hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
原発事故による放射性物質拡散が農山漁村の自然資源利用に与えた影響とその対応

前年度は被災地域における薪利用・シイタケ原木利用・野外レクリエーション利用や野生動物管理の実態、有機農家の地域資源利用などについて調査を実施できた。放射性物質拡散の影響としてシイタケ原木として地元の里山利用ができなくっていること、狩猟者が狩猟を行う地域を変更している例があること、有機農家がその農業生産の中で地域資源の循環的利用をやめざるを得なくっている例などが確認された。またこうした影響の回避において、生産物販売の側面では原料の他所からの入手といった生産は再開すれども地域資源との関係性の切断が起きていること、また「風評」的被害の回避においては顧客との緊密なコミュニケーションなどが重要であることが明らかとなった。ただし、こうした産業的な生業と異なり、マイナーサブシステンス的な地域資源利用程被害がありつつも補償などがなされていない点や被害からの回復が難しい点なども明らかとなりつつある。また海外における調査では、汚染はいまだ継続中でありつつも、日本における原発周ほどの高濃度汚染でない地域においては、おおむね資源利用が回復しつつあることも確認できた。具体的には西ヨーロッパ中部地域では一部キノコや野生鳥獣利用に制限があるものの、日常的な森林利用などにおいてはほとんど意識されておらず、専門家レベルの認識も同様であっつた。今年度は調査対象を絞り込んで深めつつ、昨年度調査実績の報告・論文化を並行して進める予定である。今年度は研究実績の概要で述べたように、当初予定よりも幅広い分野(原木シイタケ・薪・野生動物・野外レクリエーション・有機農家の資源利用など)において調査を行うことができたことから計画以上に研究を進展できたものと判断している。その結果として、放射性物質拡散が農山漁村における種々の自然資源・地域資源利用に広範に影響を及ぼしていることが明らかとなりつつある。また、そうした影響は商品生産的地域資源利用の取り組みとマイナーサブシステンス的地域資源利用の取り組みでは異なる離京をもたらしていることも明確になりつつあり、自然科学的に数値で把握可能な放射性物質汚染状況とは別に被災地域における自然と人間の関係性の質的な部分への着眼を強めることの重要性が明らかになったといえるだろう。こうした点に鑑みて、今年度予定よりも幅広く得ることのできたデータの解析を順次行い、順次報告・論文化などをすすめたいと考えている。昨年度の調査が予定よりも進んだため、前年度のデータ解析を着実に進め、報告や論文化に力を入れたい。前年度の調査が予定よりも進んだものの、それ自体が新たな調査課題を指名してくれている点もあり、また継続的調査の重要性に鑑みて、今年度も被災地における聞き取り調査を着実に進めていく予定である。また前項で触れたように「被害」は放射性物質による汚染状況の濃淡のみによって現れるものではなく、被災地域における地域住民の自然資源・地域資源との関係性のあり方によっても大きく左右されることが明らかとなっており、こうした点に着目しつつ、さらに調査を継続していく予定である。

また前項で触れたように「被害」は放射性物質による汚染状況の濃淡のみによって現れるものではなく、被災地域における地域住民の自然資源・地域資源との関係性のあり方によっても大きく左右されることが明らかとなっており、こうした点に着目しつつ、さらに調査を継続していく予定である。ごくわずかな端数のため使い切らず次年度に繰り越した。
資源循環の一環としての環境保全型酪農の形成・展開条件に関する研究

農業、とくに酪農業は本来、地域とともに共生・共存することができ、個別経営として循環システムを形成しうる産業である。或いは、地域レベルの自然環境や地域複合システムのなかに位置付けしやすい産業である。しかし、経済のグローバル化の進行に伴い経済性の追求による経営規模の拡大が求められ、地域内で安定的に存続できる生産規模の限界を越えるような状況がみられる。この問題を解決するためには、自然と人間との共生の中で安定的な生産が技術的及び経済的に存続できる個別酪農循環システムを実現して行かねばならない。個別酪農経営内でふん尿等が活用しきれない場合には、地域的な循環システムも構築する必要がある。このような認識から、本研究では生産技術的視点と経営経済的視点を統一的にとらえ環境保全型酪農の形成・展開条件を検討した。具体的には、道内畑地型酪農地帯と草地型酪農地帯、及び府県の土地利用型酪農地帯と都市近郊型酪農地帯の調査、さらにデンマークの研究者ヒアリングや中国杭州市の現場研修・資料収集より考察した。加えて酪農学園大学と帯広畜産大学での生産技術的・実験的な検討を行った。その結果、個別酪農における資源循環を考慮した環境保全型酪農が展開するためには、地域的な連携・交換システムや、酪農のふん尿活用のひとつとしてのバイオガス利用システム、さらにこれらを含む地域的な支援システムの形成が必要であることを明らかにした。個別酪農経営は個別で資源循環システムを形成するか、個別でできない場合には、地域的な資源循環システムを形成することが、環境保全型酪農の存続にとって不可欠である。その成立・展開のためには、適切な規模を考え、堆肥施設の整備やバイオガス利用システム等を考慮に入れた支援システムを形成する必要がある。農業、とくに酪農業は本来、地域とともに共生・共存でき、個別経営として循環することができる。或いは、専業化が進行しても地域の自然循環・地域複合化のなかに位置付けしやすい産業である。しかし、現状では経済のグローバル化の進行によって経済性の追求による生産経営規模の拡大が求められ、地域内で安定的に存続できる生産規模の限界を越えるような状況にある。この問題を解決するためには、自然と人間との共生の中で生産できる個別酪農循環システムを実現していかねばならない。個別酪農経営内でふん尿等が活用しきれない場合には、地域的に処理・活用できうる循環システムも明確にする必要がある。本研究では、これらの酪農経営の実態と問題点を解明し、生産技術的、及び経営経済的な統一的な視点から環境保全型酪農の形成・展開条件を調査検討した。具体的には、1年目には従来の研究成果を確認しながら、道内畑地型酪農地帯の十勝酪農と草地型酪農地帯の根釧酪農、及び府県の土地利用型酪農地帯の九州酪農(農家・家族経営法人)の調査、及び関係機関・団体の調査と検討を行った。さらに、デンマークの研究者からの報告、及び中国杭州市での持続型酪農についての現場研修・資料収集と研究者によるレビューを受けた。加えて酪農学園大学と帯広畜産大学での生産技術的・実験的な検討を担当者を中心に行った。これを通じて、個別酪農での資源循環を考えた環境保全型酪農の条件、さらに他の稲作や畑作との連携や、酪農のふん尿活用のひとつとしてのバイオガスシステム、バイオマス再生エネルギー活用システム、さらにこれらを含む地域的な支援システムのなかでの環境保全型酪農の形成・展開条件についての検討を行った。表記の研究課題に沿って、本研究では、今日の酪農経営の問題点を解明し、生産技術的、及び経営経済的な統一的な視点から環境保全型酪農の形成・展開条件を検討した。具体的には、1年目の成果を踏まえ、道内畑地型酪農・十勝の鹿追町酪農や網走の湧別町酪農、草地型酪農の根釧の別海町酪農、府県の都市近郊酪農の京都八木町酪農の実態調査と、これに関連する関係機関・団体の調査研究を行った。

