hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
線維芽細胞の内皮細胞への分化による血管新生:lacZ導入による解析

血管新生は、従来、既存の血管の内皮細胞の出芽によって起こると信じられ、今までこのメカニズムに従って多くの研究が行われてきた。しかし、このメカニズムでは説明できない現象が報告されるに至り、これに変わる新しいメカニズムが求められている。我々のウサギ耳窓法における新生血管の電子顕微鏡的観察の結果、線維芽細胞が血管外に出た赤血球を取り囲んでいることが明らかになり、「線維芽細胞の内皮細胞への分化」による血管新生が示唆された。本研究では、「線維芽細胞の内皮細胞への分化」をlacZ細胞標識法を用いて証明することを試みた。lacZには、細胞質で発現し細胞質全体を青く染色するものと、核移行シグナルを持ち核内で発現し核のみを青く染色するものがあるが、当初予定していた核lacZの調整が予定通りに進まなかったので、細胞質lacZを用いることとした。実験上注意しなければならないことは、標識した線維芽細胞の移植実験を行うため、移植に伴う拒絶反応を回避しなければならないことである。このため3T3線維芽細胞とBalb/cマウスの組み合わせを材料として用いた。lacZ遺伝子を導入した3T3線維芽細胞をBalb/cマウスの角膜ポケットに移植し、その後ポケットを瞬間接着剤により密封した。この後、血管新生を誘導するため、硝酸銀で角膜中央の径約1ミリメートルの大きさの範囲を1-2秒間焼灼した。2-3日すると血管が伸び始め、4-6日目には角膜ポケットの中程に達した。このとき、角膜の表面に軽く触れて出血させた。この後さらに2-3日後に組織の固定を行い、X-Galによる細胞化学的染色を施した。顕微鏡観察の結果、lacZにより細胞質が青く染色された内皮細胞が、極わずかであるが認めれれた。このことにより、3T3線維芽細胞が血管内皮細胞に分化する場合があることが示唆された。今後は、同じことを核lacZを用いて調べ、「線維芽細胞の内皮細胞への分化」をより確かなものとする必要があると考えられる。
卵巣顆粒膜細胞の黄体化に伴うVegf遺伝子発現の転写調節機構の解明

ラット顆粒膜細胞の黄体化過程において、Vegf遺伝子発現は増加することが示されている。その転写因子を探るため、JASPAR databaseを用いてVegf遺伝子プロモーター領域の転写因子結合配列を検討し、HIF1a、C/EBPbの結合配列を確認した。そこでHIF1a、C/EBPbタンパク発現変化をウエスタンブロットを用いて検討した。ラット顆粒膜細胞においてはHIF1a、C/EBPbともに発現しており、さらに黄体化過程においてタンパク発現は増加することが明らかとなった。そこでVegf遺伝子プロモーター領域への転写因子HIF1a、C/EBPbの結合をChIP assayを用いて評価した。HIF1aについては転写因子への結合変化を認めなかったが、C/EBPbは黄体化過程で増加していることがわかった。そこでVegf遺伝子プロモーター領域に存在するC/EBPb結合配列の転写活性をLuciferase assayを用いて評価した。ラットVegf遺伝子プロモーター領域を組み込んだLuciferaseコンストラクトを作成しヒト顆粒膜細胞種細胞株であるKGN細胞に導入してLuciferase assayを行った。この結果C/EBPb結合配列は転写活性を有していることが判明した。さらに、C/EBPbのノックダウンを行ったところ、Vegf遺伝子発現は抑制され、Luciferase活性も抑制されることが判明した。このC/EBPb結合領域のヒストン修飾をChIP assayを用いて、クロマチン構造変化をFAIRE-qPCRを用いて評価し、やはり転写調節に関わる部位であることが判明した。結果が出ており、順調に進行し、当初の計画よりも進展している。現段階までのデータで論文を作成し、acceptされた。Vegf遺伝子プロモーター領域のメチル化の変化をBisulfite sequenceを用いて評価し、メチル化が変化しているかどうかを検討する。また、Vegf遺伝子のエンハンサー領域に着目し、転写を調節するC/EBPb結合配列やその他の転写因子結合配列の有無を評価する予定である。当初予定していたより順調に研究計画が進んだため、試薬や実験動物の費用が必要とならなかった。今後当初予定していなかった、Bisulfite sequenceやエンハンサー領域の転写調節因子の検討において、研究費を使用する予定である。
教員養成学部における「ものづくり」を重視した理科教育プログラムの開発

小学校理科において「ものづくり」授業を効果的に行うために、教員養成の段階で留意すべき点について検討した結果、自分が作りたいものを明確にイメージできること及びそれを実現するための技術を身に着けることが重要であり、つぎの2点を大学の授業に取り入れると有効であることが明らかになった。(1)学生が小学校理科における学習内容を利用して、オモチャなどを実際に設計・製作し、道具の使い方や材料の性質を把握する。(2)小学校理科の教科書実験の問題点を見出し、その問題解決のために器具を改良したり新規に開発したりする中で多くの試行錯誤を経験する。小学校教員を目指す学生達に、「ものづくり」を重視した理科教育を行うための授業内容について検討した。理科における「ものづくり」といえば、一般的には、児童が新たに学んだ内容を使ってオモチャ等を作製することを指すが、本研究では、小学校教員が理科授業で使用する実験器具を改良・新規開発することも含めることにする。その理由は、教員の適切なものづくりが児童の授業内容の理解に役立つばかりでなく、教員のものづくり経験が授業での指導に生かされ、その熱意が児童に良い刺激を与えると考えるからである。このような「ものづくり」に強い教員の養成を目指して、著者が担当する授業科目における内容を洗い直し、その効果について考察を加えた。授業科目「理科」では、小学校理科で扱う代表的な実験を体験させ、関連するオモチャづくりのアイディアをレポートさせた。また、自分達が使用するろうそく立て等を工夫して作らせたり、ガラス製ピペットやL字管を作製するためにガラス細工の時間を設けたりした。学生達は実験器具を自分で作ることは想定外だったようである。「理科教育法」では、教材研究として電熱線実験器具を作らせる際、太さの異なる2種類のニクロム線を与えて学習効果を上げる長さを予備実験により決めさせたところ、教科書の実験条件がどのように決められるかを理解できたようである。また、各自が考案したオモチャを実際に作製することにより、計画段階での不備に気付けたようである。さらに「卒業研究」では、必要なものは自分で工夫して作ることをモットーとしたところ、「小学校理科実験のための安価な電源」や「天動説・地動説における地球から見た火星の運動を示す模型」で成果を挙げることができた。詳細は省略するが、理科における「ものづくり」では、これから作るものが持つべき機能の把握や基本となる原理・技術の獲得が重要であることが明らかになった。研究目的が理科の授業で使用できる実験器具を教員が製作できるようにする、学習内容を応用した児童・生徒の「ものづくり」およびそのシステム構築であるので、24年度は次の事項に取り組んだ。1.教員養成学部の学生といえども、理科実験器具は業者から購入するものという認識が強い。そこで、その意識改革のために、授業科目「理科」において小学校理科実験器具を学生に作らせたところ、大きな効果があった。(1)ろうそく立てを針金とアルミホイルで作る。(2)集気びん中の燃焼の実験で使用する集気びんの蓋を、合板とアルミホイルで作る。2.小学校6年生の理科「電気の利用」における電熱線実験で使用する電熱線実験器具および安価な電源装置の製作を卒業研究の一環として試行錯誤を行わせたところ、次の(1)(3)にある成果の他に、学生の回路技術が格段に向上した。(1)電熱線の長さを一定にして、電気的接続を確実にするには、電熱線を圧着で接続するのが最適であった。(2)小学校理科学習指導要領に沿った出力1.5Vと3.0Vの電源装置を作製した。経費は市販品の1/10であった。(3)市販のデジタル電圧計キットを組み立てて使用した。価格は、教材用指針型電圧計の1/10であった。3.天動説の周転円モデルで地球から見た火星の見かけの動きは、地動説における見かけの動きと同じになることを理解させることはかなり難しい。そこで、卒業研究の一環として、天動説と地動説の惑星の運動を示す模型を、組み込みコンピュータ制御のパルスモーターを利用して製作したところ、一目瞭然の装置とすることができた。4.ファラデーの電気分解の法則の実験は、今の教科書でも50年前の古典的方法が紹介されている。しかし、最新のデジタル電流計を使用すると、安価な実験装置で非常に正確な実験結果が得られることを示した。現在までの成果を「24年度研究計画」と対比すると、下記が未実行であるが、25年度内に実行できる。1.小学校「理科」学習指導要領でいう「ものづくり」、すなわち、学習成果を応用したものづくりについては学生達に、何を作るか、材料は何が必要か、どのような道具・工具類が必要かを一覧表として提出するように伝えてあるので、結果を待って作業を進めていく。

