hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ナノスケール液中電位分布計測AFM技術の性能改善による実用性の向上

当該年度は、探針先端部にのみ導電性をもつAFMプローブを作製し、探針先端部以外の箇所に寄与する静電的相互作用を抑制できるかどうか調べた。まず、以下のような探針先端部のみ導電性をもつAFMプローブの作製手順を確立した。最初に、カンチレバー/探針全体にAuコートが施された市販のプローブの全面に、高周波スパッタリング装置を用いて、絶縁物(SiO2)を約100 nmコートした。次に、そのプローブと導電性試料(アルミ板)を電気的に接触させた状態で、コンタクトモードAFMを用いて探針先端のSiO2を除去した。SiO2が除去されたかどうかは、探針ー試料間に流れる電流値をモニターすることで確認した。これにより、先端部にのみ導電性をもつAFMプローブを作製した。この探針を用いて静電気力検出の性能評価を行った。比較用プローブも含めて、(1)市販のAuコートプローブ、(2)それにSiO2;をコートしたプローブ、(3)探針先端のSiO2を除去したプローブを用い、1 mM KCl水溶液中で探針ー試料間に周波数fmの交流電圧を印加することで探針ー試料間に生じる静電気力のfm成分(A1)をロックインアンプで検出し、そのfm依存性と距離依存性を調べた。fm依存性からは表面張力を示す成分が、特に低周波数側において、プローブ(2)と(3)で抑制されていることが分かった。距離依存性を見ると、プローブ(1)と(3)では、探針が試料に接触する直前でA1が増大するのに対し、プローブ(2)ではその様子が見られなかった。これらのことから、探針先端部のみに導電性を有するプローブが、絶縁膜によってカンチレバーの表面張力由来の不要な成分を抑制しつつ、探針先端部の静電的相互作用力を検出できる性能を有している可能性を示せた。当該年度は、当初の計画通り、先端部にのみ導電性を有するAFMプローブの作製手順を確立でき、そのプローブの評価を行うことで、液中電位計測の定量測定に有効性の一端を示すことができた。また、次年度実施予定の静電的相互作用力を支配的に検出できる可能性を有するヘテロダイン法に必要な周辺装置の準備も済ませており、次年度の研究も速やかに開始できる状態にある。引き続き、作製したプローブを用いて、探針ー試料間距離依存性の理論との比較や、実際のイメージングを行い、その性能を詳細に検討する。また、ヘテロダイン法による静電気力の支配的検出の可否についても検討する。さらに、空間・電位分解能を向上するイメージング技術に必要なソフトウェアの作製・導入も行う。本研究は、表面電位分布を液中かつナノスケールで可視化できるオープンループ電位顕微鏡の定量測定の信頼性向上と電位・空間分解能向上を目的とするものである。今年度は、探針先端にはたらく静電的相互作用力を支配的に検出することができる手法の開発に取り組んだ。そこでまず、導電性カンチレバー/探針を絶縁体でコーティングし、探針先端の絶縁コーティングをコンタクトモードで除去することで、探針先端部だけ導電性を有するようなカンチレバーの作製を試みた。そのために、高周波スパッタリング装置を導入した。絶縁コーティング材料として、今回は二酸化シリコン(SiO2)を選択し、まずはマイカ基板の上で成膜条件の検討を行い、100nm程度までの成膜条件を決定した。その後、カンチレバーに絶縁コーティングを施し、コンタクトモードによる絶縁膜除去の条件検討を行った。この続きは次年度に行う。一方、真空中ケルビンプローブフォース顕微鏡(KFM)測定では、ヘテロダイン法により、探針先端にはたらく静電的相互作用力を支配的に検出できることが報告されている。KFMと異なり、静電的相互作用力の1次と2次の変調周波数成分を利用して電位を求めるオープンループ電位顕微鏡でもヘテロダイン法が応用できるか検討した。その結果、理論計算上では、報告されたヘテロダイ法と同等のレベルで支配的検出が可能であることが示唆された。次年度、この結論を実験的に評価する。導電性カンチレバー/探針の絶縁コーティングに必要な高周波スパッタリング装置は非常に高額であるため、仕様決定するまでに複数の業者から話をしっかり聞く必要があったこと、入札、そして、導入までに業者と綿密な打ち合わせを必要としたことにより、納品まで予想以上に時間を要した。そのため、当初は探針先端部にのみ導電性を有するカンチレバーの作製とそれを用いた静電的相互作用力検出の評価まで行う予定であったが、そこまで到達することができなかった。今年度は、探針作製・評価に注力することで、これまでの遅れを取り戻す。

これにより、先端部にのみ導電性をもつAFMプローブを作製した。この探針を用いて静電気力検出の性能評価を行った。比較用プローブも含めて、(1)市販のAuコートプローブ、(2)それにSiO2;をコートしたプローブ、(3)探針先端のSiO2を除去したプローブを用い、1 mM KCl水溶液中で探針ー試料間に周波数fmの交流電圧を印加することで探針ー試料間に生じる静電気力のfm成分(A1)をロックインアンプで検出し、そのfm依存性と距離依存性を調べた。fm依存性からは表面張力を示す成分が、特に低周波数側において、プローブ(2)と(3)で抑制されていることが分かった。距離依存性を見ると、プローブ(1)と(3)では、探針が試料に接触する直前でA1が増大するのに対し、プローブ(2)ではその様子が見られなかった。これらのことから、探針先端部のみに導電性を有するプローブが、絶縁膜によってカンチレバーの表面張力由来の不要な成分を抑制しつつ、探針先端部の静電的相互作用力を検出できる性能を有している可能性を示せた。当該年度は、当初の計画通り、先端部にのみ導電性を有するAFMプローブの作製手順を確立でき、そのプローブの評価を行うことで、液中電位計測の定量測定に有効性の一端を示すことができた。また、次年度実施予定の静電的相互作用力を支配的に検出できる可能性を有するヘテロダイン法に必要な周辺装置の準備も済ませており、次年度の研究も速やかに開始できる状態にある。今年度は、前年度取り組む予定であった、探針先端部の絶縁膜除去の条件を確立する。具体的には、コンタクトモードAFMで探針先端を金属試料表面にこすりつけて絶縁膜を除去する。絶縁膜が除去できたかどうかは、探針ー試料間に電流が流れたかどうかで判断する。Deryloらはこの方法でも探針先端の曲率半径は大きくならず、空間分解能にあまり影響しないことを示している。次に、その探針を用いて、探針先端部にかかる静電的相互作用力を支配的に検出することができるかどうか検討する。探針先端、探針側面、カンチレバーにかかる静電的相互作用力の距離依存性は異なるため、静電的相互作用力の1次、2次の変調周波数成分の探針ー試料間距離依存性を測定し、それぞれの理論式と比較することで、探針先端成分の静電的相互作用力が予想通りに検出できているかどうか確認する。報告されているヘテロダイン検出法では、変調用交流電圧信号と、カンチレバーの励振信号と同期した信号を掛け合わせることで生じるそれぞれの周波数差の周波数をもつ交流電圧を探針ー試料間に印加する。このとき生じる静電気的相互作用力はその周波数成分を有する。一方、静電気力には距離依存性があり、探針の位置はカンチレバーの共振周波数で振動しているため、静電的相互作用力はカンチレバーの共振周波数で変調されている。そのため、静電的相互作用力には変調周波数成分が生じる。そこで、これらの動作が可能な装置を立ち上げ、オープンループ電位顕微鏡での応用が可能かどうか検討する。引き続き、作製したプローブを用いて、探針ー試料間距離依存性の理論との比較や、実際のイメージングを行い、その性能を詳細に検討する。また、ヘテロダイン法による静電気力の支配的検出の可否についても検討する。さらに、空間・電位分解能を向上するイメージング技術に必要なソフトウェアの作製・導入も行う。
北アイルランドにおける長期紛争経験と自然資源管理

