hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
好中球細胞外トラップを標的とした新たな心筋梗塞治療戦略の構築

以上より、Elane遺伝子欠損によりで境界部位のアポトーシスが抑制されていることが梗塞サイズの減少に繋がったことが推察された。また、野生型に比べNETs形成不全マウスでは梗塞部位への白血球(CD45+細胞)の浸潤が有意に減少し、特に好中球(CD11b+Ly6Ghigh細胞)の減少が示された。また、マクロファージの中で炎症性のM1マクロファージと抗炎症性のM2マクロファージの割合を比較したところ、KOマウスでは炎症性のM1(F4/80+CD11b+CD206-)マクロファージが減少し、M1/M2比が減少していた。同様に好中球エラスターゼ阻害剤投与によっても心筋梗塞後の心室リモデリングが改善され、生存率が上昇した。以上より、NETs形成不全によって急性期の過剰な炎症反応が抑制され、虚血部位におけるアポトーシスが減少し、梗塞サイズの減少や心筋梗塞後の生存率、心機能が改善されることが示唆された。実験結果が順調に得られており、研究はおおむね順調に進展している。インスリンやインスリン様成長因子1(IGF-1)は心筋細胞に発現するIGF-1受容体に作用し、受容体に内蔵されたチロシンキナーゼが活性化し、インスリン受容体基質1(insulin receptorsubstrate-1; IRS-1)のリン酸化を介してAktを活性化する。活性化したAktは心筋細胞においてアポトーシスの抑制、蛋白合成促進、生存に必要なシグナル物質の転写促進、DNA合成促進などの作用により、さまざまなストレスに対する抵抗性を発揮する。上述のように、NET形成不全により心筋梗塞後の予後が改善した理由として、心筋細胞の生存に与える影響を考え、好中球エラスターゼによるIRS-1の分解とAktシグナルへの影響に着目して研究を推進していく。他研究者からの譲渡や他研究費からの購入により、当該研究費で購入予定であった消耗品への支出が不要であったものが生じたため、次年度使用額が生じた。次年度は、消耗品の購入、国際学会、国内学会での発表および情報収集のために使用する。当初の計画では、H30年度とH31年度にin vivo実験とin vitro実験を併行して行うこととしていたが、H30年度はin vivo実験に集中して行なった。そのため、in vitro実験で使用する予定であった金額を次年度に使用するため、次年度使用額が生じた。
酸化亜鉛/色素ハイブリッド薄膜の電気化学的作製と光電気化学的評価

色素増感型太陽電池の光電極に用いられる色素修飾されたポーラス酸化物半導体薄膜は、通常半導体微粒子のペーストをコーティング、熱処理して膜を得た後に色素分子を吸着するプロセスが用いられているが、我々は増感色素を含む亜鉛塩水溶液からの一段階カソード電析によって酸化亜鉛/色素ハイブリッド薄膜を得ることに成功した他、酸化チタンとチタン塩の混合ペーストの水蒸気処理によってポーラス酸化チタン薄膜を得ることにも成功した。本研究ではこれら2種の低温合成法によって作製された光電極について、本特別研究員が構築した時間及び周波数分解光電気化学測定法による光電気化学分析を行なった。電析法によって作製された酸化亜鉛/色素ハイブリッド薄膜電極は、その高い結晶性ゆえに、通常の半導体微粒子を出発原料とするポーラス電極に比して極めて速い電子拡散を可能としていることが明らかとなった。また、電析されたハイブリッド膜においては色素分子の一部が酸化亜鉛表面に直接結合しておらず、一旦色素をアルカリ洗浄によって除去した後、再度色素溶液から色素分子を吸着することで、飛躍的な色素増感光電極機能の向上がおこることが分かった。これにより低温合成された材料としては異例のIPCE=90%の高い変換効率を達成した。水蒸気処理によって作製したポーラス酸化チタン電極についても、通常の熱処理を要するプロセスによって得られる材料に遜色ない電荷輸送特性を有していることが明らかとなった。これらの成果について今年度2報の論文が学術雑誌に掲載された他、2報が投稿済みである。また、国際会議において5件の成果発表を行なった。
皮膚悪性腫瘍細胞の増殖能及び細胞動態に関する研究

本研究では皮膚悪性腫瘍における腫瘍細胞の細胞動態と各種の臨床的パラメーターとの関係を明らかにすることを目的とした。皮膚腫瘍におけるS期細胞の分布をbromodeoxyuridineを用いてinvitroで検討した。S期細胞の分布とlabeling indexを悪性皮膚腫瘍,良性皮膚腫瘍、良性増殖性皮膚疾患について検討した。Labeling indexは一般に悪性疾患では高く、良性疾患では低かった。S期細胞の分布は、全体として良性疾患ではgerminative celllayerに限局して存在したのに対して悪性疾患ではgerminative celllayerとは無関係に分布していた。しかし、labeling indexあるいはlabeling pattern単独では必ずしも臨床的悪性度とは相関していなかったが、高いlabelingindexとlabelingpatternの乱れを併せもつことは悪性疾患の特徴と考えられた。主として、悪性異色腫と扁平上皮癌についてflowcytometryを行った。両腫瘍とも進行した原発巣や転移巣においてDNAaneupladyが観察される傾向があった。又Bowen病等の表皮内癌ではDNAaneuploidyは全く観察されなかった。しかしこれは必ずしも腫瘍細胞にDNAaneuploidyが無いということを意味するものではなく、腫瘍細胞の数が少なく正常細胞のDNApatternにaneuploid patternが隠されたためとも考えられる。核のribosomalRNA転写部位の酸性蛋白質を染めるAgNOR染色を悪性黒色腫と基底細胞上皮腫について行った。染色顆粒の数は色素性母斑や正常表皮に対して有意に高かった。正常表皮や色素性母斑ではAgNORの数は12個であったのに対して、基底細胞上皮腫や悪性黒色腫では4個以上に増加していた。また、正常表皮では基底層から角質層へと分化が進むにしたがって、AgNORの数は減少した。それに対して、基底細胞上皮腫や悪性黒色腫では一様にAgNORの数が増加していた。これらの結果はAgNOR染色が良性と悪性を鑑別する有用な方法となりうることを示唆している。本研究では皮膚悪性腫瘍における腫瘍細胞の細胞動態と各種の臨床的パラメ-タ-との関係を明らかにすることを目的とした。皮膚腫瘍におけるS期細胞の分布をbromodeoxyuridineを用いてin vitroで検討した。S期細胞の分布とlabeling indexを悪性皮膚腫瘍である基底細胞上皮腫・ボ-エン病と良性腫瘍である脂漏性角化腫や角化細胞の良性増殖性疾患である尋常性乾癬と比較した。ところがこれには例外もあり、labeling indexあるいはlabeling patten単独では必ずしも臨床的悪性度とは相関していなかった。しかし高いlabelingindexとlabeling patternの乱れの両者をを合わせもつことは悪性疾患の特徴と考えられた。主として、悪性黒色腫と扁平上皮癌についてflow cytometryを行った。両腫瘍とも進行した原発巣や転移巣においてDNA aneuploidyが観察される傾向があった。又、Bowen病等の表皮内癌ではDNA aneuploidyは全く観察されなかった。しかしこれは必ずしも腫瘍細胞にDNA aneuploidyが無いというこを意味するものではなく、腫瘍細胞の数が少ないため正常細胞のDNA patternにaneuploid patternが隠されたとも考えられる。核のribosomal RNA転写部位の酸性蛋白質を染めるAgNOR染色を悪性黒色腫について行ったところ、染色顆粒の数は色素性母斑に対して有意に高いという結果を得た。ただし、角化細胞の良性増殖性疾患でもAgNORの数は増加していたのでAgNORの数の増加は悪性度を示すのではなく増殖能を反映していると考えられた。

