hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ボードリヤールの社会理論の再構成、及びその受容と影響についての批判的検討

本研究の課題は「ボードリヤールの社会理論の再構成,及びその受容と影響についての批判的検討」である。研究は具体的には(1)ボードリヤールの一次文献を精査して,(2)研究の手薄であった「悪」「不可能な交換」といった諸概念を明確化し,(3)ボードリヤールの社会理論を情報社会論的な視点から理論的に再構成する。さらに,(4)ボードリヤールの社会理論の多方面での影響を整理して,その社会的,文化的意味を明らかにし考察する。以上の研究については,学会発表,学術論文として概ね成果をあげることができた。とはいえ,(4)は十分な成果をあげたとはいえず,本研究の最終目標である著書執筆を果たせず,今後に課題を残した。本研究の課題は「ボードリヤールの社会理論の再構成、及びその受容と影響についての批判的検討」である。研究の具体的な取り組みの概要は以下のとおりである。(1)ボードリヤールの未邦訳を含む文献(一次文献)を精査して、(2)研究の手薄であった「悪」「不可能な交換」といった諸概念を明確化し、(3)ボードリヤールの社会理論を情報社会論的な視点から理論的に再構成する。さらに、(4)ボードリヤールの社会理論の多方面での影響を整理して、その社会的、文化的意味を明らかにし考察する。なお、(1)(2)(3)の研究では、フランス思想、文化人類学、メディア論といった関連する分野の諸研究(関連文献)とボードリヤールの社会理論との関係性を明らかにするとともに、ボードリヤールに関する先行研究(二次文献)を吟味することも構想している。平成25年度は研究構想のうち、(1)(2)(3)について順次取り組んできた。まずは、前年度から引き続き、ボードリヤールの原著、英訳書、邦訳書(一次文献)、二次文献、関連文献を収集し、(1)(2)については、文献を順次精査するとともに、諸概念の明確化に取り組んだ。一次文献の精査はひととおり終了したが、諸概念を明確化する作業は思いのほか難航して現在にいたっている。中間的な成果についてはは平成25年度に学会発表、論文としてまとめることはできた。研究の具体的な取り組みの概要は以下のとおり。(1)ボードリヤールの未邦訳を含む文献(一次文献)を精査して、(2)研究の手薄であった「悪」「不可能な交換」といった諸概念を明確化し、(3)ボードリヤールの社会理論を情報社会論的な視点からの理論的に再構成する。平成24年度は研究構想のうち、(1)(2)(3)について順次取り組んできた。まずは、ボードリヤールの原著、英訳書、邦訳書(一次文献)、二次文献、関連文献を収集し、(1)(2)については、文献を順次精査するとともに、諸概念の明確化に取り組んだ。一次文献の精査はひととおり終えたものの、関連文献、二次文献の吟味は済んでいないこともあり、諸概念を明確化し、関連する分野の諸研究とボードリヤールの社会理論との関係性を明らかにできたわけではない。こうした前段階的な研究があまり進んでいないため、(3)については、方向性は漠然とは見えているものの、研究の端緒を開くにとどまった。以上のことから、平成24年度は、学会報告、論文として研究成果を挙げられていない。だが、平成24年度が研究期間の初年度であること、社会理論研究の性格上、研究成果をすぐに挙げられるとは考えにくいこと、研究成果の発表スケジュールを考慮すると、目立った研究成果がまだないことは残念ではあるが、致し方ないように思われる。

なお、(1)(2)(3)の研究では、フランス思想、文化人類学、メディア論といった関連する分野の諸研究(関連文献)とボードリヤールの社会理論との関係性を明らかにするとともに、ボードリヤールに関する先行研究(二次文献)を吟味することも構想している。平成26年度は研究構想のうち、(1)(2)(3)(4)について網羅的に取り組んできた。具体的には、これまでどおり、ボードリヤールの二次文献、関連文献を収集し、(1)(2)(3)については、文献をさらに深く精査するとともに、諸概念の明確化に取り組み、ボードリヤールの社会理論を情報社会論として全体的な構図を描くことにある程度は成功したと思われる。これらについては学会発表、論文として研究成果をまとめた。他方、(4)については、文献や資料を精査するといった研究計画を十分に消化できたとはいえず、学会発表、論文として成果をまとめることができなかった。こうしたこともあり、本研究全体の成果をまとめた著書の執筆という本研究の最終目標は果たせなかった。それでも、(4)の取り組みをとおして、今後の研究の方向性、具体的な取り組みがはっきりしたことは収穫であった。社会理論,消費社会学,情報社会論,社会調査法本研究は、フランスの社会学者、社会理論家であるボードリヤールの(1)文献精査、(2)諸概念の明確化、(3)理論的再構成、(4)他分野への影響の考察に大別される。このうち、平成25年度は(1)(2)(3)を中心に取り組んだ。(1)(2)は研究については中間的な成果をあげた。(3)については平成25年度後半から研究に取り組んでいる段階であり、(4)については、研究の端緒を開くにとどまり、成果があがっているとはいえない。以上より、研究の現在までに達成度は「やや遅れている」と判断する。その理由としては、第一に、本研究が社会学の理論研究、あるいは社会理論研究のため、分野の性格上、短期間で研究成果をあげにくいこと、第二に、研究成果の発表スケジュール上の問題、すなわち、研究成果の発表申請が年度の前半に集中しているため、年度の後半で研究成果を発表する機会が得にくいことが影響したと思われる。本研究プロジェクトは、フランスの社会学者、社会理論家であるボードリヤールの(1)文献精査、(2)諸概念の明確化、(3)理論的再構成、(4)他分野への影響の考察に大別される。このうち、平成24年度は(1)(2)(3)を中心に取り組んだ。とはいえ、目立った研究成果は挙げられておらず、(1)(2)は研究の途上段階、(3)は研究の端緒を開くにとどまった。以上のことから、研究の現在までに達成度は「やや遅れている」と判断する。達成度については決して満足いくものではないが、その理由のうち、交付申請書の実施計画からみて想定できなかったものとしては、学内業務などの臨時的な負担増により、研究時間の確保が思いのほか、難しかったことがあげられる。本研究は、フランスの社会学者、社会理論家であるボードリヤールの(1)文献精査、(2)諸概念の明確化、(3)理論的再構成、(4)多分野への影響の考察に大別される。今後も研究計画やその方法を変更することはせずに、平成26年度は(3)(4)についても集中的に研究し、本研究全体の総括的な成果をあげられるようにしたい。
雌性生殖器官における組織幹細胞システムの分子メカニズムの解明

