hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
卵巣癌腹膜播種における腹腔内免疫動態の解析と新規治療による腫瘍免疫寛容の克服

卵巣癌腹膜播種対し、腫瘍免疫の強化を目的とした腫瘍溶解性ウイルス療法の治療効果について検討した。Immunocompetent mouseを用いた卵巣癌腹膜播種モデルにおいてサイトカインのHSVアンプリコン併用療法を施行した群がウイルス単独群に比べ、腹腔内腫瘍量や腹膜肥厚が減少しており治療効果を認めた。さらに新規分子標的薬であるHDAC inhibiorであるバルプロ酸とOVの併用療法をヒト卵巣癌マウス腹膜播種モデルにおいて検討したところ、併用群の方が生存期間の延長を認めた。これらの結果より、サイトカインを産生するarmingvectorやHDAC inhibitorを併用する事により腫瘍免疫が強化されている可能性が示唆された。卵巣癌に対するがんウイルス療法の療法の現在の問題点を明示し、それらを改良・克服するために、腹腔内播種腫瘍の治療を念頭におき、腹腔内免疫系とウイルス療法の連関、腫瘍免疫を強化するようなサイトカインなどを産生するArming vectorの作製、様々な分子標的薬との併用効果について詳細に検討した。腫瘍免疫を強化するようなサイトカインを産生するArming vectorを用いて治療効果を検討した。Immunocompetent mouseを用いた卵巣癌腹膜播種モデルに対し、PBS投与群、腫瘍溶解性ウイルス単独投与群(OV群)またはサイトカインのHSVアンプリコン併用投与群に分け、それぞれ3回腹腔内投与したところ、PBS投与群に対し、治療群で腹膜肥厚消失または軽減し、腹腔内腫瘍重量は顕著に減量しており、治療効果を認めた。さらに、治療群では有意に生存期間の延長を認めた。卵巣癌、特に腹膜播種病変に対するがんウイルス療法の臨床応用への理論的根拠を確認するために、腫瘍免疫を強化するようなサイトカインを産生するArming vectorを用いて治療効果を検討した。OVHM-1マウス卵巣癌腹膜播種モデルに対し、PBS投与群、腫瘍溶解性ウイルス単独投与群(OV群)またはGM-CSF HSVアンプリコン併用投与群に分け、それぞれ3回腹腔内投与したところ、PBS投与群に対し、治療群では腹腔内腫瘍重量が優位に減量していた(PBS群>OV単独群>>アンプリコン併用群)。さらに、治療群では優位に生存期間の延長を認めた。次に、新規分子標的薬と腫瘍溶解性ウイルス(OV)療法の併用効果を検討するために、ヒト喉頭癌細胞株にHDACiであるTrichostatin A(TSA)100ng/mlをウイルス感染前後に添加した場合とウイルス感染前のみに添加した場合を検討したところ、TSA処理をすることによってウイルス蛋白発現は増強を認め、前処理のみが効果的であった.また、後期でアセチル化ヒストンの増加を認めた。さらにヒト卵巣癌細胞株SKOV3に対し、HDACiであるバルプロ酸(VPA)0.5nMにて前処理しOVをMOI0.03で感染させたところ、VPA前処理のみやOV感染のみに比較し、VPA前処理後にOV感染させた場合には顕著な細胞変性効果を認め、MTT assayにて生細胞率が有意に減少した。in vivoにてSKOV3卵巣癌マウス腹膜播種モデルに対し、PBS投与群、VPA単独投与群、OV単独投与群、VPA+OV併用投与群に分け検討したところ、PBS投与群とVPA単独投与群では生存期間に差は認めなかったが、OV単独投与群とVPA+OV併用投与群では生存期間の延長を認め、VPA+OV併用投与群でより良い傾向を認めた。IDO強発現腫瘍細胞移植マウスに対するウイルス療法の治療効果の検討に関しては、以前に作製したIDO高発現マウス腫瘍細胞クローンを継代を繰り返し行ううちにIDOの発現が弱くなってしまったため、再度クローンの作製を行っている。この為、研究実施計画より一部遅れている部分はあるが、その他の計画については順調に経過しており、新規分子標的薬と腫瘍溶解性ウイルス療法の併用効果の検討では平成24年度に施行していく予定であったin vivoの検討をすでに開始する事ができた。IDO高発現マウス腫瘍細胞にクローニングの作製を行う。継代してもIDO発現が安定するようにtet-onシステムの利用なども検討していく。また、平成24年度の研究実施計画に基づき研究を推進していきながら、各種の学会や研究会などで得た新たな手法や知見を研究に取り入れ、がんウイルス療法の臨床応用への理論的根拠の確立を目指す。(1)IDO強発現腫瘍細胞移植マウスに対するウイルス療法の治療効果の検討;IDO高発現マウス腫瘍細胞クローンを作成し、これらの細胞を同系マウスに腹腔内投与後、経時的に腹水(腹腔洗浄液)と血清を回収し、サイトカイン・ケモカインを検討する。腹水中の細胞はCD3,4,8,11b,11c,14,25,CTLX

4,DX5,NK1-1,GITR,FoxP3などの各種抗体を用い、FACSにて細胞分画を測定する。さらに、腹腔内腫瘍細胞に対しては、摘出し新鮮凍結後、前述の各種抗体を用いて免疫染色を行い、浸潤免疫細胞の質的評価をする。さらに腫瘍を移植後、弱毒化変異型HSV1を用いて治療を開始し治療効果について検討する。(2)GM-CSFのHSVアンプリコンによる治療効果の基礎的研究;今年度のin vivoの研究で得られた腹腔洗浄液と血清を用い、これらの中の各種サイトカイン、ケモカイン、免疫細胞の誘導について検討する。(3)新規分子標的薬と腫瘍溶解性ウイルス療法の併用効果の検討今年度に得られたHDACiの治療効果について、その原因を細胞周期解析やアポトーシス分子の変化など詳細に検討し明らかにしていく。また他の新規分子標的薬mTOR inhibitorであるrapamycinを併用し、その抗腫瘍効果を詳細に検討する。(4)がん幹細胞様であるCD133陽性卵黄嚢腫瘍に対する腫瘍溶解性ウイルス療法の感受性をin vitro、in vivoにて検討する。
モスクワ・コンセプチュアリズムを中心とするソ連非公式芸術の研究

