hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
量子渦糸乱流の大規模シミュレーションによる研究II

本研究の目的は、近年、飛躍的に発展している巨視的量子ダイナミクスの研究において、更に研究進展を加速させ、新しい概念形成を目指すため、超大規模数値シミュレーション(テラフロップス及びテラバイト級の世界最大のシミュレーションを行う)による量子ダイナミクスの研究を行うことである。尚、本研究で研究を行う具体的対象は、希薄原子ガス及び超流動ヘリウムにおいて共通に現れダそのイナミクスを支配する量子渦糸の多体ダイナミクスであり、計画研究代表者(坪田誠氏)と密接に協力し、超大規模シミュレーションを地球シミュレータ及び研究機関のスパコン等で実施した。その結果、量子乱流の直接シミュレーションとしては、世界最大規模の2096の3乗グリッドでのFFTを用いた超並列シミュレーションに世界で初めて成功し、量子乱流分野にて確認すべき課題であった「量子乱流のコルモゴロフ則のサイズによらない不変性」を実際に確認する等の成果を得た。近年希薄原子ガスにおけるポーズ・アインシュタイン凝縮の成功により、巨視的量子現象の直接観測が可能となり、量子ダイナミクス、延いては、量子力学に対する根本的理解が飛躍的に進歩する可能性が開けてきた。このように、大きな飛躍への転換機にある巨視的量子ダイナミクスの研究に対し、更に研究を加速させ、新しい概念形成を目指すため、本研究では超大規模数値シミュレーション(テラフロップス及びテラバイト級の世界最大のシミュレーションを行う)による量子ダイナミクスの研究を行うこととした。平成20年度、本研究で具体的に研究を実施した対象は、希薄原子ガス及び超流動ヘリウムにおいて共通に現れダイナミクスを支配する量子渦糸の多体ダイナミクスであり、研究代表者(坪田誠氏)と密接に協力し、超大規模シミュレーションを地球シミュレータ等を利用し、量子乱流状態のスペクトル解析を行った。特に、前年度までに得られたコルモゴロフスケーリングが高波数で破れた部分について、それが数値計算による産物であるか、物理的に本質的なものであるかについて詳細に追試シミュレーションを行い検証し、後者(即ち、物理的に本質的なもの)であることを突き止めた。
文化と世界市場－日伊文学作品の受容・流通・拡販の力学

比較文学に文芸社会学的視点を加味したアプローチによって、日本語文学が「世界文学」の文脈のなかで果たしつつある(そして果たしうる)機能を、イタリア語圏文学における翻訳出版を通してみる受容の様態に着目することで明らかにすべくしようとする、これまで未着手の研究が大きな意義を有することになる。まず研究主題に関する理論的背景を渉猟することから始めて、最新の理論的枠組みを措定した。国内の諸機関に赴かせ参考文献の収集にあたらせるとともに、適宜、イタリアでの資料収集に派遣した。日本語・イタリア語・英語圏における三様の学問背景を有する多様かつ豊富な方法論的アプローチが可能になった。つまり、日伊文学作品のグロバリゼーションと流通に関する越境的かつ普遍的反復モデルを同定することが可能になった。以後も適宜、最新の参考文献と研究方法の更新を促した。併せて「世界文学」の理論と研究に携わる多数の国内研究者に紹介を行うことで、進行中の研究の主体的な反省と見直しを示唆した。日伊文学作品の受容・流通・拡販をめぐる力学に関する理論的背景を明確に把握するに至り、次いで、日伊双方における文学作品の翻訳と出版の詳細な分析に移った後、この力学作用に関する包括的なスキームを完成させた。以降は、より実践的な作業へと研究は移行し、国内の大手出版社の文学編集者や国際ライツ事業部スタッフ等とのインタビューの準備に着手した。インタビューの目的は、版権取得過程における実践的手続き全般にわたる知見の獲得をとおして、市場流通のメカニズムの実態を確認することにあった。次いで、イタリアの主要出版社(Feltrinelli、Einaudi、Il Saggiatore、Neri Pozza)の編集者、さらには現代文学の日英翻訳者、文芸批評家などにもインタビューを行わせた。研究成果の一部は、第2回東アジア翻訳研究学会等、国際会議で発表させた。28年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は文学作品が越境的もしくはグローバルな市場において、どのような力学のもとに生産され、流通し、受容されるかについて、特に日伊両国の文学市場に焦点をあて語圏横断劇な比較文学研究として考察するものである。とりわけその受容から流通に際して作用する力学に着目するため、外国人特別研究員である補助研究者にとって、当該の国内研究者との交流および意見交換が、きわめて有効であると考えられる。この観点から、3月19・20日両日、本学(東京外国語大学)において開催した「世界文学・語圏横断ネットワーク第2回研究集会」への参加は、当初の予定どおり、補助研究者はもちろん本研究自体にとって、最良の舞台となった。研究代表者とともに運営に携わるとともに、研究代表者が主宰し司会を務めたシンポジウム「世界文学と(しての)日本文学」は、補助研究者に多大な示唆をもたらしたものと認識している。日伊両国の文学市場に焦点をあて、今日の文学作品が越境的もしくはグローバルな市場において、どのような力学のもとに生産され、流通し、受容されるかについて、比較文学的方法を中心に据えて考察を行ってきた。とくに、それぞれ日伊両言語を表現言語とする作家のなかでも、当該2言語(母語・非母語に関わらず)に加え、複数言語使用もしくは第3、第4の言語を表現言語とする作家を研究対象に加えることで、語圏横断的な比較文学研究のなかに、日本語文学およびイタリア語文学をも組み込んだ作品分析、さらにはその受容から流通、普及にあたり作用する力学を総合的に考察する作業を中心に進めてきた。その成果は研究分担者による論文3本と研究発表2回に見ることができる。研究実績の概要に述べたとおり、研究分担者は研究代表者の指導のもと、着実に研究目的に沿った成果を上げつつある。2015年度だけで国外での口頭発表2回および論文3本という実績は充分に研究の進展状況をしめしているとみなすことができる。本研究が、今日の文学作品が越境的もしくはグローバルな市場において、どのような力学のもとに生産され、流通し、受容されるかについて、比較文学的方法を中心に据えての考察であることから、語圏横断的な比較文学研究のなかに、日本語文学およびイタリア語文学をも組み込んだ作品分析、さらにはその受容から流通、普及にあたり作用する力学の総合的分析を積み重ねることこそが、他でもない研究進展の王道であり、研究分担者はこれを充分に果たしている。

