hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新しい緑内障治療薬-Prostaglandins-開発に関する基礎的・臨床的研究

UF-021点眼液は点眼3時間後から10時間後に渡り有意に眼圧を下降させた(最大1.6mmHg)が、房水蛋白濃度、Kin、房水流量、房水流出率についてはいかなる時点においてもcontrolとの間に有意差は認められなかった。UF-021点眼液は房水産生量、房水流出率を変化させずに眼圧を下降させることからuveoscleral outflowの増加、あるいは上強膜静脈圧の低下により眼圧下降をもたらすことが示唆された。UF-021は従来の眼圧下降薬とは異なった作用機序を有し、且つ血液房水柵透過性には影響を与えないため、新しい緑内障治療薬として有力である。
知的発達障害者のライフステージに応じた生涯発達支援システムの構築に関する研究

平成30年度は、ライフステージ別の活動内容についての調査研究に取り組んだ。就労移行支援事業所2058ヵ所に調査票を配布し、496ヵ所から回答があった。(回収率24.1%)。結果、「日常生活に関する活動」、「学習活動に関する活動」、「作業や就労に関する活動」、「コミュニケーションに関する活動」、「健康管理に関する活動」の5つの領域に関する活動内容が明らかとなった。「日常生活に関する活動」は20代、30代、50代に多く見られ(順に17.9%、19.4%、15.8%)、ライフステージに関係なく一貫して活動を提供していることが明らかとなった。「学習活動に関する活動」は10代、20代に多く見られ(順に15.3%、15.8%)、その後減少したことから、学齢期から成人期への移行期である10代、20代に多く提供されることが明らかとなった。「作業や就労に関する活動」は20代、30代、50代に多く見られ(順に26.3%、25.8%、31.6%)ライフステージに関係なく一貫して活動を提供していることが明らかとなった。「コミュニケーションに関する活動」は20代、30代に多く見られ(順に、37.4%、35.5%)、職場での対人関係などのトラブルへの対応のためにこのような活動を提供していることが予想された。「健康管理に関する活動」は10代、20代、30代に多く見られ(順に12.7%、14.2%、14.5%)、ライフステージに関係なく一貫して活動を提供していることが明らかとなった。これらの結果に基づき、ライフステージ別の支援内容を検討している。平成30年度は就労移行支援事業所への調査により活動内容について明らかにした。また、支援課題、活動内容の結果に基づき、研究協力者とともに知的発達障害者におけるライフステージ別の実態に応じて支援内容を検討した。しかし、支援内容の検討は進められているものの、支援内容、支援方法を含めた支援プログラムの作成ができていない。その理由として、活動内容の分析に時間がかかっていたこと、支援内容に関する研究協力者の考えをまとめることに時間がかかっていることがある。平成31年度の研究の推進方略として、1期:7月までに、支援プログラムの作成を行う。2期:912月までに、支援プログラムの試行を行う。3期:112月までに、生涯発達支援システムのモデル開発を行う。平成29年度は、ライフステージ別の支援課題についての調査研究に取り組んだ。障害者相談支援事業所4159箇所に調査票を配布し、1076箇所から回答があった(回収率25.8%)。相談事例件数は2891件であった。結果、「学習・余暇支援」「自立生活支援」「作業・就労支援」「コミュニケーション支援」「健康支援」の5つの領域に関する実態が明らかとなった。学習・余暇支援領域では、「転学」に関する相談の6割が小学校段階で、「アセスメント」「学習の遅れ」「サービス利用」の相談も同様に多く見られた。中学校から高校段階では「不登校」の相談が多く見られた。成人期ではこの領域の相談件数は少ない結果であった。自立生活支援領域では、家族や経済の相談が継続し、ADLに関しては10代で獲得、2、30代で維持の問題に変化した。作業・就労支援では、高校卒業後に不満などを感じ相談に至るケースが多く、20歳代にはキャリアアップ、30代では転職希望などの支援要請の相談の割合が増加、40歳以上では辞意が多く見られた。「コミュニケーション支援領域」では、10代では友人や家族との間で、自身の障害特性を理解できないことなどから、他害をする等の相談が見られた。20代では友達や同僚、職員との間で、周囲の理解の不十分、環境変化の結果の対人トラブルも見られた。30代では、同僚や職員との間で、精神疾患、動作緩慢などによる関わり方の難しさがあった。40代以上は行動上の問題は減少するが、30代で見られた問題が継続した。「健康支援領域」では、10代までは、「精神面での不安定」「障害が受容できない」。20代では環境変化により「精神的・身体的な傷病」に発展、また「能力を発揮できない」場面も顕在化する。30代では安定するが、「加齢により発症する疾病」が現れ始める。40代以上になると、「退行期へと移行」「全身状況の老化」が見られた。相談支援事業所への調査で、支援課題について明らかになった。しかし支援課題の分析は進んでいるものの、支援内容については分析を進める必要がある。理由として、支援課題の分析に時間がかかっていたこと、および支援内容の分析に時間がかかっていることがある。

「学習活動に関する活動」は10代、20代に多く見られ(順に15.3%、15.8%)、その後減少したことから、学齢期から成人期への移行期である10代、20代に多く提供されることが明らかとなった。「作業や就労に関する活動」は20代、30代、50代に多く見られ(順に26.3%、25.8%、31.6%)ライフステージに関係なく一貫して活動を提供していることが明らかとなった。「コミュニケーションに関する活動」は20代、30代に多く見られ(順に、37.4%、35.5%)、職場での対人関係などのトラブルへの対応のためにこのような活動を提供していることが予想された。「健康管理に関する活動」は10代、20代、30代に多く見られ(順に12.7%、14.2%、14.5%)、ライフステージに関係なく一貫して活動を提供していることが明らかとなった。これらの結果に基づき、ライフステージ別の支援内容を検討している。平成30年度は就労移行支援事業所への調査により活動内容について明らかにした。また、支援課題、活動内容の結果に基づき、研究協力者とともに知的発達障害者におけるライフステージ別の実態に応じて支援内容を検討した。しかし、支援内容の検討は進められているものの、支援内容、支援方法を含めた支援プログラムの作成ができていない。その理由として、活動内容の分析に時間がかかっていたこと、支援内容に関する研究協力者の考えをまとめることに時間がかかっていることがある。平成30年度の研究の推進方略として、1期:7月までに、支援方法の分析を行う2期:83月までに、プログラムの作成を行う平成31年度の研究の推進方略として、1期:7月までに、支援プログラムの作成を行う。2期:912月までに、支援プログラムの試行を行う。3期:112月までに、生涯発達支援システムのモデル開発を行う。支援課題についての分析に留まり、支援内容の分析に至らなかったため次年度使用額が生じた。謝金:データ整理やデータ入力および解析のための謝金が必要である。また、本研究において最も独創的な内容である「支援プログラム」の「生涯発達支援システム」のモデル開発についての、研究協力者への謝金として使用予定である。旅費:国内における日本特殊教育学会や発達障害学会で本研究の発表をし、本研究に関する研究者との意見交換を通して、研究を進める予定である。(理由)支援プログラム作成に係る謝金及び支援プログラム作成に伴う経費が、平成30年度の進行の遅れに伴い、使われなかったため。(使用計画)平成31年度の研究の推進方策として、7月までに、支援プログラムの作成を行い、912月までに、支援プログラムの試行を行うため、確実に使用できる。
認知神経科学に基く注意障害児への支援

