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19世紀日本の女性南画家の移動と交遊圏

実践女子大学香雪記念資料館において、山水画・花鳥画・人物画の幅広いジャンルを網羅する「野口小蘋ー女性南画家の近代ー」展(会期:2018年10月8日12月1日)を開催するとともに、それに関連してシンポジウム(2018年11月17日)を企画し、『女性画家研究研究成果報告書野口小蘋ー女性南画家の近代ー』(実践女子大学香雪記念資料館、2019年3月)を刊行した。その報告書では、小蘋の伝記と画業を明らかにするとともに、婚家である山梨の野口家(十一屋)が小蘋に及ぼした影響や、近代日本絵画史における小蘋の位置付けなどを論じた。女性であった小蘋が何故、明治期の日本絵画界で名声を得たのか、また帝室技芸員にまでなった小蘋が、何故近代絵画史から忘却されていったかなど、日本近代絵画史にとっても重要問題の数々を掘り下げた。また同報告書には、今後の研究のための資料として、今や古本でも入手しにくくなっている『小蘋画譜』と『小蘋印譜』(実践女子大学香雪記念資料館蔵)の全図版も掲載した。張(梁川)紅蘭に関する研究成果は、「張(梁川)紅蘭の旅と絵画」と題して講演(奥の細道むすびの地記念館、2018年8月19日)を行うとともに、「張紅蘭の西遊」(『玉堂清韻社報』第7号、2018年10月)を公にした。夫とともに中国・九州・四国を旅した紅蘭の旅は、まさに清遊と呼ぶにふさわしい前近代的なものであったが、養老の滝や耶馬溪など、近世末期の南画家たちが愛好するようになる新たな「風景」を発見した点では重要な意義が認められる。実践女子大学香雪記念資料館で開催した「記録された日本美術史-相見香雨・田中一松・土居次義の調査ノート展」(2018年5月12日6月16日)では、日本における美術史学の草創期から形成期に活躍した3人の先学による研究の中から、女性画家研究を抽出し、全研究の中でのそれらの位置付けを検証した。本年は特に張(梁川)紅蘭(1804-79)と野口小蘋(1847-1917)に注目して、二人の生き方を対比しつつ、交遊圏や移動が、画風の形成や作画の質などに及ぼした影響等を考察した。紅蘭は、夫の梁川星巌(1789-1858)とともに各地を旅行し、その土地でさまざまな知識人たちと交遊を繰り返した。いわば江戸時代以来培われてきた文人的な価値観を保持しつつ、激動の幕末明治期を生き抜いた女性画家であった。これまでの紅蘭研究は主として残された漢詩を主体とするもので、絵画についてはほんの断片的に紹介されただけであったが、本研究では、絵画制作に重点を置いて、社会的変化の著しい時代の中で、紅蘭はそれらにどのように対応しながら作画を展開していったかを考察した。幸いにも28年度には、出身地である大垣市や岐阜市を中心に、かなりの数量の作品を調査することができたおかげで、基礎的研究ではあるが、使用した印章(特に「張氏景婉」印と「道華」印)の変遷を確定できた。また紅蘭は従来女性南画家と見なされてきたが、初期作などを見るかぎり、初めから南画風の画技のみを目指していたのではないことと、星巌との結婚、西遊による山陽道や九州の文人との交遊を通じて徐々に南画家へと転身したことも明らかとなった。小蘋に関しては、慶応年間(1865-8)京都に出た後、木戸孝允の知遇を得て、彼が開いた宴席に連なり、その交遊圏に仲間入りすが、そこに安住せず、明治4年には東京へと出立する。そこでも新たな交遊圏を獲得する。同時に彼女は広く社会的な活動へも目を向け、その結果として、シカゴコロンブス博などの万博への出品、女性初の帝室技芸員就任、皇室関係の注文の受注などを獲得する。本年度は特に東京に移ってきた直後の明治5年の小蘋の交遊状況を明らかにすることが出来た。上記の成果は『実践女子大学香雪記念資料館館報』第14号誌上に発表している。『実践女子大学香雪記念資料館館報』第14号誌上に、仲町啓子「張(梁川)紅蘭筆《牧梅図》付《李かん写竹図》」及び、山盛弥生「新出の野口小蘋筆《柳下二美人図》、《美人読書図》と初期画業について」として、28年度の研究結果の一部を発表できたことは、大きな成果であったと思われる。特に、二人は行き方を異にしているだけに、女性と社会との関わり、特に交遊圏や移動の質を対比的に問うのに好都合な対象であることを痛感した。この二人の女性画家を中心に、幕末明治の問題を引き続き今年度以降も考察を深めたいと考えるようになったのも、28年度の成果のおかげであると確信する。昨年度に引き続き、張(梁川)紅蘭(1804-79)と野口小蘋(1847-1917)を中心として、二人の生き方を対比しつつ、交遊圏や移動の質的変化と絵画制作活動との関係性を考察した。

紅蘭は大垣に生まれ、星巌と結婚直後の文政5年(1822)に出発した西遊の旅では、各地の文人との交遊のなかで多くの作品を残した。特に初期の代表作《群蝶図》は広島の好事家のために制作されたものである。文政9年に帰郷後、翌年京都に出て頼山陽らとの交遊の中で合作も手がけている。天保3年(1832)には江戸に向かい、墨田川畔等を転々とした後、神田柳原のお玉が池に居を構え、詩社「玉池吟社」からは、小野湖山、大沼枕山、江馬天江などの幕末から明治にかけて活躍する多くの人材を輩出した。弘化2年(1845)足かけ14年に及んだ江戸生活を引き上げ、一旦帰郷した後、再び京都に赴く。晩年を送った京都では、若き日の富岡鉄斎などとの交遊も見られる。上記のような活動内容と彼女らを支援する社会のあり方が、本研究では「実作品」によって具体的に検証することができた。なお紅蘭の生き方と対照するために、水戸から江戸に出て、同地に定住して職業的な絵師として18世紀後半から19世紀初頭に活躍する櫻井雪保(1754-1824)についても考察した。紅蘭が前近代的な社会に基盤を置きつつ、貧にありながらも徳を重んじる人生観を貫いたのに対して、小蘋は幕末に生を受け、10歳代から20歳代前半にかけては守旧的な遊歴生活を経験した後、明治4年(1871)に東京に出て、結婚や甲府転居などの身辺の変化もありながら、新たに制度化する美術とも真摯に向き合い、かつ南画に拠りどころをおきつつ、万博出品など欧米にも通用する「美術」を生みだし、女性初の帝室技芸員になった。今まであまり知られていなかった彼女の驚異的ともいえる足跡を具体的作品によってかなり明らかにできた張(梁川)紅蘭、奥原晴湖、野口小蘋の作品調査を重ね、多くの作品を把握することができ、制作活動の全体像をかなり具体的に把握できるようになった。その中には未紹介の作品も含まれ、新たな紅蘭像、晴湖像、小蘋像を構築すると同時に、伝記研究や交遊圏に関する資料収集も進んできている。実践女子大学香雪記念資料館において、山水画・花鳥画・人物画の幅広いジャンルを網羅する「野口小蘋ー女性南画家の近代ー」展(会期:2018年10月8日12月1日)を開催するとともに、それに関連してシンポジウム(2018年11月17日)を企画し、『女性画家研究研究成果報告書野口小蘋ー女性南画家の近代ー』(実践女子大学香雪記念資料館、2019年3月)を刊行した。その報告書では、小蘋の伝記と画業を明らかにするとともに、婚家である山梨の野口家(十一屋)が小蘋に及ぼした影響や、近代日本絵画史における小蘋の位置付けなどを論じた。女性であった小蘋が何故、明治期の日本絵画界で名声を得たのか、また帝室技芸員にまでなった小蘋が、何故近代絵画史から忘却されていったかなど、日本近代絵画史にとっても重要問題の数々を掘り下げた。また同報告書には、今後の研究のための資料として、今や古本でも入手しにくくなっている『小蘋画譜』と『小蘋印譜』(実践女子大学香雪記念資料館蔵)の全図版も掲載した。張(梁川)紅蘭に関する研究成果は、「張(梁川)紅蘭の旅と絵画」と題して講演(奥の細道むすびの地記念館、2018年8月19日)を行うとともに、「張紅蘭の西遊」(『玉堂清韻社報』第7号、2018年10月)を公にした。夫とともに中国・九州・四国を旅した紅蘭の旅は、まさに清遊と呼ぶにふさわしい前近代的なものであったが、養老の滝や耶馬溪など、近世末期の南画家たちが愛好するようになる新たな「風景」を発見した点では重要な意義が認められる。実践女子大学香雪記念資料館で開催した「記録された日本美術史-相見香雨・田中一松・土居次義の調査ノート展」(2018年5月12日6月16日)では、日本における美術史学の草創期から形成期に活躍した3人の先学による研究の中から、女性画家研究を抽出し、全研究の中でのそれらの位置付けを検証した。前年度に引き続き、張(梁川)紅蘭(1804-79)と野口小蘋(1847-1917)に注目して、二人の生き方を対比しつつ、交遊圏との関わり方や移動の質が、特に後半生の画風の形成などに及ぼした影響等をさらに具体的に考察して行きたいと考えている。
低酸素環境を標的にした癌の複合型免疫・分子標的療法の開発

