hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
都市環境に配慮したサツマイモ養液栽培法およびそのLCAによる環境影響評価法の確立

これらのバイオマスが大気中のCO_2を吸収固定したと考えると,固定されたLC-CO_2は1植物体あたり1.44CO_2-kgである。(3)生産されたバイオマスからの等ネルギー回収屋上緑化で生産されたバイオマスからのエネルギー回収の手法が確立できれば,地球環境への貢献が期待できる。本研究による栽培方法によって,1植物体が生産した塊根(乾燥重238.0g,生体重1012.1g)をエタノール発酵することにより0.13kgのエタノール回収が見込まれる。また,地上部および細根(乾燥重745.5g)をメタン発酵させることにより,メタン69%を含む溶液が246Lの生成が見込まれる。当山ら(1984)の研究を参考にした。4.今後の課題栽培にかかわる環墳負荷,植物によるCO_2固定と冷却効果,バイオマスからのエネルギー回収についての評価を継続する。【参考資料】国立環境研究所,産業連関表による二酸化炭素排出原単位1995.当山清善ら,甘藷茎葉のメタン発酵:第2報大型発酵槽を用いた発酵,琉球大学農学部学術報告No.31,(1984/11)当山清善ら,酵素剤利用による甘藷芋からのエタノール生産,琉球大学農学部学術報告No.31,(1984/11)
気道上皮の創傷治療におけるHIF-1αの役割

気道上皮細胞に創傷刺激を与えると、創傷部位近傍の細胞において低酸素誘導因子(HIF)-1αの核内への集積が認められた。そこで、気道上皮細胞のHIF-1αの発現を抑制すると、創傷治癒の速度は明らかに早くなった。一方、気道上皮細胞をHIF-1α発現誘導剤で刺激すると、創傷治癒の速度は明らかに遅くなり、この影響はHIF-1αの発現を抑制することで減弱した。以上より、気道上皮細胞において創傷刺激により誘導されるHIF-1αは創傷治癒に対して負の調節因子として働くことが明らかとなった。本年度は、気道上皮細胞において創傷に伴って誘導されるHIF-1αの創傷治癒に及ぼす影響とその分子機構について検討を行い、以下の知見を得た。1)気道上皮細胞株NCI-H292細胞にHIF-1αmRNAを標的とする低分子干渉RNAを導入し、その発現をノックダウンすると、創傷に伴うHIF-1αタンパク質の発現誘導が消失した。2)HIF-1αmRNAをノックダウンしたNCI-H292細胞の単層コンフルエントを擦過したとき、創傷治癒の速度は野生型の細胞と比べて有意に早くなった。3)NCI-H292細胞を、HIF-1αタンパク質の発現を誘導することで知られる塩化コバルトで刺激すると、創傷治癒の速度は未処理の細胞と比べて有意に遅くなり、この影響はHIF-1αmRNAをノックダウンすることにより減弱した。以上より、気道上皮細胞では創傷によって誘導されるHIF-1α及び細胞外からの刺激によって誘導されるHIF-1αいずれも創傷治癒に対して負の調節因子として機能することが明らかとなった。さらに、皮膚上皮細胞では創傷によって誘導されるHIF-1αは創傷治癒に対して正の調節因子として機能することが明らかにされていることから、創傷治癒におけるHIF-1αの役割は気道上皮と皮膚上皮とでは明らかに異なることが明確となった。気道上皮細胞株NCI-H292細胞を単層コンフルエントを形成するまで培養し擦過すると、酸素濃度非依存的に低酸素誘導因子(HIF)-1αのタンパク質発現量が増加し、特に擦過部位近傍の細胞においてHIF-1αの核内集積が認められた。そこで本研究では、気道上皮細胞において創傷に伴って誘導されるHIF-1αの創傷治癒に及ぼす影響とその分子機構について検討し、以下の知見を得た。まず、NCI-H292細胞にHIF-1αmRNAを標的とする低分子干渉RNAを導入しその発現をノックダウンすると、創傷に伴うHIF-1αタンパク質の発現誘導が消失することを確認した。次に、HIF-1αをノックダウンしたNCI-H292細胞の単層コンフルエントを擦過したとき、コントロール低分子干渉RNAを導入した細胞と比べて創傷治癒の速度は有意に早くなった。一方、NCI-H292細胞をHIF-1αタンパク質の発現誘導剤としても知られる塩化コバルトで刺激すると、未刺激の細胞と比べて創傷治癒の速度は明らかに遅くなり、この影響はHIF-1αをノックダウンすることにより明らかに減弱した。さらに、創傷によって各種の運動機能促進因子(マトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)-9、ラミニン各種サブユニット、ヘパリン結合性上皮増殖因子、ヒアルロン酸合成酵素2)のmRNA発現量が増加することが確認された。これらの運動機能促進因子のうち、創傷に伴うMMP-9 mRNAの発現量の増加はHIF-1αをノックダウンすることにより増強された。以上より、気道上皮細砲において創傷に伴って誘導されるHIF-1αは創傷治癒に対してネガティブ調節因子として働き、その機序として創傷に伴うMMP-9 mRNAの発現亢進を抑制することによる可能性が示唆された。
ヒトにおける毛様体神経栄養因子(CNTF)の遺伝的欠損に関する分子遺伝学的研究

毛様体神経栄養因子(CNTF)は、脊髄運動ニューロンの強力な生存因子である。最近、CNTF遺伝子を欠失させたマウスで運動ニューロンの変性が生ずることが報告されたが、我々は、今回、遺伝的にCNTFを欠損したヒトが運動ニューロンをはじめとして神経系に明らかな異常をきたすことなく生存することを初めて明らかにした。ヒト坐骨神経cDNAライブラリーにより、2種類のCNTFのcDNAが単離された。一方は正常のCNTFのcDNAと考えられた。ところが他方は翻訳領域内に4塩基の挿入があり、それ以降の読み枠のずれによって、コードするタンパクが正常の1/3以下に短縮された変異のcDNAと考えられた。CNTF遺伝子の塩基配列を直接シークエンス法で解析したところ、片方のアレルにおいて、GからAへの点変異によってイントロン内に新たにスプライス受容部位(AG)が形成され、挿入配列に一致するイントロンの配列がエクソンに組み込まれることが判明した。変異遺伝子からは、培養細胞でもヒトの組織でも、変異のmRNAしか転写されないことが判明した。さらに、イムノブロットでの解析及び変異のホモ接合のヒトの脊髄根の免疫組織化学で変異タンパクに相当する免疫陽性物質は検出されなかった。以上より、この遺伝子変異はCNTFを完全に欠損させることが明らかになった。健康人151名、神経疾患の患者240名、計391名で、変異遺伝子の分布を決定した。その結果は、正常のホモ接合61.9%、ヘテロ接合35.8%、変異のホモ接合2.3%であった。変異のホモ接合はCNTFを欠損していると考えられるが、その頻度に健康人(4名)と患者(5名)で有意差はなく、また変異のホモ接合の患者が罹患する疾患にも一定の傾向はなかった。また、健康人ホモ接合2名において詳細な電気生理学的解析を行ったが、異常はなく、ヒトCNTFの欠損は神経疾患の病因には関与しないと結論した。
水産加工食品のコレステロール酸化物に関する研究-調理,加工,貯蔵がコレステロール酸化に与える影響-

