hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ユビキチン修飾系による転写因子Hes1タンパク質の安定化と幹細胞制御

抑制型転写因子であるHes1は、分化を促進する転写因子等の発現や活性を抑制し、幹細胞・癌細胞などの様々な未分化細胞の維持に必須である。Hes1の発現パターンは特徴的で、自身の発現を抑制するネガティブフィードバックループによって、細胞内でその発現量が周期的に増減(オシレーション)する。近年、Hes1は、その振動ダイナミクスを使い分けて幹細胞の分化を制御していることが分かってきた。しかし、その振動を制御する細胞内の分子機構はほとんど明らかになっていなかった。我々は、Hes1タンパク質の安定性を調節し、幹細胞分化を制御する分子機構を明らかにすることを目的に、Hes1タンパク質と相互作用する因子の網羅的同定を行ってきた。その結果、同定されたユビキチン修飾系関連因子の中から、Hes1タンパク質を安定化する新規脱ユビキチン化酵素(DUB)として、Usp27xを、また、そのホモログであるUsp22, Usp51を同定した。これらの酵素によるHes1タンパク質の制御機構をin vitro, in vivoで調べた結果、これらの新規DUBは、その活性部位に依存してHes1タンパク質と相互作用し、Hes1タンパク質を脱ユビキチン化して安定化すること、Usp22のノックダウンにより、Hes1タンパク質が不安定化し、Hes1オシレーションが遅れ、胎児脳組織内での神経幹細胞の分化が昂進することを明らかにした。一方、Usp27xの過剰発現では、神経幹細胞の分化が抑制された。これらの研究成果は、これらのDUBが、脱ユビキチン化を介してHes1タンパク質のダイナミクスを調節し、神経幹細胞の分化を制御していることを明らかにした。この研究成果は、Hes1の翻訳後修飾がHes1オシレーションとその機能を調節することを初めて示したものである。26年度が最終年度であるため、記入しない。Hes1の発現パターンは特徴的で、自身の発現を抑制するネガティブフィードバックループによって、細胞内でその発現量が周期的に増減(振動)する。しかし、その振動を制御する細胞内の分子機構はほとんど明らかになっていない。我々は、Hes1タンパク質の安定性に着目をし、Hes1と相互作用するユビキチン修飾系関連因子を同定した。その中からHes1タンパク質を安定化するユビキチン化酵素(E3)と脱ユビキチン化酵素(DUB)を見いだした。平成25年度は、主に同定した脱ユビキチン化酵素(DUB)の解析を行い、このDUBに類似したホモログが同様の活性を持つこと、これらのDUBの過剰発現やノックダウン法を用いた解析により、DUBによるHes1タンパク質の安定化とその分子機構、ならびにHes1の活性制御機構を明らかにした。また、このDUBのin vivoでの機能解析を、Hes1との発現比較、ノックアウトマウスの解析、マウス胚脳組織への遺伝子導入法などにより行い、マウス脳組織における神経幹細胞の増殖や分化への影響を調べた。さらに、Hes1の発現振動をリアルタイムでモニターできる発光レポーターを用いて、培養細胞における振動の変化を調べた。現在、以上の結果をまとめている段階である。同定した脱ユビキチン化酵素(DUB)の解析を行い、Hes1に対する機能解析をほぼ終了することができた。

同定したHes1タンパク質を安定化するユビキチン化酵素(E3)、並びに他の候補相互作用因子の機能解析を行う。また、Hes1の翻訳後修飾を詳細に調べ、特にユビキチン修飾によるHes1の転写因子活性の制御機構を調べる。
岩盤中のき裂の長期透水性評価

地下岩盤内の水の流れの長期的な予測と制御のために,一定垂直応力でのき裂の時間依存的閉鎖挙動に関する理論的研究,岩石の緩和係数を実験的に求めるための試験装置の開発および実験,三軸圧縮応力下で垂直応力が一様かつ一定でせん断変形を受けるき裂の透水試験を実現できる装置の開発および実験を行った。得られた成果をまとめると以下のとおりである。1)ランダムな突起を有するき裂の時間依存的閉鎖挙動の粘弾性理論を構築した。本理論により,岩石の緩和係数が求められれば垂直応力-弾性的閉口変位関係から,き裂の最終変位が予測できること,垂直応力-弾性的閉口変位関係がGoodmanの式に従う場合には時間依存的閉口変位は垂直応力に依存しないことが明らかになった。2)温度制御された剛円柱圧入試験により弾性定数E'ならびにそれに対応する緩和係数YE'(t)を評価する装置ならびに方法を開発した。実験によって得られた緩和係数を用いて一定垂直応力下におけるき裂の時間依存的閉口変位のシミュレーションを行なった結果,時間依存的閉口変位の垂直応力依存性が花崗岩に対しては無く,砂岩に対してはあるという既往の実験結果を定性的に再現したものの,予測した閉口変位ははるかに小さな値であった。これは,接触面積の相違による寸法効果が主な原因であると考えられた。3)人工き裂面に作用する垂直応力を一定かつ一様に保ちながらせん断-透水試験を実施し,せん断変形に伴うシェアダイレーションならびにそれに伴う透水性の変化を評価した。本年度は,一般的応力条件における透水実験装置を設計・試作するとともに,これまで測定されてこなかった岩石の緩和係数を測定する装置を設計・製作し,花崗岩と砂岩についてクリープコンプライアンスと緩和係数を測定した.透水実験装置は,耐圧30MPaの大型圧力容器(外径260mm,内径200mm,高さ700mm),間隙水圧を負荷するための定流量送水システム(制御容量ポンプ;吐出量0.0529l/min,吐出圧力1.5MPa)ならびに試験片をセットした圧力容器を現有のサーボコントロール型材料試験機(100tf)に移動・設置する装置からなっている.これらの装置が所定の機能を有していることを確認した後,三軸圧縮応力条件で滑りを許しながら透水試験を行うための試験片の形状と被覆方法の検討を行った.岩石の緩和係数は,一辺が約120mmの立方体試料に直径10mmの超硬合金(WC)製丸棒を圧入することによって行った.予備実験を行った結果,圧入量を一定に保持すると,材料試験機や測定装置ならびに岩石試料の線膨張係数の差により実際の岩石への圧入量を一定に保持できないことがわかった.そこで,荷重を一定に保持してクリープコンプライアンスを測定し,測定結果に関数のあてはめを行った後,これをLaplace逆変換することによって緩和係数を求めた.緩和係数に関して得られた主な知見は次の通りである.1)緩和係数は時間とともに始め急激に小さくなるが,120時間から150時間でほぼ一定になる.本研究で求めた荷重レベルでは,緩和量は弾性変形分の1割以下である.2)花崗岩と砂岩を比較すると,花崗岩は緩和量がかなり小さく,かつ一定に達するまでの時間が短い.3)緩和量は荷重とともに増加する.すなわち,緩和係数は荷重または変位依存性がある.本年度は、垂直応力のみならずせん断応力も考慮した岩石き裂の透水性試験装置を昨年度に引き続いて作製するとともに,一定垂直応力でのき裂の時間依存的閉鎖挙動に関する理論的研究を行った.製作した試験システムを用いて予備実験を行った結果,通常の封圧三軸試験のように封圧を一定に保持した状態で軸荷重を増加させてき裂をせん断変形させると,同時にき裂面への垂直応力も増加するため,き裂透水性に及ぼす応力の影響を定量的に評価することが困難であることが判明した.