2.実験に必要な器具を教員が作る場合の例として、発光ダイオードの過大電流防止、検流計での発光ダイオードに流れる電流の測定をまだ行っていないが、今年度の「理科」の実験中に行う。3.太陽系模型の製作の過程において、組み込みコンピュータによるパルスモーターの制御は、非常に正確にできることが分かったが、モジュール化には至っていない。可能な限り、特別な器具を使わずに、パソコンだけで条件設定ができるようにする。今後の研究計画を以下のようにする。1.昨年度の研究計画の中で積み残した部分を実行する。2.理科実験器具としての組み込みコンピュータの活用を進めるため、モジュール化等でさらに利用しやすくする。3.小学校理科における学習成果を利用するオモチャなどの「ものづくり」例として、小学校6年生の「電気の利用」単元を取り上げ、「理科教育法」履修生全員に10Fの電気二重層コンデンサーと手動式発電機を貸し出してものづくりに利用させる。特に、昨年来の理科実験で行ってきた「風の力で走る自動車模型」、「ゴムの力で走る自動車模型」、「乾電池で走る自動車模型」、「光電池で走る自動車模型」等の「いろいろな力で走る自動車模型」シリーズの集大成として、「充電して走る電気自動車模型」を例示として扱う。学生たちの反応を分析し、小学校理科における「ものづくり」の効果、問題点などについて考察を加え、今後の小学校理科における「ものづくり」のあり方について提言する。当初の「研究計画・方法」のうち、下記の変更をする。1.発光ダイオード(LED)に流れる電流を測定するために、小学校で通常使われている簡易型検流計を改造してより定電流を測定するようにすることを計画していた。しかし、学生達に電流計の分流抵抗を変えることでレンジを変えることができることを実感させることは意義があるが、市販品を改造するのはメンテナンスの上で問題がある。そこで、検流計のレンジは通常の500mAのままにし、LEDの電流制限抵抗が異なるものをいくつか準備して、LEDの明るさにより電流値をかろうじて計れる場合と検流計の指針がほとんど触れない場合があることを経験させるにとどめる。2.小学校教員養成課程の全学生に組み込みコンピュータモジュールの製作をさせるのは無理があるので、授業では試作モジュールでこのような事ができるということにとどめ、興味・関心を抱いた学生には指導することにする。3.学生達が9月に行う小学校教育実習において、実習校での許可が下りれば「ものづくり」を取り入れていただくことを予定していたが、無理な注文はしないことにした。その代りに、今年度から全国的に新しく始まる「小学校・中学校における観察実験アシスタント配置事業」には、本学部の多くの学生がアシスタントとして登録しているので、その配置校の担当者と連絡を取り合って、「ものづくり」支援に関わっていくこととする。
樹立したヒト肺癌高転移株高転移能の解明と関連分子を用いた診断治療法の開発

肺癌の転移過程で重要な因子を捉えるため、ヒト肺癌の高転移株を樹立し、cDNA arrayを用いた網羅的発現プロファイルを親株と比較する事で、転移関連因子を総合的に捉えるとともに、未知の因子の単離を行ってきた。これらの解析により、高転移能の獲得は、単一因子の発現変化ではなく、多数の特定機能を有する因子の発現変化によることを明らかにした。また、肺癌の転移能との関連について報告の無かった因子を単離した。今回、我々は、他のスクリーニング法として、2D-DIGEを用いた二次元電気泳動およびMass spectrometryと抗体アレイによるプロテオーム解析を採用すると共に、より進化したcDNA arrayで再検する事で、より多くの情報を得た。その結果、新たにGalectin-1の発現増加等をはじめ、cDNA arrayで8個、DIGEを用いた二次元電気泳動およびMass spectrometryで29個、抗体アレイで52個の因子が新たに単離された。これらの情報について機能解析と臨床症例を用いた評価を行うことにより、術後補助療法施行例の選択や治療標的の設定などの臨床に耐えうる確かな因子の選択と応用方法の開発を目指す予定である。現在、Western blotやNorthern blotあるいはreal-time RT-PCR等で確認された因子について随時評価している。2つの因子について、SiRNAによる遺伝子ノックアウトを行い機能を解析している。同時に、6個の因子について、I期肺癌手術例の10年以内に再発した症例、しない症例のセットを用いて評価を行っている。これらの解析により、高転移能の獲得は、単一因子ではなく、多数の特定機能を有する因子の発現変化によることを明らかにし、また肺癌の転移能との関連について報告の無かった因子を単離した。今回、我々は、他のスクリーニング法として、遺伝子、mRNA、蛋白各レベルでの解析を加えることを企画した。最近開発されたCGH arrayを採用すると共に、より進化したcDNA arrayやプロテオーム解析を行う事で、より質の高い情報を得て、臨床応用を考慮しうるという観点で重要な因子を選択し診断治療への応用を検討している。最新バージョンのcDNA arrayやプロテオーム解析などを用いて、新しい因子のクローニングを試み、特にcDNA arrayで多くの因子の発現異常が明らかになった。現在、今までの報告やホモロジーから機能解析候補の選択を行っている。また、網羅的遺伝子異常解析にも入る予定である。これらの情報について機能解析と臨床症例を用いた評価を行うことにより、術後補助療法施行例の選択や治療標的の設定などの臨床に耐えうる確かな因子の選択と応用方法の開発への道が開かれると考えている。今回、我々は、他のスクリーニング法として、2D-DIGEを用いた二次元電気泳動およびMass spectrometryと抗体アレイによるプロテオーム解析を採用すると共に、より進化したcDN Aarrayで再検する事で、より多くの情報を得た。

