hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ことばによる審美的効果の喚起機構の認知モデル:修辞表現を対象として

平成15年度の研究により得られた成果は以下のとおりである.1.修辞表現の理解過程の認知・計算モデルと審美的効果の喚起モデルを融合した認知モデルの構築(a)昨年度に提案した審美的効果の喚起過程の認知モデル-言語表現に内在するずれによって生じる多大な処理労力・負荷に見合うだけの豊かな解釈により審美的効果が生じる-を,研究代表者が以前に提案している比喩理解の認知・計算モデルに融合した.(b)研究代表者が提案しているアイロニーの暗黙的提示理論に基づき,アイロニーの対人的効果である嫌味さとユーモラスさがどのようなメカニズムによって生じるのかをモデル化した.2.心理実験による修辞表現の理解・鑑賞過程の認知モデルの評価(a)「AはBである」という形式の隠喩表現を用いて,隠喩の解釈生成および審美的効果の喚起に関するオフライン実験を行った.その結果,AとBの類似度が低いほど比喩解釈に多くの創発特徴(たとえる概念やたとえられる概念では顕現的でないが,比喩の意味では顕現的となる特徴や属性)が含まれること,創発特徴が多く含まれるほどその解釈は豊かである(エントロピーが高くなる)こと,豊かな解釈を持つか,または美的評価が高い比喩表現は審美的効果を喚起しやすいことが明らかになった.これらの結果は,上記1(a)の統合認知モデルの妥当性をおおむね支持する.(b)アイロニーの表現と発話状況がアイロニーさ(皮肉さ)の度合い,嫌味さの度合い,ユーモラスさの度合いに与える影響を調べるためのオフライン実験を行った.その結果,皮肉さと嫌味さは主にアイロニーの表現スタイルに依存するのに対し,ユーモラスさは表現と状況の両方に影響を受けるという,1(b)の認知モデルの予測に沿う実験結果を得た.本研究課題で得られた以上の成果をもとに,認知修辞学という新たな学問領域を形成していきたい.平成14年度の研究により得られた成果は以下のとおりである.1.審美的効果の調査・分析比喩研究に関する文献を調査し,審美的効果(または詩的効果)に,自然さ,美しさ,形式さ,面白さなどの要因が関係することを把握した.さらに,美学に関する文献を調査し,美的質・美的範疇に関するさまざまな要因が提案されていることを確認した.なお,本調査は現在も継続中である.2.審美的効果の喚起に関係する認知的要因・機構の検討(1)修辞表現の審美的・詩的効果の喚起過程の認知機構として以下を提案し,どのような比喩やアイロニーが審美的効果を喚起しやすいかを説明した.Step1.言語表現に内在するずれによって多大の処理労力(負荷)が生じる.Step 2.ずれを十分に解消することができるくらいの豊かな解釈が生成される.Step 3.その解釈は,解釈の主体が何が起こったか判断できないほと,一瞬のうちに生じる.さらに,これらの認知機構が,ユーモアの面白さの認知機構および文学性の概念と密接な関係にあることを論じ,文学の鑑賞過程の統合的な理論体系の可能性について考察した.(2)比喩理解モデルと上記の喚起機構を統合するための試みとして,WWWを用いた質問紙法による心理実験を行い、比喩解釈に現れる創発特徴(たとえる概念やたとえられる概念では顕現的でないが,比喩の意味では顕現的となる特徴や属性)や比喩解釈のばらつき具合(エントロピー)と,比喩から喚起される詩的効果の度合いに相関があるという結果を得た.平成15年度は,上記1に基づくさまざまな要因が審美的効果に及ぼす影響を心理実験により調べるとともに,喚起機構に関するオンライン実験や,比喩理解と比喩鑑賞(審美的効果の喚起過程)を統合した認知・計算モデルの構築を行う予定である.平成15年度の研究により得られた成果は以下のとおりである.1.修辞表現の理解過程の認知・計算モデルと審美的効果の喚起モデルを融合した認知モデルの構築(a)昨年度に提案した審美的効果の喚起過程の認知モデル-言語表現に内在するずれによって生じる多大な処理労力・負荷に見合うだけの豊かな解釈により審美的効果が生じる-を,研究代表者が以前に提案している比喩理解の認知・計算モデルに融合した.(b)研究代表者が提案しているアイロニーの暗黙的提示理論に基づき,アイロニーの対人的効果である嫌味さとユーモラスさがどのようなメカニズムによって生じるのかをモデル化した.2.心理実験による修辞表現の理解・鑑賞過程の認知モデルの評価(a)「AはBである」という形式の隠喩表現を用いて,隠喩の解釈生成および審美的効果の喚起に関するオフライン実験を行った.その結果,AとBの類似度が低いほど比喩解釈に多くの創発特徴(たとえる概念やたとえられる概念では顕現的でないが,比喩の意味では顕現的となる特徴や属性)が含まれること,創発特徴が多く含まれるほどその解釈は豊かである(エントロピーが高くなる)こと,豊かな解釈を持つか,または美的評価が高い比喩表現は審美的効果を喚起しやすいことが明らかになった.これらの結果は,上記1(a)の統合認知モデルの妥当性をおおむね支持する.(b)アイロニーの表現と発話状況がアイロニーさ(皮肉さ)の度合い,嫌味さの度合い,ユーモラスさの度合いに与える影響を調べるためのオフライン実験を行った.その結果,皮肉さと嫌味さは主にアイロニーの表現スタイルに依存するのに対し,ユーモラスさは表現と状況の両方に影響を受けるという,1(b)の認知モデルの予測に沿う実験結果を得た.
PPARγを標的とするプラーク破綻に対する革新的ナノ医療の研究開発