さらに、昨年の中国杭州市に引き続き、デンマークでの持続型酪農についての現場研修・資料収集と研究者によるレビューを受けた。加えて酪農学園大学と帯広畜産大学での生産技術的・実験的な研究を担当者を中心に検討した。これを通じて、個別酪農での資源循環を考えた環境保全型酪農の条件、地域的な連携・交換システムや、酪農のふん尿活用のひとつとしてのバイオガス利用システム、さらにこれらを含む地域的・公益的な農業・酪農支援システムのなかでの環境保全型酪農の形成・展開条件についての検討を行った。ここから個別酪農経営としては、個別で資源循環システムを形成するか、個別でできない場合には、地域的な資源循環システムを形成するのが、環境保全型酪農の存続で大切なことである。その成立・展開のためには、適切な規模を考え、堆肥施設の整備やバイオガス利用システム等を考慮にいれて支援システム・外部組織の支援システムを形成する必要がある。しかし、バイオガス利用システムの形成成果はまだ日本では十分でなく、評価しにくい状況であり、これを評価していくこと・評価システムを確立していくことが今後の課題でもある。また、大規模化の進行のもとで、どのように地域循環システムを形成していくか、どのように位置付けていくかを明確にすることも今後の課題である。
軟骨再生を目指したＣＴＧＦ／ＣＣＮ２発現促進因子の同定とその応用

軟骨細胞においてCTGF/CCN2発現はグルココルチコイドの作用によって促進されることが過去の我々の研究で明らかとなっていた。本研究はその作用メカニズムを明らかとすることを目的に行った。DNAマイクロアレイ、real-time PCR、RNAi、DNA transfection法などの手法を用いた結果、軟骨細胞に副腎皮質ホルモンの1つである糖質コルチコイドが作用するとCTGF/CCN2と供に、脂肪細胞分化に必須の転写因子として知られているCEBPB、CEBPD遺伝子の発現が促進されCTGF/CCN2はCEBPB、CEBPDによって転写調節されていることが示唆された。また細胞イメージアナライザーを用いて、軟骨細胞内にこれら遺伝子を強制発現させ、細胞内局在を検索したところ、CTGF/CCN2、CEBPB、CEBPDは同様の細胞内局在を示すことが示唆された。続いてWestern blot法などの手法を用いて検索したが、タンパク質レベルではCEBPB、CEBPD強制発現によるCCN2/CTGFタンパク質の発現変化は明らかではなかった。今回の研究結果を元にして、CEBPB、CEBPDがCTGF/CCN2をコントロールしているメカニズムを、さらに明らかにすることによって、CEBPB、CEBPDを介してCTGF/CCN2の発現をコントロールし軟骨の成長・分化を導くことが可能となり、軟骨再生の鍵となる可能性があるものと考えている。前年度では軟骨細胞に副腎皮質ホルモンの1つである糖質コルチコイドが作用するとCTGF/CCN2と供に、CEBPB、CEBPD遺伝子の発現が促進されることが明らかとなり、CTGF/CCN2はCEBPB、CEBPDによって転写調節されている可能性があると考えられた。そのため、CEBPB、CEBPD遺伝子のRNAiおよびDNA transfectionによる強制遺伝子発現の手法を用い、転写調節の有無を検索した。本年度では前年度に引き続き行った実験結果よりCTGF/CCN2がCEBPB、CEBPDによって発現調節されている可能性が示唆されたため、それをさらに確認するため細胞イメージアナライザーを用いて軟骨細胞様細胞株HCS-2/8細胞にCTGF/CCN2、CEBPB、CEBPD遺伝子を導入して強制発現させ、細胞内での発現局在を調べた。その結果、CTGF/CCN2、CEBPB、CEBPD遺伝子が細胞内で同様の局在を示すことが示唆された。この結果よりCTGF/CCN2がCEBPB、CEBPDによって発現調節されている可能性がさらに示唆された。次にタンパク質レベルでCEBPB、CEBPDによるCCN2/CTGFの発現調節が行われるか否かをWestern blot法により検索した。その結果、CCN2/CTGFタンパク質の発現変化は明らかではなかった。この結果よりCCN2/CTGFはそのタンパク質発現までの過程においてCEBPB、CEBPDの因子が関わっている可能性が示唆された。今回の研究結果を元にCEBPB、CEBPDが直接CTGF/CCN2発現をコントロールしているメカニズムをさらに明らかにすることによって、CEBPB、CEBPDを介してCTGF/CCN2をコントロールし軟骨の成長・分化を導くことが可能となり、これが軟骨再生への鍵となる可能性がある。軟骨細胞においてCTGF/CCN2発現はグルココルチコイドの作用によって促進されることが過去の我々の研究で明らかとなっている。そこで本年度はまず、DNAマイクロアレイの手法を用い、軟骨細胞にグルココルチコイドを作用させた際の発現変動遺伝子、111個を同定した。これらの遺伝子についてin silicoで検索を行い、CTGF/CCN2に関わりの深いと推測される遺伝子として、脂肪細胞分化に必須の転写因子として知られているCEBPB、CEBPDの2つの遺伝子をピックアップした。続いて、real-time PCR法を用いてその遺伝子発現変動を定量的に解析し、これら遺伝子の発現促進を確認した。つまり、軟骨細胞に副腎皮質ホルモンの1つである糖質コルチコイドが作用するとCTGF/CCN2と供に、CEBPB、CEBPD遺伝子の発現が促進されることが明らかとなった。この結果よりCTGF/CCN2はCEBPB、CEBPDによって転写調節されている可能性があると考えた。