以降は、より実践的な作業へと研究は移行し、国内の大手出版社の文学編集者や国際ライツ事業部スタッフ等とのインタビューの準備に着手した。インタビューの目的は、版権取得過程における実践的手続き全般にわたる知見の獲得をとおして、市場流通のメカニズムの実態を確認することにあった。次いで、イタリアの主要出版社(Feltrinelli、Einaudi、Il Saggiatore、Neri Pozza)の編集者、さらには現代文学の日英翻訳者、文芸批評家などにもインタビューを行わせた。研究成果の一部は、第2回東アジア翻訳研究学会等、国際会議で発表させた。補助研究者の来日が11月末と遅く、実質的な研究期間は4ヵ月であったため、当初より、主として研究対象とする作家と作品をめぐる市場力学について分析考察する計画であった。必要な主要関連書籍はあらかじめ研究代表者が準備してあったので、資料の整理等のために補助研究者にはあらたにパソコンを購入させるにとどめた。そのうえで、本研究の方針および計画を入念に再検討しつつ必要な修正を加えた。また補助研究者には積極的に国内の研究者との交流および資料収集を促し、国内旅費を支出した。また、3月末、研究代表者が発起人を務める「世界文学・語圏横断ネットワーク」による第2回研究集会に補助研究者を参加させ、上述のごとく、新年度以降の成果発表の準備を進めさせた。以上の点から、概ね当初の計画通り研究は進捗していると認識している。最終年度の成果検証を目的として、研究分担者には国外で開催される学会での発表を行わせる(イタリア日本学会を予定している)。国内での成果検証手段としては、9月24日25日京都にて開催予定の「世界文学・語圏横断ネットワーク」による第5回研究集会(於:立命館大学)に研究代表者・同分担者ともに参加することによって行う予定である。この間、11月末の研究協力者の離日に照準を合わせ、これまでの成果集成にむけて、その方法と形態を検討しつつ、作業を重ねる。またイタリア美学会誌『ESTETICA』に研究代表者および補助事業者が投稿する論文2本の掲載を予定している。28年度が最終年度であるため、記入しない。補助研究者には積極的な成果発表を促すとともに、前年度同様、国内の研究者との打合せもしくは資料収集に当たらせる。また国外の研究集会もしくはシンポジウム等において、国外の研究者との意見交換の機会も設け、研究の相対化に努めさせたい。具体的には、5月開催予定の美学・比較文学関連シンポジウム(於ボローニャ大学)の聴講、また9月開催のイタリア日本学会(カターニア大学)およびイタリア比較文学会(フィレンツェ大学、11月)における成果発表により、検証を試みさせる。その際、あわせてドイツ、フランス、イタリア在住の研究対象とする作家にインタビューを行わせたい。
レーザーによる残留応力制御および疲労防止技術の開発

本研究では、SUS304に融解や組織変化を起こさない条件でレーザーを照射することによって、圧縮残留応力を生成いた上での、疲労強度向上の可能性を検討した。その結果、条件が満足すれば疲労強度を高めることが可能であることを明らかにした。金属表面にレーザー照射を行った場合、疲労強度に影響を与える大きな因子としては、熱応力によって生ずる残留応力と表面上に形成される凹凸形状が挙げられる。残留応力は、組成変化を生じない温度条件の下で熱応力による塑性変形のみによって発生することを想定した。まず、非線形非定常熱弾塑性有限要素解析による計算により、残留応力分布は試験片形状に依存することが分かった。表面の凹凸は、レーザー照射部に発生する酸化膜によってできていることを電子顕微鏡観察から明らかにした。その場合き裂が多数発生し、疲労強度は低下することが分かった。丸棒の場合、レーザー照射によって表面に圧縮残留応力が発生し、疲労強度的に有利になる。しかし、圧縮残留応力と表面凹凸の両者が発生した場合には、疲労強度が弱くなった。もし、圧縮残留応力が生じていて、しかも表面に凹凸がない状態を実現できれば疲労強度が向上するはずである。切欠き付丸棒の切欠き横にレーザーを照射した場合には、この条件を満足することを有限要素性によって明らかにした。実験的な検証として応力集中部である切り欠き底に圧縮残留応力を発生させて疲労強度を求め、レーザー未照射材のそれとくらべたところ疲労強度が向上することが明らかとなった。レーザー処理はレーザー光の届く所であればどこでもよく、大気中でも行なえるので、使い方の自由度は非常に大きい。実際の機械部品に対して、疲労強度を強化したい部分だけにレーザー照射して処理を行なうことも可能であろう。レーザー処理は、現在開発中のものであり、今後の研究が進めば、実用価値を増していくと思われる。レーザー照射用試験片精密走査装置の開発:YAGレーザー照射装置から放出されるパルスレーザーをJIS標準丸棒試験片に照射するための精密走査測定装置を設計・試作した。これにより、照射時の試験片回転速度を幅広い範囲で高精度に制御出来るようになり、これまで困難とされてきた、レーザーの照射ムラの問題を解決することができた。また、レーザーのデフォーカス量や、周波数、強度、波形形状を幅広い範囲でパラメータスタディすることにより、材料組織変化を伴わない降伏条件発生条件を明らかにした。X線残留応力測定装置による残留応力データの収集:SUS304の平板にレーザーを照射した上で、照射線直交方向の残留応力分布をX線法によって測定した。しかし、SUS材に対してはSN比がよくないこと、分解能が十分でないこと、などの理由で必ずしも高精度の測定は行えなかった。次年度も引続き検討する。疲労強度基礎データの収集:疲労強度改善の効果を図るために、非照射材と照射材の両者について回転曲げ疲労実験によるSN試験を実施した。本年度は非照射材について疲労限の解析を行った。解析は通常の統計的疲労試験法によった。得られたSN曲線と疲労限の値を材料学会疲労強度データベースと比較したところ、ほぼ妥当なデータとなっていることが確認された。今後得られる照射材のSNデータと比較することにより疲労限の改善効果が確認できる。熱応力分布の解析:平板にレーザーを照射する際の熱応力による降伏発生条件を、実験的及び計算により考察した。今のところ、有限要素法による計算により、温度分布の変動を正確に評価できることが確認されている。本研究では、SUS304に融解や組織変化を起こさない条件でレーザーを照射することによって、圧縮残留応力を生成した上での、疲労強度向上の可能性を検討した。

