hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
完全埋込式硬膜外頭蓋内圧計の開発と臨床応用

われわれは、安全で患者の苦痛の少ない頭蓋内圧モニターを可能にするため、新しい完全埋込式硬膜外圧計を製作した。本硬膜外圧計はコイルとコンデンサーからなる受動回路で、硬膜外圧の変動に伴ってフェライテコアが上下し、硬膜外圧計内のコイルの共振周波数が変化する。この変化を外部のアンテナ(プローブ)を用いてグリッドディップ方式により、テレメーター式に測定するものである。直径13mm、高さ15mm、重さ約6gの円筒形で、ハウジングはセラミック性である。構造はバネばかりを小さくして逆にしたようなもので、真空部分がないので気圧補正等の複雑な機構が不要となり、信頼性が高い。取り付け具にも工夫を加え、簡単で信頼性の高い方法を開発した。本硬膜外圧計の特徴を以下に記す。1.圧を伝達する手段として、ベローズの替わりにイタバネを用いているので、ガスの漏出によるゼロ点移動がない。2.バネ定数の異なるイタバネを用いることにより、いろんな感度の硬膜外圧計が簡単に製作できる。3.イタバネを2枚組み合わせることにより、少々偏った負荷が受圧板にかかっても受圧板やコアが傾かないので、設置に従来ほどの厳密さを要しない。4.硬膜外圧計の内部に真空部分がないので、気圧補正等の複雑な機構が不要である。5.1分間に50回測定するので脈波を捉えることができる。6.温度変化による誤差をほとんど無視できる。7.患者の頭皮上からプローブを当てるだけで簡単に硬膜外圧が測定でき、安全で患者の苦痛も少ない。本硬膜外圧計を臨床例4例に用い、全例で長期間にわたって、安全で正確な硬膜外圧測定が可能であった。このことからも、本硬膜外圧計は急性期の頭蓋内圧測定にきわめて有用と思われる。各種誘発反応と硬膜外圧の関係について若干の知見も合わせて報告する。
アクティブ捕集による大気中オゾン及び反応生成物質の簡便・同時測定法の開発

簡便なアクティブサンプリング装置を用いて、オゾンおよび窒素酸化物等オゾン反応生成物質の同時測定法の開発を行った。室内における捕集効率実験により、流量0.5L/min、保湿剤であるグリセリン濃度10%、フィルター厚さが0.38mmである条件下で、オゾン、NO2の捕集効率が90%以上であることを確認した。最適化された条件下で、ガス、粒子状物質の野外測定試験を行った。アクティブサンプリングによる測定値は、オゾン、NO2の自動測定機の測定器と良く一致していた(R>0.83)。また、PM2.5の化学成分特性と発生源解析の結果から、海塩、バイオマス燃焼、土壌粉じん、二次粒子が主要な起源であった。フィルターパックを内部に設置した曝露チャンバーにオゾンガスを導入し、捕集効率を求める実験を行った。オゾンガス標準発生器から発生させた実大気濃度レベル(約60ppb)で既知濃度のガスを曝露チャンバー内に導入する。チャンバー内にオゾンを捕集するフィルターパックを設置し、バッテリー式小型ポンプで吸引することによって、捕集効率=(フィルターパックによるガス捕集量(mol)/ガス捕集量の理論値(mol))の式で定義される捕集効率を求めた。反応試薬、吸引流量、相対湿度の条件を変えた曝露実験により、オゾン測定のための最適条件を決定した。trans-1,2-bis(2-pyridyl)ethylene(BPE)及びNaNO2をオゾン反応試薬に用いた所、BPEについては捕集効率は5%未満でありほとんど捕集されなかった。一方、NaNO2はBPEよりも格段に捕集効率が高かったことから、以後の暴露実験ではNaNO2を用いた。吸引流量を変化させた実験については、流量10L/minの条件では捕集効率は20%未満であったが、流量が低くなるにつれて捕集効率が増加する傾向が見られ、流量0.5L/minの条件で最大の捕集効率が得られた。