hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新規LOVタンパク質LKP2、TLP1の構造と機能の解明

シロイヌナズナの新規LOVタンパク質TLP1の特徴付けを行った。LKP2過剰発現による胚軸伸長機構を明らかにした。長日植物であるシロイヌナズナのLOVタンパク質LKP2とZTLが、短日条件下で花芽を作らせないように働いていることを明らかにした。遺伝子組換え技術によりシロイヌナズナのLKP2をジャガイモで過剰に作らせると、塊茎形成がおこりにくい長日条件でも、十分な塊茎が形成されることを明らかにした。本研究の目的は、LKP2による葉就眠運動の制御機構を明らかにすること、TLP1の新規光受容体としての特徴付けを行なうこと、その他の新規LOV光受容体の機能解明である。本年度は以下の知見等の成果を得た。1、香川大学工学部と共同で相対ステレオ視覚を利用した3次元視覚センサーによる葉運動記録・解析装置を設計した。測定時の照明(光源)として高周波蛍光灯とLEDの使用を可能にした。2、葉就眠運動を解析するための植物実験材料として、LKP2部分過剰発現体(LOV、F-box、kelch repeatsの各領域、及び、2つの組み合わせ)、LKP2-KO植物をライン化した。3、葉就眠運動は概日リズムのよって制御されていることが知られているので、上記の植物について遺伝子発現を指標として概日リズムを調べたところ、リズムの消失や延長、短縮等の予備的な結果が得られた。4、TLP1の相互作用因子を酵母2ハイブリッド系(Y2H)を用いて単離し、それらの全長cDNAも取得した。5、TLP1と単離した相互作用因子のY2Hでの相互作用が光条件で変動することを見い出した。6、TLP1を大腸菌内で発現させ、抗血清を得るためにウサギに免疫した。7、大腸菌内で発現させたTLP1のLOVドメインにはFMN等の色素団の結合は検出できなかった。8、フシナシミドロのbZIP-LOVタンパク質を大腸菌内で発現させ、それらが認識するDNA塩基配列を決定し、ゲルシフトアッセイによりその結合特異性を確かめた。本研究の目的は、LKP2による葉運動、概日リズム、胚軸伸長、花芽形成時期の制御機構を明らかにすること、新規光受容体としてのTLP1(PLP:PAS LOV Proteinに改名)の特徴付けを行うこと、新規LOV光受容体AUREO(AUREOCHROME)の機能解明である。1.ルシフェラーゼ遺伝子をレポーターに用いてライン化したLKP2部分過剰発現体の概日リズムを測定した。2.LKP2部分過剰発現体の花芽形成時期を調べた。3.LKP2部分過剰発現体の胚軸長を連続光条件下で解析した。4.LKP2とリプレッサー融合型CO(CO-Rep)をバレイショで過剰発現させ、その塊茎形成に与える効果を解析した。5.PLPと相互作用因子との酵母2ハイブリッド系での相互作用は青色光で減弱するが、その際にPLPの分解が起こっていないことをイムノブロットによって示した。7.フシナシミドロのbZIP-LOVタンパク質AUREOCHROME1(AURE01)のbZIP領域をGST融合タンパク質として大腸菌内で発現させ、コンペティターを用いたゲルシフトアッセイにより、DNA認識配列の特異性を解析した。8.AURE01全長をGST融合タンパク質として大腸菌内で発現させた後、GSTを酵素処理で切り離すことでAURE01タンパク質を取得後、ゲルシフトアッセイにより青色光がDNA結合に及ぼす影響を解析した。LKP2相互作用因子として同定したASK20A、ASK20Bに関して、遺伝子発現、プロモーター解析、タンパク質局在、F-boxタンパク質との相互作用、Cullinとの相互作用を解析した。1.ASK20A、ASK20Bは1つの遺伝子からオルタナティブスプライシングの結果生じるが、各々のmRNAはRT-PCRによって調べられた全ての器官で検出され、その蓄積量は植物ホルモンやストレス処理によって大きくは変化しなかった。2.β-グルクロニダーゼ(GUS)をレポータに用いてASK20プロモーター活性を調べると、根、葉、花、種子で活性が認められ、それらの器官・組織でASK20A、ASK20B mRNAがRT-PCRにより検出された結果と矛盾しなかった。4.酵母2ハイブリッド系により、At3g61590、At5g39250タンパク質をASK20A、ASK20Bの相互作用因子として同定した。5.酵母2ハイブリッド系、酵母3ハイブリッド系、in vitropull downアッセイの結果、ASK20A、ASK20Bは、Cullin1とF-boxタンパク質のブリッジとして働く典型的なSKP1オーソログのASK1とは異なり、Cullin1には強く結合しないことが明らかとなった。酵母2ハイブリッド系を用いて同定した複数のLKP2相互作用因子に関して、蛍光タンパク質タグとシロイヌナズナ培養細胞を用いて、それらの細胞内局在とLKP2との相互作用を解析した。

2.蛍光タンパク質と融合させたLKP2のシグナルは核と細胞質に認められた。3. LIP1は核内で斑点上の局在を示し、LKP2と共発現させた場合、LIP1の局在は変化しなかったが、LKP2はLIP1と同じ核内斑点状の局在へと変化した。4. LIP2はLKP2と同様の核と細胞質の局在を示し、LKP2と共発現させた場合にも両者の局在に変化は認められなかった。5. LIP3、LIP4は核内で斑点上の局在を示し、LKP2と共発現させると、LKP2がLIP3、LIP4と同じ核内斑点状の局在へと変化した。6. LIP5は単独ではLKP2と同様の核と細胞質の局在を示したが、LKP2と共発現させた場合にはLIP5とLKP2の両者の局在が変化し、核外で斑点状のシグナルが認められた。7.蛍光顕微鏡3D画像解析ソフトを用いた解析から、共発現させた場合のLIP5とLKP2のシグナルは90%重なっていることが示された。8. FRET解析を行い、LIP5とLKP2がシロイヌナズナ細胞内で相互作用することを示した。以上の結果から、LKP2は相互作用因子に応じてその細胞内局在を変化させて機能する青色光受容体であると考えられる。LKP2を過剰発現させたシロイヌナズナでは照明下での胚軸伸長が促進されるが、その際、LKP2過剰発現体とコントロール間で表皮細胞数に差がないこと、LKP2過剰発現体の皮層細胞数はコントロールの1.4倍であること、LKP2過剰発現体の表皮細胞、皮層細胞はコントロールに比べて長く、特に胚軸の中心部の伸長領域でその差が大きいこと(2.9倍の表皮細胞長、1.8倍の皮層細胞長)、LKP2過剰発現体の胚軸の核相はコントロールに比べて8C、16Cが増え、2C、4Cが減少していることを明らかにした。また、LKP2過剰発現体の胚軸ではコントロールに比べオーキシン応答性遺伝子の発現が上昇していること、LKP2過剰発現体とコントール間で葉と根のオーキシン含量には差はないが、胚軸ではLKP2過剰発現体の方がオーキシン含量が高いこと、LKP2過剰発現体の胚軸徒長はオーキシン作用阻害剤で阻害されることを明らかにした。以上の結果から、LKP2過剰発現は、胚軸でのオーキシン含量増加、オーキシン応答性遺伝子の発現誘導、細胞伸長、核相増加を引き起こし、胚軸を徒長させることが明らかとなった。シロイヌナズナLKP2を過剰発現させたジャガイモ(S. tuberosum cv. May Queen)を作製し、15%のショ糖を含む培地を用いて暗黒条件下で栽培した結果、コントロールの1.8倍の塊茎形成数が認められた。塊茎形成が起こりにくい長日条件で土壌栽培を行ったところ、シロイヌナズナLKP2過剰発現ジャガイモはコントロールの4.5倍の塊茎形成数、12.5倍の塊茎重量を示した。これらの結果は、ジャガイモの光周性塊茎形成には、LKP2が関与するシロイヌナズナの光周性花成経路と類似の制御機構が働いていることを示唆するものであった。
小麦粉の調製生地の性状に関する基礎的研究

