hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ナノ構造材料を適用した電力貯蔵用大容量電気二重層キャパシタの開発

電気二重層キャパシタ(以下キャパシタ)の分極性電極に配合される導電性カーボンブラックに、ナノ構造多孔体のケッチェンブラックを用いることにより、通常の導電性カーボンブラックとして使用されるアセチレンブラック(消耗品として購入した)を配合したキャパシタの特性と比較して、静電容量が約2倍になることを示した。また、キャパシタ内部の空間電荷分布測定の結果からも、ケッチェンブラックを配合したキャパシタの蓄積電荷密度がアセチレンブラックを配合したキャパシタと比較して高いことが分かり、ケッチェンブラックが有する細孔に電荷が蓄積されていることを示すことができた。この結果は、欧文ジャーナルSurface and Coatings Technology, Vol. 201, No.9-11, pp.5392-5395,2007に、"Space charge behaviors of electric double layer capacitor with nanocomposite electrode"として掲載された。さらに、窒素プラズマを用いてキャパシタ用カーボン電極の特性向上を行った結果、未処理のカーボン電極と比較してプラズマ処理を行ったカーボン電極の蓄積電荷密度が約1.5倍上昇することが分かり、応用物理学会欧文誌Japanese Journal of Appled Physics, Vol. 45, No. 10B, pp.8521-8524, 2006に、" Plasma Surface Treatment of Carbonaceous Materials for Application in Electric Double Layer Capacitors"として掲載され、大容量のキャパシタを開発する上での一つのプロセスとして期待される。電気二重層キャパシタ(以下キャパシタ)の分極性電極に配合される導性カーボンブラックに、ナノ構造多孔体のケッチェンプラックを用いることにより、通常の導電性カーボンプラックとして使用されるアセチレンブラック(消耗品として購入した)を配合したキャパシタの特性と比較して、静電容量が約2倍になることを示した。また、キャパシタ内部の空間電荷分布測定の結果からも、ケッチェンブラックを配合したキャパシタの蓄積電荷密度がアセチレンブラックを配合したキャバシタと比較して高いことが分かり、ケッチェンブラックが有する細孔に電荷が蓄積されていることを示すことができた。この結果は、学会誌Surface Coating Technology, Vol.201,No.9-11,pp.5392-5395,2007に、"Space charge behaviors of electric double layer capacitor with nanocomposite electrode"として掲載された。また、キャバシタの分極性電極にカーボンナノチューブを配合し、その空間電荷分布特性を評価した結果、比表面積や細孔の大きさに対する蓄積電荷密度の関係を明らかにすることができ、今後の大容量キャパシタ開発のための新たな知見を得ることができた。この結果は、誘電材料の空間電荷分布測定に関する専門家が多く集まるアメリカでの国際学会IEEE Conference on Electrical Insulation And Dielectric Phenomenaで"Relation between SpaceCharge and Pore Size of Nano Porous Electrode for Super Capacitor"として発表し、ProceedingsとしてCEIDP2006,No. 2B-1,pp.125-128,2006に掲載された。さらに、窒素プラズマを用いてキャパシタ用カーボン電極の特性向上を行った結果、未処理のカーボン電極と比較してプラズマ処理を行ったカーボン電極の蓄積電荷密度が約1.5倍上昇することが分かり、学会誌Japanese Journal of Applied Physics, Vol.45,No.10B, pp.8521-8524、2006に、"Plasma SurfaceTreatment of Carbonaceous Materials for Application in Electric Double Layer Capacitors"として掲載され、大容量のキャパシタを開発する上での一つのプロセスとして期待される。また、窒素プラズマ処理における窒素ドープの深さについて研究を進めた結果をドイツで開催された国際学会Tenth International Conference on PlasmaSurface Engineering (外国旅費として申請した)でSurface Modification of Carbon Electrode for Electric DoubleLayer Capacitors"として発表し、学会誌Plasma Processes and POlymersへの掲載が決まっている。
ロシアの健康格差と生活水準格差のミクロ計量分析

本研究の目的は,ロシアの格差を多面的に分析することから,計画経済から市場経済への移行の中で急激に高まった格差に対し,是正のための解決策を探ることである。ロシアの生活保護制度の基盤はロシア国家社会扶助法であり,格差是正がその目的の一つとされている。平成30(2018)年度は,まず,ロシア国家社会扶助法で2012年に規定された社会契約(социальныйконтракт)と呼ばれるワークフェアが,貧困家計の貧困脱出にどのように影響しているのかについて,因果推論を試みた。貧困削減のために雇用保障と所得保障のいずれが有効かという議論は,途上国,先進国の貧困を問わず貧困研究において重要なトピックである。しかし,ロシアではワークフェアが社会保護制度に組み込まれたのが比較的最近であるためか,ワークフェアの貧困削減効果に関する実証研究は,ロシアの貧困研究ではほとんど見られず,まだそれほど発展していない研究課題と思われる。本分析は更なる精緻化が必要ではあるが,今後ロシアでも注目されるであろう重要な問題を先取りしたものであり,このような意味において,意義のある分析と考えることができる。これらの研究を行ったほか,ロシアの格差の別の側面である健康格差についても,ロシアにおける研究状況の調査のために現地に出張し,資料取集のほか現地研究者と意見交換を行った。なお,以上の研究成果の一部は,国際学会にて報告したほか,研究論文として研究図書に所収された。研究成果の一部を,学会で報告したほか,研究論文として発表した。以上の点から,本研究はおおむね順調に進展していると考える。2019年度は,2018年度に実施した実証研究を精緻化し,学術誌に投稿することを目指す。また,2019年度も,現地感覚と実証分析の結果にずれがないかどうかを調べるために,ロシアへの出張も実施する。
膵内分泌細胞の分化におけるJAM-1の新たな機能の解析

