hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
オブジェクト指向型ソフトウェアの仕様記述と検証及び実行プログラム導出

本研究はオブジェクト指向ソフトウェアの高品質設計方法,高信頼性ソフトウェア導出のための仕様記述方法,および,効率のよい実行プログラム導出方法の確立をその目標にしている.本研究は,用いる仕様記述モデルに関して,ペトリネットおよびその拡張モデルを用いたアプローチと,時間オートマトンを用いたアプローチに大別できる.1.ペトリネットおよびその拡張モデルを用いた設計:トークンを時間拡張したペトリネットモデルを提案し,そのモデルに基づいたワークフロー記述,およびそのワークフローに基づいたスケジュール管理機構および処理系を提案し,発表した.また,ペトリネットによる動作仕様記述からの携帯端末向けのアプリケーション開発方法を考案し,発表した.提案方式では携帯端末の限られたリソース上で効率よく実行するため,ペトリネットで記述された制御フローから逐次必要な部分コードをサーバーから必要に応じて転送する.実験により有用性を評価した.2.時間オートマトンモデルを用いた設計と検証:GUIのシナリオ記述を時間拡張オートマトンベースで行う方法を提案した.この方法では,シナリオの断片記述と合成パターンを指定して,全体のシナリオを表す時間オートマトンを自動合成する.次いで,時間制約を満たすプログラムの設計方法を考案した.上位記述にUML/OCLを用いて設計記述を行い,コンポーネントベースの設計と検証作業を二段階に分けることにより,システム全体に課せられたQoS制約が満たされることを保証し,さらに制御コードを導出する.オーディオビデオネットワークプロトコルの例題で有用性を評価した.本研究はオブジェクト指向ソフトウェアの高品質設計方法,高信頼性ソフトウェア導出のための仕様記述方法,および,効率のよい実行プログラム導出方法の確立をその目標にしている.本研究は,用いる仕様記述モデルに関して,ペトリネットおよびその拡張モデルを用いたアプローチと,時間オートマトンを用いたアプローチに大別できる.1.ペトリネットおよびその拡張モデルを用いた設計:トークンを時間拡張したペトリネットモデルを提案し,そのモデルに基づいたワークフロー記述,およびそのワークフローに基づいたスケジュール管理機構および処理系を提案し,発表した.また,ペトリネットによる動作仕様記述からの携帯端末向けのアプリケーション開発方法を考案し,発表した.提案方式では携帯端末の限られたリソース上で効率よく実行するため,ペトリネットで記述された制御フローから逐次必要な部分コードをサーバーから必要に応じて転送する.実験により有用性を評価した.2.時間オートマトンモデルを用いた設計と検証:GUIのシナリオ記述を時間拡張オートマトンベースで行う方法を提案した.この方法では,シナリオの断片記述と合成パターンを指定して,全体のシナリオを表す時間オートマトンを自動合成する.次いで,時間制約を満たすプログラムの設計方法を考案した.上位記述にUML/OCLを用いて設計記述を行い,コンポーネントベースの設計と検証作業を二段階に分けることにより,システム全体に課せられたQoS制約が満たされることを保証し,さらに制御コードを導出する.オーディオビデオネットワークプロトコルの例題で有用性を評価した.オブジェクト指向ソフトウェア開発ではUML,ステートチャート,カラーペトリネットが多く利用される.本研究では,オブジェクトの動作を視覚表現可能なカラーペトリネットで,オブジェクトの静的関係をUMLで記述するという仕様記述モデルを採用し,対象とする有用な部分クラスを決定し,その記述・検証・実行のための手法を考案し,支援系を作成する.今年度は,カラーペトリネットに時間の概念を導入したモデルの考案を行い,そのモデルのグループウェアへの適用について研究を行った.カラーペトリネットの発火に実行時間制約を付けるだけでなく,発火に時間幅を設け中断を許すところに特徴があり,その結果,グループワークなどの分散協調作業がより自然に記述できる.提案ペトリネットで記述されたグループワークの全体記述から導出された分散実行クライアントは実行スケジュールに従い,実行すべき動作(コマンド,プログラム)を逐次実行していく.これらの中間結果を研究会で報告した.また,分散オブジェクトから構成されるGUIアプリケーションを自動導出するための方法論について考案した.提案手法では,GUIの部分的な複数個の動作系列の記述から,複数の時間オートマトン自動合成し,時間オートマトンを各オブジェクトに対応させてプログラムコードを生成することによって時間制約を持つGULを効率よく生成することができる.この方法論を研究会で発表した,今後は,この手法に基づいたGUIの分散オブジェクトプログラムを生成するプログラム導出系を作成する.またカラーペトリネットで記述された全体仕様に対する性質検証の方法論についても今後検討を進めていきたい.本研究では,分散オブジェクトプログラムの仕様を抽象度の高い記述モデルで記述し,その動的性質や機能の正しさを検証した上でプログラムコードを自動導出することで,設計・実装時の誤りを削減し,信頼性の高い分散オブジェクトプログラムを少ない設計コストで実現するための方法論に関する研究を行っている.今年度は,カラーペトリネット仕様からのJavaプログラムコード自動導出アルゴリズムについて検討し,それに基づく自動導出系のプロトタイプ実装を行った.自動導出アルゴリズムでは,近年の携帯端末クライアントの普及を考慮し,クライアントメモリ制約下においても与えられた仕様を満たしてプログラムが実行されていくようにした.このため,導出アルゴリズムは,サーバ及びクライアントへの適切な機能分担及びプログラムデータの配置を行い,クライアント側でインタプリタ方式で実行するコードを導出する.なお,実行時にはサーバ・クライアント間の通信量がなるべく少なくなるように工夫している.複数人によるコラボレーションフロー管理の例題記述を行い,作成した自動導出系を用いて対応するJavaコードを導出し,Java携帯端末を含む分散環境上で実行実行を行った.その結果,そのようなクライアントを含む環境においても導出したコードは問題なく実行できることが確認できた.これらの中間成果は電子情報通信学会の研究会等で発表した.