市販水産加工品中のコレステロール酸化物(COP)をガスクロマトグラフィーおよびマススペクトロメトリーで定性、定量したところ、供試した11種の全ての製品に8.3-188ppmのCOPが含まれていた。含量が特に高かったのは7β-hydroxycholesterolと7-ketocholesterolで各々2.9-43.8ppmおよび2.3-60.6ppmであった。その他に、αおよびβ-epoxides,cholestanetriol,25-hydroxycholesterolが含まれていた。COPの生成機構を解明する目的で、微結晶セルロースに、イワシ油トリグリセリドまたは精製トリオレインのいずれか一つとコレステロールとの混合物をコーティングしたモデル系を室温で酸化し、トリグリセリドの不飽和度の相違がコレステロールの酸化に及ぼす影響を検討した。その結果、酸素吸収量の増加と構成脂肪酸の減少はCOPの増加と挙動がよく一致した。さらに、トリグリセリドの不飽和度が高いほどCOPの生成が速いこと、コレステロール単独では酸化が進行しないことがわかった。また、トリグリセリドとコレステロールが液状で酸化する場合においてもほぼ同様な知見が得られた。以上のことから、水産加工品のCOPはコレステロールと共存する不飽和度の高い魚油の酸化に伴い共役的に進行することが判った。一方、これらの加工品を加熱調理すると条件によってはCOPが増加すること、また、BHAなどの抗酸化剤の添加および酸素吸収在を併用した脱気包装によりCOPの生成を効果的に抑制できることが判った。水産加工食品中のコレステロール酸化物をガスクロマトグラフィー及びマススペクトロメトリーを用いて定性・定量した。可食部の総コレステロール含量は桜エビの8.3ppmからカタクチイワシ煮干しの188ppmと製品の種類により大きく変動した。7β-Hydroxycholesterol及び7-ketocholesterolの含量が最も高く、α及びβ-epoxides、cholestane triolならびに25-hydroxycholesterolの含量は比較的低かった。次に、魚介類の加工、貯蔵中のコレステロールの酸化機構を解明する目的で、コレステロールと魚油トリグリセリド、コレステロールとトリオレイン、コレステロールのみの3種の組成の異なるモデル系を調製し、25°C、乾燥空気中でのコレステロールとトリグリセリドの酸化を調べた。コレステロールとトリオレインから成る試験区では、酸素吸収量がほとんど変化しなかったことから、脂質の酸化は極めて緩慢であった。さらに、構成脂肪酸であるオレイン酸の残存量の減少とコレステロール酸化物の生成はみられなかった。これに対して、コレステロールと魚油トリグリセリドから成る試験区では酸素吸収が貯蔵38日目以降に急増したことから、酸化が著しく進行したことが示唆された。さらに、魚油トリグリセリドの22:6、20:5、20:4は38日目までに消失し、オレイン酸の残存量も減少した。これと時期を同じくして、コレステロール酸化物の生成をみた。コレステロール酸化物の種類は、上述の水産加工食品中に蓄積していたそれらと同種類であった。以上の結果は、魚油トリクリセリドの共存するコレステロールは魚油トリグリセリド中の高度不飽和脂肪酸の酸化に伴って共役的に酸化が進行することが判明した。さらに、コレステロールの酸化は共存するトリグリセリドの不飽和度が高い程速やかに進行した。以上より、水産加工食品におけるコレステロールの酸化は共存する高度不飽和脂肪酸の酸化により共役的に進行するものと結論した。この他に、αおよびβ-epoxides,cholestanetriol,25-hydroxycholesterolが含まれていた。

COPの生成機構を解明する目的で、微結晶セルロースに、イワシ油トリグリセリドまたは精製トリオレインのいずれか一つとコレステロールとの混合物をコーティングしたモデル系を室温で酸化し、トリグリセリドの不飽和度の相違がコレステロールの酸化に及ぼす影響を検討した。その結果、酸素吸収量の増加と構成脂肪酸の減少はCOPの増加と挙動がよく一致した。さらに、トリグリセリドの不飽和度が高いほどCOPの生成が速いこと、コレステロール単独では酸化が進行しないことがわかった。また、トリグリセリドとコレステロールが液状で酸化する場合においてもほど同様な知見が得られた。以上のことから、水産加工品のCOPはコレステロールと共存する不飽和度の高い魚油の酸化に伴い共役的に進行することが判った。一方、これらの加工品を加熱調理すると条件によってはCOPが増加すること、また、BHAなどの抗酸化剤の添加および酸素吸収在を併用した脱気包装によりCOPの生成を効果的に抑制できることが判った。
発達障害を疑われた外国人未就学児と親のための療育支援モデルの検討

