hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
膵内分泌腫瘍におけるDAXX遺伝子の作用解明と薬物治療効果への関係

DAXX遺伝子の機能解析に先立ち、NETの予後への関連が示唆されているプロゲステロン受容体(PgR)に注目。NETにおいて臨床学的特徴の異なる、機能性腫瘍および非機能性腫瘍におけるPgRおよびインスリン産生能に焦点を絞り、研究を行った。機能性腫瘍の代表格であるインスリノーマでは、非機能性腫瘍とくらべ明らかにPgRの発現率が高いことが確認された。さらに非機能性腫瘍の中でも、免疫組織学的検討によってのみホルモン発現している腫瘍が存在し、これも有意差を持ってPgRの発現率が高いことを示せた。NETをホルモン分泌の種類によって分類することで、PgR発現と、腫瘍の臨床学的特徴を明らかにすることができた。本研究は、膵内分泌腫瘍(NET)においてDAXX遺伝子が、腫瘍肝転移時にあたえる影響を動物モデルで検討し、また各種薬剤への治療効果にどのように関与しているかを明らかにすることを主旨として計画された。初年度に当たる今年度は、DAXX遺伝子の機能解析に先立ち、NETの予後への関連性が示唆されているプロゲステロン受容体に注目し、この機能解析を進めた。プロゲステロン受容体は、NETで高率に発現し腫瘍増殖抑制を、正常膵ランゲルハンス島においてはインスリン産生抑制が報告されている。まず、当科で経験されたNET症例100例に対し、プロゲステロン受容体発現の有無によってグループ分類し、腫瘍における各種の膵内分泌由来ホルモンの発現、予後との相関について検証した。その結果、プロゲステロン受容体陽性検体において、β細胞由来ホルモンであるインスリンの共発現が認められた。一方、プロゲステロン受容体とNETの予後との相関であるが、我々の検体からは、両群間に病期の進行度、腫瘍径、リンパ節転移の有無に差はなく、その結果、プロゲステロン受容体発現の有無はNETの予後に相関しないことが分かった。このように、標的タンパク(あるいは遺伝子)の有無によるNETの特性を、臨床検体を用いた組織学的検証法で評価することは有用であると考えられ、この手法によりDAXXの発現によるNETの特性の一端を明らかにすることが可能になるのではないかと考えている。以上の結果を踏まえ、次年度以降のDAXX遺伝子の機能評価を進めていきたい。今年度はDAXX遺伝子の評価系を確立するために時間を要した。その結果、プロゲステロンレセプター陽性検体において、β細胞由来ホルモンであるインスリンの共発現が認められた。一方、プロゲステロンレセンプターとNETの予後との相関であるが、我々の検体からは、両群間に病期の進行度、腫瘍径、リンパ節転移の有無に差はなく、その結果、プロゲステロンレセプター発現の有無はNETの予後に相関しないことが分かった。標的タンパク(あるいは遺伝子)の有無によるNETの特性を、臨床検体を用いた組織学的検証法で評価することは有用であると考えられ、この手法によりDAXXの発現によるNETの特性の一端を明らかにすることが可能になるのではないかと考えている。本研究は、膵内分泌腫瘍(NET)においてDAXX遺伝子などが、腫瘍肝転移時にあたえる影響を動物モデルで検討し、また各種薬剤への治療効果にどのように関与しているかを明らかにすることを主旨として計画された。DAXX遺伝子の機能解析に先立ち、NETの予後への関連性が示唆されているプロゲステロン受容体に注目し、この機能解析を進めていた。本年度は、NETにおいて臨床学的特徴の異なる、機能性腫瘍および非機能性腫瘍におけるプロゲステロン受容体およびインスリン産生能に焦点を絞り、関連性を明らかにすべく、研究を行った。プロゲステロン受容体とホルモン産生の関連を確認していくと、機能性(ホルモン産生)腫瘍の代表格であるインスリノーマでは、非機能性腫瘍とくらべ明らかにプロゲステロン受容体の発現率が高いことが確認された。さらに非機能性腫瘍(臨床学的にはホルモンを産生していない腫瘍)のなかでも、免疫組織学的検討によってのみホルモン発現している腫瘍が存在し、インスリノーマほどではないものの、全くホルモン発現していない非機能性腫瘍と比べると、有意差をもってプロゲステロン受容体の発現率が高いことを示した。NETをホルモン分泌の種類によって分類することで、プロゲステロン受容体の発現と、腫瘍の臨床学的特徴を明らかにすることができた。今後、プロゲステロン受容体および各種ペプチドホルモン産生との関連およびpNETにおける内分泌的特徴獲得におけるプロゲステロン受容体の役割などについて検討していく。今回の研究結果を踏まえ、DAXXの機能解析を進める。具体的には当科の臨床検体にDAXXの免疫染色を行い、その有無により産生ホルモンや予後に差があるかを組織学的検討により検証する。また、MIN6などの膵内分泌腫瘍セルラインを用いた検証、動物モデルを使用した検証も来年度以降に進めていく予定である。膵神経内分泌腫瘍

今年度はDAXX遺伝子の評価系を確立するために時間を要し、次年度にDAXX遺伝子の機能解析を重点的に進める必要性から、次年度により多くの研究費をかけることとした。今回の研究結果を踏まえ、DAXXの機能解析を進める。具体的には当科の臨床検体にDAXXの免疫染色を行い、その有無により産生ホルモンや予後に差があるかを組織学的検討により検証する。また、MIN6などの膵内分泌腫瘍セルラインを用いた検証、動物モデルを使用した検証も来年度以降に進めていく予定である。
中間バリオン数密度領域での相構造の統一的解明と中性子星物理への応用