これを検索するため、CEBPB、CEBPD遺伝子のRNAiおよびDNA transfectionによる強制遺伝子発現の手法を用いた。この手法に必要なsiRNAと強制発現ベクターを作成し、行った実験結果よりCTGF/CCN2がCEBPB、CEBPDによって発現調節されている可能性が示唆された。CCN2/CTGFは軟骨の成長・分化・組織再生因子として働くことが過去の我々の研究より明らかとなっており、今回の研究結果を元にCEBPB、CEBPDが直接CTGF/CCN2発現をコントロールしていることが明らかとなれば、CEBPB、CEBPDを介してCTGF/CCN2をコントロールし軟骨の成長・分化を導くことが可能となり、これが軟骨再生への鍵となる可能性がある。CEBPBおよびCEBPDの強制発現ベクターの作成が極めて困難であったことと、RNAiの実験系確立も困難であったため、その作成と実験系の確立に予想以上の時間がかかってしまったため。NCRFまたはNCRFimを特定し得なかった場合、いったんグルココルチコイド(デキサメタゾン;以下Dexと略す)から離れ、これまでとは逆の戦略をとる。つまりCTGF/CCN2遺伝子発現を誘導する小分子化合物、orphan ligandライブラリーをスクリーニングしCTGF/CCN2を特異的に引き出す分子を同定する。得られた分子については、その作用メカニズムを分子細胞生物学的通法に従って解析する。それに並行して4、5で述べた方法論に基づき、その軟骨再生効果を検討する。この方法そのものはDexと無関係だが、新たに見出された因子による、軟骨細胞における遺伝子発現プロファイルの変化を、予備実験のDexのものと比較することはCTGF/CCN2をとりまくシグナルパスウェイに新たな知見を加える。1、CEBPB、CEBPDを含め、CTGF/CCN2の発現促進に直接作用する遺伝子を同定し、それを新規のCTGF/CCN2関連因子(New CTGF/CCN2 related factor:以下、NCRFと略す)とする。2、同定したNCRFの軟骨細胞での局在・動態・機能をin vitroで解析し、軟骨代謝における役割を解析する。3、NCRFの軟骨細胞分化における役割をin vitroで機能解析する。4、NCRFを介してCTGF/CCN2を特異的に誘導する分子(NCRF induced molecule:以下、NCRFimと略す)を探索する。5、実験動物でNCRFまたは4で見出された分子が軟骨再生機能を有するか否かを検証する。
光機能性バルクシリカガラスの液相合成法の開拓

広い透明領域、高い機械的強度と化学的安定性という、光学材料として優れた性質をもつシリカガラスの液相合成法の開発を行った。乾燥・焼結時に亀裂が生じやすく、大きなサイズの材料(バルク)が得にくいという液相合成法の短所を克服し、低SiOH基濃度シリカガラス、LaF_3ナノ結晶分散シリカガラス、希土類イオン高濃度ドープシリカガラスなどの光機能性シリカガラスの合成法を確立するとともに、ポリシルセスキオキサン液体、紫外透明有機無機ハイブリッドガラスなどシリカ系新材料の合成にも成功した。シリカガラスは広い透明領域、高い強度と化学的耐久性を併せ持つ優れた光学材料であり、希土類イオンなどの発光中心をドープすることで、ファイバーレーザーなどの機能性発光材料が実現されている。しかし、シリカガラスは希土類イオンを溶解しにくく、それらの凝集が起こりやすいため、希土類イオンの高濃度ドープによる小型化・高性能化は困難である。本研究者らは最近、液相合成法の一種であるゾル-ゲル法によって試薬使用量の削減と合成時間の短縮が可能であることを示してきた。この手法を発展させ、希土類イオンが高濃度均一分散したシリカガラスの合成、発光強度を減少させる大きな原因となるSiOH基の低減、フッ化物との複合材料であるフッ化物ナノ結晶ドープシリカガラスの合成、などに取り組んだ。リンは、希土類イオンを溶媒和し、そのシリカガラスへの溶解を促すことが知られていたが、前駆体溶液中で希土類イオンと反応して沈澱を生じることが多く、希土類-リン共ドープシリカガラスの液相合成例はこれまでなかった。今回、POH基を含まない化合物をリン源とすることで沈澱生成を抑制し、希土類イオンをSiに対して2at.%と高濃度に含むシリカガラスの液相合成に成功した。緑色の発光を示すTb^<3+>イオンドープガラスでは、Tb^<3+>イオン濃度に比例して発光強度が増大したことから、濃度消光の影響は小さく、希土類イオンが均一分散していることが示唆された。あわせて、この手法はNd^<3+>, Ho^<3+>, Er^<3+>Eu^<3+>イオンなど、他の希土類イオンを含むシリカガラスの作製に一般化できることを示した。また、液相フッ素ドープによって、気相合成法によるシリカガラスにほぼ匹敵する低SiOH基濃度のフッ素ドープシリカガラスが得られること、従来の手法に比べて大幅に短い時間でアップコンバージョン蛍光体であるEr^<3+>ドープLaF_3ナノ結晶ドープシリカガラスが合成できることを示した。前年度、シリカガラスへの希土類イオンの溶解を促進する元素としてリンを選択し、これまで報告例のない、希土類イオンをSiに対して2mol%と高濃度に含み、かつ透明性に優れた希土類イオン-リン共ドープシリカガラスの合成法を確立した。Tb^<3+>-リン共ドープ試料において確認された明るい緑色発光について詳しく調べるため、発光寿命測定を行った。発光減衰曲線は単指数関数的であり、また発光寿命はTb^<3+>イオン濃度に依存せず一定であった,一方、Tb^<3+>イオンを単独ドープした場合は発光寿命が大幅に短くなり、かつ発光減衰曲線も単指数型から大きく外れたことから、リンの共ドープによって希土類イオンを効果的に溶媒和できることが確かめられた。また、リンとならんで希土類イオンの溶媒和を促進する元素として知られているアルミニウムに本研究課題の液相合成法を適用し、希土類-アルミニウム共ドープシリカガラスも従来の手法に比べて短時間で合成できることを確認した。本研究課題の目標のひとつは、シリカガラスの液相合成の際に多用されてきたアルコールをはじめとする共溶媒を使用せず、かつ亀裂のないバルクシリカガラスを得るために従来使用されてきた高濃度の酸や高分子などの添加剤も不要な低環境負荷プロセスを開発することであったが、その過程で、シリカガラスの合成に用いてきた4官能アルコキシドの代わりに、Siに有機官能基が1つ結合した3官能アルコキシドを用いて無共溶媒合成を行うと、一般式RSiO_<3/2>で表される有機無機ハイブリッド液体が得られることを見出した。この一般式を有する材料(ポリシルセスキオキサン、PSQ)はほとんどの場合固体であるが、これが液体として得られたことで、成膜、成形、他の試薬との混合などが容易になり、その利用価値が広がると期待される。Rとしてアルキル基を有するPSQ液体からは紫外透明性に優れたPSQガラスが合成できることを示した。
心不全における心腎連関のメカニズム－機能的腎予備力評価からのアプローチ－

