hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
スギ花粉アレルゲン分子種の網羅的アレルゲノーム解析

スギ花粉症は今や深刻な国民病であるが、原因アレルゲンに関する知見は2種類の主要抗原以外には殆ど得られていないのが現状であった。本研究ではスギ花粉アレルゲン分子種構成の全容解明を目標として、プロテオミクスを基調とした同抗原の網羅的アレルゲノーム解析を行い、以下の成果を得た。(1)スギ花粉アレルゲンのIgE反応頻度マップの作製二次元電気泳動上でスギ花粉粗抗原と花粉症患者IgEとの反応頻度を網羅的に調べた結果、1人以上の検体と反応するアレルゲンが合計131スポット存在することが判明した。また本マップ上で検体ごとに反応するアレルゲン分子種が異なっていること、主要抗原Cry j 1およびCry j 2が広範なアイソフォーム分布を示すこと、更にCry j 2以上の反応頻度(40%)を有する未同定の高IgE反応性スポットが31個存在することを明らかにした。(2)新規スギ花粉主要アレルゲンの同定と免疫生化学的特性の解明上記アレルゲンマップ上で主要抗原Cry j 2以上のIgE反応頻度を示した新規分子に着目し、同アレルゲン遺伝子の単離・同定を試みた。そのうちキチナーゼホモログとして同定されたCJP-4は天然型抗原のIgE反応頻度が100%と主要抗原cry j 1のそれ(71%)を大きく凌駕するものであった。興味深いことに本分子はラテックスアレルゲンとの交差反応性も有しており、臨床上重要な主要抗原であることが強く示唆された。更にβ-1,3-glucanaseホモログであるCPA39、aspartyl proteasse様分子であるCPA63を同定するとともに、両分子をバキュロウイルス-昆虫細胞発現系を用いて活性型アレルゲンとして発現させることにも成功した。またCPA39にはオリーブ花粉アレルゲンとの交差反応性が認められ、CJP4と同様にパンアレルゲンとしての重要性が示唆された。個々のスギ花粉症患者がそれぞれ異なる固有の感作抗原スペクトラムをもつことから、次世代診断システムの確立やワクチン創薬研究等のテーラーメイド医療に資するための基盤技術を整備する上で、感作抗原に関する基礎的知見を集積することは必須である。そこで、スギ花粉症患者の特異IgEを用いてスギ花粉抗原の網羅的解析を行い、抗原のIgE結合頻度マップを作製した。二次元電気泳動上で、主要抗原(Cry j 1およびCry j 2)に加えて高IgE反応性頻度を示す新規抗原スポット群のなかで、今年度は、二つの抗原スポット(CPA39およびCPA63)およびアイソフォーム群の部分アミノ酸一次配列をTOF-MS解析により決定した。その情報を許に縮重プライマーを作製し、PCRおよび5'-ならびに3'-RACE法にて、それぞれの全塩基鎖長を取得し、塩基配列を決定した。CPA39はβ-1,3-glucanase活性をもつ471アミノ酸残基からなるポリペプチドであり、他植物由来の同じ酵素活性をもつアレルゲンであるOle e 9(オリーブ)、Hev b 2(ラテックス)とそれぞれ約48%および36%の相同性を示した。一方、CPA63は472アミノ酸からなり、aspartyl protease/nucleoid DNA binding proteinと相同性を有していた。当該アレルゲン遺伝子を含む組換えバキュロウイルスを作製して、昆虫細胞Sf21を用いた分泌発現・精製系を構築した。得られた精製組換え型CPA39ならびにCAP63とスギ花粉症患者

IgEとの結合活性をELISAにて検証したところ、それぞれ60.7%(17/28)および33.3%(10/30)のIgE結合頻度を有していた。逐次、異種生物起源の同種分子種間の交差反応性の立証と残りの主要アレルゲンレパートワータを揃えていく予定である.スギ花粉症患者がそれぞれ異なる固有の感作アレルゲンスペクトラムをもつことから、これらに関する生化学的知見を集積することは、抜本的対策を確立する上重要である。そのためには、感作アレルゲン分子種を特定する次世代臨床診断システムの構築、およびその情報に基づくテーラーメイド型ワクチンの創製を可能にする基盤技術の整備が必須となる。そこで、網羅的アレルゲノーム解析によって作製したIgE反応頻度マップから、昨年度に続いて、高反応性を示す新規アレルゲン分子種の部分アミノ酸一次配列をTOF-MS解析により決定した。これらの情報を許に縮重プライマーを作成し、PCRおよび5'-ならびに3'-RACE法にて、それぞれの全塩基配列を決定した。これによって、主要抗原(Cry j1、Cry j2および昨年度全塩基配列を決定したCPA39、CPA63)に、新たにCPA9、CPA71/72、CPA114-1、2が加わった。CPA9、CPA71/72、CPA114-1、2は、それぞれプロテアーゼ・ファミリー、リパーゼ/ハイドロラーゼ・ファミリー、ハイドロラーゼ・ファミリータンパク質と高い相同性を示す新規なアレルゲンである。当該アレルゲン遺伝子を含む組換えバキュロウイルスを別々に作製して、多角体中にアレルゲン分子種を発現封入して、このアレルゲン封入多角体がスギ花粉症患者特異IgEと反応することを確認した。一方、組換え型CPA63をバキュロウイルス系で発現・精製して、その基質特異性および阻害剤との反応性から酸性プロテアーゼであることを証明した。逐次、これら新規アレルゲンの免疫生化学的特性の解析と異種生物起源の同種分子種間の交差反応性を立証して、特許出願していく予定である。
株式市場の時間相関についての統計力学的手法による確率モデルの研究

