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中国の大学設置形態の変容に関する実証的研究

本年度新たに入手し、翻訳した法令には、主なものとした、「高等教育機関の基本建設の管理責任に関する暫定規則」「一般高等教育機関の校舎面積基準」「高等教育機関の財務管理改革実施規則」などが含まれ、これらは大学の設置・運営形態を具体的に理解する上で、欠くことのできないものであることが分かった。また、法規のような基本資料すら、わが国では邦文で利用可能なものがほとんどない状態に鑑み、本研究の運程で入手、翻訳したものを整理して、『中国高等教育関係法規(解説を正文)』の一冊にまとめ刊行した。これによって、中国の大学の設置や運営の形態の現状については、かなり詳細に、かつ全面的に把握することができるようになったと思われる。本年度はさらに、中国の大学設置形態の原型が形成された建国初期の状況を明らかにするため、昨年に続いて当時の新聞、雑誌、中国政府刊行資料に掲載された関連の記事、論説の分析を行い、この成果の一部として、「50年代初期中国における大学の再編成」と題する論文を発展した。この論文では、1952、53年に全国的規模で実施された大学組織の再編成の過程を詳細に跡づけするとともに、中華人民共和国の建国前後から既に行われていた個別大学の改組と前者との連続性、非連続性を解明した。この他、本研究課題に間接的に関わるものとして、中国における海外留学の問題ならびにわが国への留学の評価に関する検討を行い、「中国から見た日本留学」と題する論文にまとめた。
角膜上皮バリア機能の詳細な解析とその再生医療への応用

角膜は外界から眼組織を守る重要な組織であり、その上皮はバリア機能、透明性を維持することが必要である。膠様滴状角膜ジストロフィ(GDLD)においてはその二つが阻害され失明にいたる。我々はGDLDの原因遺伝子TACSTD2を単離したが、今回そのin vivoモデルであるノックアウトマウスを作成し、表現型の再現に成功した。TACSTD2ノックアウトにおいては老齢において、明らかに重篤な角膜混濁が多く発生していた。また、この上皮の培養にも成功しており、これに遺伝子改変を行って、患者に戻す、再生医療と遺伝子治療を組み合わせた、新しい疾患治療法の開発を開始した。TACSTD2欠損マウスの作出:今回の検討ではvivoでの検討のためモデルマウスが必要であり、我々はTACSTD2のConventionalノックダウンの作出をおこなった。25年度5月にヘテロマウスの作成に成功したが、ヘテロマウス同士の交配が不調で、ラインが途切れる懸念があったため、新たにキメラマウスからヘテロマウスの作成を行うこととした。この作出とほぼ同時期に1系統においてヘテロマウスの維持に成功したため、この相互交配によるホモマウスの作出を行い、現在、ジェノタイプの結果からはホモマウスのTACSTD2のノックアウトマウスを得ている。TACSTD2欠損マウスの表現型解析:上記のTACSTD2ノックアウトマウスは現在2か月齢であるが、外観はほぼ正常の表現型を示しており、角膜の混濁や血管侵入も認めない。ただし、ヘテロマウスも含め、体毛が局所的に抜ける状態を多く認めるが、まだ、個体数が少ないため、これが特異的な表現型か否かについては検討中である。TACSTD2新規変異の同定:上記の動物モデルでの解析と並行して、新たに、GDLDと診断された患者から、TACSTD2の新規のミスセンス変異とフレームシフト変異を同定した。これらの変異の病原性を証明するために、これら変異TACSTD2と野生型TACSTD2の発現コンストラクトを作成し、それぞれ、クローディン分子CLDN1およびCLDN7と同時にHeLa細胞に強制発現させた。すると、二つの変異TACSTD2を導入した細胞においては、CLDN1、CLDN7ともに蛋白の発現レベルが低下しており(ウエスタンブロットにより確認)、特にミスセンス変異においても病原性があることが確認できた。現在までにTACSTD2コンベンショナルノックアウトマウスを、ヘテロマウスより作成することに成功した。TACSTD2-/-マウスにおいては、老齢期までに重篤な角膜混濁が発生する割合が、TACSTD2+/-, TACSTD2+/+と比して明らかに高く(p<0.05)、これはこのマウスのふぇのタイプであると考えられた。その組織像は炎症細胞の浸潤を認める、過形成のような所見であった。ただし、ヒトで認められるようなコンゴーレッド染色陽性のアミロイドの沈着は認められなかった。これは、マウスにおいては寿命との関連から、沈着が長期間に必要であるアミロイド沈着のような表現型はとりにくいためと推測された。さらに、電子顕微鏡での観察において、角膜上皮においては主要な接着装置を認めなかった。また、フルオレセインを用いた、透過性の試験においても、定性的な解析ながら、TACSTD2-/-マウスにおいては透過性の亢進を示すような所見を認めた。さらに、TACSTD2-/-マウスにおいては当然RT-PCR,免疫染色においてもTACSTD2の発現を角膜上皮においては認めなかったが、同時にCLDN7の発現も減弱しており、これらにより、TACSTD2-/-マウスは少なくともヒトの臨床症状の一部を再現しており、ヒトの角膜難治疾患である膠様滴状角膜ジストロフィーのモデルとして使用できると考えられた。日本人に多い膠様滴状角膜ジストロフィーの原因遺伝子がTACSTD2であることをわれわれはポジショナルクローニングで示した。今回の研究ではこのTACSTD2のノックアウトマウスを作成し、表現型を解析した。ノックアウトマウスはコンベンショナル法で作成し、ゲノムPCRにて遺伝子の改変を確認した。このマウスは高齢になると極めて高い頻度で角膜の混濁をきたし、これは、野生型と比較してもその割合は優位に高かった。また、マウスは若いうちから、角膜の染色に対する透過性が以上に亢進しており、これもヒト膠様滴状角膜ジストロフィーに対応する表現型と考えられた。また、非常に興味深いことに、角膜の混濁の発生は、光線の強さと関連しており、光線に暴露された個体においては重篤な角膜混濁を引き起こす割合が高かった。また、光が強い状態(1000lx程度)においてはTACSTD2 Nullでは若い個体に於いても角膜混濁が発生した。角膜混濁の組織的検討を行ったが、白血球の浸潤を認めるも、ヒトに認められるようなアミロイドの蓄積は証明できなかった。角膜の創傷治癒にかかわる研究においては、角膜上皮をアルコールで作成し、その面積の変化を検討したが、正常野生型とNull Mouseで大きな違いはなかった。続いて、このマウスにおいて角膜上皮シート移植を行うための準備として、角膜上皮細胞の培養を開始した。マウスにおいては角膜上皮細胞の培養はきわめて困難であるが、我々の研究室では長年の経験を有しており、野生型および、TACSTD2 Nullの両マウスとも角膜上皮細胞の培養自体は成功した。現在、重層化、シート化できるかどうかを検討している。