本研究の目的は、発達障害を疑われる外国人の未就学児と保護者が必要な支援を継続して受けることが出来るよう、発達障害を疑われる外国人の未就学児とその保護者が必要な支援をドロップアウトすることなく継続できる療育支援の必要条件を明らかにし、療育モデルの検討をはかることである。平成28年度までに発達障害児への看護介入についての海外文献や、国内における日本人の発達障害児とその保護者へのサポートについて文献検討を行い、インタビュー項目を設定した。また、研究計画のうち「発達障害児と保護者のための保健事業への参与観察」を予定していたが中止し、支援を行う者(保健師)と支援を受ける者(外国人の発達障害を疑われる未就学児とその保護者)の両者からのインタビュー結果を分析することにより、より充実した療育支援の検討に繋がると考え、療育に関するサービスを受けている外国人の発達障害児をもつ保護者へのインタビューを実施する計画へと修正を行った。平成29年度までに、1発達障害が疑われる外国人への支援経験がある2名の市町村保健センター勤務の保健師へのインタビュー、2児童発達支援&放課後等ディサービスに通所する外国人の未就学児をもつ保護者へのインタビューを行った。平成30年度は、引き続き、2児童発達支援&放課後等ディサービスに通所する外国人の未就学児をもつ保護者へのインタビューを行い、3両者のインタビュー結果を分析し、継続的に療育支援を受けるための必要条件を考え、療育モデル(案)を作成した段階である。今年度は作成した療育モデル(案)について、専門家パネルを開催し意見を頂き、モデルを完成させる予定である。研究協力者へのアクセス、インタビューに同席する通訳者の確保、日程調整に時間を要したこと、外国語のため逐語録作成にも時間を要してしまったことが理由である。平成30年度末に、インタビューの分析から考えられる療育モデル(案)の作成を行ったため、今年度は本モデルの信頼性、妥当性、期待される効果等について、療育の専門家や日本において子育て経験のある外国人の母親より意見等をいただき、療育モデルを完成させる。本研究の目的は、発達障害を疑われるブラジル人の未就学児と親が必要な支援を継続して受けることができるよう支援を振り返る事例研究を行い,発達障害を疑われるブラジル人の未就学児とその親が必要な支援をドロップアウトすることなく継続できる療育支援の必要条件を明らかにし,療育支援モデルの検討を図ることである。平成28年度は,1愛知県内で外国人登録者数の多い市町村に勤務する母子担当保健師(発達障害を疑われるブラジル人の未就学児とその親の支援をした経験がある保健師)にインタビューの実施,2外国人登録者数の多い市町村保健センターにて,発達障害児と親のための保健事業に参加し,参与観察を予定していた。1については文献検討を行い,海外においての外国人の発達障害児への看護介入や,国内における日本人の発達障害児とその親の心理面,サポート,ペアレントトレーニング等についての文献からインタビュー項目の検討を行い,インタビューガイドの作成を行った。現在,県内の2箇所の市保健センターに研究協力依頼を行っている段階であり,インタビューは未実施である。2については,発達障害児と親のための保健事業への参与観察を予定していたが,実際に事業に参加しているブラジル人の保護者へのインタビューを行い,支援に対する思いや支援に繋がった経過等をインタビューし,支援者と支援を受ける者の両方からのインタビュー結果を分析することがより充実した結果になると考え,現在計画を修正中である。文献検討に時間を要し,研究協力依頼を現在行っている段階であり,平成28年度に実施予定であったインタビューまでは実施ができなかった。また,保健事業への参与観察を予定していたが,計画の再検討を行っているため,参与観察も実施ができなかった。本研究の目的は,発達障害を疑われるブラジル人の未就学児と保護者が必要な支援を継続して受けることが出来るよう支援を振り返る事例研究を行い,発達障害を疑われるブラジル人の未就学児とその保護者が必要な支援をドロップアウトすることなく継続できる療育支援の必要条件を明らかにし,療育モデルの検討をはかることである。平成28年度までに発達障害児への看護介入についての海外文献や,国内における日本人の発達障害児とその保護者へのサポートについて文献検討を行い,インタビュー項目を設定した。また,研究計画のうち「発達障害児と保護者のための保健事業への参与観察」を予定していたが中止し,支援を行う者(保健師)と支援を受ける者(ブラジル人の発達障害を疑われる未就学児とその保護者)の両方からのインタビュー結果を分析することにより,より充実した療育支援の検討に繋がると考え,療育を受けているブラジル人の発達障害児をもつ保護者へのインタビューを実施する計画へと修正を行った。平成29年度は,1発達障害が疑われるブラジル人への支援経験がある2名の市町村保健センター勤務の保健師へのインタビュー,2継続的に療育サービスを受けているブラジル人の未就学児をもつ保護者へのインタビューを行った。現在,この二つのインタビューデータを分析中である。研究協力施設がなかなか見つからず,1の研究協力者へアクセスするまでに数か月の期間を要したこと,2のインタビュー日程が限られており,インタビューに同席してもらう通訳者との日程調整も困難な状況であったため,インタビュー実施までに期間を要してしまったことが理由である。

本研究の目的は、発達障害を疑われる外国人の未就学児と保護者が必要な支援を継続して受けることが出来るよう、発達障害を疑われる外国人の未就学児とその保護者が必要な支援をドロップアウトすることなく継続できる療育支援の必要条件を明らかにし、療育モデルの検討をはかることである。平成28年度までに発達障害児への看護介入についての海外文献や、国内における日本人の発達障害児とその保護者へのサポートについて文献検討を行い、インタビュー項目を設定した。また、研究計画のうち「発達障害児と保護者のための保健事業への参与観察」を予定していたが中止し、支援を行う者(保健師)と支援を受ける者(外国人の発達障害を疑われる未就学児とその保護者)の両者からのインタビュー結果を分析することにより、より充実した療育支援の検討に繋がると考え、療育に関するサービスを受けている外国人の発達障害児をもつ保護者へのインタビューを実施する計画へと修正を行った。平成29年度までに、1発達障害が疑われる外国人への支援経験がある2名の市町村保健センター勤務の保健師へのインタビュー、2児童発達支援&放課後等ディサービスに通所する外国人の未就学児をもつ保護者へのインタビューを行った。平成30年度は、引き続き、2児童発達支援&放課後等ディサービスに通所する外国人の未就学児をもつ保護者へのインタビューを行い、3両者のインタビュー結果を分析し、継続的に療育支援を受けるための必要条件を考え、療育モデル(案)を作成した段階である。今年度は作成した療育モデル(案)について、専門家パネルを開催し意見を頂き、モデルを完成させる予定である。研究協力者へのアクセス、インタビューに同席する通訳者の確保、日程調整に時間を要したこと、外国語のため逐語録作成にも時間を要してしまったことが理由である。発達障害を疑われるブラジル人の未就学児とその親の支援をした経験がある保健師へのインタビューを実施し,早期に分析を行う。また,実際に支援を受けている発達障害を疑われるブラジル人の未就学児を育てる親へのインタビューも行い,早期に分析をする。これら分析結果から,継続的に支援を受けるための必要な条件を検討する。インタビュー自体は終了しているため,データの分析を早急に行い,療育支援モデルの検討を行う。平成30年度末に、インタビューの分析から考えられる療育モデル(案)の作成を行ったため、今年度は本モデルの信頼性、妥当性、期待される効果等について、療育の専門家や日本において子育て経験のある外国人の母親より意見等をいただき、療育モデルを完成させる。平成28年度に保健師へのインタビューを予定していたが、研究の遅れから平成28年度内に実施できなかったため、予算の執行ができなかった。(理由)テープ起こしを一部のみ外注し,他は研究者自身で実施したことやインタビュー場所の借り上げに費用がかからなかったためである。(使用計画)1.療育支援モデルの試行(交通費,協力者への謝品,郵送費等)2.学会発表(旅費)完成予定であった療育モデルが未完成であり、そのモデルの完成を目指し、専門家パネルを実施するため、専門家に支払う旅費や謝金が必要である。また、療育モデル完成後に、外国人の集住地域に本モデルについて製本し、送付する予定である。1.保健師および発達障害児を育てるブラジル人保護者を対象としたインタビュー調査の実施(協力者への謝品、テープおこし費用、通訳代,
チトクロムc酸化酵素における酸素還元とそのNO阻害の化学モデル研究

