hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
サケの母川水ニオイに対する嗅覚記憶脳内分子に関する研究

サケの生まれた川(母川)のニオイに対する嗅覚記憶脳内分子に関する研究を行い、シロザケ稚魚がふ化場から川に放流されると脳ー下垂体ー甲状腺(BPT)ホルモンが活性化し、その後にNMDA受容体必須サブユニットNR1遺伝子発現量が増加すること、およびシロザケ親魚がベーリング海からふ化場までの母川回帰する時は、脳ー下垂体ー生殖腺(BPG)ホルモンが活性化し、NR1遺伝子発現量も遡河回遊に伴い増加することを明らかにした。サケの母川記銘・回帰は、BPT・BPGホルモンにより制御され、母川水ニオイの記憶・想起脳内分子としてNR1を分子指標として用い得ることを明らかにした。我国の重要な水産資源であるサケは、稚魚期に記銘された母川水のニオイを頼りに親魚が繁殖のため母川回帰する。サケの母川水ニオイに対する嗅覚記憶機構を解明するために、嗅覚記憶に関連する脳内分子について次の5点に着目して研究を行い、平成23年度の実験により下記のような成果を得た。1)サケ脳のNMDA受容体遺伝子の解析:ヒメマスのNMDA受容体遺伝子サブユニットGluN1とGluN2(A,B,C,D)の塩基配列を解析し、GluN1は2400bp、GluN2(A,B,C,D)は各1500bpの解読を行い、in situハイブリダイゼーション法により発現部位の観察、およびリアルタイムPCR法により発現量を解析する準備を進めている。2)サケ稚魚の母川記銘時のTRHとNMDAの役割:シロザケのTRHおよびTRHレセプター(TRHR)遺伝子の発現量を測定する実験系を立ち上げている。3)サケ親魚の母川想起時のGnRHとNMDAの役割:ヒメマス親魚の脳各部におけるsGnRHとcGnRH-IIホルモン量の変動を時間分解蛍光測定法でマルチラベルプレートリーダー【平成23年度購入備品】により測定し、sGnRHとcGnRH-IIホルモン量が脳各部位において性成熟期に増加することを解析した。また、MNDA添加によりsGnRHの分泌量が増加することを解析した。サクラマスのsGnRHとcGnRH-II遺伝子情報に基づき、ヒメマスのsGnRHとcGnRH-II遺伝子の解析準備を進めている。4)NMDA受容体阻害剤がサケの嗅覚記憶に及ぼす影響:ヒメマス1歳魚を用いてNMDA受容体の競合阻害剤のD-AP5と開口チャネル阻害剤のMK-801投与実験による人工記銘実験の予備実験を行っている。5)他河川迷入サケの嗅覚記憶の解析:耳石温度標識された千歳川水系のシロザケを用いて、豊平川および漁川への迷入率を解析する準備を進めている。サケは、稚魚が生まれた川(母川)のニオイを降河時に記憶(記銘)し、親魚がそのニオイを遡河時に想起して母川回帰する。サケの母川水ニオイに対する嗅覚記憶機構を解明するため、嗅覚記憶に関連する脳内分子を解析する研究を行い、下記のような成果を得た。1サケ脳のNMDA受容体遺伝子の発現量と発現部位解析:シロザケのNMDA受容体遺伝子必須サブユニットNR1の発現量をリアルタイムPCR法、発現部位をin situハイブリダイゼーション法により解析した。シロザケ稚魚の降河回遊に伴い、NR1の発現量はふ化場から放流された後に増加し始め、河口付近で最大となった。発現部位は、嗅球からの嗅覚情報が投射される終脳の腹側部においてふ化場から放流された後にNR1発現神経細胞が増加した。2稚魚の母川記銘時のTRHとNMDAの役割:上記の降河回遊に伴い、TRHa・b遺伝子の発現量はふ化場から放流された直後に急上昇し、TRHa・bの活性化がNR1に作用している可能性が示唆された。平成26年度は、TRH・T4を投与してNR1遺伝子がどのように変化するかを解析する。3親魚の母川遡上時のGnRHとNMDAの役割:ベーリング海から母川に回帰するシロザケ親魚のNR1遺伝子発現量は、遡河回遊に伴い上昇した。平成26年度は、sGnRH遺伝子がどのように変化するかを解析する。4NMDA受容体阻害剤が嗅覚記憶に及ぼす影響:NMDA開口チャネル阻害剤MK-801の投与によりサクラマス・ベニザケスモルトのNR1遺伝子の発現量および嗅覚応答がどのように変化するかを実験する予定である。5他河川に迷入するサケの嗅覚記憶:千歳川に回帰するシロザケ親魚を用いて、Pitタグシステムを導入したY字水路において、千歳川・石狩川・豊平川の河川水の選択行動を解析しており、耳石温度標識された千歳川起源のシロザケの迷入率を解析する予定である。サケの母川水ニオイに対する嗅覚記憶機構を解明するために、嗅覚記憶に関連する脳内分子について次の5点に着目して研究を行い、平成24年度の実験により下記のような成果を得た。1サケ脳のNMDA受容体遺伝子の解析:シロザケのNMDA受容体遺伝子サブユニットNR1のプライマーを用いて、リアルタイムPCR法により発現量を解析したところ、降河回遊時ではふ化場からの放流直後に、河回遊時では前産卵場から産卵場にかけ発現量が増加した。

