hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
粘膜ワクチンによるI型アレルギーの誘導機序とその制御に関する研究

マウスのアレルギー性鼻炎モデルを用いて、Th1/Th2バランスおよびアレルギー病態に対するPCの関与について検討した。OVA感作前にPC-BSAを経鼻投与し、アレルギー症状、鼻粘膜への好酸球浸潤、血清IgE値、脾臓のCD4陽性T細胞のサイトカイン産生能を検討した。PC-BSAの経鼻前投与によりくしゃみ、鼻掻き回数が減少し、血清中OVA特異的IgE濃度の低下を認めた。さらに脾臓CD4陽性T細胞のIL-4産生の減少が認められた。これらの結果からマウスのPC前投与のアレルギー性鼻炎に対する抑制効果が示唆され、PCにはTh2型のアレルギー反応を抑制する働きがあると考えられた。IgE高値のマウスモデルであるBALB/cマウスを用いてOVA-alumを用いた実験で,アレルギー感作前にPC-BSAの腹腔内投与(IP),経鼻投与(IN)を行った.アレルギー症状では,鼻かみ,くしゃみといった症状の比較で,コントロールと比較して,PC前投与の群で有意に低下を認めた.また血清OVA specific IgE値はコントロールと比較してPC前投与群で有意に減少した。IgEの有意な低下を認めたことから,Th1/Th2サイトカイン産生について脾臓CD4陽性T細胞のOVA刺激によるIL-4とIFN-γ産生を調べたところ,コントロールと比べてPC-BSAでIL-4産生抑制を認めた。IFN-γについては、コントロールと比べて有意差は認めなかった.これらの結果から,PCを用いて経鼻免疫することでIL-4産生を抑制し,Th2型免疫応答が抑制される可能性が考えられた。また,IgE高値のマウスモデル(BALB/c)において,経腹腔でのPC投与により,IgE産生を抑えることができた。グラム陽性及び陰性細菌の共通構成成分であるPCはCD4陽性T細胞に作用しTh1/Th2バランスを変化させ,I型アレルギーを抑制する働きがある可能性が示唆された。生後6週のBALB/cマウスを用いAからDの4つのグループに分けて実験を行った。グループA,BはそれぞれPC-BSAを週1回ずつ、3週にわたって腹腔内(IP)、および経鼻(IN)投与した。その後IgE高値のマウスモデル(アレルギーモデル)を作成するためにOvalbmin (以下OVA)+alumによる感作を行った。グループC、DにはそれぞれPBSを投与することでコントロール群とした。グループCにはOVA-alumによる経鼻感作を行い(positive control)、グループDにはOVA-alumによる経鼻感作を行わず(negative control)。OVA感作後にそれぞれアレルギー症状の観察と血清、脾臓、NALT組織のサンプリングを行った。アレルギー症状はそれぞれのグループで5分間ずつくしゃみと鼻かきの回数を計測し、また血清からELISA法にてtotal IgEおよびOVA特異的IgEを測定した。またNALTおよび脾臓から単核球を分離し、そこからCD4陽性T細胞を分離精製した。CD-4陽性T細胞をOVAで刺激後に、培養上清中のIL-4,IFN-γをELISA法で測定した。結果はPC-BSAを事前に投与した群では、positive contorol群と比べて、アレルギー症状の有意な低下を認めた。また血清OVA特異的IgEの低下を認めた。IL-4の産生抑制を示していたことから、Th2型の反応にシフトしている可能性が考えられ、PC-BSA前投与によるアレルギー反応抑制推測された。平成23年度に当初計画していたマウスを用いた実験は順調に進み、論文作成のためのデータの解析を行っているところである。平成23年度に得られたサンプルを基にELISA法でのサイトカイン測定を行う。また、PC前投与によるTh1/Th2メカニズムをELISA法以外の側面からも検討することを目的に、追加の実験として脾臓およびNALT組織からはRNAを抽出し、RT-PCRにてIL-4、IFN-γ、CCR5、CCR8の遺伝子発現を調べ、Th1/Th2のバランスについて多角的に考える。これらのデータを基にして得られた結果を取りまとめ、成果発表を行う。サンプルのサイトカイン測定にはELISAキットを使用するが、キットには使用期限があるので、測定直前に購入しているため未購入のELISAキットがある。そのため約30万円の繰越金が発生した。この繰越金でELISAキットを購入し、また今年度の予算にてRT-PCR解析のための試薬購入、実験動物を購入にする。また研究成果発表のための学会参加の旅費に使用する予定である。
医療における専門家と非専門家のコミュニケーションの適切化のための社会言語学的研究

【平成17年度】(1)医療面接の談話を収録し,医師・患者(SP)双方にフォローアップインタビューを行った。(2)若手医師・中堅医師2グループを対象とするフォーカス・グループ・インタビューを行った。談話収録データおよびインタビュー・調査データの分析結果から,次の知見が得られた。(1)医療面接における敬語の過剰な使用は,患者・医師間のラポールの構築に逆効果である。(2)患者と同じ方言の使用は相互の心理的距離を縮め,患者・医師間のラポールの構築に役立つ。(3)医学・医療用語を極力用いない説明を患者は期待するが,症状や治療によっては用いない説明が困難なものもある。その場合,医師側には医療情報の伝え方の工夫が求められる。【平成18年度】(1)医師・歯科医師を対象に,敬語や方言の効果的な使い方,ポライトネス・ストラテジー,医学・医療用語の使い方の工夫,インタビュー方略,解釈モデルの活用などをテーマにインターネット調査を実施した。(2)インターネット調査の結果を踏まえて,「医療コミュニケーションの適切化」をテーマとするWEB討論会を開催した。(3)患者と医療者(医師,看護師,薬剤師など)双方を対象にランダム面接調査を実施した。各種調査およびWEB討論によって得られた量的・質的データの分析結果から次の知見が得られた。(1)難解な医学・医療用語を患者・家族に配慮して分かりやすく伝えるには,どんな工夫が必要か明らかになった。この知見を「病院の言葉を分かりやすくする提案」に活用する。(2)医療面接に相応しい敬語は,対等な関係の相互尊重に必要な最小限の敬語である。患者参加型の意志決定を目指す患者・医療者ほどラポールの構築に役立ち,ポジティブ・ポライトネス効果もある簡素な敬語を適切と意識している。(3)患者と医療者間の方言会話はポジティブ・ポライトネス効果があり,患者をリラックスさせる。1.医療面接の談話を収録し,医師・患者(SP)双方にフォローアップ・インタビューを行った。医療面接の談話は,ポライトネス・ストラテジーやコミュニケーション・スキルが異なる様々な場面を設定して収録した。また,次の(1)(3)について医師・患者(SP)双方にフォローアップ・インタビューを行った。(1)敬語や方言の使い方によるポライトネス効果,および,ラポール(共感を伴う信頼関係)構築への影響。(2)医学・医療用語を用いた説明と,極力用いない説明による患者の理解度・満足度の差異(3)言い換えることや説明を加えることが難しい医学・医療の専門用語・外来語・略語2.医師グループを対象とするインタビュー調査を行った。インタビュー調査の内容は,(1)患者・家族との良好な関係構築に役立つコミュニケーションの工夫や,(2)必要な情報が患者・家族に適切に伝わるよう受け手に配慮した医学・医療用語の使い方など,医療コミュニケーション適切化の課題に関するものである。これらの課題について,医師としての考えや,コミュニケーションの工夫,言葉遣いの内省などを尋ねた。また,国立国語研究所平成16年度世論調査「外来語に関する意識調査II(全国調査)」の第4章「医療の専門家に期待する言葉遣いの工夫」の分析結果を医師グループに提供し,医療コミュニケーション適切化の具体的な課題について医師の意見を求めた。3.収録データおよびインタビュー調査の分析結果から,次の知見が得られた。(1)医療面接における敬語の過剰な使用は,患者・医師間のラポールの構築に逆効果となる。(2)患者と同じ方言の使用は,お互いの心理的距離を縮め,患者・医師間のラポールの構築に役立つ。

