hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
宿主免疫応答を制御する結核菌由来ミコール酸修飾因子の研究

結核菌に特徴的なミコール酸を詳細に分析すると炭素鎖長、構成分子種(α、メトキシ、ケト、ジカルボキシ、エポキシ等)、不飽和度(シクロプロパン環、二重結合)、幾何異性体等、その構造にバラエティーがあり、結核菌の形態(コード紐状)や抗酸性に加え、宿主防御機構への関与が想定される。本年度は、前年度の研究成果から得られたミコール酸合成遺伝子欠損△kasB株について、その構造や宿主応答に与える影響について解明した。△kasB株は親株に比ベミコール酸炭素鎖長が2-6個分短鎖になっていた。α、メトキシミコール酸の炭素鎖長は2分子分、ケトミコール酸は6分子分短鎖であった。興味深いことは、幾何異性体に変化が生じトランスタイプのメトキシ、ケトミコール酸が激減していたことである。結果として△kasB株はミコール酸の鎖長が短くなり、シスタイプのみのα、メトキシ、ケトミコール酸サブクラスから構成されていた。主な表現型として抗酸性の減弱化と弱毒化を示した。透過電子顕微鏡観察でミコール酸を多量に含む細胞壁を中心に△kasB株、親株、相補株で比較観察した。3株間で細胞膜を含むcell envelopの厚さに有意差はなかった。一方、細胞膜と細胞壁部分の電子密度は△kasB株が親株、相補株に比べ常に高値を示し、細胞壁ミコール酸密度が抗酸性を含む表現型に関与していることが示唆された。△kasB株のミコール酸短鎖化は親株が炭素鎖80-86に対して数%程度であり、表現型への影響の度合いは低いと考えた。むしろトランス型ミコール酸の欠失が細胞表層の分子間ミコール酸配列に影響して細胞表層の変化をもたらし、抗酸性や宿主応答の変化に重要であると考えられた。
アミロイド線維形成における過飽和の果たす役割

アミロイド線維は変性蛋白質の形成する線維状の凝集体であり、アミロイドーシスの原因となる。アミロイド線維は原因蛋白質の過飽和溶液から、核形成、成長によって形成する。本研究ではアミロイド線維形成における過飽和の役割を研究した。超音波が過飽和を解消する特に有効なアジテーションであることを示した。超音波照射装置とプレートリーダを組み合わせた装置HANABIを作製し、アミロイド線維形成のハイスループット解析を可能とした。また、別の蛋白質凝集としてアモルファス凝集がある。アミロイド線維とアモルファス凝集の関係が、物質の結晶とガラスとの関係にあることを示し、これにより、蛋白質凝集の一般的な原理を提唱した。アミロイド線維の構造や形成機構を理解することは、これらの関わる疾患の病態解明に止まらず、広く蛋白質を理解するために重要である。研究代表者は、アミロイド線維の形成は、「原因蛋白質の過飽和状態からの析出」であることを提案した。本研究では、蛋白質の異常凝集、特にアミロイド線維形成反応を、この提案に基づいて研究する。超音波照射は過飽和を解消する有効な手段であり、今年度は超音波を用いてアミロイド線維の形成機構を研究した。(1)システムの改良:超音波がアミロイド原因蛋白質の過飽和を解消しアミロイドを生成する有効な方法である。これを効率的に行うために、96穴プレートリーダと超音波装置を組み合わせることによって、アミロイド形成を効率よく、迅速に測定する装置HANdai Amyloid Burst Inducer(HANABI)を改良した。特にプレートを移動させて超音波を均質に照射すること、浴槽内の水を脱気して、超音波の伝播効率を高めることができた。(2)超音波による線維形成の促進:超音波を用いて、さまざまな蛋白質のアミロイド線維形成が促進されることを検証した。材料の蛋白質としては、これまで主に使用してきたβ2ミクログロブリンに加え、アルツハイマー病に関わるアミロイドβ、パーキンソン病に関わるαシヌクレイン、角膜変性症に関わるケラトエピセリン、またモデル蛋白質としてニワトリ卵白リゾチームを用いた。(3)超音波による線維崩壊の促進:超音波を継続的に照射することによつて、β2ミクログロブリンのチオフラビンTの蛍光強度は減少した。これと、線維崩壊の関係を調べた。また、アミロイドβについては臨界濃度以下で超音波を照射することによって、線維を溶解させることができた。超音波照射は過飽和を解消する有効な手段であり、昨年度に引き続き、今年度も超音波を用いたアミロイド線維の形成機構を展開した。アミロイド蛋白質として、β2ミクログロブリン、ニワトリ卵白リゾチーム、アミロイドβペプチド、αシヌクレインなどを用いた。1システムの改良:超音波がアミロイド原因蛋白質の過飽和を解消しアミロイドを生成する有効な方法である。これを効率的に行うために、96穴プレートリーダと超音波装置を組み合わせることによって、アミロイド形成を効率よく、迅速に測定する装置HANdai Amyloid Burst Inducer (HANABI)を改良した。今年度は特に、浴槽内の水を脱気することにより、超音波の伝播効率を高めた。アミロイド形成が速まるとともに、96穴プレートの反応が均質化された。2超音波による線維形成の促進:特にβ2ミクログロブリンやニワトリ卵白リゾチームを用いて、アミロイド形成反応のラグ時間の分散について検討し、アミロイド形成反応が本質的に揺らぎの大きな反応であり、主にその原因が核形成段階にあることを明らかにした。3超音波による線維崩壊の促進:アミロイド線維に対して超音波を継続的に照射することによって、チオフラビンTの蛍光強度は減少する。この原因が不定形凝集の形成にあることを明らかにした。代表者は、「蛋白質異常凝集の統一原理」を提唱した。すなわち、アミロイド線維形成は、短いペプチドや変性した蛋白質が、溶解性を超えることによって析出する場合の、基本構造である。しかしながら、ペプチド溶液はしばしば過飽和となるためアミロイド形成は容易には起きない。このような統一原理によって、アミロイド線維だけでなく、三次元結晶から不定形凝集まで、蛋白質の構造転移を包括して理解することが、本研究の目的である。平成26年度は最終年度であり、これまでの熱測定や超音波を用いた研究を継続して行うと共に、アモルファス凝集とアミロイド線維の競争的形成についての研究を進めた。1.アミロイド至適