2サケ稚魚の母川記銘時のTRHとNMDAの役割:ヒメマスのTRHaとTRHb遺伝子のプライマーを用いて、リアルタイムPCR法により発現量を解析したところ、TRHaとTRHbが銀化に伴い異なる変動を示した。3サケ親魚の母川想起時のGnRHとNMDAの役割:成熟ヒメマス親魚の脳培養を行い、sGnRHとcGnRH-IIホルモン量の変動を時間分解蛍光測定法により測定し、NMDA添加により両ホルモン量の放出量が脳各部位において増加し、NMDA開口チャネル阻害剤MK-801添加により両ホルモン量の放出量が脳各部位において減少する場合が多かった。4NMDA受容体阻害剤がサケの嗅覚記憶に及ぼす影響:ヒメマス1歳魚を用いてNMDA受容体の競合阻害剤のD-AP5と開口チャネル阻害剤のMK-801投与実験を行い、平成25年度以降に解析する予定である。5他河川迷入サケの嗅覚記憶の解析:耳石温度標識された千歳川水系のシロザケが、豊平川に241個体迷入していることが観察され、今後Y字水路における選択行動実験を計画している。我国の重要な水産資源であるサケは、稚魚が生まれた川(母川)のニオイを降河時に記銘し、親魚がそのニオイを遡河時に想起して母川回帰する。サケの母川水ニオイに対する嗅覚記憶機構を解明するため、嗅覚記憶に関連する脳内分子を解析する研究を行い、平成26年度は下記のような成果を得た。1.稚魚の母川記銘時のTRHとNMDAの役割:シロザケ稚魚の降河回遊に伴い、TRHa・b遺伝子発現量は千歳ふ化場から放流された直後に上昇し、その後にNMDA受容体必須サブユニットNR1遺伝子が増加することが確認された。TRHおよびT4を腹腔内注射により投与したところ、注射によるストレスの影響により投与群と対照群に有意差は認められなかった。平成27年度は、餌にT4を混ぜてシロザケ稚魚に給餌投与し、電気生理学的に嗅覚応答(EOG)を測定し、NR1遺伝子発現量の変化を観察する。2.親魚の母川遡上時のGnRHとNMDAの役割:ベーリング海から千歳川に回帰するシロザケ親魚のsGnRH-I・II遺伝子発現量は、母川回帰に伴い脳部位ごとに発現量のピークが異なるが増加する傾向がみられ、また雄のみでベーリング海で高い発現量を示す雌雄差も認められた。石狩湾に回帰した海水中のシロザケ親魚のGnRHアナログ(GnRHa)を投与しEOGを測定すると、GnRHa投与群の千歳川河川水に対するEOGが有意に増加し、GnRHにより母川水に対する感受性が増加することが明らかになった。GnRHa投与による脳各部位のNR1遺伝子発現量は、嗅球において増加傾向が認められたが有意差は検出されなかった。3.Pitタグシステムを導入したY字水路の河川水選択行動:Pitタグシステムを導入したY字水路において、千歳川に回帰するシロザケ親魚の千歳川と豊平川のアミノ酸組成に基づき作成した人工河川水の選択行動を解析したところ、人工千歳川河川水への滞在時間が有意に長いことが分かった。我国の重要な水産資源であるサケ(シロザケ)は、稚魚が生まれた川(母川)のニオイを降河時に記銘し、親魚がそのニオイを遡河時に想起して母川回帰する。サケの母川水ニオイに対する嗅覚記憶機構を解明するため、嗅覚記憶に関連する脳内分子を解析する研究を行い、平成27年度は下記のような成果を得た。1.稚魚の母川記銘時の甲状腺ホルモン(T4)とNMDA受容体必須サブユニットNR1の関係:T4を餌に混ぜてシロザケ稚魚に給餌投与すると、NR1遺伝子発現量が投与後4日目に対照群に対して有意に増加した。しかし、1週間2週間後では対照群と有意差はなく、母川記銘は1週間以内に行われることが明らかになった。
腫瘍吸収性ペプチドとナノテクノロジーを融合した革新的難治性腫瘍標的医療技術の開発

デンドリマーおよびリポソームとのペプチドコンジュゲートは、これらの粒子単独の場合の肝臓への高度集積性は抑制されたが、in vivo動態の計測では完全な肝吸収性の回避には至らず、むしろペプチド単独フォームの方が実効的な標的腫瘍への集積の選択性を保持することが判明した。そこで、がんに卓越した選択的吸収性を発揮できる腫瘍高度選択的集積性ペプチド(腫瘍ホーミングペプチド)のランダムペプチドライブラリーからの分離・開発を実施し、ヒト膵がん、胆管がん(胆道がん)、脳腫瘍(グリオブラストーマ)各々の系統に対応するホーミングペプチドとして獲得した。これらについては国内特許申請を完了した。現行の治療技術でなお回復困難な進行期ヒト難治性悪性腫瘍を対象として、われわれが最近開発した“腫瘍ホーミングペプチド"(特定の腫瘍細胞系に高度の選択的吸収性を示す細胞膜透過型ペプチド)を応用した我が国の次世代制がん医療に貢献する腫瘍標的技術の基盤開発を目指す。腫瘍ホーミングペプチドは能動的・選択的機序で腫瘍への取り込みが起こるため、血管外漏出による受動的拡散が輸送機序であるナノ粒子(デンドリマーなど)と組み合わせることにより、ナノデリバリーの特性をがん細胞・組織への能動的選択的な送達システムに変換した非常に高効率の腫瘍標的技術を構築することを試みる。初年度として、ナノ粒子に搭載する2種のペプチド“腫瘍ホーミングペプチド"と“抗腫瘍機能ペプチド"を選定する段階を実施した。肝がんホーミングペプチド(CPP44: KRPTMRFRYTWNPMK)については蛍光TAMRA修飾位置(N-term, C-term)の検討と担癌モデルマウスへの投与実験を、肺がんホーミングペプチドについては(pE12circ: CLRAKTLRLHVC)の親水性向上を目指した改変型環状ペプチド(pE12circA4E :[FLC]CLREKTLRLHVC[OH]; pE12circA4N :[FLC]CLRNKTLRLHVC[OH])を試作した。また、癌抑制遺伝子機能回復型p14ARFペプチドの配列を短縮、改変し、がん細胞増殖抑制効果の向上とペプチド感受性腫瘍の探索・同定、感受性を規定する細胞内因子の探索を合わせて行った。結果、肝がん標的用ホーミングペプチドはin vivoにおける腫瘍vs背景肝(tumor vs background ratio)吸収比が約25倍と良好であったが、ペプチドの体内での急速な変性崩壊と骨格筋、血漿中への流出が全身スキャンを目的とした場合の克服課題であることが判明した。現行の治療技術でなお回復困難な進行期ヒト難治性悪性腫瘍を対象として、われわれが最近開発した“腫瘍ホーミングペプチド"(特定の腫瘍細胞系に高度の選択的吸収性を示す細胞膜透過型ペプチド)を応用した我が国の次世代制がん医療に貢献する腫瘍標的技術の基盤開発を実施継続している。当初腫瘍ホーミングペプチドがアクティブターゲティング機序で腫瘍への取り込まれるためこれをコンジュゲートし受動的拡散が輸送機序であるナノ粒子の特性をがん細胞・組織への能動的選択的な送達システムに変換した高効率腫瘍標的技術の構築を狙ったが、初年度の研究結果からデンドリマーおよびリポソーム・ペプチド複合体は一部肝に集積することが判明し、必ずしもナノ粒子との複合体が腫瘍標的の効率化に直結しないことが考えられた。この結果から複合体の生体実効的なデザイン化については今後詳細な検討を有する。従って、本年度は本研究の根幹的目的である高性能低侵襲性制がん技術のペプチドによる確立のために、腫瘍ホーミングペプチドの性能を革新的に向上する新たなランダムペプチドライブラリーの作成技術およびそれをソースとした新規腫瘍標的ペプチド分離技術を開発した。また、性能向上を企図した癌抑制遺伝子機能回復型p14ARFペプチドの改良デザイン化(ペプチド配列の27アミノ酸から12アミノ酸配列へのコア機能を維持した短縮とがん細胞内導入後のペプチド機能増強システムの構築)に成功し、in vivo膵がん移植モデルマウスにおけるがん細胞増殖抑制効果とペプチド感受性腫瘍の探索・同定、感受性を規定する細胞内因子の探索に関する成果を得た。現行の治療技術でなお回復困難な進行期ヒト難治性悪性腫瘍を対象として、われわれが最近開発した“腫瘍ホーミングペプチド"(特定の腫瘍細胞系に高度の選択的吸収性を示す細胞膜透過型ペプチド)分離技術を応用し、我が国の次世代制がん医療に貢献する腫瘍標的技術の基盤開発を目指した。腫瘍ホーミングペプチドは能動的・選択的機序で腫瘍への取り込みが起こるため、血管外漏出による受動的拡散が輸送機序であるナノ粒子(デンドリマーなど)と組み合わせることにより、ペプチドの多価化による吸収効率の増強と、薬剤封入機能を有するナノ粒子のデリバリーの特性をがん細胞・組織への能動的選択的な送達システムに変換した、2重の意義を持つ分子輸送体の創成を企図した研究を実施した。さらに、抗腫瘍効果を発揮するペプチド型の抗腫瘍剤の開発も、キャリアへの応用分子として計画した。結果として、デンドリマー・ホーミングペプチドコンジュゲートは、ペプチドの結合部位と数の精密設計(結合ペプチド間距離と数の制御)が現行技術では困難な点がネックとなり、ホーミングペプチド本来の性能を超えることはできず、むしろペプチド単体のほうが優秀な標的組織選択性と吸収性を示すことが判明した。そこで、改良ペプチド分離技術を確立し、これを応用して研究開始時に保有していたホーミングペプチドの性能を凌駕する膵がん、グリオーマ、肝がん各難治性悪性腫瘍に卓越した選択的吸収能を発揮する特異ペプチド群の獲得に成功した。

