hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
腎臓特異的薬物輸送蛋白OATP-Rのノックアウトマウスの作製と生体内機能の解明

Gene Targeting vectorの構造はEx4を挟み、その5'側のintronにloxP配列を、3'側のintronにES細胞への導入時のpositive selectionのためのneomycin耐性遺伝子の両端にloxP配列を配置してある、loxP-neo-loxpカセットを挿入し、Cre recombihaseによるEx4のdeletionを行うようにし、また相同組換えのために5'側に約8.8kbのlonga arm、3'側に1.2kbのshort armとなるマウスOatp-Rのgenomic DNAを配置する設計とした。実際にノックアウトマウスを作製する系統である、129SVJ mice strainのgenomic libraryをEx4を含むDNAプローブを用いた方法でスクリーニングしEx4の5'側、3'側とも約10kbを含むgenomic DNAのクローンを単離し、さらに適切な制限酵素で切り出した断片をpBluescript-SK(+) plasmidへサブクローニングした。loxP配列の挿入上問題となる、intron上のcis elementを避けるため、同部位のintronの塩基配列をsequenceで確認の上(NIH等のマウスゲノムDNAのデータベースにあるC57BL/6 strainと比較すると、129SVJ strainではintron部分の塩基配列はsequenceを行った約3000bpの部位のみでも全体の1.4%程で塩基の置換や欠失等の相違があった)、loxP配列挿入部位を決定した。
造血幹細胞移植後の血栓性微小血管症の発症機序の解明

血栓性微小血管症(TMA)は造血幹細胞移植後の主要な合併症の1つである。移植後の腎TMAが慢性移植片対宿主病(chronic GVHD)により発症していると考えられる症例を経験した。組織学的に強い毛細血管の内皮細胞障害とC4d沈着を認め、腎微小血管に対する抗体が関与したchronic humoralGVHDによる腎TMAの概念を世界で初めて提唱し、移植後腎TMAには免疫抑制剤の増量が必要な症例が含まれると結論づけた。この裏付けとして、ラット同種骨髄移植実験を行い、ラットGVHDモデルの確立、移植後腎TMAの糸球体所見を有するモデルの作成に成功し、腎臓がGVHDの標的臓器となることを示した。造血幹細胞移植後に腎障害を呈した腎GVHD症例、特に腎微小血管の内皮細胞に対する抗体産生により発症したchronic humoralGVHDの関与が考えられる移植後TMAの症例を経験し、論文として報告した。現在、造血幹細胞移植後TMAの場合には免疫抑制薬の副作用を考えて減量されることが多いが、移植後TMAの原因にhumoral GVHDが関与する場合には、免疫抑制薬の増量を、もしくは抗体が関連している場合には血漿交換や抗CD20抗体の使用が必要となる。本研究で臨床で行われた造血幹細胞移植後症例の蓄積や、動物実験においてGVHDモデル(特にchronic humoral GVHDモデル)を作成し解析することで、その特徴を明らかにし、移植後TMAの治療や予後の大幅な改善を目指す。実際に臨床で経験した移植後TMAと考えられる症例に免疫抑制薬の増量を行い、良好な経過を得ている症例が蓄積されており、臨床病理学的特徴を解析し、今後症例数が増えた時点で論文として報告する予定である。また、動物実験モデルの作成に関しては、同種間骨髄移植のラットモデルを用いて、急性GVHDの主な標的臓器である皮膚、肝臓、消化管以外に、腎臓においても微小血管障害が存在することを確認し、学会報告するとともに解析をすすめている。造血感細胞移植後の腎障害を呈した腎GVHD症例、特に腎微小血管の内皮細胞に対する抗体産生により発症したchronic humoralGVHDの関与が考えられる移植後TMAの症例を経験し論文として報告した。現在、移植後TMAの場合には免疫抑制薬の副作用を考え減量されることが多いが、移植後TMAの原因にhumoral GVHDが関与する場合には免疫抑制薬の増量、もしくは抗体関連である場合には血漿交換や抗CD20抗体の使用が必要となる。我々は、移植後の腎GVHDと考えられる症例を蓄積するとともに臨床病理的な解析をおこない、一部の症例でGVHDに対する治療としてステロイド剤の増量を行うことにより腎機能の改善を認めたため、学会にて報告し現在論文作成中である。また、ラットを用いた同種骨髄移植実験を行い、Lewisラットへ10Gyの全身放射線照射後、DAラットの骨髄細胞を移植することで、急性GVHDを発症するモデルを確立し、GVHDの標的臓器として認知されていない腎臓でのGVHDを確認し学会で報告するとともに現在論文を作成中である。現在、慢性GVHDのstableなモデルの確立に関しても検討をすすめている。造血幹細胞移植後に腎障害を呈した腎GVHDの症例、特に腎微小血管の内皮細胞に対する抗体の産生により発症したchronic humoralGVHDの関与が考えられる移植後TMAの症例を経験し論文として報告した。現在、造血幹細胞移植後TMAの治療は免疫抑制剤の減量が行われることが多いが、造血幹細胞移植後TMAの原因にChronic GVHDが関与する場合には免疫抑制薬の増量を、もしくは抗体が関連している場合には血漿交換や抗CD20抗体の使用が必要となる。本研究で、臨床で行われた造血幹細胞移植症例や、動物実験を用いて作成したchronic GVHDモデルにおける造血幹細胞移植後TMAを解析し、特にchronic humoral GVHDによる造血幹細胞移植後TMAの存在と、その特徴を明らかにし、移植後TMAの治療や予後の大幅な改善を目指すことが目標である。当院で経験した造血幹細胞移植症例の腎生検例と剖検例の腎病変について臨床病理的解析を行い、臨床における造血幹細胞移植後TMAの発症機序にchronic GVHDが関与することを報告した。現在も症例数を蓄積中である。造血幹細胞移植後症例の腎病変について臨床病理学的解析を行い、臨床における造血幹細胞移植後TMAの発症機序に慢性GVHDが関与し、その中にchronic humoralGVHDが関与することを論文として報告した。chronic humoralGVHDが関与したと考えられる移植後TMAに免疫抑制薬の増量を行い、良好な経過が得られている症例が徐々に蓄積されてきている。また基礎実験では、現在ラット急性GVHDモデルの作成をし、腎GVHDの解析をすすめているとともに、慢性GVHDモデルの作成をすすめているところである。