現代の多くの株式市場では,取引情報が秒単位あるいはそれ以下の単位で記録された高頻度データが保存されている。膨大な量の高頻度データを分析することで,日次データでは観測できない現象が次々と発見されている。本研究では,それらの現象のうち,取引符号の長期記憶の発生原因について,統計力学の手法を用いて理論的な研究を行なった。取引符号とは,世界の株式市場で一般的な連続オークション方式において,最良売気配での取引をプラス,最良買気配での取引をマイナスとして定義される。古典的に価格変動は長期記憶を持たないことが知られていることから,取引符号の長期記憶性は高頻度データの解析により明らかになった興味深い現象である。その発生原因が個々の投資家による潜在的注文の分割発注にあるという仮説に基づき,機関投資家から個人投資家までタイプの異なる投資家それぞれの投資行動を統計力学のポリマーを用いて表現し,累積取引符号を表す離散型確率過程を定義した。さらにクラスター展開を用いて,そのスケール極限の連続時間確率過程がブラウン運動と異なるハースト指数を持つ複数の非整数ブラウン運動の重ね合わせになることを示した。これらのハースト指数は1/2以上,すなわち得られた確率過程の増分は長期記憶を持つことが示された。先行研究では,取引頻度の高い投資家の投資行動が取引符号の長期記憶を生み出す主な原因と考えられていたが,本研究で構成された連続時間確率過程のハースト指数に最大の寄与をするのは,取引頻度が中間的な投資家であるという興味深い結果が得られた。当該年度は,投資家による投資行動をポリマーで記述し,統計力学において発展を遂げてきたクラスター展開の手法を用いることで,金融市場における取引符号の長期記憶性を説明する新しい数学モデルを提案する研究に取組んだ。長期記憶性の原因について(1)注文の分割発注,(2)発注の時間間隔はべき分布にしたがう,(3)群集行動のひとつである公開情報の効果,の3つの仮説を用いて数学モデルを構成した。(1)は計画した売買注文(これを「潜在的注文」とよぶ)を一度に市場に発注せずに分割して発注する投資家の行動により長期記憶性が発生するという仮説であり,金融取引の現場および経済物理学における先行研究においても広く受け入れられている考え方である。なおモデルを単純にするために,すべての潜在的注文のサイズは2つであると仮定している。(2)は電子メールの送信など特定の人間行動に注目したとき,その行動の時間間隔はべき分布にしたがうという「バースト現象」の理論にもとづいた仮説である。金融市場には価格に影響を与える数多くの公開情報が続々と到着する。(3)は公開情報に対する投資家の反応に遅れがあることから,取引符号の長期記憶性が発生するという仮説である。これらの3つの仮説のもとで,累積取引符号の離散時間確率過程を定義した。その確率過程にある変換を施したものがトレンド項に概収束すること,すなわち大数の強法則が成り立つことを示した。さらにトレンド項からの揺動をスケール変換した極限が,長期記憶性を持つ連続時間確率過程に弱収束することを示した。このとき導出された確率過程は,ブラウン運動に対する確率積分とハースト指数が$ 1/2 $より大きい非整数ブラウン運動に対する確率積分の和で表現される。なおこの研究成果は,2つの国際学会(マケドニア,インド)で研究発表を行い,学術雑誌に投稿中である。本研究の当該年度の目的は,人間行動の時間間隔の分布が取引符号の長期記憶という現象に及ぼす影響を理論的に調べることである。人間行動の時間間隔の分布に加えて,次年度以降の課題である群集行動のひとつである公開情報の効果を取り入れた新しい数学モデルを構築した。今回のモデルでは,大数の強法則を示すことで群集行動の影響によるトレンド項が導出された。さらにトレンド項からの揺動が長期記憶性を持つことが示された。当該年度は,前年度に引き続き,取引符号の長期記憶性を統計力学モデルで記述する研究に取組むとともに,投資家の行動に市場の情報がフィードバックされるモデルについての研究に着手した。現実の金融市場において,多くの投資家が取引コストを抑制する目的で予定しているある一定規模の売買注文(潜在的な注文)を一度に市場に発注する代わりに,小口の注文に分割して発注するという行動をとることが知られている。本研究のモデルでは,1人の投資家による1つの潜在的な注文の一連の分割発注(分割しない注文を分割数0としてモデルに取り込む)を,発注時間の列,取引符号(売り注文は+で買い注文はー)の組み合わせで表現し,これを統計力学の用語を用いてポリマーとして記述した。このとき,取引符号のみに注目するのであれば,金融市場を多くの互いに重なり合わないポリマーの集合体として記述することができる。ポリマーごとに異なる重みを与える。分割された注文間の時間間隔が大きくなるに連れてべき分布にしたがってポリマーの重みが減衰すするとし,ニュースなどの外因的要素もポリマーの重みに反映するとした。このようにそれぞれのポリマーに異なる重みを与えることで,ポリマーの実現可能な配置(ひとつの時間に注文はひとつのみとする)全体の空間に確率測度を定義する。多くのポリマーからなるひとつの配置に対し,取引符号の累積和の関数を考え,これを標本路とする離散時間確率過程を定義することができる。統計力学において発展を遂げてきたクラスター展開の手法を用いることで,累積取引符号の離散時間確率過程を時間方向と空間方向に適切にスケーリングした極限の連続時間確率過程が得られた。この極限の過程は増分が長期記憶性をもつ非整数ブラウン運動を用いて表現される。

すなわち,取引符号の長期記憶性を理論モデルにより再現することに成功した。なおこの結果は学術雑誌に掲載された。本研究は,統計力学の手法を用いて金融市場における時間相関に関する確率モデルの構築を行なっている。当該年度には,これまでの研究成果をまとめた論文を学術雑誌で発表した。この論文の理論モデルでは,潜在的な注文の分割数に上限を設けたが,該当年度の研究により,分割数の上限を設けないモデルに拡張した。さらに,この理論モデルにおける累積取引符号の離散時間確率過程のスケール極限として得られる連続時間確率過程は長期記憶性をもち,その記憶の強さを表すハースト指数は,潜在的な注文の分割数がある中間的な値であるような投資家グループの投資行動により大きな影響を受けることを明らかにした。またフィードバックの効果を取り入れた新しいモデルについて考察を始めた。当該年度は,金融市場における高頻度データで観察される取引符号が記憶をもつことについて,理論モデルを構築することでその原因を探る研究を行った。金融市場における高頻度データには,すべての約定が記録されており,ひとつひとつの約定が買い注文によるもの(取引符号をプラスとする)か売り注文によるものか(取引符号をマイナスとする)のデータを取り出すことができる。価格の上昇(プラス)と下落(マイナス)のデータは記憶を持たない,すなわち自己相関がきわめて弱いことが古典的に知られている一方で,この取引符号のデータが長期記憶をもつことが近年の実証研究により明らかになっている。取引符号が長期記憶をもつ原因のひとつとして,投資家が潜在的な注文を分割して発注する行動が挙げられている。また市場のマルチフラクタルな構造との関連も指摘されている。本研究では,投資家の分割発注行動を統計力学におけるポリマーを用いて表現した。投資家の注文の売り買いの種類に相当する符号と,注文時間に相当するある有界区間内の整数の集合でポリマーを定義して,ポリマー全体の集合を標本空間とする。このとき標本空間は有限集合であり,ひとつひとつのポリマーに確率を与えることで確率測度を定義する。ここで,投資家が一つの注文を発注してから次の注文を発注するまでの時間間隔をバラバシのバースト理論にしたがい,べき分布になることを仮定した。さらに,多くの取引を活発に行っている投資家は,注文と注文の時間間隔が短いことから,べき指数が大きくなることを仮定した。理論モデルによれば,取引回数が中間的な投資家の行動が取引符号に最も大きな影響を与えていることが示唆された。本研究では,投資家の分割発注が取引符号の長期記憶に与える影響について理論的な考察を行っている。これまでの研究では,技術的な問題から投資家の分割数に制限を与えていたが,その制限を取り除くことにほぼ成功している。当該年度には,この新しい理論モデルの論文を執筆する予定であったが,本務校での業務が多忙であったこともあり,理論的な細部について十分に検討する時間を確保することが困難であったため,当初の計画から遅れている状況である。
光遺伝学による光活性化アデニル酸シクラーゼ合成酵素（PAC）の創成

