hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
棘皮動物における「結合組織キャッチ」仮説の再検証

結合組織キャッチとは,コラーゲン性の結合組織がその力学的性質を可逆的に変化させる現象で,棘皮動物門全体にわたってみられる.その機構は,コラーゲン繊維と繊維間基質の相互作用に由来する粘弾性変化に基くとする説が有力であるが,最近,ウニの棘基部にあるcatch apparatus(CA)のキャッチ現象は少数の筋細胞の活動によって説明できるとする仮説が提出された.このような状況下で,本研究は筋細胞を含まない結合組織とされる,ウニ棘中央靭帯の形態と機能を詳細に調べ,さらにCAのキャッチへの筋収縮の関与を従来とは異なる角度から検討することによって結合組織キャッチの機構解明に寄与することを目的とした.まず,棘基部のCAのキャッチに筋収縮が関与しているという仮説を検証するため,CAの力学的性質に対するミオシン阻害剤2,3-butanedione-2-monoxime(BDM)の効果を検討した.その結果,BDMがCAのキャッチを完全に阻害することが明らかになった.さらに,表面活性剤を用いて細胞要素の膜を可透化したCAはATPに反応してキャッチ状態を示すことがわかった.これらのことは,筋細胞の関与を強く示唆するものである.つぎに,ガンガゼの中央靭帯(CL)の力学的・生理学的性質について再検討を試みた.その結果,CAのキャッチを引き起こすアセチルコリンや,キャッチの弛緩を引き起こすアドレナリンは.CLに対しても同様の効果を持つこと,さらにBDMがCLの伸展性を増大させることが明かになった.この結果は,中央靭帯は筋細胞を含まず,(したがって)キャッチを示さないとする一部の主張とは一致しない.CLの細胞要素などについてはさらに検討を要する.結合組織キャッチとは,コラーゲン性の結合組織がその力学的性質を可逆的に変化させる現象で,棘皮動物門全体にわたってみられる.その機構は,コラーゲン繊維と繊維間基質の相互作用に由来する粘弾性変化に基くとする説が有力であるが,最近,ウニの棘基部にあるcatch apparatus(CA)のキャッチ現象は少数の筋細胞の活動によって説明できるとする仮説が提出された.このような状況下で,本研究は筋細胞を含まない結合組織とされる,ウニ棘中央靭帯の形態と機能を詳細に調べ,さらにCAのキャッチへの筋収縮の関与を従来とは異なる角度から検討することによって結合組織キャッチの機構解明に寄与することを目的とした.まず,棘基部のCAのキャッチに筋収縮が関与しているという仮説を検証するため,CAの力学的性質に対するミオシン阻害剤2,3-butanedione-2-monoxime(BDM)の効果を検討した.その結果,BDMがCAのキャッチを完全に阻害することが明らかになった.さらに,表面活性剤を用いて細胞要素の膜を可透化したCAはATPに反応してキャッチ状態を示すことがわかった.これらのことは,筋細胞の関与を強く示唆するものである.つぎに,ガンガゼの中央靭帯(CL)の力学的・生理学的性質について再検討を試みた.その結果,CAのキャッチを引き起こすアセチルコリンや,キャッチの弛緩を引き起こすアドレナリンは.CLに対しても同様の効果を持つこと,さらにBDMがCLの伸展性を増大させることが明かになった.この結果は,中央靭帯は筋細胞を含まず,(したがって)キャッチを示さないとする一部の主張とは一致しない.CLの細胞要素などについてはさらに検討を要する.結合組織キャッチとは,コラーゲン性の結合組織がその力学的性質を可逆的に変化させる現象で,棘皮動物門全体にわたってみられる.その機構は,コラーゲン繊維と繊維間基質の相互作用に由来する粘弾性変化に基くとする説が有力であるが,最近,ウニの棘基部にある"catch apparatus"(CA)のキャッチ現象は少数の筋細胞の活動によって説明できるとする仮説が提出された.このような状況下で,本研究は筋細胞を含まない結合組織とされる,ウニ棘中央靭帯の形態と機能を詳細に調べ,さらにCAキャッチへの筋収縮の関与を従来とは異なる角度から検討することによって結合組織キャッチの機構解明に寄与することを目的とする.本年度は,棘基部のCAのキャッチに筋収縮が関与しているという仮説を検証するため,CAの力学的性質に対するミオシン阻害剤2,3-butanedione-2-monoxime(BDM)の効果を検討した.その結果,BDMがCAのキャッチを完全に阻害することが明らかになった.このことは,筋細胞の関与を強く示唆するものである.つぎに,ガンガゼの中央靭帯(CL)の力学的・生理学的性質について再検討を試みた.その結果,CAのキャッチを引き起こすアセチルコリンや,キャッチの弛緩を引き起こすアドレナリンは,CLに対しても同様の効果を持つこと,さらにBDMがCLの伸展性を増大させることが明かになった.この結果は,中央靭帯は筋細胞を含まず,(したがって)キャッチを示さないとする一部の主張とは一致しない.CLの細胞要素などについてはさらに検討を要する.コラーゲン性の結合組織がその力学的性質を可逆的に変化させる結合組織キャッチは,棘皮動物門全体にわたってみられる現象であるが,その機構はいまだに解明されていない.力学的性質の変化は,コラーゲン繊維と繊維間基質の相互作用に由来する粘弾性変化に基くとする説が有力であるが,最近,ウニの棘基部にあるcatch apparatus(CA)のキャッチ現象は,少数の筋細胞の活動によって説明できるとする仮説が提出された.本研究は,CAのキャッチにおける筋収縮の関与を従来とは異なる角度から検討すること,ならびに,筋細胞を含まない結合組織とされるウニ棘

中央靭帯の形態と機能を詳細に調べることによって結合組織キャッチの機構解明に寄与することを目的とした.まず,棘基部のCAのキャッチに筋収縮が関与しているという仮説を検証するため,CAの力学的性質に対するミオシン阻害剤2,3-butanedione-2-monoxime(BDM)の効果を検討した.その結果,BDMがCAのキャッチを完全に阻害することが明らかになった.さらに,表面活性剤を用いて細胞要素の膜を可透化したCAはATPに反応してキャッチ状態を示すことがわかった.これらの結果は,キャッチにおける筋細胞の関与を強く示唆するものである.つぎに,ガンガゼの中央靭帯(CL)の構造ならびに力学的・生理学的性質について再検討を試みた.まず,CLの細胞要素について電子顕微鏡による予備的観察を試みたが,従来の報告と同様に,明瞭な筋細胞は見いだせなかった.しかし,CAのキャッチを引き起こすアセチルコリンや,キャッチの弛緩を引き起こすアドレナリンは.CLに対しても同様の効果を持つこと,さらにBDMがCLの伸展性を増大させることが明かになった.これらの結果は,中央靭帯は筋細胞を含まず,(したがって)キャッチを示さないとする一部の主張とは一致しない.
メディアの相互補完性を利用するユーザレベルQoS向上の研究

