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公立劇場による地域への演劇教育活動の実態調査-日本と英国の比較研究-

公立劇場が地域に対しいかなる演劇教育活動を行っているか、あるいは行うべきであるかという問題について、英国の公立劇場、特にマンチェスターの2劇場を中心に実地調査を行った。また、わが国の公立劇場の活動についても調査を行った。彼我の比較を通して、演劇教育活動に対する意識の相違が明らかとなり、また組織・資金・人材面においてわが国が大きく後れを取っている現状も明らかとなった。[1]実地調査(英国)岩井が現地を訪問。Royal Exchange Theatreの諸施設および演劇活動を見学。またManchester周辺の小劇場であるGuide Bridge Theatreを見学し、Stuart Needham(Chairman)にインタヴューを行う。またおりしも申請者3名の翻訳したDealer's Choiceが地元アマチュア劇団によって上演されていたため、俳優に対しても地域における芝居づくりのあり方についてインタヴューを行う。Guide Bridge TheatreはRoyal Exchange Theatreからの資金援助と地元のボランティアによって運営されている。その詳細については平成19年度の課題とする。[2]実地調査(日本)1)新国立劇場岩井が同劇場運営財団井上桂氏にインタヴューを行い、同劇場養成所において行われているワークショップ(ペーター・ゲスナーによる)を見学。同養成所はプロのためのものであり、地域への教育活動とは一線を画するが、演劇教育のひとつのひな形を示されたと考える。2)世田谷パフリッタシアター岩井が同劇場制作部長高萩宏氏にインタヴューを行う。同劇団の沿革と概要、スタッフ、資金、地域への教育活動、芸術活動と教育活動との整合性等について調査。同劇場は地域への文化活動の点において国内でもっともすぐれた劇場であるが、特に演劇教育活動のスタッフと資金面では英国にかなり立ち後れていることが知られた。[3]演劇教育関係書籍の収集岩井がManchesterを訪問した際、図書館・書店等で演劇教育関係の書籍約100点のリストを作成。帰国後、入手可能な洋書38冊を収集。他に和書4冊、和雑誌2種38冊を収集。[1]実地調査(英国)[2]実地調査(日本)新国立劇場、世田谷パブリックシアター、せんがわ劇揚、彩の国さいたま芸術劇場、金沢芸術村、びわ湖ホール、北九州芸術劇場等の公立劇場を視察。地域への演劇教育活動(劇揚に於けるワークショップ,学校等へのアウトリーチ活動)の実態について調査する。英国に比して,地域への演劇教育活動を計画的かつ継続的に行っている公立劇場は非常に少なく,特にアウトリーチ活動については特筆すべきものがなかった。[3]実地調査(福岡)福岡市における地域への演劇教育活動の歴史を,公立劇場の設立経緯,文化振興課および文化芸術振興財団の活動,さらにはこれを準備した地元劇団の活動を追いつつ調査。1英国マンチェスターを拠点とする演劇教育活動調査英国北西部の演劇拠点であるマンチェスターにうる下記の劇場について、演劇教育活動の実態調査を行った。マンチェスター市が運営するイングランド唯一の市営劇場。市営であるため、「劇場が公的機関としていかに地域に貢献できるか」を追及しながら活動している。小学校を中心とする若年層に焦点を当てた教育活動についてCommunity and Educational DirectorのLiz Postlethwaite氏にインタビューを行い、小学校でのワークショップに参加した。英国の教育システムの中でにおける劇場の役割と可能性について聞く。なおこの調査結果については、道行が日本演劇学会全国大会(2009年6月、大阪市立大学)にて「英国における劇場のアウトリーチ活動」というタイトルで口頭発表する予定である。2国内の公立劇場の演劇教育活動調査国内の公立劇場については、調布市立せんがわ劇場に対し、2度の実地調査を行った。また世田谷パブリックシアターの旧スタッフには数度にわたるインタヴューを行っている。しかし他の劇場については印刷物やホームページを材料とする網羅的情報収集にとどまった。今後継続的に調査を行うつもりである。3福岡の劇団の活動史研究平成20年度交付申請書でも述べたとおり、研究協力者・安永行政(九州大学大学院芸術工学府・後期博士課程)の協力を得、昭和後期以降の劇団の活動史についてはほぼ調査を終了した。その成果は、やはり前述の日本演劇学会全国大会にて「地方中枢都市における地域演劇文化の系譜」というタイトルで口頭発表する予定である。
アルツハイマー病におけるアミロイド蛋白生成γセクレターゼ活性の生体画像法の開発