呼吸鎖末端酵素のシトクロムc酸化酵素(CcO)は生体エネルギー生成のために酸素から水への選択的四電子還元を触媒する。本研究課題は、CcOによる酸素還元機構ならびに一酸化窒素(NO)還元機構について、精密CcO化学モデルを用いて分光学的に解析することを目的とした。酸素還元反応において鍵となる反応中間体、およびNO還元におけるN-N結合(N_2O)生成過程の重要な反応中間体について分光学的に解析し、CcO酵素において本質的なHis-Tyrクロスリンクの構造と機能の相関について洞察を得た。これらのモデル錯体の分光学的な解析は、酸素活性化およびNO_x除去分子触媒の分子設計に寄与する。ヘム酵素の化学モデルを用いて、NOとの反応と密接に関連した酸素活性化反応における鍵中間体としてend-on型ペルオキシおよびヒドロペルオキシ鉄(III)錯体について明瞭なスペクトルによる同定を行った。特に、次の3点に具体的成果を得た。1. end-on型ペルオキシおよびヒドロペルオキシ鉄(III)ポルフィリンの溶液中での生成と分光学的同定:酸素配位サイト上部に修飾官能基を有し、同時に共有結合で固定しなイミダゾール軸配位子を持つヘムモデルを用いて、還元体と次の連続した反応、酸素との反応/一電子移動ノプロトン化、により、溶液中で対応するend-onペルオキシおよびヒドロペルオキシ鉄(III)錯体の選択的合成と捕捉に成功した。これは化学モデル研究としては初の例である。2.チトクロムc酸化酵素モデルにおけるヒドロペルオキシ中間体の生成と分光学的同定:チトクロムc酸化酵素(CcO):紫外可視およびEPRスペクトルにより、CcO活性中心に存在する官能基等を全て備えた「完全活性中心モデル」を用いて、還元体より酸素付加体(スーパーオキシ錯体)の一電子還元およびメタノールによるプロトン化を観測した。今後、共鳴ラマンによる同定により中間体構造の確証を進める。3. CcOモデルにおける鉄(IV)オキソ中間体の生成と分光学的同定:2で生成したヒドロペルオキシ中間体へ、酸添加による更なるプロトン化により酸素-酸素結合が解裂して生成したと考えられる鉄(IV)オキソ種の観測に成功した。6配位一酸化窒素結合型ヘムおよびその一電子還元種のヘム-ニトロキシル(HNO/NO^-)付加体は、バクテリア由来一酸化窒素還元酵素やシトクロム酸化酵素によって触媒される一酸化窒素還元において中間体として存在しうると考えられている。これら金属酵素による一酸化窒素還元では、N-N結合を生成して亜酸化窒素(N_2O)を生成することが知られている。ヘム-ニトロキシル付加体について、これまでに金属蛋白質、およびモデル錯体との反応により研究されてきたが、その不安定な性質から詳細な分子構造および反応性については理解されていない。本研究では、生体を規範として合理的に分子設計したヘム錯体を用いることで、一酸化炭素結合型ヘムの性質および反応性について以下の知見を得た。(1)電子供与性および電子吸引性置換基を導入したポルフィリンと一酸化窒素の反応において一酸化窒素付加体の合成に成功した。室温で安定な一酸化窒素付加体は各種分光法(電子遷移吸収、電子スピン共鳴、赤外吸収、共鳴ラマン分光法)により解析し、その詳細な分子構造を明らかにした。(2)6配位一酸化窒素結合型ヘムをコバルトセンで還元することにより、6配位ヘム-ニトロキシル(NO^-)錯体の生成に成功し、その性質は、各種分光法により同定した。(3)6配位一酸化窒素結合型ヘムを液体窒素凍結下でγ線照射することにより得たサンプルを共鳴ラマン分光により解析することで、ヘム-ニトロキシル(HNO^-)が生成することを見出した。モデル錯体において初めて本化学種の生成に成功した例である。
ES 細胞特異的 Ras,ERas を標的とした新規胃癌治療の基礎的解析