心不全における腎機能障害は重要な予後規定因子であるが、腎機能障害が心不全の病態にどのような影響を持っているかについては不明な点が多い。本研究では、心不全のうち特に拡張不全患者における機能的腎予備力評価を、腎血流ドプラを用いた生理学的指標、探索的研究による生化学的代謝指標を用いて行い、腎動脈抵抗が拡張不全患者で増加しており、また特異的な免疫因子の拡張不全患者血中での増加が認められ、心機能と関連があることがわかった。本研究の目的は、機能的腎予備力評価を、腎血流ドプラを用いた生理学的指標、メタボローム解析を用いた探索的研究による生化学的代謝指標を用いて行うことで、心不全における心腎連関のメカニズムを解明することである。腎血流ドプラ法によるresistance index(RI)=(最大収縮期血流速-拡張末期血流速)/収縮末期血流速を機能的腎予備力評価方法として用い、CKD患者および心不全患者に対しての臨床研究を継続している。研究デザインは観察研究で、外来通院患者でeGFR 1559 (CKD stage 24)の患者群(CKD群)とFramingham Heart Studyの心不全診断基準を満たし、心不全での入院歴がある患者群の2群で心エコー検査時に腎血流ドプラ評価を行った。アウトカム変数を腎エコーによる腎機能指標(RI)とし、説明変数として年齢、性別、身長、体重、心エコーデータ、採血データ、内服薬について解析を行っている。心不全群でRI値は有意に高値であり、左室拡張機能障害指標とRI高値には関連を認めた。また心不全患者で拡張不全患者と収縮不全患者に分けた場合のRI値の意義についても検討を行っている。高血圧性心不全ラットモデルの尿、血液サンプルを用いたメタボローム解析から心不全との関連物質候補を決定した。キャピラリー電気泳動法(CE)と飛行時間型質量分析法(TOFMS)と組み合わせたCE-TOFMS法を用いた検討から、食塩感受性と心不全の関連候補物質を見つけ、その機能解析をすすめるため、心不全モデルラットに対する投与実験を行い、心不全発症抑制効果があるという結果を得た。またその心不全発症抑制効果には心臓線維化の抑制が関与しておりその機序についてさらに検討を進めている。機能的腎予備力評価方法としてresistance index(RI)=(最大収縮期血流速-拡張末期血流速)/収縮末期血流速を腎血流ドプラ法により評価した。研究デザインは観察研究とし、外来通院患者でeGFR 1559 (CKD stage 24)の患者群(CKD群)とFramingham Heart Studyの心不全診断基準を満たし、心不全での入院歴がある患者群の2群で心エコー検査時に腎血流ドプラ評価を行った。アウトカム変数を腎エコーによる腎機能指標(RI)とし、説明変数として年齢、性別、身長、体重、心エコーデータ、採血データ、内服薬について解析を行った。心不全群でRI値は有意に高値であった。また左室拡張機能障害指標とRI高値には関連を認めた。また、生化学的代謝指標を検討するため我々が確立した高血圧性心不全ラットモデルの尿、血液サンプルを用いてメタボローム解析を行い、心不全との関連物質を探索した。メタボローム解析ではキャピラリー電気泳動法(CE)と飛行時間型質量分析法(TOFMS)と組み合わせたCE-TOFMS法を用いて、約600程度の陽イオン性代謝物質、陰イオン性代謝物質,ヌクレオチド類代謝物質の濃度測定を行った。その結果食塩感受性と心不全の関連候補物質を見つけ、その機能解析をすすめるため、心不全モデルラットに対する投与実験を行い、心不全発症抑制効果があるという結果を得た。またそれらの生化学的代謝指標異常を反映した新たなマウス心不全モデルの作成にも成功した。平成23年度は、resistance index(RI)=(最大収縮期血流速-拡張末期血流速)/収縮末期血流速を腎血流ドプラ法による機能的腎予備力評価方法として用い、臨床研究を開始した。また、我々が確立した高血圧性心不全ラットモデルの尿、血液サンプルを用いてメタボローム解析を行い、心不全との関連物質を探索した。

メタボローム解析ではキャピラリー電気泳動法(CE)と飛行時間型質量分析法(TOFMS)と組み合わせたCE-TOFMS法を用いて、約600程度の陽イオン性代謝物質、陰イオン性代謝物質,ヌクレオチド類代謝物質の濃度測定を行った。その結果食塩感受性と心不全の関連候補物質を見つけ、その機能解析をすすめるため、心不全モデルラットに対する投与実験を行い、心不全発症抑制効果があるという結果を得ている。臨床研究については観察研究による症例数も増加し、予定通りCKDおよび心不全患者について解析が進み、腎血流ドプラ法を用いた評価が心不全患者の病態診断に有用であるという結果を得ている。また心腎連関に関係の深い食塩感受性と心不全の関連候補物質を同定し、モデル動物に対する投与実験で心不全発症に関与するという結果を得、その機序についての検討がすすんでいる。臨床研究を開始し、観察研究により当初の予定通りCKDおよび心不全患者について解析が進み、腎血流ドプラ法を用いた評価が心不全患者の病態診断に有用である結果を得ている。また心不全ラット検体を用いたメタボローム解析により、心腎連関に関係の深い食塩感受性と心不全の関連候補物質を同定し、モデル動物に対する投与実験で結果を得ている。ラット高血圧性うっ血性心不全モデルにおける候補物質の機能解析を続けるとともに、心不全患者の血液および尿サンプルを用いた候補物質の解析を行う。心不全患者を拡張不全患者と収縮不全患者に分け、さらに検討を加える。機能的腎予備力指標として、生理学的指標、候補物質を含む生化学指標、そしてeGFRの3者を組み合わせて検討し、これらの指標が心不全患者、特に各心不全の病態と関連があるかどうかの検討を行う。平成23年度のラット高血圧性うっ血性心不全モデルにおける解析を続けるとともに、心不全患者の血液および尿サンプルを用いたメタボローム解析を行う。機能的腎予備力指標として、生理学的指標、生化学代謝的指標、そしてeGFRの3者を組み合わせて検討し、これらの指標が心不全患者と関連があるかの検討を行う。心不全モデル動物の作成、飼育費用および本モデル動物からの血液、尿、組織検体の解析費用に用いる。また心不全患者の候補物質解析のための費用に使用する計画である。心不全モデル動物の作成、飼育費用および血液、尿、組織検体の解析費用に用いる。また心不全患者のメタボローム解析のための費用に使用する計画である。
多ポイント近赤外測光法による非侵襲的脳血液量・酸素飽和度定量的測定法の開発

