hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
粒子状汚染物質の慢性生体影響を調べるための吸入暴露チャンバーの試作

粒子状物質の吸入による生体へ及ぼす影響は、長い間、その重要性が認められながらも、長期間一定の暴露濃度および粒径分布を保つのが困難なため、実行されていなかった。今回、連続式流動層による発塵装置の開発および流体力学的に良好な暴露チャンバーを試作し、上記問題を解決した。さらに、今後大きな環境問題になると予測される石炭火力発電所から排出されるフライアッシュについて、実際に1年間の長期吸入暴露実験をラットを用いて実施し、開発された装置が有効に働くことを確認するとともに、下記の結論を得た。1.すべての実験において、暴露群の体重増加率には、コントロール群と比べて顕著な差異が認められなかった。2.肺の肉眼的観察によれば、高濃度暴露群において、肺全葉にフライアッシュ粒子の著しい沈着が認められた。3.高濃度暴露群の肺重量を除いて、暴露群の臓器重量はコントロール群と比較して顕著な差異は認められなかった。4.アルミニウム量から推算したフライアッシュの肺内沈着量はコントロール群と比較して著しく増加していたが、他の肝、腎、脾臓中の沈着量については、差異は認められなかった。5.肺内沈着率については、粒子径、暴露濃度の影響が認められた。6.暴露により肺内に取り込まれたフライアッシュは、1年程度のクリアランス期間では、ほとんど排泄されないことがわかった。7.暴露したラットの肺中リン脂質量、とりわけフォスファチジルコリン(FC)量は、著しく増加した。さらに、PC中の脂肪酸組成で不飽和脂肪酸の低下と、パルミチン酸の増加が見られた。8.暴露直後屠殺した肺の病理組織学的検索では、フライアッシュを貧食したマクロファージの増加および慢性間質性肺炎の病理像が観察され、粉塵結節への移行が示唆された。
「身装」画像のディジタルアーカイブ化に係る研究-日本の近代化の過程において

本研究の目的は、近代化にともなう文化の変容を、近代日本の「身装-身体と装い-」画像の態様を中心に解明し、関連画像のディジタルアーカイブ化を目指すことである。対象とする期間は、1868年1945年であり、この期間は、和装生活と洋装生活がせめぎあい、現代の日本人の衣生活が定着するまでの試練の時であった。対象の中心となる画像は、人がある情景のなかで装っている画像である。まずは、画像選択基準を明らかにするために、文化変容にかかわる重要主題を、画像資料と文字資料とを分析することにより抽出した。つぎに抽出された重要主題にそって、約2万枚の画像を選択、描かれた事柄の事実関係および信憑性について論議し、重要主題の概念の検証・修正を行った。重要主題の概念の確定したものは、検索キーとして、統制された検索概念表である<身装画像概念コード表2003>に反映させた。さらに、本表の有用性を証明するために、約200件の画像を対象として身装画像データベースのプロトタイプを作成した。また、並行して作成していた近代日本の身装電子年表のプロトタイプを、身装画像データベースへの時系列からの入り口として有効かどうかを検証した。加えて、すでにインターネット上で公開している服装雑誌記事データベース(「服装・身装文化データベース」<http://www.minpaku.ac.jp>に含まれる)とのリンクもはかり、既存のデータベースとの関連性についても検証した。一方、重要主題について論議を深めることにより、当該期間の文化論研究あるいは歴史研究への拡がりをみせ、その成果は、著書『近代日本の身装文化-身体と装いの文化変容-』(三元社2005年12月)において記している。その結果、近代日本における各年の人々の、さらに具体的な着装状況を把握することの重要性を認識し、平成18年度からは、身装電子年表のプロトタイプの充実をはかり、身装をとりまく情景や社会的環境の記述も含めて、画像を伴う近代日本の身装電子年表の作成を計画している。本研究の目的は、近代化にともなう文化の変容を、近代日本の「身装」画像の態様を中心に解明し、関連画像をディジタルアーカイブ化し、インターネット上で公開することである。対象とする期間は、和装生活と洋装生活がせめぎあう特異な期間であった明治維新以降、約100年間である。対象とする画像は約2万枚である。今回のディジタルアーカイブ化にともなう問題を、次の4点に絞った。1)画像内容の事実性の解明-文献データによる裏付けが中心となるため、おもに文献の分析。2)検索語の設定-1)の研究結果をうけて、身装、すなわち身体と装いにかかわるモノとコトガラのための検索語を設定。3)採録対象とする画像の著作権、肖像権等にかかわる問題の解明。4)利用者の使い勝手のよいシステムの環境作り-インターネット上での標準とされる検索項目(たとえばダブリンコア)への対応づけも含む。上記の問題を解決するための平成15年度の計画は、次の通りである。1)画像内容の事実性を明らかにするための、同時代文献の収集と分析。2)1)の研究結果にともなう検索項目と検索語の充実。3)画像データの内容に関する年代の表記法の確立4)画像データの内容分析とディジタル化5)システムによる画像データの動作確認およびソフトの改良

1)と2)は一応完了した。当該期間の重要主題を統制された検索語(索引語)として取り入れ、実際に画像データを分析・索引することによって、その適正度を検証しつつある。3)については、表記法確立のための前段階として、身装画像電子年表の可能性を模索した。4)については、1)、2)、3)の研究をふまえて、画像データの分析・索引づけを行い、入力を進めている。5)については、4)にともなって動作確認を行い、ソフトの改良の目途をつけた段階である。本研究の目的は、近代化にともなう文化の変容を、近代日本の「身装」画像の態様を中心に解明し、関連画像のディジタルアーカイブ化をはかり、インターネット上で公開することである。対象とする期間は、明治維新以降、約100年間である。この期間は、わが国の衣生活において、和装生活と洋装生活が拮抗する特異な期間であった。ディジタルアーカイブ化の対象となる資料は、人がある情景のなかで装っている画像、約2万枚である。今年度、とくに取り組んだ問題はつぎの通りである。1)本ディジタルアーカイブの時系列からの検索のために、身装電子年表の構築を企画し、プロトタイプを作成した。対象とした年代は、明治期のなかでも、衣生活に関する重要な課題がとくに集中した1886年1894年である。本電子年表では、一般の総合年表における風俗の事柄に関する記述の不備な点を指摘し、3つの欄-<事件>、<現況>、<回顧>に区分して身装にかかわる事柄を記述することを提案している。採録の対象となるおもなデータは、国立国会図書館所蔵の当時の大新聞、小新聞の記事である。データを収集・分析することを通じて、記載のための選択基準も同時に明らかにすることができた。なお、本電子年表においては、必要に応じて、新聞記事全文を画面上に提示することができる。さらに、各年の標準風俗画像を提示できるようにした。画像の種類は、"景観""未婚女性""既婚女性""男性""子ども""美しいひと像"である。年表で代表的な画像を閲覧し、それ以上の画像を必要とするときは、本体のディジタルアーカイブにリンクが可能である。このプロトタイプのシステムは、ファイルメーカプロのWebコンパニオンで開発し、本ディジタルアーカイブとともにWeb上で公開する予定である。2)本ディジタルアーカイブのデータソースのひとつとして、画像とテキストが一体となった挿絵の指示性の高さに注目し、その有効性を明らかにした。さらに当時の小新聞を中心に連載小説の挿絵を収集・分析し、現在ディジタル化を進めつつある。対象とした時期は、草双紙の流れを汲む<絵解き>の要素が色濃く残っていた、また熟練した多くの挿絵画家が活躍した1880年代後半から1890年代末におよぶ10年間である。3)近代日本における、身装の延長線上にある<美しいひと>15類型に含まれる画像データを、目、鼻、口などの各パーツを整理・分析することによって、それぞれの時代を代表する美しい顔のインデックスも可能ではないかと、現在模索中である。来年度の課題のひとつとしたい。
分子シャペロンによる細胞機能制御