本研究は,音声・ビデオIP伝送のユーザレベルQoSを対象とし,その研究成果は5種類に大別できる.まず第1は,ユーザレベルQoS評価法の研究である.端末モニタサイズの影響,時間的連続評価,及び多次元評価の研究を行った.続いて,音声・ビデオの時間品質とビデオの空間品質とを考慮したリアルタイム推定法を提案し,その有効性を実験により示した.第2に,IEEE802.11無線LANのMACプロトコルと,アプリケーションレベルQoSやユーザレベルQoSとの関係を詳細に検討した.DCFとEDCAにおいて,メディア同期制御を用いた場合のアプリケーションレベルとユーザレベルのQoSを評価して,達成可能なユーザレベルQoSの範囲を明らかにした.また,伝送誤りがある環境で,TXOP-Burstingを用いたEDCAの評価も行った.HCCAによるユーザレベルQoS保証可能なパケットスケジューリング方式を提案した.同様の検討を,DCFやEDCAを用いたアドホックネットワークについても行った.特に,メディアの相互補完性を利用するQoS制御方式として,マルチパス伝送メディア同期制御併用方式(MPMS)を提案し,その有効性を示した.第3は,多対多IPテレビ会議システムにおけるユーザレベルQoSの1次元と多次元の評価である.第4は,メディアの相互補完性を利用して,ユーザレベルQoSを最大とする音声とビデオへの帯域配分法の研究である.CBRの音声とビデオを対象として,これら2メディアへの合計割当帯域を一定としたときに,2メディア間でどのように帯域を配分すべきかを,実験により明らかにした第5は,ユーザレベルQoS保証方式GPSQの提案である.SIPによるセッション制御方式を採用したアーキテクチャを考案し,簡単な構成の実験システムによって,その実現可能性を立証した.本研究は,音声・ビデオIP伝送のユーザレベルQoSを対象とし,その研究成果は5種類に大別できる.まず第1は,ユーザレベルQoS評価法の研究である.端末モニタサイズの影響,時間的連続評価,及び多次元評価の研究を行った.続いて,音声・ビデオの時間品質とビデオの空間品質とを考慮したリアルタイム推定法を提案し,その有効性を実験により示した.第2に,IEEE802.11無線LANのMACプロトコルと,アプリケーションレベルQoSやユーザレベルQoSとの関係を詳細に検討した.DCFとEDCAにおいて,メディア同期制御を用いた場合のアプリケーションレベルとユーザレベルのQoSを評価して,達成可能なユーザレベルQoSの範囲を明らかにした.また,伝送誤りがある環境で,TXOP-Burstingを用いたEDCAの評価も行った.HCCAによるユーザレベルQoS保証可能なパケットスケジューリング方式を提案した.同様の検討を,DCFやEDCAを用いたアドホックネットワークについても行った.特に,メディアの相互補完性を利用するQoS制御方式として,マルチパス伝送メディア同期制御併用方式(MPMS)を提案し,その有効性を示した.第3は,多対多IPテレビ会議システムにおけるユーザレベルQoSの1次元と多次元の評価である.第4は,メディアの相互補完性を利用して,ユーザレベルQoSを最大とする音声とビデオへの帯域配分法の研究である.CBRの音声とビデオを対象として,これら2メディアへの合計割当帯域を一定としたときに,2メディア間でどのように帯域を配分すべきかを,実験により明らかにした第5は,ユーザレベルQoS保証方式GPSQの提案である.SIPによるセッション制御方式を採用したアーキテクチャを考案し,簡単な構成の実験システムによって,その実現可能性を立証した.本年度は,研究計画に従って,ユーザレベルQoSの定量化及びQoSマッピング手法の確立を中心に研究を行うとともに,ユーザレベルQoS向上のためのQoS制御技術の準備的検討も行った.有線及び無線のIPネットワークにおける音声・ビデオ伝送を主たる検討対象とした.有線ネットワークについては,本年度の研究費で購入した2台のルータで実験ネットワーク構築した.また,無線ネットワークの場合は,シミュレーションを行った.ユーザレベルQoSの定量化及びマッピングについては,まず,端末モニタサイズの影響の定量的評価を行った.次に,有線ネットワークにおいて,ユーザレベルQoSの時間的連続評価の方法も検討した.これは,アプリケーションレベルQoSから,マッピングによってユーザレベルQoSを推定するものである.続いて,コンテンツがユーザレベルQoSに及ぼす影響を,メディアの相互補完性の観点から調査し,その性質を利用してユーザレベルQoSを向上させる方法を考案した.更に,多対多IPテレビ会議システムにおけるユーザレベルQoSの評価方法とマッピングによる推定方法も研究した.無線ネットワークについては,本年度は,ユーザレベルQoS研究の準備として,アプリケーションレベルQoSを扱った.まず,メディアの相互補完性を利用する音声・ビデオQoS制御方式として,アドホックネットワークに対して,マルチパス伝送メディア同期制御併用方式(MPMS)を提案し,その有効性を示した.更に,IEEE802.11eを用いる場合も検討した.一方,ユーザレベルQoS向上のためのQoS制御技術については,SIPによるセッション制御により,ユーザレベルQoSを保証する方式の提案を行った.実験ネットワークに提案方式を実装し,40名の被験者による主観評価を行うことによって,システムの稼動に必要な最低限のデータ取得と基本的な動作確認を行った.本年度は,ユーザレベルQoSの定量化及びマッピング手法の研究を継続するとともに,ユーザレベルQoS向上や保証のためのQoS制御技術の準備的研究も行った.得られた主な成果を以下に示す.