今年度は論文投稿や学会報告、ならびに現地調査を行った。主に取り扱ったテーマは、以下のように大別される。1,距離の問題について。本研究が扱ってきたソ連非公式芸術の一部であるモスクワ・コンセプチュアリズムにおいては、心理的なものであれ空間的なものであれ、しばしば距離が意識されてきた。野外活動や外国との関係を通してそういったテーマが内面化されていった過程を追った。2,言葉に対する意識。モスクワ・コンセプチュアリズムにおいては過剰なまでに言葉の存在感が強いが、そのような言語への志向性の源泉のひとつが、ウラジーミル・ファヴォルスキイという画家・版画家であった可能性がある。ファヴォルスキイとコンセプチュアリストたちの関係を、言葉への関心という視点から論じた。3,キャラクターという概念。コンセプチュアリストたちは芸術のある種の作者性についての問いを抱えていた。たとえば、本人名義ではなく架空の作者を仕立て上げ、その人物の作品という体で展示を行うといった具合である。こうしたキャラクターに関する美学の展開に光を当てた。現地調査においては資料収集はもとより、グループ「集団行為」のパフォーマンスへの参加や展示の観覧、ユーリイ・アリベルトやイワン・ノヴィコフ、ヤン・ギンズブルグといったアーティストとの面会などを行い、新旧の世代を問わずロシアの現代アート界の現状に触れた。とりわけギンズブルグの展示はコンセプチュアリズムを素材にしたもので、若手におけるコンセプチュアリズムの遺産について示唆を与えるものだった。29年度が最終年度であるため、記入しない。初年度である本年度は、資料収集ならびに現地調査を行った。初回の現地調査(5月・6月)ではモスクワとサンクト・ペテルブルクに赴き、研究に関連する展示の鑑賞、資料収集、アーティストへの聞き取り調査を行った。モスクワではリアノゾヴォ派の一員でもあった抽象画家ウラジーミル・ネムーヒンの大規模回顧展、ペテルブルクでは抽象絵画の歴史を再考する展示などを鑑賞し、ロシア美術史上十分に光が当たってきたとは言い難い芸術家たちに関する知識を得た。聞き取り調査ではモスクワ・コンセプチュアリズムを代表するグループ「集団行為」のリーダー、アンドレイ・モナストゥイルスキイを訪問し、「集団行為」の活動はもちろんのこと、若手世代との交流など、現在のアート・シーンに関する彼の見解について聞き取りを行った。一方、二回目の現地調査(9月・10月)では、上記の作業に加え、モスクワで行われた第六回モスクワ・ビエンナーレを視察した。資料に関しては、近年刊行されている「モスクワ・コンセプチュアリズム叢書」シリーズを中心として、回顧展のカタログや論文集などを収集した。以上の調査を下地にして、8月に開催されたICCEES(中欧・東欧研究国際評議会)では90年代に生じた美術界の制度的変化を背景にしたコンセプチュアリズムとアクショニズムの文化的接点について報告し、この論点を発展させた論文が『スラヴィアーナ』第七号に掲載された。後期には、戦後ロシア美術における人間像という新たなテーマに取り掛かり、このテーマに関して3月にベルギーのゲント大学におけるシンポジウムで報告を行った。・ICCEESでの口頭発表をきっかけに、『スラヴィアーナ』にロシア語論文を掲載する事が出来、国内外へ研究を発信する事ができた。・予定していたロシアにおける調査は問題なく行われたが、研究実施計画に記載したアメリカでの調査は未だ行うことができていないため、次年度以降の課題とする。・ゲント大学でのシンポジウムに参加することで、ヨーロッパにおけるロシア文化研究者との交流を行うことが出来た。本年度に行った研究は、主に以下の3つに大別される。第一に、モスクワ・コンセプチュアリズムの起源と展開の足跡を辿るため、アート・グループ「集団行為」ならびにグループのリーダーであるアンドレイ・モナストゥイルスキイの初期作品や言説を検討した。この作業の結果を、日本ロシア文学会全国大会における「モスクワ・コンセプチュアリズムのはじまり」パネルにて報告した。コンセプチュアリズムについてまとまったパネルが組まれたことはおそらく日本では初めてであるため、有意義なアウトプットとなったと思われる。第二に、本年度の新たなテーマとして、研究対象におけるモノ観に関する問題に取り組み始めた。この第二のテーマについては、北海道大学とソウル大学のジョイントシンポジウムにて報告を行い、さらに日本ロシア文学会の学会誌に論文を投稿している。モノに対する態度は潜在的にそれを見つめる視線や記述の問題が関係しており、ここで行った作業はこれからの研究のための下地となることが予想される。第三に、参加している研究会において、20世紀ロシア美術に関するロシア語の著作を翻訳している。未だ出版には至っていないが、翻訳の過程で大きな枠組みでの研究対象に関する様々な知見が得られた。また現地調査に関しては、モスクワへ赴き、資料収集ならびに各種展覧会の観覧を行い、研究対象のパフォーマンスに参加した。パフォーマンスの参加後には研究対象のウェブサイトに参加記を寄稿した。現代ロシア美術史の概観、モスクワ・コンセプチュアリズムの潮流としての生成過程、そして「集団行為」における芸術家と物体の関係性という、3つの異なるレベルでの研究を進め、一定量のアウトプットを行うことが出来た。また、研究対象のパフォーマンスに参加し、彼らの活動を自らの目で観察できたことも成果のひとつである。

野外活動や外国との関係を通してそういったテーマが内面化されていった過程を追った。2,言葉に対する意識。モスクワ・コンセプチュアリズムにおいては過剰なまでに言葉の存在感が強いが、そのような言語への志向性の源泉のひとつが、ウラジーミル・ファヴォルスキイという画家・版画家であった可能性がある。ファヴォルスキイとコンセプチュアリストたちの関係を、言葉への関心という視点から論じた。3,キャラクターという概念。コンセプチュアリストたちは芸術のある種の作者性についての問いを抱えていた。たとえば、本人名義ではなく架空の作者を仕立て上げ、その人物の作品という体で展示を行うといった具合である。こうしたキャラクターに関する美学の展開に光を当てた。現地調査においては資料収集はもとより、グループ「集団行為」のパフォーマンスへの参加や展示の観覧、ユーリイ・アリベルトやイワン・ノヴィコフ、ヤン・ギンズブルグといったアーティストとの面会などを行い、新旧の世代を問わずロシアの現代アート界の現状に触れた。とりわけギンズブルグの展示はコンセプチュアリズムを素材にしたもので、若手におけるコンセプチュアリズムの遺産について示唆を与えるものだった。・年度前半に再度モスクワでの資料調査を行い、それを元に査読雑誌に論文を投稿する。・可能であればアメリカでの資料収集も行う。・年度後半には日本ロシア文学会において、コンセプチュアリズムなどのロシア現代美術を総括するパネルに参加する。今後の研究の方向性としては、まずは博士論文に向けた軸を定める必要がある。これに関しては、本年度に行ったコンセプチュアリズムにおけるモノの位置付けについての研究を展開させ、モノだけではなくそれを観察する芸術主体の問題などを盛り込んでいきたい。また、次年度の後半にはモスクワに長期滞在し、資料収集や芸術家との交流を進める予定である。29年度が最終年度であるため、記入しない。
新規高周期14族元素カテネートおよびヘテロカテネートポリマーの設計

