hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
<パルダ>からの解放:マイクロファイナンスの制度設計と社会関係資本の役割

本年度の研究は,1)バングラデシュにおけるフィールドワーク,および,2)収集したデータベース解析のための新しいツールの開発の2つである.フィールドワークについては,2006年7月日8月日までバングラデシュ・マニコンジュ地区のフィールドにて,マイクロファイナンスに属する住民(以下,会員)と属していない住民(以下,非会員)の間で,友人・地域内の住民,NGO職員,地方政府の政治家などに対する信頼度をヒアリングした.分析の結果,Bonding Social Capitalの形成は会員と非会員の間に差異がないものの,BridgingあるいはLinking Social Capitalの形成には差異が認められた.また,2007年2月日日に行った同地区のフィールドでは,ネットワークの形成過程をLinの分析を発展させた手法で分析し,過去20数年の問に形成された主要な人物と地区内女性との間のネットワーク形成の過程を解析した.その際,主要な人物の職業をprestige scoreで計測し,このスコアで形成されたネットワークを評価する手法を応用し,地域内の総ネットワークの価値を計測するとともに,マイクロファイナンスがそれにどのような形で寄与するかを明らかにし,マイクロファイナンス以外に基礎を置くネットワーク形成との間に発展経路の差異を確認した.また,個別のメンバー分析からは,マイクロファイナンスヘの参加後にネットワーク形成が及ぼす影響を直接計測する分析手法も開発し,地域全体におけるインパクトもグラフ化することに成功した.社会関係資本,マイクロファイナンスおよびバングラデシュのジェンダ問題をレビューするとともに,エンパワーメント論のひとつである内発的発展論と社会関係資本の関係を整理し,公表した.また,現地調査をバングラデシュとフィリピンで展開した.バングラデシュでは首都ダッカ近郊のマニコンジュ地域からチャンドール村をフィールドとして選択し,そこに展開しているBRACをはじめとした非政府組織によるマイクロファイナンス活動とそれがもたらす社会関係資本の形成に関する調査に着手した(2006年1月).BRACなどの組織はすでに70年代から地域支援を始めているが,当初活発であったクレジット・プラスと呼ばれる人的資本形成の活動が90年代に中止されると,マイクロファイナンスによる社会関係資本の形成は停滞の傾向をみせていることが判明した.そこで,ドッキンモリック・パラを対象に全戸調査を行い,両者の関係を量的に捉える努力を始めている.フィリピンについては,水利用の組織における社会関係資本の有無の検証に向けた準備をすすめている.ルソン島南部の水田地帯において,古くから調査蓄積のあるナガ近郊の農村を対象に実態調査をおこなうための準備を整えた.本年度の研究は,1)バングラデシュにおけるフィールドワーク,および,2)収集したデータベース解析のための新しいツールの開発の2つである.フィールドワークについては,2006年7月日8月日までバングラデシュ・マニコンジュ地区のフィールドにて,マイクロファイナンスに属する住民(以下,会員)と属していない住民(以下,非会員)の間で,友人・地域内の住民,NGO職員,地方政府の政治家などに対する信頼度をヒアリングした.分析の結果,Bonding Social Capitalの形成は会員と非会員の間に差異がないものの,BridgingあるいはLinking Social Capitalの形成には差異が認められた.また,2007年2月日日に行った同地区のフィールドでは,ネットワークの形成過程をLinの分析を発展させた手法で分析し,過去20数年の問に形成された主要な人物と地区内女性との間のネットワーク形成の過程を解析した.その際,主要な人物の職業をprestige scoreで計測し,このスコアで形成されたネットワークを評価する手法を応用し,地域内の総ネットワークの価値を計測するとともに,マイクロファイナンスがそれにどのような形で寄与するかを明らかにし,マイクロファイナンス以外に基礎を置くネットワーク形成との間に発展経路の差異を確認した.また,個別のメンバー分析からは,マイクロファイナンスヘの参加後にネットワーク形成が及ぼす影響を直接計測する分析手法も開発し,地域全体におけるインパクトもグラフ化することに成功した.
三次元内部構造顕微鏡を用いた,哺乳類四肢血管・袖経の形成過程の研究

哺乳類の四肢血管・神経を同時に観察して,その形成過程を解明する目的で,まずはラット胚の前肢芽に対して,三次元内部構造顕微鏡観察,血管樹脂鋳型SEM観察,血管色素注入・神経免疫染色全載胚標本の実体顕微鏡観察を並行して試行し,それらを総合して,次の成果を得た.1.先の研究でラット胚の原始鎖骨下動脈は背側大動脈外側面から節間動脈とは全く無関係に複数・不定にでる動脈で,後主静脈の腹側を通過する事を示したが,本研究では頭側の幾つかの原始鎖骨下動脈が心臓下降に伴い起始が下降・合体して鎖骨下動脈となること,その鎖骨下動脈が後主静脈の中をすり抜けて背側に移動すること,その起始が背側大動脈上を大規模に移動して,節間動脈を飲み込むこと等を解明した.2.神経叢が動脈形成に遅れて始まるが,腋窩動脈幹は神経叢C6-7間を貫通する外側腋窩動脈幹が鎖骨下動脈から,尾側を回る内側腋窩動脈幹がより尾側の原始鎖骨下動脈から形成され,それらの腋窩動脈幹には窓が開いて網状化すること.その網状化した部分の一部に遅れて発達する鎖骨下静脈が交通すると,腋窩動脈と伴行する腋窩静脈との動静脈伴行形態に変化すること.次の段階で神経叢を貫通する外側腋窩動脈幹が消失し,代わって内側腋窩動脈幹が発達して,ヒトのAdachi-C型腋窩動脈と似たラット成体型の腋窩動脈となること;等が分かった.3.初期の胚の血管は内皮細胞のみで非常に可塑性に富むが,受精以後13日目位に背側大動脈の背面から血管壁の形成が始まり,動脈・静脈・毛細血管の区別が生じ,前枝動脈幹の遠位部はより遅れて網状化と伴行静脈顕性を経た後,成熟すること,腹大動脈腹側面から起始する腸管の大血管などは更に遅い時期まで起始の下降が続くことなど,部域によって成熟時期が異なることが分かった.4.前主静脈,鎖骨下・腋窩静脈,前枝の皮静脈幹,外頸静脈などの形成過程が解明された.哺乳類の四肢血管・神経を同時に観察して,その形成過程を解明する目的で,まずはラット胚の前肢芽に対して,三次元内部構造顕微鏡観察,血管樹脂鋳型SEM観察,血管色素注入・神経免疫染色全載胚標本の実体顕微鏡観察を並行して試行し,それらを総合して,次の成果を得た.1.先の研究でラット胚の原始鎖骨下動脈は背側大動脈外側面から節間動脈とは全く無関係に複数・不定にでる動脈で,後主静脈の腹側を通過する事を示したが,本研究では頭側の幾つかの原始鎖骨下動脈が心臓下降に伴い起始が下降・合体して鎖骨下動脈となること,その鎖骨下動脈が後主静脈の中をすり抜けて背側に移動すること,その起始が背側大動脈上を大規模に移動して,節間動脈を飲み込むこと等を解明した.2.神経叢が動脈形成に遅れて始まるが,腋窩動脈幹は神経叢C6-7間を貫通する外側腋窩動脈幹が鎖骨下動脈から,尾側を回る内側腋窩動脈幹がより尾側の原始鎖骨下動脈から形成され,それらの腋窩動脈幹には窓が開いて網状化すること.その網状化した部分の一部に遅れて発達する鎖骨下静脈が交通すると,腋窩動脈と伴行する腋窩静脈との動静脈伴行形態に変化すること.次の段階で神経叢を貫通する外側腋窩動脈幹が消失し,代わって内側腋窩動脈幹が発達して,ヒトのAdachi-C型腋窩動脈と似たラット成体型の腋窩動脈となること;等が分かった.3.初期の胚の血管は内皮細胞のみで非常に可塑性に富むが,受精以後13日目位に背側大動脈の背面から血管壁の形成が始まり,動脈・静脈・毛細血管の区別が生じ,前枝動脈幹の遠位部はより遅れて網状化と伴行静脈顕性を経た後,成熟すること,腹大動脈腹側面から起始する腸管の大血管などは更に遅い時期まで起始の下降が続くことなど,部域によって成熟時期が異なることが分かった.4.前主静脈,鎖骨下・腋窩静脈,前枝の皮静脈幹,外頸静脈などの形成過程が解明された.哺乳類四肢血管・神経の形成過程を,まず,ラット胚を用いて,血管色素注入法と神経細線維免疫染色の併用によって,血管・神経同時染色標本を作製して調べた.0.1日ごとの発生段階の変化を追って,肢芽形成期以前から,肢芽血管の基本的型が完成する時期まで,多くの親ラットから,膨大な数の胚を得た.三次元顕微鏡への適用に際して,基礎的データを得るため,この標本の一部を,三次元内部構造顕微鏡で薄切・再構築を試みた.その結果,最初血管注入に用いたベルリンブルー色素は,血管壁に沈着するので,全載標本の観察には適するが,切片では観察が難しいことが分かり,蛍光色素で標識したマイクロビーズを溶かし込んだゲラチンを注入剤とし,また,神経も蛍光標識に換え,三次元内部顕微鏡の共焦点光学系装着への試験データーとするよう準備も進めている.三次元内部顕微鏡への適用においては,まだ至適条件を探っている段階ではあるが,その基礎データとしての,全載標本光顕観察および,血管樹脂鋳型腐蝕標本のSEM観察による解析からは,重要な結果が得られている.それは,1)ラットにおいては,神経叢を貫通する腋窩動脈網と,神経叢を迂回する内側腋窩動脈幹との2重状態を経て,内側腋窩

