hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新しい逸脱マーカーによる初期病変の早期検出と障害度測定法の開発(組織特異的FABPファミリー蛋白の利用)

1.逸脱マーカーとして利用し得る既知及び新FABP分子種の性状検索:既知FABPマーカーとしての有用性を深る基礎研究として、ヒトの心筋型H-FABPに対する抗体を用い免疫組織化学的に、急性心筋虚血1時間後の壊死心筋細胞及び周辺の形態学的に正常な心筋細胞でのH-FABP染色能は著しく減少し、H-FABPが損傷した心筋細胞の良い組織マーカーとなることを確認した。回腸より見出した肝臓型L-FABPと近縁のI-15P蛋白は黄体、副腎でも免疫染色されたがノーザンブロットでは副腎は陰性であった。この他、皮膚に心筋型H-FABPと近縁の新しいタイプのFABPが同定された。従って逸脱マーカーとして肝型、心筋型、腸型、脂肪細胞型、回腸型、シュワン細胞型、皮膚型の利用が示唆された。2.逸脱マーカーとしての応用:ヒト心筋型H-FABPに対するモノクロナル抗体、並びにポリクロナル抗体を作成しサンドイッチ法による血清H-FABPのラジオイムウノアッセイ法を確立し、心筋梗塞患者のアンギオプラスティー(AP)施行後の血清について、逸脱マーカーとしての有用性を検討した。本法での健常成人血清の測定値は7.16±1.13ng/mlであった。発作後1.5時間内にAPを施行した心筋梗塞患者9例中4例の血清は何れも正常範囲を示した。一方、発作後1.5時間以上を経過した症例では血清H-FABPは著しく増加したが、血清のクレアチニンキナーゼ(CK-MB)やクレアチニン燐酸キナーゼ(CKP)の変動より早く6時間以内にはマキシマムに達した。H-FABPはAP処理後尿にもいち早く検出されたが、CK-MB、CKPは検出されなかった。これらの結果はH-FABPが心筋梗塞発作の検出よりはむしろAP施行による血行再建に対する生化学的マーカーとして有用であることを示唆している。1.FABPファミリー蛋白の特性:FABPファミリー蛋白を逸脱マーカーに用いる基礎的研究として腸疾患への応用が期待されるI-15Pについて、その組織局在性、cDNAクローニングと発現の動向をネズミで検討した。その結果I-15Pはウエスターンブロット検索で回腸のみならず卵巣及び副腎でも検出された。特に腸では吸収上皮の他一部腸クロマフィン細胞に局在し、卵巣では黄体細胞、副腎では一部皮質細胞に検出された。この他I-15P類似の免疫交叉性が胃の粘膜上皮細胞、顎下腺の顆粒回旋性細管細胞にも認められた。細胞内局在はサイトゾルに限局したが、腸クロマフィン細胞、顆粒回旋性細管細胞では分泌顆粒に認められた。クローニングされたI-15P(ネズミ)のcDNAは457個のヌクレオチドより成り、蛋白をコードする127個の推定アミノ酸配列はネズミ腸より精製した蛋白の配列と完全に一致した。このcDNAをプローブにノーザンブロットを行った結果、回腸と同じサイズの転写産物が卵巣で検出された。一方肝型-FABPは、確立されたヒトhepatoblastomaのathymic nude mouseモデルで腫瘍細胞及び腫瘍細胞抽出液でほぼ40%の割合でポリクロナル抗体により検出された。2.逸脱マーカーとしての応用:ネズミ腸より精製した腸型-FABPに対するポリクロナール抗体を調製しヒト腸型FABPとの免疫交叉性を検討したが陰性であった。

この抗体を利用しネズミの腸上間膜動脈を切断、或は一過性に血行を閉塞させた腸組織の虚血状態での腸型-FABPの血清値動態を検討した。その結果、腸の虚血状態での早期鋭敏な検出法であることを確認した。現在ヒト心筋型-FABP、肝型-FABPに対する抗体の調製を終え、血清の測定キットを確立し心筋梗塞及び腎疾患、肝疾患に対する症例を検討中である。1.逸脱マーカーとして利用し得る既知及び新FABP分子種の性状検索:既知FABPマーカーとしての有用性を探る基礎研究として、ヒトの心筋型H-FABPに対する抗体を用い免疫組織化学的に、急性心筋虚血1時間後の壊死心筋細胞及び周辺の形態学的に正常な心筋細胞でのH-FABP染色能は著しく減少し、H-FABPが損傷した心筋細胞の良い組織マーカーとなることを確認した。回腸より見出した肝臓型L-FABPと近縁のI-15P蛋白は黄体、副腎でも免疫染色されたがノーザンブロットでは副腎は陰性であった。この他、皮膚に心筋型H-FABPと近縁の新しいタイプのFABPが同定された。従って逸脱マーカーとして肝型、心筋型、腸型、脂肪細胞型、回腸型、シュワン細胞型、皮膚型の利用が示唆された。2.逸脱マーカーとしての応用:ヒト心筋型H-FABPに対するモノクロナル抗体、並びにポリクロナル抗体を作成しサンドイッチ法による血清H-FABPのラジオイムウノアッセイ法を確立し、心筋梗塞患者のアンギオプラスティー(AP)施行後の血清について、逸脱マーカーとしての有用性を検討した。本法での健常成人血清の測定値は7.16±1.13ng/mlであった。発作後1.5時間内にAPを施行した心筋梗塞患者9例中4例の血清は何れも正常範囲を示した。一方、発作後1.5時間以上を経過した症例では血清H-FABPは著しく増加したが、血清のクレアチニンキナーゼ(CK-MB)やクレアチニン燐酸キナーゼ(CKP)の変動より早く6時間以内にはマキシマムに達した。H-FABPはAP処理後尿にもいち早く検出されたが、CK-MB、CKPは検出されなかった。これらの結果はH-FABPが心筋梗塞発作の検出よりはむしろAP施行による血行再建に対する生化学的マーカーとして有用であることを示唆している。
平滑筋細胞における平滑筋型と非筋細胞型ミオシン重鎖の遺伝子発現制御機構