その結果、条件が満足すれば疲労強度を高めることが可能であることを明らかにした。金属表面にレーザー照射を行った場合、疲労強度に影響を与える大きな因子としては、熱応力によって生ずる残留応力と表面上に形成される凹凸形状が挙げられる。残留応力は、組成変化を生じない温度条件の下で熱応力による塑性変形のみによって発生することを想定した。まず、非線形非定常熱弾塑性有限要素解析による計算により、残留応力分布は試験片形状に依存することが分かった。表面の凹凸は、レーザー照射部に発生する酸化膜によってできていることを電子顕微鏡観察から明らかにした。その場合き裂が多数発生し、疲労強度は低下することが分かった。丸棒の場合、レーザー照射によって表面に圧縮残留応力が発生し、疲労強度的に有利になる。しかし、圧縮残留応力と表面凹凸の両者が発生した場合には、疲労強度が弱くなった。もし、圧縮残留応力が生じていて、しかも表面に凹凸がない状態を実現できれば疲労強度が向上するはずである。切欠き付丸棒の切欠き横にレーザーを照射した場合には、この条件を満足することを有限要素法によって明らかにした。実験的な検証として応力集中部である切り欠き底に圧縮残留応力を発生されて疲労強度を求め、レーザー未照射材のそれとくらべたところ疲労強度が向上することが明らかとなった。レーザー処理はレーザー光の届く所であればどこでもよく、大気中でも行なえるので、使い方の自由度は非常に大きい。実際の機械部品に対して、疲労強度を強化したい部分だけにレーザー照射して処理を行なうことも可能であろう。レーザー処理は、現在開発中のものであり、今後の研究が進めば、実用価値を増していくと思われる。
新規低分子化合物による抗HIV‐1中和抗体感受性の特異的増強とメカニズムの解析

低分子化合物NBD-556は、CD4が結合したときと同様にgp120の立体構造を大きく変化させ、中和単クローン抗体の反応性を著しく増強することをこの基盤研究により証明した。NBD-556存在下では、中和単クローン抗体だけでなく、患者血清IgGで同時期に分離されたウイルスを中和できるようになる。これらの結果は、このNBD化合物が免疫増強作用を持つ低分子化合物として、新しい抗HIV治療の道を開くことが期待される。HIV-1 gp120の立体構造変化を誘導し中和抗体の感受性を増強する低分子化合物の開発平成20年度は、HIV-1 Envの立体構造を変化させて、中和抗体の感受性を増強させる化合物の検索を行った。NBD-556という低分子化合物はV3ペプチドに対するCD4i抗体の反応性を増強することがELISAアッセイで確認できた。また、感染細胞表面のHIV-1 Envに対するCD4i Abや抗V3Abの反応をsCD4非存在下で有意に増強することがFACS解析により確認できたことから、この化合物が三量体上でCD4様の立体構造変化(エピトープの露出)を惹起していることが分かった。これらを確認した後、HIV-1治療用中和抗体KD-247との相乗効果の判定を行った。この抗体は、6種類のV3のtip部分を含むペプチドを連続してマウスに免疫することにより得られたもので、gp120の可変領域以外の部分をヒト型に置き換え、HIV-1感染者への臨床投与を目指して開発されて来た単クローン抗体である(Eda Y, et al., J Virol 80:5552-5562,2006, J Virol80:5563-5570,2006)。NBD-556とKD-247を同時にウイルスと反応させて、それぞれ単独投与時と比較して、相乗効果が見られるかを2種類の異なるsynergy判定法(Chou and Talalay's methodと3-Dementional method)で確認した。その結果、NBD-556を加えることで、KD-247の中和活性が増強されることが分かった。このことから、NBD-556がsCD4と非常に似た中和感受性増強作用を引き起こすことが示唆された。今年度の結果から、この化合物とその誘導体が非常に有望な構造変化誘導物質であることが確認できた。来年度は、この化合物がどのようにウイルスのgp120と結合しているかを予測するため、我々が新規に樹立したin vitro耐性誘導システムを用いて(Yoshimura K, et al., AIDS,20:2065-2073,2006)、化合物に耐性のウイルスを誘導し、sCD4の耐性ウイルスとシークエンスを比較する予定である。前年度に引き続き、平成21年度も我々はHIV-1エンベロープの立体構造を変化させて、中和抗体の感受性を増強させる低分子化合物(NBD-556)に関する研究を行った。NBD-556がどのようにウイルスのgp120と結合しているかを予測するため、我々が新規に樹立したin vitro耐性誘導システムを用いて、化合物に耐性のウイルスを誘導した。PM1/CCR5細胞にIIIBウイルスを感染させ、NBD-556またはsCD4をそれぞれ1μM及び1μg/ml存在下に培養を開始する。NBD-556は50μM (21 passage)、sCD4は20μg/ml (5 passage)まで培養を続け、パッセージごとにエンベロープのシークエンスを行い、それぞれの変異部位を同定した。また、耐性変異アミノ酸を持ったpseudovirusを作製し、NBD-556とsCD4に対する感受性を野生株のエンベロープを持つものと比較検討した。その結果、NBD-556耐性ウイルスは、sCD4耐性変異と非常に近い場所、すなわちCD4 cavityといわれるCD4結合部位に集中してみられることが分かった。このことは、V3に対する中和抗体の抗ウイルス効果を増強するような立体構造変化を引き起こす機能を持つ分子量350前後の低分子化合物NBD-556が、in vitro耐性誘導実験の結果sCD4の結合部位に近い場所に結合していることを意味している。これらの結果は、NBDのどの部位が立体構造の変化に強く関与しているかを知る上で、非常に大きな知見となった。現在進行中であるNBD-556類似の構造で、より活性の強いNBD compoundの誘導体の設計を行う上で大変有用な情報となることは確かである。事実、現在10以上のNBD誘導体を今回の結果をもとに合成している。今後、これらの中からより低濃度で、強力に中和抗体の感受性を増強し、細胞毒性も低いものを追求していく。これまで我々は、低分子化合物NBD-556がgp120の立体構造を大きく変化させ、中和抗体の反応性を増強することを証明し、この化合物が非常に有望なHIVのエンベロープ構造変化誘導物質であることを示した。

また、NBD-556のin vitro耐性誘導により、その結合部位がsCD4の場所に非常に近いこともわかった。そこで、本年度は実際にどのような抗体の中和感受性を増強するのかを各種の中和抗体と感染症例の血清から精製したIgGを用いて検討した。治療用抗HIV-1抗体として開発が進んでいる広範囲ウイルス中和抗体KD-247(坑V3抗体)や熊本大学エイズ学研究センター(松下プロジェクト研究室)で樹立された4E9C(CD4i抗体)を用いて、NBD-556存在下における中和感受性の増強効果を検討した。その結果、NBD-556非存在下では、全く中和しなかった両抗体が、NBD-556を5μM加えただけで、IC_<50>がそれぞれKD-247は10μg/ml、4E9Cは20μ9/mlで中和するようになった。次に、我々が分離した臨床ウイルスの中で、同じ症例から精製した血清IgGに対して中和抵抗性のウイルスでかつ、NBD-556存在下では中和されるようなウイルスがあるかどうかを調べた。今回使用した臨床分離ウイルスは、同時期の血清IgGが200μg/ml存在していても中和されなかった。しかしNBD-556が4μM存在すれば、血清IgG炉20μg/mlでも50%以上の抑制が見られるようになった。このことは、ウイルスと同時期に存在する血中の抗体は、中和エピトープが変異しているために中和できなくなっているのではなく、エンベロープの三量体構造の中にエピトープが隠されているためであることを示している。これらの成果をまとめて報告した(Yoshimura et al., JV, 2010, 84 : 7558-68)。
植物粘質物の構造と抗補体および血糖降下活性相関の研究

