hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
眼底動画像解析による脳血管障害早期発見のためのスクリーニング・システム

これにより,動脈および静脈の正確な輪郭線が抽出可能になり,視神経乳頭部付近の太い血管だけでなく,その他の細い血管の動的な動きまでも正確に解析できる可能性が高まった.更にこれにより,眼底血管の動脈硬化度を評価する指標を正確に計算できるようになった.今後の課題は,大規模なコホート研究データを本システムで解析し,同一患者の経年変化の追跡,現在の患者の将来予測,かつ適切な診断支援情報を与えることのできるシステムに成長させることである.また,高価な眼底カメラでなく,スマートホンのカメラで手軽に撮影し,眼底カメラと同等な解析のできるシステムにすることにより,医療施設の整備されていない発展途上国の診断支援にも大きく貢献することができる.眼底解析による脳血管障害早期発見のためのスクリーニング・システムの開発において,一般の眼科に普及している走査型レーザー検眼鏡の眼底動画に対し,被験者の瞬きや眼球運動に対するブレ補正などを行い,網膜血管の拍動を高精度で抽出した.また,静的観点からは,Convolutional Neural Networkを用い,実際に眼科医が動脈硬化診断のために注目する動脈と静脈が交叉する血管交叉部の自動検出に成功した.更に,視認性の極端に悪い眼底画像中の血管輪郭線の抽出にも成功した.これにより,細い血管の動的な動きまでも正確に解析できるようになり,さらに正確な動脈硬化度の評価ができるようになった.平成27年度に抽出した拍動情報(脈波)から動脈硬化の判別を行う.網膜血管の異常は脳細動脈血管における動脈硬化のスクリーニング指標として有用であることが統計的に示されている.即ち,脈波から網膜血管の動脈硬化の自動判別が可能になれば,CTやMRIなどの精密検査に移る前に非常に簡便に脳血管動脈硬化のスクリーニングができる.動脈硬化患者と健常者のそれぞれの眼底動画を取得し,それぞれの脈派に対して,機械学習を行い,動脈硬化患者群と健常者群の2つのグループ間の特徴量の差を解析する.これにより,脈波から動脈硬化の自動判別を行うプロトタイプ・システムを開発する.臨床データの取得は平成27年度に引き続き継続的に行う.(動脈硬化度の指標作成)動脈硬化の進行度を定量的に評価するための指標を作成する.動脈硬化かどうかの単純な判別だけではなく,動脈硬化の進行度の指標となる特徴量を拍動波形から抽出する.血管の柔らかさは拍動の柔軟さに反映される.ここでは,拍動から抽出した脈波の動力学的な特徴を捉え,そのダイナミクスを規定するパラメータを動脈硬化度の指標とする.(脳内血管の動脈硬化予測スクリーニング・システムへの展開)脳血管障害で死亡した患者の眼底動画を調査することにより,網膜抹消血管の動脈硬化と脳内血管の動脈硬化の関連を明らかにし,本システムを脳内血管の動脈硬化予測スクリーニング・システムへと発展させる.これが本研究の最終目標である.これにより,CTやMRIなどの精密検査に移る前に,非常に簡便に脳血管動脈硬化のスクリーニングができる.臨床データの取得は引き続き継続的に行う.総合領域今年度の研究成果の公表が次年度が適当であると判断し,そのための経費を次年度に繰り越した.今年度の研究成果の公表が次年度が適当であると判断し,そのための経費を次年度に繰り越した.次年度直接経費総額(1,248,169円)消耗品費(各種コンピュータ関連消耗品190,000円,文房具類他80,000円);旅費(学会発表東京1回x2人176,000円,学会発表
肝線維化過程における塩基性線維芽細胞成長因子の動態と病態生理学的意義について

慢性肝障害の肝線維化過程におけるb-FGFの臨床的意義を明らかにするため、各種肝疾患患者の血清および肝組織中のb-FGFを測定するとともに、肝組織内のbasic-FGFの局在ついて検討した.脂肪肝5例、慢性肝炎10例,肝硬変15例,肝癌9例を対象とした。血清および肝組織中のb-FGF値はモノクロナール抗体を用いたサンドイッチEIA法により測定した。血清P-III-P,IV-C(7s domain),ヒアルロン酸を測定、また生検肝組織所見をKnodellらのHAIscoreに従って算定し、血清b-FGF値との相関を検討した。肝組織中のbasic-FGFの局在はホルマリン固定パラフィン切片を用い、proteinase-K処理による抗原賦活化後,抗ヒトb-FGFモノクロナール抗体およびmyofibroblastの細胞骨格である平滑筋アクチン抗体を用いて連続切片上で酵素抗体間接法を行い対比検討した.血清b-FGF値は慢性肝炎13.6pg/mlと対照群の脂肪肝9.5に比し明らかな上昇は認められなかったが、肝硬変では29.6pg/mlと脂肪肝、慢性肝炎に比べ有意に高値を示した。肝癌でも36.0pg/mlと著明に上昇を示したが、肝硬変群との間に明らかな差はみられなかった。肝組織中のb-FGFは硬変肝で168.2pg/mlと非硬変肝85.8に比べ明らかに上昇を認め,臨床病期別には代謝期33.6pg/mlと非代謝期12.4に比べ高値を示し、肝での蛋白合成能との関連が示唆された。血清IV-C、PIIIP、ヒアルロン酸との間に相関はみられなかったが,HAIscoreとの対比では,特にcategoryIV(線維化)との相関がみられ、肝線維化の進行に伴う血清b-FGF値の上昇が示された。肝組織内b-FGFの局在は,線維性隔壁内および拡大を示した門脈域内の紡錘型細胞に陽性で,連続切片法を用いた平滑筋アクチンとの対比上,多くはmyofibroblastに]相当すると考えられた。平成11年度は、各種進行段階にある患者検体を用いて、慢性肝疾患における塩基性線維芽細胞成長因子(Basic-fibroblast growth factor:b-FGF)の変化について、免疫組織化学ならび生化学的に検討した。方法としては、診断的.治療的必要性から肝生検を行った各種線維化段階(慢性非活動性肝炎:CPH,慢性活動性肝炎:CAH,肝硬変:LC)にある患者肝組織とその同一時期の患者血清を用い行った。形態学的検討は肝組織内のb-FGFの局在を酵素抗体間接法により染色して行った。また生化学的検討は、単位容積あるいは重量あたりの血清および肝組織(ソニケーター処理にて粉砕)におけるb-FGF量をサンドイッチEIA法を応用して計測した。結果、肝硬変患者肝組織においてb-FGF陽性反応は伊東細胞、線維芽細胞とその移行期にあるmyofiboblastに陽性と考えられた。この所見をさらに確実なものとするために、免疫電子顕微鏡的観察や特異的細胞抗原の同定、すなわち伊東細胞におけるdesminやmyofibroblastにおけるf-actine,alpha-smooth muscle actinなどの検索が併せて必要と考えている。またこのb-FGF陽性反応が、切片中の全ての同細胞系に陽性を呈しない点に関し解明する必要性があると思われる。その一因としては、線維化段階の差異により、活性化される細胞種とその数に変化が生じるためと考えられ、例数を重ねることにより一端が明らかとなると考えている。一方患者血清および肝組織中のb-FGF量の変化については、現在のところ個体間のばらつきが大きく、その計測方法と計測時期について再検討中である。すなわち肝組織での計測において、乾燥重量,湿重量いずれを基準とすべきか検討中である。また血清については採血時期による差異がみられ、実際の肝組織内での変動を反映したものであるか疑問が提起された。これらはtransaminaseなど炎症マーカー、および既存の線維化マーカとの対比を行うことで一定の見解が得られると考えられ,肝組織同様例数を重ねる必要性が示された。実験動物モデルによる検討は、現在四塩化炭素により肝硬変を作成中であり、今後開始の予定である。

