hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
エルサルバドルのニアミス症例の検討：妊産婦死亡率削減に向けた新たな戦略の構築

ニアミス症例とは、重篤な産科合併症で死に直面しながら幸いにも生き延びた事例である。本調査は、2015年1月12月にエルサルバドルの国立病院2施設の集中治療室(ICU)に産科合併症で入院した患者のカルテから情報を収集した。産婦人科領域で国内唯一の第三次医療機関である国立女性病院へは608名が、地方の第二次医療機関へは19名が入院し、施設毎の死亡者数は、それぞれ26名と1名だった。また、2016年に国立女性病院ICUに入院経験のある元ニアミス症例30名に、ニアミス状態に至った経緯・経験に関する個別インタビューを行ったところ、要因は妊産婦・医療従事者・医療システム等、多岐に渡っていた。本研究は、エルサルバドルにおける妊産婦死亡率削減に向けた戦略を構築することを目的としている。エルサルバドル政府は、国づくりの指針となる「国家開発5ヵ年計画20142019年」の中で、妊産婦死亡率削減を最重要課題としているがものの、その方策は具体的ではない。本研究では、妊産婦死亡例と同時に、妊産婦死亡の周辺に多数存在する「死に直面しながらも幸いにも生き延びた妊婦・分娩中・産後42日以内の女性(ニアミス症例)」を分析することで、産科医療・ケアの質、保健医療システムの側面から、妊産婦死亡の削減を妨害している要因を探求することを目指している。目的達成のため、以下の3つの調査を実施する。【研究1】2015年に集中治療室に入院した女性を対象とした横断研究、【研究2】集中治療室に入院した経験を持つ女性を対象とした質的研究、【研究3】分娩を取り扱う病院を対象とした横断研究、である。初年度は、ニアミスに関する文献レビューを行い、途上国の妊産婦はニアミス状態となった際、先進国の妊産婦より容易に死に至りやすい現状が明らかとなった。具体的には、アフリカ地域においてニアミス症例5-10名毎に1名の妊産婦死亡が起こるのに対し、欧州では50-100名毎に1名の妊産婦死亡が起きていた。また初年度はエルサルバドルへ2回渡航し、研究の実現に向けて保健省、調査対象施設と協議を重ねながら、【研究1】と【研究3】を実施する施設の選定、横断研究で用いる質問票(日本語・英語・スペイン語)の作成、【研究2】の個別面接で用いる質問項目(3ヵ国語)の作成等を行った。研究プロポーザルはスペイン語で初稿を執筆し、現在はカウンターパートの意見を反映しながら最終版の作成中である平成27年度に実施を予定していた、文献レビュー、研究に対するエルサルバドル側との合意形成、研究で用いる調査票・同意書・調査手順書等の必要書類作成は計画の通りに進んでいた。しかし、研究プロポーザルのエルサルバドル倫理委員会への提出、および現地でのパイロット調査は実施できなかった。当初、2回目のエルサルバドル渡航時(2016年3月)に、現地の倫理委員会に研究プロポーザルを提出することを目標としていたが、エルサルバドルのカウンターパート機関から、研究計画の一部変更(追加)の要望が挙がり、その調整・協議、研究方法等の加筆のため、エルサルバドル渡航期間中に研究プロポーザルと調査手順書の改訂版が完成まで至らなかった経緯がある。しかし、これらの研究計画一部変更は、エルサルバドル側のニーズを反映した、より良い研究計画を作り上げるための前向きな変更であると考えている。本調査は、妊産婦死亡例と、重篤な産科合併所で死に直面しながらも幸いにも生き延びた女性の分析を通じ、世界的な目標である妊産婦死亡削減を妨害している要因を探求することを目的としている。調査対象者は、国内唯一の産婦人科領域の第三次医療機関と、地方の第二次医療機関の2施設で実施した。包含基準は、2015年1月12月に、産科合併症のため集中治療室(ICU)へ入院した女性で、カルテを用いた情報収集は、本調査のために雇用された調査員によって行われた。第三次医療機関においては、データベース上、同期間にICUへの入院登録されている641名中、婦人科疾患や重複登録などを除外し、包含基準を満たした608名のデータを分析した。第二次医療機関においては、登録されている19名全員のデータを分析した。なお、施設毎の死亡者数は、それぞれ26名と1名であり、ICU入院者の死亡割合は2施設合計で4.3%であった。妊産婦死亡例の平均年齢は25歳(17-38歳)、分娩歴の内訳は初産婦9名、経産婦18名(最大6経産)だった。主要死因は敗血症で、約半数が発症していた。産後異常出血と子癇発作はそれぞれ30%の死亡例に認められた。主要な介入は赤血球製剤輸血で、約60%に用いられた。産科的医療介入として重要な子宮全摘術は約10%に施行された。本調査はさらに、2016年に国立女性病院ICUに入院経験のある元ニアミス症例30例を対象に、カウンセリング・スキルのある調査員2名による個別インタビューを実施した。インタビューを通じて、ニアミス状態に至った経緯・経験に関する個別インタビューを行ったところ、妊産婦の知識不足・医療従事者の判断・治療の不適切性、・搬送システムの機能不全等、その原因は多岐に渡っていることが明らかになった。

本調査は、2015年1月12月にエルサルバドルの国立病院2施設の集中治療室(ICU)に産科合併症で入院した患者のカルテから情報を収集した。産婦人科領域で国内唯一の第三次医療機関である国立女性病院へは608名が、地方の第二次医療機関へは19名が入院し、施設毎の死亡者数は、それぞれ26名と1名だった。また、2016年に国立女性病院ICUに入院経験のある元ニアミス症例30名に、ニアミス状態に至った経緯・経験に関する個別インタビューを行ったところ、要因は妊産婦・医療従事者・医療システム等、多岐に渡っていた。エルサルバドル・日本両国の倫理委員会に研究プロポーザルを速やかに提出し、承認されるまでの審査プロセスをフォローする。【研究1】3施設における集中治療室に入院した女性を対象とした横断研究では、計4名の調査員を雇用し、既存の産科診療録から情報を収集する予定である。調査員に対して事前トレーニングや研究者による定期的なモニタリングを通じ、入手するデータの質の確保に努める。【研究2】集中治療室に入院した経験を持つ女性を対象とした質的研究は、退院後の女性を対象に個別面接を行う。面接では、自宅から病院に到着するまでの受診行動や到着時の妊産褥婦の状態に関する聞き取りから、ニアミスに至った社会・文化的背景を調べる。また、病院に到着後どのような対応を受け、どのように感じたかを聞き取ることで、患者の視点からの産科医療・ケアの質、保健医療システムに対する改善点を検討する。なお面接対象者リクルート時に調査協力へのモチベーションが上がるよう、謝礼として石鹸やハンカチ等の粗品を準備する。【研究3】国内の分娩を取り扱う国立病院は29施設あるが、全施設を対象とした横断研究を予定しており、各病院の緊急時の妊産褥婦への対応についての特性と課題を検討する。本調査は保健省としても非常に関心の高い分野であることから、保健省を通じて各施設への調査協力依頼のレターや質問票を送付してもらうことが取り決められた。研究チームは保健省と連携を取りながら、月例で開催される病院長の集会および産科医の定例集会への参加、各施設の個別訪問等を通じて、研究の重要性を説明しながら調査協力を仰ぎ、研究を推進していく予定である。28年度が最終年度であるため、記入しない。母性看護学・助産学28年度が最終年度であるため、記入しない。
FGF-2による歯髄象牙質複合体再生の新展開