フヨウ属のムクゲの葉および白花のつぼみ、アメリカフヨウの葉から、それぞれ代表的植物粘質物を抽出,精製し、それらの性質と化学構造の様相を明らかにした。各物質は電気泳動およびクロマトグラフィーで単一であり、水溶液の極限粘度は、26.5,26.0,26.1の値を示し、分子量約200万,105万,180万の高分子化合物で、酸性多糖を主体とするプロテオグリカンであった。多糖部は、1→2結合のα-L-ラムノースと1→4結合のα-D-ガラクツロン酸で構成される主鎖中の、一部のガラクツロン酸の3位にβ-D-グルクロン酸が結合する共通点があり、ラムノースの一部には、その4位にムクゲ由来の粘質物はβ-D-ガラクトース,アメリカフヨウ由来の粘質物はβ-D-グルコースをも介した1→4結合中性糖側鎖が結合するが、その種類と鎖長は物質により異なる。アオイ科植物粘質物は一般に抗補体活性は弱いが、血糖降下活性を示す物質が多いことを見出し、比較的強い血糖降下活性を示す粘質物に共通の構造は、3位にβ-D-グルクロン酸を有する1→4結合α-D-ガラクツロン酸を2位に結合するα-L-ラムノースから成る三糖単位のくり返しであり、ムクゲおよびアメリカフヨウ由来の粘質物もその例に属すことを指摘できる。一方、オオバコ科のオオバコの種子(車前子)から抽出精製して得た、強い抗補体活性物質である主粘質多糖について、脱アセチル化、過ヨウ素酸酸化、カルボキシル基の還元、部分酸加水分解による低分子化などの化学修飾を行い、各成績体の抗補体活性を比較した。脱アセチル化によって活性はさらに著しく増強され、アセチル基の存在は古典経路による補体活性化を妨げていること、過ヨウ素酸酸化後の還元で得たポリアルコール体は代替経路による補体活性化を促進すること、かなり低分子化しても活性は保たれることなど、興味深い知見が得られた。
p53遺伝子ファミリーの機能解析とがん治療への応用

ゲノムインフォマティクスを利用した新規p53標的遺伝子の予測は、発現解析との組合せによって新規標的遺伝子の同定に有用なこと明らかにした。マイクロアレイを利用したp73およびp63特異的標的遺伝子の検索を行い、新たにPEDF、FLOT2およびAPODなどの同定に成功した。p53ファミリー組換えアデノウイルスは、マウスモデルでの骨肉腫に対する遺伝子治療においてp53に比較して強力な腫瘍抑制効果を得た。また、p53とヒストン脱アセチル化酵素阻害剤FK228との併用効果もマウスモデルにおいて明らかにした。腫瘍抑制におけるp53遺伝子ファミリーの機能解明を目的とし、p53ファミリーの機能的類似点と相違点、およびp53依存的アポトーシス誘導における相互作用・協調作用について解析を行っている。既にcDNAマイクロアレイ解析により、これまでにp63およびp73がNotchシグナルを活性化できること,またp73がIL-4シグナルを介してT細胞の分化に関与していることを明らかにしてきた.本年度はこれらの知見をさらに押し進め,p53ファミリーがどのような機構で増殖,分化,アポトーシスに関与しているかを明らかにすることを目標とし,以下の成果をあげた.1 p73,p63に特異的な標的遺伝子としてpigment epithelium derived factor(PEDF)を同定した.PEDF遺伝子のプロモーターにはp73,p63に特異的な応答性配列が認められ,PEDFの発現はp73またはp63によって誘導されたが,p53では誘導されなかった.また,p73を強制発現させたヒト大腸癌細胞株の培養上清を骨由来細胞に添加したところ,細胞の分化を誘導した.この効果はPEDFに対する中和抗体によって阻害されたことより,PEDFがp73,p63の下流で細胞分化に関わっていることが示唆された.2比較ゲノム解析により,ヒトと齧歯類とで種を越えて高度に保存されているp53ファミリーに特異的な結合配列を抽出する方法を開発した.その近傍の遺伝子を解析した結果,vitamin D receptor遺伝子など,p53ファミリーの機能を媒介し直接実行する新規標的遺伝子を多数同定できた.1.現在p53の癌特異的なアポトーシス誘導活性を利用した遺伝子治療の臨床研究が行われているが,p53遺伝子治療に抵抗性の腫瘍が存在することが知られている.p53ファミリーに属するp63およびp73は,p53と構造的・機能的類似性が高く,強力なアポトーシス誘導活性を有する.本研究では,p53ファミリー遺伝子を発現する組換えアデノウイルスベクターを用いて,11種類のヒト骨肉腫細胞に対する抗腫瘍活性をin vitroおよびin vivoの系で比較解析し,癌治療への応用の可能性を検討した.(1)5株ではAd-p53導入によりアポトーシスが誘導されたが,残りの6株ではp53によるアポトーシスに抵抗性であった.Ad-p63γ導入では,p53抵抗性の3株を含む8株でアポトーシスが誘導された.(2)遺伝子増幅によりMDM2タンパクの発現上昇を認めた2株では,p53に比較してp73βおよびp63γ導入でより強いアポトーシスが誘導された.(3)p73β,p63γはp53と同様に,遺伝子導入単独ではアポトーシスに抵抗性の腫瘍細胞における抗癌剤に対する感受性を促進した.さらに,ヌードマウス皮下移植モデルにおいても,p63γはp53と同様に抗腫瘍活性を示した.2.我々は,これまでp53ファミリーの機能を媒介し直接実行する標的分子の同定を行ってきた.本研究では,p63およびp73の直接の標的分子として脂質ラフト構成タンパクであるFLOT2(flotillin-2)を新たに同定した.(1)マウス・ヒト細胞でp73あるいはp63の強制発現により内在性FLOT2遺伝子およびタンパク発現が上昇した.また,CDDP処理後のFLOT2の発現誘導は内在性p73発現に依存していた.(2)FLOT2遺伝子の上流にはp73,p63に特異的な応答性配列が認められ,種を越えて保存されていた.(3)p63を強制発現させた細胞ではIL-6シグナル伝達経路が活性化されており,その効果は内在性FLOT2発現に依存することをFLOT2に対するsiRNAで検証した.(4)以上の結果より,p73,p63はFLOT2の発現誘導を介して,細胞分化,炎症反応に関わっている可能性が示唆された.p53ファミリーメンバーのp73, p63は癌抑制遺伝子p53と構造的・機能的に類似性をもつ転写因子であり,発生・分化および個体の恒常性維持に重要な役割を果たしている.最近では, p63, p73を含めたp53ファミリーが従来考えられていたよりも深く腫瘍抑制に関与している研究成果が次々と報告されてきている.

