hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
神経変性疾患における蛋白質の構造変化と細胞変性機構に関する研究

神経変性の共通の分子メカニズムを明らかにすることを目的として、患者脳に蓄積する蛋白質の解析、リコンビナント蛋白質を用いた解析を行った。その結果、同じ4リピートタウが蓄積するPSPとCBDにおいて、蓄積するタウの線維構造が異なっている可能性が示唆された。また、FTLD、ALSに蓄積するユビキチン陽性封入体の構成タンパク質としてリン酸化TDP-43を同定した。さらにαシヌクレインの部位特異抗体を用いて、αシヌクレインのモノマーから線維化への構造変化をとらえることに成功した。1.疾患患者脳内に蓄積する異常蛋白質の解析タウが蓄積する変性疾患はアルツハイマー病だけでなく、ピック球を伴うピック病、皮質基底核変性症、進行性核上性麻痺、FTDP-17など多くの疾患にみられ、タウオパチーと総称される。今年度は様々なタウオパチー患者の脳からサルコシルという界面活性剤に不溶性を示す画分を調製し、プロテアーゼ処理した後に電気泳動、ウエスタンブロット解析を行った。その結果プロテアーゼ処理後のタウのバンドパターンが、疾患によって異なる様子を示すことが観察された。症例数を増やしてもこの違いは明らかであったことから、単に症例による違いではなく疾患に蓄積するタウの分子種や構造の違いによるものと考えられた。現在、各種抗体による反応性の違いや質量分析により、プロテアーゼ耐性タウの領域の解析を進めている、2.構成成分未同定のユビキチン陽性封入体の構成蛋白質の解析。前頭側頭型認知症(FTD)、あるいは前頭側頭葉変性症(FTLD)として分類される患者脳には、タウ陰性、ユビキチン陽性封入体の蓄積が観察される。同様の封入体が認知障害を伴う筋萎縮性側索硬化症(ALS)にもみられ、その構成成分の同定が望まれていた。申請者らは、アルツハイマー病、レビー小体型認知症、脳疾患以外で剖検になった対照例、及びFTLDの脳から、界面活性剤不溶性画分を調製し、LC/MS/MSを用いたプロテオミクス解析を行った。その結果、FTLD脳の低分子領域においてTDP-43が頻度高く検出されることを見出し、2種類のTDP-43抗体を用いた免疫組織染色とイムノブロット解析により、TDP-43がユビキチン陽性封入体の構成蛋白質であることを同定した。興味深いことに、蓄積しているTDP-43は、タウやαシヌクレイン同様、異常なリン酸化を受けている可能性も示唆された。多くの神経変性疾患では、変性する神経細胞内にユビキチン陽性の異常構造物が観察され、その形成過程が病態や発症と密接に関係していることが示されている。我々は患者脳の不溶性タンパク質を詳細に調べるプロテオミクス解析と免疫組織学的解析により、前頭側頭葉変性症(FTLD)に出現するユビキチン陽性封入体の構成成分として核タンパク質の一種であるTDP-43を同定した。TDP-43は筋萎縮性側索硬化症(ALS)のユビキチン陽性構造物の構成成分であることも判明した。生化学的解析により患者組織に蓄積するTDP-43は異常リン酸化されていることが示唆されたことから、異常リン酸化部位を同定し、そのリン酸化に関わる酵素の探索を試みた。患者組織に蓄積するTDP-43は、量的に少なく、直接解析が困難であると予想されたため、合成リン酸化ペプチドに対する抗体を用いる間接法を用いた。その結果、TDP-43のC末端のいくつかのリン酸化ペプチドに対する抗体が、正常TDP-43とはほとんど反応せず、患者脳に蓄積するTDP-43を濃染することがわかり、C末端のセリン残基が異常リン酸化部位として同定された。複数のリン酸化酵素を用いてin vitroでTDP-43をリン酸化し、抗体との反応性を調べた結果、CK1,CK2がTDP-43の異常リン酸化をおこすことが明らかとなった。また、リン酸化によりTDP-43の線維形成やオリゴマー形成の促進が観察された。(1)患者脳に蓄積する異常タンパク質の解析TDP-43のリン酸化部位特異抗体(pS409/410,pS403/404など)を用いて、FTLD-U、ALS疾患脳に見られるTDP-43の異常や蓄積を解析した。その結果、FTLD-U、ALSには全長TDP-43に加えて1826kDaのリン酸化C末断片が多く蓄積していること、それがFTLD-U、ALS、プログラニュリン(PGRN)変異を有するFTLDでそれぞれ異なったバンドパターンを示すことを明らかにした。また、ADやDLBの3050%にTDP-43の蓄積が見られること、そのC末のバンドパターンはプログラニュリン(PGRN)変異を有するFTLDに近いことを明らかにした。

(2)蛋白質の構造変化に関する研究αシヌクレイン(αsyn)のN末からC末まで、約10アミノ酸ごとのペプチドを抗原にして作製した部位特異抗体を用いてその構造を解析した結果、C末端の抗体は強く反応するのに対し、N末や中央部分に対する抗体の反応が弱かった。一方、線維化したαsynはどの抗体もほぼ一様に強い反応を示した。この結果はαsynが溶液中である程度の構造をとっており、繊維化することによりその構造が大きく変化することを示す。また、凝集阻害効果を有する低分子化合物を添加すると化合物と結合したモノマーや二量体が形成されるが、それらはモノマーと線維のちょうど中間的な反応を示した。この結果から低分子凝集阻害薬が結合したαsynモノマーや二重体は線維形成のon-pathwayの中間体であり、阻害薬は構造変化したモノマーや二量体に作用して繊維形成を抑制することが示唆された。
Thypanosama bruceiにおけるプロスタグランジン生合成経路

我々はアフリカ睡眠病の病原寄生虫であるトリパノソーマ(Trypanosoma brucei)が、アラキドン酸からプロスタグランジン(PG)D2・E2・F2αを合成することを見出した。T.bruceiのPG合成活性は、熱処理により失活し、ヒトのシクロオキシゲナーゼ阻害剤である非ステロイド性抗炎症剤(インドメタシン・アスピリン)により阻害されないことから、哺乳類のシクロオキシゲナーゼとは異なる酵素系により触媒されることが明らかになった。さらに、T.bruceiの可溶性画分に、PGD2・E2・F2αの共通前駆体であるPGH2をPGF2aに還元するPGF合成酵素活性を検出し、本酵素をSDS電気泳動上均一に精製した。さらに、精製酵素のリジルエンドペプチダーゼ処理により得られたヘプチドのアミノ酸配列を決定し、その配列に基いて合成したオリゴヌクレオチドを用いたRT-PCRにより、T.bruceiのPGF合成酵素をコードする全長cDNAをクローニングした。得られたcDNAから予想されるアミノ酸配列を用いた相同性検索の結果、T.bruceiのPGF合成酵素はアルド・ケト還元酵素遺伝子ファミリーに属し、且つ、動物や細菌のアルド・ケト還元酵素とは進化的にかけ離れた新しいメンバーであり、病原寄生虫リーシュマニアにおいて報告されているアルド・ケト還元酵素類似蛋白質と進化的に最も近縁関係にあった。PGF2αは哺乳類の生殖に重要な機能を担っている物質であり、トリパノソーマ感染症患者ではPGF2αの過剰生産や、それに伴う不妊が報告されている。従って、寄生原虫由来のPGF2αがトリパノソーマ感染症における不妊の一因として作用する可能性が考えられる。
12世紀ドイツにおける法の構造変動の総合的研究-中世中期の王権を中心に