造血幹細胞移植症例の2腎生検例と5剖検例の腎病変について臨床病理的解析を行い、臨床における造血幹細胞移植後TMAの発症機序にchronic GVHDが関与し、その中にchronic humoralGVHDが関与する症例があることを論文として報告した。さらに、chronic humoralGVHDによる造血幹細胞移植後TMAの頻度や予後を含め臨床病理的な特徴を明らかにするために症例を蓄積しているところである。また、ラットの急性GVHDと慢性GVHDのモデルを作成するため動物実験を進めているところである。ラットGVHDモデルの確立とそのモデルを用いて、放射線照射や免疫抑制薬の移植後TMAに対する影響、T細胞性や抗体依存性の慢性GVHDの関与を検討し、造血幹細胞移植後TMAの発症原因を明らかにする。さらに、患者血清中や動物モデルでの移植後TMAを発症させる抗体の存在とその特徴を明らかにする。ラットのGVHDモデルの確立とそのモデルを用いて、放射線照射や免疫抑制薬の移植後TMAに対する影響、T細胞性や抗体依存性のchronicGVHDの関与を検討し、造血幹細胞移植後TMAの発症原因を明らかにする。さらに、患者血清中や動物モデルでの造血幹細胞移植後TMAを発症させる抗体の存在とその特徴を明らかにする。臨床検体および動物実験モデルの腎組織の検討のため、引き続き抗体などの試薬の購入、画像解析のための消耗品の購入等に使用する。また、国内・国外の学会に参加し、研究成果の発表を行う。臨床検体および動物実験の腎組織の組織学的検討のため、引き続き抗体などの試薬の購入、画像解析のための消耗品の購入等に使用する。また国内・外の学会に参加し、研究成果の発表をおこなう。
環状炭素クラスターの分光研究

本研究では、単環構造の炭素クラスターの振電状態の解明、および、炭素数3050付近の炭素クラスターの幾何構造の決定を二つの大きな柱として研究を進めてきた。単環構造の炭素クラスターの振動構造が、その一部ではあるが負イオン光電子分光によりはじめて明らかになったことは大きな前進であった。特に、電子脱離によって励起されるの振動モードの種類が4の倍数のリングと4n+2のリングで大きく異なることの発見は、炭素数の違いによる結合交替の有無を端的に示すものであった。また、16員環骨格をもつ有機化合物の熱分解では、炭素クラスター負イオンC_<16>-だけでなく、2量体の負イオンC_<32>-も生成するが、その光電子スペクトルが別の方法で生成した単環構造のC_<32>-のものとは明らかに異なることから、この2量体が単環構造以外の異性体であることが示唆された。炭素数30付近のクラスターはフラーレンやナノチューブにみられるネットワーク構造の安定性や生成機構を考えるうえで重要とされており、ネットワーク構造の制御という観点からも、今後さらに研究を進める必要がある。本年度の成果の一つに、単環状炭素クラスターC_<10>-の特異的生成の発見がある。代表者らが開発した二重レーザーアブレーション質量分析法は、従来検出の難しかった中性フラグメントの検出を可能にした。その結果、炭素数1020程度の単環構造の中性フラグメントが、炭素数200程度の中性クラスターの熱分解の過程で多量に放出されることを見い出した。この結果は低温マトリックス単離分光法を用いた今後の研究に方法論的な変革をもたらすばかりでなく、炭表クラスターの生成メカニズムを探るうえでの重要な手がかりを与えるものである。
水熱条件下で起こる「構造遺伝的固相脱水反応」の研究

本研究の目的は,水熱条件下で起こる構造遺伝的固相脱水反応を新しい合成ツールとして利用するため,そのような反応を実現する因子やその反応で起こる構造組換えの方向(構造組換えがどの構造に向かって起こるのか)を決めるパラメータについて明らかにすることである.そのため,申請者が最近新たに見出した,水熱条件下で起こる構造遺伝的固相反応「CoMoO_4.3/4H_2Oが453K, ca.10気圧の水熱条件下で高圧相hp-CoMoO_4(従来法による生成では,873K,50000気圧の過酷な条件が必要)へ変化する脱水反応」と関連する種々のモリブデン酸塩の水化物の水熱条件下での構造変化について調べる必要がある.本計画の研究対象となるこれらの水化物のいくつかについては,結晶構造が未知であり,また,合成方法が確立されていないものもある.本年度の研究では,それらの結晶構造の決定と合成法の確立を行った.まず,組成の解釈に混乱があり,単一相としての合成法の確立がなされていない,NiMoO_4nH_2Oについて検討を行い,単一相として合成する方法を確立するとともに,その結晶構造の決定に成功し,その水化物がCoMoO_4.3/4H_2Oと同一構造型をとることを明らかにした.また,その研究の過程で,新たな水化物であるNiMo_4O_132H_2OやCoMo_4O_132H_2Oを見出し,それらの合成方法を確立するとともに,それらの結晶構造を決定することに成功した。そして,それらが層間架橋された興味深い酸化物骨格を持つことも明らかにした.(これらの結果は学会発表と論文により報告し,公開された)これら以外の水化物についても順次合成方法を詰め,研究実施計画に必要な種類と量の水化物の合成は,ほぼ出来上がりつつある.また,合成された水化物を用いて,水熱条件下で起こる構造組み換え反応について調べる研究も順次進行しつつある.本研究の目的は,水熱条件下で起こる構造遺伝的固相脱水反応を新しい合成ツールとして利用するため,そのような反応を実現する因子やその反応で起こる構造組換えの方向(構造組換えがどの構造に向かって起こるのか)を決めるパラメータについて明らかにすることである.そのため,申請者が最近新たに見出した,水熱条件下で起こる構造遺伝的固相反応「CoMoO_4・3/4H_2Oが453K,ca.10気圧の水熱条件下で高圧相hp-CoMoO_4(従来法による生成では,873K,50000気圧の過酷な条件が必要)へ変化する脱水反応」と関連する種々のモリブデン酸塩水化物の水熱条件下での構造変化について調べている.本研究の門的は,水熱条件下で起こる構造遺伝的固相脱水反応を新しい合成ツールとして利用するため,そのような反芯を実現する因子やその反応で起こる構造組換えの方向(構造組換えがどの構造に向かって起こるのか)を決めるパラメータについて明らかにすることである.そのため,申請者が最近新たに見出した,水熱条件下で起こる構造遺伝的固相反応「CoMoO_43/4H_2Oが453K,ca.10気圧の水熱条件下で高圧相hp-CoMoO_4(従来法による生成では,873K.,5000O気圧の過酷な条件が必要)へ変化する脱水反応」と関連する種々のモリブデン酸塩水化物の水熱条件下での構造変化について調べている本年度の研究では,昨年度の研究で明らかになったCoMoO_43/4H_2Oの結晶性による反応性の違いの原因を明らかにするとともに.(CoMoO_43/4H_2Oの水熱条件下での高圧相への構造転換反応のメカニズムを明らかにするため.水化物の構造転換に対する,水熱溶媒への種々の物質の添加効果や各CoMoO_4相の接種効果などについて調べた.その結果,高圧相への転換には酸が必要である(低結晶性のCoMoO_43/4H_2Oでは水熱処理時にMo成分が溶出し,それが酸として働き,高圧相への構造転換を起こさせた)ことがわかった.また,種々の検討の結果.高崖相への構造転換は,1)固相反応による高圧相の核の形成と2)その後の溶液を介した,高圧相核へのホモエピタキシャル析出によって進行するだろうと言うことがわかった.なお,各CoMoO_4相の接種効果について調べたところ,CoMoO_43/4H_2Oは酸のない水熱条件下では,接種相以外への相交差転換は起こらず.種結品へのホモエピタキシャル析出により高圧相以外の相も含め任意のCoMoO_4相へ転換させ得ることもわかった.これらの結果は学会発表で報告し.公開するとともに.論立により公開するため,投稿準備中である
知識外交における外国分校の機能に関する実証的研究

