hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
薬剤徐放機能を備えたステントの冠動脈再挟窄に対する有効性の評価

【目的】薬剤徐放機能を備えたステントからの徐放薬剤を選択する実験を行った.薬剤の選択は冠動脈狭窄抑制の可能性のあるものを選択した.冠動脈ステント留置後再狭窄抑制薬剤評価のため,ブタ冠動脈狭窄モデルを作製し血管内皮機能改善と血管平滑筋活性抑制機能を併せ持つアムロジピンの投与を行いその有効性を評価した.【方法】SPF/ランドレースポーカインの左冠動脈前下行枝にステントを過拡張の状態で留置し狭窄モデルを作製した.コントロール群(n=9)には術後には抗血小板等の薬剤投与を行わず,アムロジピン投与群(n=6)にはアムロジピンのみを0.35mg/kg/dayで投与し,それぞれの留置部血管の評価に血管内超音波(IVUS)を用い評価しp<0.05を有意とした.【結論】ブタ冠動脈狭窄モデルは,ステント過拡張にて慢性刺激を冠動脈に加えることで人為的冠動脈狭窄を引き起こす.ステント過拡張の刺激にて血管内膜,中膜及び外膜には円周方向のシアーストレスが慢性的にかかり,内皮機能障害,血管平滑筋細胞に活性刺激が加わる.NO産生抑制,酸化ストレスの発生,血管平滑筋細胞のL型カルシウムチャンネルの活性を引き起こし,静止型から活性型へと変化させ複合的に冠動脈狭窄を引き起こす.カルシウム拮抗薬アムロジピンは,これらのチャンネルを正常化することで,冠動脈狭窄を抑制する可能性が示唆された.臨床においてアムロジピンの経口投与でもステント留置後の狭窄を抑制できる可能性が示唆された.アムロジピンは薬剤徐放型ステントの対象薬剤としても非常に有望である.【目的】薬剤徐放機能を備えたステントからの徐放薬剤を選択する実験を行った.薬剤の選択は冠動脈狭窄抑制の可能性のあるものを選択した.冠動脈ステント留置後再狭窄抑制薬剤評価のため,ブタ冠動脈狭窄モデルを作製し血管内皮機能改善と血管平滑筋活性抑制機能を併せ持つアムロジピンの投与を行いその有効性を評価した.【方法】SPF/ランドレースポーカインの左冠動脈前下行枝にステントを過拡張の状態で留置し狭窄モデルを作製した.コントロール群(n=9)には術後には抗血小板等の薬剤投与を行わず,アムロジピン投与群(n=6)にはアムロジピンのみを0.35mg/kg/dayで投与し,それぞれの留置部血管の評価に血管内超音波(IVUS)を用い評価しp<0.05を有意とした.【結論】ブタ冠動脈狭窄モデルは,ステント過拡張にて慢性刺激を冠動脈に加えることで人為的冠動脈狭窄を引き起こす.ステント過拡張の刺激にて血管内膜,中膜及び外膜には円周方向のシアーストレスが慢性的にかかり,内皮機能障害,血管平滑筋細胞に活性刺激が加わる.NO産生抑制,酸化ストレスの発生,血管平滑筋細胞のL型カルシウムチャンネルの活性を引き起こし,静止型から活性型へと変化させ複合的に冠動脈狭窄を引き起こす.カルシウム拮抗薬アムロジピンは,これらのチャンネルを正常化することで,冠動脈狭窄を抑制する可能性が示唆された.臨床においてアムロジピンの経口投与でもステント留置後の狭窄を抑制できる可能性が示唆された.アムロジピンは薬剤徐放型ステントの対象薬剤としても非常に有望である.我々はブタを用い,冠動脈狭窄抑制実験を薬剤の全身投与と,局所投与による薬剤の効果を確認する実験を行うこととした.stent-based Drug Delivery System(DDS)としたディバイスで局所投与を行いその有効性を評価する.今回は,血管内皮機能改善と血管平滑筋細胞の活性抑制に効果のあるといわれているカルシウム拮抗剤アムロジピンを選択し我々の実験モデルに経口投与し効果を確認することとした.【目的】冠動脈ステント留置後再狭窄抑制薬剤評価のため,ブタ冠動脈狭窄モデルを作製しアムロジピンの投与を行いその有効性を評価した.【方法】SPF/ランドレースポーカイン(体重25-30kg)を用いヘパリン投与下に左冠動脈前下行枝にステントを過拡張の状態で留置し狭窄モデルを作製した.コントロール群(n=7)とアムロジピン投与群(n=5)の2群をステント留置後1ヶ月間の飼育を行った.コントロール群には薬剤投与を行わず,アムロジピン投与群にはアムロジピンを0.35mg/kg/dayで投与し,それぞれの留置部血管の評価を行った.ステント留置部の冠動脈径は血管内超音波(IVUS)を用い評価しp<0.05を有意とした.【結果】ステント留置時のコントロール群,アムロジピン投与群の留置部の冠動脈平均直径,ステント拡張率,留置直後径には両群に有意差は認めなかった.1M後の狭窄率に関してはコントロール群15.14±6.57%,アムロジピン投与群6.89±2.41%となり有意差を認めた.【結論】ブタ冠動脈狭窄モデルは,ステント過拡張にて慢性刺激を冠動脈に加えることで人為的冠動脈狭窄を引き起こす.ステント過拡張の慢性刺激にて血管内膜,中膜及び外膜には演習方向のシアーストレスがかかり,内皮細胞,血管平滑筋細胞に活性刺激が加わり血管平滑筋細胞のL型カルシウムチャンネルの活性を引き起こし,静止型から活性型へと変化させ,冠動脈狭窄を引き起こす.カルシウム拮抗薬アムロジピンは,そのチャンネルを抑制することで,活性型平滑筋細胞の出現を抑制し狭窄の発生を抑制すると考えた.