中性子星は、その高い密度や強い磁場、高速回転などの特異な性質により、古くから多くの研究者の関心の対象となってきた。この天体の性質の理解は、超新星爆発のメカニズムや金などの重い元素の誕生、重力波の発生、高密度素粒子の状態の解明につながる重要テーマである。今回申請者は素粒子理論の立場からこの課題に取り組み、星の質量と半径を説明する方程式や、星の作る磁場とカイラル対称性とよばれる素粒子の性質の関係、さらには星に暗黒物質という未知の粒子が捕獲される現象などの研究を行い、これらの成果を国内外の研究会や論文雑誌、また一般講演などの機会に発表した。平成25年度は、研究題目「中間バリオン数密度領域での相構造の統一的解明と中性子星物理への応用」に基づく研究計画として掲げた研究内容のうち、以下の2点と、それとはまた新たにもう1点の成果を挙げることができた。一つは前年度に挙げた成果である、ゲージ/重力対応を用いて得られた、中間バリオン数密度領域での核物質の状態方程式(equation of state)の中性子星への性質の解明への応用である。これは平成24年度に掲げていた目標のうち、未遂行であった課題であり、これについて中性子星の質量と半径の計算を行い、観測結果との比較を行った。次に強い磁場の環境下での有限温度クォーク物質の性質、特にカイラル対称性に着目した研究を行った。これ自身は直接研究題目に基づく内容ではないが、有限バリオン数密度に拡張することは容易で、かつ中性子星内部における強磁場の生成と関係する重要な課題である。最後に素粒子物理と核物理、天体物理にまたがる横断的課題として、中性子星における暗黒物質(dark matter)捕獲についての研究を行った。これは元々の研究計画には記載されていなかったが、申請者が中性子星についての研究を進めて行く中で、興味深い内容として注目した新たな課題である。これはイギリス・グラスゴーでの国際研究会Baryons2013において口頭発表され、その後プレプリントとして発表された。平成24年度は、研究題目「中間バリオン数密度領域での相構造の統一的解明と中性子星物理への応用」に基づく研究計画として掲げた3点のうち、以下の2点に関してその成果を挙げることができた。一つは中性子星内部に存在する可能性のあるクォーク物質が超伝導状態になった時に生じる、渦(vortex)形成とそのエネルギーの輸送を見積もることである。ここでは具体的にカラーフレーバーロックとよばれるクォークの超伝導状態を考え、その有効ラグランジアンを構成した上で散乱断面積を見積もった。散乱断面積を求めることで、クォーク物質のエネルギーが渦を通してどのように拡散するかを知ることができる。ここでの成果はイタリアの国際研究会QCD@Work2012で発表され、後にプロシーディングスに収められた。今後はここでの成果を中性子星に適用して、観測結果との比較などからクォーク物質の存在について知見を深めていくことを考えている。もう一つは状態方程式の研究で、ここではこれまで経験的に理解されていた、中間バリオン数密度領域での核物質の気相-液相転移(gas-liquid transition)を、ゲージ/重力対応とよばれる新たな手法を用いた解析を行った。具体的には、強い相互作用を記述する量子色力学(QCD)に双対(dual)な重力理論として酒井-杉本模型を考え、そこに現れるインスタントンとよばれる解を多粒子系に拡張し、そこでのエネルギー配位を調べた。その結果、気相-液相転移特有の密度の不連続な跳びを確かめることに成功した。今後はここでの解析をさらに高密度に拡張し、中性子星の質量や半径を求めることを考えている。平成26年度は、研究題目「中間バリオン数密度領域での相構造の統一的解明と中性子星物理への応用」に基づく研究計画として掲げた研究内容のうち、以下の1点と、それとはまた新たに今回の研究課題遂行の中で生じたテーマに関して成果を挙げることができた。ひとつはゲージ/重力対応、いわゆるホログラフィック原理を用いた、クォーク・ハドロン物質の相構造の解明である。これは今回の研究課題の中でももっとも中心的なものとなるが、ここでは特に「とじこめ」と「カイラル対称性」という2つの点に着目して解析を行った。より具体的には5次元の重力理論を考え、それが負の宇宙項の入った4次元の場の理論と等価であるというホログラフィック原理を用いて、QCDの物理量を解析した。直感的には負の宇宙項は負の真空エネルギーに相当し、それがQCDの非摂動的真空の役割を果たすと考えられる。ここではとじこめ-非とじこめ転移およびカイラル対称性回復の温度、中間子の質量スペクトルの温度変化などを考察した。我々の得た結果は、格子ゲージ理論による数値計算や、有効模型を用いた先行研究と比較することができる。一方、前年度から新たに開始した、中性子星における暗黒物質の捕獲についての研究をさらに押し進めた。

前年度に発表した結果は、定性的なものにとどまっていたが、今回暗黒物質と核子の相互作用の模型として具体的にはヒッグス交換模型を設定し、それによって先行研究とは異なる結果が得られる予測が立てられた。まだ国内学会の発表の段階で、これから論文として完成させる所存である。中性子星とクォーク・ハドロン物理24年度に残された課題について遂行できた点、25年度に掲げた内容に関係する成果および、そこから新たに派生した研究内容について既に一定の成果が挙がっている点から、おおむね順調に進展していると判断した。24年度に掲げた課題のうち2つについて、成果を発表することができ、残りの一つについてもその足がかりとなる成果を既に得ていることから、おおむね順調に進展していると判断した。24年度は国際研究会への参加や、九州内での共同研究を進めることにより、ほぼ期待通りの成果をおさめることができた。25年度に入ってすぐ海外の研究者との研究成果を発表し、いくつかの方面からの反響を既に得ている。これらのことから鑑みて、25年度も昨年度と同様に研究を進めていく形が良いと申請者は考えている。海外からの研究者の招聘を予定していたが、日程的な都合がつかなかった。そのため次年度に繰り越しの使用額が生じる結果となった。今年度は海外からの共同研究者の招聘を行いたいと計画している。その他、研究を進める上で必要な物品(計算機や書籍関係)を購入する計画がある。申請者の研究計画推進にとって一番重要なのは、研究交流による情報収集や研究打合せ、研究会や国際学会での研究発表である。その意味で25年度は今のところ2度の海外渡航を予定している。それに要する費用に研究費を使用することを計画している。
センサー機能のモーダルシフトによる触覚受容の病的変化のメカニズム

