hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新奇アーキア酵素を活用した非天然イソプレノイドの生合成マシナリー

アーキアが持つイソプレノイド代謝酵素を利用し、大腸菌において新奇イソプレノイド生合成マシナリーを構築することを目的とした研究を行った。主要な結果は以下の通りである。1)メタン生成アーキアMethanosarcinaacetivoransに存在するフィトエンデサチュラーゼのホモログが、アーキア膜脂質前駆体を含む、ゲラニルゲラニル基を有する化合物群を基質とするゲラニルゲラニルレダクターゼ(GGR)であることを見出した。同酵素は既知のGGRとは相同性を持たず、さらに、ゲラニルゲラニル基中の3-4個の二重結合を還元する既知GGRと異なり、ω末端の二重結合のみを選択的に還元する新奇酵素であった。2)M. acetivoransの遺伝子を複数大腸菌中で発現させることで、水酸化イソプレノイド鎖を含むアーキア型脂質を与える生合成マシナリーの構築に成功した。構造解析の結果、同脂質中では一方のプレニル基の3位に水酸基が存在していることが分かった。この結果より、同脂質がMethanosarcina属アーキアとその近縁種に特異的なヒドロキシアーキオール脂質の前駆体となることが推察された。3)好熱性アーキアThermoplasma acidophilumにおいて、既知のメバロン酸経路のいずれとも異なる新規なメバロン酸経路が利用されていることを実証し、同経路の酵素としてメバロン酸3-キナーゼの同定に成功した。4)好熱性アーキアSulfolobussolfataricus由来のジホスホメバロン酸デカルボキシラーゼの構造解析に成功した。同構造中に存在するジスルフィド結合が、S. solfataricus菌体内でも形成されており、さらに同酵素の耐熱性を向上させることを示した。26年度が最終年度であるため、記入しない。アーキア膜脂質の前駆体を生成する大腸菌ベースの生合成マシナリーを用いて、常温性メタン生成アーキアMethanosarcinaacetivorans由来のゲラニルゲラニル基還元酵素の活性発現に、その生理的な電子供与体と推察されるフェレドキシンの存在が必須であることを示した。フェレドキシンを介したゲラニルゲラニル基還元酵素の還元は初めて見出された現象である。また、同マシナリーを用いることで発見されたM. acetivorans由来新奇ゲラニルゲラニル基還元酵素について詳細な特性評価を行った。同酵素はゲラニルゲラニル基あたり1つの二重結合しか還元せず、さらに膜脂質生合成に関わる既知のゲラニルゲラニル基還元酵素に相同性を持たない。既知酵素が膜脂質の完全飽和を触媒できるため、この新奇酵素は膜脂質以外のイソプレノイド生合成に関わることが予想された。そこで生化学的な検証を行い、新規酵素がゲラニルゲラニル基を持つ基質に高い特異性を持つことや、還元部位がω末端のイソプレン単位であることを示した。さらに、M. acetivoransにおいて一部二重結合が還元された糖キャリア脂質が合成されていることを初めて明らかにした。直接的な証拠は無いものの、おそらく同酵素は糖キャリア脂質の生合成に関与していると考えられる。さらに、好熱性アーキアThermoplasma acidophilumにおいて、3-ホスホメバロン酸を経る変形メバロン酸経路の存在を明らかにし、一部酵素の機能同定を行った。同経路は古典的メバロン酸経路だけでなく、好塩性アーキアなどで最近見出された変形経路とも異なり、いわば第3のメバロン酸経路とも呼べるものである。その全容はまだ解明されていないが、イソプレノイド化合物を合成する生合成マシナリーに導入することで、その生産性を向上させることができるかもしれない。

これまでに、大腸菌ベースのアーキア膜脂質生合成マシナリーを活用することで、主要なターゲットであるM.acetivoransから、アーキア膜脂質の構造に影響を与える既知酵素のホモログ、および新奇酵素や機能未知酵素が単離されている。それらの機能解析は順調に進んでおり、特に今年度はフェレドキシンや新奇ゲラニルゲラニル基還元酵素の特性評価を進めることで、それらの生理的機能の推定に至ることができた。特に後者については、おそらく膜脂質ではなく糖キャリア脂質の生合成に関わることが予想されているものの、完全な新奇酵素の発見であり、価値の高い結果と言える。すでに単離済みの推定アーキア膜脂質水酸化酵素についても、酵素発現系の構築が難航し思うように成果が得られていないが、生合成マシナリーにより合成される構造未知の脂質の単離精製を進めている。これらのテーマに関してはおおむね順調に進展していると言って良い。さらにこれらに加えて、T. acidophilumの新奇変形メバロン酸経路に関する成果が得られている。同経路は3-ホスホメバロン酸を経由する、過去に報告例の無いものである。メバロン酸経路はアーキアにおけるイソプレノイド生合成の上流経路であるだけでなく、我々が生合成マシナリーの構築に用いている大腸菌には存在しない生合成経路である。その導入が大腸菌におけるイソプレノイド生産を改善することは、酵母等のメバロン酸経路関連酵素を用いた既報の研究により明らかである。したがって、この全く新しい経路の発見は、今後イソプレノイド生合成マシナリーの生産性向上を導きうる重要な成果と言える。M. acetivoransより単離した新奇ゲラニルゲラニル基還元酵素については、糖キャリア脂質生合成への関与を示すより直接的なデータの獲得を目指したい。構造解析により同菌の糖キャリア脂質がω還元型ポリプレノールであることを示す、もしくは同菌のシス型ポリプレニル二リン酸合成酵素がジヒドロゲラニルゲラニル二リン酸に高い反応性を有することを示すことで、同酵素の生理機能を提唱できるだろう。また、この新奇酵素のホモログは複数種のアーキアに存在しており、それらの酵素機能や生理的な役割についても調べていきたい。同様に生合成マシナリーを用いてM. acetivoransより単離された推定アーキア膜脂質水酸化酵素については、MSやNMRを用いることで同マシナリーが生産する推定水酸化脂質の構造決定を進めたい。また、難航している同酵素の異種発現系を大腸菌以外の宿主を用いて構築し、in vitroでの活性検出を可能にすることで、酵素反応機構を明らかにしたい。T. acidophilumの新奇変形メバロン酸経路については、クローニング済みのメバロン酸3-ホスホリラーゼより下流に位置する酵素を探索する。これについては、まず複数存在する古典的メバロン酸経路関連酵素のホモログについて活性の有無を検証し、それでも見つからなければ酵素精製による同定を行うつもりである。これまでの結果に基づいて、3-ホスホメバロン酸5-
角度の観測を含むデータのためのコピュラ理論

