hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
スポーツとの類似性に基づくキーボード操作技能の向上方法に関する研究

人とコンピュータとの自然で円滑なコミュニケーションを実現するため、我々は音楽を用いて情報技能のトレーニングを支援する研究を行った。特に、タッチタイプトレーニングとスポーツにおける反復練習との類似性に着目した練習手法を提案し、集合研修と2種類の評価プログラムによって調査を行った。調査協力者は18歳63歳の男女403名、調査期間は平成13年4月1日から平成15年12月17日である。まず、音楽を聴きながらタッチタイプトレーニングを行うグループと、通常練習を行うグループを比較して行う調査の結果、音楽の有効性が確かめられた。次に、音楽によるタッチタイプ向上のメカニズムを明らかにするため、音程やリズム感、歌唱技能などを調べる音感テストを行い、タッチタイプとの相関性を調べた。その結果、タッチタイプ技能と歌唱実技に相関性が確認された。最後に、身体能力の違いがタッチタイプトレーニングに及ぼす影響を明らかにするため、スポーツテストを行い、タッチタイプとの相関性を調べた。調査項目は、反復横跳び、垂直跳び、背筋力、上体そらし、体前屈、握力、踏み台昇降である。その結果、タッチタイプのトレーニング時間と背筋力との相関が確認された。しかし、その他の項目においてはタッチタイプ技能との相関は確認できなかった。一方、音感テストとスポーツテストの間には、リズム感と背筋力、上体そらし、そしてスポーツテスト総合点など、多くの相関が確認された。このように、相関性が低いと思われるスポーツとタッチタイプの双方のトレーニングに対し、音楽が有効であることは非常に興味深い。また、今回の調査結果は、タッチタイプが身体の不自由な障害者や高齢者にも十分に習熟可能な技能であることを示唆しており、生活をサポートする道具として誰もがコンピュータを有効に利用可能であると考えられる。コンピュータやインターネットに興味を持ち、自由に活用するためには、時間的・身体的負担が少なく、最小限の努力で最大の練習効果が得られるようなキーボード練習方法が必要である。我々はキーボード練習過程において最も困難と考えられる、練習初期における反復トレーニングの負担軽減に向け、スポーツ科学における音楽リズムの効果に注目した学習システムを提案し研究調査を行った。そして今回は特に、音楽を聴きながら練習することがキーボード練習の時間的・身体的負担の軽減につながることを明らかにするため研究授業と夜間の集合研修による検証を行った。まず、指導方法と学習システムの問題点を明確化するため、決められた種類の音楽を聴きながら練習を行うグループと通常の方法で練習を行うグループに対する比較調査を行った。その後、事前調査の分析と協力者へのアンケート調査を行い、システムの見直しを行った。修正点と構築したシステムは次の通りである。1.音楽を常に聴きながら練習するのではなく、時々聴きながら練習できるような学習システムとした。2.無線ヘッドセットを利用したオーディオシステムと、パーソナルコンピュータとマルチメディアヘッドセットを利用した有線システムの2種類を構築した。3.線ヘッドフォン側では、アンケート調査の結果、最も希望の多かった有線放送のJ-POPチャンネルを、パソコンとマルチメディアヘッドセットのシステムでは、クラシックや最新のCDアルバムなどを選んで聴きながら練習できるように設定した。以上のシステムを用いて、研究参加の同意を得た小学生から63歳の男女363人について、音楽を聴きながらキーボード練習を行うグループと、通常の練習を行うグループを比較しながら、音楽とキーボード技能の関係を調査した結果、好きな音楽を聴きながら練習を行うことの有効性が確かめられた。
Ａｒｉｄ５ａによるＩＬ－６　ｍＲＮＡ安定化機構の解明

本研究においては、AT-rich interactive domain-containing 5a (Arid5a)分子のIL-6 mRNA安定化機構を詳細に解明し、IL-6に関与する病態との関連について調査した。マクロファージは、細菌感染等の初期応答に重要であるが、リポ多糖の刺激によりArid5aが発現誘導されることを発見した。Arid5aは、IL-6 mRNAの3'非翻訳領域に存在するステムループ様構造に直接結合して、RNAを分解するタンパク質(Regnase-1タンパク質等)からの攻撃をブロックすることが明らかとなった。生体内においても、LPS誘導後のArid5a欠損マウスでは、血清中のIL-6が顕著に抑制され、生存率にも影響を与えた。また、Arid5aは、マクロファージのみならず、T細胞においても重要な働きをすることが判明した。未分化なT細胞にIL-6依存的な刺激を与えると、Arid5a分子の発現が上昇した。Arid5aは、IL-6刺激依存的なStat3 mRNAの安定化に寄与した。この場合においてもIL-6 mRNAの安定化と同様に、Stat3 mRNAの3'非翻訳領域であるステムループ様構造に結合し、mRNAの不安定化を抑制した。結果として、Arid5a欠損T細胞では、IL-6依存的に誘導されるTh17細胞の誘導が阻害され、EAE等の自己免疫疾患の抑制につながった。このように、Arid5aは、IL-6のみならずStat3 mRNAの安定化に寄与し、炎症や自己免疫疾患に深く関わることが明らかとなった。26年度が最終年度であるため、記入しない。AT-rich interactive domain 5a (Arid5a)が、マクロファージにおいてリポ多糖により誘導され、IL-6 mRNAの3'末端非翻訳領域(3'UTR)に結合することで、IL-6 mRNAの安定化に寄与することを示した。一方で、リポ多糖により、マクロファージにおいて誘導される分子Zc3h12a (Regnase-1)は、RNaseとしてIL-6 mRNAを分解し、過剰な炎症を抑制している。本研究では、Arid5aがIL-6 3'UTRのステムループ構造を有する箇所の近辺に応答することをその領域をコードしたルシフェラーゼベクターの活性化により見出した。Regnase-1はIL-6 3'UTRのステムループ構造を認識して分解することが知られている。HEK細胞において、IL-6 3'UTRのステムループ領域をコードするルシフェラーゼベクターの活性はRegnase-1発現下で抑制されるが、Arid5aおよびRegnase-1を共発現させるとその活性が回復した。このことから、Arid5aは、Regnase-1のIL-6 mNA分解能をステムループ領域近辺に作用することで抑制したものと考えられる。生体内においては、Arid5aを欠損させるとリポ多糖により誘導される血清中IL-6量が顕著に減少し、また実験的自己免疫性脳脊髄炎がArid5a欠損マウスで抑制された。このようにArid5aは、IL-6 3'UTRのステムループ構造近辺においてRegnase-1と競合することでIL-6 mRNAを安定化し、炎症に寄与していることが示唆された。当初の目的通り、予測される結果を得ることができた。Arid5aの免疫学分野における重要性をサイトカインIL-6 mRNAの安定化によるIL-6依存的な疾患とのつながりにより示した。Arid5aのRegnase-1とのIL-6 mRNA上における拮抗関係についてさらなる発展性を示す結果が得られた。Arid5aによるIL-6 mRNAの安定化機構の背景には、IL-6 mRNAを分解するRegnase-1との拮抗関係が重要であることが示された。