触→痛への応答変換に関与するセンサー分子群を探索し、μオピオイド、ペリフェラルベンゾジアゼピン受容体(PBR)、カゼインキナーゼIイプシロン(CKIε)がN型カルシウムチャネル活性化の下流に位置しモーダルシフトすることを明らかにした。さらにこれら分子群のモーダルシフトが、神経細胞の興奮性、および細胞内カルシウム濃度変化([Ca^<2+>]i)にどのような影響を及ぼすのか、これら分子群の阻害剤が認められた変化にどの様な影響を及ぼすのかを明らかにした。本研究は"触→痛"への応答変換に関与するセンサー分子群(伝達物質受容体、チャネル、トランスポーター、リン酸化酵素、脱リン酸化酵素など)の単離と、センサー機能のモーダルシフトによる触覚受容の病的変化のメカニズムを明らかにすることである。一方、これまでの予備実験から、脊髄と脳組織においては異なったメカニズム(異なったセンサー分子群のモーダルシフト)が働いていることが示唆されているので、スクリーニングは脊髄組織(脊髄と後根神経節)と脳組織(大脳皮質、中脳、延髄、視床)、の両方について行い両者の結果を比較検討するとともに、両システム間に相乗、あるいは相加効果があるのかを検討する。本研究の目的は"触→痛"への応答変換に関与するセンサー分子群(伝達物質受容体、チャネル、トランスポーター、リン酸化酵素、脱リン酸化酵素など)の単離と、センサー機能のモーダルシフトによる触覚受容の病的変化のメカニズムを明らかにすることである。本年度は、センサー機能のモーダルシフトを誘導する電位依存性Caチャネルの不活化の影響(BBRC,2006)、チャネル遺伝子への疾患変異導入の及ぼす影響(MCN,2006)、DNAマイクロアレイ解析より得られた候補分子の機能(EJP,2006)の検討を行った。脊髄標本のDNAマイクロアレイ解析の結果、ニューロステロイド合成系遺伝子の発現上昇が認められた。我々は昨年度グルココルチコイド受容体の働きに関して報告した(EJP,2005)。今年度は"触→痛"への応答変換に及ぼすプロゲステロン受容体およびエストロゲン受容体の影響の有無を明らかにするために、これら受容体に対する作用薬および拮抗薬を神経損傷モデルマウスの髄腔内へ投与することにより行動薬理学的に検討した。その結果、プロゲステロン受容体拮抗薬およびエストロゲン受容体作用薬に"触→痛"への応答変換を阻害する働きがあることが明らかとなった。さらにプロゲステロン受容体拮抗薬とエストロゲン受容体作用薬の同時投与により、相加的に阻害作用が強まることも明らかとなった。現在、その作用メカニズムを明らかにすることを目的に、神経損傷モデル動物から作製したスライス標本を用いて、プロゲステロン受容体拮抗薬やエストロゲン受容体作用薬の脊髄神経の興奮性に及ぼす影響を電位感受性色素を用いた膜電位変化の測定により解析している。また神経細胞の細胞内Ca濃度上昇に及ぼす影響に関しては細胞内Ca感受性色素を用いたCaイメージング法により検討を行っており、その成果に関しては次年度に報告したい。神経損傷モデルマウス脊髄標本のDNAマイクロアレイ解析の結果、末梢型ベンゾジアゼピン受容体(PBR)遺伝子の発現上昇が認められた。そこで神経損傷モデルマウスの髄腔内へPBR作用薬、拮抗薬を投与することによりPBRが神経損傷により誘導される"触→痛"への応答変換に影響を及ぼすかどうかを行動薬理学的に検討した。その結果PBR拮抗薬に"触→痛"への応答変換を阻害する働きがあることが明らかとなった。PBRはニューロステロイド合成系においてコレステロールをミトコンドリアへ輸送するトランスポーター分子であり、輸送されたコレステロールは代謝され最終的にアロプレグナノロン、テトラヒドロデオキシコルチコステロン(THDOC)が産生する。これら分子はGABA_A受容体を活性化することが知られている。通常GABA_A受容体は抑制性伝達に関与するが、神経因性疼痛時においてはカリウムークロール共役担体(KCC2)の発現低下による細胞内Cl-濃度の上昇によりGABA_A受容体が抑制性伝達に寄与できなくなる、さらには興奮性伝達に変換される可能性があるとの報告がなされた。以上のことからPBR発現上昇に伴なうニューロステロイド合成の促進がGABA_A受容体の活性化を誘導しそれにより"触→痛"への応答変換が引き起こされている可能性が示唆された。本年度はこの可能性の検討を含めPBRの発現上昇がどのようなメカニズムで"触→痛"への応答変換を引き起こしているのかを検討した。検討結果に関してはまだ詰めの段階で来年度早々に論文を投稿したいと考えている。

本研究の目的は"触→痛"への応答変換に関与するセンサー分子群の単離と、センサー機能のモーダルシフトによる触覚受容の病的変化のメカニズムを明らかにすることである。昨年度、末梢型ベンゾジアゼピン受容体(PBR)拮抗薬PK11195に"触→痛"への応答変換を阻害する働きがあることを明らかにし、本受容体活性化が神経因性疼痛の発症、維持に関与する可能性を示したがそのメカニズムに関しては不明であった。そこで今年度はこのメカニズムの解明を目標に、PBRの脊髄における発現様式の検討、本受容体が関与する種々のシグナル伝達系の下流分子の活性化、不活性化の影響を探索した。まず神経損傷(SNL)マウス脊髄におけるPBR蛋白の発現パターンを解析したところ、PBRは非損傷サイドにおいてその発現量は非常に低く、損傷サイドの脊髄において有意差の認められない程度のかすかな発現上昇を示すことが明らかとなった。一方、これまでの報告通り損傷サイドの脊髄においてミクログリアの著しい集積が認められた。PBRの生理機能として重要なのはコレステロールをミトコンドリアへと輸送するトランスポーター機能である。運ばれたコレステロールは代謝されプロゲステロンへと変換され、さらに代謝されるとGABA_A受容体のアゴニスト作用を持つアロプレグナノロンへと変換する。そこでPK11195による鎮痛効果がニューロステロイド合成の減少、それに伴う、プロゲステロン受容体あるいはGABA_A受容体活性化の低下によるものかどうかを検討した。その結果、プロゲステロンはPK11195による鎮痛効果に何の影響も及ぼさないことが明らかとなった。それに対しアロプレグナノロンは、PK11195による機械性アロディニアの軽減には何ら影響を与えなかったが、熱性痛覚過敏の軽減作用を抑制した。したがってGABA_A受容体活性化の抑制作用がPK11195による神経因性疼痛抑制作用において部分的に貢献していることが示唆された。神経因性疼痛は様々な神経の傷害や病的変化により発症し、アロディニア、痛覚過敏、自発痛などの臨床症状を特徴とする難治性慢性疼痛である。発症および維持に関与する分子メカニズムに関しては現在も未解明な点が多く、新規の薬理学的対処法の開発が望まれている。我々は先の研究で、神経型(N型)Caチャネルノックアウトマウスでは神経因性疼痛が著明に減弱していることを見出した。そこで野生型(Ca_v2.2^<+/+>)および変異型(Ca_v2.2^<-/->)マウスの脊髄における遺伝子発現を比較することで神経因性疼痛に関与する分子を選別し、その1つとしてセリン/スレオニンリン酸化酵素の一種であるCK1ε(カゼインキナーゼ1イプシロン)が、マウスの神経因性疼痛に関与する分子であることを新たに見出した。CK1は哺乳類ゲノムに存在する8群の主要なタンパク質リン酸化酵素群の内の1群を形成し、分化やサーカディアンリズムなど、様々なシグナル伝達に関連することが報告されている。哺乳類では現在7種のアイソフォーム(α,β,γ13,δ,ε)の存在が知られているが、痛覚を含めた体性感覚経路における機能に関する報告はこれまでなされていない。
卓球サービスの球威を探る：ボールの回転と打球フォームに着目して