肝癌でも36.0pg/mlと著明に上昇を示したが、肝硬変群との間に明らかな差はみられなかった。肝組織中のb-FGFは硬変肝で168.2pg/mlと非硬変肝85.8に比べ明らかに上昇を認め,臨床病期別には代謝期33.6pg/mlと非代謝期12.4に比べ高値を示し、肝での蛋白合成能との関連が示唆された。血清IV-C、PIIIP、ヒアルロン酸との間に相関はみられなかったが,HAIscoreとの対比では,特にcategoryIV(線維化)との相関がみられ、肝線維化の進行に伴う血清b-FGF値の上昇が示された。肝組織内b-FGFの局在は,線維性隔壁内および拡大を示した門脈域内の紡錘型細胞に陽性で,連続切片法を用いた平滑筋アクチンとの対比上,多くはmyofibroblastに]相当すると考えられた。
原核、真核生物の複製開始蛋白質の活性制御機構の解明

DnaAは大腸菌染色体DNAの複製開始蛋白質である。DnaAがDNA複製反応を開始するためには、DnaAは複製開始反応前に不活性なADP結合型からATP結合型に再活性化される必要がある。この再活性化に関わる因子として重要なのが、膜リン脂質である。私は、膜リン脂質とDnaAとの相互作用の分子機構を明らかにすることが、DnaAの活性化機構の解明に不可欠と考え、DnaAの膜結合ドメイン(Lys327-Ile344およびAsp357-Val374)に変異を導入した多数の変異DnaAを構築し、その遺伝生化学的な解析を行った。その結果、膜リン脂質がDnaAのArg328及びLys372とイオン的に結合することを示唆し、膜リン脂質が不活性なADP結合型DnaAをATP結合型に活性化する分子機構を提唱した(J. Biol. Chem. 276, 7450-7456 (2001), J. Biol. Chem. 275, 4513-4518(2000), Biochem J. 362, 453-458 (2002))。また私は、膜リン脂質がDnaAのDNA結合を抑制するという全く新しい活性を見出した。DnaAはDNAに対して非特異的および特異的に結合する。この内DnaAの非特異的なDNA結合は、DnaAの膜結合ドメイン(Lys327-Ile344およびAsp357-Val374)を介していることを示唆し、報告した(J. Biochem. (Tokyo) 131, 419-425 (2002))。一方DnaAの特異的なDNA結合に対する、種々の膜リン脂質の阻害効果を検討したところ、この阻害には膜リン脂質が酸性部分を持つこと(酸性リン脂質であること)、および膜を構成するリン脂質の流動性が関与することが明らかになった(Mol. Microbiol. 46, 245-256(2002))。以上は、膜リン脂質がDnaAの活性化に関与するばかりか、細胞周期のある場面においては、DnaAの特異的なDNA結合を阻害し、複製開始反応を抑制することによって、細胞周期に呼応した染色体複製反応を制御するという、全く新しい可能性を示唆している。また、私は、高等生物の複製開始因子ORCの研究も行っており、ORCがDnaAと同様に、膜リン脂質と相互作用することを世界で初めて見出し、報告した(Biochem J. 362, 395-399(2002)))。以上の事実はDnaAと同様の活性調節機構がORCにも保存されていることを示唆している。
悪性高熱症CICR亢進症例におけるリアノジン受容体突然変異の検索及びその解析

東京大学医学部薬理学教室に保存されている、CICRが異常に亢進している日本人悪性高熱症患者三人から採血してgenomic DNAを抽出し、PCR法を用いて90組のプライマーを作製して106個のエクソン部分を増幅した。そのDNA配列をオートシークエンサーを用いてシークエンス解析し、リアノジン受容体遺伝子タイプ1(RYR1)の全塩基配列を決定した。そのデータを既に明らかになっている正常人のものと比較した。その結果、三人の患者ともRYR1遺伝子のC末部分の膜貫通領域(R4645Q,P4668S,L4838V)に、アミノ酸の変異を伴う突然変異を発見した。この三つの突然変異をウサギのRYR1チャネルに導入し、CHO cellに発現し、カフェインに対する感受性を調べたところ、R4645Q,L4838Vで、感受性の亢進がみられた。この変異の存在する場所は、カルシウムチャネルを形成している場所であり、この突然変異によりカルシウムチャネルの機能亢進が引き起こされ、悪性高熱症が発症したと推察される。東京大学医学部薬理学教室に保存されている、CICRが異常に亢進している日本人悪性高熱症患者三人の血液からgenomic DNAを抽出し、PCR法を用いてRYR1遺伝子の全塩基配列を決定する作業をさらに進めた。昨年度までに、この作業の1/2を終了しており、今年度は、残り2/3の作業をすべて終了することができた。つまり、三人の患者のRYR1遺伝子106個のエクソンすべての検索を終了した。三人の患者ともRYR1遺伝子のC末部分にそれぞれアミノ酸の変異を伴う突然変異を発見した。現在、この突然変異の検索法に関し、特許を出願中なので、詳しい位置に関しては、今は公表できない。さらに、このアミノ酸変異を培養細胞に導入してCICRを測定し、悪性高熱症を引き起こす原因となりうるかどうか検証中である。その結果がでたら、すぐに、論文として発表予定である。東京大学医学部薬理学教室に保存されている、CICRが異常に亢進している日本人悪性高熱症患者三人のgenomic DNAを抽出し、PCR法より100組のプライマーを用いて106個のエクソンよりなるRYR1遺伝子全塩基を増幅し、それをプラスミドベクターに組み込んだ。そのベクターをクローニングし、1エクソンにつき、5クローン以上をシークエンサーを用いて解析し、RYR1遺伝子の全塩基配列を決定した。その結果、三人の患者ともRYR1遺伝子のC末部分の膜貫通領域(R4645Q、P4668S、L4838V)に、それぞれアミノ酸の変異を伴う突然変異を発見した。それぞれの変異を、培養細胞に導入して、カフェインに対するCa^<2+>放出の反応を見たところ、R4645QとP4668Sの変異では、反応の亢進が見られた。現在、さらに検証を進めており、その結果をまとめて、論文として発表予定である。
細胞老化により誘発される持続的炎症シグナルの分子機構と癌微小環境に及ぼす影響