アルツハイマー病の脳内のβアミロイド蓄積の程度が必ずしも認知活動と並行しないことが指摘されているため、βアミロイド生成の上流にあるγセクレターゼの活性の生体画像化を試みた。その結果、γセクレターゼ活性依存的に発生するように設計したMRIプローブはin vitro系ではうまくシグナルを発生したが、生体実験ではシグナルが得られず、より効率に細胞内移行を示し高シグナルを出すプローブが必要であると結論した。23年度では、PS1のγセクレターゼ酵素活性によるAPPのプロセシングを、NMRを用いてin vitroで画像化するためのイメージング技術を開発することを目的とし研究を行った。まず、家族性AD変異を持つPS1(PS1-A246E)を安定的に発現するNeuro2a細胞株(N2a/A246E細胞)において、PS1のγセクレターゼ酵素活性によるAPPのプロセシングをNMRで検出することをねらい、新規の分子機能プローブを作製した。即ち、APPのγ切断部位ペプチド(GGVVIATV)のN末端に、ランタノイド金属イオン(Gd^<3+>)とDOTAの錯体を付加し、また、C末端に[^<19>F]標識したHIV-Tatタンパク質を結合することで、[^<19>F]NMRのT2緩和時間をGd^<3+>によるparamagnetic effectにより短縮して、プローブの[^<19>F]NMRシグナルが減弱されるものを作製した。ここで、HIV (human immunodeficiency virus)-Tatタンパク質はPTD (protein transduction domain)活性を持つので、創製したプローブ(以下、γAPP-Tatと略)を細胞内に取り込ませることに働く。また、γAPP-Tatプローブはγセクレターゼによるプロセシングを受け、[Gd^<3+>]DOTAを遊離するために、[^<19>F]MRIシグナルがNMRで検出できる程度までに増強される。次に、培地にγAPP-Tatプローブを添加することでN2a/A246E細胞に導入し、γセクレターゼによりAPPがプロセシングされることで生じるNMRシグナルから、in vitroでNMRを用いてγセクレターゼ酵素活性を定量的に評価した。サル脳を画像化できる改変γAPP-Tatを試みてMRI画像を施行したが、プローブの脳内移行が十分でなく、十分なシグナルが得られなかった。この結果が用いられた動物(自然発症認知症サル)の脳内でアミロイド集積がなかったことに起因したかどうかについて調べる目的で、PET画像でサル脳を確認した。その結果、[11C]PIBによるアミロイドとミクログリア活性を試みてアミロイドの脳内集積がみられ、軽度ミクログリア活性が生じていることが示された。本研究のγセクレターゼのAPP分解酵素活性を評価できるin vitro研究では、実際にNeuro2a細胞株を用いてγセクレターゼの酵素活性APPのプロセッシングを評価できるプローブを設計することができた。その後、そのプローブを用いたin vivo画像化を試みて、細胞内に取り込ませるためのプローブ(γAPP-Tat)を作成してサル脳で確かめたが、脳内移行がうまく行かず十分なMRIシグナルを得られなかった。本年度では、前年度に創製したγセクレターゼ酵素活性を定量解析するためのNMR機能プローブを培養生細胞に適用し、In-cell NMR技術によるγセクレターゼ酵素活性の生細胞での画像化を行った。ここでは、まず創製済プローブにHIV-Tatタンパク質の一部アミノ酸を置換した改変HIV-Tatタンパク質を付加し、マウス胎仔大脳皮質由来神経細胞培養系の培地中に添加した。そして、NMRを用い、培養生神経細胞にてγセクレターゼ酵素活性動態をリアルタイムに可視化し、その酵素活性を定量解析した。次に、Swedish変異APPを発現するAD病態モデルマウス(APP23マウス)胎仔脳皮質から神経細胞を初代培養し、改変HIV-Tatタンパク質付加プローブによるIn-cell NMRでγセクレターゼ酵素活性を画像化、定量評価した。また、ELISAによりAβ1-42の産生を同時的に計測した。その結果、Aβ1-42の産生に与るAD病態特異的なγセクレターゼ酵素活性の賦活を確認することができた。本年度は、さらに、改変NMR機能プローブにて改変HIV-Tatタンパク質を、血液脳関門透過性がこれまでに報告されている狂犬病ウィルス糖タンパク質RVGに置換し(RVG-MRIプローブ)、そのγセクレターゼ酵素活性のin vivoイメージングへの適用を図った。ここでは、APP23マウスに脳定位装置を用いてRVG-MRIプローブを海馬に注入し、γセクレターゼ酵素活性を3T MRIで画像化し、プローブの機能評価を行った。その結果、APP23マウスでのAβ1-42の産生を反映し、MRIシグナルが増強することを確認した。γセクレターゼ酵素活性のMRIによるin vivoイメージング技術を創出するに当たり、その基礎的な技術要素である培養生細胞でのγセクレターゼ酵素活性のNMRによる定量解析系が確立されたため。25年度が最終年度であるため、記入しない。

AD病態モデル神経培養細胞系にて、培地にNMR機能プローブを添加することで、γセクレターゼ酵素活性をNMRにより画像化することができるIn-cell NMR技術を確立したため。本年度では、Swedish変異APPを発現するADモデルのトランスジェニックマウス(APP23マウス)に、先に創製したγセクレターゼ酵素活性のin vivoイメージングのための分子プローブ、γAPP-Tatを末梢より投与し、MRIを用いて高解像度で脳内のγセクレターゼ酵素活性を画像化する。また併せて、HIV-Tatタンパク質のアルギニン以外のアミノ酸残基を置換することで変異Tatタンパク質を調製し、脳への導入効率に優れた高PTD活性を持つ変異Tatタンパク質をスクリーニングする。高いPTD活性の認められた変異Tatタンパク質より、新規γAPP-Tatを作製し、分子プローブの脳への取り込みを改善する。25年度が最終年度であるため、記入しない。これまでにNMRを用い、培養生細胞にてγセクレターゼ酵素活性を定量評価することができたNMR機能プローブの修飾基をRVGに置換することで、MRIによりin vivoでAD病態脳におけるγセクレターゼ酵素活性動態を画像化することを目指す。そのために、RVG-MRIプローブの血液脳関門透過性の至適化を行いながら、APP23マウスにプローブを末梢投与し、その機能評価を進める。
角膜実質幹細胞による実質細胞外マトリックスの再生

生体組織に近い人工角膜構築のためには、組織にもともと存在する細胞を用いることが望ましく、また、恒常的に安定な細胞の供給のためは組織幹細胞の分離・培養法の確立が必要である。我々は実験動物(マウス)を用いて、角膜実質内に組織間細胞が存在している事を明らかにし、また、その培養法を確立した。本研究は人工角膜作製を目指した人工角膜実質の構築を目的としている.生体組織に近いマテリアルの開発のためには組織本来の細胞を用いることが望ましく、恒常的に安定な細胞の供給のため、組織幹細胞の分離・培養法の確立が必要であった.そこでまず、実験動物(マウス)を用いた検討を行った結果、角膜実質細胞の分離と長期培養に成功した.更に、この細胞を角膜実質幹細胞としてキャラクタライゼイションを行い、角膜実質が本来由来している神経堤幹細胞の性質も持っていることを明らかにした.この結果は、「Isolation of multipotent neural crest-derived stem cellsfrom the adult mouse cornea」として、英文科学誌「Invest Ophthalmol Vis Sci.」に発表することが出来た.さらに、この成果を応用して、ヒト角膜実質からの同様な細胞の分離・培養にも成功しつつある.また、分離した角膜実質幹細胞を元に、フィブリンゲル、およびコラーゲンゲル中での細胞培養を様々な培養条件下で検討しており、生体組織中の角膜実質細胞に近い形態を保った培養条件を確立しつつある.この培養条件下での、ケラトカンをはじめとするマーカーの発現についてRT-PCRおよび免疫染色法によって確認を行っている.本研究は人工角膜作製を目指した人工角膜実質の構築を目的としている.生体組織に近いマテリアルの開発のためには組織本来の細胞を用いることが望ましく、恒常的に安定な細胞の供給のため、組織幹細胞の分離・培養法の確立が必要であった.先年の報告書にあるように、マウス角膜実質から角膜実質幹細胞(COPs)の分離・培養技術の確立に成功している.本年度は、人工角膜実質の構築を目的として、この細胞を用いた3次元培養の検討を行った.当初の計画にある、フィブリンゲルを用いた培養では、3次元の培養は困難であった。そこで、角膜実質本来の構成成分でもあるコラーゲンを用いた3次元培養を検討した。その結果、コラーゲンゲル中でのCOPsの良好な生育を認めた。免疫染色法によりマーカーの発現を調べたところ、ガレクチンなど本来の角膜実質で発現している細胞外基質の一部の発現は認められたが、もっとも角膜実質特異的なケラトカンの発現は失われていた。また発現している細胞外基質も細胞の周囲にとどまっており、全体に拡散して存在するところまで至っていない。今後、ケラトカンの発現を保ったまま3次元培養できる系を確立するためさらなる研究が必要である。実質細胞の性質を表すためには上皮からの誘導も重要である可能性を考え、現在、当研究室で既に作成法が確立している培養上皮シートとの共培養を行い、検討中ある。また、ヒト角膜実質からの幹細胞分離・培養法もほぼ確立した。現在はマーカーの発現を確認中で、一部のマーカーに関しては既に発現を確認できているが、発現が消失しているマーカーも一部あり、培養法に関してもさらなる検討・改良が必要であると考えられる。本研究は人工角膜作製を目指した人工角膜実質の構築を目的としている.生体組織に近いマテリアルの開発のためには組織本来の細胞を用いることが望ましく、恒常的に安定な細胞の供給のため、組織幹細胞の分離・培養法の確立が必要であった.一昨年、昨年の報告書にあるように、マウス角膜実質から角膜実質幹細胞(COPs)の分離・培養技術の確立に成功している.本年度は、昨年度に引き続きコラーゲンゲルを用いた3次元培養の検討を行ってきたが、期待する強度と透明性、またマーカー遺伝子の発現を保持した状態での構築に至っていない。培養上皮シートとの共培養系での検討も行っているが、この系ではコラーゲンの溶解が激しく、やはり目的の状態に至っていない。現在は、架橋剤やUVを用いた架橋により、コラーゲンゲルの融解を抑えることができるか検討中である。また、マウス角膜実質内に直接COPsを注入し、COPsの有用性を確認するための検討を行っている。さらに、本来の目的とは異なるが、角膜実質細胞と同じ神経堤細胞由来である角膜内皮細胞をCOPSから誘導できそうであるため、詳細に検討を行っているところである。
現代日本映画におけるジェンダーとセクシュアリティ:表象とアイデンティティ