一方、抗がん機能性ペプチドの開発としては、癌抑制遺伝子機能回復型p14ARFペプチドの最適デザイン化(最少コア配列の同定)とin vitro, in vivoでの基礎的な抗腫瘍効果を検証できた。今後、本研究で獲得したこれら各ペプチドの実効的応用に関する技術研究に本格的に移行する予定である。デンドリマーおよびリポソームとのペプチドコンジュゲートは、これらの粒子単独の場合の肝臓への高度集積性は抑制されたが、in vivo動態の計測では完全な肝吸収性の回避には至らず、むしろペプチド単独フォームの方が実効的な標的腫瘍への集積の選択性を保持することが判明した。そこで、がんに卓越した選択的吸収性を発揮できる腫瘍高度選択的集積性ペプチド(腫瘍ホーミングペプチド)のランダムペプチドライブラリーからの分離・開発を実施し、ヒト膵がん、胆管がん(胆道がん)、脳腫瘍(グリオブラストーマ)各々の系統に対応するホーミングペプチドとして獲得した。これらについては国内特許申請を完了した。腫瘍ホーミングペプチドとナノ粒子との複合体形成には利点と欠点があることが判明したが、生体適用の実現性を考慮し、昨年度に立てた「今後の推進方策」である新たな高性能配列ペプチドの開発を現計画と並行して実施するとした課題については基盤を確立できた。(現在、肺がん、肝がん、膵がん、グリオーマについて候補ペプチドを獲得)また、がん増殖抑制機能を発揮するペプチド配列については、プロトタイプに比較し一層の性能向上を発揮する癌抑制遺伝子機能回復型p14ARFペプチドの新デザインの確立とin vivo study、さらにがん細胞内での作用の向上を誘導する新たな方策を獲得できた。27年度が最終年度であるため、記入しない。腫瘍病理学腫瘍ホーミングペプチドの性能を革新的に向上する新たなランダムペプチドライブラリーの作成技術およびそれをソースとした新規腫瘍標的ペプチド分離技術を開発し、現在具体的に、肺がん、肝がん、膵がん、グリオーマについて新規高性能候補ペプチドを獲得しているため、今後はこれら候補ペプチドのin vitro, in vivoにおける腫瘍特異的な抗腫瘍効果やイメージング性能について詳細な解析による最高性能型ペプチドの絞り込みとスペックの検討を行う。肝がん吸収性ペプチドについてはN末端蛍光標識型CPP44: KRPTMRFRYTWNPMKを第一候補配列とするが、より分解耐性と肝吸収性を抑えたスペックの開発、または新たな高性能配列ペプチドの開発を企図する。肺がん(腺癌)吸収ペプチドは疎水性を配列置換体の開発により改善したので、in vivo studyによる詳細な解析に進む。がん細胞増殖抑制機能を発揮するp14ARFペプチドはより配列の短く効果的なペプチドデザインの開発に成功した。以上より、改題点の発見と進捗を合わせて上記評価とした。肝がん吸収性ペプチドについてランダムペプチドライブラリーを利用した新たな高性能配列ペプチドの開発を現計画と並行して実施する。肺腺がん吸収性ペプチドも同様に進めてみる。がん増殖抑制機能を発揮するペプチド
空間設計の創造性を目指したデザイン手法の準実験的研究

本研究では、設計者自身が空間を見る目・「視点」と空間にイメージする行動・「仮想行動」に、個人の設計方法を区別しその偏りを明らかにする鍵が潜んでいると考えている。この「視点」・「仮想行動」を用いた教育手法を試行し、設計プロセスの分析・評価を行い、創造的な空間設計のための新しい教育方法の開発を行った。平成11・12年度に設計教育unitの試行とデータの収集を行い、平成13年度にはその解析を行った。その結果、以下のことを明らかにした。1.結果の良いグループに属する学生(上位グループ)は、知覚できる空間の領域(知覚領域)がスケッチしている範囲を超えている。設計結果の良くないグループに属する学生(下位グループ)は、スケッチ内に知覚領域が限定されており、大きく異なっている。2.設計教育unitを提示することで、上位グループは、さらに知覚する空間の数を増やし、空間を周囲に広げ、イメージする複数の空間の中を自由に動くことができるようになっていった。これに対して、下位グループは、特筆すべき効果が見られず、設計教育unitの影響を生かすことができないように思われた。3.設計のコンセプトや期間となる空間イメージが出来上がるのは、一つの空間内に滞在したり空間を「思う」ような静的な「場面」がイメージされる時が多い。複数の空間内を移動するような行為は、設計のコンセプト生成よりも、設計コンセプトの生成後に確認をするような時に、現れることが明らかになった。4.CADは、操作する空間の数と種類を増やす効果を持っており、特に、「思う」という「仮想行動」がスケッチに比べて多くなり、CADの中では、模擬的な体験がしやすくなることがわかった。5.「空間をつなぐ」という「仮想行動」は、上位グループの方が下位グループよりも出現頻度が高い。これは、設計コンセプト生成後の、空間創造にかかわる操作を充実させるのに重要な役割を果たしていると考えられる。本研究で試行した設計教育unitは、設計プロセスの各段階でその操作に応じて内容を構成していくと、より効果的であることが分析より明らかになった。空間の設計では、設計者自身が空間を見る目・「視点」と空間に想定するヒトの行動・「仮想行動」を設定していると考えることができ、この「視点」・「仮想行動」のあり方や見る対象に、個々の設計方法を区別し、その偏りを明らかにする鍵が潜んでいる。本研究は、この「視点」・「仮想行動」を用いた教育手法を試行・分析して、創造的空間設計のための独創的教育方法の開発を目指すものである。今年度は、エスキースの記録を行うためにコンピュータCADを活用して、設計課題の試行・記録実験を行った。設計課題の試行・記録実験は、建築学科学生5人・社会人3人を調査対象として、一日の短期設計課題にを科して、設計の区切れ目(20分1時間)毎にその設計内容(CAADによる図形データ収集)とプロトコルデータを記録するという方法が用いられた。収集されたデータに対して、教育unit試行前後に創られる空間イメージの変化と「視点」・「仮想行動」の操作との関連に注目して、分析が進められている。現在進められている分析から以下の特徴が捉えられている。1)CAADによる設計では、予想していなかった空間「視点」の発見があり、その「視点」が新しい空間生成の種となっている。2)鳥瞰的な空間視点は、比較的操作しやすく、多く出現する傾向を持っている。空間内部に入り込んで空間認識するような「視点」の生成頻度が低い。

