hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
生体由来高親水性化合物の超高性能分離のためのHPLC用カラムの開発

ヌクレオチドの分離は、HILICモードにおいては未だに挑戦的な課題である。双性イオン型のカラム6種を用いて1リン酸型のヌクレオチドの分離最適化を行なったところ、核酸部のカチオン性によって好適な分離条件(移動相中の緩衝液塩濃度、分離の温度)が異なることが示された。また、双性イオン型のカラムでも、化学修飾の違いによって堅牢な分離条件の範囲が狭いものと広いものの差があることも明らかになった。さらにカラム内外に露出しているステンレス部分がヌクレオチド分離に悪影響を与えることがわかったので、内面PEEK被覆型カラムを用いて対処できるようになった。HILICの分離条件下で糖類のキラル分離を実現したが、その分離係数は1.02とまだまだ不十分な値である。より保持を大きくするため、キラル源としてのアミノ酸に加えて、糖鎖と相互作用するボロン酸を合わせて有するモノマーの開発を実施した。複数の合成ルートを試したところ、そのうちの多くはモノマーの分離段階での重合などにより効率的ではなかったが、アミノ酸に保護基を修飾しボロン酸部と結合する段階を先に行う手法が有効であることを見出した。まだ大量合成には至っていないが、目的物の合成には成功した。今後この分子を大量合成し、新たな固定層を開発してゆく。テトラゾールを含むシリル化剤を開発し、シリカ粒子を化学修飾した。反応条件を種々検討したところ、表面反応率を高めた条件下では非常に高い親水性(市販のHILICカラムの1.52倍)の充填剤が得られた。高性能/高選択的な親水性相互作用(HILIC)型、イオン交換型、キラル分離型HPLC用カラムをモノリス型、粒子充填型について調製し、既存の粒子充填型カラムの性能限界を超えた高親水性化合物の分離媒体を開発した。(1)シリカの表面修飾に用いる重合反応の反応条件とカラム性能の関係を精査し、最適な修飾条件を確立した(2)導入した高分子鎖の鎖長と分離性能の相関を検討した(3)カラムの理論段高4-10ミクロン、理論段数30万段を発生させるHILIC型カラムを調製し、メタボローム解析に応用した。(4) HILIC型,カチオン交換型、アニオン交換型、キラル分離能を併せ持つカラムを調製した。直径5ミクロンのシリカ粒子に化学修飾し、充填、カラムに成形、性能評価を行なうことはできるようになったが、それより小さい粒子、特に直径2ミクロン以下の粒子の扱いについては、未だに学界においても好適な充填方法の模索が続いている状況で、まだ困難な状況にとどまっている。我々が提案したカラムテスト法は、二次元にカラムの選択性をプロットすることで、親水層の厚みとカラム表面の酸性ー塩基性の程度を一度に表現できる。市販のカラムのグループ化を行ない、まだ発表されていないタイプの固定層がどのようなものであるか、調査することができた。今後は、まだ報告例がない、または少ないタイプの固定層を重点的に開発する予定である。HILICとキラル分離の両立は、大変興味深い結果を与えたが、より一層糖類の識別能力を向上するため、新しい化学修飾を検討中である。分析化学(1)理論段高5ー10ミクロンの極性化合物分離用のカラムを調製する。HILIC型で、テトラゾールメタクリルアミドをモノマーに用いた場合、長さ12mのカラムを重合修飾することが可能となった。それを数本接続することで、各分離モードについて理論段数50万段のカラムを調製し、HILIC型分離における分離の極限について検討する。(2) HILICやイオン交換とキラル分離を同時に発現するカラムの調製を行なう。
視覚による正の情動誘起の神経機構

本研究は「好ましい」という正の情動にかかわる神経回路、神経活動を特定し、視覚認知から情動反応が誘起される神経機構の解明を目指した。H26年度は視覚認知から生じる情動状態を客観的に捉えるために、音声コミュニケーションが豊かな小型霊長類であるコモンマーモセットを用いて正負の情動に関連する音声の特定を試みた。正の情動が誘起される状況で、マーモセットが一貫した発声を示さなかった一方、負情動である恐怖と不安について、それぞれ異なる音声(Tsik/Tsik-egg)が観察された。これらの結果から、マーモセットは恐怖と不安の情動状態で異なる発声による情動表出をしており、逆にこれらの音声を手掛かりに、情動状態を客観的に評価できることが明らかとなった。次に視覚から情動につながる神経経路を特定するために、化学遺伝学的手法の一つDREADDをサルで利用できるよう、手技の確立を進め、動物が生きた状態でDREADD発現が確認できるPETイメージング法を開発した。視覚刺激から価値判断を生じる神経回路を特定するために、視覚刺激と価値との連合をもとにした報酬獲得行動を利用して、辺縁系、特に線条体腹側部の各部位が価値判断や情動反応にどのように関与するかを調べた。2頭のサルの吻内側尾状核の神経細胞に発現させた抑制性DREADDをCNO投与により活性化させることで、神経活動を抑制した場合に、価値判断が特異的に障害されることが繰り返し確認された。この結果より視覚から正情動の価値判断に必須となる神経情報の流れとして、側頭葉視覚野ー前頭眼窩野ー吻内側尾状核という神経経路を特定することができた。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、これまでに培ったマーモセットの音声的情動反応の解析法などを基に、神経生理、解剖学的研究を行うことで、「好ましい」という正の情動にかかわる神経回路、神経活動を特定し、視覚認知から情動反応が誘起される神経機構の解明を目指す。H25年度は(A)マーモセットの「好ましい」という情動表出を音声により検出する方法を確立し、(B)その情動表出に特異的に関連する側坐核の部位を特定することを試みた。まずマーモセットの正の情動表出の指標に利用可能な音声を抽出するため、数ある音声のレパートリーの中から、1不安などの負の情動状態で発声されない、2たまに与えられる好物などを見て発声される、という特徴をもつ音声を複数選んだ。その中で、特にfood callとして知られる音声に着目し、好物を呈示する間隔を長くするなど、再現性高く誘発できる条件を探索中である。一方、正の情動表出に特異的に関連する側坐核部位の同定のために、遺伝子改変受容体をウィルスベクターによる遺伝子導入法を用いて導入する技術を採用した。改変受容体を発現した神経細胞の活動は末梢から投与した薬剤で抑制することが可能である。まず、マカクサルの側坐核の背内側部にウィルスベクターを局所注入し、改変受容体を発現させることに成功した。このサルに標的薬剤を投与すると、サルの報酬獲得行動が障害された。側坐核の特定部位の機能特異性を検証する上で、この手法が有用であることが確認できた。加えて、マーモセットの側坐核にウィルスベクターを局所注入し、改変受容体を発現させることに成功した。今後、改変受容体発現部位を変えたり、量を増やすなどにより、情動表出に特異的な側坐核部位の同定につなげる。マーモセットの「好ましい」という情動表出を音声により検出する方法について、候補となる音声を同定できた。