細胞老化とは生体に備わった恒常性維持システムの一つであり、正常細胞にDNA損傷などの発がんの危険性が加わると誘導される不可逆的細胞増殖停止である。最近、細胞老化をおこすと、様々な炎症性サイトカインが大量に分泌されることが明らかになった。今回、この細胞老化にともなうサイトカインの持続分泌現象に着目しがん微小環境への影響を検討した。その結果、申請者らは肥満にともない発症する肝癌組織において、肝臓の間質に存在する肝星細胞が細胞老化をおこし、炎症性サイトカインを持続分泌する発癌に促進的な、がん微小環境を形成することを明らかにした。さらにこの病態における細胞老化の誘導機構、炎症シグナルの経路を同定した。正常細胞にDNAダメージなど強いストレスが加わると、細胞に本来備わった癌抑制機構として、不可逆的細胞増殖停止である「細胞老化」が誘導される。しかし細胞老化を起こすと細胞が死滅せず長期間生存し続けることから、細胞老化は、初期には癌抑制機構として働くが、長期的には生体にとってなんらかの慢性的な不利益を及ぼす可能性があると考えられる。本研究においては、細胞老化による炎症性サイトカイン分泌の分子機構を明らかにするため、まずはTLRシグナルとオートファジー特異的に分解されるp62タンパク、ミトコンドリア障害に着目し実験を行った。TLRシグナル炎症シグナルの誘導に、リガンドの違いによって様々なToll様レセプターシグナルが関与するが、ヒト正常線維芽細胞において細胞老化を誘導する際に、TLR4をノックダウンしたところ、炎症性サイトカィンの発現が著しく低下することが明らかになった。つまりヒト正常線維芽細胞においては、TLR4を介するシグナルが細胞老化に伴う炎症性サイトカインの発現に関与していると考えられた。p62タンパクヒト正常線維芽細胞に細胞老化を誘導したところP62の発現上昇を認めた。その際P62の発現をノックダウンすると、炎症性サイトカインの発現が著しく低下することが明らかになった。このことから、p62の高発現も細胞老化に伴う炎症性サイトカインの発現に関与していると考えられた。ミトコンドリア障害ヒト正常線維芽細胞の細胞老化においてミトコンドリア障害は認められ、ROSの産生も上昇するが、培養上清において、ミトコンドリアDNAの放出はコントロールと比較してあまり顕著ではなかった。このことからミトコンドリアDNAを介する炎症シグナルの影響は小さい可能性がある。正常細胞には異常細胞を増やさないためのさまざまな恒常性維持システムが備わっている。そのひとつが「細胞老化」である。細胞老化とは正常細胞にDNA損傷など発癌の危険性のあるストレスが加わると、誘導される不可逆的細胞増殖停止である。本研究では、細胞老化によって引き起こされる持続的サイトカイン分泌が癌微小環境形成に及ぼす影響を解析している。昨年度までの研究で、化学発癌による肝癌誘発実験で形成された肝がん部に存在する線維芽細胞において細胞老化が誘導され、それにともなって炎症性サイトカインが発現する癌微小環境を形成することを確認できた。炎症性サイトカインの発現は、TLR4を介するシグナルによって誘導される可能性が示唆されていたが、TLR4KOマウスを用いて、同様の肝癌誘発実験を行ったところ、予想に反してTLR4KOマウスで発生する肝腫瘍数は野生型と比べて減少することはなかった。今年度は他のTLRノックアウトマウスを用いて検討したところ、TLR2KOマウスで、肝がん形成の抑制が認められた。TLR2のリガンドとしては、グラム陽性菌の外膜の構成成分であるリポタイコ酸などが知られている。そこで、マウスの腸内細菌を調べたところ、肥満マウスではグラム陽性菌が著しく増えていたことから、腸肝循環を介して肝臓に到達したグラム陽性菌の膜成分が、TLR2を介して炎症性サイトカイン誘導に関わっている可能性が示唆された。正常細胞にDNAダメージなど発癌の危険性のあるストレスが加わると、不可逆的細胞増殖停止である細胞老化が誘導される。細胞老化はアポトーシスとならぶ重要な発癌防御機構であるが、アポトーシスとは異なり細胞老化をおこしても細胞が死滅せず長期間生存し続ける。本研究では、細胞老化の誘導・維持によって引き起こされる持続的サイトカイン分泌の分子機構と、その癌微小環境形成に及ぼす影響を解析している。昨年度までの研究で、培養ヒト正常線維芽細胞において、細胞老化が誘導される際に炎症性サイトカインの発現は、TLR4を介するシグナルによって誘導される可能性が示唆された。