本年度は、初年度の研究成果に基づいて得られたヒト子宮内膜sidepopulation (endometrial SP : ESP)細胞の組織幹細胞特性について、細胞分子生物学的アプローチを用いて、より詳細な検討を行った。分離したESPおよびnon-ESPを免疫不全マウスへ移植したところ、non-ESPとは異なりESP移植部位において、内膜特性のひとつであるプロゲステロン受容体が陽性の腺管構造を有する子宮内膜様組織の再構築が認められた。現時点で24個体に移植を行ったが、内膜組織の各コンポーネント(例えば血管のみ)より成る様々な組織も構築されることが判明し、その多様性はnon-ESPに比べてESPで高かった。ESPおよびnon-ESPよりRNAを抽出し、GeneChip^<【○!R】>による遺伝子発現プロファイリング解析を行ったところ、non-ESPに比べてESPに強く発現している遺伝子群に、ABCG2やCD34などの一般幹細胞マーカーが含まれていた。ESPのin vitroでの単独培養は困難であったが、様々な細胞との共培養系でESPは増殖可能であり、特にOP-9細胞をフィーダーにした場合、安定的な増殖が得られただけでなく、ESPは神経様細胞などの異なる細胞系譜へ分化転換し得た。以上、移植実験、発現遺伝子プロファイル、およびin vitro培養実験の結果より、ESPが高い幹細胞的特性を有することが明らかとなった。同様のアプローチで雌性生殖器官のひとつである子宮筋よりSPを分離し解析した結果、子宮筋SPも組織幹細胞ポテンシャルを有するというデータを得ている。このように雌性生殖器の幹細胞は、生殖器由来疾患の発生・進展機構の解明、ならびに各組織に共通する組織再生メカニズムの解明に貢献するのみならず、雌性生殖器の機能不全・欠損に対する再生医療における医療資源になり得る可能性が示された。本年度は、ユニークな再生ポテンシャルを保有する子宮内膜組織における成体幹細胞の同定・分離・培養技術の確立について、特に申請時に挙げた以下の点に焦点を絞り検討を行った。1.子宮内膜幹細胞の同定・分離(1)他の幹細胞に共通なマーカーによる同定・選別:既知の他臓器幹細胞マーカー(例えば神経幹細胞マーカーMusashi-1等)に対する抗体を用いて免疫組織染色による位置的・時間的な幹細胞局在の確認を行った。しかし既知幹細胞マーカー陽性細胞は、幹細胞が比較的豊富にあると考えられる基底層には必ずしも局在しておらず、内膜組織構成細胞の多様性を考慮に入れた戦略の必要性が判明した。(2)Side Population (SP)法の応用:Hoechst33342染色によるSP分離方法を用いて、子宮内膜から高い幹細胞活性を持つことが予想される細胞集団の同定分離を試みた。内膜組織からのSP細胞分離条件の検討を重ねた結果、安定的にSP細胞を分離する方法を確立した。2.選別細胞が幹細胞であることの証明前記1.(2)によって分離されたSP細胞集団はCD31/CD45の発現パターンにより+/+,+/-,-/-の3つの分画に分けられた。免疫不全マウスへのSP細胞移植実験では、構築頻度は低いものの、SP移植部位に腺管構造を有する子宮内膜様組織の再構築が認められた。3.幹細胞維持および分化のためのin vitro培養系の確立自己複製能と相対的な不死化能の証明のため、各種増殖因子を含んだ培養カクテルやマトリゲルを含めた細胞外基質存在下でSP細胞の長期培養系の確立を目指したがin vitroの培養は極めて困難であることが判明した。現在共培養を中心とした新しい培養システムの開発に加え、さらに様々な培養カクテルを用いてin vitro培養が可能か否かを検証中であり、これは次年度も引き続いて行う。

このように雌性生殖器の幹細胞は、生殖器由来疾患の発生・進展機構の解明、ならびに各組織に共通する組織再生メカニズムの解明に貢献するのみならず、雌性生殖器の機能不全・欠損に対する再生医療における医療資源になり得る可能性が示された。
ドナーアクセプター型シクロオクタテトラエン誘導体の合成と光機能性有機材料への応用

本研究では,スルホニル基を電子求引基として利用した,ドナーアクセプタービニルスルホン型色素を合成した.この合成プロセスに,ワンポット法やワンショット法を利用することで,目的とするビニルスルホンを効率良く合成することに成功した.また,末端アセチレンのシリル保護基,あるいは,ホスホリル保護基を利用することで,効率良くビニルスルホン誘導体へ変換できることが分かった.こうして得られたビニルスルホン色素に対して,新たな機能を付与するために脱スルホン化反応を検討した.様々な光触媒存在下,光照射を行ったところ,高出力なキセノンランプを用いて反応を行った場合に低収率ではあるが,目的とする脱スルホン化が進行した.アルコキシ基など様々な置換基を有する誘導体にも本反応を適用可能であった.現在は,他の光触媒を用いたり,より簡便で安価なLEDを光源に用いた実験装置で本反応を検討している.こうした一連の脱スルホン研究の過程で,活性金属表面を用いた脱シリル反応にも取り組んだ.9,10位にシリルアセチレンを有するアントラセンを原料に用いて脱保護を行ったところ,得られた末端アセチレンは,すぐさま分解し,次の反応に利用することができなかった.そこで,専門家の力を借りながら,活性な金属表面を用いて脱保護,続くホモカップリングによる連結反応を行った.高真空・極低温下で金属表面上にシリルエチニルアントラセンを蒸着し,続いてアニーリングしたところ,目的とする脱シリル化-オリゴマー化が進行した.生成物は,高分解能走査型顕微鏡で確認した.また,詳細な顕微鏡観察と量子化学計算から本反応が,これまでに知られていない分子内シリル転位を含むことを明らかにした.入手が本研究では、ドナーアクセプター型シクロオクタテトラエン誘導体の合成法の確立とその光機能性を明らかにすることを目的とする。今年度は、シクロオクタテトラエン骨格の簡便合成およびその誘導体化法を確立した。また、基本的な光物性測定を完了した。これらの結果を国際シンポジウムを含む国内の学会で発表した。現在はこれらの結果を論文としてまとめつつある。有機合成今年度はシクロオクタテトラエンテンプレート骨格の実用的な合成法を確立し、その誘導体化反応を確立することで、比較的簡便な実験操作で光物性を測定するために必要なある程度まとまった量の化合物を合成することに成功した。また、溶液および固体状態で紫外可視吸収および発光スペクトルを測定し、置換基が及ぼす効果について明らかにした。とりわけ、ドナーアクセプター型誘導体へ導くことで強い蛍光発光を示すことを明らかにするとともに、溶液中でのdual emission (二重発光)を観測した。本研究ではドナー・アクセプターを置換したシクロオクタテトラエン(COT)誘導体の光化学や構造化学に関する基礎データを蓄積し、新たな機能性有機材料の創成を目指す。申請者が確立した8員環誘導体合成法を活用して、当該化合物の簡便かつ実用的な合成を確立するとともに、本法を適用して様々なπ拡張型COT誘導体を合成する。紫外可視吸収、蛍光発光、酸化還元電位、包接能、溶液中での反転やねじれに関する挙動、結晶中での分子配列等、実験的アプローチと計算化学を駆使した理論的アプローチから、発見と理解の深化を通じて新機能材料の開発に挑む。今年度は、入手が容易な原料を用いたドナーアクセプター型シクロオクタテトラエン誘導体合成法を確立した。また、紫外可視吸収、蛍光発光、酸化還元電位を測定し、分子構造との相関関係を明らかにした。ジベンゾシクロオクタテトラエンの希釈溶液に紫外線を照射した際には、強い蛍光を発することが確認された。また、再結晶から結晶に紫外線を照射した場合にも比較的強い蛍光発光が確認された。興味深いことに、再結晶から得られた結晶を乳鉢ですり潰した粉末では、蛍光発光が長波長シフトするメカノクロミズム現象が観測され、再結晶と乳鉢での摩砕を繰り返すことで、可逆的に発光波長を切り替えることに成功した。一方、八員環の反転を利用した「疎水的なベンゼンキャビティ」あるいは「親水的なトリアゾールキャビティ」による包接能の開発については、環反転のエネルギー障壁が大きく、実現していない。昨年度はシクロオクタテトラエンテンプレート骨格の実用的な合成法を確立した。今年度は、このテンプレートを用いて、ドナーやアクセプターなど種々の電子的効果を示す置換基で置換したジベンゾシクロオクタテトラエン誘導体の合成に成功した。得られた誘導体は、環上の置換基の立体障害によって環が反転できないことが、ab initio化学計算を利用することにより明らかになった。また、固体状態のジベンゾシクロオクタテトラエン誘導体に紫外線を照射した際には、比較的強い蛍光が観測された。また、結晶を乳鉢上でこすった場合に、その蛍光発光の波長と蛍光量子収率が変化するメカノクロミック現象が観測された。これらの一連の結果を学術論文としてまとめることができた。ドナーアクセプター型色素の合成過程において、比較的単純な骨格で可視光を吸収できる色素位を見出した。更なる官能基化の手掛かりとなる官能基の導入法の開発および、配向基等の導入法を開発した。また、これら一連の作業を簡略化することにも成功しつつある。具体的には、ドナーアクセプター型可視光色素に末端アセチレンを導入し、これを手掛かりに、クリック反応により配向基を導入する。

