hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
１次リンパ組織の微小環境特異的エピジェネティック制御の解明

しかし(1)が難航しており、さらに研究内容に関し批判をいただいている状況で、この部分に関しては根本的な再考が必要と思われる。(2)に関しては、現在、eed-cKOはキメラマウスまで出来ている状況、mel-18-cKOはES細胞樹立まで出来た状況で、これからmicro-injectionを行う段階である。また、Ezh2-cKOは譲渡していただけることになった。また脱ユビキチン化酵素のcKOも検討している。胸腺での正負の選択に関する事を検討するためにH-Y Tg, OT-1 Tgなどを含めいくつかのTCR Tgを譲渡していただく考えである。(3)に関しては、「研究目的」にも記載した様に、Bmi-1KOマウスの研究から、Tリンパ球においてはp19Arf依存性であるが、胸腺上皮細胞ではp19Arf非依存性であった事から、同じBmi1KOの胸腺内において、T細胞と胸腺上皮細胞(TEC)におけるエピジェネティック制御ネットワークが異なる事が考えられた。その標的遺伝子特異性(依存性)の差異を説明する可能性の一つがlong-noncoding RNA(lncRNA)である。PRC1/2蛋白質複合体と結合するlincRNAの中の一つがANRILでありINK4b-ARF-INK4a遺伝子座のantisense orientationから転写される事が最近発見された。現在、まだ初期確認段階であるが、胸腺内のリンパ球でのみ発現しており、TECでの発現は我々の手では確認できていない。上記の様に(2)(3)はほぼ予定どおりに目標を達成できているが、(1)の状況が複雑になった。現在、リンパ球の各分化段階ごとに、PRC1複合体のどのフォームがドミナントであるかを同定しようとしている。さらにその機能解析法として、PcGの発現ベクター(またはshRNA発現ベクター:レトロウイルス、またはレンチウイルス)を用いて、FTOCではなくRTOCを用いて細胞分化解析、single cell程度のごく少数の細胞による蛋白質解析技術の導入・共同研究を検討している。上記の様に(2)(3)はほぼ予定どおりに目標を達成できているが、(1)が達成できていないし、実験デザインに対する批判を受けており再考の余地があると考えている。批判を受けながら予定通り進むよりは、情報収集に勤め再考した方がより当初の研究目的に沿った形になると考えている。PRC1複合体については、我々を含めいくつかのグループがmel-18を含む物とbmi1を含むアイソフォームの存在を確認してきた。さらに最近、Cellに、RYBPを含む複合体とCBX7を含む複合体の2種類の存在が報告され、PRC1複合体の種類が増加中である。しかし最大の批判は、「いくらリンパ球細胞株を用いて蛋白質複合体の精製を行っても、自然な胸腺内リンパ球とは異なり、分化・成熟が出来ない不死化した細胞であり、そこから蛋白質複合体を精製しても正常を反映していないのでは意味が無いのではないか」、という意見である。現在、PcGの発現ベクター(またはshRNA発現ベクター:レトロウイルス、またはレンチウイルス)を用いて、FTOCではなくRTOCを用いて細胞分化解析、single cell程度のごく少数の細胞による蛋白質解析技術の導入・共同研究を検討している。研究項目(1)の最大の技術的ネックは、「いかに少ない細胞数から蛋白質複合体のサブユニット組成のプロテオーム解析が出来るか?」である。
単一細胞バイアビリティイメージング

本年度は以下の結果を得た。(1)マイクロスタンプ法などによって,単一細胞レベルで細胞を配列させることができた。電気化学顕微鏡による呼吸量計測によるバイアビリティイメージングを行い,細胞パターンの形状が細胞活性に与える影響を調べた。また,心筋細胞のパターンにおけるギャップ結合の活性についても薬理学的な応答を評価することができた。(2)バリノマイシンの添加に伴ってE.coli細胞の膜内外にカリウム拡散電位が形成され、蛍光強度が増大して行く様子が,Bis-oxonol型の膜電位感受性色素であるDiBAC_4(3),および共焦点レーザー顕微鏡を用いて観測できた。また,脂質の再構成膜小胞を作製して膜内外のpHを^<31>P核磁気共鳴で観測することも試み,脂質にコレステロールを加えて作製した膜小胞では、膜内外のpH差が観測され、それが24時間以上持続できることが明らかとなった。(3)光トラップで好中球内顆粒を捕捉したのち,トラップの中心を1秒間矩形波状に100nm変位させ,顆粒の動きを4分割光ダイオードで分析した。また,毒素タンパク質1ukFとHSのシステインミュータントを作成し,そのシステインに蛍光をラベルした.この毒素タンパク質と血球を反応させて,タンパク質の膜上での集合の様子を,1分子蛍光観察から決定した.(4)サクラマスの魚卵について,受精,孵化,ストレス負荷時における生体内酸化還元機能および形態変化の情報を得るために,in vivo ESR計測および,in vivo Optical Coherent Tomography (OCT)計測を行った。ポータブルESR装置を飼育現場に搬入して測定を行ったところ,正常卵のみに呼吸に起因すると考えられるスピンプローブ剤のESR信号強度がリズムを刻んで増減する現象を捉えることができた。本年度は以下の結果を得た.(a)電気化学顕微鏡を用いた細胞機能のイメージング:プローブであるマイクロ電極を,高精度XYZステージに取り付け,このステージ系と倒立顕微鏡,マルチポテンシオスタット,ステージ駆動制御系と組み合わせることにより,細胞を対象とした電気化学顕微鏡を作製した.また,システムを一元管理するためのソフトウェアを開発した.このシステムを用いて細胞近傍の酸素濃度をマッピングすることにより細胞活性をイメージングできることが予備的検討により明らかとなった.(b)共焦点レーザー顕微鏡を用いた細胞形態のイメージング:共焦点レーザー顕微鏡を用いて、光合成細菌および植物(ハネモ)プロトプラストの形態特に膜構造イメージングを行った.黄色硫黄光合成細菌の膜構造は複雑で細胞質内部まで観入していることが観測された.また,プロトプラストの膜構造生成過程をイメージングできた.(c)モータータンパク質のイメージング:超高感度蛍光顕微鏡を用いて,一分子の蛍光性ATPと精子鞭毛ダイニンの化学反応を直接イメージングすることに成功した.さらに,ダイニンをポリエチレンビーズに結合させ,ビーズの動きを高精度でイメージングすることにより,ダイニン-分子の力学特性を明らかにした.(d)細胞内ラジカルをイメージングするための小型ESR装置の開発:ESR装置の電磁石と表面コイル型共振機を一体化し,直径数mmの卵細胞に適用可能な小型プローブヘッドを作製した。このヘッドの基礎特性を,TEMPOL溶液を用いて明らかにした.(e)細胞内一分子イメージングのための超高感度システムの作製:細胞内分子の動的挙動を観測するために,超高感度で偏光計測を可能としたエバネッセント蛍光イメージングシステムを開発し,ATPaseの回転運動を解析した.本年度は以下の結果を得た.1)電気化学顕微鏡による細胞機能と形状の同時イメージング:白金マイクロディスク電極をプローブとし、植物細胞(ハネモ)プロトプラスト近傍の酸素濃度計測に成功した.また,この酸素濃度を二次元マッピングすることにより細胞の光合成および呼吸活性をイメージングできた.2つの白金ディスクが先端部に配置されたデュアルマイクロディスク電極をプローブとした場合には,細胞の形状と光合成活性,あるいは形状と呼吸活性の同時イメージングが可能であった.2)共焦点顕微鏡による細胞内構造のイメージング:多核単細胞緑藻類であるハネモの原形質から成体への再生過程をリアルタイムで観測することに成功し、プロトプラストの膜表面にクロロプラストが局在していることなど、細胞内構造に関する3次元的情報を得た。3)モータータンパク質キネシンのイメージング:細胞分裂や物質輸送に関与しているモータータンパク質であるキネシンを、ポリスチレンビーズに結合させ,これを微小管と混ぜるとキネシン・ビーズ・微小管複合体が細胞骨格のような構造を形作ることを明らかにした。これにCaged-ATPを加え,紫外線を当てて運動を開始すると細胞運動のような形態変化が観測された。4)ESRスピンプローブ法によるサケ科サクラマス魚卵の酸化還元機能解析:魚卵のin vivo計測の結果、受精直後に存在する還元機能はすみやかに低下したが、10日目に急激に活発になり、その後孵化までほとんど消失することが分かった。また、携帯可搬型ESR装置の開発も行いプローブヘッドと発振器の小型化に成功した。5)磁気ピンセットシステムの開発:電磁石による磁場回転システムを試作し、F1-ATPaseのトルクの測定を開始するとともに、時計回り回転によるATP合成とその検出を試みた。また、鉛直方向に向いた磁場でDNAの端に付けた磁気ビーズをつり上げることにより、RNA合成酵素によるDNAの右ねじ状回転の観察に成功した。本年度は以下の結果を得た.