光活性化アデニル酸シクラーゼ(photoactivated adenylate cyclase; PAC)は、動物・植物で普遍的な情報伝達物質(cAMP, cGMP)の生産を光で制御できる生体タンパク質で、生体内での光スイッチとして医学的な応用が期待される分子である。PACは、最初にミドリムシから発見され以後、複数の原核生物からも相同遺伝子が見出されていたが、いずれも原子レベルでの構造・機能解明までには至ってなかったが申請者によって、ランソウ由来の光活性化アデニル酸シクラーゼ(OaPAC)における初めて原子レベルでの構造・機能解明に成功した。本研究では解明されたOaPAC光活性化メカニズムの構造科学的解明を基に、細胞内でのセカンドメッセンジャー光制御への光遺伝学の展開や、PACの酵素ドメイン改変によるcGMP光産生酵素の創出、更には脳病変発生などにおける発生学的疾病の機構解明と治療を光制御医学ツールとして基礎医学的研究を目指す。本研究の目指す、藍藻(ランソウ)由来の生物光センサー分子OaPACやその改変OaPACタンパク質の応用による細胞内セカンドメッセンジャーcGMPを光で制御する手法の確立は、これらによる特異的遺伝子発現制御などを介した血管新生・脳疾患・記憶・神経ネットワークの形成など、広範な発生・分化的メディカル現象の機構のよい解明と、それを踏まえた革新的な治療法あるいは薬剤スクリーニング法の開拓につながる、極めて有望な方向である。本年度ではOaPAC(1-366残基)の遺伝子に、N末端の領域HisタグとFactorXaサイトを付加し、プラスミドをpColdベクターに挿入した。作成したプラスミドを用いてE. coliArcticExpress株に形質転換し、LB培地で培養した。37°Cで培養後O.D.600が0.5-0.8のときに終濃度0.5 mMとなるようにIPTGを添加し、タンパク質の発現誘導を10°Cで4日間行った。OaPAC菌体を陰イオン交換カラム、硫安沈殿、ハイドロキシアパタイトカラムで精製した。精製したサンプルを10 mg/mlまで濃縮し、Roseo-Flavin化合物を導入し、4°Cで1日間攪拌しながら、FAMの置換を行った。その後、ハイドロキシアパタイトカラムで精製を行う。この操作を3回繰り替えることで、高純度のRoF-OaPACタンパク質の作製に成功した。PACは日本の研究グループによって発見されたタンパク質で、青光により活性化アデニル酸シクラーゼcAMP分子を量産する酵素として、特性解明や生物機能光制御への展開も提唱・実行してきた(Nature, 2002)。本申請者は、PACの相同遺伝子であるOaPACの立体構造解明に世界初めて成功し、光活性化機構に関する構造科学的な研究は本研究グループが先駆的に積み上げてきた。神経興奮の光制御、いわゆる「光遺伝学、optogenetics」が急速に普及し、OaPACによるcAMPを介する生体機能光制御も概念上同類とみなされつつあるが、はるかに広範で多彩な生命活動の光制御につながり、血管新生・脳病変原生・神経回路ネットワーキング・記憶などの光発生医学現象の制御・解明・治療・創薬スクリーニングという広大な新分野の開拓を先導するものであり、かつ独創的な新領域の研究分野であると言える。このような目標に向け、今後、高純度のRoF-OaPACタンパク質のcAMP活性測定や、反応機構、X線結晶構造解析を行い、詳細な機能・構造解析を行う予定である。また、OaPACにRoseo-Flavinが置換されたOaPAC-RoFタンパク質を哺乳類培養細胞HEK293細胞へ導入し、光制御、生物発光による細胞内cAMPの定量計測を行う。市販のプラスミドpGloSensor-22F (プロメガ社製)を用いて、glosensor-22Fを発現するHEK293細胞株に発現させる。細胞内cAMPの定量計測はホタルイカのルシフェラーゼベースによるcAMPレポーターの発光で行う。細胞内での発光量は浜松ホトニクス製のEM-CCDカメラにより測定をおこなう。本申請者はこのような方法で、OaPAC(ワイドタイプ)をHEK293細胞での光制御による細胞内cAMPの定量計測技術は確立している。本研究の目指す、藍藻(ランソウ)由来の生物光センサー分子OaPACやその改変OaPACタンパク質の応用による細胞内セカンドメッセンジャー

cGMPを光で制御する手法の確立は、これらによる特異的遺伝子発現制御などを介した血管新生・脳疾患・記憶・神経ネットワークの形成など、広範な発生・分化的メディカル現象の機構のよい解明と、それを踏まえた革新的な治療法あるいは薬剤スクリーニング法の開拓につながる、極めて有望な方向である。本年度ではOaPAC(1-366残基)の遺伝子に、N末端の領域HisタグとFactorXaサイトを付加し、プラスミドをpColdベクターに挿入した。作成したプラスミドを用いてE. coliArcticExpress株に形質転換し、LB培地で培養した。37°Cで培養後O.D.600が0.5-0.8のときに終濃度0.5 mMとなるようにIPTGを添加し、タンパク質の発現誘導を10°Cで4日間行った。OaPAC菌体を陰イオン交換カラム、硫安沈殿、ハイドロキシアパタイトカラムで精製した。精製したサンプルを10 mg/mlまで濃縮し、Roseo-Flavin化合物を導入し、4°Cで1日間攪拌しながら、FAMの置換を行った。その後、ハイドロキシアパタイトカラムで精製を行う。この操作を3回繰り替えることで、高純度のRoF-OaPACタンパク質の作製に成功した。PACは日本の研究グループによって発見されたタンパク質で、青光により活性化アデニル酸シクラーゼcAMP分子を量産する酵素として、特性解明や生物機能光制御への展開も提唱・実行してきた(Nature, 2002)。本申請者は、PACの相同遺伝子であるOaPACの立体構造解明に世界初めて成功し、光活性化機構に関する構造科学的な研究は本研究グループが先駆的に積み上げてきた。神経興奮の光制御、いわゆる「光遺伝学、optogenetics」が急速に普及し、OaPACによるcAMPを介する生体機能光制御も概念上同類とみなされつつあるが、はるかに広範で多彩な生命活動の光制御につながり、血管新生・脳病変原生・神経回路ネットワーキング・記憶などの光発生医学現象の制御・解明・治療・創薬スクリーニングという広大な新分野の開拓を先導するものであり、かつ独創的な新領域の研究分野であると言える。このような目標に向け、今後、高純度のRoF-OaPACタンパク質のcAMP活性測定や、反応機構、X線結晶構造解析を行い、詳細な機能・構造解析を行う予定である。また、OaPACにRoseo-Flavinが置換されたOaPAC-RoFタンパク質を哺乳類培養細胞HEK293細胞へ導入し、光制御、生物発光による細胞内cAMPの定量計測を行う。市販のプラスミドpGloSensor-22F (プロメガ社製)を用いて、glosensor-22Fを発現するHEK293細胞株に発現させる。細胞内cAMPの定量計測はホタルイカのルシフェラーゼベースによるcAMPレポーターの発光で行う。細胞内での発光量は浜松ホトニクス製のEM-CCDカメラにより測定をおこなう。本申請者はこのような方法で、OaPAC(ワイドタイプ)をHEK293細胞での光制御による細胞内cAMPの定量計測技術は確立している。
消化器癌転移時のセンチネルリンパ節微小環境変化を可視化評価するための基礎研究

