hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
人工心肺後の肺血管抵抗上昇に対する有効な薬剤とその分子メカニズムの解明

心臓外科手術における人工心肺離脱時に、一過性に肺血管抵抗が増加し肺動脈圧が上昇することがしばしば認められ、これが血行動態の破綻をきたす端緒となる危険性があり、肺血管抵抗上昇のメカニズムを解明し、それに対処することは臨床的に重要である。これまでに、臨床レベルでは心臓外科手術における肺動脈圧上昇に種々の血管拡張薬が試みられ、ある程度の結果を得てきた。また、基礎研究レベルでは、薬剤性肺高血圧モデルの肺動脈リモデリングと肺血管抵抗の上昇に低分子量GタンパクであるRhoの標的タンパクRhoキナーゼが重要な役割を果たしていることが明らかとなった。麻酔薬存在下の急性期の肺血管抵抗増加には、慢性期の動物モデルと同様にRhoキナーゼ活性の一過性の上昇が関与している可能性がある。上記を解明するために、ブタおよびラットの摘出肺動脈標本を用いて、アゴニスト誘発性血管収縮におけるRhoキナーゼ活性化の関与、および麻酔薬の有無がそれに及ぼす影響と、さらに、種々の血管拡張薬の存在がこの現象をどのように修飾するかについて、等尺性張力測定法を用いた生理学的手法用いて検討した。2年間の研究により、比較的太い部分の摘出肺動脈リング標本においては、そのアゴニスト誘発性収縮にはRhoキナーゼの関与は大きくないことが示唆され、論文として発表に価する有意な結果を得ることはできなかった。人工心肺離脱時の肺血管抵抗上昇のメカニズムを解明するには、肺血管抵抗の形成により大きく関与していると考えられるさらに細い径の肺動脈において検討を行う必要があることが明らかとなった。当初の予定通り、等尺性張力測定設備の確立を目指した。まず最初に、当研究に最適な条件を設定するべく、ブタ摘出肺動脈よりリング標本(約5mm)の作製法を確立させる必要があった。これまで申請者が用いてきた方法を応用した。申請者はこれまでにブタ冠動脈や、今回よりも大口径の肺動脈を用いた等尺性張力測定を行ってきた。今回はさらに細い径での張力測定を行う必要があったためである。そのための張力測定フックや恒温槽を科学研究費にて新たに購入した。肺動脈は血管平滑筋層が薄く、血管径が細くなるほどその傾向が顕著である。そのため小さな力が加えられるだけでも平滑筋が容易に損傷し、充分な張力を得ることができなくなる。これを回避すべく、最小限の操作で測定装置に懸架できるように技術が習熟するのに4ヶ月半の時間を要した。安定してカリウム投与による等尺性張力が測定できるようになった後、アゴニスト誘発性肺動脈収縮反応を測定した。アセチルコリンに対する肺動脈収縮反応は個体による差が大きく、コントロールとなる収縮を誘発するアゴニストとしては不適当と考えられた。アセチルコリンによる収縮反応は生体内では通常よく認められる反応であるが、個体差のばらつきがあったことに加えて、人工心肺後の肺動脈収縮反応にどの程度関与しているかはっきりとしたエビデンスがなかったため、収縮誘発アゴニストとしてまず、α刺激薬フェニレフリンを考えた。人工心肺後は通常カテコラミンの投与が行われる。その代表がドパミンであり、血行動態制御に関してはα刺激による血圧の維持がもっとも期待される作用の一つである。カテコラミン以外にも、昇圧薬としてフェニレフリンもよく使用されている。今後このフェニレフリンに対する収縮反応をコントロールとしてデータの蓄積を行う予定である。
宗教教団を中心とした現代宗教の総合的研究

これまでの収集した資料・デ-タを持ち寄って、各研究分野ごとに検討のための会議を随時行った。その結果、各研究分野を代表した研究分担者が、現在までの各分野や歴史と現状を取りまとめることとした。総論を松木滋、神道を上田賢治、仏教を田丸徳善、キリスト教を鈴木範久、新しい宗教運動を洗健、民間信仰を宮家準、宗教と教育を井上順孝、都市化・過疎化と宗教を石井研士(研究協力)がまとめた。文化庁編『宗教年鑑』記載の教団に関する数値をデ-タ-ベ-ス化する作業を終了した。400弱の教団のそれぞれに信者数、法人数、教師数などを戦後から現在にいたるまで網羅した膨大なデ-タを作成した。印刷頁数が膨大であるために、関係者に限定して資料を配布した。また、教団別のデ-タ以外に、宗教法人の位置する都道府県別のデ-タを戦後から現在まで網羅しデ-タベ-スを作成した。教団作成の数値に関する資料も収集を完了し、比較検討を行った。こうした資料は圧という的に仏教教団(浄土真宗西本願寺派、浄土真宗東本願寺派、浄土宗、曹洞宗、臨済宗)が多く、ついで新宗教(天理教、立正佼成会)であり、神道はほとんどなかった。報告書のとりまとめに際して、研究代表者、研究分担当以外の研究者を含めた研究』を開催した。第一回全体会議を9月23日に開催し、各研究分野(仏教、神道、キリスト教、諸教、民間信仰等)研究計画の策定を行った。また、その際に必要な情報と文献のリスト・アップを行い、それらが重複しないような効率的収集と利用のあり方を検討した。こうした打ち合せの中で、宗教界全体を同じ視点から把握した基礎デ-タの必要性が強調され、そのために、文化庁編『宗教年鑑』記載の教団に関するデ-タを昭和23年度版から現在にいたるまでコンピュ-タ-によりデ-タ・ベ-ス化することとなった。また、個別の教団の『年鑑』や統計資料の資料収集が行われ、浄土真宗本願寺派、浄土真宗大谷派、曹洞宗、臨済宗妙心寺派、天理教、立正佼成会の資料を網羅的に収集した。こうした作業の積み重ねの上に、あるいは並行して個々の研究者による調査研究が実行された。初年度は調査の困難な小規模な新宗教の調査研究に重椅を置いたが、上述の作業を待ったために、また、活発な新宗教教団が東京に偏在していることもあり、全国的調査というよりは東京を中心とした調査が主体となった。年度内に今年度に得られた情報と資料を持ち寄り、それぞれの調査研究領域での発表を行い、初年度のとりまとめと翌年度の研究計画のための意見交換を行う。いちおう今年度の研究計画の目標はおおむね達成できたと思われるが、とくに個別調査の面で翌年度の成果に待つところが少なくない。平成2年度は地域別の集中調査と、教団関係資料の収集整理を中心に行った。地域別の集中調査は、東京都に位置する教団を中心に行い、かなりの成果をあげることができた。教団制作の教会・支部名簿および電話帳に宗教として記載されている団体に対して訪問調査を行った。こうした訪問調査は、特定の教団全体を調査する場合にはもれてしまう小規模な教会や支部、布教所における活動を詳細に把握することを可能にさせ、また地域に根づく小規模な宗教活動相互の関係についても明らかにさせる。これら調査から興味深い研究成果を得ている。教団関係資料の収集に関しては、文化庁編『宗教年鑑』の資料の収集、整理、コンピュ-タ-への入力を行った。『宗教年鑑』は、昭和27年からほぼ毎年刊行されており、文化庁宗務課所轄の包括宗教法人、都道府県知事所轄の包括宗教法人、創価学会を初めとした一部の単立宗教のそれぞれについて、「宗教団体数」、「宗教法人数」、「教師数」、「信者数」が記載されている。これら434法人に関する上記のデ-タをすべてコンピュ-タ-に入力しデ-タベ-スを作成した。さらに、このデ-タベ-スを基に、40年にわたる教団の教勢の変化を把握するために、数値をグラフ化した。この作業によって教勢の変化を一望することが可能となった。また、映像資料の収集にも力を入れ、教団作成のビデオのリストアップを行い、千点にのぼるリストを作成し、デ-タベ-ス化した。当初の予定にしたがって、様々な形態での資料の収集を完了した。第一には、戦後まもなくから刊行されている文化庁編『宗教年鑑』に記載されている教団別の資料(宗教法人数、宗教団体数、教師数、信者数)のデ-タベ-ス化を終了した。戦後から現在までのおよそ400弱の教団に関する個別のデ-タベ-スはコンピュ-タ-の導入によって可能となった。用紙に印刷されたデ-タは膨大な枚数に昇るが、グラフ化も併せて活用し易い形態に整理した。また同時に、『宗教年鑑』には都道府県別の宗教法人資料が掲載差入れており、あわせてデ-タベ-ス化を終え、都道府県別の変化を把握することが可能となった。教団が独自に調査を行った資料の収集も現状で可能なものはすベて収集を終えた。仏教系の教団(浄土真宗西本願寺派、浄土真宗東本願寺派、浄土宗、曹洞宗、臨済宗)が多く、ついで新宗教(天理数、立正佼成会)であり、神道はほとんどなかった。また、教団調査に関しては、ビデオカメラを可能な限り携帯し、文献資料のみならず、映像資料の収集も行うこととしたが、教団制作の映像資料を含めて、かなりの量の資料が収集できた。

