hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
癌細胞のアポトーシス耐性および分化誘導耐性克服物質の探索

NF-κBの阻害剤は抗炎症剤、抗癌剤として期待され、私達はepoxyquinomicinの構造をもとにNF-κB阻害剤DHMEQをデザイン・合成した。前年度DHMEQがNF-κB活性化シグナルを核移行阻害という比較的下流で阻害していることがわかったので、今年度、恒常的にNF-κBが活性化しているヒト膀胱癌由来KU-19-19細胞を用いてEMSAを行ったところ、DHMEQは処理後2-6時間で阻害作用を示し、さらに今年度KU-19-19細胞でもNF-κBの核移行を阻害していることがわかった。さらにDHMEQはNF-κBが恒常的に活性化しているヒト前立腺癌JCA-1細胞においてもNF-κBを阻害することがわかった。またJCA-1腫瘍の増殖をヌードマウスで腹腔内投与により顕著に抑制することがわかった(Cancer Res.63,107-110,2003)。一方、NF-κBは血管内皮細胞の機能にも動脈硬化や転移の原因として作用している。DHMEQをヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)に作用させると、NF-κBの活性化を阻害し、ICAM-1,VCAM-1,E-selectinなどの接着因子発現を阻害した。さらにDHMEQはHUVECと初代培養ヒト白血球およびHUVECと固形癌細胞や白血病細胞の接着をshear stress(流れ)条件下でも阻害した。以上のことからDHMEQは動物実験で抗癌硬化を示し、さらに動脈硬化や転移への抑制効果が期待される。2)放線菌由来アポトーシス誘導物質IC101の生合成経路二次代謝産物生合成の研究は、遺伝子レベルの研究への発展や、新しい生理活性物質の発見に有用である。アポトーシス誘導物質IC101は異常アミノ酸を含む環状ヘキサデプシペプチド構造を有し、生産菌からどのようにIC101がつくられるのか興味深い。そこで13Cラベルアミノ酸等を用い、IC101の生合成経路の解析を行った。面白いことにC5 side chainはイソプレンの形をしているがLeuが取り込まれ、前駆体になっていることがわかった(J.Nat.Prod.65,1953-1955,2002)。1)DHMEQによるNF-κB阻害の機構私達はepoxyquinomicinの構造をもとにNF-κB阻害剤DHMEQをデザイン・合成した。機構解明としてまず、ヒトT細胞白血病Jurkat細胞をTNF-αで処理し、DHMEQはNF-κBの転写因子活性を阻害した。つぎに、DHMEQはTNF-αに誘導される核内NF-κBとDNAの結合を阻害することがわかった。さらにDHMEQはIκBのリン酸化・分解を阻害しないことがわかった。そこでDHMEQがNF-κBの核移行に与える影響を細胞分画して検討したところ、DHMEQはp65の核移行を阻害していた。さらに、恒常的にNF-κBが活性化しているヒト膀胱癌由来KU-19-19細胞を用いてgel shift assayを行ったところ、DHMEQは処理後2-6時間で阻害作用を示した。以上の結果から、DHMEQはTNF-αから出されるNF-κB活性化、JNK活性化、apoptosis誘導の三つのシグナルのうち、NF-κBの活性化を、核移行の過程で選択的に阻害していることがわかった。2)polyoxypeptin Aの生合成経路二次代謝産物生合成の研究は、遺伝子レベルの研究への発展や、有用生理活性物質の有効生産、新しい生理活性物質の発見に役立つアポトーシス誘導物質polyoxypeptin Aは新規異常アミノ酸3-OH, 3-MeProを含む環状ヘキサデプシペプチド構造を有する。そこで、^<13>Cラベルアミノ酸等を用い、polyoxypeptin Aの生合成経路の解析を行った。[1-^<13>C]Ileと[U-^<13>C]Ileを取り込ませた結果、3-OH, 3-MeProはIleからつくられることがわかった。さらに面白いことに、C_5side chainはイソプレンからつくられるのではなく、ここにもIleが取り込まれ、前駆体になっていることがわかった。以上のように、polyoxypeptinは新規アミノ酸を含むユニークな構造であり、その生合成はいくつからの新しい機構を含むものであった。

DHMEQをヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)に作用させると、NF-κBの活性化を阻害し、ICAM-1,VCAM-1,E-selectinなどの接着因子発現を阻害した。さらにDHMEQはHUVECと初代培養ヒト白血球およびHUVECと固形癌細胞や白血病細胞の接着をshear stress(流れ)条件下でも阻害した。以上のことからDHMEQは動物実験で抗癌硬化を示し、さらに動脈硬化や転移への抑制効果が期待される。2)放線菌由来アポトーシス誘導物質IC101の生合成経路二次代謝産物生合成の研究は、遺伝子レベルの研究への発展や、新しい生理活性物質の発見に有用である。アポトーシス誘導物質IC101は異常アミノ酸を含む環状ヘキサデプシペプチド構造を有し、生産菌からどのようにIC101がつくられるのか興味深い。そこで13Cラベルアミノ酸等を用い、IC101の生合成経路の解析を行った。面白いことにC5 side chainはイソプレンの形をしているがLeuが取り込まれ、前駆体になっていることがわかった(J.Nat.Prod.65,1953-1955,2002)。
テーブルトップ型PET薬剤生成装置

本研究では核融合反応3He+D→p+4Heにより大強度の陽子を生成させRI生成を行い、サイクロトロン等の加速器に代わる、PET用RI生成装置の実現可能性を模索するものである。そのため「Heイオン源の大強度ビーム開発」と「標的構造の最適化」が研究の2つの大きな柱となる。このうち「標的構造の最適化」について、まず実施した。研究対象であるRI生成装置の構造は、真空層内に設置されたD標的である重水素化ポリエチレンを設置し、イオン源で発生させた3Heビームを標的に照射し、核融合反応の結果発生する陽子を金属の薄い窓をとおして大気側に取り出しRI生成用の試料に照射するという形式をとっている。ここに示した金属の薄い窓付のフランジが一つの標的構造であり、その試作機の製作を行った。窓はAl製で径が20mm、厚さが0.3mmで、Al製真空フランジを削り込んで製作した。0.3mmという厚さは大気圧に耐えられるぎりぎりの薄さを安全率3倍で決定したものである。また、熱対策としてフランジに冷却水路を切削した。製作したAl窓に薄く伸ばした重水素化ポリエチレンを張り付け、イオン源装置の真空層に設置しイオン源で生成される3Heビームにより照射を行った。3Heビームのエネルギーと強度は40keV,200μAであった。照射の結果発生する陽子は大気側に設置したプラスチックシンチレーターにより測定された。測定の結果、数Hzの頻度で発生した陽子が取り出されたことが確認された。一方、発生した陽子が0.3mmのAl窓を通過する際、そのエネルギーが減衰することも確認された。以上の研究により卓上型PET用RI生成装置の実現に向けた目途と、問題点が明らかとなった。今後は、この発生陽子の個数を桁違いに増やすため、引き続き「標的構造の最適化」を行うとともに「Heイオン源の大強度ビーム開発」にも着手する。PET用RI生成装置の実現可能性を模索するためには「Heイオン源の大強度ビーム開発」と「標的構造の最適化」という2つの大きな柱が研究の中心となるわけだが、このうち「標的構造の最適化」について、50%程度の進捗があったことになる。標的構造をなすフランジの構造解析や設計製作には時間がかかることを加味すると、進捗状況はおおむね順調といえる。発生した陽子のエネルギーの減衰を低減するため取り出し窓を薄くする必要があるが、Alの場合、薄くすることに限界があるため、Beなど別の素材の検討を行い新しい窓の製作を行う。D標的である重水素化ポリエチレンは、実験の際、Al窓にカプトンテープで固定する方式をとったが、実験後熱変形していることが確認された。標的と冷却構造付きAl窓フランジとの熱接触を向上させるため設置方法の検討を行う。また、Dを吸着させたTi標的の可能性も検討する。発生陽子の強度を向上させるため、イオン源の大強度化を進める。具体的には加速電圧を向上させられるよう耐圧構造に工夫を凝らす。加速電圧を上げることは、核融合反応の反応率を桁違いに上げることにもつながるため、この方策により、発生陽子の強度の大幅な向上が見込まれる。

