hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
大規模人間活動による気候環境の変動に関する基礎的研究

冬季オリンピック開催が決定している長野盆地地域を例にして、大規模人間活動による気候環境の変動に関する方法論を考案し、具体的研究例を示した。環境把握の方法、研究の方向性を示すことが重要であり、基礎的研究とした。また、大規模人間活動による環境の変化は開催地の直接的な改変ではなく長野盆地全体に展開され、より一般的な用語として都市化を定義した。都市化の進展に伴う気候環境の変化プロセスは地表被覆の人工物化とエネルギー消費量の増大が放射収支・熱収支を改変し、結果が気候環境の改変である。直接的な気候環境変化の把握例としては、長野、須坂、中野、篠ノ井、松代、小布施、豊野につて基礎的な観測を実施した。ハンドヘルドコンピュータHC-40を使った気温の移動観測システムを確立した。結果の解釈として都市化の程度を表わす指標(人口、DID人口、市街地面積、天空比など)を考察した。ここでは最も一般的な人口数を用いた。具体的には各都市規模に対応したヒートアイランド強度を算出し、長野市が最大になるのは当然であるが、特徴的なことは人口1万2千の小布施のヒートアイランド強度が都市規模に比して大きいことが判明した。須坂市は長野市に比べて人口規模では3分の1程度となるが長野市のヒートアイランド強度3.4に対して2.7と大きいことも判明した。小布施とは異なるが、中心部での高層建築化を示している。気候環境の把握は、アメダス観測点の長野市と郊外地点として信州新町と菅平を選び、差の頻度分布を求め、都市化による気候環境変化を明らかにした。ランドサットによる環境把握は熱映像や緑被率などを算出し、有効性を証明した。本研究は、大規模人間活動による気候環境の変動について長野で開催される冬期オリンピックを前提にしてその前段階における環境把握を研究しようとするものである。特に人間活動による気候環境の変化を、開催地の直接的な改変ではなく長野盆地全体に展開される影響を把握しようとするものである。その結果、直接的な気候環境の変化は、ハンドヘルドコンピュータHC-40を使った気温の移動観測を、長野、須坂、中野、藤ノ井、松代、小布施、豊野について実施し、各都市域の大きさに対応したヒートアイランド強度を算出した。その結果、長野市が最も大きくなるのは人工規模からして当然であるが、特に特徴的なことは人工1万2千の小布施のヒートアイランド強度が都市の規模に比して大きいことが判明した。また、須坂市は長野市に比べて人工規模からみると3分の1程度となるが長野市のヒートアイランド強度3.4に対して2.7とかなり大きいことが判明した。このことは小布施とは異なるが、都市規模に比して中心部で高層建築化が進んでいることを示している。気候環境の把握は、アメダス観測点である長野市とその郊外地点として信州新町を選び、差の頻度分布を求め、長野市の都市化による影響を明らかにした。ランドサットによる環境把握は、テラマ-ルにより現在、熱映像や緑被率などを算出しているところで、次年度に両者の関係を定量的に求める予定である。本年度も、直接的な気候環境変化の把握例としては、長野、須坂、中野、篠ノ井、松代、小布施、豊野につて基礎的な観測を実施し、解析した。特に須坂と中野について集中的に分布観測を実施した。すでに確立した移動観測システムを利用した。さらに、観測点を中心にして半径50m,175m,250mの円内の土地被覆(土地利用)を求め、重回帰分析による気温のモデル化を考察した。気候環境変化の把握としては、アメダス観測点の長野市と郊外地点として信州新町と菅平を選び、差の頻度分布を1°C間隔で求めた。

その結果、都市化による気候環境変化が近年ますます進行していることが明らかになった。ランドサットデータから得られる熱映像や緑被率などは経年的な環境変化の把握に有効であることが判明した。冬季オリンピック開催が決定している長野盆地地域を例にして、大規模人間活動による気候環境の変動に関する研究の方向性を示すことができた。大規模人間活動のより一般的な用語として都市化を定義し都市化の進展に伴う気候環境の変化プロセスを考察した。
眼内新生血管の新しい治療法の開発

眼内新生血管は多くのサイトカイン、増殖因子により制御されている。その中で近年の研究により血管内皮増殖因子(VEGF)、線維芽細胞増殖因子(FGF)、TGF-βスーパーファミリーの諸因子などによって制御されていることが明らかになりつつある。本研究では、牛大動脈由来血管内皮細胞、豚大動脈由来血管内皮細胞、ヒト臍帯静脈由来血管内皮細胞、ヒト皮膚由来毛細血管内皮細胞にたいする上記の因子の機能制御について検討した。血管新生ステップを4つにわけて検討した。即ち、プラスミノーゲンアクチベータ(PA),遊走、増殖、管腔形成である。VEGFは全てのステップを促進したが、TGF-β1はすべてのステップを抑制した。アクチビンAはPA誘導、増殖、管腔形成を抑制したが、遊走を促進した。しかしこれらの作用は生体内での作用と並行しなかった。鶏漿尿膜を用いた検討ではVEGF、TGF-β1は血管新生を促進し、アクチビンAは促進しなかった。サイトカイン、増殖因子を用いて血管新生を制御するためにはin vitroでの研究結果ではなく生体内での作用を基に検討すべきである。上記の検討の結果ではアクチビンAがin vivo,in vitroともに血管新生に抑制的に働いているためにその作用を制御して、具体的には作用を増強して血管新生を抑制することを試みた。先ず豚大動脈血管内皮細胞にアクチビンII型受容体を安定的に形質導入した細胞株を作成して、アクチビンAに対する反応性の変化を検討した。II型受容体発現を増加させると、アクチビンAによる増殖抑制効果が10倍増強され、PA誘導活性も抑制された。遺伝子治療を用いて受容体レベルでのシグナル伝達効率の制御により血管新生がより副作用のない方法で制御できる可能性が示唆された。
NO合成酵素完全欠損マウスを用いた生体内NO合成酵素系の意義の解明

