hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
逆強化学習法による「動物の行動戦略を制御する神経基盤」の同定

線虫の温度走性行動に対して逆強化学習を適用し、線虫が持つ報酬関数を推定した。その結果、線虫は「培養温度に向かう戦略」と「温度が変わらないことを好む戦略」の二つの混合戦略を持つことを示唆する結果が得られた。また、サロゲーションを用いた統計的検定を行うことで、これら二つの戦略はアーティファクトではないことを示した。実際、線虫は一定温度をトラッキングすることが知られていることから、本手法の妥当性が示された。現在は、複数の異なる戦略を持つ場合、戦略切り替えのタイミングまでも推定することができるように手法の拡張を行っているところである。逆強化学習法により線虫の温度走性における行動戦略を明らかにし、その成果を論文として出版することができた。一方で、予定していた行動戦略と神経活動との比較解析は、自由行動中の線虫の神経活動データを十分に得ることができていないため停滞している状況である。これらの状況を総合して、「2おおむね順調に進展している」と判定した。開発した手法を、線虫だけではなく、別の動物の行動データへの適用を目指す。現在、自由行動化のマウスの神経活動を計測しているグループと議論を重ねているところである。動物は行動パターンを制御することで新しい環境に適応することができる。このような行動戦略の同定は動物の意思決定を理解する上で重要である。しかしながら、行動戦略を同定する手法は未だ十分に確立されていなかった。そこで本研究では、動物の行動時系列データから行動戦略を同定する計算論的手法を開発した。この手法を線虫の温度走性行動に対して適用し、線虫が培養温度に移動していく行動戦略を同定することができた。その結果、同定された行動戦略から二つのモードを発見した。一つのモードは培養温度に効率的に移動する特性を持ち、もう一つのモードは等温線上を移動する特性を持つ。さらには、温度感受性神経細胞が機能していない系統の行動戦略を同定し、二つのモードがどのように変化するのかを明らかにした。動物の行動戦略を強化学習でモデル化し、動物の行動時系列データから行動戦略を同定する手法を提案した。強化学習のフレームワークとして線形可解マルコフ決定過程を採用し、動物は得られる報酬を最大化する行動戦略を既に獲得していると仮定した。そして、行動時系列データから行動戦略を表現する報酬関数を推定する手法を開発した。この手法を用いることで、線虫の温度走性における行動戦略を同定した。この成果を現在、論文にまとめている状況である。動物は生命維持や子孫繁栄のため、外界の状況に応じて、最も多くの報酬を得ることが期待される行動を選択すると考えられている。これまでの多くの研究では、特定の課題を動物に課し、研究目的に合わせて、動物が取れる行動や得られる報酬が人為的に設計されていた。一方で、自然な環境で自由に行動している動物を研究する場合、動物にとっての報酬が不明であることが問題であった。そこで本研究では、動物の行動時系列データから報酬に基づく行動戦略を同定する機械学習法(逆強化学習)を提案した。逆強化学習法の応用先として、線虫C. elegansの温度走性行動に注目した。一定の温度で餌を十分に与えて育成した線虫は、その育成温度を記憶し、温度勾配下では育成温度に移動する。一方で、一定の温度で餌を与えずに育成した線虫は、温度勾配下で育成温度を避けるようになる。まず始めに、温度勾配において大量の線虫をトラッキングすることで、行動時系列データを取得した。そして、そのデータを逆強化学習法に適用することで、線虫の報酬関数を推定した。その結果、餌を与えて育成した線虫の報酬は、「絶対温度」および「温度の時間微分」の関数になっていることが明らかとなった。一方で、飢餓状態で育成した線虫は「絶対温度」のみに依存した報酬関数を持つことが明らかとなった。さらには、推定された報酬を用いて、線虫行動のシミュレーションを行い、線虫の温度走性行動を再現できることを確認することで、逆強化学習法の妥当性を示した。28年度に開発した逆強化学習法を用いることで、線虫の温度走性における行動戦略を明らかにした。その成果を論文としてまとめ、現在専門学術誌へ投稿中であるが、掲載に時間がかかっている状況である。しかし、その過程で行なった追試によって、手法の妥当性を示すことができた。状況を鑑みて、推定した行動戦略と神経活動データとの比較解析は先送りにしている。

これらの状況を総合して、「2おおむね順調に進展している」と判定した。今年度の研究成果を論文として出版することを目指す。今年度開発した手法を、線虫だけではなく、別の動物の行動データへの適用を行なう。また、同定された行動戦略(報酬関数)から動物の行動をシミュレーションするための手法の開発を目指す。研究成果として論文掲載を目指す。開発した手法を、線虫だけではなく、別の動物の行動データへの適用を目指す。29年度での予備的な結果から、複数の行動モードを切り替える混合戦略の存在をデータから見出している。30年度は当初計画に加えて、混合戦略を扱うことのできる手法の開発を目指す。また当初予定取り、行動戦略と神経活動との比較解析に向けた検討を行なう。現在、自由行動化のマウスの神経活動を計測しているグループと議論を重ねているところである。予定していた国際会議を別の予算で捻出したこと、また計算を既存のクラスター計算機で行ったことにより、次年度使用額が生じた。予定していた国際会議に行かなかったため、また計算を既存のクラスター計算機で行ったことにより、次年度使用額が生じた。次年度は、高性能計算機を購入することで、研究の促進を図る。またあわせて、29年度の成果を海外で広く発表することも検討する。予定していた国際会議に別の予算で行ったため、次年度使用額が生じた。次年度は進行中の研究を論文としてまとめ、出版経費に使用する予定である。学生を研究補助として雇用し、また高性能計算機を購入することで、研究の促進を図る。
時系列外部刺激を用いた分子機能の動的制御