動脈幹が腋窩動脈になる;2)腋窩動脈網は,節間動脈外側枝間の縦吻合によるとの従来の定説とは異なり,1本の原始鎖骨下動脈(第8原始鎖骨下動脈:節間動脈とは無関係な血管)の肥厚と,第7神経の接近に伴う窓形成による;3)内側腋窩動脈幹は,従来の2つの相反する定説(第9節間動脈由来という説と,外側腋窩動脈幹からの二次的枝の吻合によるとの説)の両者とも異なり,原始鎖骨下動脈の一次枝である:などである.この結果は,2000年度日本解剖学会総会で発表した.さらに,2001年度日本解剖学会でのシンポジウムで,上記の結果の講演を依頼されており,かつ,詳細は,現在投稿準備中である.哺乳類四肢血管・神経の形成過程を,まず,ラット胚を用いて,血管色素注入法と神経細線維免疫染色の併用によって,血管・神経同時染色標本を作製して調べた.0.1日ごとの発生段階の変化を追って,肢芽形成期以前から,肢芽血管の基本的型が完成する時期まで,多くの親ラットから,膨大な数の胚を得た。三次元顕微鏡への適用に際して,基礎的データを得るため,この標本の一部を,三次元内部構造顕微鏡で薄切・再構築を試みた.その結果,最初血管注入に用いたベルリンブルー色素は,血管壁に沈着するので,全載標本の観察には適するが,切片では観寮が難しいことが分かり,蛍光色素で標識したマイクロビーズを溶かし込んだゲラチンを注入剤とし,また,神経も蛍光標識に換え,三次元内部顕微鏡の共焦点光学系装着への試験データーとした.現在,その結果を解析中であるが,三次元内部顕微鏡への適用においては,まだ至適条件を探っている段階である.しかし,その基礎データとしての,全載標本光顕観祭および,血管樹脂鋳型腐蝕標本のSEM観察による解析からは,重要な結果が得られている.それは,1)ラットにおいては,神経叢を貫通する腋窩動脈網と,神経叢を迂回する内側腋窩動脈幹との2重状態を経て,内側腋窩動脈幹が腋窩動脈になる;2)腋窩動脈網は,節間動脈外側枝間の縦吻合によるとの従来の定説とは異なり,1本の原始鎖骨下動脈(第8原始鎖骨下動脈:節間動脈とは無関係な血管)の肥厚と,第7神経の接近に伴う窓形成による;3)内側腋窩動脈幹は,従来の2つの相反する定説(第9節間動脈由来という説と,外側腋窩動脈幹からの二次的枝の吻合によるとの説)の両者とも異なり,原始鎖骨下動脈の一次枝である;4)従来,全く不明であった,鎖骨下静脈や腋窩静脈の形成過程が明らかとなった:などである.この結果は,2000年度および2001年度日本解剖学会,第5回国際脊椎動物形態学会(2001,Jena)で発表し,静脈形成過程の結果は,第3回アジア太平洋国際解剖学会(浜松)で発表予定であり,かつ,腋窩動脈網形成過程の詳細は,現在,Anantomy & EmbryoIogy誌に投稿中である.哺乳類四肢血管・神経の形成過程を,まず,ラット胚を用いて,血管色素注入法と神経細線維免疫染色の併用によって,血管・神経同時染色標本を作製して調べた.0.1日ごとの発生段階の変化を追って,肢芽形成期以前から,肢芽血管の基本的型が完成する時期まで,多くの親ラットから,膨大な数の胚を得た.この標本の一部を,三次元内部構造顕微鏡で薄切・再構築を試みた.その結果,最初血管注入に用いたベルリンブルー色素は,血管壁に沈着するので,全載標本の観察には適するが,連続断面観察法である三次元内部構造顕微鏡では観察が難しいことが分かり,蛍光色素で標識したマイクロビーズを溶かし込んだゲラチンを注入剤とし,また,神経も蛍光標識に換え,三次元内部顕微鏡に共焦点レザー光学系の装着を試みて,その試験データーとした.現在,その結果を解析中であるが,三次元内部顕微鏡への適用においては,まだ至適条件が得られていない.しかし,そのデータと,全載標本光顕観察および,血管樹脂鋳型腐蝕標本のSEM観察を総合した解析よって,ラット胚の前肢血管形成過程に関する重要な結果が得られている.それは,1)神経叢を貫通する腋窩動脈網と,神経叢を迂回する内側腋窩
希土類元素を含む混合アニオンリチウムイオンガラス中でのリチウムイオン導電性