一方、IL-6 mRNA安定化の人為的な制御のためには、より詳細なArid5aのIL-6 mRNAに対する結合箇所の同定が必要である。このためには、Arid5aおよびIL-6 mRNAの複合体における結晶構造解析が有効である。解析結果よりRegnase-1のIL-6 mRNA分解をいかにしてArid5aが阻害するか分子レベルで検討する。また、マクロファージにおけるArid5aの役割だけでなく、細菌感染や自己免疫疾患において重要なT細胞におけるArid5aの役割を詳細に解明する。
ラン藻の青色光受容系に関する分子生物学的研究

青色光は多くの生物において重要なシグナルとして働き、様々な生命現象を引き起こすことが知られている。しかし、青色光受容体や情報伝達機構などの青色光受容系の分子機構については不明な点が多い。本研究では、ラン藻Synechocystis PCC6803を用いて、ラン藻の青色光受容系について分子生物学的な解析を行なった。昨年度は、このラン藻から青色光受容系が欠損していると推定される変異株(19株)の分離を行なったが、本年度は、それらの変異株のキャラクタリゼーションを行ない、変異株の相補を指標にした遺伝子のクローニングを試みた。分離した19株のうち、4株が青色光に反応できない変異株であることを確認し、これらの変異株をBlue light insensitive mutants(BliA-Blid)と命名した。BliA変異株は、野性株から調製したゲノムDNAによって相補され、この変異株の相補を指標した遺伝子のクローニングが可能であることが明らかになった。現在、BliA変異株の相補を指標にしたゲノムDNAライブラリーのスクリーニングを進めており、青色光受容系に関与した遺伝子をラン藻から始めてクローニングできるものと期待している。一方、昨年末に高等植物の光屈性に関係した青色光受容体をコードしているものと推測されるNPH1遺伝子がクローニングされた。このNPH1と相同性をもつタンパク質をコードした遺伝子がSynechocystis PCC6803のゲノム中に存在するかどうか検索したところ、12個の遺伝子の存在が明かとなった。そこで、それらの遺伝子のうち、青色光受容体をコードしているのではないかと推定される遺伝子について遺伝子破壊株を作製した。現在、それらの破壊株の青色光に対する応答を調べ、それらの遺伝子が青色光受容体遺伝子であるかどうかについて解析している。青色光は多くの生物において一つの重要なシグナルとして働き、様々な生命現象を引き起こすことが知られている。しかし、青色光がどのように生物によって受容され、また、その受容されたシグナルがどのように伝達されてそれらの生命現象が引き起こされるのか、青色受容体や情報伝達機構などの青色光受容系の分子機構はほとんど未解明である。本研究では、ラン藻Synechocystis PCC6803を用いて青色光受容系の分子生物学的な解析を行うことを目的としている。この株は、光独立栄養条件および混合栄養条件下(グルコースを培地に添加し、連続光のもとで培養)で増殖できるラン藻であるが、この株を混合栄養条件下で培養した後に暗条件に移し、1日に1回だけ短時間(数分間)の青色光パルスを与えてやると従属栄養的に増殖するようになる。このことは、このラン藻に青色光受容系が存在していることを示している。本年度は、このラン藻から青色光受容系が欠損している変異株の分離を行なった。野生株をエチルメタンスルホン酸で処理し突然変異を誘発させ、従属栄養条件下で青色光のパルスを与えても増殖できない変異株を19株分離した。これらの変異株は、光独立栄養条件および混合栄養条件下では野生株と同じように増殖するが、従属栄養条件下では野生株とは異なり、青色光パルスを与えても増殖できなかった。このことは、これらの変異株は青色光受容系に異常をきたしていることを示している。このラン藻は、外部からDNAを容易に取り込むことのできる形質転換型のラン藻の一種であり、分子生物学的な手法による解析が容易である。今後は、得られた変異株の相補を指標にして青色光受容系に関係している遺伝子群をクローニングし、解析していく予定である。

本研究では、ラン藻Synechocystic PCC6803を用いて、ラン藻の青色光受容系について分子生物学的な解析を行なった。昨年度は、このラン藻から青色光受容系が欠損していると推定される変異株(19株)の分離を行なったが、本年度は、それらの変異株のキャラクタリゼーションを行ない、変異株の相補を指標にした遺伝子のクローニングを試みた。分離した19株のうち、4株が青色光に反応できない変異株であることを確認し、これらの変異株をBlue light insensitive mutants(BliA-BliD)と命名した。BliA変異株は、野生株から調製したゲノムDNAによって相補され、この変異株の相補を指標にした遺伝子のクローニングが可能であることが明らかになった。現在、BliA変異株の相補を指標にしたゲノムDNAライブラリーのスクリーニングを進めており、青色光受容系に関与した遺伝子をラン藻から初めてクローニングできるものと期待している。一方、昨年末に高等植物の光屈性に関係した青色光受容体をコードしているものと推測されるNPH1遺伝子がクローニングされた。このNPH1と相同性をもつタンパク質をコードした遺伝子がSynechocysstisPCC6803のゲノム中に存在するかどうか検索したところ、12個の遺伝子の存在が明かとなった。そこで、それらの遺伝子のうち、青色光受容体をコードしているのではないかと推定される遺伝子について遺伝子破壊株を作製した。現在、それらの破壊株の青色光に対する応答を調べ、それらの遺伝子が青色光受容体遺伝子であるかどうかについて解析している。
石造アーチ技術の再評価による高耐久・長大石橋の開発

