hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
シラアレンカチオン活性種及び類縁体の合成開発と応用研究

従来のアレン化学の研究成果(J.Synth.Org.Chem.,Jpn. 2003,61,1088-1098)を基盤として我々は1-シラアレン種及び1-シラアレンカチオン種の合成開発と応用研究を3年間展開してきた。先ずそれらの前駆体であるジアリルモノアルキニルフルオロシランの独自の実用的な合成法を確立した。即ち、ガス状で高価なテトラフルオロシランを使用せず、液体のテトラクロロシランを利用して異種のアリルリチウムと2回反応させてジアリルジクロロシランに変換した後、二フッ化銅と反応させてジアリルジフルオロシランに誘導した。続いて、アルキンのリチウム塩と反応させたところ高収率で各種ジアリルモノアルキニルフルオロシランを合成することができた。さらに異なるアルキンのリチウム塩と反応させて、四つの置換基が異なる各種ジアルキニルジアリルシランを高収率で合成することに成功した。Tip、t-Bu、フェニルアルキニル、フッ素から成るシランにt-BuLiを低温下に反応させた後さらに反応液を室温下あるいは加熱還流下に撹拌して、所望の1-シラアレン誘導体を得た。in situで生成した1-シラアレンン誘導体と各種ケトン及びアルデヒド体とを室温下に反応させて、各種1,2-オキサシレタン誘導体を好収率で得ることに成功した。イミンとの同様の環化反応では低収率ながら1,2-アザシレタン誘導体を得ることができた。各種ジアルキニルジアリルシランをシクロペンタジエニルジルコニウムエチレン錯体を用いた高橋反応に付して、新規な各種シラシクロブテンを合成した。各種シラシクロブテンをテトラブチルアンモニウムフルオリドと反応させて各々対応する共役ジェン及びトリエン誘導体を高収率で合成することに成功した。達成した各種反応は、今後有機エレクトロルミネスセンス材料等の開発に応用できるものと期待している。我々は数年来研究展開してきたアレン化学の研究成果(J.Synth.Org.Chem.,Jpn.2003,61,1088-1098.)を基盤として、米国ウイスコンシン大学のR.Westらによってのみ若干検討されている1-シラアレン種ならびに未開拓分野の1-シラアレンカチオン種の合成開発と応用研究に着手した。現在までに次のような研究成果が得られている。ジアリルアルキニルフルオロシランを1-シラアレン種ならびに1-シラアレンカチオン種として着目しその合成を試みた。ジアリルアルキニルフルオロシランの合成を従来法に従って、テトラフルオロシランとアリルリチウムとの反応によって先ず、アリルトリフルオロシランを合成した。次いで、アリルトリフルオロシランと各種アリル及びアルキルリチウムと反応させて所望の各種三置換モノフルオロシランを合成した。しかしながら、本合成法は取扱い困難なテトラフルオロシランを使用するという問題があったので、新規な合成法を試みそれに成功した。すなわち、各種アリルブロミドとn-ブチルリチウムとを反応させてアリルリチウム体に変換し、テトラクロロシランと反応させてアリルトリクロロシランに誘導する。その反応液に別途に合成したアリルリチウム体を反応させて各種ジアリルジクロロシランを得た。ジアリルジクロロシランをフッ化銅(II)と反応させたところ、対応する各種ジアリルジフルオロシランを高収率で得た。ジアリルジフルオロシランを種々のリチウムアセチリドと反応させることにより、所望の各種ジアリルアルキニルフルオロシランを安価で効果的に得ることに成功した。その分子構造はX線結晶構造解析にて確認している。

現在、各種ジアリルアルキニルフルオロシランを用いて1-シラアレン種ならびに1-シラアレンカチオン種の合成を検討している。アレン化学における独自の研究成果(J.Synth.Org.Chem., Jpn.2003,61,1088-1098.)を基盤として、我々は米国ウイスコンシン大学のR.West教授グループによってのみ若干報告されている1-シラアレン種及び未開拓の1-シラアレンカチオン種の合成開発と応用研究に着手し2年間経過している。その間、1-シラアレン種等の前駆体である各種ジアリルアルキニルフルオロシランの安価で効果的な合成には成功しているが、未だ当初の研究目的である1-シラアレン種等の合成を達成していない。しかしながら、下記のような注目すべき関連研究成果を挙げている。すなわち、従来同種のジアルキニルから成るジアリルジアルキニルシランの合成は容易であったが、異種のジアルキニルから成るジアリルジアルキニルシランの効率的合成法は無かった。我々は、独自に開発した合成法に従って、テトラクロロシランをジアリルジフルオロシランに変換し、任意のアルキンのリチウム塩と反応させて高収率でジアリルモノアルキニルフルオロシランを合成した。次いで、前述と異なるアルキンのリチウム塩と反応させて極めて高収率で異種のジアルキニルから成る所望の多種多様なジアリルジアルキニルシランの合成に成功した。これらの化合物から、高橋らの方法に従って、世界に先駆けて異種のアルキンから成る新規な歪み化合物である各種シラシクロブテン誘導体の変換に成功した。これらの構造はX線結晶構造解析によって決定した。従来のアレン化学の研究成果(J.Synth.Org.Chem.,Jpn.2003,61,1088-1098)を基盤として我々は1-シラアレン種及び1-シラアレンカチオン種の合成開発と応用研究を展開してきた。本年度は先ず、独自に開発した実用的合成法に従って合成したジアリルモノアルキニルフルオロシランの中で、Tip、t-Bu、フェニルアルキニル、フッ素から成るシランにt-BuLiを低温下に反応させた後さらに反応液を室温下あるいは加熱還流下に撹絆し、所望の1-シラアレン誘導体を効率良く得ることができた。本1-シラアレンン誘導体は不安定なため、取り出さずにメタノールを加えてその付加体としてその分子構造を間接的に証明した。in situで生成した1-シラアレンン誘導体と各種ケトン及びアルデヒド体とを室温下に反応させたところ、[2+2]の環化反応が進行して各種1,2-オキサシレタン誘導体を好収率で得ることに成功した。イミンとの同様の[2+2]の環化反応では低収率ながら1,2-アザシレタン誘導体を得ることができた。アセトニトリルとの反応では、アセトニトリルのメチレンアニオンがケイ素原子を攻撃して生成したと考えられる生成物が得られた。これらの化合物の分子構造をX線結晶構造解析にて証明した。さらに、独自に合成開発した異種のジアルキニルから成る新規なジアルキニルジアリルシランを用いて各種シラシクロブテン誘導体(有機エレクトロルミネスセンスの機能が期待される。)を合成し、それらの立体選択的な共役ジエン体への変換を達成した。
DNA依存性プロテインキナーゼルと放射線応答