今回、我々は歯髄象牙質複合体再生におけるFGF-2応用の可能性を検討するために、ヒト歯髄細胞に対するFGF-2の作用について解析した。その結果、ヒト歯髄細胞を石灰化誘導培地にてFGF-2(10ng/ml)存在、非存在下にて培養後、その培養上清中のアルカリフォスファターゼ(ALPase)活性を測定した。その結果、FGF-2がヒト歯髄細胞のALPase活性を抑制することが明らかとなった。また、ヒト歯髄細胞を石灰化誘導培地にてFGF-2存在、非存在下にて培養後、全RNAを抽出してRT-PCR法を用いて以下のmRNA発現を検索した。その結果、FGF-2は、ヒト歯髄細胞による石灰化関連因子(I型コラーゲン、オステオネクチン、骨シアロタンパク、デンチンマトリックスプロテイン-1、デンチンシアロフォスフォプロテインおよびデコリン、バイグリカン)mRNA発現を抑制した。一方、ラミニンα3鎖mRNA発現を充進したが、フィブロネクチンmRNA発現には影響を及ぼさなかった。さらに、歯髄細胞の遊走活性を調べるために、FGF-2存在、非存在下にて歯髄細胞を培養して無細胞スペースに遊走してきた細胞数を測定した。その結果、FGF-2により歯髄細胞の遊走が促進されることが明らかとなった。また、歯髄細胞表面上のヒアルロン酸レセプターであるCD44分子発現状況をflow cytometerを用いて解析した結果、FGF刺激により歯髄細胞表面上でのCD44分子の発現が上昇することが明らかとなった。今回の結果より、FGF-2はヒト歯髄細胞による細胞外基質産生を調節するとともに歯髄組織の修復過程にとって重要な役割を果たしている可能性が示唆された。FGF-2が歯髄細胞の生物活性に及ぼす影響を検討するために、ヒトの便宜抜歯を行った歯牙から無菌的に摘出した歯髄組織をin vitroにて培養を行いヒト歯髄細胞のライン化を行った。そこで、このヒト歯髄細胞の増殖反応に対するFGF-2の影響について検討するために、24穴プレートにてコンフルエントに達するまで培養したヒト歯髄細胞を可及的に静止期に同期させた後、FGF-2の存在下あるいは非存在下にて培養し、[^3H]-チミジンの取り込み量を指標として増殖活性について検討を行った結果、FGF-2の濃度依存的に歯髄細胞の増殖が促進されることが明らかとなった。また、歯髄細胞の細胞外基質産生に及ぼすFGF-2の影響について検討を行うために、FGF-2の存在あるいは非存在下にて歯髄細胞を培養し、その培養上清中の細胞外基質量をenzyme linked immunosorbent assay(ELISA)法を用いて測定した。また、関連する合成酵素mRNA発現をRT-PCR法を用いて解析した。その結果、FGF-2レセプターとしても知られるヘパラン硫酸産生量ならびにその合成酵素mRNA発現は、FGF-2による影響を受けなかった。しかしながら、ヒアルロン酸量ならびにヒアルロン酸合成酵素-1,2mRNA、さらにはラミニンα3鎖のmRNA発現量はFGF-2により促進された。一方、コラーゲンに関してはI型コラーゲンmRNA発現は抑制されたが、III型コラーゲンmRNAの発現には影響を与えなかった。ヒト歯髄細胞を石灰化誘導培地にてFGF-2(10ng/ml)存在、非存在下にて培養後、その培養上清中のアルカリフォスファターゼ(ALPase)活性を測定した。

その結果、FGF-2は、ヒト歯髄細胞による石灰化関連因子(I型コラーゲン、オステオネクチン、骨シアロタンパク、デンチンマトリックスプロテイン-1、デンチンシアロフォスフォプロテインおよびデコリン、バイグリカン)mRNA発現を抑制した。一方、ラミニンα3鎖mRNA発現を亢進したが、フィブロネクチンmRNA発現には影響を及ぼさなかった。さらに、歯髄細胞の遊走活性を調べるために細胞排除用シリコンゴムシートを静置したガラスボトムディッシュ上で歯髄細胞を培養し、コンフルエントに達した時点でシートを除去して無細胞スペースを作製後、FGF-2存在、非存在下にて引き続き歯髄細胞を培養して無細胞スペースに遊走してきた細胞数を測定した。その結果、FGF-2により歯髄細胞の遊走が促進されることが明らかとなった。また、歯髄細胞表面上のヒアルロン酸レセプターであるCD44分子発現状況をflow cytometerを用いて解析した結果、FGF刺激により歯髄細胞表面上でのCD44分子の発現が上昇することが明らかとなった。今回の結果より、FGF-2はヒト歯髄細胞による細胞外基質産生を調節するとともに歯髄組織の修復過程にとって重要な役割を果たしている可能性が示唆された。
新規RhoGEFによる神経軸索誘導のメカニズム

脊髄損傷、頭部外傷により失われた機能を回復させる有効な治療法はない。中枢神経の再生が困難な理由のひとつとして、軸索伸展阻害因子の存在が挙げられるが、これらの物質のうち幾つかが、神経細胞内にて低分子量Gタンパク質Rhoを活性化することを今までに明らかにしてきた。私はこれまで新規のRho GEF FIRを神経細胞より単離した(Kubo, Yamashita et al., 2002)。この蛋白はRhoGEFdomainならびにFERMdomainを有しており、Rac1の活性化を担っている。FIRは大人の海馬および小脳の神経細胞に豊富に発現しており、神経損傷により発現上昇が認められた。FIRはFERM domainを介して、何らかの細胞膜表面の受容体と付着し、細胞外からのシグナルを伝える役割を持っていると考えられる。本研究ではFIRのシグナル伝達のカスケードを解析する目的で、FIRのFERM domainに結合する蛋白の単離をyeast two hybridを用いて行った。その結果、数種類の候補蛋白のcDNAが得られた。それぞれの蛋白を外来性にHEK293細胞に発現させ、共沈および細胞内局在解析により、両蛋白の結合を確認した。得られた新規蛋白を過剰発現すると、Rac1が細胞内で活性化された。これらの結果により、当該蛋白はFIRに対し促進的に働き、FIRの機能を制御する蛋白であることが明らかになった。一連の研究により当該蛋白の機能を制御することで、中枢神経障害に対する治療が可能になると期待される。現在、機能的連関を解析するために、得られた蛋白を過剰発現した時のRac1の活性化を細胞内で調べている。それにより得られた蛋白がFIRに対して、抑制性に働いているか、活性化しているかが明かになると考えられる。一連の研究により軸索損傷時の新たな再生阻害シグナルの詳細が明らかになると期待される。
施設コンフリクトの全国悉皆調査による実態経年比較分析とマネジメント手法の構築