今後はカラーペトリネットで記述された仕様の性質検証について,オブジェクト指向プログラムに適した方法論の検討を行う予定である.本研究ではカラーペトリネットなどの高水準の形式的モデルから,Javaで記述された分散プログラムを自動導出する方法論を目指して研究してきている.時間的要素を考慮にいれるとカラーペトリネットモデルの他に時間オートマトンネットワークも記述モデルとして表現能力がある.そこで,本年度は,特に,時間オートマトンネットワークモデルによるコンポーネントベースの実時間システム設計に着目し,マルチメディアシステムの時間QoS(スループット,ジッタ,遅延)の検証について研究を行ってきた.提案手法では,時間オートマトンネットワークとして記述されたシステムの各コンポーネントに対して,要求される時間QoSが守れるかどうかの検証をUPPAAL等を用いて行う.システム全体を同様の方法で行うと状態爆発によるメモリ空間の圧迫が問題となるので,各コンポーネントに課された提供時間QoSとコンポーネントの接続関係の2つを入力とし,それらがシステム全体への要求時間QoSを満たすかどうかの判定問題を定式化し,その問題を線形制約の非可解性問題に帰着した.この方法論の正しさを京都大学で行われた計算機科学基礎理論の研究会で発表した.上記の方法論を元にコンポーネントベースのマルチメディアシステムの総合的な開発方法を定め,電子情報通信学会のソフトウェアサイエンス研究会で発表した.提案方法論では提供QoSに対する要求QoSの一貫性を線形制約の非可解性判定問題として高速に解いた後,各コンポーネントの時間的動作を時間オートマトンで記述し,確かめる.その後,時間制約を満たすように動作するJavaコードを自動導出するこの導出系のプロトタイプをすでに開発している.導出法については電子情報通信学会の春季総合大会で発表予定である.今後は例題などに適用し,導出されるJavaコードの改善など行う予定である.本研究はオブジェクト指向ソフトウェアの高品質設計方法,高信頼性ソフトウェア導出のための仕様記述方法,および,効率のよい実行プログラム導出方法の確立をその目標にしている.昨年度からは,時間制約を満たすプログラムの設計方法を提案し,その有用性を調べている.今年度は昨年度の研究を踏まえ,上位記述にUML/OCLを用いて設計記述を行い,コンポーネントベースの設計と検証作業を二段階に分けることにより,システム全体に課せられたQoS制約が満たされることを保障し,さらに制御コードを導出する方法を考案した.上位設計においては,各コンポーネントの接続関係と各コンポーネントの提供時間QoS制約(スループット,ジッター,遅延),及び,システム全体の要求
他者と自由についての古代ユダヤ思想と古代ギリシア思想の比較研究

研究計画に従って、研究代表者及び分担者の各自が各担当分野で「自由」と「他者」概念の検討をテキスト読解を基礎としつつ遂行し、その成果を発表した。研究代表者は、古代ヘブライ思想における他者と自由の問題について、様々な研究成果を公にした。キリスト教学会では「旧約的一神教の再構築」という基調講演を、また旧約学会のシンポジウムでは「預言者と申命記主義」というシンポジウム発題をして、それぞれ、同名の論文として発表した。またギリシアとヘブライの倫理思想を比較した英語の著作.A Comparative Study of the Origins of Ethical Thought : Hellenism and Hebraism, Rowman & Littlefield Publishers,2005,281+xviiipp.を上梓し、また『旧約聖書の思想24の断章』の改訂版、講談社学術文庫として、『倫理思想の源流-ギリシアとヘブライの場合』の改訂版を放送大学教育振興会から出版した。研究分担者は、「自由」については国際学会で口頭発表し、プラトンの文化論がグローバリゼーション化されている現代文化に批判的であらざるを得ないのは彼が独自の自由観を有しているからだと明らかにした。また「他者」については研究成果報告書にて、他者を理解不可能性と規定すると、ソクラテスは私たちにとって他者であるが、しかし他方で多くの人にとっては他者である対話相手や感情はソクラテスにとっては他者でありえないのではないかという疑念が生ずることを指摘した。その上で通常他人との関わりで理解される正義をプラトンがむしろ魂の調和として把握するのは、ソクラテスがすでに正義をそのように把握しているからこそであると主張した。平成16年度には研究計画に従って、研究代表者及び分担者の各自が各分野で「自由」と「他者」概念の検討をテキスト読解を基礎としつつ行ない、17年度の纏めに向けて相互に情報交換、批判的対論を行っている。研究代表者は、夏前はウィーン大学哲学科およびエッセン大学聖書学科での講義・演習において、ヘブライ・ギリシアそして日本の「自由」論、「他者」論の比較を行い、またドイツ・オーストリアの学者との学術交流に努めた。その結果は11)の項目に挙げた英語の著作で発表された。秋は、日本キリスト教学会の一神教をめぐる基調講演、日本旧約学会の申命記主義をめぐるシンポジウムでの発題等で、この問題を展開した。そして冬は、『倫理思想の源流-ギリシアとヘブライの場合』、『旧約聖書の思想』という著作の、それぞれの改訂増補版の執筆と、上記学会や講義の内容を纏めた論文の執筆に従事した。いずれも本研究課題に関わり、来年度その纏めをするための基礎となる研究である。研究分担者は、古代ギリシア倫理思想における自由概念をとりわけプラトンの『国家』を中心に検討した。これによりプラトンが理想とする国家は、一般に見解とは異なり、自由な国家であること、思慮を伴った正義を持つ人のみが自由であることが明らかにされた。研究成果の一部は英語論文として発表された。夏にはドイツで開かれた国際プラトン学会に参加し、様々な国の研究者と学術交流をし、また当地での資料収集を行った。また古代ギリシア倫理思想における他者概念は、ソクラテスにおけるダイモニオンや感情といった観点からなされるべきとの知見がテキスト読解作業を通じて得られた。双方の研究成果は来年度、密接な形で纏められる予定である。平成17年度は16年度に引き続き、研究計画に従って、研究代表者及び分担者の各自が各担当分野で「自由」と「他者」概念の検討をテキスト読解を基礎としつつ遂行し、その成果を発表した。

またギリシアとヘブライの倫理思想を比較した英語の著作A Comparative Study of the Origins of Ethical Thought : Hellenism and Hebraism, Rowman & Littlefield Publishers, 2005, 281+xviiipp.を上梓し、また『旧約聖書の思想24の断章』の改訂版、講談社学術文庫として、『倫理思想の源流-ギリシアとヘブライの場合』の改訂版を放送大学教育振興会から出版した。研究分担者は、古代ギリシア倫理思想における自由概念をとりわけプラトンの『国家』篇を中心に、経済との関連を軸として探った。その成果として、夏にギリシアで開かれた国際学会において`Platoon Culture and Freedom in the Age of Globalisation'というタイトルで発表し、プラトンの経済観が当時のアテナイ帝国主義の批判に基づくものであることを指摘した。また、他者概念については不正を被りながらも怒りを示さないソクラテスの姿を『ソクラテスの弁明』篇と『クリトン』篇を基に分析し、ソクラテスにとっての他者の理解の一助とした。研究代表者と分担者の研究成果は『科学研究費研究成果報告書』にまとめる予定である。
水素結合型遷移金属錯体に基づく分子性導体の開発