さらにその情動表出に特異的に関連する側坐核の部位を特定する手段として、ウィルスベクターによる遺伝子導入が利用可能であることを示し、道筋をつけた。H26年度はマカクザルの側坐核から神経活動を記録し、情動/意欲に関わる視覚性反応の特性を調べ、側坐核部位における視覚に誘起される情動表出に特異的な神経活動特性を明らかにするのとともに、視覚野から同部位への神経連絡を同定する。
層状およびカゴ状構造を有するエキゾチック超伝導体の開発

山中は,シリコンクラスレート超伝導体Ba_8Si_<46>を超高圧で処理し,さらにSiリッチなBaSi6に構造転移することを明らかにした。La-Si2元系では,新たに高圧相LaSi_5の合成に成功し,Siからなるポリアセン擬1次元鎖を含み,Tc=11Kの超伝導体となることを明らかにした。MgB_2と同形のBaAlSiは超伝導を示さないが,Siが僅かに過剰なBaAl_<0.95>Si_<1.05>はTc=3Kの超伝導体となることを見いだした。藤は、ZrNC10.7の塩素核のNMR測定に成功し、核磁気縦緩和率1/T1の測定をおこなった。常伝導状態では、1/T_1T=10^<-4>1/sKと通常のメタル状態に於いて観測される値より1桁以上小さな値をとることが明らかとなった。このことは、塩素サイトの部分状態密度が小さいことを示す。超伝導転移温度以下では、1/T1はHebel-Slighter peakや指数関数的な温度依存性を示さず、8K付近に磁束格子の運動に起因する緩和率の極大を示す。これらより、この物質の2次元的超伝導特性を明らかにした。浴野は,STM/STSによりMgB_2やCaAlSiの局所電子状態の測定を行なっているが,さらに詳しく調べるため,表面観測にとって最も重要なパラメーターである仕事関数の空間分布の測定を開始した.基準物質であるBi_2Sr_2CaCu_2O_<8+y>について,この物質の仕事関数は,原子格子点の直上で大きい,BiO面変調構造の欠損部分で低く中腹部で高い,超伝導ギャップ分布との相関は弱い,など数々の新事実を見いだした.犬丸は,CrNは反強磁性体でありT_N270Kでmonoclinicな格子歪みを生じる.MgO(001)上に成長したCrN(001)薄膜では,バルクのT_N近傍で構造転移がみられるが,Al_2O_3面上のCrN(111)薄膜は構造転移を起こさなかった.つまりミスマッチが大きく格子が緩和した薄膜でも基板の効果で構造転移の有無を制御できた.CrN(111)薄膜の電気伝導にも異常が現れず,この膜は常磁性を保っていると推定された.山中は,軽元素カギ状構造物質の創製による新規超伝導体の実現を目指して、フラーレンC_<60>の3次元ポリマーの合成と物性評価を行った。3種類の結晶性3次元ポリマーの超高圧力合成に成功し、構造解析と電気伝導度、マイクロビッカース硬度の測定を行った。X線構造解析により、体心斜方格子と面心立方格子の3次元ポリマーの構造を明らかにした。藤は、Li-ZrNCl,およびZrNClx配向試料の強磁場電気抵抗測定、および核磁気共鳴実験プローブを用いたラジオ波インピーダンス測定を行った。磁気抵抗測定および磁化率の異方性測定から,超伝導の異方性パラメータはγ>4と予想され、2次元的な超伝導が強く示唆された。浴野はトンネル分光法により層状窒化塩化物超伝導体ZrNCl(T_c=14K)について調べ,多重ギャップの存在や電子対波動関数のs波対称性を示す事実を見出した.多重ギャップ値は2Δ=6-8k_BT_cおよび3-4k_BT_cとなり,前者は銅酸化物超伝導体の値と同程度の異常な強結合性を示し,後者は通常のBCS値程度である.このような強結合性を示す多重ギャップの起源について検討を行った.犬丸は,RF窒素ラジカル源を装備したPLDおよびMBEによりモリブデン窒化物の薄膜合成を検討した.バルク体でも合成例の少ないβ-Mo_2N(tetragonal)の結晶性配向膜の合成に成功し,Tc=5.2Kの超伝導体であることを見出した.また,MgOおよびAl_2O_3基板上に格子歪が小さく組成が精密に制御されたNaCl型MoN薄膜の合成にも成功した。この窒化物はこれまで,高いTc(29K)を有することが予測されていたが,本研究では,Tc=4Kが観測された。超伝導特性と膜の組成と格子の歪み,格子定数との関係を実験データに基づき議論した。

超伝導転移温度以下では、1/T1はHebel-Slighter peakや指数関数的な温度依存性を示さず、8K付近に磁束格子の運動に起因する緩和率の極大を示す。これらより、この物質の2次元的超伝導特性を明らかにした。浴野は,STM/STSによりMgB_2やCaAlSiの局所電子状態の測定を行なっているが,さらに詳しく調べるため,表面観測にとって最も重要なパラメーターである仕事関数の空間分布の測定を開始した.基準物質であるBi_2Sr_2CaCu_2O_<8+y>について,この物質の仕事関数は,原子格子点の直上で大きい,BiO面変調構造の欠損部分で低く中腹部で高い,超伝導ギャップ分布との相関は弱い,など数々の新事実を見いだした.犬丸は,CrNは反強磁性体でありT_N270Kでmonoclinicな格子歪みを生じる.MgO(001)上に成長したCrN(001)薄膜では,バルクのT_N近傍で構造転移がみられるが,Al_2O_3面上のCrN(111)薄膜は構造転移を起こさなかった.つまりミスマッチが大きく格子が緩和した薄膜でも基板の効果で構造転移の有無を制御できた.CrN(111)薄膜の電気伝導にも異常が現れず,この膜は常磁性を保っていると推定された.
高性能薄膜Liイオン電池の開発：水素化物薄膜の液相成長を利用した良好界面の形成