現在、Western blotやNorthern blotあるいはreal-time RT-PCR等で確認された因子について随時評価している。2つの因子について、SiRNAによる遺伝子ノックアウトを行い機能を解析している。同時に、6個の因子について臨床症例を用いた評価を行っている。
非特殊視床大脳皮質投射系への自律神経性入力の形態解析

視床大脳皮質系の活動や睡眠覚醒周期の諸相における自律神経機能の適応に内臓性シグナルが影響を及ぼすことは従来から認識されており、視床の広汎投射系が内臓から新皮質および辺縁系前脳の広い範囲へ向かう経路上の中継点の役割を果たす可能性が示唆されてきていた。しかしながら、内臓性の求心性入力が視床非特殊核に達し大脳皮質の自発リズムに影響を及ぼす神経回路に関する形態学的基盤は確率されておらず、自律神経反射に関与する視床非特殊核および脳幹の個々のニューロン群間の神経連絡を系統的に調べた研究はほとんどない。また、延髄の中枢性自律神経ニューロンと前脳とを機能的に統合する神経回路を示唆するような軸索側枝の派生などの基本的な神経回路も明らかにされていない。本研究においては、自律神経系の主要中継核である延髄弧束核と非特殊視床皮質投射系の視床正中核とを統合する神経結合に焦点をあて、弧束核に投射しているニューロン群が軸索側枝を派生して視床正中核群にも投射しているのかを調べることを目的とした。実験にはSprague-Dawley系ラットを用い、抱水クロラールあるいはハロセン麻酔下に視床正中核と弧束核に2種類の逆行性蛍光トレーサーを注入した。適当な生存期間の後、凍結切片を作成、蛍光顕微鏡にて、標識ニューロンを全脳にわたって精査した。二重標識されたニューロンは、大脳皮質では島皮質および辺縁下皮質の第V層、皮質下前脳では外側中隔核、分界条床核、内側視索前核、扁桃体内側核・中心核、視床下部外側野の尾側部、乳頭体上核、視床下部室傍核小細胞部、中脳・橋においては中心灰白質、背側縫線核、中脳網様体、外背側被蓋核、外側・内側結合腕傍核、A5野、延髄では網様体腹外側部で観察された。これらの軸索側枝を派生するニューロン群は、睡眠覚醒周期の諸相や種々の行動発現における臓性反射の興奮性と視床皮質リズムの変化を統合・調整している可能性がある。
ハボロハナカセキと被子植物の起源に関する研究

1.西田誠は北海道産の白亜系の球果をはじめとする数々の生殖器官を発見した.球果としては,新属パラタイワニア,パラグリプトストローブスエゾセコイアを確認し,その他,マツ科,ヒノキ科の球果に夫々3および2属を認めた.さらに,ナス型の外見をもった双子葉類の果実を発見,その類縁を目下,考究中である.この成果の一部は,植物分類学会大会(水戸市1988年3月)において発表した.2.田村は,ハボロハナカセキの属すると思われる多心皮類の花形態学について,特に心皮について,ハボロハナカセキを論評しつつ考察した.3.山下は,単子葉類,特にツユクサ目とイネ目の胚発生,特に幼根の発達について研究,その成果について国際植物学会議(ベルリン)において,討論講演を行った.同時に,ラン科,ハクサンチドリ連の地下器官について研究,成果の一部は国際寄生植物シンポジウム(マルブルク)において発表した.4.角野は,花と昆虫の共進化について研究し,古植物の受粉生態学について考察した.特に虫媒の起源や白亜紀における受粉について考察した.また,それを通じてハボロハナカセキの受粉様式をも類推した.5.岡本は,多心皮類と対立的なもう一方の原始的双子葉類,尾状花序類の祖型における花弁の有無について考察した.6.植田は,多心皮類の植物地理学的考察を行った.特にハボロハナカセキが類縁をもつといわれるモニミア科をゴンドワナ要素と考え,それが白亜紀には日本にも分布していたことは,特筆大書するに値すると考えた.7.西田治文は,ハボロハナカセキに関する研究を一応完成させた.特に花柄から子房(心皮)への維管束の支向を復元し,かつ胚珠のつき方をも復元した.1.西田誠は北海道産の白亜系の球果をはじめとする数々の生殖器官を発見した.球果としては,新属パラタイワニア,パラグリプトストローブスエゾセコイアを確認し,その他,マツ科,ヒノキ科の球果に夫々3および2属を認めた.さらに,ナス型の外見をもった双子葉類の果実を発見,その類縁を目下,考究中である.この成果の一部は,植物分類学会大会(水戸市1988年3月)において発表した.2.田村は,ハボロハナカセキの属すると思われる多心皮類の花形態学について,特に心皮について,ハボロハナカセキを論評しつつ考察した.3.山下は,単子葉類,特にツユクサ目とイネ目の胚発生,特に幼根の発達について研究,その成果について国際植物学会議(ベルリン)において,討論講演を行った.同時に,ラン科,ハクサンチドリ連の地下器官について研究,成果の一部は国際寄生植物シンポジウム(マルブルク)において発表した.4.角野は,花と昆虫の共進化について研究し,古植物の受粉生態学について考察した.特に虫媒の起源や白亜紀における受粉について考察した.また,それを通じてハボロハナカセキの受粉様式をも類推した.5.岡本は,多心皮類と対立的なもう一方の原始的双子葉類,尾状花序類の祖型における花弁の有無について考察した.6.植田は,多心皮類の植物地理学的考察を行った.特にハボロハナカセキが類縁をもつといわれるモニミア科をゴンドワナ要素と考え,それが白亜紀には日本にも分布していたことは,特筆大書するに値すると考えた.7.西田治文は,ハボロハナカセキに関する研究を一応完成させた.特に花柄から子房(心皮)への維管束の支向を復元し,かつ胚珠のつき方をも復元した.西田誠および西田治文は北海道の白亜系から得た数個の果実,種子,球果について目下研究中であり、またハボロハナカセキをモニミア科に近縁の植物として連載中である。田村道夫は、沖縄および徳之島で採集した多心皮類、特にツヅラフジ科、およびニューギニアのトリメニア科、ヒマンタンドラ科、モニミア科の花のプレパラートを作り、研究中である。山下貴司はツユクサ科とイネ科の胚の比較発生、特に主根と根鞘の発達について研究、1982年7月、ベルリンの植物学会において発表予定であり、さらにラン科、特にサギソウの胚と幼植物の無菌培養により、地下器官の比較発生、1年目の塊根の発達と茎頂の移動を観察、1982年8月の国際着生植物シンポジウムにおいて発表予定である。角野康郎は、多心皮類の中でも、子房下位から子房上位の種までを含むスイレン科各属において、開花習性と訪花昆虫を調査し、花の形態と訪花昆虫グループとの関係を検討した。また原始的被子植物の受粉に関連する文献を検索した。植田邦彦は、原始的被子植物が集中するアジアオセアニア地域についての植物地理学的解析を行い、まとめた論文を投稿中である。また、多心皮類における胚珠維管束の走向の分析を行い、まとめつつある。岡本素治は、尾状花序群のブナ科の花序の発生形態学を研究、ブナ科はエングラーの体系でいわれているほど原始的な群ではないが、マンサク科から由来したと考えるほど派生的でもない、という結論に達した。結果は目下、論文作成中である。
造血幹細胞の増殖分化の細胞内制御機構に関する研究