本研究では,脂質輸送タンパクlipocalinスーパーファミリーの1員であるapoD(apolipoprotein D)がp53ファミリーメンバーの直接の転写標的遺伝子であることを明らかにした.(1)apoDの発現はTAp73およびTAp63により特異的に誘導されるが, p53によっては誘導されなかった.(2)さらに, RNA干渉により内在性p73発現を抑制すると,シスプラチン処理後のapoD転写誘導が阻害された.この結果は,シスプラチン処理によるapoDの転写活性化が内在性p73依存的であることを示している.(3)我々は, apoD遺伝子のプロモーター領域にp73/p63結合性の応答配列を同定した.(4)骨肉腫細胞Saos-2にTAp73を強制発現させると,骨芽細胞分化の指標であるアルカリ性フォスファターゼ活性が上昇した。重要な点は,このp73によるアルカリ性フォスファターゼ活性の上昇が, apoDのノックダウンにより阻害されたことである.この結果は, p73による骨芽細胞分化誘導がapoDを介していることを強く示唆している.(5)さらに,神経芽腫細胞SH-SY5Yにおいて, p73によるapoDの発現誘導は,神経細胞マーカー発現および形態分化を誘導した.これらの研究結果は,発生分化におけるp73の機能の少なくともその1部はapoD誘導を介していることを強く示唆している.p53はヒト悪性腫瘍において最も高頻度に異常が認められる遺伝子である。p53変異は癌の悪性度や予後にかかわっており、p53の機能を解明することは癌の診断・治療の上で重要ある。本年度はcDNAマイクロアレイにより、p53ファミリーによって発現が変化する分子の同定とその機能解析を行なった。その結果、(1)新規のp53ファミリー標的遺伝子としてhuman calcium-activated chloride channe1-2(hCLCA2)を同定した。hCLCA2の遺伝子およびタンパク発現はp53依存的に誘導され、hCLCA2ゲノム上に種を越えて保存される特異的応答配列を見いだした。さらに,hCLCA2の強制発現系、siRNAによる発現抑制系を構築し、hCLCA2が癌細胞の浸潤能、遊走能、接着能を抑制しうることを明らかにした。hCLCA2は細胞膜上に局在するCa活性化Clチャネル関連分子であり、本研究結果はp53ファミリーがhCLCA2の発現制御を介して、癌の浸潤、転移を抑制していることを示した。さらに、(2)p53ファミリーの標的遺伝子early growth response-2(EGR2)の同定、転写制御機構および、その機能解析として腫瘍細胞に対する増殖抑制効果を検討した。p53ファミリーの強制発現により内在性EGR2の発現が上昇した。DNA障害後のEGR2の発現誘導は正常型p53の存在に依存していた。EGR2遺伝子のプロモーター領域に種を越えて保存されるp53結合配列が認められ、この配列がp53に転写応答することを示し、EGR2がp53ファミリーの直接の転写標的であることを明らかにした。EGR2を標的としたsiRNAは癌細胞の増殖能を有意に促進し、抗癌剤に抵抗性となり、アポトーシスを抑制した。一方、EGR2の癌細胞への導入は増殖抑制とアポトーシス誘導をもたらした。
光解離反応のポテンシャル面と波束ダイナミックス

(a)OCSの光解離ダイナミックス:OCSは62000-72000cm^<-1>に数本の鋭いピークからなる強い吸収が見られる。そこで、これらのピークや他の微細構造が共鳴状態に困るものであるかどうか、また64000cm^<-1>以下にあるブロードな吸収の帰属などについて、OCSの一重項/共線的な光解離過程をモデルに検討した。ab initioポテンシャル面を用いた波束計算の結果は、1_<II>、2_Σ^+への遷移はブロードな吸収、1_Δへの遷移は構造を持った吸収スペクトルを示した。したがって62000-72000cm^<-1>の鋭いピークは、単一ポテンシャル面上のダイナミックスではなく、2_Σ^+と交差する2_Δ状態の2つのポテンシャル面が関連したダイナミックスに起因すると推測される。(b)ファンデルワールス錯体Na(XCH_3)_n(X=F,Cl)の光解離反応:Na^*(3p)+XCH_3の衝突実験に比較して、分子配向、分子間距離を規定した基定状態錯体を利用した場合、より高い反応効率が期待される。そこで、ファンデルワールス錯体Na(XCH_3)_n(X=F,Cl)(n=1-5)の構造を量子化学計算により検討した、n=2,3の場合それぞれC_<2v>、C_3対称性の構造が一種類得られ,Koopmas法によるイオン化エネルギーはn=0から3まで単調に減少し,実験結果と良い一致を示した.一方n=4の場合3種類の最適構造が得られた.n=4ではこれらの3種の構造が混在すると考えると,n=3から4のイオン化エネルギーの減少率は,n=0から3までの減少率と比較して緩やかになり実験結果と一致した。
空気の旋回流を用いたガラス基板の浮上搬送用エアレールの開発研究

