hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
超高齢社会に向けた交通医療福祉モデルの構築

代替交通手段については、身近に運転してくれる人がいる人は74%、乗合タクシーが利用できる人は52%、自宅から15分以内にバス停や駅がある人は33%であった。運転免許を更新しなかった人は5%で、閉じこもりの人、過去1か月に運転しなかった人、安全運転にまったく自信がない人、家族などから運転中止の助言があった人、日常生活動作や歩行能力が低い人、健康状態が悪い人に多かった。ただし、安全運転にまったく自信がなくても、身近に運転してくれる人がいない人、自宅近くにバス停や駅がない人はそうでない人と比べて、免許を更新していた。考察:安全運転にまったく自信がなくても代替交通手段がなければ免許を更新せざるをえないことがわかった。今後は本コホートの追跡を継続し、運転中止がその後の生活や健康に及ぼす影響とその予防策を検討し、超高齢社会に必要な交通医療福祉モデルを提案する。東日本大震災の影響により、データ入力と解析に遅れが生じ、研究発表に至っていない。それ以外はおおむね順調に進展している。24年度が最終年度であるため、記入しない。研究対象者のうち、追跡に同意した人が予想以上に多く、詳細な統計解析に耐えうる4000人超のコホートを形成することができた。今後はこのコホートを維持しながら、どのようなモビリティ支援あるいは生活環境が高齢者の身体的・精神的健康度の維持に寄与するかを明らかにし、政策提言に結び付けたい。
新しい心電図指標と心磁図マッピング法を用いた川崎病症例の心筋虚血検出法の確立

【方法】冠動脈造影で川崎病性冠動脈病変が確認されている63例(男性50例)の臨床経過および心磁図検査所見の解析を行った。川崎病発症年齢は中央値2.4歳(0.212.0歳)、心磁図検査施行時年齢は中央値19.1歳(3.639.3歳)であった。筑波大学および国立循環器病研究センター内の磁気シールドルーム内に設置されている64チャネルの心磁計測装置を用いて、正面および背面での磁気計測を行った。QRSおよびT波の電流アロー図および最大のベクトル成分についてベクトル環を作成した。正面のT波の最大および平均の電流角度から基準値からから外れた項目の数を再分極異常スコア(06点)として算出し、スコアが1以上と1未満で比較した。QRSとT波の電流を時間積分し、総電流量の比を算出した。冠動脈造影の結果から狭窄性病変群(心筋梗塞、閉塞、セグメント狭窄、局所性狭窄)と非狭窄性病変群(狭窄性病変を有さない症例)の2群に分けて各パラメータについて検討した。【結果】狭窄病変群が37例、非狭窄病変群が25例であった。狭窄性病変群の方が、有意に発症年齢が小さかった(p = 0.025)。QRSの最大ベクトル角度、総電流比については2群間で有意な差はなかったが、再分極異常スコアは2群間で有意差があり(p = 0.019)、狭窄病変群では平均2.51(±1.68)と高値であった。再分極異常スコアが1以上か、1未満であるかも2群間で有意差があった(p = 0.042)。再分極異常スコア1以上は狭窄性病変の感度89%、特異度32%、陽性的中率66%であった。【結論】狭窄性病変を有する症例の検出において、心磁図での再分極異常スコアが有用である可能性がある。【方法】川崎病性冠動脈病変があり長期フォローされている症例7名(中央値20歳、範囲1032歳)、健常成人ボランティア17例(中央値31歳、2161歳)を対象とし、通常の12誘導心電図の記録と、心磁計測装置(日立ハイテクノロジーズ社製MC-6400)を用い、正面・側面・背面の3方向の心磁図を記録した。専用の心磁図解析ソフトを用い、隣接する2点間の磁界勾配により各点の電流ベクトルアローとして表示する、電流アロー図を作成した。また正面・側面・背面の3方向の平均および最大のベクトル成分についてベクトル環を作成した。正面の記録から、T波をピークを含む4時相(ST80, ST110, Tp, Te)に分け、各時相における最大の電流を持つベクトルの角度(最大電流角度)、全電流角度の差も算出した。1最大電流角度(Tp)、2平均電流角度(Tp)、3平均電流角度差(Tp-ST110)、4平均電流角度差(Tp-Te)、5最大電流角度(ST80)、6平均電流角度(ST80)のそれぞれを基準範囲から外れた項目があれば1点とし、合計点を再分極異常スコアとして算出した。【結果】冠動脈病変のある症例では12誘導心電図で明らかな異常があったのは2例で、心磁図による再分極異常スコアが1点以上だったのは1例のみであった。健常ボランティアではST-Tの時相の側面の平均ベクトル環の方向が後ろ向きは12例(70.6%)、中央は5例(29.4%)、前向きは0例(0%)であったが、冠動脈病変のある症例では3例(42.8%)で前向きであった。【結論】冠動脈病変のある症例でも、必ずしも12誘導心電図では典型的な虚血性変化を示さず、心磁図による再分極異常スコアも陽性にはならなかったが、側面の電流ベクトルの方向で異常を示す症例が多かった。多方向での電流ベクトルの方向の評価が心筋虚血の初期変化を検出する指標となる可能性がある。以前に確立された再分極異常スコアが川崎病性冠動脈病変を持つ症例での心筋虚血の初期変化の検出に有効である、という仮定で研究を進めていたが、今回の検証で明らかに異常のある症例でもスコアで異常とはならないことが判明した。一方で側面を含めた多方向からの記録が有効である可能性も示された。正面・背面のみの健常ボランティアのデータは多数あるが、側面方向の心磁図記録は健常例での記録が限られているため、新規で健常ボランティアでのデータ収集が必要となる。また小児への応用を目標としており、正常コントロールとして、小児の健常ボランティアによる心磁図記録を行う予定であったが、募集に対し十分は数が確保できなかった。【方法】前年度に引き続き、川崎病性冠動脈病変があり長期フォローされている症例の解析を進めた。合計9名(中央値18歳、範囲432歳)を対象とし、12誘導心電図と心磁図検査を施行した。筑波大学附属病院内の磁気シールドルーム内に設置されている64チャネルの心磁計測装置を用い、ベッド上で体位変換し磁気センサーを近づけることで、正面・側面・背面の3方向での磁気計測を行った。得られた心磁波形を、信号処理でノイズ除去し、R波を基準として各チャネルでの加算波形を作成した。