本研究は、世界的に進展している国際人的交流・知識交流の主要な場である高等教育セクターにおいて、どのような交流がおこなわれており、それがどのような効果をもたらしているのかについて実証的に分析することを目指している。具体的には次世代の社会を担う存在である学生に着目し、学生を主体とした人的交流や知識交流が学生個人の成長や高等教育機関の教育・研究活動にもたらす影響について質的・量的に明らかにすることを目的としている。平成30年度の研究実績の概要としては、主に次の点があげられる。第一に、ノルウェーとエチオピアの高等教育セクターにおける教育・研究交流に関する現地調査をおこない、教育・研究交流が連携する当事者同士の教育・研究力の発展をもたらすだけにとどまらず、その周辺領域への波及効果をもたらしており、持続的可能な開発目標(SDGs)の達成に向けて寄与していることを明らかにした。第二に、その現地調査から得られた成果を平成31年度に出版予定の共著書籍として執筆した。第三に、高等教育交流がもたらす外交的機能について高等教育の国際移動をテーマとする国際セミナーで発信し、また関連する内容を国内シンポジウムにおいて発表をおこなった。また、アジア太平洋地域、北米、ヨーロッパにおける国家間・地域間の高等教育交流および知識外交をテーマとしたユネスコ主催のシンポジウムに参加し、様々な国・地域からの参加者と議論を交わすことでその最新情報や知見を深めた。平成30年度は海外現地調査をおこない、過年度の研究成果も踏まえた成果の発信を計画した。その達成状況として、共著書籍を執筆するとともに、国際セミナーと国内シンポジウムで発信をおこなった。平成31年度は海外で開催される国際学会において本研究成果の発信を行う予定である。また、執筆した原稿を国内外の学術雑誌に投稿する予定である。また、中国での現地調査を追加して事例研究を深める計画である。本研究は、世界的に進展している国際人的交流を通じた知識の交流が国家間連携にもたらす効果について調査することを目的としている。具体的には、人的交流と知識交流の主要な場である教育セクターに着目し、実際にどのような交流がおこなわれており、それがどのような効果をもたらしているのかについて実証的に分析することを目指している。本研究の初年度である平成28年度は、知識外交の概念整理と事例研究をおこなった。前者ついては、知識と外交をテーマとした関連する先行研究を調べ、2つの概念を用いたアプローチの概念的枠組みや実践事例について調査した。後者については、北欧、ケニアにおける知識交流の事例を調査した。北欧では、ノルウェー、スウェーデン、フィンランドの政府関係機関と高等教育機関を訪問し、知識交流に関連する外交政策や大学間プログラムについてインタビューをおこなった。また、ケニアでは現地大学において研究会を開催し、先進諸国との知識交流がケニアにとってどのような効果が期待されるのかについて議論をおこなった。本年度の研究を通じて、教育セクターにおける知識交流の場が、学生交流や研究者交流など従来からある形態だけでなく、より財政的・物理的負担を軽減し、より幅広く優れた人材の交流をおこなうための取り組みがおこなわれていることが明らかとなった。初年度の研究計画では、文献調査や事例調査の遂行が主要目的であったため、概ね計画通り達成することができたと考えている。平成28年度に計画していた文献調査や事例調査については、研究実績の概要で記載した通り概ね順調に進んでいる。また、各国における協力者を得ることができた。平成29年度の研究実績の概要としては、主に次の点があげられる。第一に、理論研究については、初年度におこなった先行研究調査を踏まえ、異文化理解・多文化共生社会研究が進んでいるカナダの高等教育機関を訪問し、現地研究者との研究会をおこなった。その成果の一部を共著書籍にまとめて刊行した。第二に、現地調査においては、国際人的交流の事例として中国、マレーシア、ベルギーのブランチキャンパス本務校に調査をおこなった。次年度はブランチキャンパスに所属する研究者・学生への調査をおこなう手配が整っている。第三に、国際人的交流の一つである留学を取り上げ、留学が参加学生の異文化理解や渡航国・地域の人々との相互理解の進展にどのように寄与しているのかについて実証分析を進め、その結果についてはアメリカ合衆国の異文化理解関連の学会にて発表をおこなった。これをベースに次年度の成果物の発信につなげていく予定である。第四に、昨年度の現地調査の結果の一部について共著書籍にまとめて刊行した。初年度と今年度の研究実績を踏まえ、以下の通り進捗している。第一に、理論研究については、先行研究のレビューとカナダで調査した結果について共著書籍として刊行した。第二に、現地調査においては、平成28年度におこなった知識交流の調査に加え、平成29年度は国際人的交流の調査をおこなった。第三に、国際人的交流の一つである留学を取り上げ、留学が異文化理解や相互理解の進展にどのように寄与しているのかについて実証分析を進め、その結果についてアメリカ合衆国の学会にて発表をおこなった。第四に、昨年度の現地調査の結果の一部については共著書籍として刊行した。