注意障害は、知覚・認知のみならず、記憶・学習・運動などのいずれか、あるいはいくつかの機能に関わる症状を呈し、ADHDのみならず知的障害、自閉症、感覚障害、書字障害や読字障害などの学習障害の症状とも密接に関わっている。本研究は、最近の学校教育で看過しえない問題である注意障害について、神経心理学的検索と認知神経科学的計測を行い、かれらに対する有効な教育支援を企画することを目的とした。本研究で取り組んだ内容は6つに大別され、それぞれについての成果概要は以下の通りである。(1)視覚的注意評価(知的障害児等):周辺視野での視力、視認知機能、視覚学習について行動データと事象関連電位による検討をおこない、特別支援を要する児童・生徒の視覚的認知を評価した。(2)聴覚的注意評価(知的障害児、ダウン症児、読み障害児等):知的障害児、ダウン症児、発達性読み障害児における音節認知や発語時の聴覚フィードバックについて、行動と事象関連電位から検討をおこない、それぞれの聴覚情報処理を明らかにした。また、反復音系列での時間偏位検出を計測し、リズムの変化がどのように知覚されるのかを明らかした。(3)意識状態と脳内情報処理(注意欠陥/多動性障害児、視覚障害者):注意欠陥/多動性障害(ADHD)における運動制御について連続遂行課題(CPT)時の脳波を検討し、注意障害を事象関連電位で捉えうることを明らかにした。さらに、触弁別への注意の影響を事象関連電位と脳血流(NIRS)で検討し、触弁別時には視覚障害者は頭頂連合野などを積極的に活用していることを明らかにした。(4)運動表出:運動準備や筋リラクセーションにともなう生体の変化を筋電図や運動関連脳電位を用い検討した。(5)教育・学習支援(知的障害児、ダウン症児、軽度発達障害児):認知神経科学的知見に立脚したダウン症児や軽度発達障害児への教育支援について提言した。(6)認知神経科学と特別支援教育:認知神経科学的知見の特別支援教育への活用方策を提言した。ADHDなど注意機能が関わる障害児への教育についてはティームティーチング(TT)で対応するなど部分的取り組みは行われているが、多くの場合は担任教員の個人的努力・配慮や教室で親等による付き添いで対応されているのが実情である。このような注意障害は、知覚・認知のみならず、記憶・学習・運動などのいずれか、あるいはいくつかの機能に関わる症状を呈し、ADHDのみならず知的障害、自閉症、学習障害などの症状とも密接に関わっている。そのため彼らへの適切な教育支援には、(1)注意の如何なる点で個々の子どもに困難さがあるのか、(2)それがいかなる認知的機能に由来するのか、(3)何故学習や行動上で困難さを呈するに至るのか、に関する情報が必要とされてきている。本研究は、最近の学校教育で看過しえない注意障害とその関連近縁症状について、神経心理学的検索と認知神経科学的計測をおこない、かれらへの有効な教育支援を企画しようとするもので、1年目の平成15年度には下記に取り組み、成果を得た。1.研究条件を整備するため、64チャンネルデジタルDCアンプと近赤外分光イメージング装置を導入し、神経活動や脳血流変化を脳機能画像としてトプグラフィカルに捉えることが可能になった。

2.連続遂行課題や上肢挙上課題時の脳の局所神経活動の動態を捉え、認知神経科学的手法を注意障害児に適用するための基礎データを得た(研究発表参照)。3.聴覚フィードバックによる発音改善(ダウン症)、事象関連電位による運動制御(ADHD)、事象関連電位による語音知覚(発達性読み障害児)についての検討進めた(研究発表参照)。本研究では、注意に左右される認知行動時の脳機能状態を認知神経科学的計測を用いて捉え、注意障害への支援方策を提言しようとするものである。2年目の平成16年度には、下記に取り組み成果を得た。(1)CPT-AX課題時の事象関連電位を用い、注意欠陥多動性障害(ADHD)の運動実行と運動抑制を追跡的に検討した結果、経年的な行動改善に対応して脳内過程の様相も変化していた。(2)自分が発した声を増強させて聴覚的にフィードバックすると、ダウン症の発語の明瞭化が促進されるとともに、発語関連脳電位(VRCP)でも振幅増強が認められたことから、ダウン症の発語明瞭化に聴覚フィードバック増強が少なからず有用であるとの見通しを得た。(3)読み障害では音韻への気づきの脆弱さが懸念される。そのような音韻への気づきについて、事象関連電位(ERP)を用い発達性読み障害児で検討した結果、単音節知覚における認知処理過程の活性化が低いことが明らかになった。(4)指先の触機能を駆使して蝕認知している視覚障害者での振動刺激弁別時の選択的注意をERPにより検討した。その結果、視覚障害者は非選択的注意事態でも的確に振動パターンを認知していることが明らかになった。(5)視野周辺からの視覚情報入手は、環境認識や視覚探索の際に重要な役割を果たしている。ERPのP2成分の出現様相から、低視力では狭い視野範囲からの情報入手に頼っていることを示した。本年度は、視覚・聴覚・脳機能についての研究をすすめた。(1)視覚的注意行動関連知見視能力は視野内の位置によって異なるが、周辺視野においては視力低下が著しい。視野の中心から周辺に向かうにつれ視認知力が低下するが、本年度は脳内中枢でどのように捉えられるかを有効視野と関連させて検討した。その結果、ERP成分に周辺視野での図形認知識別の可否が反映されうることを指摘した。さらに、図形の認知・識別についての学習が進行するにつれて、ERP波形が変化することを突き止め、視覚学習の進行に伴って、脳では可塑的な変化が生じていることを指摘した。これらの知見は、発達障害の注意・認知を探る際に、重要な基礎を与えるものであり、このような観点からの支援についても検討を進めてきた。(2)聴覚的注意行動関連知見聴覚情報は継時的処理によって遂行されるが、その際、テンポやリズムが重要な要素となる。本年度は、反復音系列を聞いた際のリズム知覚を中心に検討を進めた。その結果、アクセントが含まれない反復音系列において一定程度以上の時間偏位があるとリズムの歪みは検出されるが、アクセントが付加された反復音系列では、その検出が難しくなることを突き止め、それには反響記憶と注意が関わっていることを指摘した。(3)脳血流計測による機能評価手を触っている時の脳血流変化を計測し、行動が著しく制約されている超重症児が外界情報をどのように取り込んでいるのかを評価した。その結果、これまで働きかけにたいして何ら反応が認められなかった超重症児でも、脳のレベルでは働きかけに応じて反応していることを明らかにし、支援への有用な情報を提供しうることを指摘した。
超流動ヘリウム表面における放射性イオンと原子の挙動

