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近世指図の作図技法・描法の展開に関する研究Ⅳ―建地割の作製目的と編年指標の検討―

本研究は、江戸時代の建築図面のうち、立面および断面を描く建地割について作図技法・描法を検討し、また江戸時代の建地割の特徴を鮮明にするために中世以前の建地割も調査対象に加えて分析し、様々な技法の使用があったことを明らかにするとともに、それらの時代的変遷として、とくに平面図(指図)を附属するものはとしないもの、寸法線を記入しないものとするもの、朱線・朱文字の使用しないものとするものを指標とすることができ、これらは大凡、18世紀前期を境に前者から後者に移行することが明らかになった。これにともない図の名称も、18世紀前期を境に「地割」などから「建地割」になった。本年度は、京都府立総合資料館所蔵中井家文書中の建地割、および出雲大社所蔵建地割の2つの調査を実施し、他に東京都立中央図書館特別文庫の江戸城関係建地割の予備調査を実施した。京都府立総合資料館所蔵中井家文書中の慶長度内内女御御殿御休息之間建地割は、彩色を用いず、墨だけで描いた梁間方向の立面と断面を同時に描く図である。楮紙を用いており、図中に寸法の記入や仕様の記入はなく、縮尺の書き込みもないが、実測値から縮尺は1/10と考えられ、作図時につけられたヘラ筋、針穴が認められた。棟を軸にして屋根は左右対称であるが、ヘラ筋や針穴は左右どちらかに偏ってみられ、屋弛みは左側で、茅負・木負は右側で検討していることがわかり、勾配がつき曲線を描く屋根を描く際には、作図による位置決めを片側で行い、反対側にはそれを写したと推定された。また、図の右上には平面図を描いている。縮尺は明記していないが実測値から1/50であった。江戸時代の畿内近江六か国の建築活動を支配した中井家の建地割であるから、この時代の一つの基準となる建地割の作図技法・描法が明らかになった訳で、その意義は大きい。なお、建地割ではないが、参考にするため承応度内裏指図の調査も実施した。一方、出雲大社所蔵の建地割は、51枚あるが、そのうち17枚の調査を行った。いずれも雁皮紙を用いる。縮尺は1/20を基本とし、小型の建物は1/10で描く。墨線を中心に用いた図で、各所にヘラ筋、針穴、墨点が認められた。同内容の図が2枚ずつあるが、作図痕に違いはなく、ともに同様の作図過程を経て作製されたものと推定された。また、右上に平面を描く点は京都府立総合資料館の建地割と共通する。このほか、次年度のための予備調査として、東京都立中央図書館特別文庫の江戸所関係建地割を概観し、点数の多い建地割の中から詳細調査を行うべき建地割を抽出した。円覚寺仏殿造営図(鎌倉国宝館保管)のうち、建地割はGLを墨壺で描く。貫や台輪、桁などの四角い断面には交差する対角線を引く(×印)、画面に垂直な方向の肘木には円弧状の線を引き下部が円弧状を成す肘木であることを明示する、画面に垂直な尾垂木はやや角度を振って側面を描いて明示する等の表現の工夫がある。料紙寸法や紙厚、紙質とも平面を描く指図と同一の料紙を用いる。多くのヘラ線が残され、中世の建地割の作図技法・描法を伝える貴重なデータが収集できたといえる。自性寺所蔵建地割には、ヘラ線や針穴などの作図痕の多い図と作図痕のほとんどない図があり、後者は紙厚が0.080,09mmと薄く、写しである可能性が強い。作図した図の中には、左右対称の場合、中央で二つ折りにして右側の絵様を左側にヘラ押しして写しとる方法を採った図が見出された。また、幅を押さえたヘラ線(凹線)がある垂木の下部、軸部の位置に垂木幅の凸のヘラ線が認められる図があり、支割を示す作図痕である可能性がある。軒丸瓦の中心にはわずかな凹みが見出される図が多く、貫通する針穴でない点が注目される。独自の技法が見られる成果であった。大瀧神社絵図(建地割)は、正面および側面立面図である。料紙はともに557mm×427mm程度、紙質も同一である。現存する神社を造営する際の設計段階の図と考えられる。直線は墨差し、曲線は筆を用いる。作図痕が多く、屋根では垂木をヘラ線で描いた後に曲線の破風や屋根面を墨で描くが、作図痕の意味についてはなお検討を要する。

画面に垂直な尾垂木や脇障子は描かないが、木鼻の獅子は正面でも描く。拝殿の横羽目板や桟唐戸には木目も表現する。正面図の方が汚れや痛みが多く、図の周囲には側面図にはない一定の間隔の針穴があり、造営費等を集める際に竣工予想図として衆目を集める場に展示されたことも想像され、図の作製目的の点でより詳細な検討が必要である。今年度は、1)東京都立中央図書館所蔵東京誌料中の万延度江戸城関係図の調査および2)鎌倉国宝館の河内家文書(鎌倉市指定有形文化財)の指図・建地割関係の調査を実施した。また、3)宮内庁書陵部内匠寮本の建地割を『中井家文書の研究一十』中央公論美術出版1976年1985年を用いて慶長度安政度までの御所関係建地割を分析し、都立中央図書館の江戸城関係図と比較検討した。1)については、黒書院の建地割3点、御座之間の建地割2点、大広間および御座之間の矩計各1点を調査した。裏打ちのため、針穴や小刀痕、墨点等が観察しにくくなっているが、建地割の本紙の屋根部に極めて薄い貼紙をし、透写して屋根部を描く技法のみられる図があり、貼紙をした図は完成後に寸法や仕様が記入されたこと、寸法線や部材の背後にある材の表現に朱線を用い、一部に文字の朱書きもあること、縮尺は1/20が中心であること、建地割が建物全体を描くのに対し、矩計は、柱を中心に、柱間の建具や部材などは省略し、柱に取りつく部材の高さと軒周りを示す図で、縮尺1/10であった。2)については、浪川幹夫「河内家と英勝寺」(「鎌倉」99号鎌倉文化研究会2004年12月、pp.31ー59)における英勝寺関連の絵図の報告があるがものの、その他の図については未調査に近かったので、今後の本調査のための指図・建地割の抽出と写真撮影を実施した。3)については、全体に寸法や仕様の書き込みは少ないが、江戸末期になると記入が増えること、縮尺は1/10が多く、1/20や1/30もあること、平面図を伴う図がみられるが宝永度以降はないこと、寛文度に「地割」、延宝度では「建大地割」、正徳度ではじめて「建地割」が見られ、享保度にも「建地割図」もみられたことを明らかにした。幕末になると書き込みが詳細になるのは万延度江戸城図と同様の傾向であることを明らかにした。26年度が最終年度であるため、記入しない。日本建築史26年度が最終年度であるため、記入しない。平成24年度および平成25年度に予定していた調査先を一部入れ替えることはあったが、研究期間内の予定していた調査を着実に実施し、かつ予定していなかった調査をも実施することができたが、最終的な目的である編年指標の十分な検討にまでは到達していないため。平成25年度までに予定していた調査をほぼ着実に実施し、かつ予定していなかった調査をも実施することができたが、最終的な目的である編年指標の十分な検討にまでは、まだなお到達していないため。調査を予定している建地割の調査を確実に実施してゆくことが基本で、江戸時代中期以降の建地割や江戸幕府作事方、とくに江戸方で作製した建地割の調査が重要であり、それらの調査を実施した上で、編年指標の分析を早めに進めたい。改めて調査を予定している江戸時代中期以降の建地割や江戸幕府作事方の江戸方が作製した建地割の調査を実施してデータを増やすとともに、調査結果の分析を急ぎ、研究分担者の分析結果を持ち寄ってのミーティングの機会を増やして編年指標の確立に努めたい。調査先の都合もあって24年度と25年度の調査先を入れ替えたために今年度の使用額が予定を下回ったので、次年度の使用計画は、次年度の調査を実施したときに両年度を合わせた使用額が予定通りとなる見込みである。したがって、次年度の調査を確実に実施することが重要になる。平成25年度に調査を実施した都立中央図書館特別文庫室所蔵
中世喜界島人の系統と生活誌および埋葬に関する骨考古学的研究

