hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
Myocardial hibernationの病態および成因に関する実験的研究

1)心機能の評価NMRコイルやペ-シング・リ-ドは植え込んだがペ-シングを行わずに経過を見た対照群と,rapid ventricularpacingを535日行いペ-シング中止後15分7日経過をみたHIBERNATION群(以下H群)のペ-シング終了直後の圧デ-タを比較すると、左室拡張期末圧と左室peak negative dp/dtに有意差を認めた。Rapid ventricularpacing中止後の心機能回復過程をみると、左室peak dp/dtはペ-シング終了60分後に有意に改善し、左室収縮期圧も120分後に有意に上昇して、ペ-シング中止後早期に収縮能が回復することが示唆された。一方、左室拡張終期圧はペ-シング中止後7日して初めて有意な改善を認め、左室拡張能の回復には比較的時間がかかることが示唆された。2)NMRスペクトロスコピ-によるリン酸化合物代謝の評価Phosphomonoester(PME),inorganic phosphate(Pi),phosphodiester(PDE),phosphocreatine(PCr),ATPの3つのリン酸基(αーATP,βーATP,γーATP)および標準物質HMPTのピ-クについて、対照群とH群で検討した。対照群では、手術直後に比べると全般にピ-クの減少することはあるが、手術1週間以後は比較的安定した^<31>Pスペクトルが得られた。H群ではペ-シング前に比しペ-シング終了直後にPCrやβーATPが減少するものが多かったがばらつきがあり、全体としては有意でなかった。ペ-シング終了後3時間までのそれらの回復は少ないようであった。3)HPLCによる心筋内高エネルギ-リン酸化合物の測定ペ-シング終了後の心筋摘出までの時間(1時間4例、3間時2例、7日1例)と比較したところ有意差が無かったが、例数が少なく確定的でない。以上より、rapib ventricular pacingがhibernating myocardiumの研究に有用である可能性があり、今後のデ-タの蓄積が必要である。Rapid ventricularpacingによるhibernating myocardium(冬眠心筋)の作成をこれまで約30頭について行った。それらのうち良好なデ-タの得られた15頭についてみると、左室peak dp/dtはペ-シング終了60分後に有意に改善し(1550±426→1814±406mmHg/sec,n=10,p<0.005)、左室収縮期圧も120分後に有意に上昇して(105±15→121±16mmHg,n=9,p<0.05)、ペ-シング中止後早期に収縮能が回復(冬眠から覚醒)することが示唆された。ただし心室容積測定装置シグマ5システムを用いたコンダクタンス・カテ-テル法による心機能の測定では、E_<max>の有意な改善が見られなかったが、これについてはn=15と、例数が少ないことによる可能性がある。

一方、左室拡張終期圧はペ-シング中止後7日にして初めて有意な改善を認めたが(16±6→13±9mmHg,n=3,p<0.05)、左室peak negative dp/dt(n=17)や左室等容弛緩期圧曲線の時定数T(n=15)の改善を認めず、左室拡張能の回復には比較的時間がかかることが示唆された。以上よりhibernating myocardiumの回復過程では、まず収縮能が改善し、続いて拡張能が改善すると考えられるが、いずれも今後例数を増やしてさらによく検討する必要がある。なお、^<31>P NMR spectroscopyについては良好なin situ NMR spectrumを得るために、現在シム調整や適切な表面コイル作成に鋭意努力中である。また、electron probe x-ray microanalysisについては、凍結超薄切片をドライアイス下に凍結真空乾燥して、X線分析装置(EDAX 9100)で分析したところ、Caなどのpeakは出るが細胞形態が保持できないためにその局在の同定は困難であった。Rapid ventricularpacingによるhibernating myocardiumの作成をこれまで約40頭について行った。それらのうち良好なデ-タの得られた16頭についてみると、左室peak dp/dtはペ-シング終了60分後に有意に改善し(1683±599→1920±544mmHg/sec,n=11,p<0.02)、左室収縮期圧も120分後に有意に上昇して(107±16→122±15mmHg,n=10,p<0.005)、ペ-シング中止後早期に収縮能が回復することが示唆された。ただし心室容積測定装置シグマ5システムを用いたコンダクタンス・カテ-テル法による心機能の測定では、Emaxの有意な改善が見られなかったが、これについてはn=16と、例数が少ないことによる可能性がある。一方、左室拡張終期圧はペ-シング中止後7日して初めて有意な改善を認めたが(21±9→13±10mmHg,n=3,p<0.005)、左室peak negative dp/dt(n=18)や左室等容弛緩期圧曲線の時定数T(n=18)の改善を認めず、左室拡張能の回復には比較的時間がかかることが示唆された。以上よりhibernating myocardiumの回復過程では、まず収縮能が改善し、続いて拡張能が改善する可能性がある。1例で^<31>P NMRスペクトロスコピ-によりペ-シング終了後の変化を3時間にわたってみたところ、phosphomonoesterは徐々に増加、無機リン酸は初めの1時間で著明に減少、phosphodiesterは1時間にわたり増加した後、減少した。Phosphocreatineは3090分にovershoot傾向を示しながら回復し、ATPは徐々に増加した。ペ-シング終了3時間後にHPLCで測定したphosphocreatineは正常、ATPは正常の約8割であった。この例では極めて軽度の虚血が短時間のうちに回復したわけであるが、rapid ventricularpacingに対する反応は個体によりかなり違いがあり、一律に250/分でペ-シングしても、早期に強度の心不全を起こすものから全く状態の変わらないものまであり、今後さらに、例数を重ねて検討する必要がある。1)ペ-シング犬の心機能の対照群(sham operation群)との対比NMRコイルやペ-シング・リ-ドは植え込んだがペ-シングを行わずに6112日(66.3±51.0日)経過を見た対照群6頭(体重12.2±3.4kg)のうち2頭の圧デ-タと、rapid ventricularpacingを535日(21.5±9.4日)行いペ-シング
近現代フランス習慣論の美学的射程―「創造」と「飽き」