これらの結果はAgNOR染色が良性と悪性を鑑別する有用な方法となりうることを示唆している。本研究では皮膚悪性腫瘍における腫瘍細胞の細胞動態と各種の臨床パラメ-タ-との関係を明らかにすることを目的とした。主として、悪性黒色腫と扁平上皮癌についてflow cytometryを行った。両腫瘍とも進行した原発巣や転移巣においてDNA aneuploidyが観察される傾向があった。又、Bouen病等の表皮内癌ではDNA aneuploidyが無いということを意味するものではなく.腫瘍細胞の数が少なく正常細胞のDNA patternにaneuploid patternが隠されたためとも考えられる。核のribosomal RNA転写部位の酸性蛋白質を染めるAgNOR染色を悪性黒色腫と基底細胞上皮腫について行った。染色顆粒の数は色素性母斑や正常表皮に対して有意に高かった。正常表皮や色素性母斑ではAgNORの数は1ー2個であったのに対して、基底細胞上皮腫や悪性黒色腫では4個以上に増加していた。また正常表皮では基底層から角質層へと分化が進むにしたがって、AgNORの数は減少した。それに対して、基底細胞上皮腫や悪性黒色腫では一様にAgNORの数が増加していた。これらの結果はAgNOR染色が良性と悪性を鑑別する有用な方法となりうることを示唆している(第301回日本皮膚科学会北海道地方会)。本研究では皮膚悪性腫瘍における腫瘍細胞の細胞動態と各種の臨床的パラメーターとの関係を明らかにすることを目的とした。又、Bowen病等の表皮内癌ではDNA aneuploidyは全く観察されなかった。しかしこれは必ずしも腫瘍細胞にDNA aneuploidyが無いということを意味するものではなく、腫瘍細胞の数が少なく正常細胞のDNA patternにaneuploid patternが隠されたためとも考えられる。正常表皮や色素性母斑ではAgNORの数は1-2個であったのに対して、基底細胞上皮腫や悪性黒色腫では4個以上に増加していた。また、正常表皮では基底層から角質層へと分化が進むにしたがって、AgNORの数は減少した。
高速な多倍長算術演算ハードウェアアルゴリズムの開発

本研究では,冗長性を持つSD数表現を用いた高速な加算回路と,それを基礎とした算術演算回路の開発を目的としている.SD数表現は,その冗長性を利用して遅延時間が桁数に依存しない加算アルゴリズムが知られており,非常に大きな桁数の算術演算に有効であることが知られている.その一方で,数表現をデジタル回路上で利用しようとするとその演算回路は2進数のものと比較して大きく,実装面で不利となっている.平成30年度は,既存の2進SD数加算アルゴリズムを基本として,処理速度が桁数に依存しない加算アルゴリズムをFPGA上に実装し,既存の加算アルゴリズムよりも小さな回路面積で実現できることを示した.加算回路内部では,SD数の表現を一般的なものから変更することで,論理素子をベースにした回路構成を考えると既存のものより大きな規模の回路になってしまうことがあるが,LUTで回路を構成するFPGAでは,複雑な組み合わせでも少数のLUTで実現できることがある.今回提案したアルゴリズムでは,その特徴が明確に現れた.また,本結果は,研究開始当初に想定していた,加算器の入出力に使用する数表現を制限することで表現に必要なビット数を削減したり,数表現の冗長性を低くしたりすることで回路面積の削減を達成する目論見とは異なり,既存の数表現をそのまま利用して,FPGA上で加算器の回路面積削減を達成している.これは,既存の回路との置き換えを考える際,数表現の変換回路を別途用意する必要がないことを意味し,余計な回路面積の増加を抑えることができる.加えて,当初は回路面積削減のために導入予定であった短い桁上げ伝播も導入することなく回路面積の削減が実現できたため,クリティカルパスの長さも既存のものと同等である.概要で述べた研究成果は論文誌に投稿中である.しかしながら,昨年度から進捗が遅れており,平成30年度もその進捗の遅れを回復できるほどではないため,改善はみられるものの全体として遅れている状況である.平成30年度の実績の中心は加算アルゴリズムの考案とその評価のみであったが,本実績で得られた知見をもとに,複数の演算を用いた回路全体の構造を分解・再構成することで効率的な演算回路の構築を目指す.特に,複数の乗算や加算を行う剰余数系から重み数系への変換回路について,2進数を用いた回路やSD数を用いた既存の回路・手法との比較を行いながら,効率化を目指す.本研究では,冗長性を持つ数表現を用いた,高速な加算回路と,それを基礎とした算術演算回路の開発を目的としている.その研究をもとに,大きな桁数の算術演算の高速化を実現することが目標である.精度の高い計算や強固な暗号化のためには大きな桁数の算術演算が必須であり,これを効率良く行えるようになることは重要である.しかし,本研究では,単に回路の高速性を追求したものではない.冗長性を持つ既存の数表現を用いて高速な処理を実現する回路を作成すると,通常使用される数表現による回路よりも必要な回路面積が増大し,それに伴って消費電力の増大などの問題も発生しうる.本研究では,冗長性を持つ数表現を用いた算術演算回路の回路面積の削減方法として,既存の数表現より冗長性を低くした数表現を用いることと,その数表現上での速度低下が少ない算術演算回路の開発により目標を実現する.本研究では,(1)冗長性を持つ数表現の提案,(2)加算回路を基本にした算術演算回路の提案,(3)数表現の冗長性を利用した算術演算回路の改良,を繰り返し行い,(4)具体的な算術演算アルゴリズムへの適用へとつなげていく流れとしている.各段階で既知の手法や表現などとの比較検討を行い,より良いものを提案する.平成29年度では,第一段階として,数表現の考案と加算回路を,VLSI設計ソフトウェア上で評価した.既存のものとの比較を行った結果,既存の数表現に一旦変換し,その上で加算を行ってから戻す手法のものが,新たに考案した数表現の上で直接加算をする手法よりも優れている結果を得た.また,考案した数表現に対して,時間的な制約から十分な改良ができなかったこともあり,研究成果として公表できるレベルのものが得られなかった.研究実績の概要でも延べた通り,公表に値するレベルの研究成果が得られなかったため,進捗は遅れている.また,交付決定後に増加した用務もあり,十分な研究時間が確保できなかったことも研究の進捗が遅れた原因である.本研究では,冗長性を持つSD数表現を用いた高速な加算回路と,それを基礎とした算術演算回路の開発を目的としている.SD数表現は,その冗長性を利用して遅延時間が桁数に依存しない加算アルゴリズムが知られており,非常に大きな桁数の算術演算に有効であることが知られている.その一方で,数表現をデジタル回路上で利用しようとするとその演算回路は2進数のものと比較して大きく,実装面で不利となっている.平成30年度は,既存の2進SD数加算アルゴリズムを基本として,処理速度が桁数に依存しない加算アルゴリズムをFPGA上に実装し,既存の加算アルゴリズムよりも小さな回路面積で実現できることを示した.加算回路内部では,SD数の表現を一般的なものから変更することで,論理素子をベースにした回路構成を考えると既存のものより大きな規模の回路になってしまうことがあるが,LUTで回路を構成するFPGAでは,複雑な組み合わせでも少数のLUTで実現できることがある.今回提案したアルゴリズムでは,その特徴が明確に現れた.

