hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
アクションリサーチによる在宅緩和ケア拠点の形成とその活動評価

末期がん患者の療養の場が病院から在宅へと移行する中で、専門職や地域住民にフレキシブルな対応ができる在宅緩和ケアの拠点を形成するためのアクションリサーチを行った。この結果、素人である地域住民と専門職との本音の対話は、両者に地域でのがん患者のケアや看取りについて気づきと学びをもたらした。素人の日常生活、実践知、専門知をリンクさせるワークショップを通したコミュニティづくりの活動にしていくことが在宅緩和ケア拠点の形成に重要であることが示唆された。ソフトシステム論をベースとするアクションリサーチの手法を用いて、研究フィールドである「すみだ地域で多職種専門チームによる在宅ホスピス緩和ケア拠点を実現するとはとういうことか?」をテーマに、研究者と専門職等による研究参加者で「思いのモデル」を作成した。これをもとに比較表を用いて思いと認識された現実の擦り合わせを行い、以下のアクションプランを立案した。1)在宅ホスピス緩和ケア拠点の形成のための活動の基盤を作る。具体的には、拠点や活動の理念づくり、活動資金収集の方法の検討、事務局体制の整備等である。2)拠点を具現化するモノとしての緩和ケアグループホームについて検討する。具体的には、緩和ケアグループホームの概念作り、場所探し、市民参加型かつ最先端であるための仕掛けを作ること等である。3)在宅ホスピス緩和ケアについての情報発信を行う。具体的には、講演会の開催、自治体主催のがんパネル展への参加等である。4)これらの活動を行うために定例会を開催していく。一部のアクションプランを実践し、以下の学びがあった。1)「在宅ホスピス緩和ケアの地域作り」がどのような影響をもたらすか、地域住民と共有する必要がある。2)この活動は地域住民と専門職との連携が鍵となる。3)在宅ホスピス緩和ケアの地域作りという視点で、専門職同士の連携を図る必要がある。本年度の研究活動により、研究のトピックは「すみだに在宅ホスピス緩和ケアの拠点を作っていくプロセスはどのようなプロセスか?」から、「専門職が地域住民とどのようにかかわれるか?」「専門職がこのかかわりをどのように改善させ、改革することができるか?」「在宅ホスピス緩和ケア拠点の形成に関わる地域住民や専門職等のメンバーの気づきを共有する場をどのように作っていくか?」へとシフトしてきている。今年度の課題は、1)在宅緩和ケア拠点におけるサービスとケアチームの相談・調整、2)情報提供と教育、3)看取りのためのネットワークシステムとこれらの3つのシステムを動かす振り返りのシステムについて、立案したアクションプランの実践を行うことであった。このなかで専門職の地域住民へのかかわりのあり方、在宅ホスピス緩和ケア拠点の形成に関わる地域住民や専門職の気づきを共有する場づくりという点に着目して進めていった。しかしながら、当初の研究フィールドである東京都墨田地域においては地域住民の活動メンバーを増やしていくことが難しく、専門職中心の活動にならざるを得なかった。このため、地域ケアのネットワークが比較的整備されている多摩地域を新たな研究フィールドとして加え、これらの点について検討することとした。その結果、2)地域で末期がん患者をケアすることについて、地域住民を含めたワークショップを開催し、本音で語り合うこと、大丈夫と思えること、生きた情報の収集・整理という思いのモデルのテーマが見いだされた。2)アクションリサーチによるワークショップによって地域住民が専門職の役割を知る貴重な機会となること、専門職の役割について他の専門職や地域住民へ伝える方法論として有効であること、専門職の役割がより相対化されて地域住民にも専門職にも理解しやすくなること等が明らかとなった。また、3)ワークショップをスムースに展開させ、地域における在宅緩和ケアの活動の促進につながるための場づくりのリーダーの重要性等が示唆された。今後の課題として、専門職が中心となる活動において、本研究でのワークショップのような思いの共有の場を整えること、そのような場で用いられるフレームワークのあり方が見いだされた。各参加者が平成23年度に立案したミニプロジェクトの見直しを行い、実践、振り返りを行った。専門職のミニプロジェクトは、直接ケアに関わらない地域住民へアクセスする方法を探り、素人である地域住民の方は、地域での介護や看とりが具体的に思考された内容となった。活動の振り返りにおいて専門職である訪問看護師の気づきは、「最期まで自宅で暮らすには『コミュニティづくり』であると行き着き」、その活動は「地域を大切に思う気持ち」を持って「地域住民から教わることが一番」であり、「専門職である前に、一人の地域住民として行動すること」が重要であるというものであった。また、病院の看護師は、末期がん患者の退院に際して在宅ケア提供者へ「院内での様子を伝えるだけだった」ことから、「自宅での安心」や「家で暮らすためにその人が持っているネットワーク」に感受性が高くなり、これらに対する患者・家族の言動を意識するようになる変化が見られた。

地域住民の気づきは、死とは「一人で暗い世界へ行く」というイメージが、「自然のサイクルのなかの出来事で、最期を支えてくれる人々の姿が見えるようになった」ことや、「サービスの受け手方に大きな壁がある」、「専門職が」情報を共有していないことが、利用者を戸惑わせている」など、専門職との対話や専門職同士のディスカッションの場への参加を通して得られたものが多かった。専門職と素人である地域住民との対話は、自宅での療養や看取りというテーマにおいて専門職と地域住民との双方に実感をともなった学びをもたらし、このような経験の積み重ねが拠点作りのベースとして重要であることが示唆された。10th APHC及びCARN 2013において研究成果の一部を発表した。ソフトシステム方法論をベースにしたアクションリサーチの手法を用いて、「地域でのがん患者のケア」を実現するためのニーズを導き出すことを目的としたワークショップを行った。一連のワークショップのトピックは、「地域で看取り、看取られること」とした。これまでの医療福祉の専門職中心から、1)これらの専門職と本テーマに関心のある素人、2)専門職と患者・家族・遺族、3)地域住民(1) 2)の参加者を含む42名)へと対象を広げてディスカッションを重ねていった。ワークショップの前後には、研究メンバーによる振り返りを継続的に行い、以下の3つの気づきと学びが取り出された。a)住み慣れた地域で最期を看取ることへの思いは、医療福祉の専門職と専門職以外の人々とで共有できると思われる。また、本人・家族・ケアを提供する専門職が本音を出し合い、大丈夫と思える関わりの中に地域での看取りへの基盤がありそうである。b)看取りについて医学と生活の視点から捉え直すことができた。すなわち個の生命活動とその長さ、一人の命から次の人々の命へのつながりという差異が明確になった。生活の視点からの家での看取りは、家族とその地域とが直接的に触れ合う機会となり、家族・近隣住民・専門職という重層的な人のつながりが生み出されていくといえる。c)最期について考え、話し合うことがコミュニティづくりにつながる。家での看とりについて素人は専門職に新たな視点を与え、専門職は素人にその役割や意義を伝えられる。また、看取りの機会は少なく、必要になる時期も明確でないことから、個々のニーズの発生前から動き、その「構え」を作る必要がある。これらはその土地に愛着をもった素人が要となって専門職とともに取り組んでいく必要のある活動であり、専門職と地域あるいは素人の生活領域との間の「縁側」をつくっていく活動といえそうである。研究代表者の所属先変更により研究フィールドへのアクセスに物理的な時間を要するようになったこと、昨年度の課題として見いだされた東京都墨田地域における専門職と地域住民との連携による在宅ホスピス緩和ケアの活動のあり方についてアクションリサーチによるワークショップ等を開催し、気づきを取り出すという点が充分でなかったため。25年度が最終年度であるため、記入しない。
非線形発展方程式と準変分解析