部刺激に対して応答する人工分子を設計・合成し、その挙動について実験・分子シミュレーションによって研究した。以下の成果が得られた。・2つの異なる金属ポルフィリンを末端に持つピンセット型分子の合成法を確立した。・上記の分子について、両端に正負の電荷を導入することに成功した。・上記の分子の溶液中挙動を蛍光発光スペクトルによって解析し、架橋部分の性質によって平均コンフォメーションが異なることを見出した。・外部刺激によるコンフォメーション変化をよりよく観測するための計算機シミュレーションを行い、新たな分子設計を行った。(1)両端にフリーベースポルフィリン・亜鉛ポルフィリンを結合したピンセット型分子の合成を行った。この分子は、ポルフィリンジカルボン酸のモノエステルから出発して、アミド結合生成を逐次的に繰り返すことで合成できた。ピンセットの接合部としては、トリメチレンジアミンを用いた。ポルフィリンの両側に異なる置換基を適切に導入するため、アミノ基の保護基としてBocとZを使い分けて合成を進めた。最後に、両末端の保護基を同時に切断することにより、本研究でターゲットとする両末端に異なる官能基を持つピンセット型分子に誘導することができた。(2)さらに、ピンセットのロッド部分を延長した分子の合成法を確立した。延長部分としてp-ベンズアミドの二量体を採用した。剛直なベンズアミド部分は溶解度が低いため、側鎖を種々検討したところ、10-ウンデセニル基を用いれば十分な溶解度が得られることがわかった。ベンズアミド部の結合生成は、各種縮合剤を比較した結果、BOP-Clが最も優れていることがわかった。この分子の合成では、(1)の分子に比べてカルボン酸の保護基をもう一種類導入する必要が生じたので、2-メチルスルホニルエチル基を保護基として利用した。また、ベンジルエステルの塩基加水分解による脱保護に伴って、ベンズアミド部分の結合が一部切断される副反応が発見されたが、この副反応は、塩基の等量と反応温度・時間を注意深く調整することによって回避できることがわかった。(1)両端にフリーベースポルフィリン・亜鉛ポルフィリンを結合したピンセット型分子について、両端に正負の電荷を導入したものの合成に成功した。この分子はジクロロメタンなどの低極性の溶媒には極めて難溶であるが、一当量の酸を添加することで溶解度が大きく増大した。この挙動は、酸添加前は分子間で正負の電荷を向かい合わせるような形で凝集しており、酸添加によってその凝集が解けたものと解釈することができる。また、中性状態でもジクロロメタンにTHF、アルコールなどの高極性溶媒を添加すると溶解度が高くなり、クーロン力による凝集が弱められたためと考えられる。(2)ピンセットの根元部分の接合部について、トリメチレン・シクロヘキサン-trans-ジイル・キサンテン-1,8-ジイル架橋を用いた3種類の分子を合成し、亜鉛ポルフィリンからフリーベースポルフィリンへの分子内エネルギー移動について調べた。エネルギー移動の効率はキサンテン>トリメチレン>シクロヘキサンの順となり、2つのポルフィリン間の平均距離を反映した結果となった。また、接合部が可動と考えられるトリメチレン架橋体について、両端に電荷を導入する前後のエネルギー移動効率を比較したが、有意な差は見られなかった。これらの分子について計算機シミュレーションを行ったところ、予想に反してトリメチレン架橋の化合物では2つのポルフィリンが対面型に近づく確率が少ないことが示唆された。(3)接合部の運動性をさらに確保するため、3-オキサペンタン-1,5-ジイル、3,6-ジオキサオクタン-1,8-ジイル架橋を用いた分子の合成を行った。(1)両端にフリーベースポルフィリン・亜鉛ポルフィリンを結合したピンセット型分子で、両端に正負の電荷を導入したものについて、吸収・発光スペクトルの測定を行った。試料調製の方法によってスペクトルの変化が観測され、とくに脱水の程度によって大きな変化が見られることがわかった。試料に水が含まれている場合、分子内の正負の電荷に電離した水のイオン(H+, OH-)が対イオンとして存在していることが示唆された。(2)外部電場の引加下でスペクトルを測定するため、2枚の透明電極に試料をはさむ形の特注セルを製作した。実際に試料をはさんで電場を加えたところ、電極間の短絡が問題となったため、高分子の絶縁層を介して試料をはさむことでこの問題を解決した。(3)実測したスペクトルの変化が予想よりも小さかったため、分子設計を再検討した。分子シミュレーションの結果、ポルフィリンに電荷を結合する場所を変えることで、当初目指していた機能がよりよく実現できる可能性が示唆された。当該分子の合成に改めて取り組み、鍵中間体の合成は完了した。

本年度は、異なる接合部を用いたピンセット型分子のエネルギー移動を比較することで、分子の形を評価することができ、また接合部の構造と分子の形の相関についても実験・シミュレーションの両方から一貫性ある結果が得られた。動的挙動の制御には未だ至っていないが、その実現に必要な知見は着実に蓄積できている。24年度が最終年度であるため、記入しない。運動性を十分に確保した接合部を持つ分子を合成し、両端への電荷導入前後での溶液内構造の変化について調べる。また、これらの分子について、外部刺激による動的挙動の制御を行う。外部刺激としては透明電極を介した電圧の印加を用いる。測定媒体として何を使うかが問題であるが、今年度の成果に基づいて、高沸点の塩素系溶媒とグリセリンもしくはポリエチレングリコールの混合物が利用できると考えている。
医療関連感染における制御活動の費用節約効果に関する研究