本研究によって以下のような成果を得た。1)多ポイント方式を使用し、脳血液量や酸素飽和度を定量的に測定できる近赤外反射測光装置を試作した。装置には705,810,880nmの3波長の発光ダイオードを使用し、ラットの低酸素実験により得られた。それぞれの波長に対する係数を酸素飽和度を求める演算に用いた。2)これによりファロー四徴症新生児の脳血液酸素飽和度を測定したところ、患児の動脈血酸素飽和度より高値であったので、ラット脳組織のバックグラウンドがヒト新生児と異なることが見出された。そこで、死亡直後の新生児のデータを使って、装置の酸素飽和度の演算式をヒト新生児に当てはまるように修正した。3)10名の正常成熟新生児の脳ヘモグロビン量を測定したところ、その結果が平均42.5%absorptionであり、これを換算すると脳血液量は3.69ml/100gとなった。この値は成熟新生児の脳血液量としてはきわめて妥当な値であることが判明している。4)しかしこれまでの装置では、異なる3波長の発光ダイオードは受光部に対して並列に3mmずつ離して設置するように設計しており、しかもダイオードはいつも同じ順番に設置していた。この設置の順番を変えてみたところ、脳血液量はほとんど変動がなかったが、微妙な計算式から計算される酸素飽和度には大きなばらつきが生じ、受光部に対して3mm前後の微妙な距離の変化によっても計算値が変化することが判明した。この問題の解決が今後の課題となるが、それは3波長のダイオードの光を同一点から発射するファイバーを組み込んだプローブを作製すれば可能と考えられる。また、受光プローブの形態を改良すれば、よりノイズの少ないデータが獲得できると推測できる。本年度は、まず、最近我々が特許を得た多ポイント方式を使用し、脳血液最や酸素飽和度を定量的に測定できる近赤外反射測光装置を試作した。この時、705.810.880nmの3波長の発光ダイオ-ドを使用しているが、最初は、外国でも開発中の装置と同様、ラットの低酸素実験により得られた。それぞれの波長に対する係数を酸素飽和度を求める演算に用いていた。ところが、これによってまずチアノ-ゼ型心疾患であるファロ-四徴症新生児の脳血液酸素飽和度を測定したところ、77%であり、これは患児の動脈血酸素飽和度(50-60%)より高値であったので、ラット脳における脳組織のバックグラウンドがヒト新生児と異なることが見出された。そこで、その後、死亡直後の新生児3例において脳血液量や酸素飽和度を測定したところ、やはり脳酸素飽和度は0%になっているべきところが、それぞれの症例で44.2%45.6%43%を示していた。そこで、そのデ-タを使って、装置の酸素飽和度の演算式をヒト新生児に当てはまるように修正した。次に、装置の正確さの決め手となるのはプロ-ブの頭部への固定法であるので、本年度はプロ-ブを固定する方法の工夫を行なった。当初は黒色ゴム製バンドで頭部に固定するよう設計していたが、それを用いて正常成熟新生児の測定を多数行なっている内に、数値は安定するものの、その基本となるフォトンのカウント数にばらつきがみられ、これがやはり固定の調子に影響されていることが判明した。そこで、プロ-ブ自体が頭部に接する周辺だけを元通りゴム製の固定パ-ツとし、それを弾性包帯及びテ-プで固定したところ、光の漏れがない、信頼し得るデ-タが得られることが判明した。これにより2人の患者の状態や1人の患者の非連続の2回の測定時点の状態を定量的に比較できる装置が一応準備できたと考えられた。本研究によって以下のような成果を得た.

1)多ポイント方式を使用し,脳血液量や酸素飽和度を定量的に測定できる近赤外反射測光装置を試作した.装置には705,810,880nmの3波長の発光ダイオードを使用し,ラットの低酸素実験により得られた,それぞれの波長に対する係数を酸素飽和度を求める演算に用いた.2)これによりファロー四徴症新生児の脳血液酸素飽和度を測定したところ,患児の動脈血酸素飽和度より高値であったので、ラット脳血組織のバックグラウンドがヒト新生児と異なることが見出された.そこで,死亡直後の新生児のデータを使って,装置の酸素飽和度の演算式をヒト新生児に当てはまるように修正した.3)10名の正常成熟新生児の脳ヘモグロビン量を測定したところ,その結果が平均42.5%absorptionであり,これを換算すると脳血液量は3.69ml/100gとなった.この値は成熟新生児の脳血液量としてはきわめて妥当な値であることが判明している.4)しかしこれまでの装置では,異なる3波長の発光ダイオードは受光部に対して並列に3mmずつ離して設置するように設計しており,しかもダイオードはいつも同じ順番に設置していた.この設置の順番を変えてみたところ,脳血液量はほとんど変動がなかったが,微妙な計算式から計算される酸素飽和度には大きなばらつきが生じ,受光部に対して3mm前後の微妙な距離の変化によっても計算値が変化することが判明した.この問題の解決が今後の課題となるが,それは3波長のダイオードの光を同一点から発射するファイバーを組み込んだプローブを作製すれば可能と考えられる.また,受光プローブの形態を改良すれば,よりノイズの少ないデータが獲得できると推測できる.
位相制御パルス光によるチラコイド膜中光合成活性律速因子の解明

本研究では、フェムト秒波形整形パルスによるフラッシュ励起と非破壊酸素濃度計による電子伝達測定を組み合わせることにより、チラコイド膜内でエネルギー移動を律速している条件を明らかにする全く新しい方法を開発した。電荷分離過程観測系は、(i)光合成試料を分光するための波長変換用フォトニッククリスタルファイバー、(ii)時間分解分光のための波形整形用反射型4f-SLM光学系、(iii)酸素濃度測定-時間分解分光系、の三部構成となっている。ホウレンソウからチラコイド膜を遠心分離と薬品処理にて抽出し、測定試料とした。光学式酸素センサーにて光照射箇所での酸素濃度を測定した。これらの装置を用いて、照射パルス波形と発生する酸素分圧との相関を詳細に調べた。その結果、以下の知見を得た。(1)電子の二次受容体であるキノン濃度に対する依存性:チラコイド膜試料中にキノンがなければ酸素発生が起きず、キノン濃度が増加するに従って酸素発生量が増加することがわかる。これにより、電子の二次受容体への電荷移動を直接酸素発生によってモニターできることが立証された。(2)パルス列励起による光合成効率の測定と制御:ハロゲンランプによる電荷分離過程と波長変換したパルス列による電荷分離過程を比較した。フィルターを用いて同一波長および強度の条件下では類似した酸素濃度変化を確認でき、同じ電荷分離過程が起きていることが確認できた。現状ではフェムト秒パルス列は連続光励起と等価である。なお、ハロゲンランプおよび波長変換パルス列のどちらの照射下においても、酸素濃度変化ではあらわな濃度上昇は見られなかった。これは呼吸と酸素発生が釣り合っているためだど考えられる。今日直面しているエネルギー枯渇や二酸化炭素排出といった問題を解決するブレークスルーとなりうるのが、自然界の光合成反応系を工学的にモデル化した「人工光合成系」である。具体的には以下のような成果を得た。(1)チラコイド膜の分離精製:本学農学部園芸学研究室のアドバイスをもとに、チラコイド膜の分離精製を行った。(2)レーザー照射型酸素濃度測定チャンバーの製作:外気の酸素から隔離された試料分散液内に非破壊酸素濃度計のプローブを挿入して、光照射に伴う酸素発生量を測定することのできる装置を製作した。光合成活性が保持されているチラコイド膜分散液試料に光を照射し、光合成によって発生した酸素の分圧の光照射時間依存性を測定した。比較対象として、ホウレンソウ個体を対象に同様の測定を行った。その結果、ホウレンソウ個体では、光合成による酸素発生量を測定でき、この装置が正常に動作することが確認できた。一方、チラコイド膜では、安定した酸素発生が検出できなかった。(3)クロロフィル分光用可視パルス光の生成:チタンサファイアレーザーの出力波長750850nmを、フォトニック結晶ファイバモジュールにより波長変換して、クロロフィルの光吸収帯の波長ピーク640680nmを直接励起できる可視光を発生させた。しかしながら、前項の酸素発生実験には、まだ十分な光量が得られていないことがわかった。
反芻動物の成長に伴う栄養素吸収特性に関する研究