1.単一動物細胞のバイアビリティ評価法として、電気化学顕微鏡による呼吸量計測法と、生死判定用蛍光試薬を用いた方法とを比較して各々の特長を整理し、相補的活用への指針を得た。HeLa細胞を用いた実験では、エタノールなど細胞膜構造にダメージを与えるタイプの刺激に対しては蛍光試薬法が有効であるのに対し、シアン化カリウムなどによる活性変化は電気化学法によって迅速に検出可能であることが分かった。2.Bis-oxonol型のアニオン性膜電位感受性色素であるDiBAC_4(3)を蛍光プローブとし,共焦点レーザー顕微鏡により、膜電位変化のイメージングを試みた。カリウム溶液に細胞を懸濁した後,バリノマイシンの添加により細胞の蛍光強度が時間と共に増大していく様子を共焦点レーザー顕微鏡によって観測し,膜電位の過渡変化を追跡することが可能となった.3.光トラップで好中球内穎粒を捕捉し,その後極微小振動させることにより,細胞骨格および細胞質の粘弾性特性に関する検討を行った.その結果,遊走中の好中球では、仮足進展部の粘弾性が体部、尾部に比べて低くかった.これは,クチン等の細胞骨格が疎であることを示唆する.4.in vivo ESR法により,サケ科サクラマス魚卵の酸化還元機能を受精から孵化まで調べた.その結果,孵化するまで酸化能あるいは還元能は極めて弱いことが明らかとなった.また,魚卵にストレスを負荷すると尾芽体発現時期に高い還元能を示したことから,魚卵の胚盤の部分にある血液脳関門のような防御機構が,正常な発育状態にある場合のみ正常に動作したものと考えられる.このような計測を飼育現場で行うために,ポータブルESR装置の開発を行った.さらに,魚卵のOCT断層画像の取得を試みた結果,魚卵内部の構造変化に関しての知見が得られることが分かった.本年度は以下の結果を得た。(1)マイクロスタンプ法などによって,単一細胞レベルで細胞を配列させることができた。電気化学顕微鏡による呼吸量計測によるバイアビリティイメージングを行い,細胞パターンの形状が細胞活性に与える影響を調べた。また,心筋細胞のパターンにおけるギャップ結合の活性についても薬理学的な応答を評価することができた。(2)バリノマイシンの添加に伴ってE.coli細胞の膜内外にカリウム拡散電位が形成され、蛍光強度が増大して行く様子が,Bis-oxonol型の膜電位感受性色素であるDiBAC_4(3),および共焦点レーザー顕微鏡を用いて観測できた。また,脂質の再構成膜小胞を作製して膜内外のpHを^<31>P核磁気共鳴で観測することも試み,脂質にコレステロールを加えて作製した膜小胞では、膜内外のpH差が観測され、それが24時間以上持続できることが明らかとなった。(3)光トラップで好中球内顆粒を捕捉したのち,トラップの中心を1秒間矩形波状に100nm変位させ,顆粒の動きを4分割光ダイオードで分析した。また,毒素タンパク質1ukFとHSのシステインミュータントを作成し,そのシステインに蛍光をラベルした.
ケロイド及び肥厚性瘢痕の分子病態と抑制遺伝子の解明-無瘢痕外科をめざし