喜界島南部の手久津久遺跡群中増遺跡から出土した人骨の整理・復元作業を行い、形態学的分析を行った。喜界島中世人骨の比較資料を得るために、2016年に行った奄美大島宇検村の屋鈍遺跡の発掘調査を、再度、行った。この屋鈍遺跡の第2次発掘調査では新たに1基の中世墓(5号墓)が検出された。単体埋葬で,伏臥屈位の姿勢で埋葬され、副葬品は遺存していなかった。今回新たに出土した5号墓からは熟年男性人骨が出土した。中世墓の墓域の広がりを確認するために、第2次調査で新たに4つのトレンチを設定した。4つのトレンチの内、2トレンチ拡張部に5号墓が検出できただけで、他の3つのトレンチから墓を発見することはできなかった。墓域に関しては,広く広がることは考えにくい。また、奄美大島南部の中世から近世墓の埋葬人骨の形質等の変化を探る目的で、宇検村平田墓地の近世末から近代にかけての異なる形の墓(積石墓など)の調査も行った。平田墓地内には在地の積石墓や薩摩藩政期の本土同様の石塔形式の墓がある。これまで、近世の墓の中にどのように何体埋葬されているのかをはじめ、納められている人骨が洗骨改葬されたものか、1次葬のままなのかもわかっていなかった。平田墓地積石墓の出土甕中の人骨取り上げと形態分析を行い、5つの甕の中と甕外から人骨の出土を確認した。甕に納められた個体数は単体のものと、複数体のものがあった。いずれも頭蓋が最上部に安置されるという共通点が認められ、改葬の際の基本様式であることが確認できた。喜界島手久津久遺跡群から出土した人骨の整理・復元が順調に進展している。また1次資料化が終了した人骨について、形態学的分析も行っている。屋鈍遺跡での第2次発掘調査、平田墓地での洗骨改葬墓の調査も実施し、中世喜界島人骨研究の比較資料もさらに増加させることができた。これらのことから、研究はおおむね順調に進展していると判断した。喜界島中世人骨の1次資料化を完成させ、形態分析の完了に向け、研究を進める。発掘調査を行った奄美大島の屋鈍遺跡の発掘調査報告書の刊行を目指していく。喜界島南部の手久津久遺跡群から出土した人骨の整理・復元を行った。同遺跡群中の、崩リ遺跡から出土した中世末の古人骨の研究資料化の作業を行った。また、1次資料化が終了した崩リ遺跡人骨について、形態学的調査と分析を開始した。骨形態、歯の形態、骨格のストレスマーカー、う蝕(虫歯)、歯周病、歯の咬耗状況、抜歯型式、他の生活習慣や作業習慣、加齢による骨形態の変形、骨格に残る病気や外傷痕、歯を作業に使用した痕跡に関するデータ収集を行った。次に、喜界島島内で埋葬環境の異なる古人骨との比較研究を行うために、砂丘埋葬址として知られる荒木小学校遺跡周辺の調査を行った。埋葬址の発見につながる情報は得られなかった。さらに、奄美諸島内での中世人骨の変異を探るために、奄美大島宇検村の屋鈍遺跡の発掘調査を行った。4基の中世墓を発掘し、4体の中世人骨を得た。内、2体は極めて保存状態が良い。4体とも、仰臥屈葬であった。4基の墓を作った砂層から青磁腕片が検出されており、4基の墓は13世紀前後につくられた可能性が考えられる。同時期の喜界島では、初埋葬後、遺骨を掘り出し、一部の骨を移動させたり、掘り出した骨を火葬し、再び埋める行為が行われている。今回の屋鈍遺跡で発見された墓は、いずれも埋葬遺体が白骨化した頃に墓を再び掘り返し、人骨を移動させた痕跡は認められなかった。これは、当時の屋鈍には、初埋葬後、白骨化した遺骨を掘り返す習俗はなかったことを意味するものなのか、今後も検討を続けたい。手久津久遺跡群から出土した人骨の整理・復元が順調に進展している。また、1次資料化が終了した人骨について、形態学的分析も始まっている。屋鈍遺跡で実施した発掘調査も成果を挙げ、2体の保存良好な人骨を含む4体の中世人骨が得られていることから、研究は順調に進展していると判断した。喜界島南部の手久津久遺跡群川尻遺跡から出土した人骨の整理・復元作業を行い、形態学的分析を行った。喜界島中世人骨の比較資料を得るために、2016年に行った奄美大島宇検村の屋鈍遺跡の発掘調査について、調査概報をまとめる作業も行った。発掘した屋鈍遺跡の4基はすべて中世の土壙墓と考えられる。1号墓人骨人骨は単体で、埋葬姿勢は南頭位の仰臥屈葬である。顔面は西を向く。踵骨や腓骨、大腿骨の出土位置から、膝を立てて埋葬された可能性が高い。人骨の保存状態はそれほどよくはない。性別は男性、年齢は熟年と判定される。副葬品は遺存していない。2号墓人骨は単体で、埋葬姿勢は西頭位の仰臥屈葬である。左右の膝関節は強く曲げている。