とくに教団制作の映像資料のデ-タベ-スを作成し、合計1200本を越える資料の存在を確認した。これまでの収集した資料・デ-タ-を持ち寄って、各研究分野を代表した研究分担者が、現在までの各分野や歴史と現状を取りまとめることとした。この報告書は日本社会に置ける宗教の現状を理解する上で有用と考え、英文化し海外の研究者に供することを決定した。これまでの収集した資料・デ-タを持ち寄って、各研究分野ごとに検討のための会議を随時行った。その結果、各研究分野を代表した研究分担者が、現在までの各分野や歴史と現状を取りまとめることとした。総論を松木滋、神道を上田賢治、仏教を田丸徳善、キリスト教を鈴木範久、新しい宗教運動を洗健、民間信仰を宮家準、宗教と教育を井上順孝、都市化・過疎化と宗教を石井研士(研究協力)がまとめた。文化庁編『宗教年鑑』記載の教団に関する数値をデ-タ-ベ-ス化する作業を終了した。400弱の教団のそれぞれに信者数、法人数、教師数などを戦後から現在にいたるまで網羅した膨大なデ-タを作成した。印刷頁数が膨大であるために、関係者に限定して資料を配布した。また、教団別のデ-タ以外に、宗教法人の位置する都道府県別のデ-タを戦後から現在まで網羅しデ-タベ-スを作成した。教団作成の数値に関する資料も収集を完了し、比較検討を行った。こうした資料は圧という的に仏教教団(浄土真宗西本願寺派、浄土真宗東本願寺派、浄土宗、曹洞宗、臨済宗)が多く、ついで新宗教(天理教、立正佼成会)であり、神道はほとんどなかった。報告書のとりまとめに際して、研究代表者、研究分担当以外の研究者を含めた研究』を開催した。
遠隔地ＲＩ治療を目指した短半減期アルファ放射体２１１Ａｔジェネレータの製造と応用

内用療法に利用可能なα放射体の中で、半減期7.2時間の211Atは最も臨床応用が期待されている。しかし半減期が短いためその利用は大型サイクロトロン施設近辺に制限されている。本研究では、211Atの広範囲における国内実用化を目指し、有機溶媒抽出系を用いた211Rn/211Atジェネレータの製造を行った。核反応で製造した211Rnをターゲットから分離して有機溶媒中に捕集し、次に211Rnから成長する211Atを水溶液およびメタノール中に回収した。標的内に製造された211Rnは82%を有機相へ抽出することができ、また、211Rnから生成した211Atのメタノール溶媒への回収率は98%であった。α線はβ線に対してRBEが高く、飛程が短いため、正常組織へのダメージを軽減しながら悪性細胞に集中的に放射線を照射できる。α線を放出する核種の中で^<211>At(T_<1/2>=7.21h)はハロゲン元素であり、ヨウ素標識の経験を活かしやすい。しかし、国内で医学利用を前提とした製造はこれまで皆無である。本研究では、医学利用を前提とした^<211>Atの製造と分離およびマウスにおける体内動態について検討した。^<209>Bi(α,2n)^<211>At反応による直接製造法では、入射αビームの最適エネルギーは副生成^<210>Atを避け27MeV前後であること、およびビーム電流の上昇に伴って生成放射能量は増加するが、発熱により一部蒸発することを確認した。^<211>Atの分離にはハロゲン元素の特徴である昇華性を活かし乾式分離を適用した。石英管に照射後のターゲットを置き、管状炉を用いて650°Cまで加熱し、気化した^<211>AtをArガスで送り、冷却した生理食塩水に捕集した。^<211>Atは100%揮発移行したが、その捕集は6.1%であり今後捕集方法の改善の検討を要する。捕集した^<211>Atを^<125>Iと混合し、マウスに尾静脈投与し体内分布を検討した。投与後30分、1時間、3時間で解剖し、血液、腎臓、肝臓、胃、腸、甲状腺を採取し放射能を測定したところ、予備的結果ではあるが、^<211>Atと^<125>Iは同様の体内分布を示した。今後、時間経過に伴う集積の変化や異なる臓器への検討を行う必要がある。内用療法への応用が考えられるアルファ放射体のなかでも、半減期7.2時間の211Atは、最も臨床応用が期待されるアイソトープである。しかし半減期が短いゆえにその利用はサイクロトロンの存在する製造拠点近辺に制限されている。本研究では、211Atの広範囲における国内実用化を目指し、有機溶媒抽出系を用いた211Rn/211Atジェネレータの製造を試みた。209Bi+7Li系による209Bi(7Li, 5n)211Rn反応により211Rnを製造した。照射後のBi標的から211Rnを精製分離する手法には、有機溶媒抽出系を利用した。その結果、標的内に製造された211Rnのうち82%を有機相へ抽出することができた。また核反応副生成物の210At等のRIについては、抽出の過程で定量的に211Rnと分離でき、有機相へは211Rnのみが選択的に抽出できることを見いだした。次に有機溶媒中に存在する211Rnから壊変生成した211Atを回収する方法として、メタノール系での逆抽出を検討した。種々の検討の結果より、N-ハロスクシンイミドを酸化剤としてメタノール中に添加することで効率的に211Atを回収出来ることを見いだした。特に、N-ブロモスクシンイミドを添加したメタノールで逆抽出した場合、211Atのメタノールへの分配比が55という高い値を得た。最後に、逆抽出で回収した211Atを用いた標識抗体を作成し、動物実験による標識薬剤の体内分布を行った。投与後1時間で解剖した結果は、昨年度209Bi(4He, 2n)211Atで直接製造した211Atの標識化合物で行った動物実験で得られた結果とほぼ同様であった。以上から本研究によって有機溶媒抽出系を利用した211Rn/211Atジェネレータが製造可能であること、またミルキングして得られる211Atを用いた内用療法が可能であることが示された。