3)CAADへの習熟の差とCAADソフトの操作方法の差とによって、空間を認知する構造が変化し、個人差も生まれてくる。空間の設計では、設計者自身が空間を見る目・「視点」と空間に想定する人の行動・「仮想行動」を設定していると考えることができ、この「「視点」・「仮想行動」のあり方や見る対象に、個々の設計方法を区別し、その偏りを明らかにする鍵が潜んでいる。本研究は、この「視点」・「仮想行動」を用いた教育手法を試行・分析して、創造的空間設計のための独創的教育手法の開発を目指すものである。今年度は、平成11年度にCAADを用いた教育unitの試行を行った。この試行の前後で、CAADによる図形データと設計内容を示すプロトコルデータ(スケッチ・CAADファイル・インタビューによる設計説明・模型他)を集めた。さらに、アンケート調査を行い、設計の進行状況を把握した。このデータ収集にあたっては、教育unit試行前後に創られる空間イメージの変化と「視点」・「仮想行動」の操作との関連に注目して行った。設計課題の評価に基づいて、調査対象とした8名の学生を、成績の上位グループ・中位グループ・下位グループの3つに分け、評価と設計プロセスとの創刊を捉えた。1)CAADによる設計では、スケッチに比べて空間の疑似体験が充実していた。しかし、スケッチに比べて「のぞく」「垣間見る」といった見方が減少しており、CAADによる空間把握が空間の視点に偏りの大きいことが捉えられた。2)CAADによって、操作する空間の数が多く、そこで想像される行為の種類も増加する傾向を持っていた。特に、空間内での仮想行為は、より現実的な行動をより多く展開していくという傾向を持っていることがわかった。3)設計の後期に視点の操作に関する練習を行った。その結果、CAADに習熟した学生が想像する行為の種類がさらに増えていることが、スケッチとの比較で認められた。本年度は、平成11・12年度に設計教育unitの試行によって集められたデータの解折を行った。特に、設計教育unitの前後につくられる空間イメージを「視点」・「仮想行動」の操作との関連に注目しながら分析している。分析の結果、以下のことが明らかになった。1.設計結果の良いグループに属する学生(上位グループ)は、知覚できる空間の領域(知覚領域)がスケッチしている範囲を超えている。設計結果の良くないグループに属する学生(下位グループ)は、スケッチ内に知覚領域が限定されており、大きく異なっている。2.設計教育unitを提示することで、上位グループは、さらに知覚する空間の数を増やし、空間を周囲に広げ、イメージする複数の空間の中を自由に動くことができるようになっていった。これに対して、下位グループは、特筆すべき効果が見られず、設計教育unitの影響を生かすことができないように思われた。3.設計のコンセプトや期間となる空間イメージが出来上がるのは、一つの空間内に滞在したり、空間を「思う」ような静的な「場面」がイメージされる時が多い。
CAM型光合成の明期におけるミトコンドリア呼吸の関与に関する比較研究