本研究ではナノ技術を応用したPPARγアゴニストの単球・マクロファージへの効率的送達によりプラーク破綻を予防しうるか検討を行った。ポリ乳酸グリコール酸共重合体を基材としたナノ粒子にピオグリタゾンを封入し高脂肪食及びアンジオテンシンII負荷を行ったApoE欠損マウスに静脈内投与した結果、プラーク破綻後に形成されるburied fibrous cap数の減少、線維性被膜の増厚を認めた。近赤外線プローブを用いた分子イメージングの結果、ピオグリタゾンナノ粒子によりMMPならびにカテプシンの活性が抑制されることが示され、ピオグリタゾンナノ粒子がプラーク破綻を予防する機序のひとつと考えられた。単球・マクロファージを介する炎症は動脈硬化の病態において重要な役割を果たしており、同細胞を標的とする抗炎症治療は動脈硬化性疾患に対する新たな治療となる可能性が期待される。本研究では、生体吸収性PLGAナノ粒子を用いたPPARγアゴニスト(ピオグリタゾン)の単球・マクロファージへの送達により抗炎症作用を通じ動脈硬化プラークの破綻が抑制されるとの仮説を検証した。高脂肪食負荷・アンジオテンシンII投与を行ったApoE欠損マウスに蛍光マーカー(FITC)を封入したPLGAナノ粒子を静脈内投与したところ、末梢血単球、プラークマクロファージへの集積を認めた。ピオグリタゾン封入PLGAナノ粒子(Pio-NP)の血管内投与は腕頭動脈においてプラーク破綻のサロゲートマーカーである線維性被膜(buried fibrous cap)数を減少させた。また、Pio-NPは末梢血Ly-6Chi単球数を減少させ、腕頭動脈においてMMP活性化を抑制した。平成27年度の研究計画に従い、1) in vivoにおけるPLGAナノ粒子の単球・マクロファージへの送達、2)高脂血症マウスモデルにおけるPio-NPによるプラーク破綻抑制効果を確認できた。【最終年度に実施した研究の成果】平成27年度に実施した研究によりピオグリタゾンを封入したPLGA(ポリ乳酸グリコール酸共重合体)ナノ粒子によるプラーク破綻抑制効果が示唆されたため、平成28年度はナノ粒子の標的細胞である単球・マクロファージ機能にピオグリタゾンナノ粒子が及ぼす作用について検証した。その結果、ピオグリタゾンナノ粒子は末梢血において炎症性単球と考えられているLy-6Cを高発現した単球数を減少させた(フローサイトメトリー)。また、細胞レベルでは単球に発現するIL-1β等の炎症性サイトカイン発現や細胞外マトリックス分解酵素MMP(matrix metalloproteinase)の活性を抑制する一方、arginase-1等の抗炎症性マクロファージ関連分子の発現を増加させた。【期間全体を通じて実施した研究の成果】本研究により生体吸収性ポリマーPLGAを用いたナノ粒子は単球・マクロファージ指向性薬物送達システムとして有用であることが示された。本システムとPPARγ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ)アゴニストを組み合わせることによりPPARγアゴニストの有する抗炎症単球・マクロファージへの分化促進作用を効果的に発揮し動脈硬化の病態における終末像のひとつ、プラーク破綻を抑制しうる可能性が示された。【意義・重要性】急性心筋梗塞を代表とするプラーク破綻に起因する血栓性合併症はその頻度が多いだけでなく生命予後、quality of life (QOL)に与える影響も大きい。しかし、プラーク破綻に対する予防効果が認められている現行治療はスタチンのみであり、その効果も十分である。本研究をもとに新規ナノ治療、抗炎症治療が実用化されれば動脈硬化性疾患治療におけるブレークスルーとなることが期待される。これまでの研究においてPio-NPによるプラーク破綻抑制効果が確認できたため、今後は以下の項目を予定している。1.単球・マクロファージによるPLGAナノ粒子取り込み機序の検討循環器内科学
人体を伝送路として利用したウェアラブルデバイスの信号伝送モデルの確立

人体を伝送路として利用する概念はMITのZimmerman氏によって提案されている(T. G. Zimmerman, "Personal Area Networks (PAN) : Near-Field Intra-Body Communication," M. S. Thesis, MIT Media Laboratory, 1995.).そして, Zimmerman氏はこの論文中に人体近傍の電気力線モデルを提唱している.しかしながら,このモデルの妥当性に関して,解析的な検討はなされていないのが現状である.そこで,研究代表者は数値人体モデルを用いて,コンピュータシミュレーションを行い, Zimmerman氏のモデルの妥当性について検証を行った.人体組織は皮膚,筋肉,脂肪,骨など様々な損失性媒質から構成されており,リアルな数値人体モデルを用いることが本来は望ましい.しかしながら,計算機資源や設計開発の観点からは必ずしもリアルモデルを用いる必要はないと考えられる.そこで,簡素人体モデルの構築を試み,リアル人体モデルと比較を行い,その使用妥当性を明らかにした.また,人体は大地グラウンド上に直立している場合,足元の電界強度が弱くなることが明らかになった.一方で,直接,足が大地グラウンドに接していない場合,自由空間中と電界強度分布は変わらないことが明らかになった.様々な研究開発機関によって経験的に独自の伝送路モデルが提唱されているが,本年度の研究代表者の成果により,正しい伝送路モデルを確立できたと言える.これらの成果により,人体通信用ウェアラブルデバイス設計開発の指針を与える事ができ,研究意義は非常に大きいものと言える.人体を伝送路として利用する概念はMITのZimmerman氏によって提案されている(T. G. Zimmerman, "Personal Area Networks (PAN) : Near-Field Intra-Body Communication," M. S. Thesis, MIT Media Laboratory, 1995.).そして, Zimmerman氏はこの論文中に人体近傍の電気力線モデルを提唱している.しかしながら,このモデルの妥当性に関して,解析的な検討はなされていないのが現状である.そこで,研究代表者は数値人体モデルを用いて,コンピュータシミュレーションを行い, Zimmerman氏のモデルの妥当性について検証を行った.人体組織は皮膚,筋肉,脂肪,骨など様々な損失性媒質から構成されており,リアルな数値人体モデルを用いることが本来は望ましい.しかしながら,計算機資源や設計開発の観点からは必ずしもリアルモデルを用いる必要はないと考えられる.そこで,簡素人体モデルの構築を試み,リアル人体モデルと比較を行い,その使用妥当性を明らかにした.また,人体は大地グラウンド上に直立している場合,足元の電界強度が弱くなることが明らかになった.一方で,直接,足が大地グラウンドに接していない場合,自由空間中と電界強度分布は変わらないことが明らかになった.様々な研究開発機関によって経験的に独自の伝送路モデルが提唱されているが,本年度の研究代表者の成果により,正しい伝送路モデルを確立できたと言える.これらの成果により,人体通信用ウェアラブルデバイス設計開発の指針を与える事ができ,研究意義は非常に大きいものと言える.
歯髄失活に伴う歯牙変色の生化学的検討と変色原因蛋白分解酵素の開発