1.厚生労働省院内感染サーベイランス事業(JANIS)にて収集している病院感染に関するデータと医療行為・診療報酬に関する情報が含まれているDPCデータの両データを統合する方法論を構築し,感染制御方策の向上に資する礎を築いた.2.全国の多施設病院から協力を得て,JANIS/DPC統合データベースを整備し,病院感染発生による追加的医療費および病院感染のリスク因子が明らかになった.また,調査協力病院を対象にしたヒアリング調査を行い,感染対策費用が推計された.本研究は平成23年度に,JANIS(厚生労働省院内感染サーベイランス事業)データおよびDPCデータを提供可能な39病院の協力を得て,2007年2011年の患者個票データを収集した.また,JANISデータとDPCデータを突合させたJANIS/DPC統合データベースを構築した.平成24年度は,前年度に作成したデータベースを用いたデータ解析ならびに調査協力病院を対象にしたベンチマーク分析の結果をフィードバックした.具体的な研究実績は以下の3点である.第1に,手術部位感染が発生することによる追加的医療費を術式別に推定し,国内外の学術誌に掲載した.多施設からなる患者データを用い,患者重症度を精緻に補正した推定は,国内外問わず研究蓄積が乏しく,本研究成果は本邦における感染制御方策の費用効果分析の参照値として活用することができる.第2に,各病院を対象にしたヒアリング調査・質問紙調査を実施し,感染制御活動の実施状況について把握した.また,当該活動を貨幣価値に換算することで,感染制御活動による対策費用を推計した.第3に,手術部位感染発生のパフォーマンスを病院間比較するための標準化感染比の算出方法を検討し,国内外の学術誌に掲載した.当該指標は,感染制御方策の有効性評価に活用することが可能になる.また,感染制御活動の対策費用と標準化感染比の関連性を検討することで,感染制御方策の費用対効果を明らかにすることができると期待される.今後,引き続き研究を重ね,標準化感染比を精緻化することで,医療政策の議論において関心が高まっているpay for reportingへの活用可能性も期待される.1.厚生労働省院内感染サーベイランス事業(JANIS)にて収集している病院感染に関するデータと医療行為・診療報酬に関する情報が含まれているDPCデータの両データを統合する方法論を構築し,感染制御方策の向上に資する礎を築いた.2.全国の多施設病院から協力を得て,JANIS/DPC統合データベースを整備し,病院感染発生による追加的医療費および病院感染のリスク因子が明らかになった.また,調査協力病院を対象にしたヒアリング調査を行い,感染対策費用が推計された.医療関連感染は医療機関にとって日常的な脅威であり,消化器外科においては,およそ67手術症例あたり1症例に手術部位感染が生じている.これを抑制するため,医療機関には感染制御活動の充実が求められている.しかしながら,感染制御活動には多大な費用を要するため,十分な対策を実施するための意思決定が困難な現状がある.本研究は,手術部位感染・カテーテル関連感染・多剤耐性菌感染を対象に,(1)医療関連感染発生による追加的医療費を推定し,(2)院内における感染制御活動を把握し,(3)感染制御活動による医療関連感染の防止効果を検討することを目的としている.研究初年度である平成23年度の研究実績は下記の5点である.第1に,当該研究を実施するための研究体制を形成した.地域性・病床規模・開設者等を考慮した上で調査協力病院を募り,当初計画していた病院数を上回る40病院から研究協力を得た.第2に,感染制御活動を把握するための調査項目について,4病院における感染制御担当者を対象にしたヒアリング調査を実施して表面的妥当性を高めた.調査項目は,感染対策チーム構成,委員会・会合,研修,サーベイランス,ラウンド,ケアバンドル,マニュアル整備,感染対策器材購入に定めた.第3に,調査協力40病院における感染制御担当者を対象にしたインタビュー調査・質問票調査を実施して,感染対策の実施状況を把握した.第4に,症例別の感染サーベイランス結果および医療資源投入量に関するデータを収集し,本研究を遂行するためのデータベースを構築した.第5に,パイロット調査として先行して実施した病院のデータを用いて,消化器系および心臓血管系の手術実施症例を対象に,手術部位感染発生による追加的医療費および手術部位感染のリスク因子を検証し,国内学会において報告した.パイロット研究を通じて,統計解析手法についても検討した.研究計画時に予定していた調査協力病院数は20病院であったが,初年度終了時には40病院程度から調査協力を得ることができた.また,先行して実施したパイロット調査では,8病院を対象に,手術部位感染発生による追加的医療費およびリスク因子を検証し,国内学会において報告することができた.1.データ解析:平成24年度は,初年度に構築したデータベースを用いて,(1)医療関連感染による追加的医療費の推定のためのデータ解析,(2)感染制御活動による対策費用の推計のためのデータ解析,(3)感染制御活動による医療関連感染の防止効果の検証に関するデータ解析,を同時並行的に実施する.2.解析結果のフィードバック:解析結果を調査協力病院にフィードバックし,調査協力病院とのディスカッションを実施する.それにより,実臨床の感覚に即した再解析の必要性の有無を検討する.3.研究成果発表:国内学会において研究成果を発表し,海外誌への論文投稿を行う.1.データ解析:データ解析のための統計ソフトウェアを購入する.2.解析結果のフィードバック:調査協力病院へのフィードバックを行うため,調査協力病院を訪問し解析結果を説明するとともに,報告書等を送付する.報告書作成にあたっては作業者に対する謝金を支払う
協調学習のための能動型データベースシステムの研究

本研究の目的は,コンピュータとネットワークを利用した学習者中心の協調学習を実現するための能動型データベースシステムを開発することである.本研究では,データベースの内容と各学習者の操作履歴情報を有効活用して,協調学習を誘発する適切なアウェアネス情報を生成するための高度な協調能動型データベースを構築した.さらに,協調学習における能動型データベースの可能性を探るため,テキスト型仮想現実環境MOOを利用した協調学習環境と文章構造化技術を利用した協調学習環境の構築を行った.KnowledgeAwareness (KA)は,“知識に気付く"という意味であり,学習者に対して,討論のきっかけとなる知識や他の学習者の行動に気付かせる情報である.KAの目的は,学習者間の討論の誘発であるが,学習者の要・不要に関係なく情報を提供するため,学習の妨げとなることがある.従って,本研究では,学習者の学習状態に応じて,KA情報を提供するFiltering機構を構築した.実験的な評価の結果,本手法が,学習意欲を軽減させることなく,協調学習へのきっかけを適切に与れることが分かった.(2)SGMLを利用した添削作業に基づく協調学習環境学習者と教師が協調しながら行う添削作業を,コンピュータを用いて分散環境で可能とするシステムCoCoAを提案した.また,実験によりCoCoAの学習環境における添削に必要となる添削記号や支援機能を抽出した.その考察結果をもとに,添削文章の交換方式としてCCMLを提案した.さらに,システムを試作し,評価実験を行い,CoCoAとCCMLの有効性を示した.(3)テキスト型仮想現実環境MOOを利用した協調学習環境本研究では,MOOを用いて構築された仮想環境及びそれを利用した協調学習とその実験的な評価を行った.我々は,仮想的な協調学習環境VirsicleとそのグラフィカルユーザインタフェースMooErを構築した.この仮想学習環境は,バーチャルクラスルームとして試用し,試験を含むすべての授業,演習がそこで行われた.半年にわたる実験的な評価の結果,Virsicleは協調学習に適し,学習者の積極的な参加による学習効果の向上が期待できることがわかった.本研究の目的は,コンピュータとネットワークを利用した学習者中心の協調学習を実現するための能動型データベースシステムを開発することである.本研究では,データベースの内容と各学習者の操作履歴情報を有効活用して,協調学習を誘発する適切なアウェアネス情報を生成するための高度な協調能動型データベースを構築した.さらに,協調学習における能動型データベースの可能性を探るため,テキスト型仮想現実環境MOOを利用した協調学習環境と文章構造化技術を利用した協調学習環境の構築を行った.KnowledgeAwareness (KA)は,“知識に気付く"という意味であり,学習者に対して,討論のきっかけとなる知識や他の学習者の行動に気付かせる情報である.KAの目的は,学習者間の討論の誘発であるが,学習者の要・不要に関係なく情報を提供するため,学習の妨げとなることがある.従って,本研究では,学習者の学習状態に応じて,KA情報を提供するFiltering機構を構築した.実験的な評価の結果,本手法が,学習意欲を軽減させることなく,協調学習へのきっかけを適切に与れることが分かった.(2)SGMLを利用した添削作業に基づく協調学習環境学習者と教師が協調しながら行う添削作業を,コンピュータを用いて分散環境で可能とするシステムCoCoAを提案した.また,実験によりCoCoAの学習環境における添削に必要となる添削記号や支援機能を抽出した.その考察結果をもとに,添削文章の交換方式としてCCMLを提案した.さらに,システムを試作し,評価実験を行い,CoCoAとCCMLの有効性を示した.(3)テキスト型仮想現実環境MOOを利用した協調学習環境本研究では,MOOを用いて構築された仮想環境及びそれを利用した協調学習とその実験的な評価を行った.我々は,仮想的な協調学習環境VirsicleとそのグラフィカルユーザインタフェースMooErを構築した.この仮想学習環境は,バーチャルクラスルームとして試用し,試験を含むすべての授業,演習がそこで行われた.半年にわたる実験的な評価の結果,Virsicleは協調学習に適し,学習者の積極的な参加による学習効果の向上が期待できることがわかった.
特殊環状ペプチドを診断ツールとする低侵襲的な腫瘍特性解析法の開発

