hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
報酬・忌避行動と意志決定における大脳基底核神経回路の制御機構

新しく解明した大脳基底核神経回路における情報伝達の統合と処理の様式から、精神神経疾患の神経回路から見た病態解明と治療法開発へつなげたい。26年度が最終年度であるため、記入しない。神経科学、精神医学26年度が最終年度であるため、記入しない。大脳基底核神経回路における情報伝達の統合と処理の分子機構の一端を明らかに出来た。前年度までに報酬・忌避行動における大脳基底核神経回路制御機構を明らかにしてきたが、さらに高度な認知行動課題にすすんでいる。可逆的神経伝達阻止法と薬理学的手法の組み合わせによって、報酬・忌避行動における大脳基底核神経回路制御の分子機構を明らかにすることが出来た。可逆的神経伝達阻止法と薬理学的手法を組み合わせて、報酬・忌避行動と意志決定における大脳基底核神経回路制御の分子機構を調べる。可逆的神経伝達阻止法を用いて、高次脳機能と精神疾患病態における大脳基底核神経回路機構を探る。ドーパミン神経活動制御による大脳基底核神経回路機構を探る。
1950年代から1960年代の日本における子どもの人体実験に関する歴史研究

本研究では子どもを対象とした人体実験について、19501960年代の日本国内における医学研究の事例を扱う。当時の国立の研究機関、大学医学部、旧陸軍病院、公立病院、教育委員会、学校長などが関与していることに注目し、戦後の児童福祉体制の構築期において、実験対象になった子どもたちが社会的弱者という集団として出現したプロセスを検討する。本研究の調査と考察を通して、戦前・戦時中から戦後へとつづく医療倫理・医学倫理をめぐる構造的な問題を示す。
フラーレン構造をもつヘテロポリ酸の光化学的合成と触媒作用

これまで光化学的に得られる球状ヘテロポリ酸の多くは中性分子,アニオンがカプセル化したフラーレン類似構造化合物であり,熱化学(水熱合成も含めて)的にもカチオンがカプセル化された球状クラスターの合成は極めて希であった。しかしながら本研究によりカチオンをカプセル化したバナジウムの新規球状ヘテロポリ酸としてNa^+がカプセル化した[V_<12>B_<32>O_<84>(Na)_4]^<15->クラスターが光化学的に合成された。このアニオンはVO_5square pyramidが陵共有した(VO)_<12>O_<24>リングに2つのB_<16>O_<20>(OH)_4リングがサンドイッチしたド-ナツ状の構造であり,中心のcavityにはNa^+が8個,2.62×2.62×2.98AÅ^3の直方体の端を1/2の占有率でNa...Na距離3.693.999AÅでTd近似に位置するものと結論された。Li^+,K^+が中心にカプセル化した結晶も同様に得られ,Na^+の一部はEu^<3+>により容易に置換されることが明らかとなった。さらに従来見い出してきたVの球状ヘテロポリ酸を中心のtemplate交換反応により容易に互いに交換できることを見い出し全く新しい球状ポリ酸の合成方法として今後期待できることが判明した。
膜型エストロゲン受容体GPR30を用いた末梢神経における髄鞘形成活性化機構の解明

後根神経節および脊髄前角細胞の有効な初代培養系を確立する。神経細胞としては、後根神経節(DRG)を選択し、胎児マウスから抽出した。さらに、脊髄前角細胞motor neuronの初代培養のために、ラット脊髄から専用キット(NycoPrepTM)を用いて抽出した。シュワン細胞の抽出はラットの坐骨神経を採取し、溶解処理を行い、抽出した。細胞体と軸索の分離培養系確立のため、AXISおよびCampenot chamberを使用した。また観察法として、共焦点レーザー顕微鏡での観察の時期および定量方法の調整を行った。長期の治療期間を要する末梢神経障害に対して、薬物療法による早期の再生誘導を目指すことは、整形外科領域において非常に意義のあることである。申請者はこれまでに、運動器機能の再生をテーマに、末梢神経再生につながる分子の同定、実験手技を蓄積してきた。GPR30は膜型受容体として髄鞘形成機構のシグナル伝達に関与すると考えられ、創薬のターゲットになりうるきわめて理想的なターゲットであり、今後の研究の発展が期待できる。GPR30の髄鞘形成の制御機構を解明し、再髄鞘化の過程を効果的に機能させる方法が明らかにすることで、末梢神経障害の治療応用を目指す。本研究では、神経細胞およびグリア済ぼの共培養系を用いる。そのために、後根神経節および脊髄前角細胞の有効な初代培養系を確立する。細胞体と軸索の分離培養系確立のため、AXISおよびCampenot chamberを使用し、神経とシュワン細胞の共培養系をそれぞれ確立するための条件設定および、効果的な細胞濃度や比率の調整を行った。また各分化段階のシュワン細胞がGPR30に対する応答性を検討するために、GPR30のアゴニストG1を濃度を変えて投与した時の、GPR30のmRNA発現量をreal time PCRで検討するために、遺伝子の採取方法の条件設定を行った。後根神経節およびシュワン細胞の抽出は可能であるが、共培養系の確立が成功していない。単培養から共培養に移行する過程では、さまざまな条件設定が必要であり、安定して、再現することが難しい。細胞濃度、比率、長期の培養管理のための、無菌捜査過程や、細胞抽出の際の技術的課題の整理と克服が必要であるが、まだ完成されていない。そこで、組織レベルの実験を平行して行っている。その初期段階として、モデル動物の作成を行っている。脱髄モデルとして、2週齢のラットに、脱髄効果をもつ0.6% cuprizoneを2週間食餌に混ぜて摂取させ、脱髄モデルを作成する。さらに、神経圧挫損傷モデル坐骨神経を絹糸で5分間結紮させ軸索損傷させる。共培養系の確立とともに、組織レベルでの実験を平行して行うことで、研究の目的達成を目指す。