放射線に対する細胞応答の中で、DNA依存性プロテインキナーゼ(DNA-PK)の果たす役割を明らかとする目的で、射後速やかな細胞死の発現を示すヒトリンパ性白血病由来MOLT-4細胞よりDNA-PKを精製し性状解析を行うとともに、照射の千の活性の経時的変化、細胞種による活性の差異、および活性と温熱による放射線致死効果の増強との関係を検討した。1.MOLT-4細胞により精製したDNA-PKは、分子量70kDa、86kDa、および470kDaの3つのサブユニットからなり、前2者は抗Kuと反応した。触媒活性は470kDaサブユニット(p470)にあった。活性は2本鎖DNAの量に依存して増強されたが、1本鎖DNAは無効であった。2.精製したDNA-PKは44°C処理で急速に失活した。Ku成分のみを温熱処理してからp470と混合しても同様の活性の低下が認められた。Kuの温熱不安定性が温熱による活性低下の原因と考えられた。3.X線(10Gy)照射されたMOLT-4細胞においては、照射1時間まではDNA-PK活性に変化はなく、2次間以降活性の低下が認められた。p470を抗原として作製したウサギ抗体によるウェスタン解析で、照射6次間目以降、p470断片化が顕著に認められたる細胞死の過程の進化とともに、p470の切断と活性低下の起こることが示された。4.ヒト由来細胞(5種)では、げっ歯類由来細胞(4種)よりもDNA-PK活性が高い傾向が見られた(非照射・非温熱処理時)。種々の時間の温熱(44°C)処理を施しDNA-PK活性を測定すると、ヒト由来細胞では3時間処理までは顕著な活性の低下は見られなかった。げっ歯類細胞では1時間以内に活性が低下した。また、コロニー形成能を指標とした放射線致死効果の増感は、げっ葉類細胞で大きい傾向が見られた。放射線応答の様相の異なる哺乳動物培養細胞を用いて、DNA依存性プロテインキナーゼ(DNA-PK)の生化学的性質の解析、およびDNA-PKの作用機序の解析を行い、これによって細胞の放射線応答機構の初期過程とDNA-PKの機能を明らかにすることを目的とした。照射後速やかな細胞死を起こすヒトTリンパ性白血病細胞MOLT-4、同じく高感受性で照射後細胞周期進行遅延が起こらない毛細血管拡張性運動失調症(Ataxia telangiectasia:AT)由来細胞のDNA-PK活性を解析したが、両者とも充分なDNA-PK活性を保持していた。MOLT-4細胞の核抽出液から、3段階のカラムクロマトグラフィーにより精製し、更にグリセロール濃度勾配遠心により、p470とKu成分(Ku p85,Ku p70)に分離した。精製DNA-PKの活性は37°C前処理ではほとんど変化しなかったが、44°Cで前処理すると顕著に低下した。次にp470とKuを別々に前処理した後、両者を混ぜ合わせてDNA-PK活性を調べた。DNA-PKは温熱に不安定であり、それがKu成分に起因することが示唆された。DNA-PKの温熱不安定性は、2重鎖切断の修復や情報伝達の障害を介して、温熱の放射線増感作用の原因となっていると考えられた。分離したサブユニットを抗原として、p470,Ku p85に対するウサギポリクローナル抗体を作製できた。得られた抗体はウェスタンブロッティング、免疫沈降などに使用可能であることが確認された。

今後、これらの抗体を用いて、DNA-PKの分布、機能、役割について調べることを予定している。哺乳動物培養細胞を用いて、DNA依存性プロテインキナーゼ(DNA-PK)の照射後の活性の経時的変化、細胞種による活性のちがい、および放射線致死効果の修飾と活性の関係を検討することにより、細胞の放射線応答機構におけるDNA-PKの役割を明らかにすることを目的とした。1.MOLT-4細胞においてX線10Gy照射後のDNA-PK活性を経時的に解析したところ、照射1時間までは活性に変化はなかったが、2時間以降活性の低下が認められた。昨年度に得られた抗体を用いて、照射後のMOLT-4細胞におけるp470サブユニットの変化をウェスタン法で解析すると、照射6時間目以降、断片化が顕著に認められた。時間的な前後関係の詳細な解析は今後の検討課題であるが、細胞死の過程の進行とともに、p470の切断と活性低下の起こることが示された。2.DNA-PKがDNAと結合することを利用して、DNAセルロースにより細胞粗抽出液からDNA-PKを回収し、より迅速・定量的に活性を測定する方法(Pull-down法)を確立した。Pull-down法を用いて、9種類の培養細胞(非照射)のDNA-PK活性を解析した。ヒト由来細胞(5種)では、げっ歯類由来細胞(4種)よりもDNA-PK活性が高い傾向が見られた。3.9種類の培養細胞に種々の時間の温熱(44°C)処理を施した後に細胞粗抽出液を調整し、DNA-PK活性を測定した。ヒト由来細胞(5種)では3時間処理まで顕著な活性の低下は見られなかったが、げっ歯類細胞(4種)では1時間以内に活性が低下した。また、コロニー形成能を指標とした放射線致死効果の増感は、げっ歯類細胞で大きい傾向が見られた。
乳化燃料液滴燃焼におけるミクロ爆発過程の数値シミュレーション

本研究は,乳化燃料の液滴燃焼時に発生するミクロ爆発現象を,数値解析手法を用いて検討したものである。当初の計画通り,1.水分凝集過程のモデル化,2.ミクロ爆発発生のモンテカルロシミュレーション,3.ミクロ爆発過程の数値シミュレーションの3段階によって遂行した。計算は,含水率を20%とし,燃料成分をドデカンおよびヘキサデカンとした水中油滴型乳化燃料について行った。各段階の概略と主な結果は以下の通りである。1.液滴燃焼時における液滴内部の温度場を,液滴直径の変化を加味した境界条件を与えて,非定常熱伝導問題として差分法により求めた。温度-水分凝集についての実験結果を計算過程に組み込み,液滴内の水分量分布の変化を求めることによって,液滴内における水分凝集過程を数値実験において再現できるモデルを確立した。2.液滴の内部に微小要素を想定し,各要素に対して,実験式に基づく温度場および水分体積を考慮した核生成率と,要素の発泡し易さのばらつきをワイブル乱数を用いて与え,液滴燃焼の進行に伴う初気泡核発生を調べた。その結果,実験結果に見られるミクロ爆発発生までの待ち時間の確率的様相は本手法によって検討が可能であること,および気泡核は液滴内部の広い範囲で発生していることなどを示した。3.液滴のミクロ爆発過程を,MAC法を用いるととも,上記の検討によって得た,初気泡核の発生位置および温度場,水分量を加味した蒸気泡の成長条件を用いて,数値実験によって調べた。その結果,従来より観察されていたミクロ爆発現象,蒸気の吹出し現象に対応した計算結果が得られ,これらの現象が生起するための,気泡核の発生位置および蒸気泡の成長条件などを明らかにした。以上の結果は,国内または国際学会で発表の後,機械学会論文集などにおいて公表の予定である。
背景画像上でのペトリネットシミュレーション構築法による地震防災計画の動的支援研究