生体内における一酸化窒素合成酵素(NOS)系の役割を検討するために、3つのNOS遺伝子(nNOS,iNOS,eNOS)をすべて欠損させたNOS系完全欠損マウス(triple n/i/eNOS-KOマウス)を世界に先駆けて作製した。本研究では、このマウスに、自然発症心筋梗塞、骨代謝異常、高脂血症、拡張期心不全、および腎病変形成が認められることを明らかにした。以上より、NOS系が、心血管系、代謝系、および骨系の恒常性の維持に重要な役割を果たしていることが示唆された。本研究の目的は、我々が世界に先駆けて開発した一酸化窒素(NO)合成酵素(NOS)システム完全欠損マウスを用いて、生体内におけるNOSシステムの意義を解明することである。3年計画の1年目である本年度は、以下の点を明らかにした。1.自然発症心筋梗塞の機序の解明:NOSシステム完全欠損マウスにアンジオテンシンII1型(AT1)受容体拮抗薬オルメサルタンを10ヶ月間長期投与したところ、冠動脈硬化病変形成、心筋梗塞罹患率、並びに心臓突然死が有意に抑制された。以上より、AT1受容体経路がNOSシステム完全欠損マウスの心筋梗塞の病因に関与していることが示唆された。2.血管傷害後の血管病変形成におけるNOSシステムの意義の解明:頸動脈結紮後の血管病変形成(内膜肥厚および収縮性血管リモデリング)の程度は、野生型マウスに比してNOSシステム完全欠損マウスで著明に増悪していた。従って、NOSシステムが血管傷害後の血管病変形成に対して抑制的に作用していることが示唆された。3.メタボリックシンドロームの病態の解明:AT1受容体拮抗薬オルメサルタンの長期投与は、NOSシステム完全欠損マウスに見られたメタボリックシンドロームも有意に改善した。従って、AT1受容体経路がNOSシステム完全欠損マウスのメタボリックシンドロームの分子機序に関与していることが示唆された。4.高脂肪食負荷が脂質代謝に及ぼす効果の検討:NOSシステム完全欠損マウスに高脂肪食を3ヶ月間負荷すると、血清コレステロールレベルが著しく増加した。現在、この機序の一部に、肝臓の低比重リポ蛋白(LDL)受容体のダウンレギュレーションが関与していることを明らかにしつつある。本研究は、生体内におけるNOSシステムの意義を、世界で初めて詳細に解明する点に、大きな学術的意義がある。本研究の目的は、我々が開発した一酸化窒素(NO)合成酵素(NOS)完全欠損マウスの表現型を解析し、生体内におけるNOS系の意義を明らかにすることである。3年計画2年目の本年度は、以下の点を明らかにした。1.血管病変形成におけるNOS系の意義の解明頸動脈結紮2週間後の新生内膜形成および収縮性血管リモデリング(血管断面積の減少)は、野生型マウスに比してNOS完全欠損マウスで著明に増悪していた。この血管病変形成の増悪は、NOS完全欠損マウスの骨髄を移植した野生型マウスにおいても同程度に認められたことから、骨髄由来細胞の寄与が示唆された。2.脂質代謝におけるNOS系の意義の解明高コレステロール食を3ヶ月間負荷したNOS完全欠損マウスでは、著明な高low density lipoprotein(LDL)コレステロール血症、粥状硬化病変形成および心臓突然死が認められた。この高コレステロール食惹起性高脂血症の機序には、肝臓LDL受容体のダウンレギュレーションやLDL受容体発現制御因子であるSREBP-2の発現低下が関与していることが示唆された。3.拡張期心不全におけるNOS系の意義の解明心エコーおよび心血行動態の解析では、NOS完全欠損マウスが加齢とともに拡張期心不全の病態を呈することを示した。この病態は、アンジオテンシンII1型(AT1)受容体拮抗薬オルメサルタンの3ヶ月間長期経口投与により改善したことから、AT1受容体を介した機序が関与していることが示唆された。4.慢性腎臓病におけるNOS系の意義の解明NOS完全欠損マウスの腎臓を2/3摘除し慢性腎臓病モデルを作成した所、野生型マウスに比して生存率が著明に低下し心血管突然死が見出された。現在、この分子機構を検討中である。本研究は、生体内におけるNOS系の意義を、世界で初めて解明出来る点に、大きな学術的意義がある。本研究の目的は、一酸化窒素合成酵素(NOS)完全欠損マウスを用いて、循環器疾患の成因におけるNOS系の意義を解明することである。1.血管病変形成における骨髄NOS系の意義の解明頸動脈結紮後の血管病変形成における骨髄NOS系の役割を検討した。NOS完全欠損マウスの骨髄を移植した野生型マウスでは、野生型マウスの骨髄を移植した野生型マウスと比較して、頸動脈結紮2週間後の新生内膜形成および収縮性血管リモデリングが著明に増悪した。

以上より、骨髄NOS系が頸動脈結紮後の血管病変形成において抑制的役割を果たしていることが初めて示唆された。2.脂質代謝におけるNOS系の意義の解明脂質代謝におけるNOS系の役割を検討した。NOS完全欠損マウスに高脂肪食を負荷すると、著明な高脂血症と心臓突然死が惹起された。この高脂血症の機序には、肝臓SREBP-2を介した肝臓LDL受容体の発現低下が関与していることを見出した。以上より、NOS系が脂質代謝の恒常性の維持に重要な役割を果たしていることが示唆された。3.拡張期心不全におけるNOS系の意義の解明5ヶ月齢のNOS完全欠損マウスでは、拡張期心不全の病態が認められた。Angiotensin II 1型(AT1)受容体拮抗薬オルメサルタンを長期経口投与するとこの病態が改善したことから、この機序にはAT1受容体経路が関与していることが示唆された。4.慢性腎臓病の成因におけるNOS系の意義の解明慢性腎臓病の成因におけるNOS系の役割を検討した。野生型マウスでは、4/6腎摘後の生存率の低下は認めなかったが、NOS完全欠損マウスでは生存率の著明な低下を認めた。主要な死因は、急性心筋梗塞であった。以上より、NOS系が慢性腎臓病の成因に重要な役割を果たしていることが示唆された。以上本研究では、循環器疾患の成因におけるNOS系の意義を世界で初めて明らかにした。
サルコメアにおける心拍動依存的な恒常性維持機構とその破綻