本研究は新材料開発と界面現象の深い理解に基づいて全固体Liイオン電池の研究開発ステージを飛躍させようとするものである。そのために従来のLiイオン電池では使われなかったが、Liイオン伝導および界面密着性の両方を向上させ得る水素化物という材料を固体電解質に応用している。さらに、これまで誰も作れなかったLiイオン伝導性水素化物の高品質薄膜を独自に開発することで、界面設計能力に秀でた薄膜を用いた高度な界面現象調査を可能とした。以上本研究の成果は、界面現象の理解により得られる界面設計指針を駆使した高性能な全固体Liイオン電池開発への道を切り開くものである。今年度は、水素化物を固体電解質とする高性能な薄膜Liイオン電池の開発における基礎の構築を目指して、LiH電解質薄膜とSi電極から成る良好な界面作製に取り組んだ。以下に詳細を報告する。[多孔質Si基板上でのLiH薄膜成長]Li移動抵抗を減少することができる大きな接触面積を持つ電極/電解質界面を作製するために、マイクロスケールの表面微細構造を有するSi基板上でLiH薄膜の成長を行った。Si微細構造は陽極酸化法により形成した。LiH薄膜は、蒸着法で堆積したLi薄膜を加熱融解することによって得られるLi融液を、0.5気圧の水素ガス雰囲気に保持することで成長した。このように、微細構造内部まで浸透できるLi融液から薄膜成長を行うことで、複雑な構造を持つSi基板表面をLiHが均一に覆うことが期待される。[大気非暴露測定環境の構築]水素化物には、水分や酸素との反応性が極めて高い化合物が多く、そのため、水素化物を電解質として応用する本研究における薄膜Liイオン電池の開発に当たっては、作製した試料の電気化学測定を大気非暴露で行う環境の構築が必須である。そこで、成膜装置に取り付けた電気化学測定機構を有する真空評価室の開発を行った。この結果、大気非暴露で、インピーダンス測定や充放電測定などを行うことが可能となった。[評価]Si/LiH界面におけるLiイオンの出入りを実証するために、薄膜電池構造試料のSiとLi電極間に、最大±4 Vの電位差を与えてサイクリックボルタンメトリー(CV)測定を行った。ところが、Si電極にLiが挿入される向きに電位差を与えた場合(Li側が正)には、電流がほとんど観察されず、Si/LiH界面でのLiの移動が妨げられていることが示唆された。27年度は、高性能薄膜電池の開発において重要な、接触面積の広い電極ー電解質界面の作製および、正確な性能評価に必要な大気非暴露電気化学測定環境の整備を完了しており、本研究を推進する基盤を構築することに成功した。一方、当初の計画に反して、Li移動抵抗の小さな良好界面を実現するには至らず、またその原因解明が不十分であった。したがって、進捗状況はやや遅れていると判断した。本研究は、Liイオン伝導性水素化物を固体電解質とする新型の高性能全固体電池開発への道を切り拓こうとするものである。そのために重要となるのが、LiBH4に代表される高いLiイオン伝導率を示す水素化物の高品質薄膜を作製し、電池性能を決定する界面におけるLiイオン挙動や界面化学反応を詳細に理解することである。そこで昨年度(平成27度)は、高品質薄膜成長の強固な研究土台を構築するために、高純度な水素ガスや高活性な水素プラズマを利用できる水素化物薄膜合成用の専用装置を開発した。またLiH薄膜成長をモデルケースとして、薄膜成長温度や成長時の水素ガス分圧が膜質に及ぼす効果などを調査して、高品質薄膜合成のノウハウを構築した。今年度(平成28年度)はこれらの研究基盤を活用して、従来技術では合成不可能であったLiBH4の高品質薄膜成長に挑戦した。以下に詳細を記す。LiBH4は液体電解質並みの高Liイオン伝導率を示すため固体電解質として期待される水素化物である。そのため多くの研究者がスパッタ法やパルスレーザー堆積法などの汎用的な成長手法を用いた薄膜化に挑戦してきたが、成功例は皆無であった。なぜなら、これらの手法ではLiBH4をガス化させる際に加速イオン衝突などの高エネルギー課程を経る必要があり、その途中で結晶を形成する(BH4)-分子状クラスターが分解されてしまうからである。そこで申請者は、特殊な加熱手法を開発し、薄膜成長に適応したところ、(BH4)-クラスターの分解を抑制してLiBH4単相薄膜を得た。さらに、適切な単結晶基板と薄膜成長温度を選択することで、単結晶グレードでなおかつ平坦な表面を持つエピタキシャル薄膜の成長に成功した。現在はこの薄膜を用いて、粒界の影響を含まない材料本来のLiイオン伝導の評価や、界面抵抗の起源解明に向けた電極/LiBH4の多層薄膜構造の作製に取り組んでいる。

本研究が現在解決すべき最重要課題は、Si/LiH界面における大きなLi移動抵抗の原因解明と、その理解に基づく抵抗の減少である。そこで初めに、X線回折による不純物相の有無の検証や、電子顕微鏡による界面接触状態の観察など、Si/LiH界面の多角的な評価を予定している。次に、評価結果に基づき、Si電極の表面処理方法やLiH電解質の成長方法を改良して、Li移動抵抗の小さな良好界面の実現を目指す。最後に、充放電特性を評価して、水素化物を電解質とする薄膜電池の可能性を実証する。無機材料購入を予定していた真空部品の大半を、知人から譲り受けることができたため。27年度の研究により明らかになった、電極-電解質界面における大きなLi移動抵抗の原因を、28年度は詳細に解明する必要がある。そこで、今年度の予算を、界面の詳細な評価が可能な外部機関所有の特殊な装置の利用費に充てる予定である。また、やはり27年度の研究により、良好な界面を得るためには、電解質として利用している水素化物薄膜の成長手法を改良する必要性が高いことが分かっている。そこで、成長手法の改良に必要な装置開発にも予算を充てる予定である。
大都市圏におけるジェントリフィケーションの体系的把握と公共介入の評価に関する研究

本研究は、21世紀初頭の政策再編とともに、都市開発の主体が国や自治体から民間企業に移行したことに着目する。そして、近年の都市開発が引き起こしつつある「ジェントリフィケーション」、すなわち住民流入による新旧の都市環境の物理的・社会的分裂という課題を網羅的に把握し、これに対して国や自治体が行う「公共介入」の評価を行う。研究は(1)ジェントリフィケーションの網羅的把握、(2)民間開発に対する公共介入の類型論、(3)民間開発に対する公共介入の評価という3つの段階からなり、最終的には居住者の多様性と多様な住環境価値を実現する民間都市開発に向けた公共介入の計画学的提言を行うことを目指す。
款記と印章から読み解く絵師像

近代以前の絵師が用いた款記と印章は、その有無自体も重大な問題にはなるが、存在している場合でも、形式が実にさまざまであり、内容面においても制作者の価値観に関わるような大きな違いが見られる。その多様さは、款記と印章が単に制作者であることの表明に止まらず、それ自体も独自な意味を伝えようとしていることを示唆している。そうした問題意識にたって、鎌倉時代中期頃から江戸時代末までのさまざまな立場の絵師たちの款記と印章に関する資料を網羅的に収集し、款記と印章の内容と形式(無い場合も含めて)が、絵師の存在形態といかなる関わり方をしていたか、絵師の社会的なあり方を示す機能とは何か、について明らかにしてゆく。
標識アネキシンVを用いた放射線誘導アポトーシスとFDG腫瘍糖代謝能の基礎的検討