そこで、次に個体においてもTLR4を介するシグナルによって細胞老化による炎症性サイトカイン分泌が制御され、発がんに促進的な微小環境を形成しているのかどうか調べた。我々はマウスを用いた化学発癌による肝癌誘発実験で、30週齢の時点では普通食摂取群に比して高脂肪食摂取群では非常に高頻度に肝がんが発生し、さらに肝がん部に存在する線維芽細胞において、細胞老化が誘導され、それにともなって炎症性サイトカインが発現することを見出している。そこでこの系を利用して、H24年度はこのマウスの肝癌誘発実験系で細胞老化を起こした肝がん部の線維芽細胞における炎症性サイトカイン発現もTLR4を介しているかどうか調べるため、TLR4KOマウスを用いて、同様の肝癌誘発実験を行った。しかし、予想に反してTLR4KOマウスで発生する肝腫瘍数は野生型と比べて減少することはなかった。上記の結果から、細胞老化における炎症性サイトカインの発現上昇と関係している経路として、TLR4シグナル、p62タンパクを介する経路が候補として考えられた。今後の実験はこれらの経路に絞って行う。今年度、研究の方向性が絞られた点については、順調に進展したと評価できる。25年度が最終年度であるため、記入しない。前年度の計画ではTLR4KOマウスとTLR2KOマウスを用いて実験を行う予定であった。しかし、この肝がん誘発実験は少なくとも30週間を要するため、TLR4KOマウスを用いた実験は終了したが、TLR2KOマウスを用いた実験は年度をまたいで継続中であり、来年度にかけて実験を終了する予定である。培養ヒト正常線維芽細胞において細胞老化を誘導する際に発現する炎症性サイトカインの発現はTLR4を介する可能性が示唆された。また、我々はマウス生体において、高脂肪食摂取にともなう肝がん部に存在する線維芽細胞で、細胞老化にともなって炎症性サイトカインが発現することを見出している。そこで、TLR4KOマウスを用いて、同様の実験を行い炎症性サイトカイン発現が抑制されるのか、またそれに伴い肝腫瘍形成がどのように変化するのかについて検討する。TLR4ノックアウトマウスは購入する。また、同様にp62ノックアウトマウスを用いて検討を行う予定であるが、p62ノックアウトマウスは開発者から供与してもらわなければならないため、申し出る予定である。前述したように、高脂肪食を負荷する肝癌誘発実験では、培養線維芽細胞を用いた予備実験の結果とは異なる結果が得られた。この理由として、今回行った個体の実験では、培養環境では存在しない高脂肪食に伴う著明な脂質の蓄積を伴っていることが培養系との違いとして考えられた。そこで、次年度は、脂質やリポタンパクをリガンドとして認識するTLRに着目し、TLR2(継続中),TLR1等のKOマウスを用いて解析する。また、昨年度はp62にも着目する計画であったが、p62を介する炎症はTLRとは別の経路と考えられるので、来年度はまずはTLRシグナルに着目した炎症シグナル経路の関与を明らかにすることを優先する。
観測および数値シミュレーションから探る銀河形成・進化と暗黒物質の関連

本年度は前年度の研究結果に分子雲同士の衝突による誘発的な星形成を加え,分子雲質量関数の時間発展と銀河円盤中の星形成過程を整合的に評価すことに取り組んだ.本研究で解明された主要な事項は,主に以下の4点に集約できる.1)分子雲衝突誘起で形成された星からのフィードバックは, 30万太陽質量以上の大質量分子雲を100万年以内に破壊するが, 30万太陽質量以下の小質量分子雲の微分数密度は,衝突の影響が小さく基本的には単一冪分布を示す.2)分子雲衝突誘起の星形成は,その8割程度が30万太陽質量以上の大質量分子雲由来である.内訳としては1万太陽質量程度の小質量分子雲との衝突が高頻度だが形成できる星質量が相応に小さく限られており, 30万太陽質量の大質量分子雲同士の低頻度衝突と同程度の寄与である.3)現在観測される分子雲衝突現象は1万太陽質量程度の小質量分子雲同士の衝突であり,これは小質量分子雲の数密度が高いことに起因する.今後の電波観測で同定されうる質量ペアを推定したところ,星形成に重要と目される大質量分子雲同士の衝突現象は銀河円盤全体を観測できたとしても数10個程度しか同定できない可能性があると明らかになった.従って今後の観測では,数100個程度同定可能と思われる質量比の大きくついたペアを電波および光赤外で観測することが良い方針であると提案した.4)大質量分子雲は星からのフィードバックから生き残った種族であるため,年齢が1億年程度と非常に長いとわかった.一方で星からのフィードバックにより破壊される時間スケールは1000万年かそれ以下程度であるので,寿命は短い.従って観測から示唆されている分子雲の長寿命性と短寿命性という二分的議論は,分子雲の「年齢」と「寿命」という異なる時間スケールの評価にそれぞれ対応していることを明らかにした.29年度が最終年度であるため、記入しない。29年度が最終年度であるため、記入しない。銀河内部での主要な現象である星形成活動は銀河の性質を著しく変化させる要因であるため,銀河形成・進化と暗黒物質の関係解明において重要な現象の一つである.しかし星形成活動は種々の物理素過程を含み極めて複雑であるため,宇宙論的な大規模な統計量を扱う際に簡単な仮定に基づいたモデル化が不可避となっている.そこで今年度は,星形成活動の前段階となるガスの生成・破壊について基礎過程に基づいた定式化を集中的に行なうことで,実際に銀河内部で起こる物理現象と観測量との対応関係を明らかにすることに取り組んだ.ガスの中でも星形成の母体となるのは巨大分子雲と呼ばれる天体で,100太陽質量以上も質量を持つ巨大なガスの塊である.近年の大規模な電波観測から,地球が存在している天の川銀河,およびその近傍に存在する銀河において,巨大分子雲が大量に同定され始めている.これにより巨大分子雲の質量分布(質量関数と呼ばれる)が銀河の領域ごとに明らかにされ始めている.また近年の3次元の高解像数値シミュレーションにより,分子雲の生成は多数回の衝撃波圧縮に駆動されるという示唆が得られている.本研究では,多数回の衝撃波圧縮によって分子雲が形成・成長するという描像を銀河スケールに適用し,銀河スケールにおける巨大分子雲質量関数の時間発展方程式を定式化した.本研究の意義・特徴は,星形成活動の主な段階として近年注目を集めている巨大分子雲同士の衝突現象も含めたことにより先行研究をより精密に再定式化した点であり,また星形成によって破壊された分子ガスが次世代分子雲形成に寄与する効果も導入したという点にある.この定式化から数値計算を実行し,観測されている巨大分子雲質量関数の銀河領域ごとの差異を再現することに成功した.海外研究機関におけるセミナー2回と学会発表10回を行い,国内外問わず積極的に発表した.こうした発表の機会を通して海外も含む他研究機関の研究者と活発に議論を交わしたことにより,本課題で考慮されていなかった現象(例えば大質量巨大分子雲の生成が抑制されてしまう効果や小質量分子雲を生成する機構)が必要であることを理解し,本研究でのモデル化に反映させることができた.さらに研究成果・発表が評価され,口頭発表とポスター発表で各1回表彰を受けた.また次年度の早い段階で論文1本,要旨集1冊に研究成果が出版・掲載予定となっている.さらに多数回の高精度な計算を必要としたため,数値計算手法の知識および技術の向上があり,これは今後の研究にも広く活かすことができる.星間ガスは多相構造になっており,その中でも特に星形成活動に主要な材料となるのは水素分子の集合体である巨大分子雲と呼ばれる天体である.従って銀河の星形成活動を理解するにあたり,多相な星間ガスの時間進化を整合的に取り扱い巨大分子雲の形成・進化を明らかにすることは本質的に重要である.近年の大規模な電波観測により,天の川銀河およびその近傍に存在する銀河において巨大分子雲が大量に同定され始めた.また近年の3次元の高解像数値シミュレーションにより,磁化した星間ガスから巨大分子雲を生成するためには,多数回の衝撃波圧縮が必要であると示唆されている.本年度は星形成により破壊されたガスが次世代巨大分子雲として再生される効率の定量化,巨大分子雲が持つ質量の最小値の制限,および現在までの観測では確認されてこなかった相の星間ガスの重要性の指摘に取り組んだ.本研究で解明された主要な事項は,主に以下の3点に集約できる.