(1)Mda-7遺伝子とそのタンパクを誘導・発現しても、ケロイド線維芽細胞の増殖抑制は見られない。(2)Thrombinはケロイド細胞増殖促進効果を示す。(3)ビオチン化cDNAをoligo-nucleotides結合マイクロビーズにhybridizeさせ、R-PE標識アビジンで検出する蛍光マイクロビーズアレイ法を開発した。(4)C-erb-B2とc-erb-B4のNorthern解析では、ケロイドと正常線維芽細胞株の間に差異を認めない。(5)正常細胞1株を対照に、ケロイド線維芽細胞2株につき約2万種プローブ"DNAマイクロアレイで解析し、20種のケロイド細胞特異発現遺伝子を見出した。(6)Par-1の特異発現はケロイド線維芽細胞1株にのみ見られ、Mda-7には特異発現性が見られない。(7)Par-1およびMda-7遺伝子発現のリアルタイムPCR解析では、千種プローブマイクロアレイ解析とは相反する結果を得た。(8)ケロイド線維芽細胞1株のマイクロアレイ解析によりデコリン遺伝子発現に約50%の低下、リアルタイムPCR解析でデコリンに関連するTGF-β1遺伝子発現に約50%の低下が示された。(9)有遺伝素因性ケロイド患者(5例)の患部組織由来線維芽細胞5株、無素因ケロイド患者由来線維芽細胞2株、他の疾患の皮膚組織由来線維芽細胞3株を新規樹立した。(10)有遺伝素因性ケロイド細胞系と原組織につきデコリン及びルミカン遺伝子とそのタンパク発現を、リアルタイムPCR法と免疫組織化学的染色法で調べたが、ケロイドと正常組織・細胞の間に差異を認めない。(11)有遺伝素因性ケロイド線維芽細胞5株それぞれにつき、正常線維芽細胞3株混合を対照に、同時に2万種プローブマイクロアレイ解析し、5株のケロイド線維芽細胞に共通・特異的発現の遺伝子を47種同定した。その中12種はup-regulated gene、35種はdom-regulated geneである。(12)コラーゲン形成に関与する遺伝子群につき、そのプロモータ領域の塩基配列特異性を検索中である。平成14年度15年度の半ばまでの研究計画として、ケロイド(耳介部および他部位)および肥厚性瘢痕組織細胞の、(1)遺伝子とタンパクの詳細かつ総括的な発現性を解析し、その機能についてより詳細に解析することを目的として、蛍光マイクロビーズアレイ法の開発を進めた。その結果、ミクロビーズに結合させた60-merの参照用遺伝子のoligo-nucleotidesに対し、各細胞から抽出したmRNAに対するBiotin-標識cDNAを作成しhybridizeさせ、Phycoerythrin-標識Avidinによる検索が可能であることを示すことができた。同時に、(2)現在明らかになっているMda-7増殖抑制遺伝子および関連タンパク(Mda-7/II/24)を、Interferon β+Mezereinで誘導・発現させた場合の、培養耳介部ケロイド線維芽細胞の増殖動態を調べた結果、この組み合わせによっては、それほど顕著な増殖抑制作用を示すことができなかった。

そこで、(3)現在まで我々が耳介部ケロイド線維芽細胞に特異的発現を認めた8種の遺伝子の中、Thrombin Receptor (PAR-1)に注目し、培地中にThrombinを投与したときの細胞増殖への影響を調べた結果、Thrombinはケロイド細胞の増殖を促進させることが示された。また、(4)新たに、ケロイド組織由来培養線維芽細胞株、および、対照となるヒト正常皮膚組織細胞の初代培養・継代例数を増やし、検索対象を拡げることが可能となった。1、約千種のプローブを含むDNA-microarray法による検索で、ケロイド線維芽細胞培株において特異的発現性が示されていた8種の遺伝子の中、erb-B oncogeneについて重点的に調べた結果、それら増殖関連遺伝子群の中、c-erb-B2及びc-erb-B4はNorthern法による検索では、正常皮膚由来線維芽細胞株と比較して差異が認められなかった。2、新たに樹立した細胞株の中、ケロイド線維芽細胞株2種及び正常線維芽細胞株1種を用い、約2万種のプローブを含むDNA-microarray法により、ケロイド組織細胞特異的な遺伝子発現につき検索したところ、新たに20種のケロイド組織細胞特異発現遺伝子を見出した。3、千種プローブによるmicroarray解析では、Par-1遺伝子のケロイド特異的発現、及び、正常細胞でのMda-7遺伝子の高発現が推定されたが、後の2万種プローブによる検索では、Par-1遺伝子の特異的発現が1種のケロイド線維芽細胞にのみ見られ、Mda-7遺伝子発現特異性は見られなかった。4、Real-Time PCR法により、Par-1およびMda-7遺伝子発現についてより定量的に調べたところ、千種プローブを含むmicroarray解析によるものとは相反する結果を得た。この点につき、今後、より詳細な解析が必要とされる。5、2万種プローブによるmicroarray解析による20種の特異的発現遺伝子の中、collagen形成及び線維芽細胞増殖に関わることが知られるproteoglycanの一であるDecorin遺伝子発現が、ケロイド線維芽細胞では正常細胞に比し約50%低い発現率を示すことが判明したので、Decorin分子と共役して作用すると考えられるTGF-β1遺伝子発現についてReal-Time PCR法により調べたところ、ケロイド組織細胞では約50%の発現性の低下を示すことが知られた。6、現在、Decorin遺伝子及びTGF-β1遺伝子発現の低下が、ケロイド細胞増殖及びそのcollagen形成に与える影響について検索中である。1、遺伝的にケロイド素因を保持すると思われる(肉親・兄弟姉妹にケロイド発症)患者の患部組織由来培養線維芽細胞株を5例、また、遺伝的素因が認められないケロイド組織由来培養線維芽細胞株2例、および、ケロイド以外の疾患の皮膚組織由来培養線維芽細胞株3例を新たに樹立した(全例、同意書を取得)。2、Small leucine-rich proteoglycansの中lumicanおよびdecorinは、細胞行動やcollagen fibrinogenesisに関与することが知られている。
アラビドプシスにおけるサイトカイニン水酸化酵素遺伝子の機能解析