Tc-99mアネキシンVの集積は9Gy,12Gy照射群では48時間後に,コントロール,3-6Gy照射群よりも強く認められた。invivoマウスの腫瘍移植部でTc-99mアネキシンVの増加が高線量9Gy照射側で反対側の照射なしコントロール部位よりも強く認められた。Tc-99mアネキシンVは、ヒト肺癌に対する放射線治療のアポトーシス発現による治療効果の早期判定に有効な放射性薬品であることが示唆された。放射線誘発アポトーシスを特異的に評価する検査法として^<99m>TC-HYNIC-coupled Annexin V (TAV)の有用性について検討した.方法;使用した細胞は非小細胞性肺癌細胞H1299のwtp53 gene (H1299/wtp53)を用いた.0Gy,3Gy,6Gy,9Gy,12Gyの5段階のガンマ線を照射し,24,48時間後の細胞内集積をウェルカンターにて測定した.対比評価法として腫瘍集積性放射性薬品として臨床利用されている^<201>TlCl集積も同様に測定した.実験細胞における反応早期の細胞内動態を評価する目的で90分間の細胞取り込みと洗い出しを測定した.アポトーシス細胞の評価にはTUNEL法を用いた.放射線照射の細胞分裂機能への影響を評価する目的で細胞増殖率も同時に評価した.結果;48時間後に細胞増殖率は低下した.アポトーシス細胞数は9Gy,12Gy照射群はコントロール,3-6Gy群に比較して増加していた.24時間後ではTAV集積は,1-90分後のいずれにおいても照射線量との関連がなかったのに対し,48時間後9Gy,12Gy照射群ではコントロール,3-6Gy群に比較して増加していた.TAVの洗い出しは線量とは関連がなかった.^<201>TlCl集積は9Gy,12Gy照射群ではコントロール,3-6Gy群に比較して増加していた.^<201>TlClでは細胞内からの速やかな洗い出しが認められた.結論;TAVは癌細胞の放射線治療によるアポトーシスの早期検出に有用であることが示唆された対象と方法:使用した細胞は非小細胞性肺癌細胞H1299のwtp53 gene(H1299/wtp53)である.放射線として0Gy,3Gy,6Gy,9Gy,12Gy,5段階のガンマ線を照射し,24,48時間後の細胞内集積をウェルカンターにて測定した.対比評価法として腫瘍集積性放射性薬品として臨休利用されている201TlCl(以下、タリウム201)の細胞集積も同様に測定した.実験細胞における反応早期の細胞内動態を評価する目的で90分間の細胞取り込みと洗い出しを測定した.アポトーシス細胞の評価にはTUNEL法を用いた.放射線照射の細胞分裂機能への影響を評価する目的で細胞増殖率も同時に評価した.腫瘍モデルとして同じ細胞系をマウス左大腿部に移植し,in vivoにおけるタリウム201とTc-99mアネキシンVの体内分布を測定した.結果:照射線量の増加と対応した細胞増殖率の低下が照射48時間後に認められた.TUNEL法で評価したアポトーシス陽性細胞数は9Gy, 12Gy照射群で増加を認めた.タリウムの集積は高線量(9Gy,12Gy)照射群において低線量照射群よりも強く認められた.タリウムの急速な流出が9Gy,12Gy照射細胞群で認められた.9Gy, 12Gy照射48時間後に,Tc-99mアネキシンVの集積はコントロール,3-6Gy照射群よりも強く認められた.in vivoマウスの腫瘍移植部でTc-99mアネキシンVの増加が高線量9Gy照射側で反対側の照射なしコントロール部位よりも強く認められた.対象と方法:使用した細胞は非小細胞性肺癌細胞H1299のwtp53 gene (H1299/wtp53)である.放射線として0Gy,3Gy , 6 Gy,9Gy , 12 Gy,5段階のガンマ線を照射し,24,48時間後の細胞内集積を測定した.対比評価法として201TlCl (以下、タリウム201)の細胞集積も測定した.実験細胞における反応早期の細胞内動態を評価する目的で90分間の細胞取り込みと洗い出しを測定した.アポトーシス細胞の評価にはTUNEL法を用いた.放射線照射の細胞分裂機能への影響を評価する目的で細胞増殖率も同時に評価した.腫瘍モデルとして同じ細胞系をマウス左大腿部に移植し,in vivoにおけるタリウム201とTc-99mアネキシンVの体内分布を測定した.結果:照射線量の増加と対応した細胞増殖率の低下が照射48時間後に認められた.

TUNEL法で評価したアポトーシス陽性細胞数は9Gy,12Gy照射群で増加を認めた.タリウムの集積は高線量(9Gy,12Gy)照射群において低線量照射群よりも強く認められた.タリウムの急速な流出が9Gy,12Gy照射細胞群で認められた.9Gy,12Gy照射48時間後に,Tc-99mアネキシンVの集積はコントロール,3-6 Gy照射群よりも強く認められた.in vivoマウスの腫瘍移植部でTc-99mアネキシンVの増加が高線量9Gy照射側で反対側の照射なしコントロール部位よりも強く認められた.研究計画の実施に特に問題はなく、計画通りに遂行できた。放射線照射線量に対応するアネキシンVの集積度変化とこれを支持する免疫組織所見が得られた。24年度が最終年度であるため、記入しない。腫瘍の放射線による治療効果を発現する検査法としてFDG-PETの有用性とアネキシンVとの相違点、共通点について検討する。
暗号ハードウェアの高精度サイドチャネル解析技術の開拓