近年,がん治療は著しく進歩したが,胃癌においては未だ十分な成果は得られておらず,新たな治療の開発が喫緊の課題である.この問題を克服するためには,新たな胃癌の治療標的分子を明らかにすることが重要であると考えられる.これまでに我々は新規Ras遺伝子,ERas(ES cell-expressed Ras)が胃癌に発現し,胃癌の浸潤・転移に関与していることを,ERasが胃癌の予後診断バイオマーカーとして有用である可能性を示してきた.本研究ではさらに研究を発展させ,ERasの転移促進のメカニズム,ERasを標的とした治療の可能性を示した.近年,がん治療は著しく進歩したが,胃癌においては未だ十分な成果は得られておらず,新たな治療の開発が喫緊の課題である.この問題を克服するためには,新たな胃癌の治療標的分子を明らかにすることが重要であると考えられる.これまでに我々は新規Ras遺伝子,ERas(ES cell-expressed Ras)が胃癌に発現し,胃癌の浸潤・転移に関与していることを,ERasが胃癌の予後診断バイオマーカーとして有用である可能性を示してきた.本研究ではさらに研究を発展させ,ERasの転移促進のメカニズム,ERasを標的とした治療の可能性を示した.独自に作製した高感度抗ヒトERas抗体を用い胃癌142症例の免疫組織染色を行い,臨床病理学的に検討した.胃癌におけるERasの発現はリンパ節転移(P<0.05)および肝転移(P<0.001)と有意に正の相関を示した.なおERasの発現と胃癌の組織型とには有意な相関は認められなかった.分子生物学的検討では,ERas発現により胃癌細胞の転移・浸潤能が増強されることが示された.さらにERasは,FibronectinやVimentinなどの間葉系マーカーの発現増強,E-cadherinなどの上皮マーカーの発現抑制を誘導することが明らかとなり,ERasは腫瘍転移の重要なメカニズムの一つとされている上皮間葉移行の誘導を介し胃癌細胞の転移能を増強していると考えられた.siRNAを用いた検討では,ERasのknockdownにより胃癌細胞の間葉上皮移行が誘導される結果が得られた.ヌードマウス(BALB/c, Slc-nu/nu)を用いた腫瘍皮下移植モデルを用いた検討では,ERas高発現胃癌細胞株で腫瘍形成能および増殖能が有意に増強されていた.免疫不全マウス(Nod-skid mouse)を用いた転移モデルの検討では,ERas高発現胃癌細胞株は強い転移能を示し,臨床病理学的検討および分子生物学的検討の結果を支持するものであった.以上の結果より,ERasは,胃癌の浸潤・転移を誘導する重要な因子の一つであり,胃癌の予後診断マーカー,胃癌治療の標的因子となりうると考えられた.われわれは、これまでの研究で、ES細胞特異的Ras, ERasが胃癌に発現し、胃癌の浸潤・転移を増強し、その発現が胃癌肝転移と有意な相関を有することを明らかにしてきた。最近、癌に対する新規分子標的薬として、Akt阻害剤、またAktのeffecterであるmTOR(mammalian target of Rapamycin)阻害剤が注目されており、一部の薬剤は既に臨床応用されている。PI3k/Aktシグナル伝達系は多くの癌種で活性化され、腫瘍の増殖のみならず、抗癌剤の耐性にも関与していることが報告されている。われわれはERasがAktを選択的に活性化していることに注目し、ERas発現とmTOR阻害剤であるRapamycinの効果について検討した。まずERas発現胃癌細胞を用い、ERas発現と癌治療に頻用されている5種類の抗癌剤、5-FU、CDDP、CPT-11、Paclitaxel、etoposideの効果について検討した。5-FU、CDDP、Paclitaxel、etoposideにおいてはERas発現と薬剤感受性に関連は認められなかったが、ERas発現によるCPT-11耐性の獲得を認めた。分子生物学的検討から、ERas発現胃癌細胞では、PI3k/Akt/mTORシグナル伝達系の活性、NF-kappaBの活性、さらにCPT-11の細胞外への排出に関与しているABCG2(ATP-binding cassette(ABC)transporter)の発現増強が確認され、これらの因子がERasによるCPT-11耐性に関与していると考えられた。またRapamycinを用いAktのeffecterであるmTORを阻害することにより、ERas発現胃癌細胞に対する殺細胞効果が認められ、さらにRapamycinによるCPT-11に対する薬剤感受性の増強も確認された。以上の検討から、ERasは抗癌剤選択のバイオマーカーとして有用であることが示唆された。またERas発現胃癌には、ERasの下流因子であるmTORを標的としたRapamycinによる治療が、単独および他剤との併用で有効である可能性が考えられた.これまでに申請者らは、病理学的検討から胃癌におけるERas発現は胃癌肝転移と有意な正の相関を示すこと(p <0.05)、また分子生物学的検討からERasは上皮間葉移行の誘導を介し、胃癌の転移・浸潤能を増強することを明らかにしてきた。本年度はPCR arrayを用いた、ERasによる転移促進因子の発現変化、および動物実験によるERasの転移能増強についての検討を行った。

PCR arrayでは、ERas発現によるHGF、MMP2、ICAM1などの転移促進因子の発現増強が確認され、ERasは上皮間葉移行に加えて、これらの因子の発現増強により転移・浸潤能を増強している可能性が示された。動物実験は、免疫不全マウス(Nod-skid mouse)を用いたマウス肝転移モデルを使用した。胃癌細胞株は既に樹立したERas強制発現GCIY、およびコントロールベクターを導入したGCIYをコントロールとして使用した。マウスの脾臓に胃癌細胞を移植し(各群N=10)、1週間経過後マウスを屠殺、肝臓の転移病変を病理学的に検討した。ERas高発現胃癌細胞株移植マウスでは10個体中5個体で脾臓に腫瘍の形成を認めた。一方、コントロールでは10個体中2個体に腫瘍の形成を認めた。肝転移については、ERas高発現胃癌細胞株移植マウスでは10個体中4個体で肝に転移病変を認めたが、コントロールでは肝転移陽性例はみられなかった。以上の結果からERas発現により胃癌の腫瘍形成能のみならず、肝転移能も増強されたことが示された。マウスを用いた動物実験の結果は、これまでの臨床病理学的検討および分子生物学的検討の結果を支持するものであった。これまでの研究で、ERasの胃癌における発現の意義については、分子生物学的な検討および臨床病理学的な検討から確認できたと考えられる。ERasを標的とした胃癌治療に関しての検討は十分とは言えず、マウスを用いた検討を進める必要がある。24年度が最終年度であるため、記入しない。ERasによる胃癌の浸潤・転移能の増強、抗癌剤耐性について、vivoモデルを用いて検討を進める。すでに転移能増強はマウス肝転移モデルを用いた検討から確認されており、そのメカニズムに関して、免疫染色などの手法を用いて、更に精査する。
レクチンマイクロアレイを用いた食道癌の再発予測マーカーの開発