2年目に当たる平成30年度は、新たな2次元シリンダー上の確率分布の研究を行った。Johnson and Wehrly (1978)は、周辺分布を自由にとることができる2次元シリンダー上の確率分布族を提案した。彼らの分布族は、確率変数変換により、2次元シリンダー上のコピュラとみなすことができる。彼らが提案した一般的な分布族において、実数上の周辺分布、円周上の周辺分布、コピュラ関数に適当な仮定をおくことにより、我々は2次元シリンダー上の確率分布を得た。そして、この分布について、以下の扱いやすい性質が成り立つことを明らかにした:(a)確率密度関数を、積分や無限級数などを含まない陽な形で表わすことができる。(b)実数値変数の周辺分布が実数上のコーシー分布、角度の変数の周辺分布が円周上のコーシー分布となる。(c)実数値変数を与えたときの角度の変数の条件付分布が円周上のコーシー分布となり、角度の変数を与えたときの実数値変数の条件付分布が実数上のコーシー分布となる。(d)パラメータは5つあり、それぞれのパラメータの解釈が明確である。2つのパラメータは実数値変数の周辺分布の位置と尺度、2つのパラメータは角度の変数の周辺分布の位置と集中度、そしてもう1つのパラメータは変数間の関係の強さを調節する。(e) 2つの(0,1)上の一様乱数を用いて、得られた分布に従う2次元確率ベクトルを棄却なく1つ発生することができる。上記の性質(a)-(e)は、Johnson and Wehrly (1978)による一般の分布族には成立せず、また、我々の知る限り、他の既存のシリンダー上の分布においても全てが成り立つものは存在しない。今回得られた分布は、その解析的な扱いやすさにより、シリンダー上のデータの統計解析において有用となると考えている。進捗状況は、「おおむね順調に進展している」とした。これは、交付申請書の「研究の目的」に記載した目的を概ね達成していると考えているためである。令和元年度には、平成29年度に提案した2次元トーラス上のデータのためのコピュラおよび平成30年度で扱った2次元シリンダー上のデータのためのコピュラに対して、Aas et al. (2009)による多変量コピュラ構成法を応用することにより、角度の観測を含む多変量データのためのコピュラを提案することを目指す。そして、提案したコピュラについて統計的性質と推測を考察する予定である。1年目にあたる平成29年度には、新たな2次元トーラス上のデータのためのコピュラの提案およびその統計的性質・推測の考察を行った。そして、提案したコピュラは、Wehrly and Johnson (1980)のモデルでは成しえなかった中央や裾付近での多様な依存関係を表現することが可能となることを示した。また、このコピュラは、分布関数や確率密度関数が陽に表せること、パラメータの解釈が容易であること、dependence measureが簡潔に表現できること、最尤法に基づくパラメータ推定が数値的に求めることができることなど、扱いやすい多くの性質が成り立つことを明らかにした。コピュラを導いたアイデアについて述べる。コピュラの提案にあたっては、研究代表者の過去の研究結果(Kato and Jones, 2015)のアイデアの一部を活用した。Kato and Jones (2015)による論文「A tractable and interpretable four-parameter family of unimodal distributions on the circle」(Biometrika, 102巻, 359-370頁, 2015年)では、円周上の新たな非対称分布を提案し、その統計的性質を調べている。この研究そのものはコピュラとは直接関係はないが、この論文の着目すべき点は、分布の導出を特性関数(より正確にはtrigonometric moment)の特徴付けによって行った点にある。この特徴付けにより、分布の平均方向・集中度・歪度・尖度を柔軟に調節することが可能となっている。研究代表者は、このアイデア(特性関数による特徴付け)を生かして、上述の2次元トーラス上のデータのためのコピュラを得た。これは、交付申請書の「研究の目的」と「研究実施計画」に概ね記載した通りに研究が進展しているためである。

2つのパラメータは実数値変数の周辺分布の位置と尺度、2つのパラメータは角度の変数の周辺分布の位置と集中度、そしてもう1つのパラメータは変数間の関係の強さを調節する。(e) 2つの(0,1)上の一様乱数を用いて、得られた分布に従う2次元確率ベクトルを棄却なく1つ発生することができる。上記の性質(a)-(e)は、Johnson and Wehrly (1978)による一般の分布族には成立せず、また、我々の知る限り、他の既存のシリンダー上の分布においても全てが成り立つものは存在しない。今回得られた分布は、その解析的な扱いやすさにより、シリンダー上のデータの統計解析において有用となると考えている。進捗状況は、「おおむね順調に進展している」とした。これは、交付申請書の「研究の目的」に記載した目的を概ね達成していると考えているためである。平成30年度は、新たな2次元シリンダー上のデータのためのコピュラの提案を目指す。(2次元シリンダー上のデータとは、1つの実数値と1つの角度のペアのデータのことをいう。)そして、提案したモデルの統計的性質と推測を考察する予定である。また、変量間の依存関係に関して考察し、特に中央や裾付近の依存関係について既存のモデルとの比較を詳しく行う計画である。平成31年度には、上記の2次元シリンダー上のデータのためのコピュラおよび平成29年度に提案した2次元トーラス上のデータのためのコピュラに対して、Aas et al. (2009)による多変量コピュラ構成法を応用することにより、角度の観測を含む多変量データのためのコピュラを提案することを目指す。そして、提案したコピュラについて統計的性質と推測を考察する予定である。令和元年度には、平成29年度に提案した2次元トーラス上のデータのためのコピュラおよび平成30年度で扱った2次元シリンダー上のデータのためのコピュラに対して、Aas et al. (2009)による多変量コピュラ構成法を応用することにより、角度の観測を含む多変量データのためのコピュラを提案することを目指す。
災害支援における看護マンパワーを効率的に活用するための運用システムに関する研究

