hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
中性単一成分分子金属の構造と機能

本研究では、共同研究者が[Ni(tmdt)_2] (tmdt=trimethylenetetrathiafulvalenedithiolate)の磁気量子振動の観測に成功し、電子とホールからなる三次元的なフェルミ面の存在を確認した。第一原理擬ポテンシャル法と局所密度近似(LDA)を用いたバンド構造計算によりもとまったFermi面の断面積は、磁気量子振動測定実験の結果と比較し、角度依存性も含め、実験結果を良く再現した。この実験により、この中性単一成分分子が金属であることを実験的に完全に証明することができた。金錯体はニッケル錯体と同様平面四配位である。しかしニッケル錯体と異なり分子全体で奇数電子を1個持つ。拡張型TTF骨格を持つジチオレン金錯体[Au(tmdt)_2]を合成し、その磁化率、ESRを測定した。^1HNMRの測定の結果、反強磁性相転移を示す緩和率の発散と,二次モーメントの急激な立ち上がりが110Kに観測された。電気伝導度測定および第一原理バンド計算からこの単一成分分子は三次元金属で、4KまでFermi面が消えずに残っており、金属的伝導性を示すこと、また三次元Fermi面はa^*/2をnesting vectorとする擬一次元的なFermi面を擁していることがわかった。反強磁性転移温度が高い理由は,詳しい電子状態の計算から、三次元性が強い事によると結論出来た。Ni, Auと同形構造をもつ[Pd(tmdt)_2], [Pt(tmdt)_2]を合成した。[Pt(tmdt)_2]は粉末試料でも4Kまで金属的な伝導度を示す珍しい分子物質である。1)昨年、米国フロリダ州タラハシーの強磁場実験施設を使用し、最初の中性単一成分分子金属[Ni(tmdt)_2]の磁気量子振動の観測に成功し、この物質の電子とホールからなる三次元的なフェルミ面の存在を確認した。本年は共同研究者が第一原理擬ポテンシャル法と局所密度近似(LDA)を用いたバンド構造計算を行い、求められたFermi面の断面積が、磁気量子振動測定実験の結果と比較し、角度依存性も含め実験結果を良く再現することを明らかにした。この実験により、[Ni(tmdt)_2]の電子構造に関する重要な知見が得られ、この中性単一成分分子が金属であることを実験的に完全に証明することができた。2)配位子の硫黄原子を一部セレン原子に置き換え、硫黄原子だけの時に比べ分子間相互作用を大きくし、低温までより大きなフェルミ面を持つ中性単一成分分子金属を合成することを目指し、tmdtのSを一部Seに置き換えた[M(tmstfdt)_2](M=Ni, Au)を合成した。SPrihg-8の放射光を用いたX線粉末回折測定により、硫黄類縁体[M(tmdt)_2](M=Ni, Au)と同形であるという興味深い結果を得た。現在構造解析、物性測定用試料を集積している。3)中心金属原子を磁性原子に置き換えた中性単一成分分子を集積し、金属結晶を構築できれば、転移温度が高い磁性金属となる可能性が期待できる。本年はコバルト原子を導入したTTF型ジチオラト金属錯体[Co(dt)_2]_2を合成し、その構造、物性を調べた。加圧成形試料による伝導度測定で室温で19Scm^<-1>,0.55Kでも室温の1/10の伝導度が得られた。又磁化率は低温までPauli常磁性的であった。構造はCo(dt)2がCo-Sで架橋した二量体構造をなし、コバルトは5個の硫黄原子に配位され、歪んだ四角錐構造をとっていた。バンド計算から三次元金属的なフェルミ面が得られ、期待される[Co(dt)_2]_2の金属的な性質と一致した。

このように、珍しい二量体構造を持つ金属を得ることが出来た。[Au(tmdt)_2]の反強磁性相転移の詳細を検討するため、合成法を改良した。塩基として^nBu_4N・OH、金属源として^nBu_4N・AuCl_4を用いることにより、生成した(^nBu_4N)[Au(tmdt)_2]が分解せず、溶解性が上がり、THFを用いた再結晶が可能となった。再結晶後の(^nBu_4N)[Au(tmdt)_2]の電解酸化により、[Au(tmdt)_2]の小さな単結晶と格段に純度の高い黒色微結晶が得られた。30μmの単結晶のX線構造解析の結果、[Au(tmdt)_2]のAu原子は温度因子が大きく、分子面に対して垂直な方向への大きな熱的振動又は分子面からのずれの可能性が示唆された。高純度の[Au(tmdt)_2]の加圧成形試料の室温伝導度は50S・cm^<-1>で以前の報告の3倍程度の値を示した。2-300Kで様々な磁場(3,5,10,20,30,40,50kOe)下での[Au(tmdt)_2]の多結晶試料の静磁化率の温度依存性を調べた。室温静磁化率は4.2×10^<-4>emu・mol^<-1>で、高温部でほぼ一定で、150K付近から次第に減少し、110K付近で急激な減少を示した。110K以下の静磁化率は5kOe以下および40kOe以上では磁場に依存せず、23kOe付近をスピンフロップ磁場とする反強磁性相転移であることが示唆された。40kOe以上での50-100Kの静磁化率は3.6×10^<-4>emu・mol^<-1>で、高温部と低温部の値から相転移後もFermi面が15%程度残っていることが推測された。^1H NMRでも反強磁性相転移を示すスピン格子緩和率のピークと、二次モーメントの急激な立ち上がりが観測された。試料の質の向上により、[Au(tmdt)_2]の伝導性が上がり、110Kという有機物では例のない高い反強磁性相転移温度が観測された。この[Au(tmdt)_2]は伝導性と磁性を一つの分子が担う初めての分子性金属であることがわかった。分子性結晶[Ni(tmdt)_2]は、単一種の分子のみから構成された最初の金属である。一方[Au(tmdt)_2]は粉末X線構造解析より[Ni(tmdt)_2]と同形の結晶構造を持つが、ニッケル錯体とは異なり分子全体で奇数電子を持つことから、この対を作らない電子の振る舞いが注目されてきた。[Au(tmdt)_2]のこれまでの研究から[Au(tmdt)_2]は110K付近で反強磁性相転移をし、相転移温度以下でのFermi面の存在が磁化率測定、第一原理バンド計算により示唆されてきた。これまでは粉末試料での伝導度測定を行っていたので、この系の金属性についての疑問が残されてきたが、本年は、多結晶試料による測定から、4Kまで金属的伝導度を示すことが明らかとなった。また[Au(tmdt)_2]の高圧下での結晶構造変化をSPring-8の放射光を用いて調べた。ダイアモンドアンビルセルを用いて、Au(tmdt)_2の粉末結晶により波長は0.49998Å、圧力媒体はフロリナートを使用し、10.66GPaまでの圧力下の測定を行った。結晶の各軸の長さは圧力が増すに従いほぼ一様に減少し体積が常圧の76%程度となった。
極限条件下の近藤半導体周辺物質の電磁気的性質