今年度は、(1)構造制御されたケイ素-炭素ヘテロカテネートポリマー、(2)シロールを主鎖骨格に組み込んだポリシラン、をアニオン開環重合によって合成しその光物性ついて検討した。炭素-ケイ素ヘテロポリマーの合成は、テトラシラシクロペンタンを触媒量のブチルリチウムあるいはフェニルリチウムアニオンをもちいて開環重合を行ったところ重合反応はスムーズに進行し、分子量数万のポリマーが得られた。このアニオン開環重合では、ケイ素のσ*-π共役によるα-シリルアニオンの安定化効果により反応が位置選択的に進行し、高度に主鎖構造を制御出来ることがわかった。ポリマーの吸収および蛍光スペクトルを測定し各種オリゴシランと比較した。その結果、テトラシランのセグメント間でメチレン鎖を通しての、σ共役が、基底状態で重要な役割を果たしていることが明らかになった。また新たにシロール環とテトラシランが環状に結合したスピロ化合物の触媒量のブチルリチウムによるアニオン開環重合により、シロール環とテトラシランが高度に規則正しく交互に配列したポリシランの合成を行った。またこの重合反応は、平衡状態で存在するシリルアニオンとアリルアニオンのうち、重合活性なシリルアニオンのみが位置選択的にモノマーを攻撃することによって重合が進行する。得られたポリマーの光物性についてもあわせて検討したところ、ポリシランからシロール環へのエネルギー移動が起きていることがわかった。またポリマーの蛍光量子収率は、テトラフェニルシロールの値に比べ約10倍大きい値を示した。
過飽和液中レーザープロセスを利用した強化エナメル再生と初期う蝕制圧

過飽和液中レーザー照射法によるアパタイト成膜技術を、ヒト歯牙由来のエナメル質基材およびエナメル質初期う蝕モデルに適用する。具体的には、フッ素添加リン酸カルシウム過飽和溶液中に上記の基材を浸漬し、種々の条件下でパルスレーザー光を照射することで、フッ素置換水酸アパタイトの迅速成膜を図る。生成膜の物性・機能を評価し、照射条件設定にフィードバックすることで、成膜条件を最適化していく。以上により、ヒトエナメル質の表面に、耐酸性・抗菌性・膜強度に優れたフッ素置換アパタイト(強化エナメル)を迅速成膜するための技術を確立し、エナメル質初期う蝕治療における本法の有効性を基礎実証する。
口腔外科手術をともなう全身的炎症反応の制御に関する研究

本研究の目的は、口腔外科手術侵襲に伴うサイトカイン反応を薬剤投与によってどのように制御できるかを検討することである。本年度は、一般に臨床使用されており、制御できる可能性のある薬剤として、ペンゾジアゼピン系薬剤、プロスタグランジン製剤について検討した。1-1.ペンゾジアゼピン系薬剤(ミダゾラム)1)対象:健康成人ボランティア(研究前にインフォームド・コンセントを得た。)2)方法:ミダゾラム0.075mg/kg静脈内投与し、投与前、投与後30、60、90分に採血血中IL-6レベルの測定:ELISA法(最低検出感度0.7pg/ml)単核球中IL-6mRNAの定量測定:totalRNA抽出・cDNA合成・競合的RT-PCRl-2.プロスタグランジン製剤(PGEl)1)対象:口腔外科手術を受けた患者(術前にインフォームド・コンセントを得た。)2)方法:術中PGElを0.10.15microgram/kg/minで持続投与し、麻酔導入前、PGEl投与直前、投与後30、60分、投与終了時、投与後2時間に採血血中IL-6レベルの測定:ELISA法(最低検出感度0.7pg/ml)2.結果1)ペンゾジアゼピン系薬剤であるミダゾラム投与によって血中IL-6レベルに変化はみられなかったが、単核球中IL-6mRNA発現量は投与前と比較して投与後30分に有意な上昇がみられた。2)プロスタグランジン製剤であるPGEl投与によって、血中IL-6レベルは非投与群と比較して、有意な上昇がみられた。以上の結果より、ペンゾジアゼピン系薬剤・プロスタグランジン製剤の両者,ともin vivoにおいては逆にサイトカイン反応を増加させる結果になった。今後、生体の間接的な影響も十分考慮する必要があると考えられた。本研究の目的は口腔外科手術の手術侵襲によって、活性化するサイトカインの反応を薬剤投与によってどのように制御できるかを血中レベルおよび白血球(単核球)でのサイトカイン遺伝子の発現を評価することによって検討することである。本年度は口腔外科手術時に一般に使用される薬剤として全身麻酔薬の影響を検討し、手術侵襲によって産生される代表的な炎症性サイトカインの一つであるインターロイキン6(IL-6)に特に注目した。1.方法(1)全身麻酔薬として吸入麻酔薬であるセボフルレンを使用(2)採血:麻酔導入前・手術開始1時間後・手術終了時・手術終了2時間後・術翌日(3)血中IL-6レベルの測定:ELISA法(最低検出感度0.7pg/ml)(4)単核球中IL-6mRNAの定量測定:totalRNA抽出・cDNA合成・競合的RT-PCR(5)術翌日の臨床検査値-発熱・白血球数2.結果(1)血中IL-6レベルは手術によって徐々に上昇し、手術終了2時間で最高値になった。(2)単核球中IL-6mRNAは手術開始1時間で上昇したが、手術終了2時間には低下し、術翌日には再度上昇する傾向がみられた。(3)血中IL-6レベルと術翌日の臨床検査値には関係が認められた。以上の結果より、口腔外科手術において血中IL-6レベルと単核球中IL-6mRNA発現とには関連が少なく、手術中の血中IL-6レベルの上昇は術部の由来ではないかと考えられた。さらに、術翌日からの血中IL-6の上昇には血球由来のIL-6が関与していると考えられるが、吸入麻酔薬自体には白血球IL-6産生抑制作用があるのではないかと推測された。
微生物二次代謝遺伝子の改変、覚醒による新規生物活性物質の創出