人骨の保存状態はそれほどよくはない。性別は男性、年齢は熟年と判定される。副葬品は遺存していない。3号墓人骨は単体で、埋葬姿勢は北頭位の仰臥屈葬である。左右の膝関節は強く曲げている。計測を行ったところ、頭蓋長幅示数は68.6と極めて長い。ピアソン式により右大腿骨最大長から身長を計算すると158.4cmと推定される。また、特記事項として、右頭頂骨に良性の骨腫が2か所に認められた。また、右前腕遠位部にコーレス骨折の治癒痕跡が確認できた。4号墓人骨は単体で、埋葬姿勢は東頭位の仰臥屈葬である。性別は女性、年齢は壮年後期と判定される。人骨の計測を行ったところ、頭蓋長幅示数は76.8と極めて長い。ピアソン式により右大腿骨最大長から身長を計算すると、146.2cmと推定される。また、喜界島島内で埋葬環境の異なる古人骨との比較研究を行うために、花良治地区の踏査を行い、埋葬址を発見した。喜界島手久津久遺跡群から出土した人骨の整理・復元が順調に進展している。また、1次資料化が終了した人骨について、形態学的分析も行っている。屋鈍遺跡で実施した発掘調査についての調査概報を作り、発掘で出土した4体の中世人骨の分析も行っていることから、研究は順調に進展していると判断した。喜界島南部の手久津久遺跡群中増遺跡から出土した人骨の整理・復元作業を行い、形態学的分析を行った。喜界島中世人骨の比較資料を得るために、2016年に行った奄美大島宇検村の屋鈍遺跡の発掘調査を、再度、行った。この屋鈍遺跡の第2次発掘調査では新たに1基の中世墓(5号墓)が検出された。単体埋葬で,伏臥屈位の姿勢で埋葬され、副葬品は遺存していなかった。今回新たに出土した5号墓からは熟年男性人骨が出土した。中世墓の墓域の広がりを確認するために、第2次調査で新たに4つのトレンチを設定した。4つのトレンチの内、2トレンチ拡張部に5号墓が検出できただけで、他の3つのトレンチから墓を発見することはできなかった。墓域に関しては,広く広がることは考えにくい。また、奄美大島南部の中世から近世墓の埋葬人骨の形質等の変化を探る目的で、宇検村平田墓地の近世末から近代にかけての異なる形の墓(積石墓など)の調査も行った。平田墓地内には在地の積石墓や薩摩藩政期の本土同様の石塔形式の墓がある。これまで、近世の墓の中にどのように何体埋葬されているのかをはじめ、納められている人骨が洗骨改葬されたものか、1次葬のままなのかもわかっていなかった。平田墓地積石墓の出土甕中の人骨取り上げと形態分析を行い、5つの甕の中と甕外から人骨の出土を確認した。甕に納められた個体数は単体のものと、複数体のものがあった。いずれも頭蓋が最上部に安置されるという共通点が認められ、改葬の際の基本様式であることが確認できた。また1次資料化が終了した人骨について、形態学的分析も行っている。屋鈍遺跡での第2次発掘調査、平田墓地での洗骨改葬墓の調査も実施し、中世喜界島人骨研究の比較資料もさらに増加させることができた。これらのことから、研究はおおむね順調に進展していると判断した。手久津久遺跡群から出土した人骨の整理・復元と、形態学的分析をさらに進める。比較資料を得るための発掘調査を喜界島と奄美大島で実施することを計画している。発掘調査により、新たな古人骨資料が出土した場合、それらも含め、中世喜界島人の系統と生活および埋葬について吟味したい。
虚血心臓の再灌流障害発症機序の解明とその予防法の開発

虚血再灌流心筋障害の原因として、活性酸素、エネルギー欠乏、Ca過剰負荷の3要因が、最近特に注目を集めている。本研究では、(1)活性酸素を産生するキサンチンオキシダーゼ系の競合的阻害剤であるアロプリノールの作用機序、(2)Ca過剰負荷と心筋障害の因果関係の2点を検討した。(1)アロプリノールの作用機序。摘出ラット心臓をランゲンドルフ法で灌流し、嫌気的灌流60分後、好気的灌流液で30分再灌流した。嫌気的灌流20分で張力発生は消失し、再酸素化によって回復しなかった。アロプリノール灌流投与群(100μM)では、張力発生は嫌気的灌流60分でわずかに残存し、30分再酸素化によって18%まで回復した。アロプリノール投与群の組織ATP量は高値に保たれ、灌流液一のCPK漏出は減少した。さらにNaーK ATP ase(脂質依存性の形質膜酵素)活性の減少やマロンアルデヒドの産生は、アロプリノール投与群では嫌気的灌流一再酸素化期を通じて予防されていた。アロプリノールによる心筋保護は嫌気的灌流期から見られ、しかも特にエネルギー代謝面での作用が重要と考えられたので、次に嫌気的灌流早期のエネルギー代謝に対する影響を見た。心筋表面NADH蛍光によれば、嫌気的灌流10分において、投与群と非投与群の間に差が無く、両者均等に好気的代謝阻害に陥っていることがわかったが、投与群では乳酸産生が多く、解糖系によるエネルギー産生が亢進していることがわかった。アロプリノールは活性酸素による障害の抑制のみならず嫌気的灌流時のエネルギー産生を維持することによって再灌流心筋障害を防止する可能性が考えられた。(2)フラ2を取込ませた幼児ラット心臓のCaパラドックス実験から、Caパラドックスにおける心筋障害の発現には、Ca過剰負荷のみならず心筋細胞の成熟に伴う膜の機能あるいは構造変化が必要条件となることが示唆された。アロプリノール(AL)は、虚血-再灌流心筋障害を防止することがよく知られているが、その作用機序は十分に解明されていない。これまでのところ、ALは、再灌流時に引起されるスーパーオキシド生成や、脂質過酸化の防止によって細胞障害を防止すると考えられているが、これだけでは防止効果の全てを説明できない。本研究では、低酸素-再酸素化心筋障害に対するALの防御機序について、エネルギー代謝の面から検討した。摘出ラット心臓をランゲンドルフ法で灌流し、嫌気的灌流液で60分間灌流後、好気的灌流液で30分間再灌流した。AL(100μM)は灌流液に添加し、灌流開始から終了まで連続投与した。AL非投与群の発生張力は、嫌気的灌流20分で消失し、再灌流によって回復しないが、投与群では、嫌気的灌流60分後でもわずかながら残存し、30分の再灌流によって18%まで回復した。AL投与群では非投与群に比し、嫌気的灌流時の静止張力の上昇が軽度であった。嫌気的灌流60分後のAL投与群の心筋組織ATPおよび総アデニンヌクレオチド量は、非投与群の5.3および2.1倍であった。また再酸素化30分後では、それぞれ1.9および1.5倍であった。