温度:卵白リゾチームの温度に依存したアミロイド線維形成を、温度を変化させて調べると、アミロイド線維の形成量に至適温度が見られた。また、昇温速度が遅い方がアミロイド線維の形成量は多かった。このような温度依存性は、アミロイド線維と不定形凝集の競争が起きているためと考えられた。2.アミロイドβをはじめとする多くのアミロイド性ペプチドは、大きな蛋白質から切り出された比較的小さなペプチドであることが多い。他方、卵白アルブミンのように大きな蛋白質はアミロイド線維を形成しない。その理由は単に大きな蛋白質はもつれてガラス状態を形成してしまうためと考えられる。卵白アルブミンを用いて、これを検証した。トリプシン分解した卵白アルブミンの混合液を超音波照射下においたところ、40°C付近で極めて効率的にアミロイド線維が形成された。隠されていたアミロイド原性が断片化によって露呈したことを示す。また、高温で急激にアミロイド性は減少したが、これはアモルファス凝集が競争的に進んだためと考えられる。3.以上の実験より、アミロイド線維と不定形凝集の競争にもとづく、蛋白質の一般的な凝集機構を提唱した。26年度が最終年度であるため、記入しない。蛋白質科学26年度が最終年度であるため、記入しない。アミロイド線維の形成は、原因蛋白質の過飽和状態からの析出であることを証明するために、超音波照射を用いた3つの課題を設定した。「(1)システムの改良」については、水槽の脱気によって超音波の伝播効率を高めることができた。「(2)超音波による線維形成の促進」については、予定通りの蛋白質を用いた実験を行った。「(3)超音波による線維崩壊の促進」については、該当する論文の作成を進めた。研究代表者は、「アミロイド線維は、原因蛋白質の過飽和状態からの析出」であることを提案した。本研究では、過飽和や超音波をキーワードとしてこれを証明することを目指した。今年度までにHANABIの改良、アミロイド線維形成における揺らぎの評価、超音波による線維崩壊の発見とその機構、アミロイド形成の熱測定などの研究を進めることができた。これらは世界的に評価される研究であり、アミロイド線維形成における過飽和の役割は、他の研究者によっても受け入れてきている。以上より、本研究は当初の計画以上に親展していると判断する。昨年度に引き続き超音波照射を用いてアミロイド線維の形成機構を研究する。主な課題として以下を設定する。(1)超音波照射システムの改良、(2)超音波による線維形成の促進、(3)超音波による線維崩壊の促進、(4)一線維蛍光顕微鏡によるアミロイド線維形成反応の解析。次年度は最終年度であり、これまでの研究を総括し、更に発展させるために以下を実施する。1超音波照射システムの改良、2超音波による線維形成の促進、3一線維蛍光顕微鏡によるアミロイド線維形成反応の解析、4アミロイド線維形成の熱測定以上の研究を総合して、過飽和の蛋白質の構造物性における役割、さらには生命科学における役割を考察する。
壁面の粘弾性を組み込んだ声道の集中系モデル化手法の開発及び医療技術への応用

人間の音声生成機構である声帯振動および声道の形状による音響伝達特性を統一的に扱える簡便な解析手法の開発を目的とし,声帯ー声道モデルの連成解析による声帯自励振動の解析について研究を行った.声道内の空気の伝播を質点・ばね・減衰から構成される多自由度集中系でモデル化し,固有値解析が可能な音声生成解析モデルを提案した.そして本モデルの周波数応答と発声器官の模型を用いた実験結果がある程度一致していることを確認した.また,声帯部を質量,線形ばね,減衰からなる1自由度の弁としてモデル化し,声道モデルと連成解析することで声帯自励振動を解析可能であることを示した.声道を異なる粘弾性,断面積を持つ弾性管が縦続する音響管として,質量,ばね,減衰要素を用いた集中系でモデル化し,各要素の値をMRI撮像等で得られる声道断面形状と口唇インパルスや音声信号から得られる周波数応答を用いて同定することで,声道壁の部位による粘弾性の違いを考慮した声道モデルの同定手法を開発することを全体構想とする.研究期間内には,軸方向に粘弾性の異なる縦続音響管や三次元声道模型を対象とし,管壁の粘弾性を組み込んだ集中系モデル化手法の開発および狭窄部や分岐部の要素形状や分割数が同定精度に与える影響の解明を行うことを目的とする.本年度は一様な断面形状および粘弾性を持つ音響管を対象とし,音響管壁面の粘弾性の違いによる音響固有周波数の変化について実験により確認し,その結果と音響管を集中系モデル化して行ったシミュレーション結果の比較を行った.実験はアルミニウム,アクリルおよび柔らかさの異なる2種類のシリコーンの計4種類の素材からなる内径20mm,外径60mm,長さ170mmの音響管を作製し行った.音響管開口部の片端から小型振動試験器により音響加振し,音響固有周波数を測定したところ,アルミニウムおよびアクリル製の音響管では片端開片端閉の音響管の理論値とよく一致し,実験装置の妥当性を確認した.また,シリコン製の柔らかな壁面を持つ音響管を対象とした測定では,壁面が柔らかいほど音響固有周波数が低周波数側へ移動し,ピーク値が低減した.この現象に対し,音響管内の圧力変動により管壁面が周方向に変形したことで発生するエネルギー損失によるものとして,結合減衰で表した要素を集中系モデルに付加し,シミュレーションを行った結果,同様の現象を確認することができた.本年度は集中系モデルを用いた声道(音響空間)と声帯振動の連成解析を行う第一段階として,笛式人工喉頭を対象に音響ー振動連成解析を行った.笛式人工喉頭とは喉頭を摘出した患者の代替声帯として使用されるもので,声帯振動を模擬したブザー音を発生するゴム製の弁と気管孔と口腔内を繋げるゴム製のチューブ(音響空間)から構成される.気管孔からの呼気により弁を振動させることにより音源を生成し,これをチューブにより口腔内に誘導することにより発声する.解析結果と実験結果を比較するにあたり,生体を対象とした場合では声帯の振動計測や物性値の特定が困難であるため,声帯振動と同様に自励振動を発生させ音源を生成する笛式人工喉頭を本年度の研究対象とした.音響空間はチューブ内部を1次元音響管として軸方向に要素分割し,分割点に要素内の空気から求めた質量を集中させ,その質点間は線形ばねおよび減衰要素で結合した集中系でモデル化した.ばね定数は要素内の空気を断熱過程と仮定して導き,減衰係数は軸方向に垂直な断面に働く粘性による法線応力から導いた.弁は質点,線形ばね,減衰要素でモデル化し弁前後の圧力差を外力として運動方程式を立てた.ベルヌーイの定理から弁前後の圧力差,弁の変位,弁の隙間を通る空気の流速変動量の関係を導き,弁の隙間を通過する空気の流速を弁に隣接する音響空間要素の速度条件として与えることで音響-振動連成解析を行った.以上によりモデル化した系の安定性判別に固有値解析を行った結果,実験と同様に自励振動を起こすことを示した.この成果を日本機械学会九州学生会第46回卒業研究発表講演会にて発表した.人間の音声生成機構である声帯振動および声道の形状による音響伝達特性を統一的に扱える簡便な解析手法の開発を目的とし,声道壁の粘弾性を組み込んだ多自由度集中系モデルの開発および声帯部モデルと声道モデルの連成解析による声帯自励振動の解析について研究を行った.一様な断面形状および粘弾性を持つシリコーン製の音響管を対象とし,音響管壁面の粘弾性の違いによる音響固有周波数の変化を測定した結果,壁面が柔らかいほど低周波数側へ移動し,ピーク値が低減した.音響管内の圧力変動により管壁面が周方向に変形したことで発生するエネルギー損失によるものとして,結合減衰で表した要素を集中系モデルに付加した結果,同様の現象を確認した.また,声帯振動と声道の連成解析を行う第一段階として,笛式人工喉頭を対象に振動ー音響連成解析を行った.音源生成部である弁を質点,線形ばね,減衰要素により1自由度でモデル化し,人工喉頭のチューブ内部(音響空間)の多自由度集中系モデルに組み込んだ.系の安定性判別を行った結果,実験と同様に自励振動を起こすことを示した.