相対湿度については、オゾン捕集用NaNO2含浸フィルターに添加するグリセリンの濃度による影響が見られ、グリセリン濃度が1%以下の時には相対湿度が30%以下の条件で捕集効率が下がる傾向が見られたが、5%以上の時には湿度依存性が見られず捕集効率はほぼ一定であった。一連の暴露実験から得られた最適条件により、オゾン捕集効率が90%以上で大気中オゾンを測定する方法を確立することが出来た。更に、オゾン自動測定器とフィルターパックを用いた野外並行測定によっても、両者の測定値は概ね10%以内で一致し、相関係数についても0.8以上の良い相関が見られたことから、野外測定に適応できることを実証した。前年度に引き続き曝露チャンバーを用いた捕集効率を求める実験を行い、オゾン測定条件の検討を行った。これまでの条件ではオゾン捕集用ろ紙を4段直列に繋ぐことが必要であったが、多成分同時測定を行うために1段ろ紙で捕集できる条件を検討した。吸引流量、相対湿度、グリセリン含浸濃度、ろ紙の厚さの条件を変えた実験を行った。グリセリン含浸濃度が0.5%10%の条件では濃度が高いほど捕集効率が高くなり、表面上で水分が保持できる10%で最大の捕集効率となった。ろ紙の厚みについては、厚さが大きくなるほどガスとの接触時間が長くなり、捕集効率が高くなった。厚さ0.38mmのガラス繊維ろ紙を用いたときに、0.51.0L/minの吸引流量、1090%の相対湿度の条件下で、1段で90%以上のオゾンを捕集できることが示された。更に、オゾン、窒素酸化物自動測定器とフィルターパックを用いた野外並行測定により、測定条件と測定値の妥当性検証を行った。異なる厚みを持つNO2捕集フィルターを用いたフィルターパック測定値と窒素酸化物自動測定器の測定値を比較したところ、厚さ0.38mmのガラス繊維ろ紙を用いたときに、1段で90%以上のオゾンを捕集できることが示された。前記で決定したオゾン、NO2捕集条件において、自動測定器とフィルターパックの並行測定を2014年夏季、秋季、20142015年冬季に行った。両者の測定値について非常に良い相関(R>0.83)が得られ、自動測定器の測定値を基準としたオゾン平均捕集効率は0.5 L/minでは約94%、1.0 L/minでは約82%であり、NO2平均捕集効率は0.5 L/minでは約89%、1.0 L/minでは約80%であった。以上の結果から、オゾンについては自動測定器と整合性の取れる測定法が確立され、NO2については干渉補正するとほぼ整合性が取れる結果が得られた。曝露チャンバーを用い、吸引流量、グリセリン含浸濃度、ろ紙の厚さの条件を変え、二酸化窒素を含む多成分測定条件を検討した。流量0.5L/min、グリセリン含浸濃度5%以上、厚さ0.38mmのガラス繊維ろ紙を用いたときに、1段で90%以上の二酸化窒素を捕集できることが示された。この条件でオゾン捕集用ろ紙と組み合わせたときの、アーティファクトの検討を行った。前段に二酸化窒素捕集用ろ紙を設置したときには、ほぼ全てのオゾンが前段で捕集された。従って、多成分測定を行うためには、粒子状物質、二酸化窒素、オゾンの順で試料捕集する必要のあることが明らかになった。

オゾン捕集用ろ紙に含浸している亜硝酸ナトリウム含浸ろ紙が、二酸化窒素測定に及ぼすアーティファクトは14ppb程であり、このアーティファクトは炭酸ナトリウム含浸ろ紙を用いることで除去できることが確かめられた。更に、炭酸ナトリウム含浸ろ紙による二酸化窒素の消失量についても調べた。最大で1ppb程度の二酸化窒素が消失される可能性のあるデータが得られ、遠隔地のような二酸化窒素濃度が低い地域での測定において、この消失による二酸化窒素過小評価の影響が大きい可能性があり、今後の検証が必要である。自動測定器とフィルターパックの並行測定の結果から、気象条件が測定値に与える影響について考察した。相対湿度70%以上の条件下では自動測定器とフィルターパック法の相関が非常に良く、90%以上のオゾン、二酸化窒素を捕集できていた。これは、相対湿度が高いほど捕集効率が良くなるという曝露チャンバー実験の結果と整合性の取れる結果となった。