研究代表者が提唱した「準変分解析」という非線形解析の考え方の枠組みのうち、定常的(楕円型)問題と非定常的(放物型)問題双方について研究を進め、下記の研究成果を得ることができた。楕円型準変分解析問題に関しては、楕円型変分不等式と準変分不等式に関しての解の存在について抽象的定理を証明し具体的問題に応用した。存在定理においては、従来、汎関数の主部に狭義凸性を仮定していたが、本研究においては凸性のみを課すことで解の存在を証明することができた。存在定理は不動点解析に基づくが、従来は不動点の存在を示す写像の一価性を要請してSchauderの不動点定理を適用するために汎関数主要部の狭義凸性が必要であった。本研究では、多価写像に関する角谷の不動点定理を適用することによって、汎関数主要部の凸性のみを仮定するだけで不動点の存在を導き、解の存在を証明することに成功した。放物型準変分解析問題に関しては、抽象的放物型変分不等式と準変分不等式の解の存在を証明することができた。方程式の形としてはEuler-Lagrange型に限らない空間微分作用素に関する非線形放物型偏微分方程式に適用できる抽象的理論を構築することに成功し、具体的問題に応用した。その際、時間依存劣微分発展方程式の理論と手法、特にエネルギー不等式の方法を効果的に適用した。このエネルギー不等式によって、不動点解析を行う際の評価を導くことが議論の主要部である。ただし、時間局所解を時間大域解に延長する議論を行う際に、想定していたよりも繊細な議論が必要になることが明らかになった。この困難を克服して、証明遂行と応用可能性確保を両立させるために、与えられた汎関数の準変分性に関する定義域に、時間に関して右半連続性という微妙な条件を課すことの適切性を認識することが、本研究を完成するにあたって重要であった。従来行ってきた準変分解析の研究を次のふたつの方向に一般化した:(1)楕円型準変分不等式の研究:準劣微分作用素を用いた楕円型準変分不等式の定式化において、解の存在証明に用いる不動点定理を、従来用いたシャウダーの不動点定理から、より一般的な(多価写像を許容する)角谷の不動点定理(の無限次元への一般化)に変更しても適切な改良のもとで証明を遂行できることを確認した。このことによって、解の存在のための条件をゆるめることに成功し、その結果、より広い問題への応用が可能となった。特に生物拡散問題のモデルとして現れる非線形偏微分方程式系に関する準変分不等式への応用を与えた。この研究成果について、生物数学の国際会議で発表し、村瀬勇介氏(名城大)との共著論文を現在投稿準備中である。(2)放物型準変分不等式の研究:これまでの研究で、主要部が変分構造を持ちさらに低階項を含む非線形偏微分方程式の変分不等式問題を扱う抽象的枠組みを準劣微分作用素の概念を用いて作ったが、本年度の研究では、解に非局所的依存性を持つ制約条件を課した準変分不等式の問題に関する剣持ー加納ー村瀬による理論と統合する枠組みを作ることに成功した。これによって、変分構造に加えて低階項を持ち、さらに未知関数に依存する制約条件を課した準変分不等式も扱えるようになり、非線形発展方程式の抽象理論の有効性の範囲をさらに広めることに成功した。この結果については、加納理成氏(高知大)、村瀬勇介氏、山崎教昭氏(神奈川大)との共著論文を現在作成中である。以上のように非線形発展方程式と準変分解析の研究を楕円型、放物型両面から一歩進めることができた。準劣微分作用素に関する抽象的方程式を研究して、解の存在定理を証明し、さらにその結果を具体的な楕円型変分不等式、楕円型準変分不等式に応用した。準劣微分作用素は、変分原理と不動点解析を統一的に扱うために、研究代表者が2013年に発表した論文で導入した概念であり、多くの非線形問題を数学的に解析するための有効な枠組みを与える。この論文で同時に研究代表者が得た抽象的な解の存在定理では、不動点定理としてシャウダーの定理を用いることを想定した条件を定理の仮定として用いていたため、変分原理において汎関数を最小化するものが一意的であることが必要であった。具体的には汎関数の狭義凸性を仮定することが必要であったため、この点を緩めることができるようにすることが、本研究の主要課題のひとつであった。本年度の研究では、不動点定理として、角谷等による多価写像に対する不動点定理を用いて存在定理を証明することができた。これによって、汎関数の狭義凸性を仮定からはずすことが可能となり、凸性(これは変分原理において自然な仮定である)とコンパクト性(これは不動点解析において自然な仮定である)のもとで抽象的作用素方程式の解の存在定理を証明することができた。具体的問題への応用においても、汎関数の狭義凸性を仮定しないで、楕円型変分不等式や、楕円型準変分不等式の解の存在を証明することができるようになった。さらに、生物拡散問題に表れる連立楕円型偏微分方程式に関する準変分不等式への応用も、生じる汎関数の狭義凸性を仮定することなく、与えることができた。