サルコメアにおけるアクチン動態制御を担うフォルミン蛋白質Fhod3を、時期特異的に心臓で欠損する遺伝子改変マウスを作出して解析した結果、出生期および成獣期においてFhod3が心筋の肥大応答に関与することを明らかにした。さらに、心筋症の原因遺伝子として知られる心筋ミオシン結合蛋白質CとFhod3が直接結合すること、この両者の結合が心筋ミオシン結合蛋白質C欠損による心筋症様病態の発現に深く関わることを明らかにした。本研究の目的は、横紋筋の収縮装置「サルコメア」の恒常性維持機構を、アクチン重合制御の観点から明らかにすると同時に、その破綻がもたらす病態を明らかにすることである。具体的には、サルコメア構造の形成に必須であることを申請者が明らかにしたアクチン重合制御因子Fhod3の遺伝子改変マウスの表現型、およびヒト心筋症で見出されたFhod3遺伝子の変異を手がかりに、サルコメアの構築とその恒常性維持において、アクチン重合制御機構が果たす役割とその制御シグナルを明らかにすることを目指している。昨年度までにFhod3欠損マウスを作出し、ホモ欠損マウスは胎生8.5日以降の筋原線維の成熟を伴う心筋発達が損なわれる結果、胎生11.5日までに心不全兆候を伴って死亡することを明らかにした。さらに、アクチンと結合出来ない変異型Fhod3のトランスジェニックマウスは、未熟な筋原線維を含む心筋症様の変化を示して新生仔期に死亡した。これらの結果より、アクチン重合制御因子Fhod3によるアクチン細胞骨格制御が、筋原線維の形成を通じて心臓形成に必須の役割を果たすことを明らかにした。次に、Fhod3変異によるヒトの心筋異常の可能性を考え、既知の原因遺伝子に変異が見いだされない日本人家族性拡張型心筋症患者を対象としてFHOD3遺伝子の変異を検索した結果、進化上よく保存されたアミノ酸のミスセンス変異を1名の患者に検出した。当該変異により、アクチン動態依存性に活性化される血清応答因子SRFの転写活性が減少したことから、Fhod3がアクチン動態依存的にヒトにおける拡張型心筋症の発症に関わる可能性が示唆された。現在、Fhod3による作用の分子メカニズムの解明を進めている。本研究の目的は、横紋筋の収縮装置「サルコメア」の恒常性維持機構を、アクチン合制御の観点から明らかにすると同時に、その破綻がもたらす病態を明らかにすることである。これまでにFhod3欠損マウスを作出し、ホモ欠損マウスは胎生8.5日以降の筋原線維の成熟を伴う心筋発達が損なわれる結果、胎生11.5日までに心不全兆候を伴って死亡することを明らかにした。さらに、アクチンと結合出来ない変異型Fhod3を出生後の心臓に特異的に発現するトランスジェニックマウスを作出したところ、そのマウスは未熟な筋原線維を含む心筋症様の変化を示して新生仔期に死亡した。本年度は、同変異型Fhod3を胎生期の心臓に特異的に発現するトランスジェニックマウスを作出して、胎生期におけるFhod3のアクチン結合能の役割を検討した。当該マウスは、Fhod3欠損マウスと同様に、心筋サルコメアの形成不全により心臓が形成されずに胎生期に致死となったことから、Fhod3のアクチン結合能は胎生期の心臓形成に必須であることが明らかとなった。さらに、野生型Fhod3を胎生期の心臓に特異的に発現するトランスジェニックマウスも作出し、これを用いて心臓形成過程におけるサルコメア内のFhod3の局在様式を詳細に検討した結果、Fhod3がサルコメア内のアクチン線維の周期的な配置の完成に関わる可能性を見出した。おおよそ計画通りに遂行しているため。しかしながら、同マウスでは最終的に分化した心臓が形成されないために、成体の成熟した心筋サルコメアにおけるアクチン重合制御機構の役割は不明であった。本年度は、Cre-loxPシステムを用いたFhod3コンディショナルノックアウトマウスを作出し、出生直後の心筋に特異的なMCKプロモーターの下流でCreリコンビナーゼを発現する系統と交配し、出生後の心臓特異的にFhod3を欠損するマウスを作出した。

本Fhod3条件的欠損マウスは著明な心肥大とサルコメア構造の破綻を伴って生後2週間前後で死亡したことから、Fhod3によるアクチン重合制御は一旦完成した心筋サルコメアにおいても必須であることが示された。計画通りにFhod3コンディショナルノックアウトマウスを作出し、出生直後の心筋におけるFhod3の役割を明らかにすることができたため。本研究の目的は、横紋筋の収縮装置「サルコメア」の恒常性維持機構を、アクチン合制御の観点から明らかにすると同時に、その破綻がもたらす病態を明らかにすることであった。これまでに、アクチン重合制御因子Fhod3欠損マウスを作出し、ホモ欠損マウスは胎生8.5日以降の心筋発達が損なわれる結果、胎生11.5日までに心不全によって死亡することを明らかにした。しかしながら、同マウスでは最終的に分化した心臓が形成されないために、成体の成熟した心筋サルコメアにおけるアクチン重合制御機構の役割は不明であった。本年度は、出生期および成獣期に心臓特異的にFhod3蛋白質を欠損するコンディショナル・ノックアウト(cKO)マウスをそれぞれ作出し、その形態的・機能的解析を行った。出生期cKOマウスは、サルコメア構造の破綻を伴う心不全によりほとんどが新生仔期に死亡した。一方で、成獣期cKOマウスは致死とならず、軽度の心拡大と心機能の低下を認めるもサルコメア構造の破綻は認めなかった。しかしながらα1アドレナリン受容体刺激に対して、成獣期cKOマウスはコントロールマウスと比較して、より高度の心肥大と心機能の低下を認めた。以上より、Fhod3によるアクチン重合制御機構は出生期および成獣期の心臓において、心筋の肥大応答に関与することが示唆された。さらに、その分子機序を明らかにするために、Fhod3の結合蛋白質を探索した結果、心筋症の原因遺伝子として知られる心筋ミオシン結合蛋白質Cと直接結合すること、この結合が心筋ミオシン結合蛋白質Cの欠損による心筋症様病態の発現に深く関わる可能性を見出した。サルコメアにおけるアクチン動態制御を担うフォルミン蛋白質Fhod3を、時期特異的に心臓で欠損する遺伝子改変マウスを作出して解析した結果、出生期および成獣期においてFhod3が心筋の肥大応答に関与することを明らかにした。さらに、心筋症の原因遺伝子として知られる心筋ミオシン結合蛋白質CとFhod3が直接結合すること、この両者の結合が心筋ミオシン結合蛋白質C欠損による心筋症様病態の発現に深く関わることを明らかにした。おおよそ計画通りに遂行しているため。今後も、当初の研究実施計画に従って、研究を推進する。研究計画に従って研究を遂行する。具体的には、薬剤応答性に心臓特異的にCreを発現する系統との交配によって、成体となった後にFhod3を欠損させたマウスを作出してその表現型を検討し、Fhod3によるアクチン重合制御の成体サルコメアにおける役割を明らかにする。分子細胞生化学今後も、当初の研究実施計画に従って、研究を推進する。実験に使用するマウスの繁殖が計画よりも時間を要したために、本年度に予定した免疫組織染色による解析を一部次年度に繰り越すこととなったため納品に時間を要したため九州大学から宮崎大学へ異動により、研究の一部が滞ったため上述の一部解析を次年度に繰り越す以外は、当初計画通りに進める。ほぼ当初の計画通りに使用する予定である。昨年度に滞った研究を次年度分と併せて行う
小児悪性脳腫瘍における包括的遺伝子解析と分子診断法の確立