平成20年度は,以下の2項目について研究・開発を実施した.1.ソフトウェア実装された共通鍵暗号モジュールに対する解析精度を評価した.特に,位相限定相関法に基づく波形マッチング技術を用いることで,波形取得のタイミング誤差を高精度に補正可能であることを実証した.共通鍵暗号には現在のデファクトスタンダードであるDESを用い,実験用の差分電力解析ソフトウェアには前年度に開発したソフトウェアと連動するため, MATLABを用いた.解析を簡単化するため, DESのラウンド15の開始時にトリガ信号を発生させ,そのタイミングで波形取得を行った.波形の取得は,サンプリング周波数100MHz1GHzで行い,提案する波形マッチングよる解析精度を周波数ごとに評価した.また,マイクロ磁界プローブによる取得に加え,従来の電圧プローブによる取得も行い,取得されたサイドチャネル情報の精度を比較・評価した.2.ハードウェア実装された公開鍵暗号モジュールに対する解析精度を評価した.公開鍵暗号にはRSA暗号を用い,実装するRSA暗号プロセッサには高基数モンゴメリ乗算器に基づくアーキテクチャを用いた.波形の取得およびデータの解析には前年度開発したソフトウェアを利用した。本実験では,演算器の自乗算と乗算時の消費電力の違いに着目し,さまざまな実装の安全性を評価した.また, FPGAに内蔵されるマクロ乗算器を利用した実装も合わせて評価した.マクロ乗算器の場合であっても単純電力解析が可能かどうか評価するとともに, FPGA上に安全に公開鍵暗号モジュールを実装するための対策方法を検討した.平成19年度は,研究目的(1)に対応して以下の2項目について研究・開発を実施した.1.位相限定相関法に基づく波形マッチング技術の開発位相限定相関法を用いてディジタル測定機器により取得された信号波形へのマッチング技術を開発するとともに,高水準設計言語MATLABを用いて同マッチング技術を実現するプロトタイプソフトウェアを開発した.このとき,本申請者らが画像マッチング技術として開発してきた位相限定相関法の3つの基本アルゴリズム(「画像の相似変換パラメータの高精度推定アルゴリズム」,「サブピクセル画像対応点探索アルゴリズム」,「帯域制限型位相限定相関法による画像照合アルゴリズム」)を利用した.特に,画像マッチングで開発された関数フィッティングによる相関ピークの推定手法を波形マッチングに適用し,データ取得時における取り込み誤差の高精度な補正を試みた.2.マイクロ磁界プローブを用いたサイドチャネル解析システムの構築マイクロ磁界プローブは,従来LSIのEMI測定のために開発されたため,スペクトラムアナライザを組み合わせた使用を想定されている.一方,サイドチャネル解析では,LSI動作の時間波形を用いるため,ディジタルオシロスコープによる測定が必要となる.そこで,サイドチャネル解析にマイクロ磁界プローブを利用するため,得られるサイドチャネル情報(電圧に変換された電流値)を適切に解析用PCに送信するインタフェースソフトウェアを開発した.開発には,ディジタルオシロスコープ専用のライブラリ関数とVisual Basic言語を用いた.同ソフトウェアの想定する暗号モジュールは,日本規格協会から配布される暗号実装の標準評価プラットホームINSTAC-8/32とした.平成20年度は,以下の2項目について研究・開発を実施した.1.ソフトウェア実装された共通鍵暗号モジュールに対する解析精度を評価した.特に,位相限定相関法に基づく波形マッチング技術を用いることで,波形取得のタイミング誤差を高精度に補正可能であることを実証した.共通鍵暗号には現在のデファクトスタンダードであるDESを用い,実験用の差分電力解析ソフトウェアには前年度に開発したソフトウェアと連動するため, MATLABを用いた.解析を簡単化するため, DESのラウンド15の開始時にトリガ信号を発生させ,そのタイミングで波形取得を行った.波形の取得は,サンプリング周波数100MHz1GHzで行い,提案する波形マッチングよる解析精度を周波数ごとに評価した.また,マイクロ磁界プローブによる取得に加え,従来の電圧プローブによる取得も行い,取得されたサイドチャネル情報の精度を比較・評価した.2.ハードウェア実装された公開鍵暗号モジュールに対する解析精度を評価した.公開鍵暗号にはRSA暗号を用い,実装するRSA暗号プロセッサには高基数モンゴメリ乗算器に基づくアーキテクチャを用いた.波形の取得およびデータの解析には前年度開発したソフトウェアを利用した。本実験では,演算器の自乗算と乗算時の消費電力の違いに着目し,さまざまな実装の安全性を評価した.また, FPGAに内蔵されるマクロ乗算器を利用した実装も合わせて評価した.マクロ乗算器の場合であっても単純電力解析が可能かどうか評価するとともに, FPGA上に安全に公開鍵暗号モジュールを実装するための対策方法を検討した.
DNAの磁気泳動分離

磁場と電場の複合場において、電磁場が与える4つの力、すなわちトルク、クーロン力、ファラデー力、ローレンツ力を受けるDNAの運動について観測し、理解した。その応用として、磁化率の違いによるDNAの電気磁気力泳動分離に成功した。配向モデルのシミュレーションおよび泳動モデルの定式化を行った。物質が磁場中で受ける3つの力(ファラデー力、トルク、ローレンツ力)を用い、DNAの磁気情報を反映した新しい磁気分離手法を確立することを目的とする。DNAは4つの塩基(Aアデニン、Tチミン、Gグアニン、Cシトシン)の配列が遺伝情報を担っている。しかしながら、従来の電気泳動分離は長さのみの分離であり、これらの塩基配列には無頓着であった。A=Tペアと水素結合は2本であり、G≡Cペアのは3本であることから、A=T割合の多少によって磁化率が異なる。磁化率に比例する磁気力を泳動分離に応用することにより、ATリッチなDNAとGCリッチなDNAを分離できると考えられる。本研究ではDNAが磁場中で受ける3つの力とそれらの合力について、電気泳動との関連を定性的・定量的に調査する。10T級の超伝導磁石を用い、様々な電磁環境下でDNAの電気磁気泳動を観察することによって基本的なメカニズムを解明し、DNAの磁気分離手法を確立することを目的とする。強磁場がDNAに及ぼすと考えられる力は、磁気異方性によるトルクと、勾配磁場下での磁気力であり、さらにDNA電気泳動では電流と磁力線の向きが平行でない場合にローレンツカが働く。本研究ではこれらの磁場効果を追求することにより、DNAの磁気力泳動の基本的なメカニズムを明らかにし、磁場を用いた新しいDNAの分離手法を確立することを目的とした。本年度は、DNAの磁化率やその異方性によって、泳動速度と泳動軌道は様々に変化し、泳動パターンを磁場によってコントロールする可能性を追求した。1.13Tの強磁場を発生する現有の超伝導マグネットボア(100mm)にセットできる小型の電気泳動槽を作製し、磁場配向による泳動速度の変化と、磁気力駆動による速度変化を効果的かつ精密に捕捉できる測定系を構築した。2.強い磁気力の働く高勾配磁場下では無電圧でも泳動が起こるとの予想に反して、DNAは磁気力のみでは泳動しなかった。3.DNAに磁気力を作用させるように勾配磁場中で電気磁気泳動させ、磁気力場(B・dB/dz)をパラメータにして泳動速度に対する磁気力効果を測定した結果、正負の磁気力はDNAを加速または減速することを明らかにした。4.無磁場での電気泳動に比較して、磁場中での電気泳動は泳動速度を低下させる。電場と磁場が平行な条件ではDNA速度は80%に減速し、垂直な条件ではローレンツ力により軌道が変化しながら70%に減速することを明らかにした。これらの実験結果より、DNAの新しい電気泳動分離技術としてローレンツ力を積極的に利用出来ることを明らかにした。(1)磁気力泳動:静電引力に比較して比較的弱い磁気力をDNA泳動パターンに顕在化させるには支持体ゲルの濃度が低い方が有利であることをつきとめた。この知見により、0.25wt.%アガロースゲルを支持体として採用し、96時間の磁気力泳動を5°CのTAEバッファーを用いて試みた。結果として、B=6.4T,|B(dB/dz)|=420T^2m^<-1>では泳動せず、B=9.1T,|B(dB/dz)|=583T^2m^<-1>では1kb15kbのサイズのDNAが分離せずに3mm程度泳動することを見出した。5T以上で配向が飽和していると考えられるので、磁気力DNA泳動について磁気力場の閾値が存在し、その値は500T^2m^<-1>程度であると考えられる。(2)磁場配向:磁場中でのDNAの速度変化は磁気力とDNAの磁場による配向による。磁場中での磁場配向の様子を計算機シミュレーションで評価した。試料回転による一軸配向の様子を調査した結果、条件を選べば低回転速度でも容易に磁場配向することを明らかにした。(3)電気磁気泳動:ローレンツ力効果を顕在化させる泳動電圧閾値が存在することを利用して、電気磁気泳動における磁気力によるDNAの軌道の変化を追求した。具体的には、弱い横電場(E=870Vm^<-1>)と強い横磁場(|B(dB/dz)|=583T^2m^<-1>,B=9.1T)が直交する場を用いて、鉛直方向にかかるローレンツ力によるDNA泳動を無視できる条件で電気磁気泳動を行った。1kb15kbのサイズのDNAを5°Cで50分間泳動した結果、大サイズのDNAほど軌道変化が大きく、磁気力のかかる方向へtanθ=0.110.28の軌道変化を観測した。磁場勾配による磁気力とローレンツ力を分離して観測する手段を確立した。(4)異形状DNAの分離:これまで用いてきた2本鎖直鎖状(2重螺旋)

