hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
結晶格子包接能を有する環化付加体の合成,機能及び結晶構造に関する研究

また、TGによる包接体の重量減少はNMRの結果を支持していた。・単結晶X線解析から、エーテル系、ケトン系溶媒の包接にはphenanthrene環に対して垂直に固定された芳香環平面が、ベンゼン系溶媒の包接にはphenanthrene環の関与が大きいことが示唆された。この包接には新しいタイプの相互作用が関与しており、ゲスト分子の安定化にはホスト分子とのC-H...O型水素結合が、空間の構築に必要が芳香環の固定にはedge-to-face相互作用が重要な役割を果たしていた。Cyclopentadienone類(1)をジエン基質として種々のオレフィン類(2)と系統的に付加反応させ,得られた環化付加体(3)を用い,新規骨格クラスレートの検索,その構造修飾と溶媒取り込み能との関連,更に取り込みに関与する因子ついて,核磁気共鳴装置(^1H-NMR)、示差走査熱量計(DSC)、熱重量計(TG)、単結晶X線構造解析の観点から系統的な検討を実施した.得られた知見を以下に示す.(1)付加体(3)を種々の溶媒で再結晶し,^1H-NMRよりホスト/ゲスト比を決定した.その結果,結晶格子内にゲストを保持するためには,phenanthrene環の様な固定された多環式芳香環により形成される空間が必要であった.また,置換基の変化により取り込み能に相違が見られ,ジエノフィル部分やphenanthrene環部分の自由度が増すと包接が困難になった.さらに溶媒分子の大きさや形状の違いにより,分子取り込みに選択性が認められた.(2) DSCデータより,ホスト分子が包接したゲスト分子を放出する際に見られる吸熱ピークが,その保持力の大きさによって溶媒沸点より大きくずれることが観測された.また,TGによる包接体の重量減少は^1H-NMRの結果を支持した.(3)単結晶X線解析から,エーテル系、ケトン系溶媒の包接にはphenanthrene環に対し垂直に固定された芳香環平面が,ベンゼン系溶媒の包接にはphenanthrene環の関与が大きいことが示唆された.この包接には新しいタイプの相互作用が関与しており,ゲスト分子の安定化にはホスト分子とのC-H・・・O型水素結合が,空間の構築に必要な芳香環の固定にはedge-to-face相互作用(σ-π相互作用)が重要な役割を果たしていた.また,溶媒放出に必要なエネルギーはホスト-ゲスト間の相互作用だけでなく,結晶格子を形成しているホスト分子同士の作用も重要な因子になっているものと考察した.
紫外線長期眼照射による皮膚光老化と記憶学習能力低下の脳内遺伝子クロストークの解析

先ず我々は光老化の最も重篤な症状である皮膚癌について検討した。光老化によって誘導される非メラノーマ性の皮膚癌が、UVA長期眼照射においても誘導されることが判明した。このことよりUVA長期眼照射は光老化全般について関係していることが示された。更にこの皮膚癌の誘導には副腎皮質刺激ホルモン(ACTH)が重要な役割を持つことが分かった。UVA長期眼照射後の皮内検討の結果、光老化におけるシワ、色素沈着および皮膚癌の発現にはACTH以外にCRHR type2、μ-opioid receptor、OGFR、urocortin2、β-endorphin、methionine enkephalin、histamineが作用することも分かってきた。これらのホルモンおよび受容体はUVAの直接な皮膚照射によって皮膚で増加してくる。しかし眼照射では皮膚に直接的な刺激が与えられないため、脳(視床下部下垂体系)を介して増加したものと考えられた。一方、UVA長期眼照射により記憶・学習能力が低下し、脳中のCRHR type2、OGFR、urocortin2、methionine enkephalinのレベルが増加することが示された。このことから皮膚の光老化と記憶・学習能力の低下には脳内の同じ分子が作用していることが判明した。更に長期眼照射した脳内ではhistamineや炎症性サイトカイン、更には好中球も増加し炎症状態を示した。この炎症状態は長期間続き脳内で慢性炎症状態となる。この慢性炎症が皮膚や脳の老化を誘導している可能性を見出した。しかしながら脳内慢性炎症のメカニズムはまだ分かっていない。以上のことから、UVA長期眼照射により脳内のホルモンバランスが変化し光老化を誘導していることが分かった。更に脳内慢性炎症が光老化を誘発、もしくは悪化させる可能性が示され、今後検討を加えていく予定である。本年度の目標である皮膚の光老化(シワ、色素沈着、皮膚癌)と脳の光老化(記憶・学習能力の低下)の脳内の原因共通遺伝子の探索が順調に進んでいる。脳内の光老化に対する共通遺伝子が見つかってきた。また、慢性炎症に関する項目についても脳内で多く共通遺伝子が見られた。慢性炎症は加齢、アルツハイマーなどの原因となっており脳内慢性炎症を解析することは大変意義のあることと考えられ、光老化と慢性炎症についてさらなる検討を加えて行く予定である。次年度からは脳内のホルモン系および炎症を動かすシグナル系を検討する。これまでに見出した共通遺伝子がそれぞれどのようなクロストークを行なっているのかを検討するとともに、1癌においては細胞分裂に関与するもの2記憶・学習能力においては免疫系とアミロイド系3皮膚の光老化においては免疫系、について共通遺伝子がどのように関わっているかを検討する。また、光の刺激は脳において時計遺伝子と密接に関係している。時計遺伝子はアレルギーや炎症、更にはストレスなどの引き鉄にもなっている。それゆえ、最終的には、時計遺伝子による光老化誘導の包括的なネットワークを検討する。

これまでに見出した共通遺伝子がそれぞれどのようなクロストークを行なっているのかを検討するとともに、1癌においては細胞分裂に関与するもの2記憶・学習能力においては免疫系とアミロイド系3皮膚の光老化においては免疫系、について共通遺伝子がどのように関わっているかを検討する。また、光の刺激は脳において時計遺伝子と密接に関係している。時計遺伝子はアレルギーや炎症、更にはストレスなどの引き鉄にもなっている。それゆえ、最終的には、時計遺伝子による光老化誘導の包括的なネットワークを検討する。
エビデンスに基づく行動支援を促進するアプリケーションとSV研修プログラムの開発