本研究は、有用なα線放出核種211Atの広範囲での利用の実用化を目指し、211Rn/211Atジェネレータの製造および211Atを使用した担がんマウスの治療実験を行うことを最終目標としている。今年度の本研究では、医学利用を前提とした211Atの抗体への標識方法および211At標識抗体のマウスにおける体内動態について検討した。通常抗体へのハロゲン標識を行う場合、アミノ酸のチロシン残基に直接標識する方法がとられるが、211Atはこの方法では安定に標識することが出来ないため、リジン残基上にスズ誘導体(ATE)を介して標識を行う。この場合、予めATEに211At標識し、次に標識された211At-ATEを抗体に標識する。この方法は、抗体中のリジン残基のみに211Atが標識され、体内での代謝を受けない利点を持つが、一方で時間がかかる操作を含むことや比放射能が低くなるという欠点がある。そこで本方法では、スズ誘導体を抗体に予め複合化させ、その後に211Atを標識する方法を行った。実験はヨーテボリ大学のSture Lindegren准教授の下で行い、10MBqの211Atを100ugのATE複合化抗体と反応させた。モノクローナル抗体にはリツキシマブを用いた。標識では放射化学的収率70-80%、また放射化学的純度は95%以上であった。次に金沢大学で211At標識抗体をマウスに尾静脈投与し体内分布を検討した。投与後30分、1時間、3時間で解剖し、血液、腎臓、肝臓、胃、腸、甲状腺を採取し放射能を測定したところ、ATEを予め抗体に複合化させた場合の211At標識抗体の薬物動態は従来用いられている211At標識抗体と同様の体内分布を示した。以上の結果から予めATE誘導体を抗体に複合化させた方法を用いても211Atを効率的に標識できることが示された。H23年度中に実施予定であった項目は、1)加速器を用いた^<211>Atの製造、2)抗体、ペプチド等への^<211>At迅速標識法の開発、3)細胞を用いた生物学的効果の検討、4)ラドン発生器を用いたラドンの物理化学的挙動の検証の4つの項目であった。このうち項目1)2)には予定通りの研究を実施し、4)についても基礎的な項目の検討が終了したところである。3)に関してはあまり進展を見なかったため、現在の達成度を(3)やや遅れている、と判断した。25年度が最終年度であるため、記入しない。今年度は211At迅速標識法の開発という目的を達成はしたが、一方で加速器を用いた211Rnの製造が依然定常的に行うことが出来ないため、現在の達成度を3やや遅れている、と判断した。本研究課題のα線放出核種^<211>Rnの製造には加速器が必要である。そこで日本原子力研究開発機構(原研機構)のタンデム型加速器を利用する。同時に、治療に有用な^<211>Rnの娘核種^<211>Atの製造を引き続き行い、^<211>Atを使用した担がんマウスの治療実験を行う。また、^<211>Rnを利用できない期間は、^<211>Rnの代替トレーサーとして^<222>Rnを利用してジェネレータの条件検討を行う。具体的には以下のとおりとする。1)加速器を用いた^<211>Rnの製造製造には日本原子力研究開発機構のタンデム加速器を利用する。実験では、^<209>Bi(^7Li,5n)^<211>Rn反応を利用して^<211>Rnを製造する。また加速器製造では副反応として^<209>Bi(α,6n)^<210>Rnがあり、^<210>Rnは最終的に生体にとって有毒な^<210>Poに壊変する。
フローサイトメトリを用いたコレラ菌の培養細胞への付着性状に関する研究

コレラの発症機序は、経口摂取されたコレラ菌が小腸粘膜に定着して増殖し、外毒素であるコレラ毒素を産生してコレラ特有のsevere diarrheaを惹起することが基盤となる。感染の第一段階である定着は、コレラ菌と類似した発症機序を有する大腸菌などでは、定着因子や培養細胞への付着性が明らかにされているが、コレラ菌の場合いまだに明らかにされていない。そこで、コレラ菌の培養ヒト小腸上皮細胞への付着性状をFlow cytometric analysisを用い定量化することを目的として研究を行った。また、これまでコレラ菌の定着因子として研究対象となってきたヘマアグルチニンとコレラ菌の小腸上皮細胞への付着性状との関連性についても検討した。その結果、コレラ菌の培養ヒト小腸上皮細胞Intestine407への付着陽性細胞率は、80%以上となる菌株、2080%となる菌株、そして20%以下となる菌株の3種類のパターンに分けることができた。これらの結果は、コレラ菌の培養細胞への付着性が大きくslightly adhesive群、moderately adhesive群、highly adhesive群、に分かれることを示唆しているものと考えられた。一方、コレラ菌のモルモット赤血球凝集活性はFlow cytometric analysisにより明らかにしたコレラ菌の小腸上皮細胞への付着性状と強い相関を示した。しかしながら、コレラ菌のモルモット赤血球凝集活性を抑制する糖類ではコレラ菌の小腸上皮細胞への付着を抑制することができなかった。したがって、コレラ菌の培養細胞への付着はヘマグルチニン以外にも付着因子が関わっていることが示唆された。
聴覚障害者のための音声・手話・文字情報のマルチメディア伝達システム