標的構造をなすフランジの構造解析や設計製作には時間がかかることを加味すると、進捗状況はおおむね順調といえる。発生した陽子のエネルギーの減衰を低減するため取り出し窓を薄くする必要があるが、Alの場合、薄くすることに限界があるため、Beなど別の素材の検討を行い新しい窓の製作を行う。D標的である重水素化ポリエチレンは、実験の際、Al窓にカプトンテープで固定する方式をとったが、実験後熱変形していることが確認された。標的と冷却構造付きAl窓フランジとの熱接触を向上させるため設置方法の検討を行う。また、Dを吸着させたTi標的の可能性も検討する。発生陽子の強度を向上させるため、イオン源の大強度化を進める。具体的には加速電圧を向上させられるよう耐圧構造に工夫を凝らす。加速電圧を上げることは、核融合反応の反応率を桁違いに上げることにもつながるため、この方策により、発生陽子の強度の大幅な向上が見込まれる。小額の端数が発生したが、年度中に研究関連の支出に使うには小額すぎるため、次年度使用とした。次年度の物品費に繰り込んで使用する予定である。
高分解能電子顕微鏡法による金属/陶材異相界面の原子構造の解明

金合金、及びチタンを基板としたメタルボンドポーセレン焼付界面の透過型電子顕微鏡(TEM)観察を行い、陶材と金属間の異種界面の原子構造を明らかにすることを目的とした。貴金属系メタルボンドのケースとして陶材焼付用金合金(KIK Hard II,Ishi fuku)とオペークポーセレン(VMK68,VITA)、卑金属系メタルボンドのケースとして純チタン(TypeII)とボンディングポーセレン(Super porcelain TITAN,Noritake)の焼付界面の断面TEM観察を行った。また焼成手順は使用説明書に従った。デギャッシング処理後、チタン表面にはルチル構造のTiO_2表面酸化物層が数nm厚のTiO層を挟んで整合性を持って生じていた。一方金合金ではベルビー層の再結晶と同時にSnO_2やIn_2O_3酸化物が結晶粒界に内部酸化物として非整合析出した。ポーセレン焼成後、チタン表面酸化物層は消失した。陶材側には多結晶のTiOやTi_2O_3酸化物が生じていた。またチタン側には酸素を多く固溶したチタンと非晶質チタニアからなるチタン欠乏層が生じていた。このように高温化学反応によって中間酸化物層が生じていたが、チタン欠乏層が存在するため界面チタン側が非常に弱くなっていた。一方金合金の場合、陶材は金合金と原子スケールで直接結合し、従来考えられていた中間層は認められなかった。界面に稀にみられたSnO_2やIn_2O_3酸化物は金合金とは整合性はなく機械的な結合力の向上に寄与していると考えられた。本研究によってメタルボンドポーセレン界面構造は金属が貴か卑かで大きく異なり、中間酸化物層の存在が界面の化学結合力、界面強度に大きく寄与しているという従来の考えは間違いであることを、原子レベルでのTEM観察で初めて明らかに出来た。今年度はデギャッシング後のチタン表面酸化物の状態について検討した.表面酸化物層の厚みはサブミクロン程度で,表面近傍では表面に垂直方向に酸化物の結晶粒が成長し,チタンとの界面近傍では100nm程度の結晶粒となっていた.これらの酸化物は共にルチル構造のTiO_2だった.さらにチタンと酸化物の界面には10nm以下の微結晶が認められた.hcp構造のα-チタンの(00・1)最密面が界面の5nm弱の領域でfccの(111)最密面へと変化し,fcc相の(1^^-1^^-1)面と微結晶のTiO_2の(101)面とが格子整合性を維持して接していた.回折図形はhcpの[21^^-・0]とfccの[11^^-0]入射パターンの重ね合わせで理解でき,これよりfcc相の格子定数は0.42nmと見積もられた.界面の数nmの領域はNaCl構造のTiO相であると思われる.またチタン側のhcp相は軸比が1.63を示すが,これは純チタンの軸比1.587よりかなり大きい.純チタンに酸素が固溶するにつれて軸比が大きくなり,その規則構造としてhcpの八面体空隙の(00・1)面ごとに酸素が規則的に固溶した軸比が1.637のTi_2O相が存在することが知られている.[21^^-・0]からの高分解能像には(00・1)面の格子縞が見えるので,Ti_2O相である可能性がある.しかし00・1禁制反射は二重回折として観察されうるので,二重回折が生じない[11^^-・0]方位にしたところ00・1反射は削減した.従ってチタン中に酸素はかなり固溶するもののTi_2Oの規則構造は生じていないと思われる.以上のことからTi/TiO/TiO_2各相間に格子整合性を持ったチタン/チタン酸化物界面が存在することが明らかとなった.金合金、及びチタンを基板としたメタルボンドポーセレン焼付界面の透過型電子顕微鏡(TEM)観察を行い、陶材と金属間の異種界面の原子構造を明らかにすることを目的とした。

界面に稀にみられたSnO_2やIn_2O_3酸化物は金合金とは整合性はなく機械的な結合力の向上に寄与していると考えられた。本研究によってメタルボンドポーセレン界面構造は金属が貴か卑かで大きく異なり、中間酸化物層の存在が界面の化学結合力、界面強度に大きく寄与しているという従来の考えは間違いであることを、原子レベルでのTEM観察で初めて明らかに出来た。
ペプチドを用いる特異的溶離による生理活性タンパク質の高品位精製