水素結合を伴った電荷移動錯体は電子とプロトンの相互作用により種々の興味ある物性が期待される.このような考えに金属元素のレドックス特性を導入した新しいプロトン-電子連動系の開発を行っている.金属錯体を用いることによりM-MあるいはM-Lの大きな分子間相互作用が得られると考えられる.本年度は先ず,ドナー分子としてエチレンジアミノグリオキシム(H_2deag)を配位子とする遷移金属錯体(1:M=Ni,Pd,Pt)を合成した.次いで,これらの塩酸塩からTCNQとの電荷移動錯体を合成した.得られたTCNQ錯体ハ元素分析の結果から,いずれも遷移金属錯体とTCNQが1:1の組成であることがわかった.パラジウム錯体については,拡散法により板状の単結晶を得ることができた.錯体(M=Pd)の単結晶のX線結晶構造解析から,遷移金属錯体とTCNQは分離積層型でstackingしており,これら二種のカラム間に水素結合が存在していることがわかった.また,隣接する遷移金属錯体がカラム間にもオキシム酸素を介した水素結合の存在が認められた.電気伝導度測定から,金属的挙動は示さなかったが,比較的高い伝導度を有することが分かった.赤外スペクトルの温度依存性の実験から,低温でTCNQ分子が二量化したとして解釈できる結果を得た.今後,この金属元素を含む高い伝導度を持つ電荷移動錯体の高圧化での物性測定を予定している.水素結合を伴った電荷移動錯体は電子とプロトンの相互作用により種々の興味ある物性が期待される.このような考えに金属元素のレドックス特性を導入した新しいプロトン-電子連動系の開発を行っている.金属錯体を用いることによりM-MあるいはM-Lの大きな分子間相互作用が得られると考えられる.本年度は先ず,ドナー分子としてエチレンジアミノグリオキシム(H_2deag)を配位子とする遷移金属錯体(1:M=Ni,Pd,Pt)を合成した.次いで,これらの塩酸塩からTCNQとの電荷移動錯体を合成した.得られたTCNQ錯体ハ元素分析の結果から,いずれも遷移金属錯体とTCNQが1:1の組成であることがわかった.パラジウム錯体については,拡散法により板状の単結晶を得ることができた.錯体(M=Pd)の単結晶のX線結晶構造解析から,遷移金属錯体とTCNQは分離積層型でstackingしており,これら二種のカラム間に水素結合が存在していることがわかった.また,隣接する遷移金属錯体がカラム間にもオキシム酸素を介した水素結合の存在が認められた.電気伝導度測定から,金属的挙動は示さなかったが,比較的高い伝導度を有することが分かった.赤外スペクトルの温度依存性の実験から,低温でTCNQ分子が二量化したとして解釈できる結果を得た.今後,この金属元素を含む高い伝導度を持つ電荷移動錯体の高圧化での物性測定を予定している.
各種動物と人に寄生するクリプトスポリジウムの診断・予防・治療法の確立

1.クリプトスポリジウム(Cr)感染の生前診断のためのオ-シスト分離精製法とOPG値測定法の確立:ビ-カ-内で冀便1gに4mlの水を加え,マグネチックスタ-ラ-で30分以上攪拌する。この後,鶏では比重1.25前後,牛では比重1.20前後の蔗糖液を8倍量加えてさらに充分に混和して40倍または80倍の希釈液を作製する。これから0.1mlをプランクトン計算盤に移し,24×36mmのカバ-グラスをかけ,約5分間放置する。この後鏡下でオ-シスト数を測定する。この方法により,冀便中の集オ-シストとオ-シスト排泄の推移を観察できる。2.Crのオ-シストの形態学的比較:我々が1983年からin vivoで継代・維持している鶏由来のCrオ-シストの大きさは平均6.0×4.5mmであった。この大きは鳥類で知られているC.meleagridis並びにC.baileyiの中間に位置し,新種の可能性が高い。また,1991年1月岡山の子牛に多発したCr感染症から分離して維持しているCrオ-シストは,形態学的にはC.parvumに酷以していた。このようにオ-シストの形態はCrの種の同定に極めて有効である。3.Crの免疫原性: 1週齢の鶏にCrを実験的に感染させ,以後感染率の推移を調べた。その結果,感染は産卵鶏,肉用鶏双方とも7週齢まで持続した。しかし,8週齢以降ではCr感染は見られず,自然免疫の成立が示唆された。一方,Cr感染耐過鶏(初感染後3,4週)にCrオ-シストで攻撃し,その後におけるオ-シスト排泄状況を調べた。その結果,初感染時の接種オ-シスト数が少ない時再攻撃を行ってもオ-シストを排泄せず,Crの免疫原性が示唆された。4.鶏のファブリキウス嚢(BF)の器官培養の確立:4週齢のSPF鶏のBFの嚢上皮の薄片をトリプシンEDTA液で培養し得た。この培養系は,今後Crの培養に有効と考えられる。1.クリプトスポリジウム(Cr)の純化野外の鶏からCrを分離する時、しばしば鶏コクシジウムが混合感染している。そこでコクシジウムを除くことを試みた。先ず、コクジジウムを含むCrをヒナに接種し、これより7日間市販の抗コクシジウム剤を投与した。その後ヒナから排泄されたCrを浮游法によって収集し、これを別のヒナに接種したところ、Crの純化が成功した。また、抗コクシジウム剤投与後のヒナのファブリキウス嚢の乳剤を別のヒナに接種した所、コクシジウムとの混合感染はなく、純化が成功した。以上の成績から、抗コクシジウム剤はCrに効果を示さないことも立証された。2.野外のネズミのCrの診断法の確立と感染調査Crの人と動物あるいは動物間、人同志間の媒介に野ネズミの関与を想定し、北海道の限られた地域のネズミのCr感染調査を行った。