本研究の主要な研究目的のひとつである、抽象楕円型の準劣微分作用素方程式に関して、多価作用素に関する不動点定理を用いることが可能となり、解の存在定理の仮定を緩めることができた。まず、楕円型準変分不等式について、本研究当初の「研究の目的」に沿う形での抽象論を完成することに成功した。すなわち、不動点解析において、多価作用素に関する不動点定理を使える形に議論を改良・修正することにより、従来仮定していた汎関数の狭義凸性を凸性に緩和することに成功したということである。これによって、具体的問題への応用上も、与えられたデータの仮定を弱めることができるようになった。抽象的理論についての成果を、生物拡散モデル等の具体的問題への応用例とともに論文としてまとめ、査読を通過し、当該年度中に公刊された。つぎに、放物型準変分不等式について、先行研究を統合する形で、解の存在についての抽象論を構築することに成功した。解の制約条件としては、未知関数に依存する準変分不等式が扱えるのみならず、偏微分作用素として、劣微分作用素のみでは書くことができない(オイラー・ラグランジュ型にはおさまらない)広いクラスのものが扱えるようになった。解のクラスとして、ヒルベルト空間値の強微分を持つ「強解」の存在を証明することができた。証明においては先行研究で用いられていたアイデア(研究代表者のものも含む)を統合するのみならず、他の研究者達の従来の議論を整理して見透しよくしたとともに、統合に際して生ずる微妙な論点を、ヒルベルト空間値の右半連続関数の空間を基礎関数空間として用いる精密な議論を行うことによって、統合を完成することができた。証明に際して新たに導入されたこれらのアイデアは、今後の発展に向けて有用な知見を与えるものと考えている。広い範囲をカバーする抽象理論ができたことによって、多様な具体的応用を統一的に理解する基盤ができたので、いくつかの応用例とともに論文としてまとめ、査読付きジャーナルにおける公刊に向けて作業を進めている。楕円型準変分不等式については、当初予定していた目標が達成されて、論文が公刊された。放物型準変分不等式については、抽象論が完成して、論文公刊に向けての作業が開始できた。これらのことはおおむね当初の研究予定通りである。準変分構造を持つ放物型偏微分方程式に関して、未知関数に依存する制約条件を課した問題(放物型準変分不等式)の研究を行った。方程式の形も制約条件も、通常の変分原理のみでは扱えない問題を抽象論として研究し、具体的問題にも応用した。準変分構造とは未知関数に依存した変分構造のことであり、単純な変分構造の問題よりも広いクラスの問題を扱う。時間依存劣微分作用素に関する発展方程式の理論を応用して、放物型準変分不等式について、時間大域強解の抽象的存在定理を確立し、具体的応用を与えた論文について、専門誌での公刊に向けて作業を進めた。まず、時間小域解の存在定理証明では、時間依存劣微分発展方程式の理論におけるエネルギー不等式と不動点定理の議論を組み合わせて議論を完成した。その際、未知関数に依存する時間依存劣微分作用素から出発するのであるが、定義域として、ヒルベルト空間値の右半連続の関数全体を考慮することにより、具体的問題への応用と、証明中の微妙な論理のバランスをとることに成功した。つぎに、時間大域解への延長については、Zornの補題を使う従来の議論をさらに精密化することにより証明を完成した。具体的問題への応用では、方程式の係数に準変分構造を持つもの、制約条件が未知関数に依存する準変分不等式、さらに、連立準変分不等式など、これまであまり研究されてこなかったクラスの方程式や制約条件に関して、時間大域強解の存在を証明することに成功した。
アジア大陸の大陸変形現象を中国の四川省・雲南省に探る

二年間の研究期間で,4つの調査隊(1997A・B/1998A・B)を送り出した。アジア大陸の変形現象を見積もるために,アジア大陸東部の南北に二つの調査研究地域を設定した。南部調査地域には,変形がおこったと推定される地域であるインド大陸の東北に位置する中国の雲南省を(調査隊1997A・1998A)、北部調査地域にはインドから十分はなれて変形を被らなかったと推定される北中国地塊の内蒙古自治区を選んだ(調査隊1997B)。1998年度は,内蒙古自治区に未曾有の洪水が起こったため,ロシア共和国の沿海州のシホテアリン山地を変形がおこらなかった地域とした(調査隊1998B).(1997A隊)雲南省の中央部にて白亜紀・古第三紀の赤色砂岩の試料を採取した.向斜の構造を示す永仁盆地と大姚の北部地域において42箇所・計336個の赤色砂岩を採取した.現在古地磁気測定用の試料作成し測定中である.(1997B隊)内蒙古自治区の大興安嶺山脈に分布するジュラ紀の溶結凝灰岩を3箇所計18個採取し,残留磁化を測定を完了した.(1998A隊)四川省・雲南省において調査をおこない.四川省南西部にて後期ジュラ紀の赤色砂岩の試料を,また、雲南省南西部にて白亜紀の赤色砂岩を採取した。合計41個所・366個の試料を採取し,現在古地磁気測定用の試料作成し測定中である.(1998B隊)ロシア共和国のシホテアリン北部に分布する白亜紀の溶結凝灰岩を,3箇所計34個採取した。ロシアからの輸送を現在待っている.1997・1998年度調査隊以前採取した試料についても,古地磁気学的研究をおこなった.二年間の研究期間で,4つの調査隊(1997A・B/1998A・B)を送り出した。ロシアからの輸送を現在待っている.1997・1998年度調査隊以前採取した試料についても,古地磁気学的研究をおこなった.(1)二つの調査研究地域を設定した。調査地域には,変形がおこったと推定される地域であるインド大陸の東北に位置する中国の雲南省と、インドから十分はなれて変形を被らなかったと推定される北中国地塊の内蒙古自治区の二つを選んだ。二つの調査隊(A・B)を送り出した。(A隊)12月7日23日:雲南省の中央部にて白亜紀・古第三紀の赤色砂岩の試料を探取した.永仁周辺にて,向斜の構造を示す永仁盆地にて古第三紀の江底河層3・4と白亜紀の江底河層1・2を29箇所で232個の試料を採取した.大姚の北部に江底河層1・2が分布し向斜の構造を示す.その地域で13箇所・計104個の赤色砂岩を採取した.試料は2月5日に日本に到着,現在古地磁気測定用の試料作成中である.(B隊)8月16日9月1日:赤峰の北部の大興安嶺山脈に分布する上庫力層,塔木蘭勾層のなかの溶結凝灰岩を古地磁気学と年代学の目的で3箇所計18個採取した。現在残留磁化を測定中である.(2)雲南省元謀地区で1995年に採取した江底河層1・2を赤色砂岩について古地磁気測定をおこなった.赤色砂岩の残留磁化は褶曲テストを満足し、99%の信頼度で,後期白亜紀の残留磁化を保存していることがわかった.偏角値は27度を示し,元謀をふくむ揚子

クラトンの南部は変形現象を被ったことを明らかにした.今年度の調査地域は変形がおこったと推定される地域であるインド大陸の東北に位置する中国の四川省・雲南省と、インドから十分はなれて変形を被らなかったと推定される北中国地塊の内蒙古自治区の海拉爾周辺の二つを設定した。1998年の夏に中国北部で未曾有の洪水がおこり,内蒙古自治区の海拉爾周辺の大興安嶺山脈へは調査にはいることができない旨の知らせが中国側の研究者からはいり,調査旅行は中止することとなった。そこで急遽ロシア共和国の沿海州のシホテアリン山地を変形のない地域の代表とし,ロシア共和国の研究者と連絡をおこない,調査旅行を実現させた。乙藤洋一郎,吉岡晋也の両名が参加し,9月30日10月18日のあいだシホテアリン山地(エジンカ)に赴き,シホテアリン北部に分布するキシングループのなかの溶結凝灰岩を,アホベ周辺で古地磁気学と年代学の目的で3箇所計32個採取し,ザミン周辺で古地磁気学と年代学の目的で3箇所計34個採取した。中国の四川省・雲南省の調査には劉育燕,横山昌彦、佐藤謙、吉岡晋也が参加した。12月5日26日のあいだ,四川省南西部にて後期ジュラ紀の赤色砂岩の試料を西昌周辺の官溝層から10個所で87個の試料を,雲南省南西部にて白亜紀の赤色砂岩を思茅・普周辺の曼崗層から24個所で216個、景星層から7個所で63個の試料を採取した。
ボノボを中心とするヒト上科霊長類の筋骨格構造から読み解く環境適応

