hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
日韓の共通歴史教科書作成のための総合的研究

そして、ソウル同様、教材作成のために九州北部の調査を行い、名護屋城跡、元寇防塁などの資料収集及び図版作成を行った。本研究は、平成11年度から3ヶ年間行われた科研費による研究「日韓の歴史教科書の改善のための基礎的研究」の成果を踏まえて、両国の高校生を対象とした歴史共通教材の作成を目的としている。研究プロジェクトは、日本側は東京学芸大学を中心とする歴史教育研究会、韓国側はソウル市立大学校国史学科を中心とする歴史教科書研究会によって構成され、メンバーは歴史学・歴史教育を専攻する大学教員・高校教諭・大学院生である。研究方法としては、両国の研究会における文案作成及び討議を踏まえて、年2回の継続的な合同シンポジウムにおいて両国の視点から討議を重ね、文案の修正を行っている。以上の研究目的及び研究方法に基づき、2年次となる本年度は、15年8月にソウル、16年1月に東京でシンポジウムを開催した。ソウルの第12回シンポジウムでは、44本(日本側23本、韓国側16本、相互執筆5本)の文案が発表され、両国の研究者・教育者が前近代史(1)(先史・古代)、前近代史(2)(中世・近世)、近現代史(1)(近代)、近現代史(2)(現代)の4つの部会に分かれて意見交換及び文案の修正を行った。さらに、教材作成のために各地の調査を行い、光州学生事件記念館、雲住寺、晋州城、楽安邑城民俗村、倭城(馬山付近)、金首露王陵附属博物館などで資料収集及び図版用にデジタルカメラでの撮影を行った。東京の第13回シンポジウムでは、ほぼ全ての文案(前回までの議論を踏まえた改訂版)が提出された。さらに、日韓両国の高校生が使用する教材という性格に鑑み、両国が妥結できる歴史認識の具体化、及び文案の精選と平易化を図るために、相手国及び他部会のメンバーによるチェックを行って修正点を抽出した。その成果は次年度8月の第14回シンポジウムでの最終文案に反映される予定である。また、日韓関係史の背後にある両国それぞれの歴史を理解してもらうために、各章に両国の歴史の概説を組み込んだ。なお、継続的な取り組みに基づく研究成果として、歴史教育研究会編『日本と韓国の歴史共通教材をつくる視点-先史時代から現代までの日韓関係史-』(梨の木舎,2003)を刊行したことを附記しておく。以上の研究目的及び研究方法に基づき、最終年次となる本年度は、16年8月にソウル、17年1月に東京でシンポジウムを開催した。ソウルの第14回シンポジウムでは、44本(日本側23本、韓国側16本、相互執筆5本)の文案が発表され、両国の研究者・教育者が前近代史(1)(先史・古代)、前近代史(2)(中世・近世)、近現代史(1)(近代)、近現代史(2)(現代)の4つの部会に分かれて意見交換及び文案の修正を行った。さらに、教材作成のために各地の調査を行い、韓国東海岸(洛山寺・統一展望台など)一帯で資料収集及び図版用にデジタルカメラでの撮影を行った。東京の第15回シンポジウムでは、ほぼ全ての文案(前近代史全8章、近現代史全4)が提出され、最終の検討・修正を行った。
PETを用いた心臓イオンチャンネルイメージングの研究

心臓のイオンチャネルのひとつであるNaチャネルを画像化しその病態を解析することを目的に、1)Naチャネルに特異的に親和性のある陽電子放射核種標識トレーサ^<11>C-diphenylhidantoin(DPH)を開発、2)対向型ポジトロンイメージング装置を用いて小動物(ラット)を撮像、3)このデータをもとに、動態解析を行い、心臓のNaチャネルを画像化、4)マイクロドーズ投与時と薬理量投与時の体内動態、特に心筋への集積の差について検討する。ラット(雄、250g、n=15)を5群に分けた(a:マイクロドーズ(2μgの^<11>C-DPH)b:a+0.5mg/kg,c:a+1.0mg/kg, d:a+3.0mg/kg,and e:a+25mg/kgのDPHを^<11>C-DPHとともに投与)。尾静脈からボーラス投与し、投与直後から対向型ポジトロンイメージング装置で全身撮像を連続20分間行った(1画像/1秒)。投与直後に腹部大静脈から心腔内への^<11>C-DPHの流入が認められ、心臓の位置が同定された。投与後10分15分に、心筋への集積のピークが認められた。投与後20分におけるae群の心筋集積量(RUV)は、1.51±0.20%,1.81±0.06%,1.95±0.05%,1.99±0.09%,and 2.62±0.09%であった。^<11>C-DPHと非放射性DPHのco-injectionにより、心筋への^<11>C-DPH集積が変化したことから、^<11>C-DPH由来の放射能濃度はNaチャネル特異的結合を反映していると考えられた。また、集積量が投与量依存性であることから、マイクロドーズ時と薬理量投与時では薬物動態が異なることが明らかにされた。1)ナトリウムイオンチャンネルに結合するPET標識薬剤の開発抗てんかん薬phenytoinはナトリウムイオンチャンネル特異的阻害剤であり、神経細胞や心筋の電気的活動に影響を与える。phenytoinを陽電子放出核種^<11>Cで標識するために、^<11>COCl2合成装置を製作した。HM18 AVFサイクロトロンにより、^<14>N(5%H2含有)をターゲットとして陽子を加速し、照射。^<14>N(p,α)^<11>C反応で^<11>CH4を生成。^<11>CCl4を経て^<11>COCl2を生成。phenytoinの前駆体と^<11>COCl2を反応させ^<11>C-phenytoinを生成した。^<11>C-phenytoinの体内分布をplanar positronimaging system(PPIS、浜松フォトニクス社製)で測定した。本装置は検出器部がBGOシンチレータで120.8mmx186.8mmの矩形領域を撮像する。空間分解能は撮像平面内で2mm。感度は107cps/kBqである。ラット尾静脈から1530MBq(phenytoinとして1μg/kg)をボーラス投与し、40分間撮像した。