アムロジピンにはステント留置後の狭増を抑制できる可能性が示唆された.【結果】【結論】実験開始時の実験群の条件に差は認めず同一条件で実験を行った.1カ月後の狭窄発生に関し,コントロール群に比し,アムロジピン投与群は線形狭窄率,面積狭窄率ともに有意差を持って抑制することを認めた.ブタ冠動脈狭窄モデルは,ステント過拡張にて慢性刺激を冠動脈に加えることで人為的冠動脈狭窄を引き起こす.ステント過拡張の慢性刺激にて血管内膜,中膜及び外膜には演習方向のシアーストレスがかかり,内皮細胞,血管平滑筋細胞に活性刺激が加わり血管平滑筋細胞のL型カルシウムチャンネルの活性を引き起こし,静止型から活性型へと変化させ,冠動脈狭窄を引き起こす.カルシウム拮抗薬アムロジピンは,そのチャンネルを抑制することで,活性型平滑筋細胞の出現を抑制し狭窄の発生を抑制すると考えた.アムロジピンにはステント留置後の狭窄を抑制できる可能性が示唆された,
麻酔薬によるGLUT4トランスロケーション変化の解析

「研究の目的」外科的侵襲やその他ストレスにより周術期に生体は容易に高血糖となり、それが合併症の増加・創傷治癒の遅延などを引き起こす。しかし、手術中に使われる麻酔薬がインスリンの作用を細胞レベルでどのように変化するかは不明である。そのため、我々はグルコース・トランスポーターのひとつであるGLUT4の動態を軸に、麻酔薬と血糖調節の関係について調べている。「実施計画」まず初年度ではGLUT4可視化細胞の作製にあたり、次年度でその細胞を用いた解析を進める予定である。「研究実績」研究初年度である平成21年度では、計画どおりまずGLUT4可視化細胞の作製にあたった。(内容)ヒトGLUT4配列にマーカーとしてGFPをタギングしたpCMV6-AC-hGLUT4-GFPベクターを用いてトランスフェクションをおこなった。用いた細胞はマウス3T3-L1細胞を特殊培地で分化誘導した3T3-L1脂肪前駆細胞である。ベクターを調製したのちリポフェクション試薬を用いて3T3-L1脂肪前駆細胞にトランスフェクションをおこなった。そしてGFP発現を、波長フィルターをもちいた蛍光顕微鏡で碓認した。hGLUT4-GFPの発現は約1030%の細胞でみられ、トランスフェクションの効率の良さが推測された。発現様式はほぼ細胞質全域に広がり感度も良好であった。(意義、重要性)麻酔薬によるGLUT4トランスロケーションの変化を調べるためのhGLUT4-GFP発現細胞を得る事ができた。この細胞を用いて各種薬物添加後の反応を観察することができる。ただ、よりクリアな画像を得るため今後は観察にあたり共焦点レーザー顕微鏡などの使用が必要であろうと考えている。
2型糖尿病の代謝アダプテーション

申請者らは、2型糖尿病の代謝アダプテーションの解析における基盤技術として、トランスオミクスを測る、繋ぐ、読み解く解析手法の確立を行った(川田ら、iScience; 2018,川田ら、Genes Cells, 2018)。ラット肝がん由来のFAO細胞にインスリン刺激を施し、細胞から抽出したRNA、リン酸化タンパク質、代謝物量の時間波形を、トランスクリプトーム、リン酸化プロテオーム、メタボローム計測により網羅的に取得した(トランスオミクスを測る)。またこれらの網羅的データからインスリン刺激に対して増加もしくは減少する遺伝子、リン酸化タンパク質、代謝物を同定した。リン酸化タンパク質からインスリンのシグナルを伝えるシグナル伝達ネットワークを同定し、転写因子の活性を制御するタンパク質をデータベースから同定することで、インスリン刺激に対して応答を示す遺伝子の制御ネットワークを構築した(トランスオミクスを繋ぐ)。インスリン応答性遺伝子のうち代謝に関与する遺伝子を選定し、同時にインスリンに応答する93代謝物からこれらの代謝反応を調整する代謝物を同定することで、インスリン刺激時の遺伝子発現を介した代謝制御ネットワークを構築した。ネットワークに含まれる分子がインスリン濃度に対してどのように応答するかを詳細に解析した。細胞が高いインスリン濃度に対しては転写因子を介した遺伝子発現制御を主に行い、低いインスリン濃度に対しては糖代謝を主に制御することを見出した。さらに、ラットを用いた個体レベルの解析から、発現が変化する遺伝子およびタンパク質の一部は、実際に生体内の肝臓でも同様の応答をすることが確かめられた。このことは細胞内ネットワークが、インスリンの濃度に依存してそれぞれ選択的に使い分けられていることを示している(トランスオミクスを読み解く)。当初の計画は順調に進んでおり、期待通りの成果が得られている。正常と肥満モデルマウスを用いて個体レベルでの2型糖尿病の代謝アダプテーションの解析を行う。通常のグルコースに加えて、13Cで標識したグルコースによる経口糖負荷を行い、肝臓、筋肉、脂肪組織などでのフラックス解析も行う。糖負荷後の肝臓・筋肉・脂肪組織・血液などの代謝物の同位体計測を行い、数理モデルを用いて臓器内・臓器間の代謝フラックスの時間変化を推定する。このフラックスデータを、他の階層と統合するネットワークインテグレーション技術も開発する。これにより、各代謝フラックスの制御メカニズムを明らかにするとともに、血中代謝物濃度を制御している反応を同定する。さらに、野生型および肥満モデルマウスの解析結果を比較し、肥満に伴う代謝異常をフラックスとその制御の観点から解明する。疾患トランスオミクスネットワークの生化学反応を基にしたmechanisticな因果関係を解析するため、疾患トランスオミクスネットワークを動的ネットワークとして解析する。疾患トランスオミクスネットワークのうち、代謝物と代謝酵素を中心に生化学反応モデルを作成する。野生型および肥満モデルマウスの生化学反応モデルを用いて変数選択を行うことにより、ネットワーク上のどの分子が野生型および肥満モデルマウスの代謝応答の違いを生み出しているかを解析する。さらにパラメータ感受性解析を行い、ネットワーク上のどの反応が野生型および肥満モデルマウスの代謝応答の違いを生み出しているかも解析する。

疾患トランスオミクスネットワークのうち、代謝物と代謝酵素を中心に生化学反応モデルを作成する。野生型および肥満モデルマウスの生化学反応モデルを用いて変数選択を行うことにより、ネットワーク上のどの分子が野生型および肥満モデルマウスの代謝応答の違いを生み出しているかを解析する。さらにパラメータ感受性解析を行い、ネットワーク上のどの反応が野生型および肥満モデルマウスの代謝応答の違いを生み出しているかも解析する。
実験的不全心における心筋内Ca^<2+>動態異常の定量化解析法の開発