本研究ではまず、近現代フランス哲学史上の習慣概念を、感性という枠組みから読みなおし、それが、「創造」概念といかにかかわるかをさぐった。習慣論の「経験論的転回」とともに、不変性たる習慣から、可変性たる習慣へと習慣概念の含意が移り変わるにつれ、習慣が創造とかかわるにいたる。そのとき「飽き」は、創造の受動性という両義的な役割をになう。すなわち、古(旧)いものの忌避の感情でありながら、いわば内側からの更新を果たす。そうした「飽き」を「身体図式の組み替え」にさいしての「疎外感」とメルロ=ポンティは言い、河本英夫は「総合的感性」と呼んだ。資料の収集と精読:モンテーニュの『エセー』、パスカルの『キリスト教護経論』、『パンセ』、デカルトの『方法序説』、『精神指導の規則』、コンディヤックの『人間認識起源論』、『感覚論』、『動物論』、『論理学』、メーヌ・ド・ビラン『習慣論』、ラヴェッソン『習慣論』、ベルクソン『物質と記憶』、『創造的進化』、メルロ=ポンティ『知覚の現象学』、ドゥルーズ『差異と反復』の精読を進めた。概念リストの作成:精読と同時に、後の内容分析のために、習慣およびそれに関連する諸概念を含む記述箇所のリスト作成を進めた。精読のさいに、次の二点を念頭に置き、該当箇所を随時メモをとるかたちで、記録し、電子デイタベース化した。i)「理性(知性)」、「感性(感覚)」、「精神」、「身体」、「能動」、「受動」といった二元論的諸概念と習慣概念の関係を示す記述をピックアップする。ii)「飽き」にかかわる記述をピックアップする。研究計画・方法に即して、研究を進めているので。2015年度の作業である文献精読のさいに、「理性(知性)」、「感性(感覚)」、「精神」、「身体」、「能動」、「受動」といった二元論的諸概念と習慣概念の関係を示す記述をピックアップした。2016年度は、ピックアップした箇所を中心に、再度、諸文献を確認しつつ、美学的見地からの習慣論の系譜を作成した。具体的には、個々の思想家が理性と感性の二元的枠組みの中で(あるいはそれを超えて)、どのように習慣概念を位置づけているかという視点から各思想家の習慣概念を散文的に記述し、諸思想家を分類した。2015年度の文献精読のさいに、「飽き」にかかわる記述をピックアップした。2016年度は、ピックアップした箇所をもとに、飽き論の系譜のリストを作成した。また、同じく2016年度に進めた、「感性的質」である「かっこいい」の研究のなかで、「かっこいい」が、その内包において、語源の一つである「恰好」から、適合性に対する感性(ぴったりきていることがぴったりくる)をひきついでいることを明らかにした。そのうえで、「かっこいい」は、逆説的に、適合の不適合(ぴったりくることがぴったりこない)、不適合の適合(ぴったりこないことがぴったりくる)をはらみ、「ずらし」や「はずし」という感性に至ることを見とおした(「「カッコイイとは、こういうこと」かー適合性suitabilityの感性化」(美学会第67回全国大会2016年10月)、「「カッコイイとは、こういうこと」かー適合性suitabilityの感性化(発表要旨)」(『美学』67, 2, 98、2016年12月)、「「恰好」から「かっこいい」へー適合性suitabilityの感性化」『人間科学研究』13号、2017年3月)。こうした逆説は、習慣と「飽き」の問題の圏内で論じうるテーマであり、ひきつづき、本研究課題のサブテーマの一つという位置づけで論究したい。本研究課題である「飽き」概念の研究とは別に進めていた「かっこいい」概念の研究を、「飽き」概念研究にくみいれうることを発見したから。平成27年度、28年度の資料調査、精読、分析の成果をフィードバックし、習慣論の系譜を再編成したうえで、それに基づき、フランス近現代の美学的習慣論の系譜、および「飽き」論を包括的なかたちで散文的に記述した。その結果、とりわけメルロ=ポンティ(1908-61)の習慣論、芸術論を、河本英夫『飽きる力』(2010)と併せながら、「飽き」論と読む可能性を提示した。おおむね研究計画・方針に即して進める。1美学的習慣論の系譜作成:27年度から続けている美学的習慣論の系譜作成精読を終えたところで、前年度のメモに基づき、ピックアップした箇所を中心に再度確認しつつ、美学的見地からの習慣論の系譜を作成する。具体的には、個々の思想家が理性と感性の二元的枠組みの中で(あるいはそれを超えて)、どのように習慣概念を位置づけているかという視点から各思想家の習慣概念の概要を散文的に記述しながら、諸思想家を分類する。

また、思想家ごとに理性、感性の意味内容も異なるため、単に習慣を表現する語の異同に基づく平面的な分類にとどまらず、語法そのもののずれも視野に入れた立体的な系譜の作成を目指す。2飽き概念のリスト作成:一次文献精読の際、前年度のii)に基づくメモを活用し、飽き論の系譜のリストを作成する。具体的には、各思想家が飽きを指示するのに、「倦怠ennui」や「嫌気」、「疲労fatigue」、「飽満rassasiement」他、どのような語を用いているかのリスト作成であり、またそれは同時に、どのようなフランス語を日本語の「飽き」に回収するかという応募者の解釈を反映するリストでもある。また、各思想家において、「飽き」が「習慣」とどのような関係を結んでいるかも同時にリストに記載していく。こうした作業は、29年1月までに終える。平成27年度は、フランスの国立図書館での調査にかえて、北海道大学付属図書館、ならびに国立国会図書館での調査を多くおこなった。28年度、29年度にフランスでの調査をおこなう可能性がある。習慣論の系譜を再編成したうえで、それに基づき、メルロ=ポンティまでを視野に入れた美学的習慣論の系譜、および「飽き」論を包括的なかたちで散文的に記述していく。その成果の一部と、同時に進める「かっこいい」研究の成果を、美学会をはじめ、学会で発表し、また、研究雑誌に投稿する。美学・芸術学物品を、研究費の申請したときに想定していたよりも、安く購入できたため。旅費の一部に使用します。
形質転換緑藻クラミドモナスを用いた光化学系IIの構造と機能の解析

