hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
重力波の放出と伝播について

本年度の成果は以下の通りである。1.重力波の直接検出との関連で最近注目を集めている一般相対論におけるポスト・ニュートン近似の新しい定式化を行った。従来、この近似法は特定の座標条件のもとで定式化されていたが、今回は種々の量の座標条件に対する依存性を明らかにするために3+1形式と呼ばれる方法を用いて定式化を行った。これによって従来得られていた輻射の反作用などの表現が、数値計算にとってより扱い易い形に求められる可能性がでてきた。2.上記の定式化に基づいて、ポスト・ニュートン近似の高次に現れる対数発散を調べた。従来この発散は3次のポスト・ニュートン近似に現れることが指摘されていたが、実際には次数に現れる発散は物理的ではなく、座標条件の適当な設定で消せることが判明した。さらに座標条件によって消せない対数項が4次のポスト・ニュートン近似で現れる可能性を指摘した。この項は中性子星からなる連星の進化の最終段階で大きな影響をもつので、現在この項によるエネルギー放出率と輻射の反作用力を計算中である。3.孤立系から放出される重力波の波長が背景の時空の曲率半径よりも十分小さい場合の近似法の新しい定式化を行った。この方法は、放出される重力波の時空に対する影響を非線形のかたちで含んでおり、固定された背景時空を用意する従来の取扱いでは不可能な反作用が計算できる。
マルチメディアデータベースを用いる人文科学研究支援のための統合環境の構築

本研究では、1867年(慶応3年)の伊勢神宮・秋葉三尺坊大権現などのお札降りを発端とした「ええじゃないか」に関する各地の伝承や史料を収集した「ええじゃないかデータベース」のマルチメディア統合環境下での構築について研究を行った。1,「ええじゃないかデータベース」の構築伊勢信仰や秋葉信仰を中心とする民間信仰に関する調査・資料収集を進めた。2,人文科学に適したインタフェースシステムの設計人文科学研究からのデータベースへの要望の分析を進めた。3,自然言語インタフェースの設計データベース検索のために、汎用的自然言語インタフェースを設計した。4,画像情報解析システムの設計画像的特徴を記述した文によって画像データの検索を行う手法を考察した。5,文字情報解析システムの設計文字情報と画像情報を統合的に取り扱うための画像処理法を検討した。6,統合環境設計マルチメディアデータや応用プログラムの視覚化・統一化機能を設計した。7,インタフェースシステムの詳細設計人文科学支援に特有のニーズに応えうるインタフェースの要求仕様を決定した。
エンドトキシンに対する再生肝の過敏反応の機序の解明とその治療

研究目的]肝切除術後23日目に通常は非致死的量のエンドトキシン(LPS)血症が起こると高率にラットが死亡するという現象はPAF拮抗剤で生存率は有意に改善された。平成12年度はLPSによる影響がplatelet-activating factor(PAF)によるものと同様であり、PAF拮抗剤の後投与の効果についても確かめることとした。結果]肝切除後2日目にPAFを投与すると重篤なショックとなり、死亡率、血中ALT,TNF-a,CINC,エンドトキシンが有意に上昇した。これらはPAF拮抗剤投与で有意に改善された。sham群でPAF投与1h後までALT,TNF-a,CINCが上昇し、NF-kBのびまん性の発現を起こした。肝切除ラットではPAF投与4h後まで門脈域にNF-kBの発現が活性化されていた。PAFの投与後肝組織内の好中球の集積は有意に増加した。PAF拮抗剤の後投与についても前投与と同様の効果が得られた。結論]PAFは好中球の集積と活性化を介して持続的なCINCの上昇及びNF-κBの活性化に働いている。PAFによる再生肝の傷害はPAF拮抗剤で前または後投与において有効である。PAF投与により血中エンドトキシン血漿が起こり、悪循環に陥ると考えられた。70%肝切除2日後エンドトキシン(LPS)投与及び血小板活性化因子拮抗剤(PAF-A)投与により、再生肝のLPSに対する過敏性について検討した。70%肝切除+LPS投与群は、sham手術+LPS投与+PAF-A投与群、肝切除+LPS投与+PAF-A投与群、sham手術+LPS投与群に比べ、lhr後の血清中TNFα,4hr後の血清中ALT値,CINC値,及び肝組織浸潤好中球数は有意に高値を示した。しかし、PAFreceptor(PAFR)mRNA及びTNF αmRNAの量は4群間に有意差はみられなかった。肝切除+LPS投与群では肝組織中のNF-κB活性化、CINC mRNA転写促進はLP鍛与1hr後と4hr後に認められたが、他の3群では1hrのみに認められた。肝組織中のNF-κBが活性化状態にある細胞は壊死巣を囲むKupffer細胞と浸潤した好中球であったが、CINC陽性細胞は浸潤した好中球であった。PAF-Aの後投与実験でもほぼ同様の結果が得られた。PAF-A後投与群の生存率は非投与群に比べて有意に高かった。結論として、再生肝はLPS刺激に対して過敏である。PAFが持続的なNF-κB活性化とCINC mRNA転写促進を通して好中球の集積と活性化に影響を及ぼしていると考えられた。ラットの70%肝切除後48時間目にendotoxin(LPS)を1.5mg/kg静注群と、その30分前にPAF拮抗剤(PAF-A)100μg/kgを投与した群において生存率、血清中TNFα、CINE濃度、肝組織中のNF-kB活性、PAFreceptor、TNFα及びCINCmRNA量の測定を行った。CINC産生細胞及びNF-kB活性状態の細胞の同定を酵素抗体法で、好中球の浸潤はNaphthol-ASD法で行った。[結果及び考察]肝切除後LPSを投与するとTNFα、ALT、CINC濃度が有意に上昇し、生存率はが低下した。PAFRmPNA、TNFαmRNAに変化はなかった。肝組織の傷害、好中球の浸潤は有意に増加した。これに対し、PAF-Aを投与した郡では生存率の上昇、血中TNFα、CINC及びALTが低下した。PAFRmRNA、TNFαmRNAに変化はなかったが、好中球の浸潤は抑制され、組織傷害も軽減された。また、LPS投与の30分後にPAF-Aを投与した後投与群についても検討し、同様の良好な結果が得られた。これらの結果はHepatologyに掲載された。本研究は肝切除術後