研究史の検討を行ない、11世紀後半の「教皇革命論」、「中世的法観念」をめぐる議論から出発して中世法の妥当構造を「法的諸慣習」という概念でとらえる考え方、いわゆる紛争解決論、そして中世の政治における儀礼や演出を重視する考え方の相互の意味と、12世紀の法構造の変動を理解するためにそれらが用いる意味について整理し、これらの新しい考え方が、リジッドな近代的法概念に基づく法史研究から脱却するための重要な出発点となることを確認した。この研究史の分析を受けて、王権を中心とする法構造の変動を理解するための前提となる、(観念形態をも含む)ライヒの構造の変動を、貴族と王権の関係という視角から分析した。とりわけ、シュタウフェン期において、一面においては国王支配の基盤が狭隘化するという現象が、同時に王権の個別貴族(の同意)からの相対的自立化をもたらすという側面があることを明らかにし、このことが、王権の行為形式の高権化、「寛容」から「法の厳守」へという国王イデオロギーの変化の背景にあると考えた。次に、中世中期の法を考える際に重要な位置を占めるラントフリーデに関しては、「合意」の中に存在する法という、中世法の存在構造に関する最近の論を前提として、その法的意味を、近代法的な意味での法テキストの「妥当」という観念から離れて理解すべき事を主張した。更に国王の裁判権とその実務の発展を、オットーネン期からシュタウファー期にかけて追跡し、古い法構造を一部で維持しながら、同時に新しい高権的な裁判のあり方、王の意思の貫徹を可能にした制度的な発展を追跡した。これらの研究によって、とりわけ王権と法との関係を、王権と貴族層との関係の変化という視点から分析する具体的な手推かりが得られたように思う。本年度は、研究の初年度であったため、主として関係する諸問題に関する研究の最新動向を広く検討し、学説史的な関連の中に位置づけることに努めた。とりわけ、近年その研究の進展の著しいオットー朝、ザーリアー朝の王権の政治的支配と政治的行為のあり方に関する諸研究を網羅的に調査した。これらの研究は、それが扱っている時代に対する従来の見方を根底から変えようとする意図を持って発表されているため、その個々の主張の史料的根拠を精査し、それぞれのケースにおけるアクターの具体的な属性を分類することにより、史料によって支持されない一般化を避けることに努めた。次に、主として叙述史料を主たる材料としつつ、貴族社会における儀礼的な行為の持つ(広い意味での)法的・政治的インプリケーションを明らかにしたこれらの研究の与えた衝撃を前提として、従来の法制史的研究が主要な史料としてきた国王証書をもう一度新たな視角から検討する作業に入った。オットー朝期からザーリアー期まで、MGH Diplomataに含まれている国王証書をすべて分析し、予想されたことではあったが、発給地がドイツであるかイタリアであるかによって極めて特徴的な差異があることが明らかになった。すなわちドイツにおいて発給された証書においては、例えば国王集会における行為も制度的な性格がきわめて弱い。それでも、証書には、ある決定が正当な裁判によるものであるとの観念があったことを示す文言(たとえばlegali iudicio (con) fiscatum)がしばしば見られ、必ずしも制度的な(広い意味での)裁判の観念が消滅していたわけではないことが明らかである。これに対し、イタリアで発給された証書には、王権が在地の裁判制度に適応した形での裁判に加わる現象がはっきり見られた。(1)17年度に行なった準備作業を基礎として、シュタウフェン期における国王周辺の知識人のスコラ学的知識のあり方について、最近かなり発表されている研究文献(とりわけOtto von Freisingについて)を検討したほか、Otto von FreisingおよびAnselm von Havelbergの著作を分析した。

また、下記(3)の作業の中で、Wibald von Stabloが、初期シュタウフェン朝の国王文書の中で、裁判による紛争解決を進める方向での動きを促進したのではないかという見通しを持つことができた。(2)王権の発する諸文書の多くは、各地の修道院で教育を受け、司教教会で実務に就いていた聖職者たちによって作成されていたものと思われる。また、これらの文書の受け手の中心も、同様にこれらの司教教会の聖職者であった。そこで、王権との関係が深く、司教文書がある程度残っているヴュルツブルク、マインツの教会と関係のある証書を分析し、そこに見られる法観念の変化を析出することに努めた。しかしこの点については、十分な情報量を持った史料を見いだすことができず、必ずしも明確な結論に達することができなかった。(3)最近のゲルト・アルトホフらの問題提起を念頭に置いて、オットーネンから初期シュタウファーまで、とりわけ国王宮廷における裁判にかかわる証書を網羅的に分析して、紛争解決に関する王権及び宮廷に集う諸有力者のの態度、紛争解決のパターンの変化を跡づけることに努めた。オットーネン期については、ドイツとイタリアの明確な違い、ドイツにおいてもいわば刑罰的な仕方で国王裁判が用いられていること、初期シュタウフェン期については、はっきりと教会が裁判による紛争解決の推進者であることが明らかになった。今年度は最終年度であるので、初期中世から12世紀への法構造の変動に関して、大きな見取り図を描くことに努めた。神の平和やラントフリーデは、個別的合意によって形成され、合意の存在する限りにおいて存立する法という構造を前提としつつも、誓約に参加した者たちに合意のためのある程度客観化した基準を課すことによって、法構造の変動を準備する。とりわけラントフリーデに王国有力者たちが参加したことは、王権と大貴族の間における一般的な法的基準の観念の密度を高めることに資した。また、叙任権闘争以後、とりわけ先進的な司教教会や修道院との関係を維持する聖職者たちを通して、スコラ学的な理論や新しい教会法的な観念が様々な文書領域に入り込む。そのような聖職者たちの登用による宮廷の性格変化、教皇権との対抗の必要、さらには、イタリア諸都市との間の交渉とイタリア人の宮廷における滞在を通じて、ドイツ王権の周辺に、新しい法観念・社会観念が流入する。その中には、立法の実務、特権の効力についての理論、さらには仲裁制度の導入等、学識法的な考え方の影響にもとづくものもあるが、直接的には学識法の影響を示さない国王裁判の枠組や手続の確立も観察されうる。この点は、国王宮廷に集う非専門家たちの法的行動に影響を及ぼすだけに、とりわけ「土着の」法観念、法実務の展開にとって重要な意味を持つ。実際に、13世紀は、学識法的な法観念、法実務の更なる浸透と、このような「土着の」法形式の固定化の二つの方向で、法構造の変化が進むのである。
前4世紀初頭を中心としたローマと西地中海世界の政治的・文化的関係に関する研究