本研究は3部構成である(4年計画)。第1部(平成28年度29年度)においては、行動支援に携わる支援者が持つ問題に対する帰属スタイルと行動支援に関する基礎知識を評価するツールを開発した。第2部(平成28年度30年度)においては、支援者が行う行動支援計画の立案をサポートする介入手続きのデータベースとそのデータベースを関連づけたアプリケーションの開発を試みた。第3部(平成29年度31年度)においては、教育現場において、行動支援計画の立案や実行を主導し、他の支援者に対してサポートとフィードバックを提供するスーパーバイザー(SV)を養成するための研修プログラムを開発し、効果検証を行う予定であった。平成29年度と平成30年度は、第2部におけるデータベース作成に着手した。データベースの作成については、発達障害児者、知的障害児者の行動支援に関わる行動支援をテーマとした論文が掲載されているジャーナルをピックアップし、系統的レビューの準備を始めた。また、データベースと関連付けられたアプリケーションの開発に向けて、予備的なシステムの構築とテスト試行に着手し始めた。さらに研修プログラムの内容選定の基礎的資料とするため、平成28年度はこれまでに先行研究が乏しかった義務教育段階の特別支援学級における児童生徒の行動問題の実態や教師のニーズについて調査を行い、平成29年度は同様に先行研究が乏しかった幼稚園・保育園・認定こども園を対象とした行動問題と教員・保育士が抱えるニーズに関する調査研究を実施した。続いて平成30年度は、発達障害のある当事者を対象に、学校場面における困難性や必要な配慮事項について調査を行った。第2部において行う予定であった介入手続きのデータベース化とそのデータベースに関連づけたアプリケーション開発に予定していたよりも時間がかかっており、第3部において取り組む予定であった研究にまだ着手できていない。国内外の主要ジャーナルをレビューし、客観的な効果指標が示されている研究論文をピックアップし、データベースを作成することを急ぐ。問題行動の型と機能ごとに各研究において実施された具体的な支援手続きを整理する予定である。連携研究者である大対香奈子氏、田中善大氏、野田航氏の他、研究協力者を募り作業のペースを上げる。データベースが完成し次第、支援者が対象者の問題行動の型と機能を入力すれば、自動的に推奨される支援手続きが表示され、それを選択すれば設定しておいた書式で支援計画が出力されるようなアプリケーションの作成を継続する予定である。また、典型的ないくつかの支援手続きについては、ユーザーが必要に応じて閲覧・参照できる解説用の動画ファイルを組み込む。なお、アプリケーションはWindows、Mac OSで使用できるよう作成し、さらにスマートフォンやタブレットでも使用できるようAndroidやiOSにも対応させる。第1部(平成28年度29年度)においては、行動支援に携わる支援者が持つ問題に対する帰属スタイルと行動支援に関する基礎知識を評価するツールを開発する。第2部(平成28年度30年度)においては、支援者が行う行動支援計画の立案をサポートする介入手続きのデータベースとそのデータベースを関連づけたアプリケーションを開発する。第3部(平成29年度31年度)においては、教育現場において、行動支援計画の立案や実行を主導し、他の支援者に対してサポートとフィードバックを提供するスーパーバイザー(SV)を養成するための研修プログラムを開発し、効果を検証する。さらに、第2部と第3部の内容を検討するにあたり、日本の学校教育において、特別支援学級を対象とした問題行動とその支援に関する実態調査がないことが明らかとなったため、全国実態調査を行い、基礎的な資料を得た。データベースの作成が予定より少々遅れているものの、その他の計画については予定通り順調に進んでいる。また、データベースの作成についても協力者からの協力が得られる見通しが立ち、計画が遂行できる見込みである。平成29年度は、第2部におけるデータベース作成に着手した。さらに研修プログラムの内容選定の基礎的資料とするため、平成28年度はこれまでに先行研究が乏しかった義務教育段階の特別支援学級における児童生徒の行動問題の実態や教師のニーズについて調査を行ったが、平成29年度は同様に先行研究が乏しかった幼稚園・保育園・認定こども園を対象とした行動問題と教員・保育士が抱えるニーズに関する調査研究を実施した。また、アプリケーションの作成についても協力者からの協力が得られる見通しが立ち、計画が遂行できる見込みである。

第2部(平成28年度30年度)においては、支援者が行う行動支援計画の立案をサポートする介入手続きのデータベースとそのデータベースを関連づけたアプリケーションの開発を試みた。第3部(平成29年度31年度)においては、教育現場において、行動支援計画の立案や実行を主導し、他の支援者に対してサポートとフィードバックを提供するスーパーバイザー(SV)を養成するための研修プログラムを開発し、効果検証を行う予定であった。平成29年度と平成30年度は、第2部におけるデータベース作成に着手した。データベースの作成については、発達障害児者、知的障害児者の行動支援に関わる行動支援をテーマとした論文が掲載されているジャーナルをピックアップし、系統的レビューの準備を始めた。また、データベースと関連付けられたアプリケーションの開発に向けて、予備的なシステムの構築とテスト試行に着手し始めた。さらに研修プログラムの内容選定の基礎的資料とするため、平成28年度はこれまでに先行研究が乏しかった義務教育段階の特別支援学級における児童生徒の行動問題の実態や教師のニーズについて調査を行い、平成29年度は同様に先行研究が乏しかった幼稚園・保育園・認定こども園を対象とした行動問題と教員・保育士が抱えるニーズに関する調査研究を実施した。続いて平成30年度は、発達障害のある当事者を対象に、学校場面における困難性や必要な配慮事項について調査を行った。第2部において行う予定であった介入手続きのデータベース化とそのデータベースに関連づけたアプリケーション開発に予定していたよりも時間がかかっており、第3部において取り組む予定であった研究にまだ着手できていない。2000年以降の国内外の主要ジャーナルをレビューし、客観的な効果指標が示されている研究論文をピックアップし、データベースを作成する。問題行動の型と機能ごとに各研究において実施された具体的な支援手続きを整理する予定である。連携研究者である大対香奈子氏、田中善大氏、野田航氏、そして研究協力者である月村彈氏の協力を得ながら作業を進める。平成29年度が終わる時点で300程度の研究をデータベース化してアプリケーションの開発に着手する。さらに支援者が対象者の問題行動の型と機能を入力すれば、自動的に推奨される支援手続きが表示され、それを選択すれば設定しておいた書式で支援計画が出力されるようデザインする計画である。また、典型的ないくつかの支援手続きについては、ユーザーが必要に応じて閲覧・参照できる解説用の動画ファイルを組み込む。なお、アプリケーションはWindows、Mac OSで使用できるよう作成し、さらにスマートフォンやタブレットでも使用できるようAndroidやiOSにも対応させる予定である。国内外の主要ジャーナルをレビューし、客観的な効果指標が示されている研究論文をピックアップし、データベースを作成する。
妊娠高血圧症候群の血管内皮機能障害改善に向けての栄養管理に関する総合的研究