この時、配向基にも末端アセチレンを導入しておき、ドナーアクセプター型色素、配向基、およびジアジドプラットフォームとをワンショットで連結することを検討した。ここに含まれる2種類のクリック反応の相対的な反応速度を比較し、反応剤の仕込み比率をチューニングすることにより、望む1:1:1付加体の収率を向上させる手掛かりを得た。また、色素の官能基化には様々な配向基を導入できるよう検討を行った。特に色素を生理活性部位へターゲッティングするためには糖類の導入が有効であることことから、糖の導入後に他の官能基を損なうことなく、脱保護する方法も検討した。この反応では有機スズ触媒が極めて有効であり、簡便な操作と温和な反応条件下で糖の脱保護を行うことができた。また、3次元的に拡張したドナーアクセプター型色素の誘導体を更に合成し、メカノクロミズム等新たな機能発現に繋がる現象をシステマティックに調査しており、X線構造回折を用いた時間分解型の解析等も検討中である。本研究では、ドナーアクセプター型色素の新たな利用方法、応用展開として官能基化およびその簡略化に取り組んだ。可視光吸収色素を合成し、ここへ更なる官能基化の手掛かりとなる官能基を導入した後に、配向基の簡略化導入法を開発した。すなわち、ドナーアクセプター型可視光色素に末端アセチレンを導入し、ドナーアクセプター型色素、配向基、およびジアジドプラットフォームとをワンショットで連結した。この研究の過程で、生成物が銅触媒に配位することで、反応が加速するような現象が一部で確認された。過去の研究から、トリアゾール生成物が銅触媒の安定化に有効であるとの報告例もあり、電子チューニングを利用した反応制御の可能性が見えてきた。新たな反応制御法の端緒を掴んでおり、概ね順調に研究が進展したものと判断した。本研究では,スルホニル基を電子求引基として利用した,ドナーアクセプタービニルスルホン型色素を合成した.この合成プロセスに,ワンポット法やワンショット法を利用することで,目的とするビニルスルホンを効率良く合成することに成功した.また,末端アセチレンのシリル保護基,あるいは,ホスホリル保護基を利用することで,効率良くビニルスルホン誘導体へ変換できることが分かった.こうして得られたビニルスルホン色素に対して,新たな機能を付与するために脱スルホン化反応を検討した.様々な光触媒存在下,光照射を行ったところ,高出力なキセノンランプを用いて反応を行った場合に低収率ではあるが,目的とする脱スルホン化が進行した.アルコキシ基など様々な置換基を有する誘導体にも本反応を適用可能であった.現在は,他の光触媒を用いたり,より簡便で安価なLEDを光源に用いた実験装置で本反応を検討している.こうした一連の脱スルホン研究の過程で,活性金属表面を用いた脱シリル反応にも取り組んだ.9,10位にシリルアセチレンを有するアントラセンを原料に用いて脱保護を行ったところ,得られた末端アセチレンは,すぐさま分解し,次の反応に利用することができなかった.そこで,専門家の力を借りながら,活性な金属表面を用いて脱保護,続くホモカップリングによる連結反応を行った.
望ましい学校選択制度設計:マッチング理論によるアプローチ