本研究の目的は、イギリス領北アイルランドの都市ベルファストに隣接する丘陵地(ベルファスト丘陵)をめぐって、その土地を所有する人々とそこをレクリエーションのため利用する人々との間で生じている対立的状況、すなわち「農村アクセス問題」の実態について、この地域で長期にわたって続いた武力紛争の経験に注目しながら、明らかにすることである。本年度は、北アイルランドおよびベルファストの社会状況について文献による情報収集に努めると共に、8月27日9月7日と2月16日2月28日の二度にわたってベルファストおよびアイルランド共和国の首都ダブリンに渡航し、フィールドワークをおこなった。具体的には、まずベルファスト丘陵に関わる各セクターの代表者から構成される組織であるBelfast Hills Partnershipのマネージャーと、その理事会においてレクリエーション利用者を代表する理事数名へのインタビューをおこなった。さらに、ベルファスト丘陵に関わる取り組みをおこなっている複数のコミュニティ組織の担当者にもインタビューを実施した。また、公文書館・公立図書館・大学図書館等において、農村アクセスやベルファスト丘陵に関わる資料の収集をおこなうとともに、ベルファスト丘陵の主要なレクリエーションスポットを歩き回り、その利用・管理状況について把握した。現在までの調査から見えてきたのは、レクリエーション利用者、特にコミュニティ組織はしばしば、ベルファスト丘陵のレクリエーション利用を「紛争がもたらした地域の停滞からの脱出」という自らのプロジェクトを達成するためのひとつの手段として捉えているということである。他方で、インタビュー対象者の属性によって紛争や丘陵をめぐる経験には違いも見られた。上記の成果は、自然資源管理研究と紛争後社会研究の架橋を目指す本研究の足がかりとなるものである。当初の研究計画では、Belfast Hills Partnershipの理事会において各セクターを代表している理事らにインタビュー調査等を実施し、それぞれのセクターの活動や見解を比較する予定であった。しかし、現在までに調査協力を得られたのはレクリエーションセクターを代表する理事のみであり、行政セクターと土地所有者セクターを代表する理事からは、快い返事をもらえていない。特に土地所有者は本研究にとって重要な調査対象であるが、調査依頼のためのアクセスルートが限られており、いまだインタビューの見通しは立っていない。ベルファスト丘陵は広大な面積を有しており、その所有者・利用者は広範囲に渡っている。そして、本研究のため現地に渡航できる期間や費やせる資金は限られている。そのため、本研究が依拠する質的な調査方法では、Belfast Hills Partnershipのような組織を越えて全体状況を論じていくことはなかなか難しい。そのため来年度は、引き続きレクリエーション以外のセクターを代表する理事への調査ルートを探ることと並行して、今年度にインタビューをおこなったコミュニティ組織のうち目ぼしいものをいくつか取り上げて、より地域を絞ったインテンシブな調査の実施も試みたいと考える。また、Belfast Hills Partnershipやそれらのコミュニティ組織が主催するイベントの参与観察も実施予定である。1研究発表

「北アイルランドの農村アクセス問題・序説」、日本村落研究学会北海道地区研究会、2018年11月10日、於北海道大学2フォーラム「著者と語るアイルランド」、第26回アイルランド研究年次大会、2018年11月24日、於青山学院大学
体液イオン環境調節とNa,K-ATPase遺伝子の発現