嫌気的灌流および再酸素化灌流時に灌流液中に漏出したAL投与群のCPK活性は、非投与群に比し低値であった。脂質依存性の形質膜標識酵素である【Na^+】,【K^+】-ATPase活性の減少は、AL投与群では、嫌気的灌流時および再酸素化灌流時ともに非投与群に比べ軽度であった。また、非投与群に比しAL投与群では、再酸素化灌流時のマロンデアルデヒド生成が抑制されていた。本研究結果から、ALは再酸素化によるフリーラジカル生成および脂質過酸化の抑制のみならず、嫌気的灌流時のエネルギー産生を維持することによっても、低酸素-再酸素化心筋障害を防止する可能性が示唆された。アロプリノール(AL)は,虚血-再灌流心筋障害を防止することが知られている.申請者は,昨年度の本研究実績報告において,虚血-再灌流心筋障害のALによる防止機序としてスーパーオキサイド産生阻止作用のみならず虚血時間におけるエネルギー代謝改善作用が重要であることを示した.本年度は,このエネルギー代謝改善作用の中でも,特に虚血ごく早期のエネルギー代謝及びエネルギー産生系に対するALの影響を検討した.摘出ラット心臓をランゲンドルフ法で灌流し,嫌気的灌流液で10分間灌流を行った.ミトコンドリアの酸化還元状態を反映すると考えられているNADH蛍光を心表面蛍光測光システムを用いて測定し,ミトコンドリアのATP産生能の指標とした. AL(100μM)は灌流液に添加し,灌流開始から終了まで連続投与した. AL投与群では非投与群に比し,心筋組織ATPの減少は緩やかであり,嫌気的灌流間始10分後には有意に高い値を示した(13.4±0.7 AL群, 8.4±0.6μmol/g dry weight非投与群). AL投与群,非投与群ともに嫌気的灌流開始直後からNADH蛍光は増大し,約2分でほぼ100%となり,両群間に差を認めなかった.このことは,電子伝達系の阻害,すなわち,好気的エネルギー産生阻害については,両群間に差が無いことを示唆する.解糖系活性の指標として灌流液中に放出された乳酸量を測定したところ, AL投与群では嫌気的灌流時の乳酸産生亢進が非投与群に比しより著明であった.本研究の結果から, ALには解糖系の亢進作用があり,このためにAL投与心臓では虚血ごく早期から非投与心臓と比べて,エネルギー産生がより高く維持されていることが明かとなった.これは, ALの心筋障害防止機序の一つとして,重要な役割を演じていると考えられる.心筋のCa代謝変化を直接、生体で連続観察できる光学的方法を開発し、これを用いて、乳児ラット心臓のCaパラドックス心筋障害におけCa動態変化を調べ、Ca過剰負荷と心筋障害の関係を検討した。〔方法〕乳児ラット心臓をランゲンドルフ法で定圧灌流(40cm水柱圧)した。灌流液としては1.3mMCacl_2および5.5mMブドウ糖を含むCarbonate緩衝液を用いた。摘出心臓にCa指示色素フラ2/AMを取り込ませた後、無Ca液で5分間灌流し、さらにCa再灌流を行った。我々の開発による表面蛍光2波長励起測光システムを用いてフラ2蛍光を測定し、細胞質Ca濃度(Ca)iの指標とした。灌流液中のCPK量を測定し、心筋細胞障害の指標とした。〔結果〕生後8日目以前のラット心臓では、無Ca灌流によって(Ca)iは次第に低下し定常状態となった。(121→31nM)。この際、心拍動は停止した。5分後に1.3mMCa液を、再灌流すると(Ca)i正常値に戻り、CPKの漏出は認められなかった。生後9日目から14日目のラット心臓では、Ca再灌流後、(Ca)iは上昇し定常状態となり(187nM)、Ca過剰が認められた。しかし80%の心臓が収縮を回復し、CPKの漏出は認められなかった。80cm水柱圧で定圧灌流した成熟ラット心臓ではCa再灌流後、(Ca)
ニホンジカとニホンカモシカの環境及び餌資源における競合に関する研究

現在日本国内ではニホンジカ(以下、シカ)の分布拡大と個体数増加による森林下層植生の衰退が問題となっている。シカと同じく大型の草食動物であるカモシカとシカ(以下、両種)とが同所的に生息する地域においては、生息域や餌資源を巡る両種間の競争が生じていると考えられている。しかしながら両種間の種間関係についての研究は少なく、詳細は不明である。本研究では岐阜大学位山演習林(岐阜県下呂市)にて両種の種間関係の一端を明らかにするため、(1)林内に20台の自動撮影装置を設置して両種の土地利用傾向を明らかにするとともに、(2)次世代シーケンサーを用いたDNAバーコーディングによって両種の餌植物の同定を実施した。(1)2014年2016年の3年間にわたって撮影された自動撮影装置の映像を解析したところ、カモシカの撮影頻度は春にゆるやかなピークを示した後、冬に向かって漸減していた。一方でシカの撮影頻度は89月に非常に明瞭なピークを持つことが明らかとなった。(2)シカ・カモシカの糞、計146サンプルについて、次世代シーケンサーによるDNAバーコーディングを実施し、両種の採食植物の種構成に関するデータを得た。データを分析した結果、シカおよびカモシカは、特定の種で出現頻度に偏りが見られたものの、種構成自体はほぼ差がないことが明らかとなった。また、顕微鏡を用いた糞分析の結果、シカはササ、カモシカは双子葉植物の構成割合がそれぞれ大きいことが明らかとなった。これらの結果から、(1)位山演習林には両種が同所的に生息しているが、森林内の利用頻度には両種間で差があり、それらの採食行動が森林に与える影響にも種間で相違があること、(2)両種の採食植物は量的には差があるが種構成には差がないため、シカによる下層植生の衰退は両種の餌資源の競合をより強める可能性があること、が示唆された。日本において、ニホンジカ(以下、シカ)とカモシカが同所的に生息し、かつシカの個体数が増加している地域では、カモシカの個体数の減少や利用場所の変化が報告されている。この減少や変化は、シカとカモシカ(以下、両種)の生息域や餌資源を巡る競合が原因であると考えられているが、両種の競合についての研究は少なく、詳細は不明である。本研究では両種が同所的に生息している岐阜大学位山演習林(岐阜県下呂市、以下位山演習林)にて、自生する植物と両種の糞を採集し、(1)DNAバーコーディングを用いた糞分析による両種の餌植物の種構成と、(2)顕微鏡を用いた糞分析による両種の餌植物の構成比率を把握・比較した。(1)位山演習林にて採取した植物258種について、草食動物の食性解析に有用なバーコード領域であるtrnL P6loop領域の塩基配列データベースを作成した。また、2013年2015年にかけて採取された両種の糞96サンプルから採食植物のDNAを抽出してtrnL領域をPCR増幅し、次世代シーケーンサーを用いて塩基配列を決定し、塩基配列データベースと照合することで採食植物を同定した。(2)両種の糞133サンプル中に残存する植物片を顕微鏡観察によって5項目(ササ、単子葉類、双子葉類、樹皮・枝、その他)に分類し、それぞれの項目の割合を調べた。(1)の結果より、両種の糞から多様な採食植物が検出された。両種間で出現頻度に差のある植物分類群が存在した(シカ:ササ、コナラ類が多い、カモシカ:ハイイヌガヤ、イヌツゲ、ネコノメソウが多い)。一方、餌植物の種構成全体には有意な差はなかった。一方、(2)の結果より、1年を通してシカはカモシカに比べてササを食べる割合が多く、一方カモシカはシカに比べて双子葉類を食べる割合が多いことが明らかとなった。当初予算の削減のため、本年度は次世代シーケンサーを利用した実験を追加することはできなかったが、植物の塩基配列データベースに関しては、調査地のフローラを概ねカバーできるだけのデータを集積できた。また、糞サンプルについても十分追加することができており、次年度の次世代シーケンサーを用いた実験の準備を順調に進めることが出来ている。またこの問題は森林に生息する他の生物にも影響を与えている。シカと同じく大型の草食動物であるカモシカとシカ(以下、両種)とが同所的に生息する地域においては、生息域や餌資源を巡る両種間の競争が生じていると考えられており、シカの影響によりカモシカ個体数の減少や利用場所の変化が報告されている地域も存在する。