(3)医学・医療用語を極力用いない説明を患者は医師に求めるが,症状や治療によっては医学・医療用語を用いない説明が困難なものもある。その場合,医師側には情報の伝え方の工夫が,患者側には知る努力が求められる。この研究は,医療の専門家である医師と,非専門家である患者・家族のコミュニケーションに関わる言語問題を社会言語学的調査に基づいて解明し,医療現場のコミュニケーションを適切化するための基礎データを提供することを目的とする。具体的な課題は次の三点である。(1)医療コミュニケーションの適切化に貢献するポライトネス・ストラテジー,コミュニケーション・スキルを明らかにする。(2)医療場面で使われる分かりにくい医学・医療用語について,専門家・非専門家双方を対象に意識調査を実施し,社会言語学の観点から分析する。(3)医師と患者・家族の良好な関係・信頼関係を築くコミュニケーションの工夫,および,患者・家族に分かりやすく伝え,患者・家族との情報共有に役立つ説明の工夫を提案する。本年度の研究実績は次のとおりである。(1)医師・歯科医師を対象にインターネット調査を実施し,調査結果を報告書にまとめた。医療コミュニケーションの適切化に関する次の三つのテーマについて,医師としての意見や報告を求めた。ア.患者・家族との良好な関係構築に役立つ,敬語や方言の効果的な使い方,ポライトネス・ストラテジー。イ.患者・家族への分かりやすい説明に役立つ医学・医療用語の使い方の工夫。ウ.患者・家族からの情報収集に役立つインタビュー方略,解釈モデルの活用。(2)インターネット調査の結果を踏まえて,「医療コミュニケーションの適切化」をテーマとするWEB討論会を開催した。次の三つのテーマをめぐって議論を深め,討論のすべてをWEBページ上に公開した。A.医師と患者・家族の良好な関係・信頼関係を築くために。B.効果的な医療情報収集のために。C.効果的な説明のために(3)患者と医療者双方を対象にランダム面接調査を実施し,分析結果の一部を研究論文に公表した。(4)調査研究の成果を,学会誌論文,医学雑誌論文,医学教育テキスト,報告書などにまとめ,公表した。
薬物担体への応用を目指したリン酸八カルシウムの作製と評価

【成果(1):OCP(リン酸八カルシウム)/HA(水酸アパタイト)複合球状顆粒の作製】OCP/HA複合球状顆粒を作製した。結晶相をOCP/HAとし、骨再生の促進と薬剤の徐放化を狙った。顆粒の形は、骨欠損の形に関わらず充填することができる球状を目指した。また、顆粒には約70%の気孔をもたせて多孔質とし、比表面積の向上と骨再生の促進を狙った。さらに、顆粒を骨欠損部に充填した際に顆粒間に骨再生に適した気孔を得るために、顆粒の粒径は1000μmとした。これまで作製されたOCP顆粒は形状が制御されていなかったが、本研究では顆粒の形状を真球に近い球状に制御することができた。骨欠損部に顆粒を充填することにより顆粒間に気孔が形成されるが、この気孔の大きさが骨再生のために重要である。顆粒の形状を制御することで、顆粒間に形成される気孔の大きさを制御することができ、骨欠損部に骨伝導に適した大きさの気孔を容易に形成できると考えられる。【成果(2):OCP/HA複合球状顆粒の薬剤担体としての評価】成果(1)にて作製したOCP/HA複合球状顆粒の薬剤担体としての能力を、薬剤および細胞を用いて評価した。抗がん剤であるメトトレキサートのモデル物質として葉酸を用いて、OCP/HA複合球状顆粒からの放出特性を評価した。放出された葉酸の濃度は、メトトレキサートの治療域濃度を維持していたことから、OCP/HA複合球状顆粒は抗がん剤徐放型の骨充填剤として応用が期待できる。また、顆粒に担持させたメトトレキサートが骨肉腫細胞であるHOS細胞へ与える影響を評価したところ、薬理効果を失うことなくHOS細胞の増殖を抑制した。作製したOCP/HA複合球状顆粒は、抗がん剤担持型骨充填材としての応用が大いに期待できる。本研究では、リン酸カルシウムを用いて骨部位へのドラッグデリバリーを行うための薬物担体を作製することを目的とする。抗がん薬による治療効果を高め副作用を極力抑えるためには、抗がん薬をがん病巣局所に効率よく高濃度に集積し、適当な量の抗がん薬を適切な速度で放出(徐放化)させることが有効である。本研究では、抗がん薬の徐放化担体として、生体内で骨や歯の無機主成分である水酸アパタイト(HA)の前駆体とされているリン酸八カルシウム(OCP)に注目した。薬物を吸着させたOCPを体内に入れると、HAへの転化に伴い吸着特性が変化し薬物が放出されると考えられる。このとき、OCPからHAへの転化速度を制御することで、薬物の放出速度を制御できると考えられる。また、OCPからHAへ結晶構造が変わることで薬物を放出できる可能性があるため、高い放出率が期待できる。本研究では、OCPを用いて薬物担体を作製するための材料合成および評価を行い、薬物担体となる材料自体を生体システムの一部に組み込んだ新たなドラッグデリバリーシステムの構築を目指す。本年度はまず、生体内を模擬した条件下におけるOCPからHAへの転化挙動の評価を行った。生体内にはOCPの転化挙動に影響を与えると考えられる因子が数多く存在するため、OCPを用いて薬物担体を作製する際にはそれらの影響を考慮する必要がある。OCPを溶液に浸漬し、浸漬後の試料について、研究従事機関で有しているX線回折装置、走査型電子顕微鏡、透過型電子顕微鏡により評価を行った。これにより、溶液のpHや組成がOCPからHAへの転化挙動にどのような影響を与えるかを調べた。次にこの結果をふまえ、OCPからHAへの転化挙動および転化速度を考慮しながら、OCPを薬物担体として応用するための成形を行った。