本研究では、近年わが国でも関心の高まる公立学校選択制を、ゲーム理論の一分野であるマッチング理論と呼ばれる手法を用いて分析した。具体的には、既存のマッチング理論を、学校選択固有の問題に対応できる形に拡張・発展させると共に、その手法を用いて、米国や日本で実際に使用されている代表的な運営方式を分析し、その性能を比較・評価した。また、理論的に望ましい新制度を検討し、政策提言も行った。学校選択制は今日最も活発に議論が行われている政策問題のひとつであり、わが国でも選択制導入に伴う生徒の学力の変化や、学校間格差に与える影響等に関する実証研究が既に行われている。これらの国内研究が、選択制を採用している学区で用いられているメカニズムを“所与として"その影響を分析しているのに対し、本研究は「どのようなメカニズムを用いるのが望ましいのか?」という“メカニズム選択の問題"をゲーム理論、とりわけマッチング理論の視点から分析する、という独創的なものとなっている。本研究の目的は、最近わが国でも関心を集めている学校選択制に焦点を当て、既存のマッチング理論を学校選択固有の問題に対応できる形に拡張・発展させると共に、理想的なメカニズムの設計・提案を通じて政策提言を行うことである。平成20年度は、この目的の大部分を達成する研究成果をAbdulkadiroglu教授(米デューク大)およびChe教授(米コロンビア大)との共同研究である"Expanding`Choice'in School Choice"としてワーキングペーパーの形にまとめた。本論文は、従来のマッチング研究でほとんど考慮に入れられてこなかった“弱い"選好の存在する状況で生じる非効率性を、新たな“事前の評価基準"を導入することで理論的に明らかにしている。さらに、既存のマッチング・メカニズムを改良した独自のCADA(=Choice Augmented Deferred Acceptance)というメカニズムを提唱し、その望ましさを理論・シミュレーションの両面から示しており、学術的な貢献のみならず極めて政策的含意に富んだ研究となっている点が特徴的である。平成20年度は国内の6ヶ所で、この論文で得られた知見をセミナー形式で報告した。本年度は、平成20年度より継続している学術研究をさらに掘り下げると共に、いくつかの具体的な研究成果を広く世に広める活動を行った。以下、11の研究発表の内容を言及しながら研究実績をご紹介する。まず、小島武仁氏(米スタンフォード大助教授)との共著で、本研究を含むマッチング理論の実践的な応用研究に関する展望論文を『経済セミナー』誌上にて発表した。この分野はマーケットデザインとも呼ばれ、近年急速に関心を集めており、最先端の研究動向を紹介することは極めて意義深いと考えられる。次に、Atila Abdulkadiroglu氏(米ヂューク大准教授)とYeon-Koo Che氏(米コロンビア大教授)との共著論文が、経済学分野を体表する国際ジャーナルであるAmerican Economic Review誌にアクセプトされた。こちらは従来の学校選択制研究の流れに一石を投じると言う点で政策的な含意や示唆に富む一方、マッチング理論の新たな方向性をも示唆するユニークな研究である。両氏と前年度に完成させた別論文「Expanding "Choice" in School Choice」も現在改訂中で、草稿段階ながらすでにいくつかの関連論文から引用されており、学会で幅広く認知されつつある。他に特筆すべき実績として、NTT出版より2010年3月に出版された書籍を上げることができる。これは、研究代表者がフェローを務める東京財団仮想制度研究所において、プロジェクトリーダーとなって進めた、「学校選択制デザインプロジェクト」という研究チームの1年あまりにわたる研究成果をまとめたものである。学校選択制に関する学術研究だけではなく、実際の自治体へのヒアリングや、独自のシミュレーションなどを用いつつ、日本における学校選択制の政策提言を行っている。
転写因子C/EBP-βによるヒト腫瘍の増殖・分化・転移能の調節作用

本研究は「腫瘍において病理形態学的に同定される分化度や分化方向性がその腫瘍の生物学biologyを規定する重要な因子の一つである」という病理総論的現象の分子病理学的解明が究極の目的として行われた。この研究のため我々は(1)通常胃癌細胞株7株とAFP産生胃癌株3株、(2)ラット膵腫瘍細胞株AR42J-B13、(3)ラット卵黄嚢腫瘍株AT-2-TCを用い、主に肝細胞特異的転写因子の一種CCAAT/enhancer-binding protein(C/EBP)-βの発現解析および発現導入実験を行った。1、AFP産生胃癌株は肝細胞分化を有する胃癌モデルである。ヒトAFP産生胃癌株3株は通常型胃癌7株に比べalbuminなど肝特異的蛋白質の発現から肝細胞性をもつことを確認した。さらにLAP/LIP比、HNF-4α発現、およびHNF-1α発現が高いことなどもあわせて確認した。相対的にLAP isoform発現が高いことが肝への分化転換の重要な要因の一つであると仮定し、LIP isoformをAFP産生胃癌へ導入した結果、部分的な肝細胞形質の抑制が認められた。2、AR42J-B13は膵腺房細胞から肝細胞への分化転換モデル細胞である。AR42J-B13にC/EBP-βを導入した結果、肝細胞形質の発現が見られたとともに転移能の亢進が見られた。導入細胞はin vitroにおいて血漿のもつ細胞傷害性に対し耐性を獲得し、in vivoの検討では転移標的臓器血管内でのアポトーシスの減少が認められた。C/EBP-β導入による転移能亢進は標的臓器血管内での細胞死が減少するためと推測された。AT-2-TCはhepatoidな分化を時折示すことが知られる卵黄嚢腫瘍のモデル株である。AT-2-TCにC/EBP-βを導入した結果、AFPの発現が誘導され、この際、他の肝細胞特異的転写因子の発現も変化した。本研究は「腫瘍において病理形態学的に同定される分化度や分化方向性がその腫瘍のbiologyを規定する重要な因子の一つである」という病理総論的現象の分子病理学的解明が究極の目的である。肝細胞癌では肝細胞特異的転写因子として知られる複数の転写因子の発現パターンが分化度に重要であることが知られてきたが、他の腫瘍においては不明である。我々は肝細胞特異的転写因子のうちC/EBP-βに注目し、(1)通常型胃癌細胞株7株とAFP産生胃癌株3株、(2)ラット膵腫瘍細胞株AR42J-B13、(3)ラット卵黄嚢腫瘍株AT-2-TCを用いC/EBP-βの発現解析および遺伝子導入実験を行った。これまで以下の結果を得た。2.ラット膵腫瘍細胞株AR42J-B13はC/EBP-βにより肝細胞へ分化転換するユニークな細胞である。我々はC/EBP-β導入により血行性転移能が増加することを見出した。今回の検討で、導入株ではBcl2発現の増加、血漿の細胞傷害性によるapoptosisの減少などが認められ、さらに尾注後早期において肝でのviableな腫瘍細胞数は導入株で増加することなどが分かった。以上、これまでの研究で腫瘍の分化やbiologyにおけるC/EBP-βの関与が分かってきた。

本研究は「腫瘍において病理形態学的に同定される分化度や分化方向性がその腫瘍の生物学biologyを規定する重要な因子の一つである」という病理総論的現象の分子病理学的解明が究極の目的として行われた。この研究のため我々は(1)通常胃癌細胞株7株とAFP産生胃癌株3株、(2)ラット膵腫瘍細胞株AR42J-B13、(3)ラット卵黄嚢腫瘍株AT-2-TCを用い、主に肝細胞特異的転写因子の一種CCAAT/enhancer-binding protein(C/EBP)-βの発現解析および発現導入実験を行った。1、AFP産生胃癌株は肝細胞分化を有する胃癌モデルである。ヒトAFP産生胃癌株3株は通常型胃癌7株に比べalbuminなど肝特異的蛋白質の発現から肝細胞性をもつことを確認した。さらにLAP/LIP比、HNF-4α発現、およびHNF-1α発現が高いことなどもあわせて確認した。相対的にLAP isoform発現が高いことが肝への分化転換の重要な要因の一つであると仮定し、LIP isoformをAFP産生胃癌へ導入した結果、部分的な肝細胞形質の抑制が認められた。2、AR42J-B13は膵腺房細胞から肝細胞への分化転換モデル細胞である。AR42J-B13にC/EBP-βを導入した結果、肝細胞形質の発現が見られたとともに転移能の亢進が見られた。導入細胞はin vitroにおいて血漿のもつ細胞傷害性に対し耐性を獲得し、in vivoの検討では転移標的臓器血管内でのアポトーシスの減少が認められた。C/EBP-β導入による転移能亢進は標的臓器血管内での細胞死が減少するためと推測された。3、AT-2-TCはhepatoidな分化を時折示すことが知られる卵黄嚢腫瘍のモデル株である。AT-2-TCにC/EBP-βを導入した結果、AFPの発現が誘導され、この際、他の肝細胞特異的転写因子の発現も変化した。
間質性肺炎、肺傷害における炎症性サイトカインIL-18の役割の解明