投与後20分間の脳、心筋、肝、腸、腎への集積率(全放射能に対する各臓器の放射能の百分率)は、各々1.5%、1.9%、10.0%、3.9%,1.7%であった。投与後20分以内に肝臓から腸管への排泄が認められた。^<11>C-phenytoinのラット心筋への集積率は、薬理量投与によって増加した(薬理量15mg/kgで2.5%、30mg/kgで2.8%)。したがって心筋ナトリウムイオンチャンネルは今回の投与量では飽和せず、さらに高密度存在すると推定された。心臓のイオンチャネルのひとつであるNaチャネルを画像化しその病態を解析することを目的に、1)Naチャネルに特異的に親和性のある陽電子放射核種標識トレーサ11C-diphenylhidantoinを開発、2)対向型ポジトロンイメージング装置を用いて小動物(ラット)を撮像、3)このデータをもとに、動態解析を行い、心臓のNaチャネルを画像化、4)Naチャネル密度と心機能の関係を解析するために心筋酸素代謝を反映する11C-acetateを標識合成した。トレーサの標識合成は、N_2ガスターゲットに陽子を照射(照射電流10μA,照射時間3分)、14N(p,α)11C反応によって得られた11CH_4から、11CCl_4、11COCl_2を生成し、クロロホルムを反応溶媒として、反応温度0°C、反応時間5分で11C-diphenylhidantoin1187MBqを得た。放射化学的純度は66%であった。11C-diphenylhidantoin注射液(5MBq)をラット(雄、250g、n=3)の尾静脈からボーラス投与し、投与直後から対向型ポジトロンイメージング装置で全身撮像を連続20分間行った(1画像/1秒)。投与直後に腹部大静脈から心腔内への11C-diphenylhidantoinの流入が認められ、心臓の位置が同定された。投与後10分15分に、心筋への集積のピークが認められた。11C-diphenylhidantoinと非放射性diphenylhidantoinのco-injectionにより、心筋への11C-diphenylhidantoin集積が変化したことから、11C-diphenylhidantoin由来の放射能濃度はNaチャネル特異的結合を反映していると考えられた。本研究により、臨床例において心筋Naチャネルとエネルギー代謝の関連について研究を推進することが可能になった。
脳室系の発達過程と脳脊髄液循環システムの解明

本研究は脳脊髄液(Cerebrospinal fluid, CSF)のホメオスタシスに関して産生、循環、吸収のプロセスを統一的に説明し、その異常と病態の基盤を解明することを企図している。本年度は、(1)昨年度に引き続きくも膜顆粒(Arachnoid granulation, AG)の微細形態と、その細胞学的特徴の解析、(2)脳室の繊毛機能に関係する軸糸構成分子CFAP70の細胞生物学的解析、を行った。免疫蛍光染色法で確認されていた細胞が内皮細胞であることを微細形態レベルで確認するために抗Lyve1抗体を用いた免疫電子顕微鏡法を実施した。金コロイドがこれまでTEM観察で内皮細胞と考えていた構造に特異的に局在し、この細胞が内皮細胞としての性質を有することが判った。さらに別の分子マーカーとして抗Prox1抗体での染色も行い、その局在を確認した。また、この細胞がtelocyteと類似した構造を持つことから、AGを構成しうるか否かをその分子マーカーであるCD34ならびにpodoplaninの免疫抗体染色で検討を行なっている。一方、脳脊髄液の循環には繊毛が機能が必須であることから、上衣細胞繊毛でも発現が見られるCFAP70の機能解析、構造解析と行なった。この分子を培養上衣細胞に強制発現させ、そのN末が繊毛への局在に関与することを示した。また、その培養上衣細胞でCFAP70をノックダウンすると繊毛打頻度の低下が見られ、この分子が繊毛運動に重要であること、ひいては脳脊髄液循環に関係することが伺われた。CFAP70の微小管との関係をクラミドモナスの鞭毛軸糸を用い、クライオ電子線トモグラフィ法で解析した。その結果CFAP70がダイニン外腕の基部に存在することがわかり、この分子がダイニン機能の調節に与ることが示唆され、脳脊髄液循環という観点からの新たな研究への足がかりが得られた。1.上衣細胞の繊毛形成とCSF循環上衣細胞繊毛機能において重要な役割を担うと考えられるCFAP70の細胞生物学的解析が進み、同時にクラミドモナス鞭毛を用いて軸糸構造解析や運動解析につなげるところまでの成果を得た。当初の計画では上衣細胞形成機構を時系列で解析する予定であったが、進捗状況を鑑み別のストラテジーで形成過程に関係しうる分子に着目して解析を同時進行させていた。そしてこの中から繊毛機能の解析につながりうる結果を得たため、生物学的な重要性を鑑みて、こちらを優先して解析を進めた。この結果は国際英文誌に原著論文として掲載され、また上衣細胞の繊毛形成に関して当初の目的に貢献する示唆を与えたので当初とは若干方向性は異なるが、脳脊髄液循環機構の解明に資したと考え、上記の進捗評価とした。2.AGの形成とその機能AGに関しては主に微細形態学的な解析に留まったが、これまでに知られていなかったAGでのリンパ管様構造の存在が免疫電験法によって確認できたことは脳脊髄液循環機構の解明に大きな意義があると考える。また、経産ブタを用いた解析も進めており、これまでの生後半年程度の若い個体で行なった解析と併せて発生過程に伴うAGの変化を明らかにしつつある。また最終年度用に手術検体を利用したヒトのクモ膜顆粒で観察を行なうための準備が概ね終わり、ヒトでの知見が得られることから最終年度での論文発表の布石が形成された。従って、概ね進捗したという評価と行なった。予定通りに進まなかった部分はマウスでのAGや上矢状静脈洞の発達が著しく悪く、解析が困難であったためである。従って上記の様に検体をブタに替えて解析を進めているところであり、成果が出つつあるといえる。但しマウスの結果はAGの存在や機能が大型哺乳類に特有のものである可能性を示しており、この意味では脳脊髄液還流機構に比較発生学的な軸を示したものとして興味深い。本予算の最終年度を迎え、本年度はまずAGの形態学的記述に関する論文を完成させこれを英文国際誌に出版する。現時点では若年ブタ、経産ブタでのAGの構造を成長発達の観点から原稿を準備しており、この中にはAGでのリンパ系構造の存在を確認しつつある。複数の分子マーカーでの確認と経産ブタでの変化を主に検討する予定である。また、ヒトの検体を用いてその構造を比較解析し、今後の機能解析の礎にする予定である。一方計画から遅れていた上衣細胞の繊毛の経時的変化を形態学的に追跡し、同時にCFAP70の発現パタンを追跡することを試みる。CFAP70が欠損しても軸糸は壊れないが、繊毛打頻度は明らかに低下することから繊毛の成熟と共にCFAP70の発現が進み、それによって繊毛が成熟することが予想される。繊毛打は周産期に獲得され、生後一定期間を経て弱くなることを2013年に研究代表者が報告しているがその分子機構が明らかになる可能性がある。また、フランスの研究グループによりCFAP70のヒトのホモログでの変異が発見されており、主に造精機能の観点から解析が進行している。既にこのグループとコンタクトを取っており、CFAP70のヒトでの解析も視野にいれて研究を進める予定である。さらに申請書に記載した4833427G06Rikの解析が主に精子形成の観点から別途に進行中なので、この分子の解析から得られる結果も併せて、脳室上衣細胞の繊毛機能を解明できればと考えている。