小麦粉濃度1520%でつくられるクレープやお好み焼きなどは、調理過程でグルテン形成を抑制する副材料が多量に加えられる。このような状態下でのグルテンの形成機構に閧する研究は未だに明らかにされていない。そこで本研究はまず、小麦粉に砂糖、鶏卵、牛乳、バター及び少量の食塩を加えてつくるクレープ生地を対象として、各々の材料と調製方法が仕上がり性状の及ぼす影響について検討した。その結果、調製時に良く攪拌し生地を均質にすることはクレープを軟らかく、引っ張りによるのびを良くし、しかも'ねかす'操作を省くことを可能とした。また、加えたバターはクレープの硬さや伸びに関与し、更に生地中に形成されたグルテンがバターによる、油っこさ'をマスクし、生地の硬さを軟らかくしかも伸びやすくすると推察した。次に加水量を小麦粉の0.55倍量に変化させ生地中に形成されるグルテン量を比較した。加水量が増えると共にグルテン量は減少し、3倍以上になると激減したが、5倍量でもグルテンは形成されていた。また、材料として牛乳、バター、砂糖を用いると形成されるグルテン量は減少した。次に、加水量の異なる生地から得られる、'グルテン'の構造、すなわち単位分子量の大小について検討した。抽出したグルテンを0.5%SDS-2メルカプトエタノールに溶解した液を20万分子量分画フィルターでろ過し、高速液体クロマトグラフィーによるペプチド分析を行った。その結果、各々の生地から単位分子量の異なるペプチドが46種類検出された。この組成比はアミノ酸1単位前後の分子量の小さなものが3050%を占めた。割合は加水量の多い(35倍)生地の方が、加水量が少ない(0.52倍)生地に比べ多かった。加水量12倍からの組成にはアミノ酸230単位前後の高分子ペプチドが十数%含まれていた。以上の結果から、加水量の違いは、グルテン形成機構に質及び量いずれにも影響を及ぼすことが示された。小麦粉のタンパク質の約80%はグルテニンとグリアジンで、他の穀類中に含まれるタンパク質とは性状が異なるため、多量の副材料の加わる小麦粉生地で、これらがどのような挙動をしているかは極めて興味深い。そこで今回はモデル実験として、小麦粉(強力粉、薄力粉)に一定量の水、或いはタンパク質分解酵素を含む生姜絞り汁を加えて混捏した場合に生成されるタンパク質の違いを、ローリー法による定量と電気泳動法による分子量の比較から検討した。小麦粉の脱脂処理の有無がグルテン形成に及ぼす影響についても併せて検討した。粉の脱脂処理及び捏ね水の違いがグルテン採取量に及ぼす影響について粉の50%量の捏ね水でグルテン採取した結果、強力粉、薄力粉いずれも脱脂処理による採取量の影響はほとんど認められなかった。また50%生姜汁を捏ね水とした場合、水を捏ね水とした場合に比べ全般的にグルテン採取量は減少する傾向がみられた。粉の50%量、3倍量、5倍量の捏ね水で攪拌後抽出したグルテンの0.01N酢酸液抽出試料液をローリー法により定量した結果、加水量を増やした場合、抽出されたタンパク質量は、強力粉からは21、11、9(mg/ml)、薄力粉からは26、5、4(mg/ml)となり、加水量の増加に伴い、薄力粉からのタンパク質量が顕著に減少した。

また、50%生姜汁による抽出量への影響は、加水量が粉の3倍量から5倍量と増加したとき減少する傾向がみられた。強力粉、薄力粉の0.01N酢酸液抽出タンパク質試料液の電気泳動法による分子量分布の比較から、1.38.6ダルトン間に各々12、10点の分布が認められた。これに対して、強力粉、薄力粉から抽出したグルテンからは各々10、7点の分布で低分子量のタンパク質が消失していた。また薄力粉に5倍の50%生姜汁を加水した場合、最も低分子の領域のタンパク質のみがわずかに認められた。現在、高速液体クロマトグラフィーでの分析を検討中である。小麦粉調理において、生地中に形成されるグルテンは製品の仕上がり性状に大きく影響する。そこで、小麦粉を用い、加水量の多い生地(クレープやお好み焼き程度で小麦粉濃度約1520%)中でのグルテンの形成機構について基礎的な検討を行った。本年は昨年度得られた結果から、脱脂処理した強力粉に加水量を粉の50%量から5倍量まで加えた生地からグルテンを採取した。これにSDS+2-メルカプトエタノールを加え、45°C下で攪拌振盤することでグルテンの均質液が得られたため、この溶媒で均質液を調製した。更にこれを、20万分子量分画フィルタに加圧下で通し試料液とした。得られた試料液に含まれるペプチド類の分子量と組成比割合の違いを高速液体クロマトグラフィーで分析した。用いたカラムはSuperdex 75 HR 10/30及びSuperdex 200 HR 10/30で、標準物質としてグルテニンとグリアジン(アサマ化成(株)製)について同様に分析し、各々の結果を比較検討した。その結果、標準物質としたグルテニンはアミノ酸1単位(分子量60)前後のものが最も多く約60%で、アミノ酸6単位(分子量320)前後のもの1525%、アミノ酸1213単位(分子量800)前後のもの約10%であった。また、グリアジンはアミノ酸1単位前後のもの約60%、アミノ酸6単位前後のもの十数%、アミノ酸1213単位のもの約20%であった。一方、調製生地中のグルテンには、分子量の異なるものが46種類に区分された。組成はアミノ酸1単位のものが3050%、アミノ酸6単位前後のもの2028%であった。加水量が0.53倍量の生地にはアミノ酸230単位前後の高分子のものが十数%含まれたのに対し、加水量35倍量の生地にはごく低分子量のものが十数%含まれていた。これらのことから、加水量の違いにより生地中での、グルテン形成機構が質、量共に影響されることが示唆された。
アルファヘルペスウイルス感染の体内動態:侵入から神経への感染初期の伝播経路