石橋で使用している石材を収集し、圧縮強度試験やせん断試験を実施して材料特性を明らかにした。次に、せん断試験より得られた摩擦特性と石材の接触モデルを用いて離散型有限要素解析手法を開発した。スパン・ライズ比が0.2と0.35の石アーチ輪石模型を多数製作し、静的および動的載荷試験を行ない、解析との比較により石橋の挙動特性を明らかにした。長大かつ高耐久の石造アーチ橋の開発を目指して多くの研究成果を得た。石材面粗度を反映した摩擦モデルを作成するため、石材の摩擦特性を評価可能な試験装置を新たに製作し、種々の石材を集めて石材間の摩擦現象と石材表面の粗度との関係を実験により求めた。得られた結果を既存のデータベースに加え、ほぼ九州の代表的な石橋を構成する石材のデータを収集することができた。得られたデータを用いて弾性係数と表面粗度より高精度摩擦特性モデルを提案し、かつ3次元静的および動的解析手法に導入し、その信頼性や有効性を模型実験の結果と比較することにより検証した。また、実験では、簡易的な表面粗度の観察試験や石材間の接触度合について、感圧紙を用いた面内の圧力画像解析装置(プレスケール)を活用することにより、石材間の圧力分布の実態を把握することができ、非常に有効な装置であった。今後は、解析手法にこの結果を生かすよう工夫したい。また、模型は、単層石アーチ模型(スパン90cm)で、スパン・ライズ比が0.2と0.35に変化させた2体とした。模型数が少ないのは、製作精度に問題がありその修正等に時間を要したためである。2体を用いて静的試験を実施した後、同じ模型で動的載荷実験を模型の固有値特性や耐震挙動等について地震波を作用させて実施した。以上の結果と開発した数値解析手法による結果との比較検討を試みた。静的および動的載荷試験では、静的変位や振動中の変位挙動を正確に測定するためにレーザー変位計を用いた。実石橋の3次元動的解析の実現に向け、提案する離散体FEMの解析入力データとして利用するためのデータコンバートのソフトを開発し、解析システムを構築できた。データ作成から解析までのシームレスなシステムが構築できたが、石橋のリアルな数値解析を行うにはさらに改善が必要であることがわかった。以上の研究成果より、実石橋の健全度評価手法の提案に向けて手法の構築が出来つつある。種々の石材を集め、石材の圧縮試験、乾燥密度試験、せん断試験等により材料特性を得、結果を既存のデータベースに加え、石橋を構成する石材データを収集することができた。また、石アーチ模型を使用した正弦波応答実験と地震波応答実験を行い、石アーチ模型の卓越振動特性と周波数特性を求めた。前年度の動的解析では精度の問題があった、今年度はこの問題を解決するため、石材の材料試験で得られたデータと解析手法の接触摩擦モデルを用いてより精度よく解析できる接触摩擦モデルを試行錯誤により求め、2・3次元静的および動的解析手法に導入した。この解析手法により、地震波を受ける場合の模型モデルの動的載荷試験結果と解析結果に非常に良い対応が見られ、解析精度の有効性を確認できた。また、実石橋の座標測定データから3次元解析へのモデル化および解析の実行も実施できた。今後は接触摩擦モデルの係数決定法を検討し、他の模型や実石橋に適用可能か検討が必要である。一方、石アーチ模型の静的載荷実験では、スパン90cm、幅27cmで、スパン・ライズ比が0.2と0.35の模型を使用して実施した。特に、石材間の接触圧や圧力の分布方法を調べるため圧力測定紙を用いた。今年度は石材間の圧力分布とひずみゲージの測定結果を比較することにより、ひずみゲージは作用応力度を過少評価する傾向があることや石材が切れている場合、作用応力度が極端に上昇にすることが確認できた。つまり、実石橋では長いアーチ輪石の石材が折れている場合が散見されていることから、この石材損傷の発生の要因と考えられる。アーチ輪石の部材が折れるメカニズムの解明が可能と思われる。また、せん断挙動や静的変位挙動の解析も従来の手法と比較しても精度が向上しており、実石橋の3次元動的解析の実現に向けての準備ができた。今後、3次元解析も含め、モデル化や解析手法の改善が必要である。最終年度は、今までの解析・実験研究で得られた知見を基に、スパンが3050m程度の新しい石橋の開発は十分達成できる目途がついた。また、開発した数値解析法を用いてパラメトリック解析を行ない、実石橋に適用できるモデル化の検討と実模型との比較検証を行なった。石アーチ輪石模型を用いて新形式の開発への問題点や解析との比較検証に利用しようとしたが、模型自体が小さ過ぎて十分な実験ができず、その対策を検討した。

動的載荷試験では橋軸方向および橋軸直角方向の振動試験を実施し、周波数特性や石材間の応力分布や荷重伝達などの結果と解析結果との比較を行ない非常に良い対応結果を得た。3次元モデル化も含めて十分な成果を上げることができ、今までの研究成果を基に、石橋を耐久性があり,長寿命化が可能な橋梁として用いることを目的に,石橋の設計・施工に使用できる石橋設計ガイドラインを作成した。一方、実石橋を対象に常時微動測定や衝撃載荷試験等による周波数特性の測定および車両通行による動的挙動特性の測定を行い、石橋の動的特性を把握してデータ収集に努めた。今回は水路橋や石材をモルタル接着している実石橋を選び実験した。得られた固有の静的挙動特性や周波数特性を用いて静的・動的解析を実施し、測定結果との比較検討を行なった。さらに、継続して実施している石橋の構造形式および石材の形状や材料特性、石材の組み方などについて点検要領の改善に努めた。石橋の健全度評価法や適切な補修・補強対策法等を実験や解析を通して得られた知見を基に、最終的に本研究の目的の一つである、実石橋の点検手法や健全度評価を含めた維持管理のガイドラインを作成し提案することができた。これらの作成した2つの石橋に関するガイドラインを利用することにより、実石橋の維持管理の面からの点検手法や、旧石橋の補修・補強方法や新規に石橋を架設する場合の参考手引書ができた。放物線形状を有する長大スパンを有する石造アーチ橋の開発を引き続いて行なうことができた。実際に設計する場合の設計ガイドライン等も必要であることから、中国で用いられている長大アーチ橋の設計手法の日本語翻訳に協力した。開発した解析手法では石材の接触モデルを用いているが、モデルの間隙量と接触圧の関係を求める必要があり、試行錯誤でなく実験的に求めることを試みた。しかし実験例が少ないので今後他の石材での検討が必要である。また、解析では,2種類の解析プログラム開発を目指しており、両者を比較しながら石橋の挙動特性を検討している。解析では摩擦モデルを適切に適用することで,崩落現象までの挙動の再現が十分可能であることを確認した.これらの解析結果から石橋の長大化が十分可能であることが示されたので、さらにパラメータ解析を行い、開発を進めたい。石アーチ模型の静的載荷実験では、スパン・ライズ比が0.2と0.35の模型を使用して集中載荷を作用させ、石材間の接触圧や圧力の分布方法および石材の割れを発生させるメカニズムの解明を行った。作用荷重を増加させた結果、アーチ輪石の組み方により石材の角が作用することにより長い石材の割れが発生する様子が確認できた。動的載荷試験では、長大石橋を想定した模型モデルを用いたが剛性が小さ過ぎたため周波数特性を求めるまでできなかった。また、形状が違う実石橋を対象に、常時微動を測定することにより石橋の周波数特性を加速度等の測定によりの把握し、20ton大型車両走行実験による静的強度及び動的挙動特性を把握することができた。また、得られた固有の周波数特性や卓越振動数は非常に高く、アーチ模型の場合と対応が見られた。多様な損傷形態に対応した石橋の適切な補修・補強対策についても検討を試みた。石材に関する圧縮試験やせん断試験から材料特性データは収集でき、実石橋の座標測定データから3次元解析へのモデル化および解析の実行、模型実験の実施などほぼ予定通りの研究をすすめることができている。しかし、長大石橋の開発については少し予定より遅れている。25年度が最終年度であるため、記入しない。
麻酔薬の腫瘍増殖抑制に関する研究