平滑筋細胞の増殖は動脈硬化病変の形成や動脈血行再建術後の再狭窄において重要な役割を演じている。我々は、平滑筋細胞に認められる4種のミオシン重鎖のcDNAクローニングを行ない、平滑筋の分化・増殖におけるミオシン重鎖の発現の変化を検討してきた。その過程で、非筋型ミオシン重鎖であるSMembの発現が再発現し、平滑筋特異的ミオシンSMIが消失する。そこで我々はまずSMembとSMI遺伝子のプロモーター領域を単離し、発現調節機構について検討した。さらに多分化能を持つマウス胎児癌細胞であるP-19細胞に着目して、平滑筋細胞への誘導を試みた。ウサギゲノムライブラリーよりSMemb遺伝子の第1エクソンとその周辺をクローニングした。ウサギSMemb遺伝子のプロモーター領域にはTATAboxや反復するGCboxは存在しなかった。SMemb遺伝子プロモーターには、-105bpと-99bpの間に重要なポジティブエレメントが存在した。ゲルシフトアッセイ、DNaseIフットプリントアッセイで、この領域にSMemb発現を正に調節するcis-elementが存在することが示された。SMI遺伝子についてはプロモーター領域を単離し、その塩基配列を解析した。SMI遺伝子はSMemb遺伝子と異なりTATAboxを有し、E-Box、Mef-2ないしMef-3様の配列が見出された。本プロモーターを初代培養平滑筋細胞や後述のP19細胞に導入することにより、平滑筋特異的遺伝子発現を調節している因子の解析が可能になると期待される。P-19細胞はレチノイン酸、DMSO等の処理により、平滑筋細胞、心筋細胞、神経細胞等に分化が誘導されることが知られている。我々は神経細胞への分化に関与する転写因子であるBm-2の発現を抑制した細胞系を用いた検討により、高レチノイン酸下で高率にSM1を発現する平滑筋細胞に分化させることが可能であることを確認した。これらの結果は、平滑筋の増殖と分化を遺伝子発現制御という高次のレベルで検討する上で重要な手掛かりを提供するものである。
機械学習を導入した局所燃焼現象同定手法に基づく高精度乱流燃焼モデル

次世代高効率・低環境負荷燃焼器を低コストで開発するには数値熱流体解析による予測が必要であるが,そのような燃焼場の予測を可能とする単一の乱流燃焼モデル開発は困難である.また,低環境負荷燃焼場で起こり得る火炎同士の干渉による燃焼速度の変化や自着火,消炎などの複数の局所現象が複合的に混在する燃焼場を予測可能な乱流燃焼モデルは存在しない.本研究では,複合的乱流燃焼場におけるこれらの局所現象を解明し,解明された洞察に基づき構築された学習データを用いて,複合的乱流燃焼場を連続的に記述するような機械学習支援型の乱流燃焼モデルを開発することを目的とする.次世代高効率・低環境負荷燃焼器を低コストで開発するには数値熱流体解析による予測が必要であるが,そのような燃焼場の予測を可能とする単一の乱流燃焼モデル開発は困難である.また,低環境負荷燃焼場で起こり得る火炎同士の干渉による燃焼速度の変化や自着火,消炎などの複数の局所現象が複合的に混在する燃焼場を予測可能な乱流燃焼モデルは存在しない.本研究では,複合的乱流燃焼場におけるこれらの局所現象を解明し,解明された洞察に基づき構築された学習データを用いて,複合的乱流燃焼場を連続的に記述するような機械学習支援型の乱流燃焼モデルを開発することを目的とする.
化学反応によって合成した炭素前駆体からの機能性ナノカーボンの創製

アルカリ金属による脱フッ素化反応を利用して、全フッ素化物から均一細孔を有するナノポーラスカーボン、新しい形態を持つナノファイバーやナノスフィアーなど、低温で生成した炭素質物質を炭素の前駆体としたこれまでの方法では得られない機能性ナノカーボンの創製を目指した。その結果、各種フッ素化物を用いることにより、またアルカリ金属としてナトリウムやカリウムを使うことにより、特異な形態や構造をもった各種のナノカーボンを合成することに成功した。得られた炭素質物質は基本的にはアモルファス構造ではあるが、高温処理を施すことにより、難黒鉛化成分だけでなく、黒鉛化成分も生成してくることを見出した。さらに、鎖状のフッ素化物であるペンタフルオロオクテン、管状の芳香族構造を有するフッ素化ナフタレンやフッ素化ビフェニール以外にヘキサフルオロベンゼンやオクタフルオロトルエン、それに芳香族管内に窒素を含むペンタフルオロピリジンを用いることによっても、メソ孔と細孔分布が異なるナノポーラスカーボンやナノファイバーが生成できた。また細孔制御、およびspとsp^2炭素が混ざり合ったナノコンポジットカーボンの合成を目的として、沸点温度が近いオクタフルオロトルエンとペンタフルオロオクテンを適当な割合で混合した原料を用いて脱フッ素化反応を行い、新しい多孔質炭素に関するデータを蓄積した。アルカリ金属による各種フッ素化物の脱フッ素化反応により、新しい形態や構造などを有するナノカーボンを得ることを目的として、本年度はまずオクタフルオロナフタレン(OFN)をナトリウム金属で脱フッ素化し、得られた炭素質物質、およびその熱処理物について検討した。その結果を以下に示す。1.脱フッ素化物は非常に反応性に富むため、試料を空気中に曝すと容易に表面が酸化される。2.脱フッ素化物中に含まれる副生フッ化ナトリウムを除去するため、希塩酸、水で洗浄、乾燥し、その後試料の窒素吸着測定を行ったところ、BET比表面積は784m^2/gであった。3.これを800°Cに熱処理したところ、比表面積は1021m^2/gに増加した。4.この熱処理物を透過電子顕微鏡で観察したところ、約2nmの厚さを持つ4060nmのアモルファスの中空状ナノカーボンなどが見られた。5.これをさらに2800°Cで処理した場合、螺旋状の渦を巻いたような特異な形態をしたカーボンが多数生成しているのが観察された。6.OFNとナトリウムの両方を真空中、120°Cで脱フッ素化する方法では、生成物の形態が不均一になる。そこで、ナトリウムの部分だけを120°Cに熱し、OFNは室温で昇華させながら気相中で徐々に脱フッ素反応を行い、生成物をガラス管内壁に堆積させる方法をとった。その結果、薄膜状の均質な物質が得られた。この物質の比表面積は1670m^2/gとなった。7.他方、脱フッ素化後、副生したフッ化ナトリウムを共存させたままで500°Cに加熱し、その後酸処理したところ、比表面積は2270m^2/gと非常に大きい値が得られた。8.これを走査電子顕微鏡で観察したところ、上述の薄膜状と異なり、繊維の束状の形態であった。以上のように、副生したフッ化ナトリウムを除去した後に熱処理するか、それとも共存下で熱処理するかによって生成物の形態が大きく異なることを見出した。これは熱処理に伴う副生フッ化ナトリウムの凝集、結晶成長に密接に関係しているものと思われる。芳香族フッ素化物であるオクタフルオロナフタレン(OFN),デカフルオロビフェニール(DFB)をナトリウム金属で脱フッ素化させた。未反応のナトリウムを真空下で400500°Cで加熱して除き、さらにナトリウムによって溶け出したガラスや副生したフッ化ナトリウムをフッ化水素酸、希塩酸処理によって除去して炭素質物質を得た。これを窒素ガス中、800°Cで加熱して炭素化させた。その後、高温処理として1500、2000、2400、2800°Cに加熱した。これらを種々の温度で処理した生成物の形態、構造などを走査電子顕微鏡、透過電子顕微鏡、X線回折で調べた。