重点領域研究として、どのようなデ-マを重点的、かつ優先的に行うことが必要かを調査し、班員相互のあいだで検討した。分子シャペロンが細胞内でどのような機能をもっているか、細胞の機能制御にどのような必須の役割を果たしているかを明らかにするために、当面、2つのテーマを設定している。第一に、基質と分子シャペロンとの相互作用を解析することが重要である。そのためには、まず分子シャペロン自体のダイナミックな構造を明らかにし、次にそのシャペロン分子によって認識される基質側の構造(たとえばmolten globule構造)に注目することが重要と考えられる。第二に、分子シャペロンが細胞内において、どのような細胞機能制御に関わっているかを明らかにする。そのためには、分子シャペロンが関与する種々の側面、すなわち、新生ポリペプチドのfoldingやサブユニットの会合、新たに合成されたタンパク質の各オルガネラあるいは細胞外への輸送、ならびに作られたタンパク質の"Quality Control"などの側面において、それらがどのような機能を果たしているかを明らかにする。このような研究のテーマ設定の妥当性、世界的な研究の進展状況の把握、さらにどのような班員を求め、どのような研究体制を作り上げるかなどに関して、具体的な検討を行った。このような研究計画を遂行するために、班会議を開催し、班員からの意見を聴取した。また、重点領域研究として、機能的に運営するために、研究費の配分方式、公募研究の採択方針、講演会やシンポジウムの開催、並びに若手研究者の育成などに関して討議を行なった。
BCL6がん遺伝子のリンパ球腫瘍化機序の解析

転写抑制因子BCL6やBAZFのがん遺伝子としての磯能を明らかにすることを目的として、これらの遺伝子を欠損させたマウスや過剰発現にしたトランスジェニック(Tg)マウスを作製する。これらのマウスを用いて、リンパ腫を含めた悪性腫瘍の発生や生体内でのリンパ球の機能異常を解析したり、BCL6やBAZFの体細胞突然変異誘導機序を解析した。その結果、1)BCL6を主にT細胞で過剰発現するトランスジェニック(Tg:lck-BCL6)マウスを作製したところ、生後1年半以内に高率にT細胞リンフォーマの発症がみられた。2)BAZFを主にT細胞で過剰発現するトランスジェニック(Tg:lck-BAZF)マウスを作製したところ、生後1年半以内にはT細胞リンフォーマの発症がみられなかった。3)Ig V領域遺伝子で体細胞点突然変異が高頻度で起きる胚中心B細胞では、Ig遺伝子以外の遺伝子にも体細胞点突然変異が起きることが報告されている。そこで、BCL6-KOマウス由来のB細胞をLPSとIL-4で刺激して、c-Myc遺伝子の体細胞突然変異を調べたところ、有意にその頻度が亢進していた。その結果、BCL6はB細胞内で体細胞突然変異を抑制していることが示唆された。4)lck-TIAPマウスに1.6Gyの放射線を一週間隔で四回照射することにより、リンパ球が高率に腫瘍化(胸腺腫)するシステムを立ち上げた。この系では、TIAPの過剰発現により胸腺腫の発症頻度には変化が見られなかったが、その腫瘍の増大が明らかに亢進していた。現在lck-BCL6マウスを用いて同様の実験をいている。
LB多層膜における層間エネルギー移動とその機構

一層毎に異なる色素が累積したLB多層膜では、一方向の励起エネルギー移動が可能となる。本研究課題の目的は、この連鎖型エネルギー移動の機構を調べ、新しい光物理化学の展開を図ることである。本年度の研究成果は次のように要約される。種々のシアニン色素から成るLB多層膜をつくり各層から発する蛍光の偏光解消減衰を測定した。励起パルスレーザーとしてTi:サファイアレーザーの第2高調波(パルス幅180 fs)、光検出器としてMCP-PMTを用い偏光子を通して蛍光を測定した。垂直偏光レーザーパルス励起に対して、時間分解蛍光スペクトルでは観測側の偏光子を垂直および水平方向にしたときの挙動は互いに異なり、各層の蛍光帯の生成減衰曲線において、初期時間においては垂直成分が強度が大きく、異方性が高いのであるが、時間が進むとともに層内および層間エネルギー移動が起こることによって、はじめの偏光(垂直方向)が失われていく。蛍光偏光解消曲線をつくりそれらの減衰寿命を比較した。例えば第1層OCの偏光解消についてみれば、OC1層系では50ps、OC-TCの2層系では34ps、OC-TC-OCCの3層系ではさらに短くなり20psとなる。これらの結果はエネルギー移動には2種類の経路があって、はじめの偏光が保存される高速の移動経路および各層において偏光が解消されつつ進む低速の移動経路が存在することを示している。さらに以前の実験結果すなわちエネルギー移動効率の積層数依存性、サイト選択性などの実験から、ここで問題とする連鎖型エネルギー移動においては、従来のForster機構とは異なって、はじめに光励起された高い振動準位からの直接的なエネルギー移動が起こり、さらに位相緩和の時間スケールにおいて可逆的なエネルギー移動プロセスが関与していることが示唆される。
充填層型肝細胞培養リアクターによる新しい代謝型人工肝臓の開発

