hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ダウン症関連急性巨核芽球性白血病の発がんメカニズムの解明

ダウン症(DS)児において、一過性異常骨髄増殖症(TAM)から急性巨核芽球性白血病(AMKL)を発症するメカニズムを解明するために、DSの新生児期の血液検体において次世代ーシークエンサーを用いて遺伝子解析を行った。DS新生児39例のうちTAMを発症した27例中18例(67%)でGATA1遺伝子変異が確認された。DS-AMKL30例のうちGATA1遺伝子変異は26例(87%)で確認された。さらに、GATA1変異に加えて、JAK3変異、p53変異、およびRAD21変異がそれぞれ3例ずつ確認された。ダウン症(DS)児の約10%が、新生児期に一過性異常骨髄増殖症(TAM)を発症し、一旦は自然軽快するものの、その約20%が4歳までに急性巨核芽球性白血病(DS-AMKL)を発症する。TAMの発症にGATA1遺伝子が関与することが知られている。最近、我々は、次世代シークエンサーを用いた網羅的解析により、DS-AMKLの発症にコヒーシン関連遺伝子(RAD21、STAG2)、CTCF遺伝子、エピジェネティクス関連遺伝子(EZH2、KANSL1)などが関与することを明らかにした。本研究の目的は、これらの遺伝子変異を、TAM発症からAMKL発症までの複数の時点において解析し、TAMにおける自然軽快の経過や、DS-AMKL発症までのclonal evolutionを明らかにすることである。まず、ダウン症の新生児期の末梢血血液検体を収集し、サンガー法でGATA1遺伝子変異解析を行った。ダウン症の新生児期の血液検体は31例収集された。このうちTAMを発症していた25例中18例(72%)でGATA1遺伝子変異が確認された。一方で、TAMを発症していないダウン症児の血液検体では6例すべてでGATA1遺伝子変異は確認されなかった。GATA1遺伝子変異が確認されなかった症例については、次世代シークエンスでGATA1遺伝子変異解析を行う予定である。また、DS-AMKLの骨髄検体は30例収集された。このうちGATA1遺伝子変異は26例(87%)で確認された。さらなる付加的な遺伝子異常の有無を解析したところ、JAK3:3例、JAK2:2例、p53:3例、MPL:1例、EZH2:1例、SRSF2:1例、RAD21:3例、STAG2:2例、CTCF:1例、KANSL1:2例、BCOR:1例に遺伝子変異が確認された。TAMと比較してDS-AMKLではGATA1遺伝子変異に加えて様々な遺伝子変異が加わっていることが明らかになった。本研究の目的は、DS-AMKL発症に関わる遺伝子変異を、TAM発症からAMKL発症までの複数の時点において解析し、TAMにおける自然軽快の経過や、DS-AMKL発症までのclonal evolutionを明らかにすることである。しかしながら、現在はTAMからAMKLに至るまでの経時的血液検体の収集を行っている段階であり、本研究の目的とする解析には至っていないため。最近、我々は次世代シークエンサーによる網羅的解析により、DS-AMKLの発症にコヒーシン関連遺伝子(RAD21、STAG2)、CTCF遺伝子、エピジェネティクス関連遺伝子(EZH2、KANSL1)が関与することを明らかにした。本研究の目的は、これらの遺伝子変異をTAM発症からAMKL発症までの複数の時点において解析し、DS-AMKL発症までのclonal evolutionを明らかにすることである。ダウン症の新生児期の血液検体は39例収集された。このうちTAMを発症していた27例中18例(69%)でGATA1遺伝子変異が確認された。一方で、TAMを発症していないダウン症児の血液検体では12例すべてでGATA1遺伝子変異は確認されなかった。これらの12例中6例については次世代シークエンサーによるターゲットシークエンスでもGATA1変異は確認されなかった。このうちGATA1変異はサンガー法で26例(87%)で確認された。さらに、付加的な遺伝子異常の有無を解析したところ、JAK3:3例、JAK2:2例、p53:3例、MPL:1例、EZH2:1例、SRSF2:1例、RAD21:3例、STAG2:2例、CTCF:1例、KANSL1:2例、BCOR:1例に遺伝子変異が確認された。

DS-AMKL30例のうちGATA1遺伝子変異は26例(87%)で確認された。さらに、GATA1変異に加えて、JAK3変異、p53変異、およびRAD21変異がそれぞれ3例ずつ確認された。本研究の目的は、DS-AMKL発症に関与する遺伝子変異を、TAM発症からAMKL発症までの複数の時点において解析し、TAMにおける自然軽快の経過や、DS-AMKL発症までのclonal evolutionを明らかにすることである。しかしながら、TAMからAMKLに至るまでの経時的血液検体の収集は現在行っている最中であり、現時点では、本研究の目的とする解析には至っていないため。新たに出生したダウン症児の登録システムを立ち上げたので、ダウン症全体のデータベースを作成するとともに、出生時の末梢血血液検体を収集する。より多くの血液検体を収集するために、名古屋大学小児科および名古屋大学小児科関連施設に加えて、愛知県内の名古屋市立大学、愛知医科大学、および藤田保健衛生大学小児科に本研究への協力を依頼し、すでに同意を得ている。それゆえ、4つの大学およびそれぞれの関連施設で出生したダウン症児の末梢血血液検体を収集することができるため、より多くの検体を効率よく収集できると考えられる。小児血液腫瘍学新たに出生したダウン症児の登録システムを立ち上げ、ダウン症全体のデータベースを作成するとともに、出生時の末梢血血液検体を収集する。より多くの血液検体を収集するために、名古屋大学小児科および名古屋大学小児科関連施設に加えて、すでに愛知県内の大学である、名古屋市立大学、愛知医科大学および藤田保健衛生大学小児科から本研究への研究協力の同意を得ている。よって、4つの大学およびそれぞれの関連施設で出生したダウン症児の末梢血検体を収集することができるため、より多くの血液検体を効率よく収集することができると考えられる。収集された血液検体については、次世代シークエンサー(Illumina社、MiSeq)を用いてGATA1遺伝子のターゲットシークエンスを行う。GATA1遺伝子変異が検出された症例については、末梢血検体を3カ月ごとに収集する。DNAとRNAを抽出した時点で凍結保存し、適宜解析を行う。すなわち、経時的に収集された検体のゲノムDNAを用いて、16の遺伝子(GATA1、RAD21、STAG2、NRAS、CTCF、DCAF7、EZH2、KANSL1、TP53、KRAS、PTPN11、JAK1、JAK2、JAK3、MPLおよびSH2B3)について、次世代シークエンサーによるターゲットシークエンスを行う。そして、変異を有する腫瘍細胞の割合(variant allele frequency: VAF)を決定し、時系列的なVAFの推移から、clonal evolutionを推定する。平成27年度はTAMからDS-AMKLに至るまでの経時的検体の収集を行うことに時間がかかってしまったために、それぞれの段階における検体の遺伝子解析を行うことができていない。平成26年度はTAMからDS-AMKLに至るまでの経時的検体の収集を行うことに時間がかかってしまったために、それぞれの段階における遺伝子解析を十分に行うことができていない。平成27年度に収集した検体に加えて、新たにTAMからDS-AMKLに至るまでの検体を収集しながら、次世代シークエンサーを用いた、DS-AMKL発症に関与する遺伝子解析を行うため、次世代シークエンサー解析で必要な消耗品に使用する。
亀裂または破折歯の診断法確立のための基礎的研究