膵外分泌腺由来AR42J細胞は共通前駆細胞の性質を持ち、アクチビンA+ベータセルリンの作用でインスリン産生細胞へ分化する。この時、多くの遺伝子の発現が変化する(Mashima, et. al.Diabetes48;304-9:1999)が、今回、Junctional Adhesion Molecule-1(JAM-1)に着目した。AR42J細胞がインスリン産生細胞へ分化する時、タイトジャンクション(TJ)を形成しないにも関わらず、TJの構成蛋白であるJAM-1は著明に発現が亢進する。JAM-1のAR42J細胞の分化に及ぼす影響の検討が本研究の主眼である。JAM-1はアクチビンA+ベータセルリンの添加後、mRNAレベルでは3時間後、蛋白レベルでは24時間後に発現の増加がみられた。TJからのシグナル伝達分子であるPAR-3やatypical PKCλも同様に発現が亢進した。AR42J細胞に過剰発現をさせると細胞表面だけでなく、細胞内小胞にも発現が認められた。TJの蛋白は細胞間接合部にとどまるのではなく、分裂や増殖にあわせて細胞内をリサイクリングしていることが最近明らかにされ、RabファミリーのRab3BやRab13が関与していると報告された。二重染色を行った所、JAM-1もやはり、Rab3BやRab13と同じ細胞内小胞に存在した。ストレプトゾトシンを腹腔内投与して糖尿病ラットを作成し、膵ラ氏島のJAM-1の発現を比較したところ、糖尿病ラットではJAM-1の発現が亢進していた。以上から、JAM-1はAR42J細胞のインスリン産生細胞への分化及び膵内分泌細胞の再生に重要な役割を果たしていることが明らかにされ、今後は胎生期の膵ラ氏島やJAM-1の発現変化がAR42J細胞の分化に及ぼす影響等を詳細に検討することにより、JAM-1の機能を明らかにしてゆく。AR42J細胞は膵共通前駆細胞の性質を持つ。アクチビンAとベータセルリンの作用でインスリン産生細胞へ分化する時、タイトジャンクション(TJ)を形成しないにも関わらず、Jam-1は著明に発現が亢進し、TJからのシグナル伝達分子であるPAR-3やatypical PKCλも発現が亢進した。アドヘリアンスジャンクション(AJ)に局在するE-カドヘリンは発現が変化しなかった。極性をもったMDCK細胞において、Jam-1はTJに存在するが、過剰発現をさせると細胞内にもドット状の発現がみられ、細胞内小胞にも存在しうることが予想された。Jam-1はインスリン産生細胞に発現すると予想され、膵ラ氏島を免疫組織化学の手法を用いて検討したところ、驚くことにJam-1は膵β細胞ではなく、膵α細胞に発現しており、しかも発現は細胞間接着部位だけでなく、細胞内にもドット状に認められた。最近、TJやAJの蛋白は結合部にとどまるのではなく、分裂や増殖にあわせて、細胞内をリサイクリングしていることが明らかとされた。Rabファミリーに属するRab3BやRab13がこのリサイクリングに関与しているとの報告があり、MDCK細胞を用いて2重染色を行った所、Jam-1はRab3BやRab13と同じ細胞内小胞に存在していることが明らかとなった。以上より、1.AR42J細胞がインスリン細胞に分化する際、TJを形成しないにも関わらず、Jam-1およびその情報伝達系が活性化すること、2.Jam-

1はTJだけでなく、細胞内のRab3B,Rab13の小胞上にも存在すること、3.膵ラ氏島ではβ細胞ではなく、α細胞に発現していることが明らかとなった。Jam-1は膵内分泌細胞の分化に大きな役割を果たしていることが予想されるが、分化のどの段階に影響を及ぼしているかが興味深く、次年度の検討課題である。AR42J細胞は膵共通前駆細胞の性質を持つ。アクチビンAとベータセルリンの作用でインスリン産生細胞へ分化する時、タイトジャンクション(TJ)を形成しないにも関わらず、JAM-1は著明に発現が亢進し、TJからのシグナル伝達分子であるPAR-3やatypical PKCλも発現が亢進した。しかし、理由は不明であるが、免疫細胞染色を行うと、AR42J細胞ではJAM-1は染色されなかった。タグ(myc)のついたJAM-1を過剰発現させ、抗myc抗体で染色すると細胞膜上と細胞内にドット状に染色された。極性をもった上皮細胞であるMDCK細胞では、通常状態においてJAM-1は細胞間にのみ染色されるが、過剰発現をさせると細胞内にもドット状の発現がみられた。JAM-1は膵ラ氏島においてインスリン産生細胞に発現すると予想されたが、免疫組織化学にて検討すると、β細胞ではなく、α細胞に発現していた。TJに局在するいくつかの蛋白は結合部にとどまるのではなく、分裂や増殖にあわせて、細胞内をリサイクリングしていることが報告されており、Rabファミリーに属するRab3BやRab13がこのリサイクリングを調節しているとの報告もある。MDCK細胞を用いて2重染色を行った所、JAM-1はRab3BやRab13と局在が一致した。以上より、1.AR42J細胞がインスリン細胞に分化する際、JAM-1およびその情報伝達系が活性化すること、2.JAM-1はTJだけでなく、細胞内においてRab3BやRabl3と同じ小胞上に存在すること、3.膵ラ氏島ではβ細胞ではなく、α細胞に発現していることが明らかとなった。JAM-1は膵内分泌細胞の分化に大きな役割を果たしていることが予想されるが、分化のどの段階に影響を及ぼしているかが興味深く、今後はβ細胞、α細胞の細胞株であるMin6細胞、αTC細胞を用いて、JAM-1の発現、局在を検討する。またこれらの細胞株にアクチビンとベータセルリンを添加し、JAM-1の発現の変化をインスリン量・グルカゴン量の変化と共に検討し、JAM-1が膵内分泌細胞の分化とどのように関連しているかを検討してゆく。前年までの検討により、アクチビンAとベータセルリンの作用でインスリン産生細胞へ分化する時、1.タイトジャンクション(TJ)を形成しないにも関わらず、JAM-1およびその情報伝達系が活性化すること、2.JAM-1はTJだけでなく、細胞内においてRab3BやRab13と同じ小胞上に存在すること、3.膵ラ氏島ではβ細胞ではなく、α細胞に発現していることが明らかとなった。JAM-1は膵内分泌細胞の分化に大きな役割を果たしていることが予想されるが、β細胞、α細胞の細胞株であるMin6細胞、αTC細胞に過剰発現させても、インスリンやグルカゴンの発現には特に変化がみられなかった。ラット腹腔内にストレプトゾトシンを注射すると糖尿病ラットを作成することができる。この時転写因子PDX-1やPGP9.5の発現は亢進しており、膵ラ氏島の再生は促されている。JAM-1の発現レベルを正常ラットと比較すると、mRNAレベル・蛋白レベル共に発現が亢進していた。
ニホンザル,ヒヒなど国内飼育サル由来ヘルペスウィルスの実験動物における病原性解析