それぞれのチャネルの位置情報と磁場強度とを統合し、QRSおよびT波の電流アロー図を作成した。正面のT波の最大および平均の電流の角度から、基準値から外れた項目数をスコア化し、再分極異常スコアとして算出した。また正面・側面・背面の3方向の平均および最大のベクトル成分についてベクトル環を作成した。QRSとT波の電流を時間積分し、総電流量の比を算出した。【結果】冠動脈病変のある症例では12誘導心電図で明らかな異常があったのは2例で、V1でのQSパターンとII, aVFでのlow Tであった。QRSの主ベクトルは全例で左左下方に向かい基準範囲内であった。再分極異常スコアは2例で1点以上となり、それぞれ最大電流角度が低値、および平均電流角度差が小さく、それらの症例は心電図異常を有する症例とは一致しなかった。T波のベクトル環は正面では全例で左下方で、側面では3例で前方であった。T波とQRSの電流総和の比は中央値1.61(範囲1.062.70)で、全例で基準値内であった。【結論】心磁図検査で、再分極スコア、T波ベクトル環で基準値と異なる所見を示す症例があったが、必ずしもそれぞれの異常所見を持つ症例が一致しなかった。心磁図のみでの心筋虚血の発見は現段階では判断が難しく、他のモダリティも含めて同時に検討する必要がある。以前に確立された再分極異常スコアが冠動脈病変を持つ症例での心筋虚血の初期変化の検出に有効である、という前提で研究を進めていたが、今回の検証で明らかに異常のある症例でもスコアで異常とはならないことが判明した。また、冠動脈異常があっても、必ずしも心筋虚血とはならず、心電図や心磁図でも基準値内である可能性がある。心筋虚血があると判明している症例も含めて検討する必要がある。心筋虚血が明らかな症例については、現段階では十分な数が確保できていない。【方法】冠動脈造影で川崎病性冠動脈病変が確認されている63例(男性50例)の臨床経過および心磁図検査所見の解析を行った。川崎病発症年齢は中央値2.4歳(0.212.0歳)、心磁図検査施行時年齢は中央値19.1歳(3.639.3歳)であった。筑波大学および国立循環器病研究センター内の磁気シールドルーム内に設置されている64チャネルの心磁計測装置を用いて、正面および背面での磁気計測を行った。QRSおよびT波の電流アロー図および最大のベクトル成分についてベクトル環を作成した。正面のT波の最大および平均の電流角度から基準値からから外れた項目の数を再分極異常スコア(06点)として算出し、スコアが1以上と1未満で比較した。冠動脈造影の結果から狭窄性病変群(心筋梗塞、閉塞、セグメント狭窄、局所性狭窄)と非狭窄性病変群(狭窄性病変を有さない症例)の2群に分けて各パラメータについて検討した。【結果】狭窄病変群が37例、非狭窄病変群が25例であった。狭窄性病変群の方が、有意に発症年齢が小さかった(p = 0.025)。QRSの最大ベクトル角度、総電流比については2群間で有意な差はなかったが、再分極異常スコアは2群間で有意差があり(p = 0.019)、狭窄病変群では平均2.51(±1.68)と高値であった。再分極異常スコアが1以上か、1未満であるかも2群間で有意差があった(p = 0.042)。再分極異常スコア1以上は狭窄性病変の感度89%、特異度32%、陽性的中率66%であった。【結論】狭窄性病変を有する症例の検出において、心磁図での再分極異常スコアが有用である可能性がある。今後の方針として、1健常小児による心磁図の基準値を確立し、2川崎病患児の心磁図データと比較する予定である。
発熱物質による発熱反応とACTH反応への脳内アンギオテンシンIIの関与 〜アンギオテンシンII type2 receptor knockout mouse 及び正常マウスを用いた検討〜

本研究では、ストレスによる高体温反応へのアンギオテンシンII type2 receptor(AT_2receptor)の関与について検討した。実験動物はAT_2receptor knockout mouseを用いた。AT_2receptor knockout mouseおよびそのコントロールマウスは両者共、体温と活動量が暗期に高い日内変動を示した。一方、両群のマウスを比較すると、暗期にはknockout mouseの方がコントロールマウスより有意に低い体温を呈した。knockout mouseとコントロールマウスの腹腔内にインターロイキン1を投与するとknockout mouseの方がコントロールマウスに比べて低い発熱反応を示した。両群のマウスの腹腔内に生理食塩水を投与したり、あるいは両群のマウスにケージ交換ストレスを負荷するとknockout mouseの方がコントロールマウスに比べて高い体温上昇反応を呈した。以上の結果より、マウスの発熱発現には、AT_2receptorが関与していると考える。一方、その他の非炎症ストレス(腹腔内生理食塩水投与やケージ交換ストレス)による高体温はAT_2receptorにより抑制されている。あるいは、AT_2receptor knockout mouseでは1型受容体の機能が強調されて体温上昇反応が亢進した可能性も想定される。AT_2receptor knockout mouseで暗期の正常体温がコントロールに比べて低かったことより、AT_2receptorは正常体温調節にも関与している可能性が高い。今後は、ストレスによるACTH上昇反応へのAT_2receptorの関与やストレス時の脳内アンギオテンシンII産生状況の検討を行う必要がある。脳内アンギオテンシンIIがtype2(AT_2)レセプターを介して“ラット"の発熱反応発現をmodulateすることを私たちはすでに報告している(J.Pharmacol.Exp.Ther.,282:873-881,1997)。本研究は、発熱物質投与による“マウス"の発熱反応に於ける脳内アンギオテンシンIIの役割の解明を第一目標とする。具体的には、AT_2-receptor knockout mouseに発熱物質えを投与して、発熱反応の発現状況をコントロールマウスと比較検討する。その予備実験として、まず本年度はknockout mouseの腹腔内に体温測定用のプローブを植え込みbaselineの体温をfree-movingの条件下で測定した。その結果knockout mouseの体温の方がコントロールマウスのそれより低い傾向が見られた。この観察はAT_2レセプターが体温調節機構に積極的に関与している可能性を示唆する。現在はAT_2-reseptor-knockout mouseを用い、発熱反応へのAT_2レセプターの関与について検討を行っているところである。したがって、この実験の成果については本研究終了予定の来年度末の報告書に詳述したい。あわせて来年度は、発熱物質により発現するマウスのACTH反応に於ける脳内アンギオテンシンIIの役割についても検討し、その結果を報告する予定である。平成9年度はアンギオテンシンII2型受容体(AT_2 receptor) knockout mouseの体温がcontrol mouseのそれより低いことを明らかにした。すなわち、AT_2 receptorが体温調節機構に積極的に関与している可能性が示唆された。平成10年度はストレス高体温へのAT_2 receptorの関与について検討を行った。その結果、1) knockout mouseとcontrol mouseの腹腔内にインターロイキン1を投与するとknockout mouseの方がcontrol mouseより低い発熱反応を示した。2)両群のマウスの腹腔内に生理食塩水を投与するとknockout mouseの方がcontrol mouseに比べて高い体温上昇反応を呈した。3)両群のマウスにケージ交換ストレスを負荷するとknockout mouseの方がcontrol mouseに比べて高い体温上昇反応を呈した。以上の結果より以下の可能性が示唆される。1)炎症ストレスによるマウスの発熱発現には脳内のAT_2レセプターが重要な役割を果たしている。ラットの脳内へのAT_2レセプター拮抗薬の投与により発熱が抑制された事実がこの考えを支持する。2)その他の非炎症ストレス(腹腔内生理食塩水投与やケージ交換ストレス)による高体温はAT_2レセプターにより抑制されている。