実験I:サクララン(Hoya carnosa)の単離ミトコンドリアにおけるアラメトシン(AlaM)のミトコンドリア内膜透過性とその呼吸特性に及ぼす影響:H. carnosaから単離したミトコンドリアを用いて,AlaM処理によってNAD(P)Hを任意にミトコンドリア・マトリックスへ供給したときのNAD(P)Hの酸化特性を検討した.まず,H.carnosaの単離ミトコンドリアにおいてAlaM処理によって外生NAD(P)Hがミトコンドリア内膜を透過できる系を確立した.AlaM処理によって外生NAD(P)Hは内膜を透過し,内膜マトリックス面に存在する複合体I及びNADH脱水素酵素,更にはNADPH脱水素酵素によって酸化される.これらのNAD(P)H脱水素酵素はミトコンドリア・マトリックスにおけるNAD(P)Hの酸化に重要な役割を果たすが,複合体Iの活性は,他の2種類のNAD(P)H脱水素酵素に比べ明らかに高く,複合体IにおけるNADH酸化はH. carnosaミトコンドリアにおいてはATP生成と強くリンクしていることが明らかになった.結果として,H. carnosaミトコンドリアにおいて,内膜マトリックス面に存在する複合体Iも含めたNAD(P)H脱水素酵素は,内膜外面の細胞質側に存在するNAD(P)H脱水素酵素とともにH. carnosaのCAM型光合成のphase IIIにおけるミトコンドリアにおけるATP生産とその制御に関係することが明らかになった.実験II:3種類のCAM植物(Ananas comosus, Kalanchoe pinnata, Hoya carnosa)から単離したミトコンドリア・タンパクの2次元電気泳動特性に関する研究:3種類のCAM植物の単離ミトコンドリアにおける2次元電気泳動解析を用いたプロテオーム解析系の確立を試みた.開発した手法を用い,A. comosusとK. pinnataから単離ミトコンドリア・タンパクの2次元電気泳動解析を実施し,前者では389個の,後者では415個のタンパク・スポットを確認することができた,それらの単離タンパクからミトコンドリアにおける電子伝達系に係ると予想される42個のタンパク・スポットについてMALDI-TOF MSを用いたタンパクの同定を行った.CAM型光合成はリンゴ酸の脱炭酸酵素の違いによってリンゴ酸酵素(ME)型とホスホエノールピルビン酸キナーゼ(PCK)型の2種類に分類できる.学位論文研究においてHoangらは代表的なPCK型CAMであるパインアップルでは,ミトコンドリアにリンゴ酸・オキザロ酢酸シャトルが機能し,細胞質におけるリンゴ酸のPCKによる脱炭酸を補助するとともに,そのときに使用されるATP生成を通しても関与していることを明らかにしている.このようなパインアップルのPCK型CAMにおけるミトコンドリアの炭酸ガス固定に対する特異的な関与がその他のPCK型CAMでも普遍的に存在することを検討することが本事業の主要な課題である.そのためにPCK型CAMのサクララン(Hoya carnosa)について,ミトコンドリアにおけるリンゴ酸・オキザロ酢酸シャトルの存在を検討した.その結果,サクラランには,リンゴ酸・オキザロ酢酸シャトルではなくリンゴ酸・アスパラギン酸シャトルが機能していることが明らかになった.このことは,サクラランが低酸素処理によってCAM型光合成を特徴付ける昼間のCO2吸収抑制を消失し,活発なCO2吸収を示す結果と併せると,サクラランにおけるミトコンドリアはME型CAMに見られるリンゴ酸の直接的な脱炭酸作用によってCAM型光合成の昼間のリンゴ酸の脱炭酸に関与していることを示し,サクラランのリンゴ酸脱炭酸の形は,PCK型とME型の併用による新たな変異であることを示唆するものである.実験I:サクララン(Hoya carnosa)の単離ミトコンドリアにおけるアラメトシン(AlaM)のミトコンドリア内膜透過性とその呼吸特性に及ぼす影響:H. carnosaから単離したミトコンドリアを用いて,AlaM処理によってNAD(P)Hを任意にミトコンドリア・マトリックスへ供給したときのNAD(P)Hの酸化特性を検討した.まず,H.carnosaの単離ミトコンドリアにおいてAlaM処理によって外生NAD(P)Hがミトコンドリア内膜を透過できる系を確立した.AlaM処理によって外生NAD(P)Hは内膜を透過し,内膜マトリックス面に存在する複合体I及びNADH脱水素酵素,更にはNADPH脱水素酵素によって酸化される.これらのNAD(P)H脱水素酵素はミトコンドリア・マトリックスにおけるNAD(P)Hの酸化に重要な役割を果たすが,複合体Iの活性は,他の2種類のNAD(P)H脱水素酵素に比べ明らかに高く,複合体IにおけるNADH酸化はH. carnosaミトコンドリアにおいてはATP生成と強くリンクしていることが明らかになった.結果として,H. carnosaミトコンドリアにおいて,内膜マトリックス面に存在する複合体Iも含めたNAD(P)H脱水素酵素は,内膜外面の細胞質側に存在するNAD(P)H脱水素酵素とともにH. carnosaのCAM型光合成のphase IIIにおけるミトコンドリアにおけるATP生産とその制御に関係することが明らかになった.

実験II:3種類のCAM植物(Ananas comosus, Kalanchoe pinnata, Hoya carnosa)から単離したミトコンドリア・タンパクの2次元電気泳動特性に関する研究:3種類のCAM植物の単離ミトコンドリアにおける2次元電気泳動解析を用いたプロテオーム解析系の確立を試みた.開発した手法を用い,A. comosusとK. pinnataから単離ミトコンドリア・タンパクの2次元電気泳動解析を実施し,前者では389個の,後者では415個のタンパク・スポットを確認することができた,それらの単離タンパクからミトコンドリアにおける電子伝達系に係ると予想される42個のタンパク・スポットについてMALDI-TOF MSを用いたタンパクの同定を行った.
ATLウイルスの経母乳感染の予防

ATLウイルスの経母乳感染の予防を目的として、長崎県内各地でキャリアー母親の母乳を停止し、子供のキャリアー化の阻止を試みた。1.上五島地区および対馬地区のキャリアーの実体調査を行った。上五島地区は成人の22.1%(631/2862),対馬地区は22.7%(255/2582)のキャリアー率であり予想通り高汚染地区であった。妊婦のキャリアー率は上五島12.1%(42/346),対馬8.4%(96/1140)であり、県本土の4%と比し高率であった。小児のキャリアー率は上五島の06才では1.3%(3/228),対馬の04才では2.9%(2/69)であり、最近出生した児のキャリアー率はかなり低かった。2.キャリアー母親の母乳栄養を停止する試みに同意して、6カ月以上観察を続けている母子は現在までに90組以上である。このうちの子供22人は1才以上に達しており、1才の時点でATLA抗体が陽転した者はいない。一方、キャリアー母親の母乳で育てられた子供の抗体陽性率は23.5%(16/68)であり、現時点では母乳停止によるATLウイルスの感染予防は十分に初期の目的を達していると考えられる。3.キャリアー母親でその母乳中のリンパ球にATLV抗原が証明された例と証明されない例に分けて、それぞれの出生児の感染の有無を追跡調査した。ATLV抗原が証明された母乳で育った子は50%(4/8)がキャリアーとなり、証明されない母乳で育った子は10%(2/20)がキャリアーとなっていた。これよりキャリアーの母親の中に感染させ易いグループの存在が示唆された。
LAr-TPCのシンチレーション光と電荷信号を用いたドリフト電子寿命に関する研究

検出器媒質に液体アルゴンを用いたTPC(LAr-TPC)を、将来のニュートリノ振動観測実験や暗黒物質探索等に用いる事を目的とした、大型LAr-TPCの開発を目指している。本研究では、アルゴンのシンチレーション光を観測する事で、液体アルゴン純度を監視する事を目的としている。50 cmドリフト長の小型LAr-TPCテストベンチを開発し、液体アルゴン純度監視システムを構築し、これを評価する。
嗅球に対する嗅神経細胞のトポグラフィックな軸索投射の分子機構

1)嗅球におけるトポグラフィックな糸球マップの解析:申請者はこれ迄に、染色体上で同一クラスターに属し、且つ、相同性の高い嗅覚受容体遺伝子は、嗅上皮の同じゾーン内で発現し、それら発現細胞は嗅球上で近接した糸球に軸索を投射する傾向にあることを示した(Tsuboi et al., J.Neurosci.19,1999)。この観察は、最近の嗅球のイメージング解析より得られた"特定の官能基を有する匂い分子は、嗅球表面において局所的なドメイン内の糸球を興奮させる"という知見を勘案すると、類似した匂い分子はその官能基を介して、相同性の高い嗅覚受容体群により受容され、嗅球上の特定のドメインに属する糸球を興奮させると考えられる。そこで私共は、マウス嗅覚受容体遺伝子MOR28クラスター(Nagawa et al., Gene 292,2002)を含めた複数のクラスターに関して、受容体遺伝子を発現する嗅細胞の軸索投射先を解析した結果、"同一クラスター上に存在し、相同性の高い嗅覚受容体遺伝子を発現する嗅細胞は、類似した匂い分子を受容し、嗅球においては局所的な糸球ドメインに軸索投射すること"が示唆された。2)嗅上皮で領域特異的に発現する遺伝子の解析:嗅上皮で発現する嗅覚受容体遺伝子は、四つのゾーンの中のいずれか一つに限定して発現しており、嗅上皮におけるゾーンに対応して、嗅細胞の投射先である嗅球にも四つのゾーンの存在が知られている。そこで、嗅細胞の特異的な軸索投射の第一段階であるzone-to-zoneの対応を解明する為、嗅上皮で領域特異的に発現する遺伝子をdifferential display法を用いて探索したところ、これ迄に複数の候補遺伝子が得られたので、それらの機能について解析している。また、このスクリーニングの過程で単離された新規因子stomatin-relatedolfactory proteinは、嗅上皮の嗅細胞でのみ特異的に発現しており、嗅覚シグナル伝達に関与している可能性が示唆されているので(Kobayakawa et al., J.Neurosci.22,2002)、現在ノックアウトマウスを作製しその機能解析を進めている。
脊髄前角ターゲッティングHdADを用いた筋萎縮性側索硬化症の遺伝子治療法の開発