妊娠高血圧症候群(PIH)は血管内皮機能障害が病態の中心とされる。妊娠初期に同意を得て、血管内皮機能の低下がみられた妊婦において葉酸(FA)0.8mgとL-アルギニン(LARG)1g/日を投与した。PIHの中で蛋白尿も持つ妊娠高血圧腎症(PE)発症は、内皮機能低下妊婦で高率に発症した。FA+LARG投与により内皮機能は改善し、PE発症は低下した。投与により赤血球内FA値とLARG値は有意に増加した。しかし、血清cGMP濃度は、投与やPE発症に関わらず、変化しなかった。妊娠初期から血管内皮機能の低下を認めた妊婦ではPEを高率に発症し、FA+LARG投与は血管内皮機能を改善し、PIHの発症を予防する可能性が示唆された。娠高血圧症腎症(PE)は、高血圧と蛋白尿を主症状とし、母体の血液循環不全や胎児の発育不全を発症する。近年、血管内皮機能障害とその病態形成との関係に注目が集まっている。我々はPEでは上腕動脈における血管内皮機能が減弱し、血液中の血管内皮由来弛緩因子nitric oxide (NO)の基質であるL-アルギニン(LARG)量が減少していることを明らかにした。また、循環器疾患を有する患者への葉酸(FA)の慢性投与はNO機能障害を改善すると報告されている。妊娠初期に血管内皮機能の低下がみられた妊婦の内皮機能異常をFAとLARG投与が改善するか否かを検討した。娠初期(1215週)に同意を得て、上腕動脈でのflow mediated vasodilatation (FMD)を測定した。血管内皮機能の低下がみられた妊婦(FMDの1分値が110%以下)に対して、FA0.8mg+LARGlg/日を妊娠16週から分娩まで投与した群(FL(+)群,n=8)。FA+LARGを投与しなかった内皮機能低下妊婦をFL(-)群(n=8)、%FMDが110%より大きい妊婦を内皮機能正常妊婦(C群,n=10)とした。投与前、投与開始3週後、妊娠30週、分娩前にFMD、赤血球内LARGとFA濃度、血清中soluble Flt1(sFlt1)とNOx濃度を測定した。PE症は、FL(+)群1名、FL(-)群3名、C群0名であった。FA(+)群の%FMDは、C群と同程度にまで増加した。FA(-)群は低値のままであった。FL(+)群の赤血球内FA値とLARG値は有意に増加した。LARG値はPE発症妊婦において低下した。しかし、血清NOx濃度は、LARG+FA投与やPE発症に関わらず、変化しなかった。sFlt1濃度はLARG+FA投与に関わらず、PE発症患者において発症前に高値となった。娠初期から血管内皮機能の低下を認めた妊婦ではPEを高率に発症した。FA+LARG投与は血管内皮機能を改善し、PIHの発症を予防する可能性が示唆された。LARG値の低下は、PE発症に関係し、その摂取はPEの発症を予防する可能性がある。妊娠高血圧症腎症(PE)は、血管内皮機能障害とその病態形成との関係に注目が集まっている。PE妊婦では、妊娠初期から上腕動脈における血管内皮機能の減弱がみられ、PE発症予知因子との報告もある。また、妊娠初期に血管内皮機能低下がみられた妊婦は(1)PE発症のハイリスク群であること、(2)葉酸(FA)とL-アルギニン(LARG)慢性投与はPE発症を予防するか否かを検討した。妊娠初期(1215週)に妊婦に同意を得て、上腕動脈においてshear stressによる内皮由来一酸化窒素(NO)産生による血管内皮機能を反映するとされるflow mediated vasodilatation (FMD)を測定した。FMD1分後の変化率(%FMD)が110%以下を血管内皮機能の低下とした。血管内皮機能の低下がみられた妊婦において、FA 0.8mg+LARG1g/日を妊娠16週から分娩まで投与した妊婦(n=12)をFL(+)群、FA+LARGを投与しなかった妊婦(n=13)をFL(-)群、%FMDが110%より大きいものを内皮機能正常妊婦(C群、n=13)とした。

投与前、投与開始4週後、8週後、妊娠32週と分娩前にFMD、赤血球内LARGとFA濃度、血中soluble Flt 1 (sFlt 1)とcGMP濃度(NOのsecond messenger)を測定した。PE発症は、FL(+)群2名、FL(-)群8名、C群0名であった。FL(+)群の%FMDは、投与によりC群と同程度にまで回復した。FL(-)群は低値のままであった。FL(+)群の赤血球内FA値とLARG値は有意に増加した。PE発症妊婦(FA(+)群も含めて)においてLARG値は低下し、sFlt1濃度はPE発症前に高値となった。しかし、血中cGMP濃度は、FA+LARG投与やPE発症に関わらず、変化しなかった。この検討から、(1)妊娠初期から血管内皮機能の低下を認めた妊婦ではPEを高率に発症すること、(3)FA+LARG投与は、ハイリスク妊婦の血管内皮機能を改善し、PE発症を抑制する可能性が示唆された。妊娠高血圧症候群(PIH)は、血管内皮機能障害が病態形成に関係する。(1)妊娠初期から上腕動脈における血管内皮機能の減弱がみられた妊婦はPIH発症のハイリスク群であること、(2)葉酸(FA)とL-アルギニン(LARG)慢性投与はPIH発症を予防するか否かを検討した。FAは水溶性で、ビタミンB群に所属し、胎児神経管閉鎖不全の予防のために、妊娠可能な女性において摂取がすすめられている。FAの体内の動態は赤血球中のFA濃度を用いられるが、妊婦においてその検討はされていない。赤血球中FA濃度推移の検討を行った。妊娠初期に妊婦に同意を得て、上腕動脈においてshear stressによる内皮由来一酸化窒素(NO)産生による血管内皮機能を反映するとされるflow mediated vasodilatation(FMD)を測定した。FMD1分後の変化率(%FMD)が110%以下を血管内皮機能の低下とした。血管内皮機能の低下がみられた妊婦において、FA0.8mg+LARG1g/日を妊娠16週から分娩まで投与した妊婦(n=12)をFL(+)群、FA+LARGを投与しなかった妊婦(n=13)をFL(-)群、%FMDが110%より大きいものを内皮機能正常妊婦(C群、n=13)とした。投与前、投与開始4週後、8週後、妊娠32週と分娩前にFMD、赤血球内LARGとFA濃度とcGMP濃度(NOのsecond messenger)を測定した。PIH発症は、FL(+)群2名、FL(-)群8名、C群0名であった。FL(+)群の赤血球内FA値とLARG値は有意に増加し、FA値は投与開始3週、10週と増加し、20週でplateauに達した。PIH発症妊婦(FA(+)群も含めて)においてLARG値は低下した。しかし、血中cGMP濃度は、FA+LARG投与やPIH発症に関わらず、変化しなかった。この検討から、(1)妊娠初期から血管内皮機能の低下を認めた妊婦ではPEを高率に発症する、(2)FA+LARG投与は、ハイリスク妊婦の血管内皮機能を改善し、PE発症を抑制する可能性がある、(3)妊娠5月までFA0.4mg/日摂取は過剰摂取となりえないなどが示唆される。
見えない部分の知覚の研究