アラビドプシスにおいてイソペンテニルアデニン(ip)型サイトカイニン(CK)をトランスゼアチン(tZ)型CKへ水酸化する酵素はCYP735A1およびCYP735A2遺伝子にコードされている。遺伝子破壊株cyp735a1 cyp735a2はtZ型CKの蓄積量が野生株の1%程度しかなく、地上部の生育抑制の表現型を示す。CK応答性遺伝子であるA型ARR遺伝子群の発現を定量的RT-PCR法で詳細に解析したところ、前年度に行ったアレイ解析の結果とは異なりcyp735a1cyp735a2根においてもA型ARR遺伝子群の発現量低下は観察された。ただし、地上部での発現量低下の割合の方が著しく、これらの結果より、cyp735a1cyp735a2株ではCK情報伝達能が低下しており、特にそれが地上部で著しいために地上部の生育阻害を引き起こしていると推測した。ip型、tZ型CKの生理作用に違いがあるかを調べるために、cyp735a1cyp735a2をipまたはtZで3時間処理し、根および地上部における遺伝子発現パターンをaffymetrix社のATH1ゲノムアレイを用いて網羅的に解析した。発現量の比(tZ処理/iP処理)が2以上の遺伝子は22個、逆に1/2以下の遺伝子は3個存在した。その中にはNACやHAT等の植物の形態や分化の制御に関与していることが知られている転写制御因子の遺伝子ファミリーに属するものが含まれており、これらの遺伝子がtZ型、ip型CKによる地上部の形態制御の差異に関与する可能性が推察された。アラビドプシスにおけるサイトカイニン(CK)水酸化酵素遺伝子CYP735A1およびCYP735A2の生理機能を明らかにするため、T-DNA挿入変異株の解析を行った。野生株と比較し、cyp735a1株およびcyp735a2株において形態およびCK組成の差異は観察されなかった。二重変異株においては水酸化反応の基質となるイソペンテニル型CKが増加し、水酸化されたトランスゼアチン(tZ)型CKが野生株の1%以下に減少するというCK組成の変化がみられた。このことは二つの遺伝子がアラビドプシスの主要なCK水酸化活性を担っていることを示唆している。また、二重変異株では地上部の成長が抑制され、葉の大きさや草丈は野生株の50%程度であった。花茎数の増加も観察された。これらの形態の変化はtz型CKの投与により相補されたことから、tZ型CKの減少が形態変化の原因であると推測している。一方、根の成長に関しては野生株との違いは観察されなかった。遺伝子発現レベルで比較するためアレイ解析を行ったところ、CK情報伝達に関与し、CKにより正に発現調節されるA型レスポンスレギュレーター遺伝子群の発現が二重変異株の地上部において抑制されていたことから、tz型CKの減少は地上部においてCK情報伝達の抑制を誘引すると考えている。それぞれの遺伝子についてプロモーターの制御下でGUS遺伝子を発現する形質転換植物を作出し、発現部位の解析を行った。CYP735A1は葯や種子、CYP735A2は根端や根の維管束、茎頂分裂組織、葯において組織特異的に発現していることがわかった。
精神分裂病の発症を規定する脳内蛋白質の探索とその治療領域への応用

薬物療法低反応性の精神分裂病陰性型(2型)の発症に、脳内N-メチル-D-アスパラギン酸(NMDA)型レセプターの異常な活性低下が関与する可能性を追究する目的で、脳内における遺伝子転写調節に着目した。転写制御因子は、細胞核内で遺伝子DNAからmRNAへの転写を制御する核内蛋白質である。実験動物にNMDAを全身的に適用すると、転写制御因子activator protein-1(AP1)のDNA結合能が、脳内各部位の中でも特に海馬において選択的に増強された。実体顕微鏡下における凍結脳切片からのパンチアウト法を用いて解析したところ、AP1結合増強は海馬の歯状回顆粒細胞層においては強く認められたが、CA1野およびCA3野錐体細胞ではこのような増強は見られないことが明らかとなった。歯状回におけるAP1結合上昇は、投与後2時間をピークとする一過性の現象であり、投与後4時間目にはほぼ消失したが、錐体細胞層ではいずれの経過時間でも、著明なAP1結合上昇は観察されなかった。NMDAアンタゴニストを前投与すると、NMDAによる歯状回AP1結合増強は完全に阻止された。免疫組織化学的検討により、NMDA投与は歯状回顆粒細胞層においてのみ、選択的にc-FosおよびC-Jun蛋白質を強く発現する事実が判明した。また、NMDAを全身適用すると、その後動物は「tail biting」のような異常行動を示した。以上の結果より、精神分裂病のような脳機能長期的変化の出現メカニズムには、特定機能蛋白質の生合成変動が、深く関連する可能性が示唆される。精神分裂病は、精神機能低下とともに思考、知覚、感情および行為等の障害を含む精神病症状を特徴とする慢性的精神障害である。陽性型および陰性型ともに、40歳前後に発症してその兆候が長期間持続する慢性傾向を示す。これらの長期的な神経機能変動に、特定の機能蛋白質の「de novo」生合成変化が関与する可能性は十分に考えられる。真核細胞では、機能蛋白質生合成は遺伝子転写レベルでの調節を受ける場合が多いので、本研究では各種転写制御因子DNA結合能の信号応答性を指標に、長期的神経機能変動メカニズムを解析することとした。つまり、各種転写制御因子が認識するコア塩基配列を含むオリゴヌクレオチドを合成後、DNAポリメラーゼIのKlenowフラグメントを用いて・[^<32>P]α-ATPにより標識したのち、マウス全脳細胞各抽出液と反応させた。反応液を、ポリアクリルアミドゲル上で電気泳動後、オートラジオグラフィー法により結合プローブを検出した。その結果、同細胞核抽出液中に強いTRE配列(TGACTCA)およびCRE配列(TGACGTCA)の認識活性が存在することが判明した。両結合は、非放射性プローブの添加により濃度依存的に阻害されたが、各コア配列にポイントミューテーションを導入した場合は、結合に対する阻害活性が消失したので、今回検出されたDNA結合能がそれぞれのコア配列を特異的に認識する蛋白質に由来することは明らかである。次いで、陰性症状発症との関連性が考えられるN-methyl-D-aspartate(NMDA)を投与すると、脳内特定部位でも特に海馬において、著明なTRE認識活性の上昇が観察されたが、同部位のCRE認識活性はNMDA投与に伴う著明な影響を受けなかった。したがって、NMDA投与はTRE配列を認識する転写制御因子のDNA結合能上昇を介して、特定の機能蛋白質の生合成変化を誘発し、その結果長期的な神経機能変動を招来する可能性が示唆される。精神分裂病の陰性症状(II型)発症との関連性が考えられるN-methy1-D-aspar tate(NMDA)をマウス腹腔に投与したのち、転写制御因子Activator protein-1(AP1)のDNA結合能を、昨年度に開発したゲルシフトアッセイを用いて測定したところ、種々の脳内部位の中でも特に海馬において著明な上昇が観察された。