(1)地震時消防防災システムの動的点検・構築支援研究a)緊急車両走行のミクロペトリネットシミュレーション開発と点検支援:混在流のペトリネットを基に,緊急車両を大型車とし,その走行特性である警報および一般車退避のサブネットの結合化でシミュレーションシステムを開発,その実行結果を受けて,緊急車両の交差点内走行の支援信号制御のペトリネット構成し,このネットの結合化による再シミュレーション実行により,走行性の向上化を確認した.b)地震時緊急路網の走行性の動的点検・構築支援実行:火災通報・指令・緊急車両出動・現場到達までのシミュレーションネットを対象地域画像上で構築・実行することで,震害阻害の点検が具体的に,かつ幅広く行え,阻害ネットの結合化により,即時再点検の可能性を示すとともに,地震時火災の特徴から,災害情報収集活動に基づく戦略的指令シナリオの検討シミュレーションネットも開発した.(2)地震時避難計画シナリオの動的点検・構築支援研究a)市街地避難計画シナリオのペトリネットシミュレーション開発:地震時避難計画では,震害による建物倒壊と火災による避難路の制約/切断阻害の点検が重要となる.建物倒壊では阻害点は固定であるが,火災では延焼に伴い変動する.この違いを考慮し,火災延焼シミュレーションとの連携の下での阻害ネット構築法を開発し,背景画像上での基本避難シナリオを出発点に,阻害シナリオの点検・再構築を行い,地震時火災の同時多発性との関連で,避難場所の複数化と誘導情報提供の重要性を示唆した.b)中山間地避難計画シナリオのペトリネットシミュレーション開発:中山間地避難では,まず,経路の勾配や線形といった地理的持性の反映化が大きな課題となる.そのために,プローブカーと携帯GPSによる経路データの収集と,それをベースとして避難経路移動の基本ネットを自動構築するシステム開発を行った.次に,独居者や高齢者の避難シナリオが重要な検討課題となるが,援助者の想定,徒歩/車による避難の想定,非避難者の想定の部分ネットをそれぞれに構築した.最後に,震害阻害としては,斜面崩壊に加えて,降雨災害との複合による土石流が問題となるために,この支援システムの特徴を生かした公開住民討論会を行い,当初想定の経路については,降雨時の危険性が具体的に指摘され,その即時組み入れ実行により,この方式での今後の展開方向の確認を行った.(1)地震時消防防災システムの動的点検・構築支援研究a)緊急車両走行のミクロペトリネットシミュレーション開発と点検支援:混在流のペトリネットを基に,緊急車両を大型車とし,その走行特性である警報および一般車退避のサブネットの結合化でシミュレーションシステムを開発,その実行結果を受けて,緊急車両の交差点内走行の支援信号制御のペトリネット構成し,このネットの結合化による再シミュレーション実行により,走行性の向上化を確認した.b)地震時緊急路網の走行性の動的点検・構築支援実行:火災通報・指令・緊急車両出動・現場到達までのシミュレーションネットを対象地域画像上で構築・実行することで,震害阻害の点検が具体的に,かつ幅広く行え,阻害ネットの結合化により,即時再点検の可能性を示すとともに,地震時火災の特徴から,災害情報収集活動に基づく戦略的指令シナリオの検討シミュレーションネットも開発した.(2)地震時避難計画シナリオの動的点検・構築支援研究a)市街地避難計画シナリオのペトリネットシミュレーション開発:地震時避難計画では,震害による建物倒壊と火災による避難路の制約/切断阻害の点検が重要となる.建物倒壊では阻害点は固定であるが,火災では延焼に伴い変動する.この違いを考慮し,火災延焼シミュレーションとの連携の下での阻害ネット構築法を開発し,背景画像上での基本避難シナリオを出発点に,阻害シナリオの点検・再構築を行い,地震時火災の同時多発性との関連で,避難場所の複数化と誘導情報提供の重要性を示唆した.b)中山間地避難計画シナリオのペトリネットシミュレーション開発:中山間地避難では,まず,経路の勾配や線形といった地理的持性の反映化が大きな課題となる.そのために,プローブカーと携帯GPSによる経路データの収集と,それをベースとして避難経路移動の基本ネットを自動構築するシステム開発を行った.次に,独居者や高齢者の避難シナリオが重要な検討課題となるが,援助者の想定,徒歩/車による避難の想定,非避難者の想定の部分ネットをそれぞれに構築した.最後に,震害阻害としては,斜面崩壊に加えて,降雨災害との複合による土石流が問題となるために,この支援システムの特徴を生かした公開住民討論会を行い,当初想定の経路については,降雨時の危険性が具体的に指摘され,その即時組み入れ実行により,この方式での今後の展開方向の確認を行った.(1)防災計画シナリオのペトリネット化による動的支援の基礎研究:地震時防災計画は,計画的・事象の連鎖によって目的達成に至る一種のシナリオであると考え,各事象の生起前提条件(状態)と遷移状態を明示化し,遷移状態と他事象の前提状態との対応関係と,ペトリネットの特徴である結合性より事象連鎖を形成することで,防災計画シナリオをペトリネット表現化する基本枠組みを明らかにした.そして,地震農時防災計両=初期シナリオとし,各事象の阻害条件(状態)とそれをもたらす阻害事象連鎖の検討,および阻害状態の解消と阻害事象連鎖の抑止を行う計画的事象連鎖の代替案構成からなる批判的・建設的検討の動的支援道筋を示し,この道筋のどの段階でのシナリオも即時視覚型シミュレーションが実行可能であることから,この道筋の妥当性と実効性を主張した.(2)背景画像上での地震時防災計画の動的支援の適用化