野生型(WT)KITの細胞内領域に存在する個々のTyr残基(22個)をPheに置換した変異KITを作製し、IL-3依存性細胞株BaF3細胞へ導入しSCFによる細胞増殖や走化性に及ぼす影響を検討した。KIT-WTを発現するBaF 3細胞をSCFで刺激すると濃度依存性に細胞増殖や細胞運動が促進され細胞内Ca^<2+>の動員が生じた。個々のTyrをPheに置換したKITでは、Tyr567PheとTyr 719Phe置換により著明に細胞運動の低下が認められた。種々のdominant negative変異体や阻害剤を用いた検討によりKITを介する細胞運動の制御には、Tyr567からSrc型チロシンキナゼ、p38MAPキナーゼを経てErk1/2を介する経路とTyr 719からphosphatidylinositol 3' kinase (P13K)を介する経路の2経路が重要な役割を担っていることが明かとなった。また、KIT-WTのTyr-Phe置換は、SCFによる細胞増殖には著明な影響を及ぼさなかった。また、造血幹細胞がら巨核球への分化機構についても解析した。AIM-1とSTK15(AIK)は共にG2/M期特異的に発現するセリン・スレオニンキナーゼであり、AIM-1は細胞質分裂に、STK15は分裂後期の染色体分離に関与すると考えられている。造血幹細胞が巨核球へと多倍体化時にはAIM-1、STK15の発現は持続性に低下していた。ヒト赤白血病細胞株K562や巨核球性白血病細胞株CMKにLac-inducible Systemを用いて正常型(WT)AIM-1、STK15を発現させるとWT-AIM-1ではTPAによる多倍体化が抑制されたがWT-STK15では抑制されなかった。またキナーゼ活性を持たないdominant-negative(K/R)型のK/R-AIM1を発現させると多倍体化が誘導されたがK/R-STK15を発現させても明らかな影響は認められなかった。以上のことより巨核球が多倍体化する際にはAIM-1の持続的な発現低下が重要であることが示唆された。IL-3やTPOによる血球の増殖にはrasとSTAT5が関与していた。rasとSTAT5は、それぞれ個別にまた協調的に、細胞周期制御因子cyclin D1の転写を活性化させた。一方、TPOによる巨核球分化にはrasの長期活性化が重要であったが、rasの長期活性化による巨核球分化には細胞内におけるGATA-1の活性化が必須であった。このGATA-1活性はPU-1やc-mybにより負の制御を受けていた。また、造血幹細胞は巨核球に分化する過程で増殖した後、多倍体化する。しかし、多倍体化の分子機構についてはほとんど解明されていない。多倍体化に関連する遺伝子として、染色体数が過剰である消化器系腫瘍で発現異常が認められるAIM-1(セリン・スレオニンキナーゼの一種)に着目し解析を行った。正常ヒト造血前駆細胞が巨核球へと多倍体化する際、AIM-1の発現が低下することを見い出した。

さらに、未分化血液細胞株を巨核球へと分化誘導させる系で、正常型AIM-1をこの細胞株へ恒常的に発現させると多倍体化が誘導されないことを示した。また、dominant-negative型AIM-1を用いてAIM-1の機能を低下させるとこの細胞株の多倍体化が誘導されることを明らかにした。マウス骨髄性白血病株M1はIL-6によってマクロファージへの分化とアポトーシスが誘導されるが、GATA-1導入細胞はIL-6による分化誘導、アポトーシス誘導に抵抗性を示した。GATA-1はSTAT3の転写活性化に影響を及ぼさず、サイクリンD1とbcl-2の持続性発現を誘導し、IL-6による分化、アポトーシス誘導を阻害することを見い出した。野生型(WT)KITの細胞内領域に存在する個々のTyr残基(22個)をPheに置換した変異KITを作製し、IL-3依存性細胞株BaF3細胞へ導入しSCFによる細胞増殖や走化性に及ぼす影響を検討した。KIT-WTを発現するBaF3細胞をSCFで刺激すると濃度依存性に細胞増殖や細胞運動が促進され細胞内Ca^<2+>の動員が生じた。個々のTyrをPheに置換したKITでは、Tyr567PheとTyr719Phe置換により著明に細胞運動の低下が認められた。種々のdominant negative変異体や阻害剤を用いた検討によりKITを介する細胞運動の制御には、Tyr567からSrc型チロシンキナーゼ、p38MAPキナーゼを経てErk1/2を介する経路とTyr719からphosphatidylinositol 3 ́kinase(PI3K)を介する経路の2経路が重要な役割を担っていることが明かとなった。また、KIT-WTのTyr-Phe置換は、SCFによる細胞増殖には著明な影響を及ぼさなかった。また、造血幹細胞がら巨核球への分化機構についても解析した。AIM-1とSTK15(AIK)は共にG2/M期特異的に発現するセリン・スレオニンキナーゼであり、AIM-1は細胞質分裂に、STK15は分裂後期の染色体分離に関与すると考えられている。造血幹細胞が巨核球へと多倍体化時にはAIM-1、STK15の発現は持続性に低下していた。ヒト赤白血病細胞株K562や巨核球性白血病細胞株CMKにLac-inducible Systemを用いて正常型(WT)AIM-1、STK15を発現させるとWT-AIM-1ではTPAによる多倍体化が抑制されたがWT-STK15では抑制されなかった。またキナーゼ活性を持たないdominant-negative(K/R)型のK/R-AIM1を発現させると多倍体化が誘導されたがK/R-STK15を発現させても明らかな影響は認められなかった。以上のことより巨核球が多倍体化する際にはAIM-1の持続的な発現低下が重要であることが示唆された。
計算解剖モデルの診断・治療の融合的支援応用