ERO1-Lαは正常組織と比較し、腫瘍細胞、特に大腸癌細胞株や膵癌細胞株において高発現していた。ERO1-Lαは小胞体常在の酸化酵素として、種々の細胞表面分子や分泌蛋白質のジスルフィド結合形成に重要な役割を果たしている。本研究では低酸素環境にあるがん細胞において、ERO1-LαはMHC class I分子内のS-S結合形成に必須の酸化酵素であり,その品質管理及び発現制御を行っていることを示した。低酸素環境下でのERO1-Lα発現増強は、癌の特徴的な細胞周囲環境である低酸素環境下におけるMHC class I分子の発現維持に寄与していると考えられる。平成24年度に行ったERO1-αに対するshort hairpin RNAを用いて、ERO1-αの発現を抑制した結果、ヒトおよびマウス乳がん細胞株の腫瘍増殖および肺転移抑制を認めたことから、ERO1-αの発現あるいは機能阻害は、抗腫瘍効果を示すことが予想された。そこで、平成25年度は、北海道大学薬学研究院の前仲勝実教授との共同研究で、ERO1-αの低分子阻害剤をin silicoおよびin vitroのassayを用いてスクリーニングを精力的に行っているところである。これに加え、臨床応用を念頭に置き、ヒト乳癌細胞株MDA-MB-231を用いて、ERO1-αノックダウン細胞株を樹立し、検討を行っている。興味深いことに、ERO1-αノックダウン細胞株では、がん幹細胞画分が減少し、上皮間葉転換も消失して、充実性増殖を示すような形質転換を示した。これに伴い腫瘍増殖は明らかに抑制された。この結果は、ERO1-αは腫瘍増殖に非常に重要な役割を果たしていることを示すものであり、がんの治療標的として非常に有望である。またERO1-α由来のがん抗原ペプチド同定については、HLA-A24トランスジェニックマウスに候補ペプチドを免疫することで、細胞傷害性T細胞を誘導可能なペプチドを3つに絞り込こんだ。これらの候補ペプチドが、ヒト末梢血においても細胞障害性T細胞を誘導可能かにつき、検討を進める。平成24年度の研究計画は、ERO1-Laの機能を阻害する低分子化合物をスクリーニング・同定し、新しい分子標的療法を開発することである。そこで、まずERO1-La阻害による抗腫瘍効果を確認するために、short hairpin RNAを用いてERO1-Laのノックダウン株を作成した。マウス乳癌細胞株および臨床応用を念頭に置き、ヒト大腸癌細胞株および膵臓癌細胞株を用いて検討した。BALB/cマウスあるいはSCIDマウスに移植し、その腫瘍増殖を比較検討した。マウス乳癌細胞株4T1細胞、ヒト大腸癌細胞株SW480、ヒト膵臓癌細胞株Panc1のいずれにおいてもERO1-aノックダウン細胞株は、野生株と比較して明らかに腫瘍増殖が抑制された。マウス乳癌4T1を用いた検討では、肺転移の顕著な抑制も認められた。その機序として、ERO1-Laノックダウン細胞による腫瘍では、野生株と比較して、VEGF-A産生抑制とこれに伴う新生血管の密度が低下していた。マウス乳癌細胞株4T1では、ERO1ノックダウン細胞では、肺転移能が著明に減少していた。そのメカニズムを解明するために、マトリゲルを用いた検討およびscratch testを用いて検討した結果、浸潤能・運動能も低下していることが明らかとなった。このように、腫瘍において高発現しているERO1-Laの発現ないし機能を抑制することは、新たな癌治療となると考えられた。現在、ERO1-La機能阻害可能な低分子化合物をスクリーニング中である。具体的には、組換え型ERO1-Laとその標的蛋白質であるPDIとのジスルフィド結合形成の抑制をSDS-PAGEを用いて、スクリーニングを行っている。ERO1-αはがんに高発現している小胞体常在酸化酵素である。ERO1-αは、protein disulfide isomerase (PDI)と協働して種々の分泌蛋白質や細胞表面分子のジスルフィド結合を形成し、これらの蛋白質の発現や機能発揮に重要な役割を果たしている。我々はERO1-αが正常組織と比較して、がん細胞において高発現していることを見出し、がんの増殖における役割を解析している。マウス乳がん細胞4T1において高発現しているERO1-αは、G-CSFのジスルフィド結合形成促進による産生増加を介して、免疫抑制性のmyeloid derived suppressor cell (MDSC)の誘導により、強力に抗腫瘍免疫応答を抑制していることを明らかにした。さまたMDA-MB-231細胞は、VEGFAを高産生し、高転移性であるが、このVEGFA産生におけるERO1-αの役割についても解析したところ、ERO1-αをノックダウンした細胞では、VEGFAの分子内ジスルフィド結合形成不全によりVEGFAの産生が低下していた。