現在肝移植が唯一の救命手段となっている重症の肝不全に対する治療の切り札として、装置内に生体の肝組織を組み込んだ、ハイブリッド型人工肝臓の開発が活発になされている。ハイブリッド型人工肝臓の開発のためには、肝細胞の高密度大量培養法の開発がその鍵となる。研究代表者らはこれまでに多孔質の樹脂である、polyvinyl formal(PVF)樹脂多孔質体を用いる肝細胞の高密度培養法について検討を行い、その有用性を指摘してきた。本研究は、反応工学的な視点からハイブリッド型人工肝臓の設計を行うことを目的とした。装置の形式は、スケールアップの容易さなどを考慮に入れ、充填層型リアクターとした。肝細胞を固定化するための培養基材としては、研究代表者らが肝細胞培養への有効性を初めて示した、ポリビニールホルマ-ル(PVF)樹脂多孔質体を用いた。PVF樹脂は、その構造上、高い粒子保持能有するため、比較的容易に大量の肝細胞を固定化することが可能で、肝細胞の高密度、大量培養を実現できる可能性が高い。本研究では、PVF樹脂を用いる充填層型リアクターを設計試作し、10日間の連続培養を行い、肝細胞の代謝能を評価した。ハイブリッド型人工肝臓の開発においては、装置内に培養肝細胞を含むことから、従来の人工腎臓や人工肺などの物質移動型人工臓器の開発において用いられた物質移動の理論のみならず、生体の肝細胞の代謝能の反応工学的解析が不可欠である。この分野においても研究代表者らは、従来から独自のモデルを確立してきた。本研究においてもこのモデルを応用し適用することにより効率的な開発研究が可能となった。本研究により、PVF樹脂を用いる充填層型リアクターを用いることで、肝細胞を10^7肝細胞/cm^3基質という高密度の条件で、1週間以上にわたってアンモニア代謝やアルブミン分泌能を維持したまま培養することが可能となった。人工肝臓として実用化されるためには、肝細胞が10^<10>のオーダーで供給される必要があるとされている。本研究で得られた成果は、実用時の人工肝臓にまでスケールアップするにはPVF基質は10^3mlのオーダーでよいことになり、これは今後、充分到達可能なスケールである。ハイブリッド型人工肝蔵の開発のためには、肝細胞の高密度大量培養技術の確立が不可欠である。本研究では、polyvinyl formal樹脂多孔質体(PVF樹脂)を担体として用いる充填層型バイオリアクターを試作して1週間の連続培養を行い、肝細胞の機能に及ぼす培地条件の影響について検討した。内径20mmのリアクターに、平均孔径250μmのPVF樹脂を2×2×2mmに細切した担体500個を充填して潅流培養に用いた。ラットから遊離した肝細胞をリアクター内に播種して7日間の連続培養を行った。Williams'E培地にホルモン、抗生剤を加えた培地を基本とし、牛胎児血清、成長因子(epidermal growth factor;EGF)が肝細胞の機能維持に与える影響を検討した。肝細胞の機能の指標として、アンモニア代謝、尿素合成能を測定した。培養終了後に担体に固定化された肝細胞のDNA量を測定して担体内の細胞密度を計算した。さらに、固定化された肝細胞の走査型電子顕微鏡写真を撮影して形態学的な評価を行った。

無血清培地を用いた培養では、リアクターのアンモニア代謝、尿素合成能は培養期間の経過とともに急激に低下し、培養3日目で1日目の10%以下の代謝能を保持しているに過ぎなかった。EGF添加培地では、培養初期にはリアクターの性能は良好に維持されたものの、1週間の培養後には1日目の10%以下に低下した。一方、血清添加培地においては代謝能は良好に維持され、1週間の培養後には1日目の約40%の活性を示した。血清添加培地を利用した系では、培養終了時に最高で約6×10^6cells/cm^3-PVFの細胞が固定化されており、培養期間を通じて肝細胞が高密度で培養されていることが示された。また、血清添加培地を使用した場合には、担体上にspheroid状の肝細胞凝集塊が観察されたことから、細胞の形態変化が機能維持に関連している可能性が示唆された。【緒論】ハイフリッド型人工肝臓の開発のためには、肝細胞の高密度大量培養法の開発がその鍵となるが、研究代表者はこれまでの研究で、多孔質の樹脂である、polyvinyl formal(PVF)樹脂多孔質体を用いることにより、肝細胞の高密度に培養できることを示した。本研究では、培養肝細胞の機能をより良好に維持することを目的として、PVF樹脂の表面修飾が肝細胞の機能の維持に与える影響を検討した。【実験方法】平均孔径が250μmのPVF樹脂を20×20×2mmに細切し、dish内に静置して培養に用いた。PVF樹脂をcollagenもしくはpoly-HEMA(hydroxyethylmethacrylate)にてコートし、無処理の群と比較した。Wister系雄性ラットから得た遊離肝細胞を4×10^6cells/PVFの濃度で播種して10日間の培養を行った。培地として10%fetal bovine serumを加えたWilliams'E培地を用いた。肝細胞の機能の指標として、アルブミン分泌能およびアンモニア代謝能の経時変化を測定した。また、PVF樹脂内に固定化された肝細胞密度の経時変化を測定した。【結果と考察】アルブミン分泌能は、collagenコート群では無処置群と比し、48hr以降ほぼ一定の良好な結果を示した。一方、poly-HEMA群では、経時的にアルブミン分泌能は低下した。一方、アンモニア代謝能は、3群ともほぼ同じ傾向で、培養時間の経過とともに低下した。一方、PVF樹脂内に固定化された肝細胞密度は、3群とも経時的に減少傾向を示したが、poly-HEMA群では当初から固定化細胞数が少なく、固定化効率に問題があるものと考えられた。Collagenコート群では無処置群よりやや良好な結果を示した。PVF樹脂を用いる肝細胞培養において、PVF樹脂をcollagenでコートすることにより、肝細胞の代謝能が無処置のものと比較してやや良好に保たれる可能性が示唆された。今後、灌流培養法により、さらに高密度に肝細胞を培養し得る条件について検討が必要と思われる。【緒論】現在肝移植が唯一の救命手段となっている重症の肝不全に対する治療の切り札として、装置内に生体の肝組織を組み込んだ、ハイブリッド型人工肝臓の開発が活発になされている。
ダニ抗原発現ベクターを移入した乳酸菌の経口投与によるダニアレルギー発病の予防

目的:年々増加するダニアレルギーの発病を抑えるため、ダニ抗原に対する経口トレランスを誘導する方法の確立を図る。その目的のためダニ抗原を発現した大腸菌や乳酸菌を経口させる動物実験を行う。方法:ダニ抗原のDerf2のcDNAを挿入した発現ベクターpUXlをエレクトロポーション法により大腸菌と乳酸菌Lactobacillus lactisに導入し形質転換して増殖させた。このダニ抗原Derf2を発現している大腸菌の加熱死菌および乳酸菌の生菌と無処置の大腸菌および乳酸菌をC57BLマウスにあらかじめ経口投与した後、Derf2抗原をAlumとともに腹空免疫し、そのIgE、IgG抗体産生をELISA法にて調べた。結果と考察:大腸菌死菌を経口させたマウス群は、いずれもPBSのみ経口させた対照マウスに比べIgE、IgG抗体産生とも亢進した。特にダニ抗原Derf2発現大腸菌経口群ではIgE抗体の産生がより強く増強された。一方、乳酸菌の生菌を経口させたマウスは、ダニ抗原の発現の有無にかかわらず対照マウスと差のない抗体産生を示した。大腸菌は菌自体にIgE、IgG抗体産生を高めるadjuvant作用があるため、たとえダニ抗原が含まれていても経ロトレランスは誘導されなかったと考えられた。逆に乳酸菌にはそれが無いことが示されたにもかかわらす経ロトレランスが誘導出来なかった事について、ダニ抗原の菌当たりの発現量を調べたところかなり低値であった。現在、乳酸菌に効率的にダニcDNAを導入するため、乳酸菌の菌株やエレクトロポーション法の条件を検討している。目的:年々増加傾向のあるダニアレルギー患者の発病を抑えるため、その第一次予防となるダニ抗原の経口トレランスを誘導する方法としてダニ抗原を発現した大腸菌や乳酸菌を経口させる動物実験を行う。方法:平成9年度は、ダニDer fII抗原のcDNAを組み込みDer fII抗原を発現している大腸菌の加熱死菌をC57BLマウスにあらかじめ経口投与した後、Der fII抗原をAlumと伴に腹腔免疫し、そのIgE,IgG産生抗体産生能をELISA法にて調べた。結果と考察:IgG抗体産生をみると、ダニ抗原発現大腸菌および非発現大腸菌経口マウスは、ともにPBSのみ経口マウスに比べIgG抗体産生が増強された。IgE抗体については、ダニ抗原発現大腸菌経口マウスが、非発現大腸菌を経口したマウスよりもより強いIgE抗体産生を示した。これらの結果は、最初の狙いにある経口トレランスは誘導されて、IgE,IgG抗体産生が推測されるという期待とは反するものであった。その理由は、1.経口トレランスがかかるほどの多量のDer fII抗原が経口されていない。2.大腸菌のもつアジュバント作用(LPSや細菌壁成分など)がトレランス誘導に勝っていたことが考えられる。また大腸菌にあるLPSは、Th2細胞を誘導すると言われているので、大腸菌ではIgE抗体産生を抑えるという目的は達せられないかも知れない。しかし最近抗原投与により抗体産生(B細胞)は増強することがあっても遅延型T細胞の反応は低下しているという報告があり、今回実験系にもT細胞反応は低下(T細胞トレランス)は起きている可能性は残っている。慢性のアレルギーは、細胞の関与が大きいことが認められつつあるので引き続き、このT細胞反応示の検討および大腸菌ではなく乳酸菌にダニ抗原cDNAを組み込ませ、Der fII抗原を発現した乳酸菌をマウスに投与し、IgE,IgG抗体産生とT細胞反応を検討する。目的:平成9年度に行ったダニ抗原発現大腸菌をマウスに経口させて、経口トレランスを誘導する試みの結果は、予想と違い逆にダニ免疫に対するIgEとIgGの抗体産生が亢進したので、平成10年度は大腸菌の代わりにダニ抗原を発現させた乳酸菌を用いてマウスに経口トレランスを誘導することを目的とした。

