hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
国際的資本移動の下でのアジア諸国における金融政策運営の現状と課題

国際的な資本の流出入が新興国の金融政策運営に与える影響を考察するため、2つの分析を行った。まず、新興国では先進国と比べて、長期国債利回りが海外投資家による資本移動の影響を受けやすく、特にその傾向は世界金融危機発生以降に顕著であることがわかった。この結果は、経済規模の大きな先進国の金融政策の変更が、資本移動を生み出し、新興国の長期金利の変動を通じて金融政策運営をより難しくしていることを示唆している。次に、東南アジア諸国4か国では、世界金融危機後、金融政策運営手段に変化が生じたことがわかった。これは、世界金融危機以後の世界的な流動性の増加が、各国の金融政策の運営に影響を与えた可能性を示している。本研究は、国際的資本の流出入や対外ショックが、金融市場への影響を通じてアジア地域の新興国・途上国の金融政策運営にどのような困難を生じさせるか、また、それが先進諸国とは異なるのかを考察することを目的としている。そのために、アジア諸国の金融政策運営手段に関する分析、および、資本流入が長期金利に与える影響についての分析を行う予定である。平成25年度は、研究を遂行する上で必要となる、金融政策や金融市場、資本移動に関する資料や先行研究、使用するデータの収集を中心に作業を行った。データについては、金利と資本流入に関する分析で用いる主なデータをほぼ得ることができ、回帰分析で使用するデータ・セットを作成した。引き続き必要なデータを補充していくものの、平成26年度は実証分析を行える状況となった。金融政策運営手段に関する分析で用いるデータの収集も現在行っており、来年度にはやはり実証分析が始められる見通しである。また、資料の収集についてはまだ作業を続けているが、先行研究の調査作業はおおむね終わり、推定方法等の方針もほぼ決定している。したがって、いずれの分析においても平成26年度においては、回帰分析を行って結果を得ることが可能であると考えている。なお、並行して行っていた関連研究が完成し、書籍の中の一つの章として出版予定である。この論文は、海外の銀行部門および株式市場で発生したショックがアジア諸国の銀行部門全体に及ぼす影響を分析しており、対外ショックと金融システムの関係を考察している点が本研究とは共通であり、参考になる結果も得られた。たとえば、推定結果は1990年代に比べて2000年代には対外ショックの影響が大きくなったことを示唆しているが、これは、推定期間の設定など本研究の今後の実証分析において有用な情報である。本研究は、国際資本の流出入や対外ショックが、新興国・途上国の金融市場にどのような影響を与えているか、さらに、そうした影響を通じてアジア地域の新興国の金融政策運営にどのような困難が生じているかを考察することを目的としている。そのために、アジア諸国の金融政策運営手段に関する分析、および、資本流入が各国の長期金利に与える影響についての分析を行う予定である。平成26年度においては、前年度に得られたデータ等を使用し、国際資本移動と国債利回りの関係について世界各国を対象にパネル・データを用いて推定する作業を行った。具体的には、各国の10年物国債利回りに対して、海外投資家による国債購入、債券購入、ポートフォリオ流入が及ぼした影響を分析した。その際、上記の変数に加えて様々なコントロール変数を説明変数として用い、新興国と先進国を含むパネル・データ分析を行った。特に、新興国と先進国の違い、世界金融危機発生以前と以後の期間の違いについて注目して考察した。分析の結果、資本流入の新興国の国債利回りへの影響が、世界金融危機後に大きくなっており、とりわけ、外国人投資家の債券売却によって利回りが上昇したことが分かった。さらに、こうした傾向は先進国よりも新興国で顕著であった。なお、本研究に関しては論文としてまとめ、海外の学会で報告を行った。次に、アジア諸国の金融政策運営に関する研究でも、データや資料の収集を進め、推定作業を開始した。インドネシア、マレーシア、フィリピン、タイを対象に金融政策の事実上の操作指標はどのようなものだったのかを実証分析により明らかにする計画である。特に、2008年の世界金融危機発生以前および以後における期間で、各国の金融政策の操作指標が変化したのかを考察する。平成27年度は、アジア諸国の金融政策運営に関する研究について、平成25-26年度に収集したデータを使用し実証分析を進めた。分析に際しては、収集した資料に基づく情報から各国の推定の時期や変数を検討し、時系列分析の手法を用いた。具体的には、アジア危機後にインフレーション・ターゲッティングを導入したタイやフィリピンに加え、同政策を導入しなかったマレーシアとインドネシアを対象に、金融政策の事実上の操作指標はどのようなものだったのかを構造VARにより特定した。すなわち、金融政策の運営手段として、実際に、金利を用いて操作していたのか、それとも、非借入準備等の量的な政策手段も用いて操作していたのかを推定により考察した。推定結果は現在まとめている最中ではあるものの、世界金融危機発生前、インドネシアやマレーシアにおける金融政策運営では金利操作を用いていたことが、タイでは非借入準備といった量的政策手段を使用していたことが、結果から示唆された。さらに、世界金融危機後の混乱の影響が小さくなった期間においては、インドネシアとマレーシアでは金利操作でなく、量的手段を用いた金融政策運営を行っていることを支持する結果が得られた。これは、先進国の世界金融危機以後の金融緩和に伴う世界的な流動性の増加が、これらの国の金融政策の運営に影響を与えた可能性を示している。さらに、平成27年度においては、主に前年度に進めた新興国における国債利回りと国際資本移動の関係に関する研究をさらに進め、学会や研究会等で報告後、得られたコメントを参考に改訂し、論文を完成させた。

本論文は、世界各国の10年物国債利回りに対して海外投資家による国債購入、債券購入、ポートフォリオ流入が及ぼした影響をパネル・データを用いて実証分析し、新興国と先進国の違いおよび世界金融危機以前と以後の違いに注目して考察したものである。国際的な資本の流出入が新興国の金融政策運営に与える影響を考察するため、2つの分析を行った。まず、新興国では先進国と比べて、長期国債利回りが海外投資家による資本移動の影響を受けやすく、特にその傾向は世界金融危機発生以降に顕著であることがわかった。この結果は、経済規模の大きな先進国の金融政策の変更が、資本移動を生み出し、新興国の長期金利の変動を通じて金融政策運営をより難しくしていることを示唆している。次に、東南アジア諸国4か国では、世界金融危機後、金融政策運営手段に変化が生じたことがわかった。これは、世界金融危機以後の世界的な流動性の増加が、各国の金融政策の運営に影響を与えた可能性を示している。国際資本の流入が新興国の長期金利に与えた影響に関する研究については、平成26年度に前年度に収集した資料やデータを使用し、推定作業を主に行った。さらに、それらを論文としてまとめ、海外の学会で報告を行った。アジア諸国の金融政策運営に関する研究についても、関連する資料や先行研究の収集を行いながら、推定作業に着手している。平成27年度に実証分析の結果を得て、論文作成作業を行う見通しである。以上の状況はいずれも当初の計画と整合的で、研究はおおむね順調に進展しているといえる。経済学平成27年度においては、アジア諸国の金融政策運営に関する実証分析を主に行う。引き続き資料や先行研究の収集を進めながら、推定結果を得て論文を作成する計画である。対象国は、当初、インフレーション・ターゲッティングを導入したタイとフィリピンを考えていたが、それらに加え、インドネシアとマレーシアについても考察する。推定の詳細については、計画通り、金融政策運営に関する公表された情報を詳細に分析したうえで時系列分析の手法を用い、金融政策の事実上の操作指標はどのようなものだったのかを特定する。すなわち、金融政策の運営手段として、実際に、金利を用いて操作していたのか、それとも、非借入準備等の量的な政策手段も用いて操作していたのかを明らかにする。その際、2008年の世界金融危機発生以前および以後における期間で、各国の金融政策の操作指標が変化したのかを分析する。さらに、主に平成26年度に研究を進めた国際資本移動と長期金利の関係についての論文は、引き続き学会等で報告を行いながら、得られたコメントをもとに改訂作業を続ける。平成27年度中には完成させた論文を海外のジャーナルに投稿する予定である。平成25年度は、翌年度以降の作業に必要となる情報や先行研究、データの収集を中心に行った。いずれも想定していた内容と若干の相違はあったものの、おおむね必要なものを得ることができた。
新開発活性解析法を用いた新規ジアシルグリセロールキナーゼ関連経路の同定と機能制御

