hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
歯科用コーンビームCTのQuality control法の確立

平成29年度までに、歯科用コーンビームCT(CBCT)装置、3D Accuitomo 80 (Morita, Kyoto, Japan)、Veraviewepocs 3Df (Morita, Kyoto ,Japan)、CS9300 (Carestream,USA)で、既存のファントム(ヨーロッパのガイドラインに比較的準拠したSEDENTEXCTのIQファントムと歯科医学会プロジェクト研究で作製した歯科放射線学会所有のファントム)を撮影し歯科用コーンビームCT装置の特性を比較した。これを元に、既存ファントムの不足点や改良点を吟味した。その結果ファントムの材質が骨に近い方が良いと考えられ、人工ハイドロキシアパタイトを用いて新たなファントムを作成し計測をおこなった。ファントムの濃度は気孔なし(緻密体)、気孔30%、気孔50%、気孔85%の4種類とした。解像度を決定するためのファントムはそれぞれの濃度のハイドロオキシアパタイトに直径0.8mm、1.0mm、1.25mmの穴があいているものを作成した。グレイ値直線性を見るためのファントムは前述の4種の気孔率で均一なものを作成した。これを2種のCBCT装置で撮影した。その結果、解像度は2種で異なることが明瞭に観察された。グレイ値の直線性は1機種では比較的良好で会ったが、もう1機種ではやや不良であった。この結果を中間報告としてH30年度の国際歯科学会総会(ロンドン)で発表した。しかしながら、ハイドロオキシアパタイトは機械的安定性が低く破損しやすいことが実験操作中に明らかになった。特に小さな直径の穴で計測する解像度の測定には不向きなため、別の材質を検討した。その結果CT値が骨に近いテフロンが適切であるとわかり、これを使って解像度の測定用ファントムを作成した。また、ImageJを用いて客観的評価方法を作成している。当初の計画と比較すると、解像度の測定用ファントムを再製作したためその分研究の進行が少し遅れている。ただ、すでに新しいファントムを用いて2機種の歯科用コーンビームCTで測定をおこなっておりその結果は順調であった。またImageJを用いての半自動測定方法もまとまってきた。H31年度にこれをまとめ学会にて公開する予定である。ここまでわずかに遅れている程度なので、H31年度は研究データの最終的なまとめと公開を考え、下記の点に重点を置いて研究を推進する。(1)測定用プログラムの作成:作成した特製ファントムに対応するように作成したImageJのマクロVisual Basic for Application of Excelの画像解析および計算処理処理プログラムのバグフィックス・ブラッシュアップをおこなう。(2)特製ファントムによる画質測定と品質管理:特製ファントムによるこれまでの測定結果をまとめ、ファントムの有用性を明らかにする。(3)成果をフィラデルフィアで開催される国際歯顎顔面歯科放射線会議にて発表する。現在あるCBCTファントムのうち比較的信頼できると考えられる2つのファントムのうち、ヨーロッパのガイドラインに比較的準拠したSEDENTEXCTのIQファントム(ファントムA)と歯科医学会プロジェクト研究で作製した歯科放射線学会所有のファントム(ファントムB)とを用いて、歯科用コーンビームCT(CBCT)装置の特性を測定した。実施した装置は3D Accuitomo 80 (Morita, Kyoto, Japan)、Veraviewepocs 3Df (Morita, Kyoto ,Japan)、CS9300 (Carestream,USA)とした。ピクセルのグレイ値の評価では、比較としてMultidetector CT (MDCT, Hi Speed QXi, GE yokogawa, Tokyo, Japan)を用いた。結果は、画像の均一性では、一部の装置の辺縁で不均一であった。ノイズは装置により大きな違いがあった。多数の装置は線量が多いとノイズは低下したが、線量を増加してもノイズがそれほど変化しない装置もあった。幾何学的歪みは、FOVの中心部は認めなかった。FOVの辺縁部でひずみを認める装置があった。各機種のグレイ値とMDCTのCT値の間に直線が描け、良好な相関が認められた。コントラスト分解能および空間分解能はこのファントムで測定できない機種もあった。ボクセルサイズとは直接の相関は認めないものもあった。これらより、特にコントラスト分解能と空間分解能を組み合わせて限界まで測定できるファントムの必要性が示唆された。これを元に、新たなファントムの設計図を作成した。H29年度はこの設計図を元にファントムを試作する予定である。当初の計画では、H28年度は既存のCBCT用ファントムで複数のCBCT装置で物理的特性の計測を行うこと、その結果を元に新たなファントムの設計を行うこと、が予定されていた。計画通りに複数のCBCT装置で計測を行い、有意義な結果が得られた。それを踏まえて新たなファントムの設計まで進んだので、ほぼ計画通りの進行である。歯科用コーンビームCT(CBCT)装置、3D Accuitomo 80 (Morita, Kyoto, Japan)、Veraviewepocs 3Df (Morita, Kyoto ,Japan)、CS9300 (Carestream,USA)で、既存のファントム(ヨーロッパのガイドラインに比較的準拠したSEDENTEXCTのIQファントムと歯科医学会プロジェクト研究で作製した歯科放射線学会所有のファントム)とを撮影し歯科用コーンビームCT装置の特性を比較した。これにより得られたデータを元に、既存ファントムの不足点や改良点を吟味した。その結果ファントムの材質が骨に近い方が良いと考えられた。そこで新たなファントムを試作した。これは人工ハイドロキシアパタイトを用いることとした。

その濃度は気孔なし(緻密体)、気孔30%、気孔50%、気孔85%の4種類とした。解像度を決定するためのファントムはそれぞれに濃度のハイドロオキシアパタイトに直径0.8mm、1.0mm、1.25mmの穴があいているものを作成した。グレイ値直線性を見るためのファントムは前述の4種の気孔率で均一なものを作成した。これを2種のCBCT装置で撮影した。その結果、解像度は2種で異なることが明瞭に観察された。グレイ値の直線性は1機種では比較的良好で会ったが、もう1機種ではやや不良であった。さらに、解像度の決定を自動で処理できるようにプログラムの検討を開始した、現在までの所NIH ImageJを利用してプラグインを作成した方が最も正確で、かつ本ファントムを公開した場合に不特定多数が簡便に利用できることが推察された。H30年度はこのプログラムを開発してCBCTファントムとともにして、簡便にCBCT装置の能力の測定ができるようにまとめる予定である。当初の計画と比較すると、1つにはH29年度は新たなファントムを作成しそのファントムを用いて歯科用コーンビームCT(CBCT)装置の比較をおこなう予定であった。2機種について比較をおこないこの部分ではほぼ予定通り進行している。ただ、コンピュータプログラムを作成し、自動測定ができるようにする部分では、プログラムの作成と検証がやや遅れいている。特に簡便なプログラムの作成にはラップトップPC程度のパソコンでおこなう必要があるため、H30年度はPCを購入して研究を進める予定である。平成29年度までに、歯科用コーンビームCT(CBCT)装置、3D Accuitomo 80 (Morita, Kyoto, Japan)、Veraviewepocs 3Df (Morita, Kyoto ,Japan)、CS9300 (Carestream,USA)で、既存のファントム(ヨーロッパのガイドラインに比較的準拠したSEDENTEXCTのIQファントムと歯科医学会プロジェクト研究で作製した歯科放射線学会所有のファントム)を撮影し歯科用コーンビームCT装置の特性を比較した。これを元に、既存ファントムの不足点や改良点を吟味した。その結果ファントムの材質が骨に近い方が良いと考えられ、人工ハイドロキシアパタイトを用いて新たなファントムを作成し計測をおこなった。ファントムの濃度は気孔なし(緻密体)、気孔30%、気孔50%、気孔85%の4種類とした。解像度を決定するためのファントムはそれぞれの濃度のハイドロオキシアパタイトに直径0.8mm、1.0mm、1.25mmの穴があいているものを作成した。
中学校社会科における文化的多様性と宗教に関する学習の課題