本研究では、2010年度以降の障害者施設をめぐるコンフリクト発生実態を、全国調査を実施することにより究明する。そして、施設コンフリクト発生率の高い地域と低い地域の外部環境の差異、及び合意形成に至るプロセスを明らかにする。具体的には、精神障害者施設を取り上げ、施設コンフリクトの発生事由について、地域側の要因の関与を明らかにする。2010年に申請者が実施した2000年から2010年までの10年間における施設コンフリクトの実態調査結果との比較検証を行うことにより、直近10年間の動向について分析し、コンフリクト・マネジメント手法の可能性と仲介者の属性や資質、期待される具体的な機能等について解明する。
リーマン及び擬リーマン対称空間への群作用の幾何とリー群上の左不変計量

本研究の目的は対称空間への群作用の幾何とLie群上の左不変計量の幾何を関連づけて研究することである.平成26年度は主にRiemann対称空間への群作用の軌道(等質部分多様体)の幾何について研究を行った.主な研究成果は以下の通りである:(1)複素双曲空間へのpolar作用の軌道に関して研究を行った.具体的には,特異軌道を持たないpolar作用の軌道を分類し,それら軌道の幾何(極小性やRicci soliton性)を調べた.この成果については,既に学術論文として出版されている.(2)対称空間内の全測地的曲面に関して研究を行った.具体的には,「非コンパクト型対称空間内の非平坦全測地的曲面の然るべき合同類の集合」と「非自明な冪零軌道の然るべき共役類の集合」の同型を示し,さらに幾つかの対称空間に対してその全測地的曲面を明示的に分類した.この成果については,現在論文を執筆中である.(3)非コンパクト型対称空間内のLie超曲面(特異軌道を持たない余等質性1作用の軌道)に関して研究を行った.具体的には,対称空間の階数が1の場合に, Ricci solitonとなるLie超曲面を分類した.また,ある階数2対称空間内のRicci soliton Lie超曲面で,(κ,μ)-接触構造と呼ばれる特殊な接触構造をもつ多様体の例を構成した.これらの成果については,現在論文を執筆中である.翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
柔軟なｄ－π共役プラットフォームを有する金属錯体の異方的集積制御に基づく機能創出

申請者は新たにペンタメチレン基を有するtrans-ビス(サリチルアルジミナト)白金錯体が結晶状態でオレンジ色発光を示すのに対し、結晶の周りを流動パラフィンで覆うことで発光色が黄緑色に変化することを見出した。結晶状態での発光特性を制御する方法として結晶構造や結晶サイズを変化させることが一般的に知られているが、本研究ではX線結晶構造解析、発光寿命解析、理論計算により結晶構造や結晶のサイズが変化することなく結晶表面と外場の流動パラフィンが相互作用することで発光特性を制御可能であるということを明らかにした。このような新しい結晶発光特性の制御法の開拓は次世代の発光デバイス創出のための基礎研究として非常に重要であり、分子構造や分子集合様式を変化させずに発光特性を制御できるような材料はデバイスの高い耐久性を実現する潜在的な可能性を秘めている。また、申請者は、長鎖アルキル基を有するtrans-ビス(サリチルアルジミナト)白金錯体がボルテックス気液界面上で分子集合することで樹網状集合体を形成することが明らかにした。粉末X線回折、発光スペクトル、円二色性スペクトルなどからこの樹網状集合体は過去に報告された熱力学的安定晶とも速度論的安定晶とも異なる新たな結晶多形であることが明らかとなり、ボルテックスの方向に依存した超分子キラリティを示すことが明らかとなった。このようなボルテックス気液界面上で特異的な樹網状集合体を形成する例は他になく、新たな分子集合制御法として期待される。また、ボルテックスの方向によって超分子キラリティを誘起することが可能なこの錯体は円偏光発光などのキラル物性への応用可能性を秘めており、今後白金錯体の円偏光発光特性などを調査していく。申請者の研究目標は様々な外部刺激・外部環境によって分子に特異的な異方性集合を誘起し、分子集合体としての新規機能の発現及び機能制御である。本年度はNIMSとの共同研究によって、気液界面上で分子集合させる技術を用いることができた。その手法により、当研究室オリジナルの分子が特異な異方性分子集合を発現することを見出したことにより当初計画していたよりもよりインパクトの大きい分子集合制御が可能になった。NIMSとの共同研究によって、気液界面上で特異な異方性分子集合を発現することに成功したが、まだその集合体の機能性に関して深く探求することはできていない。したがって今後は新たに発見した白金錯体の特異な樹網状集合体の光学特性や分子構造を明らかにすることを目標とする。具体的には、気液界面上で形成した集合体を石英基板に転写することで光学特性を測定することを試み、また同様にx線結晶構造解析によって樹網状の集合体の中で白金錯体がどのような構造を取っており、何が駆動力となってその特異な分子集合体を誘起したのかを明らかにする。【具体的内容】我々が合成した平面型ニッケル錯体は有機溶媒中では自己集合によるゲル化を起こさないのにも関わらず、液晶中では超分子ゲルを形成することを発見した。さらに溶媒として用いた液晶の配向に応じてニッケル錯体の分子集合様式を制御すること目指し、偏光顕微鏡観測、CDスペクトル、走査型電子顕微鏡、粉末X線回折測定などの種々の測定を用いることでニッケル錯体の分子集合様式を確かに制御することに成功した。【意義】有機金属錯体とは金属中心周りに有機配位子を有する化合物のことであり、金属が持つ特異な電子状態と有機物が持つ骨格の可変性を組み合わせてこれまで様々な研究がなされてきた。特に有機合成的な観点から分子デザインを自由に設計できる有機金属錯体は触媒、発光素子、磁性素子などの様々な応用の可能性を秘めている。しかしこれまでに研究されてきた有機金属錯体の多くは単分子としての機能を目指したものであり、金属錯体が集合した状態での機能に関してはまさに最先端の研究である。そこで我々は自在に金属錯体の集合様式を制御することができれば、単分子での分子デザインと集合様式のデザインを複合させることにより今までにない新たな機能性材料を創出できるのではないかと考え、金属錯体の集合様式をコントロールすることを目指した。その中で長鎖アルキル基を有するニッケル錯体が液晶の配向に応じて集合様式を自由に制御することが可能であるということを見出した。この方法では特定のニッケル錯体でしか集合様式の制御を達成できなかったが、今後汎用的に用いることができる金属錯体の集合様式制御法を開発するための大きな一歩になる非常に重要な研究である。また、この研究について国内学会において発表を8件及び国際学会において発表を2件行った。現在、この研究に関する論文を投稿中である。ニッケル錯体のみならず同じ分子構造を有するパラジウム錯体や白金錯体においても同様に液晶によって分子集合様式を制御できるか試したが、うまく液晶ゲルを作ることができなかった。これは研究を発展させる上では残念な結果ではあるが、液晶中でのみニッケル錯体がゲル化するという現象の機構に関してヒントを与えてくれる結果であり、有機配位子による溶媒との相互作用だけでなく金属のもつ電子軌道も分子集合に対して大きな影響を及ぼすことが明らかになった。これらの結果によってニッケル錯体のゲル化に関して詳細なメカニズムを考察することができたので、おおむね順調に進展していると評価した。