また,本結果は,研究開始当初に想定していた,加算器の入出力に使用する数表現を制限することで表現に必要なビット数を削減したり,数表現の冗長性を低くしたりすることで回路面積の削減を達成する目論見とは異なり,既存の数表現をそのまま利用して,FPGA上で加算器の回路面積削減を達成している.これは,既存の回路との置き換えを考える際,数表現の変換回路を別途用意する必要がないことを意味し,余計な回路面積の増加を抑えることができる.加えて,当初は回路面積削減のために導入予定であった短い桁上げ伝播も導入することなく回路面積の削減が実現できたため,クリティカルパスの長さも既存のものと同等である.概要で述べた研究成果は論文誌に投稿中である.しかしながら,昨年度から進捗が遅れており,平成30年度もその進捗の遅れを回復できるほどではないため,改善はみられるものの全体として遅れている状況である.平成29年度で考察を行った加算器は,既存のものと比較して性能が劣っているものの,改良の余地が十分にあるため,その改良を平成30年度の第一段階として研究し,回路面積と処理速度のバランスのとれた数表現の提案を行う.当初の研究計画では,暗号化アルゴリズムへの本研究結果の適用を挙げていたが,初年度の遅れから,その段階まで到達できない可能性がある.そこで,当面は数表現の提案と算術演算アルゴリズムの基本である四則演算の高効率化に焦点を絞り,平成30年度の進捗が順調であれば,当初の研究課題の範囲である応用分野についても研究を行う.また,FPGAへの適用についても調査し,既存の回路との差についてVLSI設計を主眼としたものと,優劣の差がどの程度現れるか,またFPGA固有の特徴を活かした数表現の提案なども研究の視野に入れる.平成30年度の実績の中心は加算アルゴリズムの考案とその評価のみであったが,本実績で得られた知見をもとに,複数の演算を用いた回路全体の構造を分解・再構成することで効率的な演算回路の構築を目指す.特に,複数の乗算や加算を行う剰余数系から重み数系への変換回路について,2進数を用いた回路やSD数を用いた既存の回路・手法との比較を行いながら,効率化を目指す.平成29年度に研究発表を行えなかったため,発表に伴う旅費,ならびに英文校正費用・論文出版費用の予定として計上していた予算を利用しなかった.平成30年度は研究成果を積極的に発信するために使用予定である.研究の進捗状況が遅れており,研究発表を行うための旅費の支出や,論文の出版にかかる費用として計上されていたものの支出が実際には行われていなかったため,次年度使用額として生じた.
キボシカミキリの種分類学的研究

キボシカミキリは発生生態や前胸背斑紋の違いから西日本型と東日本型に分けられるといわれている。これらの差異を生理的面より検討するため、西日本型として鳥取産を、東日本型として福島産を用いて酵素について調べた。その概要を報告する。酵素活性はアガロースゲル電気泳動法によって分別した後、非特異的エステラーゼとフォスファターゼを検出しその泳動像を両地間で比較した。エステラーゼの泳動像について調べた結果、ふ化幼虫において、移動度の少ない原点近くにある泳動帯が鳥取産に比較して福島産でやや低く現れた。また、福島産において、鳥取産と同じ移動度を示す泳動帯を合わせもち2本見られる個体があった。幼虫組織については血液、脂肪体、消化管について調べた。血液において、幼齢期には1本の泳動帯が見られ、鳥取産に比して福島産の多くのもので移動度が低く、活性が弱かった。老齢期には両地産とも陰極側に泳動帯が見られるようになった。また、福島産において、鳥取産と同じ移動度と活性のある泳動帯をもつ個体あるいわ活性の弱い2本の泳動帯をもつ個体も若干見られた。脂肪体がにおいて、血液と同じく原点近くで両者に移動度の異なる1本の泳動帯が見られた。個体変異は鳥取産のもので少なく、福島産で大きかった。特に、福島産において鳥取産のものと同じ移動度の泳動帯で活性の同じものや弱いものあるいはないものなどが認められた。消化管において、両者の泳動像にも差異が認められた。そして、個体差は鳥取産で少なく福島産で大きかった。次に、酸性フォスファターゼは消化管に活性が認められたが両地産の間に差異は認められかった。アルカリ性フォスファターゼは各組織とも活性が弱く両者の差異は見出せなかった。以上の結果、エステラーゼの泳動像において両地産間に差異は認められ、福島産で個体変異が多かった。これらの点の解明は今後にまちたい。その概要を報告する。
気候変動・分断化が進むアジアの森林の将来像：大規模野外データと群集モデルの結合

気候変動により森林を構成する樹木の種類が変わることが危惧されている。このような種組成の変化は人間社会に様々な影響を及ぼすため,将来の種組成を予測することが求められている。従来の予測モデルは,樹木の分布が気候などの環境条件で決まるという環境制限を前提としている。樹木の分布を決めるもう一つのメカニズムである散布制限(樹木の種子の散布距離が制限されていること)は無視されてきた。しかし,今日では各地の森林が分断化され,散布制限の重要性が高まっている。本研究は,環境制限と散布制限とを統合した群集モデルと大規模野外データとを結合し,将来の気候および森林の分断化の進行によって,アジアの熱帯から亜寒帯までの森林の種組成が実際にどのように変化するのかを予測する。平成30年度は国内外の種組成データおよび形質データの収集を完了した。アジアのデータについては既存データや文献の収集を行った。これらのデータを用いた群集モデルの解析にむけて研究協力者と相談を進めた。収集データを用いた解析を学会発表した。海外調査の許可取得についてカウンターパートとの覚書の締結を必要としたため。収集済みのデータと既存データを中心に解析をすすめ論文を作成する。本年度は群集モデルの開発に必要なデータの収集を行った。日本国内のデータについては、西日本の森林データが不足していたため、野外調査を行いデータを収集した。さらに国内の毎木データの整理や共同研究者とモデルの開発について打ち合わせを行った。インドネシアで来年度に野外調査を行うため予備調査を行った。ボゴール植物園やスマトラ島での形質調査やインドネシア全国のインベントリデータの利用のため、カウンターパートに会い調査許可取得にむけた相談を行った。またインドネシアでの調査経験者との研究相談を行った。育児休暇を半年取得したため当初の予定通りには進まなかったものの、国内外でのデータ収集を進め、また予備調査や形質データを集めるための文献を入手した。平成29年度は国内外の種組成データおよび形質データの取得・整理を進めた。国内のデータについてはほぼ完了した。アジアのデータについては野外調査の調整が難しかったため、既存データや文献の収集を先行して行った。また来年度の海外での試料サンプリングについての留意点について整理した。インドネシアの調査許可取得のため、本学とカウンターパートとの覚書の締結を必要としたため。国内のデータ収集を終わらせ、群集モデルの開発を共同研究者と進める。海外の群集データを収集するために野外調査を行い、文献から形質データを収集する。まずは収集が完了した国内データに関し、群集モデルを適用し散布制限と環境制限のパラメータを推定する。