本研究では,卓球サービスについて,ボールの回転と打球フォームに着目することにより,球威を決定する要素を検討した.具体的には,世界レベル,日本レベル,日本地方レベルの各大会を対象に,サービス回転数,サービス動作,ラリー中の打球回数などの分析を行った.その結果から,卓球サービスの回転に関する威力の大小は,単なるボール回転数の大小によって決定されるのではなく,回転調節時におけるフェイント動作の巧拙などとも関連していることが示唆された.卓球のラリーでは,相手打球の回転の影響を強く受ける.そこで本研究は,ボールの回転が特に重要とされている卓球サービスに関して,世界トップレベルから日本の地方レベルまでの大会における試合を対象に,ボールの回転と打球フォームの分析を行ない,それらの結果と対戦選手のレシーブの成否などとの関係から,球威を決定する要素を明らかにしようというものである.この研究により,「ボールの回転により球威を増す」ことが必要とされる場面の多い卓球について,ボールの回転からみた競技特性の解明が進むこと,新たな技術の創造のための有効な知見が得られること,などが期待できる.3年計画の2年目にあたる平成25年度は,平成24年度と同様に,以下の撮影と分析を行なった.1)撮影世界トップレベル,日本トップレベル,および日本地方レベルの各大会において撮影を実施した.1試合の撮影には,高速度ビデオカメラ(1000fps)1台と家庭用ビデオカメラ(30fps)1台を用いた.高速度ビデオカメラの撮影対象は,男女それぞれの各大会の上位選手が,カメラに向かってプレーしている時のサービスとした.高速度ビデオカメラでは,ボールに刻印されている製造会社のマークの動きと,選手の動きが分析できる映像が得られるようにした.家庭用ビデオカメラでは,試合全体が観察できる映像が得られるようにした.2)分析平成25年度撮影の映像について,ボールに刻印されているマークの動きから,ボールの回転数を測定した.その他,本研究において実戦場面から得られるデータ数には限りがあるため,それらを相対的に評価する目的で,関連研究のデータから次の分析を行なった.(1)国際大会におけるサービスの回転数.(2)実験場面におけるサービスの回転数と動作.(3)多数の試合におけるラリー中の打球回数からみたサービスの威力.これらについては,成果の一部を公開した.本研究では,卓球サービスについて,ボールの回転と打球フォームに着目することにより,球威を決定する要素を検討した.具体的には,世界レベル,日本レベル,日本地方レベルの各大会を対象に,サービス回転数,サービス動作,ラリー中の打球回数などの分析を行った.その結果から,卓球サービスの回転に関する威力の大小は,単なるボール回転数の大小によって決定されるのではなく,回転調節時におけるフェイント動作の巧拙などとも関連していることが示唆された.卓球のラリーでは,相手打球の回転の影響を強く受ける.しかし,これまでのところ,実際の大会の試合において,「ボールの回転はどの程度であるか」,「選手はどのようにボールの回転を操作しているか」などを明らかにした研究はあまりみられない.そこで本研究は,ボールの回転が特に重要とされている卓球サービスに関して,世界トップレベルから日本の地方レベルまでの大会における試合を対象に,ボールの回転と打球フォームの分析を行ない,それらの結果と対戦選手のレシーブの成否などとの関係から,球威を決定する要素を明らかにしようというものである.この研究により,「ボールの回転により球威を増す」ことが必要とされる場面の多い卓球について,ボールの回転からみた競技特性の解明が進むこと,新たな技術の創造のための有効な知見が得られること,などが期待できる.3年計画の1年目にあたる平成24年度は,以下の撮影と分析を行なった.1)撮影世界トップレベル,日本トップレベル,および日本地方レベルの各大会において撮影を実施した.1試合の撮影には,高速度ビデオカメラ(1000fps)1台と家庭用ビデオカメラ(30fps)1台を用いた.高速度カメラの撮影対象は,男女それぞれの上位8シードの選手が,カメラに向かってプレーしている時のサービスとした.高速度ビデオカメラでは,ボールに刻印されている製造会社のマークの動きと,選手の動きが分析できる映像が得られるようにした.家庭用ビデオカメラでは,試合全体が観察できる映像が得られるようにした.2)分析全撮影映像について,ボールに刻印されているマークの動きから,ボールの回転数を測定した.試合中のレシーブの成否などからサービスの威力を評価するため,卓球のゲーム分析を実施した.卓球のラリーでは,相手打球の回転の影響を強く受ける.そこで本研究は,ボールの回転が特に重要とされている卓球サービスに関して,世界トップレベルから日本地方レベルまでの大会における試合を対象に,ボールの回転と打球フォームの分析を行ない,それらの結果と対戦選手のレシーブの成否などとの関係から,球威を決定する要素を明らかにしようというものである.3年計画の最終年にあたる平成26年度は,以下の撮影と分析を行なった.1)撮影平成25年度までに十分なデータが得られなかった日本トップレベルおよび日本地方レベルの各大会において,前年度までと同じ方法で撮影を実施した.2)分析ボールのマークの動きから,サービス回転数を測定した.3年間の撮影データの分析により明らかにされたサービス回転数について,各競技レベルで,10以上20rps未満,20以上30rps未満...と,10rpsごとに振り分け,各回転数群のサービス数を特定した.さらに,競技レベルごとのサービスエース時のサービス回転数などを検討した.その他,ラリー中の打球回数について,本研究の結果を相対的に評価するために,ロンドンオリンピックの試合を対象とした分析を行なった.

本研究の撮影映像を分析した結果,サービス数の最も多かった回転数群は,いずれの競技レベルにおいても40以上50rps未満であった.サービス回転数の最大値は,世界トップレベルと日本トップレベルの80.0rpsであり,日本地方レベルでは66.7rpsであった.さらに,サービスエースの発生する回転数などから,卓球サービスの回転と球威の関係についての検討がなされた.試合中のサービスにおけるフェイント動作に関しては,カメラアングルの関係などで十分な検討には至らなかった.これについては,今後,実験的検討が必要であると考えられた.スポーツバイオメカニクス平成25年度に予定していた実験を実施し,予定していたデータ収集を全て行なった.さらに,それらの多くに関して,ボールの回転数を明らかにした.残された一部のデータについては,平成26年度に分析する予定である.本研究において実戦場面から得られるデータ数には限りがあるため,それらを相対的に評価する目的で,これまでの関連研究から,次の3点の分析の必要性が認められた.(1)国際大会におけるサービスの回転数.(2)実験場面におけるサービスの回転数と動作.(3)多数の試合におけるラリー中の打球回数からみたサービスの威力.これらについて,大半の分析は終了した.以上のように,当初予定していたデータの収集と分析に加え,新たに生じたいくつかの課題の検討を行ないながら,「卓球の球威を探る」という研究をほぼ予定通り進めることができていることから,「おおむね順調に進展している」と判断した.平成24年度に予定していた実験を全て実施し,データ収集を行なった.さらに,全データに関して,ボールの回転数の測定を終了した.しかし,打球動作の質的分析に関しては一部を残した.これは,平成25年度に分析する予定である.平成24年度の分析対象試合に関して,サービスの威力を対戦者のレシーブの成否などで評価するための基礎データが十分でないことがわかった.そこで,分析対象以外の卓球の150試合程度を対象にゲーム分析を行ない,サービスの威力をレシーブの成否などから評価するための基礎データを収集した.これについては,近く成果を公開する予定である.3年計画の最終年にあたる平成26年度には,これまでに十分なデータの得られていない日本トップレベルおよび日本地方レベルの各大会において撮影を実施する.撮影方法はこれまでと同じとする.撮影は,これまでと合わせて,各競技レベルにおいて男女8名以上,1名について20本程度のサービスの映像データが得られるようにする.また,平成25年度までの研究でその必要性が示唆されたこととして,これまでの関連研究から,1)国際大会におけるサービスの回転数,(2)実験場面におけるサービスの回転数と動作,
仕様の意味的類似性判定とそのソフトウェア自動合成への応用に関する研究