研究:まず,防災計両シナリオの基本構成要素は,S(空間)・H(人)・E(設備)・R(リスク)の4項とし,空間移動(S-H),煙拡散と滞留(S-R),防火シャッター作動と反転避難(S-H-E-R)等,基本部分ネットおよびそれらの結合化による部分システムネットを開発した.次に,対象事例では,背景画像上で基本4要素を特定化し,基本部分ネットに精緻化・拡張化を施し,初期シナリオのシミュレーションネットを構成し,(1)の道筋でその動的な批判的・建設的検討支援の実践性を検討した.1つは,建物内避難計画への適用化研究で,背景画像上でS-Eは明確に特定化されるが,H-Rには計画者の想定が入り,この部分の避難リスクを高くするシナリオへの展開支援が求められとし,その実践例として,出火場所の変更と避難者の多様化への展開を取り上げ,初期シナリオペトリネットを基盤にシステマテックに展開構築する手順を明らかにし,その即時シミュレーション検討から訓練や点検面での有用な示唆も得ることができた.いま1つは,地震時緊急車両の出動計画への適用で,ここでは通常時運用システムを初期シナリオとし,それを基盤に,地震時災害画像と緊急路の周辺画像とを対比し,地震時阻害を切断型ないしは制約型ネットとして結合化していくことで,地震時計画シナリオ自身を,関係者の経験智が批判的・建設的に働く形で構築支援できる可能性を示した.(1)地震時消防防災システムの動的点検・構築支援研究a)緊急車両走行のミクロペトリネットシミュレーション開発と点検支援:一般車・大型車の混在流のペトリネットを基に,緊急車両を大型車とし,その走行特性である警報および一般車退避のサブネットを結合化してシミュレーションシステムを開発,そのシミュレーション実行結果を受けて,緊急車両の交差点内走行の支援システムとして,緊急車両からの指令情報による信号制御のペトリネット構成した.そして,このネットの結合化による再シミュレーション実行により,緊急車両の走行性の向上化を確認した.b)地震時緊急路網の走行性の動的点検・構築支援実行:火災通報を受け,指令が出され,緊急車両が出動し現場に到達するまでのシミュレーションネットを対象地域画像上で構築・実行することで,震害阻害の点検が具体的に,かつ幅広く行え,それらの阻害ネットの構成と結合化により,シミュレーションの再実行も容易にしかも即時に行えることを示すとともに,地震時火災の特徴から,緊急路阻害,火災発生数,延焼予測等の情報収集活動に一定時間を割く戦略的指令シナリオの基本シミュレーションネットを開発し,収集活動の許容時間を検討している.(2)地震時避難計画シナリオの動的点検・構築支援研究a)市街地避難計画シナリオのペトリネットシミュレーション開発:地震時避難計画では,震害による建物倒壊と火災による避難路の制約/切断阻害の点検が重要となる.建物倒壊では阻害点は固定であるが,火災では延焼拡大に伴い変動する.この違いを考慮し,火災延焼シミュレーションとの連携の下での阻害ネット構築法を開発した.そして、背景画像上での基本避難シナリオのペトリネットシミュレーションを出発点に,阻害シナリオの点検・再構築を行い、地震時火災の同時多発性との関連で,避難場所の複数化と誘導情報提供の重要性を示唆した.b)中山間地避難計画シナリオのペトリネットシミュレーション
SQUID磁束計を用いたマウス脳磁場計測による嗅覚情報処理機構の研究

本年度は,マウス生体磁気計測システムの一層の改良と,whisker刺激による体性感覚野の脳磁図計測実験,aconitine誘発不整脈の心磁図の計測実験を行った。時間的制約により本研究の最終目標である嗅覚誘発脳磁図計測の遂行にはいたらなかったが,実用の前段階として心磁図や体性感覚誘発脳磁図などの計測を行い,本システムが遺伝子改変マウスを用いた非侵襲的脳・心機能計測の研究へ大きく貢献可能であることを示唆する有益な知見が多々得られた。1.昨年度の研究において,開発したマウス用生体磁気計測システムにおいて野生型マウスの心磁図計測に世界で初めて成功し,本システムを用いて,マウスの生体磁気信号計測が可能であることが示されていた。本年度はさらにマウスの体温を調整するための温度調整装置付き測定台,麻酔深度をコントロール可能なガス麻酔システムを開発,導入し,システムの信頼性をさらに高める改良を行った。2.嗅覚誘発脳磁図の計測に先駆け,体性感覚誘発脳磁図計測実験を行った。体性感覚は,嗅覚に比べ慣れの影響が少なく,より脳磁図が計測しやすい。Whisker刺激装置を圧電素子を用いて独自に開発し,脳磁図計測と,その相補的なデータとして脳内電極埋め込みによる脳波計測を行った。3.昨年度行った野生型マウスの心磁図計測をさらに発展させ,疾患モデルとして神経毒(aconitine)を投与することにより人為的に不整脈を発生させたマウスに対して心磁図計測を行った。正常時と不整脈時の心筋興奮過程の違いが本システムにより明確に示せることがわかった。マウスの心臓の電気生理学的な体表面マッピングは,その体躯の小ささから従来の電位計測では困難であり,これまで類似の研究はほとんど行われてこなかった。本システムを用いた心磁図計測により,はじめてマウス体表面上の非侵襲心機能スクリーニングが可能になった。本年度は,マウス脳磁図計測システムと感覚刺激装置の構築,マウス心磁図の計測実験を行った。1.計測システムの構成においては,SQUID磁束計を磁気シールドボックス内に設置し,これらを更に電磁シールドルーム内へ配置することにより、微弱生体磁気計測のための環境を整えた。その結果,当測定環境下での本システムのノイズレベルは1.34pT/√Hz(@1kHz)となり,既存の小動物(ラット)用磁気計測システムよりも高い空間分解能をもつシステムでありながら,これらの装置と同等のノイズレベルを実現することができた。2.感覚刺激装置の構成にあたっては,フェロモン物質(urine)を刺激とする嗅覚刺激装置を新たに製作した。ニオイ吸着性の低いテフロン素材を用いて,適度な温湿度を保持した無臭空気もしくはニオイ刺激がシールドボックス内のマウスの吸気として供給され,呼気は速やかにシールドルーム外へ排出されるような装置とした。3.構築した本システムによってマウスが発生する生体磁気信号を計測可能か調べるために,マウスの心磁図計測をおこなった。心臓興奮の心筋活動に由来する生体磯気信号を計測する心磁図は、脳内のニューロン活動に由来する生体磁気信号の脳磁図に比べて活動強度が大きく,特別な外部刺激を要しない自律的活動であるため,計測システムの有効性の評価に適している。同時計測の心電図第2誘導電位をトリガとして,得られた心磁図信号を加算平均し,多点計測を行った結果,得られた心磁図信号はpeak to peakで150pT程度と十分な強度を持って心電図に同期して変化しており,磁気の湧き出し・吸い込みを示す空間的パターンも明瞭に確認可能であった。本システムを用いて,マウスの生体磁気信号計測が可能であることが示された。
次世代シーケンサーを用いたサメ類の繁殖生理機構の解明と応用に向けた実践と発信