L字形の図形を正方形が部分的に覆っているような図形において、L字形の可視部分が手前に来るように両眼視差をつけ、またL字形の輝度が背景と正方形の中間の輝度のとき、(半)透明なL字形の全体が見えることがある(図1)。昨年の藤田の報告によると、この主観的な角が50%の比率で見えるときの主観的なアーム(内側のアーム)の長さは約0.6度である。この主観的な角の形成にはどのような要因が影響を与えているのかをさまざまな点から調べた。実験1。[目的]L字形の正方形に覆われていないアーム(外側のアーム)の長さが、主観的な角の形成に影響を与えているかを調べる。[方法]外側のアームの長さを3段階、内側のアームの長さを5段階に変化させた。被験者の課題はL字形の内側の角が見えるかどうかを判断することである。他の実験手続きは昨年とほぼ同様。[結果]図2に示されているように、外側のアームの長さは主観的な角の形成にあまり影響を与えていない。また50%の比率で主観的なアームが見える長さは約0.6度であった。実験2。[目的]外側のアームの長さを一定にし、内側のアームの縦(6段階)と横(3段階)の長さを変えて、これらが主観的な角の見えにどういう影響を与えるかを調べる(図3)。[結果]図4からわかるように内側のアームの一方が短いとき、主観的な角は形成されやすくなる。[考察]被験者の何人かは横のアームが短いとき、L字形を覆う長方形の縦の辺がアームに平行で近くにあるので、アームが見やすいと報告した。この可能性を次に調べる。実験3。[目的]ここではL字形ではなく、I字形(図5)を用い、主観的アームの形成に及ぼす、覆い隠す図形の幅の効果を調べる。もし実験3でえられた示唆が正しいとすれば、図5におけるbの長さが短いほど、主観的なアームが見えやすいはずである。[方法]aの長さを7段階、bの長さを5段階に変えた。[結果]図6からわかるように、bの長さが短いほど主観的アームが形成されやすい。またbの長さが16ドットのときと32ドットのときには差がなくなっている。実験4。[目的]覆い隠す図形が正方形の場合と八角形の場合(図7)を比較する。もし内側のアームの近くにそれと平行な線のある方が、主観的な角が見えやすいとすれば、正方形の方が有利であろう。もし覆い隠す図形の面積が小さい方が主観的な角が見えやすいとすれば、八角形のほうが有利であろう。[結果]図8からわかるように、内側のアームが比較的短いならば、覆い隠す図形が正方形のときの方が、主観的な角が見えやすい。しかし内側のアームがある程度以上長くなると、正方形と八角形の間に差がなくなる。[結論](1)覆い隠す図形の外側にあるアームの長さは主観的角の形成に主要な影響を及ぼさない。(2)覆い隠す図形の辺が主観的アームと平行でかつそれが近くにあるとき、主観的なアームおよび主観的な角の形成に促進的な効果を及ぼす。実験1。実験2。実験3。[目的]

ここではL字形ではなく、I字形(図5)を用い、主観的アームの形成に及ぼす、覆い隠す図形の幅の効果を調べる。もし実験3でえられた示唆が正しいとすれば、図5におけるbの長さが短いほど、主観的なアームが見えやすいはずである。[方法]aの長さを7段階、bの長さを5段階に変えた。[結果]図6からわかるように、bの長さが短いほど主観的アームが形成されやすい。またbの長さが16ドットのときと32ドットのときには差がなくなっている。実験4。[目的]覆い隠す図形が正方形の場合と八角形の場合(図7)を比較する。もし内側のアームの近くにそれと平行な線のある方が、主観的な角が見えやすいとすれば、正方形の方が有利であろう。もし覆い隠す図形の面積が小さい方が主観的な角が見えやすいとすれば、八角形のほうが有利であろう。[結果]図8からわかるように、内側のアームが比較的短いならば、覆い隠す図形が正方形のときの方が、主観的な角が見えやすい。しかし内側のアームがある程度以上長くなると、正方形と八角形の間に差がなくなる。[結論](1)覆い隠す図形の外側にあるアームの長さは主観的角の形成に主要な影響を及ぼさない。(2)覆い隠す図形の辺が主観的アームと平行でかつそれが近くにあるとき、主観的なアームおよび主観的な角の形成に促進的な効果を及ぼす。
高効率的ロジウム触媒反応の開発とその応用