まず,IPプロトコルを用いたインフラストラクチャネットワークにおける音声・ビデオ伝送を対象とし,そのユーザレベルQoSをリアルタイムで推定する一つの方法を提案した.提案方式では,音声・ビデオの相互補完性を考慮して,昨年度に開発したユーザレベルQoSの定量化及びマッピング手法を利用している.次に,IEEE802.11無線LANによる音声・ビデオ伝送のユーザレベルQoS評価を行った.最初に,DCFと802.11eのEDCAにおいて,メディア同期制御を用いた場合のアプリケーションレベルとユーザレベルのQoSを評価して,達成可能なユーザレベルQoSの範囲を明らかにした.更に,EDCAでTXOP-Burstingを用いた場合とHCCAを用いた場合の評価も行った.続いて,ユーザレベルQoS定量化の研究をマルチキャスト環境に拡張した.多対多IPテレビ電話会議における多数の端末が,インタラクティブに音声・ビデオ伝送を行っている環境を想定し,その場合のユーザレベルQoSを,簡単な実験システムを用いて評価した.ユーザレベルQoS向上法の一つとして,メディアの相互補完性を利用する方法を研究した.CBRの音声とビデオを対象として,これら2メディアへの合計割当帯域を一定としたときに,ユーザレベルQoSを最大とするためには,2メディア間でどのように帯域を配分すべきかを,実験により明らかにした.ユーザレベルQoS保証の実現方法の研究も開始した.昨年度に行ったSIPによるセッション制御方式を発展し,ユーザレベルQoS保証を可能とするアーキテクチャを考案した.そして,簡単な構成の実験システムによって,その実現可能性を立証した.本年度は,昨年度に行った準備的研究を更に発展させ,以下の成果を得た。まず,音声、ビデオIP伝送のユーザレベルQoSリアルタイム推定方式の研究を継続し,ビデオの空間品質の影響まで含めるよう拡張した。更に,これまでのMPEG1ビデオに加え,H.264ビデオも検討対象とし,ビデオの誤り補償を行った場合の検討や,非線形回帰式による推定の研究も行った。次にIEEE802.11e無線LANのEDCAを用いた場合に,伝送誤りがあるという条件下で,TXOP-Burstingに加えblock ACKがアプリケーションレベルとユーザレベルのQoSに及ぼす影響を評価した。同様の検討を,アドホックネットワークでEDCAを用いた場合にも行った。また,HCCAを採用することによって,ユーザレベルQoS保証を可能とするパケットスケジューリング方式を提案し,評価した。多対多IPマルチメディアアプリケーションの研究では,受信バッファリング時間やネットワーク負荷がユーザレベルQoS(主観品質と作業成績)に及ぼす影響を,SD法により多次元的に評価した。更に,昨年度に提案したユーザレベルQoS保証アーキテクチャGPSQについて,3音声、ビデオ蓄積ストリームを伝送する場合の実験を行い,その有効性を確認した。
カルシウム活性化クロライドチャネルTMEM16の新規修飾サブユニットの同定

カルシウム活性化クロライド(ClCa)チャネルとして同定されたTMEM16Aに注目し、血管平滑筋における生理的意義の解明を目指した。マウス門脈平滑筋細胞において、TMEM16Aが高発現し、二量体でClCaチャネルを形成していた。その活性はアクチン骨格との相互作用による影響を受けた。TMEM16AはTMEM16Bとヘテロ二量体でClCaチャネルを形成できることが示唆された。肝硬変由来の門脈圧亢進症モデルマウスにおいて、門脈平滑筋細胞でのTMEM16Aの発現および機能が低下していた。本研究成果は、血管におけるTMEM16Aチャネルの生理機能と病態での役割を解明する上で重要な知見であると考えられる。血管平滑筋において、カルシウム活性化クロライド(ClCa)チャネルの活性化は、静止膜電位を脱分極側へシフトさせるため、血管筋緊張の増大をもたらす重要な要素である。近年、TMEM16遺伝子ファミリーに属するTMEM16Aが、様々な平滑筋に発現するClCaチャネルの分子実体として報告された。本研究では、マウス門脈平滑筋細胞に発現するTMEM16ファミリーの発現解析と機能解析を行った。門脈平滑筋において、TMEM16AのmRNAおよびタンパク質発現が認められた。また、門脈平滑筋細胞において、脱分極刺激によって活性化する外向き電流と再分極によって惹起される内向き末尾電流が観察された。これらの電流は、ClCaチャネルの阻害薬によって抑制された。次に、門脈平滑筋からTMEM16Aをクローニングしたところ、スプライスバリアントのabc体とacd体が大部分を占めた。abc体とacd体をHEK293細胞に発現させて、ClCa電流を観察したところ、末尾電流の時定数は、門脈平滑筋細胞の時定数よりも大きかった。そこで、門脈平滑筋細胞をアクチン骨格の重合阻害剤で前処置したところ、その時定数は延長した。さらに、全反射蛍光顕微鏡を用いたFRET解析によって、TMEM16Aのスプライスバリアント体は、ホモもしくはヘテロ二量体でチャネル1分子を構成することが示された。本研究によって、マウス門脈平滑筋細胞では、主にTMEM16A(abc)とTMEM16A(acd)のホモもしくはヘテロ二量体で機能的ClCaチャネルを形成していることが明らかとなった。また、ClCaチャネル活性は、アクチン骨格によって制御されていることも示唆された。以上の研究成果は、血管平滑筋に機能発現するClCaチャネルの生理機能を解明する上で重要な知見になると考えられる。門脈圧亢進症は門脈圧が上昇する疾患群の総称であるが、肝硬変の合併症として発症する場合が大部分を占めている。門脈圧亢進症が進行すると食道静脈瘤、脾腫、腹水などの症状を呈する。門脈圧亢進症には、未だ根本的な予防法・治療法が確立されておらず、対症療法による治療が主である。また、門脈圧亢進症の病態の進行メカニズムについては未だ知見に乏しい。本研究では、門脈圧亢進症モデルマウスの門脈を用いて、病態時の門脈平滑筋機能変化の分子基盤の解明を目指した。胆汁性の肝硬変を起こす胆管結紮モデル(BDL)マウスを使用した。リアルタイムPCR法によりBDL群の門脈平滑筋では、Ca2+活性化Cl-チャネル分子であるTMEM16AのmRNA発現量がSham群と比較して減少していた。免疫細胞化学法によりTMEM16Aがタンパク質レベルでも減少していた。ホールセルパッチクランプ法においてCa2+活性化Cl-チャネルの電流密度がBDL群から単離した門脈平滑筋細胞において有意に減少していた。これらの結果より、BDL群門脈ではTMEM16Aの機能発現が低下している可能性が示唆された。さらに収縮実験において、両群ともに自発収縮が観察されたが、BDL群ではSham群と比較し収縮力減少と、収縮頻度増加の傾向が明らかとなった。以上より、門脈圧亢進症では門脈平滑筋細胞におけるTMEM16Aの発現および機能が低下した結果、自発収縮の発生機序に変化の生じた可能性が示唆された。平滑筋においてCa2+活性化Cl-チャネル活性が減弱すると細胞膜が過分極し、細胞の興奮性が低下することが知られているため、TMEM16Aの機能発現低下は門脈圧の上昇に対し抑制的に働いていると考えられる。本研究で得られた知見が門脈圧亢進症の病態進行の機序解明に役立つことが期待される。カルシウム活性化クロライドチャネルは、細胞内カルシウム濃度の上昇により活性化され、血管平滑筋細胞を脱分極すなわち収縮方向へ誘導する。我々は、カルシウム活性化クロライドチャネルの分子実体として同定されたTMEM16Aチャネルに注目し、血管平滑筋におけるTMEM16Aチャネルの機能解析およびその活性を修飾する因子の同定を行ってきた。本年度は、血管平滑筋に豊富に発現しているTMEM16Aチャネルに対する他のTMEM16ファミリー遺伝子の影響を解析した。ヒトおよびラットTMEM16A(細胞内カルシウムに対する感受性は高い、活性化および不活性化は遅い)を発現させたHEK293細胞にTMEM16B(細胞内カルシウムに対する感受性は低い、活性化および不活性化は早い、カルシウム活性化クロライドチャネル活性を有する)を一過性に遺伝子導入し、パッチクランプ法を用いて電気生理学的および薬理学的解析を行った。