CeNiSnは当初近藤半導体として注目されたが、最近の結晶純良化技術により金属的であることが示された物質である。このことはしかし、なぜ極微量の不純物の存在で金属から半導体になるのか、強相関物質の磁気散乱による抵抗と残留抵抗を今までのように単純に扱って良いのか?というような興味ある新たな問題を提起した。この事を基に、単にフェルミ準位と磁気準位が近く伝導バンドとの相互作用の強いCeNiSnだけでなく、同型のRNiSn型の一連の結晶についても磁気相転移に伴う電磁気的性質、特に磁気モーメントと磁気抵抗との関係に重点をおいて系統的に性質を明らかにすることが重要ではないかと思われ本研究が計画された。実験は多彩な磁気相転移をするTbNiSnとそれとは対照的に単純な磁化過程をしめすGdiSnを中心に行われ実験的に次の結果を得た。1)磁気抵抗は必ずしも磁気モーメントの大きさにに比例せず時には、磁化が増加しても磁気抵抗は大きく減少する。2)しかし磁気相転移とはきわめて密接に関係しており、各磁気相の出現消滅に伴って磁気抵抗はドラステイックに出現・消滅をする。3)磁化過程の温度変化が小さいのに磁気抵抗は大きな磁気抵抗変化をする。4)GdNiSnでは、ごく小さな磁化変化しかしない磁場誘起相転移に対しても大きな磁気抵抗変化を生じる。これらの実験の厳密な理論をバック押した解析は今の所行えないが、それほど厳密ではない(しかし物理的イメージの描きやすい)-電子近似の磁気散乱公式をもとにした、不純物問題の公式を使って解析すると磁気モーメントそのものというより磁気相の安定性に関係して磁気抵抗が大きく寄与し、また磁気相によっては不純物による残留抵抗にも大きな影響を与えているかも知れないという結果となった。これらの問題の本当の解決のためには出来るだけ早い厳密な理論的背景の確立が要求される。
胚性幹細胞を用いた血管形成の研究(vasohibinとPILSAPの関与)

2.アミノペプチダーゼ活性が抑制されたmtPILSAP-EBならびにMock-EBの核蛋白のプロテオーム解析より、前者において発現が有意に抑制されていた蛋白群にpigpenを見出した。Pigpenは、胎児期のangioblast(血管芽細胞)や、増殖期、腫瘍のECの核に強く発現することが報告されている核内封入体cajal/coild body蛋白質の1つである。しかし、この蛋白に関する論文は現在までわずか22報で、その働きに関しては不明な点が多い。Pigpenは、我々が検討したマウスEC株(MS1,MSS31)でも核に発現し、VEGF刺激により発現が促進される。Pigpenの発現をsiRNAにより抑制すると、PILSAP発現抑制の場合と同様にEC、平滑筋ならびに骨格筋細胞への分化が抑制された。さらに、細胞質蛋白であるPILSAPがVEGF刺激により核に移動して、pigpenと結合する事が判明した。また、mtPILSAP-EBでは、核におけるPILSAPとpigpenの結合が有意に抑制されており、VEGFR2陽性細胞の分化・増殖、並びにEBでの血管網の構築に、このpigpenがPILSAPと協同して何らかの役割を果たしている事が強く示唆された。1.我々が見出した血管新生調節因子puromycininsensitive leucyl-specific aminopeptidase(PILSAP)の血管形成における影響を見るため、マウス胚性幹(embryonic stem:ES)細胞株、MG1.19にアミノペプチダーゼ活性を欠くcDNAを導入して変異株(mtPILSAP)を作製した。MG1.19をin vitroの3次元分化系で血管新生促進因子を添加して培養すると、他のマウスES細胞でも報告されているように10日以内に胚葉体内にCD31(PECAM-1)陽性の血管構築が構築された。空ベクターを導入したMockにおいても同等な血管形成がみられた。一方mtPILSAPの場合は、Mockに比し、著名な血管構築の阻害が見られた。PILSAPのアミノペプチダーゼ活性阻害剤であるleucinethiol(LT)処理あるいはPILSAPに対するsiRNA導入でも同様な効果が見られ、PILSAPが血管形成に関与する事が強く示唆された。さらにこの系において血球・血管細胞の遺伝子発現を経時的に観察すると、ES細胞のPILSAPの活性を抑制すると、Flk-1陽性の系列細胞(発生途中一過性に発現するもの含めて)の血球、血管内皮細胞、平滑筋細胞、骨格筋細胞への分化が抑制された。しかし、外胚葉由来細胞の発現には影響を与えなかった。また、分化初期のFlk-1陽性前駆細胞の出現には影響を与えず、それ以降における分化に関与する事が示唆された。(以上の結果は現在リバイス中である。)2.上記1の機序を検討する目的で、培養8日目のmtPILSAP-EBならびにMock-EBの核蛋白をプロテオーム解析したところ、前者において発現が有意に抑制された蛋白が幾つか検出され、そのうちの一つの核蛋白は、血管内皮細胞においてPILSAPと結合する事、その結合は血管新生促進因子VEGFで増強する事が判明した。現在、両者の結合がどのような作用をもたらすのか検討中である。3.我々が発見した血管新生調節因子vasohibin-1,vasohibin-2の血管形成における役割を分析するため、上記ES細胞の3次元分化培養系においてvasohibin-1,vasohibin-2の発現の時間経過を解析した。この発現パターンを元に、発現の時期に合わせてこれら遺伝子の発現を一時的に抑制して、その血管形成における作用を検討する。この目的のためにMG1.19にvasohibin-1 shRNAあるいはvasohibin-2 shRNA発現ベクターと、テトラサイクリンリプレッサー発現ベクターを共発現させた細胞株を作製中である。しかし、発見から現在までこの蛋白に関する英語論文はわずか22報で、その働きに関しては不明な点が多い。

Pigpenは、我々が検討したマウスEC株(MS1,MSS31)でも核に発現し、VEGF刺激により発現が促進される。さらに、細胞質蛋白であるPILSAPがVEGF刺激により核に移動して、pigpenと結合する事が判明した。また、アミノペプチダーゼ活性を欠失したmtPILSAP-EBでは、核におけるPILSAPとpigpenの結合が有意に抑制されており、VEGFR2陽性細胞の分化・増殖、並びにEBでの血管網の構築に、このpigpenがPILSAPと協同して何らかの役割を果たしている事が強く示唆された。
筋形成抑制因子マイオスタチンの機能制御における栄養センサーAMPKの作用

