分子の研究の端緒を開いた。また、イミノニトロキシドやフェノキシルラジカル骨格を結合させたコラヌレン誘導体を設計し、その合成にも成功した。そして、各種ESR測定やUV-visスペクトル等の測定や量子化学計算からの考察を行い、電子スピン構造について検討した。その結果、いずれもコラヌレン部位上への電子スピンの大きな非局在化を明らかにした。特に、フェノキシル置換体は、スピン非局在化の度合が大きいことがわかった。これらの実験結果から、ラジカル置換基上のコラヌレンとの結合位置でのスピン密度の正負が、コラヌレン部位上への電子スピンの非局在化に重要であることを実験的に明らかにした。またコラヌレン骨格の非交互π共役電子系に起因した特異な電子スピンの非局在化様式も明らかにすることができた。このような成果は、今後の分子設計および研究の進展において大いに有益な知見である。
二十一世紀の漢文教育テキスト作成〜長崎から世界へ

儒教偏重を脱却する新しい漢文教科書を作るため,多数の資料を蒐集した。広く世界の常識的事物を平易に叙述した漢文を教材として採用した。特に長崎は日本・アジア・西洋の交点として重要な場所であり,長崎関聯漢文には異文化接触的題材が多いので利用した。これらに注解を加えて今年度出版助成を申請する準備を整えた。以下の例のような漢文を蒐集し、協議を重ね、教材となるものを精選採録する作業を開始した。【西洋哲学】丁?良「西学考略」(西洋の大学制度と諸科の学術の概略)。顧鳴鳳「泰西人物志」(カント・ニュートン・ダーウィン等の伝)。「中西聞見録」(アリストテレス伝)。【西洋文学】奚若訳「天方夜譚」、商務印書館「希獵神話」。【西洋史】重野安繹「「万国史綱目」(アレキサンダー東征、フランス革命等)。岡本監輔「万国史記」。鄒?「泰西各国新政考」(アテネとスパルタの争い・天王星発見)。岡午仞「米利堅志」(民主建国を讃える序文)。上海広学会「万国通史」(オリンピック等)。徐景羅「俄史輯譯」(ピョートル大帝が造船を学んだ遺事)【東アジア史】ベトナム・「大越史記全書」(蒙古襲來の時事)。新井白石「南島志」・蔡温「中山世譜」(源為朝の琉球漂流譚)。川口長孺「台湾鄭氏紀事」「台湾割據志」。黄宗義「賜姓始末」(鄭成功と母佃川氏の事)。大橋訥菴「元寇紀略」「坤?万国全図」(日本・大明国・朝鮮の条)【経済学】「富国真理」(社会主義思想の紹介)。西周「利学」。【長崎関連】足立敬亭「燈雨篇」、西道仙「シーボルト傳」「からすみ賛」。黄宗義「日本乞師記」。汪鵬「袖海編」(踏み絵)。王韜「扶桑游記」等(長崎を経て東上)。渡辺庫輔「投化唐人墓碑録」(長崎通事から出た明治の外務官僚の伝)。「朱舜水集」(朱舜水が長崎で安東省庵に助けられた物語)。安東省庵「頴川入徳碑銘」(住宅唐人の伝記)、盧千里「長崎先民伝」、大槻磐溪「西遊紀程・瓊浦筆語」。黄遵憲「日本雑事詩」(長崎の条)「『日本国志』(学術志)。【その他】呉汝編「東遊叢録」(井上哲次郎筆談)、李卓吾「答女人学道為見短書」(女性の能力を正当に評価したもの)。西村茂樹「言海序」、中村正直「西国立志伝序」高校の漢文教育活性化のための教材集作成という本研究目的に沿って、昨年度に継続して平易で尚且つ東アジア文明に関わる漢文を蒐集した。そして教科書掲載傾向の分析を加えて、中間報告を九州中国学会で行った。そこで出された意見(長崎の「地域」を軸にして焦点を絞る。高校生の実力を考慮して難解さを払拭することなど。)を参考にして更に資料の蒐集を行った。例えば西道仙の「シーボルト伝」、黄宗義の「日本乞師記」(長崎求援始末)、汪鵬の「袖海編」(踏み絵)、王韜「扶桑游記」(長崎の世相)、渡辺庫輔「投化唐人墓碑録」(長崎通事から出た明治の外務官僚の伝)、盧千里の「長崎先民伝」、大槻磐溪「西遊紀程・瓊浦筆語」等に加え、長崎の儒者楠本碩水の「碩水先生日記」、明治の長崎の漢文学の状況を示す足立清三の自伝の「燈雨篇」、キリスト教の受容形態を示す「活水起源」、明治期に多方面で活躍した長崎の漢学者西道仙の「嘉良壽美記」、長崎大学医学部の前身を記した王景禧の「日游筆記」、長崎の世相を記した定樸の「東遊日記」、長崎で英語を学んだ井上哲治郎と呉汝綸の筆談「東遊叢録」、琉球の正月風景を記した「中山傳信録」などを加えた。