その結果、共発現により、TMEM16Aチャネルの細胞内カルシウム感受性が低下し、活性化および不活性化が早くなった。その変化量は、TMEM16Bの導入量に比例した。次に、TMEM16AとTMEM16Bの相互作用を検出するため、全反射蛍光(TIRF)顕微鏡下での蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)解析および共焦点蛍光顕微鏡下での蛍光タンパク質再構成法(BiFC)アッセイを行った。その結果、TMEM16AはTMEM16Bと相互作用し、ヘテロ二量体として機能的カルシウム活性化クロライドチャネルを形成できることが示唆された。本研究成果は、TMEM16チャネルの生理機能を解明する上で、非常に重要な知見であると考えられる。カルシウム活性化クロライド(ClCa)チャネルとして同定されたTMEM16Aに注目し、血管平滑筋における生理的意義の解明を目指した。マウス門脈平滑筋細胞において、TMEM16Aが高発現し、二量体でClCaチャネルを形成していた。その活性はアクチン骨格との相互作用による影響を受けた。TMEM16AはTMEM16Bとヘテロ二量体でClCaチャネルを形成できることが示唆された。肝硬変由来の門脈圧亢進症モデルマウスにおいて、門脈平滑筋細胞でのTMEM16Aの発現および機能が低下していた。本研究成果は、血管におけるTMEM16Aチャネルの生理機能と病態での役割を解明する上で重要な知見であると考えられる。本年度は、門脈圧亢進症モデル動物として、胆管結紮(BDL)マウスを作製し、Ca2+活性化Cl-チャネル分子であるTMEM16Aの発現および機能低下を見いだすことができた。Ca2+活性化Cl-チャネルTMEM16Aが、病態機構に関与していることを示唆する結果である。薬理学門脈圧亢進症において、Ca2+活性化Cl-チャネルであるTMEM16Aの発現が低下したことに着目し、TMEM16A分子の発現調節機構の解明を目指す。また、肝硬変を伴わない門脈圧亢進症のモデルとして用いられている門脈部分結紮(PPVL)マウスを作製し、BDLマウスと比較解析する。血管平滑筋に発現するカルシウム活性化クロライドチャネルのスプライスバリアント体を複数同定できた。また、カルシウム活性化クロライドチャネルの活性を修飾する内因性因子としてアクチン骨格を同定できた。本年度は、学会旅費の大部分を大学経費等により負担し、科研費より執行しなかったため、相当分が残額となった。血管平滑筋に発現するカルシウム活性化クロライドチャネルの発現および活性を修飾する内因性もしくは外因性因子をさらに同定する。また、カルシウム活性化クロライドチャネルの血管生理機能を明らかにする。さらに、門脈圧亢進症などの病態におけるカルシウム活性化クロライドチャネルの機能変化などにも注目して研究を進める。次年度は、学会旅費も科研費より執行する予定である。また、次年度は、モデル動物作製のため、動物購入費用が当初の計画より大幅に増加する予定である。
医療従事者コンピテンシーモデル構築とe-learningシステムの展開

コンピテンシーとは「仕事で成果をあげるのに必要な行動」という意味で、仕事や何らかの役割に関して効果的で優れた成果を発揮する人(ハイパフォーマー)の行動特性や、性格特性のことをいう。それらを調査・分類しまとめたものをコンピテンシーモデルといい、人材教育や採用などに活用されている。平成16年6月15日、薬剤師法の一部改正法案が可決・成立し、薬剤師養成のための薬学教育年限を6年に延長することが決定した。薬学教育に長期の実務実習を加え、医療人としての倫理観、更なる高度の知識と技術を習得し、臨床にあった人材の養成を行うことを大きな目的としている。今後、6年制を向かえるに当たって,新教育システムとして本研究を応用することを目的とした。初年度の一昨年は、行動結果面接法を用いて薬剤師15名の行動事例を解析し、3階層のコアカテゴリ,カテゴリ,サブカテゴリに分類し、モデル構築した。昨年度は薬剤師がとった思考・行動をデータベース化し、実務で必要とされる、または過誤を未然に防ぐ行動要素・コンピテンシー要素の重要性のレベルを評価・階層化した。これらの目標達成行動力、問題解決力、創造能力、自己管理能力など各種モデル化した行動をデータベース化とWebベースの初期e-learningシステムに構築した。本システム利用を医療薬学専攻修士1年生に試行したところ、臨場感をどう与えるかという課題も浮かび上がった。最終年度である今年度は新人薬剤師や学生のためのカリキュラム(習得経過評価票、指導要項)などの考案と更なるシステムの最適化を計った。また、行動解析には多大の時間と労力を要するので、この点を解決する方向性の一つとしてテキストマイニング手法が利用できないかどうか検討した。基本的に実務実習の施設を持たない薬学部にあって、その可能性として本研究の医療従事者コンピテンシーモデル構築とe-learningシステムの展開が合致しているといえ、その応用性が期待されるが、人間性の涵養を図るための対面教育の重要性も再認識できた。ビジネス分野の一般モデルでは8つの群の75のコンピテンシーが考えられている.例えば,自己の成熟性,変化行動・意思決定,組織・チームワーク,戦略・思考,情報,リーダーなどの群である.自己の成熟生の中には冷静さ,誠実さ,几帳面さ,慎重さなど10のサブカテゴリが含まれている.こうした一般モデルが医療従事者のモデルにそのまま適応可能かどうか検証することを本研究の初年度の目的とした.方法として行動結果面接法を用いて,現場の薬剤師に対し面接,結果分析を行った.対照とした薬剤師は石川県薬剤師会,金沢大学附属病院薬剤部,石川県病院薬剤師会所属の薬局薬剤師10名,病院薬剤師5名である.得られたイベントは112,行動事例は628を抽出・解析し,初期カテゴリ126を得て,3階層の分類により,コアカテゴリ11,カテゴリ18,サブカテゴリ41に分類できた.イベントおよび行動事例の件数について薬局薬剤師と病院薬剤師の間に差は無かった.現在,薬剤師の経験年数,それぞれのイベントの対象を薬剤師,コメディカルスタッフ,患者・家族などに分けて解析中である(日本薬学会第124年会・大阪にて発表予定).一方,e-learningシステムを構築し,本学部3年生の医療薬学情報演習において用い,対面教育をサポートするcombined learning(予習・復習など補助教材の提示,演習結果のディスカッションなど)の有用性を確認した.今後,上記の薬剤師が過去,実際に行った思考,行動をデータベース化し,実務で必要とされるまたは過誤を減少させる行動要素・コンピテンシーを抽出し,各要素の重要度を評価する.評価基準,行動基準,組織診断,個人の行動の質(スキル)測定,スキルの向上,ノウハウやコツの共有化,目標達成行動力・問題解決力を創り出す能力,自己を管理する能力など各種モデル化された行動を用い,新人薬剤師や学生のためのカリキュラム(習得経過検査票,面接指導法など)およびe-learningシステムの展開を計り,その有効性を検証する.コンピテンシーとは「仕事で成果をあげるのに必要な行動」という意味で、仕事や何らかの役割に関して効果的で優れた成果を発揮する人(ハイパフォーマー)の行動特性や、性格特性のことをいう。それらを調査・分類しまとめたものをコンピテンシーモデルといい、それと各人の実際の行動を比較し正確な評価や不足している能力の見極めを行い、人材教育や採用などに活用されている。基本的に実務実習の施設を持たない薬学部にあって、今後、新教育システムが必要であると考える。その可能性として本研究の医療従事者コンピテンシーモデル構築とe-learningシステム展開が合致しているといえる。初年度の昨年は、行動結果面接法を用いて薬剤師15名の行動事例を解析し、3階層のコアカテゴリ,カテゴリ,サブカテゴリに分類し、モデル構築した。本年度は薬剤師がとった思考・行動をデータベース化し、実務で必要とされる、または過誤を未然に防ぐ行動要素・コンピテンシー要素の重要性のレベルを評価・階層化した。