23日目に通常は非致死的量のエンドトキシン(LPS)血症が起こると高率にラットが死亡するという現象について、そのメカニズムを明らかにすることを目的とした。肝再生の最も盛んな時期にLPS血症が起こると、好中球やマクロファージから産生、放出されるサイトカイン、chemical mediatorが経時的にどのように関与するかを明らかにすることにより、肝切除後の肝再生の病態を明らかにするものである。70%肝切除48時間後LPS投与に対する血小板活性化因子(PAF)-antagonistの効果を血漿中alanine transaminase(ALT)、TNF-α、CINCの量、及び組織中TNF-α、CINC、PAF receptor(PAFR)のmRNAの発現を検索した。NF-κB、CINCの免疫組織化学的染色および組織学的に好中球の浸潤を検討した。また、PAFの投与を行い、PAF-antagonistの効果を検討した。結論としてPAFは好中球の集積と活性化を介して持続的なCINCの上昇及びNF-κBの活性化に働いていることが明らかになった。LPSによる再生肝の傷害はPAF拮抗剤で前または後投与で有効であり、生存率は有意に向上した。PAF投与後についてもLPS投与と同等の結果が得られた。PAFはLPSと関連して種々の病態で発生し、門脈経由で肝に悪影響を及ぼす。小腸にはPAFRが豊富にある。肝切除を伴う門脈再建において門脈に急性狭窄を生じたとき小腸からPAFが再生肝にどのような影響を及ぼすか、それに対するPAF-Aの効果を見た。また、全肝虚血において肝からPAFやendothelin-1が放出され、腎機能に及ぼす影響を見た。
近代日本絵画史における鉛筆の意義

鉛筆は現代に生きる我々にとっては、もはや古いツールである。しかし、幕末明治の頃にあっては、新奇なツールであった。美術の文脈にとっても新しいツールであり、それまでの毛筆と墨などを主とした絵画表現とは異なる様相をもたらした。特に油彩画や水彩画を学び始める以前、その初学の者が利用することが多かった。なぜなら、油彩画、水彩画の道具、絵の具類は輸入品であり、高価だったためである。そのため、鉛筆と紙でもって洋画技法を学ぶことが強いられた時代があった。その制限された時代状況があったものの、そこから新しい表現が生まれていったことを本研究では明らかとした。本年度実施した主な調査は,以下の二点に絞った。第一に作品調査である。特に五姓田派に関する鉛筆デッサンを中心に行った。第二に文献調査である。従来,鉛筆で描かれた作品が如何に言及されていたのかについて,資料収集を行い,考察を深めた。以下の調査は全体像を推定するための意義があり,平成20年度もその継続調査の必要性が充分に認識された。研究目的に即し,本年度推定されることとなった成果は以下の通りである。第一に作品調査の観点から,鉛筆デッサンの点数に関する総数は,明治前半期だけでも千点以上あること。その端緒は幕末の開成所,その後,明治期の私画塾あるいは公立私立の美術学校で制作が継続されていたこと。特に五姓田派に所属した絵師たちが制作した作風の影響力が強く,明治20年代の図画教科書にその特質が顕著となること。よって,西洋絵画技術の伝承という点を考えると,油彩画以上に鉛筆デッサンを学んでいた実態の方が遙かに大きいことが推定される。第二に文献調査の観点から,鉛筆デッサンの重要性は認識されていたとはいえ,しかしながら現在まで,その評価が高いわけではないことが明らかとなった。常に油彩画イコール西洋絵画技術とし,それを頂点とする価値観が強く形成されていたと推定される。その理由,おそらく作品に基づく理由と,言説のみでつくられた理由,双方の存在が想定されるが,平成20年度の問題提起を明確としたことが,本年度の研究概要である。平成20年度は、主に明治前半期における五姓田派の素描群に関して研究をすすめた。本研究の目的である近代絵画史という大枠での鉛筆の効果について考察をおこなうにあたり、前年平成19年度には文献調査をもとに調査対象の全体像を把握することにつとめた。その結果、明治前半期には五姓田義松を核とする五姓田派の面々が印したその足跡が、非常に得意なものであると予想されたことから、五姓田派を重点的に検証した。その際、以下の二つの方向性から、検証を加えた。第一に、言説的側面から。第二に、造形的側面から。第一の点について具体的には、鉛筆という存在が現在までつらなる美術史の言説において有意義なものとして語られていたのか、あるいは作家や作家集団を語る祭の特徴として見なされていたのかについて、「近代日本洋画史」という歴史館の形成をにらみつつ論じた。また第二の点について具体的には、神奈川県立歴史博物館所蔵五姓田義松旧蔵作品群と、岡山県立美術館所蔵渡辺文三郎旧蔵作品群並びに同館所蔵松原三五郎旧蔵作品群との比較考察をおこない、五姓田派内部の技術継承の様相を具体化した。さらには東京国立博物館所蔵満谷国四郎素描群とそれらの比較もおこない、明治前半期に鉛筆を主たる画材として継承された技術が存在したことを、明治前半期の美術教育の現状なども視野に入れつつ論じた。最後の研究は、次年度以降展開する予定の明治後半期以後の鉛筆の存在意義を考察することにつながるものである。本調査研究は、近代日本絵画史という枠組みの中で果たされた鉛筆というツールの役割について明らかにするものである。平成21年度までに、特に洋画に即して研究を進めてきたが、平成22年度はその過程で発見された「橘忠助氏旧蔵美術資料群」についてその資料群を整理し概要を報告した。同資料群は明治洋画史を先駆的に研究した西田武雄の旧蔵資料であり、実に内容の豊富なものである。最初期の研究実施計画には含まれてはいなかったものの、当該調査研究とも関係する内容が含まれていることから、同資料群についての考察をおこなった。特に、その中に含まれていた鉛筆画群について考察を加え、その内容の精査と美術史上の位置付けについて明らかとした。それは研究当初以来、中心的におこなってきた五姓田派研究に積み重ねるものであり、鉛筆というツールの重要性を別の角度から明らかとした。

これにより、洋画史の中でも語られる機会も少なかった鉛筆という存在の重要性を浮き彫りにすることができ、ここから当時の画学生の日常的な修練の様子が垣間見られることを指摘するとともに、その学習内容を具体化した。そして、本調査研究の最終年度ということで、従来から計画していた報告書の刊行をおこなった。以上の考察に加え、鉛筆を普及させる一端を担った明治期の図画教科書群についての報告、これまでの調査研究の概要などを報告書にまとめた。特に鉛筆の画材としての存在意義について展望を示しながら、本調査研究では漏らした点についても言及し、今後の課題についても記した。特に現在時制への視点をも加え、デジタル化との競合も視野に入れながら、表現と身体の相関関係について示唆した。
高齢者の発話行為の理解と記憶定着における情動機能：脳機能イメージング研究