臨床応用も行われているセンチネルリンパ節理論であるが、癌転移巣の形成に関しては癌細胞の特性の研究は多く行われているものの、その受け皿であるリンパ節内の環境が変化するという視点からの研究はほぼ皆無であった。本研究課題の遂行により、リンパ節の内部環境を変化させるような要因がリンパの流れや癌細胞から分泌されるケモカインであることが確認できた。この事実をもとに、リンパ節の環境変化を察知することが癌細胞のリンパ節内転移の早期診断につながるという観点からの基盤研究をさらに進めることが、臨床応用を行う上での今後の課題と考える。私共はセンチネルリンパ節理論を生理学的視点から考え直してみると、癌の原発巣から最も多量のリンパ液が流れ込んでいるリンパ節と言い換えることができる、との仮説を提唱してきた。その証明のために、本研究課題ではラット・マウスの小動物からミニブタの大動物を用いたin vivo実験を行い、多角的かつ網羅的に解析を行った。すなわち、(1)ラット尾部に、流れ刺激によってリンパ管内皮細胞から分泌されるのと同濃度のATPを外因的に投与し、リンパ節内のリンパ管内皮細胞表面の細胞接着分子ICAM-1の発現が亢進することを発見した。(2)ケモカインの一種であるCCL2で培養リンパ管内皮細胞を刺激することによっても、リンパ管内皮細胞表面のICAM-1の発現亢進が認められた。(3)発現が亢進したICAM-1を用いて培養乳癌細胞がリンパ管内皮細胞と接着しやすくなることも確認した。この事実をもとに、リンパ節の環境変化を察知することが癌細胞のリンパ節内転移の早期診断につながる基盤研究を進めることが更なる課題と考える。2005年に特許出願(特許2005-19853)したヒトリンパ管内皮細胞株と市販されているヒト胃癌細胞株を用いて、分子生物学的、分子遺伝学的研究を行い、微小癌転移モデル実験でリンパ管内皮細胞表面に特異的に発現する分子マーカーを体系的に解析した。また、生体顕微鏡システムを用いて、市販されているヒト腫瘍細胞株あるいは腫瘍細胞分泌物質を用いてセンチネルリンパ節の微小癌転移モデル実験を行い、センチネルリンパ節における微小癌転移成立時にそのリンパ節内に生ずる内部環境の変化を分子マーカーの出現、リンパ液内のケモカイン、サイトカインの量的変化、リンパ内圧、リンパ流量、リンパ酸素分圧変化等の指標を用いて体系的に解析した。その結果、高転移株の腫瘍細胞により分泌されるATPやケモカインの一つであるCCL2等によってセンチネルリンパ節に微小癌転移が成立する直前に、リンパ管内皮細胞に接着因子ICAM-1が特異的にしかも48時間以上長時間にわたって強く発現することを見出した。すなわち、エーテル麻酔を施行したWistar系ラットおよびDDYマウスを用いて、尾部付け根に癌細胞培養上清、ATP (10-8M10-6M)、CCL2 (100300ng/mL)、各種リンパ管新生刺激因子(VEGF-C・CXCL12等)を皮下投与し、18時間待機する。翌日、ネンブタール腹腔内投与により麻酔した後、尾部付け根からアルブミン含有エバンスブルー色素を注入し、リンパ節が濃染するのを確認した後摘出し、薄切標本を作製して、ICAM-1を含む接着分子の発現変化を検討した結果、外因性ATP投与群で所属リンパ節に多量のICAM-1が発現することを見出した。研究実績の概要で述べたように、センチネルリンパ節内に微小癌転移を成立させるリンパ節内の微小環境の変化を分子生物学的レベルで解明できた。さらにマウスの腸管リンパ節の蛍光顕微鏡を用いた可視化実験で、微小癌転移の分子イメージングも可能となる実験成果を収め、平成25年度の実験計画を進めるための基礎データをほとんど取得できた状態にある。24年度と同様のヒトリンパ管内皮細胞株ならびにラット、マウス等の実験動物を用いて、ケモカイン、サイトカイン刺激によるリンパ節内の微小環境変化を免疫染色にて解析する。具体的には、Wistar系ラットおよびDDYマウスを用いて、エーテル麻酔を施行したうえで、尾部付け根に癌細胞培養上清、ATP (10-8M10-6M)、CCL2 (100300ng/mL)、各種リンパ管新生刺激因子(VEGF-C・CXCL12等)を皮下投与し、18時間待機する。翌日、ネンブタール腹腔内投与により麻酔した後、尾部付け根からアルブミン含有エバンスブルー色素を注入し、リンパ節が濃染するのを確認した後、摘出し、薄切標本を作製して、ICAM-1を含む接着分子の発現変化を検討する。前年度は当初計画時よりも研究用消耗品が安価で購入できたため、未使用額が生じた。次年度の請求額と合わせ、センチネルリンパ節

微小環境変化を可視化する実験ための実験動物(マウス、ラット等)、ICAM-1等分子マーカー抗体、研究用消耗品費用のほか、研究成果の発表等に必要な旅費、論文投稿料に使用する。
ラット海馬における「自己」と「他者」の空間表現のメカニズム