また熱処理していないOFN, DFBについて、1000°Cまでの熱重量分析(TG)なども行った。その検討結果の概要を以下に示す。1.得られたOFN、DFBの元素分析を行ったところ、酸素含有量が約20数パーセントと高く、生成物は反応性に富むため、空気の酸素や水蒸気とすぐに反応することがわかった。2.OFN、DFBのTGを測定したところ、それぞれ69.8、52.2%といずれもかなり高い値を示した。3.これら2種類の800°C処理物は、アモルファス状の繊維束と板状の形態が観察され、さらに高温に加熱してもその形態はほとんど変わらなかった。4.2800°C処理試料の透過電子顕微鏡観察から、節をもった数十ナノメートルのナノファイバーと球形をした黒鉛質のものが共存していた。5.X線回折結果からは、層面間隔が0.3363、0.3426nmnmの2種類の構造が確認され、透過電子顕微鏡での観察結果とよい対応関係を示した。以上の結果より、アモルファス構造ではあるがナノサイズをもったファイバーが生成することが明らかになった。本年度は、これまで用いてきた全フッ素化ナフタレンよりも低分子量で、液体であるフッ素化ベンゼン(HFB)、フッ素化トルエン(OFT)、フッ素化ピリジン(PFP)、それに鎖状構造をしたパーフルオロオクタン(PFO)を使って、ナトリウムによる脱フッ素化反応を行った。また、sp^1とsp^2炭素が任意に混ざった新規なポーラスナノコンポジットの調製を試みるため、OFTとPFOを任意の割合で混合した原料も用いた。脱フッ素化した生成物をフッ酸などで処理して副生物を除去し、得られた炭素体について元素分析、熱重量測定、それに窒素吸着測定により多孔質炭素としての特性評価を行った。他方、各種基盤上にアルカリ金属を蒸着させ、その上で全フッ素化ナフタレンの脱フッ素化反応を行い、薄膜状の多孔質炭素の合成を試みた。以下のこれらの結果を箇条書きに記す。1.HFB、OFT、PFOからの炭素は孔、板状、球状の形態をしたものが多く見られ、PFPについては太さ数百nmの針状が多く存在し、TEMで詳細に観察した結果、中空状であることが確認できた。2.PFPからの炭素について窒素含有量を調べたところ、脱フッ素化試料では原料中の窒素がほぼ全量残存していたが、800°Cで熱処理すると減少するものの、約2/3は残存していた。3.窒素吸着測定により細孔構造を調べた結果、原料構造の違いによって細孔分布がかなり異なることがわかった。特にPFPからの800°C処理炭素では、比表面積、メソ孔容積とも大きく、それぞれ1950m^2/g、0.77ml/gであった。4.ガラスや金属基板を使って多孔質炭素薄膜の合成を試みたが、非常に脆く、酸洗浄などの過程で簡単に薄膜が壊れることがわかったため、これ以上の実験は行わなかった。
英語が苦手な学習者のためのグローバル人材育成プログラム開発と効果に関する予備調査

本研究は、英語が苦手な学生を対象に、1最低限の英語力に加え、2多様な異文化状況で自律的に対応する力と、3異文化の他者と積極的に関係を構築できる人間性や協調性を兼ね備えたバランスの取れたグローバル人材育成のための教育プログラムを開発することを目的とした。その結果、かなり英語が苦手な場合は学習の必要性を感じていない一方、企業を対象とする調査でも、高い英語力よりも、異文化間状況において積極的に対応していく力が求められ、それに応じた人間性を育成することも必要とわかった。今後は、英語に特化せず多様な異文化間状況に必要な力を育成するCLIL(内容言語統合型学習)が重要と考えられる。平成26年度は,1異文化の人と積極的なコミュニケーションを取る態度を育成する指導法,2効果的な異文化間交流プログラムの策定,3特に苦手とする学生に最低限の英語力獲得を目指すリメディアル教材と指導法の検討,4自律した学習者を育てる異文化理解インターンシッププログラムの構築,を主とする教育プログラムの構築が目的であった。このうち,1については,RT (Readers' Theater)に関する研究会で、群読や実践方法について学び,27年度の授業で取り入れることにした。またコミュニケーション関連の授業では,身体動作を伴う多様なアクティビティーやインプロヴィゼーション(即興劇)などを実践した。2については,これまでペンシルバニアの大学との交流をしてきたが,費用負担が大きく参加人数が減少していた。また,学生の就職が多い三河企業に調査した所,現在の取引先及び,今後の進出先や提携先は東南アジア諸国であった。そして治安が良い,外国人向け英語教育を効果的に実施,などからクアランプール近郊の大学4校を3月に訪問した。また,効果的な異文化間交流プログラムの策定のために,学生の海外留学意識について量的調査を行った。その結果,異文化志向(アメリカへの短期留学などの海外に対する志向)には,英語力だけでなくアジアの言語学習や将来の国際意識が影響する等の結果が得られた。3については,苦手な学生の英語に対する意識を探るインタビュー調査を行いその結果から,1.コミュニカティブな授業を求めている,2.英語学習の必然性を感じていない,ということが分かった。また4については,東洋大学の「学生の海外体験学習とグローバル人材育成にかかわる研究大会」に参加し,海外インターンシッププログラムは学生の成長にかなり有効であり,英語力以外にも遂行力・問題解決能力・意欲など多様な能力を十分発展させる機会となり得る,と考えられた。平成27年度は,1異文化の人と積極的なコミュニケーションを取る態度を育成する指導法,2効果的な異文化間交流プログラムの策定,3特に苦手とする学生に最低限の英語力獲得を目指すリメディアル教材と指導法の検討,4自律した学習者を育てる異文化理解インターンシッププログラムの構築,を主とする教育プログラムを前年に引き続き構築することが主な目的であった。このうち,1については,RT (Readers' Theater)を当該年度の授業で取り入れたところ効果がある程度見られた。またコミュニケーション関連の授業では,身体動作を伴う多様なアクティビティーを27年度も実践し,学生のコミュニケーション力育成に一定の効果が伺えた。2については,前任校で,昨春にマレーシアの大学を訪問したが,大学を異動することになったため,個人留学の機会を提供するだけになった(1名が留学中)。このため,28年度は,異動した新しい大学で,異文化間交流プログラムについて検討する予定である。また,前任校で行った学生の海外留学意識についての26年度に発表した調査結果を論文に執筆した。また,前任校の学生の主な就職先となる企業にグローバル動向に関する調査を行った。この結果をイギリスの学会で発表し,論文を執筆した。3については,前年度に苦手な学生の英語に対する意識を探るインタビュー調査を行った結果をまとめていたので,報告書に執筆をし,これまでの成果をまとめてワークショップ形式の発表も行った。また4については,前任校では,海外インターンシッププログラムの確立は英語力の壁があり難しいと判断し中断したが,現勤務校でも,英語が苦手な学生がある程度はいるため,可能性を模索している。平成27年度の目的も,実績の概要に記載した,14の4つを主とする教育プログラムの構築を中心に行うことであった。このうち,1と3については,研究実績にも記入したように順調に進んでいると考えられる。しかし,2に関しては,大学を異動し,国際交流に関する環境が大きく変わってしまったため,新たな赴任先で異文化間交流プログラムを検討する必要がある。但し,異文化に関する意識に関してはヨーロッパなどの研究などによれば,早い段階(若い年齢)で異質なものに対する尊重意識の育成は重要と考えられた。そこで,年齢が若い段階から効果的な異文化間交流プログラムを考えるため,関連する書籍を読み,またイタリアでCLIL(内容言語統合型学習)の授業を参観した。これらの研究活動に基づき,書評を執筆し,また学会のシンポジウムで異文化間能力の育成に関する報告を行った。また,効果的な異文化間交流の在り方や将来学生が実際に異文化接触の現場で必要とされるのはどのような力かを探るため,製造業を中心とする企業のグローバル動向に関する調査を行い,その結果,海外授業展開は,今や欧米よりむしろアジア諸国がますます増える傾向にあり,新入社員には,それほど高い英語力ではなくむしろ異文化間コミュニケーション力も必要としている等の結果が得られ,これを発表,また論文も執筆をした。