上皮成長因子受容体(EGFR)のチロシンキナーゼ活性化を介した細胞内シグナル伝達は細胞の分化・増殖に重要な役割を持っている。種々の癌細胞においてEGFRの過剰発現が認められており、腫瘍増殖との関連が明らかになると共に、EGF受容体を介したシグナル伝達経路を標的とする新しい癌治療薬が開発され注目されている。申請者らは局所麻酔薬がインスリン受容体(IR)の自己リン酸化部位のアミノ酸配列に相互作用を及ぼし、チロシンキナーゼ活性を阻害することを明らかにしている。ここで同じ受容体型チロシンキナーゼであるEGFRの自己リン酸化部位のアミノ酸配列がIRのものと類似していることに注目し、EGFRのチロシンキナーゼ活性も阻害するという仮説をたてた。研究に用いる細胞として、頭頸部癌の中でもEGF発現量の多いヒト舌癌細胞株であるCAL27(ATCC ; CRL-2095)を用いた。細胞をプレート上で十分量培養した後、上皮成長因子(EGF)と局所麻酔薬(リドカイン、40μM4mM)を加え5分間反応させ、それらの細胞から蛋白を抽出し、EGF受容体の自己リン酸化を免疫沈降法及びウェスタンブロット法にて解析した。また局所麻酔薬による細胞毒性を検討するため、CAL27を40μM4mMの局所麻酔薬(リドカイン)存在下で培養し、顕微鏡による細胞の形態変化ならびにTUNEL法によりアポトーシスを検出した。リドカインは400μM以上でCAL27の細胞増殖とEGFによるEGF受容体の自己リン酸化を有意に抑制した。リドカインは4000μM以上で細胞毒性を示したが400μMにおいてはこれを認めなかった。リドカインは局所麻酔薬として舌癌の疼痛管理に用いられる。400μMのリドカイン濃度は浸潤麻酔で用いられる局所濃度に相当する。この濃度での局所麻酔薬がEGF受容体活性の抑制作用をもつことが明らかとなり、腫瘍増殖抑制作用をもつ可能性が示唆された。
薬物の消化管吸収制御におけるNitric Oxide の決定的役割に関する研究

消化管粘膜は医薬品の吸収部位の一つであるとともに異物の体内移行を防御する境界線でもある。つまりここでの防御機構の破綻は異物の体内侵入を許すことになり結果的に生体恒常性の乱れが予想される。例えば消化管管腔側からバクテリアのトランスロケーションを介して産生されるlypopolysaccharide(LPS)は免疲系に影響を与え、これが多臓器不全や肺血症を誘導し時として死に至るケースも少なくない。異物の解毒排泄は主として肝臓で行われるため、消化管粘膜を介した解毒排泄に関する報告は少ない。LPSは腹腔マクロファージとの相互作用が知られているが、申請者はLPSの体内動態制御を基盤とした解毒排泄システムの構築を念頭に置き、昨年度はLPSのpolysaccharide構造に着目し、モデル物質(dextran polysaccharideのFITCラベル体)の消化管粘膜を介する排泄様式についてCaco-2単層膜を用いて検討した。その結果、dextran polysaccharideは基底膜上ではpolysaccharideとして認識されその後のendocytosisを介して頂側膜側に排泄されることを示し、従来の常識を覆した(BioL Pharm.Bull.,22:330-331(1999))。本年度はさらに(1)基底膜を介するdextran polysaccharideのendocytosisは硫酸基を持つもの(sulfated polysaccharide)では見られないことを示し、硫酸基の有無が基底膜上での上でのpolysaccharideの基質認識およびendocytosisに於いて重要であることを明らかにした。これに対して(2)dextran polysaccharideの細胞内から頂側膜側への輸送に関してはexocytosisの関与を示唆出来る結果を得ている。(3)protein kinase C(PKC)の活性化はdextran polysaccharideの排泄を促進した。(4)nitric oxide(NO)は逆にdextran polysaccharideの排泄を抑制した。以上の結果から(5)dextran polysaccharideの消化管粘膜を介する排泄にはPKCの活性化が考えられNOレベルとの関連性も推察出来た。生理的条件下、栄養物質は腸管上皮の細胞膜を介して効率よく吸収されるが、それ以外の水溶性物質や異物などは細胞同士を密に接着しているTight Junction(TJ)によって血液中への移行が著しく制限されていることが知られている。つまり腸管粘膜は異物に対しての透過バリアー能を有している。一方、病態時にはTJのバリアー能低下が予想され、一般にはそのバリアー能の低下をFITCでラベルされた分子量4000のdextran(FD-4)の吸収方向への透過性亢進で評価している。本研究の平成10年度の実績として、ヒト結腸由来Caco-2単層膜を用いて以下のことを明らかにした。(1)生理的条件下、FD-4の分泌(排泄)方向への輸送はTJ経由の拡散ではなく、FD-4のdextran-polysaccharide部分を認識したtranscytosis機構に基づくことを種々の検討により証明した。この結果はこれまでの常識を覆すものであり、速報として発表した(裏面参照)。(2)Nitric Oxide(NO)のドナーとして選択した低濃度のsodium nitroprusside(SNP)を基底膜側に添加するとFD-4のtranscytosisが顕著に抑制された。(3)Na_2[Fe(CN)_5NO]・2H_2Oの構造を持つSNPはNOドナーであると同時にCNも保有していることから、SNP効果の本質を調査するためにpotassium ferricyanide(K_3[Fe(CN)_6])を基底膜側に添加した。その結果、transcytosis]は[有意に抑制された。つまりこの輸送系の阻害はNOよりもむしろCNによる代謝エネルギーの阻害に起因していると考察した。(4)次にFD.4の吸収方向の透過(transport)に対するSNPの影響を調査した。高濃度のSNPを用いるとFD.4のtransportは顕著に増大した。これはTJバリアー能の低下に起因したFD-4の拡散の増大によるものであった。(5)SNPの添加部位の影響を調査したところ、基底膜側の方が頂側膜側よりも感受性が大きかった。以上、SNPは低濃度ではdextran polysaccharideのtranscytosis(transcellular route)を抑制し、高濃度ではtransport(paIracellular route)を促進することを明らかにした(投稿中)。