育児休暇を取得したため当初予定していた野外調査を行えなかった。インドネシアでの調査許可が取得できなかったため、海外調査を行えなかった。平成30年度は調査許可が取得できる見込みであり、調査を行う。次年度の旅費に使用するため、繰り越す。次年度以降に野外調査を行い、調査補助者を雇用し、調査を行う。
記憶機能への海馬の量的・質的関与の様態に関する研究:一過性全健忘症例を通して

目的:平成2年度に、陳述記憶の獲得には、海馬領域を含む側頭葉内側部が重要な役割を演じることを一過性全健忘症例を通して実証した。本年度は、陳述記憶の中で知識に相当する意味記憶の神経基盤について検討した。対象:語の意味記憶が選択的に障害される病態である語義失語像を呈する葉性萎縮7例、及び語義の障害が比較的軽いヘルペス脳炎1例。方法:病巣部位をCTないしMRIにより形態的に同定し、さらにSPECTにより機能不全が生じている部位の拡がりを検討。結果:全例に共通する形態的障害部位は左側頭葉前方部で、機能的にはさらに中間部の内側から外側にまで異常が認められた。右側頭葉前方部にも何がしかの病巣が全例みられた。葉性萎縮が右側頭葉前方部でより目立った1例では、相貌の認知障害が認められた。考察:側頭葉内側部が両側性に侵襲された場合、エピソ-ド記憶は障害されても知識となっている意味記憶の障害は生じない。てんかん例ではあるが、左側頭葉前方部が切除された場合、語想起障害は生じても明らかな語の意味記憶の障害は生じない。左側頭葉後下部が障害された場合、漢字の失書や失読が生じても、語の意味記憶の障害は生じない。以上のことから左側頭葉中間部が浮かび上がってくる。サルでの嗅内野および嗅周野と側頭葉連合野との密接な連絡、自験例の機能障害部位を考慮すると、語の意味記憶を担う神経基盤として優位半球の海馬領域と側頭連合野が、また相貌の意味記憶を担う神経基盤として劣位半球の相同部位が重視される。ただし、選択的で重度の語の意味記憶の崩壊は、これまでPick病が疑われる症例でしかみられていないので、側頭葉を中心とする葉性萎縮過程は、単に部位ということだけではなく、意味記憶を支える系あるいはneural networkを選択的に侵す可能性が考えられた。
難治性子宮内膜癌の治療戦略～高分子ミセルを用いたＥＭＴ制御を目指した治療の開発～

再発や多臓器転移を示す難治性内膜癌に対しての新規治療法は改善を認めていない。細胞表面マーカーのひとつCD24の発現増加が臨床検体での解析により予後不良因子であることを報告し、CD24の機能解析を細胞株を用いて行なった。GPIアンカー蛋白であるCD24は細胞膜表面のHGF受容体Metをripid laftにリクルートし、Metシグナルの増幅に寄与していることを発見した。さらに多剤耐性能獲得メカニズムのひとつABCトランスポーターの発現制御も行なっており、内膜癌の転移能獲得、多剤耐性能獲得に大きく寄与していることが明らかとなり、分子標的としてふさわしい膜蛋白であることを明らかにした。子宮内膜癌の浸潤・転移に重要な上皮・間葉形態転換(Epithelial-Mesenchymal Transition:EMT)現象の制御を目指し、EMT化細胞の表現マーカーに対する抗体を外郭に結合させた抗癌剤内包高分子ミセルを作成し、EMT化細胞を標的とするドラッグデリバリーシステムの開発が目的である。具体的にはCD24抗体を外郭に結合させた抗癌剤内包高分子ミセルを作成し、子宮内膜癌モデルマウスに投与し、その抗腫瘍効果・薬物臓器親和性・副作用を明らかにするだけでなく、抗腫揚メカニズムの分子生物学的検討も行ない、将来の臨床応用へ近づけることを本研究の目的とする。平成24年度では、EMTの表面マーカーとして乳癌、膵臓癌で注目されているCD24に着目している。CD24陽性細胞は幹細胞と間葉系細胞の性質を合わせもち、腫瘍形成能にすぐれていることが報告されているが、子宮内膜癌においても予後不良因子として臨床的に示してきた(Cancer Biol Ther.2013;14(1):13-9)。また内膜癌を用いた我々のprelimina甲な検討により、CD24陽性細胞はEMT特異的表現型(E-cadherinの減少、Snail,Slugの増加)を示しており、cisplatin耐性であった。以上より、CD24は子宮内膜癌における浸潤・転移に関するEMTマーカーとして利用できる可能性があると考えており、CD24抗体ミセルの開発の準備にとりかかったところである。平成25年度はマウス子宮内膜癌モデルの作成をし、CD24抗体を外郭にもったシスプラチン内包高分子ミセルを投与する。Day28にすべてのマウスをイソフルレンで安楽死させ解剖し、抗腫瘍効果の検討と同時に、血液学的検査により骨髄毒性を検討し、血清電解質、AST、ALT、γ-GTP、ビリルビン、クレアチニン、尿素窒素、CRP、β2-microglobulinで肝・腎毒性を検討する。腫瘍マーカーとしてCA125を測定する。摘出腫瘍は固定後免疫染色などで、実際のCD24陽性細胞の消滅率、血管新生の有無などを定量する。子宮内膜癌の浸潤・転移に重要な上皮・間葉形態転換(Epithelial-Mesenchymal Transition: EMT)現象の制御を目指し、EMT化細胞の表現マーカーに対する抗体を外郭に結合させた抗癌剤内包高分子ミセルを作成し、EMT化細胞を標的とするドラッグデリバリーシステムの開発が目的である。具体的にはCD24抗体を外郭に結合させた抗癌剤内包高分子ミセルを作成し、子宮内膜癌モデルマウスに投与し、その抗腫瘍効果・薬物臓器親和性・副作用を明らかにするだけでなく、抗腫瘍メカニズムの分子生物学的検討も行ない、将来の臨床応用へ近づけることを本研究の目的とする。平成25年度では、EMTの表面マーカーCD24に着目している。CD24陽性細胞は幹細胞と間葉系細胞の性質を合わせもち、腫瘍形成能にすぐれていることが報告されているが、子宮内膜癌においても予後不良因子として臨床的に示してきた(Cancer Biol Ther. 2013;14(1):13-9)。また卵巣癌、内膜癌を用いた我々のpreliminaryな検討により、CD24陽性細胞はEMT特異的表現型(E-cadherinの減少、Snail, Slugの増加)を示しており、cisplatin耐性であった。以上より、CD24は卵巣癌、子宮内膜癌における浸潤・転移に関するEMTマーカーとして利用できる可能性があると考えており、CD24抗体を外郭にもったシスプラチン内包高分子ミセルを作成し、卵巣癌モデルマウス、および子宮内膜癌モデルマウスに投与した。マウスをイソフルレンで安楽死させ解剖し、抗腫瘍効果の検討をおこなった。すると、CD24陽性腫瘍の腹腔内播種モデルマウスに対する治療において、vehicle群、シスプラチン群と比較し、CD24-シスプラチンミセル群はOSの有意な延長を認めた。シスプラチン耐性のCD24陽性細胞腫瘍への抗腫瘍効果が明らかとなった。