今回我々は、食道がんの摘出標本を用い、レクチンマイクロアレイシステムを用いて糖鎖発現を網羅的に解析した。2008年から2012年までの当施設で切除術を施行された臨床病期IからIIIまでの食道癌患者41名の正常食道組織切片とがん組織切片を用いて、それぞれ45種類のレクチンの発現を比較した。その結果、正常組織とがん組織で、有意に低下しているレクチンはAOL(p=0.0035), AAL(p=0.002), PHA(L)(p=0.004), ACA(p=0.011)の4レクチンであった。また有意に増加しているレクチンは、TJA-I(p=0.048), HHL(p=0.037), WFA(p=0.031), SBA(p=0.014)の4つであった。また単変量解析にて食道癌術後の再発に関連するレクチンとして、PSA(p=0.011), AOL(p=0.027), AAL(p=0.042), DBA(p=0.040)の4つの候補を同定できた。その候補の中から臨床から得られた情報をもとに多変量解析を行った結果、食道癌の再発に関連する1つのレクチン、PSA(p=0.009)を同定できた。実際に再発の有無の確認のためにKaplan-Meier解析を行った結果、PSA値が高値であった場合に再発する可能性が有意に高い(p=0.009)ことが確認された。現在、レクチンPSAについて検証作業を開始しており、免疫染色によって食道癌組織切片におけるPSAの発現について研究を進め、Validation studyを行っている。それらの結果をもとに論文投稿中である。【はじめに】消化管癌の中でも胃癌、大腸癌の本邦の死亡数は上位を占める癌であり、食道癌も男性では死亡数第7位である。食道癌における合計5年生存率は34.6%であり、予後不良な疾患である。治療の個別化のためには新しい予後予測マーカーが必要である。すでにわれわれは大腸癌組織53例のホルマリン組織検体を材料とし、大腸癌に特有のレクチンアレイプロファイリングを行なっている。大腸癌では正常部と比較して特定のレクチン結合性を示す糖鎖を有する症例が見られ、その一部は予後と強く相関していた。本研究では食道癌の予後予測マーカーの同定及び遠隔転移先での糖鎖構造の変化にも注目し転移予防や転移治療の研究を目指す。【方法】食道癌60例を対象とし、レクチンプロファイリングを行う。原発巣のホルマリン固定切除標本から抽出した膜タンパク質を、cy3で蛍光標識する。糖鎖を認識するレクチン45種類を固層化したレクチンアレイ(GP BioSCIENCES)を使用して糖鎖プロファイリングを解析する。【結果】53症例の食道癌切除標本の癌部組織および非癌部組織をサンプリングした。それぞれの組織標本のレクチンプロファイリングを行った。現在、癌部/非癌部の糖鎖発現解析、再発・転移に関わる糖鎖発現の解析を行っている。【まとめ】食道癌の転移や再発に関わる糖鎖と高い特異性をもって結合するレクチンの網羅的解析を行った。これまでにわれわれは、胃癌・大腸癌の遠隔再発に関わるレクチンを報告しており、本研究課題では、食道癌の予後予測マーカーの同定に加え、遠隔転移先での糖鎖構造の変化にも注目し、転移予防、転移治療の開発を目指す。現在までに予定症例の標本サンプリングは完了し、レクチンプロファイリングを行うことが出来た。現在、臨床的背景因子や再発・転移に関連するレクチンデータの解析を行っている。今後も引き続き研究計画に沿って研究を継続する。本研究では食道癌の予後予測マーッカーの同定及び遠隔転移先での糖鎖構造の変化にも注目し転移予防や転移治療の研究を目指す。

これまでにわれわれは、胃癌・大腸癌の遠隔再発に関わるレクチンを報告しており、本研究課題では、食道癌の予後予測マーカーの同定に加え、遠隔転移先での糖鎖構造の変化にも注目し、転移予防、転移治療の開発を目指す。現在までに予定症例の標本サンプリングは完了し、レクチンプロファイリングを行うことが出来た。現在、臨床的背景因子や再発・転移に関連するレクチンデータの解析を行っている。レクチンプロファイリングデータと患者背景因子との多変量解析を行い、いくつかの糖鎖が食道癌予後と関与していることが判明した。現在、その糖鎖においてValidationのため、免疫染色を行い、レクチン発現について解析を進めているところである。今後も引き続き研究計画に沿って研究を継続する。今回我々は、食道がんの摘出標本を用い、レクチンマイクロアレイシステムを用いて糖鎖発現を網羅的に解析した。2008年から2012年までの当施設で切除術を施行された臨床病期IからIIIまでの食道癌患者41名の正常食道組織切片とがん組織切片を用いて、それぞれ45種類のレクチンの発現を比較した。その結果、正常組織とがん組織で、有意に低下しているレクチンはAOL(p=0.0035), AAL(p=0.002), PHA(L)(p=0.004), ACA(p=0.011)の4レクチンであった。また有意に増加しているレクチンは、TJA-I(p=0.048), HHL(p=0.037), WFA(p=0.031), SBA(p=0.014)の4つであった。また単変量解析にて食道癌術後の再発に関連するレクチンとして、PSA(p=0.011), AOL(p=0.027), AAL(p=0.042), DBA(p=0.040)の4つの候補を同定できた。その候補の中から臨床から得られた情報をもとに多変量解析を行った結果、食道癌の再発に関連する1つのレクチン、PSA(p=0.009)を同定できた。実際に再発の有無の確認のためにKaplan-Meier解析を行った結果、PSA値が高値であった場合に再発する可能性が有意に高い(p=0.009)ことが確認された。現在、レクチンPSAについて検証作業を開始しており、免疫染色によって食道癌組織切片におけるPSAの発現について研究を進め、Validation studyを行っている。それらの結果をもとに論文投稿中である。現在までの研究状況)本研究予定期間は3年を予定しており、研究目的は食道癌のレクチンの網羅的解析法を用いて再発因子および転移予測因子を同定することである。平成28年度は食道癌53症例より癌部および非癌部をそれぞれサンプリングしレクチンプロファイリングを行った。これらのデータを遠隔転移、遠隔リンパ節の転移臓器ごとに症例をわけ、再発や転移と関連のあるレクチンを同定した。今後の研究方策)現在までの研究で判明したレクチンをもとに、平成29年度はさらに症例を抽出し食道癌の原発巣と転移巣でのレクチンプロファイリングを行い、遠隔転移病巣で発現の強いレクチンを同定する。また遠隔転移に関与する糖鎖の同定を行う。さらに遠隔転移に関与する糖転移酵素の同定を行う。本研究期間内に明らかにした糖転移酵素をコードするmRNAを同定し、ノックダウンマウスを作成し、再発を予防できるか検討する。本研究予定期間は3年を予定しており、研究目的は食道癌のレクチンの網羅的解析法を用いて再発因子および転移予測因子を同定することである。
光学活性含窒素化合物の効率的合成を目的とした新規キラル触媒の開発