生理活性タンパク質は製品の活性が重要であり、またきわめて高い純度が要求される。このような生理活性タンパク質を極めて穏和な条件下で、その活性に全く影響を与えず溶離するため、免疫アフィニティ抗体リガンドの設計と、特異的な溶離法の開発を行うことを目的とした。すなわち、タンパク質の特定部位と結合する抗ペプチド抗体をリガンドとし、その結合を抗原として用いたペプチドを含む液によって競合的に溶離し、生理活性タンパク質の安定な条件から変えることなく分離する新しい手法を開発することとした。まず、酵母分泌生産イネα-アミラーゼ、ヒトCD2タンパク質およびインスリンを対象とし、これらのC末端およびN末端のアミノ酸配列に相当するペプチドを合成し、これを抗原として免疫して得た抗ペプチド抗体の抗原ペプチド、および対象タンパク質のアフィニティ吸着特性を検討した。そして、これらの抗ペプチド抗体は抗原ペプチドはもちろん、対象タンパク質ともアフィニティ精製に充分な強度で結合することを明らかとした。また、抗原ペプチドに類似した様々なペプチドを合成し、これらと取得抗ペプチド抗体との相互作用を検討し、抗体認識部位と吸着特性の関連を明らかにした。ついで、これらの抗体をリガンドとして固定化したカラムでイネα-アミラーゼおよびインスリンを吸着し、溶離することによって高い純度にアフィニティ精製できた。さらに、抗原として用いたペプチドを含んだ溶離液を用いることによって吸着タンパク質を特異的に競合溶離することができた。溶離にpH変化やイオン強度変化を利用する非特異的溶離の場合と比べて、タンパク質の失活を起こさない穏和な条件で溶離することかでき、高活性・高純度であった。この際ペプチド濃度はあまり溶離特性に影響しないことが明らかとなった。すなわち、タンパク質の特定部位と結合する抗ペプチド抗体をリガンドとし、その結合を抗原として用いたペプチドを含む液によって競合的に溶離し、生理活性タンパク質の安定な条件から変えることなく分離する新しい手法を開発する。平成9年度に得られた研究成果は以下のようである。1.酵母分泌生産イネα-アミラーゼ、ヒトCD2タンパク質およびインスリンを対象とし、これらのC末端のアミノ酸配列に相当するペプチドを合成し、これを抗原として免役して得た抗ペプチド抗体の抗原ペプチド、および対象タンパク質のアフィニティ吸着特性を検討した。その結果これらの抗ペプチド抗体は抗原ペプチドはもちろん、対照タンパク質ともアフィニティ精製に充分な強度で結合することが明らかとなった。また、抗原ペプチドに類似した数々なペプチドを合成し、これらと取得抗ペプチド抗体との相互作用を検討し、抗体認識部位と吸着特性の関連を明らかにした。2.この抗体を固定化したカラムでイネα-アミラーゼおよびインスリンを吸着し、これを抗原として用いたペプチドによって特異的に競合溶離することができた。この実験によっペプチド濃度はあまり溶離特性に影響しないことが明らかとなった。また、溶離されたタンパク質はpH変化やイオン強度変化による非特異的溶離の場合と比べて、高活性・高純度であった。このような生理活性タンパク質を極めて穏和な条件下で、その活性に全く影響を与えず溶離するため、免疫アフイニテイ抗体リガンドの設計と、特異的な溶離法の開発を行うことを目的とした。すなわち、タンパク質の特定部位と結合する抗ぺプチド抗体をリガンドとし、その結合を抗原として用いたぺプチドを含む液によって競合的に溶離し、生理活性タンパク質の安定な条件から変えることなく分離する新しい手法を開発することとした。

まず、酵母分泌生産イネα-アミラーゼ、ヒトCD2タンパク質およびインスリンを対象とし、これらのC末端およびN末端のアミノ酸配列に相当するペプチドを合成し、これを抗原として免疫して得た抗ペプチド抗体の抗原ぺプチド、および対象タンパク質のアフィニティ吸着特性を検討した。そした、これらの抗ペプチド抗体は抗原ペプチドはもちろん、対象タンパク質ともアフィニティ精製に充分な強度で結合することを明らかとした。また、抗原ペプチドに類似した様々なペプチドを合成し、これらと取得抗ペプチド抗体との相互作用を検討し、抗体認識部位と吸着特性の関連を明らかにした。ついで、これらの抗体をリガンドとして固定化したカラムでイネα-アミラーゼおよびインスリンを吸着し、溶離することによって高い純度にアフィニティ精製できた。さらに、抗原として用いたペプチドを含んだ溶離液を用いることによって吸着タンパク質を特異的に競合溶離することかできた。溶離にpH変化やイオン強度変化を利用する非特異的溶離の場合と比べて、タンパク質の失活を起こさない穏和な条件で溶離することかでき、高活性・高純度であった。この際ペプチド濃度はあまり溶離特性に影響しないことが明らかとなった。
統合失調症患者の「心の理論」と症状および対人関係障害に関する融合的研究

統合失調症患者の生活の質を向上させ,より豊かな人生を支援するには,症状の改善ばかりでなく対人関係の障害をも視野に入れた援助が必要と考えられる。本研究では,彼らの対人関係障害のコア概念として,「心の理論」の問題を想定して症状との関連を検討した。すなわち統合失調症患者は,他者の意図や信念を理解する課題に困難を示し,その結果として対人関係に齟齬を来たし,不適応に陥るのではないかと考えた。そしてそのような傾向の強い統合失調症患者ほど,妄想や幻聴のような陽性症状が強いのではないかと思われた。今回の研究ではヒント課題(Janssen, et. al., 2003)とコミック課題(Brunet, 2003)を「心の理論」課題として使用した。また症状の評価としてはPANSSを,対人関係障害の評価としてはLASMIを使用した。研究には統合失調症患者14名,非統合失調症患者6名,健常成人7名が参加した。分析の結果,統合失調症患者は他のコントロール群より,ヒント課題とコミック課題の両方において成績が低下していた。さらにヒント課題の成績が低く,PANSSにより「抽象的思考の困難」と評価された統合失調症患者は,対人関係が円滑に維持できないことが示唆された。以上の結果から,統合失調症患者の対人関係障害の一因には,他者の心の状態を適切に推測することが困難である,いわゆる「心の理論」の問題があることが確認された。しかしながら当初予測していた「心の理論」の障害と,妄想などの陽性症状との関連は見出されなかった。統合失調症患者の「心の理論」の障害には,他者の心の状態を推測すること自体が困難な,陰性症状が強く認知機能が低下した群と,過剰に不適切に他者の心の状態を推測する群(妄想群)の2群に分けられる可能性も考えられる。しかしこれについては今後の研究の進展に期待される。平成16年度の研究の実施計画は,統合失調症を対象とした適切な「心の理論」課題を選択すること,および症状を評価する尺度の検討であった。「心の理論」の課題としては,Frith, Corcoranらの研究を参考に,誤信念課題,スマーティ課題,絵画配列課題,ヒント課題など種々の課題を試行的に数名の統合失調症患者に実施した。誤信念課題は被験者への記憶負荷が大きく,特に第2水準の課題ではその傾向が強かった。これまでスマーティ課題は,「心の理論」を検証する課題として利用されてきたが,今回の予備的試行においては,統合失調患者がある程度他者の信念は理解しながら,自己の経験を抑制できないために失敗に至る可能性が示唆された。また絵画配列課題では,被験者が適切な順に配列できても,それが他者信念の正しい理解に基づくものなのか,他の要因で可能になったのか判別が困難であった。ヒント課題は最近導入された課題であるが,統合失調症患者においては,必ずしも容易な課題ではなかった。今回の予備的研究ではそれぞれの課題の特徴が明らかになった。これらのデータをもとに記憶負荷が少なく,知識の量とはあまり関連のない,しかも他者信念の理解の程度を敏感に反映する課題,あるいは被験者への適切な質問の仕方を検討し,平成17年度の研究につなげる予定である。症状評価の尺度としては,全般的な症状を評価するためにBPRSを,妄想に関連した症状を評価するために,丹野らの作成した「妄想観念チェックリスト」を使用することにした。