さらに、脊髄前角細胞motor neuronの初代培養のために、ラット脊髄から専用キット(NycoPrepTM)を用いて抽出した。シュワン細胞の抽出はラットの坐骨神経を採取し、溶解処理を行い、抽出した。細胞体と軸索の分離培養系確立のため、AXISおよびCampenot chamberを使用し、神経とシュワン細胞の共培養系をそれぞれ確立するための条件設定および、効果的な細胞濃度や比率の調整を行った。また観察法として、共焦点レーザー顕微鏡での観察の時期および定量方法の調整を行った。後根神経節および脊髄前角細胞の有効な初代培養系を確立する。神経細胞としては、後根神経節(DRG)を選択し、胎児マウスから抽出した。細胞体と軸索の分離培養系確立のため、AXISおよびCampenot chamberを使用した。本研究では、神経細胞およびグリア済ぼの共培養系を用いることを前提としている。後根神経節およびシュワン細胞の抽出は可能であるが、共培養系の確立が成功していない。単培養から共培養に移行する過程では、さまざまな条件設定が必要であり、安定して、再現することが難しい。細胞濃度、比率、長期の培養管理のための、無菌捜査過程や、細胞抽出の際の技術的課題の整理と克服が必要である。さらに共培養系が確立できない場合の、組織レベルでの研究を遂行することなどを検討している。組織レベルの実験を行う上で、モデル動物の作成を行う。脱髄モデルとして、2週齢のラットに、脱髄効果をもつ0.6% cuprizoneを2週間食餌に混ぜて摂取させ、脱髄モデルを作成する。さらに、神経圧挫損傷モデル坐骨神経を絹糸で5分間結紮させ軸索損傷させる。共培養系の確立とともに、組織レベルでの実験を平行して行うことで、研究の目的達成を目指す。共培養系の確立にむけて、さらに条件設定や詳細な実験プロとコロールの決定を行う。そのために、課題克服のために、実験効率を上げるための、物品の調達や、実験器具の調達を検討する。さらに組織レベルでの研究を平行して進めている。組織レベルの実験としての脱髄モデルとして、2週齢のラットに、脱髄効果をもつ0.6% cuprizoneを2週間食餌に混ぜて摂取させ、脱髄モデルを作成する。動物モデルの作成および評価方法については、以前の研究プロトコールを応用し、なるべく成功確率の高い方法を選択していく。また、評価方法の習熟のため、正常ラットでも同様の実験を開始する。
βアミロイド神経毒性の分子機構

Aβによってその発現が誘導される遺伝子の一つがMAP1Bと同定されたため、他の微小管関連白のmRNA変化を、northern blotで調べた。その結果tauよりもMAP1Bの方が一過性に誘導さること、aged Aβよりもnew Aβの方がより一過性の誘導を引き起こすこと、また、ニューロンに先んじて、β-tubulin mRNAが特異的に減少することがわかった。次に、Aβ添加によるMAP1B白量の変化を、immunoblotで調べた。その結果、newAβ添加6時間後にわずかに増加するものの、24時間後には検出できないほどに減少していることがわかった。MAP1Bには3種類のtranscriptがあり、exon 3Uから始まるtranscriptの発現がadult brainよりもembryonic brainで多いとがわかっている。そこで、Aβ添加によって、どのaltemative transcriptの発現が増加するのかを、RT-PCR-southern b1otで解析した。その結果、new Aβ添加3時間後に、embryonic typeである3Uから始まるtranscriptが増加していることがわかった。本研究の結果、培養ニューロン内ではあるが、PHFのminor componentであり、胎児性抗原であるMAP1Bの発現を、Aβが一過性に誘導することが明らかとなった。Soluble Aβ(sAβ)とaggregated Aβ(aAβ)の神経毒性はそれぞれ別の物質によって、神経毒性が緩和されるため、sAβとaAβではニューロン死をおこす分子過程が異なることが示唆される。そこで、どのような分子機構を経てsAβやaAβがニューロン死を引き起こすのかを明らかにするために、以下の研究計画を実施した。sAβまたはaAβによるニューロン死のcommitment pointを調べたところ、どちらも3時間であったため、Aβ添加3時間後に培養ニューロンよりmRNAを調製し、72種類のprimer pairを使ったdifferential display法で、発現誘導される遺伝子断片を解析した。その結果、aAβ添加により培養ニューロンに出現するbandが6個、sAβ添加により出現するbandが9個、どちらによっても出現するbandが14個得られた。また、aAβ添加によりニューロンから消失するbandが7個、sAβ添加により消失するbandが4個あった。band中のcDNAをプローブとしたnorthern blotによって発現の誘導や抑制の確認を試みたが、1個のband中には複数のcDNAが含まれていたため、発現の誘導や抑制を確認することが難しかった。そこで、40個のbandをsubclone化し、reverse primed probeによって、特異的に発現しているcloneをこれまでに6種類拾い、このうち、i81B-11、i132-1、F182C-2、i132-3についてはnorthern blotによって発現変化が確認できた。i132-3は12SrRNAでsAβ添加により発現が減少した。i81B-11、i132-1、F182C-2は、aAβとsAβのどちらによっても発現誘導されるcloneで、いずれも、9kb以上のmRNAを認識していた。
モラクセラ・カタラーリスの薬剤耐性に関わる外膜タンパク質の解析

【背景および目的】モラクセラ・カタラーリス(Moraxella catarrhalis)は呼吸器感染症の主要起炎菌として広く認識されている。一方でグラム陰性菌の薬剤耐性因子として外膜タンパク質(Outer membrane protein : OMP)の発現量減少が知られている。これまでの研究で大腸菌や緑膿菌ではOMPと各種抗菌薬耐性の関連は研究され報告されているが、M. catarrhalisのOMPと薬剤耐性に関する報告は少ないことから本研究では、M. catarrhalisのOMP欠損株を作製し、OMP欠損が薬剤耐性に与える影響を調べた。【材料と方法】菌株としてATCC49143株を使用し、外膜タンパク質を調整した。調整した外膜タンパク質をSDS-PAGEで分離し、35-50kDa付近のタンパク質を質量分析装置によるペプチド・マスフィンガープリンティングで同定した。その中で、ポーリンタンパク質と同定された3種類のタンパク質(M35, M45(仮称), OmpE)について、アミノ酸翻訳領域内にトランスポゾンを挿入した標的タンパク質ノックアウト株を作製した(ΔM35, ΔM45, ΔOmpE)。それぞれの菌株について、キノロン系抗菌薬であるlevofloxacinとciprofloxacinの最小発育阻止濃度を微量液体希釈法で測定した。【結果】作製したノックアウト株3株はいずれもPCRで標的遺伝子の野生型消失およびSDS-PAGEで目的タンパク質の消失が確認された。ΔM35, ΔM45, ΔOmpEのlevofloxacinおよびciprofloxacinの最小発育阻止濃度は野生株と比較し、ΔM35で2管上昇, ΔM45で1管上昇, ΔOmpEでは変化しなかった。【考察】本研究により、M35およびM45は軽度ではあるがキノロン系抗菌薬の耐性に関与し、OmpEはキノロン耐性に関与しない可能性が示唆された。今後は対象抗菌薬を増やし検討を継続していく予定である。
アポトーシス関連遺伝子Par-4による子宮内膜発癌抑制機構の解明と治療への展開