本年度の主要な研究目的はジェンダーと〈クイア〉および異形の身体表象という視点で映画を体系的に考察することであった。研究代表者、三神は、マーティン・マクドナー作のアイルランド映画『In Bruges』(2008)を考察し、道徳的タブーを覆すために、小人症などに代表される〈フリークス=異形の者〉を登用するケースを論じるとともに、映画に登場するヒエロニムス・ボッシュの絵画「最後の審判」の中の〈異形の者たち〉との関連性を考察することによって主人公の内面の楝獄/地獄が観光都市ブルージュと結び付けられていることを議論した。外国人特別研究員、高は〈クイア〉という視点では松本俊夫による『薔薇の葬列』(1967)を分析し、ゲイボーイの身体表象を映画のリアリズムと関連付けて考究し、「ジェンダーとエスニシティ」のテーマにおいては、大島渚による『日本春歌考』(1967)を考察し、映画内という枠組みを超えて、より広範な社会・文化的文脈との関連性をからみあわせて考察を試みた。さらに『日本春歌考』の中で歌われる『満鉄小唄』に想起される、従軍慰安婦の問題を1950年代の戦争アクション映画における表象の考察に発展させを論じた。三神による研究はこれまでのアイルランド映画研究の主要テーマであったナショナルアイデンティティや〈アイリッシュネス〉の表象を踏まえながらも身体表象、絵画、またマクドナーの演劇作品との隣接性に焦点を当てることで従来のアイルランド映画研究に新しい視点とメソドロジーを提供し多大な学術的貢献をしたといえる。高の研究も、従来の日本映画研究ではほとんど論じられることのなかったリアリズムと身体表象、エスニシティとジェンダーという錯綜するテーマを取り上げることにより、既存のジェンダー・セクシュアリティ、クイア表象研究の枠組みを発展させる重要な役割をもつといえる。本年度は、高は、カルト映画作家として知られる松井良彦の4作品のテクスト分析を、三神は、マーティン・マクドナーの映画『In Bruges』(2008)のテクスト分析をそれぞれ行った後、各自の分析を報告し合い、議論をすることで、映像作品における同性愛、性倒錯者、外国人、小人などのいわゆる社会的に疎外されてきた人々の表象について考察した。松井作品において、これらの社会的、性的マイノリティはかならずしもポジティブに描かれているわけではない。しかし、実社会の一般的な規範の枠組みの中に生きるマジョリティが往々にして「見えないふりをする」これらの存在を暴力的といえるまでに観客に対峙させることは、単にポジティブなイメージを提供し観客に安易なカタルシスを与えるよりもはるかに政治的に批判的な力を持つといえる。また、松井作品の分析における「クィア理論」の有益性についても検討したが「クィア」という概念を同性愛表象を超えた小人症や異形の身体表象やエスニシティの問題にあてはめるには、身体論、民族に関係する理論のさらな考察が必要である。高はカルト映画として高い評価を受けながらも日本映画研究の中で取り扱われることがなかった松井作品を分析した本研究の成果をまとめ、5月の国際メディア・映画学会で発表し、年内に論文を映画研究誌へ提出する。マクドナー監督による映画『In Bruges』においても、小人症、肥満症などに代表される<フリークス=異形の者>の表象が、物語を展開させていく一つの鍵となっている。<異形の者>を全面に押しだし、さらに、殺人、ドラッグ、喫煙マナーといった道徳的タブーを「詩的放縱=Poetic liceace」を用いて描くことによって、根底から覆そうとするスタンスをとりながら、最終的に乾いた笑いを産み出すことに成功している。また、主要登場人物である殺し屋3人のうち、2人をアイルランド人、1人をイギリス人とし、舞台をベルギーのブルージュに設定することによって生じるナショナル/カルチュラル・アイデンティティの問題についても検討を加えた。本年度は、女性実験映画作家である出光真子の作品におけるフェミニスト映画としての可能性を考察するとともに、日本映画におけるマイノリティ女性の声の扱われ方という視点から大島渚監督の『日本春歌考』のテクスト分析を行った。出光作品の考察においては監督自身が依拠し、作品のタイトルにも使用されているユング精神分析における「グレートマザー」という概念の映像化とその批判的可能性を検討した。出光の作品に繰り返し登場する娘(時には息子)を支配・抑圧する母親像は、家父長の代理として父権の代行者として描かれ、家父長制への批判を試みるが、「母」を悪者として仕立てることで、その背後にある「男」つまり「父(家父長)」を不在化し放免してしまい、フェミニズムの立場からの家父長制批判と言う点では限界があったといえる。また出光の前衛手法とフェミニスト・ポリティクスの特性を明らかにするために他国の女性の映画作家(アイルランド人のCarol Moore、Vivianne Dick、ベトナム系・アメリカ人のTrinh T.Minh-ha)との比較検討も行った。大島渚の『日本春歌考』の考察においては、劇中で在日女子学生によって歌われる『満鉄小唄』を取り上げ、「女の声」と「民族の声」の相克を検討した。映画音楽研究で援用される精神分析理論、特に「歌」「音楽」と「母性」との関係を論じる議論を参照し、やくざ映画において同曲が使われる例と比較を行った。