気温との相関については、オゾン、二酸化窒素について顕著な相関が見られなかったが、平均気温が30°C近くなるような極度に気温が高い条件では、ろ紙上の亜硝酸イオンが硝酸イオンに酸化され、捕集効率が100%を大幅に超える傾向が見られた。平成25年度27年度の研究でオゾン、二酸化窒素の試料ガスを、アクティブ型捕集器(フィルターパック)が設置された曝露チャンバーに導入し、大気測定のための最適条件を決定した。平成25年度に行った検討結果では、同一の捕集用ろ紙を4段直列に繋ぐことが必要であったので、多成分同時測定を行うための測定法の改善を平成26年度平成27年度に実施した。更に最適化された測定条件下で、オゾン、二酸化窒素についても自動測定器との並行測定により、測定妥当性および気象条件の影響を検討した。相対湿度が極端に低く、気温が極端に高い条件を除いて、両者の測定値が良好に一致し、オゾン、二酸化窒素、粒子状物質の多成分同時測定法が実大気測定に適応できることを実証した。これらの成果は第57回大気環境学会年会等で学会発表を行い、室内実験の結果については国際学術誌に投稿する予定である。また、関連研究についても学術誌に発表を行っており、着実な研究成果を挙げている。一方、炭酸ナトリウム含浸ろ紙による二酸化窒素の消失のアーティファクトが最大で1ppb程度起こりうる結果が得られた。遠隔地のような二酸化窒素濃度が低い地域での測定において、このアーティファクトによる二酸化窒素測定値の過小評価が大きい可能性が考えられるので、今後の検証および改善対策が必要である。また、自動測定器との野外並行測定による本研究で開発した方法の実証実験については、これまで新潟県の郊外地点で行ったのみであるが、研究分担者及び連携研究者との間で並行測定の準備が進められており、平成27年度に最適化した測定条件下で、北海道及び新潟県の都市地点、遠隔地点の測定所において平成28年夏季冬季に実施する予定である。以上の状況を鑑みて、本研究は研究目的に照らして、概ね順調に進展していると言える。国設新潟巻酸性雨測定局においてアクティブ型捕集器(フィルターパック)によるガスおよび粒子状物質の24時間もしくは1週間ごとのサンプリングを行い、各測定値の時間変動、相関プロットの一致性により実大気測定への適応性を検証した。オゾンに関しては1週間平均値が春季と秋季に高く、冬季に低い季節変動が見られた。自動測定機との相関に関しては、気温および相対湿度の影響を受けず良好な一致を示しており、通年を通して実大気測定に適応できることを示した。二酸化窒素および揮発性有機化合物については室内実験の検討が必要であり、実大気測定は実施しなかった。
「配慮<できる>身体」を育成するスポーツ教材についての実践的考察

本研究の目的は、「配慮<できる>身体」の育成を目指すスポーツ教材について実践的に考察することであった。シッティングバレーボール講習会への参加を機にチームに加入し、日々の練習や各種大会へ参加することを通して具体的な考察を行うことができた。プレーする人々へのアンケート調査も実施し、シッティングバレーを授業の教材として扱うために有益であり、とくに「座って移動することの難しさ」からは、シッティングバレーに独特の技能があり、それに慣れるための動きづくりが必要であることが明らかとなった。本研究の目的は、「配慮<できる>身体」の育成を目指すスポーツ教材について実践的に考察することである。本年度は、シッティングバレーボールの実践・情報収集を中心とし、以下14を実施する計画を立てた。1、「障害者スポーツ」において、「いつ」、「誰が」、「何に対して」、「何のために」「配慮」しているかについて、実践を通して明らかにする。2、シッティングバレーボールのプレー場面に生じている「配慮」を分析するための方法である「現象学的観点からの考察」をより厳密化するため、現象学の文献を講読、検討する。3、大学体育のバレーボール授業において、シッティングバレーを取り入れることによって何がどう変化するかの見通しを立てる。4、障害者スポーツに関連のある研究領域、活動団体からの情報収集及び意見交換を行う。