反芻動物の消化吸収能は、ルーメンの発達に伴い大きく変化する。しかし、栄養生理的には不明な点が多々残されている。そこで、子ウシの成長、発育に伴う栄養素吸収特性を調べ、その調節の可能性について、特にグルコース吸収能に焦点を当て、SGLT-1を指標として検討した。実験に先立ち、子ウシの腸管粘膜上皮細胞に存在するSGLT-1・mRNA定量法の検討を行った。次いで子ウシ(計27頭)を供試し、腸管粘膜細胞からtotal RNAを抽出し、RT-PCRによりサブクローニングしたSGLT-1・のcDNAをプローブとしてノーザンブロッティングを行った。離乳前、後および十二指腸から回腸上部の間で比較した。その結果、離乳前の子ウシでは、十二指腸でSGLT-1・mRNAの発現が弱く、幽門部より遠位になるに従い徐々に発現が強くなった。一方、離乳後では十二指腸から回腸上部にかけてほぼ同様のSGLT-1・mRNAの発現が見られた。しかし、この発現には個体による変動も大きい可能性が示唆された。子ウシの場合、消化吸収能の発育には12週齢ではまだ充分ではなく、もう少し成育の進んだ状態まで検討する必要があるものと思われた。次に、子ウシの離乳前後におけるα-グルコシダーゼおよびβ-ガラクトシダーゼ活性についても検討した。α-グルコシダーゼ活性は、離乳前の子ウシの方が低く、部位による顕著な違いも見られなかった。一方、離乳後では、離乳前に比べておよそ2倍の活性が認められた。また、消化管を部位別に比較すると、十二指腸に比べ下部になるに従い高い活性を示した。β-ガラクトシダーゼ活性については、離乳前、離乳後ともに大きな違いは見られなかった。以上より、子ウシの場合、12週齢では、まだ消化吸収能は発育途上にあり、更に週齢の進んだ動物を供試して検討する必要があるが、グルコース吸収能を調節する可能性は充分にあると考えられた。1週齢から17週齢までの子ウシ、計27頭を供試し、試料を凍結保存した。1、子ウシの離乳前後におけるSGLT-1の発現離乳前の子ウシ3頭(12、16、22日齢)と離乳後2頭(105、119日齢)の腸粘膜上皮細胞を供試して、total RNAを得た。RT-PCRによりクローニングしたSGLT-1・cDNAをプローブとしてノーザンブロットを行った。(1)子ウシのSGLT-1・mRNAの発現解析には、腸粘膜上皮細胞のtotalRNAを試料としたノーザンブロットにより比較検討することが可能であることが判明した。(2)離乳前後の比較では、離乳前の試料にSGLT-1・mRNAの発現が認められた。しかし、さらに検出方法については検討する必要がある。2、子ウシの離乳前後におけるα-グルコシダーゼおよびβ-ガラクトシダーゼ活性について2週齢の雄子ウシ5頭(離乳前)、1217週齢の雄子ウシ5頭(離乳後)を供試した。酵素活性の測定については、A.Dahlqvist(1964)の方法により、単位タンパク質量に換算して比較した。(1) α-グルコシダーゼ活性は、離乳前に比べ離乳後の方がおよそ2倍高い値を示した。

消化管を部位別にみると、十二指腸に比べ空腸上部から回腸にかけて高い活性がみられた。(2) β-ガラクトシダーゼ活性は、離乳前と離乳後の間で大きな違いは見られなかった。このように、離乳前後では膜消化酵素活性が変動し、その大きさは酵素によって異なることが示唆された。平成11年度には、SGLT-1の成長に伴う発現の比較を行うと共に、他の消化酵素についても検討し、成反芻動物の栄養素吸収能を調節する可能性について検討する予定である。1、子ウシの成長に伴うグルコース吸収能の変動離乳前の子ウシ4頭、離乳直後2頭(38、40日齢)および生後12週齢2頭を供試した。常法に則って速やかに、第四胃幽門部を起点として30,70,150,200,250cmの各腸管粘膜上皮細胞を採取した。前年度に確認した方法に従いtotal RNAを抽出し、RT-PCRによりサブクローニングしたSGLT-1・cDNAをプローブとしてノーザンブロットを行った。その結果、離乳前の子ウシでは、30,70cmのサンプルでSGLT-1・mRNAの発現が弱く、幽門部より遠位になるに従い徐々に発現が強くなった。一方、離乳後では30,70cmに限らず、30250cmの間で、ほぼ同様のSGLT-1・mRNAの発現が見られた。しかし、この発現には個体による変動も大きい可能性が示唆された。子ウシの場合、消化吸収能の発育には12週齢ではまだ充分ではなく、もう少し成育の進んだ状態まで検討する必要があるものと思われた。2、子ウシの離乳前後におけるα-グルコシダーゼおよびβ-ガラクトシダーゼ活性α-グルコシダーゼ活性は、離乳前の子ウシの方が低く、部位による顕著な違いも見られなかった。一方、離乳後では、離乳前に比べておよそ2倍の活性が認められた。また、消化管を部位別に比較すると、十二指腸に比べ下部になるに従い高い活性を示した。β-ガラクトシダーゼ活性については、離乳前、離乳後ともに大きな違いは見られなかった。3、ルーメンバイパス飼料ルーメンバイパス飼料を米粉を基質に作製した。現在、その物理的性質を調べているところである。反芻動物の場合、誇張症になる可能性もあるので、動物実験に先だって、充分なデータを得る必要がある。子ウシの場合、12週齢では、まだ消化吸収能は発育途上にあり、更に週齢の進んだ動物を供試して検討する必要があるものと思われた。
ドイツ文学における〈批評〉の展開