以上の通り、現時点では概ねに順調に進んでいるが、海外学会誌への投稿については時間を要す見込みであり、この点を留意して進めていきたい。本研究は、世界的に進展している国際人的交流・知識交流の主要な場である高等教育セクターにおいて、どのような交流がおこなわれており、それがどのような効果をもたらしているのかについて実証的に分析することを目指している。具体的には次世代の社会を担う存在である学生に着目し、学生を主体とした人的交流や知識交流が学生個人の成長や高等教育機関の教育・研究活動にもたらす影響について質的・量的に明らかにすることを目的としている。平成30年度の研究実績の概要としては、主に次の点があげられる。第一に、ノルウェーとエチオピアの高等教育セクターにおける教育・研究交流に関する現地調査をおこない、教育・研究交流が連携する当事者同士の教育・研究力の発展をもたらすだけにとどまらず、その周辺領域への波及効果をもたらしており、持続的可能な開発目標(SDGs)の達成に向けて寄与していることを明らかにした。第二に、その現地調査から得られた成果を平成31年度に出版予定の共著書籍として執筆した。第三に、高等教育交流がもたらす外交的機能について高等教育の国際移動をテーマとする国際セミナーで発信し、また関連する内容を国内シンポジウムにおいて発表をおこなった。また、アジア太平洋地域、北米、ヨーロッパにおける国家間・地域間の高等教育交流および知識外交をテーマとしたユネスコ主催のシンポジウムに参加し、様々な国・地域からの参加者と議論を交わすことでその最新情報や知見を深めた。平成30年度は海外現地調査をおこない、過年度の研究成果も踏まえた成果の発信を計画した。その達成状況として、共著書籍を執筆するとともに、国際セミナーと国内シンポジウムで発信をおこなった。今後は、当初の研究計画に示した最終的な目的を達成するため、研究計画書で記載しているデータ収集と分析をおこなう。そのために必要な各国の協力者は得ることができている。今後は、研究成果の発信に重点を置いていく予定である。ただし、その間にも最新の知見を得るために先行研究レビューも継続しておこなっていく。また、現地調査についても計画通り進めていくことを予定している。平成31年度は海外で開催される国際学会において本研究成果の発信を行う予定である。また、執筆した原稿を国内外の学術雑誌に投稿する予定である。また、中国での現地調査を追加して事例研究を深める計画である。残額1917円は、執行計画と実際の支出金額との微調整によって発生した。現地調査で使用が予定されていた旅費について、別の業務との平行で出張し、学内規則により航空券代がその予算で支払われたため使用金額が大幅に変更になった。次年度の調査や学会論文投稿などで利用する予定である。実施した海外現地調査の費用支出について、別出張と日程が連続したことにより出張経費の支出を勤務先の執行ルールに基づいて按分したことが主な理由である。
算数・数学教育の内容とその配列に関する総合的研究

算数・数学教育の内容とその配列に関する要因について,その要因に大きく関わる6層の人々の意見を2年間にわたって調査した。その結果,数学の価値や系統性という要因(数学価値調査)については,数学者約300名,小中学校の教師約1900名,数学教育担当指導主事約160名,数学教育研究者約50名から回答を得て,社会の算数・数学に対する必要性という要因(数学社会調査)については,小中高校の保護者約1800名,研究者約400名から回答を得ることができた。これらの調査の主な結果は,次の通りである。算数・数学の内容の重要性については,全体的に肯定率が高いのは,計算,比・比例,統計の内容である。例えば,次の通りである。整数・小数・分数とその計算,割合や比例・反比例とその使い方,グラフや表,データの傾向など。数学価値調査の対象者は,数学社会調査の対象者よりも,より多くの算数・数学の内容を重要としている。算数・数学の能力や技能の重要性については,全体的に見ると,数学価値調査の対象者,保護者,研究者の3グループに分かれる。数学価値調査の対象者は多くの能力や技能を重要としているが,保護者は計算能力を重要とし,研究者は表やグラフを扱う能力を重要としている。保護者,研究者,小学校教師は,コンピュータを使うことも重要としている。算数・数学の学習を通して育てられると考えられている姿勢や態度の重要性については,全体的に見ると,5つのグループに分かれる。多くの姿勢や態度を重要だとする指導主事・数学教育研究者グループ,考えることや楽しむことを重要だとする教師グループ,考えることを重要だとする数学者グループ,考えることや説明することが重要だとする研究者グループ,楽しむことや根気強く考えることが重要だとする保護者グループである。算数・数学の姿勢や態度については,多様である。1.算数・数学の教育課程における「内容」の同定(1)算数・数学の内容の選択とその配列を考える場合の「内容」には2つの考え方を採ることができる。1つは,単元を構成できるものとしての大きな内容(「内容のまとまり」)であり,もう1つは,「内容のまとまり」を構成する小さな内容(「小さな内容」)である。2.これまでの小中学校の算数・数学の教育課程における内容とその配列(1)最近の算数・数学の学習指導要領における「内容のまとまり」のほとんどが,継続的に選択されている。(2)最近の算数・数学の学習指導要領における「内容のまとまり」の学年配当は,多くの内容がある特定の学年に安定している。(3)最近の算数・数学の学習指導要領において、選択や配当学年で安定していない「小さな内容」がある。3.児童・生徒の現在及び過去の達成度(1)戦後,児童・生徒の算数・数学の達成度を全国的に大規模に調べることは,1960年代には盛んに行われていたが,その後,約20年間は途絶え,1980年代に再開されるようになった。(2)調査の平均通過率を見ると,1960年代と,1980年代以降では,差が見られ,前者は概ね40%位であるが,後者は60%位である。(3)算数・数学の「内容のまとまり」の選択について考える際の基準としては,内容のまとまり全体の平均通過率,内容のまとまりの3観点ごとの平均通過率が考えられる。(4)算数・数学の「内容のまとまり」の選択を,3観点の通過率を基準に考えると,最近の「内容のまとまり」については,60%,70%,80%という基準を満たさないものもある。(5)算数・数学の内容を問題ごとに見てみると,時代によってその通過率は変化するが,多くの場合,10%ぐらいの幅に収まっている。4.研究者調査,保護者調査平成16年2月から3月にかけて、算数・数学内容の配列等に関する社会の意識を分析するために、研究者、保護者を対象とする調査を実施した。分析は来年度に行う。

多くの姿勢や態度を重要だとする指導主事・数学教育研究者グループ,考えることや楽しむことを重要だとする教師グループ,考えることを重要だとする数学者グループ,考えることや説明することが重要だとする研究者グループ,楽しむことや根気強く考えることが重要だとする保護者グループである。算数・数学の姿勢や態度については,多様である。
合成応用を指向したコバルト触媒によるC(sp3)-H官能化とその立体制御