アポトーシス関連分子Prostatic apoptosis response-4 (Par-4)は、正常子宮内膜の間質細胞で月経期に一過性の発現増加を示し、かつ、リン酸化NF-_κB/p65やアポトーシスと正の相関を示した。子宮内膜癌はその発現が減少したが、リン酸化p65とは正の相関を示した。培養細胞にp65遺伝子を導入すると、転写レベルでPar-4発現が誘導された。Par-4遺伝子導入はbcl-2やp21WAF1発現変化を介したアポトーシスや細胞増殖停止を誘導した。以上から、子宮内膜発癌過程で、NF-kB/p65依存性Par-4系はアポトーシスや細胞周期調節等を含む細胞動態の調節に関与することが明らかになった。平成20年度は、本研究の第一の目的である「Par-4はどのような機序でその発現が制御されているか?」について、計画書に沿って臨床検体(正常及び腫瘍性子宮内膜組織)を用いて検索を行った。1)正常子宮内膜:免疫組織化学検索で、Par4蛋白発現は内膜腺上皮では細胞質内増殖期から分泌期を通じて恒常的に発現していたが、核内発現は分泌期後期のみ認められた。一方、間質細胞では、分泌期中期から月経期にかけてその細胞質及び核発現が認められた。Par-4mRNAをもとに作成した約400b pのRNA probe in situ hybridizationによる検討で、Par-4 mRNA発現は内膜腺細胞では月経周期を通じて恒常的に発現が認められたが、間質細胞ではその蛋白発現と一致して分泌期後期にかけてその発現が増加する傾向があった。以上から、Par4発現制御機構は内膜腺上皮細胞と間質細胞で異なり内膜腺上皮細胞では細胞質内Par4の核内移行、及び間質細胞ではPar4発現誘導が月経期の子宮内膜脱落に関与する等の可能性を得た。2)癌組織:Par4蛋白発現は正常内膜に比べて著しく減少し、殆どの症例は陰性ないし散在性の弱シグナルを示した。現在、in situ hybridizationによるPar-4 mRNA発現の検索中である。更に、Par4遺伝子のgenetic,/epigeneticな検索も行う予定である。3)内膜癌細胞培養: Ishikawa及びHec251細胞で、血清除去によるapoptosis誘導によりPar4蛋白の発現増加とその蛋白の核内への移行が認められた。また、レポーターアッセイによりPar4プロモーターはrelAにより活性化することを見出した。今後、上記検索をさらに進めて、Par4遺伝子発現制御機構を解明する予定である。平成21年度は前年度の結果に基づいて、主に子宮内膜正常及び癌組織を用いて、免疫組織学的にPar4発現に関連する分子の検出を行った。同時に、Tunnel法による組織標本上でのアポトーシス細胞の検出を行い、Par4発現との関連性を検索した。1)免疫染色:アポトーシスに関与するrelA, pAkt, bcl-2,及びWT1に加えてホルモンレセプター(ER, PR)発現を検索し、Par4発現との関連性を検討した。正常子宮内膜でPar4発現は、上皮成分でホルモンレセプター発現とのみ正の相関を示し、間質細胞ではrelAと正の、pAktと負の相関を示した。一方、内膜癌組織では、relA, bcl-2と正の相関を示していた。2)アポトーシスとの関連:正常組織では、アポトーシスは上皮細胞のみなら間質細胞でその陽性率が増加した。癌組織では、腫瘍の組織学的悪性度と一致して増加した。Par4発現とアポトーシスは正常間質細胞で正の相関を示したが、正常上皮細胞や癌組織では、そのような関係は認めなかった。3)内膜癌培養細胞による検索:Ishikawa及びHec251細胞で、血清除去またはTNFα処理によるアポトーシスやsenesence誘導と一致してPar4発現が誘導された。同時にrelA発現誘も増加した。加えて、外因性にPar4遺伝子を導入は、アポトーシスとsenesence細胞の増加をきたした。以上の結果から、Par4発現はrelAやpAK及びbcl2発現と関連を示した。一方、そのアポトーシス誘導メカニズムは極めて複雑であることが示唆された。来年度は、その分子メカニズムを主に内膜癌培養細胞と分子生物学的手法を用いて解明したい。最終年度である平成22年度は、前年度の結果に基づいて、Par4遺伝子の発現調節機構とその機能解析を子宮内膜癌細胞で行い、以下の結果を得た。1)Par4遺伝子制御機構:子宮内膜癌細胞に外因性にNF-kB/p65を過剰発現させると、内因性Par

4発現が蛋白及びmRNAレベルで増加した。そこで、Par4遺伝子プロモーター領域を段階的に欠落したconstructsを作製し、NF-kB/p65に対する反応性を検索したところ、-2805bpから-1448bpの領域にその反応配列の存在が疑われ、3カ所にNF-kB/p65結合配列(GGRNNYYCC)を認めた。これらの領域に変異を加えると、Par4プロモーターのNF-kB/p65に対する反応性示著明に減弱した。また、ChIP assayでこれらの領域にNF-kB/p65蛋白が結合することが確認でした。以上から、Par4遺伝子はNF-kB/p65により転写レベルで制御されることを明らかにした。2)子宮内腰癌細胞の細胞周期をG1期で停止させると、Par4蛋白は核内に異常集積を示し、G2/M期で停止させるとcentrosomeに集積した。以上から、Par4発現およびその局在は細胞周期によっても変化し、細胞増殖抑制や細胞分裂に密に関与する可能性を得た。3)子宮内膜癌細胞で、外因性にPar4遺伝子を過剰発現させると、プロモーター活性は変化することなしに内因性のbc1-2蛋白発現減少とp21WAF1蛋白発現増加が認められたことから、Par4による蛋白レベルでの改変が生じている可能性が考えられた。これらの分子の発現変化は、Par4遺伝子過剰発現による子宮内膜癌細胞のアポトーシス誘導や増殖抑制の原因と考えた。以上の結果から、子宮内膜癌においてPar4遺伝子はNF-kB/p65シグナル系に属し、bc1-2やp21WAF1発現調節による増殖抑制やアポトーシス誘導を介して子宮内膜発癌に重要な役割を演じる可能性が示唆された。
正則自己同型群による複素ユークリッド空間の特徴付けに関する研究