数名の被験者に実施したところ,彼らの特徴をよく把握できることがわかったので,本実験においてもこれらの尺度を使用することとした。以上の予備的研究をふまえ,今年度の研究においては,統合失調症妄想群,統合失調症陰性症状群,精神科コントロール群,健常コントロール群を対象に研究を進める予定である。平成17年度の実績としては、21名の統合失調症患者と21名の健常成人を対象として、2種の「心の理論」課題(サリー&アン課題、絵画配列課題)と2種類の視点変換課題(模型条件、人形条件)、ストループテスト、ベイズ課題を実施するとともに、症状評価のためにPANSSを使用した。サリー&アン課題の第1試行では群間差はみられなかったが、第2試行ではPANSS得点高群と健常群の間に有意差がみられ、症状の重いものほど「心の理論」課題が困難であることがわかった。また絵画配列課題においても、PANSS得点高群がPANSS得点低群や健常群より、成績が有意に低く「心の理論」課題が困難であることが確認された。さらに「心の理論」課題の成績とPANSS得点との相関を検討すると、陰性尺度総合得点との負の相関が1%水準でみられ、「概念の統合障害」、「情動の平板化」、「情動的引きこもり」、「抽象的思考の困難」、「衒奇症と不自然な姿勢」、「失見当識」の項目に有意な負の相関がみられた。視点変換課題に関しては、模型条件では群間に有意な差はみられなかったが、人形条件では0°および180°において、患者群の方が健常者群より成績が低下していた。このことより他者視点球得の困難さは、統合失調症患者に存在すると考えられる。しかし人形条件のように複雑な刺激布置でないと明らかでなく、先行研究の結果とやや異なるものであった。ストループテストでは、PANSS高得点群と健常群の間に差がみられ、陰性症状との関連が強くみられた。ベイズ課題では群間に差はみられず、PANSSの得点とも有意な相関は得られなかった。当初「心の理論」課題の成績は陽性症状、とりわけ妄想的な傾向と関連しているのではないかと予想していたが、今回のデータからは陰性症状との関連が示唆された。この原因のひとつに今回対象とした統合失調症患者が、比較的軽症の外来患者が中心であったこと、また薬物療法をすでに行っているため、陽性症状が顕著な患者が少なかったことなどが関連していると考えられる。今回の研究結果をまとめると、統合失調症患者の心の理論の障害は、思考に関する認知機能と周囲への関心と認識に関連していると言えるだろう。したがって心の理論の障害が、直接的に妄想的な思考を惹起し、対人関係障害生じさせるのではなく、認知障害と関連した陰性症状により、適切な判断や行動がとれないため、対人関係上の齟齬が生じてくるのではないか推測される。その結果として統合失調症患者は、被害的感情や妄想を抱くようになるのではなかろうか。しかし今回の研究では、まだサンプル数が少なく、また偏りがみられるので、より広範なデータを収集することを平成18年度の目標としたい。また統合失調症患者の基礎的障害と考えられる認知障害との関連性を検討するため、認知機能を測定する新たな神経心理学的テストも導入したい。これまでの研究から,統合失調症患者は症状の重い者ほど,「心の理論」課題が困難であることがわかった。また「心の理論」課題の得点とPANSSの得点の相関分析から,陰性症状の得点が高い者ほど「心の理論」課題が困難で,情動の平板化やひきこもり傾向が見られ,安定した対人関係の維持に問題があることが示唆された。
肝内胆汁うっ滞の発生機序に関する研究ーCa^<++>,カルモデュリン,アクトミオシン系の解析ー

本研究では胆汁分泌とその障害による肝内胆汁うっ滞発生機構の解明を目的にCytoskeletal systemとその調節因子について,健常肝,in vivoならびにin vitroでの実験的急性肝内胆汁うっ滞モデルおよびヒト急性,慢性肝内胆汁うっ滞生検肝を用い免疫蛍光あるいは免疫電顕酵素抗体法,,電顕細胞化学ならびに微小部X線分析法により究明した。calciumおよびactinの分布とその変化はコンピュ-タ-システムを用いた画像解析により定量化し,毛細胆管の収縮性は超微速度映画撮影により動的に解析した。その結度,肝細胞内,特にBC周囲のCa^<++>,Ca^<++>結合蛋白質calmodulinおよびCa^<++>ーMg^<++>ーATPaseの存在はactin系を介する毛細胆管(bile canaliculus:BC)の収縮機構に必須であることが証明された。そして,これら三因子のいずれの低下もBCの収縮障害,すなわちBCの弛緩性拡張を起こすと考えられ,肝内胆汁うっ滞の発生要因として重要であることが判明した。ラット肝よりSDSーPAGEおよびcephalose cdumnを用いて分離,精製したactinを家兔に免疫し,抗actin抗体を作製した.肝細胞内のactinの局在を証明する目的で正常Wistar系ラット肝末固定凍結クリオスタット6μ切片を作製し,抗actin抗体を用いた螢光抗体間接法により観察すると,肝細胞形質膜直下に沿って特異螢光がpolygonal patternを呈した.これは肝細胞膜と密接して肝細胞内にactin収縮蛋白が存在することを裏付けるものと考えられた.特に毛細胆管(BC)に一致して強い特異螢光がみられ, actinがBC周囲に特に豊富に存在した.電子顕微鏡学的にactin filaments(AF)の局在をuranyl acetateブロック染色を施した標本で観察すると, BCの全周を取り巻いて直経50ー70〓のAFが網工を形成しているのが認められ, tight junctionからdesmosomeにかけてその網工は特に密であった.一部の線維は微絨毛内に伸展し,その先端はBC膜に密接していた.アンチモネート・オスミウム酸法によりCaの局在を示す高電子密度の顆粒は,比較的大きな粗大顆粒と微小顆粒の2種類が認められた.粗大顆粒は肝細胞質内およびBC腔内に散見され,微小顆粒は細胞質内小胞や空胞内に認められ,ミトコンドリア内ではミトコンドリア顕粒にほぼ一致して観察された.これらの顆粒内に高濃度のCaを含有することがX線微小分析法により証明された.カルモデュリンの局在は,螢光抗体間接法により肝細胞形質膜およびその直下,特にBC膜およびその周囲の細胞質内に認められた. Ca-Mg-ATPaseの局在は, Wachstein&Meisel変法により超微形態学的にもBC膜に限局して認められた. Jeejeebhoy変法により分離した初代単層培養肝細胞のBCはリズミカルな収縮性を有し, actin,カルモデュリン, Caの局在はinvivoと同様であった.原発性胆汁性肝硬変患者の生検肝組織の未固定凍結クリオスタット切片に抗HLA-DR2抗体を用いた酵素抗体間接法を施すと,胆管上皮細胞の存在部位に一致してペルオキシダーゼ陽性反応が認められた.62年度、63年度において明らかとした、actin,calmodulin,calciumの局在の証明をふまえ、calcium結合性蛍光物質fura2を用い、Jeejeebhoyの変法に従って分離した肝細胞内のCa^<++>濃度分布を検討した。既に62年にcalcium antinonate法により電顕的に明らかにした初代培養肝細胞内のCa^<++>分離では、肝細胞膜周囲および毛細胆管周囲に豊富に認められ、毛細胆管周囲性マイクロフィラメントの分布とあわせ、毛細胆管の律動的収縮におけるcalcium-calmodulin actin系の作動が示唆された。更に、本年度、fura2を用い各種薬剤によるCa^<++>の細胞内濃度分布の変化を経時的かつ定量的に測定記録した。細胞内Ca^<++>濃度を上昇させるcalcium ionophoreは投与直後より細胞内Ca^<++>濃度を上昇させ48秒後にプラト-に達する。