左心室の収縮に関して様々な研究がなされたが、菅らによる収縮期末圧容積関係により左心室の挙動は十分に説明されるようになった。しかし細胞分子レベルの研究による新しい知見との間にあるギャップは近年ますます拡大している。そこで本研究ではカルシウム-筋線維相互作用モデルにより、左室圧容量依存性をカルシウム-トロポニン(Ca-Tn)関係、アクチン-ミオシン(A-M)関係について検討した。イヌ摘出心交叉灌流標本6例を用い、左室表面に注入したエクオリンにより心筋細胞内カルシウム濃度([Ca2+]i)を測定、同時に左室圧を記録した。左室容積はサーボポンプにて駆出性収縮をさせた後、容積を固定し等容性収縮とした。モデルに記録した[Ca2+]iを入力し、出力としてのA-M結合が左心室発生張力を表すと仮定し、実験から得られた左室張力曲線をもっともよく表す平衡定数群を求めた。モデルは、A-M関係を左室容積依存性とし、Ca-Tn関係が左室容積に依存する(解析1)、依存しない(解析2)場合について検討した。[Ca2+]iは、収縮様式、左室容積によらず、同じ時間経過を示した。解析1および2は、Ca-Tn関係の左室容積依存性に関わらず、ともに左室張力曲線をよく表した。さらに、等容性収縮で得られた平衡定数群から、等容性収縮に先行した駆出性収縮についても表すことができた。しかし、解析から得られるCa-Tn関係は、解析1では左室容積の増加に伴い結合が増えるのに対し、解析2では左室容積の影響は受けなかった。心筋のカルシウム-筋線維相互作用モデルは、Ca-Tn関係の左室容積依存性の有無に関わらず、等容性および駆出性収縮の左室張力曲線をよく表すことができたが、[Ca2+]iが左室容積の影響を受けないため、Ca-Tn結合も左室容積に応じた変化はしない、すなわちCa-Tn関係は左室容積に依存しないと考えられる。不全心では、心筋細胞内の収縮蛋白、カルシウム動態を含むイオン環境、エネルギー代謝などさまざまな点で正常な心筋細胞とは異なることが知られている。特に収縮蛋白やカルシウム動態の異常は、直ちに心収縮力の異常、エネルギー代謝のミスマッチを招来し更なる心不全の進行を惹起する。過去に報告した大型動物と同様、ラット・フェレットなど小動物の正常心標本においても期外収縮後に一過性交互脈が認められた。また各心拍の収縮性の強弱は同時に細胞内カルシウムトランジエントの強弱を伴うことが明らかとなった。さらに、収縮能の基本的なメカニズムを探るため、心室容積で変化に伴うの圧波形変化とカルシウムトランジエントから、負荷依存性の左心室の挙動について差分方程式モデル<4-State Biochemical Interaction Model)を考案・解析した。心筋の負荷依存性の規定因子についてトロポニンのカルシウム親和性およびアクチン・ミオシンの相互作用の二つが考えられる。4-State Modelによる解析の結果、左室容積を変化による筋長変化に伴い、トロポニンのカルシウム親和性は影響を受けないがアクチン・ミオシン相互作用を規定する因子が負荷依存性をもつ可能性が示唆された。この解析は臓器レベルの心標本での筋線維のカルシウム感受性を評価することにも成功した(Am J Physiol,2002)。すなわち筋線維を取り出すことなく収縮蛋白機能を評価することを可能にした。次年度はこれらの解析を実験的心不全モデルに適用し、解析法の妥当性を評価する。

心筋のカルシウム-筋線維相互作用モデルは、Ca-Tn関係の左室容積依存性の有無に関わらず、等容性および駆出性収縮の左室張力曲線をよく表すことができたが、[Ca2+]iが左室容積の影響を受けないため、Ca-Tn結合も左室容積に応じた変化はしない、すなわちCa-Tn関係は左室容積に依存しないと考えられる。
大都市中心部からのメタン放出量の連続測定

都市中心部(堺市役所高層館屋上)と郊外(大阪府立大学建屋屋上)の2サイトに渦相関法によるCH4フラックス連続測定システムを立ち上げた。郊外サイトは2019年6月に、都市中心部サイトは2019年10月から連続的にCH4フラックスの連続測定が実施できている。2019年11月からは、都市サイトにおいてCOフラックスの連続測定システムを設置し、COフラックスの測定も開始した。フラックス測定システムについては、長期観測に向けての必要なノウハウの蓄積をはかり、管理方法を確立した。観測開始以降は、長期の欠測もなくおおむね順調にデータを蓄積させることができた。CH4・CO2濃度計を車載することで、これらの温室効果気体を移動観測できる装置を試作した。郊外サイトの半年間の計測データを解析したところ、CH4フラックスの季節変動に影響を及ぼす環境要因として気温や建物のガス使用量が重要であることが明らかとなった。対象地域においては、夏季と冬季におけるガス空調に利用にともなうCH4放出がCH4フラックスの季節変動を作り出しているものと思われる。渦相関法によるフラックス観測データとフットプリント解析を組み合わせて、CH4およびCO2放出・吸収源の空間分布を評価する手法を開発した。初期解析結果をまとめて、2件の学会発表を行った。初年度に予定していた「フラックス観測システムの立ち上げ」と「移動観測システムの試作」はおおむね予定通りに実施できた。移動観測システムに利用予定のCH4ガス分析計を、移動観測に利用しない時期にフラックス観測に利用することで、都市サイトに加えて郊外に1サイト追加でフラックス観測システムを立ち上げることができた。郊外サイトについては、半年以上の連続データを蓄積することができた。初年度に構築した長期観測システムの保守・管理を行い、高品質なCH4フラックス、COフラックスのデータを蓄積させる。観測されたフラックスがどのような環境要因によって変動しているかを、気温などの物理環境に加えて、交通量やガス使用量などの人為起源の要因とも比較を行い、明らかにする。初年度に開発したフラックスの空間分布推定手法の高度化を図り、都市内に存在するCH4放出エリアを特定する。得られた空間分布の解析結果を移動観測の結果と比較して、CH4放出源の空間分布を多面的に評価する。観測された年間CH4放出量を排出インベントリーの値と比較を行う。
南部アフリカにおける昆虫利用の文化地理学的研究

今年度は,上記研究課題に関しての1.現地調査,2.研究成果発表,3.成果のとりまとめを行った。1.現地調査2002年5月に,南アフリカ北部各地において,食用カメムシの利用と流通に関して,トランスバール博物館ロブ・トムズ博士と共同で観察および聞き取り調査を行った。カメムシはベンダ族の間でよく食べられている。この調査では,ノーザンプロビンスにおける食用範囲,ジンバブウェから南アフリカへの交易状況,採集・調理方法が明らかになった。これはこれにより,南部アフリカを特徴づける昆虫食の一つとして重要であることがわかった。2.研究成果発表2003年8月に,南アフリカダーバンにて開催された国際地理学会の生物地理学部門にて,これまでの成果をまとめ,「Human-insect Relationship in Southern Africa」と題し,口頭発表を行った。食用薬用をはじめとするさまざまな利用の仕方とその民族差・地域差について言及し,あわせて昆虫利用が文化的行為としてこの地では生活に組み込まれていることを述べた。3.成果のとりまとめ本年度は,南部アフリカの昆虫食に関する文献調査と既存の資料のデータベース化と分析および現地調査を行った。1.文献ならぴに既存資料分析南部アフリカ地域における昆虫利用は,食用,薬用,生活用具,遊び,という物質生活的側面と,歌の題材,言い伝え,など精神生活の側面とに分けられ,各側面での用いられ方を民族昆虫学的側面と地域差・民族差について文化地理学的見地から整理した。2.現地調査昆虫出現時期の雨季,1月27日から2月23日まで,ナミビア,ボツワナ,ザンビア,ジンバブエ,南アフリカの各地において,集落や市場にて観察・聞き取り調査を実施した。バッタ,甲虫,カメムシ,セミ,シロアリ,羽アリ,ガ幼虫,などさまざまな昆虫の利用の実際が明らかになった。なかでもガの幼虫(イモムシ)が市場産品として重要であり,その種類と産地・消費地,国際間での流通の広がりとネットワークは,この地の昆虫資源利用の特徴を示すものとして重要であることがわかった。これらの地域では,イモムシを含め,ほとんどの昆虫は一度乾燥される。これは,保存や流通という機能的な理由よりも乾燥食品を好むことに起因するとも考えられる。自給的な採集・食用においても乾燥させることが不可欠である。市場では魚や植物性食品など乾燥ものが多く,また昆虫もこうした乾燥食品の部門で扱われている。こうした特徴は,昆虫食の盛んな東南アジアにおいては生あるいは調理品が主体で売られているが,それと対照的であり,「乾燥」食品と昆虫食との関連は今後の比較研究を行う上で重要な示唆を与えてくれる。3.成果のとりまとめ
Rab14とCCN2の相互作用が骨・軟骨の細胞に与える新たな機能の解明