本研究は脳脊髄液(Cerebrospinal fluid, CSF)のホメオスタシスに関して産生、循環、吸収のプロセスを統一的に説明し、その異常と病態の関連を解明することを企図している。まず、古くからCSFの静脈系への吸収部位として考えられているにも関わらずその機能が明確に解明されていないくも膜顆粒(Arachnoid granulation, AG)に着目し、その微細形態を観察した。マウス、ブタの脳および髄膜を一塊にして摘出し、プラスチック樹脂EPONに包埋し、準超薄切片を作成の上、トルイジンブルーで染色し、AGが存在するか否かを確認した。マウスの硬膜は極めて薄いが静脈洞は存在した。その一方でAGと見られる構造の存在は確認出来なかった。ブタではヒト同様の厚い硬膜が存在し、硬膜組織とは明らかに異なる疎性結合組織がこれを貫く特徴的な構造を同定することができた。電子顕微鏡でその微細形態を仔細に観察すると、髄腔側より伸長した疎性結合組織中に一層の細胞質に乏しい扁平な細胞で内張りされた洞様構造が見られた。また、モンタージュ画像として再構成すると、この構造が髄腔側から静脈洞に至る水路であることが推測された。また細胞は内皮細胞分子マーカーの抗Lev1抗体で染色されることから、リンパ管を含む脈管の内皮細胞であると思量される。以上の結果より、AGは内皮細胞で裏打ちされた洞様構造をその内部にもち、これがCSFを髄腔から静脈系に輸送する流路である可能性が示唆された。輸送が能動的なものなのか、或いは脳脊髄液圧と静脈洞圧の平衡によって調節されているのかを今後検討する必要がある。また内皮細胞の一次繊毛がその調節に関係する可能性もあり、その解明は次年度以降の課題である。これらの知見は様々な水頭症の病態を説明し、治療法を開拓する上での基盤となる。計画書で記載されたノックアウトマウスの供給が一時的に途絶えたため。本研究は脳脊髄液(Cerebrospinal fluid, CSF)のホメオスタシスに関して産生、循環、吸収のプロセスを統一的に説明し、その異常と病態の基盤を解明することを企図している。本年度は、(1)昨年度に引き続きくも膜顆粒(Arachnoid granulation, AG)の微細形態と、その細胞学的特徴の解析、(2)脳室の繊毛機能に関係する軸糸構成分子CFAP70の細胞生物学的解析、を行った。免疫蛍光染色法で確認されていた細胞が内皮細胞であることを微細形態レベルで確認するために抗Lyve1抗体を用いた免疫電子顕微鏡法を実施した。金コロイドがこれまでTEM観察で内皮細胞と考えていた構造に特異的に局在し、この細胞が内皮細胞としての性質を有することが判った。さらに別の分子マーカーとして抗Prox1抗体での染色も行い、その局在を確認した。また、この細胞がtelocyteと類似した構造を持つことから、AGを構成しうるか否かをその分子マーカーであるCD34ならびにpodoplaninの免疫抗体染色で検討を行なっている。一方、脳脊髄液の循環には繊毛が機能が必須であることから、上衣細胞繊毛でも発現が見られるCFAP70の機能解析、構造解析と行なった。この分子を培養上衣細胞に強制発現させ、そのN末が繊毛への局在に関与することを示した。また、その培養上衣細胞でCFAP70をノックダウンすると繊毛打頻度の低下が見られ、この分子が繊毛運動に重要であること、ひいては脳脊髄液循環に関係することが伺われた。CFAP
カルシウムチャネルサブユニット欠損マウスの作製とその機能解析

電位依存性Ca^<2+>チャネルP/Q型のチャネル形成サブユニットα_<1A>(或いはBI)遺伝子の変異である、tottering(tg)、及びleaner(tg-la)(欠神性小発作或いは強い運動失調が特徴的)が引き起こす、P/Q型電流の直接の機能異常を検討した。パッチクランプ法による急性単離ブルキンエ細胞におけるP/Q型Ca^<2+>チャネル、及びBHK細胞に組み換え発現させた両変異体P/Q型チャネルを解析し、野性型の性質との比較をしたところ、2つの変異のうちでは強い行動異常を示すtg-laの方がより強く、P/Q型Ca^<2+>電流の電流密度減少や不活性化の変化を及ぼすことが明らかになった。これらのことは、α_<1A>遺伝子に起因するヒト遺伝性神経疾患の発症機序を明らかにする上で、非常に重要な知見である。また、同じく欠神性小発作或いは運動失調症状を示すstargazerマウスが新規γサブユニット(γ_2)に欠損変異を有することが明らかになった。更には、GTP結合(G)蛋白質による電位依存性Ca^<2+>チャネル活性抑制の分子的機序の検討を行ったところ、Gβ_γがα_<1B>(N型)及びα_<1A>(P/Q型)の繰り返し単位I-II loopに、GaがC末端に結合することが明らかになった。さらには、骨格筋における興奮収縮連関を司る、L型Ca^<2+>チャネル(ジヒドロビリジン受容体)とカルシウム放出チャネル(リアノジン受容体)との相互作用に重要な領域をそれぞれの1次構造上に決定した。これらの知見は種々の変異体における機能異常を理解する上で非常に重要である。さらには、受容体Ca^<2+>チャネルを形成する新規のTRP5のcDNAをマウス脳より単離した。TRP5はHEK細胞内在性のG蛋白質共役型ATP受容体の刺激によって、Ca^<2+>ストアの枯渇とは無関係に開口する、Ca^<2+>チャネルであることが明らかになった。『神経伝導』過程における情報統合、および『神経伝導』と『神経伝達』の間の相互作用の分子様式を解明するべく、以下の研究を達成した。まず、電位依存性Ca^<2+>チャネルの機能特性に関する検討を、組み換え発現系を用いて行った。全く異なった薬剤感受性を示す2種類の高閾値Ca^<2+>チャエルタイプ(L及びN)は、非常に似通った電位感受性・活性化、及びイオン透過性機構を有することが明らかになった。また、神経特異的N型Ca^<2+>チャネルにおいて、GTP結合蛋白質α、及びβγサブユニットは異なった細胞質領域に結合することによって、Ca^<2+>チャネル電流を抑制し、ひいてはシナプス前抑制を惹起することを明らかにした。さらに、cDNAクローニングにより、新奇の受容体作動性Ca^<2+>チャネルTRPのサブタイプ(TRP5)を見い出した。TRP5は脳にのみ発現しており、その活性化開口はCa^<2+>ストア枯渇に非依存的であった。これら形質膜に局在するCa^<2+>チャネル群からの、シグナルの受け手である神経細胞小胞体膜Ca^<2+>放出チャネルの分子的同定も行った。我々が、興奮性細胞のモデル系として追及している骨格