期間中に以下の4つのテーマについて研究した.(2)髄芽腫における免疫組織学的および細胞遺伝学的異常とその臨床的意義c-,N-mycおよびβ-,γ-カテニン,cyclin D1に着目して(4)頭蓋内胚細胞性腫瘍におけるKITの発現とc-kit遺伝子の変異解析(3)の研究は,AT/RTが誤診されている可能性を検討するため,(1)で得られた知見を応用し3歳以下の悪性脳腫瘍の自験16例を解析したものである.結果の要約は,1)5例(31%)がAT/RTと診断された.2)cyclin D1の過剰発現はhSNF5/INI1遺伝子の不活化と相関した.以上より、AT/RTの高い誤診率の低減にcyclin D1の免疫染色が有用であることが示唆された.本成果は、2005年国際医学雑誌Journal of Neuro-oncologyに受理され,印刷中である.(4)の研究は、当院で経験した頭蓋内胚細胞性腫瘍26例について、近年分子標的薬イマチニブに高い感受性を示すことが知られるチロシンキナーゼ受容体KITの発現と責任遺伝子c-kitの変異,CD34の発現を解析した.その結果,KITはgerminomaおよびmixed germ cell tumorのgerminomatous成分の腫瘍細胞膜のみに高発現が認められた.c-kitの変異は3例のgerminoma(13例中3例,23%)において,計5個検出された.いずれもミスセンス変異であり,機能獲得性作用が示唆された.これら変異に対するイマチニブの効果は明らかでなく,今後検討が必要である.本研究は,頭蓋内胚細胞性腫瘍においてKITの発現と同時にc-kit変異を解析した初めての報告であり,現在、国際医学雑誌に投稿中である.期間中に以下の4つのテーマについて研究した.(2)髄芽腫における免疫組織学的および細胞遺伝学的異常とその臨床的意義c-,N-mycおよびβ-,γ-カテニン,cyclin D1に着目して(4)頭蓋内胚細胞性腫瘍におけるKITの発現とc-kit遺伝子の変異解析(3)の研究は,AT/RTが誤診されている可能性を検討するため,(1)で得られた知見を応用し3歳以下の悪性脳腫瘍の自験16例を解析したものである.結果の要約は,1)5例(31%)がAT/RTと診断された.2)cyclin D1の過剰発現はhSNF5/INI1遺伝子の不活化と相関した.以上より、AT/RTの高い誤診率の低減にcyclin D1の免疫染色が有用であることが示唆された.本成果は、2005年国際医学雑誌Journal of Neuro-oncologyに受理され,印刷中である.(4)の研究は、当院で経験した頭蓋内胚細胞性腫瘍26例について、近年分子標的薬イマチニブに高い感受性を示すことが知られるチロシンキナーゼ受容体KITの発現と責任遺伝子c-kitの変異,CD34の発現を解析した.その結果,KITはgerminomaおよびmixed germ cell tumorのgerminomatous成分の腫瘍細胞膜のみに高発現が認められた.c-kitの変異は3例のgerminoma(13例中3例,23%)において,計5個検出された.いずれもミスセンス変異であり,機能獲得性作用が示唆された.これら変異に対するイマチニブの効果は明らかでなく,今後検討が必要である.本研究は,頭蓋内胚細胞性腫瘍においてKITの発現と同時にc-kit変異を解析した初めての報告であり,現在、国際医学雑誌に投稿中である.研究計画書に従い,平成15年度は以下の3つのテーマについて研究を行った.(2)髄芽腫における免疫組織学的および細胞遺伝学的異常とその臨床的意義C-,N-mycおよびβ-,γ-カテニン,cyclin D1に着日して(2)は,小児悪性脳腫瘍の代表である髄芽腫においてWntシグナル伝達系の分子を中心に,免疫組織学,分子生物学を用いて解析したものである.当教室の経験症例24例の標本,臨床情報等を収集,検討した.得られた結果の要約は,1)γ-カテニンの陽性所見は,予後良好と相関した(p=0.003).2)cyclin D1の過剰発現は予後不良の傾向があった(p=0.057).3)c-myc, N-mycの遺伝子増幅を各々1例に認めた.組織学的には両者共に予後不良のlarge cell/anaplastic typeであった.以上の結果はいずれも臨床応用可能な知見であり,現在,国際医学雑誌に投稿中である.(3)は,3歳以下の悪性脳腫瘍中にAT/RTが誤診されている可能性を検討するため,(1)で得られた,AT/RTの診断にEMA, SMA陽性所見とhSNF5/INI1変異が有用,との知見を応用し自験16例を解析したものである.得られた結果の要約は,1)5例(31%)がAT/RTと診断された.2)Cyclin D1の過剰発現はhSNF5/INI

1遺伝子の不活化と相関した.以上から,AT/RTにおいてhSNF5/INI1の変異解析はcyclin D1の免疫染色で代用可能で,cyclin D1の過剰発現はEMA, SMA陽性所見と並んで臨床的意義が高い.本内容は,現在,国際医学雑誌に投稿中である.研究計画書に従い,平成16年度は以下の3つのテーマについて研究を行った.(1)髄芽腫における免疫組織学的および細胞遺伝学的異常とその臨床的意義(平成15年度からの継続)c-,N-mycおよびβ-,γ-カテニン,cyclin D1に着目して(3)頭蓋内胚細胞性腫瘍におけるKITの発現とc-kit遺伝子の変異解析(2)の成果は,脳腫瘍関連の国際医学雑誌Journal of Neuro-oncologyに受理され,印刷中である.(3)は平成16年度に新規に取り組んだ研究テーマである.頭蓋内胚細胞性腫瘍はastrocytomaに次いで第2位を占める小児悪性脳腫瘍で,neoadjuvant therapy導入後格段に治療成績が向上しつつあるが,非ジャーミノーマ群を中心として未だ治療抵抗例が存在する.近年,チロシンキナーゼ受容体の1つであるKITを発現する腫瘍が,分子標的薬イマチニブに高い感受性を示すことが判明し注目されている.本研究では当科で経験した26例について,KIT,CD34の発現,c-kit遺伝子の変異を解析した.その結果,KITはgerminomaおよびmixed germ cell tumorのgerminomatous成分の腫瘍細胞膜のみに高発現が認められた.c-kitの変異は3例のgerminoma(13例中3例,23%)において,計5個検出された.いずれもミスセンス変異であり,機能獲得性作用が示唆された.これら変異に対するイマチニブの効果は明らかでなく,今後検討の必要がある.本研究は,頭蓋内胚細胞性腫瘍においてKITの発現と同時にc-kit変異を解析した初めての報告であり,現在国際医学雑誌に投稿中である.
消滅の危機に瀕した言語の言語資料のコンピュータ処理のためのデータ構造・分析ツールの研究