1.肺特異的IL-18 TGマウスの作製Tet-on/Cresystemを用いてヒトサーファクタントプロモーターSP-Cを用い肺特異的conditional肺異的発現IL-18 TGマウスを作製した。成熟マウスに1ヶ月間肺特異的にIL-18を発現すると間質性肺炎が発症した。一方、恒常的発現、肺特異的IL-18 TGマウスを作製したところ右心不全(肺性心)を伴う肺気腫が発症した(論文投稿中)。2.ヒト間質性肺炎病変部における遺伝子発現の解析我々はIL-18をIL-2とともにマウスに連日投与するとすべての投与マウスに肺のみにリンパ球浸潤が急激に起こり肺線維化を伴う肺障害が誘導され効率に死亡する事を見出した。これらの結果はヒト特発性間質性肺炎発症においてIL-18が重要な役割を果たすと考えられる。そこでIL-18,IL-18 receptora鎖に対するモノクロナール抗体を当教室で作成し特発性間質性肺炎の患者の肺生検組織で免疫組織染色を行った。患者病変部とりわけfibroblast foci (FF)には正常肺より著明にIL-18,IL-18Rα鎖の発現していた(AJRCMB 2004)。ブレオマインやイレッサで亡くなった患者の肺病変部では正常肺より著明にIL-18,IL-18Rα鎖の発現していた(論文投稿中)。一方、恒常的発現、肺特異的IL-18 TGマウスを作製したところ右心不全(肺性心)を伴う肺気腫が発症した(未発表)。2.間質性肺炎抑制の治療薬開発の基盤的研究Redox活性蛋白チオレドキシン(TRX)がIL-18/IL-2で誘導されるマウス間質性肺炎モテル、ブレオマイシンによる肺線維症を抑制することを見つけた。これらの結果はRedox活性蛋白が間質性肺炎の新しい治療薬になる可能性がある(AJRCCM,2003、特許出願中)。3.ヒト間質性肺炎病変部における遺伝子発現の解析我々はIL-18をIL-2とともにマウスに連日投与するとすべての投与マウスに肺のみにリンパ球浸潤が急激に起こり肺線維化を伴う肺障害が誘導され効率に死亡する事を見出した。患者病変部とりわけfibroblast foci(FF)には正常肺より著明にIL-18,IL-18 receptorα鎖の発現していた(AJRCMB 2004)。
放射光を用いたイオン液体のドメイン構造の検証と磁性イオン液体の構造解析

本課題は、イオン液体(IL)の特異的性質の起源を、主に電子構造の観点から明らかにすることを目的として実施した。本研究では、これを実現するため、難揮発性物質を気相に取り出して、その電子構造、反応性に関する知見を得るための分光手法を、大別して二種類考案し、装置を製作した。また、ILに性質の類似した試料を標準物質として使用し、装置の試験を行った。以下に、各装置について説明する。加熱により昇華させたIL試料に放射光を照射すると、解離性光イオン化が起こり、解離断片が放出されると予想される。この解離の並進エネルギー放出分布を測定すれば、ILイオン対の結合エネルギー、結合解離のダイナミクスなどについての知見が得られる。そこで、解離断片の三次元散乱分布を、二次元投影像として測定する画像観測装置を開発した。ILを構成する陰イオンと構造の類似したCF_4およびSF_6を用いて画像観測を行ったところ、高速で散乱されている成分が検出された。この結果は解離断片の観測が可能であることを示している。さらに、代表的な難揮発性物質であるフラーレンを昇華させて、生成したフラーレン分子線の画像観測を行ったところ、分子線の速度分布を反映した画像を観測できた。光イオン化の際に放出される光電子とイオンの同時計測を行えば、気相に取り出されたILの組成を確定して光電子分光を行うことができる。そこで、光電子-光イイオン同時計測装置を開発した。この装置で、室温の希ガスについて、放出された光電子の検出時刻をt=0として、イオンの飛行時間を測定した。またイオン生成量の、放射光のエネルギー依存性を測定することで、イオン収量スペクトルを得ることができた。さらにフラーレンを用いて試験を行ったところ、解離断片の収量スペクトルを得ることができた。以上により、ILの気相分光を行うために必要な基本性能を備えた装置を開発できたと考えている。本課題は、イオン液体(IL)の特異的性質の起源を、主に電子構造の観点から明らかにすることを目的としている。本年度、分子科学研究所の放射光施設(UVSOR)のビームライン2Bに、ILやフラーレン等の難揮発性物質の気相分光を行うことを目的とした真空槽を設置した。この真空槽は、昨年度から「若手研究(B)No.17750023」において設計および製作の一部を開始したものである。この真空槽に、既存の飛行時間型質量分析装置を取り付け、フラーレンを用いて装置の性能を評価した。この予備実験から、本装置で難揮発性物質の正確な光吸収断面積の見積もりが可能であることが確かめられた。さらに、フラーレン類はIL測定の際の「標準物質」として適していることが明らかになった。また、ヘリウム放電管を光源とする光電子分光装置を開発し、予備実験としてフラーレンの光電子スペクトル測定を行った。従来に比べ高分解能の光電子スペクトルが測定可能であることを確認した。上記に並行して、課題申請時の計画を拡張し、解離フラグメントの質量選別運動量画像観測装置を考案した。ILが気相で形成するクラスターなどが光吸収の際に解離する様子を観察すれば、その構造や結合に関する知見が得られると考えたためである。撮像および質量選択用電極の配置を計算機シミュレーションにより最適化した結果、炭素原子2個程度の質量を選択し、その並進エネルギーを10meVの分解能で測定できることがわかった。本年度に装置の一部を試作した。なお、来年度は、各装置の分解能向上のための改良を行い、気相IL(イオン対、クラスター)の形状を反映したスペクトルの構造を探索し、ILのドメインとの関係を調べる。電子状態に関する気相での詳細な測定からは、従来ほとんど知られていない「液体における常磁性」の発現機構についても、有用な知見が得られると考えている。