ジアシルグリセロール(DG)キナーゼ(DGK)には10種のアイソザイムが存在する.それらの生理機能はこれまで殆ど不明だったが,最近申請者らは,DGKアイソザイムそれぞれが,多様なシグナル伝達系を決定的に制御し,難治病態形成において重要な役割を担う可能性を示した.そこで,(1)DGK各アイソザイムが形成する「新規DG代謝経路」の探索・実体同定と(2)その生理機能と制御機構の解明することを計画した.その結果,DGKα,δ,ηとζが形成する「新規DG代謝経路」とそれらの生理病理機能(例えば,がん,免疫,双極性障害,強迫性障害,パーキンソン病等)に関して興味ある知見が得られた.「研究の目的」,「研究実施計画」に沿って幾つかの興味ある知見が得られた.目的・計画I-1(新規ジアシルグリセロール(DG)代謝経路の探索・同定):まずDGキナーゼ(DGK)δに関して検討した.DGKδは主に飽和脂肪酸のみを含有するDG分子種(30:0, 32:0, 34:0(2本の脂肪酸の和))に選択性を示した.DGKδがホスファチジルコリン特異的ホスホリパーゼC(PC-PLC)と相互作用することが判明し,DGKδが利用するDGは新規のPC-PLC経路によって供給されることが強く示唆された.以上の結果は,DGKδはPI由来のアラキドン酸(20:4)を含むDGではなく他の経路由来のDG分子種を基質にすること,即ち,これまで誰も想定していなかったPI代謝回転とは独立した「新規シグナルグリセロ脂質代謝系」の存在の可能性を示している.目的・計画I-2(新規DG代謝経路の生理機能・調節機能):1. DGKαの活性化機構として,カルシウム結合に伴いDGKαのEFハンドモチーフの構造が変化し,それによってC1ドメインとの分子内相互作用が弱まることを報告した.2.DGKα特異的阻害剤のがん細胞の死滅やT細胞の活性化に対する顕著な効果を明らかにした.3.2型糖尿病と連関するDGKδの発現量をオレイン酸(18:1)が減少させ(半減),逆に,ミリスチン酸(14:0)が増加させる(倍増)ことを見出した.4.病態との関連を探る第一歩としてDGKδとηの脳での発現を明らかにした.DGKδは海馬と歯状回にも強い発現がみられた.DGKηは歯状回での発現がCA領域に比べ非常に強く,CA3領域ではほとんど検出されなかった.5. DGKη-KOマウスは双極性障害の躁状態に類似する表現型を示した.目的・計画II(DGKアイソザイム特異的な活性制御剤の開発):幾つか大きな進捗はあったが特許の関係等から公表は控えたい.「研究の目的」,「研究実施計画」に沿って幾つかの興味ある知見が得られた.目的・計画I-1(新規ジアシルグリセロール(DG)代謝経路の探索・同定):1.DGキナーゼ(DGK)α,δとηは1,2-DGに加え,2-モノアシルグリセロール(MG)をリン酸化することを明らかにした(投稿中).また,興味あることに,DGKθはDGKα,δ,ηとは異なり,1-MGをリン酸化するユニークなアイソザイムであることが明らかになった.2.DGKζは神経細胞分化時に16:0/16:0-DGを選択的にリン酸化することを明らかにした(投稿準備中).目的・計画I-2(新規DG代謝経路の生理機能・調節機能): 1.脳特異的DGKδノックアウトマウスを作製し,強迫性障害様の表現型を示すことを明らかにした(投稿準備中). 2.ミリスチン酸(14:0)がDGKδ(2型糖尿病と連関する)の発現量を増加させる(倍増)ことによって筋細胞の糖取り込み能を亢進することを見出した(投稿中).3. DGKη-KOマウスはGSK3βのリン酸化の低下を通じ双極性障害の躁状態に類似する表現型を示すことを明らかにした(J. Neurochem. 2016).4.DGKηのプレクストリン相同ドメインは特異的且つ強力なホスファチジルイノシトール4,5二リン酸結合領域であることを明らかにした(J. Biol. Chem. 2016).5.DGKηがDGに親和性の高いユニークなアイソザイムであることを明らかにした(FEBS Lett. 2015).目的・計画II(DGKアイソザイム特異的な活性制御剤の開発):1. DGKα特異的阻害剤は,肝細胞がん,子宮頸がん,メラノーマ細胞の死滅を誘導し,逆にT細胞では活性化することを明らかにした(J. Lipid. Res. 2016).研究実施計画の11項目の内,前年度からの通算で8項目(73%)で顕著な進捗があった.まだ,進捗が見られない項目についても,それらの困難性は概ね解決しつつある.