補助金が交付された3年間に行った研究とその成果は以下のとおりである。1.基本史料の文献学的・歴史学的研究本研究の基本史料であるディオドロス『ビブリオテケ(歴史総覧)』第14,15巻とリウィウス『ローマ建国以来の歴史』の第2ペンターデ(第610巻)を中心に前4世紀初頭に関する文献の史料批判的研究を行った。リウィウス『ローマ建国以来の歴史』の第2ペンターデの前半部分(第8巻24章まで)の翻訳と注釈の作業を完了し、京都大学学術出版会に入稿した。これは「西洋古典叢書」の第IV期配本として出版される予定である。2.イタリアおよびドイツでの文献収集と現地調査3回の現地調査-平成16年8月31日9月10日(ローマ、ミュンヘン)、平成17年9月8日9月19日(ローマ)、平成18年8月31日9月12日(ローマ、ミュンヘン)-でカエレ(チェルヴェテリ)、ピュルギ(サンタ・セヴェーラ)、ウェイイ(ヴェーヨ)、ラヌウィウム(ラヌーヴィオ)、ウェリトラエ(ヴェッレトリ)の遺跡と考古学博物館を訪れ、発掘報告や考古学関係の論文の内容を実見によって検証した。併せて、本プロジェクトに関係する書籍・論文で日本では入手・閲覧が困難なものや、ラティウムを中心とする中部イタリアで行われている発掘の最新の報告を収集した。3.研究成果のまとめエトルリア南部・ラティウム・カンパニア地域におけるローマの覇権確立と、カルタゴやギリシア植民市で構成される西地中海世界の政治的状況に関する諸問題のうち、ムニキピウムの起源に関する論攷を完成させた(『史学雑誌』第116編第2号に掲載)。また、今回の補助金交付期間内に完成させることはできなかったが、「エトルリア人都市カエレのローマへの併合と「投票権なき市民権」の起源」も完成が間近である。更に「ローマ=カルタゴ条約」に関する研究文献、ピュルギの神殿の発掘報告も系統的に収集しており、研究成果を近い将来発表する予定である。平成16年度は今回のプロジェクトの初年度であるため、この研究全体にとって基本となる歴史史料の文献学的研究を中心に据え、併せて考古学資料及び研究文献の収集を行った。また研究史の整理も開始した。具体的には、1.ディオドーロス『ビブリオテーケー(歴史総覧)』の史料批判的研究を行った。同書の第14巻(前404年から前387年までを扱う)をP.J.Stylianou(1998)のコメンタリーを利用しつつ読み進め、イタリア史に関する記述を中心に、リーウィウス『建国以来』を始めとする平行史料との比較を通して、ディオドーロスに伝わる伝承の史料的価値を検証した。2.8月31日から9月10日まで、イタリアおよびドイツで文献の収集と現地調査を行った。(1)ローマ・トレ大学、在ローマ・ドイツ考古学研究所、バイエルン国立図書館(ミュンヘン)で、『ビブリオテーケー』の史料批判的研究に必要な文献、前4世紀初頭を中心としたローマとラティウム・南エトルーリア地域の諸都市との政治的・文化的関係に関する文献、カエレの遺跡及びカエレの外港ピュルギの神殿跡の発掘に関する報告・研究文献を収集した。

(2)チェルヴェテリ(カエレ)の博物館、ヴィラ・ジュリア国立エトルスキ博物館(ローマ)、サンタ・セヴェーラのアンティクワリウムとピュルギの神域跡の発掘現場を訪れ、ラティウム・南エトルーリア地域の諸都市と西地中海世界との交流に関する研究を考古学史料によって補強するための、実地の見分と資料の収集を行った。3.前4世紀におけるローマとラティウム・南エトルーリア地域の諸都市の関係に関連する問題群のうち、「ムーニキピウム(自治都市)」と「投票権のないローマ市民権」の起源に関して、研究史の整理を開始した。今年度は、基本的な文献史料(フェストゥス、リウィウス、ディオドロス)の研究を続けるとともに、考古学史料(遺跡の発掘報告)、および研究テーマに関係する論文、研究書のうち昨年度収集しきれなかったものを補い、研究の進捗によって新たに必要が生じたものを収集した。また、これまでの研究成果の一部を論文にまとめる作業に取りかかった。具体的には:1.ディオドロスの『ビブリオテケ(歴史総覧)』第14巻の史料批判的研究を進めるとともに、ローマが前4世紀に南エトルリア、ラティウム、カンパニア地域にヘゲモニーを確立する過程で作り出した「municipium(自治都市)」や「civitas sine suffragio(投票権なしの市民権)」に関して、関係史料を収集し、先行研究の成果に目を配りながら解釈を試みた。2.9月8日から19日までローマを訪れドイツ考古学研究所の図書館で日本では入手しがたい文献を閲覧し、Archeologia Lazialeのバックナンバーによってラティウムにおける主な遣跡の発掘調査に関する情報を系統的に収集した。またエトルリアの都市ウェイイのボルトナッチオのミネルヴァ神殿跡、ローマのヴィラ・ジュリア博物館、ローマ国立博物館を訪れ、発掘報告や考古学関係の論文の内容を実見によって検証した。なお今回は時間の関係で当初予定していたトゥスクルムの遺跡の調査は行えなかった。3.南エトルリア・ラティウム・カンパーニア地域におけるローマのヘゲモニー確立とカルタゴやギリシア植民市などで構成される西地中海世界の政治的状況に関して、研究成果の一部を現在二編の論攷にまとめつつある。そのうち「ムニキピウムの起源」は3月中に完成の予定。また「エトルリア人都市カエレのローマへの併合とcivitas s.s.の起源」も来年度の前半には完成させうる見込みである。実績報告書今年度は今回のプロジェクトの最終年にあたるので、過去2年間の研究成果をまとめると共に、その過程で新たに必要となった文献及び史料を収集することを中心に計画を立て、以下の実績をあげた。1.「ムニキピウム」の起源に関する論攷(「古代ローマのmuniceps -古代の学者が伝える定義の解釈を中心に-」)を完成させて『史学雑誌』に投稿した(第116編第2号に掲載)。更にローマによるエトルリア人都市カエレの併合とcivitas sine suffragio(投票権を伴わない市民権)の起源を扱った論攷を現在執筆している。2.2006年8月31日から9月12日まで、資料収集のためローマとミュンヘンに出張した。ローマではドイツ考古学研究所の附属図書館で考古学関係の研究誌のバックナンバーでピュルギ(カエレの外港)の神殿に関する最近の発掘報告を中心に収集を行うかたわら、前4世紀のラティウムの歴史で重要な役割を演じるラヌウィウム(ラヌヴィオ)とウェリトラエ(ヴェッレトリ)の遺跡と考古学博物館を訪れて実地に調査を行った。ミュンヘンでは、バイエルン国立図書館において研究の進捗に伴い新たに必要となったローマ史関係の研究文献を収集した。3.本研究の基本史料の一つであるリウィウス
顎関節症における筋緊張性抑制機能障害に関する研究