1.研究の目的宗教に関する学習については、公教育における政教分離や宗教に無自覚な社会状況から議論が避けられてきた面があり、欧米と比較し、日本のエスニックマイノリティの受容の課題の中でも論じられることは少なかった。しかし、イスラム教圏の外国人児童生徒の受入れなど、グローバル化、多文化化が進行する中、多文化教育の視点から、宗教と生活の関わりや宗教への寛容を学ぶカリキュラムを改めて検討する必要がある。中学校社会科におけるモデルプラン作成をめざし、育成したい資質・能力の検討とともに、価値観の対立について考える授業実践を試みたい。2.研究方法(1)中高教科書における宗教に関する記述の調査。欧州評議会が示した宗教的多様性を扱う異文化間教育のねらい(「寛容tolerance」「相互性reciprocity」「市民的見識civic-mindedness」)や事例の調査。(2)宗教に関する理解や意識に関する生徒対象質問紙調査(3)ハラルなど食のタブーや刺青など、伝統や信仰に関わる生活文化を取り上げた地理的分野の授業実践。身近な宗教施設の資料や映像を用いた歴史的分野の授業実践(4)伊勢神宮、名古屋モスク等で収集した資料を教材化し、日本の文化的土壌を捉えたり、宗教的多様性をめぐる価値観の対立と寛容について討論する授業の検討。3.研究成果教科書における宗教に関する記述は増加しているが、事例や扱いは偏りがちである。ISの報道もあり、生徒の関心は高まったが、先入観や曖昧な理解も多く、自文化対他文化という構図で捉えがちである。地歴公の三分野のねらいを明確にしながら、多様な宗教を比較したり、対立の解決について討論する協働的学習の場面を設定することで、多様な価値観に気づく効果がみられた。
医療者側から転院や退院をすすめられた癌患者とその家族の心理過程の分析

本研究は、がん患者やその家族が医療者側より転院や退院をすすめられたときに、転院先や退院を選択するまでの心理過程を明らかにし、がん患者とその家族に対して看護が果たすべき役割について検討することを目的とした。本年度は、データ収集及び分析を行った。対象者は患者2例と在宅で看取った家族8例であった。インタビューは外来及び自宅で行い、それに要した時間は40分から120分であった。インタビューガイドを用いて半構成的質問を行い、内容は対象者の許可を得て録音した。テープから会話の内容を逐語的に記述し質的に分析した。その結果、医療者側から転院や退院をすすめられた時、対象者は動揺するが、その受け止め方や行動は3つに分類できた。一つは患者の家に帰りたい希望を叶え、残された時間にできる限りのことをする覚悟を決めて在宅を選択した「前向き群」。次に医師から他の患者が入院を待っているとの説明や入退院数の多さ、自分の経験からもしかたないとの思いから、近医への転院を選択した「入院待機患者の為にやむをえない群」。更に患者が治療を断ったため入院の必要がない、あるいは治療法がないと言われ、医師が見放すなら何とかする思いで在宅を選択した「見放された群」である。しかし、見放されたと受け止めても、入院中からの在宅医・訪問看護師との関わりや在宅への病棟看護師の訪問、その後の関わり方によって、次第に感謝の気持ちへ変化した事例もあった。これら療養の場選択の影響要因として、患者の病状や余命に対する認識、患者・家族の生き方、必要時再入院の保証、同室者や医療者との関係、入院生活の不自由さ等があげられた。また、対象者の国に対する要望として、在宅ホスピス医の増員、経済的支援、ホスピスのショートステイ、在宅ホスピスの啓蒙、がん治療法とその専門医や症例数及び民間療法に関する公的機関からの情報提供、精神的ケアを提供する専門看護師の育成等があげられた。本研究は、がん患者やその家族が、医療者側より転院や退院をすすめられたときに、転院先や退院を選択するまでの心理過程を明らかにし、がん患者とその家族に対して看護が果たすべき役割について検討することを目的にしている。本年度は、文献検討後、インタビューガイド、研究協力の依頼文書、同意書を作成した。平成13年7月に本大学の研究倫理委員会に研究計画書の審査を依頼し承認された。その後、福島県内の病院に研究協力を依頼し、3病院から調査協力の内諾を得て、10月よりデータ収集を開始した。対象者の条件は(1)成人・老人のがん患者とその家族、(2)がん診断名は問わないが、がんの告知を受けている、(3)医療者側から転院・退院をすすめられている、(4)研究に同意を得られていることである。サンプル数は約10名を予定しているが、現在の所2名しかインタビューが行われていない。その2名は60代の男性と女性であり、2名とも大学病院から総合病院に転院され外来通院中であった。このような研究の条件を満たす対象者が少ないため、今後は外来通院中の患者だけでなく、現在、療養の場として、在宅、緩和ケア病棟、ホスピス、一般病棟などを選択している対象者にまで条件を拡大して、データ収集を継続し、研究の完了に努めていきたい。
組成変調アモルファス合金膜の磁気的性質に関する研究