現在、リチウム二次電池用いられている非水溶媒電解液は、いずれも真の意味で4V級二次電池用の電解液として安定であるとは言えず、安定な無機化合物からなる固体電解質を開発することが急務である。本研究では化学的に安定且つ耐電圧性にすぐれ、空気中で容易に高温合成することが可能なペロブスカイト型Li_xLa_<1/3-x1/3>NbO_3系のリチウムイオン導電体を合成した導電性を検討した。試料の合成は、通常の固相反応法を用いた。Li_2CO_3(99.9%)、La_2O_3(99.9%)、Nb_2O_5(99.9%)を所定の比に混合し、白金るつぼに入れ空気中で800°C、2時間処理した後、1100°C1200°Cで4時間反応させた。合成した試料は粉末X線回折法により同定した。また結晶構造を調べるために粉末回折に対するリ-トベルト解析を行った。イオン伝導率の測定は、交流インピーダンス法を用いて測定した。1100°C1200°C、12時間焼結させた試料の表面を研磨、洗浄した後、金属極をスパッタリングにより形成させた。測定周波数範囲5Hz13MHz、温度範囲25°C200°Cで真空中で行った。また電子伝導性は、直流分極法により測定した。母構造La_<1/3>NbO_3は、斜方晶であったが、La^<3+>をLi^+に置換すると格子定数が減少し正方晶へ近づくことがわかった。交流インピーダンス測定の結果、リチウムイオン導電性は室温で約10^<-4>S・cm^<-1>、400Kにおいて10^<-3>S・cm^<-1>の導電率を示した。従来のリチウムイオンの固体電解質の中でもかなり大きく注目される値となった。直流分極法により測定した電子伝導性は、室温付近で10^<-10>S・cm^<-1>程度でありほぼイオン伝導であることが分かった。Li^+の添加量が増加するとイオン伝導度の減少と活性化エネルギーの増加が見られた。これは、格子定数の減少によりLi^+の移動が妨げられたものと考えられる。
食物試料中の必須微量重金属元素の定量

1.定量対象は,銅・鉄・マンガン・亜鉛の4元素であり,試料とした食物は,しじみ貝可食部・胡麻・ひじきであった.胡麻はそのまま,他は乾燥粉末化した後,酸分解により溶液化し,誘導結合プラズマ発光分析または原子吸光分析により各元素の定量を行った.2.各食物について,品種・産地・採取時期・部位などの異なる試料を分析した.各元素の含有量の大略は,最小願値ー最大値の範囲で示すと次のようであった(単位はμg/乾燥試料1g).すなわち,しじみ貝(12試料):銅20ー56,鉄250ー1080,マンガン7.5ー150,亜鉛140ー210;胡麻(11試料):銅16ー18,鉄67ー130,マンガン12ー42,亜鉛46ー67;ひじき(4試料):銅1.6ー3.3,鉄330ー890,マンガン28ー56,亜鉛21ー34,である。3.試料のもつ個別の条件から,分析結果は次のように考察される.(1)同じ食物でも条件により含有量が変動しやすいのは鉄とマンガンであり,とくにマンガンでその傾向が顕著であった.今後,栄養成分としてマンガンを取り扱う場合の重要な留意点を見出したといえる.(2)胡麻の品種の差が,ひじきでは部位の違いが,それぞれ分析結果に明瞭に反映した.黒胡麻は白胡麻より,芽ひじきは長ひじき(茎の部位より,重金属元素含有量が最大2倍と多かった。(3)しじみ貝は異なる産地のものを定期的に入手して分析したが,季節に依存する変動はなく,むしろ,産地間のマンガン濃度の変動が,最大で100倍と極めて大きいことが目立った.4.ひじきのダイエタリ-ファイバ-(DF:非消化性多糖類)に吸着するミネラル分について,DF定量用酵素(αーアミラ-ゼ,アミログルコシダ-ゼ,プロテア-ゼ)を用いて分解後残存するDFを試料として検討した.その結果,ひじき中の鉄とマンガンの殆んど全部がDFと行動を共にする一方,亜鉛は約50%にすぎないことがわかった。
植物の自己防御機構を利用した高品質苗生産システムの開発に関する基礎的研究

育苗時における物理環境が植物の自己防御能力に及ぼす影響を,光合成能力や生物的・非生物的ストレス抵抗性について定量的に評価した.赤色/遠赤色光比(R/FR比)の高い照射光下や低湿度下では,ストレス抵抗性の向上が見られたが,それら環境下での展葉,ひいては量的成長は抑制される傾向が見られた.高R/FR比順化葉は陽葉と似た光合成特性を示した.高R/FR比の光照射下や低湿度下では,植物が葉の展葉速度を高めることよりも強光あるいは水分損失に対する防御を優先したと考えられ,自己防御能力と量的成長の間にはバイオマス分配を介したトレードオフがあることが示唆された.育苗時における物理環境が植物の自己防御能力に及ぼす影響を,光合成能力や生物的・非生物的ストレス抵抗性について定量的に評価した.赤色/遠赤色光比(R/FR比)の高い照射光下や低湿度下では,ストレス抵抗性の向上が見られたが,それら環境下での展葉,ひいては量的成長は抑制される傾向が見られた.高R/FR比順化葉は陽葉と似た光合成特性を示した.高R/FR比の光照射下や低湿度下では,植物が葉の展葉速度を高めることよりも強光あるいは水分損失に対する防御を優先したと考えられ,自己防御能力と量的成長の間にはバイオマス分配を介したトレードオフがあることが示唆された.キュウリを3波長型白色蛍光灯(FL)またはメタルハライドランプ(ML)下で育成し,うどんこ病菌の分生胞子を接種した.接種後,植物を同一の環境条件で育成し,接種後7日目に子葉向軸面におけるうどんこ病の病斑数を数えた.FL下で育成した実生に発生したうどんこ病の病斑数は,ML下で育成した実生よりも少なかった.この結果から,FL下で育成することによって,ML下で育成するよりも,キュウリのうどんこ病抵抗性が向上することが明らかとなった.FL照射光に順化した葉は厚く,色が濃くなる傾向がみられ,表皮組織,柵状組織,海綿状組織が厚くなる傾向がみられた.FL照射光に順化した葉の表面構造の違いがうどんこ病の生育に影響した可能性が考えられた.キュウリをFLまたはML下において異なるPPFD条件で育成し,実生の単位葉面積あたりの総光合成速度を,光合成・クロロフィル蛍光測定システムを用いて測定した.FL照射に順化した葉の最大総光合成速度は,育成時のPPFDにかかわらず,ML、照射光に順化した葉よりも大きかった.R/FR比をFLおよびMLと同じにしたLEDで育成した実生においても同様の傾向が見られた.したがって,FL照射下における光合成能力の向上は,高R/FR比の光照射に起因すると考えられる.光化学系IIの実効量子収率,比葉面積重およびクロロフィル濃度の解析から,FL下での光合成能力の向上には,光質と光強度が複合的に作用した可能性が示された.クロロフィル蛍光パラメータの解析から,FL順化葉は強光下での光障害が緩和されることが示唆され,高R/FR比によって強光耐性が高まる可能性が示された.FL下では,ML下よりも展葉が遅く,同じPPFDで育成しても,FL照射光に順化した葉の形態は陽葉的であり,FL_LおよびML照射光に順化した葉は陰葉的であった.照射光のR/FRが植物葉の光合成特性および水分ストレス応答特性に及ぼす影響を明らかにするため,異なるR/FRの照射光下で順化したキュウリ葉のガス交換特性を,気孔特性と水利用効率(WUE)に注目して調べた.キュウリを高R/FRまたは低R/FRの光照射下で育成し,第1本葉の純光合成速度(A),蒸散速度(T)および気孔コンダクタンス(gs)を測定した.高R/FR順化葉のA,gsおよびTは,低R/FR順化葉よりも大きかった.高R/FR順化葉においてgsが大きかったのは,高い気孔密度によるものと考えられ,光合成能力向上の一因と推察された.同じCi下におけるAは高R/FR順化葉の方が大きかったことから,高R/FR順化葉の光合成能力の向上には,非気孔要因も関与していると考えられた.高R/FR順化葉では,単位面積あたりの乾物重が大きいことから,高R/FRの光照射によって葉が厚くなり,葉面積あたりの葉緑体量が増加したことが考えられる.WUEは,高R/FR順化葉において低R/FR順化葉よりも低かったことから,高R/FRで育成した植物は水分損失を過剰に起こしやすい可能性がある.次に,光質および湿度環境が植物の病害抵抗性に影響するメカニズムを検討した.キュウリを低湿度または高湿度で育成した後,うどんこ病菌の接種を行った.うどんこ病菌の発芽率および吸器形成を調べたところ,発芽率には影響が見られなかった一方,吸器形成は低湿度順化葉において抑制された.吸器形成はその後の病斑形成とよく似た傾向を示したことから,低湿度順化葉におけるうどんこ病抵抗性の向上は,表皮における吸器の侵入抑制によると考えられる.吸器の侵入抑制は高R/FR順化葉でも見られたことから,光質および湿度環境が病害抵抗性に及ぼす影響には共通したメカニズムが存在する可能性がある.湿度環境が植物の害虫抵抗性に及ぼす影響を調べた.異なる飽差に順化したキュウリ葉におけるナミハダニの産卵速度を調査し,葉の特性と産卵速度との関係を調べた.