あるいは、非炎症ストレスによるラットの高体温反応がAT_1レセプター拮抗薬の脳内投与により抑制されたことから、knockout mouseではAT_1レセプターの機能が強調されて体温上昇反応が亢進した可能性も想定される。以上のスペキュレーションはAT_2レセプターが過度に発現したtransgenic mouseを用いてさらに検討する必要がある。
白血病細胞に対する多機能サイトがVHGFの分化・増殖作用の検討

1.造血に対する作用HGF添加下で骨髄単核細胞のコロニー形成の能を検討した。HGFはBFU-E、CFU-GEMの産生を有意に増強したが、CFU-GMに対する作用はみられなかった。同様の実験を純化したCD34陽性細胞でおこなったところ、HGFのコロニー刺激作用はみられず、CD34陽性細胞はHGFレセプターを発現していなかった。また骨髄細胞ではHGFレセプターは単球分画に発現されていた。またHGFは骨髄ストローマ細胞からのSCF,IL3の産生を増強した。このことからHGFの造血刺激作用は幹細胞に対する直接の作用ではなく、HGFは単球系細胞やストローマ細胞に働くことにより他の増殖刺激因子の産生を誘導しその結果造血幹細胞の分化、増殖を刺激するものと思われる。2.白血病細胞でのHGFの役割約80例の白血病症例で白血病細胞のHGF産生およびHGFレセプターの発現を検討したところ、ほとんどの症例で白血病細胞からのHGFの産生が認められた。一方、HGFレセプターの発現は一部の症例で認められた。また白血病細胞株ではHUT78,U266でHGFレセプターの発現がみられた。これらの細胞株を用いた実験では、HGFによる増殖刺激効果はみられなかった。骨髄ストローマ細胞に対する接着能はHGFはHUT78に対しては接着の増強に働き、一方U266には接着を阻害した。現在これらの現象を司っている接着分子を解析中である。以上のことにより、HGFは白血病細胞はHGFを恒常的に産生することにより、単球や骨髄ストローマ細胞からの増殖因子の産生を誘導すること。一部の白血病細胞ではHGFはストローマ細胞に対する接着能に影響を与えることが明らかとなった。
観光財・サービスの地域経済波及効果の計測手法に関する研究

観光統計は、国全体もしくは市町村等の各地域の政策立案のための重要な指標である。本研究では、我が国の観光産業の実態を明らかにし、観光統計の指標の作成と観光を考慮した地域経済モデルの構築を行う。本研究の主要な目的は以下のとおりである。我が国の観光政策、実態の把握及び将来動向の整理を行う。観光消費の経済効果の包括的な推計手法を開発する。観光に特化した調査方法を開発し、産業連関分析などの経済モデルへの拡張を試みる。行政機関が観光消費の経済効果を容易に測定可能とするシステムを開発する。主要な観光地を選択し、開発したシステムを用いて、観光の経済効果を測定し、その相互比較を行う。長期的・総合的な視点から、我が国観光産業の将来展望を示すことが本研究の目標である。平成18年度は、主要観光地に対する調査として、昨年度に続いて、中部地域、九州地域の調査を継続して実施した。地域情報とデータの整理等も行った。地域産業連関表と観光情報を連携させた評価ソフトウエアの設計とプロトタイプの開発を行った。観光消費の経済効果を計測するためのシステムを設計し、経済効果を計測するために必要な入力情報の整理を行った。産業連関表と基本的な観光消費情報から、市町村レベルの経済効果を計測するシミュレーションを実施している。また、研究全体の総括と今後の課題等について検討した。研究成果の一部については「雲雀野」などで公表している。長期的・総合的な視点から、我が国観光産業の将来展望を示す。平成16年度は、観光産業、日本経済、地域経済、リゾート法、統計処理などに関する資料収集及び整理を行った。既存文献等から、我が国における観光政策と将来動向の解析を行い、愛知県、静岡県等の観光地の地域経済構造の整理を行った。地域の観光状況を把握するための調査手法の検討を行い、観光消費の経済波及効果の測定モデルのプロトタイプの開発を行った。研究成果の一部を日本地域学会と国際会議PRSCO SummerInstituteにおいて報告した。平成17年度は、主要観光地に対する調査として、昨年度に続いて、九州地域(長崎)、中部地域(名古屋)の調査を継続して実施した。観光産業の特徴、問題点改善方法などを検討した。また、地域経済との関係を解析した。各種資料、データ、情報を統計ソフトを用いて分析する方法の検討とデータ解析を行った。観光調査と経済モデルのリンクさせるために、地域投入産出モデルと観光調査情報を統合する手法の開発を検討した。簡易評価ソフトウエアのプロトタイプの開発を行い、地域投入産出シミュレーションモデルの設計、プログラム作成及びプロトタイプによる評価と試算を行った。研究成果の一部については、日本地域学会、米国西部地域学会等で報告した。

産業連関表と基本的な観光消費情報から、市町村レベルの経済効果を計測するシミュレーションを実施している。また、研究全体の総括と今後の課題等について検討した。研究成果の一部については「雲雀野」などで公表している。
新規循環調節ペプチドの探索と機能解析に関する研究