1)太陽質量の100万倍以上も重い大質量な巨大分子雲は銀河の渦状腕構造に沿ってのみ存在する一方で,渦状腕構造の隙間の空間には軽い巨大分子雲のみが選択的に存在しているという近傍銀河での観測結果は,超音速衝撃波生成機構となっている大質量星や超新星残骸の発生率が渦状腕領域では渦状腕間領域の6倍程度であると考えると説明可能である.2)星形成により破壊された分子ガスのうち,渦状腕領域では1%程度が次世代巨大分子雲の生成に再利用されており,一方で渦状腕間領域ではその効率は40%にも達する.3)現在までの観測では空間分解能が不足しており同定に至っていないと考えられている最小の巨大分子雲が太陽質量の1万倍程度の質量を保持していると考えると,観測されている質量関数を説明可能である.これらの内容について,招待講演2回と学会発表8回を行い,さらに海外研究機関におけるセミナー7回と,国内外問わず積極的に発表した.このような発表の機会を通じて,観測結果の解釈,星間空間における冷却過程,および本研究を発展させるべき方向性について,理解が深まった.研究成果は論文1本,要旨集2冊に出版され,次年度の早い段階でさらに要旨集1冊にも掲載予定となっている.本年度は前年度の研究結果に分子雲同士の衝突による誘発的な星形成を加え,分子雲質量関数の時間発展と銀河円盤中の星形成過程を整合的に評価すことに取り組んだ.本研究で解明された主要な事項は,主に以下の4点に集約できる.1)分子雲衝突誘起で形成された星からのフィードバックは, 30万太陽質量以上の大質量分子雲を100万年以内に破壊するが, 30万太陽質量以下の小質量分子雲の微分数密度は,衝突の影響が小さく基本的には単一冪分布を示す.2)分子雲衝突誘起の星形成は,その8割程度が30万太陽質量以上の大質量分子雲由来である.内訳としては1万太陽質量程度の小質量分子雲との衝突が高頻度だが形成できる星質量が相応に小さく限られており, 30万太陽質量の大質量分子雲同士の低頻度衝突と同程度の寄与である.3)現在観測される分子雲衝突現象は1万太陽質量程度の小質量分子雲同士の衝突であり,これは小質量分子雲の数密度が高いことに起因する.今後の電波観測で同定されうる質量ペアを推定したところ,星形成に重要と目される大質量分子雲同士の衝突現象は銀河円盤全体を観測できたとしても数10個程度しか同定できない可能性があると明らかになった.従って今後の観測では,数100個程度同定可能と思われる質量比の大きくついたペアを電波および光赤外で観測することが良い方針であると提案した.4)大質量分子雲は星からのフィードバックから生き残った種族であるため,年齢が1億年程度と非常に長いとわかった.一方で星からのフィードバックにより破壊される時間スケールは1000万年かそれ以下程度であるので,寿命は短い.従って観測から示唆されている分子雲の長寿命性と短寿命性という二分的議論は,分子雲の「年齢」と「寿命」という異なる時間スケールの評価にそれぞれ対応していることを明らかにした.本課題でこれまで取り扱った銀河円盤部にとどまらず,巨大分子雲衝突現象が重要になると考えられる銀河中心部における質量関数の統御機構を,これまでのモデルを衝突現象に特化して発展させることで明らかにする.これにより,銀河の中心から外縁部にいたるまでの星形成前段階の描像を確立する.一方で巨大分子雲の自己破壊については,破壊機構のモデル化に不定性がある.
CD-DST法を用いた新規抗癌剤の至適濃度の検討

CD-DST法での抗癌剤接触濃度は臨床での奏効率にあわせるように接触条件を設定する他の既存の感受性試験法とは異なり,各薬剤のarea under curve(AUC)をIn vitroで再現するように設定されている.従ってより理論的にまた前臨床の段階で新規抗癌剤を検討することが可能である.そこで新規抗癌剤として肺癌領域で期待されるDOC,CPT-11,NVBなどについて本法における至適薬剤接触条件を検討した.2.次いでヌードマウス(5-7週齢,Balb/c-nu/nu/mice,日本クレア,東京)を用いてin vivoとin vivoの相関について検討することとした.薬剤投与開始時と投与後14日目の推定腫瘍重量W0とW14の比をと無治療群と比較してT/Cを求め50%以下を感受性陽性とした.CDDP,ADM,及びNVBについてPC13,PC14を用いてまず感受性を調べたところ,CDDP,ADMでは感受性が認められなかったが,NVBては65%と陽性を示した.これはIn vitroであるCD-DST法での感受性結果とほぼ一致していた.現在その他の細胞株と新規薬剤を用いてin vivoとin vivoが相関するか検討中である.CD-DST法での薬剤接触濃度は各薬剤のarea under curve(AUC)をin vitroで再現するように設定される.したがって臨床での奏効率にあわせるように接触条件を設定する既存の方法とは異なり,より理論的にまた前臨床の段階で新規抗癌剤を検討することが可能である.そこで,本法を用いて新規抗癌剤として期待されるDOC,CPT-11,NVBについて本法における至適接触条件を検討するため,まず肺癌臨床検体252例に対しCD-DST法を用いた抗癌剤感受性試験を行い,結果が治験での奏効率に比べて妥当であるか検討した.効果判定は画像解析法により抗癌剤接触群と非接触群とのコロニー体積比よりT/C ratio(%)を求め,100-T/C ratio(%)を算出し,50%以上を持って感受性陽性とした.臨床検体は切除標本127例,気管支鏡下生検検体39例,表在リンパ節生検検体27例,縦隔リンパ節生検検体27例,胸水29例,心嚢液3例の計252例を用いた.測定成功率は切除標本が86.6%,気管支鏡下生検検体が38.5%,表在リンパ節生検検体が85.2%,縦隔リンパ節生検検体が68.3%,胸水が58.6%,心嚢液が100%であった。各薬剤別感受性陽性率は,従来の抗癌剤ではCDDP17.8%,CBDCA12.8%,VDS27.0%,VP-16 22.4%であったが,新規抗癌剤ではDOC41.2%,PAC46.7%,CPT-11 43.6%,NVB40.2%と従来のものと比べ高い値を示し,治験と比べてもやや高値であった.現在,新規抗癌剤の至適接触濃度の確認をするため,in vivoでの測定を行いin vitroとの相関関係を検討中である。すなわち,肺癌細胞株を移植したヌードマウスにMTD量の新規抗癌剤を投与し,担癌ヌードマウスの腫瘍増殖抑制率を求める.これとAUCに基づく薬剤接触条件でのCD-DSTの相関を検討しているところである。CD-DST法での抗癌剤接触濃度は臨床での奏効率にあわせるように接触条件を設定する他の既存の感受性試験法とは異なり,各薬剤のarea under curve(AUC)をIn vitroで再現するように設定されている.従ってより理論的にまた前臨床の段階で新規抗癌剤を検討することが可能である.そこで新規抗癌剤として肺癌領域で期待されるDOC,CPT-11,NVBなどについて本法における至適薬剤接触条件を検討した.2.次いでヌードマウス(5-7週齢,Balb/c-nu/nu/mice,日本クレア,東京)を用いてin vivoとin vivoの相関について検討することとした.薬剤投与開始時と投与後14日目の推定腫瘍重量W0とW14の比をと無治療群と比較してT/Cを求め50%以下を感受性陽性とした.CDDP,ADM,及びNVBについてPC13,PC14を用いてまず感受性を調べたところ,CDDP,ADMでは感受性が認められなかったが,NVBては65%と陽性を示した.これはIn vitroであるCD-DST法での感受性結果とほぼ一致していた.現在その他の細胞株と新規薬剤を用いてin vivoとin vivoが相関するか検討中である.
超強力細胞保護ペプチドＣＰＰの機能と応用技術に関する研究