人工格子膜あるいは組成変調膜(周期的に組成の異なら原子属からなる膜)では、通常の薄膜では得られない性質が期待される。本研究では、磁性材料に特有であり応用上も重要な交換相互作用と磁気異方性に注目し組成変調膜の性質を調べた。その結果、Gd/Co人工格子における超格子スピンフロッピングやErCo組成変調膜における垂直磁化など興味ある現象を見いだした。〈1〉Gd/Co多層膜に関する研究、真空蒸着法によるGdとCoを交互に室温基板上に積層したところ、周期19A以上ではx線小角散乱により周期構造が認められた。またオージェ電子分光によって膜中の酸素量を調べたところ、その量は少なくGdは金属として存在することが確かめられた。室温で飽和磁化は周期100A以下ではアモルファス合金の値にちかづいているが、100A以上ではCoのみの磁化の大きさに漸近した。磁化曲線は膜の磁化が面内にあることを示したが、周期150A以上の膜では、低温、高磁界のもとで、磁化が急増する現象がみられた。分子場近似による計算機シミレーションの結果この現象は超格子スピンフロッピングであることが確かめられた。〈2〉ErCo組成変調膜の研究、スパッタ法による膜作成時に基板バイアス電圧を周期的に変組させることによって、膜厚方向に組成および構造の周期的変化をもった膜を作成することができる。ここでは既に報告されたTbCoのTbと4f電子雲の形状が対照的なErを用いた。ErCo合金は基板バイアスの有無にかかわらず面内磁化膜となるが、3060Aの周期でバイアス電圧を0/100Vと変化させたところTbCo組成変調膜の場合と同様垂直磁化膜が得られた。このことからCoも界面磁気異方性に関与していることが推定された。本研究ではアモルファス合金層からなる組成変調周期構造膜を試みる予定であるが、本年度は基礎段階として、作成と解析の容易な2元系の組成変調膜(各層は一元すなわち結晶)を作成し磁気的性質を調べた。(1)作成・構造;真空蒸着法によりGdとCoを交互に積層したところ周期19A以上では、X線小角散乱により周期構造の存在が確かめられた。またオージェ電子分光によると膜中の酸素量は少なくGdは金属としての磁性をもつものと考えられる。周期が250Aの膜について厚さ方向の元素プロファイルを調べた結果、Gd層内にCoがかなり拡散しているものと推定された。(2)磁気的性質:GdとCoの膜厚比を3:4として組成変調周期Dを変えた時、飽和磁化MsはDが100A以下では急速にアモルファスGdCo合金の値に近づく。一方、Dが100A以上ではMsはCoのみの磁化の値に向って除々に増加している。この結果は100A程度の合金層の存在を示唆している。(3)分子場近似による多層膜の磁化温度特性の尊出:最近接原子間相互作用だけを考慮して計算機シミュレーションを行った結果、Gd層は室温(ほぼキュリー温度と同じ)で、Co層から教えて3番目の層で磁化が約半分(バルクに比べて)、10番目でほぼ消失する。(4)上記結果を適用すると、100A程度の拡散層が存在すると考えると実験結果が説明される。(5)組成変動調膜に数KOeの磁界を加えたところ、磁化が急増する現象が見られた。これは反平行に配列したGdとCoのスピンが平行状態に変わるスピンクセップ現象と理解された。2.Tb-Co/Co組成変調

膜:予備的な実験では長周期(D200A)において周期構造を確認した。前年度作成したGd/Co多層膜の磁化過程について検討するとともに,新たにErCo組成変調膜を作成しその磁化過程を調べた.前年度作成した(Gd110〓/Co147〓)を12周期積層した膜においては, 80150Kの温度範囲で磁化曲線を測定すると一端飽和しかけた磁化が数KOe以上の磁界で再び急増する現象がみられた.この原因を調べる目的で,分子場近似を用いて磁化過程の計算機シミュレーションを行ったところ, GdのスピンがCoのスピンと反平行の状態から,磁界の増加とともにねじれたスピン配列の状態へと変化していく様子がみられた.また計算により求めた磁化曲線は実験結果と定性的に一致した.このことから実際の膜においても上記のようなGdスピン配列の転移が起っているものと推定される.基板バイアス変調スパッタ法により膜厚方向に組成の周期的変化をもつ膜を作成した.バイアス電圧を0V/100Vと交互に変化させた膜では, 8原子%の組成変調が得られた.この膜は組成変調周期が減少するにつれて垂直磁気異方性が増加し周期64〓では,磁化曲線において,膜面に垂直方向を容易軸とする磁化成分が見られた.この垂直磁気異方性の成因については現在検討中である.
電子線ホログラフィーによる精密形態評価法の開発

電子線ホログラフィー利用した、各種先端材料に対する精密形態評価法の開発を行った。まず、ホログラフィー実験システムのハードウエア開発として、加熱冷陰極型電子銃を備えた透過電子顕微鏡に0.6μmの白金ワイヤを導入してバイプリズム系を構築した。更に、高感度TVカメラを導入して、ホログラムを高精度かつ定量的に記録できるシステムを立ち上げた。ホログラムの精密解析のためのソフトウエアは以下の通り構築した。ホログラム解析用の専用コンピュータを活用して、ディジタル画像として得られたホログラムから位相の情報を抽出するプログラムを作成した。このプログラムは高速フーリエ変換を利用したもので、演算効率に優れ、汎用性の高いものである。また、ホログラムの観察に対しては、電子顕微鏡のレンズ系の操作を通して、最も鮮明度の高い干渉縞を得る実験条件も確立している。上記の手法を用いて、先端材料の精密形態評価を実施している。例えば、形態制御されたSiO_2粒子を用いて、従来厚さ測定に広く利用されてきた電子エネルギー損失分光法(EELS)と、ホログラフィーによる厚さ測定との比較検討を行った。その結果、EELSでは30nm程度以下の厚さ測定は難しくなるのに対し、ホログラフィーでは10nm以下の厚さに対しても測定可能であることを明らかにしている。また本研究では、SiO_2粒子のような絶縁体資料の観察でしばしば問題となる帯電現象の解析も行い、ホログラムのコンピュータシミュレーションと実験データの比較(残差因子の評価)により、帯電量を精度良く決定できる手法を開発した。電子線ホログラフィーの実験は、従来、冷陰極型電子銃を備えた電子顕微鏡や、像再生のための大がかりな光学システムを必要とし、評価の対象は制約されてきた。本研究において、ディジタル画像解析法やレンズ系等の操作により、電子線ホログラフィーが各種先端材料の精密形態評価に極めて有効であることが示され、研究の目的は十分に達成できたと言える。研究実施計画に基づいて以下の研究を行い、それぞれ重要な成果をおさめている。まず、加熱陰極型電子銃を備えた高分解能電子顕微鏡(既存)に、直径0.6μmのPt細線を導入し、ホログラムの形成に必要な電子線バイプリズム系を構築した。さらに、設備備品として購入した電子線ホログラム用高感度TVカメラシステムを導入し、電子線ホログラムを高感度、かつ定量的に記録することを可能にした。導入したTVカメラシステムに対しては、検出感度や各種記録モードに対する十分な特性評価を実施しており、電子線ホログラムに含まれる情報を高精度に記録する体制を確立した。また、既存の冷却・加熱ステージと組み合わせて、電子線ホログラムの温度依存性を動的に記録することも可能とした他、定量的な記録媒体であるイメージングプレートを併用することで、ディジタルデータ処理の精度を一層向上できることも確認している。以上の研究を通して、電子線ホログラムの定量解析を実施するための記録系に、大きな進展をもたらすことができたと言える。また、本年度は上記の記録システムを用いて、電子線ホログラムの最適撮影条件を決定するための各種実験を行った。具体的には、バイプリズムに印可する電圧を変えた際に、干渉縞の間隔がどう変化するかを詳細に調べており、今後の応用研究に極めて重要な基礎データを数多く得ることに成功した。また、ホログラム撮影が可能な観察倍率範囲についても詳しい調査・考察を行っており、これまでにない広範な観察範囲を達成するためのレンズ系改造も着手している。