方法:乳酸菌の一種のLactobachillus lactisに、ダニ抗原Derf2のcDNAを挿入した発現ベクターpUX1をエレクトロポーション法により導入した形質転換させて増殖した。このだに抗原発現乳酸菌(Derf2-LL)の生菌と無処理の生菌(LL)をそれぞれA/Jマウスに一匹当たり10^9ケを1日1回、10日間連日経口投与した。対照マウスにはPBSのみを経口させた。投与後各マウス群にDerf2を10μg/Alum5mgを腹空内に初回免疫した。その後28日目に追加免疫し、当日と56日目にマウスから採血した。血清中のダニ特異的IgE、IgG、IgG_1抗体は、ELISA法で測定した。結果と考察: Derf2-LL、LLとPBS群の間には、ダニDerf2特異的IgE、IgG、IgG_1抗体価に差は無く、経口トレランスは誘導されなかった。この結果は、Derf2発現大腸菌を経口した実験において、Derf2発現の有無にかかわらず大腸菌そのものがIgEとIgGの抗体産生を増強させるadjuvantとしての作用を示したのとは違い、乳酸菌の生菌にはadjuvant効果は無いことを示唆している。Derf2-LLとLL群の間でもIgEとIgGの抗体産生に差が無かったので、Derf2-LLの菌当たりのダニ発現量を調べたところその値は極く低値であった。トレランスを誘導するには経口するDerf2量が不足していたと考えられる。現在、効率的な形質転換を図るため、乳酸菌の菌株、ベクター、エレクトポーションのパルス電圧などダニcDNAを導入する条件を検討中である。
磁性ナノ粒子の楕円化による新しい磁気－電気－光複機能ナノグラニュラー膜の高機能化

次世代の多機能電子デバイス用の材料開発には、複数の機能性を同時に併せ持つ(電気ー磁気、磁気ー誘電、光ー磁気特性など)高効率でエネルギー変換可能な「複機能磁性材料」の開発が求められる。申請者らのグループでは、磁性ナノ粒子が誘電体マトリクス中に分散する「ナノグラニュラー薄膜」により、室温における磁場変化で誘電率εが変化する「トンネル磁気誘電(TMD)効果」および磁場変化で透過率Tが変化する「トンネル磁気光学(TMO)効果」を新たに見出した。しかしながら、これらの特性発現は、球状の磁性粒子が均一分散した膜でしか報告されていない。本研究は、粒子形状を「縦長楕円形」および「横長楕円形」にしたナノグラニュラー膜を作製し、TMD効果、TMO効果およびトンネル磁気抵抗(TMR)効果などの「複機能磁性」に与える粒子形状の影響を体系的に調べ、新機能・高機能「複機能磁性材料」を開発することを目的とする。平成30年度は1)縦型(膜面垂直)の楕円形状Co粒子を内包するCo-SiO2ナノグラニュラー膜の高周波軟磁気特性、および2)横型(膜面内)の楕円形状Co粒子を内包するCo-BaF2膜の高周波TMDおよびTMR効果について構造との関連を調べた。1)縦型(膜面垂直)の楕円形状Co粒子を内包するCo-SiO2ナノグラニュラー膜は、5GHz帯まで損失が小さく極めて良好な軟磁気特性を示した。2)Co-BaF2系ナノグラニュラー膜をタンデムスパッタ法で創製し、その構造とTMDおよびTMR効果を調べた。分散形態および密度を変化させたところ、35MHz帯において6.0%のTMD効果および5.9%のTMR効果を一つの膜で実現した。磁性金属粒子間のスピン依存トンネル電流ならびに孤立した磁性粒子ペアの間のスピン依存電荷分極の両方が関与していることを明らかにした。目的とする楕円形状のCo粒子を内包するナノグラニュラー膜の作製に成功し、さらに高磁性粒子密度な膜において、TMD効果およびTMR効果を両立する複機能性を発現することを明らかにした。上記の知見は当初のひとつの複機能性発現の目標を上回り、現在、高密度なCo粒子の分散と複機能性の関係について詳細な構造解析を進めている。一方で、粒子形状を横型(膜面内)の楕円形状に変化させた場合では2%のTMD効果しか得ることが出来なかった。この原因を明らかにし(今後の推進方策で記述)、次年度は楕円形状による相乗効果を検討する。楕円形状粒子を内包するナノグラニュラー膜の作製に成功し、複数の磁気機能性を実現できたことから、本研究課題はおおむね順調に進展している。今後は、平成30年度に引き続き、縦型(膜面内)および横型(膜面垂直)にCo粒子を楕円形状へ変化させたナノグラニュラー膜のTMD効果およびTMR効果を他の組成系でも調べる。横型(膜面内)の楕円形状のCo粒子を内包するCo-BaF2膜でTMD効果が小さい原因として膜の誘電特性を膜面垂直方向でしか評価していないことが挙げられる。この場合、スピン依存分荷電極のみに起因した小さなTMD効果しか得られない。そのため、電極を膜の両側面に配置した微細加工を行い膜面内方向の誘電特性を検討する。また、現在、高密度なCo粒子の分散と複機能性の関係について詳細な構造解析を進め、膜のグラニュラー形成過程やその条件等について明らかにしていく。