第1年度に、システムの枠組みを構成するために、1)口形によって伝わる音声情報、2)発音の歪みと歯列の形状の関係、3)聴覚障害者の言語媒体の試用能力についての基礎資料を収集した。第2年度は、これらのうちで、とくに3)聴覚障害者の言語媒体の使用能力について、国立身体障害者リハビリテションセンターで1991年に行った聴覚障害者のコミュニケーション手段の調査の資料を、補聴器・読唇・指文字・手話の使用能力の年代による変遷に注目して詳細に分析した。その結果、どの言語媒体の使用能力でも、補聴器を常用している人も時々しか使っていない人も、旧い年代より新しい年代の方が高かった。回帰曲線に沿って今後の動向を予測すると、最も新しい年齢層では、使用能力がさらに増えていく。しかし、言語媒体のうちの口話・手話・筆談の使用の比率を分析してみると、個々の聴覚障害者によって著しい偏りがあった。この偏りは年代が新しくなるにつれて少なくなってはいるが、聴覚障害者がマルチメディア通信技術を介しての情報伝達に順応するためには、音響情報に対して残存能力をできる限り活用すること、視覚を通しての画像情報も充分に活用できるように、読唇や、指文字や手話の使用能力を高めておくこと、さらに、文字情報も迅速に処理できるような言語能力を備えておくことなどの、総合的な対応策が必要であると考えられた。聴覚障害者のための音声・手話・文字情報のマルチメディア伝達システムの研究課題(平成1112年度,19992000年度)の第1年度(1999年度)には,システムな枠組みを構成するための,つぎの3種類の基礎資料を整える作業をした。1.口形によって伝わる音声情報発話に伴う口形の変化によって視覚を通して伝わる言語的な情報を,詳細に解析するためのシステムを作成した.このシステムでは,口形を発音動作のレベルで表記する記号体系を作り,口の動きの解剖構造的なモデルで関与する筋群の収縮を介して,これを神経レベルで制御する規則を作り,口形の3次元的な形状を合成する.2.発音の歪みと歯列の形状の関係幼児の発音の歪みの原因と解消の経過を系統的に解明して,難聴児の発音の歪みの改善の方策に参考にするために,東北大学歯学部で歯列の形状と発音の歪みの関係についてデータを収集して,生じる音声の音響的な性質との対応を検討した.3.聴覚障害者の言語媒体の使用能力聴覚障害者が使っている音声・文学・手話などの言語媒体の使用状況について,厚生省の国立リハビリテーションセンターの調査資料にもとずいて,現在1520才の若い世代が,とくに残存機能の活用,読唇の利用,指文字の使用,手話の使用などの能力を,どのように向上させる可能性があるかを予測した.第1年度に、システムの枠組みを構成するために、1)口形によって伝わる音声情報、2)発音の歪みと歯列の形状の関係、3)聴覚障害者の言語媒体の試用能力についての基礎資料を収集した。第2年度は、これらのうちで、とくに3)聴覚障害者の言語媒体の試用能力について、国立身体障害者リハピリテーションセンターで1991年に行った聴覚障害者のコミュニケーション手段の調査の資料を、補聴器・読唇・指文字・手話の使用能力の年代による変遷に注目して詳細に分析した。
分泌小胞エクソソームを介した臓器間コミュニケーションによる卵巣制御

分泌小胞エクソソームは、様々な因子を内包し、細胞間の情報伝達を担う新規因子として注目されている。本研究では、卵巣以外の臓器から分泌されたエクソソームが卵巣内に到達し、卵巣機能を制御する可能性を検討することを目的とした。具体的には下記の研究成果が得られた。1ブタの卵巣卵胞内に存在するエクソソーム内のmRNAを、RNAシーケンス法により網羅的に解析し、卵胞エクソソームの少なくとも一部が卵巣外の臓器由来である可能性を明らかとした。2卵胞エクソソームが卵巣体細胞において、FSH下流のシグナル伝達を補助する役割を持つ可能性を明らかとした。動物の卵巣の機能は、個体の栄養状態、周囲の環境やストレスなど多岐にわたる要因に影響を受けるが、これらの要因が具体的にどのようなメカニズムで卵巣機能に影響を及ぼすかは不明である。本研究では、卵巣外の臓器から分泌された膜小胞エクソソームが卵巣内に到達し、卵巣機能を制御する可能性の検討を目的としている。本年度は以下の2項目を行った。1卵胞エクソソームの由来臓器・組織の同定エクソソームには、それを分泌した細胞のもつmRNAが内包され、それらの中にはエクソソームを分泌した細胞種特異的なmRNAも含まれる。すなわち、エクソソームに内包されたmRNAを調べることで、それを分泌した細胞を同定可能である。そこで、組織特異的なmRNA発現を探索するために、卵胞エクソソームに内包されるmRNAをRNAシーケンス法により網羅的に解析した。当初予定では、当該研究機関の共通機器を用いて解析をする予定であったが、受託解析の価格が安くなったため、解析を企業に委託した。現在シーケスまで完了している。2卵胞エクソソームが卵丘細胞、壁顆粒層細胞に与える影響の解析エクソソームはマイクロRNAに代表される小分子ノンコーディングRNAを多く内包しており、エクソソームによる細胞機能制御にはマイクロRNAが重要であると考えられている。また、我々は壁顆粒層細胞と卵丘細胞の機能には代謝制御が重要であることを報告している。そこで、卵胞エクソソームが卵丘細胞や壁顆粒層細胞での代謝に与える影響を解析した。本項目では、当初、メタボローム解析を行う予定であったが、予算の充足率が低く解析に十分な費用が取れないことから、卵胞エクソソームがこれらの細胞での代謝関連遺伝子の発現に与える影響を解析した。前述のように解析項目1については、おおむね完了しており、すぐにシーケンスデータの解析に入れる状態である。解析項目2については、当初はメタボローム解析を委託する予定であったが、予算の充足率が低く解析に十分な費用が取れないことから、予定を変更し、細胞代謝に関連する遺伝子の発現を解析した。現在までに卵胞エクソソームが有意な影響を与える代謝経路の同定には至っておらず、この点については解析が若干遅れている。しかし、上述はしなかったが、平成29年度に予定している卵胞エクソソームに内包されるマイクロRNAの網羅的解析につてい、予備実験を行い、卵胞エクソソーム内容のマイクロRNAを網羅的にシーケンス解析可能であることを確認することができた。総合的に判断し、おおむね十丁に進展していると考えられる。動物の卵巣の機能は、個体の栄養状態、周囲の環境やストレスなど多岐にわたる要因に影響を受ける。しかし、これらの要因が具体的にどのようなメカニズムで卵巣機能に影響を及ぼすかは不明である。分泌小胞エクソソームは、様々なマイクロRNAを内包し、細胞間の情報伝達を担う新規因子として注目されている。本研究では、卵巣外の臓器から分泌されたエクソソームが卵巣内に到達し、卵巣機能を制御する可能性を検討することを目的とした。具体的には以下の2項目について検討を行った。1卵胞に存在するエクソソームの由来臓器・組織の同定:クソソームには、それを分泌した細胞のもつmRNAが少なからず内包され、それらの中にはエクソソームを分泌した細胞種特異的なmRNAも含まれる。そこで、ブタ卵胞エクソソームに内包されるmRNAをRNAシーケンス法により網羅的に解析し、組織特異的なmRNA発現を探索した。その結果、卵胞エクソソームには、一般に卵巣顆粒層細胞特異的とされるmRNAに加えて、卵巣では発現が低くく他の臓器において特異的に高い発現を示すことの知られるmRNAが多く検出された。すなわち、卵胞エクソソームの少なくとも一部はそれらの臓器由来である可能性が示唆された。2卵胞エクソソームが卵巣体細胞に与える影響の解析:我々は、ブタの卵胞エクソソームは、培養下においてFSH刺激による卵丘膨化現象を促進することを報告している。そこで、卵胞エクソソームのFSHシグナルに対する影響を解析したところ、卵胞エクソソームは壁顆粒層細胞において、FSH下流のERKシグナル活性化を維持する役割を持つ可能性が示唆された。