これらの諸研究に並行して、ホログラムから位相情報を引き出す基礎的な解析も行っており、次年度以降の応用研究を行う上での重要な知見を得ている。平成12年度は以下の研究を行い、それぞれ重要な成果をおさめている。1.電子線ホログラムからの位相像の再生備品として購入したコンピュータシステムを用いて、電子線ホログラムに含まれる位相情報を高精度に抽出し、それを可視化する手法を開発した。具体的には、1024x1024ピクセルの大容量画像として記録したホログラムから、高速フーリエ変換を利用して位相成分を正確に抽出するシステムを構築できた。これら画像の演算に要する時間はごく短く、極めて汎用性の高い解析システムを作成することができた。2.ホログラムフリンジの解析精度の向上ホログラムの解析をより高精度化するために、電子顕微鏡の照射系レンズの励磁操作を行った。その結果、電子線の干渉性を高めるのに適した照射の条件が決定され、ホログラムのフリンジの可視度を格段に高めることができた。これによって、ごく微小な変化を伴うホログラムの解析や、厚い試料から位相情報を抽出する場合の精度を向上させることができた。3.試料帯電の精密解析セラミックスなどの絶縁体を観察する場合、電子顕微鏡観察中に試料が帯電を起こし、各種の実験に大きな影響を及ぼすことが知られている。本研究では、酸化物微粒子を用いて帯電がホログラムに及ぼす影響を詳細に調べた。その結果、試料の帯電に伴いフリンジに大きな変化が現れる効果を確認した他、絞りの挿入などにより本効果を抑制できることを見出した。また。フリンジに対する精密評価と電磁学的解析を組み合わせることで、帯電の量を定量的に求める方法を示すことができた。電子線ホログラフィーを利用した、各種先端材料に対する形態評価法の開発を行った。まず、ホログラフィ実験システムのハードウェア開発として、加熱礼陰極型電子銃を備えた透過電子顕微鏡に直径0.6μmの白金ワイヤを導入してバイプリズム系を構築した。更に、高感度TVカメラを導入して、ホログラムの高精度かつ定量的に記録できるシステムを立ち上げた。ホログラムの精密解析のためのソフトウェアは以下のとおり構築した。ホログラム解析用の専用コンピュータを活用して、デジタル画像として得られたホログラムから位相の情報を抽出するプログラムを作成した。このプログラムは高速フーリエ変換を利用したもので、演算効率に優れ、汎用性の高いものである。また、ホログラムの観察に対しては、電子顕微鏡のレンズ系の操作を通して、もっとも鮮明度の高い干渉縞を得る実験条件も確立している。上記の手法を用いて、先端材料の精密形態評価を実施した。例えば、形態制御されたSiO2粒子を用いて、従来厚さ測定に広く利用されてきた電子エネルギー損失分光法(EELS)と、ホログラフィーによる厚さ測定との比較検討を行った。その結果、EELSでは30nm程度以下の厚さ測定は難しくなるのに対し、ホログラフィーでは10nm以下の厚さに対しても測定可能であることを明かにした。また、SiO2粒子のような絶縁体試料の観察でしばしば問題となる帯電現象の解析も行い、ホログラムのコンピュータシミュレーションと実験データの比較(斬差因子の評価)により、帯電量を制度良く決定できる手法を開発した。
攻防の動きを学ぶ柔道の学習プログラムの開発

本研究の目的は、柔道の「攻防」を構成する動きのまとまりを明らかにするとともに、効果的な学習プログラムを開発することによって、これまで軽視されてきた柔道授業における戦術学習を提案することにある。研究にあたっては、初年度に柔道の「攻防の動き」に関する質問紙を作成し、柔道競技者を対象にした調査を行うこととする。研究2年目については、得られたデータにより柔道の「攻防」を構成する動きのまとまりを明らかにするとともに、それらを効果的に習得するための学習プログラムを試作する。最終年度については、中学校3年生高校の授業において学習プログラムを実施し、その学習効果を検証したうえで学習プログラムを完成させる。
CD28を介した補助刺激の構造を基にしたシグナル伝達機構の解明

ナイーブT細胞の成熟には、主要組織適合抗原(MHC)/T細胞受容体(TCR)複合体を介した抗原特異的なシグナルとB7/CD28複合体を介した補助刺激と呼ばれる抗原非特異的なシグナルの両方が必要である。我々は、前者のシグナル関わる分子として、MHCクラス2(Nature Immunology,2002)、LFA-3(Proc. Natl. Acad. Sci. USA,1999)の構造解析を行った。また後者の補助刺激の構造を基にした知見を得るため、B7-1細胞外ドメインの構造(Immunity,2000)、及びB7-1/CTLA-4複合体の結晶構造(Nature,2001)を明らかにした。更に補助刺激の構造を基にした知見を得る為、補助のシグナル伝達機構の構造を基にした解明を計画した。CD28の構造解析を試みているが、重度に糖修飾を受けている為、結晶構造解析に適した試料は得られていない。Wurzburg大学のグループがCD28に結合する9種の抗体を作成し、これらがTCRシグナルに依存して補助刺激を与えるものと、TCRシグナルのない状態でT細胞を活性化するものに大別されることを明らかにした。これらの抗体認識部位の同定を、Oxford大学及びWurzburg大学との共同研究で行った。構造既知であったCTLA-4からヒトCD28のモデルを作成し、その情報を基にマウスとラットのキメラCD28を作成して抗体の結合部位を同定した。この結果については、論文をJ. Exp. Med.に発表予定である。また、MHC/TCR複合体,CD2/LFA-3複合体,B7-1/CTLA-4複合体に関する認識機構についてNature ImmunologyにReviewを発表した。
植物の光合成リズムに合わせた間欠照明技術の開発