検査はエヅヤチネズミ24頭、アカネズミ6頭、ヒメネズミ15頭について実施した。検査方法は、これらの新鮮な糞便からオーシストを浮游法で収集し、キニヨンあるいは無染色で行う方法に從った。その結果、検査例の5367%にCr寄生が確認された。また、寄生例の一部の小腸と結腸を光顕的、電顕的に検策し、それらの部位にCrを確認した。よって、野ネズミのCrの診断にも浮游法、キニヨン染色が適することを確認した。3.鶏のファブリキウス(F)嚢の器官培養によるCr培養の試み本年度はF嚢の器官培養の可否を検討した。その結果、次の方法によって8日間の培養が可能であった。F嚢を数mm^3の組織片の細切し、RPMI1640で器官培養を行う方法が最も良かった。1.鶏のクリプトスポリジウムのオ-シストの排泄状況クリプトスポリジウム症の生前診断や治療効果の判定のために、糞便中に排泄されるオ-シストの数ならびに排泄期間を知ることは極めて有益である。そこで、鶏にクリプトスポリジウム(CR)のオ-シストを接種し、その接種数と再生オ-シスト数との関係を調べた。方法としてはオ-シスト3.5×10^6個とその10倍階段希釈系列を作製して鶏にそれぞれ経口接種し、OPG値の推移を調べた。その結果、オ-シスト再生日数は67日、排泄期間は23週間で、OPG値は10^6個接種群で7日目から10^510^6個台を、10^5と10^4個群で910日目から10^5個台を約10日間示したが、10^3と10^2個群は10^310^4個台を示し、排泄期間も短かった。2.間接免疫蛍光法によるクリプトスポリジウムの検出CRは小型であるため、特に糞便中のCRのオ-シスト検出が困難である。そこで我々は蛍光抗体法を応用すべく検討していたところ、米国のMeridiam Diagnostic,Inc.で、間接免疫蛍光法用の抗体が開発された。そこで我々は、この抗体を取り寄せて、鶏の糞便中のオ-シスト検出を試みた。この抗体はモノクロ-ナルで、オ-シストの細胞壁に結合するものである。試みた結果では、抗体の希釈倍数、オ-シストの成熟度会によって、陽性結果にかなりの変動が見られ、これを一定化すべく目下検索を重ね中である。3.鶏のファブリキウス嚢の器官培養によるクリプトスポリジウムの培養の試みこの器官培養が8日間可能であることは昨年明らかにした。この培養系にクリプトスポリジウムを感染させたが、現在までのことろ感染成立に至ってはいない。これには接種材料、殊に脱オ-シストしたスポロゾイトの調製に問題があり、現在これについての検討を実施中である。1.我々が1983年からin vivoで継代・維持しているクリプトスポリジウム(Cr)のオ-シストの形態学的観察を行い,その分類学的位置づけを検討した。オ-シストは長径5.16.6μm(平均6.0μm),短径4.05.2μm(平均4.5μm),長短径比1.12×1.63(平均1.32μm)であった。この大きさはすでに鶏のCrとして知られているC.meleagridis並びにC.baileyiのオ-シストの大きさの中間である。この大きさの違いのほか,寄生がファブリキウス嚢のほか盲腸にも起こることから,我々のCrは新種である可能性が示唆された。2.Cr感染に自然免疫が成立するか否かを検討した。すなわち,1週齢の産卵鶏および肉用鶏にオ-シストを感染させ,1週間おきに病理組織学的に観察して感染率を調べた。その結果,産卵鶏の感染率は4,5週齢100%,6週齢40%,7週齢20%で,8週齢以降観察した14週齢までは0%であった。肉用鶏の感染率は,2週齢67%,3週齢83%,4週齢67%,57週齢17%,8週齢以降0%であった。以上の成績から,Cr感染には自然免疫の成立が示唆された。
韓国の生鮮青果物流通改善政策が対日本輸出に与える影響分析

韓国の青果物流通改善政策は基本的に日本型共同出荷をモデルとしている。しかし、日本型モデルは農協を出荷主体としているに比して、韓国は農協と営農法人を主体としている。農協共同出荷も農協の買い取りによる共同出荷に止まっている。政府は農協に共同出荷に力を入れているが、共同出荷が軌道に乗っているのは営農法人である。営農法人は少数農家で構成されているため、農家間の合意が得られるところにその理由がある。農協主体の共同出荷の成否は農家の意識にあると思われる。農家の出荷先決定要因を分析した結果、産地商人と農家の絆が強いこと、農協に対する不信感があること、多数の農家間の合意形成が至難であること、が分かった。また、日本輸出は営農法人又は大規模農家と輸出入業者間の契約による輸出がほとんどである。しかし、政府の補助によって発足した営農法人は、今後の大幅な補助金削減と自己資金不足で投資更新が難しいために、衰退すると思われる。その上、生産主体と貿易主体間のrisk sharingがなく、sport transactionのみであり、常にconflictが生じている。以上の今年度研究で得た知見と前年度の知見から、流通改善政策の成否と日本輸出に与える影響について、次のような結論が得られた。1.規格・共同出荷は農協の販売事業軽視の歴史と指導者不在から見て、農家の信頼を得るには時間がかかる。2.現時点での定時・定量・定質出荷による日本輸出は営農法人や大規模農家が生産主体であるが、risk sharing sport transactionの問題点を抱えている。3.営農法人は政府補助金の大幅な削減と自己資本不足で10年内に経営危機に直面する。4.日韓間の品質格差は大幅に縮小している。また、農家の栽培技術向上と政策的指導によって更なる縮小が見込まれる。5.韓国内での供給過剰・飽和需要や中国からの輸出が増加することから、日本輸出の圧力は更に増加する。6.以上の結論から、韓国産青果物の日本輸出は単発的なダンピング輸出が、当分の間、繰り返し起こり、日本市場の不安定をもたらすと思われる。全体研究計画は韓国の青果物生産・需要の概要、政策の概要、共同出荷による定時・定量・持続的取引の可能性分析日本輸出に与える影響分析となっている。今年度は韓国の青果物生産・需要の概要及び政策の概要を分析した。その結果、得られた知見は以下の通りである。1.生産において、米の輸入自由化が予想されるなかで、野菜・果樹作作への転作が進み、生産過剰の恐れが生じている。特に施設野菜の急増によって供給の周年化が確立した。2.また、品種も日本の種子や苗、または改良した日本種子や苗が多く栽培され、品質も糖度が若干低いものの、全体的に日本産の品質と非常に近似している。3.需要において、通貨危機による所得激減は消費の低迷を招いているなかで、高品質趣向が台頭し、生産の高品質化に拍車をかける可能性が高い。4.流通政策は産地流通改善、価格安定であり、その財源は一般会計予算、農漁村特別税、農産物安定基金である。5.政策は農協販売事業や農業法人を通して実施しているが、中心に置いてあるのは農協販売事業である。また、農協販売事業の調査によって、(1)政策による農協販売事業の展開を行政連携型、広域園芸農協型、小規模園芸農協型、有指導者総合農協型、無指導者総合農協型、作目班混在型に分類できた(2)そのうち、広域園芸農協型と無指導者総合農協型を除く他の型は、共同出荷へ着実に移行している(3)何れの農協においても指導者の力量が重要である、ことが分かった。政策の鍵となるのは農協の指導者育成といえる。

5.韓国内での供給過剰・飽和需要や中国からの輸出が増加することから、日本輸出の圧力は更に増加する。6.以上の結論から、韓国産青果物の日本輸出は単発的なダンピング輸出が、当分の間、繰り返し起こり、日本市場の不安定をもたらすと思われる。
生態系からみた近世の自然環境の研究