動物の環境適応を考える上で解剖学的知識は必要不可欠である。これまで、解剖学的にほぼ未知の動物であったボノボに関して解剖学的なデータの収集を行った。ボノボの筋構築や神経血管の走行はチンパンジーの変異の範囲に入るものであったが、四肢骨の海面骨量パタンはヒトに近く、他の霊長類とは異なる。ボノボの解剖的特徴は基本的な運動様式である懸垂行動に適応的であるが、頻繁に二足歩行を行うという特徴が骨内部構造に影響していると考えられる。平成21年度の研究計画に従い、左側の前・後肢を体から分離し、CT撮影を行った。それにより、骨格系の三次元データを入手した。体幹および右側の前・後肢は計画2年目に行う固有背筋と脈管神経系の詳細解剖のため10%ホルマリンで固定をした。左側の前・後肢を体幹から分離する際、左腋窩動脈と左腕神経叢の解剖と近縁種との比較検討を行った。ボノボの腕神経叢はヒトや類人猿の形態に非常に類似していた。しかし、ボノボの腋窩動脈の走行および分岐は特異的で、ヒトでは5%以下の破格である。分離した前・後肢については、個々の筋の同定を行い、CT撮影で得られた画像を参考にしながら、筋の起始、停止、走行を記録した。また、それぞれの筋の筋重量および筋長を計測した。分離した筋は10%ホルマリンで固定したのち筋束長を計測した。ボノボの筋形態は、他の類人猿やヒトと比較の結果、チンパンジーに酷似していた。ボノボの後肢、特に足部について詳細な解剖を肉眼的に行い、これまでに分析したチンパンジー、ニホンザル、テナガザル、クモザルとの比較を行った。その結果、ボノボにおいては、上の4種では第3指周りに配置されている背側骨間筋が、ヒトの場合と同様に第2指周りに配置されていたことが確認できた。これは、ボノボの足の機能軸が第3指ではなく、ヒト同様に第2指にあったことを意味する。体幹に関しては、ボノボの体幹の固定が完了していないため、他種の体幹筋構造に関する解析を実施した。特に腰方形筋に着目し、類人猿(シロテテナガザル,コモンチンパンジー,オランウータン)、新世界サル(ジェフロイクモザル)、原猿(ガーネットガラゴ)における腰方形筋の肉眼解剖学的検索を行なった、分析の結果,腰方形筋を構成する筋線維束パターンには種差があり,同筋の筋構築が種特異的なロコモーション様式を反映することが示唆された。本研究計画ではこれまでほとんど解剖されたことのないボノボの解剖を行い、解剖学的な基礎データの収集・備蓄を行うことを主目的とする。平成21年度にホルマリン固定した体幹と右側の前後肢のCT撮像を京都大学霊長類研究所において行った。その後、体幹から右側の前後肢を離断した。この時、腕神経叢と腰神経、仙骨神経、および腋窩と大腿・臀部の動脈の走行と、離断する筋の起始、停止、走行を記述した。離断後、体幹は体幹筋の形態学的検索をおこなった。前後肢は固定が不十分であったので再度ホルマリンに浸けた。体幹筋の形態学的検索の主な所見は以下の通りである。1)腸肋筋:第5肋骨以上では筋の発達は弱いが、明瞭な停止腱が発達する。第6肋骨以下に停止する筋束は起始範囲が広く、発達した筋を形成する。胸腸肋筋の起始の上限は第5肋骨であった。2)最長筋;内側停止列は、第4肋骨以下の肋骨と、第1腰椎の横突起に停止を確認した。筋束の起始は第7以下の肋骨と仙棘筋腹のほか、第13胸椎に起始する上行腱に由来する筋束が加わっていた。第12肋骨以下に停止する筋束は、腰背腱膜腹側面に起始していた。外側停止列は、第112肋骨への停止を確認した。外側停止列においてはいずれの筋束も腰背腱膜に起始する。3)棘筋:棘筋は、第18胸椎の棘突起に停止する明瞭な筋束からなっていた。4)横突棘筋系:第9胸椎以下では4体節上行する筋束が最長で、第5-8胸椎では7体節を上行する筋束が含まれていた第4胸椎より頭側では、5体節以上を経過することがない。他の霊長類の固有背筋についての所見との比較から、ボノボの体幹筋の筋構築はチンパンジーと同様の懸垂行動に適応したものであると認められた。

本年度は右側の前後肢の神経血管系の精密解剖を行った。腋窩動脈は腕神経叢を貫くことなく、常に腋窩動脈が腕神経叢の腹側に位置し、更に上腕部でも浅上腕動脈となっていた。ヒトの場合、腋窩動脈がC7とC8の間から背側に位置を変え、神経叢の腹側と背側の枝の中間に位置するようになることが多い。今回のボノボでは、その様な位置変化が認められず、ヒトにおけるデータとの比較から、外側胸動脈や下胸筋動脈などが腋窩動脈の本幹になった可能性が示唆される。ヒトにおいてもその様な例が見られることから、ヒトとヒト以外の類人猿における腕神経叢と腋窩動脈の相関関係の類似性が示された。また、高解像度のCT四肢骨の内部構造を観察した。四肢長骨の軸部の断面係数は、骨の荷重耐性と相関すると考えられ、運動行動との関係が議論されてきた。緻密骨面積と極二次モーメントについて、大腿骨と上腕骨中軸部の比をとったところ、このボノボ標本の値は、先行研究でのコモン・チンパンジーの平均よりは高いが、その変異内に含まれ、ヒトよりは明らかに低く、ヒヒやオランウータンよりは明らかに高かった。海綿骨の骨梁の発達は荷重がかかる方向や強さと関係していることが知られている。霊長類の上腕骨骨頭と大腿骨骨頭の海綿骨を比べた場合、容積密度は常に大腿骨骨頭の方で高いが、その程度は種によって異なる。このボノボ標本では、大腿骨骨頭の値は霊長類の平均より高く、コモン・チンパンジーの範囲であるのに対し、上腕骨骨頭は霊長類の平均より低いという独特な特徴が見られた。この容積密度の差は骨梁数の増減ではなく、骨梁厚の変化に起因すると考えられる。これらの結果はボノボやチンパンジーが運動時の後肢への依存がヒトに比べ低く、他の霊長類に比べ高いことの現れである。
明治初頭日本における近代医学の受容と民衆の人体像