光化学系II酸素発生部位の詳細な解析のため、緑藻C. reinhardtiiを用い、D2タンパク質のTyr-162(いわゆるTyrD)の欠失変異株を作製した。まずPELDOR(Pulsed Electron DOuble Resonance)法により構造を解析した。TyrDを欠失したことにより単独のラジカルとして測定が可能となったTyrZ(活性チロシン残基である)と第一電子受容キノンであるQAとの距離は、34.5±1Åと決定した。次に、P680+の再還元キネティクスの詳細な解析を、ヒスチジンタグ付与野生株とヒスチジンタグ付与TyrD欠失変異株より精製した光化学系II粒子を用いて行い、以下の知見を得た。(1)ヒスチジンタグ付与野生株とホウレンソウとでは、本質的に同等のキネティクスが得られた。(2)TyrD欠失変異株のマイクロ秒領域のキネティクスは有意の差が見られた。このマイクロ秒領域の異常なキネティクスと正常であった四周期振動より、TyrD欠失がS状態の遷移に影響を与えたわけではなく、プロトン移動と共役した電子伝達に影響を与えたものと結論した。酸素発生部位は電子伝達とプロトン移動が調和的に共役しているとされるが、TyrDがこれに重要な役割を果たしていることがわかり、これまで不明であったTyrDの機能が明らかとなった。光合成光化学系IIのD1タンパク質のC末端のプロセッシングは、酸素発生Mn複合体の形成に必須である。このD1タンパク質のC末端付近のアミノ酸残基の性質が、プロセッシング自体やMn複合体の機能に与える多様な影響を詳しく調べるため、本研究ではプロセッシング後のC末端の2残基Leu343(-2位置)とAla344(-1位置)にタンパク質としての局所立体構造に大きな変化をもたらしうるPro残基をそれぞれ導入した。その効果を検討したところ以下の結果を得た。1)変異体Leu343→Pro(LP変異体)は光独立栄養条件で生育したが、C末端残基の置換体Ala344→Pro(AP変異体)は光従属栄養条件でした生育しなかった。2)熱発光の測定より、LP、AP両変異体ともS状態の酸化還元電位が低下していることがわかった。3)蛍光収率のキネティクス解析より、LP変異体は電荷再結合の速度に若干の低下が見られ、AP変異体はP_<680^+>の再還元速度に大きな低下が見られることがわかった。4)EPRスペクトルの解析より、LP変異体は正常なマルチライン信号を示すのに対し、AP変異体ではマルチライン信号が見られず、S3スプリット信号が見られることがわかった。以上の結果より、Mn複合体の機能においてはC末端-2位置の残基であるLeu343に対する置換の効果よりも、C末端-1位置の残基であるAla344に対する置換の効果がより大きく、-1位置残基がMn複合体の構造/機能に決定的な役割りを果たしていると結論した。
慢性副鼻腔炎及びアレルギー性鼻炎鼻汁に対する特異的モノクローナル抗体を用いた研究 -モノクローナル抗体を利用した病態の解明とその臨床応用-

我々はヒト慢性副鼻腔炎鼻汁と特異的に反応する18個のモノクローナル抗体の作成に成功した。その反応性から以下の4種類に分けることができた。慢性副鼻腔炎上顎洞粘膜において(1)上皮の杯細胞のみと反応する抗体、(2)粘膜下腺細胞のみと反応する抗体、(3)杯細胞と粘膜下腺細胞に反応する抗体、(4)杯細胞、腺細胞と血管内皮細胞を認識する抗体、以上の4種類である。ウェスタンブロットや過ヨウ素酸に対する反応性から、いずれの抗体も分泌顆粒中の高分子量粘液糖蛋白の糖鎖を主要抗原として認識すると考えられた。他動物(ラット、モルモット、ウサギ、イヌ)や他臓器でも種々の交差反応性が確認された。ドットブロットによる慢性副鼻腔炎、アレルギー性鼻炎鼻汁の反応性を検討したところ、抗体によって慢性副鼻腔炎とアレルギー性鼻炎鼻汁で反応性に差が認められた。免疫組織化学的検討でも慢性副鼻腔炎、アレルギー性鼻炎、術後性頬部のう胞などの疾患で下鼻甲介粘膜の分泌細胞に対する反応性が異なっいることが明らかになり、抗体の一部は疾患特異的な粘液の性状の変化の認識に役立てることができると考えられた。作成された抗体は粘液分泌量の定量的測定法としても役立てられている。近年、びまん性汎細気管支炎や慢性副鼻腔炎などの上下気道の慢性炎症疾患に対してエリスロマイシンなどの14頁環系マクロライド剤の有用性が確立されているが、その作用機序は不明な点が多い。そこでエリスロマイシンの鼻粘膜上皮細胞からの粘液分泌におよぼす影響を、鼻粘膜上皮の細胞培養モデルを用いて検討した。粘液分泌量は杯細胞の分泌顆粒と特異的に反応する抗体HCS18を利用してドットブロットを行い、バンドの濃さをDensito meterで定量的に測定した。その結果、エリスロマイシンは上皮細胞からの粘液分泌に直接影響を与えず、炎症反応の制御を介した関接作用によって気道分泌を制御すると考えられた。我々はヒト慢性副鼻腔炎鼻汁と特異的に反応する18個のモノクローナル抗体の作製に成功した。これらの抗体はその染色性から大きく以下の4種類に分けることができた。慢性副鼻腔炎上顎洞粘膜において(1)上皮の杯細胞のみと反応するもの(1個),(2)粘膜下腺細胞のみと反応するもの(4個),(3)杯細胞と粘膜下腺細胞に反応するもの(11個),(4)杯細胞,腺細胞と血管内皮細胞を認識するもの(2個)であった。このうち7個はIgMに属し11個はIgG_1であった。固定法の影響を検討すると,アセトン固定したパラフィン切片では凍結切片と同様な反応性が認められたが,ホルマリン固定標本では10個の抗体で主に粘液細胞の反応性が低下した。精製した慢性副鼻腔炎鼻汁を抗原として行ったウェスタンプロットでは,反応性を失った2個の抗体を除いていずれの抗体も高分子量領域を中心とした広い範囲の物質と反応した。また過ヨウ素酸による抗原処理ですべての抗体で反応性が消失し,いずれの抗体も糖鎖を主要部分として認識すると考えられた。他動物(ラット,モルモット,犬)や他臓器(気管,顎下腺,耳下腺,胃,結腸,膵臓)でも種々の交差反応性が確認された。