結晶状態での発光特性を制御する方法として結晶構造や結晶サイズを変化させることが一般的に知られているが、本研究ではX線結晶構造解析、発光寿命解析、理論計算により結晶構造や結晶のサイズが変化することなく結晶表面と外場の流動パラフィンが相互作用することで発光特性を制御可能であるということを明らかにした。このような新しい結晶発光特性の制御法の開拓は次世代の発光デバイス創出のための基礎研究として非常に重要であり、分子構造や分子集合様式を変化させずに発光特性を制御できるような材料はデバイスの高い耐久性を実現する潜在的な可能性を秘めている。また、申請者は、長鎖アルキル基を有するtrans-ビス(サリチルアルジミナト)白金錯体がボルテックス気液界面上で分子集合することで樹網状集合体を形成することが明らかにした。粉末X線回折、発光スペクトル、円二色性スペクトルなどからこの樹網状集合体は過去に報告された熱力学的安定晶とも速度論的安定晶とも異なる新たな結晶多形であることが明らかとなり、ボルテックスの方向に依存した超分子キラリティを示すことが明らかとなった。このようなボルテックス気液界面上で特異的な樹網状集合体を形成する例は他になく、新たな分子集合制御法として期待される。また、ボルテックスの方向によって超分子キラリティを誘起することが可能なこの錯体は円偏光発光などのキラル物性への応用可能性を秘めており、今後白金錯体の円偏光発光特性などを調査していく。申請者の研究目標は様々な外部刺激・外部環境によって分子に特異的な異方性集合を誘起し、分子集合体としての新規機能の発現及び機能制御である。本年度はNIMSとの共同研究によって、気液界面上で分子集合させる技術を用いることができた。その手法により、当研究室オリジナルの分子が特異な異方性分子集合を発現することを見出したことにより当初計画していたよりもよりインパクトの大きい分子集合制御が可能になった。平面型ニッケル錯体は発光特性も磁性も持たないために、集合様式を制御することに成功してもそれによる新規機能性の創出には適していないということが本年度の研究によって明らかになった。今後は発光特性を有する白金錯体の分子集合様式を液晶によって制御することでこれまでにない付加価値を有する発光材料を創出することを目指す。具体的には、白金錯体の有機配位子骨格に液晶と相性のいい部位と光重合を起こす部位を同時に導入することによって、液晶中で光重合を起こし液晶の配向に応じて様々な構造を実現できる金属錯体高分子を創出し、マクロな構造の違いによって生じる発光特性の変化に関して詳細に研究していく。NIMSとの共同研究によって、気液界面上で特異な異方性分子集合を発現することに成功したが、まだその集合体の機能性に関して深く探求することはできていない。したがって今後は新たに発見した白金錯体の特異な樹網状集合体の光学特性や分子構造を明らかにすることを目標とする。具体的には、気液界面上で形成した集合体を石英基板に転写することで光学特性を測定することを試み、また同様にx線結晶構造解析によって樹網状の集合体の中で白金錯体がどのような構造を取っており、何が駆動力となってその特異な分子集合体を誘起したのかを明らかにする。
南洋地理学の系譜と現代地誌・地域研究への意義

「南洋」とは、第2次大戦前・戦中の日本で、現在の東南アジアからオセアニア島嶼部にかけての地域を指して使われた地域名称であり、当時の日本の地理学者は「南洋」に関する多くの地誌書を著した。本研究の中心的な学術的問いは、次の2つである。1)戦前・戦中の南洋地域を扱った地理学(南洋地理学)が、戦後の地誌・地域研究にどのような影響を与えたのか。そこには、いかなる連続と断絶があるのか。2)現在の日本の地理学が、こうした南洋地理学の系譜から何を学び、その教訓をどのように活かすことができるのか。
骨髄単核球細胞由来新規心筋細胞保護的増殖因子の同定