今後、新人薬剤師や学生のためのカリキュラム(習得経過評価票、指導要項)などの考案と更なるシステムの最適化を計る予定である。また、行動解析にテキストマイニング手法が利用できないかどうか検討する。コンピテンシーとは「仕事で成果をあげるのに必要な行動」という意味で、仕事や何らかの役割に関して効果的で優れた成果を発揮する人(ハイパフォーマー)の行動特性や、性格特性のことをいう。それらを調査・分類しまとめたものをコンピテンシーモデルといい、人材教育や採用などに活用されている。平成16年6月15日、薬剤師法の一部改正法案が可決・成立し、薬剤師養成のための薬学教育年限を6年に延長することが決定した。薬学教育に長期の実務実習を加え、医療人としての倫理観、更なる高度の知識と技術を習得し、臨床にあった人材の養成を行うことを大きな目的としている。今後、6年制を向かえるに当たって,新教育システムとして本研究を応用することを目的とした。初年度の一昨年は、行動結果面接法を用いて薬剤師15名の行動事例を解析し、3階層のコアカテゴリ,カテゴリ,サブカテゴリに分類し、モデル構築した。昨年度は薬剤師がとった思考・行動をデータベース化し、実務で必要とされる、または過誤を未然に防ぐ行動要素・コンピテンシー要素の重要性のレベルを評価・階層化した。これらの目標達成行動力、問題解決力、創造能力、自己管理能力など各種モデル化した行動をデータベース化とWebベースの初期e-learningシステムに構築した。本システム利用を医療薬学専攻修士1年生に試行したところ、臨場感をどう与えるかという課題も浮かび上がった。最終年度である今年度は新人薬剤師や学生のためのカリキュラム(習得経過評価票、指導要項)などの考案と更なるシステムの最適化を計った。また、行動解析には多大の時間と労力を要するので、この点を解決する方向性の一つとしてテキストマイニング手法が利用できないかどうか検討した。基本的に実務実習の施設を持たない薬学部にあって、その可能性として本研究の医療従事者コンピテンシーモデル構築とe-learningシステムの展開が合致しているといえ、その応用性が期待されるが、人間性の涵養を図るための対面教育の重要性も再認識できた。
血管伸長の統合的な制御機構の解明

血管形成は、血管内皮細胞の増殖、分化、形態変化を経て機能的な血管となる。しかし、増殖、分化に比べて、血管内皮細胞の初期の形態変化(伸長・紐状構造)の調節機構についての知見は少ない。そこで、薬剤スクリーニングを用いて血管内皮細胞の伸張機能に関与するシグナルを検討することで、血管形成の調節メカニズムの解明を試みた。血管内皮細胞特異的に蛍光タンパク質EGFPを、血管壁細胞特異的にDsRed.T4を発現するマウスES細胞を構築し、このES細胞から分化した血管前駆細胞による血管形成モデルを用いて、薬剤スクリーニングを行った。その結果、PI3K-Akt阻害剤(LY294002, Akt inhibitor)、mTORC1阻害剤(rapamycin, everolimus)の4種の薬剤によって、通常血管伸張が起こらない低濃度VEGF環境での血管伸張が誘導されることが明らかになった。これら4種の薬剤は血管壁細胞には影響しないことから、伸張効果は血管内皮細胞に特異的であると考えられる。血管形成に重要な役割を持つ転写因子Foxo1を欠損した血管内皮細胞は、VEGF刺激による血管様伸張機能を消失している。このFoxo1欠損細胞を用いた解析によって、PI3K-Akt阻害剤による血管伸張の誘導にはFoxo1が必須であること、また、低濃度VEGF環境において、mTORC1阻害剤はmTORC2の活性化を介してFoxo1依存的に血管伸張を促進することを明らかにした。一方、高濃度VEGF環境では、mTORC1阻害剤はFoxo1非依存的に血管伸張を誘導された。これらの結果から、血管伸張の調節には、VEGF濃度の違いによってFoxo1依存的/非依存的な2つの経路が関与することが示唆された。血管内皮細胞の伸長・紐状構造の形成は、機能的な血管の構築につながる重要な過程であるが、その調節メカニズムについての知見は少ない。申請者は、細胞骨格の調節因子であるPPP1R14と、平滑筋細胞マーカーとして知られるSM22αが、血管内皮細胞の伸長促進にも関与することを見いだしている。この二つの因子の転写調節配列には、配列類似性が非常に高い領域が存在することから、これらの配列を解析することで、血管伸長を誘導する複数の因子を統合的に調節できる転写因子群と、その応答配列「伸長モチーフ」を同定できるのではないかと考えた。近年、再生医療による組織の回復が応用されつつあるが、組織の再生には、その内部に酸素や栄養を供給する血管網が必要不可欠である。血管誘導のために、血管内皮細胞増殖因子(VEGF)等の増殖因子を用いる方法が試みられているが、増殖因子の機能は、増殖・分化から形態調節まで多岐にわたるため、未成熟な血管の過形成が問題となっている(Chung et al., Cells, vol. 1, p1246-1260, 2012)。そこで申請者は、血管伸張を特異的に制御するメカニズムを解明することで、成熟した機能的な血管の誘導による組織再生に貢献できると考えた。本研究では、マウスES細胞の試験管内分化系と株化細胞を用いた解析によって、血管伸長の統合的な制御機構を明らかにする。本年度は、ES細胞を用いた血管伸張の調節機構の解析を目的とした解析を行った。◆【血管内皮細胞におけるPPP1R14関連因子、SM22αの発現の検討】ES細胞由来の血管内皮細胞、血管内皮細胞株、マウス網膜の血管内皮細胞、また胎生11.5日目のマウス胚の免疫抗体染色を行い、PPP1R14によって調節されるリン酸化ミオシン軽鎖とSM22αの血管内皮細胞における発現を解析した。◆【血管伸張に特異的な転写因子応答配列の検討】転写因子結合配列予測プログラムによって、PPP1R14エンハンサーとSM22αプロモーターの配列に共通して配列類似性が高い領域の存在が予測されたため、この配列を中心に、フラグメント化したSM22αプロモーターについて、血管内皮細胞株と血管壁細胞株を用いた、ルシフェラーゼレポーターアッセイによる転写活性測定を行った。その結果、血管内皮細胞と血管壁細胞におけるフラグメント化SM22αプロモーターの相対的な活性は、ほぼ同様であることが示された。◆【血管伸長を調節するメカニズムの検討】ES細胞由来血管内皮細胞を用いた薬剤スクリーニングの結果、LY294002、Akt Inhibitor VIII、everolimus、Rapamycinの4種を血管伸長を促進する阻害剤として同定し、これら阻害剤の機能から、血管伸張を抑制する2つの経路を示した。一つは、PI3K/AktによってFoxo1を抑制することで伸長を阻害する経路であり、もう一つは、mTORC1によってmTORC2を抑制することによって伸長を阻害する経路である。また、これら2つの経路はいずれも、Rho/ROCKを介したアクチン細胞骨格のリモデリングを制御していることを示した(in press)。しかし、増殖、分化のメカニズムに比べて、血管内皮細胞の初期の形態変化(伸長・紐状構造)についての調節機構についての知見は少ない。マウスES細胞は、OP9フィーダー細胞と共培養することで血管前駆細胞、さらに血管内皮細胞に分化誘導することが可能である。