次に疾患特異性を検討する目的でプールした慢性副鼻腔炎鼻汁とアレルギー性鼻炎鼻汁を用いて,ドットプロットにて各モノクローナル抗体の反応性を検討したところ,抗体によって慢性副鼻腔炎鼻汁とアレルギー性鼻炎鼻汁で反応性に差がみられた。組織学的にもアレルギー性鼻炎の下甲介粘液では粘液細胞との反応性が低下している抗体が多く,慢性副鼻腔炎下甲介の粘液細胞の性質が異なる可能性が考えられた。現在は疾患による差と共に,粘液の性状や病態における変化,部位や個体による差について検討中である。今後はこの抗体を利用したELISA法の開発により,鼻汁面からの臨床診断や治療効果判定の一手法として役立てたいと考えている。我々は平成6年度の研究において、ヒト慢性副鼻腔炎鼻汁と特異的に反応する18個のモノクローナル抗体の産生に成功した。いずれの抗体も分泌顆粒中の粘液糖蛋白の糖鎖を主要抗原として認識すると考えられたが、その反応性から以下の4種類に分けることができた。慢性副鼻腔炎上顎洞粘膜において(1)上皮の杯細胞のみと反応する抗体、(2)粘膜下腺細胞のみと反応する抗体、(3)杯細胞と粘膜下腺細胞に反応する抗体、(4)杯細胞、腺細胞と血管内皮細胞を認識する抗体、の4種類であった。ドットブロットによる慢性副鼻腔炎、アレルギー性鼻炎鼻汁の反応性を検討したところ、抗体によって慢性副鼻腔炎とアレルギー性鼻炎鼻汁で反応性に差が認められた。免疫組織化学的検討でも慢性副鼻腔炎、アレルギー性鼻炎、術後性頬部のう胞などの疾患で下鼻甲介粘膜の分泌細胞に対する反応性が異なっていることが明らかになり、抗体の一部は疾患特異的な粘液の性状の変化の認識に役立てることができると考えられた。作成された抗体は粘液分泌量の定量的測定法としても役立てられている。近年、びまん性汎細気管支炎や慢性副鼻腔炎などの上下気動の慢性炎症性疾患に対してエリスロマイシンなどの14頁環系マクロライド剤の有用性が確立されているが、その作用機序は不明な点が多い。そこでエリスロマイシンの鼻粘膜上皮細胞からの粘液分泌におよぼす影響を、鼻粘膜上皮の細胞培養モデルを用いて検討した。粘液分泌量は杯細胞の分泌顆粒と特異的に反応する抗体HCS18を利用してドットブロットを行い、バンドの濃さをDensito meterで定量的に測定した。その結果、エリスロマイシンは上皮細胞からの粘液分泌に直接影響を与えず、炎症反応の制御を介した関接作用によって気道分泌を制御すると考えられた。現在はモノクローナル抗体を利用したELISA法の開発によりより精度の高い粘液分泌の測定が行われようとしている。
各種腎疾患におけるメサンギラム細胞高発現遺伝子(megsin)のmRNAおよび蛋白発現の組織学的解析

1.各種腎組織のメサンギウム領域の定量化昨年度に引き続き、各種腎組織でのメサンギウム領域の定量を我々が最近開発した画像解析ソフトを用いて、自動画像解析装置[KS300]にて行った。その結果、IgA腎症や非IgA増殖性糸球体腎炎、糖尿病性腎症では膜性腎症や微小変化型ネフローゼ症候群の腎組織に比較して、明らかなメサンギウム領域の拡大が認められた。megsinのプローブを用いて、非放射性標識法によるin situ hybridization法を行った。各種腎組織ともmegsin mRNAの発現は、糸球体を中心に認められ、特にメサンギウム細胞の局在と一致していた。mRNAの発現の程度を定量化する目的で自動画像解析装置を用いたが、逆に主観が入ることが多かったため、糸球体全体の総細胞数を数え、次に糸球体内での陽性細胞数を数えることにより、糸球体全体の総細胞数に対する百分率で陽性細胞の割合を算出した。その結果、mRNAの発現はIgA腎症や糖尿病性腎症で強く認められた。3.megsin抗体を用いた免疫組織染色昨年度と同様に我々が作成したポリクローナル抗megsin抗体を用いて各種腎組織に免疫組織染色を行った。その結果、ポリクローナル抗megsin抗体は各種腎疾患とも糸球体を中心に染色され、その局在は特にメサンギウム領域に限局していた。蛋白レベルでの発現の程度は、IgA腎症や非IgA増殖性糸球体腎炎、糖尿病性腎症で膜性腎症や微小変化型ネフローゼ症候群の腎組織に比較して増加していた。4.megsin蛋白の抗体作製今年度は3で用いた抗体とは別に、数種類のモノクローナル抗体およびポリクローナル抗体の作成に成功した。この新たに作成した抗体については、学術英文誌(Biochem Biophys Res Commun)に掲載された。1.各種腎組織のメサンギウム領域の定量化メサンギウム細胞の増殖もしくはメサンギウム基質の拡大を特徴とするIgA腎症、非IgA増殖性糸球体腎症、糖尿病性腎症を対象とした。さらに、メサンギウム細胞の増殖やメサンギウム基質の拡大を伴わない膜性腎症、微小変化型ネフローゼ症候群の腎組織および種々の理由で摘出された腎臓の正常部分を対照として用いた.腎組織でのメサンギウム領域の定量は、我々が最近開発した画像解析ソフトを用いて、自動画像解析装置[KS300]にて行った。この方法を用いることにより、より客観的な腎組織の形態の評価ができた.その結果、IgA腎症や非IgA増殖性糸球体腎炎、糖尿病性腎症では膜性腎症や微小変化型ネフローゼ症候群の腎組織に比較して、明らかなメサンギウム領域の拡大が認められた。megsinのプローブを用いて、非放射性標識法によるin situ hybridization法を行った.各種腎組織ともmegsin mRNAの発現は、糸球体を中心に認められ、特にメサンギウム細胞の局在と一致していた。その発現の程度はIgA腎症や糖尿病性腎症で強く認められた.来年度にその詳しい定量を行う予定である。3.megsin抗体を用いた免疫組識染色蛋白レベルでのmegsinの発現を観察するため、最近我々が作成することに成功したポリクローナル抗megsin抗体を用いて各種腎組織に免疫組織染色を行った。各種腎疾患におけるその発現の程度の評価は,来年度に行う予定である。4.megsin蛋白の抗体作製3の実験を行うとともに、本研究を成し遂げるに十分量のmegsin抗体を確保する目的で、megsinの合成ペプチドを免疫源として抗megsin抗体をさらに作製中である。
半導体レーザー誘起蛍光・吸収分光法による燃焼計測に関する研究