原子核,天体核物理学分野および凝縮系物理学における新しい実験方法として,超流動ヘリウム中と表面における放射性イオンと原子の挙動の研究を行った.多彩な重イオン反応の生成核の核分光研究のための新しい捕集体として,超流動ヘリウムを提案し,正イオンの創るスノーボール中で核スピンを制御しつつ反応生成核の核分光研究をする実験技術の基礎を築いた.放射性核ビームを超流動ヘリウム中に導入し,イオン表面から取出すと,極冷(零エネルギー)放射性イオン線,または原子線が得られる.研究成果は,以下のとおりである..核反応で生成した放射性イオンの超流動ヘリウム中での分離と搬送,表面のポテンシアル障壁の測定などを行い,イオンを超流動ヘリウム液相表面から,蒸気相中に取り出し,零エネルギーの超冷放射性イオン線生成の新しい方法の基を試みた.正イオンの表面からの取り出しには電場と第2音波の併用が効果的であることを示した.過度の第2音波強度はヘリウムの温度上昇のためイオンの移動を妨げ,取り出し効率は却って低下する.新たに得た知見は超流動ヘリウム中におけるイオンの存在時間についてである.まだ,十分に定量的ではないが,実験に持ちた線源219Rnの半減期と同程度であることが分かった.次の課題として,低温のヘリウム蒸気中での搬送について,気体が電離される場合について実験に取り組んだ.なお,研究は,大阪のほか,オランダKVI.ドイツGSI,フィンランド・イワスキラ大学で行った.原子核,天体核物理学分野および凝縮系物理学における新しい実験方法として,超流動ヘリウム中と表面における放射性イオンと原子の挙動の研究を行った.多彩な重イオン反応の生成核の核分光研究のための新しい捕集体として,超流動ヘリウムを提案し,正イオンの創るスノーボール中で核スピンを制御しつつ反応生成核の核分光研究をする実験技術の基礎を築いた.放射性核ビームを超流動ヘリウム中に導入し,イオン表面から取出すと,極冷(零エネルギー)放射性イオン線,または原子線が得られる.研究成果は,以下のとおりである..核反応で生成した放射性イオンの超流動ヘリウム中での分離と搬送,表面のポテンシアル障壁の測定などを行い,イオンを超流動ヘリウム液相表面から,蒸気相中に取り出し,零エネルギーの超冷放射性イオン線生成の新しい方法の基を試みた.正イオンの表面からの取り出しには電場と第2音波の併用が効果的であることを示した.過度の第2音波強度はヘリウムの温度上昇のためイオンの移動を妨げ,取り出し効率は却って低下する.新たに得た知見は超流動ヘリウム中におけるイオンの存在時間についてである.まだ,十分に定量的ではないが,実験に持ちた線源219Rnの半減期と同程度であることが分かった.次の課題として,低温のヘリウム蒸気中での搬送について,気体が電離される場合について実験に取り組んだ.なお,研究は,大阪のほか,オランダKVI.ドイツGSI,フィンランド・イワスキラ大学で行った.原子核,天体核物理学分野および凝縮系物理学分野における新しい実験方法として,超流動ヘリウム中と表面における放射性イオンと原子の挙動の研究を行っている.1)超重核など,多彩な重イオン反応の生成核の核分光研究のための新しい捕集体として,超流動ヘリウムを提案する.現存または,計画中の気体停止装置に対して格段に小型化できる.停止距離が小さいことは短寿命核の計測には必須である.2)零エネルギーの放射性核ビームを生成する新しい方法を提供する.放射性核ビームを超流動ヘリウム中に導入し,イオン表面から取出すと,零エネルギーの放射性イオン線,または原子線が得られる.3)超流動ヘリウムの特性についても搬送や表面の挙動に関して,新しい知見を得ることが目的である.このため,国内および欧州の研究者と討論を繰り返し,核反応分野で最も有効に放射性核ビームを利用する条件を探った.本研究の中間の成果を見て,ドイツGSI研究所は将来の放射性核ビームの計画の中に,この計画を取り込みたいと申し入れている.本年度の実験研究成果は,次のように纏める.1)核反応で生成した放射性イオンを超流動ヘリウム中に導入した.2)イオンと原子の分離を行い,イオンの電場による易動度,表面のポテンシアル障壁の測定などから,正イオンの構造を研究した.3)さらに,これらのイオンを超流動ヘリウム液相表面から,蒸気相中に取り出したあと真空中を搬送し,零エネルギーの超冷放射性イオン線生成の新しい方法を試みた.このさい,第2音波をパルス的に印加する新しい効率の良い方法を試みている.4)原子にも,液体ヘリウム中の固有の流れや気相中のヘリウム流による搬送を試みた.このさい,原子やイオンからの放射性崩壊を観測することによって位置と時間変化を知り,輸送現象と超流動ヘリウムの加えられた擾乱による固有の流れの観測を行っている.5)そのほか放射性核ビームを用いた分光実験が完成した.この研究計画では,原子核・天体核物理学分野および凝縮系物理学における新しい実験方法として,超流動ヘリウム中と表面における放射性イオンと原子の挙動の研究を行う.次のような手順で実験を試みている.1)核反応で生成した放射性イオンを超流動ヘリウム中に導入する.2)イオンと原子の分離を行い,イオンの電場による易動度,表面のポテンシアル障壁の測定などから,正イオンの構造を推測する.3)イオンのほか原子も,液体ヘリウム中や気相中で搬送を試みる.このさい,原子やイオンからの放射性崩壊を観測することによって位置と時間変化を知り,輸送現象と超流動ヘリウムの加えられた擾乱による固有の流れの観測を行う.

4)さらに,これらのイオンを超流動ヘリウム液相表面から,蒸気相中に取り出したあと真空中を搬送し,零エネルギーの超冷放射性イオン線生成の新しい方法を確立する.このさい,第2音波をパルス的に印加する方法をさらに発展させる.本年度はクライオスタットを抜本的に改良したことと,第2音波の利用にさいし能率化に取り組んだ.実験は主としてKVI Groningenで行い,大阪ではこのための準備と検討を行った.また,新しい試みとして,極低温の希ガス中で高速イオン線を停止させる実験を始め,初めての定量的な結果を出すことができた.この計画は基礎実験としてドイツGSI研究所のFAIR計画で注目され,援助を受けることとなった.原子核,天体核物理学および凝縮系物理学における新しい実験方法として,超流動ヘリウム中と表面における放射性イオンと原子の挙動の研究を行った.1)重いイオンが,軽いイオンのように超流動ヘリウム中で創るスノーボールの生成効率を改善し,不純物の易動性を制御し,負の帯電体(負イオンや電子)の場合ように,超流動ヘリウム液面から正イオンを取り出し搬送する条件を調べた.2)本年は新たに,低温のヘリウム蒸気中での搬送について,気体が電離される場合について実験に取り組んだ.これは高エネルギーの放射性核ビームの停止体中で問題となるイオンの再結合を調べるためである.3)正イオンの表面からの取り出しには電場と第2音波の併用が効果的であることを以前示した.さらに強い第2音波のもとでの研究を行った.過度の第2音波強度はヘリウムの温度上昇のためイオンの移動を妨げ,取り出し効率は却って低下する.本年度新たに得た知見は超流動ヘリウム中におけるイオンの存在時間についてである.まだ,十分に定量的ではないが,実験に持ちた線源219Rnの半減期と同程度であることが分かった.なお,研究,実験場所は,大阪のほか,オランダ・フロニンゲンのKVI,ドイツ・GSIダルムシュタットである.また,フィンランド・イワスキラ大学で行った実験の解析と検討を行った.
写像類モノイドとファイバー構造の改変操作を用いた接触多様体の研究