ウシ腰最長筋より高効率で筋管へと分化可能なウシ初代筋芽細胞培養系を確立した。採取した筋芽細胞は、筋芽細胞マーカーMyf5を発現し、分化誘導によって分化マーカーmyogeninを発現した。AMPKを活性化する低グルコース培地で分化誘導したとき分化が抑制され、マイオスタチン(MSTN)発現が減少した。しかし、MSTNレセプターの発現に変化は無かった。AMPKの活性化剤AICARは同様に筋分化を抑制し、MSTN発現を低下させた。また、AICARはMSTNシグナル阻害剤の作用を打ち消した。よって、AMPKはMSTNの作用を調節している可能性が示唆された。マイオスタチン(MSTN)は筋形成を負に制御する因子である。一方、AMP-activated protein kinase(AMPK)はシグナル伝達因子で細胞内のエネルギー状態を感知して活性化し、エネルギー代謝を制御する。本研究ではAMPKシグナルによるMSTN発現と機能の調節について明らかにすることを目的として研究を行った。本年度は研究計画に従い遂行し、以下の新知見が得られた。1.正確な解析を可能にするために筋分化能の高いウシ初代筋芽細胞培養系の調整に成功した。この培養系において通常培地とAMPKを活性化する低グルコース(0.5mM)培地で分化を誘導した。そのとき、筋管形成は低グルコースによって著しく抑制された。また、MSTN mRNA発現は低グルコースによって著しく抑制された。しかし、MSTNのレセプターであるActivin receptor type IIの発現に変化は見られなかった。以上のことから低グルコースによるAMPKの活性化はMSTNの発現調節に関与していることが示唆された。2. AMPK活性化におけるMSTNの細胞内シグナル伝達の変化を解析した。低グルコース培地によってシグナル伝達物質であるSmad2/3の発現とそのリン酸化に大きな変化は見られなかったが、MSTNによるSmad2/3の転写活性化は有意に抑制された。よって、ウシ筋細胞においてAMPKはMSTNシグナル伝達とクロストークしている可能性が示唆された。来年度はさらにAMPK活性化剤などを用いて研究を展開し、MSTN発現・機能に対するAMPKの作用を明らかにする。一方、AMP-activated protein kinase (AMPK)は細胞内エネルギー状態を感知して活性化するシグナル伝達因子である。本研究ではMSTNの発現・機能調節に対するAMPKシグナルの役割について解明することを目的とする。本年度は昨年度に引き続き、研究計画に従い遂行し、以下の新知見が得られた。1.前年度に確立した調整法で得られたウシ初代筋芽筋芽細胞の分化時にAMPKの活性化剤AICARで刺激したところ、対照区と比べ筋芽細胞でのミオシンタンパク質発現が低下し、筋管形成は有意に抑制された。しかし、分化制御因子myogeninのタンパク発現はわずかに上昇していた。このとき、MSTN mRNA発現は著しく低下した。また、分化後の筋管にAICARを添加したどころ、同様にMSTN mRNA発現が低下した。以上のことから、AMPKの活性化は分化を抑制するが分化抑制因子であるMSTN発現は反対に低下することが示された。2.ウシ筋芽細胞におけるMSTN発現抑制の作用を明らかにするため、AMPK活性化時にMSTNで刺激もしくはMSTNの作用を阻害したときの細胞分化について解析した。MSTNとAICARは、ともにウシ筋芽細胞の分化を抑制し、MSTNとAICARを同時に添加したところ単独で刺激するよりさらなる分化の抑制が見られた。一方、MSTNのシグナル阻害物質であるSB431542は分化を促進したが、AICARの存在下では分化促進が見られなかった。以上のことから、AMPKの活性化はMSTN発現制御を介して分化を抑制する可能性が示唆された。
ウシPNLIP DNA多型の検出および和牛脂肪交雑との相関解析

ダイレクトシーケンスによるPNLIP遺伝子多型の検出およびPCR-RFLPによる多型タイピング法の確立を行うことで、rs41648172、rs41648176およびrs41648178 SNPが和牛集団の高脂肪交雑能力牛群と低能力牛群間でアリル頻度が異なることを示した。さらに、相関解析、品種間アリル頻度比較解析および既知脂肪交雑マーカーを同時に取り込んだ相関解析により、rs41648172 SNPが脂肪交雑向上を目指したDNA育種技術に有用なマーカーとなることを明らかにした。脂肪交雑形成能力の異なる個体間のmRNA量の差に基づき、ウシ脂肪交雑原因遺伝子を探索している。これまでに、EDG1遺伝子の+166SNP、TTN遺伝子の-652 SNPおよび未知遺伝子であるMBL1遺伝子の+22220SNPは、黒毛和種牛において脂肪交雑育種価と相関を示し、これら3つの遺伝子は脂肪交雑原因遺伝子の有力な候補になることを示唆してきた。脂肪交雑形成能力が異なる牛間で発現量に差がみられたEDG1、TTN、MBL1以外の20個の位置的機能的候補遺伝子について、新たにSNPを検出し、脂肪交雑育種価との相関解析を行った。20個の遺伝子について、36個のSNPを検出した。これら36個のSNPは、すべて高い脂肪交雑形成能力をもつ黒毛和種の牛群と低い脂肪交雑形成能力をもつホルスタイン種の牛群の間で検出された一塩基多型であった。これらのSNPのうち、RPL27A遺伝子のプロモーター領域に位置する-5354SNPは、黒毛和種種雄牛および優良種雄牛の後代肥育牛において、脂肪交雑育種価に対する遺伝子型効果が5%水準で有意であり、Cアリルに対してTアリルが脂肪交雑に対してプラスの相加的効果をもっていた。また、EDG1については、ルシフェラーゼレポーター遺伝子を用いたプロモーター解析により、+166 SNPが機能的な原因変異である可能性が否定され、黒毛和種牛における脂肪交雑に対して相関を示すプロモーター領域内の新規SNPを発見した。PNLIP遺伝子はウシ脂肪交雑原因遺伝子の位置的機能的候補とみなされている。脂肪交雑形成能力の高い黒毛和種種雄牛群とその能力が低い黒毛和種種雄牛群において、ウシPNLIP遺伝子の12個の一塩基多型(SNPs)のアリル頻度分布を調べた。その結果、5個のSNPsでは多型が検出されなかったが、7個のSNPs(rs41648171,rs41648172,rs41648173,rs41648174,rs41648176,rs41648178,rs42104801)については、2群間でのアリル頻度が有意に異なっていた。また、脂肪交雑についての選抜が行われてきた黒毛和種とそのような選抜が行われていないホルスタイン種との間においても、7個のSNPsのアリル頻度は有意に異なっていた。これらのSNPsの中から、ゲノム上での位置およびアリル頻度の差に基づき3個のSNPs(rs41648172,rs41648176,rs41648178)を選択し、脂肪交雑および皮下脂肪厚の育種価との相関解析を行った。101頭の大分県有黒毛和種種雄牛を用いた相関解析の結果、rs41648172において、脂肪交雑育種価との間で有意に近い相関が検出された。このSNPは皮下脂肪厚育種価に対しては相関が検出されなかった。また、rs41648176およびrs41648178においては、脂肪交雑と皮下脂肪厚の育種価のいずれに対しても相関が観察されなかった。こうして、rs41648172についてホモ型である優良種雄牛の後代の半きょうだい肥育牛367頭を用いて、rs41648172と脂肪交雑および皮下脂肪厚の育種価との相関解析を行った。その結果、脂肪交雑育種価に対しては有意な相関が検出され、皮下脂肪厚育種価に対しては相関が観察されなかった。種雄牛および後代肥育牛の両方において、Cアリルに対してTアリルが脂肪交雑に対してプラスの相加的効果をもっていた。PNLIP遺伝子は、ウシ脂肪交雑原因遺伝子の位置的機能的候補とみなされている。これまでの研究で、PNLIP遺伝子のプロモーター領域に存在するSNPであるrs41648172が、大分県有の黒毛和種種雄牛集団および大分県産の半きょうだい去勢肥育牛集団において、脂肪交雑の育種価と有意な相関を示し、Cアリルに対してTアリルが脂肪交雑に対してプラスの相加的効果をもつことを明らかにしてきた。

