hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
乳癌・大腸癌の浸潤・転移を規定する腫瘍間質線維芽細胞・細血管内皮の時性解析

上記の二つの検討は腫瘍間質線維芽細胞、リンパ管内侵入腫瘍塞栓形成腫瘍成分が乳管癌の浸潤・転移において重要な役割を担っていることを本研究により初めて明らかにしたものである。浸潤性乳管癌(Invasive ductal carcinoma, IDC)巣内線維化巣(Fibrotic focus, FF)を構成する線維芽細胞の増殖能が、IDC患者の予後を推測する上で非常に重要な予後因子となることを後ろ向き検討により証明した。今回さらに439例のIDC症例による前向き検討において、IDCにおけるFFの存在が、浸潤性乳管癌の重要な予後因子となることを再度確認した。この検討において、FFの長径が重要であることが判明し、FF長径が8mmを越えるIDC症例は、リンパ節転移の有無、ホルモン受容体蛋白発現の有無で層別化を行った検討において、腫瘍再発率、遠隔臓器転移率がFFの長径が8mm以下のIDC症例に比べ有意に高いことを証明した。また、FF長径が17mmを越える乳管癌症例は特に悪性度が高く、リンパ節転移、ホルモン受容体蛋白発現の有無に関係なく、FF長径が17mm以下のIDC症例に比べ腫瘍死率が有意に高いことを明らかとした。以上のことは、IDCの腫瘍間質成分、特に線維芽細胞がIDCの悪性度を規定する上で、腫瘍細胞成分より重要な役割を担っていることを証明したこととなる。また、我々はリンパ管腫瘍塞栓、静脈腫瘍塞栓およびリンパ節転移腫瘍の性状を検討し、それら成分の性状がIDCの増殖・進展にどの様な影響を与えるのか前向き検討を行った。その結果、核分裂数及びアポトーシス数が多いリンパ管並びに静脈腫瘍塞栓成分を有するIDC症例は、これら腫瘍成分の核分裂数、アポトーシス数が少ないIDC症例に比べ、有意に予後が不良であることが明らかとなった。また、リンパ節転移腫瘍性状では、腫瘍細胞核分裂数、リンパ節外浸潤およびリンパ節外腫瘍塞栓の有無が重要な予後因子となることを明らかとした。以上の検討は、腫瘍間質線維芽細胞、脈管内腫瘍成分、リンパ節転移腫瘍成分がIDCの浸潤・転移において重要な役割を担っていることを初めて明らかにしたものである。
蛍光ディファレンシャルディスプレイ法を用いた高血圧成因遺伝子の研究

本研究の目的は、ヒト高血圧症の発症に関わる遺伝子や、血圧調節に関与する未知の遺伝子を探索することである。家系内に高血圧発症者を持ち、高血圧を発症した患者より検体を採取し、total RNAを用いて蛍光ディファレンシャル法(FDD法)にて比較を行った。3種のアンカープライマーと25種のアービタリープライマーを用いてFDD法を行った結果、高血圧患者において発現量が増大しているcDNA断片が10個と、発現量が低下しているcDNA断片が5個得られたため、これらのcDNA断片を候補cDNA断片としてさらに解析をすすめた。はじめに候補cDNA断片の発現異常を確認するため、ノーザンブロットハイブリダイゼーションを行ったところ、高血圧患者において発現量が増大している候補cDNA断片10個のうち2個で発現異常が確認された。また、発現量が低下している候補cDNA断片5個はいずれも発現異常が確認されなかった。次に、高血圧患者において発現量が増大している候補cDNA断片に対し、配列を決定するためシークエンスを行った。得られた配列は未知のものであり、この候補cDNA断片の全長を得るため、クローン化し、レース法を用いて全長の配列を得た。これらの候補cDNAの発現異常が、通常の高血圧患者において認められる例があり、これを解析中である。また、既知の高血圧に関する遺伝子座位と比較するため、FISH法を用いてこの候補cDNAの遺伝子座位を検索中である。今後、アービタリープライマーの数を増やしさらに新たな候補cDNA断片の探索を行う予定である。また、症例数を増やし、新たな候補cDNA断片の探索を行う予定である。3種のアンカープライマーと20種のアービタリープライマーを用いてFDD法を行った結果、高血圧患者において発現量が増大しているcDNA断片が8個と、発現量が低下しているcDNA断片が3個得られたため、これらのcDNA断片を候補cDNA断片としてさらに解析をすすめた。はじめに候補cDNA断片の発現異常を確認するため、ノーザンブロットハイブリダイゼーションを行ったところ、高血圧患者において発現量が増大している候補cDNA断片8個のうち1個で発現異常が確認された。また、発現量が低下している候補cDNA断片3個はいずれも発現異常が確認されなかった。現在、既知の高血圧に関する遺伝子座位と比較するため、FISH法を用いてこの候補cDNAの遺伝子座位を検索中である。
液体カルコゲンにおける非金属・金属転移の第一原理シミュレーション

液体カルコゲン(セレン、テルル)は、2配位共有結合を持つ鎖状高分子からなる液体である。液体セレンは、低温においては半導体的性質を示すが、温度を上昇させていくと、鎖状高分子が短くなるのに伴い金属状態になる。一方、液体テルルは、融点直上から金属的性質を示し、半導体への転移は、300°C以下の過冷却液体において起こる。前者(液体セレン中の非金属・金属転移)に関しては、平成9年度に行った研究により、そのミクロな機構を明らかにした。本年度では、低温においても金属的性質を示す液体テルル中における、鎖状構造の安定性と電子状態の関係を明らかにするために、アルカリ・テルル混合系の第一原理分子動力学法による計算機シミュレーションを行った。その結果、アルカリ添加に伴い、テルル鎖が安定化され平均鎖長が長くなると共に、テルルの金属的性質が失われていくことを示した。本研究により、明らかになったことは、「液体カルコゲンの半導体・金属転移は、鎖状構造の変化と深く関係しており、平均鎖長が短くなると、鎖端に大きな振幅を持つフェルミレベル近傍の状態が増え、金属的性質を持つようになる」ということである。液体セレンの場合、セレン鎖は比較的安定であり、鎖状高分子の切断は、ある程度の高温にならないと起こらない。しかし、液体テルルの場合、セレンに比べ鎖内の共有結合が弱いため、融解と同時にテルル鎖の切断が起こる。融点直上で平均鎖長は数個程度になり、低温でも金属的性質を示すことになる。また、本研究では、アルカリ原子からテルル鎖に移った余剰電荷の空間分布を求めることにも成功し、実験結果の解釈に、重要な指針を与えた。液体セレンは、三重点近傍において、10万個もの原子が含まれる長い鎖状高分子からなる液体であり、半導体的性質を示す。しかし、温度を上昇させていくと、密度の減少に伴いセレン鎖は徐々に切断され、超臨界領域では、一つの鎖に含まれる原子は10個程度にまで減少する。このとき、液体セレンは、金属的性質を示す。また、液体イオウ、液体テルルも鎖状構造を有しており、セレンと同様、温度・圧力の変化に応じて様々な物性を示す。このように、液体カルコゲンの物性を理解する上で、鎖状構造の安定性と電子状態の関係を明らかにすることは本質的に重要である。この目的のために、本年度は以下のような研究を行った。(1)液体セレンにおける半導体・金属転移の研究第一原理分子動力学法による計算機シミュレーションを用いて、流体セレン中での半導体・金属転移のミクロな機構が調べられた。温度の上昇と共に、セレン鎖の長さは短くなり、それに伴って、電子の状態密度におけるフェルミレベル近傍のギャップが消失し、金属状態に転移することが再現された。鎖状構造の時間変化を詳細に解析することにより、セレン鎖の切断の機構と転移の関係が明らかにされた。(2)光誘起による八員環イオウクラスターの開裂の機構に関する研究第一原理分子動力学法による計算機シミュレーションを用いて、光誘起によるS_8分子の開裂の機構が調べられた。電子を最高占有状態(HOMO)から最低非占有状態(LUMO)へ励起することにより、直ちにS_8分子が開裂することが示された。この開裂は、反結合的性質を持つLUMOが安定化されるために引き起こされることが明らかにされた。この結果は、液体イオウにおける光誘起重合化の可能性を強く示唆する。
島孤高温型変成帯の形成過程と上昇テクトニクス