健常者および筋性顎関節症患者における、症状と筋緊張抑制機能(ES2)との関連性の検討を行った。ES2測定の概略;1、最大かみしめ中に電気刺激を与え、咬筋、側頭筋表面筋電図を記録した。2、筋電導出と同側の下顎神経を頤部で刺激した。3、ES2は筋電の原波形をAD変換しコンピューターに取り込み、10回分を正規化、平均処理し、刺激前50ms間の積分値と刺激後50msから50ms間の積分値を求め、その比から筋活動の抑制率を求めた。実験的筋痛誘発試験の概略;最大かみしめ力の10%程度で30分間、持続かみしめを行わせた。アルゴメーターで試験前後と24時間後に筋圧痛閾値を測定し、24時間後までの筋痛発現の有無と共に、筋圧痛の変化を評価した。以上の実験により得られたES2抑制率と筋症状との関連を検討した。結果;筋症状を主とする顎関節症患者のES2は緊張型頭痛と同様に、健常者と比較して抑制率が低下する傾向であった。またこのとき、ES2の潜時の長さおよび異なる筋での同期したES2の潜時に差が認められなかった。さらに筋性顎関節症患者群では対照群に比べて、ES2の抑制率が低いものが多く、さらに筋痛誘発試験により筋痛が生じたものが多かった。顎関節症における筋症状の発症原因あるいは永続化因子として中枢性筋緊張抑制機能の障害が関与している可能性が示唆されると共に、ES2は筋緊張抑制機能の評価検査になりうることが示唆された。
生体機能を有したヒトiPS細胞由来血液脳関門モデルの構築

1.ヒトiPS細胞由来血管内皮細胞の誘導これまで申請者らは、血管系列の分化発生過程を段階的にかつ単一細胞でも解析を可能とするマウスES細胞・マウスiPS細胞の新しい分化誘導法を確立した。また、この分化誘導系を用いて、セカンドメッセンジャーであるcAMPの分化発生過程における様々な役割を解明してきた。そこで我々は、これまでのマウスES細胞・マウスiPS細胞からの血管内皮細胞の誘導のノウハウを生かし、ヒトiPS細胞からの血管内皮細胞の誘導を試みた。様々な条件検討の結果、まず血管内皮細胞の前駆細胞を効率的に誘導することに成功した。血管内皮細胞の前駆細胞のマーカーであるVEGFII型受容体(KDR)陽性の細胞を80%以上誘導できる系を構築した。このKDR陽性細胞をFACSまたはMACSで純化し、cAMPやVEGFといった血管内皮細胞を誘導する因子を処置することにより、100%に近い血管内皮細胞の誘導に成功した。2.ヒトiPS細胞由来ペリサイトの誘導上記の血管内皮細胞の誘導法を応用し、ペリサイトの誘導を試みた。KDR陽性細胞を血清条件(血管内皮誘導因子なし)で培養することによりペリサイトを約100%誘導することに成功した。3.ヒトiPS細胞由来神経細胞の誘導ヒトiPS細胞より神経細胞を効率的に誘導する分化誘導系の構築を試みた。笹井先生らが開発した神経細胞誘導を参考にしてヒトiPS細胞からの神経細胞誘導を行い、効率的な神経細胞の誘導に成功した。4.ヒトiPS細胞由来アストロサイトの誘導ヒトiPS細胞よりアストロサイトを効率的に誘導する分化誘導系の構築を試みた。笹井先生らが開発した神経細胞誘導を参考にしてより長期培養およびPassageを繰り返すことでヒトiPS細胞からのアストロサイト誘導を行い、効率的なアストロサイトの誘導に成功した。脳を健康な状態に保つためには神経細胞を有害物質から守ることが重要であり、そのバリアーとして役割を果たすのが血液脳関門(Blood-Brain-Barrier; BBB)である。BBBは血管内皮細胞と、その周りをペリサイトや神経細胞、アストロサイトなどが取り囲むことで構成され、強固なタイトジャンクションを形成すると共に特異的なトランスポーターを発現し、物質の移送を厳密に制御することにより脳の恒常性を維持している。このバリアー機能は時として障害となりえる。すなわち、脳内への薬物の輸送を阻害する。これまでに我々は、ヒトiPS細胞より血管内皮細胞、ペリサイト、神経細胞、アストロサイトへの効率的な分化誘導法を確立した。iPS細胞より血管内皮細胞、ペリサイトの分化誘導はほぼ100%の確立で誘導することに成功している。本研究では、BBB形成に必要な血管内皮細胞、ペリサイト、神経細胞、アストロサイトを共培養することにより脳血管内皮細胞を誘導することを試みている。脳血管内皮細胞はqPCR,免疫染色等で解析している。さらに、iPS細胞より誘導した脳血管内皮細胞をトランスウェルの上部側、アストロサイトから誘導されるサイトカインが脳血管内皮細胞を成熟させることが報告されているため、iPS細胞より誘導したアストロサイトをトランスウェルの底面に接着させ共培養することにより、BBBモデルを作製する可能性を検討した。平成28年度の目標であった二次元血液脳関門モデルを構築することを試みている段階である。iPS細胞由来血管内皮細胞、ペリサイト、神経細胞、アストロサイトの共培養で脳血管内皮細胞の誘導を試みている。生体の血管内皮細胞は血流によるシェアストレスが常に作用している。血管内皮細胞はシェアストレスの変化を認識して、その形態や機能、また遺伝子発現の変化を伴う細胞応答を起こす性質がある。