rs41648172 SNPのアリル頻度分布を、大分県の黒毛和種種雄牛および肥育牛集団、熊本県の褐毛和種種雄牛集団および肥育牛集団、日本短角種種雄牛集団および肥育牛集団、ホルスタイン種集団、ならびにブラウンスイス種集団において比較検討したところ、脂肪交雑についての選抜が歴史的に行われてきた黒毛和種集団とそのような選抜が行われてこなかった他の4品種との間で有意な差が検出され、黒毛和種ではTアリル頻度が高いという結果が得られた。こうして、rs41648172 SNPは、和牛の脂肪交雑向上を目指した選抜育種における有用な分子マーカーになりうると示唆された。さらに、rs41648172 SNPが肉質形質とともに増体形質に対しても、影響するものか否かを検討するために、当該SNPと増体形質との相関解析を行った。rs41648172 SNPのCアリルをホモ型でもつ優良種雄牛の後代の半きょうだい去勢肥育牛367頭の集団を用いた相関解析の結果、有益Tアリルは増体形質である枝肉重量、一日当たりの増体量、ロース芯面積およびバラ厚を増加させる効果をもつことが明らかにされた。また、Tアリルをホモ型でもつ優良種雄牛の後代半きょうだい肥育牛587頭の集団を用いた解析においても、有益Tアリルは枝肉重量、一日当たりの増体量およびロース芯面積を増加させる効果を有していると判明した。以上の結果より、PNLIPのrs41648172 SNPは和牛DNA育種を行うにあたっての有用なマーカーとなりうることが示唆された。
感情障害におけるセロトニントランスポーター遺伝子変異の解析

双極性障害21例(男性11,女性10)と大うつ病性障害9例(男性6,女性5),健常人30例について,PCR-SSCP(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism)の方法で,セロトニントランスポーター(5-HTT)遺伝子のコーディング領域,第2エキソンから第14エキソンの配列について突然変異を検索した.その結果,電気泳動の条件に何通りか試みてもバンドのシフトは認められず,今回調査した症例には5-HTT遺伝子のコーディング領域に変異をもつものはないと考えられた.1996年に外国の研究グループより,大うつ病性障害の1例で255番目のアミノ酸がロイシンからメチオニンに変わる点突然変異が報告された.現在上記30例を含む症例を用いてこの変異を検索中であるが,まれな変異であることから,5-HTT遺伝子のコーディング領域の変異は感情障害の遺伝的病因にとってあまり重要ではない可能性がある.また,同年に5'プロモーター領域の配列に,反復配列の長さが44塩基だけ異なる2種類の多型がなることが報告された.この報告によると,培養細胞で発現させた場合にプロモーター領域の配列が長いアレルの5-HTT遺伝子は,短いアレルの遺伝子より発現量が多いという.さらに,健常人でのデータとして,プロモーター領域の配列が長いアレルと不安の強い性格傾向との相関も1996年に報告されており,5-HTT遺伝子の発現量が感情障害の病前性格に関与する可能性も示唆される.この変異と感情障害との関連についても現在検索中である.双極性障害21例(男性11,女性10)と大うつ病性障害9例(男性6,女性5),健常人30例について,PCR-SSCP(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism)の方法で,セロトニントランスポーター(5-HTT)遺伝子のコーディング領域,第2エキソンから第14エキソンの配列について突然変異を検索した.その結果,電気泳動の条件に何通りか試みてもバンドのシフトは認められず,今回調査した症例には5-HTT遺伝子のコーディング領域に変異をもつものはないと考えられた.1996年に外国の研究グループより,大うつ病性障害の1例で255番目のアミノ酸がロイシンからメチオニンに変わる点突然変異が報告された.現在上記30例を含む症例を用いてこの変異を検索中であるが,まれな変異であることから,5-HTT遺伝子のコーディング領域の変異は感情障害の遺伝的病因にとってあまり重要ではない可能性がある.また,同年に5'プロモーター領域の配列に,反復配列の長さが44塩基だけ異なる2種類の多型がなることが報告された.この報告によると,培養細胞で発現させた場合にプロモーター領域の配列が長いアレルの5-HTT遺伝子は,短いアレルの遺伝子より発現量が多いという.さらに,健常人でのデータとして,プロモーター領域の配列が長いアレルと不安の強い性格傾向との相関も1996年に報告されており,5-HTT遺伝子の発現量が感情障害の病前性格に関与する可能性も示唆される.この変異と感情障害との関連についても現在検索中である.
CCK Releasing Peptideの精製及びアミノ酸配列の決定