歯牙の加齢や歯髄処置のために変色を引き起こし、その結果漂白等の処置を余儀なされているのが現状である。しかしながら症例によっては必ずしもこのような処置のよって本来の白さに回復、継続するとは限らない。これらは今までの原因として考えられるヘモグロビン中の鉄分や壊死組織の分解産物の反応物質である硫化鉄であるとは言い切れなく、その他の物質も大きな関与が考えられる。そこで前年度は変色永久歯象牙質を対象として吸光光度計をもちいて無機成分の比較分析をし、その結果正常色永久歯に比較してFe,Mg量が減少し、Zn量が増加しているのを報告した。今年度は乳歯象牙質に含有される無機成分を比較検討した。被検歯は変色乳歯と正常色乳歯を10本ずつもちいた。エナメル質や残存歯髄等を除去した後象牙質のみを粉末状に調整した。酸溶解後日立製作所Z-9000原子吸光光度計によって計測を行った。その結果Ca量は変色、正常ともに同量であった。一方、Fe量は正常色のほうが有意に増加していた。今回の結果よりFe量が多いことが明らかとなったがこれが変色に関与しているか否かは更なる検討が必要であると考えられる。また、無機成分のみならず有機成分すなわちアミノ酸定性、定量も今後の課題と思われる。平成15年度はまず初めに永久歯の変色象牙質を色彩色差計により変色の度合いを計測した。続いて象牙質粉末を10%EPTA水溶液にて4度で撹拌しながら14日間脱灰した。その後、7日間透析しEDTA水溶液を除去した。最後に、3000rpm10分間遠心分離後、上清を採取、この試料をゼーマン原子吸光度計によって無機質の定性、定量を行った。その結果、変色象牙質は正常象牙質を比較すると亜鉛の含有量が増加していることを確認した。しかしながら亜鉛は歯科材料にも多く含まれており歯質内本来のものであるかは不明である。特に、失活している歯に根管充填材として酸化亜鉛を広く使用するためこの影響もあると考えられる。また、鉄、マグネシウム量は逆に減少していることが確認された。一方、変色象牙質中の有機成分の検討を電気泳動法にて検討したがトランスフェリンやヘモグロビンの明らかな存在はバンドでは確認できなかった。この結果、有機質中の変色原因因子は他のアミノ酸である可能性が強く示唆された。しかし、他のアミノ酸を抽出するのは多くの時間が必要であり電気泳動法にも限界があると考えられた。この結果かも次年度は永久歯のみならず乳歯の変色原因もやはり無機質に対して検討し、そのとき可能な限り抜去歯他乳歯の履歴がはっきりとしたものを試料として用いる予定である。そこで前年度は変色永久歯象牙質を対象として吸光光度計をもちいて無機成分の比較分析をし、その結果正常色永久歯に比較してFe, Mg量が減少し、Zn量が増加しているのを報告した。エナメル質や残存歯髄等を除去した後象牙質みを粉末状に調整した。
生体複合場金属錯体による新反応系の構築

〔Mo_2Fe_6S_8(SEt)_9〕^<3->の2電子還元体を触媒としてRC(O)SEt(R=CH_3,C_2H_5,C_6H_5)へのCO_2固定を行ない,RC(O)COO^-が触媒的に生成することを明らかにした。CO_2はMoFeSクラスタ-の骨格硫黄上で活性化を受け,硫黄で鉄に結合したRC(O)SEtのカルボニル炭素に求核付加してRC(O)COO^-が生成する機構を提案した。酵素反応ではCO_2の極性が逆転した後に,アセチルコエンチ-ムAと反応してαーケト酸が生成する可能性が提案されていることから,本研究によるαーケト酸生成は光合成細菌によるCO_2固定の機構解明に鍵を与える研究である。また,生体内酸素毒性防御の観点からス-パ-オキシド不均化活性(SOD)を有する新規鉄錯体を十数種合成した。これらの錯体は現在報告されているSODmimicの中でも最高の活性を示すとともに大腸菌の細胞内でもSODのかわりに作用することが示された。このような活性を有する錯体は前例がなく,作用機構の解明に興味がもたれる。さらに,オキシヘモシアニンおよびオキシチロシナ-ゼの決定的な構造モデルとなる酸素錯体の合成に成功するとともに,これらの酸素錯体を用いたフェノ-ル誘導体の酸化反応を行い,チロシナ-ゼの作用機構に関して,従来の定説を覆す新しいラジカル性の反応機構を提唱した。またアルキル置換ヒドロキノンをプロトンおよび電子供与体として非ヘム鉄錯体を用いたオキシゲナ-ゼ型酸素化反応を開発し,従来に比較して広範囲の芳香属および直鎖飽和炭化水素からアルコ-ル,ケトン,アルデヒドが生成することを明らかにした。生体分子変換反応に関してはCo(II)とNー置換ジアミン系によるアルド-ス変換反応を同位体で標識した糖を用いて詳細な検討を行い,新反応機構を提案した。また天然に希少なマンノ-ス型の還元末端を有する二糖類の合理的合成法を確立するとともに,アルド-スの金属錯体への取り込みに対する制御の方法論を示した。
ドイツ貸借対照表価値・計上能力論争の経緯と株式会社会計の変貌に関する研究