本年度はさらに(1)基底膜を介するdextran polysaccharideのendocytosisは硫酸基を持つもの(sulfated polysaccharide)では見られないことを示し、硫酸基の有無が基底膜上での上でのpolysaccharideの基質認識およびendocytosisに於いて重要であることを明らかにした。これに対して(2)dextran polysaccharideの細胞内から頂側膜側への輸送に関してはexocytosisの関与を示唆出来る結果を得ている。(3)protein kinase C(PKC)の活性化はdextran polysaccharideの排泄を促進した。(4)nitric oxide(NO)は逆にdextran polysaccharideの排泄を抑制した。以上の結果から(5)dextran polysaccharideの消化管粘膜を介する排泄にはPKCの活性化が考えられNOレベルとの関連性も推察出来た。
中東イスラーム世界の「地域秩序」と国際法との関係についての研究

本研究は、国際法と「中東地域秩序」との関係を解明するため、同概念の内容と実態を実証的に明らかにすることを目的としたものである。その結果、アミーン・アルスラーン等のシリア・レバノン系の著者がアラブ民族主義的な目的を持ちつつ、「国際法」知識の伝達に寄与し、国際法にとっても中東地域秩序にとっても根本的な概念のアラビア語を鋳造していることが確認された。彼らの記述にはアラビア語の重視が見て取れ、そこに中東地域秩序の一つの源流を見出すことができた。ただ、その実態の研究に関しては『統一に関する討議についての報告書』の分析を行ったが、いまだ結論を出すには至っていない。本研究は、国際法と中東地域秩序の関係を解明することを目的としている。この目的を達成するために本年度はまずは当初の予定通り中東地域秩序概念の意味内容・その全体像を描写するための調査・整理・分析を行った。具体的には中東地域秩序を直接論じるムハンマド・サイード・アフマドの論文や新聞記事を収集・分析しているほか、特に中東地域秩序概念の一つの源流になっていると考えられるアラブ民族主義に注目した検討を行った。その結果、未だ研究途上ではあるもののこれまでのところ、シャキーブ・アルスラーン、アミーン・アルスラーン、ユースフ・ハマーム・アースアーフなどといったレバノン系アラブ人がアラブ民族主義的な目的を持ちつつも「国際法」知識の伝達に寄与していたことが確認できた。これらの人物は、国際法学においてはほぼ完全に知られておらず、中東研究においてもシャキーブ・アルスラーンを除いてほとんど言及されることのない人物である。しかしながら、アラビア語文献に注目する限り、これらの人物が果たした役割はきわめて重要であることが明白であり、このため国際法学、中東研究にとっても重要な研究上の寄与となる。来年度以降は、国際法にもアラブ民族主義にも積極的に関与しているこれらの人物こそが中東地域秩序概念の形成・展開に重要な役割を果たしたとの想定のもと、これらの人物の人的連関や社会的・宗教的背景等を検討していく。また、さらに本年度においては、平成28年度に予定していた「中東地域秩序」にかかわる中東諸国の実践や地域的国際機関の実行についても、1973年に出版された『統一に関する討議についての報告書』という中東諸国首脳の統一に向けた国際会議の議事録を入手し、この分析を進めている。本年度の研究の主たる調査地として想定していたエジプト、同地での政情不安の場合の補助的な調査地と想定していたトルコともに政情不安等の事態が発生したこともあり、当初予定していた中東地域秩序に冠する網羅的な文献調査は、必ずしも十分に行うことが出来なかった。この事実のみであれば、本研究は少なくとも「やや遅れている」と評価せざるを得ない。しかしながら、中東地域秩序の一つの源流であると考えられる「アラブ民族主義」そしてイスラーム世界にとっては外来の「国際法」、この両者のアラビア語世界への伝播・普及に重要な役割を果たしたと考えられるレバノン系移民の人々による著作を多数収集することができ、これらの分析を行えていること、そしてさらに本来であれば来年度に予定されていた中東地域秩序にかかわる諸国の実行を検討する上で極めて重要な資料も既に入手できたことから、全体としては「おおむね順調に進展している」と評価することが可能であると思われる。この目的を達成するために本年度に行った検討は大きく次の二つに区分することができる。まずは中東地域秩序概念、とくにその源泉についての研究であり、これは昨年度に引続き行ったものである。昨年度の研究でその重要性を確認していたシャキーブ・アルスラーン、アミーン・アルスラーン、ユースフ・ハマーム・アースアーフらの論者に加え、ヤヒヤー・カドリー、ナヒラ・キルファート、ヌーヴァル・ヌーヴァル・タラーブルスなど、アラビア語での初期の国際法関連著作の書き手である人物をもとりあげ、彼らが国際法にとっても中東地域秩序にとっても根本的な概念である「民族」、「国家」、「人民」などといった西洋起源の概念をアラビア語でいかに表現していたかを検討した。その結果、一つには各著者とオスマン帝国との関係性によって用いる用語が異なること、そしてシリア・レバノン系の著者についてはアラビア語やアラブ性への言及が大きいことが確認された。このアラブ性への執着は、中東地域に後に形成される主権国家よりもより広い対象に対する帰属意識を示すものであり、中東地域秩序意識の一つの源流を見出すことができる。また、本年度は予定されていた中東地域秩序にかかわる中東諸国の実践についての検討も、1960年代以降の条約を中心に行った。もっとも現段階では、条文の文面を対象とした表面的な検討にとどまっており、それ以上に研究を進めるために昨年度入手した『統一に関する討議についての報告書』の読解を進めている。まず昨年度の研究の結果、中東地域秩序概念を理解するために重要であることが明らかとなっていたシリア・レバノン系の人々については、その経歴、相互関係、国際法の主要概念の理解について、一定程度、研究をおしすすめることができた。しかし、エジプトやトルコへの渡航期間を確保できなかったため本来予定されていた同地での資料調査・収集が行えなかった。また、昨年度、収集した『統一に関する討議についての報告書』の読解が、各国の方言で記されているためもあって困難を極めている。これらの事情を勘案すると、現在までの進捗状況は「やや遅れている」と評価せざるを得ない。