本年度は,昨年度までの研究を発展させるとともに,3年間の研究期間の研究成果を国内外の研究集会で報告したり,出版物として発表することに重点がおかれ,研究協力者も積極的に参画した。2002年5月下旬,本研究班を代表して,研究協力者の千葉庄寿が,スペインで開かれた国際研究集会「フィールド言語学に置けるリソースとツールに関する国際ワークショップ」に参加し,同研究集会における唯一の日本人発表者として,言語データをXMLとUnicodeによってコンピュータ処理するための統合環境に関する研究発表を行った。2002年7月下旬9月下旬,松村がフィンランドとエストニアに出張し,ウラル系言語の言語資料の収集を行うとともに,フィンランドの言語コーパスセンターのコーパスを利用する機会を与えられ,また,フィンランド国内にある音声言語リソースの統一的なマークアップ方法を研究するプロジェクト集会に参加した。2002年11月初旬,仙台で開かれた日本言語学会で,松村は研究脇力者の小野智香子と「フィールド言語学者のニーズに合った多言語処理ツールの試み」という研究発表を行い,Unicodeに対応した文字入力方法と,チュクチ・カムチャツカ諸語の基本語彙を使った多言語対応辞書ツールのデモを行った。開発されたフォントとツールは無料で公開されている。松村一登は,文字を持たず,音声記号を用いて記録された,ボート語(ウラル系),イテリメン語(古アジア系)のテキストを,文法研究のためのテキストコーパスに加工整形した。また,複数の言語のコーパスに利用できる共通のツールを備えたコーパスサーバーを試験的に立ちあげ,データをサーバー上で利用するための環境を整備した。さらに,正書法が確立しているウラル諸語(フィンランド語,エストニア語)のコーパス研究のための用例検索ツールの開発について,国際学会で発表し,これらのツールが音声記号で記録される言語のコーパスにも利用できることを示した。滝沢直宏は,英語のコーパス研究で用いられている分析ツールを,多言語に対応した柔軟なソートができるよう改良した。松村(研究代表者)は,2001年7月下旬9月上旬に,フィンランドとエストニアに出張し,バルト・フィン諸語のテキストを新たに取得し,ロシア・旧ソ連地域の少数言語に関する情報を収集するとともに,フィンランド言語学会が主催した危機言語に関する研究集会にパネリストとして出席し,危機言語の電子的な記録保存の現状と課題について発言した。2002年2月の外国出張では,ロシアの少数言語に関する文献リストをインターネット出版物および通常の印刷物として公開するための校正作業をロシアの研究者と合同で行った。また,バルト・フィン諸語のテキストの音声表記に関してエストニアの専門家と意見交換をし,フィンランド言語学会の研究集会に参加した。滝沢(研究分担者)2001年10月に,ドイツのビーレフェルト大学,連合王国のバーミンガム大学に出張し,言語コーパスやコーパス利用のためのツールの開発の現状と今後の課題に関する情報を収集した。研究面では,British National Corpusの構造を詳細に調査し,言語コーパスを用いた言語研究の可能性の広がりに関して研究を行った。
二次元金属・ナノロッドアレイ法による超高感度表面増強ラマン散乱法の開発と酵素イムノアッセイへの応用

本年度は二次元金属、ナノロッドアレイ法による超高感度表面増強ラマン散乱法(SERS)の開発の準備として単一銀ナノ粒子系のSERSについて研究した。SERSは金属表面における数ナノメートル領域の微細構造で生じると考えられている。本研究ではLee-Meiseiクエン酸還元方法で合成され、単一分子SERS測定に実績のある銀ナノ粒子を用いた。銀ナノ粒子は表面プラズモン共鳴(SPR)が最も効率よく起き、SERS基質として適している。銀ナノ粒子分散液の吸収スペクトルから平均粒子径、濃度はそれぞれ約53nm、1.7×10^<-12>Mと見積もられた。使用する分子は励起光波長が共鳴波長域にあるローダミン6G(R6G)を濃度3.4×10^<-8>Mで用いた。銀ナノ分子分散液とR6G水溶液をNaCl濃度10mM下で混合することでR6G分子を銀ナノ粒子に吸着させ、SERS活性な銀ナノ粒子分散液を作成した。この銀ナノ粒子分散液をスピンコート法によりガラス基板上に分散し、単一分子測定を行った。次に波長可変でラマン励起を分子の電子共鳴あるいは非共鳴領或でSERS分光が容易に可能となり、任意の分子についてSERS発現の励起レーザー波長、SPRのバンドピークエネルギー依存性が解明できる。次に単一銀ナノ粒子のSPR, SERS測定を行うことでのみ選択、制御が可能となることを具体的に3点述べる。(1)SERS発現に適した励起光の偏光をSPRの光学異方性に合わせて選択、制御できる。(2)SERS発現に適した励起波長をSPRのピーク波長と吸着分子の電子共鳴波長を考慮して設定できる。(3)金属ナノ粒子の表面電荷を制御し、SERS発現に適した分子の吸着条件を金属ナノ粒子ごとに達成できる。本研究から次のような結論が得られた。単一銀ナノ凝集体を用いた実験により得られたSPRとSERSとの関係から、銀ナノ凝集体に吸着した分子が高強度電場と電磁相互作用したときSERSを発現することが強く示唆された。これらの結果は励起光の波長、偏光、SPRバンドを制御することでSERSを用いた分子検出を最適化できることを示している。
新聞投書とジェンダー意識の調査・研究(男女共同参画社会に向けて)

本調査・研究は、新聞投書を利用して、ジェンダーをめぐる意識調査を行なうことを目的としている。投書の個人情報をふせて、書き手の性を推測し、その理由も考えることで、回答者の中にある、ジェンダー意識に気づくのに有効であることが、調査から確認できる。調査結果より、投書の書き手として想定される典型は、男性はサラリーマン、女性は主婦であり、これは、性別役割分業体制における成入男女のイメージに通づるものであることが分かった。さらに、語彙・文体・内容等で判断根拠として提示されたものは、男性の場合、力強く、主張のはっきりした書き方で、仕事をする中で身につけたと思われる専門性あふれる内容を論理的に展開し、広い視野にたって表現しているとしている。一方、女性の場合、丁寧でやわらかい書き方をしつつも、働いていない、つまり、主婦として生活しているためか、視野がせまく、ワイドショーなどの受け売りのような情報しかなく、感情的で、よくねられていない表現をしているとしている。このような書き言葉を通したジェンダーステレオタイプは、男性ばかりでなく、女性も持ち合わせているものであり、特に女性は女性を否定的にみなしてしまっていることが判明した。今回の調査・研究は、投書の書き手の性を推測する中で、回答者の中にある内面化されたジェンダーを引き出すことにある。男女平等を標榜する教育現場において、なかなか、男女をめぐる本音を引き出しにくいため、このような方法が有効である。内面化されたジェンダーに気づくことで、自らの「らしさ」を相対化し、自由に生きようとする、ジェンダー・フリーの精神に到達できるのではないかと考えている。今回の調査・研究は、今後もさらにその方法を吟味し、ジェンダー意識の気づきをより促進するようなものにするつもりである。男女共同参画社会の実現に向けて、さらに取り組んでいこうと考えている。本年度の成果として、まず第一に、ジェンダーによる内面化が書き言葉にどのように影響を与えているのか、言語学と女性学関連の文献にあたり、批判的に概観した。そこでは、日本における男女役割分業体制に裏打ちされた「らしさ」が巧妙に内面化され、維持されていることが分かった。言語学関連の研究においても、男女をめぐる表現の非対称性や、男女が使用する表現の差によって証明されているが、書き言葉におけるジェンダーについては、具体的指摘があまりなされていないことも確認できた。そこで、第二に、新聞投書に注目し、特に、戦後から現在までの新聞投書の文体・内容等を調査してみたところ、書き手の性によって、文体(ですます体)や内容(公的・私的)に差のあることが確認できた。以上の二点をふまえ、新聞投書の中で、特に、山一証券自主廃業をめぐる投書をとりあげ、そこにみるジェンダーをいかに認識しているのか調査を試みた。大企業とされる会社の廃業をめぐって、投書欄でも反響があり、事の大きさを示しているが、それよりもさらに特徴的なのは、大企業では、いかに男女役割分業体制(男は仕事、女は家庭)が貫徹して成立しているのかということが、投稿者の性を通して、如実に物語っていることが分かった。例えば、男性投稿者であれば、会社や政府への批判が多く、女性投稿者であれば、社員、または社員の家族への励ましが多くみられるのである。これらの特徴と、文体(ですます体を使用しているかどうか)を考慮し、8つの投書を選びだし、個人情報をふせて、読んでもらい、投稿者の性をあててもらった。今年度は、主に学生を対象に調査したが、結果として、大企業に典型的にみられるジェンダーを認識しているということ、さらに、ですます体は女性が書いたものだとする傾向があることが分かった。