1については、シッティングバレーボール講習会への参加を機にチームに加入した。日々の練習や各種大会へ参加することを通して具体的な考察が進んだと考えている。特にバレーボールとの相違点(スキル及びルール)が明らかとなり、教材化への下準備ができた。2については、1本の雑誌論文投稿及び2本の学会発表の際に関連文献を収集し検討を行った。しかし、考察方法の厳密化に関してはさらに議論が必要であるため、次年度も文献講読を継続したい。3については、大学体育のバレーボール授業について、関係領域の研究会にて報告を行う中で、他の研究者との議論を深めることができた。スポーッ実践における参加者間の技能差は、「配慮<できる>身体」を育成するために不可欠なものであるとの見通しを立てることができた。4については、「車椅子バスケットボール」を社会学的観点から研究する研究者との情報交換を行い、博士論文等の貴重な資料を得ることができた。中でも本研究においては、具体的なスポーツ種目として「シッティングバレーボール」に着目し、その教材としての意義を、運動実践を通して考察した。さらには実際の授業を実施することによって、具体的な教材化の可能性について考察した。21年度前期には、大学体育の授業へのシッティングバレーボールの応用を試み、改善プログラムを作成するための資料を得た。また、シッティングバレーボールチームの練習や各種大会に参加し、プレー場面を撮影しつつ実際に何が生じているかについて分析を行った。撮影に際しては、多数の日本代表選手が所属するチームから、日々地域の体育施設等で練習しているチームまで、幅広く依頼することができた。さらに、プレーする人々へのアンケート調査も実施し、申請者自身の分析の妥当性について検討する補助資料を得ることができた。これらの資料は、どれもシッティングバレーを授業の教材として扱うために有益であり、とくに「座って移動することの難しさ」からは、シッティングバレーに独特の技能があり、それに慣れるための動きづくりが必要であることが明らかとなった。このことは、シッティングバレーがまさに競技スポーツであることを物語っている。しかし、「座る」ことによって、怪我や障害を抱えて参加していることを保留し、「一緒にプレーする」ことを可能とすることも明らかとなった。シッティングバレーは、「すべての人を受け入れるためのスポーツ」と、「競技スポーツ(エリートスポーツ)」の中間点に位置するスポーツであると言える。今後、具体的な授業づくりを継続していきたい。なお、テーマに関わって原著論文を作成・投稿し、現在査読中である。
鼓室硬化症における石灰化機序の解明

1)鼓室硬化症患者の手術時に、患者さん本人あるいは保護者の承諾を得て採取した鼓膜および鼓室粘膜15例をHE染色にて光学顕微鏡下に観察した。鼓膜の石灰化は、固有層に存在し、周辺には多数の線維芽細胞が見られた。現在、それらの標本をグルタールアルデヒドに固定しており透過型電子顕微鏡を用いて、細胞成分および石灰化の状況、特にCa^<++>の分布を解析する予定である。コントロールとして患者さん本人および保護者の同意を得られた慢性単純穿孔性中耳炎患者の鼓膜および鼓室粘膜15例を採取し比較をする予定である。2)ウィスター系ラット(150200g)の右鼓膜に鼓膜切開刀で鼓膜穿孔を起こし、同時にエンドトキシン、リポタイコ酸を中耳腔に注入し、2週間、1カ月、3カ月、6カ月後に側頭骨を取り出した。単純に穿孔を起こしただけのものは2週間後には穿孔は閉鎖し、光学顕微鏡下の観察では左右の変化は認めなかった。エンドトキシンおよびリポタイコ酸注入例も3カ月後には鼓膜は閉鎖し、様々な炎症反応は見られたものの石灰化は認められなかった。現在鼓膜処置後12カ月が経過するラットの飼育中である。さらにこれらの検体をグルタールアルデヒドで固定中であり電子顕微鏡で観察する予定である。なお今後はエンドトキシン、リポタイコ酸による刺激を繰り返し行う必要があると考えている。さらに様々な物質による刺激を試み、石灰化が生じるかどうかを検討する必要がある。