これまでに、不死化した脳血管内皮細胞を用いて、培養液の還流によるシェアストレスによりBBBの機能的指標である経内皮電気抵抗が320倍増加することが報告されている。また、ラット成体のBBBにおける経内皮電気抵抗はin vitroにおけるラット由来の脳血管内皮細胞を用いた二次元BBBモデルと比較し、10100倍高値を示すことが知られ、同様に我々の二次元ヒトBBBモデルはラット成体の10分の1程度の値を示す。このことからBBBの成熟化には、還流によるシェアストレスが必要であると考え、還流可能なiPS細胞由来の三次元BBBモデルの構築を行う。さらに、脳血管内皮細胞の微細環境では、アストロサイトがend-footを伸ばし、脳血管内皮細胞を包囲することで、BBBの成熟化を促している。今までの研究で、アストロサイトの発生とBBBの成熟化の時期が相関していることが示されており、器質的・機能的にも両者が密接に相互作用していることが報告されている。そのため、BBBの微細環境を整えることにより、二次元培養では構築が不可能な、管腔構造を伴った三次元構造を形成することは、BBB成熟化及びより生体内環境を模倣した薬物透過性試験を行う上で重要である。これらの理由から、平成29年度の目標である三次元血液脳関門モデルの作製にすでに取り組んでいる。
人工現実感における立体視覚および立体聴覚の脳磁気・脳波計測

人工現実感を効果的に生成するには,受け手でもある生体の特性をよく知る必要がある。本研究では脳磁気などの測定を通じて,3次元的に広がりをもつ外的環境を知覚する脳内過程を調べた。方法としては,空間-時間分解能にすぐれる脳磁気計測を中心に据え,脳波あるいはPETなどからの情報を副次的に利用して脳内活動源位置を推定し,それをMRI画像上に比定した。感覚・弁別・認知活動を対象としてとり上げた。まず感覚のレベルでは仮現運動の知覚過程をとり上げ,短い時間感覚で呈示される視覚刺激が誘発する脳内過程を調べ,運動感覚がもたらされる場合には刺激呈示後約200msの視覚反応が視覚領内で前方かつ中央寄りに移動することを見出した。これは,外観から刺激が脳内の神経場の中で相互作用をひきおこしていることの反映であると考えられる。つぎに,知覚が成立した後に弁別を行う過程を,聴覚弁別課題を利用して調べた。具体的には,2種類の純音刺激によるオドボール手続きを用いた。その結果,刺激提示後280300msにかけて両上側頭溝に活動があり,300400msでは海馬・側頭葉・前頭前野などに活動が見られた。そのうちでも海馬は活動の中心的であり,弁別作業に重要な役割を果たしていると考えられる。また,立体認知において内的視覚操作を伴う左右手の視認時における脳内活動を測定した。これはすでにPETによって研究されているが,その情報を脳磁気測定に活かして空間-時間分解能を大幅に向上させたものである。その結果,左右手の判別に際しては運動系がその方略の一翼を担っていること,その活動時期は刺激受容後350msごろに始まることなどが示された。
空間的クラスタリング手法の開発とその都市・地域データへの実証的適用

本年度は、まず、昨年度まで開発してきた空間的クラスタリング手法が、より一般的な場合でも利用可能であるかどうか理論的に検討した。昨年度までのものは、メッシュデータというごく限られた形式の空間データにのみ適用可能なものである。しかし、ある条件を満たすように、空間オブジェクト間の隣接関係を定めることで、より一般的なベクター形式データに対しても、この手法が利用できることを示した。次に、空間的クラスタリングアルゴリズムを実装したプログラム開発を行い、数値例および地価公示データに対する適用を行った。そして、幾つかの好ましい性質を満たす部分領域への分割が得られることを明らかにした。より具体的には、第一に、群内分散によって部分領域の均質性を評価したとき、群内分散が非常に小さく押さえられていることを示した。第二に、隣り合う部分領域は、(属性値の点でみて)顕著に異なった性質を持ち、またその顕著さは統計的に有意であることを示した。また、既存研究のサーベイをさらに徹底し、より包括的なレビューに基づいた上で、本研究の位置づけや新規性を明らかにした。特に、地理学分野においては、AZP (Automatic Zoning Procedure)と呼ばれる空間的クラスタリング手法があるが、この手法との優劣比較を行った。そして、本研究で開発した手法は、局所最適な部分領域への分割ではなく、大局的最適であるという意味で優れていることを示した。また、建築・都市工学においては、各種情報量規準を援用し、空間的クラスタリングを行う手法が開発されてきた。そして、この種の手法との比較したとき、本研究で開発した方法は、ノイズ状の微細な部分領域を生み出しにくいという点で優れていることを示した。以上の研究内容をまとめた内容は、平成18年度内には公刊されていない。しかし、地理情報科学分野雑誌に投稿したものが、すでに受理されており、平成19年度には、審査付き学術論文として出版されることが決定している。本年度においては、まず、空間的クラスタリングの結果として生成される部分領域毎に、その中心となるべき特異箇所を検出するアルゴリズムを開発した。そして、メッシュデータというごく限られた形式のデータにおいて、これら特異箇所に接続関係を与え、ツリーグラフを生成するアルゴリズムの開発を行った。このツリーグラフの各リンク上に一つの切断点を設けることで、メッシュデータを部分領域に分割することができる。そこで、各部分領域の属性値が可能な限り均一であり、また、個々の部分領域が空間的に連担するような切断点の組み合わせを求める方法について検討した。その結果、研究に先立っては、任意の切断点の組み合わせにおいても、すべての部分領域が空間的に連担することを予想していたが、必ずしもそうではないことが判明した。そこで、空間的な連担性が満たされないような切断点の組み合わせを排除するよう、空間的クラスタリング法に対して修正を加えた。また、研究当初からの予想通り、切断点の組み合わせの比較計算回数は、何ら工夫をしない限り、極めて膨大になることが判明した。ただし、理論的検討を行った結果、ツリーグラフの位相構造上の特徴を用い、平均的には、多項式時間に収められることを示した。以上の成果については、都市計画学会、および、日本不動産学会において発表を行った。今後の課題としては、まず、空間的クラスタリング法を、より一般的な形式の空間データに適用可能に拡張することが考えられる。また、最悪時における計算量についても検討することも必要と考えている。
等比的に広範囲レベルの信号検出を可能とする多チャンネルランダムノイズ発生器の開発

本研究では,入力信号の有無だけしか判断できない低感度で単純な『しきい素子』を多数組み合わせ,また同時に各素子に対して,互いに相関のないノイズを加えるだけで高感度なセンシングを実現するため,これまで誰も試みたことがない多チャンネル・ランダムノイズ発生器の開発を目的とする.そこで,ホワイトノイズをロバストに発生しうる条件や得られるノイズの性質を位相幾何学および統計学的な観点から明らかにする.その結果に基づいて,回路を設計製作し,その動作確認後,多チャンネルノイズ発生器を構成し,実際にセンシングに応用し特性を評価する.本研究では,入力信号の有無だけしか判断できない低感度で単純な『しきい素子』を多数組み合わせ,また同時に各素子に対して,互いに相関のないノイズを加えるだけで高感度なセンシングを実現するため,これまで誰も試みたことがない多チャンネル・ランダムノイズ発生器の開発を目的とする.そこで,ホワイトノイズをロバストに発生しうる条件や得られるノイズの性質を位相幾何学および統計学的な観点から明らかにする.その結果に基づいて,回路を設計製作し,その動作確認後,多チャンネルノイズ発生器を構成し,実際にセンシングに応用し特性を評価する.
膜蛋白質の一分子計測に用いるリポソームの開発