そこで,垂直応力を一定に保持するために,封圧を軸荷重に従って減少させる封圧制御装置を設計・製作した.本装置は,三軸圧力容器の容量を考慮して手動ポンプで所定の封圧を加えた後,往復動型の微量吐出ポンプ(吐出量0.77.1cc/min)を駆動して封圧を減少させる.コントローラの追随制御を用いて軸荷重に対する追随制御を行った結果,所定の封圧減少を精度良く実行することを確認した.このことから,載荷系(大型圧力容器,サーボコントロール型材料試験機(容量100t),封圧載荷用微量吐出ポンプユニット),透水試験系(定流量水ポンプ,電子天秤),変位・温度系(カンチレバー式せん断変位計,πゲージ式き裂変位計,温度ゲージ)ならびに測定・記録系(データロガー,パソコン)から成る本試験システムがほぼ完成した.傾斜角45°の人工き裂面(研磨面)を有する断面100mm×100mm,高さ200mmの岩石試料を用いて予備実験を行った結果,現在のシリコーンを用いたシール方法では十分な大きさの封圧には耐えきれないことが判明し,シール方法の改善を検討中である.一定垂直応力のき裂の時間依存的閉鎖挙動に関する理論的研究では,ランダムな突起を有するき裂の時間的依存的閉鎖挙動の粘弾性理論を構築した.本理論は,岩石の緩和係数が求められれば垂直応力-弾性的閉口変位関係からき裂の最終変位が予測できること,垂直応力-弾性的閉口変位関係がGoodmanの式に従う場合には時間依存的閉口変位は垂直応力に依存しないことを明らかにしている.また,時間依存的閉口変位のシュミレーションコードを開発し,垂直応力-弾性的閉口変位関係がGoodmanの式に従う場合に時間依存的閉口変位は垂直応力に依存しないのは,垂直応力が大きいほど時間依存的な接触面積の増加が大きいためであることを明らかにした.本年度は,昨年度開発したせん断透水試験装置を用いて三軸圧縮応力下で垂直応力が一様かつ一定でせん断変形を受けるき裂の透水試験を行うとともに,一定垂直応力でのき裂の時間依存的閉鎖挙動を予測するために,岩石の緩和係数を実験的に求めるための試験装置を開発し,得られた緩和係数を用いて,すでに開発したき裂の時間依存的閉鎖挙動に関する理論に基づいた予測と従来の実験結果との比較検討を行った.その結果得られた本年度の主な研究成果をまとめると以下のようである.1)斜めの人工き裂面を有する直方体岩石試料を用いて試験片のシール法について検討し,耐圧が20MPa,許容せん断変位7mmの被覆法を完成した.本被覆法では,き裂の側面部は金属板で,き裂の上下端部はシリコンゴムシートでカバーした後全体をシリコーンで被覆する.2)人工き裂面に作用する垂直応力を一定かつ一様に保ちながらせん断-透水試験を実施した結果,人工き裂面に固有なスティックスリップが生じた場合には垂直応力とせん断応力が一時的に低下するが全体としては垂直応力を一定に制御できることを確認するとともに,せん断変位に伴うシェアダイレーションならびにそれに伴う透水性の変化を評価した.3)温度制御された剛円柱圧入試験により弾性定数E'ならびにそれに対応する緩和係数Y_<E'>(t)を評価する装置ならびに方法を開発した.4)花崗岩と砂岩の緩和係数を評価した結果,圧入量の増加または圧入棒の断面積の減少に伴う垂直応力の増加とともに緩和係数の低下率が大きくなることを明らかにした.
藻類における雌雄非対称性の成立とオルガネラ遺伝の方向を決める形態と構造の探索

動物においても、植物においても、雌雄は正確に2つであって、大きな雌(♀)の配偶子と小さな雄(♂)の配偶子になる。ただ、同形や異形という中間体がいるのは藻類をおいて他になく、アオサ藻綱のヒラアオノリは同形と異形の中間段階にある。その配偶子には4本の鞭毛根(1d,1s,2d,2s)があり、眼点は1dと2sで区切られた面にあって、雌(♀)の接合装置は眼点と同面に、雄(♂)のそれは反対面にあった。この雌雄非対称性はオルガネラ遺伝の方向性と同じであることが分かった。免疫サブトラクション法の再現性を検討するとともに、正逆のサブトラクションで、雄(♂)の接合装置に特異的な抗体の調製に挑戦した。1.ヒラアオノリの培養系統をさらに増やし、配偶子の大小が真正の性的二形性なのか単なる地域差なのかを解析した。系統関係を明瞭にするためにマイクロサテライトマーカーとオルガネラDNAマーカーを単離した。マイクロサテライトに関してはSNXリンカー・オリゴプローブ法で単離することに成功しているし、葉緑体とミトコンドリアもゲノム配列が公開されているアオサ藻網の近縁種の遺伝子配置を参照し、PCR-RFLPで識別できるDNAマーカーを得ることができた。2.免疫サブトラクション法で配偶子の細胞表層に接合装置の性的二形性を検出している。ウェスタンブロット解析から、免疫サブトラクション法の抗原となっているタンパク質は、250kDaと80kDaと推測している。免疫サブトラクション法の再現性を調査すると同時に、雌(♀)ではなく、雄(♂)の接合装置を認識する抗体を調製した。また、抗原タンパク質とその遺伝子を同定するために、発現cDNAクローンライブラリーを構築した。北大グループと共同で野外採集した配偶体から放出された褐藻の配偶子を使うことを検討している。3.FE-SEMは、試料の乾燥法を工夫することで、眼点や接合装置など細胞表層からでは識別が難しい構造を観察できるようにした。今回は、「凍結乾燥法」を工夫して、雌(♀)の接合装置に特異な顆粒状の構造を観察できるようにした。透過電顕も用いることで、雄(♂)の表層や接合装置に何か特異的な構造が観察できることを試しているところである。一方、FE-SEM免疫電顕に関しては、筑波大グループと共同で、サブトラクション法で調製した抗体が細胞表層の接合装置の何を認識しているかを調べていて、光学顕微鏡による免疫染色の解析が進んでいる。免疫サブトラクション法の再現性を検討するとともに、正逆のサブトラクションで雄(♂)の接合装置に特異的な抗体の調製に挑戦し、それをプロテオーム解析するための基盤を構築した。1.ヒラアオノリの培養方法を再検討して雌雄配偶子の大量供給を可能にした。このことで雌雄配偶子のESTライブラリー構築、ゲノムシーケンス、プロテオーム解析が可能となった。2.ヒラアオノリのマイクロサテライトマーカー、葉緑体とミトコンドリアのDNAマーカーを取得することができ、葉緑体とミトコンドリアの遺伝様式の大規模解析を続行している。3.免疫サブトラクション法で配偶子の細胞表層に接合装置の性的二形性を検出している。アオノリに限らずノリの葉状体タンパク質の電気泳動は極めて難しい。これを克服する方法を考案し、ウェスタンブロット解析などが容易になった。免疫サブトラクション法を拡張して、抗雌(♀)抗血清と抗雄(♂)抗血清を調整して、雌(♀)では200kDa、雄(♂)では40kDaの特異抗原を見いだすことができた。また、雄(♂)に特異的な60kDaと40kDaのバンドも検出した。北大グループと共同で、野外採集した褐藻の配偶子でも調査予定である。4.抗雌(♀)抗血清と抗雄(♂)抗血清を用いて蛍光抗体染色をおこない、雌雄に特異的な細胞構造の発見に務めている。接合装置だけでなく雌雄の膜が融合する領域の染色にも成功した。FE-SEM免疫電顕に関しては筑波大グループと共同研究する予定である。5.雌雄配偶子で6769万リード規模のESTを構築した。また、雌雄配偶子で7795万リード数程度ではあるが全ゲノム解析を行った。さらに、共同研究で、雌雄配偶子の細胞膜分画をマスでプロテオーム解析した。いずれも限られた規模なので、3つのデータをそれぞれ補完することで、雌雄特異的な遺伝子群の同定を可能にした。免疫サブトラクション法の再現性を検討するとともに、正逆のサブトラクションで雄(♂)の接合装置に特異的な抗体を調製できることが示された。主な進捗は以下の通りである。