次年度は、さらに、調査を進め、新聞投書を利用し、ジェンダーがいかに内面化されてきたのか気づく作業を行なっていく予定である。本年度は、投書による性別判断調査の結果を分析した。判断根拠としてあげられている要因、例えば、語彙・文体・内容等を分類し、書き言葉を通して感じるジェンダー意識を整理した。その結果、男性が書いたと判断するものは、「論理的」等、肯定的なイメージが多かったのに比べ、女性が書いたと判断するものは、「論理的でない」「感情論になりがち」等、否定的なイメージが多かった。さらに、女性の投書について、肯定的なイメージとしてあげられている「丁寧」「気配り」等は、女らしさにも通じるものであり、「丁寧で気配り」ができないと、女らしくないとして、社会的制裁を受けてしまうものである。この点に関わり、最近、テクスチュアル・ハラスメントと名付けられ、女性の作品に対する差別的評価・判断が「女ゆえに」なされているとの認識ができつつある。今回の性別判断調査からみえてきたジェンダー意識、特に女性の投書とする否定的判断根拠は、いわゆる、プロと言われる人々、つまり、識者にも共通にあることが分かった。判断根拠を通して、学生の中には、自身のジェンダー意識について、「偏見」にすぎないかもしれないと、前述したテクスチュアル・ハラスメントを念頭に入れた感想をもつ者がいる。この点は、若い人たちの新しい意識に希望をつなげたい。今回の判断根拠調査を反省したところ、調査資料の投書の吟味や調査後のフォローの必要があることが判明した。調査の方法を改善し、さらに、様々な立場の人たちに調査を試みたいと考えている。そして、その結果を回答者に還元するなど、男女共同参画社会の実現を目指して、さらに、調査を発展させていくつもりである。今回の調査で回答者となってくれた人々に感謝するとともに、調査が、今後のジェンダー・フリーに向けての一つの気づきとなればと願っている。
高次統計量追跡に基づくハンズフリー音声対話システムの教師なし自律最適化

本研究は,音声強調部と音響モデル・言語モデルなどの音声認識部を含めたハンズフリー音声対話システムを想定し,システム全体の統合的な自律的最適化を行うことを目的とするものである.音声対話システムは様々な環境で運用されることより,各環境に応じて最高の音声認識性能を引き出すために,手作業での調整を余儀なくされている.そこで,音声強調部の内部パラメータに対応する音声認識率を予測する理論を確立する.さらに,それに基づき,音声認識率が最も高くなるように内部パラメータを自動的に最適化する.音声認識性能を左右する要因の一つは「SN比の改善量」であることは以前より広く知られているが,この要素は目的音声に混入される雑音の「量」に関するもので,「質」に関しては評価していない.音声認識性能の良し悪しは「SN比の改善量」に加えて,音声強調後の「雑音の品質」・「音声の品質」によっても決定される.そのため,これら三要素の値を事前に算出することが出来れば,それに対応する音声認識率を予測できると考えられ,かっ最も音声認識率が高くなるような内部パラメータの自動最適化にっながる.これまでに,私は,「音声の品質」を評価するための高次統計量についての検討を行ってきた.目的音声に混入する背景雑音の種類が定常か非定常か,また, SN比の良し悪しによっても音声の統計量を安定的に求める手法は異なることを明らかにした.この結果は,「音声の品質」を評価する上で安定して統計量を求めることが出来るという意味で大きな成果であり,今後の研究につながると言える.(抄録なし)本研究は,音声強調部と音響モデル・言語モデルなどの音声認識部を含めたハンズフリー音声対話システムを想定し,システム全体の統合的な自律的最適化を行うことを目的とするものである.音声対話システムは様々な環境で運用されることより,各環境に応じて最高の音声認識性能を引き出すために,手作業での調整を余儀なくされている.そこで,音声強調部の内部パラメータに対応する音声認識率を予測する理論を確立する.さらに,それに基づき,音声認識率が最も高くなるように内部パラメータを自動的に最適化する.音声認識性能を左右する要因の一つは「SN比の改善量」であることは以前より広く知られているが,この要素は目的音声に混入される雑音の「量」に関するもので,「質」に関しては評価していない.音声認識性能の良し悪しは「SN比の改善量」に加えて,音声強調後の「雑音の品質」・「音声の品質」によっても決定される.そのため,これら三要素の値を事前に算出することが出来れば,それに対応する音声認識率を予測できると考えられ,かっ最も音声認識率が高くなるような内部パラメータの自動最適化にっながる.これまでに,私は,「音声の品質」を評価するための高次統計量についての検討を行ってきた.目的音声に混入する背景雑音の種類が定常か非定常か,また, SN比の良し悪しによっても音声の統計量を安定的に求める手法は異なることを明らかにした.この結果は,「音声の品質」を評価する上で安定して統計量を求めることが出来るという意味で大きな成果であり,今後の研究につながると言える.(抄録なし)
長周期自然超格子を用いた量子構造の創製