天然物、特に微生物代謝産物から、抗生物質、抗がん剤、免疫抑制剤など多くの医薬品が開発されてきた。近年、合成化合物が創薬の探索源として用いられることが多いが、生物活性の強さ、構造多様性では天然物が優れている。本研究では、微生物代謝産物を起点に、我々が構築してきた新世代ケミカルバイオロジー研究基盤を駆使することで、新規生物活性物質の創出法の確立に取り組んだ。その結果、新規微生物代謝産物を複数取得することができ、今後の新規生物活性物質発見、さらには医薬・農薬シーズ創出が大いに期待できる成果が得られた。本研究では、我々が構築してきた新世代ケミカルバイオロジー研究基盤を利用して新規生物活性物質の創出を目指している。今年度は、パスウェイ工学、およびNPPlotデータベースを駆使し、新規微生物代謝産物の取得に取り組んだ。リベロマイシン、テルペンドール、フミトレモルジン等の有用代謝物生合成経路の改変により、これまで生物活性評価の対象とされてこなかった生合成中間体などの関連化合物を収集した。さらには、バーティシラクタムやフサリセチン、テヌアゾン酸など、今後の有用代謝産物探索に資する新規生合成遺伝子クラスターを発見した。NPPlotデータベースの活用により、迅速かつ効率的な新規化合物探索が可能となり、当研究室が保有する有用代謝物生産菌株の培養物の中から、新規オキシインドール類の取得に成功している。リベロマイシン生産を制御する転写因子ネットワークの解析により、遺伝子クラスターに含まれる転写因子の中で主要な役割を担うマスター制御因子を同定した。MorphoBase拡張の一環として、真菌版MorphoBase構築に取り組んだ。本課題で取得した新規化合物の生物活性評価を行い、高次評価に資する候補化合物を見出した。I.新規微生物代謝産物の取得(1)パスウェイ工学による代謝産物取得:これまで生合成機構解析に用いてきたリベロマイシン生産菌、テルペンドール生産菌、およびフミトレモルジン生産菌に由来する遺伝子破壊株において蓄積する中間産物とその関連化合物30種類を収集した。さらには、バーティシラクタムやフサリセチン、テヌアゾン酸など、NPPlotデータベースの活用等により見出した有用微生物代謝物の生合成遺伝子クラスターの同定に成功した。(2)バイオメディエーター探索系構築:リベロマイシン生合成遺伝子クラスターを制御する転写因子ネットワーク解明を進め、生産調節に中心的に機能する経路特異的制御遺伝子を同定した。その支配下にある遺伝子プロモーターを用いたGUSレポーターアッセイ系を構築した。(3)NPPlotデータベースを活用した新規化合物取得:我々が保有する有用代謝物生産菌株の培養物を分析しNPPlotデータベースと照合することで、新規化合物探索を行った。その結果、新規オキシインドール類の取得に成功した。II.生物活性物質の探索(4)MorphoBaseの拡張:MorphoBaseの手法を真菌(イネいもち病菌Magnaporthe oryzaeと深在性真菌症原因菌Aspergillus fumigatus)へ適用し、既存抗真菌薬が誘導する形態変化を収集し、真菌版MorphoBaseの構築に取り組んだ。また近年報告のあった新しい分子標的薬を用いて、データベースの拡充を行った。(5)生物活性評価:本課題で取得された新規化合物について、様々ながん細胞や各種真菌に対する増殖阻害活性、形態変化誘導活性の評価を行った。特徴的な化合物については、MorphoBaseやChemProteoBaseによる評価に加え、分化誘導活性、抗細菌活性や抗原虫活性などについても検討を行った。今年度は、引き続きパスウェイ工学、およびNPPlotデータベースを駆使し、新規微生物代謝産物の取得に取り組んだ。前年度までの解析で見出した有用代謝産物の生合成遺伝子クラスターの解析に取り組み、生合成経路の全容解明を目指すとともに、破壊株において蓄積する代謝産物の取得を行った。また、イネいもち病菌をモデルに、制御系改変による遺伝子クラスター活性化技術の開発に取り組んだ。その結果、通常実験室条件では検出出来なかった代謝産物を生産させることに成功した。前年度構築したリポーターアッセイ系を用いて、リベロマイシン生合成遺伝子発現を活性化する外来因子(バイオメディエーター)の探索を行い、候補となる化合物を発見した。NPPlotを活用した化合物探索では、抗マラリア活性を有する複数の新規化合物の取得に成功した。前年度構築に取り組んだ真菌版MorphoBaseを用い、新規作用機序を有する抗真菌物質のスクリーニングを行い、Candida albicansに対して興味深い形態変化を誘導する活性を発見した。高次評価に資する候補化合物の取得を目指し、微生物代謝産物の生物活性評価を継続して行っている。I.新規微生物代謝産物の取得(1)パスウェイ工学による代謝産物取得:バーティシラクタムやフサリセチンといった、前年度見出した有用代謝産物生合成遺伝子クラスターを対象に遺伝子破壊実験を行った。破壊株で蓄積する代謝産物を精査し、鍵となる生合成中間体の取得とその生合成に関与する遺伝子の同定を試みている。

(2)制御系改変による遺伝子クラスター活性化:イネいもち病菌をモデルに、制御系改変による遺伝子クラスター活性化技術の開発に取り組んだ。二成分情報伝達系の撹乱により、通常実験室条件では検出出来なかった代謝産物を生産させることに成功した。(3)バイオメディエーターによる遺伝子クラスター活性化:前年度に構築したリポーターアッセイ系を用いて、リベロマイシン生合成遺伝子発現を活性化するバイオメディエーターの探索を行ったところ、遺伝子活性化化合物の候補を見出した。さらには、構造活性相関研究を行い構造の最適化を試みた。(4)NPPlotデータベースを活用した新規化合物取得:我々が保有する土壌単離微生物菌株より、新規化合物探索を行った。その結果、抗マラリア活性を有する新規ネオアンチマイシン類縁化合物や新規デプシペプチドの取得に成功した。II.生物活性物質の探索(5)MorphoBaseを用いたハイコンテントスクリーニング:真菌版MorphoBaseを用いたスクリーニングから、Candida albicansに対して興味深い形態変化を誘導する活性を理研ブロス(微生物抽出液)ライブラリーから見出した。(6)生物活性評価:本課題で取得された化合物について、様々ながん細胞や各種真菌に対する増殖阻害活性、形態変化誘導活性の評価を行った。また、ガン細胞に対する強力な生育阻害物質であるコリスミシンAの作用標的をChemProteoBase等のプロファイリングにより解明した。天然物、特に微生物代謝産物から、抗生物質、抗がん剤、免疫抑制剤など多くの医薬品が開発されてきた。近年、合成化合物が創薬の探索源として用いられることが多いが、生物活性の強さ、構造多様性では天然物が優れている。本研究では、我々が構築してきた新世代ケミカルバイオロジー研究基盤を利用して新規生物活性物質の創出を目指してきた。今年度も引き続き、パスウェイ工学およびNPPlotデータベースを駆使し、新規微生物代謝産物の取得に取り組んだ。これまでの解析で見出した有用代謝産物の生合成遺伝子クラスターの解析を行った。それにより、生合成経路の全容を明らかにするとともに、生合成経路遺伝子クラスター改変により多様な構造の類縁化合物を収集し、生物活性評価に供することで、今後の農薬開発に資する構造活性相関を得た。また、イネいもち病菌をモデルとした二次代謝制御系の解析から、植物感染との関連が指摘されている代謝物の生産制御を担う経路特異的転写活性化因子の同定に成功した。リベロマイシン生合成遺伝子発現を活性化する外来因子(バイオメディエーター)の解析では、候補化合物の構造最適化を行い、放線菌での作用標的を同定した。本化合物が他の放線菌においても、二次代謝物生産誘導が可能であることを実証した。NPPlotを活用した化合物探索では、ユニークな環構造を有する糸状菌代謝産物の取得に成功した。
遅延時間を活用した丈夫で多様なネットワークダイナミクスの設計・構築とその応用展開