水分変化過程における木材のクリ-プ機構とその抑制法に関する研究

1.水分変化過程における木材の曲げクリ-プの応力依存性とそのクリ-プに伴い発生するアコ-スティック・エミッション(AE)特性について検討した。吸湿・脱湿過程における含水率変化量とクリ-プひずみとの関係を指数式に適合させた場合の指数の次数は、吸湿過程では応力レベル高くなるほど、高い値を示したが、脱湿過程では応力レベルに関係なく1より若干高い値を示した。水分一定状態に比べて吸湿・脱湿・過程では発生するクリ-プは非常に大きいが、一般に負荷応力に対するその増加割合が増大し始めると、AEが発生することが認められた。気乾状態と吸湿過程では応力レベル50%以上でAEの発生がみられ、高含水率状態と脱湿過程では応力レベル35%でもAEが発生した。クリ-プ破壊に至る場合は、破壊の直前あるいは少し前から多数のAEが発生した。しかし、AEの発生数はクリ-プひずみ量との密接な関係は認められず、クリ-プ破壊しない場合は、AEは断続的に発生した。2.水分変化過程における木材の曲げクリ-プを抑制するために、アセチル化処理を施したラミナを配した3層構成集成材の曲げクリ-プに対するアセチル化したラミナの抑制効果をそのラミナを配した層と関連させて検討した。吸湿過程および脱湿過程において圧縮側層と引張り側層に処理ラミナを配した集成材は、無処理ラミナからなる集成材に比べてクリ-プ量の減少を示し、含水率変化量の減少に伴う抑制効果が認められた。引張り側層に処理ラミナを配した集成材は、吸湿・脱湿過程とも最もクリ-プ量が大きく、圧縮側層にそのラミナを配した集成材は、脱湿過程ではクリ-プ量が最も小さく、吸湿過程では無処理ラミナからなる集成材よりも少し大きかった。この現象はアセチル化したラミナと無処理ラミナの収縮・膨潤量の差異によって生じるそりおよび両者のラミナの引張りクリ-プと圧縮クリ-プの差異から説明できる。1.水分変化過程におけるスギ材の曲げクリ-プとそれに伴い発生するアコ-スティック・エミッション(AE)特性について検討した結果、低応力レベルではAEの発生は殆ど認められず、高応力レベルでみられ、特にクリ-プ破壊に至る過程で多量のAEの発生が認められた。AEは不連続的に発生し、水分一定状態でAEが短時間に多く発生した後、クリ-プ量が著しく増加する傾向がみられた。しかし、含水率一定、吸湿、脱湿によるAEの発生の明確な差異は認められなかった、また、水分変化過程におけるクリ-プ量と水分変化量との関系は、負荷応力に依存することが見出された。2.水分変化過程における木材素材と集成材の曲げクリ-プ特性について検討した結果、スギ材を用いた集成材の場合、吸湿過程のクリ-プ量は含水率変化量の増加に伴い直線的に増加するのに対して、素材の場合、徐々にその増加割合が減少する傾向がみられた。ブナ材を用いた集成材と素材の場合とも、含水率変化量の増加に伴いそのクリ-プ量の増加割合が増し、集成材のクリ-プ量の方が僅かに大きかった。脱湿過程のクリ-プ量と含水率変化量との間には、いずれの場合も直線関係が認められ、両樹種とも集成材の方がクリ-プ量が僅かに大きかった。

3.水分変化過程における集成材の曲げクリ-プに対するラミナをアセチル化処理することによる抑制効果を調べた結果、上中下層および上下層のラミナをアセチル化処理した集成材の場合、ほぼ同じ程度顕著な抑制効果がみられ、集成材では上下層ラミナの含水率変化を抑えれば、曲げクリ-プがかなり抑制できることがわかった。4.双極子配向の脱分極に基づく熱刺激電流のピ-クは、水分一定よりも脱湿過程で分極したものの方が高く、高温側に現われ、後者の方が分子運動の活性度が高いことがわかった。1.水分変化過程における木材の曲げクリ-プの応力依存性とそのクリ-プに伴い発生するアコ-スティック・エミッション(AE)特性について検討した。吸湿・脱湿過程における含水率変化量とクリ-プひずみとの関係を指数式に適合させた場合の指数の次数は、吸湿適程では応力レベル高くなるほど、高い値を示したが、脱湿過程では応力レベルに関係なく1より若干高い値を示した。