1)雌雄と連鎖する性的二形性(配偶子の大小、交配型、接合部位の配向、オルガネラ遺伝の方向性)とは何か?ヒラアオノリの培養系統をさらに増やし、配偶子の大小が真正の性的二形性なのか単なる地域差なのかなどをオルガネラDNAマーカーを用いて解析した。2)免疫サブトラクション法で配偶子の細胞表層に接合装置の性的二形性を検出した。ウェスタンブロット解析から、免疫サブトラクション法の抗原となっているタンパク質(250kDaと80kDa)を確認した。サブトラクションの方向を逆にして、雌(♀)ではなく、雄(♂)の接合装置を認識する抗体も調製できることを確かめた。また、筑波大グループ、北大グループも、培養可能な緑藻や褐藻はもちろん、培養が難しいものでも野外採集した配偶体から放出された配偶子を使うことを検討している。3)ヒラアオノリの雌雄配偶子を用いて、ESTとゲノミックライブラリーを構築し、シーケンスレベルのサブトラクションで雌雄に特異的な遺伝子を同定できないかを検討した。「ゲノム支援」の全面的な協力を受け、植物から動物まで広く保持し、雄性配偶子で特異的に発現するGCS-1に注目し、その雌雄のゲノム構造や発現様式を解析した。4)雌雄配偶子の非対称性についてGCS-1抗体とFE-SEMを用いて解析した。GCS-1抗体は、雄(♂)配偶子の接合装置付近の表層抗原を認識しており、接合時に雌雄の接合を特異的に阻害することが明らかとなった。雄(♂)の接合装置の表面構造とGCS-1との関係に関しては金コロイドを用いた免疫FE-SEMで解析している。これらの解析で雌雄配偶子の接合装置の非対称性に直接関わる因子が明らかにできそうだ。本研究課題の「オルガネラ遺伝の方向性」と「雌雄配偶子の非対称性」を調べるためには、1)マイクロサテライトマーカー、葉緑体とミトコンドリアのDNAマーカーを取得と2)免疫サブトラクション法の再現性調査が欠かせない。この両方ともにクリアできたので、達成度はおおむね順調に進展していると考えられる。24年度が最終年度であるため、記入しない。免疫サブトラクション法の再現性をヒラアオノリの異なる株と褐藻などの他の藻類で見る必要がある。調製された雌雄特異的な抗血清の利用方法についても検討する必要があろう。プロテオーム的な解析とリンクさせるためには、雌雄特異的な抗血清を用いた免疫沈降法によるマス解析が是非とも必要になろう。
発展系の数値解析の総合的研究