県下災害支援病院、福祉保健所、高知県看護協会および看護教育機関からなる高知県災害看護支援ネットワーク検討会、ならびに高知県と高知市の災害および災害医療にかかわる部署による高知県災害看護支援ネットワーク連絡会を立ち上げ、災害前および発災後の災害支援における看護の役割を検討するとともに、看護マンパワーを如何に効果的に活用するかを、システム思考に則り、災害看護協力協定の締結をゴールとして検討した。その結果、災害看護のガイドラインの更新、および高知県、県下市町村、そして高知県看護協会の三者による災害看護協力協定の締結を実現した。1.災害時における効率的な看護マンパワーの活用を目指し、県下の各災害支援病院の災害看護担当者全員と、保健所の災害看護担当者、および看護職能団体の代表者の参加を得て、災害看護支援ネットワーク検討会を開催した。また、この検討会と同様に、行政職が参加する別個の連絡会も開催し、本課題達成のための議論を行った。その結果、これまでの議論の中において、臨床と行政の乖離があるのではないかとめ指摘があり、その対応として、それぞれの第2回目の会議から合同による検討会・連絡会へと発展し、本課題を達成するための組織的な基盤の形成を見た。2.現在の当該県の災害医療救護計画と災害救急医療活動マニュアルでは、救護を中心に計画が展開されており、救援はその延長線上に位置づけられ、発災後35日以降の具体的な取り決めが無く、この空白を埋める活動が必要であることが議論された。結論として、災害救護と災害救援の差異を明確にし、本運用システムに反映することとなった。3.災害看護協力協定の要件として、看護職能団体の人的および組織的体制作りが必要であり、この体制作りは当該県に止まらず、全国展開することにより、より被災県への支援が拡大することが議論された。また、行政側の要件としては、要請によらない災害支援ナースの派遣を可能にする方策、そして、法令の定めるもの、あるいは行政が別に定める基準を考慮して、費用支出を明確にする必要があることが確認された。一方、システム作成側の要件として、更に災害看護教育研修を充実して行くこと、および災害支援ナースの登録・派遣に関する、(1)災害支援ナース登録システム、(2)災害支援ナース派遣調整システム、の構築が必要であることが議論された。1.災害支援ナースの身分保障:日本看護協会は、災害支援ナースをボランティアとして位置付けており、身分保障を個々の支援ナースおよびその所属都道府県看護協会に求めている。災害救助法では、ボランティアによる災害救助活動に対しては保障をしていない。第24条(従事の指示)または第25条(協力命令)の規定により、救助に関する業務に従事し協力しなければ保障は得られない。よって、災害救助法の保障対象となるように、ボランティアではなく災害救助法によるところの救助業務従事者および協力者となれるような、行政との仕組みを作る必要があることが明らかとなった。2.災害支援ナースが活動できる仕組み:各行政には災害対策本部が設置されるが、行政の縦系列のシステムでは、適時・適所で直ちに災害看護活動を開始できるとは限らない。いくら災害支援ナースのマン・パワーを制御できたとしても、活動が開始されなければ意味が無いので、行政の要請によらず災害看護活動を開始できることが必要である。3.行政との災害看護協力協定:以上の災害支援ナースの身分を保障し、災害看護活動ができる災害看護協力協定の締結が必要であり、その原案を作成した。4.災害支援ナースとして保証する仕組み:行政側が災害救助法の下災害支援ナースを保障し、行政の要請の有無にかかわらず活動が許されるためには、協定とともに災害支援ナースの活動を保証する必要がある。そのためには、災害支援ナースの日頃の災害看護教育と、災害支援ナースの登録、および災害支援ナース証の交付が必要である。1.災害支援ナースの教育県看護協会における災害看護教育は、これまでの災害看護支援ネットワーク検討会での議論を経て、毎年定期的に開催されている。また、本年度は、能登半島地震や新潟県中越地震等での新たな知見も踏まえ、災害看護のガイドラインを改訂し、災害看護教育の充実を図った。2.災害支援ナースの派遣/受入態勢の構築最終システムである災害看護協力協定締結の前提として、災害支援ナースの派遣ばかりではなく、全国から派遣されて来る当該ナースの受入体制の充実が必要であり、県看護協会における受入体制を構築した。3.行政との災害看護協力協定の締結県、県下全市町村および県看護協会の三者による災害看護協力協定の締結を実現した。これにより、災害における三者間の協力体制が確立した。4.災害看護支援ナースの認知推進活動の推進前述の災害看護協力協定により、やむを得ない場合には、行政の依頼が無くとも災害支援ナースを派遣することが可能となったが、派遣先での当該ナースの認知がなければ、効果的な活動が展開できない。そこで、災害支援ナースの認知の促進として、ポスターを作製し、特に行政において認知促進活動を推進した。
ラットを用いた成体肺内への胎仔肺組織及び成体肺組織移植の検討

再生医療は、機能障害や機能不全に陥った生体組織・臓器に対して、細胞を積極的に利用することによりその機能再生を図る医療である。肺実質に関しては困難な状況である。その原因として肺の構造の複雑さが指摘されており、ES細胞からの誘導は極めて難しい。そこで、胎仔肺組織に着目した。胎生晩期の胎仔肺は、肺としてのある程度の分化が進み、かつ増殖能旺盛な状態と考え、肺胞レベルでの組織再生を念頭に置き、ラット胎仔肺組織の成体肺内移植実験を行ってきた。胎仔移植片の生着・分化を明らかにし、その結果は学会発表してきた(第19回日本肺および心肺移植研究会・第20回日本呼吸器外科学会総会・第56回日本胸部外科学会総会・第4回日本再生医療学会総会)。1)レシピエント肺容量を減じた状態では、正常状態より更に換気による肺胞へのmechanical stretchがかかる。このような状態では、胎仔肺移植片はより分化・増殖した。2)分化・増殖能が旺盛と思われる胎仔肺移植片の方がより成体肺移植片に比べ生着・分化の点で優位性があった。3)組織学的に胎仔移植片は、レシピエント肺と肺胞レベルでの気道の交通と毛細血管レベルでの血管の交通が示唆された。H17年度のプロジェクトでは、このラットモデルを用い更に以下の点を明らかにし報告した。4)移植片肺胞内には、走査型電子顕微鏡にてレシピエント肺胞内と同様の肺胞小孔も認めた。5)移植片の細胞増殖は、1Wにピークを迎え2W以降は、ほぼ観察できなかった(第56回日本胸部外科学会総会・J Thorac Cardiovasc Surg in press)。今後、本研究を発展させていくことにより、傷害肺の修復再生へのヒント(関与する細胞は?関与する因子は?物理的要因は?)が得られるのではないかと考えられる。現在殆どの臓器・組織がその研究対象になっている。しかし、呼吸器領域に関して、一部が臨床応用されつつあるが、肺実質に関しては困難な状況である。胎仔移植片の生着・分化を明らかにし、その結果は学会発表してきた(第19回日本肺および心肺移植研究会・第20回日本呼吸器外科学会総会)。今回のプロジェクトでは、ラットモデルを用い以下の点を明らかにし報告した(第56回日本胸部外科学会総会・第4回日本再生医療学会総会)。今後、本研究を発展させていくことにより、傷害肺の修復再生へのヒント(関与する細胞は?関与する因子は?
脳外科手術への応用を前提とした冷却乳酸リンゲル液による選択的脳冷却の実験的研究