がん治療を困難にする悪性形質の中でも、転移や薬剤耐性の形質発現は、がん細胞周囲の環境(がん微小環境)が重要であることが知られている。そのため、悪性形質をもたらす微小環境を早期に検出し、腫瘍特性を理解したうえで治療法を選択することは、難治性固形がん治療における理想といえる。肝細胞増殖因子(Hepatocyte Growth Factor: HGF)とその受容体METは、転移・薬剤耐性両者に深く関連する、代表的ながん微小環境形成因子である。本課題では、HGFおよびMETに対し、高い選択親和性を有する特殊環状ペプチドをPETプローブとして応用し、イメージング画像と腫瘍特性を強く関連付けた診断技術を確立することを目的とする。本年度は、(1)薬剤耐性腫瘍の選択的検出、(2)がん微小転移巣の描出、そして(3)転移前ニッチのメージングに着手した。(1)では、分子標的治療薬Gefitinibに感受性のある肺がん細胞株と、同細胞にHGFを強制発現させた細胞を、それぞれ薬剤感受性モデル、耐性獲得モデルとしてマウスへ担がんし、HGF結合性ペプチドを使用してPETイメージングを行った。その結果、薬剤耐性腫瘍へのプローブの選択的集積が認められ、可視化することに成功した。(2)、(3)に関しては、次年度以降に行う実験系の立ち上げとして、免疫組織化学による評価系の妥当性の検証と蛍光プローブによる動物実験の予備検討を行った。昨年度からの継続したテーマであり、本課題において最も重要なプローブ構造の最適化が既に達成されているため、実験モデルの構築に十分な検討時間を設けることができ、おおむね順調に進んでいる。今後は、研究計画に基づき、より臨床病態を反映したモデルを模索・検討し、がん微小環境を対象とした低侵襲診断法の確立を目指す。
単糖代謝阻害剤を標的とした嚢胞性腎疾患群の病態機序解明と薬効の検証

本研究では「糖鎖修飾」に着目して、常染色体優性多発性嚢胞腎(ADPKD)の病態機序を明らかにする。近年のゲノム研究からADPKDにおいて糖鎖合成酵素や単糖代謝酵素の変異が報告され、糖鎖の病態への関与が注目されているが、その機序は未だ不明である。本研究では単糖代謝により生み出される様々な糖鎖分子が連動して細胞増殖を調節するという作業仮説に基づく。特に1糖脂質代謝と2細胞質O-グルコシル化に焦点をあてて、単糖代謝による嚢胞性腎疾患の細胞内シグナル調節機構を明らかにする。本年度は2つのアプローチを並行して進めた。1糖脂質代謝阻害剤(Genz123346)はこれまで糖脂質への影響しか調べられてこなかったが(Natoli, 2010)、共同研究者の石橋らは糖脂質代謝がグルコース代謝とクロスリンクしている可能性を提唱した(石橋ら,JBC,2015)。本年度はその薬効機序を明らかにした。各薬剤を嚢胞腎患者由来遠位尿細管細胞株(W9-12)に添加し、表現型を解析した。結果、Genz123346はグルコース代謝全般を著しく抑制、AMP活性化プロテインキナーゼのリン酸化を亢進した。また糖脂質合成酵素のノックアウト細胞を樹立し、糖脂質が直接的に関与するかどうかを検証した。予想に反して、Genz123346の薬効に糖脂質は関係しておらず、直接的にグルコース代謝を阻害していることが明らかになった。本結果は米国腎臓学会やISN FRONTIERS 2018にて報告、後者ではポスター発表Top 10を受賞した。2細胞質O-グルコシル化はリン酸化修飾と拮抗する翻訳後修飾である。本年度は、共同研究者の長尾らが進めているリン酸化プロテオミクスを共同研究者として推進した。一方、O-GlcNAc化タンパク質の解析に必要なクリックケミストリーによる標識法や阻害剤実験を実施、次年度以降の礎を構築した。本研究は単糖代謝を介した嚢胞性腎疾患の病態機序解明を目指し、1)糖脂質代謝を介した病態悪性化機構、2)O-GlcNAc化の意義解明、3)マンノースアナログの合成と検証、4)トルバプタンとの薬剤併用法の検討を計画している。平成30年度は予定通り1)糖脂質代謝阻害剤Genz123346の薬効機序を解析、2)に必要な基礎検討を完了した。1)ではGenz123346の薬効機序を明らかにするため、メタボローム解析、ATP量やミトコンドリア機能を検討した。またグルコシルセラミド合成酵素(UGCG)をノックアウトした細胞を樹立、糖脂質の寄与を検討し、本薬剤が糖脂質非依存的に細胞増殖を抑えることが示唆された。大出らの報告に基づいて考察すると(Exp Cell Res. 2017)、今回認められた現象はGenz123346が直接的にmTORを阻害していると考えられた。2)では嚢胞腎患者遠位尿細管細胞株やネフロン勞モデルマウスの腎臓から、リン酸化タンパク質を解析した。リン酸化タンパク質の同定数が少なかったことから、新たな細胞内情報伝達経路の発見には至っていない。一方、O-GlcNAc化タンパク質は、O-GlcNAc抗体(CTD110.6)によるウエスタンブロットやO-GlcNAc Enzymatic labeling technologyによる標識法を構築、解析系の構築が完了した。また予備的な結果として、O-GlcNAc化タンパク質の発現量は嚢胞腎で増加すること、さらに尿中に分泌されるO-GlcNAc化タンパク質の存在可能性について興味深い知見が得られつつある。3)と4)は既に6ーアジドマンノースなどの候補化合物を化学合成して検討を開始している。今後は2)O-GlcNAc化の解析を継続する。また3)新たな単糖代謝阻害剤の合成と検証、4)トルバプタンとの併用療法を検討する。2)のO-GlcNAcタンパク質のプロテオミクスは、最高精度の解析能力を持つOrbitrap Fusion ETD (Thermo Fisher Scientific)により行うため、数百個の候補タンパク質が見つかってくることが予想される。この中から、特定のタンパク質の特定の修飾サイトを介した制御機構を証明することは難しい。それゆえ現在見出しつつある稀な尿中に分泌されるO-GlcNAc化タンパク質に焦点を当て、嚢胞腎の早期診断バイオマーカーとしての評価を優先する。嚢胞腎の早期において特定のO-GlcNAc化タンパク質が変化することが証明できれば臨床的に意義はあると考えられる。3)はマンノースに着目して研究を進める。なぜならマンノースは抗腫瘍効果を有し、抗がん剤の化学療法の効果を高めることが最近報告されている(Gonzalez et el. Nature,2018)。マンノース含有食品として、多糖ポリマーであるマンナンを含むコンニャクやアロエなどが挙げられる。それゆえマンノース機能性食品を素材とした食事療法も検討する。以上のように単糖代謝阻害剤やマンノース関連化合物の中から、臨床に早く還元できそうな候補化合物を選択する。将来的には、低用量メトホルミン療法、低用量2-DG療法などを参考にして、トルバプタンと併用するADPKDの補助療法を提唱したい。将来的には本学の臨床研究で得た「段階的トルバプタン導入法」を組み合わせることも想定している。