感情の認知や社会的制御の方略は加齢にしたがって変化する。感情制御や対人認知は主に前頭前皮質、扁桃体、頭頂接合部等の働きに依る。しかし言語の社会的使用の加齢変化を脳神経科学的に検討する試みはまだほとんど行われていなかった。本課題は、高齢者の言語コミュニケーションにおける肯定的感情語の記憶定着率がPFCの背内側部(dorsomedial PFC)の灰白質密度によって説明できることをVBM(voxel-based morphometry)解析によって明らかにし、高齢者との言語コミュニケーションにおいて肯定的な感情表現を援用することの有用性を示唆した。本課題は、聞き手が話し手の意図を理解し記憶に定着させる際の情動機能の役割とその加齢変化について、脳機能イメージングを通して検討するものである。話し手の意図は、必ず発話・文が発せられる文脈、聞き手との関係との関係で決まる。話し手の意図を検討するためには、発話・文が置かれる文脈を設定した実験を計画しなければならない。このような談話レベルの言語理解とその記憶定着過程における情動効果、さらにその加齢変化を脳機能イメージングによって検討した先行研究は見られない。そこで、まずは文脈をともなわない文のみの理解と記憶定着過程を検討することにした。初年度であった25年度には、上述の文再認における情動効果を検討するfMRI実験の準備を終えた。実験で提示する刺激文の作成のために、若年者および高齢者述べ256名を対象とした合計3回の予備調査を実施し、条件設定に叶う刺激文を選定した。またfMRI実験のプログラムを完成させた。脳活動信号を効果的に得られる刺激提示順をシミュレーションによって確定させ、そのプログラムによって2名の試し撮りを行い、問題なく実験を実施できることを確認した。2年目の26年度には、若年者および高齢者30名ずつ、合計60名の実験を実施し、分析、結果をまとめる計画である。この結果を参考にし、本課題の最終目標である「文脈を伴う話し手の意図の伝達」過程を扱うfMRI実験の立案を行う予定である。円満な社会生活を送る上で他者との関わりを維持することは不可欠である。齟齬なく他者との意志疎通を図り共同行為を成功させるためには、話し手が情報を正しく伝えるだけではなく、聞き手がその情報を確実に記憶に定着させ行為の実現に貢献しなければならない。言語性作業記憶(verbal working memory)には、感情の効果が認められるという。「うれしい」「かなしい」等の感情語の再認の成績は中立語よりよいことが報告されている(Levens & Phelps, 2008)。本研究課題は、与えられた文を理解し記憶に定着させる際の肯定的/否定的感情語の果たす役割の神経基盤について、磁気共鳴機能画像法(functional magnetic resonance imaging: fMRI)を通して検討するものである。健常の若年者および高齢者を対象として行ったfMRI実験の結果、文が先の文処理課題で提示されたものであったか否かを問う文再認課題遂行中の脳機能において、感情効果が認められた。肯定語を含む文の再認では、中立語を含む文に比べて両側眼窩回の活動が亢進した。否定語を含む文は、中立語文に比べて左眼窩回、右中側頭回、左嗅皮質、右紡錘状回が賦活した(p < .001 uncorrected, k = 50 voxels)。肯定/否定両条件の感情語に眼窩回が関わることは、単語再認課題における感情効果の神経基盤を検討した先行研究と一致する(Maddock, et al., 2003)。さらに、否定的感情語を含む文の再認において、嗅皮質や紡錘状回など辺縁系のより広範囲での亢進が見られた。若年者は、文の再認において、肯定的感情語より否定的感情語に強く反応することが示唆される。行動データとfMRIデータの分析の結果、その文が先の文処理課題で提示されたものであったか否かを問う文再認課題遂行中の脳機能において、感情効果が認められた。文を再認する際の感情語の働きは、主に大脳辺縁系の周辺に認められることが観察された。さらに、とりわけ否定的感情語を含む文の再認において、嗅皮質や紡錘状回など辺縁系のより広範囲での亢進が見られた。

感情制御や対人認知は主に前頭前皮質、扁桃体、頭頂接合部等の働きに依る。しかし言語の社会的使用の加齢変化を脳神経科学的に検討する試みはまだほとんど行われていなかった。本課題は、高齢者の言語コミュニケーションにおける肯定的感情語の記憶定着率がPFCの背内側部(dorsomedial PFC)の灰白質密度によって説明できることをVBM(voxel-based morphometry)解析によって明らかにし、高齢者との言語コミュニケーションにおいて肯定的な感情表現を援用することの有用性を示唆した。本研究課題は、言語を用いた対人コミュニケーションの過程にどのように加齢変化が見られるか、その神経基盤を解明することを目的とするものである。とくに高齢者が相手から受け取った情報を確実に記憶し共同行為の実現に貢献するために、どのように働きかけることが記憶の定着に貢献する要因に注目して、機能的磁気共鳴画像法(functional magnetic resonance imaging: fMRI)による研究を行う計画であった。今年度までに、若年者と高齢者双方のMRIデータを取得し、解析を終えた。神経言語学最終年度となる次年度は、得られた研究成果を国内外の学会で発表し、論文を執筆して国際学術誌に投稿する予定である。予備調査、fMRI実験準備が完了、試し撮りも済んでおり、実験を開始できる状態になった。これまでに得られた成果を順次発表していく予定だが、そのための学会出張旅費や執筆した論文の英語母語話者による校閲など、次年度に見込まれる使用額が大きいため。26年度6月までに若年高齢者合わせて60名の実験を終え、8月までに初分析を終える。その成果を国際学会で発表すべく準備するとともに、話し手の意図の理解を調べるfMRI実験の刺激立案、予備調査を実施する。国際学会出張旅費、書籍購入、論文の英語校閲等に充てる。初年度は、2年目に実施するfMRI実験の予備調査等の準備を行った。配分金額の少ない2年目には、多くの人件費(被験者謝金および実験補助者謝金)が必要となるので、次年度使用額が生じた。fMRI実験の被験者謝金(若年者、高齢者、各30名ずつ、1回につき7,000円)、およびその実験の補助者への謝金(1実験につき2名、時給1,030円)を支払うために使用する。
中範囲理論を用いた看護におけるナラティブの実践基準開発