本研究の目的は、オープンブック分解やLefschetzファイバー空間という多様体のファイバー構造を介し、写像類群の情報により接触多様体やそのStein充填、Stein領域の性質を解明することにある。今年度は、写像類モノイドの研究、オープンブック分解の改変操作とHF不変量の関係の研究を計画していた。これらの解明には至らなかったが、オープンブック分解の改変操作を足がかりとして、4次元球体の中のシンプレクティック曲面に関する以下の結果を得た。先行研究において、2つ以上の相異なるシンプレクティック曲面で、同じ横断的結び目を境界に持つ曲面の存在が知られている。これまでのシンプレクティック曲面の例は、4次元球体における曲面の補空間の基本群により全て区別することができた。本研究では、その基本群では区別できないシンプレクティック曲面のペアを構成した。曲面の構成には、シンプレクティック曲面の改変操作を用いる。これは、オープンブック分解、Lefschetzファイバー空間に対する改変操作としても解釈できる。曲面の区別には、この曲面を分岐集合とする4次元球体の分岐被覆を用いる。このような区別の仕方を境界つきシンプレクティック曲面の研究に導入したのは、本研究が初めてである。また、計画にあったように、Zehmisch氏(ドイツ・Muenster大学)のもとへ3ヶ月間滞在した。滞在中には現地のセミナーなどで発表の機会をいただき、Geiges氏(ドイツ・Koeln大学)など、当分野を牽引する研究者と多く交流が持てた。中でも、Kwon氏(ドイツ・Heidelberg大学)とは、研究関心で合致する部分が多く、Stein領域に関する共同研究を開始した。氏とは30年度以降も継続して、共同研究を行っていく予定である。29年度が最終年度であるため、記入しない。本研究の目的は,オープンブック分解やLefschetzファイバー空間という多様体のファイバー構造を介し,曲面の写像類群によって接触多様体やコンパクトStein曲面の性質を究明することである.今年度は,Stein充填可能である接触多様体に適合するオープンブック分解で,右手デーンツイストの積に分解できないモノドロミーを持つものの構成を計画していた.結果としてはこのような例は構成できなかったが,計画していた方法を発展させ,以下に述べる2つの研究を完成することができた.LoiとPiergalliniにより,4次元多様体がコンパクトStein曲面であることと,4次元球体の中のブレイド状曲面という曲面に沿って分岐する4次元球体の単純分岐被覆であることは同値であることが示されている.報告者は,分岐被覆を用いて,微分同相であるがStein構造は異なる任意有限個のコンパクトStein曲面の族を構成した.とくに,これらのコンパクトStein曲面たちは同じブレイド状曲面で分岐する被覆として実現される.この結果は従来までのLefschetzファイバー空間のみを用いたコンパクトStein曲面の研究とは異なり,新たな方向性を示す結果といえる.また, Burak Ozbagci氏( Koc大学)の下に2ヶ月滞在した.滞在中に,氏と有向閉曲面の単位余接束上の標準的接触構造に関する共同研究を進めた.その結果,この接触構造に適合するオープンブック分解のページとなる曲面,モノドロミーとなる写像類のデーンツイストによる積表示を与えることができた.今年度の目標であった,Stein充填可能である接触多様体に適合するオープンブック分解で,そのモノドロミーが右手デーンツイストの積に分解できない例の構成ができなかった.しかし,その構成の中で用いることを計画していた接触多様体の分岐被覆については,コンパクトStein曲面との関係を通じ,今年度に詳しく見ることができた.これは次年度以降の研究に役立ち得る結果である.本研究の目的は、オープンブック分解やLefschetzファイバー空間という多様体のファイバー構造を介し、写像類群の情報により接触多様体やそのStein充填、Stein領域の性質を解明することにある。今年度は、(1) Stein構造が誘導する接触構造とスピンc構造の関係の研究、(2)高次元接触多様体とそのStein充填に関する研究、の2つの研究を完成させた。(1)本研究はCagri Karakurt氏(Bogazici大学)と浮田卓也氏(東京工業大学)との共同研究である。Lisca氏とMatic氏、Plamenevskaya氏らにより、同じ4次元多様体上に2つのStein構造があった時、それらが誘導するスピンc構造が非同型であれば、Stein構造が誘導する境界上の接触構造たちのOzsvath-Szabo不変量は異なることが示されている。我々は、この結果の逆が成り立たない例をコルクと呼ばれる4次元多様体を用いて構成した。(2)無限個のStein充填を持つ3次元接触多様体が2000年代初頭にStipsicz氏とOzbagci氏により構成された。この構成はオープンブック分解、Lefschetzファイバー空間を用いたものであった。本研究ではそれらのファイバー構造の高次元版を用いることにより、無限個のStein充填を持つ4n-1次元接触多様体を構成した。これは、高次元オープンブック、Lefschetzファイバー空間を、高次元多様体の写像類群の組合せ群論的手法により具体的に扱った初めての研究でもある。今年度はStein充填可能である接触多様体に適合するオープンブック分解で,右手デーンツイストの積に分解できないモノドロミーを持つものの構成を目指していた。考察するべき曲面を種数1に制限したが、そのような例は構成できなかった。