25年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は,他者の行動に対するラット海馬の場所ニューロンの活動特性を明らかにし,海馬領域の空間認知に関するミラーシステムとしての可能性を検討することを目的としている。研究初年度である本年度は,報酬を獲得するためにラットが互いの行動に対して持続的に注意を払う必要がある行動課題を考案し,迷路装置の設計と実装を行った。また,ラット海馬には運動に関連して反応するニューロンも少なくないため,それらの他者への反応を検討するべく,スキナー箱を用いた2匹のラットによる協調行動課題を考案し,装置の設計を行った。両課題ともに現在ラットの訓練を進めている。一方,ラットが他者に注意を払っている期間は,一般的に行動が止まり,移動行動中とは異なるメカニズムのシータ波が強く観測されることが知られている(Type 2シータ波)。場所ニューロンの活動は移動行動中のシータ波(Type 1)との関係性が多角的に議論されているが,Type 2シータ波に関する知見は非常に少ない。移動行動中と静止中の神経活動の類似点と相違点をクリアにするために,本年度はType2シータ波と静止中の細胞活動の関連性と,静止期間の海馬における局所脳波のダイナミクスを詳しく解析した。その結果,ラットが行動を停止し,次の行動再開に向けて準備を開始すると,海馬内のガンマ波は最初高周波成分が強く,その後低周波成分が強くなる傾向が確認された(CA1領域での計測)。これは行動を停止した直後には海馬が海馬外部からの入力を強く受け取り,その後海馬内部(CA3)の活動が高まって行くという情報処理の流れを強く示唆している。またガンマ波,細胞活動ともに静止中のシータ波の特定の位相に強く活動がロックしていることも確認された。これらの結果と今回用いた解析手法は,二個体で行う実験課題のデータ解析に活用してゆく。(i)過去の研究例では2匹のラットが自由探索行動をしている際の海馬活動には,明確な他者の脳内表現は確認できなかったとされている。そこで本研究では,報酬を獲得するためには,他者のラットの動きを定点から注視する必要のある迷路課題を考案し,迷路装置の設計・実装を完了させた。現在は一部装置の制御をコンピュータで自動化する必要性が生じたため,改良を行なっているが進捗は概ね順調である。(ii)他者の行動を注視している際,ラットは行動を停止することが一般的である。そのような静止状態に発生する海馬内シータ波(Type 2)は,移動行動中のType1シータ波とは薬理学的性質や発生の起源が異なるが,その特性の詳細は明らかになっていない。本年度は今後の解析に備えて,単独のラットに認知課題を行わせ(delayed spatial alternation),行動を一時的に停止して次の行動を再開させるタイミングを図っている際に観測されるシータ波・ガンマ波と,細胞活動の関連性を詳細に解析した。その結果,この状態に特徴的な神経活動の特性を捉えることに成功した。現在この成果については1編が論文投稿中であり,さらに1編が投稿準備中である。また,これらの現象から推測される,行動準備中の海馬における情報処理の流れに関する仮説モデルを構築し,この期間の特徴的な神経活動の機序を説明する計算モデルの構築を,同じ新学術領域「情報創成機構」の所属グループ(津田一郎教授班)との共同研究としてスタートさせた。以上より,初年度の研究は概ね順調に進捗していると判断する。平成25年度は,初年度に実装した迷路を用いた行動観察課題の訓練を完了させ,課題中のラットからの神経活動記録・解析を本格的に進めて行く。「他者」の行動を観察している際のラットの行動状態に注意し,なるべく運動由来の外乱を排除した静止状態で観察が行われるように,課題と装置の細部の調整を行う。データの解析には,従来の場所ニューロンの活動パターン解析と併せて,初年度の研究で発見した静止状態特有の神経活動が,他者の観察行為によってどのような影響を受けるのかという点にも着目し,局所脳波・細胞活動の両面から詳細に解析して行く。また,場所ニューロンが他者の行動に対して明確な神経活動を示さなかった場合を想定し,互いの姿が確認できる壁面の透明なスキナー箱2台をつなぎあわせた装置を使った2匹のラットによる協調行動課題を考案した。海馬ニューロンには運動に関連した活動を示すものも少なくないため,場所ニューロンの解析と併せて,これらのニューロンの他者の動きへの応答特性を,この協調行動課題を用いて解析して行く。そして,得られたデータの背後にあるメカニズムの検証(シミュレーション)および計算モデルの構築にあたっては,初年度にスタートさせた本新学術領域・津田一郎教授グループとの共同研究を引き続き推し進めていく。
社会的排除による権利侵害への憲法理論に関する横断的比較法的研究

社会学的文脈において、排除構造に着目して差別などの問題を把握・摘発するものとして「社会的排除」という考え方がある。本研究はこの「社会的排除」という分析視点を利用して、これまで憲法上の権利侵害とみなされていなかった差別問題を可視化し、それに由来する差別を救済する法的な枠組作りを目指す。その際に、欧州や米国の事例や救済策を調べ、それらの議論を踏まえたうえで、日本国憲法論として扱える「社会的排除」論の構築を目指す。
乳歯歯根吸収および永久歯歯根形成に伴う歯根膜咬筋反射の変化

末梢性下顎運動制御に果たす歯根膜受容器の役割は大きく、成人や成熟動物を対象とした実験系により神経生理学的にかなり詳細に解明されてきている。しかしながら、歯根の吸収・形成に伴う変化については、いまだ不明な点が多い。ヒト小児を対象とした研究では、児が検査者の指示に従えないため、口腔内から誘発される反射様相を観察することはこれまで困難であった。そこで今回、歯に振動刺激を加える新たな刺激方法を用い、被験児の協力度に影響を受けない実験系を考案した。被験児にバイトブロックを咬合させ、弱い筋活動が咬筋に認められる状態で、24-96Hzの機械的振動刺激を上顎乳中切歯に加えると、振動に対応して強い抑制反射とそれに引き続く筋活動興奮性の回復が観察された。刺激頻度が高くなると、刺激と筋活動変化の対応は不明瞭となった。刺激方向は、唇側から舌側へ、舌側から唇側への2方向としたが、反応は類似していた。また、歯根の吸収程度をデンタルエックス線写真で確認し、歯根膜咬筋反射の出現様相との関連を調べたところ、歯根全長がほぼ吸収完了する時点まで、歯根膜由来の咬筋への反射は残存し、大きく変化しないことが明らかとなった。臨床的には乳歯歯根吸収がかなり進行しても、動揺度が大きくならず、咀嚼が可能である。乳歯が歯としての機能を果たしている間は歯根膜からの反射性調節機構が残存している可能性が示唆された。あわせて小児の顎運動機能の成長に関するいくつかの研究を行い、小児の吸啜から咀嚼までの発達様相を総合的に評価することができた。なお、永久歯歯根形成に伴う歯根膜咬筋反射の変化については、動物実験にて形成中の永久歯歯根への振動刺激が侵害刺激でないことを明らかにした後、再検討する予定である。平成7年度は、乳歯歯根吸収、永久歯歯根形成に伴う歯根膜咬筋反射の発育変化を分析するためのコントロールとして、歯根安定期での歯根膜咬筋反射の出現様相についてデータの収集、分析を行った。被験者に、臼歯部でバイトブロックを一定の力で咬合させ、上顎の切歯唇側にストレインゲージを内蔵した被刺激板を装着し、唇側から、あるいは舌側からの異なる2方向から各種頻度で振動刺激を与えた。咬筋の反射活動の変化を双極表面電極で導出し、以下のような傾向を認めた。顎口腔系に異常を認めない成人では、1.持続的圧刺激では唇側から刺激を加えると、抑制反射が、舌側からでは興奮反射が生じたが、振動刺激時には両方向とも、潜時の短い抑制反射とそれに引き続く興奮反射が出現した。2.抑制反射が生じてから、興奮反射を認めるまでの潜時は、唇側からの刺激時の方が長かった。3.刺激頻度が高くなると、興奮反射は減弱された。4.持続的圧刺激と比較して振動刺激による反射閾値は低値であった。5.上顎切歯に浸潤麻酔を施したところ、咬筋の応答は著しく減弱された。上顎乳中切歯歯根吸収開始以前の小児では、1.方向性、反射閾値、生じる反応は成人と類似していた。2.比較的高頻度の刺激ほど安定した効果が記録された。3.低頻度の刺激時には、一定の咬合力でバイトブロックを咬んでいるようにという指示に従えないことが多かった。