「研究の目的」,「研究実施計画」に沿って幾つかの興味ある知見が得られた.目的・計画I-1(新規ジアシルグリセロール(DG)代謝経路の探索・同定):1.まずDGキナーゼ(DGK)α,δとηが1,2-DGに加え,2-モノアシルグリセロール(MG)をリン酸化することを明らかにし,また,興味あることに,DGKθはDGKα,δ,ηとは異なり,1-MGをリン酸化するユニークなアイソザイムであることが明らかになった(BBA 2016).2.DGKζは神経細胞分化時に16:0/16:0-DGを選択的にリン酸化することを明らかにした(Biochem. Biophys. Rep. 2016a).3.異なるDG分子種が異なるプロテインキナーゼCアイゾザイムを異なる強さで活性化することを示した(Biochem. Biophys. Rep. 2016b).4.新たなホスファチジルコリン特異的ホスホリパーゼの測定法を確立した(Anal. Biochem. 2017).目的・計画I-2(新規DG代謝経路の生理機能・調節機能): 1.脳特異的DGKδノックアウトマウスを作製し,強迫性障害様の表現型を示すことを明らかにした(Brain Res. 2016). 2.ミリスチン酸(14:0)がDGKδ(2型糖尿病と連関する)の発現量を増加させる(倍増)ことによって筋細胞の糖取り込み能を亢進することを見出した(Lipids 2016).3. DGKη-KOマウスはGSK3βのリン酸化の低下を通じ双極性障害の躁状態に類似する表現型を示すことを明らかにした(J. Neurochem. 2016).4. DGKηには新たな精巣特異的選択的スプライス散文都賀有ることを報告した(PLOS ONE 2016).4. 18:1/18:1-ホスファチジン酸がαシヌクレインの凝集を強く促進することが明らかになった(FEBS Lett. 2017).目的・計画II(DGKアイソザイム特異的な活性制御剤の開発):1. DGKα特異的阻害剤は,肝細胞がん,子宮頸がん,メラノーマ細胞の死滅を誘導し,逆にT細胞では活性化することを明らかにした(J. Lipid. Res. 2016).ジアシルグリセロール(DG)キナーゼ(DGK)には10種のアイソザイムが存在する.それらの生理機能はこれまで殆ど不明だったが,最近申請者らは,DGKアイソザイムそれぞれが,多様なシグナル伝達系を決定的に制御し,難治病態形成において重要な役割を担う可能性を示した.そこで,(1)DGK各アイソザイムが形成する「新規DG代謝経路」の探索・実体同定と(2)その生理機能と制御機構の解明することを計画した.その結果,DGKα,δ,ηとζが形成する「新規DG代謝経路」とそれらの生理病理機能(例えば,がん,免疫,双極性障害,強迫性障害,パーキンソン病等)に関して興味ある知見が得られた.研究実施計画の11項目の内,5項目(45%)で顕著な進捗があった.まだ,進捗が見られない項目についても,それらの困難性は概ね解決しつつある.まだ顕著に進捗していない項目を中心に推進して行く.また,進捗のあった項目についても更に前に進める.28年度が最終年度であるため、記入しない。生化学まだ顕著に進捗していない項目を中心に推進して行く.また,進捗のあった項目についても更に前に進める.28年度が最終年度であるため、記入しない。28年度が最終年度であるため、記入しない。
動原体DNAの段階的除去・改変による減数分裂染色体分配の素過程の解析

分裂酵母染色体動原体は反復DNA配列を多く含むので、染色体ウォーキングのような方法での構造解析は困難である。本研究では大腸菌などへのクローニングを用いないで、ゲノム構造を直接解析する方法を開発した。分裂酵母ゲノムには8塩基対認識制限酵素NotIの切断位置は14ケ所しかない。そこで相同組換えによるプラスミドの組込み形質転換を利用して、動原体近傍にNotI認識DNA配列を導入した。次にNotIで完全消化後、別の制限酵素で限定分解し、DNA断片をPFGで分離、プラスミドDNAをプローブとしてサザン法で調べた。この方法で分裂酵母の3本の染色体の動原体における、反復DNA配列の構造とその配置が解明された。本研究で用いたミニ染色体が含むcen3は120kbの領域に約6kbの単位が10数コピー含まれていた。我々が先に作成した120kbのミニ染色体Ch10はまさにこの領域のみを含む。Ch10DNAの末端は、両側とも、復配列の内部にあった。Ch10DNAに上述の方法でNotI切断配列を導入し、構造を解析した。その結果、染色体III動原体と基本的に同じ構造をもつことが確められた。Ch10に遺伝的マーカーを導入して有系分裂における安定性を測定したところ、脱落の頻度は分裂あたり0.1%以下であった。Ch10は有糸分裂だけでなく減数分裂においても安定に保持されるが、相同染色体の対合能はほぼ完全に失っているようである。一方、動原体反復領域の全部を含む150kbのDNAを、530kbのミニ染色体から一段階遺伝子置換法で除去し、400kbの直線状DNAを作成した。これは予想通り極めて不安定であり、分裂あたり0.2以上の頻度で脱落した。以上の結果から、反復配列領域だけで動原体機能を果せること、この領域の存在が染色体の安定化に必須であることがわかった。今後はさらに細かい領域に欠失を導入するなどして、動原体機能に必須のDNA配列を同定する必要がある。
骨・軟骨両者の分化可能な骨髄器官培養系の確立とその分化過程の細胞生物学的解析

F344系ラット(3週齢、雄)の大腿骨および脛骨より可及的無菌下に摘出した骨髄組織を骨髄本来の組織構築を維持したままタイプIコラーゲンゲル内に包埋し、培養を行った。培養液は、10%牛胎仔血清、50mug/mlL-アスコルビン酸、60mug/mlカナマイシンを含むalpha-MEMを用いた。培養下における骨髄組織の経時的変化を観察するため、培養開始直後、培養1、3、5、7、10、14、21、28日目に骨髄組織を周囲のコラーゲンゲルを含めて10%中性緩衝ホルマリンにて固定し、エタノール系列にて脱水、ハイドロキシエチルメタクリレート樹脂に包埋し、4°Cで重合させた。続いて厚さ3mumの組織切片を作製し、ヘマトキシリン-エオジン染色、トルイジンブルー染色(pH4)を行った。さらにカルシウムを検出するためにアリザリンレッドS染色、リン酸カルシウムを検出するためにvon Kossa染色、アルカリ性ホスファターゼ活性を検出するためにナフトールAS-BIリン酸を基質としたアゾ色素法による染色を行った。この結果、培養7日目よりコラーゲンゲル内に線維芽細胞様細胞の増殖がみられ、これらの細胞はアルカリ性ホスファターゼ活性を有していた。さらに培養28日目では一部石灰化が認められた。また本培養系にさらに5mMbeta-グリセロリン酸を添加し同様の実験を行ったが、明らかな石灰化促進は認められなかった。この石灰化物につき現在引き続き電子顕微鏡レベルでの確認を行っており、今後さらにx線微小分析、電子線回折等を行う予定である。本研究により、骨髄間質細胞はコラーゲンゲル内においても骨原性細胞に分化し得ることが示唆されたが、骨あるいは軟骨の組織構築を実現するためにはさらに適切な培養条件等の設定が必要と考えられた。
5アミノレブリン酸によるチェックポイント阻害剤の抗腫瘍効果増強に関する研究

PD-1/PD-L1経路阻害を介した免疫療法は、メラノーマ治療における奏効率を劇的に改善したが、一方でなお無効な症例も過半を占め、さらなる治療法改善が求められている。申請者らは、抗PD-L1抗体単剤に比べて、5-ALAとの併用療法が腫瘍縮小効果を大幅に改善することを見出した。しかし、これらの包括的な検証は未だ無い。そこで本研究では、このメカニズムを検証する。また、この結果が複合的ながん免疫療法の有効性を示唆するものであることに鑑み、さらに異なる角度から免疫系を刺激する療法(β-glucan投与)の併用効果も検証する。以上の検証を通じて、皮膚腫瘍免疫療法の有効性検証を目指す。
超活性大型天然物の機能解明