しかし、種数1の曲面をファイバーとするLefschetzファイバー空間を許容するStein領域が楕円曲面E(n)をブローアップした閉4次元多様体に埋め込まれることがわかった。これは次年度に引き続き行う構成の足掛かりとなる重要な考察である。本研究の目的は、オープンブック分解やLefschetzファイバー空間という多様体のファイバー構造を介し、写像類群の情報により接触多様体やそのStein充填、Stein領域の性質を解明することにある。今年度は、写像類モノイドの研究、オープンブック分解の改変操作とHF不変量の関係の研究を計画していた。これらの解明には至らなかったが、オープンブック分解の改変操作を足がかりとして、4次元球体の中のシンプレクティック曲面に関する以下の結果を得た。先行研究において、2つ以上の相異なるシンプレクティック曲面で、同じ横断的結び目を境界に持つ曲面の存在が知られている。これまでのシンプレクティック曲面の例は、4次元球体における曲面の補空間の基本群により全て区別することができた。本研究では、その基本群では区別できないシンプレクティック曲面のペアを構成した。曲面の構成には、シンプレクティック曲面の改変操作を用いる。これは、オープンブック分解、Lefschetzファイバー空間に対する改変操作としても解釈できる。曲面の区別には、この曲面を分岐集合とする4次元球体の分岐被覆を用いる。このような区別の仕方を境界つきシンプレクティック曲面の研究に導入したのは、本研究が初めてである。また、計画にあったように、Zehmisch氏(ドイツ・Muenster大学)のもとへ3ヶ月間滞在した。滞在中には現地のセミナーなどで発表の機会をいただき、Geiges氏(ドイツ・Koeln大学)など、当分野を牽引する研究者と多く交流が持てた。中でも、Kwon氏(ドイツ・Heidelberg大学)とは、研究関心で合致する部分が多く、Stein領域に関する共同研究を開始した。氏とは30年度以降も継続して、共同研究を行っていく予定である。引き続き,Stein充填可能な接触構造に適合するオープンブック分解で,モノドロミーが右手デーンツイストの積として表示できない例の構成を行う.Steinモノイドという曲面の写像類群の中のモノイドを考えたときに,このようなオープンブック分解のモノドロミーとなる写像類は特異な生成元となり得るため,このような例は重要と考えられる.次年度は考察する曲面を種数1,境界数1の曲面に制限して構成を試みる.この曲面の写像類については,生成元を用いた各元の標準形が知られている.さらに,その標準形を用いて,写像類がタイトな接触構造に適合するオープンブック分解のモノドロミーである条件も知られている.このような既知の結果を活かし,この曲面に対して,欲しているオープンブック分解の存在の有無を決定する.
意味的に周辺にあるウェブ情報へのナビゲーションの研究

本研究は、現在閲覧中のWeb情報に対して、意味的に周辺にある情報に容易に到達することができるようにするナビゲーション技術の開発を行った。現在閲覧中のWeb情報の特徴をうまく表現する技術、複数の語で表現されるような情報要求に対して同位関係にある表現を発見する技術、それらの情報を利用した周辺情報の取得技術、得られた周辺情報をグラフィカルに表示する技術について開発を行った。本研究の目的は、現在閲覧中のWeb情報に対して、意味的に周辺にある情報に容易に到達可能にするナビゲーションを実現することにある。ある情報に対して意味的に周辺にある情報とは、一般化、特殊化、平行移動などの関係にある情報のことである。本目的を達成するため、(1)Web情報の特徴表現、(2)複数の語集合に対する知識発見技術、(3)取得された知識を用いた周辺情報の取得、(4)ナビゲーション情報の提示の各機能の研究開発を行う。平成24年度は、各機能について、それぞれ1つ以上の手法の開発を行った。(1)周辺情報を考慮するためには、情報を何らかの方法で表現する必要がある。現在は、従来手法を基にした手法を1用いている。画像情報に対しては、局所特徴をクラスタリングして作成されるボキャブラリツリーによる高次元ベクトル、色ヒストグラム、構図に基づく特徴表現などを用いた。テキスト情報に対しては、語の出現頻度に基づく手法を、段落を考慮して用いた。(2)語のペアが与えられた時に、それらと同位関係にあるペアを発見する手法の開発を行った。Web検索エンジンを用いた手法であり、現在は、数十回のWebアクセスが必要である。また、大量のテキストコーパスから作成された、語の上位下位関係の辞書を利用して、複数の語が与えられた時に、それらにとって意味のある同位語を取得するために、二部グラフの分析技術を利用した手法の開発を行った。(3)周辺情報とは、一般的な類似情報とは異なり、なんらかの異なる情報を含む情報のことである。今年度は、画像やテキスト情報を対象として、周辺情報がどのようなものであるかを定義し、そのような情報を取得するために、情報の隣接性について計算する手法を開発した。(4)画像検索結果を対象として、ファセットと呼ばれる複数のカテゴリ情報を提示し、ナビゲーションを実現する手法を開発した。本研究の目的は、現在ユーザが閲覧している情報から、意味的に周辺にある情報に容易にアクセスできるようにすることである。この目的を達成するため、(1)Web情報の特徴表現、(2)複数の語集合に対する知識発見技術、(3)取得された知識を用いた周辺情報の取得、(4)ナビゲーション情報の提示の各機能について研究開発を行う。平成25年度の実績について以下で説明する。(1)ユーザが閲覧している情報周辺の対象としてはWeb情報を扱う。特に、Webブラウザとして一般的となっているタブブラウザの利用を想定した。タブブラウザでは、ユーザがタブを切り替えることなどを行いながら、同時に複数のページを閲覧することが可能である。共起して閲覧されているページ群を認識し、それらで頻出する語を抽出し、さらに、検索エンジンに与えられたクエリも利用し、ユーザが行っているタスクを特徴ベクトルとして表現する手法を開発した。(2)前年度に引き続き、大量のテキストコーパスから作成された、語の上位下位関係の辞書から、同位関係や上位下位関係のうち重要な意味をもつ部分を抽出する手法として、二部グラフの分析技術を利用した手法を提案した。さらに、語集合に対する意味のある同位語集合を取得する手法として、まず、語集合の要素に対して上位語下位語辞書を用いて候補となる同位語集合を作成し、その中で意味のある語集合を評価する手法を提案した。(3)Webページを閲覧している際に、ユーザが過去に閲覧したページの中で、再度閲覧したいと考えると想定される情報を発見する手法を開発した。(4)上記で述べた各種機能について、Webブラウザのアドオンとして実装し、閲覧中のWebページに対して、周辺情報を提示するインタフェースを開発した。本研究の目的は、ユーザが現在閲覧中のWeb情報に対して、意味的に周辺にある情報へ容易に到達可能にするナビゲーションを実現することである。目標達成のために、(1)Web情報の特徴表現、(2)複数の語集合に対する知識発見技術、(3)取得された知識を用いた周辺情報の取得、(4)ナビゲーション情報の提示の四つの課題について研究を推進している。以下で各課題の実績を説明する。(1)本課題は現在ユーザが閲覧している情報を表現することである。ユーザの閲覧行動の主たるものはおおむねウェブブラウザ上で行われると考えられる。検索エンジンに対して入力したクエリや、各ページをどの程度の期間閲覧したか、どのようなページを同時に閲覧しているかといった情報を取得し、ユーザの現状を把握するシステムの開発を行った。(2)今年度は、新たに短い文で表現される事実と同位の関係にあるような事実を発見する研究に取り組んだ。文に出現するエンティティの組に対して、同位関係にあるエンティティの組を発見し、同時にその文と同じ意味を表す文テンプレートの発見を行う手法を開発した。(3)ユーザが現在閲覧している情報にたいして、過去に閲覧した文書中から再度閲覧したいと考えられる情報を推薦するシステムを開発した。そのために、重視すべき特徴量を明らかにした。