1ブタの卵巣卵胞内に存在するエクソソーム内のmRNAを、RNAシーケンス法により網羅的に解析し、卵胞エクソソームの少なくとも一部が卵巣外の臓器由来である可能性を明らかとした。2卵胞エクソソームが卵巣体細胞において、FSH下流のシグナル伝達を補助する役割を持つ可能性を明らかとした。平成28年度の解析項目1で得られた卵胞エクソソーム内包mRNAの網羅的シーケンスデータの解析を行い、卵胞エクソソームの由来組織を同定する。また、卵胞エクソソームに内包されるマイクロRNAの網羅的にシーケンス解析を行う。卵胞エクソソームの機能解析については、前述のようにメタボローム解析による網羅的な解析は費用面で困難であることから、mRNAシーケンスデータおよびマイクロRNAシーケンスデータより、卵胞エクソソームの機能を予測し、予測された機能に絞って解析を行っていく。これらを総合的に判断し、卵胞エクソソームの由来組織を同定し、さらにその機能を解明する。繁殖遺伝学
卵巣癌・子宮体癌におけるタンパク質メチル化を標的とした新規分子標的治療薬の開発

本研究の最終目標は卵巣癌、子宮体癌を中心とした婦人科癌におけるタンパク質メチル化を標的とした新規分子標的治療薬の開発である。まず子宮体癌について検討を行った所、細胞株、臨床検体においてヒストンメチル化酵素EZH2の発現の亢進が認められた。またEZH2のノックダウンを行うと子宮体癌細胞株の増殖抑制、及びアポトーシス作用が認められ、EZH2選択的阻害剤を使用すると、ノックダウン時と同様な結果が得られた。以上の結果から、子宮体癌においてヒストンメチル化EZH2高発現は増殖促進に深く関与しており、同阻害剤が新たな分子標的薬となる可能性が示された。ヒストンメチル化はエピジェネティクスを制御する主要因子であると考えられている。また乳癌や白血病、膀胱癌、食道癌等の様々な癌において様々なヒストンメチル化酵素、脱メチル化酵素が過剰発現されていることが報告されているが、卵巣癌・子宮体癌などの婦人科癌とタンパク質メチル化について調べた報告はほとんど無い。そこで申請者らは卵巣癌・子宮体癌におけるタンパク質メチル化の意義を調べ、新たな分子標的治療薬の開発を目指した研究を計画した。まず晩婚化や少子化、生活習慣病のなどのリスク人口の増加に伴い、罹患者数も年々増加している子宮体癌における検討から行った。まずリアルタイムPCR法にて子宮体癌細胞株(11種類)、子宮体癌臨床検体(50例)における14種類のヒストンメチル化酵素・脱メチル化酵素の発現解析を行った。それぞれ不死化子宮内膜細胞株及び正常子宮内膜と比較して5種類のヒストンメチル化酵素、3種類のヒストン脱メチル化酵素において有意に発現の亢進が認められた。その中で、まずヒストンメチル化酵素EZH2について機能解析を行った。子宮体癌細胞株に対してsiRNA法によりEZH2をノックダウン後、細胞増殖試験を行ったところ、コントロールと比較しEZH2をノックダウンした細胞株において有意に細胞増殖が抑制された。次にFACS法、AnnexinV法を行ったところ、EZH2をノックダウンした細胞株においてアポトーシス細胞の増加が認められた。また申請者はヒストンメチル化酵素についての基礎的な研究も行った。ヒストンメチル化酵素SUV420H1がヒストンタンパク質だけでなく非ヒストンタンパク質であるERK1をメチル化することにより、ERKのリン酸化を制御することを発見した。この事からERK1のメチル化がMAPK経路の活性を促し、癌化に寄与していると考えられる(Oncotarget,2015)。当該年度は1.婦人科癌(卵巣癌、子宮体癌)検体におけるヒストンメチル化酵素、脱メチル化酵素の発現解析、2.婦人科癌細胞株を用いた細胞増殖試験を研究計画として行う予定であった。まず子宮体癌から研究を開始したが予定通り進行しており、細胞増殖試験まで終了している。今後卵巣癌細胞株も平行して行う予定であるが、当該年度の子宮体癌における研究で実験系が確立されているのでスムーズに研究を進めることができると考えられる。乳癌や白血病、膀胱癌、食道癌等の様々な癌において様々なヒストンメチル化酵素、脱メチル化酵素が過剰発現されていることが報告されている。この事からメチル化の均衡の破綻が癌化と関連することが明らかとなったが、卵巣癌・子宮体癌などの婦人科癌とタンパク質メチル化について調べた報告はほとんど無い。上記の背景及びこれまでの研究成果をもとに、まず子宮体癌におけるヒストンメチル化酵素・脱メチル化酵素の発現解析を行った。子宮体癌細胞株11株および子宮体癌臨床検体50検体における14種類のヒストンメチル化酵素の発現解析を定量的リアルタイムPCR法を用いて行ったところ、9種類のヒストンメチル化酵素・脱メチル化酵素の発現亢進が認められた。その中でまずヒストンメチル化酵素EZH2について機能解析を行った。子宮体癌細胞株に対しsiRNAを用いてEZH2のノックダウンを行ったところ、細胞増殖抑制およびアポトーシス誘導が認められ、ヒストンにおけるメチル化シグナルの抑制も認められた。さらにEZH2選択阻害剤を用いた子宮体癌細胞株の検討においてもsiRNAを用いた解析と同様の結果が認められた。またEZH2選択阻害剤と抗癌剤(シスプラチン、アドリアマイシン)との子宮体癌細胞株における相加的抗腫瘍効果も認められた。上記よりヒストンメチル化酵素EZH2が子宮体癌の治療標的になりうる可能性が示された。現在、子宮体癌における他のヒストンメチル化酵素の機能解析及び、卵巣癌におけるヒストンメチル化酵素の発現解析を行っている。

卵巣癌においても子宮体癌と同様に研究を開始し、ヒストンメチル化酵素・脱メチル化酵素の発現解析、細胞増殖試験まで行う予定である。子宮体癌においてはヒストンメチル化酵素EZH2の機能解析をさらに進めていく。具体的にはEZH2阻害剤を用い子宮体癌細胞株において細胞増殖実験、アポトーシス実験、併用効果のある化学療法探索を行っていく。阻害剤における抗腫瘍効果が認められたならばin vivo実験も開始する。具体的には子宮体癌細胞株を移植したヌードマウスを用いEZH2阻害剤を投与し抗腫瘍効果を検討する。またヒストン脱メチル化酵素においても子宮体癌にて発現の亢進が認められた3遺伝子について研究を開始する。婦人科悪性腫瘍それぞれの実験でほとんどミスなく実行でき、研究計画に沿った結果が得られたので当初の予定より試薬、培地、プライマー等の消耗品が少なく済んだ。また前年度に購入した消耗品も併せて使用したので当該年度の使用額が少なく済んだ。EZH2阻害剤等のメチル化酵素阻害剤・LSD1等の脱メチル化酵素阻害剤の購入、in vivo実験のためのヌードマウスの購入、その他消耗品に使用する。
インフルエンザウイルスRNAポリメラーゼによるウイルスゲノム複製機構の解析