筋興奮収縮連関において、組織特異的な電位依存性Ca^<2+>チャネル-Ca^<2+>放出チャネル間相互作用を明らかにした。以上の知見を、生体に近い状態でのCa^<2+>電流・細胞内動態の解析に生かすため、天然の電位依存性Ca^<2+>チャネル変位マウスより、急性単離神経細胞を調製し、それの電気生理学同定を現在、試みているところである。電位依存性Ca^<2+>チャネルP/Q型のチャネル形成サブユニットα_<1A>(或いはBI)遺伝子の変異である、totterimg(tg)、及びleaner(tg-la)(欠神性小発作或いは強い運動失調が特徴的)が引き起こす、P/Q型電流の直接の機能異常を検討した。パッチクランプ法による急性単離プルキンエ細胞におけるP/Q型Ca^<2+>チャネル、及びBHK細胞に組み換え発現させた両変異体P/Q型チャネルを解析し、野性型の性質との比較をしたところ、2つの変異のうちでは強い行動異常を示すtg-laの方がより強く、P/Q型Ca^<2+>電流の電流密度減少や不活性化の変化を及ぼすことが明らかになった。これらのことは、α_<1A>遺伝子に起因するヒト遺伝性神経疾患の発症機序を明らかにする上で、非常に重要な知見である。また、同じく欠神性小発作或いは運動失調症状を示すstargazerマウスが新規γサブユニット(γ_2)に欠損変異を有することが明らかになった。更には、GTP結合(G)蛋白質による電位依存性Ca^<2+>チャネル活性抑制の分子的機序の検討を行ったところ、Gβγがα_<1B>(N型)及びα_<1A>(P/Q型)の繰り返し単位1-II loopに、GαがC末端に結合することが明らかになった。さらには、骨格筋における興奮収縮連関を司る、L型Ca^<2+>チャネル(ジヒドロビリジン受容体)とカルシウム放出チャネル(リアノジン受容体)との相互作用に重要な領域をそれぞれの1次構造上に決定した。これらの知見は種々の変異体における機能異常を理解する上で非常に重要である。さらには、受容体Ca^<2+>チャネルを形成する新規のTRP5のcDNAをマウス脳より単離した。TRP5はHEK細胞内在性のG蛋白質共役型ATP受容体の刺激によって、Ca^<2+>ストアの枯渇とは無関係に開口する、Ca^<2+>チャネルであることが明らかになった。
急性肝不全における新たな早期酸化ストレスマーカーＮｒｆ２

転写調節因子nuclear factor erythroid 2 (NF-E2)-related factor 2 (Nrf2)は酸化ストレスを感知し、ヘムオキシゲナーゼ-1をはじめさまざまな抗酸化タンパク質の発現を制御している。肝にp450を誘導するフェノバルビタール水前投与後、四塩化炭素CCl4投与した酸化ストレス肝傷害ラットモデルにおいてCCl4投与後早期に肝にNrf2 mRNAの強誘導が見られ、血清ALT値とNrf2 mRNA発現には強い相関が見られた。Nrf2が酸化ストレスの指標として、また、肝不全の重症度の早期診断に役立つ可能性が示唆された。申請者らはこれまでの研究で、急性臓器不全の細胞障害には酸化ストレスが関与し、細胞保護作用を持つストレス蛋白Heme Oxygenase (HO)-1や、その発現を抑制的に制御する転写調節因子であるBach1 mRNAが急性肝不全において肝細胞に誘導されることを報告してきた。最近、活性酸素などの酸化ストレスにより活性化される転写因子Nrf2は、Bach1と相互作用しHO-1などの抗酸化タンパク質遺伝子の発現を強力に活性化するとともに、タンパク分解経路の一つであるオートファージー(自食作用)にも関与し細胞傷害を制御していることが報告された。本研究では、急性肝不全のより鋭敏で早期に感知できる酸化ストレスマーカーとしてのNrf2の有用性を検討するとともに、肝傷害重症化機序のさらなる解明のため、肝傷害とNrf2、オートファジーの関係をin vivo、in vitroさらにはヒト肝不全症例において明らかにする。H24年度は、四塩化炭素(CCl4)暴露ラット劇症肝炎モデルの肝臓おいてNrf2が酸化ストレスマーカーとして使えるかNrf2の発現動態を遺伝子レベルで検討した。H25年度はCCl4暴露ラット劇症肝炎モデルと、より劇症肝傷害となるフェノバルビタール(PB)水を事前に5日間飲水させたCCl4暴露ラット劇症肝炎モデルを作成し遺伝子レベル(Norther blot法)、タンパクレベル(Western blot法)で検討した。PB水前投与CCl4暴露ラット劇症肝炎モデルの方がCCl4暴露ラット劇症肝炎モデルより更に、Nrf2 mRNAが6時間をピークとして強誘導された。CCl4暴露ラット劇症肝炎モデルの肝Nrf2タンパク発現は経時的に明らかな傾向がとらえられなかった。PB水前投与CCl4暴露ラット劇症肝炎モデルでは肝Nrf2タンパク発現は核ではCCl4投与後1時間で上昇する傾向がみられた。申請者らはこれまでの研究で、急性臓器不全の細胞障害には酸化ストレスが関与し、細胞保護作用を持つストレス蛋白Heme Oxygenase(HO)-1や、その発現を抑制的に制御する転写調節因子であるBach1 mRNAが急性肝不全において肝細胞に誘導されることを報告してきた。H24年度は、肝不全においてNrf2が酸化ストレスマーカーとして使えるかNrf2の発現動態をまず明らかにする。四塩化炭素(CCl4)暴露ラット劇症肝炎モデルでは、CCl4由来の酸化ストレスによりヘムタンパクであるチトクロームp450が崩壊し、遊離ヘムの増加をBach1が感知することによりNrf2がKeap1から離れMARE配列に結合しHO-1が誘導されると考えられる。そこで、ラットCCl4肝傷害モデルにおいて、CCl4容量依存的、また経時的にNrf2発現動態を遺伝子レベルで検討した。CCl4をラットに0.12.0 ml/kg body weight投与し容量依存的にNrf2 mRNAの発現が増加した。また、Nrf2 mRNAはCCl4投与後3-6時間をピークとして肝に誘動された。申請者らはこれまでの研究で、急性臓器不全の細胞傷害には酸化ストレスが関与し、細胞保護作用を持つストレス蛋白Heme Oxygenase (HO)-1や、その発現を抑制的に制御する転写調節因子Bach1 mRNAが急性肝不全において肝細胞に誘導されることを報告してきた。最近、活性酸素などの酸化ストレスにより活性化される転写因子Nrf2は、Bach1と相互作用しHO-1などの抗酸化タンパク質遺伝子の発現を活性化するとともに、タンパク分解経路の一つであるオートファージー(自食作用)にも関与し細胞傷害を制御していることが報告された。本研究では、急性肝不全のより鋭敏で早期に感知できる酸化ストレスマーカーとしてのNrf2の有用性を検討するとともに、肝傷害重症化機序のさらなる解明のため、肝傷害とNrf2、オートファジーの関係を明らかにする。