また高校生の関心を考慮して、男女平等を説いた李卓吾の「答以女人学道為見短書」、朱舜水が記した海賊や幽霊の話、中国の羽衣伝説の「捜神記」、七夕説話の「天中記」、江戸時代の唐通事の小笠原島発見の史実「長崎先民伝」などを追加した。以上の資料について、選択範囲の難易度、注釈の程度、訓読、現代語訳の必要度など、高校教員の意見・評価を参考にし、実際の教育の現場で使用できるように内容を削除補正し、刊行を目指して底本の作成作業に着手した。
高齢者の注視範囲を考慮した快適な歩行環境整備に関する研究

本研究は高齢化社会に対応した快適な交通環境を整備するために,(1)高齢者の歩行環境における問題点の抽出、(2)高齢者の注視点の特徴の抽出の2つの分析から構成されている。(1)について、従来高齢者という1つの分類で評価されていた歩行環境について、年齢や障害の種類、自動車の有無など、モビリティの違いによってどの様な問題点や評価が異なるのかについて分析を行った。とくに高齢者の身体的特徴として、明確な障害があるわけではないが、長距離の歩行や段差の昇降ができないといったさまざまな交通困難がモビリティに大きく影響している。そこで、夏期ならびに冬期における交通困難着目した歩行環境の問題点の抽出を行った。その結果、困難グループと非困難グループでは、交通環境に対する評価が異なり、困難グループで顕著となった問題点は、夏期では横断施設の少なさ、ベンチなどの休憩施設の少なさであり、また冬期では、歩道の凍結、歩道橋や横断歩道の凍結、横断歩道で時間内に渡りきれないなど、安全管理施設に関して他の高齢者と異なった問題があることが明かとなった。また、車いす混入時の車いすと利用者と歩行者の挙動について分析した。次いで車いす利用者の負担感を把握するため、その注視特性について分析を行い、両者が安全で快適に利用できる環境について考察を行った。車いすと歩行者の混合交通における歩行挙動分析においては、車いすや歩行者のコンフリクトについて、車いす2台の状況までを考慮して、速度低下や追従、減速の状況を明らかにした。(2)の注視点調査では、車いす利用者の注視点分析から、車いすは狭幅員で通行量が多くなると左右を見る余裕がないこと、危険対象を注視する割合が高くなること、目のと動きも速くなることなど、車いすにとっては負担が大きいことが分かった。注視する割合の高い放置自転車は、歩道の幅員を狭めている原因ともなっており、注視特性の観点から問題点を指摘した。今後、自転車通行帯を設けるなど車いす利用者が安心して歩道を利用できるような配慮が望まれることを指摘した。本研究は高齢化社会に対応した快適な交通環境を整備するために、(1)高齢者の走行環境における問題点の抽出、(2)高齢者の注視点の特徴の抽出の2つの分析から構成されている。平成4年度は(1)について、従来高齢者という1つの分類で評価されていた走行環境について、年齢や障害の種類、自動車の有無など、モビリティの違いによってどの様な問題点や評価が異なるのかについて分析を行った。とくに高齢者の身体的特徴として、明確な障害があるわけではないが、長距離の走行や段差の昇降ができないといったさまざまな交通困難がモデリティに大きく影響している。そこで、夏期ならびに冬期における交通困難着目した走行環境の問題点の抽出を行った。その結果、困難グループと非困難グループでは、交通環境に対する評価が異なり、困難グループで顕著となった問題点は、夏期では横断施設の少なさ、ベンチなどの休憩施設の少なさであり、また冬期では、歩道の凍結、歩道橋や横断歩道の凍結、横断歩道で時間内に渡りきれないなど、安全管理施設に関して他の高齢者と異なった問題があることが明らとなった。この結果をふまえて(2)の注視点調査では、歩行環境の評価のために交通困難の有無別に注視点調査を行い分析を行っている。来年度は車いす利用者など注視点の特徴についても分析する予定である。なおこれとは別に、運転者からみた走行者の見え方についても分析を行った。