本研究ではコバルト触媒を用いたC(sp3)-H官能基化反応の発展を目指す。特にこれまで困難だった反応基質、反応剤との反応を実現し、有機合成的に使える反応の開発を目指す。そのために、(1)新しい配向基の開発および(2)近年急激に研究が進んできている光触媒・電気化学反応との融合を研究する。また研究代表者らが近年精力的に研究をおこなっているキラルカルボン酸やキラルアニオンとのハイブリッド触媒系とも融合させることで、不斉反応への展開も視野に入れて研究をおこなう本研究ではコバルト触媒を用いたC(sp3)-H官能基化反応の発展を目指す。また研究代表者らが近年精力的に研究をおこなっているキラルカルボン酸やキラルアニオンとのハイブリッド触媒系とも融合させることで、不斉反応への展開も視野に入れて研究をおこなう
小児固形悪性腫瘍の非侵襲的診断と新規治療開発のためのトランスレーショナルリサーチ

小児がんについて、わが国の先端的基礎研究を結集・統合し、次期臨床試験に応用できるトランスレーショナルリサーチを推進することを目的とした。その結果、1血液から抽出できる小児がんの新規バイオマーカーを探索し、治療層別化へ応用可能なマーカーを抽出2低・中間リスク小児がん患者に対する副作用軽減を目指し、間葉系幹細胞を用いたドラッグデリバリーシステムの可能性3高リスク小児がん患者に対するペプチドワクチン、PD-1阻害剤、NKT細胞療法を用いた新規免疫療法の可能性4超高リスク小児がんに対し、次世代ゲノム解析技術を用いた詳細な分子病態を解析・新規分子標的の候補となるゲノム異常、について明らかにした。1.血液から抽出できる小児がんの新規バイオマーカーの探索。横紋筋肉腫について米国のと共同研究を行い、血清中のmiR-Xのコピー数が、1横紋筋肉腫において他の小児がん検体より高いこと、2胞巣型横紋筋肉腫において、胎児型横紋筋肉腫より高いことを明らかにした。神経芽腫の患者血清由来遊離核酸を用いたMYCN遺伝子増幅の有無を検出するシステムを開発し、韓国と共同して、多数症例での検討を行い、腫瘍と血清での相関をみとめた。2.低・中間リスク小児がん患者に対する副作用軽減を目指した新規療法の開発。低・中間リスク神経芽腫における治療終了後の残存腫瘍の長期的予後を検討し解析した結果、予後に影響を与え無いことを見いだした。3.高リスク小児がん患者に対する新規免疫療法の開発、超高リスク小児がんの病態解明に基づく新規分子標的治療薬開発のための基礎研究・高リスク横紋筋肉腫特異的キメラ遺伝子であるPAX3-FKHR(P3F)のマウス筋芽細胞(C2C12)において発現させ、遺伝子発現変化を網羅的解析し、横紋筋肉腫の造腫瘍性に関与する候補遺伝子を抽出した。横紋筋肉腫の病理学的検索ではJRSG登録例から組織型、骨格筋系マーカー、HMGA2発現、PAX3/7-FKHRの有無、予後を解析し、病理組織型判定基準の標準化と、リスク組織分類作成を行っている。肺芽腫の臨床検体について次世代シークエンサーを用いて新規遺伝子DICER1のBiallelic変異を検出した。本遺伝子の機能解析を行っていGlypican-3(GPC3)由来のペプチドを負荷した樹状細胞を免疫すると,GPC3発現腫瘍の増殖が抑制される。GPC3由来のHLA-A2あるいはHLA-A24拘束性エピトープペプチドを同定し,これらを用いて小児がん患者の末梢血単核球からGPC3ペプチド特異的細胞傷害性Tリンパ球が誘導できることを確認した。小児がん患者に過不足のない至適治療を行い、予後および治療後QOL改善するため、1)より迅速、非侵襲で的確な新病理診断技術を開発し、より予後を反映する新リスク群基準を作成することを第一目的とする。また、2)小児がんの分子標的同定と新規治療薬開発の本邦研究を共同化し、低リスク群患者への治療軽減、高リスク群患者への予後改善させる新規治療法開発を促進することを第二目的に、以下の研究を推進する。1)血液検査可能な小児がんの新規バイオマーカーの探索と層別化治療への有用性の検証:血清中腫瘍由来遊離DNA、micro RNAの網羅的解析により、小児がん各種に特異的な新規バイオマーカーを同定し、患者血清でその有用性を検証する。2)低・中間リスク群小児がん患者に対する副作用軽減のための新規治療法の開発:神経芽腫の分化誘導療法に向けて、レチノイン酸関連遺伝子の発現とレチノイン酸反応性を神経芽腫細胞で検討。低リスク群横紋筋肉腫では、がん抑制遺伝子p53の機能回復剤(MDM2阻害剤)の併用が従来の化学療法薬の減量を可能とするか、腫瘍細胞を用いて検討する。3)高リスク小児がん患者に対する新規免疫療法の開発:神経芽腫細胞を用い、NKT細胞の抗腫瘍効果及び抗GD2抗体療法の併用効果、抗GD2抗体療法との併用療法の有用性を検討する。胞巣型横紋筋肉腫ではがん抗原特異的細胞免疫療法を、その他の小児がん種でもGLYPICAN3をターゲットとしたワクチン療法の開発および樹状細胞免疫療法の開発を行う。4)超高リスク群小児がんの病態解明に基づく新規分子標的治療薬開発研究:超高リスク群小児がん腫瘍組織を用い、次世代シークエンサーで全ゲノム解析、全エクソーム解析、発現解析を行い、超高ハイリスク群小児がんに特徴的な遺伝子変化と発現を解明し、新規分子標的を同定する。小児がんについての、わが国の先端的基礎研究を結集・統合し、次期臨床試験に実応用できるトランスレーショナルリサーチを推進することを目的として、本研究事業を行った。その結果、1血液から抽出できる小児がんの新規バイオマーカーを探索し、治療層別化へ応用可能なマーカーを抽出することが出来た、2低・中間リスク小児がん患者に対する副作用軽減を目指し、間葉系幹細胞を用いたドラッグデリバリーシステムの可能性について明らかにすることが出来た。3高リスク小児がん患者に対し、ペプチドワクチン、PD-1阻害剤、NKT細胞療法を用いた新規免疫療法の可能性について明らかにした。4超高リスク小児がんに対し、次世代ゲノム解析技術を用いた詳細な分子病態を解析し、新規層別化、新規分子標的の候補となるゲノム以上について明らかにした。その結果、1血液から抽出できる小児がんの新規バイオマーカーを探索し、治療層別化へ応用可能なマーカーを抽出2低・中間リスク小児がん