本研究では、Rab14とCCN2の結合様式を明らかにし、両者の相互作用が細胞内の小胞輸送に及ぼす影響や、骨・軟骨の細胞または組織に与える生理的作用を検証することを目的とした。初年度では、Rab14がCCN2のIGFBPドメインに結合すること同定し、両者が細胞内で共局在することで小胞輸送を制御することを明らかにしてきた。本年度は、Rab14およびCCN2の発現あるいは機能を抑制することで、軟骨細胞の小胞体ストレスが上昇し、プロテオグリカンの分泌が減少することを示した。これらの結果から、Rab14とCCN2は細胞内で相互作用し、軟骨細胞の基質産生を制御していることが示唆された。本研究では小胞の細胞内輸送を制御する因子Rab14と軟骨分化促進因子CCN2について、これらの分子間相互作用が骨、軟骨の細胞に与える新たな機能と作用機構の解明を目的とする。申請者は予備実験において、軟骨分化促進因子CCN2の結合因子としてRab14を同定し、各々が骨、軟骨で高い発現を示すことを明らかにした。そこで、今年度はRab14とCCN2がどのような結合様式を取り細胞内の小胞輸送を制御しているかを検証し、以下の結果を得た。1. CCN2のフラグメントを含む発現ベクターとRab14の発現ベクターを、酵母内で共発現させ、レポータージーンによる制限培地での生育アッセイにて2つの因子の相互作用を評価した。Rab14はCCN2のIGFBPドメインを有するフラグメントとのみ相互作用したことから、CCN2とRab14はIGFBPドメインを介して結合することが示された。2. COS7細胞内でGFP融合CCN2、Halo融合Rab14を異所性に発現させ、細胞内におけるCCN2とRab14の局在を調べたところ、CCN2とRab14が細胞内でドット状に染色され、共局在していた。以上の結果より、Rab14はCCN2と相互作用することで小胞にassociateし、細胞質で小胞の輸送に関与していることが示唆された。軟骨分化促進因子CCN2は軟骨に強い発現を示し、基質の合成促進能を有する分泌性の液性因子とされてきた。昨年までに我々は、軟骨細胞様細胞株HCS-2/8由来のcDNAライブラリーから、CCN2と結合するタンパク質としてRab14を単離し、CCN2とRab14がIGFBPドメインを介して結合し、細胞内で両者が共局在することで、小胞の輸送に関与していることを報告してきた。そこで、今年度はCCN2とRab14の相互作用が、軟骨細胞に及ぼす生理的意義を明らかにすることを目的とし、以下の結果を得た。2. dominant negative formのRab14をHCS-2/8細胞に過剰発現させると、プロテオグリカンの蓄積が野生型のRab14と比較して75%以下に低下した。これらの結果から、CCN2はRab14とIGFBPドメインを介して細胞内で結合することで小胞にassociateし、分泌タンパク質を含む小胞の輸送に関与していることが明らかとなった。一方で、CCN2やRab14の発現や活性を抑制することで、細胞内で小胞輸送の秩序が崩れ、輸送されなかったタンパク質が細胞内に蓄積されている可能性が示された。このことはCCN2がRab14のエフェクター分子として作用し、両者の相互作用が軟骨細胞の基質産生を制御していることを示唆している。本研究では、1Rab14とCCN2がどのような結合様式を取り細胞内の小胞輸送を制御しているか、2Rab14とCCN2の相互作用が骨や軟骨の細胞または組織にどのような生理的作用与えるのかを検証することを目的としている。本年度では、Rab14がCCN2のIGFBPドメインに結合すること同定し、両者が細胞内で共局在することで小胞輸送を制御する可能性を示しており、上述の1の課題を明らかにしてきた。現在、これらの結果をもとにRab14とCCN2が軟骨細胞に及ぼす生理的な作用を検証しており、進行状況は概ね順調であると言える。27年度が最終年度であるため、記入しない。歯科矯正学I. Rab14とCCN2の結合が骨・軟骨組織の細胞に及ぼす生理作用について検討する。骨・軟骨組織の細胞では、Rab14およびCCN2のmRNAが高レベルで発現しており、その生理作用にも何らかの影響が現れると予測される。そこで、骨芽細胞、軟骨細胞様の細胞株で、Rab14およびCCN2の発現を抑えることで、これらの細胞に生じる変化をコントロールと比較する。

特に細胞内で小胞輸送の秩序が崩れ、輸送されなかった蛋白質が細胞内に蓄積する可能性があるため、小胞体やゴルジ体ストレスに関与する因子の発現レベルを解析する。さらに、骨・軟骨形成に関与する細胞は、基質蛋白を生産・分泌していることから、Rab14とCCN2の結合親和性や発現量をコントロールすることで、基質の分泌量がどのように変化するかを調べる。また、Rab14とCCN2の相互作用を介して輸送される蛋白質として、分泌蛋白質以外にも細胞膜上の膜蛋白質が考えられる。受容体や接着因子などの膜蛋白質は、増殖、接着・遊走といった細胞の機能を調節している。Rab14とCCN2の相互作用が骨・軟骨組織の細胞に及ぼすこれらの機能への影響を、細胞の接着試験や増殖アッセイにより検討していく。II. Rab14とCCN2の骨・軟骨組織の形成に及ぼす影響を検討する。CCN2ノックアウトマウスおよびCCN2トランスジェニックマウスを用い、Rab14とCCN2の骨・軟骨組織の形成との関わりを検討する。これらのマウス由来の骨や軟骨組織切片で、Rab14とCCN2蛋白質の局在を組織レベルで検出すると共に、CCN2蛋白質の有無あるいは発現量の違いによるRab14蛋白質の挙動や分泌蛋白等の状態を組織レベルで調べる。これらの結果から、Rab14とCCN2が骨・軟骨組織の形成にどのように関与しているかを検証する。27年度が最終年度であるため、記入しない。
抗原特異的T細胞の抑制によるシェーグレン症候群での新規治療薬の開発