本研究の目的は、国際法と「中東地域秩序」との関係を解明することである。中東イスラーム世界に関して、1960年代以降今日まで、「中東地域秩序」などという呼称のもと、中東イスラーム世界には国際法とは異なる独自の秩序が存在する、あるいは存在するべきであるとの議論が行われている。これらの議論を正確に評価するため、本研究では中東地域秩序の内容と実態を実証的に明らかにし、そのうえで国際法との関係を解明することを目指した。本研究の期間中、まずは中東地域秩序概念の意味内容・その全体像を描写するための調査・整理・分析を行った。具体的には中東地域秩序を直接論じるムハンマド・サイード・アフマドの論文や新聞記事を収集・分析し、さらに中東地域秩序概念の一つの源流になっていると考えられるアラブ民族主義に注目した検討を行った。その結果、シャキーブ・アルスラーン、アミーン・アルスラーン、ユースフ・ハマーム・アースアーフ、ヤヒヤー・カドリー、ナヒラ・キルファート、ヌーヴァル・ヌーヴァル・タラーブルスなどのシリア・レバノン系の著者がアラブ民族主義的な目的を持ちつつ、「国際法」知識の伝達に寄与していたことが確認できた。彼らは、国際法にとっても中東地域秩序にとっても根本的な概念である「民族」、「国家」、「人民」などといった西洋起源の概念をアラビア語でいかに表現しているが、その表現は各著者とオスマン帝国との関係性によって用いる用語が異なるものであった。また、アラビア語やアラブ性への言及が頻繁になされており、そこには中東地域秩序意識の一つの源流を見出すことができた。中東地域秩序の実態の研究に関しては『統一に関する討議についての報告書』の分析を行ったが、いまだ結論を出すには至っていない。本研究は、国際法と「中東地域秩序」との関係を解明するため、同概念の内容と実態を実証的に明らかにすることを目的としたものである。その結果、アミーン・アルスラーン等のシリア・レバノン系の著者がアラブ民族主義的な目的を持ちつつ、「国際法」知識の伝達に寄与し、国際法にとっても中東地域秩序にとっても根本的な概念のアラビア語を鋳造していることが確認された。彼らの記述にはアラビア語の重視が見て取れ、そこに中東地域秩序の一つの源流を見出すことができた。ただ、その実態の研究に関しては『統一に関する討議についての報告書』の分析を行ったが、いまだ結論を出すには至っていない。まずは平成28年度中に「中東地域秩序」に関する基礎的な資料・文献の収集を追加的に行う。この作業は、エジプト・カイロ市に所在する諸資料館(主としてエジプト国立図書館・公文書館、エジプト国際法学会)において行う。9月、12月、2月の3度を予定している。この追加的な資料収集と並行して、本年度の研究の結果得られたレバノン系移民の重要性に注目した調査・分析も行う。具体的には国際法に関連するアラビア語著作を著しつつも、アラブ民族主義に寄与するための著作活動も行っている多数のレバノン系移民の人的なネットワークをまずは確認する。そして彼らの著作とその傾向とを中東地域秩序へのつながりという観点から概観する。これらの研究のために必要な調査等もカイロにおいて行うことが基本的に可能である。
日本人の動物観の基層とその変遷

1.日本人の動物観を考える上に重要な示唆を与える宮沢賢治と動物の世界を論考した。“なめとこやまの熊′′はマタギの民話が底流にあり、そこに猟師の心情を読みとることができる。作品には動物が総計約200種登場する。多くは身近な動物で外国産動物は賢治の心象風景の理解に重要である。昆虫への関心は薄い。総じて、動物学への興味は薄い。奥山のカモシカなどは登場せず、ほとんどは村里・里山の動物である。山猫を奥山と里山をつなぐ媒介者とみると、作品の新たな理解が展開しそうだ。2.伝承での虚像の「たぬき」は文化という環境の中でさまざまなバリエーションを生んだ。実像の「タヌキ」は時代とともに変化する虚像の「たぬき」の姿を修正しなかった。日本人は実像の動物とインタラクションを持たず、内部に取り込まれ虚像の動物とインタラクションしてきた。3.江戸期の諸国産物帳で復元された鳥獣分布を補充修正するため資料収集し、データベース化を進めた。旧南部藩・旧琉球国・旧薩摩藩などの資料を収集し、これら資料から鳥獣関連記事を検索しデータベース化をした。4.江戸期から明治にかけてトキの分布変遷が明かとなった。江戸初期の分布は東日本に片寄っていた。徳島領などでトキを取り寄せ繁殖させたこともあって分布を広げ、江戸末期には日本全域に生息するようになった。明治になると江戸期の規制が反故となり鳥獣が激減した。トキはその最も顕著な例であった。5.明治以降から第二次大戦後のハンティングの興隆は野性動物に壊滅的な打撃を与えた。奥山の森林伐採はニホンザルに里山偏重の遊動を定着させ害獣化させた。背景には明治以降すべての価値を貨幣価値に換算する強力な経済活動があった。そして畏敬の念も含まれたアニミズム的な属性や力は喪失し、サルは嘲笑と駆除の対象となった。日常的な接触も激減し、野性動物との正しい接し方も人々の記憶から喪失していることが明らかとなった。昆虫への関心は薄い。1,動物霊:霊力は種によって異なり、性質強猛なものが霊力も大であること。動物には狩猟対象となるもの、ならないもの、信仰・尊崇するもの等に区別されること。これら動物観や動物霊に関する意識は後世の神道や仏教での説話伝道の影響が大きいことなどを明らかにした。また、人々に親しまれ昔話の題材でもあるたぬき観では、生物としてのタヌキとの位相が大きく、この差はタヌキの実体がよく知られる現在でも存在することを明かにした。2,鳥獣分布;1730年代の盛岡領、金沢領、名古屋領内での分布の概状を明らかにした。これらの分布概状を詳細にするための広島藩、八戸藩、萩藩領、薩摩藩などの鳥獣情報約1000件などの史料収集とデータベース化を行なった。また、東北北部のニホンザルの分布については、減少の兆候は近世に始まり、背景には江戸時代の寒冷化→農業への打撃→狩猟への依存の増大と明治期の村田銃と西洋銃の普及だったことを明かにした。3,鳥獣行政

;明治16年政府が全国に旧藩時代の鳥獣行政・慣行を報告させているがその控え文書が奈良県と埼玉県で保存されていた。それらも含め当時の鳥獣行政慣行の実態を村レベルで知ることができる貴重な資料の発見もあった。明治初期に諸府県が鳥獣の激減に危機感を持ち独自の条例を公布し始め、これが政府を動かすに至った過程を明らかにした。4,動物観アンケート結果:平成4年秋日本モンキーセンターにおいて815名に動物観についてアンケートを実施した。若い女性はカエルやムシが嫌いであること。獣へのイメージは男は「たくましい」、女は「こわい」と感じていること。また「獣を見た」「獣の肉を食べた」という体験と獣に対して肯定的好意的な感情とが正の相関関係にあるという結果が出た。また70%の人はヒトは「サルから進化」したと考えており、米国人の約90%余が「神による創造」を受け入れている結果とは対照的であることなどが判明した。
プリオン蛋白の神経障害機構とGPIアンカーの役割