サメ類の繁殖保護を図るために、これまで未解明であったサメ類の卵子・精子形成の分子制御機構及び性分化機構を明らかにすることを目的として、モデル魚としてトラザメを用いて、研究を行った。まず、次世代シーケンサーを用いて、視床下部や脳下垂体及び卵殻腺において網羅的遺伝子探索を行い、これまで未同定であった性成熟に係わる生殖腺刺激ホルモン放出ホルモンや生殖腺刺激ホルモン及び卵殻の形成に重要なコラーゲンやコラーゲン合成酵素など多数の遺伝子を初めて同定し、その生理機能について検討した。さらに、軟骨魚類の性分化過程を組織学的に明らかにし、それに係わるステロイドホルモンとその代謝酵素を単離同定した。サメの繁殖保護を図るためにサメ独特の性分化機構及び卵子・精子形成の分子制御機構を明らかにすることを目的として、今年度は、次世代シーケンサーによる脳下垂体及び卵殻腺の網羅的遺伝子探索及び組織学的観察、トラザメの生殖腺の性分化過程の観察及びステロイド転換酵素および性分化関連遺伝子cDNAのクローニングを行った。その結果、サメ類独特の脳下垂体領域である腹葉において2種類のGTHが産生されていることが免疫組織学的に示された。視床下部-脳下垂体における発現遺伝子群を次世代シーケンサーを用いて解析し、生殖に関わるGnRH、バソトシンなどの視床下部内分泌因子やGH、GTH、TSHなどの脳下垂体ホルモン遺伝子群を得ることができた。また、サメ類独特の器官である卵殻腺における次世代シーケンサーを用いた遺伝子の網羅的解析の結果、type I及びtypeII keratinやコラーゲン及びコラーゲン形成に関わる酵素などの遺伝子群が見いだされ、baffle zoneでは卵殻の成分としてケラチン等が生成されていることが判明した。性分化に関する研究の結果、産卵後45日では、腸管背部にある一層の体腔上皮組織で生殖腺や輸卵管、卵殻線、子宮及び輸精管の原器の形成や腸間膜と体腔上皮が繋がる部位の左右に生殖細胞が確認されたが、性的に未分化の状態であった。産卵後60ー90日において生殖細胞の分布において2型が確認され、性分化開始したことが確認された。性ステロイド合成に関わる種々のステロイド代謝酵素について、そのcDNAクローニングを行った。これまでに部分的クローニングを含めてStAR、Cyp11a, Cyp17a, Cyp19a1、3beta-hsd等のcDNAが得られている。組織特異発現解析から、StAR、3beta-hsdの発現は卵巣、精巣、間腎腺に加えて卵殻腺、精嚢部、エピゴナル器官で認められた。サメの繁殖保護を図るために、サメ独特の性分化機構及び卵子形成の分子制御機構を明らかにすることを目的として、昨年度は、トラザメの性分化過程を明らかにした。また、次世代シーケンサーを用いてトラザメの生殖機構に係わる候補遺伝子(GnRH、バソトシン、GH、GTHなど)及び卵殻形成に係わる候補遺伝子(コラーゲン、コラーゲン合成酵素など)が見いだされた。今年度は、性分化制御機構を明らかにすることや次世代シーケンサーの解析から得られた候補遺伝子の生理機能を明らかにすることを目的に研究を行った。その結果、アカエイ胎児の性分化過程の組織学的観察を行なった。卵巣は未分化なエピゴナル器官の上皮のみに分布して発達したのに対して、精巣はエピゴナル器官組織中へと浸潤した。しかし、芳香化酵素の抗体を用いて免疫染色を試みたが明確な反応を示す細胞は卵巣、精巣共に認められなかった。トラザメの下垂体腹葉より、糖タンパク質ホルモン(GPH)α鎖ならびに3種類のGPHβ鎖(FSHβ、LHβ、TSHβ)をコードする遺伝子構造の全配列を同定した。原始的な顎口類である軟骨魚類でのTSH分子の同定は初めてである。卵殻腺は4つの層から形成され、そのうち、buffle zoneと呼ばれる層が卵殻形成に重要な働きを行っていることやコラーゲンやコラーゲン合成酵素及びケラチンの遺伝子が卵殻腺で発現していることが明らかとなった。さらに、ステロイド代謝酵素遺伝子の組織特異発現解析から、Cyp19a1の発現は卵巣でその発現がみられたが、精巣(精母細胞リッチ領域、精子リッチ領域)ではみられなかった。エピゴナル器官では卵巣での発現比べると弱いがその発現が認められた。一方、3beta-hsdの発現は、上述のすべての組織で発現がみられた。サメの繁殖保護を図るために、サメ独特の性分化機構及び卵子・精子形成の分子制御機構を明らかにすることを目的として、以下の項目について検討した。1生殖腺及び生殖輸管系の性分化:生殖輸管系の性分化過程を組織学的に観察した。その結果、産卵後90日目にはすでに膨大した卵殻腺が観察され、産卵後180目には上皮組織の発達が認められた。また、産卵後80日目の胚を生体外に取り出して、エストラジオール添加した培養液で培養したところ、卵殻腺の大きさが増大し、上皮の発達が認められたことから、エストラジオールが卵殻腺の発達に関与していることが明らかとなった。3視床下部ー脳下垂体系ホルモン:トラザメの下垂体腹葉で生合成される3種類のGPH(FSH、LH、TSH)の機能を理解するため、FSH及びLHの遺伝子を測定したところ、卵黄形成初期の個体群ではFSH遺伝子の発現量のみが高く、FSHの卵黄形成過程への寄与が推察された。