脊髄前角細胞のターゲッティングを目的に検討開始したが、前角細胞の培養は胎生期の脊髄から単離する必要があり収集が難しく技術を獲得するのに時間を要するため、同細胞の培養を検討するのと並行して、既に培養技術を習得している脊髄後根神経節(DRG)ニューロンを用いて標的ペプチドの探索技術の獲得を目指した。1)7桁のランダムなペプチド配列を含むphage displaypeptide libraryを利用して、DRG特異的なペプチド配列の決定を試みた。単離培養したadult C57/BL mouseのDRGニューロンとファージを反応孵置後、回収し、E.coliに感染させ、プラークを形成するファージのDNA sequenceの中から候補ペプチドA, B, Cを得た。しかし、ファージを用いた研究につき文部科学省から平成16年1月29日の告示第7号により、その使用は大臣確認実験の範疇であることの注意が喚起され、新たに第二種使用等拡散防止措置確認申請書およびその他の書類を提出せざるを得なくなり、止むを得ず実験は中断した。2)ファージを使用せずに行う方法の代わりに、DRGニューロンに対して親和性を有するアデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターを用いた検討を行った。マウス神経組織よりPCR法によりクローニングした神経成長因子ならびにエリスロポイエチン遺伝子にCMVプロモータならびにpolyAを接着し、シャトルベクターを作成した。この配列はAAV作成に際し、組み込める適正容量より小さいことから、stufferを作成した。このように、ベクター作成の最終段階にあった時点で、平成18年2月6日付で遺伝子組換え生物等の使用にファージを追加するとの改正を受けて本研究は大臣確認の必要はないとの連絡を文部科学省から受け、ペプチド配列の採取を再開し、ファージを用いたニューロン特異的遺伝子治療ベクターの作成を進めようとした段階で研究期間は終了した。前年度までにファージディスプレイ法を用いて脊髄後根神経節ニューロンに特異的ペプチド配列を3つ同定した。平成16年度に引き続き、脊髄神経節ニューロンを標的とする遺伝子治療ベクターを使用した新たな脊髄側索硬化症に対する遺伝子治療法の開発を行った。1)ニューロン特異なペプチド配列を用いた選択ベクターの作成脊髄ニューロンに特異的に接着できる7個のペプチド配列の採取には、ファージディスプレイ法によるペプチド配列の採取が必要となる。ファージを用いた研究につき文部科学省から平成16年1月29日の告示第7号により、その使用は大臣確認実験の範疇であることの注意が喚起され、新たに第二種使用等拡散防止措置確認申請書およびその他の書類を提出せざるを得なくなり、止むを得ず実験は中断した。その後、平成18年2月6日付で遺伝子組換え生物等の使用にファージを追加するとの改正を受けて本研究は大臣確認の必要はないとの連絡を文部科学省から受け、ペプチド配列の採取を再開した。これを受け、ファージを用いたニューロン特異的遺伝子治療ベクターの作成を進める予定である。2)脊髄後根神経節ニューロンに対する遺伝子治療ベクターの開発一方、ファージを用いた研究が中断している間、ペプチド配列を用いずに行う方法として、脊髄後根神経節ニューロンに対して親和性を有するアデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターを用いた検討を行った。この配列はAAV作成に際し、組み込める適正容量より小さいことから、stufferを作成し、現在ベクター作成の最終段階にある。今後、動物モデルを用いた治療研究に移る予定である。
ペプチドキレ-ト配位子によるMo(VI)錯体のオキソ配位子の活性化

モリブデン酸化酵素の活性部位は(Mo^<VI>O_2)^<2+>や(Mo^<VI>OS)^<2+>を持ち特異的な酸化反応を行っている。この反応性を探るためにペプチドモデル錯体を合成し、Mo=Oの移動反応を指標にして反応性を調べている。平成元年度前半はシステインチオラ-トでキレ-ト配位したモデル錯体、〔Mo^VO(ZーcysーProーLeuーcysーOMe)_2〕^ーを合成し、Mo^<IV>に還元して空気やアミンーNーオキシドとの反応でMo^<VI>を作り、その酸化反応性を調べた。後半は金属タンパク質にinvariantなCys,His残基によるキレ-ト配位したものがあることに着目し、CysーXーYーHis配列を持つペプチドの合成を行った。下の反応式に従って〔Mo^<VI>O_2(ZーcysーXーYーhisーOMe)_2〕(XーY=AlaーPro,ProーVal)を合成した。〔Ma^<VI>O(acac)_2〕+ZーCysーXーYーFlisーOMe→〔Mo^<VI>O_2(ZーcysーXーYーhisーOMe)_2〕+2acacーHこの錯体は黄色粉末として得られ、従来の(S、N)配位子を持つMo^<VI>錯体とスペクトルは酷似しているが、酸化反応性は極めて高いことが判明した。現在、この錯体の溶媒による電気化学的性質の変化などを研究中である。また、Cys残基とHis残基の間のアミノ酸残基数がキレ-ト効果を制御すると考えられるので、ZーCysーXnーHisーOMe(X=Ala,n=0,1,2,3)を同時に合成している。この配位子から下の様な反応式でHg^<II>錯体およびAg^I錯体を合成した。
悪性神経膠腫に対するFas/Apo-1(CD95)標的治療の基礎的研究