分化誘導された血管内皮細胞は血管内皮細胞増殖因子(VEGF)の刺激により、OP9細胞上で血管様の細胞伸張を示し、また1型コラーゲンを用いた三次元培養においても血管様のチューブ構造を形成する。申請者は、このES細胞分化誘導系を用いた実験系において、細胞骨格の調節に関与する因子PPP1R14と、平滑筋細胞マーカーとして知られるSM22αが、それぞれ血管内皮細胞の伸長に関与することを見いだしている。そこで、これらの血管内皮細胞での役割・機能の詳細を解析することで、血管伸長のメカニズムを明らかにできるのではないかと考えた。近年、再生医療による組織の回復が応用されつつあるが、組織の再生には、その内部に酸素や栄養を供給する血管網が必要不可欠である。血管誘導のために、VEGF等の増殖因子を用いる方法が試みられているが、増殖因子の機能は、増殖・分化から形態調節まで多岐にわたるため、未成熟な血管の過形成が問題となっている(Chung et al., Cells, vol. 1, p1246-1260, 2012)。そこで申請者は、血管伸張を特異的に制御するメカニズムを解明することで、成熟した機能的な血管の誘導による組織再生に貢献できると考えた。本研究では、マウスES細胞の試験管内分化系と株化細胞を用いた解析によって、血管伸長の調節機構を明らかにする。本年度は、血管内皮細胞におけるSM22αの解析を中心に解析を行った。◆【血管内皮細胞株と血管壁細胞株を用いたSM22αプロモーター活性の解析】アクチン結合タンパク質SM22αは、血管平滑筋を含む筋系組織に豊富に存在することから、平滑筋細胞マーカーとして広く利用されている。株化血管内皮細胞(bEnd.3)は、細胞外マトリックス等を使用しない通常の増殖培地による培養条件においても伸張形態を示す細胞である。そこで、血管内皮細胞におけるSM22αの転写活性の有無を明らかにするため、bEnd.3と株化血管壁細胞(MOVAS)を用いて、SM22αプロモーターの活性をルシフェラーゼ活性測定によって比較した。MOVASは、非常に高いSM22αプロモーターの活性を示した。一方、bEnd.3においてもSM22αプロモーターの活性の有意な増加が検出された。◆【血管内皮細胞株と血管壁細胞株を用いたSM22α発現の解析】血管内皮増殖因子(VEGF)は強力な血管形成促進因子である。bEnd.3は外因性VEGFの投与にかかわらず、伸張形態を示し、またSM22のmRNA発現が見られる。bEnd.3はVEGFとその受容体VEGFRの両方を発現することが報告されており、VEGF-VEGFRのオートクリンループ作用の影響が関与していると考えられる。蛍光免疫染色によって、bEnd.3とMOVASにおけるSM22αタンパク質の局在を解析した結果、血管内皮細胞と血管癖細胞のどちらにおいても、SM22αタンパク質のアクチン繊維との共局在が観察された。◆【血管内皮細胞株と血管壁細胞株を用いたサイトカインのスクリーニング】血管内皮細胞株(UV2)と血管壁細胞株(MOVAS)を用いて、無血清培養での成長因子・サイトカインのスクリーニングを行った。その結果、どちらか一方の細胞種にのみ細胞形態に影響を与える因子として、bFGFが得られた。bFGFの投与は、MOVASの細胞形態を敷石状から紡錘形に変化させる一方、UV2の敷石状形態には影響しなかった。
配管モデルエンジニアリングに関するCADシステムの開発

複雑高度化した配管・機器配置設計に、モデルエンジニアリング手法が導入されているが、配管モデルの3次元デ-タ化が人手によっているため、CADとのリンクが行われていない。本研究は、モデルエンジニアリングとCADを連結し、両者の利点を併せて効率よい設計システムを、開発するものである。当初、配管モデルをスライドフイルムに撮影し、透明板デジタイザに投影してモデルの各位置を計測し、コンピュ-タで座標変換して3次元デ-タを得ること、着色した配管をカラ-フィルタを用いて系統織別を行う方法で、CADとの連結を図る予定であった。初年度の研究途中で配管モデルの撮影に際して、直接正投影図に相当する映像が得られるアイデ複雑高度化した配管・機器配置設計に、モデルエンジニアリング手法が導入されているが、配管モデルの3次元デ-タ化が人手によっているため、CADとのリンクが行われていない。初年度の研究途中で配管モデルの撮影に際して、直接正投影図に相当する映像が得られるアイデアを得た。正投影撮影法と名付けた新手法は、大口径凸レンズにより平行光線を作りモデルを撮影するもので、確認実験で正投影の映像が得られ、この手法により特別な座標交換を必要とせず、正投影映像から配管モデル各位置の3次元デ-タが得られた。平行光線の領域に配管モデルを置いて撮影する必要性から、レンズの口径は大きいことが望ましく、このため直径700mmの凸レンズを、透明アクリル板を素材に設計し製作した。モデルの正面,平面,側面を撮影するための回転台、大口径凸レンズの保持台,カメラの固定台により正投影撮影装置を構成し、本格的な研究を進めた。透明デジタイザを介したコンピュ-タへのデ-タ入力、カラ-フィルタ-による配管系統の識別も成功し、CADによる系統別の配管図および全体配管図の作成も、ほぼ満足すべきものであった。なお、完全な実用化については、一部分配管の交差部分の前後関係修正、イメ-ジラインの除去に関して、ソフト的な問題が残っているが、解決可能な時間的問題であり、本研究の目的はほとんど達成できたものといえる。複雑な配管の高度化設計について、現在モデルエンジニアリング手法が進展している。本研究では、これをさらに発展させて配管立体モデルから自動的に三面図を生成するCADシステムの開発を行なう。研究計画通りに、モデル作成用の加工機器具を購入した後、圧力容器ポンプ等の機器配置と一系統の配管について、立体モデルの作成を完了した。そのモデルをもとにスライド写真によりモデルの平面・正面・側面を映像化し、クリスタイザの背面にプロジェクタで投影して、配管位置の三次元デ-タの入力を行なった。クリスタイザの購入により、背面からの透過光でディジタイズ可能となった。