本研究は旋回流を用いた新しいエアベアリングユニット(以下,旋回流ユニットという)を研究対象とした。まず,旋回流ユニット単体の基本特性を解明し,一部の設計指針を確立した。これらの結果と知見を踏まえ,複数の旋回流ユニットからなるエアレールを製作し,ガラス基板の浮上搬送実験を実施した。浮上実験と数値計算によりガラス基板の浮上精度を影響する要因を考察し,浮上精度を向上させる使用条件とエアレールの設計指針を導出した。24年度では,旋回流ユニットを用いてガラス基板の浮上搬送用エアレールとその計測システムを構築し,ガラス基板の浮上搬送実験を実施した。まず,旋回流型エアベアリングユニットからなるエアレール(幅300mmx長さ700mm)を製作した。また,3つのCCDレーザヘッドを有する浮上搬送精度計測システムを構築した。幅350mmx長さ330mmのガラス基板を浮上搬送対象とした。次に,エアレールの圧力分布の計算方法を示した。そして隙間の高さと浮上力の関係を求め,浮上剛性を算出した。旋回流型エアレールを用いた場合,オリフィス型エアレールを用いた場合に比べ,浮上剛性が向上していることを確認した。また,一般に給気圧力が高い場合,浮上剛性が向上するが,ガラス基板が薄い場合においては,給気圧力を高くしても,大幅な剛性向上にはいたらなかった。そのため,浮上量と浮上力の関係を求めることにより搬送するガラス基板の厚さに応じ適切な給気圧力を選択することを可能とした。さらに,エアレールの浮上量-浮上力の関係の算出は,今後のエアレールの設計にも有効であることを示した。旋回流型エアレールからなる浮上搬送装置を用いて,実際にガラス基板の搬送を行った。その結果,ガラス基板先端が旋回流型エアベアリングの円筒室を覆った時,負圧吸引の影響を受けることが確認できた。そして,旋回流による負圧吸引力が大きい場合,エアベアリング通過時の影響を大きく受けることを確認した。また,各ガラス基板の厚さにより最適な供給流量,供給圧力があることを確認した。オリフィス型エアレールと比較しても,浮上搬送精度は向上しており,浮上剛性向上の効果が有効であることを示した。現在までの研究は,旋回流を用いた新しいエアベアリングユニット(以下,旋回流ユニットという)の基本特性を解明し,一部の設計指針を確立した。これらの結果と知見は旋回流ユニットを用いる大型エアレールの開発に非常に有意である。定常特性の解析では,(1)旋回流ユニットの流量特性,負荷容量特性と浮上剛性などの基礎特性を実験的に測定した。従来のオリフィス型ベアリングと比較した結果,同じ消費流量と負荷の条件では,旋回流ユニットはより高い剛性を示した;(2)圧力分布の測定実験により,中心部の旋回流に起因する負圧分布と外周支持面の粘性流れによる正圧分布が旋回流ユニット内において形成され,また,中心部の旋回流の流れ状態は外周の粘性流れに影響されないことは明らかになった;(3)圧力分布の測定結果を半径位置に対して微分することによって,旋回流ユニット内の流速分布を解明した;(4)慣性項(中心部の旋回流)と粘性項(外周支持面の粘性流れ)を考慮した簡略のモデルを提案した。非定常解析では,まず,外乱によるワークの浮上量の振動を再現するために,50Hzまでの微小振動を発生可能な実験装置を製作した。浮上量が振動するとき,旋回流ユニットの圧力は,振動の速度と方向によってヒステリシスのように応答する。浮上量の時間変化を考慮したレイノルズ方程式を解くことにより,これは外周部の粘性流れのスクイズ効果による現象であることがわかった。これらの結果を踏まえ,旋回流ユニットのノズルと円筒室と外周支持面を主な設計要素とし,それぞれの寸法の変化が特性に及ぼす影響を調べた。ノズルの直径は消費流量と旋回流の回転速度を大きく左右する,円筒室の大きさは負圧の作用面積に決め負圧の効果を影響する,外周の支持面の面積は大きく設定すれば流れの粘性に起因する支持力とダンピング力が強くなる,などの設計指針は得られた。現在までの研究では,旋回流ユニットの定常特性と非定常特性を実験により解明し,簡略の理論モデルを導出できた。これらの結果を踏まえ,旋回流ユニットの設計要素を抽出し,主な設計指針を一部確立することができた。さらに,従来のオリフィス型ベアリングユニットとの比較実験を行い,本研究の旋回流ユニットの優位性を確認できた。当初の研究計画に「流体数値計算の手法を用いて旋回流の流れ現象を解析する」との内容があったが,予算の削減のため,流体数値計算のソフトウェア(FLUENT,一年契約)を購入できず,流体数値計算による流れの解析を実施しなかった。解決策としては,圧力分布の測定実験で得られた圧力分布を半径位置に対して微分することによって,旋回流の回転流速成分の分布を算出した。これによって,流れ解析を実現でき,旋回流の流れ現象を解明できた。

旋回流ユニットを用いてガラス基板の浮上搬送用エアレールとその計測システムを構築し,ガラス基板の浮上搬送実験を実施する。ガラス基板の浮上精度とたわみに着目して実験考察と理論解析を行い,ガラス基板の浮上精度の向上とたわみの減軽を実現できる使用条件とエアレールの設計指針を導出する。また,23年度は効率的に研究費の使用ができたため,残額が生じた。その残額を24年度のエアレール装置の構築に使用する予定となる。(1)ガラス基板の浮上搬送用エアレールとその計測システムを構築するために必要な消耗品を購入する;(2)ガラス基板の浮上精度と挙動を観測するために,高速高精度CCDレーザ変位計を購入する;(3)研究成果の国際発表を行うための旅費と学会参加費;(4)実験に協力する大学院生1人への謝金を支払う。
Hunt症候群の発症および予後へのVZV特異的細胞性免疫能の関わりについての研究

顔面神経麻痺は予後良好なBell麻痺と予後不良のHunt症候群で約8割を占める。Hunt症候群は顔面神経に潜伏感染したVZVの再活性化によって生ずるが、その発症メカニズムは未だ十分には解明されていない。本研究は、Hunt症候群患者の水痘・帯状疱疹ウイルス(以下VZV)特異的細胞性免疫能を、ELISPOT法を用い発症直後から経時測定し、VZV特異的細胞性免疫能の低下がHunt症候群の発症およびその予後に関わるかの解明を目指している。具体的にはHunt症候群およびBell麻痺患者の血液から単核球を分離し、VZV抗原刺激で産生されるIFN-γをELISPOT法にて測定し、VZV特異的細胞性免疫能を評価する。これを同一患者において発症直後と発症12か月後に複数回測定し、VZV特異的細胞性免疫能の発症後における動態を計測する。Bell麻痺とHunt症候群におけるVZV特異的細胞性免疫能の変化を比較することで、Hunt症候群発症におけるVZV特異的細胞性免疫能低下の関与について考察する。平成30年度は前年度に引き続き解析を進め、Hunt症候群ではVZV特異的細胞性免疫能は発症直後には比較的高く、その後緩やかに低下するのに対し、Bell麻痺では一定の傾向はみとめなかった。以前の我々の研究成果を合わせ考えると、Hunt症候群はVZV特異的細胞性免疫能の低下により発症し、その後免疫能は急激に上昇、以後なだらかに低下すると考察された。顔面神経麻痺患者、特にHunt症候群とVZV特異的細胞性免疫能との関連について、5つの学術講演会・研究会で発表した。Hunt症候群はVZV特異的細胞性免疫能低下により発症し、その後免疫能は急激に上昇、以後なだらかに低下すると考察された。この研究成果を学会・研究会で発表・報告した。令和元年度は研究成果の学会発表やホームページでの公表に加え、論文作成を行い投稿する予定である。顔面神経麻痺は比較的予後良好なBell麻痺と予後不良のHunt症候群で約8割を占める。Hunt症候群は顔面神経に潜伏感染したVZVの再活性化によって生ずることが以前から知られているが、その発症メカニズムは未だ十分には解明されていない。本研究は、Hunt症候群患者の水痘・帯状疱疹ウイルス(以下VZV)特異的細胞性免疫能を、enzyme-linked immunospot法(ELISPOT法)を用いて発症直後から経時測定し、VZV特異的細胞性免疫能の低下がHunt症候群の発症およびその予後に関わるかを明らかにするものである。これを統一患者において発症直後と発症12か月後に複数回測定し、VZV特異的細胞性免疫能の発症後における動態を計測する。平成28年度はHunt症候群3名、Bell麻痺7名の合計10名に対してそれぞれ24回の測定結果を解析した。その結果、Hunt症候群ではVZV特異的細胞性免疫能は発症直後には比較的高く、その後緩やかに低下するのに対し、Bell麻痺では当初高くのちに下がるもの、最初は低く後で上がるものなど、一定の傾向はみられていない。顔面神経麻痺患者、特にHunt症候群とVZV特異的細胞性免疫能との関連について、3つの学術講演会・講習会で発表、報告した。