H2425年度は四塩化炭素曝露ラット劇症肝炎モデルとフェノバルビタール(PB)水前投与後四塩化炭素曝露ラット劇症肝炎モデルを用い、Nrf2 mRNAの酸化ストレスマーカーとしての有用性を示してきた。H26年度は、四塩化炭素曝露ラット劇症肝炎モデルの肝臓におけるオートファジーについて検討した。雄性SDラットに四塩化炭素を投与しオートファジー活性化の指標の一つLC3とp62タンパク質の肝臓における発現を検討した。オートファジー活性化に伴い上昇するLC3-IとLC3-IIの比は(LC3-II/LC3-I)は、四塩化炭素投与後1時間より有意に上昇した。オートファジー活性化により低下するp62はCCl4投与後3時間より低下傾向を示し、四塩化炭素投与により肝でオートファジーが活性化していることが予想された。今後、酸化ストレスによる肝傷害の程度とNrf2遺伝子発現、オートファジー活性化の関係をさらに追及してく予定である。医歯薬学CCl4投与モデルではNrf2タンパクの動態を肝組織を核とサイトゾルに分離しWestern blot法で検討したが、明きらかな傾向がとらえにくく、フェノバルビタール水前投与してより重篤な肝傷害モデルで検討する必要があったため、予定よりやや実験がおくれている。H24年度は、CCl4暴露ラット劇症肝炎モデルにおける肝のNrf2の誘動を検討したが、遺伝子レベルの実験はほぼ終了し、現在たんぱくレベルでの発現を検討中である。H26年度は、CCl4暴露ラット劇症肝炎モデルにおける肝のNrf2の発現をタンパクレベルでの検討をさらに続ける。また、肝傷害重症化の機序を明らかにする目的で肝傷害の程度とオートファジーの関与を検討する。臓器傷害の重症化とオートファジーの関係を調べるために、オートファジーをモニターできるオートファゴソーム蛍光標識マウス(GFP-LC3#53)にCCl4投与しオートファジーの有無を組織学的に検討。更に重症肝傷害モデルを作成するために、p450を強誘導するフェノバルビタール(PB)や、細胞保護作用を持つheme oxygenase (HO)を拮抗阻害するスズメゾポルフィリン(SnMP)を前投与したCCl4投与GFPLC3マウスモデルにおいて、肝傷害の程度とNrf2、オートファジーの関係を遺伝子レベル、タンパクレベルで検討する。具体的には、オートファゴソーム蛍光標識マウス(GFP-LC3#53)を用い、CCl4投与群、PB前投与+CCl4投与群、SnMP前投与+CCl4投与群、vehicle群、各群10匹ずつ以下の検討をおこなう。1.肝傷害重症化とオートファジーの関与を組織学的(蛍光顕微鏡、電子顕微鏡)に証明する。3.また、肝傷害の程度をMDA活性、血清ALT値、組織学的検討により評価し、オートファジー不全時に過発現するといわれるp62が肝傷害の程度によりいかに変化するかNrf2の発現とともに比較検討する。
ホール効果による単結晶イッテルビウム化合物の研究

本研究の目的のひとつである、タンマン炉によるイッテルビウム(特にイッテルビウムニッケル系)化合物の単結晶育成については、参加が極めて著しい希土類の化合物の単結晶育成が行えるように炉内を10_<-6>torrの高真空まで減圧出来るように炉を改造した。その結果、この炉を用いたブリッジマン法でランタンニッケル、セリウムニッケルおよびガドリニウムニッケルで残留抵抗比が約50の純良な単結晶を得ることに成功した。現在は、さらに蒸気圧が高く単結晶育成が困難である本研究の目的の物質であるイッテルビウムニッケルの単結晶育成をおこなっている。また、ニッケルと同じ遷移金属であるコバルトとの化合物である希土類コバルト3対1の化合物についても単結晶の育成を行った。本研究のもうひとつの目的であるホール効果等の測定装置の開発については、7テスラの超伝導マグネットの中でホール効果や磁気抵抗とあわせて比熱、磁化の測定が行えるように装置の開発を行っている。本申請で整備されたデジタル電圧計は、ホール効果測定時のホール抵抗測定や比熱測定時の温度計の抵抗測定に用いている。現在のところ最も注目すべき結果は、希土類コバルト3対1の化合物の物性である。まず電気抵抗は昇温するにつれて線形性を失い飽和する。また、ランタン、プラセオディミウム、ネオディミウム、サマリウムと4f電子が増えると系統的に電気抵抗の線形性が回復する。これは、コバルトの3d電子の比較的大きな状態密度がフェルミ面近傍に存在する事、この3d電子とフェルミ面の相対的な位置関係が4f電子のレベルによって決められることを示唆し、4f電子と3d電子の新しい相関を暗示しているように思える。今後も、イッテルビウム化合物と共にこの物質系の展開に期待している。
デザイン系学科における実技科目の教育実践-色彩構成の指導法に関する研究-

生徒は,予めコンピューターにて色彩構成した課題を基準に画用紙に着彩していく。理論的には限りなく手本に近いものが出来上がるはずであるが,現実はかなり厳しいものがある。授業では,混色の段階で明度が下がっていく減法混色の影響が生徒を悩ませていた。絵の具を混ぜるたびに目指す色からどんどん離れていく。しかし,この経験が第2学年時以降の応用編で活かされる。印刷実習の際,「調肉」というインクを混ぜる作業がある。これは刷りの成否に関わる重要な作業であり,実習導入部において必要不可欠なトレーニングとなっている。次に,混色の原理を理解するため組紐の課題を提案した。作業開始直後,紐の編み方に慣れるまで230分程度要したが,その後はスムーズな授業展開であった。2色の紐を編み込むことで,それらは何もしていない状態から姿を大きく変える。出来上がった作品は隣接する色同士が影響しあい,「混色」に似た効果が得られる。すなわち、印刷技術に見られる並置加法混色である。紐の太さおよび色数を増やすことでバリュエーションに幅を持たせることも可能となる。補色関係にある色を選択した場合,目で見た感覚はより印象の強いものとなる。デザイン系の学校および小・中・高等学校で行われる美術・図工など,教育現場での学習効果について期待できる。この課題は生徒の取り組みも良く,結果も踏まえ次年度も継続していきたいと考えている。最後に,グラフィックデザイン系を志望する43名の生徒には,次の2種類の課題を科した。各辺1cm,64個の正六面体を準備し,それぞれの面を赤,青,緑,黄,白,黒で着色する。これらは,併置加法混色の概念を学ぶ教材として関連する科目で使用する。空間における同様のトレーニングのため,「V字型ブロックパズル」を1人あたり8個制作させた。これらに自由に着色させ,パズルの組み方の違いによる「印象」の変化を学習する教材とした。
中・高校生期の双生児と一般児における身体の発育・発達に関する縦断的分析