近年、海洋生物から強い生物活性と特異な化学構造を有する天然有機化合物が数多く発見されている。なかでも、従来の天然物の範疇を越えるマイトトキシン、ゾ-ザンテラトキシン、パリトキシンのような大型分子が単細胞性藻類から分離され注目を集めている。本研究では、マイトトキシンなどの大型天然物の作用機構を解明するために、まず精密な3次元構造に基づいた作用点の解明を試みた。はじめに、マイトトキシンの作用に対するブレベトキシンBの阻害効果を調べた。すなわち、ラットグリオーマC6細胞を用いてマイトトキシン(0.3ng/ml)のCa^<2+>流入促進活性に対するブレベトキシンBの阻害活性を調べたところ、1-30μg/mlの範囲で用量依存的にマイトトキシンの活性を阻害した。その他マイトトキシンの部分合成フラグメント等を用いた同様の実験によって、標的分子との結合部位を推定した。一方で、NMRと分子力場計算によりMTXの後半部分の17個の疎水的エーテル環部(P-F'環)がほぼ直線的な立体配座を有していると推定されていたが、生物試験の結果はこの部分が脂質二重膜を貫通し、かつ標的分子への結合に関与していることを示唆した。また、親水性部分は屈曲した立体配座を有していることが判明したが、この部分は膜表面に露出しており、特に硫酸エステルを含むEFGH環付近の構造は作用標的分子との結合に関与していると考えられる。このことは、MTXが全長140Åにも及ぶ細長い構造によって標的分子の膜貫通部位と細胞表層部位の両方を認識している可能性を示している。
鉄-マンガン二次ナノ鉱物の生成過程と微量元素の地球化学的挙動に対する影響の解明

本研究課題は、地球表層に存在する鉄水酸化物やマンガン酸化物がどのように生成するのか、あるいは生成後、周囲の環境に対してどのような影響を与えるのかを調べるという目的の課題である。昨年度から、海洋環境に広く存在し、様々な微量元素の濃集することで海水中の元素の溶存濃度を規定している物質である鉄マンガン酸化物に着目し、海水中の微量元素との相互作用に関して研究を行っているが、鉄マンガン酸化物への微量元素の吸着構造をX線吸収微細構造などの手法を用いて系統的に調べた結果、海水から取り込まれたモリブデンとタングステンが吸着に伴って、分子の構造を大きく変化することを見出していた。そこで本年度は、様々なイオンと固相を比較することで、吸着構造を規定する化学的要因を調べた。その結果、固相表面の酸性度およびイオンの酸性度が吸着種のイオンの安定性に大きく聞いていること、また、固相表面の水酸基の幾何学的な配置が分子の構造変化を支配していることを見出した。このメカニズムを明らかにしたことで、今後、モリブデンとタングステン以外の様々な元素についての吸着現象の理解が進むと期待されるという点で、環境地球化学分野における元素の挙動の理解に対して、極めて重要な意義をもつと考えられる。本年度は、特に、海洋環境に広く存在し、様々な微量元素の濃集することで海水中の元素の溶存濃度を規定している物質である鉄マンガン酸化物に着目し、海水中の微量元素との相互作用に関して研究を行った。鉄マンガン酸化物への微量元素の吸着構造をX線吸収微細構造などを用いて系統的に調べる研究を推進していたが、その過程でモリブデンについて鉄酸化物とマンガン酸化物への吸着構造が大きく異なることを見出した。そしてさらにこの違いが、近年地球化学で注目されているモリブデンの同位体比の変動と直接関連することを明らかにした。モリブデンは、海洋環境において大きな同位体分別を起こすことが知られていたが、その要因を分子レベルの吸着構造に立脚して明らかにした点で、本研究は地球化学的に極めて重要な成果であり、特筆に値する。またタングステンについて、鉄酸化物に対する吸着構造がモリブデンと大きく異なることも示した。この結果も、海洋においてモリブデンとタングステンの挙動が異なる原因を明確に示した点で重要である。またこれらの成果の一部を査読付き英文論文として発表した。
センチネルリンパ節シンチグラフィのSPECT/CT像の吸収・散乱線補正の最適化

センチネルリンパ節シンチグラフィに用いられるSPECT/CT画像ではアイソトープを注入した部位の集積によるアーチファクトを認めることがある。このアーチファクトを減少させるために、SPECT/CT装置を用いた場合に吸収補正や散乱線補正を行っているが、逆にその補正が原因でセンチネルリンパ節の描出能が低下する場合もある。そこでセンチネルリンパ節シンチグラフィにおいて吸収補正・散乱線補正の影響を臨床画像で比較・検討した。女性乳癌症例28例(右側12例、左側16例、両側2例)症例に対してSPECT/CT像を撮像して吸収補正(AC)・散乱線補正(SC)を使用した画像と使用しない画像、どちらか1つのみの補正を行った場合の4通りの画像を作成した。その画像を5名の臨床医が5段階評価でセンチネルリンパ節の有無について評価し(1 :確実にない、2 :たぶんない、3 :疑わしい、4 :たぶんある、5 :確実にある)、診断能を比較するために統計学的な有意差検定を行った。5人の読影医のスコアの平均が4以上の症例を全症例で割ったものをセンチネルリンパ節の検出率として評価した。最も検出率が高かったのはAC+SC-で(スコア: 4.8±0.45、検出率: 96.4%)、次はAC-SC-で(スコア: 4.6±0.60、検出率: 89.3%)、3番目はAC+SC+で(スコア: 4.2±1.3、検出率: 78.6%)、最も評価の低かったのはAC-SC+で(スコア4.3±1.2、検出率: 75.0%)であった。AC+SC-とAC-SC-、AC+SC-とAC+SC+のスコアに有意差が認められた(P=0.0076、0.0090)。吸収補正をかけることによりセンチネルリンパ節の診断能が有意に改善されたが、散乱線補正をかけると淡いセンチネルリンパ節が見えなくなる例があり診断能が有意に低下したため、散乱線補正を行わない方がよい。
泌尿器癌の進展におけるガレクチンー３の分子機構の解明と治療応用