4については,前任校の英語が相当苦手な学生の場合(単文を書けない,文章が読めない),海外での体験型インターンシップ先や外国人労働者が多い企業先を探すのはやはり困難であり保留になっていたが,現勤務先のある程度苦手な学生(複文が書けない,簡単な文章なら理解できる)を対象に,海外に拘らず,国内で異文化理解のためのインターンシッププログラムの構築が可能かどうかについて,再度検討していく予定である。最終年度の28年度は,主に1異文化の人と積極的なコミュニケーションを取る態度を育成する指導法,2効果的な異文化間交流プログラムの策定,3特に苦手とする学生に最低限の英語力獲得を目指すリメディアル教材と指導法の検討を中心に行い,4自律した学習者を育てる異文化理解インターンシッププログラムの構築については新たな視点,CLIL(内容言語統合型学習)に関する研究を始めたため,それについての知見を取り入れて検討した。まず,1については,ドラマを英語教育に利用するワークショップに参加し、またインプロを授業に取り入れる方法を紹介するワークショップの研究会を開催した。2については,新しい勤務先大学でも海外との交流を進めており、単位互換制度等はすでに確立してはいるが、留学する学生も多くなく、また外国からの留学生も少ないこともあり、外国人学生と共に学ぶ協同学習を取り入れた教育プログラムを開発するには至っていない。但し、授業外の地域貢献活動として留学生と日本人学生が協力して異文化理解を地域に広める活動の支援を開始した。また、1の目標である「異文化の人と積極的なコミュニケーションを取る態度を育成」するには、年少の内から交流の機会がある方が望ましいと考えられたため、小学校で異文化間交流をする学校の先生と協力して、協同研究を始めた。また,前任校で行った学生の海外留学意識についての論文は投稿後何度か修正が入ったが出版予定である。また,企業に対するグローバル動向に関する論文は、前年度執筆した論文の英語版を執筆した。一方、3については,前年度報告書を執筆したもののまだ出版に至っていないため出版先を変更するなどして急ぐ。4については,現勤務校でも、海外でのインターンシップを体験できるほど英語の得意な学生は多くないため、実施は難しい面があるが、国際交流委員会などの大学の組織と連携して今後も可能性を模索する。本研究は、英語が苦手な学生を対象に、1最低限の英語力に加え、2多様な異文化状況で自律的に対応する力と、3異文化の他者と積極的に関係を構築できる人間性や協調性を兼ね備えたバランスの取れたグローバル人材育成のための教育プログラムを開発することを目的とした。その結果、かなり英語が苦手な場合は学習の必要性を感じていない一方、企業を対象とする調査でも、高い英語力よりも、異文化間状況において積極的に対応していく力が求められ、それに応じた人間性を育成することも必要とわかった。今後は、英語に特化せず多様な異文化間状況に必要な力を育成するCLIL(内容言語統合型学習)が重要と考えられる。本研究の目的は,実績の概要に記載した,14の4つを主とする教育プログラムの構築を中心に行うことであった。このうち,13については,研究実績の通り順調に進んでいると考えられる。
転移性大腸癌における原発巣切除による免疫状態変化と予後に関する検討

これまでの先行研究で、切除不能転移性大腸癌において、原発巣切除は予後を延長させる可能性がある事、原発巣切除を行った症例の間でも、切除によりLMR(末梢血中リンパ球単球比)の術後増加する症例は減少する症例よりは生命予後が良い可能性がある事を示している。本研究では、1切除不能転移性大腸癌の原発切除後のLMR増加例と減少例で摘出検体中の免疫状態の差異を評価し予後との相関を検討する事、2大腸癌肝転移における原発肝転移同時切除症例の切除検体を用いて原発巣と転移巣の免疫状態の差異を評価する事、3マウス大腸癌肝転移モデルを作成し大腸病変摘出有無での生存期間差異と大腸肝病巣それぞれの免疫状態を評価する事で最終的に大腸癌切除後の免疫状態を指標とする予後予測、治療選択の判断に資する画期的診断法を確立させる事を目的とする。本年は、まず課題1に対する研究を行った。切除不能転移性大腸癌の摘出原発巣検体を用い、抗CD163、CD68、CD4、CD8、FOXP3抗体で免疫染色し、LMR増加例と減少例で原発巣の免疫状態の差異を比較した。結果、予後の良いLMR増加症例では、LMR減少症例に比較して免疫細胞の浸潤が少なく、特にCD163陽性マクロファージおよびCD8陽性リンパ球の浸潤が有意に少ない事を見いだした。すなわち、末梢血中のリンパ球単球比の変化が原発巣の免疫状態を反映し、これが予後と関係する可能性が示した。また、同結果について国内および国際学会で発表を行った。究明目標としている3課題(1切除不能転移性大腸癌の原発切除後の末梢血リンパ単球比(LMR)増加例と減少例で摘出検体中の免疫状態の差異を評価し予後との相関を検討する事、2大腸癌肝転移における原発肝転移同時切除症例の切除検体を用いて原発巣と転移巣の免疫状態の差異を評価する事、3マウス大腸癌肝転移モデルを作成し大腸病変摘出有無での生存期間差異と大腸肝病巣それぞれの免疫状態を評価する事)のうち、本年は課題1に取り組んでいる。現時点で、術前後でのLMR変化が原発巣の免疫細胞浸潤量を反映している事を示しており、おおむね順調と考えるが、浸潤免疫細胞の組成が仮説通りでなかったことや、新たにLMR変化と術前生検検体中の免疫細胞の浸潤量を評価する必要性など、研究前に予定していなかった問題にも直面している。しかしながら、課題1の成果は今後の日常診療に直接生かす事ができ、切除不能転移性大腸癌の治療方針を大きく変える可能性のあるもっとも重要性の高い部分なので、十分に時間をかける価値がある。課題1(切除不能転移性大腸癌の原発切除後のLMR増加例と減少例で摘出検体中の免疫状態の差異を評価し予後との相関を検討する事)については、予後とリンクさせて原発巣の免疫細胞浸潤状態を評価した症例の術前生検検体を免疫染色で評価し、切除検体と生検検体の相関があるかどうかをプレリミナリーで検討する。続いて、症例数を増やし、生検検体における免疫細胞の量と術前後でのLMRの変化の相関を証明し、予後との関係を評価する。平行して課題2(大腸癌肝転移における原発肝転移同時切除症例の切除検体を用いて原発巣と転移巣の免疫状態の差異を評価する事)の免疫染色による評価を行う予定である。また、課題3(マウス大腸癌肝転移モデルを作成し大腸病変摘出有無での生存期間差異と大腸肝病巣それぞれの免疫状態を評価する事)についても、モデル作成を開始し、安定したモデルが確立できるように準備を進めていく予定である。