代表者らは寒冷地の生物が有する幾つかの不凍蛋白質(AFP)が強力な細胞保護機能を併せ持つことを見出しCPPと名付けた。本研究では、実用化に最適なCPPを見出す為に様々なAFPの組成、分子構造、不凍・細胞保護機能等を詳細に解析し、最終的にカレイ由来のCPPを用いてマウス膵島細胞を数日間生かし続ける技術開発に至った(2013年PLoS ONE)。また、世界初の菌類AFPのX線構造解析(2012年PNAS)やCPP3のNMR構造解析(2013年JBNMR)等に関する基礎と応用の成果を3年間精力的に発表した:論文総数23(うち査読有19)、学会等発表数40(うち招待講演14)、特許出願数1。本研究の目的は、水溶液中の細胞の生存率を高める新規物質である"超強力細胞保護ペプチドCPP"の機能発現メカニズムを解析し、CPPの応用技術を開発することである。CPPは一般には不凍蛋白質(Antifreeze Protein,略称AFP)と呼ばれ、氷結晶の表面に結合して水溶液の凍結を妨げる機能を有している。すなわちCPPは細胞表面にある水分子の凍結を阻害することで細胞の生存率を高めると推察される。本事業においてはCPP量産手法の開発、CPPの分子構造機能解析(顕微鏡+X線法+NMR法)、CPP細胞保護試験を実施する。H23年度は本事業で行う全ての研究と開発に必須となるCPPの大量生産技術の開発に注力した。これと平行して、CPPが氷結晶や細胞幕膜に結合するメカニズムを解析するための実験システム並びに肝臓由来細胞HEPG2やマウス膵島細胞RIN5Fの初代培養細胞を得るための実験システムを構築した。CPPとして、魚類I型、II型、III型に分類されるAFP(AFP1IIIと略)並びに菌類ベータらせん型AFP(菌類AFPと略)を用いた。いずれのCPPについても天然物と遺伝子組換え物の両方を生産するための精製技術を開発した。更に、AFPI、AFPIII、および菌類については大腸菌による遺伝子組換え物を大量発現するための技術を開発した。いずれも1Lあたり10600mgと非常に高い収率を得るに至った。またAFPIIIと菌類AFPの結晶化に成功し、また最少培地を用いたAFPIとAFPIIIのNMR測定試料(13C/15Nラベル試料)の作製にも成功した。予備的なX線回折実験とNMR実験を開始し、これらCPPの分子構造情報の取得を開始した。付加価値の高い卵細胞をCPPを用いて長期冷蔵保存する技術を特許出願した。本研究の目的は、水溶液中の細胞の生存率を高める新規物質の"超強力細胞保護ペプチドCPP"の機能発現メカニズムを解析し、CPPの応用技術を開発することである。CPPは一般に不凍蛋白質(Antifreeze Protein,略称AFP)と呼ばれる分子の仲間であり、細胞表面のみならず氷結晶の表面に結合して水溶液の凍結を妨げる機能を有している。すなわちCPPは細胞表面にある脂質二重膜ならびに水分子に作用することで細胞の生存率を高める可能性がある。本事業においてはCPPの量産手法の開発、CPPの機能解析(顕微鏡+X線法+NMR法)、CPP細胞保護試験を実施した。これまで様々なAFPについて新種探索、組成解明、量産技術開発、分子構造解析などを進め、そのうちの2種類がCPPとして機能することを見出した(CPP1とCPP3、各1グラム)。今年度はモデル細胞として特にマウス膵島細胞を選び、同細胞の生存率がCPPによってどのくらい向上するかの実証試験を行った。また3年間の研究成果を11報の論文+13件の学会等で発表した。CPP含有の細胞保存液の中にマウス膵島細胞を浸し+4°Cで24120時間保存した。一定時間毎に細胞を取り出し、染色法やインスリン分泌量から膵島細胞の生存率を解析したところ、120時間後で約60%という非常に高い生存率の値が得られた。CPPを含有しない液で保存した同細胞の生存率は48時間以内にほぼ零になった。この、CPPがマウス膵島細胞の生存率に与える強力な保護効果はオンラインジャーナルPLoSONEに発表した。また、機関の公式ホームページ等などでも公開した。本研究の成果はCPPが細胞治療の分野で活用できる大きな可能性を示すものと言える。他機関等の協力を得て更に当該研究開発を進めて行きたいと考えている。