前立腺癌細胞に対するタキサン系抗がん剤およびPARP阻害剤の薬剤耐性に及ばすガレクチンー3の作用とそのメカニズムを解明するため、LNCaP細胞およびガレクチンー3が強発現したLNCaP-Gal-3細胞に1nMのドセタキセルあるいは10μMのオラパリブを投与し、治療効果の差を細胞のアポトーシスの程度で検討した。その結果、ドセタキセル投与群では、LNCaP細胞のアポトーシス細胞の割合は17.4%に対してLNCaP-Gal-3細胞では6.8%と有意にアポトーシスが抑制された。オラパリブ投与群でも同様に、LNCaP細胞のアポトーシス細胞の割合が24.2%であったのに対してLNCaP-Gal-3細胞では8.9%と有意にアポトーシスが抑制された。以上の結果より、タキサン系抗がん剤およびPARP阻害剤の薬剤耐性にガレクチンー3が関与することが証明された。薬剤耐性に関与する分子メカニズムを解明するため、microarrayを用いた最新のバイオインフォマティクス解析した結果、LNCaP-Gal-3細胞ではPI3KーAktシグナルが増強し、Aktのリン酸化が促進された。また細胞増殖に関与するTGF-betaシグナルも増強しEGFやTGF-betaの発現が増強していた。さらにPARP関連因子でアポトーシスに関与するPARP14の発現も増強していた。この研究で、去勢抵抗性前立腺癌での重要な治療の1つであるタキサン系抗がん剤と、将来的に臨床応用が期待されるPARP阻害剤の薬剤耐性にガレクチンー3が関与することが示され、ガレクチンー3の発現に関連する候補分子が同定された。この結果からガレクチンー3をターゲットにした治療の有用性が示され、去勢抵抗性前立腺癌治療薬の感受性を高める効果が期待される。本研究で、実験計画の「治療抵抗性におけるガレクチンー3の関与と分子メカニズムの解明」の前立腺癌の項目のうち、前立腺癌細胞に対するタキサン系抗がん剤による化学療法およびPARP阻害剤耐性にガレクチンー3が関与することが証明された。またガレクチンー3の治療抵抗性のメカニズムをmicroarrayで網羅的に遺伝子解析を行い、様々なキー分子を同定した。これらの成果は2019年米国泌尿器科学会で発表する予定であり、研究はおおむね順調に進展している。今後は、腎細胞癌および尿路上皮癌でガレクチンー3の関与を検討していく予定である。すなわち、腎細胞癌ではVEGF受容体阻害剤耐性に及ばすガレクチンー3の作用メカニズム、主に血管新生に及ぼす影響を詳細に検討する予定である。また尿路上皮癌ではゲムシタビンおよびシスプラチンによる化学療法耐性に及ばすガレクチンー3の作用メカニズムを解明する予定である。さらにガレクチンー3の治療応用のため、われわれが既に構築している数種類のガレクチンー3のブロッキング抗体とsiRNAを使用し、去勢抵抗性前立腺癌および腎細胞癌、尿路上皮癌に対する有用性をin vitroおよびin vivo(マウス転移モデル)で検討する予定である。また、ガレクチンー3の発現抑制により、ホルモン療法(前立腺癌)、放射線療法(前立腺癌、腎細胞癌、尿路上皮癌)、化学療法(前立腺癌、腎細胞癌、尿路上皮癌)、分子標的薬治療(腎細胞癌)の際の相加、相乗効果も検討する予定であり、ガレクチンー3の治療応用を目指したい。

またガレクチンー3の治療抵抗性のメカニズムをmicroarrayで網羅的に遺伝子解析を行い、様々なキー分子を同定した。これらの成果は2019年米国泌尿器科学会で発表する予定であり、研究はおおむね順調に進展している。今後は、腎細胞癌および尿路上皮癌でガレクチンー3の関与を検討していく予定である。すなわち、腎細胞癌ではVEGF受容体阻害剤耐性に及ばすガレクチンー3の作用メカニズム、主に血管新生に及ぼす影響を詳細に検討する予定である。また尿路上皮癌ではゲムシタビンおよびシスプラチンによる化学療法耐性に及ばすガレクチンー3の作用メカニズムを解明する予定である。さらにガレクチンー3の治療応用のため、われわれが既に構築している数種類のガレクチンー3のブロッキング抗体とsiRNAを使用し、去勢抵抗性前立腺癌および腎細胞癌、尿路上皮癌に対する有用性をin vitroおよびin vivo(マウス転移モデル)で検討する予定である。また、ガレクチンー3の発現抑制により、ホルモン療法(前立腺癌)、放射線療法(前立腺癌、腎細胞癌、尿路上皮癌)、化学療法(前立腺癌、腎細胞癌、尿路上皮癌)、分子標的薬治療(腎細胞癌)の際の相加、相乗効果も検討する予定であり、ガレクチンー3の治療応用を目指したい。
機能的神経ネットワークの構築と制御の分子メカニズムの研究

本研究プロジェクトにおいては、特定の神経回路の神経伝達を可逆的かつ選択的に遮断する独自の手法を開発し、小脳運動記憶の時系列を持った素過程を明らかにし、小脳記憶は2つの神経回路の情報の処理と統合によって誘導されること、また報酬記憶と忌避記憶が大脳基底核の2つの神経経路によって特異的に支配されていること、更に小脳神経回路の活動依存的な成熟化の分子機構を明らかにした。これらの成果は機能的神経回路の形成と制御の全く新しい機構を示したものである。本研究は入力と出力が定量的に解析出来る運動系の小脳と大脳基底核の神経回路に焦点を当て以下の研究を進めた。1.小脳発達期の神経回路構築機構:小脳顆粒細胞は生後、増殖、分化、移動し、その後成熟したシナプスを形成する。我々は未成熟顆粒細胞が成熟するにつれて静止膜電位を脱分極から非脱分極に移行する事に着目し、初期培養顆粒細胞を脱分極及び非脱分極化しその結果発現誘導を受ける遺伝子の同定、小脳顆粒細胞の発達との関係及びそのメカニズムを追求した。この結果、脱分極及び非脱分極によってそれぞれ未成熟顆粒細胞の増殖、分化、移動に関わる遺伝子と成熟細胞のシナプス成熟にかかわる遺伝子を誘導する事、また膜電位で変化するCa^<2+>とCa^<2+>依存性カルシニューリンがこの発現調節に鍵となる事を明らかにした。さらに成熟時に誘導されるNMDA受容体NR2Cの発現誘導には、カルシニューリンとBDNFの協調的な制御が働くという新しい機構を明らかにした。2.小脳神経回路の制御機構:小脳神経回路において興奮性神経伝達を可逆的に制御出来る変異マウスを作製する事に成功し、このマウスを用いて運動記憶の典型である条件付き瞬目反射の獲得と発現が可逆的に制御出来る事を示した。またin vivoの小脳プルキンエ細胞の反応性を電気生理学的に測定出来る系を確立し、小脳性運動記憶の獲得と発現における小脳神経回路の神経伝達の変化の解析を進めている。3.大脳基底核の神経回路の制御と可塑性の機構:大脳基底核の神経回路においてはドーパミンと基底核に局在するアセチルコリンが拮抗的かつ協調的に作用して基底核の伝達を制御し運動のバランスと薬物依存の誘導を調節している事、さらに大脳皮質からのグルタミン酸神経伝達の前シナプス性の新しい制御機構を明らかにした。基底核の主要な細胞は形態学的に同一の直接路と間接路の2種類の神経細胞からなる。それぞれを蛍光蛋白で識別出来るトランスジェニックマウスの作製を進め、直接路、間接路の主要細胞に対するドーパミン、アセチルコリン、グルタミン酸の相互作用と作用の違いの解析を解析する研究を進めている。本研究は入力と出力が定量的に解析出来る運動系の小脳と大脳基底核の神経回路に焦点を当て以下の研究成果を得た。我々は未成熟顆粒細胞が成熟するにつれて静止膜電位を脱分極から非脱分極に移行する事に着目し、初期培養顆粒細胞を脱分極及び非脱分極化し、その結果脱分極及び非脱分極が未成熟顆粒細胞の増殖、分化、移動に関わる遺伝子と成熟細胞のシナプス成熟にかかわる遺伝子をそれぞれ誘導する事を明らかにした。さらに薬理学的解析及びRNAi,dominant-negative法を用いて上記膜電位の制御にleak K^+ channelが重要な役割を果たしている事を示した。2.小脳神経回路の制御機構;小脳神経回路の顆粒細胞に神経伝達物質の分泌を阻害する破傷風毒素を特異的かつ可逆的に発現するトランスジェニックマウスを作製し神経伝達を可逆的に制御出来る全く新しい方法を確立した(可逆的神経伝達制御法:RNB法)。このモデルマウスを用いて運動記憶の典型である条件付き瞬目反射を可逆的に制御し、小脳記憶の獲得と維持には小脳中位核が必須の役割を果たし、また記憶発現にはプルキンエ細胞の可塑的変化を必要とする事を明らかにし、小脳記憶に異なった神経回路の統合的な神経可塑性が関わるという新しいメカニズムを明らかにした。3.大脳基底核の神経回路の制御と可塑性の機構:大脳基底核の運動制御及び薬物依存の誘導は直接経路と間接経路が拮抗的かつ協調的に相互作用することによって調節を受けている。それぞれの経路の役割と制御をより詳細に明らかにするために上記RNB法を適用出来るモデルマウスの作成を行い現在解析を進めている。