本研究は循環器系に発現するオーファン受容体の内因性リガンドを探索,同定し,新たな循環調節機構を提示することを目的とした。1.昨年度に引き続き,循環器系に発現する3種類のオーファン受容体(GPR19,GPR37L1,PGR7)発現細胞を用いて新規生理活性ペプチドの探索を遂行した。各種動物組織から調製したペプチド抽出物を細胞に添加後,細胞内cAMP濃度変動を指標に新規ペプチド性リガンドを探索した。昨年度実施した細胞内Ca^<2+>濃度上昇を指標とした探索と同様に,オーファン受容体の活性化に伴う特異的な活性を見出すことはできなかった。原因として,リガンドと予想されるペプチドの組織含量が低いことが考えられる。そこで,従来の100倍濃縮したサンプルを用いたアッセイ系を構築し,探索を現在進めている。2.今まで申請者は探索を進めていく中で,内因性受容体に作用する種々の既知ペプチドを同定している。そこで内因性受容体由来のシグナルを減弱させるために,受容体と結合するために必須であるGα(Gαq,Gαs,Gαi)タンパク質のC末端断片(Gα-minigene)を作製し,HEK293やCHO細胞に一過性に発現させた。内因性受容体由来のシグナルを若干減弱できたものの,目的である標的受容体由来のシグナルのみを検出できるアッセイ系は構築できなかった。原因として,リガンド添加に伴う細胞内Ca^<2+>,cAMP濃度変動の検出系が高感度であることが考えられる。現在,生理活性ペプチドに作用する内因性受容体の少ないjurkat細胞に標的オーファン受容体を発現させ,内因性受容体由来のシグナルが少ないアッセイ系を構築し,探索を進めている。今後オーファン受容体のリガンド探索に関わる諸問題を解決するために,a)リガンドソースの改善,b)内因性受容体由来のシグナル除去,c)受容体のソーディングに対するする改善を遂行する。本年度は以下に示す研究を実施したので報告する。1.循環器系にも発現するニューロテンシン受容体(NTS1)に対し、今までに報告のないペプチド画分に活性を見出し、精製を遂行した。ラット小腸300グラムの抽出物からNTS1の活性化に伴う、細胞内Ca^<2+>濃度上昇を指標に精製を行った。その結果、約10ピコモルのペプチドを単一に精製した。質量分析計にて測定した結果、分子量は2116.4であった。また、プロテインシークエンサーによりアミノ末端から15残基のアミノ酸配列を決定し、得られた配列はニューロテンシン前駆体中の131番から145番目に一致した。精製したペプチドにはNTS1の内因性リガンドであるニューロメジンNが含まれていたため、プロセシングが不十分であったにも拘らず、NTS1に対し活性を与えたことが考察される。2.循環器系に発現する3種類のオーファン受容体(GPR19,GPR37L1,PGR7)発現細胞を用いて新規生理活性ペプチドの探索を遂行した。各種動物組織から調製したペプチド抽出物を細胞に添加後、細胞内Ca^<2+>濃度上昇についてFLIPR(現有設備)を用いて測定することにより新規ペプチド性リガンドを探索した。しかしながら、受容体の活性化に伴う特異的な活性を見出すことはできなかった。原因として、リガンドと予想されるペプチドの組織含量が低いこととCa^<2+>ではない別のセカンドメッセンジャーを介した活性化であることが考察される。リガンドが結合した受容体は、細胞内2次メッセンジャーとしてCa^<2+>のみならずcAMP濃度変動、受容体のインターナリゼーションが知られている。今後、リガンド結合に伴うcAMP濃度変動及び受容体のインターナリゼーションを活性の指標に用い、探索・精製を遂行する。また、目的とするリガンドの組織含有量が低い事も考えられるため、アッセイに使用するサンプルを濃縮、添加することで受容体の活性化によって引き起こされる特異的な活性を探索する。

原因として,リガンド添加に伴う細胞内Ca^<2+>,cAMP濃度変動の検出系が高感度であることが考えられる。現在,生理活性ペプチドに作用する内因性受容体の少ないjurkat細胞に標的オーファン受容体を発現させ,内因性受容体由来のシグナルが少ないアッセイ系を構築し,探索を進めている。今後オーファン受容体のリガンド探索に関わる諸問題を解決するために,a)リガンドソースの改善,b)内因性受容体由来のシグナル除去,c)受容体のソーディングに対するする改善を遂行する。
会計測定に関する理論的、応用的研究

会計測定は会計処理手続の基本的部分を構成する。会計は常に経営実践(実務)との間に密接な相互作用をする関係をもつ。実務からの問題提起、その処理方法の模索、およびそれの実務への応用というプロセスを繰返えし乍ら理論化され、進化していくものである。本研究の計画では、これまでの会計測定基準を、現代の会計学の通説となっている三分野(財務会計、管理会計、会計監査)に分けて、実務を視察の上、意見交換も含めて再検討し、新しい測定基準を示唆することを意図した。財務会計の分野では測定方法の変革の方法が示されたし、生態会計、社会会計、会計と利益・情報・財務等について新しい測定思考を得た。管理会計の分野では技術革新やコンピュータ処理に応ずる新しい測定の対応方法、分権的管理組織での会計測定のあり方についての漸新な考え方、監査の領域では現在進行中の商法会計規定との調整についての解決の問題、監査の会計測定への働きかけの問題等について新しい見解を得た。更に計画外ではあるが、政府・官庁も含めて、現在単年度会計で完全に予算優先主義をとっている公会計における会計測定のあり方について、マクロおよびミクロの立場から極めて有益な成果を得た。公会計が企業会計より後まわしになっている会計学界の現状にかんがみ、大いに示唆に富むものである。また、最近の企業の海外進出に伴って発生する為替換算等の会計測定の諸問題の提起もあった。以上、これらすべてについて、統一的な新しい基準を形成する処までは時間の関係上至らなかったが(ここにも政府会計の改善すべき点があるのだが)、FASBの会計基準の研究に基いて基準形成の基礎が示されたり、部分的に測定基準が示されている処もある。本研究は現行の企業会計原則の改訂や、とくに原価計算基準の管理会計化に大いに役立つ提言が含まれている。これらは既に貴重な成果であるが、各分担者により更に一層の展開が期待される。
部位特異的脱硫酸化による硫酸化多糖の超分子形成機能の変換

シリル化試薬であるN-メチル-N-トリメチルシリルトリフルオロアセトアミド(MTSTFA)を用いることによりグリコサミノグリカンの6位硫酸基を位置特異的にかつ効率よく脱離する反応を前年度までに開発してきた。今年度はこの方法によって得られた6-O-脱硫酸化ヘパリンおよび既知の方法で得られる2-O-脱硫酸ヘパリンとN-脱硫酸化ヘパリンを用い、神経細胞などの成長・分化に重要な役割を果たしているミッドカインがヘパリンと相互作用する際に必要なヘパリン側の構造を明らかにしようとした。その結果、ミッドカインがヘパリンと結合してその活性を発揮し、さらに構造安定化されるには2-O-、6-OおよびN-硫酸基がいずれも必要であるが、とりわけN-硫酸基が大きな役割を果たしていることがわかった。さらに各種の位置特異的な脱硫酸化法や硫酸化法を組み合わせて任意の位置に硫酸基を結合した各種のヘパリン(6-O-脱硫酸化、2-O-脱硫酸化、N-脱硫酸化、2,6-O-脱硫酸化、6-O-,N-脱硫酸化、2-O-,N-脱硫安化、完全脱硫酸化、6-O-硫酸化)を作成し、それらと血漿中および脳細胞内の各種タンパク質との相互作用を明らかにしようとした。ウシ血漿中よりヘパリン結合性の数種のタンパク質を同定し、そのうちハプトグロビンが6-O-,N-硫酸化(2-O-脱硫酸化)ヘパリンと相互作用することを見いだした。これよりこの相互作用には6位およびN位の硫酸基が必要であることがわかった。また、ウシ脳組織のヘパリン結合性タンパク質のうち、フルクトースジリン酸アルドラーゼが6-O-硫酸化(2-O-,N-脱硫酸化)ヘパリンと親和性を示した。これより同酵素とヘパリンの相互作用には6位の硫酸基が関与しているものと考えられた。
少数個転移（オリゴメタスターシス）を示した肺癌の病理学的特性