この成果を日本機械学会九州学生会第46回卒業研究発表講演会にて発表した.最終年度は,声帯部での自励振動の発生条件・メカニズムを解明するため,声道内の空気の伝播を質点・ばね・減衰から構成される多自由度集中系でモデル化し,固有値解析が可能な音声生成解析モデルを提案した.そして発声器官の模型で実験を行い,本モデルの周波数応答と実験結果がある程度一致していることを確認した.また,声帯部を質量,線形ばね,減衰からなる1自由度の弁としてモデル化し,声道モデルと連成解析することで声帯自励振動を解析可能であることを示した.この成果を日本機械学会九州学生会第47回卒業研究発表講演会にて発表した.人間の音声生成機構である声帯振動および声道の形状による音響伝達特性を統一的に扱える簡便な解析手法の開発を目的とし,声帯ー声道モデルの連成解析による声帯自励振動の解析について研究を行った.声道内の空気の伝播を質点・ばね・減衰から構成される多自由度集中系でモデル化し,固有値解析が可能な音声生成解析モデルを提案した.そして本モデルの周波数応答と発声器官の模型を用いた実験結果がある程度一致していることを確認した.また,声帯部を質量,線形ばね,減衰からなる1自由度の弁としてモデル化し,声道モデルと連成解析することで声帯自励振動を解析可能であることを示した.集中系モデルを用いた声道と声帯振動の連成解析は,音響領域と声帯の振動を同時に解析することができ,偏微分方程式である流体の基礎式と振動体の運動方程式を交互に解析する手法と比べ取り扱いを容易にすることができた.本年度の対象は喉頭摘出者の代替声帯として使用される笛式人工喉頭であるが,生体の声帯と同じく自励振動により音源を生成するものであり,本年度の結果を声帯へ適用することは困難ではない.医療技術への応用を考えた場合,本解析モデルを用いて声道形状および音声波形から声帯モデルのパラメータ(質量,ばね,減衰係数)を同定することができる.同定結果が正常範囲(過去の文献による測定値から標準的な値は入手可能である)から逸脱したときに,喉頭癌や声門閉鎖不全の可能性を示唆するといった簡易的な診断手法としての応用が考えられる.この検討は本年度実施できなかったが,今後実施していく予定である.以上により本年度の評価をおおむね順調であると判断した.能動音響制御声道は硬口蓋,軟口蓋,舌,口唇など粘弾性の異なる部位が存在する.この声道を縦続音響管でモデル化する場合,管円周方向に壁面粘弾性が異なるモデル化手法を開発することで精度が向上すると考えられる.そのため,前年度までの一次元縦続音響管モデルを拡張し,声道を軸対称円筒座標系でモデル化する手法を開発する.声道を複数の要素に分割し,各要素の長さおよび体積の等しい音響管を縦続接続したもので近似する.さらに各音響管を円周方向に要素分割することで二次元縦続音響管モデルを構築する.各要素を質量,ばね,減衰要素で結合した集中系で表し,固有値解析および音波の伝搬の様子を解析する.このとき,音響管壁面の粘弾性はばね,減衰要素として扱う.まずは複数の粘弾性をもつシリコーンを使って作成した,円周方向に粘弾性の異なる音響管を対象とする.音響管の一端から加振器により音響加振し,他端でその音圧信号を取得して管内の音響特性を測定する.この結果と,2次元従属音響管モデルで解析した結果の比較を行い,従来の一次元従属音響管モデルに対する優位性について検討する.また,音響管の断面形状データと音響特性からガウスニュートン法などを用いて,モデルの各要素の粘弾性パラメータを同定する手法の開発を試みる.本年度は一様な断面形状および粘弾性を持つ音響管を対象とし,音響固有周波数測定装置の作製と集中系モデルを用いたシミュレーションプログラム作成を行った.作製した実験装置は小型振動試験器を用いた音響管加振部と音響管部の2つのユニットで構成される.
歯科補綴物のためのCAD/CAMシステムの開発

本研究では、歯科補綴物のためのコンピュ-タ支援による設計/製作(CAD/CAM)システムについて、実用化を目的として遂行したものである。2年間の研究成果を以下にまとめる。1.患者の口腔形態を非接触で迅速・正確に計測するための入力装置として,高解像度CCDカメラを用いて、電子制御式液晶スリットから対象に投影された8種類のコ-ド化パタ-ンを撮影し、対象表面上の空間距離座標を計測する、超高速画像入力装置を開発した。さらに、顎顔面を対象とする計測装置として、8本のマルチスリットレ-ザ-と2台のCCDカメラによる高速計測装置を試作した。2.ボクセルモデル法の適用によって再構築された支台歯の三次元画像について、補綴物と歯冠との適合境界線である辺縁線を自動認識させるプログラムを開発し、咬合干渉部位の除去など部分的修整も可能とする機能を付加した。これにより、操作の誤差と時間を大幅に減少できた。3.隣接歯の形態の特徴点などから、冠の設計理論の知識情報処理法を適応して、標準補綴物の形態を修整・適合させる自動設計プログラムにも成功し、補綴物の設計手法の標準化と簡素化、省力化を達成した。4.三次元画像や補綴物の設計形態を保存し、検索するために、再書き込みが可能で、容量が大きく、パ-ソナルコンピュ-タに設置できる光ディスク装置を利用し、簡便で実用的な情報管理法を検討した。5.歯科補綴物の自動切削加工が可能な小型計算機制御3軸小型工作機械を試作した。金属・セラミックスなどの難加工材に適するように十分な剛性を有し、切削条件を多段階に変化できる性能が具備させた。6.切削加工用補綴材料として、チタンならびにカルシウムマイカ系ガラスセラミックスおよび複合レジンを選択し、研削性と靭性の向上を図るとともに、切削性評価試験機を試作して、最適切削条件を求めた。1)高解像度CCDカメラを用いて、電子制御式液晶スリットから対象に投影された78種類の白黒コ-ド化パタ-ンを撮影し、対象表面上の空間距離座標を計測する、超高速画像入力システムを開発した。2)計測した空間距離座標から元の三次元画像として再構築するには、本補助金により購入したグラフィックス-パ-コンピュ-タが威力を発揮し、従来数10分を要した計算を大幅に短縮することができるようになった。3)さらに下顎運動を想定して、上下顎歯牙の咬合干渉状態を三次元構造的に検出することができる、ボクセルモデル法を考案し、高速かつ精密な画像処理のためのソフトウェアを開発した。4)支台歯ならびに隣接、対合歯の形態の特徴点を客観的に定義する数字コ-ドシステムを利用して、患者の口腔形態の代表点を特定し、標準補綴物の形態を自動設計するプログラミングを開始した。これにより、これまで計画してきたような標準モデルデ-タベ-スを予め構築する必要がなく、コンピュ-タメモリ-の大幅な節約と、標準モデルから患者モデルへの形態修正のための計算と手間が省略できた。5)設計が終了した補綴物モデルに対して、切削工具が動くべき軌道を作成するプログラムの開発に着手した。6)歯科補綴物の自動切削加工が可能な計算機制御小型工作機械の試作を始めた。7)補綴物用に応用の可能性がある各種材料について、その切削加工特性を評価するための装置を試作した。8)切削加工に適する補綴材料として、ベ-タチタン合金やカルシウムマイカ系ガラスセラミック材料が研削性と靱性の点から比較的有望であることが分かった。