抗がん剤であるメトトレキサートのモデル物質として葉酸を用いて、OCP/HA複合球状顆粒からの放出特性を評価した。放出された葉酸の濃度は、メトトレキサートの治療域濃度を維持していたことから、OCP/HA複合球状顆粒は抗がん剤徐放型の骨充填剤として応用が期待できる。また、顆粒に担持させたメトトレキサートが骨肉腫細胞であるHOS細胞へ与える影響を評価したところ、薬理効果を失うことなくHOS細胞の増殖を抑制した。作製したOCP/HA複合球状顆粒は、抗がん剤担持型骨充填材としての応用が大いに期待できる。当初の計画通り、OCPの転化挙動の調査およびOCPの成形を行うことができた。また、その成果を論文および学会にて発表することができた。以上から本研究はおおむね順調に進展しているといえる。今後はOCPと薬物との相互作用を調べるために、OCPに対する薬物の吸着・放出特性、及び吸着された薬物の薬理効果の評価を行う。まず、薬物(抗がん薬のシスプラチンをモデル薬物として想定)の溶液にOCPを浸漬し、吸着特性の評価を行う。次に、体液を模擬した溶液に薬物を担持させたOCPを浸漬し、HAへの転化による薬物の放出特性を評価する。さらに、細胞(骨肉腫細胞のHOSを想定)を、薬物を担持させたOCPの存在下で培養する。HAに転化することで放出された薬物の薬理効果を、細胞数の増減により評価する。OCPに対する薬物の吸着特性、転化後のHAからの薬物の放出特性、放出された薬物の薬理効果を明らかにする。これらの結果を踏まえ、OCPの作製方法および成形方法、薬物の担持方法を検討し、OCPの薬物担体への応用を目指す。
ヒストン修飾酵素異常を基軸としたリンパ腫発生機構の解析と新規治療戦略の検討

犬リンパ腫細胞株を用いたHAT活性およびHDAC活性の解析,WBによるアセチル化ヒストンならびにCREBBP/EP300の解析,CREBBP/EP300のmRNA発現解析の結果から,犬リンパ腫ではH3K18Ac/27Acのアセチル化をWestern Blot法を用いて解析し,アセチル化の低下が確認された場合にCREBBP/EP300の遺伝子ならびに蛋白解析を行うことが有用である可能性が示唆された。また,犬リンパ腫においても,MGMTがニトロソウレア系抗癌剤lomustineの耐性に関与している可能性が強く示唆されたが,本研究ではその発現を調節するメチル化領域を明らかにすることは出来なかった。MGMTは抗癌剤によってアルキル化されたグアニンを修復するDNA修復酵素であり,これまで我々の研究室で行われた犬リンパ腫細胞株を用いた研究においても抗癌剤ロムスチン耐性へのMGMT発現の関与が示唆されている。また,人医領域ではMGMT Exon 1近傍のCpGアイランドのメチル化によりMGMT遺伝子発現が抑制されていると報告されている。本年度は犬リンパ腫に関わるエピジェネティック異常として,犬MGMT遺伝子のメチル化に着目し,メチル化阻害薬添加の有無によるMGMT遺伝子のmRNA発現量の比較を行うとともに,CpGアイランドのメチル化状態を解析した。犬リンパ腫細胞株と健常犬PBMCを用い,メチル化阻害薬添加によるMGMT遺伝子mRNA発現量への影響を検討した。その結果,メチル化阻害薬非添加状態ではMGMT mRNA発現が認められなかった一部の細胞株でメチル化阻害薬添加によりMGMT遺伝子発現が認められるようになった。次にMGMT遺伝子Exon 1の上流約10,000bp下流約7,000bpを対象としてCpGアイランドの検索を行ったところ, Exon 1の上流約10,000bpの領域に4つのCpGアイランドが存在することが明らかとなった。さらにこれらのCpGアイランドについてメチル化解析を行ったが,いずれの領域においてもCpGのメチル化によるMGMT遺伝子の発現抑制という仮説との一致は認められなかった。以上の結果から本研究では犬リンパ系腫瘍細胞株においてMGMT遺伝子の発現がメチル化により抑制されている可能性が強く示唆された。しかし,今回解析した犬MGMT遺伝子のExon 1の上流約10,000bp下流約7,000bpの領域には犬MGMT遺伝子の発現調節に関わるメチル化領域が存在する可能性は低いものと考えられた。以上の結果は現在,投稿準備中である。CREBBP/EP300はHAT活性を有しており,このHATを介してヒストンのアセチル化,癌抑制遺伝子の活性化,癌原遺伝子の不活性化を行っている。本研究では犬のリンパ腫においてもCREBBP/EP300の異常によるHAT活性の低下が腫瘍発生に関与している可能性を想定し,犬リンパ腫培養細胞株を用いたHAT異常解析系の検討を行った。まず,犬リンパ腫細胞株8種の核蛋白抽出物を用いてHAT活性測定キットによる解析を行った。その結果,EmaにおいてHAT活性の顕著な低下が認められたため,CREBBP/EP300の異常が起こっている可能性を疑い,CREBBP/EP300が特異的にアセチル化しているヒストンH3K18Ac/K27AcについてWestern Blot解析を行った。しかしながら,Emaを含む全ての細胞株で両リジン残基のアセチル化が認められ,CREBBP/EP300に特異的なHAT活性には細胞株間で大きな差がないことが示唆された。次に,CREBBP/EP300の蛋白発現量をWestern Blot法で,mRNA発現量をReal-time PCR法を用いて解析したが,細胞株間で大きな差異は認められなかった。さらに, HDAC活性測定キットによる解析も行ったが,低アセチル化を起こすほどの顕著な活性増加は認められなかった。また,HDAC活性を有する蛋白をコードするEID1遺伝子,EID2B遺伝子,SIRT7遺伝子のmRNA発現量についても顕著な増加は認められなかった。以上の結果から,HAT活性測定キットによる活性の低下が認められたEmaについては,CREBBP/EP300以外のHAT活性を有する蛋白の活性異常の存在が疑われ,in vitroにおけるHAT活性測定キットによる解析では,CREBBP/ EP300が有するHAT活性の影響が反映されていない可能性が示唆された。リンパ腫は犬において最も発生頻度の高い悪性腫瘍の一つであり,臨床上大きな問題となっているが,その発生分子機構に関してはほとんど明らかになっていない。本研究では犬のリンパ腫発生にゲノムの不安定性とエピジェネティック修飾が関連しているとの仮説の下,それぞれ研究を行った。まず,5種の犬リンパ腫培養細胞株について,M期染色体標本の蛍光染色により染色体不安定性の解析をおこなった。その結果,すべての細胞株において不安定性を伴う染色体異数性が認められ,染色体不安定性の存在が明らかとなった。また,テロメアに関する解析では,5種すべてにおいてテロメラーゼ活性が認められ,FISH法による平均