本研究課題は,理工学の多くの分野で現われる時間発展をともなう現象を数理科学における発展系としてモデル化し,これを解法特に離散近似解法の観点で総合的に検討し,新たな結果をえようとするものである.分担者および多数の研究協力者の研究推進によって,以下の成果をうることができた.時間遅れあるいは確率的要素を含む発展系の離散解法解折的な漸近安定性に対応する数値的安定性をもつ離散変数法を系統的に研究し,主として線型安定性に関する結果と,一部非線型安定性についても成果をえ,その解析と実際への応用を展開することができた.力学系に対する長時間離散積分法Hamilton力学系とそれに応ずるsymplectic numerical integratorsの代数的な関係を明らかにするとともに,さらに保存量と,の関係も解明することができた.離散近似解の精度保証放物型発展系に対する有限要素法に基づく精度保証を,大きく前進させるとともに,常微分方程式系に関しても従来の方法を改善することができた.発展系に対する離散解法の並列化Runge-Kutta法をaccross-the-stepの局所的なレベルで,あるいはWaveformRe-laxationを通じて大域的なレベルで,並列化を進める観点で,その収束性能などを理論・実践の両面で明らかにした.発展系に対する高性能かつ安定な離散解法の開発と評価時間方向の数値積分を離散化する際に,微分方程式の定義函数の導函数を取り入れるなど,多くの工夫による新しい試みを導入し,解析することができた.これらの研究成果は国内外の研究集会において発表されるとともに,学術論文としても多数が発表あるいは掲載予定である.本研究課題は,理工学の多くの分野で現われる時間発展をともなう現象を数理科学における発展系としてモデル化し,これを解法特に離散近似解法の観点で総合的に検討し,新たな結果をえようとするものである.分担者および多数の研究協力者の研究推進によって,以下の成果をうることができた.時間遅れあるいは確率的要素を含む発展系の離散解法解折的な漸近安定性に対応する数値的安定性をもつ離散変数法を系統的に研究し,主として線型安定性に関する結果と,一部非線型安定性についても成果をえ,その解析と実際への応用を展開することができた.力学系に対する長時間離散積分法Hamilton力学系とそれに応ずるsymplectic numerical integratorsの代数的な関係を明らかにするとともに,さらに保存量と,の関係も解明することができた.離散近似解の精度保証放物型発展系に対する有限要素法に基づく精度保証を,大きく前進させるとともに,常微分方程式系に関しても従来の方法を改善することができた.発展系に対する離散解法の並列化Runge-Kutta法をaccross-the-stepの局所的なレベルで,あるいはWaveformRe-laxationを通じて大域的なレベルで,並列化を進める観点で,その収束性能などを理論・実践の両面で明らかにした.発展系に対する高性能かつ安定な離散解法の開発と評価時間方向の数値積分を離散化する際に,微分方程式の定義函数の導函数を取り入れるなど,多くの工夫による新しい試みを導入し,解析することができた.これらの研究成果は国内外の研究集会において発表されるとともに,学術論文としても多数が発表あるいは掲載予定である.時間発展をともなう現象は理工学の多くの分野で現れ,その数理科学的取扱いは科学技術の中心的なテーマであるといって過言ではない.また,この現象に係わる問題は,数学に豊富な解析対象を提供してきた.本研究では,伝統的に異なった立場・領域で取り扱われてきた発展系の問題を,解法特に離散近似解法の観点で総合的に検討し、新たな結果をえようとするものである.本研究では研究分担者とその研究協力者の,直後の研究交流をもっとも重視して進める.テーマ別課題研究として各研究分担者が研究協力者の助力をかて恒常的に実施するもので、以下にあげるテーマを重点的に推進した.1.発展系に対する高性能かつ安定な離散解法の開発と評価(分担者:三井,小野,大野,中島)2.発展系に対する離散解法の並列化(分担者:三井,大野,小澤)3.時間遅れあるいは確率的要素を含む発展系の離散解法(分担者:三井,小藤,齊藤,鈴木)4.力学系に対する長時間離散積分法(分担者:三井,篠原,前田,室田,吉田)5.離散近似解の精度保証(分担者:三井,久保田,中尾,室田)96年10月名古屋大学において研究分担者を含む研究者の参加をえて、ワークショップを開催して、研究の相互交流をはかるとともに、各分担課題の発展を促すことができた。また、96年12月龍谷大学瀬田キャンパスにおいて応用数学分野の合同研究集会を開催し、多数の参加をうるとともに、分担者等から多くの講演発表を行なった。分担者・吉田春夫は97年1月にインドで開催された国際シンポジウムに招待され、本研究経費から渡航費を援助して出席し、学術交流に大きな成果をあげた。このように3か年計画の初年度ではあるが、本年度多くの研究成果を収めることができ、その主要なものは裏面記載の発表論文のごとく分担者や研究協力者の手によって公刊され、また他にも多くの学術論文が準備中である。時間発展をともなう現象は理工学の多くの分野で現われ,その数理科学的取扱いは科学技術の中心的なテーマであるといって過言ではない.また,この現象に係わる問題は,数学に豊富な解析対象を提供してきた.本研究では,伝統的に異なった立場・領域で取り扱われてきた発展系の問題を,解法特に離散近似解法の観点で総合的に検討し,新たな結果をえようとするものである.

本研究では研究分担者とその研究協力者の,直接の研究交流をもっとも重視して進める.テーマ別課題研究として各研究分担者が研究協力者の助力をえて恒常的に実施するもので,以下にあげるテーマを重点的に推進した.1.力学系に対する長時間離散積分法(分担者:三井,篠原,前田,室田,吉田)2.時間遅れあるいは確率的要素を含む発展系の離散解法(分担者:三井,小藤,齊藤,鈴木)3.離散近似解の制度保証(分担者:三井,久保田,中尾,室田)4.発展系に対する高性能かつ安定な離散解法の開発と評価(分担者:三井,大野,中島)5.発展系に対する離散解法の並列化(分担者:三井,大野,小澤)また,本研究計画も参加して97年12月龍谷大学瀬田キャンパスにおいて応用数学分野の合同研究集会を開催し,多数の参加をうるとともに,分担者等から多くの講演発表を行なった.このように3か年計画の中間年度として,本年度多くの研究成果を収めることができ,その主要なものは裏面記載の発表論文のごとく分担者や研究協力者の手によって公刊され,また他にも多くの学術論文が準備中である.時間発展をともなう現象は理工学の多くの分野で現われ,その数理科学的取扱いは科学技術の中心的なテーマであるといって過言ではない.また,この現象に係わる問題は,数学に豊富な解析対象を提供してきた.本研究では,伝統的に異なった立場・領域で取り扱われてきた発展系の問題を,解法特に離故近似解法の観点で総合的に検討し,新たな結果をえようとするものである.本研究では研究分担者とその研究協力者の,直接の研究交流をもっとも重視して進める.テーマ別課題研究として各研究分担者が研究協力者の助力をえて恒常的に実施するもので,以下にあげるテーマを重点的に惟逸した.1.離散近似解の精度保証(分担者:三井,久保田,中尾,室田)2,時間遅れあるいは確率的要素を含む発展系の離散解法(分担者:三井,小藤,齊藤,鈴木)3.発展系に対する高性能かつ安定な離散解法の開発と評価(分担者:三井,小川,大野,中島)4,力学系に対する長時間離散積分法(分担者:三井,篠原,前田,室田,吉田)5.発展系に対する離散解法の並列化(分担者:三井,大野,小澤)98年10月名古屋大学において,本研究計画の分担者を中心に研究集会を開催し,研究発表を行うとともに,今後取り組むべき個別的な研究課題について集中討議を実施した.また,本研究計画も参加して98年12月龍谷大学瀬田キャンパスにおいて応用数学分野の合同研究集会を開催し,多数の参加をうるとともに,分担者・研究協力者から多くの講演発表を行なった.研究代表者・分担者は今年度海外で開催された研究集会(Leuven,Piracus etc)にも積極的に参加し,講演発表を行うとともに,各国の研究者と交流を深め,研究の進展に寄与することができた.このように3か年計画の最終年度として,多くの研究成果を収めることができ,その主要なものは裏面記載の発表論文のごとく分担者や研究協力者の手によって公刊され,また他にも多くの学術論文が準備中である.
女性農業者の資産形成とソーシャル・キャピタル