tert-Butyldimethylsilyloxy(TBDMSO)基の立体電子的効果により制御された、α-ジアゾケトン類の新規な化学及び立体選択的ロジウム(II)触媒C-H挿入反応を開発した。その結果、種々の置換基を持つ多置換シクロペンタノンが効率的に合成可能となった。さらに、得られたシクロペンタノンへの新たな立体選択的置換基導入法を見いだした、またシクロペンタノンからδ-ラクトンへの環拡大反応(Baeyer-Villiger反応)の新規な反応促進法を見いだし、多置換δ-ラクトンの一般合成法を開発できた。これらの反応を組み合わせて、プロスタグランジン類の重要中間体、Corey lactoneの短工程合成や、抗腫瘍活性天然物discodermolideのラクトン部の合成を達成した。また、L-バリンから容易に合成されるα-ジアゾ-α'-アルコキシケトン類のロジウム(II)触媒C-H挿入反応により、立体選択的にcis-2,5-二置換3-ジヒドロフラノン類の合成に成功した。3-ジヒドロフラノン類はBaeyer-Villiger反応により位置及び立体選択的にcis-2,6-二置換1,3-ジオキサン-4-オンに変換された。これは保護されたβ-ヒドロキシ酸と見ることができ、有機合成化学上価値ある合成中間体である。この一連の反応は、第一級ハロゲン化アルキルから二炭素増炭したβ-ヒドロキシ酸の不斉合成を意味しており、新規なβ-ヒドロキシ酸の不斉合成法を提供することが出来た。3のラクトン環2-位の立体選択的メチル化、つづく5-位tert-butyldimethylsilyloxymethyl基のアリル基への変換の後、Sharpless不斉ジヒドロキシル化により7-位不斉炭素を構築して抗腫瘍活性海洋天然物dicodermolideのCI-C8セグメントを合成した。さらに市販のmethyl(3)-3-hydroxy-2-methylpropanoateより立体選択的に合成したC9-C15セグメントとWiitig反応により連結してC1-C15セグメントの合成を達成した。一方、4の5-位tert-butyldimethylsilyloxymethyl基をアルデヒドとした後Wiitig反応によりα,β-不飽和アルデヒドとした。アルデヒド基を還元してメチル基へと変換して天然物prelactoneCの3-位O-tert-butyldimethylsily体を合成した。α-置換-α-アルコシキジアゾケトン類のロジウム(II)触媒C-H挿入反応では2,5-二置換-2-ジヒドロフラノン類が得られることが報告されているが、その収率ならびに立体選択性は満足の行くものではなかった。我々は、α-位に立体的にかさ高い置換基があれば立体選択性の増大が期待できると考え、α-位にイソプロピル基を持つα-アルコシキジアゾケトン類(3-ベンジルオキシ-及びブトキシ-1-ジアゾ-4-メチルペンタン-2-オン)と種々のロジウム触媒との反応を検討した。その結果、ベンゼン中オクタン酸ロジウム(II)と加熱還流すると高収率、高立体選択的にC-H挿入反応が進行し、2,5-cis-2-イソプロピル-5-フェニル(及びプロピル)ジヒドロフラン-3-オンが得られることを見いだした。本反応を光学活性α-置換-α-アルコシキジアゾケトンの反応に応用した。L-バリンより容易に合成できる(S)-2-ヒドロキシ-3-メチルブタン酸メチルと臭化ベンジルを用いて光学活性(S)-3-ベンジルオキシ-1-ジアゾ-4-メチルペンタン-2-オンを合成し、ベンゼン中触媒量(1mol%)のオクタン酸ロジウム(II)と加熱還流すると、75%の収率で(2S,5S)-2-イソプロピル-5-フェニルジヒドロフラン-3-オンが単一の異性体として得られた。

これをBaeyer-Villiger反応にふすと、(2R,3S)-2-イソプロピル-6-フェニル-1,3-ジオキサン-4-オンが高収率で得られた。これは保護されたβ-_ヒドロキシ酸と見ることができ、有機合成化学上価値ある合成中間体である。この一連の反応は、第一級ハロゲン化アルキルから二炭素増炭したβ-ヒドロキシ酸の不斉合成を意味しており、新規なβ-ヒドロキシ酸の不斉合成法を提供することが出来た。
ヨーロッパ高等教育改革におけるECTS(欧州単位互換制度)の実践的効果と課題

本研究では、ヨーロッパ高等教育改革におけるECTSの高等教育機関への影響について調査した結果、オランダ、ベルギー(フランダース地域)における重要な影響として、学生の流動性の向上は期待していたほどではなく、むしろECTSと2サイクルシステム(教育課程の学士と修士課程への二分化)の制度化により、学生が取得した科目の内容や学習時間数が透明化され、以前は進学がほとんど不可能であった高等専門大学(以下HBO)の学士課程から研究大学の修士課程への進学希望者が急増していることが判明した本研究では、ヨーロッパ高等教育改革におけるECTSの高等教育機関への影響について調査した結果、オランダ、ベルギー(フランダース地域)における重要な影響として、学生の流動性の向上は期待していたほどではなく、むしろECTSと2サイクルシステム(教育課程の学士と修士課程への二分化)の制度化により、学生が取得した科目の内容や学習時間数が透明化され、以前は進学がほとんど不可能であった高等専門大学(以下HBO)の学士課程から研究大学の修士課程への進学希望者が急増していることが判明した(1)4月-9月は、オランダ、ベルギー、イギリスの高等教育改革に関する資料収集。(2)9月13日-15目は、欧州国際教育学会(EAIE)大会に出席し欧州委員会代表者とTUNINGプロジェクトの代表者に、オランダ・ベルギー、イギリスの高等教育機関を対象とするアンケート調査の質問項目について相談。また、欧州高等教育制度専門家並びにベルギーフランダース教育省職員にも今後の研究の方向性について相談。現地調査としては、上記大会中並びにその後、オランダの大学連盟の代表者、アムステルダム高等専門大学(Hogeschool)の職員等へECTSの影響についてインタビューを実施。(3)10月-12月は、アンケート調査票の作成とオランダ、ベルギー、イギリスの全ての高等教育機関の連絡先を検索しメールリストを作成。そして、12月-2月に最終的なアンケート調査票の内容に修正を加え、3月7日にオランダ、ベルギーの高等教育機関ヘアンケート調査票を配布。(4)2月26日-28日は、イギリスのカーディフ大学、リーズメトロポリタン大学、レスター大学を訪問し、ウェールズ、イングランド地域における大学の単位の取り扱いの違いについて調査。その結果、オランダ、ベルギーとはECTSの取り扱いが非常に異なっているため、現在、イギリスの高等教育機関へのアンケート調査の内容を大幅に修正している。(5)3月10日-19日は、オランダではアムステルダム自由大学、アムステルダム高等専門大学、アルンヘム・ナイメーヘン高等専門大学、デルフト工科大学を訪問し、ベルギーでは、ブリュッセル・セントルーカス高等専門大学、ブリュッセル自由大学、並びにウェンテンシャップ・カント高等専門大学を訪問し、特に高等専門大学(Hogeschool)におけるECTSの影響について調査。(6)20年度は、イギリスへのアンケート調査の実施並びにオランダ、ベルギーのアンケート調査の結果を分析し、報告書並びに論文を作成する計画である。研究成果としては、(1)平成20年6月13日に国立台湾大学国際部主催の学内ワークショップにて、「Impact of ERASMUS,EGTS and Bologna Process in European Higher Education」という演題で講演を行った。(2)6月29日には「欧州高等教育改革(ボローニア・プロセス)による大学改革の現状と課題-オランダ、ベルギー(フランダース地域)におけるECTSの影響」で日本比較教育学会にて発表した。(3)9月11日には、EAIE(欧州国際教育協会)の第20周年大会に出席し、欧州委員会高等教育局長でボローニャ・プロセスのECTSに関する事業を統括するPetervan der Hjiden氏の計らいで、パネルディスカッション「MOPILE ECTS-Friends or Foe?」に急遽、アジアからの専門家として参加し本研究の調査結果について発表した。そして、本研究結果は、現在広島大学が開発に協力しているUMAP(アジア太平洋大学交流機構)[議長は浅原学長]の政策立案等にも有効に活用されているということが20年の実績としては、重要である。21年3月の時点で2年間の研究結果は最終的にまとめられたので、今後は上記UMAPや学会等での発表を継続しつつ、論文執筆にも専念したい。また、20年度の調査実績としては、9月には、オランダの高等教育機関3校と欧州の2つの主要研究機関であるCHEPS(高等教育政策研究所)並びにINCHER(高等教育研究国際センター)にて調査を行い、さらに12月には、広島で本研究テーマの分野では最も学識のあるUlrich Teichler氏と面談し21年3月には、パリでボローニャ・プロセスから生まれたENQA(欧州質保証協会)のBruno Curvale会長とも面談する事ができた。以上のように、ボローニャ・プロセスの中核となる団体代表、研究機関とほぼ全て連携が取れるようなネットワークも形成できたので、今後は、このネットワークを活用してさらなる研究を進めて行きたい。
アデノシン受容体遺伝子欠損マウスを用いた睡眠調節の解析