高信頼性ソフトウェアの開発工程は以下の二つに分けることができる.1.形式的仕様の獲得フェーズ2.仕様からプログラムへの自動変換フェーズ2.に関して,仕様を数学的に与える論理的手法や,実行効率の改善のためのプログラム変換などの手法が試みられているが,その対象はトイプログラムの域を出ていない.また1.については,ほとんど研究されていない.一方,ソフトウェアの再利用は,開発の効率化のキ-である.再利用をできるだけ高い抽象レベルで行うために,与えられた仕様と類似した仕様を部品データベースに保存されている既存のソフトウェア部品の仕様群から柔軟に検索する必要がある.そこで,我々は以下のような研究を行った.まず,形式的仕様の獲得手法の研究として,代数的仕様の類似性に基づくソフトウェア再利用に関する研究を行った.ここでは,仕様に基づく再利用モデルを提案し,代数的仕様の類似性を定義し,類似性に基づく検索方法を提案した.さらに,仕様の差分を抽出する方法を提案した.仕様からプログラムへの自動変換に関する研究として,仕様と対応づけられたプログラムの再利用法を提案し,そのプロトタイプシステムを実装した.また,自動変換を支援するための研究として,仕様とプログラムの対応のパターンを調べ,そのパターンを用いたプログラム生成法の研究を行った.また,ソフトウェア部品の研究として,プログラム部品抽出手法の研究,およびプログラムパターンを蓄積,応用するための研究を行った.また,関連研究として,代数的仕様の効率的な検証のための項書換え系に関する研究,細粒度のソフトウェア部品を扱うことのできるリポジトリの研究などを行った.高信頼性ソフトウェアの開発工程は以下の二つに分けることができる.1.形式的仕様の獲得フェーズ2.仕様からプログラムへの自動変換フェーズ2.に関して,仕様を数学的に与える論理的手法や,実行効率の改善のためのプログラム変換などの手法が試みられているが,その対象はトイプログラムの域を出ていない.また1.については,ほとんど研究されていない.一方,ソフトウェアの再利用は,開発の効率化のキ-である.再利用をできるだけ高い抽象レベルで行うために,与えられた仕様と類似した仕様を部品データベースに保存されている既存のソフトウェア部品の仕様群から柔軟に検索する必要がある.そこで,我々は以下のような研究を行った.まず,形式的仕様の獲得手法の研究として,代数的仕様の類似性に基づくソフトウェア再利用に関する研究を行った.ここでは,仕様に基づく再利用モデルを提案し,代数的仕様の類似性を定義し,類似性に基づく検索方法を提案した.さらに,仕様の差分を抽出する方法を提案した.仕様からプログラムへの自動変換に関する研究として,仕様と対応づけられたプログラムの再利用法を提案し,そのプロトタイプシステムを実装した.また,自動変換を支援するための研究として,仕様とプログラムの対応のパターンを調べ,そのパターンを用いたプログラム生成法の研究を行った.また,ソフトウェア部品の研究として,プログラム部品抽出手法の研究,およびプログラムパターンを蓄積,応用するための研究を行った.また,関連研究として,代数的仕様の効率的な検証のための項書換え系に関する研究,細粒度のソフトウェア部品を扱うことのできるリポジトリの研究などを行った.平成7年度の計画は,部品の類似性の分類,性質,ならびに,その仕様定義の方法について研究するとともに,各種手法の統合化のためのデータ・アーキテクチャ(サブシステム群が共通に利用するデータ構造)の研究を行うことであった.その詳細を以下に示す.(1)形式的仕様の獲得手法の研究:(1-1)類似性の形式的定義の研究,(1-2)類似性評価方式の研究,(1-3)代数的仕様の実現正当性の検証支援系の研究(2)仕様からプログラムへの自動変換の研究:(2-1)データアーキテクチャの検討と設計,(2-2)ソフトウェア部品データベースの研究項目(1-1,2)に関しては,論文『形式的仕様を用いた再利用モデル』に発表した.そこでは,形式的仕様として代数的仕様を用い,仕様とプログラムの組を部品とした再利用モデルと仕様に基づく検索と差分抽出,およびプログラムへの適用からなる再利用法を提案し,再利用法の適用例を示した.適用例では約60%の既存プログラムが再利用でき,自動生成されたプログラムと比較して効率の良いプログラムが得られことも判明した.項目(1-3)に関しては,項集合書換え系に関する研究を進めた.項目(2-1,2)に関する研究として,細粒度リポジトリに関する研究を進めた.その成果に関しては,『細粒度リポジトリに基づいたツール・プラットフォームとその応用』などで発表した.平成8年度の計画を以下に示す.(1).類似性評価系を組み込んだソフトウェア部品データベースのプロトタイプの作成(2)ある程度の規模の部品データを上記プロトタイプデータベースに蓄積し,登録,検索,使用定義などの作業に関する問題点を探るより知的なソフトウェア部品データベースに関する研究として,日本ソフトウェア科学会FOSE'96において発表した「プログラム理解のための依存関係表示ツール」および「プログラム動作理解のための抽象実行系」などの研究を進めた.どちらも,従来のCASEツールが提供していた一般的なビューよりも高度で柔軟なビューをCASKツール作成者に提供するためのモデルとその実現であるAIP関する研究である.ソフトウェア部品データに関する研究として既存のソフトウェアからソフトウェアコンポーネントを抽出するための基礎的な調査を行った.具体的には4.4BSD-Liteを対象としたUNIX APIに関するコーパスのプロトタイプを作成した.コーパスを作成するためにUNIX APIのngram作成コマンド,およびUNIX APIの組み合わせパターンの検索コマンドの実現方法を検討し試作した.また,約33万行の4.4BSD-Liteソースプログラムから比較的よく使用される約50個のプログラム部品を抽出した.