また、2種のGTH遺伝子は、卵殻形成に寄与している可能性も示唆された。4生殖腺のステロイド合成:遺伝子発現が確認された3b-hsdおよびCyp19a1の局在について免疫組織化学法による解析を行ったところ、前者は、精巣および、エピゴナル器官の間質部でクラスターを構成している細胞で、後者ではエピゴナル器官の間質のクラスターを構成している細胞でその局在が見られた。また、Cyp11a1についても同様な解析を精巣およびエピゴナル器官で行ったところ、3b-hsdと同様であることが確認された。次世代シーケンサーから得られた結果から、卵殻形成に関わる遺伝子の数を多く、それそれの遺伝子について精査するために、時間を要する。また、それぞれの研究項目の遂行のために必要なトラザメのサンプルが十分に取得できなかったため、予定していた実験が進んでいない。サメの繁殖保護を図るために、サメ独特の性分化機構及び卵子・精子形成の分子制御機構を明らかにすることを目的として、これまでに1生殖線及び生殖輸管系の性分化2卵殻腺の機能解析3視床下部ー脳下垂体系ホルモン4生殖線のステロイド合成の4つの項目について検討した。このうち、本年度は、以下のような結果を得ることができた。卵殻腺の機能解析については、次世代シーケンサーによる卵殻腺の網羅的遺伝子探索から得られた卵殻形成に関わる遺伝子(collagenα1及びprolyl 4-hydroxylase)が卵殻腺のbuffle zoneに発現していたことから、buffle zoneが卵殻形成の重要な場であることが分子生物学的に初めて明らかとなった。性ステロイドホルモンの受容体であるエストロゲン受容体(ER)及びアンドロゲン受容体(AR)の遺伝子発現解析を行った結果、成熟及び未成熟個体の生殖輸管においてER及びARの発現が認められた。また、視床下部ー脳下垂体系ホルモンに関する研究では、トラザメの下垂体腹葉で生合成される3種類の糖タンパク質ホルモン(濾胞刺激ホルモンFSH、黄体形成ホルモンLH、甲状腺刺激ホルモンTSH)の機能を理解するために、FSH及びLHの遺伝子を測定したところ卵黄形成初期の個体でFSH遺伝子の発現量が高く、FSHの卵黄形成への関与が推測された。また、卵殻形成にもFSHやLHが関与している可能性が示された。サメ類の繁殖保護を図るために、これまで未解明であったサメ類の卵子・精子形成の分子制御機構及び性分化機構を明らかにすることを目的として、モデル魚としてトラザメを用いて、研究を行った。まず、次世代シーケンサーを用いて、視床下部や脳下垂体及び卵殻腺において網羅的遺伝子探索を行い、これまで未同定であった性成熟に係わる生殖腺刺激ホルモン放出ホルモンや生殖腺刺激ホルモン及び卵殻の形成に重要なコラーゲンやコラーゲン合成酵素など多数の遺伝子を初めて同定し、その生理機能について検討した。さらに、軟骨魚類の性分化過程を組織学的に明らかにし、それに係わるステロイドホルモンとその代謝酵素を単離同定した。今年度は、予定通り、性分化に関するホルモン制御機構の解析と次世代シーケンサーの解析から得られた候補遺伝子の解析及び生殖線のステロイドホルモン転換酵素の遺伝子解析を行うことができ、ほぼ予定通り計画が進展している。生殖腺や生殖輸管系の分化に関する研究においては、性分化後の生殖腺及び生殖輸管の発達過程を明らかにする。
ヨーロッパの都市部における自然保育の実践とその教育的意義に関する実証的研究

近年のわが国は,都市化やテクノロジーの発展に加え,AIの普及により便利で快適な生活を手に入れた。その反面,生活や学びから自然が分断され,非日常を象徴する自然体験活動という概念が定着した。こうした子どもを取り巻く環境に対し,保育の分野では「日本自然保育学会」が設立されるなど,森や自然を活用した幼児期からの学びを再評価する傾向にある。しかし,これら一連の盛り上がりは,自然豊かな地方や森の幼稚園に偏っているのが現状である。そこで本研究は,ヨーロッパ5か国における自然保育の実態調査に基づき,その教育的意義を明らかにすることで,都市部の保育実践に対応した「自然保育ガイドライン」の構築を目的とする。
ロボットコンテストとしての自作の吸光光度計による定量分析競技の検討

【研究目的】静岡大学工学部は、全学科新入生を対象にものづくり基礎実習を行っている。ここでは、メカトロニクス(ロボット)実習を通じて工学教育の導入を行っている。具体的に、回路実習、プログラム実習、マイコン基板製作実習、ロボット製作実習、まとめとしてロボットコンテストの実施である。しかし、使用教材がロボット教材のため、化学系学科の学生には専門との関連に疑問を持ち、モチベーションが上がらない者がおり、授業アンケートでも裏付けられている。そこで、実習のロボットコンテストのテーマとして、化学分析で用いる吸光光度計をマイコン基板等で自作し、定量分析を行う競技を検討する。これにより、化学系学科の学生が化学とマイコン制御の関係に興味を持ちやすくし、ものづくりの楽しさや分析装置の原理への関心などが高まることが期待される。【研究方法】定量分析の対象は、種々検討して存酸素量(DO : Dissolved Oxygen)の測定とした。測定法は、妨害物質や化学的妨害が少なく市販キットが充実している酸性インジゴカルミン吸光光度法とした。測定は、LEDを光源に検出器としてフォトトランジスタを用い、透過する光の強度を迅速に測定する。制御や測定は実習用マイコン(Arduino UNO)を用いた。資料測定装置は、市販のDO測定用アンプルが入るように3D-CADで設計し、三次元加工機により、ケミカルウッドを材料として切削加工で製作した。【研究成果】上記の装置で種々の濃度のDOを測定し、得られた検量線をもとにプログラムを作成し、市販のDO用吸光光度計と同等な結果を出せる試作の吸光光度計が完成した。測定結果の表示法の工夫でコンテスト用のテーマとしても問題ないことが分かった。【今後の課題】実際のロボットコンテスト実習のテーマに提案し、実践することによって、化学系学科の学生の授業アンケートの変化につながるかを検討する。
スリーブ胃切除術における耐糖能改善機序の解明：糖代謝へ影響するグレリン変化の解析