CPPは一般には不凍蛋白質(Antifreeze Protein,略称AFP)と呼ばれ、氷結晶の表面に結合して水溶液の凍結を妨げる機能を有している。すなわちCPPは細胞表面にある水分子の凍結を阻害することで細胞の生存率を高めると推察される。本事業においてはCPP量産手法の開発、CPPの分子構造機能解析(顕微鏡+X線法+NMR法)、CPP細胞保護試験を実施する。昨年度までに作製した種々のCPPサンプル(NMR実験用の13C/15Nラベル化CPPを含む)についてX線回折法と多次元NMR法による3次元分子構造解析を行い、得られた成果を国際誌等に発表した。特に、世界初となった菌類CPP構造機能解析の論文は米国科学アカデミー紀要(PNAS)に掲載するに至った。このCPPの分子表面には複数の結合水が不規則に配置している事を明らかにし、これらが細胞表面にある水分子と一体化する新たなCPP機能発現メカニズムを見い出した。多次元NMR解析によって魚類CPPにおいても同じ結合水の存在が示唆され、FEBS LettersやJBNMR誌等に発表した。また、ウシ受精卵を対象としたCPP細胞保存技術の実証試験を全農ET研究所の協力を得て開始した。まずはCPPを含まない状態で受精卵の寿命を最大限に延ばす溶媒成分を精査して199培地、血清、HEPESの3成分だけでも受精卵を7日間も冷蔵できることを突き止めた。この成果をNature誌のScientific Reportsに論文掲載した。これらの成果は国内外の学会やセミナーで発表し、またホームページ等でも幅広く紹介した。当初の予定よりも多い6種類のCPPの量産技術を開発できた。特に、本事業開始前は日本産魚類の筋肉すり身からAFPI、AFPII、AFPIIIの約50%純度の粗精製品を生産するのみであったが、いずれの95%高純度品も生産可能になった。更に、AFPIIIと菌類AFPについては結晶化に成功した。またAFPIとAFPIIIのNMR測定試料(13C/15Nラベル試料)の作製に成功した。市販細胞(ヒト肝臓細胞HEPG2とマウス膵島細胞RIN5F)の培養には経験不足から困難を伴ったが、平成23年度内にこれらの初代培養細胞を安定的に準備するシステムを構築でき、CPP存在下での生存率の時間依存性を調べる基礎を確立できた。特に、いずれの細胞もCPPが無い溶液中では約24時間後に死滅することまでを統計的に確かなレベルで明らかにできた。付加価値の高い卵細胞をCPPを用いて数日間冷蔵保存する技術の特許出願をした。25年度が最終年度であるため、記入しない。本事業における重要目標の一つはCPPの3次元分子構造を解析し機能相関を解明することである。本年度では、菌類が有するCPP(AFP)の分子構造をX線法を用いて決定することに世界で初めて成功し米国科学アカデミー紀要(PNAS)に掲載するに至った。また、CPPを含まない状態で受精卵の寿命を最大限に延ばす溶媒成分を精査し199培地、血清、HEPESの3成分だけでも受精卵を7日間も冷蔵できることを明らかにし、Nature誌発刊のScientific Reportsに論文掲載するに至った。いずれも高インパクトの研究成果であり、この研究の重要性と社会からの期待度の高さを示すと考えている。研究代表者らがこれまでに得た膨大なデータの蓄積に支えられている事で本事業は非常なスピード感をもって良く進捗していると言える。
機能性大環状化合物を用いた液-液界面イオン移動に関する研究

1.アルカリ金属イオンに対する機能性大環状化合物(L)のイオン選択性を平衡論的に明らかにする為、市販ビス(12-クラウン-4)及び12-クラウン-4のニトロベンゼン/水(NB/w)界面透過促進挙動をイオン移動ポーラログラフィーにより検討した。その結果、液膜型ISEにおける電位選択係数は、金属イオン単独の2相間分配定数と油相中の金属イオン錯体の安定度定数の積の比として表現できた。非環状イオノホアビス(キノリルオキシ)プロパン誘導体についても、同様の結論を得た。L及び非環状イオノホアに対して得られた選択係数の値は、ポテンショメトリーで求められた塩化ポリビニル-o-ニトロフェニルオクチルエーテル液膜を含むISEの報告値と一致した。以上の結果より、本研究によるイオン選択性評価の方法が、1価金属イオン-L系に対しては有効であることを示す。2.1価及び2価金属イオン間で、ジベンゾ-18-クラウン-6(DB18C6)、ベンゾ-18C-6、ジベンゾ-24-クラウン-8のイオン選択性を1の評価法で検討した。本評価法では、ISEを用いるポテンショメトリーで指摘されている、選択係数の活量等への依存性がほとんど無いことが判明した。しかしながら、ISEでの報告値とは異なる値を得た。3.クロロホルム/w系について、1と同様、界面イオン移動促進挙動を調べた。NB/w系とは異なり、界面でのイオン対錯体{例えば、K(DB18C6)^+(ピクレート)^-}の生成を考慮することにより、正確に系を解析することができた。4.S及びO配位原子を併せ持つ新規大環状化合物の合成・単離に成功した。今後、ソフトな金属イオンを対象として新規合成Lの機能を評価する予定である。研究代表者らは、すでに確立された電機化学測定法を用い、ニトロベンゼン(NB)/水系及びクロロホルム(CF)/水系界面におけるクラウン化合物(L)のイオン選択性及び輸送能の支配因子について研究した。また、新規機能性大環状化合物の機能評価については、本年度一部合成が完了し、今後、イオンの界面透過促進能を電気化学測定法等により検討する予定である。1.従来、Lのイオン選択性は、水相中におけるLに金属錯体の安定度定数(β_1)とその錯体の分配定数の大きさに依存すると強調されてきた。しかしながら、親油性Lの場合、水相中のβ_1及び分配定数を決定することはきわめて困難であり、正確な報告値は少ない。そこで、本研究では、平衡反応系の熱力学サイクルに基づいて、イオン選択性の評価におけるパラメータを、垣内他の考えと同様有機溶媒中におけるLのβ_1に置き換えた。その結果、NB相中のβ_1とイオン単独の二相界面透過能の双方に界面イオン選択性が依存することを、いくつかの親油性Lについて実証した。加えて、その選択性の大小関係は、ポテンショメトリーにより見積られた結果と一致した。2.CF/水系については、その理論的解析に重点を置き研究を行なった。本系はCF相の低い誘電性の為に、イオンのみを平衡系内に考えたモデルによる解析は不適当と考えられる。本研究では、両相中において無電荷のイオン対錯体の生成を考慮し、モデルに加えることにより、測定結果の解析を試みた。実験結果の解析より、CF相中におけるイオン対錯体の生成定数は約10^6mol^<-1>dm^3以上でなければ、測定結果の解析には影響しないことを明らかにした。

研究代表者らは、すでに当該研究室で理論及び実験的に確立された電気化学測定法を用い、ニトロベンゼン/水(NB/w)界面におけるクラウン化合物(L)のイオン選択性及び液膜輸送能力を決定する因子の定量化を、前年度に引き続き検討した。さらに、比較の為に新規非環状機能性キレート化合物を取り上げ、その機能を評価した。1.一価金属イオンに対するLのイオン選択性を平衡論的に明らかにする為、Lとして市販ビス(クラウン)化合物及び比較イオノフォアとして新規合成非環状キレート化合物を選び、それらのNB/w界面透過挙動を検討した。両化合物とも、イオン選択性は、イオン単独の界面透過性とNB相中における生成錯体の安定性の大小の双方に比例した。これらの結果より見積られた選択性は、NB誘導体を膜溶媒とし、上記化合物を含むイオン選択性電極(ISE)のポテンショメトリーにより報告された結果とも、よい一致を示した。2.電荷の異なる金属イオン間でLのイオン選択性を評価した結果、本評価法では、ISEの場合に指摘されている、目的イオンの活量変化等による選択性の値がほとんど変化しないことが判明した。また、見積られるNB/w二相界面における選択性が、w相中に二種類の一価金属イオンが共存した系と単独イオン系、いずれの場合も、同じであることを明らかにした。3.以上の1及び2の結果は、油/水二相界面系におけるLのイオン選択性は、主として油/水界面近傍の化学平衡過程に由来するものであり、各相中に存在するイオン種の拡散挙動にはあまり影響を受けないという従来からの指摘を実証した。4.新規化合物の合成・機能評価については、本年度まで、特定イオンに高い選択性を有すると期待されるLは、得られていない。
医療専門職者をめざす学生のための包括的医療倫理教育の概念枠組みの構築