1.日高変成帯の研究.グラニュライト層における砂泥質片麻岩の部分溶融・ト-ナル岩質マグマの形成条件とプロセスが解析され,島弧火成活動帯の下部地殻における熱構造と火成活動-変成作用の交互関係が提案された.これと関連し,地殻の流動と上昇プロセス・地殻規模のデコルマンの形成深度とそれを規制する要因として,どの深さで部分溶融が始まるかが基本的要因であることが提示された.2.領家変成帯の研究.変成岩の主要分布地域において原岩層序・構造・変形-変成作用の調査研究が推進され,つぎのことが明らかになった.1)原岩はチャート砕屑岩シークエンス,砂泥整然互層,ブロ-クンフォーメイション,メランジュからなり,ジュラ紀付加体の構成に対応するが,部分的に後者には含まれない岩相が存在する.2)D1(flattening),D2(local shearing with prograde metamorphism),D3(local shearing with retrograde),D4(shortening and upright folding)の変形一変成史をもつ.また,変成作用の熱源が古期花崗岩体の貫入によることが熱構造の解析から明らかにされた.一方,CHIMEモナザイトの年代測定によって変成年代(100Ma),花崗岩は95Maから80Maまで連続的に活動したことが明らかにされた.古期と新期の活動は連続的であり,西部から東部へ変成帯は連続的に上昇した.3.肥後変成帯がグラニュライト相に達し,部分溶融を伴っていることが明らかにされた.さらに,サフィリン・コランダム・シソ輝石をもつ変成岩ブロックが蛇紋岩中に見いだされ地殻下部のレスタイトとして注目された.肥後片麻岩の年代は250Maを示し,さらに100Ma前後に領家変成作用の熱的影響を重複して受けていることが判明した.4.付加体の堆積岩の後背地と起源,付加体の変形構造と熱構造,付加体形成場の構造条件について新しい進展があった(成果報告書参照)1.日高変成帯の研究.グラニュライト層における砂泥質片麻岩の部分溶融・ト-ナル岩質マグマの形成条件とプロセスが解析され,島弧火成活動帯の下部地殻における熱構造と火成活動-変成作用の交互関係が提案された.これと関連し,地殻の流動と上昇プロセス・地殻規模のデコルマンの形成深度とそれを規制する要因として,どの深さで部分溶融が始まるかが基本的要因であることが提示された.2.領家変成帯の研究.変成岩の主要分布地域において原岩層序・構造・変形-変成作用の調査研究が推進され,つぎのことが明らかになった.1)原岩はチャート砕屑岩シークエンス,砂泥整然互層,ブロ-クンフォーメイション,メランジュからなり,ジュラ紀付加体の構成に対応するが,部分的に後者には含まれない岩相が存在する.2)D1(flattening),D2(local shearing with prograde metamorphism),D3(local shearing with retrograde),D4(shortening and upright folding)の変形一変成史をもつ.また,変成作用の熱源が古期花崗岩体の貫入によることが熱構造の解析から明らかにされた.一方,CHIMEモナザイトの年代測定によって変成年代(100Ma),花崗岩は95Maから80Maまで連続的に活動したことが明らかにされた.古期と新期の活動は連続的であり,西部から東部へ変成帯は連続的に上昇した.3.肥後変成帯がグラニュライト相に達し,部分溶融を伴っていることが明らかにされた.さらに,サフィリン・コランダム・シソ輝石をもつ変成岩ブロックが蛇紋岩中に見いだされ地殻下部のレスタイトとして注目された.肥後片麻岩の年代は250Maを示し,さらに100Ma前後に領家変成作用の熱的影響を重複して受けていることが判明した.4.付加体の堆積岩の後背地と起源,付加体の変形構造と熱構造,付加体形成場の構造条件について新しい進展があった(成果報告書参照)(1)日本列島の高温型変成帯に関する研究の進展.本年度11月に討論会を行い,合わせて代表的変成帯である肥後変成帯において現地討論を行った.本討論会では,日高変成帯グラニュライトユニットの部分溶融過程(小松ほか),高温マイロナイトの形成と地殻流動(豊島,小松ほか),S-タイプ/I-タイプ・ト-ナル岩マグマの関係(志村),日高変成帯の上昇速度(在田),阿武隈変成帯の広域変成作用と接触変成作用(田辺),領家変成帯の変形-変成作用(小松ほか),領家変成岩の原岩層序と構造(小松ほか),領家帯花崗岩マグマの起源物質(加々美),花崗岩の挙動とテクトニクス(早坂ほか),肥後変成帯の変成作用と部分溶融(小山内ほか),領家帯原岩物質の起源と形成テクトニクス(八尾),地殻部分溶融の新しい基準(広井),島弧における花崗岩マグマの形成位置(柳)の発表が行われた.討論では高温型変成帯における部分溶融と花崗岩マグマの形成,地殻流動の問題に焦点がしぼられ,これらの成果を通して島弧および大陸地殻の形成発展過程の解明に具体的展望が与えられた.