角膜は外界から眼組織を守る重要な組織であり、その上皮はバリア機能、透明性を維持することが必要である。膠様滴状角膜ジストロフィ(GDLD)においてはその二つが阻害され失明にいたる。我々はGDLDの原因遺伝子TACSTD2を単離したが、今回そのin vivoモデルであるノックアウトマウスを作成し、表現型の再現に成功した。TACSTD2ノックアウトにおいては老齢において、明らかに重篤な角膜混濁が多く発生していた。また、この上皮の培養にも成功しており、これに遺伝子改変を行って、患者に戻す、再生医療と遺伝子治療を組み合わせた、新しい疾患治療法の開発を開始した。1年目においてTACSTD2ノックアウトマウス(TACSTD-/-マウス)の作成に困難があったため、進行が遅れていたが、2年目の去年においては、この問題を克服し、詳細な表現型解析を行い、このモデルの正当性を評価できている。再生医療現在、研究計画にある、マウスにおける上皮シート作成の検討を行っているのと同時に、角膜の創傷治癒、上皮細胞の増幅能についても検討を行っている。また、研究計画にあるミスセンス変異については、TACSTD2の機能が減弱していることを示し、ここの部分が機能に関わりがあるであろうことを示した。(現在論文投稿準備中)ツーハイブリッド法を用いたパートナー遺伝子の探索は、スクリーニングを行ったものの有用な分子が出てこなかったため、現在中断している。今後は作成したシートを用いての機能実験を行っていくのと、移植による治療法の探求を行っていく。将来、ヒトに応用する場合、自家の上皮シートを使用することが望ましいが、この場合は遺伝子改変を行う必要があると考えられるため、その方法についても検討を行う。ホモマウスの作成に難点があったため、TACSTD2ノックアウトの表現型解析に遅れが出ているため。しかし、現在はホモマウスを得ており、表現型解析も行っている。ほぼ全額使用したが、些少額次年度に繰り越しいたしました。誤差の範囲と考えております。マウスからの角膜および口腔粘膜上皮シートの作成:マウスにおいては角膜上皮細胞を培養することに困難が存在していたが、現在、教室の上杉らはこの困難を克服し、培養に成功している。我々はこの方法を用いて、TACSTD2ノックアウト、および野生型のマウスより、角膜口腔粘膜上皮細胞シート、角膜上皮細胞シートを作成し、TACSTD2の発現、クローディンの不安定性などをRT-PCR、免疫染色などで検討するとともに、電気抵抗を測定することによりシートのバリア機能を測定する。細胞増殖能の検討:TACSTD2 nullマウスと野生型マウスより角膜輪部の細胞を回収し、コロニーフォーメーションアッセイを行い、角膜幹細胞能についての検討を行うのと同時に、角膜細胞の培養においてダブリングタイムの計測を行い、増殖能の差についての検討を行う。また、同様に、TACSTD2 nullマウスと野生型マウスの角膜中央部にトレパンにて上皮欠損部を作り、この創傷治癒に差が無いかどうかを検討する。これらの実験は上皮バリア不全と角膜血管侵入の表現型がそもそも角膜幹細胞の脆弱性からくるものではないことの確認のためにおこなう。
日本人英語学習者の言語・非言語コミュニケーションに関する研究

平成17年度は、本科学研究費プロジェクトの最終年度として以下の活動を行った。1)平成15、16年度に収集したデータに加え、日本人大学生被験者11名による英語発話をデジタルビデオカメラで録画し、データベース化の作業を継続した。特に被験者の非言語行動(視線、表情、ジェスチャー等)について着目し、その特徴について記述した。その被験者による英語発話ビデオクリップを、アメリカ人判定者(日常的にアジア人との関わりの頻度が高いグループと低いグループの2グループ)に提示し、同被験者の英語発話に対する印象を回答させた。この日本人被験者は、英語習熟度別に上位、下位群にわけられており、被験者の英語能力とアメリカ人判定者の回答との関係について、平成15、16年度に収集したデータと合わせて、現在、分析作業を継続中である。まとまり次第、国内外の学会誌に投稿の予定。本研究の平成15年度は、3カ年のプロジェクトの初年度として、データの収集・保存・分析に関してパイロットスタディーを行なった。日本人大学生英語学習者4名を被験者として、バッテリーテストとして簡易版のPaper-Based TOEFLを受験させた。被験者には1)アニメ課題と2)説明課題を課し、その様子をデジタルビデオ(DV)カメラ2台で録画した。1)では、アニメーションの物語(Canary Row, Warner Brothers)を提示した後、その内容を、英語と日本語で聞き手に説明をさせた。なお、刺激物語を分割して提示し(言語の使用順序を途中で逆転させて)言語発話を求め、使用言語の順序を被験者内・間でカウンターバランスした。2)では、「大学生活において楽しかったことと楽しくなかったこと」という題でそれぞれの項目について、英語と日本語で使用言語の順序をカウンターバランスして被験者に説明させた。これら二つの課題において、聞き手は被験者に対面し被験者に対して視線を送るが、あいづちやうたずきなどの積極的インタクションはしないように伝え、聞き手のすぐ背後にデジタルビデオカメラ2台のうち1台を置き、被験者の顔、視線・ジェスチャー画面一杯に録画した。残りの1台で、別角度から聞き手も含めて録画し、こちらをコンピユーターのHDに取り込んだ。実験の後、被験者にノンバーバル・スキル尺度への回答を求め、被験者自身の非言語コミュニケーション意識に関するデータを収集した。さらに英語音声データのみをネイティブスピーカーの教員に聞かせ被験者のスピーキング力を判定させ、paper testの得点を考慮して被験者を初級・中級・上級の三つにレベル別けした。現在、英語学習者の英語習熟度、非言語行動、非言語コミュニケーション意識等の関係についてデータの分析を実施中で、平成16年度以降、さらに被験者を増やしデータを精査して、発表の予定である。平成16年度は、以下の2点を中心に研究をおこなった。1)平成15年度に開始したデータ収集・保存・分析作業を継続した。具体的には、バッテリーテストとして簡易版のPaper-based TOEFLを受験した、日本人大学生英語学習者(6名)による英語発話時のインタラクションを、デジタルビデオ録画しコンピュータのHDに取り込み、特に視線表情、ジェスチャー等に着目して分析するデータベース化の作業を継続した。2)さらに、米国マイアミ大学において、上記の手順でデータベース化したサンプル刺激(英語を話している日本人大学生のビデオクリップ刺激=今回は英語初級レベル者2名と英語上級レベル者2名のビデオクリップ)を、これまでアジア人と日常的接触が稀な米国東海岸出身の米国人大学生(6名)に提示し、そのクリップ上の日本人学生の英語力・ジェスチャー等について評価と判定を求めた。また、日本人を含めアジア人のコミュニケーションに対するその回答者が持つ印象等についても聞き取りをおこなった。米国ワシントン大学にて、上記サンプル刺激を、これまでアジア人と日常的接触が頻繁な米国西海岸出身の米国人大学生(6名)に提示し、そのクリップ上の日本人学生の英語力、ジェスチャー等について、評価と判定を求めた。さらに、日本人を含めアジア人のコミュニケーションに対するその回答者が持つ印象等についても聞き取りをおこなった。今後、1)のデータベース化作業を継続し、2)の評価と判定結果を分析し、さらに評価者の人数をさらに増やし、平成17年度以降の研究に繋げてゆく予定である。
脳血管障害後の残存ニューロンに発現する可塑的変化の解析