研究の目的は(1)各時代の批評意識を再検討し、(2)その作業を通して私たち自身の批評意識を自覚的に吟味しなおし、(3)暦が変わった時代の新たな〈批評〉意識の確立に寄与することにあったが、以下二つの形態においてこれを達成した。(I)五月及び九月に行われた、第十四次研究会から第十八次研究会の研究会を通じ、多岐にわたる知見を明らかにした。時代的にはモデルネ及びポストモデルネが中心となったが、それ以前の批評の伝統も顧みられた。具体的には以下の通りである。-ノヴァーリスを題材にしてのロマン派の批評の検討。-ドイツ文献学の伝統と批評との関連。-カフカの文学から見た、「文学であること」と「文学を生み出すこと」という批評のトポス。-ベンヤミンの批評文学をてがかりとした身体と批評との関係。-二十世紀ドイツの代表的批評文学、ホルクハイマー・アドルノの「啓蒙の弁証法」の再検討。-ドイツで物議をかもしたボ-ト・シュトラウスの「膨れ上がる羊の歌」から見た「パフォーマンスとしての批評」。-ポストモダンの時代における批評のありかた。(II)下半期には、昨年度の研究成果と今年の上に述べた研究成果とを、再検討を加えた上で、論集にまとめ刊行した。本研究の目的は、時代がある大きな変動を経た、暦が変わった、という認識を受け、批評意識の見直しを図る事にある。本年度の研究は、様々な領域と作品とに関して行われたが、以下五つに大別して素描する。(1)批評に関わる歴史構成の再検討。カントやシラーにおける批評と言語想像力との関係、F・シュレーゲルの神話論における歴史意識、ヘルダーリンのメタ詩(詩による詩の批評)、ガリーツィエンという土地と「荒蕪」というモチーフの、グリルパルツァー、トラークル、マゾッホにおける現れ方、ニーチェのワーグナー・コンプレックスなどが検討された。(2)現在の批評意識の再検討。ラカンなどの影響下にあるポストモダン批評の有効性と限界、「マイナー文学」の多声性の観点から見た、文学批評の尺度としての「マルチ文化性」の可能性などが検討された。(3)モデルネの批評意識。モデルネとはここでは、ほぼベンヤミンの生きた時代(1892-1940)を指すものとする。文学を症候として捉え、その隠された意味を解読しようとする、フロイトにより可能になった新たな文学批評の可能性、十八世紀の市民的公共性のなかで確立された近代批評にとって、キッチュという十九世紀末産業社会が産んだ美的現象がいかなる意味を持つか、ヘルマン・ブロッホの「夢遊の人々」における、想像言語の批評言語に対する関係、ムージルの「トンカ」における認識批判、などについて研究された。(4)我々の批評意識に格別な刺激を与え続けるベンヤミンの批評。通常の意味での「未来」を持たない時間意識と彼の批評意識との関連、芸術作品に内在するメシア的終末を呼び寄せるものとしての批評などについて研究された。(5)フェミニズム批評。近代の発展とともに形成され、文学批評の基準としての可能性を備えるに到った女性の特性を母性と規定する母性神話が研究された。次年度は、批評意識の再検討作業を推し進め、成果を論文集にまとめることを予定している。(I)五月及び九月に行われた、第十四次研究会から第十八次研究会を通じ、多岐にわたる知見を明らかにした。

-ベンヤミンの批評文学をてがかりとした身体と批評との関係。-二十世紀ドイツの代表的批評文学、ホルクハイマー・アドルノの「啓蒙の弁証法」の再検討。ドイツで物議をかもしたボ-ト・シュトラウスの「膨れ上がる羊の歌」から見た「パフォーマンスとての批評」。-ポストモダンの時代における批評のありかた。ほか。(II)下半期には、昨年度の研究成果と今年の上に述べた研究成果とを、再検討を加えた上で、論集にまとめ刊行した。
虚血性脳血管障害超急性期の病態と治療に関する研究 ―再開通治療はどこまで有効か―

米国で脳塞栓発症3時間以内のt-PA静注の有効性が確認されて以来、超急性期血栓溶解療法に多くの関心が寄せられているが、再灌流による神経細胞障害については充分知られていない。そこで、神経細胞障害に大きく関与している白血球に注目し、多核白血球・単球が内在しているmyeloperoxidase(MPO)が虚血再灌流障害にいかに関与しているかを検討した(実験A)。さらに、永久および一過性局所脳血管閉塞モデルを用い、脳梗塞容積、NO2-Tyr生成率について2群間で比較検討した(実験B)。【方法】(実験A)MPO欠損mice29匹、C57 Black/6 mice28匹を用い、中大脳動脈を2時間閉塞後再灌流させ、14時間・24時間後にsacrificeし、梗塞巣の同定・NO2-Tyrの定量を行った。脳梗塞容積はTTC染色により同定しdigitizerにて測定した。(実験B)SD ratを用い、両総頚・左中大脳動脈を24時間閉塞する永久閉塞群(n=14)と、両総頚動脈永久閉塞+左中大脳動脈を2時間閉塞後22時間再灌流する一過性閉塞群(n=12)の2群を作製した。NO2-Tyrは脳を梗塞部(1)、梗塞周辺部(P)、基底核梗塞部(B)に分割後HPLCにて測定した。HE染色slideよりdigitizerで梗塞巣容積を測定した。【結果】(実験A)1)対照群と比較し、MPO欠損miceの脳梗塞容積は有意に増大していた(81±20 mm3 vs. 52±13 mm3)。2)対照群と比較し、MPO欠損miceの梗塞半球のNO2-Tyrは、虚血・再灌流14時間群で有意に増加し(3.3±2.9 vs. 1.4±0.4 μg/mg)、24時間群で増加傾向を示した。(実験B)1)NO2-Tyr生成率は、永久閉塞群ではI:0.04±0.02%,P:0.09±0.02%,B:0.01±0.01%、虚血再灌流群ではI:0.71±0.12%,P:1.09±0.22%,B:0.17±0.07%であり、永久閉塞群と比較して虚血再灌流群でNO2-Tyr生成率が有意に増加した。2)梗塞巣の容積は、虚血再灌流群の大脳皮質梗塞巣は永久閉塞群と比較して有意に増大した。【考察】MPO欠損マウスでNO2-Tyrの生成を認めたことより、脳虚血/再灌流においては多核白血球に内在するMPOはチロシンのニトロ化やOH-の生成を抑制して神経保護的に働くと推察された。また再灌流での梗塞巣の増大とNO2-Tyrの増加は、多量のsuperoxideとiNOS活性化に伴うNOの産生が引き起こされ、ONOO-生成が増強されたことを反映している。以上より、臨床での血栓溶解療法は再開通の時期が遅れると梗塞巣が増悪することがあり充分な注意が必要と考えられた。(実験B)