マカカ属サルのBウイルス(BV)感染を血清学的にインハウスで診断するために、ヒヒヘルペスウイルス(HVP2)を代替抗原に用いたキットを開発してきた。抗原性の点で類似したHVP2とBVの両ウイルスは、ヒトでの致死性という点では大きな違いが存在する。BVをクラス4たらしめる責任遺伝子が存在し、近縁のヒヒヘルペスウイルスを解析することによってその遺伝子が浮き彫りになるのではないかという仮説をたて、これを解析することにした。米国のカニクイザルに由来するBVの塩基配列について概ね決定し、既知のアカゲザル由来BV(E2490株)とは異なるカニクイザル固有のBVの存在を示唆した。マウスで神経病原性の強いnv型のOU1-76株について約1kbを残して決定し、既知株(X313株)との相同性が各orfのアミノ酸配列において79100%であった。神経病原性のないap型のOU2-5株についても、90%以上の塩基配列が判明している。OU2-5/X313間の相同性は、各orfのアミノ酸配列において75100%一致した。nv型とされるA189164株について、US領域の塩基配列が明らかになった。US領域の13個のorfに限れば、OU1-76株と最も近縁で、OU2-5株がこれに次ぎ、HVP2nvのX313株が最も遠い存在となった。この結果はX313株がHVP2nv/apのキメラウイルスである可能性を示唆した。さらに、チンパンジーから分離されたChHVについても、14個のorfが決定されている。これまでの結果から、ヒトの単純ヘルペスウイルス2型と最も近縁のウイルスであることが推定される。ただ、このウイルスがチンパンジー固有のウイルスなのか、あるいはアクシデンタルにヒトから感染したものなのかは未解決の問題として残されている。マカカ属のアルファヘルペスウイルスであるBウイルス(BV)は、ヒトに感染すると致死的な脳炎を起こすウイルスとして知られている。このウイルスは、マウスやウサギの実験動物を用いた感染実験においても致死的脳炎を発症させることができる。最近、ヒヒヘルペスウイルス(HVP2)のマウスの感染実験において、病原性のある株(nv)とない株(ap)との存在が報告された(2002年)。BVのヒトでの病原性と、HVP2のマウスでの病原性との関係について興味は尽きない。BVとHVP2とは、近縁のウイルスでありながら、病原性に差異があり、その原因についてウイルス側の因子に注目しつつ研究を進めている。病原性のないOU2-5株(ap)のUS領域の遺伝子解析を行い、その配列をもとにして、病原性を有するOU1-76株(nv)のUS領域についても一部解析を行うことにした。両者を塩基配列レベルで比較し、病原性の差異を探ることとした。OU2-5株(ap)のUS領域に位置するゲノム断片クローンを精製し、BV用に設計されていたプライマー、あるいは、新たにHVP2用に設計したプライマーを用いて、シークエンスを行った。これまでのところ、OU2-5株(ap)のUS領域全長が解明され(14,725bp,G+C:75.2%)、OU1-76株はUS69の配列が明らかになっている。US2-5株については、アカゲザル由来のBVrh(E2490株)とのアミノ酸一致率は53%(US5)85%(US6)だった。

OU1-76株(nv)とでは、いずれのORFでも93%以上の相同性を認め、アカゲザルとカニクイザルのBV間(BVrh/BVcy)の相同性(83%以上)を概ね上回っていた。UL領域については、OU1-76株(nv)の解析がUL56およびOriLの一部を残してほぼ終了しつつある。マカカ属のアルファヘルペスウイルスであるBウイルス(BV)は、ヒトに感染すると致死的な脳炎を起こすウイルスとして知られている。このウイルスは、マウスやウサギの実験動物を用いた感染実験においても致死的脳炎を発症させることができる。最近、ヒヒヘルペスウイルス(HVP2)のマウスの感染実験において、病原性のある株(nv)とない株(ap)との存在が報告された(2002年)。BVのヒトでの病原性と、HVP2のマウスでの病原性との関係について興味深い。BVとHVP2とは近縁のウイルスでありながら、病原性に差異があり、その原因についてウイルス側の因子に注目しつつ研究を進めている。マウスで病原性あるOU1-76株(nv)および病原性のないOU2-5株(ap)のUS領域の遺伝子解析を行い、両者を塩基配列レベルで比較して病原性の差異を探ることとした。OU2-5株(ap)のUS領域に位置するゲノム断片クローンを精製し、BV用に設計されていたプライマー、あるいは、新たにHVP2用に設計したプライマーを用いて、シークエンスを行った。これまでのところ、OU1-76株、OU2-5株ともにUS領域全長が解明された(約14,700bp,G+C:75.2%)。US領域には13個のorfが見出され、両者のアミノ酸配列レベルでの相同性は、87%(US4)99%(US9)だった。アカゲザル由来のBVrh(E2490株)とカニクイザル由来のBVcy(E90-136株)とのアミノ酸相同性が70%(US4)99%(US6)であるのに比べて概ね高い値となった。US領域の塩基配列を見る限り、きわめて近縁のウイルス株間に病原性の差異をもたらす責任遺伝子が存在する可能性は低いことが示唆された。近年、ヒヒヘルペスウイルス(HVP2)のマウスの感染実験において、病原性のある株(nv)とない株(ap)との存在が報告された。マウスで病原性のあるOU1-76株(nv)および病原性のないOU2-5(ap)のUS領域の遺伝子解析を行い、両者を塩基配列レベルで比較して病原性の差異を探ることとした。ゲノム断片クローンを精製し、BV用あるいはHVP2用に設計されていたプライマーを用いて、シークエンスを行った。OU1-76株、OU2-5株ともにUS領域全長が解明され(約14,700bp,G+C:75.2%)、US領域には13個のorfが見出され、両者のアミノ酸配列レベルでの相同性が、87%(US4)99%(US9)であることが明らかになった。現在、他のウイルス分離株についても同様に検討中である。
強迫性障害患者の脳機能画像研究-前頭葉白質回路網に注目して-