地殻部分溶融と流動については,本総研として本年4月の地質学会(広島大学)の討論会として企画を行っている.(2)島弧下部地殻の組成構造に関する研究.火山岩中の変成岩ゼノリスの研究(小松),グラニュライト相の実験岩石学的研究(川嵜),バイブロサイスによる変成帯深部構造の解析(在田)が進行した.(3)付加体の形成場と構造運動の研究.高温変成岩すなわち島弧地殻の原岩として付加体の意義が再考され,アジア大陸東縁における付加体形成場と東弧高温変成帯形成場の位置付けを堆積物の性格と年代から考察する新しい研究が進行した(足立,鈴木).1.高温変成帯,変成岩の研究領家変成帯において新たにざくろ石-斜方輝石グラニュライト,ざくろ石-きん青石-珪線石片麻岩が発見され,後者には十字石,コランダム,スピネルが含まれることが分かった.これらの岩石は領家帯では初めての発見であり,より深部の変成岩層を表わすものとして貴重な資料として重要な意義をもつ.また,肥後変成帯において従来知られていたコランダムースピネル-ざくろ石岩にサフィリンが発見され,蛇紋岩中の他のブロックとともに下部地殻から持ち上げられたレスタイトであることが判明した.これは日本列島における最下部地殻岩石の最初の発見である.さらに,これらを含む肥後変成岩の形成年代の最新の手法による結果は250Maであることが明らかになった.この年代が何を意味するか今後,大きな議論を呼ぶ.日高変成帯についてはト-ナル岩のへい入機構と深度,条件,デコルマンの形成に関する研究が進展した.2.花崗岩-変成岩の年代と帰属CHIME法による領家帯花崗岩および変成岩年代の測定が進められ,従来混沌としていた古期,新期花崗岩年代が明確にされた.これによると,古期は100-95Ma,新期は80-70Ma,変成作用は100Ma以前に始まり,古期花崗岩貫入時にピークに達した.この年代は領家帯全体を通じて共通しており,西から東へ年代が若くなるという従来の見解は誤っていることが明らかになった.また,黒瀬川帯に沿って220-250Maを示す花崗岩変成岩が点在することが知られているが,この帰属に関して性格な年代測定と岩石学的検討が行われた.1.領家変成帯の研究.中部段戸山地域・西部瀬戸内地域において原岩層序と変形-変成作用の研究が進展し,領家変成帯のほぼ全域の原岩層序と変形-変成史が確立された.原岩層序はチャート砕屑岩シークエンス・砂泥互層整然層・ブロ-クンフォーメイション・メランジュからなり,地域および変成度によって構成が異なる.変形-変成史はD1(層理面に垂直圧縮,層面片理S1の形成,増進変成M1),D2(局所的剪断,層内褶曲,剪断面および軸面S2の形成,増進変成M1),D3(局所的剪断-マイロナイト帯の形成,剪断面S3,後退変成M2),D4(層理面/片理面S1に水平圧縮による鉛直褶曲・クレニュレイション褶曲-軸面へき開S4,後退変成M2)の4ステージにまとめられた.古期花崗岩はD1とD2の間に貫入している.2.日高変成帯の研究.上部変成岩層の研究を着手し変成-変形過程と熱史に新しい問題が提起された.上部変成岩は初期変成期に擬六方双晶を呈するきん青石ポ-フィロブラストが形成され,これがその後回転する変形を受け,同時に岩石は黒雲母で特徴付けられる片理を形成する.これは初期に熱変成作用,つぎに広域的変形変成作用を受けたことを意味する.熱変成を与えた熱源は広範に分布するS-タイプト-ナル岩体であり、深部で変成帯の最高温度条件で部分溶触によって形成されたものである.したがって,上部の変成作用は深部の変成ピーク時期より遅れることが分かった.
海洋性微細藻類及び貝類をバイオリアクターとした無機ヒ素含有廃水処理および無害化

真昆布を用いて、As(V)を含有する廃水処理特性と、その取り込み機構を検討した。実験は全て模擬海水組成を用いて行った。真昆布は、初期As(V)濃度が高い場合にはAs(V)を吸収するが、低い場合には逆に体内のAs(V)を放出する特性があることがわかった。また、As(V)を取り込んだ藻類をXAFS測定に供したところ、何らかの有機ヒ素の形態でAs(V)を取り込んでいることが確認された。他の金属元素の処理またはリサイクルを目的として、Al、Co、Niの単独または混合溶液に対する吸着特性を調べたところ、Alのみを選択的に吸着除去する特性を有し、CoやNiのリサイクルに有効であることが確認された。年間79000トンが廃棄されている宮城県産の廃棄真昆布を用いて、ヒ素の除去および無害化に関する可能性を調査した。初期濃度1.0mg/LのAs(V)溶液に50gの生昆布を投入し、120時間の静置後、溶液中のAs(V)濃度を測定したところ、純水中ではAs(V)濃度はほとんど変化しなかったのに対し、海水中では0.3mg/Lまで減少した。この時、実験開始後24時間では、逆にAs(V)濃度は0.2mg/L程度増加しており、真昆布は、体内から一旦ヒ素を溶出してから再び取り込む性質があることが確認された。比較試験として、粉末状にした真昆布を用いて同様の試験を行ったところ、溶液中のヒ素は0.2mg/L増加しており、同時に、Ca、K、Mg、Naも溶出することがわかった。したがって、真昆布は生存している状態でなければヒ素を取り込まず、死亡時には逆にヒ素を含む種々の成分を溶出させることがわかった。真昆布に対して、KEK-PFにおいてAs K端のXANES測定を行ったところ、試験前の昆布からは有機ヒ素のピークが確認されたが、ヒ素の無害な形態として知られるアルセノベタインのピークとは異なっていた。また、試験後はNa2HAsO4・7H2Oと同様のピークが確認された。このことから、真昆布は成長過程にヒ素を取り込み、有機ヒ素として体内に蓄積する機能があるが、廃昆布では既に死亡の状態であることから、その取り込み機能は低下しており、取り込んだとしても有機ヒ素の形態で取り込むのは困難であることがわかった。廃昆布をさらに有効に活用する方法として、昆布中のアルギン酸からアルギン酸カルシウムビーズを作成し、種々の重金属回収の吸着剤として用いる実験を行った。この吸着剤を用いることで、Al、Fe、Mn、Ni、Co、Zn、Pbなどといった金属が溶液中から回収できることがわかった。環境中に一般的に存在する代表的なヒ素の形態であるヒ酸As(V)を対象として、海洋性微細藻類をバイオ入りアクターとした回収および無害化を試みた。初めに、ヒ酸に対する藻類の耐性を系統的に評価した。As(V)を10ppm含有させた純水および模擬海水中にて藻類を共存させたところ、純水中では、24時間後に藻類の壊死が確認されたが、模擬海水中では24時間後に溶液中のヒ素が2割程度減少したのち、海藻の壊死の確認と共に溶液中のヒ素濃度は逆に増加した。このことから、少なくとも純水下での藻類によるヒ素の除去は困難であること、藻類はヒ素を吸収するものの、壊死と共に吸収したヒ素を再び放出することがわかった。ヒ素を取り込んだ藻類を凍結乾燥し、高エネルギー加速器研究機構PFのビームライン12Cにてヒ素のK端よりその形態分析を行ったところ、アルセノベタインにピークが類似しているものの厳密には一致しないXANESスペクトルが得られた。このことから、藻類中のヒ素は、アルセノベタインに類似した有機ヒ素体で吸収されているものと予測された。一方、国内外で問題となっている酸性坑廃水を用いて同様の試験を行ったところ、同様に藻類の壊死が確認されたが、溶液中のヒ素濃度は排水基準値の0.1ppm以下に減少していた。この理由を詳しく解明したところ、酸性坑廃水の処理と共に生成した水酸化第二鉄にヒ素が共沈し、その水酸化第二鉄が藻類に吸着したためであることがわかった。また、酸性下では、藻類から生成したアルギン酸が陽イオン交換能を有することから、種々の有害元素の選択的な処理が可能であることも確認された。
配位環境の三次元的制御による高機能イオン分離系の構築