本研究では「糖鎖修飾」に着目して、常染色体優性多発性嚢胞腎(ADPKD)の病態機序を明らかにする。近年のゲノム研究からADPKDにおいて糖鎖合成酵素や単糖代謝酵素の変異が報告され、糖鎖の病態への関与が注目されているが、その機序は未だ不明である。本研究では単糖代謝により生み出される様々な糖鎖分子が連動して細胞増殖を調節するという作業仮説に基づく。特に1糖脂質代謝と2細胞質O-グルコシル化に焦点をあてて、単糖代謝による嚢胞性腎疾患の細胞内シグナル調節機構を明らかにする。本年度は2つのアプローチを並行して進めた。1糖脂質代謝阻害剤(Genz123346)はこれまで糖脂質への影響しか調べられてこなかったが(Natoli, 2010)、共同研究者の石橋らは糖脂質代謝がグルコース代謝とクロスリンクしている可能性を提唱した(石橋ら,JBC,2015)。本年度はその薬効機序を明らかにした。各薬剤を嚢胞腎患者由来遠位尿細管細胞株(W9-12)に添加し、表現型を解析した。結果、Genz123346はグルコース代謝全般を著しく抑制、AMP活性化プロテインキナーゼのリン酸化を亢進した。また糖脂質合成酵素のノックアウト細胞を樹立し、糖脂質が直接的に関与するかどうかを検証した。予想に反して、Genz123346の薬効に糖脂質は関係しておらず、直接的にグルコース代謝を阻害していることが明らかになった。本結果は米国腎臓学会やISN FRONTIERS 2018にて報告、後者ではポスター発表Top 10を受賞した。2細胞質O-グルコシル化はリン酸化修飾と拮抗する翻訳後修飾である。本年度は、共同研究者の長尾らが進めているリン酸化プロテオミクスを共同研究者として推進した。一方、O-GlcNAc化タンパク質の解析に必要なクリックケミストリーによる標識法や阻害剤実験を実施、次年度以降の礎を構築した。本研究は単糖代謝を介した嚢胞性腎疾患の病態機序解明を目指し、1)糖脂質代謝を介した病態悪性化機構、2)O-GlcNAc化の意義解明、3)マンノースアナログの合成と検証、4)トルバプタンとの薬剤併用法の検討を計画している。平成30年度は予定通り1)糖脂質代謝阻害剤Genz123346の薬効機序を解析、2)に必要な基礎検討を完了した。1)ではGenz123346の薬効機序を明らかにするため、メタボローム解析、ATP量やミトコンドリア機能を検討した。またグルコシルセラミド合成酵素(UGCG)をノックアウトした細胞を樹立、糖脂質の寄与を検討し、本薬剤が糖脂質非依存的に細胞増殖を抑えることが示唆された。大出らの報告に基づいて考察すると(Exp Cell Res. 2017)、今回認められた現象はGenz123346が直接的にmTORを阻害していると考えられた。2)では嚢胞腎患者遠位尿細管細胞株やネフロン勞モデルマウスの腎臓から、リン酸化タンパク質を解析した。リン酸化タンパク質の同定数が少なかったことから、新たな細胞内情報伝達経路の発見には至っていない。一方、O-GlcNAc化タンパク質は、O-GlcNAc抗体(CTD110.6)によるウエスタンブロットやO-GlcNAc Enzymatic labeling technologyによる標識法を構築、解析系の構築が完了した。
漢代における古典の成立と文学の変容

前漢文学と後漢文学との性質の違いについては、従来から指摘されていたが、その理由についてはあまり詳細には検討されていなかった。本研究では、儒学古典の成立を承けて、前漢末の揚雌あたりから、文学作品の創作方法が変質し始め、過去の作品の模倣をふまえた上で独創性を打ち出すようになること、前漢中期の儒学古典の成立が、変質の主要な原因の一つであることを明らかにした。この文学作品の創作法に改変をもたらされたことが、後漢以後の文学ジャンルと作品総数との激増の要因となったことを提示した。すなわち、先行作品の模倣という創作方法の確立が、後漢時期からの文学ジャンルと作品数の激増をもたらし、それが後の二千年になんなんとする中国古典文学の特質、たとえば典故の頻用などの方向付けをしたことを明らかにした。従来こうした現象の説明として、後漢における紙の発明とその普及が指摘されていたが、紙の普及がかかる現象を大いに加淳したことは事実であるにしても、紙の発明以前からこうした現象が見られていたことを考えると、上のような創作方法の確立が、むしろ有力な原因の一つとして上がってこよう。今後の問題として、後漢の他の文人たちを例にして、さらに創作方法について考察を続けていく必要があることを感じる。前漢末の揚雄の作品には、「甘泉賦」「河東賦」「長楊賦」「羽猟賦」等の賦があり、基本的に司馬相如の「子虚賦」「上林賦」の模倣であるといってよい。しかし、形式面において「甘泉賦」をはじめとするいくつかは対話形式を用いておらず、また司馬相如の作品にはあまり見られない三字句で構成される表現があって、激烈さを表すのに効果的に使われている。難解な文字の多用と併せて揚雄のこうした特徴は、相如の作品を継承するとともに、それを超えるべき対象として強く意識するがゆえの、必然的な変革の志向に由来するといえる。「逐貧賦」等には『詩経』をはじめとする儒家の典籍中の語句や表現が、原型に近い形で取り込まれている。これは揚雄と同時代の劉〓や後漢の崔篆の賦にも共通する特徴であり、賦以外の著作にも見られる。その根底には、創作者の身分が宮廷文人から学者的性格をもつものに変わったことと、儒学が古典として確立したこととが存在しよう。この時期は文学史観の形式においても大きな意味をもっている。劉向らの『七略』に代表される図書の分類、目録の学の出現は、儒学の成立と不可分の関係にあり、しかも『史記』太史公自序などの「序」が、歴史的視点から書物等の特質を記述しているのとも共通する。こうした著作に文学史観が見られることはそれを裏付けているし、文学史観の形成を促進したものとしてはさらに、過去の作品の理解の上に立ってその系譜上において作品を書くようになる創作法があげられよう。
牧草蛋白質の有効利用に関する研究