本研究の目的は、少数個転移(13個)に留まる肺癌(オリゴメタスターシス)の特性を明らかにすることである。一般的に転移を伴う肺癌は、全身性疾患としての性格を持ち、化学療法が標準治療である。しかし、近年、少数個転移に留まる肺癌は、手術や放射線治療などの局所治療で完治する可能性がある事が明らかになってきた。一方で、当初、少数個転移であったが、経過中に複数臓器への多数個転移を示す症例もあり、治療開始時点でこれらを峻別可能とする指標の確立が目下切実な課題である。本研究では、過去の肺癌手術材料から1少数個転移に留まった症例、2多数個転移を来した症例を選抜し、原発巣における病理学的因子、および遺伝子発現プロファイルを網羅的に解析する事で、少数個転移(オリゴメタスターシス)肺癌に固有の性質を明らかにする事を目標とした。研究期間内に、まず少数個転移(オリゴメタスターシス)群と多数個転移群との間で各種病理学的因子の比較解析を行った結果、縦隔リンパ節転移(N2)が多数個転移群と有意な相関を認めた。次に、少数個転移群と多数個転移群からそれぞれ解析に適した症例を5例ずつ抽出し、DMAチップを用いたmicroRNA発現の網羅的解析を行ったところ、複数のmicroRNAが多数個転移群と比較して、少数個転移群で高発現/低発現していた。これら候補microRNAの発現をReal-Time PCRで検証したところ、複数のmicroRNAで同様な発現傾向が認められ、microRNA発現と少数個転移肺癌との関連性が示唆された。今後も引き続き症例集積と解析を進め、少数個転移肺癌の病理学的特性を明らかにしていきたいと考えている。しかし、近年、少数個転移に留まる肺癌は、手術や放射線治療などの局所的治療で完治する可能性がある事が明らかになってきた。本研究では、過去の肺癌手術材料から1少数個転移に留まった症例、2多数個転移を来した症例を選抜し、原発巣における病理組織学的因子、および遺伝子発現プロファイルを網羅的に解析する。そして、これらの比較検討から、少数個転移(オリゴメタスターシス)肺癌に固有の性質を明らかにし、その峻別指標の確立を目標としている。平成28年度では、少数個転移(オリゴメタスターシス)群と多数個転移群との間で各種病理組織学的因子の比較解析を行った結果、多変量解析で病理病期(III期)が多数個転移群と有意な相関を認めた。さらに、少数個転移群と多数個転移群からそれぞれ解析に適した症例を5例ずつ抽出し、DNAチップを用いたmicroRNAの網羅的解析を行ったところ、複数のmicroRNAが多数個転移群と比較して少数個転移群で高発現/低発現していた。ほぼ計画通りの進行状況である。前述の如く、平成28年度では、少数個転移(オリゴメタスターシス)群と多数個転移群との間で各種病理組織学的因子の比較解析を行った結果、多変量解析で病理病期(III期)が多数個転移群と有意な相関を認めた。本研究では、過去の肺癌手術材料から1少数個転移に留まった症例、2多数個転移を来した症例を選抜し、原発巣における病理学的因子、および遺伝子発現プロファイルを網羅的に解析する。現在までの研究実績としては、少数個転移(オリゴメタスターシス)群と多数個転移群との間で各種病理学的因子の比較解析を行った結果、多変量解析で縦隔リンパ節転移(N2)が多数個転移群と有意な相関を認めた。また、少数個転移群と多数個転移群からそれぞれ解析に適した症例をそれぞれ数例ずつ抽出し、DMAチップを用いたmicroRNAの網羅的解析を行ったところ、複数のmicroRNAが多数個転移群と比較して、少数個転移群で高発現/低発現していた。この中からいくつかのmicroRNAを選抜し、Real-Time PCRで定量的解析を行ったところ、同様な発現傾向を認めた。現在、これら候補microRNAに対して、さらに症例を追加した上でReal-time PCRによる検証作業を進めている。

おおむね計画通りと考えられる。前述の如く、現在までの研究実績としては、少数個転移(オリゴメタスターシス)群と多数個転移群との間で各種病理学的因子の比較解析を行った結果、多変量解析で縦隔リンパ節転移(N2)が多数個転移群と有意な相関を認めた。また、少数個転移群と多数個転移群からそれぞれ解析に適した症例をそれぞれ数例ずつ抽出し、DMAチップを用いたmicroRNAの網羅的解析を行ったところ、複数のmicroRNAが多数個転移群と比較して、少数個転移群で高発現/低発現していた。現在、これら候補microRNAに対して、さらに症例を追加した上で、Real-time PCRによる検証作業を進めている。本研究の目的は、少数個転移(13個)に留まる肺癌(オリゴメタスターシス)の特性を明らかにすることである。一般的に転移を伴う肺癌は、全身性疾患としての性格を持ち、化学療法が標準治療である。しかし、近年、少数個転移に留まる肺癌は、手術や放射線治療などの局所治療で完治する可能性がある事が明らかになってきた。一方で、当初、少数個転移であったが、経過中に複数臓器への多数個転移を示す症例もあり、治療開始時点でこれらを峻別可能とする指標の確立が目下切実な課題である。本研究では、過去の肺癌手術材料から1少数個転移に留まった症例、2多数個転移を来した症例を選抜し、原発巣における病理学的因子、および遺伝子発現プロファイルを網羅的に解析する事で、少数個転移(オリゴメタスターシス)肺癌に固有の性質を明らかにする事を目標とした。研究期間内に、まず少数個転移(オリゴメタスターシス)群と多数個転移群との間で各種病理学的因子の比較解析を行った結果、縦隔リンパ節転移(N2)が多数個転移群と有意な相関を認めた。次に、少数個転移群と多数個転移群からそれぞれ解析に適した症例を5例ずつ抽出し、DMAチップを用いたmicroRNA発現の網羅的解析を行ったところ、複数のmicroRNAが多数個転移群と比較して、少数個転移群で高発現/低発現していた。これら候補microRNAの発現をReal-Time PCRで検証したところ、複数のmicroRNAで同様な発現傾向が認められ、microRNA発現と少数個転移肺癌との関連性が示唆された。今後も引き続き症例集積と解析を進め、少数個転移肺癌の病理学的特性を明らかにしていきたいと考えている。申請書の計画通り、引き続き少数個転移群と多数個転移群からそれぞれ解析に適した症例を数例ずつ抽出し、DNAチップを用いた網羅的解析を行い、多数個転移群と比較して少数個転移群で高発現/低発現している遺伝子群を同定する。これらの比較解析から、少数個転移(オリゴメタスターシス)肺癌に固有の性質を明らかにし、その峻別指標の確立に繋げる。引き続き、少数個転移群と多数個転移群との間で異なった発現を示した複数の候補microRNAに対して、症例を追加した上で、Real-time PCRによる検証作業を進めていく。この解析結果から、少数個転移(オリゴメタスターシス)肺癌に固有の性質を明らかにし、その峻別指標の確立に繋げる。研究はほぼ計画通りに進行中と言えるが、年度内に消化できなかった実験があり、次年度使用額が生じた。研究はおおむね計画通りといえるが、年度内に消化できなかった実験があり、次年度使用額が生じた。
食後高脂血症に対する運動の効果に関する研究