目的とする楕円形状のCo粒子を内包するナノグラニュラー膜の作製に成功し、さらに高磁性粒子密度な膜において、TMD効果およびTMR効果を両立する複機能性を発現することを明らかにした。上記の知見は当初のひとつの複機能性発現の目標を上回り、現在、高密度なCo粒子の分散と複機能性の関係について詳細な構造解析を進めている。一方で、粒子形状を横型(膜面内)の楕円形状に変化させた場合では2%のTMD効果しか得ることが出来なかった。この原因を明らかにし(今後の推進方策で記述)、次年度は楕円形状による相乗効果を検討する。楕円形状粒子を内包するナノグラニュラー膜の作製に成功し、複数の磁気機能性を実現できたことから、本研究課題はおおむね順調に進展している。今後は、平成30年度に引き続き、縦型(膜面内)および横型(膜面垂直)にCo粒子を楕円形状へ変化させたナノグラニュラー膜のTMD効果およびTMR効果を他の組成系でも調べる。横型(膜面内)の楕円形状のCo粒子を内包するCo-BaF2膜でTMD効果が小さい原因として膜の誘電特性を膜面垂直方向でしか評価していないことが挙げられる。この場合、スピン依存分荷電極のみに起因した小さなTMD効果しか得られない。そのため、電極を膜の両側面に配置した微細加工を行い膜面内方向の誘電特性を検討する。また、現在、高密度なCo粒子の分散と複機能性の関係について詳細な構造解析を進め、膜のグラニュラー形成過程やその条件等について明らかにしていく。
国際美術シーンにおける戦後日本美術の展開とJ・D・ロックフェラー3世の文化政策

研究期間中、精力的に研究テーマについて調査を行い、学会や国際シンポジウムでの発表を行った。ニューヨーク近代美術館やジャパン・ソサエティ等での調査を行い、対米生活の長い作家達にインタヴューを行った。大きな成果として、2012年にニューヨーク州立大学ニューパルツ校の付属美術館で篠原有司男の回顧展を企画・開催し、研究論文を複数収録した図録を制作・出版した。また、1960年代における国際的なポップアートの広がりを検証するという、次の研究課題にもつながる成果を挙げることができた。これらの論考の成果は、「ポスト・コンフリクトの日米美術交流:ジョン・D・ロックフェラー3世の役割を中心に」と題した論文にまとめ、『コンフリクトの人文学』ジャーナルに投稿し、査読を経て掲載された。11月にはハーヴァード大学で開催される大阪万博についてのシンポジウムで、EATという団体が関わったペプシ館について"World without Boundary ?' E.A.T。Goes to the Expo'70, Osaka"と題して発表した。このため、7月末から8月にかけてロサンジェルスのゲッティ財団研究所のアーカイヴで調査を行い、EATに関する文書を調べた。この調査と発表の成果は城西大学の紀要が企画している大阪万博特集号に論文として発表予定である。この他、9月末には単著The Great Migrator : RobertRauschenberg andthe Global Rise of American ArtがMIT Pressより刊行されたことが本年度の大きな成果である。また、10月にはインドで行われたアジアキュレーターズ会議に招待され、オーラルヒストリーの取り組みについて講演したほか、国内外で日本人作家にオーラルヒストリーの手法を用いたインタヴューを行った。また11月には東京芸大で開催したオーラルヒストリーのシンポジウム企画に携わり、司会者として登壇した。今年度は5月にマレーシアに調査旅行に行き、国立現代美術館で調査を行った。また8月にはイタリア、フランスに調査旅行にでかけ、ヴェニス・ビエンナーレとアルル国際写真展における日本人作家の展示について調査を行った。また、10月には韓国のKorean Association for the History of Modern Artの年次大会に招聘され、"The 'Triumph' of Japanese Neo-Pop : A Historical Evaluation"と題した発表を行った。さらに、2012年2月にはアメリカのCollege Art Associationという美術史学会の"Pop and Politics"というパネルで"Looking at Being Looked Art : Jasper Johns in Tokyo,1964"と題した研究発表を行い、アメリカの美術家ジャスパー・ジョーンズと日本の批評家東野芳明や、美術家の篠原有司男の交流について発表した。さらに、3月にはポロック展のシンポジウムでアメリカ美術の国際市場形成について講演をした。この他、篠原有司男については来年度ニューヨーク州立大学で開かれる彼の回顧展に企画参加しており、ロックフェラー・アーカイヴ・センターでの調査を進めている。また、College Art Associationでの発表とパネル討議を共著として出版する計画に携わっており、来年度以降具体的に進めていく予定である。展覧会の評判としては、アメリカの主要な美術雑誌である「Artforum」誌に展評が掲載され、「Art in America」の表紙を飾るなど、大きな反響を得た。さらに、今年度の国際美術批評家連盟アメリカ支部が選ぶ、大学の美術館で開催された展覧会で最も優れた展覧会に与えられる賞にノミネートされた。出版成果物としては、同回顧展のカタログをニューヨーク州立大学の出版界から出版した他、Asia Art Archivesのジャーナルに日本美術オーラル・ヒストリー・アーカイヴについて紹介する論考を寄稿した。この他、8月に富山県立近代美術館で講演を行い、9月にニューヨーク州立大学ニューパルツ校で、12月にウォーカー・アート・センター、1月に国際美術史学会と横尾忠則現代美術館、2月にUCバークレイ校で研究発表を行った。これまでの研究成果を着実に発表・出版しており、1969年にロックフェラー3世財団の奨学金で渡米した篠原有司男に関しては、ロックフェラー・アーカイヴ・センターでの調査からこれまでに知られていなかった多くの資料を見つけることができた。24年度が最終年度であるため、記入しない。これまでと同じく、アーカイヴ調査と聞き取り調査を中心に調査を進めていく。来年度は篠原有司男展の図録に寄稿するため、そこでロックフェラー財団の文化政策と実際の個人アーティストの制作の関わりについて、具体的に詳述することで研究成果をまとめる予定である。
子宮内膜における免疫担当細胞の機能分担と機能発現に影響を与える因子