明治初頭日本における近代医学の受容に伴う「人体」像の変化のプロセスを明らかにするために、明治8(1875)年から明治11(1878)年に刊行された「人体問答」を表題につけた一群の初等教科書を分析した。多様な社会的・文化的・教養的背景をもつ人々によって記述された明治8年から9年はじめの「人体問答」書の多様な人体像が、明治9年から11年の間に変化していったことを明らかにした。本研究の目的は、明治初頭日本における近代医学の受容に伴う「人体」像の変化のプロセスを、医療啓蒙家・民衆・形成過程にある医療専門家集団を軸に構成し直すことにある。今年度は、明治8年-11年刊行の「人体問答」を表題につけた一群の初等教科書を収集し、内容を整理してエクセル表に登録する作業を進めた。また、本研究の背景を成す明治初頭日本における近代医学の受容過程に関する報告を、第110回日本医史学会学術集会(6/67,佐賀)で「明治初頭日本における医療情報の伝達・普及・定着」として、また、XXIII International Congress of History of Science and Tpchnology(7/288/2, Budapest, Hungary)において、"Language, Information, Instruments, and Medical Treatment-The medical assessment by Japanese doctors at the beginning of the Meiji era in Japan-"と題して発表し、さらに、看護歴史学会・交流セッションにおける基調講義「これだけは備えておきたい歴史研究方法のキーポイント」(2009年8月21日:聖路加看護大学)で、その一部を紹介した。また、明治初頭の日本に舶載され、形成過程にある医療専門家集団と民衆の人体像に大きな影響を与えたフランス製人体模型の修理過程に立ち会い、解組、再組み立てを通じて内容の理解を深めた。今年度は、次の3方向から研究を進め、以下のような成果をあげた。1)昨年にひきつづき、明治8年11年に刊行された「人体問答」を表題に付けた一群の初等教科書を収集し、内容を整理してエクセル表に登録する作業を進めた。このエクセル表を分析、検討し、大阪で刊行された「人体問答」書の特徴を抽出して、その背景をあとづけた。また、「人体問答」書刊行の終息する明治13年15年にかけての歴史的背景を教育史的、社会史的、民衆史的な観点から検討し調査を進めた。2)本研究の背景を成す明治初頭日本における近代医学の受容過程に関して、医療啓蒙家と、形成過程にある医療専門家集団の発信した情報の内容に踏み込んだ研究を行い論文に纏めた。また、明治初頭日本における医療者集団の再形成過程について、医療関係者たちの会であるマスターズ・コミュニティでの招待講演で「明治維新と医療」と題して発表した。3)明治初頭の日本に舶載され、形成過程にある医療専門家集団と民衆の人体像に大きな影響を及ぼしたフランス製人体模型の解組、修理、再組み立て過程に関して、茨城大学で行われた日本医史学会学術大会において「金澤大学所蔵キンストレーキの解組と新たに確認されたオランダ語・日本語ラベル」と題して発表した。本研究の目的は、明治初頭日本における近代医学の受容に伴う「人体」、像の変化のプロセスを、医療啓蒙家・民衆・形成過程にある医療専門家集団を軸に構成し直すことにある。今年度も、次の3方向から研究を進め、それぞれ以下のような成果をあげた。1、明治8年11年に刊行された「人体問答」を表題に付けた一群の初等教科書を収集し、内容を整理してエクセル表に登録する作業を進あた。このエクセル表を分析、検討し、東京、大阪、長野で刊行された「人体問答」書の特徴を抽出して、その背景をあとづけた。研究の成果は、研究代表者が実行委員長をつとめた第112回日本医史学会研究太会で「大阪の『人体問答』-明治812年刊行初等教育教科書における人体像」として発表した。2、本研究の背景を成す明治初頭日本における近代医学の受容過程に関して、医療啓蒙家とぐ形成過程にある医療専門家集団の発信した情報の内容に踏み込んだ研究を行い論文にまとめ、『日本医史学雑誌』に発表した。3、明治初頭の日本に舶載され、形成過程にある医療専門家集団と民衆の人体像に大きな影響を及ぼした金沢大学所蔵のフランス製人体模型の解組、修理、再組み立て過程を収録した、山本博監修、金沢大学医学部創立150周年記念事業、デジタルアーカイブ『キンストレーキ-平成の修理と解体・組付け動画-』、国立大学法人金沢大学医学部制作、2011.DVD制作にアドバイザーとして参加した。
健常者と障がい者との共通理解の地平に関する理論的考察

こんにち、障がい者の人権の保障が強く求められ、障がい者の社会進出も促進されている。しかし、その一方で、障がい者に関する差別や偏見は未だ根強く存在していると言わざるを得ない。そのような状況を顧みれば、障がい者の権利の拡充や社会制度の充実だけを追い求めているのでは十分ではない。いまや、障がい者を真に理解し、そうした理解に基づいて、成熟した形で健常者と障がい者とが共生することをめざさなければならない。そこで、本研究では、倫理学的な見地から、想像力や暗黙知の洗練という点に焦点を絞りながら、健常者と障がい者との共通理解の地平を切り開く方途を探究した。現在、障がい者の社会進出が強く求められ、健常者と障がい者との成熟した共生の形に関するさまざまな理論的モデルが提案されている。しかし、障がい者自身の側から、精緻な理論的モデルを提案しようとした取り組みは極めて少ない。健常者と障がい者とが真に成熟した形で共生するためには、障がい者自身の観点から作成したモデルを、健常者が提示してきたモデルと突きつけ合う作業が不可欠であり、そのためには、障がい者の観点から、健常者と障がい者との共生に関する哲学的モデルの構築をめざす取り組みが、今まで以上に行われる必要がある。とはいえ、同じような障がいを抱えているひとびとの場合でも、障がいの程度や個々人のパーソナリティや置かれている環境などによって、そのひとに立ち現れる世界は違ったものになるはずである。してみれば、重要なのは、障がい者と認定されるひとたちにとっての最大公約数的なニーズを特定し、そのニーズを満足させるような理論的モデルを構築することではない。むしろ、健常者と障がい者とのあいだで、また、異なる種類の異なる状態の障がいを抱えている者のあいだで、相手の置かれている状況や相手が抱えている苦しみをいささかでも理解しあえる地平を切り開いていくことが肝要なのである。しかも、障がい者の置かれた状況に関する言語的な説明を尽くしていくだけでは、このような共通理解の地平を切り開くには不十分であり、相手の状況や苦しみをできるだけ的確にイメージできるような想像力と、相手が言語的に表現し尽くせない事柄を適切に捉える暗黙知とを洗練していくことが求められる。このような問題意識のもとに、本研究は、想像力や暗黙知の洗練という主題を盛り込む形で、障がい者の観点から、健常者と障がい者との共生に関する哲学的モデルの構築をめざすものである。健常者と障がい者とが真に成熟した形で共生するには、障がい者自身の観点から作成したモデルを、健常者が提示してきたモデルと突きつけあう作業が不可欠であり、そのためには、障がい者の観点から、健常者と障がい者との共生に関する哲学的モデルの構築をめざす取り組みが、今まで以上に行われる必要がある。しかも、障がい者と認定されるひとたちにとっての最大公約数的なニーズを特定し、そのニーズを満足させるような理論的モデルを構築することが重要なのではない。むしろ、健常者と障がい者とのあいだで、また、異なる種類の異なる状態の障がいをもつ者のあいだで、相手のおかれている状況や相手の抱えている苦しみに関していささかでも理解しあえる地平を切り開いていくことが肝要なのである。このような問題意識のもとに、本研究は、他者理解のための想像力や暗黙知の洗練という側面を念頭におきながら、障がい者の観点から、健常者と障がい者との共生に関する哲学的モデルの構築をめざすものである。平成27年度に、研究代表者宮崎と研究分担者新は、クレア・コズニック、クライブ・ベック著、『教員養成の新視点』(晃洋書房、2015年)の翻訳に携わり、「インクルーシブ教育」や「コミュニティー」を扱った章を担当することで、アメリカやカナダにおいて健常者と障がい者との共生のためにどのような教育が試みられているのかについて把握した。また、平成27年度における中核的な研究実績としては、宮崎が本研究の成果を、日本道徳性発達実践学会第15回同志社大会において「「習慣」の発想に基づく他者理解の基礎」という題目で発表した。これまでの研究動向の大要は、以下のとおりである。研究代表者宮崎は、他者理解の基礎の確立・拡張を構想したジョン・デューイの思想を詳細に考察するとともに、障がい者文学に描写されているような世界観、特に、自らが障がいを抱えながら文筆活動に従事した作家の作品に描写されているような世界観を入念に検討している。そして、宮崎はその研究成果の一端を、平成27年度に日本道徳性発達実践学会第15回同志社大会において「「習慣」の発想に基づく他者理解の基礎」という題目で発表した。本発表での質疑応答を踏まえて、宮崎と研究分担者新は、検討会を開き、他者理解にかかわるデューイ思想の考察と、障がい者文学に描写されている諸々の世界観の分析をさらに推し進めていく必要性を確認したが、他方で、他者理解の基礎の確立・拡張という主題を扱ううえでは、マーサ・ヌスバウムがその独自のアリストテレス解釈で提示した「領地(terrain)」概念を批判的に吟味しておくことが不可欠であることも確認した。