社会の医療に対するニーズの変化に伴い、医療専門職者をめざす学生の教育には、「医療専門職者としての基本的な態度」、「生命に関わることの重大性を自覚し、その尊厳を保つこと」について教育内容を強化しなければならないという共通点があった。高度化する医療を担う知識・技術の学習に加え、態度領域について学生の医療倫理に関する関心や学習ニーズに沿った学習内容を検討し、カリキュラムを構成する必要性が明らかとなった。本年度は、倫理教育に携わる医療専門職の教育者へのインタビューと、文献検索を行い、医療従事者の基礎教育における倫理教育の現状と課題を明らかにした。医学中央雑誌において、1983年から2007年までに、"倫理"と"教育"をキーワーズに1322件の文献が検索されるが、その多くは看護、医学教育に関する文献であった。この5年間(20032007年)は、コメディカルスタッフに対する大学教育の充実とともに、医学、看護学によらず、様々な専門職種の基礎教育における倫理教育の必要性も示唆され、倫理教育の必要性は拡大している。しかし、現状では、それぞれの専門職への倫理教育の在り方に言及する文献は見られるが、医療専門職者に共通して教育すべき倫理の必要性や、その中心となる概念は、職業倫理として解説されていることに留まっている。倫理教育に関する研究は、倫理教育の対象となる学生の"倫理的感受性"、"教育へのニーズ""実習における倫理的問題の認識"等についての意識調査が多く、横断的調査、医療倫理に関する認識の変化についての縦断的調査が、各教育課程で行われていた。医学生と看護学生の両者に関して同様の調査を行い、その比較を行ったものは、少数であった。この結果は、医学生と看護学生の問題の見方が異なることを考慮して、教育をすべきであるという見解を得たが、共通に教育することによる効果は明らかになっていない。医学、看護学教育においては、教育方法の効果について研究されており、ワークショップ、カンファレンス、ロールプレイ、PBLなど知識を応用し、倫理的判断を可能とするために、具体的な事例を検討させることが効果的とされている。臨床の医療従事者達は、いずれも倫理教育の充実を望んでおり、倫理教育の必要性は共通して増大している。今後のチーム医療の向上のため、倫理教育に共通する概念を明らかにするとともに、その効果を探る必要性がある。研究目的:包括的カリキュラムとしての医療倫理学の、カリキュラム構成を検討する基礎データを収集するために、倫理教育の現状について明らかにする。1.医療倫理教育の内容と方法医療に関わる専門職の基礎教育におけるカリキュラムの構成、単位・授業時間数・教育年次・担当教員の専門についてシラバスをはじめとした資料収集と教員への質問調査を行った。この結果、医療倫理学としてカリキュラムに含まれているものの、一般教育課程・専門課程、選択科目・必修科目と倫理教育の位置づけは異なっており、授業を担当する教員の専門も倫理学、医学、看護学と多様であった。特に、専門課程において、生命倫理学・医療倫理学から、各専門職における倫理学まで内容を深めているカリキュラムは少数である。大学院教育において、複数の専門職課程に属する学生を対象とした倫理教育が開始されているが、学生の興味関心が高く、学生間での活発な討議や主体的な学習を促進するためのトピックの選択は困難であった。包括的医療倫理教育として授業のテーマの選択、学生の授業への準備性の向上、授業方略の開発の途上にある。2.卒業時の倫理的問題の感受性とその解決方法の思考プロセスの特性卒業時の看護学専攻の学生を対象に質問紙調査を実施した。この結果、一般教育科目として、医療倫理学に関する授業を履修する学生は11%と少なく、低学年時の倫理に関する興味関心が低いことが明らかとなった。しかし、専門教育期には、90%の学生が履修しており、卒業時には高い学習の必要性の認識を示していた。卒業時点で、インフォームドコンセント、QOL、患者の権利に関する関心が高く、医療資源の配分、遺伝子検査、研究における倫理に関する関心は低かった。臨地実習において、70%の学生は倫理的問題を認識しており、そのうち43%の学生は、教員、臨床指導者、クラスメートに相談し、解決に当たろうと行動していた。1.臨床実践における倫理的問題と人権問題に関する調査医療倫理教育へのニーズについて、実態を明らかにするために、看護、理学療法、作業療法、診療放射線検査、衛生検査に関わる医療専門職者28名を対象に、質問紙調査を行った。この結果、基礎教育において「医療倫理」を科目として履修したと答えたものは51.9%であった。その内容について、「QOL」、「延命処置」、「脳死と移植」、「インフォームドコンセント」については、80%以上の回答者が「学習した」と回答し、学習の必要性については「患者の権利」、「終末期医療」、「QOL」、「インフォームドコンセット」に関して、「非常に必要である」と回答していた。半数の回答者は臨床で倫理的問題に遭遇したと解答しており、解決のために学習する必要性を感じていた。

以上の結果から、医療の先端技術に関する倫理的問題よりも、「患者」の生活や自律性、権利に関する倫理的問題に関心を持っており、基礎学習において学習した内容であっても、臨床において実際に倫理的問題に遭遇し、さらに学ぶ必要性を感じていた。2.研究結果の統合と考察医療専門職者に共通して、卒前・卒後教育における倫理教育の必要性は強く認識されカリキュラムの体系化が開始されていた。現在、各医療専門職者に必要とされている倫理に関する問題は異なっていたが、「人間関係」を基盤とする患者とのコミュニケーションのあり方、患者の自律性・権利の擁護という視点からは共通点を持っていた。チーム医療の充実のためには、基礎教育期から、合同の授業を展開することで、相互理解が深まり、臨床で起きている倫理的問題に対応できる可能性が示された。基礎教育期の学生の医療倫理に関する関心や学習の必要性の認識には特性があり、この特性を踏まえて、学習させるトピックスや専門科目の学習との関連を考慮し、カリキュラムを構成する必要がある。