A01【計算解剖学基礎】、A02【計算解剖学応用】において確立された基盤技術を臨床に適用し、かつその結果をフィードバックし、基礎から応用までの一致した向上をはかった。Open MRIを設置した手術室においてはリアルタイムヴァーチャルリアリティナビゲーションやリアルタイムオーグメンテットナビゲーションを応用した。肝癌局所治療、乳腺切除術、腹腔鏡下手術に対して応用した。いずれの低浸襲手術に対してもナビゲーションにより精確で安全な手術を行うことができた。また、腹部リンパ節自動検出システム、バーチャル気腹システム、血管内フライスルーシステムを臨床応用し、その有用性を確認した。【具体的内容】(1)Open MRIを応用したリアルタイムナビゲーションシステムを開発し、改良を重ねている。平成21年度の実績として、本システムを初めて腹腔鏡下手術に応用し、平成22年4月現在、6例の臨床応用例を数えている。肝癌に対する局所治療、乳癌に対する乳房部分切除、さらに腹腔鏡下手術において、安全で確実な治療が可能であった。(2)腹腔鏡下外科手術を行う外科医の手や上半身の動きをジャイロセンサーを用いて解析するシステムを開発中である。(3)各症例データを入力したシミュレーターを用いて腹腔鏡下手術の術前シミュレーションや腹腔鏡下手術トレーニングを行うプログラムの開発を行っている。【意義】(1)「計算解剖モデル」と個別化された症例データとの差異を定量的・明確に記述する高度な治療計画及び画像誘導治療を実現するプラットフォームを開発する基盤が整備された。(2)手術手技の工程解析ワークベンチを構築し、二次イベントを「計算解剖モデル」より予測し、論理性を有する適切なナビゲーションプラットフォームを開発するための基盤技術が整いつつある。(3)「計算解剖モデル」と個別化された症例データとの差異が定量的に記述された画期的なトレーニングプログラムが整備される第一歩となる。【重要性】「計算解剖学」を一つの大きな学理として昇華させるためには、上述のように最終受益者である患者と対面する臨床現場から発せられた要請に基づいて本領域を見直すことが極めて重要である。とくに肝癌に対する局所治療はこれまで51例に行っており、超音波ガイドのみでは十分に描出されなかった12例に対してもリアルタイム3次元ナビゲーションにより容易に穿刺が可能であった。これは、同様の背景を持つ患者を対象として行われた同様の治療成績とほぼ同じであった。(2)リンパ節自動検出システムを術前シミュレーションに応用した。主病変の周辺では非常に検出能力が高く有用性が高いことが明らかとなったが、転移診断はまだ困難であり今後の研究課題である。(3)各症例データを入力したシミュレーターを用いて腹腔鏡下手術の術前シミュレーションや腹腔鏡下手術トレーニングを行うプログラムの開発を行っているが、本プログラムの基盤技術となるバーチャル気腹システムの精度検証を行った。(2)「計算解剖モデル」と個別化された症例データとの差異が定量的に記述された画期的なトレーニングシステムが構築されつつある。【重要性】本研究領域の最終受益者である患者と対面する臨床現場から発せられた要請に基づいて本領域を見直すことが極めて重要である。平成23年度は、計算解剖学の臨床応用のプラットフォームを構成する要素技術として各種のシミュレーション技術あるいはナビゲーション技術を開発した。Open MRI治療室内で行う超音波ガイド下肝癌局所治療を51例の肝癌患者に応用し、その治療成績につき検討した。対象は2005年10月から2011年3月までの肝癌,のべ51例。平均70.6歳男性32例,女性19例。肝細胞癌初発10例,肝細胞癌再発33例,転移性肝癌7例,その他の腫瘍1例,単発が18例,多発が33例,最大腫瘍径は1.03.5cm(平均2.1cm)であった。全例において腫瘍と穿刺針の3次元位置関係が直観的に把握でき、誤差は24mmであった。とくに、超音波ガイドのみでは十分に描出されなかった12例に対してもリアルタイム3次元ナビゲーションにより穿刺が容易となった。また、リンパ節自動検出システムの検証を行った。症例は,S状結腸癌の診断で腹腔鏡下S状結腸切除術予定の54歳男性。術前のMulti detector-row computedtomography (MD-CT)のデータを用いて本システムにて分析した。主病変近傍の3個のリンパ節は放射線科読影専門医の診断とすべて一致していたが,偽陽性も多くみられた。

主病変と離れた遠隔リンパ節の検出や転移診断能については今後の研究開発が待たれる。バーチャル気腹システムでは,おおむね実画像と同等と考えられるバーチャル画像が得られた。本システムを応用し,個別化されたトレーニングを行うことにより手術トレーニングがより精緻化することが期待される。平成25年度は、計算解剖学の臨床応用の最終段階としてナビゲーション技術の臨床応用を行った。Augmented Reality(AR)ナビゲーションの臨床応用として、OpenMRI治療室にて、手術時の体位かつ気腹後の状態すなわち腹腔鏡下手術中の状態でMR画像を取得し手術ナビゲーションを行った。腹腔鏡下胆嚢摘出術を3例、腹腔鏡下腹壁瘢痕ヘルニア手術を3例施行した。6例全例に対し、Open MRI治療室で行う腹腔鏡下外科手術が成功した。気腹下のMRIデータに基づく画像誘導の精度は極めて良好であった。腹腔鏡下胆嚢摘出術の3例中2例は総胆管の画像誘導により安全に手術を施行できた。腹壁瘢痕ヘルニアの2例中1例は膀胱がヘルニア内に脱出しており術中のナビゲーションにより膀胱の損傷を回避しつつヘルニア周囲の剥離を行うことができた。MR対応機器の開発・導入や医療ガスなどの設備配置によりMR空間における腹腔鏡下外科手術がより安全に行われると考えられた。さらに、術中の臓器変形に対応するためのナビゲーションシステムの開発を行った。術中の変形に追従するために3つのCCDカメラから非接触に肝臓の表面形状の3次元的なデータを取得するステレオカメラおよび背面の情報を取得するために3次元位置センサを用いることとした。これらのデバイスからリアルタイムに得られる情報を用い、肝臓の脈管構造を含む3次元再構築像を変形し、術者の視野に融合させようと試みた。その結果、術者の視点に追従して、術野にCGにより再現された腎臓、尿管、腫瘍の3次元再構築像を融合させることができた。以上の成果は、術者の疲労の軽減、手術時間の短縮はもちろんのこと、手術手法そのものの向上にも役立つだけでなく、本システムを応用し,個別化されたトレーニングを行うことにより手術トレーニングがより精緻化することが期待される。平成24年度は、計算解剖学の臨床応用のプラットフォームを構成する要素技術として開発した各種のシミュレーション技術やナビゲーション技術を発展させた。Open MRI治療室内で行う3次元バーチャル画像によるリアルタイムナビゲーションシステムを2例の乳腺部分切除術に応用した。いずれも乳腺MRIにて左乳頭下に拡張した乳管が認められるものの、触診、マンモグラフィ、超音波検査では明らかな腫瘤陰影を認めなかった。3次元バーチャル画像によるリアルタイムナビゲーション下に切除範囲をマーキングする色素を乳腺組織内に穿刺注入した後、マーキングに沿って乳腺を切除した。
一般化された伏見関数による複雑な量子多体系の研究

