hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ストレス時における微生物に対する感染抵抗性と血清レクチンの相関性について

本研究は、生体が本来備えている動物血清レクチンのヒトでの動態及びその性質を把握し、生体でのレクチンのトータルな役割を探ろうとするもので、糖鎖を表面にもつ微生物感染における宿主の新しい生体防御のメカニズムを検討するものである。1)私達がウシで精製し、クローニングしたコレクチンcDNAやその他のcDNAをプローブとして、動物やヒトの種々のコレクチンの遺伝子をクローニングした(Kawai,Gene,1997.,Kawai,Glycobiology,1998)。2)得られたcDNAを用いて、大腸菌や真核細胞を用いてのリコンビナントコレクチンの作成を行い、コレクチンの諸性質を比較検討した(Eda,Biochem.J,1997.,Eda,Biosci.Biotech.Bioch.,1988.,Suzuki,Biochem.Biophys.Res.Commun.,1997.,Ohtani,J.Immunol.Methods,1999)。さらに本リコンビナントレクチンを用いてウサギに免疫し、抗体作製を行い、それらを用いてコレクチンのアッセイシステム(ELISA法)を確立した(Ohtani,J.Immunol.Methods,1999)。3)本邦における欠損症の存在を検討するため、さらに正常人のコレクチンの正常値を設定する目的で、大阪府下衛生研究所や自衛隊中央病院の協力を得て、いろんな年齢における血液を得、血清と白血球を分離した。自衛隊では特殊レンジャー部隊での、レインジャー訓練の前後でのレクチン量を比較し、ストレス時の変化を調べた。減少、普遍、増加は60%、20%、20%の比率であった。全体の平均値では減少を示した。(Keshi,manuscript preparation)。急性炎症蛋白ではストレス時に増加を示すことが多いが、レクチンでは逆の現象がみられた。本研究は、生体が本来備えている動物血清クレチンのヒトでの動態及びその性質を把握し、生体でのレクチンのトータルな役割を探ろうとするもので、糖鎖を表面にもつ微生物感染における宿主の新しい生体防御のメカニズムを検討するものである。1)私達がウシで精製し、クローニングしたコレクチンcDNAやその他のcDNAをプローブとして、動物やヒトの種々のコレクチンの遺伝子をクローニングした(Kawai et al,Gene,1997.,Kawai et al,Glycobiology,in press)。また、これらの得られたcDNAを用いて、大腸菌によるリコンビナントコレクチンの作成を行い、コレクチンの諸性質を比較検討した(Eda et al,Biochem.J,1997.,Eda et al,Biosci.Biotech.Bioch.,in press.,Suzuki et al,Biochem.Biophys.Res.Commun.,1997)。さらに本リコンブナントレクチンを用いてウサギに免疫し、抗体作製を行い、それらを用いてコレクチンのアッセイシステム(ELISA法)を確立した。2)本レクチンは遺伝子のミューテーションによる欠損症の報告があり、本邦における欠損症の存在を検討するため、さらに正常人のコレクチンの正常値を設定する目的で、大阪府下衛生研究所の協力を得て、いろんな年齢における血液を得、血清と白血球を分離した。さらに、府下の病院でインフォームドコンセントに基づき、ストレス時、出産時、ウイルス感染時における種々の病態の患者の血清のサンプリングを行った。本研究は、生体が本来備えている動物血清レクチンのヒトでの動態及びその性質を把握し、生体でのレクチンのトータルな役割を探ろうとするもので、糖鎖を表面にもつ微生物感染における宿主の新しい生体防御のメカニズムを検討したものである。

1)私達がクローニングしたコレクチンcDNAやその他のcDNAをプローブとして、動物やヒトの種々のコレクチンの遺伝子をクローニングした(Kawai,Glycobiology,1998)。2)得られたcDNAを用いて、大腸菌や真核細胞を用いてのリコンビナントコレクチンの作成を行い、コレクチンの諸性質を比較検討した(Eda,Biosci.Biotech.Bioch.,1988.,Ohtani,J.Immunol.Methods,1999)。さらに本リコンビナントレクチンを用いてウサギに免疫し、抗体作製を行い、それらを用いてコレクチンのアッセイシステム(ELISA法)を確立した(Ohtani,J.Immunol.Methods,1999)。3)本邦における欠損症の存在を検討するため、さらに正常人のコレクチンの正常値を設定する目的で、大阪府下衛生研究所や自衛隊中央病院の協力を得て、いろんな年齢における血液を得、血清と白血球を分離した。自衛隊では特殊レンジャー部隊での、レインジャー訓練の前後でのレクチン量を比較し、ストレス時の変化を調べた。減少、普遍、増加は60%、20%、20%の比率であった。全体の平均値では減少を示した。(Keshi,manuscript preparation)。急性炎症蛋白ではストレス時に増加を示すことが多いが、レクチンでは逆の現象がみられた。
発話・上肢・下肢の運動制御の個人差に着目した吃音の神経メカニズムの探求