供試植物はキュウリとし,気温28°C,飽差0.4 kPa、1.9 kPaまたは飽差4.0 kPaに制御した人工気象器内で,第2本葉が展開するまで育成した.キュウリ実生の第1本葉および第2本葉から葉片を切り抜き,ナミハダニ雌成虫を放飼した.ナミハダニの産卵速度は,低い飽差に順化した葉ほど大きくなり,順化時の飽差による有意な影響がみられた.毛じ密度は,低い飽差に順化した葉で大きく,このことがナミハダニの産卵に正の影響を及ぼした可能性が示唆された.低湿度での育苗はナミハダニの繁殖に関しては正の影響を及ぼすことが明らかとなったが,これは病原菌の侵入やタバココナジラミの寄生など他の寄生者への影響と逆であった.次に異なる飽差に順化したキュウリ葉のガス交換特性を調べた.葉面コンダクタンスは、順化時の飽差が大きいほど小さくなる傾向が見られたが、純光合成速度には有意差がみられなかった.これによって,水利用効率は,低飽差で順化した葉において大きく向上した.飽差が葉面コンダクタンスに及ぼす影響は,気孔発達の違いが一因と考えられ,育苗時の湿度を低くすることは,苗の水利用効率を高める上で重要であることが示唆された.26年度が最終年度であるため、記入しない。生物環境調節学26年度が最終年度であるため、記入しない。研究成果に基づき,学術論文および学会発表における研究発表を行っており,概ね順調に進展している.物理環境処理による光合成能力向上メカニズムに関しては,当初予定ではクロロフィル蛍光パラメータを中心に解析する予定であったが,A-Ci曲線にもとづいて気孔・非気孔要因の解析を行うことで,より適切にメカニズムを解析することができた.気孔・非気孔要因の解析については植物生理学分野の学術雑誌に投稿中である.物理ストレス耐性については,水利用効率を中心に解析を行い,新しい知見が得られている.光環境と湿度環境双方の影響を比較するための実験も予備的に行っており,次年度に向けての準備は十分に整っている.病害虫抵抗性のメカニズムについては,キュウリうどんこ病を対象に実験を行い,その成果の一部は植物病理学の学術雑誌に掲載されている.メカニズムの解明に解剖学的手法を新しく取り入れ,妥当な結果が得られていることから,この方法を用いることで次年度の研究は飛躍的に進むことが予想できる.害虫抵抗性については進行が遅れているが,ハダニの行動を観察することで害虫抵抗性を評価できることを予備的に確認している.以上のことから,現在までの達成度は,おおむね順調に進展していると評価する.26年度が最終年度であるため、記入しない。25年度の研究は当初計画通りに遂行できる見通しである.害虫抵抗性に関する試験がやや遅れているが,茨城大学農学部に非常勤研究員として在籍している鈴木丈詞氏を研究協力者として加えることで円滑に遂行できる見通しである.害虫抵抗性の評価については,コナジラミやアザミウマを用いた予備試験を行ってきたが,材料の扱いやすさや評価のしやすさからハダニを対象とすることが効率的な試験を行う上で妥当であることが判明した.現在,天野洋教授(京都大学)のアドバイスを受けながらハダニを用いた予備試験を行っており,物理環境処理による植物のハダニ抵抗性向上についての新しい知見が得られつつある.さらに詳細に調査することで学術的にも実用的にも重要な知見が得られることが予想されることから,次年度はハダニを中心とした実験に完全移行する.また,次年度は自己防御能力を高めた苗を用いての実証試験を行う予定であるが,苗生産現場との連携を図ることで,問題なく本研究課題を遂行できると考える.26年度が最終年度であるため、記入しない。
木材腐朽菌の進化史：未知系統の探索と宿主材への適応から紐解く多様化過程