脳神経外科における破裂脳動脈瘤に対する手術は、低血圧麻酔でおこなわれるのが一般的である。しかし通常の低血圧麻酔では、後頭蓋窩巨大脳動脈瘤等に対する直達術における術中破裂による出血の制御は、実際には困難である。これに対し一部の施設では、全身低体温、心停止下に手術を行っているが、人口心肺装置が必要とされ、これによる高度のヘパリン化、そして心停止による合併症が問題とされている。そこで、脳血流を遮断し、低温乳酸リンゲル液で脳血管内を灌流し、低血圧、低体温下で脳を保護する方法につき犬を用い実験的研究を行い、これを発表した。この方法によれば、平均5分以内に脳温を28°Cまで低下させ、これを60分間維持する一方、体温は平均34°C以上を保つことが可能で、心拍は、維持される上、大量のヘパリン化も不必要であった。また、実験後の犬は神経学的異常を来すことはなかった。しかし、膠質浸透圧の極めて低い乳酸リンゲル液による灌流では脳に何らかの障害を来すことも考えられ、更に安全な灌流液を模索するため今回実験を行った。実験用ビ-グル犬を10匹用い、灌流方法は頚部脳血管遮断後、その内の一本より灌流液を注入することとし、灌流時間は120分、灌流液温度は5°Cに設定した。5匹に対しては前回同様乳酸リンゲル液を灌流し、残りに対しては膠質浸透圧を血液と同じくすめためヒトアルブミンを添加した乳酸リンゲル液を作成し灌流した。灌流終了後血液で脳を復温し、6時間後に脳を摘出し病理学的検索を行った。海馬や前頭葉脳皮質、小脳皮質のHE染色を行ったが、前者と後者には有意と考えられる病理的差異は認められなかった。しかし脳浮腫に関しては両者に何らかの有意差があってしかるべきと考えられ、今後は、脳虚血に対しする影響を微小透析法等を用いて脳代謝産物を直接測定することで評価したり、比重法による脳浮腫の定量化を追加し、安全な灌流液を作成していく予定である。
複素平面上の有理型函数及び代数型函数の値分布

本研究の当初の目的の一つが、いわゆるHaymanの予想の解決であった。即ち、複素平面上の有理型函数fとその二階導函数f′′が零点を持たないとき、対数的導函数f′/fの逆数は高々一次多項式に帰着される(このとき、f(z)=f_<exc>(z):=exp(Az+B)または(Az+B)^<-n>,A,B∈C,n∈N)ことの証明である。30年間以上も未解決であったこの予想は、しかしながら本研究を開始して間もなく、J.K.Langley氏により完全に解決された。それ故、導函数の零点が有する特異性を別な方向から論ずるべく、Haymanの予想とも密接に関連する次の問題の考察が研究目的となった:有理型函数fの零点分布とその各k階導函数f^<(k)>(n【greater than or equal】k【greater than or equal】1)の零点分布が不変と仮定したn=3、或はn=2かつfの零点の収束指数有限条件のもとで、得られたこの問題の解はf=f_<exc>である。これにより、f_<exc>を除けばどの函数も高階導函数の零点分布が特異ではないことを、本研究で確かめたと考える。第二の研究目的は、n価代数型面のPicard定数に関するOzawa-Sawadaの定理の拡張であった。Picard定数の最大値2nそして2n-1をもつn価代数型面S(n=3,4)をそれぞれ特徴付けるため、Ozawa-Sawadaはその面の位数が有限、即ちSを定義するn価整代数型函数yの位数が有限であることを仮定した。本研究では、複素平面上の有理型函数に関して得た結果を応用して、n=3のときにSawada-Tohgeが、n=4の場合にNiino-Tohgeがそれぞれ別の手法を用いて、位数有限性の仮定を取り除くことに成功した。特にNiino-Tohgeが用いた手法は、一般のn(【greater than or equal】3)に対しても適用可能であり、今後の研究に寄与する処は少本研究の当初の目的の一つが、いわゆるHaymanの予想の解決であった。特にNiino-Tohgeが用いた手法は、一般のn(【greater than or equal】3)に対しても適用可能であり、今後の研究に寄与する処は少
中心静脈栄養法を長期間続行している患児がもつ食行動の問題分析とケア方法の探究

本研究は、長期間IVH療法を施行している子どもがもつ食行動の問題を分析し、そのケア方法を見いだすことを目的とした。対象は4才から16才(平均9.8才)の10名で、いずれも難治性下痢症やヒルシュスプルング病などの腸疾患であった。10名中7名が生後2カ月以内にIVHを開始し、1才からが1名、5才からが2名で、現在IVHから離脱できている子どもは10名中2名のみであった。全員が遅くとも1才8カ月までに離乳食を開始できていた。子どもと母親への面接または子どもの診療録から摂食状況を把握した結果、1)IVH施行中はどの子どもにも食欲低下が認められ、摂食の回数・量が激減していた。2)IVHを施行している8名中6名の母親から「咀嚼が下手」「固形物を飲み込めない」との訴えがあった。3)IVHから離脱できた2名のうち1名は1才1カ月から離乳食を開始し摂食機能のリハビリを行っていた。他の1名も離乳食が開始後、子どもが嘔吐しても嫌がっても母親が意図的に摂食の機会を増やしていた。母親から食行動に問題があると訴えのあった子どものうち、2事例の摂食状況をビデオに撮影し、取り込み・咀嚼・嚥下の一連の摂食機能を評価した。その結果、1)食物を取り込み時に口腔の閉鎖ができていない。2)咀嚼時に上手く舌が機能しておらず、一側方に食物を運ぶことができていない。3)嚥下までに時間がかかり、飲み込み時に吐気や嘔吐がある。以上のことから、子どもたちは摂食機能を学習する時期に、食欲低下により摂食の機会が極端に少なかったため、摂食機能を獲得できなかたことが推察された。また、口腔を閉鎖せずに食物を取り込み・咀嚼をするため、咽頭への交通路を遮断できていないことと、舌が機能していないため固形物を嚥下可能な食塊に加工できていないため吐気や嘔吐を誘発しやすいことも明らかになった。今回、得られた結果をもとに摂食訓練につなげてゆきたい。
専門知とモノ作り実践知を融合した集落復興支援構築：放射線測定調査の社会的応用

本研究は、放射線量測定による基礎研究により、東京電力福島第一原子力発電所事故による環境中の放射性物質の分布を明らかにし、事故がもたらす被ばく経路を特定し、それを応用することで、汚染地域での共同体の存続に必要な事柄を把握することを目的とした。研究方法として、住民のエンパワメントとコミュニティの修繕の為に、参加型調査手法を援用した。人が住み続ける放射能汚染地域として、農村である福島県大玉村を主に対象とした。研究実績には、住民が主体的に運営する藍染めの集まりが定着したことが挙げられる。2016年に歓藍社という名前で始った運動体が、当初から参加している住民が年間を通じての作業を創意工夫し、規模を必要な分拡大し、一昨年に比べ2倍程度の藍染染料産物、スクモを産出した。また、当初から参加していた都市部の若者1名が村の地域おこし協力隊として移住したことは、運営の円滑化と、活動の村内での広がりに大きな推進力となった。藍染め産物の試験的な販売が東京新宿駅内のカフェで常設化されたことも、今後の産物の販路としてだけでなく、都市と農村を繋ぐ事柄として特筆できる。染めの技法としても、在来のスクモ建ての工法を住人と共に実現できたことは誇らしい出来事であった。それにより、淡い青から濃紺までの色彩を可能にすることが出来、住人の針仕事の得意な人の絞り染めの仕上がりが、一段と際立ち、当人も周囲もそれを嬉しく思った。こうした活動を通じた参加型調査から見えてきたニーズとして、スクモを藍染め工程で使用する木灰の供給を発見した。大玉村での汚染レベルでは、一年草の藍は食品としても十分に耐える汚染量に留まるが、樹木は、事故当年に表皮に汚染を被っており汚染量が高く、灰化することによって濃度は一段と高まる。今後、農村と周囲の過疎地域を産物で繋ぐ回路として重要なニーズの発見であった。参加型調査の問題は、調査に住民を参加させるという包含関係であると考えられる。本研究は、調査者あるいは、調査するプロジェクトを住民の日常の農作業の中に参加させるという転倒が特筆的であり、その為、住人の関心に沿って活動は進められ、調査はその中で必要とされた時に立ち上がる。こうした実験的な研究手法を取った為、どの程度の進展があるか計画段階では、その時点での見通しを立てたため、推測していた以上の進展が2018年度あった。実績の概要でも述べた、在来の工法を改めて行うことが、住人のエンパワメントになることや、活動を共にしていた仲間が村に住むようになることは想定しておらず、結果当初の予定よりもはるかに研究の広がりが得られた。進展の推測が難しい研究手法であるが、大地震、放射能汚染、津波という複合災害に対する復興事業は、長期的視野を持って、優先順位の在り方を考える必要があると考えており、その為には、村を構成する行政区画、字(あざ)規模の共同体にとっての「復興」における時間感覚に沿った研究が最適であると考えているため、同様の手法で研究を進める。