人体に感染するアルファウイルスは主として接触により人から人に伝播し、一部のウイルス(水痘帯状疱疹ウイルスVZV)は空気感染で伝播する。接触により侵入したウイルスは皮膚・粘膜・結膜の扁平上皮に病変を引き起こすとともに、神経節に到達し、潜伏感染し、ときに再燃する。本研究では体表より侵入したウイルスがどのように神経に到達するかを解明することを目的とした。Interferon α/βレセプター(Ifnα/βR)を保有したマウス(BALB/cあるいはC57BL/6)(WT)と欠損したマウス(KO)に予め偽妊娠状態を誘導し、排卵を停止する非経口的避妊ステロイドDepo-Proveraを腹腔内投与し、4あるいは5日後に単純ヘルペスウイルス2型(HSV-2)実験室株(strain 186)を非侵襲的に膣腔内に接種し、経時的にウイルス感染細胞の局在を解析した。対照としてDepo-Proveraを投与していないマウスに同様にHSV-2を接種した。Depo-Provera処理を行うことにより、感染高率は100%となったが、対照の非処理マウスでは発症は観察されなかった。同量の致死量のウイルスを接種した同じマウス系統(C57BL/6)のWTとKOのウイルス接種後の経過はKOマウスがWTマウスに比し、麻痺ならびに死亡が1-3日早く進行し、1型インターフェロンがウイルス伝播に抑制的に作用していることを明らかにした。接種マウスを組織学的に解析し、1型インターフェロンが感染細胞の局在にどのように影響しているかを検討した。WTとKOマウスともに最初の感染細胞は膣壁の扁平上皮であり、感染初期の扁平上皮の病巣には明らかな差異は無く、上皮の感染に関して1型インターフェロンの影響は見いだされなかった。一方、上皮下組織における感染動態は非常に異なり、KOマウスでは容易に感染細胞を検出した。従って、KOマウスの解析結果より、HSV-2は扁平上皮細胞、上皮下組織の非上皮細胞、末梢神経細胞の順にウイルスが伝播されていくことが示唆された。単純ヘルペスウイルス1型(HSV1)、2(HSV2)型等のアルファウイルスは原則的にはヒトからヒトへの接触で感染が成立する。この接触時に皮膚あるいは粘膜に侵入したウイルスの神経到達・伝播機序を解明することが本研究の目的である。正常マウスとInterferon α/βレセプター(IfnA/BR)遺伝子欠損マウスにHSV2実験室株を膣壁粘膜に非外傷性に接種し、経時的にウイルス増殖の動態を解析した。また、接種前にdepo-proveraを投与したマウスとしていないマウスを用いて、ステロイドホルモンによるHSV2感受性の違いがこの早期の侵入時に関与しているのかどうかについても検討している。これまでにウイルスを膣腔内に非外傷性に接種すると、膣壁の扁平上皮に感染が生じ、上皮下の末梢神経を経て、求心性に逆行性に神経節に到達し、その後、直腸、膀胱等の平滑筋層内の神経節に遠心性に、あるいは脊髄を経て延髄までの求心性ルートを経てウイルスの伝播が拡大することを病理学的・免疫組織学的に明らかにした。また、IfnA/BR遺伝子欠損マウスでは正常マウスに比較して、感染初期の病変が重篤化しないことを明らかにした。

これは最近のVolstedt et al.(2004)、Luker et al.(2003)らのHSV1感染の結果とは違い、HSV1とHSV2感染におけるIfnA/BRの役割が異なっていると推定される。現在、組織・細胞・遺伝子レベルでの解析を進行中である。単純ヘルペスウイルス1型(HSV1)ならびに2(HSV2)型等のアルファウイルスは性行為等のヒトからヒトへの接触で感染が成立する。この接触により皮膚あるいは粘膜に侵入したウイルスがどのようにして神経に到達するかを解明するかを明らかにするために本研究を行った。免疫機能正常のBALB/cあるいはC57BL/6、さらにInterferon α/βレセプター(Ifnα/βR)遺伝子を欠損(KO)雌マウスに予めDepo-Proveraを腹腔内投与し、4あるいは5日後にHSV-2実験室株である186株を外傷を加えることなく膣壁粘膜に接種し、経時的にウイルス増殖の動態を解析した。また、対照としてdepo-proveraを投与していない免疫機能正常マウスを用いて、ステロイドホルモンによるHSV2感受性の違いについて検討した。Depo-Provera処理を行うことにより感染効率は100%となり、致死量を接種したマウスはすべて死亡するのに対し、非処理マウスの発症はない。免疫機能正常(WT)マウスとIfnα/βR-KOマウスにおけるウイルス接種後の経過はKOマウスがWTより麻痺ならびに死亡が1-2日早く進行する条件であり、HSV-2の体内伝播においてI型interferonが抑制的に作用することが明らかにされた。これまでに経膣接種後、HSV-2は膣粘膜の扁平上皮に最初に病巣を作製し、次に粘膜上皮下の末梢神経線維を経て、神経節に侵入する。さらに、脊髄に上行あるいは消化管・膀胱の末梢神経に遠心性に到達することを明らかにした。脊髄では後角細胞を経て、後索を上行する。ウイルスは扁平上皮細胞・神経細胞等では後期遺伝子産物のみならず、前初期遺伝子産物も発現するが、乏突起膠細胞等の一部の細胞では後者の遺伝子産物の発現のみが確認された。
リガンド交換動力学に基づく海洋性藻類の鉄摂取モデルの構築

鉄はほぼすべての生物にとって必須な微量栄養素であり,湖沼,沿岸域,海洋など様々な水域で藻類の主要な生長制限栄養素となっている。本研究では,環境中での藻類の鉄利用性を的確に評価するために,海洋性藻類の鉄摂取モデルを構築することを目的としている。多くの藍藻類や一部の真核生物は,摂取可能な鉄が不足する環境下において鉄と特異的に親和性のある生体由来有機物(シデロフォア)を細胞外に放出し,フルボ酸などの有機鉄錯体とのリガンド交換反応により形成された鉄シデロフォア錯体を摂取する。自然水中におけるリガンド交換反応には,二価金属,自然有機リガンド濃度,pH,塩濃度,シデロフォア生成量,また,光化学的または生物化学的還元力が鉄摂取に大きな影響を及ぼすことが指摘されている。本年度の研究では,pH4.0における光照射後のフルボ酸溶液中のFe(II)の酸化について調べ,その酸化剤の生成速度や寿命を調べた。この実験により,フルボ酸の光化学的反応によって,相当量の酸化剤が生成されること,またその寿命は数分以上であり,スーパーオキシドや一重項酸素等の活性酸素種と比べて非常に長いことが示された。これまでフルボ酸の光化学的反応に関しては,還元剤の生成のみが報告されており,酸化剤の存在は考慮されてこなかった。光存在下における鉄の動態を表すことができる一貫した反応モデルは未だ構築されておらず,今後,光化学的反応によって生じる酸化剤の存在も考慮していくことが,光存在下における鉄の動態を解明する上で重要であると考えられる。また,フルボ酸の表面電荷と錯形成反応速度定数との関係をモデルに組み込むことで,初年度に構築したpH及びイオン強度の影響を考慮したリガンド交換反応モデルを改良した。本研究において構築されたリガンド交換反応モデルは,沿岸域における藻類の鉄摂取速度・増殖速度を評価する上で有用であると考えられる。本年度の研究では,自然有機リガンド濃度,pHおよび塩濃度に着目し,これらの条件が変化した場合に,有機鉄錯体とシデロフォアとのリガンド反応により,シデロフォア鉄錯体が形成される速度を予測するための反応モデルを構築した。自然有機リガンドのモデル物質にはフルボ酸とクエン酸を用いた。pHが変化すると,有機リガンドと溶解性無機鉄及びこれらの錯体に,酸解離や水和による形態変化が生じる。これらの形態ごとに反応性を評価することで,pH変化を考慮したリガンド交換反応モデルを構築した。イオン強度が変化すると分子間に働く静電的相互作用の強さが変わるため,錯形成速度定数が変化する。従って,Eigen-Wilkinsメカニズムによって錯形成速度定数をイオン強度の関数として推定値することで,イオン強度変化を考慮したリガンド交換反応モデルを構築した。また,錯解離のような一分子反応には,イオン強度はほとんど影響しないことが示された。本年度の研究では,光化学的な反応による有機鉄錯体の還元とそれに対するpHの影響を調べた。まず光化学的反応によって生成される過酸化水素濃度の測定を行った。また,フルボ酸によるスーパーオキシドの消費速度を観察し,この反応をモデル化した。上記の実験の結果,pHが上昇するにしたがいフルボ酸によるスーパーオキシド生成速度が上昇することが示された。また,pHが減少するにしたがいフルボ酸によるスーパーオキシドの消費速度定数は減少することが示された。これまでに報告されている鉄とスーパーオキシドとの反応に関する知見とこれらの成果とを組み合わせることにより,鉄の光化学的還元に対するスーパーオキシドの寄与を見積もるための有用な反応モデルが得られる。これらの現象を踏まえた上で光化学的な鉄の還元を観察したところ,光照射下においては鉄の酸化速度が変化することが示された。次年度に酸化の影響を詳しく調べることにより光還元モデルが構築されるものと期待される。