木材腐朽性きのこ類の未知系統を効率的に探索する方法の確立を目的とし,子実体採集,分離培養,環境DNA解析の比較を行った.結果,子実体採集,分離培養,環境DNA解析にて11,10,16 OTUが得られ,このうち4,4,6 OTUがそれぞれの方法でのみ検出された.すなわち,これらの3つの方法はきのこ類の多様性探索において相補的であった.また,子実体採集による新規OTU検出数は10回目の調査でほぼ飽和し,分離培養と環境DNA解析でのみ未知の初期分岐系統を3つ検出することができた.分離培養や環境DNA解析のみで検出されたアカキクラゲ綱の未知系統には,肉眼で見える子実体を形成しないものが含まれている可能性がある.また,アカキクラゲ綱の分子系統解析から,その進化の初期に分岐する系統は背着性や直径1 mm以下のクッション状などの目立たない子実体を形成する傾向が見て取れる.従来の子実体採集に基づく多様性探索では,これらの肉眼で見える子実体を形成しない系統や,子実体が目立たない系統を見落としてきたと考えられる.アカキクラゲ綱以外の担子菌系きのこ類であるハラタケ綱やシロキクラゲ綱においても,その多様性や系統進化に関する研究は主に採集された子実体に基づいて進められてきた.これらのきのこ類の初期分岐系統にも目立つ子実体を欠くものが多く,従来の子実体の目視による探索では重要な系統を検出できていなかった可能性が高い.本研究の結果から,きのこ類の系統にあっても肉眼で見える子実体を形成せず環境中に潜在している未知系統が存在し,これらが菌類の進化を考えるうえで重要な系統的位置を占めている可能性が見えてきた.「きのこ類は目に見えるもの」という常識にとらわれず,見えない未知系統の探索とその生物学的情報を得るための手法を洗練することで,菌類の生態や進化に関する理解をより深めていくことができるだろう.27年度が最終年度であるため、記入しない。27年度が最終年度であるため、記入しない。腐朽材に生息する木材腐朽菌類の未知系統,特に,子実体を形成せず肉眼では確認できない未知系統の検出・分離培養を目的とし,「子実体の視認」,腐朽材からの「分離培養」,「環境DNA解析」を併用した調査を行った.筑波山のアカマツ林(40×40m)にて,木材腐朽性担子菌類であるアカキクラゲ類を対象とし, 2013年5月2014年4月の期間毎月子実体の採集を行い,形態観察による種同定を行った.同時にアカマツ腐朽枝を3つの腐朽段階に分けて各4本ずつ採集した.腐朽枝は粉砕後,湿式振とうふるい機にかけて大きさ100-200μmの粒子を回収した.粒子は洗浄後,麦芽寒天培地入りのマイクロプレート(48ウェル×12枚)に1ウェルあたり2粒子ずつ分注して培養し,出現したアカキクラゲ様コロニーを分離した.また,腐朽材粒子からDNAを抽出し, 28SrRNA遺伝子領域を増幅後, DNAクローニングを経て配列を決定した,子実体および培養菌糸からもDNA抽出を行い, rRNA遺伝子領域の塩基配列を決定した.結果,子実体発生では確認できなかった8系統が環境DNA解析と分離培養によって見出された.子実体発生では確認できなかった未知系統が検出できたことから,本研究の目的「子実体を形成せず肉眼では確認できない未知系統の検出」を達成できたといえる.また,環境DNA解析では検出されなかった3系統の菌株を分離培養にて得ることができた.これらの菌株を用いてアカキクラゲ綱内における詳細な系統的位置を推定したところ,分岐の深い独立した系統が含まれていることが分かった.環境DNA解析は環境中の真菌類を最も網羅的に検出できる手段であると考えられているが,今回の調査では環境DNA解析で検出できなかった未知系統が分離培養にて得られた.さらにこの系統がアカキクラゲ類の進化を考えるうえで重要視すべき系統であったことは当初の予想を上回る成果である.結論として,分離培養では環境DNA解析で検出できない系統,しかも分岐の深い重要な系統が得られることがあり,さらに菌株からゲノム配列や生理情報を追取得できることから,優れた多様性探索手法として評価できる.前年度中に確立した木材腐朽菌類の効率的分離培養法に関する解析と論文執筆を行った.真菌類の多様性調査法は,古くは子実体採集(FBC)に始まり,培地を用いた分離培養(CI),環境DNA解析(EDA)と,技術の進歩とともに発達してきた.これらの方法にはそれぞれ利点と欠点があり,一つをもってある生態系における全真菌類を把握することは困難である.本研究では,腐生菌の多様性を効率的に探索する方法の確立を目的とし,FBC,CI,EDAの比較を行った.木材腐朽性担子菌であるアカキクラゲ綱を対象とし,筑波山のアカマツ林(40×40m)にて1年間毎月調査を行い,アカキクラゲ様子実体(FBC),およびアカマツ腐朽枝を採集した.腐朽枝は粉砕後,湿式振とうふるい機にかけて大きさ100-200umの粒子を回収した.粒子は洗浄後,麦芽寒天培地入りのマイクロプレート(48ウェル×132枚)に1ウェルあたり2粒子ずつ分注して培養し,出現したアカキクラゲ様コロニーを分離した(CI).また,腐朽枝の粒子1gからDNAを抽出し,28S rRNA

遺伝子領域を増幅後,DNAクローニング(腐朽枝132本×10クローン)を経て配列を決定した(EDA).結果,FBC,CI,EDAにて11,10,16 OTUが得られ,このうち4,4,6 OTUがそれぞれの方法でのみ検出された.すなわち,3つの方法は多様性探索において相補的であった.また,FBCの新規OTU検出数は10回目の調査でほぼ飽和し,CIとEDAでのみ未知の初期分岐系統が3つ検出された.このことから,FBCでは重要な系統を見落としている可能性がある.これらの未知系統に対しては, EDAによる1次調査とCIによる2次調査の2段階調査により,検出効率を最大化できると考える.木材腐朽性きのこ類の未知系統を効率的に探索する方法の確立を目的とし,子実体採集,分離培養,環境DNA解析の比較を行った.結果,子実体採集,分離培養,環境DNA解析にて11,10,16 OTUが得られ,このうち4,4,6 OTUがそれぞれの方法でのみ検出された.すなわち,これらの3つの方法はきのこ類の多様性探索において相補的であった.また,子実体採集による新規OTU検出数は10回目の調査でほぼ飽和し,分離培養と環境DNA解析でのみ未知の初期分岐系統を3つ検出することができた.分離培養や環境DNA解析のみで検出されたアカキクラゲ綱の未知系統には,肉眼で見える子実体を形成しないものが含まれている可能性がある.また,アカキクラゲ綱の分子系統解析から,その進化の初期に分岐する系統は背着性や直径1 mm以下のクッション状などの目立たない子実体を形成する傾向が見て取れる.従来の子実体採集に基づく多様性探索では,これらの肉眼で見える子実体を形成しない系統や,子実体が目立たない系統を見落としてきたと考えられる.アカキクラゲ綱以外の担子菌系きのこ類であるハラタケ綱やシロキクラゲ綱においても,その多様性や系統進化に関する研究は主に採集された子実体に基づいて進められてきた.これらのきのこ類の初期分岐系統にも目立つ子実体を欠くものが多く,従来の子実体の目視による探索では重要な系統を検出できていなかった可能性が高い.本研究の結果から,きのこ類の系統にあっても肉眼で見える子実体を形成せず環境中に潜在している未知系統が存在し,これらが菌類の進化を考えるうえで重要な系統的位置を占めている可能性が見えてきた.「きのこ類は目に見えるもの」という常識にとらわれず,見えない未知系統の探索とその生物学的情報を得るための手法を洗練することで,菌類の生態や進化に関する理解をより深めていくことができるだろう.予定通り野外調査と実験,解析を終え,論文投稿することができた.予定以上の成果が得られたわけではないため,おおむね順調に進展していると判断した.27年度が最終年度であるため、記入しない。前年度に確立したきのこ類の多様性探索法を活用し,様々な生態系から菌類の未知系統を収集する.また,未知系統が多数潜在していると考えられる南半球での調査を行う.得られたサンプルを用いてRAD-seqを活用した系統推定を行い,より信頼性の高いアカキクラゲ系統樹の構築を目指す.分離菌株を効率的に得るための手法(粒子洗浄法)を確立でき,木材腐朽菌であるアカキクラゲ類の未知系統を検出できたことから当初の目的を達成できたといえる.さらに,環境DNAでも野外観察でも得られない系統をみいだすことができたのは,予想を上回る結果であった.27年度が最終年度であるため、記入しない。研究対象であるアカキクラゲ類のオンライン図鑑を作成した.前年度確立した分離培養法を用いてさらなる未知系統の探索を行い,得られた菌株を用いて詳細な系統解析と木材分解に関わる機能遺伝子の探索を進めていく予定である.
圧力を用いた生体鉱物模倣材料の開発