リハビリテーションによってもたらされる脳血管性障害後の脳可塑的変化の機構を明らかにするために,ラット一側運動野への脳梗塞作製によって反対側上肢に運動麻痺を生じさせた後,麻痺上肢を使ったリーチ動作訓練を行った。その結果,巧緻性の高いリーチ動作を再獲得できた訓練群の梗塞反対側運動野では,脳内微小電気刺激によって麻痺肢の運動が誘発され,麻痺肢リーチ動作時のマルチユニット活動が増加することが観察された。これらの結果は,リハビリテーション訓練を行うことによって,本来その上肢の運動を司っていなかった梗塞反対側の運動野が代償的に機能するようになることを示唆している。片麻痺などの脳血管障害後遺症からの機能回復の仕組みを明らかにすることを目的として、ラットの右(あるいは左)前肢の運動を司る左(あるいは右)一次運動野内の前肢領域に光血栓法を用いて脳梗塞を作製した後、1リーチ動作の機能回復過程の行動観察と2その機能回復がどの脳領域の残存ニューロンの代償によって生じているのかについてマルチユニット活動記録法を用いて検索した。その結果、1脳梗塞作製後に麻痺した前肢が徐々にリーチ動作を回復することが観察された。特に、麻痺肢にリーチ動作強化訓練を行った動物では機能回復は顕著であった。このことは、リーチ動作強化訓練などのリハビリテーションが前肢のリーチ動作のような巧緻性の高い運動機能の回復に効果があることを示している。2マルチユニット活動記録を梗塞巣反対側の一次運動野で行ったところ、リーチ動作に関連する運動野ニューロンの活動が記録された。このことは、一次運動野が同側前肢の運動を司るようになったことを示唆しており、ラットでは通常観察されないことである。梗塞巣反対側一次運動野の残存ニューロンの可塑的変化がリーチ動作のような巧緻性の高い運動機能の回復に関与している可能性が示唆された。そこで、この現象を確認するために、リーチ動作機能回復後の梗塞巣反対側一次運動野を微小電気刺激して、同側前肢の運動が誘発されるかどうかを観察するという追加実験を行った。その結果、シャム手術のみを施したコントロール群および脳梗塞後訓練をしなかった非訓練群と比べて、訓練群では梗塞巣反対側一次運動野の微小電気刺激によって明らかにより多数の同側前肢の運動が誘発されることが観察された。このことは、前肢領域に生じた脳梗塞後に、梗塞側の反対側運動野の残存ニューロンが可塑的変化を起こし、同側前肢の運動を代償し、前肢のリーチ動作のような巧緻性の高い運動機能を回復させていることを示唆している。脳血管障害の後遺症からのリハビリテーション訓練による機能回復の機構を明らかにすることを目的として、ラットの一側前肢の運動を司る反対側大脳半球一次運動野に光血栓法を用いて脳梗塞を作製し、その一側前肢に麻痺を生じさせた。その後、麻痺した前肢を使って餌を取るというリーチ動作訓練を6週間行った訓練群は、麻痺肢を餌に伸ばし、握り、口に運ぶという巧緻性の高いリーチ動作を行うことが出来るようになった(訓練群のリーチ動作成功率は梗塞を作製しなかった健常コントロール群の約90%;リーチ動作訓練を行わなかった非訓練群では30%程度)。さらに、この訓練群の脳機能変化を解析したところ、麻痺肢と同側の大脳半球一次運動野を脳内微小電気刺激すると麻痺肢が動くようになり、さらに同側の大脳半球一次運動野においてマルチユニット記録すると麻痺肢のリーチ動作に関連して活動電位を発生する運動野ニューロンが多く観察された。これらの結果は、一側前肢の運動を司る反対側大脳半球一次運動野に脳梗塞が生じると、運動訓練をすることによって、本来その前肢の運動を司っていなかった同側の一次運動野が代償的に機能するようになることを示している。そこで、機能回復を示した訓練群の同側一次運動野に順行性トレーサーであるBDAを注入し、軸索走行を観察したところ、同側一次運動野から起始する皮質脊髄路ニューロンの軸索は、延髄錐体で一度交叉し反対側脊髄を下行した後、上位頸髄レベルで再度交叉して同側の脊髄へ投射することが有意に多く観察された。以上の結果は、脳梗塞後にリハビリテーション訓練を実施すれば、梗塞側の反対側大脳半球(麻痺肢と同側大脳半球)運動野の残存ニューロンが可塑的変化を起こし、同側の脊髄運動ニューロンに連絡することによって、同側前肢の運動機能を代償し、リーチ動作のような巧緻性の高い運動機能を回復させる可能性を示唆している。リハビリテーション神経科学研究実績の概要で記述したように、当初計画されていた脳梗塞後の運動機能の回復過程観察のための検討モデルの確定および残存ニューロンの活動記録が予定通り達成された。さらに、微小電気刺激を用いた可塑的変化についての確認追加実験も進展的に行った。

これらのことから本研究は順調に成果を得ており、来年度はより発展的な研究の展開が期待できる。前肢領域の脳梗塞後、梗塞側の反対側運動野の残存ニューロンが示す可塑的変化を明らかにする目的で以下の実験を行う。1初年度に得られたデータの蓄積を行う。2可塑的変化を示した神経回路がどのようなニューロンネットワークを形成しているかについて、biotinylated dextran amineなどのトレーサーを用いて形態学的に検索する。3観察されたニューロン局所回路の機能的活動を検索するために、細胞内電位記録法・染色法を用いて電気生理学的および神経解剖学的にニューロン局所回路の働きを解析する。以上の結果をもとに、前肢運動機能を司る大脳皮質一次運動野の損傷後に反対側運動野において残存ニューロンによって新たに形成される神経回路とその機能を明らかにする。さらに、これらの実験によって得られた結果を取りまとめ、脳血管障害後の身体障害からの機能回復の仕組みを考察し、効果的なリハビリテーション介入法の開発のための基本的原理について成果の発表を行う。マルチユニット記録のためのテレメーター装置の開発が、当初計画していたよりも短期間で完成させることができた。そのため、その開発試行のために予定していた主たる必要支出経費である動物費、テレメーター電子部品費などを節約できた。上記のように予想していたよりもテレメーター装置の開発が短期間で達成できたので、来年度はより多くの動物を用いてより多くのテレメーターを作製して研究をさらに発展させることができる。その経費に使用する。さらに、得られた経費と時間を利用して可塑的変化を示す神経回路を単一ニューロンレベルで解析することが可能となった。この実験実施には、単一ニューロン活動解析用の実験用物品を購入することが必要であるので、その経費にも使用する計画である。
異種細胞および臓器移植におけるマクロファージ性拒絶機構の解明とその制御法の確立