この三次元デ-タは、写真映像が透視投影であるため、正投影による三面図を得るにはデ-タの補正が必要である。この補正をコンピュ-タで行なう予定であったが、新しいアイデアを得て、モデルを映像化する際に直接三面図に相当する映像を得る光学的手法の開発に取り組み、試行的な実験を行なった。その結果、デ-タの面倒な補正を必要とせずに立体モデル・図面変換の非常に効率的な手法を確立できることが分かった。この方法を用いて、コンピュ-タで一系統の配管モデルの図面変換に成功した。この成果をもとに、研究計画に従って多系統の配管モデルを作成し、色別フィルタによる系統別の配管図生成、配管交差部分の識別と連結補正の研究に着手している。研究の進行はほぼ予定通りでありモデルエンジニアリングと関連付けたCADシステムの確立に努力中である。モデルエンジニアリング手法に於て,最も問題となっているのは立体配管モデルから,CAD活用のための3次元デ-タを得る問題である.本研究は,モデル各位置の計測を人手によるのではなく,モデルを映像化してその3次元デ-タを得ることを試み,前年度の研究成果によって,全く新しい計測手法を開発し,その基礎的な確認実験を行った.この手法は,凸レンズにより撮影光線を平行光線に変換して,配管モデルの撮影を行うもので,モデルから直接正投影図形の映像が得られる.この図形をもとに,ディジタイザを用いてモデルの各位置の3次元デ-タが,特別な変換を必要とせずに,コンピュ-タに入力できる.この新手法を正投影撮影法と,名付けることとした.配管モデルの撮影に際しては,平行光線の領域を広くすることが望ましいため,確認実験で用いたレンズより大きい直径700mmの大口径凸レンズを,透明アクリル板を素材に設計製作した.また本格的研究のため,配管モデルの正面,平面,側面の正投影図を得るためのモデル回転台,凸レンズ設置台などを製作し,正投影撮影装置を構成した.前年度の1系統配管を高度化し,着色した多系統の配管モデルを製作して,正投影撮影装置を用いてモデルを映像化した.この3面図から透明板ディジタイザにより,3次元デ-タ計測とコンピュ-タへの入力を行った.この際,カラ-フイルタを介して各系統の配管識別を行い,各系統図別の配管図および全体配管図を,CADによって作成した.イメ-ジラインの除去と,全体図における配管交差部分の修正に,一部分ソフト的問題が残っているが,配管モデルの3次元デ-タ計測・入力,CADとのリンクは成功し,本研究の目的はほとんど達成できた.
補体因子ＭＡＳＰ－１／３を標的とする新規製剤の開発とＳＬＥモデル動物への治療効果

本研究では、SLEなど補体レクチン経路と第二経路が病態に関与する疾患に対する新規治療法の開発を目的に、2つのリコンビナント蛋白(MAp44-Ig, MAp44-fH)を開発した。その結果、マンナンコートプレートを用いたin vitroの実験ではMAp44-fHが最も強くレクチン経路と第二経路の活性化を抑制した。MAp44-fHをマウス腹腔内に投与し、48時間後までに採血した血清を用いたin vivoの実験でも、レクチン経路と第二経路の活性化の抑制効果が認められた。今後は同薬をSLEモデルマウスに投与しその治療効果を判定する。1MASP-1/3遺伝子ノックアウトのC57BL/6マウスにリコンビナントMASP-1/3を免疫し、モノクローナル抗体の作製を試みたが、MASP-1/3に対する抗体は産生されなかった。その理由として、MASP-1/3遺伝子のノックアウト部位をスキップして、MASP-1/3遺伝子ノックアウトマウスでもMASP-1/3の微量タンパクが産生され、これが免疫寛容を誘導してしまったためと考えられた。2MASP-1/3を阻害する融合タンパクMAp44-Igの開発C57BL/6マウスの心臓、肝臓からtotal RNAを抽出し、RT-PCRでMAp44のDNA配列を増幅、大腸菌でクローニングしvector pFUSE-IgG1-Fc1にMAp44遺伝子を組み込んでCHO細胞にTransfectionした。MAp44-Ig融合タンパクの産生を確認し、4M NaCl条件下でPritein Aによる免疫沈降法にて融合タンパクの回収を行った。融合タンパクの機能解析として、mannancoat plateでのC3 deposition、C4 depositionが阻害されるか検証したところ、いずれも融合タンパクを加えるとdepositionが増加してしまい、逆に補体が活性化されてしまう結果となった。3MASP-1/3を阻害する融合タンパクMAp44-PAの開発MAp44-Igで補体が活性化された結果であったため、IgG1の影響の可能性を考え別のtagを有するvectorで再度MAp44の融合タンパクを作成した。pFUSE-IgG1-Fc1に組み込んだMAp44のDNA配列を制限酵素で切り出し、vector pCAG-Bsd PA tag-Cへ組み込んだ。PA tagに対するaffinity chromatographyで融合タンパクを回収した。MAp44-PA融合タンパクはmannancoat plateでのC3deposition阻害作用が確認された。現在、融合タンパクを量産しさらに解析中である。昨年度はMASP-1/3を阻害する2つのリコンビナント蛋白MAp44-IgとMAp44-PAを開発した。これらをマウス血清に添加し、マンナンコートブレートを用いてC4もしくはC3の沈着を測定し、レクチン経路と第二経路の抑制効果を判定した。リコンビナント蛋白を加えない血清と比較して、C4もしくはC3の沈着レベルの抑制効果が認められたが十分とはいえず、SLEモデルマウスの治療効果も十分に得られないことが予想された。そこで、本年度はレクチン経路の活性化を競合阻害するMAp44に、第二経路の補体活性化因子であるC3bBbやC3bを解離失活することで第二経路の活性化を抑制するH因子(fH)を結合させた融合蛋白MAp44-fHを作製し、in vitroとin vivoでの有効性を評価した。マウス肝細胞からMAp44とH因子(fH)のcDNAをRT-PCRで作成し、リンカー(GGGGS)4で結合し、PA-Tag付加の発現ベクターに組み込んだ。CHO細胞にトランスフェクトしてMAp44-fH-PAを産生させ、培養上清から融合蛋白を抗PA抗体カラムで精製。レクチン経路と第二経路の抑制能をin vitroとin vivoで評価した。その結果、マンナンコートプレートアッセイを用いたレクチン経路と第二経路の活性化抑制の評価では、MAp44単独と比較しMAp44-fHを添加した血清で有意なC3の沈着の抑制効果が確認され、in vitroでのMAp44-fHの有効性が確認された。MAp44-fHをマウス腹腔内に投与し、48時間まで経時的に採取した血清を用いたin vivoの評価では、腹腔内投与1時間に血清濃度がピークに達し、48時間までにピーク時の10%までに減少したが、マンナンコートプレートアッセイでは、48時間後の血清でも投与1時間後の血清と同等に、レクチン経路と第二経路の抑制効果が保たれていた。以上の結果から、MAp44-fHはin vitroとin vivoで、レクチン経路と第二経路の活性化を抑制する能力を有することが確認された。今後は、SLEモデルマウスに投与し、治療効果を判定する予定である。