金属イオンに対する多座配位子の配位における配位環境の三次元的制御を利用することにより、各種金属イオンおよび陰イオン種の高機能分離分析法を設計することを目的として、以下のような基礎的研究を行った。[1]三脚型3価四座配位子であるトリス(2-ヒドロキシ-3,5-ジメチルベンジル)アミンを用いる13族3価金属イオンのキレート抽出に関する検討を行い、三脚構造による配位環境の束縛とメチル置換基基因の立体障害とを巧妙に利用することによってガリウムイオンのみを選択的に抽出分離できることを見いだした。さらに、配位子結晶のX線構造解析の結果より、中性状態におけるこの配位子の水素結合状態が錯形成反応速度論的に比較的有利な状況をもたらしているということを見いだした。[2]無電荷配位子であるN,N-ビス(2-ピリジルメチル)アミノ基と2価遷移金属イオンとで構成される配位不飽和荷電金属錯体を陰イオン交換基として用いる新たなイオンクロマトグラフ法の開発に関する基礎検討を行い、イオン交換反応と配位子交換反応を巧妙に併用することにより、中心金属イオンのアクセプターとしての特性を利用した、配位性陰イオンの高機能クロマトグラフ分離を実現した。[3]各種のピリジン-2-カルボニル化合物とジアミン類とから合成される無電荷Schiff塩基を錯形成試薬に用いて、水-ニトロベンゼン系における2価遷移金属イオンのイオン対抽出選択性に及ぼすイミン窒素ドナー原子近傍の立体構造の効果について比較検討を行った。その結果、ドナー隣接炭素原子上の置換基や2つのイミン窒素原子間の架橋構造形態が抽出選択性に大きな影響を与えることが確かめられた。多座配位子の金属イオンへの配位環境に関する三次元的制御を利用した各種金属イオンおよび陰イオン種の高機能分離分析法の設計を目標として、以下のような基礎的研究を行った。[1]各種のピリジン-2-カルボニル化合物とエチレンジアミンとから合成される無電荷Schiff塩基を用い、水-ニトロベンゼン系における2価遷移金属イオンのイオン対抽出選択性に及ぼすイミン窒素ドナー原子近傍の立体構造の効果について比較検討を行った。その結果、ドナーに隣接するイミン炭素原子上の置換基の存在が、直接錯形成への立体障害を引き起こさない位置であるにもかかわらず、抽出選択性に大きく影響を与えることが確かめられた。形成される荷電錯体の立体的な歪みがこの主たる要因であると考えられ、現在さらに詳細な検討を進めている。[2]無電荷配位子であるN,Nビス(2-ピリジルメチル)アミノ基およびその構造類似基と2価遷移金属イオンとにより構成される配位不飽和荷電金属錯体を陰イオン交換基とする新たなイオンクロマトグラフ法の開発に関する基礎検討を行い、従来のイオンクロマトグラフ法とは異なる新奇な保持選択性を実現した。「荷電錯体型陰イオン交換基(CCAG)」と名付けたこの交換基は、中心金属原子上に不飽和配位サイト(厳密には水和サイト)を有し、静電相互作用による通常の陰イオン交換能の他に、水和水分子と配位性陰イオンとの配位子交換能を併せ持つ。後者の特性が中心金属イオンの種類および配位子の三次元的構造に大きく依存することから、これらを巧妙に選択することにより各種陰イオンの保持特性を制御できる。現在、このタイプの配位子では固定不可能である3価以上の金属イオンのCCAGへの利用について、新たな交換基構築法を中心とした各種検討を行っている。
アフリカ農村社会における市場経済の浸透と文化変化

本研究の目的は、現代アフリカの農村社会が直面している激動状況を、主として市場経済の浸透による経済的変化の側面と、消費主義の蔓延に起因する社会-文化変化の側面から、総合的に解明することにあった。調査の対象として、主としてマリ、ギニア、タンザニアの三ヵ国を選び、二年度にはギニア・ビサウを加えた。いづれも自然環境、独立後の政治経済体制、イスラムの普及など共通の類似点があり、近年の経済自由化にともなう急激な社会・文化変化にさらされている点で類似している。調査の初年度、二年度には、アフリカ農村に恒常的にみられる複合的生産構造の実態の把握と、経済自由政策下における商業的農業の進展状況の調査を実施してきた。計画の最終年度には三年間の調査成果の全体的な総合を意図した。本調査の全体の成果としては、タンザニアにおいては多数の民族が共存して構成するスワヒリ社会における共通文化の普及による文化変化の実態を把握した。マリにおいては首都バマコ周辺の農村地域において都市化に付随する商業的農業の普及、消費的文化の蔓延、NGO主導の農村発展の援助計画に伴う商業的農業の進展などの実態を、ニジェル川中流のセグ周辺地域において出稼ぎ労働の増加による村落構造の変容実情を把握した。本調査によって本格的に着手したギニアについては、フ-タ・ジャロンのラベ地域における野菜栽培を中心にした商業的農業の進展状況、東部のカンカン地域における商業的農業の普及、農作物の流通状況、都市農業(シティ・ファーム)の実態などにかんする資料入手した。本研究は、現代アフリカ農村が直面している激動的状況を、市場経済の浸透と消費的文化の蔓延に起因する文化変化の両面から解明するため計画された。調査対象国としてマリ共和国、ギニア共和国、タンザニア共和国の三ケ国をえらんだ。計画の初年度の平成7年度には、まずアフリカ農村社会に恒常的な農業および非農業の複合的な生産構造の実態の把握を目指した。また、経済自由化政策の下で商業的農業をはじめとする現金収入の方策を求める行動に着目し資料の収集に努めた。マリ国ではバマコおよびブグニ周辺地域で都市化の影響下で進展しつつある農産物、薪炭等の商品化の実態調査をした。ここでは計量的データの収集をもくろみ、複数の村落でアンケート調査をこころみたが調査項目の設定や村落等の抽出方法にかんして若干の課題を残した。タンザニア国では、モロゴロ地域とモシ地域において市場経済化の進展の過程にかんする資料を収集した。構造調整政策にともなう政治経済的変動が激しい状況で、地方における小売商と卸売商の役割が市場経済化の表舞台に登場しつつある実態を把握した。ギニア国では、カンカン周辺地域における伝統的な水稲耕作が商業的農業に展開する過程についての資料を収集した。海岸部のボケ地域においては、漁業を中心とした複合的な生産構造をもつ漁村における、近年の市場経済化の進展過程にかんする資料収集につとめた。今回、地域調査の対象とした三ケ国のあいだでは市場経済の浸透の度合いに相違がみとめられたが、何れの国も独立以後の一定の期間、社会主義的な政策を選択した結果、農村社会においても集団主義的な生産・流通の施策がとられた経緯がある。近年、経済自由化の政策が導入された結果、これらの農村では急速に生産・流通における商業化と生活面における消費的文化の浸透が進展している実態が明白になったが、それが当該農村社会における文化変化にどのような影響を及ぼし、いかなる方向へ進めるかについては、次年度以降の研究の課題にしたい。本研究は全体計画の2年度目に当たり、タンザニア国東部モロゴロ地域、マリ国南部バマコ地域、ギニア国東部カンカン地域、ギニア・ビサウ国西部ボラマ地域の四カ国で、農村社会における社会・文化変化の実態調査を行った。ギニア・ビサウは前年度のギニア調査との比較のために加えられた。タンザニアについては梶(研究分担者)が参加し、多数の民族が共住するスワヒリ農民社会の文化変化の実態調査を実施した。