患者に対する副作用軽減を目指し、間葉系幹細胞を用いたドラッグデリバリーシステムの可能性3高リスク小児がん患者に対するペプチドワクチン、PD-1阻害剤、NKT細胞療法を用いた新規免疫療法の可能性4超高リスク小児がんに対し、次世代ゲノム解析技術を用いた詳細な分子病態を解析・新規分子標的の候補となるゲノム異常、について明らかにした。1)血液から抽出できる小児がんの新規バイオマーカーの探索と治療層別化の有用性の検証:横紋筋肉腫については、特異的microRNAを同定し、患者血清での検証がすんでおり、遠隔転移、リンパ節転移、予後との関係を検証中である。神経芽腫においては候補遺伝子の同定が終了したが、臨床検体での検証がまだである。2)低・中間リスク小児がん患者に対する副作用軽減を目指した新規療法の開発:神経芽腫においてレチノイン酸関連遺伝子の発現とレチノイン酸反応性の検討が終了。臨床検体において予後因子となるかを検討中。MDM2阻害剤を併用した横紋筋肉腫細胞株の増殖抑制の検討が終了。3)高リスク小児がん患者に対する新規免疫療法の開発:神経芽腫細胞株に対するNKT細胞の抗腫瘍効果及び抗GD2抗体療法の併用効果を検討し、NKT細胞免疫療法の臨床応用、さらには抗GD2抗体療法との併用療法を検討中。GLYPICAN3をターゲットとしたワクチン療法の開発、樹状細胞免疫療法を用いた小児がん治療の開発は臨床応用の準備中。胞巣型横紋筋肉腫におけるがん抗原特異的細胞免疫療法の開発中。4)超高リスク小児がんの病態解明に基づく新規分子標的治療薬開発のための基礎研究:神経芽腫、肝芽腫等において次世代シークエンサーにて全ゲノム解析、全エクソーム解析、さらに発現解析中。新規MAPK阻害剤による神経芽腫細胞株の抗腫瘍効果を検討中であるが、動物実験での検討がまだである。27年度が最終年度であるため、記入しない。小児腫瘍学1)1)血液から抽出できる小児がんの新規バイオマーカーの探索と治療層別化の有用性の検証:横紋筋肉腫に関しては、患者血清において有用性の検証がすんでおり、さらに予後を予測できるバイオマーカーとして実用可能か症例と検体を増やして検討する。神経芽腫においては候補遺伝子の同定が終了したが、今後臨床検体での検証を行う。また、病理学的な検証を行う予定である。臨床検体において予後因子となるかを検討する予定。3)高リスク小児がん患者に対する新規免疫療法の開発:神経芽腫細胞株に対するNKT細胞の抗腫瘍効果及び抗GD2抗体療法の併用効果を検討し、NKT細胞免疫療法の臨床応用、さらには抗GD2抗体療法との併用療法を検討する。胞巣型横紋筋肉腫におけるがん抗原特異的細胞免疫療法の開発を行う。その他の免疫療法の可能性についても検討を行う。
プラント運転員訓練のための知的ディジタル教科書の試作

電力ネットワーク上の配電用変電所における構内事故対応業務を対象として、複雑かつ高度な運転操作訓練を支援する知的ディジタル教科書(自習システム)を試作するとともに、オーサリングツールの開発を行った。距離的に分散している多種多様な学習資源を学習者が自由に探訪するのを支援し、質問に答え、さらに適した学習項目や教材などを提示することによって学習支援を行う新しい訓練システムである。単なる情報提示システムではなく、システムが所有するメディア教材の内容を理解しており、学習者の理解状態に応じて適切な指導を行うことができる。知識を教え込むのではなく、学ぶ側の主体性を尊重すると共に、動機付けを促進するインターフェイスを備えている。また、システムの開発過程を一般化して知的なオーサリングツールのプロトタイプシステムの開発を行った。研究の過程においては、企業側との連絡を密にとりシステムの実用性に最大限の注意を払った。電力ネットワーク上の配電用変電所における構内事故対応業務を対象として、複雑かつ高度な運転操作の訓練を支援する知的ディジタル教科書の試作を進めている。企業側との連携を密にとり、実用システムへの展開を視野にいれた実証システムレベルのシステムの開発を進めている。本システムは高速のコンピュータネットワークをベースにして知的マルチメディアナビゲ-タとしての機能を持ち、距離的に分散している多種多様な学習資源を学習者が自由に探訪するのを支援し、質問に答え、さらに学習項目や教材などを提示することによって学習支援を行う新しい訓練システムである。本年度は特に、1)実際に企業で行われている訓練の実体を把握するために、企業で使用されているテキストとカリキュラムを分析した。2)単純な知識工学技術を用いて事故対応業務のごく一部の訓練システムを具体化したプロトタイプを作成し、現場の評価をえた。3)知的ディジタル教科書が対象とする訓練タスクのオントロジーを設計した。このオントロジーは対象とする領域に独立となるように留意して設計されている。4)このオントロジーに基づいて訓練のシナリオを洗い出し、システムの動作と蓄積するべき教材について分析した。5)以上の結果に基づいて本格的システムの基本設計を行った。電力ネットワーク上の配電用変電所における構内事故対応業務を対象として、複雑かつ高度な運転操作の訓練を支援する知的訓練システムのオーサリングツールを試作した。この過程において、企業側との連携を密にとり、実用システムの展開を視野にいれた実証システムへの技術移転が可能なオーサリングツールの枠組みを開発した。配電用変電所における構内事故対応業務の専門家を対象として行なった予備的な調査によって、訓練現場のニーズを分析した結果、以下の4項目が重要であることがわかった。(1)操作系列を暗記させるのではなく、その原理を併せて理解させること。(2)マルチメディアを統合した迫真性のある教材であること。(3)操作員が待機時間を利用して独習できること。(4)プラントの発展的な変化に容易に追従できること。本研究では、これらの4つの項目を要求仕様として設定し、それを満足させることに最大の優先順位を与えて試作を行なった。このニーズを元に本研究で目指すところを以下のように設定し、オーサリングツールの試作を行った。(A)プラント操作知識のオントロジーの明示化(原理レベル知識を含む)(B)プラント操作の独習支援のための教授戦略の開発(C)オントロジーをベースにした教材知識オーサリングツールの開発(マルチメディアを含む)試作したシステムについては試運用を行いながら改訂作業を継続する。
心筋細胞肥大における肥大反応遺伝子の転写調節機構の解明

