hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
高速電気化学的パルス法による高分子錯体の多電子移動過程の解析

本研究では、電気化学的に活性である、すなわち酸化還元置換基をもつ高分子を薄膜にし、電気化学的手法(電場印加)により多電子移動過程を伴う反応場を作製し、当研究室で開発してきている電気化学的各種高速パルス測定法と分光学的手法とを併用して多電子移動過程の機構を定量的に解析評価する。その電子移動過程の解明と一般的モデル化を行うことを目的とした。(a)ポリアルキレンビオローゲン(PAV)とポリスチレンスルホン酸(PSS)ポリイオン錯体の薄膜を作製しビオローゲン活性点の酸化状態を2価から0価にする2電子移動反応場を作製しその反応機構の解明を行った。ビオローゲン活性点間の距離をアルキル基の長さ(メチレン基の数n=3、4、5、6、7、8、9、10、12)を変え同様の測定を行い電子移動反応に対する距離の依存性を昭和62年度に引き続き調べた。さらに、ビオローゲンサイトの2価(V^<2+>)から1価(V^+)へと1価から0価(V^0)への二つの還元反応における薄膜内の電子移動反応の速度定数Dappを求めた。2電子還元反応に対するDappの値はV^+→V^0への還元反応に対する値より小さく、またV^<2+>→V^+への還元反応に対する値よりも大きいことがわかった。これらの還元反応に対するDappの相対的な大きさよりPAV-PSSコンプレックス薄膜内における2電子還元反応では、電極表面で2電子還元により生成したV^0とV^<2+>が膜内で、V^0+V^<2+>→2v^+で示される均化反応を起こして、2つのV^+を生じこれが膜内電荷移動反応過程に大きく寄与していると推定した。(b)二分子膜を形成する化合物を用いて固定した幾何学的ドメインを作製し、その中にポリ(ビオローゲン)などの高分子錯体を配置しその配置の電子移動速度への影響を調べた。nが奇数・偶数とでDappの値の大きさに規則性があることを見い出した。分光学的手法を併用しビオローゲンサイト間の相互作用を調べ、Dappの値とその相互作用の違いとの相関性を調べた。
南アジアと東アジアのジェンダーに関する比較研究

東南アジアを含めたアジアの家族のパターンについては、「比較の中の日本の家族」で概観することができた。その上で南アジアの変動プロジェクトのジェンダー班などの研究会で発表をし、意見交換を進めるとともに、東アジア関係の学会でも報告をし、ジェンダーに関する基礎的な比較を行ってきた。その成果の一部は論文「中国社会のジェンダー:比較を通じて紡ぎ出す中国的特色」として公表した。南アジアのジェンダーの問題を考えていくときの一つの大きな対比は、東アジア特に中国においては、近代化のプロセスで自らの手で自らの伝統を否定し、新しい社会を建設するといった方向性を打ち出し得たのに対し、南アジアの場合は、植民地化の影響で、伝統的な家族規範が植民地権力に対する抵抗の核となってしまい、古い構造を温存させる結果となったという点であろう。カースト制度が独立以降も残存し、またそのことが、恋愛結婚を成立させないというように現在のジェンダーのあり方を考える上でも大きな影響を及ぼしていることを考えれば、こうした伝統的ジェンダーとナショナリズムのあり方というのは、非常に興味のある対比である。このほか性暴力の問題については、「性犯罪へのアプローチ」において、南アジアの問題には直接言及していないものの、他の凶悪犯罪や性規範との関係で、日本を中心とする東アジアの強姦がどういう分布をしているかを明らかにし、日本を含めて性犯罪の問題を考えていく際の基本的な視角を得ることができた。
小脳発達期における神経-グリア相互作用Ca透過型AMPA受容体の役割

小脳のグリア細胞は、Caを透過する特殊なAMPA型受容体をもち、Caを介した神経-グリア相互作用を通して、神経回路の形成と発達に関与している可能性がある。その機能的役割を調べるため、小脳のグリア細胞に選択的にGluR2(編集型GluR2)サブユニットを発現させて、もともとCa透過型の性質からCa非透過型にAMPA受容体の性質を変化させる実験手法の確立を試みた。レンチウイルスベクターを用い、GFAPプロモーターのサイズ減らして、グリア選択性を保ったまま遺伝子を効率的に発現させる事に成功した。小脳バーグマングリアに存在するAMPA受容体はGluR2サブユニットを持たないため、Ca透過型の性質を持つ。この受容体は、神経細胞から放出されるグルタミン酸によって活性化されるので、このCa透過型AMPA受容体がグリア内でのCaシグナルを誘発して神経-グリア相互作用の担い手の一つとなり、小脳神経回路の形成やシナプス発達などに関与する可能性がある。そこで、本研究では、発達期の小脳において、ウイルスベクターを用いてグリア細胞に選択的にGluR2を発現させ、本来のCa透過型からCa非透過型にAMPA受容体の性質を人為的に変化させることにより、小脳の神経回路発達にどのような影響が生じるかを検討する。そのため、当該年度では、幼若マウスの小脳に直接ウイルスベクターを注入し、小脳バーグマングリア細胞に選択的かつ効率的にGluR2サブユニットを発現させる実験手法の確立を試みた。しかしながら、遺伝子発現のマーカーであるGFPのみの発現であればバーグマングリアに選択的に、しかも高効率で発現させることに成功したものの、GFPと共にGluR2サブユニットを発現させようとすると発現効率が極端に悪くなり、当初予定した実験の安定的遂行が困難であることが判明した。そこで、これまでの実験方法を見直し、新生仔マウス小脳からグリア細胞と神経細胞を一緒に分散培養し、ウイルス液を投与してグリア細胞に選択的・効率的にGluR2を発現させる実験手法を試みることにした。この培養系においても、生体内での特徴を保持したシナプス形成が行われるため、当初の実験目的にそったシナプス形成への影響を検討することが十分可能である。当該年度内においては、小脳分散培養を用いたグリア特異的GluR2サブユニット発現の実験系を未だ確立中ではあるが、以前行っていたマウス個体での遺伝子導入法よりもはるかに導入効率の高い結果が得られている。神経細胞は、一般にGluR2サブユニットを含まないCa非透過型のAMPA受容体を持つが、小脳バーグマングリアには、神経細胞とは異なり、GluR2を含まないCa透過型のAMPA受容体をもつ。そのため、バーグマングリアは、周囲の神経細胞から放出されたグルタミン酸を受容した後、グリア内でのCaシグナルを誘発して神経-グリア相互作用の引き金となり、小脳神経回路の形成やシナプス発達などに関与する可能性がある。そこで、本研究では、発達期の小脳における神経-グリア相互作用を調べるため、グリア細胞に選択的にGluR2を発現させ、本来のCa透過型からCa非透過型にAMPA受容体の性質を変化させることにより、小脳の神経回路発達にどのような影響が生じるかを検討することを目的とした。当初、幼若マウスの小脳に直接レンチウイルスベクターを注入し、GFAPプロモーターを用いて小脳バーグマングリア細胞に選択的かつ効率的にGluR2サブユニットを発現させる実験手法を試みた。しかしながら、遺伝子発現マーカーであるGFPのみの発現であれば高効率で発現させることに成功したものの、GFPとGluR2サブユニットを共発現させようとすると発現効率が悪くなり、導入する遺伝子のサイズが大きいと導入効率が減少することがわかった。そこで、発現効率を高めるために、グリア細胞への特異性を保ったまま、GFAPプロモーター(2kbp)のサイズを減らす工夫を試みた。それと同時に、遺伝子導入効率をより高めるため、新生仔マウス小脳からグリア細胞と神経細胞を一緒に分散培養する実験系を用いることにした。その結果、GFAPプロモーターを300bpまでに削っても、グリア選択性を保ったままGluR2を発現させられることが可能となった。これらの改変コンストラクトを用いて、小脳神経回路形成とシナプス発達への影響を解剖学的・電気生理学的に解析している。
差異の受容－ニュージーランド文学から見たキリスト教とマオリ宗教の弁証法的融合－