報告はI女性農業者の資産形成をめぐる諸問題II家族経営協定と認定農業者制度III女性農業者の起業活動と資産形成IV地域金融とマイクロファイナンスV生活資源とソーシャル・キャピタルからなる。女性農業者の生活資源を個人・家族・地域の3段階に分類した。(1)個人のヒューマンキャピタル(人的資本)レベル、(2)家族経営協定などによって作られる家族資源レベル、(3)生活改善や地産地消をもとにした起業活動などコミュニティやネットワークに関わるソーシャル・キャピタルレベル。女性農業者の資産形成につながる起業活動は、直売やレストラン経営、食育、グリーンツーリズムなど消費者ニーズに直結する傾向がある。安全で安心できる食の提供や、家族や地域の信頼関係構築、生活文化の継承などが公益性の強いものが多い。経営のアプローチは、生活の産業化により生産者と消費者が分断されことによって発生した生活能力の低下、人間関係の希薄化、生活文化の断絶、地球環境問題などの弊害を是正する。すなわち、女性農業者の資産形成により消費者ニーズにあった公益的要素の強い事業活動が進展すると考えられる。女性農業者の資産形成を指標として、金融をソーシャル・キャピタル形成の媒介として活用する工夫も求められる。まとめと考察としては(1)農山漁村のソーシャル・キャピタルでは生活改善で培われた生活文化継承の側面が重要である。(2)生活、農業、地域マネジメントに経営体の資金調達視点が、加わることが活動の活性化に寄与する。(3)個人資源と家族資源と地域資源の相互関連を考え全体的マネジメント能力の向上が望まれる。農家の資産とりわけ不動産は、男性経営主に所有名義を集中させ分割しないことを当然とする慣習・意識が残存しており、女性農業者と男性農業者では、農地・宅地・家屋などの所有名義に圧倒的な格差が存在する。農業委員やJA理事総代への女性登用など、農山漁村女性の資産形成を促進する具体策は展開されつつある。しかし、同じ政策が推進されても、女性農業者の経営参画・社会参画が進む地域もあれば、進展が見られない地域もある。それぞれの、地域社会での女性農業者のもつソーシャル・キャピタルの質と家族・家計が相互に作用し、女性農業者の資産形成を規定していると考えられる。まず県別状況を検討した。女性農業委員の活動としては、長野県が女性農業委員の数も多く特色ある活動の歴史をもつ。今回の研究では、熊本農業者の活動が行政を動かす契機となった点に注目した。例えば「くまもと女性農業委員の会」が農地移動適正化あっせん事業に基づく「あっせん譲り受け等候補者名簿」に関して「夫とともに農業経営に参画している女性が農地を取得する場合の売り手への優遇措置に関する要望」を決議し農林水産省に要望書を提出したことが、女性農業者の農地取得を促進する動きにつながった。また、「認定農業者」へ夫婦共同申請が「認定農業者制度の運用改善のためのガイドライン」(平成15年6月)により出来ることとなったが、全国440件のうち熊本県の共同申請は245件である。熊本県は国に先駆けて独自の連名申請という制度を導入していたことが夫婦共同申請に結びついている。夫婦共同申請には家族経営協定が締結されていることが条件となり単独での女性認定農業者の多い北海道、岩手、鹿児島と異なった動きをしている。農家にきめ細かい指導をしてきた生活改良普及から、認定農業者を重点的に支援する方向が出されるなか、地域のネットワークをつなぎ組合せ生活支援を行っていく方法の確立が女性農業者の資産形成には重要である。地域に根付いた活動への聞き取りを進める予定である。本年度の研究では、家族経営協定と経営改善計画(認定農業者申請における経営改善の計画書)の関係に注目し、地域と家族の生活経営(ライフマネジメント)が、資産形成に及ぼす影響を探った。■ソーシャル・キャピタルについて熊本・長野・茨城の以下の3点の特色を文献研究、インタビュー調査、アンケート調査で整理した。(1)戦後の地域の生活改善運動を土台にした生活研究グループの活動(2)家族経営協定の10年間の普及活動

(3)地産地消やグリーンツーリズムなど消費者と結びっいた起業活動インタビュー調査では、(1)の活動によって育てられた女性リダーが中心になって(2)・(3)の活動を展開していることが示された。その流れによって地域のソーシャル・キャピタルの類型化の可能性を探っている。■農地取得と家族経営協定・経営改善計画農地取得を含めた女性農業者の資産形成は、内閣府の男女共同参画社会基本計画(第2次)に掲げられている。女性農業者の農地の取得方法は、(1)親から単独で一括相続、(2)購入(3)親から他の相続人と分割相続(4)配偶者からの生前贈与である。それぞれの取得方法が、家族経営協定や経営改善計画といかに結びついているのか、検討中である。■資金の借り入れや金融資産の形成と地域の金融規制改革によって金融環境も大きく変動した。金融制度、資金融資に関して、女性農業者が置かれた立場と課題を聞き取り、マイクロファイナンス・地域金融に関しての教育・情報提供の課題を整理している。生産者であり消費者であるプロシューマーとしての女性農業者の潜在能力(ケイパビリティ)を引き出すためのアプローチを考察した。女性農業者の資産形成につながる起業活動は、直売やレストラン経営、食育、グリーンツーリズムなど消費者ニーズに直結する傾向がある。生活経営や農業経営、コミュニティのマネジメント目標は、安全で安心できる食の提供や、家族や地域の信頼関係構築、生活文化の継承などが公益性の強いものが多い。女性農業者のマネジメントを個人・家族・地域の3段階に分類した。(1)個人のヒューマンキャピタル(人的資本)レベル、(2)家族経営協定などによって作られる家族資源レベル、(3)生活改善や地産地消をもとにした起業活動などコミュニティやネットワークに関わるソーシャルキャピタルレベル。熊本・宮崎・兵庫・長野・群馬・栃木を中心にインタビュー調査を実施した。各段階のマネジメントの特徴は、地域や農業生産物の種類によって異なるが、生活の産業化により生産者と消費者が分断されことによって発生した生活能力の低下、人間関係の希薄化、生活文化の断絶、地球環境問題などの弊害を是正するアプローチをとる点は共通する。とりわけ、生活、農業、地域マネジメントに経営体の資金調達視点が、加わることが活動の活性化に寄与している。女性農業者の資産形成を指標として、従来農家の女性が無報酬で担っていた、衣食住、育児や介護に関わる家事労働、農産物を生産するのみならず加工し流通させる職業労働、地域密着NPO、コミュニティの活動などを見直し再編するしくみが必要である。
発想法による挨拶表現の歴史的変遷と地理的分布の総合的研究