これらの結果から、位山演習林にはシカとカモシカが同所的に生息しているが、森林内の利用頻度には両種間で差があり、それらの採食行動が森林に与える影響にも種間で相違があることが示唆された。(2)昨年度までに次世代シーケンサーによるDNAバーコーディングが終了していた95サンプルに加え、新たにシカ・カモシカの糞、計51サンプルについて、同じ分析を実施し、結果を得た。新たに分析を行った糞サンプルはまだ排泄動物の種判別が終了していないため、今後さらに分析を進め、得られたデータを統合して解析を進める予定である。昨年度から今年度にかけて追加したサンプルのうち、冬季のサンプルが十分確保できず、次世代シーケンサーを用いた実験の実施時期が大幅に遅れてしまった。しかし、今年度2月末には冬季サンプルの追加を得ることができ、その後すぐに計51サンプルについてDNAバーコーディングを実施した。現在日本国内ではニホンジカ(以下、シカ)の分布拡大と個体数増加による森林下層植生の衰退が問題となっている。またこの問題は森林に生息する他の生物にも影響を与えている。シカと同じく大型の草食動物であるカモシカとシカ(以下、両種)とが同所的に生息する地域においては、生息域や餌資源を巡る両種間の競争が生じていると考えられており、シカの影響によりカモシカ個体数の減少や利用場所の変化が報告されている地域も存在する。しかしながら両種間の種間関係についての研究は少なく、詳細は不明である。本研究では岐阜大学位山演習林(岐阜県下呂市)にて両種の種間関係の一端を明らかにするため、(1)林内に20台の自動撮影装置を設置して両種の土地利用傾向を明らかにするとともに、(2)次世代シーケンサーを用いたDNAバーコーディングによって両種の餌植物の同定を実施した。(1)2014年ー2016年の3年間にわたって撮影された自動撮影装置の映像を解析したところ、カモシカの撮影頻度は春にゆるやかなピークを示した後、冬に向かって漸減していた。一方でシカの撮影頻度は8ー9月に非常に明瞭なピークを持つことが明らかとなった。先行研究より、この傾向はニホンジカが土地利用の季節変化に依存して撮影頻度が変化しているのに対し、固定的ななわばりを持つカモシカは活動量の季節変化が撮影頻度の増減に影響を与えていると考えられた。(2)シカ・カモシカの糞の次世代シーケンサーによるDNAバーコーディングについて、これまで2度のRUN(1回目:95サンプル、2回目:51サンプル)の分析結果を得ている。現在、2回のRUNで得られたデータセットの統合を図っており、今後さらに分析を進め予定である。2回のRUNで得られた次世代シーケンサーデータの質に差があり、また解析に用いていたソフトウェアの一部仕様変更も相まって、これらを統合した解析が難航している。シカと同じく大型の草食動物であるカモシカとシカ(以下、両種)とが同所的に生息する地域においては、生息域や餌資源を巡る両種間の競争が生じていると考えられている。
地域団体商標による温泉地ブランドの構築と競争優位性の比較研究

初年度は、地域団体商標を得ている複数の旅館協同組合を訪問して、協同組合の目的および現状と課題について、ヒアリング調査およびアンケートのプリテストを行う。その結果をみて、アンケート内容の改善を行う。次に、2020年度は旅館協同組合、旅館、DMOを対象にアンケート調査を行う。最終年度は、アンケート結果に基づき、地域団体商標によるブランド構築、旅館協同組合の組織力について分析を行う。その後、研究論文を執筆し、学会等で報告する。
食用植物由来新規エラジタンニンZeylaniin Aの生活習慣病改善機能

ベトナム栄養研究所より入手した食用植物Tramから新規ポリフェノールZeylaniin Aを精製し、細胞に与えると紫外線に抵抗性を示した。遺伝性糖尿病マウスの餌に添加し投与した。血糖値はコントロール群(DC)が304mg/dl、ゼーラニーン群(DZ)が320ml/dlであった。AGE類はIntrada Amino AcidカラムとLC-MS/MSで新定量法を作成した。血液中CELは73-129ng/mL、MG-H1は38-184ng/mLであった。CELの平均値はDC群が101ng/ml、DZ群が104ng/ml、で血糖値、AGE濃度にはZeylaniin A投与の影響は少なかった。UVAによる細胞傷害に、抗酸化物質Zeylaniin A添加によりUVAによる酸化傷害が抑制されるかを検討した。NB1RGB細胞にUVAを照射した後、抗酸化物質を添加し培養した。その後MTT assay法を用いて細胞生存率を測定し、抗酸化物質によるUVAダメージ抑制効果を検討した。抗酸化物質にはアスコルビン酸とN-アセチルシステイン及びベトナム植物Syzygium zeylanicum (L.) DCより単離した新規物質であるzeylaniin Aの3種類を用いて実験を行った。Zeylaniin AによりUVA照射による細胞死が抑制されたことから、Zeylaniin Aには酸化ストレス抑制効果があることが示唆された。リアルタイムRT-PCRの結果より、Zey AによりHO-1、IL-8、CASP3、MMP-1の発現上昇が抑制されることが明らかとなった。次にこの物質を用いて細胞培養実験を行い、過酸化水素の酸化傷害に対する、Tram成分添加の影響を検討するため、MTTassayを用いて細胞成長率を比較した。96 well plateに細胞を6000cells/wellになるように撒き、一晩培養し、過酸化水素曝露群とコントロール群にわけ、この単離物質と過酸化水素を添加し、4時間後に過酸化水素を除去して24時間後、48時間後、72時間後にそれぞれ細胞成長率の測定を行った。ポジコンにはアスコルビン酸とNACそれぞれ200μMを用いた。その結果、48時間後と72時間後において、1μM添加群で酸化障害を回復させ、有意な細胞成長がみられたが、Tram成分20μM,30μM添加群においては細胞成長は低下し、高濃度では細胞毒性を示すことも示唆された。一方Tram BuOH層をHPLCで分析したところ、zeylaniin Aと異なるUV-Vis吸収の物質(λmax 350 nm)が一つ見えた。そこでBuOHエキスから抗酸化物質を単離し、構造決定したところ、抗酸化活性の高い物質が得られ、myricitrinと同定した。本物質はtram (Syzygium zeylanicum)からは初めて見つかった。酸化ストレスによる遺伝子発現をDNAマイクロアレイで網羅的に解析した。その結果から、酸化ストレスに応答した、未だにリガンドが同定されていないオーファン受容体の一種であるNR4A1遺伝子に着目し、RNAi法を用いてNR4A1遺伝子の発現を抑制して酸化ストレスに対する働きを検討した。フローサイトメーターで酸化ストレス下でのアポトーシス細胞を測定したところ、NR4A1遺伝子の発現を抑制することにより、酸化ストレスによるアポトーシス細胞の割合が有意に上昇した。また、この時のカスパーゼの活性を測定したところ、アポトーシスを引き起こす経路の一つである外因性経路を調節するカスパーゼ-8と-3の活性が有意に上昇した。以上の結果により、過酸化水素による酸化ストレスの刺激でNR4A1がカスパーゼ-8、-3の活性を抑制することにより、主に外因性経路によるアポトーシスを抑制することが示唆された。次にNR4A3ノックダウン細胞を作製した。昨年度行ったときよりmRNAの量は多かったので、蛋白質レベルでどれくらいノックダウンされているかを検討した。次年度はこれらノックダウンされて抗酸化力の落ちた細胞に対するゼーラニンAの保護効果を明らかにするとともに、動物実験により、高血糖改善効果を明らかにする。ゼーラニンAがどのように体内に吸収され、血液中や細胞中でそのまま効果を発揮するのかそれとも分解されたエラジタンニンなどが抗酸化力を発揮するのかを引き続き検討した。ベトナム食用植物トラムの糖尿病への効果を調べた。S.zeylanicum葉を粉砕し、MeOHで24時間抽出を行い濃縮し、残渣を蒸留水に溶解し、各種有機溶媒で液液分配した。残渣の水画分をHP-20カラムクロマトグラフィーにかけて分画し、20%40%MeOH画分を濃縮し、HPLCで分析を行った。HPLC分析ではエラジタンニンZeylaniin A以外に3成分が認められる混合画分を糖尿病マウスに投与した。遺伝性糖尿病動物KKAyマウス(オス、10週令)を2群に分け7匹には通常の餌(日本クレア株式会社:粉末試料『CE-2』)を11日間投与し、6匹には通常の餌に0.1%になるように上記の混合画分を投与した。実験期間中の体重の変化を測定したのち、解剖を行い。血液中のグルコース濃度と、糖尿病で上昇するといわれている、CML,MG-H1などのAGEsの分析をLC-MS/MSを用いて行った。