前年度の研究成果では、アクリル棒を被験体とした場合には、良好な結果が得られたが、ヒト天然抜去歯での亀裂・破折の検出能力に問題があった。そこで、探触子の形状、出力、接触様式について検索を行った。超音波パルサーレシーバー5072Rに接続する探触子をM201-RM(出力5MHz)、M202-RM(出力10MHz)の二種とし、また探触子先端に取り付ける遅延材を先端径3.0mmと7.5mmの二種の組み合わせで被験体をアクリル棒で実験を行った。その結果、M201-RMと遅延材7.5mm径を用いた場合、水平性亀裂・破折の測定で、実測値に比べ誤差は平均0.015mm以内、その標準偏差0.194mmともっとも良好な結果を示した。そこで、被験体にヒト天然歯歯根部象牙質を用い、歯軸方向に連続水平断(2.5mm間隔)したものを元の状態に復位した後、歯根面をパラフィンワックスで固定して、連続した水平歯根破折を想定した模型上で各接合部までの距離測定を行った。連続した水平性亀裂・破折にみられる断端面の検出では、測定の誤差は測定面から2.5mmで-0.044mm、5.0mmまでで0.060mm、7.5mmまでで0.098mm、測定限界に近い10.0mmでは0.378mmと距離に比例し誤差が増えることがわかった。このことから、深度が増すことにより、音波の伝播が阻害されること、それぞれの断端面で音波の減弱が起こり、オシロスコープ上での目測の誤差が増える傾向が見られた。以上のことから物質の構造が緻密であれば超音波の伝播も影響されず、測定可能深度は大きくなった。ヒト天然歯歯根部象牙質にみられる多孔性の構造を有する物質では超音波の散乱・減弱は大きくなるものの、本機器では10mm前後の測定可能域を有していると考えられた。また、超音波の特性の一つに、検出できる亀裂・破折の断端面は測定機器が接触する測定面と水平な断端とされていたが、傾斜角10度以内であれば深度15mm以内の検出能力もあることが判った。臨床応用では、測定接触面積と平滑性が重要と成るが。その他に探触子・遅延材自体の小型化が、必要と考えられた。歯の亀裂や破折の客観的診断に超音波探傷器を用いる方法に関して、その基礎的研究を行った。探傷器として超音波パルサーレシーバ5072R、接触子としてM208-RM(10Mhz直径3mm)を使用し、まず被験体固有の音速測定を行った。すなわち、実験材料として亀裂や破折のない透明アクリル棒(対象5本)、ヒト抜去歯(対象5本)、を使用し、音速をオシロスコープの波形から算出した。その結果、縦波音速・横波音速はそれぞれ、透明アクリル棒(4.025mm/μs・2.108mm/μs)、天然歯象牙質(4.105mm/μs・2.354mm/μs)であった。その後それをもとに亀裂や破折を伴う実験材料を使用し、その部位までの距離(横軸・縦軸方向)の測定を行った。その結果、透明アクリル棒における亀裂・破折に関しては検出することができ、その再現性も確認されたが、天然歯(上顎前歯)を用いた場合の検出は困難であった。これは、エナメル質上の亀裂が微妙に関係し、音波の波形が乱れることや、探触子の歯面への接触状態を一定に保つことが難しいため測定値にばらつきが生じ易いこと、垂直方向の探触角度、接触子の形状、歯の乾燥状態などが異なることなどの様々な因子が関係して測定精度に影響を与えていると考えられる。現在、測定値に適した探触子先端の形状、接触方向に関する検討を行うとともに、また術者間の誤差を調べる目的で、術者3名による測定結果を比較検討しているところである。本研究は平成11年度10月に2次採用となっており、設備備品等の納入遅延のため当初より研究予定が遅れているが、以上の抜去歯や模型上でのデータがそろい次第、サルの歯を使用しin vivoにおける亀裂や破折歯の測定を行う予定である。

連続した水平性亀裂・破折にみられる断端面の検出では、測定の誤差は測定面から2.5mmで-0.044mm、5.0mmまでで0.060mm、7.5mmまでで0.098mm、測定限界に近い10.0mmでは0.378mmと距離に比例し誤差が増えることがわかった。このことから、深度が増すことにより、音波の伝播が阻害されること、それぞれの断端面で音波の減弱が起こり、オシロスコープ上での目測の誤差が増える傾向が見られた。以上のことから物質の構造が緻密であれば超音波の伝播も影響されず、測定可能深度は大きくなった。ヒト天然歯歯根部象牙質にみられる多孔性の構造を有する物質では超音波の散乱・減弱は大きくなるものの、本機器では10mm前後の測定可能域を有していると考えられた。また、超音波の特性の一つに、検出できる亀裂・破折の断端面は測定機器が接触する測定面と水平な断端とされていたが、傾斜角10度以内であれば深度15mm以内の検出能力もあることが判った。臨床応用では、測定接触面積と平滑性が重要と成るが。その他に探触子・遅延材自体の小型化が、必要と考えられた。
東アジア産ヨコバイ族の分類と系統関係の解明