Na,K-ATPaseのαとβアイソフォーム遺伝子のうち全組織でhouse keeping遺伝子として発現するα1、筋組織で発現するα2、神経細胞接着分子AMOGと同一物であるβ2の5′上流制御配列を、変異の導入等によりさらに詳細に解析した。α1:ARE[-102-61]結合タンパク質の検索の結果、ゲルシフト法でC1,C2,C3複合体が観察された。ARE領域をプロープとしたサウスウェスタンクローニングから、別に2種類の結合タンパク質が得られた。その一方であるAREB6は7個のZn-fingerとGluに富む領域をもち、そのmRNAは心組織や骨格筋に存在するが肝、膵、脾では検出されなかった。他方のタンパク質はすでに他の調節因子として報告のあるHEB(Huet al.,1992)であった。HEBやAREB6のcDNAを培養細胞にトランスフェクトした場合、α1遺伝子の転写への効果は、細胞株や発現量によって正負の両方であった。ARE内にはATF-1結合領域もあり、ATFの結合を確認した。以上のように、ARE領域に6種類以上の蛋白質が結合し複雑に相互作用する全体像が判明した。β2:ラット神経芽細胞腫由来のB103細胞で、特異的制御エレメントAMREをすでに同定していたが、新たに確立したラット脳アストロサイト初代培養細胞や、他の培養細胞株でも、転写制御エレメントとしてのAMREの活性が確認された。AMREに結合するタンパク質のうち一つは、Sp1結合コンセンサス配列を含むオリゴヌクレオチドにより結合が競合阻害される。さらに、抗Sp1抗体による結合阻害がみられた。Na,K-ATPaseを構成するαとβの両サブユニット遺伝子に多数のアイソフォームがあるうち、各組織で普遍的に発現して体液のホメオスタシス的維持を基本的に担っているα1と、心筋組織等に特異的で循環系を介しての体液制御で重要なα2と、さらに中枢神経組織で特異的発現の知られるβ2の各5'上流の転写制御領域、またこれらに結合する制御タンパク質の同定を研究した。α1では、転写制御エレメント(ARE)に結合するタンパク質(HEBおよびARE6)のcDNAをサウスウェスタン・クローニングし、大腸菌で発現させたHEBおよびAREB6を用いて、結合領域を解析した。またゲルシフト法で認められる3種類の複合体(C1,C2,C3)のうちC3構成タンパク質を精製し、100KDと5KDの2種のバンドのうちで、DNA結合能をもつのは100KDタンパク質であることを明かにした。α2上流域については、突然変異を組み込んだ遺伝子を培養細胞に導入した結果の解析から、少なくとも1個のE-boxと、合計3個のSp1および類似配列を含む領域が明かになり、最大転写活性のためにはSp1結合配列は協調的にはたらくことが判った。E-boxは抑制的エレメントであるが、結合するタンパク質はすでに報告されている因子とは異なる。Sp1に対する結合配列は、α1,α2,β2のいずれの遺伝子の制御領域にも認められるが、各アイソフォームの制御領域ごとに、結合配列の配置および数は異なっており、他の結合因子との相互作用も、アイソフォームごとに同一ではない。Na,K-ATPaseの発現制御による体液環境の維持は、多数の因子による複雑なネットワークを介して行われているという実態を、アイソフォーム遺伝子ごとの制御の特異性という面から示すことが本研究の眼目であり、その方向への本年の計画は、ほぼ予定の程度に遂行できた。Na,K-ATPaseのalphaとbetaアイソフォーム遺伝子各3種類のうち全組織で発現するalpha1、筋組織で発現制御が注目されるalpha2、神経細胞接着分子AMOGと同一物

beta2の各遺伝子の5'上流制御配列を変異の導入等により解析し、配列に結合する制御タンパク質同定とcDNAでトランスフェクトした細胞の解析を進めた。【.encircled1.】alpha1:ARE[-102-61]結合タンパク質として、ゲルシフト法でC1C3複合体が観察された。C1,C2は全細胞株で認められ、C3はMDCKとHeLa細胞にはあり、B103細胞やNamalvaでは検出されない。ARE領域をプローブとしたサウスウェスタンクローニングから、別に2種類の結合タンパク質を得た。一つ(AREB6)は部分配列既報のNi1-2-a(williams et al.,1991)が延長されたもので、7個のZn-fingerと、Gluに富む領域をもち、そのmRNAは心組織や骨格筋に存在し、肝、膵、脾では検出されない。他方のタンパク質はHEB(Hu et al.,1992)であった。HEBやAREB6のcDNAを培養細胞にトランスフェクトした場合、alpha1遺伝子転写への効果は細胞株や発現量により正負両様である。ARE内にはATF-1結合領域もあり、ATFの結合を確認した。ARE領域に6種類以上の蛋白質が結合し複雑に相互作用する全体像が判明してきた。【.encircled2.】alpha2:Sp1結合配列と類似配列GGGAGGと2個のE-boxを含む領域(-175-108)は筋芽細胞L6において数倍の転写促進活性を示す。Sp1結合による転写促進はKinetic synergism(Herschlag and Johnson,1993)モデルに適合する。促進にE-box結合タンパク質も関与する。【.encircled3.】beta2:ラツト神経芽細胞腫由来のB103細胞で、特異的制御エレメントAMREをすでに同定していたが、新たに確立したラット脳アストロサイト初代培養細胞や他の培養細胞株でも転写制御エレメントとしてのAMREの活性が確認された。AMREに結合するタンパク質のうち一つは、Sp1結合コンセンサス配列を含むオリゴヌクレオチドにより結合が競合阻害される。さらに抗Sp1抗体による結合阻害がみられた。Na,K-ATPaseのαとβアイソフォーム遺伝子のうち全組織でhouse keeping遺伝子として発現するα1、筋組織で発現するα2、神経細胞接着分子AMOGと同一物であるβ2の5′上流制御配列を、変異の導入等によりさらに詳細に解析した。α1:ARE[-102-61]結合タンパク質の検索の結果、ゲルシフト法でC1,C2,C3複合体が観察された。ARE領域をプローブとしたサウスウェスタンクローニングから、別に2種類の結合タンパク質が得られた。その一方であるAREB6は7個のZn-fingerとG1uに富む領域をもち、そのmRNAは心組織や骨格筋に存在するが肝、膵、脾では検出されなかった。他方のタンパク質はすでに他の調節因子として報告のあるHEB(Huet al.,1992)であった。HEBやAREB6のcDNAを培養細胞にトランスフェクトした場合、α1遺伝子の転写への効果は、細胞株や発現量によって正負の両方であった。
皮膚表皮老化メカニズムの新概念ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｙの解明