インフルエンザウイルスは、8本の(-)鎖RNAをゲノムとして持ち、感染した宿主細胞核内でPB1、PB2、PAという3つのサブユニットからなるRNAポリメラーゼを用いて、転写、複製を行なう。これまでにウイルス粒子から精製したRNAポリメラーゼにより、転写についての研究は進んでいたが、ウイルス粒子由来のRNAポリメラーゼでは、複製活性は検出できず、その研究は遅れていた。今回、インフルエンザウイルスゲノムRNAの複製を試験管内で行なわせるために、ゲノム第8分節の両末端を持つ53ヌクレオチドのモデル鋳型を用いて、プライマー非依存性に行なわれるRNA合成を指標にして、ウイルス感染細胞から複製活性を持つRNP画分を抽出した。このRNP画分は、0.5MKClを含むグリセリン濃度勾配遠心にて分画することにより、ジヌクレオチドApG依存性の転写活性は保持したが、複製活性は喪失した。そして、その遠心上清画分又は、非感染細胞核抽出液と混合することにより、ゲノム複製活性を回復した。この0.5MKClを含むグリセリン濃度勾配遠心にて分画した感染細胞RNPには、ウイルス成分として、NPとRNAポリメラーゼのみが存在することが、BioRadの装置を用いたウエスタンブロットにより確認された。以上、インフルエンザウイルスゲノムRNA複製をモデル鋳型を用いて、試験管内で、その全過程を再現し、複製には、感染細胞内におけるNPとRNAポリメラーゼ、及び、宿主細胞由来の因子が、関与していることを明かにした。そして、現在、この因子の同定を行なっている。
近接場光を用いた伝達物質放出過程の観察と分析

平成11年度培養神経細胞PC12(細胞株の名称)に、蛍光を発するように遺伝子改変が行われたシナプトタグミンを遺伝子導入する(辰巳担当)。この蛍光を発する蛋白分子をもつ細胞を現有の全反射型近接場光顕微鏡にセットする。シナプトタグミンは細胞膜のすぐ近くの細胞小胞に突き刺さるように位置していると考えられる。近接場光による細胞の励起では、細胞の膜からわずかに200nm以下の蛋白分子が蛍光励起されることである。このわずかな光の層にある蛋白質分子、あるいは蛋白質分子の集合が近接場光イメージングされる。細胞を興奮するように化学的な刺激を与えると、斑点状に蛍光が変化することが見出されており、その細胞生物学的意味を近接場光を用いて検討した。11年度の研究では蛋白分子シナプトタグミンのこの斑点状の蛍光変化の意味を検討する。すなわち、蛋白分子シナプトタグミンが近接場光のなかで形を変え、それが蛍光発色団蛋白の光エネルギー準位に影響するかを検討した。つぎに光の強度変化の意味を探るために、ベシクルからの物質の放出過程を可視化する蛍光色素で同時に細胞を処理する。これにより、ベシクルからの物質の放出過程とGFPの斑点状の蛍光変化の関係を検討した。平成12年度本研究では、神経成長因子NGFを添加して、PC-12細胞が神経様に形態変化することを観察している。同時に、神経様に形態変化し、樹状突起を伸ばすときの先端に形成される神経成長円錐部にシナプトタグミンが集積していく様子を観察している。この集積は、神経成長円錐部にベシクルを集めシナプス形成の準備をおこなっていると考えることもできる。成長円錐部におけるベシクルの放出過程を近接場顕微鏡で観察し、細胞体でみられる放出機構と比較した。また、ベシクルを細胞先端に運ぶ仕組みや、ベシクルの放出と細胞の膜の供給の関係についても検討をおこなった(辰巳担当)。近接場光を応用した高解像度観察と分子反応の制御が最も必要とされる領域の一つに、生体機能分子の観察と制御があげられる。近接場光を応用した高解像度観察では、生体分子を化学固定することなしに高分解能での観察ができる。本研究では、生命現象にとって大切な分子を、細胞内で"機能する状態"そのままに、その動的変化を近接場光を用いて研究する。研究対象とする分子は神経細胞の情報の受け渡しを行うシナプスの機能を担っている蛋白質シナプトタグミンである。シナプスとは神経細胞の間の情報を受け渡しする場所である。脳における情報処理の根幹は、シナプスによる情報の受け渡しにあるとされる。シナプトタグミンはこのシナプスにあって情報の担い手である伝達物質を貯えている小胞の膜に存在し伝達物質を神経細胞が放出するときに重要な役割をになっていると考えられている。これまでの本研究から、全反射モードの近接場顕微鏡を構成することができた。この装置に488nmのアルゴンレーザを打ち込むと青色のエバネセント光の場(厚さ200nm)をつくることができた。培養細胞で発現した蛍光シナプトタグミンを、生きた細胞の中で、全反射型近接場光顕微鏡で観察ができた。このようにして近接場光で観察している細胞を興奮するように化学的な刺激を与えると、斑点状に蛍光が変化することが見出された。この斑点状の蛍光変化の意味を検討をおこなっており、伝達物質の放出過程と間連することがわかった。

生きて活動する神経細胞の中で働く分子あるいは、細胞内小器官の振る舞いをありのままに観察することは研究者の夢である。しかし、生体機能高分子は光の波長にくらべて小さいために、生きた細胞の中の分子あるいは分子の集団の観察は困難であった。本研究では、従来の光とは異なった新しいタイプの光(近接場光)を細胞の中の分子の観察に用いる。近接場光を用いることで、生きた細胞の中で働く分子あるいは分子の集団のダイナミックな変化を観察し、シナプス伝達に関わる蛋白質分子シナプトタグミンの機能を研究する。この研究では、エバネセント光を蛍光物質の励起光として用いる。このエバネセント光によって観察する対象として、蛍光を発するアミノ酸配列(GFP)を付加したシナプトタグミンを用いる。この蛍光ラベル蛋白質分子(シナプトタグミン)を細胞内で機能する"生きた状態"で近接場光で観察することができた。培養細胞PC12で発現した蛍光シナプトタグミンを、生きた細胞の中で、全反射型近接場光顕微鏡で観察ができることを示すことができた。すなわち、青色のエバネセント光(厚さ200nm)で細胞内の極めて限局した蛍光シナプトタグミンを励起し蛍光観察可能であった。、この蛍光映像の動的変化を詳細に画像処理し、細胞内での生体機能分子の振る舞いを明らかにした。またカルシウムイオンを細胞に導入するような刺激をおこなうと、カルシウムイオンによる蛍光シナプトタグミンの蛍光の明るさが変化した。この分子構造変化は、細胞膜あるいは、シナプトタグミン結合蛋白質分子との相互作用によるものと推定された。これによって、近接場光による生体中の分子の化学反応の制御とその結果の観察と機能の分析を行う実験系を確立することができた。
植物の強光適応を支える細胞核定位運動-その分子機構と生理学的役割-