また,最近注目を集めているJava言語を対象とした,ソフトウェアデータベースに関する研究として「Java言語のための細粒度リポジトリ」を行うとともに,我々の研究の全体像を情報処理学会のワークショップにおいて「柔らかなソフトウェア部品と新工法」として示した.高信頼性ソフトウェアの開発工程を形式的仕様の獲得フェーズと仕様からプログラムへの自動変換フェーズに分けて考え,実用規模の高信頼性ソフトウェアを開発するための研究を行ってきた.前年までに,形式的仕様の獲得手法の研究として,代数的仕様の類似性に基づいて,与えられた仕様と類似した仕様を部品データベースに保存されている既存のソフトウェア部品の仕様群から柔軟に検索するための研究を行った.そして,仕様からプログラムへの自動変換に関する研究として,部品データベースに蓄えられた仕様と対応づけられたプログラムの再利用法を提案し,そのプロトタイプシステムを実装した.また,既存のソフトウェアを利用して仕様からプログラムへの自動変換を行うには,柔軟なソフトウェア部品をデータベースに蓄える必要があるが,そのための細粒度ソフトウェアリポジトリに関する研究を行った.本年はこれまでの研究成果をふまえ,仕様からプログラムへの自動変換に関する研究を中心に行ってきた.まず,自動変換を支援するための研究として,仕様とプログラムの対応のパターンを調べ,そのパターンを用いたプログラム生成法の研究と既存のソフトウェアからプログラムパターンを抽出,蓄積し,応用するための研究を行った.また,既存のソフトウェアからプログラム部品を抽出する方法の研究を行った.また,既存のソフトウェア部品を与えられた仕様に適合させるための変更法を関する研究を行った.また,関連研究として,代数的仕様の効率的な検証のための項書換え系に関する研究やソフトウェア部品の解析に関する研究などを行った.
顆粒層細胞による卵核胞期(GV期)ウシ卵の染色体凝集への影響

タンパク合成阻害条件下で起こる卵核胞期(GV期)ウシ卵の染色体凝集は,顆粒層細胞を介した卵細胞内cAMP濃度の増加に伴うcAMP依存型タンパクリン酸化酵素(PK-A)の活性化によって抑制される。本研究は,GV期ウシ卵の卵核胞内染色体凝集過程を制御しているPK-A活性が成熟促進因子(MPF)の活性化に関与しているか否かを検討した。糸状染色体を有するGV期卵と凝集染色体を有するGV期卵のMPF構成タンパクであるp34cdc2キナーゼのリン酸化状態の変化をウエスタンブロッティング法により比較したところ,糸状染色体を有するGV期卵におけるp34cdc2キナーゼのSDS-PAGE上の移動度は,凝集染色体を有するGV期卵のそれと同じであつた。したがって,GV期ウシ卵の卵核胞内染色体凝集にp34cdc2キナーゼの脱リン酸化は関与していないと考えられた。一方,糸状染色体を有するGV期卵と凝集染色体を有するGV期卵のヒストンHlキナーゼ活性を液体シンチレーションカウンターを用いてそれぞれ測定したところ,凝集染色体を有するGV期卵のヒストンHlキナーゼ活性(65.4fmol/h/oocyte)が,糸状染色体を有するGV期卵のそれ(46.8fmol/h/oocyte)より有意に高かった。このことから,活性型ヒストンHlキナーゼがGVBD誘起前のウシ卵の染色体凝集に関わっていることが明らかとなった。以上の結果から,GV期ウシ卵におけるPK-A活性の低下はp34cdc2キナーゼの脱リン酸化と関係しない系でヒストンHlキナーゼ活性を増加させ,卵核胞内の染色体凝集を惹起させることが明確になった。
ショウジョウバエ・ムコ多糖代謝異常症モデルを用いたヘパラン硫酸分解の意義の解明