臓器移植ドナー不足の究極的解決策としてブタを用いた異種移植に期待がかかる。しかし、同種移植に匹敵する成績を得るには、マクロファージ性拒絶反応を制御する必要があると考えられているが、その詳細な機序は未解明である。我々は異種移植におけるヒトマクロファージ性拒絶機構の解明とその制御法を確立する目的で以下の研究を行った。1.ヒト末梢血マクロファージ・肝網内系マクロファージを分離し、抗体補体非存在下における異種細胞貪食試験・細胞傷害性試験を確立した。その結果ヒトマクロファージにはブタ細胞に対し抗体補体非依存性の貪食能・細胞傷害能が存在し、それらはαGal抗原非依存性であることを解明した。2.異種細胞間の貪食反応は、CD47-SIRPαシグナル伝達の不応性のために生ずることを解明した。ブタ細胞上CD47はヒトマクロファージ阻害受容体SIRPαの細胞質内チロシン残基をリン酸化できないため、ヒトマクロファージの非特異的活性が抑制されずブタ細胞は貪食される。すなわちCD47自己認識機構の種特異性を証明した。3.可溶性ヒトCD47投与によりヒトマクロファージによる異種細胞貪食反応を抑制できることを証明した。ヒトマクロファージとブタ細胞を可溶性ヒトCD47存在下で共培養すると、劇的な貪食抑制を認めた。4.ヒトCD47を異種細胞に表出させることによりヒトマクロファージによる貪食反応を回避できることを証明した。遺伝子導入によりヒトCD47分子をブタ細胞上に表出させ、ヒトマクロファージと抗体補体非存在下で共培養すると、無処置ブタ細胞・コントロールベクター遺伝子導入ブタ細胞と比べ、劇的な貪食回避を認めた。以上よりマクロファージ性拒絶反応を制御するにはαGal、ノックアウトブタ、ヒト補体制御因子トランスジェニックブタに加え、ヒトCD47トランスジェニックブタの確立が必要である可能性が示唆された。異種細胞・組織・臓器移植後の免疫応答として、抗体非依存性マクロファージ拒絶機構が存在すること、また、CD47分子(インテグリン関連蛋白質)と阻害受容体シグナル制御蛋白(SIRP)を介したマクロファージの自己認識機構の種特異性を解明した。マクロファージによる異種細胞拒絶機構には貪食とケミカルメディエーターによる直接細胞傷害に分けられる。まず、ヒトマクロファージによるブタ異種細胞貪食試験と傷害性試験を確立した。ヒトマクロファージに強い異種細胞貪食能および傷害性を認めた。標的にしたブタ細胞上のαGal抗原をendo-β-galactosidase Cで処理し除去しても、マクロファージによる被貪食能、被細胞傷害性は影響されなかった。すなわち、ヒトマクロファージによるブタ異種細胞の貪食性、直接細胞傷害性はαGal非依存性であることが解明された。また、マウス-ブタモデルCD47遺伝子導入実験においてCD47自己認識機構の種特異性を証明した。マウスCD47(mCD47)をブタリンパ芽球様細胞株(LCL)遺伝子導入した結果、マウス細胞と同程度ブタ細胞上にmCD47の表出を認めた。LCL-mCD47とLCL-neoをマウスマクロファージと共培養すると、時間依存的にLCL-mCD47の存在比率が増加した。すなわち、ヒト-ブタ間と同様、マウス-ブタ間においてもマクロファージによる抗体補体非依存性の貪食能を認め、ブタ細胞にmCD47を遺伝子導入することによりその貪食を制御し得ることを示した。

この結果は、我々の仮説「ヒトマクロファージによるブタ異種細胞の貪食は、ヒトマクロファージのSIRPがブタ細胞上のCD47を認識しないため、非特異的活性化が抑制されず強い貪食を被る」に矛盾しない。以上の結果から、マクロファージ性拒絶反応を制御するには、ヒトCD47トランスジェニックブタの確立が必要である可能性が示唆された。臓器移植ドナー不足の究極的解決策としてブタを用いた異種移植に期待がかかる。しかし、同種移植に匹敵する成績を得るには、マクロファージ性拒絶反応を制御する必要があると考えられているが、その詳細な機序は未解明である。我々は異種移植におけるヒトマクロファージ性拒絶機構の解明とその制御法の確立する目的で以下の研究を行った。(1)ヒト末梢血マクロファージ・肝網内系マクロファージを分離し、抗体補体非存在下における異種細胞貪食試験・細胞傷害性試験を確立した。その結果ヒトマクロファージにはブタ細胞に対し抗体補体非依存性の貪食能・細胞傷害能が存在し、それらはαGal抗原非依存性であることを解明した。(2)異種細胞間の貪食反応は、CD47-SIRPαシグナル伝達の不応性のために生ずることを解明した。ブタ細胞上CD47はヒトマクロファージ阻害受容体SIRPαをチロシンリン酸化できないため、ヒトマクロファージの非特異的活性が抑制されずブタ細胞は貪食される、すなわちCD47自己認識機構の種特異性を証明した。(3)可溶性ヒトCD47投与によりヒトマクロファージによる異種細胞貪食反応を抑制できることを証明した。ヒトマクロファージとブタ細胞を可溶性ヒトCD47存在下で共培養すると、劇的な貪食抑制を認めた。(4)ヒトCD47を異種細胞に表出させることによりヒトマクロファージによる貪食反応を回避できることを証明した。遺伝子導入によりヒトCD47分子をブタ細胞上に表出させ、ヒトマクロファージと抗体補体非存在下で共培養すると、無処置ブタ細胞・コントロールベクター遺伝子導入ブタ細胞と比べ、劇的な貪食回避を認めた。以上よりマクロファージ性拒絶反応を制御するにはGalノックアウトブタ、ヒト補体制御因子トランスジェニックブタに加え、ヒトCD47トランスジェニックブタの確立が必要である可能性が示唆された。
共生コンピューティングのためのマルチエージェントシステム