我々は小脳器官培養と初期顆粒細胞培養系を用い生体と同様、未成熟顆粒細胞は成熟するにつれて静止膜電位が脱分極から非脱分極に移行すること、非脱分極化によってカルシニューリン脱燐酸化酵素が不活性化されシナプスの成熟とシナプス成熟に関わる遺伝子の発現が誘導されること、さらにCaMキナーゼとカルシニューリンの2つのシグナル系が時系列を持って顆粒細胞の発達と成熟化の制御を行っている事を明らかにした。2.小脳神経回路の制御機構:小脳神経回路の顆粒細胞に神経伝達物質の分泌を阻止する破傷風毒素を特異的かつ可逆的に発現するトランスジェニックマウスを作製し、顆粒細胞からプルキンエ細胞への神経伝達を可逆的に完全に遮断出来る全く新しい方法を確立した(可逆的神経伝達制御法:RNB法)。このモデルマウスを用いて運動記憶の典型である条件付き瞬目反射を可逆的に制御し、時系列を持って記憶のメカニズムを解析する事に成功した。この結果記憶の獲得/維持と発現に関わる神経回路が分離出来る事、またプルキンエ細胞が発現に、一方小脳深部中位核が獲得と維持に必須の役割を果たしているという全く新しい事実を明らかにした。3.大脳基底核の神経回路の制御と可塑性の機構:我々は上記RNB法が破傷風毒素遺伝子導入ウイルスを組み合わせる事によって基底核の神経伝達を可逆的に阻止出来る事を示し、この結果基底核の直接路と間接路か運動制御と薬物による運動抑制と亢進にそれぞれ重要な役割を果たしている事を明らかにした。本研究は入力と出力が定量的に解析出来る運動系の小脳と大脳基底核の神経回路に焦点を当て、以下の研究成果を得た。1.小脳発達期の神経回路構築機構:小脳顆粒細胞は生後、増殖、分化、移動し成熟シナプスを形成する。我々は小脳器官培養系を用い生体と同様、顆粒細胞は成熟に伴い静止膜電位が脱分極から非脱分極に移行する事、この非脱分極化が小脳顆粒細胞のカルシニュリンを不活化しシナプス形成とシナプス機能蛋白の発現を制御している事を明らかにした。また初期顆粒細胞培養系を用い非脱分極化がグルタミン酸受容体の反応性を高め、NMDA受容体のサブユニットの置換に必須の役割を果たしている事を示した。2.小脳神経回路の制御機構:小脳神経回路の顆粒細胞に神経伝達物質の分泌を阻止する破傷風毒素を特異的かつ可逆的に発現するトランスジェニックマウスを作製し、顆粒細胞からプルキンエ細胞への神経伝達を可逆的に遮断出来る方法を確立した(可逆的神経伝達制御法)。このモデルマウスを用いて運動記憶の典型である条件付き瞬目反射の記憶のメカニズムを、時系列を持って解析する事に成功し、この結果、プルキンエ細胞が記憶の発現に、一方小脳深部核が獲得と維持に必須の役割を果たしていることを明らかにした。更に小脳記憶の視運動性反射の解析を進め、瞬目反射と同様の機構が働いている事を明らかにし、記憶の一連のプロセスが階層的に多様な神経回路で制御されているという新しい事実を明らかにした。3.大脳基底核の神経回路の制御と可塑性の機構:我々は破傷風毒素遺伝子導入ウイルスを組み合わせる事によって基底核の直接路と間接路の神経伝達をそれぞれ特異的、可逆的に阻止出来るモデル動物を作製する事に成功し、この結果直接路と間接路が基底核の神経伝達を協調的かつ独自の機構で制御しているという新事実を明らかにした。
キメラタンパク質を応用した中枢神経再生のための人工細胞外マトリックスの創製

本年は、材料に担持した細胞制御因子の立体構造の維持と安定固定の重要性について、神経幹細胞へさらに効率的に作用させるための細胞制御因子の改良について、また新たな構造形成キメラ蛋白質ユニットであるハイドロゲル材料の模索、の三点について研究を行った。キメラタンパク質の固定法に関する詳細な検討の結果、配向固定化EGF-Hisが、固定化された状態で細胞に作用していること、また配向固定化EGF-Hisは生理条件下で構造変化を起こすことなく固定されていることが明らかとなった。これらの結果は、神経幹細胞の単層での増殖には、固定化EGFの構造維持、ならびにキレート結合による安定な固定が重要であることを示唆するものであると考えられる。次に、神経幹細胞(NSC)をより高効率に増幅できる培養基材の開発を目指し、固定化するEGFキメラ蛋白質の改良による高効率化について検討した。遺伝子工学的手法により、EGFにコイルドーコイル形成能を有するペプチドを融合し、自己二量体を形成するキメラタンパク質を作製した。このEGF-His二量体を固定した表面上では、NSCをさらに高効率に増幅できることを明らかにした。最後に、パーキンソン病治療を目指した細胞移植に用いる、移植細胞保護材料の開発について検討した。これまでに報告したケラチンベースの材料の問題点を克服するべく、ベース材料としてヒアルロン酸(HAc)を用いた神経栄養因子(BDNF)担持ゲルの創製に取り組んだ。このハイドロゲル中にNSCを分散させることが可能であり、組み込んだBDNFの作用で細胞の生存率が対象群に比べて有意に高いことが示された。これらの結果から、BDNFを組み込んだHAcハイドロゲルが移植材料として有望であることが示された。本年は、ヘテロ2量体形成能をもつケラチンを基本骨格とするマトリックスを合成することとした。このケラチンタンパク質に、ラミニン由来の細胞接着ドメインを導入して、細胞接着性を有するキメラタンパク質を合成することを試みた。合成したケラチンキメラタンパク質を、ヒト毛髪から抽出した天然ケラチンと複合化することでマトリックスを作製した。このケラチンマトリックス上で神経幹細胞の細胞培養試験を行った結果、細胞接着ドメインを導入したケラチンマトリックスでは、導入しなかった揚合に比べて、細胞接着性が有意に優れていた。この結果から、細胞接着ドメインの導入により、ケラチンマトリックスが細胞の足場として機能していることが明らかとなった。また、細胞機能制御キメラタンパク質の構築を目的として、多機能キメラタンパク質を遺伝子工学的手法により合成した。そのタンパク質は、上皮細胞増殖因子-ヒスチジンタグ-毛様体由来神経成長因子-プロテアーゼ切断ユニットー神経成長因子ブロッキングドメインの5つの部位からなる。この多機能キメラタンパク質を、Niキレートを介して基材表面に固定化し、その表面上で神経幹細胞の培養試験を行った。その結果、培養初期には、上皮細胞増殖因子の効果で神経幹細胞が選択的に増幅することがわかった。さらに、所定期間後に、プロテアーゼ処理によって神経成長因子ブロッキングドメインを脱離させ、毛様体由来神経成長因子ドメインを露出させた。これに伴い、神経幹細胞からグリア細胞への分化の誘導されることがわかった。この結果から、神経幹細胞の増殖と分化を時間的に制御することのできる新規な材料が開発できたと考える。
ナノマテリアルに対する特異的受容体の同定