高リン血症を伴う慢性腎不全などの疾患では表皮の老化様変化が認められる。本研究では、高リン血症が表皮ケラチノサイトに老化様変化を引き起こす可能性を検討した。成人皮膚ケラチノサイトを様々なリン濃度で培養した結果、4 mMの濃度において、最も長く増殖を続けることが判明した。至適濃度以外では細胞分裂回数が低下し、表皮分化マーカーの発現が亢進した。しかし、老化関連分泌タンパクの発現上昇は認めなかった。本研究により、過剰な高リン濃度はケラチノサイトへの分化ストレスとなり、早期の細胞老化をもたらすことが示唆された。本研究では、慢性腎不全患者における老化様皮膚の形成機構を「phosphate toxicity」、すなわち高リン環境の毒性による表皮の早期老化と言う観点から、解明する事を試みた。前年までに表皮ケラチノサイト培養系における実験系はほぼ終了したが、マウスモデルの樹立は実現できていなかった。原因として、昨年に試みた高リン食によるマウスモデルでは、血中のリン濃度が安定して上昇しなかった事が考えられたため、部分的にマウスの腎を破壊した腎不全モデルマウスを作成する事を試みた。その結果として、安定してマウスを維持することができず、皮膚のフェノタイプを再現性を持って確認する事はできなかった。より洗練された腎不全モデルの作成、もしくは1歳以上の高齢マウスをより長期にわたり、高リン食で飼育する事などが、改善案として考えられ、今後の課題である。研究期間全体を通じての研究成果として、本研究により、表皮ケラチノサイトは至適リン濃度以外で培養を行うと、早期に細胞老化を起こす事が確認された。早期に分裂を停止した群では各種の表皮分化マーカーの発現が亢進する事から、ケラチノサイトの終末分化が促進され、結果として早期の細胞老化がもたらされている可能性が考えられた。一方で、細胞老化時に発現が亢進することが知られている老化関連分泌蛋白質の発現亢進は認められなかった。このように、不適切な細胞外リン濃度が、表皮角化細胞の分化を誘導する事で、老化様フェノタイプを形成するという、新しい皮膚老化概念を示す結果が得られたことが本研究の成果である。近年、遺伝子改変マウスを用いた研究により、高リン血症が組織の早期老化様現象を起こす可能性が示唆された。また、高リン血症を起こす慢性腎不全、人工透析、副甲状腺機能低下症で表皮の老化様変化が認められる。成人皮膚ケラチノサイトを15 mMの高リン環境で培養すると、増殖を停止し、細胞老化を起こした。様々なリン濃度で培養した結果、4 mMの濃度において、最も長く増殖を続けることが判明した。高リン環境によってケラチノサイトの終末分化への促進が起きている可能性と、老化関連分泌蛋白質の発現亢進等で特徴づけられる細胞老化が起きている可能性を検討した。異なるリン濃度において、表皮分化マーカーの発現レベルを定量PCRにより比較したところ、表皮ケラチノサイト分マーカーである、ロリクリン、インボルクリンは4 mMのリン濃度下で培養した細胞で発現が最も少なく、同じく分化により発現の上昇するABCA12についても同様の傾向が認められた。一方で、老化関連分泌蛋白質として、細胞老化時に発現が亢進することが知られている、GMCSF、IL6、IL8、MMP3、ICAM1、GROαについて、その培地中の濃度を測定したが、リン濃度を変化させても、一定の傾向は認められなかった。結論として、今回の実験で、リン濃度はヒト表皮ケラチノサイト培養系の増殖停止時期を左右する因子であることが示された。その機序の一つとして高リン濃度が細胞の分化ストレスとして働く可能性が考えられた。培養細胞を用いた実験系はおおむね当初の計画の通り、研究を遂行することができ、重要な知見を得ることができた。一方で、高リン血症老化モデルマウスを作成して用いる実験では、技術的問題の為、また、老化研究という必然的に長期間を要する研究課題の為、進行が遅れているため。マウスを高リン食で飼育する事により、高リン血症のモデルマウスを作成したが、血中の濃度変化が不十分であり、皮膚老化の評価が困難であった。高リン食に加えて人為的に腎不全を起こしたマウスを作成して、高リン血症をより強固にし、検討を行う。マウスの維持費、及び、表現型解析のための試薬、キットの為の予算として計上する。
ナノスケール・ヘリウムにおける量子臨界現象の解明と超流動性の制御

本研究は、ヘリウム(4He)をナノメートルサイズの空間に閉じこめることで生まれる新しい量子臨界現象を系統的に明らかにすると共に、その超流動性を自在に制御する方法を確立して、新しい超流動ジョセフソン素子の開発につなげるものである。科研費の交付を受けた研究期間で、以下の研究を行った。細孔径25Aのナノ多孔質ガラス内壁に吸着した4He超薄膜に対してねじれ振り子の実験を行い、本来4He原子が局在して超流動が観測されないと考えられていた極めて低い吸着量領域でも、超流動的な振る舞いが観測されることを発見した。この超流動的挙動はある温度を境に低温での回転慣性モーメントの緩やかな減少とエネルギー散逸の極大で特徴付けられ、散逸が極大を示す温度は吸着量を増やすと共に低下する。この低下の傾向は通常の液体4He薄膜が示す超流動のそれと全く逆であり、粒子相関が強く効いていることを示している。非常に興味深い現象であり、真の超流動か否かを含めてその機構解明が待たれる。また、ジョセフソン素子の開発に向けた準備として、ポーラスアルミナのナノポアアレイをヘリウム流路に挿入したねじれ振り子を製作し、動作確認を行った。これは超伝導体のSQUID(量子干渉素子)と同等の構造を持ち、将来開発を予定している超流動SQUIDの原型となるものである。
哺乳動物の長期記憶におけるC/EBPファミリーメンバーの役割

Kandelらは、現在、神経細胞から記憶形成にいたる転写因子の活性化カスケードとして次のようなモデルを考えている。神経細胞内ではCREBとATF4は、ヘテロダイマーを形成してCREBのリプレッサーとして働いているが、PKAでCREBがリン酸化されるとATF4が遊離されCREBがC/EBPなどの初期早期遺伝子を活性化する。その際遊離されたATF4はC/EBPとヘテロダイマーを形成し今度はアクチベータ-として記憶形成の遅延反応遺伝子の転写を活性化させる。本研究では、アメフラシの研究から得られた記憶の分子メカニズムが哺乳動物でもあてはまるかどうかを調べた。NF-IL6とNF-IL6β、ATF4ノックアウトマウスの海馬スライス切片に電極を挿入しCA1錐体細胞からの興奮性シナプス後電位を記録したが、正常マウスと比較して海馬における長期増強に変化は認められなかった。しかし、アメフラシの場合と異なり、哺乳動物ではいくつかのC/EBPファミリーメンバーが存在しており他のメンバーにより代償された可能性があり、現在ダブルノックアウトマウスを作製している。また、海馬における長期増強に変化は認められなかったが、これらのノックアウトマウスの学習行動に異常がないかどうか調べる予定である。
非平衡物理学に基づくスロー地震と通常の地震の統一的理解