本研究計画ではパッチクランプを行いながら膜蛋白質の一分子観察に使用可能なリボソーム系の開発を冒的とした.当初の計画では,電極の刺入を可能にするために,ゲル状の球体をまず作り,その周囲に脂質二重膜を透析法によって自発的に形成させる方法で作成する予定であったが,界面活性剤で可溶化した脂質はゲルの内部に浸透してしまい,透析を行っても表面に脂質二重層を形成することはできなかった.内部に脂質が浸透することのないガラス球では,表面に脂質膜が形成されることが蛍光性脂質による蛍光観察で確認されたので,やはりこの脂質分子の浸透が大きな問題の一つであることが確認された.また,ゲル状物質としてはアガロースやアクリルアミドを用いたが,アクリルアミドでは10μmのオーダーの比較的大きな球体を作ることが難しく,アガロースでは固すぎて電極の刺入がほとんど不可能という問題が生じた.脂質の浸透を押さえるには表面のゲル物質の密度を高くして稠密な構造を作る必要があると考えられ,それと電極の刺入が容易な柔らかい構造を作ると言うことは相反することになり,この点の難しさも浮かび上がった.これらの問題を解決するために,柔らかいゲル状物質の表面に予め作成した巨大なリボソームを付着させるという方法も試みたが,それでも脂質がゲル内に浸透する様に見える結果となった、この場合は,うまくいっても巨大リボソームを逆相蒸発などで作ることになるので膜蛋白の組み込みに難点がある。以上の様に残念ながら,様々な問題があり,これらに関する解決策を研究期間内に見いだすことはできなかった.しかし,膜蛋白質の一分子観察をリボソーム系で行うという目標自体の重要性が薄らいだわけではなく,今後も良いアイディアを考え出して模索してゆきたい.本研究は,膜蛋白質を容易に再構成でき,電気生理的研究(パッチ電極の刺入)が可能な大きさと丈夫さを兼ね備えた新しいリポソーム系を,ゲル様物質の表面を透析法によって脂質膜で覆うことにより作成して,最終的に膜蛋白質の一分子観察系に利用することを試みている.本年度は,アガロースでできたゲルの小球(直径50100μm)の表面にまず透析法によって脂質膜を付着させることを試みた.脂質の付着は蛍光性の脂質を添加して顕微鏡で観察することにより確かめた.その結果,脂質はゲル表面によく付着したが,ゲルの内部まで浸透してしまい,二重層にはなっていないことが,蛍光強度やFRAPの解析から明らかになった.そこで,ゲル表面の化学的性質の異なるものを試すため,市販の疎水性カラム用ゲル,陰イオン交換カラム用ゲル,陽イオン交換カラム用ゲル等について同様の操作を行った.更に脂質の付着方法についても,あらかじめ脂質のみで作成したリポソームを付着・融合させる方法を試みた.その結果,ゲルの表面の性質によって脂質の付着状況は確かに変化したが,二重層を作ることはできていない.そこで,最終目標からは遠ざかるが,ガラスの小球に対して,上記の方法で脂質を付着させたところ,ガラスには脂質は浸透しないので,表面だけに脂質が薄く観察された.FRAPにより流動性を調べようとしたが,励起光がガラスの球体で反射・散乱してしまい,この点に関しては確認できていない.当初の計画にあったアクリルアミドの球体については,調製が難しく.まだあまり試行を重ねていない.本研究計画ではパッチクランプを行いながら膜蛋白質の一分子観察に使用可能なリボソーム系の開発を冒的とした.当初の計画では,電極の刺入を可能にするために,ゲル状の球体をまず作り,その周囲に脂質二重膜を透析法によって自発的に形成させる方法で作成する予定であったが,界面活性剤で可溶化した脂質はゲルの内部に浸透してしまい,透析を行っても表面に脂質二重層を形成することはできなかった.内部に脂質が浸透することのないガラス球では,表面に脂質膜が形成されることが蛍光性脂質による蛍光観察で確認されたので,やはりこの脂質分子の浸透が大きな問題の一つであることが確認された.また,ゲル状物質としてはアガロースやアクリルアミドを用いたが,アクリルアミドでは10μmのオーダーの比較的大きな球体を作ることが難しく,アガロースでは固すぎて電極の刺入がほとんど不可能という問題が生じた.脂質の浸透を押さえるには表面のゲル物質の密度を高くして稠密な構造を作る必要があると考えられ,それと電極の刺入が容易な柔らかい構造を作ると言うことは相反することになり,この点の難しさも浮かび上がった.これらの問題を解決するために,柔らかいゲル状物質の表面に予め作成した巨大なリボソームを付着させるという方法も試みたが,それでも脂質がゲル内に浸透する様に見える結果となった、この場合は,うまくいっても巨大リボソームを逆相蒸発などで作ることになるので膜蛋白の組み込みに難点がある。以上の様に残念ながら,様々な問題があり,これらに関する解決策を研究期間内に見いだすことはできなかった.しかし,膜蛋白質の一分子観察をリボソーム系で行うという目標自体の重要性が薄らいだわけではなく,今後も良いアイディアを考え出して模索してゆきたい.
動作の時系列的規則性獲得の認知メカニズム:鳥をモデルとした研究