またイオン生成量の、放射光のエネルギー依存性を測定することで、イオン収量スペクトルを得ることができた。さらにフラーレンを用いて試験を行ったところ、解離断片の収量スペクトルを得ることができた。以上により、ILの気相分光を行うために必要な基本性能を備えた装置を開発できたと考えている。
新生仔くも膜下出血における脳血管攣縮の検討‐血中エレドセリンとの関係において‐

新生児は原発生あるいは仮死に伴いくも膜下出血を認めることが多い.しかし成人と異なり脳虚血症状を来すことは少ない.この差異に関する明確な原因は明らかでない.そこでこの事を解明するために,くも膜下出血を認めた新生児の髄液中のエンドセリンを測定した.対象は在胎33週5日より在胎41週0日の生後5日以内の新生児10例である.このうち3名はくも膜下出血を認めた例であり,7名はくも膜下出血を認めていない例であった.方法は髄液検査の際に1mlの髄液にトラジロールを添加し凍結保存.その後髄液を解凍しEIA法及び光化学反応法を用いてエンドセリンを測定した.結果はくも膜下出血の存在に関わらず髄液中のエンドセリンの量は4pg/ml以下であった.これは従来成人において測定されているエンドセリンの量に比し少なかった.また今回くも膜下出血を認めた新生児はその後の経過で,脳梗塞や水頭症は合併しておらず経過は順調であった.すなわちくも膜下出血を認めた新生児の髄液中のエンドセリンは成人のくも膜下出血例に比べ低値であり,この事が新生児くも膜下出血において脳虚血症状が少ない事と関係している可能性があると考えた.今後は同一条件下の成熟および新生仔動物においてくも膜下出血モデルを作成し,髄液および血液のエンドセリンを測定し,くも膜下出血後の脳虚血症状へのエンドセリンの影響をさらに検討したい.新生児は原発生あるいは仮死に伴いくも膜下出血を認めることが多い.しかし成人と異なり脳虚血症状を来すことは少ない.この差異に関する明確な原因は明らかでない.そこでこの事を解明するために,くも膜下出血を認めた新生児の髄液中のエンドセリンを測定した.対象は在胎33週5日より在胎41週0日の生後5日以内の新生児10例である.このうち3名はくも膜下出血を認めた例であり,7名はくも膜下出血を認めていない例であった.方法は髄液検査の際に1mlの髄液にトラジロールを添加し凍結保存.その後髄液を解凍しEIA法及び光化学反応法を用いてエンドセリンを測定した.結果はくも膜下出血の存在に関わらず髄液中のエンドセリンの量は4pg/ml以下であった.これは従来成人において測定されているエンドセリンの量に比し少なかった.また今回くも膜下出血を認めた新生児はその後の経過で,脳梗塞や水頭症は合併しておらず経過は順調であった.すなわちくも膜下出血を認めた新生児の髄液中のエンドセリンは成人のくも膜下出血例に比べ低値であり,この事が新生児くも膜下出血において脳虚血症状が少ない事と関係している可能性があると考えた.今後は同一条件下の成熟および新生仔動物においてくも膜下出血モデルを作成し,髄液および血液のエンドセリンを測定し,くも膜下出血後の脳虚血症状へのエンドセリンの影響をさらに検討したい.
新坑菌性ティッシュコンディショナーのin vivoにおける理工学的・生物学的挙動

ティッシュコンディショナーは,義歯床下粘膜の調整,機能印象,即時義歯および顎補綴栓塞子の暫間裏装などに頻用されているが,経時的に劣化すること,さらに,微生物が容易に付着したまま比較的長期間使用されることから,義歯性口内炎や誤嚥性肺炎の感染源になることが指摘されている。そこで,この問題の解決のために,ティッシュコンディショナーに抗菌性を付与することに着想し,抗菌剤として持続的な抗菌性と防臭性を兼ね備えた無機系抗菌剤である銀ゼオライトの応用を試みた。試作抗菌性ティッシュコンディショナーを蒸留水またはヒト唾液に7および28日間の長期間浸漬後,37°C湿潤下にて菌液を24時間まで作用させた後,生菌数(CFU)を算定した。その結果,対象菌である誤嚥性肺炎および義歯性口内炎起因菌の5菌のうち,P. aeruginosaに対してのみ抗菌効果が認められなかった。そこで,ティッシュコンディショナーに付着するヒト唾液中の有機成分の除去を試みたところ,P. aeruginosaのCFUは0となった。これらのことより,長期間唾液に浸漬した場合,抗菌効果を示さなかった原因に唾液中の有機成分が関与し,この有機成分を除去することにより,誤嚥性肺炎および義歯性口内炎の起因菌に対して,抗菌効果が発揮される可能性が示唆された。以上の結果から,ヒト唾液により処理した銀ゼオライト添加ティッシュコンディショナーの抗菌効果は,菌種により異なることが明らかとなり,その原因としてティッシュコンディショナーに付着する唾液中の有機成分が関与している可能性が示唆された。以上のことから,新しい抗菌性ティッシュコンディショナーの臨床応用に際して有益な知見を得ることができた。平成12年度は,銀ゼオライトを添加した試作ティッシュコンディショナーを作製し,蒸留水およびヒト唾液に浸漬した場合において,速やかに抗菌効果が発揮されるかどうかについて検討した。対象菌は誤嚥性肺炎および義歯性口内炎の起因菌とし,各試料を蒸留水またはヒト唾液に1日間浸漬後,37°C湿潤下にて菌液を24時間まで作用させた後,1時間毎に生菌数(CFU)を算定した。その結果,全ての菌に対して蒸留水および唾液に浸漬した銀ゼオライトを添加したティッシュコンディショナーは,添加していないものと比較して早期に抗菌効果を認めた。しかしながら,唾液に浸漬した場合は,蒸留水と比較して抗菌効果の発現時間が若干延長する傾向が認められた。このため,唾液に長期浸漬した場合に抗菌効果が十分に発揮されない可能性が考えられた。抗菌効果の発現時間が延長した理由および唾液に長期浸漬した場合の抗菌効果について,今後も引き続き検討する予定である。平成12年度では,銀ゼオライトを添加した試作抗菌性ティッシュコンディショナーを作製し,その抗菌効果を検討した。蒸留水に浸漬した場合,早期の抗菌効果が発揮されたのに対して,唾液に浸漬した場合は,抗菌効果の発現時間が若干延長する傾向が認められた。平成13年度では,試作抗菌性ティッシュコンディショナーを蒸留水またはヒト唾液に7および28日間の長期間浸漬後,37°C湿潤下にて菌液を24時間まで作用させた後,生菌数(CFU)を算定した。