重症心不全に対する細胞移植治療は、次世代の治療法として期待されている。今回我々は非虚血性拡張型心筋症マウスに対する骨髄単核球細胞移植の効果およびその分子機序を明らかすることを目的と検討を行った。骨髄単核球細胞移植は、短期的な左室収縮能の改善効果を示し、それは、骨髄単核球中の顆粒球系の細胞が分泌する成長ホルモンによる効果であることが明らかとなった。ただ、心不全マウスの骨髄顆粒球の成長ホルモン分泌量は健常マウスに比し有意に低値であることから、臨床応用に向けては、骨髄顆粒球の成長ホルモン分泌制御に関わる分子機序の解明が今後必要と考えられる。今回我々は、複数の拡張型心筋症(DCM)マウスに対し2週間毎に計4回の経静脈的骨髄単核球細胞移植を行い、PBS投与群をコントロールとして、その効果及び機序を検討した。骨髄単核球細胞移植3日目には、コントロールに比して有意な左室短縮率の改善を認めたが(骨髄単核球,0.29±0.01;PBS,0.24±0.04,p<0.05,n=6)、その効果は移植14日目には認めなかった。GFPマウス由来骨髄細胞移植の結果では、移植細胞の大部分は末梢血中に存在しており、その後も心臓への遊走および心筋細胞への分化は認めなかった。骨髄単核球細胞移植により、DCMモデルマウスの心筋細胞に有意な肥大を認めた。次に、骨髄単核球細胞を無血清培地で24時間培養した後に培養上清を回収し、新生仔ラット心筋細胞に添加することにより、心筋細胞の細胞短縮率に有意な改善が確認され、また添加群では非添加群に比して培養心筋細胞の肥大を認めた。骨髄単核球細胞は、種々の1ineage細胞及び未分化な細胞により構成される。そこで、マグネットビーズを用いて各分画を選別した後に培養上清を回収し、心筋細胞への添加による、心筋細胞短縮率効果を比較したところ、顆粒球由来培養上清においてのみ、心筋細胞短縮率の改善が認められたが、リンパ球、赤芽球、未分化細胞由来培養上清では改善しなかった。顆粒球由来培養上清の経静脈的投与により、DCMマウスの左室短縮率は骨髄単核球細胞移植と同等に改善した。以上より、骨髄単核球中の顆粒球には、心筋収縮力を増強する増殖因子の産生能が存在すると考えられたため、顆粒球細胞においてより発現の多い増殖因子の発現をMicroarrayにて解析し、複数個の候補遺伝子を同定した。現在、骨髄単核球細胞移植後の、末梢血中の候補遺伝子の発現をELISAで検討するとともに、候補遺伝子の心筋細胞への直接的効果を検討中である。前年度に我々は、健常マウス由来骨髄単核球細胞中のGr-1陽性細胞(顆粒球系細胞)の培養上清を投与することにより、拡張型心筋症マウスの心機能を改善すること、新生仔ラット心筋細胞への添加により、心筋細胞の収縮率改善効果を確認し、一方この効果は、拡張型心筋症マウスの骨髄由来Gr-1陽性細胞では確認されないことを見出し、健常マウスおよび拡張型心筋症マウスの骨髄Gr-1陽性細胞の遺伝子発現の差異を明らかにすることで、新たな心筋保護的増殖因子を同定することを目的に、DNA microarrayを行い、複数の候補遺伝子を同定した。今年度は、real time PCR、ELISAを行い、Arrayによって得られた候補遺伝子の発現の差異を確認した結果、一種類の候補遺伝子に同定に至った。この遺伝子のリコンビナント蛋白を添加すると、新生仔ラット心筋細胞は、Gr-1陽性細胞培養上清と同様に心筋収縮率の改善効果を示した。一方、Gr-1陽性細胞培養上清による新生仔ラット心筋細胞の収縮率改善効果、及び拡張型心筋症モデルマウスへの経静脈的投与による左室収縮能改善効果は、この候補因子の阻害剤投与により有意に抑制された。さらに拡張型心筋症マウスの末梢血中の蛋白を解析したところ、候補遺伝子の発現は有意に低く、一方候補遺伝子の発現を負に制御することが知られている上流の蛋白の発現が有意に高いことが確認され、拡張型心筋症に伴い心不全を発症することによって、Gr-1陽性細胞からの心筋保護的増殖因子の発現が抑制され、心不全増悪の一因となっている可能性も示唆された。以上より骨髄単核球細胞移植による、拡張型心筋症モデルマウスの心機能を改善効果の一機序として、骨髄由来Gr-1陽性細胞の分泌する特定の因子によるパラクリン効果が示唆された。
膵がん細胞表面に存在する抗原分子の機能解析と早期診断・治療法への応用

申請者らは、バイオ医薬品開発を目指して、ヒト膵がん細胞株MIA PaCa-2を免疫源として、がん細胞表面を認識するマウスモノクローナル抗体を産生する3種類のハイブリドーマを樹立した。なかでも12-13.8は1)ヒトがん組織を用いた免疫組織学的解析でがん細胞表面を特異的に染色し、2)その染色強度は肺がんおよび膵がん患者の予後と相関していた。3)担がんモデルマウスにおいて、同標識抗体の腫瘍部への集積、4)同抗体修飾抗腫瘍薬内包リポソームによる腫瘍増殖抑制効果を有することを確認した。12-13.8の抗原分子を同定する目的で免疫沈降産物のトリプシンおよびトリプシン以外のタンパク質分解酵素を用いた断片化による質量解析を行ったが、抗原の同定には至らなかった。そのため、ヒトタンパク質をコードする16,152の遺伝子を発現させたタンパク質を搭載したプロテインアレイ解析を行い、12-13.8に特異的に反応する候補タンパク質を同定した。その候補上位10種類についてタンパク質を哺乳動物細胞で発現させたところ、1種類の候補遺伝子を導入した細胞溶解液のウエスタンブロット解析で12-13.8に特異的に反応した。さらに、同遺伝子を大腸菌で発現させ、ウエスタンブロット解析したところ同様に反応した。同遺伝子産物は細胞表面で糖鎖修飾を多数受けることが知られており、そのため質量解析で同定できなかったことが判明した。現在、1)同遺伝子産物に対するモノクローナル抗体をさらに作製しており、血液中での遺伝子産物の同定により膵がんをはじめとしたさまざまながんの早期診断および予後診断に応用可能か検討している。今後、2)抗原分子が同定できたことで、膵がん撲滅に向けたバイオ医薬品開発をさらに加速させていく。申請者らは、バイオ医薬品の開発を目指して、ヒト膵がん細胞株MIA PaCa-2を免疫源として、がん細胞表面を認識するマウスモノクローナル抗体を産生する3種類のハイブリドーマを樹立した。モノクローナル抗体12-13.8は、1)線維芽細胞株など正常細胞株では発現を認めず、膵がんや肺がんをはじめ多くのがん腫の細胞株の細胞膜表面を認識した。2)12-13.8抗体を用いたヒト肺がんおよび膵がん組織の免疫組織学的解析したところ、がん組織においてがん細胞を特異的に染色した。さらにその染色強度は肺がんおよび膵がん患者の予後と相関していた。3)島根大学動物実験計画の承認を受け、ヒト膵がん細胞株MIA PaCa-2を接種した担がんモデルマウスを作製した。近赤外線を発するインドシアニングリーンで標識した12-13.8抗体をマウス尾静脈から静注し、48時間後に小動物蛍光イメージングシステムを用いて標識抗体の腫瘍部位への集積性を確認した。4)担がんモデルマウスを用いた12-13.8抗体修飾抗がん剤内包リポソームによる腫瘍増殖抑制効果を確認したところ、抗がん剤(ゲムシタビン)を内包した12-13.8抗体修飾リポソームは、抗体修飾しなかったものやPBS投与群などに比べ、明らかな腫瘍抑制効果を示した。3種類の抗体を用いた免疫沈降産物から質量解析を用いて抗原分子を同定した。モノクローナル抗体4-6.8が認識する表面抗原は上皮成長因子受容体(EGFR)であった。がん細胞におけるEGFRの意義についてはすでに多くの論文が存在しており、本研究でEGFRが新たに同定できたことで本研究の取った戦略は正しかったことが証明された。分子量の異なる細胞表面タンパク質を認識する他の2種類のモノクローナル抗体12-13.8および10-15.1については、さらに解析を進めている。ヒト膵がん細胞株MIA PaCa-2を免疫源として樹立した、がん細胞表面を認識する3種類のマウスモノクローナル抗体を用いた平成28年度に予定している研究内容、1)膵がん細胞膜表面に存在する抗原分子の質量解析による同定、2)抗原分子の機能解析、3)抗体を用いた免疫組織染色および予後解析、および抗体を用いた担がんモデルマウスを用いた治療実験が研究実績の概要に記載したように、順調に進展しているから。□抗原分子を同定する目的で免疫沈降産物の質量解析を行った。1)同抗体に反応しない乳がん細胞株MCF-7をネガティブコントロールとした質量解析で67種類の候補が得られた。さらに分子量(同抗体を用いたウエスタンブロット解析で45 kDa前後に検出)および過去の論文によるがんとの関連性を加味し、Vimentin、5'-nucleotidase(NT5E、あるいはCD73)、CD44、Placental-like alkaline phosphatase(ALPPL2)およびAnnexin A2の5種類を選び抗体を購入し検討した。