鉄はほぼすべての生物にとって必須な微量栄養素であり,湖沼,沿岸域,海洋など様々な水域で藻類の主要な生長制限栄養素となっている。本研究では,環境中での藻類の鉄利用性を的確に評価するために,海洋性藻類の鉄摂取モデルを構築することを目的としている。多くの藍藻類や一部の真核生物は,摂取可能な鉄が不足する環境下において鉄と特異的に親和性のある生体由来有機物(シデロフォア)を細胞外に放出し,フルボ酸などの有機鉄錯体とのリガンド交換反応により形成された鉄シデロフォア錯体を摂取する。自然水中におけるリガンド交換反応には,二価金属,自然有機リガンド濃度,pH,塩濃度,シデロフォア生成量,また,光化学的または生物化学的還元力が鉄摂取に大きな影響を及ぼすことが指摘されている。本年度の研究では,pH4.0における光照射後のフルボ酸溶液中のFe(II)の酸化について調べ,その酸化剤の生成速度や寿命を調べた。この実験により,フルボ酸の光化学的反応によって,相当量の酸化剤が生成されること,またその寿命は数分以上であり,スーパーオキシドや一重項酸素等の活性酸素種と比べて非常に長いことが示された。これまでフルボ酸の光化学的反応に関しては,還元剤の生成のみが報告されており,酸化剤の存在は考慮されてこなかった。光存在下における鉄の動態を表すことができる一貫した反応モデルは未だ構築されておらず,今後,光化学的反応によって生じる酸化剤の存在も考慮していくことが,光存在下における鉄の動態を解明する上で重要であると考えられる。また,フルボ酸の表面電荷と錯形成反応速度定数との関係をモデルに組み込むことで,初年度に構築したpH及びイオン強度の影響を考慮したリガンド交換反応モデルを改良した。本研究において構築されたリガンド交換反応モデルは,沿岸域における藻類の鉄摂取速度・増殖速度を評価する上で有用であると考えられる。
アトピー性疾患に伴う脊髄前角運動ニューロン傷害の発生機序に関する分子免疫学的研究

1)気管支喘息発作後に脊髄前角運動ニューロン傷害により弛緩性麻痺を呈した成人2例を報告し、アトピー素因が背景因子として重要であることを指摘した。2)アトピー性疾患に伴う脊髄炎のうち、皮膚アレルギー(アトピー性皮膚炎)を伴う脊髄炎では頚髄後索傷害が主体であるのに対し、気管支喘息やアレルギー性鼻炎など気道アレルギーを伴う脊髄炎では、側索・前角運動ニューロン傷害による運動麻痺を主徴とすることを見出した。また、脊髄性進行性筋萎縮症や平山病(頚髄前角運動ニューロン傷害による若年性一側上肢遠位筋萎縮症)では気道アレルギーの頻度が対照より有意に高いこと、平山病では全例ダニ特異的IgEが陽性でアレルギー性疾患の家族歴が健常対照より有意に高いことを明らかにし、気道アレルギーが運動ニューロン傷害の重要な危険因子であることを見出した。3)平山病では血小板CD23(低親和性IgE受容体)陽性率が、健常対照や他の神経疾患に比し有意に高く、アトピー素因を背景にIgEを介した血小板の活性化が生じている可能性を指摘した。4)平山病5例における検討では、抗神経抗体は全例陰性、抗ガングリオシド抗体もIgM型抗GM1抗体を1例で認めたのみであった。しかし、早期例では血漿交換が有効であったことから、今後は発症早期にこれらの自己抗体検索を行うことが重要であると考えられた。5)脊髄性筋萎縮症患者の中で血漿交換が有効な4例を経験し、血清中に抗神経抗体が存在することを見出した。ヒト脊髄cDNAライブラリー(λZAPII)を作製し、現在イムノスクリーニングを行っている。
イオンミキシング蒸着法による窒化物耐食性薄膜の信頼性向上に関する電気化学的研究

耐食性ドライコーティング膜の一種であるTiNは、美麗で硬度が高く、耐磨耗性は勿論のこと膜自体の耐食性も極めて優れている。しかし、膜内には様々な微小欠陥が存在し、特にピンホールと呼ばれる貫通型欠陥は環境遮蔽効果が少なく、素地金属の耐食性改善にはまだ多くの課題が残されている。そこで本研究では、イオンミキシング蒸着装置を用いてステンレス基板上TiN薄膜を成膜し、その組成・構造を調べるとともに、耐食性向上の観点から、ピンホール欠陥を抑制するための最適成膜条件について検討した.1)常温で作製したTiN被覆材表面は膜厚に依存せず黒ずんだ黄金色であるが、基板を加熱しながら作製すると300°Cで最も鮮やかな黄金色を呈する。また、いずれの被覆材表面にもピンホール欠陥が依存するが、その個数は極めて少なく、大部分は欠陥の存在しない平坦な膜であり、基板との密着性も優れている。2)常温で作製したTiN薄膜の結晶配向性は、膜厚に依存せず<111>配向であるが、基板表面温度が上昇するにつれて<200>配向が強くなる傾向にある。また、基板表面温度300°Cにおいては、膜厚が増加するにつれて<200>配向が強くなる傾向にあり、これらの原因として真空チャンバ内の残留不純物ガスが寄与しているものと考えられる。3)作製されたTiN薄膜のXPS分析による組成比Ti/Nは1.11.5とややTiリッチな膜である。また、TiN薄膜は結合エネルギーの化学シフトが認められ、化合物として薄膜を形成している。深さ方向のAES分析による組成分布は一様であり、均質なTiN薄膜が形成されている。TiN薄膜の硬度については、基板表面温度が上昇し、<200>配向が強くなるにしたがって硬くなる。4)ピンホール欠陥面積率は、基板を常温よりもむしろ加熱して作製したTiN被覆材の方が低くなり、基板表面温度300°Cで極小値の0.06%となる。また、常温で作製した膜厚1.5μm以上のTiN被覆材に発生した膜のはく離現象は、膜内部の残留圧縮応力によるものであり、基板を加熱しながら成膜することによって抑制することができる。これらのことから、基板を加熱して成膜することで、より耐食性の良い薄膜を作製することができると言える。耐食性ドライコーティング膜の一種であるTiNは、美麗で硬度が高く、耐摩耗性は勿論のこと膜自体の耐食性も極めて優れている。しかし、膜内には様々な微小欠陥が存在し、特にピンホールと呼ばれる貫通型欠陥は環境遮蔽効果が少なく,素地金属の耐食性改善にはまだ多くの課題が残されている。最近では、このピンホール欠陥に注目した電気化学的な検討が幾つかなされているが、当然のことながら、成膜条件を制御してピンホール欠陥を極力少なくすることは重要である。このためには、膜内のピンホール欠陥を迅速かつ定量的に評価できる手法の確立が望まれる。