次年度は、以上の傾向を定量化するために被験者数を増やし、当初の予定通り、歯根吸収度、形成度に応じた反射効果の変化についても調べる予定である。ヒト上顎切歯へ機械的振動刺激を加え、咬筋に誘発される反射性応答を記録した。顎口腔機能に異常を認めない成人および、幼児を対象とした。被験者(児)に、臼歯部でバイトブロックを一定の力で咬合させ、上顎永久(乳)中切歯の唇側にストレインゲージを内蔵した被刺激板を装着し、唇側から、あるいは舌側からの異なる2方向から機械的振動刺激を加えた。両方向とも刺激の頻度を変えて実験を行った。咬筋の反射性筋活動の変化を双極表面電極で導出・記録した。以下のような傾向を認めた。成人においては、1.持続的圧刺激では唇側から刺激を加えると、抑制反射が、舌側からでは興奮反射が生じたが、振動刺激時には両方向とも、潜時の短い抑制反射が記録された。2.抑制反射に先立ち筋活動波形にピークが認められた。このピークは運動ニューロンに強い抑制が生じた際に表出される筋電図波形の特徴的変化と考えられた。3.刺激頻度が高くなると、ピークの大きさは小さくなった。4.成人に浸潤麻酔を施したところ、咬筋の応答は著しく減弱された。歯根吸収を認めない小児においてもほぼ同様の反射性筋活動変化が観察された。持続的圧刺激では実験者の指示に従えないことが多く、小児が反射性変化を誘発することが容易でなかった。これに対し、振動刺激では低頻度の刺激の場合を除いて再現性が高かった。歯根吸収が開始された小児においては、吸収程度に応じた反射効果の減弱を予想したが、乳歯の脱落間近になるまで、反射性効果が容易に誘発された。レントゲン的に歯根吸収がほぼ完了した時点で、成人の麻酔実験と同様反射性効果が著しく減弱された。末梢性下顎運動制御に果たす歯根膜受容器の役割は大きく、成人や成熟動物を対象とした実験系により神経生理学的にかなり詳細に解明されてきている。しかしながら、歯根の吸収・形成に伴う変化については、いまだ不明な点が多い。ヒト小児を対象とした研究では、児が検査者の指示に従えないため、口腔内から誘発される反射様相を観察することはこれまで困難であった。そこで今回、歯に振動刺激を加える新たな刺激方法を用い、被験児の協力度に影響を受けない実験系を考案した。被験児にバイトブロックを咬合させ、弱い筋活動が咬筋に認められる状態で、24-96Hzの機械的振動刺激を上顎乳中切歯に加えると、振動に対応して強い抑制反射とそれに引き続く筋活動興奮性の回復が観察された。刺激頻度が高くなると、刺激と筋活動変化の対応は不明瞭となった。刺激方向は、唇側から舌側へ、舌側から唇側への2方向としたが、反応は類似していた。また、歯根の吸収程度をデンタルエックス線写真で確認し、歯根膜咬筋反射の出現様相との関連を調べたところ、歯根全長がほぼ吸収完了する時点まで、歯根膜由来の咬筋への反射は残存し,大きく変化しないことが明らかとなった。臨床的には乳歯歯根吸収がかなり進行しても、動揺度が大きくならず、咀嚼が可能である。乳歯が歯としての機能を果たしている間は歯根膜からの反射性調節機構が残存している可能性が示唆された。あわせて小児の顎運動機能の成長に関するいくつかの研究を行い、小児の吸啜から咀嚼までの発達様相を総合的に評価することができた。なお、永久歯歯根形成に伴う歯根膜咬筋反射の変化については、動物実験にて形成中の永久歯歯根への振動刺激が侵害刺激でないことを明らかにした後、再検討する予定である。
共役高分子1分子鎖の本質的伝導特性の非接触定量評価

本年度は、研究実施計画の中でも主に、分子の合成方法そのものに着目した。発達したπ電子系を主鎖に有する分子の合成には、多くの場合、金属触媒を用いた塩基存在下でのハロゲン化アリルのカップリング反応が用いられる。また、オリゴマーの合成のためには多層多段階の反応が必要であり、最適な反応環境に要求される条件も厳しい。実験として、DHF-Br_2を様々な溶媒に溶解し、5分間のArバブリング、もしくは脱気下封管したサンプルにγ線を27-430kGy照射した。照射後溶液の上澄みを取り、Benzeneに希釈し、吸収と発光スペクトルの測定を行った。生成物の同定に、1HNMRやGPC測定、質量分析を用いた。その結果、3量体までの生成が確認され、溶媒にPyridineやBenzeneを用いるとオリゴマー生成率が高いことが明らかとなった。また、反応の進行には、DHF-Br_2からの解離したBr-の塩形成が重要であることが明らかとなった。さらに、溶媒のG値を考慮すると、オリゴマー生成反応には解離性電子付着のみでなく、溶媒の励起状態を経由したモノマーラジカルの生成経路の存在が示唆された。光電子材料・生体センサー等への応用を鑑みると、物質中の電荷移動度の最適化は不可欠であり、高分子の電子構造を正確に理解するためには、明確な構造を有するオリゴマーの電子構造の詳細な検討が有効である。本研究では、fluoreneの9位にhexyl基及びhydroxyethoxymethyl基を有する両親媒性のAm-F3を合成し、UV-vis.分光測定、蛍光測定を行い、hexyl基のみを有する疎水性のDHF3の光学特性及び骨格上の電荷分布について比較検討を行った。UV-vis.分光測定結果より、Am-F3では溶媒の極性の増加に伴う吸収のred-shiftが見られる一方、DHF3では溶媒の影響は見られなかった。密度汎関数法により、Am-F3はDHF3より約10倍大きな双極子モーメントを有することが分かり、溶媒効果を受けやすいと予想される。また、Am-F3の発光スペクトルにおいて、溶媒の極性の増加に伴い非極性溶媒中での400nm付近の発光がほとんど見られなくなると同時に、540nm付近に強い発光が現れた。これは、溶液中でのAm-F3分子の凝集によるエキシマー発光であると推測される。極性溶液よりdrop-cast法にて作製した薄膜をAFMにより観察したところ、ナノ粒子が観測された。次に、9位にhexyl基を持つfluoreneの1-5量体(DHF1-5)の光学特性とその電子構造について、理論と実験結果の両面から考察を行った。電子線パルスラジオリシス分光法を用いたDHF1-5の各電荷キャリアの過渡吸収測定の結果は、時間依存密度汎関数法(TDDFT)による計算結果とよい一致を示し、鎖長の増加に伴う吸収のred-shiftにより鎖上の共役の発達が示唆された。またTDDFT計算により、鎖上への電荷の付与によるfluorene分子の二面角の緩和が見られ、骨格の平面性への電荷の寄与が明らかとなった。
全胚免疫・分子組織化学的染色による心・鰓弓系器官の神経・血管形成の三次元的解明