心不全の進行や心筋細胞肥大の進行には心筋特異的転写因子GATA4とHAT(ヒストンアセチルトランスフェラーゼ)活性をもつp300の協調的な作用が重要な役割を担っている。このp300/GATA4経路の更なる制御メカニズムを解明するため、プロテオミクス解析にてGATA4結合タンパクを同定し、その中のNuRD複合体などのリプレッサー複合体の構成蛋白であるRbAp48/46に着目した。本研究では、p300/GATA4経路におけるRbAp48/46の影響を検討することを目的とした。【方法・結果】HEK293Tでの免疫沈降・WB法による解析でRbAp48、RbAp46はどちらもGATA4と直接結合し、p300によって誘導されるGATA4やヒストンのアセチル化、ANFやET-1のプロモーターへのGATA4のDNA結合能やプロモーター活性の亢進はRbAp48、RbAp46の発現によって抑制された。ラット胎児初代培養心筋細胞を用いたレポーターアッセイではRbAp48やRbAp46はフェニレフリン刺激で亢進するANFやET-1のプロモーター活性を抑制した。RbAp48およびRbAp46強制発現させた心筋細胞はフェニレフリン刺激によって誘導されるGATA4のアセチル化や心筋細胞の肥大を有意に抑制した。shRNAにて心筋細胞中のRbAp48/46をノックダウンさせるとGATA4のアセチル化やANFやET-1のプロモーター活性が亢進し、心筋細胞の肥大が誘導された。またフェニレフリン刺激はGATA4とRbAp48およびRbAp46との結合を減少させ、ANFプロモーターのGATAエレメント上からのRbAp48、RbAp46の遊離やRbAp48、RbAp46の核外への移行を誘導した。【結果】RbAp48/46はp300/GATA4経路によって誘導される心筋細胞肥大を抑制した。また、肥大刺激によってRbAp48/46はGATA4から遊離したことから、p300/GATA4と機能的なコンプレックスを形成し、心筋細胞肥大反応を制御していることが示唆された。新規GATA4結合蛋白であるNuRD (Nucleosome Remodeling Deacetylase)複合体の構成蛋白であるRbAp48/46によるp300/GATA経路の制御機構の詳細な解明のため,下記の実験を実施した。(1)GST-pull downアッセイにより,RbAp48/46はGATA4およびp300と直接結合することを確認した。(2)HEK293細胞においてIP-WB法にてGATA4はRbAp48/46とそれぞれ結合することを確認した。(3)p300/GATA経路による肥大反応遺伝子の転写活性化に対する影響をHEK293細胞で調べたところ,p300/GATA4で誘導されるANFやET-1のプロモーター活性をRbAp48/46は用量依存的に抑制した。(4)p300のHAT活性への影響をIP-WBにて検討したところ,p300過剰発現によって増加するGATA4のアセチル化はRbAp48/46によって抑制された。(5)また,培養心筋細胞においてフェニレフリンによって増加する肥大反応遺伝子の転写活性はRbAp48/46によって有意に抑制された。レンチウイルスを用いてRbAp48/46を過剰発現させた心筋細胞はフェニレフリンによって誘導される心筋細胞の肥大を有意に抑制することを見出した。NuRD複合体は,Mi2b, RbAp48/46, HDAC1/2などからなり,転写を制御することが知られている。今回の研究では,NuRD複合体因子であるRbAp48/46の過剰発現によりp300のHAT活性が抑制され,心筋細胞肥大が抑制されたことを見出した。このことからRbAp48/46を活性化する薬物の開発が待たれる。また,RbAp48/46による肥大抑制効果の詳細なメカニズムの解明,さらには心不全モデル動物を用いた検討などを行う必要がある。

shRNAにて心筋細胞中のRbAp48/46をノックダウンさせるとGATA4のアセチル化やANFやET-1のプロモーター活性が亢進し、心筋細胞の肥大が誘導された。またフェニレフリン刺激はGATA4とRbAp48およびRbAp46との結合を減少させ、ANFプロモーターのGATAエレメント上からのRbAp48、RbAp46の遊離やRbAp48、RbAp46の核外への移行を誘導した。【結果】RbAp48/46はp300/GATA4経路によって誘導される心筋細胞肥大を抑制した。また、肥大刺激によってRbAp48/46はGATA4から遊離したことから、p300/GATA4と機能的なコンプレックスを形成し、心筋細胞肥大反応を制御していることが示唆された。
新規トリフェニルアミンラジカルカチオンを基盤とする有機磁性体・伝導体の開発

昨年度は、酸素架橋トリフェニルアミンラジカルカチオン塩を中心に、計7種類の磁性体を見出した。今年度は、得られた7種類の磁性体を含め、合成した各種の塩について比熱の測定を含め、磁気的挙動の詳細について検討するとともに、新たなアプローチによる磁性体の創出を目指した。ラジカル置換基を持たない酸素架橋トリフェニルアミンラジカルカチオン塩については、昨年度に3種類の反強磁性体を見出したが、比熱の測定を行うことでさらに2種類の反強磁性体を見出すことに成功した。同様に、ニトロニルニトロキシド置換酸素三架橋トリフェニルアミンのラジカルカチオン塩については、1種類の反強磁性体を新たに見出すとともに、昨年度に合成した塩化鉄塩が弱強磁性体から反強磁性体への二段階の逐次相転移を示す非常に珍しい化合物であることを発見した。逐次相転移は一部の金属化合物に特徴的なものであり、有機化合物を主成分とする化合物では初めての例である。また、メチルチオ基やメチルセレノ基を導入した酸素三架橋トリフェニルアミンラジカルカチオン塩を新たに合成・検討し、弱強磁性的性質を有する反強磁性体を2種類見出した。さらには、酸素三架橋トリフェニルアミンに安定ラジカルであるt-ブチルニトロキシドを3つ導入した化合物の合成にも成功している。既に有機アクセプターとの塩の形成が示唆されており、純有機磁性体の構築が期待される。また、新たな磁性金属錯体への展開も可能となる。今年度までの研究で、トリフェニルアミンラジカルカチオン塩を基本骨格とする磁性体を計12種類見出し、ラジカル導入などの分子修飾により従来にない新規物性を発現することを明らかとした。また、新しい高スピン種を合成し、今後の展開の基礎を築いた。有機磁性体(分子磁性体)の構築を目的として、酸素架橋トリフェニルアミンを基本骨格に持つラジカル置換ラジカルカチオンの塩を合成し、その構造と磁気的挙動について検討を行った。対アニオンとして、磁性金属アニオンである塩化鉄(FeCl_4^-)や臭化鉄(FeBr_4^-)、及び非磁性金属アニオンである塩化ガリウム(GaCl_4^-)や臭化ガリウム(GaBr_4^-)を用いた。ラジカル置換ラジカルカチオンの検討に先立ち、ラジカル置換基を持たない酸素架橋トリフェニルアミンのラジカルカチオン塩について検討を行った。その結果、3種類の反強磁性体が得られることを明らかとした。次にラジカル置換ラジカルカチオン種である、ニトロニルニトロキシドを置換した酸素架橋トリフェニルアミンのラジカルカチオン塩について検討を行ったところ、弱強磁性体、フェリ磁性体、メタ磁性体がそれぞれ1種類得られることを明らかとした。これらの磁性体はラジカル置換ラジカルカチオンを基盤とする世界初の磁性体である。酸素架橋トリフェニルアミンは磁気相転移を示しやすく、極めて稀で魅力的な化合物であり、対アニオンの変換や骨格への電子供与性置換基の導入によって新たな磁性体への展開が期待できる。また、ニトロニルニトロキシドを置換したジフェニルジヒドロフェナジンのラジカルカチオンについて同様の検討を行い、1種類のフェリ磁性体が得られることも明らかとした。これらの結果は、「分子磁性」の分野において非常に注目すべきものであり、国内外の物性科学分野に大きなインパクトを与えるものとなる。
TLR2遺伝子を標的としたエピジェネティクス制御による新規歯周治療薬の開発