実績の概要でも述べた、在来の工法を改めて行うことが、住人のエンパワメントになることや、活動を共にしていた仲間が村に住むようになることは想定しておらず、結果当初の予定よりもはるかに研究の広がりが得られた。進展の推測が難しい研究手法であるが、大地震、放射能汚染、津波という複合災害に対する復興事業は、長期的視野を持って、優先順位の在り方を考える必要があると考えており、その為には、村を構成する行政区画、字(あざ)規模の共同体にとっての「復興」における時間感覚に沿った研究が最適であると考えているため、同様の手法で研究を進める。
末梢血中の微量白血病細胞定量検出に有用なエマルジョンPCR法の確立と臨床応用

白血病など血液疾患に対する化学療法後の治療反応性や骨髄移植後の再発評価において、微小残存病変の評価は、重要である。また、原発巣以外での再発を考えると循環末梢血中に存在する腫瘍細胞を早期に高感度に検出・定量することは有用と考えられる。これまで遺伝子変異(主に一塩基変異)を腫瘍細胞マーカーとした遺伝子変異特異的PCR法を検討し、ロック核酸(locked nucleic acid, LNA)およびミスマッチ塩基を含有する遺伝子変異特異的プライマーを使用することで、特異度および感度が高いPCR法を検討してきた。本研究では、定重的な評価を行うことを目的としてLNA、ミスマッチ含有プライマーを使用したエマルジョンPCR法とPCR産物を蛍光量として定量する反応系の検討を行った。エマルジョン作製では、ミネラルオイル、非極性界面活性剤および乳化剤を使用し、超音波装置、微小ビーズを用いた懸濁方法などを試行した。しかし、エマルジョン状態が長時間持続せず、PCRを行うと初期ステップ(変性過程)で既にエマルジョン状態が消失していた。簡便かっPCRに適したエマルジョン作製のために試薬組成や懸濁方法の検討がさらに必要である。そのため、その後の定量的評価を目的とした検出系の検討では、プライマー固相化ビーズを用いてPCRを行う替わりに、はじめにLNA、ミスマッチ含有変異特異的プライマーとFAM標識共通プライマーを用いて遺伝子変異特異的PCR法を行った後に、正常配列特異的なプローブを固相化したビーズとPCR産物をハイブリダイゼーションさせ、ビーズを遠心回収した後に再溶解し蛍光量を測定した。野生型DNAに変異型DNAを混和した希釈系列を用いて、感度および特異度を検討した結果、0.01%0.001%の変異型DNAを検出できた。また、野生型DNAには反応が認められなかった。正確な定量性が今後の課題である。
新規アルツハイマー病創薬ターゲットによる神経細胞死メカニズム解明とその阻止

アルツハイマー病は神経が細胞死を起こすことで認知機能の低下を起こす疾患であるが、成熟神経の細胞死の原因とそのメカニズムは不明であった。今回、長らくアルツハイマー病の原因と考えられてきたアミロイドβが、30個集まった凝集体、アミロスフェロイドが、成熟神経細胞の生存と機能に必須であるナトリウムポンプに結合し、その機能を抑制することで細胞死を起こすことを初めて明らかにした。さらに、アミロスフェロイドに結合するペプチドが、ナトリウムポンプへの結合を阻止することで、細胞死を抑制することを示し、治療への道筋を拓いた。また、アミロスフェロイドの立体構造についても解明し、特異的な立体構造で有ることを示した。アルツハイマー病は、シナプス変性を経て成熟神経細胞が死に至り初めて発症する。βアミロイド(Aβ)集合体(2量体・12量体)は、NMDA受容体を障害しシナプスを変性するが神経細胞死は起こさない。従って、成熟神経細胞死を誘導する原因分子とそのメカニズムを解明し、その上に治療法を開発することが必要とされている。申請者は、患者脳に蓄積する様々なAβ集合体の中から、初めてヒト成熟神経細胞に死をもたらすAβ集合体「アミロスフェロイド(ASPD)」を単離し(JBC2009等)、最近、ASPDがあるシナプス膜タンパク質に結合し毒性を発揮することを見出した。本研究は、ASPDターゲット分子の機能解明により、アルツハイマー病で起こる成熟神経細胞死を分子レベルで理解することを目的とする。さらに、ASPDが選択的にターゲット分子に結合する構造基盤を解明し、細胞死の阻止を目指す。初年度は、固体NMRによりASPDの構造を決定し、論文として報告した(JACS in press)。また、その過程で、新しい線維の構造を発見し報告した(NSMB in press)。また、ターゲット分子の構造モデルを構築し、ASPDに結合し、ターゲットとの相互作用を阻止するペプチドの同定に成功した(論文投稿中)。ASPDがターゲット分子に結合した下流については、ASPD投与によりタウのリン酸化が起きるだけではなく、細胞内よりタウが失われることを見出した。アルツハイマー病の脳では、神経細胞同士の接続を担うシナプスがまず障害され、最終的には細胞体本体が細胞死を起こすことでネットワークに障害が起こり、高次機能が低下する。これまで、アルツハイマー病の原因とされたアミロイドβが本当にこの神経細胞死の原因であるのか、原因であるとしたら神経細胞死のメカニズムはどうなっているのかは全く不明であった。申請者は、初めて、患者脳から神経細胞死活性を持つアミロイドβの約30量体「アミロスフェロイド」の単離に成功し、昨年度、アミロスフェロイド1個が、成熟神経細胞の機能と生存に必須であるシナプス膜表面のポンプ、Na,K-ATPaseポンプのα3サブユニットに1:1で結合し、その機能を阻害することで神経細胞死を引き起こすことを各種手法で証明した(PNAS2015)。上記以外に、アミロスフェロイドの立体構造を溶液NMR(PNAS2015)並びに固体NMR(JACS2015)で決定し、さらに、アミロイドの特定のアイソフォームだけで出来る新たな線維の立体構造をNMRで決定し(NSMB2015)、これらを論文として報告するに至った。また、ファージディスプレイを用いてアミロスフェロイド結合ペプチドを探索し、そのペプチドがアミロスフェロイドに結合し、Na,K-ATPaseポンプに結合することを妨げることで、神経細胞死を阻止出来ることを示した。上記のとおり予定した研究計画を順調に進めることが出来た。設定した課題の内、1については、アミロスフェロイド自体のの構造論文の1報目を順調に報告出来た上に、全く予想外のこととして、アミロイドの42残基のものだけで構築が可能なトリプルβシートと名付けた新たな線維の構造を発見し、それについて、Nat Str Mol Biolに報告することが出来た。これは、患者脳から得たアミロイドのシーズを使って、試験管内で構造解析を可能にする技術構築したことに基づいており、今後、アミロイドの代謝についてヒトでのプロファイリングが可能になるかもしれない重要な手法の構築に繋がった。課題2については、予定どおり順調にペプチドを同定することに成功した。この過程で全く新たなASPD調製方法を発見。これが次の課題である、なぜ脳内でASPDが形成されるのかという課題への手がかりとなることがわかった。さらに得られたペプチドから低分子化への作業を製薬企業を開始することになった。課題3については、アミロスフェロイド発見の時に見出したタウリン酸化酵素の活性化を確認為、改めて、タウとアミロイドをつなげる結果となった。上記を総合すると、今年は当初の計画以上に新たな進展があり、次の展開に繋がった。アルツハイマー病の脳では、最終的に神経細胞そのものが細胞死を起こすことで、高次機能を司るネットワークに障害が起きる。これまで、アルツハイマー病の原因とされてきたアミロイドβが本当にこの神経細胞死の原因となっているのか、どのように神経細胞死を起こしているのかは全く不明であった。代表者らは、初めて、患者脳から神経細胞死活性を持つ、アミロイドβの約30量体である「アミロスフェロイド」の単離同定に成功した。この患者由来アミロスフェロイドを用いることで、この研究期間内に、アミロスフェロイドが、成熟神経細胞のシナプス膜表面に選択的に発現しており、その生存と機能に必須で有るナトリウムポンプ「Na, K-ATPase」のα