上肢運動に関する脳機能計測研究は多く存在するが,MRI環境内では姿勢や体動の制限があることから,下肢運動時の脳活動を調べた研究は限られている.横臥位のまま下肢運動が可能な非磁性の装置を作成し,ファイントムや20名の協力者を対象にデータを取得してきた.当該年度はその解析と論文としてまとめる作業を行った.上肢運動に関しては,複雑な指運動課題(指回し課題等)を吃音話者・非吃音話者を対象に取得したデータを解析し,まとめる作業を進めてきた.得られた結果については30年度の学会において発表する予定である.マインドフルネス瞑想法を用いることで,吃音話者が吃音を有することに伴う心理や身体的負担に関して改善の効果がある可能性がある.吃音話者が一定期間,マインドフルネスを練習した前後の事象関連電位の変化を計測する実験を開始した.現在も継続中である.瞑想中に限らず,普段の生活においても,目の前の課題ではなく,現在の課題とは無関係な思考や感情,想像に注意が逸れたマインドワンダリング状態に陥ることが多い.そこで,脳波をオンラインで解析しながら,マインドワンダリングに陥ったと思われるタイミングで視覚や音により注意の持続を促すニューロフィードバックシステムの作成を進めた.その後39名の協力者からデータを取得し,現在解析中である.その他,話者の声の大きさと相手が聞くであろうと想定する大きさや話者自身の好みの大きさとの関係についての実験データ,口唇運動の模倣に関するfMRI実験,疑似対面会話時の吃音話者の扁桃体の活動と吃音頻度に関するデータ,吃音児の割合に関するデータ等の解析と考察,論文化,投稿等を順次行ってきた.継続的に研究を進めており,順次結果が出ている.成果としてすぐに形には出来ないものの,おおむね順調に進んでいると考える.現在進行中の実験を引き続き継続する.終了済みした実験についてデータ解析と論文化作業を進める.本研究では,吃音のメカニズムを考察するために,発話だけでなく上肢や下肢の運動の性質・個人差に着目して研究を進める.発話の際に自分の声を知覚する聴覚フィードバックの性質は吃音話者と非吃音話者で異なり,個人差も大きい.気づきを向上させる訓練法の一つとしてマインドフルネス瞑想法が知られているが,聴覚フィードバックを含めた自己の感覚への気づきに着目することは,吃音の理解や改善のヒントとなるかもしれない.そこで本研究ではまず,マインドフルネスが聴覚フィードバック知覚を変化させるかを検討した.非吃音話者が一定期間練習を行い,その前後で遅延聴覚フィードバック条件下における発話の乱れや,遅延聴覚フィードバック音に対する聴覚誘発電位が変化するかを調査した.結果は,マインドフルネスを練習した群では,短い「あ」の発話時の遅延聴覚フィードバック音に対する聴覚誘発電位の振幅が有意に上昇し,さらに遅延聴覚フィードバック条件下における文章読み課題中の発話の乱れが有意に減少する結果が得られ,「気づきが上昇しているが発話が乱されにくくなる」ことを示唆する結果が得られた.下肢運動に関わる神経基盤を調査する目的で,障害物のない場所を移動している動画を見ながら足を動かす条件と,障害物を避けながら移動している動画を見ながら足を動かす条件で計測したMRIデータについて解析を進めた.被験者の足の裏に貼り付けられたマーカーの動きの動画を解析することで,足の動きと脳活動の関連を調査した.頭頂葉,後頭葉や運動野などは,障害物を避ける随意的な制御に対してより関わることが示唆された.これらの結果について,解析・論文化を進め,論文誌に投稿した.また,上肢運動として,複雑な指回しタスクを吃音者・非吃音者に対して課したデータの映像解析と統計解析を進め,まとめる作業を行ってきた.その他,口唇運動の模倣に関するMRIデータの解析を進めた.継続的に実験・解析を進めており,順次結果が出ているため,おおむね順調に進んでいると考える.上肢運動に関する脳機能計測研究は多く存在するが,MRI環境内では姿勢や体動の制限があることから,下肢運動時の脳活動を調べた研究は限られている.横臥位のまま下肢運動が可能な非磁性の装置を作成し,ファイントムや20名の協力者を対象にデータを取得してきた.当該年度はその解析と論文としてまとめる作業を行った.上肢運動に関しては,複雑な指運動課題(指回し課題等)を吃音話者・非吃音話者を対象に取得したデータを解析し,まとめる作業を進めてきた.得られた結果については30年度の学会において発表する予定である.マインドフルネス瞑想法を用いることで,吃音話者が吃音を有することに伴う心理や身体的負担に関して改善の効果がある可能性がある.吃音話者が一定期間,マインドフルネスを練習した前後の事象関連電位の変化を計測する実験を開始した.現在も継続中である.瞑想中に限らず,普段の生活においても,目の前の課題ではなく,現在の課題とは無関係な思考や感情,想像に注意が逸れたマインドワンダリング状態に陥ることが多い.そこで,脳波をオンラインで解析しながら,マインドワンダリングに陥ったと思われるタイミングで視覚や音により注意の持続を促すニューロフィードバックシステムの作成を進めた.

その後39名の協力者からデータを取得し,現在解析中である.その他,話者の声の大きさと相手が聞くであろうと想定する大きさや話者自身の好みの大きさとの関係についての実験データ,口唇運動の模倣に関するfMRI実験,疑似対面会話時の吃音話者の扁桃体の活動と吃音頻度に関するデータ,吃音児の割合に関するデータ等の解析と考察,論文化,投稿等を順次行ってきた.継続的に研究を進めており,順次結果が出ている.成果としてすぐに形には出来ないものの,おおむね順調に進んでいると考える.現在進行中の実験を引き続き継続する.すでに終了した実験についてデータ解析を進める.結果が出てきたら順次まとめる作業を行う.吃音当事者や関係者と議論する場を設ける.現在進行中の実験を引き続き継続する.終了済みした実験についてデータ解析と論文化作業を進める.実験参加者数や,参加者に支払う交通費の予測が難しく,最後に若干の残りが生じたため.論文の掲載料がかかることを予測していたが,受理されず別の雑誌に投稿し直したため,その分を翌年度に繰り越すことになった。実験協力者に支払う謝金や旅費,装置使用料,雑誌投稿・掲載料等に使用する予定である.謝金・人件費,実験機器類,出張費,英文校正料,その他消耗品等の費用に充てる.
Hepatocyte Growth Factor (HGF) の肝癌細胞への影響

材料と方法1)in vitroでdHGF添加により細胞増殖が抑制あるいは促進された肝癌細胞株および細胞増殖に無影響で細胞分散傾向が観察された3つの異なる肝癌株をSCIDマウスに移植し腫瘍成着後、dHGFの連日2週間の投与を行った。投与期間、換算腫瘍重量から腫瘍増殖曲線の作成およびマウス体重の測定を行った。2)dHGFの移植腫瘍および担癌マウス組織に及ぼす影響について2週間のdHGF投与後に肝癌移植担癌マウスを屠殺し、肝、腎重量の測定と供に腫瘍組織も含め各臓器の組織学的検索を行った。3)dHGF投与開始前後の全身状態の指標としてヘマトクリット値を測定した。結果および考察in vitroで観察されたdHGFの肝癌細胞の増殖、細胞形態変化、浸潤転移促進への直接的な影響はin vivoでは見られなかった。しかしdHGFの投与により、その濃度依存性に肝腎重量の増加、癌細胞増殖に伴うるいそうあるいは貧血の進行が抑制された。これらのことはdHGFの投与による肝腎重量の増加が血漿蛋白増加などに作用し担癌マウスに有益に作用すると供に、胆癌マウスの全身状態に影響すると考えられる種々の炎症性サイトカインの発現をdHGFが間接的に抑制している可能性が考えられる。今後は更に、これらのdHGFの胆癌マウス全身状態改善の機構についての検討を加え臨床治療薬としての応用を探求していく事が必要と考えられる。
水溶液を反応場とする近距離金属相乗効果系化合物の自律的形成と発光機能制御