このERO1-αをノックダウンしたMDA-MB-231細胞をNOD/SCIDマウスの乳腺に移植し、肺転移を観察したところ、野生型のMDA-MB-231と比較して、著明に肺転移数が抑制されていた。このようにがん細胞に高発現しているERO1-αはMDSCの誘導を介して、抗腫瘍免疫応答を抑制すると同時に、VEGFAの産生を増加し腫瘍の血管新生を促進することで、腫瘍の増殖に有利な環境を作り出していることが明らかとなった。これらの結果はERO1-αによる翻訳後修飾を標的とするがん治療の可能性を示唆するものである。病理学ERO1-αの低分子阻害剤の同定は、現在、共同研究先と集中的に実施中である。最も重要な研究テーマであり、精力的に進めていく。本年度は、ERO1-αが、がん幹細胞形質発現に重要な、薬剤排泄トランスポー夛であるABCG2の発現を翻訳後修飾のレベルで、制御していることを明らかにした。今後の低分子阻害薬の同定が非常に期待される。またERO1-α由来のがん抗原ペプチド同定については、HLA-A24トランスジェニックマウスに候補ペプチドを免疫することで、細胞傷害性T細胞を誘導可能なペプチドを3つに絞り込んでおり、おおむね順調に進展していると考えている。平成24年度は、ERO1-Laの発現抑制により各種癌において、抗腫瘍効果を得ることが確認された。また転移能も抑制可能である。これは、ERO1-LaがVEGF-Aの産生に関わり、血管新生に重要な役割を果たしていることが1つのメカニズムと考えられた。ERO1-αの発現抑制により、腫瘍増殖が抑制されることを乳がん、膵臓がん、および大腸癌の細胞株を用いて明らかにすることができた。この事実は、ERO1-αに対する低分子阻害剤が新規の分子標的治療薬として非常に期待が持たれることを示す。そこで、本年度はin silicoおよびin vitroでのスクリーニングに加え、siRNAを用いた分子標的薬の開発を進めていく。具体的には、腫瘍へのターゲッティング目的に修飾リポソームを種々作製し、siRNA封入し、in vitroでの腫瘍特異的なsiRNAの取り込みを評価し、その後in vivoの検討を行うことを計画している。またERO1-α由来のがん抗原ペプチド同定については、候補ペプチドが、ヒト末梢血においても細胞障害性T細胞を誘導可能かにつき、検討を進める。さらに最も免疫原性の高い抗原ペプチドを同定し、HLA-A24トランスジェニックマウスに我々が樹立したHLA-A24トランスジェニックマウス由来の腫瘍細胞を接種し、がんワクチン効果を検討する。最終的には、ERO1-α阻害剤とERO1-α由来抗原ペプチド免疫による複合治療の効果を検討し、臨床応用への基盤とする。平成25年度は、引き続きERO1-Laの機能阻害活性を示す化合物のスクリーニングを継続する。さらに、もう1つの柱であるHLA-A24およびHLA-A02に提示されるERO1-La由来の癌抗原ペプチドの同定を行う。すなわち日本人の70%をカバーできるHLA-A24あるいはHLA-A02に提示され、特異的な癌細胞障害性T細胞を誘導できる癌抗原ペプチドを同定する。
動物介在療法・活動におけるイルカの有用性に関する研究

イルカは数Hz1600kHzに及ぶ音波を使い分け、水中での個体識別や仲間とのコミュニケーション、反響定位(エコロケーション)などを行っている。イルカ介在療法(Dolphin-assisted therapy,DAT)・活動の効果を評価するうえで、イルカの行動変化や鳴音変化は重要なパラメータになると考え、DATの前後とDAT中における鳴音と行動を記録・解析し、興味ある結果を得た。鳴音はそれぞれ波形の成分、継続時間、発生頻度を解析し、行動は連続サンプリングを用い、DATにおけるイルカの反応の変化について比較検討した。波形の分類は、直線上の波形はI型、右上がり状の波形はII型、右下がり状の波形はIII型、凹状の波形はIV型、凸状の波形はV型、N字状の波形はVI型、山が2つ以上の波形はVII型とした。その結果、1)DATの前後とDAT中とを比較した平均周波数と周波数振幅値、可視的な波形の分類、鳴音の発生回数、日別の鳴音発生回数において有意な差が見られた。平均周波数においては行動の活発性と関連があり、より活発に行動している時は高い周波数の鳴音、活発性が比較的低い時は低い周波数の鳴音が観察された。2)波形の種類が増加するときには、より複雑なコミュニケーションを取っている可能性が示唆された。また、より複雑なコミュニケーションを取っていると考えられるときにIV型、V型、VI型、VII型などのより複雑な波形は多く用いられるということも推察された。3)鳴音の発生回数の比較でDAT中に回数が飛躍的に多いことから、イルカが人に対してもコミュニケーションを取ろうとしている可能性が示唆された。これらのことから、平均周波数や周波数振幅値、波形の型などにDAT前後と最中において明らかな変化がみられ、この鳴音を用いた評価法はイルカとヒトの関係、さらにDATの効果を考察する上で大いに有益であることがわかった。
量子伝導によるスピントランジスタの性能限界の打破

本研究では、磁性体の超高速不揮発性メモリを内蔵する高性能な量子伝導スピントランジスタを実現し、トランジスタと不揮発性メモリの間のレイテンシを実質的にゼロにすることができる。本研究のスピントランジスタはノーマリオフ論理回路やニューロチップなどの非ノイマン回路に応用でき、ディープランニングや人工知能などの次世代コンピューティングの基盤技術を提供する。そのために、去年度に強磁性金属から半導体チャネルへのスピン注入およびスピン検出効率を最適化するために、強磁性金属/半導体/強磁性金属からなる簡易な横型スピンバルブ構造を作製し、そのスピンバルブ比とスピン依存出力電圧の評価を行った。まず、IV族半導体分子線エピタキシャル結晶成長装置(MBE)を用いて、Si基板上に高品質の強磁性金属/MgO/Ge/Siの積層構造を作製した。この多層膜を強磁性ソースとドレインに用い、チャネル長20 nmのナノスケールSiスピンバルブ構造を極微細加工技術を用いて作製し、スピンバルブ効果の評価を行った。また、Mg層の膜厚を0.5-1.5 nmと系統的に変化させ、強磁性電極のスピン注入とスピ検出効率の最適化を行った。その結果、最大25 mVのスピン依存出力電圧および3.6%の逆スピンバルブ比を達成した。次に、III-V族半導体MBEを用いて移動度が高いIII-V半導体チャネルおよびMnGaやMnAsの化合物強磁性金属からなるスピンバルブ構造を作製し、スピンバルブ効果の評価を行った。その結果、世界最高の12%のスピンバルブ比および33 mVのスピン依存出力電圧を達成した。これらの結果はIII-V族半導体量子伝導スピン電界効果トランジスタのポテンシャルを示した。IV族半導体スピンバルブデバイスにおいて、Si系スピンバルブデバイスとして世界最高の3.6%のスピンバルブ比と25 mVのスピン依存出力電圧を達成した。さらに、III-V族半導体スピンバルブデバイスにおいて、世界最高の12%のスピンバルブ比と33 mVのスピン依存出力電圧を達成した。■IV族系量子伝導電界効果トランジスタ去年にIV族半導体スピンバルブデバイスとして世界最高3.6%のスピンバルブ比を達成した。今後には、さらに高いスピンバルブ比を実現するために、IV族半導体MBEおよび原子層堆積法(ALD)を組み合わせて、Si基板上に高品質の強磁性金属/MgO/Al203/Siの積層構造を作製する。Al203を挿入することによって、MgOトンネル障壁の結晶性の向上が期待でき、MgO特有のスピンフィルタ効果により、高いスピン注入効率を実現する。そのために、Al203およびMg0トンネル層の膜厚や成膜条件の適化を行う。また、この多層膜から、チャネル長10 nmの量子伝導Siスピンバルブ構造を極微細加工技術を用いて作製し、スピンバルブ効果を評価する。最終的には、SOI基板を用いて、バックゲート型電界効果トランジスタの構造の作製を試み、スピントランジスタとしての基本動作の確認を行う。去年度にはMnGaやMnAsの化合物強磁性金属およびIII-V族半導体チャネルからなる簡易なスピンバルブ構造を作製し、世界最高の12%のスピンバルブ比を達成した。今後には、さらに高いスピンバルブ比およびトランジスタ動作を実現するために、III-V族半導体分子線エピタキシャル結晶成長法および極微細加工技術を用いて、量子井戸トランジスタ(Quantum well transistor; QWT)を作製する。このトランジスタにおいて、チャネル長が短いことと、変調ドーピング効果による高い電子移動度が得られるため、量子伝導を容易に実現できる。また、本格的にIII-V量子井戸をチャネルとするナノスケールのスピンバルブ構造を作製し、そのスピンバルブ効果を評価するとともに、電界効果によるトランジスタ動作を試みる。