近代会計の基底,動態論を首唱したシュマーレンバッハの唯一の関心は,貸借対照表を財産計算でなく損益計算の手段として論証することにあった.それも,株式会社の台頭,さらに,普仏戦争後の経済恐慌に直面して複雑に経緯する評価問題,すなわち,価値論争に終止符を打つためであった.1861年のドイツ一般商法典が,貸借対照表の作成を規定したものの,これに計上すべき価値について全く無色の表現をしていたからである.そこで,財産計算を支持する法律の因襲から解放すべく,損益計算を支持する商人慣行を前面に打ち出して,自己の見解が正当であることを表明しただけでなく,因襲に囚われた見解を納得させるために,法律には法律で対抗すべく, 1897年のドイツ商法典に組み込まれた正規の簿記の諸原則を活用したのである.商人慣行を斟酌して,帳簿記録から貸借対照表が誘導されるかぎり,これに計上すべき価値も自ずから明白になるからである.それだけではない. 1891年のプロシア所得税法が,それまでの収入・支出計算による損益計算に加えて,貸借対照表による損益計算を認許したことからも,価値論争が繰り返されるが,これに終止符を打つとしたら,さらに,自己の支持する収益・費用計算としての損益計算が,そのいずれにも代位しうることこそを論証しておかねばならなかった.そこで,計算構造についてであるが,設立から解放までの全体損益計算が収入・支出計算であるのに対して,これを区画しての期間損益計算は収益・費用計算である.しかも,全体利益は期間利益の合計に等しいので,収入,支出,収益,費用のズレである未決項目を収容するのが貸借対照表であると主張したのである.そのために,これに計上すべき項目も自ずから規制されざるをえない.したがって,計上能力論争にも終止符が打たれたのだが,いま,情報需要の高度化と多用化は新たな計上能力論争の転回を余儀なくしている.近代会計の基底,動態論を首唱したシュマーレンバッハの唯一の関心は,貸借対照表を財産計算でなく損益計算の手段として論証することにあった.それも,株式会社の台頭,さらに,普仏戦争後の経済恐慌に直面して複雑に経緯する評価問題,すなわち,価値論争に終止符を打つためであった.1861年のドイツ一般商法典が,貸借対照表の作成を規定したものの,これに計上すべき価値について全く無色の表現をしていたからである.そこで,財産計算を支持する法律の因襲から解放すべく,損益計算を支持する商人慣行を前面に打ち出して,自己の見解が正当であることを表明しただけでなく,因襲に囚われた見解を納得させるために,法律には法律で対抗すべく, 1897年のドイツ商法典に組み込まれた正規の簿記の諸原則を活用したのである.商人慣行を斟酌して,帳簿記録から貸借対照表が誘導されるかぎり,これに計上すべき価値も自ずから明白になるからである.それだけではない. 1891年のプロシア所得税法が,それまでの収入・支出計算による損益計算に加えて,貸借対照表による損益計算を認許したことからも,価値論争が繰り返されるが,これに終止符を打つとしたら,さらに,自己の支持する収益・費用計算としての損益計算が,そのいずれにも代位しうることこそを論証しておかねばならなかった.そこで,計算構造についてであるが,設立から解放までの全体損益計算が収入・支出計算であるのに対して,これを区画しての期間損益計算は収益・費用計算である.しかも,全体利益は期間利益の合計に等しいので,収入,支出,収益,費用のズレである未決項目を収容するのが貸借対照表であると主張したのである.そのために,これに計上すべき項目も自ずから規制されざるをえない.したがって,計上能力論争にも終止符が打たれたのだが,いま,情報需要の高度化と多用化は新たな計上能力論争の転回を余儀なくしている.
海洋洪水玄武岩のマグマ分化作用の解明

過去2億年間に地球上で最もマグマを生産したオントンジャワ海台火山を対象として,岩石溶融実験および全岩化学組成分析を行った.また海台上部に厚く(>1km)堆積する海洋堆積物のホウ素含有量を決定した.私は国際深海掘削計画のLeg 192に参加し,海台の各地域で採取した数十個の火山岩および堆積物を研究室へ持ち帰ったので,これらを対象とした研究を行った.火山の活動中は地下数km部分に大規模なマグマ溜まりが存在し,マグマは分別結晶作用を行ったと提案されている.しかし分別結晶作用の程度やマグマ溜まり中の温度・圧力は定量的に見積もられていなかった.そこで平成14年度の常圧(100kPa)での岩石溶融実験に引き続き,今年度は高圧(200MPa)実験を行った.実験では内側のカプセルに岩石試料を入れ,外側のカプセルに酸素雰囲気制御剤(Co-CoO)を入れて酸素雰囲気制御を行った.実験により決定した鉱物組み合わせ,マグマ組成,鉱物組成を天然の岩石の鉱物組み今わせ,岩石組成,鉱物組成それぞれと比較することにより,マグマ溜まり中の温度は11601240°C,深さは低圧(6km以浅)と予想した.この成果は地球惑星科学関連学会2003年合同大会にて発表するとともに,2つの論文に執筆を行った(Sano & Yamashita,2004;佐野他,2004).またホウ素は地球内部での流体移動を調べるために有用であり,地球物質中では海洋堆積物に最も濃集しているが,その含有量が明らかでなかった.そこで,海台の38個の堆積物試料について即発γ線分析によりホウ素含有量を決定した.この成果も論文に掲載した(Sano et al.2004).地球で最も大きな火山であるオントンジャワ海台火山を対象として岩石溶融実験,鉱物鑑定および岩石・鉱物化学組成分析を行った.オントンジャワ海台をつくったマグマはマントル内での巨大な上昇流が溶けたものである可能性が強いため,この海台のマグマ成因を明らかにすれば,全マントルの運動および進化論等に重要な制約条件を与えることができるであろう.また多量のマグマが短時間に噴出したため大規模な地球環境変動を引き起こした可能性が高い.従って地球規模での環境変動を考える上でも重要な火山である.溶融実験は富士常葉大学および岡山大学固体地球センターのシリコニット溶融炉を用いて常圧にて11501250°Cの温度範囲で行った.実験回収物および天然鉱物の観察は富士常葉大学のエネルギー分散型走査電子顕微鏡を使用し,鉱物分析は東京大学地震研究所の波長分散型走査電子顕微鏡を用いた.また岩石化学組成分析には東京大学地震研究所の蛍光X線分析装置を用いた.この中で富士常葉大学の走査電子顕微鏡は本研究前には使用されていなかったので,精力的に研究を行い,実用化し,結果を論文にまとめた(佐野,印刷中,富士常葉大学研究紀要).実験により決定した鉱物組み合わせ,マグマ組成,鉱物組成を天然の岩石の鉱物組み合わせ,岩石組成,鉱物組成それぞれと比較することにより,マグマ溜まり中の温度は11601240°C,深さは低圧(6km以浅)と予想した.また斜長石斑晶の累帯構造を詳しく調べることにより,斜長石斑晶の部分はマグマ溜まりの縁付近に存在する低温・高含水量のマグマから結晶化した可能性を指摘した.これら成果の一部は日本火山学会2002年度秋季大会にて発表すると共に,執筆も行った(佐野・成瀬,印刷中,月刊地球).過去2億年間に地球上で最もマグマを生産したオントンジャワ海台火山を対象として,岩石溶融実験および全岩化学組成分析を行った.また海台上部に厚く(>1km)堆積する海洋堆積物のホウ素含有量を決定した.私は国際深海掘削計画のLeg 192に参加し,海台の各地域で採取した数十個の火山岩および堆積物を研究室へ持ち帰ったので,これらを対象とした研究を行った.火山の活動中は地下数km部分に大規模なマグマ溜まりが存在し,マグマは分別結晶作用を行ったと提案されている.しかし分別結晶作用の程度やマグマ溜まり中の温度・圧力は定量的に見積もられていなかった.そこで平成14年度の常圧(100kPa)での岩石溶融実験に引き続き,今年度は高圧(200MPa)実験を行った.実験では内側のカプセルに岩石試料を入れ,外側のカプセルに酸素雰囲気制御剤(Co-CoO)を入れて酸素雰囲気制御を行った.実験により決定した鉱物組み合わせ,マグマ組成,鉱物組成を天然の岩石の鉱物組み今わせ,岩石組成,鉱物組成それぞれと比較することにより,マグマ溜まり中の温度は11601240°C,深さは低圧(6km以浅)と予想した.この成果は地球惑星科学関連学会2003年合同大会にて発表するとともに,2つの論文に執筆を行った(Sano & Yamashita,2004;佐野他,2004).またホウ素は地球内部での流体移動を調べるために有用であり,地球物質中では海洋堆積物に最も濃集しているが,その含有量が明らかでなかった.そこで,海台の38個の堆積物試料について即発γ線分析によりホウ素含有量を決定した.この成果も論文に掲載した(Sano et al.2004).
局所内分泌療法の開発・難治性脳膜腫を対象として