究明目標としている3課題(1切除不能転移性大腸癌の原発切除後の末梢血リンパ単球比(LMR)増加例と減少例で摘出検体中の免疫状態の差異を評価し予後との相関を検討する事、2大腸癌肝転移における原発肝転移同時切除症例の切除検体を用いて原発巣と転移巣の免疫状態の差異を評価する事、3マウス大腸癌肝転移モデルを作成し大腸病変摘出有無での生存期間差異と大腸肝病巣それぞれの免疫状態を評価する事)のうち、本年は課題1に取り組んでいる。現時点で、術前後でのLMR変化が原発巣の免疫細胞浸潤量を反映している事を示しており、おおむね順調と考えるが、浸潤免疫細胞の組成が仮説通りでなかったことや、新たにLMR変化と術前生検検体中の免疫細胞の浸潤量を評価する必要性など、研究前に予定していなかった問題にも直面している。しかしながら、課題1の成果は今後の日常診療に直接生かす事ができ、切除不能転移性大腸癌の治療方針を大きく変える可能性のあるもっとも重要性の高い部分なので、十分に時間をかける価値がある。課題1(切除不能転移性大腸癌の原発切除後のLMR増加例と減少例で摘出検体中の免疫状態の差異を評価し予後との相関を検討する事)については、予後とリンクさせて原発巣の免疫細胞浸潤状態を評価した症例の術前生検検体を免疫染色で評価し、切除検体と生検検体の相関があるかどうかをプレリミナリーで検討する。続いて、症例数を増やし、生検検体における免疫細胞の量と術前後でのLMRの変化の相関を証明し、予後との関係を評価する。平行して課題2(大腸癌肝転移における原発肝転移同時切除症例の切除検体を用いて原発巣と転移巣の免疫状態の差異を評価する事)の免疫染色による評価を行う予定である。また、課題3(マウス大腸癌肝転移モデルを作成し大腸病変摘出有無での生存期間差異と大腸肝病巣それぞれの免疫状態を評価する事)についても、モデル作成を開始し、安定したモデルが確立できるように準備を進めていく予定である。究明目標としている3課題(1切除不能転移性大腸癌の原発切除後の末梢血リンパ単球比(LMR)増加例と減少例で摘出検体中の免疫状態の差異を評価し予後との相関を検討する事、2大腸癌肝転移における原発肝転移同時切除症例の切除検体を用いて原発巣と転移巣の免疫状態の差異を評価する事、3マウス大腸癌肝転移モデルを作成し大腸病変摘出有無での生存期間差異と大腸肝病巣それぞれの免疫状態を評価する事)を1年1課題ずつ究明する予定とし、それぞれに必要な金額を1年ごと計上していたが、前述のごとく、課題1は評価途中であり、これに利用予定であった金額が未使用として繰り越しとなっている。次年度に同課題を引き続き行う時に、順次使用予定となっている。
地域に暮らす精神障害者の服薬への意識を高める要因の探索と訪問看護師の介入

ロンドン大学のGray博士らが開発した精神疾患患者のための動機づけ面接を主体とした治療的介入法であるAdherence Therapy(アドビアランス療法)を日本語に翻訳した。また、ワシントン大学のKozuki博士が提唱する服薬アドビアランス向上のための面接法であるVisual feedback法について、その要素を日本語にて要約した。アドビアランス療法のほとんどは動機付け面接の要素で構成されており、看護師がもつべき背景として「協働的な介入」「治療に対する積極性」「柔軟性」「自尊心の確立」「安全」「中立を守る」があった。さらに、アドピアランス療法において重要視している要素としては「認知的不協和を共有する」「重要性を考察する」「抵抗に対処する(不安の表出などを用いる)」「前向きに、成功した点を強調する」「嫌な治療経験を検討する」「アンビバレンスを探る」「解決(改善)したい症状を患者の言葉で表現してもらう」などがあった。これらの要素のなかには、既に我が国の精神科看護師によって用いられている技法であるものもあると考えられたため、わが国内で精神科訪問看護を実践している医療機関に対して協力を依頼し、現在行われている看護実践のなかにアドビアランス療法の要素が既に含まれているかどうかをヒアリング調査した。その結果、「自尊心の確立」「中立を守る」などの要素は多くの看護師が実践しているという認識であったものの、「嫌な治療経験を検討する」「アンビバレンスを探る」「認知的不協和を共有する」などの方略を用いている看護師は非常にすくなかった。これらの要素は患者の治療に対する積極性を高めるために有益と考えられるので、今後はこの要素を取り入れた訪問看護における介入法をさらに検討したい。研究1:服薬意識を評価するための質問紙(Moriskyの服薬意識調査)の日本語版を作成するため、以下の調査を行った。・Moriskyの服薬意識質問紙の日本語版を作成した岩手県立大学兼松百合子教授の研究グループに研究の主旨を説明し、Moriskyの服薬意識質問紙を使用する許可を得た。・地域に暮らす精神障害者90名(岩手県内の通所授産施設2施設とデイケア3施設に通所している者へ調査協力を依頼し、同意を得た者)に対してMoriskyの服薬意識質問紙と服薬中断の関連について質問した。その他の質問項目として、薬の仕分けを自分で行うかなど服薬継続に関する工夫を聞いた。・その結果、Moriskyの服薬意識質問紙によって服薬意識が高いとされた患者と服薬中断の有無の間には有意な差があった。また、服薬中断の有無には薬の仕分けを自分で行うかどうかが有意に関連していた。その後、追加インタビュー調査を行った結果、精神障害者自身が服薬継続に対して行っている工夫には「財布に入れておく」「洗面所など目に見える場所に置く」など忘れないための工夫と「朝薬を飲んだときに昼の分の薬もポケットに入れておく(すると、昼の薬がポケットにあるかないかで朝の薬を飲んだかどうかがわかる)」などの、飲み忘れたときに気づかせる工夫があった。研究2:アメリカ合衆国とイギリス国に赴き、それぞれの国で精神障害者への服薬継続指導について研修を行った。特にアメリカ合衆国では精神科ナースプラクティショナー2名と会い、精神障害者の服薬継続のためには服薬アドヒアランスを目に見える形でフィードバックすること(ビジュアルフィードバック)が重要であるとの示唆を得た。ビジュアルフィードバックの具体的な方法として、薬を入れておく箱にマイクロチップを埋め込んでおき、箱が空になった時刻を自動的に記録しておいて外来を受診するときにデータを読み込んで服薬時刻を推定するというものであった。
画像診断に基づく頭頚部動脈硬化症のリスクに関する疫学研究