1.子宮NK細胞の機能分担を見る目的に子宮内膜NK細胞サブセットが周期ごとに変動するか否かに関する検討を行った。その結果子宮内膜NK細胞サブセットは、その周期ごとにCD16-CD56bright細胞、CD16+CD56dim細胞の分布が変動するものが約25%存在することが明らかとなった。またこの変動をふまえたその後の臨床成績の検討により、もともと良好な子宮NK細胞分布(CD16+CD56dim細胞が増加していないもの)を示しているもの、良好な変化が得られた周期(CD16+CD56dim細胞が増加していたがその後減少したもの)では妊娠率の増加および流産率の低下が見られる傾向があることが明らかとなった。2.子宮NK細胞の機能発現を見る目的に子宮NK細胞とKiller Inhibitory Receptors(KIRs)、ケモカイン、その他の免疫担当細胞との関連性に関する検討をおこなった。すなわち黄体中期に採取した子宮内膜細胞の浮遊液を作成の上、浮遊液中の細胞の表面抗原マーカーを測定ならびに、浮遊液中のケモカインを測定し、それぞれの細胞の関連性を検討した。CD16-CD56bright細胞とKIR(CD158a,CD158b)との間には正の、CD16+CD56dim細胞とKIRとの間には負の相関関係があることが明らかとなった。これはCD158bで顕著であった。さらにCD16-CD56bright細胞とケモカイン(MIP-1α)との間にも正の相関があることが明らかとなった。3.調査研究費を用いて日本産科婦人科学会(4月、京都府)、日本産科婦人科内視鏡学会(8月、兵庫県)に参加し、本研究の遂行に必要な情報収集を行った。1.子宮内膜浮遊液中ケモカイン(MIP-1α、MIP-1β)の妊娠成立への関与をみる目的に体外受精・胚移植施行患者の子宮内膜浮遊液中ケモカインの妊娠成立例、妊娠不成立例、流産例における違いを解明するための検討を行い現在も継続中である。すなわち患者の同意のもと体外受精・胚移植施行前周期分泌期子宮内膜を採取し、機械的に分散したうえで72時間培養し、子宮内膜浮遊液中ケモカイン(MIP-1α、MIP-1β)をELISAで測定している。現在妊娠転帰との関連を検討中である。2.子宮NK細胞(uNK細胞)の機能発現をみる目的に、uNK細胞サブポピュレーションとKiller Inhibitory Receptors(KIRs)、ケモカインとの関連性を解明するための検討を行っている。すなわち患者の同意のもと黄体期子宮内膜日付診時あるいは体外受精・胚移植施行前周期分泌期子宮内膜を採取し、子宮内膜浮遊液を作成した。これを72時間培養したうえで、uNK細胞サブポピュレーションとKIR(CD158a、CD158b)をフローサイトメトリーで測定し、さらに培養上清中ケモカイン(MIP-1α、MIP-1β)をELISAで測定している。それらの関連性を現在検討中である。3.調査研究費を用いて日本産科婦人科学会(4月、東京都)、日本不妊学会・日本受精着床学会(9月、旭川市)に参加し、本研究の遂行に必要な情報収集を行った。
自己免疫病自然発症マウスの新生時期胸腺摘除による新たに多発する自己免疫病

SLE様の全身性の自己免疫病を自然発症するマウスとしてBWF1やMRL/1pr等多数開発されている。一方、臓器局在性の自己免疫病を自然発症するマウスは少数である。そのなかで自己免疫性とされている膵島炎を自然発症し、その結果I型糖尿病に陥るマウスとしてNODマウスが注目されている。われわれは標準的なマウスであるBALB/cやA/Jマウスの胸腺摘出(Tx)を生後3日におこなう(Txー3)と、甲状腺、胃、等に臓器局在性の自己免疫病が自然発症するを明かとしてきた。同病変はTxー7マウスには発症しない。本研究では自己免疫病を自然発症するマウスの新生時期におけるTxが、本来の自己免疫夫の発症にどのような効果をもたらすか、また新たに臓器局在性の自己免疫病の発症がみられるかどうかを検討し、自己免疫病の発症機序を考察した。Txー3をしたBWF1やMRL/1prマウスには腎炎や血管炎の発症がみられた。その発症頻度や程度は無処置マウスとほぼ同様であった。一方同マウスには卵巣や胃等にも臓器局在性の自己免疫病の発症がみられた。全身性ならびに臓器局在性の自己免疫病の発症がみられた。全身性ならびに臓器局在性の自己免疫病を引き起こすエフェクタ-細胞は、生後非常に早い時期に胸腺から末梢に出現していることが伺えた。Txー3をしたNODマウスにも複数の臓器に臓器局在性の自己免疫病の発症が認められた。同病変はTxー7あるいはTxー14でも発症する例がみられ、NODマウスの胸腺の機能に欠陥があることが示唆された。ところでTxー3マウスにも膵島炎は発症するが、同病変は無処置マウスに比較して発症率および程度が低い傾向がみられた。Txにより発症する自己免疫病は正常マウスの末梢のL3T4陽性のTリンパ球の注射で予防できた。われわれは標準的なマウス(C57BL/6、A/J,C3H/He、等)の胸腺摘出を新生時期の生後3日におこなう(Txー3)と臓器局在性の自己免疫病が自然発症することを明かとしている。SLE様の全身性の自己免疫病を自然発症するマウスとして、NZB、BWF1,SL/Ni、MRLー1pr,等が開発されている。また、脾臓のランゲルハンス島に対する臓器局在性の自己免疫病を自然発症し、I型糖尿病を引き起こすNODマウスが開発されている。これらの動物の胸腺を新生時期に摘出し、本来発症する自己免疫の消長、並びに新たに臓器局在性の自己免疫病の発症があるかどうかを検討した。C3H/Heーgld,C3H/Heーlpr.,MRL一rlマウスには生後3か月頃からリンパ節の腫大がみられる。このリンパ節腫大はTxー3により完全に予防できた。BWF1、NZB、MRLー1pr,等には糸球体腎炎が発症する。この病変の発現は尿中の蛋白濃度を検定することにより診断できる。Txー3マウスの尿中の蛋白濃度をウロペ-パ-で検定したかぎりにおいては、無処置マウスのそれと比較して、大差は認めなかった。NODマウスに発症する膵臓内のランゲルハンス島炎はTxー3によりあまり影響をうけなかった。自己免疫病を自然発症するマウスにおいて、Txを試みたすべての系統において、本来の病変に加えて、新たになんらかの臓器局在性の自己免疫病の発症がみられた。

自己免疫病の発症のみられた臓器は甲状腺、胃、卵巣、精巣、前立腺、等である。NODマウスは自己免疫性の膵島炎を自然発症し、その結果I型糖尿病を発症するモデル動物として注目されている。NODマウスの胸腺を摘出(Tx)することを基盤として、同マウスの自己の臓器に対する免疫反応を検索した。NOD、A/JおよびBALB/cマウスのTxを生後3日(Txー3)、7日(Txー7)、および14日(Txー14)におこなった。動物は経時的に採血するとともに屠殺し、組織学的に検索した。蛍光抗体間接法(IFL)により、種々の組織に対する自己抗体の出現を検索した。またTxー3のNODマウスに同系正常マウスの脾細胞を注射し自己免疫病の予防の効果を検討した。抗L3T4抗体および抗Lytー2抗体と補体で処理した脾細胞についても検討した。Txー3NODマウスにおいて、膵島のほかに甲状腺、胃、涙腺、眼、卵巣、精巣、前立腺等に炎症を認めた。臓器炎の発症に伴って血中にはそれらの対応臓器と特異的に反応する極めて高力価自己抗体がIFLにより検出できた。涙腺を除いて、これらの臓器炎および自己抗体は無処置NODマウスでは観察されない。Txー3マウスにおいても膵島炎は観察されたが、発症頻度および程度は無処置群に比較して低かった。Txー14のBALB/cおよびA/Jマウスにおいては自己免疫病は観察されなかったが、Txー14のNODマウスにおいては卵巣や前立腺に対する高力価の自己抗体が検出できた。NODマウスの胸腺は標準的なマウスのそれに比較してサプレッサ-Tリンパ球を産生する機能が劣っていることが推測される。Txー3NODマウスの膵島炎以外の臓器炎はTx後に同系無処置マウスの末梢のL3T4陽性のTリンパ球を注射することにより予防できた。
ストリゴラクトン生合成遺伝子欠損トマトの生育特性評価とその利用