平成30年度は、昨年度まで行っていた文献による人情本における挨拶表現について引き続いてデータ収集を行った。それと同時に、フィールワークによる挨拶表現の調査を、愛知県、京都市、佐渡島において行った。愛知県ではおもに尾張北部、京都市においては中央部において伝統的な商家の挨拶表現について、佐渡においては日本放送協会の『方言談話資料』に収められている3地点において特殊な発想法による挨拶表現の調査を実施した。平成30年度は文献の調査による成果として論文を1本執筆した。フィールドワークによる調査はまだ資料収集の段階にあるため、論文としてまとめられる状況にない。令和元年度にさらに調査をすすめて、その研究成果を公開したいと考えている。本年度の研究によって次のことが明らかになった。現在関西で使用されているオーキニは、ほぼ同時期に江戸においても使用されていたことがわかった。上方から江戸に伝播したのか、あるいは同時に発生したか今後の調査を待たなければならないが、どちらも「オーキニアリガトウゴザイマシタ」という表現からの省略形である。上方の用例はまだ1例にすぎないが、それも芸子によるものであったが、現在の状況を考えると、今後の調査によって用例は増えるものと思われる。一方、江戸においては若い女性の会話に出てきている。江戸においてはこのように使用されていたが、それが広まらなかったのは男性が使用する相づちのオーキニの影響と思われる。一方上方では、オーキニの前にダンダンという言い方が存在したことによって、副詞による感謝表現が発想法が存在していたことによって、流布したと考えられる。以上が、平成30年度の成果である。平成30年度は、フィールドワークを全国各地で実施しようと計画していたが、インフォーマントの選定が思うように進まず、調査が行えたのが、愛知県の尾張地方、京都市、佐渡島だけであった。挨拶表現についてのフィールドワークの方法がまだ確定しておらず、今回の調査においてもかなり手間取った。また1回の調査で明らかにできる点は少なく、何度も訪問する必要を感じた。フィールドワークとして、他に高知、熊本、山陰を考えていたが、熊本県はまだ復興の最中であり、フィールワークを実施しづらい状況にある、また、フィールドワークを行うしても、間に入って下さる方(研究者、あるいは地元の方)の協力が重要であり、高知県、山陰についてはそのような方を見つけることができなかった。平成29年度から行っていた文献調査に手間取ったこともその原因となった。文献資料によって論文1本を執筆することができたが、その資料について信頼できる資料を求めて、調査機関に通ったりしたため、フィールドワークの準備に遅れてしまった。令和元年度はフィールドワークを中心とした研究を行う予定でいた。しかし、これまでのフィールドワークを中心とした研究からは、最初期待していた程の成果が得られないのではないかと思われてきた。また調査のための準備(例えば、その地域の方言書の蒐集、そしてその方言書から挨拶表現の抜き出し、そしてその表現が出る場面の設定など)に時間がかかりすぎた。また、方言調査を行うにあたっても協力者が必要である。そのようなことを考えると、計画をしていた方言調査の地域を減らし、減らした分ある地域での調査を綿密に行った方がよりよい成果が得られるように思われる。そこで、令和元年度においては、方言調査については平成30度に調査を行った佐渡島を中心として、他に四国(特に高知県)や東北(福島県あるいは青森県)の調査に留めようと考えている。方言調査を減らした分、文献調査に時間をかけたいと思っている。文献調査においては、これまでの調査から考えると、まだまだおもしろい問題が出てくるように思われる。これまでの洒落本や人情本に加えて、噺本や歌舞伎の脚本の調査に取り組み、近世後期の挨拶表現の発想法について様々な点から明らかにしていく予定である。研究実施計画にも記したように、挨拶表現についての資料をとるために、大学図書館に所蔵されていない書籍や手元で活用したい書籍を購入した。例えば、江戸時代の挨拶表現を広く観察するために、人情本の翻刻が収載されている図書や、人情本や洒落本についての研究書を購入した。また、平成30年度以降に方言調査を行うために、品切れになる前に、各地に出版されている方言に関する書籍やCDなどを前もって購入した。提出した実施計画では、平成28年度は上方の挨拶表現の資料収集を行う予定であった。しかし、前半期は急に入ってきた別の研究に追われた。そのため資料をとる時間が限られてきた関係で、これまでも資料をとっていて、また平成29年度に行う予定であった江戸における挨拶表現についての資料採集を先に行なうことにした。なお、上方の挨拶表現についての調査は平成29年度に行う予定である。江戸における挨拶表現について、人情本を読みながら用例の採集を行った。その結果、江戸時代後期にはアリガトーゴザイマスが広く定着していることがわかった。また感謝表現に関していえば、上方専用の表現だと思われていたオーキニが、江戸においても感謝表現として使用されている例があった。また江戸においてもオーキニが副詞としてかなり利用されていることがわかった。人情本の主人公たちは、商人が多く、本店が上方である場合もあり、上方の影響を受けているのかもしれない。これについてはさらに上方の資料について調査が必要であり、またオーキニが江戸において定着しなかった理由についても考える必要がある。その他に、サヨーナラについては、まだ別れの挨拶表現としては確立できていない状況であった。別れの挨拶表現だとはっきりわかるのはサラバであった。

また断り表現を伴った感謝表現など、現代に通じるところが見えてきた。平成28年度は、漱石没後100年にあたっていたため、前半期はその関係のシンポジウム(4月30日台湾大学「漱石没後百年記念国際シンポジウム」、6月4日帝塚山学院大学第53回表現学会全国大会「漱石没後百年記念シンポジウム漱石の表現」)を担当した。また、それに伴う原稿執筆(「『こころ』における「といふ言葉」の働き」『表現研究』104号、「ことばの観察者夏目漱石」印刷中)に追われ、予定通りの調査を行うだけの時間を十分に確保することが不可能になった。そこで、平成28年度に行う予定でいた上方の挨拶表現についての資料調査を平成29年度に回し、これまで行っていて、ある程度の見通しがついていて、平成29年度に行う予定でいた江戸における挨拶表現を先に行うことにした。このように年次計画の変更によって対処したが、前半期に担当した用事のために、調査研究が遅れているのが現状である。昨年度(平成28年度)と同様に、挨拶表現のデータを得るために、本学図書館に所蔵されていない書籍や、手元において活用したい書籍の購入を行った。例えば、太平書屋から刊行されている人情本の影印本や、黙阿弥全集を購入した。刊行されていない文献については、所蔵されている研究機関に出かけて調査を行った。なお、本研究に近い分野である感動詞の研究に関する科研による発表会があったので、情報を得るために、その研究会にも参加した。平成29年度は、江戸時代の人情本や洒落本を読みながら、データ収集の作業を実施した。また昨年度調査の遅れていた上方の用例収集のために、上方の洒落本を用いてデータ収集を実施した。2年間の調査によってかなり多くのデータが集まったが、まだ整理することができていない状況である。平成29年度は、本研究に関する論文を2本執筆し、研究発表として台湾の銘傳大學における国際学会に参加して口頭発表を行った。またこの学会における発表内容を纏めた論文集にも執筆した。本年度に明らかにしたことは、関西で使用される感謝表現のオーキニと同じ語形が江戸にも見られたが、両者に意味の異なりがあることを指摘した。ただし、論文執筆後の調査によって、若い世代では関西と同様なオーキニ使用も見られたが、後世の状況からいえば定着できなかったようである。これについては、次年度以降の課題とした。また感謝表現においては、現代もよく使用する断り表現を伴った感謝表現が江戸後期に既に使用されていたことを明らかにした。また別れの挨拶においては、サラバからサヨーナラの間にゴキゲンヨーの使用があり、このゴキゲンヨーによって、別れの挨拶表現が去る側だけでなく見送る側の表現ともなった。そしてサヨーナラによって去る側も見送る側も同じ表現形式を使用できる状況ができたことを明らかにした。平成29度は、研究計画に記したように、江戸時代後期の江戸における挨拶表現の調査を昨年度(平成28年度)に引き続いて行った。主として、人情本や洒落本における挨拶表現の抜き出し作業を実施した。
超臨界金属流体のミクロにゆらいだ電気伝導度