チアカリックスアレーン(TCAS)を配位子として用い,水溶液系での元素相乗系化合物を創製し,光物理特性を明ちかにした.Ag^I-Tb^<III>-TCAS三元系について水-DMF系から錯体Ag^I4-Tb^<III>-TCAS_2(Na_9[Ag^I_4Tb^<III>[tcas^<8->)_2]・dmf_8(H_20)_6の単結晶を得た.結晶構造解析の結果,本錯体は二つのTCASが4重のS-Ag-S架橋により結ばれたdouble-cone形状をとることを明らかにした.錯体はTb^<III>に対称心を持つが,大まかにはTCASの中心を軸とするC_4対称をとる.TCAS骨格はわずかに歪んだconeコンホメーションを取っており,その疎水空孔にDMF(4)を包接する.Tb^<III>は計8個のフェノール酸素で構成される8配位立方体構造を持つ.特筆すべきはTb^<III>は配位水分子を持たないことである.これは励起Tb^<III>からOH振動子へのエネルギー移動による緩和を防止する上で重要な配位環境である.合成的にこのような配位環境を作り出すことは難しく,TCASとAg^Iとの混合により各構成要素が相乗的に作用し,超分子構造を組み上げるアプローチが奏功したといえる.なおAg^I_4・Tb^<III>コアにおいてAg^I-Tb^<III>距離はそれぞれ3.3233,3.2383Åであり,直接的な相互作用は認められなかった.単離した単結晶錯体の発光量子収率は20%程度であったが,結晶サイズが小さくなるにつれ減少した(2117%).また^5D_4→^7F_5遷移帯の形状の変化が観測され,Tb中心の対象性の差異が示唆された.発光寿命は2msであった.チアカリックスアレーン(TCAS)を配位子として用い,水溶液系での元素相乗系化合物を創製し,光物理特性を明ちかにした.Ag^I-Tb^<III>-TCAS三元系について水-DMF系から錯体Ag^I4-Tb^<III>-TCAS_2(Na_9[Ag^I_4Tb^<III>[tcas^<8->)_2]・dmf_8(H_20)_6の単結晶を得た.結晶構造解析の結果,本錯体は二つのTCASが4重のS-Ag-S架橋により結ばれたdouble-cone形状をとることを明らかにした.錯体はTb^<III>に対称心を持つが,大まかにはTCASの中心を軸とするC_4対称をとる.TCAS骨格はわずかに歪んだconeコンホメーションを取っており,その疎水空孔にDMF(4)を包接する.Tb^<III>は計8個のフェノール酸素で構成される8配位立方体構造を持つ.特筆すべきはTb^<III>は配位水分子を持たないことである.これは励起Tb^<III>からOH振動子へのエネルギー移動による緩和を防止する上で重要な配位環境である.合成的にこのような配位環境を作り出すことは難しく,TCASとAg^Iとの混合により各構成要素が相乗的に作用し,超分子構造を組み上げるアプローチが奏功したといえる.なおAg^I_4・Tb^<III>コアにおいてAg^I-Tb^<III>距離はそれぞれ3.3233,3.2383Åであり,直接的な相互作用は認められなかった.単離した単結晶錯体の発光量子収率は20%程度であったが,結晶サイズが小さくなるにつれ減少した(2117%).また^5D_4→^7F_5遷移帯の形状の変化が観測され,Tb中心の対象性の差異が示唆された.発光寿命は2msであった.
走査型トンネル顕微鏡におけるスピン偏極トンネル現象に関する研究

(1)大気中STMで、GaAsエピタキシャル薄膜試料およびNi探針の系においてトンネル電流が、GaAs伝導帯中に光励起された電子のスピン偏極度およびNi探針の磁化に依存することを検証した。これは汎用的SP-STMが可能であることを示し、原子分解能で磁性体試料のスピン偏極度が測定可能ということである。現在、表面の不安定性を除くために、超高真空STMに実験を移すことを始めている。(2)スピン偏極度を同定した半導体探針を用いることを考え、探針より電界放射により電子を引き出し、スピン偏極度をモット・スピン分析器で測定することにし、40KVの球状加速電界型モットスピン分析器について電子軌道シミュレーション、設計、作製を行い、現在測定が出来るようになった。(佐々木誠他:日本応用磁気学会投稿中)(3)絶縁物試料に対してはSTMが適用できない。試料表面スピン、探針スピン間に働く力をAFMで検出することを考えた(交換力顕微鏡:EFM)。遷移金属同志の交換力を理論的に検討し、10^<-10>Nのオーダにあることが分かり、これはAFMの測定範囲内にあることになる。
固有値によるグラフの特徴付け・分類に関する研究

(1)一般BetheTreeの構造、(2)ホフマングラフの他分野への応用、(3)隣接最小固有値(以降、最小固有値)によるクラスタリング、(4)ホフマングラフの3-格子への応用30年度は前年に引き続き上記(1)-(4)を進めた。(1)について、研究協力者の瀬川氏、吉江氏、久保田氏(三名とも東北大)らと、計算機実験で得られた結果が正しいのか研究を進めてきた。昨年度、一般ベーテ木のグローバーウォークの周期性についてまとめ投稿していた論文がlinear algebraand its applicationsに掲載された。(2)について、瀬川氏とライングラフの一般形というホフマングラフの性質を活かした研究を行ってきた中で、有向グラフへのホフマングラフの一般化を考えた。この先行研究はGuo氏、Godsil氏に依るものであったが、グラフ同型判定の固有値による判定の精度をさらに高めることに成功した。2019年7月までには投稿したい。また、吉野氏(東北大)、久保田氏と、最小固有値が-1-√2以上であるグラフのクラスの禁止グラフを決定し、ARS MATHEMATICACONTEMPORANEAに投稿していた論文がアクセプトされた。(3)については、見村氏(東北大)、楠木氏(大阪大)と研究を進めている。(4)について、昨年以上に目立った進展がみられた。ホフマングラフのfat頂点と辺(符号化)についての一般化を行うことで、一般的な整格子との対応をつけることに成功した。整格子のingerabilityについて説明することができ、かなり大きな進展である。並行する研究の多くの進捗が順調である。また、昨年から続けてきた研究二つ「概要(1),(2)」について掲載決定している。概要(3)については、まだ解決には至っていないが、計算機実験により、ホフマングラフのカバーによって上手くクラスタリングができていることが予想できた。概要(4)については、3-格子の分類で重要なのはルート格子で登場する例外型の様な格子の分類である。ホフマングラフで表される部分は、多くの3-格子をカバーする。現在は、ホフマングラフの一般化を考えることで,例外型に対応する3-格子の特徴付け作業をすすめている。この発見は3-格子に限らず、一般の整格子の特徴付けに大きな進展をもたらした。概要(2)についてはこれまで通り、制御理論の一分野であるマルチエージェント・システムについて、応用するための基礎理論を構築する。その際に必要となる作業はラプラシアン行列の一般化である。従来の一般化について、再生核ヒルベルト空間論を経由した議論で進めてきたが、これに組合せリッチフローや量子ウォークでの遷移行列を利用して進めたい。また、任意の最小固有値に関する或るグラフのクラスの禁止グラフについても吉野氏(東北大)、古谷氏(北里大)と共同研究を進める。概要(3)については、方針も見えてきたことから今年度見村氏(東北大)と積極的な議論に入って行きたい。概要(4)については、ホフマングラフの一般化を用いて、例外型3-格子の分類問題に取り組みたい。この部分についての進捗は極めて良い。(1)一般BetheTreeの構造、(2)ホフマングラフの他分野への応用、(3)隣接最小固有値(以降、最小固有値)によるクラスタリング、28年度は主に上記3つについて研究をした。(1)についてその構造は階層的で対称的であるが、具体的な固有値を見ることは大変難しい。先ずは単純に固有値の観点でその構造を特徴付けることが重要である。そこで、当初の問題よりも少し難度を落とし、取り組んできた。グローバーウォークの周期性は具体的なグラフで確かめられている例が少ないようである。計算機実験の結果では周期性を持つとき、その構造が特徴付けられる事が確認できた。(2)これまでグラフの最小固有値による構造を考える上でのみホフマングラフを利用してきた。そもそもホフマングラフはグラフの最小固有値による極限構造を表しているものであり、グラフの最小固有値問題について研究する時に用いることが自然だからである。しかし、ライングラフの一般化などにも用いられている為、応用の幅は広い。(1)の問題を考える上でホフマングラフを用いることもその分野で重要な問題である。更に、ある一般ライングラフで周期性を持つことを突き止めた。(3)についてはグラフの最小固有値を固定した時、どの様なホフマングラフが在るのかを考えた時に自然と出てくる問題である。Fat頂点を付け加える作業をするのだが、効率よく付け加えることまでには至っていない。まずは二つに分割することを考えることとした。グラフの固有値、固有ベクトルをみることでその分割が出来るのではないかということをコンピュータによる実験で確認できた。これはスペクトラルクラスタリングと呼ばれる手法と同じようなことで実現出来る。スペクトラルクラスタリングはラプラシアン行列の第二最小固有値にも関わらず、その反対側である最小固有値の固有ベクトルをみてクラスタリング出来るのは大変興味深い現象である。研究実績の概要で記述したように、現在3つの項目について研究を進めている。概要(1)は総ての代数的整数は一般BetheTreeの固有値として現れるという予想の解決を目標に研究する過程で現れた問題である。先ずは一般BetheTreeの固有多項式について、その構造をよく知ることが大事である。それゆえ、かなり順調に進んでいると言っても良い。概要(2)はスペクトラルグラフ理論の分野で情報収集を行うために取り組んできた活動から生まれた問題である。