本研究課題「共生コンピューティングのためのマルチエージェントシステム」では、デジタル空間と現実空間の情報伝達に関するギャップを埋めるために、共生コンピューティングモデルに基づく情報処理を提案し、いくつかのアプリケーションにおいて実証することを目的として研究を実施した.この過程において、人間の持つ感覚的な現実感を処理するパーセプチュアルウェア、社会的な現実感を処理するソーシャルウェアをマルチエージェントシステムによって構成するフレームワークを実装した.アプリケーションとして、GPS情報とウェブに地方公共団体が公開している地域情報を使って、子供の見守り支援システムを構築した.この結果、従来個別のアプリケーションとして作成された情報システムが、人間の感覚的・社会的なモデルと合致しやすいフレームワーク上に構築できることを示した.本研究では,共生コンピューティングを実現するためのソフトウェア基盤として,相互のエージェントが互いの認識モデルを持って,自律的に行動するマルチエージェントシステムとしてのフレームワークを構築することを目的としている.この目的のためにフレームワーク構築と有効性を評価するために,評価システムを実装した.2006年度において,共生コンピューティングの実環境における実験として,子供の見守り支援システム,お年寄りの見守り支援システムを作成評価した.これらの実装は,本研究課題で目的としている,マルチエージェントシステムを用いて行われた.このマルチエージェントシステムを構成する,自律的なソフトウェアモジュールであるエージェントは,フレームワークにより,一意性,永続性を確保されており,共生コンピューティング実現において有効な手法であることが示された.この評価システム構築に当たり,共生コンピューティングの要素技術として,地域情報基盤,社会知表現,GPSデータ記録からの逸脱行動検知機能,逸脱行動理由推定機能が,マルチエージェントシステムによって実現された.この結果,共生コンピューティングを実現するためのマルチエージェントシステム設計の有効性が確認できた.これらの研究成果については,関連する国際学会,国内の学協会が主催する研究会上で公表され,関連研究者との議論が行われた.本研究課題「共生コンピューティングのためのマルチエージェントシステム」では、デジタル空間と現実空間の情報伝達に関するギャップを埋めるために、共生コンピューティングモデルに基づく情報処理を提案し、いくつかのアプリケーションにおいて実証することを目的として研究を実施した.この過程において、人間の持つ感覚的な現実感を処理するパーセプチュアルウェア、社会的な現実感を処理するソーシャルウェアをマルチエージェントシステムによって構成するフレームワークを実装した.アプリケーションとして、GPS情報とウェブに地方公共団体が公開している地域情報を使って、子供の見守り支援システムを構築した.この結果、従来個別のアプリケーションとして作成された情報システムが、人間の感覚的・社会的なモデルと合致しやすいフレームワーク上に構築できることを示した.
水-岩石系における速度論と元素濃集・分散メカニズムの解明:鉱床と環境問題への応用

本研究の主な研究実績は以下の通りである。1.水-岩石反応実験として,模擬海水-火山岩(玄武岩,デイサイト)間の反応実験を熱水条件下で行った.これらの実験により,岩石の熱水変質の程度,水溶液の化学組成(塩濃度等)により,最終的な水溶液の組成(カルシウム,バリウム,ストロンチウム等)が異なることが明らかとなった.この結果より,黒鉱鉱床中の重晶石,石膏,硬石膏の成因を明らかにすることができた.2.熱水鉱床地域(黒鉱鉱床、エピサーマル金鉱床)の熱水変質岩の化学分析(主要成分、微量成分、重金属元素、希土類元素)を多数行い、熱水変質作用による元素の地球化学的挙動を明らかにした。従来は移動が小さいと考えられている希土類元素の挙動を明らかにし、この希土類元素濃度と他の地球化学探査指標(酸素同位体組成、カリウム濃度など)との対応関係を見いだした。その結果、酸素同位体組成、カリウム濃度以外に希土類元素の地球化学探査指標の有効性を明らかにした。3.熱水性鉱床(黒鉱鉱床)における鉱物(石英、重晶石、硬石膏)の分布を明らかにした。この分布が化学平衡では説明出来ないことを示した。そして、沈殿カイネティックス-流動モデルに基づいたコンピュータシミュレーションを行い、これらの鉱物の鉱床内の分布の解釈を行った。4.風化岩の化学分析(主要成分、微量成分、重金属元素、希土類元素)を多数行った。その結果、各元素の風化作用による移動のメカニズムを明らかにした。特に、重金属元素と希土類元素の挙動を支配する要因として、吸着、イオン交換が重要であることを見いだした。本年度の主な研究実績は以下の通りである。(1)水-岩石反応に関する基礎的な研究を行った。例えば、変質岩、風化岩と水溶液間の反応実験を行い、水溶液のpH、カチオン濃度、アニオン濃度の時間的変化を調べ、これらを決める要因についての検討を行った。従来は、溶解反応、沈殿反応、イオン交換反応が重要とされてきたが、これ以外に、H^+イオンの鉱物表面への変化がpHに与える影響が大きいことを明らかにした。(2)熱水鉱床地域(黒鉱鉱床、エピサーマル金鉱床)の熱水変質岩の化学分析(主要成分、微量成分、重金属元素、希土類元素)を多数行い、熱水変質作用による元素の地球化学的挙動を明らかにした。(3)熱水性鉱床(黒鉱鉱床)における鉱物(石英、重晶石、硬石膏)の分布を明らかにした。(4)風化岩の化学分析(主要成分、微量成分、重金属元素、希土類元素)を多数行った。水-岩石反応実験として,模擬海水-火山岩(玄武岩,デイサイト)間の反応実験を熱水条件下で行った.また,水溶液-鉱物反応実験として,水溶液-石膏間の元素(ストロンチウム,マグネシウム,カルシウム)分配実験を行った.