やくざ映画においては『満鉄小唄』が失われた母(国)の象徴として男性キャラクターの民族的アイデンティティの印となり、男同士のホモソーシャルな絆の形成に奉仕するのに対し『日本春歌考』では「被抑圧民族の歌」としてだけでなく「女の歌」としての一面を強調し、女性に対する抑圧を批判する「女」の声を前面化しており、在日男性の「民族言説」の代弁者としてその身体を利用される在日女性という従来の紋切り型の表象を否定しているといえる。本年度の主要な研究目的はジェンダーと〈クイア〉および異形の身体表象という視点で映画を体系的に考察することであった。研究代表者、三神は、マーティン・マクドナー作のアイルランド映画『In Bruges』(2008)を考察し、道徳的タブーを覆すために、小人症などに代表される〈フリークス=異形の者〉を登用するケースを論じるとともに、映画に登場するヒエロニムス・ボッシュの絵画「最後の審判」の中の〈異形の者たち〉との関連性を考察することによって主人公の内面の楝獄/地獄が観光都市ブルージュと結び付けられていることを議論した。外国人特別研究員、高は〈クイア〉という視点では松本俊夫による『薔薇の葬列』(1967)を分析し、ゲイボーイの身体表象を映画のリアリズムと関連付けて考究し、「ジェンダーとエスニシティ」のテーマにおいては、大島渚による『日本春歌考』(1967)を考察し、映画内という枠組みを超えて、より広範な社会・文化的文脈との関連性をからみあわせて考察を試みた。さらに『日本春歌考』の中で歌われる『満鉄小唄』に想起される、従軍慰安婦の問題を1950年代の戦争アクション映画における表象の考察に発展させを論じた。三神による研究はこれまでのアイルランド映画研究の主要テーマであったナショナルアイデンティティや〈アイリッシュネス〉の表象を踏まえながらも身体表象、絵画、またマクドナーの演劇作品との隣接性に焦点を当てることで従来のアイルランド映画研究に新しい視点とメソドロジーを提供し多大な学術的貢献をしたといえる。高の研究も、従来の日本映画研究ではほとんど論じられることのなかったリアリズムと身体表象、エスニシティとジェンダーという錯綜するテーマを取り上げることにより、既存のジェンダー・セクシュアリティ、クイア表象研究の枠組みを発展させる重要な役割をもつといえる。
摂食ホルモン受容体シグナリングの調節-抗肥満薬の新たな標的を探る

メラニン凝集ホルモン(melanin-concentrating hormone : MCH)は、そのノックアウトにより摂食量が低下し体重が減少する「ヤセ」表現形を示す唯一の神経ペプチドである。1999年、斎藤らはGタンパク質キメラを活用した新規ストラテジーによりオーファン(孤児)Gタンパク質結合型受容体(GPCR)のひとつであるSLC-1がMCH受容体(MCH1R)そのものであることを同定し、創薬開発への最初の突破口を開いた。当該研究期間において、斎藤はMCH1Rの様々な変異体の作成により構造活性相関を明らかにした。更にその情報を基盤として、MCH1Rの細胞内第2ループに結合する脳由来細胞内因子をGST融合蛋白質とMALDI-TOF-MSを用いることにより3分子同定した。そのうちの1つはセリン/スレオニンキナーゼであり、(1)GST-細胞外N末端、GST-細胞内第3ループ,GST-細胞内C末端にはほとんど結合しないがGST-細胞内第2ループ融合タンパク質に非常に効率よく結合する。(2)細胞膜においてMCH1Rとそのキナーゼの局在が一致する。さらに(3)細胞内においてキナーゼ活性を不活性化させることにより、MCH1Rのインターナリゼーション程度が有意に減少する、という極めて興味深い結果を得た。これはMCH1Rに結合するタンパク質がインターナリゼーションに直接関与する初めての報告である。メラニン凝集ホルモンメラニン凝集ホルモン(melanin-concentrating hormone : MCH)は摂食調節機構の下流に位置する特に重要な"食欲誘起ホルモン"である。その受容体はオーファンGタンパク質結合型受容体MCH1R(SLC-1)及びMCH2Rであることが同定された(Saito et al,1999)。MCH1Rの研究はノックアウトマウス及び特異的アンタゴニスト作成により急速な展開を見せ、摂食・エネルギー代謝、そして最近ではうつや不安にも非常に重要な機能を持つことが次々と明らかになってきた。私達はMCH1R構造活性相関の情報が創薬および受容体活性化機構の理解に役立つと考え、これまで細胞外N末端・C末端における様々な変異体を作成すると同時に、様々なアッセイ系を確立して詳細な構造活性の解析を行ってきた。今年度は細胞内第2ループに存在するアルギニン残基(R155)が情報伝達に欠かせない重要なアミノ酸であることを初めて見出し、他のGタンパク質結合型受容体においてもR155の相同部位が受容体機能にとって重要であることも明らかにした。また、コンピュータ上で3次元分子モデル作成を行い、R155の位置的重要性を分析・推察した。更に実験を進め、MCH1Rの細胞内第2ループに結合する脳由来細胞内因子をマススペクトロメトリーにより2分子同定した。それぞれの分子がどのような受容体機能を修飾するか現在詳細に検討中である。以上の結果の一部はEndocrinologyに発表した。そのほかMCH1Rに関する邦文総説を2報、英文の総説を3報発表した。メラニン凝集ホルモン(melanin-concentrating hormone : MCH)は、そのノックアウトにより摂食l量が低下し体重が減少する「ヤセ」表現形を示す唯一の神経ペプチドである。1999年、斎藤らはGタンパク質キメラを活用した新規ストラテジーによりオーファン(孤児)Gタンパク質結合型受容体(GPCR)のひとつであるSLC-1がMCH受容体(MCHIR)そのものであることを同定し、創薬開発への最初の突破口を開いた。その後、斎藤はMCHlRの様々な変異体の作成により構造活性相関を明らかにしている。その構造活性相関情報を基盤として、平成18年度はMCHlRの細胞内第2ループに結合する脳由来細胞内因子をGST融合蛋白質とMALDI-TOF-MSを用いることにより3分子同定した。(2)細胞膜においてMCHIRとそのキナーゼの局在が一致する。