運動習慣を有しない健常若年女性において、脂肪摂取後の中等度有酸素運動は、腸管由来リポ蛋白質の粒子数増加を抑制し、粒子を大きくすることによって、外因性脂質代謝を改善した。一方、脂肪と糖質を同時に摂取した後の有酸素運動はインスリン節約効果を示し、血糖のピークを抑制したが、脂質代謝に対する効果は一過性であった。グルコースと脂肪クリームを用いた糖・脂質負荷試験は、クッキーのような実際の菓子摂取による糖・脂質代謝を反映すると考えられた。また、中等度の有酸素運動トレーニングは、運動習慣を有しない健常若年女性において、脂肪摂取後の脂質代謝と抗酸化能を改善し、継続可能な有酸素運動が、将来の食後脂質異常症などの生活習慣病予防に有効である可能性が示唆された。糖尿病の予防・治療を目的とする運動は食後に行うのが効果的であるという常識が定着しているが、高トリグリセライド血症、とくに食後高脂血症(食後高トリグリセライド血症)の運動療法に関する研究は乏しい。本研究では、スポーツとしての運動ではなく、健康の維持・増進のために継続可能な運動(時間・強度ともに)にしぼって、メタボリックシンドロームの中心的構成要因としての高トリグリセライド血症、とくに食後高トリグリセライド血症と食後高血糖の予防・治療を目的とする運動療法において、いつ、どの程度の強度で、どのような運動(有酸素運動か無酸素運動か)を行うのが好ましいかを明らかにすることを目的とする。初年度は、健常若年女性において、異なるタイミングの運動が食後脂質代謝に及ぼす影響について検討した。試験食には脂肪クリームを用い、運動はトレッドミルを用いた30分間の中等強度(最大酸素摂取量の50%程度)の歩行運動とした。まず、食後運動の効果を検討した。外因性脂質代謝の指標であるアポ蛋白B48(ApoB48)は、対照群に比べて運動群で脂肪負荷26時間後に有意に低値を示した。ApoB48の上昇程度を表す曲線下面積においても、対照群に比べて運動群は有意に低値を示した。これらのことから、食後の運動は外因性脂質代謝の改善に有用であることを示した。次に、食前の運動について検討した。運動群は脂肪クリーム摂取前に同じ運動を行った。その結果、トリグリセライド、ApoB48、レムナント様リポ蛋白(RLP)-トリグリセライドの経時変化では、両群間に有意差は見られなかった。以上、食後および食前の運動について検討し、食後脂質代謝の改善を目指した運動では、食前の運動に比べて、食後の運動の方が、より効果的であることを示した。本年度は、食後の糖・脂質代謝に対する有酸素運動の運動を検討した。インフォームド・コンセントを得た若年健常女性(21.5±0.2歳)で、アポ蛋白質E表現型3/3の者を対象とした。12時間の絶食の後、経口グルコース負荷試験の25分後から30分間の有酸素運動(最大酸素摂取量の50%程度のトレッドミル歩行)を課す「運動試験」と課さない「対照試験」を、4週間の間隔を開けてクロスオーバー法で実施した。グルコース負荷量は、体重1kg当たり1gとした。血中グルコースとインスリンは、運動試験では対照試験に比べて、負荷1時間後に有意に低値を示した。インスリンの曲線下面積(IAUC)は、運動試験では対照試験に比べて有意に低値を示した。トリグリセライド(TG)およびレムナント様粒子トリグリセライド(RLP-TG)には両試験で有意差は見られなかった。アポ蛋白質B-48は、対照試験では負荷4・6時間後には前値に比べて有意に低下した。運動試験では、負荷1時間後にはアポ蛋白質B-48の一過性上昇が見られたが、4・6時間後には対照試験と同様に前値に比べて有意に低下した。以上より、糖質(グルコース)食後の中等度有酸素運動(歩行)では、グルコースの代謝は促進されたが、トリグリセライドの代謝は有意な影響を受けなかった。運動試験でのアポ蛋白質B-48の一過性の軽度上昇は、運動によって腸管血流が増加したことにより、アポB-48の分泌が一過性に増加したと推定された。この結果を踏まえて、H23年度には糖・脂質同時負荷に対する有酸素運動の効果を検討する。【目的】グルコースのみ、あるいはこれに脂肪クリームを加えた飲料の摂取後に有酸素運動を実施し、食後の糖・脂質代謝に対する効果を検討した。【方法】運動習慣を有さず、正常体重で、規則的な性周期を有する健常若年女性で、アポリポ蛋白質Eの表現型がE3/3型である者を対象とした。