ニュージーランドにおいては、文学が哲学的な思考を担ってきたことが、これまでしばしば指摘されてきた。ニュージーランドの国民文学の揺籃期から20世紀半ばまでの文学者によるピューリタニズム批判、1970年代のマオリ文学の誕生とマオリ文化の再評価、そして1980年代以降のふたつの文化の架橋的な作家たちの文学的な実践から、ニュージーランドの政治的・社会的変動を捉えていく。
食虫植物型超分子の合成,機能およびダイナミクス

当該研究期間中に次の化合物を合成した。(i)異なる二種類の芳香環側鎖を向かい合った位置に導入したアームドサイクレン,(ii)異なる二種類の芳香環側鎖を隣合った位置に導入したアームドサイクレン,(iii)二枚の発色団を向かい合った位置に導入したダブルアームドサイクレン,および(vi)光学活性なテトラアームドサイクレン.化合物(i)に対して:この配位子を用いてCu^<2+>との錯体を形成したところ,二次元マトリクス状の高分子状錯体を形成した.Cu^<2+>とAg^+との錯体では一次元の高分子状錯体であった.また,Cu^+とCu^<2+>との錯体では六角形状の高分子状錯体を形成していた.化合物(ii)に対して:異なる二種類の芳香環側鎖を隣合った位置に導入したアームドサイクレンを合成した.この化合物については現在検討を続けている.化合物(iii)に対して:この配位子を用いて各種金属に対する^1H NMR, UV-VISおよび蛍光スペクトルを用いた滴定実験を行った.その結果,導入する側鎖によって選択性が異なることを見出した.化合物(vi)に対して:環状アミン骨格にキラル中心を1個導入したテトラアームドサイクレンを合成した.この化合物だけでは旋光度は低く,円偏光二色性(CD)スペクトルでは顕著なコットン効果を示さなかったが,Ag^+錯体を形成させた後に測定すると,旋光度の数値は大きくなり,CDスペクトルでは顕著なコットン効果を示した.以上のことより,各種食虫植物型分子を合成し,錯体の構造ならびに機能,ダイナミクスについて検討を行った.本研究は継続して平成18年度以降もおこなう.当該研究期間中に次の化合物を合成した。(i)異なる二種類の芳香環側鎖を向かい合った位置に導入したアームドサイクレン,(ii)異なる二種類の芳香環側鎖を隣合った位置に導入したアームドサイクレン,(iii)二枚の発色団を向かい合った位置に導入したダブルアームドサイクレン,および(vi)光学活性なテトラアームドサイクレン.化合物(i)に対して:この配位子を用いてCu^<2+>との錯体を形成したところ,二次元マトリクス状の高分子状錯体を形成した.Cu^<2+>とAg^+との錯体では一次元の高分子状錯体であった.また,Cu^+とCu^<2+>との錯体では六角形状の高分子状錯体を形成していた.化合物(ii)に対して:異なる二種類の芳香環側鎖を隣合った位置に導入したアームドサイクレンを合成した.この化合物については現在検討を続けている.化合物(iii)に対して:この配位子を用いて各種金属に対する^1H NMR, UV-VISおよび蛍光スペクトルを用いた滴定実験を行った.その結果,導入する側鎖によって選択性が異なることを見出した.化合物(vi)に対して:環状アミン骨格にキラル中心を1個導入したテトラアームドサイクレンを合成した.この化合物だけでは旋光度は低く,円偏光二色性(CD)スペクトルでは顕著なコットン効果を示さなかったが,Ag^+錯体を形成させた後に測定すると,旋光度の数値は大きくなり,CDスペクトルでは顕著なコットン効果を示した.以上のことより,各種食虫植物型分子を合成し,錯体の構造ならびに機能,ダイナミクスについて検討を行った.本研究は継続して平成18年度以降もおこなう.フッ素,メトキシ,メチル,ニトロ,シンナモイル基などを置換基として導入した芳香環側鎖を4枚持つアームドサイクレン(食虫植物型超分子)をサイクレンと芳香族アルデヒドとの還元的アミノ化反応によって合成した.これらのAg^+イオンに対する挙動を低温CCD-X線結晶構造解析によって検討した.その結果,ベンジルタイプの芳香環を有する化合物のAg^+錯体すべてにおいて,4枚の芳香環側鎖がAg^+イオンを包み込むような構造をとることがわかった.Ag^+と最も近い芳香環側鎖の炭素の距離は約3Åであり,Ag-芳香環の間に相互作用があることがわかった.また溶液中の挙動を^1H-NMRスペクトルを使った滴定実験によって検討を行ったところ,芳香環に導入した置換基の電子供与性/電子求引性によって顕著に芳香環側鎖のプロトンシグナルがシフトすることを見いだした.すなわち,メチル基などの電子供与性の置換基を導入した化合物では大きいものでは約1ppmほど芳香環シグナルが高磁場側にシフトし,一方,ニトロ基のような電子吸引性の置換基を導入した化合物では芳香環シグナルがほとんどシフトしなかった.次にAg^+イオンと芳香環側鎖の直接的な相互作用を見るために,UV-VISスペクトルを使った滴定実験を行った.その結果,すべての場合において吸収極大が増大し,その位置と吸光度の変化の大きさは置換基の種類ならびに置換位置によって異なることがわかった.結晶構造を使ってAg^+錯体のHOMOとLUMOを計算したところ,LUMO(Ag^+の5s軌道)が明らかに変型して側鎖の芳香環のHOMOと相互作用しており,各種実験データをサポートする結果が得られた.現在,これらの挙動がAg^+イオンに特有なものなのかどうか,鋭意検討を進めている.