本研究では複合アニオン化合物と呼ばれる、複数アニオンの層が交互に積層した層状化合物について、物質探索及び機能開拓を行った。イオン半径や電気陰性度などのアニオンごとの物性の違いを利用し、層状構造を形成する元素の組み合わせに関する指針を得て、数多くの複合アニオン化合物を発見した。発見した化合物について、特に発光特性及び超伝導特性に着目して機能性を評価した。その結果多数の新物質を見出し、半導体ー絶縁体層が積層した化合物は励起子発光すること、化合物により発光波長や発光強度が異なることを明らかにした。また新しいタイプの層を持ち、高い超伝導特性を持つ鉄系超伝導体も見出した。我々は複合アニオン化合物と呼ばれる、複数の層が交互に積層した層状化合物において、様々な観点から相生成指針を見出すことにより、鉄系超伝導体を中心に多数の新規化合物を発見した。これらの化合物は超伝導相と絶縁層が積層した二次元化合物だが、例えば半導体層と絶縁体層が積層した化合物の場合には自然超格子を形成することから、量子閉じ込め効果やそれに由来する励起子発光が発現することが期待できる。そこで類似の構造を持つ新物質を開拓し、構成元素や積層周期や格子サイズを変化させることで、超伝導や発光など様々な機能性を発現させることを目的として研究を行った。我々はこれまでに、励起子発光物質Sr2ScCuSO3をはじめ数多くの複合アニオン化合物を発見している。この際に得られた知見を元に新規化合物の探索を行った。その結果、MnAs層、AgSe層を持つ化合物を中心に、30種以上の化合物を発見した。このうちSr2ScCuSeO3、Ba3Sc2Cu2Se2O5、Ba3RE2Ag2Se2O5など様々な関連化合物で励起子発光を観測した。これらの化合物の発光は蛍光寿命が非常に短いことから、例えばシンチレータとして応用が期待できる。この他広いバンドギャップと、酸素5配位の希土類サイトという特異な配位環境を持つ化合物、Ba3RE2Cl2O5を発見した。今後希土類サイトに発光元素を添加して特性を評価する予定である。この他、BiS2層を持つ複合アニオン化合物Bi2OS2をXeF2を用いて低温でフッ化するトポタクティック反応で超伝導化することを見出した。この手法は他の化合物にも適用可能で、今後の発展が見込まれる。我々は複合アニオン化合物と呼ばれる、複数のアニオン層が交互に積層した層状化合物に着目した。これらの化合物は層間の性質の違いに由来する自然超格子構造を形成するほか、特異的な配位構造を取りうる。そこでこの複合アニオン化合物について、化学的な観点から相生成指針を見出すことにより新物質を開発した。このうちSr2ScCuSeO3、Ba3Sc2Cu2Se2O5などの化合物では自然超格子構造に由来すり発光を観測した。またCrP層を持つ初の化合物BaCr2P2、CrAs層を持つ新規化合物Sr2ScCrAsO3などを発見した。CrP層、CrAs層は、高温超伝導を発現する鉄系超伝導体の超伝導発現層であるFeAs層と構造的に同一で、関連化合物として注目に値する。この他広いバンドギャップと、酸素5配位の希土類サイトという特異な配位環境を持つ化合物、Ba3Y2Cl2O5、Ba3Lu2Cl2O5等を発見した。これらの化合物は、希土類サイトにEuやTbを添加することで発光を示し、特にEuを添加した場合には80%程度の量子収率で発光した。今後更に高い特性や特徴的な性質を見出すことで、実用材料化を目指したい。本研究では系統的に物質探索を進めることで、まだ成果発表を行っていないものも含めて100種を超える複合アニオン化合物を発見した。研究当初に予想していたように、Ba3Y2Ag2Se2O5, Ba3Lu2Ag2Se2O5など、半導体層と絶縁体層が積層した化合物では、自然超格子構造に由来する励起子発光を見出した。一方層の種類を変えることで、広いバンドギャップと特異な配位環境を持つBa3Y2Cl2O5などの化合物を発見し、蛍光体としての応用が期待できることを見出した。複合アニオン化合物は元素の組み合わせを変えることで全く異なる機能性を発現されられることも特色であり、新規超伝導体の開発を目指して開発したSr2VMnAsO3、Sr2Mn3Bi2O2などMnニクタイド層を持つ化合物が抵抗率が大きな圧力依存性を持つことを見出した。この他、BiS2層を持つ複合アニオン化合物が、トポタクティック反応と呼ばれる合成後に二次反応によりキャリアドープを行う手法により、超伝導化することを見出した。特にトポタクティック反応については汎用性があり、これまで発見した化合物などに適用することで超伝導などの機能発現が期待できる。このように物質の数、機能共に当初の計画より大きな成果を挙げており、今後の発展が見込めると考えている。

本研究では複合アニオン化合物と呼ばれる、複数アニオンの層が交互に積層した層状化合物について、様々な観点から物質探索を行った。我々はこれまでに、層構造を形成する元素の組み合わせに関する指針を得ており、励起子発光物質Sr2ScCuSO3をはじめ数多くの複合アニオン化合物を発見している。Sr2ScCuSO3はこれらの化合物は半導体層と絶縁体層が積層した化合物の場合には自然超格子を形成することから、量子閉じ込め効果やそれに由来する励起子発光が発現することが期待でき、昨年度までに見出した化合物のうちのいくつかでも本年度もこれまでの知見を元に新規化合物の探索を行った。その結果、CuTe層、MnAs層とペロブスカイト型酸化物層が積層した化合物を中心に、多数の新物質を発見した。CuTe層を持つ化合物は励起子発光が見られず、Sr2ScCuSO3等と異なる電子構造を持つ一方、高いゼーベック係数を持つことを見出した。またBa3RE2Cl2O5(RE:希土類)で表される化学式を持つ一連の化合物を見出した。Ba3Y2Cl2O5やBa3Lu2Cl2O5は広いバンドギャップと酸素5配位の希土類サイトという特異な配位環境を持っており、Euのドープで高効率発光することが分かった。今後他の希土類元素を添加した場合についても特性を評価する予定である。この他、フッ化剤を用いて低温でフッ素化するトポタクティック反応についてもいくつかの化合物に対して反応を試み、ルテニウム化合物超伝導体Sr2RuO4がCuF2, ZnF2等によりフッ素化されSr2RuO3F2に変化することを見出した。この手法は他の化合物にも適用可能で、今後の発展が見込まれる。本研究では複合アニオン化合物と呼ばれる、複数アニオンの層が交互に積層した層状化合物について、物質探索及び機能開拓を行った。イオン半径や電気陰性度などのアニオンごとの物性の違いを利用し、層状構造を形成する元素の組み合わせに関する指針を得て、数多くの複合アニオン化合物を発見した。発見した化合物について、特に発光特性及び超伝導特性に着目して機能性を評価した。その結果多数の新物質を見出し、半導体ー絶縁体層が積層した化合物は励起子発光すること、化合物により発光波長や発光強度が異なることを明らかにした。また新しいタイプの層を持ち、高い超伝導特性を持つ鉄系超伝導体も見出した。本研究では系統的に物質探索を進めることで、まだ成果発表を行っていないものも含めて100種を超える複合アニオン化合物を発見した。このうちSr2ScCuSeO3、Ba3RE2Ag2Se2O5といった化合物が励起子発光することを見出した。これらの化合物はいずれもバンド端近傍のバンドはセレン化物層の原子に由来しており、これらの発見により、構造と構成元素からある程度電子状態の見通しをつけた物質探索が可能になった。これらの化合物の発光特性を評価することで、構成元素によりバンドギャップと発光波長を制御できること、積層構造により発光の温度依存性を制御できることが明らかとなった。これ以外にも数多くの化合物を発見しており、例えばSr2VMnAsO3、Sr2Mn3Bi2O2は抵抗率が大きな圧力依存性を持つことや、広いバンドギャップと特異な配位環境を持ち、蛍光体としての応用が期待できるBa3RE2Cl2O5を発見した。また光学特性以外にも、MnAs層を持つ化合物での圧力効果や、BiS2層を持つ化合物のトポタクティック反応による超伝導化を見出した。
メロン果実の熟度及び品質の非破壊的評価のための揮発性成分の品種特性及び栽培要因