大規模な新田開発により、近世前期に日本の耕地は倍増した。水田が造成されたことで自然環境が一変したのだが、これが環境破壊なのかどうかは意見がわかれている。そこで近世の自然環境の豊かさを検証するため、水田に棲息する生き物に注目した。たとえば、ヒトからみれば水田は耕地にしかすぎないが、魚・貝・鳥といった生き物から見れば水辺となる。その水辺に多くの生き物が棲み、豊かな生態系が成り立っていたこと、すなわち近世型生態系が成り立っていたことが明らかになった。そこで注目したのは水田に棲息する生き物、たとえば魚・貝・鳥である。ヒトからみれば水田は耕地にしか過ぎない。しかし、生き物から見れば水辺となる。水田が水辺となり、そこに多くの生き物が棲み豊かな生態系が成り立っていたならば、近世の自然環境は豊かだったことを意味する。すなわち、生態系という視点から水田を研究することで、近世の自然環境の豊かさを検証する。これが本研究の目的である。初年度にあたる平成21年度は、まず史料調査とフィールド・ワークを中心に研究を進めた。分析する史料は、近世中期の金沢平野における百姓の暮らしを描いた絵農書「農業図絵」である。「農業図絵」の原本は今のところ発見されておらず、写本がいくつかある。そのつ西尾市岩瀬文庫が所蔵する写本の調査をおこない、これが最も原本に近いことを確認した。次に「農業図絵」に描かれているのは金沢平野なので、そこを領する加賀藩の史料調査を金沢市立玉川図書館近世史料館でおこなった。今日の水田は圃場整備がおこなわれているため、水田に棲む生き物が少ない。近世とは明らかに生態系が違う。そこで圃場整備があまり進んでいないタイ東北部を実地踏査し、水田漁撈に注目することで、近世でどのような生態系が成り立っているのかを考察した。また、水田漁撈に欠かせない道具として筌がある。今でも筌漁がおこなわれている庄内平野でもフィールド・ワークをおこない、数多くの筌が展示されている財団法人致道博物館では、その材料・使用法などを調査した。近世中期に金沢平野の百姓・土屋又三郎は絵農書「農業図絵」を描いたが、この史料の画期的なところは、絵画でもってして農業技術を百姓に広めようとしているところである。これまで歴史学といえば文字を中心とした史料が分析の中心で、このような絵画が注目されることはあまりなかった。この「農業図絵」を一点一点解読していくことによって、近世の自然景観を復原していくことが本研究の目的である。(1)史料調査・分析「農業図絵」の舞台となった金沢平野を支配していた加賀藩を理解するため、同藩の史料を所蔵している金沢市立玉川図書館近世史料館加越能文庫の史料調査をおこない、「産物帳」を中心とした史料を分析した。それだけではなく、金沢平野とその周辺、さらには野生のコウノトリが放鳥されている兵庫県立コウノトリの郷公園などのフィールドワークをおこなった。先行研究を調査するために国立国会図書館をはじめとした各地の図書館で文献調査をおこなった。(2)研究成果「農業図絵」を読み解いていくなかで、とくに注目したのは水田で作付けされている米の品種であった。これまでの近世史研究では、「米」は重要な研究テーマの1つだった。しかし、「米」とひとくくりにするだけで、その品種にはあまり注目が払われていなかった。分析した結果、金沢平野では近世中期の段階で、100種以上もの米が作付けされていたことがわかった。百姓は早稲・中稲・晩稲を使い分けて作付けすることで、災害へのリスクを分散していたと考えられる。これは、それだけ百姓が自然界への理解を深めていたことを意味する。この研究成果を学術論文としてまとめ、本学の研究紀要において発表した。近世中期に金沢平野の篤農家・土屋又三郎は、絵農書「農業図絵」を描き、農書「耕稼春秋」を執筆した。本研究では、「耕稼春秋」を用いながら「農業図絵」に描かれている場面を分析し、水田を中心にした近世の自然環境を明らかにした。生き物の捕食-被食関係から生態系を復原した結果、近世の自然環境を理解する手立てとして、近世型生態系という、新たな概念を提唱するに至った。研究は、以下に示した2つの方法でおこなった。1史料調査・分析「農業図絵」の舞台となった金沢平野を支配していた加賀藩の理解を深めるため、同藩の史料を所蔵している金沢市立玉川図書館近世史料館の史料調査・分析をこれまでの2年間おこなってきた。

本年度は、それらの史料を最終確認するために同館を訪れ、史料の校訂作業をおこなった。また、「農業図絵」そのものの史料確認をするために、西尾市岩瀬文庫を調査した。2研究報告・論文執筆史料分析・校訂作業と同時進行で、研究成果をまとめていった。岡山と東京の2か所でおこなわれた環境史の研究者による合同研究会では、研究成果の中間報告をおこなった。具体的なタイトルは、「開発と臨界」(岡山)と「新田開発」(東京)である。研究の内容については、生態系を復原した結果、近世の新田開発によって水田と草山が造成され、ヒト(武士)-タカとヒト(百姓)-ウマ・ウシを軸にした自然環境が成り立っていたこと、すなわち近世型生態系が形成されたという結論を導き出した。最終的な成果は論文と著書(共著)で公表するが、後者は編集作業に時間を要することから、公表できるのは次年度以降と予想される。
基板制御による非平衡新物質相の創製と相変態

基板上に金属薄膜を積層すると,基板の拘束を受けて,平衡状態図にない構造をもつ物質を創製することが出来る.これら非平衡物質,および非平衡物質に各種処理を施し相変態を引き起こさせた物質では,従来にない特性を発揮することが期待できる.しかし,非平衡物質の創製とその相変態は種々の条件により左右され,支配因子について十分に理解されていない.我々のこれまでの一連の研究で,基板の種類,積層膜犀,バッファ層,シード層を制御することにより,非平衡結晶の創製に成功してきた.本研究では,Dy/Cr,Al/Agを選び,MBE法により結晶成長させ,基板拘束下という特殊環境下での相変態の様子を,明らかにすることを試みた.Dy/Cr人工格子では,CrはMgO(100)上にCr(100)および(110)上にCr(211)がエピタクシアル成畏させることができた.その上のDyもエピタクシアル成長させることができた.Cr上のDyは,Dy(1012)面が成長面であった.この面はDy[1210]方向を回転軸として,±3.7度傾斜していた.しかし,それ以上の積層では,CrもDyも膜厚が薄いとき,アモルファスあるいは微結晶となり.厚くなると多結晶になった.Al/Ag人工格子は,設定構造を[Al(1.8nm)/Ag(1.2nm)]60とし,Al,Ag共に成長速度0.1ML/s,基板温度20,50,70,100°Cにて,(100)Agバッファ層上にMBE成長させた.いずれの場合も初期には(100)のエピタキシャル成長が認められた.また,Agバッファ層上のAl層の成長時にはRHEED振動が認められた.しかし,積層を繰り返す内に(111)成長する領域が現れ,次第に優勢になっていき,最終的にはすべて(111)成長に変わった.(100)成長の持続性は,基板温度に極めて敏感で,50°Cでは比較的長く続くが.20°Cや70°Cでは数回十数回の(100)bilayer成長を繰り返した後は(111)成長に変わった.基板上に金属薄膜を積層すると,基板の拘束を受けて,平衡状態図にない構造をもつ物質を創製することが出来る.これら非平衡物質,および非平衡物質に各種処理を施し相変態を引き起こさせた物質では,従来にない特性を発揮することが期待できる.しかし,非平衡物質の創製とその相変態は種々の条件により左右され,支配因子について十分に理解されていない.我々のこれまでの一連の研究で,基板の種類,積層膜犀,バッファ層,シード層を制御することにより,非平衡結晶の創製に成功してきた.本研究では,Dy/Cr,Al/Agを選び,MBE法により結晶成長させ,基板拘束下という特殊環境下での相変態の様子を,明らかにすることを試みた.Dy/Cr人工格子では,CrはMgO(100)上にCr(100)および(110)上にCr(211)がエピタクシアル成畏させることができた.その上のDyもエピタクシアル成長させることができた.Cr上のDyは,Dy(1012)面が成長面であった.この面はDy[1210]方向を回転軸として,±3.7度傾斜していた.しかし,それ以上の積層では,CrもDyも膜厚が薄いとき,アモルファスあるいは微結晶となり.厚くなると多結晶になった.Al/Ag人工格子は,設定構造を[Al(1.8nm)/Ag(1.2nm)]60とし,Al,Ag共に成長速度0.1ML/s,基板温度20,50,70,100°Cにて,(100)Agバッファ層上にMBE成長させた.いずれの場合も初期には(100)のエピタキシャル成長が認められた.また,Agバッファ層上のAl層の成長時にはRHEED振動が認められた.しかし,積層を繰り返す内に(111)成長する領域が現れ,次第に優勢になっていき,最終的にはすべて(111)成長に変わった.(100)成長の持続性は,基板温度に極めて敏感で,50°Cでは比較的長く続くが.20°Cや70°Cでは数回十数回の(100)bilayer成長を繰り返した後は(111)成長に変わった.
破骨細胞分化誘導に対する血管内被細胞増殖因子受容体機能の解析