卵生の動物のメスにとって産卵量の調節は,限られた繁殖資源を配分投資し,自身とさらに子の適応度を最適化するという面で,重要な繁殖パラメータである.一般的に,卵1個に対する栄養投資量が多いほど子の生存率は高まる一方,メスには総投資量として大きな負担を強いることになる.また,一度の繁殖で産む卵は多いほうが,効率的に子の数を増やすことができ,適応度に寄与する可能性もあるが,他方で,育児・育雛のコストが大きくなり兄弟間競争が激化するぶん,メス自身や子の各個体にとって必ずしも利益となるとは限らない.そのため,産卵量の調節は,繁殖コンディションの影響を鋭敏に反映するのではないかと予測されている。このような産卵量の調節に関わるのが,繁殖コンディションやつがい相手オスの質である.ジュウシマツのような鳴禽類は,性淘汰形質として発声行動(歌)を求愛ディスプレイに用いる.そこでメスは,どのような歌をうたうオスとつがうと産卵投資を増加させるのか検討を行った.その結果,それぞれのメスがつがった相手の歌の音響特性が,初期発達期にさらされた歌とどれだけ似ているかどうかという指標が,卵重・一腹卵数・性比の増減に関連していた.メスの配偶投資に反映される選好性には,父親よりも,発達初期に社会交渉のあった非父親オスの歌の方が影響を与えていることが示唆された.このことは,初期聴覚記憶にもとづく性的刷り込み学習が繁殖投資に影響している一方で,近親交配を促進するような,すなわち父親の歌を選好するような傾向は無いことを示唆している.この結果については,学会において発表を行い,論文を準備中である.ジュウシマツのような鳴禽類は,晩成性の発達様式を持つため,未発達・未分化な状態で孵化し,その後性成熟に達するまでの短期間で急速な成長を遂げる.このため,身体形質や行動形質への初期発達コンディションの影響は著しい.特に鳴禽類オスは,求愛歌を発声学習によって発達初期に獲得し,成熟後の歌形質は繁殖成功に大きく影響することから,歌獲得に関わる固体発生要因に対して性淘汰圧が作用してきたと考えられる.本年度の研究においては次の二点に着目して研究を行った.(1)これまでの研究によって,ジュウシマツ母鳥の卵への栄養投資は産卵順に応じて勾配することが分かっている(母性効果)。そこで,このような母性効果が,子の歌行動獲得へ及ぼす影響を検討した.(2)ジュウシマツのオス雛は,主に父鳥の歌をモデルに歌を学習するが,他の成熟オスもモデルにすることがあることも分かっている.そこで,雛がどのような個体の歌をモデルとするかということと,モデルの歌の質には関連があるか検討した.これらの検討によって,次のような知見が得られた.(1)ジュウシマツ雛は,産卵順が早い卵に由来する個体ほどより複雑な歌を学習していることが分かり,このことは,卵に対する母鳥の栄養投資が,初期発達期の歌学習に関わる神経発達に寄与していることを示唆する.(2)ジュウシマツ雛は,父親の歌の質が低い時には,他の成熟オスからも歌を学習しようとする傾向を示した.このことは,雛の歌学習がモデルとなる成熟オスの歌の「質」に基づいており,性淘汰圧によって「質」のより高い歌を学習するような行動戦略が進化してきたのではないかと,考えられる.ジュウシマツのような晩成性鳴禽類は,身体形質や行動形質,認知機能への初期発達コンディションの影響が著しい.特に鳴禽類オスにおいては,求愛歌を発声学習によって発達初期に獲得し,歌形質は繁殖成功に大きく影響することから,歌獲得に関わる個体発生要因に対して性淘汰圧が作用してきただろう.またメスにとっても,繁殖に関する投資配分は子の適応度と大きく結びつくため,オス歌に対する選好がメスの繁殖投資に影響している可能性は高い.このような見地からこれまでに行ってきた研究により,本年度までに以下の(1)(3)のような成果を得ることができた.(1)ジュウシマツ雛は,一腹内での産卵順が早い卵に由来する個体ほど,より複雑な歌を学習していることが分かった.このことは,卵に対する母鳥の栄養投資が,歌学習に関わる神経発達に寄与していることを示唆する.(2)ジュウシマツ雛は,父親の歌の質が低い時には,他の成熟オスからも歌を学習しようとする傾向を示した.このことは,雛の歌学習がモデルとなる成熟オスの歌の「質」に基づいており,性淘汰圧によって「質」のより高い歌を学習するような行動戦略が進化してきたのではないかと考えられる(3)母鳥は,オスの歌形質に応じて,産卵に関する投資を調節していた.オスの身体コンディションの指標となる歌のバウト長が長いほど,卵サイズは大きく,孵化雛の性はオス(育雛にコストがよりかかる性)である傾向が高かった.よって,好ましいオスとつがった時にメスは,繁殖投資を増大させているといえるだろう.これらのうち,(1)については論文として刊行され,(2)(3)各々については国際学会および国内学会において発表を行った.とりわけ学会誌に発表された(1)の研究内容に関しては,個体発生の非常に初期の効果がのちの認知発達に影響を与えることを示唆しており,Nature誌からの取材を受けてオンライン版に記事が掲載されるなど,高い注目を集めた.

卵生の動物のメスにとって産卵量の調節は,限られた繁殖資源を配分投資し,自身とさらに子の適応度を最適化するという面で,重要な繁殖パラメータである.一般的に,卵1個に対する栄養投資量が多いほど子の生存率は高まる一方,メスには総投資量として大きな負担を強いることになる.また,一度の繁殖で産む卵は多いほうが,効率的に子の数を増やすことができ,適応度に寄与する可能性もあるが,他方で,育児・育雛のコストが大きくなり兄弟間競争が激化するぶん,メス自身や子の各個体にとって必ずしも利益となるとは限らない.そのため,産卵量の調節は,繁殖コンディションの影響を鋭敏に反映するのではないかと予測されている。このような産卵量の調節に関わるのが,繁殖コンディションやつがい相手オスの質である.ジュウシマツのような鳴禽類は,性淘汰形質として発声行動(歌)を求愛ディスプレイに用いる.そこでメスは,どのような歌をうたうオスとつがうと産卵投資を増加させるのか検討を行った.その結果,それぞれのメスがつがった相手の歌の音響特性が,初期発達期にさらされた歌とどれだけ似ているかどうかという指標が,卵重・一腹卵数・性比の増減に関連していた.メスの配偶投資に反映される選好性には,父親よりも,発達初期に社会交渉のあった非父親オスの歌の方が影響を与えていることが示唆された.このことは,初期聴覚記憶にもとづく性的刷り込み学習が繁殖投資に影響している一方で,近親交配を促進するような,すなわち父親の歌を選好するような傾向は無いことを示唆している.この結果については,学会において発表を行い,論文を準備中である.
アジア・太平洋諸国の都市住民の健康と生存の比較生態学研究