最近、液体-液体1次相転移が注目を浴びている。原子や分子が凝縮して金属になる過程は、原子配置が電子状態と密接に関連し合うので、このような1次相転移と全く無縁ではないと考えられる。実際半世紀以上も前に、ノーベル賞物理者のランダウは、流体水銀の金属-非金属転移が1次相転移である可能性を指摘した。我々は、金属-非金属転移のメカニズムを探るためこれまでSpring-8の放射光を利用して超臨界流体水銀の構造研究を行ってきた。金属-非金属転移領域の流体水銀に対して高分解能非弾性X線散乱実験を行った結果、X線で観測されるミクロな音速が、超音波で観測される音速の3倍も早いことを見いだした。転移の際にミクロな音速が早くなるのは、流体中のある原子が金属状態にあるか非金属状態にあるかで隣接原子間相互作用が異なり、圧力のゆらぎが生成することによると説明できる。我々はこの成果をPhysical Review Lettersに公表した。さらに流体水銀を対象にX線小角散乱実験を行い、測定データを詳しく解析した。流体水銀が体積膨張して金属から非金属へ徐々に転移していく際、1020Å程度の相関距離をもつドメインが出現することが明らかになった。小角散乱実験により、金属-非金属転移の際、ミクロなドメインが出現すること見いだされたことで、非弾性X線散乱から推定した圧力のゆらぎとは、金属的ドメインと非金属転移的ドメインの間で圧力が不連続に変化することであると推定される。金属-非金属転移に伴い圧力が不連続に変化する理由は、伝導電子のフェルミ縮退圧があるかないかの効果であると考えられる。現在このような成果をまとめて、Physical ReviewLettersに投稿中である。原子や分子が凝縮して金属になるとき、どのような過程を経て金属になるのか、逆の見方をすれば、金属はどのように膨張・解離して絶縁体になるのか。この物質科学における最も基本的な問いに答えるために、我々は超臨界金属流体の研究を行ってきた。放射光の強力な高輝度X線を用いたX線回折実験から求められた局所構造の変化は、水銀が体積膨張するとき、原子間距離が増大するのではなく配位数が減少することが明らかになった。放射光を用いたX線小角散乱実験の結果から、流体水銀が体積膨張して金属から非金属へ徐々に転移していく際、20Å程度の相関距離をもつ弱いゆらぎが出現することを見いだした。さらに金属-非金属転移領域の流体水銀に対して高分解能非弾性X線散乱実験を行った結果、X線で観測されるミクロな音速が、超音波で観測される音速の3倍も早いことが明らかになった。転移の際にミクロな音速が早くなるのは、流体中のある原子が金属状態にあるか非金属状態にあるかで隣接原子間相互作用が異なることによると説明できる。このように全属-非金属転移に伴って弱いゆらぎが生成されていることがX線を用いた実験から明らかにされてきた。このようなゆらぎが電気伝導度などの物性値にどのように影響を及ぼしているのか大変興味深い。電気伝導度の時間ゆらぎなどが測定できれば、ミクロなゆらぎがマクロな物性にどのように反映しているのか、重要な知見を得ることができる。我々はX線散乱実験を行うため、サファイアを精密に加工して試料容器を製作してきた。この技術を応用して電気伝導度を精密に測定できる試料容器を開発しているところである。
炎症反応における遺伝子発現パターンを決定するIκB－ζの刺激特異的転写後制御機構

転写制御因子IκB-ζは、免疫系の様々な細胞において必須の役割を担っていることが明らかとなっていた。しかし、B細胞においてはその機能は未だ不明であったため、B細胞におけるIκB-ζの機能についてIκB-ζ欠損マウスを用いて解析した。まず、抗体産生について解析を行った。IκB-ζ欠損マウスはT細胞依存性抗原、T細胞非依存性抗原タイプ1に対する抗体が正常に誘導される一方、T細胞非依存性抗原タイプ2のTNP-LPSを抗原として投与した際は抗原特異的な抗体産生が著しく損なわれていた。この原因を解析する目的で、抗体産生までの重要なステップである増殖、形質細胞分化、クラススイッチを解析した結果、IκB-ζ欠損B細胞は、LPS刺激に伴う増殖、形質細胞分化、クラススイッチすべてが低下していた。さらに形質細胞分化が低下する理由として、形質細胞分化の鍵となる制御因子Blimp-1の発現がIκB-ζ欠損により誘導されない事を明らかにした。またクラススイッチにおいても、組換え酵素であるAicdaの発現がIκB-ζ欠損によって顕著に低下している事を明らかにした。続いて、IκB-ζによるAicdaの発現制御機構を解析した。過去の報告からAicdaの発現制御において、種間で保存された4か所の遺伝子領域が重要である事が明らかとなっている。IκB-ζ欠損B細胞におけるこれらの領域のヒストンアセチル化をクロマチン免疫沈降により解析した結果、転写開始点近傍領域とイントロンにおけるアセチル化が減少していた。これまでT細胞依存性抗原とT細胞非依存性抗原による抗体産生において、Aicdaの発現誘導に伴うクラススイッチは同様の機構により制御されていると考えられてきた。IκB-ζのような転写を制御する因子が抗原刺激特異的に機能し、抗体産生を制御する機構はこれまでの概念を覆す重要な発見であると考えている。IκB-ζは、LPSなどの細菌成分をToll様受容体を用いて認識した際に自然免疫系の細胞で発現が誘導される転写制御因子である。このIκB-ζの発現において、転写後制御が必須の役割を担う事からその全容解明を目標に研究を行っている。22年度の研究では、IκB-ζmRNAの安定性を制御するRNA結合タンパク質の精製及び同定を行った。実験手法として、Sl aptamerと呼ばれるstreptavidinと単離に十分な結合力を持つRNA tagを用いて精製し、質量分析による同定を行った。その結果、IκB-ζmRNA3'-UTR特異的に結合するタンパク質を2種類同定する事が出来た。また、Sl aptamerによる精製では、Aptamerに対して非特異的に結合するタンパク質が多く、目的のバンドが覆われている可能性が示唆された。そこで、MBL社製品のRiboTrap kitを用いて、aptamerとは異なる手法により、1-165ntに結合するタンパク質の精製を試みた。その結果、Sl aptamerを用いた精製とは異なる位置に新たな結合タンパク質を検出する事に成功した。また、IκB-ζの転写後制御機構が一見かけ離れたシグナル経路を構成する獲得免疫系B細胞の抗原受容体刺激においても機能するか検討を行った。その結果、自然免疫系での制御同様にIκB-ζmRNA3'-UTRが獲得免疫系B細胞においても、その制御に必要十分である事を明らかにした。IκB-ζが炎症反応の重要な制御因子である事から、これらの制御機構解明は、単なる一遺伝子の発現機構解明という意味合いだけでなく、炎症反応や免疫応答の新たな制御機構解明に繋がると期待される。IκB-ζは、LPSなどの細菌成分をToll様受容体(TLR)を用いて認識した際に自然免疫系の細胞で発現が誘導される転写制御因子である。このIκB-ζの発現において、転写後制御が必須の役割を担う事からその全容解明とB細胞におけるIκB-ζの機能解明を目標に研究を行っている。23年度の研究では、IκB-ζmRNAの転写後制御解明を目標に、IκB-ζmRNAの安定性を制御するRNA結合タンパク質の精製を試みた。実験手法として、MBL社製品のRiboTrap kitを用いて、IκB-ζmRNA 1-165ntに結合するタンパク質の精製を試みた。その結果、165-ntに特異的に結合するタンパク質を複数検出する事に成功した。さらに、それらのタンパク質を質量分析により同定した。また、IκB-ζの転写後制御機構がB細胞の抗原受容体刺激(BCR)においても機能するか検討を行った。23年度は、実際にIκB-ζmRNAの半減期を測定し、BCR刺激により半減期が遅延する事を明らかにした。また、BCR刺激時の転写の制御も解析し、BCR刺激時に活性化するIκB-ζの転写制御は、転写因子NF-κBに依存している事を見出した。一般にB細胞はBCR以外にもTLRを発現しており、ウィルスなどを認識する際はBCRとTLRに同時に刺激が入る。そこで、BCRとTLRに同時に刺激をかけた際のIκB-ζの発現を解析し、同時刺激によりIκB-ζの発現が相乗的に上昇する事を見出した。