シェーグレン症候群(SS)において注目されている自己抗原であるM3ムスカリン作働性アセチルコリン受容体(M3R)に対する免疫応答に着目し、ヒトM3R反応性CD4+T細胞のSS病態への影響、およびその解析結果を元にした抗原特異的治療法の構築を目的とした。ヒトSS患者の小唾液腺に浸潤するT細胞より細胞株を樹立した。同時に、ヒトM3Rの全長(590アミノ酸配列)をカバーする約20mer×45種類の合成ペプチドを作成(5merずつ前後のぺプチドが重なるようデザイン)した。現在、同一患者のCD14+細胞から誘導した樹状細胞および作製したペプチドを用いてT細胞株のM3R反応性を継続して評価している。シェーグレン症候群(SS)において近年注目されている自己抗原であるM3ムスカリン作働性アセチルコリン受容体(M3R)に対する免疫応答に着目し、ヒトM3R反応性T細胞のSS病態への関与を詳細に解析し、抗原特異的治療法の構築を目的とした。具体的にはヒトSS患者の小唾液腺局所におけるM3R反応性T細胞の検出および機能解析を検討した。SS患者および対照群としてIgG4関連疾患患者の小唾液腺組織に浸潤するCD4+T細胞をフローサイトメトリーにてsingle cell sortしmonoclonal Tcell lineを樹立した。フィーダー細胞として45Gyの放射線照射済のアロ末梢血単核球(allo-PBMC)を用いて、約2-3か月で6人のSS患者から計66株、1人のIgG4関連疾患患者から計7株が樹立できた。また、一部のTcell lineはTCR sequenceを行い、monoclonalityを確認した。T cell lineを樹立した患者のHLAタイピングを行うと共に、ヒトM3Rの全長(590アミノ酸配列)をカバーする約20 mer×45種類の合成ペプチドを作成(5 merずつ前後のペプチドと重なるようデザイン)した。現在、M3Rペプチドとの共培養を行い、抗原に対する特異的反応をElispot AssayやBrdUなどを用いて検討中である。また、同時にT細胞エピトープ解析も行っている。複数のヒトSS患者の小口唇唾液腺よりCD4T細胞株の樹立が確認できた。ヒトM3Rの全長をカバーするペプチド合成も完了し、網羅的にM3Rペプチドとの共培養を行い抗原特異性を評価している。しかし、抗原提示細胞として利用する患者の末梢血中より誘導した樹状細胞が十分量確保できず、当初よりも抗原特異的反応の評価が遅れてしまっている。ヒトSS患者の小唾液腺に浸潤するCD3+CD4+CD14-T細胞をsingle cell sortし、monoclonal CD4+ Tcell lineの樹立を行った。尚、フィーダー細胞は45Gy照射済のアロ末梢血単核球(allo-PBMC)を用いた。複数人のSS患者(primary SS, secondary SSいずれも含む)からCD4+T細胞株の樹立を行った。T cell lineを樹立した患者のHLAタイピングを行い、SS患者から樹立できていることを確認した。また、一部のクローンに関してはTCR sequenceを行い、monoclonalityがあることを確認した。同時に、ヒトM3Rの全長(590アミノ酸配列)をカバーする約20mer×45種類の合成ペプチドを作成(5merずつ前後のぺプチドが重なるようデザイン)し、抗原特異的T細胞の抗原とした。現在、Elispot assayを用いたCD4+T細胞株からのIFNg産生やBrdUでの細胞増殖能を評価して、SS患者の小唾液腺から樹立したmonoclonal Tcell lineにおけるM3R反応性の有無を継続して評価している。今後、小唾液腺全体のTCRレパトアの偏りも併せて確認しM3R反応性T細胞の解析を続けていく予定である。またdisease controlとして、IgG4関連疾患患者の小唾液腺よりT cell lineの樹立も進めていく予定である。現在、iPS細胞などを利用した簡便かつ安定した十分量の抗原提示細胞の誘導を並行して検討している。こちらから誘導した樹状細胞が、末梢血から誘導した樹状細胞と同様に抗原提示能を保持しており、本研究でも利用できることを現在検証中である。そちらが確認でき次第、解析を更に進めていく予定である。また、末梢血中からのM3R反応性Tcell lineの樹立も行っており、唾液腺局所に存在するM3R反応性Tcell lineとサイトカイン産生能やTCRレパトアなどを比較検討していく予定である。自己免疫
県がん登録を活用したがん検診の有効性の評価に関する研究

【目的】1982年1月1日から1996年12月31日までの15年間の佐賀県がん登録に基いて、胃、子宮頸、肺、大腸、乳房の各部位のがんについて、がん検診が生存率に与える影響を調べた。【方法】5つのがんの部位ごに、性、年齢、進展度と受診契機(検診か否か)との相関を調べた。さらに、がん検診を医療機関への受診契機としたがん患者を検診群とし、それ以外の受診契機のがん患者を非検診群として、最終観察日を1996年12月31日とした生存率へ与えるがん検診の影響をCox回帰分析によって性と年齢を調整して評価した。【結果】検診群は非検診群よりも肺で女性の割合が有意に大きく、大腸で男性の割合が有意に大きかった。また、検診群は非検診群よりも胃、子宮、肺で診断時の年齢が有意に低かった。検診群は非検診群よりもすべての部位で進展度が有意に低かった。さらに、検診群は非検診群よりも、すべての部位で15年間の累積生存率が有意に高かった。そして、検診の死亡に対する性と年齢を調整したハザード比(その95%信頼区間)は、胃がん検診0.40(0.360.44)、子宮頸がん検診0.41(0.270.62)、肺がん検診0.51(0.450.57)、大腸がん検診0.45(0.320.62)、乳がん検診0.43(0.200.90)といずれも有意に低かった。【考察】性と年齢を調整してもすべての部位のがん検診の死亡率減少効果が示されたが、結果の解釈に当たってはlead-time biasなどに対する注意が必要である。しかし、国内外におけるがん検診に関する最近の症例対照研究でも、いくつかの部位で、同様の死亡率減少効果が示されており、今回の結果もそれらと符合していた。【目的】1982年初めから1995年末までの14年間の佐賀県がん登録に基づいて、胃、子宮頸肺、大腸、乳房の各部位のがんについて、がん検診が生存率に与える影響を調べた。【方法】1.(相関分析)性、年齢、進行度と受診契機(検診か否か)との相関を調べた。2.(コホート研究型の解析)がん検診を医療機関への受診契機としたがん患者を検診群とし、それ以外の受診契機のがん患者を非検診群とした。生存率へ与える受診契機の影響をCox回帰分析によって性・年齢を調整して評価した。3.(症例対照研究型の解析)各がんの1995年末までの死亡者を症例群とし、当該部位のがんに罹患し症例群と性・出生年が同じで1995年末までの生存者を対照群として、受診契機(検診か否か)を要因としたデータをconditional logistic回帰分析法によって解析した。【結果】1.相関分析の結果、検診群は非検診群よりも乳房を除く4部位で検診時の年齢や進行度が低く、肺で女性の割合が大きく、大腸で男性の割合が大きかった。2.コホート研究型の解析結果、いずれの部位でも検診群は非検診群と比べて有意にハザード比が低かった。3.症例対照研究型の解析結果、いずれの部位でも受診契機ががん検診という要因の死亡に対するオッズ比は有意に低かった。【考察】1.コホート研究型の解析結果も症例対照研究型の解析結果も、ほぼ一致してがん検診の有効性を示した。