1.研究代表者児玉と研究分担者清水は,複素多様体Mの正則自己同型群Aut(M)のなす位相群としての構造からMの複素多様体構造を特徴付けるという基本的な問題を研究した.特に,Aut(M)がAut(C^k×(C^*)^<n-k>)と位相群として同型であるような複素多様体Mの構造を明らかにした.また,この過程で用いた方法の興味ある応用として,ユニタリー群の直積として与えられる群による複素多様体上への群作用に関するいくつかの新しい結果を得た.2.研究分担者奥山は複素力学系に現れる数論的問題である無理的中立周期系の解析的線型化問題を有理函数のみならず超越整函数に対しても研究し,特に,自然な幾何学的有限性のもとでこの問題を解決した.一方,この問題をネヴァンリンナ理論の手法を用いても研究し,70年来の古典的結果を大きく改良することに成功した.さらに,この研究を複素力学系とネヴァンリンナ理論の横断的研究へと発展させ,数論における類似とも併せて辞書を構築した.3.研究分担者今吉はリーマン面の正則族のモノドロミーに関連した種々の研究をし,多くの新しい結果をえた。また,研究分担者野口は正則曲線の値分布と有理点の分布について研究し,多くの新しい知見を得た.これらの結果は小林双曲性問題への応用が見込まれる.1.研究代表者児玉と研究分担者清水は,複素多様体Mの正則自己同型群Aut(M)のなす位相群としての構造からMの複素多様体構造を特徴付けるという基本的な問題を研究した.特に,Aut(M)がAut(C^k×(C^*)^<n-k>)と位相群として同型であるような複素多様体Mの構造を明らかにした.また,この過程で用いた方法の興味ある応用として,ユニタリー群の直積として与えられる群による複素多様体上への群作用に関するいくつかの新しい結果を得た.2.研究分担者奥山は複素力学系に現れる数論的問題である無理的中立周期系の解析的線型化問題を有理函数のみならず超越整函数に対しても研究し,特に,自然な幾何学的有限性のもとでこの問題を解決した.一方,この問題をネヴァンリンナ理論の手法を用いても研究し,70年来の古典的結果を大きく改良することに成功した.さらに,この研究を複素力学系とネヴァンリンナ理論の横断的研究へと発展させ,数論における類似とも併せて辞書を構築した.3.研究分担者今吉はリーマン面の正則族のモノドロミーに関連した種々の研究をし,多くの新しい結果をえた。また,研究分担者野口は正則曲線の値分布と有理点の分布について研究し,多くの新しい知見を得た.これらの結果は小林双曲性問題への応用が見込まれる.Mをn次元連結パラコンパクト複素多様体,C^nをn次元複素ユークリッド空間とし,Aut(M)およびAut(C^n)をそれぞれの(コンパクト開位相を入れた)双正則自己同型群とするとき,本研究の主要な目的の一つは「Aut(M)とAut(C^n)が位相群として同型であるならば,MはC^nに双正則同値であるか?」という基本問題を解決することであった。しかし,最近ロシアの数学者A.V.IsaevとN.G.Kruzhilinはn次ユニタリ群U(n)が双正則自己同型として効果的に作用するような複素多様体Mの分類理論を作り,その応用として上述の基本問題を肯定的に解決した。これを受けて,研究代表者児玉は,研究分担者清水との共同研究において,「n次元スタイン多様対Mに対して,Aut(M)とAut(C^k×(C^*)^<n-k>)が位相群として同型であるならば,MはC^k×(C^*)^<n-k>に双正則同値である。ただし,C^*=C\{0}で,Kは0≦K≦nを満す整数とする.」ことを証明した。この結果はIsaev-Kruzhilinの分類理論からは導くことが出来ない新しいものであり,論文として印刷公表する予定である。研究分担者加須栄は正則ディリクレ空間と内在的距離に関する幾何解析の問題として,スペクトル収束理論を中心に研究した。具体的には,強縮小半群を持つ正則ディリクレ空間族のプレコンパクト性のより詳細な解析として,エネルギー形式のモスコ収束,ディリクレ形式の部分の収束,エネルギー最小写像の収束などの問題に関して研究成果をあげた。Mをn次元連結パラコンパクト複素多様体,C^nをn次元複素ユークリッド空間とし,Aut(M)およびAut(C^n)をそれぞれの(コンパクト開位相を入れた)双正則自己同型群とするとき,本研究の主要な目的の一つは「Aut(M)とAut(C^n)が位相群として同型であるならば,MはC^nに双正則同値であるか?」という基本問題を解決することであった.しかし,2002年にA.V.IsaevとN.G.Kruzhilinはn次ユニタリ群U(n)が双正則自己同型群として効果的に作用するような複素多様体Mの分類理論を作り,その応用としてこの基本問題を肯定的に解決した.これを受けて,研究代表者児玉は,研究分担者清水との共同研究において次のことを証明した:「n次元スタイン多様体Mに対して,Aut(M)とAut(C^k×(C^*)^<n-k>)が位相群として同型であるならば,MはC^k×(C^*)^<n-k>に双正則同値である.」