ヒト髄膜腫(計13症例)を初代培養し、プロゲステロン受容体発現の有無と抗プロゲステロン剤による抗腫瘍効果との関連性について検討した。抗腫瘍効果は13例中10例で認められたが、プロゲステロン受容体発現の有無と直接的な関連性は見い出されなかった。またプロゲステロン受容体陽性の下垂体腫瘍株では、明らかな抗腫瘍効果が認められたのに対し、受容体陰性のグリオーマ細胞株では、抗プロゲステロン剤による抗腫瘍効果は得られなかった。これらの知見より、抗プロゲステロン剤によるヒト髄膜腫の抗腫瘍効果は、一部には特異的プロゲステロン受容体を介する作用の他に、他のステロイド受容体を介した機序によっても抗腫瘍効果を発揮する可能性が考えられた。一方、ヒト髄膜腫を初代培養によって増殖させた後、細胞の一定数をコラーゲンゲルに包埋し、その固まりをヌードマウス腎皮膜下に移植した。そして抗プロゲステロン剤によるin vivo系での抗腫瘍効果を検討した。その結果、プロゲステロン受容体陽性例、陰性例とも著明な抗腫瘍効果が得られた。さらに、その効果の程度に受容体陽性、陰性例の間に明らかな差は認められなかった。以上の知見はin vitro系での結果と一致した。さらに、抗プロゲステロン投与群の腫瘍組織に明らかな壊死像が見られなかった事より、in vivo系での抗プロゲステロン剤による抗腫瘍効果は細胞増殖抑制の結果と考えられた。以上のin vitro,in vivo系でのヒト髄膜腫細胞に対する抗プロゲステロン剤の抗腫瘍効果は必ずしもプロゲステロン受容体を介する作用ばかりでなく、他のステロイド受容体を介した機序も考慮しなければならないと結論づけた。なおこれらの研究成果は既に論文として公表された(J.Neurosurg.80:527-534,1994)。当初予定していたヒト悪性脳膜腫株については、progesカerone receptorがABC法による免疫組織学的検査で証明されなかったので、脳膜細胞は臨床材料を用いることに変更した。また、新規抗progesterone剤としてはMifepristoneとOnapristoneを用い、脳膜細胞に対する抗腫瘍効果をin vitroで検索することから着手した。実験方法は、まず手術により得られた脳膜細胞をABC法による免疫組織検査でprogesterone receptorの検索を行なった。同時にこの脳膜細胞1x10^5コをmicroplate内で初代培養し、3日後にMifepristoneとOnapristoneの各々10^<-10>、10^<-8>、10^<-6>Mの各濃度処理を行ない、さらに3、6、9日後にMTT assayにて、抗腫瘍効果を判定した。また、未処理のものを対照として用い、処理群の吸光度が50%以下のものを感受性陽性とした。現在これらの検索が達成出来た臨床材料は4例である。progesterone receptorは4例中1例に認められた。MTT assayの至適条件設定としては、Mifepristoneは10^<-8>M、Onapristoneは10^<-6>Mが最も抗腫瘍効果が強くみられ、両者とも処理後6日目が判定に適していた。progesterone receptorと抗progesterone剤による抗腫瘍効果の関係では、receptor陽性の1例はMifepristoneとOnapristoneのいずれにも陽性を示さなかった。receptor陰性3例のうち、Mifepristoneは2例、Onapristoneは3例に感受性陽性を示した。OnapristoneはMifepristoneに比べ抗腫瘍効が強い傾向にあった。

現在のところ、抗progesterone剤は必ずしもprogesterone receptorを介した作用だけではないことが判明したが、今後これらの抗progesterone剤が脳膜腫に有効と成りえるかの検討を進めていきたい。ヒト髄膜腫(計13症例)を初代培養し、抗プロゲステロン剤による抗腫瘍効果と腫瘍細胞のプロゲステロン受容体発現との相関性について検討した。抗腫瘍効果の程度はプロゲステロン受容体の有無と直接的な相関性は得られなかった。一方、受容体陰性のグリオーマ細胞株では、抗プロゲステロン剤で抗腫瘍効果が得られなかったのに対し、受容体陽性下垂体腫瘍株では、明らかな抗腫瘍効果が認められた。以上の結果から、抗プロゲステロン剤によるヒト髄膜腫の抗腫瘍効果は、一部には受容体を介する作用の他に、他のステロイド受容体もしくは受容体を全く介さない機序で抗腫瘍効果を発揮する可能性が考えられる。以上はin vitro系での検討であるが、今年度はさらにin vivo系での検討も加えた。ヒト髄膜腫細胞をコラーゲンゲルに包埋し、その固まりをヌードマウス腎皮膜下に移植し、抗プロゲステロン剤による抗腫瘍効果を現討した。その結果、プロゲステロン受容体陽性例、陰性例とも著明な抗腫瘍効果が得られた。その効果の程度に受容体陽性例と陰性例の間に明らかな差は認められなかった。また、抗プロゲステロン投与群の腫瘍組織に明らかな壊死像が見られなかったことより、in vico系での抗プロゲステロン剤の抗腫瘍効果は細胞増植抑制効果の結果と考えられた。以上のin vitro、in vivo系でのヒト髄膜腫細胞に対する抗プロゲステロン剤の抗腫瘍効果は必ずしもプロゲステロン受容体を介する作用ばかりでなく、他の機序も考慮に入れる必要性があると結論づけた。なお来年度は以上の結果をさらに補充する研究を行なうとともに、雑誌論文への投稿準備を進める予定である。ヒト髄膜腫細胞の初代培養系における抗プロゲステロン剤の抗腫瘍効果の機序を詳細に検討するため、平成5年度はヒト髄膜腫細胞株(KT21MG1)を用い、以下の研究を行なった。1)KT21MG1細胞株(プロゲステロン受容体陰性)におけるプロゲステロン受容体発現誘導の試み。2)プロゲステロン受容体発現状態下での抗プロゲステロン剤による抗腫瘍効果の機序の解明。各種成長因子、分化誘導物質によってKT21MG1細胞株のプロゲステロン受容体発現をin vitro系で試みた。しかしプロゲステロン受容体は発現されなかった。それ故、受容体発現には複数の因子による複雑な機序によって制御されている可能性が示唆されるものの、現状では次のステップである2)の研究を遂行できなかった。以上のごとく、平成5年度は明らかな成果はあげられなかったが、平成3.4年度の研究成果から、当初の目標を十分達成できたと考えている。
アストログリア細胞のエンドサイトーシスの障害による神経発達障害