紫外半導体レーザーは火炎内ラジカル等のLIF励起波長域で発振可能であることから、小型で安価な分光計測用光源としても高いポテンシャルを有する。分光計測用光源には波長制御性、連続波長可変レンジおよびスペクトル単色性が必要となる。本研究ではこれらの点においてファブリペロー型、外部共振型、Wavelength-agile型の3つの発振制御法を用いた場合の紫外半導体レーザーの特性を明らかにし、これらのレーザーを光源として火炎中のCHおよびPAHの計測を試みた。昨年度までに発振制御性について調べたファブリペロー型及び外部共振型レーザー(キャビティ長2cm)では、火炎内ラジカルの計測に十分な波長制御性、連続波長可変レンジ及びスペクトル単色性を同時に実現するのは困難であった。今年度は新たにWavelength-agile外部共振型レーザーの発振特性を調べた。このレーザーは外部キャビティ長を1m程度とし外部モードによるモードホップの間隔を微小化することで、実質的に連続な高速広域波長掃引を可能にするというものである。この発振制御法は赤外半導体レーザーに適用した場合には単色性の高い発振スペクトルを得られるが、紫外半導体レーザーに適用した場合には20GHz程度の広い線幅で発振し、その発振スペクトルは外部キャビティモードに起因する細かい櫛型のマルチモード構造を有することがわかった。連続波長可変レンジは内部キャビティモード幅に相当する50GHz程度まで拡大できることがわかった。これらの制御法を用いて紫外半導体レーザーを発振させた場合、火炎内CHの計測に必要な波長変調・掃引レンジは確保されなかった。火炎内PAHについては紫外半導体レーザーを光源としてLIFを測定できることを示した。PAHによるLIFは軸対称拡散バーナー火炎の上流部に円錐状に観察され、その下流側ですすによる吸収が観察された。1.レーザー発振スペクトル分析システム(Burleigh TL-15-S-SW)及び紫外線波長計(Burleigh WA-1000-UV)を用い,燃焼計測用光源として用いる予定であったファブリペロー型紫色判導体レーザー(日亜化学工業NLHV500A及びNLHV3000E)の発振スペクトルと連続波長可変レンジを調べた。その結果,これらのレーザーはマルチモード発振しているうえにモードホップが多発しており,分光計測用光源として用いるには外部共振化によるスペクトル狭窄化とモードホップ抑制が必凄であることが分かった。2.紫色半導体レーザーを使用したリトロマウント外部共振型レーザー(Toptica Photonics DL100)の発振スペクトルと連続波長可変レンジを調べたその結果,発振スペクトルはシングルモード(数MHz)であり燃焼計測に充分な性能を持つが,ピエゾアクチュエータによる連続波長可変レンジは火炎中のCHラジカルの吸収線幅と同程度の15GHz程度であり,波長変調分光法による計測や高圧燃焼場における計測を行うためには,ピエゾアクチュエータとレーザー動作電流の同時掃引や,外部共振に用いる回折格子のピボット位置等の調整により連続波長可変レンジを拡大する必凄があることが分かった。3.リトロマウント外部共振型レーザーを用い、火炎中のCHのB^2Σ^--X^2II(0, 0)P_1(10)及びP_2(9)吸収線(395nm)の直接吸収測定を試みた。波長の安定性と連続波長可変レンジが十分確保されなかったためCHの検出には至らなかったが,測定時のS/N比は火炎中のCHの検出が可能なレベルであることが確認された。
ホロ-ファイバ-培養法を用いたNMRによる培養細胞の研究

HF法を用いて、培養神経芽腫細胞の潅流条件下で^<31>PーMRSの測定に成功した。得られたスペクトルでは、腫瘍組織におけるin vivo ^<31>PーMRSと同様に、PMEは高くPCrは低い傾向が示された。一般にHF法の欠点として、ICS容積が大きいこと、潅流圧が高いこと、薬剤負荷に時間を要することなどがある。今回良好なスペクトルが得られたことより、HF法によりMRS分析に必要な高密度細胞培養が可能であることが示された。本系ではECSの潅流に成功したことより、迅速な薬剤負荷が可能であることが示された。本系により培養細胞エネルギ-代謝,細胞膜リン脂質代謝についての検討、および各種生理活性物質によるそれらの変化についての検討が可能であると考えられる。1.測定中における培養環境の恒常性維持のための基礎的検討ホロ-ファイバ-培養法を用いたNMRによる培養細胞の研究のためには、NMRプロ-ブの局所における細胞外環境を一定に保つことが測定中の細胞の細胞内環境を一定に保つために必要である。しかし従来の5%CO_2条件下での培養法では潅流培養装置を用いて測定中も同様の細胞外環境を保つことは困難である。そのために我々はCO_2を必要とせず通常のroom airのガス分圧下において培養可能な特殊な培養液を用い、ヒト神経芽腫細胞株を材料としてフラスコ内で細胞の成育状態につき検討してきた。その結果フラスコ内においては本細胞株はCO_2非投与下にても充分培養可能なことが明らかとなった。しかし当条件下にて従来の培養法と同様の細胞機能が保たれているかどうかは今後の検討を要する。2.培養細胞のNMRスペクトル観測のための基礎的検討フラスコ内で通常の条件下で培養したヒト神経芽腫細胞を用い、トリプシンを用いてharvestした約1×10^71×10^8個の細胞をroomair下において培養液中に浮遊させ、高分解能NMR装置を用いて31P-NMRスペクトルを観測した。その結果スペクトルは観測可能であるが約10分数10分の積算時間を必要とし、さらに数10分後より急速なATPの減少を認め細胞の生存率の低下することが明らかとなった。また生細胞と同様に細胞抽出液についても31P-NMRスペクトルを観測し、リン脂質組成や無機リン/ATP比につき検討した。3.ホロ-ファイバ-による細胞培養現在セルマスタ-潅流培養システムを用い、上記細胞のホロ-ファイバ-による培養を行っている。培養液WRC935による細胞培養についての検討:WRC935(37°Croom air,10%牛胎児血清含む)培養での、ヒト及びマウス神経芽腫細胞(NB)株,ラットメサンギウム細胞(MC)株の増殖は、従来の培養液PRMI1640(5%CO_2)と同様の傾向であった。またWRC935培養での分化誘導剤によるヒトNB株の形態学的分化は、RPMI1640と同様の傾向であった。以上よりWRC935の培養条件下では、従来の培養条件下での細胞増殖,分化などの機能が再現されることが示された。ホロ-ファイバ-(HF)による高密度細胞培養についての検討:HF内にマウスNB株C1300を1x10^8個を注入し、WRC935を30ml/分で潅流し14日間培養した。37°Cに保ちながら^<31>PーMRSを測定した。αβγーATPと無機リンと考えられる4本のピ-クを認めた。他のピ-クは信号レベルが低く不明瞭であった。測定には約50分を要した。HF式培養方法により測定中も細胞内外の培養環境の恒常性を維持しつつ、MRS測定可能な細胞密度が得られたことが示された。HF式培養方法の問題点についての検討:長期間の培養のために培養液潅流ポンプのチュ-ブが破損し液漏れが生じたこと、HF内に空気が貯留したために細胞が増殖しなかったことなどが問題となった。以上については耐久性の高いポンプとチュ-ブに変更し、潅流圧を高めることによりHF内の空気貯留を防ぐことが可能となった。以上を克服してもNBのある株やMC株は、HFでは十分な細胞密度が得られなかった。今後の展望:明瞭なMRSが短時間で測定可能な細胞密度を得るために、HF式培養方法に適したヒトNB株を選択し培養中である。