テロメア長の解析では,4種で健常犬PBMCと比較して短く,1種で長い結果となった。本研究で得られた知見は,将来的に犬リンパ腫における染色体不安定性の解析をおこなう上で有益な基礎情報を提供するものと考えられた。次に抗癌剤耐性に関与しているDNA修復酵素MGMTの解析を行った。その結果,メチル化阻害薬を添加したリンパ腫細胞株の一部でMGMT遺伝子mRNA発現量が増加し,犬リンパ腫でもメチル化によるMGMT遺伝子発現抑制が生じていることが明らかとなった。また,興味深いことに犬リンパ腫培養細胞株の中にはMGMT遺伝子が発現している細胞株とMGMT遺伝子を発現していない細胞株があることが明らかとなり,前者では抗癌剤耐性に関連している可能性,後者では化学物質をはじめとする各種DNA傷害物質によるDNA損傷に対する防御能を失っている可能性が示され,これが変異の蓄積による腫瘍の発生に関与している可能性も示唆された。本研究の目的の本質は犬リンパ腫発生の分子機構を明らかにすることで,新たな治療戦略を提案することであり,本研究成果はその端緒として有益な情報を提供するものと考えられる。獣医内科学ヒストンの修飾を検出するための市販抗体の反応性に問題があり,免疫染色,Western blotによるヒストン修飾の解析が難航しており,代替として本年度は犬リンパ腫に関わるエピジェネティック異常という観点からMGMT遺伝子のプロモーター領域のメチル化を行っていたため。H24年度に遂行予定であったA. HATs (CREBBP, EP300),MHT(MLL2)の発現異常の解析とB.ヒストン修飾の網羅的解析による異常酵素の解析のうち,A.については概ね解析を終了し,犬のリンパ腫培養株では,CREBBP/EP300の発現異常は認められない可能性が明らかとなった。また,本年度の結果から,HAT活性測定キットによる測定では,CREBBP/ EP300が有するHAT活性の影響が反映されていない可能性が示唆され,臨床サンプルを用いた解析に際しては注意を要することが明らかとなり,今後の解析に有用な知見が得られた。一方,B.ではヒストンH3K18Ac/K27AcについてWestern Blot解析を行ったが,その他のヒストン修飾については解析を終了することが出来なかった。これは,免疫染色,Western Blot解析の非特異反応が主な問題であり,前者では固定法を含め,現在,条件検討を行っている。目的の本質は犬リンパ腫発生の分子機構を明らかにすることで,新たな治療戦略を提案することであり,リンパ腫発生に重要な分子についての解析を展開したいと考えている。前年度,解析を完了できなかったヒストン蛋白のN末端のアミノ酸側鎖修飾について免疫染色学的解析を行い,リンパ腫細胞における修飾パターンを解析する。この結果に基づき,推定される酵素の異常を蛋白レベル,mRNAレベル,ゲノムレベルで解析する。具体的には腫瘍細胞株を用いて酵素活性の測定,WB解析,Real-time PCR解析,DNA塩基配列解析を行う。
胃癌細胞における放射性ヨード治療の可能性の基礎的検討

ヨードトランスポーターNISは、甲状腺のほか、乳癌や胃癌でも発現しており、腫瘍組織での発現増強は腫瘍を標的とした放射性ヨード治療の可能性を示唆する。われわれは胃癌細胞株MKN45において、核内受容体RXRの刺激によりNISの発現が誘導されること、AKT阻害剤によりその効果が増強されることを見出した。さらに、タンパク質合成阻害剤によるNIS発現誘導作用を見出し、2種のNIS発現誘導剤(レチノイドおよびタンパク質合成阻害剤)がもたらすmiRNA発現プロフィールの変化について検討した結果、新たなNIS遺伝子発現増強剤の候補を確定した。分化型甲状腺癌の放射性ヨード治療は、腫瘍細胞におけるナトリウム/ヨード共輸送体(Na/I Symporter, NIS)の発現に依存しており、NISを介した放射性ヨードの腫瘍細胞への選択的な取り込みは腫瘍を標的とした細胞毒性をもたらす。われわれは、胃癌細胞を用いた予備実験で、細胞分化に重要なレチノイド(ビタミンA誘導体)がNIS遺伝子の発現を増加させ、放射性ヨードの取り込みを有意に上昇させることを見出している。この結果は腫瘍細胞特異的なNISの発現誘導を利用した胃癌に対する標的治療の可能性を示唆するが、その実現のためには、胃癌細胞におけるNIS発現誘導のための細胞内シグナル伝達を解明し、より特異的かつ効率的にヨードの取り込みを誘導する必要がある。2014年度には、まず合成レチノイドを用いて、2種類あるレチノイド受容体(RAR, RXR)のうち、RXRが胃癌細胞のNIS発現誘導に重要であることを示した。レチノイドによるヨード取り込みの増加は3倍程度と小さかったが、AKT阻害剤、MEK阻害剤の添加で、それぞれ12倍、6倍に増強された。興味深いことに、AKT阻害剤とMEK阻害剤のNIS mRNA誘導効果はほぼ同じであり、AKT阻害によるヨード取り込みのより大きな上昇には、遺伝子発現誘導以外の機序が関与している可能性が示唆された。そこで、AKT阻害によるNIS翻訳後の発現調節について検討を行った。すなわち、外因性NISを強制発現したサル腎細胞を用いて細胞表面のNISタンパク質の発現量について評価したところ、AKT阻害剤処理により、細胞表面に発現するNISの増加が認められ、AKT阻害によるNISの細胞内分布の変化がヨードの取り込み量の増加に関与していることが示唆された。これらの成果の一部は、2015年の日本内分泌学会学術総会で発表した。2015年度には、レチノイドのNIS遺伝子発現誘導効果のメカニズム検索を引き続き行うべく、まず、新規タンパク質の合成の関与の有無の評価を目的として胃癌細胞株に蛋白質合成阻害剤であるサイクロヘキシミド処理を行った。驚くべきことに、NIS遺伝子発現の有意な増強が観察されたため、胃癌以外の数種の癌細胞株(乳癌、肺癌、甲状腺癌、前立腺癌)で同様の作用が見られるか確認したところ、いずれの細胞株においてもNIS mRNAの有意な発現増強(9倍222倍)が認められた。他の蛋白質合成阻害剤(ピューロマイシン)でも同様の誘導が見られたため、NISの誘導は、サイクロヘキシミドのオフターゲット効果ではなく、蛋白質合成の阻害そのものによることが強く示唆された。さらにサイクロヘキシミドの作用はp38 MAPキナーゼ阻害剤で強く抑制され、p38の関与が示唆された。これらの成果の一部は、2016年の日本内分泌学会学術総会で発表した。実験計画(1)と(2)の実行により、MKN45胃癌由来細胞株におけるNIS発現誘導にはレチノイド受容体RXRが重要であること、AKT阻害剤、とくにmTORC阻害剤が発現誘導の増強に有効であることが示された。さらに、蛋白質合成阻害剤によりNIS遺伝子発現誘導が認められ、それが多くの癌細胞で再現されたことから、今まで明らかとなったRXRやAKTシグナル伝達と、蛋白質合成阻害剤により惹起されるシグナルとのクロストークがあるのかが興味の対象のひとつとなった。研究計画(3)“3次元培養条件下でのNIS発現誘導の検討"については、アガロース上でのスフェロイド培養を試みたが、再現よく3次元培養できなかったため、低接着性高分子ポリマーを利用した足場型3次元培養システムの利用を検討している。実験計画(6)ーAKT阻害剤のNISの細胞膜上の発現に対する効果の検討: GFPタグ標識したNISを強制発現させたサル腎細胞株COS7を用いた予備実験の結果、AKT阻害剤添加により、3倍程度の細胞表面のNIS-GFPの発現の増加がウエスタン・ブロットで確認されている。