血糖値は両群とも正常マウスより優位に高く、AGEsの中ではCML,CEL,MG-H1が血液中には認められ、CELは73-129ng/mL、CMLは211-486ng/mL含まれており、MG-H1は38-184ng/mL含まれていた。血糖値の平均値はコントロール群が304mg/dl、ゼーラニーン群が320mg/dl、CELの平均値はコントロール群が101ng/ml、ゼーラニーン群が104ng/ml、CMLの平均値はコントロール群が252ng/ml、ゼーラニーン群が292ng/ml、MGH1の平均値はコントロール群が110ng/ml、ゼーラニーン群が126ng/ml、GH1の平均値はコントロール群が13ng/ml、ゼーラニーン群が15ng/mlであった。血糖値および、AGE濃度にはZeylaniin A投与の影響は少なかった。今後長期飼育や経口摂取されたAGEの及ぼす影響など明らかにする。ベトナム栄養研究所より入手した食用植物Tramから新規ポリフェノールZeylaniin Aを精製し、細胞に与えると紫外線に抵抗性を示した。遺伝性糖尿病マウスの餌に添加し投与した。血糖値はコントロール群(DC)が304mg/dl、ゼーラニーン群(DZ)が320ml/dlであった。AGE類はIntrada Amino AcidカラムとLC-MS/MSで新定量法を作成した。血液中CELは73-129ng/mL、MG-H1は38-184ng/mLであった。CELの平均値はDC群が101ng/ml、DZ群が104ng/ml、で血糖値、AGE濃度にはZeylaniin A投与の影響は少なかった。ゼーラニンAの抗酸化力や生活習慣病に対する効果を明らかにするために、通常のすい臓細胞や、ヒト正常細胞よりさらに抗酸化力の低下する細胞を作製するために酸化ストレスの初期に急激に転写が増加するNR4A1やNR4A3ノックダウン細胞を作製することができた。この細胞を用いればゼーラニンAの抗酸化効果を詳細に明らかにできると考えられ、おおむね順調に進展していると判断している。27年度が最終年度であるため、記入しない。分子栄養学2型糖尿病マウスKK-AyなどにゼーラニンAを摂取させ抗糖尿病効果があるかを明らかにする。ゼーラニンAのマウスに及ぼす影響を明らかにするとともに、臓器における遺伝子発現の変化を調べる。NR4A3ノックダウン細胞をやNR4A1ノックダウン細胞を用いて酸化ストレスに弱くなった状態の細胞にゼーラニンAがどれだけ効果があるか、既存のNACなどの抗酸化剤、アスコルビン酸などの抗酸化ビタミンより優れているのかなどを明らかにする。過酸化水素の酸化傷害に対する、Zeylaniin A添加の影響を検討するため、MTTassayを用いて細胞成長率を比較した。ポジコンにはアスコルビン酸とNACそれぞれ200μMを用いた。その結果、48時間後と72時間後において、1μM添加群で酸化障害から回復し、有意な細胞成長がみられたが、20μM,30μM添加群においては細胞成長は低下し、高濃度では細胞毒性を示すことも示唆された。これはガン細胞を用いたからと考えた。Zeylaniin AによりUVA照射による細胞死が抑制されたことから、Zeylaniin Aには酸化ストレス抑制効果があることが示唆された。リアルタイムRT-PCRの結果より、Zey AによりHO-1、IL-8、CASP3、MMP-1の発現上昇が抑制されることが明らかとなった。
日本における予防接種の歴史社会学的研究