(4)前年度に引き続き、ウェブブラウザ上で動作するグラフィカルインタフェースの開発を行った。複数の同位語群を扱うためよりわかりやすく簡潔に情報を提示するようにし、周辺ページへのアクセスも容易に行えるようになった。本研究の目的は、ユーザが現在閲覧中のWeb情報に対して、意味的に周辺にある情報へ容易に到達可能にするナビゲーションを実現することである。目標達成のために、(1)Web情報の特徴表現、(2)複数の語集合に対する知識発見技術、(3)取得された知識を用いた周辺情報の取得、(4)ナビゲーション情報の提示の四つの課題について研究を行った。以下で各課題の実績を説明する。(1)本課題は現在ユーザが閲覧している情報を表現することである。ユーザの情報取得行動は、ウェブを対象として行われるため、ブラウザ上での情報行動の取得が必要となる。検索エンジンに対して入力したクエリや、各ページをいつどの程度の期間閲覧したか、どのようなページを同時に閲覧しているかといった情報を取得し、ユーザの現状を把握するシステムをブラウザ拡張として開発した。(2)本課題では文章で表現される事実と同位関係にあるような別の文章を発見する研究に取り組んだ。文に出現するエンティティに着目し、それらの組に対して同位関係にあるエンティティ組をウェブ検索を用いて発見する手法を開発した。提案手法により、同じ意味となる文章を発見することや、類似するが別の意味となる文書を発見することが可能となった。(3)ユーザが求める情報は少なからず過去に閲覧した情報の再発見である。そこで現在閲覧している情報に対して、過去に閲覧した文書中から再度閲覧したいと考えられる情報を発見する手法を提案した。現在閲覧している情報や、過去の閲覧行動などにおいて、どのような特徴に着目するべきかが明らかとなった。(4)ウェブブラウザ上で動作するグラフィカルインタフェースの開発を行った。語レベルの情報をグラフィカルに提示し、インタラクションを行うことができるようにすることで、大量の情報から求める情報にたどり着くことができるようになった。研究実施計画で提示した四つの課題についての技術開発は、概ね予定通りの成果が得られた。成果発表についても国内外での学会発表を積極的に行っており、予定通りであるといえる。ユーザの検索行動や閲覧行動を取得し、ユーザの現状を把握するシステムをブラウザ拡張として開発した。
microRNAプロファイリングによる悪性グリオーマの新規治療法の開発

ヒト悪性グリオーマよりグリオーマ幹細胞(GIC)を樹立し、GICに共通して発現異常が見られるmicroRNAの解析を行い、有意に発現が低下しているmiR-340を新規発見した。miR-340をGICに過剰発現させると、増殖、浸潤、運動性が低下し、マウス脳内に移植したGICは腫瘍形成能が抑制され、マウスは長期間生存した。また、miR-340の標的遺伝子を探索し、新規なものとしてPLAT(組織プラスミノーゲンアクティベータ)を同定した。PLATをsiRNAにて発現抑制するとmiR-340の過剰発現時と同様、細胞増殖能、浸潤能、運動能の低下とin vivoでの腫瘍形成が抑制された。ヒト神経膠腫の摘出組織の初代培養により、6種類のグリオーマ幹細胞(GIC)を樹立した。これらの細胞からRNAを抽出し、マイクロアレイにより網羅的にmicroRNA (miRNA)のプロファイリングを行った。これらの中で、正常ヒト神経幹細胞と比べ、有意に発現上昇、或いは発現低下のあるmiRNAの検索を行ったところ、7種のmiRNAが同定され、その中で、miRNA-340はこれまで報告のない新規の発現低下したmiRNAであることを発見した。miRNA-340のGICにおける役割を明らかにするため、レンチウイルスを用いて、miRNA-340をGICに強制発現させ、細胞の増殖、運動能、浸潤能、ならびにNOD/SCIDマウス脳内での腫瘍形成能について調べた。miRNA-340強発現させたGICは、細胞増殖の低下、運動能・浸潤能の抑制、マウス脳内での腫瘍形成の抑制をきたした。次に、miRNA-340の標的遺伝子を同定するため、miRNA-340強発現GICにおける遺伝子発現のプロファイリングを行ったところ、plasminogen activator, tissue (PLAT)が直接の標的遺伝子であることを発見した。PLATのshRNAによる抑制実験では、miRNA-340強制発現の時と同様に、細胞増殖の低下、運動能・浸潤能の抑制がみられた。悪性グリオーマの予後が極めて不良の原因として、高度な腫瘍浸潤性、放射線抵抗性、抗がん剤耐性と共に、早期に腫瘍再発をきたす高い腫瘍増殖性が挙げられ、これらに共通する腫瘍細胞として、グリオーマ内に潜在するグリオーマ幹細胞が想定される。従って、グリオーマ幹細胞を制御できれば、グリオーマの治療は大きく向上することが期待される。そこで、本研究では、グリオーマ幹細胞を標的とした新規の治療法を確立するため、複数のヒト悪性グリオーマ患者の摘出腫瘍組織から、7種類のグリオーマ幹細胞様細胞株(GIC)をsphere法にて確立し、これらの細胞内のmicroRNAの網羅的解析を行い、正常神経幹細胞と比べ、有意に発現が低下しているmiR-340を新規同定した。miR-340の機能を調べるため、GICにmiR-340を過剰発現させると、GICは増殖、浸潤、遊走が抑制され、マウス脳内での腫瘍形成が見られなくなった。次に、miR-340の直接的な標的遺伝子の探索を行い、PLAT (tissue plasminogen activator)を新規同定した。PLATの発現をshRNAにて阻害すると、miR-340の過剰発現と同様に、GICでは細胞増殖、浸潤、遊走が抑制され、マウス脳内での腫瘍形成も生じなくなった。すなわち、miR-340はグリオーマ幹細胞において、tumor suppressorとして機能し得ることが明らかとなり、ヒト悪性グリオーマ患者に対するmiR-340を用いた核酸医薬療法が有効となることが示唆された。一般に核酸医薬を脳内の腫瘍組織に移送することは難しいが、最近、私達の教室では、集束超音波とマイクロバブルを用いて血液脳関門を開放する方法を開発している。すなわち、ナノバブルをカチオニックリポソームに封入し、miR-340を含有するプラスミッドをこのバブルリポソームに結合させ、血中に投与した後、脳内の腫瘍を標的として集束超音波を照射する計画を立案しているヒト悪性グリオーマよりグリオーマ幹細胞(GIC)を樹立し、GICに共通して発現異常が見られるmicroRNAの解析を行い、有意に発現が低下しているmiR-340を新規発見した。外科系臨床医学・脳神経外科学ヒトグリオーマ幹細胞から、新規のmicroRNA-340を同定することができた。その性状解析により、microRNA-340がgene supressorとして機能していることを明らかにした。また、microRNA-340の標的遺伝子として、新規のPLAPを同定した。以上の結果は当初の計画通り得られたものである。1microRNA-340の腫瘍形成における詳細なメカニズムを明らかにする。2PLAPのほかにもmicroRNA-340の制御下にある遺伝子群が確認できており、これらの遺伝子群による腫瘍幹細胞の悪性形質獲得に関するメカニズムを解析する。3グリオーマ細胞よりエクソゾームを分離し、グリオーマ幹細胞に特有のmicroRNAを同定し、腫瘍診断マーカーへの応用の可能性について検討する。
雑種神経細胞株NG108-15を用いた神経突起伸長の制御機構の解析