これらの実験により,岩石の熱水変質の程度,水溶液の化学組成(塩濃度等)により,最終的な水溶液の組成(カルシウム,バリウム,ストロンチウム等)が異なることが明らかとなった.この結果より,黒鉱鉱床中の重晶石,石膏,硬石膏の成因を明らかにすることができた.すなわち,熱水と変質岩が反応することにより,カルシウム,バリウム,ストロンチウムが岩石から溶出し,熱水中のこれらの濃度が増加する.この様な熱水と海水が海底面下の浅所で混合し,硫酸塩鉱物が生成すると考えられる.分析的研究として,黒鉱鉱床地域,金鉱脈鉱床地域の熱水変質岩,風化岩石(堆積岩,花崗岩,火山岩,各種土壌)中の主成分元素,希土類元素,重金属元素等の分析を行った.その結果,熱水-岩石反応,地下水・土壌水-岩石反応によるこれらの元素の地球化学的挙動を明らかにすることが出来た.熱水・変質作用及び風化作用における希土類元素,重金属元素の付加・溶脱メカニズム,特に,熱水条件におけるイオン交換反応,風化条件における吸着,イオン交換,表面錯体反応メカニズムについて明らかにすることが出来た.これらの研究結果を放射性廃棄物地層処分,及び土壌の重金属汚染問題に適用した.本研究において,(1)熱水性鉱床における元素濃集・分散メカニズム,(2)風化作用における元素移動・分散メカニズムに関する分析的,実験的,及び理論的研究を行った.(1)では,黒鉱鉱床,金鉱床における鉱物生成メカニズム,熱水変質における元素移動に関する研究を行った.特に,硫酸塩鉱物の生成が熱水と海水との混合により生成されることをストロンチウム同位体組成,希土類元素組成をもとに明らかにした点が重要な成果である.この他に,熱水変質における希土類元素の挙動を明らかにし,希土類元素組成が地球化学探査の指標になることを示した.また,水-岩石反応実験を高温(300°C)で行い,アルカリ元素,アルカリ土類元素の地球化学的挙動を明らかにした.その結果,水-岩石反応の進行とともに,水溶液中のこれらの元素濃度が変化することがわかった.この結果より,黒鉱鉱床の生成に対して,海底下における水-岩石反応が重要であることが示された,(2)では,様々な岩石と土壌の化学的風化作用における主成分元素,微量成分(重金属,重元素),希土類元素の挙動を分析的,理論的研究により明らかにすることができた.例えば,火山灰土(黒ボク土,ローム土)の風化では,主成分元素,希土類元素共に溶解するが,重金属元素は,溶解,吸着し,主として水酸化鉄が吸着体として重要であることを明らかにした.花崗岩の化学的風化作用においては,主成分元素(アルカリ,アルカリ土類,Si)は,長石などのケイ酸塩鉱物の風化作用により溶解するが,希土類元素,重金属元素は,溶解と共に吸着もおこす.重金属現存御吸着は,主に水酸化鉄により生じ,希土類元素,アルカリ土類元素は,イライト,スメクタイト,ヴァミキュライトといった粘土鉱物によることが明らかにされた.
高次筋収縮系における構造的・機能的再構築と力学特性の研究

本研究の目標は、バイオメカニクス研究の一環として筋収縮運動系を取り上げ、その構造と機能を、力学特性の面から明らかにすることにある。我々は特に、横紋筋線維(骨格筋と心筋)り収縮要素系(この主要な構成要素は、アクチン、ミオシン)と弾性要素系(コネクチン(タイチン)、ネブリンなど)を取り上げた。さらに、レーザー光ピンセット法を用いて筋収縮系を構成する単一分子モーター(アクチン、ミオシン分子複合体)の力学特性を検討した。(1)顕微鏡下における単一筋原線維の力学特性の研究においては、画像検出系に4分割フォトダイオ-を装備して時間分解能を向上させることができた。その結果、等尺性のみならず等張性条件下での研究が可能になった。この装置は、自励振動条件下での単一筋原線維の長さ振動の研究に応用された。(2)筋(原)線維内での細いフィラメントの構造的・機能的再構築の研究においては、昨年度からの研究を更に推進し、ウシ心筋線維束中でアクチンフィラメントが100%以上再構成されることを、超薄切片電子顕微鏡観察によって確認した。再構成されたアクチンフィラメントの本数は、元の細いフィラメントの本数とほぼ同じだったが、長さが平均で数十%長くなっていた。しかしこれだけでは、再構成筋線維において発生張力が200%以上にも達するという実験結果を説明できない。そこで、心筋線維中では発生張力が100%発揮できないような調節(因子)機構が働いているのではないかと推測された。(3)in votro滑り運動系においては、硬直条件(ATP非存在)下にあるHMM(ミオシン分子の酵素断片)一分子とアクチンフィラメントの間の結合力(実際は破断力)をレーザー光ピンセット法によって顕微計測し、平均9.2pNという値を得た。さらに、この実験系の張力-歪みの曲線からHMM一分子の弾性率を約0.6pN/nmと見積もった。この値は、筋線維を用いて得られたミオシン頭部の曲げの平均弾性率(約10億個のミオシン分子の平均)とほぼ同じ大きさであった(しかし我々の見積もった弾性率にはHMM分子以外の弾性要素の寄与が含まれている可能性があり、今後の検討課題である)。
現代ペルーにおける文化遺産の活用をめぐるパブリック考古学的研究

本研究の目的は、ペルー北海岸において過去に対する認識の分析から一般の人々へのアプローチ法を確立し、「文化遺産保護」モデルの実現に向けた道筋を構築することである。近年、ペルーで調査を実施している考古学者は、文化遺産保護の重要性に関する一般の人々の認識を促すために、様々な方法を模索してきた。そうした試みのなかには、短期間のうちに良好な成果を納めた例はあるものの、彼らの意識を長期間持続させること、または広めることは困難であった。この問題を解決するためには、一般の人々に遺跡保護の必要性を訴える言説が生成される必要がある。その言説は、考古学者による過去の解釈だけではなく、一般の人々による歴史認識をも盛り込んだものでなくてはならない。これまで「パブリック考古学」、特に現地コミュニティと文化遺産に関する研究は、盗掘者とシャーマンを対象としたものが多かった。本研究は、民族誌的分析から両者の関係性を考察する点が特色といえる。考古学調査の実態を明らかにし、さらに考古学者と現地コミュニティの交流の様子も把握することができると考える。ペルーにおいて、このような研究は少ないため、考古学調査が特定地域に与えるインパクトの様相を、初めて明確に提示することができるといえる。特に、これまで一般の人々の考古学への関心の程度や関連性については等閑視されてきたため、本研究で考古学情報を受信する側の視点を提供できる点は独創的である。さらに、本研究は観光業の盛んな地域を対象としており、開発人類学へも大きく貢献すると考える。本研究の特色は、文化遺産の保護とその活用について現地コミュニティの観光業的な観点を含めた新たな指針を提示することである。また、そのような経済活動が、ナショナリズムや教育に与える影響に関しても追究する予定であり、本研究が考古学のみならず広く人類学的領域において多大な意義を持つと考える。平成23年度は、(1)9月23日から25日まで現地でパブリック考古学についてシンポジウムを開き、(2)9月から1月まで第二回現地調査による現地コミュニティーにインタビューを行った。本研究は、ペルー北海岸において過去に対する認識の分析をするため、現地コミュニティの歴史観についてデータ収集を目的としている。現在まで現地コミュニティのインタビュー及び参与観察は計画通りに進んでいる。本研究は「文化遺産」について考古学者と一般の人々の間に、異なる概念と異なる活用方法が存在することを観察した。文化遺産保護の運動を発展させるためには、学問的な視点に一般の人々の視点を組み込むべきである。そのため、本研究は一般の人々の歴史観についてデータを収集した。今後は、この歴史観の形成を分析した上で考古学者の歴史観と同意点を探索する。これまで一般の人々の考古学への関心の程度や関連性について等閑視されてきていることからも、本研究の考古学情報を受信する側の視点を提供できる点は独創的である。対象地域は、ペルー北海岸に位置するランバイエケ県フェレニャフェ市ポマ森林歴史保護区域である。本研究でいう現地コミュニティとはポマ森林歴史保護区域周辺の集落を指す。地域住民と考古学者との関係性を理解するため、本研究では2010年7月から2011年1月まで(6ヶ月間)ポマ森林歴史保護区域の周辺村落に滞在し、村人へのインタビューを行った。それらに加えて、フェレニャフェ市の住民に対しても、シカン国立博物館の建設がもたらした影響について、無作為にインタビュー調査を行った。彼らが博物館を「地元の一部」と捉えているのか、それともあくまで「外から来たもの」とみなしているのか、博物館をめぐる地域住民の認識について考察を加えた。さらに、博物館と連携して働いている住民や観光業者(特に観光ガイド)、学校の教諭へも同様にインタビューを行った。2011年1月に帰国後総合研究大学院大学にて収集したデータを整理し、調査結果をまとめている。