IV族半導体スピンバルブデバイスにおいて、Si系スピンバルブデバイスとして世界最高の3.6%のスピンバルブ比と25 mVのスピン依存出力電圧を達成した。さらに、III-V族半導体スピンバルブデバイスにおいて、世界最高の12%のスピンバルブ比と33 mVのスピン依存出力電圧を達成した。■IV族系量子伝導電界効果トランジスタ去年にIV族半導体スピンバルブデバイスとして世界最高3.6%のスピンバルブ比を達成した。今後には、さらに高いスピンバルブ比を実現するために、IV族半導体MBEおよび原子層堆積法(ALD)を組み合わせて、Si基板上に高品質の強磁性金属/MgO/Al203/Siの積層構造を作製する。Al203を挿入することによって、MgOトンネル障壁の結晶性の向上が期待でき、MgO特有のスピンフィルタ効果により、高いスピン注入効率を実現する。そのために、Al203およびMg0トンネル層の膜厚や成膜条件の適化を行う。また、この多層膜から、チャネル長10 nmの量子伝導Siスピンバルブ構造を極微細加工技術を用いて作製し、スピンバルブ効果を評価する。最終的には、SOI基板を用いて、バックゲート型電界効果トランジスタの構造の作製を試み、スピントランジスタとしての基本動作の確認を行う。去年度にはMnGaやMnAsの化合物強磁性金属およびIII-V族半導体チャネルからなる簡易なスピンバルブ構造を作製し、世界最高の12%のスピンバルブ比を達成した。今後には、さらに高いスピンバルブ比およびトランジスタ動作を実現するために、III-V族半導体分子線エピタキシャル結晶成長法および極微細加工技術を用いて、量子井戸トランジスタ(Quantum well transistor; QWT)を作製する。このトランジスタにおいて、チャネル長が短いことと、変調ドーピング効果による高い電子移動度が得られるため、量子伝導を容易に実現できる。また、本格的にIII-V量子井戸をチャネルとするナノスケールのスピンバルブ構造を作製し、そのスピンバルブ効果を評価するとともに、電界効果によるトランジスタ動作を試みる。
喘息疾患患児の家族対処とその効果に関する多元的データに基づいた有効な指標の同定

1)家族を全体として捉え、データ収集をすることは、全体状況を捉えるひろくとらえるには有効な方法ではあるが、深く現象を捉えるためには、限界がある。個別インタビューの方が本音や行動の裏に隠された思い・意図などが出やすい。例えば、喘息の自己管理に自信を持っている子どもに対し母はそれを認める発言をするが、実際にはまだまだ心配で任せられないと思っており、子どもに気づかれないように監視している。また、家族から禁煙してほしいと言われている父は、様々なところで気遣いをし、肩身の狭い思いをしているが、他の家族員にはそれは伝わっていない。その背景には、グループインタビューでは、他の家族員を傷つけるようなことは出さないように全参加者が気遣い言葉を選んで語るため、本音の部分が出にくいこと、インタビューアーも家族員が揃っているところでは、関係性に配慮し、裏にある本音を引き出すような投げかけができないため、表面的な部分しか出てこないなどが存在していた。したがって、複数の家族員を対象として質的なデータを収集する場合には、研究者に高い臨床判断能力が求められる。2)個別インタビューでは、子ども自身の対処や子どもを中心とした両親の動きなどが見えにくい。小学校高学年になると、子どもは子どもなりに考え行動している。グループインタビューでは子どもから得られる情報も多く重要なものもあったが、個別インタビューは両親しか行わなかったため、大人の視点からの客観的な情報しか得られなかった。子どもの言葉を受けての両親の言葉や反応も重要である。子どもの病気を中心とした家族の動きを知るためには、子どもの動きや思いを知ることが必要となろう。まだ、データ分析中であり、継続をして多元的データに基づいた有効な指標を同定するように研究を進めていく予定である。本年度は、過去10年の医学中央雑誌及びCINALを活用して、「対処」「家族対処」「QOL」「家族QOL」の測定用具を広く探索をした。そしてその結果をもとに、測定用具を現在修正・開発中である。それとともに、面接法によるデータ収集・データ分析方法を開発し、一貫性のある方法論となるように、研究方法を開発中である。すなわち、模擬家族を設定し、1つの模擬家族に対しA・B・Cの方法を用いてロールプレイを重ねている。A:父親と母親と子供を含めての面接を行い、ロールプレイ、面接内容を録音する。B:父親と母親との面接〔患児を含まず〕を行い、ロールプレイ、面接内容を録音する。C:父親、母親、子供の個別の面接を行い、ロールプレイ、面接内容を録音する。面接はすべて録音し、逐語録を作成している。事例ごとに逐語録から、個人の対処行動、家族としての対処行動、家族のQOLを抽出分類し、カテゴリー化を進めているとともに、A・B・Cによって結果や方向性の相違点や類似点、面接中の看護者の介入による家族の気づきやグループダイナミクスの変化について分析を行っている。平成15年度は、さらにD・Eの方法によるデータ収集を追加するD:父親と母親各自の自分自身についての捉え等を、測定用具を活用してアンケート調査するE:父親と母親から、家族全体についての捉え等を、測定用具を活用してアンケート調査するD・Eから得られたデータをA・B・Cの分析結果と、照合し、その共通点と相違点に注目して分析することで、喘息疾患患児の家族対処とその効果に関して有効な指標を同定することを意図すると共に、家族全体を捉える研究方法の確定を明確化することを目指す。(1)本年は慢性疾患児を抱える家族に対する家族看護についての文献検討を行い、外国と日本との相違を明らかにし、このような相違が家族の対処行動にどのように影響をするかを探索を行った。特に質的な研究を行う上で考慮するべき点を現在抽出中である。この結果から、我が国固有な家族対処を明らかにする研究方法を検討することができると想定される。(2)家族員のなかの子どもが喘息を病む場合と、成人の家族員(父親か母親)が喘息を病む場合をを想定して、家族ロールプレイを行っている。このようなロールプレイを繰り返し行い、現在までのそれぞれ30セッション(一日1セッション)を行った。映像にても録音をしそれぞれの家族員の経験を分析をしている途中である。このデータの結果から、個人としての経験、家族員の経験、家族の経験が明らかになるとともに、その研究方法も編み出していけると予想している。(3)家族員のなかの子どもが身体的な障害をもつ場合と、成人の家族員(父親か母親)が中途障害を抱えた場合を想定して、家族ロールプレイを行っている。