3サブユニットに結合し、その機能を阻害していることで神経細胞死を引き起こすことを患者脳組織を始め複数の手法で証明した(PNAS2015)。これにより初めて神経細胞死のメカニズムを解明することが出来た。上記以外に、アミロスフェロイドの立体構造の一部を溶液NMR(PNAS2015)及び固体NMR(JACS2015)で報告し、さらにアミロイドβのうち毒性が強い特定のアイソフォームでのみ形成される線維が新たな立体構造を取ることを証明した(NSMB2015)。また、ファージディスプレイを用いることで、アミロスフェロイド結合ペプチドを得ることに成功し、その中からナトリウムポンプとの結合を阻止することで神経細胞を保護するものを見出すことが出来た。興味深いことに、パーキンソン病の原因となるαシヌクレインもアミロスフェロイドど同じ部位でナトリウムポンプに結合し機能を阻害していることが解り、ナトリウムポンプを抑制することによる神経細胞死メカニズムは神経変性疾患に共通で有る可能性が拓いた。上記のとおり、予定していた研究計画を全て順調に進めることが出来た。アルツハイマー病は神経が細胞死を起こすことで認知機能の低下を起こす疾患であるが、成熟神経の細胞死の原因とそのメカニズムは不明であった。今回、長らくアルツハイマー病の原因と考えられてきたアミロイドβが、30個集まった凝集体、アミロスフェロイドが、成熟神経細胞の生存と機能に必須であるナトリウムポンプに結合し、その機能を抑制することで細胞死を起こすことを初めて明らかにした。さらに、アミロスフェロイドに結合するペプチドが、ナトリウムポンプへの結合を阻止することで、細胞死を抑制することを示し、治療への道筋を拓いた。また、アミロスフェロイドの立体構造についても解明し、特異的な立体構造で有ることを示した。設定した課題の内、1については、予想以上の進展があり、ASPDの構造論文の1報目を順調に報告出来た上に、全く予想外のこととして、アミロイドの42残基のものだけで構築が可能なトリプルβシートと名付けた新たな線維の構造を発見し、それについて、Nat Str Mol Biolに報告することが出来た。これは、これまでアミロイドの42残基のもの(疾患初期にある)と40残基のもの(正常でも多い)の違いについて初めて物質的な根拠を与える研究である。これは、我々が培ったアミロイドの合成精製技術によるもので、今後NMRを使ったアミロイドの品質管理という新たな可能性を拓いた。構造解析用のASPDの品質は明治大学佐藤道夫先生に依頼した。課題2については、予定どおり順調にペプチドを同定することに成功した。この過程で全く新たなASPD調製方法を発見。これが次の課題である、なぜ脳内でASPDが形成されるのかという課題への手がかりとなることがわかった。そのために、今後、5xFADマウスなどを解析しASPDが脳内に存在するかどうか検証する。存在しない場合は新たにマウスモデルの構築を目指すこととする。課題3については、ASPD発見の時に見出したタウリン酸化酵素がASPDにより活性化することが改めて確認出来ただけではなく、タウ自体に影響を与えること、それがターゲット分子の機能阻害によることを複数の証拠により証明した。タウとASPDが繋がったことは大きい。
終末期がん患者のスピリチュアルケアに関する理論的基盤の構築