平成29年度はHunt症候群5名、Bell麻痺8名の合計13名に対してそれぞれ24回の測定結果を解析した。その結果、Hunt症候群ではVZV特異的細胞性免疫能は発症直後には比較的高く、その後緩やかに低下するのに対し、Bell麻痺では当初高くのちに下がるもの、最初は低く後で上がるものなど、一定の傾向はみられなかった。以前の当科における研究で、Hunt症候群患者では発症ごく初期においてはVZV特異的細胞性免疫能は低く、その後急速に上昇することが明らかになっている。これを考え合わせると、Hunt症候群における発症はVZV細胞性免疫能低下により発症し、その免疫能は急激に上昇、以後緩やかに低下すると考察された。顔面神経麻痺患者、特にHunt症候群とVZV特異的細胞性免疫能との関連について、国際学会も含め3つの学術講演会・研究会で発表、報告した。その結果、Hunt症候群ではVZV特異的細胞性免疫能は発症直後には比較的高く、その後緩やかに低下するのに対し、Bell麻痺では一定の傾向はみられなかった。顔面神経麻痺は予後良好なBell麻痺と予後不良のHunt症候群で約8割を占める。Hunt症候群は顔面神経に潜伏感染したVZVの再活性化によって生ずるが、その発症メカニズムは未だ十分には解明されていない。本研究は、Hunt症候群患者の水痘・帯状疱疹ウイルス(以下VZV)特異的細胞性免疫能を、ELISPOT法を用い発症直後から経時測定し、VZV特異的細胞性免疫能の低下がHunt症候群の発症およびその予後に関わるかの解明を目指している。具体的にはHunt症候群およびBell麻痺患者の血液から単核球を分離し、VZV抗原刺激で産生されるIFN-γをELISPOT法にて測定し、VZV特異的細胞性免疫能を評価する。これを同一患者において発症直後と発症12か月後に複数回測定し、VZV特異的細胞性免疫能の発症後における動態を計測する。Bell麻痺とHunt症候群におけるVZV特異的細胞性免疫能の変化を比較することで、Hunt症候群発症におけるVZV特異的細胞性免疫能低下の関与について考察する。平成30年度は前年度に引き続き解析を進め、Hunt症候群ではVZV特異的細胞性免疫能は発症直後には比較的高く、その後緩やかに低下するのに対し、Bell麻痺では一定の傾向はみとめなかった。以前の我々の研究成果を合わせ考えると、Hunt症候群はVZV特異的細胞性免疫能の低下により発症し、その後免疫能は急激に上昇、以後なだらかに低下すると考察された。顔面神経麻痺患者、特にHunt症候群とVZV特異的細胞性免疫能との関連について、5つの学術講演会・研究会で発表した。
オリゴ糖ライブラリー構築のための連続的電解グリコシル化反応の開発

アミノ糖は生理活性を示すオリゴ糖に多く含まれる単糖であるため、オリゴ糖ライブラリーへの導入が不可欠である。本年度はヘキソースを用いて明らかにした知見を基に、電解グリコシル化反応のアミノ糖への基質拡張と反応中間体の解明、並びに活性種の変換を行った。まず、アミノ糖を与える糖供与体として2-アジド基や2,3-オキサゾリジノン骨格を有するチオグリコシドを用い、糖受容体の非共存下での低温電解酸化を行った。この電解後の溶液を低温NMRにより分析し、発生した化学種はα-グリコシルトリフラートであることを明らかにした。これらのグリコシルトリフラートを用いたグリコシル化反応を行ったところ、糖受容体によって差はあるもののβ-選択性が発現することが分かった。また、糖供与体の水酸基上の保護基によっては、反応後に昇温することでα体への異性化が進行することが明らかになり、α体とβ体が選択的に合成出来ることも分かった。本手法は単一の糖供与体から反応条件の違いによってα体とβ体を作り分けることが出来る点でオリゴ糖ライブラリー構築上、有用である。さらに2-アジド基を有するチオグリコシドから発生させたα-グリコシルトリフラートに対してスルフィドを作用させることで、スルフォニウムイオンへと定量的に変換できることを見出した。このスルフォニウムイオンの構造、反応性を明らかにすることはグリコシル化反応の立体選択性発現のメカニズム解明や新規立体制御手法の開発につながる点で極めて重要であり、現在も検討中である。我々は本年度の研究期間において、活性化剤によらない電気化学的な手法でチオ糖からグリコシルトリフラートを単一のグリコシルカチオン等価体として発生・蓄積させることに成功し、グリコシル反応への応用も検討した。グルコシルトリフラート前駆体として、アノマー位にp-トリルチオ基を有し、酸化電位の低いグルコース由来のチオ糖(酸化電位:1.50V)を用いて支持電解質Bu4NOTfの存在下で低温電解酸化を行った。電気化学的に発生させたグリコシルトリフラートは低温条件下(-78°C)では安定であり、低温NMR測定(-78°C)によりグルコシルトリフラートの立体化学はアノマー位のプロトンのケミカルシフトと結合定数からα-トリフラートであると決定した。またグルコシルトリフラート中間体に対してメタノールを求核剤として作用させるとグリコシル化反応が進行し、β体のメチルグリコシドが主生成物として得られた。この結果も中間体がα-トリフラートであることを支持している。またグルコースの他に、ガラクトース、マンノースについてもグリコシルトリフラートを発生・蓄積し、低温NMR測定によりグリコシルトリフラートの立体化学を明らかにした。さらに種々のグリコシルトリフラートの熱的安定性を検討したところ-50°C以下では安定であった。グリコシルトリフラートは反応性の高いグリコシル化反応の中間体であり、電気化学的に発生させたグリコシルトリフラートも糖水酸基とのグリコシル化反応によって対応する二糖をβ体選択的に与えた。特にチオ糖を糖受容体に用いた場合は、得られる二糖をさらに糖供与体としてグリコシル化反応に用いることが出来るため、本手法を迅速なオリゴ糖ライブラリー合成へと展開する。
線虫抗原によるTリンパ球の活性化とアポトーシス