rhVEGF-Eの投与により、op/opマウスの大腿骨に多数の破骨細胞の出現が観察された。VEGF165投与により正常マウスの上顎切歯骨歯根膜内に出現する破骨細胞数は、Flt-1、およびFlk-1中和抗体の投与によって有意に抑制された。また、Flt-1とFlk-1中和抗体の同時投与により抑制が前進し、単独投与群との間に有意差を認めた。以上の結果から、歯の移動時の歯周組織内においてVEGFとM-CSFの発現が亢進し、破骨細胞の分化誘導を主体とした骨改造に大きな影響を及ぼすことが示唆された。また、VEGFはFlt-1、およびFlk-1両受容体を介して破骨細胞の分化誘導を行うことが明らかとなった。血管内皮細胞増殖因子(VEGF)は血管新生や血管透過性を制御し、個体発生時や炎症などの病的状態における、様々な生物学的過程において重要な役割を果たすことが知られている。また、血管新生と骨代謝については、古くから密接な関連性が指摘されており、近年、マクロファージコロニー刺激因子(M-CSF)と同様に、VEGFが破骨細胞分化誘導能を有することが明らかにされた。さらに、マウスの実験的歯の移動時における骨芽細胞でのVEGF発現や、VEGF投与により誘導された破骨細胞が歯の移動を促進することが報告され、骨代謝におけるVEGFの役割が徐々に明らかになりつつある。本研究の目的は、VEGFによる破骨細胞誘導におけるシグナル伝達経路の解明を目指してVEGF受容体機能を明らかにすることにある。実験には、培養破骨前駆細胞RAW264.7細胞を用いてVEGFの受容体Flt-1とFlk-1の発現をRT-PCR、およびWestern Blotting法により検討した。その結果、RT-PCR、およびWestern Blotting法により、破骨前駆細胞にFlt-1、Flk-1受容体の遺伝子発現が認められた。以上の結果から、破骨前駆細胞はFlt-1、Flk-1受容体を発現し、両受容体を介して破骨細胞の分化誘導を行うことが示唆された。VEGFファミリーの一つであるrhVEGF-EはFlk-1のみを受容体として機能することから、大理石骨病マウス(op/opマウス)にVEGF-Eの投与を行い、出現する破骨細胞の観察を行った。さらに、VEGF 165の破骨細胞誘導能に与えるFlt-1、およびFlk-1中和抗体の影響を正常マウスを用いて検討した。その結果、以下の所見が明らかになった。2. VEGF 165投与により正常マウスの上顎切歯骨歯根膜内に出現する破骨細胞数は、Flt-1、およびFlk-1中和抗体の投与によって有意に抑制された。
メタンフェタミンとモルヒネの併用による毒性の増加に関する研究

メタンフェタミンとモルヒネの単独あるいは併用による投与後の死亡率と体温の変化がマウスを使って研究された。300mg/kgのモルヒネ(LD_<so>は670mg/kg)とメタンフェタミンを併用投与すると、メタンフェタミンのLD_<so>は95mg/kgから5mg/kgに減少した。又、モルヒネの投与(300mg/kg)は低体温を示し、一方メタンフェタミンの投与(5mg/kg)はわずかに体温を上昇させるが、両者を併用投与すると著明に体温が上昇した。死亡率においても、又体温変化においても、メタンフェタミンとモルヒネの併用投与は毒性の増強を示した。メタンフェタミン(5mg/kg)とモルヒネ(100mg/kg)の併用による体温上昇の増強に対する神経伝達物質の関与を調べるために、それらの受容体の遮断薬を前投与して、体温変化を調べた。その結果、メタンフェタミンによる高体温は、ハロペリドール(ドーパミン遮断薬)とケタンセリン(セロトニン遮断薬)によって完全に抑えられたが、ナロキソン(モルヒネ拮抗薬)によって逆に増強された。一方、メタンフェタミンとモルヒネの併用による体温上昇は、ナロキソン、ケタンセリン、プロプラノロール(βー遮断薬)により抑えられたが、ハロペリドールによっては抑えられなかった。トラゾリン(αー遮断薬)は、メタンフェタミン単独あるいはメタンフェタミンとモルヒネ併用による体温上昇には、全く関係なかった。これらの結果から、メタンフェタミンとモルヒネの併用による体温上昇の増強には、モルヒネレセプターや生体アミンが複雑に関与していることが示唆された。我々は,マウスにメタンフェタミンとモルヒネを同時投与すると著しく死亡率が上がること,そしてその際に体温の著明な上昇が起こることを発見している.そこで,この体温上昇がどのような機構により起こるのかを調べるために,モルヒネのアンタゴニストであるナロキソンあるいはドーパミンアンタゴニストであるハロペリドールを前処置したマウスを用いて実験した.ナロキソン(10mg/kg)の前投与はメタンフェタミン(5mg/kg)・モルヒネ(100mg/kg)同時投与による体温上昇を抑えるのみならず, 90分後には著明な体温下降を示した.一方,メタンフェタミン(5mg/kg)単独投与による体温上昇に対して,ナロキソンは抑制せず,逆に増強させた.このように,ナロキソンは体温上昇に関してモルヒネ存在下ではアンタゴニストとしての効果をモルヒネが存在しなし場合にはアゴニストとしての効果を示した.ハロペリドール(2.5mg/kg)を投与すると,体温は著明に下降する.しかし,ハロペリドール投与後メタンフェタミン・モルヒネを同時投与すると約1時間遅延するけれども,体温は著明な上昇を示した.一方,メタンフェタミン単独投与による体温上昇に関しては,ハロペリドールは完全に抑制した.メタンフェタミンによって起る高体温はドーパミンレセプターが重要であることが確認された.一方,メタンフェタミンによる高体温をモルヒネは増強するけれども,この増強効果にドーパミンレセプターは重要ではなく,オピエートレセプターが重要であることが示唆された.現在,メタンフェタミン単独投与あるいはメタンフェタミン・モルヒネ同時投与した時の脳内カテコールアミン量(視床下部,線条体,大脳皮貭)を測定・検討中である.我々は、マウスにメタンフェタミンとモルヒネを併用投与すると、それらの毒性が増強されること、又、メタンフェタミン単独投与よりもさらに著明な体温上昇が起ることを示した。