今回我々は、16名の強迫性障害患者と16名の健常者について脳梁の5つの部位におけるFractional Anistropy値(FA値)とMean Diffusivity値(MD値)を得た。患者と健常者間のFA値に有意差が認められた脳梁部位は、眼窩前頭葉から投射を受けるrostrum(患者のFA値、健常者のFA値、P値:0.55±0.07,0.69±0,06,P<0.001)のみであった。他の4部位のFA値は以下のとおりで、患者と健常者間のFA値に有意差を認めなかった。(部位:患者のFA値、健常者のFA値、P値、genu:0.80±0.07,0.81±0.09,P=0.70,rostralbody:0.68±0.08,0.70±0.06,P=O.46,isthmus:0.69±0.08,0.73±0.07,P=0.06,splenium:0.87±0.10,0.86±0.08,P=0.74)。MD値については、全ての脳梁部位で患者と健常者間に有意差を認めなかった。また、患者のrostrumにおけるFA値と強迫症状の重症度の指標であるY-BOCS値は逆相関を示した(r=-0.72,p=0.002)。我々は、強迫性障害患者における白質線維連絡に着目し、拡散テンソル画像解析を用いて、今日までに提唱された強迫性障害の神経回路網の異常を検出するべく研究を進め、神経回路網の障害の程度が、臨床症状の重症度と関連するという結果を得た。将来この研究も含めた神経科学的脳画像研究が、強迫性障害の病態解明の一端を担うにとどまらず、強迫症状に苦しむ多くの患者の診断や治療指針に貢献していくものと考えている。本研究の計画書を作成し、必要な書類を関西医科大学倫理委員会に提出し承認を得た。対象患者は、DSM-IVの診断基準に基づき選出した(Obsessive-Compulsive Disorder:300.3)。年齢は16歳以上であり、未治療患者のみを対象とした。症状重症度は、Yale-Brown強迫観念・強迫行為評価尺度(Y-BOCS)を用いて評価した。対照として、性別、年齢が患者群と同じ健常志願者を選出した。平成16年度は、患者、被験者とも10例づつを目標例数と設定していた。現時点では、患者が14名、健常者が9名である。患者には、治療目的で、セロトニン再取り込み阻害剤(塩酸パロキセチン)を投与し、外来にて12週間の間隔で臨床経過追跡を行っている。対象には、本研究の内容を十分に理解してもらった後、同意の得られた選出者にMRIならびに脳波検査を実施している。MRI装置は、1.5 TeslaのGE Signa Horizon LXを用い、前交連および後交連を結んだ線(AC-PC line)に平行な水平断面についてspin-echo type single-shot echoplanar sequence (TR 2000ms、FOV 24×24cm、マトリックス128×128、加算回数4回)の条件下で、1000s/mm^2の拡散検出傾斜磁場を印加して計9スライスの拡散強調画像を得ている。得られた拡散協調画像を光磁気ディスク(消耗品として必要となる)に保存している。現在、用手ROI法にてテンソル解析を行なっている。

脳波測定に関しては、安静時脳波記録に加えて、症状暴露時脳波記録を行っている。磁気ディスクにデータを記録している。脳波は、不潔恐怖患者に鯛いてのみ行っているため、現在は9名において完了している。選択基準に基づき、16名の強迫性障害患者(男性7名と女性9名)と16名の健常被験者(男性7名と女性9名)のテンソルMRI撮影を終了した。患者の年齢は、28.7±9.8歳であり、健常者の年齢は29.9±9.0歳であった。患者の強迫症状の重症度を表すY-BOCSの点数は、26.0±5.3点であり、うつ症状の重症度を表す点数は、5.3±2.7点であった。2名の検査者が、無作為に抽出された10名(患者5名、健常者5名)に、別々にROIを設定し、その一致度を確かめたところ、全ての部位において0.94であり、本手法におけるFAは、検査者間での信頼度にすぐれていることが確認された。患者間と健常者間のFAに有意差がみられたのは、rostrumだけであり、他の4部位には有意差は認められなかった。2名の検査者が、無作為に抽出された10名(患者5名、健常者5名)に、別々にROIを設定し、その一致度を確かめたところ、全ての部位において0.94であり、本手法におけるEAは、検査者間での信頼度にすぐれていることが確認された。本研究で得られた知見を国内学会、国際学会で発表し、国際学会においては第14回欧州精神科医学会でベストポスター賞を受賞した。現在海外の学会誌に投稿中である。今回我々は、16名の強迫性障害患者と16名の健常者について脳梁の5つの部位におけるFractional Anistropy値(FA値)とMean Diffusivity値(MD値)を得た。患者と健常者間のFA値に有意差が認められた脳梁部位は、眼窩前頭葉から投射を受けるrostrum(患者のFA値、健常者のFA値、P値:0.55±0.07,0.69±0.06,P<0.001)のみであった。他の4部位のFA値は以下のとおりで、患者と健常者間のFA値に有意差を認めなかった。(部位:患者のFA値、健常者のFA値、P値、genu:O.80±0.07,0.81±0.09,P=0.70,rostralbody:0.68±0.08,0.70±0.06,P=0.46,isthmus:0.69±0.08,0.73±0.07,P=0.06,splenium:0.87±0.10,0.86±0.08,P=0.74)。MD値については、全ての脳梁部位で患者と健常者間に有意差を認めなかった。また、患者のrostrumにおけるFA値と強迫症状の重症度の指標であるY-BOCS値は逆相関を示した(r=-0.72,p=0.002)。我々は、強迫性障害患者における白質線維連絡に着目し、拡散テンソル画像解析を用いて、今日までに提唱された強迫性障害の神経回路網の異常を検出するべく研究を進め、神経回路網の障害の程度が、臨床症状の重症度と関連するという結果を得た。将来この研究も含めた神経科学的脳画像研究が、強迫性障害の病態解明の一端を担うにとどまらず、強迫症状に苦しむ多くの患者の診断や治療指針に貢献していくものと考えている。
近世日本幕藩教育体制の創出過程における漢学教育の役割―孔子廟・釈奠の制度化を軸に