次に2)12-13.8とアイソタイプが同じである抗体をネガティブコントロールとした質量解析で、さらにN-myc downstream-regulated gene 3 protein(NDRG3)およびSodium/potassium-transporting ATPase subunit beta-1(ATP1B1)の候補が得られた。抗体を購入し検討したがこれらのタンパク質は抗原ではなかった。さらに同抗体と強く反応する3)肺がん細胞株A549および4)ヒト慢性骨髄性白血病細胞株K562を用いて質量解析をおこなったが、現在のところ抗原の同定には至っていない。同抗体に反応しない乳がん細胞株MCF-7や、同抗体とアイソタイプが同じ抗体などをネガティブコントロールとして、さらにMIA PaCa-2以外で同抗体と強く反応する2種類の細胞の細胞膜分画を用いて同抗体を用いて質量解析後、候補タンパク質の選び出しを行い、人工遺伝子による発現解析、抗体を用いて解析、さらCRISPRを用いたノックアウト解析を行ったが、現在のところまだ12-13.8の抗原同定に至っていないため。申請者らは、バイオ医薬品開発を目指して、ヒト膵がん細胞株MIA PaCa-2を免疫源として、がん細胞表面を認識するマウスモノクローナル抗体を産生する3種類のハイブリドーマを樹立した。なかでも12-13.8は1)ヒトがん組織を用いた免疫組織学的解析でがん細胞表面を特異的に染色し、2)その染色強度は肺がんおよび膵がん患者の予後と相関していた。3)担がんモデルマウスにおいて、同標識抗体の腫瘍部への集積、4)同抗体修飾抗腫瘍薬内包リポソームによる腫瘍増殖抑制効果を有することを確認した。12-13.8の抗原分子を同定する目的で免疫沈降産物のトリプシンおよびトリプシン以外のタンパク質分解酵素を用いた断片化による質量解析を行ったが、抗原の同定には至らなかった。そのため、ヒトタンパク質をコードする16,152の遺伝子を発現させたタンパク質を搭載したプロテインアレイ解析を行い、12-13.8に特異的に反応する候補タンパク質を同定した。その候補上位10種類についてタンパク質を哺乳動物細胞で発現させたところ、1種類の候補遺伝子を導入した細胞溶解液のウエスタンブロット解析で12-13.8に特異的に反応した。さらに、同遺伝子を大腸菌で発現させ、ウエスタンブロット解析したところ同様に反応した。同遺伝子産物は細胞表面で糖鎖修飾を多数受けることが知られており、そのため質量解析で同定できなかったことが判明した。現在、1)同遺伝子産物に対するモノクローナル抗体をさらに作製しており、血液中での遺伝子産物の同定により膵がんをはじめとしたさまざまながんの早期診断および予後診断に応用可能か検討している。今後、2)抗原分子が同定できたことで、膵がん撲滅に向けたバイオ医薬品開発をさらに加速させていく。膵がんの早期診断に向けて、がん組織から血液中に分泌される抗原分子の測定法の開発を行う。膵がん細胞膜表面に出現する抗原分子であれば、膵がん患者の血清中に抗原分子が存在するのではないかと仮定した。血液中の抗原分子を簡便に、かつ高感度で同定するために、サンドイッチ酵素結合免疫吸着法(以下、ELISA)を構築する。そのためにはエピトープの異なる少なくとも2種類の抗体を作製する必要がある。すでに樹立している3種類の抗体の各抗原分子について、分割化した抗原分子の断片を大腸菌で発現させ、まずそれぞれの抗体のエピトープ部位を同定する。
パニック障害における脳構造、生理機能、臨床症状との関連および性差