統合失調症の約30%は妊娠中の母親のウィルス感染に関連があると報告されているが、周産期ウィルス感染による脳神経発達障害の分子機構は不明である。そこで我々は、toll-like receptor 3 (TLR3)を介して自然免疫を活性化する二本鎖RNA様物質polyI:Cを用いて周産期擬似ウィルス感染モデルマウスを作製した。さらに、polyI:Cモデルの神経発達障害や脳機能障害には神経ーアストロサイト相互作用が関与しており、アストロサイトで誘導されるIFITM3が重要な役割を果たしていることを明らかにしている(Glia, 2013)。昨年度は、polyI:C処置したアストロサイトの培養液(polyI:C-ACM)に含まれる神経発達障害活性の本体を同定するために2D-DIGE法によるプロテオーム解析を実施し、候補分子を複数同定した。さらに候補分子の一つであるFollostatin like-1 (Fstl1)が神経発達障害活性を有することを明らかにした(投稿準備中)。本年度は、polyI:C-ACMに含まれるグリア因子として同定したmatrix metalloproteinase-3 (MMP3)に焦点を絞り、polyI:C処置後のアストロサイトにおける動態と神経発達に及ぼす影響を明らかにした。同時に、polyI:C刺激に対するアストロサイトとミクログリアの反応性を比較し、polyI:C刺激によりMMP3はアストロサイトで特異的に誘導・分泌されることを明らかにした(Brain Behav Immunity, in press)。これらの結果は、IFITM3の他、Fstl1やMMP3が神経発達障害における全く新しい創薬標的になりうることを示唆しており、本研究課題における最大の成果である。25年度が最終年度であるため、記入しない。我々は、toll-like receptor 3 (TLR3)を介して自然免疫を活性化する二本鎖RNA様物質polyI:Cを生後2日目から連続5日間、新生仔マウスに投与することにより周産期擬似ウィルス感染モデルマウスを作製した。成獣となったpolyI:C処置マウスは学習記憶障害、情動行動異常および海馬グルタミン酸神経伝達の異常を示すが、clozapineやD-serineの投与により改善する。PolyI:C処置モデルマウスの脳内遺伝子発現の網羅的解析により、統合失調症などの神経発達障害患者で増加が報告されているinterferon-induced transmembrane protein 3 (IFITM3)遺伝子の発現増加を見出した。さらに、polyI:Cモデルの神経発達障害や脳機能障害には神経ーアストロサイト相互作用が関与しており、アストロサイトで誘導されるIFITM3が重要な役割を果たしていることを明らかにした。本研究の中で最も重要な研究計画であるpolyI:C-ACMに含まれる神経発達障害因子の候補を複数同定した。さらに、その一つであるFstl1がpolyI:c処置によりアストロサイトで誘導・分泌されること、その機能を一部解明できたことは非常に大きな成果であり、研究は概ね順調に進展していると考えられる。また、もう一つの目標であるIFITM3の機能解明に関連して、結合分子を同定するための実験材料の準備が整ったことも成果と考えられる。本年度に同定したpolyI:C-ACMに含まれる神経発達障害因子の機能解析を進めるとともに、IFITM3の結合タンパクの同定・機能解析も進める。また、グリア細胞にIFITM3を過剰発現する動物モデルを作製するために必要なウイルスベクターの作製を進める。さらに、研究成果を取りまとめ、成果の発表を行う。
発声変動が韻律的個人性情報に与える影響に関する研究

音声中に含まれる個人性は,声道の伝達特性に由来するスペクトル包絡や声帯振動に由来するスペクトル微細構造に含まれている.このうち,スペクトル包絡情報に関連した特徴量が,話者認識に広く利用されている.これらの特徴量は,個人性情報を多く含んでいる上に,発声者が意図的に変えることが困難であると言われている.しかし一方で,伝送系や雑音,環境騒音などの影響を受けやすいことも知られている.スペクトル微細構造に関連した特徴量として,声の高さや大きさ,話す速さや話し方などの韻律情報がある.これらは発声者が容易に変えることができる特徴量であるため,これまで話者認識には積極的に利用されることは少なかったが,伝送系や雑音,環境騒音などの影響を受けにくいなどの利点があるため最近注目されつつある.この韻律情報は,発声者が意図的に変化させることができる特徴量ではあるものの,その変動幅にも個人差が存在すると考えることができる.そこで,本研究では,発声様式の異なる発話における基本周波数の頻度分布が,話者や発声様式の違いによって受ける影響を検証した.また、同じ言葉を話すときに,同じ人であれば同じような話し方をする傾向が強いので、テキスト依存型話者照合における話し方を利用する手法についても検討した.更に、話者認識に有効となる特徴量変換を提案した.本研究によって,韻律情報に含まれる個人性情報やそれを利用した話者認識手法を示すことができ,更には,話者認識に有効な特徴量変換を導入することによって,話者認識性能の向上に寄与できるものと考える.音声中に含まれる個人性は,声道の伝達特性に由来するスペクトル包絡や声帯振動に由来するスペクトル微細構造に含まれている.このうち,スペクトル包絡情報に関連した特徴量が,話者認識に広く利用されている.これらの特徴量は,個人性情報を多く含んでいる上に,発声者が意図的に変えることが困難であると言われている.しかし一方で,伝送系や雑音,環境騒音などの影響を受けやすいことも知られている.スペクトル微細構造に関連した特徴量として,声の高さや大きさ,話す速さや話し方などの韻律情報がある.これらは発声者が容易に変えることができる特徴量であるため,これまで話者認識には積極的に利用されることは少なかったが,伝送系や雑音,環境騒音などの影響を受けにくいなどの利点があるため最近注目されつつある.この韻律情報は,発声者が意図的に変化させることができる特徴量ではあるものの,その変動幅にも個人差が存在すると考えることができる.そこで,本研究では,発声様式の異なる発話における基本周波数の頻度分布が,話者や発声様式の違いによって受ける影響を検証した.また、同じ言葉を話すときに,同じ人であれば同じような話し方をする傾向が強いので、テキスト依存型話者照合における話し方を利用する手法についても検討した.更に、話者認識に有効となる特徴量変換を提案した.本研究によって,韻律情報に含まれる個人性情報やそれを利用した話者認識手法を示すことができ,更には,話者認識に有効な特徴量変換を導入することによって,話者認識性能の向上に寄与できるものと考える.音声中に含まれる個人性情報は、声道の伝達特性に由来するスペクトル包絡情報と声帯振動に由来する基本周波数などの韻律情報に大きく分けることができる。この韻律情報は、発声者が意図的に変化させることができる特徴量であるため、これまで話者認識に利用されることは少なかったが、伝送系の影響を受けにくいなどの利点があるため最近注目されつつある。そこで本研究では、発声様式をさまざまに変化させた音声資料を収集し、発声様式の変動が韻律情報に関連する特徴量にどのような影響を与えるかについて調べるものである。本年度は、発声様式を変化させて31名の話者(成人男性27名、成人女性4名)の音声を収録した。収録は、無響室内で行い、コンデンサマイクロホンを通した音声と電話回線を通した音声を同時に収録した。発声内容は5母音を含む30秒程度のフレーズである。発声様式は、発話速度、発声時の音量、声の高さを変化させることとし、各状態における音声を3回発声させた。収録は2時期に亘って行い、時期差を2ヶ月程度とした現在、収録した各発話状態における音声資料を、コンピュータに取り込み、ファイル化する作業を行っている。ファイル化したデータの一部を周波数分析し、基本周波数を調べた結果、声の高さと大きさの間に関係があることが推察された。今後は、更に音声資料のファイル化を行い、発話速度、発声時の音量、発声時の音域などの発声様式の違いが各種特徴量の変動範囲に与える影響を明らかにし、各種特徴量を話者認識に取り入れることの有効性などについて検討を行う。音声中に含まれる個人性情報は、声道の伝達特性に由来するスペクトル包絡情報と声帯振動に由来する基本周波数などの韻律情報に大きく分けることができる。本年度は、まず、発声様式として、通常の発話(普通発話)及び話す速さ、声の高さ、声の大きさをそれぞれ変化させて収録した音声資料をコンピュータに取り込み、周波数分析を行い、基本周波数を調べた。