その背景には、グループインタビューでは、他の家族員を傷つけるようなことは出さないように全参加者が気遣い言葉を選んで語るため、本音の部分が出にくいこと、インタビューアーも家族員が揃っているところでは、関係性に配慮し、裏にある本音を引き出すような投げかけができないため、表面的な部分しか出てこないなどが存在していた。したがって、複数の家族員を対象として質的なデータを収集する場合には、研究者に高い臨床判断能力が求められる。2)個別インタビューでは、子ども自身の対処や子どもを中心とした両親の動きなどが見えにくい。小学校高学年になると、子どもは子どもなりに考え行動している。グループインタビューでは子どもから得られる情報も多く重要なものもあったが、個別インタビューは両親しか行わなかったため、大人の視点からの客観的な情報しか得られなかった。子どもの言葉を受けての両親の言葉や反応も重要である。子どもの病気を中心とした家族の動きを知るためには、子どもの動きや思いを知ることが必要となろう。まだ、データ分析中であり、継続をして多元的データに基づいた有効な指標を同定するように研究を進めていく予定である。
生活保護受給母子世帯の自立過程に関する研究:データベース構築によるパネル調査分析

A自治体における2005年度生活保護廃止世帯を対象に研究データを収集した。収集データの分析は継続中である。現時点で確認できたのは以下の諸点である。(1)生活保護の開始から廃止までのプロセス(自立過程)において世帯類型は変動する。(2)「母子世帯」以外の有子世帯、「傷病者世帯」「障害者世帯」以外の傷病・障害者は世帯類型を超えて存在する。(3)世帯主・配偶者の学歴構成は同一世代の男女と比べて低いほうに偏りがある。(4)開始から廃止までの受給期間は世帯主の学歴・性別や世帯類型で違いがある。3年計画の初年度にあたる平成18年度は,生活保護受給母子世帯の就労・生活条件の変化を長期継続的に把握し分析するための基礎的作業として,A自治体の協力を得ながら以下の諸点に取り組んだ。第一に,本研究の分析資料となるデータベースの作成である。平成17年度中に生活保護が廃止された世帯を調査対象として,(1)世帯構成・年齢・健康状態・学歴・就労歴といった世帯条件,(2)保護開始理由・保護受給歴・保護受給期間・保護廃止理由・廃止時世帯構成といった受給動向をデータ化した。A自治体における平成17年度廃止世帯すべてをデータ化することにより,生活保護受給母子世帯の特性を他の世帯類型との比較から検討する資料を作成した。さらに母子世帯については,受給期間中の職業と賃金の変遷,賃金・社会保障費・養育費等の収入充当費の変遷についてデータ入力を開始し,受給期間中の自立プロセスを分析する資料の作成に入った。第二に,生活保護受給母子世帯への面接インタビューである。生活保護受給母子世帯の自立条件を質的な側面から把握するために,質的調査分析に関する先行研究を収集し検討した。さらにA自治体において生活保護を受給している母子世帯,過去に受給していた母子世帯,一度も受給したことのない母子世帯を対象として,面接インタビューを実施した。第三に,生活保護受給母子世帯への支援の方策や課題を検討するための資料収集である。生活保護制度における自立支援プログラム事業に関して全国各地の資料を収集し,A自治体の自立支援プログラム事業については,自立生活支援員や業務が委託されているNPO等,関係者へのインタビューを行った。以上の研究遂行にあたっては,研究分担者との研究会の開催,A自治体との協議・意見交換を随時行った。3年計画の2年目にあたる平成19年度は、生活保護受給母子世帯の就労・生活条件の変化を長期継続的に把握し分析するための作業として、A自治体の協力を得ながら以下の諸点に取り組んだ。第一に、初年度に着手した本研究の分析資料となるデータ入力を継続し、データベースを精査する段階まで完成させた。平成17年度中に生活保護が廃止された全世帯のデータセットを精緻化したほか、母子世帯については自立過程をより詳細に分析するために、受給期間中の職業と賃金の変遷、月々の最低生活費と収入充当費の変遷、ケースワークの変遷を把握した。また、母子世帯の自立過程の特性を明確にするために、比較対象群として、母子世帯以外の有子世帯(障害者世帯、傷病者世帯、その他世帯)を抽出し、分析に必要なデータ入力を行った。第二に、これまでの研究経過を報告し、中間段階における研究成果を還元し、福祉現場と意見交換をするために、本研究の中間報告会をA自治体で開催した。本研究のデータベースに基づく分析方法やデータの解釈に関して、福祉事務所のケースワーカーや査察指導員と意見交換を行い、今後の研究課題を析出した。第三に、生活保護受給母子世帯への面接インタビューを継続して実施した。1年目にインタビューした母子世帯に再度インタビューを実施し、1年目には把握できなかった諸点に接近した。また、1年目と2年目における生活状況・世帯条件の変化に着目し、時間の経過とともに母子世帯の仕事や子育てにどのような影響が生じうるか、対象世帯を通して確認した。3年計画の最終年度にあたる平成20年度は,生活保護受給母子世帯の就労・生活条件の変化を長期継続的に把握し分析するための作業として, A自治体の協力を得ながら以下の諸点に取り組んだ。第一に,平成17年度に生活保護が廃止された全世帯のデータベースを完成させ,母子世帯および母子世帯以外の有子世帯については比較可能なタデータセットを作成した。さらに,それらのデータに基づく分析を開始し, 3年間の研究成果を発表する最初の論文を執筆した。第二に,生活保護受給母子世帯の相対的な位置を検討するために, A自治体における母子世帯関連のデータを収集した。児童扶養手当の受給動向や生活保護との関係についてはとくに担当者と意見交換を重ね,児童扶養手当に関するデータ収集を行った。第三に, 1・2年目に続いて生活保護受給母子世帯への面接インタビュー調査を実施した。

これまでインタビューを重ねてきた母子世帯に面接インタビューを行い,生活状況・世帯条件の変化を確認するとともに,時間の経過とともに母子世帯の仕事や子育てにどのような影響が生じうるかについて把握した。また,インタビュー資料の取り扱いや研究成果の発表方法について,あらためて説明・相談を行い,各当事者との合意を形成した。第四に,母子世帯の支援策に関するスウェーデン調査を行った。当事者団体,支援団体,保育所,公共職業紹介・職業訓練機関等を訪問し,母子世帯の労働と福祉を支える個別プログラムのあり方と課題について現地資料を収集した。以上の研究遂行にあたっては,研究分担者との研究会の開催, A自治体との協議・意見交換を随時行った。
描画の統計的画像解析と臨床的利用の検討