ギニアでは今回はじめてカンカン大学社会科学部との研究協力体制を組み、経済学および社会学のスタッフの協力で、赤阪(研究代表者)がカンカン県全域のエクステンシブな実態調査を実施し、市場経済の浸透の度合いに伴って、村落にきわめて流動的な状況が生まれつつあり、格差が生じつつある実態を把握することができた。特に都市-農村間の人口移動、農産物などの商品化などの要因で消費主義の傾向がすすみ、住民間に経済行動の多角化が進展し、伝統的な家族および村落の構造にも影響がおよび、文化変化が起こりつつある現状が把握できた。マリのバマコ地域では首都の後背地域の農村部において前年に引き続き都市化・商業化・イスラム化が一体となって社会・文化変化が浸透し、商業的農業の普及にとどまらず、現金獲得の手段の多角化が進展しつつある状況を把握した。竹沢はギニア・ビサウの調査にわが国ではじめて着手し、今後の調査の可能性を切り開いたが、不慮の事故のため途中帰国を余儀なくされた。後を竹内が引き継ぎ、当初の目的を果たすことができた。具体的には農業や漁業など伝統的な自給生産から商業的生産の移行状況、生産物の商品化の進行や消費欲求の拡大状況にかんする資料を収集した。タンザニアは市場経済の浸透がずっと進展しており、スワヒリ農耕民社会における伝統文化の衰退の現象と、多様なメディアを媒介としたあらたな共通文化の形成の動向が把握できた。本研究は、アフリカの農村社会が直面している激動状況を、主として市場経済の浸透による経済的側面と、消費主義の蔓延に起因する文化変化の側面の両方から総合的に解明する目的で計画された。調査の対象として、マリ、ギニア、タンザニアの三カ国を選択したが、いづれも自然環境、独立後の政治経済体制、イスラムの普及など共通の類似点を抱き、近年の経済自由化にともなう急激な社会・文化変化にさらされている。調査の初年度、二年度には、アフリカ農村に恒常的みられる複合的生産構造の実態の把握と、経済自由化政策下における商業的農業の進展状況の調査を実施してきた。計画の最終年度にあたる今年度は三年間の成果の全体的な総合を意図して調査を実施した。タンザニアにおいては研究分担者の梶が多数の民族が共存して構成するスワヒリ社会における文化変化の実態を調査した。マリにおいては代表者の赤阪がバマコ周辺の農村地域において顕著なNGO主導の農村発展の援助計画に伴う商業的農業の進展状況を、研究分担者の竹沢がセグ周辺地域において出稼ぎ労働の増加による村落構造の変容状態にかんする調査を実施した。本調査によって本格的に着手したギニア調査にかんしては、竹沢がフ-タ・ジャロンのラベ地域における野菜栽培を中心にした商業的農業にかんする実態調査を、赤阪がカンカンにおける都市農業(シティ・ファーム)の実態調査を実施し、地区ごとの住民構成の相違と商業化の進展の程度に相関関係を発見した。
中世ロシア聖堂壁画に見るバルカン半島の影響