細胞の培養培地を変える事によってMWCNTに対する細胞の生物応答、特に細胞内の取り込みに影響を与える細胞膜レセプターの発現が変化することを明らかにした。この取り込みはクラスリン依存性エンドサイトーシスだけでなく、カベオリン依存性エンドサイトーシス、マクロピノサイトーシスも関与していた。変化した細胞膜レセプターはITGB1やMARCOであることをRT-PCRで確認した。エンドサイトーシスで取り込まれたMWCNTはオートファジーのマーカーであるLC3Bの発現を誘導し、細胞増殖を抑制した。receptor-mediated endocytosisの検討;前述した既存のエンドサイトーシス阻害剤はCNTの取り込みを完全には抑制しなかった。このため、他の取り込みメカニズムの存在が示唆されることから我々がこれまでの研究で明らかにしたCNTを取り込む細胞と取り込まない細胞を用いてプロテオミクス分析した。その結果、ある1つのタンパク質(A)が候補タンパク質としてリストアップされた。一方、MC3T3-E1細胞でも石灰化処理の前後でCNTの取り込みに差があることが明らかになったため、この石灰化処理前後のMC3T3-E1細胞と別の分化状態で取り込み差があったBEAS-2B細胞のマイクロアレイ解析を行い、共通する遺伝子として(B)がリストされた。(A)はCNT以外のナノマテリアルのエンドサイトーシスに関与している可能性が報告されているタンパク質であるが、(B)は現在までのところそのような報告はない。初年度行った検討から肺関連細胞においてエンドサイトーシスがカーボンナノチューブ(CNT)の取り込みに重要であり、その中でもクラスリン介在エンドサイトーシスが最も重要であることが示されたが、その一方でレセプターの特定には至っていない。なぜなら、昨年度の実験結果からCNTの細胞内取り込みが分散剤によって全く異なることが示されたからである。牛胎児血清(FBS)やゼラチン、ポリソルベート80などでは細胞内に取り込まれる一方で、カルボキシメチルセルロース(CMC)ではほとんど細胞内に取り込まれないという結果が得られた。この結果からわかる事はCNTの細胞内取り込みは純粋に細胞がCNTだけを認識しているという事ではなく、分散剤とCNTが何らかの複合体を作り、この複合体を細胞が認識しているという事になる。そして、その認識はCMCで分散されたものは取り込み対象となっていないことになる。現在、この認識メカニズムを解明するために複数のエンドサイトーシスレセプターのsiRNA実験を行っているが、思うような成果が上がっていない。大きな理由が2つ考えられる。1つはCNTはもともと単一の形状でないため、サイズに違いのあるCNTが同じメカニズムで取り込まれている保証がないことである。もう1つは細胞による違いである。我々が既に報告したように神経芽細胞でCNTはどのような分散剤を使った場合でも細胞内に取り込まれないが、肺胞上皮細胞でもやはり取り込まれない。さらに、神経芽細胞ではFBSで分散したCNTで細胞に取り込まれない細胞毒性も観察されており、それぞれのケースでの検討が必要であろう。前年度、CNTの取り込みが細胞やサイズによって全く異なることを報告した。そこで、最終年度としてCNTの取り込みと細胞種、及びCNTサイズとの関係をさらに検討した。CNTのバイオマテリアルとしての開発の関連から、まず、骨芽細胞での取り込みを検討した。骨芽細胞での取り込みではこれまで同様、分散剤による細胞増殖への違いがあった。特にゼラチン分散による細胞毒性が見られ、これが細胞取り込みによるものと思われたが、分散しきれていないCNT凝集塊にテストプレートから細胞が移動して接着し、増殖試験試薬投与前の培地のアスピレーションによって生きた状態で除去されている事が明らかになった。これはCNTサイズとも関連した結果であることから、我々はこれまでと異なるより高度にCNTを分散させるために高出力水槽式超音波分散機によるCNTの分散を試みた。その結果、これまで用いていた超音波分散装置でのCNTの粒子サイズが35μmを示していたのに対し、100200 nmとなった。この時のマクロファージ様細胞での取り込みを比較したところ、CNT粒子径が大きなCNTではCNTの取り込みが分散剤に関わらず、高分散CNTと比較し、有意に取り込み量が多かった。さらに界面活性剤であるポリソルベートで分散した高分散CNTでは細胞内にCNTがほとんど取り込まれていない結果であった。これらの結果は少なくとも1次元にナノサイズがあるCNTがナノサイズとして存在する単独粒子、あるいはナノスケールでの凝集のままであると細胞のレセプターはCNTを認識しなくなる事を示している。言い換えると一次粒子でナノ粒子が存在できるのであれば、細胞に認識されることは難しく、ナノ粒子の特性である二次粒子を形成し、サブミクロンサイズになるとエンドサイトーシスに作用するレセプターに認識され、細胞内に取り込まれるものと考えられる。一連の発表はCNTによる細胞毒性はエンドサイトーシスを介して細胞内に取り込まれたCNTがオートファジーのパスウェイを刺激して生じるというCNTの細胞毒性の基本メカニズムを示すものであり、現在、CNT以外でも行われているナノマテリアルによる毒性のメカニズム解明の一助となろう。