一言にスペクトラルグラフ理論と言っても分野は広く、まだ横断的な研究が可能な領域である。これまでの研究で、グローバーウォークの周期性を持つ一般ライングラフの特徴付けが得られている。未だ解決していない小さな問題はあるものの、後はそれを論文にまとめるだけである。その第一歩が踏め、ほぼ完成した事は順調と言って良い。概要(3)はどうしてもクリアしたい問題でもある。本研究における大きな目標は固有値を固定した時にグラフがどの様な構造をしているのかを知ることにある。そのためにもFat頂点を効率よく付け加える手法の開発は解決したい研究の内の一つとなる。現象として固有ベクトルを見ることによる分割の可能性が見つかったことは良い流れだと考える。そして、最小固有値が出来るだけ大きくなるFatの付け方が良いクラスタリングである可能性があるということは、この分野の応用を考える上でも重要な発見である。以上のことから順調に研究が進んでいるといえる。(1)一般BetheTreeの構造、(2)ホフマングラフの他分野への応用、(3)隣接最小固有値(以降、最小固有値)によるクラスタリング、(4)ホフマングラフの3ー格子への応用29年度は前年に引き続き上記(1)ー(3)及び、(4)を追加して研究を進めた。(1)について、研究協力者の瀬川氏、吉江氏、久保田氏(三名とも東北大)らと、計算機実験で得られた結果が正しいのか研究を進めてきた。一般ベーテ木のグローバーウォークの周期性について論文にまとめ投稿した。(2)について、瀬川氏とライングラフの一般形というホフマングラフの性質を活かした研究を行っている。構造については特徴づけられたので、周期性などが決定できるか、現在研究中である。量子ウォークの研究を特定のグラフのクラス上で行うという研究は、この分野での得意とするところであり、一方であまり進捗がない領域でもある。また、吉野氏(東北大)、久保田氏と、最小固有値がー1ー√2以上であるグラフのクラスの禁止グラフを決定し、論文にまとめ投稿した。(3)については、昨年から継続して進めているが、まだ目立った進捗はない。計算機実験でも予想している結果の反例も見つかっていない。(4)について、目立った進展がみられた。禁止グラフを発見し、(ホフマングラフで表現できない)3ー格子の例外型を小さいながらも構成できた。これを拡大して、例外型3ー格子を幾つか作った。それらがより次元の高い例外型3ー格子の部分格子になっているのか突き止めている最中である。平行する研究の多くの進捗が順調であることと、昨年から続けてきた研究二つ「概要(1),(2)」について、論文にまとめ、投稿している。概要(3)については、昨年から進めてはいるものの解決には至っていない。概要(4)については、最小固有値がー3以上のホフマングラフの研究から自然と出てくる問題である。
眼組織移植における新規の免疫補助シグナル分子の機能解析とその臨床応用にむけた展開

方法:マウス正常眼と角膜移植眼におけるGITRLの発現と、眼内浸潤CD4+T細胞におけるGITRとFoxp3の発現を免疫蛍光法で解析した。アロ脾細胞前房接種後の前房関連免疫偏位(ACAID)誘導モデルと角膜アロ移植モデルに、GITRL抗体、GITR抗体、isotype抗体を腹腔内投与し、ACAID誘導と移植片生着を検討した。また、C57BL/6マウスの正常角膜を抗GITRL抗体または対称rat IgGで前処運した後、マウスの脾臓CD4陽性T細胞と共培養し、T細胞におけるFoxp3発現の変化と、角膜内皮細胞障害を解析した。結果:GITRLは正常角膜内皮細胞と虹彩毛様体に恒性発現していた。In vivoでのGITRL抗体とGITR抗体の投与ははいずれもACAID誘導に影響しなかったが、移植角膜の生着を対照より有意に短縮させた。移植角膜内のGITR+CD4+T細胞は、対照の生着角膜内ではFoxp3陽性であったのに対し、GITRL抗体投与によりFoxp3陰性となった。In vitroでは、GITRL阻害角膜との共培養後と比較して、GITRL陽性角膜との共培養後に、T細胞のFoxp3発現は増強した。抗原特異的反応性T細胞と非特異的活性化T細胞のいずれによる角膜内皮細胞障害も、GITRL陽性角膜と比較してGITRL阻害角膜において有意に強かった。結論)角膜に恒性発現するGITRLを介して眼局所でTregが誘導される。この局所誘導型のTregは活性化T細胞による角膜内皮細胞障害を抑制して前眼部の恒常性を保持し、移植片生着を維持する。【目的】免疫補助シグナル分子の中で、新規のB7ファミリー分子であるB7-H3の、眼組織における発現と機能を明らかにすること。【方法】In vivoの解析として、C57BL/6ドナーからBALB/c宿主への角膜アログラフトモデルと、C57BL/6由来アロ抗原特異的な前房関連免疫偏倚(ACAID)モデルを用い、抗B7-H3抗体投与を行い、眼局所と2次リンパ器官における免疫応答を解析した。。またin vitroの解析として、C57BL/6やC3H/Heの脾細胞で免疫されたBALB/cマウスまたは正常のBALB/cマウスの脾臓T細胞とC57BL/6角膜を共培養する系で、共培養の前にC57BL/6角膜を抗B7-H3抗体または対照IgGで前処理した。共培養後、角膜内皮死細胞を定量解析した。【結果】B7-H3は前眼部の角膜と虹彩毛様体組織に恒性的に発現し、前房関連免疫偏位(ACAID)の誘導と角膜アログラフト生着に必要な分子であった、眼局所において、アロ反応性T細胞による角膜内皮障害は、B7-H3を発現する角膜に比して阻害された角膜の方で有意に強かった。一方、正常BALB/cマウス、同系やアロ移植マウスのいずれの頸部リンパ節、脾臓にもB7-H3発現細胞はほとんどなかった。【結論】B7-H3は二次リンパ器官での免疫抑制よりは、眼局所でのT細胞との相互作用で抑制効果を発揮していることが示唆された。
加齢に伴う姿勢と運動制御の不安定化メカニズムの解明