固体触媒を用いる精密有機合成の開発が様々なアプローチによって進行する中、筆者はメゾ多孔体を活用する反応設計を試みた。MCM-41(以下M41)は規則的ヘキサゴナル細孔を有するメゾ多孔性シリカであり、細孔内は広大で均一な平面である。筆者はこの空間が一般的な有機化合物の反応場として非常に興味深いと考えた。1.M41の酸特性を活かした有機合成M41の細孔壁はアモルファスであり、その酸強度は低く、有機合成反応の酸触媒として利用することは困難であろうと考えられる。ところが、少量のM41存在下、Diels-Alder反応、向山アルドール反応、Firedel-Crafts反応がそれぞれ円滑に進行することを見出した。向山アルドール反応においては、アセタール類を選択的に活性化することを見出した。さらに、M41による活性化機構を検討し、不純物として含まれているA1や表面積による影響を否定し、細孔構造の規則性が酸特性発現の鍵となっていることを見出した。2.M41上での不斉酸化反応M41にTiイオンを担持し、過酸化水素を酸化剤としてスルフィド類を酸化すると酒石酸存在下で不斉酸化反応が進行することが筆者の研究室において見出された。そこで不斉源の構造、修飾方法について検討を行った。まず選択性を網羅的に評価するため反応進行程度をパラメータとして導入し、これにより選択性が一義的に決定されていることを見出した。また、不斉源についての知見を得るため様々な光学活性物質を用いたところ、α-ヒドロキシカルボン酸が必須ユニットであり、この絶対構造が生成物の立体化学を決定すること、このユニットに続くβ位の不斉中心が選択性に大きな影響を与えることを見出した。この条件を満たすタートラニル酸を用いた場合、酒石酸を上回る選択性の獲得に成功した。これにより、本不斉反応の新たな可能性を示すことができた。医薬品など、生物活性物質の多くはその構造中に窒素原子を含む。従ってこの含窒素化合物を効率的に合成する手法の開発は、有機合成化学における大きな課題となっている。本研究は、含窒素化合物合成における触媒の開発とその応用に焦点をあてたものであり、本年度の研究によって以下のような成果を得た。1,光学活性ジルコニウム触媒を用いる触媒的不斉合成反応ジルコニウムアルコキシドとビナフトール誘導体から誘導されるキラルジルコニウム触媒が、イミン類の不斉アリル化反応に対し高い活性を示すことを明らかにした。この触媒を用い、光学活性多官能性ホモアリルアミン類の効率的合成を行った。また、同様の触媒は、イミン類の活性化に対し一般的に能力を発揮するばかりではなく、触媒的不斉アルドール反応などアルデヒド類の活性化に対しても有効である事を明らかにした。即ち、一連のキラルジルコニウム触媒はイミン類、カルポニル化合物の活性化に基づく様々な化合物の触媒的不斉合成法を提供するのもである。さらに、同様の触媒による触媒的不斉含窒素化合物合成反応を鍵段階とする新規生物活性化合物HPA-21の合成を行った。2,規則性ナノ空間における有機合成反応の開発規則的に配列した微細孔(メソポーラス孔)を有するシリカ系化合物MCM-41はそのメソ孔の形成する特異な空間内における触媒特性、触媒担体としての特性に注目が集まっている。筆者は特にMCM-41の酸特性に注目し、これを固体酸触媒として用いるFriedel-Craftsアシル化反応、Diels-Alder反応、向山アルドール反応の検討を行った。MCM-41は構成要素として含まれるシラノール基をブレンステッド酸点として酸特性を発揮するのもと考えられ、Diels-Alder反応やアセタール類を用いるアルドール型反応に対し優れた活性を示すことを明らかにした。
抗HIV活性を有する(+)-サイコトリンのキラル合成

(+)-アイコトリン及び(+)-O-メチルサイコトリンは3ヵ所の不斉中心を有するベンゾキノリジジンアルカロイドであり,HIV-2RTに対して極めて強い阻害活性を有することがPezzutoらにより明らかにされた.申請者は本化合物のキラル全合成を目指して本研究に着手し,イソキノリン骨格1位への立体選択的アルキル基導入反応及びラジカル閉環反応を検討した.その結果,1位への選択的アルキル基導入反応はGrignard試薬及びジエチルアルミニウムクロリドの組み合わせにより高い選択性で立体制御を達成し,また本法は広汎な適用が可能であることを明らかにした.一方ラジカル閉環反応は,当初ヨウ化サマリウム(II)により達成されるものと考え,本全合成研究計画を立案したが,Sm(II)の還元能力がN-N結合を開裂するに至らず別途合成ルートへの変更を余儀なくされた.現在,標的化合物合成研究と併せて,N-N結合開裂反応が新たな研究課題となりうると考え,この点を検討中である.(+)-アイコトリン及び(+)-O-メチルサイコトリンは3ヵ所の不斉中心を有するベンゾキノリジジンアルカロイドであり,HIV-2RTに対して極めて強い阻害活性を有することがPezzutoらにより明らかにされた.申請者は本化合物のキラル全合成を目指して本研究に着手し,イソキノリン骨格1位への立体選択的アルキル基導入反応及びラジカル閉環反応を検討した.その結果,1位への選択的アルキル基導入反応はGrignard試薬及びジエチルアルミニウムクロリドの組み合わせにより高い選択性で立体制御を達成し,また本法は広汎な適用が可能であることを明らかにした.一方ラジカル閉環反応は,当初ヨウ化サマリウム(II)により達成されるものと考え,本全合成研究計画を立案したが,Sm(II)の還元能力がN-N結合を開裂するに至らず別途合成ルートへの変更を余儀なくされた.現在,標的化合物合成研究と併せて,N-N結合開裂反応が新たな研究課題となりうると考え,この点を検討中である.
フーリエ解析を使った関数微分方程式の解の構成と数値計算および偏微分方程式への応用