さらに(3)細胞内においてキナーゼ活性を不活性化させることにより、MCHIRのインターナリゼーション程度が有意に減少する、という極めて興味深い結果を得た。これはMCHIRに結合するタンパク質がインターナリゼーションに直接関与する初めての報告である。
意思決定行動と認知行動理論を基盤としたIBS症状の維持悪化メカニズムの検証

【問題と目的】過敏性腸症候群(以下IBS)は,心理社会的ストレスによって発症もしくは増悪する心身症である。IBSの病態生理は,脳機能異常と消化管機能異常が相互関連することによる脳腸相関の異常と考えられている。これまでの脳機能研究により,眼窩前頭皮質の活動が,IBS者の高不安とIBS重症度に関連することが示唆された。本研究では,アイオワギャンブリング課題(以下IGT)を用いて,IBS有症状者の眼窩前頭皮質の報酬予測機能を測定するとともに,課題前後の唾液中ストレスホルモンの変化について検討した。【方法】大学生を対象に調査用紙を配布し,実験協力者を募った。その結果,IBS有症状者15名,健常者10名が対象となった。調査項目は,年齢,性別,IBS重症度,Rome III診断基準であった。実験場面においては,IGTの他に,検査の前後およびフォローアップ時に唾液中ストレスホルモン(以下S-IgA)を測定した。【結果と考察】本研究の結果,IBS群は,健常者群と比較して,IGT前の唾液中S-IgA濃度が有意に高かった。IGTの成績において,両群に有意な差は認められなかった。健常者群のみ,IGT前後にS-IgA濃度が高まった。一方で,IBS群のみIGT前からフォローアップ時のS-IgA濃度が低下した。また、IBS群のみポストベンション時からフォローアップ時において有意にS-IgA濃度が低下した。本研究の結果から,IBS群は,高ストレスの維持によって,報酬予測機能が保たれている可能性があることが示唆された。本研究では、意思決定行動と認知行動理論を基盤としたIBS症状の維持悪化メカニズムの検証をおこなった。平成27年度では、以下13の作業を行った。1各測定に用いる備品および消耗品の準備・収集を行なった:本実験にあたり、アイオワギャンブリング課題は、米国のPAR,Incより購入した。また、ウィスコンシンカードソーティングテストは脳卒中データバンクによって作成されたPC版WCST2.0版を用いた。生理学的検査の準備としてTEAC社製EDAユニットを購入した。また実験中に採取する唾液採取のためのサリベット管を購入した。本実験で使用するアンケートには、VSI日本語版(消化器症状に対する不安)、IBS-SI(消化器症状の重症度)、RMQ-III(IBSの診断基準)を用いた。注意課題であるDot probe taskは既に作成済みであるため、動作確認を行った。2予備実験および本実験:2015年10月より予備実験および本実験を行った。研究協力者は14名(男性7名、女性7名、平均年齢20歳)であった。14名中1名はIBS有症状者であった。研究計画通りに実験を行なうことが確認された為、本実験の対象者に含めることとした。3データ解析:本実験で得られたデータを解析し、実験中に得られた唾液は検査依頼中である。達成度については、概ね計画通りである。概ね計画通りであった点については、以下の理由が考えられる。平成27年度に予定した研究機器の準備が予定通りに行なうことができたため、順調に予備実験および本実験をおこなうことができたためである。しかし、実験機器が1台しかないため、研究協力者数が募ることができても本来予定していた人数を実施できなかったことが挙げられる。平成28年度では、以下13の作業を行った。1各測定に用いる備品および消耗品のチェックを行なった:本実験に必要なアイオワギャンブリング課題、ウィスコンシンカードソーティングテスト、生理学的検査としてのTEAC社製EDAユニット、および唾液採取のためのサリベット管の準備および動作チェックを行なった。また平成27年度に消耗した備品を補充した。注意課題であるDot probe taskは既に作成済みであったが、Ideoquest社の研究者用注意バイアス修正リサーチシステムABMトレーナーの備品を購入した。また、本実験で使用するアンケートには、VSI日本語版(消化器症状に対する不安を測定する尺度)、IBS-SI(消化器症状の重症度を測定する尺度)、RMQ-III(IBSの診断基準によってIBSの有無を鑑別する尺度)の他にASI(不安感受性を測定する尺度)、BVS(身体感覚に対する注意を測定する尺度)を追加した。2本実験:平成27年10月より本実験を開始している。平成27年の研究協力者は14名(男性7名、女性7名、平均年齢20歳)であった。平成28年度も継続して研究計画通りに実験を継続する予定であったが、平成28年度では、80名規模の対象者に対して研究協力者を募集したところ、参加者同意取得者内にはIBS有症状者に該当する者がいなかったため、データ取得ができなかった。3データ解析:本実験で得られた質問紙データを解析および唾液試料に関するデータは既に解析済みである。実験中に皮膚電気抵抗の解析は全ての実験協力者のデータが揃ってから実施する予定である。平成28年度の本研究参加同意取得者数が目標に達せず,当初計画よりも遅延したため。平成29年度では、以下13の作業を行った。1各測定に用いる備品および消耗品のチェックを行なった。