1)弾性体や流体を用いたアナログ実験表面に凹凸をもつゲルを用いて摩擦力のすべり速度依存性を測定し、ある臨界速度において速度強化型から速度弱化型に遷移する非単調な摩擦則を得た。このゲルではプレート駆動速度が臨界値より僅かに大きな条件で複雑な滑り挙動を示す。断層面の凹凸を制御することで臨界速度を制御できることも発見した。流体系モデリングでは、粘弾性流体を用いて単純ずりや溶液注入によるパターンダイナミクスを解析し、パターン生成の相図や機構を明らかにした。単一緩和時間の粘弾性流体を調製し非線形なひずみ領域における特性を制御する手法や、脆性破壊から塑性破壊を示す材料を化学物質の濃度で制御する手法を確立できた。2)実験室とプレート境界のスケールギャップを埋める理論的研究破壊核形成過程のシミュレーションを行い、プレートの厚みが遅い滑りへ与える影響を確認した。特に、厚みが核サイズと同程度かそれより小さい場合は、滑り核が一箇所で成長せず、複数の異なる場所で同時多発的に成長することが分かった。この原因は、薄いプレートでは滑りフロントの実効的な線張力が弱いことに帰着される。同時並行して、地震のスケール依存性を考える際に特に重要な性質である、滑り面の粗さの影響を考慮した摩擦シミュレーションコードの作成を行った。完成したコードを用いて予備的シミュレーションを実行し、コードの妥当性を確かめた。3)プレート境界の数理モデル構築と解析動的な地震滑りにおける、摩擦発熱による流体の高圧化及び空隙生成による流体の減圧化をモデル化した。並行して、薄いプレートの沈み込み帯を速度状態依存摩擦法則でモデル化した系を解析し、安定滑りから不安定滑りに遷移する分岐点近傍に着目して方程式系の縮約を行った。縮約した方程式がある種の不安定性を示すことを明らかにし、この不安定性の特性とスロー地震の性質の共通点を探った。タイムラインとしては多少のズレはあったものの、内容的には当初の計画通りに研究を実行することができたのみならず、予想を大きく上回る新しい成果が複数あった。特に、ゲル摩擦実験において凹凸を制御することで摩擦特性が定性的に変化することの発見は大きな成果と言える。流体実験においても、単一緩和時間の粘弾性流体を調製し非線形なひずみ領域における特性を制御する手法を確立できたことは、今後の実験を進めるにあたって重要な進展である。スケールギャップに関する研究では、当初の計画にはなかった「フラクタル的な凹凸を持つ断層」をシミュレーションコードに実装することができた。このことで、断層形状がスロー地震へ与える影響を定量的に議論できる道具立てが揃ったことになり、次年度以降には計画をさらに大きく超える進展が期待される。ゆっくり地震における熱・流体・空隙生成相互作用の効果を調べる研究では、未知な部分の多い空隙発展則の詳細に依らない結果を得て、より一般化的な言明へ繋げられたのは計画以上の成果である。この結果は非線形動力学的視点からも興味深く、他分野への波及性も期待される。ゲル摩擦実験では、地震発生前のひずみ蓄積過程における応力場の可視化を行い、その後の破壊挙動との対応を調べる。各粒子を“観測点"として、多観測点での破壊伝播挙動のインバージョンを試みたい。可視化で直接得られる結果と比較することで、インバージョンの精度を検証する。その上でアスペリティサイズに分布をもたせることによって、通常の地震とスロー地震が共存する実験系を構築し、通常の地震とスロー地震との相互作用を調べる準備とする。流体系実験に関しては、均一材料系において単純ずりで生じるパターンダイナミクスを理解・制御する。この知見を生かし、系に不均一な構造を導入することで、現実の地球環境に近い設定でのパターンダイナミクスを観察・理解する。具体的には粒子や、塑性材料と脆性材料の混合系を用いる。ゆっくり地震における熱・流体・空隙生成相互作用の効果を調べていく計画である。今回見出された普遍性・臨界性に対して、流体の流れの影響を考慮する。ゆっくり地震ではそれが重要な役割を果たしていると示唆されているからである。しかし、層流の仮定ではゆっくり地震がいつかは必ず加速してしまうことも過去の研究から示唆されている。従って乱流的流れが与える影響について考察する必要があり、まずは「多孔質媒質と乱流」という枠組みの構築に取り組む。薄いプレート境界に速度状態依存摩擦則を設定して得られた縮約系と複素ギンツブルグランダウ方程式の相図と対比させ、系が時空間パターンの特性を明らかにし、観測結果の解釈へつなげる。同時に、今年度に構築したフラクタル的な凹凸を持つ摩擦面での滑り挙動のシミュレーションも本格化し、スロー地震の発生を再現したい。1)弾性体や流体を用いたアナログ実験弾性体を用いた滑り実験においては、接触面の幾何形状と摩擦挙動との関係を調べるため、形状を精密に制御したアスペリティをゲル表面に多数配置して摩擦実験を行った。その結果、アスペリティの曲率半径を大きくすると、速度強化から速度弱化に遷移することや、すべり速度と摩擦力との関係がある普遍的な関数で表されることを発見した。また、速度強化ー弱化転移速度の近傍で、ゆっくりすべりや間欠的な巨大イベントが発生することを見出した。流体を用いた実験においては、摩擦が重要となるヘレショウセル中において、反応により先端が固化する流体を注入しそのパターンダイナミクスを解析した。本系は、流動と固化が重要となる地盤中での流体の振る舞いに関して深い考察を与える。それに加えて、テレケリックポリマーとo/w

エマルジョンからなる粘弾性流体を用いることで空間的な破壊現象を観察する系を構築した。2)レオロジー理論室内岩石実験で得られている経験的摩擦法則の理論的導出を行った。この法則は固有の長さ定数を含み、スケール依存性が予測される。経験則の理論的導出を通じて、固有長さ定数の系のサイズに対する変換性を解明した。3)プレート境界のミニマル数理モデル構築と解析温度・流体圧・空隙率系の時間依存性のみを考えたモデルについて解析を行った。重要なことに、支配方程式中で共通のヌルクラインが現れることを発見した。ヌルクラインの特性を考察することで、初期滑り速度と最終滑り量の間に臨界指数1/2が成立することを発見した。この値は空隙発展則の詳細には依存しない。面白いことに、この系は例えばLotka-Volterraモデルの一種も記述しており、地震だけにとどまらない普遍性を持ったダイナミクスと言える。弾性体実験においては、当初の計画で掲げていたゲル摩擦実験系の構築に成功し、ゆっくりすべりと高速すべりの両方を再現することができたので、次なる段階として画像処理を用いた動的挙動の解析を行う予定である。流体実験においては、ヘレショウセル中で固化を示す流体に関する注入先端のパターン解析結果をとりまとめ、予定通り論文投稿段階まで進むことができた。粘弾性流体を用いた実験系に関しては材料の作成には成功しており、この点予定よりも早く進捗していると考えられる。その一方で、実験の幾何学的条件などは想定外に条件の絞り込みが難しく現在検討中となっている。理論モデルにおいては、解析的に臨界的振る舞いを見出して臨界指数を得るという当初の目標の中でも最も重要な成果を論文にとりまとめることができた。本研究にはB02班メンバーとの議論が大きく寄与しており、領域同士の相互作用という観点からも成功していると言える。1)弾性体や流体を用いたアナログ実験表面に凹凸をもつゲルを用いて摩擦力のすべり速度依存性を測定し、ある臨界速度において速度強化型から速度弱化型に遷移する非単調な摩擦則を得た。このゲルではプレート駆動速度が臨界値より僅かに大きな条件で複雑な滑り挙動を示す。断層面の凹凸を制御することで臨界速度を制御できることも発見した。流体系モデリングでは、粘弾性流体を用いて単純ずりや溶液注入によるパターンダイナミクスを解析し、パターン生成の相図や機構を明らかにした。単一緩和時間の粘弾性流体を調製し非線形なひずみ領域における特性を制御する手法や、脆性破壊から塑性破壊を示す材料を化学物質の濃度で制御する手法を確立できた。2)実験室とプレート境界のスケールギャップを埋める理論的研究破壊核形成過程のシミュレーションを行い、プレートの厚みが遅い滑りへ与える影響を確認した。特に、厚みが核サイズと同程度かそれより小さい場合は、滑り核が一箇所で成長せず、複数の異なる場所で同時多発的に成長することが分かった。この原因は、薄いプレートでは滑りフロントの実効的な線張力が弱いことに帰着される。同時並行して、地震のスケール依存性を考える際に特に重要な性質である、滑り面の粗さの影響を考慮した摩擦シミュレーションコードの作成を行った。
テラトーマ発症におけるc-Kitとそのリガンド及び新規キナーゼタンパク質の関与