Fas/APO-1(CD95)はFas ligand(FasL)やFas抗体でアポトーシスを引き起こすことで知られる細胞膜受容体の一つである。以前、神経膠腫の壊死巣周囲細胞にFasが主に発現し、そのFasがアポトーシスを引き起こし、壊死巣を形成するのではないかと報告した。また、細胞死の経路構成し、抗癌剤やFas抗体、放射線で誘発されるアポトーシスにおいて誘導されるカスパーゼファミリーであるICE{interleukin-1β-converting enzyme(ICE)}やICH-1(ICE/CED-3 homologue-1)、CPP32は本研究においては極めて重要な因子である。本研究においては、神経膠腫13例に対してFasL、ICE、ICH-1およびCPP32の発現をRT-PCR、Western blot法、さらに免疫組織化学的手法を用いて、それらのmRNAと蛋白を観察した。RT-PCR法では神経膠腫全例にFasL、ICH-1、CPP32の発現がみられた。免疫染色ではFasLは神経膠芽腫全例の腫瘍細胞膜に過剰発現がみられた。このことは、もし神経膠腫がFasを発現すれば、アポトーシスが誘導できることを示唆する。ICE、ICH-1、およびCPP32の蛋白レベルの過剰発現は、神経膠腫の悪性化と共に認められた。さらに、ICH-1とCPP32の神経膠芽腫における過剰発現は、神経膠芽腫の病理学的特徴である壊死巣の形成に深く関与し、重要な機能を担うことが示唆された。悪性神経膠腫の15例に対して、壊死巣とFas,Fas-L,ICE,ICH1,CPP32の発現をmRNAおよび蛋白レベルで観察した。RT-PCRではfas,およびICEがコントロール脳とlow grade astrocytomaには発現が見られなかったが、悪性神経膠腫では全例に発現がみられた。fas-L,ICH1,CPP32はコントロールを含めたすべての症例に発現がみられた。神経膠芽腫にみられる壊死巣との関係は、免疫組織化学的検索では、FasとICH1が壊死巣周辺の腫瘍細胞にのみ発現がみられたのに対して、ICEおよびCPP32のprecursorは壊死巣周辺の腫瘍細胞を含めて、全体に散在していた。Fas-Lは壊死巣と関係なく瀰慢性に発現がみられた。興味深いことに、ICE,ICH1およびCPP32の神経膠芽腫における発現は細胞質のみならず、核にも認められた。Fas,Fas-L,ICE,ICH1,CPP32のシーケンスをおこなったが、神経膠芽腫においては、点突然変異の異常はみられなかった。壊死巣周囲にはTUNEL法にて、多数のアポトーシスが観察された。神経膠芽腫におけるアポトーシス誘発遺伝子のカスケードは1)Fas-Fas-L系からICE,CPP32にいたる経路、2)低栄養状態から誘発されるICH1が過剰発現する経路、3)Fas以外からCPP32が過剰発現する経路の三つが考えられた。現在はCPP32とICH1がいかなる条件の時に核内に移行するのか、培養細胞を用いて検索中である。悪性神経膠腫の15例に対して、Fas,FasL,ICE,ICH-1,CPP32の蛋白発現を免疫組織化学的および蛋白電気泳動を用いて観察した。さらに、CPP32は活性を測定し、その局在も調べた。全ての悪性神経膠腫にFas,FasL,ICE,ICH-1,CPP32の蛋白発現がみられ、悪性化に伴い発現量が増した。壊死巣の周囲のみに発現したのは、FasとICH-1であり、壊死巣を含めて広範に発現したのが、FasLとCPP32であった。また、細胞株による抗癌剤を用いたアポトーシス誘導の際にCPP32は活性化し、PARPが切断された。CPP32の活性型は壊死巣周囲に発現がみられた。

以上より、FasとICH-1および活性型のCPP32の発現が壊死巣周囲にみられたことは、悪性神経膠腫のin vivoにおける細胞死にはICH-1の過剰発現とそれに伴うCPP32の活性型への変化が、DNAS\修復蛋白であるPARPを切断することによって生じるのではないかと考えられた。Fas-FasL経路は腫瘍細胞死よりも腫瘍免疫によるT細胞殺効果に働く可能性が高い。
ＤＲＭ虚記憶と自伝的虚記憶の理論的関連性に関する実証的研究

本研究は、実験室におけるDRM課題による虚記憶と現実世界で生起すると考えられる自伝的虚記憶との関連性を、連想活性化、及び、モニタリングに係る個人変数を通して検討することであった。本研究では、日常において空想的に生じる自伝的虚記憶として、「心霊体験」が仮定され、そして、その生起に関与する個人変数として、心霊信奉はもとより、解離体験、認知スタイルなどが検討された。その結果、予測に反して、DRM虚記憶と自伝的虚記憶との間には、それぞれに関与するいくつかの個人変数は示されたものの、強い関連性は認められなかった。実際には呈示されていない関連ルアー項目の虚記憶を誘発するDRM課題を用いた数多の実験室研究の成果から、虚記憶の生起が複雑な活性化やモニタリングのプロセスからなることが明らかにされ、理論的説明がなされてきた。今後の課題は、このような知見の、より多様で複合的な自伝的記憶への応用可能性であり、個々のプロセスがどのように自伝的な虚記憶と関連しているのかを解明することであろう。本研究は、実験室のDRM課題による虚記憶と現実世界で生起する空想的自伝的虚記憶との関連性を究明するために、双方の虚記憶に関与する活性化及びモニタリングに係る個人変数を個別に検討し、DRM課題の研究知見や理論の一般化可能性を探求する。平成24年度は、まず、一般大学生においてDES-Cの日本語版の信頼性と有用性を確認した。次に、包括的心霊信奉・心霊体験尺度の作成を行った。調査結果にもとづいて、それぞれの尺度において、項目分析を行い、本調査で必要な項目を選出した。包括的心霊信奉・心霊体験尺度作成の本調査に向けた準備が終了した。平成25年度は、まず、DES-Cの妥当性の検討のために、想像活動への没入尺度、空想傾向尺度、日常的離人・解離・分割投影尺度、アレキシサイミア傾向尺度を250名の一般大学生で実施した。日常的離人尺度と高い相関がみられたが、日常的解離尺度の一部の下位因子とはほぼ相関がみられないなど、DES-Cの特徴が明らかになった。結果に関して、茨城県立医療大学の佐藤准教授と検討した。また、作成した包括的心霊信奉・心霊体験尺度を250人の被験者に実施した。個別実験に向けて、提示リストなどの材料の選定、刺激提示ソフトのプログラムの作成など、個別実験への準備を行った。そして、これまでの結果や今後の実験について、ベルギー・リエージュ大学のDehon博士、および、Bredart教授と討議し、重要な助言を得た。実際には呈示されていない関連ルアー項目の虚記憶を誘発するDRM課題を用いた数多くの実験室研究の成果から、虚記憶の生起が複雑な活性化やモニタリングのプロセスからなることが明らかにされ、理論的説明がなされてきた。今後はこれらの知見が、より多様で複合的な自伝的記憶にどのように応用可能であり、個々のプロセスがどのように自伝的な虚記憶と関連しているのかを解明することが重要課題となる。平成24年度は、DESを一般大学生(臨床群ではないという意味)で使用する際の床効果や歪度の問題を解消したのDES-Cの日本語版の信頼性を検討した。まず、DES(DES-II)とDES-Cを90名の一般大学生で実施し、その整合性を確認した。また,DES-C日本語版は、DES-IIとくらべて、歪度や床効果の問題が少ないことがわかった。サンプルサイズを179人に増加した分析でも同様の結果が得られた。まず、不思議現象に対する態度尺度、超自然現象信奉尺度における心霊信奉・心霊体験に関連する項目、および、批判的思考や科学的思考に関する文献や研究に基づいて欠格プロセスの判断基準となる項目を加えて、質問項目を作成した。その結果、心霊信奉尺度については163項目、心霊体験尺度については49項目の質問紙が作成された。続いて、一般大学生95名にそれぞれの質問紙の回答を求めた。その結果にもとづいて、それぞれの尺度において、項目分析を行い、本調査で必要な項目を選出した。実際には提示されていない関連ルアー項目の虚記憶を誘発するDRM課題を用いた実験室研究の成果より、虚記憶の生起が複雑な活性化やモニタリングのプロセスからなることが明らかにされ、理論的説明がなされてきた。今後の課題は、それらのプロセスがどのように自伝的な虚記憶と関連するのかを解明することであろう。本研究は、実験室の虚記憶と現実世界で生起する空想的自伝的虚記憶との関連性を明らかにするために、双方の虚記憶に関与する活性化、および、モニタリングに係る個人変数を個別に検討し、DRM課題からもたらされた理論の一般化可能性を探求する。そして、包括的心霊信奉・心霊体験尺度の本調査に向けた準備が完了した。