NISの細胞表面上への発現を視覚化するため、MKN45細胞にGFPタグ付きNISを強制発現させ共焦点レーザー顕微鏡で観察したが、個々の細胞への遺伝子導入効率に大きな差があり、NISの細胞膜上への局在について、定量性の点で再現よく評価できなかった。現在、導入効率の改善とフローサイトメーターによるNIS発現細胞のソーティングによる再現性の担保を試みている。分化型甲状腺癌の放射性ヨード治療は、腫瘍細胞におけるナトリウム/ヨード共輸送体(Na/I Symporter, NIS)の発現に依存しており、NISを介した放射性ヨードの腫瘍細胞への選択的な取り込みは腫瘍を標的とした細胞毒性をもたらす。われわれは、胃癌細胞を用いた予備実験で、細胞分化に重要なレチノイド(ビタミンA誘導体)がNIS遺伝子の発現を増加させ、放射性ヨードの取り込みを有意に上昇させることを見出している。この結果は腫瘍細胞特異的なNISの発現誘導を利用した胃癌に対する標的治療の可能性を示唆するが、その実現のためには、胃癌細胞におけるNIS発現誘導のための細胞内シグナル伝達を解明し、より特異的かつ効率的にヨードの取り込みを誘導する必要がある。2015年度には、レチノイドのNIS遺伝子発現誘導効果のメカニズム検索の過程で、タンパク質合成阻害剤によるNIS発現誘導を複数のがん細胞株で確認したが、2016年度には、胃癌細胞株および乳癌細胞株において、さらに他の数種のタンパク質合成阻害剤でも同様の効果を確認した。そのうち2種のタンパク合成阻害剤は臨床で使用される薬剤であり、今後、放射性ヨウ素治療におけるNIS発現増強剤としての臨床応用の可能性についても検討すべきであると考えられた。さらに、本研究申請後に新たに当施設に導入された次世代シークエンサーによるエクソーム解析により、レチノイド刺激およびPI3Kカスケード阻害で2倍以上の発現変化をきたす1000以上の遺伝子を胃癌細胞株で同定した。今後、レチノイド刺激によく反応する乳癌細胞株のエクソーム、並びにトランスクリプトーム比較により、NIS発現増強に必要な因子の同定をRNAレベルで試みる予定である。実験計画(1)および実験計画(2)の実行により、MKN45胃癌由来細胞株におけるNIS発現誘導にはレチノイド受容体RXRが重要であること、AKT阻害剤、とくにmTORC阻害剤が発現誘導の増強に有効であることが示された。さらに、蛋白質合成阻害剤によりNIS遺伝子発現誘導が認められ、それが多くの癌細胞で再現されたことから、今まで明らかとなったRXRやAKTシグナル伝達と、蛋白質合成阻害剤により惹起されるシグナルとのクロストークがあるのかが興味の対象のひとつとなり、RNAレベルでの包括的検討についての予備実験はほぼ完了している。研究計画(3)“3次元培養条件下でのNIS発現誘導の検討"について、低接着性高分子ポリマーを利用した足場型3次元培養システムを利用したが、今のところレチノイド刺激に対するNIS発現誘導については再現性のある結果が得られていない。引き続き培養条件などの検討が必要である。実験計画(6)ーAKT阻害剤のNISの細胞膜上の発現に対する効果の検討: GFPタグ標識したNISを強制発現させたサル腎細胞株COS7を用いた予備実験の結果、AKT阻害剤添加により、3倍程度の細胞表面のNIS-GFPの発現の増加がウエスタン・ブロットで確認されている。
アカパンカビのATP-GTP結合蛋白質を含む信号伝達系遺伝子の解析

アカパンカビ膜分画に多数のNTP結合蛋白質を見い出した。Ras特異抗体を用いて、21kDa,24kDa,27kDa蛋白質をウエスタンブロットにより検出した。そのうち26kDa蛋白質を部分精製した。26kDa蛋白質はATP,GTP,CTP,UTPの結合能を持ち、[γ^<-32>P]ATP,[γ^<-32>P]GTPからの自己リン酸化がなされた。v-Ha-rasをプローブにし、ras関連遺伝子NC-ras2A,NC-ras2Bをクローニングした。NC-ras2AについてはcDNAもクローン化され、塩基配列も決定された。NC-ras2BはNC-ras2Aに相似するが異なる遺伝子であり、部分に塩基配列が決定された。これらの遺伝子はras蛋白質のもつ全ての共通配列を含んでいた。菌糸の膜分画を用いてUV-A光(355nm)1秒照射によりATP,GTPを結合する58kDa,77kDa,83kDa,129kDa蛋白質を見い出した。83kDa蛋白質へのGTPの結合はトランスデューシンC末特異抗体で、UV-A光の信号が入らなくなった。トランスデューシン-1及び-2のC末mRNAを用いて、アカパンカビのゲノムライブラリーより5つのクローンを単離した。そのうち1つはNC-ras2Aにも強い相同性を示した。このクローンの塩基配列決定を進めている。さらに膜分画を用いて、青色光(465nm)1秒照射により、0°C5秒でリン酸化の促進される15kDa蛋白質が見い出された。光に感受性の変異株であるwc-1,wc-2変異株では、この15kDa蛋白質のリン酸化が見られなかった。しかし両者の膜分画を混合すると光信号によりリン酸化の上昇が見られた。これらのリン酸化はATPaseの阻害剤であるDCCD,DES,オリゴマイシンにより、光信号の入りが阻害された。さらに15kDa蛋白質のリン酸化と共役して70kDa蛋白質のリン酸化が存在する可能性が示唆されている。70kDa蛋白質のリン酸化はアルカリ性に耐性で、ヒスチジンのリン酸化と考えられる。これは大腸菌のcheA(73kDa),cheY(15kDa)と相似しており、F_0F_1-ATPaseとの関連において今後解決されていかねばならない問題である。a)アカパンカビの菌糸より膜を含む粗抽出液を調製した。1%ルブロ-ルで処理後、ゲル濾過で分子量により分画した。得られたAGN16分画はおよそ30種の( ^<35>S)ATPγS,( ^<35>S)GTPγSを結合するATPーGTPー結合蛋白質が見い出された。