本研究は、看護実践として患者に対するナラティブ(語り)の実践基準を得ることを目的とした。具体的方策としては、中範囲理論Theory of Attentively Embracing Story(Smith and Liehr,1999)の日本における適応を試行し、患者が自らの疾患の体験を語ることの意義および看護実践への具体的基準を質的・量的に明らかにすることを試みた。疾患の体験を"具体的にことばに表現すること"に関する質的調査では、大阪府下中小規模病院に入院中の、血液透析導入前後の対象者4名にインタビューを行った。結果は、Smith and Liehr(2003)にあるように、疾患を通しての日常生活体験は多様であり、「健康の変化」にもとづいて、ライフイベントに対する「個人の考え」は変化し、「感情」面は個人的特性をもって揺れ動いていた。またそれらは、過去・現在・未来の時系列にもとづく「関連性」をもっており、ナラティブの特性である「ストーリーとしての人生」を裏付けていた。また、疾患の体験を"具体的にことばに表現すること"に関する量的調査では、Smith & Liehr(2003)およびLiehr & Takahashiら(2002)を参考に、言語データ分析ソフトウェアLinguistic Inquiry and Word Count(LIWC)の使用を試みた。上記で得られたデータについて日本語の段階での分析の可能性を検討し、英語に翻訳することを試みたが、本来英語圏で作成されたソフトウェアの日本における使用の妥当性を再考察し、使用を断念した。今後は、語彙選択の一定基準を得るために、ソフトウェアのさらなる利用可能性を探るとともに、その前段階として、量的分析に耐えうるようなインタビューデータのさらなる分析が必要であると考えられた。加えて、"具体的にことばに表現する"体験に関する患者の主観的気分の変化は、研究者からの質問を控えて得ることを目的としたが,最後に精神的安寧を得られたと答えたものが4名中2名であった。本大学ならびに研究協力施設双方の倫理委員会の承認を得て、調査を開始した。現段階で研究同意の得られた対象者5名のインタビューが終了しているが、対象者の健康状態や施設側の状況により、当初の目標である1015名には未だ達していない。次年度も引き続き対象者へのインタビューを行う予定である。研究者は、対象者が語ること自体の意味を探る目的から、恣意性を持たない非構成的面接を目指した。その結果、対象者は現在おかれている状況において想起する、最も関心の高いできごとを自由に語っていた。過去の出来事であっても、現疾患への影響の有無にかかわらず、これまでの自己にとって重要度の高い内容を話す傾向があった。また入院生活という状況下では自明のことであるが、対象者は自己の「からだ」に起こっている変化を中心に話し、治療・看護を受けるその体験を自己の「からだ」全体で受けとめていた。そこで生じる治療の効果・副作用を含めた変化には、多様な驚きや不安の感情を有していた。今後、患者の身体性、また医療者にとっては患者という他者の身体性について考察を進めていく必要性が示された。また、対象者の感情変化は、研究者との面接後に意図的に問わなかったが、「話せてよかった」「誰かに聞いてほしいと思っていた」などの感想が聞かれた。特に2回目の面接において、前回の面接内容について上記のように述べることが多く、その間には数日から1週間の日程を要しているが、その間対象者が面接内容や語った自己のありようについて振り返っているさまがうかがえた。このことは、言語化することによって体験を内面化する、再構築するというナラティブの原則にふれる結果であると考えられる。上記はインタビュー5名からの概観であり、今後はインタビュー内容を英訳し、言語分析ソフトにかけ、既存研究との比較を行うことが課題である。

加えて、"具体的にことばに表現する"体験に関する患者の主観的気分の変化は、研究者からの質問を控えて得ることを目的としたが,最後に精神的安寧を得られたと答えたものが4名中2名であった。
がんの高効率加温・自動温度制御・血管塞栓を同時に実現する窒化鉄微小球の創製

近年、がんの治療方法として外科手術や化学療法に替わる、より低侵襲かつ効果的な治療法の開発が求められている。その一つに温熱療法があり、マグネタイトなどの酸化鉄微粒子が交流磁場中で発熱することを利用した温熱治療用材料の研究が行われてきた。窒化鉄(FexNy)にはマグネタイトよりも高い飽和磁化を示す。窒化鉄はマグネタイトに替わる温熱治療用材料への応用が期待できる。そこで本研究では、マグネタイトを出発原料として窒化鉄の合成を試みた。得られた窒化鉄の構造および磁気特性を評価し、さらに交流磁場下での発熱量を見積もり、ラット由来線維芽細胞(Rat-1細胞)に対する毒性を評価し、これまで生体材料としての研究が進められてきたマグネタイトナノ粒子(MNPs)のそれと比較した。その結果、MNPsを還元することにより鉄が得られ、さらにこれを窒化することにより窒化鉄の一つであるFe16N2が得られた。また、窒化処理時間の増加とともにFe16N2相の割合は増大した。特に40時間窒化したサンプルの飽和磁化および保磁力は190 emu/g、1000 Oeとなり、出発原料のMNPsのそれら(70 emu/g、160 Oe)よりも大きな値となった。また、磁化曲線から100 kHz、300 Oeの交流磁場下での磁気ヒステリシス損失による発熱量を見積もると、Fe16N2は20 W/g、MNPsは17 W/gとなった。従って、Fe16N2を用いることで高効率な温熱治療の実現が期待できることがわかった。さらに、サンプルをラット線維芽細胞の培地に直接添加したところ、FexNyナノ粒子とMNPsとの間に毒性の違いはみられなかった。以上より、窒化鉄ナノ粒子が従来生体材料として研究されてきたMNPsと同等の細胞適合性を示し、より高い発熱能を示す温熱種となり得ることが明らかとなった。窒化鉄微小球を得るには未だ至っていないが、その素材となる窒化鉄ナノ粒子の合成条件を見出すことには成功し、その構造および磁気的特性を明らかにできた。また、磁気ヒステリシス曲線から窒化鉄ナ粒子の発熱特性を明らかにし、同窒化鉄ナノ粒子の生体適合性をも明らかにすることができた。従って、本研究はおおむね順調に進展しているといえる。平成31年度は窒化鉄微小球の作製に取り組み、その構造、磁気的性質、交流磁場下での発熱特性および生体適合性を明らかにする予定である。既にコアとなるシリカガラス微粒子や実験に要する試薬や器具類は準備できており、平成31年度早々に取り掛かる予定である。なお、交流磁場下でのサンプルの発熱測定は、交流磁場装置導入後(おそらく6月以降)に行う予定である。

既にコアとなるシリカガラス微粒子や実験に要する試薬や器具類は準備できており、平成31年度早々に取り掛かる予定である。なお、交流磁場下でのサンプルの発熱測定は、交流磁場装置導入後(おそらく6月以降)に行う予定である。当初は窒化鉄微小球を合成する予定であったが、その前段階として窒化鉄ナノ粒子の合成とその物性評価を行うこととした。窒化鉄ナノ粒子の合成および物性評価に要する費用は、窒化鉄微小球のそれらよりもやや低いが、サンプルを安定的に合成する条件を見出すのに予想よりも長い期間を要したたため、次年度使用額が生じた。平成31年度は、翌年度分として請求した助成金と合わせて窒化鉄微小球の合成及び評価に必要な物品を購入し、研究に取り組む予定である。
局所体上の多様体のChow群とBrauer群