平成10,11年度における研究の結果は以下の通りである.1.線虫感染によりラットの総腸間膜リンパ節(MLN)における総細胞数は14倍に増加し,T細胞数は9-10倍に増えたが,CD4^+T細胞比の上昇からCD4^+T細胞の活性化がより強いことが示された.2.非感染ラットMLN由来のCD4^+およびCD8^+T細胞ではTh1タイプのIL-2,IFN-γ,TNF-βのmRNA発現が認めたが,Th2タイプのサイトカインであるIL-3,IL-4,IL-5,IL-13の発現はいずれにも認められなかった。3.感染ラットMLN由来のCD4^+T細胞ではIL-3,IL-4,IL-5,IL-13のmRNA発現が著しく増加した.一方CD8^+T細胞においてはIL-3,IL-5,IL-13の発現が増強されたがCD8^+T細胞におけるIL-4のmRNA発現は認められなかった.4.胸腺においてCD4^+8T細胞からCD4^+8^-T細胞への分化過程に異常を持つLECラットにおいても線虫感染はMLNにおけるCD4^+T細胞の増加とIL-4mRNA発現を誘導し,その後血中IgE抗体の上昇や小腸,肺におけるマスト細胞数の増加などのTh2細胞反応をが確認された.5.線虫由来分泌排出(ES)抗原は抗CD3/CD28抗体で刺激したMLN,CD4^+およびCD8^+T細胞によるIFN-γnRNAの転写とIFN-γ産生を濃度依存的に抑制しIL-4,IL-10産生には影響をおよぼさなかった.6.線虫感染はラット小腸絨毛の萎縮と上皮細胞のアポトーシスを誘導し,病変部上皮細胞におけるES抗原の存在が確認された.7.ES抗原によるラットCD4^+T細胞およびCD8^+T細胞に対するアポトーシス誘導確認できなかった.本研究は,線虫抗原中の種々の分子によるT細胞の増殖,活性化およびアポトーシス誘導を解析し,ES抗原中のどの分子がいかなるT細胞集団に作用し,Th1タイプおよびTh2タイプ細胞への分化やアポトーシスを誘導するのかを明らかとすることを目的として実施した.現在までのところ,線虫抗原および部分精製したフラクションにラットリンパ球のin vitroでのIFN-γ産生を濃度依存的に抑制する作用が認められたことから,さらに非感染ラットの腸間膜リンパ節から分離した,CD4および,CD8T細胞を表面抗原(CD3,CD28など)に対するモノクローナル抗体やマイトージェンでin vitro刺激しIFN-γ産生におよぼす線虫抗原の影響を調べた.これまでに,CD4および,CD8T細胞では線虫抗原に対する反応性が異なること,線虫抗原が刺激により誘導されるリンパ球の幼若化にも影響を与えている可能性を示す結果が得られている.これら作用は,線虫抗原との6時間の前培養によってその後のマイトージェン刺激によるIFN-γ産生を抑制したことからも確認された.また,感染マウスのリンパ節,脾臓,肝臓から得たT細胞のCD4,CD8表面抗原および細胞内でのIL-4産生をFACSで解析したところ,感染1週目からIL-4陽性細胞が増加し,T細胞の構成比にも変化が生じていることを見いだした.来年度はまず上記の結果について追加確認の実験を行ない,さらにサイトカイン産生に加えmRNA発現についても解析を進める.アポトーシス誘導の有無についてはすでにAnnexin Vと7AADを用いることにより表面抗原との同時染色を可能にするシステムを確立したのでに特定の細胞集団における検索が可能になった.平成10,11年度における研究の結果は以下の通りである.1.線虫感染によりラットの総腸間膜リンパ節(MLN)における総細胞数は14倍に増加し,T細胞数は9-10倍に増えたが,CD4^+T細胞比の上昇からCD4^+T細胞の活性化がより強いことが示された.2.非感染ラットMLN由来のCD4^+およびCD8^+T細胞ではTh1タイプのIL-2,IFN-γ,TNF-βのmRNA発現が認めたが,Th2タイプのサイトカインであるIL-3,IL-4,IL-5,IL-13の発現はいずれにも認められなかった。3.感染ラットMLN由来のCD4^+T細胞ではIL-3,IL-4,IL-5,IL-13のmRNA発現が著しく増加した.一方CD8^+T細胞においてはIL-3,IL-5,IL-13の発現が増強されたがCD8^+T細胞におけるIL-4のmRNA発現は認められなかった.4.胸腺においてCD4^+8T細胞からCD4^+8^-T細胞への分化過程に異常を持つLECラットにおいても線虫感染はMLNにおけるCD4^+T細胞の増加とIL-4mRNA発現を誘導し,その後血中IgE抗体の上昇や小腸,肺におけるマスト細胞数の増加などのTh2細胞反応をが確認された.5.線虫由来分泌排出(ES)抗原は抗CD3/CD28抗体で刺激したMLN,CD4^+およびCD8^+T細胞によるIFN-γnRNAの転写とIFN-γ産生を濃度依存的に抑制しIL-4,IL-10産生には影響をおよぼさなかった.6.線虫感染はラット小腸絨毛の萎縮と上皮細胞のアポトーシスを誘導し,病変部上皮細胞におけるES抗原の存在が確認された.

7.ES抗原によるラットCD4^+T細胞およびCD8^+T細胞に対するアポトーシス誘導確認できなかった.平成10,11年度における研究の成果は以下の通りである。1.線虫感染によりラットの総腸間膜リンパ節(MLN)における総細胞数は14倍に増加し、T細胞数は9-10倍に増えたが、CD4^+/CD8^+T細胞比の上昇からCD4^+T細胞の活性化がより強いことが示された。2.非感染ラットMLN由来のCD4^+およびCD8^+T細胞ではTh1タイプのIL-2、IFN-γ、TNF-βのmRNA発現が認めたが、Th2タイプのサイトカインであるIL-3,IL-4,IL-5,IL-13の発現はいずれにもに認められなかった。3.感染ラットMLN由来のCD4^+T細胞ではIL-3,IL-4,IL-5,IL-13のmRNA発現が著しく増加した。一方CD8^+T細胞においてはIL-3,IL-5,IL-13の発現が増強されたがCD8^+T細胞におけるIL-4のmRNA発現は認められなかった。4.胸腺においてCD4^+8^+T細胞からCD4^+8^-T細胞への分化過程に異常を持つLECラットにおいても線虫感染はMLNにおけるCD4^+T細胞の増加とIL-4mRNA発現を誘導し、その後血中IgE抗体の上昇や小腸、肺におけるマスト細胞数の増加などのTh2細胞反応をが確認された。5.線虫由来分泌排出(ES)抗原は抗CD3/CD28抗体で刺激したMLN,CD4^+およびCD8^+T細胞によるIFN-γmRNAの転写とIFN-γ産生を濃度依存的に抑制しIL-4,IL-10産生には影響をおよぼさなかった。6.線虫感染はラット小腸繊毛の萎縮と上皮細胞のアポトーシスを誘導し、病変部上皮細胞におけるES抗原の存在が確認された。7.ES抗原によるラットCD4^+T細胞およびCD8^+T細胞に対するアポトーシス誘導確認できなかった。