H.15年5月からH.16年9月まで、レーゲンスブルク大(独)に滞在。レーゲンスブルク大では、主に受け入れ教官のM.Brack氏とともに、周期軌道のマスロフ指数の幾何学的性質について調べた。このテーマについては、K.Jaenich氏を中心とする同大学の数学者グループと定期的にセミナーを行い、交流を深めた。また、カオス系の半古典振幅とマスロフ指数の数値計算に現れる不安定性を克服する手法を開発した。(松古氏(KEK)との共同研究。)この手法を用いると、ほぼ無限に長い時間にわたって安定に半古典振幅を計算することが出来る。これらの研究については、近日中に論文にまとめる予定。伏見関数から定義されるエンタングルメントのmeasureについては、量子情報の分野で重視されるLOCCに対する単調性について考察した。また、東京大学の清水氏、森前氏と共同で、以前我々のグループで開発したマクロなエンタングルメントを評価する手法を用いて、マグノン系のエンタングルメントを調べた。(Phys.Rev.Aに発表。)この研究により、マグノンの個数がスピンの数Nに対して0(1)である場合には系は安定、0(N)である場合にはマグノン波数の分布に応じて安定な場合と不安定な場合があることが分かった。一般化された伏見関数の広がりにより多体系のエンタングルメントを定量化する方法を提案し、論文にまとめた。特に、伏見関数の広がりをモーメントで定義し、それを代数的に計算する手法を発展させた。この方法は、識別可能な粒子系だけでなく、同種粒子系(フェルミオン、ボソン)にも直接適用可能で、また多くのmeasureを系統的に生成できるという利点を持つ。さらに、ダイナミクスとエンタングルメントの関連を分かりやすく示すことができるので、この方法は量子情報と量子カオスの関係について新たな視点を拓く可能性があると考えている。また、東京大学の清水明氏と共同で、マクロな自由度を持つカオス的な量子系の研究を行い、このような系は強いエンタングルメントを持つにもかかわらず、外部からの影響(局所的観測、環境からの小さな摂動)に対して極めて安定であることを見出した。さらに、関連問題として、量子カオスの研究に重要な役割を果たす周期軌道理論(Gutzwillerトレース公式)について、Matthias Brackを中心とするレーゲンスブルク大(ドイツ)のグループと共同研究を行った。特に、まだ完全な定式化が成されていないスピン-軌道力(LS力)を持つ系について、スピンコヒーレント状態を用いた定式化の研究を進めた。この理論を3次元調和振動子+LS力の系に適用し、完全な古典周期軌道の分類を得たが、半古典論についてはまだ幾つかの問題があり、現在研究が進行中である。また、周期軌道理論に現れるマスロフ指数についてレーゲンスブルク大のKlaus Jaenichを中心とする数学者のグループと共同で研究を行い、この指数が一種のintersection numberと見做せることを明らかにした。
ドイツの文学と歴史に見るジェンダー-フイクションと現実の相剋-

1.日置:「近代初頭ヨーロッパの魔女裁判にみるジェンダー」近代初頭のヨーロッパで猛威を振るった魔女迫害について研究。16世紀の迫害としては大規摸に展開したドイツ・トリアー地方の魔女裁判を取り上げ、中でも、社会的に地位のある男性を魔女として抹殺した「Dr.フラーデ事件」に焦点を絞って考察した。その結果、魔女迫害は、単に女性を謂われのない迫害の対象にしたという点のみならず、男性社会において女性を犠牲にした上での「男性による、男性のための迫害装置」と位置づけた。2.平井:「ドイツロマン派の時代における書簡文化と女性像」18世紀後半から19世紀の初頭の女性たちにとって、書簡は唯一の自己表現の場であった。そこにおいて社会と個、夢と現実とが鋭く交錯する。しかし現実の市民社会の中では、その夢と願望は挫折していかざるを得なかった。3.垂水:「20世紀初頭ドイツの労働者文化とジェンダー」ここでは主に二つの問題を扱った。1.19034年ザクセン・クリミッチャウの繊維業ストライキにおいて女性労働者は市民派女性運動などの同情と支援を得た。2.第一次世界大戦下に労働者層の女性は食糧不足に抗して行動し、食糧暴動など自然発生的な行動は1918年革命への最も重要な要因になった。4.西谷:「ドイツ文学とジェンダー研究-類型化された男性像と女性像」ドイツ語圏の文学に現れた類型化された男性像と女性像の成立過程を調査・研究した。特にドイツ語圏においては、ドイツの特殊事情により19世紀後半からこの類型化が強化された。その原因を、「文化学」の定義を求め、この定義から探求した。文化学の概念なくして現在、ドイツ文学研究は不可能といっても過言ではないからである。さらに今日、いたるところで安易に使用されている「ジェンダー」の言葉の意味を、専門分野としての「ジェンダー研究」として明確にし、この研究からも文学上の類型化された男女の成立過程を論述した。本年度は当研究の初年度に当たるため、各自が自己のテーマをかなり自由に追究し、折にふれて報告しあい、共通の認識を築き、テーマを絞りこむ方向を模索した。以下が各自の研究実績である。1.日置:中世後期の13世紀以降、自治都市化していく都市社会のなかで急速に発展した「ベギン会」を検討した。これは男性の庇護を失ったか、あるいは庇護を否定した女性の半聖半俗の生活共同体で、その修道願望と自立的な組織運営のなかに、ジェンダー意識の覚醒を読み取ることができる。2.平井:ドイツ・ロマン主義時代の作家の典型例として、クレメンス・ブレンターノとベッティーナ・フォン・アルニムの兄妹を選び、その書簡文学を研究。「書簡」はこの時代に台頭しつつあった市民階級の内面の新たな表現手段で、またドイツ近代文学史上初めて登場してきた女性作家たちのほとんど唯一の自己表現手段であった。この新たなメディアが文学活動と深く結びつくため、関係する一次資料の収集と現地調査をドイツ、オーストリア各地の大学、図書館、文書館等で行った。3.垂水:03年5月本学で開催された日本西洋史学会大会のシンポジュウムを基に、9名の関係者の共著『革命と性文化』を出版する計画がある。そのために「20世紀初頭・ドイツの労働者文化とジェンダー」と題する論文を用意しつつあり、特に第一次大戦下の女性たちの多面的な活動や食糧暴動に注目する。