緩和ケア病棟入院中の日本人がん患者のスピリチュアリティの概念構造を、質的研究手法を用いて帰納的に明らかにすることを目的として研究を実施した。1.文献レビュースピリチュアリティに関する欧米の文献検索を行い、検索基準を満たす49文献の記述を分析した。スピリチュアリティという概念には、「統合・関係」「孤立」という関係性、「超越的なものへの探求」「内的自己探求」「他者や環境事象への探求」などの方向性の要素が含まれていた。2.緩和ケア病棟における予備調査首都圏の1緩和ケア病棟に入院中の終末期がん患者3名に各2回程度のインタビューを実施、その逐語録を質的に分析した。抽出されたカテゴリーは「先が見えない」「孤立することへの恐怖」「規範と対立する自分」などであった。個人のスピリチュアリティに関連する要因を時間的変化にも着目してとらえていく必要があると示唆された。3.本調査結果予備調査を経て作成されたプロトコールに従い、4ヶ所の緩和ケア病棟にて計13名の患者に、グラウンデッドセオリーアプローチによるインタビューを行なった。その逐語録を各研究者が整理した上で合同会議を開き、分析を進めた。死を意識する状態におかれたことを契機に、個人の価値観の転換が生じ、回避、葛藤、意味の探求などの過程が進行し、「孤立」や「つながり」に至っていた。また、理想と現実のギャップの意識がスピリチュアリティに関わる苦悩と関連していると推察された。意識されている理想は「健康で何かできる」「きれいな死/すみやかな死を迎える」のような外的自己、「自律」「おだやかな状態」などの内的自己のあり方と、「父親の役割を果たす」「周りに迷惑をかけない」など他者との関係のあり方とに大別された。これらはスピリチュアリティの概念における方向性の要素と考えられる。緩和ケアを受ける日本人がん患者のスピリチュアリティの意味とその構成概念を、質的研究手法を用いて帰納的に明らかにすることを目的として、本年度は以下のように研究を実施し、知見を得た。1.文献や既存の知識を用いた研究対象領域の選定スピリチュアリティに関する欧米の文献検索を行い、検索基準を満たす56文献の記述を分析した。スピリチュアリティという概念には、特性として「超越的なものへの探求」「内的自己探求」「他者や環境事象への探求」「統合・関係」「孤立」などが含まれていた。いくつかの特性は統合のレベルという次元の両端に位置し、対概念となっていると見られた。この結果を基に、スピリチュアリティを暫定的に「統合」の概念でとらえることとし、統合のレベルによって変化する表現とスピリチュアリティの3領域(超越的、内的、他者・環境)に焦点を当ててインタビューを進めることとした。個人によりスピリチュアリティの構成要素は異なっており、そのあり方に関連する要因を時間的変化にも着目しつつとらえていく必要があることが示された。抽出されたカテゴリーは「先が見えない」「孤立することへの恐怖」「規範と対立する自分」「ホスピスに入るというあり方」などであった。3.第一次調査予備調査を経て完成させたプロトコールに従い、本調査(第一次)を実施した。4ヶ所の緩和ケア病棟にて計16名の患者に、予備調査結果に示されたカテゴリーやコンディションに留意したインタビューを複数回行なった。その逐語録を各分担研究者が整理した上で合同会議を持ち、グラウンデッドセオリーアプローチによる分析を進めている。

緩和ケアを受ける日本人がん患者のスピリチュアリティの意味とその構成概念を、質的研究手法を用いて帰納的に明らかにすることを目的として、以下のように研究を実施し、知見を得た。1.文献や既存の知識を用いた研究対象領域の選定スピリチュアリティに関する欧米の文献検索を行い、検索基準を満一たす49文献の記述を分析した。スピリチュアリテイという概念には、「統合、関係」「孤立」という関係性、「超越的なものへの探求」「内的自己探求」「他者や環境事象への探求」などの方向性の要素が含まれていた。2.緩和ケア病棟における予備調査首都圏の1緩和ケア病棟に入院中の終末期がん患者3名に各2回程度のインタビューを実施、その逐語録を質的に分析した。抽出されたカテゴリーは「先が見えない」「孤立することへの恐怖」「規範と対立する自分」などであった。個人のスピリチュアリティのあり方に関連する要因を時間的変化にも着目しつつとらえていく必要があることが示された。3.本調査予備調査を経て完成させたプロトコールに従い、本調査を実施した。4ヶ所の緩和ケア病棟にて計13名の患者に、グラウンデッドセオリーアプローチによるインタビューを各2回程度行なった。その逐語録を各研究者が整理した上で合同会議を開き、分析を進めた。死を意識する状態におかれたことを契機に、個人の価値観の転換や葛藤、意味の探求などの過程が展開していた。理想と現実のギャップを意識する強さがスピリチュアリティに関わる苦悩の表現の強さと関連していることが示唆された。ギャップ意識している事例の理想は「健康で何かできる自分」「自律している自分」「死を覚悟した自分」など内的自己のあり方と、「父親の役割を果たす」「周りに迷惑をかけない」など他者との関係のあり方とに大別された。ここにスピリチュアリテイの構造の一端が示されていると考えられる。
日本古典文学作品フルテキストデータベースのためのデータ記述文法に関する実証的研究

KOKINルールと呼ぶデータ記述文法を開発した。これにより、日本古典文学の全般的な作品のテキストのデータ記述の枠組を定義した。KOKINルールは3規則から成る。すなわち、KOKINルール♯1は、国文学作品の作品構造及び文体構造の定義を行う。韻文、散文、戯曲の文体毎に、さらに細かくジャンル対応に、TTD(Text-data Type Descripition)を定義する。TTDはSGMLのDTDにほゞ同等である。KOKINルール♯2は、日本語の特有な表記のためのデータ記述である。原文は本文と傍記から成るとする。傍記はテキストであるが、本文に対する付随的な情報と考え、意味を考えない(例えば、読み、振り漢字、校異註、参照等の区別をしない)。KOKINルール♯3は分かち書きを行い、品詞情報や各種属性情報を付加するための規則である。付加価値づけと呼んでいる。KOKINルールに基づき、岩波書店刊行「日本古典文学大系」の全作品約600について、データ記述を行い、ホストコンピュータに本文データベースとして登録した。また、東京堂出版刊行「噺本大系」全20巻、正保版本歌集「二十一代集」を対象に、記述の精緻化を進め、KOKINルールを完成した。これらの研究成果は国際会議にも発表し、高い評価を得た。また、国際的なデータ流通のための、SGMLやTEIとの連携を進め、二十一代集のSGML化を進め、完成した。とくに、SGMLとKOKINルールとの機能互換性を検証し、評価した。一方、研究者のデータ利用環境の進展のため、SINETやCD-ROMによるデータ流通の技術開発を進め、実現した。とくに、国際接続による海外からのデータ利用を進め、インターネットによる接続を可能にした。CD-ROMは噺本をサンプルとして、ワークステーション、パソコン用にシステムも含めて、作成し、専門業者との共同研究を行い、製品レベルのシステムの開発に成功した。初年度に当たり、全体計画及び各年次計画の策定を行った。国文学研究資料館設置の大型コンピュ-タと日本古典文学本文デ-タベ-スを活用した。研究環境の整備として、これらのシステムにLAN経由にて高機能ワ-クステ-ション及び高機能パソコン(初年度購入)を接続し、実証実験を開始した。本文デ-タベ-スに対する国文学研究上の要求仕様を確定するために、専門領域の研究者を招き検討を行った。基本的なデ-タ記述文法の設計のために、研究対象ジャンルとして江戸期小噺集及びアンソロジとしての古今和歌集を選定し、プロトタイプ仕様を設計試作した。この文法をKOKIN文法と呼ぶ。作品の構造記述(デ-タ型定義:DTD)と日本語特有の表記形式の変換規則から成る。全体のシステム概念(本文デ-タベ-スの形成、管理、利用システム)を規定し、デ-タ記述文法のパ-ザシステムを大型コンピュ-タ、高機能パソコン上に試作した(プログラム作成費)。機能試験のため作品は論文形式である講演会発表論文を具体的対象とした。次年度にはワ-クステ-ション上で前述の作品に関する構造化デ-タ(DTDによる)を取扱う予定である。一方、今年度作成したKOKIN文法により、具体的なデ-タとして江戸期噺本作品の構造化を進め、約2万種の小噺デ-タベ-スを構築した(入力費、謝金)。この蓄積より、デ-タ入力や流通のための標準化が可能であり、特にエンドユ-ザが使い易くかつ憶え易いということが評価され、実証されたと思われる。