この結果はIsaev-Kruzhilinの分類理論からは導くことが出来ない新しいものであり,論文として2004年3月に印刷公表された.さらに,本年度の研究成果として,児玉は清水との共同研究において,この結果が「複素多様体Mが必ずしもスタインでなくとも,Mが正則分離で,しかも滑めらかなスタイン正則包を持つ場合」にも成立することまで一般化出来ることを示した.また,その証明の過程で用いたアイディアの応用として,いくつかの高次元単位球の直積を双正則自己同型群の観点から特徴付けることが出来ることがわかり,論文として印刷公表する予定である.さらに,児玉,清水と韓国の数学者Jisoo Byunとの共同研究として,n次元単位球とm次元ユークリッド空間の直積の特徴付けに成功した.研究代表者児玉と研究分担者清水は,複素多様体Mの正則自己同型群Aut(M)のなす位相群としての構造からMの複素多様体構造を特徴付けるという基本的な問題を研究し,以下のような結果を得た:定理1.Mをn次元の連結な複素多様体とし,Mは正則的に可分で,滑らかな正則包を許容するものとする.このとき,もしAut(M)がAut(C^k×(C^*)^<n-k>)と位相群として同型であるならば,M自身がC^k×(C^*)^<n-k>と双正則同値である.この定理の帰結として,2つの非負整数の組(k,l)と(k',l')が一致しないとき,位相群Aut(C^k×(C-*)^l)とAut(C^<k'>×(C^*)^<l'>)は同型にはならない,という基本結果を得た.また,この定理の証明の方法の興味ある応用として,ユニタリー群の直積として与えられる群による複素多様体上への群作用に関する次の事だわかった:定理2.Mをn次元の連結なスタイン多様体とし,Kをユニタリー群の直積K=U(n_1)×...×U(n_s)として与えられるコンパクト群とする.ここで,各U(n_j)はn_j次のユニタリー群であり,Σ^s_<j=1> n_j=nであるものとする.今KからAut(M)の中への単射で連続な群準同型写像pが与えられたとする.このとき,MからC^n内のあるラインハルト領域Dの上への双正則写像Fが存在して,KはAut(D)の部分群となり,F_p(K)F^<-1>=Kが成り立つ.さらに,この定理を基礎にして次の定理を証明することに成功し,論文とし目下投稿中である:定理3.Mをn次元の連結なスタイン多様体とする.このとき,もしAut(M)がAut(B^k×C^<n-k>)と位相群として同型であるならば,M自身がB^k×C^<n-k>と双正則同値である.ここで,B^kはC^kの単位球である.
前弧堆積盆の累積様式から島弧前縁のひずみ履歴を復元する手法の開発

沈み込み帯における重要な構成要素の一つである前弧堆積盆は,島弧の隆起・削剥・気候・火成活動などの履歴を高解像度で保存するだけでなく,島弧前縁の変形履歴を反映した形状変化や埋積様式を示している.しかし,プレート境界での物質的・力学的な変動に対する前弧堆積盆の応答の詳細は良く分かっていない.本研究の目的は,プレート収束境界における物質収支が島弧前縁の様式(付加体型・非付加体型)を決めるとともに前弧堆積盆の形態にも影響を与えるとの仮定のもとに,島弧前縁のひずみ履歴と前弧堆積盆の傾動・沈降・埋積過程との相互関係を明らかにすることである.平成30年度は,昨年度に改造した東京大学大気海洋研究所のアナログ実験装置を用いて,基本的な前弧堆積盆を形成する実験の継続して実施した.実験の目的は,付加体とバックストップとの間に形成される前弧堆積盆における埋積様式が土砂供給量の変化にどう対応するかを調べることである.実験中に砂を供給しない場合では,バックストップの傾斜面に沿って発達するバックスラストが外縁隆起帯を形成し,その陸側に前弧堆積盆に相当する凹地が作成された.一方,実験中に砂を供給した場合では,凹地が砂によって埋積されて平坦面となり,フォアスラストの上部に外縁隆起帯が形成された.また,複数回の実験を繰り返した結果,上面に平坦面をともない前縁斜面に傾斜変換点が生じるタイプと連続した緩い前縁斜面が形成されるタイプとの2つのタイプが見られた.さらに,沈み込む砂層に間に2層の弱層を挟んだ実験や海山を模した障害物を沈み込まれる実験,バックストップ下底から土砂が流出する実験も実施することができた.本実験の結果と現世前弧堆積盆との比較を行うため,ニュージーランド沖のIODP Exp. 375航海に2018年3月から5月に参加した.調査航海で得た試料について粒度分析や古地磁気などの堆積学的な分析を行った.当初の計画通りに実験ができている.次年度以降も,シート引きタイプの実験装置を用いた実験を行う.今後は,付加体の成長にともなって増加する荷重の影響を考慮した実験,付加体表層部に形成される海溝斜面堆積盆の実験などを実施していく.ニュージーランド沖の沈み込み帯についても,付加体と前弧堆積盆との相互関係について検討する.沈み込み帯における重要な構成要素の一つである前弧堆積盆は,島弧の隆起・削剥・気候・火成活動などの履歴を高解像度で保存するだけでなく,島弧前縁の変形履歴を反映した形状変化や埋積様式を示している.しかし,プレート境界での物質的・力学的な変動に対する前弧堆積盆の応答の詳細は良く分かっていない.本研究の目的は,プレート収束境界における物質収支が島弧前縁の様式(付加体型・非付加体型)を決めるとともに前弧堆積盆の形態にも影響を与えるとの仮定のもとに,島弧前縁のひずみ履歴と前弧堆積盆の傾動・沈降・埋積過程との相互関係を明らかにすることである.平成29年度は,東京大学大気海洋研究所の砂箱実験施設に設置されているアナログ実験装置を押し出しタイプからシート引きタイプへ実験装置を改造するとともに,基本的な前弧堆積盆形成実験を実験を行った.実験の目的は,付加体とバックストップとの間に形成される前弧堆積盆における埋積様式の時間変化を調べることである.1回目の実験では,改造前の押し出しタイプの実験装置に木製のバックストップを組み合わせて,付加体とバックストップとの間に前弧堆積盆を作成する実験を行った.2回目の実験では,シート引きタイプの実験装置への改造後に,1回目と同様の実験を実施した.いずれの実験においても,バックストップの傾斜面に沿って発達するバックスラストが外縁隆起帯を形成し,その陸側に前弧堆積盆に相当する凹地が作成された.実験中の一定時間ごとに,予め設定した分量の砂を凹地に投入することで,堆積盆を埋積する層序の時間変化が追跡できるようになった.課題としては,実験準備(砂の撒き方など)の均質化・効率化が挙げられる.実験準備の効率化も実験回数を増やすために,重要な課題であることが分かった.実験は,当初の計画通りに進んでいる.沈み込み帯における重要な構成要素の一つである前弧堆積盆は,島弧の隆起・削剥・気候・火成活動などの履歴を高解像度で保存するだけでなく,島弧前縁の変形履歴を反映した形状変化や埋積様式を示している.しかし,プレート境界での物質的・力学的な変動に対する前弧堆積盆の応答の詳細は良く分かっていない.本研究の目的は,プレート収束境界における物質収支が島弧前縁の様式(付加体型・非付加体型)を決めるとともに前弧堆積盆の形態にも影響を与えるとの仮定のもとに,島弧前縁のひずみ履歴と前弧堆積盆の傾動・沈降・埋積過程との相互関係を明らかにすることである.平成30年度は,昨年度に改造した東京大学大気海洋研究所のアナログ実験装置を用いて,基本的な前弧堆積盆を形成する実験の継続して実施した.実験の目的は,付加体とバックストップとの間に形成される前弧堆積盆における埋積様式が土砂供給量の変化にどう対応するかを調べることである.実験中に砂を供給しない場合では,バックストップの傾斜面に沿って発達するバックスラストが外縁隆起帯を形成し,その陸側に前弧堆積盆に相当する凹地が作成された.