本研究の特色は、文化遺産の保護とその活用について現地コミュニティの観光業的な観点を含めた新たな指針を提示することである。また、そのような経済活動が、ナショナリズムや教育に与える影響に関しても追究する予定であり、本研究が考古学のみならず広く人類学的領域において多大な意義を持つと考える。平成23年度は、(1)9月23日から25日まで現地でパブリック考古学についてシンポジウムを開き、(2)9月から1月まで第二回現地調査による現地コミュニティーにインタビューを行った。本研究は、ペルー北海岸において過去に対する認識の分析をするため、現地コミュニティの歴史観についてデータ収集を目的としている。現在まで現地コミュニティのインタビュー及び参与観察は計画通りに進んでいる。本研究は「文化遺産」について考古学者と一般の人々の間に、異なる概念と異なる活用方法が存在することを観察した。文化遺産保護の運動を発展させるためには、学問的な視点に一般の人々の視点を組み込むべきである。そのため、本研究は一般の人々の歴史観についてデータを収集した。今後は、この歴史観の形成を分析した上で考古学者の歴史観と同意点を探索する。
プロテアソームによるDNAメチル化バランス制御機構の解明

プロテアソームはユビキチン化されたタンパク質を選択的に分解することによって様々な生命現象の制御に機能している。一方,DNAメチル化はエピジェネティック制御の一つであり,トランスポゾンの抑制や遺伝子発現制御に機能している。DNAメチル化が過剰になると,有益な遺伝子までサイレンシングされてしまうため,植物はDNAメチル化レベルを適切なレベルに維持することによって,ゲノムの保護と遺伝子発現を両立している。これまでの申請者の研究から,植物プロテアソームがDNAメチル化関連タンパク質の分解制御に機能することを見出している。本研究では植物プロテアソームによるDNAメチル化関連因子の分解メカニズムの解明,およびこれら因子の分解の生理的役割を解明するため研究を実施した。既存の報告から,複数のDNAメチル化関連因子の変異体がカルスからの再分化時に異常を示すことが報告されていた。そこで当該年度はDNAメチル化関連タンパク質変異体のカルスからの再分化時の表現型を検証した。その結果,本変異体において再分化が促進される事を明らかにした。また,この促進の原因遺伝子を同定するために再生化時のトランスクリプトームを実施した。その結果,変異体において葉器官形成に機能する因子の発現が促進する事が明らかになった。これらの結果から,DNAメチル化関連因子は再生化を負に制御しており,プロテアソームは本因子を分解する事で再生化を促進する可能性が示唆された。一方,DNAメチル化はトランスポゾンの抑制や遺伝子発現に機能する。植物は適切なDNAメチル化レベルを維持することによって,ゲノムの保護と遺伝子発現を両立している。これまでに植物プロテアソームがDNAメチル化を負に制御すること,DNAメチル化関連タンパク質の分解制御に機能することを見出している。本研究では植物プロテアソームによるDNAメチル化関連因子の分解メカニズムの解明,およびこれら因子の分解の生理的役割を解明することによって,プロテアソームによるDNAメチル化制御機構の解明を試みる。当該年度は,プロテアソームによるDNAメチル化関連因子の分解機構を明らかにするために,プロテオミクス解析を実施した。その結果,メチル化関連タンパク質のユビキチンリガーゼの同定および本因子の新規相互作用因子の同定に成功した。また,プロテアソームによる分解の生理的意義を解析するためにTILLING法によってイネ変異体ライブラリーのスクリーニングを実施し,イネプロテアソーム変異体候補を複数単離することができた。本研究課題に関して,当初予定していた進捗が見られたため。なかでもプロテオミクス解析から得られた相互作用因子の解析は本研究を推進できると期待できる。これまでの研究から,植物プロテアソームがDNAメチル化を負に制御すること,DNAメチル化関連タンパク質の分解制御に機能することを見出している。本研究では植物プロテアソームによるDNAメチル化関連因子の分解メカニズムの解明,およびこれら因子の分解の生理的役割を解明することによって,プロテアソームによるDNAメチル化制御機構の解明を実施している。当該年度は,1) DNAメチル化関連因子がユビキチン化されることを確認した。2) DNAメチル化関連因子のユビキチンリガーゼ候補因子を同定した。3) DNAメチル化関連因子が再分化で遺伝子発現が増加することを明らかにした。4)DNAメチル化関連因子変異体は再分化異常を示すことを明らかにした。遺伝学的解析から,DNAメチル化関連タンパク質の機能の詳細について解析を進めている。今後はDNAメチル化関連タンパク質が制御する領域を明らかにするため,全ゲノムレベルのクロマチン免疫沈降を実施する。本研究で使用する形質転換体作製時に病気が発生して実験をやり直したため,当初の計画より遅延している。より精力的に実験することで遅れを挽回したい。

当該年度で得られたユビキチンリガーゼの遺伝学的・生化学的解析を実施することによって,DNAメチル化関連因子がいつ・どこで・どのように分解制御を受けるか解明を試みる。また、イネプロテアソーム変異体を取り寄せ,ホモ化を進めると共に,表現型およびDNAメチル化解析を実施する。同時に,ゲノム編集を用いたイネプロテアソーム変異体の作製も進める。当該年度で得られた結果から,DNAメチル化形成時にはDNAメチル化関連因子が安定化し,DNAメチル化の付加が完了すると分解されることが示唆された。プロテアソームはゲノムが過剰にDNAメチル化されることを抑制していると考えられる。今後は,ChIP seqによって,本因子が制御する具体的な領域を決定し,論文にまとめたい。次年度使用額は,今年度に実施することができなかったChIP seqに必要な消耗品に充てる予定である。次年度分については,当初予定していた研究を実施するための消耗品,成果発表などの経費に充てる。
ヒト口腔組織由来細胞における早期増殖応答タンパク質の発現と成長因子によるその影響