子宮内膜癌の浸潤・転移に重要な上皮・間葉形態転換(Epithelial-mesenchymal Transition: EMT)現象の制御を目指し、EMT化細胞の表現マーカーに対する抗体を外郭に結合させた抗癌剤内包高分子ミセルを作成し、EMT化細胞を標的とするドラッグデリバリーシステムの開発が目的である。具体的にはCD24抗体を外郭に結合させた抗癌剤内包高分子ミセルを作成し、子宮内膜癌モデルマウスに投与し、その抗腫瘍効果・薬物臓器親和性・副作用を明らかにするだけでなく、抗腫瘍メカニズムの分子生物学的検討も行ない、将来の臨床応用へ近づけることを本研究の目的としていた。平成25年度までは、子宮内膜癌においてCD24陽性細胞は幹細胞と間葉系細胞の性質をあわせ持ち、腫瘍形成能にすぐれていることを明らかにし、CD24を標的分子とした抗癌剤の有用性について検討してきた。平成26年度においては、CD24陽性細胞はHGF(hepatocyte growth hormone)シグナルの活性化が認められることより、内膜癌における予後不良因子としてのHGFシグナルを制御する薬剤:foretinibの有用性についてin vivo, in vitroで検討し、現在論文作成中である。26年度が最終年度であるため、記入しない。婦人科腫瘍学26年度が最終年度であるため、記入しない。内膜癌における予後不良因子としてのEMT現象を臨床的にまとめ上げており、高分子ミセルの作成段階にいるため。CD24抗体付帯のシスプラチン内包ミセルの作成と、癌モデルマウスへの投与実験に着手し、ミセルの薬物効果を示すことができたため。内膜癌モデルマウス作成の際、腫瘍体積を定量化するため、GFP-CD24を恒常発現した内膜癌細胞株の樹立を計画している。in vivoにおけるCD24シスプラチン内包ミセルの副作用実証を行なう。シスプラチンの臓器集積性の比較や、腎毒性の比較、腫瘍集積性の相違を検討し、臨床検討へのステップにしたい。今回使用した抗体、キット製品の改良により比較的高額ではなかったため次年度は、さらに細胞株の購入、siRNA導入のためのウイルス培養、モデルマウス作成に使用する計画である。
MAPキナーゼシグナルと癌細胞の運動におけるアクチン重合制御

WAVE2は細胞の移動先端で生じる葉状仮足形成に必要不可欠なタンパク質であり、葉状仮足形成を通じて細胞の運動を制御している。本年度の研究では、WAVE2がMAPキナーゼによってリン酸化されることを見いだしていたので、リン酸化サイトをプロリンリッチ領域およびC末部に同定した。プロリンリッチ部位のリン酸化はリン酸化のおおきな割合を占めていた。しかしながら、リン酸化の有無でWAVE2をふくむタンパク質複合体の構成に大きな変化を見いだすことができなかった。また、WAVE2ノックアウト繊維芽細胞の葉状仮足形成のおよび細胞運動の欠陥をプロリンリッチ部位のリン酸化されないWAVE2の変異体でも回復することができたので、葉状仮足形成にこのリン酸化が積極的に関与している可能性は否定された。C末部のリン酸化の意義については未だ解析できていない。B16メラノーマがん細胞系列をもちいてWAVE2とがんの転移能の相関を検討したところ、WAVE2は正常細胞の運動だけでなく、マウスを用いたin vivoのがん細胞の転移にも必要不可欠であった。しかし転移性の高い系列でもリン酸化の顕著な上昇は見られなかった。次に、種々の大腸がん細胞株を用いてWAVE2のリン酸化レベルを検討したところ、Erkの活性の高い細胞株でWAVE2のリン酸化が高い傾向が見られた。しかしながら、WAVE2のリン酸化と運動能との高い相関は見られなかった。
精神障害における他害行為の治療および予防に関する研究-措置入院患者の実態調査-

平成6年度から8年度の3年間に、県立岡本台病院で措置鑑定(2次鑑定)を受けた精神障害者230名、および警察署など栃木県内の他所で措置鑑定を受け措置一時預かりで県立岡本台病院に入院した精神障害者58名の計288名を対象として、措置鑑定時の状態および平成11年度末の状態の調査を行い、精神分裂病患者の暴力発動に関して、以下の知見を得た。i.妄想や幻覚に支配された他者に対する激しい攻撃は、比較的高年齢でなされ、発症後長い年月を経た中年期に発現する傾向があった。ii.攻撃時の緊張病状態および攻撃の方向性が定まっていることは、攻撃行為後の速やかな病状回復と相関した。iii.攻撃行為後に速やかな病状回復が見られる事例では、病前の社会適応がよい傾向が認められた。iv.大多数の攻撃行為は病勢増悪時に見られ、通院の中断や怠薬が大きく影響していた。通院中断の末に病勢増悪して措置入院に至った事例の通院中断期間は、3ヵ月以上1年未満が大半を占めるため、PSW等の充足等により精神障害者の受診行動を把握し、精神医療からの脱落を防ぐことができれば、精神障害者による自傷他害事件を減少させることが可能であろう。また、新規措置入院患者数の増減は、社会や国、県、受け皿としての病院、およびそれらを連携する医療体制によって大きな影響を受けると推測されるが、近年の新規措置入院患者数の増加には、警察官通報を主とする緊急医療システムの充実が大きくかかわっていると推測された。さらに、近年の新規措置入院患者の中には、措置症状のみならず、緊急に精神科治療を必要とする、いわゆる「精神科救急医療」の対象となるべき事例が包含されている可能性が示唆された。平成6年度から8年度の3年間に、県立岡本台病院で措置鑑定(2次鑑定)を受けた精神障害者230名、および警察署など栃木県内の他所で措置鑑定を受け措置一時預かりで県立岡本台病院に入院した精神障害者58名の計288名を対象として、措置鑑定時の状態および平成11年度末の状態の調査を行った。対象患者の大半は後方病院である栃木県内の精神病院に移送されていたため、後方病院から情報の提供を受けたが、不足している情報が多く、現在調査結果を補完中である。また、これと並行して、昭和50年度から平成10年度までの24年間に栃木県において新規措置入院になった患者の年次変化を検討したところ、新規措置入院患者数は昭和60年前後にいったん減少し、近年再び増加傾向にあることが判明した。精神障害者の申請・通報・届出等の別をみると、以前は一般人の申請が多かったのに対し、昭和60年ころからは警察官通報が著明に増加していた。鑑定実施率および措置入院率も増加しており、昭和59年の「宇都宮病院事件」以降に栃木県で推進された緊急医療体制の整備の結果が反映していると思われた。新規措置入院患者数の増減は、社会や国、県、受け皿としての病院、およびそれらを連携する医療体制によって大きな影響を受けると推測されるが、近年の新規措置入院患者数の増加には、警察官通報を主とする緊急医療システムの充実が大きくかかわっていると推測された。
環境化学物質の生体影響に関する時間生物学的研究