Babin-Mahalov-Nicolaenkoは1997年に「初期値が周期関数におけるNavier-Stokes方程式の時間大域解の存在」を示した.この問題に対して著者は初期値が概周期関数の場合の大域解の存在,より具体的には任意の時間区間内における滑らかな解の一意存在を示した.コリオリカとは地球の自転によって引き起こされる力のことをいい,台風などの発生原理を追求する際にはこの力は無視できない.現在,気象変動などの地球規模の流体を解析するときには,コリオリカ付きの流体方程式を扱うのが主流である.最近はコンピュータを用いたシミュレーションによる気象変動などの研究が盛んにおこなわれており,工学的な技術としても重要な方程式である.コリオリカ付きNavier-Stokes程式の非線形項は,周波数集合の相互作用を分析することでコリオリカに依存する部分と依存しない部分に分けることが出来る.Babin-Mahalov-Nicolaenkoで行われているこの分解法に対して,私は2進数に基づく作用素族を導入して計算がより見やすくなるようにした.コリオリカに依存する部分を取り除いた非線形項をもつ方程式は2次元的なので,ここではextended2D-NSという(E2DNS).その方程式の解はコリオリカに依存しない.このE2DNSが滑らかな大域解を持つということを示すのが,証明の鍵となる.そこでGiga-Inui-Mahalov-Matsuiが2005年に初めてNavier-Stokes方程式へと応用したFMO空間を使った.FMO空間とは,原点に点質量(デルタ測度)を持だない有限ラドン測度のフーリエ逆変換像全体である.私はそのFMO加空間上のmild solutionを使ってE2DNSの大域解の存在を導いた.$f'(x)=4f(2x)$の解が無限個存在することも分かり、その構造から数値計算も容易であることが分かった。$'f(x)=4f(2x)$の解を構成するのにフーリエ変換を本質的に用いているのであるが、フーリエ変換の考察を深化させるため、フーリエ級数の一般化であるalmost periodic関数の研究も始めている。最近「almost periodic関数が無限遠で最大値(或る定数でも良い)をとらない」という証明が出来た。今の所、これは放物型方程式の解の爆発問題に応用されている。「自己評価する上で、特に重要と思われる事項」に書いてある通り、独自の発想力に沿った研究のみならず、歴史的に深い偏微方程式の研究にも尽力している。偏微分の研究に関しては、amalgam空間空間上のNavier-Stokes方程式の研究を深化させた。全空間でのamalgam空間上のNavier-Stokes方程式の時間局所解の一意存在を示すには、amalgam空間上のHolder型不等式、Youngの不等式、リース変換の有界性が必要となるのであるが、本研究ではYoungの不等式を示し、上述の問題を解決するに至った。尚、実解析的問題として、amalgam空間上の特異積分の有界性も示した。証明の方針としては、先ずは局所的な領域にL^p有界性を使い、その次に数列における特異積分作用素の有界性を使うというものである。この有界性の証明により、amalgam空間上のリース変換の有界性が保証されることとなり、Navier-Stokes方程式の局所一意解の存在が導けることとなった。その次に或る角領域上のHelmholtz分解を構成する研究を行った。証明の方針としては、先ず角領域上のノイマン問題における熱核を構成し、その熱角を使ってHelmholtz射影を構成するというものである。角領域上のノイマン問題における熱角の構成に関しては、折り返し法を使用した。尚、この方法を使うとL^p空間に限らず、amalgam空間でもHelmholtz分解が出来ることが分かった。最後にamalgam空間自体の性質を調べる研究を行った。具体的にはamalgam空間とBesov空間がフーリエ変換によって或る包含関係を有することを示した。その包含関係において、amalgam空間の指数とBesov空間の指数との間にある関係性が見出せるが、それがsharpになることも示した。我々の扱うNavier-Stokes方程式には有名な未解決問題が存在し、それはClay財団が「解けたら100万ドルの懸賞金を提供する」と宣言した7つの未解決問題の一つとしても有名である。より具体的には「初期値が十分滑らかな周期関数におけるNavier-Stokes方程式において滑らかな解の時間大域的一意解の存在または非存在を示せ」というものである。我々はこの未解決問題を解くことを最終目標としているが、そのために我々は先ずは「コリオリ力付き」のNavier-Stokes方程式やEuler方程式を初期値が概周期関数である場合においての考察を色々と進めた。ここでいうコリオリカとは台風のような地球の自転によって引き起こされる回転力みたいなものを指す。なおコリオリ力付きなら「初期値が周期関数における滑らかな解の時間大域的一意解の存在」はすでに言えているので、我々の当面の目標は「初期値が概周期関数における滑らかな解の大域的一意解の存在」になる。最初に我々は次のことを示した。初期関数が概周期関数におけるコリオリ力付きNavier-Stokes方程式において解も概周期関数となり、解の振動数集合は初期関数の振動数集合によって生成される加法的自由群に含まれる。次に我々は以下のことを示した。

初期関数が概周期関数における2次元Euler方程式において解も概周期関数となり解の振動数集合は初期関数の振動数集含によって生成される加法的自由群に含まれる。次に我々は以下のことを示した。「初期値に対する連続依存性」が今のところ成立していない関数空間上において、初期関数が概周期関数における2次元Euler方程式において解も概周期関数となり、解の振動数集合は初期関数の振動数集合によって生成される加法的自由群に含まれる。最後に我々は以下のことを示した。初期関数が概周期関数におけるコリオリ力付き3次元Euler方程式において解も概周期関数となり、解の振勤数集合は初期関数の振動数集合によって生成される加法的自由群に含まれる。Babin-Mahalov-Nicolaenkoは1997年に「初期値が周期関数におけるNavier-Stokes方程式の時間大域解の存在」を示した.この問題に対して著者は初期値が概周期関数の場合の大域解の存在,より具体的には任意の時間区間内における滑らかな解の一意存在を示した.コリオリカとは地球の自転によって引き起こされる力のことをいい,台風などの発生原理を追求する際にはこの力は無視できない.現在,気象変動などの地球規模の流体を解析するときには,コリオリカ付きの流体方程式を扱うのが主流である.最近はコンピュータを用いたシミュレーションによる気象変動などの研究が盛んにおこなわれており,工学的な技術としても重要な方程式である.コリオリカ付きNavier-Stokes程式の非線形項は,周波数集合の相互作用を分析することでコリオリカに依存する部分と依存しない部分に分けることが出来る.Babin-Mahalov-Nicolaenkoで行われているこの分解法に対して,私は2進数に基づく作用素族を導入して計算がより見やすくなるようにした.コリオリカに依存する部分を取り除いた非線形項をもつ方程式は2次元的なので,ここではextended2D-NSという(E2DNS).その方程式の解はコリオリカに依存しない.このE2DNSが滑らかな大域解を持つということを示すのが,証明の鍵となる.そこでGiga-Inui-Mahalov-Matsuiが2005年に初めてNavier-Stokes方程式へと応用したFMO空間を使った.FMO空間とは,原点に点質量(デルタ測度)を持だない有限ラドン測度のフーリエ逆変換像全体である.私はそのFMO加空間上のmild solutionを使ってE2DNSの大域解の存在を導いた.