近世日本の幕藩教育体制は、江戸中期以降、湯島聖堂・藩校の創設をもって確立したとされるが、それを遥かに遡る江戸前期より幕府・諸藩では、将軍・藩主が各々の政治的関心に基づき、漢学教育を行ってきており、それらの営為こそが幕藩教育体制を生み出す基盤となった。本研究では、江戸前期に為政者が主導した個々の漢学教育の営みを、孔子廟・釈奠の制度化を軸として解明し、それらが幕藩教育制度の創出過程において果たした役割を明らかにした。本年度は、幕府・諸藩の教育体制が未だ確立される以前、江戸前期より漢学教育が営まれてきた主要な地域のうち、特に早期に儒学・孔子廟・釈奠の研究が勃興した肥前(佐賀藩・多久邑・小城藩)の関係史料の調査収集を行い、幕藩教育体制創出過程における漢学教育の役割について考察を進め、学術論文・学会発表等を通じて、研究成果を国内外において発信した。本年度の研究により、以下の史実を実証的に跡付けることができた。佐賀藩では、第二代藩主鍋島光茂・第三代藩主鍋島綱茂が儒学に関心を示していた。その環境の下、第二代藩主光茂が佐賀城二の丸に鬼丸聖堂(孔子廟)を建立し、儒学者武富廉斎が大財聖堂(孔子廟)建立した。多久邑では、第四代邑主多久茂文の主導の下、元禄年間に儒学を教える学校が創設され、宝永五年に多久聖廟(孔子廟)が建立され、釈菜(釈奠)が行われた。小城藩では、第二代藩主鍋島直能の主導により、漢学教育に力を入れ、藩士に儒学の知識と中国の言語を学ばせ、漢学教育を行っていた。下級藩士の子である下川三省は、藩主鍋島直能の命令と援護の下、中国知識人朱舜水について生きた漢語と儒学を学び、やがて藩儒に登用され、小城藩漢学教育の基礎を築いた。本年度は、前年度の研究を通して得られた研究成果を基礎として、江戸前期の主要な漢学教育機関の漢学教育・孔子廟・釈奠関係史料の調査収集を更に進めると同時に、幕藩教育体制創出過程における漢学教育の役割について考察を更に進め、学術論文・学会発表等を通じて、研究成果を国内外において発信した。本年度の研究により、多久聖廟の建立が、これに先立つ幕府および地域(佐賀藩、小城藩)における儒教勃興の流れの中に位置づけられるとともに、儒教的な徳によって領民を文明化し、領地を治めようという多久邑主多久茂文の政治構想の一部分をなす、具体的な視覚表現であることを実証的に跡付けることができた。研究実施計画に基づき、本年度に計画された主要な現地調査を実施し、関係史料を収集し、幕藩教育体制創出過程における漢学教育の役割について考察を進め、学術論文・学会発表等を通じて、研究成果を国内外において発信した。したがって、江戸前期の幕藩教育草創期に着目し、当時の日本の政治的・社会的・文化的な環境の中で、為政者が如何なる目的・方法をもって孔子廟・釈奠を自ら主導した漢学教育機関に採り入れたのかを考究し、幕藩教育体制の創出過程における漢学教育の役割を解明するという本研究の目的の達成は、おおむね順調に進展しているといえる。最終年度に当たる本年度は、これまでの研究を通して得られた研究成果を基礎として、江戸前期から江戸中期にかけての主要な漢学教育機関の漢学教育・孔子廟造営・釈奠(国家の正統の学であることを示す孔子を祀る儀式)実施に関する史料の調査収集を更に進めると同時に、幕藩教育体制の創出過程における漢学教育の役割について考察を更に進め、学術論文・学会発表等を通じて、最終的な研究成果を国内外において発信した。近世日本の幕藩教育体制は、江戸中期以降、幕府による湯島聖堂の創設と諸藩による藩校の設立をもって確立したとされるが、それを遥かに遡る江戸前期より幕府・諸藩では、将軍・藩主が各々の政治的関心に基づき、漢学教育を行ってきており、それらの営為が近世日本の幕藩教育体制を生み出す基盤となった。江戸前期において、為政者が主導した個々の漢学教育の営みを通して、孔子廟造営・釈奠実施の制度化が進められ、それらが幕藩教育体制の創出過程において重要な役割を果たした。更に進んで江戸中期になると、第五代将軍徳川綱吉による儒教経典の研究、文治政治の促進、孔子廟造営への関心を基礎として、林家塾第三代当主林鳳岡との協力により、湯島聖堂が創設され、それを契機として、幕府と諸藩との交流を通して、諸藩による藩校の設立が急増し、武家社会に漢学教育が普及し、文治の気運が高まった。研究実施計画に基づき、本年度に予定された現地調査を実施し、関係史料を収集し、幕藩教育体制創出過程における漢学教育の役割について考察を進め、学術論文・学会発表等を通じて、研究成果を国内外において発信した。

したがって、江戸前期の幕藩教育草創期に着目し、当時の日本の政治的・社会的・文化的な環境の中で、為政者が如何なる目的・方法をもって孔子廟・釈奠を自ら主導した漢学教育機関に採り入れたのかを考究し、幕藩教育体制の創出過程における漢学教育の役割を解明するという本研究の目的の達成は、おおむね順調に進展しているといえる。本年度までの研究を通して得られた研究成果を基礎として、江戸前期の主要な漢学教育機関の漢学教育・孔子廟・釈奠関係史料の調査収集を更に進めると同時に、幕藩教育体制創出過程における漢学教育の役割について考察を更に進め、逐次研究成果を社会・国民に伝達する。具体的には、国内外の資料館・図書館等を訪問し、江戸前期の漢学教育機関における儒学研究、教育実践、孔子廟造営、釈奠実施に関する一次史料の調査し、同時に、広く日中両国の漢学教育に関する文献を収集・分析し、学術論文・学会発表等を通じて、研究成果を国内外に発信する。日本教育史、東アジア文化史本年度の研究を通して得られた研究成果を基礎として、江戸前期の主要な漢学教育機関の漢学教育・孔子廟・釈奠関係史料の調査収集を更に進めると同時に、幕藩教育体制創出過程における漢学教育の役割について考察を更に進め、逐次研究成果を社会・国民に伝達する。本年度に計画された現地調査の一部が実施できなかったため、次年度繰越使用額が生じた。次年度に計画されている現地調査に加えて、本年度実施できなかった現地調査を実施し、江戸前期漢学教育関係史料の調査収集を行い、幕藩教育体制創出過程における漢学教育の役割について考察をまとめ、研究成果を社会・国民に伝達する。
ファーマコフォア検索を用いた新たながん標的分子の探索研究