環境化学物質の生体影響について時間生物学的な視点から検討するために、明期(ZT3)または暗期(ZT15)に、89週齢の雄性C3Hマウスにベンツ[a]ピレン(BaP)またはN-エチル-N-ニトロソウレア(ENU)を投与したところ、BaPは明期でも暗期でも末梢血中の小核誘発に関しては影響しなかったが、暗期に投与すると肝臓において脂質合成に関与するFasn遺伝子の発現が促進した。ENUは明期に投与する方が小核誘発頻度が低く、p53標的遺伝子であるCyclin G1の発現が亢進し、DNA修復能力が高まっている可能性が示唆された。現代社会は、24時間型社会となり、労働時間や勤務形態が多様化し、生体リズムに変調をきたす深夜交代勤務者や夜型の生活をする人の数が増加している。しかしながら、環境汚染物質や食品中に残留する有害物質の安全性評価や健康影響評価を行う際、その多くは明期に被験物質を投与することが多く、時間生物学的な検討はほとんどなされてこなかった。そこで、本研究では、日常的に曝露される可能性が高いベンツ(a)ピレン(BaP)をモデル化合物として、マウスに明期(睡眠期)と暗期(活動期)にそれぞれ投与した場合や時差ぼけマウスに投与した場合の環境化学物質の生体影響について時間生物学的な視点から検討することを目的とした。本年度は、まず、4週齢の雄性C3H/HeSlcマウス(日本SLC)を午前8時午後8時の12時間の明暗サイクル下で4週間順化ざせ、午前8時をZTO(ライトon)として、肝臓における時計遺伝子(Clock, Per1, Bmal1など)および時計遺伝子の制御下にある遺伝子(PPARα, AhRなど)、さらにBaPの代謝と発がんに関与する子(Cyp1A1, Cyp1A2, Gstm1, Sult1a1, Gadd45βなど)の日内発現リズムを検討した。その結果、時計遺伝子やその制御下にある遺伝子は明確なリズムを刻み、Cyp1a2やAhRの発現量は明期の後半に高く、暗期の後半に低いという典型的な日内発現リズムが見られた。一方、Cyp1a1の発現量には、顕著な日内発現リズムは見られなかった。明期と暗期の一定時刻にBaPを腹腔内投与し、上述の遺伝子の発現経過を調べたところ、Cyp1b1が暗期の投与により特に発現量が増大することがわかり、遺伝子により変動が異なっていた。今後、BaPのDNA付加体形成や血中の生化学マーカー、脂質代謝などへの影響について明らかにする予定である。そこで、本研究では、日常的に曝露される可能性が高いベンツ(a)ピレン(BaP)をモデル化合物として、マウスに明期(睡眠期)と暗期(活動期)にそれぞれ投与した場合の環境化学物質の生体影響について時間生物学的な視点から検討することを目的とした。4週齢の雄性C3H/HeSlcマウス(日本SLC)を午前8時午後8時の12時間の明暗サイクル下で4週間順化ざせ、午前8時をZTO(ライトon)として、明期と暗期にBaPを投与し、骨髄に誘発される染色体異常の指標である末梢血中の網状赤血球中の小核誘発頻度を比較したところ、投与時刻による差は見られなかった。しかし、第I相酵素であるCYP、第II相酵素のグルクロン酸転移酵素(Ugtlal)のBaP投与後の肝臓、肺、骨髄における各遺伝子の発現解析を行ったところ、肝臓においては、Cy1a1p、Cyp1b1、Cyp1a2いずれの遺伝子も暗期投与群の方がより早い発現低下が見られた。また、ugt1a1の発現は、明期投与群では投与後48時間後に有意な増加を示したが、暗期投与群ではほとんど誘導されなかった。骨髄細胞と肺においては投与時刻によりCyp1a2の発現に違いが見られた。一方、BaPとはDNA損傷の種類が全く異なるアルキル化剤のENUを明期と暗期に投与したところ、小核誘発頻度に違いが見られ、暗期に投与する方がより誘発率が高いことがわかった。これらの結果は、化学物質の種類により明期と暗期での生体応答が異なり、また、臓器によっても応答が異なることを示しており、化学物質の安全性評価に時間生物学的な視点を考慮していくことが重要であることが示唆された。

本研究では、日常的に曝露される可能性が高いベンツ(a)ピレン(BaP)とN-エチル-N-ニトロソウレア(ENU)をモデル化合物として、マウスに明期と暗期にそれぞれ投与した場合の環境化学物質の生体影響について時間生物学的な視点から検討することを目的とした。4週齢の雄性C3H/HeSlcマウスを午前8時午後8時の12時間の明暗サイクル下で4週間順化ざせ、午前8時をZT0(ライトon)として、明期(ZT3)と暗期(ZT15)に各化合物を投与した。昨年までの研究により、末梢血中の網状赤血球中の小核誘発頻度を比較したところ、BaPは投与時刻による差は見られなかったが、ENUについては、暗期に投与する方がより誘発率が高いことがわかった。そこで、本年度は、ENUについては、明期と暗期での生体応答が異なる機序を解明するために、ENU投与後の骨髄細胞を採取し、細胞周期(G0/G1、S、G2期)をフローサイトメトリーにより測定するとともに、RT-PCRを用いてDNA修復酵素(MgmtおよびMlh1)やp53遺伝子の標的遺伝子(p21, Bax, Cyclin G1)の発現を調べた。その結果、細胞周期の割合には大きな影響はなかったが、各遺伝子発現は明期に投与した方が影響を受けており、DNA修復能力が高まっている可能性が示唆された。一方、BaPについては、投与後の血液生化学マーカーおよび肝臓の脂質代謝関連遺伝子の発現について検討したところ、明期でも暗期でも脂質分解に関与するPPARα遺伝子の発現が減少し、脂質合成に関与するFAS遺伝子が、暗期に投与するとより増加し、BaPは暗期に脂質代謝に影響を与えることが示唆された。これらの結果は、化学物質の種類により明期と暗期での生体応答が異なることを示しており、化学物質の安全性評価に時間生物学的な視点を考慮していくことが重要であることが示唆された。脂質代謝関連の遺伝子発現への影響については、まだ結果が出ていないが、既に実験済みで試料を保存してあるので、平成24年度に検討できる。時差ぼけマウスについては全く検討できなかったが、当初予定になかったENUについて検討でき論文化できた。よって計画はおおむね順調に進展していると思う。24年度が最終年度であるため、記入しない。BaPの場合、骨髄における染色体異常の指標となる小核試験において明期と暗期の投与に違いが見られなかったが、アルキル化剤でありBaPとは全く異なるDNA損傷性を示すENUは、明期と暗期の投与で有意な差が見られたので、当初の予定にはなかったが、ENUの明期と暗期の骨髄における影響について今後メガニズムを検討することとした。また、脂質代謝への影響と時差ぼけマウスにおける検討を今後行い、研究をまとめたいと考えている。
ロイコトリエンB4受容体BLT1が規定する新規樹状細胞サブセットの機能解析