ラットではCCKを介した膵外分泌のfeed back regulationが存在し、それを調節する因子としてtrypsinにsensitiveなCCK-releasing peptide (CCK-RP)の存在が予測されている。本研究は、CCK-RPを分離、精製し、それにより膵外分泌の調節機構を明らかにすることを目的として行われた。初めに、高純度精製に必要な精度の高いCCK分泌活性測定系を確立するため、ラット単離小腸粘膜細胞や小腸腫瘍由来培養CCK分泌細胞であるSTC-1細胞を用いたCCK分泌活性の測定系についての検討を行った。次に、これらの系を用いラットの小腸灌流液よりCCK分泌作用を持つfractionを分離し、CCK-RPの部分精製を試みた。部分精製されたCCK-RPはtrypsinにて処理をすることにより、その活性を失った。また、CCK-RPによるSTC-1細胞のCCK分泌はcalcium依存性であった。以上の結果から、STC-1細胞を用いた系によりCCK-RPの分離、精製が可能と考え、それを試みたが完全な精製には至らなかった。しかし、これらの過程で胆汁酸や脂肪などもCCKの分泌に関与することが明らかになり、脂肪負荷時の膵外分泌に対する胆汁の役割を明らかにする目的でvivoのラットを用いた実験も行った。その結果、胆汁が存在しなくても脂肪負荷によりCCK分泌および膵外分泌は刺激され、脂肪による直接のCCK分泌刺激作用があることが明らかになった。CCKの分泌は種々の因子が複雑に絡み合って調節されており、今後も詳細な検討が必要と考えられた。ラットではCCKを解した膵外分泌のfeed back regulationが存在し、それを調節する因子としてtrypsinにsensitiveなCCK-releasing peptide (CCK-RP)の存在が予測されている。高純度精製に必要な精度の高いCCK分泌活性測定系を確立するため、ラット単離小腸粘膜細胞や小腸腫瘍由来培養CCK分泌細胞であるSTC-1細胞を用いたCCK分泌活性の測定系についての検討を行った。その結果、胆汁が存在しなくても脂肪負荷によりCCK分泌および膵外分泌は刺激され、脂肪による直接CCK分泌刺激作用があることが明らかになった。
訪問看護における別居介護者支援モデルの構築

本研究の目的は、訪問看護における別居介護者への効果的な支援を示した「別居介護者支援モデル」の構築である。第1段階では、別居介護者への支援経験を持つ訪問看護師を対象としたインタビュー調査を行い、別居介護者支援の仮説モデルを作成する。第2段階では、作成した仮説モデルをもとに質問紙を作成し、訪問看護師を対象とした調査により、最終的な別居介護者支援モデルを構築する。第3段階では、モデルで示された訪問看護師の支援と別居介護者の介護負担との関連を検討するため、別居介護者を対象とした質問紙調査を行う。
ガストリノーマ組織株を用いたホルモン異常分泌機構及びインスリン分泌の検討

本研究の目的はこれら、ホルモン異常分泌機構を明らかにすることである。われわれはすでにインスリノーマにおいてカルシウムに対する反応が正常のB細胞と異なることを示し、この反応はカルシウム感受性受容体を介する反応であることを明らかにした。また、ガストリノーマにおいてもカルシウム感受性受容体が発現し、カルシウム負荷にてガストリン分泌が起こることを報告している。一方、膵発生の過程で重要な役割を果たしているPDX-1がガストリノーマにおいても発現していることが分かった。このことは分化の過程で膵ラ島とはガストリノーマに何らかの関係があることが示唆される。また、MEN-1に伴う機能性膵・消化管内分泌腫瘍では複数のホルモンを分泌する腫瘍が多発することが知られており、腫瘍化及びホルモン異常分泌にmenin遺伝子異常の関与も示唆される。すでに散発性ガストリノーマにおいてmeninの異常について報告がなされているが、その役割は明らかではない。我々の施設で経験したガストリノーマについてmeninの異常を調べるとともに臨床的背景との相関について検討を行った。散発性ガストリノーマ組織8/13(61.5%)(P:4/7,D:3/5,M:1/1)にmeninのmutationを認めた。3症例に同一のmutationを認めたmenin mutationの有無と原発巣・肝転移・リンパ節転移の間には明らかな相関は認めなかったが、十二指腸ガストリノーマで、menin mutationの有るものは、単発性の腫瘍の傾向があった。散発性ガストリノーマにおいてもmeninの異常が腫瘍化に関連している可能性が示されたが、その異常と臨床病理学的な関連については今後更なる検討を要する。今回、カルシウム感受性受容体に着目しこの反応が正常B細胞とどのように異なるかについて研究を行い、正常B細胞とインスリノーマ細胞ではカルシウム感受性受容体のシグナル伝達機構が異なっていることを明らかにした。(Pancreas:26(2);2003)一方、正常B細胞ではセクレチンがインスリン分泌促進に働くのに対して、インスリノーマ細胞ではこのような働きがないことが分かっていた。しかし、膵・消化管内分泌腫瘍におけるセクレチン受容体の発現やその役割についてはいまだ不明である。これらの問題に対して、まず、セクレチン受容体の発現について独自に抗体を作製し検討を行った。結果、セクレチン受容体は膵・消化管内分泌腫瘍と正常の膵ラ島、消化管G細胞に発現していることがわかった。また、セクレチン刺激によるインスリノーマおよびガストリノーマからのインスリン分泌にはカルシウム刺激時と同様セカンドメッセンジャーとしてカルシウムが働いていることもわかった。ホルモン分泌機構の分子生物学的検討に関しては、マウスに移植することで樹立したヒト・ガストリノーマ組織株にPDX-1遺伝子がすでに発現していることがわかった。今後は発現量を検討するとともにPDX-1遺伝子の働きについても見当を行う。
保健師を対象とした自然災害に対する教育訓練プログラムの構築

自然災害に対しての保健師、防災担当者の取り組みの現状を把握するため、南海地震を想定した防災対策や予防活動に関して、災害対策基本法に想定されている高知県内市町村の災害対策担当者45名と県内の市町村保健師267名を対象としたアンケート調査の二種類の調査を実施した。アンケート調査は、阪神・淡路大震災や新潟中越地震の教訓や文献県作成のマニュアルを参考にし、さらに、南海地震の際に引き起こされる大津波を想定した上で、市町村の防災対策や保健医療活動、初動体制、それに対応する保健師の予防的活動や事後の保健活動などを質問項目とした。回収されたアンケート票は統計ソフトSPSSを用いて分析した。結果、防災担当者45名、保健師89名より回答を得た。そして本研究より以下の内容が明らかとなった。1、南海地震における防災・災害時の保健師の役割は、健康保健、医療、管理調整の多岐に、かつ災害発生前の静穏期から復興期までの全災害サイクルにわたるという特徴を認めた。2、南海地震における防災・災害時の保健師の役割について、防災担当者は「医療」を、保健師は「健康・保健」を重視する傾向にあった。3、防災・災害時の保健師に想定される役割に関して、保健師自身が役割として考えている項目の自信はは高く、役割として考えていない項目の自信は低かった。またそれらに対しては、学習や研修の希望が多かった。4、南海地震における防災・災害時の保健師の役割について防災担当者と保健師の間の考えには多くの差があり、特に「救急処置」、「負傷者の振り分け」などの災害時の急性期医療に関する分野が保健師に期待される課題であることが示唆された。これらにより、教育プログラムには、防災担当者が保健師に強く期待し、かつ保健師自身が対応する自信の低かった「救急処置」や「負傷者の振り分け」などの急性期医療を重点項目として取り入れることが必要であると考える。
TDT解析を用いた日本人子宮内膜症発症関連遺伝子の解明