平成17年度では,(1)異なる二種類の芳香環側鎖を向かい合った位置に導入したアームドサイクレンの合成と超分子錯体の構造,(2)異なる二種類の芳香環側鎖を隣合った位置に導入したアームドサイクレンの合成と金属錯体の構造解析,(3)光学活性なテトラアームドサイクレンの合成,および(4)二枚の芳香環側鎖を向かい合った位置に導入したダブルアームドサイクレンの合成と金属イオン特異的UV-Visおよび蛍光スペクトル特性について検討を行った.(1)と(4)の合成は初めにサイクレンジオンをジエチレントリアミンとイミノジ酢酸ジエチルの反応で合成し,次いで芳香族アルデヒドとの還元的アミノ化反応によってダブルアームドサイクレンを合成した((4)).これをDIBAL-Hによって還元して向かい合った位置に側鎖を導入したダブルアームドサイクレンを合成した.これにさらに還元的アミノ化によって異なる側鎖を導入したら(1)が得られた.また,隣り合った位置に側鎖を導入するためには,サイクレンとシュウ酸ジエチルとの反応で隣り合った二つのアミノ基を保護しておき,これに還元的アミノ化によって側鎖を導入した後,アルカリ条件下で脱保護することによって隣合った位置に側鎖を導入したアームドサイクレンを合成した.これに還元的アミノ化によって側鎖を導入することにより,(3)を得た.光学活性なテトラアームドサイクレンは乳酸エチルをトシル化した後,グリシンエチルエステルと反応させ,次いでジエチレントリアミンと環化して光学活性なサイクレンジオンを合成した.これに還元的アミノ化によって側鎖を導入し,DIBAL-Hで還元後,さらに側鎖を導入した.得られた化合物の構造は各種スペクトルおよび元素分析によって確認し,それらの銀をはじめとする様々な金属イオンとの錯体を形成させ,その構造を詳細に検討した.また,光学活性な化合物については旋光度やCDスペクトルも測定した.
SAM系新規緑内障モデルにおける神経特異性上皮増殖因子制御と軸索伸展機構の解明

老化マウス、特にSAMP8及びSAMP10はSAMR(正常老化マウス、コントロールマウス)に比し、生後3か月で網膜神経節細胞が有意に減少していることが判明した。内顆粒層及び外顆粒層に関してこれらのマウスにおいて有意差はなかった。この結果より老化促進マウスのSAMP8及びP10では網膜神経節細胞が早期に減少することが判明した。神経細胞の成長や投射に関与する分子の神経特異性上皮増殖因子(Nell2)をImmunoblotにて検討すると、SAMRに比し、SAMP8及びSAMP10で生後1か月から減少傾向にあった。また抗老化分子で知られるSIRT1の変化も同様に検討するとSAMP8及びSAMP10で減少傾向にあった。この結果は老化マウスにおける網膜神経節細胞死にはNell2の分解及びSIRT1の減少が関与していることが判明した。本研究では正常眼圧緑内障自然発症動物モデルを想定したマウスの視神経変性における神経特異性上皮増殖因子(Nell2)の制御機構を解析し、視神経軸索保護及び軸索伸展への応用を試みる。老化促進モデルマウスのSenescene-accelerated mouse (SAM)は早期から酸化ストレスにより神経変性を来たすマウスで、記憶障害をはじめ種々の感覚障害を生じる。本研究ではSAMP8, SAMP10に着目し網膜神経節細胞変性を組織学的・分子生物学的に解析した。生後1か月ではそのコントロールマウスであるSAMRと網膜神経節細胞数に変化はないが、生後3か月でSAMP8及びSAMP10における網膜神経節細胞数の有意な減少が見られた。また網膜神経節細胞をmagnetic beadsを用い単離後、immuno blotでNell2の発現を解析すると、SAMP8及びSAMP10で有意な減少が見られた。この結果は網膜神経節細胞死にNell2の減少が関与していることを示唆した。次にNell2の相互分子同定のため、網膜蛋白抽出液を用いNell2抗体でimmunoprecipitation(IP)を行い、Mass spectrometryにて質量分析を行ったところMACF1が検出された。MACF1の局在を免疫染色にて確認したところThy-1陽性網膜神経節細胞に認められ、さらにNell2と共存を示した。この結果よりNell2の制御にはMACF1が何らか関与していることが示唆された。Nell2の神経保護効果はelectroporationにて網膜神経節細胞にNell2を強制発現後、視神経挫滅を作成し検討した。Nell2強制発現により視神経挫滅による網膜神経節細胞死の減少がみられ、神経保護効果が認められた。特にSAMP8・SAMP10ではミトコンドリア機能障害を主とした酸化ストレスにより、神経変性を来たす。一方SAMRは正常老化を示す。本研究ではSAMにおける視神経軸索変性及び網膜神経節細胞死を組織学的・分子生物学的に解明し緑内障の機序解明に応用させる。生後1ヵ月、3ヶ月及び6ヶ月のSAMの眼圧はSAMR、SAMP8及びSAMP10において有意差を認めなかった。網膜神経節細胞数に関し、生後1ヵ月では有意差認めないが生後3ヵ月でSAMRに比しSAMP8及びSAMP10で有意に減少していた。抗老化の主要分子であるsirtin1(SIRT1)及び神経細胞の成長や分化及び軸索ガイダンスの制御機構において重要な役割を担っている神経特異性上皮増殖因子Nell2 (neural tissue-specificepidermalgrowthfactor-like repeatdomain-containing protein)に関し、単離網膜神経節細胞のimmunoblot及び免疫組織学染色でその発現を検討した。生後1ヵ月齢のSAMP8及びSAMP10のSIRT1及びNell2の発現はSAMRに比し減少していた。この結果はSAMP8及びSAMP10の網膜神経節細胞変性には老化及び成長因子の制御破綻が関わっていることが示唆された。我々の研究において網膜神経節細胞変性に神経細胞の成長や分化、成長円錐及び軸索ガイダンスの制御機構において重要な役割を担っているNell2が強く関わっていることが示唆された。Nell2はMass spectrometry及びimmunoprecioitation/immunoblotにてMACF1(Microtubule-actin cross-linking factor 1)と相互してることが判明した。MACF1は網膜神経節細胞の細胞体-軸索の輸送制御などに強く関わっており、Nell2はMACF1と相互することで、網膜神経節細胞の軸索変性及び細胞体死に関わっていると考えられた。Nell2 construct