分泌型変異プリオン蛋白を発現するトランスジェニックマウスを作製した。変異蛋白は、その殆どが分子量約26kDの糖鎖構造を持たない分子種として発現された。トランスジェニックマウスへのプリオン接種実験を行ったところ、内因性プリオン蛋白と変異蛋白の両者を発現するマウスでは、高度アミロイド沈着を伴う劇症型プリオン病が起こり、潜伏期間が著明に短縮した。潜伏期間の短縮やアミロイド沈着の程度と、変異蛋白発現量との関係は不明瞭であった。発症マウス脳組織内には、プリオンを接種された野性型マウスと同程度のプリオン増殖が認められた。内因性プリオン蛋白を発現せず、変異蛋白のみを発現するマウスヘプリオンを接種した場合には、海綿状変性や発病は認められず、高度アミロイド沈着のみが観察された。アミロイド沈着の程度は変異蛋白発現量と相関していた。脳組織中には蛋白分解酵素耐性の異常化した分泌型変異プリオン蛋白の存在が確認された。脳組織中でのプリオン増殖については、現在接種実験を用いて検討中である。プリオン非接種の場合、上記マウスには全く異常は認められなかった。これらのことから、プリオン蛋白によるアミロイド形成およびプリオン蛋白の異常化にはGPIアンカ-は不必要であること、分泌型変異プリオン蛋白発現はプリオン形成を少なくとも抑制しないこと、および異常型プリオン蛋白およびプリオン蛋白アミロイドはそれらのみでは海綿状変性を引き起こす充分条件ではないことが明らかとなった。今後の検討により、分泌型変異プリオン蛋白自身がプリオンを伝搬する能力が有るか否かを明らかにする。
自己注目の2側面と抑うつ : 抑うつ低減のための方略の検討

自分のことを考えること,すなわち「自己注目」は抑うつと関連する不適応的な素因であると考えられてきた。しかし自己注目にはこうした不適応的な側面(反芻)に加え,抑うつの抑制につながる適応的な側面(省察)もあると考えられている。抑うつを抑制するためには不適応的な自己注目を取り除き,適応的な自己注目を促進すればよいと予想されるが,本研究ではこうした自己注目の相反する2側面に焦点を当て,ネガティブ感情や抑うつ,睡眠との関連を検討した。まず,日常生活の中で,より不適応的な自己注目とされる反芻がいつ生じやすいのかを検討したところ,抑うつ傾向が高い人において,夕方から夜にかけて反芻が生じやすいことが明らかとなった。この結果から,夜間の考え込みが特に,われわれのメンタルヘルスに悪影響を及ぼしていると考えられる。そこで次に,反芻と睡眠との関連を縦断調査により検討したところ,高い反芻や心配の傾向は,将来の睡眠の悪化を予測することが明らかとなった。これらの結果から,反芻を取りのぞき,より適応的な思考スタイルの獲得することで,抑うつの予防が実現できると考えられる。そこで最後に,適応的自己注目スタイルの促進を目的とした認知トレーニングを大学生を対象に実施した。分析の結果,トレーニングの前後において感情制御能力の向上が確認された。以上の結果から,不適的な自己注目スタイルからより適応的なスタイルへとシフトさせることが,メンタルヘルスの向上に寄与できるものと考えられる。しかし自己注目にはこうした不適応的な側面に加え,抑うつの抑制につながる適応的な側面もあると考えられている。前者を「反芻」,後者を「省察」と呼ぶ(Trapnell & Campbell, 1999)。抑うつを抑制するためには不適応的な自己注目を取り除き,適応的な自己注目を促進すればよいと予想されるが,本研究ではこうした自己注目の相反する2側面に焦点を当て,抑うつとの関連を検討した。まず,大学生173名を対象に縦断調査を行い,反芻の傾向が強い人は,ストレスを経験した場合に抑うつが特に強まることを確認した。次いで,大学生480名を対象に質問紙調査を実施し,自己注目することは良いことなのか,それとも悪いことなのかという「自己注目に対する信念」を測定する尺度(PBRS)の日本語版を開発した。この尺度を用いて,適応的・不適応的な自己注目と抑うつとの関連を検討した。その結果,自己注目をすることは良いことだという信念を持っている人は,不適応的な反芻を行うことで抑うつを強める一方で,適応的な省察を通じて抑うつを低減させる可能性も示され,自己注目と抑うつの間にある両価的な関連が明らかとなった。以上から,どのような自己注目を行うかが抑うつを考える上で重要であることが明らかとなり,反芻を抑制し省察を促進するという抑うつの予防法への示唆が得られた。抑うつを抑制するためには不適応的な自己注目を取り除き,適応的な自己注目を促進すればよいと予想されるが,本研究ではこうした自己注目の相反する2側面に焦点を当て,ネガティブ感情や抑うつとの関連を検討した。まず,日常生活の中で,自己注目が実際にどのように機能しているかを検討するために,思考形態と感情状態との関連を調べた。その結果,自己注目時の思考形態が抽象的な場合には,より高いレベルのネガティブ感情と関連するが,一方で,思考形態が具体的な場合には低いレベルのネガティブ感情と関連することが明らかとなった。このことから,抽象的思考法ではなく具体的思考法をトレーニングにより獲得することで,ネガティブな感情反応を抑制することができると考えられる。また,同様に日常生活の中で,より不適応的な自己注目とされる反芻がいつ生じやすいのかを検討したところ,抑うつ傾向が高い人において,夕方から夜にかけて反芻が生じやすいことが明らかとなった。この結果から,夕方から夜にかけての考え込みは,睡眠を阻害するなどの心身に対する悪影響を有していると考えられる。従って,こうした夜型の反芻を行わないように生活習慣を改善することで,心理的適応を促進できるものと予想される。

そこで次に,反芻と睡眠との関連を縦断調査により検討したところ,高い反芻や心配の傾向は,将来の睡眠の悪化を予測することが明らかとなった。これらの結果から,反芻を取りのぞき,より適応的な思考スタイルの獲得することで,抑うつの予防が実現できると考えられる。そこで最後に,適応的自己注目スタイルの促進を目的とした認知トレーニングを大学生を対象に実施した。分析の結果,トレーニングの前後において感情制御能力の向上が確認された。以上の結果から,不適的な自己注目スタイルからより適応的なスタイルへとシフトさせることが,メンタルヘルスの向上に寄与できるものと考えられる。
マイネルト基底核の誘発する大脳可塑性が大脳皮質微小回路へ及ぼす作用の解明