その結果,対象菌である誤嚥性肺炎および義歯性口内炎起因菌の5菌のうち,P. aeruginosaに対してのみ抗菌効果が認められなかった。そこで,ティッシュコンディショナーに付着するヒト唾液中の有機成分の除去を試みたところ,P. aeruginosaのCFUは0となった。これらのことより,長期間唾液に浸漬した場合,抗菌効果を示さなかった原因に唾液中の有機成分が関与し,この有機成分を除去することにより,誤嚥性肺炎および義歯性口内炎の起因菌に対して,抗菌効果が発揮される可能性が示唆された。以上の結果から,ヒト唾液により処理した銀ゼオライト添加ティッシュコンディショナーの抗菌効果は,菌種により異なることが明らかとなり,その原因としてティッシュコンディショナーに付着する唾液中の有機成分が関与している可能性が示唆された。以上のことから,新しい抗菌性テイッシュコンディショナーの臨床応用に際して有益な知見を得ることができた。
準結晶の構造とその秩序化過程の理論的研究

一次元模型については、一種の初期位相の違いについての分類がわかり、ある意味での〓〓小数的なもの、無理数的なものの区別がついた.これは.換言すれば、対称中心のある自己相似性と,中心をもたない相似性の相違であるらしい。また、全く異質の問題とも言える選挙制度の比例代表制での議席配分方法が、一次元準結晶と同じ数理をもつことが明らかとなった。二次元.三次元系については.有性比近似を系統的に行って詳しく調べる方法.フェイゾン歪みについての群論的考察が進み、実験との比較もある程度可能となってきた。計算機実験によって準結晶的な秩序の成長を試みることも行われてきたが長距離秩序の形成をみるには至っていない。幾何学的な秩序形成模型を離れると、物理的な模型、すなわち、揺動による撹乱に抗しての秩序形成をなしうるようなメカニズムについては、まだ何もわかっていない。今後の大きな課題である。電子論やスピン系に関する研究は当課題でも行われ、若干の成果をみた。中国における同様のプロジェクトとの協力により、共同のセミナ-ももたれ.研究の交流が行われた.一次元模型については、一種の初期位相の違いについての分類がわかり、ある意味での〓〓小数的なもの、無理数的なものの区別がついた.これは.換言すれば、対称中心のある自己相似性と,中心をもたない相似性の相違であるらしい。中国における同様のプロジェクトとの協力により、共同のセミナ-ももたれ.研究の交流が行われた.
低金属量星の形成と銀河系の化学進化

特別研究員Hartwig氏は、最新の理論計算に基づく超新星元素合成の結果を用いて、宇宙に生まれる第二世代の星々に特徴的な元素組成パターンを明らかにした。さらに、膨大な分光観測サンプルの中から銀河系で最も古い星々を抽出するための化学診断手法を提案し、主著論文として発表した(Hartwig et al. 2019, ApJ)。最近ではこの抽出作業に機械学習を導入し、バナジウムやヨウ素などのキーエレメントを同定している。考案した分光化学診断手法は、さらに次のような判定にも適用できることを示した。個々の古い(すなわち低金属量の)星が、一回の超新星爆発により生成された重元素のみを含むのか、あるいは複数回の超新星爆発により重元素汚染されたのかを推定する指標も与える。この指標はすでにドイツの研究グループらが採用し、低金属量星のクラス分類に用いられている。つぎに、炭素過剰とよばれる特殊な種類の星の生成過程について新たなモデルを提唱した(Hartwig & Yoshida, 2019, MNRAS )。古い星の元素組成はその親星の超新星爆発時の元素合成量が正確に反映されているとするのが標準的な仮説であろり、上記の成果もその仮説に基づく。しかし、Hartwig氏や他の複数の研究者が行ったこれまでの研究からは、生成され放出された各元素が星間ガス中で厳密に一様に混じり合うわけではないことも示唆されている。Hartwig氏はこの未混合率に着目し、これまでの観測から示唆される炭素過剰星の生成頻度は、そのような非一様なガスから生まれる星々の頻度でもあると考えた。つまり、星間ガスの中でも炭素過剰な部分から低質量星が生まれやすいと提唱した。Hartwig氏はここまでの研究成果を精力的に発表し、特に3つの国際学会で講演を行った。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。本研究の目的は、銀河系の古い星々の分光観測および軌道解析の結果を用いて、宇宙初期の銀河形成と化学進化の過程を明らかにすることである。H29年度は、N体シミュレーションの出力から作り出した銀河の合体成長史(マージャーヒストリー)に、星形成、超新星爆発および重元素汚染の準解析モデルを適用し、天の川銀河系内の低金属量ハロー星の金属量分布を再現するとともに、元素含有量の特徴から第二世代星を見つけ出す方法を考案した。特に、鉄、炭素、マグネシウムに着目し、その含有量比をあらわす二次元平面上で「化学組成変化量勾配」という概念を導入し、たった1回の超新星爆発により重元素が生成された確率、すなわち当該星が真に第二世代の星である確率を定義、計算した。次に、エネルギーの低い超新星爆発モデルなど、最近の観測でその兆候がしめされた特異なモデルに関してもその元素合成・放出量を解析モデルにとりいれた。これまでの低金属量星分光観測結果をこの平面上で比べることで即時に第二世代星候補を抽出でき、今後の系統的な探索に大きく貢献できる。この成果をまとめた論文はMNRAS誌に受諾され, 2018年6月に出版される予定である。H29年度は成果発表も精力的に行った。2017年11月にプラト(イタリア)にて開催された国際研究集会での初期構造形成についての招待講演をはじめとして、メルボルン(オーストリア)、呉(日本)で口頭発表を行った。H30年度にはこれまでに探索した第二世代星選択法を、ToPosサーベイなど実際の観測データに適用し、第二世代星候補を抽出するとともに、それらに含まれる重元素を生み出した超新星のタイプなどを推定する。次に、国立天文台のスーパーコンピュータを使用して超新星残骸進化の流体力学シミュレーションを実行する。研究員Hartwig氏が訪日する以前から検討していた研究を、外国人特別研究員として着任後に集中的にすすめた。第二世代星の探索手法を具体的に提案するとともに、近年すすめられているToPosサーベイの観測結果と直接比較することも可能になり、研究期間内に目標に向かって着実に成果があがると期待できる。また、国際学会での成果発表を通して国内外の研究者、研究グループとの共同研究が発展しており、当初計画にはなかった新たな成果も見込まれる。