4.西谷:本年は理論構築の準備のために、クリスティーナ・フォン・ブラウンやインゲ・シュテファンらの多数のジェンダー研究を整理し、性的役割分担の歴史と文学における「典型的」な理想像の形成をみた。その結果、小説などにみる現実とはかけ離れた「虚像」が、読者の意識のなかに浸透していく過程を論証する方法を取得できた。全体としてジェンダーでは「虚像」ないし「フィクション」の果す影響力が想像していた以上に大きい、という結論に達した。昨年に引続き、各自自己のテーマを追究する一方で、共通の認識を深めた。1.日置:ドイツを中心とした西欧で猛威をふるった魔女裁判の問題を調査。魔女問題は、近代という競争社会に突入していく過程で発生した社会的ヒステリー現象として捉えることができるが、同時に、近代への動きの中で自己主張をし始める「新しい女性」に対する社会的・ジェンダー的な抑圧現象という分析視点から、主としてトリアー地方を対象に研究。2.平井:ベッティーナ・フォン・アルニムをとりあげ、ジェンダーならびにセクシュアリティが作品においていかに作用し、また一方でいかに構築されているかを考察。現在、書簡体小説『ゲーテとある子どもの往復書簡』に関する論文を執筆中。3.垂水:共編著『革命と性文化』(山川出版社、2005年5月出版予定)所収の「20世紀初頭・ドイツの労働者文化とジェンダー」(146-177頁)を完成。この編集過程で、理論構築の方法を新たに得た。例えば、第一次大戦下のドイツでは貧困層の女性は、戦場の夫・兄弟等との文通や食糧暴動を通じて、別の「政治への別の回路」をもったように、女性と「公共圏」とのかかわり方を分析することである。4.西谷:ドイツ語圏の文学研究における最新の方法論として注目される「文化学」と「系譜学」を、本年度は集中的に調査・研究。日本独文学会東海支部にて学会発表。(愛知大学、平成16年12月4日)この理論とジェンダー学の接点である「身体論」から「女性性の軽侮」を歴史的に論証。また、イエリネックのノーベル文学賞受賞に際し、新聞に関連原稿を執筆。歴史研究の側から、「公共圏」という分析軸の設定が提案された。文学作品の受容過程で、いかなる読者が産出されるかという点において、「公共圏」の問題が浮上してくる。文学という「フィクション」と歴史における「現実」とは、その時代の「公共圏」という場で相互に影響しあうという問題設定が確認された。日置:問題点として、先ず、中世後期の13世紀以降、自治都市化していく都市社会の中で急速に発展した「ベギン会」の存在、さらに、中世末期の14世紀あたりから始まり、16、17世紀の近代に入ってドイツを中心とした西欧で猛威を振るった魔女裁判の二つがあげられる。ベギン会の運動も魔女裁判の問題も都市における女性の問題として捉えることが出来る。その視点から、両者の関連性に焦点を合わせて研究を開始したが、直接的な接点や因果関係は、見いだすことはできなかった。従って、当該研究の重点を途中から魔女裁判の問題に収斂させ、事例研究として、Dr.D・フラーデ裁判をとりあげた。平井:詩人ヘルダーリンとの間で交わされたズゼッテ・ゴンダルトの書簡、詩人クレメンス・ブレンターノの妹であるベッテーナの書簡小説、彼女の友人で夭折した女性詩人ギュンダーローデの書簡などを対象とした研究をとりまとめた。
補綴歯科的技術を応用した乳房エピテーゼの新たな製作方法の開発

乳房を喪失した患者において、乳房エピテーゼの製作に非接触三次元デジタイザ、3Dプリンターを使用し、補綴歯科的技術を応用することにより、患者に直接触れることなく、製作過程における負担を軽減した、精巧なエピテーゼの製作を目的とした。乳房のアンダーカットの撮影が困難であり、撮影装置や撮影方法について再考が必要となった。また、エピテーゼの装着をより簡便にするために粘着シリコーンを開発し、粘着性、硬さについての検討を行った。生体安全性に関してさらなる検討をしていく予定である。乳がんによって乳房を喪失した患者の肉体的・精神的苦痛はQOLの低下に直結する。乳房喪失患者において、乳房エピテーゼの製作に非接触三次元デジタイザ、3Dプリンターを使用し、補綴歯科的技術を応用することにより、患者に直接触れることなく、製作過程における負担を軽減した、精巧なエピテーゼの製作を目的とする。また、材質に粘着性シリコーンを使用することによって、エピテーゼの装着をより簡便にし、接着剤による皮膚炎の発症を抑制する。はじめに、乳房エピテーゼに使用する粘着シリコーンの研究開発を行う。耐水性・接着性を高めるため、カテコール系接着ポリマー含有粘着シリコーンを開発し、その安全性の検討を行う。次に、マネキンを用いて乳房左右非対称モデルを製作し、以下に示す乳房エピテーゼの製作方法について検討を行う。1)形態計測(光学印象採得):非接触三次元デジタイザを用いて三次元データを取得する。従来の製作過程では、石膏等を用いて直接患部の印象採得を行っていたが、本装置の使用により患部に触れることなく自然な状態の乳房形態を短時間で正確に行うことが可能である。2)完成乳房イメージ像の製作:取得した三次元データを、健常側乳房を反転させミラー像を作成し製作する。3)模型・鋳型製作:完成乳房イメージ像の三次元データを3Dプリンターに出力し行う。4)シリコーン内部カラーリング5)樹脂填入・重合6)試適・最終表面着色7)完成・装着8)形状・性状・製作過程等の検討:自然な乳房の形状を保ち、軽量化を図るために数種類の内部構造のエピテーゼを試作し検討する。左右対称性の評価には、申請者らが開発した正中矢状平面を基準平面とし、健常側の点と、その点を患側に反転することにより得られる理想点との距離を計測することにより評価する方法を応用し行う。乳房エピテーゼに使用する粘着シリコーンの研究開発中であるため。また、使用予定であった非接触三次元デジタイザでは、精巧な乳房形態の計測が困難であることが明らかになったため。乳がんにより乳房を喪失した患者の肉体的・精神的苦痛はQOLの低下に直結する。乳房エピテーゼの製作に非接触三次元デジタイザ、3Dプリンターを使用し、補綴歯科的技術を応用することにより、患者に直接触れることなく、製作過程における負担を軽減した、精巧なエピテーゼの製作を目的とする。材質に粘着性シリコーンを使用しエピテーゼの装着をより簡便に、接着剤による皮膚炎の発症を抑制する。エピテーゼに使用する粘着シリコーンの研究開発を行う。耐水性・接着性を高めるため、カテコール系接着ポリマー含有粘着シリコーンを開発し、安全性の検討を行う。マネキンを用いて以下に示すエピテーゼの製作方法について検討を行う。1形態計測(光学印象採得):非接触三次元デジタイザを用い三次元データを取得する。従来は、石膏等を用いて直接患部の印象採得を行っていたが、本装置の使用により患部に触れることなく自然な状態の乳房形態を短時間で正確に行うことが可能である。2完成乳房イメージ像の製作:取得した三次元データを、健常側乳房を反転させミラー像を作成し製作する。3模型・鋳型製作:完成乳房イメージ像の三次元データを3Dプリンターに出力し行う。4シリコーン内部カラーリング5樹脂填入・重合6試適・最終表面着色7完成・装着8形状・性状・製作過程等の検討:自然な乳房の形状を保ち、軽量化を図るために数種類の内部構造のエピテーゼを試作し検討する。左右対称性の評価には、申請者らが開発した正中矢状平面を基準平面とし健常側の点とその点を患側に反転することにより得られる理想点との距離を計測することにより評価する方法を応用し行う。粘着性シリコーンの製作過程において有害物質が生じ、使用材料について再検討を行っている。また、使用予定であった非接触三次元デジタイザでは乳房基部等のアンダーカットの精巧な撮影が困難であり撮影方法・機器について再検討を行っている。引き続き、乳房エピテーゼに使用する粘着シリコーンの研究開発を行う。具体的には、耐水性・接着性を高めるため、カテコール系接着ポリマー含有粘着シリコーンを開発し、その安全性の検討を行う。また、乳房形態を精巧に計測できる3D画像撮影装置の使用し、撮影条件や方法についてマネキンを用いて検討を行っていく。歯科補綴学乳房