申請者はこれまで、子宮内膜症との関連が疑われる多数の遺伝子(TNF-beta、E-cadherin、Transforming growth factor beta1、CYP1B1、tumor necrosis factors-beta、Interleukin-10の特にプロモーター領域)上における遺伝子多型と子宮内膜症発症との関連について、日本人検体を用いて患者対照研究(case control study)を行い、これら遺伝子における多数の遺伝子多型を子宮内膜症患者ならびに正常対照者群において解析してきた。これら遺伝子領域における遺伝子多型の出現頻度を対照群と比較した相関解析を行った。その結果、健常コントロール群と患者群の間にアリル頻度、遺伝子多型分布とも有意な差を認めなかった。子宮内膜症rAFS IV期[重症群]と健常者群との間でも同様に解析を行ったが、有意差を認めなかった。これまでの子宮内膜症に関する研究から、本疾患の遺伝的素因の存在の可能性が報告され、子宮内膜症に関連する複数の遺伝子が相互に干渉して子宮内膜症が発症するという仮説が提唱されている。そこで、子宮内膜症との関連が疑われる複数の遺伝子多型と子宮内膜症発症との関連について、日本人検体を用いて、本疾患原因遺伝子を同定する目的で、患者対照研究(case control study)をまずは行った。日本における子宮内膜症症例ならびに健常者を対象とし、子宮内膜症との関連が予想される複数の遺伝子、TNF-beta、E-cadherin、の遺伝子多型を解析し、その出現頻度を対照群と比較した相関解析を行った。子宮内膜症rAFS IV期[重症群]と健常者群との間でも同じ解析を行ったが、有意な差を認めなかった。出産の高齢化や生活環境の変化により子宮内膜症は近年増加傾向にあるが、その発生機序には不明な点が多い。これまで本疾患に関する研究から、子宮内膜症の遺伝的素因の存在の可能性が報告され、子宮内膜症に関連する複数の遺伝子が相互に干渉して子宮内膜症が発症するという仮説が提唱されている申請者は、子宮内膜症との関連が疑われる複数の遺伝子多型と子宮内膜症発症との関連について、日本人検体を用いて、まずは患者対照研究(case control study)を行い、さらに有意差が認められた遺伝子領域を対象として複数のマイクロさてライトナーカーを設定し、Transmission disequilibrium test(TDT解析)を用いた遺伝疫学的手法を用いて、本疾患原因遺伝子を同定する。日本における子宮内膜症症例ならびに健常者を対象とし、これまでに、TNF-beta、E-cadherinを含む子宮内膜症との関連が予想される複数の遺伝子上の遺伝子多型を解析してきた。これら患者対照研究を進めると同時並行して今後の研究を発展させる目的で、TDT解析に供する患者とその両親の検体を収集し、DNAを抽出保存した。申請者はこれまで、子宮内膜症との関連が疑われる多数の遺伝子(TNF-beta、E-cadherin、Transforming growth factor beta1、CYP1B1、tumor necrosis factors-beta、Interleukin-10の特にプロモーター領域)上における遺伝子多型と子宮内膜症発症との関速について、日本人検体を用いて患者対照研究(case control study)を行い、これら遺伝子における多数の遺伝子多型を子宮内膜症患者ならびに正常対照者群において解析してきた。21年度、E-cadherin上の複数の遺伝子多型を解析する際に、実験手技ならびに結果が安定しないことが判明し、基礎実験の反復に当初想定していた以上の時間を要したが、これを解決した。22度ではこれまでの研究成果の統計学的解析を行い、データの取りまとめを行うと同時に、さらに研究を広く展開する目的で研究対象を同じく婦人科腫瘍である子宮体癌患者に広げ、研究を展開した。
新海洋像：その機能と持続的利用

本領域では、海洋学、水産学、社会科学が連携して海の恵みの持続的利用のための学術基盤を確立することを目的とした。総括班は、領域内融合と成果共有のための会議開催、分野間を横断した班間連携テーマを設定しての共同研究の推進、領域主催航海における観測データの分析・管理のためのデータセンターの設置などにより成果達成を図った。また、国際会議の主催、Web情報開示や講演会などのアウトリーチ活動による成果発信、および海外派遣支援による若手育成を進めた。総括班の役割である領域内の研究推進および運営について、各計画研究班相互の連携およびデータセンターの立ち上げ、若手海外渡航支援、領域外への発信について以下を行った。まず、班連携については、平成24年7月6日8月14日に実施された本領域の研究航海(白鳳丸KH-12-3航海)に項目A01およびA02に属する本班の連携研究者5名が各計画研究班分担者とともに乗船し、各課題の推進に平行して海洋区系確立のための総括班としての重点項目を整理した。また項目A03とA04の計画研究班による合同勉強会の結果と合わせて平成24年9月および平成25年3月に開催した領域全体集会で討議した。外部評価者3名からの助言を加え、領域全体の課題として、1)現時点での知見をもとにした海洋区系のとりまとめ、2)対象とする機能の絞り込み、3)複数の生態系モデルによる各区系の物質循環像の相互比較、4)海洋の価値評価の基本概念の整理、に取り組むことにし、これらに沿って各班の連携を図ることにした。データセンターでは植物プランクトン組成解析のためのフローサイトメトリーの整備、白鳳丸KH-11-10航海(西部北太平洋および東部南太平洋海域)のデータの整備と品質管理、KH-12-3航海からのデータの収集を進めた。若手研究者の海外渡航支援は米国およびベルギー派遣の2件を行った。領域外への発信については、ウェブサイトの立ち上げ、IGBP-IMBER(海洋生物地球化学・生態系統合研究)が平成26年6月に開催予定の研究集会における本領域からのセッションの提案した。また、本領域の国際研究集会を平成25年10月に東京で、同11月にチリのサンチャゴで開催を準備し、実施した。総括班の役割である領域内の研究推進および運営について、各計画研究班相互の連携およびデータセンターの運営、若手海外渡航支援、領域外への発信について以下を行った。班間連携については、本領域主催の研究航海(白鳳丸KH-13-7次航海)を実施して、12月から翌年2月にかけて西経170度線上の赤道から南緯40度にわたる海域において項目A0lおよびA02に属する各計画研究班および関連公募研究班メンバーが研究協力者である大学院生、ポスドクらとともに参加し、各課題に係わる共同研究を実施した。今年度から公募研究班が参加することから、全研究班代表者による総括班会議を7月に実施し、同じく総括班会議を11月、翌年3月に実施した。領域全体集会を11月に開催し、成果の報告と今後の計画を討議した。また、海洋区系確立のための領域勉強会を実施した。また、領域主催の国際シンポジウム「新海洋像:海の機能に関する国際的な評価の現状」を10月に東京において、チリ・サンチャゴにおいて「Food Resources on the Land and the Sea」を11月に開催した。データセンターでは炭素・窒素同位体比を測定するための質量分析計を整備し、これまでに収集した試料の分析を進めた。前年度に引き続き、白鳳丸KH-11-10、KH-12-3、KH-13-7次各航海からのデータの収集と品質管理を進めた。若手研究者の海外渡航支援について、総括班では学際的な渡航目的に重点を置いて行い、北太平洋漁業委員会科学作業部会(カナダ)、国際二酸化炭素会議(中国)、国際学会での成果発表(台湾、韓国、米国)、海洋生態系動態についてのサマープログラム(香港)、共同研究(米国)など合計9名派遣した。成果の社会への公開については、領域ホームページの充実およびサイエンスカフェの実施により進めた。班間連携については、本領域主催の研究航海(白鳳丸KH-14-3次航海)を実施して、平成26年6月から8月の50日間、西経170度線上の赤道からチャクチ海にわたる海域において項目A0lおよびA02に属する各計画研究班および関連公募研究班メンバーが研究協力者である大学院生、ポスドクらとともに参加し、各課題に係わる共同研究を実施した。前年度実施したKH-13-7次航海と合わせて夏季の西経170度線上の南北太平洋縦断観測を終了した。全研究班代表者による総括班会議を11月および翌年3月に実施した。両総括班会議では、中間評価により指摘された課題点を中心に討議を行い、社会科学系分野を中心に研究期間後半の研究計画を確認した。また、海洋区系がほぼ確立されたことから9月13日に長崎大学において公開シンポジウム「持続的な海洋利用のための海洋区系」を開催し、領域内外からも多数の研究者参加を得て討議を加えた。データセンターではこれまでに収集した試料の分析を進めた。