ロシア、ジョージアの中世壁画をもつ聖堂の現地調査を行い、聖堂装飾プログラムの分析を試みた。過去の調査で蓄積のあるバルカン半島(ギリシア、マケドニア、セルビア、コソヴォ、アルバニア)の諸聖堂のデータを比較し、バルカン半島が中世ロシア文化圏に与えた影響を具体的に分析した。その結果、ロシアの装飾プログラムの特異性がいくつか浮かび上がり、またロシアがバルカンに与えたと想定できる事象も明らかになった。バルカンの図像はテオファニス(フェオファン・グレク)やマヌイル・エウゲニコス経由で、ルブリョーフらによってロシアの地に定着し、ディオニーシの装飾プログラムにまで継承されてゆく。47月に事前の調査及び許可申請を行なった上で、8月から9月にかけて、グルジアとトルコ(イスタンブール)で現地調査を実施した。幸いにもグルジア正教総主教座の全面的な協力が得られて、撮影はほぼスムースに行なわれた。イスタンブールでは、コーラ修道院の調査を行なった。14世紀のビザンティン美術において、首都コンスタンティノポリス、バルカンの都テサロニキとグルジア、ロシアとの関係は重要である。今回キリスト伝のプログラムに関して新たな知見を得た。93月は、撮影した写真を整理し、図像プログラム図を一部作成した。資料と照らし合わせ、学会発表の準備を行なった。モスクワと「黄金の環」と称される諸都市の聖堂装飾を調査した。Sergiev Posad、Pereslavl Zalessky、Rostov Veliky、Yaroslavl、Vologda、Ferapontov修道院、Kostroma、Suzdal、Pokrova na Nerli、Vladimirの諸都市・モニュメントである。特にディオニシ工房がフレスコを制作したフェラポントフ修道院の装飾プログラムは、カストリア(ギリシア)、オフリド(マケドニア)のプログラムを受け継ぎ、ロシア化させたものと評価できる。モスクワにおいては、Pokrovsky Sobor、プーシキン美術館、クレムリン、Spaso Andronikov修道院、トレチャコフ美術館、Novodevich修道院、ヴァスネツォフの家博物館を訪れた。11世紀以降ビザンティン世界で始まった、「受難の聖母」のイコノグラフィーは、ロシアに伝わり、独特の感覚世界を形成する。それはロシア文学に見るトスカ(タスカー)のニュアンスに近いものと考えられる。トレチャコフにおいては、フェオファン・グレク、アンドレイ・ルブリョフ、ディオニシと続く系譜を、様式・図像の両面より確認する。「黄金の環」で調査した聖堂壁画の大半は17世紀のものであった(特にコストロマ派)。最も見事であったのは、ヤロスラヴリ郊外の「トルチュコヴォの洗礼者ヨハネ聖堂」Ioan Krestitelya v Tolchkovo/ Ioan Predtechiであった。しかしこの装飾プログラムは、ビザンティンの伝統下にあるとはもはや言えず、ロシア独自のものである。三位一体第一位格「父なる神」の造形を畏れぬ点等、ビザンティン世界とは異質なものを認める。しかし「クリスマス賛歌」図像や「ポクロフの聖母」に関しては、14世紀バルカン半島との連関を想定してもよい。平成26年度グルジア(ジョージア)、平成27年度ロシア(モスクワ周辺)と年度ごとに調査した。平成28年度についてはロシア(ノヴゴロド周辺)を予定する。以上に関しては順調である。ただし申請時にはウクライナ調査も計画の対象としていた。これについては政治状況の激変があり、どの程度の調査が可能か、不確定要素が残る。現在のところキエフとその周辺の調査は可能である模様で、全体計画には支障をきたさないと考えている。文献収集は早稲田大学のILLシステムによって、順調に進行している。間もなく今年度の調査対象聖堂・修道院の許可申請を行うことになる。特にPskovのMirozh修道院が最大の調査対象となる。この許可が下りれば、今年度の調査もおおむねうまくゆくであろう。ノヴゴロド周辺とプスコフにおいて、12世紀及び14世紀のフレスコ壁画を有する聖堂・修道院を調査した。特に重要なのは、プスコフのミロジュMirozh修道院で、12世紀のフレスコを壁面全体に残す中規模の聖堂としては、正教世界唯一の作例となる。十二大祭をプログラムの要とする最初期の例であるが、「キリスト降誕」と「聖母の眠り」を関連づけて配置する興味深い試みをしている。キリスト公生涯のサイクルに関しては、典礼との関係が予想されるものの、未だに選択と配列の理由は解明できていない。今後の課題である。プスコフ郊外のスネトゴルスキイ女子修道院(1313年の壁画)は、同時代のバルカン(例えばセルビアのストゥデニツァ修道院王の聖堂)やコンスタンティノポリス(例えばコーラ修道院)とも異なる独特のプログラムをもつ。これがロシア的なプログラムと言えるものか、引き続きの検討が必要である。上記以外に、Staraya Ladogaの聖ゲオルギオス聖堂、ノヴゴロドの聖ソフィア大聖堂・変容聖堂・ズナメンスキイ大聖堂・アントニエフ修道院・ユリエフ修道院・聖テオドロス・ストラテラティス聖堂・アルカジ村受胎告知聖堂・聖ニコラオス大聖堂(ヤロスラフ宮廷)・墓地内降誕聖堂・ヴォロトヴォ村聖母の眠り聖堂・コヴァリョヴォ村救世主聖堂・ネレディツァ村救世主聖堂・プスコフのメレトヴォ修道院等の調査を行った。図像学的に関連するイコンの調査としては、ペテルブルグのロシア美術館・エルミタージュ美術館、プスコフの国立博物館、ノヴゴロドの国立美術館を訪問して、撮影を行った。調査撮影が許可されない場合も想定しており、その場合は代替聖堂を考えていたが、申請した聖堂・修道院の調査がすべて認められ、大きな成果を上げることができた。

また予期したことではないが、エルミタージュ美術館において大掛かりな「ビザンティン展」が開催されており、アクセス困難な作例を多数実見することができた。平成26年度と同様、ジョージアの中世聖堂・壁画の調査を行った。ジョージア正教会総主教座の調査許可を取得した上で、以下の聖堂、修道院等を訪れた。上記中、特にアチとダヴィド・ガレジの一礼拝堂において、装飾プログラム上の興味深い発見をした。ロシア、ジョージアの中世壁画をもつ聖堂の現地調査を行い、聖堂装飾プログラムの分析を試みた。過去の調査で蓄積のあるバルカン半島(ギリシア、マケドニア、セルビア、コソヴォ、アルバニア)の諸聖堂のデータを比較し、バルカン半島が中世ロシア文化圏に与えた影響を具体的に分析した。その結果、ロシアの装飾プログラムの特異性がいくつか浮かび上がり、またロシアがバルカンに与えたと想定できる事象も明らかになった。バルカンの図像はテオファニス(フェオファン・グレク)やマヌイル・エウゲニコス経由で、ルブリョーフらによってロシアの地に定着し、ディオニーシの装飾プログラムにまで継承されてゆく。当初の計画に基づいて、グルジアの調査を行なった。こちらが期待した以上の数、質の聖堂調査が許され、日本人が初めて足を踏み入れる聖堂も多数あった。特に12世紀の聖堂に関して、カッパドキアとの図像学的類似を確認した。14世紀におけるバルカン半島との関係と合わせて、新たに考察すべき問題である。ロシア文化圏とバルカン半島をつなぐべき首都コンスタンティノポリスに関しては、コーラ修道院の調査によって、新たな視点が得られた。特に聖母マリア伝については、ビザンティン文化圏で失われた12世紀の作例を、アテニ・シオニ聖堂等が補強してくれると思われる。平成28年度の調査は、サンクトペテルブルクを拠点として、Novgorod、Pskov等の古都を踏査する。時間的に余裕があれば、キエフに足を延ばしたいが、目下ロシアーウクライナ問題により、両国間の直接のフライトが廃止されている。日程内に収まれば、他国のフライトを利用し、もしくは他国を経由することによって、キエフ調査も行いたい。それが無理であれば、平成29年度にジョージアとキエフの調査を行うことで、当初計画を遂行したい。いずれの場合でも、研究の進行上、大きな差は生じない。今年度はジョージア(グルジア)の再調査を予定する。前回の訪問で総主教座の担当者とコンタクトをもつことができたので、今回は事前に調査許可の申請を行い、時間的に無駄のない調査を実施したい。ウクライナの調査を申請当初予定していたが、政治情勢が不安定であるため、調査は実施しないこととする。29年度が最終年度であるため、記入しない。西洋美術史当初の計画ではグルジア、ロシア、ウクライナ3国を調査する予定であったが、採択後にウクライナ情勢が急変し、目下のところ現地調査の見込みが立たない。
単クローン抗体を用いたマレー糸状虫の感染防御に関する研究