また平成28年度に消耗した備品を補充した。2本実験:平成27年10月より本実験を開始している。平成27年の研究協力者は14名(男性7名、女性7名、平均年齢20歳)であった。14名中1名はIBS有症状者であった。平成29年度の研究協力者は14名(男性7名、女性7名、平均年齢20歳)であり、14名中14名がIBS有症状者であった。平成27年度および平成29度における研究協力者29名のうち15名がIBS有症状者であった。3本実験で得られた質問紙データおよび唾液試料に関するデータが揃ったため、解析を行った。所属および実験施設の移転に伴って、実験および解析に遅れが出た。【問題と目的】過敏性腸症候群(以下IBS)は,心理社会的ストレスによって発症もしくは増悪する心身症である。IBSの病態生理は,脳機能異常と消化管機能異常が相互関連することによる脳腸相関の異常と考えられている。これまでの脳機能研究により,眼窩前頭皮質の活動が,IBS者の高不安とIBS重症度に関連することが示唆された。本研究では,アイオワギャンブリング課題(以下IGT)を用いて,IBS有症状者の眼窩前頭皮質の報酬予測機能を測定するとともに,課題前後の唾液中ストレスホルモンの変化について検討した。【方法】大学生を対象に調査用紙を配布し,実験協力者を募った。その結果,IBS有症状者15名,健常者10名が対象となった。調査項目は,年齢,性別,IBS重症度,Rome III診断基準であった。実験場面においては,IGTの他に,検査の前後およびフォローアップ時に唾液中ストレスホルモン(以下S-IgA)を測定した。【結果と考察】本研究の結果,IBS群は,健常者群と比較して,IGT前の唾液中S-IgA濃度が有意に高かった。IGTの成績において,両群に有意な差は認められなかった。健常者群のみ,IGT前後にS-IgA濃度が高まった。一方で,IBS群のみIGT前からフォローアップ時のS-IgA濃度が低下した。また、IBS群のみポストベンション時からフォローアップ時において有意にS-IgA濃度が低下した。本研究の結果から,IBS群は,高ストレスの維持によって,報酬予測機能が保たれている可能性があることが示唆された。今後の研究の推進方策については以下の通りである。平成28年度:1研究者が担当している授業を用いて引き続き研究協力者をリクルートし、前期および後期にIBS有症状者をリクルートする。2リクルート後、直ちに実験を行なう。3得られたデータを解析する。また、得られた唾液は半期ごとに検査依頼をする。平成29年度:1平成28年度から引き続き前期まで実験をおこなう。その後、得られた研究結果をまとめ論文投稿を行なう予定である。当初の予定では、20歳以上のIBS有症状者を対象としていたが、対象年齢を引き下げ研究協力者を募る予定である。平成29年度内の国際学会の演題発表登録は期間的に厳しいため、国内学会での発表登録を行なう。生物学的指標については、唾液試料のS-IgAの測定結果を用いる。
原核生物に見出された新規ジテルペン環化酵素の機能解析と応用

ジテルペン化合物は(炭素数20)、香料、医薬・医薬中間体、植物ホルモンなど重要な化合物を含んでいる。これら化合物の生合成の第一段階は、環化酵素が直鎖状の基質であるゲラニルゲラニル2リン酸の末端オレフィンをプロトン化、または2リン酸を脱離することによってカルボカチオンを生成することから始まる。最終的にカルボカチオンが捕捉中性化されるまで、各環化酵素特有のカチオン中間体を経る反応が順次進行し、多種多様なイソプレノイド骨格へと導かれる。反応の第一段階が共通であるにもかかわらず、最終的に多様な骨格を持つ化合物が生成する事実は、環化酵素の特定アミノ酸残基のみが反応に関与するのではなく、酵素全体のアミノ酸残基が種々のカルボカチオン中間体の生成に関与することを示唆する。従って、これら環化酵素の構造機能相関解析を行うことにより、任意の段階でカルボカチオンが捕捉中性化された化合物の生成を制御できる可能性がある。しかし環化酵素に関しては、真核生物を材料に用いた場合、酵素調製が難しいことなどから一部の酵素を除いて殆ど解析が行われていない。このような背景下、筆者は原核生物と真核生物起源のイソプレノイド生合成遺伝子を多数取得しており、今回、(1)お米由来の2つのent-copalyl diphosphate生合成酵素、(2)原核生物のNocardia属放線菌が生産するジテルペン化合物、brasilicardin A生合成遺伝子クラスターの取得、(3)原核生物のStreptomyces属放線菌により生産されるテトラテルペン化合物(KS-505a)生合成遺伝子クラスターの取得とこれらの機能解析を行った。イソプレノイド化合物の多様性を生出す「鍵」となる環化酵素の新規遺伝子の取得、組換え酵素を用いた詳細な酵素学的諸性質の解析を行った。1.Streptomyces属放線菌により生産されるKS-505a(longestin)は、多環性テトラテルペン骨格にメチルグルクロン酸とスクシニル安息香酸が付加したユニークな構造を有している。その生合成機構を知る第一歩として生合成遺伝子群の取得を試みた。最初にC40の基質を供給するオクタプレニル2リン酸(OPD)生合成酵素遺伝子をPCRで取得し、次いでその周辺領域を探索した結果、24からなる遺伝子群を見出した。その中のOPDの環化に関与すると推定される遺伝子を破壊した結果、KS-505aの生産性を失ったことから、これら遺伝子群が実際にKS-505aの生合成に関与していると推定された。本遺伝子は炭素数40の環化反応を触媒する酵素としては初めての例である。2.米はphytohormoneであるgibberellinとphytoalexinsであるoryzalexinやphytocassaneの生合成のための2つのent-copalyl diphosphate生合成酵素(各々OsCPS1とOsCPS2/OsCyc2)を持っている。これらの酵素を組換え酵素として発現させ、酵素学的な両者の違いを詳細に検討した。その結果、至適pH・温度、2価金属要求性、基質であるゲラニルゲラニル2リン酸に対するKm、Vmax等はほとんど同じであったのに対し、基質阻害はOsCPS1が50-60μMで疎外を受けたのに対し、OsCPS2/OsCyc2は本濃度では影響を受けなかった。また環化酵素阻害剤であるAmo-1618に対してOsCPS1はより強い感受性を示した。原核生物のNocardia属放線菌は、類縁のStreptomyces属細菌には見られない特異的な構造を持つ二次代謝産物を生産する。

中でも、千葉大学真菌医学研究所の三上襄教授らにより取得されたジテルペン化合物brasilicardin Aは、ジテルペン骨格に芳香環、L-rhamnoseとアミノ酸誘導体が付加したユニークな構造を有し、その生理活性も特異であることから医薬のリード化合物として有用である。従って、その生合成遺伝子を取得・改変する事により新規な関連化合物の生産を誘導することは大変興味深い。そこでこれまでに、brasilicardin A生産菌であるN.brasiliensis IFM0406株から、ジテルペン化合物の共通出発原料であるゲラニルゲラニル2リン酸を生成する酵素(イソペンテニル2リン酸を4つ縮合し、炭素数20の直鎖状前駆体を生成する)遺伝子を取得し、その周辺領域を探索することにより、brasilicardin A生合成遺伝子クラスターと推定されるDNA断片を取得している。今回、この中の環化酵素遺伝子を破壊することにより、これら遺伝子群が実際にbrasilicardin Aの生産に関与することの証明を試みた。通常、放線菌の形質転換はプロトプラスト・PEG法で行われるが、N.brasiliensis IFM0406株はプロトプラスト化が困難なため接合による遺伝子導入と相同組換えによる遺伝子破壊を行った。DNA断片中、環化酵素遺伝子のみをthiostrepton耐性遺伝子で置換したのち接合ベクターに導入した。接合後thiostrepton耐性株を取得しPCRで確認した結果、何れの耐性株も予想通り環化酵素遺伝子のみがthiostrepton耐性遺伝子と置換されていた。そこでこれらの破壊株を培養した結果、brasilicardin Aの生産性は消失していたことから上記環化酵素遺伝子がbrasilicardin Aの生産に関与することを証明した。
ケミカルプレストレスとケミカルプレスの統一的評価