各発話様式における平均基本周波数の話者平均と普通発話における平均基本周波数の話者平均との比を求めた結果、大きな声で発声すると基本周波数が高くなるという既知の知見を再確認した.次に,各話者,発話毎の基本周波数の頻度分布及びその発話様式における平均基本周波数で規格化した頻度分布をそれぞれ求め、比較したところ、発話様式の違いによって基本周波数の頻度分布は大きく変化するが,平均基本周波数で規格化することによってそれらの違いがかなり小さくなることがわかった.したがって、発話様式の違いによって基本周波数は強く影響を受けるが,その発話時の平均基本周波数で規格化することによって,発話様式に頑健な周波数分析の可能性があることが示唆された.次に、単語音声による話者照合において、動的計画法における経路情報を利用する効果について検討したところ、従来手法に比べると照合性能は落ちるが、経路情報単独でもある程度の話者照合は可能であると考えられたので、今後は、経路情報の有効な利用法についても検討する必要があると考える。
日本古代の社会統合と国家形成

2013年度は、前年度からおこなってきた、5世紀から8世紀の地城社会における統合のあり方についての研究を継続しつつ、それらを総括して国家形成史研究への位置付を図った。地域史研究の一環として、大阪府(海会寺跡)、千葉県(芝山古墳群、香取)、茨城県(鹿の子C遺跡、鹿島)、新潟県(佐渡国分寺)、広島県(宮の前廃寺跡)、栃木県(上神主茂原官衙遺跡)、福岡県(大野城跡、宗像)さらには韓国(慶州・光州・ソウル)の各地で実地調査をおこなった。いずれも集落や古墳、窯址、寺院、官衙の立地などを総合的に把握するとともに、出土文字資料を含む関連資料を実見することができ、古代社会像を描くうえで有益な成果であった。以上のフィールドワークによって得られた調査成果を活用し、文献史料の分析によって7世紀以前における社会統合について研究を実施した。その一環として、これまでに俎上にあげてきた陶邑古窯跡群の形成過程について検討し、その成果は溝口優樹「氏族分布からみた初期陶邑古窯跡群」(『日本歴史』784号、2013年9月)として公表している。8世紀の地域社会をめぐっては、「大野寺土塔と瓦生産」(明治大学古代学研究所公開シンポジウム、2013年6月8日)、「行基集団の構造とその原動力」(国造研究会、2013年6月1日)として口頭報告をおこなった。さらに、前年度までの成果をまとめ、その要旨を「日本古代の地域社会」(中国日本国際歴史文化研究会、2013年9月17日)として口頭報告をおこない、さらに博士論文「日本古代の社会統合と国家」を國學院大學に提出し、博士(歴史学)の学位を取得した。(抄録なし)2012年度は7世紀以前の地域史研究に関わる史料やそれに関わる地域の調査と行基関連施設の調査・研究を中心におこなった。前者に関連するものとしては、九州・中国地方を主な対象とし、具体的には清原古墳群、牛頸窯跡群出土刻書須恵器、宇佐神宮、防府天満宮、周防国分寺、佐波神社、長登銅山出土木簡、岡田山古墳群と岡田山一号墳出土大刀銘、出雲大社、土師百井廃寺、智識寺・鳥坂寺跡、百舌鳥古墳群等の実地調査・見学をおこなった。また、後者に関連するものとしては泉橋寺、山崎院跡、大野寺土塔、竹林寺の踏査をおこなった。いずれも古墳や窯址、寺社、官衙の立地などを把握するとともに、出土文字史料の実見をおこなうことができ、具体的な古代社会像を描くうえで有益な成果であった。以上のフィールドワークと併行して、文献史料の分析に基づき、7世紀以前における倭王権の地域支配について研究を実施した。その一環として67世紀における三輪君氏と須恵器生産の再編について検討をおこない、その成果は溝口優樹「三輪君と須恵器生産の再編」(『国史学』206・207合併号、2012年)として公表した。さらにその成果をふまえて歴史学研究会古代史部会で「部制の成立とその構造」(2012年10月20日)と題する口頭報告をおこなった。これらの研究によって、倭王権による地域支配の具体的様相が明らかになりつつある。また、行基関連施設、特に大野寺土塔の実地調査や文字瓦の分析をふまえて、土塔を造営した知識集団の労働編成や財源、その構造などについて検討をおこなった。その成果は溝口優樹「大野寺土塔の知識と古代地域社会」(『ヒストリア』2013年)として公表した。行基集団が形成される史的背景を明らかにするための足がかりとして意義があるといえる。