plasmid DNAを作成し、electroporationで網膜神経節細胞に強制発現させると、視神経座滅に対し約40%神経保護効果を示した。Nell2を強制発現することで、MACF1と相互し軸索変性に対し保護的な役割をしめすことが判明した。Nell2細胞体保護及び軸索伸展効果の評価として、網膜神経節細胞をmagnetic beads法で単離後、初代培養を行う。その後EGFPが挿入されたNell2 plasmid DNAを網膜神経節細胞に強制発現させ、軸索伸長効果をLivecell imaging (タイムラプス)にて解析する。軸索伸展効果に関しては酸化ストレスをTNF-α及びbuthionine sulfoximine (BSO)にて細胞体を障害してからGAP43の免疫染色などを用い評価する。in vivoでは生後1ヶ月のSAMにLenti-Nell2 copGFP WPREの硝子体注射を行う。注射後、Nell2相互分子の変化を生化学的に解析する。Nell2の発現局在はを共焦点顕微鏡にて確認し、蛋白レベルで定量する。軸索変性及び細胞体死は組織学的に検討する。コンピュータソフトウェアのAphelionを用い軸索数・細胞体数を定量する。まず初代培養のneurobasal mediumに比較的費用がかかる。さらにレンチウィルスベクターであるLenti-Nell2 copGFP WPRE作成及び遺伝子導入にも費用がかかる。プラスミド作成にはプライマー、制限酵素、DNAポリメラーゼの購入、DNAシークエンスに関わる試薬も必要である。
「希少がん」軟部肉腫のキナーゼ阻害剤著効症例に基づいた新規治療法の開発

本研究は、難治性かつ「希少がん」である高悪性軟部肉腫における生命予後の改善に貢献する新規治療法の開発を目的とする。具体的には我々のグループが、Tyrosine kinase (TK)阻害剤であるPazopanib著効例の高悪性軟部肉腫手術検体より新規発見したキナーゼ遺伝子変異、及びそれらに一致したリン酸化タンパク質の高発現に注目し、大規模コホートによる変異・発現検証及びin vitro, in vivoの機能解析を行う。(1) Pazopanib著効症例の特異的遺伝子変異と特異的リン酸化タンパク質発現の解明:Pazopanib著効例の腫瘍検体と正常組織を用いたNGSによる網羅的遺伝子変異解析(RNA-seqとDNA-seq解析)及びリン酸化アレイによる発現解析を行い、Pazopanib著効例の腫瘍特異的遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現のプロファイルを明らかにする。その結果としてRNA-seqとDNA-seq解析及びリン酸化アレイを行い、奏効性候補ターゲットの同定に成功した。(2)軟部肉腫コホートにおける同定遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現の頻度の探索:(1)で同定に成功している著効例特異的遺伝子変異・リン酸化タンパク質発現を軟部肉腫コホート(FFPE)に対してPCR法及び免疫染色法を用いて探索する。著効例で同定されたGLI1遺伝子増幅、mRNA高発現を高悪性軟部肉腫コホート内で検証を行い、著効例特異的であることを確認した。(3)著効例特異的遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現の機能解析:腫瘍細胞株を用いて著効例特異的遺伝子変異の遺伝子導入を行い、細胞増殖や薬剤奏功性の観察を進め、がん化能・薬剤奏功性能などの機能を明らかにする。細胞株内にGLI1の導入を行い癌化能の確認に成功した。本年度、(1) Pazopanib著効症例の特異的遺伝子変異と特異的リン酸化タンパク質発現の解明として、Pazopanib著効例の腫瘍検体と正常組織を用いたNGSによる網羅的遺伝子変異解析(RNA-seqとDNA-seq解析)及びリン酸化アレイによる発現解析を行い、Pazopanib著効例の腫瘍特異的遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現のプロファイルを明らかにし、奏効性候補ターゲット(GLI1遺伝子増幅、PDGFRBリン酸化)の同定に成功した。計画時予測した治療ターゲットより複雑な発現機構を示したため因子同定に時間がかかりやや遅れているが、検証実験計画内で進め成功を収めている。次年度以降も引き続き、(1) Pazopanib著効症例の特異的遺伝子変異と特異的リン酸化タンパク質発現の解明としてPazopanib著効例の腫瘍検体と正常組織を用いたNGSによる網羅的遺伝子変異解析(RNA-seqとDNA-seq解析)及びリン酸化アレイによる発現解析を行い、Pazopanib著効例の腫瘍特異的遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現のプロファイルの更なる解明を進める。(2)軟部肉腫コホートにおける同定遺伝子変化及びリン酸化タンパク質発現の頻度の探索として、(1)で同定に成功している著効例特異的遺伝子変化・リン酸化タンパク質発現を軟部肉腫コホートに対してmRNA及びタンパク質発現レベルで検証を進める。更には臨床病理学的素因と共にPazopanibが著効する因子を明らかにする。(3)著効例特異的遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現の機能解析として、細胞株を用いて著効例特異的遺伝子増幅の遺伝子導入を行い、細胞増殖・がん化能以外の薬剤奏功性の観察を進め、薬剤奏功性能における機能を明らかにする。更にはinvivoにて腫瘍増殖や薬剤奏功性の観察を進め、実際のバイオマーカーや治療標的としての可能性を明らかにする。下記ステップを順次達成し、現在まで未知である難治性軟部肉腫におけるPazopanibの治療奏効・抵抗因子の解明を進め、新規個別化治療法・新規分子標的治療法の開発を行い、飛躍的な難治性軟部肉腫の生命予後改善を目指す。本年度はRNA-seqとDNA-seq解析及びリン酸化アレイを行い、奏効性候補ターゲットの同定に成功した。(2)軟部肉腫コホートにおける同定遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現の頻度の探索:(1)で同定に成功している著効例特異的遺伝子変異・リン酸化タンパク質発現を軟部肉腫コホート(FFPE)に対してPCR法及び免疫染色法を用いて探索。次年度以降に行う。(3)著効例特異的遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現の機能解析:腫瘍細胞株を用いて著効例