というのも、ヌスバウムが強調するような「領地」といったものが仮にあるとしても、健常者のそれと障がい者のそれとは大きく異なっていると考えられるからである。また、宮崎と新は、平成27年度に、クレア・コズニック、クライブ・ベック著、『教員養成の新視点』(晃洋書房、2015年)の翻訳に携わった。その目的のひとつは、アメリカやカナダでの教育において共生のために何が試みられているのかを知ることであった。このように、宮崎と新は、共生のために現実に立てられている方策にも目配りしながら本研究に取り組んでいる。新たな検討課題の発見に伴い必要とされる文献の収集という点では、やや遅れが生じてしまったが、上述したように、研究主題に関する展望が一層鮮明な形で開けてきたという点では、本研究は、おおむね順調に進展していると言える。現在、障がい者の社会進出が強く求められ、健常者と障がい者との成熟した共生の形に関するさまざまな理論的モデルが提案されている。しかし、障がい者自身の側から、精緻な理論的モデルを提案しようとした取り組みは極めて少ない。健常者と障がい者とが真に成熟した形で共生するには、障がい者自身の観点から作成したモデルを、健常者が提示してきたモデルと突きつけあう作業が不可欠であり、そのためには、障がい者の観点から、健常者と障がい者との共生に関する哲学的モデルの構築をめざす取り組みが、今まで以上に行われる必要がある。しかも、障がい者と認定されるひとたちにとっての最大公約数的なニーズを特定し、そのニーズを満足させるような理論的モデルを構築することが重要なのではない。むしろ、健常者と障がい者とのあいだで、また、異なる種類の異なる状態の障がいを抱えている者のあいだで、相手のおかれている状況や相手が抱えている苦しみをいささかでも理解しあえる地平を切り開いていくことが肝要なのである。このような問題意識のもとに、本研究は、他者理解のための想像力や暗黙知の洗練という課題を念頭におきながら、障がい者の観点から、健常者と障がい者との共生に関する哲学的モデルの構築をめざした。平成28年の主な研究成果に関しては、以下のとおりである。研究代表者宮崎は、前年に日本道徳性発達実践学会で発表した内容をさらに発展させた論文を、「デューイの「習慣」の発想に基づく他者理解の基礎」というタイトルで書き上げ、その論文は、当該学会の機関紙である『道徳性発達研究』第10巻第1号に掲載された。また、宮崎と研究分担者新は、平成29年4月に刊行予定である『プラグマティズムを学ぶ人のために』という教科書の執筆に加わり、執筆を担当する章において本研究で得た知見を可能な範囲で盛り込んで、そうした知見を広く社会に発信することに取り組んだ。こんにち、障がい者の人権の保障が強く求められ、障がい者の社会進出も促進されている。しかし、その一方で、障がい者に関する差別や偏見は未だ根強く存在していると言わざるを得ない。そのような状況を顧みれば、障がい者の権利の拡充や社会制度の充実だけを追い求めているのでは十分ではない。いまや、障がい者を真に理解し、そうした理解に基づいて、成熟した形で健常者と障がい者とが共生することをめざさなければならない。そこで、本研究では、倫理学的な見地から、想像力や暗黙知の洗練という点に焦点を絞りながら、健常者と障がい者との共通理解の地平を切り開く方途を探究した。これまでの研究は、後述する展望を確立できたという点では順調である。
巨大ポルフィリングの新しい超分子化学-分子チューブと光合成反応中心への挑戦

天然の光合成アンテナ系を模倣した巨大ポルフィリンリングの合成を行う予定であったが、研究開始直前にロジウム触媒によりポルフィリン周辺への不飽和カルボン酸残基導入反応が当研究室や開発されたのを受け、急遽、合成ターゲットを色素増感太陽電池に用いるポルフィリン系に変更し、合成を行った。メゾーフリーポルフィリンにイリジウム触媒によりβ位にホー素を導入した後、ロジウム触媒により不飽和カルボン酸の導入を行った。本反応をメゾーメソポルフィリン2量体にも適応し、さまざな構造を持つポルフィリン系色素を合成した。これらを実際にTiO2上に担持したデバイスを作成し、光電流変換効率を調べたところ、高い変換効率が確認できた。人工光合成研究に役に立つポルフィリン分子の合成を行った。ポルフィリンリングやポルフィリンチューブに進む準備として、ロジウム触媒によるポルフィリン側鎖へのエステル基導入反応について検討した。我々は、これまでの研究により、イリジウム触媒を用いた反応により、空いているメゾ位の隣のべータ位に選択的にぼー素を導入する反応を開発していた。これらポルフィリン-ホー素は、ロジウム触媒の作用により、ポルフィリン-ロジウム種が生成すれば、アルファーべータ不飽和エステルと反応することが期待できる。メゾーホー素化ポルフィリンは、メゾブロモポルフィリンから合成した。反応の結果、べータホー素化ポルフィリンからは、Heck型の反応が進行し、不飽和エステルが付加した生成物が得られ、メゾーホー素化体からは、共役付加が進行し、飽和エステル付加対が得られる事が分かった。共役を伸ばしたエステルからも、収率は若干落ちるものの、同様な反応が進行することを明らかにした。これらのエステル付加体を水酸化ナトリウムにより加水分解してカルボン酸として、二酸化チタン表面に吸着させると薄膜を生成することがわかった。これらの薄膜を光照射するとポルフィリンが励起されて、二酸化チタンに電子移動し、結果として、超電流が発生することを明らかにした。カルボン酸残基が4個ある基質よりも同じ側に2個ある基質の方が、効率が高いことも分かった。
骨吸収制御を担う新規膜表面分子複合体の分子免疫学的解析と形態学的動態解析