高齢者の立位時の姿勢および運動の不安定性について,健康な若年者と高齢者を対象に視覚誘導型の足圧中心を用いた追跡運動課題を行った.高齢者は与えられえるフィードバック情報に立位バランスは影響を受け,運動の開始だけでなく運動の停止も遅延し,大きな変動性を持つことが明らかとなった.このとき,高齢者の立位バランスへの二関節筋の作用や垂直方向への姿勢戦略が重要な役割を果たすことが示唆された.本研究では高齢者の健康維持・転倒予防のための効果的な運動プログラムを構築するために運動戦略への加齢の影響について運動学的手法を用いて若年者と比較した.方法は若年者と高齢者に立位時に視覚誘導型の足圧中心追跡課題(コンピュータモニターを見ながら,両方の足底の圧力が最も加わる点と目標となる点を重ね合わせる課題)を行わせ,運動の正確さ,下肢関節運動,下肢筋活動について調べた.高齢者の股関節を主に用いる立位姿勢制御が行われ,過去の研究報告と一致していた.さらに,下肢筋活動の因子分析から二関節筋であるハムストリングスが高齢者の姿勢制御に加わることが明らかとなった.続いて,一連の運動遂行の中で高齢者の不安定性が主に出現するのかを明らかにするため,足圧中心を前方へランプ状(ゆっくりと動く)とステップ状(素早く動く)に移動させる立位運動課題を高齢者と若年者に行わせた.その結果,ステップ状の運動課題(素早く動いて,止まる課題)では反応時間,前方移動直前に後方へ移動する時間(準備期),運動を停止するのに要する時間(制動期)の変動係数に年齢差がみられ,高齢者でばらつきが大きかった.一方,運動開始後の前方へ移動している時間(推進期)に差はなかった.また,ランプ状の運動課題では全ての項目で差はなかった.これらの結果から,高齢者は素早い運動を行うとき,反応時間だけでなく,運動の準備や停止にも不安定性さが出現することを明らかにした.今回の調査で,高齢者の姿勢制御への二関節筋(特に,ハムストリングス)の働きと素早い運動に対する反応直後の運動と運動停止に加齢の影響をうけることが明らかとなった.本研究結果を高齢者の転倒予防のため運動プログラムに反応直後の初動動作と停止動作について着目し,適切な訓練内容が必要と思われる.高齢者の立位時の姿勢および運動の不安定性について,健康な若年者と高齢者を対象に視覚誘導型の足圧中心を用いた追跡運動課題を行った.高齢者は与えられえるフィードバック情報に立位バランスは影響を受け,運動の開始だけでなく運動の停止も遅延し,大きな変動性を持つことが明らかとなった.このとき,高齢者の立位バランスへの二関節筋の作用や垂直方向への姿勢戦略が重要な役割を果たすことが示唆された.本研究では、高齢者の運動戦略の多様性の低さと運動成績の不安定さに着目し、運動学的手法を用いて運動学習の各段階での運動制御を若年者と比較し、加齢による運動制御の不安定化メカニズムを明らかにすることを目的とした。加齢による運動制御への影響を調べるために視覚誘導型足圧中心追跡運動課題の妥当性について検証した。とした。被験者は健常若年者20名及び地域に居住する健康高齢者20名であった。本運動課題の難易度は空間的な要素(振幅の大きさ)と時間的要素(運動の速さ、または、周波数)によって決定され、中等度の運動速度(0.5Hz)と比較的大きな振幅(体重の30%)での運動成績がが両群とも好成績であった。高齢群の運動適応後の運動成績は自身の足圧中心に関する情報のみ視覚的に与えられる条件で若年群より著しく低下していた。また、適応後、視覚情報を遮断しが場合(閉眼時)、両群とも運動成績は遮断前に比べ有意に低下したが、年齢差を認めなかった。適応後の運動制御において、高齢者は、適応後に視覚から得られる自身の足圧中心を処理し、運動制御に役立たせることが困難であることが示された。今回は被験者の負担軽減のための実験時間短縮、データ収集精度向上と解析の効率化を図るために現有している3次元動作解析システムの更新を行い、被験者あたり約3時間ほどの拘束時間が約2時間に縮小された。新たなシステムに伴うデータの信頼性は高く、その有効性が示された。加齢によるバランス能力の低下は高齢者の転倒リスクを高め,転倒は寝たきり状態を引き起こす.高齢者のバランス能力の特徴に姿勢および運動制御の不安定性があり,高齢者の運動パフォーマンスを低下させる.また,この姿勢や運動制御の不安定性は運動学習に負の影響を与え,高齢者の転倒予防プログラムの効果に影響を与える.本研究では,高齢者の転倒予防の運動プログラムの有効性向上を目指し,加齢による立位姿勢・運動制御の不安定化メカニズムを明らかにすることを目標に立位での追跡運動課題を用いて研究を進め,以下に列挙する研究成果を得た.(1)立位バランスにおいて,運動学に関するフィードバック情報は一般的に有効である.視覚的フィードバック情報を用いて動作の安定性がプラトーに達した後,若年者は制限されたフィードバック情報下でも動作を安定させることが可能であったが,高齢者では僅かなフィードバック情報の制限で動作の安定化に影響を受けていた.(2)立位姿勢を制御するために姿勢筋や抗重力筋の共同性は不可欠である.立位姿勢制御時の若年者の筋シナジーは運動方向に対応して構成されるが,高齢者の筋活動は若年者で観察された筋シナジーと異なる.