病的肥満患者における胃内グレリン発現状況には個体差があり,グレリン発現量が高い患者ほどスリーブ状胃切除後体重減少効果が大きいが,発現量に関わらず全例がスリーブ胃切除により糖尿病が寛解した.また,スリーブ切除後残胃小彎にグレリン発現および食欲が亢進する症例が存在し,このような症例は他の症例と比較し,血中インスリン値・Cペプチド値が正常値化しない傾向がみられた.また,このような症例は体重リバウンドを認めた.以上から胃内グレリン発現量は,スリーブ状胃切除術による糖尿病改善効果に直接的相関は認めなかったが,間接的もしくは一因子として影響している可能性が示唆された.本年度は,マウスを用いた腹腔鏡下スリーブ状胃切除(以下,LSG)モデル作成に着手した.まず,LSGモデルマウスを用いた,LSG耐糖能改善効果機序解明目的に1)グレリン,インスリン,GLP-1との関係および2)残胃グレリン発現状況と糖尿病改善効果の関係を検証する内容についてプロトコルを作成し,大阪大学倫理委員会にて承認を得た.マウスLSGはモデルとして作成が難しいことが想定されていたため,手技の確立と安定化を狙いまず3匹にLSGを施行した.しかしながらいずれも縫合不全による術死となり原因として縫合閉鎖ステープリングの方法および用いる針糸の太さが影響すると考えられ,それらを改良し,さらに3匹のLSGを施行した.これらは術後経過良好で経過中である.この3匹のマウスについては術後リバウンドをきたしたのちに儀死させ,体内グレリン発現状況をRT-PCR法にてグレリンmRNA発現量を測定予定である.今後,インスリン抵抗性マウスなどに対するLSGを施行し,耐糖能改善効果機序について検討する予定である.上記動物実験と並行して,平成27年度予定した研究計画(当科でLSGを施行され1年以上経過した患者に対する残胃グレリン発現状況検証)についてもプロトコルが倫理委員会にて承認を得たので,残胃小彎の胃粘膜生検サンプル採取および臨床データ収集・血液サンプル採取を開始している.Preliminaryなデータではあるが,実施計画書に記載した仮説どおり,LSG術後残胃小彎胃粘膜にはグレリン発現量が多いことが確認できている.動物実験モデル作成にやや難渋したものの,おおむね研究計画は順調に進んでおり,H27年度にこれらの実験データの集積・解析を行う予定である.残胃小彎胃粘膜生検サンプル採取および臨床データ収集・血液サンプル採取に着手し,本年度手術予定となった患者は全例,術前胃小彎および穹窿部の生検サンプルが採取することができた.Preliminaryなデータではあるが,実施計画書に記載した仮説どおり,穹窿部グレリン発現量が最も多く,ついで,体上部大彎>体中部大彎>体下部大彎>体部小彎となることが確認できた.さらにグレリンホルモン活性化酵素であるGOATについてもmRNA発現量を解析し,同様の発現状況を確認した.特に3例の患者については,LSG術後残胃小彎グレリンmRNA発現量定量を行い,リバウンドした2症例についてはグレリン発現量増加を認めたが,リバウンドのない症例では低発現であった.糖尿病との関連については,症例ごとに異なりはっきりしないものの,インスリン感受性に影響している可能性も示唆され追跡調査が必要である.動物実験については計8匹のLSGを施行し,3匹のマウスの生存および体重推移の観察が可能であった.体重は一旦減少し,すぐに術前体重に回復した.この3匹のマウスについては血中グレリン値の測定,術後リバウンド後において,RT-PCR法によるグレリンmRNA発現量定量(残胃小彎,十二指腸,膵臓,脳),残胃小彎についてはグレリン細胞数カウント(免疫染色)を行った.コントロールマウスと比較し,小彎グレリン細胞数はLSG術後残胃の方が多く,またmRNA発現量の解析では,コントロールと比較しても十二指腸,膵臓,脳でグレリン発現量の変化は認めなかった.よって,LSG術後のグレリン回復,体重増加については,胃外グレリン産生臓器の代償発現増加ではなく,残胃小彎におけるグレリン発現増加が原因である可能性が高いことが示唆された.本結果は,LSG術後のリバウンドに対する残胃小彎粘膜切除など新規治療の開発に応用可能で,重要な意義を持つものと思われる.病的肥満患者における胃内グレリン発現状況には個体差があり,グレリン発現量が高い患者ほどスリーブ状胃切除後体重減少効果が大きいが,発現量に関わらず全例がスリーブ胃切除により糖尿病が寛解した.また,スリーブ切除後残胃小彎にグレリン発現および食欲が亢進する症例が存在し,このような症例は他の症例と比較し,血中インスリン値・Cペプチド値が正常値化しない傾向がみられた.また,このような症例は体重リバウンドを認めた.以上から胃内グレリン発現量は,スリーブ状胃切除術による糖尿病改善効果に直接的相関は認めなかったが,間接的もしくは一因子として影響している可能性が示唆された.本研究計画プロトコルが倫理委員会にて承認を得ることができ,予定通り動物実験を開始することができた.マウスLSGはモデルとして作成が難しいことが想定されていたため,手技の確立と安定化を狙いまず3匹にLSGを施行した.しかしながらいずれも縫合不全による術死となり原因究明を行った.結果として,縫合閉鎖ステープリングの方法および用いる針糸の太さが影響すると考えられ,それらを改良することで,生存が可能となった.

LSGモデルマウスが確立したので,このマウスについては術後リバウンドをきたしたのちに儀死させ,体内グレリン発現状況をRT-PCR法にてグレリンmRNA発現量を測定予定である.今後,インスリン抵抗性マウスなどに対するLSGを施行し,耐糖能改善効果機序について検討する予定である.上記動物実験と並行して,平成27年度予定した研究計画(当科でLSGを施行され1年以上経過した患者に対する残胃グレリン発現状況検証)についてもプロトコルが倫理委員会にて承認を得たので,残胃小彎の胃粘膜生検サンプル採取および臨床データ収集・血液サンプル採取を開始している.Preliminaryなデータではあるが,実施計画書に記載した仮説どおり,LSG術後残胃小彎胃粘膜にはグレリン発現量が多いことが確認できている.モデル作成に難渋したものの手技の改良により克服することができた.動物実験については手技が確立したため,今後ノックアウトマウス(GLP-1欠損など)も加えて,LSGを施行し,データ回収に努めることが可能となった.また,ヒトLSG術後患者に対する研究計画についても倫理委員会承認を得ることができ,実際26年度にLSGを施行された患者については,全員において承諾を得ることができ,サンプル採取がスタートしている.以上から,27年度研究計画への移行は比較的スムーズに進むと考えられ,達成度を上記と設定した.消化器外科LSGモデルマウスとして,インスリン抵抗性マウスおよびGLP-1ノックアウトマウスを用いる予定である.しかしながら,後者については取得,管理が難しい可能性があり,研究計画の変更(ノックアウトマウスではなく,GLP1阻害薬の使用など)を検討しておく.また,マウスから術後経過中の血液サンプル採取(特にグレリン)は手技的・動物的に困難であることが,26年度において判明した.よって,血液サンプル採取は儀死時のワンポイントし,術前データは別のマウスを儀死のうえ採取する形とする.ヒトにおいては,LSG施行予定患者に術前より研究内容を説明,同意確認を得たうえで,術前および術後における胃粘膜採取および血液サンプル採取を行っていく.2型糖尿病(T2DM)を合併していた当科LSG術後患者(術後経過期間1年以上)が対象となるが,症例が足りない場合は他施設に協力を依頼する.術後,T2DMに関する薬剤が完全中止となり、かつHbA1c≦6.0(JDS基準)を満たす場合完全寛解、それ以外の場合を不完全寛解と定義したうえで,上記症例に対して、上部消化管内視鏡検査を施行し、残胃ステープルライン近傍で、口側から肛門側にかけて、胃粘膜生検を24か所施行する。これら粘膜のグレリンmRNA発現量を定量評価し、4か所の合計発現量を残胃グレリン発現量と定義し,完全寛解群と不完全寛解群間で、残胃グレリン発現量を比較検討する予定である。10例程度のデータを解析したうえで,結果をまとめて論文化する.今年度に必要な物品を購入したため。来年度に必要な物品を購入するため。
『文選』の伝承から見た文学言語の型の形成と継承