本研究は、歯科補綴物のためのコンピュ-タ支援による設計/製作(CAD/CAM)システムについて、実用化を目的として逐行したものである。すなわち、口腔領域の三次元表面形態を高速に計測するための光学的計測装置、三次元立体画像の再構築のためのプログラム、補綴物の設計に関する知識情報処理と標準形態のデ-タベ-ス化、支台歯形成面の自動認識と形態修整のための画像処理プログラム、自動切削加工のための工具軌道創生システム、微細で複雑な凹凸を切削できる小型自動工作機械、さらに、切削加工に最適な歯科補綴用材料、など広範囲におよぶ開発研究を行った。平成2年度の研究実績を以下にまとめる。1.ボクセルモデル法の適用によって、高速に三次元画像として再構築された支台歯について、補綴物の歯冠との適合境界線であるマ-ジンラインを自動認識させるプログラムを開発し、部分的修整も可能とする機能を付加した。これにより、操作の誤差と時間を大幅に減少できた。2.隣接歯の形態の特徴点などから、冠の設計理論の知識情報処理法を適応して、標準補綴物の形態を修整・適合させる自動設計プログラムにも成功し、補綴物の設計手法の標準化と簡素化、省力化を達成した。3.三次元画像や補綴物の設計形態を保存し、検索するために、再書き込みが可能で、容量が大きく、パ-ソナルコンピュ-タに設置できる光ディスク装置を利用し、簡便で実用的な情報管理法を検討した。4.歯科補綴物の自動切削加工が可能な小型計算機制御3軸小型工作機械を試作した。金属・セラミックスなどの難加工材に適するように十分な剛性を有し、切削条件を多段階に変化できる性能を具備させた。5.切削加工用補綴材料として、チタンならびにカルシウムマイカ系ガラスセラミックスおよび複合レジンを選択し、研削性と靭性の向上を図るとともに、切削性評価試験機を試作して、最適切削条件を求めた。
高齢者(痴呆、有病者寝たきり老人)の歯科治療に対する循環動態

痴呆高齢者を対象とした。電極、装置を毟り取る、家族の了解、承諾が得にくい、その日の気分で歯科治療を拒否するため、実際には調査できた患者は5名(男2、女3)と少数であった。平均年齢73歳(68歳83歳))。痴呆度は境界方痴呆。治療内容は抜歯3名、局麻下レジン充填1名、歯石除去1名。測定にはA&D社製携帯型自動血圧心拍計(TA-2425+TA-2025)および専用ソフト(TA-2415)を使用した。測定時間は(治療当日朝7時翌朝7時)24時間。同時に行動記録票の記入を始めた。治療時間は13時14時の間とした。脈拍は12時と18時付近で僅かに増加、14時に僅かに増加した。収縮期血圧およびMAPは14時に低下、17時と21時に上昇した。17時、21時、2時頃はトイレ、オムツ交換、夕食時にあたる。午前中のトイレや食事では血圧上昇は認められなかった。副交感神経機能を反映しているRR50は、昼間は高値を示し、8時、12時、16時頃にピークが見られた。14時頃は逆に落ち込み副交感神経活動の低下が見られ、夜間は低値を示した。RR間隔より得たパワースペクトラムは、0.040.15Hzを低周波成分(LF)、0.150.40Hzを高周波成分(HF)とし、緒家の報告に基づいてHFを副交感神経の指標に、LF/HFを交感神経の指標とした。HFは朝、高値を示し徐々に下降したが12時、15時頃に一過性に上昇のピークがあり、その後は下降し、夜間低値を示した。LF/HFは午前中低値であったが、14時に一時的な高値のピークがあり、その後徐々に上昇し、夜間高値を示した。環境温度は特に顕著な変化は無く。体動は行動表と照合すると、トイレ使用時に顕著に記録されていた。今回対象の高齢者は、感情反応能力は正常者と同等と思われる。本研究によって、術中よりも術後に交感神経は興奮状態にあり、排便、創部痛によって術前よりも血圧上昇を起こすことが判明した。痴呆度は境界方痴呆。対象は入院の上歯科治療を予定した65歳以上の患者を対象とした。治療は通常の歯科治療で、抜歯を除いて口腔外科的手術はいれていない。治療前日の入院とし、形態型自動血圧心拍計(A&D TM2425)を装着し,経時的に心電図R-R間隔、STレベル、非観血血圧、環境温、体動(運動量、姿勢)を経時的に測定した。測定間隔は治療時は5分間隔、昼間は30分間隔、夜間は1時間間隔で測定を行った。現在測定データーは解析ソフト(エ-アンドデ-TM2025-15)によりR-Rパワースペクトラム、LH・HFトレンド、血圧、脈拍、心拍、STレベルなどの経時的変化を算出して傾向を得、患者の全身状態、歯科治療の種類等との対比を行っているところである。