特に,下肢二関節筋群の立位姿勢制御への関与は若年者に比べて高齢者で増大する.(3)高齢者のバランス能力を低下させる要因に運動の開始の遅れ(つまり,反応時間の延長)が特徴的であるが,姿勢を安定させるための様々な代償運動が行われ,運動の開始と停止が繰り返される.運動制動課題において,高齢者では若年者に比べて運動開始の遅れとともに運動停止までに要する時間が延長し,大きな変動性を持つ.(4)さらに,後方への姿勢および運動を修正する時,若年者に比べて高齢者は重心を下方に移動させていた.高齢者は垂直方向への姿勢制御,つまり,第3の姿勢戦略である膝関節を中心とした懸垂戦略を代償的に用いる可能性がある.総合領域本年度の計画と目標は,1Feedback系内の運動の推進と制動の制御への加齢の影響(特に,運動の不安定性)を調べること,2加齢における運動戦略と二関節筋の役割の変化,3学習による運動の安定性の加齢の影響であった.1と2に関してはおおむね順調に進展しているが,3についてはやや遅れていると判断する.3は運動学習の効果を調べるため,ある一定の実験期間を必要とする.しかしながら,昨年度より本研究施設の耐震工事に伴い実験室を長期間に渡って使用することができなくなり,また,施設内および施設外で代替の実験室を確保することが出来なかった.そのため,3については早急に対策を立て,実験室の確保及び被験者の日程調整を図るなど研究予定の見直しの必要がある.現在,得られた実験データの解析は進行中であり,全体的の中では支障なく順調に進捗している.本年度の計画と目標は、加齢の運動制御への影響を調べるための視覚誘導型足圧中心追跡運動課題を考案し、被験者の負担軽減のための実験時間の短縮、データ収集精度向上と解析の効率化であった。地域のシルバー人材センターと連携し、被験者数は当初予定していた人数(若年者10名、高齢者10名)より多い人数(若年者20名、高齢者20名)を確保することが出来た。しかしながら、高齢被験者の場合、実験登録時の健康状態が良好であっても、実験当日の体調がすぐれないことが起こり得る。今回の実験参加者は当日体調不良を訴えなかったが、実験当日の体調の変化に対して中止基準を設定し、同意書等に明文化し、被験者に説明する必要がある。高齢者を対象とする実験では被験者への身体的及び精神的負担の軽減が必要である。本課題での最適な運動条件が明らかとなったことにより運動条件が1つに絞り込まれたことで運動課題数が縮小し、被験者への負担が軽減した。また、3次元動作解析システムのプログラムの更新(Cortexへアップデート)が完了したことにより、実験準備や条件変更などの操作が簡便化し、被験者の拘束時間の更なる縮小が可能となった。得られた実験データの解析は現在も進行中であるが、全体計画の中では支障なく順調に進捗している。本年度は本研究の最終年度にあたり,2つの目標を掲げる.1つ目はこれまでの研究結果より,運動制御の加齢の影響の検証実験を行う.具体的には若年者を対象として,下肢関節活動や下肢関節運動の制限,立位床面条件の変化など模擬的実験条件下において加齢の影響が再現されるかどうかを検討する.
Mg2Si/CNT複合ナノファイバーによるn型フレキシブル熱電変換素子の開発

カーボンナノチューブ(CNT)の表面をシリサイド系熱電変換材料でコーティングした複合ナノファイバーを作成し,400°Cまで使用可能なn型フレキシブル熱電変換素子を開発することが本研究課題の目的である.本年度はマグネシウムシリサイドコーティングの高性能化とマグネシウムシリサシド/CNT複合ナノファイバーによる薄膜形成を行った.昨年度までの研究から,プロセスの中間生成物であるシリコン中にシリカを残存させないことが重要であることが明らかなっている.しかしエッチングによりシリカを完全に除去するとシリコンナノ粉末がCNTから剥離してしまうことが分かった.そこでシリコンのサブミクロン粉末を原料粉末として新たに採用し,コロイドプロセスを用いたマグネシウムシリサイド/CNT複合ナノファイバー合成プロセスを新たに開発した.本プロセスによりマグネシウムシリサイドがCNTに付着した複合ナノファイバーを得ることに成功した.さらにCNT表面の官能基除去プロセスを合成プロセス内に組み込むことにより,マグネシウムシリサイド中の不純物を低減できることが明らかとなった.また不純物を低減させることにより,マグネシウムシリサイド/CNT複合ナノファイバーの性能指数は大幅に向上した.次に吸引濾過を利用したプロセスにより複合ナノファイバーの薄膜化を行った.その結果,薄膜化には成功したものの,薄膜のサイズがある程度以上大きくなると亀裂が入り割れてしまうことが分かった.CNT表面に合成されるマグネシウムシリサイドの大きさは原料シリコン粉末と同程度の大きさとなるが,本研究で用いたシリコン粉末の粒径はCNTと比較して大きかったため,薄膜形成に必要なCNT同士の絡み合いをマグネシウムシリサイドが阻害してしまったためであると考えられる.カーボンナノチューブ(CNT)の表面をシリサイド系熱電変換材料でコーティングした複合ナノファイバーを作成し,400°Cまで使用可能なまでn型フレキシブル熱電変換素子を開発することが本研究課題の目的である.本年度は薄膜化に適したマグネシウムシリサイド/CNT複合ナノファイバーを得るために,マグネシウムシリサイドコーティングの高性能化と析出形態制御プロセスの開発を行った.従来のプロセスで作製された複合ナノファイバーでは,マグネシウムシリサイドコーティング中に不純物である酸化マグネシウムのナノ結晶が分散しており,この酸化マグネシウムが電子伝導を阻害するために導電率が低下し,無次元性能指数が低減していると考えられる.したがってナノファイバー高性能化のためには酸化マグネシウムを低減させる必要がある.本研究ではまず酸化マグネシウムが生成される原因を調査し,その結果,プロセス中に中間生成物として得られるシリコンナノ粒子の表面酸化によって生成されたシリカ,またはシリコンナノ粒子中に残存した未還元のシリカが,マグネシウムと酸化還元反応することにより,不純物である酸化マグネシウムが生成されていることを明らかにした.次に,酸化マグネシウムを低減させるためにフッ化水素酸によるシリカの除去,また,シリコンへと還元する前のシリカ層の厚さを低減することによる還元の促進を試みた.これらにより不純物である酸化マグネシウムを完全に除去することはできなかったものの,シリカ層の厚さを変えることによりマグネシウムシリサイドコーティングの析出形状を,厚い層状の単結晶からブロック状へと変化させられることがわかった.したがって,コーティング中にまだ不純物は残存しているものの,析出形態制御のためのプロセスを開発することができた.本年度は薄膜化に適したマグネシウムシリサイド/CNT複合ナノファイバーを得るために,マグネシウムシリサイドコーティングの高性能化と析出形態制御プロセスの開発を行う計画であったが,析出形態制御プロセスは開発できたものの,不純物低減による高性能化までには至らなかった.カーボンナノチューブ(CNT)の表面をシリサイド系熱電変換材料でコーティングした複合ナノファイバーを作成し,400°Cまで使用可能なn型フレキシブル熱電変換素子を開発することが本研究課題の目的である.本年度は薄膜化に適したマグネシウムシリサイド/CNT複合ナノファイバーを得るために,マグネシウムシリサイドコーティングの高性能化と析出形態制御プロセスの開発を行った.昨年度までの研究から,CNTにコーティングされたシリカ層の厚さを低減することにより,マグネシウムシリサイドコーティングの析出形状が層状からブロック状へと変化することがわかっている.そこでシリカ層の厚さをより薄くし,ナノ粒子状のマグネシウムシリサイドを合成しようとしたところ,中間生成物であるシリコンナノ粒子の結晶性が低下し,合成後にマグネシウムシリサイドの結晶が得られなくなってしまった.合成されたアモルファスを分析したところ,マグネシウムとシリコン,酸素が含まれていることがわかり,プロセス中にシリコンナノ粒子が酸化しアモルファス状の酸化物となってしまったために結晶性が低下したのではないかと考えられる.そこでシリコンの酸化を防ぐために,全てのプロセスを不活性雰囲気または真空雰囲気中で行えるよう装置を改良した.さらにシリコンナノ粒子の表面酸化や残存している未還元のシリカを除去できるよう,弗化水素酸によるシリカ除去プロセスの追加も行った.しかし弗化水素酸による処理を行うことにより,シリコンの結晶性が低下し最終生成物であるマグネシウムシリサイドがアモルファス化してしまうことがわかった.この原因については現在調査中であるが,不純物除去プロセスと析出形態制御プロセスを実現するためには,中間生成物であるシリコン中にシリカを残存させないことが重要であることを明らかとした.本年度はマグネシウムシリサイド/CNT複合ナノファイバーの薄膜化と評価を行う予定であったが,マグネシウムシリサイドコーティングの不純物低減プロセスを実現できず,薄膜化まで到達できていない.カーボンナノチューブ(CNT)の表面をシリサイド系熱電変換材料でコーティングした複合ナノファイバーを作成し,400°Cまで使用可能なn型フレキシブル熱電変換素子を開発することが本研究課題の目的である.