破骨細胞は造血幹細胞に由来し、骨微小環境下に形成された単核の破骨前駆細胞どうしが融合することにより大型で多核の破骨細胞が形成される。更に骨芽細胞や骨基質から提供される刺激を受け、骨吸収機能に必須の形態学的超構造であるruffled border(刷子縁)が形成される(しばしば「活性化」という言葉で表現される)と、破骨細胞の活発な骨吸収が始まる。破骨細胞分化因子RANKLとその受容体であるRANKの発見により、分化シグナルに関する知見は急速に集積されつつあるが大規模な形態学的変化を伴う破骨細胞の「活性化」とその制御機構に関しては不明の点が多い。本研究では、破骨細胞の活性化に伴う特異的膜タンパク質の同定と破骨細胞の機能発現に伴う形態学的な動態解析を行い破骨細胞活性化の制御機構の一端を解明することを目的とする。破骨細胞を認識するモノクローナル抗体の1つを用いた免疫アフィニティークロマトグラフィーにより抗原の精製を行いSDS電気泳動後、LC-MASSを用いた質量分析を行った。候補蛋白質の1つとしてガレクチン3が検出されたが、ガレクチン3が抗原そのものであるのか、あるいは抗原に会合した分子であるのか、に関しては特定できなかった。ところで、ガレクチン3はMac2抗原として破骨細胞が発現することが報告されているが、その機能は分かっていなかった。特異的siRNAによりガレクチン3の遺伝子発現阻止を行い分化における機能を解析したが、破骨細胞分化への関与は認められなかった。そこでリコンビナントガレクチン3をRANKLに依存した破骨細胞分化系に添加したところ、破骨細胞の形成が顕著に阻害された。アジュバント関節炎ラットの系でも関節腔にガレクチン3を投与すると破骨細胞の形成が抑制され骨吸収が軽減されることがわかった。本研究より、ガレクチン3が破骨細胞の活性化を制御する重要な制御因子であることが強く示唆された。当該分子を認識するモノクローナル抗体を用いた免疫学的精製の条件設定にかなりの時間を要したが、現在、設定した条件下での純化・精製を行なっている段階である。また、複数のタンパク分子に関して相互作用を形態学的に解析する為には、基礎情報として、最初に各分子各々についての動態解析を必要とする。当該分子の発現が破骨細胞分化に伴い発現誘導されることを明らかにした。また複数の分子の相耳作用を時間・空間的に解析する為には抗体を異なる蛍光色素で標識する必要がある。異なるモノクローナル抗体のFITC標識やPE標識を行ない、形態学的動態解析を遂行中である。

一方、本研究では炎症性骨破壊の系に於ける当該タンパク質の動態を解析することが重要であるが、動物実験系として新たに、タイプIIコラーゲンを抗原として免疫して作成する「コラーゲン関節炎動物」の系も導入し、本研究の応用面での研究対象を広げた。破骨細胞は造血幹細胞に由来する骨吸収細胞であるが、多核細胞として形成された後、更に骨芽細胞や骨基質から提供される刺激を受け、骨吸収機能に必須の形態学的超構造であるruffled border(刷子縁)が形成され(しばしば「活性化」という言葉で表現される)、破骨細胞の活発な骨吸収が始まる。破骨細胞分化因子RANKLとその受容体であるRANKの発見により、分化シグナルに関する知見は急速に集積されつつあるが大規模な形態学的変化を伴う破骨細胞の「活性化」とその制御機構に関しては不明の点が多い。本研究では、破骨細胞の活性化に伴う特異的膜タンパク質の同定と破骨細胞の機能発現に伴う形態学的な動態解析を行い破骨細胞活性化の制御機構の一端を解明することを目的とする。破骨細胞を認識するモノクローナル抗体の1つを用いた免疫アフィニティークロマトグラフィーにより抗原の精製を試みた。TFAにより溶出後SDS電気泳動により分離し、銀染色を行った。複数のバンドが得られたが、強染するバンドのみを切り出した後、通法によりトリプシン消化によりペプチド断片を得た。LC-MASSを用いた質量分析を行った結果、候補蛋白質の1つとしてガレクチン3が検出された。ガレクチン3が抗原そのものであるのか、あるいは抗原に会合した分子であるのかに関しては特定できず、更なる研究が必要である。ところで、ガレクチン3はMac2抗原として破骨細胞が発現することが報告されているが、その機能は分かっていない。特異的siRNAにより遺伝子発現阻止を行い分化における機能を解析したが破骨細胞分化への関与は認められなかった。リコンビナントガレクチン3をRANKLに依存した破骨細胞分化系に添加したところ、破骨細胞の形成が顕著に阻害された。アジュバント関節炎ラットの系でも関節腔にガレクチン3を投与すると破骨細胞の形成が抑制され骨吸収が軽減されることがわかった。本研究は、ガレクチン3が破骨細胞の活性化を制御する重要な制御因子である可能性を示唆するものである。
フェムト秒レーザー誘起衝撃力による単一細胞刺激と活性化機構の解析