痴呆患者では記憶力障害、妄想、幻覚が起き始めている患者では携帯型自動血圧心拍計を装着しておくのが難しい症例が多くい。人格が荒廃してくると口腔清掃に関心が無くなり、また義歯の装着および管理も難しくなる。さらに片麻痺などが生じて植物的になると咀嚼、嚥下が難しくなり歯科治療の場に現れなくなる傾向にあり、重症患者の計測に考慮しているところである。入院の上歯科治療を予定した65歳以上の患者を対象とした。長谷川式簡易知能評価スケールを用い正常、軽度痴呆、中等度痴呆、重度痴呆の4段階に分類し、それぞれに、歯科治療中および歯科治療後の循環動態を調査した。老人の感情は内的刺激より外的刺激に影響されるといわれる。外来刺激として歯科治療の他に環境温度を測定した。環境温度は±5°Cの範囲で変化していたが、患者は順化した温度が高くなるより、低下するほうが循環動態に影響するようであったが歯科治療中には特に有意な影響はなかった。歯科治療は観血的処置(抜歯)と非観血的処置(充填、印象、スケーリング、など)に分けた。観血的治療後3時間頃よりR-R間隔周波数領域解析法でLF/HFが上昇し始め交感神経機能の緊張が持続する傾向が見られた、平均血圧は術前、術後で特に変動は見られなかったが、トイレの際の一過性の血圧上昇は術前値に比べて高値を示していた。また、DOUBLE PRODUCTを見るとトイレ以外に食事摂取時に値は高くなっている。術後に交感神経系が緊張するのは局所麻酔の効果が薄れ、痛みにより興奮し、交感神経が過敏になったのではないかと推察される。そこに血圧を上昇させる排便が重なると通常より血圧が上昇すると考えられる。術後に痛みを自覚する治療では、循環器系疾患を有する高齢者では術後鎮痛・鎮静に十分配慮したほうが偶発事故を予防できると推察された。現在データーの取り纏めに時間が掛っており、詳しい報告は若干おくれます。
三陸思い出パートナープロジェクトの実際と多面的効果

三陸思い出パートナープロジェクトの展開を以下のように実施した。1岩手県宮古市において5月22日にボランティアに対するグループ回想法のスーパービジョンを行った。26月3日午前と午後に宮古市内公民館において研修会を行った。午前中ではこれまでの調査結果の説明と学会報告の成果を平易に伝達し、相互の信頼関係を更に気づくことに務めた。午後には東京で認知症カフェを実践されているT氏の講演を開催し、宮古市に加えて近隣の市町村在住の認知症ケアに関心の深い方達の参加があり、熱心な質問が寄せられた。39月6日午前中に住民による見守り活動に関する講話及びグループ回想法の基本についての研修を行った。午後には盛岡市の福祉専門学校学生20数名の参加により高齢者、学生、保健福祉関係者の世代間交流を含めた回想法グループを【運動会】をテーマとして展開し、若い世代に伝えることの大切さと楽しさが参加高齢者から語られ、学生からは高齢者観の変化や生きがいの在り方に関心が高く示されていた。410月20日に思い出パートナーの会を仮設住宅・復興住宅居住高齢者30名を中心にもやいの会、学生、行政関係者計約60名の参加により実施し、ボランティアがグループリーダーを務め、開催への期待の大きさが示された。512月3日もやいの会に地区の老人会から回想法の会について依頼があり、老人会の参加者20数名、もやいの会10名で思い出語りの会を行った。61月28日個人回想法に加えて化粧療法の実践を行った。研究成果に関しては、日本老年社会科学会において報告をポスターにより発表し、東京において研究グループ「語りと回想研究会」の場で経過とその都度のまとめを報告している。各研修会の事前打ち合わせを主に東京において複数回実施し、データの分析と検討を重ねてきた。2018年度は特に地域への展開の方法と各研修後の評価項目の再検討を行った。研究の進捗はおおむね計画通りに順調に進展しているが、昨年度の変更点同様、津波の被害に遭われた高齢者の方々への訪問個人ライフレヴューについては、グループ回想に力点を置き、その中で語られる多様な思い出を中心とする取り組みに変更した。思い出語りの会に参加される復興住宅居住の高齢者ともやいの会のボランティアの方たちの自然に支え合う形が、昨年度に増して示されたようにも思われる。ボランティアの方達には聴き手としてライフヴューを伺う役割ではなく、自らの人生を振り返る機会とされたい意向が強く見られた。様々の重大な危機を重ね越えてきている方達であり、中には認知症の母親を介護する立場を重ねつつ、母親のライフレヴューを冊子にまとめ、自らの振り返りもともに行われているメンバーもおられた。個人ライフレヴューの研修を実施することの意義は高く、各自の振り返りをおだやかに進めながら、他者の回想の意味と重ね合わせ、相互に心を寄せ合い聴く文化が、醸成されつつある。多様な研修・学生との世代間交流・地域の保健・福祉関係者との連携等については、各関係者の協力と積極的な参加の意向により、順調に展開しており、岩手県の近隣地域の保健・福祉関係者、関東からの参加者等広がりを見せている。地元の老人会からの要請等があったが、より一層様々の関係機関や組織との協力・連携の仕組みの検討の必要性があり、2019年度に向けての重要な課題となる。研究成果は、多面的な評価を質的・量的に蓄積できるものとなっており、成果報告の機会を多面的に組み合わせて検討・考察することが望まれている2019年度の課題としては、宮古市における複数回の研修、仮設住宅・復興住宅におけるもやいの会メンバーによる回想グループの自主活動への支援とスーパービジョン、学生との世代間交流の機会、大規模な思い出パートナーの会を順に実施する予定である。更に、宮古市の近隣市町村に加えて三陸地域のケアマネージャーから回想法の研修会が期待されており、日程について検討をし、実施することとしている。三陸地域の保健・医療・福祉専門職の関心を互いにつないでいく方策とともに、その経過や進捗状況、意識の変化等に関して、個人・グループに対するインタヴュー及び研修参加者への質問紙調査を含める予定である。もやいの会の活動が地元で周知され、また、従来の地区以外の復興住宅居住の高齢者の参加の増加も予測されており、独居や高齢者世帯の閉じこもりを防ぐことにも一層力点を置くことが必要となる。もやいの会が独自で複数回行う従来の地区以外での復興住宅における回想グループにオブザーバーとして参加し、地域による参加者の異なった課題や状況を踏まえ、思い出パートナープログラムの現状と今後の課題に対する考察を深める。もやいの会結成以来のメンバーの方達に対して、活動への意識の変化、震災後の思い出語りの会の実際に関する評価や参加高齢者の方達との関係性、今後への期待等に関して個人面接を実施し、その語りの分析を最終年度の結果評価に含む。成果報告に関しては、最終年度であり、老年社会科学会学会における報告とともに、各研究担当者が論文執筆を蓄積する。複数回の研修会の内容をミニシンポジウムの形態に変えて、もやいの会のメンバー、広汎な参加者(宮古市、近隣地区、三陸地域を含め岩手県・東北地方各県等)に本研究の成果を報告する。岩手県宮古市において思い出パートナープロジェクトを以下の内容で実施した。第1に、すでに回想法を地域で展開している高齢者グループへの継続的な研修を研究分担者・研究協力者とともに行う。その際に研修プログラム自体をより参加