その内12種類が内在性ADPーリボシル化酵素によりADPーリボシル化された。b)アカパンカビ菌糸から0.25M蔗糖存在下に膜分画及び可溶性分画を調製した。(αー^<32>P)ATP,(αー^<32>P)GTPを結合後UV照射をし、これらの結合蛋白質にクロスリンクさせた。その試料をSDSーPAGEで分画し、オ-トラジオグラフィをとった。およそ90%の結合蛋白質が(αー^<32>P)ATPおよび(αー^<32>P)GTPを結合した。抗Haーras抗体を用いてウェスタンブロットすると23KDに濃いバンドと他に数本のバンドが得られた。これらに対応して、(αー^<32>P)ATPおよび(αー^<32>P)GTP結合活性を認めることができた。c)Haー<ras>___ーDNAをプロ-ブとしてゲノムDNAバンクより<ras>___ー関連遺伝子をクロ-ニングした。ヌクレオチド配列の決定により、イントロンの存在が明かとなった。N末端の近傍にATPー結合の共通配列GlyXGlyXXGlyを見い出した。Altschulerら(1990)によりクロ-ンされた<ras>___ー関連遺伝子はcDNAクロ-ンで、24KDと計算された。これもATPー結合の共通配列を含み上記23KD蛋白質との関連が考えられる。d)アカパンカビ膜分画にサイクリックフォスフォジエステラ-ゼを見い出した。この酵素は10mM MgCl_2存在下に、0.1mM GTPにより活性化され、0.5mM ATPにより活性が抑制された。光信号はATPーGTPー結合蛋白質を経由してこの酵素の活性制御する可能性がある。e)アカパンカビの核を調製し、NotIでDNAを切断後、パルスフィ-ルド電気泳動法によりDNAを分画した。各DNA断片を既にクロ-ンされた遺伝子を用いてその染色体上の位置を決定しつつある。a)アカパンカビ菌糸膜分画に(αー^<32>P)ATP,(αー^<32>P)GTP,(αー^<32>P)CTP,(αー^<32>P)UTPを結合する25種のNTP結合蛋白質を見い出した、(αー^<32>P)ATPの結合は10^<ー4>10^<ー3>M GTPにより同濃度のATP,CTP,UTPより弱く阻害された.(αー^<32>P)GTPの結合は10^<ー4>10^<ー3>M ATP,CTP,UTPにより同濃度のGTPより強く阻害された(α^<ー32>P)CTPの結合は10^<ー4>10^<ー3>M CTPによってのみ強く阻害された.(αー^<32>P)UTPの結合は34種のNTP結合蛋白質を除いて他のNTPにあまり大きな影響を受けなかった、これらのNTP結合蛋白質は複数のNTPを相互にアロステリック効果で制御し合い結合することが明かとなった従来のGTP結合蛋白質の定議に合う結合蛋白質は存在しなかった.b)Haーras抗体に交叉反応を示す26KDrasー関連蛋白質を精製した.26KD蛋白質は(αー^<32>P)ATP,(αー^<32>P)GTP,(αー^<32>P)CTP.(αー^<32>P)UTPを結合した,(αー^<32>P)ATPの結合はATPにより強く阻害されるが,(αー^<32>P)GTPの結合は10^<ー4>M ATPにより10^<ー4>M GTPよりも強く阻害された.26KDrasー関連蛋白質遺伝子がクロ-ンされたが,ATP結合の共通配列がGTPase部位に存在した.
ドイツにおける移民の社会統合をめぐる問題：学校適応の「難しさ」に着目して

本研究は、ドイツにおける移民の社会統合をめぐる問題を、移民の子どもの学校適応の「難しさ」に着目しながら論じるものである。2000年代に入り、ドイツでは教育制度の整備を進め、移民背景をもつ子どもに努力を求めることでの統合が目指されてきた。排外主義的な流れが強まる当該社会では、統合はますます重要な「移民の」問題として位置づいているが、本研究は移民側のいわば主体的努力を求める・促す態度への批判的再考が刷新され続けるべきだという問題意識に立ち、学校での成績不振や不適応の問題を抱える移民の子どもをめぐる問題を個人に起因する問題としてではなく、受け入れ社会の問題として論じるものである。
AEによる木材加害昆虫の食害行動の解析

木材加害昆虫の摂食行動がアコースティック・エミッション(AE)の発生とリアルタイムに対応していることが明確になったので、この原理を用いてその行動様式を追跡し、解析した。すなわち、立木の樹皮下を加害するスギカミキリ、乾材害虫であるヒラタキクイムシ、それにシロアリのいずれについても、発生AEをモニタリングすることによって摂食行動を捕捉することに成功した。また、ファイバー照明装置の付いたCCDマイクロカメラを用いて、昆虫口器の動作による木材の微小破壊の発生状況を、食害によって木材から発生するAEとを対応させて観察することができた。シロアリについて明らかになった成果は次の通りである。(1)AE事象数と木材の食下量とはほぼ対応したが、加害される木材の密度が高い程発生する事象数は少なかった。(2)試験開始後、数時間数十時間でAE事象数は急増し、その後一定値まで低下するが、数日経過後再び上昇する。その後、このリズムを繰り返した。(3)兵蟻を全く移入しない場合、移入区より明らかにAE事象数は少なく、これに対応して木材の食下量も小さかった。また、兵蟻の割合が標準値より多い場合においても、AE事象数は少なくなったが、経過日数につれて逆転し、この傾向は野外で採取したシロアリで著しかった。試験途中で兵蟻を投入した場合は、発生するAE事象数に明らかな影響は認められなかった。(4)周囲の温度によって事象数は変化し、基準温度より低下するにつれ減少し、12°Cでは発生は停止した。一方、基準温度より上昇させると32°C付近までは増加する場合も認められるが、その後は一般的に減少し38°Cを越えると再び停止した。その後は、基準温度付近にまで下げてもAEは再び発生しなかった。(5)目が退化しているといわれているイエシロアリ食蟻および兵蟻であるが、その食害活動は明らかに照明光によって影響を受け、一旦停止ないし低下する。しかし、照明下であっても食害活動は再び回復した。今後、この手法を応用して木材を加害する昆虫の生態をより明らかにするとともに、環境と共存した防除システムの確立を進めていきたい。木材食害活動をAE(アコースティック・エミッション)の電気信号として捉える手法を、広く木材加害昆虫に適用する技術を開発するため、今までシロアリで明らかにした測定システムを基本にして、乾材害虫であるヒラタキクイムシと生材害虫であるスギカミキリについて、発生AEの波形ならびに伝播特性を明らかにし、的確に測定できるラインの設定値を決定した。食害時に木材内部で発生する微小破壊に伴ってAEが発生し、そのモニタリング法によって、いずれの昆虫の食害活動も検出できることが明らかになったが、生材害虫の場合は、木材中の水分の影響によってAEが減衰しその伝播距離が制限された。また、ファイバー照明装置の付いたCCDマイクロカメラを用いて、シロアリ、乾材害虫、生材害虫について、口器の動作による木材の微小破壊の発生状況と、食害によって木材から発生するAEの対応関係について観察と解析を行った。さらに、設定された測定ラインを用いて、主としてシロアリを対象に、AE事象数と食害量との対応、昆虫の齢や階級構成比率による摂食行動量の変化、樹種・材質の相違による食害活動の変化、環境条件の食害活動への影響を実験室的に検討した。