本研究では、エピジェネティクスを標的とする新規歯周治療薬を開発すること目的とした。その結果、歯周炎モデルマウスにおいて、DNAメチル化阻害剤であるDecitabineは歯槽骨吸収を抑制し、破骨細胞の活性化も抑制した。また、細胞実験において、Decitabineは抗炎症性サイトカインのmRNA発現を亢進させた。その一つの要因として、転写因子KLF2に着目したところ、DecitabineはKLF2発現を亢進させ、KLF2が抗炎症性サイトカインを亢進させた。以上より、Dcitabineは転写因子KLF2を介して炎症を制御することで、歯周炎モデルマウスの骨吸収を抑制する可能性が示された。慢性歯周炎は細菌感染により惹起され,炎症の進行に伴い骨欠損等の歯周組織破壊を引き起こす。その病態は複雑であり,不明な点も多い。そのため,病態解明及び新規治療薬の確立が期待されている。一方,申請者らは、歯肉上皮細胞においてDNAメチル化が炎症反応を制御している可能性を見出している。本研究では,さらに,歯周炎の病態とDNAメチル化の関連を解析し,エピジェネティクスを標的とする新規歯周治療薬を開発すること目的としている。本年度はマウスの臼歯部に結紮糸を留置し歯周炎を誘導する歯周炎モデルマウスの作成に成功した。またそのマウスを用いて,DNAメチル化阻害剤であるDecitabineをoral gavage法で投与することで,実験的歯周炎により誘導される歯槽骨吸収が抑制されることを明らかにした。次に、そのメカニズムを同定するため,組織切片を作成し,TRAP染色により破骨細胞の活性化を調べたところDecitabineは破骨細胞活性を抑制した。また,免疫組織染色により,DecitabineはRANKL-OPG発現のバランスに影響を及ぼすことを示した。さらに、CD14+単球を用いた破骨細胞分化実験において、Decitabineは破骨細胞分化を抑制し,さらに抗炎症性サイトカインであるIL-10,TGF-βのmRNA発現を亢進させることを確認した。つまり,本研究においてDecitabineは抗炎症性サイトカイン発現を誘導し,破骨細胞活性に関与するシグナル経路を制御することで,歯周炎モデルマウスの骨吸収を抑制する可能性が示された。当初予定していた歯肉上皮細胞の炎症状態でのエピジェネティクス解析は遅れているものの、本年度は歯周炎モデルマウスを用いた、DNAメチル化阻害剤の効果、解析の解明が前進したと考え、上記の区分と判断した。慢性歯周炎は細菌感染により惹起され、炎症の進行に伴い骨欠損等の歯周組織破壊を引き起こす。その病態は複雑であり、不明な点も多い。一方、申請者らは、歯肉上皮細胞においてDNAメチル化が炎症反応を制御している可能性を見出している。本研究では、さらに、歯周炎の病態とDNAメチル化の関連を解析し、エピジェネティクスを標的とする新規歯周治療薬を開発すること目的としている。前年度は歯周炎モデルマウスの作成に成功し、DNAメチル化阻害剤であるDecitabineをoral gavage法で投与することで、実験的歯周炎により誘導される歯槽骨吸収が抑制されることを明らかにした。次に、そのメカニズムを同定するため、TRAP染色により破骨細胞の活性化を調べたところDecitabineは破骨細胞活性を抑制した。また、DecitabineはRANKL-OPG発現のバランスに影響を及ぼすことを示した。さらに、CD1 4+単球を用いた破骨細胞分化実験において、Decitabineは破骨細胞分化を抑制し、抗炎症性サイトカインであるIL-10,TGF-βのmRNA発現を亢進させることを確認した。本年度は、炎症制御メカニズムの解明として、転写因子KLF2に着目した。組織切片を用いた免疫染色においてKLF2発現はDecitabine投与群で発現が亢進し、また破骨細胞を用いた分化実験においてもDecitabineはKLF2mRNA発現が上昇した。さらにルシフェラーゼアッセイにより、KLF2がIL-10,TGF-β,C/EPBβの転写活性を亢進させることを確認した。以上の結果より、Dcitabineは転写因子KLF2を介して炎症制御を行うことで、歯周炎モデルマウスの骨吸収を抑制する可能性が示唆された。以下の研究を推進する予定である。1.ヒト歯肉上皮細胞におけるエピジェネティクス解析:歯周病原細菌であるP.gingivalis誘導のDNAメチル化を含むエピジェネティクス異常の解析、歯周炎の病態の関連を解明する。2. Decitaibneによる骨吸収抑制作用のメカニズム解明:引き続きDecitabineによる破骨細胞の活性を抑制機序を解明する。

3. Decitabine効果のDNAメチル化の網羅的解析:Decitabineによる、DNA脱メチル化のターゲットとなる遺伝子を解明する。歯周病学計画していた実験が難航し、当初予定していた試薬等の購入を保留しているため。引き続き、実験は継続して行なっているため、次年度に必要な試薬等を購入する予定としている。