フィラリア症における感染防御免疫の機構を解析し,有効な防御抗原を持定する目的で,マレー糸状虫マウスモデル系を確立した.マウスに100隻の感染幼虫を腹腔内感染し, 2週後に開腹して生存虫体の回収率を調べることによりT細胞依存性の防御免疫が重要な役割を担っていることが示された.その際のエフェクター細胞としてM中が重要であることも同様に示唆された.しかし免疫血清の移入による受動免疫は発現せず, 20種以上の抗マレー糸状虫単クローン抗体の投与によっても防御免疫が示されないことから,抗体依存性の防御免疫は重要でないことが示唆された.そこで単クローン抗体を用いてマレー糸状虫のミクロフィラリア抗原を精製し,その皮下投与による能動免疫について検討した結果, 1種のIgM単クローン抗体(OvH)アフィニティ精製抗原によって,ミクロフィラリアの粗抗原と同程度の強い感染防御が誘導された.なおこの単クローン抗体は糖鎖を認識していると考えられる.さらにミクロフィラリア抗原をSDS-PAGEによって分子量10200KDaの14分画にわけ,それぞれの皮下投与(フロイント完全アジュバンドとともに)を行なった結果,分子量3335KDaと4045KDaに強い感染防御と誘導する抗原が存在することが示された.一方60170KDaの比較的分子量の大きな分画においては,まったく防御能を誘導することができなかった.このように,単クローン抗体を用いて精製した抗原,またはSDS-PAGEにより分画した抗原の両者にマレー糸状虫に対する感染防御を誘導する抗原が特定され,今後ワクチン開発研究などに有用な手掛りが得られた.フィラリア症における感染防御免疫の機構を解析し,有効な防御抗原を持定する目的で,マレー糸状虫マウスモデル系を確立した.マウスに100隻の感染幼虫を腹腔内感染し, 2週後に開腹して生存虫体の回収率を調べることによりT細胞依存性の防御免疫が重要な役割を担っていることが示された.その際のエフェクター細胞としてM中が重要であることも同様に示唆された.しかし免疫血清の移入による受動免疫は発現せず, 20種以上の抗マレー糸状虫単クローン抗体の投与によっても防御免疫が示されないことから,抗体依存性の防御免疫は重要でないことが示唆された.そこで単クローン抗体を用いてマレー糸状虫のミクロフィラリア抗原を精製し,その皮下投与による能動免疫について検討した結果, 1種のIgM単クローン抗体(OvH)アフィニティ精製抗原によって,ミクロフィラリアの粗抗原と同程度の強い感染防御が誘導された.なおこの単クローン抗体は糖鎖を認識していると考えられる.さらにミクロフィラリア抗原をSDS-PAGEによって分子量10200KDaの14分画にわけ,それぞれの皮下投与(フロイント完全アジュバンドとともに)を行なった結果,分子量3335KDaと4045KDaに強い感染防御と誘導する抗原が存在することが示された.一方60170KDaの比較的分子量の大きな分画においては,まったく防御能を誘導することができなかった.このように,単クローン抗体を用いて精製した抗原,またはSDS-PAGEにより分画した抗原の両者にマレー糸状虫に対する感染防御を誘導する抗原が特定され,今後ワクチン開発研究などに有用な手掛りが得られた.マレー糸状虫に対する感染防御を検討するために、無処理またはγ線照射弱毒化感染幼虫(【L_3】)、およびミクロフィラリア(mf)を抗原として免疫されたBALB/Cマウスの脾細胞と骨髄腫細胞を融合させ、各種の単クローン抗体(MAb)を作製した。これらのMAbの【L_3】およびmfに対する殺虫効果をin vitroとin vivoで検討した結果、以下の成績を得た。1)すでに腹水化された11種のMAbをマウスに移入し、【L_3】に対する殺虫効果を観察したが、現在までに有効なMAbは得られていない。(2)しかしこれらのMAbを移入したマウスにおいて2種のMAbに抗mf効果が認められた。(3)現在なお多数のMAbを作製しつつある。そこでこれらのMAbの抗フィラリア効果を効率的に検索するために、簡便なin vitro判定法の確立条件を検討している。一方、マレー糸状虫に対する感染防御の機構を明らかにするために、T細胞移入実験を行った。その結果γ線照射【L_3】免疫マウス脾細胞をナイロンウールに通過させて得られたT細胞移入によって、対照に比べ99.6%減少率を示す抗【L_3】効果が観察された。一方免疫血清移入によって、約約54%の有意な防御能が誘導された。これらの結果は、本研究で作製されるMAbによって、ある程度の抗【L_3】効果が示される可能性を示唆すると同時に、細胞性免疫を検討する必要がある事を示唆している。そこで次年度は、MAbの移入による抗【L_3】効果の検討とともに、これらのMAbで精製した抗原による能動免疫による感染防御を検討する予定である。上記の結果から、本研究で得られたMAbによる抗原精製のための、粗抗原の検討を行う必要が示唆されたので、比較的入手しやすいmf粗抗原による感染防御能をマウスモデルで検討した。その結果5×【10^5】mfの1回免疫によって、BALB/Cマウスで99%以上の防御が示された事から、MAbによる抗原精製に、mf粗抗原の利用が可能であると考えられた。
UVP法による機能性流体の流動計測

昨年度に引き続き,磁性流体中を伝播する超音波特性を詳細に調べた。昨年度の研究結果から,超音波の伝播速度および吸収率に関して異方性が存在すること,その異方性は印加磁場強度に異存すること,超音波伝播特性には印加磁場に対してヒステリシスが存在すること,等が明らかとなった。しかし,その原因の究明を行う事ができなかった。そこで,装置の改良を行い,1MHz,2MHz,4MHzの異なる周波数を用いた実験を行い,周波数によって超音波伝播の異方性が異なる事が明らかとなった。これらの周波数依存性は内部の磁性体微粒子のクラスタ構造に関係があると考えられるので,クラスタ形成を可視化するシステムを新たに構築し,クラスタ成長過程と印加磁場の関係を調べた。その結果,クラスタ撮影画像の明度の標準偏差によって,クラスタの大きさがある程度評価出来ることが明らかとなった。また,磁場を印加後もクラスタは6時間を経ても成長し続けている事が確認できた。これは,従来あまり知られていない事であり,今後様々な磁性流体現象を解明する上で貴重な知見である。昨年度に引き続いて,円筒容器内の磁性流体スワーリング実験も行った。昨年度の実験結果を踏まえ,磁気体積力,重力,流体慣性力を考慮した解析を行い,現象を特徴づけるパラメータを見出す事ができた。今後,UVPによる内部流速測定結果を踏まえた解析を行うことにより,詳細な流動メカニズム解明が期待できる昨年度に引き続き,磁性流体中を伝播する超音波特性を詳細に調べた。今後,UVPによる内部流速測定結果を踏まえた解析を行うことにより,詳細な流動メカニズム解明が期待できる超音波流速分布測定法(UVP法)で内部の速度分布計測を行う場合、超音波の反射体として流体中に微粒子を添加する必要がある。磁性流体や電気粘性流体などの機能性流体には元来強磁性体や誘電体の微粒子が含まれている。磁性流体に磁場を印加した場合、磁性体微粒子自身が鎖状クラスタを形成し、大きな構造体を形成する。その結果、このクラスタと添加微粒子の形態によって、反射された超音波エコーの特性変化が予想される。そこで、まず磁性流体に磁場を印加した時の磁性体微粒子のクラスタ形成を特殊顕微鏡によって観察し、その画像データを解析した。その結果、従来報告されていない、クラスタ形成の長時間における経時変化の様子が明らかとなった。また、具体的な流れ場の計測も実施した。まず円筒容器内の磁性流体スワーリングの発生メカニズムの解明を、内部流速および液面波形の同時測定から明らかにする事を試みた。液面の変動と内部流速変動の位相差や流速分布のスペクトル分布など、従来入手困難な測定データが得られたが、スワーリング発生メカニズムの詳細までは解明できなかった。次に、二重円筒内のテーラ渦におよぼす回転磁場の影響を、速度分布測定から調べた。その結果、一様磁場とは異なり、単なる見かけの粘度増加では説明できない現象を捉えることができた。磁気体積力、円筒回転によって生じるせん断力を考慮した新しいパラメータを提案し、この現象を説明する事が可能となった。超音波流速分布測定法(UVP法)で流動計測を行う場合,流体中の音速値が必要となる。しかし,従来から超音波の磁性流体中の伝播特性に関する研究があまり行われていなかった。多少実験が実施されているが,その測定精度や内部のクラスタ状態によって様々な結果が提示されており,統一した知見が得られていない。そこで,磁性流体中を伝播する超音波特性を詳細に調べる実験装置を新たに設計・製作し,超音波伝播方向と磁場印加方向のなす角度,および磁場強度を変化させ,精密な実験を遂行した。その結果,超音波の伝播速度および吸収率に関して異方性が存在すること,その異方性は印加磁場強度に異存すること,超音波伝播特性には印加磁場に対してヒステリシスが存在すること,等が明らかとなった。昨年度の実験結果を詳細に検討したところ,実験装置の不備が見出されたので,実験装置の改良を行った。