一方,実験中に砂を供給した場合では,凹地が砂によって埋積されて平坦面となり,フォアスラストの上部に外縁隆起帯が形成された.また,複数回の実験を繰り返した結果,上面に平坦面をともない前縁斜面に傾斜変換点が生じるタイプと連続した緩い前縁斜面が形成されるタイプとの2つのタイプが見られた.さらに,沈み込む砂層に間に2層の弱層を挟んだ実験や海山を模した障害物を沈み込まれる実験,バックストップ下底から土砂が流出する実験も実施することができた.本実験の結果と現世前弧堆積盆との比較を行うため,ニュージーランド沖のIODP Exp. 375航海に2018年3月から5月に参加した.調査航海で得た試料について粒度分析や古地磁気などの堆積学的な分析を行った.当初の計画通りに実験ができている.次年度以降も,シート引きタイプの実験装置を用いた実験を行う.来年度は,土砂供給量の時間変動に加え,バックストップ下底からの土砂流出を考慮した実験を行う予定である.次年度以降も,シート引きタイプの実験装置を用いた実験を行う.今後は,付加体の成長にともなって増加する荷重の影響を考慮した実験,付加体表層部に形成される海溝斜面堆積盆の実験などを実施していく.ニュージーランド沖の沈み込み帯についても,付加体と前弧堆積盆との相互関係について検討する.次年度使用額が生じた理由は,アナログ実験装置の改造にかかる費用が予定よりも少額で済んだこと,人件費の一部に別予算を使用したことが原因である.次年度の研究は,当初計画通りに進める.今年度からの繰越金は,装置の改善にかかる費用及び旅費の一部に充てる.次年度使用額が生じた理由は,人件費の一部に別予算を使用したことが原因である.次年度の研究は,当初計画通りに進める.今年度からの繰越金は,装置の改善にかかる物品費及び旅費の一部に充てる.
コルヒチン中毒死における血中エンドトキシン測定の法医学的意義

研究目的:法医学分野において、毒物を含有する植物の誤食による食中毒死亡例が報告されている。特にイヌサフランにはコルヒチンが含有されており、下痢や嘔吐などの症状がみられる。コルヒチンは細胞増殖を阻害する作用があるため、腸管粘膜上皮細胞は、その作用を強く受け腸管バリア機能が破綻すると予想される。その際、血中エンドトキシン濃度が上昇し、いわゆる「エンドトキシンショック」による重篤な症状を引き起こすことが推測される。こうした仮説から、法医解剖時所見、血中・臓器中のコルヒチン濃度に加えて、血中エンドトキシン濃度がコルヒチン中毒死のマーカーとして法医診断上有用であるか検討することを目的とし、本研究を行った。研究方法:1コルヒチンが腸管バリア機能を破綻させるか確認するため、大腸癌細胞株Caco-2を単層培養し、コルヒチンを含んだ培養液で培養して、タイトジャンクション蛋白質であるZO-1の発現量をウエスタンブロット法及び免疫蛍光染色によって解析した。2コルヒチンをマウスに経口投与し、死に至る前に採血と各臓器の摘出を行う。血清を検体として、エンドトキシン測定キットを用いて血中エンドトキシン濃度を測定する。摘出した臓器から病理組織標本を作成し、ヘマトキシリン・エオジン染色及び抗ZO-1抗体を用いた免疫染色し、その形態変化を評価した。研究成果:1コルヒチン添加12時間後のCaco-2において、ZO-1のタンパク発現低下が認められた。2血液からはエンドトキシン、TNFαが高濃度に検出された。また、コルヒチン投与群の小腸におけるZO-1の免疫蛍光染色で、腸管バリアの欠損を認めた。これらの結果から、コルヒチンが腸管バリア機能を破綻させ、エンドトキシンの上昇、さらにはエンドトキシンショックを誘導することが証明された。よって、血中エンドトキシン濃度を測定することは、法医診断の一助となることが示唆された。
β-カテニン制御におけるAXINとAPCの関係の分析

今回我々は泌尿器科癌におけるWntシグナル伝達系での遊離β-カテニンの制御に対するAxinとAPCへの作用について検討した。まず平成11年度は【泌尿器科癌におけるAxinおよびAPCの発現の検討】を行った。まず一般的に様々な癌腫における、β-カテニンの減弱、β-カテニン遺伝子のmutationはそのmalignant characterと関係する事実は知られている。そこで我々はPCR-SSCPとDNA direct sequencingを用い、移行上皮癌(TCC)・腎細胞癌(RCC)細胞株及び臨床的材料におけるβ-カテニンの3番exonでのgenetio alterationを検出した。臨床例での腎癌と転移性腎癌及び移行上皮癌症例の標本においてβ-カテニンの発現を検討した。さらにwestern blottingを用い、β-カテニンの発現を検討した。結果)β-cateninの発現を蛋白レベルで見ると膜上での染色性はRCCの15.5%、TCCの24.7%で減弱していた。それはRCCではそのstaging・リンパ節転移と、TCCではstagingと多発性と相関していた。しかし全体数が少なく、再発や生存率との相関はみられなかった(Clinical Cancer Research Vol.6,460-499,2000)。平成12年度は症例の蓄積により、β-cateninの発現と再発や生存率との相関を検討中であり、さらには正常β-cateninの発現低下によってRCCとTCCのmalignant characterやtumor progressionが引き起こされる可能性について検討を重ねていく予定である。β-カテニンはE-カドヘリンなどの接着因子の裏打ち蛋白としてまず認識され、研究されてきた。当教室でも腎癌(Katagiri,A.,et al.Br.J.Cancer,1995.)、移行上皮癌(Wakatsuki,S.,et al.Cancer Lett.1996.)について報告してきた。しかしその一方でβ-カテニンはtumor suppressor gene産物のAPCと結合し、Tcfなどの転写因子と協調作用を起こしてその作用を制御していることもわかってきた。そこで今回我々は泌尿器科癌におけるWntシグナル伝達系での遊離β-カテニンの制御に対するAxinとAPCへの作用について検討している。まず平成11年度は【泌尿器科癌におけるAxinおよびAPCの発現の検討】を行っている。そこで我々はPCR-SSCPとDNA direct sequencingを用い、移行上皮癌(以下TCC)・腎細胞癌(以下RCC)細胞株及び臨床的材料におけるβ-カテニンの3番exonでのgenetic alterationを検出した。まず臨床例での検討では原発性腎癌症例標本と腎癌転移症例標本及び移行上皮癌症例の標本においてβ-カテニンの発現を検討した。結果)β-cateninの発現を蛋白レベルで見ると膜上での染色性はRCCの15%、TCCの24%で減弱していた。しかし全体数が少なく、再発や生存率との相関はみられなかった。今後は正常β-cateninの発現低下によってRCC/TCCのmalignant characterやtumor progressionが引き起こされる可能性についてさらに検討していく。そこで我々はPCR-SSCPとDNA direct sequencingを用い、移行上皮癌(TCC)・腎細胞癌(RCC)細胞株及び臨床的材料におけるβ-カテニンの3番exonでのgenetic alterationを検出した。