本研究では、膨張コンクリートを引張剛性の異なるFRPで一軸方向に拘束したはり供試体、および輪切り鋼管とPC鋼棒とを用いて三軸方向に、任意に拘束した供試体の試験結果をもとに、ケミカルプレストレスの効果や仕事量などの膨張コンクリートの膨張エネルギーの評価を総合的に行った。また、膨張エネルギーの持続性およびケミカルプレス効果についても考察を加えた。本研究の範囲内で次のことが明らかになった。1)三軸拘束試験の拘束器具に関しては、輪切りの二重鋼管とPC鋼棒とを用いることにより、鋼管の軸方向の付着力が不足する問題点が解決できること、内鋼管の偏心配置が膨張コンクリートの膨張特性に与える影響は小さいことが、それぞれ明らかになった。2)拘束鋼材に蓄えられる平均の弾性ひずみエネルギーより算出した膨張コンクリートの平均の仕事量は、軸方向の拘束鋼材比が1%6%、半径方向の拘束鋼材比が16%28%の範囲で、拘束の程度によらず一定となった。3)約2年間拘束を受けた三軸拘束供試体について、拘束を解除して残留膨張量を測定した結果、単位膨張材量が多量であるほど、残存した膨張エネルギーは減少することがわかった。4)膨張コンクリートは、その膨張力を拘束することで得られるケミカルプレス効果により、圧縮強度およびヤング係数を1030%程度増加させることができた。拘束鋼材比がケミカルプレス効果に与える影響は1%程度までが顕著であり、それ以上に拘束鋼材比を5倍程度まで増加させてもケミカルプレス効果の増加はほとんど認められなかった。また、ケミカルプレス効果は、水結合材比が小さい場合ほど大きくなった。平成4年度において得られた研究成果は以下の通りである。1、輪切り鋼管とPC鋼棒を組み合わせた三軸拘束方法において、コンクリートの上面と拘束端板との接着度により、軸方向の膨張ひずみに差が生じることが明らかになり、PC鋼棒をナットで締める時期と程度を統一して、供試体を作製した。2、膨張ひずみの測定結果から、外径が15cm、高さが30cmの円柱状の膨張コンクリートに幅が5cmの輪切り鋼管をその外側に配置して拘束した場合、半径方向の膨張は拘束するが、軸方向の膨張を拘束する程度はほとんど無視できると考えて良く、この三軸拘束方法は、各方向の拘束程度を任意に選定できる点でも優れている。3、PC鋼棒に代えてヤング係数の小さい繊維強化プラスチックFRPで膨張コンクリートの膨張作用を拘束しても、はり部材の曲げ・せん断性状の改善にケミカルプレストレスの効果が得られることが確かめられた。4、内側にも輪切り鋼管を配置した二重鋼管とPC鋼棒による三軸拘束状態において発生するケミカルプレストレスの算定方法を提示することができた。5、ケミカルプレス効果は、鋼管による二軸拘束状態ではほとんど得られず、少くとも材齢初期においてPC鋼棒を併用して三軸拘束状態にすることによりはじめて得られた。本研究では、輪切り鋼管とPC鋼棒とを用いて膨張コンクリートを三軸方向に、任意に拘束した試験結果をもとに、ケミカルプレストレスや仕事量などの膨張コンクリートの膨張エネルギーの評価を総合的に行った。

3)約2年間拘束を受けた三軸拘束供試体について、拘束を解除して残留膨張量を測定した結果、単位膨張材量が多量であるほど、残存した膨張エネルギーは減少することがわかった。膨張エネルギーは、単位膨張材量が80kg/m^3の場合で7075%に、単位膨張材量が70kg/m^3の場合で8085%にそれぞれ減少した。4)膨張コンクリートは、その膨張力を拘束することで得られるケミカルプレス効果により、圧縮強度およびヤング係数を1030%程度増加させることができた。拘束鋼材比がケミカルプレス効果に与える影響は1%程度までが顕著であり、それ以上に拘束鋼材比を5倍程度まで増加させてもケミカルプレス効果の増加はほとんど認められなかった。また、ケミカルプレス効果は、水結合材比が小さい場合ほど大きくなった。
暑熱環境下における運動能力低下に関する中枢性作用機序の解明と熱中症予防対策