細胞内分布では特に毛細胆管周囲のCa^<++>濃度の上昇が著しく、この時透過光下に同一肝細胞を観察すると、毛細胆管は収縮している。一方、actin重合阻害物質cytochalasinBを投与すると、透過光下の観察では毛細胆管は著しく拡張するが、fura2による蛍光強度の細胞内分布は変化を認めない。又、calmodulin antagonistであるW7投与により、毛細胆管は軽度拡張するがCa^<++>濃度は徐々に低下傾向を示した。62年度、63年度PBC患者血清中抗intermediate filament(IF)抗体、抗actinfilament(AF)抗体を検出するため、IFに富む継代培養株PtK_2、AFに富む_3T_3に対し蛍光抗体法を施し、PBC患者血清中抗IF抗体価が有意に高い。PtK_2よりcytokeratinを抽出し、immunoblot法を用いPBC患者血清中の抗cytokeratin抗体価を測定したところ、蛍光抗体法により測定した抗IF抗体価と同様の傾向を示した。即ち、病初期においては高力価を示し、病期の進行とともに低下する為、PBC病期診断に有用と考えられた。PBC病初期、無症候性PBCにおいても高力価であることから、胆管破壊との強い関連が示唆された。
外場環境の変化に応答した可逆な発光波長可変性を示す金属錯体の開発と発光波長の制御

本研究は,光照射,温度や圧力,電位,プロトン濃度といった外場環境の変化に応答して構造や電子状態を変化させ,発光波長可変性を示すような発光性金属錯体の開発を目指して,3年間にわたり実施したものである。その結果,ジフェニルホスフィノベンズアルデヒド,アルキルチオベンズアルデヒドとヒドラジノピリジンあるいはヒドラジノキノリン,および,ベンゾイルヒドラジンあるいはピコリン酸ヒドラジドを反応させて得たヒドラゾンを配位子とするパラジウム(II),白金(II)錯体が,プロトン濃度の変化にともなって可逆的に配位子上のプロトンを脱着し,吸収および発光スペクトルの可逆変化を示すことを見出した。また,これらの錯体が,光照射により新たな光反応性を示すことも明らかにした。一方,対応する配位子を有するルテニウム(II)錯体では,プロトン濃度の低下が錯体の酸化還元電位を低下させ,これにともなってルテニウム(III)へと酸化が進行することを見出した。このような現象は,まさに外場環境の変化が金属錯体の電子状態の変化へと変換された結果であり,意図していた新しい発光性金属錯体の開発へと結びつけることができた。したがって,本研究は概ね良好に進展し,今後の展開が期待できる成果をあげることができたと考えられる。今後は,さらに多様な金属へと組み合わせを拡張し,配位子にも修飾を加えるた研究の展開が可能と思われる。本研究では,プロトン濃度の変化に応じて可逆的に窒素原子上のプロトンが脱着する各種ヒドラゾン化合物を配位子に用いて,主に白金(II)錯体の合成を行った。プロトン濃度変化を外場環境の変化としてとらえ,これらの配位子と白金(II)錯体の発光強度および発光波長がどのように変化するかを検討した。まず,2-メチルチオベンズアルデヒド,2-(4-クロロフェニルチオ)ベンズアルデヒド,2-ジフェニルホスフィノベンズアルデヒドと,ベンゾイルヒドラジドあるいはピコリン酸ヒドラジドとの反応で得られたヒドラゾン化合物を配位子として白金(II)錯体を合成し,X線結晶構造解析により構造を決定した。三座のヒドラゾン配位子とCl^-が配位した平面型構造であることがわかった。しかし,この配位子の発光は観測されず,その白金(II)錯体にも発光は観測されなかった。一方,2-メチルチオベンズアルデヒド,2-(4-クロロフェニルチオ)ベンズアルデヒド,2-ジフェニルホスフィノベンズアルデヒドと,2-ヒドラジノピリジンを反応させて得たヒドラゾンを配位子として白金(II)錯体を合成すると,やはり平面型構造を有する白金(II)錯体が得られた。この配位子に発光は観測されなかったが,白金(II)錯体には可視部に強い発光が観測された。発光寿命を測定したところ,極めて発光寿命が短く,この発光は,LMCTに由来する蛍光である可能性が高い。プロトンの付加あるいは解離によって発光が消失するのではなく,発光極大がシフトする点が特徴的である。この錯体のジクロロメタン溶液にトリフルオロメタンスルホン酸およびトリエチルアミンを添加してプロトン濃度を変化させると,吸収スペクトルと発光スペクトルは等吸収点を示して可逆的に変化した。2-メチルチオベンズアルデヒド,2-(4-クロロフェニルチオ)ベンズアルデヒド,2-ジフェニルボスフィノベンズアルデヒドと2-ヒドラジノピリジンを反応させて得た三座のヒドラゾン配位子(HL^n, n=1-3)を,PtCl_2(PhCN)_2と反応させて,白金(II)錯体([PfX(HL^n)]^+および[PtX(L^n)],X=Cl^-,Br^-,I^-)を合成した。得られた錯体のうち,良好な単結晶が得られた錯体については,その分子構造と結晶内におけるパッキング構造を,X線結晶構造解析により決定した。これらの白金(II)錯体には,いずれもLMCTに由来すると思われる発光が観測された。