【研究目的】農薬の大量使用、第二に連作と多量の化学肥料投入のため、土地の老朽化が進んでいる。そこで時間・空間によらない生産、狭い土地での大量生産、無農薬栽培、連作障害がない、高品質の野菜栽培が可能といった利点がある植物工場が世界中で注目されてきている。このような観点に立ち植物工場システムをさらに普及させるためには、高能率化、省資源、省エネルギーなど環境整備が重要である。ここでは人工光源として、発光ダイオード(LED)の最適照射方法を見出すことを目的とする。【研究方法】16、19年度に自作した植物育成装置を使用し栽培を行う。光源は三波長合成白色LEDのうち青色+赤、緑蛍光体使用発光の高出力ものを用いる。水耕栽培養液は大塚ハウス1号、2号を適量に溶かしたものを使用し、ph計、ECメータで数値をモニターし安定化を図る。栽培植物に葉菜類のステムレタスを用いる。LEDの特徴の一つである間欠照明(パルス照射)を生かし、これまでの栽培実験からパルス周期が2,500Hzの時、生育が良かったことから2,500Hzに設定し、明期比率(デューティ比10、20、40、50、70、80%)をパラメータに、連続照射の場合との生育の相違(乾物重量、栄養素、葉緑素)を調べる。栄養成分の測定にはヨウ素を用い酸化、還元反応を利用した、ビタミンCの定量測定を行う。またリアルタイムで炭酸ガス、酸素濃度をモニターする。【研究成果】LEDの特徴を生かした間欠照明により、明期比率が70%を超えると炭酸ガス、酸素濃度の変化が認められるようになった。さらに連続照射と生育、栄養価の点でも遜色ないことが分かった。このことから完全制御型植物工場における照明の消費電力を3割程度削減することができると考えられる。
トリスタン物語における海事用語の研究

12世紀から13世紀にかけて創作された複数の『トリスタン物語』は、海と人間の宿命的なかかわりをモチーフとした最初の作品群である。この研究では、それぞれの作品に記述されている海事表現、とりわけ船舶と航海に関わる表現に考察を加え、それらが登場人物の内的現実にどのように関与しているかを明らかにした。また異なる地域や時代に生み出された作品相互の海事表現を比較検討することによって、中世の人々の海に対する意識の変遷を跡づけ、それぞれの作品に及ぼした影響について考察を加えている。今次申請の研究は、中世ヨーロッパにおいて創作された複数のトリスタン物語を取り上げ、作品中にみられる海事表現を相互に比較検討することによって、中世人の海に対する意識の変遷を跡づけ、人間と海との関わりの普遍的な原点を明らかにしようとするものである。研究実施計画書に記載のとおり、平成21年度は現存する一連のトリスタン物語うち、フランス詩人トマの作品のドイツ語への翻訳であるゴットフリート・フォン・シュトラースブルクの『トリスタンとイゾルデ』を取り上げて分析と検討を行った。その結果、この作品には、他のトリスタン物語には見られない航海に対する厳密で明確な姿勢が随所にみとめられること、またそれらが初期ハンザ同盟の商業交易における海事思想を強く反映したものであること、そしてその結果、物語本来の性格に変化を与えていることが理解された。すなわちトリスタン伝説で語り継がれてきた「命運を委ねる海」のテーマが、本作品においては「克服するべき海」という視座から語られはじめているのである。このことは、中世時代、特に12世紀末から13世紀にかけて大きな進展を見せた海事社会の変化を知る上で大変興味深い手掛かりを示すものと考えられる。また同時に、これより後に書かれた作者不詳の『散文トリスタン物語』にも影響を及ぼしたものと推察される。研究実施計画書にあるように、平成21年度後半には『散文トリスタン物語』の解読と分析にとりかかっている。すでに第1巻と第2巻についての作業を終えているが、全体が9巻にわたる長大な作品であるため、全体の把握に至るまでには多くの時間を要するものと見込まれる。本年度は昨年度に引きつづいて『散文トリスタン物語』13巻のテキストの読解作業を継続し、そこに見られる海事表現の分類と分析にあたった。『散文トリスタン物語』の特徴は『トリスタン物語』を壮大なアーサー王物語群に組み入れた点にあるが、結果として物語の地理的背景は、コーンウォール半島とブルターニュ半島、そしてウェールズに至る広範囲な地域にまで広がりを見せることになった。そこには海に隔てられた国々への移動のために海路の利用を余儀なくされた物語の登場人物たちが、あるいは順調な航海に恵まれ、あるいは遭難や漂流などのさまざまな海の難儀に遭遇する様子が描かれている。本年度の研究作業では、これらの航海にまつわる記述のすべてについて検討を加え、船舶の種類と運用、航海の旅程、艤装、海難事故など、本作品が成立したとされる13世紀当時の海上交通の実情を教える数多くのデータを収集することができた。またこの作業と並行して、アングロ=ノルマン語領域で創作された『トリスタン物語』諸作品から収集された海事事象にかかわる記述部分と、平成16年度、17年度科学研究補助金による研究によって申請者がすでに構築している「ヴァースの海事表現」データとの比較照合をおこない、『散文トリスタン物語』における海事表現の特徴と作者の表現意図を明らかにする作業を行った。その結果としてアングロ=ノルマン語領域における海事思想がどのようなものであったのか、またそれらの思想が一連の『トリスタン物語』の諸作品にどのような形で反映しているのか、そしてそれらの作品が、中世の北西ヨーロッパの人々の精神風土に、どのような影響をもたらしたのか等の諸問題について、いくつかの知見を得ることができた。中世のヨーロッパ社会において、海や浜辺は必ずしも推奨される暮らしの場ではなかった。むしろ海や浜辺は危険と悲惨に満ちた周縁的空間であり、そこで暮らす人々は根強い侮蔑と嫌悪の対象とされていた。とりわけ騎士階級においては、海を宗教的禁忌の空間ととらえ、溺死を恥辱と考える傾向が強かったと言われる。しかしこのような一般的な不評にもかかわらず、海を物語構造の要諦にすえた『トリスタン物語』は広く受容され、ついには中世における代表的な文学作品の一つとして評価を得るに至っている。今次申請の研究では、『トリスタン物語』を中世ヨーロッパにおける海洋への覚醒の証しとして位置づけ、主人公トリスタンを新たな海洋的人間像の創造という側面から捉え直すことによって、中世の人々の多くが抱いていた海の暮らしに対する強い不信の感情がどのように変化し、どのような過程を経て克服されていったのかという問題を解明することを主たる目的としている。