マメ科草および若刈りイネ科草には多量の蛋白質が含まれ、これを反芻家畜の飼料として給与すると過剰の蛋白質が有効に利用されずに排泄されてしまう。したがって、過剰の蛋白質を抽出し、これを單胃家畜の飼料等として有効に利用する方策を検討しようとした。牧草より蛋白質を抽出するためにはこれを圧砕して溶汁し、汁液中の蛋白質を凝固分離することが必要である。この際、蛋白質濃縮物のほか圧搾残渣および蛋白質分離残液が副産するのでこれらの有効利用をはかることも必要である。蛋白濃縮物の抽出に際し、搾汁方法、蛋白質の沈澱方法および沈澱蛋白質の乾燥方法が製品の収量や品質に影響を及ぼす。今回は、加熱処理、酸あるいはアルカリ処理および発酵処理などの蛋白質沈澱法について検討した。その結果、発酵処理では収量が低く製品の栄養価が劣ること、またアルカリ処理によりPH8に調整したのち加熱処理すると製品の収量が高まることが明らかになった。蛋白濃縮物のアミノ酸組織とその利用性については従来多くの研究がなされているが、加熱乾燥は特にリジンの破壊につながることを今回明らかにした。蛋白濃縮物のミネラル合量を測定すると、通常の蛋白飼料に比してかなりのアンバランスがあること、またこれをミネラル添加等により矯正すると濃縮物の利用性が向上することを知った。特にアルファルファより製造した蛋白濃縮物にはサポニンの含量が高く、これをヒナに多給すると発育を阻害する主要な要因になることを知った。さらにこの害作用は、サボニン含量と同量のコレステロールを添加給与することにより完全に除去することができた。これら基礎的研究のほかに実用試験をも行った。例えば、産卵鶏用飼料のダイズ粕を蛋白質濃縮物で蛋白質当たり5%代替しても産卵に影響はなく、卵黄色の発現に有効であった。また子豚用飼料の蛋白源としてかなりの量まで使用できるが、その許容量は子豚の日齢により変化した。
シェーグレン症候群の外分泌腺異常における上皮-間葉転換の意義と新規治療法の開発

ヒトのシェーグレン症候群患者の小唾液腺、皮膚生検組織で免疫組織化学法を行うと、上皮ー間葉転換時に発現が上昇するSnail1、Twist1の発現が上昇していた。シェーグレン症候群モデルマウスでCD209d(DC-SIGN)の発現が涙腺で上昇しており、人のシェーグレン症候群患者でもCD209d(DC-SIGN)陽性の樹状細胞が小唾液腺周囲に増加し、新規治療法のターゲットになる可能性が示唆された。シェーグレン症候群は中高年女性に好発する唾液腺や涙腺など外分泌腺に対する自己免疫疾患であり、口腔内乾燥や乾燥性角結膜炎をひきおこす。また、皮膚症状として皮膚乾燥や環状紅斑を呈することがある。同じ自己免疫疾患である全身性強皮症においてエクリン汗腺細胞が、上皮-間葉転換をおこし、筋線維芽細胞に変化し、病態に関与する可能性をこれまで産業医科大学より発表した(Nakamura M etal,Br J Dermatol 2011)。シェーグレン症候群の小唾液腺や涙腺生検では唾液腺、涙腺周囲のリンパ球浸潤のほかに、線維化をおこしている症例があり、シェーグレン症候群においても小唾液腺、涙腺や汗腺細胞が上皮-間葉転換をおこし、病態形成に関わっているかどうか本研究で明らかにする。平成23年度においては、ヒトのシェーグレン患者の小唾液腺、エクリン汗腺において上皮-間葉転換がおこっているかどうかを検討するために、シェーグレン症候群患者から同意を得られて採取された小唾液腺、皮膚生検組織を上皮-間葉転換時に発現が上昇するSnaill、Twist1に対する抗体を用いて免疫組織化学法を行い、Snaill、Twist1などの蛋白の発現が上昇しているか比較した。その結果、ヒトのシェーグレン患者の線維化をおこしかけている小唾液腺、エクリン汗腺においてSnaill、Twist1が発現していることが明らかになり、ヒトのシェーグレン患者の小唾液腺、エクリン汗腺においても上皮-間葉転換が起こっている可能性が示唆された。シェーグレン症候群は中高年女性に好発する唾液腺や涙腺など外分泌腺に対する自己免疫疾患であり、口腔内乾燥、乾燥性角結膜炎、皮膚乾燥や環状紅斑をひきおこす。シェーグレン症候群の病態形成にどのような蛋白、遺伝子が関わっているかどうか不明な点が多い。本研究においては、平成24年度シェーグレン症候群マウスモデルを用いて、マイクロアレー法でシェーグレン症候群マウスモデル涙腺において発現上昇している遺伝子を検索した。シェーグレン症候群患者の小唾液腺組織においてSnaill、Twist1陽性細胞が認められ、ヒトのシェーグレン症候群においても上皮-間葉転換がおこっている可能性が示唆された。24年度が最終年度であるため、記入しない。マウスにシェーグレン症候群の自己抗体が認識する自己抗原を注射するシェーグレン症候群のマウスモデルを用いて涙腺、唾液腺、皮膚からmicroRNA、mRNAを抽出しマイクロアレイを施行する。このマイクロアレイで候補にあがった遺伝子がコードする蛋白に対する抗体を用いて免疫組織化学染色を行い、ヒトシェーグレン症候群患者やシェーグレン症候群のマウスモデルの上皮-間葉転換時の発現パターンを調べる。さらにマウスモデルに上皮-間葉転換に重要なTGF-β1に対する中和抗体やSnaill siRNAを投与し涙腺、唾液腺の線維化が抑えられるか観察する。
バースト雑音通信路におけるターボ符号の適用に関する研究