水分一定状態に比べて吸湿・脱湿過程では発生するクリ-プは非常に大きいが、一般に負荷応力に対するその増加割合が増大し始めると、AEが発生することが認められた。気乾状態と吸湿過程では応力レベル50%以上でAEの発生がみられ、高含水率状態と脱湿過程では応力レベル35%でもAEが発生した。クリ-プ破壊に至る場合は、破壊の直前あるいは少し前から多数のAEが発生した。しかし、AEの発生数はクリ-プひずみ量との密接な関係は認められず、クリ-プ破壊しない場合は、AEは断続的に発生した。2.水分変化過程における木材の曲げクリ-プを抑制するために、アセチル化処理を施したラミナを配した3層構成集成材の曲げのクリ-プに対するアセチル化したラミナの抑制効果をそのラミナを配した層と関連させて検討した。吸湿過程および脱湿過程において圧縮側層と引張り側層に処理ラミナを配した集成材は、無処理ラミナからなる集成材に比べてクリ-プ量の減少を示し、含水率変化量の減少に伴う抑制効果が認められた。引張り側層に処理ラミナを配した集成材は、吸湿・脱湿過程とも最もクリ-プ量が大きく、圧縮側層にそのラミナを配した集成材は、脱湿過程ではクリ-プ量が最も小さく、吸湿過程では無処理ラミナからなる集成材よりも少し大きかった。この現象はアセチル化したラミナと無処理ラミナの収縮・膨潤量の差異によって生じるそりおよび両者のラミナの引張りクリ-プと圧縮クリ-プの差異から説明できる。
室内気流設計のための気流感メカニズムに関する基礎的研究

本研究は,主に1バーチャルマネキンを用いた人体周辺の気流解析,23Dプリンタで再現した人体模型での皮膚表面の風圧測定,3サーマルマネキンによる皮膚表面の熱移動量の把握、4被験者による気流に対する主観評価を行う。それぞれの結果を比較し各手法の精度検証を行いながら,気流感に関する物理量及び心理量の基礎データを蓄積する。なお,対象気流は,時間的に変動のない定常気流のみならず,時間変動する非定常気流に対しても評価を行う。
大腸菌のテトラサイクリン耐性克服のための芳香族ポリケタイド生合成解明と応用研究

研究代表者においては、アクチノロジン(ACT)生合成の関連化合物及びテトラサイクリン類のUHPLC分析条件を新規に検討した。ODS系コアシェルカラムを選択したところ、ACT関連化合物はテーリングが、テトラサイクリン類はリーディングが酷かった。テトラサイクリン類に関しては移動相にギ酸を10%まで添加することでピーク形状の改善が認められたものの、分離能は不十分であった。学会、論文等の調査結果から、メタルフリーカラムの使用でピーク形状及び分離能が改善する事例が多いことが判明した。一方、研究分担者においては、ACT生合成に関わるエノイル還元酵素ActVI-2と、その相同性酵素で機能未知のActVI-4を、C-末His-tag融合タンパクとして発現、精製することに成功した。ActVI-2の失活速度が想定以上に速かったが、迅速に精製し・アッセイすることで基質特異性について検討できた。以前の我々の研究から推定されていたActVI-2の機能、即ち「生合成中間体(S)-DNPAを基質とし14,15位の二重結合を立体特異的に還元し6-deoxy-dihydrokalafungin (DDHK)を生成する」ことを実験的に証明できただけでなく、補酵素としてNADHではなくNADPHを要求すること、(S)-DNPAのエナンチオマーである(R)-DNPAも基質として認識し、同様に立体特異的還元し3-epi-DDHKを生成することを始めて示すことができた。これに対してActVI-4は、(S)-DNPAをはじめとする基質となり得る化合物を一切還元しなかったが、ACT生合成のシャント化合物の一つ、DHK-OHの誘導体の構造を変化させる可能性が示唆された。変化後の化合物の構造については、今後さらなる検討を要する。研究代表者が初年度に所属を異動したことから、初年度に計画していた実験を十分に行うこと多できなくなった。