2012年度に計画をしていた57世紀における社会統合について、事例研究を1編の論文として公表し、現在はそれを総括する段階にある。また、2013年度に研究を進める予定であった、78世紀の知識(仏教を信仰する人々の集団)に関する社会統合について、一部研究に着手し、その成果として既に論文を公表している。今後は7世紀代の寺院址や文字瓦を中心として、日本列島各地、さらには韓国の仏教に関連する遺跡や史料に関する調査・分析を進実施する。そのうえで、78世紀の仏教信仰を介した社会統合のあり方について、これまでの研究成果をまとめ、総括的な研究を進める。さらに、これまで実施してきた研究成果の総括をおこない、日本古代史を通時代的に「社会統合」という観点から捉え直しを図る。(抄録なし)
多重アノ-ド光電子増倍管を使ったRICH検出器の実用化への検証

1.本科研費により行った研究経緯の概略。256チャンネルに分割された位置感応(多重アノ-ド)型光電子増倍管をシングル光子検出部に組み込んだリングイメ-ジ型チェレンコフ検出器(RICH)を試作した。平成3年6月および12月に東大原子核研究所電子シンクロトロン実験室にて高エネルギ-電子ビ-ムを利用し、光子検出部の実用化に向けた性能評価を行った。解析は広島大学にて行った。2.本研究による成果として明らかになったこと。(1)高計数率(1k事象/秒)の下でも高い検出効率(約95%)にて、バックグランドの少ない綺麗なチェレンコフリングを検出することに成功し、RICH検出器の光子検出部として実用できることを検証した。(2)1事象当たり約37個のチェレンコフ光子を検出した。この結果から本光電子増倍管のシングル光子に対する明るさは1901/cmであることを初めて明らかにした。この「明るさ」は、実用化に向けRICH検出器をデザインする上で最も基本的で重要な数値である。(3)ニュ-ラルネットワ-ク型のアルブリズムを適応し、高速・高効率なチェレンコリングのパタ-ン認識ソフトウェアの開発準備研究を行った結果、本研究にて得られた実験デ-タに対し約80%のリング識別機能を有すことが解り、オンライン・オフライン解析に有効な手段であることを発見した。3.本研究により明らかにされた問題点および今後の展開。(1)RICH検出器を実用化する場合、数千から数万本の電気信号を取り扱わねばならない。効率良い信号処理・読み出し方法を開発する必要がある。(2)高度な実験を可能とするためには、オンラインでの最終トリガ-として機能できる、チェレンコフリングのパタ-ン認識方法を開発する必要がある。(3)本研究代表者は、これらの問題点を然るべき補助を受け(科学研究費試験研究Bに申請中)、解決して行きたいと考える。
ヒト胆道上皮細胞のコラーゲン・ゲル上継代培養による純粋培養法の確立

1)ヒト胆嚢粘膜移植片(microexplant)の作製:胆石症の診断で,開腹手術により摘出された胆嚢を,直ちに無菌的に切開し,胆汁を流出させた.粘膜面に付着した胆汁成分を滅菌ガ-ゼで拭き取り,氷冷ハンクス液で充分洗浄した後,肉眼的に著変のない部位を選んで,粟粒大の粘膜片を線維筋層を含まないように剥離切除し,微小移植片(microexplant)を得た.2)ヒト胆嚢粘膜上皮の初代培養系の確立:作製したmicroexplantをI型コラーゲン・ゲル上に静置し,15%牛胎児血清添加培養液(DMEM/HamF12)を重層し,5%CO_2インキュベータ-内に初代培養した.ほとんどのmicroexplantはコラーゲン・ゲルに接着し,培養2日にはヒト胆嚢上皮細胞が周囲のコラーゲン・ゲル上に増殖するのが位相差顕微鏡で確認できた.上皮細胞は培養7日までコラーゲン・ゲル表面を進展増殖し,培養面積が増加したが,以後はコラーゲン・ゲルから剥離し,培養面積は縮小した.移植片が小さいほど間質細胞の増殖は少なく,12週間では上皮の増殖に与える影響は少なかった.上皮細胞の形態は扁平であり,in vivoのごとく円柱状のものはみられなかった.また,粘液産生像は認められなかった.3)培養上皮細胞へのHLA-DRおよび接着分子の誘導:培養4日目に培養液中にインターフェロン-gamma(100ng/ml)を添加して一週間培養し,培養上皮細胞にHLA-DRおよびICAM-Iの発現誘導を試みたが,凍結切片を使用した酵素抗体法では検出できなかった.1)ヒト胆嚢粘膜移植片(microexplant)の作製:胆石症の診断で,開腹手術により摘出された胆嚢を,直ちに無菌的に切開し,胆汁を流出させた.粘膜面に付着した胆汁成分を滅菌ガ-ゼで拭き取り,氷冷ハンクス液で充分洗浄した後,肉眼的に著変のない部位を選んで,粟粒大の粘膜片を線維筋層を含まないように剥離切除し,微小移植片(microexplant)を得た.2)ヒト胆嚢粘膜上皮の初代培養系の確立:作製したmicroexplantをI型コラーゲン・ゲル上に静置し,15%牛胎児血清添加培養液(DMEM/HamF12)を重層し,5%CO_2インキュベータ-内に初代培養した.ほとんどのmicroexplantはコラーゲン・ゲルに接着し,培養2日にはヒト胆嚢上皮細胞が周囲のコラーゲン・ゲル上に増殖するのが位相差顕微鏡で確認できた.上皮細胞は培養7日までコラーゲン・ゲル表面を進展増殖し,培養面積が増加したが,以後はコラーゲン・ゲルから剥離し,培養面積は縮小した.移植片が小さいほど間質細胞の増殖は少なく,12週間では上皮の増殖に与える影響は少なかった.上皮細胞の形態は扁平であり,in vivoのごとく円柱状のものはみられなかった.また,粘液産生像は認められなかった.3)培養上皮細胞へのHLA-DRおよび接着分子の誘導:培養4日目に培養液中にインターフェロン-gamma(100ng/ml)を添加して一週間培養し,培養上皮細胞にHLA-DRおよびICAM-Iの発現誘導を試みたが,凍結切片を使用した酵素抗体法では検出できなかった.