現代社会を支える通信/交通/物流/エネルギーのネットワークには,サブシステム間を流れる情報/人/物/エネルギーのダイナミカルな挙動が生じる.挙動の理解には,流れ・ダイナミクスと,流れに伴う「遅延」の把握が不可欠である.しかし,遅延はネットワークの解析・理解を格段に難しくするため,大半の研究は,遅延を考慮していない.一方,IoTが普及すると,ネットワークは「より大規模」・「より複雑」となり,その安定運用が一段と難しくなる.本研究では,これらの「学術的問い」に対し,大規模かつ複雑なネットワークダイナミクスの基盤的な知見を調査しつつ,「遅延」がこのネットワークダイナミクスに与える影響を,基礎的な視点で探求する.2018年度の具体的な成果は以下の通りである.【1.遅延結合発振器ネットワーク】複数の同一の発振器を拡散的に結合しても,発振器は発振を止めることなく動作し続ける.一方,この拡散に「遅延」が伴うと,全ての発振器が一斉に発振を止める事態となる.これは「遅延結合に誘発された振動停止現象」と呼ばれている.(1)従来の遅延結合にフィードバックループを追加することで,この現象が容易に生じることを見出した.(2)発振器が同一でなくても,振動停止現象が生じるよう,結合の強さ・遅延時間は理論的に設計できることを示した.【2.直流給電ネットワーク】直流給電ネットワークの基本回路に,Act-and-wait遅延フィードバックを施し,動作点のベイスン(初期値領域)を評価した.本年度は,研究はおおむね順調に推移している.特に,振動停止現象については,新たなフィードバックループを追加した「拡張型遅延結合」の有用性が確認できたことは特筆できる.また,直流給電ネットワークについても,さまざまな解析ツールが使用できる知見を蓄え,さらなる発展へと繋がる成果も出てきており,今後の進展が期待できる.本研究では,複数のサブテーマを並列に実施していた.これらのサブテーマで最も重要で共通するキーワードとして「遅延結合に誘発される同相同期・逆相同期・Splay状態・キメラ状態」が浮上してきた.このキーワードを徹底的に調査・研究することで,各サブテーマが飛躍的に進展するものと考えている.現代社会を支える通信/交通/物流/エネルギーのネットワークには,サブシステム間を流れる情報/人/物/エネルギーのダイナミカルな挙動が生じる.挙動の理解には,流れ・ダイナミクスと,流れに伴う「遅延」の把握が不可欠である.しかし,遅延はネットワークの解析・理解を格段に難しくするため,大半の研究は,遅延を考慮していない.一方,IoTが普及すると,ネットワークは「より大規模」・「より複雑」となり,その安定運用が一段と難しくなる.本研究では,これらの「学術的問い」に対し,大規模かつ複雑なネットワークダイナミクスの基盤的な知見を調査しつつ,「遅延」がこのネットワークダイナミクスに与える影響を,基礎的な視点で探求する.2018年度の具体的な成果は以下の通りである.【1.遅延結合発振器ネットワーク】複数の同一の発振器を拡散的に結合しても,発振器は発振を止めることなく動作し続ける.一方,この拡散に「遅延」が伴うと,全ての発振器が一斉に発振を止める事態となる.これは「遅延結合に誘発された振動停止現象」と呼ばれている.(1)従来の遅延結合にフィードバックループを追加することで,この現象が容易に生じることを見出した.(2)発振器が同一でなくても,振動停止現象が生じるよう,結合の強さ・遅延時間は理論的に設計できることを示した.【2.直流給電ネットワーク】直流給電ネットワークの基本回路に,Act-and-wait遅延フィードバックを施し,動作点のベイスン(初期値領域)を評価した.本年度は,研究はおおむね順調に推移している.特に,振動停止現象については,新たなフィードバックループを追加した「拡張型遅延結合」の有用性が確認できたことは特筆できる.また,直流給電ネットワークについても,さまざまな解析ツールが使用できる知見を蓄え,さらなる発展へと繋がる成果も出てきており,今後の進展が期待できる.本研究では,複数のサブテーマを並列に実施していた.これらのサブテーマで最も重要で共通するキーワードとして「遅延結合に誘発される同相同期・逆相同期・Splay状態・キメラ状態」が浮上してきた.このキーワードを徹底的に調査・研究することで,各サブテーマが飛躍的に進展するものと考えている.
避難所や仮設住宅等における睡眠や体温調節の支援技術に関する研究

大規模災害の発生率が高いため、無断熱の体育館等の非住宅における睡眠や生活を支援する技術を開発する。現状の避難救助用毛布を改善するため、寝具を含めた睡眠環境が睡眠と起床後の疲労に及ぼす影響を解明する。また、身体部位への加熱・冷却による睡眠や体温調節への影響を検討し、PCM等での調整や無電技術を検討し要件を導出する。被災後の仮設住宅等において健康で安全な熱環境を保障するため、温熱環境計測、居室状況のモニタリング技術を開発する。居室環境の見える化を低コスト、低電力で実施する測定ユニットを開発し、居住者の行動を記録する。空調機器の積極的介入(自動発停・温度調整)による見守り支援技術を構築する。
地下水流出への雨水供給に関する研究