ヘパラン硫酸プロテオグリカン(HSPG)はヘパラン硫酸(HS)を側鎖にもつ糖蛋白質であり、様々な分子と相互作用することで多くの生理機能を調節する。一方、ヒトにおいてリソソームに局在するHS分解酵素の欠損は、様々な発達異常を伴うムコ多糖代謝異常症を引き起こす。本研究では、ムコ多糖代謝異常症の疾患モデルとしてショウジョウバエを用い、発生過程におけるHSの分解の役割を調べた。HS分解酵素の一つであるイズロニダーゼの機能に注目し解析した結果、イズロニダーゼの機能減少はBMPシグナルの低下を引き起こし、翅の形態異常を引き起こすことが分かった。HSPGはコア蛋白質にHSが共有結合した糖蛋白質であり、細胞膜表面の構成分子として細胞増殖・分化、細胞接着などの様々な現象に関与することが知られている。HSPGがこの様な多彩な機能を示す一つの原因は、HS鎖が非常に多くの蛋白質と結合し、それらの機能を調節するためだと考えられている。一方、HS鎖は最終的にリソソームで分解されるが、ヒトにおいてHS鎖の分解に異常をきたすと骨格異常や精神発達遅滞を伴うムコ多糖代謝異常症が発症することが知られている。HS鎖の分解は多数の特異的なグリコシダーゼ及びスルファターゼが、非還元末端から順次分解反応を触媒することによって進行する。そのためこれらのHS分解酵素が欠損すると、HS鎖の分解が途中で停止しリソソームに蓄積するため、リソソームが肥大することが知られている。このようにHS鎖の分解は発生過程において極めて重要な働きをするが、ムコ多糖代謝異常症で見られる骨格異常や精神発達遅滞がどの様な分子メカニズムにより発症するのか全く分かっていない。そこで本研究では、ムコ多糖代謝異常症の新たな疾患モデルとしてショウジョウバエを用い、発生過程におけるHSの分解の意義を明らかにすることを目標としている。平成26年度の解析の結果、HS分解酵素の一つであるイズロニダーゼをノックダウンするとGPIアンカー型HSPGであるDlpの細胞膜表面におけるレベルが減少し、BMPのシグナル活性(リン酸化Smadのレベル)が低下する結果、翅の発生に異常をきたすことが判明した。この結果はHSの代謝分解が細胞膜表面のHSPGの機能を調節することを示唆するものである。したがって、今後解析を進めることでHSの分解によるHSPG機能調節の詳細な分子機構が明らかになる可能性は高いと考えられる。ヘパラン硫酸プロテオグリカンは細胞膜表面及び細胞外マトリックスの主要な構成分子である。この分子は共有結合しているヘパラン硫酸鎖を介して様々な細胞増殖因子や細胞接着分子等と結合し、それらの機能を調節することが知られている。ヘパラン硫酸が多様な分子と相互作用する一つの要因は、合成過程においてゴルジ体に局在する様々なエピメル化酵素及び硫酸転移酵素による修飾を受け、極めて多様な構造を有するためだと考えられている。一方、ヘパラン硫酸はリソソームにおいて、多数のグリコシダーゼ及びスルファターゼによって非還元末端から分解される。ヒトにおいてこれらの酵素の異常はヘパラン硫酸の分解に異常をきたし、骨格異常や精神発達遅滞を伴うムコ多糖代謝異常症を引き起こすことが知られている。しかしながらこれらの発達異常がどのような分子メカニズムにより引き起こされるのかは未だ分かっていない。そこで本研究ではモデル生物であるショウジョウバエを用いることで、発生過程におけるヘパラン硫酸の分解の役割を調べた。平成27年度はヘパラン硫酸分解酵素の一つであるイズロニダーゼのWntシグナルにおける機能を解析した。ヘパラン硫酸分解酵素の生理的役割を調べるためにイズロニダーゼ欠失変異体及びノックダウン個体を用いて解析した。平成26年度において我々はイズロニダーゼの異常がBMPシグナルの低下を引き起こすことを見出した。一方、ヘパラン硫酸プロテオグリカンはBMP以外にもWntなどのシグナル活性を調節することが知られている。そこでイズロニダーゼの異常がWnt変異体に類似した表現型を示すのか成虫翅を中心に調べたが、明らかな形態異常は観察されなかった。以上の結果から、ヘパラン硫酸の分解はある特定のシグナル伝達において重要な役割を有することが示唆された。ヘパラン硫酸プロテオグリカンはコア蛋白質にヘパラン硫酸鎖が共有結合した糖タンパク質であり、細胞膜表面及び細胞外基質に存在する。ヘパラン硫酸プロテオグリカンは、ヘパラン硫酸鎖を介して分泌性の細胞増殖因子や細胞外基質分子などの多様な分子と相互作用することで、それらの活性を調節する。この様なヘパラン硫酸プロテオグリカンの多彩な機能はヘパラン硫酸の微細構造を形作るヘパラン硫酸修飾酵素によって調節されると考えられている。一方、ヘパラン硫酸はリソソームにおいて、多種類のグリコシダーゼ及びスルファターゼによって非還元末端から分解される。重要なことに、ヒトにおいてこれらの分解酵素の異常は骨格異常や精神遅滞を伴うムコ多糖代謝異常症を引き起こすことが知られている。以上のことから、ヘパラン硫酸の分解過程は生体内において極めて重要であることは分かっているが、分解酵素の異常がどの様なメカニズムにより発達異常を引き起こすのかは未だ不明である。そこで、本研究ではムコ多糖代謝異常症のモデルとしてショウジョウバエを用いて解析を行っている。これまでヘパラン硫酸分解酵素の一つであるイズロニダーゼの機能に注目し解析を行った結果、イズロニダーゼの機能減少がBMPシグナルの低下を引き起こし、翅の形態異常を引き起こすことを見出している。

そこで平成28年度では、イズロニダーゼがどの様にBMPシグナルを調節するのか詳細な解析を行った。その結果、イズロニダーゼの機能減少個体ではヘパラン硫酸プロテオグリカンのコア蛋白質の減少により発生異常が起きる可能性が考えられた。生体内におけるヘパラン硫酸分解酵素の役割を調べるため、イズロニダーゼトランスジェニックRNAi個体を用いて解析を行った。これまでの我々の解析から、イズロニダーゼRNAi個体ではコア蛋白質であるDlpのレベルが減少し、BMPのシグナル活性が低下することが分かっている。そこでイズロニダーゼの機能減少によるBMPシグナルの低下が、Dlpによって引き起こされた可能性を調べた。イズロニダーゼRNAi個体においてDlpの過剰発現を行ったところ、BMPシグナルの活性及び翅脈の形態異常が部分的に回復した。以上の結果から、翅の発生においてイズロニダーゼは細胞膜表面のDlpのレベルを調節することでBMPシグナルを調節することが示唆された。ヘパラン硫酸プロテオグリカンは、コアタンパク質にヘパラン硫酸鎖が共有結合した分子であり、細胞膜表面および細胞外基質に局在する。ヘパラン硫酸プロテオグリカンはヘパラン硫酸鎖を介して様々な細胞増殖因子や細胞接着因子等の分子と相互作用することで多くの生理現象を調節している。このようなヘパラン硫酸の多様な機能は、ヘパラン硫酸がゴルジ体において複数のヘパラン硫酸修飾酵素による修飾を受け、極めて多彩な微細構造をもつためだと考えられている。一方、細胞膜表面に輸送されたヘパラン硫酸プロテオグリカンは最終的にリソソームに移行し、多種類のグリコシダーゼ及びスルファターゼによってヘパラン硫酸の非還元末端から分解される。重要なことに、ヒトにおいてこれらの分解酵素の異常は骨格異常や精神遅滞などを伴うムコ多糖代謝異常症を引き起こすことが知られている。しかしながら、これらの疾患がリソソームの機能異常により引き起こされるのか、もしくはヘパラン硫酸の蓄積によるシグナル活性の異常により引き起こされるのか、発症の直接的な原因はよく分かっていない。そこで本研究では、遺伝学的手法が容易なショウジョウバエを用いることでムコ多糖代謝モデルハエの確立と疾患発症のメカニズムの解明を目指している。特に平成29年度はヘパラン硫酸分解酵素の一つであるイズロニダーゼに注目し、イズロニダーゼの機能減少が引き起こす発生異常の解析とシグナル活性の異常を見出した。ヘパラン硫酸プロテオグリカン(HSPG)はヘパラン硫酸(HS)を側鎖にもつ糖蛋白質であり、様々な分子と相互作用することで多くの生理機能を調節する。一方、ヒトにおいてリソソームに局在するHS分解酵素の欠損は、様々な発達異常を伴うムコ多糖代謝異常症を引き起こす。本研究では、ムコ多糖代謝異常症の疾患モデルとしてショウジョウバエを用い、発生過程におけるHSの分解の役割を調べた。HS分解酵素の一つであるイズロニダーゼの機能に注目し解析した結果、イズロニダーゼの機能減少はBMPシグナルの低下を引き起こし、翅の形態異常を引き起こすことが分かった。
蒸発分子の空間分布に関する研究