その結果、イエシロアリの階級構成比率が摂食行動量へ与える影響については、摂食活動を行う職蟻に対する被扶養階級である兵蟻の割合が、一定値(自然状態では約10%)をとる場合を最高にして、それより増加あるいは減少すると、いずれの場合も摂食活動量は低下した。環境条件と食害活動の関係を実験室的に明らかにする一つの試みとして、周囲温度の影響を検討した結果、27゚C付近を最高にして、その上下いずれの場合も差が広がるにつれて摂食活動量は低下した。昨年度の研究によって、木村加害昆虫の摂食行動がアコースティック・エミッション(AE)の発生とリアルタイムに対応していることが明確になったので、この原理を用いてその行動様式を測定し、解析した。すなわち、立木の樹皮下を加害するスギカミキリ、乾材害虫であるヒラタキクイムシ、それにシロアリのいずれもについて、発生AEをモニタリングすることによって摂食行動を補捉することに成功した。シロアリについて明らかになった成果は次の通りである。(1)AE事象数と木材の食下量とはほぼ対応したが、加害される木材の密度が高い程発生する事象数は少なかった。(2)試験開始後、数時間数十時間でAE事象数は急増し、その後一定値まで低下するが、数日経過後再び上昇する。その後、このリズムを繰り返した。(3)兵蟻を全く移入しない場合、移入区より明らかにAE事象数は少なく、これに対応して木材の食下量も小さかった。また、兵蟻の割合が標準値より多い場合においても、AE事象数は少なくなったが、経過日数につれて逆転し、この傾向は野外で採取したシロアリで著しかった。試験途中で兵蟻を投入した場合は、発生するAE事象数に明らかな影響は認められなかった。(4)周囲の温度によって事象数は変化し、基準温度より低下するにつれ減少し、12°Cでは発生は停止した。一方、基準温度より上昇させると32°C付近までは増加する場合も認められるが、その後は一般的に減少し38°Cを越えると再び停止した。その後は、基準温度付近にまで下げてもAEは再び発生しなかった。(5)目が退化しているといわれているイエシロアリ食蟻および兵蟻であるが、その食害活動は明らかに照明光によって影響を受け、一旦停止ないし低下する。しかし、照明下であっても食害活動は再び回復した。
中間的スケールにおける脳情報処理の一般ネットワーク数理モデルの構築及びその解析

脳の機能には様々なスケールの現象が関わっており、ミクロレベルの電気的、化学的な信号処理から、マクロレベルの行動変化や刺激応答までの間には、大きな隔たりがある。このことは、脳の情報処理メカニズムを明らかにする上で問題となっている。本研究は、脳の中間レベルのスケールに着目し、そこで生じる複雑現象を対象とした新たな数理モデルを構築し解析することで、脳の機能解明や応用に役立てることを目的とする。本年度は、これまでの研究期間に得られた知見をもとに、新たに表出した課題を解決しつつ、引き続き数理モデルの構築、動作特性の分析、理論の整理、モデルの評価、応用研究等に従事し、成果をまとめることを目指した。これまでの2年間の研究により、大規模なニューラルネットワークを対象とした効率的な計算法や可視化法が整ってきた。その結果、メゾスケール系に特有の現象として、複雑な進行波が発生することも分かってきた。これらの成果を英文の雑誌論文や和文の解説論文などにまとめた。また、進行波発生のメカニズムの一つとして、神経細胞の不応性が重要ではないかと考え、物理学の分野で用いられているスピンモデルに不応性を加味したメゾスケールモデルを提案した。また、大規模なニューラルネットワークが計算できるようになった利点を活かし、複雑な構造を持つ記憶集合を埋め込んだ場合の動作特性を調べた。さらに、ネットワークの複雑な動作のメカニズムを明らかにするため、ニューロン数が1の場合から徐々に数を増やしていった際に、過渡期長や周期長などの統計量がどう変化するかを調べた。最後に、動的ベイジアンネットワークモデルを用いて、脳の情報処理の2大要素である「入力の解釈」と「出力の計画」が、ベイズ推論の観点から統一的に理解できることを示した。脳の情報処理メカニスムを解明するにあたり、ミクロレベルの電気的、化学的な信号処理と、生体の行動として観測されるマクロな現象との間には大きなギャップがあることが問題となっている。本研究は、それらの中間にあたるスケールで生じるさまざまな現象を適切に記述するための数理モデルの開発及びその解析を目的とするものである。本年度は、これまでの研究で得られていた数理モデルをベースとして、理論的により洗練された新たなモデルを構築することを計画していた。当初の計画段階では、離散時間系での進展を予想していたが(例えば、動的ベイジアンネットワークやマルコフ連鎖の分解表現といった枠組みを用いた再定式化など)、それらは現状まだあまり成果が出ていない。一方で、連続時間系において大きな成果が得られた。脳の中間的スケールの重要な現象の一つに、「結びつけ」というものがある。本研究では、この現象に対して新たな連続時間系の数理モデルを提案し、それを用いて、「局所的アトラクタと大域的アトラクタの関係」という新たな観点に立った解釈を示すことに成功した。また、中間的スケールにおいて生じる諸現象を数値実験によって確認するという目的で、並列計算を用いた大規模な神経回路のシミュレーションにも取り組んでいる。これにより、ネットワークの構造変化や各素子の内部パラメータなどの違いによって、大規模な「アトラクタ交代」や、近年神経科学の分野で注目されつつある「進行波」などの諸現象が観測された。脳の情報処理メカニズムを解明するにあたり、ミクロレベルの電気的、化学的な信号処理と、生体の行動として観測されるマクロな現象との間には、大きなギャップがあることが問題となっている。本研究は、それらの中間にあたるスケールで生じるさまざまな現象に対して、それを適切に記述するための数理モデルの開発及びその解析を目的とするものである。本年度は、前年度に引き続き、新たな数理モデルの構築及びその解析を行うことに加えて、得られた数理モデルに対して、その生物学的な根拠及び妥当性を評価し、また、工学的な問題解決の手段としての応用にも取り組むことを計画していた。まず、前年度に提案した「結びつけ」現象を定性的に記述する数理モデルに関して、その生物学的対応や解釈をより詳細に調べて整理し(例えば、局所的な神経細胞群の活動のパターンとアトラクタとの対応関係など)、雑誌論文としてまとめた。また、前年度に開発した、並列計算による大規模な神経回路のシミュレーション技術を利用し、カラー画像をネットワークに記憶させ、神経ダイナミクスによってそれらを取り出す手法を提案した。この手法は神経回路網を用いた画像処理などへの応用に役立つものと考えられる。また、ネットワークの有する複雑なダイナミクスの基盤となっている「カオスの骨格」についても調べ、それが非常に長い周期軌道であることを明らかにした。また、近年「能動的な相関除去」という新たな現象が見つかった。この能動的な相関除去が生じている状況においては、多層に連なる神経細胞群の挙動が、単純な一次元写像の反復によってよく近似されうることを発見した。この知見は、細胞集団の機能を単純な写像で記述するメゾスケールモデルの妥当性を支持するものである。最後に、モジュール構造を持つ神経回路網を考え、それが高いノイズ耐性と計算能力を備えることを示した。