ヨコバイ族Deltocephaliniは,イネ科植物などを寄主とする小型のヨコバイで,イネのツングロ病を媒介するイナズマヨコバイなどの多くの害虫を含む分類群であるが,分類体系およびその定義に関する統一的な見解は得られていない.そこで,本研究では本族を含むヨコバイ亜科および近縁亜科の43属を用いて,系統分類学的な観点から体系の構築と分類単位の定義を行った.系統解析は外部・内部形態の64形質に基づき,最節約法を用いた.その結果,狭義のヨコバイ族は側系統群で,2つの異なる系統群を含んでいることを明らかにした.第1の系統群は模式属であるDeltocephalusを含む4属から構成される.第2の系統群はFutasuJinusなど4属から構成されるが,これらはParalimniniとDoraturiniとして分類されていた9属と共に単系統群を構築する.この結果から,前者の系統群をヨコバイ族Deltocephalini,後者をParalimniniと分類した.この分類学的措置によって,これまでAthysaniniに分類されていたParamesodesをヨコバイ族に移し,DoraturiniをParalimniniのシノニムとした.ヨコバイ族は,膜質の雄第10節,接合部基部が中央を向く把握器,直線状の結合節,癒合する結合節と挿入器,直線状の挿入器という5つの共有新形質によって新たに定義され,これに従ってOmanら(1990)が含めた137属のうち,62属のみを真のヨコバイ族と認めた.ヨコバイ族Deltocephaliniは,イネ科植物などを寄主とする小型のヨコバイで,イネのツングロ病を媒介するイナズマヨコバイなどの多くの害虫を含む分類群であるが,分類体系およびその定義に関する統一的な見解は得られていない.そこで,本研究では本族を含むヨコバイ亜科および近縁亜科の43属を用いて,系統分類学的な観点から体系の構築と分類単位の定義を行った.系統解析は外部・内部形態の64形質に基づき,最節約法を用いた.その結果,狭義のヨコバイ族は側系統群で,2つの異なる系統群を含んでいることを明らかにした.第1の系統群は模式属であるDeltocephalusを含む4属から構成される.第2の系統群はFutasuJinusなど4属から構成されるが,これらはParalimniniとDoraturiniとして分類されていた9属と共に単系統群を構築する.この結果から,前者の系統群をヨコバイ族Deltocephalini,後者をParalimniniと分類した.この分類学的措置によって,これまでAthysaniniに分類されていたParamesodesをヨコバイ族に移し,DoraturiniをParalimniniのシノニムとした.ヨコバイ族は,膜質の雄第10節,接合部基部が中央を向く把握器,直線状の結合節,癒合する結合節と挿入器,直線状の挿入器という5つの共有新形質によって新たに定義され,これに従ってOmanら(1990)が含めた137属のうち,62属のみを真のヨコバイ族と認めた.
Rett症候群の遺伝子連鎖解析

現在までのRett症候群の25家系の患児、両親のDNAを用いて以下の事を検討した。(1)本症は女児にのみ発生が見られ、家系図解析からX連鎖性優性遺伝が想定されている。新潟大学辻省二教授により供与頂いたX染色体上のDNAマーカー26種類(2)また本症はミトコンドリアの異常による病気であるというもう一つの提唱されている仮説を証明するため以下の研究を進めている。56種類の人ミトコンドリアPCR primers[高乳酸、卒中様症状を伴うミトコンドリア脳筋症(MELAS)、ミトコンドリア異常を伴うミオクローヌスてんかん(MERRF),慢性進行性外眼筋麻痺症(CPED),Leber病、その他のprimersを用いて、Rett症候群患児のミトコンドリアDNAの全シークエンスを現在も検討中である。Pharmacia社のLKB ALFred DNAのシークエンサー(小児科購入)を用いて解析その結果を日本人の正常のミトコンドリアDNA多型と比べたが、現在まで病気と直接関係あると思われる点変異はみつかっていない。今後PCR-SSCP法を用いてミトコンドリア遺伝子の突然変異や多型配列の検出を検討中である。また常染色体に関しても連鎖解析を開始している。現在までのRett症候群の20家系の患児、両親のDNAを用いて以下の事を検討中である。現在、新潟大学辻省二教授により供与頂いたX染色体上のDNAマーカー26種類また本症はミトコンドリアの異常による病気であるというもう一つの提唱されている仮説を証明するため以下の研究を進めている。56種類の人ミトコンドリアPCR primers[高乳酸、卒中様症状を伴うミトコンドリア脳筋症(MELAS)、ミトコンドリア異常を伴うミオクローヌスてんかん(MERRF),慢性進行性外眼筋麻痺症(CPEO),Leber病、その他のprimersを用いて、Rett症候群患児のミトコンドリアDNAの全シークエンスを検討中である。Pharmacia社のLKB ALFred DNAのシークエンサー(小児科購入)を用いて解析する。その結果を日本人の正常のミトコンドリアDNA多型と比べる。本研究は、米国コロンビア大学より帰国した古賀靖敏講師と共同研究中である。現在までRett症候群の25家系の患児、両親のDNAを用いて以下の事を検討した。(2)また本症はミトコンドリアの異常による病気であるというもう一つの提唱されている仮説を証明するため以下の研究を進めている。56種類の人ミトコンドリアPCR primers「高乳酸、卒中様症状を伴うミトコンドリア脳筋症(MELAS)、ミトコンドリア異常を伴うミオクローヌスてんかん(MERRF),慢性進行性外眼筋麻痺症(CPEO), Leber病、その他のprimersを用いて、Rett症候群患児のミトコンドリアDNAの全シークエンスを現在も検討中である。
うつ病の病態におけるアストロサイトの機能異常へのリゾホスファチジン酸受容体の関与

これまでに申請者は、リゾホスファチジン酸(LPA)を実験動物の脳室内投与するとLPA受容体(LPAR)を介してうつ様行動が惹起すること、LPAシグナル伝達系の下流のRho kinaseの阻害によりうつ様行動が起こらないことを明らかとした。さらに、うつ病モデル動物の海馬でLPAR発現が増加すること、この増加はアストロサイトで起こることを発見した。これらのことから、うつ病の病態に、LPARによるアストロサイトの機能変化が関与するとの仮説に至った。そこで本研究では、LPARが調節するアストロサイトの機能とそのメカニズム、それに続く脳内変化を明らかにする。
心理負荷後の軽運動が自律神経系活動に及ぼす影響

本研究の目的は、心拍変動の周波数解析の手法を用いて、健常において心理的負荷を与えた後の軽運動が自律神経系活動に及ぼす影響を定量評価することにある。被験者は健常な男子5名であった。各被験者は椅座位にて20分間安静を保った後、メトロノ-ムに合わせ15breaths/minの呼吸数で10分間椅座位安静を保った。2項2桁の暗算を5秒間隔でパーソナルコンピューターの画面上に表示し、各被験者は10分間口頭で解答を行った。暗算後再び15breaths/minの呼吸で10分間椅座位安静を保った。60watts負荷強度で10分間自転車エルゴメーターを駆動し、再び15breaths/minの呼吸数で10分間椅座位安静を保った。各制限呼吸時、暗算中および運動中の各3-8分間の心電図をII誘導から導入し、1kHzのサンプリングレートでR-R間隔を計測した。FFT法を用いてパワースペクトル密度を推定し、0.05-0.15Hz(HRV_<LF>)と0.15-0.50Hz(HRV_<HF>)の2つの帯域毎に各々積分し、その平方根を平均R-R間隔で除すことで正規化した。心理負荷前、心理負荷中、心理負荷後、運動中及び運動後の平均R-R間隔はそれぞれ772±41msec、787±15msec、807±9msec、599±25msecおよび768±23msecであった。副交感神経系活動の指標であるHRV_<HF>は、それぞれ0.756±0.156、0.970±0.332、1.012±0.175、0.971±0.291および0.791±0.274であり、交感神経系活動の指標であるHRV_<LF>/HRV_<HF>はそれぞれ1.426±0.237、1.503±0.299、1.272±0.248、0.997±0.166および1.526±0.172であった。以上の結果より暗算による心理負荷は相対的な交感神経系の緊張状態をもたらし、その後の自転車エルゴメーター駆動による軽運動は交感神経系活動の亢進を抑制する方向に動いた。
データロガーを用いた日本在来コイの琵琶湖沖合における行動パターンの解明