植物資源から単離したイソフラボノイドの内、最も強い活性を示した化合物をモデルとし、ファーマコフォア3次元モデルを構築した。次に、データベース検索および活性試験で得られた結果よりファーマコフォアモデルの検証と改善を行い、モデルを再構築した。再構築モデルでのファーマコフォア探索の結果、得られた化合物は期待どおりの活性を認めた。以上のことから、再構築モデルは、より精度を増した有効なモデルへと改良することができた。また、従来の天然資源より生物活性物質の探索研究についても同時進行し、いくらかの新知見を得た。1、シンナミルフェノール類の合成と発がんプロモーション抑制活性数種のシンナミルフェノール類を合成し、これらに対する発がんプロモーション抑制活性試験を実施した。プレニル基を有するシンナミルフェノール類に強い活性を認め、さらにマウス皮膚2段階発がん抑制活性試験においても強い活性が認められたため、これらは発がんプロモーション抑制試薬として有用であることを認めた。2、フラノンクマリン類のアポトーシス誘導活性タイ産ミカン科Murraya siamensisの葉部から単離した5種のフラノンクマリン類について、ヒト前骨髄性白血病由来細胞株HL60に対する成長阻害活性試験を実施した。その結果、murrayacoumarin Bで処理した細胞では顕著な細胞死が認められ、その効果は処理時間に依存することを認めた。また、核染色による観察では核の断片を有するアポトーシス細胞の割合が時間依存的に増加した。さらに、murrayacoumarin Bはcaspase-9/caspase-3経路を経てアポトーシスを誘導することも証明した。3、フェニルプロパノイド類およびフィトキノイド類のヒスタミン放出抑制活性シキミ科シキミ属植物から単離した6種のフェニルプロパノイド類と6種のフィトキノイド類について、Caイオノフォアで刺激したラットマスト細胞株RBL-2H3細胞からのヒスタミン放出抑制活性試験を実施した。その結果、それぞれ2種の化合物に著しいヒスタミン放出抑制活性が認められた。さらに、これらの化合物についてTNF-α産生抑制活性試験を実施したところ、いずれの化合物もマスト細胞からのTNF-α産生抑制活性が認められた。1、醸造食品の米種麹に含まれる抗酸化物質と血管接着分子の発現抑制効果焼酎に広く使用されているAspergillussaitoi, A. kawachii, A. awamoriの米種麹抽出液に高いDPPHラジカル捕捉能が認められた。A. saitoiの抽出液から抗酸化物質を単離、各種スペクトルデータからまた、PG-Aは、TNF-αで誘導されたヒト臍帯静脈血管内皮細胞(HUVECs)において血管接着分子の発現を有意に抑制した。Citrus属植物から単離したnatsudaidainのratmast cell株RBL-2H3細胞に対する効果を検討した。Natsudaidainは、100、200μMの濃度で僅かにヒスタミン放出を阻害した。TNF-αに関しては投与量依存的にタンパクレベルと遺伝子レベルともに抑制した。更にcyclooxygenase-2のタンパク発現と遺伝子発現も投与量依存的に減少させた。以上のことから、natsudaidainは、抗炎症作用を示すことが期待される。1、ミカン科Clausena anisataよりγ-ラクトンカルバゾールアルカロイドタイで採集したミカン科Clausena anisataの枝部のアセトンエキスから、新しいカルバゾールアルカロイド2種を単離、furanoclausamine AおよびBと命名し、構造決定した。これらの化合物は、いずれもカルバゾール骨格の3位と4位にγ-ラクトン構造が縮合したもので、天然より単離されたのはこれが初めての例である。また、含有成分についてヒト急性骨髄性白血病細胞株HL-60に対する細胞毒性試験を行ったところ、clausamine Eに顕著な細胞死が認められた。2、かつお節・枯節の製造時に使用される糸状菌Eurotiumherbariorumが生産する抗酸化物質鰹節から単離された糸状菌10株のメタノール抽出物について、DPPHラジカル消去能を調べた。枯節(鰹節の一種)の製造のカビ付けに使われるE.herbariorum NE-1とNE-4は高い活性を示し、^1H-NMR、^<13>C-NMR、EI-MS分析によりisodihydroauroglaucin、auroglaucin、dihydroauroglaucin(DAG)、tetrahydroauroglaucin(TAG)、flavoglaucinの抗酸化成分の5成分が同定された。これらはα-トコフェロールと比較するとDPPHとスーパーオキシドのラジカル捕捉能が高かったが、DHAの自動酸化における阻害性は低かった。これら抗酸化成分はEurotium属によって生産され、Aspergillus属では生産されなかった。DAGとTAGは他成分より高いラジカル捕捉能を示し、E.herbariorum NE-1とNE-4の抽出物に多く含まれていた。
受精に関与する新規ユビキチン化酵素の研究

受精は,生物が種を保存する上で不可欠なプロセスである。受精を成立させるためには、精子は糖タンパク質性の卵保護層(卵黄膜)に精子通過口を開ける必要があり、この溶解物質はライシンと呼ばれている。新口動物におけるライシンは精子プロテアーゼであると考えられているが,その詳細は不明である。我々は、ホヤにおいて、精子の新規ユビキチンープロテアソーム系がライシンとして細胞外で機能することを見いだした。今回は、カタユウレイボヤを用いて、そのユビキチン化酵素の探索を行い、精子/精巣で特異的に発現する本酵素を同定することに成功した。上記研究課題に関して,当初の計画に従って研究を行ったので報告する。精子ユビキチンープロテアソームシステム(UPS)は、マボヤ精子の卵外被通過の際に精子通過口を開けるライシンとして機能している事をすでに報告している。当初、卵黄膜成HrVC70をユビキチン化する酵素(E1/E2/E3)をマボヤ精子浸出液から精製することを試みたが、構造解析を行うのに十分な量が得られなかった。そこで、カタユウレイボヤを用いて、精巣で発現しているE2とE3をゲノムデータベースから検索することにした。E3に関しては昨年度の実績報告で報告しているので、今年度はE2に焦点を当てて探索を行った結果を報告する。遺伝子モデルから精巣で高発現している複数のE2候補分子を見出し、それが実際に精巣で発現しているか否かをRT-PCR法により確認した。その結果、ある候補分子が精巣と筋肉で特異的に発現していることが示された。こ酵素が受精に関与するか否かを調べる目的で、発現タンパク質をマウスに免疫し、抗体の作製を試みた。しかし、免疫原性が極めて低く、力価の高い抗体は得られていない。そこで現在、本タンパク質をラットに免疫し、単クローン抗体の作製を試みている。得られれば、それを用いて受精阻害実験等を行う予定である。ホヤの場合、先体胞が非常に小さく、精子反応時に先体反応を起こしているか否は見解が一致していない。そこで今回、先体反応が明白な数種類のウニ(ムラサキウニ,アカウに,バフンウニ)を用いて、マボヤと同様の酵素系が先体内容物(先体反応後の上清)中に存在するか否かを検討した。その結果,少なくともプロテアソームは先体内容物中に存在することが確認された。また、ウニでは卵黄膜が受精前からユビキチン化されていることが示唆され,哺乳類における報告と類似していた。今後は、ホヤとウニの配偶子ユビキチン化酵素の同定を試みる。上記研究課題に従い、当初の実験計画をほぼ完了したので報告する。原索動物マボヤでは、精子が卵保護層を通過する際に、精子由来の酵素が卵保護層タンパク質HrVC70を細胞外でユビキチン化すること、またそれを精子細胞膜表面のプロテアソームが分解することを既に報告しているが、そのユビキチン化酵素の分子的実体に関する知見は得られていない。そこで、平成19年度は、精子浸出液(活性化精子の遠心上清)を出発物質として、既報に従ってユビキチン化酵素の精製を行い、得られる標品の分析を行なった。DEAE-celluloseによりイオン交換クロマトを行なった後、ubiquitin-agaroseによるアフィニティクロマトを行ない、ユビキチン化酵素に富む画分を精製した。本標品は、SDS-PAGEで、分子量40kDaの主要バンドを与えた。このタンパク質は僅かしか得られないので、最終精製標品のアミノ酸配列分析は行なえなかったが、DEAE吸着画分を用いてSDS-PAGEを行ない、PVDF膜に転写後、40kDaタンパク質のアミノ酸配列の分析を行なった。その結果、このN末端配列は、既に我々がHrVC70と相互作用するタンパク質として同定しているHrTTSP-1の内部配列と一致することが示された。従って、HrTTSP-1がプロセシングされて、40kDaタンパク質が産生されたと考えられる。本タンパク質は、ubiquitin-agaroseに吸着しDTTで溶出されるが、ATP非存在下でも吸着することから、ubiquitinにチオエステル結合を介して結合しているのではなく、TTSP分子内のSS結合がubiquitin-agaroseへの結合に重要であると考えられる。本タンパク質は、ubiquitinとHrVC70の両者に結合する活性を有しており、HrVC70をユビキチン化する際の足場タンパク質として機能している可能性が考えられるが、このタンパク質がユビキチン化反応に本当に関わるか否かを明らかにするには、更に詳細な解析が必要であると思われる。