DNAと、一本鎖直鎖状DNA(M13mp18,7249bp)、プラスミド環状2本鎖DNA(pUC18,2686bp)の分離を試みた。一本鎖DNAは5kbの、プラスミドは2kbの2本鎖DNAと同じ泳動速度を示す。電場と磁場が直交する場で泳動を行ったところ、明確な分離は得られなかった。しかしながらDNAの蛍光分布に偏りを認めたことにより、今後の発展が期待できる。DNAの磁化率に違いによる新しい磁気分離法の可能性を探ることを目的とし、異方的反磁性磁化率を有する物質の磁場による配向を計算機シミュレーションを行い、実験的にDNA電気泳動に対するローレンツ力効果とファラデー力効果を調査し、以下の知見を得た。(1)回転磁場中で異方的磁化率をもつ弱磁性粒子の配向挙動をする様子をについて計算機シミュレーションした。磁気エネルギーと室温の比に関連する量αが15以上であれば、角周波数ωが3以上の回転磁場により、換算時間τが3以下で配向することが分かった。通念以上に早い時間で配向が完了するという知見を得た。(2)B//E条件で、無磁場、均一磁場、勾配磁場中でDNAの泳動測度を調査した。泳動速度は、磁場外、均一磁場、正勾配磁場中の順で減少した。正勾配中での磁気力による泳動速度の減少はゲル濃度1.5%で最大15.8%に達した。(3)B⊥E条件で電気泳動を行い、磁気力方向への泳動距離の泳動電圧依存性を測定し、前項と比較した。クーロンカによる泳動距離に対する磁気力泳動距離の割合は約3%であり、磁気力効果が現れる電場強度の閾値は182-364V/mであった。前項の3-10%、286-429V/mと同程度であった。(4)長周期交流矩形波電場を用いることで磁気力によるDNAの分離を試み、磁場勾配を下る向きのDNAの泳動を観測した。泳動電圧と泳動時間を適切に設定することでDNAバンドに濃淡が現れ、DNAサイズによる磁気分離の兆候を得た。また、矩形波周期による泳動の様子の違いも観測された。本研究で磁気力のみによる泳動に成功した。この結果はDNAの分離能を高める上で極めて重要な知見である。今後磁気力を利用することによって、今までの電気泳動では分離が不可能であった磁化率の違いによる分離が可能となり、強磁場空間をDNAの分離へ応用することが期待できる。DNAの磁化率に違いを利用した新しい磁気泳動分離法の可能性を探ることを目的とし、異方的反磁性磁化率を有する物質の磁場による配向挙動について計算機シミュレーションを行い、実験的に種類の異なるDNA電気磁気泳動分離を試みその運動を解析し、以下の知見を得た。(1)3軸性異方的磁化率をもつ弱磁性粒子が回転磁場中で配向する様子をについて計算機シミュレーションした。回転磁場の方向に応じて磁束密度が変化する楕円磁場では、磁化容易軸χ1および困難軸χ3を磁気的に配向させることは比較的簡単であるが、中間的な磁化軸χ2を磁場配向させることは困難である。(2)13T超伝導マグネットの勾配磁場位置を使用し、磁束密度B=9.1T、磁気力場B(dB/dz)=583T^2m^<-1>となる位置に泳動槽を設置し、磁力線と直交するように交流矩形電場を配置して、DNAの磁気力泳動を行なった。最大の泳動速度429μm/hは、電場強度電圧0.926V/mm、支持体のアガロースゲル濃度0.5wt.%で得られた。この速度はゲル濃度0.7wt.%での実験の約3倍であり、電界強度0.556V/mmにおける速度の実験値の約3倍であった。また、磁気力場の値の減少に従い泳動速度も減少した。
NKT細胞の分化と機能維持の分子メカニズム