ロイコトリエンB4第一受容体BLT1は、好中球や好酸球に多く発現し、炎症反応に関わる分子として研究が進められて来たが、近年の研究からBLT1が、T細胞等のリンパ球にも発現し、免疫反応にも関わることが明らかになって来た。しかしながら、免疫応答の司令塔である樹状細胞におけるその役割は不明な点が多い。申請者は、BLT1発現量の異なる新規樹状細胞サブセット(BLT1hi、BLT1lo)を同定し、サイトカイン産生能やT細胞分化誘導能に大きな差がある事を見出した。この成果は、脂質メディエーターおよびその受容体による免疫応答の制御機構を解明する上で重要な知見である。生理活性脂質ロイコトリエンB4の高親和性受容体であるBLT1の樹状細胞における役割には不明な点が多い。申請者はこれまでに、独自に樹立した抗BLT1単クローン抗体を用いて、樹状細胞にBLT1発現量の異なるサブセット(BLT1hi、BLT1lo DC)が存在することを見いだした。本研究では、BLT1の発現量の違いにより規定される新規樹状細胞サブセットの免疫応答における役割を明らかにすることを目的とし研究を行っている。DNAマイクロアレイを用いて、BLT1hiとBLT1lo樹状細胞におけるサイトカイン分泌能とT細胞分化誘導能の違いを生み出す原因遺伝子を調べた。その結果、Th1分化を誘導することが知られているIL-12p35,IL-36α,IL-36γといった遺伝子やTh2分化を誘導する事が知られるIL-10遺伝子がBLT1hi樹状細胞において高く発現していることがわかった。IL-12p35とIL-10においてはタンパク質レベルでもBLT1hi樹状細胞において高い発現を認めた。そこでIL-12の中和抗体を用いたところ、BLT1hi樹状細胞によるTh1分化誘導が抑制された。また、BLT1hi樹状細胞と比べて、BLT1lo樹状細胞ではIL-2の分泌能が高いことが明らかとなった。樹状細胞から分泌されるIL-2は、T細胞が分化・増殖を始めるのに重要な因子である事が知られているため、両サブセットを用いてT細胞増殖に対する影響を調べた結果、BLT1lo樹状細胞はBLT1hi樹状細胞に比べて、2倍ほどのT細胞増殖誘導能を持つ事がわかった。これらの結果から、BLT1の発現で規定される両樹状細胞サブセットはT細胞の分化と増殖を分担して免疫応答の活性化に関わっていると考えられた。また、細胞特異的なBLT1ノックアウトマウスを作製する為に、キメラマウスを作製したところ、五匹得られ、そのうち一匹はその遺伝型を仔に伝える事が出来た。現在、CAG-FLPeマウスと交配している。生理活性脂質ロイコトリエンB4の高親和性受容体であうBLT1の樹状細胞における役割には不明な点が多い。申請者はこれまでに、独自に樹立した抗マウスBLT1単クローン抗体を用いて、樹状細胞にBLT1発現量の異なるサブセット(BLT1hi、BLT1lo)が存在する事を見出した。本研究では、BLT1の発現量の違いにより規定される新規樹状細胞サブセットの免疫応答における役割を明らかにする事を目的とし、研究を行っている。BLT1hiとBLT1lo樹状細胞における遺伝子発現プロファイルから、MetaCoreを用いて両サブセットで異なる活性化パターンを示す転写因子の推定を試みた。その結果、BLT1hiではCpG DNA刺激によって、AP-1、Oct-1、c-Rel、BLIMP1、IRF3が、BLT1loでは、AP-1、RelA、E2F1、p53、STAT3が活性化していると推定された。これらin silico解析で挙げられた経路が実際に活性化しているか、WBを用いて検討したところ、BLT1hiではp38 MAPKが活性化し、BLT1loではRelAが活性化されている事がわかった。さらに上流のどの部分からシグナル伝達経路の違いが生じているのか解析を進めたところ、CpG DNAの受容体であるTLR9の切断パターンからBLT1hiにおいてはendolysosomeにBLT1においてはendosomeにTLR9が局在する事が考えられた。現在、オルガネラマーカーとの共細胞内染色によりさらなる検討を進めている。BLT1floxマウスは当初、CAG-FLPe Tgとの交配がうまく行かなかったので、飼育施設を変更した。やっと繁殖がうまく行き始めており、今後各種CREマウスとの交配を進めて行く。脂質免疫学DNAマイクロアレイを用いた解析より、当初わかっていなかったBLT1hi樹状細胞によるTh1、Th2分化誘導のメカニズムがおおよそわかってきたこと、また、キメラマウスのもつ標的遺伝子座がGermにのり、交配もうまく行っていること等により順調に進展していると判断している。

一方で、MetaCoreを用いてパスウェイ解析を行い、サイトカイン誘導の違いを生み出すメカニズムもある程度予測できてきていることも1つの要因である。今後は、これらの樹状細胞における異なるサイトカイン産生能の分子メカニズムの解明と、両サブセットのin vivoにおける機能解析を接触性皮膚炎等のモデルを用いて解析して行きたい。コンディショナルノックアウトマウスについては既に交配しているCAG-FLPeの系がうまく行き次第、CD11c-CREおよびLck-CREマウスと交配し、樹状細胞特異的ノックアウト、T細胞特異的ノックアウトマウスを作製する。なお、それらのマウスは既に入手確約済みである。ノックアウトマウスの作製に少し時間がかかったため、計上していた費用ほど増えなかった。また、消耗品等も節約して使用する事を徹底していたため、少し余剰費用を残す事が出来た。これから増えると考えられるコンディショナルノックアウトマウスの維持・管理費と研究成果を報告するために行く、国際学会の参加・渡航費用に当てる予定である。
妊産婦の受動喫煙に対する禁煙プログラムの開発