鉛直に置いた2二次元るつぼから蒸発した分子の無限遠方における飛行方向をあらわす空間分布(蒸発源を点源とみなした時の分布)を,直接シミュレーション・モンテカルロ法を用いて詳細に調べ,空間分布におよぼすクヌーセン数および液面深さの影響を明らかにした.分子の流れは,クヌーセン数が大きくなるにつれコリメートされ,分子線束はるつぼの中心軸方向に集中してくる.同様な現象は,液面深さを増大した時にも見られた.また,るつぼとるつぼに垂直に置かれた基板との距離がるつぼの半径の20倍以上の時,得られた空間分布を使って基板上に成形される薄膜の厚み分布を,かなり良い精度で予測できることを示した.同様な計算を軸対称円筒型るつぼに対しても実施した.さらに,得られた空間分布から,基板の位置や向きをいろいろ変えた時の基板上の薄膜分布を,希薄気体流シミュレーション用アニメーションシステムのカラーディスプレイ上に描かせるソフトウェアを開発した.今後,蒸発分子の空間分布を実験的に測定し,直接シミュレーション・モンテカルロ法で求めた結果と比較することにより,計算による薄膜分布の予測の正確さを実験的に実施することを計画している.鉛直に置いた2二次元るつぼから蒸発した分子の無限遠方における飛行方向をあらわす空間分布(蒸発源を点源とみなした時の分布)を,直接シミュレーション・モンテカルロ法を用いて詳細に調べ,空間分布におよぼすクヌーセン数および液面深さの影響を明らかにした.分子の流れは,クヌーセン数が大きくなるにつれコリメートされ,分子線束はるつぼの中心軸方向に集中してくる.同様な現象は,液面深さを増大した時にも見られた.また,るつぼとるつぼに垂直に置かれた基板との距離がるつぼの半径の20倍以上の時,得られた空間分布を使って基板上に成形される薄膜の厚み分布を,かなり良い精度で予測できることを示した.同様な計算を軸対称円筒型るつぼに対しても実施した.さらに,得られた空間分布から,基板の位置や向きをいろいろ変えた時の基板上の薄膜分布を,希薄気体流シミュレーション用アニメーションシステムのカラーディスプレイ上に描かせるソフトウェアを開発した.今後,蒸発分子の空間分布を実験的に測定し,直接シミュレーション・モンテカルロ法で求めた結果と比較することにより,計算による薄膜分布の予測の正確さを実験的に実施することを計画している.
１ステップ型接着システムの臨床的スミア層溶解能に基づく分類と短・長期的接着性能

1ステップ型接着システムを臨床的な条件下で作製した2種のスミア層溶解能を指標に分類するとともに、それらの短長期的接着性能を検討した。その結果、当初の目的の一つであった臨床的スミア層溶解能を指標にした1ステップ型接着システムの分類は困難であったが、近年頻繁に臨床応用されている1ステップ型接着システムは、スミア層によっては長期的に接着強さが有意に減少するものもあることから、その応用には使用するバーの選択などに注意することが肝要であることが示唆された。H22年度は、まず各種1ステップ接着システムの臨床的スミヤー層溶解能を走査型電子顕微鏡(SEM)にて検討した。具体的には、健全ヒト抜去大臼歯歯冠部を水平に切断してダイヤモンドポイント(レギュラー)および耐水研磨紙(#2000)を用いて、可及的平坦な2種の被着研削象牙質面を得た。この被着面に対し、Clearfil Tri-S Bond(クラレメディカル、S3)、Absolute 2(デンツプライ三金、A2)、Hybrid Coat II(サンメディカル、HC)、G-BOND PLUS(GC、GP)、BOND FORCE(トクヤマデンタル、BF)、およびBeauti Bond(SHOFU、BB)の1ステップ型接着システムを用いて、それぞれ指示書どおりに処理した後、光照射せず、ただちにアセトン洗浄し、脱水乾燥を行った。これら試料の処理面および割断面をSEM観察した。S3においては、レギュラー研削象牙質面表面はスミヤー層で覆われており、細管部のひび割れ様の像が認められた。割断面の象牙細管はスミヤーで埋まり、細管内にはスミヤープラグが認められた。これに対し、#2000研削象牙質表面ではスミヤー層は脱灰され、象牙細管が観察されたが、割断面の細管中にはスミヤープラグが残存していた。同様の像が、HC、GP、BF、およびBBのレギュラーおよび#2000研削象牙質の表面および割断面においても観察された。一方ABにおいては、レギュラーおよび#2000いずれの研削象牙質表面においてもスミヤー層は除去され、象牙細管は開口し、スミヤープラグは認められなかった。特に細管開口部が漏斗状に広がっており、管周象牙質が脱灰されていた。以上の結果から、今回使用した接着システムの中で、いずれの研削面においてもA2が最も強いスミヤー層溶解能を持つことが示唆された。これは、A2が特に強い酸性度を持つことによると考えられた。H23年度は、各種1ステップ接着システムの微小引張り接着強さ測定と、臨床的スミア層溶解能の透過型電子顕微鏡(TEM)による観察を行った。1.接着強さの測定健全ヒト抜去大臼歯歯冠部を水平に切断し、2種の臨床的スミア層を産生するためダイヤモンドポイント(レギュラー)および耐水研磨紙(#2000)を用いて、可及的平坦な2種の被着研削象牙質面を得た。この被着面に対し、Clearfil Tri-S Bond(S3)、Hybrid Coat II(HC)、Beauti Bond(BB)、BOND FORCE(BF)、Absolute2(AB)、およびG-BOND PLUS(GP)の接着システムを用いて、それぞれ指示書どおりに処理した後、通法に従い微小引張り試験を行った。その結果、S3ではレギュラー研削面に対する接着強さは約20MPaであったが、#2000研削面に対しては約40MPaと有意に高い値を示した。しかしその他のシステムでは、いずれも接着強さは約20-30MPaで、研削面間で有意差は認められなかった。これはS3の酸性度が他と比較し高いためと考えられた。2.TEM観察H22年度にスミア層の溶解能を検討するために表面をSEM観察した試料を用い、通法に従いTEM観察した。その結果、ABの#2000およびレギュラーいずれの研削面においても、蒸着したAg-Pd粒子層の下部にアパタイトが脱灰したコラーゲン線維網と思われる層が見られた。また象牙細管開口部は漏斗状に広がっていた。BBでは、レギュラー研削面の方がスミア層が残存していると思われる像が観察され、また細管中にはスミアプラグが認められた。一方S3では、いずれの面においてもスミア層の存在は認められず、更なる詳細な検討が必要と思われた。現在TEM観察は継続中であり、H24年度も引き続き行う予定である。H25年度は、前年度から行っていたサーマルサイクリング負荷試験(TC)が6月に終了したので、それらの試料について微小引張り接着試験と透過型電子顕微鏡(TEM)観察を行った。1.TC後試料の微小引張り接着試験ヒト抜去健全大臼歯歯