『文選』の伝承から見た文学言語の型の形成と継承を追究するための基礎作業として、まず『文選』詩編(12巻分)の訳注作業を完成した。原稿作成は25年度内に完了したので、近々にこれを出版社から刊行し、広く社会に公表する予定である。また、『文選』所収の主な詩人の経歴や作品についてのコメントをまとめた。これも刊行予定の訳書に付載する。更に近年の『文選』研究の整理や唐代宋代の詩人への『文選』の影響についても、学術雑誌などに掲載し、著書としても刊行した。また、台湾大学の柯慶明・蔡瑜の両教授を招聘して『文選』の文学言語の継承に与えた影響について討論を行い、研究成果の国際的交流を行った。本年度は『文選』詩編(12巻分)の訳注作業を行い、文学言語の型の形成と継承に関する研究を進めるために以下のことを実施した。1.東京、京都、大阪などで計10回の研究会を開催し、6人で分担して作成した訳注(第一稿)の内容を検討し、随時修正稿を作成した。2.旧来の訳注の問題点を克服すべく、中国古典のデータベースを最大限活用し、より詳細な詩語の使用例をあげて詩の内容、各詩人の詩語の創作と継承の仕方を分析検討し、『文選』詩編(12巻分)の内、11巻分の修正版第二稿を完成させた。3.検討会では、最新の『文選』や漢魏六朝文学に関する研究書も随時活用して、詩の読解や解説、注釈をより詳細なものにすることができた。4.『文選』の全作品に通し番号をつけ、各作品の詩語との関連をスムーズに比較検討できるようにした。5.訳注修正版第二稿の体裁は、詩題解説(作品構成の分析、作詩年代の推定、作詩状況の説明、後代の作品批評の紹介などを含む)、訓読、日本語訳、詩の内容の要約、詩語と詩句の意味の説明(典故や使用例を挙げて詩語の来歴も説明)、押韻字の指摘とした。6.完成した修正版第二稿は、研究代表者の下に集めて整理し、出版物として公刊できる準備をするとともに、次年度以降に予定している海外の研究協力者との共同研究の資料として提供できるようにした。7.適宜詩語を抽出して、文学言語の型の形成、継承、改変が詩語を通して一覧できる形式に整理するための作業にも着手した。本年度は、『文選』詩編(12巻分)の訳注校訂作業を行い、文学言語の型の形成と継承に関する研究を進めるために以下のことを実施した。1.秋田、箱根で研究会を開催し、昨年までに作成した訳注第二稿の内容を検討し、完成稿実現のための修訂作業方針を確認した。地名、人名などの固有名詞解説の表記を統一すること、『文選』関係年表を作成すること、各詩人の系図を整理すること、主な詩人(曹植・陸機・謝靈運・顔延之など)の経歴や作品についてコメントを記述すること、「文選学」の研究史を整理し『文選』が文学の型になる経緯を明確にすること、中国古典のデータベース検索機能を最大限活用してより詳細な詩語の創作と継承過程を明示すること、最新の『文選』や漢魏六朝文学に関する研究書を調査し、詩の読解や解説を充実したものにすることなどについて、6人の役割分担を取り決めた。2.箱根の研究会には、台湾大学の柯慶明、蔡瑜の両教授を招き、「『文選』編纂をめぐって」「中国古典実用文類美学」「永明詩学声境論」「2000年以降の『文選』研究」などについて、研究討論を行った。また、この成果を訳注校訂に反映するための作業手順についても議論を行った。3.秋田での研究会では、完成稿作成後に研究成果を図書として刊行するための計画を出版社の編集担当者と協議し、図書刊行の見通しを立てた。4.適宜『文選』の詩語を抽出し、文学言語の型の形成、継承、改変が詩語を通して一覧できるように整理するための作業を加速し、訳書とは別の形で出版することを計画した。1.東京、京都、大阪、台湾大学などで計8回の研究会を開催し、6人で分担して作成した訳注(第一稿)の内容を検討し、随時修正稿を作成した。

旧来の訳注の問題点を克服すべく、中国古典のデータベースを最大限活用し、より詳細な詩語の使用例をあげて詩の内容、各詩人の詩語の創作と継承の仕方を分析検討し、『文選』詩編(12巻分)すべての修正版第二稿を完成させた。検討会では、最新の『文選』や漢魏六朝文学に関する研究書も随時活用して、詩の読解や解説、注釈をより詳細なものにした。また、『文選』の全作品に通し番号をつけ、各作品の詩語との関連をスムーズに比較検討できるようにした。2.訳注修正版第二稿の体裁は、詩題解説(作品構成の分析、作詩年代の推定、作詩状況の説明、後代の作品批評の紹介などを含む)、訓読、日本語訳、詩の内容の要約、詩語と詩句の意味の説明(典故や使用例を挙げて詩語の来歴も説明)、押韻字の指摘とした。3.完成した修正版第二稿は、研究代表者の下に集めて、来年度の最終修正作業ができるように書式を整理した。これは本研究終了後に、出版物として公刊できるようにする準備と、来年度に予定している海外の研究者を招聘してのシンポジウムの資料として活用するためである。4.適宜詩語を抽出して、文学言語の型の形成、継承、改変が詩語を通して一覧できる形式に整理するための作業に着手し、6人の意見をもとに書式を設定した。現在までに『文選』詩編(12巻分)の訳注作業については、当初予定していた11巻分の第二稿を終了、残り1巻分のみとなっている。25年度が最終年度であるため、記入しない。当初予定していたとおり、旧来の訳注の問題点を克服すべく、中国古典のデータベースを最大限活用し、より詳細な詩語の使用例をあげて詩の内容、各詩人の詩語の創作と継承の仕方を分析検討し、『文選』詩編(12巻分)すべての修正版第二稿を完成させることができた。最新の『文選』や漢魏六朝文学に関する研究書も随時活用して、詩の読解や解説、注釈を更に詳細なものにし、来年度の海外の研究者を招聘してのシンポジウムに提供する資料の素案がほぼできあがった。今後は、残り1巻分の第二稿を6月までに終え、7凋から第三稿(最終稿)の検討を進め、来年度中には詩編の訳注を完成させる予定である。そして当初の研究目的のとおり、最終年度には、詩編の訳注を随時出版することによって公刊するとともに、海外の研究協力者とともに、世界の古典文学の型と比較検討を行うことにしている。今後は、『文選』詩編12巻の最終稿作成のための検討を進め、今年度中には完成させる予定である。そして当初の研究目的のとおり、来春から、詩編の訳注を随時公刊することを計画している。また、海外の研究者を招聘して、シンポジウムを開催し、より訳注の精度を高めるとともに、中国の文学の型を世界の古典文学の型と比較検討したいと考えている。また、完成した訳注原稿のデータを、文学言語の型の継承と改変が詩語を通して一覧できる形式に整理し、より多くの研究者が利用できるようにすることを目指す。そのために、詩語の整理の仕方について引き続き分担者とともに検討する。