【目的】ここ近年、若者の男女全般にわたり体力・運動能力面において低下傾向にあるといわれている。その要因に個人の心の変化や社会環境、生活習慣のあり方等が影響していると考えられている。そこで本研究は、新スポーツテストと日常生活におけるアンケート調査より、双生児の類似度を遺伝と環境の側面から分析すると共に一般児と比較・考察し、身体の発育・発達に与えている影響を探るものとする。【方法】2001年度から2009年度までの9年間における13歳から18歳男女延べ6,100名の新スポーツテストデータおよび形態的測定(身長、体重、座高)、並びに生活習慣における質問紙調査の中から、MZ(一卵性双生児)男女約726組、DZ(二卵性双生児)男女148組を抽出し、さらに縦断的分析対象者男女66組を抽出し、母集団の統一化をはかる。そして測定項目ごとに双生児法を用いて、一般児測定データと双生児および双生児間測定データを横断的かつ縦断的に分析を行った。【結果および成果】MZ, DZ、および一般児の男女を比較し、その類似度を調べた結果、双生児は身体形態的発育や単純運動能力においては高い相関があり、体力、運動技術、巧緻性に関する能力においては相関が高くないといった結果を得た。また、これまでの研究結果で質問紙調査「運動・スポーツの大切さ」と測定値(総合得点)との関連では、男女とともに50M走、持久走、立ち幅跳びに有意差が見られ、特に女子では13歳頃から日常生活の中にある一定の運動量を確保することによりスポーツテストの測定結果に反映することがわかっている。そこで今回は13歳から18歳までの女子の双生児(MZ, DZ)を対象に50M走と持久走について遺伝率を求めた。結果、50M走は各年代に於いて遺伝率が高く、中でも中学前半が特に高かった。一方、持久走に於いては遺伝の影響は低く、共有環境、非共有環境ともにその影響が高く、特に高校後半になるほど非共有環境の影響を大きく受けていることがわかった。つまり男女ともに運動の大切さや必要性を感じている者ほど、運動能力の測定値が高く、環境によっても影響を受けやすく、特に女子に於いては環境要因や運動習慣の影響を受けやすいといえる。したがって、早い段階から運動に親しむ習慣と運動の重要性を認識させる必要があると考えられる。
GUI環境下での重度視覚障害者によるソフトウェア開発の方法とその教育に関する研究

GUI方式のOSであるWindowsの普及により、重度視覚障害者のパソコン利用環境は相対的に悪化した。なかでも、独力でのソフトウェア開発が困難になってきたことは、情報処理技術者としての就労の可能性や、障害補償ソフトの自力開発の可能性を閉ざす深刻な問題である。このような背景の下、本研究では以下のことを行った。1)重度の視覚障害を持つ情報処理技術者を対象に、Windowsの使用状況とソフトウェア開発の現状を調査した。その結果、スクリーンリーダの開発や機能の向上によってWindowsの使用環境は徐々に改善されてはいるものの、未だ問題が多く、その原因の一つにはこのシステムを学習する機会の不足であることが明らかになった。また、Windowsの下でのソフトウェア開発における困難が、具体的に判明した。2)Windowsの体系や操作法を非視覚的に教育するための点字教材や触図教材、指導法を開発し、それらの使用効果を確認した。3)Windows用ソフトウェアを非視覚的手段で開発する方法を確立した。開発環境の構築には、点字ディスプレイや音声出力を用いた。非視覚的方法でのソフトウェア開発における困難の一つである画面表示の設定については、文字列によるリソース定義の手法で解決を図った。実行結果や表示レイアウトの独力での確認には、オプタコンを活用した。本研究では、GUI環境の下で重度視覚障害者が独力でソフトウェア開発を行う方法を確立した。しかし、この方法の有効性は、現段階ではまだ小規模で単純なソフトウェアの開発に対してしか確認できていない。さらに、その範囲内においてもいくつかの問題点が残されているのが事実である。今後さらなる研究の継続が必要である。初年度である平成9年度は、基礎段階の研究として以下のことを行った。なお、点字教材や触図教材の作成は、専門の点訳者に依頼した。また、重度視覚障害者用のアクセス機器として、点字ディスプレイ装置、点字プリンタ、音声出力装置等を使用し、触読教材の作成には、点字データ作成システム、イメージスキャナ、立体コピー機等を用いた。1.GUIシステムへの非視覚的アクセスの研究:(1)日本語版および英語版のWindows95を対象に、非視覚的アクセスの可能性を調査し、現状を把握した。(2)Windows95用スクリーンリーダのうちの「95Reader」(日本語環境)と「JAWS」(英語環境)について、機能、操作法等を実証的に調査研究し、それぞれの可能性や問題点等を明らかにした。2.GUIの概念や機能などを非視覚的に教育する方法の研究:(1)Windows95に関する教育を試行的に行い、重度視覚障害者がGUIを理解する道程を明らかにし、教育上必要な要素を抽出した。(2)その結果に基づいて点字教材や触図教材を試作し、検討した。3.ソフトウェア開発用システムに関する調査:(1)Windows95の環境下において非視覚的方法でソフトウェアを開発するのに適した処理系を見いだすために、英語環境用の開発システムとマクロ言語システムのそれぞれ複数種類について調査した。次年度は、非視覚的方法でのソフトウェア開発について重点的に研究する。平成10年度は、研究の中間段階として以下のことを行った。1. GUIシステムへの非視覚的アクセスの研究:新たなOSとスクリーンリーダがリリースされたので、それらについて以下のことを行った。(1)日本語版Windows98への非視覚的アクセスの可能性を調査した。2. GUI環境下でのソフトウェア開発の方法についての研究:Windowsシステムの下でプログラミングを行う方法について調査研究した。(1)前年度の研究成果や視覚障害プログラマーに対するヒアリングの結果に基づいて、ソフトウェア開発用の言語やツールを選定した。(3)前述の「Visual C++ Ver.6.0」をスクリーンリーダの音声化機能とともに用いる方法を確立し、限られた範囲内ではあるが、非視覚的方法でのWindowsプログラミングを可能にした。

3ソフトウェア開発の教育に関する研究:プログラミングやそのためのシステムについて非視覚的に教育する方法を検討した。(1)上記2.の実験を通じて、教育上必要な要素を抽出した。(2)その結果に基づいて点字教材や触図教材を試作した。平成11年度は、ソフトウェア開発の方法論の確立と関連する教育方法の開発を目指して研究を行った。使用実験や評価においては、重度の視覚障害者を被験者とした。点字教材や触図教材の作成は、専門の点訳者に依頼した。1.GUI環境下でのソフトウェア開発の方法についての研究点字ディスプレイや音声出力などを用いてWindows用ソフトウェアを非視覚的に開発する方法を確立し、そのシステムの実現を図るために、(1)点字出力機能付きのプログラムエディタや音声化関数など、非視覚的な方法でのソフトウェア開発に必要な資源を整備した。(2)Windows用ソフトウェアを非視覚的環境で開発する方法を具体的に比較検討して整理し、実行可能な形に体系化した。(3)Windows用ソフトウェアを非視覚的方法で開発するシステムの使用実験を行い、評価した。2.ソフトウェア開発の教育に関する研究Windows用ソフトウェアの開発やそれに使用するシステムについて非視覚的に教育する方法を確立するために、(1)前年度までの成果を踏まえて教育手段や指導法を体系化した。(2)点字教材や触図教材を作成した。(3)教育システムや教材の使用実験を行い、評価した。
源氏物語の注釈書に引かれた物語本文の伝流史-中世における河内本優勢説への批判-