得られた^<31>PーMRSにより、エネルギ-代謝,細胞膜リン脂質代謝についての検討、および各種生理活性物質によるそれらの変化についての検討を行なう予定である。HF法を用いて、培養神経芽腫細胞の潅流条件下で^<31>P-MRSの測定に成功した。得られたスペクトルでは、腫瘍組織におけるin vivo ^<31>P-MRSと同様に、PMEは高くPCrは低い傾向が示された。一般にHF法の欠点として、ICS容積が大きいこと、潅流圧が高いこと、薬剤負荷に時間を要することなどがある。今回良好なスペクトルが得られたことより、HF法によりMRS分析に必要な高密度細胞培養が可能であることが示された。本系ではECSの潅流に成功したことより、迅速な薬剤負荷が可能であることが示された。本系により培養細胞のエネルギ-代謝、細胞膜リン脂質代謝についての検討、および各種生理活性物質によるそれらの変化についての検討が可能であると考えられる。
マクロファージを味方にして難治性肺疾患を克服するバイオミメティックDDSの構築

肺がん、肺結核、慢性閉塞性肺疾患(COPD)などの難治性肺疾患を克服するために必要な治療薬を肺病巣部に有効に送達できるDDS製剤の調製を行うとともに、DDS製剤を疾患部に送達するラットやマウスなどの小動物用経気管投与装置の開発に成功した。また、肺胞内で病原細胞は攻撃型の「善玉」のM1マクロファージ」を自己の生存を有利にさせる「悪玉」のM2マクロファージ」に形質変換させるが、この変換を防ぎM1マクロファージの存在率を向上させるにはリポ多糖(LPS)およびリピッドA同族体であるONO-4007が極めて有効であることを見いだした。マクロファージは侵入して来る病原体の種類により「善玉系」のマクロファージまたは「悪玉系」のマクロファージへと表現形が変わると考えられる。本研究課題では、結核、がんおよびCOPDの疾病モデルを作出し、病態に依存したマクロファージの表現形の変化、および「善玉系」マクロファージを増殖させるための方策に関して研究し、以下の成果を得ることができた。1)結核菌に感染した肺胞マクロファージはリポ多糖(LPS)の作用によりTNF-αおよびnitric oxideを感染状態の50倍および10倍産生するようになり、肺胞マクロファージ内の結核菌の8割を殺滅することを明らかとした。すなわち、LPSは「善玉系」マクロファージを増やす作用を持つ物質であることが明らかとなった。2)弱毒ウシ型結核菌株BCGとフロイント完全アジュバントを併用することで、肺内でBCGが長期間生残するlatent TBモデルを作出した。この動物モデルに対してLPSを投与したところ、「善玉系」マクロファージが増え、肺内の結核菌数が90%減少することを明らかにした。3) LPSは微量で強力な炎症反応を誘導することから毒性が高いと考えられより安全に「善玉系」マクロファージを増やすための化合物を探索した。その結果、LPSの構造に類似しONO-4007はマクロファージによるTNF-αおよびnitric oxide産生を誘導し、かつマクロファージの細胞死を誘導しない化合物であることを明らかにした。さらに、ONO-4007により活性化したマクロファージはヒト肺がん細胞を障害することを明らかにした。4) COPDは炎症が慢性的に持続することにより起こる肺疾患であり、「悪玉系」マクロファージが関与していると考えられる。エラスターゼを肺へ直接投与することにより、激しい炎症が惹起された後、肺胞が拡張する肺気腫モデル動物の作出に成功した。病原体が体内に侵入すると、生体防御系の一員であるマクロファージによって捕捉され分解される。しかし、病原体もマクロファージに対して攻撃を仕掛け、マクロファージの性質を本来の攻撃型(「善玉系」)から病原体を保護する「悪玉系」へと変化させてしまう。その様な変化を与える病原体の代表的なものとして結核菌とがん細胞とがある。本研究では肺結核、肺がんおよびCOPDなどの肺疾患を克服するために、病態に依存したマクロファージの表現型の変化の仕組みを明らかにするとともに、治療効果を有効にするために治療薬を疾患部位である肺に送達する経気管DDS装置を開発することを目的としている。本年度に得られた研究成果は以下に記す通りである。1)結核感染肺胞マクロファージにリポ多糖(LPS)を投与すると、マクロファージに貪食された結核菌を有効に殺菌するばかりでなく、結核菌とマクロファージなどによって形成されている肉芽腫を分解する作用があることを明らかにした。この作用は、LPSが善玉マクロファージの存在率を増大させるからである。2)肺がん細胞は、マクロファージを悪玉マクロファージに改変し、がん細胞を保護するようにしてしまう作用があるが、LPSは善玉マクロファージの存在率を増大させ、その結果がん細胞を死滅させる作用があることを見いだした。3)しかし、LPSは極めて低濃度で炎症反応を誘導する毒性が高い薬物である。ONO-4007はLPSに替わる低毒性の薬物として有効であることを見いだした。4) COPDは炎症が持続化することによって発症する肺疾患であるが、そのモデル動物の作出を行った。5)治療薬を疾患部である肺胞にまで送達する装置の開発も試みた。その結果、ベンチュリー効果などを活用してミクロンサイズおよびナノサイズの製剤を有効に肺胞に送達可能な装置を作成した。本研究プロジェクトは、肺結核、肺がん、COPDなどの難治性肺疾患を有効に克服するためには、治療薬の作用を有効にするには、肺における生体防御の最初のステップを司る肺胞マクロファージの機能との関連で明らかにする必要があることと、治療薬を肺の疾患部位に有効に送達させる方法を開発することが重要であるという考えに基づくものである。肺胞マクロファージは、病巣部にある病的細胞を主として貪食によって排除する機能を本来有しているが、がん細胞や結核菌はマクロファージに作用して、その機能をこれらの病原体を保護し増殖するように変換する作用を有している。前者は善玉マクロファージであり、後者は悪玉マクロファージである。悪玉マクロファージをマクロファージ本来の機能である善玉マクロファージに変換するための方策が重要である。また、肺病巣部に治療薬を効率よく送達する方法は、難治性肺疾患の治療にとってきわめて有用である。