NKT細胞は免疫系を制御する細胞であり、KRN7000(α-galactosylceramide)投与によりIFN-γおよびIL-4サイトカインの両者を産生することが知られている。我々は本研究の中でKRN7000により刺激されたNKT細胞の抗原レセプターは急速に(数分以内)down-regulationし、見かけ上NKT細胞が消失することを見出した(Harada, et al.2004 Int Immunol)。この結果はヒトに対するKRN7000投与後のNKT細胞挙動を理解するうえで重要である。NKT細胞の様々な遺伝子発現の変動を把握し解明することは、NKT細胞の機能制御機構を解明する上で重要である。この目的を達成するためにマイクロアレイやサブトラクションを用いてNKT細胞の遺伝子発現のプロファイリングを行ったところ、他のリンパ球よりNKT細胞に強く発現する新規のNK細胞レセプターのクローニングに結びついた(Koike, et al.2004 JEM)。この分子NKG21のKOマウスを作成し解析したところ、この新規分子はアロ細胞の拒絶に重要であることが判明した(Shimizu, et al.2004 Blood)。昨年度より、KRN7000により機能変化したNKT細胞の様々な遺伝子発現の変動をマイクロアレイにて解析中であり現在も進行中である。また、生体内におけるNKT細胞の他の細胞への作用の解析は重要であり、樹状細胞を含む免疫制御細胞のNKT細胞活性化後の変化について検討してきた。その中で、NKT細胞の単回刺激は樹状細胞を成熟させTh1タイプの反応を引き起こすが、頻回刺激では樹状細胞はむしろ免疫抑制的になることを見出した(論文投稿中)。現在その責任分子について検討中である。1.NKT細胞分化の分子メカニズム:リンパ球前駆細胞の分離:RAG・GFP-knock-inマウスヘテロから蛍光発色した細胞を分画した。GFP色素は胸腺で発現し、末梢組織ではパイエル板だけであった。胸腺ではGFPはDNとDP細胞にだけ発現し、CD44・CD25陽性細胞から発現していた。この結果、GFPをノックインしたマウスのT細胞は正常に機能していると考えられた。しかし、パイエル板中のこれらの細胞群の一部はIL-7R、pTa遺伝子、RAG遺伝子発現が陽性であり前駆細胞としての特徴を全て満足する。これらの細胞を分画し、胸腺培養系(FTOC)にて培養すると2週間で11%がNKT細胞に分化することが判明した。2.サブトラクション法によるNKT細胞前駆細胞の機能を規定する遺伝子の同定:NKT前駆細胞はGM-CSF受容体を持ち、GM-CSFによりVα14遺伝子再構成を誘導する。その際に起こるシグナルカスケードおよび分化を決定する遺伝子機構を解明するために、分化前後の細胞を用いたサブトラクション法を行った。その結果、NKT細胞前駆細胞であるNKβ細胞でのGM-CSF+/-でGM-CSFによってmRNAの増幅が強くかかるものは1)GPCRを有する7回膜貫通型レセプター遺伝子、2)イソメラーゼの一種、3)ヒスタミン分泌因子、4)転写抑制遺伝子の4種類であった。これらに関してはノックアウトのコンストラクトを作成し、NKT細胞分化に関する役割を調べることにしている。3.NKT細胞機能の分子基盤:NET細胞からcDNAライブラリーを作成し、NKT細胞DNAチップを作成している。未だ完成には至っていないが、特異的遺伝子の検索には必須の作業である。NKT細胞がI型糖尿病発症制御に関係し、それがTh2サイトカイン産生異常によること、アロ心臓移植の生着に不可欠であること、EAEの発症制御に重要であることを明らかにした。

さらにリガンドであるα-GalCerのCD1dへの結合部位を明らかにした。NKT細胞による細胞傷害の分子機構:NK細胞やNKT細胞の機能はMHC Class I様分子を認識する複数種のNK receptorからのシグナルにより調節されているが、NKT細胞特異的な遺伝子の検索過程で新規C-タイプレクチンに属する"NKG21"を新規同定した。T細胞と比較し、NKT細胞に特異的に発現している遺伝子をサブトラクション法により検索し、得られたクローンの1つについてRACE-PCRによりcDNA配列を決定した。得られたcDNAは226アミノ酸からなる分子で、マウスCD94、NKG2Dとアミノ酸配列でそれぞれ40%程度のホモロジーを有していた。FACSによる解析から、NKG2IはNK細胞の約80%に発現しており、胸腺Vα14NKT細胞の約20%に発現していた。IL-2存在下にてNK細胞表面上のNKG2IをクロスリンクすることによりIFNγ産生が誘導された。抗NKG2I抗体はB6のNK細胞のBALB/c標的細胞に対する細胞障害活性を抑制し、放射線照射したB6に移植したBALB/c BMCの生着を促進した。NKG21 KOマウスにおいてもNK細胞によるallogenic Con Ablastに対する細胞障害活性はwild typeと比較して弱く、放射線照射したマウスに移植したBALB/c BMCの生着も著しく促進した。以上の結果から、NKG2Iは新規の活性化型NK受容体であり、アロ骨髄移植に関与していると考えられた。NKT細胞機能の分子基盤:NKT細胞に特異的なDNAチップを作成し、免疫寛容状態のNKT細胞の免疫寛容維持遺伝子機構を探索した。とくに移植片が性着しているWTマウスと移植拒絶が開始されたNKT細胞欠損マウスの脾細胞をアレイで調べたところ、現在、少なくとも3つの遺伝子候補が拒絶に関係して変動していることが判明した。PCR方を用いて確認実験を行っている。NKT細胞の自然免疫系における役割:NKT細胞の自然免疫系あるいは獲得免疫系に対する相互作用を明らかにするため、BCGをマウスに注射し解析を行った。その結果、BCG投与では肝臓NKT細胞数は著明に増加した。さらにBCG投与によって、NFkBを活性化し、IL-12の産生を促し、NKT細胞からIL-12が大量に産生されIgE抗体産生を選択的に抑制した。自然免疫系、NKT細胞を介する新しい免疫抑制機構になる可能性を示した。NKT細胞による細胞傷害の分子機構:昨年、NK細胞やNKT細胞の機能を制御する新規C-タイプレクチンに属する"NKG2I"を新規同定した。この機能をより明確に示すためにhomologous recombinationの技法を用いてNKG2I遺伝子欠損マウスを作成した。NKG2I遺伝子欠損マウスにおけるNK細胞、NKT細胞の分化成熟は正常であったし、個体の発育に関しては全く以上を認めなかった。NKG2I欠損マウスのNK細胞のアロ標的細胞に対する細胞障害活性を失い、放射線照射した欠損マウスに移植したアロ骨髄細胞の生着を促進した。
インドにおける胎蔵曼荼羅の成立過程に関する研究