本年度は,神経回路形成における最も重要な現象の一つであるニューロンの神経突起形成・伸長制御機構について,特に神経突起形成・伸長の直接的な牽引力を提供する細胞骨格アクチン線維の動態に着目して解析した。生きた細胞内におけるアクチン線維の動態を可視化するために,Fluorescent Speckle Microsoopy (FSM)を適用した。FSMとは,蛍光標識された細胞骨格分子を少量細胞内に導入することで細胞骨格の動態を解析する方法である。標識分子は内在性の細胞骨格内にランダムに取り込まれて蛍光斑(speckle)を形成するため,speckleの移動を経時的に観察することで細胞骨格全体の動態が詳細に解析できる。その結果,神経突起形成時の細胞体周辺部に見られるラメラ構造(perisomatic lamella)や,伸長中の神経突起先端部に見られる成長円錐において,アクチン線維の後方移動を観察することに成功した。このアクチン後方移動が神経突起形成・伸長の直接的な牽引力を提供していると考えられる。ところで,神経突起の伸長・方向転換等の細胞運動は,細胞内セカンドメッセンジャーであるカルシウムによって制御を受けることが知られている。そこで次に,細胞内局所カルシウム上昇によるアクチン動態調節機構について解析した。細胞内に導入されたケージドカルシウムの光解離によって成長円錐内局所領域におけるカルシウム上昇を引き起こしたところ,アクチン後方移動の速度に有意な変化は見られなかった。この結果から,細胞内カルシウム上昇はアクチン後方移動の速度変化を引き起こす直接的な要因では黒いことが示唆された。現在は,もう一つの細胞骨格である微小管の生きた細胞内での動態を解析中である。
免疫疲弊を起こす、病的PD-1発現機構の解析

PDー1分子は、Tリンパ球の活性化に伴って発現し、免疫の過剰な活性化による自己組織の傷害を防止するために役立っている。がんや慢性感染症における免疫反応においては、長引く免疫応答の間にPDー1の過剰な発現が誘導され、有用な免疫反応を抑制することがわかっている。当研究では遺伝子改変マウスを用い、PDー1が過剰に発現する仕組みを明らかにしようと試みた。結果、1PDー1の発現を詳細に解析するためのレポーターマウスを作成し、2サイトカインレセプターのシグナルでPDー1が抑制されることを示した。また、3PDー1がマクロファージの抑制を通じて免疫反応を制御することなどを明らかにすることが出来た。研究代表者は、免疫細胞上の抑制レセプターPD-1の、ノックアウトマウスが自己免疫疾患を発症することから、PD-1による免疫調節機構について解析を進めている。自己寛容に必須であるPD-1が、幾つかの病態にはマイナスに働くという例が注目されている。例えばがんや慢性ウイルス感染といった、長期的な免疫反応を伴う疾患においては、T細胞がPD-1の非常に高い発現を呈し、エフェクターサイトカインを産生する能力を失った「疲弊T細胞」へと変化していく。標的となるがんや感染細胞には、PD-1の生理的リガンドが高発現していることから、がんやウイルスは、PD-1を利用して宿主から免疫逃避している、とも考えられる。本研究では、1既存の免疫関連遺伝子欠損マウスや2新規作成マウスモデルを用いて、PD-1の高発現を起こす要因と、ひいてはPD-1高発現の、免疫疲弊成立における意義を解析することを目的としている。本年度は、1の研究より、無処置マウスにおいてPD-1の発現を負に制御していると考えられるサイトカインを見出している。2については、マウスの作成途中であり、次年度以降の課題である。また、既存のPD-1抗体がPD-1ノックアウトマウスの細胞に対しても検出してしまうという技術的な問題があり、新しい抗体を用いることにより、非常に高感度でPD-1陽性細胞を検出することが出来るようになった。これとは別に、PD-1が主に調節するT細胞を完全に欠損するRAG2ノックアウトマウスの解析から、PD-1がリンパ球以外の自然免疫担当細胞を抑制制御するという証拠を見出し論文報告した。研究代表者は、免疫細胞に発現する、PD-1のノックアウトマウスが自己免疫疾患を発症することに注目し、PD-1による免疫調節機構について解析を進めている。作年度は、1の研究より、無処置マウスにおいてPD-1の発現を負に制御していると考えられるサイトカインを見出している。2については、PD-1発現と同時に緑色蛍光タンパク、およびCRE組み換え酵素を発現する、レポーターマウスの作成に成功した。このマウスを用いることによって、PD-1を発現した細胞の、その後の免疫反応における役割が明らかにできると考えている。また、PD-1と制御性T細胞の関連を見つける過程で、すい臓の外分泌部に自己免疫性炎症を起こすマウスを同定した。この解析が進めば、自己免疫疾患のメカニズム解明に貢献することができると考えられる。これに関しては解析を進めると同時に、成果発表を準備している。免疫細胞上の抑制レセプターPD-1のノックアウトマウスが自己免疫疾患を発症することから、PD-1による免疫調節機構について解析を進めている。1の研究においては、無処置マウスにおいてPD-1の発現を負に制御していると考えられるサイトカインを見出し、このレセプターのKOマウスがPDー1の高発現を起こすことを見出した。当該サイトカインは、欠損によってT細胞数の大幅な減少を起こすが、この減少に伴ってPDー1の発現が増加することがわかった。2について、PDー1遺伝子にGFP-CRE遺伝子をレポーターとして連結した新規マウスを作成した。このマウスでは、T細胞の活性化でPDー1が上昇すると、それに伴ってGFPレポーターの上昇が見られ、PDー1を生理的に高発現する腸管パイエル板のT細胞でもっとも高いレポーター遺伝子の発現が見られた。