前年度に引き続き、白鳳丸KH-12-3、KH-13-7、KH-14-3次各航海からのデータの収集と品質管理を進めた。若手研究者の海外渡航支援についても引き続き総括班では学際的な渡航目的に重点を置き、生物多様性会議COP12(韓国)、国際学会での成果発表(スペイン、オーストラリア)、海洋生態系動態についてのサマープログラム(上海)、共同研究(米国、台湾、デンマーク)など合計8名派遣した。成果の社会への公開については、領域ホームページの充実を中心に進めた。領域内の研究推進および運営について、各研究計画班相互の連携、データセンターの運営、若手海外渡航支援、領域外への発信から実施した。班間連携として計画研究班A01-2代表者が主席研究員を務める白鳳丸KH-15-4次航海を実施し、項目A01およびA02の各班計画研究班メンバーおよび研究協力者が乗船して黒潮域を中心とした西部北太平洋海域において共同研究を行った。領域全体会議を2015年11月に開催し、成果と今後の計画について討議した。また、各研究班代表者による総括班会議を2015年11月および2016年3月に開催した。総括班会議では、外部評価委員からの指摘事項への対応を中心に議論し、全体として研究の進捗が順調であることを確認するとともに、これまでの研究の進捗を踏まえて、班間横断の研究テーマとして「太平洋における生物生産と栄養塩類の動態」、「安定同位体データベース」を総括班内に立ち上げた。2015年7月に国際シンポジウム「Regional Applications and Nexus of the Ocean Health Index」、同年12月に国際シンポジウム「Developing New Ocean Provinces on Their Biogeochemistry and Ecosystems」を開催した。データセンターでは、前年度に引き続き、これまでに収集した試料の分析とデータの品質管理を行い、KH-15-4次航海の実施を支援した。若手海外渡航支援はこれまでと同様に学際的な渡航目的に重点を置いて、気候変動と海洋生態系に関するサマープログラム(香港)、学会参加(イタリア)、共同研究(ドイツ)などに計5名を派遣した。領域内の活動を、領域ホームページでの一般向け記事の掲載や9月および3月のニュースレターの発行により領域外に発信した。今年度の交付申請書に記載した研究計画は全て順調に遂行した。さらに、項目A01A03の計画研究班が中心となって策定した太平洋の海洋区系について、2015年12月に開催した国際シンポジウムにおいて海洋の生物地球化学分野で世界をリードする研究者らから、他に類例のない研究成果であるとの極めて高い評価を得た。これに関連してFuture Earth事務局長から2016年の国際シンポジウムに領域代表者が招待講演の依頼を受けたが、この点は、海洋学分野ばかりでなく、社会科学的な分野を併せ持つ本領域の研究進捗が国際的に関心を持たれていることを示している。以上から、自己評価としては(1)および(2)の中間にあると判断する。総括班として、各研究計画班相互の連携促進、データセンターの運営、若手海外渡航支援、領域外への発信を実施した。
免疫系の制御による生体恒常性維持システムの解明と疾患の予防・治療基盤の確立