本年度は研究計画の最終年度に当たるため、平成21年度から考察を進めてきた数種の『トリスタン物語』を比較検討し、『トリスタン物語』という共通のプロットの枠組みの中で表明される航海技術や海事理念の変遷を、地域別、時代別に分析し、北西ヨーロッパにおける海洋的精神の醸成の過程を解明して、その結果を本年5月の研究報告書に取りまとめる作業をおこなった。この作業によって得られた知見のいくつかを挙げると、交易活動が隆盛期を迎えていた12世紀プランタジネット王朝下の詩人たちの作品には、海に活躍の場を求める新しい騎士像としてトリスタンを描き、人びとを海に対する覚醒へと誘おうとする意図が読み取れること。また13世紀のドイツ詩人ゴットフリート・フォン・シュトラースブルクの『トリスタンとイゾルデ』には、初期ハンザ商人のきわめて合理的な海事思想が濃厚に反映されていること。さらに13世紀のリュース・ド・ラとエリー・ド・バロンの作とされる『散文トリスタン物語』には、交通機関として常用されはじめた船舶の利用実態が描き出されていることなどである。
好酸球性炎症病態におけるシャルコー・ライデン結晶(galectin-10)の意義

この研究は、長年にわたって医師や病理学者の間で謎だったシャルコー・ライデン結晶の出現機構を、分子細胞学的な観点から初めて明らかにしたものである。端的には、好酸球が特殊な細胞死:ETosisを起こす過程でgalectin-10を制御しなくなり、最終的に細胞が崩壊することが結晶化の原因と考えられた。組織の電子顕微鏡では、結晶の出現とETosisが一致していることを種々の疾患で見いだした。また、好酸球性副鼻腔炎の組織には、重症度が上がるほどシャルコー・ライデン結晶が出現していることを示した。ヒト好酸球を用いたin vitroのタイムラプス顕微鏡観察では、結晶が出現する瞬間をとらえたことは、これまで誰も見たことのない所見として特に重要である。そのほか、galectin-10が細胞外小胞として放出されることも初めて見いだした。本論文はBlood誌においてEditorialだけでなく、表紙として取り上げられるなど高い評価を受けた。また、研究結果は一般向けにプレスリリースを行ったほか、教室のホームページにも掲載し、webジャーナルへの寄稿を行うなど、わかりやすく複数の媒体を介して発表した。昨年度の予定をおよそクリアし、シャルコーライデン結晶の成因について論文が発表できた。ETosisの重要性についてカナダの研究グループとともに総説を発表したほか、好酸球の機能について論文化を行った。galectin-10の血清濃度を検討するために健常者の血清を昭和大学との共同研究として収集している。この書類上の手続きと協力者を集めるために時間を要したため、研究期間を延長している。本研究では、これまでよくわかっていなかったシャルコー・ライデン結晶がどのように生成されるのかを明らかにし、これをもとに臨床的な意義を検討していく必要がある。本年度は昨年度に引き続いて末梢血から高純度分離した好酸球を用いて、シャルコーライデン結晶の試験管内モデルを検討した。その結果、好酸球の活性化によりETosisが起こること、ETosisによって細胞内のgalectin-10の局在が大きく変化すること、それに伴ってgalectin-10が結晶化してシャルコー・ライデン結晶が生成されることをはじめて発見し、その様子をタイムラプス顕微鏡で示すことに成功した。細胞を用いた検討では、シャルコー・ライデン結晶は透過型電子顕微鏡で電子密度の高い結晶構造として観察でき、galectin-10の免疫染色でも鮮明に検出できることが確認できた。この方法を応用して、実際の炎症組織におけるETosisとシャルコー・ライデン結晶の関連について検討を行い、症例数を増やして検討を継続している。病理医とも連携し、通常のヘマトキシリンエオシンによる組織染色を用いてシャルコー・ライデン結晶を検出できるかどうかも合わせて検討している。また、培養上清、細胞のライセート、血清を用いて、galectin-10の濃度を検討するために、ELISAキットで測定するための条件設定、基礎検討を行った。研究結果については論文化を進め、投稿に向けて準備中である。このほか、本年度は活性化した好酸球から産生されるmicrovesiclesの特徴を明らかにし、論文化を行った。おおむね仮説を裏付ける研究成果が得られている。臨床サンプルの解析、臨床データとシャルコー・ライデン結晶の存在との関連について、とりわけ免疫染色法の最適化により明確な評価法を得るための基礎検討を継続する。また、これまでに得られたデータをもとに論文化を目指す。新しく加入した共同研究者との追加実験を完遂するため一部の研究費を来年度にも使用するものである。当初予定していたELISAを用いた実験がサンプル収集を待っていたため持ち越しとなっているためであり、次年度に使用予定である。
超伝導ルータ用超高速パルス列発生回路の研究