これとは別に、PD-1とFoxP3遺伝子の強調により、致死的な自己免疫疾患の発症抑制が起こることを見出し、現在論文投稿中である。PDー1分子は、Tリンパ球の活性化に伴って発現し、免疫の過剰な活性化による自己組織の傷害を防止するために役立っている。がんや慢性感染症における免疫反応においては、長引く免疫応答の間にPDー1の過剰な発現が誘導され、有用な免疫反応を抑制することがわかっている。当研究では遺伝子改変マウスを用い、PDー1が過剰に発現する仕組みを明らかにしようと試みた。結果、1PDー1の発現を詳細に解析するためのレポーターマウスを作成し、2サイトカインレセプターのシグナルでPDー1が抑制されることを示した。また、3PDー1がマクロファージの抑制を通じて免疫反応を制御することなどを明らかにすることが出来た。本研究の目的である、PD-1レポーターマウスの作成を達成できた。また、既存の遺伝子欠損マウスからも有用な知見が得られている。免疫学新規レポーターマウスに、自己免疫疾患を誘導し、解析を進める。また、制御性T細胞とPD-1のクロストークを明らかにするため、本年度見出した、新規自己免疫マウスの表現型解析を遂行する。新規マウスの作成が途上である一方で、既存の遺伝子欠損マウスからは本研究の目的達成に有用な知見が得られている。自然免疫系におけるPD-1の関与を見つけることも出来たため、次年度以降の発展性が期待できると考えている。当初計画では、新規作成したマウスの表現系解析を行うための費用を計上していたが、マウスの作成が昨年度遅れた。また、既存マウスの交配から新規知見が得られたため、表現系解析のための資金を来年度に繰り越した。免疫関連遺伝子欠損マウスの解析を続ける。新規マウスに関しては、今後の展開によっては方法を見直す必要がある。来年度は新規マウス、既存マウスの2系統のマウス解析に、当該助成金、および来年度助成金を充て、一体的に使用する。
刺激ー分泌連関:とくに細胞内カルシウムの作用と未知調節因子の探求

本研究は、神経系のモデルとしての意図も含め、副腎クロマフィン細胞を用い、刺激ー分泌(生合成)連関におけるCa^<2+>の動員機構、細胞内Ca^<2+>の作用などについて精査し、同時にこのCa^<2+>の作用をメティエ-トしている新しい調節因子の発見に努めるのを目的としている。1.薬物作用からの解析:培養ウシ副腎クロマフィン細胞あるいはそのジキトニン処理膜透過性細胞を用い、ミオシン軽鎖リン酸化酵素(MLCK)の阻害薬が、各種の分泌刺激によるCa^<2+>の細胞内への流入を抑制し、その結果カテコ-ルアミン分泌を抑制することを明らかにし、MLCKは分泌細胞では細胞膜でのCa^<2+>の流入機構の調節にあづかっていることを明らかにした。またサイトカラシン、ビンブラスチンなど細胞骨格成分に働く薬物のカテコ-ルアミン分泌と生合成に対する作用から、アクチンなど細胞骨格成分が、チロシンの細胞内へのとり込みを促進し、チロシン水酸化酵素活性を調節し、同時にCa^<2+>に依在した分泌機構にも深いかかわり合いを持っていることを明らかにした。他方、各種フラボノイド類を用いた検索から、カテコ-ルアミン生合成と分泌の調節にはプロテインキナ-ゼ(PK)系とくにPKーCの関与が示唆された。2.Ca^<2+>の代わりにBa^<2+>を用いて行って生合成、分泌機構の検索から、低濃度Ba^<2+>の作用がPKーCの阻害薬によって阻害され、またホルボ-ルエステルで長期処理し、PKーCの活性を低下させた細胞ではBa^<2+>の作用が著減することから、生合成、分泌機構におけるPKーCの役割を考察することができた。ホルモンの分泌や神経伝達物質の放出に必須なCa^<2+>の細胞内での作用機序とその調節因子について精査し、いわゆる開口分泌のしくみを明らかにしようとするものである。研究には、主として神経細胞のモデルという意図も含めて、モルモット、ウシなどの副腎クロマフイン細胞を用いた。その結果、1)細胞膜受容体刺激によるCa^<2+>の動員機構として、Ca^<2+>の細胞外からの細胞内への流入と、細胞内Ca^<2+>プ-ルからの放出の二通りがあり、前者は主としてニコチニック受容体を介したものであり、後者は主としてムスカリニック受容体をはじめ、ノンコリナ-ジック受容体を介した反応であることがわかった。またVIPなど必ずしも細胞内Ca^<2+>の増加を伴わない分泌機構のあることも示唆できた。2)ミオシン軽鎖リン酸化酵素の阻害薬であるMLー9が、細胞膜刺激によるCa^<2+>の細胞内への流入を抑制し、カテコ-ルアミン分泌を抑制することから、このリン酸化酵素が膜でのCa^<2+>の流入に関係し、間接的に分泌機構を調節していることがわかった。またアクトミオシン系がカテコ-ルアミンの生合成とくにチロシン水酸化酵素の活性調節にもかゝわり合いをもっていることも明らかにすることができた。3)Ca^<2+>の代わりにBa^<2+>を用いた分泌機構の検索から、低濃度Ba^<2+>によるカテコ-ルアミン分泌は、ポリミキシンB、スタウロスポリン、フラボノイドなどプロテインキナ-ゼCの阻害作用をもつ薬物により阻害され、またホルボ-ルエステルなどの長期投与によりプロテインキナ-ゼCのdown-regulationを起こさせた細胞でも、Ba^<2+>によるカテコ-ルアミン分泌が抑制されることが明らかになった。本研究は、神経系のモデルとしての意図も含め、副腎クロマフィン細胞を用い、刺激ー分泌(生合成)連関におけるCa^<2+>の動員機構、

細胞内Ca^<2+>の作用などについて精査し、同時にこのCa^<2+>の作用をメディエ-トしている新しい調節因子の発見に努めるのを目的としている。1.薬物作用からの解析:培養ウシ副腎クロマフィン細胞あるいはそのジキトニン処理膜透過性細胞を用い、ミオシン軽鎖リン酸化酵素(MLCK)の阻害薬が、各種の分泌刺激によるCa^<2+>の細胞内への流入を抑制し、その結果カテコ-ルアミン分泌を抑制することを明らかにし、MLCKは分泌細胞では細胞膜でのCa^<2+>の流入機構の調節にあづかっていることを明らかにした。またサイトカラシン、ビンブラスチンなど細胞骨格成分に働く薬物のカテコ-ルアミン分泌と生合成に対する作用から、アクチンなど細胞骨格成分が、チロシンの細胞内へのとり込みを促進し、チロシン水酸化酵素活性を調節し、同時にCa^<2+>に依存した分泌機構にも深いかかわり合いを持っていることを明らかにした。他方、各種フラボノイド類を用いた検索から、カテコ-ルアミン生合成と分泌の調節にはプロテインキナ-ゼ(PK)系とくにPKーCの関与が示唆された。2.Ca^<2+>の代わりにBa^<2+>を用いて行った生合成、分泌機構の検索から、低濃度Ba^<2+>の作用がPKーCの阻害薬によって阻害され、またホルボ-ルエステルで長期処理し、PKーCの活性を低下させた細胞ではBa^<2+>の作用が著減することから、生合成、分泌機構におけるPKーCの役割を考察することができた。