そこで本研究では、2種類のイオン源系(220kV、3080mA)を備えた表面改質専用のイオンミキシング蒸着装置を用い、まず電子ビーム加熱より純チタンを蒸発させながら窒素のイオンビームでステンレス鋼基板表面に照射することによってTiN薄膜を作製した。次いで、膜表面および断面のモルフォロジーや密着性を詳しく調べると共に、現在、電気化学的な手法によるピンホール欠陥の評価を行っている。これまで得られた結果をまとめると、次のようになる。1)イオンミキシング蒸着装置の排気特性、イオンビーム特性や基板温度特性などの基本特性を詳しく調べると共に、TiN薄膜を作製するための最適成膜条件を明らかにした。すなわち、加速電圧2kV、アーク電圧80Vの成膜条件で膜質と密着性の優れたTiN薄膜を作製できる。2)得られたTiN薄膜はNaCl構造をとり、膜厚にほとんど依存せず優先配向が<111>方位である。膜表面にはいずれも微小欠陥が認められるが極めて平坦であり、膜断面については柱状組織の様相を呈する。3) TiN被覆材の臨界不働態化電流密度は膜厚の増加と共に減少するが、膜厚1.5μm以上では逆に減少する傾向が認められ、現在、その原因を詳しく検討している。耐食性ドライコーティング膜の一種であるTiNは、美麗で硬度が高く、耐摩耗性は勿論のこと膜自体の耐食性も極めて優れている。しかし、膜内には様々な微小欠陥が存在し、特にピンホールと呼ばれる貫通型欠陥は環境遮蔽効果が少なく,素地金属の耐食性改善にはまだ多くの課題が残されている。そこで本研究では、イオンミキシング蒸着装置を用いてステンレス基板上にTiN薄膜を成膜し、その組成・構造を調べるとともに、耐食性向上の観点から、ピンホール欠陥を抑制するための最適成膜条件について検討した.1)常温で作製したTiN被覆材表面は膜厚に依存せず黒ずんだ黄金色であるが、基板を加熱しながら作製すると300°Cで最も鮮やかな黄金色を呈する。また、いずれの被覆材方面にもピンホール欠陥が存在するが、その個数は極めて少なく、大部分は欠陥の存在しない平坦な膜であり、基板との密着性も優れている。2)常温で作製したTiN薄膜の結晶配向性は、膜厚に依存せず<111>配向であるが、基板表面温度が上昇するにつれて<200>配向が強くなる傾向にある。また、基板表面温度300°Cにおいては、膜厚が増加するにつれて<200>配向が強くなる傾向にあり、これらの原因として真空チャンバ内の残留不純物ガスが寄与しているものと考えられる。3)作製されたTiN薄膜のXPS分析による組成比Ti/Nは1.11.5とややTiリッチな膜である。また、TiN薄膜は結合エネルギの化学シフトが認められ、化合物として薄膜を形成している。深さ方向のAES分析による組成分布は一様であり、均質なTiN薄膜が形成されている。TiN薄膜の硬度については、基板表面温度が上昇し、<200>配向が強くなるにしたがって硬くなる。4)ピンホール欠陥面積率は、基板を常温よりもむしろ加熱して作製したTiN被覆材の方が低くなり、基板表面温度300°Cで極小値の0.06%となる。また、常温で作製した膜厚1.5μm以上のTiN被覆材に発生した膜のはく離現象は、膜内部の残留圧縮応力によるものであり、基板を加熱しながら成膜することによって抑制することができる。これらのことから、基板を加熱して成膜することで、より耐食性のよい薄膜を作製することができると言える。
直下型地震と地下水の動き

今年度の研究は,昨年度の兵庫県南部地震の際の地下水の動きに関する大阪層群より新しい帯水層の検討に対して,その基盤を構成する花崗岩類の亀裂中の地下水の影響を主として検討した.亀裂の中の地下水の地震時の動きについては,すでに昨年度までにある程度検討していたが,それに加えて,基盤岩の上昇による亀裂の発達と風化による透水性の低下について検討し,以下の結論を得た.1.淡路島や大阪平野地下など関西のいくつかの地域では,地震時に花崗岩類の上昇が認められ,それに伴う岩盤中の亀裂の発達が見られる.淡路島ではこの地震によって基盤の透水係数は3.6倍増加した.2.関西における花崗岩類の上昇は高槻市での花崗岩類に含まれる黒雲母中のFe-Mg相対比が風化によって一定の変化曲線に乗って変化することを用いて風化度を計算すると,この岩体に近接する段丘の形成速度(平均上昇速度)にほぼ等しい速度であることが判明した.3.上述のような花崗岩類の上昇に関しては,関西地区では適切な検討地がないために,中部日本の花崗岩類の形成年代と分布標高などから検討したところ,花崗岩類の上昇速度は平均0.2mm/年となり,オーダ的に活断層の活動周期と一致する.1.研究目的:兵庫県南部地震の際の地下水の動きから,基盤の花崗岩類の亀裂が地震によって急激に増加し,地下水の流動に大きな変化をもたらせた.このような現象に対して,そのメカニズムを明らかにするとともに,一般的に言われている"深層風化"の原因のひとつがこのような現象の積み重ねでではないかととの仮説にもとずいて,その証拠を科学的に集める.2.本年度の研究計画とその成果:(1)地震前の井戸の状態の整理:大阪府下と淡路島の井戸群について,その諸元や水位記録を収集した.ことに,大阪平野で掘削された井戸については地震前後の地下水位記録を整理し,帯水層別の影響を集約して,主として砂層の液状化による厚密が地層の続成作用に影響を及ぼしていることを明らかにした.(2)現地調査と試料採取:花崗岩の風化が更新世の段丘化とどのように関連しているのかを明らかにするために,大阪平野周辺と中部地方の風化花崗岩を高度別に採取して,その風化程度を黒雲母をもちいて検討した.現在の分布高度の高いものほど風化が進んでいることがわかった.(3)亀裂の立体的統計処理:大阪府下の花崗岩の亀裂を計測して,その立体的な配置をコンピュータ入力した.近くの断層の影響が見られるほか岩体の膨潤を示すようなものも想定される.(4)石英の水和層測定:亀裂発生の相対的年代差を知るために亀裂に露出する石英の水和層の暑さを測定することを試みたが薄片作成の過程でうまく行かず,問題点として来年度に持ち越された.今年度の研究は,昨年度の兵庫県南部地震の際の地下水の動きに関する大阪層群より新しい帯水層の検討に対して,その基盤を構成する花崗岩類の亀裂中の地下水の影響を主として検討した.亀裂の中の地下水の地震時の動きについては,すでに昨年度までにある程度検討していたが,それに加えて,基盤岩の上昇による亀裂の発達と風化による透水性の低下について検討し,以下の結論を得た.1.淡路島や大阪平野地下など関西のいくつかの地域では,地震時に花崗岩類の上昇が認められ,それに伴う岩盤中の亀裂の発達が見られる.淡路島ではこの地震によって基盤の透水係数は3.6倍増加した.2.関西における花崗岩類の上昇は高槻市での花崗岩類に含まれる黒雲母中のFe-Mg相対比が風化によって一定の変化曲線に乗って変化することを用いて風化度を計算すると,この岩体に近接する段丘の形成速度(平均上昇速度)にほぼ等しい速度であることが判明した.3.上述のような花崗岩類の上昇に関しては,関西地区では適切な検討地がないために,中部日本の花崗岩類の形成年代と分布標高などから検討したところ,花崗岩類の上昇速度は平均0.2mm/年となり,オーダ的に活断層の活動周期と一致する.
硬質レジン前装冠の耐摩耗性に関する研究