臨床例での腎癌と転移性腎癌及び移行上皮癌症例の標本においてβ-カテニンの発現を検討した。さらにwesternblottingを用い、β-カテニンの発現を検討した。結果)β-cateninの発現を蛋白レベルで見ると膜上での染色性はRCCの15.5%、TCCの24.7%で減弱していた。それはRCCではそのstaging・リンパ節転移と、TCCではstagingと多発性と相関していた。しかし全体数が少なく、再発や生存率との相関はみられなかった(Clinical Cancer Research Vol.6,460-499,2000)。平成12年度は症例の蓄積により、β-cateninの発現と再発や生存率との相関を検討中であり、さらには正常β-cateninの発現低下によってRCCとTCCのmalignant characterやtumor progressionが引き起こされる可能性について検討を重ねていく予定である。
鞭毛・繊毛のレドックス・シグナリングの分子機構

本研究の目的は、緑藻クラミドモナスを材料として、i)鞭毛内で機能しているダイニン活性を調節するレドックス(酸化還元)シグナリング経路を分子レベルで明らかにすることii)鞭毛内の酸化還元状態がどのような条件で変化し、そのときi)の経路がどのように働くかを明らかにすることであった。第一の目的については、具体的にはダイニンサブユニットのうちLC3,LC5,DC3という3つのレドックス感受性タンパク質の基質を明らかにすることであった。これらの基質タンパク質を少量精製する方法を開発することに成功したが、期間内に同定に足る量の精製には至らなかった。しかし、今後も研究を続けることで同定に至るものと確信している。第二の目的については、レドックス感受性GFPを導入したクラミドモナス株を作製することで、鞭毛内レドックス状態を直接モニターできる系を開発した。現在鞭毛内酸化還元電位をリアルタイムで計測する実験が進行している。今後、レドックス依存的な運動変化を行う鞭毛の、変化の閾値などの詳細が明らかにする。研究期間中の副産物的な成果として、2つの発見があった。1つ目に、撹拌された培養液中の細胞の鞭毛打頻度がカルシウム依存的に上昇するという新奇の現象を見出した。その後の詳しい研究により、ずり応力によって機械刺激チャネルと電位依存性カルシウムチャネルが連動し、鞭毛内カルシウム濃度が上昇することで外腕ダイニン活性が上昇することがわかった。この成果を論文にまとめ、CellMotility and the Cytoskeleton誌に受理された。2つ目に、膜透過性酸化・還元薬剤処理細胞の行動観察により、クラミドモナスの走光性の符号(正か負か)がレドックスで調節されていることを発見した。細胞が光に向かうか逃げるかを決める切り替え機構は長い間謎であったが、本研究により初めてそれが、光合成活性などで変化する細胞内レドックス状態で調節されていることが見出された。この知見については現在論文を投稿中である。平成20年度は、チオレドキシン様ダイニン軽鎖であるLC3, LC5の基質タンパク質の精製からスタートした。まず、LC3, LC5に、生体内で基質をトラップするための機能ドメインへの変異導入を行い、クラミドモナス野生株細胞で発現させた。すると確かに、変異LC3, LC5は基質を生体内でトラップした。鞭毛軸糸のような巨大タンパク質複合体からのLC3/LC5-基質という微量複合体のタンパク質精製は困難を極めたが、「SDS変性+SDSミセル化によるクエンチングをしたのちに免疫沈降をする」という方法を確立し、少量精製に成功した。現在、質量分析に足る量を精製するためにさらに方法を改良しているところである。さらに、第3のレドックス感受性ダイニンサブユニットであるDC3についても、変異導入の後、クラミドモナスのDC3欠失株において発現させることに成功した。これについても、生体内で基質をトラップしていることを確認し、これから基質の精製に入る。これと並行して、鞭毛・繊毛を持つ細胞がレドックス調節を受ける意義を探るため、クラミドモナス細胞をさまざまに酸化・還元薬剤処理をしたところ、走光性の正負がレドックスで決定されていることを見出した。このことは細胞運動を利用したレドックス・ホメオスタシスを反映していると考えられ、上のLC3, LC5, DC3の活性との関連を調べているところである。

この発見は、葉緑体・ミトコンドリアの活性クロストークや酸化ストレス防御の領域に限られた研究であったレドックス・ホメオスタシスが、モータータンパク質の活性という生物物理学的領域にも関係することを示した最初の例であり、広い波及効果が見込まれる。平成21-22年度の研究目的は、鞭毛内で機能する、ダイニンを含むレドックス調節の分子的実態、とりわけダイニン軽鎖LC3,LC5のレドックス反応における基質を、鞭毛研究のモデル生物であるクラミドモナスを用いて明らかにすることであった。実施計画通り、基質タンパク質をトラップするための変異を導入したLC3,LC5を発現するクラミドモナス形質転換株の作成に成功した。しかし、変異型LC3,LC5の発現量が極端に少ないことから、同定に足るだけのタンパク質量を得るまでに至っていない。現在、微量精製を繰り返すことでそれに足る量の取得を目指している。一方、この研究の過程で、新たに2つの知見を得た。1つは、膜透過性酸化・還元薬剤処理細胞の行動観察により、クラミドモナスの走光性の符号(正か負か)がレドックスで調節されていることを発見した。細胞が光に向かうか逃げるかを決める切り替え機構は長い間謎であったが、本研究により初めてそれが、光合成活性などで変化する細胞内レドックス状態で調節されていることが見出された。この知見については現在論文を投稿中である。2つ目に、撹拌された培養液中の細胞の鞭毛打頻度がカルシウム依存的に上昇するという新奇の現象を見出した。その後の詳しい研究により、ずり応力によって機械刺激チャネルと電位依存性カルシウムチャネルが連動し、鞭毛内カルシウム濃度が10^<-7>M程度に上昇することで外腕ダイニン活性が上昇することがわかった。この成果を論文にまとめ、Cell Motility and the Cytoskeleton誌に受理された。
改良した測定法による眼球電図(EOG)の測定とクロストークの定量的解析