アデノシンは脳内で睡眠誘発物質として機能簾する。脳内には4つのアデノシン受容体サブタイプ(A_1,A_<2A>,A_<2B>,A_3が存在し、A_1受容体(A_1R)とA_<2A>受容体(A_<2A>R)が睡眠誘発に関与すると考えられてきた。しかし、どちらが主要な役割を果たすかについて意見が対立していた。そこで、我々は、アデノシンの睡眠誘発に関与する受容体を同定するために、各受容体の遺伝子欠損(KO)マウスと選択的作動薬を用いた薬理学的実験をおこなった。AIR-KOマウスの通常時の睡眠は、野生型マウスと比べて変化が見られなかった。さらに、WTマウスと同様、断眠後のリバウンドとしてノンレム睡眠とレム睡眠量が増加した。しかし、A_<2A>R-KOマウスは、夜間活動時のノンレム睡眠とレム睡眠が野生型マウスに比べわずかに増加し、断眠後のノンレム睡眠の増加が見られなかった。カフェインはコーヒー・緑茶・コーラの成分であり、A_1RおよびA_<2A>Rに対して同等の結合親和性を持ち、それらの作用を阻害する。カフェインの覚醒作用がA_1RとA_<2A>Rのどちらの受容体の阻害によるのかに関しても議論が続いていた。そこで我々は、睡眠期の野生型マウス、A_1R-KOマウス、A_<2A>R-KOマウスに、カフェインを腹腔内投与して、その覚醒効果の有無を調べた。その結果、野生型マウスとA_1R-KOマウスは、カフェイン投与後の覚醒時間が用量依存的に増加したが、A_<2A>R-KOマウスの覚醒時間は全く変化しなかった。従って、カフェインの覚醒作用はA_<2A>Rの阻害によると考えられる。ラットへのCyclopentyl adenoslne(A_1R作動薬)の投与は睡眠覚醒サイクルを変化させなかった。一方、CGS21680(A_<2A>R作動薬)は顕著にノンレム睡眠を増加させ、睡眠中枢である腹側外側視索前野(VLPO)の活動を亢進し、GABA作動性神経を介してヒスタミン系覚醒中枢(結節乳頭核、TMN)の活動を抑制した。H_1受容体-KOマウスを用いて、H_1受容体刺激が中途覚醒を増加させ、睡眠から覚醒へのステージ移行を促進し、H_3受容体拮抗薬(Ciproxifan)による覚醒を仲介することを証明した。以上の結果は、睡眠調節で重要な役割を果たすアデノシン受容体は、A_1RではなくA_<2A>Rであり、その睡眠調節はVLPOとTMNのフリップ・フロップ機構により行われることを示している。

カフェインは茶やコーヒー、コーラの成分であり、疲労を解消し覚醒を増強する。カフェインはアデノシンA_1受容体(A_1R)およびアデノシンA_<2A>受容体(A_<2AR>)に対して同等の結合親和性を持って、それらの作用を阻害する。これらの受容体はいずれも睡眠覚醒の制御に関与すると考えられているが、どちらの受容体がカフェインの覚醒作用をもたらすのか依然議論が続いている。今回我々は、A_1RないしA_<2A>Rの欠如がカフェインの覚醒作用にどのように影響するかを解明するために、これら受容体の欠損マウスを利用した。野生型マウスおよびA_1Rノックアウトマウスに対して、午前9時にカフェインを3.75、7.5、15mg/kg腹腔内投与すると、投与後3時間の覚醒時間は用量依存的に増加した。これに対し、カフェインはA_<2A>Rノックアウトマウスの覚醒時間を全く増強しなかった。また、カフェインの興奮作用はDARPP-32(ドーパミン及びサイクリックAMPに制御される分子量32,000のリン酸化蛋白質)のThr^<75>へのリン酸化の増加を伴う事が報告されている。我々は、カフェインの腹腔内投与(7.5mg/kg)によるDARPP-32のThr^<75>のリン酸修飾の増加が、野生型マウスおよびA_1Rノックアウトマウスでは起きるが、A_<2A>Rノックアウトマウスでは起こらないことを証明した。以上の結果は、カフェインの覚醒作用がアデノシンA_<2A>受容体により調節されていることを示している。アデノシンは脳内で睡眠誘発物質として働いている。脳内には4つのアデノシン受容体サブタイプ(A_1,A_<2A>,A_<2B>,A_3)が存在し、A_1受容体(A_1R)とA_<2A>受容体(A_<2A>R)が睡眠誘発に関与すると考えられてきた。しかし、どちらが主要な役割を果たすかについて意見が対立していた。そこで、我々は、アデノシンの睡眠誘発に関与する受容体を同定するため、野生型(WT)マウスと各受容体の遺伝子欠損(KO)マウスとの睡眠構造の変化を調べた。A_1R-KOマウスの通常時の睡眠は、WTマウスと比べて変化が見られなかった。さらに、WTマウスと同様、断眠後のリバウンド睡眠としてノンレム睡眠とレム睡眠量が増加した。しかし、A_<2A>R-KOマウスは、夜間活動時のノンレム睡眠とレム睡眠が野生型マウスに比べわずかに増加し、断眠後のノンレム睡眠の増加が見られなかった。カフェインはA_1RおよびA_<2A>Rに対して同等の結合親和性を持ち、覚醒作用がA_1RとA_<2A>Rのどちらの受容体の阻害によるのかに関しても議論が続いていた。我々は睡眠期のWT、A_1R-KO、A_<2A>R-KOマウスにカフェインを投与し、その覚醒効果の有無を調べた。その結果WTマウスとA_1R-KOマウスはカフェイン投与後の覚醒時間が用量依存的に増加したが、A_<2A>R-KOマウスの覚醒時間は全く変化しなかった。従ってカフェインの覚醒作用はA_<2A>Rの阻害によると考えられる。ラットへのA_1R作動薬の投与は睡眠覚醒サイクルを変化させなかった。一方、A_<2A>R作動薬は顕著にノンレム睡眠を増加させ、睡眠中枢であるVLPOの活動を亢進し、GABA作動性神経を介してヒスタミン系覚醒中枢(TMN)の活動を抑制した。以上の結果は、睡眠調節で重要な役割を果たすアデノシン受容体は、A_1RではなくA_<2A>Rであり、その睡眠調節はVLPOとTMNのフリップ・フロップ機構により行われることを示している。
肺組織傷害と好中球に関する基礎的研究-肺胞に存在する好中球抑制因子の分離・精製ならびに肺組織傷害に対する影響-