そして,再度実験データを取得した。その結果,自由表面のスワーリングと加振振動との位相差が印加磁場と伴にほぼ一次関数的に変動する,という新たな知見を得ることが出来た。円筒容器内磁性流体スワーリングの具体的応用例として,磁性流体の同調液体ダンパーへの適用を試みた。その結果,磁場印加による構造物の制振効果向上の可能性が見出された。以上,本年度は昨年度の成果を基に,新たな研究展開を試みた。いずれのテーマもその研究成果の可能性が見出されたので,最終年度では本年度の知見を生かした研究遂行を予定している。昨年度に引き続き,磁性流体中を伝播する超音波特性を詳細に調べた。昨年度の研究結果から,超音波の伝播速度および吸収率に関して異方性が存在すること,その異方性は印加磁場強度に異存すること,超音波伝播特性には印加磁場に対してヒステリシスが存在すること,等が明らかとなった。しかし,その原因の究明を行う事ができなかった。そこで,装置の改良を行い,1MHz,2MHz,4MHzの異なる周波数を用いた実験を行い,周波数によって超音波伝播の異方性が異なる事が明らかとなった。これらの周波数依存性は内部の磁性体微粒子のクラスタ構造に関係があると考えられるので,クラスタ形成を可視化するシステムを新たに構築し,クラスタ成長過程と印加磁場の関係を調べた。その結果,クラスタ撮影画像の明度の標準偏差によって,クラスタの大きさがある程度評価出来ることが明らかとなった。また,磁場を印加後もクラスタは6時間を経ても成長し続けている事が確認できた。これは,従来あまり知られていない事であり,今後様々な磁性流体現象を解明する上で貴重な知見である。昨年度に引き続いて,円筒容器内の磁性流体スワーリング実験も行った。昨年度の実験結果を踏まえ,磁気体積力,重力,流体慣性力を考慮した解析を行い,現象を特徴づけるパラメータを見出す事ができた。今後,UVPによる内部流速測定結果を踏まえた解析を行うことにより,詳細な流動メカニズム解明が期待できる。
MRSA複合感染を伴うウイルス感染症の防御に関する基礎研究

MRSA複合感染によるウイルス感染症の重症化に与るプロテアーゼの役割を解明することを目的とした。具体的には黄色ブドウ球菌のプロテアーゼにより活性化された血液凝固・線溶系酵素がウイルスの活性化・増殖を促進する、という可能性に着目し、インヒビターを用いてこの過程の解析をめざした。得られた成果を以下に述べる。1)精製酵素によるウイルス活性化作用の解析炎症局所で活性化される可能性の高い擬固・線溶系の酵素およびトリプシンのセンダイウイルスの増殖能を検討した結果、プラスミンおよびトリプシンはセンダイウイルスの感染力価を増加させたが、トロンビンおよびトリプターゼは用いた濃度では活性化作用を示さなかった。プラスミンおよびトリプシンによる活性化作用は活性部位指向型のインヒビターPASI535 (Nα-(4-aminomethylbenzoyl)-4-(3-picolyloxy)-L-phenylalaninen-hexylamide)およびMNAPPA ((2R,4R)-4-phenyl-[Nα-(7-methoxy-2-naphthalene-sulfonyl)-L-arginyl]-2-piperidinecarboxylic acid)により強く阻止され、活性部位指向型の小分子合成インヒビターがin vitroでウイルス感染を阻害する有用な手段であることが示された。2)黄色ブドウ球菌培養液中のプロテアーゼによる合成基質分解と小分子合成インヒビターによる阻害効果尿路感染症患者尿より分離した黄色ブドウ球菌の培養上清硫安分画は、ヒト血漿ユーグロブリン分画とあわせると合成蛍光基質bocValProArgMCA分解やフィブリン形成作用を示した。これらの作用は、黄色ブドウ球菌が放出するコアダラーゼがヒトプロトロンビンと結合して生じたスタフィロトロンビンによると考えられた。合成トロンビン・インヒビターアルガトロバンは上記スタフィロトロンビンの活性を強力に阻害した。スタフィロトロンビンの協力なインヒビターはいまだ報告されておらず、感染局所におけるフイブリン形成へのコアグラーゼ/スタフィロトロンビンの関与を解明する上で、本インヒビターは有用な手段となると期待される。研究実施計画1.精製酵素によるウイルス活性化作用の解析血漿カリクレイン、トリプトシン、プラスミン、トロンビン、トリプターゼのウイルス活性化作用を検討した。血漿カリクレインはヒト血漿を原材料として、PKSI527-アフィニテイクロマトグラフィにより精製し(研究発表1)、高純度の血漿カリクレイン標品を得た。トリプトシン(牛、Mochida)、プラスミン(ヒト、Chromogenix)、トリプターゼ(Cortex)は市販の精製酵素標品を用いた。センダイウイルス活性化作用の検討のために、抗ウイルス抗体を用いた免疫染色測定法を確立した。プロテアーゼと37°Cで10分間作用させたセンダイウイルスを、confluentに培養したLIC-MK2細胞に感染させ、抗センダイウイルス血清を用いてAvidin-Biotin-Peroxidase法により感染細胞の数を測定した。本方法により、トリプシン、プラスミン、血漿カリクレインにセンダイウイルス活性化作用が見られた。トロンビン(50100u/ml)は弱いながらセンダイウイルス活性化作用を示したが、トリプターゼには用いた濃度(0.1^5μg/ml)では活性化作用は見られなかった。研究実施計画2.黄色ブドウ球菌培養液中のプロテアーゼの合成基質分解およびこれに対する各種インヒビターによる阻害スペクトルの解明