テラトーマは生殖細胞に由来する腫瘍で、特定の系統のマウスに高率に生ずることが知られているが、その発症の分子機構は明らかでない。本研究では、始原生殖細胞の増殖制御因子であるS1因子と、そのレセプターであるc-Kitの過剰発現がテラトーマ発症の原因となるかを調べることを第1の目的としている。そのために生殖系列で特異的に発現するoct-3遺伝子の上流約2Kbpを含むDNA断片をマウスc-kitcDNAにつないだキメラ遺伝子を用いてc-Kitを始原生殖細胞で過剰発現するトランスジェニックマウスを作った。得られた8系統のトランスジェニックマウスのうち5系統で、導入した遺伝子の精巣での発現が見られた。現在これらの始原生殖細胞の初代培養を試みている。予備的な実験結果では、正常マウスに比べてトランスジェニックマウスでは細胞数の増加が顕著であることが示唆された。またこれまでにEF-1α遺伝子プロモーターとS1因子cDNAによるトランスジェニックマウスも得ているので、両者の交配によりテラトーマが発症するかどうかを調べていく予定である。また、本研究の第2の目的として生殖細胞や、その支持細胞で発現する未知のキナーゼ遺伝子をクローニングし、同様にテラトーマ発症との関連を明らかにすることをめざした。始原生殖細胞由来の細胞株であるEG細胞を材料に、キナーゼの活性領域の保存配列に対するプライマーを使ってRT-PCRを行い、既知のものを含む20種類のキナーゼをコードするcDNA断片を得た。このうち、成体での発現が精巣、卵巣及び脳にのみ見られた、レセプターチロシンキナーゼSky/rseについて、全長をコードするcDNAをクローニングし、さらにin situ hybridization法により発生過程及び生殖巣での発現を調べた。その結果、発生過程から生後にかけて、主に生殖細胞の支持細胞で発現していることが明らかになった。
解剖学的リモデリングに焦点をあてた動脈管制御法の開発

胎児期に存在する動脈管は出生後には速やかに閉鎖するが、早産児では出生後の動脈管開存症が生命予後を悪化させ、ある種の先天性心疾患では出生後にも動脈管の開存が必要である。つまり、動脈管の閉鎖と開存の制御は小児医療上極めて重要な課題である。動脈管の完全な閉鎖には、胎生中期から始まる解剖学的リモデリングである内膜肥厚が重要な役割を果たす。しかしながら現在の治療では内膜肥厚形成を制御することができておらず、十分な効果が得られていない。本研究では、動脈管の閉鎖に必要な内膜肥厚形成の分子機序を解明し、内膜肥厚形成の制御に基づく新たなアプローチによる動脈管の治療法の開発を行うことを目的とした。先行研究でヒトとラット動脈管を用いて網羅的遺伝子解析を行い、内膜肥厚を誘導する最も有力な候補遺伝子として組織型プラスミノーゲン活性化因子(tPAまたはPLAT)とファイブリン1(FBLN1)の2つを同定し、PLAT, FBLN1がヒト・ラットの動脈管内膜肥厚部に局在し、PLATは内皮細胞、FBLN1は平滑筋細胞から分泌されること、PLATがMMP-2活性を増加させること、を明らかにした。これを受けて本年度は、PLATがMMP-2を活性化させることで血管の内弾性板を破壊すること、in vivoにてプラスミノーゲン投与が動脈管内膜肥厚を促進すること、を明らかにして論文報告を行った。またEP4下流シグナルとして、古典的経路ではなくフォスフォリパーゼCープロテインキナーゼCーNFkBを介してFBLNの転写活性が亢進すること、平滑筋細胞由来のFBLN1が内皮細胞由来のバーシカンと共役して平滑筋細胞の遊走を促進すること、遺伝子改変マウスを用いた実験から明らかにした。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。先行研究でヒトとラット動脈管を用いて網羅的遺伝子解析を行い、内膜肥厚を誘導する最も有力な候補遺伝子として組織型プラスミノーゲン活性化因子(tPAまたはPLAT)とファイブリン1(FBLN1)の2つを同定した。これを受けて本年度は以下について実験を行い結果を得た。1ヒト動脈管を用いたPLATとFBLN1の局在の検討:ヒトの動脈管組織を用いた免疫組織染色によりPLAT, FBLN1がヒトの動脈管内膜肥厚部に局在することが明らかとなった。2ラット動脈管組織を用いた発達段階でのPLATとFBLN1の発現検討を行い、PLATとFBLN1は胎生19日の未熟児ラットでも発現が認められ、胎生後期に向けて発現が増加することが明らかとなった。3PLATとFBLN1それぞれの分泌を担当する細胞の同定を行い、PLATは内皮細胞、FBLN1は平滑筋細胞から分泌されることがわかった。4PLATがプロテアーゼ活性に与える作用をザイモグラフィーで検討し、MMP-2活性を増加させることが明らかとなった。ラット動脈管平滑筋細胞と内皮細胞を用いた検討より、当初の予定通りPLATとFBLN1の分泌担当細胞を同定し、PLATが内皮細胞で多く発現することが明らかとなったため、ラット動脈管内皮細胞を用いて、PLATによるMMP2活性の増加が確認できた。また、ヒトとラットの動脈管組織切片を用いた検討から、それぞれが内膜肥厚部分に発現し、発達とともにその発現が増加することが確認できた。実験は予定通り行い結果を得ることができた。先行研究でヒトとラット動脈管を用いて網羅的遺伝子解析を行い、内膜肥厚を誘導する最も有力な候補遺伝子として組織型プラスミノーゲン活性化因子(tPAまたはPLAT)とファイブリン1(FBLN1)の2つを同定し、平成28年度は、PLAT, FBLN1がヒト・ラットの動脈管内膜肥厚部に局在し、PLATは内皮細胞、FBLN