トリフルオロメタンスルホン酸あるいはトリエチルアミンを加えてヒドラゾン配位子上のプロトンを可逆的に脱着することが可能であり,これにともなって吸収波長,発光波長が可逆的に極めて大きくシフトすることが見出された。配位子単独では,大きな発光波長の変化は観測されない。さらに,プロトンの非付加体である白金(II)錯体をエタノールに溶解させて放置したところ,暗所ではその吸収スペクトルは変化しなかったのに対し,室内光下ではスペクトルが等吸収点を示して変化し,対応するプロトン付加体の白金(II)錯体が生成することがわかった。即ち,光によりプロトンの脱着を制御できる可能性が示された。以上の結果は,照射する光の波長を変化させるという外場環境の変化にともなって可逆的に発光波長が変化する白金(II)錯体,という新しい系を構築できる可能性を示している。昨年度合成した,ジフェニルホスフィノベンズアルデヒドアルキルチオベンズアルデヒドとヒドラジノピリジンあるいはヒドラジノキノリンを反応させて得たヒドラゾン配位子を有する白金(II)に加え,対応する配位子を有するルテニウム(II)錯体,ランタニド(III)錯体の合成と構造の決定を行った。また,新たに,ヒドラジノピリジンヒドラジノキノリンの代わりに,ベンゾイルヒドラジンあるいはピコリン酸ヒドラジドを用いた配位子を合成し,そのパラジウム(II),白金(II)ルテニウム(II)錯体の合成も試みた。[PtCl(L)]型の白金(II)錯体にはいずれも発光現象が観測され,配位原子上のプロトンの付加脱着により可逆な吸収,発光スペクトルの変化が見られた。また,光照射により等吸収点を示すスペクトル変化が現れた。当初,光照射によりプロトンの付加反応が進行すると予想したが,各種測定結果から,錯体の二量化が引き起こされていると示唆された。即ち,本研究では,これらの金属錯体がプロトン濃度の変化に対応した可逆的な発光波長変化だけでなく,新たな光反応性を示すことも明らかになった。一方,ルテニウム錯体では,プロトンの付加脱着が酸化還元電位の変化をもたらした。配位子をデザインすることで,可逆的な発光と消光を制御できる系を構築できるのではないかと期待される。
プロジェクト学習の創発的分業を支援するブレンディッドラーニング環境の開発と評価

本研究では,大学生のプロジェクト学習において,学生間の協調を教室内外で促進するためには,学生相互のアウェアネスをリアルタイムに提供し,相互評価懸念を高め,社会的促進をもたらすことが重要であることを明らかにし,それを反映した携帯電話用グループウェアと,コンピュータのデスクトップ画面共有ツールを開発した.これにより,授業時間内外に,学生同士が分業を随時見直しながら協調的に学習活動を推進することが期待される.本研究では,大学生のプロジェクト学習において,学生間の協調を教室内外で促進するためには,学生相互のアウェアネスをリアルタイムに提供し,相互評価懸念を高め,社会的促進をもたらすことが重要であることを明らかにし,それを反映した携帯電話用グループウェアと,コンピュータのデスクトップ画面共有ツールを開発した.これにより,授業時間内外に,学生同士が分業を随時見直しながら協調的に学習活動を推進することが期待される.高等教育におけるブレンディッドラーニング型プロジェクト学習において,より内容面に踏み込んだ創発的分業を支援することを目的として,分業状況に加えて,個々の学習者の作業内容を相互に把握可能にするソフトウェアを開発する.これにより,主に対面機会で相互の作業内容把握の増進をはかるとともに,分散環境においても作業進行の質的な見直しを促進することを目指す.学習者が相互に作業内容をリアルタイムに把握できるようにすることで,ブレンディッドラーニング環境における創発的分業が,質的な側面でより柔軟かつ十分実現できることを実証的に明らかにすることが本研究の目的である.平成19年度の研究では,これらの研究課題について以下の成果が得られた.1協調学習場面において,学習者間が相互に状況把握をし,また状況把握をされていることを確認可能にすることにより,相互評価懸念による社会的促進をもたらすことを理論的かつ実証的に明らかにした.この知見は,協調学習場面のみならず,さまざまな学習場面における学習活動促進に効果的と考えられる.2主に情報教室における相互のリアルタイムな作業内容把握をはかるために,コンピュータの作業内容を相互モニタリング可能にするシステムの設計を行い,その仕様およびデザインを策定した.このソフトウェアはWebグループウェアProBoと連携して動作するように設計されている.これらの成果は,学会論文誌(主著1本)ほか国内外における複数め発表に集約して公表した.高等教育におけるブレンディッドラーニング型プロジェクト学習において,分業状況に加えて,個々の学習者の作業内容を相互に把握可能にするソフトウェアを携帯電話向けとPC向けに開発し,評価を行った.携帯電話向けのアプリケーションは,高等教育向けプロジェクト学習管理システムProBo (メディア教育開発センター)と連携して,その上で管理されている学習者の分業情報だけでなく,学習者の活動状況やメッセージ等の情報を携帯電話の待ち受けアプリケーションにリアルタイムに提供するシステムProBoPortableを開発し,授業実践において評価した結果,学習者間が相互に状況把握をし,また状況把握をされていることを確認可能にすることにより,相互評価懸念による社会的促進をもたらすことを理論的かつ実証的に明らかにした.この知見は,協調学習場面のみならず,さまざまな学習場面における学習活動促進に効果的と考えられる.この成果を国際会議ED-MEDIA2008で発表し, ED-MEDIA Outstanding Paper Awardを受賞した.また,この知見をもとに,携帯電話のキャリア・機種に依存しない携帯電話用プロジェクト管理システムProBoMobileの開発を実施した.上記成果をもとに,教室内で行われる対面のプロジェクト学習において,相互の作業状況を把握可能にするためのソフトウェアLive Screen Boardを開発した.このシステムはセキュリティの厳しい大学の情報教室ですぐに活用可能なように開発され,授業実践においてその試行的評価を行った.いくつかのシステム・インターフェイス上の問題が発見されたものの,授業実践での活用可能性が見いだされた.
フェロモン候補としてのイモリ腹腺ステロイドに関する研究