従来の研究によると、源氏物語の本文系統は定家本・河内本・別本に分類され、定家本を重視し始めたのは十五世紀に活躍した宗祇あたりかと推測され、宗祇に教えを受けた三条西実隆が家の証本として定家本系統を採用した結果、近世の流布本も定家本系になった、と考えられている。そこで先ず、宗祇が著した源氏物語の注釈書(『帚木別注』『種玉編次抄』)に引かれた本文を調べると、意外なことに河内本や別本も散在するので、宗祇が定家本を尊重したと見なす通説は再検討の余地がある。次に、三条西家から源氏物語を伝受して編纂した、と考えられる注釈書十一種を調査した。以下、成立順に並べる。1.編者未詳(宗硯か?)『源氏聞書』(1516年成立、竜谷大学図書館本)。2.猪苗代長珊『長珊聞書』(1516年、陽明文庫本)。3.吉田兼右『兼右聞書』(1546年、東海大学桃園文庫所蔵自筆草稿本)。4.里村昌休『休聞抄』(1550年、東海大学桃園文庫所蔵伝徳大寺公推筆本)。5.林宗二『林逸抄』(1560年、天理図書館所蔵自筆草稿本)。6.編者未詳『聞源抄』(1563年、内閣文庫本)。7.里村紹巴『紹巴抄』(1565年)。8.覚勝院『覚勝院抄』(1571年、穂久邇文庫本)。9.九条稙通『孟津抄』(1575年)。10.能登永閑『万水一露』(1575年)。11.編者未詳『紹巴聞書』(1579年、静嘉堂文庫所蔵)。このうち8は複製、7と9・10は活字本、11はマイクロフィルムにより、その他は複製などが出版されていないので実際に閲覧して、紙焼き写真を注文できるものは全て取り寄せた。調査の結果、物語本文の系統は引用部分が短いこともあり、すぐには結論を出せないが、注記内容に関しては今まで指摘されていないことを見出し、それを論文にまとめた(1994年、汲古書院より刊行予定)。
基礎科学・工学と連携した英語教育のための教材と指導法に関する研究

本研究の成果は以下の3つである(1)英国で出版された中学高校用の数学・科学教材を資料とするコーパス(「TACMAS」)の開発、(2)理工系英語学習者のための重要語彙集(「COCET3300」)の開発、(3)『基礎科学・工学重要用例文集』の開発。(1)コーパスは約150万語を蓄えるに到り、(2)(3)を開発するための基礎資料として、大きな役割を果たした。また、語彙や文法項目などを調査する際の資料としての価値も高い。(2)語彙リストは(1)のコーパスを主な資料として、COCET(全国高等専門学校英語教育学会)のプロジェクトチームとともに開発したものである。この語彙リストの訳語や解説などを共同執筆し、メディア教育開発センターの制作により、「COCET3300:理工系学生のために必修英単語3300」を開発した。(3)例文集は、専門科目の教員が専門科目を学習する上で重要な概念を含む英文を執筆・収集するとともに、その例文の内容についての解説をも執筆したものに、英語教員が語彙の解説を加えたものである。β版をインターネット上に公開するとともに、簡易印刷したものを授業で試用中である。基礎科学・基礎工学分野の重要用語集(以下,用語集)を開発するために,以下の作業を行った:1.重要概念の特定用語集が扱う概念の分野は,数学,物理学,通信工学,電子工学,制御工学,及び情報工学とした。各分野の基本概念は,高等専門学校の3年終了時で既習事項であることとし,約3040の概念を選定した。最終的には200程度の基本概念を含む例文からなる用語集を開発する。2.フォーマットの決定と例文データベースの開発用語集に記載する項目は,「例文・和訳・例文中の重要語・発音・語義・内容の説明」とし,これらの項目をインターネット上から入力するデータベースを開発した。本年度は各分野の担当者が、計60程度の例文を作成・入力した。入力作業と平行して,各々の例文について,研究代表者,他1名の英語科教官が入力内容を検討し,補足・修正をおこなった。3.数学・理科・工学教科書のテキスト・データベース(コーパス)の開発英国で出版された,数学・理科教科書を第一次資料とする,コーパスを開発中である。このコーパスの開発目的は,(1)用語集を開発するための補助データとして,例文作成者が利用すること,(2)英語授業・学習の補助教材として,教師・学習者が利用すること,の2つである。データとする教科書(約100冊)は,主に英国の中等教育(12歳17歳)向けのものから選定した。主な分野は数学,科学・工学一般,物理学,生物学,及び化学である。作業は,(1)ドキュメントスキャナにより教科書をパソコンへの取り込み,(2)テキスト(文字)部のみからなるファイルを作成し,(3)コーパス・データとして加工する,という手順でおこなっている。本年度は約20冊程度の教科書について,これらの作業をおこなった。コーパス全体の設計については,現在開発中である。基礎科学・基礎工学分野の重要用語集(以下、『用語集』)を開発するために、以下の作業を行った:1.基礎科学・工学分野の例文作成用語集が扱う、数学、物理学、通信工学、電子工学、制御工学、及び情報工学の各分野において、高等専門学校の3年終了時で既習事項である基礎的概念を含む例文を作成した。各分野で約3040の例文を、前年度に引き続き、作成した。2.用語集フォーマットの改良各例文について、「日本語訳・例文中の重要語・語義・内容の説明」を作成した。「発音」については次年度に記入する予定である。『用語集』は、紙媒体としてだけでなく、Web上での利用を考えているため、適切なフォーマット、およびインターフェイス(利用画面)を開発中である。3.数学・理科・工学教科書のコーパス(TACMAS)の開発英国で出版された数学・理科教科書を第一次資料とするコーパスを開発し、TACMAS (Takuma Academic Corpus of Math And Science)と名付けた。このコーパスに蓄えた言語資料に関して諸学会で分析結果を発表し、肯定的な評価を得た。また、このコーパスは、各例文制作者によって執筆された例文の妥当性を検証する補助データとして利用できる。つまり、コンコーダンス・ソフトウェアを利用することにより、中心的概念を担う語のコロケーション(連語)情報を検索し、例文の適切さを確認し、ある場合には改訂することができるようになった。

(3)例文集は、専門科目の教員が専門科目を学習する上で重要な概念を含む英文を執筆・収集するとともに、その例文の内容についての解説をも執筆したものに、英語教員が語彙の解説を加えたものである。β版をインターネット上に公開するとともに、簡易印刷したものを授業で試用中である。
大腸癌の生物学的特徴に関与する遺伝子異常の総合解析