昨年度の報告書において、ドーパミンあるいはモルヒネの遮断薬を前処置することにより、メタンフェタミンの体温上昇にはドーパミンが重要な役割を果しているが、モルヒネによるメタンフェタミンの体温上昇の増強効果に対しては、オピオイドレセプターが重要であることを示した。本年度は、これらの体温上昇に対するノルエピネクリン及びセロトニンの影響を調べた。α、β、セロトニンの各受容体の遮断薬として、それぞれトラゾリン(5mg/kg)、プロプラノロール(5mg/kg)、ケタンセリン(2.5mg/kg)を用い、メタンフェタミン(5mg/kg)あるいはモルヒネ(100mg/kg)投与の30分前に皮下投与した。尚、体温(直腸温)は体温・皮膚温用温度計測器K923(宝工業K.K)にて測定した。いずれの遮断薬も、モルヒネ単独投与による体温下降に対しては、その下降を増強した。メタンフェタミン単独投与では、やや体温が上昇するが、その上昇に対してトラゾリンは効果なく、プロプラノロールは上昇を遅らせ、ケタンセリンはそれ自身による体温低下をさらに下げた。メタンフェタミンとモルヒネ併用による著明な体温上昇に対しては、トラゾリンは効果なく、プロプラノロール及びケタンセリンは、これらの単独の時よりもやゝ体温が下降し、その後徐々に上昇するが、前処置をしなかった時の体温には至らなかった。これらの結果からメタンフェタミンやモルヒネによる体温変化には複雑な生体アミンの関与が示唆された。
初期ストア派の政治哲学－法とポリスについての議論の再構築

今年度主に取り組んだ課題は、初期ストア派における規則と正しい行為の関係を明らかにすることである。研究の結果、行為の正しさを理性的な行為者の直観に帰する徳倫理学的な解釈も、状況に言及しない複数の対立しうる規則に帰する規則主義的な解釈も不十分であり、その行為が行われる状況のタイプによって行為の正しさは決定されると解釈するべきことが明らかになった。この成果は、川本愛「ストア派の倫理学における行為と規則について」『西洋古典学研究』63, 2015. 3. 11において出版されるとともに、第140回PHILETHセミナー(2014年6月)において、英語で口頭発表され、国外の研究者と意見を交わした。さらに、この解釈にしたがってセネカの94、95書簡を解釈し、ストア派が教育において用いる「忠告(praecepta)」はタイプ別の状況における正しい行為を指示するものであるということを明らかにした。この成果は、第26回政治哲学研究会(川本愛,'The Stoic Natural Law: praecepta and decreta in Seneca's 94th and 95th Letters', 2014年8月)において口頭で発表され、主に近現代の政治哲学を専門とする研究者たちと意見交換した。これらの作業を通じて、ストア派が従来考えられてきたよりも実践的な生の指針を示すことを企てていた可能性が見えてきた。今後は、ストア派が実践的な生をどのように論じたかをさらに研究したい。26年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、初期ストア派において法とポリスという概念がどのように再定義されたかという問題について取り組んだ。この問題について、法とポリスについて、ゼノン、クレアンテス、クリュシッポスのそれぞれがどのように再定義を行ったのかを明らかにした。主に、以下のことを指摘した。a)法は知者の徳として言われる場合と宿命あるいは摂理として言われる場合がある。b)ポリスは、人間の知者のポリスとして言われる場合と、神々と人間の知者を市民とする宇宙として言われる場合がある。c)全人類を市民とするポリスという概念は初期ストア派において確認されない。d)神々と人間の知者を市民とする宇宙をポリスと論じる主張は、ゼノン、クレアンテスには帰せられず、クリュシッポスに帰せられる。e)神々と知者のポリスの論証は、ゼノンにおける知者のポリスの議論と宇宙をポリスに喩える議論を組み合わせてクリュシッポスにおいて発展したと推測される。f)「知者だけが市民である」という命題は、法が知者の徳として再定義されていることを論拠としている。b)c)d)は、先行研究において論争されている点であるが、a)という解釈を新たに主張することによって、論争の解決に寄与した。従来の研究においても、法が知者のロゴス(理性)としても考えられているということは示唆されてきたが、クリュシッポスについての諸証言から、法が、全世界の統括原理である宿命とは区別される知者の徳として再定義されていることを説得的に論じることに成功した。e)f)については先行研究において論じられておらず、今後、新たな議論の活性化をもたらすだろう。これらの指摘によって、ストア派における政治哲学用語の再定義の解明に貢献した。昨年度は、主に以下のような成果を発表した。1初期ストア派におけるポリスと法のそれぞれの概念を明確化した。とくに重要な点として、従来あまり指摘されなかったが、ストア派におけるポリスの再定義は法の再定義を前提としていることを論じた。すなわち、ストア派は倫理学において法を知者(有徳な人間)の徳として再定義することによってポリスを知者を市民とする国家として再定義したのである。また、2初期ストア派における理想的共和国家の議論とコスモスーポリスの議論の関係という問題について、つぎのような発展的な解釈を提案した。すなわち、ゼノンにおいて論じられている自然学的なポリスの概念と倫理学的なポリスの概念がクリュシッボスにおいてコスモスーポリスとして統合されたということを論じた。すなわち、ゼノンは徳としての法に従う知者を市民とする共同体が真の国家であるという主張を彼の倫理学においてなし、それとは独立した主張として宇宙は宿命を法とする国家にたとえることができるという主張を自然学においてなし、その後クリュシッボスにおいてこれらの二つの主張は宇宙全体を法とする国家という思想に結実したのである。さらに3「全人類の協同関係」という概念は初期ストア派においては論じられず中期ストア派のパナイティオス以降に形成されたと従来考えられる傾向があったが、このような解釈に反論し、すでに初期ストア派においてこの概念が確認されるということを主張した。