本年度は摩耗モデルの構築と各光重合条件の設定をおこない、歯ブラシ摩耗を行った際の経時的変化を解明した。摩耗モデル:前装用硬質レジンに対し精密低速切断機を用いてφ10.0×10.0mmの寸法に調製する。メーカー指示によるものを比較対照として、光強度、照射時間を変化させた試料を作製した。光強度をさらに変化させるために、メーカー指示の光照射器のほかに、メタルハライドランプを使用している多目的光重合器を使用した。照射時間は、上下両面から30,60,90,120,180秒間照射を行った。重合後、レジン表層を耐水研磨紙、アルミナ懸濁液とバフの順で研磨し、実験試料とした。歯ブラシ試験:この摩耗モデルに対し歯ブラシ摩耗試験を行った。摩耗試験条件は、歯ブラシとしてナイロン毛のものを使用し、歯磨材として研磨剤の含有したものを選択し、ストローク式摩耗試験機を用いて、荷重条件2.9N、ストローク幅60mmの条件下で10万回まで行う。摩耗面の測定、観察は1万回ごとに走査型レーザー顕微鏡にて行った。さらに歯ブラシ摩耗後の表面粗さの測定として3次元測定器の使用を検討し、さらに臨床においての歯ブラシ摩耗の現状について報告した。照射時間は、上下両面から30, 60, 90, 120, 180秒間照射を行った。重合後、レジン表層を耐水研磨紙、アルミナ懸濁液とパフの順で研磨し、実験試料とした。
プロテオミクスを用いた人種別血管炎患者における抗血管内皮細胞抗体の対応抗原の同定

プロテオミクスを用いて抗血管内皮細胞抗体(anti-endothelial cell antibodies : AECA)の対応抗原候補蛋白を検出・同定したところ、日本人大型血管炎患者と米国人大型血管炎患者では大きく異なっていた。AECAの対応抗原であるPeroxiredoxin2(Prx2)とPPIA cyclophilin A(PPIA)に対する自己抗体陽性率を高安動脈炎患者で評価したところ、日本人では85%以上であったが米国人では15%以下であった。プロテオミクスで巨細胞性動脈炎患者血清を用いて大動脈血管内皮細胞に特異的なAECAの対応抗原候補蛋白を9個、巨細胞性動脈炎に特異的なAECAの対応抗原候補蛋白を22個同定した。一方米国人高安動脈炎患者血清では、大動脈血管内皮細胞に特異的なスポットを15個検出し、米国人高安動脈炎に特異的なスポットを4個検出した。本研究よりAECAの対応抗原における人種別評価の重要性が示唆された。【21年度の研究目的】1)我々が今までに日本人血管炎患者における抗血管内皮細胞抗体(AECA)の対応抗原と同定した、Peroxiredoxin2(Prx2)およびcyclophilin A(PPIA)の2つ蛋白に対する自己抗体測定を米国人血管炎患者血清(大型血管炎である高安動脈炎および巨細胞性動脈炎)を用いて行った。2)1)の結果を日本人患者血清の場合と比較検討し、その臨床的意義について考察した。【結果】1)米国人患者血清におけるPrx2およびPPIA、それぞれの蛋白に対する自己抗体陽性率は両者の大型血管炎ともに15%以下であった。2)日本人患者血清では上記2つの蛋白に対する自己抗体陽性率は両者とも85%以上であり、血管炎患者における米国人血清と日本人血清では明らかに異なっていることが示唆された。更に、日本人患者血清においては両蛋白の抗体価が疾患活動性と相関していたが、米国人患者血清では相関は認められなかった。また、血管炎患者血清を用いたWestern blotting(抗原として血管内皮細胞抽出蛋白を使用)を行ったところAECAの対応抗原候補蛋白が日本人患者血清と米国人患者血清では明らかに異なることが示唆された。【考察】血管炎患者におけるAECAの対応抗原は日本人と米国人では大きく異なる可能性が示唆された。これらの結果からも、人種におけるAECAの対応抗原の検出・同定および人種間における比較検討は、血管炎の診断・治療、さらには血管炎の病態解明に非常に重要であると考えられた。22年度はこれらの結果を踏まえ、米国人血管炎患者血清を用いてAECAの対応抗原候補蛋白をプロテオミクスにより検出・同定していく。【平成22年度の研究目的】1)プロテオミクスを用いて、米国人大型血管炎患者(高安動脈炎および巨細胞性動脈炎)における抗血管内皮細胞抗体(AECA)の対応抗原候補蛋白を検出・同定する。2)1)の結果を日本人大型血管炎患者の場合と比較検討し、その臨床的意義について考察する。【結果】大動脈血管内皮細胞および大動脈外膜線維芽細胞(対照)からの抽出蛋白と活動性が高い米国人巨細胞性動脈炎患者血清および米国人健常人血清(対照)を用いてWestern blotting(WB)をおこなった。血管内皮細胞に特異的なAECAの対応抗原候補蛋白スポットを10個検出し、9個の蛋白を同定した。さらに米国人巨細胞性動脈炎患者に特異的なスポットを18個検出し、22個の蛋白を同定した。このうち両者に特異的なスポットは6個であり、3個の蛋白を同定した。同様に、活動性が高い米国人高安動脈炎患者血清を用いてWBをおこなったところ、血管内皮細胞に特異的なスポットを15個検出し、米国人高安動脈炎患者に特異的なスポットを4個検出した。このうち両者に特異的なスポットは4個であり、今後これらの蛋白スポットを同定する。現在、すでに同定された蛋白の組み換え蛋白を用いて米国人および日本人大型血管炎患者血清における自己抗体陽性率を評価している。【考察】米国人と日本人血管炎患者血清を用いた結果を比較検討したところ、同定されたAECAの対応抗原候補蛋白において、数個は同様であったが日本人と米国人では大きく異なっていた。現在、大型血管炎患者で同定蛋白における自己抗体陽性率およびその人種別評価を行っており、これらの結果が血管炎の診断・治療、更には血管炎の病態解明に非常に重要であると考えられた。