本年度は、これまでの研究期間に得られた知見をもとに、新たに表出した課題を解決しつつ、引き続き数理モデルの構築、動作特性の分析、理論の整理、モデルの評価、応用研究等に従事し、成果をまとめることを目指した。これまでの2年間の研究により、大規模なニューラルネットワークを対象とした効率的な計算法や可視化法が整ってきた。その結果、メゾスケール系に特有の現象として、複雑な進行波が発生することも分かってきた。これらの成果を英文の雑誌論文や和文の解説論文などにまとめた。また、進行波発生のメカニズムの一つとして、神経細胞の不応性が重要ではないかと考え、物理学の分野で用いられているスピンモデルに不応性を加味したメゾスケールモデルを提案した。また、大規模なニューラルネットワークが計算できるようになった利点を活かし、複雑な構造を持つ記憶集合を埋め込んだ場合の動作特性を調べた。さらに、ネットワークの複雑な動作のメカニズムを明らかにするため、ニューロン数が1の場合から徐々に数を増やしていった際に、過渡期長や周期長などの統計量がどう変化するかを調べた。最後に、動的ベイジアンネットワークモデルを用いて、脳の情報処理の2大要素である「入力の解釈」と「出力の計画」が、ベイズ推論の観点から統一的に理解できることを示した。
近代日本における美意識の変容と文化的越境

近代日本における美意識の変容と文化的越境を東アジアを視野に入れて研究を進めた。とりわけ近代日本と朝鮮にどのような近代美学が創出されたかに注目した。その成果は2016年度3月にシアトルで開催されたアジア学会年次大会、2016年8月のプノンペンのワン・アジア・コンベンション、2017年6月のAAS in Asia Conference、2018年3月にローマ大学で学会発表をした。また2017年5月にはアメリカ、韓国、中国からの研究者と国際シンポジウムを開催し、その成果を『言語社会』12号に掲載した。こうした研究を通して伝統的美意識とモダニティの対立のあり方の類似点と相違点を理解することができた。2015年度においては、まず日本の伝統的美意識の枠組みがどのように成立したかを考察した後に、それに対するモダニズムの挑戦のあり方を考察することを予定していた。しかし、研究を進めるうちに、美意識の問題の底にある国民意識の問題、とりわけ民俗学的にとらえられた国民意識の問題を考察する必要に迫られた。なぜなら、美意識は結局のところ「国民」の当為のひとつの形式として成立することがわかったからである。韓国の延世大学に招聘されて行った講演「言語が開く<日本>という空間ー柳田国男と折口信夫の場合」は、まさにこの問題に取り組んだ研究の成果である。この講演では、柳田国男と折口信夫という近代日本を代表する二人の民俗学者が、どのように「日本」という空間を想像していたかを、かれらの著作を貫く「言語」への眼差しから追究したものである。その結果、このような「国民」を作り上げる言語空間が、近代の「美」の前提にあったことが明らかとなった。伝統的美意識に対するモダニズムの挑戦については、モダニズムの舞踏家の弟子であった崔承喜における美意識と民族意識との交錯の問題を追究した。その成果は、2016年3月31日から4月3日までアメリカのシアトルで開かれた2016年アジア学会年次大会で発表したが、発表日が2016年4月1日であったため、2016年度の研究成果に回すこととした。とはいえ、この発表の実質的部分は2015年度の業績として数えられる、この発表では、崔承喜の舞踏がモダニズムの流れにありながら、日本と朝鮮、民族性と近代性などさまざまな相克のなかから作り上られていったことを明らかにした。論文としてまとめることはできなかったものの、研究成果を一つの招待講演を行うとともに、国際学会での学会発表の準備を行うことができたことは、研究が順調に進展していることを示している。前者の招待講演は、韓国の延世大学人文学部の専門的研究者の前で行ったものであるので、高度な内容の水準を保つことができ、しかも国際的な研究交流という面でも大きな意義があった。後者の学会発表については、2016年4月に開催されるアメリカ・アジア学会年次大会での発表のために、1940年代に日本で活躍した朝鮮出身の舞踏家崔承喜についての発表資料を作成した。この発表は、美意識と植民地主義、モダニズムと越境の関係を考察する研究の一環である。平成28年度は近代東アジア、とりわけ近代日本と朝鮮にどのような近代美学が創出されたかに注目した。その成果は、平成28年3月31日から4月3日までアメリカのシアトルで開催された2016年アジア学会年次大会において、“Choi Sunghui(1911-1969): A Korean Dancer of Diaspora in the Crossroad of Modernity, Ethnicity, and Cold-war"と題して発表した。そこでは、まず植民地朝鮮でどのように宗主国日本からモダニズムが受容されたのかという問いを立て、植民地主義と日本的ロマン主義のアンビバレントな交差と相克を分析した。平成28年8月5日、6日にカンボジアのプノンペンで開催された「ワン・アジア・コンベンション」では、崔承喜と彼女のモダンダンスの師匠である石井漠の作品をModernityとEthnicityの観点から分析した。その発表の成果は2017年7月には出版される予定で、すでに入稿済みである。「近代日本と朝鮮における美意識の変容と文化的越境」の課題を進める中で、「帝国」という政治的、地理的、文化的装置が根幹にあることを再確認した。平成29年3月20日(月)、21日(火)、22日(水)の三日間にわたって、アメリカのUCLAで開かれた国際シンポジウム“Empire of Others"はまさにこの問題を真摯に議論したシンポジウムだった。研究代表者は言語の観点から、"Language and the ideology of the modern emperorsystem"と題した発表を行った。文化的越境を現在の視座から、考えてみる作業も試みてみた。その成果は「日本語教育」「多文化共生」「言語とナショナリズム」などのテーマのもとに、学会ないしシンポジウムで発表した。「近代日本の美意識と文化的越境」の問題を追究するなかで、美意識の変容、帝国と植民地主義、言語とナショナリズムなどのテーマを柱として立て、学会やシンポジウムにおいて年間6本の研究発表を行った。そのうち4つは国外であり、研究成果の国際的発信を積極的に進めることができた。なかでもアメリカのUCLAで開催された国際シンポジウムで行った発表では、国際的に著名な研究者との意見交換を行うことができ、今後の研究の進行を決定づけるほどのインパクトを受けた。