一人間ドック施設における平成15年2月-7月及び平成16年1月-3月までの受診者で研究への協力の応諾の得られた470人(男性318人、女152人)を研究対象者とした。対象者全員にMRIとMRAを実施し、脳動脈硬化については代替的に1人の放射線科医がFazekas分類を用いて大脳深部白質病変を診断した。頚部動脈硬化については複数の臨床検査技師が頚部超音波検査を行ったが、診断基準の統一を図ることができなかったので研究対象外とした。大脳深部白質病がgrade2以上であった39人(男性20人、女性19人)を症例とし、そうでなかった331人を対照とした症例・対照研究として、性と年齢に加えて、計測測定値、血液検査測定値、自記式調査票による既往疾患、家族歴、生活習慣、ADL及びQOLについてunconditional logistic regression analysisの強制投入法を用いて解析を行った。大脳深部白質病変に対するリスク要因として、女性、加齢、高血圧(収縮期・拡張期単独を含む測定値並びに既往歴)、眼底異常(Keith-Wagener(K-W)分類I群以上、Scheie分類の高血圧性変化と硬化性変化)、ビタミンB12低値、γトコフェロール低値、漬物を週に34回以上食べること、佃煮を週に34回以上食べこと、年金書類の記入ができないことが得られ、ほとんどがこれまでに言われている脳卒中のリスク要因と共通していた。多変量解析の結果では、これら相互に関連を有する要因の相互の関連が補正されるため、高血圧(例えば正常に対する高血圧のオッズ比(OR)、95%信頼区間(CI):4.00、1.53-10.45)と高血圧・動脈硬化に関連した眼底異常(例えば正常に対するK-W分類I群以上のOR、95%CI:3.40、1.25-9.24)だけが有意なリスク要因であった。大阪府内にある一健診機関における1999年1月から2002年6月までの50-69歳の脳ドック受診者のうち男性572人について、脳ドック所見の見直しを行った。ラクナを含む脳梗塞保有者は30人(5.2%)、白質病変保有者は114人(19.9%)であった。したがって、このような集団を対象にすることによって、これらの動脈硬化症を含む背景要因について検討することが可能とわかった。そこで、京都府内の一健診機関における50歳以上の人間ドック友の会会員約1,000人を対象に、2003年2月より通常の人間ドック検査に追加して脳ドック検査(MRI、MRA)と血液検査(血漿ホモシステイン値、血漿フィブリノーゲン値、血清ヘリコバクタ・ピロリ菌抗体価、血清クラミジア・ニューモニエ抗体価や血清中の抗酸化物質であるビタミンC値、ビタミンE値、カロテノイド類(αカロテン、βカロテン、ゼアキサンチン、βクリプトキサンチン、ルテイン、リコペン)、葉酸、ビタミンB12)への受診の呼びかけをおこなった。2003年3月中旬までに150人が応諾した上で受診し、現在そのデータを整理中である。また、撮像された画像を通常の脳ドックの読影とは別に放射線科医によりまとめて読影する準備を現在進めている。所見は、動脈硬化と関連する動脈の閉塞、脳萎縮、脳室拡大、海馬の萎縮、白質病変、ラクナの有無等である。

今後、上記の放射線科医による読影所見とドックにおける問診や血液検査項目及び追加血液検査個目との関連を横断的な症例・対照研究の方法で解析する予定である。なお、本研究は「京都府立医科大学における人間を対象とする医学研究審査委員会」の審査を受け、その許可を得て開始した。京都府内の一健診機関における50歳以上の人間ドック受診者を対象に、2003年2月より通常の人間ドック検査に追加して脳ドック検査(MRI、MRA)と血液検査(血漿ホモシステイン値、血漿フィブリノーゲン値、血清ヘリコバクタ・ピロリ菌抗体価、血清クラミジア・ニューモニエ抗体価や血清中の抗酸化物質であるビタミンC値、ビタミンE値、カロテノイド類(αカロテン、βカロテン、ゼアキサンチン、βクリプトキサンチン、ルテイン、リコペン)、葉酸、ビタミンB12)への受診の呼びかけを行った。2004年3月末までに412人が応諾した上で受診したので、そのデータの入力を行った。また、大阪府内にある一健診機関における1999年1月から2003年5月までの40-79歳の脳ドック受診者のうち男性859人について、脳ドック所見の見直しを行った。ラクナ梗塞保有者は42人(4.9%)であった。そこで、動脈硬化を背景とするラクナ梗塞の所見保有者42人を症例群、ラクナ梗塞の所見の非保有者817人を対照群として、横断的な症例・対象研究として解析した。年齢、内臓肥満、高血圧、糖尿病、飲酒、喫煙についてロジスティック回帰による多変量解析を行い、オッズ比(95%信頼区間)を求めた。40-64歳では高度の内臓肥満(腹部CTで129cm^2以上)は2.6(1.0-6.8)と有意にラクナ梗塞のリスクを高めていた。65-79歳では中等度以上の高血圧は8.3(1.8-38.1)、禁酒は59.3(2.9-122.3)と有意にラクナ梗塞のリスクを高めていた。
メタルゲート/高誘電率金属酸化物ゲート絶縁膜スタック構造の真空一貫原子層成長