特異的遺伝子変異の遺伝子導入を行い、細胞増殖や薬剤奏功性の観察を進め、がん化能・薬剤奏功性能などの機能を明らかにする。次年度以降に行う。本年度、(1) Pazopanib著効症例の特異的遺伝子変異と特異的リン酸化タンパク質発現の解明として、Pazopanib著効例の腫瘍検体と正常組織を用いたNGSによる網羅的遺伝子変異解析(RNA-seqとDNA-seq解析)及びリン酸化アレイによる発現解析を行い、Pazopanib著効例の腫瘍特異的遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現のプロファイルを明らかにし、奏効性候補ターゲットの同定に成功したが、計画時予測した治療ターゲットより複雑な発現機構を示したため、同定に時間がかかりやや遅れている。本研究は、難治性かつ「希少がん」である高悪性軟部肉腫における生命予後の改善に貢献する新規治療法の開発を目的とする。具体的には我々のグループが、Tyrosine kinase (TK)阻害剤であるPazopanib著効例の高悪性軟部肉腫手術検体より新規発見したキナーゼ遺伝子変異、及びそれらに一致したリン酸化タンパク質の高発現に注目し、大規模コホートによる変異・発現検証及びin vitro, in vivoの機能解析を行う。(1) Pazopanib著効症例の特異的遺伝子変異と特異的リン酸化タンパク質発現の解明:Pazopanib著効例の腫瘍検体と正常組織を用いたNGSによる網羅的遺伝子変異解析(RNA-seqとDNA-seq解析)及びリン酸化アレイによる発現解析を行い、Pazopanib著効例の腫瘍特異的遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現のプロファイルを明らかにする。その結果としてRNA-seqとDNA-seq解析及びリン酸化アレイを行い、奏効性候補ターゲットの同定に成功した。(2)軟部肉腫コホートにおける同定遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現の頻度の探索:(1)で同定に成功している著効例特異的遺伝子変異・リン酸化タンパク質発現を軟部肉腫コホート(FFPE)に対してPCR法及び免疫染色法を用いて探索する。著効例で同定されたGLI1遺伝子増幅、mRNA高発現を高悪性軟部肉腫コホート内で検証を行い、著効例特異的であることを確認した。(3)著効例特異的遺伝子変異及びリン酸化タンパク質発現の機能解析:腫瘍細胞株を用いて著効例特異的遺伝子変異の遺伝子導入を行い、細胞増殖や薬剤奏功性の観察を進め、がん化能・薬剤奏功性能などの機能を明らかにする。細胞株内にGLI1の導入を行い癌化能の確認に成功した。本年度、(1) Pazopanib著効症例の特異的遺伝子変異と特異的リン酸化タンパク質発現の解明として、Pazopanib著効例の腫瘍検体と正常組織を用いたNGSによる網羅的遺伝子変異解析(RNA-seqとDNA-seq解析)及びリン酸化アレイによる発現解析を行い、Pazopanib著効例の腫瘍
遺伝子多型に着目した島嶼地域における動脈硬化の生理的多型性の解明

動脈硬化の新たな危険因子であるホモシステインの血中濃度(Hcy)と、その代謝酵素であるメチレンテトラヒドロ葉酸還元酵素(MTHFR)の遺伝子多型(C677TによるCC, CT, TTの3型)について、人口1,OOO人未満の小離島、比較的人口の多い大離島、そして本土の地方都市の住民を対象として調査を行った。同時に、動脈硬化の指標である頚動脈内膜中膜複合体厚(IMT)と心臓足首血管指数(CAVI)を測定した。小離島281名、大離島1,695名、本土291名に協力を得た。3地域間のMTHFR遺伝子多型には差を認めなかったが、Hcyは小離島が11.1(±0.3,SD)μmol/lと最も高く、次いで大離島8.8(±O.1,SD)μmol/l、本土6.6(±0.3,SD)μmol/lの順で有意差を認めた。MTHFR遺伝子多型のうちTT型がHcyの上昇を来しやすい型とされるが、小離島ではCC+CT群10.0(±O.4,SD)μmol/lとTT群18.7(±0.9,SD)μmol/lに大きな差があり、大離島でもCC+CT群8.7(±0.1,SD)μmol/1とTT群10.0(±0.4,SD)μmol/lとに有意差を認めた。本土ではCC+CT群6.7(±0.3,SD)μmol/lとTT群6.6(±0.7,SD)μmol/lに有意差を認めなかった。IMT値およびCAVI値は、3地域間やMTHFR遺伝子多型間に有意差はなく、Hcyとの関連も認められなかった。生活環境の違う3地域の調査で、遺伝因子に差がないにもかかわらずHcyに地域差があることを証明した。原因として遺伝因子を上回る環境因子、特に食習慣などの関与が強く疑われる。Hcyと動脈硬化の指標が関連しなかった点は、Hcyの低下が動脈硬化性疾患の発症予防には寄与しないとする近年の大規模介入試験の報告を指示する結果かもしれない。1.島嶼地区におけるサンプル収集文書による同意を得た上で、大離島の福江島で1,139件、その周辺小離島の嵯峨島、椛島、黄島で160件のサンプルを収集した。アンケート結果、身体測定値、Cardio Ankle Vascular Index、頚動脈の内中膜複合体厚、一般血液検査値はデータベース化し、血液は血球成分と血清、血漿に分離して-30°Cで凍結保存した。2.サンプル測定と解析血中ホモシステイン濃度は高速液体クロマトグラフィーにより測定した。また、ホモシステイン代謝に関与するMTHFR(Metylene-Tetra-Hydro-Folate-Reductase)遺伝子の変異(C667T)について解析を行った。この結果、MTHFR遺伝子変異(CC/CT/TT)については福江島と小離島間に差がなかったものの、血中ホモシステイン濃度については福江島(8.4±3.7μM)と小離島(11.7±6.5μM)間に有意差(p<0.001)を認めた。MTHFR遺伝子多型間での解析では、福江島(CC/CT/TT:8.0±2.5μM/8.5±4.4μM/10.4±4.0μM)と小離島(CC/CT/TT:10.5±3.8μM/11.0±3.7μM/19.1±14.5μM)のそれぞれで、CCとTT間(福江島p<0.001、小離島p<0.01)、CTとTT間(福江島p<0.005、小離島p<0.01)に有意差を認めている。また、同じMTHFR遺伝子多型間における血中ホモシステイン濃度を比較してみると、福江島に比べて小離島が有意に高値であった(CC:p<0.001、CT:p<0.001、TT:p<0.01)。血清CETPに関しては、HDLコレステロールの正常値70mg/dlを超えるサンプルについて測定を行った。この結果2検体で低値であることが判明し、現在CETP遺伝子変異についての解析を進めている。MTHFR遺伝子多型のうちTT型がHcyの上昇を来しやすい型とされるが、小離島ではCC+CT群10.0(±O.4,SD)