本年度はマグネシウムシリサイドコーティングの高性能化とマグネシウムシリサシド/CNT複合ナノファイバーによる薄膜形成を行った.昨年度までの研究から,プロセスの中間生成物であるシリコン中にシリカを残存させないことが重要であることが明らかなっている.しかしエッチングによりシリカを完全に除去するとシリコンナノ粉末がCNTから剥離してしまうことが分かった.そこでシリコンのサブミクロン粉末を原料粉末として新たに採用し,コロイドプロセスを用いたマグネシウムシリサイド/CNT複合ナノファイバー合成プロセスを新たに開発した.本プロセスによりマグネシウムシリサイドがCNTに付着した複合ナノファイバーを得ることに成功した.さらにCNT表面の官能基除去プロセスを合成プロセス内に組み込むことにより,マグネシウムシリサイド中の不純物を低減できることが明らかとなった.また不純物を低減させることにより,マグネシウムシリサイド/CNT複合ナノファイバーの性能指数は大幅に向上した.次に吸引濾過を利用したプロセスにより複合ナノファイバーの薄膜化を行った.その結果,薄膜化には成功したものの,薄膜のサイズがある程度以上大きくなると亀裂が入り割れてしまうことが分かった.CNT表面に合成されるマグネシウムシリサイドの大きさは原料シリコン粉末と同程度の大きさとなるが,本研究で用いたシリコン粉末の粒径はCNTと比較して大きかったため,薄膜形成に必要なCNT同士の絡み合いをマグネシウムシリサイドが阻害してしまったためであると考えられる.CNT上でシリカをシリコンへ還元するプロセスを見直し,還元条件だけでなく装置の改良も行うことにより,コーティングの高性能化を図る.CNT上でシリカをシリコンへ還元するプロセスを見直し,コーティングの高性能化を図る.それと同時に薄膜化へ向けた研究も行い,当初の目的である,400°Cまで使用可能なまでn型フレキシブル熱電変換素子を開発する.研究を進めていく上で必要に応じて科研費を執行したため,当初の見込み額と執行額が異なってしまった.研究を進めていく上で必要に応じて科研費を執行したため,当初の見込み額と執行額が異なってしまった.達成度についてやや遅れてはいるものの,研究計画に大きな変更はなく,前年度の研究費も含め当初予定通りの計画を進めていく.具体的には,マグネシウムシリサイド合成およびフレキシブル熱電変換素子試作のための消耗品,情報収集のための旅費に使用する.達成度についてやや遅れてはいるものの,研究計画に大きな変更はなく,前年度の研究費も含め当初予定通りの計画を進めていく.
近代韓国における愛国唱歌教育運動と音楽教育成立過程の研究

愛国唱歌教育運動の成立過程は自主独立、文明開化、民族精神、排日思想などを理念とした。このような理念は、近代国家の形成過程にも重要な役割をしたが、理念の羅列化を招く恐れが存在した。そのために、開国以来、韓国における「近代の意味」を分析した。すなわち、近代の意味を「思想としての近代」と「文明としての近代」に分けると同時に、近代韓国の唱歌教育がどのような枠組みに位置づけられるかを考察した。その結果、開国から保護条約時代に限ると、民族系学校では、抗日的・民族的歌詞、朗読風旋律が主流であった。宣教系学校では、抗日的・民族的歌詞、讃美歌旋律による替歌が現れると共に、宣教師の高い水準の音楽教育を受けて愛国唱歌も歌われた。そして、日本系学校では、公立普通学校、官立漢城師範学校を中心に、日本唱歌の替歌、韓国伝来童謡が掲載された唱歌教科書を刊行し、愛国唱歌教育運動に対抗すると共に、日本唱歌の普及に努めたことを明らかにした。このように、3系統学校の音楽教育活動を中心に、近代韓国における愛国唱歌教育運動と音楽教育成立過程を考究した。一方、統監府における音楽教育政策の特質を解明すべく日本の対韓教育政策論を考察した。日本から対韓教育論が叫ばれたのは、日清戦争直後から見られる。それらは、駐韓公使大鳥圭介官立日語学校長岡倉由三郎など在韓官僚をはじめ、重岡薫五郎、青木寛吉など日本国内の在野論客から、日本語教育、農業教育、同化教育、学校制度などの植民地教育政策論が示された。このような論調は統監府や学部(文部省)に影響を与え、第2回教監会議以後、最初の日本人音楽教師である小出雷吉が日本唱歌普及に尽力したことを解明した。しかし、このような理念は、近代国家の形成過程にも重要な役割をしたが、理念の羅列化を招く恐れが存在した。すなわち、近代の意味を「思想としての近代」と「文明としての近代」に分けると同時に、近代韓国の唱歌教育がどのような枠組みに位置付けられるかを考察した。その結果、開国(江華島条約)から保護条約時代に限ると、民族系学校では、抗日的・民族的歌詞、朗読風旋律が主流であった。宣教系(キリスト教)学校では、抗日的・民族的歌詞、賛美歌旋律による替歌が現れると共に、宣教師の高い水準の音楽教育を受けて愛国唱歌も歌われた、そして、日本系学校では、公立普通学校、官立漢城師範学校を中心に、日本唱歌の替歌、韓国伝来童謡が掲載された唱歌教科書を刊行し、愛国唱歌教育運動に対抗すると共に、日本唱歌の普及に努めたことを明らかにした。このように、3系統学枝の音楽教育活動を中心に、近代韓国における愛国唱歌教育運動と音楽教育成立過程を考究した。日本から対韓教育論が叫ばれたのは、日清戦争直前から見られる。それらは、駐韓公使大鳥圭介、官立日語学校長岡倉由三郎など在韓官僚をはじめ、重岡薫五郎、青木寛吉など日本国内の在野論客から、日本語教育、農業教育、同化教育、学校制度などの植民地教育政策論が示された。このような論調は統監府や学部(文部省に準ずる)に影響を与え、第2回教監会議以後、最初の日本人音楽教師である小出雷吉が日本唱歌普及に尽力したことを解明した。韓国の近代教育における音楽教育は、近代学校の成立から行われたと言える。