細胞核は強光条件下で細胞側壁に定位する「光定位運動」を行う(Iwabuchi et al. 2007).この運動は紫外線A/青色光受容体フォトトロピンやアクチン細胞骨格により厳密に制御されており(Iwabuchi et al. 2010),紫外線を含む強光によるDNA損傷や細胞死を防ぐ上で重要な役割を果たしている(論文準備中).平成25年度は,核光定位運動の仕組みおよびその進化的側面に着目し,下記の成果を得た.1.コケ植物タイ類ゼニゴケにおける核光定位運動の解析を実施した.核光定位運動の存在は,シロイヌナズナ(種子植物)およびホウライシダ(シダ植物)の二種でのみ確認されているが,その他の種では調べられていない.そこで陸上植物進化の基部に位置するゼニゴケを用いた。ゼニゴケ葉状体を暗所で2日間静置したところ,核は特定の場所に定位し,続いて青色強光を3時間照射すると,核は細胞側壁に定位した.側壁への核の移動は,青色光受容体フォトトロピンおよびアクチン細胞骨格により制御されることを,突然変異体や阻害剤実験により明らかにした.2. EMS処理およびT-DNA挿入により作出したシロイヌナズナ突然変異体のプールから得られた,核の暗所定位に異常を示す2.系統を解析した.アクチンが核定位運動に必須であることを遺伝学に実証することができた.また,細胞内膜交通が核定位運動に関与するという興味深い発見があった.交付申請書に記載した実施計画はほぼ予定通りに進められたと考えている.核定位運動の進化的側面が明らかになりつつあり,また運動の仕組みに関して意外な発見があった.(抄録なし)シロイヌナズナの葉の細胞核は,光に応答して細胞内で存在場所を変える"光定位運動"を示す.しかし,核がなぜ動くのかについては分かっていない.本年度は,核光定位運動の生理学的役割の解明を目指した.核は強い光に曝されると位置を変えることや,入射光に対して平行な垂層壁に定位することなどから,申請者は,核は過剰光から逃れるために動くのではないかと予想した.地上に到達する太陽光には紫外線が含まれており,特にUV-B(280-320nm)と呼ばれる紫外線がDNAに重大な損傷をもたらすことが知られている.そこで本研究では,細胞核の位置とUV-BによるDNA損傷との関係について調べた.シロイヌナズナの葉の核は暗黒下で細胞底面中央に位置しているが,強い光(青色光,100μmol m^<-2>S^<-1>)を照射すると1-3時間ほどで垂層壁に定位する.この時の核の最大受光面積を測定したところ,垂層壁に定位した核の面積は細胞底面中央に定位した核の面積に比べて有意に小さかった.そこで,垂層壁に定位した核を持つ葉と細胞底面に定位した核を持つ葉にそれぞれUV-Bを照射し,DNAに生じる傷(シクロブタン型ピリミジンダイマー,CPD)を免疫染色法により定量化したところ,垂層壁に定位した核を持つ葉では顕著なCPD量の減少が認められた.さらに,核が常に垂層壁に定位したシロイヌナズナ突然変異体を用いて同様の実験を行った.変異体にUV-Bを照射し,生じるCPDをELISA法およびリアルタイムPCR法により定量化したところ,CPD量は野生型よりも少なかった.以上の結果より,核光定位運動は紫外線照射により生じるDNA損傷を抑制する働きを持つことが明らかになった.動物とは異なり,植物は紫外線に曝されてもその場から逃げることはできない.そこで植物は,細胞内で核を動かすという手段を使って紫外線から身を守っているのではないかと申請者は考えている.植物細胞の核は光に応答して細胞内で存在場所を変える"光定位運動"をする.シロイヌナズナの葉に対して暗処理を行うと表皮細胞および葉肉細胞の核は細胞底面に定位し,強光を連続照射すると核は一時間以内に細胞側壁に移動する.しかしながら核光定位運動の生理学的役割についてはわかっていない.そこでは我々は"核は強光を避けるために動く"のではないかと考え,これを実験的に証明することを行った.強光を避ける理由として紫外線の存在が挙げられる.地上に到達する太陽光には紫外線が含まれており,特にUV-B(280-320nm)と呼ばれる,より短波長側の紫外線が核DNAに重大な損傷(シクロブタン型ピリミジンダイマー,6-4光産物の生成)をもたらす.そこで,核定位とDNA損傷との関係について調べたところ,側壁への核定位率とDNA損傷量との間には負の相関関係が成り立つことがわかった.すなわち,核が側壁に定位することでDNAへのダメージを抑制できることを意味している.さらに,DNA損傷により引き起こされる細胞死について核定位との関係を調べたところ,DNA損傷の場合と同様に,核が側壁に定位すると細胞死が起こりにくいことが分かった.以上の結果は核光定位運動が紫外線を含む強光を避けるための防御機構として有効に働くことを示している.一方,核は光の有無により細胞の底面と側壁を行き来するが,これは弱光下で生育させた個体で見られる定位様式であり,比較的強い光の下で育てた個体では,ほとんどの核は常に側壁に定位するという現象も見出された.

この結果は核の定位場所が生育時の光環境に大きく依存することを示している.弱光順化個体では強光に曝された場合にのみ核を側壁へ定位させるのに対し,強光順化個体では常に強い光に曝されているため,光が当たる前に核をあらかじめ側壁へ定位させておくという,興味深い戦略をとっていると考えられる.現在,以上の研究成果を論文にまとめている.細胞核は強光条件下で細胞側壁に定位する「光定位運動」を行う(Iwabuchi et al. 2007).この運動は紫外線A/青色光受容体フォトトロピンやアクチン細胞骨格により厳密に制御されており(Iwabuchi et al. 2010),紫外線を含む強光によるDNA損傷や細胞死を防ぐ上で重要な役割を果たしている(論文準備中).平成25年度は,核光定位運動の仕組みおよびその進化的側面に着目し,下記の成果を得た.1.コケ植物タイ類ゼニゴケにおける核光定位運動の解析を実施した.核光定位運動の存在は,シロイヌナズナ(種子植物)およびホウライシダ(シダ植物)の二種でのみ確認されているが,その他の種では調べられていない.そこで陸上植物進化の基部に位置するゼニゴケを用いた。ゼニゴケ葉状体を暗所で2日間静置したところ,核は特定の場所に定位し,続いて青色強光を3時間照射すると,核は細胞側壁に定位した.側壁への核の移動は,青色光受容体フォトトロピンおよびアクチン細胞骨格により制御されることを,突然変異体や阻害剤実験により明らかにした.2. EMS処理およびT-DNA挿入により作出したシロイヌナズナ突然変異体のプールから得られた,核の暗所定位に異常を示す2.系統を解析した.アクチンが核定位運動に必須であることを遺伝学に実証することができた.また,細胞内膜交通が核定位運動に関与するという興味深い発見があった.上記の通り,平成23年度は紫外線によるDNA損傷に注目した解析を行い,植物の新たな紫外線耐性機構を明らかにできた.現在,得られた成果を論文としてまとめており,当初の計画通り研究は順調に進んでいる.平成23年度に引き続き本年度も核光定位運動の生理学的意義について研究を行った.核の細胞内配置がDNA損傷だけでなく細胞死にも影響を与えることがわかり,核定位運動の重要性を示すことができた.現在,得られた成果を論文としてまとめており,当初の計画通り研究は順調に進んでいる.交付申請書に記載した実施計画はほぼ予定通りに進められたと考えている.核定位運動の進化的側面が明らかになりつつあり,また運動の仕組みに関して意外な発見があった.計画通り研究を進める予定である.核光定位運動の生理学的役割に関する研究を論文にまとめ,出来るだけ早く社会への公開を目指す.また,研究計画にしたがい,運動の仕組みについても解析を進めていく.(抄録なし)
層間包接光触媒を用いる人工光合成型光一化学エネルギー変換