パニック症の脳基盤を明らかにするため、MRIを用いて脳構造の変化を評価した。また、臨床で認められる性差の脳基盤の評価を行った。さらに、脳構造変化と、症状との関連がつよい自律神経機能や内分泌機能との関連や、臨床症状との関連を探求した。その結果、パニック症では眼窩回を中心として上前頭回や帯状回、上側頭回などに灰白質容積の減少および皮質厚の浅薄化が認められることが判明した。また、女性患者は男性患者と比べ、より広範囲に脳灰白質容積減少が認められることが判明した。生理機能に関しては、健常群とパニック症群では、自律神経機能、内分泌機能ともに有意な差は認められず、脳容積との関連も認められなかった。パニック障害の脳構造、自律神経機能、内分泌機能などの変化を研究し、病態を解明することを目的とした研究を行っている。また、疫学研究で明らかとなっているパニック障害の性差の脳基盤を解明することも目的としている。パニック障害では、体性感覚情報が視床や島回、内側前頭前部領域・帯状回で充分に処理されない結果、扁桃体が過活性に陥り、その情報が遠心性に脳幹や視床下部に伝達され、諸症状が引き起こされると考えられている。我々は、1.5T-MRIで収集した脳画像を解析した結果、健常群と比べ、パニック障害では辺縁系、前頭前野、側頭葉の灰白質容積が減少している事、また、脳幹部位(中脳・橋・延髄)の容積が増加している事を明らかにした。また、大脳深部領域(視床・被殻など)や扁桃体といった脳領域における灰白質容積の変化に性差が認められる事が明らかとなった。更に、視床や辺縁系、前頭前野を連絡する複数の大脳白質にも容積減少が認められる事を解明した。これらの研究成果を国内外の学会で発表した。また、H25年の夏に当院に3T-MRIが導入されたため、MRI脳構造画像のみならず、Diffusion Tensor Imageやfunctional MRIといった新たな脳画像を取得することが可能となったため、これらの撮影方法を確立し、現在新規にリクルートし撮影を開始している。同時に、多機能心電図を用いた自律神経機能、血液検査による内分泌機能のデータの収集を始めている。パニック症の脳構造、自律神経機能、内分泌機能などの変化を研究し、病態を解明することを目的とした研究を行っている。また、疫学調査により明らかとなっているパニック症の性差の脳基盤を解明することも目的としている。パニック症では、体性感覚情報が視床や島回、内側前頭前野・帯状回で十分に処理されない結果、扁桃体が過活性に陥り、その情報が遠心性に脳幹や視床下部に伝達され、諸症状が引き起こされると考えている。我々はこれまでに1.5T-MRIで収集した脳画像を用いて、これらの脳領域における灰白質容積の異常が認められること、また、これらの脳領域を連絡する複数の白質領域にも容積異常が認められることを発見し、学会・論文報告を行った。H26年度からは当院に導入された3T-MRIを用いて、Diffusion Tensor Imagneやfunctional MRIといった新たな脳画像の取得が可能となったため、データの収集を進めている。同時に、多機能心電図を用いた自律神経機能の評価、血液検査での内分泌機能の評価をすすめている。現在までに、パニック症10例、健常者5例のMRI及び血液検査、生理機能検査のデータを収集した。検査途中に関してはパニック症2例、健常者5例であり、順次データを取得してゆく。この15例に関しては、診断をブラインドとして、Diffusion tensor imaging研究においてターゲットとする白質領域(帯状束、脳梁、脳弓など)に関してTractgraphyの方法を用いて解析を進めている。また、自律神経機能や内分泌機能に関しても、測定結果を得ている。また、疫学調査により明らかになっているパニック症の性差の脳基盤を解明することも目的としている。パニック症では体性感覚情報が視床や島回、内側前頭前野・帯状回で充分に処理されないまま扁桃体に伝わり、結果、扁桃体が過活性に陥るが、その過活性に陥った扁桃体からの過度な情報が遠心性に脳幹や視床下部に伝わり、パニック症の諸症状が引き起こされると考えられている。我々はこれまでに1.5TーMRIで収集したデータを解析し、パニック症では、上述の脳領域の脳灰白質や、それらの脳領域を連絡する脳白質の容積に変化が認められる事を発見し、学会・論文発表してきた。H26年度から当院に導入された3T-MRIでもデータを収集している。また、同時に多機能心電図計を用いた自律神経機能や血液検査での内分泌機能の評価も進めている。現在までにパニック症16例、健常者13例のデータを習得している。これらのデータの解析もすすめており、パニック症では脳幹延髄の白質の構造に変化が認められる事や、先行研究では容積変化が認められないとされてきた海馬においても小区域に分けた解析では、パニック症においてCA2-3領域に容積減少が認められる事を見出し、第8回日本不安症学会で発表した。後者に関しては、若手優秀賞を受賞した。また、これまでの研究成果をセロトニン研究会で報告した。1.5Tー

MRIに関しては、MRI装置のコイルが変わったため、これまでのデータと新規のデータを同様に解析処理することは出来なくなった。3T-MRIに関しては、セットアップに時間を要したが、昨年度は比較的順調にデータを収集することができ、解析結果を学会で発表することもできた。それ以前の遅れを挽回すべく、データの収集にまい進している。パニック症の脳構造、自律神経機能、内分泌機能などの変化を研究し、病態を解明することを目的とした研究を行っている。パニック症の脳病態には扁桃体や海馬、帯状回や島回といった脳領域の関与が考えられている。1.5T-MRIデータを用いた解析ではパニック症においてこれらの脳領域を連絡する白質容積に変化が認められることを見出し、論文報告を行った。また、容積変化が認めないとされていた海馬に関しても、亜区域に分けた解析を行ったところ、右海馬のCA4/5領域に容積減少が認められることを発見し、日本不安症学会で報告した。また、前頭葉眼窩皮質や後頭葉の皮質の厚みが薄くなっていることを発見した。さらに、扁桃体や海馬、側坐核や尾状核、視床などの皮質下脳領域において、それらの形状に群間差が認められることを見出した。H26年度より当院に導入された3T-MRIを用いた研究に関しては、21例のパニック症、19例の健常群から脳画像データを収集するとともに、自律神経機能や内分泌機能のデータも収集した。1.5T-MRIデータと同様であり、パニック症において前部帯状回や前頭葉眼窩面において有意な灰白質容積の減少が認められた。また、これらと不安尺度やパニック症の重症度との関連が認められることが判明した。自律神経機能は交感神経機能副交感神経機能とを評価したが、パニック症と健常群ではとくに群間差は認められなかった。また、脳容積との関連も認められなかった。内分泌機能検査に関しても同様であり、パニック症と健常群での群間差は認められず、内分泌機能と脳構造との関連も認められなかった。パニック症の脳基盤を明らかにするため、MRIを用いて脳構造の変化を評価した。また、臨床で認められる性差の脳基盤の評価を行った。さらに、脳構造変化と、症状との関連がつよい自律神経機能や内分泌機能との関連や、臨床症状との関連を探求した。その結果、パニック症では眼窩回を中心として上前頭回や帯状回、上側頭回などに灰白質容積の減少および皮質厚の浅薄化が認められることが判明した。また、女性患者は男性患者と比べ、より広範囲に脳灰白質容積減少が認められることが判明した。生理機能に関しては、健常群とパニック症群では、自律神経機能、内分泌機能ともに有意な差は認められず、脳容積との関連も認められなかった。一昨年前に1.5T-MRI装置のコイルが変わったため、これまでのMRI画像を利用できなくなり、新規にデータを収集しなくてはならなくなった。3T-MRI装置を用いた研究では撮像条件の設定に時間を要した。現在、遅れを取り戻すべくデータ収集に邁進しているが、MRIの予約が2-3か月間後になるなど、時間を要している。電子カルテを用いて、外来・入院患者をチェックし、パニック症患者の受診状況を把握した結果、本年度は比較的順調にデータを収集することが可能であった。今後も同様の方法を用いて収集してゆく。また、研究者が2名増えたため、データを収集することのできる曜日も増え、私が火曜日・木曜日の担当、もう一人が月曜日と金曜日の担当、もう一人が水曜日の担当と割り振ることができた。
パルプ漂白の工程水中に蓄積する物質の性況の解析とその除去法の開発