日本の河川・湖沼には外国から導入されたコイが蔓延しているが、琵琶湖の沖合深層には例外的に高頻度で日本在来コイが残存している。琵琶湖で在来コイが残存している理由のひとつとして、深場での効率的な遊泳能力など沖合深層への特異な適応が予想される。そこで本研究では、動物装着型の行動記録計を装着したコイの沖合放流により、導入コイと在来コイの沖合深層における遊泳行動の違いについて調べた。11個体から得られたデータを解析した結果、在来コイは深層と表層を頻繁に行き来し、深層から浮上した後でも中性浮力を失なわない一方で、導入コイは一度水深約40m以深に行くと浮力を失い、湖底から浮上できにくくなることが判明した。本研究は、環境省レッドリストの2007年度版から「絶滅のおそれのある地域個体群」として掲載されている琵琶湖在来のコイについて、その生態学的な特徴を、放流コイ(大陸から導入された「導入コイ」)との比較により明らかにすることを目的とする。琵琶湖に生息するコイは春から夏に沿岸の水草帯で産卵を行う。導入コイは繁殖後も沿岸域にとどまるが、在来コイは繁殖期が終わると広大な沖合に移動するので、この時期にどのような生活をしているのかは全く不明である。そこで本研究では、在来コイと導入コイにデータロガーを取り付けて沖合で放流し、両者のふるまい(日夜の活動パターン、深浅移動、経験水温など)の違いから、在来コイの沖合での生態特性を浮き彫りにする。解析に用いるコイは、繁殖期に沿岸域で捕獲し、DNAマーカーで在来度(導入コイとの交雑度)を確認する。データロガーは、水深、水温、速度、3軸加速度を記録するものを用いる。放流から数日後に魚体から切り離されるようタイマーを設定し、水面に浮上したものを回収する。放流は非繁殖期の秋と冬に一度ずつ行い、一度の放流では、在来コイ(導入コイとの交雑程度が低いもの)1個体と導入コイ1個体を同時に同じ地点から放つ。一年で4個体、3年で12個体(在来コイ6個体、導入コイ6個体)のデータを得る。初年度である27年度は、予定通り4個体(在来コイ2個体、導入コイ2個体)のデータを獲得した。データ数はまだ少ないものの、在来コイと導入コイとでは活動水深等に明白な違いが見られた。本年の調査では、秋に放流した2個体のうち導入コイ1個体のデータロガーが回収できなかったが、追加でもう1個体の放流を行い、予定通り4個体(在来コイ2個体、導入コイ2個体)のデータを得ることができた。本年は秋冬の放流調査の他に、実際の行動とデータロガー記録との対応をつけるための生け簀での観察実験も行い、ロガーデータを検討する際の参考情報も得た。解析に用いるコイは、繁殖期に沿岸域で捕獲し、DNAマーカーで在来度(導入コイとの交雑度)を確認して放流実験まで畜養池で休ませる。放流は非繁殖期の秋と冬に一度ずつ行い、一度の放流では、在来コイ(導入コイとの交雑程度が低いもの)1個体と導入コイ1個体を同時に琵琶湖中央部の同じ地点から放つ。2年目を終えた現時点で合計8個体のデータが得られている。まだ十分なサンプル数ではないが、在来コイと導入コイとでは、とくに冬期の放流後の定位水深に大きな違いがあると考えられる。本年度の調査では、秋と冬の調査で、データロガーを回収できなかった個体がそれぞれ1個体ずつ出てしまったが、それぞれの季節で1個体ずつ追加の放流調査を行い、結果的に予定通り4個体のデータを得ることができた。しかし本年度は、畜養池の不調により、ストレスに弱い在来コイが死亡し、典型的な在来コイを放流実験に用いることができなかった。本研究は、環境省レッドリストの「絶滅のおそれのある地域個体群」である琵琶湖の日本在来コイについて、その非繁殖期(秋から冬)における生活をバイオロギングの手法により明らかにすることを目的とする。琵琶湖のコイは春から夏に沿岸の水草帯で産卵するが、その後、在来コイは沿岸域では見られなくなる。冬期も沿岸域にとどまる導入コイ(大陸に由来)とは異なるこのような生態は、琵琶湖における在来コイ存続の一因と考えられるが、秋冬の沖合における生活の様子は全く不明である。

本研究では、在来コイの適切な保全につなげるため、この時期の生息深度や遊泳行動を、個体ベースで解明する。解析に用いるコイは、春から夏に沿岸域で捕獲し、DNAマーカーで在来度(導入コイとの交雑度)を確認して放流まで畜養池で休ませた。データロガーは、水深、水温、速度、3軸加速度を記録するものを用い、放流から5日後に自動で魚体から切り離されたものを回収した。放流は非繁殖期の秋と冬に一度ずつ行った。在来コイ(導入コイとの交雑程度が低いもの)1個体と導入コイ1個体を同時に琵琶湖中央部の同地点から放流したが、2年目以降は畜養池の不調等により在来コイを供試できず、導入コイのみの放流となった。当初の研究計画では、3年間で在来6個体、導入6個体のデータを得る計画であったが、上の経緯やロガーの回収不成功等により、追加放流を含めても在来2個体、導入9個体のデータ取得となった(なお、最終年度は6個体放流したが3個体分しかロガーを回収できなかった)。限られた個体数ではあるが、得られた深度・運動データから以下のように推察した。在来コイは深層と表層を頻繁に行き来し、深層から浮上した後でも中性浮力を失わないが、導入コイは一度40m以深に行くと浮力を失い、湖底から浮上できない。在来コイの浮力維持能力の高さは、浮袋の気道弁が発達している点と対応していると考えた。日本の河川・湖沼には外国から導入されたコイが蔓延しているが、琵琶湖の沖合深層には例外的に高頻度で日本在来コイが残存している。琵琶湖で在来コイが残存している理由のひとつとして、深場での効率的な遊泳能力など沖合深層への特異な適応が予想される。そこで本研究では、動物装着型の行動記録計を装着したコイの沖合放流により、導入コイと在来コイの沖合深層における遊泳行動の違いについて調べた。11個体から得られたデータを解析した結果、在来コイは深層と表層を頻繁に行き来し、深層から浮上した後でも中性浮力を失なわない一方で、導入コイは一度水深約40m以深に行くと浮力を失い、湖底から浮上できにくくなることが判明した。次年度以降も、秋2個体、冬2個体の放流実験を行い、初年度と同様のデータを蓄積していく。なお、2年目の始めには、遊泳データを解析する際の基礎資料とするため、在来、導入コイの魚体密度の測定も行う。最終年度である来年度も、秋に2個体、冬に2個体のデータを得るべく放流実験を行い、今年度までと同様のデータを蓄積していく。ただし、2年目の調査で在来コイのデータが得られなかったため、予算的条件が許す限りできるだけこれらの放流実験を追加して行う。魚類分子生態学購入を予定していたデータロガーを共同研究者から借用することができた。一方、データロガーの回収に手間取り、追加の放流も行ったため、予定より多くの旅費と傭船費がかかった。最終的には両者の相殺により次年度使用額が生じた。野外調査において、研究資材を宅急便にて搬送するにあたり、予定していた研究資材の数を減らしたことにより残額が生じたため。捕獲したものの放流実験に用いなかった初年度のコイについて、体密度を測定し、その後標本として残すことにした。次年度使用額は主として、この作業を現地の畜養施設において行うための旅費・消耗品費として使用する。野外調査で使用する消耗品代として使用予定。
軟骨分化におけるLRP1の機能:シグナル受容体及びタンパク質輸送体としての役割