本研究は、日本における予防接種のあり方を歴史社会学的に検証し、予防接種が各時代においていかに実践されていたか実態を解明するとともに、その予防接種の実践が帯びていた政治性を析出した。具体的には、(1)近世後期における天然痘の流行とその対処法、(2)近世後期における種痘の実践をめぐる議論の全容、(3)明治期から戦後にかけての種痘の実施状況を、それぞれ分析・解明した。本研究は、日本における予防接種のあり方を歴史社会学的に検証し、それが時代によって帯びていた意味合いと政治性とを明らかにすべく、研究計画(交付申請書作成)の段階で、4つの具体的な課題(達成目標)を掲げていた。本年度(平成25年度)は、このうち、以下2つの課題(交付申請書ではそれぞれ「課題I」「課題II」)について取り組んだ。第1は、近世後期における天然痘の流行とその対処法の解明である。読解・分析に供するための当面必要となる資料はすでに収集を終えていたため、研究スタート時より、随時、読解・分析を進めた。これにより、従来の議論において見落とされていた天然痘に対する藩政上の対処機制が明らかとなった。なお、その成果の一部は、論文にまとめた。また、課題遂行と並行して、医学史および感染症に関連する基本文献(雑誌・事典類も含む)が所属機関に十分に揃っていなかったため、今後の研究を円滑に進めるべく、この間に資料収集・読解・論文執筆とともに基本文献の収集も行った。第2は、近世後期における種痘(天然痘に対する予防接種)施行に関する議論の全容解明である。この課題に関しては、必要最低限の資料は収集済みであったが十分ではなかったため、まずは、資料の読解をすすめるかたわら調査出張をおこなって補足資料を収集した。その結果集まった資料を読解・分析した結果、近代以降には「旧説」として顧みられなくなった天然痘に関する議論が近世後期にはむしろ支持されていたこと、ならびに、近世後期に種痘の施行に関して具体的に何が「問題」とされ議論されていたかが明らかとなった。この課題の成果についても、論文としてまとめ投稿した。本研究は、日本における予防接種のあり方を歴史社会学的に検証し、それが時代によって帯びていた意味合いと政治性とを明らかにすべく、研究計画(交付申請書作成時)の段階で、4つの具体的な課題(達成目標)を掲げていた。最終年度となる本年度(平成26年度)は、このうち、以下3つの課題(交付申請書ではそれぞれ「課題I」「課題III」「課題IV」)について取り組んだ。課題I(近世後期における天然痘の流行とその対処法の解明)に関しては、前年度に一通りの成果を出していたが、今年度におこなった国内調査により、藩政と感染症対策という観点からみて重要な事例が新たに見つかったため、あらためて資料の収集・読解・分析をおこない、成果を論文にまとめた。課題III(明治期から戦後にかけての種痘の実施状況の解明)に関しては、前年度の予備調査の結果、当初の計画よりも進捗に時間がかかることが予想されたため、今後、これを別途独立した研究課題として構想することとし、本年度は限定的に資料の収集・読解などの基礎的な作業をつづけた。課題IV(天然痘の自然界からの根絶(1980年)前後における種痘に関する議論の全容解明と、それが現代の予防接種制度におよぼした影響の析出)に関しては、資料の収集と並行して、リスクに関連する理論研究を多く参照し、資料を読解・分析する視角の構築に取り組んだ。26年度が最終年度であるため、記入しない。医療社会学26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は当初、本年度(平成25年度)に資料の収集・読解・分析という基礎的な作業を行い、翌年度においてその成果をまとめる予定であった。しかし、基礎的な作業が非常に順調に進み、成果物(論文)を2編まとめることができたため、結果のみで見れば、当初の計画よりも進展していると評価できる。ただし、調査出張に関しては、日程上の都合により翌26年度に持ち越したものがあるため、翌年度内での研究計画の調整を必要とする。当初掲げていた4つの課題のうち、2つ(交付申請書に掲げた「課題I・II」)に関しては計画よりも順調に成果を出すに至ったが、残りの2つの課題(同「課題III・IV」)については、予備調査の結果、当初の計画よりも進捗に時間がかかることが予想されるため、優先順位を変更し、まずは課題IVより着手することにする。また、日程上の都合により本年度(平成25年度)に行うことができなかった調査出張を、翌年度の早い時期に行えるよう調整する。
アデノウィルスベクターを用いた筋萎縮性側索硬化症の遺伝子治療に関する基礎研究

我々は筋萎縮性側索硬化症(ALS)における逆行性軸索輸送を利用した遺伝子治療の可能性を検討している.このため,昨年度はALSのモデル動物であるSOD1(A93G) transgenic mice(変異SOD1マウス)を用いて,LacZ遺伝子とアポトーシス抑制因子であるBcl-2遺伝子を導入したadenovirus vector (Adv)を舌筋に注入し,健常対照マウスと同様に逆行性軸索輸送によりその支配神経である舌下神経核で発現することを明らかにした.Bcl-2遺伝子発現についてはloxPで挟まれたBcl-2遺伝子を導入したAdv (AxCALNLBcl-2)とCre recombinaseを導入したAdv (AxCANCre)を用いることで,AxCANCreが発現したときにのみBcl-2が発現する系を用いた.今年度は,この系を用いて変異SOD1マウスの舌下神経核で発現させたBcl-2が,舌下神経核の運動ニューロンの変性を抑制できるか否かを検討した.10週齢(未発症)の変異SOD1マウスの舌筋にAxCALNLBcl-2及びAxCANCreを注入後,25週齢(発症後)までの舌下神経核でのBcl-2発現の経時変化と25週齢時点での運動ニューロン変性の抑制効果の有無を病理学的に検討した.Bcl-2発現は舌筋注入後8週まで認められたが,経時的に減少傾向を示した.また,舌下神経核での運動ニューロン変性に関して,未処理あるいはAxCALNLBcl-2のみ注入した対照群に比較し,病理学的に著明な抑制効果がみられることを明らかにした。このように逆行性軸索輸送や抗アポトーシス作用を有する蛋白であるBcl-2等を利用した遺伝子治療戦略は運動ニューロンの神経細胞死を抑制する効果があり,ALSの遺伝子治療の開発に役立つものと思われる.我々は筋萎縮性側索硬化症(ALS)における逆行性軸索輸送を利用した遺伝子治療の可能性を検討している.このため,昨年度はALSのモデル動物であるSOD1(A93G) transgenic mice(変異SOD1マウス)を用いて,LacZ遺伝子とアポトーシス抑制因子であるBcl-2遺伝子を導入したadenovirus vector (Adv)を舌筋に注入し,健常対照マウスと同様に逆行性軸索輸送によりその支配神経である舌下神経核で発現することを明らかにした.Bcl-2遺伝子発現についてはloxPで挟まれたBcl-2遺伝子を導入したAdv (AxCALNLBcl-2)とCre recombinaseを導入したAdv (AxCANCre)を用いることで,AxCANCreが発現したときにのみBcl-2が発現する系を用いた.今年度は,この系を用いて変異SOD1マウスの舌下神経核で発現させたBcl-2が,舌下神経核の運動ニューロンの変性を抑制できるか否かを検討した.10週齢(未発症)の変異SOD1マウスの舌筋にAxCALNLBcl-2及びAxCANCreを注入後,25週齢(発症後)までの舌下神経核でのBcl-2発現の経時変化と25週齢時点での運動ニューロン変性の抑制効果の有無を病理学的に検討した.Bcl-2発現は舌筋注入後8週まで認められたが,経時的に減少傾向を示した.また,舌下神経核での運動ニューロン変性に関して,未処理あるいはAxCALNLBcl-2のみ注入した対照群に比較し,病理学的に著明な抑制効果がみられることを明らかにした。このように逆行性軸索輸送や抗アポトーシス作用を有する蛋白であるBcl-2等を利用した遺伝子治療戦略は運動ニューロンの神経細胞死を抑制する効果があり,ALSの遺伝子治療の開発に役立つものと思われる.我々はALSにおける逆行性軸索輸送を利用した遺伝子治療の可能性を検討している.このため,ALSのモデル動物であるSODl(A93G)transgenic mice(TgM)を用いて,LacZ遺伝子とアポトーシス抑制因子であるBcl-2遺伝子を導入したadenovirus vector(Adv)を舌筋に注入し,逆行性軸索輸送によりその支配神経である舌下神経核で発現するかどうかを検討した.まず,LacZ遺伝子導入Advを各週齢のSODl(A93G)TgMとそのwild-typeマウスの舌筋へ注入した.すべてのマウスで導入遺伝子が舌下神経核で発現し,発現の経時変化に相違はなかった.この結果は両群で導入遺伝子の挙動に相違がないことを示唆した.次にBcl-2遺伝子発現をCre-loxP組換えにより調節できるAdv系を用いて検討した.これはloxPで挟まれたBcl-2遺伝子を導入したAdv(AxCALNLBcl-2)とCre recombinaseを導入したAdv(AxCANCre)を用いることで,AxCANCreが発現したときにのみBcl-2が発現する.この系がうまく機能するかどうかをSODl(A93G)TgM由来の変異SODlを有する初代神経培養細胞を作製して検討した.この培養細胞でBcl-2は高発現を示し,staurosporineによって誘導されるアポトーシスを防御した.さらにSODl(A93G)TgMとそのwildtypeマウスの舌筋にAxCALNBcl-2とAxCANCreを注入したところ,Bcl-2は注入部位の舌筋ばかりでなく,舌下神経核においても検出された.