2.性・年齢、または、性・出生年を調整して解析したが、この研究だけではlength biasやself-selection biasなどがどの程度結果に影響しているは不明であう。3.過去数年間にわたるがん検診の受診歴や、それらのがん検診を受診した理由などに関する調査を追加する必要がある。4.症例対照研究型の解析によるがん検診の評価の報告では一般住人を対照群としている場合が多いが、本研究の対照群は症例と同じ部位のがん患者であった。【目的】1982年1月1日から1996年12月31日までの15年間の佐賀県がん登録に基づいて、胃、子宮頸、肺、大腸、乳房の各部位のがんについて、がん検診が生存率に与える影響を調べた。【方法】5つのがんの部位ごとに、性、年齢、進展度と受診契機(検診か否か)との相関を調べた。さらに、がん検診を医療機関への受診契機としたがん患者を検診群とし、それ以外の受診契機のがん患者を非検診群として、最終観察日を1996年12月31日とした生存率へ与えるがん検診の影響をCox回帰分析によって性と年齢を調整して評価した。【結果】検診群は非検診群よりも肺で女性の割合が有意に大きく、大腸で男性の割合が有意に大きかった。また、検診群は非検診群よりも胃、子宮、肺で診断時の年齢が有意に低かった。検診群は非検診群よりもすべての部位で進展度が有意に低かった。さらに、検診群は非検診群よりも、すべての部位で15年間の累積生存率が有意に高かった。そして、検診の死亡に対する性と年齢を調整したハザード比(その95%信頼区間)は、胃がん検診0.40(0.360.44)、子宮頸がん検診0.41(0.270.62)、肺がん検診0.51(0.450.57)、大腸がん検診0.45(0.320.62)、乳がん検診0.43(0.200.90)といずれも有意に低かった。【考察】性と年齢を調整してもすべての部位のがん検診の死亡率減少効果が示されたが、結果の解釈に当たってはlead-time biasなどに対する注意が必要である。しかし、国内外におけるがん検診に関する最近の症例対照研究でも、いくつかの部位で同様の死亡率減少効果が示されており、今回の結果もそれらと符合していた。
内因性心筋炎症惹起分子制御機構の探索と心不全治療創薬への応用

心不全の病態形成過程において慢性炎症が重要な役割を果たしていることが知られてきた。われわれは圧負荷後心不全モデルにおいて、ミトコンドリアDNAの分解不全とToll様受容体9を解する自然免疫経路が不全心炎症を惹起していることを報告した。本研究課題では、先行研究で試みられた個々の下流サイトカインへの介入ではなく、無菌的炎症反応の上流に介入する全く新たな心不全治療戦略を開発することを目的とする。心不全においてDNaseII発現制御に関わるmiRをmicroRNA(miR)ライブラリ(約3000種類)を用いて、網羅的にスクリーニングし、心不全と強く関連していると思われるある一つのmiRを同定した。さらに、このmiRおよびanti-miRがin vitroの実験においてストレス条件下で表現型に影響を持つことが明らかとなった。また、ヒト不全心の生検サンプルを用いたDNaseII発現量の評価を行い、その発現量に差がある可能性を見出した。なお、この研究に関連し、ミトコンドリアDNAーDNaseIIーTLR9シグナルによる心筋炎症を薬剤によって抑制することにより、心不全の発症進展が抑制されることを明らかにし、報告した。また、HMGB1心筋細胞特異的欠損マウスの作成およびiPLA2beta心筋細胞特異的欠損マウスの作出に成功した。これらのマウスが正常に生まれ、非ストレス条件下では明らかな以上を認めないことを確認した。DNaseIIの発現制御にかかわるmicroRNAの同定が終了し、このmiRとanti-miRの機能解析をin vitroおよび病態モデルマウスを用いたin vivoで進めていく予定である。ヒト不全心の生検サンプルを用いたDNaseII発現量の評価が終了している。また、この研究に関連し、ミトコンドリアDNAーDNaseIIーTLR9シグナルによる心筋炎症を薬剤によって抑制することにより、心不全の発症進展が抑制されることを明らかにし、報告した。また、HMGB1心筋細胞特異的欠損マウスの作成およびiPLA2beta心筋細胞特異的欠損マウスの作成が完了し、非ストレス条件下での解析が終了している。以上より、おおむね順調に進展していると判断される。現在までの進捗状況の通り、DNaseIIの発現制御にかかわるmicroRNAの同定が終了しており、今後はこの同定したmiRおよびanti-miRの機能解析を病態モデルマウスを用いたin vivoにて行う。また、HMGB1心筋細胞特異的欠損マウスおよびiPLA2beta心筋細胞特異的欠損マウスの病態モデルを用いて、炎症と心不全との関連性についての解析を行い、内在性炎症に関わる分子経路の上流への介入が心不全治療標的となりうるのかを明らかにしていく予定である。
ネットワークメタアナリシスの医療技術評価への応用研究