1)NO2-Tyr生成率は、永久閉塞群ではI:0.04±0.02%,P:0.09±0.02%,B:0.01±0.01%、虚血再灌流群ではI:0.71±0.12%,P:1.09±0.22%,B:0.17±0.07%であり、永久閉塞群と比較して虚血再灌流群でNO2-Tyr生成率が有意に増加した。2)梗塞巣の容積は、虚血再灌流群の大脳皮質梗塞巣は永久閉塞群と比較して有意に増大した。【考察】MPO欠損マウスでNO2-Tyrの生成を認めたことより、脳虚血/再灌流においては多核白血球に内在するMPOはチロシンのニトロ化やOH-の生成を抑制して神経保護的に働くと推察された。また再灌流での梗塞巣の増大とNO2-Tyrの増加は、多量のsuperoxideとiNOS活性化に伴うNOの産生が引き起こされ、ONOO-生成が増強されたことを反映している。以上より、臨床での血栓溶解療法は再開通の時期が遅れると梗塞巣が増悪することがあり充分な注意が必要と考えられた。米国で脳塞栓発症3時間以内のt-PA静注の有効性が確認されて以来、超急性期血栓溶解療法に多くの関心が寄せられているが、一方で血栓溶解後の再灌流により広範な出血性梗塞や脳浮腫が増悪するとの報告もある。そこで、本研究では虚血再灌流障害の機序の一つとして神経細胞障害に大きく関与している白血球に注目し、特に多核白血球・単球が内在しているmyeloperoxidase(MPO)が虚血再灌流障害にいかに関与しているかを検討した。【方法】対象は雄MPO欠損マウス29匹、雄C57 Black/6マウス28匹とした。ハロセン麻酔下で中大脳動脈をthread法で2時間閉塞後再灌流させ、14時間後ないし24時間後にsacrificeし、梗塞巣の同定ないしNO_2-Tyrの定量を行った。脳梗塞容積はTTC染色により同定し、digitizerにて測定した。NO_2-Tyrはanti-nitrotyrosine rabbit IgGとdonkey anti-rabbit IgGを用いELISA法で定量した。なお実験中、神経症候、直腸温、脳血流を測定した。【結果】1)神経症候、直腸温、脳血流値は2群間で差がなかった。2)対照群と比較して、MPO欠損マウスの脳梗塞容積は有意に増大していた(81±20mm3vs.52±13mm3;p<0.01)。3)対照群と比較して、MPO欠損マウスの脳梗塞半球のNO_2-Tyrは、虚血・再灌流14時間群で有意に増加し(3.3±2.9vs.1.4±0.4μg/mg;p<0.05)、24時間群で増加傾向を示した(13.4±6.1vs.9.8±4.4μg/mg;p=0.13)。【考察】MPO欠損マウスでNO_2-Tyrの生成を認めたことより、脳虚血/再灌流においては多核白血球・単球に内在するMPOはチロシンのニトロ化やOH-の生成を抑制することにより神経保護的に働く可能性が推察された。【目的】臨床上rtPAを用いた超急性期の脳塞栓溶解療法に関して多くの関心が寄せられているが、再灌流による神経細胞障害については充分な注意が払われていない。我々はONOO-生成の指標である3-nitro-L-tyrosine (NO2-Tyr)を定量的に測定し梗塞脳でのONOO-の生成病態を報告してきたが、本研究では永久および一過性局所脳血管閉塞モデルを用い、脳梗塞容積、NO2-Tyr生成率について2群間で比較検討し、永久局所脳虚血と一過性局所脳虚血の病態の違いを解明することとした。【方法】雄SD ratを用い、両総頚・左中大脳動脈を24時間閉塞する永久閉塞群(n=14)と、両総頚動脈永久閉塞+左中大脳動脈を2時間閉塞した後左中大脳動脈を22時間再灌流する一過性閉塞群(n=12)の2群を作製した。NO2-Tyrは脳を梗塞部(I)、梗塞周辺部(P)、基底核梗塞部(B)に分割後、酸加水分解しHPLCにて測定した。また、HE染色したスライドを用いてdigitizerで梗塞巣容積を測定した。【結果】
真珠および螺鈿の保存科学的研究

本邦には真珠や螺鈿技法で加飾された美術工芸品が時代を超えて数多く伝存している。これらは劣化によって当初の姿を留めていないものも少なくなく、修復の手が加わった遺品も容易に探すことができる。本研究では、これらの素材並びにこれらと同様の光彩を放ち類似の微細構造を有する玉虫翅をも対象に、保存対策について科学的検討を加えた。まず、劣化現象の調査方法の検討についてであるが、蛍光現象、蛋白質、アラゴナイト結晶積層構造、結晶の微粒化や溶解、結晶型の変異、結晶の無機成分などの点について考察した。とくに新規性のある知見は得られなかった。材質劣化については新規に導入したキセノンランプ光照射による促進劣化試験などを実施した。ここでは玉虫翅で興味深い結果が得られた。要約すると、玉虫翅の発色はキチンの螺旋積層構造による光の選択反射により物理色として現われたもので、耐光性は比較的高いと考えられたが、光照射によって色調の変化が観測された。玉虫翅の緑色と茶色部分の差はキチンの螺旋積層構造の差であろうが、劣化前後における分析から含有成分の変化がみられ、そうした含有物質の発色への影響が示唆された。劣化した真珠・螺鈿の資料としてローマ時代真珠ネックレスを取り上げ、微細部の電子顕微鏡観察や化学分析をおこなった。その結果、この真珠は淡水産二枚貝から産出した天然真珠であるが、新鮮な真珠にみられるような固有の光彩が失われ、白濁・黄色化していた。また真珠層は微細化し、かつ剥離現象を起こしていた。これらは真珠層の各ラメラを繋ぎ止める蛋白質コンキオリンが変質し、あるいは失われる程の状況下にあること、それにより同層の深刻な構造変化が発生していることを示唆した。7年度における本研究は、(1)殻体劣化現象における調査方法の検討、(2)劣化進行のメカニズムの解明、の両テーマを研究課題に捉え研究を遂行した。(1)においては、現世殻体(メカイアワビ)を劣化している出土遺物殻体(毘沙門遺跡より出土したアワビ)を試料にこれらの状態調査法を検討している。蛍光、蛋白質、アラゴナイト結晶積層構造、結晶の微粒化や溶解、結晶型の変異、結晶の無機成分などについて、金属型光学微顕微鏡、走査型電子顕微鏡、可視紫外分光光度計、分光蛍光光度計、FT・IRなどの機材を利用し多面的な方向から解析中である。そのなかで、硬度測定が劣化状態の判定に重要であることが判明した。また、出土遺物である「ローマ時代のネックレス」に使用されている真珠の劣化状態について上記の分析法によって検討を加えた。(2)においては、同様の試料に対して新規導入した「キセノン耐光試験機」を用いて温湿度変化や光照射による長期間の劣化促進試験を実施中であり、時間経過による劣化進行のメカニズムについて検討を開始した。調査項目、使用機材は画像、分析の双方から適宜選択することにより、両テーマが有機的にかつ相補的に殻体の劣化現象を解明すると考えている。一方、ロンドン・大英博物館所蔵の中世装身具群を飾る真珠、ベネツィア・サンマルコ大聖堂の「パ-ラ・ド-ロ」を飾る真珠など海外の伝存真珠や橿原考古学研究所所蔵の「太安万侶墓出土真珠」や京都国立博物館における「蒔絵漆黒と黄金の日本美」特別展での数多くの螺鈿を検察する機会をもった。これらは今後の研究遂行の上で非常に意義のあることとなろう。8年度における本研究は、前年度に引き続き(1)真珠および殻体劣化現象における調査方法の検討、(2)劣化進行のメカニズムの解明、の両テーマを研究課題に据え研究を遂行した。