韓国の近代そのものが日本による強制開国から出発したことを勘案すれば、キリスト教、とりわけキリスト教主義学校の音楽教育は重要な位置を示している。キリスト教主義学校が韓国の音楽教育の定着に大きな貢献をしたことはいうまでもない。しかし、韓国人はそれをそのまま受容することではなく、当時の政治、経済、産業、教育などが抱えている課題を音楽教育にも反映したことはいうまでもない。本研究では、愛国唱歌教育運動を三領域から考察している。それは、洋楽を直接に受け入れたキリスト教主義学校の賛美歌、キリスト主義学校と関わりをもちながらも、自主的、主体的な近代的教育をめざした民族学校の愛国唱歌、そして日本の近代教育を注入しようとした官公立学校の日本唱歌は、それぞれからみながらも、近代的音楽教育を学校教育.と政治教育の視点から展開した。すなわち、民族学校では、賛美歌旋律に抗日的、半日的な替歌を唱っており、キリスト教主義学校では、欧米宣教師の政治的特権を背景に抗日的、反日的な替歌が普及していた。そして官公立学校では、賛美歌旋律を多く取り入れた日本唱歌を「模範教育」という教育政策のもとに移入してきた。したがって、今年度の研究では、愛国唱歌教育運動を学校教育のみ対象にしてきたが、その源流を辿り付くべく愛国唱歌教育運動の母体とその前提になる伝統音楽の伝承と儒教思想、国家近代化を呼び掛ける開化唱歌を総合的に分析した。朝鮮は小国でありながらも、518年を存命し、世界史における一王朝として最も長い歴史をもつ国である。朝鮮は朱子学儒教を統治理念として取り入れ、独特な政治・制度・経済・文化・教育などを創り出した。このような儒教国家に新たな変革をもたらしたものは、開国以来、米国宣教師によるキリスト教の布教活動が朝鮮の政治・文化・教育などに新しい時代を予告していた。彼らの最大目標は布教事業を最重視しながら、近代文明の恵みとも言える医療事業や教育事業を組織的・体系的・系統的に展開した。その結果、朝鮮民族は従来の中華文明だけではなく、新たな西洋文明の存在を認識することになる。西洋の学校教育は、キリスト教を中心に発展した音楽が学校教育の重要な教育内容として位置づけられたが、朝鮮の学校教育については存在しない新しい芸術教育として登場した。このような洋楽が近代教育を象徴する学校から、唱歌教育を通して普及されることは、唱歌教育だけではなく、社会の発展にも結び付くものであった。日清・日露戦争を契機に洋楽としても愛唱された唱歌は、近代教育を主導する私立学校から高揚した。ことにキリスト教主義学校を中心に文明開化、民族精神、抗日思想などの歌詞づけ讃美歌の替歌が広く歌われた。しかし、愛国唱歌教育運動の先行研究は、愛国唱歌に関わる政治的な歌詞が散見される反面、音楽そのものの実態がどのように発展されたかは解明されていない。したがって、本年度研究では、愛国唱歌教育運動を新しい視点から、歴史的・民族的な思想を考究しながら、洋楽はどのように導入・普及されたかを分析すると共に、論述の展開は、愛国唱歌教育運動、特に音楽教育の水準が高いキリスト教主義学校などを中心に洋楽普及の実態を考察した。
ペルオキシソ-ム異常疾患の分子生物学的研究

ペルオキシソ-ム異常疾患群は最近その存在が認知された重篤な遺伝疾患である。ペルオキシソ-ム局在性機能の欠損は疾患によって様々であるが、我々は最も多く認められるペルオキシソ-ム脂肪酸酸化能低下に注目し、この酸化系諸酵素の欠損をイムイノブロット法で明らかにし、新しい疾患も見出してきた。本研究では、これら諸疾患の病因解明に重要であるが、未検討の諸項目について検討した。1.ペルオキシソ-ム脂肪酸酸化系諸酵素のイムノブロット解析が十分なされていない新生児副腎白室ジストロフィ-について調べ、この疾患での酵素欠損のパタ-ンが一定でなく、本疾患の病因はヘテテロなものであると推定された。2.未だ酵素学的解析が行われていてい極長鎖脂肪酸活性化酵素とジヒドロキシアセトンリン酸アシル転移酵素をラット肝臓ペルオキシソ-ムより高度に精製した。特に前者は長鎖脂肪酸活性化酵素とは異なる新しい酵素であることを確認した。これら精製標品は未だ単一ではないが、モノクロ-ン抗体作成に用いることが可能と思われる。3.ペルオキシソ-ム構造欠損の疾患の病院解明にはペルオキシソ-ム形成機構を明らかにする必要がある。そこで以下の2項目について検討した。ペルオキシソ-ム膜内在性ポリペプチドの中で最も量が多くかつ分子量の大きい7OkDaポリペプチドのcDNAをクロ-ニングし、その構造決定をおこなった。その結果、本ポリペプチドは膜貫通型で外側露出部分にATD結合部位が存在することが推定された。またマトリックス局在タンパク質の局在化シグナルを検討した結果、一群の酵素の局在化シグナルはC末端のセリン・リジン・ロイシンであることを明らかにした。1.抗体を利用したペルオキシソームβー酸化系諸酵素欠損の解析は診断、病因解明に重要である。患者直腸粘膜生検検体や羊水細胞でイムノブロット解析が出来ることを確認した。また、新生児副腎白質変性症剖検肝臓についてイムノブロット解析をおこなったところ、酵素欠損に少なくとも3種類の異なるパターンが存在することがわかった。2.ペルオキシソーム異常疾患のなかで最も症例の多いX染色体副腎白質変性症の病因は極長鎖脂肪酸アシルーCoAシンテターゼの欠損であると考えられている。しかし、本酵素の実体は明らかでない。ラット肝臓を用い、本酵素の精製を試みた。易失活性のため完全精製標品は得られていないが、長鎖脂肪酸アシルーCoAシンテターゼと分離できること、後者に対する抗体で滴定できないことなどから、新しい酵素である極長鎖脂肪酸アシルーCoAシンテターゼが存在することが考えられた。3.Zellweger症候群の病因はペルオキシソーム構造の欠損である。ペルオキシソーム形成異常解析のため、ペルオキシソームβー酸化系の初発酵素であるアシルーCoAオキシダーゼの前駆体とラット肝臓ペルオキシソームを用いる無細胞輸送実験系を確立した。今後、本実験系を改良し、ペルオキシソームタンパク質局在化に必要な因子を解析できる。また、ペルオキシソーム膜内在性70kDaポリペプチドcDNAの構造解析からATP結合部位を有することがわかった。本ポリペプチドcDNAを用いて患者皮膚線維芽細胞DNAでサザンブロット解析を進めているが、本遺伝子の大きな異常はいまだ検出されていない。ペルオキシソ-ム局在性機能の欠損は疾患によって様々であるが、我々は最も多く認められるペルオキシソ-ム脂肪酸酸化能低下に注目し、この酸化系諸酵素の欠損をイムノブロット法で明らかにし、新しい疾患も見出してきた。