2, lrp1ノックダウンHCS-2/8細胞では、PKCζ特異的にリン酸化を抑制することも確認した。次にHCS-2/8細胞でLRP1を強制発現したところ、PKCζの特異的な活性化が認められ、lrp1ノックダウン時と逆の結果を示した。尚、HCS-2/8細胞へのPKCζinhibitorの添加により、lrp1ノックダウン時と同様の軟骨細胞分化マーカー遺伝子発現の変動を示した。3,ニワトリ胸骨から静止軟骨細胞、増殖軟骨細胞、肥大軟骨細胞をそれぞれ単離し、lrp1の発現をノックダウンしたところ、肥大軟骨細胞のみ、HCS-2/8細胞でのlrp1ノックダウン時と同様の軟骨細胞分化マーカー遺伝子発現の変動を示した。以上の結果は、LRP1が古典的WNTシグナル経路だけでなく、さらにはPKC経路をも調節することによって軟骨細胞分化を制御し、この効果は細胞分化段階によって異なる可能性を強く示唆するものである。
ナトリウムイオン駆動型べん毛モーターのイオン透過と回転エネルギー変換機構の研究

べん毛モーターエネルギー変換機構と生物進化との関わりを解明するために、極限環境に生息する様々な細菌に着目し、それらの固定子構成タンパク質の遺伝子をクローン化し、発現系/機能解析系を確立した。特に細菌の進化において最初期に分岐した超好熱性細菌Aquifex aeolicusの固定子が、幾つかの改変により大腸菌のモーター内で機能することを示し、細菌種を超えたモーター回転メカニズムの保存性を明らかにした。特に、この固定子はNa+駆動型のエネルギー変換を行うことが示され、モーター固定子の分子進化と水平伝播について明らかにした(Takekawa et al., Sci Rep., 2015)。また、この好熱菌由来の固定子タンパク質の高効率・高純度の大量発現/精製系を確立し、それらの化学量論性を生化学的・物理学的に検証した。固定子タンパク質MotAがその相互作用パートナーであるMotBが存在しない時でも単独で四量体を形成することを示唆する結果が分子間架橋実験および電子顕微鏡単粒子解析により得られた。さらには部位特異的システイン置換変異体の解析により、MotAの構造上表面に露出している部位が同定された。海洋性細菌Vibrio alginolyticusにおいて、べん毛の数を制御するために必要な新規因子HubPを発見し、hubPの欠損によりべん毛数が増加することを明らかにした。HubP非存在下では、べん毛数を抑制する因子FlhGの細胞極への局在が減少するのに対して、べん毛数を促進する因子FlhFの細胞極への局在が変化しないことを明らかにし、またFlhG過剰発現下でもFlhFの極局在量が変化しないことから、これまで考えられてきたFlhGによる極局在FlhF量の制限だけでなく、FlhGによる極における直接的なべん毛形成阻害活性が存在することが示唆された(論文投稿中)。27年度が最終年度であるため、記入しない。細菌べん毛モーターは、エネルギー変換ユニット=固定子と、回転する本体=回転子から構成される。モーターの回転力発生のためには、固定子を介してイオンが流入すること、固定子が回転子の周りに正しく集合すること、固定子と回転子がダイナミックに相互作用すること、が重要である。本研究では、それらの現象それぞれに着目し、ナトリウムイオン駆動型べん毛モーターの回転メカニズムの包括的な解明を目的としている。べん毛モーター固定子を介したイオン透過メカニズムを解明するため、プラグ領域を欠失した固定子による生育阻害および細胞内ナトリウム濃度を測定する事で固定子のイオン透過能を検出する実験系を用いて、固定子を介したイオンの透過経路や、チャネル開閉の制御に重要な因子の探索を行い、固定子の推定チャネル部分だけでなく細胞質側領域がイオン透過活性に関与する新規の知見を得た。固定子が回転子周囲に集合する際に重要とされるT-ring、H-ringを構成するタンパク質のペリプラズム空間における局在を観察するために、Tat輸送系により、それらのタンパク質に機能的な緑色蛍光タンパク質(GFP)を結合したものを輸送する実験系を開発し、Na^<+>非依存的な集合を観察でき、ペリプラズムタンパク質の新規イメージング法に関する新たな知見が得られた。固定子/回転子のそれぞれの荷電残基に変異を導入した二重変異体について、べん毛モーター運動能を解析し、ナトリウムイオン駆動型べん毛モーターではこれまで考えられてきたよりも複雑で多くの荷電残基がモーター機能に関与することを明らかにした。また、好熱菌・好圧菌を含めた様々な菌種由来の固定子について、いくつかが大腸菌や海洋性ビブリオ菌内で機能を相補することを明らかにし、特に高度好熱菌Aauifex aeolicusの固定子が、大腸菌内でNa^<+>駆動型固定子として機能することを明らかにした。ナトリウムイオン駆動型モーターを持つ海洋性ビブリオ菌のべん毛モーターに着目し、その回転力産生のために重要とされる固定子タンパク質PomAと回転子タンパク質FliGとの間の推定相互作用界面に存在するアミノ酸残基を別のアミノ酸残基に置換する突然変異を導入し、運動能および固定子の回転子まわりへの集合能への影響を調べたところ、大腸菌などのプロトン駆動型モーターと比べ、多数の荷電残基が様々な役割を持って重要であることが判明した。これまで大腸菌などで報告されてきた回転力産生に重要とされてきた荷電残基に加え、新規に重要な残基が発見された。べん毛モーターの機能をより一般的に検証するために、極限環境に生息する様々な細菌に着目し、それらの固定子タンパク質の遺伝子をクローン化し、発現系/機能解析系を確立した。特に細菌の進化において最初期に分岐した高度好熱性細菌の固定子が、大腸菌のモーター内で機能することを示し、種を超えたモーター回転メカニズムの保存性を明らかにした。この固定子はナトリウムイオン駆動型のエネルギー変換を行うことを示し、モーター固定子の分子進化と水平伝播について明らかにした。また固定子タンパク質の高効率・高純度の大量発現/精製系を確立し、それらの化学量論性を生化学的・物理学的に検証している。