人口の高齢化に伴い,長期にわたる喫煙や環境汚染因子に対する長期暴露の結果、肺組織傷害に起因する気腫化・線維化などの呼吸器疾患が増加している。特に成人型呼吸窮迫症候群(ARDS)は致死率が高く比較的若い世代をも巻き込む社会的疾患となっている。これら疾患の発症には、肺胞滲出好中球とそれが放出する組織傷害性のプロテアーゼや活性酸素などが深く関与している。我々は、肺胞領域に存在する好中球機能抑制因子に着目しその分離・精製ならびに治療への臨床応用について研究を進めてきた。計画書で述べたように、ラット肺胞洗浄液から遠心により細胞成分およびサーファクタント成分を除去した上清中にヒト好中球のスーパーオキサイド産生および接着を抑制する生理活性物質が存在することを見い出した。この抑制活性は、100°C、10分の熱処理にて失活したことから、蛋白性抑制因子であり、またSODのような消去剤とは異なる新種の活性物質と考えられた。今年度はさらに、実験を押し進め、この因子の分子量をSuperdex G-200のカラムクロマトグラフィーにて推定したところ、200300kDaの中等度の蛋白分子であることが判明した。また、ラット肺洗浄中には、遊離型のSP-AやSP-Dなどの比較的高分子のサーファクタント特異的蛋白が存在している。我々はこの抑制活性がこれらサーファクタント特異蛋白に由来するのではないことを検証するため、抗ラットSP-A抗体(モノクローナル)や抗ラットSP-D抗体(ポリクローナル)による中和試験を施行した。しかし、好中球スーパーオキサイド産生抑制はこれら抗体によって抑制されなかったことより、この抑制活性を有する蛋白は新種の蛋白である可能性が益々強まった。現在も精製を進めており、蛋白の同定ならびに抗体作成に取り組んでいる。
環境ストレスによる免疫機能亢進の脳内機序の解明

様々なストレスによって免疫機能が修飾されることは日常生活上よく経験される。このように精神状態が免疫機能に影響を与えるということは、元来独立した系であると考えられていた免疫系が脳による制御を受けていることを示唆する。本研究においてはストレスによる免疫機能修飾の機序、特にその脳内機序を明らかにすることを目的とし、以下の結果を得た。(1)拘束ストレスにより視床下部諸核の活動亢進が観察され、特に交感神経系、視床下部-下垂体-副腎皮質系制御に重要な働きを果たす室傍核は、拘束ストレスによりPEG2依存性に活動が亢進し、NK活性抑制に重要な役割を果たしていることが示唆された。(2)脾臓ナチュラルキラー(NK)活性制御に重要な役割を果たす脾臓交感神経系に対して、視床下部室傍核及び腹内側核は促進的な、視策前野及び外側視床下部は抑制的な影響を及ぼしていることが判明した。(3)非炎症性の拘束ストレスによっても脳内のサイトカインmRNA産生が増加する。特に拘束ストレスにより視床下部で発現が増加するIFNα、IL-1βは、交感神経系の媒介により免疫機能抑制に関与している可能性が示された。(4)拘束ストレスによる免疫機能修飾に、脾臓内でのTh1(細胞性免疫)サイトカインからTh2(液性免疫サイトカイン)へのシフトが関与している可能性が示された。(5)外側視床下部の活動亢進、及び海馬の活動抑制は免疫機能亢進に関与している可能性がある。以上の結果より、ストレスによる免疫機能修飾の機序として、ストレス→視床下部サイトカイン発現調節→交感神経活動修飾(→脾臓サイトカイン発現調節)→免疫機能調節という経路が存在すること、さらに特に免疫機能亢進に対しては、海馬及び脳内報酬系の一部をなす外側視床下部が重要な役割を果たしていることが示唆された。本研究の目的は、種々のストレスによる免疫機能修飾、中でも免疫機能亢進の機序、特にその脳内機序を解明することである。免疫系機能は細胞性免疫能と液性免疫能に大別されるが、最近、ヘルパーT細胞がさらにIl-2、Il-12、IFN-γを産生し細胞性免疫能に関与するTh1細胞と、IL-4、IL-5、IL-6、IL-1Oを産生し液性免疫に関与するTh2細胞に分かれ、このTh1/Th2バランスが生体の免疫機能に重要であり、ひいては種々の疾病の発症に関与することが分かってきた。そこで本年度はまず(1)これらTh1、Th2細胞が産生するサイトカイン群をmRNAレベルで高感度に同時に検出できる方法として、RNase Protection Assay法を導入した。(2)さらに微量の検体でより高感度にmRNAの定量化をできる方法としてcompetitive RT-PCR法を導入、この方法を用い、拘束ストレス開始30分後より視床下部、下垂体、肝臓でIL-1 βmRNA発現が増加するが、海馬、脾臓では変化しないこと及び拘束ストレスによる脾臓NK活性低下は杭IL-1血清の前投与で抑制されることから、この免疫抑制の少なくとも1部は脳内に発現するIL-1 βにより媒介されることを明らかにした。(3)さらに脳内にはIFN αがconstitutiveに存在し、拘束ストレスによりIFN αmRNAが脳内で増加するが、IFN αを海馬内に微量注入すると、NK活性が亢進することを見出した。