平成12年度においては、ジャコウネズミの心臓の静脈門を経て心臓に到達する交感神経の枝について、新発見をした。当該の神経枝は、胸部交感神経幹から起こり、この神経幹と平行して走っている奇静脈の壁にまとわりつくようにして走り、その後、上大静脈に沿って静脈門に到達すると神経枝であり、通常の解剖や切片標本では見つけられなかった神経である。本研究特有の全標本的免疫染色方法によって、この交感神経の心臓枝の存在が明らかになった。平成13年度は、この成果に基づいて、ヒトの成体における交感神経幹由来の心臓神経の存在に関する研究を行った。ヒトの成体、観察領域が格段に広く、その上、交感神経幹由来の心臓神経は迷走神経由来の心臓枝に比べると細く、形態が複雑である。そのため解剖学的に完全に究明し、命名するのは通常の肉眼解剖学的方法では難しい。当該の2年間の研究において、頚部ならびに胸部交感神経幹から起る心臓神経の詳細をA2用紙にスケッチし、心臓の動脈門と静脈門、さらには心間膜という発生学的形態概念を持って、心臓神経枝を明らかにした。この研究によって、ヒトの心臓に分布する全ての神経は、ジャコウネズミの成体で確認した心臓神経(Tanaka et al. 1988)と同じ名称が適用できることが判明した。向後は、当該のヒトのデータを念頭において、心臓神経枝の発生学的研究をこれまで以上に奥深く行う計画である。ラットの膝関節腔の形成の詳細についても解明した。膝関節腔は細胞のアポトーシスによって形成されると言われて来たが、免疫染色並びに生化学的研究により、そうではないことが判明した。1.ニワトリ胚の心臓分布する神経(節)の発生について心臓枝と、心臓神経節を形成する神経堤細胞は、肺心間膜を経由して心房中隔を経て、房室結節に達することが判った。横中隔レベルにある食道心間膜を経由するものについては、更に電子顕微鏡を用いて所見を得る必要があることが判明した(向後の研究)。2.ジャコウネズミの静脈門から入る心臓神経についてジャコウネズミの胚を全胚的免疫染色し、心臓に分布する神経を染色する実験と平行し、心臓神経形態形成過程の到達点を予め把握しておくべく、成体の心臓及び周囲大血管を全胚的に免疫染色して、神経を染色した。その結果、通常の切片標本や解剖手技では観察不可能であった奇静脈、大静脈を経由する神経と、心房中隔を通過して房室結節に達する神経の存在を発見した。3.ヒトの成体の心臓に分布する迷走神経並びに交感神経の枝について高度臨床解剖学実習に用いられる解剖体の心臓・大血管を0.03%含有のエチルアルコールの中に長期間保存し、実態顕微鏡下で当該の神経をこれまで以上に詳細に検索したところ、上・中・下頚(交感)節から起こり、心臓の動脈門に入り込む心臓神経が回転しながら、左右冠状動脈起始部に達することを初めとする、発生学的研究の為の基礎データを得た。4.膝関節腔の形成について膝の関節に分布する神経を追跡する研究過程で、膝関節腔は細胞のアポトーシスによって形成されると言われて来たが、免疫染色並びに生化学的研究により、そうではないことが判明した。1.ニワトリ胚の心臓に分布する迷走神経由来の枝(以下、心臓枝と称する。)とジャコウネズミの成体心臓に分布する心臓枝(迷走神経由来)と、交感神経幹由来の枝(以下、心臓神経と称する。)の殆ど全てについて解明が終了した。私達は、両者における心臓枝の形態がヒトの生態における心臓枝の形態と一致することを既に確認している。問題は心臓神経の形態であった。

当該の神経は心臓枝に比べると形態が複雑であり、しかも細いので解剖学的に完全に究明するのは困難であり、しかも命名が研究者により異なっている。私達はヒトの複雑な心臓神経の形態を時間を要したが殆ど解明が終了した。その結果、ジャコウネズミの成体で確認した心臓神経とほぼ同じ名称が適用できることが判明した。つまり、上・中・下頸心臓神経のほかに、胸部交感神経節で第4若しくは第5胸部交感神経節から起こり、心臓の静脈門に達する神経が存在することを確認した。強調すべきことは、これらの神経がジャコウネズミの成体の場合と同様に奇静脈と上大静脈の壁に沿って走行し、終局的に心臓の静脈門に達するということである。この枝については、これまでに記載が無く、私達が始めて形態を明白にしたと思っている。それは免疫組織化学的方法を用いて、ジャコウネズミの成体において、通常の解剖方法では確認出来ない程の細い枝を確認した結果に依拠し、ヒトの成体での同格の心臓神経の存在を想定したために、幸いにして同格神経の実在を確認することが出来たと思っている。2.ヒトの成体の肝臓に分布する神経の中で、新たに肝静脈に沿って肝臓に入る枝を確認した。今まで記載が無かった枝である。この枝は横隔神経と密接に関係している。向後は肝臓に分布する神経の発生をこの所見を配慮しながら、新しい観点から解明する計画である。
航空宇宙機用複合材構造の効率的最適化法の研究

本研究では,複合材料の異方性を積極的に利用するために,数理計画法等の最適化手法を用いて航空宇宙機用複合材構造の効率的最適設計法を発展させることを目的とした。本研究により得られた主要な成果は以下の通りである。1.航空宇宙機翼外板あるいは桁ウェブで使用される対称積層板を対象に,圧縮あるいはせん断荷重下での座屈特性を明らかにするとともに,座屈特性に関する最適化を行った。設計変数として4個の面外積層パラメータを用いることにより,あらゆる積層構成を考慮した最適化を行う手法を確立するとともに,積層板の座屈特性の最適化により大幅な軽量化が達成できることを明らかにした。2.大規模な複合材構造の効率的最適化のために,積層パラメータを中間的設計変数に用いて,精度よい近似最適化問題を作成する手法を開発した。本手法を面内力を受ける最小重量設計問題および振動数制約を受ける最小重量設計問題に適用し,10回迄の有限要素法解析で最適解が得られた。3.繊維角・層厚に加え構造形状を最適化する効率的最適化手法を提案した。本手法は,ひずみエネルギ最小化基準に基づく繊維角と層厚決定手法,並びに,古典的最適性規準法とを組合せた手法であり,10回程度の有限要素法解析で最適な形状,繊維角および板厚分布が得られた。4.遺伝的アルゴリズムによる積層材の各層の繊維角決定法を提案し,面内および面外の弾性係数の要求条件を満たす積層構成を求めた。
世界のグローバル企業のガバナンスとパフォーマンス：ステークホルダーアプローチ