次世代超伝導ルータをSFQ回路(磁束量子回路)で構成するときに用いる超高速のSFQクロックパルス列発生回路を研究した。具体的には、従来には無かった無限長でかつ高速のクロックパルス列を発生する回路を提案し、シミュレーションで動作確認を行った。またSFQパルスの伝送に用いるジョセフソン伝搬線路(JTL)の離散度とSFQ伝搬速度の関係を明らかにした。さらにJTLを伝搬するSFQパルスのくりかえし周波数の上限は、JTL前段の衝突回避回路の性能で決まることを明らかにした。また離散度の大きなJTLでは、JTL内に滞留したSFQが玉突き式に押されて伝搬する新しい伝搬モードがあることを見出した。<SFQ回路シミュレーション手法の確立>半導体回路用の市販の電子回路シミュレータ「マイクロキャップ11」を購入し、これに超伝導デバイス(ジョセフソン接合)のデバイスモデルを組み込み、超伝導SFQ回路のシミュレーションを可能とした。また、シミュレーションで頻繁に使用するDC-SFQ回路(半導体回路の関数波形発生器に相当)をセル化し、マクロモデルとしてシンボルを割り当ててシミュレータに登録した。これにより、大規模なSFQ回路を回路図ベースでシミュレーションできるようになった。<リングオシレータ型クロックパルス列発生回路の動作シミュレーション>SFQクロックパルス列発生回路の要素回路である、スプリッタ回路、コンフルエンスバッファ回路、ラダー回路のシミュレーション用回路モデルを作成し、正常動作を確認した。またこれらをJTL(ジョセフソン線路)でDC-SFQ回路と組み合わせたSFQクロックパルス列発生回路の回路構成を提案した。[電子情報通信学会ソサイエテチィ大会(東北大学)2015年9月発表]<新回路の考案>さらにこの回路で発生するクロックパルス列のくりかえし周波数の上限値を考察する過程で、あらかじめJTL内にSFQを溜めておき、これをプッシュすることでクロックパルス列を出力する方法「Pushモード」を考案した。この方法により、SFQがJTLを伝搬する過程で生じるクロックパルス列の揺らぎを取り除くことができると期待される。[電子情報通信学会総合大会(九州大学)2016年3月発表]超伝導SFQ回路用の回路シミュレータを作成し、SFQ回路の動作シミュレーションを可能にした。この項目については、当初の目標を達成した。リングオシレータ型のクロックパルス列発生回路の要素回路をシミュレーション用回路モデルとして作成し、動作を確認した。現在、全体回路のシミュレーション中である。この項目については、ほぼ順調に進展しており、次年度中には目標を達成できる見通しである。揺らぎの少ないクロックパルス列の発生方式として、新しく「Pushモード」を考案した。現在、このモードについて、シミュレーションを行っている。安定性、高速性、揺らぎの定量的評価などを次年度に行う予定である。<SFQパルス伝搬速度のJTL離散度依存性>SFQクロックパルスは、パルス発生回路から当該の論理回路まで、JTL(離散型ジョセフソン線路)内を伝搬させるが、今年度の研究では、JTLの離散度(LIJ積で表される)とSFQパルスの伝搬速度の関係を回路シミュレーションにより、明らかにした。その結果、従来用いられているJTLよりも高速でSFQパルスが伝搬する条件が存在することを見出した。また、この現象が生じるメカニズムを、周回電流モデルと機械モデルを用いて解析し、その原因が、ジョセフソン接合を含むインダクタンスループにおける磁束の量子化に起因することを明らかにした。<JTLの回路パターンによるSFQパルス伝搬速度設計法の提案>上記の現象を利用して、従来のJTLよりも高速でSFQパルスを伝搬させる方法として、JTLを構成するループ・インダクタンスLのパターン幅を広くすることを提案した。設計例では、Lを2倍にするとSFQ伝搬速度が約1.5倍に増加した。[電子情報通信学会総合大会(名城大学2017年3月)口頭発表]前年度に導入した回路シミュレータを用いて、SFQクロックパルスを伝搬させるJTL(離散型ジョセフソン線路)の離散度とSFQパルス伝搬速度の関係を調べた。その結果、従来から用いられているJTLの回路パラメータ値よりもさらに高速でSFQパルスを伝搬させる条件が存在することを見出した。またこの条件をJILの回路パターン設計で実現する方法を考案した。これにより従来のJTLよりも約1.5倍、高速でSFQパルスを伝搬させることが可能となった。来年度は、このJTLとSFQクロックパルス発生回路を用いて全体回路を構成し、シミュレーションにより、回路の安定性、高速性、ゆらぎの評価などを行う。、本研究で最終目標とする「超高速超伝導ルータ」では、SFQパルス列をSFQパルス列発生回路で生成し、ジョセフソン線路(JTL)を用いてターゲット回路まで伝搬させ、クロック信号として用いる。研究の初年度では、SFQパルス列発生回路の回路構成を提案した。ここでは、SFQパルス列の伝搬に離散型のJTLを用いるが、次年度では、この離散度(LIJ積で表される)とSFQパルスの伝搬速度の関係を回路シミュレーションにより求めた。その結果、従来のJTLよりも高速でSFQパルスが伝搬する条件が存在することを見出した。具体的には、JTLのループ・インダクタンスLのパターン幅を2倍にするとSFQ伝搬速度が約1.5倍に増加することを示した。最終年度においては、JTLを伝搬するSFQパルス列の時間周期は、伝搬中は不変であり、その周期は、SFQがJTLに入力するときに決まることを見出した。

そして、その周期は、SFQパルス列発生回路とJTLを接続する衝突回避回路(コンフルエンスバッファ回路)の性能で規定される。標準的なパターンルールを想定して、クロック信号の上限周波数をシミュレーションで求めたところ、約50[GHz]であった。この値は今までに実験結果として報告されている値とよく一致している。このことから、クロック信号の上限周波数をさらに引き上げるためには、衝突回避回路の性能向上が必要であることが分かった。本研究の計画では、最終段階で、パターンCADを購入し、SFQパルス列発生回路のマスクパターンデータの作成まで行う予定であったが、SFQパルス列発生回路の出力端の衝突回避回路の更なる性能向上を優先することとし、パターン設計は今後の課題とした。次世代超伝導ルータをSFQ回路(磁束量子回路)で構成するときに用いる超高速のSFQクロックパルス列発生回路を研究した。具体的には、従来には無かった無限長でかつ高速のクロックパルス列を発生する回路を提案し、シミュレーションで動作確認を行った。またSFQパルスの伝送に用いるジョセフソン伝搬線路(JTL)の離散度とSFQ伝搬速度の関係を明らかにした。さらにJTLを伝搬するSFQパルスのくりかえし周波数の上限は、JTL前段の衝突回避回路の性能で決まることを明らかにした。また離散度の大きなJTLでは、JTL内に滞留したSFQが玉突き式に押されて伝搬する新しい伝搬モードがあることを見出した。リングオシレータ型のクロックパルス列発生回路については、要素回路を組み合わせた全体回路のシミュレーションをおこなう。新しく提案した「Pushモード」については、シミュレーションにより、安定性・高速性を評価し、クロックパルス列のくりかえし周波数の上限値を明らかにする。また、発生したクロックパルス列の揺らぎを、シミュレーションで定量的に評価する手法を考案し、実施する。さらに、得られた回路パラメータを用いて、回路パターンの概略設計を行い、実回路への適用可能性を評価する。来年度は、この高速JTLとSFQクロックパルス発生回路を用いて全体回路を構成し、シミュレーションにより、回路の安定性、高速性、ゆらぎの評価などを行う。また、初年度に見出したSFQの新しい伝搬モードである「Pushモード」について、クロック回路やデータ転送回路への適用可能性について検討・評価する。超伝導エレクトロニクス、電子回路当初は、回路シミュレータを使用するために、処理能力に優れたワークステーションを購入する予定であったが、購入した回路シミュレータが、汎用のWindowsパソコンでも充分な速度で動作することが判明したので、ワークステーションの代わりに安価な汎用パソコンを購入したため。回路パターン設計用のCADソフトウエアを使うためのワークステーションを購入する予定であったが、この種のソフトが、安価なwindowsマシン上で動作可能であることが判明したため、そのパソコンを購入したので、費用が節約できた。回路シミュレータを動作させる汎用パソコンを追加で1台購入して、シミュレーションの効率を高める。
突然変異遺伝子を標的とした新規癌免疫療法の開発：ＫＲＡＳおよびＥＧＦＲでの解析