非晶質炭酸カルシウム(ACC)の結晶化温度に及ぼす圧力の影響を調べるために加圧実験を行い、回収したACC試料について熱分析や高温X線回折を用いて結晶化温度を求めた。その結果、加圧圧力が増加するにつれて結晶化温度が低下することが明らかとなった。また、加熱処理により含水量を変えたACCを用意し、同様の実験を行ったところ、含水量が少なくなるにつれ、結晶化温度の低下度合いが小さくなり、結晶化温度の低下にACC中の水が関与していることが明らかとなった。また、赤外分光法分析から、加圧後のACCに顕著なピークシフトが確認できた。これらの試料はX線回折測定から非晶質であることが確認され、同じ非晶質でも圧力によって構造が変化すること、加えてその変化が不可逆的であることが明らかとなった。これら水の影響、構造の変化は圧力による結晶化温度の変化だけでなく、先行研究のACCの圧力誘起結晶化のメカニズム解明にとっても重要な結果といえる。さらに、圧力を用いたACCの結晶化技術の応用として、生体鉱物に倣った無機有機複合材料の開発を行った。その結果、ACC-セルロースナノファイバー(CNF)の複合体を経由し、加圧加熱により結晶化させた炭酸カルシウム結晶-CNF複合体の作成に成功した。作成した複合体はACC単体のものに比べ約2倍の圧縮強度を示した。また、熱的に、しかも比較的低温で結晶化させることでCNFの変質・変色を防ぐとともに湿気等に対する耐久性を向上させることが可能となった。今後は他の有機高分子へ応用を広げていく予定である。添加物フリーの非晶質炭酸カルシウムの加圧実験から、赤外分光で顕著なピークシフトが見つかるなど、想定外の成果があり、それらの結果をまとめることを優先した。また、ターゲットとする不純物の内、比較的マクロな不純物であるセルロースナノファイバーの方が扱いの点でも実用化の点でも勝ると判断し、計画を前倒しした。そのため、当初H28年度に計画していた不純物元素の添加実験については翌年以降に繰り越すに至った。年度ごとの計画には変更が生じたものの、研究計画全体で見た場合、進捗具合は順調である。有機高分子との複合化についてさらに研究を進めるとともに、H28年度に計画していた不純物元素の添加実験についても、H29年度に実施する予定である。また、加圧加熱の方法も工夫し、材料特性の向上につなげていく予定である。H28年度購入予定だった試薬をH29年度購入する。計画が前後し、H28年度購入予定だった試薬を次年度購入するため。
アンサンブル学習を用いた高速ベクトル量子化法の開発とその応用

本研究は画像圧縮、音声処理、データマイニングのような応用への基礎となるデータ圧縮技術の実現方法として、高速なベクトル量子化法の開発とそのFPGA上での実装を目指したものであり、以下のような成果が得られた。1)アンサンブル学習(バギング、フイルタ,アダブースト)をベクトル量子化に応用した。その結果、数値シミュレーションによりフイルタ、アダブースト、バギングの順に能力の向上がみられ、いずれの場合もパラメータ数を数倍として、5倍程度の速度向上、2倍以上の精度向上が実現できた。2)アンサンブル学習をファジィシステムに応用することにより、同様の能力向上が実現できた。さらに、並列化モデルを提案し数倍の高速化を実現した。3) FPGAを用いたディジタル回路でベクトル量子化法を構成し、ソフトウエアより5倍程度の高速化を実現した。4)ファジィシステムのディジタル回路化を目指し、除算を用いない回路を提案し、面積を1/3、動作速度を4倍程度の回路を実現した。この結果はまた、アンサンブル学習により精度が保証される。以上、ベクトル量子化やファジィシステムへのアンサンブル学習を導入し、高速化と精度向上を与えるアルゴリズムを提案し、その有効性を示した。また、ディジタル回路化を目的としてFPGAを用いて回路設計を行い、さらなる能力向上を実現した。本研究を通して、ベクトル量子化へのアンサンブル学習導入の有効性が明らかとなり、FPGAによるディジタル回路設計によるさらなる高速化が実現できることが明らかとなった。本研究は画像圧縮、音声処理、データマイニングのような応用の基礎となるデータ圧縮技術の実現方法として、高速なベクトル量子化法の開発とFPGA上での実装を目指している。19年度は、以下の研究計画に従って遂行した。1)従来モデルにおけるクリスプやソフトマッチングなベクトル量子化アルゴリズムの研究についてのレビューを行い、これまでいかなるモデルが有効とされてきたか、また、いかにモデルの欠点についての改良がなされてきたかについての検討を行った。これらの結果は、JACIIIの論文中にまとめている。2)アンサンブル学習について、これまで行われてきた研究についてレビューを行った。その結果、アンサンブル学習についての一般的な理論と、個別のモデルへの適用については分けて考える必要があることを確認した。3)ニューラルネットワークの自己組織化手法であるSOM、ニューラルガスネットワークやc-平均法等を用いて、アンサンブル学習の導入を行い、効果的な活用法を開発し、ISCCSPにおいて発表した。その結果、それぞれの方法において、アンサンブル学習の効果を確認した。また、アンサンブルを用いることにより、c-平均法でもSOMやニューラルガスネットワークと同程度の十分な効果が得られることを確認した。4)アンサンブル学習の並列化実現を目的として、ファジィシステムにおいてFPGAによるハードウエア化実現を行った。FPGA上の実現により、同程度の面積で、4倍のスピードが実現できることを示した。。本研究は画像圧縮、音声処理、データマイニングのような応用の基礎となるデータ圧縮技術の実現方法として、高速なベクトル量子化法の開発とFPGA上での実装を目指したものであり、以下のような成果が得られた。その結果、数値シミュレーションによりフィルタ、アダブースト、バギングの順に能力の向上がみられ、いずれの場合もパラメータ数を数倍として、10倍の速度向上、2倍以上の精度向上が実現できた。3)FPGAを用いたディジタル回路でベクトル量子化法を構成し、ソフトウエアより9倍の高速化を実現した。4)ファジィシステムのディジタル回路化を目指し、除算を用いない回路を提案し、面積を1/3、動作速度を4倍の回路を実現した。また、ディジタル回路化を目的とした回路設計をFPGAを用いて行い、評価を行った。