平成30年度は、昨年度に引き続き、3つの研究プロジェクトを前に進めた。まず、プロジェクト1(世界のグローバル企業の経営目標)に関しては、昨年度に引き続き、データの収集を行った。その過程で、経営理念の内容として、ステークホルダーへの言及のみならず、その他の概念(価値観、行動規範など)にも注目することが有益だとの認識を得た。プロジェクト2(世界のグローバル企業のガバナンス)に関しては、イタリア・Luiss大学のZattoni教授と研究を進め、まず日本の企業の経営理念の経年的変化の分析を行った。1986年2017年の間の5時点のデータを分析し、経営理念とその変化の決定要因を考察した。なお、日本の経営理念の分析から得られる知見は、プロジェクト2のみならずプロジェクト1(世界のグローバル企業の経営目標)にもつながるものである。プロジェクト3-1(世界のグローバル企業のCSR)に関しては、ドイツ・ベルリン自由大学のJackson教授の来日の際に、ミーティングを行うとともに日本の企業へのインタビューを実施した。また、ベルリン自由大学を訪問し、そこで再びJackson教授とミーティングを行った。プロジェクト3-2(世界の大企業の収益性と存続可能性)に関しては、昨年度行った分析を経営の安定性の分析まで拡張し、"Profitability or Business Stability?"というタイトルで、早稲田大学(2019年1月)とベルリン自由大学(2019年3月)で研究発表を行った。プロジェクト1に関しては、世界の企業の経営理念のデータを収集する過程で、経営理念の中に企業の価値観・行動規範等が言及されるケースがしばしば見つかったため、それらの概念を取り入れた形で研究が進められないかを吟味しているところである。また、プロジェクト3に関しては、今年度の研究発表において、「サンプルをFortune Global 500の企業のみに絞らずにより大きなサンプルで分析すべき」とのコメントを複数回得たため、現段階の分析結果を論文にまとめて投稿するか、よりサンプルを広げた分析を行うかを思案中である。これらのことから、進捗状況は当初の計画よりやや遅れていると考える。今後は、基本的にはこれまでの実施計画にしたがって研究を進めるが、プロジェクト3に関しては、より広い範囲のサンプルを対象にした分析を行う可能性がある。その場合には、新たなデータ収集が必要になる。平成29年度は、研究実施計画にしたがって3つの研究プロジェクトをスタートした。まず、プロジェクト1(世界のグローバル企業の経営目標)に関しては、このプロジェクトに関連する文献を読み、研究計画を立てた後、世界のグローバル企業の経営理念のデータの収集を開始した。プロジェクト2(世界のグローバル企業のガバナンス)に関しては、イタリア・Luiss大学のZattoni氏が6月に早稲田大学を訪問した際に、数回のミーティングを行った。その結果、プロジェクト1に付随した形で、日本の企業の経営理念の経年的変化を分析することから共同研究を始めようということになった。そこで、日本の大企業の経営理念のデータを1986年、1992年、1998年、2004年、2017年の5時点にわたって収集した。研究実績の概要で述べたように、29年度の研究は、一部研究計画に変更があったものの、おおむね順調に進展している。今後は、平成29年度の一部変更した実施計画、平成30年度の実施計画にしたがって、世界のグローバル企業の経営目的、ガバナンス、パフォーマンスに関する研究を遂行する。

平成29年度には、データの収集を十分に行えなかったプロジェクトがあり、そのデータ収集を行うための人件費として使用する。平成30年度には、データの収集を十分に行えなかったプロジェクトがあり、それに加えて本研究に関連した海外での学会発表も行わなかった。次年度には、その分の額をデータ収集と海外での学会発表に使用する予定である。
加齢に伴う歯周組織変化の解明とその臨床応用に関する総合的研究

1.全身状態の変化に関する研究実績(1)免疫学的機能と歯周組織状態との関連性:FcγRIIIb-NA1アレルが歯周炎抵抗性と関連していること(吉江・宮崎),残存歯が多い高齢者群では少ない高齢者群に比較して血清総IgG2量が有意に高いことが明らかになった(中島)。(2)骨密度と歯周組織状態との関連性:健康な歯周組織を有する歯を維持することは腰椎骨骨密度の維持に貢献していることが示唆された。(新田)。(3)全身疾患と歯周組織修復との関連性:ラットに吸収性膜を用いたGBR法を行った結果から,年齢や骨の粗鬆度が進行した状態に関わらず歯周組織再生効果が期待されることが示唆された。(太田)。(4)加齢と歯周組織再生能との関連性:口蓋部骨膜下組織では,移植したBMPによる骨形成促進作用については加齢による影響をあまり受けないことが示唆された(川浪)。2.歯周組織および構成細胞の変化に関する研究業績(1)歯周組織由来細胞の歯周病原性細菌に対する反応性の変化:マウス肺胞マクロファージを調製してA. actinomycetemcomitansを感染させたところ,アポトーシスによる細胞死が亢進することが明らかになった(小鷲・西原)。(2)歯周組織のコラーゲン改造機構の変化:同一歯から調製したヒト歯肉および歯根膜由来線維芽細胞の培養系を用いてエラスチンとフィブリリンの発現を比較検討した結果,両者には機能的差異がありそれが生体組織にも反映されていることが明らかになった(矢嶋)。(3)歯集組織細胞の細胞生物学的機能変化:低出力レーザー照射の生物学的効果の機序解明と受動免疫療法に安全で有用なヒト型抗体の開発を試みた結果,レーザー治療による細胞増殖の促進、炎症抑制,骨吸収抑制機序の一端が解明され,モノクローナル抗体による歯周病原菌の感染制御の可能性も示唆された。(安孫子)。(4)歯根膜の恒常性維持におけるマラッセ上皮の役割:セメント質修復の過程においてAmeloblastin, OPNおよびBMP-2を発現していることから,マラッセ上皮遺残は発生過程のセメント質形成に深く関与していることが示唆された。(小川)。(新田)。(太田)。(安孫子)。(小川)。1.全身状態の変化に関する研究実績(1)免疫学的機能と歯周組織状態との関連性70歳以上の高齢者を対象として,全身および歯周組織の診査,試料採取を行った(宮崎)。白血球遺伝子型を決定したところ,FcgRIIIb-NA1アレルは歯周炎抵抗性に関するマーカーの一つであることが示唆された(吉江)。また,血清中IgGサブクラス量については現在,測定中である(中島)。(2)骨密度と歯周組織状態との関連性骨粗鬆症患者を対象として診査を行った結果,有歯顎者の腰椎および下顎皮質骨骨密度は無菌顎者に比べて有意に高かった(新田)。