人口の急増、資源の集中、さらには工業化といった現象に特徴づけられる都市化が、近年、欧米先進国のみならずアジア・南太平洋諸国においても急速に進行し、それに伴う物理的あるいは心理社会的な生活環境の急変が、都市に生きる人々の心身の健康を著しく脅かす可能性が問題とされている。こうした現状に対してWHOや各国政府は様々な対策に乗り出してはいるが、都市化がもたらす健康影響の系統的な把握とそれへの対応は、未だ十分とはいい難い。そこで本研究では、我国及びアジア・南太平洋地域の開発途上国の大都市に居住する人々の健康状態を系統的に評価し、これらの地域における保健政策の向上に有益な基礎資料を提供することを目的として、東大式健康調査票(The Todai Health Index:THI)を用いた健康状態の評価および毛髪中の水銀濃度の測定を主として行った。対象は、アジア・南太平洋地域の5つの首都、即ち東京、マニラ、クラアルンプル、ソウル、ポ-トモレスビ-に居住する健康リスクの比較的高い集団としての妊婦である。平均年齢は東京群(N=54)が33.2歳と最も高く、ついでマニラ群(N=50)とソウル群(N=50)がそれぞれ28.2歳と28.1歳、クアラルンプル群(N=50)が最も低く25.6歳であった。平均妊娠期間は各群ほぼ等しく2023週であった。また、各首都都市での平均居住年数は各群とも10年前後であった。デ-タの収集は東京では母親学級の場、その他の都市では外来の待ち時間を利用して行われた。研究の主旨を説明した後、THIの記入を求め、同時に毛髪を採用した。なお、THIの韓国語版は既に発表されており、本研究のためにタガログ語版、マレ-語版、そしてピジン語版が新たに作成された。無回答項目のみられたポ-トモレスビ-群を除く各対象群のTHIの回答を分析した結果、次の点が明かとなった。即ち、マニラの妊婦に呼吸器に関する訴えが多く、東京やソウルの妊婦には眼や皮膚についての訴えが多かった。またソウルの妊婦には口腔や肛門に関する自覚症状も多くみられ、各対象都市の生活環境の違いが自覚症状の出現にある程度関連していることが示唆された。「パ-ソナリティ」に関しては、マニラやクアラルンプルの妊婦に虚構性が、また東京の妊婦に神経質傾向が比較的強くみられ、国民性の違いが反映されたものと考えられた。THIに関連する要因として、年齢、妊娠期間、同居家族数、および収入が見い出されたが、関連パタ-ンに共通性は乏しく、むしろ異質性が浮き彫りにされた。一方、毛髪中の水銀濃度に関しては、最も高い値を示したのが東京群で平均3.2μg/g(±1.6)、続いてクアラルンプル群とポ-トモレスビ-群がそれぞれ平均1.6μg/g(±0.7)と1.5μg/g(±0.8)であった。最も低かったのはマニラ群およびソウル群で、ともに平均0.7μg/g(±0.5)であった。一般の健常者における体内の水銀は、魚の摂取による寄与が最も大きいことが知られているが、各群における平均水銀濃度の違いは、それぞれの国の食習慣の違いが反映されたものと推察された。また本研究では、THIおよび毛髪中水銀濃度の健康指標としての有効性がアジア・南太平洋地域の対象に対しても認められるか否かについても検討したが、これらの指標は概ね有効であることが示唆された。ただし、パプアニュ-ギニア人に対するTHIの施行に関しては、いくつかの質問項目を修正すると同時に回答の仕方を工夫する必要があることが明かとなった。各種テクノロジ-の発達によって地球が急速に縮小化し、人々の交流が活発化している今日、都市化に伴う健康問題は各国個別の対応だけでは解決不可能である。今後は、生活環境や都市化過程に関するより詳細なデ-タを収集して、グロ-バルな視点から、THIや毛髪中水銀濃度によって示される健康水準と居住環境や生活様式といった生態学的緒条件との関連性について検討を加える必要がある。その中でアジア・南太平洋地域における保健政策の向上に有益な基礎資料の提供が可能となるであろう。

平均年齢は東京群(N=54)が33.2歳と最も高く、ついでマニラ群(N=50)とソウル群(N=50)がそれぞれ28.2歳と28.1歳、クアラルンプル群(N=50)が最も低く25.6歳であった。平均妊娠期間は各群ほぼ等しく2023週であった。また、各首都都市での平均居住年数は各群とも10年前後であった。デ-タの収集は東京では母親学級の場、その他の都市では外来の待ち時間を利用して行われた。研究の主旨を説明した後、THIの記入を求め、同時に毛髪を採用した。なお、THIの韓国語版は既に発表されており、本研究のためにタガログ語版、マレ-語版、そしてピジン語版が新たに作成された。無回答項目のみられたポ-トモレスビ-群を除く各対象群のTHIの回答を分析した結果、次の点が明かとなった。即ち、マニラの妊婦に呼吸器に関する訴えが多く、東京やソウルの妊婦には眼や皮膚についての訴えが多かった。またソウルの妊婦には口腔や肛門に関する自覚症状も多くみられ、各対象都市の生活環境の違いが自覚症状の出現にある程度関連していることが示唆された。「パ-ソナリティ」に関しては、マニラやクアラルンプルの妊婦に虚構性が、また東京の妊婦に神経質傾向が比較的強くみられ、国民性の違いが反映されたものと考えられた。THIに関連する要因として、年齢、妊娠期間、同居家族数、および収入が見い出されたが、関連パタ-ンに共通性は乏しく、むしろ異質性が浮き彫りにされた。一方、毛髪中の水銀濃度に関しては、最も高い値を示したのが東京群で平均3.2μg/g(±1.6)、続いてクアラルンプル群とポ-トモレスビ-群がそれぞれ平均1.6μg/g(±0.7)と1.5μg/g(±0.8)であった。最も低かったのはマニラ群およびソウル群で、ともに平均0.7μg/g(±0.5)であった。一般の健常者における体内の水銀は、魚の摂取による寄与が最も大きいことが知られているが、各群における平均水銀濃度の違いは、それぞれの国の食習慣の違いが反映されたものと推察された。また本研究では、THIおよび毛髪中水銀濃度の健康指標としての有効性がアジア・南太平洋地域の対象に対しても認められるか否かについても検討したが、これらの指標は概ね有効であることが示唆された。ただし、パプアニュ-ギニア人に対するTHIの施行に関しては、いくつかの質問項目を修正すると同時に回答の仕方を工夫する必要があることが明かとなった。各種テクノロジ-の発達によって地球が急速に縮小化し、人々の交流が活発化している今日、都市化に伴う健康問題は各国個別の対応だけでは解決不可能である。今後は、生活環境や都市化過程に関するより詳細なデ-タを収集して、グロ-バルな視点から、THIや毛髪中水銀濃度によって示される健康水準と居住環境や生活様式といった生態学的緒条件との関連性について検討を加える必要がある。その中でアジア・南太平洋地域における保健政策の向上に有益な基礎資料の提供が可能となるであろう。平成2年6月2729日に,海外の分担当を含む全研究者が出席する会合を東京で開催し,既に合意していた基本枠組みに沿いながらも具体的な研究の進め方について調整を行った。その結果,ソウル,クアラルンプル,マニラ,ポ-トモレスビ-,東京の5都市について共通の調査研究事項として,当初から予定していた質問紙調査のほかに客観的な健康評価として頭髪を収集しその元素含有量も測定することとした。対象者には,各都市で少なくとも50名の妊婦を含むこととした。この理由は,もっとも健康リスクが高く都市住民の健康調査の対象として適しているためである。この会合の後,