河川流量の中で地下水流出成分は水資源として極めて重要であるが、その涵養・流出過程には末解明な問題が多い。本研究はこれらのうち、1.地下水涵養過程(雨水供給過程)における場の不均質性(水平方向)の効果、及び2.山塊中の地下水の存在と消長特性に注目し、前者では簡単なモデル実験を介し、後者ではトンネルの湧水記録等を参照して概念モデル構成し、それぞれ解析・検討を加えたものである。主要な成果は概略以下のようである。1.地層に割れ目がある場合の浸透現象について間隙空気の挙動も含めて実験的に研究し、(1)割れ目が層の底部まで達しているときは最終浸透能、累加浸透量は共に割れ目がないときより大きくなること、(2)割れ目が途中までのときには、最終浸透能は割れ目の深さが大きいほど小さく、累加浸透量は割れ目のない場合と比較して、割れ目が雨水で充満するまでは大きいが充満後は逆に小さくなることが判明し、その機構・原因を一応説明できた。2.山塊内の不圧地下水流出モデルに基づき、河川流量(河道への流出強度)の低減特性、山塊内の流出可能貯留水量、及び地表面からの涵養量について解析・検討し、(1)地下水帯への涵養がない場合には、河道沿いの地下水面が河床レベルに達するまでは、流出強度と地下水位は時間とともに分数関数的に減少するが、上記の地下水面が河床レベルに達した後は、流出強度は時間経過とともに指数関数に漸近する関数で低下すること、また、流出可能貯留水量と河道への流出強度の平方根は直線関係で近似できることが判明した。(2)地下水帯への涵養がある場合については、涵養強度が時間とともに減少する場合について地下水流出の低減過程を知る近似解法を提案し、この方法によって低減段階にある地下水流出強度(河道流量)の時間変化に関する情報から、逆に地下水帯への雨水浸透による涵養量を推定可能であることを示した。
血小板活性化因子の過シュウ酸エステル化学発光分析法の開発

平成5年度は過シュウ酸エステル化学発光検出・フローインジェクション法(FIA)を用いて血小板活性化因子(PAF)やコリン含有リン脂質を定量するための基礎的検討を行った。1)ホスホリパーゼDとコリンオキシダーゼをアルキルアミンガラスビーズにグルタルアルデヒド法で固定化し,ステンレスチューブに充填後、カラムリアクター(IMER)として使用した。2)FIAシステム:キャリアー溶液には10mM硝酸コバルト及び0.1%Triton-Xを含むイミダゾール緩衝液(10mM,pH8)を用い,試料を注入後、IMERを通し、次いで化学発光試薬(0.4mM TCPO+0.5mM TMP in acetonitrile,50/50)と混和させ生じる発光を測定する。3)本法を用いて検量線を作成した結果、ホスファチジルコリン(PC),ホスファチジルコリン(C14:0)、リゾホスファチジルコリン(LPC)びPAFはいずれも200pmol/inj.までは良好な直線性を示し,各検出下限は1.84,1.76,7.69及び8.7pmol(S/N=2)と高感度であった。平成6年度はPAFおよび種々のリン脂質の高速液体クロマトグラフィー(HPLC)による分離定量を中心に検討した。1)PAFやコリン含有リン脂質とコリンを含まないリン脂質(ホスファチジルエタノールアミン,PE;ホスファチジルセリン,PS;ホスファチジルイノシトール,PI)のHPLC分離を検討した。カラム:DAISOPAK-SP-120-5-APS,移動相;CH_3CN/MeOH/10mMNH_4H_4PO_4(pH5.8)=61.6/26.4/12(v/v/v,%)を用いた。2)HPLC分離後の各リン脂質の内,コリン含有リン脂質を分取し,減圧乾固後,残さに0.1%Triton X-100水溶液500μLを加えて溶解し試料とした。PC,PAFおよびLPCの検量線は8-160pmol/inj.の間で良好な直線関係を示した(r>0.996)。検出下限はそれぞれ1.6(PC),1.7(PAF)および2.9(LPC)pmol(S/N=2)であった。3)健常人血清中の総コリン含量を定量した。PS:SPM:LPC=70:20:10で作成した検量線より求めた濃度は,102-168mg/dLであった。これらの結果と,市販のキットでの測定値との相関はr=0.962と良好であった。4)健常人血清の各コリン含量リン脂質を定量した結果,健常人の成分比はPC80%,SPM15%,LPC5%であった。この結果は,既報のものと良く一致した。PAFは本法の感度下ではいずれの血清からも検出できなかった。以上,PAFおよびコリン含量リン脂質の高感度定量法を確立し,生体試料に適用することができた。本法は簡便で高感度であり、コリン含量リン脂質関連化合物の研究に有用であると考える。

検出下限はそれぞれ1.6(PC),1.7(PAF)および2.9(LPC)pmol(S/N=2)であった。3)健常人血清中の総コリン含量を定量した。PS:SPM:LPC=70:20:10で作成した検量線より求めた濃度は,102-168mg/dLであった。これらの結果と,市販のキットでの測定値との相関はr=0.962と良好であった。4)健常人血清の各コリン含量リン脂質を定量した結果,健常人の成分比はPC80%,SPM15%,LPC5%であった。この結果は,既報のものと良く一致した。PAFは本法の感度下ではいずれの血清からも検出できなかった。以上,PAFおよびコリン含量リン脂質の高感度定量法を確立し,生体試料に適用することができた。本法は簡便で高感度であり、コリン含量リン脂質関連化合物の研究に有用であると考える。過シュウ酸エステル化学発光検出フローインジェクション法を用いて血小板活性化因子(PAF)やホスファチジルコリン等のコリン含有リン脂質を定量するための基礎的検討を行った。本分析法の原理はホスファチジルコリンやPAFを基質とし、ホスホリパーゼDの加水分解で生じるコリンを、コリンオキシダーゼで更に過酸化水素まで分解し、生じた過酸化水素を過シュウ酸エステル化学発光検出により測定するものである。まず、ホスホリパーゼDとコリンオキシダーゼの混合物をアルキルアミンガラスビーズ(CPG1Aminopropyl)にグルタルアルデヒド法で固定化した。調製した固定化酵素はステンレスチューブ(70x2mm,i.d.)に充填し、カラムリアクター(IMER)として使用した。フローインジェクションシステムは過酸化水素の化学発光検出に最適な条件を用いて検討した。その結果、キャリアー溶液には10mM硝酸コバルト及び0.1%Triton-Xを含むイミダゾール緩衝液(10mM,pH8)を用い、これに試料を注入後、IMERを通し、次いで化学発光試薬(0.4mMTCPO+0.5mMTMP in acetonitrile,50/50,v/v)と混和させ生じる発光を測定することにした。なお、流速はいずれも1mL/minとした。本法を用いてリン脂質及びPAFの検量線を作成した結果、ホスファチジルコリン、ホスファチジルコリン(C14:0)、リゾホスファチジルコリン及びPAFはいずれも少なくとも200pmol/注入量までは良好な直線性を示した。それぞれの検出下限は1.84,1.76,7.69及び8.7pmol(S/N=2)と高感度であった。また、同時に検討したコリン及びアセチルコリンの検出下限は600及び640fmol(S/N=2)であった。現在、リン脂質をHPLC分取後、本法で定量する方法を検討中である。前年度に引き続き,過シュウ酸エステル化学発光検出フローインジェクション法を用いて血小板活性化因子(PAF)やホスファチジルコリン等のコリン含有リン脂質を定量するための検討を行った。本年度はPAFおよび種々のリン脂質の高速液体クロマトグラフィー(HPLC)による分離定量を中心に検討した。1.コリン含有リン脂質(ホスファチジルコリン,PC;リゾホスファチジルコリンLPC;PAF)とコリンを含まないリン脂質(ホスファチジルエタノールアミン,PE;ホスファチジルセリン,PS;ホスファチジルイノシトール,PI)を用いてHPLC分離を検討した。カラム;DAISOPAK-SP-120-5-APS,移動相;CH3CN/MeOH/10mMNH4H2PO4(pH5.8)=61.6/26.4/12(v/v/v,%)を用いた。3.健常人血清中の総コリン含量を定量した。PC:SPM:LPC=70:20:10で作成した検量線より求めた濃度は,102-168mg/dLであった。
オーラルフレイルに至るプロセスの多面的解析