固定子を形成する2つのタンパク質のうち単一のMotAのみで多量体を形成することを示す結果が得られた。べん毛モーターエネルギー変換機構と生物進化との関わりを解明するために、極限環境に生息する様々な細菌に着目し、それらの固定子構成タンパク質の遺伝子をクローン化し、発現系/機能解析系を確立した。特に細菌の進化において最初期に分岐した超好熱性細菌Aquifex aeolicusの固定子が、幾つかの改変により大腸菌のモーター内で機能することを示し、細菌種を超えたモーター回転メカニズムの保存性を明らかにした。特に、この固定子はNa+駆動型のエネルギー変換を行うことが示され、モーター固定子の分子進化と水平伝播について明らかにした(Takekawa et al., Sci Rep., 2015)。また、この好熱菌由来の固定子タンパク質の高効率・高純度の大量発現/精製系を確立し、それらの化学量論性を生化学的・物理学的に検証した。固定子タンパク質MotAがその相互作用パートナーであるMotBが存在しない時でも単独で四量体を形成することを示唆する結果が分子間架橋実験および電子顕微鏡単粒子解析により得られた。さらには部位特異的システイン置換変異体の解析により、MotAの構造上表面に露出している部位が同定された。海洋性細菌Vibrio alginolyticusにおいて、べん毛の数を制御するために必要な新規因子HubPを発見し、hubPの欠損によりべん毛数が増加することを明らかにした。HubP非存在下では、べん毛数を抑制する因子FlhGの細胞極への局在が減少するのに対して、べん毛数を促進する因子FlhFの細胞極への局在が変化しないことを明らかにし、またFlhG過剰発現下でもFlhFの極局在量が変化しないことから、これまで考えられてきたFlhGによる極局在FlhF量の制限だけでなく、FlhGによる極における直接的なべん毛形成阻害活性が存在することが示唆された(論文投稿中)。これまで解析されてこなかった新規のべん毛モーター固定子の機能解析系を確立し、その解析により、固定子のイオン選択性について系統的に解析できたことから、ナトリウムイオン駆動型べん毛モーター機能における「イオン透過」に関する現象について新たな知見が得られた。固定子タンパク質MotAの大量発現・精製系を確立し、その物理学的性質・化学的性質を解析することで、MotAがその複合体形成パートナーであるMotBが存在しない状態でも多量体を形成する能力があることを明らかにし、固定子の「集合機構」について新たな知見が得られた。大規模な網羅的変異体解析により、固定子-回転子間相互作用の際に寄与する静電的相互作用やアミノ酸残基間相互作用を明らかにし、ナトリウムイオン駆動型モーターはプロトン駆動型モーターと比べ、多くの荷電残基がモーター機能のために重要であること、ナトリウム駆動型モーターに特異的な相互作用が存在することなどを明らかにし、「固定子-回転子間相互作用」について新たな知見が得られた。それらに加え、解析が難しい高度好熱菌のべん毛運動の解析やその固定子のイオン選択性や機能互換性を解明でき、また高度好熱菌の固定子タンパク質がこれまで調べられた他種の相同タンパク質と比べて発現量・安定性が高いことを発見し、これを用いての構造解析が進捗していることから、当初の計画以上に進展しているといえる。
非有理的な頂点作用素代数の表現のフュージョン則の研究

シンプレクティックフェルミオン型とよばれる半単純ではない頂点作用素代数の既約表現の間の交絡作用素とよばれるもののつくるベクトル空間の次元を決定した.さらに,この頂点作用素代数のスーパー版に関する考察を行い,既約でない加群の間の対数的交絡作用素と呼ばれるものの空間を決定し,一部の表現のテンソル積を計算した.前年度までに得られた、シンプレクティックフェルミオン型の頂点作用素代数の既約加群の間のフュージョン積に関する結果を論文として公表した。また、上記の頂点作用素代数の超代数版となるものの対数型交絡作用素およびフュージョン積に関する結果をいくつかの研究集会で報告した。研究面では、愛媛大学の安部利之氏と共同で、前年度考察していた対数型の交絡作用素ではなく、期待されるフュージョン積の構造との関係から、超代数およびその加群のパリティーに対応する補正を行ったものを考えることが必要であることを見出した。また、フュージョン積を定義すべき加群圏も超代数構造に対応した次数付のあるもの(超加群と呼ばれている)を考える必要があることを見出した。そこで、いままで得られた結果をこの新しい対数型交絡作用素に翻訳するとともに、一般論に関しても修正を加えた。さらに、通常の頂点作用素代数の加群のフュージョン積の類似として、超加群の圏のフュージョン積を定義し、射影加群同士のフュージョン積の直既約分解を計算した。これらの内容は現在論文を準備中である。また、フェアリンデ型の公式への応用をめざし、頂点作用素超代数とその自己同型に付随する一点共形ブロックの空間の構造に関する研究を行い、その基底となることが期待される捩じれ加群上の関数を定義し、この関数が特別な場合には期待される性質を満足することを証明した。この内容は、台湾で行われた国際会議で報告した。今後この内容を発展させ、一点共形ブロックの空間の基底を捩じれ加群上の関数で実現することを目的とする研究を行う予定である。シンプレクティックフェルミオン型とよばれる半単純ではない頂点作用素代数の既約表現の間の交絡作用素とよばれるもののつくるベクトル空間の次元を決定した.さらに,この頂点作用素代数のスーパー版に関する考察を行い,既約でない加群の間の対数的交絡作用素と呼ばれるものの空間を決定し,一部の表現のテンソル積を計算した.1本年度は愛媛大学の安部利之氏とともにシンプレクティックフェルミオン型頂点作用素代数の既約加群の間のフュージョン則をすべて決定した.さらに,フュージョン則を用いて定義されるフュージョン代数と呼ばれるものを考察した.シンプレクティックフェルミオン型頂点作用素代数は構成の際に用いられるベクトル空間の次元をパラメーターとして持つが,フュージョン代数はこのパラメーターによらず,クラインの4元群の群環と同型になることを見出した.これらの結果は当初の予定通り, Frenkel-Zhu両側加群の生成元を決定し,フュージョン則の上限が1または0であることを証明することによって得られたものである.この内容は論文としてまとめ,現在投稿中である.上に述べた成果は,本研究の目的である対数型のintertwining operatorの空間を決定することの基礎になる結果である.2本年度はさらに,シンプレクティックフェルミオン型頂点作用素代数を構成する際に現れるある頂点作用素超代数の射影加群および(捩じれ)既約加群の間に定まる対数型のintertwining operatorをすべて決定し,現在論文を準備中である.この研究では対数型のintertwining operatorの空間がある有限次元結合代数の表現となること用いて,その表現の生成元となるintertwining operatorを構成することにより目的を達成した.この研究で得られた対数型のintertwining operatorを用いることにより,本研究の最終目的であるシンプレクティックフェルミオン型頂点作用素代数の直既約射影加群の間に定まるintertwining operatorの空間が決定できることが期待される.当初の予定では,本年度は既約加群のフュージョン則を決定することが目標であった.この目標はすでに達成されており,現在のところ計画の第二段階である頂点作用素超代数の対数型のintertwining operatorの空間を決定することまで完了しているため,当初の計画以上に進展していると評価する.研究計画に基づき,シンプレクティックフェルミオン型頂点作用素代数の直既約加群の間の対数型のintertwining operatorの空間を決定することを目的とする研究を行う.また,今年度の研究を進めていくうえで現れるような頂点作用素超代数の一般論の整備が不十分であることがわかったので,本来の研究計画を進めるとともに,このような一般論の整備のための研究も行う.研究を進めていく上で必要に応じて研究費を執行したため当初の見込み額と執行額は異なったが,研究計画に変更はなく,前年度の研究費も含め,当初予定通りの計画を進めていく.
単色放射光と次世代ハイビジョンカメラを用いた微小血管造影法の開発