ストリゴラクトン(SL)の生合成は、ベータカロテンを基質としてD27という鉄を含むカロテノイドイソメラーゼ、カロテノイド酸化開裂酵素(CCD)のCCD7およびCCD8の働きによってSL生合成前駆体カーラクトンを産生する。CCD8の下流でシトクロムP450酸素添加酵素ファミリーのひとつ、CYP711A(MAX1)による酸化反応を経てSLが産生される。本研究では、トマトの果実形成におけるストリゴラクトン(SL)の役割とトマトにおけるSL生合成経路を明らかにするために、TILLING法でSL生合成欠損変異系統を探索し、その形質を評価した。まず、前年度までの研究成果のうち、SlCCD8欠損系統については、SL産生量、枝分かれの数や葉の老化などの生育特性評価、果実形質評価、根寄生植物Phelipanche aegyptiacaの感染率に関するデータの取りまとめが終わり、雑誌論文として報告した(Hasegawa et al. Int. J. Mol. Sci., 2018)。次に、前年度までに得られたSlCCD8、SlMAX1、SlLBO欠損変異体について枝分かれの数に関する評価を行った。SL合成アナログGR24を購入し、SlCCD8およびSlMAX1欠損系統に処理すると、野生型と同程度まで抑制されることを確認した。しかしながら、SlLBO欠損系統の枝分かれの数については野生型とほとんど変わらなかった。現在、これらのSlCCD8、SlMAX1、SlLBO欠損変異体については戻し交雑を行っている。さらに、SL生合成遺伝子でCCD8の上流で働くSlCCD7欠損系統をTILLING法で探索した。筑波大学遺伝子実験センターが保有する約10,000系統ものマイクロトムの変異誘発系統から、第1エキソンに変異を持つ系統が1つ、第6あるいは第7エキソンに変異を持つ系統が7つ得られた。これらの系統について、枝分かれの数、Orobanche minorの発芽率、SLの産生量などを順次確認している。平成30年度は、SlCCD8欠損系統については雑誌論文として報告することができた。また、SlMAX1およびSlLBO欠損系統に関するデータも揃いつつある。さらに、SlCCD8、SlMAX1、SlLBOに加えて、SlCCD7欠損系統も得られた。マイクロトムのストリゴラクトン関連変異系統が順調に充実してきている。イネやシロイヌナズナではすでにSLの生合成経路が明らかになりつつある。しかしながら、トマトにおいてはカーラクトンより下流の経路がまだ明らかにはなっていない。SlCCD7欠損系統、SlCCD8欠損系統、SlMAX1欠損系統およびSlLBO欠損系統を接ぎ木して枝分かれの数への影響を調べ、また本学が保有するLC-MS/MSを用いてカーラクトン、カーラクトン酸、かーラクトン酸メチル、オロバンコールなどを定量することで、SlCCD8、SlMAX1、SlLBO遺伝子のSL生合成経路上の位置関係を明らかにする。カーラクトン類は非常に不安定で壊れやすいため、すでに分析系が確立されている研究室と連携して対応する。さらに、筑波大学との共同研究で、SL輸送体PDR1が欠損したマイクロトムの変異系統をゲノム編集で探索し、合成されたSLの挙動についても調査を進めていく。本研究では、果実形成におけるストリゴラクトン(SL)の役割とトマトにおけるSL生合成経路を明らかにするために、SlCCD8、SlMAX1、SlLBO遺伝子が欠損したSL生合成欠損系統の果実形質評価、SL欠損系統の接ぎ木実験、SLの定量分析を行った。また、SLは根寄生植物の発芽を誘導するため、トマトを含む様々な農作物が根寄生植物による被害を受けている。そこで、トマトSL欠損系統が根寄生植物対策に利用できるか検証するために、根寄生植物の感染実験を実施した。1.SlCCD8欠損系統を用いた評価SlCCD8欠損系統の成熟果実の割合、果実重量、果実の縦の長さと横の長さ、種子の数、開花までの日数、果実の成熟にかかる日数、糖度、酸度などの果実形質評価を行った。野生型マイクロトムとSlCCD8欠損系統では、果実形質に大きな差は認められなかった。また、果実形成・成熟中のSlCCD8遺伝子の欠損を戻し交雑で導入し、BC1作出した。次に、ライゾトロン法で、トマトに寄生するPhelipanche aegiptiacaの感染実験を行い、SlCCD8欠損系統における根寄生植物の感染率を評価した結果、SlCCD8欠損系統周辺のP. aegiptiacaの発芽率は野生型よりも低下し、感染率も減少傾向を示した。TILLING法で探索したSlMAX1欠損系統8系統、SlLBO欠損系統7系統について、劣勢ホモ変異体の探索、枝分かれの数、LC-MS/MSを用いたSLの定量分析、根寄生植物の発芽試験を行った。このうち、劣勢ホモ変異体で枝分かれの数が増加し、かつSL量が野生型よりも減少していた系統は、SlMAX1欠損系統で2系統、SlLBO欠損系統で2系統存在した。平成29年度は、SlCCD8欠損系統については、果実形質評価、SL欠損系統の接ぎ木実験、SL定量分析、Phelipanche aegiptiacaの感染実験を行い、SlCCD8欠損系統の生育特性についてほぼ必要な情報が出揃った。SlMAX1およびSlLBO欠損系統については、劣勢ホモ変異体探索、枝分かれの数とSL定量分析を行い、SL欠損の表現型を示す変異体を絞り込み、各2系統ずつ劣性ホモ変異体でSL欠損した系統が得られた。初年度としては、かなり順調に研究が進んでいると判断する。