23年度は、個々の同定蛋白に対する自己抗体が大型血管炎患者の疾患標識マーカーとなり得るか否か評価する。【平成23年度の研究目的】プロテオミクスを用いて検出・同定された米国人大型血管炎愚者(高安動脈炎および巨細胞性動脈炎)における抗血管内皮細胞抗体(AECA)の対応抗原候補蛋白に対する自己抗体陽性率を評価する。さらに特異性が認められたAECA対応抗原に関しては、その臨床的意義について検討する。【結果】巨細胞性動脈炎の患者血清を用いた検討では、血管内皮細胞に特異的なAECAの対応抗原候補蛋白を9個、巨細胞性動脈炎患者に特異的なAECAの対応抗原候補蛋白を22個、血管内皮細胞および巨細胞性動脈炎患者の両者に特異的なAECAの対応抗原候補蛋白を6個同定した。まずこれらの同定された蛋白に対して、EBMおよび蛋白のデータベースを参考に優先順位をつけ、順次その組換え蛋白を作成し、それに対する自己抗体陽性率をELISAにて評価した。現在までに、約20個の同定された蛋白に関して評価したが、自己抗体陽性率は50%以下であった。今後、残りの同定された蛋白に関して検討するとともに、検査データ、身体所見および疾患活動性との関連の有無についても検討していく予定である。【考察】今回のELISAでは、米国健常人血清が約20検体と少なかったため、cutoff値の検討が不十分であったと考えられる。今後、米国健常人検体数を40検体前後に増やして再度検討する予定である。また米国人と本邦の大型血管炎患者では、AECAの対応抗原候補蛋白が大きく異なっていたことからも、同一疾患においても疾患活動性や臨床症状などの臨床像と同定された蛋白に対する自己抗体との関連の有無など、さらに詳細な検討が必要であると考えられた。
次世代太陽電池のための光吸収層材料の第一原理設計・探索

中間バンド型太陽電池は,次世代の高効率太陽電池として期待されている.しかし,その鍵となる中間バンドを有する光吸収層材料の最適化が十分になされているとは言えず,現状では理論値を遙かに下回る変換効率しか得られていない.本研究では,高精度な第一原理計算に基づいたスクリーニングにより,高い理論変換効率が得られる物質を選出した.その結果,従来提案されているような遷移金属元素をドーパントとして添加した2元系化合物半導体のみならず,ドーパントを含まない3元系化合物の中にも理想的なバンド構造を有する物質が存在することが予測された.中間バンド型太陽電池は,集光下で63%,非集光下でも47%もの高い理論変換効率を示すことから,次世代の高効率太陽電池として期待されている.しかし,その鍵となる中間バンドを有する光吸収層材料の最適化が十分になされているとは言えず,現状では理論値を遙かに下回る変換効率しか得られていない.本研究では,高精度な第一原理計算に基づいた設計と系統的な探索を行い,高効率な中間バンド型太陽電池の実現に向けた理論予測を目指す.本年度には,第一原理計算により不純物添加化合物半導体のバンド構造と吸収係数の算出を行うための基盤技術を確立した.精確な理論予測を行うためには,電子構造の高い計算精度が要求される.密度汎関数理論への局所密度近似(LDA)や一般化勾配近似(GGA)を用いた標準的な第一原理計算では,半導体のバンドギャップや不純物準位の再現性が悪いことが知られている.このため,ハイブリッド汎関数や多体摂動論に基づいたGW近似を適用した.ホスト物質の候補としては,バンドギャップが1.43.4 eV程度の半導体が理論変換効率の観点から適切である.また既存のセル作製技術との親和性の観点から,閃亜鉛鉱型構造,カルコパイライト型構造の化合物半導体を選択した.これらを対象に系統的な計算を実行し,候補物質を絞り込んだ.さらに,吸収係数を考慮した現実的な理論変換効率の計算手法を開発し,電子構造の観点から選定された物質を対象に変換効率の理論予測を行った.中間バンド型太陽電池は,次世代の高効率太陽電池として期待されている.しかし,その鍵となる中間バンドを有する光吸収層材料の最適化が十分になされているとは言えず,現状では理論値を遙かに下回る変換効率しか得られていない.本研究では,高効率太陽電池の実現に向け,高精度な第一原理計算に基づいた光吸収層材料の設計と探索を行った.昨年度に引き続き,不純物添加2元系化合物半導体および3元系化合物半導体を対象に,バンド構造と吸収係数の観点から第一原理計算によるスクリーニングを実行した.精確な理論予測を行うためには,電子構造の高い計算精度が要求される.密度汎関数理論の枠組みでの標準的な近似であるLDAやGGAを用いた第一原理計算では,半導体のバンドギャップや不純物準位の再現性が悪いため,ハートリーフォック交換項を混合したハイブリッド汎関数を適用した.また,第一原理計算による吸収係数をインプットにした変換効率シミュレーション手法を開発し,これにより各物質の理論変換効率を光吸収層厚さの関数として算出した.以上の計算手法により,多様な対象に対してスクリーニングを実行することで,高い理論変換効率が得られる物質を絞り込んだ.その結果,従来提案されているような遷移金属元素をドーパントとして添加した2元系化合物半導体のみならず,ドーパントを含まない3元系化合物の中にも理想的なバンド構造を有する物質が存在することが予測された.中間バンド型太陽電池は,次世代の高効率太陽電池として期待されている.しかし,その鍵となる中間バンドを有する光吸収層材料の最適化が十分になされているとは言えず,現状では理論値を遙かに下回る変換効率しか得られていない.本研究では,高精度な第一原理計算に基づいたスクリーニングにより,高い理論変換効率が得られる物質を選出した.その結果,従来提案されているような遷移金属元素をドーパントとして添加した2元系化合物半導体のみならず,ドーパントを含まない3元系化合物の中にも理想的なバンド構造を有する物質が存在することが予測された.当初計画では不純物添加化合物半導体を対象としていたが,対象物質の選定プロセスを効率化することで,中間バンドを有する多元系化合物の探索まで拡張することができた.また半導体ヘテロ接合の評価に不可欠なバンドアライメントの高精度計算手法の開発が進んだ.計算材料科学本年度に開発した手法に立脚して,より広範な物質を対象に材料設計・探索へと展開する.様々な既知・仮想的な物質を対象としたデータセットを構築し,これに対して吸収係数の寄与を考慮した現実的な理論変換効率に基づいたスクリーニングを行う.これにより,中間バンド型太陽電池の光吸収層として高いポテンシャルを有する系を見いだす.具体的には以下のとおりである.1.第一原理計算による不純物添加半導体・化合物半導体のバンド構造と吸収係数の系統的算出前年度に引き続き,第一原理計算によるバンド構造と吸収係数の系統的な算出を行う.この際,下記「2」によるスクリーニングの結果を随時フィードバックすることで,計算対象とする系を効率的に絞り込みながら算出を進める.2.スクリーニングによる材料探索上記「1」により,多様な物質を網羅したデータセットが構築される.