試験は、グルコース(体重1kg当たり1g)(G試験)またはグルコース(体重1kg当たり1g)+脂肪OFTTクリーム(体重1kg当たり1g、脂肪として0.35g)(GF試験)を摂取し、摂取20分後に有酸素運動(Ex:最大酸素摂取量の約50%で30分間のトレッドミル歩行)を負荷する場合としない場合の計4回で、無作為交差法を用いて実施した。採血は摂取前(0)、20分、1、2、4、6時間後に実施した。【結果】運動した群(G+ExおよびGF+Ex)では、しなかった群(GおよびGF)に比べて、1時間で、インスリン濃度は高値、グルコース濃度は低値を示した。グルコースのみの摂取では、トリグリセライド(TG)とレムナント様リポ蛋白質(RLP)-TG濃度は経時的に殆ど変化しなかったが、アポリポ蛋白質B-48(apoB48)は運動群(G+Ex)では1時間で一過性に上昇し、運動の有無に関わらず(GおよびG+Ex)、前値に比べて4時間と6時間で低値を示した。グルコースとともに脂肪を摂取した場合には、運動群(GF+Ex)で運動しない群に比べて、TG、RLP-TG、apoB48は1時間で有意に高値を示し、4時間では低値の傾向を示した。【結論】食後の有酸素運動はインスリン節約効果によって、1時間の頂値を抑制した。脂質代謝に対する運動の効果は一過性で、早期には腸管からのTGに富んだリポ蛋白質分泌を促進する。食後の運動は、グルコースのみ(脂肪を含まない)の摂取においても、殆どTGを積み込んでいないapoB48の分泌を一過性に刺激した。
癌の悪性度(特に転移能)に関与する遺伝子の検索・同定とその生物学的機能解析

1.vーfos癌遺伝子導入によって肺転移が増強したラット形質転換細胞(SRー3Y1ー2)について,生化学的及び生物学的検討を加えた結果,以下の新知見を得た. (1)vーfosによる転移能増強は, in vitro,in vivo(筋肉内)での増強能,肺への定着能とは相関しなかった.(2)Matrigelを用いたin vitroの系及び腫瘍組織において, vーfos導入による高転移性獲得細胞は,浸潤能が増強していた.(3)浸潤能増強は基底膜成分であるラミニン,IV型コラーゲンへの細胞接着能とは相関せず,運動性の増強又は蛋白分解酵素の増強が主因と考えられた. (4)vーfos導入細胞で癌遺伝子発現を調べた結果, ras,myc,srcの顕著な発現増強はみられなかった.2.高転移性と低転移性細胞間での発現蛋白比較検討によりマウスB16黒色腫において発見したA^xアクチン(A^x)について,更なる知見を得た.(1)A^xは機能的(重合能,DNaseIへの結合能)に正常である.(2)A^xの転移能増強に伴なう発現低下は, A^x蛋白の寿命短縮ではなく, mRNAレベルで生じていた.(3)A^x発現は,アクチンストレスファイバー構築低下, in vitro浸潤能増強と逆相関した. (4)A^xのcDNAクローニングに成功し, A^xの全構造を決めた.A^xはアミノ酸配列においてβアクチンと類似している(28aaがArg→Leu)が, 5′,3′のuntranslatedregionが, βと異なっており, βとは独立の遺伝子と考えられた.3.ヒト色素組織で悪性化に伴なって発現変化する第3アクチンの検討を更に加え,多くの症例で,この事実が確認された.又,このアクチンは平滑筋α型アクチンであること,及び培養正常色素細胞において,この第3アクチンの発現が認められた.1.vーfos癌遺伝子導入によって肺転移が増強したラット形質転換細胞(SRー3Y1ー2)について,生化学的及び生物学的検討を加えた結果,以下の新知見を得た. (1)vーfosによる転移能増強は, in vitro,in vivo(筋肉内)での増強能,肺への定着能とは相関しなかった.(2)Matrigelを用いたin vitroの系及び腫瘍組織において, vーfos導入による高転移性獲得細胞は,浸潤能が増強していた.(3)浸潤能増強は基底膜成分であるラミニン,IV型コラーゲンへの細胞接着能とは相関せず,運動性の増強又は蛋白分解酵素の増強が主因と考えられた. (4)vーfos導入細胞で癌遺伝子発現を調べた結果, ras,myc,srcの顕著な発現増強はみられなかった.2.高転移性と低転移性細胞間での発現蛋白比較検討によりマウスB16黒色腫において発見したA^xアクチン(A^x)について,更なる知見を得た.(1)A^xは機能的(重合能,DNaseIへの結合能)に正常である.(2)A^xの転移能増強に伴なう発現低下は, A^x蛋白の寿命短縮ではなく, mRNAレベルで生じていた.(3)A^x発現は,アクチンストレスファイバー構築低下, in vitro浸潤能増強と逆相関した. (4)A^xのcDNAクローニングに成功し, A^xの全構造を決めた.A^xはアミノ酸配列においてβアクチンと類似している(28aaがArg→Leu)が, 5′,3′のuntranslatedregionが, βと異なっており, βとは独立の遺伝子と考えられた.3.ヒト色素組織で悪性化に伴なって発現変化する第3アクチンの検討を更に加え,多くの症例で,この事実が確認された.又,このアクチンは平滑筋α型アクチンであること,及び培養正常色素細胞において,この第3アクチンの発現が認められた.
新規糖尿病足潰瘍発症リスク評価指標の開発‐非接触型静脈可視化装置を用いた検討‐