精子ユビキチン-プロテアソームシステムは、マボヤ精子の卵外被通過の際に精子通過口を開けるライシンとして機能する事をすでに報告している。当初、卵黄膜主要成分であるHrVC70をユビキチン化する酵素(E1/E2/E3)をマボヤ精子浸出液から精製することを試みたが、構造解析を行うのに十分な量が得られなかった。そこで、カタユウレイボヤを用いて、精巣で発現しているE2とE3をゲノムデータベースから検索することにした。E3に関しては一昨年度の実績報告で報告している。また、昨年度はE2に焦点を当てて探索を行った結果について報告した。すなわち、遺伝子モデルから精巣で高発現している複数のE2候補分子を見出し、それが実際に精巣で発現しているか否かをRT-PCR法により検討し、ある候補分子が精巣と筋肉で特異的に発現していることを明らかにしてきた。今年度は、この酵素が受精に関与するか否かを調べる目的で、GST融合タンパク質として大腸菌で発現させてマウスに免疫し、抗体を作製した。この抗体を用いて免疫染色を行った。また、細胞膜非透過性のNHSビオチンで精子を標識し検討したところ、この酵素は精子細胞内に存在し、表面には露出していないことが示唆された。一方、配偶子間相互作用に関わる酵素を探る目的で、精子ラフト画分を調製し、LC-MS/MSによりプロテオーム解析を行った。そして、その画分で検出されるE3をゲノムデータベースから検索し、その遺伝子をGST融合タンパク質として発現させて抗体を作製した。この抗体を用いて局在性解析を行ったが、精子細胞膜表面に露出しているという証拠は得られず、精子形成過程等で機能している可能性が示唆された。
がん細胞におけるメカノセンシング機構の解明

細胞は基質の硬さを感知し、それに応答して表現型を変化させることが知られている(メカノセンス)。しかし、メカノセンスの詳細なメカニズムは未だ不明である。メカノセンスでは、細胞骨格や細胞接着にかかわる分子が重要な働きをしていることがこれまでの研究で明らかになっている。しかし、基質の硬さと転写因子の関与についてはこれまでほとんど報告されていない。そこで、本研究では炎症反応に深く関与する転写因子NF-kBに着目し、基質の硬さがNF-kBに与える影響を調べた。今年度は、ヒト肺がん細胞H1299において、基質の硬さが転写因子NF-kBにどのような影響を与えるかを調べた。本研究により、(1)硬い基質上のH1299細胞は軟らかい基質上の細胞に比べて高いNF-kBの活性を示すこと、(2)NF-kBの活性化は、H1299細胞において炎症反応を引き起こすこと、(3)硬い基質はミオシン調節軽鎖のリン酸化を亢進させ、それがNF-kBの活性化を誘導すること、(4)転写因子NF-kBの活性化により、H1299細胞は浸潤性の形態を示すことが明らかになった。本研究結果により、硬い基質はがん細胞においてNF-kBの活性化とそれによる炎症反応を引き起こし、ひいてはがんの悪性化をもたらすことが示唆された。本結果をもとに、1回の国際セミナー(2013年1月、シンガポール)と1回の国内学会(2012年9月、札幌)で講演を行った。現在は本研究結果をまとめて、原著論文として投稿準備中である。しかし、メカノセンスの詳細なメカニズムはわかっていない。メカノセンスにおいて細胞骨格や細胞接着にかかわる分子が重要な働きをしていることは、これまでの研究で明らかになっている。しかし、これまでに基質の硬さと転写因子の関与についてはほとんど報告されていない。今年度は、硬さの異なる基質上での細胞培養系および実験系を確立した。さらに、それを用いてNF-kBの発現量を解析し、細胞内局在を観察した。今年度は、硬い基質としてコラーゲンをコートしたプラスチックまたはガラスを用いた。また、軟らかい基質としてゲル化したコラーゲンを用いた。実験の結果、(1)NF-kBのmRNAレベルの発現量は、硬い基質と軟らかい基質でほぼ変化しないこと(2)NF-kBのタンパク質レベルの発現量は軟らかい基質では常に一定であるが、硬い基質では細胞を撒いた直後に一度発現が下がり、その後上昇して一定になること(3)細胞を基質に撒いた直後に、硬い基質ではNF-kBが核内に移行することが明らかになった。これらの事実は、基質の硬さが転写因子NF-kBの発現および活性化を変化させ、それにより細胞の炎症反応を制御していることを示唆する重要な結果である。本成果は、1回の国際会議と4回の国内学会・研究会で発表された。今後はNF-kBを制御する因子を同定し、成果を論文にまとめる予定である。(674字)細胞は基質の硬さを感知し、それに応答して表現型を変化させることが知られている(メカノセンス)。本研究は、現在のところおおむね順調に進んでいる。本研究ではNF-kBのタンパク質レベルの発現量を定量化するために、硬い基質上と軟らかい基質上で培養した細胞におけるWestern Blotting実験を行った。この実験において、硬い基質と軟らかい基質上から同質のタンパク質を抽出できる実験系を世界で初めて確立することに成功した。また、免疫蛍光染色法を用いることにより、細胞内におけるNF-kBの局在の違いも観察することができた。

今後はNF-kBの阻害実験および活性化実験を行うことにより、基質の硬さがNF-kBの発現および活性に与える影響を証明することができると考えている。本研究では、今後NF-kBの阻害実験および活性化実験を行う予定である。阻害実験では、NF-kBのドミナントネガティブタンパク質やNF-kBの阻害剤を用いる予定である。また活性化実験では、NF-kBを活性化させる液性因子として知られているTNFaなどを用いる予定である。また、本研究においてNF-kBの転写活性はまだ検証していない。そのため、今後は転写因子の活性を直接検出できるルシフェラーゼアッセイなどを用いて、NF-kBの転写活性を検出する。さらに、硬さだけを厳密に制御できる基質であるアクリルアミドゲル培養基質を現在作製中である。今後はアクリルアミドゲル培養基質上で細胞を培養し、硬さだけの違いによりNF-kBの振る舞いが変化することを証明する予定である。
fos癌遺伝子の機能解析と腎腫瘍との関連