この結果は、ウィルス感染などの状況においてIκB-ζが重要な役割を担っている事を示唆する結果となった。さらに、IκB-ζがB細胞において発現する意義を明らかにするため、IκB-ζ欠損マウス由来のB細胞と野生型マウス由来のB細胞を用いて、DNAマイクロアレイを行い、IκB-ζの標的遺伝子の探索を行った。その結果、サイトカインをはじめとする複数の遺伝子発現に大きな変化が観察された。転写制御因子IκB-ζは、免疫系の様々な細胞において必須の役割を担っていることが明らかとなっていた。しかし、B細胞においてはその機能は未だ不明であったため、B細胞におけるIκB-ζの機能についてIκB-ζ欠損マウスを用いて解析した。まず、抗体産生について解析を行った。IκB-ζ欠損マウスはT細胞依存性抗原、T細胞非依存性抗原タイプ1に対する抗体が正常に誘導される一方、T細胞非依存性抗原タイプ2のTNP-LPSを抗原として投与した際は抗原特異的な抗体産生が著しく損なわれていた。この原因を解析する目的で、抗体産生までの重要なステップである増殖、形質細胞分化、クラススイッチを解析した結果、IκB-ζ欠損B細胞は、LPS刺激に伴う増殖、形質細胞分化、クラススイッチすべてが低下していた。さらに形質細胞分化が低下する理由として、形質細胞分化の鍵となる制御因子Blimp-1の発現がIκB-ζ欠損により誘導されない事を明らかにした。またクラススイッチにおいても、組換え酵素であるAicdaの発現がIκB-ζ欠損によって顕著に低下している事を明らかにした。続いて、IκB-ζによるAicdaの発現制御機構を解析した。過去の報告からAicdaの発現制御において、種間で保存された4か所の遺伝子領域が重要である事が明らかとなっている。IκB-ζ欠損B細胞におけるこれらの領域のヒストンアセチル化をクロマチン免疫沈降により解析した結果、転写開始点近傍領域とイントロンにおけるアセチル化が減少していた。これまでT細胞依存性抗原とT細胞非依存性抗原による抗体産生において、Aicdaの発現誘導に伴うクラススイッチは同様の機構により制御されていると考えられてきた。IκB-ζのような転写を制御する因子が抗原刺激特異的に機能し、抗体産生を制御する機構はこれまでの概念を覆す重要な発見であると考えている。IκB-ζmRNA 1-165ntに結合するタンパク質の同定手法の決定が難解であったため、当初の予定よりも同定が遅れてしまった。しかし、遅れたものの同定に至っているので、今後の解析を迅速に行いたい。今後は、同定したRNA結合タンパク質のIκB-ζの転写後制御に対する関与をsiRNAを用いたknock downにより、解析していく。また、B細胞におけるIκB-ζの発現制御はほぼ解明できたものの、シグナリングに関しては不明な点が残っているため、阻害剤を用いた解析により重要なシグナル因子を同定したい。B細胞におけるIκB-ζの機能解明に関しては、前年度のDNAマイクロアレイの結果から興味深い遺伝子発現変化を発見した事から、今後はその結果をもとにB細胞におけるIκB-ζの機能を個体レベルで解明する予定である。
顔面補綴物の色調に関する研究

顔面補綴物の主たる機能は,顔面欠損を被服し,審美性の回復を目的としている.従来から用いられているシリコーン樹脂が用いられているが,患部に適合した形態に整形し患者の皮膚に調和した色調を与えることが,不可欠であるが表面の着色だけでなく,顔面補綴物深層部すなわちシリコーン樹脂そのものの色調も重要になってくる。それらの彩色は熟練を要し,診療室にて長時間拘束されることとなる.その彩色法を簡便しするために様々な方法が考案されているが一般的な術式として定着してはいない.そこで,比較的入手しやすい肌色色票「スキーン・トーン・カラー」を用い, CCMにてシリコーン樹脂に色調を再現し,色の配合を明示し一般に普及し易くする事が目的である.この配合比などが,一般に普及すれば,初心者だけでなく熟練者にもある程度の目安になりえ,彩色の時間短縮につながると考えられる.今回は従来からある,肉眼によって比較判断する視感的測色法のシェイドガイド,日本色彩研究所にて製作されている、肌色色票「スキーン・トーン・カラー」を用いた。これは,彩度(C3,C4,C5),明度(V4.0-V8.5),色相(1YR,3YR,5YR,7YR,9YR)の全145色に分類されており,それらを接触型の物理的測色計(コニカミノルタ社製CM-700)を用いて計測を行い,国際照明委員会(CIE)にて制定され、現在最も一般的なLab表色系にて、色相、明度(L*)、クロマティクネス指数(a*、b*)、彩度(C*)などの計測を行った.さらに肌色計測ソフトにてそれぞれ、ヘモグロビン指数、メラニン指数も計測し、日本人顔面色の測定データーと比較し使用頻度の高い色調を選び出す.黄色人種である日本人顔面色の測定データーと比較し使用頻度の高い色調を選び出した。