糖尿病患者に対して足潰瘍発症リスクを把握した上で適切なケアをする必要があるため、全国調査を実施したところ、フットケア専門外来を設置している施設は62.2%で、潰瘍がない患者に比べ、潰瘍がある患者に対しての実施率が低い傾向など、フットケアの実態が示された。次に、非接触型静脈可視化装置StatVein(以下SV)を使用し、糖尿病患者の両足表在血管状態を評価した。糖尿病合併症進行患者の足背血管においては、拡張、狭窄、網目状の画像を認め、健常者とは異なる所見であった。SVを用いた足血管状態の把握は、糖尿病患者の足潰瘍発症リスクを効率的にスクリーニングする手段として使用できる可能性がある。非接触型静脈可視化装置StatVein(SV)を用いて糖尿病患者の足の表在血管状態を把握できるかを検討した。SVは、赤外線と可視光によって非接触的に皮下10mmまでの表在血管を数秒間で描出する装置である。描出血管をデジカメで撮影し、光照射エリアに占める描出血管の面積が占める割合を算出して定量化した。定量化した値については、神経障害の有無、足関節上腕血圧比(ABI)、皮膚組織灌流圧(SPP)との相関を解析した。対象数は37名、年齢は66.2歳、糖尿病歴13.5年、HbA1c8.0%であった。腎症4期以降、ABI低値、SPP低値の患者の足背血管では、拡張、狭窄、網目状の画像を認め、健常者とは血管の走行パターンが異なっていることが確認された。足底の血管の走行についてのパターンは不明であった。また、光照射部位に占める描出血管面積は、右足背32.3±2.0%、右足底33.4±1.8%、左足背31.7±2.1%、左足底32.8±2.2%であり、これらの値と腎症の病期、神経障害の有無、SPP値、ABIの値の異常の有無については有意差は認められなかった。その理由として、代償性に側副血行路が新生されていた可能性があげられる。また、足底の血管の走行パターンが不明であったのは、足背の血管とは異なり、血管が深部に存在するため、十分な観察が行えなかったと思われる。腎症4期以降、ABI低値、SPP低値といった糖尿病の合併症進行患者の足背の血管では、拡張、狭窄、網目状の画像を認め、健常者とは血管の走行パターンが異なっていることが確認されたことから、糖尿病患者の静脈の走行パターンを把握することによって、足潰瘍発症リスクが高い患者がスクリーニングできる可能性がある。糖尿病患者に対するフットケア実態把握を目的に日本糖尿病学会の認定及び教育関連施設624施設に郵送式質問紙調査を実施し144施設から回答を得た。施設概要:看護体制7対1の施設75.2%、非潰瘍性足病変までの患者にフットケア実施施設66.0%、専門外来設置施設61.7%、専門外来として定期的にフットケア実施施設94.3%、専門外来でのフットケア実施状況:1か月あたり延べ30.4±53.3(2300)人、17.5±28.6(0192)時間、専門外来設置部署が看護部である施設25.3%足潰瘍発症リスク評価:靴の観察、姿勢、セルフケア状況の把握は看護体制7対1及び専門外来設置施設で有意に行われていた。ただし、姿勢の観察は実施頻度が70%未満であった。一方、足の観察、振動覚、アキレス腱反射、動脈触知、ABI、SPPは、施設間で有意差なし。フットケア介入内容:生活指導、爪切りは専門外来設置施設で有意に行われていた。一方、陥入爪、爪白癬、胼胝、鶏眼、角質の処置は、施設間で有意差なし。フットケア評価:爪切り、陥入爪、爪白癬、胼胝、角質の処置、生活指導の評価は専門外来設置施設で有意に行われていた。一方、鶏眼の処置については施設間で有意差なし。全国施設におけるフットケア現状の一端を明らかにした。専門外来設置施設や看護体制7対1では、足潰瘍発症リスク評価、フットケア介入内容、フットケア評価のいずれも多く実施されており、意識の高いことが示される一方、姿勢の観察がなされていないなど施設により実施項目のばらつきがみられた。全体のフットケア向上には、専門外来を設置していない施設への啓発と実施施設でのフットケア内容の統一化が課題であると考えられる。次年度、非接触型静脈可視化装置を使用してデジカメで撮影した足画像が足潰瘍発症リスク評価指標になりえるかを検討するため、撮影状況の設定について検討した。

H25年度に研究対象とした糖尿病患者37名の追跡調査として、下肢の浮腫の有無、BNP値との相関を検討したが、有意な相関は認められなかった。また、血管走行パターンの妥当性を確認するため、糖尿病専門医1名、腎不全看護を専門とする看護師資格を有する大学教員1名に依頼し、静脈可視化装置を用いて撮影した足画像(足背表在血管)を検討してもらい、拡張、狭窄、網膜状の画像の有無や走行パターンについて画像解析を行ってもらった。その結果、研究代表者と同様の結果が得られ、目視による足背表在血管の確認の結果が一致することが明らかとなった。さらに、赤く表出される血管画像部分の面積、ドット数、周囲の長さを数量化することを(株)インテグラル社の協力を得て試みたが、赤色に表出された表在血管画像の色調のみで境界部分の区分をすることが難しく、また、いくつかの条件設定を変更して算出を試みたが、走行パターンの異常の有無による有意差を認めることはできなかった。本研究において、足の表在血管画像を数量化することは難しかったが、定性的には表在血管障害の有無を確認することができること、判定者による誤差がないことから、表在血管障害の有無を確認するための指標としては、有用であると考えられた。静脈可視化装置Stat Veinは、簡便な操作で足の表在血管を描出できるため、今後は、フットケア専門外来において使用し、スクリーニング的に足の表在血管障害の有無を評価するのに使用する予定である。医歯薬学糖尿病患者に対して、非接触型静脈可視化装置を用いることで、侵襲がなく数秒間で表在性の血管を把握することができた。今後は症例数を増やすとともに、血管画像を数量化する方法についてのさらなる検討が必要である。糖尿病患者に対するフットケア実態把握を目的に日本糖尿病学会の認定及び教育関連施設624施設に郵送式質問紙調査を実施し144施設から回答を得たことによって、研究の第一段階である全国施設におけるフットケア現状の一端を明らかにした。専門外来設置施設や看護体制7対1では、足潰瘍発症リスク評価、フットケア介入内容、フットケア評価のいずれも多く実施されており、意識の高いことが示される一方、姿勢の観察がなされていないなど施設により実施項目のばらつきがみられたことが明らかとなった。また、多くの施設において、時間や人手不足の問題が課題となっており、足潰瘍発症リスクを把握するために、簡便に迅速に評価できる指標の開発の必要性が示唆されたため、平成25年度の計画を進めていく予定である。糖尿病合併症が進行している患者や、非糖尿病患者の表在性血管状態を把握することにより、糖尿病患者と比較検討する必要がある。また、解析ソフトの感度を上げるための検討が必要である。得られた結果については、日本糖尿病学会や日本フットケア学会の学術誌に掲載するため、論文執筆を行う予定である。平成25年度においては、非接触型静脈可視化装置を用いて、静脈指認部位の撮影画像を定量化し、足関節上腕血圧比(Ankle Brachial Pressure Index;ABI)や皮膚組織灌流圧(Skin PerfusionPressure;SPP)との相関の検討およびこれらを3次元プロットし、血管障害や足病変の解析・検討をする。対象は、糖尿病患者30名、健常者(看護学科学生)30名である。足状態については、胼胝・鶏眼、白癬・爪白癬、陥入爪、靴擦れ、潰瘍の有無、足の自覚症状も合わせて評価する。データ収集を追加したうえで画像解析ソフトの更新費用が必要なため画像解析ソフトの更新費用に8万円程度使用予定である。SPP測定装置を購入予定であったが、予算不足により購入ができないため、レンタル料と(30万円程度)でリースできないか業者に相談中である。また、物品費として、画像解析ソフト(10万円)、統計解析ソフト(40万円)を購入予定である。
DNAメチル化可変部位を指標としたウシ精子・受精卵の受胎性評価システムの構築

精液性状検査による評価結果が良好でも受胎性の低いウシ精子が存在している。ウシでも精子核DNAのメチル化異常が不妊症や老化に関連する可能性がある。本研究では、次世代シークエンスを利用し受胎性の異なる精液のメチル化レベルの網羅的比較分析から受胎性評価の指標となり得るメチル化可変部位を選択することにより、精子核DNAメチル化可変部位を指標としたウシ凍結精液の受胎性予測法を開発する。