これはPCR-Southern法による検討から,舌筋に注入されたAxCALNLBcl-2とAxCANCreが各々逆行性軸索輸送によって舌下神経核に運ばれ,そこでloxPの組換えを起こしてBcl-2が発現したことを示唆する.このような逆行性軸索輸送を利用した発現調節可能な遺伝子導入法やBcl-2のような抗アポトーシス作用を有する蛋白を利用した遺伝子治療戦略は運動ニューロンの神経細胞死の研究やALSの遺伝子治療の開発に役立つものと思われる.我々は筋萎縮性側索硬化症(ALS)における逆行性軸索輸送を利用した遺伝子治療の可能性を検討している.このため,昨年度はALSのモデル動物であるSOD1(A93G)transgenic mice(変異SOD1マウス)を用いて,LacZ遺伝子とアポトーシス制御因子であるBcl-2遺伝子を導入したadenovirus vector(Adv)を舌筋に注入し,健常対象マウスと同様に逆行性軸索輸送によりその支配神経である舌下神経核で発現することを明らかにした.Bcl-2遺伝子発現についてはloxPで挟まれたBcl-2遺伝子を導入したAdv(AxCALNLBcl-2)とCre recombinaseを導入したAdv(AxCANCre)を用いることで,AxCANCreが発現したときにのみBcl-2が発現する系を用いた.今年度は,この系を用いて変異SOD1マウスの舌下神経核で発現させたBcl-2が、舌下神経核の運動ニューロンの変性を抑制できるか否かを検討した.10週齢(未発症)の変異SOD1マウスの舌筋にAxCALNLBcl-2及びAxCANCreを注入後、25週齢(発症後)までの舌下神経核でのBcl-2発現の経時変化と25週齢時点での運動ニューロン変性の抑制効果の有無を病理学的に検討した.Bcl-2発現は舌筋注入後8週まで認められたが、経時的に減少傾向を示した.また,舌下神経核での運動ニューロン変性に関して,未処理あるいはAxCALNLBcl-2のみ注入した対照群に比較し,病理学的に著明な抑制効果がみられることを明らかにした。このように逆行性軸索輸送や抗アポトーシス作用を有する蛋白であるBcl-2等を利用した遺伝子治療戦略は運動ニューロンの神経細胞死を抑制する効果があり,ALSの遺伝子治療の開発に役立つものと思われる.
がいしのフラッシオーバ電圧の湿度補正に関する総合的検討

年間の湿度変化を踏まえた上で、自然状態において絶対湿度の320mg/cm^3の条件下でがいしのフラッシオーバ電圧に及ぼす絶対湿度の効果を調べた。試料として懸垂がいし、ピンがいし、ステーションポストがいし、ラインポストがいし、長幹がいし、高分子がいしを用いた。印加電圧は、交流電圧、雷インパルス電圧、開閉インパルス電圧および直流電圧とした。高分子がいしについては、フラッシオーバ電圧に影響を与えると考えられる表面の撥水性に関する基礎実験も実施した。本研究で得られた結果を以下に示す。1. 3年間の湿度実測データを解析した結果、絶対湿度は冬期に最小値3mg/cm^3の程度、夏期に最大値20mg/cm^3程度を示し、その間は緩やかに変化することがわかった。2.懸垂がいしおよびピンがいしに正・負雷インパルス電圧を印加した場合には、フラッシオーバ電圧は絶対湿度の上昇とともに低下することが確認された。現行のIEC(国際電気標準会議)規格の湿度補正係数に修正が必要と思われる。3.それ以外のがいしでは、フラッシオーバ電圧は絶対湿度とともに上昇した。現行のIEC規格の湿度補正は、ほぼ妥当と考えられる。4.高分子がいし外被に使用されるシリコーンゴム表面の水滴に関しては、電圧印加時に振動すること、形状が変化し水滴同士が結合する場合があること、従ってフラッシオーバしやすくなることがわかった。5.シリコーンゴム表面汚損時のフラッシオーバ電圧は汚損直後には低いが、時間経過とともに徐々に上昇し、1週間程度で一定値になることがわかった。本年度は、年間の湿度変化を踏まえた上で自然状態において絶対湿度320mg/m^3の条件下で実験を実施した。試料として、ピンがいし、ステーションポストがいし、ラインポストがいし、長幹がいし、高分子がいしの5種類の実がいしを用いた。交流電圧、雷インパルス電圧(正極性および負極性、開閉インパルス電圧(正極性、負極性)を試料に印加し、フラッシオーバ電圧の絶対湿度依存性を評価した。一方、近年欧米で台頭著しい高分子がいしについては、フラッシオーバ電圧に影響を及ぼすと考えられる表面の撥水性に関する基礎実験も実施した。得られた結果を以下に示す。1.3年間の湿度実測データを解析した結果、絶対湿度は年間では冬期に最小値3mg/m^3程度、夏期に最大値20mg/m^3程度を示し、その間は緩やかに変化することがわかった。この結果を参考にして、所望の絶対湿度の時期に実験を実施した。2.配電用ピンがいしに正・負雷インパルス電圧を印加した場合には、フラッシオーバ電圧は絶対湿度の上昇とともに低下することが確認された。現行のIEC(国際電気標準会議)規格の湿度係数に修正が必要と考えられる。3.それ以外の場合には、フラッシオーバ電圧は絶対湿度とともに上昇した。現行のIEC湿度係数はほぼ妥当と考えられる。高分子がいしに使用されるシリコーンゴムを繰返し水に浸漬すると、撥水性は徐々に低下し、乾燥時に重さもわずかに減少した。シリコーンゴム上の水滴は、交流高電界により形状が変化したり、水滴同士が結合したりすることが確認された。本年度は、年間の湿度変化に基づき自然状態において、がいしのフラッシオーバ電圧に及ぼす絶対湿度の効果を調べた。試料として新たに懸垂がいしを加え、昨年度使用したピンがいし、ステーションポストがいし、ラインポストがいし、長幹がいし、高分子がいしについてもさらにデータを蓄積した。

1.懸垂がいしおよびピンがいしに正・負雷インパルス電圧を印加した場合には、フラッシオーバ電圧は絶対湿度の上昇とともに低下することが確認された。現行のIEC(国際電気標準会議)規格の湿度補正係数に修正が必要と思われる。2.それ以外のがいしでは、フラッシオーバ電圧は絶対湿度とともに上昇した。現行のIEC規格の湿度補正は、ほぼ妥当と考えられる。3.高分子がいし外被に使用されるシリコーンゴム表面の水滴に関しては、電圧印加時に振動すること、形状が変化し水滴同士が結合する場合があること、従ってフラッシオーバしやすくなることがわかった。4.シリコーンゴム表面汚損時のフラッシオーバ電圧は汚損直後には低いが、時間経過とともに徐々に上昇し、1週間程度で一定値になることがわかった。