本研究は、臨床の現場で用いられることの多い、樹木画や人物画に関する描画法における統計的画像分析の方法を開発し、その方法に基づいて精神科医や臨床心理学者との連携のもとに新しく開発した方法の臨床的利用の検討を行い、臨床現場での心理評価や診断の補助手段としての利用法を検討することを目的とした。本研究では、描画を、フーリエ解析、ウェーブレット解析、ファジィロジック分析などの統計的画像解析の観点から統一的かつ計量的に分析し、より客観的な分析を行った。本研究では、統合失調症患者の描画を解析することを試みた。本研究では、本年度は、一般成人、成人の精神疾患患者(統合失調症の入院患者、その他の心理症状で通院する患者)を対象にして、樹木画の描画法でのデータを、スキャナーを用いて画像として取込み、画像情報に特異値分解などの解析を実施する方法を開発した。まず、基本的分析として、特異値分解を行うが、ここでは、描画の集合を画像の各ピクセルの濃度値(0:白から255:黒)を要素とする行列と見なして特異値分解の手法を適用する。行が「画像データにおけるピクセルの位置(以下描画座標と記述する)」に対応し、列が「対象者の描いた描画」に対応する行列を作成し、特異値分解を行った。このように、描画を画像情報をもつ行列として捉えて、近年成果の著しい統計的画像解析を行うことによって、測定、分析、解釈の客観性をある程度高め、心理評価や診断の際の補助手段として使用できるかについての検討を行った。本研究の結果は、様々な形での書籍、論文、学会発表などを通じて公刊がなされている。本研究では統合失調症患者のデータを取得して分析を試みたがまだ十分な数が得られていない点があげられる。分析方法の研究については順調に進展している。本研究では、描画を、フーリエ解析、ウェーブレット解析、ファジィロジック分析などの統計的画像解析の観点から統一的かつ計量的に分析し、より客観的な分析を行い、合失調症患者の描画を解析することを試みたが、データ数がまだ十分ではなく、さらに病院などに行って収集を試みる。また、描画の画像解析についての新しい方法の試みを今後行い、描画の形成過程についてもデータの取得を行い、分析を行う予定である。統合失調症患者のデータ取得等に遅れが生じてそのために使用額の変更が生じた。そのために次年度使用額が生じた。各自のWEBを紹介した。
カルモジュリン、GRK5の動態を標的とした心不全・動脈硬化に共通した治療法の探査

本研究では、RyR2に結合しているCaMと病的心肥大の関係をより詳細に解明し、CaMの心筋細胞内の動態制御に注目した全く新しい心肥大抑制薬または治療法の探査を目指す。また、GRK5はNF-kB活性を制御しているとされるため、GRK5の活性の上流に位置するRyRからのCaMの解離を抑制することで動脈硬化の進展抑制に寄与する可能性を秘めており、心不全・病的心肥大を抑制し、かつ動脈硬化をも抑制しうる創薬に着手する。
有機金属化学気相法によるp-n接合テルル化亜鉛発光素子の試作と特性

発光ダイオードを実現する上での重要な因子は、p-n接合と電極形成であり、それぞれについて下記のとうり研究を行った。〔p-n接合の形成〕:ディメチル亜鉛(DMZn)とディエチルテルル(DETe)を原料ガスとし、トリエチルアルミ(TEAl)をn形のドーパントとした有機金属気相エピタキシャル成長法(MOVPE)を用いて、ブリイジマン法にて育成したp形のテルル化亜鉛基板上にホモエピタキシャル成長を行った。得られた成長層は、低抵抗でn形の電導形(例えば、0.3Ω・cm、移動度200cm^2/V・s)を示した。そこで、n形の成長層を再現性良く、かつ制御性良く得るための成長条件とド-ピング条件を確立した。また、ホトルミネッセンセンス法による光学的評価を行った所、A1が結晶中に有効に取り込まれている事が判った。〔電極形成及びダイオード特性〕:金(Au),マンガン(Mn)及びタングステン(W)等を電極材とし、メッキ法、真空蒸着法等を用いて電極形成を行った。電極としての適応性を電気的方法等を用いて評価した所、Au/Wの二層構造が最適であった。試作したダイオードは、典型的な特性を示したが、充分な電流密度が得られず、発光には到らなかった。その原因として電極のオーミックコンタクトの問題が考えら、電極材、構造及び形成方法についてのより一層の研究が必要である。
炭窒化チタンタングステンを被膜とするPVDコーテッド工具の開発

本研究では、新しいタイプの炭窒化チタンタングステン(Ti,W)(C,N)膜に着目し、(Ti,W)(C,N)膜におけるCとNの成分割合が工具摩耗を及ぼす影響を調べることを目的とする。そこで、TiW合金ターゲットを試作し、超硬合金K10種を母材とし、PVDコーティング法によって(Ti,W)(C,N)膜を形成させた。さらに、(Ti,W)N膜の形成においては、バイアス電圧は-30v、-150v、-300vの3種類に変化させた。また、(Ti,W)(C,N)膜、(Ti,W)C膜の形成においては、バイアス電圧は、-300vで一定とした。次に、被膜特性(被膜厚さ、被膜硬度、スクラッチ強度)の測定を行った。さらに、これらの試作PVDコーテッド超硬工具でクロム鋼SCr420H、ステンレス鋼SUS304,ステンレス鋼SUS310s,焼結鋼および焼結ステンレス鋼の切削を行い、TiN、(Ti,Al)N膜PVDコーテッド超硬工具の工具摩耗と比較した。得られた主な結果は次の通りである。3.SUS304、およびSUS310S切削においては、バイアス電圧-300vの(Ti,W)N膜が耐摩耗性に優れていた。5.焼結ステンレス鋼切削においては、(Ti,W)C膜が耐摩耗性に優れていた。本研究では、チタン系セラミックスにタングステンを添加した新しいタイプの炭窒化チタンタングステン(Ti,W)(C,N)膜に着目し、(Ti,W)(C,N)膜におけるTiとWの成分割合、およびCとNの成分割合が工具摩耗を及ぼす影響を調べることによって、耐凝着性・耐アブレシブ性、いずれにも優れた(Ti,W)(C,N)膜を開発することを目的とする。そこで、この目的を達成するために、(Ti,W)(C,N)膜においてTi75atm%とW25atm%の成分割合を持つ合金ターゲットを使用し、超硬合金K10種を母材とし、PVDコーティング法によって(Ti0.75,W0.25)(C,N)膜を形成させた。なお、CとNの成分割合は、(Ti0.75,W0.25)(C0.2,N0.8)膜、(Ti0.75,W0.25)N膜(=(Ti0.75,W0.25)(C0N1)膜)、(Ti0.75,W0.25)C膜(=(Ti0.75,W0.25)(C1N0)膜)の3種類である。(Ti0.75,W0.25)N膜の形成においては、バイアス電圧を-30V、-150V、-300Vに変化させた。また、(Ti0.75,W0.25)(C0.2,N0.8)膜、(Ti0.75,W0.25)C膜の形成においては、バイアス電圧は、-300Vで一定とした。さらに、これらの試作PVDコーテッド超硬工具でクロム鋼SCr420Hを切削し、市販のTiN、(Ti,Al)N膜PVDコーテッド超硬の工具摩耗と比較を行った。その結果、チタン系セラミックスにタングステンを添加した新しいタイプの炭窒化チタンタングステン(Ti,W)(C,N)膜は、市販のTiN、(Ti,Al)N膜の比べ、耐摩耗性に優れていることが分かった。本研究では、チタン系セラミックスにタングステンを添加した新しいタイプの炭窒化チタンタングステン(Ti,W)(C,N)膜に着目し、(Ti,W)(C,N)