高齢者の学習が進展するように、新しい方法を取り入れた。第2に、実施した複数回の研修について事前・事後評価を多面的に蓄積した。第3に、ボランティア自身が復興住宅及び仮設住宅において回想法グループを実施するための計画立案をボランティアの方達・行政関係者・ケアマネージャーを中心に遂行した。その検討会自体が地域の連携の形成に役立つよう研究分担者とともに積極的な支援を行った。第4に、検討会の実施に際してフォーカスグループを実施し、各参加者の意向を取り入れて評価を行った。第5に、宮古市及び周辺地区の復興住宅及び仮設住宅に在住する高齢者約60名の方達に対し、ボランティアと研究分担者・研究協力者がリーダーとなり、大きな回想法グループを地区公民館において実施した。その際には社会福祉専門学校の学生10名の積極的な参加を得て、世代間交流を含めた思い出パートナープログラムが展開可能となった。福祉専門学校の学生の参加に関しては、専門学校教員の協力を得ることができ、また学生による事前・事後の評価も実施した。第6に、1年間のプロジェクトの総括的な評価としてボランティアの方達・行政関係者・専門学校教員等による多面的な評価を蓄積した。第7には、国内外の研究レビューを行い、特に倫理的側面について検討を重ね、論文を執筆した。地域における回想法の展開についての先行研究等は極めて限られており、執筆した論文の意義は大きいといえる。以上、三陸思い出パートナー事業の初年度の展開として、実施プログラム内容・評価方法に加えて、地域の諸団体及び構成員の積極的な参加が形成された。当初の計画通り、回想法グループを実施している高齢者ボランティアの研修のあり方を十分に検証し、研修方法の開発と研修の事前・事後の評価を実施することができた。また、高齢者ボランティアの方達の積極的な姿勢や意欲を高め、活動への期待をさらに推進することが可能になった。加えて、多様な研修や評価の際に、保健士をはじめ、行政関係者やケアマネージャーの協力を得ることが可能になり、地域の連携が進めることができた。とりわけ、地区公民館で行った大きな回想法グループでは予測以上の高齢者と若い世代や専門職の極めて積極的な参加が得られ、初年度の計画の予測を超えたものといえる。ただ、福祉専門学校の学生以外に地元の若い世代の参加は限られていた。当初の予定では、宮古市の近隣である岩泉町での展開を意図していたが、岩泉町の台風による災害という状況の中で変更を余儀なくされた。先行研究のレビューを地域の回想法に焦点をあて、内外を含んで検討することができたのは予測以上の成果であると考えられる。特に回想法・ライフレビューの倫理をめぐってという論文には、本研究プロジェクトを通しての示唆が含まれており、回想法・ライフレビュー研究の進展に寄与するものとなっている。三陸思い出パートナープロジェクトの展開を以下のように実施した。1岩手県宮古市において4月23・24日にボランティアに対するグループ回想法の研修と仮設住宅・復興住宅に居住の高齢者に対してアートセラピストの協力を得て、各自の写真を持ち寄り、子育ての思い出をテーマに描画や小石を用いてアートセラピーを行った。豊かな発想の作品群が出来、参加者は自分の作品の説明の中でライフレヴューを語られた。一ヶ月後にさらに作品を完成させ持参される方もいた。
ランダム変異株集団の動態解析による腸内生存に寄与するビフィズス菌遺伝子の探索

ビフィズス菌が腸内で生存するための分子機構については,ビフィズス菌の遺伝子変異導入系が十分確立されていないため,不明な部分が多い.本研究では,ビフィズス菌のトランスポゾン変異導入法と次世代シークエンサー解析を組み合わせて,ビフィズス菌の腸内での生存に寄与する遺伝子を同定することを目的とした.研究の成果として,まず変異導入の宿主となるビフィズス菌株の完全長ゲノム配列を決定した.さらに転移因子ISBlo11およびHimar1C9を用いて,2種類のトランスポゾン変異導入系を確立した.本研究により,ビフィズス菌が腸内で生存する機構を分子レベルで解明するための基盤技術を整備することができた.平成25年度は,次世代シークエンサーを用いて変異株集団中の各変異株の同定と菌数の変化を測定する方法であるINSeq法に適したランダム変異導入法をビフィズス菌で確立するため,以下の13の実験を進めた.1. Bifidobacterium longum 105-A株の完全ゲノム配列の決定:長鎖DNA配列の決定が可能な次世代シークエンサーPacBio RSIIを用いて,B. longum 105-A株のゲノム配列解析を行った.配列データのアセンブルを行い,過去に我々が決定したドラフトゲノム配列との統合により,完全長ゲノム配列を決定した.ゲノムサイズは約2.3 Mbp, 1,878 ORFが同定された.2.ランダム変異導入ベクターの構築:転移因子TLS143のIR(転移に必要な逆位反復配列)を薬剤耐性遺伝子の両端に付加し,転移領域を構築した.転移領域を温度感受性複製ベクターpKO403に挿入し,プロトタイプとなるベクターpBFS37を構築した.また,既知の恒常発現プロモーターPgapをORF上流に挿入したTLS143の転移酵素遺伝子の発現カセットを構築し,pBFS37にクローニングを試みたが,転移酵素遺伝子の変異が頻出したことから,大腸菌内での転移酵素の発現が問題と考えられた.3.大腸菌で低活性かつB. longumで高活性を示すビフィズス菌プロモーターの探索:2の問題は,大腸菌で活性が低いプロモーターを用いることで解決できる.一方ビフィズス菌内では,転移酵素の発現量を高くできる高発現型プロモーターが,効率の良い変異導入に望ましい.これら両方の性質を示すプロモーターを探索するため,α-galactosidase活性を指標としたレポーターアッセイ系を構築し,ビフィズス菌由来のプロモーターの評価を行った.結果として,好適な性質を示す3種類のプロモーターを同定できた.平成26年度は前年度に引き続き,次世代シークエンサーを用いて変異株集団中の各変異株の同定と菌数の変化を測定する方法であるINSeq法に適したトランスポゾン変異導入法をビフィズス菌で確立するため,以下の2つの実験を進めた.1. ISBlo11を用いたトランスポゾン変異導入系の構築と転移の検証:転移因子TLS143(挿入配列の命名法に従いISBlo11と命名)を用いたトランスポゾン変異導入系を構築した.まず昨年度同定した,キシロースによる強力な発現誘導が可能なプロモーターPfruEKFGを転移酵素ORFの上流に連結し,転移酵素発現ベクターを構築した.また,ビフィズス菌選択マーカーを持つ大腸菌pUCレプリコンにISBlo11の両末端の逆位反復配列を連結したトランスポゾンベクターを構築した.高い転移効率を達成するために,宿主株Bifidobacterium longum 105-A株に転移酵素発現ベクターを導入し,発現誘導を行って転移酵素を十分に供給した後,トランスポゾンベクターを細胞に導入するという二段階の形質転換で転移を誘導した.その結果,1,000 cfu/μg DNAという非常に高い効率でトランスポゾン変異株を作出することができた.ゲノムへのトランスポゾンの挿入部位の塩基配列を解析した結果,挿入部位は多様であることが明らかになった.2.新たな転移因子を用いたトランスポゾン変異導入系の検討:1.の系の確立と並行して,他菌種のINSeq解析に用いられているmariner型トランスポゾンHimar1C9を入手し,それをビフィズス菌で機能するように改変を行った.種々の検討の結果,温度感受性ベクターpKO403にHimar1C9の転移酵素発現カセットとトランスポゾン(転移に必要な逆位反復配列を薬剤耐性遺伝子の両端に付加して構築)を連結したベクターを構築してテストしたところ,トランスポゾンの転移が観察された.現在ゲノムへのトランスポゾンの挿入部位について検証を行っている.平成27年度は前年度に引き続き,次世代シークエンサーを用いて変異株集団中の各変異株の同定と菌数の変化を測定する方法であるINSeq法に適したトランスポゾン変異導入法のビフィズス菌での確立を進めた.Mariner型トランスポゾンHimar1C9を用いたトランスポゾン変異導入法の開発:昨年度開発した系をさらに改良し,温度感受性ベクターpKO403にHimar1C9の転移酵素発現カセットを搭載した転移酵素発現ベクターと,Himar1C9の逆位反復配列の間にスペクチノマイシン耐性遺伝子を挿入したトランスポゾンを持つトランスポゾンベクターを構築した.前者をBifidobacterium longum 105-A株に導入し,キシロースによる転移酵素遺伝子の発現誘導により細胞内に転移酵素を蓄積させたのち,トランスポゾンベクターを導入することにより,50200形質転換体/μgベクターの効率でトランスポゾン変異株を取得することが出来た.