理論研究ではネットワークメタアナリシス(NMA)の一致性(直接比較と間接比較)の検定統計量を提唱し、変量効果モデルで正確な推測のための手法を提唱した。応用研究では現存する8つのNMAチェックリストを対比し、PRISMA-NMA等を和訳出版した。9か国の費用対効果分析ガイドラインを対比し、メタアナリシス(MA)の記載充足率は21%だと示した。消費者庁の機能性表示食品届出に見られるMAも調査した。最後に、心房細動新規抗凝固薬の費用対効果分析を行い、健康寿命を1年延ばすための費用増分は平均38,000USドルと算定され、適正とされる50,000ドルに比べて高価ではないことを示した。初回班会議を2015年7月10日に富山で開催し、研究の概要と分担の内容について確認した。分担研究者の野間はネットワークメタアナリシスのバイアス評価研究、手良向はネットワークメタアナリシス・チェックリストの開発研究、主任研究者の折笠は薬価算定に費用対効果分析を適用している国のガイドライン調査及びネットワークメタアナリシスを元に心房細動薬及び糖尿病薬の薬剤経済評価を進めることを確認した。第2回班会議を2015年10月23日、第3回班会議を2016年1月21日に東京で開催した。野間はネットワークメタアナリシスに伴うバイアス評価の研究を進め、国際学会等で一部成果を発表した(研究発表参照)。また、研究者向けにネットワークメタアナリシスに関する教育講演及び総説を著した。手良向はネットワークメタアナリシスに対する8つの現存するチェックリストを見出し、その中でPRISMA-NMAというチェックリストを和訳し、班会議でその内容について吟味した。8つのチェックリストの対比表を作成中であり、2016年11月に開催される日本薬剤疫学会で発表する予定である。折笠は薬価算定に費用対効果分析を適用している国のガイドラインを調べ、9カ国のガイドラインを入手した。対比表を作成中である。心房細動薬に関してネットワークメタアナリシスの結果を用いた薬剤経済分析については、予定していた臨床試験の文献検索にとどまらず、ネットワークメタアナリシスの実施まで終えた。2016年9月に開催されるISPOR(国際薬剤経済・アウトカム研究会議)で発表する予定である。メタアナリシスに関する総説やコメントを著した(研究発表参照)。心房細動薬に関する論文、及び糖尿病薬に関する論文を発表した(研究発表参照)。分担研究者の野間はネットワークメタアナリシス研究に伴うバイアス評価の研究を計画したが、すでに国際学会で一部の成果については発表した。また、あまりなじみのないネットワークメタアナリシス研究については教育講演を行ったり、総説論文を書いたりしているので、当初の計画以上に進展している。分担研究者の手良向が担当するのはネットワークメタアナリシス研究に対するチェックリストの調査を行い、対比表を作るのが目標であった。現存するチェックリストは調査の結果、8件あることを確認した。その中でも最も重要なPRISMA-NMAチェックリストの和訳を完成させた。この和訳は2年目に専門誌へ掲載を予定している。チェックリストの対比表は作成中であり、2年目に学会発表する計画である。ほぼ計画通りに進行している。主任研究者の折笠は、1)薬価算定に費用対効果を適用しているガイドライン調査、2)心房細動薬に関してネットワークメタアナリシスに用いる文献検索が初年度の計画であった。ガイドライン調査については、9カ国のガイドラインを入手することができた。対比表は少し遅れているが、2年目の前半には完成させる。心房細動薬に関する薬剤経済分析については、ネットワークメタアナリシスに必要な臨床試験の文献検索は完了し、ネットワークメタアナリシスまで実施できた。この結果を踏まえて薬剤経済分析(増分費用効果比の算出)を進め、2016年9月に開催されるISPOR(国際薬剤経済・アウトカム研究会議)で発表する予定である。平成28年6月16日に富山市で、また12月2日には米子市で班会議を開いた。理論研究として、「ネットワーク・メタアナリシスにおける不一致性の検定」を論文出版した(Statistics in Medicine 2017; 36: 917-927)。「多変量メタアナリシスにおける正確な推測のための統一的試み」については、これから論文化の予定である。ネットワーク・メタアナリシスのチェックリスト研究については、既存のPRISMA-NMA声明の和訳を完成し出版した(薬理と治療2016; 44: 1701-1709)。また、メタアナリシス評価ツールであるAMSTAR声明の和訳も出版した(pp.148-155. IN「臨床研究と疫学研究のための国際ルール集Part 2(津谷喜一郎・中山健夫、編集)」、東京:ライフサイエンス出版, 2016Jul)。理論的な研究として、「ネットワーク・メタアナリシスにおける不一致性の検定」に関する論文を出版した。その他、メタアナリシスの理論について総説や研究会発表をいくつも行ってきた。メタアナリシスのチェックリスト研究については、PRISMA-NMA声明の和訳を完成し出版した。メタアナリシス評価ツールであるAMSTAR声明も和訳を出版した。あと残された任務として、既存のすべてのチェックリストに関する詳細調査の実施であるが、あと1年以内に完成する予定である。

心房細動治療薬の薬剤経済分析は平成28年9月の国際会議で発表した。論文化は今後の課題である。糖尿病治療薬の薬剤経済分析も今後行う予定である。各国の薬剤経済ガイドライン中におけるメタアナリシス記述の現状調査については、平成29年5月の国際会議で発表する。これも残すは論文化だけである。これらのことから、研究はおおむね順調に進んでいると思われる。理論的研究として、野間氏らがネットワークメタアナリシスで使われる変量効果モデルの問題点へアプローチした。少数例での標準的手法の問題点を指摘し、正確な推測のためのBartlett補正を伴う尤度ベースの手法を提案した。国際学会等で発表し、論文出版した。メタアナリシスに関する総説論文も「岩波データサイエンス」誌に著した。応用研究として、各国の薬剤経済ガイドラインを対象にして、メタアナリシスの記載状況について調査をした。全部で16のガイドラインを抽出した。メタアナリシスに関する記載の程度を、26項目のチェックリストで調べた。チェックリストは新たに我々で作成した。記載の充足率を調べたところ、ドイツ(65%)、英国(58%)、スコットランド(50%)がトップ3であった。フランスおよびポルトガルの充足率は0%であった。中央値は21%であり、最近のガイドラインほど充足率は有意に高かった。結果はISPOR国際学会(2017年5月)で発表した。次に、心房細動直接的抗凝固薬のWarfarinに対する薬剤経済分析の結果を、大分統計談話会(2018年2月)で発表した。Warfarinを直接的抗凝固薬へ切り替えることにより、1年延命にかかる医療費の増分(すなわちICER)は約400万円だと報告した。この額は欧米でも妥当と考えられており、日本の中医協でも追随している。ここでの分析は単純な疾病モデルに基づいていたが、1年延命に400万円というのは高すぎるという意見があった。価値観に依存するという意見や、年齢よって閾値は異なるとの意見も寄せられた。確かに、高齢者だと余命が短いので大金を使いたくないが、若者はまだ先が長いので生き延びられるなら惜しまないというのは尤もかと思えた。さらに、機能性表示食品制度で用いられたメタアナリシスについても調査し、学会発表や論文出版した。理論研究ではネットワークメタアナリシス(NMA)の一致性(直接比較と間接比較)の検定統計量を提唱し、変量効果モデルで正確な推測のための手法を提唱した。応用研究では現存する8つのNMAチェックリストを対比し、PRISMA-NMA等を和訳出版した。9か国の費用対効果分析ガイドラインを対比し、メタアナリシス(MA)の記載充足率は21%だと示した。消費者庁の機能性表示食品届出に見られるMAも調査した。最後に、心房細動新規抗凝固薬の費用対効果分析を行い、健康寿命を1年延ばすための費用増分は平均38,000USドルと算定され、適正とされる50,000ドルに比べて高価ではないことを示した。理論研究であるネットワークメタアナリシスに伴うバイアス評価に関しては、これまでに分担研究者の野間が国際学会等で発表してきたが、今後は論文化を試みる。
ケーラー多様体の擬凸部分領域の境界の幾何と関数論