本研究を通して、ベクトル量子化へのアンサンブル学習導入の有効性が明らかとなり、FPGAによるディジタル回路設計によるさらなる高速化が実現できることが明らかとなった。結果は、国際ジャーナルや国際会議等で発表した。
クロム親和細胞からのカテコ-ルアミン放出の細胞内分子機構の研究

本研究では、神経終末からの伝達物質放出の分子機構の解明を目的として、ウシ副腎髄質細胞からのカルシウムー依存性カテコ-ルアミン放出をモデル系に用いて、マストパランが開口放出を誘発する機序、及びG蛋白質の関与様式について、昨年度の研究結果に基づいて研究を継続した。マストパランが副腎髄質細胞で開口放出を誘発する機序として、その放出動態の特性から、マストパランが細胞膜表面の何等かの分子と可逆的に結合していると推測された。この時、細胞骨格系の変化を形態学的に観察すると、マストパランはカルシウムー非依存性に形質膜直下のアクチン・ネットワ-クの脱重合を引き起こしていた。こようなマストパランの作用はこれまで知られておらず、この時のマストパランの作用点はG蛋白質とは異なることから、開口放出に直接関わる分子として、この分子の同定が今後の重要な課題である。一方、カルシウムー依存性非口放出におけるカルシウムの効力の調節に関わるG蛋白質について以下の新しい知見が得られた。即ち、高浸透性細胞を、百日咳毒素感受性G蛋白質、Gi及びGoの各々のαーサブユニットC末端ペプチドに対する特異抗体で処理し、カルシウムー依存性開口放出に対する影響を調べた。その結果、昨年度百日咳毒素で得られたと同じカルシウム効力の上昇がGo抗体によってもたらされ、この作用はGoと抗体の選択的反応によるGoの不活性化による事が明かとなった。この結果から、開口放出を誘発するカルシウムの効力はGoの制御下にあると考えられ、今後、Goと共役する分子、及びGo活性の調節因子の究明が伝達物質放出の分子機構解明にとって極めて重要であることが示唆された。
癌胎児性抗原(CEA)の癌特異性の本態の解明

最近我々は正常大腸粘膜のCEA含量は従来の報告通り極く少量であるが、それをorgan cultureすると癌組織と同等かそれ以上にCEAを産生することを見出し、CEAの癌特異性の本態は正常粘膜と癌組織の間にみられるCEAの移送・放出機序の違いに求めねばならないと考え検討した。本年度次の知見を得た。(1)正常人の1日排便量(200250g)中に5070mgものCEAが存在する。(2)その約10%は新鮮糞便中で既に可溶化されている(自然可溶化抗原)。あとの90%以上はglycolipidを介して膜に結合して存在し、phosphatidylinositol specific phospholipase C(PIーPLC)により遊離される(PIーPLC可溶化抗原)。(3)従来正常糞便抗原(NFA)と同定されていたものは自然可溶化抗原であり、PIーPIC可溶化抗原の抗原性は癌組織のCEAと類似する。(4)これまでNFAとの比較から癌組織のCEAに特異的と考えられていた抗原性はCEA分子のC端部にglycosylinositol phosphate(GIP)の結合により生ずる抗原活性と考えられる。正常人の1日の排便量中に5070mgもの大量のCEAが存在することは、正常大腸粘膜でCEAが活発に産生されるという我々の知見を強く支持する所見である。しかもそれが膜結合型抗原として糞便中に存在するという新しい知見は、CEAの癌特異性の本態を単に上皮細胞から移送・放出機序に求めるのではなく、粘膜上皮細胞の増殖、分化、移動及び脱落の過程に求めねばならないという今後の新しい研究課題が生じたことになる。一方、我々が最近報告したごとく、CEAの癌特異的抗原活性と考えられていたGIPー依存性の抗原性をより強く認識するCEA測定系は腫瘍マーカーとしてのCEAの癌特異性、感受性及び精度を明確に向上させるので、血中に放出されるCEA分子上のGIPの有無がマーカーとしての有用性に大きく寄与しているらしい。従って癌細胞からどのような機序によりCEA分子が血中に放出されるかも今後解明すべき重要な研究課題となった。
都市内部の言語変種勢力と話者勢力の分布に基づく都市方言研究法の開発

本研究の目的は,地域社会の言語状況を社会の特性という点から総合的にとらえる調査の枠組みを考案することにある。多様な社会の特性のうち,本研究では現代社会の特徴であるmobility(移動性)を取り上げた。地域社会内には複数の話者集団と言語変種が存在し,その勢力のせめぎ合いが地域の言語状況を決める。本研究では,これらの勢力のせめぎ合いをとらえるために,話者と変種のパワーバランスのモデル化を試み,その妥当性を検証した。具体的な検証は,鹿児島市内の8つの中学校で実施した語彙,文法,場面による変種の使い分けをたずねるアンケート調査の結果を分析することで行った。調査は中学2年生とその保護者(生徒1人につき1名)に対して行い,最終的に1171名から回答を得た。話者の勢力を表す指標としては,居住経験地域数と居住経験地域(地方)の2つを立てた。また,言語変種勢力の指標は,各変種の項目(と思われるもの)の使用率で表した。この調査により,次のような結果を得た。(1)共通語項目は,鹿児島市のみ居住,鹿児島県内に居住経験のある者の使用が多い,(2)東京の口語は保護者より中学生の間で勢力が強い,(3)関西方言色の強い項目(伝聞の「ト」抜けなど)は,ほとんど使用されない,(4)関西・九州の両変種にまたがる項目は(断定辞「ヤ」,否定辞・終助詞「ン」など),その地域の居住経験者を中心に,決して多くはないが使用される傾向にある,(5)鹿児島の新しい方言項目(念押しの「ヨー」など)は中学生に,古い方言形(確認要求の「ガネ」など)は保護者で優勢であるまた次のような問題点があることがわかった。(1)それぞれの項目が複数の変種カテゴリーにまたがることが多く,その際,項目の分類を特定しにくい,(2)勢力を表す指標と項目の相関を見るという方法では,これまでの地域語研究の方法論との違いが不明確である。平成14年度には,当初以下のことを実施する予定にしていた。(1)文献等による使用される言語項目に関する資料収集(2)海外の類似した調査法の研究(3)調査地点の選択(4)調査票の作成(1)の言語項目については,関連文献の収集や関西学院大学の陣内正敬らの研究グループが行った関西方言の影響に関する調査の項目等を参考にすることで,鹿児島市で使用されると考えられる言語変種それぞれを代表する言語項目をある程度まで特定することができた。(2)については,本研究と類似しているトロント大学(カナダ)のChambers教授らによるLinguistic Topography調査の調査法に関わる資料収集を約1週間トロントで行った。加えて,英国レディング大学のKerswill上級講師たちが行った英国中西部の街ミルトン・キーンズの新方言発生に果たした子供の役割を調査に関わる論文を収集し,今後の鹿児島市内において新しい話者勢力となる子供のことばの影響もあわせて探る準備をした。(3)に関しては,地元話者が多いと思われる旧市街や移住者が多いと思われる新興住宅地などをバランスよく取り入れた選定を現在行っているところである。(4)の調査票の作成については,現在アクセント変化に関わる項目を取り入れるための準備を進めている段階であり,本年度中に調査票を完成させるところまでには至らなかった。また,当初の計画にはなかったが,本研究の一部とするために,名古屋大学の日本学術振興会研究員の白勢彩子と鹿児島市の幼児の言語習得に関する共同調査を始めた。今年度は調査票を仕上げてアンケート調査を中学校で行う予定でいたが,調査票の内容を決定する段階で,回答者の社会的属性を決めるための社会変数の設定と,その変数の意味を回答を得たあとに解釈するための質問項目が乏しいことに気づいた。そのため急ぎ理論的基盤を充実させるために,文献収集を行い,スタンフォード大学のP.Eckertが提唱するSocial Practice理論を使って社会項目の質問を作りかえることにした。そのため,今年度はアンケート調査を行うところまで進めなかったが,調査票は完成し現在印刷中である。来年度早々に市内の約10の中学校で調査を開始する予定である。また,音声によるアンケートは,調査が煩雑になるおそれがあるため,中止した。またアンケート調査だけでは鹿児島市内の言語状況の全体像は把握できないので,アルバイトを雇い,7080代の老年層7組の自然談話の収集と文字化を行った。談話には老年層の方言特徴が多量に含まれており,非常に良質の資料が集まった。この資料と,数年前に集めた若年層のデータと比較を今後行う予定でいる。昨年度後半から,名古屋大学の白勢綾子と共同で幼児のアクセント調査を始めたが,今年度もこの調査は継続している。昨年度は絵を見せて,単語の読みを引き出すという手法をとったが,今年度は,親子でゲームをする場面などの自然談話の収集を始めた。この調査から得られる資料も,アンケートの結果と統合させて考察することにより,鹿児島市の言語事情がより明確に記述できるものと考えている。なお白勢との共同調査の結果は,音響学会で3度にわたり発表した。