今年度は、代数体上の多様体の高次Chow群に関する研究を行った。具体的な成果として、代数体上の曲線の積の高次Chow群の構造に関するKahnの予想を部分的に(可除な群を法として)証明することができた。Kahnの予想は、曲線の高次Chow群に関するBlochの予想を曲線の積に拡張したものである。Blochの予想は、Raskindによって可除な群を法として証明されている。我々の結果とKahnの予想の関係は、Raskindの結果とBlochの予想の関係に並行的である。この結果の証明は、曲線の積の高次Chow群に関するRaskind-Spiessの研究を利用した上で、次の二つの(曲線に関する)結果を組み合わせることで行われる。第一のものは、昨年度までに得られた局所体上の多様体に関する次の研究結果である:局所体上のgoodまたはsemi-stable reductionを持つ曲線を考える。すると、基礎体の有限次拡大に付随する高次Chow群(の主要部)のノルム写像は全射になる。(なお、この結果は、昨年度行った類体論に関する研究でも中心的な役割を果たした。)第二のものは、次の「ハッセのノルム定理の高次Chow群における類似」である:代数体上の曲線を考える。その高次Chow群の元が、基礎体の有限次拡大に付随する高次Chow群のノルム写像の像に入るための必要十分条件は、全ての完備化でノルム写像の像に入ることである。(上記した咋年度の結果から、局所的な条件はほとんど全ての素点で成立することに注意。なお、ハッセのノルム定理は体の乗法群に関する類似の定理である。)最後に、井上玲氏・小西由紀子氏との共同研究で、代数曲線のヤコビ多様体を等レベル面に持つような代数的完全可積分系で新しいタイプのものを構成することが出来た。本年度の研究でもっとも大きな成果は、P-進一意化を持つ曲線(Mumford曲線)の積に対して次のことを証明したことである:(1)任意の自然数nに対して、ゼロサイクルのChow群をnを法としてみた群から、エタールコホモロジーへのサイクル写像が単射となること。先行する研究において上の(1)(2)が知られている多様体は、すべて幾何種数がゼロとなるものであった。特に、(2)においては極大可除部分群は自明となる場合だけが考察されていた。本研究の特徴的なことは、考えている多様体の幾何種数がゼロでないことである。特に、(2)においては非自明な極大可除部分群が現れる。従って、問題の左核にも非自明な群が現れるのであるが、その左核がぴたりと極大可除部分群に一致するというすっきりした結論が得られた。また、3次元以上の多様体について(1)(2)が知られている例は非常に乏しかった。上の結果ではMumford曲線の個数は任意でいいため、ここでも新しい例を提示することが出来る。さらに、Chow群のねじれ部分の構造をMumford曲線の周期で明示的に書き表す公式を得た。Chow群を具体的に計算をすことは、おおむねいつも困難なのであるが、周期という具体的な対象で、しかも非常に計算しやすい形で表すことができており、今後の研究においても有用であろうと思われる。最後に、これらの結果を応用して、大域体上の曲面上の非自明なゼロサイクルに関するMurreとRamakrishnanの最近の結果を拡張することが出来た。これについてはさらなる発展が見込まれる。来年度以降の課題である。本年度の研究成果は、大きく二つに分けられる。第一のものは、大域体上の多様体のアルバネーゼ核に関するMurreとRamakrishnanの最近の結果を拡張するものである。彼らは、ある仮定の下で楕円曲線の積のアルバネーゼ核が消えないことを示していた。われわれは、(楕円曲線とは限らない)曲線の積に対し、より弱い仮定の下で、任意に位数の大きい場合を構成できるという、はるかに強い結果を示すことができた。この証明では、昨年度の研究で得られていた結果である、局所体上のある種の多様体のChow群を曲線の周期によって明示的に書き表す公式を応用する。ここでは、周期という具体的な対象で、計算しやすい公式を得ていたことが重要な役目を果たした。第二のものは類体論に関係する。本研究課題は、局所体上の多様体について、普通の(ゼロ次の)Chow群とBrauer群を関係づけることがテーマであった。類体論はこの重要な類似であり、(Blochの)高次Chow群とガロア群を関係づけるものである。両者を結ぶ写像を相互写像という。この問題に関して次の結果を得た:局所体上の、滑らかで、射影的で、有理点を持ち、semi-stable reductionを持つような曲線の積に対しては、相互写像の核は任意の自然数により可除である。佐藤周友氏は、局所体上semi-stable reductionを持つK3曲面で、相互写像の核が可除でない例を構成している。その事実とここで示した結果を比較すると、相互写像の核の様子はreductionの善し悪しだけでは決まらず、もっと微妙な振る舞いをすることが明瞭に理解される。

具体的な成果として、代数体上の曲線の積の高次Chow群の構造に関するKahnの予想を部分的に(可除な群を法として)証明することができた。Kahnの予想は、曲線の高次Chow群に関するBlochの予想を曲線の積に拡張したものである。Blochの予想は、Raskindによって可除な群を法として証明されている。我々の結果とKahnの予想の関係は、Raskindの結果とBlochの予想の関係に並行的である。この結果の証明は、曲線の積の高次Chow群に関するRaskind-Spiessの研究を利用した上で、次の二つの(曲線に関する)結果を組み合わせることで行われる。第一のものは、昨年度までに得られた局所体上の多様体に関する次の研究結果である:局所体上のgoodまたはsemi-stable reductionを持つ曲線を考える。すると、基礎体の有限次拡大に付随する高次Chow群(の主要部)のノルム写像は全射になる。(なお、この結果は、昨年度行った類体論に関する研究でも中心的な役割を果たした。)第二のものは、次の「ハッセのノルム定理の高次Chow群における類似」である:代数体上の曲線を考える。その高次Chow群の元が、基礎体の有限次拡大に付随する高次Chow群のノルム写像の像に入るための必要十分条件は、全ての完備化でノルム写像の像に入ることである。(上記した咋年度の結果から、局所的な条件はほとんど全ての素点で成立することに注意。なお、ハッセのノルム定理は体の乗法群に関する類似の定理である。)最後に、井上玲氏・小西由紀子氏との共同研究で、代数曲線のヤコビ多様体を等レベル面に持つような代数的完全可積分系で新しいタイプのものを構成することが出来た。
東アジア地域における公定書記載生薬類の比較研究