現在、細胞癌化の原因である変異遺伝子を標的とした個別化治療の開発が期待されている。特に、変異遺伝子は免疫系から“非自己"として認識されるため、免疫治療における格好の標的分子と思われる。本研究では、肺癌に高頻度に認められる上皮成長因子受容体(EGFR)のゲフィチニブ耐性変異(T790M)由来の抗原エピトープを2種、大腸癌に高頻度に認められる変異型KRAS(G12V)由来の抗原エピトープを1種同定した。本研究成果は、これらの変異遺伝子を有する難治性癌患者に対する新規免疫療法を提供するとともに、“変異遺伝子を標的とした個別化免疫治療"の発展に寄与するものと期待される。1. EGFR遺伝子のゲファチニブ耐性変異配列(T790M)を含む2種のHLA-A2結合ペプチドの存在下に、HLA-A2陽性の健常者の末梢血単核球(PBMC)を培養したところ、6人中5人(83%)および6人中3人(50%)にペプチド特異的なT細胞の誘導が可能であった。これらのペプチドに特異的なT細胞は変異型EGFR T790M遺伝子陽性かつHLA-A2陽性の肺がん細胞株に対して強い細胞傷害活性を示した。また、HLA-A2陽性肺がん患者17人のPBMCを用いて、同定されたHLA-A2結合ペプチドのCTL誘導能を検討したところ、ゲファチニブ感受性の患者では6人中3人(50%)、ゲファチニブ耐性の患者では11人中2人(18%)にペプチド特異的なT細胞の誘導が可能であった。これらの検討より、EGFR遺伝子のゲファチニブ耐性変異(T790M)由来でHLA-A2拘束性の新規抗原エピトープが2種同定された(特許出願中)。2.KRAS変異配列(G12V, G12A)を含む2種のHLA-A2結合ペプチドの存在下に、HLA-A2陽性の健常者PBMCを培養したところ、9人中3人(33%)および9人中2人(22%)にペプチド特異的なT細胞の誘導が可能であった。これらのペプチドに特異的なT細胞は変異型KRAS遺伝子陽性かつHLA-A2陽性の大腸がん細胞株に特異的に反応した。現在、大腸がん患者血液を用いて、同定されたペプチドの免疫原性を検討中である。3.変異型KRAS、変異型EGFRの突然変異配列を含み、HLA-A24あるいはHLA-A11に結合するペプチドの免疫原性を、HLA-A24陽性(5名), HLA-A11陽性(6名)の健常者PBMCを用いて検討したが、特異的なT細胞を誘導できる抗原エピトープは同定できなかった。1. HLA-A2陽性の非小細胞肺がん患者22人の末梢血単核球を用いて、昨年度までに同定したEGFR T790M配列を含む2種のHLA-A2拘束性抗原エピトープ(アミノ酸配列はMQLMPFGCLL, LIMQLMPFGCL)に対する免疫反応とT790M変異の有無(末梢血中の遊離DNAを用いてdigital PCR法にて検出)との相関を検討した。抗原エピトープに対して免疫反応を示さない患者15人中9人(60%)がT790M変異を有していたが、免疫反応を示す患者では7人中1人(14%)のみがT790M変異を有していた。この結果から、これらの抗原エピトープに対する免疫反応がT790M変異の誘導を抑制している可能性が示唆された。2.KRAS変異配列(G12C)を含むHLA-A2結合ペプチド(1種)の存在下にHLA-A2陽性健常者の末梢血単核球を培養したところ、9人中1人にペプチド特異的なT細胞の誘導が可能であった。この抗原エピトープ及び昨年度に免疫原性を確認した2種のKRAS変異配列(G12VあるいはG12A)を含むHLA-A2結合ペプチドに特異的なT細胞が、それぞれのKRAS変異配列(G12C、G12V、G12A)陽性でかつHLA-A2を発現した大腸がん細胞株へ反応するかどうかを検討した。G12V配列を含む抗原エピトープに特異的なT細胞はG12V陽性かつHLA-A2を発現した大腸がん細胞株と反応してサイトカインを分泌したが、G12C配列あるいはG12A配列を含む抗原エピトープに特異的なT細胞はそれぞれの変異が陽性でかつHLA-A2を発現した大腸がん細胞株に反応しなかった。以上の結果より、G12V配列を含む抗原エピトープはHLA-A2結合ペプチドとしてがん細胞表面に発現しているが、G12C配列あるいはG12A配列を含む抗原エピトープはがん細胞表面には発現していないものと示唆された。

本研究成果は、これらの変異遺伝子を有する難治性癌患者に対する新規免疫療法を提供するとともに、“変異遺伝子を標的とした個別化免疫治療"の発展に寄与するものと期待される。変異型KRAS、変異型EGFRを標的とした免疫療法を開発するために、健常者の血液を用いて、変異型KRAS、変異型EGFR由来ペプチドのCTL誘導能を検討した。具体的には、1.変異型KRAS(G12V, G12R, G12D, G12C, G13D)、変異型EGFR(exon21 L858R、exon19 E746-A750del、T790M)からモチーフ検索プログラムを用いて、突然変異配列を含み、かつ、HLA-A24, HLA-A2, HLA-A11に結合すると予測されるペプチドを21種類選択した。2.HLA-A24, HLA-A2, HLA-A11を強制発現した細胞株(T2細胞あるいはRMA-S細胞)を用いて、合成ペプチド21種の各HLA分子への結合能を解析した。1種のペプチドがHLA-A24に、6種のペプチドがHLA-A2に、7種のペプチドがHLA-A11に結合することが確認された。3.HLA-A24陽性健常者3人の末梢血T細胞を、HLA-A24への結合能が確認された合成ペプチド(1種)と共培養したが、ペプチド特異的なCTL株を誘導できなかった。HLA-A2陽性の健常者5人の末梢血T細胞を、HLA-A2への結合能が確認された合成ペプチド(6種)と共培養したところ、5人中2人において2種のペプチドに対する特異的なCTL株を誘導できた。現在、この誘導したペプチド特異的CTL株を用いて各種癌細胞株を標的とした機能解析(51Cr遊離試験)を実施中である。また、同様にHLA-A11陽性の健常者血液からペプチド特異的なCTL株を誘導できるかどうか検討中である。4.EGFR T790M変異に特異的なCTL細胞株の機能解析を実施するために、EGFR T790M変異を有する細胞株(NCI H1975)にHLA-A2遺伝子をtransfectした細胞株を作製した。交付申請書に計画した研究内容をおおむね順調に実施し、期待した結果が得られつつある。交付申請書に記載した「平成23年度の研究計画・方法」の大部分を実施することができた。交付申請書に計画した研究内容をおおむね順調に実施している。今後も研究計画に従って、研究を継続する予定である。平成23年度に計画した研究はおおむね順調に進んでいる。平成23年度に得られた研究成果をもとに、交付申請書に記載した「平成24年度以降の研究計画・方法」に従い、研究を継続する予定である。次年度も交付申請書に計画した通り、主として消耗品購入のために研究費を使用する予定である。本年度には当初予定していた研究発表のための旅費を使用しなかったために、約7万円(交付額の約4%)の研究費を次年度に使用することとなった。平成23年度に計画した研究はおおむね順調に進んでおり、交付申請書に記載した「平成24年度以降の研究計画・方法」に従って研究を継続するために、研究費を使用する予定である。