この上昇は一過性であり、投与2時間後では認められたものの投与4時間後には消失した。さらに、この海馬内一過性AP1 DNA結合能上昇では、NMDAチャネルブロッカーの前処理で完全に消失しただけでなく、蛋白質生合成阻害薬のシクロホスホミドの前投与によっても有意に阻止された。この時に、AP1構成蛋白質の一つであるc-Fos蛋白質の発現を、イムノブトッティング法を用いて測定したところ、AP1 DNA結合能上昇に一致して海馬内に一過性c-Pos蛋白質の発現が観測された。しかしながら、AP1と同じロイシンジッパー型転写制御因子であるcyclic AMP response element binding protein(CRBB)やc-MycのDNA結合能は、いずれの脳内部位においても、NMDAを投与に伴う著名な変化を示さなかった。さらに、NMDA投与は海馬内抗CREB抗体陽性蛋白質の発現に対しても著明な変化を与えなかった。したがて、NMDA投与はTRB配列を認識する転写制御因子AP1のDNA結合能上昇を介して、特定の機能蛋白質の生合成変化を誘発し、その結果シグナル入力が長期間海馬に固定される可能性が示唆される。薬物療法低反応性の精神分裂病陰性型(2型)の発症に、脳内N-メチル-D-アスパラギン酸(NMDA)型レセプターの異常な活性低下が関与する可能性を追究する目的で、脳内における遺伝子転写調節に着目した。転写制御因子は、細胞核内で遺伝子DNAからmRNAへの転写を制御する核内蛋白質である。実験動物にNMDAを全身的に適用すると、転写制御因子activator protein-1(AP1)のDNA結合能が、脳内各部位の中でも特に海馬において選択的に増強された。実体顕微鏡下における凍結脳切片からのパンチアウト法を用いて解析したところ、AP1結合増強は海馬の歯状回顆粒細胞層においては強く認められたが、CAI野およびCA3野錐体細胞ではこのような増強は見られないことが明らかとなった。歯状回におけるAPI結合上昇は、投与後2時間をピークとする一過性の現象であり、投与後4時間目にはほぼ消失したが、錐体細胞層ではいずれの経過時間でも、著明なAP1結合上昇は観察されなかった。NMDAアンタゴニストを前投与すると、NMDAによる歯状回AP1結合増強は完全に阻止された。免疫組織化学的検討により、NMDA投与は歯状回顆粒細胞層においてのみ、選択的にc-Fosおよびc-Jun蛋白質を強く発現する事実が判明した。また、NMDAを全身適用すると、その後動物は「tail biting」のような異常行動を示した。以上の結果より、精神分裂病のような脳機能長期的変化の出現メカニズムには、特定機能蛋白質の生合成変動が、深く関連する可能性が示唆される。
青少年犯罪の日米比較:制裁に対する意識レベルと自己統制力が持つ抑止効果の研究

平成15年4月初旬から中旬にかけて、米国の某州立大学1年生と日本の某国立大学2年生を対象にアンケート調査を実施。4月同時期に日米で調査を実施した理由は、被験者が大学生活を約1年間終了という条件を満たす事、そして世界情勢等の外的要因をコントロールする事で被験者が同じ環境下で回答に臨む事が出来るからです。調査実施に際しては、調査員(米国では大学院生、日本では私)が自由意志のもと集合した学生を対象に約10回のセッションを開催。各セッションは本調査目的と趣旨の説明に始まり、アンケート用紙の配付、回答、回収というステップを経て行われました。平成15年6月から8月にかけては、947名から回収された回答をコードブックに基づき全て数字化し、SPSSを使ってコンピュータに入力。内訳は、アメリカ人大学生が505名、日本人大学生が442名。アメリカ人大学生の平均年齢は19.57才、男性比率は70.1%。日本人大学生の平均年齢は19.68才、男性比率は42.4%でした。平成15年9月から12月にかけては、アンケート用紙に記載された全項目において片側t検定を実施。セルフ・コントロール尺度は、24項目中20項目において日米間で有意差(p<.001)が認められ、日本人大学生の方が自己コントロール出来ない事が統計的に実証されました。特に有意差が大きかった項目は、(1)長期的ではなく、さしあたって今自分の身に起こる事に興味がある(米<日);(2)状況が複雑になると、諦めたり身を引く(米<日);(3)楽しいから、と言うだけの理由で時々危険じみた事をする(米>日);(4)狼狽えている人を見ても、それはその人の問題であって私には関係ない(米<日);(5)怒っている時の私には近寄らない方がいい(米<日)、でした。平成16年1月から3月にかけては結果概要を表にまとめ、希望する被験者宛に郵送する作業に従事しました。現在私が進めております、高レベルで社会的意義が大きい、かつ大規模な研究の途中結果報告をここに記します。まず、平成14年4月より7月にかけて、国立国会図書館等を利用し、青少年犯罪に関する日本語文献の収集、整理、解読、考察を行い、8月には夏期休暇を利用して渡米。オクラホマ大学図書館において英語文献を収集、購読を行いました。更に、"Self-Control Scale"を開発した社会学部Harold Grasmick教授に専門知識の提供や助言を受けました。帰国後は、収集した資料を基に日本語版アンケート質問項目と英語版アンケート質問項目の構築に取り組み、薬物使用や窃盗等の法律違反行為や、大学内でのカンニングや無断欠席等の校則違反行為を多数作成しました。又、犯罪学の支柱である"Social Bond Theory"や"Strain Theory""Differential Association Theory""Self-Control Theory"を実証する項目も作成。10月には、アンケート調査実施の実現に向け、関係者に協力を仰ぎながら被験者の確保に錯綜しました。11月初旬には、アンケート用紙の第一次草案を完成させ、12月初旬に日本人大学生とアメリカ人大学生を対象に事前調査(PRE-TEST)を実施し、12月後半には再び渡米。PRE-TESTで得た結果を基に質問項目の修正を行いつつ、犯罪学者Charles Tittle教授の助言も受け、まだ実証されていない新しい項目も取り入れました。平成15年1月から3月にかけては、コードブックの作成、そして日本語の質問項目と英語の質問項目の最終調整を行いました。更には、挨拶文を兼ねる見出しのページも完成させました。4月中旬からは、アメリカ人州立大学1年生450人と日本人国立大学2年生450人を対象にアンケート調査を実施。5月初旬までには全てのデータを収集する予定です。特に有意差が大きかった項目は、(1)長期的ではなく、さしあたって今自分の身に起こる事に興味がある(米<日);(2)状況が複雑になると、諦めたり身を引く(米<日);

(3)楽しいから、と言うだけの理由で時々危険じみた事をする(米>日);(4)狼狽えている人を見ても、それはその人の問題であって私には関係ない(米<日);(5)怒っている時の私には近寄らない方がいい(米<日)、でした。平成16年1月から3月にかけては結果概要を表にまとめ、希望する被験者宛に郵送する作業に従事しました。
厳密制御した局在表面プラズモン共鳴型磁気プラズモニック材料：磁気センサへの展開