1は平滑筋細胞から分泌されること、PLATがMMP-2活性を増加させること、を明らかにした。これを受けて本年度は以下について実験を行い結果を得た。1新規実験系である3次元血管モデルを用いて、PLATがMMP-2を活性化させることで血管の内弾性板を破壊すること、2in vivoにてプラスミノーゲン投与が動脈管内膜肥厚を促進すること、3EP4下流シグナルとして、古典的経路ではなくフォスフォリパーゼCープロテインキナーゼCーNFkBを介してFBLNの転写活性が亢進すること、4FBLN1がADAMTS1と共役してバーシカンを断片化させることで平滑筋細胞の遊走を促進すること、を明らかにした。ラット動脈管平滑筋細胞と内皮細胞を用いた検討より、当初の予定通りPLATの内弾性板への役割を明らかにし、FBLN1の転写活性亢進のメカニズムを明らかにできた。特に、PLATは平成30年度で予定していた実験をすべて終了し、論文が受理されたため、予定以上の進捗が認められた。FBLN1に関しても、ADAMTS1との共役が細胞遊走に重要な役割をはたしていることを明らかにできたため、次年度のin vivoの実験を行うための十分な準備ができた。胎児期に存在する動脈管は出生後には速やかに閉鎖するが、早産児では出生後の動脈管開存症が生命予後を悪化させ、ある種の先天性心疾患では出生後にも動脈管の開存が必要である。つまり、動脈管の閉鎖と開存の制御は小児医療上極めて重要な課題である。動脈管の完全な閉鎖には、胎生中期から始まる解剖学的リモデリングである内膜肥厚が重要な役割を果たす。しかしながら現在の治療では内膜肥厚形成を制御することができておらず、十分な効果が得られていない。本研究では、動脈管の閉鎖に必要な内膜肥厚形成の分子機序を解明し、内膜肥厚形成の制御に基づく新たなアプローチによる動脈管の治療法の開発を行うことを目的とした。先行研究でヒトとラット動脈管を用いて網羅的遺伝子解析を行い、内膜肥厚を誘導する最も有力な候補遺伝子として組織型プラスミノーゲン活性化因子(tPAまたはPLAT)とファイブリン1(FBLN1)の2つを同定し、PLAT, FBLN1がヒト・ラットの動脈管内膜肥厚部に局在し、PLATは内皮細胞、FBLN1は平滑筋細胞から分泌されること、PLATがMMP-2活性を増加させること、を明らかにした。これを受けて本年度は、PLATがMMP-2を活性化させることで血管の内弾性板を破壊すること、in vivoにてプラスミノーゲン投与が動脈管内膜肥厚を促進すること、を明らかにして論文報告を行った。またEP4下流シグナルとして、古典的経路ではなくフォスフォリパーゼCープロテインキナーゼCーNFkBを介してFBLNの転写活性が亢進すること、平滑筋細胞由来のFBLN1が内皮細胞由来のバーシカンと共役して平滑筋細胞の遊走を促進すること、遺伝子改変マウスを用いた実験から明らかにした。本年度の検討結果を元に、次年度はin vitroでのFBLN1の内膜肥厚作用への検討を行う予定である。FBLN1がEP4の下流シグナルにより発現が誘導される機序と、FBLN1が動脈管平滑筋の遊走能を亢進させるかを検討することを目的とする。これらの結果よりFBLN1が動脈管内膜肥厚を亢進させる可能性を示唆できることが期待される。具体的には、1PLATがMMP-2活性に与える作用の検討、2EP4の下流シグナルがFBLN1の転写を亢進させる機序の検討、3FBLN1がADAMTS-1と共役して動脈管平滑筋細胞の遊走を亢進させるかを検討することを予定している。
英文チャンク音声提示とリーダビリティ測定を利用した速読/音声訓練の高度化・標準化