これに対して前年度に開発した理論変換効率シミュレーションを適用し,その結果に基づいてスクリーニングを行う.これにより,中間バンド型太陽電池の光吸収層として高いポテンシャルを有する系を見いだすとともにその材料設計指針について検討する.当初計画より計算手法の開発を重視し,また計算プロセスを効率化できたため,コンピュータ導入のための物品費および人件費を減らした.一方,来年度には多数の物質を対象とした系統的な計算を実行するため,計算資源を増強する必要がある.このため,次年度使用額が生じた.多数の物質を対象とした計算並びにスクリーニングを実行するためのスーパーコンピュータ使用料および成果発表旅費等として使用する.
ツォンカパにおける中観哲学の研究

こんにちの仏教学学界における研究姿勢のひとつに,ツォンカパ(Tsong kha pa Blo bzang gragspa′i dpal,1357-1419)の仏教哲学の解明をもって研究を進めるという動向がある。ツォンカパは,14世紀に活躍した,チベット仏教を代表する思想家のひとりであるも,インド大乗仏教の伝統を踏まえつつ,中観帰謬論証派の見解をもって,仏教思想のそのすべてをきわめて理知的に分析し,ひとりの思想家の哲学として綜合しえたところに注意すべき意義がある。このたびの研究は,ツォンカパの思想を解明するうえで基礎となる文献について,校訂テキストの作成とともに和訳を試みることを主たる目的とした。この三カ年の研究期間内では,「見解に関する主要な五つの善説」と呼ばれる中観思想に関するツォンカパの著作に注目し,そのうち,未だ和訳が行われていない『菩提道次第略論』(Lam rim chung ba/chung ngu,1415)から観(vipasyana)に関する論述部分(1Hag mthong chung ba/ chung ngu)と『善説心髄』(Legs bshad snying po,1407/8)との二つについて和訳を完了することができた。研究期間内に行った主たる研究成果として,以下の出版物を刊行し,または平成十年度中に刊行予定である。『ツォンカパ中観哲学の研究I』ツルティムケサン・高田順仁(京都・文栄堂1996)『ツォンカパ中観哲学の研究II』片野道維・ツルティムケサン(京都・文栄堂1998)『ツォンカパ大乗菩薩道の研究』(仮題)ツルティムケサン・高田順仁(京都・文栄堂1999刊行予定)こんにちの仏教学学界における研究姿勢のひとつに,ツォンカパ(Tsong kha pa Blo bzang gragspa′i dpal,1357-1419)の仏教哲学の解明をもって研究を進めるという動向がある。『ツォンカパ中観哲学の研究I』ツルティムケサン・高田順仁(京都・文栄堂1996)『ツォンカパ中観哲学の研究II』片野道維・ツルティムケサン(京都・文栄堂1998)『ツォンカパ大乗菩薩道の研究』(仮題)ツルティムケサン・高田順仁(京都・文栄堂1999刊行予定)仏教学に対して、現代何が求められているのだろうか。仏教学は、古典文献学の成果を踏まえつつ、人文科学の一分野として、特には、人間の生活の精神的局面に直接関与しうる学問として変貌を要請されている、と筆者らは認識している。仏教の思想を、いま生きる人々に有益なものとするためには、我々は、それをより平易に、かつ十分に客観性をそなえた、すなわち哲学的批判に耐えうることばでもって語るよう努めねばならないであろう。チベットの仏教は、インドでの仏教の全動向を見定めたうえで、仏教を解釈しうるという歴史的、地理的優位性もあって、仏教の思想を、中国や日本での仏教学の伝統をしばらく離れて、考えようとする者には、きわめて有益な学問対象となっている。しかも、チベットの仏教学は、学問としての現代の仏教学における水準にも決して引けをとらない。あるいは、それ以上の文化的遺産を我々残し、現代においてもその伝統は維持されている。筆者等の研究課題は、チベットにおける最も優れた学僧とされるツォンカパ(1357-1419)という人物に伝承された仏教理解の解明である。そして今回は、特に、中観思想、すなわち、いかなる存在もそれ独自の実態性をもっていない、そして、実体性なきがゆえに、それが一存在として十全に機能しうると説く仏教思想を研究対象にしている。いまいくつかの文献の和訳作業を並列的に行っているが、近日中には、そのうち『菩提道次第略論』(観の部分)の和訳を刊行できる予定である。平成八年度には,引き続き『了義末了義善説心髄』の和訳研究を進めるとともに,『菩提道次第小論』「観」章の和訳研究を『ツォンカパ中観哲学の研究I』として公にした.

特に後者はツォンカパ晩年の著作のひとつであるとともに,彼の中観哲学に関する思想が,菩提道を完遂するための哲学的基盤として,よくまとまって示されいるといえる.「観」とは真実の観察の意であるが,『菩提道次第小論』「観」の主要部分は概ね次のような構造をもつ.我々をして迷いの生存である「輪廻」に縛るものは根源的無知(「無明」)であり,無知とは固定的実体の捏造に他ならない.固定的実体の捏造(「我の増益」)を,個体的実体(「人」)と現象的実体(「法」)との無我を知ることによって否定する.固定的実体の否定を過不足なく,すなわち的確に行うために,世間世俗諦と勝義諦との二重真実説(「二諦」)の正しい理解が要求される.ツォンカパは,これらの課題をチャンドラキールティ(Candrakirti,七世紀)の中観帰謬論派にしたがって論じている.ツォンカパ(Tsong kha pa,1s357-1419)はチベットを代表する思想家のひとりであるが,ツォンカパにおける中観哲学の研究の重要性は,必ずしもその彼の思想的独自性のみに限定されるのではなく,中観哲学をもって仏教の基本的な体系を構成・提示しているところに在るといえよう.平成八年度には,前述したように『菩提道次第小論』「観」章の和訳研究を行い,ツォンカパにおける中観哲学とは何を課題とし,何を目指しているのかという最も重要な部分を明らかにした.平成9年度は、『善説心髄』(Dran nes legsbsad snin po.1407/8年作)後編「中観章」の解読研究と、『菩提道次第大論』(Lam rim chen mo.1402年作)から、大乗菩薩道の総論部分の解読研究を行った。このうち前者は、自立論証派と帰謬論証派との思想上の特色が、存在論としての世俗の事物に対する見解の相違を通して明瞭に論述されるところに特徴がある。後者に対して行ったところの研究部分では、大乗菩薩道、特には発菩提心と六波羅密多の実践に対するツォンカパの見解が示される。これは必ずしも中観哲学に関連するものではないが、これまでのツォンカパ研究では充分に取り扱われなかった事項でもあり、彼の仏教思想の全体像を把握するために不可欠であると考えられる。両書に対する解読研究の成果はともに平成10年中に図書としての刊行を予定している。