麻酔下マウスのマイネルト基底核(NBM)とヒゲ刺激とを同時に行って大脳皮質において長期増強(LTP)を誘導し、その間の大脳皮質細胞群カルシウム(Ca^<2+>)活動を二次元可視化解析した。この結果LTP誘導最中にグリア細胞がCa^<2+>活動していることを発見した。さらに、このCa^<2+>活動を抑制したところ、NBM刺激に対する神経細胞応答は正常にも関わらず、LTPが消失することを発見した。これらの結果は、LTP誘導にグリア細胞活動が必須であることを生きたままの動物で初めて示した点で重要である。「大脳皮質と皮質下神経核との相互作用の解明」を通して、脳をシステムとして理解することを目指している。本研究課題では、コリン作動性神経核であるマイネルト基底核[NBM]の誘発する大脳可塑性が、大脳皮質微小回路の活動をどのように変化させるか研究する。具体的には、麻酔下マウスのNBMを電気刺激するのと同時に、体性感覚刺激(ヒゲなど)を行うことで大脳可塑性を誘発する。この時の大脳皮質細胞群(神経細胞・グリア細胞)の活動変化を2光子顕微鏡を用いて二次元可視化解析する。初年度である平成21年度は大脳可塑性を誘発する最適条件を確立した。そのために、マウス頭蓋を水平に保持するための治具を作成したり、顕微鏡下で刺激電極位置を調整可能とする工夫を行った。その結果、NBM刺激とヒゲ刺激とを同時に刺激することで、大脳皮質における興奮性後シナプス集合電位が増大すること(LTP)を再現できた。ただし、これまでの文献では同時刺激によるLTPの程度は50100%と報告されていたが、近年のGilbertらの報告によってそれらの計測条件では計測が不安定であることが指摘されていた。本研究では計測の不安定要素を取り除くことで、LTP程度が2030%であることを改めて示した。来年度は、LTP前後における大脳皮質細胞の活動変化を2光子顕微鏡を用いて二次元可視化解析することで、コリン作動性神経核の大脳皮質への作用を微小回路レベルで解析する。「大脳皮質と皮質下神経核との相互作用の解明」を通して、脳をシステムとして理解することを目指して研究している。本研究課題では、コリン作動性神経核であるマイネルト基底核[NBM]の誘発する大脳可塑性が、大脳皮質微小回路にどのように影響しているのか研究した。初年度である平成21年度には、麻酔下動物の大脳皮質において長期可塑性[LTP]を誘導する系を構築した。具体的には、麻酔下マウスのNBMを電気刺激するのと同時に体性感覚刺激(ヒゲ)を行うことで、大脳皮質バレル野におけるLTP誘導に成功した。この系を用いて次年度かつ最終年度である平成22年度には、LTP誘導中のグリア細胞活動を2光子顕微鏡観察によって二次元可視化解析した。この結果LTPの誘導最中にグリア細胞が活発にカルシウム活動していることを発見した。さらに、グリア細胞のカルシウム活動に必須な蛋白質を欠損させた遺伝子改変マウス[KOマウス]を用いて同様の計測を行った。この結果KOマウスにおいてグリア細胞のカルシウム活動が消失していることを確認した。驚くべき事にKOマウスにおいてNBM刺激に対する神経細胞の応答は正常にも関わらず、NBM刺激とヒゲ刺激とを同時に与えてもLTPは生じないことを発見した。これらの結果はLTPの誘導にグリア細胞のカルシウム活動が必須であることを示唆する。本研究は、皮質可塑性に神経細胞のみならずグリア細胞の活動が必要であることを、生きたままの動物で初めて示した点で重要である。
神経疾患の原因となる変異蛋白質の質量分析による検出と構造決定および新診断法の確立

家族性アミロイドポリニューロパチーの原因はトランスサイレチン(TTR)の変異によることが知られているが、この疾患は壮年期に発症し、診断および保因者の検出に、簡便で信頼の出来る検査法が望まれる。被検血清に抗TTR抗血清を加え、免疫沈降物を得、それを質量分析することにより、1時間以内に10μlの被検血清で診断しうることを示した。宮崎医大、熊本大、信州大、Umea大、Boston大において追視され、当教室で発見したG101S,D38Aなど新変異6種を含む少なくとも19種類の変異が検出可能であることを証明されている。生体内のTTRには様々なアイソフォームが存在するが、その中で80ダルトン高質量の成分が亜硫酸化TTRであることを証明し、これが高いアミロイド原性を持つのに対し無修飾のTTRにはアミロイド原性がないことをin vitroで示した。亜硫酸は食物・薬品中に防腐剤として使用されているだけでなく、一般的な大気汚染物質である。トランスサイレチン関連アミロイドーシスは何らかの環境因子が発症機序に関与しているとする報告も多く、今後さらなる外因性亜硫酸塩とアミロイドーシスの研究を進めていく必要がある。老年性全身性アミロイドーシスの世界的第一人者である、スウェーデンのPer Westermark教授との共同研究により、アミロイド組織中に質量数の異なる複数の成分があることを発見し、それらの大部分が抗TTR抗体と反応することを見出した。現在、構造解析中である。モリブデン補因子欠損症において、血清中亜硫酸化TTRの比率が変化していることを見出し、報告した。この結果、オーストリアのインスブルック大学子供病院より、様々な代謝異常症例59検体の分析依頼を受け、現在解析中である。筋萎縮性側索硬化症、アミロイドポリニユーロパチー、アルツハイマー病、プリオン病などの神経変性疾患は、種々の蛋白が不溶化・凝集・沈着することによって引き起こされることがわかってきている。これらの蛋白質は一様にbeta sheet richな構造を持ち、共通のアミロイド化過程が示唆されている。申請者らは、アミロイドポリニューロパチー患者のトランスサイレチン(TTR)を、免疫沈降法と質量分析を利用し検出・診断してきた。新種2種を含む10種類の変異が簡便に検出できることを示した。この手法は、内外の複数の施設で追試され、多くの変異で確認されている。しかし、申請者らは免疫反応を利用する限り、偽陰性が存在しうることに注目し、2種類の液体クロマトグラフィーと質量分析を連結し分析するLC/LC/MS法を考案した。その結果、免役沈降法に問題がないことを確認した。また、TTRにはその分子内にfreeのシステインが一つ存在している。これにさまざまな低分子チオール化合物が結合し複数のisoformが存在することを見出した。このうち、freeTTRより80Da高質量の成分は亜硫酸(SO^-_3)が結合しているものであることを同定した。モリブデン補因子欠損症候群患者血清中では、通常数%以下である亜硫酸化TTRが、85%以上を占めていた。この疾患では、亜硫酸塩酸化酵素の欠損が知られている。蛋白質の翻訳後修飾を検出することにより、疾患の診断が可能であることを示した。遺伝的に変異したTTRのみならず、正常構造のTTRも老年性全身性アミロイドーシスを起こすことが知られている。申請者らは、free TTRと亜硫酸化TTRのアスロイド原性を比較し、free TTRにはアミロイド原性がなく、亜硫酸化TTRにアミロイド原性があることを発見した。亜硫酸塩は食品・大気汚染物質に含まれているため、更なる研究が必要である。ただし、この手法は免疫反応を利用するため、交差反応により他の蛋白が沈降する可能性や変異や修飾により目的の蛋白が沈降していない可能性がある。このため、複数の液体クロマトグラフィーと質量分析を直結し、分析することにより免疫沈降法の短所を克服した。トランスサイレチン関連アミロイドーシスは何らかの環境因子が発症機序に関与しているとする報告も多く、今後さらなる外因性亜硫酸塩とアミロイドーシスの研究を進めていく所存である。