平成15年度より本年度まで各年度の4月、10月に妊婦の喫煙状況に関する定点調査を施行し、1041名の結果を分析した。本年度は尿中コチニン量を用いて妊婦の喫煙状況を客観的に把握することを目的とした。1.妊婦の随時尿を質問紙と同時に909名より回収した。(回収率87.3%)3.受動喫煙の尿中コチニン量への影響を検討するために、自己申告で「喫煙の経験がない」と回答した妊婦で、調査前24時間の受動喫煙が10本以上の53名と19本の33名の尿中コチニンを検討した。NicCheck値は全例で1以下を示し、受動喫煙の影響はNicCheck値1以下と判断された。また、NicCheck値2以上を示した症例は能動喫煙をしていると判断した。4.妊娠前(131名)もしくは妊娠後(170名)に禁煙したと回答した妊婦でNicCheck値が2以上を示した22名を虚偽の禁煙と判定した。虚偽の禁煙申告した妊婦は妊娠後禁煙した妊婦と比較して属性、妊娠背景、喫煙背景に差は認められなかった。5.虚偽の禁煙申告をした妊婦の割合は2003年2.5%、2004年5.9%、2006年11.6%と上昇していた。6.妊婦喫煙率は自己申告では2003年6.5%、2004年7.3%、2005年8.6%と若干の上昇にとどまったが、尿中コチニン量による補正を行った後の禁煙率は7.4%、9.1%、12.6%と大幅に上昇していた。7.2003年4月に健康増進法が施行され、妊婦やその周囲の人の禁煙が啓発されている。しかし妊婦の能動喫煙率の低下についての効果は認められず、むしろ妊婦が喫煙への罪悪感より虚偽の禁煙申告を行っている実態が明らかになった。今後、受動喫煙を含む喫煙プログラムの作成には、尿中コチニン量などの客観的な指標を用いる必要性がある。平成15年4月及び10月に兵庫県下の産婦人科施設にて妊婦の喫煙実態調査を施行した。320人の妊婦に文書ならびに口頭で研究の説明を行い、研究参加の同意を得た。同意した妊婦には診察までの間に質問紙への記入をお願いし、結果を解析した。質問紙は無記名で行い、個人が特定できないように配慮した。(1)調査対象の背景:平均妊娠週数は24.5週、平均年齢は29.1歳、232名(72.5%)が無職であった。(2)妊婦本人の喫煙状況:24名(7.5%)が調査時点で喫煙しており、63名(19.7%)が妊娠判明後に喫煙を中止していた。(3)妊婦の受動喫煙状況:喫煙妊婦の24名中家族が喫煙をしていなかったものは1名のみであった。一方、喫煙をしていない妊婦296名中176名(59.4%)の家族が喫煙をしており、この妊婦は受動喫煙にさらされていた。家族の喫煙本数は平均7.1本であった。(4)妊娠後の禁煙に影響を与える要因の検討:今回調査の320名中87名(27.1%)が妊娠直前まで喫煙していたが、このうち63名が妊娠と同時に禁煙していた。この事実は喫煙女性の72.4%が妊娠を契機に禁煙をしたことになる。禁煙した妊婦の特徴を禁煙しなかった妊婦と比較検討した。喫煙年数、ニコチン依存度に差は見られなかった。しかし妊娠前の喫煙本数では禁煙しなかった妊婦が禁煙した妊婦より有意に高値を示した。(19.0±7.8本vs13.8±6.8本p=0.004)禁煙しなかった好婦も調査時点では妊娠前と比較して喫煙量を減らしていた。(妊娠後10.7±7.0本)家族による受動喫煙と禁煙との間には関連はなかった。妊娠は女性が禁煙を行う重要な契機となることが判明した。この禁煙を産後にも持続させ永続的な禁煙に結びつける方法を今後検討していく必要がある。平成15年度より行っている妊婦の喫煙実態の定点調査を継続している。計4回の調査で得た652名の結果を分析した。(1)妊婦の喫煙率は8.4%であり、調査期間内での大きな変動は見られなかった。(2)妊娠直前には27.9%の女性が喫煙していたが、妊娠を契機に70.0%の女性が禁煙していた。妊娠を契機に禁煙した女性には妊娠前の喫煙本数を除く喫煙に関する項目(受動喫煙の有無を含む)に差は見られなかった。以上の結果は平成15年度の研究結果と同様であった。(3)一方、妊娠を契機に喫煙した女性の禁煙に対する意識には特徴が見られた。妊娠以前に禁煙した女性との比較では受動喫煙や本人の喫煙の状況や禁煙教育の経験などには差はないにもかかわらず、今後の禁煙継続の意志が不確実であった。妊娠以前には禁煙している女性では今後禁煙を継続すると回答が100%であったのに対し、妊娠を契機に禁煙した女性は52%のみが確実な禁煙継続を意識しており、12%は逆に出産後もしくは授乳後の喫煙の再開を意識していた。この結果より、妊娠を契機に禁煙した女性の禁煙に対する意識はむしろ喫煙妊婦と同じであり、将来の喫煙の再開の可能性を示唆していた。

(4)本年度は妊婦の随時尿を採取し、尿中ニコチンの測定に着手した。予備検討では本人の喫煙の有無については試験紙法のニックチェックが有用であり、受動喫煙の有無についてはELISA法が有用である可能性が高い。来年度以降は疫学調査の結果と尿中ニコチン測定結果とを用いて、受動喫煙と妊婦本人の喫煙に対する禁煙プログラムを作成する予定である。平成15年度より本年度まで各年度の4月、10月に妊婦の喫煙状況に関する定点調査を施行し、1041名の結果を分析した。本年度は尿中コチニン量を用いて妊婦の喫煙状況を客観的に把握することを目的とした。1.妊婦の随時尿を質問紙と同時に909名より回収した。(回収率87.3%)3.受動喫煙の尿中コチニン量への影響を検討するために、自己申告で「喫煙の経験がない」と回答した妊婦で、調査前24時間の受動喫煙が10本以上の53名と19本の33名の尿中コチニンを検討した。NicCheck値は全例で1以下を示し、受動喫煙の影響はNicCheck値1以下と判断された。また、NicCheck値2以上を示した症例は能動喫煙をしていると判断した。4.妊娠前(131名)もしくは妊娠後(170名)に禁煙したと回答した妊婦でNicCheck値が2以上を示した22名を虚偽の禁煙と判定した。虚偽の禁煙申告した妊婦は妊娠後禁煙した妊婦と比較して属性、妊娠背景、喫煙背景に差は認められなかった。5.虚偽の禁煙申告をした妊婦の割合は2003年2.5%、2004年5.9%、2006年11.6%と上昇していた。6.妊婦喫煙率は自己申告では2003年6.5%、2004年7.3%、2005年8.6%と若干の上昇にとどまったが、尿中コチニン量による補正を行った後の禁煙率は7.4%、9.1%、12.6%と大幅に上昇していた。7.2003年4月に健康増進法が施行され、妊婦やその周囲の人の禁煙が啓発されている。しかし妊婦の能動喫煙率の低下についての効果は認められず、むしろ妊婦が喫煙への罪悪感より虚偽の禁煙申告を行っている実態が明らかになった。今後、受動喫煙を含む喫煙プログラムの作成には、尿中コチニン量などの客観的な指標を用いる必要性がある。