μmol/lとTT群18.7(±0.9,SD)μmol/lに大きな差があり、大離島でもCC+CT群8.7(±0.1,SD)μmol/1とTT群10.0(±0.4,SD)μmol/lとに有意差を認めた。本土ではCC+CT群6.7(±0.3,SD)μmol/lとTT群6.6(±0.7,SD)μmol/lに有意差を認めなかった。IMT値およびCAVI値は、3地域間やMTHFR遺伝子多型間に有意差はなく、Hcyとの関連も認められなかった。生活環境の違う3地域の調査で、遺伝因子に差がないにもかかわらずHcyに地域差があることを証明した。原因として遺伝因子を上回る環境因子、特に食習慣などの関与が強く疑われる。Hcyと動脈硬化の指標が関連しなかった点は、Hcyの低下が動脈硬化性疾患の発症予防には寄与しないとする近年の大規模介入試験の報告を指示する結果かもしれない。
デジタル・エコノミーの進展と女性在宅ワーカーのスキルアップ支援

2002年度は在宅ワーカーとして働いている女性12名と在宅ワーカーを組織しているネットワーカー3名にインテンシヴな面接調査を行うことができた。1ネットワーカーの調査ネットワークを組織、運営していく中で在宅ワーカーの技能レベルは重要な課題になっている。それについて積極的にオフ会などで指導をするものもいれば、全くワーカーの自助努力ということで何の指導もしないものもいる。また、一緒に仕事をしたい人には何年かかってもアプローチをし、それでネットワークを作ったケースもあった。以上のように高い技能を持つ人の確保は簡単には行かず、単なる下請としてワーカーを使うか、技能形成も含めて面倒を見ていくのかは組織する者の指向性によってはっきり分かれている。2女性ワーカーの面接調査(1)在宅ワーカーの技能形成については、学卒後就職した企業でパソコンについての基本的な操作や知識を得た者が多い。また、現在行っている仕事も以前の勤め先と関係あることが多い。(2)在宅ワーカーの職業教育については、ほとんどの場合OJT、独自で仕事をしながら努力するという形で行われている。これは細分化された在宅ワーカーの仕事に対応する教育機関がないこと、在宅ワーカーの中でも仕事を始めたばかりの者と仕事が軌道に乗ってきた者など様々なニーズを持つものがおり、対応が難しいのが現状である。しかしながら、力のあるネットワーカーは勉強会を開いたり、様々な情報をMLで流したりと努力をしている。(3)ワーカーの仕事と家庭の両立については、各自がかなりの努力を行っていることでそれが可能になっている。家事の合理化や省力化を行い、場合によっては親の援助を受けながら仕事のための時間を確保している。<1 SOHOおよび在宅ワークに関連する機関調査>機関調査として、関西デジタルコンテンツ協同組合、SOHOギルド、日本SOHO協会の機関の調査を行った。これらの組織では、主に独立開業してSOHOという形で働いている人々を組織の対象としているので、いわゆる在宅ワーカーは主な対象とはなっていない。もちろん、在宅ワーカーでも加入している人はいるが、在宅ワーカーによる在宅ワーカーのための主体的、積極的な活動は今のところは行われていないことがわかった。<2在宅ワーカーの登録会社、フリーの在宅ワーカーの調査>次に在宅ワーカーが登録して仕事を受ける元請けとなる企業、登録会社と呼ばれる企業経営者の聞き取り調査も行った。これはA社(東京)とB社(北見)の2社で行った。2社ともITの浸透でかなり多くの女性から登録希望がある。登録を希望する女性は30-40歳代で、子育て中のことが多い。これらの女性らが家庭に普及したパソコン、インターネットを使って仕事を希望しているのである。しかし、登録希望者の仕事の技能レベル、あるいはやる気などはまちまちで会社では様々な対応を行っている。B社ではまずトライアルを3回程度行い、技能レベルややる気がある者だけを採用する。A社では登録希望者は全員採用し、仕事をさせていくなかで適性がない者を篩いにかけていく。また、自分でフリーランスで在宅ワークをしているCさんにも調査を行った。彼女が強調するのは、在宅ワークの成否は本人のやる気、プロ意識で、人から何かをしてもらうのを待っている人は仕事はとれないという。以上のように在宅ワークとひと括りにはできず、1登録会社に登録をして仕事を探すタイプと2フリーランスで独自にネットワークを組織しながら仕事をして行くタイプがあることが解った。
両漢における「謠」の社会思想史的研究

『史記』『漢書』『後漢書』に記録される豊富な「謠」をひとつひとつ歴史事実に基づいて整理していくと、これまでの注釈では意味不明とされていた「謠」も真に意味する所が明らかになり、「謠」が中国古代社会思想史の深層を知る資料であることが再確認できた。今年度の研究では以下のような成果があった。1.後漢桓帝期の「謠」を歴史事実に即して分析してひとつひとつの「謠」に隠されたメッセージを明らかにし、桓帝期の社会・政治の深層を論じた。また、テキストクリティークによって意味不明とされた「謠」の真相も明らかにされた(「桓帝期『童謠』の諸相」)。2.これまでの「謠」に関する内外の研究を整理するとともに、「謠」研究の意義を明らかにした。また、後世「童謠」は〓惑星と結び付いて天の託宣(神託)としての性格を濃厚にするが、それは早くとも後漢末であること、両漢の「童謠」とは切り離して考えるべきであることを論じた(「中国古代『謠』の社会思想史的研究-その課題と研究史」)。3.『史記』中の「淮南民歌」と「〓川兒歌」の内容がいずれも歴史事実と一致しないこと、そこには共通する人物武安侯田〓が隠されていること、それは司馬遷の武帝批判であることを論証し、『漢書』と比較しつつ「民歌」や「兒歌」も「謠」と同じ社会思想史的資料であることを明らかにした。(「『淮南民歌』と『〓川兒歌』に司馬遷が託すもの」)。4.漢王朝の簒奪者王莽を謗る「謠」が全くないことを指摘し、その社会思想史的意味を問うた。すなわち、成帝期・王莽期・更始期の「謠」を分析することによって、実は王莽は当時の知識人から成帝に代わる期待された人物であったということを論じた(日本中国学会第45回大会における口頭発表)。なお、成帝期の「謠」については平成6年9月に公表される。王莽期の「謠」に関しては更に揚雄「劇秦美新」と併せて論ずる予定である。
フラボノイド類の抗酸化活性機序の分子レベルでの解明とアポトーシス誘導阻害への影響