高齢者をターゲットとした研究は、日本をはじめとする先進国の喫緊の課題である。これまでの歯科領域における研究対象としての“高齢者"は、主に“要介護高齢者"あるいは“要支援高齢者"である。しかし、現実には、日常生活で口腔機能に不自由を感じていない高齢者(前オーラルフレイル期高齢者)は多数存在する。しかし、このような高齢者を対象に歯・口の機能の継時的変化(機能の衰え)を追跡した研究は少ない。そこで、岡山大学医療系部局研究倫理審査専門委員会で承認を得た後、大学病院予防歯科外来を受診した患者を対象に、オーラルフレイルと関連する身体的、精神的、社会的指標を調査した。オーラルフレイルの判定には、オーラルディアドコキネシス、舌圧、口腔乾燥、咀嚼能力、咬合接触面積、細菌検査、質問票の結果から総合的に判定した。オーラルフレイルと関連している可能性のある指標として、全身の老化指標(BMI、簡易栄養状態評価票結果)、生活のひろがり(活き活きとした地域生活を送っているか否か)、精神・心理状態(WHO Five Well-Being Index)など調査した。研究に参加した患者154名(男性45名、女性109名、平均年齢74.2±6.3歳)をJ-CHS基準に従って、健常群、プレフレイル群に分類した。ロジスティック回帰分析を用いてプレフレイルに関連する因子を調べた。男性の26%がプレフレイルと判定されたが、プレフレイルと関連のある因子を認めなかった。一方、女性では63%がプレフレイルと判定された。そして、舌口唇運動機能を評価するオーラルディアドコキネシスのうち、舌前方の運動機能に関係する「タ(ta)」の発音回数の低下がプレフレイルと有意な関連を認めた(オッズ比0.55、95%信頼区間0.31-0.99, p=0.045)。以上のことから、女性において、舌口唇運動機能が低下するとプレフレイルになりやすい可能性が示唆された。2018年度にパス解析を終える予定であったが、予定通りの症例数が集まらず、現在解析中である。研究補助者を雇用して、データ収集、入力の迅速化をはかる。計画ではフォローアップの時期であるが、引き続き新規の登録者を確保する。横断研究のデータとして利用価値がある。これに対して近年、“オーラルフレイル(口腔機能の虚弱)"という口腔機能の軽微な衰えを表す概念が注目されている。現実には、日常生活で口腔機能に不自由を感じていない高齢者(前オーラルフレイル期高齢者)は多数存在する。本研究では、オーラルフレイルに関連する要因とオーラルフレイルに至るまでのプロセス(パス)を解明することとした。岡山大学医療系部局研究倫理審査専門委員会で承認を得たのちに大学病院外来患者を対象に、オーラルフレイルと関連する身体的、精神的、社会的指標を調査した。オーラルフレイルと関連している可能性のある指標として、全身の老化指標(BMI、栄養状態、日常生活動作)、生活のひろがり(活き活きとした地域生活を送っているか否か)、精神・心理状態(WHO Five Well-Being Index)など調査した。総計150名の患者が調査に参加した。現在35名(平均年齢74.3±5.0歳、男性10名、女性25名)について入力し、分析を開始している。舌圧、口腔乾燥、咀嚼能力、質問票については正常の者が多かった。しかし、細菌検査、咬合接触面積、オーラルディアドコキネシスについては、正常以下の者が多かった。総合的に判断した口腔機能低下症が認められる群(6名)と認められない群(29名)との間で、全身の老化指標、生活のひろがり、精神・心理状態を比較したところ、2群間で有意に異なる指標はみられなかった。病院外来での臨床研究では200名の患者参加を予定していたが、現在約150名が参加している。倫理委員会の承認が遅れたこと、各種口腔機能検査測定法に不慣れであったことが考えられる。

オーラルフレイルと関連している可能性のある指標として、全身の老化指標(BMI、簡易栄養状態評価票結果)、生活のひろがり(活き活きとした地域生活を送っているか否か)、精神・心理状態(WHO Five Well-Being Index)など調査した。研究に参加した患者154名(男性45名、女性109名、平均年齢74.2±6.3歳)をJ-CHS基準に従って、健常群、プレフレイル群に分類した。ロジスティック回帰分析を用いてプレフレイルに関連する因子を調べた。男性の26%がプレフレイルと判定されたが、プレフレイルと関連のある因子を認めなかった。一方、女性では63%がプレフレイルと判定された。そして、舌口唇運動機能を評価するオーラルディアドコキネシスのうち、舌前方の運動機能に関係する「タ(ta)」の発音回数の低下がプレフレイルと有意な関連を認めた(オッズ比0.55、95%信頼区間0.31-0.99, p=0.045)。以上のことから、女性において、舌口唇運動機能が低下するとプレフレイルになりやすい可能性が示唆された。2018年度にパス解析を終える予定であったが、予定通りの症例数が集まらず、現在解析中である。引き続き参加を募っている。地域の施設における研究については、県北の保健所との連絡調整が終わり、平成30年度から調査を開始する。研究補助者を雇用して、データ収集、入力の迅速化をはかる。計画ではフォローアップの時期であるが、引き続き新規の登録者を確保する。横断研究のデータとして利用価値がある。
新しいプロセスによる超微粒子分散高分子膜の作成とその利用