平成13年度から、高誘電率金属酸化物ゲート絶縁膜であるZrO_2について[ZTB:Zr(t-OC_4H_9)_4]とH_2Oを用いた原子層堆積法(ALD)の確立を行っている。また、Si基板上・ALDSi窒化膜をバリア層として形成し、その上にZrO_2膜をALDで堆積したスタックゲート絶縁膜の形成を行い、低誘電率界面層の形成を抑制した。平成15年度は、更に詳細な膜形成の研究を行い、膜質やALDメカニズムについても調べた。また、新たに電流-電圧特性について調べ、ALDZrO_2・ALDSi窒化膜スタック絶縁膜及びALDZrO_2のリーク電流が直接トンネルに起因する事を明らかにした。更に、poly-Siゲートとゲート絶縁膜の間の界面反応の抑制のために、ZrO_2膜上へのALDSi窒化膜形成の可能性について調べた。一方、高誘電率ゲート絶縁膜として現在最も有望なHfO_2系材料に関して、[Hf(HFAcAc)_4]とH_2Oの交互照射を行いHfO_2のALDの可能性について調べたが、良好な膜質は得られなかった。更に、高誘電率金属酸化物ゲート絶縁膜とSi窒化膜とのスタックゲート絶縁膜構造に用いる極薄ALDSi窒化膜の膜質の評価のために、ALDSi窒化膜ゲート絶縁膜のトランジスタへの適用を行った。酸化膜換算膜厚(EOT)が2.3nmのALDSi窒化膜ゲート絶縁膜を有するnMOSFETを作製した。ALDSi窒化膜の最大移動度は、SiO_2膜ゲート絶縁膜の場合に比べて約80%に減少する事が判った。ホットエレクトロン及び直接トンネル注入において、移動度の劣化度合はSiO_2膜よりも少なかった。これはALDSi窒化膜での界面及びバルクトラップ形成の抑制のためと考えられ、ALDSi窒化膜ゲート絶縁膜は55nm世代(EOT=・1.Onm)での実用化の可能性がある事が判った。平成13年度は、(1)高誘電率金属酸化物ゲート絶縁膜とでスタックゲート絶縁膜構造を形成する場合に必要となる極薄原子層成長(ALD)Si窒化膜の膜質向上及び(2)原子層成長により高誘電率金属酸化物ゲート絶縁膜を形成する事の2つを行った。以下、それぞれについて説明する。(1)ホットウォール型ALD炉において作製したスタックゲート絶縁膜用Si窒化膜の膜質向上を、Si窒化膜をALD後にアンモニアによるアニールを行う事により実現した。(2)高誘電率絶縁膜としてZrO_2(ジルコニア)(k=2025)を選択した。今回、Zr[t-O(C_4H_9)_4](ZTB)を原料ガスとし、H_2Oと交互照射することにより、ZrO_2のALDを行った。ZTBは、ZrCl_4や他のアルコキシドに比べて蒸気圧が高く、また反応性が弱く、より均一な膜の形成が可能であると考えられる。ZTBは、室温で液化ガスであるため、ガスボンベ及び配管をヒーターにより75°Cに加熱して、約1kPaの蒸気圧を得た。基板温度は150°Cから300°Cに固定した。ZTBは、炉内圧力0.04kPaで1分間供給し、炉内の真空引きを挟んで、H_2Oを炉内圧力0.130.70kPaで1分間供給した。

その結果、基板温度200°C、ZTB炉内圧力0.04kPa、H_2O炉内圧力0.70kPaの堆積条件の場合に、サイクル数に比例して膜厚が増加していることが判り、原子層成長している事を確認した。同条件で作製した試料のX線光電子分光測定の結果Zr3d_<5/2>ピークが観測され、ZrO_2に帰属される成分が主体の膜であることが判った。平成14年度は、(1)Si基板と高誘電率金属酸化物の間に形成される低誘電率界面層の除去のために、薄膜Si窒化膜をSi基板上に原子層堆積法(ALD)で形成した。ALD形成する事により薄膜領域で膜厚の制御性と均一性が確保できる利点がある。更に、(2)高誘電率金属酸化物ゲート絶縁膜とSi窒化膜とのスタックゲート絶縁膜構造における極薄原子層成長Si窒化膜の膜質の評価のために、ALDSi窒化膜/酸化膜スタックゲート絶縁膜のトランジスタへの適用を行った。高誘電率絶縁膜としてZrO_2を選択し、Zr[t-O(C_4H_9)とH_2Oの交互照射を行いZrO_2をALDした。ALDSi窒化膜がSi基板とZrO_2の間にない場合には、低誘電率界面層(1nm)ができている。しかしALDによりSi窒化膜を堆積(膜厚0.5nm)した場合には、断面TEM像から界面層が形成されていない事が判った。II.ALDSi窒化膜/酸化膜スタックゲート絶緑膜を有するMOFETの作製(上記(2)に関連)ゲート絶縁膜として酸化膜(2.3nm)上にALDにより約0.4nmのSi窒化膜を堆積し、pMOSFETを作製した。ホール移動度の実効チャネル垂直方向電界(チャネル長2μm)に対する依存性を測定し、低電界側では、酸化膜より移動度が低下することが確認された。一方、高電界側では、移動度の低下が起こらないことが確認された。高電界側で移動度の低下が見られないことはスタックゲート絶縁膜と酸化膜ゲート絶縁膜においてSi/ゲート絶縁膜界面ラフネスが同程度であることに起因すると考えられる。また低電界側での移動度の低下はALDシリコン窒化膜/酸化膜における双極子によるリモート散乱の影響の可能性が考えられる。今年度は膜堆積条件を更に詳細に変え、膜質やALDメカニズムについても調べた。また、新たに電流一電圧特性についても調べ、ALDZrO_2/ALDSi窒化膜スタック絶縁膜及びALDZrO_2のリーク電流は直接トンネルによる事を明らかにした。IにおけるALDZrO_2/ALDSi窒化膜スタックゲート絶縁膜の実現のためには、Si基板上にSi窒化膜をALDで形成した場合のMOSFETにおける移動度を評価する必要がある。実効酸化膜厚2.3nmのSi窒化膜ゲート絶縁膜をALD法により堆積し、nMOSFETを作製した。電子移動度の実効電界に対する依存性を測定した。ALDSi窒化膜ゲート絶縁膜において移動度の最大値は、酸化膜ゲート絶縁膜(膜厚1.8nm)における移動度に比べて約8割であった。しかし、ストレス印加(直接電流注入)後の移動度の劣化は、酸化膜ゲート絶縁膜に比べて大きく抑制されている事が判った。IにおけるALDZrO_2/ALDSi窒化膜スタックゲート絶縁膜の実現のために、ALDSi窒化膜ゲート絶縁膜を有するMOSキャパシターについて信頼性を調べた。特に、ALDSi窒化膜ゲート絶縁膜は酸化膜ゲート絶縁膜に比べて、ストレス印加後の界面準位密度とバルクトラップ密度の増加が大きく抑制されている事が判った。
難治性小児悪性軟部腫瘍におけるFOXM1および関連蛋白発現と標的分子としての評価