(4)拘束ストレスによる脾臓NK活性低下はプロスタグランディン(PG)合成阻害薬であるディクロフェナックの脳室内前投与で抑制され、さらにPGE2の視床下部室傍核、視索前野、第3脳室前腹側壁内微量注入はNK活性を活性を抑制させるが、外側視床下部内微量注入はNK活性を亢進させることを明らかにした。(4)拘束あるいは高温及び低温ストレスにより、FOSタンパクが、視床下部室傍核、視索前野、腹内側核、第3脳室前腹側壁などに発現することを明らかにした。本研究の目的は、ストレスによる免疫機能修飾機序、特にその脳内機序を解明することである。昨年度に引き続き本年度は以下の4点を明らかにした。(1)神経活動活性化の指標であるc-Fos蛋白は拘束ストレス(IMB)により、視索前野(POA)、室傍核(PVN)、腹内側核(VMH)、外側視床下部(LH)、視索上核(SON)、視交叉上核(SCN)に発現が認められた。プロスタグランディン(PG)合成酵素阻害剤であるdiclofenacをIMB負荷前に末梢投与しておくと、PVN、VMH、LH、SON、SCNのc-Fosは発現が減少した。PGE_2の側脳室内投与により、POAのc-Fos発現は減少、PVN、VMHでは増加、LHでは変化がなかった。(2)脾臓の除神経を行っておくとIMBによるNK活性の抑制は著明に軽減する。そこで脳内各所を興奮性アミノ酸であるグルタミン酸の微量注入により化学的に刺激して脾臓交感神経活動を観察した結果、PVN、VMHは促進的な、POA、LHは抑制的な影響を脾臓交感神経活動に対して及ぼしていることが判明した。(3)IMBにより脳内に誘導されるサイトカインmRNAを検討すると、視床下部でIFN-α、IL-1β、TNFα、TNFβ、海馬でIL-1β、TNFα、TNFβ、IL-3、IL-6、IL-10のmRNA発現増加が観察された。(4)ストレスによる免疫機能修飾の末梢出力機序として、Th1及びTh2サイトカインmRNAの脾臓内動態を検討すると、IMBによりIL-1β、TNFα、TNFβ等のTh1サイトカインmRNAの脾臓内発現の抑制傾向が観察された。以上の結果より、IMBによる細胞性免疫機能抑制には、視床下部、特にPVNの活動亢進、視床下部で誘導されるIFNα、IL-1β、脾臓内サイトカイン産生のTH1からTh2へのシフトが関与している可能性が示唆された。
C型肝炎ウイルス感染の集積地におけるG型肝炎ウイルス感染の分子疫学調査

GBV-C/HGVの発見によっても非B非C型肝炎の病因の大半は不明のままである。そこで今回、非B非C非G型と考えられる肝細胞癌(以下HCC)の臨床像の特徴を検討し、GBV-Cの関与を検討した。対象は、1994年1月より1995年12月までの2年間に当科に入院した全てのHCC症例185例である。GBV-C RNAは5'-UTR内に設定したprimerを用いてnested RT-PCRにより検出した。その結果、HCC185例中、B型は23例(12%)、B+C型は5例(3%)、C型は144例(78%)であり、非B非C型は13例(7%)であった。これら13例は肝硬変が11例、慢性肝炎が2例であった。GBV-C RNAは23例(12%)に検出され、内訳はB型1例、B+C型1例、C型21例であり、非B非C型では1例も検出されなかった。GBV-C RNA陽性例と陰性例の間には、症例の臨床背景、検査成績に有意差を認めなかった。そこで以下、HCC症例をGBV-C RNA陽性を含むB型23例とC型144例、非B非C非G型13例の3群に分け、臨床像、検査成績を比較し検討した。年齢分布はそれぞれ55.2±11.3歳、66.8±7.6歳、68.8±8.8歳で、非B非C非G型が最も高齢で、3群とも男性例が多かった。輸血歴はそれぞれ22%、44%、15%で、飲酒歴は43%、54%、62%であった。検査成績では、非B非C非G型はγ-GTPがやや高値で、AST、ALTは低値の傾向がみられた。臨床病期はB型はI期が高く、C型では比較的III期が多かったが、非B非C非G型はII期の比率が高いもののIII期は少なかった。非B非C非G型HCCの13例に関して、Kaplan-Meier法による生存曲線を検討すると、3年生存率50.5%、5年生存率33.7%であった。初回治療時にすでに進行している症例が多いことを考慮すれば、非B非C非G型HCCはB型、C型に比べ予後はより良好と推定された。またGBV-C/HGVの肝発癌への関与は比較的少ないと考えられた。G型肝炎ウイルス(GBV-C/HGV)は血液伝搬性ウイルスであることから、その感染経路は輸血や透析などの医療行為の他、性的接触を含むperson-personのclose contactの可能性も推定される。そこで今回GBV-C/HGV感染者の家族構成員につきGBV-C/HGVの感染状態を検討した。対象はGBV-C/HGV陽性の発端者29例とその家族構成員86名である。発端者29例中1例はHBV、HCVの3重感染例であり、27例はHCVとの重感染例で、GBV-C/HGV単独感染例は1例のみであった。家族構成員86名の内訳は両親5名、配偶者29名、同胞10名、子供42名である。GBV-C/HGVの検出は5'UTR内のprimerを用いたnested RT-PCRにより行い、ウイルスの相同性の検討にはE1、E2領域を用いた。その結果、GBV-C/HGV陽性の発端者29例の家族構成員96名中3名に、GBV-C/HGVを検出した。3名の内訳は、2名は配偶者であり(7%)、1名は子供であった(2%)。そこで、これらの3pairにつきGBV-C/HGVの塩基配列、アミノ酸配列を比較した。1pairでは塩基配列で99%、アミノ酸配列で9799%の、他の1 pairでは各々91%、9697%の、残る1pairでは塩基配列で99%のhomologyを示し、いずれも既知のクローンの塩基配列、アミノ酸配列に比べ高い値を示していた。この事実はGBV-C/HGVがperson-to-personで伝搬する可能性を強く示唆するが、真の感染実態を調べるにはGBV-C/HGVに対する抗体の面からも検討する必要があると考えられた。

GBV-C RNA陽性例と陰性例の間には、症例の臨床背景、検査成績に有意差を認めなかった。そこで以下、HCC症例をGBV-C RNA陽性を含むB型23例とC型144例、非B非C非G型13例の3群に分け、臨床像、検査成績を比較し検討した。年齢分布はそれぞれ55.2±11.3歳、66.8±7.6歳、68.8±8.8歳で、非B非C非G型が最も高齢で、3群とも男性例が多かった。輸血歴はそれぞれ22%、44%、15%で、飲酒歴は43%、54%、62%であった。検査成績では、非B非C非G型はγ-GTPがやや高値で、AST、ALTは低値の傾向がみられた。臨床病期はB型はI期が高く、C型では比較的III期が多かったが、非B非C非G型はII期の比率が高いもののIII期は少なかった。非B非C非G型HCCの13例に関して、Kaplan-Meier法による生存曲線を検討すると、3年生存率50.5%、5年生存率33.7%であった。初回治療時にすでに進行している症例が多いことを考慮すれば、非B非C非G型HCCはB型、C型に比べ予後はより良好と推定された。またGBV-C/HGVの肝発癌への関与は比較的少ないと考えられた。