本研究では,これらの勢力のせめぎ合いをとらえるために,話者と変種のパワーバランスのモデル化を試み,その妥当性を検証した。具体的な検証は,鹿児島市内の8つの中学校で実施した語彙,文法,場面による変種の使い分けをたずねるアンケート調査の結果を分析することで行った。調査は中学2年生とその保護者(生徒1人につき1名)に対して行い,最終的に1171名から回答を得た。話者の勢力を表す指標としては,居住経験地域数と居住経験地域(地方)の2つを立てた。また,言語変種勢力の指標は,各変種の項目(と思われるもの)の使用率で表した。この調査により,次のような結果を得た。(1)共通語項目は,鹿児島市のみ居住,鹿児島県内に居住経験のある者の使用が多い,(2)東京の口語は保護者より中学生の間で勢力が強い,(3)関西方言色の強い項目(伝聞の「ト」抜けなど)は,ほとんど使用されない,(4)関西・九州の両変種にまたがる項目は(断定辞「ヤ」,否定辞・終助詞「ン」など),その地域の居住経験者を中心に,決して多くはないが使用される傾向にある,(5)鹿児島の新しい方言項目(念押しの「ヨー」など)は中学生に,古い方言形(確認要求の「ガネ」など)は保護者で優勢であるまた次のような問題点があることがわかった。(1)それぞれの項目が複数の変種カテゴリーにまたがることが多く,その際,項目の分類を特定しにくい,(2)勢力を表す指標と項目の相関を見るという方法では,これまでの地域語研究の方法論との違いが不明確である。
Runx2、Cbfbコンディショナルノックアウトマウスを用いた骨格形成機序の解明

転写因子Runx2とその共役因子Cbfbの骨格形成における役割を明らかにするために、それらの遺伝子を改変したマウスの解析を行った。Cbfbは、Runx2依存性の骨格形成に必要であり、2つのアイソフォームに機能の違いがあること、Runx2は、骨芽細胞の成熟を抑制し、エストロゲン欠乏時の骨量減少に関与すること、そして歯の象牙芽細胞を骨芽細胞に変化させる能力があることを明らかにした。Cbfbはそれ自身DNA結合能を持たないが、転写因子Runx2とヘテロダイマーを形成し、Runx2のDNA結合能を増強させる転写共役因子である。実際、我々はGata1プロモーターCbfbトランスジェニックマウスを作製し、Cbfbノックアウトマウスと交配し、最終的に造血のみがレスキューされたCbfbノックアウトマウスを作製したが、このマウスでは、Runx2依存性の骨芽細胞分化、軟骨細胞の成熟が強く阻害されていた。Cbfbには、alternative splicingにより2つのアイソフォーム(Cbfb1、Cも蝕2)が存在する。Cl曲の機能をさらに検討するため、このスプライシングの認識配列にそれぞれ変異を入れることにより、Cbfb1、Cbfb2特異的ノックアウトマウスをそれぞれ作製した。Cb鋤1ノックアウトマウスでは、野生型マウスと比較し、マイクロ印で骨壷に有意な差を認めなかっ考。一方、C的2ノックアウトやクスは、密生型マウスに比較し身体も小さく、マイクロCTで有意な骨量の減少を苛めた。また、脊柱の攣曲も認めた。さらに胎生期の骨格形成をアリザリンレッドとアルシアンブルーで染色し、石灰化を調べると、石灰化の遅れが観察され、軟骨内骨化の遅延が認められた。組織学的解析から、これは軟骨細胞の成熟あ遅れに起囲していたムしたがって、CbA、2がRunK2のDNA結合話語語群監慧語法詣宗論豊訟浣謡一品昌誓霊詣競れ、今後、R叫X2とCb鋤を含む骨芽細胞特異的串よび軟骨細胞特異的転写複合体を明らかにする上で二番専な知鼠となった。今回、Cbfb floxマウスを全身の多能性未分化間葉系細胞に発現するDermol-Creノックインマウスと交配し、Cbfb遺伝子を骨芽細胞および軟骨細胞の前駆細胞で欠失させた、Cbfbコンディショナルノックアウトマウスを作製し、骨格形成におけるCbfbの機能を調べた。Cbfbコンディショナルノックアウトマウスは、出生直後に死亡した。胎生期の骨格形成をアリザリンレッドとアルシアンブルーで染色し、石灰化を調べると、石灰化の遅れが観察され、内軟骨性骨化および膜性骨化の両者で骨化の遅延を認めた。軟骨細胞分化マーカー(II型コラーゲン、PTHrPレセプター、X型コラーゲン、オステオポンチン)の発現をin situhybridization法で検討した結果、軟骨細胞の後期分化の遅延が認められた。さらに骨芽細胞分化マーカー(I型コラーゲン、オステオポンチン、オステオカルシン)の発現をin situ hybridization法で検討したが、骨芽細胞分化の遅延も観察された。したがって、Cbfbは、生体内において、Runx2依存性の骨芽細胞分化、軟骨細胞後期分化に必要であることが明らかとなった。これは、Cbfbが骨格形成において、重要な役割を果たしていることを示している。