磁気光学効果の1種である磁気カー効果(MOKE)を示すTbFeCo磁性膜と貴金属ナノ粒子によって励起される局在表面プラズモン共鳴現象を利用した「TbFeCoプラズモニック材料」を開発することを目的として研究を実施した。この材料を超高感度な磁気センサ材料へと繋げることが本研究の最終的な将来目標である。従ってMOKEの飛躍的な増大がキーポイントになると考え、TbFeCo磁性膜のMOKEの増大に焦点を当てた研究を実施した。具体的にはTbFeCo磁性膜とAuナノ粒子を複合することで、ナノ粒子の局在表面プラズモン共鳴波長において粒子近傍に発生する近接場と周囲のTbFeCoを強固に結合させてMOKEを増大するTbFeCoプラズモニック材料の開発に焦点を当てた。本研究を通し、材料表面から光を入射するとAuナノ粒子に由来する構造的な凹凸がMOKEに影響を及ぼしてしまい本質的なMOKEを評価できないことが明らかになった。またTbFeCo磁性膜とAuナノ粒子が直接界面を接することで、プラズモンの効率的な伝搬が阻害されてしまうことや基板と材料構成元素の界面における原子拡散が示唆された。そこで最終年度ではこれらを克服するために、基板にガラスを利用し、基板側から材料に光を入射することとした。またTbFeCo磁性膜とAuナノ粒子界面に極薄の誘電膜を挿入し、プラズモニック材料全体の構造を再設計した。その結果、当初本研究で作製した構造のプラズモニック材料よりも凡そ1.5倍のMOKEの増大を達成した。従来は基礎研究が主流であったプラズモンに関連する現象を、本研究では積極的に工学的に応用することを狙っており、プラズモンの学術分野を工学的に拡張する観点からも意義があると考えている。本研究では、TbFeCo薄膜およびAuナノ粒子上にTbFeCo薄膜を堆積したTbFeCo/Auナノ粒子試料をマグネトロンスパッタ法で作製した。TbFeCoは非常に酸化し易いため、試料の酸化を可能な限り抑制する実験条件を慎重に探索し、TbFeCoの本質的な物理特性に基づく研究と議論を目指した。TbFeCoの酸化抑制条件の確立により、作製した試料のTb、Fe、Co各元素はOと未結合であり、ほぼ単体のTb、Fe、Co各元素によって構成される薄膜を作製することができた。これはXPSによる深さに対する元素の化学結合状態と定量結果からも検証している。またTbFeCoの酸化抑制は、垂直磁気異方性の発現とも非常に密接な相関があり、我々の確立した条件で作製した試料の磁気特性測定より、垂直方向の保磁力は約6.5 kOeと非常に優れた垂直磁気異方性を得ることができた。このような優れた垂直磁気異方性を示すTbFeCo薄膜の磁気光学効果について、極カー回転角から評価した。入射光の波長を250900 nmまで変化させてカー回転角を測定したところ、カー回転角の絶対値は最大で約0.1°であった。一方、TbFeCo/Auナノ粒子試料については、カー回転角の絶対値は最大で約0.3°であり、TbFeCo薄膜単層よりもカー回転角が大きい結果となった。本研究ではTbFeCo薄膜もTbFeCo/Auナノ粒子試料も、TbFeCoの成膜条件は同一である。それにもかかわらず磁気光学特性において特にTbFeCo/Auナノ粒子試料の方が大きなカー回転角を示した理由については、Auナノ粒子の局在表面プラズモン共鳴波長において、Auナノ粒子に発生する近接場とTbFeCo薄膜の界面の結合による磁気カー効果の増大、あるいはAuナノ粒子のナノ構造に由来した磁気カー効果の増大によるものであると考察しており、今後さらに検討を進める。平成28年度は本科学研究費に関する研究成果を査読付きの国際学術雑誌に1件発表し、この論文の被引用回数は順調に伸びている。また現在、本研究に関する学術論文2件が投稿目前となっている。その他、平成28年度内に国内学術学会で複数の発表を行っており、国際学術学会への招待講演の依頼2件を予定している。従って本研究の進捗はおおむね順調であると評価している。平成29年度は、保護膜/TbFeCo薄膜/Auナノ粒子構造の試料において、Auの形態の違いおよびTbFeCo薄膜の膜厚の差異による磁気光学効果(極Kerr効果)をそれぞれ評価し、詳細な解析を行った。Au薄膜層、Auナノ粒子自己組織化構造をそれぞれ作製し、TbFeCo垂直磁化膜の下地として用いた。単層のTbFeCo薄膜と比較し、下地にAu薄膜、Auナノ粒子を用いた場合には磁気光学効果の外部磁場に対する挙動が異なることを明らかにした。磁気力顕微鏡を用いてそれぞれの試料の磁区構造を観察した結果、Au下地層の構造によって磁区構造が異なっていた。従って各試料による磁気光学効果の振る舞いの違いは、磁区構造の違いも一因と考えられる。すなわちAuナノ粒子を下地とした試料は単磁区構造となっており、磁気光学効果の保磁力も20 kOe以上と非常に大きかった。またTbFeCo薄膜の膜厚を5 nmから50 nmに変化させ、下地にAuナノ粒子を用いた試料についても同様に磁気光学効果の外部磁場に対する挙動を測定した。膜厚に対するゼロ磁場でのKerr回転角を評価したところ、Kerr回転角は膜厚の依存性が見られた。

今回作製した試料においては膜厚が10 nmの際にKerr回転角が最も大きくなった。これは同じ膜厚のTbFeCo単層膜のゼロ磁場でのKerr回転角の約2倍である。この現象のメカニズムとして、Auナノ粒子から励起されるプラズモン同士がカップリンして生じる均一で増強された電界「ホットスポット」がTbFeCo薄膜の磁気的な性質に影響を及ぼした可能性を探索するため、平成29年度はプラズモンとホットスポットに関する基礎研究も行った。平成29年度は本研究課題に関する査読付き論文を公表し、また国際学会での招待講演(3件)および発表(2件)を行った。また国内外機関との共同研究による成果が纏まりつつあり、現在投稿論文を準備中である。従って本研究課題は概ね順調に進展していると考えている。磁気光学効果の1種である磁気カー効果(MOKE)を示すTbFeCo磁性膜と貴金属ナノ粒子によって励起される局在表面プラズモン共鳴現象を利用した「TbFeCoプラズモニック材料」を開発することを目的として研究を実施した。この材料を超高感度な磁気センサ材料へと繋げることが本研究の最終的な将来目標である。従ってMOKEの飛躍的な増大がキーポイントになると考え、TbFeCo磁性膜のMOKEの増大に焦点を当てた研究を実施した。具体的にはTbFeCo磁性膜とAuナノ粒子を複合することで、ナノ粒子の局在表面プラズモン共鳴波長において粒子近傍に発生する近接場と周囲のTbFeCoを強固に結合させてMOKEを増大するTbFeCoプラズモニック材料の開発に焦点を当てた。本研究を通し、材料表面から光を入射するとAuナノ粒子に由来する構造的な凹凸がMOKEに影響を及ぼしてしまい本質的なMOKEを評価できないことが明らかになった。またTbFeCo磁性膜とAuナノ粒子が直接界面を接することで、プラズモンの効率的な伝搬が阻害されてしまうことや基板と材料構成元素の界面における原子拡散が示唆された。そこで最終年度ではこれらを克服するために、基板にガラスを利用し、基板側から材料に光を入射することとした。またTbFeCo磁性膜とAuナノ粒子界面に極薄の誘電膜を挿入し、プラズモニック材料全体の構造を再設計した。その結果、当初本研究で作製した構造のプラズモニック材料よりも凡そ1.5倍のMOKEの増大を達成した。従来は基礎研究が主流であったプラズモンに関連する現象を、本研究では積極的に工学的に応用することを狙っており、プラズモンの学術分野を工学的に拡張する観点からも意義があると考えている。1.Auナノ粒子の局在表面プラズモン共鳴の高効率化現状では基板上に直接Auナノ粒子の自己組織化構造を形成しているが、Auナノ粒子の形状と粒径が均一で、さらに粒子の規則配列性が極めて高い場合、磁性薄膜に対するAuナノ粒子による局在表面プラズモン共鳴の効果が、より向上するとの報告がある。そこで基板上にZnO薄膜を堆積させ、その上にAuナノ粒子を自己組織化させてAuナノ粒子の規則配列性を一層厳密に制御する研究を予定している。2.TbFeCo薄膜の膜厚制御による局在表面プラズモン共鳴の高効率化Auナノ粒子の粒径とTbFeCo薄膜の膜厚は、Auナノ粒子に発生する近接場とTbFeCo薄膜の界面の結合に直接的に影響を与える。従ってTbFeCo薄膜の磁気光学効果に対して非常に重要なパラメータとなるはずである。
新規なTripod(三脚型)配位子を用いる酵素モデル錯体の合成と反応