癌の発育過程には、様々な遺伝子変異が関与し、その変異が段階的に蓄積された結果、癌特有の形質を獲得する。しかしながら、実際の臨床で遭遇する癌には、多種多様な遺伝子異常が併存しており、これらの変異が総合的に組み合わされ実際のヒト癌の性質が決定されていると思われる。本研究では、豊富な臨床標本を用い、様々な癌関連遺伝子を総合的に解析し、大腸癌発生機序、大腸がん発生過程、および治療過程におけるアポトーシス機構、さらに大腸癌の放射線療法、化学療法に対する感受性との関連性を総合的に検討した。2.大腸癌細胞株に、Bcl-2,Bcl-xLを遺伝子発現を抑制するアンチセンスオリゴを導入し、その感受性の変化をIn Vitroで検討した。その結果、Bcl-xLを抑制することにより、化学療法の効果を強く促進することが解った。この事実から、Bcl-xLの変化が大腸癌におけるアポトーシス機序の異常と強く関係していることが明らかとなった。3.放射線感受性については、細胞周期調節因子であるであるp53とp21/WAF-1とともにBcl-2の発現を照射前の生検標本で調べ、それぞれの発現と照射効果について臨床例での検討を行った。その結果、p53の発現が陰性でp21の発現が陽性の場合、照射の効果が著明で、逆にp53の発現が陽性でp21の発現が陰性の場合放射線抵抗性であることが解った癌の発育過程には、様々な遺伝子変異が関与し、その変異が段階的に蓄積された結果、癌特有の形質を獲得する。その結果、p53の発現が陰性でp21の発現が陽性の場合、照射の効果が著明で、逆にp53の発現が陽性でp21の発現が陰性の場合放射線抵抗性であることが解ったBcl-2の発現は、大腸癌細胞株の約20%に認められた。p53、Bcl-2、Baxの発現の間に明らかな相関は認められなかった。Bax、Bcl-X_L、Bcl-X_S、Bak、Badの発現は、ほとんど全ての細胞株で認められたが、その発現量には細胞株の間で相違が認められた。大腸癌細胞株における化学療法剤5-FUに対する感受性とApoptosisを解析し、5-FUに対する感受性にはp53-dependentなApoptosisが関与していることが示唆された。さらに、直腸癌に対する放射線療法感受性とp53、Bcl-2、p21の発現の相関を検討し、p53(+)/p21(-)の腫瘍は放射線療法に対して抵抗性を示し、p53(-)/p21(+)の腫瘍は放射線療法に対して良好な感受性を示すことが明らかになった。化学療法、放射線療法に対する感受性を規定する因子として、p53が重要であると考えられる。Bcl-2の発現は、大腸癌細胞株の約20%に認められた。大腸癌切除標本におけるBcl-2とBcl-X_Lの発現の解析から、腫瘍においてBcl-K_Lの発現上昇、Bcl-2の発現低下が認められた。大腸癌における5-FU耐性は、従来報告されたきたThymidylate SynthaseよりもDihydropyrimidine Dehydrogenaseの発現と相関していることを報告した。1.大腸癌発生関連遺伝子の解析大腸癌発生に深く関与している癌抑制遺伝子APについて、その臨床応用を目指した検討を行った。APCは巨大な遺伝子であるため、遺伝子異常の有無を測定することが困難な状況であるのが実状である。これを解決するために、AP遺伝子の断片を測定するスクリーニング法を確立した。

一方、ミスマッチ修復遺伝子異常によって生じる大腸癌については、多発性大腸ポリープに対する治療方針決定の観点から検討を行った。その結果、表面型腺腫では33%、癌では50%のreplication error(RER)が認められた。従って、表面型腫瘍においては、RERが大腸癌発生過程の初期段階で生じることが判明した。2.化学療法、放射線治療抵抗性関連因子の解析大腸癌に対する化学療法の感受性については、大腸癌細胞株を用いたアポトーシス関連因子の検討を行った。アポトーシスに強く関与しているBcl-2ファミリー(Bcl-2、Bcl-X_L、Bax、Bad、Bak)の発現を5種類のヒト大腸癌細胞株を用いて検討した。その結果、腫瘍に発現するアポトーシス抑制因子(Bcl-X_L)と促進因子(Bax)との比率が化学療法の効果を予測する上で重要なポイントであることが判明した。一方、放射線感受性については、細胞周期調節因子として重要なp53とp21/WAF1の発現ならびにアポトーシス関連因子としてBcl-2の発現を照射前の生検標本で調べ、それぞれの発現と照射効果について臨床例での検討を行った。その結果、P53の発現が陰性でP21の発現が陽性の場合、照射効果が著明で、逆にp53陽性でp21陰性の場合、放射線抵抗性であることが判明した(正診率93%)。これにより、照射前にその効果をある程度予測できることが判明した。2.大腸癌細胞株に、Bcl-2,Bcl-xLを遺伝子発現を抑制するアンチセンスオリゴを導入し、その感受性の変化をIn Vitroで検討した。その結果、Bcl-xLを抑制することにより、化学療法の効果を強く促進することが解った。この事実から、Bcl-xLの変化が大腸癌におけるアポトーシス機序の異常と強く関係していることが明らかとなった。
台湾・平埔族の言語資料の整理と分析

(1)前年度に引き続き、小川資料に残るシラヤ語の資料を整理し、コンピュ-タに入力した。さらに原典・原ノ-トに遡って照合を行い、また中国語・日本語が読めない外国人研究者の便を考え、発音を漢字で表わした清朝時代の資料についてはロ-マ字翻字を付した。その結果シラヤ語資料とされているものが、実質的にはシラヤプロパ-・タイボアン・マカタオの3種の方言にわけることができることが判明した。(土田・山田)(2)浅井資料のうち、「平埔蕃Basai」と標題をつけられたノ-トを整理しコンピュ-タに入力した。重複項目を除く異なり語数は約1000項目。英訳をつけ、バサイ語からも英語からも引けるようにした。(森口)(3)小川資料のうち、ケタガラン語に関わるノ-ト類を整理し、カ-ドにとり、コンピュ-タに入力したが、時間切れとなり、公表する段階には至っていない。(土田)(4)上記(1)と(2)の結果を印刷に付し、発表し得る形にまでまとめることができた。シラヤ語は17世紀における台湾のオランダ統治時代の聖書翻訳や語彙集、18ー9世紀における清朝時代の土地売買契約書などの資料しか存在せず、日本時代に収集し得た各方言の資料として貴重である。またバサイ語資料はこれまでまったく利用し得なかった資料である。それを見ると、祖語における*Lがtsで現われる点は、かつて台北付近に話されていたケタガラン語と同じであり、一方祖語の*sもtsで現われる点は、東海岸のアミ語と同じという、やや奇妙な音変化をみせることが判明した。また語彙的にはカバラン語と共通した部分も多く、いずれか一方から他方へ借用されたものかもしれないが、更に精密な研究が必要である。小川・浅井資料のざっとした目録作成のため、ぱらぱらになったノ-トやル-ズリ-フの資料をほぼもとの形に復元し、それぞれの言語ごとに分類することはできたが、それら資料の前後関係を確定するには至っていない。そのうち保存状態が比較的よく、また読みやすいていねいな字体で書かれてあり、かつ、資料的な価値が高いと考えられる以下の資料の入力を行なった。1.小川尚義作成にかかわるSiraya語比較語彙表(かつて台南を中心に話されていたSiraya語の単語165項目を約60の集落からの聞き取りに加え、オランダ時代から日本時代に至る欧文資料14点、さらに清朝時代の漢文資料1点を比較対照した貴重な資料)。(未校正)2.浅井恵倫による現地調査によって集められたBasay語およびKavalan語(いずれも台湾東海岸行なわれた言語)の語彙集(まだ半分ほど未入力)。これらの資料は比較的読みやす今とはいうものの読み取りには多大の時間と忍耐を要し、その結果、当初予想したより以上の謝金を支出せざるを得なかった。