フラボノイド類は植物中に含まれる抗酸化物質であり、フラボノール類、イソフラボン類、アントシアニン類などに分類できる。私はこれらの化合物群に興味を抱き、研究を展開して来た。1)アントシアニン類アントシアニン類はブルーベリー中に含まれる稿酸化物質であり、眼精疲労に効果があることが旧来より知られていた。アントシアニン骨格の不安定さもあり、詳細な検討は行われてこなかった。本研究において、私はブルーベリー中に含まれる15種類のアントシアニン類のHPLC分離に成功した。このアントシアニンの分離を用いてアントシアニンの活性酸素に対する反応性を詳細に検討した。これらの成果は論文5報にまとめている。2)フラボノイド類フラボノイド類の抗酸化活性は旧来より広く関心がもたれ研究されて来た。私はゴボウ葉中に含まれるフラボノイド類の抗酸化活性を測定しまとめた。また、フラボノイド類の一つであり玉葱に多く含まれるケルセチンの酸化を種々のシステムで試み、酸化生成物の同定を行いまとめた。3)イソフラボン類大豆などに含まれるイソフラボン類も植物に含まれる効酸化物質の一つとして位置付けられ研究が進められて来た。私はイソフラボンの代表的な化合物であるダイゼインやゲニステインの抗酸化活性を検討し、それらが細胞に及ぼす影響を研究した。これらの研究成果も論文としてまとめている。4)物質の酸化ストレスをモニターする物質として汎用されているのは蛍光性分子プローブである。その代表的なものがジクロロフルオレシン(DCFH)である。DCFHは酸化ストレスを受けると参加され蛍光性のDCFに変化するが、我々が詳細に検討したところDCFだけではなく他の蛍光性物質も生成していることが判明した。この結果は酸化-抗酸化研究に用いられている分子プローブの危険性を証明したものであり、フラボノイド類の抗酸化システムを研究する過程で見い出したものである。5)その他抗酸化物質は生体内において酸化-還元プロセスを通して再生されていく。そうした抗酸化ネットワークに関わる鍵化合物としてリボ酸が知られているが、蛋白質に結合したリボ酸のモデル化合物としてのリポイルリジンを合成し、その抗酸化活性を検討し現在フラボノイド類を含むポリフェノール化合物との相互作用を研究している。フラボノイド類の抗酸化作用には不明な点も多く、その反応機構、及び構造と活性の相関はいまだ明らかではない。今年度は、次亜塩素酸とフラボノイド類の研究を通して、抗酸化活性能、ラジカル消去能の高いフラボノイド類が以下の特徴的な構造を有することを明らかにした。(1):B環のカテコール構造、(2):5,7位のヒドロキシル基、(3):C環C2_3位の二重結合と共役するカルボニル基、(4):C環3位のヒドロキシル基の4つである。(1)については、モリンとクエルセチンを例にとり、ESRスペクトルの結果や次亜塩素酸との反応を通して、B環にカテコール構造を有していないモリンはクエルセチンよりラジカル消去活性、抗酸化活性とも劣っていた。

(3)についてはクエルセチンとカテキンの抗酸化活性を検討し、二重結合とカルボニル基を有していないカテキンがクエルセチンよりラジカル消去活性、抗酸化活性とも劣っていた。(4)についてはクエルセチンと配糖体であるルチンの活性酸素に対する反応性の違いを示すことより、3位のヒドロキシル基の役割の重要性を明らかにした。次亜塩素酸とフラボノイド類の反応の過程で非常に多くの生成物が得られるが、まず分取条件を決定し分取用高速液体クロマトグラフィー(HPLC)で分離を行なった後、精製して構造決定を行なった。量子化学計算はB環のヒドロキシル基の付いている位置の異なるクエルセチンとモリンを用いた。その最低エネルギー状態を求めた時にB環とC環のなす角度が大きく異なることが判明した。更にC環3位のヒドロキシル基の水素をラジカルとして引き抜いた後に生成してくる母核のアルコキシルラジカルの安定性を調べ、クエルセチンはクロマン環に生成したラジカルがB環のカテコール構造と共役となりうる平面構造を取るのに対して、モリンでは平面構造がとりえないためラジカルとしての安定性が大きく異なる可能性が明らかになった。フラボノイド類は基本骨格によりフラボノール、アントシアニンなどに分類され、異なる生物活性を発現する。アントシアニン類は、その構造が不安定であることなどから取扱いが困難であったこともあり、研究の展開が遅れていた。こうした難点を克服するために、まずアントシアニンを効率良く分析するシステムの開発を行うと同時にアントシアニン類の抗酸化能力を検討することを行った。1.アントシアニンの定量分析法の開発個々のアントシアニンを単離せず、同時にそれらの反応性を評価するには精確な分離分析法の開発が必須である。キャピラリー電気泳動によるブルーベリーアントシアニンの分離を用いて、個々のアントシアニンの加水分解反応を追跡した。トリフルオロ酢酸(TFA)低濃度においては、生成してくるアグリコンは速やかに開環分解するが、TFA局高度条件ではアグリコンの重合反応が優先的に起こった。アントシアニンの酸加水分解速度は、結合糖の種類により、速度が異なり、アラビノシド>ガラクトシド>グルコシドの順であることがわかった。2.アントシアニンの抗酸化活性-活性酸素種と活性窒素種への反応性の違いと構造活性相関-アントシアニンの活性酸素種に対する反応性は母核と活性酸素種により大きく異なるが、反応性の違いはアグリコンの構造に大きく起因し、結合している糖の種類にはよらないことが判明した。アントシアニンのラジカルに対する反応性をAAPHラジカルとスーパーオキシドアニオンラジカルで検討したところ、delphinidin配糖体が高い反応性を不した。一重項酸素においても同様な実験結果が示され、delphinidin配糖体が最も高い反応性を持ち、これに、malvidin配糖体が次ぐこと判明した。3.フラボノイド類の抗酸化活性評価ごぼう葉に含まれているフラボノイオ類の抽出解析を行い、抽出プロセスと抗酸化活性の関連を検討したところ、抽出プロセスを繰り返し行ったサンプルが抗酸化活性が高かった。1、アントシアニンの定量分析法を用いたブドウ品種48種類に含まれるアントシアニンの解析個々のアントシアニンを単離せず、同時にそれらの反応性を評価するには精確な分離分析法の開発が必須である。
卒前教育における代替医療の現状と今後の課題