既存のX線撮影装置(イメージ増強管(II)・テレビジョン(TV)システム)では微小血管の機能的、器質的病変の評価を期待することはできない。この目的のためには、直径50-100μmの微小血管内に含まれる微量の造影剤を背景となる生体組織から識別できる強力なX線源が必要であり、さらに50μm以下の解像度をもつX線撮影装置が必要である。我々は、単色化した放射光をX線源として、撮像システムとして次世代型ハイビジョンカメラシステムを用いることにより、この目的を達成した。つくば市の高エネルギー物理学研究所の放射光と次世代用ハイビジョンカメラシステム:アバランシェ(電子なだれ現象)型テレビカメラシステムを利用して、種々の動物実験をおこない、既存の血管造影法では評価が困難であった50-100μmの微小血管の造影を実現した。この撮影システムでは2/3インチの視野を2000°2000本のテレビ走査線で撮影するので、実寸で撮影した場合、8μmの解像度を得ることができる。既存のCCDカメラを用いたハイビジョンカメラシステムでは画素が小さくなるに連れて、画素あたりの光子数が少なくなるため感度が低下するという問題があった。このアバランシェ型テレビカメラシステムでは電子なだれ現象により入射する光子あたりの光電変換効率(量子効率)を最大でCCDカメラの約630倍に高めることができる。すなわち、解像度の向上に伴う感度の低下を解決した理想的な微小血管撮影用のテレビカメラシステムということができる。本方法ならびに本研究期間中に開発された関連技術を利用して行われた動物実験に基づく成果を、裏面及び別紙の業績リストに列記した。本方法の臨床応用が実現されると、微小冠血管の臨床的評価により、Syndrome X、大動脈弁狭窄症、高血圧性心疾患、肥大型心筋症などにみられる心筋虚血と微小冠血管に限局した狭窄性病変との関連を検討できる。また、微小脳梗塞の血管病変を判定することも可能になる。肝臓、肺などでは、腫瘍の栄養血管の評価により、小腫瘍の悪性度の判定が容易になり、癌の早期発見に役立つ。また、移植臓器の細血管病変の広がりから拒絶反応の空間的分布が評価できる可能性もある。本年度は、冠動脈以外の微小血管造影法と画像処理技術を確立した。1)犬の摘出臓器の撮影(5頭)システムの解像度、感度を確認するためには、動きがなく、しかも微小血管内に造影剤が滞留した被写体を用いる必要があった。麻酔し、開胸または開腹後、冠動脈枝、肝動脈枝、膵臓動脈枝、回腸動脈枝、脳動脈枝にカニューレを挿入し、これを介して、重量濃度37%のヨードを含有する局所血流測定用マイクロスフェア-(直径15μm)を同動脈枝に1-5^*10^8個注入した。注入終了後肝臓を摘出してホルマリン液中で固定した。これに、単色放射光(X線)を照射し(高エネルギー物理学実験施設:安藤正海、兵藤一行)、アバランシェ(電子なだれ現象)型テレビカメラ(HDTVカメラC-4860-16)で撮影を行なった。被写体を通過したX線をX線用増感紙に吸収させ、それが発する蛍光をテレビカメラで撮影した。