かさ高い三脚型窒素配位子ヒドロトリス(3、5ージイソプロピル)ピラゾリルボレイト(DIPPZ)を配位子とする銅、鉄錯体について研究を行い以下の成果を得ることができた。前年度報告したヘモシアニン(Hc)、チロシナ-ゼ(Tyr)のモデルとなるμーパ-オキソ2核銅錯体、[Cu(DIPPZ)]_2(O_2)の結晶構造の決定に成功し、パ-オキサイドがμーη^2:η^2の配位モ-ドで2つの銅に架橋配位していることを明らかにした。この様な配位構造はこれまでdブロック遷移金属錯体では例がなく、Hc、Tyrの構造としてまったく予想されていなかった。半錯体とHc、Tyrの著しい分光学的類似製からこれらのたんぱく質中で酸素分子がμーη^2:η^2という特異な構造で2核銅サイトに結合していることが強く支持された。また単核のサイトを持つ銅モノオキシゲナ-ゼの中間体モデルとなる単核のアレキルパ-オキソ銅錯体を合成し、その構造の決定に初めて成功した。既に報告したアリキルパ-オキソ錯体とともにその反応性の検討を行いこれらの錯体では0ー0結合のヘテロリティックな開裂の生じないこと、またホモリティックな開裂によって生じる銅(III)オキソ中間体には殆ど酸素添加能のないことを明らかにし、銅モノオキシゲナ-ゼの反応機構がチトクロ-ムPー450と異なることを提唱した。一方5配位の単核鉄錯体Fe(OBz)(DIPPZ)の合成・単離二世格子、この錯体を非ポルフィリン錯体としては初めて酸素を可逆的に結合できることを見い出した。さらに共鳴ラマンスペクトルによって酸素付加体がμーパ-オキソ2核鉄錯体であることを明らかにした。本錯体系は非ヘム鉄を活性点に含む酸素運搬体或はモノオキシゲナ-ゼの良好な錯体モデルと言える。かさ高い三脚型窒素性配位子,ヒドロトリス(3,5ージメチルピラゾリル)ボレイトおよびヒドロトリス(3,5ージフェニルピラゾリル)ボレイトを合成し,これを用いて酸素または過酸化水素処理により2核銅酸素錯体,(1)および(2)の単離に成功した.1および2は,モノオキシゲナーゼの一種であるチロシナーゼと類似した分光学的性質を示し,特にその酸素・酸素結合振縮振動Voーoが通常知られているパーオキソ錯体に比較し低波数(756cm^<-1>)にシフトしており,OーOが切断され易いことを示す.錯体1をシクロヘキセンおよびフェノールと反応させると酸化が進み,それぞれ対応する酸化生成物が得られる.反応はパーオキソイオンがホモリティックに開裂し,銅(II)酸素ラジカルあるいは銅(III)オキソ種が活性種と推定され,チロンナーゼモデルとして興味深いが詳細はさらに研究中である.またメタンモノオキシゲナーゼのモデルとして三脚型窒素性配位子をもつ2核鉄錯体を合成し,電子供与体としてZn粉末を用いて炭化水素の酸素酸化を行った.この系は常温常圧の温和な条件で,シクロヘキサン,nーペンタン,ベンゼン,アダマンタン,シクロヘキセン等を酸化し,対応する水酸化物やケトン,エポキシドなどを与えることを見出した.反応機構は過酸化水素を経由するフェニトン型反応とは異り,アダマンタンの2級炭素の酸化に比較的高い選択性を示す.この系につき,さらに他の還元剤を使う反応や,活性種と思われる錯体の同定など,反応機構を検討中である.本年度は新規なかさ高い三脚型配位子ドロトリス(3,5ージイソプロピルー1ーピラゾリル)ボレイトを配位子として用い、種々の酵素類似銅および鉄錯体の合成・単離に成功した。この配位子を用い銅(II)錯体として前例のない4面体型の配位子場を持つハロ銅錯体が容易に得られることを見い出し、これを出発原料として銅(II)ーチオレート、アルキルパーオキソ、アシルパーオキソ錯体の合成に初めて成功した。これらの錯体の特異な分光学的性質および反応性は、ブルー銅たんぱく質或いはドーパミンβー水酸化酵素、フェニルアラニン水酸化酵素の特性を良く再現することから、その反応性の今後の検討はこれらの酵素の構造と機能を探る上で重要な知見となることが期待される。また鉄錯体においても2価或いは3価のカルボキシレート、フェノキシ錯体の合成に成功した。これらは非ヘム鉄モノオキシゲナーゼの中間体モデルと見なすことができる。本研究費によって設置した4軸X線回折装置を用いこれらの錯体の分子構造を決定した。また前年度に合成に成功したμーパーオキソ2核銅錯体の酸化能について詳しい検討を行ないこの錯体がオレフィンのアリル位或いはフェノール、カテコールから容易に水素を引き抜きラジカル的な酸化反応を開始するものの、酸素添加能を示さないことを明らかにした。チロシナーゼの反応機能に関連し重要な知見である。またメタンモノオキシゲナーゼのモデル反応としてμーオキソ2核鉄錯体によるアルカンの水酸化反応の開発に成功し、オキソの外にヘキサフルオロアセチルアセトネートで架橋した2核鉄錯体が触媒として特に有効であることを明らかにした。