平成25年度は、まず、DES-Cの妥当性の検討のために、創造活動への没入尺度、空想傾向尺度、日常的離人・解離・分割投影尺度、アレキシサイミア傾向尺度を一般大学生で実施し、DES-Cの特徴を明らかにした。また、作成した包括的心霊信奉・心霊体験尺度を実施した。個別実験に向けて、提示リストなどの材料の選定などの準備を行った。そして、これまでの結果や今後の実験について、ベルギー・リエージュ大学のDehon博士、および、Bredart教授から、符号化や情報処理スタイルが虚記憶に関与する可能性について、有意義な助言を得た。平成26年度は、まず、虚記憶と関連すると考えるDES-C、日本語版オックスフォード統合失調型パーソナリティ尺度、健常者用幻聴用体験尺度短縮版、認知欲求尺度、リアリティ・モニタリング・エラー経験質問紙、情報処理スタイル尺度などとともに包括的心霊信奉・心霊体験尺度を実施し、その関連性を検討しながら、シングルリストを用いたDRM課題による集団実験を実施した。実際には提示されていない関連ルアー項目の虚記憶を誘発するDRM課題を用いた実験室研究の成果より、虚記憶の生起が複雑な活性化やモニタリングのプロセスからなることが明らかにされ、理論的説明がなされてきた。今後の課題は、それらのプロセスがどのように自伝的な虚記憶と関連するのかを解明することであろう。本研究は、実験室の虚記憶と現実世界で生起する空想的自伝的虚記憶との関連性を明らかにするために、双方の虚記憶に関与する活性化、および、モニタリングに係る個人変数を個別に検討し、DRM課題からもたらされた理論の一般化可能性を探求する。平成24年度は、まず、一般大学生においてDES-Cの日本語版の信頼性と有用性を確認し、包括的心霊信奉・心霊体験尺度の準備を行った。平成25年度は、まず、創造活動への没入尺度、空想傾向尺度、日常的離人・解離・分割投影尺度、アレキシサイミア傾向尺度を一般大学生で実施し、DES-Cの特徴を明らかにした。また、包括的心霊信奉・心霊体験尺度を実施した。そして、これまでの結果や今後の実験について、ベルギー・リエージュ大学の研究者から、符号化や情報処理スタイルが虚記憶に関与する可能性について、有意義な助言を得た。平成26年度は、まず、虚記憶と関連すると仮定されるDES-C、日本語版オックスフォード統合失調型パーソナリティ尺度、健常者用幻聴用体験尺度短縮版、認知欲求尺度、リアリティ・モニタリング・エラー経験質問紙、情報処理スタイル尺度などとともに包括的心霊信奉・心霊体験尺度を実施し、その関連性を検討しながら、シングルリストを用いたDRM課題による集団実験を実施した。平成27年度はシングルリストのデータを追加しつつ、研究結果を分析し、複雑なデータについての解釈について、主に国内の研究者間で情報交換しながら、研究を行った。本研究は、実験室におけるDRM課題による虚記憶と現実世界で生起すると考えられる自伝的虚記憶との関連性を、連想活性化、及び、モニタリングに係る個人変数を通して検討することであった。本研究では、日常において空想的に生じる自伝的虚記憶として、「心霊体験」が仮定され、そして、その生起に関与する個人変数として、心霊信奉はもとより、解離体験、認知スタイルなどが検討された。その結果、予測に反して、DRM虚記憶と自伝的虚記憶との間には、それぞれに関与するいくつかの個人変数は示されたものの、強い関連性は認められなかった。
ジョウロウグモの神経毒ネフィラトキシン類の合成研究

ジョロウグモの毒素はアミノ酸とポリアミンから成る全く新しい型のペプチド様神経毒であり、グルタミン酸による神経筋興奮伝達を特異的に遮断する事から、現在の神経生理学の分野で最も重要視されている化合物である。本研究は、研究計画に従いそれらの代表者毒素であるネフィラトキシン類(NPTXー112)の全合成を目指して遂行されたものであるが、その結果最もグルタミン酸遮断活性の強いNPTXー9およびNPTXー10の最初の全合成に成功すると共に、それらの末端のアルギニン残基のとれたNPTXー11および12の合成に成功した。これらのクモ毒素の合成上の最大の課題はカダベリンやプトレアニンなどのポリアミン部の導入であるが、本研究によって開発されたアジト中間体を用いる方法により極めて効率的にポリアミン部を導入できることが判明した。この方法論は他のクモ毒や昆虫毒の合成にも適用することができ、今後幅広く応用されるものと考えられる。今回の合成により、ネフィラトキシン類の3つのタイプのうちインド-ル酢酸ーアスパラギンーカダベリンープトレアニンの配列を持つ系列のもの(NPTXー1,2,5,6,10,12)とインド-ル酢酸ーアスパラギンーカダベリンーオルニチンの配列をもつクモ毒(NPTXー9,11)の合成による供給ル-トが拓かれた事になる。今後はもう一つのタイプのクモ毒であるNPTXー7およびNPTXー8の合成に着手する予定である。なお、今回の研究によって得られた成果は2つの論文にまとめ現在Tetrahedron Lettersに投稿中である。最後に、本研究は科学研究費の助成により大きな成果を収めることが出来たものであり、ここに深く謝意を表する。