エピテーゼに使用する粘着シリコーンの研究開発中であるため。また、使用予定であった非接触三次元デジタイザでは、精巧な乳房形態の計測が困難であることが明らかになり、エピテーゼの製作が次年度に持ち越したため。乳房エピテーゼに使用する粘着シリコーンの研究開発、乳房形態を精巧に計測できる3D画像撮影装置の購入に使用していく。
方言変容の「フィルター」として働く地域社会の構造と志向性

地域社会の構造と志向性が「フィルター」となって、独自の方言変容を生じる現象について、各地の事例を収集し分析した。方言の体系変化に関与する「フィルター」の働きを明らかにし、さらに、現在地域社会で活発に行われる方言の活用が、方言変容にどのように関与するかという観点での考察を行った。本研究では、地域社会の構造的特性(階層差や都市化の程度、それに伴う生活様式)や志向性(規範意識、人の気質)を「社会フィルター」と呼び、ある種の言語変化が、この「社会フィルター」を介して生じると考える。こうした想定のもと、「社会フィルター」を介した言語変化の事例を分析することにより、方言差が生じるプロセスを明らかにしていく。平成18年度は、中央社会と地方社会の比較という観点から、本土とは異なる文化的・歴史的背景を持つ沖縄社会の言語使用の動態を調査・分析するために、下記の日程でフィールドワークを実施した。6月1619日沖縄県那覇市におけるフィールドワーク(準備調査)9月1823日沖縄県那覇市におえるフィールドワーク(本調査)9月に実施した本調査では、以下の調査を実施した。・那覇市首里出身の老年層話者2名に対する、方言使用(主として授受表現、指小辞「グヮー」)に関する聞き取り調査と場面設定の会話の音声収録調査。・琉球大学学生2名(那覇市首里出身・宜野湾市嘉数出身)に対する、方言使用に関する聞き取り調査と場面設定の会話の音声収録調査。・那覇市立城西小学校の方言クラブ活動の見学。および地域ボランティアとして方言指導を行う方々へのインタビュー。・那覇市立城南小学校の地域ボランティアの方々へのインタビュー。・那覇市立泊小学校の卒業生に対するインタビュー。以上の調査をふまえて、秋田大学の学生による以下のレポートの指導を行った。加藤麻美「女性の名前の変遷から見る本土と沖縄の意識差」斎藤泉実「那覇方言の指小辞「グヮー」の意味・用法」猿田美穂子「標準語励行の実態と人々の意識-方言札に着目して-」以上のレポートは、島村恭則・日高水穂編『2006年度日本・アジア文化調査実習沖縄フィールド・リサーチ1』(秋田大学教育文化学部)に掲載した。平成19年度は、以上の観点からの研究成果発表を、「方言差を生じる言語変化の促進力と抑制カー方言差再生産のメカニズムー」と題し、第84回日本方言研究会研究発表会(関西大学・2007年5月25日)で行った。そこで取り上げたのは、国立国語研究所編『方言文法全国地図』の否定表現と命令表現の分布図に見られる地域差である。前者(否定表現)については、地域言語固有の言語体系が中央語からの異なる言語体系の伝播を拒む事例を分析し、後者(命令表現)については、地域社会固有の対人関係意識が他とは異なる待遇表現の体系を成立させるプロセスを考察した。特に、後者の事例が、本研究の「社会フィルター」を介した言語変化の事例と言える。なお、前者については、「文法化理論から見る『方言文法全国地図』一「とりたて否定形」の地理的分布をめぐって一」と題した論文をまとめ、『日本語学』26巻11号に掲載した。また、中央社会と地方社会の比較という観点から、本土とは異なる文化的・歴史的背景を持つ沖縄社会の言語使用の動態を調査・分析するために、昨年度に引き続き、11月1921日に沖縄県那覇市においてフィールドワークを実施した。今年度は、昨年度の調査で収集した首里方言話者の模擬会話の文字化データを話者に点検してもらい、再度音声収録を行った。この会話例については、ウェブサイト「沖縄フィールド・リサーチ」において公開してある(当サイト内「模擬会話」http://www.ipc.akita-u.ac.jp/hidaka/web/okinawa/mogikaiwa/top.html)。平成20年度は、秋田の地域特性を反映した方言の活用例を分析し、「現代方言とフォークロリズム-秋田の事例から-」と題して、日本言語学会(「危機言語」小委員会)主催公開シンポジウム「日本のなかの危機言語-アイヌ語、琉球語、本土方言-」(東京大学)において発表した。また、秋田において頻繁に行われる「県民性」言説とそこに利用される方言の事例を分析した「秋田における「県民性」言説の創出と再生産」を『秋田大学教育文化学部紀要人文科学・社会科学部門』第64集に掲載した(共著者:石沢真貴・近藤智彦)。

一方、地域性の特性が言語運用を含む生活文化に見出される事例として、近世には北前船の寄港地として栄え、近代には木都として繁栄した秋田県能代市においてフィールドワークを実施した。能代市および隣接する八峰町は、かつてニシン漁で北海道への出稼ぎがさかんであった。そのため、北海道沿岸部(松前・江差など)との交流の記憶が、現在の生活文化の中に痕跡を留めている。その検証のために、函館・松前・江差においてもフィールドワークを行った。能代市および北海道におけるフィールドワークの結果は、現在報告書にまとめているところである。