膜におけるTiとWの成分割合、およびCとNの成分割合が工具摩耗を及ぼす影響を調べることによって、耐凝着性・耐アブレシブ性、いずれにも優れた(Ti,W)(C,N)膜を開発することを目的とする。そこで、この目的を達成するために、平成15年度では、(Ti,W)(C,N)膜においてTi75atm%とW25atm%の成分割合を持つ合金ターゲットを使用し、超硬合金K10種を母材とし、PVDコーティング法によって(Ti0.75,W0.25)(C,N)膜を形成させ、これらの試作PVDコーテッド超硬工具でクロム鋼SCr420Hを切削し、市販のTiN、(Ti,Al)Nコーテッド超硬の工具摩耗と比較を行った結果、バイアス電圧-150Vの(Ti,W)K膜が、市販のTiN、(Ti,Al)N膜の比べ、耐摩耗性に優れていることが分かった。そこで、平成16年度では、SCr420H以外の被削材の切削においても、(Ti,W)Nコーテッド超硬が適した工具材種かどうかを明らかにするために、被削材としてステンレス鋼SUS310S、焼結鋼、および焼入れ焼結鋼を使用した。そして、これらの被削材の切削を、(Ti,W)Nコーテッド超硬工具で行った。その結果、SUS310Sの切削においては、バイアス電圧-300Vの(Ti,W)N膜が、耐摩耗性に優れていた。しかし、焼結鋼、および焼入れ焼結鋼の切削においては、SCr420Hの切削と同様、バイアス電圧-150Vの(Ti,W)N膜が、耐摩耗性に優れていた。これらのことから、被削材の種類によって、最適なバイアス電圧を選定する必要があることが明らかになった。本研究では、チタン系セラミックスにタングステンを添加した新しいタイプの炭窒化チタンタングステン(Ti,W)(C,N)膜に着目し、(Ti,W)(C,N)膜におけるTiとWの成分割合、およびCとNの成分割合が工具摩耗を及ぼす影響を調べることを目的とする。そこで、この目的を達成するために、(Ti,W)(C,N)膜においてTi75atm%とW25atm%の成分割合を持つ合金ターゲットを試作し、超硬合金K10種を母材とし、PVDコーティング法によって(Ti,W)(C,N)膜を形成させた。さらに、(Ti,W)N膜の形成においては、バイアス電圧は-30V、-150V、-300Vの3種類に変化させた。また、(Ti,W)(C,N)膜、(Ti,W)C膜の形成においては、バイアス電圧は、-300Vで一定とした。次に、被膜特性(被膜厚さ、被膜硬度、スクラッチ強度)の測定を行なった。さらに、これらの試作PVDコーテッド超硬工具でクロム鋼SCr420H、ステンレス鋼SUS310Sおよび高強度焼結鋼の切削を行い、市販のTiN、(Ti,Al)N膜PVDコーテッド超硬の工具摩耗と比較した。得られた主な結果は次の通りである。(3)SUS310S切削においては、バイアス電圧-300Vの(Ti,W)N膜が耐摩耗性に優れていた。(4)高強度焼結鋼切削においては、バイアス電圧-150V,-300Vの(Ti,W)N膜が耐摩耗性に優れていた。
麻痺喉頭の病的共同運動に対する治療法の開発

反回神経脱神経群と神経縫合群を作製した。一定期間後に声帯運動の評価、甲状披裂筋(TA)・後輪状披裂筋(PCA)の筋電図検査と免疫染色を行った。神経縫合群では共同運動あるいは弱い正常運動が認められた。共同運動を呈した例でPCAよりTAに優位な吸気時電位増強を認めた。正常運動5例中2例では吸気時にTAが、3例ではPCAが優位であった。神経縫合群では過誤再生を生じ、その程度によって共同運動または弱い正常運動を呈するものに分かれたと考えられた。筋サブタイプに特異的な変化はなかった。Caチャンネル拮抗剤を投与して軸索再生を促進した神経縫合群も検討したが、非投与群と同様であった。実験にはWistar系ラット、メス8週齢を計45匹用いた。声帯運動が正常なことを確認した後、輪状軟骨下端から10mmで左反回神経を切断し即時に断端を11-0ナイロン糸で縫合、シリコンチューブで縫合部を被覆した(神経縫合群30匹)。残る15匹は左反回神経を切断し断端を飜転して筋肉内に埋入した(脱神経群)。処置後、2、4、10週後に自発呼吸下の声帯運動、甲状披裂筋と後輪状披裂筋の筋電図検査、および両筋の誘発筋電図検査を行って声帯の共同運動と反回神経に含まれる神経線維の過誤再生を評価した。脱神経群では処置後のどの時期でも15匹すべてが左声帯に可動性はみられなかった。神経縫合群2週後は左声帯運動がみられなかった。筋電図検査では放電がみられなかった。4週後は10匹中4匹で、10週後は10匹中2匹で左声帯の共同運動がみられた。これらの動物では後輪状披裂筋に比して甲状披裂筋の電位が大きかった。4週後の1匹、10週後の3匹では不十分だが正常声帯運動がみられた。これら4匹中2匹の筋電図検査で吸気時に後輪状披裂筋の電位が甲状披裂筋よりも大きかった。誘発筋電図検査でも脱神経群ではどの時期でもすべての動物で電位は誘発されなかった。神経縫合群では両筋とも経過とともに誘発電位の振幅が増大した。神経縫合群30匹中20匹は声帯運動が回復せず、4匹で軽度の声帯運動が回復した。残る6匹で声帯の共同運動が生じた。8週齢Wistar系ラット計62匹を対象とした。神経縫合群(n=42)では左反回神経を切断後、端々縫合を行った。コントロールとして脱神経群(n=20)を作製した。処置の2、4、10週後に声帯運動の評価、甲状披裂筋・後輪状披裂筋の安静呼吸時における筋電図検査、および誘発筋電図検査および免疫組織染色を行った。声帯運動の評価では、吸気時に処置側声帯が内転するものを共同運動、外転するものを正常運動ありとした。免疫組織染色では筋線維のサブタイプの変化を評価した。全ての脱神経群と2週経過後の神経縫合群においては、声帯運動・筋活動電位は認めなかった。4週、10週後の神経縫合群42匹中、10匹で共同運動を、8匹で弱い正常運動を認めた。これらのうち、共同運動の8匹、正常運動の5匹で筋電図検査を行ったところ、誘発筋電図では全例で複合筋活動電位を認め、神経再支配・神経筋接合部の再形成の起こっている事が示唆された。共同運動を呈した8例全例で吸気時に後輪状披裂筋よりも甲状披裂筋に優位なリクルートメントを認めた。弱い正常運動を呈した5例中2例では共同運動を示した動物と同様に、吸気時に甲状披裂筋が優位であったが、3例では後輪状披裂筋が優位であった。声帯運動を認めないものでは放電は認められなかった。以上から、神経縫合群では4週以降で神経再生、一部は過誤再生を生じ、その程度によって共同運動または弱い正常運動を呈するもの、および声帯運動を生じるだけの神経再生が起こらなかったものに分かれたと考えられた。共同運動の2匹、正常運動の3匹で免疫染色を施したところ、全ての動物で筋サブタイプの変化がみられるものの、特異的な変化はみられなかった。Caチャンネル拮抗剤を投与することで再生軸索の伸長を促進した神経縫合群を42匹作製し同様に評価したが、非投与群と声帯運動に明らかな差はみられなかった。