前年度報告したヘモシアニン(Hc)、チロシナ-ゼ(Tyr)のモデルとなるμーパ-オキソ2核銅錯体、[Cu(DIPPZ)]_2(O_2)の結晶構造の決定に成功し、パ-オキサイドがμーη^2:η^2の配位モ-ドで2つの銅に架橋配位していることを明らかにした。この様な配位構造はこれまでdブロック遷移金属錯体では例がなく、Hc、Tyrの構造としてまったく予想されていなかった。半錯体とHc、Tyrの著しい分光学的類似製からこれらのたんぱく質中で酸素分子がμーη^2:η^2という特異な構造で2核銅サイトに結合していることが強く支持された。また単核のサイトを持つ銅モノオキシゲナ-ゼの中間体モデルとなる単核のアレキルパ-オキソ銅錯体を合成し、その構造の決定に初めて成功した。既に報告したアリキルパ-オキソ錯体とともにその反応性の検討を行いこれらの錯体では0ー0結合のヘテロリティックな開裂の生じないこと、またホモリティックな開裂によって生じる銅(III)オキソ中間体には殆ど酸素添加能のないことを明らかにし、銅モノオキシゲナ-ゼの反応機構がチトクロ-ムPー450と異なることを提唱した。一方5配位の単核鉄錯体Fe(OBz)(DIPPZ)の合成・単離二世格子、この錯体を非ポルフィリン錯体としては初めて酸素を可逆的に結合できることを見い出した。さらに共鳴ラマンスペクトルによって酸素付加体がμーパ-オキソ2核鉄錯体であることを明らかにした。本錯体系は非ヘム鉄を活性点に含む酸素運搬体或はモノオキシゲナ-ゼの良好な錯体モデルと言える。
ロシアにおける金帳汗国の成立の経緯とその支配について基礎的研究

ソヴエト期におけるロシアのタタール・モンゴル支配とその影響の研究は、永くロシア国民の血肉に食い込んで現在に至っているにも関わらず、当局による不断の弾圧によって、その全貌がロシア人にも良く分からないままに現在に至っている。それは例えばクリミヤにおける民族問題、カザフスタンにおける問題など、社会主義体制の崩壊と共に、健在化しつつある。中世ロシア年代記の研究にも必須のこの問題について、資料が余りに乏しく、文献の名前も分からないことが多かったために、文献目録をつくることによって、斯学の研究の基礎をつくろうとしたしかし社会主義体制崩壊後、この種の復刻、研究が急増しつつある。このために、当初の方針を若干変更して次のようにした。1.取りあえず、ソヴエト以前の時期の研究のタイトル2.簡単な説明。3.現時点でできる限りの復刻版の収集。4.国内の古い文献の検索。今後は、時間をかけてこの仕事を継続して行き、出版できればと思っている。平成6年度はソヴエト期以前の研究を軸に金帳汗国の全体像を明らかにすることを中心にして、資料の収集を行った。研究が重要であるにもかかわらず、研究者が少ないことから、単行本には希覯のものが多く、閲覧はなかなかにむずかしいことが判明した。他方比較的近年の研究は、様々な雑誌に寄稿された論文の体裁をとるものが多く、複写の必要が多いことも、わかった。しかしこれは逆に言えば未だ研究が行き届いていないということであるから、困難はあるが、ぜひとも克服しなければならないと思われる。出来得る限りの努力は、現在も続けられている。☆なお本年度の資料調査は北海道大学文学部及びスラヴ研究センターにおいて行った。1.いくつかの基本図書について、その内容を検討し、金帳汗国についてのおおよその状況を把握した。2.これに平行してロシア年代記のうち、「原初年代記」および「ノヴゴロド年代記」について、これに該当する記述を収録した。今後はそのほかの諸年代記について同様の作業を行う予定。3.一定数の研究論文の複写を行った。4.一定数の文献目録のカードを複写した。全体として若干の遅れはあるが、比較的順調に作業を遂行した。資料調査を続けているうちに、特にカザン汗国について種々の問題があることが判明した。以後は、全体に目を配りながらも特にカザン汗国並びにこれとアストラハン汗国、クリミア汗国の関係について、集中的に見て行きたいと考えている。これと関連するものとして、『ロシア年代記集成』の中に含まれているカザン年代記について、該当の記事を収録したいと思っている。今年度は、『原初年代記』の外、『ノヴゴロド年代記』の一部について関連記事の収録を行った。欽察汗国の問題に関する適当な資料や研究書は極めて少なく、多くはソヴエト期以前の古いものであって、既に稀覯に属するものが多い。現代の専門家は若干存在するが、ほとんどは西欧のものであって、ソヴエトにおける研究はほとんど無に等しい印象であったが、どうして研究書が少ないのかという問題については、当初その理由が分からなかった。したがって、とりあえずどのような研究所あるいは史料が存在し、かつ過去において刊行されたかを、たとえ書名なりとも知ることができれば、後の検索に役立つであろうと思われた。ソヴエトが崩壊し、ロシア人にすら、ほとんど知られていなかった研究、史料、すでに稀覯となっていた研究などの復刻、盛んに行われるようになり、新たな研究もさまざまな形で発表されるようになってきた。それも以前には手に入れることのできなかった、モルドヴァやカザンのような、比較的地方で出版され、発行部数も極めて制限されたものである。それに伴ってソヴィエト期にこの研究が意図的に妨害され、弾圧されたことも分かってきた。最初の計画は、若干の解題を附した文献目録を印刷に附すことであったが、文献が今後急速に増える見通しなので、頒布は少部数にとどめ、なお一層の充実と課題の拡充をはかることにした。その上で機会を得て研究者の利用できる形にしたいと考えている、現代形になったものは添付した『欽察汗国文献目録』(仮称)である。本稿の目的は、専ら欽察汗国の研究をするための基礎的な準備をすることにある。従ってこれはチンギスハンの版図の全てに亘るものではない、若干収録したものは、欽察汗国の歴史と関連してその予備知識として必要と考えた範囲に留まっている。

これは、ペルシア語文献、漢語文献、豪古語あるいはウイグル語文献等が、既に本邦においても夥しい研究があるからであり、直接に欽察汗国に関連するものが少ないからでもある。