1.【目的】歴史的に中国伝統医学の影響を強く受けた東アジア地域(日本,中国,韓国,ベトナムなど)の公定書類に記載される生薬について,名称,基原植物,薬用部位などの表記に関するハーモナイゼーションを図ることを目的とする.2.【実施事項】本年度は,日本,中国,韓国の公定書について比較検討した.(1)方法:日本薬局方(JPXIV,2001年),日本薬局方外生薬規格(1989年・増補版),中華人民共和国葯典(2000年),大韓薬典(1998年)を対象とした.記載生薬数は,粉末生薬やデンプン等を除外し,日本公定書(以下JHと略称)に収載される250品目中190種,中国公定書(CH)記載の535品目中504種,韓国公定書(KH)記載の182品目中136品種の合計830種であった.これらについてデータベースを作成し記載事項の異同を調査した.(2)結果:2カ国間の比較では,同一名称・同一基原(A-1),同一名称・異基原(A-2),異名・同一基原(A-3),異名・異基原であるにもかかわらず同一生薬として見做されるもの(A-4),複数の基原をもつもの(A-5),当該国のみに記載されるもの(A-6)の6つのカテゴリーに分けた.3カ国間での比較を行った結果,異同の関係が更に複雑で,3カ国で1対1で対応する生薬は76種のみであった.また同名異物,異名同物(類名,類物等を含む)として複数が複雑に対応する品目が存在し,それらは24グループに大別できた.上記の成果については第50回日本生薬学会学術総会にて報告する予定である.また学術誌などへ公表する予定である.1.【目的】歴史的に中国伝統医学の影響を強く受けた東アジア地域(日本,中国,韓国,ベトナムなど)の公定書類に記載される生薬について,名称,基原植物,薬用部位などの表記に関するハーモナイゼーションを図ることを目的とする.2.【実施事項】本年度は,日本,中国,韓国の公定書について比較検討した.(1)方法:日本薬局方(JPXIV,2001年),日本薬局方外生薬規格(1989年・増補版),中華人民共和国葯典(2000年),大韓薬典(1998年)を対象とした.記載生薬数は,粉末生薬やデンプン等を除外し,日本公定書(以下JHと略称)に収載される250品目中190種,中国公定書(CH)記載の535品目中504種,韓国公定書(KH)記載の182品目中136品種の合計830種であった.これらについてデータベースを作成し記載事項の異同を調査した.(2)結果:2カ国間の比較では,同一名称・同一基原(A-1),同一名称・異基原(A-2),異名・同一基原(A-3),異名・異基原であるにもかかわらず同一生薬として見做されるもの(A-4),複数の基原をもつもの(A-5),当該国のみに記載されるもの(A-6)の6つのカテゴリーに分けた.3カ国間での比較を行った結果,異同の関係が更に複雑で,3カ国で1対1で対応する生薬は76種のみであった.また同名異物,異名同物(類名,類物等を含む)として複数が複雑に対応する品目が存在し,それらは24グループに大別できた.上記の成果については第50回日本生薬学会学術総会にて報告する予定である.また学術誌などへ公表する予定である.1.【目的】東アジア地域(日本,中国,韓国,ベトナムなど)の中国系伝統医学を用いる地域の公定書あるいは公定書に準ずる書物などの記載事項について,用語・基源植物などの表記に関するハーモナイゼーションを図ることを目的としている.2.【本研究の実施事項】初年度である本年度は日中間の公定書記載生薬類の名称,発音,表記法,基源植物の比較研究を行った.(1)方法:対象:日本薬局方(JPXIV,第2部,2001年),日本薬局方外生薬規格(1989年・増補版),中華人民共和国葯典(国家葯典委員会編,化学工業出版社,2000年版)を対象とし,記載事項についてデーター入力と解析を行った.日本薬局方および日本薬局方外生薬規格には生薬の項目は全部で250種あったが,粉末生薬やデンプン等を除外して対象を190種とした.中国では全項目数534種であったが,天然由来化合物や細胞内容物などを除外し504種を対象とした.また附録IIIに未収載の薬材及炮製品127種も参考検討対象とした.(2)結果:生薬名を比較した結果,相違がもたらされる要因により,(1)同一名称・同一基原,同一部位,(2)同一名称・別基原,同一部位,(3)類似名称・別基原,同一部位,(4)別名称・同一基原,同一部位,(5)別名称・同一基原・別部位,(6)別名称・別基原・同一部位,(7)別名称・同一基原・同一部位などのカテゴリーに分類することができた.更に使用法等においても相違を見ることが出来た.

上記の成果については「東アジア地域における公定書記載生薬類の比較研究(第1報)」という演題で日本薬学会第122年会にて報告する(26P-II-139).3.【来年度の実施予定】韓国に関してはデーターベースの基本入力を完了している.これにベトナムを追加する作業を行っている.また来年度は生薬学会での報告や学術誌などへの投稿を予定している.併せて調査結果を中国,韓国,ベトナム,その他のアジア諸国へ報告し,追加情報や意見などをとり入れて公表する予定である.1.【目的】歴史的に中国伝統医学の影響を強く受けた東アジア地域(日本,中国,韓国,ベトナムなど)の公定書類に記載される生薬について,名称,基原植物,薬用部位などの表記に関するハーモナイゼーションを図ることを目的とする.2.【実施事項】本年度は,日本,中国,韓国の公定書について比較検討した.(1)方法:日本薬局方(JPXIV,2001年),日本薬局方外生薬規格(1989年・増補版),中華人民共和国葯典(2000年),大韓薬典(1998年)を対象とした.記載生薬数は,粉末生薬やデンプン等を除外し,日本公定書(以下JHと略称)に収載される250品目中190種,中国公定書(CH)記載の535品目中504種,韓国公定書(KH)記載の182品目中136品種の合計830種であった.これらについてデータベースを作成し記載事項の異同を調査した.(2)結果:2カ国間の比較では,同一名称・同一基原(A-1),同一名称・異基原(A-2),異名・同一基原(A-3),異名・異基原であるにもかかわらず同一生薬として見做されるもの(A-4),複数の基原をもつもの(A-5),当該国のみに記載されるもの(A-6)の6つのカテゴリーに分けた.3カ国間での比較を行った結果,異同の関係が更に複雑で,3カ国で1対1で対応する生薬は76種のみであった.また同名異物,異名同物(類名,類物等を含む)として複数が複雑に対応する品目が存在し,それらは24グループに大別できた.上記の成果については第50回日本生薬学会学術総会にて報告する予定である.また学術誌などへ公表する予定である.
トップダウン・ボトムアップ的行動制御における皮質－基底核の機能的役割の解明