前年度において、リポポリ多糖(LPS)は、がん細胞によってその機能を支配されていた悪玉マクロファージを善玉マクロファージに変換する機能を有していることを明らかにしたが、本年度においては、さらにLPSは結核菌によって、その培養器と化した肺胞マクロファージに作用してその病巣部を消滅させる作用があることを、その作用原理とともに明らかにすることができた。さらに、肺内病巣部に治療薬を有効に送達する装置を微少な気管を有する小動物であるラットおよびマウスを対象として開発することを前年度の引き続き試みた。その結果、ベンチュリ効果を活用することによって、従来法に比して2倍以上の効率でもって結核治療薬であるリファンピシンを結核病巣部にまで送達することに成功した。現在、新規デバイスを製品化することを試みている。さらに、レチノイドはCOPDの進行を防止する作用があることも明らかにした。肺がん、肺結核、慢性閉塞性肺疾患(COPD)などの難治性肺疾患を克服するために必要な治療薬を肺病巣部に有効に送達できるDDS製剤の調製を行うとともに、DDS製剤を疾患部に送達するラットやマウスなどの小動物用経気管投与装置の開発に成功した。また、肺胞内で病原細胞は攻撃型の「善玉」のM1マクロファージ」を自己の生存を有利にさせる「悪玉」のM2マクロファージ」に形質変換させるが、この変換を防ぎM1マクロファージの存在率を向上させるにはリポ多糖(LPS)およびリピッドA同族体であるONO-4007が極めて有効であることを見いだした。当初の研究計画では、平成26年度には、1)病原体によるマクロファージの表現形の変換に関する分子機構、2)マクロファージの表現形を善玉マクロファージの表現形に変換する薬物の探索、3)マクロファージの形質変換が抗結核作用、抗がん作用におよぼす影響、4)経気管投与に最適な微粒子製剤の調製法を行うことにしていた。その結果、2および3の項目に関してはほぼ満足すべき成果を得ることができたが、1および4項に関しては、未だ研究すべき事項が残っている。その原因として、1項は、マクロファージの生物機能を理解する上で根幹をなす課題であり、このことを解明する意義はきわめて大きいので、遺伝子解析を主とした研究を行ったが、変換機構を理解するには至っていない。また、4項に関しては、粒子間の凝集を如何にして制御したらいいかに関する研究を主体的に行った結果、一定の成果を得ることができた。しかし、完成のためには次年度における研究が必要である。27年度が最終年度であるため、記入しない。複合領域人間医工学生体医工学生体材料学研究の進展に関わる大きな問題はない。次年度も、当初の計画通り研究を推進する。本研究では、結核およびがんに加えてマクロファージが関与する慢性炎症によって引き起こされると考えられるCOPDに着目し、研究を進めている。本年度はlatent TBモデル、肺気腫モデル動物の作出が達成できた。また、「善玉系」のマクロファージを増やす作用を持つと考えられ、さらに安全性の高い化合物であるONO-4007がマクロファージを介してがん細胞を死滅させることを見出した。従って、本研究は当初の計画通り順調に進展した。来年度は本年度の成果を発展させるよう、各モデル動物における病態とマクロファージの表現形の変化について研究を進め、さらにONO-4007を用いて「善玉系」マクロファージを効果的に増やす方策についても取り組んでいく。
プレイヤーが戦略的に退出する繰り返しゲームにおける均衡の分析

本研究の目的は、プレイヤーが戦略的に退出できる繰り返しゲームモデルでの均衡の集合とその性質、さらにそのモデルの応用についての研究をすることであった。具体的には、プレイヤーの退出のメカニズムをいくつか考え(特に97年は外部からオファーがあるというモデル)、達成可能な均衡の集合との厳密な対応関係を解明していくことであった。98年度は以下の2つの研究を行った。2。外部オファーだけでなく、一般のマッチングを考えてパートナー関係を自由に解消できる長期ゲームモデルを考えた。これにより、ゲームからの退出が外生的な要因でなく、さらに大きなゲームの中での内生的なものになり、モデルを「閉じる」ことができた。新しいモデルにおいてはある種のフォーク定理が成立することがわかった。この結果を“Endogenous Partnerships"というタイトルでスタンフォード大学、コペンハーゲン大学のセミナーで報告、フィードバックを得た。現在、論文にまとめるようさらに研究を進めている。2年間でかなりのことがわかった。まず、戦略的な退出が可能なゲームにおける均衡はかなり制約され、退出できるプレイヤーのみならず、退出できないプレイヤーの利得も高くないと長期的な関係の均衡にならないことがわかった。これを協力の発生ともみなせると思う。また、このモデルの応用範囲も広く、通常の契約モデルでは報酬のタイミングは重要ではなかったが、退出の可能性を考えるとタイミングが重要になるなど、これまでの契約モデルと異なる結論が出てきた。いずれも、独創的な研究成果を出せたと思う。本研究の目的は以下のようであった。プレイヤーが戦略的に退出できる繰り返しゲームモデルでの均衡の集合とその性質、さらにそのモデルの応用について研究したい。具体的には、一部(または全て)のプレイヤーが外部オファーを得て退出するこたができるモデル、または、ある期間をおいてその成績(パフォーマンス)をテストされ、一定のレベルに達していないとゲームをおりなければならないモデル、などの均衡を調べ、プレイヤーの退出のメカニズムと達成可能な均衡の集合との厳密な対応関係を解明していく。今年度は二つのモデルの均衡を特定化する研究を行った。1。外部オファーモデル:一部(あるいは全て)のプレイヤーが外部オファーを得て退出することができるモデル。2。パフォーマンステスト・モデル:一部(あるいは全て)のプレイヤーがある期間をおいてその成績をテストされ、一定のレベルに達していないとゲームをおりなければならないモデル。Mathematicaなどの数学ソフトウエアを用いて具体的な均衡を計算し、それを理論的に一般化するというやり方をした。1の外部オファーモデルについては切り替え戦略による均衡の理論的特徴付けができたのでこれを“Repeated Games with Outside Offers: A Characterization of Trigger Strategy Equilibrium Payoffs"としてまとめた。2については、まだ具体例を計算したものができただけである。中間結果を東京経済研究センターコンファレンスとカリフォルニア大学サンディエゴ校で発表し、フィードバックを得た。2。
MUレーダーと高性能気象ゾンデ同時観測の成果を中心とする大気乱流の観測的研究

2000年5月にMUレーダーとフランスの特殊ラジオゾンデの共同観測として実施されたMUTSI(MUradar, Temperature Sheets and Interferometry)観測キャンペーンのデータ解析を実施し、大気乱流の薄層構造に関する研究を実施した。MUTSI観測キャンペーンで使用された特殊ラジオゾンデでは、高度分解能が10cmと非常に優れた超高感度の温度観測が実施されており、厚さが10m以下の大気乱流薄層が多重に存在することが明らかとなった。これとMUレーダー観測データの組み合わせによって、大気乱流の卓越する領域が大気安定度の高い領域に挟まれた構造をなすことが明らかになった。次にこの研究成果を引き継ぐ形で、MUレーダーの観測ビーム方向数を64256方向と非常に多く取った超多ビーム観測を実施し、レーダー上空の大気乱流層の水平構造を可視化する研究に取り組んだ。同様の観測は、従来はUHF帯のレーダーを用いた例があるに過ぎなかったが、UHFレーダーでは雨滴からのエコー強度が強すぎるため、降雨時に大気乱流のイメージング観測が不可能な弱点がある。VHF帯電波を使用するMUレーダーではこの問題点がないため、全天侯型のイメージング観測が可能となった。前線通過時などには、MUレーダー上空の大気乱流の水平構造は従来想像されていた以上に変動が大きいことが明らかとなった。またMUレーダーによるイメージング観測データからは、大気乱流エコーだけではなく、大気風速と違った水平運動をする鳥の集団によると見られるエコーが頻繁に発見されており、MUレーダー観測の新たな可能性を示すこととなった。
カーボンナノチューブの電界効果およびトランジスタへの応用