ストリゴラクトン(SL)の生合成は、ベータカロテンを基質としてD27という鉄を含むカロテノイドイソメラーゼ、カロテノイド酸化開裂酵素(CCD)のCCD7およびCCD8の働きによってSL生合成前駆体カーラクトンを産生する。CCD8の下流でシトクロムP450酸素添加酵素ファミリーのひとつ、CYP711A(MAX1)による酸化反応を経てSLが産生される。本研究では、トマトの果実形成におけるストリゴラクトン(SL)の役割とトマトにおけるSL生合成経路を明らかにするために、TILLING法でSL生合成欠損変異系統を探索し、その形質を評価した。まず、前年度までの研究成果のうち、SlCCD8欠損系統については、SL産生量、枝分かれの数や葉の老化などの生育特性評価、果実形質評価、根寄生植物Phelipanche aegyptiacaの感染率に関するデータの取りまとめが終わり、雑誌論文として報告した(Hasegawa et al. Int. J. Mol. Sci., 2018)。次に、前年度までに得られたSlCCD8、SlMAX1、SlLBO欠損変異体について枝分かれの数に関する評価を行った。SL合成アナログGR24を購入し、SlCCD8およびSlMAX1欠損系統に処理すると、野生型と同程度まで抑制されることを確認した。しかしながら、SlLBO欠損系統の枝分かれの数については野生型とほとんど変わらなかった。現在、これらのSlCCD8、SlMAX1、SlLBO欠損変異体については戻し交雑を行っている。さらに、SL生合成遺伝子でCCD8の上流で働くSlCCD7欠損系統をTILLING法で探索した。筑波大学遺伝子実験センターが保有する約10,000系統ものマイクロトムの変異誘発系統から、第1エキソンに変異を持つ系統が1つ、第6あるいは第7エキソンに変異を持つ系統が7つ得られた。これらの系統について、枝分かれの数、Orobanche minorの発芽率、SLの産生量などを順次確認している。平成30年度は、SlCCD8欠損系統については雑誌論文として報告することができた。また、SlMAX1およびSlLBO欠損系統に関するデータも揃いつつある。さらに、SlCCD8、SlMAX1、SlLBOに加えて、SlCCD7欠損系統も得られた。マイクロトムのストリゴラクトン関連変異系統が順調に充実してきている。平成29年度に作出した栽培トマトバックグランドのSlCCD8変異体ホモ系統について、生育特性評価を実施する。評価項目は草丈の長さ、枝分かれの数、成熟果実の割合、果実重量、果実の縦の長さと横の長さ、種子の数、開花までの日数、果実の成熟にかかる日数、糖度、酸度で、野生型とSLを産生できない栽培トマトでは、生育にどのような差が生じるかを明らかにする。栽培トマトバックグランドのSlCCD8変異体ホモ系統における内生SL含量について評価する。まず、LC-MS/MSを用いて4デオキシオロバンコール、オロバンコール、ソラナコールなどの分析を行う。また、水耕栽培を行い、根寄生植物ヤセウツボ(Orobanche minor)の種子発芽試験を行い、SlCCD8変異系統の根滲出液における発芽刺激活性を評価する。
ウサギ肝腫瘍モデルにおける血管新生阻害薬と肝動脈塞栓術の併用による抗腫瘍効果

ウサギVX2肝腫瘍モデルを用いてソラフェニブと肝動脈塞栓術の併用による抗腫瘍効果、また併用時期の違いによる抗腫瘍効果ついて検討を行った。結果としてはソラフェニブと肝動脈塞栓の併用はそれぞれ単独での治療より効果的であり、かつ動脈塞栓後にソラフェニブ投与開始、あるいはソラフェニブ投与開始後早期に動脈塞栓を併用することでより強い抗腫瘍効果を発揮する可能性が示唆された。【目的】進行肝細胞癌に対してしばしばソラフェニブの経口投与が行われているが、十分な治療効果が得られているとはいえないのが現状である。今回我々は肝動脈塞栓術を併用することにより、ソラフェニブが比較的高濃度の状態で腫瘍内にとどまり、より強い血管新生阻害作用が期待できるのではないかと考え、ソラフェニブ経口投与に動脈塞栓を併用した場合の抗腫瘍効果、血管新生の阻害の程度について実験的検討を行った。【方法】VX2腫瘍を肝左葉に移植した日本白色ウサギ20羽を無作為に5羽ずつの4群に分け,移植後2週間で実験に使用した。4群をソラフェニブ投与群、動脈塞栓群、ソラフェニブ投与+動脈塞栓併用群、無治療群に分けた。ソラフェニブの投与は経口的に胃管を挿入し20mg/dayで一週間投与した。肝動脈塞栓は、マイクロカテーテルを左肝動脈まで挿入し、ジェルパートをポンピングにより細かくしたものを逆流しないようにゆっくり注入した。治療前、治療7日後に造影CTを施行しそれぞれの治療群における腫瘍サイズを測定し腫瘍増大率の比較を行った。その後腫瘍を取り出しCD31免疫染色にて血管内皮細胞の染色を行い、顕微鏡での観察で視野あたりの陽性細胞数をカウントし血管新生の程度を比較した。【結果】腫瘍増大率についてはソラフェニブ投与+動脈塞栓群<動脈塞栓群<ソラフェニブ投与群<無治療群となる傾向が見られた。血管新生の比較ではソラフェニブ投与+動脈塞栓群<動脈塞栓群<ソラフェニブ投与群<無治療群となる傾向が見られた。【結論】ソラフェニブ経口投与に肝動脈塞栓を併用することによって、血管新生を阻害し、より強い抗腫瘍効果を発揮する可能性が示唆された。進行肝細胞癌の治療においては現在肝動脈化学塞栓療法が主治療となっているが、経口投与が可能な血管新生阻害薬(ソラフェニブ)が有望な治療となりうると期待されている。ソラフェニブの経口投与と肝動脈の塞栓術を併用すれば、抗腫瘍効果が相乗的になる可能性があり、より効果的な進行肝細胞癌の治療法になることが期待される。ウサギ肝腫瘍モデルを用いた前年度の研究において、ソラフェニブの経口投与に動脈塞栓術を併用した場合、それぞれ単独で治療した場合と比較して、より強い抗腫瘍効果を示す結果を得ることができた。今年度の研究ではソラフェニブ経口投与と動脈塞栓術を併用する時期を変えて治療を行い、画像・病理学的評価によりそれぞれの治療群での腫瘍増大率と血管増生の程度の違いを評価し、併用の最適な時期を比較検討した。肝に腫瘍を移植したウサギを以下の4群に分類しそれぞれの方法で治療を行った(Group1:肝動脈塞栓後ソラフェニブ経口投与、Group2:ソラフェニブ経口投与開始一日後に肝動脈塞栓、Group3:ソラフェニブ経口投与中間に肝動脈塞栓、Group4:ソラフェニブ投与終了後に肝動脈塞栓)。ソラフェニブの経口投与は毎回全身麻酔施行後、胃までネラトンチューブを挿入して行う必要があり、ウサギへの身体的負担が大きいと考え、当初の計画を変更し、投与期間を2週間→1週間へと短縮し、一回の投与量を増やすこととした。結果としてはGroup3やGroup4と比較しGroup1やGroup2で腫瘍増大が抑えられる傾向となった。血管増生についてはそれぞれの群で有意な差は得られなかった。以上の結果よりソラフェニブと肝動脈塞栓の併用は効果的であり、かつ動脈塞栓後にソラフェニブ投与開始、あるいはソラフェニブ投与開始後早期に動脈塞栓を併用することでより強い抗腫瘍効果を発揮する可能性が示唆された。腹部画像診断・IVR平成25年度に予定していた実験計画は細かい統計処理を除いてほぼ終了しており、当研究は概ね順調に進展していると思われる。平成25年度に施行した実験と同様の方法で、血管新生阻害薬と動脈塞栓の併用の効果を塞栓追加時期について検討する。VX2肝腫瘍を移植されたウサギ20羽をランダムに4群(各群5羽ずつA-D)に分類し、A:動脈塞栓+その後ソラフェニブ5mg経口投与・1週間、B:ソラフェニブ5mg経口投与・1週間+開始1日後動脈塞栓、C:ソラフェニブ5mg経口投与・1週間+開始3日後動脈塞栓、D:ソラフェニブ5mg経口投与・1週間+終了後動脈塞栓の治療を行う。画像・病理学的評価により、腫瘍増殖率と血管増生変化率を求め、動脈塞栓併用の最適な時期について検討する。