本研究はカテゴリという精緻化された知識を必要とするトップダウン的な行動制御と、そのような制御を必要としないボトムアップ的な行動制御が脳のどこにおいて実現されているかを調べるために、前頭連合野および線条体から神経細胞活動を記録することを目指すものであった。サルが視覚刺激と結果(報酬または嫌悪刺激)を連合させる記憶課題を行っているあいだ、前頭連合野および線条体から神経細胞活動の記録を行った。視覚刺激が提示されたとき、予測される結果や現在のルール(どちらの刺激グループがどの結果と結びついているか)をコードしている神経細胞が前頭連合野および線条体の両方において見つかった。本研究では、カテゴリという精緻化された知識を必要とするトップダウン的な行動制御と、そのような制御を必要としないボトムアップ的な行動制御が脳のどこにおいて実現されているかを調べるために、前頭連合野および線条体から神経細胞活動を記録することを目指している。平成26年度は主に2頭のサルに行動課題を訓練した。行動課題は視覚刺激と結果を連合させる記憶課題で、見た目が異なる視覚刺激4枚を1グループとして2グループ(計8枚)の刺激セットを作り、各刺激グループと特定の結果(ジュースまたは食塩水)の連合学習をサルに行わせた。学習訓練が進むにつれ、ジュースと連合している視覚刺激が提示されたときは飲み口をなめるようになったのに対し、食塩水と連合している視覚刺激が提示されたときはそのような行動を抑えるようになった。特定の刺激セットに対して、2頭のサルとも刺激と結果の関係を学習し終えた。その後、それまでジュース(食塩水)を予告していた刺激グループが今度は食塩水(ジュース)を予告するようになるというように、刺激と結果の関係を入れ替える逆転学習を導入した。さらに、刺激と結果の関係を学習する過程で神経活動がどのように変化するかを調べるため、毎日、新しい刺激セットを導入し、その日のうちに連合学習が形成されるようになるまで訓練を行った。1頭のサルは、新しい刺激を導入しても、数十トライアルのうちに刺激と結果の関係を学習し、その逆転学習もできる段階まで訓練が進んだ。しかし、2月の終わりに訓練した1頭のサルが死亡してしまう事故が起きてしまった。今後は、早急に新たなサルを購入し、訓練を開始する。また、残っているサルについては引き続き、行動訓練を進めるとともに、訓練が完了次第、神経活動の記録を開始したいと考えている。本研究ではカテゴリという精緻化された知識を必要とするトップダウン的な行動制御と、そのような制御を必要としないボトムアップ的な行動制御が脳のどこにおいて実現されているかを調べるために、前頭連合野および線条体から神経細胞活動を記録することを目指すものであった。サルに視覚刺激と結果(報酬または嫌悪刺激)を連合される記憶課題を行わせた。課題では、見た目が異なる視覚刺激4枚を1グループとして、2つのグループ(計8枚の視覚刺激)からなる刺激セットを作り、そのなかからランダムに選んだ1つの刺激をサルに提示した。各刺激グループは特定の結果を予告しており、サルは提示された視覚刺激から報酬がもらえるか、嫌悪刺激がくるかを予測する。学習訓練が進むにつれ、サルはジュースを予告する視覚刺激に対してはジュースが出る前からジュースが出てくる飲み口をなめるようになったのに対し、食塩水を予告する視覚刺激に対してはそのような行動を抑制するようになった。その後、それまでジュース(食塩水)を予告していた刺激グループが食塩水(ジュース)を予告するように、刺激と結果の関係を入れ替える逆転学習を導入した。サルは刺激と結果の関係が入れ替わったことを1つの視覚刺激で経験すると、同じグループに属する他の刺激に対しては結果との関係が変わったことを経験する前から、行動を変えることが分かった。サルがこの課題を行っているあいだに、前頭連合野および線条体から神経細胞活動の記録を行った。前頭連合野において視覚刺激が提示されたとき、予測される結果や現在のルール(どちらの刺激グループがどの結果と結びついているか)をコードしている神経細胞があることは我々の先行研究で明らかになっていたが、線条体においても同様の活動が見つかった。今後はデータの数を増やし、前頭連合野と線条体でどのような違いが見られるかを比較する予定である。サル2頭を用い、行動課題を訓練した。1頭のサルについては、新しい刺激を導入しても数十トライアルのうちに刺激と結果の連合学習が成立し、逆転学習もできる段階まで訓練が進んだため、神経細胞活動を記録するための手術を予定していた。しかし、そのサルが不慮の事故により死亡してしまったため、当初の計画より遅れることとなった。もう一頭のサルについては現在、訓練は8割くらい完了しており、訓練が完了次第、神経細胞活動の記録を開始する予定である。神経生理学新たなサルを購入し、訓練を開始する。残っているサルについても訓練を引き続き行い、訓練が完了したら、頭部に神経活動記録用のチェンバーを取り付ける手術を行う。

トップダウン的な行動制御とボトムアップ的な行動制御がそれぞれどのような神経回路によって実現されているのかを調べるため、前頭連合野と線条体から神経細胞活動を記録する。予測として、トップダウン的な行動制御には前頭連合野が、ボトムアップ的な行動制御には線条体が主に関係しているのではないかと考えている。
Coffin-Siris症候群の新規責任遺伝子探索及び分子病理の解明

知的障害、発育不全、特異的顔貌、第5指・趾爪の低形成を伴う症候群として報告されたCoffin-Siris症候群(CSS)は、その大多数は孤発例で遺伝的原因は不明であった。我々はCSSの責任遺伝子として、クロマチンリモデリング因子の1種であるBAF複合体の構成サブユニットをコードする5つの責任遺伝子(SMARCB1、SMARCA4、SMARCE1、ARID1A、あるいはARID1B)を同定した。さらに、BAF複合体の構成サブユニットをコードする遺伝子群に異常を認めないCSS症例に関して、全エクソーム解析により新規遺伝子変異探索を行った結果、2例においてSOX11にde novo変異を見出した。Coffin-Siris症候群(CSS)は、1970年にCoffin医師とSiris医師により、知的障害、発育不全、疎な頭髪および睫毛、特異顔貌、第5指・趾爪の低形成もしくは欠失を伴う症候群として報告された。その大多数は孤発例で遺伝的原因は不明であった。我々は、集積したCSSの22例のうち5例を選択し、全エクソームシークエンス(WES)を行い、うち4例にSWI/SNF複合体の構成サブユニットをコードする遺伝子、SMARCB1、あるいはSMARCA4のde novo変異を同定した。さらに残りの18例を対象に、本複合体の構成サブユニットをコードする遺伝子群の変異スクリーニングを行ったところ、15例でSMARCB1、SMARCA4、ARID1A、ARID1B、あるいはSMARCE1の5つのいずれかに変異を認めた。加えて、この5つの遺伝子群の変異で説明できない症例群で、本複合体と異なる新規責任遺伝子Xの同定に成功した。平成25年度では、新たな49例と変異が認められなかった22例中3例のCSS症例を対象に、WES、もしくはターゲットリシークエンス解析により既知遺伝子異常の探索を行った。その結果、52例中20例(38.5%)で、SMARCB1(3例、5.8%)、SMARCA4(2例、3.8%)あるいはARID1B(15例、28.8%)の3つのサブユニットに変異が認められた。最終的に71例中39例(54.9%)で、SMARCB1(7例、9.9%)、SMARCA4(8例、11.3%)、SMARCE1(1例、1.4%)、ARID1A(3例、4.2%)、あるいはARID1B(20例、28.2%)のいずれかのサブユニットに変異が認められた。本研究により、CSSの分子診断が可能となり、今後の病態解明と治療・予防法の開発につながることが期待される。BAF複合体の構成サブユニットをコードする遺伝子群に異常を認めないコフィン-サイリス症候群症例とその両親のゲノムDNAを用いて、次世代シークエンサーによる全エクソーム解析を行った。その結果、2例においてSOX11にde novo変異を見出した。転写因子であるSOX11はBAF複合体ネットワークの下流で、神経細胞の分化制御などに重要な役割を果たしていることが報告されている。本遺伝子がヒトの脳組織で発現していること定量PCR法により確認し、モデル実験動物のゼブラフィッシュにおいて、モルフォリノアンチセンスオリゴにより相同遺伝子の機能を阻害すると、頭部の縮小、中枢神経の細胞死などの異常が認められ、CSSの症状を模倣していた。これまでにCSS症例では、BAF複合体の構成サブユニットをコードする5つの遺伝子の変異が報告されていたが、新たにSOX11が同定されたことにより、本疾患の遺伝子診断の正確性が向上した。また、新たな責任遺伝子が解明されたことで、さらにCSSの病態解明と治療・予防法の開発に進展することが期待される。人類遺伝学継続的に集積するCSS症例を対象に全エクソーム解析(WES)を行い、既知遺伝子異常の実態調査、ならびに新規遺伝子異常の探索を目的とし研究を行った。平成25年度では、新たに追加したCSS症例を対象にWESを行い、20例で既知遺伝子異常が認められた。本業績はClinical Geneticsにて論文報告を行った。シークエンスでは同定できない染色体構造異常は、エクソームシーケンスデータを用いたコピー数異常同定プログラム(XHMMプログラム)により、染色体構造異常の検出を随時行っている。以上のことより、交付申請書に記載した「研究の目的」の達成度として、おおむね順調に進展しているといえる。既知の責任遺伝子に異常を認めないCSS症例については、その両親検体も同様に全エクソーム解析(WES)を行い、de novo変異を確認し新規責任遺伝子探索を行う。既に同定に成功している新規責任遺伝子Xに関しては、その遺伝子産物の性状に応じた機能解析を行う。