小児悪性軟部腫瘍は予後不良で、新たな治療標的が望まれる。Forkhead box M1 (FOXM1)は、現在主要な悪性腫瘍におけて新たな治療標的として最も注目されている分子の一つである。小児悪性軟部腫瘍のうち、横紋筋肉腫(RMS)92例と滑膜肉腫(SS)106例におけるFOXM1発現を評価し、FOXM1発現が予後不良と関連する事を示した。RMSにおいてFOXM1はVEGF発現や血管新生と相関した。SS症例のcDNAマイクロアレイ分析において、細胞周期関連遺伝子の発現がFOXM1発現と相関することを示した。各腫瘍の細胞株に対する研究においてFOM1抑制が新たな治療選択肢となる可能性を示した。本研究における小児悪性軟部腫瘍(横紋筋肉腫およびEwing肉腫、滑膜肉腫、悪性ラブドイド腫瘍)のうち、横紋筋肉腫(以下RMS)の胎児型RMS(以下ERMS)と胞巣型RMS(ARMS)についての研究を行った。RMS 92例(ERMS 44例、ARMS 48例)におけるFOXM1、VEGF発現、及びMicro-vessel density (以下、MVD)について解析し、臨床病理学的事項と比較検討した。また、横紋筋肉腫細胞株にFOXM1 siRNAを導入してノックダウンし、VEGF発現に対する影響を調べ、細胞増殖能試験や遊走能・浸潤能試験を行った。FOXM1は難治性である胞巣型において有意に高値を示し、VEGF発現と有意に相関した。胎児型においてFOXM1高発現例は有意に予後不良であった。FOXM1のノックダウンによりVEGFのmRNA発現と横紋筋肉腫細胞株の細胞増殖能、浸潤能、遊走能を有意に抑制した。FOXM1発現抑制が横紋筋肉腫の新たな治療対象としての可能性が示唆された。次いで、滑膜肉腫についてもFOXM1発現を免疫組織化学染色を用いて評価を開始している。本研究における小児悪性軟部腫瘍(横紋筋肉腫およびEwing肉腫、滑膜肉腫、悪性ラブドイド腫瘍)のうち、横紋筋肉腫(以下RMS)の胎児型RMS(以下ERMS)と胞巣型(以下ARMS)についての研究を行った。RMS92例(ERMS49例、ARMS43例)におけるFOXM1、VEGF発現及びMicro-vessel decsity (以下MVD)について解析し、臨床病理学的事項と比較検討した。また、横紋筋肉腫細胞株にFOXM1 siRNAを導入してノックダウンし、VEGF発現や細胞増殖能、遊走能そして浸潤能に対する影響について調べた。胎児型においてはFOXM1高発現群は有意に予後不良であった。FOXM1のノックダウンにより、VEGFのmRNA発現と横紋筋肉腫細胞株の細胞増殖能、遊走能及び浸潤能を有意に抑制した。以上の内容で論文投稿し、平成27年11月に医学雑誌のTumor Biologyに掲載された。上記の他に、滑膜肉腫におけるFOXM1発現評価や滑膜肉腫細胞株に対するFOXM1抑制剤やsiRNAによるノックダウンの効果について研究し、現在論文投稿中である。また、小児悪性軟部腫瘍の範囲を超えるが、成人領域においても稀な疾患ながら、予後不良で新たな治療標的が望まれている悪性軟部腫瘍である、平滑筋肉腫やメラノーマについてもFOXM1発現評価や細胞株に対するFOXM1抑制の効果について研究し、それぞれ論文掲載した。研究対象として予定していた小児悪性軟部腫瘍(横紋筋肉腫およびEwing肉腫、滑膜肉腫、悪性ラブドイド腫瘍)のうち横紋筋肉腫(以下RMS)の胎児型RMS(以下ERMS)と胞巣型(以下ARMS)についての研究を臨床検体および細胞株における研究を終了し、論文掲載まで終えた。また、滑膜肉腫における臨床検体および細胞株実験も終了し、論文投稿中である。さらに、研究対象を平滑筋肉腫や悪性黒色腫にも広げ、論文掲載まで終えた。Ewing肉腫や悪性ラブドイド腫瘍に対する研究も進めていく予定である。本研究における小児悪性軟部腫瘍のうち、横紋筋肉腫(以下RMS)の胎児型RMS(以下ERMS)、胞巣型(以下ARMS)と滑膜肉腫(以下SS)についての研究を行い、横紋筋肉腫と滑膜肉腫について報告し、それぞれ医学雑誌"Tumor Biology"(2015年11月)と"BMC cancer"(2016年6月)とに掲載された。RMS92例(ERMS49例、ARMS43例)の報告では、FOXM1、VEGF発現などについて解析し、RMS細胞株にFOXM1 siRNAを導入してノックダウンし、VEGF発現や細胞増殖能、遊走能そして浸潤能に対する影響について調べた。FOXM1のノックダウンにより、VEGFのmRNA発現と横RMS細胞株の細胞増殖能、遊走能及び浸潤能を有意に抑制した。FOXM1発現抑制が横RMSの新たな治療対象としての可能性が示唆された。SS106例の報告では、FOXM

1発現評価やSS細胞株に対するFOXM1抑制剤やsiRNAによる発現抑制の効果について研究した。SSにおいて、FOXM1発現が不良予後と関連し、cDNAマイクロアレイ分析は、細胞周期関連遺伝子の発現がFOXM1発現と相関した。チオストレプトンによるFOXM1阻害は、インビトロでSS細胞株に対して有意な抗腫瘍活性を示した。siRNAによるFOXM1の抑制は、SS細胞株における化学感受性を増加させた。FOXM1発現阻害はSSの潜在的な治療選択肢であることを報告した。また、稀な疾患ながら予後不良で新たな治療標的が望まれる悪性軟部腫瘍である、平滑筋肉腫や悪性黒色腫、血管肉腫についてもFOXM1発現評価や細胞株に対するFOXM1抑制効果について研究し、それぞれ論文掲載した。小児悪性軟部腫瘍は予後不良で、新たな治療標的が望まれる。Forkhead box M1 (FOXM1)は、現在主要な悪性腫瘍におけて新たな治療標的として最も注目されている分子の一つである。小児悪性軟部腫瘍のうち、横紋筋肉腫(RMS)92例と滑膜肉腫(SS)106例におけるFOXM1発現を評価し、FOXM1発現が予後不良と関連する事を示した。RMSにおいてFOXM1はVEGF発現や血管新生と相関した。SS症例のcDNAマイクロアレイ分析において、細胞周期関連遺伝子の発現がFOXM1発現と相関することを示した。各腫瘍の細胞株に対する研究においてFOM1抑制が新たな治療選択肢となる可能性を示した。研究対象として予定した小児悪性軟部腫瘍(横紋筋肉腫およびEwing肉腫、滑膜肉腫、悪性ラブドイド腫瘍)のうち、横紋筋肉腫(以下RMS)の胎児型RMS(以下ERMS)と胞巣型RMS(ARMS)についての研究を行ったが、横紋筋肉腫の細胞株実験も含めて行うことができた。滑膜肉腫についての研究も進めていく予定である。現在、滑膜肉腫におけるFOXM1発現の研究内容について論文投稿中である。平成28年度中に論文掲載を目指す予定である。Ewing肉腫や悪性ラブドイド腫瘍に対する研究も計画していく。小児外科、小児悪性腫瘍現在、横紋筋肉腫におけるFOXM1発現の研究内容について論文投稿の準備中であり、平成27年度中に論文掲載を目指す予定である。滑膜肉腫についての研究も進めていく。Ewing肉腫、悪性ラブドイド腫瘍についての研究も計画していく。