Kahler多様体Mの擬凸部分領域D上の関数論と、Dの境界Sの微分幾何学的な性質との関連を、与えられたKahler計量から決まるSまでの距離関数のLevi formの研究を通して明らかにすることが主な目的である。得られた結果は次の通りである。(1)M=C^nの場合に、C^nの複素部分多様体Sまでの距離関数のLevi formを、Sの定義関数を用いてexplicitに表した。その応用として、Levi formが複素接方向に退化するための条件とSの展開可能性とは密接な関係にあるが、必ずしも一致はしない例もあることを見つけた。(2)M=C^2の場合に、C^2の実超曲面Sまでの距離関数のLevi formを、Sの定義関数を用いてexplicitに表した。その応用として、2次元複素トーラス内には正則領域ではない擬凸領域が存在するが、そのような例はGrauertによって指摘されたタイプのもののみであることが分かった。(3)M=C^nの場合に、C^nの実超曲面Sまでの距離関数のLevi formを、Sの定義関数を用いてexplicitに表し、Levi formが退化するための必要十分条件を与えた。Mが非負の正則双断面曲率を持ち、Sが弱擬凸、あるいはLevi flatな場合のLevi問題、及び、境界としての実または複素超曲面そのものの研究を行い、Levi問題が解決できるための幾何学的な条件をexplicitに与え、"複素射影空間内にはLevi flatな実超曲面は存在しない(であろう)"という予想の解決につながることを目指したが、具体的に書き表したLevi formが予想以上に複雑で、まだ見通しが悪く、その点は今後の課題として残された。Kahler多様体Mの擬凸部分領域D上の関数論と,Dの境界Sの微分幾何学的な性質との関連を,与えられたケーラー計量から決まるSまでの距離関数のLevi formの研究を通して明らかにすることが主な目的である.一般的には,Mが非負の正則双断面曲率を持ち,Sが弱擬凸あるいはLevi flatな場合のLevi問題,及び,境界としての実または複素曲面そのものを研究したいのであるが,まず,多様体MやDの境界Sの曲率がゼロの場合に,研究課題の解決のための最初の問題が多く含まれている.そこで16年度は,Mの曲率がゼロの場合,すなわちDがEuclid空間C^nの場合を調べ,次の結果を得た.(1)MがC^nの複素部分多様体の場合に,Mまでの距離関数のLevi formをMの定義関数を用いて具体的に書き表した.その結果,Levi formの退化条件と複素曲面Mの展開可能性の間には,密接な関係があることが分かった.しかし,Mの余次元が2以上の場合にはそれらの条件は一致しないという例もある.(2)MがC^2の実超平面の場合に,Mまでの距離関数のLevi formをMの定義関数を用いて具体的に書き表した.その結果,複素2次元トーラスの擬凸領域で,Steinにならないものは,本質的にはGrauertによって指摘されたタイプのものしかないことを示した.このことは,トーラス上のLevi平坦超曲面の分類問題の基礎となっている.Kahler多様体Mの擬凸部分領域D上の関数論と、Dの境界Sの微分幾何学的な性質との関連を、与えられたKahler計量から決まるSまでの距離関数のLevi formの研究を通して明らかにすることがテーマである。昨年度は、曲率非負のKahler多様体の最も簡単な場合として、まずn=2の場合に、C^nの滑らかな境界Sを持つ弱擬凸領域DがSteinになるための条件を求めた。その際、Sまでの距離関数のLevi formが至る所退化するための必要条件を与えた部分が重要で、結果の応用もあった(結果は論文として公表済み)。

今年度は、その結果を一般次元の場合に拡張することを主な目標にし、境界Sの定義関数だけではなく、より幾何学的な情報に着目して研究を行った。昨年度の研究は、手法的にはrealで式を導いた後にcomplexに直すという強引なものであったので、とりあえずの結果を得たものの一般次元に対する見通しは良くない。そこで、今年度は複素解析的な研究を行い、一般のn次元の場合に、C^nの実超曲面Sまでの距離関数のLevi formを、Sの定義関数を用いてexplicitに書き表すことができた。結果は、実超曲面Sの実接平面と複素接平面の両方の情報を含むものであり、興味深い。しかし、今のところ、特別な座標系でのみしか記述できておらず、例えば、Sの補集合がSteinになるための条件を求めるといった応用につなげることは、まだ難しい。一般的な座標で、Levi formの公式をSの条件で書き表し、Sの補集合がSteinになるための条件を求めること、さらには、一般のKahler計量の場合に結果を拡張し、Kahler多様体Mの擬凸部分領域DがSteinになるための条件を、距離関数のLevi formの研究を通して特徴づけることが、次の課題である。Kahler多様体Mの擬凸部分領域D上の関数論と、Dの境界Sの微分幾何学的な性質との関連を、与えられたKahler計量から決まるSまでの距離関数のLevi formの研究を通して明らかにすることが主な目的である。特に、Mが非負の正則双断面曲率を持ち、Sが弱擬凸、あるいはLevi flatな場合のLevi問題、及び、境界としての実または複素超曲面そのものの研究を行い、Levi問題が解決できるための幾何学な条件をexplicitに与え、"Sの境界が強擬凸な点を1点でも含めばStainか?というNarasimhan予想(問題)の進展につなげたいと考えている。また、その間連で、展開可能な複素曲面の、補集合を通しての研究も行い、特に、関数論的な性質を明らかにすることを計画している。これまでに、次の結果を得た。(1)MがC^nの複素部分多様体の場合に、Mまでの距離関数のLevi formをMの定義関数を用いて具体的に書き表した。その結果、Levi formの退化条件と複素曲面Mの展開可能性の間に、密接な関係があることを見出した。(2)MがC^2の実超平面の場合に、Mまでの距離関数のLevi formをMの定義関数を用いて具体的に書き表した。その結果、複素2次元トーラスの擬凸領域で、Steinにならないものは、本質的にはGrauertによって指摘されたタイプのものしかないことを示した。本年度は、主に(2)の結果を一般のn次元の場合に調べることを目的とし、距離関数のLevi formの等式に関する基本的な部分の結果を得ることができた。しかし、Levi formの退化条件の考察は難しく、まだ、論文にまとめるには至っていない。Levi formの退化条件の研究と、一般のKahler多様体への結果の拡張は、次年度の研究課題として残された。Kahler多様体Mの擬凸部分領域D上の関数論と、Dの境界Sの微分幾何学的な性質との関連を、与えられたKanler計量から決まるSまでの距離関数のLevi formの研究を通して明らかにすることが主な目的である。