当初予定した、抗MASP-1/3モノクローナル抗体と、MASP-1/3を阻害する融合タンパクMAp44-Igの開発がうまくいかなかったため、新たにPA-tagを付加したMAp44-PAを開発し、vitroの検査でのパイロットスタディーでは、MAp44-PAによるレクチン経路の阻害作用が確認されたため。補体学当初予定した、抗MASP-1/3モノクローナル抗体と、MASP-1/3を阻害する融合タンパクMAp44-Igの開発がうまくいかなかったため、新たにPA-tagを付加したMAp44-PAを開発した。パイロットスタディーでは、in vitroの検査でMAp44-PAによるレクチン経路の阻害作用が確認された。第二経路の阻害作用の有無の検討を行うため、現在、MAp44-PAタンパクを量産しさらに解析中を進める予定である。
ゴシック壁面線条化の始動段階においてリブヴォールトが果たした主導的役割の立証

高い線条性は、ゴシック建築の壁面をロマネスク建築の壁面から区別する本質的な特徴であることから、壁面がこの特質を獲得する過程(線条化の過程)はゴシック建築の形成の核心に深く関わると考えられる。本研究は、(1)この過程を始動させたのはリブヴォールトの導入であり、(2)この過程は、アングロ・ノルマンとは無関係に、イール・ド・フランス地方だけでおこったことを、壁面を構成する主要な線条要素(ヴォールト・シャフト)のプロファイルの比較から明らかにした。ゴシック建築をロマネスク建築から区別する最も重要な特質が壁面構成要素の線条性の強さにあることから、この特質の獲得過程がゴシック建築形成の主要な過程であると考えられる。本研究の目的は、(1)この過程を始動させたのはリブヴォールトの導入であり、(2)この過程はイール・ド・フランス地方だけでおこった、とする筆者の仮説を遺構調査によって実証することにある。この過程は、具体的には線条要素(シャフト)の丸さが明瞭になり、シャフトの壁面からの独立性が高くなる過程である。本研究では、11世紀末12世紀初期のイール・ド・フランスとノルマンディーの教会堂の、リブヴォールトを架けた教会堂とそうでない教会堂のシャフトの断面形状を比較することにより、仮説を実証する。平成26年度は、ノルマンディーの13教会堂について、9月27日10月6日の実質7日間、現地調査を実施した。これらの教会堂の支柱の形状を、目視によって観察記録するとともに実測し(各教会堂につき26本程度)、さらに写真撮影をおこなった。ノルマンディーの教会堂支柱の入隅シャフトは、リブヴォールト架構以前には、支柱の入隅に半分近くが貫入するものと、予測していた。しかし、多くの教会堂で、入隅に貫入するシャフトとともに、入隅に接するシャフトが見られたことは、予想を裏切る新しい知見であった。また、リブヴォールト架構以前にも、支柱の入隅に接する若干のシャフトが存在することも、新たな知見であった。リブヴォールトの発生と入隅に接するシャフトの関係は、ゴシック建築の線条性の発達にとって重要な検証項目であることから、この現象の意味を解明する必要があるとの認識を得た。国内における作業としては、現地で得た数値データ、目視記録、および写真から支柱断面図の作成をおこない、シャフトの断面形状を視覚化した。さらに関連写真記録のデジタル変換を作業おこなった。この過程は、シャフトの壁面からの独立性が高くなる過程である。本研究では、11世紀末12世紀初期のイール・ド・フランスとアングロ・ノルマン(ノルマンディーとイギリス)の教会堂の、リブヴォールトを架けた教会堂とそうでない教会堂のシャフトの断面形状を比較することにより、仮説を実証する。昨年度の実績より、身廊を除く教会堂の従属的部分では、入隅に貫入するシャフトとともに、入隅に接するシャフトが多くの教会堂に見られることが判明した。これは本仮説に矛盾する事象である。本仮説は、教会堂の最も本質的な部分である身廊部分に関する仮説であるため、本年度以降は、調査を身廊部に限定して、仮説の可否を検証することとした。平成27年度は、イール・ド・フランスの10教会堂(リブヴォールトを架けた教会堂)、イギリス5教会堂(リブヴォールトを架けない教会堂)について、9月29日10月4日の実質11日間、現地調査を実施した。これらの教会堂の身廊部の支柱断面形状を、目視によって観察記録するとともに実測し(各教会堂につき26本程度)、さらに写真撮影をおこなった。さらにこれまでの成果を一覧図表にまとめ、イール・ド・フランスとアングロ・ノルマンの支柱断面形状の比較を行い、仮説を論証する論文としてまとめる作業にとりかかった。計画ではイール・ド・フランス6教会堂、イギリス5教会堂の調査を行う予定であった。昨年度未実施の遺構を含めて、イール・ド・フランス10教会堂、イギリス5教会堂の調査を実施した。また国内作業も、地方ごとの支柱断面形状の比較のための一覧図表の作成を行うなど比較的順調に進んだ。ただし、P・クロスリー教授との打ち合わせは、直接面談できず、メールでの意見交換に終わった。またD・サンドロン教授との意見交換は未実施となった。ゴシック建築の最も重要な特質は身廊壁面の線条性にあることから、この特質の獲得過程がゴシック建築形成の主要な過程をなすと考えられる。本研究の目的は、(1)この過程を始動させたのはリブヴォールトの導入であること、(2)この過程は、ゴシック誕生地のイール・ド・フランス地方だけで起こったことを、立証することである。線条化の傾向を最もよく表しているのは、身廊壁面を構成するシャフトであることから、筆者はこれまで、それらのシャフトを統合した複合柱の断面形状を計測してきた。