雄イモリ腹部肛門腺のステロイド画分は雌誘引活性を有することを確認した。その成分である腹腺中プレグネノロンとアンドロステンダイオンの一部が腹腺の管腔内に生理的濃度で放出され、各々単独で雌イモリに対する誘引効果をもつことを示した。以前我々が明らかにした腹部肛門腺由来のペプチド性のフェロモン・ソデフリンの間には雌誘引活性に関して相乗効果が存在することから、両者は協調してフェロモンとして働くと考えられる。本研究では1)雄イモリ腹部肛門腺のステロイド画分の雌誘引有効量を確認した。次に、2)その成分である、プレグネノロン、プロゲステロン、アンドロステンダイオン、テストステロン、エストラジオールの分泌量を調べた。腹腺のスライスをメディウム中に放置した後、メディウム中へ溶出したステロイド成分と組織中にステロイド成分の量を質量分析を行うことにより比較した。その結果、腹腺中プレグネノロンとアンドロステンダイオンの一部が腹腺の管腔内に放出されることを確認した。また、その分泌量はそれぞれの総含有量の約半分近くに相当することも確認した。一方、プロゲステロン、テストステロン、エストラジオールはメディウム中には検出されず、腹腺組織中に残ることが確認された。3)さらに、プレグネノロンとアンドロステンダイオンは、それぞれ単独で雌イモリに対する誘引効果をもつことを見出した。またその有効量をしらべたところ、1)のステロイド有効量と同様で腹腺約100分の1個体分に含まれる量に相当することを確認した。先に我々が単離・同定したペプチド性フェロモン"ソデフリン"が1000分の1個体分で有効であること、ソデフリンも約半分が腹腺管内へ分泌されることを考えることを考えるとソデフリンの方がステロイドよりも雌誘引効果が強いことが示唆された。本研究では、前年度明らかにした雄イモリ腹部肛門腺のステロイド画分の雌誘引活性についてさらに詳しく調べた結果、1)雄イモリ腹部肛門腺のステロイド画分の成分である、プレグネノロン、プロゲステロン、アンドロステンダイオン、テストステロン、エストラジオールのうち、腹腺中プレグネノロンとアンドロステンダイオンの一部が腹腺の管腔内に生理的濃度で放出され、2)プレグネノロンとアンドロステンダイオンは、それぞれ単独で雌イモリに対する誘引効果をもつことを確認した。またその有効量をしらべたところ、ステロイド有効量と同様で腹腺約100分の1個体分に含まれる量に相当することを確認、3)先に我々が単離・同定したペプチド性フェロモン"ソデフリン"の方がステロイドよりも雌誘引効果が強いが、4)プレグネノロンとアンドロステンダイオンをソデフリンと組み合わせるとソデフリン単独よりも強い雌誘引効果がみられることがわかった。このことからプレグネノロンとアンドロステンダイオンはソデフリンと同時に放出されることにより、ソデフリンの雌誘引効果を高める役割を果たすものと考えられる。
統計解析手法を使った画像計測システムに関する研究

流体の速度場全域を瞬時に計測するシステムとして、画像計測手法が一般化されつつあるが、その優れた特徴の一つは瞬時に広域を同時に計測できることにある。しかしながら、時間平均流の計測を求めるためには、この特徴は欠点にもなり得る。すなわち、瞬時に得られる大量の速度ベクトルデータから平均流速を求める必要があり、大量のメモリと計算が必要となるからである。しかしながら、問題を時間平均流の計測に限定すれば、可視化画像を撮影して得られた画像データを解析する前に、できるだけ画像データそのものの統計処理を行って、その後で速度ベクトルを求める手が有効であるとの観点から本研究は開始された。本手法の原理は、流体中のある点における粒子の通過頻度は速度に比例するとの直感的な考えによっており、まず理論的な考察から、粒子の空間密度が均一でなくても成立する一般的な関係式を導き、簡単な実験によってこの有効性を確認した。その後、その理論を拡張すれば、3次元速度ベクトルの算出も可能となることを示し、統計解析手法の一般的な結果を示した。また、本手法や他のPIV実験に有用な蛍光とレーサも開発し、その有用性を示した。さらに、本研究の動機の一つであった船尾後流分布の計測においては、ほぼ満足できる結果が得られ、スリット光の厚みによる計測誤差などについて詳細な検討を行った。広域流場の速度分布を瞬時に計測できる画像計測は、多くの分野で用いられ始めているが、時間平均流速分布を求めるためには、まず瞬時の速度場を求めた上で、大量のデータ処理を行なう必要がある。しかしながら、画像データそのものを直接統計的に処理すれば、流場の時間平均速度分布を画像データから直接得ることが可能と思われる。本研究はそのような手法について検討し、新しい計測が可能となる実験システムを開発したものである。本年度は、もともと本手法は速度ベクトルの絶対値のみを計測するものであったが、それを拡張することによって3次元流場の速度ベクトルを求められることを示し、そのための実用的な実験システムを提案した。また、船尾プロペラ断面内の速度分布(後流分布を)の計測結果はかなり満足できるものであった。流体の速度場を瞬時に計測できるシステムとして、画像計測手法が一般化されつつあるが、本研究は、時間平均流速を求めることに限定すれば、速度ベクトルを求めてから平均するのではなくて、画像データの段階で統計的処理を行い、平均化操作をする手法も開発可能と考えられることから行われた。昨年度は、その方法を提案し、理論の拡張によって3次元ベクトルを求めることも可能であることを示し、簡単な計測実験の例を示した。今年度は、計測システムをより具体化および実用化するために、PIV実験に適当と思われる蛍光トレーサを開発し、その有効性を確認すると共に、船尾プロペラ断面の後流分布を計測し、スリット光面の厚みによる計測誤差などについて詳細な検討を行った。これらの結果、本計測システムには、計測精度の点では、他の方法に比べていくつかの問題点はあるものの、統計的なデータ処理の利点を生かすことのできる計測、すなわち定常流の時間平均速度分布や、3次元影響の少ない流れにおいては、かなりの成果が期待できること、特に船尾後流の計測には適していることが確認された。
ライフコースにおける正の学習と負の学習を関連づけたジェロントロジー教育の検討