先進各国で代替医療に対する需要が高まる中、本研究の日的は日本の医学部における代替医療教育の現状を把握し今後の代替医療卒前教育の課題を探求することである。平成18年度は、まず平成17年度「日本の医学部における代替医療卒前教育の実態と担当者の意識に関する質的研究」を継続した。本調査は平成16年度全国調査より代替医療教育を実践している医学部教員を抽出し行ったインタビュー調査である。26名の対象者を作為的に選出し20名から同意を得た。調査期間は平成18年1月6日から平成19年2月6日で17名(男性16名、女性1名、平均年齢53.8歳)にインタビューした時点で飽和状態に達した。調査内容は代替医療の教育内容、教育方針、改善点で、平均インタビュー時間は68.6分、文字化したデータやフィールドノート等を質的に解析した。教員共通の意見は良い医師を養成することであった。臨床を含めた教育が理想的だが環境整備とマンパワー不足があり、現状では代替医療に対する偏見を軽減し興味を持たせることを目標とする意見が目立った。さらなる探求を継続し最終報告書で詳細を報告する。原著論文として日本医学教育学会誌に投稿の予定である。また平成18年10月にはアリゾナに出張し、北米プライマリケア研究会(NAPCRG)定例総会で平成16年度全国調査をプリイマリケアの視点から再解析した結果について発表した。代替医療/統合医療教育をリードするアリゾナ大学Program in Integrat iveMedicineを訪問し、所長のVictoria Mazieにインタビューを行い米国の代替医療教育について見識を深めた。これについては「治療」誌CAM特集に掲載された。米国では統合医療の担い手を家庭医の延長上に位置づけており、アリゾナ大学の試みについてはカレントテラピー誌の平成19年10月号の総合診療特集においても掲載の予定である。研究課題:全国医学部における代替医療教育の現状(追跡調査)方法:前調査同様、全80大学医学部の教務担当事務員を対象とした電話調査で、CAMが公式カリキュラムに含まれるか否か確認し、教育内容、形式、担当講座、担当者、授業時間、年間回数などを調査した。2005年7月22日から8月31日の期間に実施した。結果:回答率は100%で、全80校中69校(86%)でCAM教育が実施されていた。1999年は16校(20%)なので、5年間で実施校が著しく増加した。実施校のすべてで漢方(100%)が、21校で鍼灸(30%)がなされていた。前調査では95%が東洋医学という結果だったが、本調査ではCAMという広い枠組みで教育する医学部が14校(20%)認めた。その内容は、健康食品、サプリメント、指圧・あんま・マッサージ、柔道整復、スピリチュアルケア、アロマセラピー、カイロプラクティック、呪術、シャーマン、カルトなど多彩であった。また、CAM領域のEBMを教育する医学部が7校(10%)と目立った。担当者は東洋医学、漢方医学、CAMなどの専門家が37校をしめ、専門機関が存在しない大学は専門家を非常勤講師として招聘して実施していた。結論:1999年から2004年の5年でCAMを教育する医学部は急増した。漢方の必修化と、医療従事者へCAMが浸透しはじめたことが影響していると思われる。中間報告として第36回日本医学教育学会に「日本の医学部における相補代替医療教育の現状:第2報」と題して発表。現在、同学会誌に「全国医学部における相補代替医療教育の現状:追跡調査1999-2004」と題した原著を投稿中。上半期は平成16年度研究課題「全国医学部における代替医療教育の現状(追跡調査)」の発表を行い、下半期は平成17年度研究課題で「日本の医学部における代替医療卒前教育の実態と担当者の意識に関する質的研究」を実施した。<平成16年度>全国80大学医学部の教務担当事務員を対象に相補代替医療(complementary and alternative medicine : CAM)教育の実態を把握する電話調査を実施し、1999年に実施した同調査と比較検討した。回答率は100%で、CAM教育を実践する医学部は69校(86%)認めた。前調査では16校(20%)であり5年間で卒前教育にCAM教育を導入した医学部は著しく増加した。教育内容については69校全校(100%)で漢方、21校(30%)で鍼灸の教育がなされていた。前調査では95%が東洋医学という結果だったが、本調査ではCAMという広い枠組みで教育する医学部が14校(20%)あり、教育内容は多彩であった。学会発表:相補代替医療(CAM)の卒前教育とプライマリ・ケア:全国調査1999-2004.第28回日本プライマリ・ケア学会.京都、2005年5月28日日本の医学部における相補代替医療教育の現状(第3報):追跡調査1999-2004.第37回日本医学教育学会.東京、2005年7月29日

論文発表:全国医学部における相補代替医療教育の現状:追跡調査1999-2004.医学教育36(5):323-328,2005.<平成17年度>平成16年度の調査結果より、CAMの教育を積極的に行っている医学部の教育担当者を対象に半構造的面接法(semi-structured interview)によるインタビュー調査を行った。対象者は作為的(purposefnl sampling)に26名を選出した。23名から返事があり20名から協力の同意を得た。調査内容はCAMの教育内容、教育方針、改善点などである。2006年2月20日の時点で13名のインタビューを実施したが、飽和状態(saturation)に達する見込みがなく、平成18年度も同調査を継続することとした。先進各国で代替医療に対する需要が高まる中、本研究の日的は日本の医学部における代替医療教育の現状を把握し今後の代替医療卒前教育の課題を探求することである。平成18年度は、まず平成17年度「日本の医学部における代替医療卒前教育の実態と担当者の意識に関する質的研究」を継続した。本調査は平成16年度全国調査より代替医療教育を実践している医学部教員を抽出し行ったインタビュー調査である。26名の対象者を作為的に選出し20名から同意を得た。調査期間は平成18年1月6日から平成19年2月6日で17名(男性16名、女性1名、平均年齢53.8歳)にインタビューした時点で飽和状態に達した。調査内容は代替医療の教育内容、教育方針、改善点で、平均インタビュー時間は68.6分、文字化したデータやフィールドノート等を質的に解析した。教員共通の意見は良い医師を養成することであった。臨床を含めた教育が理想的だが環境整備とマンパワー不足があり、現状では代替医療に対する偏見を軽減し興味を持たせることを目標とする意見が目立った。さらなる探求を継続し最終報告書で詳細を報告する。原著論文として日本医学教育学会誌に投稿の予定である。また平成18年10月にはアリゾナに出張し、北米プライマリケア研究会(NAPCRG)定例総会で平成16年度全国調査をプリイマリケアの視点から再解析した結果について発表した。代替医療/統合医療教育をリードするアリゾナ大学Program in Integrat iveMedicineを訪問し、所長のVictoria Mazieにインタビューを行い米国の代替医療教育について見識を深めた。これについては「治療」誌CAM特集に掲載された。米国では統合医療の担い手を家庭医の延長上に位置づけており、アリゾナ大学の試みについてはカレントテラピー誌の平成19年10月号の総合診療特集においても掲載の予定である。