本研究は、カーボンナノチューブを用いた電界効果トランジスタなどの新しい電子デバイスを実現するために、カーボンナノチューブの基本的な伝導特性や、デバイス作製プロセスに関して検討を行ってきた。本年は、Si/SiO_2基板上に、櫛形のAu/Cr電極構造を作製し、この電極構造上に単層および多層のカーボンナノチューブを分散し、ナノチューブの電気的特性の評価を試みた。作製した試料の電気的特性の室温での評価から、抵抗値にして数100Ω数10kΩの線形性のある電流-電圧特性が観測された。しかしながら、基板上に分散したカーボンナノチューブの電子顕微鏡観察では、電極上に単体のカーボンナノチューブが分散されている箇所もあったが、複数本のカーボンナノチューブが束になったバンドルや、ナノチューブ以外のグラファイトなどの不純物も認められた。現在のナノチューブの作製、精製技術ではこれらの不純物の混入は避けられず、カーボンナノチューブを用いたデバイスの実現や、電子回路の配線への応用において、大きな問題となる。そこで、カーボンナノチューブの形成で、触媒金属に微細加工を施してナノチューブの形成位置制御を行う、新しい手法を考案した。本研究は、次世代のエレクトロニクスを支えるポストシリコン材料として注目されているカーボンナノチューブに注目し、超微細化工を施した半導体基板上にカーボンナノチューブを配置することにより、電界効果トランジスタの室温動作の解明を試みる事を目的とし、将来の超微細集積化デバイスの可能性を追及するものである。本年度は、カーボンナノチューブの基本的な特性を調べ、電界効果トランジスタを作製するための、デバイス構造、デバイス作製プロセスについて検討した。1.カーボンナノチューブおよびナノチューブを用いたデバイスの評価方法について検討した。カーボンナノチューブは直径が数ナノメートル程度と非常に微細であるため、高分解能の電子顕微鏡や原子間力顕微鏡を用いた構造観察手法について検討・改良を行った。2.研究分担者が所属する研究機関が持つ半導体集積回路の作製設備および、電子線描画装置などの微細加工装置を利用して、カーボンナノチューブの基本的な電流輸送特性を調べるデバイス、および、カーボンナノチューブをチャネルとした電界効果トランジスタ構造について検討した。電界効果トランジスタは、シリコン基板上に、金属ソース・ドレイン電極と、シリコン酸化膜を絶縁膜とするMOSゲート構造有する構造を設計し、デバイス作製を開始した。
アレルギー性鼻炎における感作から発症への機序の研究-疫学と分子生物学手法の接点-

20歳代の大学生229名を対象とした皮膚テストではスギ花粉抗原陽性率125名(54.6%)、このうち発症者は72名(31.4%)、感作未発症53名(23.2%)であった。感作未発症例15例を追跡したところ、7例が次シーズンで新規発症した。この7例の皮膚反応とCAP-RASTには発症前後に変化はなく、未発症例とも差がなかった。発症前の鼻粘膜のIL4とIL5を検討したが、感作未発症例と発症例に変化はなかった。このことより、感作未発症例の各種アレルギー検査による発症予知は困難と考えた。スギ花粉症95例と健常者77例を含む172名の検討でヒスタミン遊離試験とルミワード法を比較した。両法ともに発症例の陽性率が極めて高く、偽陰性例が少なかった。健常者では感作未発症例と思われる例は18.2%あったが、ヒスタミン遊離試験での陽性率が低く、より症状に反映した検査方法と考えた。そこで、新しい検査法であるヒスタミン遊離試験(シオノギ)と好塩基球中ヒスタミン含有についてさらに検討した。感作発症例11例の2年間の経時的変化をヒスタミン遊離試験で検討した。花粉飛散期とその前後でヒスタミン遊離試験に変化はなかった。食物アレルギーでのデータには経時的なばらつきが多いが、スギ花粉症では再現性が高く、安定した検査方法であった。一方、好塩基球中ヒスタミン含有量は花粉飛散期に有意に増加した。これらのスギ花粉症の症状と抗原曝露との関係を知る目的に、津市でスギ花粉の定点観測を行った。2001年のスギ花粉は総計11949個/cm^2(ダーラム型計測器)最大飛散数1372個/cm^2/日であった。2002年は4月末日まで計測予定で、3月末日現在も測定継続中である。約3000個弱の結果にななる予想である。対象母集団をスギ花粉に感作されやすい20歳代前後とし、皮膚テストをおこなった。229名に行い、陽性125名(54.6%)陰性104名(45.6%)であった。スギ花粉抗原では対象の半数以上で感作されていた。この陽性例のうち有症者は72名、症状無しは53名であり、感作・未発症53名(23.1%)発症72名(31.4%)非感作104名(45.4%)の3群に分類できた。感作・未発症53名中、15名はハウスダストなどの抗原にも陰性でスギ花粉単独感作・未発症あり、この15名をさらに詳しく検討した。特にスギ花粉飛散期の血清中特異的IgE抗体、ヒスタミン遊離試験の変化を検討し、変化を認めなかったが、好塩基球中の総ヒスタミン量は亢進していた。これらの症例の鼻粘膜擦過標本から総RNAを抽出し、さらにcDNAに逆転写して、保存している。次ぎに、スギ花粉症に焦点をあて、母集団をとった。スギ花粉症患者32名から採血し、モノクロナール抗体を用いて好塩基球を分離した。この好塩基球で、スギ花粉抗原でのヒスタミン遊離試験を行い、さらに、血清中特異的IgE抗体・鼻誘発反応・皮膚反応などのアレルギー検査との相関を確かめた。これらの検討では、陽性率は一致するが、検査結果の強さとの相関はなく、疫学調査上の検査項目の採用に有用な結果をえた。現在、この母集団は増え、100例を越えているが、すべての解析は次年度に及ぶ予定である。以上のデータをベースに次年度の検討に移る。

これらのスギ花粉症の症状と抗原曝露との関係を知る目的に、津市でスギ花粉の定点観測を行った。2001年のスギ花粉は総計11949個/cm^2(ダーラム型計測器)最大飛散数1372個/cm^2/日であった。2002年は4月末日まで計測予定で、3月末日現在も測定継続中である。約3000個弱の結果にななる予想である。