高品質かつ高速な通信を行う上で,通信路符号化は大変重要な役割を担っている.現在,大変注目を集めている通信路符号として,ターボ符号がある.ターボ符号は,組織的再帰畳み込み符号器をランダムインターリーバを介し並置した構成から成る符号器から生成される.この符号を適用することで,特にAWGN環境下ではシャノン限界に近い大変優れた通信性能が得られる.また,反復復号アルゴリズムという特徴的な復号法によって,高速な復号が可能である.このように,ターボ符号は大変優れた符号であり,特に,移動体無線通信,電力線通信など劣悪な通信環境でその威力を発揮するものと考えられる.報告者は電力線通信路のような強いバースト雑音環境へのターボ符号の適用を目標とし,それに向けての基礎的検討を行った.その結果,次に挙げる研究成果が得られた.(1)電力線雑音で発生するインパルス性雑音は,ターボ復号の復号性能を著しく劣化させる.そのため,アクセス方式を利用したンパルス性雑音の廻避が有効であることを確認した.(2)ターボ復号で用いる尤度の推定精度と特性の関係について検討した.その結果,正確な雑音推定にともなう尤度推定が,特性改善に大きく寄与することを確認した.高品質かつ高速な通信を行う上で,通信路符号化は大変重要な役割を担っている.現在,大変注目を集めている通信路符号として,ターボ符号がある.ターボ符号は,組織的再帰畳み込み符号器をランダムインターリーバを介し並置した構成から成る符号器から生成される.この符号を適用することで,特にAWGN環境下ではシャノン限界に近い大変優れた通信性能が得られる.また,反復復号アルゴリズムという特徴的な復号法によって,高速な復号が可能である.このように,ターボ符号は大変優れた符号であり,特に,移動体無線通信,電力線通信など劣悪な通信環境でその威力を発揮するものと考えられる.報告者は電力線通信路のような強いバースト雑音環境へのターボ符号の適用を目標とし,それに向けての基礎的検討を行った.その結果,次に挙げる研究成果が得られた.(1)電力線雑音は,商用電源周期に応じて分散が変化する複数のガウス雑音の和でモデル化できる.報告者は,雑音の周期性を考慮に入れて,ターボ符号の反復復号に必要な尤度を導出することで,受信特性を大きく改善できることを確認した.(2)電力線雑音環境下における,ターボ符号化で用いられるランダムインターリーバの最適なサイズについて検討した.報告者は,周期的雑音環境下では,雑音周期および伝送速度と,ランダムインターリーバのサイズとの間の関係が,信号の受信特性に大きな影響を及ぼすことを見出した.そして,電力線通信路ではランダムインターリーバサイズを適当に選択することで,通信性能が改善されることを確認した.高品質かつ高速な通信を行う上で,通信路符号化は大変重要な役割を担っている.現在,大変注目を集めている通信路符号として,ターボ符号がある.ターボ符号は,組織的再帰畳み込み符号器をランダムインターリーバを介し並置した構成から成る符号器から生成される.この符号を適用することで,特にAWGN環境下ではシャノン限界に近い大変優れた通信性能が得られる.また,反復復号アルゴリズムという特徴的な復号法によって,高速な復号が可能である.このように,ターボ符号は大変優れた符号であり,特に,移動体無線通信,電力線通信など劣悪な通信環境でその威力を発揮するものと考えられる.報告者は電力線通信路のような強いバースト雑音環境へのターボ符号の適用を目標とし,それに向けての基礎的検討を行った.その結果,次に挙げる研究成果が得られた.(1)電力線雑音で発生するインパルス性雑音は,ターボ復号の復号性能を著しく劣化させる.そのため,アクセス方式を利用したンパルス性雑音の廻避が有効であることを確認した.(2)ターボ復号で用いる尤度の推定精度と特性の関係について検討した.その結果,正確な雑音推定にともなう尤度推定が,特性改善に大きく寄与することを確認した.
アフリカ熱帯林における人類と類人猿の共存と社会進化

本研究は、熱帯林で進化したと考えられる人類と類人猿の生態、社会の特徴が環境の変化にどう対応しているかを分析し、それが他種と共存することによってどのような影響を受けているかを解明することを目的として実施された。対象としたのはガボン共和国のムカラバ国立公園(低地熱帯雨林)とコンゴ民主共和国のカフジ・ビエガ国立公園(山地林)に同所的に生息するゴリラとチンパンジー、カメルーン共和国とガボン共和国の熱帯雨林に居住するピグミー系狩猟採集民である。各地域で食物の季節変化をモニターしながら、両種類人猿や狩猟採集民の土地利用と遊動様式が食物の変化にどう対応しているかを分析した。その結果、チンパンジーは果実の分布や密度の変化に応じて集まり方や遊動域の大きさを顕著に変化させ、栄養的に安定した採食戦略をとっていることが明らかになった。一方、ゴリラは食物条件によって集団のまとまり方や遊動域の大きさを変えず、社会的に安定した採食戦略をとっていると考えられる。果実や地上性草本の量や分布は低地と高地で大きく異なり、それが両種類人猿の共存関係や社会性に影響している。低地でゴリラが同じ場所を繰り返し利用するのはチンパンジーとの種間競合が働いていることが示唆された。同じ熱帯雨林に居住する狩猟採集民は、食物の分配を原則とした採食戦略を示し、コミュニティ内部で頻繁に移動を繰り返す。このように、本研究によって3属のヒト科は熱帯林の同じような食環境の変化に異なる社会性を発達させてきたことが明らかになり、類人猿と人類の葛藤解決の方法を分析することが急務であると認識するに至った。そこで、最終年度を繰り上げて基盤研究Sとして「資源利用と闘争回避に関する進化人類学的研究」を申請することにした。幸い助成が受けられることになったので、これまでの研究成果も含めて学会やジャーナル等で発表し、新たな課題として取り組んでいく所存である。本研究は、熱帯林で進化したと考えられる人類と類人猿の生態、社会の特徴が環境の変化にどう対応しているかを分析し、それが他種と共存することによってどのような影響を受けているかを明することを目的としている。本年度はガボン共和国のムカラバ国立公園において、代表者と協力者がゴリラとチンパンジーの生態特徴を食物の季節変化をモニターしながら調査した。ゴリラの2群、チンパンジーの1群を識別し、その位置情報をGPSによって記録しながら、それぞれの集団の動きが食物の変化にどう対応しているかを分析している。また、同じ熱帯雨林に居住する狩猟採集民バモンゴの環境認識や移動状況について調査を行った。コンゴ民主共和国のカフジ・ビエガ国立公園では、まだ政治情勢が不穏なために日本から研究者を派遣せず、海外研究協力者がゴリラ、チンパンジー、狩猟採集民バトゥワの調査を実施し、協力者を日本へ招聘して代表者や分担者と共同で資料の分析を行った。その結果、類人猿の各種と狩猟採集民との間に遊動パターンに顕著な違いがあり、それが主要な食物の利用可能性や季節変化に大きな影響を受けていることが明らかになった。これらの結果の中で、とくにゴリラやチンパンジーの食性、集合性、遊動パターンについて共同で論文を執筆し、国際誌に投稿した。来年度にさらに詳しい調査を行って、遊動パターンの年変動や集合性についても類人猿の種間、類人猿と狩猟採集民との間で比較検討していく予定である。