fos癌遺伝子の異常発現をある種の癌遺伝子を持たないレトロウイルスによって誘発された鶏の腎腫瘍において見いだし、fos遺伝子の活性化の機構について解析した。まずfosの発現が高くなっていた腫瘍組織においてfosの構造遺伝子そのものに増幅や近傍へのレトロウイルスゲノムの挿入を含めた構造異常が見られないかをサザンブロット解析により検討したが、結果は否定的であった。そこで感染したレトロウイルスがfos遺伝子そのものではなくfosの発現を誘導する因子の遺伝子の近傍に位置し、間接的にfosの発現を抗進している可能性を検討するために、いくつかのfosの発現が高かった腎腫瘍のうち感染したレトロウイルスの挿入のパターンで見てclonalityの高い1個を選びプロウイルスゲノムの近傍の配列を分子クローニングした。現在サザンブロットで示された2コピーのプロウイルスゲノムに相当するクローンが得られた段階であって、これらのクローンから反復配列を含まないプローブを得て、上記の可能性を検討する予定である。また鶏の筋腱膜繊維肉腫から分離したレトロウイルスAS-42が構造解析の結果、新しい癌遺伝子をもっていることが分かりこの癌遺伝子をmafと命名した。この遺伝子の産物はfosやjun、mycといった癌遺伝子の産物やいくつかの転写制御因子に共通に存在し、DNAとの結合に重要であると考えられているロイシンジッパーと呼ばれる構造を有していた。そこでmaf遺伝子産物が特異的なDNA配列を認識して結合し、他の遺伝子の発現を制御するものであると考え、同様の機能を持つと考えられるfosやjunの遺伝子産物との相互作用の可能性を検討した。まずmafの発現を調べたが細胞を増殖因子などで刺激してもfosで知られている発現の誘導は見られなかった。現在タンパク質レベルでの相互作用の可能性などについて検討している。
食品関連物質の坑変異原性について

1着香料の坑変異原性の研究からレクアッセイが変異原性のみならず坑変異原性のスクリーニングにも利用できるとの確信を持ち,それを実証するために天然添加物20数種についてレクアッセイ,エームステストを実施した.しかし着香料以外では坑菌性を持つ添加物はほとんどなく,レクアッセイが有効に使えないために前述の仮設を補強するデータは得られなかった.2数種のお茶の熱水抽出物について坑変異原性を調べた結果日本茶には坑変異原性が強くみられたが,ウーロン茶,プアール茶にはみられなかった.またHPLCによる分画の結果では日本茶の坑変異原性はカテキン類,カフェイン類によるものではないと思われた.茶葉抽出物の場合もレクアッセイは有効ではなかった.3アラニンとグルコースのMaillard反応物はAF-2に対しては変異原性を増強させる方向に, MNNGに対しては抑制する方向に働くことが明らかにされた.しかしその作用機序は不明である.4 12種の有機ヒ素化合物について,変異原性および坑変異原性を調べた.レクアッセイでは2種が陽性,エームステストでは全てが陰性, SCEは7種の化合物が陽性,またケルセチンに対しては変異原性の抑制に働くものが3種あった.5変異原としてよく用いられる物質に水銀灯照射を行ったところ変異原性が激減するものが多いことが解った.また逆に染髪剤の原料でもある4-nitro-α-phenylenediamineは変異原性が強められた.6 1-nitro-pyrneの変異原性試験をプレインキュベーション法で行う際にプレインキュベーション液中のDMSOの濃度を下げると変異原性が上昇することを見つけた.これは水に難溶な物質に共通した現象であり,液中のDMSO濃度が低下することによって細胞壁の脂質に変異原が吸着されるためであると思われた.これは坑変異原性の機構としては今までに提唱されていない物理的な新しい型であるといえる.1着香料の坑変異原性の研究からレクアッセイが変異原性のみならず坑変異原性のスクリーニングにも利用できるとの確信を持ち,それを実証するために天然添加物20数種についてレクアッセイ,エームステストを実施した.しかし着香料以外では坑菌性を持つ添加物はほとんどなく,レクアッセイが有効に使えないために前述の仮設を補強するデータは得られなかった.2数種のお茶の熱水抽出物について坑変異原性を調べた結果日本茶には坑変異原性が強くみられたが,ウーロン茶,プアール茶にはみられなかった.またHPLCによる分画の結果では日本茶の坑変異原性はカテキン類,カフェイン類によるものではないと思われた.茶葉抽出物の場合もレクアッセイは有効ではなかった.3アラニンとグルコースのMaillard反応物はAF-2に対しては変異原性を増強させる方向に, MNNGに対しては抑制する方向に働くことが明らかにされた.しかしその作用機序は不明である.4 12種の有機ヒ素化合物について,変異原性および坑変異原性を調べた.レクアッセイでは2種が陽性,エームステストでは全てが陰性, SCEは7種の化合物が陽性,またケルセチンに対しては変異原性の抑制に働くものが3種あった.5変異原としてよく用いられる物質に水銀灯照射を行ったところ変異原性が激減するものが多いことが解った.また逆に染髪剤の原料でもある4-nitro-α-phenylenediamineは変異原性が強められた.6 1-nitro-pyrneの変異原性試験をプレインキュベーション法で行う際にプレインキュベーション液中のDMSOの濃度を下げると変異原性が上昇することを見つけた.これは水に難溶な物質に共通した現象であり,液中のDMSO濃度が低下することによって細胞壁の脂質に変異原が吸着されるためであると思われた.これは坑変異原性の機構としては今までに提唱されていない物理的な新しい型であるといえる.1食品添加物に関する研究:市販の天然添加物27品目(着色料21,増量材4,着香料2)についてレクアッセイ,エームステストおよびAFー2を用いた抗変異原性試験を実施した.レクアッセイ陽性はくん液(着香料)のみであった.またエームステスト(TA100,TA98)陽性はくん液と,アナトー色素,コチニール色素(着色料)であった.抗変異原性試験では全ての品目がAFー2の変異原性を抑制しなかった.また急性毒性はくん液のみが測定でき(4.84ml/kg)他は全て5.0g/kg以上であった.2有機ひ素化合物に関する研究:着色料に用いられるうこん色素は代謝活性化を阻害するとの報告があるが,代謝活性化の系による抗変異原性試験は未経験である.そこでモデル実験を組む目的で有機ひそ化合物13品目(全て市販)のレクアッセイ,エームステスト,抗変異原性試験(非代謝活性化,代謝活性化の2系),チゃイニーズハムスター株化細胞を用いてSCEを調べた.その結果エームステスト:陽性の化合物はみられなかった.菌に対する毒性も低いものが多かった.レクアッセイ:陽性は化合物であった. SCE:7種の化合物で頻度の上昇がみられた.しかしそれらは高々対照の2倍程度であり濃度依存性は不明瞭であった.抗変異原性:AFー2誘発変異を抑制する化合物はみられなかった.