記録装置としてアナログ型のハイビジョン用ビデオシステムを用いた。プリントアウトの装置としてビデオプリンター(精工舎VP-4500)を用いた。このシステムで解像度30μmで微小血管枝が観察できることを確認した。2)犬を対象とした生体下での微小血管造影(5頭)ビ-グル犬各1頭を用いて、生体下で肝動脈枝、肺動脈枝、回腸動脈枝、膵管の造影を行なった。麻酔し、開胸、開腹または開頭した後、左鎖骨下動脈または左大腿動脈から目標とする動脈枝にバイパス路を作成する。ヨード造影剤(イオパミロン3-5ml)をバイパス路内に注入して、微小動脈枝を選択的に造影した。対照状態での造影を終えた後、薬剤により、微小血管径を変化させて同動脈枝の造影を繰り返した。50μm前後の血管枝を生体下で描出できることを確認した。心周期中の血管径の変化を観察するためにビデオデッキに心電図を造影像に一部重ねて同時記録することも試みた。微小血管病変の臨床評価を実現しうる血管造影装置を開発するために以下の実験を行った。実験動物に単色放射光(X線)を照射し、アバランシェ型テレビカメラで撮影を行なった。これらの実験から、1)冠微小血管造影システムを確立した。2)犬を対象とした生体下での微小冠動脈枝造影を行い、微小血管造影所見と局所心筋血流量との対比を行った。3)坦癌動物の、腫瘍栄養血管の撮影を実現」した。高解像度の撮影システムでは視野が小さくなるので、動きの激しい冠動脈枝の撮影では目的とした血管を視野中に保持することがしばしば困難であった。このため、光学系を工夫して、比較的低解像度で位置決めを行い、標的血管とその周囲のみを選択的に高解像度で撮影できるシステムに改造した。このシステムを用いて、前年度の微小血管造影に準じて動物実験を行った。ビ-グル犬10頭を用いて、麻酔し、開胸した後、左鎖骨下動脈から冠動脈枝にバイパス路を作成した。このバイパス路中に電磁流量計のプローブを内蔵しておき、同冠動脈枝の血流量をモニターした。圧トランスデューサーにより冠動脈枝かん流圧をモニターした。ヨード造影剤(イオパミロン3.5ml)をバイパス路内に注入して、微小冠動脈枝を選択的に造影した。対照状態での造影を終えた後、アデノシン投与(動脈枝血流量を増加)と、エンドセリン投与(動脈枝血流量を減少)などにより、微小血管径を変化させて同動脈枝の造影を繰り返した。本年度は、3年間におよぶ本研究計画年度内に確立した微小血管造影法とその関連技術を応用して種々の動物実験を行い、裏面に示す業績を挙げた。既存のX線撮影装置(イメージ増強管(II)テレビジョン(TV)システム)では微小血管の機能的、器質的病変の評価を期待することはできない。我々は、単色化した放射光をX線源として、撮像システムとして次世代型ハイビジョンカメラシステムを用いることにより、この目的を達成した。つくば市の高エネルギー物理学研究所の放射光と次世代用ハイビジョンカメラシステム:アバランシェ(電子なだれ現象)型テレビカメラシステムを利用した、種々の動物実験をおこない、既存の血管造影法では評価が困難であった50-100μmの微小血管の造影を実現した。この撮影システムでは2/3インチの視野を2000^*2000本のテレビ走査線で撮影するので、実寸で撮影した場合、8μmの解像度を得ることができる。
東南アジア暖帯林の動物相と種分化に関する研究(第2次)Studies of the fauna of warm temperate forests in Southeast Asia,with special reference to animal speciation

東南アジアには,地域による気候の違いや地形の変化を反映する特有な暖帯林が隔離的に分布しており,そこに生息する動物も周囲の熱帯林とは異なる独特の動物相を形成している.本研究は,各地の暖帯林の動物相を調査し,それぞれの特異性を比較分析することによって,種分化の実態を解明することを目的とする.小型哺乳類は各地で総計60種を越える標本を採集することができた.これらのほとんどは日本産の種類とは共通せず,比較研究のための貴重な資料となる.また,この中には最近,新科・新属・新種として発表されたコウモリCraeonycteris thorglongyaiが含まれている.水生甲殻類は本第1次調査のフィリピンとの関連から東マレーシア・サバ州の調査を行い,バラワン諸島産の種と属のレベルでの共通性を確認した.マレー半島に関してはマレーシア側から北上し,また,タイ側から南下してほぼ全域をカバーすることができた.カニ類は地域ごとに著しく固有性が高いため,種分化の考察には好適である.一方,テナガエビ類は両側回遊をするため一般に分布が広く,種分化を論ずるためには適当な素材ではないが,時期的に抱卵雌を豊富に入手することができたため,短期間の飼育によって幼生を得ることができた.淡水産の他の重要群であるヌマエビ類は小型であるため,種の同定に時間を要するが,固有性が高く,種によっては大卵化の傾向を明瞭に示しているため,種分化に関する新知見が期待される.昆虫やクモ類は採集個体数,種数とも多いため,標本化に時間を要し,研究は未だ十分には行われていない.概観したところでは,暖帯林を中心に採集を行ったためか,従来得られていない種がかなり含まれているようである.特に,最も原始的なクモ類であるハラフシグモ属や森林性のガ類(カレハガ科,ヤママユガ科,シャチホコガ科など)には,未知の種ばかりでなく,種分化を論ずるため望ましい種が多数含まれている.本調査は60年度に実施されたフィリピンに次ぐ第2次調査である.当初から予想されたことであるが,今回のマレーシア,タイの資料によって,フィリピンの動物相の独自性がより鮮明になってきた.そこで,台湾を集中的に調査し,日本およびフィリピンの暖帯林の動物相と比較すれば,種分化に関する内容のより深い研究が可能とすり,また,台湾の亜高山・高山帯の調査結果は日本の動物相の起源の一部を示すことにもなると思われる.当初,第3次調査として計画した通り, 64年度には台湾の動物相の調査を希望している.東南アジアには,地域による気候の違いや地形の変化を反映する特有な暖帯林が隔離的に分布しており,そこに生息する動物も周囲の熱帯林とは異なる独特の動物相を形成している.本研究は,各地の暖帯林の動物相を調査し,それぞれの特異性を比較分析することによって,種分化の実態を解明することを目的とする.小型哺乳類は各地で総計60種を越える標本を採集することができた.これらのほとんどは日本産の種類とは共通せず,比較研究のための貴重な資料となる.また,この中には最近,新科・新属・新種として発表されたコウモリCraeonycteris thorglongyaiが含まれている.水生甲殻類は本第1次調査のフィリピンとの関連から東マレーシア・サバ州の調査を行い,バラワン諸島産の種と属のレベルでの共通性を確認した.マレー半島に関してはマレーシア側から北上し,また,タイ側から南下してほぼ全域をカバーすることができた.カニ類は地域ごとに著しく固有性が高いため,種分化の考察には好適である.一方,テナガエビ類は両側回遊をするため一般に分布が広く,種分化を論ずるためには適当な素材ではないが,時期的に抱卵雌を豊富に入手することができたため,短期間の飼育によって幼生を得ることができた.淡水産の他の重要群であるヌマエビ類は小型であるため,種の同定に時間を要するが,固有性が高く,種によっては大卵化の傾向を明瞭に示しているため,種分化に関する新知見が期待される.昆虫やクモ類は採集個体数,種数とも多いため,標本化に時間を要し,研究は未だ十分には行われていない.概観したところでは,暖帯林を中心に採集を行ったためか,従来得られていない種がかなり含まれているようである.特に,最も原始的なクモ類であるハラフシグモ属や森林性のガ類(カレハガ科,ヤママユガ科,シャチホコガ科など)には,未知の種ばかりでなく,種分化を論ずるため望ましい種が多数含まれている.本調査は60年度に実施されたフィリピンに次ぐ第2次調査である.当初から予想されたことであるが,今回のマレーシア,タイの資料によって,フィリピンの動物相の独自性がより鮮明になってきた.そこで,台湾を集中的に調査し,日本およびフィリピンの暖帯林の動物相と比較すれば,種分化に関する内容のより深い研究が可能とすり,また,台湾の亜高山・高山帯の調査結果は日本の動物相の起源の一部を示すことにもなると思われる.当初,第3次調査として計画した通り, 64年度には台湾の動物相の調査を希望している.