高強度の近赤外フェムト秒レーザー光を顕微鏡下で細胞培養液に集光すると、効率的な多光子吸収により集光点で爆発現象が引き起こされる。この爆発現象により発生する衝撃力は、ミクロンオーダーの領域に局在するため、1細胞の局所領域に機械刺激を加えられる。本研究では、筋芽細胞と神経細胞に、このフェムト秒レーザー誘起衝撃力を作用させ、カルシウムインディケーターにより1細胞レベルの細胞活性変化を解析する新手法を開発した。レーザー強度により機械刺激の大きさや作用領域を自在に変えられる特徴を駆使して、1細胞内で刺激が活性化されるメカニズムを検討した。本研究では、この局所的な機械刺激を単の細胞に加えた時に引き起こされる細胞活性の変化を調べ、細胞の機械刺激応答を1細胞レベルで明らかにする新しい解析手法の確立を目指している。本年度は、筋芽細胞と神経細胞にカルシウムインディケーター(Fluo-8など)を添加した細胞を培養し、それらの培養細胞の横にフェムト秒レーザーを集光照射し、細胞の活性変化をレーザー照射位置依存性、照射パルス間隔依存性として調べた。その結果、レーザー照射強度90nJ/pulse以上では、衝撃力の印加回数に依存したが、70nJ/pulseでは、衝撃力の印加回数依存性はみられなかった。90nJ/pulse以上にみられる照射回数に依存している成分は、複数回の衝撃力印加により、細胞膜が物理的損傷を受けたことに起因すると考えられる。一方、70nJ/pulseにみられる衝撃力印加回数に依存しない応答は、細胞が1ms(1/1000Hz)より短い時間を感知し、単発の衝撃力により、Ca^<2+>濃度に変化がもたらされた結果である。衝撃力による細胞内Ca^<2+>濃度上昇の過程として(i)細胞培養液中のCa^<2+>が細胞内に流入した可能性、(ii)細胞内にCa^<2+>が貯蔵されている小胞体から細胞内に放出した可能性が考えられる。Ca^<2+>を含まないCa^<2+>-free蛍光測定用緩衝溶液を用いて同様の実験を行ったところ、Ca^<2+>濃度が増加する細胞はみられなかった。これは、衝撃力に起因する細胞内Ca^<2+>濃度上昇におけるCa^<2+>濃度の上昇過程は、(i)に起因することを示唆する。また、電位依存刺激によるCa^<2+>濃度上昇が確認されている神経細胞でも同様の実験を行ったところ、衝撃力印加後にC2Cl2と同じCa^<2+>濃度上昇が観察された。本研究では、この局所的な機械刺激を単一の細胞に加えた時に引き起こされる細胞活性の変化を調べ、細胞の機械刺激応答を1細胞レベルで明らかにする新しい解析手法の確立を目指している。本年度、高強度のフェムト秒レーザーを照射している中でも観察することが可能な共焦点蛍光顕微鏡システムを開発した。その結果、前年度に構築したカルシウムインディケーター(Fluo-8)を添加した神経細胞や筋芽細胞などの培養動物細胞の蛍光イメージを秒速1コマ程度の速度で撮影しながら、その中で標的とする細胞にフェムト秒レーザー誘起衝撃力を付加し、その蛍光強度の時間変化を調べることに成功した。分担研究者である伊藤教授らは、マウスから摘出した初代培養神経細胞とマスト細胞を共培養した系を用いて上記システムによる実験を実施した。その結果、神経細胞を衝撃力により刺激すると、その直後に神経細胞のカルシウムイオン濃度が増加し、さらにそのシグナルがマスト細胞に伝達し、マスト細胞のカルシウムイオン濃度が増加する挙動が観察された。この結果は、培養皿上に無秩序に構成された神経細胞とマスト細胞間のコミュニケーションネットワークにおいて、神経のみを刺激し、神経細胞とのコミュニケーションのみでマスト細胞を1細胞レベルで刺激する新しい解析手法を確立したと位置づけられる。さらに、分担研究者である古野忠秀准教授らにより、Transient receptor potential channels(TRP channels)を抑制したマウス筋芽細胞(C2C12)が開発された。TRP channelsは、機械刺激により応答し、カルシウムイオンを細胞外から取り込む受容チャネルとして知られている。現在、正常細胞と数種類のTRPchannelsを抑制した細胞にFluo-8を添加し、上記のレーザー照射・観察システムを用いて、その挙動を明らかにしようとしている。
モノユビキチン修飾による小胞輸送蛋白質複合体依存性ウイルス増殖機構

宿主の小胞輸送系は、ウイルスの細胞内侵入から最終的な成熟ウイルスの放出に至る一連のウイルス増殖においても密接に関与していることが推察されているが、その詳細は不明である。小胞輸送関連蛋白質(HrsおよびSTAM1,STAM2)複合体は、EGF受容体を始めとする蛋白の小胞輸送に関与する。本研究ではマウスサイトメガロウイルス(MCMV)感染増殖におけるSTAMs・Hrs複合体の役割を検討した。MCMVを、STAMI/SATM2ダブルノックアウト細胞株(SSd)、STAM1あるいはSTAM2を戻したSSd細胞株(SSdS1,SSdS2)、Hrsノックアウト細胞株(HRSd)および同遺伝子戻し細胞株(HRSdRe)に対してMOI=1にて感染させ、感染後短時間における輸送系の役割を検討した。感染6、12、24時間後に細胞内侵入ウイルス量、培養上清中のウイルス量をrealtime-PCR法にて、Immediateearly遺伝子であるie1をRT-PCR法により定量した。その結果、特にHRSd細胞において感染24時問後に初期遺伝子ie1の転写量が軽度低下していた。さらにHrs欠損細胞ではIE1蛋白量が顕著に低下していた。感染直後における各細胞内の取り込まれたウイルスDNA量に有意な差がなかったことから、HrsはIE1蛋白の分解誘導に機能しているものと考えられた。共焦点顕微鏡を用いた観察から、実際にHrs欠損ではIE1が細胞質に蓄積していた。以上の結果から、サイトメガロウイルス初期遺伝子IE1は一部細胞質に移行し、小胞輸送系蛋白Hrsによって分解誘導を受けることが判明した。IE1はウイルス複製に重要であることから、HrsはCMVウイルス増殖を負に制御する宿主因子であることが明らかとなった。我々の同定した小胞輸送関連蛋白質(HrsおよびSTAM1,STAM2)複合体は、EGF受容体を始めとする蛋白の小胞輸送に関与する。MCMV(Smith株)を、以前に樹立済みのSTAM1/SATM2ダブルノックアウト細胞株(SSd)、STAM1あるいはSTAM2を戻したSSd細胞株(SSdS1,SSdS2)、Hrsノックアウト細胞株(HRSd)および同遺伝子戻し細胞株(HRSdRe)に対してMOl=0.1にて感染させ、感染72時間後に培養上清中のウイルス量、およびウイルス吸着後の細胞内侵入ウイルス量をreal time-PCR法にて定量したほか、Immediate early遺伝子であるie1を定量した。その結果、SSd細胞およびHRSd細胞では感染72時間後回収されたウイルス量が各遺伝子戻し細胞株に比べ顕著に低下していた。初期遺伝子転写量、後期遺伝子転写量共に、SSd細胞およびHRSd細胞では低下を認めたものの、感染1時間後における各細胞内の取り込まれたウイルスDNA量に有意な差がなかったことから、吸着から侵入後の感染早期に機能していることが考えられた。共焦点顕微鏡を用いた観察から、実際に感染早期の細胞内MCMV動態の異常が認められた。以上の結果からSTAMおよびHrsは、少なくともMCMVの細胞内侵入から感染成立にいたる感染初期に重要な役割を果たしていることが明らかとなった。

本研究ではマウスサイトメガロウイルス(MCMV)感染増殖におけるSTAMs・Hrs複合体の役割を検討した。MCMVを、STAM1/SATM2ダブルノックアウト細胞株(SSd)、STAM1あるいはSTAM2を戻したSSd細胞株(SSdS1,SSdS2)、Hrsノックアウト細胞株(HRSd)および同遺伝子戻し細胞株(HRSdRe)に対してMOI=1にて感染させ、感染後短時間における輸送系の役割を検討した。感染6、12、24時間後に細胞内侵入ウイルス量、培養上清中のウイルス量をreal time-PCR法にて、Immediate early遺伝子であるie1をRT-PCR法により定量した。その結果、特にHRSd細胞において感染24時間後に初期遺伝子ie1の転写量が軽度低下していた。さらにHrs欠損細胞ではIE1蛋白量が顕著に低下していた。感染直後における各細胞内の取り込まれたウイルスDNA量に有意な差がなかったことから、HrsはIE1蛋白の分解誘導に機能しているものと考えられた。共焦点顕微鏡を用いた観察から、実際にHrs欠損ではIE1が細胞質に蓄積していた。以上の結果から、サイトメガロウイルス初期遺伝子IE1は一部細胞質に移行し、小胞輸送系蛋白Hrsによって分解誘導を受けることが判明した。IE1はウイルス複製に重要であることから、HrsはCMVウイルス増殖を負に制御する宿主因子であることが明らかとなった。