本研究課題は、自然免疫系を基軸とし、生体の恒常性維持のメカニズムを解明し、その変容や破綻がもたらす各種疾患の予防・治療法に向けた分子基盤を確立することを目的としている。これまでの解析において、HMGB1遺伝子欠損がん細胞を作成し皮下移植した際の好中球の遊走について検討したところ、好中球の浸潤が顕著に低下することが判明し、また、腫瘍の大きさも減弱することを明らかにした。HMGB1による好中球の遊走が、炎症を促進し、がんの増大につながっていると考えられた。また、HMGB1の機能を阻害するオリゴ核酸の投与によって腫瘍の大きさが減弱すること、さらに、抗PD-1抗体の投与との併用によって相乗的に腫瘍の増殖が抑制されることが判明した。現在、マウスで得られた結果をもとに、ヒトがん患者でのHMGB1の動態等を解析中である。炎症を促進する新規DAMPs候補分子について、質量解析によって分子を同定し、機能解析を進めている。本分子を欠損させたがん細胞株を作成し、マウスの皮下に移植した際、腫瘍の増殖が親株の細胞と比較して顕著に減弱することを見出した。本分子が炎症を促進し、腫瘍の増大をもたらしているものと考えられた。本分子がどのように炎症を誘導し、腫瘍を増大させているのか、さらに詳細なメカニズムの解析を進めている。また、本分子以外にも免疫応答の制御に関与する複数のDAMP候補分子が得られており、解析を進めている。一方で、高い免疫原性を有するsmall nuclear RNA (snRNA)について、それが抗菌ペプチドと結合することによってTLR7 (toll-like receptor 7)の強力なリガンドとして機能することを明らかにした。現在、SLEなど自己免疫疾患との関わりについて、マウス個体レベルの解析を進めている。また、ヒト自己免疫疾患におけるsnRNAの動態解析を進めている。本研究はこれまでのところ計画に沿って順調に進んでいる。HMGB1による腫瘍増大のメカニズムについては、好中球の遊走に関与し、がんの進展、炎症病態の増悪に寄与している知見が得られている。また、HMGB1を恒常的に細胞外へ放出させる系の構築に成功した。本システムを用いることで、細胞外に放出されたHMGB1がどのように腫瘍の増大に関与するのか、その詳細を明らかにできるものと期待され、研究の取りまとめに向けた土台が整ったと考えられる。また、新規DAMPsの探索において、候補分子のタンパクを同定し、この分子の遺伝子欠損がん細胞株を作成し、マウス皮下に移植したところ、腫瘍の成長が著しく阻害され、腫瘍中の免疫微小環境が大きく変化する現象が見られた。今後、その詳細についての更なる解明が期待される。また、snRNAについてもノックアウトマウス、トランスジェニックマウスの作成を完了しており、解析を進めているところである。さらに、HMGB1やsnRNAを抑制する薬剤の機能解析も進んでいる。またさらに、上記以外の新規のDAMPs候補分子について、知見が得られている状況であり、DAMPsの生理的役割、重要性について、包括的な理解に繋がっていく可能性がある。このように、本年度も含めこれまでの研究によって、新知見が多数得られている状況であり、また遺伝子改変マウスの作成など今後研究を推進していく上での準備も着々と整いつつある。従って、研究の進捗状況は概ね順調に進展していると思われる。今後の研究の推進方策について、基本的には申請時の研究計画に沿って取りまとめに向けた研究を推進する。新展開が見られた際、または技術的困難が生じた場合には、代替法の検討などにより、適宜解決し、研究を推進していく予定である。これまでのところでは検討を進める上で大きな支障は生じていない。また、これまで得られている知見を取りまとめつつ、論文として公表を進めていく予定である。HMGB1については、がん、炎症性病態における好中球遊走のメカニズムについて詳細をさらに追究していく。恒常的に細胞外へHMGB1を放出する系なども有効に活用し、細胞外HMGB1の生理的機能、病態における役割についての解明を進める。炎症促進性の新規DAMPsについて、HMGB1とは異なった分子が複数得られている。それらの中には自然免疫応答の活性化や炎症に関与し、がんの免疫微小環境を調節する分子が含まれていることも明らかとなったことから、今後、その詳細についてさらに解明を進める。また、残りのDMAPs候補分子についても検討を進めていく予定である。snRNAについてはノックアウトマウス、トランスジェニックマウスの作成が完了したことから、マウス個体を用いて、病態モデルにおけるncRNAの役割についての検討を行なっている。引き続きこれらの解析を進める。またHMGB1、snRNAの阻害剤を作成しており、それらの効果について、マウス病態モデルを用いて検討を行う予定である。また、必要に応じ、それら阻害剤の改変体の作成なども検討する。一連の検討を通して、免疫系による恒常性維持システムの解明とその制御法の開発により、疾患の治療基盤の確立を目指していく。本研究は、自然免疫系を基軸として適応免疫系をも視野に入れ、生体の恒常性維持のメカニズムを解明し、その変容や破綻がもたらす各種疾患の予防・治療法に向けた分子基盤を確立することを目的としている。特に、自己由来免疫制御分子、及び、独自に取得した免疫系を干渉する低分子化合物、の二方面からの研究を推進する。本年度において、DAMPsとして知られているHMGB1について解析を行い、HMGB1が炎症時の好中球の遊走に重要であるという知見が得られた。

また、HMGB1の細胞外への放出には、特異的な翻訳後修飾が必要であり、その修飾部位の同定、及び、変異型HMGB1のノックインマウスの作成を開始した。また、炎症を抑制するDAMPsとしてPGE2が放出されることが明らかとなった。PGE2は過剰な免疫応答の活性化を抑制しているものと考えられる一方、このような免疫抑制は、炎症を伴うがんにおいては、がんの増大をもたらすことも明らかとなった。炎症の促進及び抑制の両面の作用によってDAMPsは生体の恒常性維持に寄与しているものと考えられる。さらに、新規DAMPsの候補分子の探索を進めている。また、高い免疫原性を有するncRNAについて、病態における役割について解析するため、ノックアウトマウス、トランスジェニックマウスの作成を行った。腸管の恒常性維持に関与する分子として、SP-Dを同定した。SP-DノックアウトマウスはDSS誘導性腸炎において脆弱性を示す知見を得た。また、Dectin-1について、骨髄移植によるキメラマウスの作成を予定していたが、条件検討に時間がかかり、計画に遅れが生じていたため予算の繰越しを申請した。H28において、移植の条件が決まったことから、検討を実施し、恒常生維持に破綻が生じるかどうか注意深く検討を進めている。これまでのところ本研究計画の解析は順調に進んでいる。本研究計画は便宜的に大別して4つの検討項目に分けられているが、それぞれにおいて、重要な、また次のステップに必要な知見が得られつつある状況である。実際、HMGB1の炎症誘導作用としては、好中球の遊走に関与している知見が得られており、これが炎症の増悪に寄与しているものと考えられる。また、新規DAMPsの探索において、今年度、免疫抑制に関わるDAMPとしてPGE2を同定した。PGE2は過度の炎症誘導を防ぎ、恒常性維持に寄与しているものと思われる。一方で、がんにおいては、免疫応答を抑制してしまうために増大をもたらしてしまうことも見出された。さらに、一連の解析の中で、PGE2によって抑制される炎症促進性DAMPsの存在が示唆された。新規DAMPsの発見につながると期待される。また、我々は免疫応答賦活化DAMPとして、ncRNAを同定しているが、このノックアウトマウス、トランスジェニックマウスを作成しており、順調に完了する予定である。マウス個体レベルでの、炎症病態におけるncRNAの機能について解析できるものと思われる。腸管恒常性の維持においては、SP-DがDSS誘導性腸炎において保護的に機能することが分かり、恐らく腸内細菌の維持に関与しているものと考えられ、今後の発展が期待される。また、Dectin-2遺伝子欠損ではがん細胞の肝臓への転移が増大していることなども判明しており、自然免疫受容体の恒常性維持における役割について知見が得られる可能性がある。上述のように、研究は計画に沿って順調に遂行されており、これまでのところ大きく計画変更を要するような状況は生じていない。本研究から既に恒常性維持に関わる多くの知見が得られており、今後の発展が期待される。
モジュレーション空間とHRT予想の研究

ホログラフィーの研究でノーベル物理学賞を受賞したD.Gabor氏が用いた「Gauss関数の平行移動と変調により生成される関数系を用いて、Fourier級数展開のように関数を展開する」というアイデアに起源をもち、これまで互いに影響し合いながら発展してきた研究テーマである「Modulation空間」と「HRT予想」を調和解析及び実解析的手法を用いて研究する。