さらに、この解釈にしたがってセネカの94、95書簡を解釈し、ストア派が教育において用いる「忠告(praecepta)」はタイプ別の状況における正しい行為を指示するものであるということを明らかにした。この成果は、第26回政治哲学研究会(川本愛,'The Stoic Natural Law: praecepta and decreta in Seneca's 94th and 95th Letters', 2014年8月)において口頭で発表され、主に近現代の政治哲学を専門とする研究者たちと意見交換した。これらの作業を通じて、ストア派が従来考えられてきたよりも実践的な生の指針を示すことを企てていた可能性が見えてきた。今後は、ストア派が実践的な生をどのように論じたかをさらに研究したい。26年度が最終年度であるため、記入しない。初期ストア派における政治哲学という先行研究が乏しいテーマについて、いくつかの新しい解釈を提案することに成功した。このことは、+分に評価されてよいと思われる。しかしながら、当該年度中に研究の成果を十分に発表することが出来なかった。ただし、研究の成果の一部は、すでに論文と学会において発表されることが決定している。初期ストア派の政治哲学を再構築するという目的に基づいた研究を行い、その成果を国内外に発信することができた。戎果を単行本という形で多くの人に公にすることはまだでぎていないので、このことは今後の目標としたい。新たに以下の問題に取り組む。-初期ストア派における知者と愚者の区別と、中後期ストア派における全人類の連帯という概念との間の断絶はどのように説明されるのか。-ゼノン『国家』は、古代ギリシアにおける政治哲学の伝統においてどのように位置づけられるか。特に、プラトン『国家』をゼノンはどのように批判し、シノペのディオゲネス『国家』をゼノンはどのように継承しているのか。今年度は、1ストア派の倫理学における規則を考察する。具体的には、ある行為が「適切な行為」であることの根拠は何らかの規則の体系に求められるのかそれとも個別的な状況に求められるのかという問題の解決を図る。(この問題については、日本西洋古典学会において、「ストア派の倫理学における行為と規則についてという題目で発表する予定)また、2「自然によって法が存在する」という思想がプラトン、アリストテレスによってどのように論じられているかを考察し、ストア派における自然法思想と比較することによってストア派の思想の特徴を明らかにすることを目指す。
低温シグナル伝達因子ＩＣＥ１の活性化に関わる分子機構の解明

1.「カルモジュリン様タンパク質CML10による低温シグナリング調節」:ICE1と相互作用するCML10過剰発現体では低温耐性を、RNAi抑制体では低温感受性を示した。50種類のCMLとICE1の相互作用を調べたところ、多くのCMLとICE1との相互作用が見られた。ただ、ICE1と同じように葉での発現が高いものはCML12, CML20, CML35だった。2.「MAPキナーゼ(MPK)による低温シグナリング調節」:先行研究においてMPK4及びMPK6が低温によって活性化されることが示されているが、その活性化パターンとICE1のリン酸化パターンが類似していた。mpk4変異株では低温感受性を示し、また低温応答性遺伝子の発現低下が見られた。活性型MPK4を用いてICE1のC末におけるリン酸化をin vitro系で調べたところ、ICE1のリン酸化が認められた。3.「転写因子MYC67, 70, 71は低温シグナルの負の調節因子である」:これらのMYC転写因子が低温シグナル伝達における負の調節因子であった。MYC67, 70, 71はホモダイマーとしてDREB1プロモータ領域に存在するMYC認識領域(CANNTG)に結合することを明らかにした。この領域はICE1も結合する領域なので、ICE1とMYC転写因子が競合すると考えられる。ICE1とMYC転写因子を用いたEMSAを行ったところ、ヘテロダイマーとしてcisエレメントに結合している可能性が示唆された。また、植物体内におけるICE1とcisエレメントとの結合度合を野生種とmyc変異体においてChIPアッセイを行った。すると、myc変異株においてはICE1とcisエレメントとの結合が強かった。このことから、MYC転写因子はICE1とヘテロダイマーを形成することでICE1とcisエレメントとの結合を阻害していることが示唆された。24年度が最終年度であるため、記入しない。1、ICE1相互作用因子を酵母2ハイブリッドスクリーニングにより単離した。その中に、転写因子MYC67,70,71が含まれていた。そこで、これらのMYCタンパク質の過剰発現体及び変異株を作製して、低温耐性及び低温応答性遺伝子の発現を調べた。これらの変異株では低温耐性が上昇し、低温応答性遺伝子の発現が上昇することが明らかとなった。逆に過剰発現体では低温感受性を示し、遺伝子発現の減少が見られたことから、MYC67,70,71転写因子は低温シグナル及び低温耐性を負に調節していることが示された。これらMYC転写因子がDREB1Aのプロモーター領域に結合することをChIP(クロマチン免疫沈降)アッセイにより明らかにした。詳細な結合部位を調べるため、MYC67及びMYC70に関してEMSA(電気泳動移動度シフト解析)を行ったところ、MYC67及びMYC70はDREB1Aプロモーター上に存在するMYC認識部位(CANNTG)を認識することが明らかとなった。この部位はICE1も結合することが知られていることから、MYC67,70はMYC認識部位においてICE1と結合し、ICE1の機能を:負に調節しているものと考えられる。2、ICE1の機能的保存性を明らかにする目的で、トマトからICE1を単離して、過剰発現トマトを作製した。ICE1過剰発現トマトでは低温に対する耐性が上昇し、低温応答1生遺伝子の発現も上昇した。更に低温応答で誘導されるビタミンC、リコピン、βカロテン等の抗酸化物質の蓄積もICE1過剰発現トマトでは、通常状態においても蓄積が上昇することが明らかとなった。また、メタボローム解析を行ったところ、糖やアミノ酸の蓄積上昇が見られた。これらのことから、トマトにおいてもICE1は低温耐性に関わること、また抗酸化物質の蓄積に関与することが明らかとなった。

すると、myc変異株においてはICE1とcisエレメントとの結合が強かった。このことから、MYC転写因子はICE1とヘテロダイマーを形成することでICE1とcisエレメントとの結合を阻害していることが示唆された。24年度が最終年度であるため、記入しない。ICE1相互作用因子としてMYC型転写因子MYC67,70,71及びMAPキナーゼの解析をあげているが、MYC型転写因子に関しては、DREB1Aとの結合を明らかにし、生化学的な研究に関してデータが揃ってきている。最終的に詰めの実験が必要であるが、論文化にできるまでにデータが蓄積してきたことから、おおむね順調に進展していると言える。今後、MYC型転写因子に関してはEMSAアッセイにおいて、competitionアッセイを行い、実際に結合していることを明らかにする。また、タンパク質の作製に至っていないMYC71に関しては、他の方法でタンパク質を作製してEMSAアッセイを行う。MAPキナーゼに関しては、変異株の単離をしており、変異株における低温応答について調べる。また、このキナーゼが実際にICE1のリン酸化に関わっているかをin vitroアッセイを行う。