英文読解教材の難易度を測定する日本人に適した難易度を計測するソフトウェアを利用するとで、どのような英文を読ませるかという選定に標準を定められた。しかしながら、理解度と速度を向上させるには、難易度だけでなく、素材の英文に対する妥当な設問が必要であることがチャンク長の研究で判明した。他方、速読や音声訓練を高度化し促進するために、英文をチャンク提示を動画・音声と同期するウェブシステムを開発し、実授業での試用にまでこぎつけた。一定の評価と英文に対する一定の理解を得たが、今後さらなる実践での利用を重ねて定量的・定性的なデータを採取して、どのような英文にどのような学習者が最適かを見極める必要がある。これまでの継承した研究課題である英文チャンク(フレージング)音声同期提示をするCALLソフトウェアを用いた音読等の音声訓練を引き続き行うことともに、英文のリーダビリティ(読みやすさ)を多角的に判定するソフトウェアを導入して、学習者と教材の最適化を目指した。しかしながら、各分担者にリーダビリティ判定ソフトの利用定着が滞り、それを踏まえた処遇が進んでいない。それに加え代表者で進めていた音声訓練を伴う実授業での速読処遇において、致命的なデータ欠損を生じて研究結果を得られることができなかった。次年度処遇を取り組む教員を増員して、成果を出したい。他方、本年度は以上とは別に、オンライン動画を用いたチャンク提示ベースの速読・音声訓練に利用できるウェブシステム(アプリ)の開発と形成的評価に取り組んだ。この背景には、先行する前課題の継承課題として、速読訓練による聴解能力への転移効果を狙って、これまで音声訓練による処遇を行ってきて、読速度の促進や理解度の向上は達成したが、それについてはいまだに有意な結果が得られていない。そこで、さらに動画も含めたマルチメディアで処遇することで、効果を狙う。また汎用のウェブブラウザでの利用となるので、授業教室のPCのみならず、OSの異なるモバイルも含めたデバイスでの利用が可能になり、処遇や訓練の機会を増やす狙いもある。本年度は同アプリ(Talkies: http://www.mintap.com/talkies/talkies.html)を代表者の一部授業で試用して、音声訓練や速読訓練を実施し、形成的評価を試み、その可能性と課題を明らかにして、いくつか学会発表をして評価を得ている。今後この利用する教員を増やして、本課題の処遇を授業で行える教員を増やす計画である。今年度はこれに先立つ科研研究の成果発表に時間を割いたことと、新たなソフトウェア、アプリの開発を受けて従来の処遇への適用が間に合わなかった。特に後者には二つあり、一つはリーダビリティ測定用ソフトで、もう一つはオンラインで動画/音声ファイルとチャンク切れ文字列を同期提示するウェブアプリであるが、いずれも不可欠なもので、それぞれの分担者に定着するのに時間がかかった。他方で従来の方法での処遇において大きなデータ欠損が生じて、成果に至らなかった。本年度昨年度の反省を踏まえて、処遇データを補うために、課題分担者を増員した。それにより読解効率の向上と英語リスニング能力向上のために、チャンクで区切った英文をこれまで使用してきたソフト(Mewm:ミント・アプリケーションズ)によって処遇データを取る量を増やせた。さらにリーダビリティの独自の新指標であるMGJP(日本人に最適化した複合的指標)を元にテキストの難易度・レベルも測定した。しかしながら、今のところ有意な結果や相関関係などは見られない。さらなる処遇と研究方法を今後検討したい。他方で関連研究として行っているチャンク区切りされた英文と動画・音声ファイルを同期表示でウェブシステム(Talikes: http://www.mintap.com/talkies/talkies.html)の開発及び運用が進み、本格的な授業実践に及んでいる。これは本課題の枠を超えて多くの利用者が増え、本格的な利用段階に入り、いずれ本課題に寄与する可能性がありえる。このような取り組みは本課題のもう一つの目的である速読訓練から、聴解訓練に進み、リーディング力向上からリスニング力への転移効果を狙うものである。これには読み速度(WPM)を図る機能や、音声訓練に使える機能も搭載されているので、本研究課題の処遇にも使えるものとなった。今後処遇とプレポストの位置づけの方法を再考して、システムとツールの使い分けが必要と思われる。さらに、もう一つの課題であるチャンク長の最適については、初期段階の研究を終えて、新たな成果を求めた準備段階に入り、最終年度で成果を出せる見込みである。実績で報告したように処遇データを分析したが、成果はこれまでどおりで、リーダビリティに関するどのような学習者がどのようなレベルの文書にどう対応しているかまでの相関関係までは見いだせていない。さらなる処遇を積み重ねデータ検証をする。またチャンク長の最適化も更なる妥当性を追求して処遇実験準備をして開始するところである。本年度は最終年度であるので、一定の成果が残せた。英文難易度の違いがチャンク長と読解能力の関係に及ぼす影響について、実授業での読解処遇試験などを行い、チャンク長が影響する場合と、それに関わらず読解理解度を示す場合が見られ、どう解釈するか今後の追処遇とともに課題が残った。他方、初年度より行っている、より動的で学習者にとって刺激的な学習素材である動画利用についても、さらにウェブシステムに改良を加えた。その点については、学会誌に掲載した論文で記録として残すことができた。また実授業において形成的評価の意味で利用してみた。

それにより難易度が高いと思われるスピーチ動画のテキストも、字幕と動画そのものの持つ訴求力や関連情報提示より、初級者でも一定の理解が可能で、好評を得ることができた。この成果を国際学会においても発表して、一定の反響を得た。ただし、研究課題は大きくどのような学習者かという点では、初級学生しか観測できておらず。またどのような読解教材かという点では、リーダビリティという難易度という指標だけではチャンクとの関わりで、一定の結論に導くことができていない。また同じ研究者グループによる別科研研究との関連で、難易度の指標と学習者特性・レベルとともに検定する試験問題の妥当性も大きく関わり、研究の精緻化を目指すと大きな課題がさらに出てきた。しかしながら、これらを統合して、さらに次年度以後も継続すべき課題を確認できたとも言える。英文読解教材の難易度を測定する日本人に適した難易度を計測するソフトウェアを利用するとで、どのような英文を読ませるかという選定に標準を定められた。しかしながら、理解度と速度を向上させるには、難易度だけでなく、素材の英文に対する妥当な設問が必要であることがチャンク長の研究で判明した。他方、速読や音声訓練を高度化し促進するために、英文をチャンク提示を動画・音声と同期するウェブシステムを開発し、実授業での試用にまでこぎつけた。一定の評価と英文に対する一定の理解を得たが、今後さらなる実践での利用を重ねて定量的・定性的なデータを採取して、どのような英文にどのような学習者が最適かを見極める必要がある。新たなソフトウェア及びアプリについての利用方法は各分担者にも浸透したので、処遇で利用する英文をリーダビリティ検定にかけて、どのような難易度・読みやすさの文章を用いて、一定の速読・音読訓練を経て、どのようなレベルの学習者が、読みの速さ、理解力において変化するかを測定する。またデータ欠損のリスクを避けるために、新たな分担者を配して処遇するクラスを増設する。リーダビリティ関連の研究については、さらに処遇を繰り返しデータを多めにとり検討を繰り返す。他方学習者に対するチャンク長の最適化を目指す研究としては、新たな処遇方法によってデータ取る。研究方法としたは、1)phraselengthでフレーズ長を実際に英文に改行を入れさせてフレーズ長を記録させる。2)rate of delivery:音読速度。30秒で何語発音できたかを計測させる。3)WRA:Word recognition accurasy。英検の長文問題から無作為に抽出したリストで、語認識精度を測定する。妥当性と信頼性は学会で発表済みで準備はできている。英語教育多少の物品購入の価格の誤差の範囲で残額が発生した。予定していた海外学会発表への出張がことごとく不可能になり、各分担者とも旅費の支出がなかったため、全体としても支出が少なかった。国内学会も主だった学会が関東圏での開催となり、特に大きな旅費の必要が必要がなかった。また処遇結果について特に際立った有意なものが出なかったので、研究会を持つ回数も減り、旅費・会議費が例年より少なかった。