現代日本では初等中等教育段階からの「個人の長寿の人生設計力、超高齢社会のデザイン力を養う」ジェロントロジー教育が急務の課題である。本研究では「できるようになることを学ぶ」という正の学習と、加齢とともに「できなくなることを学ぶ」という負の学習の二つの視点から、超高齢・大衆長寿社会の生き方への理解を促し、人生100年の生涯設計を見据えたジェロントロジー教育を提案することを目的としている。本研究では、日本、台湾、韓国の教科書分析を進め、高齢期やライフコース理解、人生の終わり方について整理を行った。日本では学習指導要領の改訂が進み、小学校家庭では「幼児又は低学年の児童や高齢者など異なる世代の人々との関わり」が、中学校技術・家庭では「介護など高齢者との関わり方」が新設された。高校家庭では「高齢期の生活と福祉」が強化され、「高齢者を取り巻く社会環境、高齢者の尊厳と自立生活の支援や介護について理解する」とともに共生社会の在り方や「認知症」にも言及されるに至り、人生100年時代を意図したジェロントロジー教育が行われ始めていることが明らかとなった。台湾では、国民小中学校9年一貫課程の綜合活動教科書5社ならびに「綜合活動学習領域」および「重大課題(家政教育)」綱要、普通高級中學必修科目「家政」の教科書6社および課程綱要を分析した。「祖孫代間教育」や「老人教育」を企図していることが確かめられた。韓国の教科書分析にあたっては金珠賢氏(韓国・忠南大学校教授)の多大な研究協力を得た。分析対象教科書は小中高校2009年改訂教科過程(2014年・最新)による社会・道徳・技術/家庭教科書309冊。高齢者に対する内容は学年が高くなるほど内容が増加しているが、高齢者イメージはなお扶養と負担の存在として否定的に描かれることが多いことが明らかとなった。少子高齢化や大衆長寿化とともに人口減少時代を迎え、「老いをどのように支え合い、生き抜くか」が問われている。人生90100年を見通し、初等中等教育段階からの「個人の長寿の人生設計力、超高齢社会のデザイン力を養う」ジェロントロジー教育が急務の課題である。本研究では、「できるようになる」という正の学習と、加齢とともに「できたことができなくなる」負の学習の二つの視点から超高齢・大衆長寿社会の生き方への理解を促し、ライフコース理解を根底にすえたジェロントロジー教育を提案することを目的とする。平成26年度は、まず日本の初等中等教育におけるジェロントロジー教育の現状と課題を探るため、韓国の既往研究を比較参照し、小学校・中学校・高等学校の学習指導要領および解説、教科書(小学校道徳・生活・社会・家庭、中学校道徳・社会・技術・家庭、高校公民(現代社会)・家庭(家庭基礎)の分析を行った。その結果、(1)小中高を通して一貫して高齢者との交流・触れ合い・相互理解の促進が図られ、(2)小学校や中学校では、祖父母ではないお年寄りや高齢者に対する尊敬と感謝の気持ちを育て、高校では人権意識を醸成し、高齢者の多様性や個人差にも理解を深め、自らの将来を見通すライフデザインの発想を育てるなど校種の進展が企図されている現状が認められた。しかしその一方で、(3)道徳では生命の有限性と連続性、さらに認知症に関して具体的な理解を促しなど工夫されている一方、社会科では社会保障と財政への負担についての言及が強い。家庭科ではエイジズムへの理解を促し、生涯を通して高齢期の生き方を理解するように方向づけるなど教科による差異があり、さらに(4)高齢者イメージ描写については生き生きとした高齢者が描かれることは相対的に少なく、支援の対象として要介護や病気、弱者など固定的イメージで描かれることがなお根強いなどの課題が析出された。少子高齢化や大衆長寿化とともに人口減少時代を迎え、社会の一人ひとりが「老いをどのように支え合い、生き抜くか」が問われている。本研究では、「できるようになることを学ぶ」という正の学習と、加齢とともに「できなくなることを学ぶ」という負の学習の二つの視点から超高齢・大衆長寿社会の生き方への理解を促し、ライフコース理解を根底にすえたジェロントロジー教育を提案することを目的としている。平成27年度は、ジェロントロジー教育の現状分析をさらに進めるために、平成26年度に行った日本の初等中等教育の学習指導要領および教科書分析結果(主として小・中・高等学校の家庭科)をふまえて、韓国、台湾の初等中等教育の学習指導要領および初等中等教育での教科書収集を行い、資料分析を行った。とくに台湾の調査分析では、日本の道徳科・生活科・社会科・家庭科に相当する国民小中学校九年一貫課程の「綜合活動学習領域」および「重大課題(家庭教育)」綱要、普通高級中學必修科目「家政」課程綱要の翻訳と教科書の分析を行った。その結果、綜合活動学習領域では、高齢期に特化したジェロントロジー教育の視点は認められなかったものの、祖父母世代と孫世代との交流(「祖孫代間教育」)を積極的に推進し、人口政策の観点からも「老人教育」(高齢者理解)を企図していることが確認できた。また、高等学校にあたる普通高級中學必修科目「家政」の教科書6社の分析を行ったが、高等学校段階では高齢者とのかかわりや高齢期に関する特記事項は見られないことも確認できた。また、上記の教科書分析とは別に、老いや死生学に関する資料収集を行い、高齢期やライフコース

理解と人生の終わり方について整理を行った。平成27年度は、台湾の初等中等教育におけるジェロントロジー教育の現状を学習指導要領(綱要)および教科書分析によって把握し、日本の比較群として課題を析出することができた。台湾語の翻訳に多くの時間と労力を要した。さらに、国際情報交換として、研究協力者による韓国のジェロントロジー教育に関する初等中等教育の教科書分析データを収集することはできた。ただし、その分析成果をアメリカ老年学会において報告する予定であったが、研究協力者の都合により実施できていない。また、韓国、台湾のジェロントロジー教育の現状をふまえて、今後の日本での実証研究に向けて、正と負の学習の観点から高齢者理解を進め、個人の長寿の人生設計力や超高齢社会のデザイン力を養うための教材化など、詳細な整理は現在途中の段階である。現代日本では、少子高齢化や大衆長寿化とともに人口減少時代を迎え、社会の一人ひとりが「老いををどのように支え合い、生き抜くのか」が問われている。人生90100年を見通し、初等中等教育段階からの「個人の長寿の人生設計力、超高齢社会のデザイン力を養う」ジェロントロジー教育が急務の課題である。そこで、本研究では「できるようになることを学ぶ」という正の学習と、加齢とともに「できなくなることを学ぶ」という負の学習の二つの視点から、超高齢・大衆長寿社会の生き方への理解を促し、長寿のライフコース理解を根底にすえたジェロントロジー教育を提案することを目的としている。平成28年度は、平成27年度に引き続き、ジェロントロジー教育の現状分析をさらに進めるために、とくに韓国の初等中等教育の、高齢者及び高齢期に関連する教科書記述の抽出資料の提供を受け、翻訳作業を進めるとともに分析を行った。その結果、中学校「技術・家庭」および高等学校「家庭科学」では、少子高齢化の現状理解や、高齢期の発達的変化と課題、さらには自立した生活設計に言及されている一方で、孫として祖父母との良好な関係性が説かれたり、また家族での思いやりあるケアが強調されるなどの特徴が見られた。生徒らが主体として老いを生き抜くという発想での記述は認められなかった。今後、さらに社会科や道徳科などの他教科で、どのような記述がなされているのか、精査していかなければならない。これら台湾・韓国の教科書分析を進めるとともに、日本における老いや死生学に関する資料収集を行い、高齢期やライフコース理解、人生の終わり方について整理を行った。台湾の教科書の翻訳、さらに韓国の教科書分析の翻訳に想定以上の時間と費用がかかり、韓国の教科書分析は現在のところまだ完了できていない。さらに、台湾、韓国の教科書分析からみたジェロントロジー教育の現状をふまえて、日本の初等中等教育の教育現場で、正と負の学習の観点から高齢者理解に関する教育をどのように進めるのか、実証研究および教材化に向けての提案について、具体的にさらに検討中である。現代日本では初等中等教育段階からの「個人の長寿の人生設計力、超高齢社会のデザイン力を養う」ジェロントロジー教育が急務の課題である。本研究では「できるようになることを学ぶ」という正の学習と、加齢とともに「できなくなることを学ぶ」という負の学習の二つの視点から、超高齢・大衆長寿社会の生き方への理解を促し、人生100年の生涯設計を見据えたジェロントロジー教育を提案することを目的としている。