ただし、神経系の細胞で見られたような取り込まれない細胞での細胞毒性のメカニズムやマイクログリアで見られた取り込まれても死なない細胞でのメカニズムはさらなる検討が必要であろう。さらにバイオマテリアルとしての検討からマウス前骨芽細胞のセルラインであるMC3T3-E1におけるCNTの細胞の取り込みが細胞密度によって影響することややはり分散剤によって増殖促進と成り得る結果も得られており、細胞でのCNTの認識がエンドサイトーシス以外のレセプターでも行われていることが示唆され、毒性以外の視点でのCNT認識レセプターの解明の重要性が示せた。ただし、CNTのレセプターの特定は概要で示したような個々の細胞やCNTのサイズなどの影響による特異性も含めた検討が必要であり、最終年度の検討課題と言える。生体材料学「概要」で記載したように、取り込みのレセプターが細胞ごとによって違う可能性と不均一なCNTが原因で、レセプターの阻害試験による検証が困難なことを考慮し、最終年度はCNTの取り込み量が最も多く、かつ、同一の細胞でありながら血清の有無でCNTの取り込みが全く異なるBEAS-2B細胞のCNTレセプターの特定を最優先する。このレセプターが特定できれば、他の細胞での同セレプターを確認し、細胞ごとのレセプターの違いの有無の確認や発言量と取り込み量の確認、タイムラプスを用いたおよそのCNTサイズと取り込みの関係を確認することができる。また、「現在までの達成度」で示したように神経系細胞で見られたような「細胞に取り込まれないケースでの細胞死」や「取り込まれても死なないケース」の検討が必要である。さらにCNTを加速しているバイオマテリアルとしての研究を補完するためにもCNTが生理活性を示すためのレセプターについても明らかにする必要があり、汎成長因子阻害剤などを用いて、CNTと分散剤の複合体が成長因子のレセプターに認識されているか否かの検証を行う。H27年度は本課題の最終年度であることから6月に米国のワシントンD.C.で行われるTechConnect World Innovation Conferenceと第42回日本毒性学会、11月に京都で行われる第37回日本バイオマテリアル学会で成果を発表し、バイオマテリアル系の国際誌への投稿を行う予定である。今年度計画していたエンドサイトーシスの関与についてインヒビターを使った実験結果からマクロファージだけでなく、ヒトの気管支上皮細胞、さらに中皮腫細胞でもCNTはある特定の機序のエンドサイトーシスによって取り込まれることを明確に示す結果が得られた。この取り込みがラットでの腹腔内中皮腫発症に重要な役割をしていることから非常に重要な結果であると考えている。その一方で細胞内へのCNTの取り込みが既存のエンドサイトーシスでは全てを説明できないという想定していた結果も得られたことからナノマテリアルで想定されているreceptor-mediated endocytosisの検討を行った。
アジア現代女性史の研究:北東及び東南アジアにおける軍事主義とジェンダー

四カ年を通して、北はモンゴルから南は東ティモールにいたる北東及び東南アジアの全域を射程として、現代女性史に関する調査・研究を実施した。日本国内はもとよりモンゴル、中国(大陸)、台湾、韓国、ベトナム、カンボジア、タイ、ビルマ、フィリピン、インドネシア、東ティモールにおいてフィールドワークを行い、資料を収集した。軍事主義が女性に与えて影響を明らかにするための研究計画に基づいて、戦争・軍事政権・外国軍隊の駐留のインパクトを調査した。第一に朝鮮戦争・ベトナム戦争、またベトナムとカンボジアの紛争、カンボジア内戦・フィリピン内戦といった戦争下における女性の経験、第二にタイ・ビルマ・インドネシア・台湾などの軍事政権が女性に与えた影響、第三に駐韓米軍・在日米軍・米比一時駐留協定・モンゴルにおけるPKO訓練基地をめぐる地域女性史に焦点をあてた。これらの調査を通して、戦争・軍事政権・外国軍隊の駐留といった状況が女性に対する性暴力を構造化させ、人身売買・性的搾取構造を確立させていった過程を明らかにした。また、このような軍事主義的・暴力的構造に対してアジアの女性たちがんなる受動的な被害者であったのではなく、果敢に抵抗し、人権と平和が尊重される秩序を構築するために力を発揮したことをも明らかにした。このような研究成果を発表するために研究代表者・研究分担者はそれぞれに機会あるごとに学会における発表、学術誌への投稿、図書の刊行などに取り組み、また研究組織として『アジア現代女性史』全十巻の刊行に取り組むとともに、年報『アジア現代女性史』を日本語版・英語版で創刊し、それぞれ四号まで発行した。第一の領域は、東アジアにおける軍事主義と性売買制度の比較・関係史的研究である。この研究のためにモンゴル、韓国、タイ、フィリピンの研究者たちと交流し、研究会、シンポジウム、協同調査を行った。それらを通して、モンゴルにおいて経済改革のインパクトによる都市移住、海外移住のなかで、売春・人身売買が表面化しつつあること、韓国の公娼制度廃止過程における女性諸団体内部にアプローチの差異があったこと、韓国及び日本には米国のアメリカン・プランと呼ばれる売春政策が影響を及ぼしていたこと、韓国及び日本の女性諸団体においては売春禁止主義が強固であるのに対して、タイとフィリピンにおいては女性諸団体による売春非犯罪化の主張が主流であり、売春の場にいる女性たち自身の組織と運動があることなどを明らかにした。中国(大陸)及び台湾に関しては、基礎資料の収集を開始し、文献翻訳に着手した。第二の領域は、東アジアにおける軍事主義に対する女性たちの抵抗を跡づける研究である。この研究のために韓国、タイ、フィリピン、ビルマを訪問して調査を実施し、またインドネシア及び東チモールに関する研究を行った。韓国に関しては海外協力研究者の金貴玉氏の協力を得て、解放後の左派女性団体に所属し、パルチザン組織に加入し、国家保安法体制のもとで厳しい迫害を被ってきた高齢女性のインタビューを開始した。タイについては70年代の学生運動、血の水曜日事件以後の武装抵抗、80年代から現在にいたるバンコクにおけるタイ民主化運動に従事し、現在では国家女性問題委員会で働いているスニー氏のインタビューと自伝の翻訳を行った。フィリピンについてはマルコス軍事独裁下の女性運動について、女性団体連合会などのNGOの協力を得て調査を行い、マルコス時代に投獄された経験もあるフィリピン大学教授ジュディー・タギワロ先生のインタビューを開始した。ビルマ、インドネシア、東チモールはいずれも長年厳しい軍事政権の下にあった。その下での女性の抵抗の文学による表現、組織的抵抗の経験、平和構築努力などの一部を明らかにした。1.6月中旬に研究組織であるアジア現代女性史研究会の年報『アジア現代女性史』を創刊し、2004年度以後の研究成果を掲載・発表した。2.6月下旬に世界女性学大会においてパネル「戦争、グローバリゼーション、移民女性の性的搾取を主催し,藤目ゆき・今岡良子・鄭嬉鎮・アガリン長瀬が報告を行った(年報第2号に収録予定)。3.9月に研究代表者がジャカルタを訪問しインドネシア社会史協会の受け入れでインドネシア現代女性史に関する調査と研究交流を行った。