しかし、Hartwig氏や他の複数の研究者が行ったこれまでの研究からは、生成され放出された各元素が星間ガス中で厳密に一様に混じり合うわけではないことも示唆されている。Hartwig氏はこの未混合率に着目し、これまでの観測から示唆される炭素過剰星の生成頻度は、そのような非一様なガスから生まれる星々の頻度でもあると考えた。つまり、星間ガスの中でも炭素過剰な部分から低質量星が生まれやすいと提唱した。Hartwig氏はここまでの研究成果を精力的に発表し、特に3つの国際学会で講演を行った。はじめに、近年すすめられている低金属量探査のためのToPosサーベイの観測結果に、これまでに考案した第二世代星探索法を直接比較することが最重要である。鉄の含有量と超新星爆発モデルを組み合わせた従来の手法と比較し、その精度や適用範囲をあきらかにする。ここまでの結果は、早期星形成および銀河形成の準解析モデルに基づいているが、これには多くの現象論的パラメータが含まれる。なかでも重要なのは、星間ガス内での重元素汚染の効率を表す混合パラメータである。関連して、重元素汚染の広がりもより正確に求めなくてはならない。このため、現実的な宇宙論的設定のもとで3次元流体シミュレーションを行い、大質量星の内部で合成された重元素が超新星残骸の中でどの程度効率よく混合されるかを直接導出する。爆発エネルギーや周辺ガス密度を様々に変えた計算を多数行い、これまでに構築した解析モデルに取り入れるための理論テンプレートを作る。この大規模シミュレーションのための計算資源は確保済みであり、本計算は国立天文台のスーパーコンピューター上で行い、結果は研究室のデータ解析用PCで解析する。この研究のため、ドイツおよび英国の共同研究者と相互訪問し、研究議論および論文執筆を集中的に行う。また、H30年度後半には東京大学で銀河考古学に関する研究会を開催する予定であり、海外著名研究者を含む第一線の研究者らと成果を発表、共有する。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
ホスホリパーゼCδ1の表皮特異的欠損が全身性白血球増加を引き起こす機構の解明

1. PLCδ1欠損マウスの表皮バリア異常についての詳細な解析を目的に、バリア脂質の量の測定を行ったところ、PLCδ1遺伝子欠損マウスにおいてはバリア脂質の減少が観察された。Outside-insideバリアの検討のために、皮膚外部からの色素の透過性についても検討を行ったところ、PLCδ1遺伝子欠損マウス表皮では色素の透過性が充進していることも明らかとなった。これらの結果により、表皮のPLCδ1の欠損が、表皮バリアの形成に異常をきたしていることが明らかとなった。2.ヒトケラチノサイトにおいてもPLCδ1の欠損によって同様の影響が示されるのかどうか検討を行うことにした。ヒト表皮細胞(Normal Human Epidermal Keratinocyte : NHEK)を用いて皮膚の構造を構築させた、"3次元培養皮膚"を作製、このサンプルを用いて色素の透過性などのバリア異常について検討した。その結果、PLCδ1を発現抑制したNHEKによる3次元培養皮膚サンプルでは色素透過性の充進、バリア脂質の減少など、マウスの表皮と類似したバリア異常が見られることが明らかとなった。3.表皮のバリアには角質バリア、タイトジャンクションバリアが存在する。色素透過性の増大により、角質バリアに異常があることは確認されたので、タイトジャンクションバリアについてもPLCδ1の欠損が影響を与えているのかどうか、検討を行った。NHEK細胞を培養した際の、タイトジャンクションタンパク質、zo-1の発現について染色レベルでの検討を行ったところ、その異常が観察された。このことから、PLCδ1発現抑制NHEKではタイトジャンクション形成に異常をきたしており、その結果、バリア異常が引き起こされている可能性が示唆された。全ての実験計画がほぼ予定通り進められた。若干、計画通りに進める事が困難である部分もあったが、代換え手段を用いることにより当初の目的を果たすことができた。以上のことからおおむね順調に進展していると判断した。PLCδ1が表皮ケラチノサイトで欠損することはケラチノサイトの増殖亢進を促し、分化異常を引き起こすことでタイトジャンクションの形成や角質バリアの形成が不十分になり、バリア異常を引き起こしていることが示唆された。そのため、今後はPLCδ1の欠損がどのようなシグナルを介してタイトジャンクションの形成異常を引き起こしているのか、また、バリア脂質の減少を引き起こしているのかなど、詳細なシグナルについて検証していきたい。1、表皮特異的にPLCδ1を欠損したマウス(PLCδ1cKOマウス)の皮膚におけるIL-23の増加とIL-17の増加の因果関係を明らかにする目的で、IL-23中和抗体を用いた検討を行い、IL-17の発現増加がIL-23に依存することを明らかにした。2、PLCδ1cKOマウスで見られる顆粒球増加がIL-17に依存するのかを検討するためにPLCδ1と同時にIL-17A、IL-17Fを欠損したマウスを作成したが、IL-17A、IL-17F欠損の影響により顆粒球数が大きく変化してしまい解析を行うことができなかった。そこで、代換え手段として再構築系を用いて、PLCδ1cKOマウスにおいて観察される顆粒球増加因子G-CSFの産生増加がIL-17に依存することを明らかにした。3、IL-23特異的抗体を用いた免疫組織染色により、PLCδ1cKOマウスの皮膚におけるIL-23の産生細胞はケラチノサイトであることを明らかにした。4、PLCδ1cKOマウスの表皮においてPLC活性、及びPLC下流因子PKCの活性が顕著に低下していることを明らかとした。さらにPLCδ1cKOマウスの表皮において薬剤処理によりPLC下流因子を活性化したところ、IL-23の発現レベルが正常化されることを明らかにした。以上の成果により、表皮のPLCδ1の欠損に伴うPLCおよびその下流因子の活性低下がケラチノサイトからのIL-23の産生亢進を介し、皮膚局所および全身におけるIL-17の増加を誘導することが強く示唆された。皮膚におけるIL-23、IL-17の異常産生は乾癬等の炎症性皮膚疾患の発症に重要な役割を担っている。本成果はIL-23、IL-17の産生制御にPLCδ1が関与することを明らかにしたものであり、上記の疾患に対する新たな治療法の開発に繋がる可能性を秘めておりとても意義深いと考えられる。1.PLCδ1遺伝子欠損マウスの皮膚がアトピー性皮膚炎と類似しているのかどうかを調べることを目的とし、PLCδ1遺伝子欠損マウスの皮膚の解析を行った。アトピー性皮膚炎の皮膚で見られる肥満細胞や好酸球の浸潤を染色により検討したところ、これらの免疫細胞が増加していることが明らかとなった。アトピー性皮膚炎で見られる全身レベルでの異常である血中のイムノグロブリン量についてもPLCδ1遺伝子欠損マウスで検討したところ、IgE及びIgG1の増加が観察されることがわかった。2.アトピー性皮膚炎では、皮膚バリア機能の低下が起きていることが知られているため、PLCδ1遺伝子欠損マウスの皮膚において体外からのFITCの浸透性を調べることで皮膚バリア機能を検討した。その結果、コントロールマウスに比べて、PLCδ1遺伝子欠損マウスでは、FITCの表皮内への浸透量が多く、Outside-insideバリアに異常があることが明らかとなった。近年アトピー性皮膚炎患者の原因遺伝子としてフィラグリンが同定された。フィラグリンは表皮バリア機能において重要な役割を担うタンパク質でその発現低下や局在異常は表皮バリア機能を低下させることが報告されている。