早期増殖応答タンパク質(Early Growth Response,EGR)は,Znフィンガードメインをもつ転写因子で,細胞増殖の重要な制御因子と考えられている.本研究で,ヒト歯根膜および歯髄由来線維芽細胞のEGR-1発現におけるFGF-1,FGF-2,IGF-IまたはIGF-IIの影響を検索して,両線維芽細胞の増殖とEGR-1との関連を検討した.両線維芽細胞を1,10および100ng/mlのFGF-1,FGF-2,IGF-IまたはIGF-IIをそれぞれ添加したDMEMで30分間培養した後,EGR-1の発現性を検索した.その結果BrdU取り込み量は,すべての成長因子の添加量に相関して増加しEGR-1タンパク質はIng FGF-1添加ですでに高い発現を示し,100ng添加で核やその周囲に局在した細胞が増加するとともに,EGR-1mRNA発現が最も高かった.FGF-2添加でEGR-1mRNA,タンパク質は濃度依存的に発現が増加し,10ng添加で核やその周囲に集中する細胞が増加した.またIGF-I,IGF-IIとも1ng添加からEGR-1mRNA,タンパク質の高い発現が観られ,10ng添加IGF-Iと100ng添加IGF-IIでEGR-1タンパク質の局在が,核やその周囲に集中した.以上の実験結果から下記のことが示唆された.1.FGF刺激による両線維芽細胞の増殖においてEGR-1が増殖制御の役割を果たし,特にFGF-1が,より低濃度でEGR-1発現を誘発する.2.IGF刺激により,1ng添加からEGR-1の高い発現が認められ,機能発現はIGF-Iが10ng添加でIGF-IIが100ng添加で観られる.早期増殖応答タンパク質(Early Growth Response, EGR)は,Znフィンガードメインをもつ転写因子で,細胞増殖の重要な制御因子と考えられている.本研究で,ヒト歯根膜線維芽細胞(PLF)におけるEGR-1およびEGR-2の発現性を検索して,PLFの増殖とEGRとの関連を検討した.1.ヘルシンキ条約に則り,同意を得た13名の患者様にいただいた抜去歯から歯根膜線維芽細胞(PLF)を3株,歯髄線維芽細胞を10株,採取・単離した.3.EGR-1およびEGR-2の発現性をImmunocytochemistry, Western blotで検索した.その結果,EGR-1タンパク質は15分後から発現の増加が認められ,特に30分後での局在は核やその周囲に集中していた.EGR-2は30分後をピークとし,45分後で核やその周囲で強い反応が認められた.4.EGR-1 mRNA,EGR-2 mRNAはともに添加後15分から発現したことをNorthern blotから明らかにした.以上の実験結果から,PLFの増殖において,EGR-1,-2ともに増殖の制御に役割を果たし,EGR-1がより早期に機能発現することが示唆された.早期増殖応答タンパク質(Early Growth Response,EGR)は,Znフィンガードメインをもつ転写因子で,細胞増殖の重要な制御因子と考えられている.本研究で,ヒト歯根膜および歯髄由来線維芽細胞のEGR-1発現におけるFGF-1,FGF-2,IGF-IまたはIGF-IIの影響を検索して,両線維芽細胞の増殖とEGR-1との関連を検討した.両線維芽細胞を1,10および100ng/mlのFGF-1,FGF-2,IGF-IまたはIGF-IIをそれぞれ添加したDMEMで30分間培養した後,EGR-1の発現性を検索した.その結果BrdU取り込み量は,すべての成長因子の添加量に相関して増加しEGR-1タンパク質はIng FGF-1添加ですでに高い発現を示し,100ng添加で核やその周囲に局在した細胞が増加するとともに,EGR-1mRNA発現が最も高かった.FGF-2添加でEGR-1mRNA,タンパク質は濃度依存的に発現が増加し,10ng添加で核やその周囲に集中する細胞が増加した.またIGF-I,IGF-IIとも1ng添加からEGR-1mRNA,タンパク質の高い発現が観られ,10ng添加IGF-Iと100ng添加IGF-IIでEGR-1タンパク質の局在が,核やその周囲に集中した.以上の実験結果から下記のことが示唆された.1.FGF刺激による両線維芽細胞の増殖においてEGR-1が増殖制御の役割を果たし,特にFGF-1が,より低濃度でEGR-1発現を誘発する.2.IGF刺激により,1ng添加からEGR-1の高い発現が認められ,機能発現はIGF-Iが10ng添加でIGF-IIが100ng添加で観られる.
古典と女性

本研究は「古典学の再構築」の「伝承と受容(世界)」班における公募研究の一環として、ヨーロッパにおいてギリシア・ローマの古典がどのように受容されてきたかという問題を、カテゴリーとしての「女性」との関わりの観点から検討してきた。このようなジェンダー古典研究を進めるうちに明らかになったことは、性差の制度化に言説が大いに寄与していたこと、そしてギリシア・ローマの古典的文献が近代の形成において文化的規範として、カテゴリー的差異の強化にも作用したことなどである。研究代表者はジェンダー視点から神話・悲劇を中心に分析を進めると同時に、古代から近現代までの文献学・古典学の形成・発展過程を検討した。古典学の受容の歴史を特に近代との関わりを軸に検討した結果、近代の発達と近代古典学の間に密接な関連があること、とくにネオ・ヘレニズムの概念の誕生とギリシア古典の規範化が軌を一にしている、そしてまた、近代初頭における「女性の地位」論争の活発化と近代家族の形成は連動していた、などの知見を得た。研究分担者は古典の女性詩人サッポーを例にとり、詩人をめぐる史実の欠如とラテン文学におけるこの詩人の受容のさいに生じたバイアスゆえに、近代においては、毀誉褒貶いずれの場合にも「サッポー」という名の「虚構」が古典的権威をもつ規範の役割を果たしたことを具体的に検証した。昨年度に続いて、相対主義的な古典解釈の立場から、古典の伝承と受容を可能にした価値観や世界観を追究した。今年度はとくに神話をジェンダー視点から読みなおすことによって古代を再認識する作業を行なった。調査と執筆に時間を割いたため、研究代表者の成果は論文1点となったが、ディオニュソス神話における女性の役割や女性信者の意味について歴史的関係を含めた考察を行ない、この面からエウリピデス『バッカイ』の解釈を行なった。また昨年度の課題からの発展的継続として、古代の身体観についてアリストテレスを中心に調査中である。現在のところまだ公表する段階に達していないが、近代のtwo sex modelと対比される形で古代にはone sex modelが支配的であったという知見をこれまでに得ており、今後さらにこれについて研究を深める予定である。研究分担者は18世紀英文学において「サッフォー」の表象がどのような意味で用いられたかを調査・考察した。その成果を調整班研究発表会で「18世紀におけるサッフォーたち」として発表し、サッフォーの名が女性同性愛者への偏見を含む社会的眼差しを映し出すことを明らかにした。また、18世紀に支配的であったオウィディウスのサッフォー像に対する同時代の女性詩人たちの反発について考察を行ない、その成果の一つとして、メアリ・ロビンソンのソネット集『サッフォーとパオーン』に焦点を絞った論文を発表した。今後の研究では18世紀女性詩人たちにとってのサッフォーの意義についてさらに考察する予定である。