メロン果実から発生する種々の揮発性成分(エチレン及び種々の香気成分)を分析し、これにより果実の熟度及び品質を非破壊的に判定するための基礎的、応用的知見を得るために行った。そこで本年度は`アンデス'メロンを供試し、成熟及び追熟期間中に発生する揮発性成分を調べ、次の要因との関係を明らかにした。(1)、収穫時の熟度、追熟中の熟度、(2)、果実の品質、(3)、栽培環境条件、今年度の研究によって得られた結果をみると、`アンデス'メロンでは収穫時のエチレン発生量は果実熟度とかなり高い相関関係が認められた。即ち、0.1μl/Kg.h以下の発生量の果実では未熟すぎる、5μl/Kg.h以上では過熟すぎる。従って収穫はこの範囲内のエチレン発生量を示す時であるが,1μl/Kg.h前後が適期と言えよう。`ア-ルス・フェボリット'では0.10.6μl/Kg.hが収穫適期であるという報告があり、やはり品種間で相当の差異があるように思われる。しかしまた、栽培環境条件によってもエチレン発生量は大いに影響された。即ち、栽培管理の悪い園地のもの、言い換えると品質の悪いメロンは、良いメロンに比べて、エチレン発生量は多くなる傾向を示した。またこれまでの調査で年次変化が相当あることより、一年次のみのデ-タ-によってすべてを判断するのは危険であると思われる。香気を構成する揮発性成分については、収穫当時においては、甚だ微量なため、収穫適期の判定の手段には利用できにくいものと思われる。
魚類の脳神経寄生粘液胞子虫病のニューロ・パソロジー

1.自然発病魚(養殖マサバ)の病理学的解析脳寄生粘液胞子虫Myxobolus acanthogobiiに感染した養殖マサバは、外観的に顕著な背腹湾を呈していた。病理組織学的に、シストは嗅葉、視蓋、中脳腔、第四脳室などに寄生していたが、脊椎湾曲に関与する部位は特定できなかった。2.M.acanthogobii自然感染魚(キタマクラとマハゼ)の病理学的解析M.acanthogobiiに感染していながら脊椎湾曲を呈さないキタマクラとマハゼの脳組織を調べた結果、視蓋葉、延髄、小脳などに多数のシストが観察された。キタマクラでは中脳腔、第四脳室、脊柱管腔内にも観察されたが、マハゼでは見られなかった。M.acanthogobiiのSSU rDNAを標的としたPCR検出系を開発し、天然魚の疫学調査を行った結果、チダイとイゴダカホデリが宿主となることが新たに判明した。さらに、環形動物の寄生調査を行ったが、放線胞子虫およびPCR陽性反応は得られなかった。4.脳外科手術による異物挿入で異常遊泳の再現実験キンギョを麻酔して開頭手術を行い、第四脳室にガラスビーズ(約1mm径)を挿入した後、回復させて経過を観察した。その結果、体躯を左右いずれかに曲げ、「くの字」に湾曲して遊泳するという異常行動が再現された。以上の研究結果より、M.acanthogobiiの感染に伴う病態の相違は魚種の違いによることが示された。また、第四脳室にビーズを挿入することで異常遊泳が再現されたことから、脊椎湾曲はシストの物理的圧迫によるものであることが示唆された。脳神経寄生M.acanthogobiiに自然感染した養殖マサバや天然キタマクラ等を採集し、病理学的な解析を行った。寄生を受けた養殖マサバは外観的にも顕著な後湾(背腹湾)を呈していた。ソフテックス検査の結果、第5から第7脊椎骨で上方に屈曲した後、徐々にS字状にカーブすること、骨折や脱臼は見られないこと等が明らかとなった。脳の病理組織学において、粘液胞子虫のシストが嗅葉、嗅球、視蓋、中脳腔、第四脳室など様々な場所に寄生することがわかったが、脊椎湾曲に関与している部位については特定できなかった。キタマクラについては、外観的に脊椎湾曲は見られなかったものの、組織学的には延髄や脊髄の周辺に多くのシストが観察された。また、M.acanthogobiiのSSU rDNAを標的としたPCR検出系を開発し、37種の天然魚の疫学調査を行った結果、チダイ、イゴダカホデリ、キタマクラが宿主となることが判明した。2.脳外科手術法の開発魚(キンギョとトラフグ)を麻酔してから、ダイヤモンドカッターを装着したミニルーターで開頭手術を行い、脳の特定部位に目視でガラスビーズ(径106μm)を埋め込んだ後、外科手術用アロンアルファを用いて切開した頭蓋を接着した。術後の魚を水槽に戻して経過を観察したところ、平衡機能の喪失や「きりきり舞い」などの異常遊泳をする魚が見られた。遊泳パターンはビデオ撮影を行って解析を試みたが、サンプル数が少なかったことと個体差が大きかったことから、有意なデータは得られなかった。その後、魚は徐々に回復し、多くは正常な遊泳を取り戻し摂餌も再開した。以上のように、脳外科手術のプロトコルが標準化され、魚類の脳内に異物を挿入する実験系が開発された。M.acanthogobiiに感染した天然マハゼを採集し、病理組織学的な解析を行った。

寄生を受けたマハゼは外観的に脊椎湾曲が見られなかったものの、脳の表面に無数のシストが観察された。病理組織において、シストが嗅葉、嗅球、視蓋、小脳、延髄の表面に多数みられたが、中脳腔と第四脳室および脳組織内には検出されなかった。また、寄生体の表面は宿主の結合組織に被包されておらず、偽足状の突起を伸ばしているのが観察された。これはキタマクラでもみられた現象であり、これらの宿主はM.acanthogobiiを異物として認識していない可能性が推測された。M.acanthogobiiの感染水域において環形動物1108個体を採集し、ウェルプレート法やPCR法で交互宿主となる無脊椎動物を探索したが、放線胞子虫およびPCR陽性反応は得られなかった。3.脳外科手術による異物挿入で異常遊泳の再現実験キンギョを麻酔して開頭手術を行い、第四脳室または間脳にガラスビーズ(約1mm径)を挿入した。開頭手術は施すがビーズは挿入しない魚を対照区とした。外科手術用アロンアルファを用いて切開した頭蓋を接着し、回復させて飼育水槽に戻し経過を観察した。その結果、対照区の魚はすべて通常の遊泳を取り戻した。間脳にビーズを挿入した魚は、遊泳行動が多少鈍くなる程度であった。一方、第四脳室にビーズを入れた魚は、体躯を左右いずれかに曲げ、「くの字」に湾曲した。刺激を与えると、湾曲した方向に旋回遊泳し、「きりこみ」回転や横転する魚も見られた。以上の結果、第四脳室に異物を挿入することにより異常遊泳および湾曲が再現された。