対向拡散法により微粒子分散高分子膜、ゾル-ゲル法により微粒子分散アルミナ膜を作成した。Gd、Dy等の希土類酸化物微粒子分散PVA膜はいずれも可視光に透明である。ペルデ定数は10^<-6>mol/cm^2ドープ量でλ=488nmの時、0.0050.008min・Oe^<-1>・cm^<-1>である。Ag/PVA膜は420nm近辺にプラズモンの吸収を示すが、粒子の凝集が進むにつれて長波長側に幅広い吸収を示す。本分散膜を用いて、種々のDNA塩基水溶液についてラマン散乱測定を行ったところ、強い増強がみられ、ナノモルの塩基量の検出が可能であった。AuコロイドにBSAを加えると吸収スペクトルの長波長側の裾がのびる。BSA添加と無添加のスペクトルの差と添加量の間に相関があり、ngのBSA検出が可能である。遷移金属微粒子/CA膜を用いて、環状α、β-不飽和ケトンである2-メチル-4-クロモンの接触水素化反応をエタノール中で常温常圧で行った。分散膜は金属塩水溶液と還元剤水溶液(NaBH_4、HCOOK)を膜を介して接触させ、金属微粒子を膜中に析出させて調製した。本基質の水素化反応の経路としては1,2水素添加と1,4水素添加によりエタノールを経て進む経路がある。NiまたはPt微粒子/CA膜では前者、RhまたはPd微粒子/CA膜では後者の経路で反応が進行していると考えられる。還元剤の種類またはその濃度によっても選択性が変化したが、これは粒子径の違いによると考えられる。粒子径が小さくなるにつれて1,2水素添加の経路が優先される傾向を示した。ゾル-ゲル法で作成した熱処理した半導体微粒子/Al_2O_3膜は発光特性がよいことから、同様にしてGe半導体微粒子/Al_2O_3膜を作成した。本膜はAr^+レーザー励起により560600nmにわたり幅広い発光を示した。
視細胞および網幕色素上皮細胞の障害に伴う脈絡膜の続発性変化に関する研究

脈絡膜循環障害により網膜変性が生じることは周知の事実であるが、逆に網膜外層の変化によって脈絡膜循環がどのように変化するかについては不明である。そこでこの課題について、網膜外層障害モデルの脈絡膜血流量を測定し検討した。実験動物は白色ウサギを使用し、水素クリアランス法によって脈絡膜組織血流量を測定し、組織変化と対比した。モノヨード酢酸による網膜外層障害モデルでは、視細胞、網膜色素上皮細胞の変性消失にともなって脈絡膜組織血流量は減少した。組織学的にも網膜外層の変化に続発して脈絡膜毛細血管の消失が部分的に生じていた。特に網膜色素上皮細胞の消失部位で脈絡毛細血管が消失し、一方網膜色素上皮が残存しているところでは脈絡膜毛細血管はよく保存されていた。一方、暗順応、明順応といった可逆性の機能的変化を網膜外層に与えた実験では、脈絡膜組織血流量には変化がみられなかった。以上から、網膜外層の不可逆性の変性によって脈絡膜循環が障害され、組織学的にも脈絡膜毛細血管が消失することが判明した。しかし暗順応や明順応といった可逆性の網膜外層の変化には、豊富な血流量を有する脈路膜循環は影響を受けないことが示された。1.視細胞の選択的障害時の脈絡膜循環を検討するために、モノヨーギ酢酸を白色ウサギに静注して実験モデルを作成した。静注1日後、3日後、7日後、21日後に水素クリアランス法を用いて脈絡膜組織血流量を測定し、光学顕微鏡と電子顕微鏡で組織学的に対比して検討した。組織学的に視細胞のみが選択的に変性していた静注1日後において、すでに脈絡膜組織血流量は有意に15%低下し、脈絡膜に組織学的変化の生じた21日後まで有意に低下していた。また網膜色素上皮細胞の障害の強い部位では脈絡膜の変化も強く、逆に網膜色素上皮細胞が残存していたところでは脈絡膜毛細血管はよく保存されていた。以上から、視細胞の選択的障害によって脈絡膜組織血流量が機能的に低下する可能性が示唆された。また上述の組織学的所見は、網膜色素上皮細胞に脈絡膜血管構築を調節する何らかの機構が存在している可能性を示唆する。2.白色ウサギを使用して、オルニチンの硝子体内注入およびヨー素酸ソーダの静注によって、網膜色素上皮細胞障害モデルを作成することができた。今後、モノヨード酢酸による視細胞障害モデルと同様に脈絡膜組織血流量を測定し、組織学的に対比して検討する予定である。3.白色ウサギを使用して、マイクロピペットにより生理的食塩水を網膜下に注入することによって実験的網膜剥離を作成することができた。今後、剥離部位と非剥離部位の脈絡膜組織血流量を測定し、網膜剥離における脈絡組織血流量の変化について検討する予定である。1.モノヨ-ド酢酸静注による視細胞の選択的障害時における脈絡膜循環の慢性期の変化について研究した。脈絡膜組織血流量は、水素クリアランス法により測定し、パラメ-タ-として血圧、脈拍数、眼圧を測定した。その結果、モノヨ-ド酢酸静注後3ヶ月群では対照と比べて約19%、6ヶ月群では約22%の有意の減少を認めた。組織所見は、3ヶ月後、6ヶ月後ともに、視細胞は完全にグリア細胞におきかわっていたが、網膜色素上皮細胞は正常なものから完全に消失してしまったものまで様々であった。脈絡膜毛細血管は網膜色素上皮細胞の残存しているところでは管腔はみとめられたが、色素上皮細胞が消失しているところでは管腔は閉塞、消失していた。2.暗順応による網膜外層の変化に脈絡膜組織血流量が影響されるか否かについて検討した。脈絡膜組織血流量は水素クリアランス法により測定し、パラメ-タ-として血圧、脈拍数、眼圧を測定した。その結果短期(40分)、長期(24時間4週間)のいずれの暗順応下においても、組織血流量に変化は生じなかった。3.オルニチンの硝子体内注入による網膜色素上皮細胞の選択的障害時における脈絡膜循環の変化について研究した。

脈絡膜組織血流量は同様に水素クリアランス法により測定した。血流量は、注入3日後より1カ月後まで有意に減少していた。1.オルニチンの硝子体注入による網膜色素上皮障害時の脈絡膜組織血流量は、注入3日後から1ヵ月後まで有意に減少することを前年度に明らかにしたが、今年度は、3ヵ月後、6ヵ月後までその有意な減少が続き、不可逆的な循環障害が脈絡膜に生じることを明らかにすることができた。2.明順応による網膜外層の変化に脈絡膜組織血流量が影響されるか否かについて検討した。その結果,明順応下において、脈絡膜組織血流量に変化が生じないことを明らかにした。3.オルニチン硝子体注入後の脈絡膜の組織所見は、2週後までは、電子顕微鏡的観察でも変化はみられなかったが、1ヵ月後より変化がみられ、毛細血管の変性消失が所々にみられた。すなわち、オルニチンの硝子体注入によって網膜色素上皮細胞が障害され、その後、脈絡膜に続発性変化が生じることが明らかになった。4.明順応下、暗順応下ともに、電子顕微鏡的観察では変化がみられないことを確認した。5.網膜別離モデルの作成は、硝子体腔内でマイクロヒペットにより網膜裂孔を作成し、その裂孔から、生理的食塩水を注入することにより広範囲な網膜別離を作ることができた。今後、このモデルを使用して、脈絡膜血流量が網膜別離下でどのように変化するかを検討する予定である。