申請時にはボストンで行われたアメリカ人類遺伝学会(ASHG)で発表する予定であったが、取り止めになったため。学会発表のための旅費や研究のための消耗品費に使用する。
高密度マイクロアレイを用いた包括的ゲノム解析による肝細胞癌の発生・再発機構の解明

我々は、肝細胞癌の細胞株から抽出したゲノムDNAや、肝細胞癌および非癌部肝組織をレーザーマイクロダイセクションにより切り出し、抽出したゲノムDNAについて、100kまたは500k chipを用いて共通の遺伝子増幅および欠失領域やLOHの有無を解析してきた。肝細胞癌において染色体8q22.3領域が高頻度に遺伝子増幅をおこし、その染色体領域にコードされるGRHL2遺伝子増幅が、肝細胞癌の早期再発に相関していることを見出した。RNAiにより肝癌培養細胞の内在性GRHL2をknock downすると細胞増殖が抑制されることからも、GRHL2の増幅は、肝細胞癌再発の予測因子となる可能性が示唆された。肝細胞癌ではComparative genomic hybridizationもしくはマイクロサテライトマーカーを用いたジェノタイピングなどの手法で様々なゲノム異常が報告されてきたが、解像度及び分解能の問題から共通領域を正確に決定し標的遺伝子を絞り込むことは困難であった。近年SNP判定に用いるプローブのシグナル強度を用いてゲノム変化を解析することが可能である高密度オリゴヌクレオチドアレイ(GeneChip Human Mapping 100K Set, Affymetrix社)が開発された。本アレイはSNP間平均距離が23.6kbpで100kb以内に少なくとも1つのSNPが含まれる領域が全ゲノムの92%と高密度で、狭い領域のゲノム異常を検出することが可能である。そこで肝発癌に関与すると考えられる遺伝子異常を網羅的に同定することを目的に、本手法を用いた肝癌細胞株におけるゲノムワイドな染色体変化の解析を試みた。肝癌細胞株16種類からゲノムDNAを抽出し、高密度オリゴヌクレオチドアレイにハイブリダイズした。得られたシグナルはソフトウェアCNAGを用いて解析し、コピー数変化、アレル不均衡性、及びヘテロ接合性の消失を検討した。増幅領域はゲノム全体にわたり広範囲に認められたものの、2つ以上の細胞株で共通して高度の遺伝子増幅が認められた部位の中で163-305kbpにわたる11q13.2-3の領域には既知の標的遺伝子であるcyclin D1が含まれていた。またゲノム上に散在するホモ接合体欠失の領域もごく狭い13-86kbp(1p21.3)の領域のものまで同定することができた。LOHは従来報告されている1p,4q,8p,9pなどの領域に高頻度に認められ、その領域に癌抑制遺伝子p53や細胞周期関連因子p16など既報の分子が含まれることが確認された。肝細胞癌では、Comparative genomic hybridization、もしくはマイクロサテライトマーカーを用いたジェノタイピングなどの手法で様々なゲノム異常が報告されてきたが、解像度及び分解能の問題から共通領域を正確に決定し標的遺伝子を絞り込むことは困難であった。またゲノム上に散在するホモ接合体欠失の領域もごく狭い13-86kbp (1p21.3)の領域のものまで同定することができた。また、臨床検体から抽出した遺伝子を用いて、高度遺伝子増幅の認められた領域と臨床パラメーターの相関関係を解析した。肝細胞癌は、本邦でも死亡率の高い癌種の1つであり、慢性肝炎・肝硬変を母地として発生する。治療法は、手術、経皮的ラジオ波療法(RFA)、肝動脈塞栓療法(TACE)等であるが、肝細胞癌が多中心性発生や肝内転移により再発しやすく、また多くが肝硬変を伴っていることから、予後は不良である。肝細胞癌の治療成績向上のための研究と発症予防対策が急務である。

GeneChip Human Mapping lOOk Setアレイは、SNPs判定に用いたプローブのシグナル強度とデータ解析ソフトとしてCNAGを使用することで、従来のCGH array等(1Mb程度)より高解像度で、染色体のより小さい増幅、欠失領域の検出が可能であり、さらに、SNP callの有無でLOHの有無が判定できる。我々は、肝細胞癌の細胞株から抽出したゲノムDNAや、肝細胞癌および非癌部肝組織をレーザーマイクロダイセクションにより切り出し、抽出したゲノムDNAについて、100kまたは500k chipを用いて共通の遺伝子増幅および欠失領域やLOHの有無を解析してきた。肝細胞癌において染色体8q22.3領域が高頻度に遺伝子増幅をおこし、その染色体領域にコードされるGRHL2遺伝子増幅が、肝細胞癌の早期再発に相関していることを見出した。RNAiにより肝癌培養細胞の内在性GRHL2をknock downすると細胞増殖が抑制されることからも、GRHL2の増幅は、肝細胞癌再発の予測因子となる可能性が示唆された。