次年度以降は、KOKIN文法の精密化とその言語への拡張法、及び実装方式、ユ-ザインタフェ-ス等の検討を計画している。なお、ハ-ドウェアとして高速に文字列をスキャニングし、発見し統計処理可能なシステムの調査研究を行った。これは国文学研究資料館が導入したので次年度はこのシステムの活用を図る予定である。2年度にあたり、研究計画に従い進めた。KOKIN文法の検証のため外部有識者を加えたシンポジウムを開催し、実用性について評価を得た。また、国際会議(ALLCACH)において発表し、注目を集め、後日機関雑誌でも高い評価を得た。さらに、新聞等にも紹介された。ホストコンピュータ、高機能ワークステーションを用いたデータ記述文法の実装を行い、システム評価を開始した。江戸期噺本データベースのDTD(データ型定義)を確定した。高速日本語文字処理装置、多機能ワークステーションを導入し、実験環境を整備した。日本古典文学作品の本文データは、諸外国のTEI型自立型の本文データと異なり、同一テキストに対する数多くの異本や校訂本、あるいは不定な文字セットなどの多様な属性情報を必要とする。このため、データベースとして管理し、利用する方法が最も有効であり、本文データベースモデルを設計し、一部機能の実験を行った。また、分かち書きされた本文データについて語彙検索を行うシステムを開発した。噺本データベースを対象として、ワークステーション用にCD-ROMを試作した。また、CD-ROM作成、検索についてMEDIA-FINDER製品システムを活用し、古典テキストに関して実用性の高いことを実証した。次年度以降の、KOKIN文法の汎用化とその言語仕様の策定、及び実装方式の確立をはかる。また、CD-ROMの実証実験を行い、実用化の段階まで進めることを計画している。初年度に策定した全体計画に従って研究を推進し、得られた研究成果を基に、国文学研究資料館と共催によるシンポジウムを開催した。主たる研究成果は次の通りである。1.データ記述文法古典テキスト用データ記述文法(KOKINルール)を、噺本及び和歌集について固めた。特にTTD(テキストデータ型定義)を確立し、SGMLとの機能互換性について評価した。特に海外の研究動向を調査するため、TEI(Text Encoding Initiative)のキーパーソンであるプリンストン大学のスーザン・ホッケイ氏と会合、およびOpen Text(カナダ)の実証実験を実施した。2.本文データベースの構築本文データベースを形成・管理・利用するシステムをほぼ完成し、国文学研究資料館ホストコンピュータに実装して、試験運用を開始した。また、和歌集について分かち書きを加え、語彙検索可能なシステムを開発し、実証実験を進めた。昨年度、試作したCD-ROMのデータ修正を行い、MS-DOS、特にWINDOWS下で動作する汎用検索システム(Media Finder)を試作し、CD-ROM化した。これにより、データと検索システム込みのCD-ROMが完成し、試験を開始した。4.データ流通方式の確立LANによる情報提供ネットワークを構築し、試験運用を始めた。
戦時戦後の映像メディアにおける「銃後」のジェンダー表象

本研究は、戦時戦後の日本映画に描かれた女性表象の分析およびその同時代的な社会的・文化的背景の調査によって、戦時期において「銃後」のイメージが如何にして形成され、それが終戦後に如何にして変容ないし継承されたのかについて検証することが目的である。具体的には、ポスト占領期における「銃後」イメージの変奏の事例として、これまで殆ど論じられることのなかった映画『傷だらけの男』(1954年、マキノ正博)について取り上げ、ヒロインの身体をめぐる複雑な同時代的コンテクストを、共演者である男たちとのジェンダー・ポリティクスおよびアメリカニズムの問題という観点から分析しつつ、更に、監督自身の政治的イデオロギーの問題についても考察した。その成果は論文「『傷だらけの男』(1954年、マキノ正博)におけるアメリカニズムをめぐる葛藤」としてまとめ、『演劇研究』第38号、早稲田大学演劇博物館、2015年3月)に投稿し採択された。また、大連出身の女性記録映画作家である羽田澄子氏の作品と殖民地における「銃後」の記憶について考察した論文「羽田澄子--大連生まれの記録映画作家にとっての「内」と「外」を『〈異郷〉としての大連・上海・台北』(和田博文、黄翠娥編、2015年3月、勉誠出版)に寄稿した。以上の研究成果をさらに深化させた論文を、映画学叢書『映画のジェンダー/エスニシティ』(加藤幹郎監修、塚田幸光編、ミネルヴァ書房、2017年予定)に寄稿する予定である。
鎮痛薬・鎮静薬の効果に関する性ホルモンの役割

〈目的〉鎮静薬のミダゾラムと鎮痛薬のDAMGO(selective mu-receptor agonist)に性差が認められるかどうか、また、エストロゲンとの併用が性差をもたらすのかどうかを調べた。〈方法〉成熟ddYマウスを用い、テイルフリック試験(TF)、ホットプレート試験(HP)で評価した。カットオフ時間は、それぞれ10秒、15秒として%MPEを求めた。実験1-1:ミダゾラムによる性差:生食群は生食0.1ml、ミダゾラム群は100mg/kgを腹腔内投与した。実験1-2:エストロゲンとミダゾラム併用による性差:エストロゲン10mg/kg投与し、24時間後にミダゾラム100mg/kgを投与した。実験2-1:DAMGOによる性差:生食群は生食0.1ml、DAMGO群は1mg/kgを腹腔内投与した。実験2-2:エストロゲンとDAMGO併用による性差:エストロゲン10mg/kg投与し、24時間後にDAMGO1mg/kgを投与した。〈結果〉実験1-1:雄21匹、雌10匹:TF(雄-15.9±30.6,雌-31.4±42.5),HP(雄-0.7±11雌-12.9±16)実験1-2:雄21匹、雌10匹:TF(雄-6.8±19.5,雌-8.8±31.1),HP(雄1.7±14,雌-9.8±15.9)実験2-1:雄10匹、雌10匹:TF(雄34.8±37.2,雌44.5±32.7),HP(雄8.1±15.3,雌9.9±8.6)実験2-2:雄10匹、雌10匹:TF(雄13.8±21.6,雌42.3±27.5),HP(雄-11.9±14.8,雌-17±46.8)〈結論〉本研究では、ミダゾラム、DAMGO単独投与では性差を認めなかった。また、エストロゲンを併用しても性差を認めなかった。(本研究は、第42回日本麻酔学会総会で発表予定である。)〈目的〉鎮静薬のミダゾラムと鎮痛薬のDAMGO(selective mu-receptor agonist)に性差が認められるかどうか、また、エストロゲンとの併用が性差をもたらすのかどうかを調べた。)