「胎蔵曼荼羅」は、インドにおいて密教の理論的確立を遂げた『大日経』の編纂と共に成立し、密教絵画としてのマンダラにとって本格的展開の始まりを告げるものであった。しかし、我国だけに残された成立過程を窺わせる貴重な資料に基づくと、以降に成立したマンダラに比して特異で、極めて多くの像を描き込むという点に加えて、水平面に方位を決めて描くマンダラ本来の性格だけでなく、垂直の上下関係に基づく構成原理も含んでいる。かかる特質が、中国に伝播し、空海が我国に伝えた「胎蔵曼荼羅」まで受け継がれている。インドにおいて、その複雑な成立過程を詳細に検討すると、様々な条件から成立地としてエローラ石窟が想定し得る。インド中期密教の最重要経典の一つである『大日経』とそれに基づく「胎蔵曼荼羅」が何処で成立したかは、未解明のままである。本研究は、後者「胎蔵曼荼羅」の成立場所と成立過程を美術史の立場で解明しようとするものである。かかる課題が解決されれば、同時に『大日経』の成立場所も明らかになる。平成25年度においては、研究代表者がこれまでの研究によって成立場所と想定している遺跡とそれと関連する遺跡の現地調査を行った。その結果、想定している場所において「胎蔵曼荼羅」および『大日経』が成立した可能性が非常に高いことが明らかになった。研究成果は、平成26年度の調査研究を経て、論文あるいは学会発表の形で公にするものの、現時点では研究の中間段階にあり、研究成果の一部は公表を控えるべき秘密事項であるため、成立場所の具体的な言及は差し控え、北西デカンから更にその西北に点在するインド後期仏教石窟の一つで成立したとだけ指摘しておく。研究代表者が「胎蔵曼荼羅」延いては『大日経』が成立したと想定している場所について、そこが候補地として最も可能性が高い理由は、いくつかある。それらのうち特に重要なものは、公表出来る範囲で記せば、以下の通りである。即ち、仏教寺院としての本尊脇侍が観自在・金剛手の二菩薩であり、その配置が「胎蔵曼荼羅」と左右および方位の点で一致すること。更に我国に伝播したものと異なり、初期のインドの「胎蔵曼荼羅」において、中台八葉院東方に位置する如来が触地印を示していたと推測される。触地印を示す中尊と観自在・金剛手の二脇侍からなる三尊を本尊として祀る寺院仏殿の方位を主とした構造的性格と中台八葉院東方に触地印の如来があることとが即応するのが、もう一つの理由である。かかる点で、同様の特徴を持った寺院は、インドでは他にあまり見られず、現在想定している場所で成立した可能性が高いと考えられるのである。本年度は、昨年度実施した現地調査に基づき、研究課題に関する探求をより詳細に遂行し得るように具体的な調査計画を立て、8月下旬から9月中旬に掛けてインドにおいて現地調査を行った。調査地や施設については、あらかじめ写真撮影を中心とした許可申請を行い、滞りなく調査を実施出来るように準備を行った。但し、担当者が急に別の任務を命じられ、当方の調査に対応し得ない場合が、少数ながら生じたため、年度末近くに短期間追加調査を実施した。本年度の現地調査は、前期密教の成立と展開が具体的に美術に現れている5世紀以降6世紀後半までの石窟寺院、および中期密教の成立と展開が確かめられる6世紀後半から8世紀前半までの石窟寺院、さらには同様の時期に制作された美術作品を出土している、東部インドあるいは中部インドを中心とした仏蹟において行った。また、かかる時期に制作された美術作品を所蔵する博物館・美術館においても調査を実施した。追加調査を含む本年度の現地調査の結果、「胎蔵曼荼羅」ひいては『大日経』は、デカン高原北西部の仏教石窟において成立した可能性が高いという、昨年度の調査による予測がさらに確実なものとなった。取り分け「胎蔵曼荼羅」が多数の神格を含み、本来マンダラが備えるべき水平方向の方位だけでなく、垂直方向の上下関係も有している点は、仏教石窟の構造と関係している。ただ我国まで伝播した「胎蔵曼荼羅」に関しては、成立地から比較的早くに受容したオリッサ(ウディシャ)地方において、幾らかの展開を経て中国に伝えられ、そこで独自の整理がされたと見るべきである。なお当初、本年度中に学会発表を予定していたが、年度末に追加調査が必要となったため、次年度に研究成果の一部について詳細に学会発表を行うこととした。成果の全体に関しては、「胎蔵曼荼羅」成立地から我国に至る、図像学的な詳細な発展の状況は、研究成果報告書で明らかにする。インド美術史平成25年度の現地調査によって、研究代表者が仮説的に想定していたインド後期仏教石窟の一つにおいて、「胎蔵曼荼羅」延いては『大日経』が成立した可能性が高まった。

研究実績の概要に記した通りである。現時点では具体的に呈示するのを控えている、成立場所として最有力候補である石窟以外の後期仏教石窟に関して、調査を行う前には、別の有力候補地が出て来る可能性も考慮して関連調査を実施した。しかしながら、調査結果においては、研究代表者が立てた仮説が最も可能性が高いことが明らかとなった。当初の計画より研究が進展していると判断している理由である。北西デカンおよび更にその西北に点在する後期仏教石窟を中心とした調査を平成25年度に完了しているので、平成26年度は、インド中期密教が盛んに行われた中部インド東の仏教遺跡であり、最近の調査研究によって『金剛頂経』および「金剛界曼荼羅」の成立場所とされているシルプル、あるいは東部インド南寄りのウディシャ州に属し、『大日経』が普及していたラトナギリやウダヤギリ等の仏教遺跡、更には東部インド北寄りにあり、やはり密教が盛んであったナーランダー等の仏教遺跡を、研究課題に則した視点から現地調査を実施する。研究の結論が確定したら、速やかに学会や研究誌等において発表する予定である。
α‐アシル・テトラミン酸系生理活性天然物BU‐4514N類の合成研究

本研究の実施計画にも記したように、BU-4514NのNMRスペクトル解析の結果、ヒドロナフタレン部の立体化学がトランスであると推定されたので、当初計画にもとづき研究を開始した。まず、(+)-β-シトロネラールを出発原料として7ステップ・全収率34%で6-オクテニルスルホン体を得,それとエチレンシアノヒドリンから誘導した2-ペンテナ-ル体(5ステップ,25%)のJuliaカップリングを経てトリデカ-2,7,9-トリエナ-ル体(56%)へと変換した。次いで、それを本研究室の吉井らの関連研究によって確立されているランタナイド触媒(Ybfod)_3)を用いる分子内Diels-Alder反応に付したところトランス・ヒドロナフタレン・アルデヒドが収率84%で得られた。このヒドロナフタレン・アルデヒドのNMRスペクトル解析の結果は、最初に推定したBU-4514Nの立体化学を指示してる。そこで、このアルデヒドにテトラミン酸部を導入すべく、本研究者らが開発したα-アシル・テトラミン酸構築法(Heterocycles1994,38,1839-1844.)を適用することにした。しかしながら、ZrCl_4等数種のルイス酸下での、N-(4-Methoxybenzyl)-N-diazoacetylglycin esterとの反応が進行せず、目的のβ-ケトアミドエステル体を得ることができなかった。その理由として、トランス・ヒドロナフタレン・アルデヒドの立体障害が考えられることから、トリデカ-2,7,9-トリエナ-ル体にβ-ケトアミドエステル部を導入してから分子内Diels-Alder反応を行い、BU-4514Nのアグリコン部へと変換するルートを検討する予定である。