眼球電図(EOG)の解析に眼球電池モデルを適用してその特性を調べているが、本解析の有用性を検証するため、従来の測定法に改良を加えた方法を導入して研究を進めた。従来の測定には、眼球両側の二つの電極の一方を負極、他方を正極としてEOGを測定する方法(バイポーラ電極測定法)が用いられてきた。本研究には、体を負極とし、眼球周辺に貼り付けた個々の電極を全て正極としてEOGを検出する方法(モノポーラ電極測定法)を用いた。モノポーラ法を導入することにより、眼球周辺部位毎の特性が個別に把握できるようになった。この改良された測定法の導入により、クロストークの特性がより明確に分析できるようになった。健常者の両眼から測定したEOG波形は、両眼を左右同じ向きにステップ状の繰り返し運動をさせたとき、右眼の内眼角部と左眼の外眼角部、同じく右眼の外眼角部と左眼の内眼角部の電位波形はそれぞれ同相に、右眼の内眼角部と外眼角部、同じく左眼の内眼角部と外眼角部の電位波形は逆相になっていることが観察できた。両眼健常者のEOGにはすでに他眼からのクロストークの影響が混入しているが、片眼無眼球者では健常眼球側からはクロストークの影響がないEOGの測定ができ、無眼球側からはクロストーク電位だけを測定できるので、クロストークの特性解析には大変好都合である。本研究では、19年度も片眼無眼球者から数例のEOG波形を測定した。バラッキは大きいが,平均してクロストークは無眼球側内眼角で健常眼側内眼角電位の25%、同外眼角で11%であった。すでに両眼健常者のクロストーク除去の理論は報告しており、その式に今回求めたクロストークの値を代入すれば、両眼健常者でもクロストークの除去ができる。また、片眼無眼球の実測データに眼球電池モデルを適用して、眼球から流出していると考えられる電流値を求め、種々の場合のEOG電位特性を計算して解析した。眼球電図(EOG)の解析に眼球電池モデルを適用してEOG電位の特性を検討しているが、本解析の有用性を検証するため、従来の測定法に改良を加えた方法を導入して研究を進めている。従来の測定法である眼球周辺の二つの電極の間だけから測定したEOGではなく、体を負極にしてそれと眼球周辺に貼り付けた電極毎のEOGを検出しているので、眼球周辺の位置毎の特性が把握できる。この改良された測定法により、クロストークの特性解析がより明確に進められるようになった。その結果、健常者の両眼から測定したEOG波形は、両眼を左右同じ向きにステップ状の繰り返し運動をさせたとき、片眼の内眼角部と対側眼の外眼角部、片眼の外眼角部と対側眼の内眼負部の電位波形はそれぞれ同相に、同一眼の内眼角部と外眼角部の電位波形は逆相になっていることが明瞭に把握された。しかも、クロストークの影響により、内眼角部の電位が外眼角部より低くなっていることも測定波形に現れていた。

両眼健常者のEOGにはすでにクロストークの影響が混入しているが、片眼無眼球者ではクロストークの影響がないEOGの測定ができ、しかも無眼球側にはクロストークによる電位が生じているので、クロストークの特性を解析するには大変好都合なデータが得られる。平成18年度は片眼無眼球者から数例のEOG波形を測定した。バラツキが大きいので、解析のためにはさらにデータ数を増やす必要がある。また、MS-DOSによるデータ処理をWindows環境下でVisual C^<++>による処理・解析に切り換える作業は半分程度進み、夏までには完成させて処理の切り替えを行う予定である。手間はかかっているが、旧システムによるデータ処理も並行して進めており、クロストーク処理の検討もある程度進んでいる。眼球電図(EOG)の解析に眼球電池モデルを適用してその特性を調べているが、本解析の有用性を検証するため、従来の測定法に改良を加えた方法を導入して研究を進めた。従来の測定には、眼球両側の二つの電極の一方を負極、他方を正極としてEOGを測定する方法(バイポーラ電極測定法)が用いられてきた。本研究には、体を負極とし、眼球周辺に貼り付けた個々の電極を全て正極としてEOGを検出する方法(モノポーラ電極測定法)を用いた。モノポーラ法を導入することにより、眼球周辺部位毎の特性が個別に把握できるようになった。この改良された測定法の導入により、クロストークの特性がより明確に分析できるようになった。健常者の両眼から測定したEOG波形は、両眼を左右同じ向きにステップ状の繰り返し運動をさせたとき、右眼の内眼角部と左眼の外眼角部、同じく右眼の外眼角部と左眼の内眼角部の電位波形はそれぞれ同相に、右眼の内眼角部と外眼角部、同じく左眼の内眼角部と外眼角部の電位波形は逆相になっていることが観察できた。両眼健常者のEOGにはすでに他眼からのクロストークの影響が混入しているが、片眼無眼球者では健常眼球側からはクロストークの影響がないEOGの測定ができ、無眼球側からはクロストーク電位だけを測定できるので、クロストークの特性解析には大変好都合である。本研究では、19年度も片眼無眼球者から数例のEOG波形を測定した。バラツキは大きいが、平均してクロストークは無眼球側内眼角で健常眼側内眼角電位の25%、同外眼角で11%であった。すでに両眼健常者のクロストーク除去の理論は報告しており、その式に今回求めたクロストークの値を代入すれば、両眼健常者でもクロストークの除去ができる。また、片眼無眼球の実測データに眼球電池モデルを適用して、眼球から流出していると考えられる電流値を求め、種々の場合のEOG電位特性を計算して解析した。