本研究は、熱帯林で進化したと考えられる人類と類人猿の生態、社会の特徴が環境の変化にどう対応しているかを分析し、それが他種と共存することによってどのような影響を受けているかを解明することを目的としている。本年度はガボン共和国のムカラバ国立公園に代表者と協力者を派遣して、ゴリラとチンパンジーの食物の季節変化をモニターしながら、両種類人猿の土地利用について調査した。ゴリラやチンパンジーの集団の位置情報をGPSによって記録しながら、それぞれの集団の動きが食物の変化にどう対応しているかを分析している。本年度はゴリラの1集団の動きを長期にわたって追跡することができ、ゴリラが季節による食物の変動にしたがって利用域をドラスティックにシフトさせていることが明らかになった。また、この地域のゴリラが一度使用したベッドを果実が豊富な時期に再利用していることが判明した。これらの特徴は他の地域に生息するゴリラと対照的で、チンパンジーとも異なることから、果実食のゴリラに特有な行動であると考えられる。さらに、同じ熱帯雨林に居住する狩猟採集民バモンゴの土地利用についても調査を行い、狭い範囲のコミュニティ内部で頻繁に移動を繰り返していることが明らかになった。コンゴ民主共和国のカフジ・ビエガ国立公園では、まだ政治情勢が不穏なために日本から研究者を派遣せず、海外研究協力者がゴリラ、チンパンジー、狩猟採集民バトゥワの調査を実施し、代表者や分担者と共同で資料の分析を行った。これらの結果はすでに共同で論文を執筆し、国際誌に発表したが、来年度にさらに詳しい調査を行って、遊動パターンの年変動や集合性についても類人猿の種間、類人猿と狩猟採集民との間で比較検討していく予定である。本研究は、熱帯林で進化したと考えられる人類と類人猿の生態、社会の特徴が環境の変化にどう対応しているかを分析し、それが他種と同所的に共存することによってどのような影響を受けているかを解明することを目的としている。本年度はガボン共和国のムカラバ国立公園に代表者、分担者、協力者を派遣して、ゴリラとチンパンジーの遊動と食物選択について調査を行った。1集団のゴリラの人付けがかなり進んだため、ほぼ毎日この集団の通跡を記録し、新しい糞を収集することができた。同時に、毎月2回、5本のトランセクトをモニターしてゴリラとチンパンジーの採食する果実のなり具合を記録している。その結果、ゴリラの集団は果実の変動によってまとまり方を変えることはないが、果実の利用可能性によって遊動距離や遊動パターンを大きく変化させることがわかってきた。しかも、葉食傾向の強いマウンテンゴリラと異なり、数種類の果樹は頻繁に繰り返し利用する。これは、果実食のチンパンジーと類似しているが、ゴリラはチンパンジーのように離合集散することはなく、訪問時間が短い。また、主要な果実はゴリラとチンパンジーで食べる時期を分けている。このように、食環境の変動によって、ゴリラが種内や種間の競合を変化させ、それに応じた行動をとっていることが明らかになった。もう一つの調査地コンゴ民主共和国のカフジ国立公園では、政治情勢が不穏なため現地協力者がこれまでの調査を継続しているが、ムカラバほど食環境は変動せず、類人猿の密度も低い。このため、ゴリラもチンパンジーも種内の集団内、集団間の社会交渉によって遊動パターンを大きく変化させていることがわかってきた。両種類人猿の社会関係に影響する生態要因や社会要因が明らかになってきたので、現在これらの成果をまとめて発表する準備を進めている。
敗血症病態における血管内皮細胞の流体力学的病態変化と遺伝子治療の考案

本研究は敗血症ショックにおける状態を流体力学的な面から解析し、敗血症性ショックの新たな治療法を確立することを目的に開始した。本年度は敗血症モデルマウスの作成、ずり応力低下モデルマウスの作成、Green fluorescent protein (GFP)-transgenic (GFP-Tg)マウス骨髄を用いた骨髄移植モデルマウスにおける骨髄細胞浸潤の評価、敗血症モデルマウス・ずり応力低下モデルマウスの評価、及びそれらの組織学的評価・生化学的評価を目標に実験を行った。敗血症モデルマウスの作成およびずり応力低下モデルマウスの作成に関しては、後者を中心に行い、ずり応力低下モデルマウスの確立を確認した(組織学的評価及び骨髄移植モデルマウスを用いた評価を行った)。敗血症モデルマウスに関しては、安定した手順にて行えることを確認した。GFP-Tgマウス骨髄を用いた骨髄移植モデルマウスに対するずり応力低下(頚動脈パーシャルライゲーションモデル及びバンデージモデル)モデル作成については、骨髄由来細胞の内膜下への浸潤を確認することができ、さらにこれらの細胞がCD205に対する蛍光免疫染色にて染色できることを確かめた(すなわちこれらの細胞が骨髄由来の樹状細胞であることが高確率となった)。ずり応力低下モデルマウスに関してはそれぞれ2種類の頚動脈パーシャルライゲーション及びバンデージモデルの評価を行った。それぞれ血管壁におけるずり応力の低下が大きいモデル(すなわち血管壁におけるずり応力が小さいモデル)においてより多くの骨髄由来細胞の浸潤を認めた。ここまで実験を行ったが、研究代表者が学外へ転勤となり実験を終了せざるを得なくなった。実験結果に関しては論文発表に若干データ集積が足りないと判断し論文化を行わなかった。