漂白工程で溶出する有機物の分析法について、熱分解ガスクロマトグラフィー(GC)を用いる手法を検討した。まず、漂白由来の物質のモデルとして、次のものを調製した。塩素化リグニンA:塩素化パルプから含水ジオキサンで抽出した物質、塩素化リグニンB:塩素化パルプから温アルカリで抽出した物質、酸化リグニンA:単離した未漂白パルプ残存リグニンをアルカリ性酸素酸化して得た物質、酸化リグニンB:単離した未漂白パルプ残存リグニンをオゾン酸化して得た物質これらの試料を落下型の熱分解装置(SHIMADZU、PYR-4A)を装着した質量分析計付ガスクロマトグラフ(SHIMADZU、GC-17A+QP5000)で分析した。得られた熱分解生成物(数百種類)のマススペクトルをマスライブラリーに登録し、これらを用いて各試料間の相互の比較を行うとともに、実際の漂白排液中の成分の分析を行う際の標準マスライブラリーとした。MWL、残存リグニンの熱分解生成物の大部分は芳香核構造を持つものであるのに対し、酸化リグニンA、Bの成分解生成物の主要ピークはほとんどが、アルカン構造を有するものであった。また、酸化を軽度に抑えた場合、芳香核構造を有するものとアルカン構造を有するものの両タイプの熱分解生成物が観測され、この両タイプの比は、酸化の程度を反映していることが示唆された。塩素化リグニンA,Bのパイログラム酸化リグニンA,Bと共通するアルカン構造が主要ピークとして見られた。塩素化芳香核構造を有する熱分解生成物の存在は、他の酸化リグニンに見られない、塩素化リグニンに固有な特徴であった。このように、アルカン構造を有する熱分解生成物を見出すことによって、パルプ漂白由来の高分子成分の熱分解GC法による分析が確立され、従来得られていなかった全く新しい重要な知見を得ることが可能になった。
腎機能マーカーを用いた口腔機能低下症スクリーニング法の開発

口腔機能低下症の診断には、専用の機器や診断に習熟したスタッフが必要であり、プライマリケアレベルで日常的に行うことは難しく、スクリーニングとして有用な簡便な指標の開発が望まれる。本研究は、腎機能マーカーである血清クレアチニンと血清シスタチンCを用いて、血清クレアチニン/血清シスタチンC比が口腔機能低下症、あるいはその下位症状と関連するかを明らかにすることにより、プライマリケアレベルで実施可能な口腔機能低下症のスクリーニング法を開発することを目的とする。本研究で得られる知見は、口腔機能低下症患者の早期発見、早期介入に資するものと考えられる。
太陽系惑星大気の観測的研究―飛翔体搭載に向けた極端紫外分光器の開発―

本年度は2013年打ち上げの小型科学衛星に搭載する極端紫外分光撮像機のフライトモデルの校正試験に着手した。具体的には可視光源やアライメントミラー、集光鏡等を用いて主鏡と分光器のアライメントを調整した。さらに極端紫外光源を新規作成し、スペクトルを取得するまでに至った。このスペクトルから観測器全体の波長・空間分解能を導出し、有意な科学観測が行えることを確認した。このように光学系の校正方法を確立したことにより、今後行われる環境試験(振動・衝撃・熱真空等)の前後にアライメントの変化の有無を確認することが容易に行える。光検出に用いるマイクロチャンネルプレートとレジスティブアノードという軽量かつ単純な仕組みの2次元検出器に、電位勾配の調整やノイズ軽減等の工夫を施すことで従来よりも2倍以上も高い空間分解能を達成した。この結果は国際学術誌(Advances in Space Research)に掲載された。NASAのカッシーニ探査機が2000年の11月から2001年の3月までかけて木星近傍をフライバイした際に取得した極端紫外分光データを用いて木星内部磁気圏の温度分布を導出した。これは、電子衝突による硫黄や酸素イオンからの輝線発光量が、背景電子温度分布を表すという性質を用いたユニークな研究である。この結果は国際学術誌(Journal of Geophysical Research)に掲載された。またこの結果を基に開発中の小型科学衛星が行う観測を模擬し、プラズマパラメタの導出精度を議論した論文を執筆し国際学術誌(Planetary and Space Science)に掲載された。本年度は2013年に打ち上げ予定の小型科学衛星に搭載する極端紫外分光撮像機のフライトモデル校正に向けた環境整備に着手した。具体的には光学試験の手法を可視光で確立し、極端紫外に応用させる手法を考案した。また鏡や回折格子への汚染を引き起し得る接着剤を特定した。さらに紫外線照射による汚染成分の固化で反射率が低下することを確認し、衛星の運用計画に反映させた。また、一度汚染された鏡をアルカリ系有機溶剤で複数回洗浄することで反射率を回復させる術を確立した。また宇宙環境を模擬した放射線照射試験を行い十分な性能を維持できることを確認した。既に打ち上げられて観測を行っている衛星および探査機の極端紫外データを用いて地球周辺のプラズマ環境及び木星の衛星イオに係るプラズマの物理を議論した。前者は日本の月周回衛星かぐやに搭載された撮像機により地球から染み出すヘリウムイオンの動きを捉えたものである。後者はNASAのカッシーニ探査機が木星をフライバイ観測した際に取得したスペクトルからプラズマの組成や電子温度、密度を導出して時間変化を追ったものである。それぞれの成果は国際学術論文に投稿され一部は既に受理されている。この成果は2013年の打ち上げを目指して現在開発中の小型科学衛星のデータを解析する際のひとつの指針となる。
B細胞分化選択過程におけるFas抗原およびbcl蛋白の発現と調節

今年度研究の成果は以下のごとくであった。1.形質のよく判明した各分化段階のB細胞株26株とを用いて、Fas抗原の発現と抗体に対する感受性を^3H-thymididine uptake法とflow cytometric PI staining法で検討した。培養およびFACS関連器具試薬、各種抗体を科研費補助金により購入し上記細胞株の維持と検索を行なった。その結果、Fas抗原はpre-pre-Bからpre-Bの段階で一部に弱く発現した。peripheral Bの段階にあるものではFas抗原を強く発現するものと欠くものがあった。plasma cellの分化段階にあるものはFas抗原を発現していた。抗体に対する感受性はBurkittリンパ腫由来のものを除き発現量に依存していた。一方Bcl-2蛋白、Baxはひろく発現しておりFas抗原とは直接の関連はみられなかった。2.Fas抗原を介するアポトーシスに対するIL-4,IL-5,IL-6やCD40抗体(科研費で購入)の影響を検討したが細胞株によって影響が一定せず概括的な結論を得るに至らなかった。しかし抗原提示に重要な働きをするHLA-D抗原のframeworkに対する抗体で刺激することによりpre-preB,pre-B,peripheral Bの一部でFas抗原を介するアポトーシスが増強されることを見いだした。後者ではその中にmemory Bの形質を示すものが含まれていた。3.正常ヒト骨髄細胞におけるFas抗原の発現をFACSを用い検討し(試薬等科研費で購入)CD10^+CD19^+の未熟B細胞、CD38^<++>CD19^<19>の形質細胞でもFas抗原が発現していることを見いだした。4.以上の知見により以下の点が判明した。(1)Fas抗原は未熟なB細胞で徐々に発現を増し成熟Bでは少なくともmemoryの段階にあるものや形質細胞では発現し機能している。(2)感受性にHLA-D抗原を介するシグナリングが関与している。従って免疫現象の終結に関わる可能性が示唆される。(3)Burkittリンパ腫では特殊な制御が予想される。5.これらの成果はEur J Immunol,Br J Hematolに公表したがつぎにはFasリガンドとの関係を検討したい。