左反回神経を第7気管輪レベルで切断し即時に縫合したモデル動物(Wistar系ラット、メス8週齢)15匹を作製した。処置20週後にすべての動物で声帯はほぼ不動であった。声帯の不動を確認した後、引き続いて反回神経を閾値上電流で刺激し後輪状披裂筋(以下、後筋と略、声門開大筋)と甲状披裂筋(以下、内筋と略、声門閉鎖筋)の誘発筋活動電位を記録した。これらの誘発電位の最大振幅を計測し、内筋の最大振幅に対する後筋の最大振幅の比(後筋/内筋)を計算した。正常側(7側)の(後筋/内筋)比は23.0±44.4%(平均±標準偏差)であった。一方、切断縫合20週後の処置側(後筋/内筋)比(2側)は333.7%、112.0%と大きな値を示した。また、内筋の筋線維サブタイプに2A線維が出現した。これらの結果から再生神経が本来の標的筋肉と異なった筋肉に到達したこと(過誤神経支配)が示唆された。明らかな共同運動は記録できなかったが、筋電図学的および免疫組織学的に過誤神経支配の生じたことが示されたことから、今回作製した動物モデルを麻痺喉頭の共同運動モデルとして使用できると考えられた。平成23年度に引き続いて動物の個体数を増やして経時的に声帯運動の観察、自発呼吸時の筋電位、および誘発筋電図検査を行った。神経縫合群の20%の動物で共同運動を生じることが分かった。後輪状披裂筋(以下、後筋と略、声門開大筋)と甲状披裂筋(以下、内筋と略、声門閉鎖筋)の誘発筋活動電位の最大振幅比を計算し、正常反回神経7側からおよその正常範囲を設定することができた。切断縫合モデル動物処置側での測定はいまだ2側に留まっているがいずれも正常範囲を逸脱する値であった。さらに、免疫組織学的に、正常では後筋に発現し内筋にみられない2A筋線維が、処置側内筋に発現することが示された。これらを定量的に評価することで過誤神経支配の程度を定量化できる目途がついた。平成23年度に行った誘発筋電図を用いた過誤神経支配の定量化法(甲状披裂筋と後輪状披裂筋の誘発電位の比)は個体間におけるばらつきが大きく定量的な評価に応用できないことが分かった。過誤神経支配程度の新たな定量的評価法として、過誤神経支配が起こると正常では後輪状披裂筋に発現し甲状披裂筋にはみられない2A筋線維が処置側甲状披裂筋に発現するので、同筋の筋線維全体に占める2A筋線維の割合を計測することとしたい。確立した動物モデルを用いて、処置後にCaチャンネル拮抗剤含有飼料で飼育し神経再支配が早く起これば過誤神経支配の程度が軽減するかどうかを検討する。神経過誤支配として、声門開大時に内筋の収縮が強くなる場合と、逆に声門閉鎖時に後筋の収縮が強くなる場合の二通りが考えられる。両筋の電位の比(PCA/TA比)を正常側および無処置正常動物のPCA/TA比と比較してa)過誤支配の有無とb)後筋優位の過誤支配か、内筋優位の過誤支配か、を判定し、さらにc)過誤支配の程度を定量化する。そのために平成24年度はモデル動物の個体数を増やすことに努める。また、把持力の強い脳血管用クリップを用いて反回神経を傷害し、声帯麻痺発症後に声帯運動が回復するモデル動物を作成して回復過程におけるPCA/TA比を測定して過誤神経支配モデル動物のPCA/TA比との違いを検討する。神経縫合群では20%の動物で共同運動の生じることが分かった。さらに高い確率で共同運動を起こすために、把持力の強い脳血管用クリップを用いて反回神経を傷害し、声帯麻痺発症後に声帯運動が回復するモデル動物を作製する。神経過誤支配の指標として、声帯運動の観察と甲状披裂筋における2A筋線維の占める割合を計測する。神経縫合群とクリップ傷害群の神経再生様式を免疫組織学的に評価する。
腎尿細管上皮細胞膜における有機カチオン輸送の分子機構

腎臓の近位尿細管上皮細胞には有機カチオン輸送系が存在し、カチオン性薬物を能動的に尿中へ排泄する。既に刷子縁膜(管腔側)、側底膜(血管側)小胞を用い、前者ではH^+/有機カチオン対向輸送系が、後者では膜電位依存性の輸送系が関与することが明らかにされている。しかしこれら輸送系の構造的側面に関しては全く不明である。本研究では、有機カチオン輸送体の遺伝子クローニングを目指し発現クローニング法による検討を進めるとともに、photoaffinity labelingの手法を用いて蛋白質側からも輸送体の同定を試みた。1.アフリカツメガエル卵母細胞による有機カチオン輸送活性の発現ラット腎皮質mRNAを卵母細胞に注入した場合、有機カチオン、テトラエチルアンモニウム(TEA)の輸送活性が発現する。そこで卵母細胞で発現しているTEA輸送系の特性について解折したところ、阻害剤に対する感受性、pHや膜電位の影響から判断して、側底膜の有機カチオン輸送系と推察された。photoaffinity labelingは、目的とする蛋白と特異的に相互作用するligandを光照射により不可逆的に結合させ、これをマーカーとして蛋白を同定、精製しようとするものである。そこで刷子縁膜のTEA輸送系に対し高い親和性を有するシメチジンを親化合物とし、アジド基を導入することでphotoaffinityプローブAMCを合成した。AMCはシメチジン同様刷子縁膜のTEA輸送を強く阻害した。このAMCを用いてUV照射により刷子縁膜蛋白のphotoaffinity labelingを行ったところ約36kDaの蛋白が標識され、この蛋白が刷子縁膜有機カチオン輸送体である可能性が示唆された。
高反応性カチオン種の制御を志向した非配位性キラルアニオンの触媒化学

有機合成化学において最も基本的な反応活性種であるイオン性化学種、特にカチオン性の反応中間体を自在に制御するためのキラルな非配位性アニオン触媒系を確立する。キラルアニオンを触媒とする化学は近年著しい進歩を見せているが、この化学に潜在する合成化学的な可能性が十分に利用できていない。これは、求核的なアニオン触媒がしばしば対となるカチオン中間体と反応して触媒活性を失うことに起因する。本研究では、申請者が開発した求核力をもたない(非配位性)キラルアニオンである五価六配位ホスファートおよび四座型ボラートの構造制御により、従来まで利用が難しかった高反応性カチオン種を経る分子変換の制御を目指す。