本研究の目的は,ヒトおよび動物実験の両方から神経生理的手法,体温・循環調節系手法を用いて,暑熱環境下における持久性運動能力の低下のメカニズムを明らかにし,新たな熱中症予防策を提案することである.動物実験では,エルゴジェニック効果として期待されているカフェインの中枢作用について,脳特定部位における神経伝達物質動態が評価できるマイクロダイアリシス法,低ストレス条件で深部体温が測定できるテレメトリー法,熱産生の直接的な指標として酸素摂取量が測定できる小動物代謝計測法を組み合わせた実験系を用いて,実験を行うことができた.カフェインの運動能力向上効果には,線条体領域におけるドーパミン作動性神経の活性が関与していること,低濃度のカフェインは運動時の高体温による危険性が少ない用量であることなどが示唆された.ヒトを用いた基礎実験では,高温環境が持久性運動中の脳および筋肉の循環動態に及ぼす影響を検討するため,これまでの体温調節系の指標に加え,大腿部皮膚血流量,中大脳動脈血流速度,大腿部筋血流量,大腿部筋酸素飽和度を新たに測定項目に加えることができた.高温環境では体温調節のため,皮膚に血流が分配されることにより脳血流が低下するが筋血流には影響を及ぼさないことが示唆された.また運動時の身体冷却など実践的な暑さ対策についても検討することができた.また,これまでの研究成果を学会やセミナー等でで発表すると共に学術誌へ論文を投稿した.本研究の目的である,ヒトおよび動物実験の両方から神経生理的手法,体温・循環調節系手法を用いて,暑熱環境下における持久性運動能力の低下の中枢性メカニズムや運動パフォーマンスについて検討することができた.特に動物実験では,異なる脳局所部位における運動中の神経伝達物質と体温調節反応を,同じ被験動物で経時的かつ同時に測定することに成功した.これらの得られた研究成果はカフェインの運動能力向上に関わる作用機序の解明に役立つものであり,神経生化学要因を具体化する内容となった.ヒトを用いた基礎実験では,暑熱環境下の運動時において,脳および筋肉の循環動態の指標となる,中大脳動脈血流速度,大腿部筋血流量,大腿部筋酸素飽和度を新たに測定項目に加えることができた.これらの独創的な実験手法を同時に用いることができるようになったことは,暑熱環境下における運動能力低下に関する生理的要因を多方面から分析することができるため,評価できる.しかし一部の研究成果に関しては,まだ学会発表や論文として出版できていないものもあるため,課題も残されている.特に身体冷却を用いた暑さ対策に注目し,暑熱環境下の運動能力および認知機能の低下について体温や脳循環調節の観点から引き続き検討していく.地球温暖化や熱中症の増大とともに東京2020オリンピックに向けた競技現場における暑さ対策が注目されているため,体温および脳循環調節の観点から明らかになった研究成果をエビデンスベースの実践的な暑さ対策として広く提案していく.提案方法としては,最終年度のため国内外の学会で発表を行うとともに,学術論文としてまとめ国際誌に投稿する.また,インターネットのホームページで研究成果を公表し,熱中症セミナー等の活動においてもパンフレットを使いわかりやすく公表する.運動時の疲労の発現には多くの要因が複雑かつ相互に関連し,近年は核心温や脳温の上昇も運動の限界に関わる重要な要因として考えられている.すなわち,運動時の高体温は暑熱耐性の制限因子となり,末梢および中枢神経系を介して疲労感を誘発し,持久性運動能力の低下,ひいては熱中症を引き起こす.中枢性の要因として脳内神経伝達物質の増減や脳血流低下などが注目され,中枢性機序の解明は熱中症予防や運動能力の制限因子を探る上で重要である.本研究の目的は,ヒトおよび動物実験の両方から神経生理的手法,体温・循環調節系手法を用いて,暑熱環境下における持久性運動能力の低下の中枢性メカニズムを明らかにし,新たな熱中症予防策を提案することである.本年度は,高体温が引き起こす運動時の疲労における視床下部内ドーパミンの機能的役割について,ラットの脳内ドーパミンを修飾し,運動能力,体温調節におけるドーパミン作動性神経の機能的役割を検討した.その結果,ドーパミン受容体拮抗薬,アデノシン受容体作動薬の投与により,PO/AHにおけるドーパミンの減少あるいは運動に伴う運動の抑制が観察された.過去の申請者らの実績を含め,暑熱環境下の運動能力に関する神経生化学的要因をある程度具体化することができた.ヒトを用いた実験では,主に国立スポーツ科学センターと共同で,暑熱下の低濃度(3mg/kg)のカフェイン摂取が運動能力及び体温調節機能に及ぼす影響について検討した.その結果,低濃度のカフェイン摂取は,暑熱環境下でも過度な体温上昇を引き起こさずに間欠的運動能力や認知機能を向上させることを観察した.これらは,暑熱環境下における持久性運動能力の低下の中枢性メカニズムの解明に大きく前進する結果であり,熱中症予防につながる重要なデータとなった.本研究は,ヒトおよび動物実験の両方から神経生理的手法,体温・循環調節系手法を用いて,暑熱環境下における持久性運動能力の低下の中枢性メカニズムを明らかにし,新たな熱中症予防策を提案することを目的としている.

動物実験では,適切な運動負荷や,運動時の体温,酸素摂取量,脳内神経伝達物質の測定が正確に評価できるよう,先ずは既存のトレッドミルチャンバーを改良し,実験環境を整備した.過去の実績を含め,暑熱下の運動能力低下に関する神経生化学的要因をある程度具体化することができ,これらは高く評価できる.ヒトを用いた実験では,暑熱環境下におけるカフェイン摂取の効果と安全性の検討は計画通り実施することができ,新たな成果を得ることができた.また,高体温が引き起こす運動能力低下および認知機能低下における脳循環調節の関与に関しては,すでに既存のエルゴメータを使用してリカンベント運動を行うことのできる装置を特別に作成するなど,次の課題に向けての準備も行うことができた.運動時の疲労の発現には多くの要因が複雑かつ相互に関連し,近年は核心温や脳温の上昇も運動の限界に関わる重要な要因として考えられている.すなわち,運動時の高体温は暑熱耐性の制限因子となり,末梢および中枢神経系を介して疲労感を誘発し,持久性運動能力の低下,ひいては熱中症を引き起こす.中枢性の要因として脳内温度の上昇や神経伝達物質の増減,脳血流低下などが注目され,中枢性機序の解明は熱中症予防や運動能力の制限因子を探る上で重要である.本研究の目的はヒトおよび動物実験の両方から神経生理的手法,体温・循環調節系手法を用いて,「暑熱環境下における持久性運動能力の低下の中枢性メカニズムを明らかにし,新たな熱中症予防策を提案すること」である.動物を用いた実験では,昨年度完成したトレッドミルチャンバーを用いて,異なる環境下における運動時の脳内神経伝達物質,核心温,体温調節反応の詳細について,再度テレメトリー法(無線式小型体温計),脳内マイクロダイアリシス(微量透析)-HPLC法(液体クロマトグラフィー),呼吸代謝測定法を組み合わせた実験系を用いて測定した.これらの研究成果を国際誌に掲載することができた.ヒトを用いた実験では,主に国立スポーツ科学センターと共同で,アイススラリーの摂取が脳温に及ぼす影響について磁気共鳴スペクトロスコピー法を用いて検討した.その結果,アイススラリーの摂取は直腸温や温熱感覚を低下させるとともに,脳温も低下させることが明らかとなった.これらの研究成果は学会や国際誌で発表することができた.さらに運動前のアイススラリー摂取が中枢性疲労に及ぼす影響について認知機能を指標とするなど,今後の身体冷却を用いた暑さ対策による脳冷却の可能性について検討できた.本研究は,ヒトおよび動物実験の両方から神経生理的指標,体温・循環調節系手法を用いて,暑熱環境下における持久性運動能力の低下の中枢性メカニズムを明らかにし,新たな熱中症予防を提案することを目的としている.両分野の実験とも,独創性の高い実験を行えていることは評価できる.動物実験における薬理刺激修飾方法や脳血流測定の確立,ヒトの運動実験における認知機能の測定や脳血流測定など課題があるものの,過去の実績を含め,暑熱環境下における運動能力低下に関する神経生化学的要因,体温調節系及び循環調節系の関与について,ある程度具体化することができている.これらの研究成果は関連する学会やシンポジウムについて発表するとともに雑誌論文や特集,図書としても発表した.また,熱中症セミナー等の活動においてもパンフレットを作成し,わかりやすく公表できている.また国際的共同研究を積極的に行ってきた教授を招へいし,研究に関する議論を行えたことは高く評価できる.本研究の目的は,ヒトおよび動物実験の両方から神経生理的手法,体温・循環調節系手法を用いて,暑熱環境下における持久性運動能力の低下のメカニズムを明らかにし,新たな熱中症予防策を提案することである.