トランスポゾン挿入部位の塩基配列を解析したところ,挿入部位は多様であり,その多くが遺伝子の内部に挿入されていたことから,INSeq法に適したトランスポゾン変異導入系を確立できたと言える.確立した系を用いて,現在トランスポゾン変異株ライブラリーの構築を進めている.研究期間全体を通して,ビフィズス菌において2種類のトランスポゾン変異導入系を確立することが出来た.このような系の確立はビフィズス菌ではほとんど報告が無く,今後の応用が期待できる.また,宿主株であるB. longum 105-A株の完全長ゲノム配列を決定することが出来た.このように,INSeq法による腸内生存に寄与するビフィズス菌遺伝子の同定に必要な基盤を本研究で整備することが出来た.今後の研究で実際に遺伝子の同定を進め,ビフィズス菌の腸内での生存のメカニズムを明らかにする.ビフィズス菌が腸内で生存するための分子機構については,ビフィズス菌の遺伝子変異導入系が十分確立されていないため,不明な部分が多い.本研究では,ビフィズス菌のトランスポゾン変異導入法と次世代シークエンサー解析を組み合わせて,ビフィズス菌の腸内での生存に寄与する遺伝子を同定することを目的とした.研究の成果として,まず変異導入の宿主となるビフィズス菌株の完全長ゲノム配列を決定した.さらに転移因子ISBlo11およびHimar1C9を用いて,2種類のトランスポゾン変異導入系を確立した.本研究により,ビフィズス菌が腸内で生存する機構を分子レベルで解明するための基盤技術を整備することができた.平成26年度は,ISBlo11を用いたトランスポゾン変異導入系を確立することができた.これはビフィズス菌の挿入配列をトランスポゾン変異導入に応用した初めての例であり,今後の応用が期待できる.上記の系については,若干の転移の偏りが観察されたため,新たな転移因子Himar1C9を用いて,トランスポゾン変異導入系の確立を並行して進めたが,こちらも転移が観察された.Himar1C9を用いた系については今後転移の偏りがないことを検証する必要があるが,次年度は両者のうちどちらかでINSeq解析に適した系を選択して進めることが可能になった.これらの事を考えると,今年度の研究はおおむね順調に推移していると判断できる.応用微生物学・腸内細菌学まずHimar1C9を用いた系の検証を進め,トランスポゾン変異導入株ライブラリー作成に用いる系を確定する.変異株の取得効率が低い場合は,形質転換,回復培養,寒天培地での選択条件などの検討を行い,1,000 cfu/μg DNA程度の変異株取得効率を達成できるようにする.確定した系を用いて,形質転換試験を複数回行い,2万3万株からなる変異株ライブラリーを構築する.INSeq解析の予備検討を行い,構築したライブラリーにおいて,ゲノム全体に偏りなく挿入変異が入っているかどうかを,次世代シークエンサーを用いて検証する.ライブラリーの構築と並行して,コンベンショナルマウスへのビフィズス菌投与試験の検討を進める.コンベンショナルマウスへの定着率が低い場合,過去に我々が確立したビフィズス菌を種ごとに選別するFISH-
楽曲系文学から見た宋元期の出版文化

本年度の主たる課題は、南宋から元代にかけて出版された各種版本の調査・収集、およびそれらのうち特に注釈附き資料の内容整理であった。前者について言えば、これまで国内外で実見した諸版本の情報整理ができ、また上海図書館と国立公文書館で新たな調査を行えた。特に公文書館では宋元の諸刊本を実見したのみならず、注釈附き版本である『後山詩注』の全画像データを入手したことは、研究の進展に極めて有用な成果であった。後者については、陳元龍集注『詳註周美成詞片玉集』について、その注釈をめぐる諸問題の考察を中国語の論文としてまとめ、二〇一一年九月に中国河南省開封にある河南大学で開催された第七届中国宋代文学国際学術検討会で口頭発表を行った。これによって、中国本土の研究者から様々な反響や意見を得ることが出来ただけでなく、中国文学研究者として彼らに認知されたことが、大きな収穫であった。なお、この口頭発表での成果を踏まえ、日本語で加筆修正した論文が、宋代詩文研究会編『橄欖』第十九号に掲載されることになっている。さらに同年十月末には、東山之會(近畿圏の中国文学研究者による定期的な学習と研究発表の場)において、宋元期の詩詞注釈本の注釈に見える共通注文について、具体例とその傾向性を中心とした簡単な報告を行った。この発表後の質疑応答では、本研究の意義を再確認すると同時に、新たな問題点に気づかされ、今後の研究を進めていく上での大きな示唆を得ることができた。
スクリュー固定補綴システムにおけるスクリュー締め付け精度と疲労に関する研究