合成した層間化物合の層間隔はいずれも1nm以下であったことより、層間に包接されたCdSおよびCd_<0.8>Zn_<0.2>Sは厚み1nm以下の超微粒子であり、量子効果によりバルクのものより大きなバンドギャップを示し、波長400nm以上の可視光照射下で光触媒活性を示した。光触媒活性はCdSのみを包接したものよりCd_<0.8>Zn_<0.2>Sを包接したものの方が優れていた。バルク触媒であるCd_<0.8>Zn_<0.2>Sゲルの触媒活性は、時間の経過とともに低下したが、層間包接されたCd_<0.8>Zn_<0.2>Sはの光触媒活性は長時間安定であった。光触媒活性を可視光照射下における0.1M Na_2S水溶液からの水素生成速度で比較すると、H_2Ti_4O_9/Cd_<0.8>Zn_<0.2>S>H_4Nb_6O_<17>/Cd_<0.8>Zn_<0.2>S>MT/Cd_<0.8>Zn_<0.2>S≒MgAl-LDH/Cd_<0.8>Zn_<0.8>S≒ZnAl-LDH/Cd_<0.8>Zn_<0.2>S>Cd_<0.8>Zn_<0.2>Sゲルの順であり、層間包接光触媒はバルクのものより優れた触媒活性を示した。なお、ホスト層として絶縁体であるMTやLDHを用いたものの光触媒活性はほぼ等しかったが、ホスト層として半導体であるH_2Ti_4O_9およびH_4Nb_6O_<17>を用いると触媒活性が著しく向上した。これはホスト層が半導体のものでは、ゲスト-ホスト間の電子移動により、光励起された正孔と電子の再結合が抑制されるためと考えられる。また層間包接光触媒は、SO_3^<2->の光酸化において嵩高いS_2O_6^<2->の生成を抑制し、SO_4^<2->の生成を促進したことから、形状選択性を有することがわかった。
ジャコモ・レオパルディの著作における詩と哲学の関係についての研究

本研究は、レオパルディ作品の総体を、その詩人としての素質と哲学者としての素質との関係を中心として再解釈・体系化するものである。今年度は、大きく分けて三つの観点から研究を行った。1レオパルディの心像論:修士論文を再検討する形でレオパルディの認識論について考察し、その唯物主義にまつわる議論を起点として先行文献の問題点を批判検討するとともに、心像論の観点からその認識論の再解釈を行なった。これについては、イタリア言語文化学会において二回の研究発表を行なっている。2レオパルディの快楽理論とその詩作品への応用:レオパルディ哲学の核心である快楽理論については、これまで多くの研究が行われてきたが、いまだ明確な体系化はなされておらず、その歴史的位置付けをめぐる議論も不十分である。そこで、レオパルディの快楽理論においては、欲望の対象のごまかしと欲望自体のごまかしの区分がなされていることを発見し、この軸に沿って快楽理論を体系化するとともに、レオパルディと彼に先行する思想家とのあいだに様々な本質的相違があることを明らかにした。また、この研究を基盤として、レオパルディの快楽理論とその詩学との関係についても考察し、レオパルディが18世紀イタリア文学の重要カテゴリーである「多様性」を重視して創作を行なっていることを見出した。3レオパルディのペシミズム:近年、レオパルディ研究では、ペシミストとしてのレオパルディ像が否定されるようになってきている。こうした潮流に反論する形で、19世紀後半から20世紀前半においてペシミズムという言葉にはある程度明確な共通理解が存在していたことを示すとともに、その観点からすればレオパルディはショーペンハウアーと並びもっとも純粋なペシミスト哲学者の一人であるということを明らかにした。レオパルディの認識論の研究については、期待以上の結果を得た。レオパルディの認識論を新たな観点から再構築した上で、バークリーやヒュームといったイギリス経験論の哲学者との共通点など、当初予定していなかった新たな発見も得ることができた。レオパルディの快楽理論についても、期待以上の結果を得た。新たな視点による快楽理論の体系化に成功した上、これにおけるdoloreとpenaの明確な峻別など、当初は予定していなかった新たな発見も得ることができた。当初は、レオパルディの作品を否定神学の議論に照らして捉えなおす研究も予定していた。しかしこれについては、具体的に文献を読み進めていくなかで、仮説そのものに困難があったことが判明したため、断念した。しかしその代わり、当初は予定していなかったレオパルディのペシミズムについて研究を大きく進展させることができた。そのため、総じて当初の計画以上に研究を進めることができたと自負している。今後は、以下の6つの観点からの研究を計画している。1『ジバルドーネ』における詩と哲学の対立:レオパルディは、とくにその初期の思索において、詩と哲学を敵対関係にあるものとして考えていた。このことが、後期における詩と哲学の協働関係についての思索とどのような関係にあるのかを明らかにする。2レオパルディ哲学における想像力と詩的霊感:レオパルディは、哲学者の素質として、理性や体系的考察力だけではなく、想像力と詩的霊感を重視していた。そのことの意義を、これまでに研究を行なったレオパルディの心像論との関係から明らかにする。3レオパルディの対話篇における対話と声の役割:先行研究において、対話の形をとった一種の哲学論文のようにして語られることが多かった『オペレッテ・モラーリ』の対話篇を分析し、『形而上学者と物理学者の対話』等の作品を、対話者どうしのけっして論理的に解消されることのない葛藤そのものとして提示するとともに、それぞれの対話者ごとの声の差・文体的個性が、作品において本質的な役割を担っていることを明らかにする。4『ストラトンの偽書断片』研究:先行研究において、レオパルディの唯物主義哲学の心髄として語られてきたこの作品を、『ジバルドーネ』の懐疑主義を根拠に喜劇的作品として捉え直し、形而上学の破綻そのものを表現した作品として再解釈する。5マキャヴェッリからの影響:3・4で提示されるようなレオパルディの悲劇的思考は、おそらくマキャヴェッリの思想から引き継がれたところが大きい。そのため、卒業論文を再検討する形で両者の関係を考察する。6『無限』研究:『無限』は、数あるレオパルディの詩作品の中でも、おそらくその哲学的素質がもっとも大きく発揮された作品の一つである。そのため、この作品の読解することによって、レオパルディがいかに哲学的思索を詩作に取り入れていたのかを考察する。