オッセオインテグレーテッドインプラントにおける術者可撤式の補綴法はパッシヴ・フィットと呼ばれる高度な適合精度が要求される。その適合性の試験方法の中に、1)ワンスクリューテストや2)スクリュー締め付け時の回転角度の測定がある。本研究の目的は、これらの試験方法を実験的に再考することにある。1)ワンスクリューテストに関する検討まず、ワックスの押しつけ力を測定し、ワンスクリューテスト時に、ワックス片によって200gの荷重量が得られるかどうか検討した。また、その荷重量におけるワックスの種類、形状および室温の影響についても検討した。その結果、種類、形状、室温の影響を大きく受け、200gの荷重量を得ることは困難であることが明らかとなった。また、200gの荷重量は、長さ25mmのカンチレバー上部構造で、最大4MPaの相当応力を生じることが、有限要素法から示唆された。2)スクリュー締結回転角の測定とその検討。インプラントはステリオスインプラントを使用し、アバットメントには、このシステムの中の、PMEアバットメントとコニカルアバットメントを使用した。上部構造固定用スクリューを締め付けたときのトルクと回転角度を計測するために、自家製の装置を製作した。この結果から、同一の術者が行う限り、有効となりうる可能性が示唆された。また、ステリオスインプラントシステムでは、アバットメントの種類により、その回転角度は異なることが明らかとなった。スクリュー固定術者可撤式のインプラント上部構造では,Passive fitと呼ばれる精度の高い適合性が要求される.この適合性の診査方法として,シェフィールドの適合試験や上部構造固定時のスクリュー締結回転角度を目安とする確認方法が提案さている.今回,これら二つの適合試験法の有効性について実験的に検討した.シェフィールドの適合試験については,上部構造に200gの荷重をかける場合に用いるワックス片について,異なる条件下で押し付け試験を行い検討した.また,200gの荷重が周囲骨組織とインプラント,上部構造に与える影響について,3次元有限要素法によりシミュレーションを行った.スクリュー締結時回転角度による確認方法については,締結時のトルク力と回転角度を同時に測定する装置を製作し,当科で導入しているステリオスインプラントシステムを用いて回転角度-発現トルク力曲線を求めて検討した.その結果,シェフィールドの適合試験は,松風,GC,KERRの3社のワックスを用いた場合には不安定な方法である事がわかった.スクリュー締結回転角度による確認法は,同一の術者が行う限り有効となりえる事が示唆されたが,ステリオスシステムにおいてはアバットメントの種類による角度差を考慮する必要があることがわかった(本研究の成果は,日本口腔インプラント学会誌に投稿の予定である).引き続き,インプラント周囲の歪みに関する研究を行う予定である.レジンブロックに3本のインプラントを植立し,歪ゲージを貼り付け,3ユニットのメタルフレームを作製する.不適合な上部構造を装着した場合にインプラント周囲に生じる応力,またスクリューの締め付け順序や締め付けトルク力が与える周囲組織への影響を検討する予定である.オッセオインテグレーテッドインプラントにおける術者可撤式の補綴法はパッシヴ・フィットと呼ばれる高度な適合精度が要求される。
歯周病関連細菌の有する「OmpA様蛋白質」の宿主に対する病原性の解明

歯周病関連細菌はOmpA様蛋白質を有している。OmpA様蛋白質は主要外膜蛋白質であることは分かっているが、その性質や宿主に対する病原性については明らかにされていない。本研究では、歯周病関連細菌の有するOmpA様蛋白質の宿主に対する病原性を調べることを目的としている。本研究では、代表的な歯周病関連細菌であるTannerella forsythiaおよびPorphyromonas gingivalisに着目し、同菌の有するOmpA様蛋白質の宿主に対する病原性について解析した。その結果、P. gingivalisの有するOmpA様蛋白質が血清抵抗性に関与することを見出した。OmpA様蛋白質を欠失した場合には溶菌しLPSなどの菌体成分が放出され、その結果ヒト歯肉線維芽細胞、血管内皮細胞やマウスマクロファージにおいてToll-like receptor4を介して細胞応答を増強させることを見出した。P. gingivalisなどの歯周病関連細菌の棲息する歯肉溝滲出液中には、約70%の血清が含まれる。OmpA様蛋白質が血清による殺菌およびLPS-Toll様受容体4を介した宿主細胞の活性化を抑制することで、歯肉溝滲出液の血清を含む歯肉溝滲出液中での生存を可能にしていることが考えられた。T. forsythiaのOmpA様蛋白質に関しては、その糖修飾様式を質量分析で解析し、O型のGlcNAおよびシアル酸を含んでおり、N型の糖鎖は含んでいないことを明らかにした。さらに、T. forsythiaはOmpA様蛋白質のGlcNAcおよびシアル酸を介して宿主細胞であるヒト口腔上皮細胞に付着し、細胞刺激性を発揮することを明らかにした。以上の内容を学会で報告するとともに、論文を公表した。歯周病関連細菌Tannerella forsythiaの有するOmpA様蛋白質の宿主に対する病原性について解析した。T. forsythiaのOmpA様蛋白質はレクチンカラムで効率的に分離精製が可能であった。精製したOmpA様蛋白質は宿主細胞表層に発現する数種のレクチンに結合することが明らかになった。OmpA様蛋白質のレクチンへの結合は、特異的な糖を介していることが分かった。歯周病関連細菌T. forsythiaの有するOmpA様蛋白質の分離精製とその宿主細胞レクチンへの結合を明らかにすることができた。前年度までに、歯周病関連細菌のうち、特にTannerella forsythiaに着目し、同菌の有するOmpA様蛋白質の宿主に対する病原性について解析した。T. forsythiaのOmpA様蛋白質は糖修飾されていること、また小麦胚芽レクチンカラムで効率的に分離精製が可能であること、さらには精製したOmpA様蛋白質は宿主細胞表層に発現する数種のレクチンに結合することを明らかにした。平成28年度には、OmpA様蛋白質の糖修飾様式を質量分析で解析し、OmpA様蛋白質はO型のGlcNAおよびシアル酸を含んでおり、N型の糖鎖は含んでいないことを明らかにした。T.forsythiaはOmpA様蛋白質のGlcNAcおよびシアル酸を介して宿主細胞であるヒト口腔上皮細胞に付着することを明らかにした。さらに、T. forsythiaはOmpA様蛋白質を介してヒト口腔上皮細胞に付着した後、細胞刺激性を発揮することを明らかにした。同年度に以上の内容を学会で報告するとともに、以上の内容をまとめた論文を公表した。歯周病関連細菌であるT.forsythiaの有するOmpA様蛋白質の分離精製、OmpA様蛋白質の糖鎖修飾とその宿主細胞への結合の関与を明らかにすることができたため。また、これらの成果を論文として公表したため。今年度は、歯周病関連細菌であるPorphyromonas gingivalisに着目し、同菌の有するOmpA様蛋白質が血清抵抗性に関与することを見出した。OmpA様蛋白質を欠失した場合には溶菌しLPSなどの菌体成分が放出され、その結果ヒト歯肉線維芽細胞、血管内皮細胞やマウスマクロファージにおける細胞応答を増強させることを見出した。以上の内容を学会で報告するとともに、以上の内容をまとめた論文を投稿中である。