加えて、新設の研究室であるため備品・設備の整備に時間がかかったこと、他の業務へのエフォートが大きいことから、全体的に研究の進捗が遅れている。とはいえ、研究課題申請時に連携研究者であった市瀬浩志教授(武蔵野大学)に研究分担者になっていただいたことで、本年度の大きな成果であるActVI-2及びActVI-4の精製と酵素機能の検討を達成できた。本成果は、当初の予定では初年度にされる予定であったので、2年目にさらに大きく進捗が遅れた、ということはないと考える。武蔵野大学市瀬教授には2年目に研究分担者となっていただいたが、他の研究課題との都合により3年目は研究分担者を解除することとなった。ただし、研究協力者になっていただく。研究代表者が異動したことで、計画していた実験の大半が異動先でできない状況ではあるが、研究代表者が武蔵野大学の客員准教授であることも加味し、武蔵野大学の設備・備品で実行予定であった実験は、代表者が武蔵野大学にて実行させていただけるよう調整済みである。目的の生合成酵素ActVI-2, ActVI-4の発現・精製系を構築できたので、当該酵素2種に加え、酸化酵素系ActVA-5/ActVBについて、テトラサイクリン類を基質とするアッセイや、これら酵素の複合酵素系での機能検証、反応条件最適化及び酵素間相互作用についての検討を予定通り進める。また、ACT特異的排出ポンプActAのリプレッサーであるActRについても、発現系の構築を進めていきたい。平成29年度に予定した実験計画は、1.二成分系フラビン依存型モノオキシゲナーゼとして機能するActVA-5/ActVBの機能解析、2.エノイル還元酵素ActVI-2及びその相同性酵素ActVI-4の発現系確立、であり、いずれも放線菌由来芳香族ポリケタイド抗生物質アクチノロジンの生合成解明とin vitroでの生合成再現を目的としたものである。このうち1について、モデル基質を用いて6位酸化反応を指標に反応pH、酵素濃度、補酵素濃度等検討して反応条件を最適化した後、本来の基質DDHKを用いて更に検討した結果、基質の溶解補助剤として用いていたethyleneglycol monomethyleter (EGME)が反応溶液に30%程度含まれると6位水酸化で反応が止まり、ごく少量に減量すると6, 8位の連続水酸化反応が進行することを見いだすことに成功した。さらに種々検討し、1) 8位水酸化の進行前に6位水酸化反応生成物が酵素ActVA-5から一度脱離すること、2) EGME高濃度存在下ではヒドロキノン体がキノン体に酸化される傾向があること、一方、3) EGMEが少ない条件で本酵素系はキノン体をヒドロキノンに還元する活性も有する可能性が強く示唆された。2については、ActVI-2、ActVI-4ともにN末又はC末にHis-Tagを付加した酵素発現用プラスミドの構築を進めたが、C末付加はPCR産物をクローン化する際、1塩基の欠落及びフレームシフトが起こり構築に失敗した。両酵素についてN末付加体発現用プラスミドを構築できたが、予試験的に発現解析したところ、発現量が少ないうえ、可溶化していないことが判明した。平成29年度に予定した実験計画1.二成分系フラビン依存型モノオキシゲナーゼとして機能するActVA-5/ActVBの機能解析、2.エノイル還元酵素ActVI-2及びその相同性酵素ActVI-4の発現系確立、のうち、1については概ね順調に進展したものの、基質調製の困難さから、酵素学的パラメーターの算出などまではいたらなかった。

一方2については、PCR産物のクローニングにおいて予想外の1塩基欠落によるフレームシフトが発生し、プラスミド構築できたN末融合酵素発現系も、発現量が少ない上に可溶化せず、用いるベクター並びに構築方法の再検討が必要となった。研究代表者(田口)が平成30年1月1日付で異動となり、また業務の都合上、異動先での生合成研究、特に遺伝子組換え実験が行えないことから実験計画2の再検討が行えず、結果、本研究課題の進捗がやや遅れることとなった。研究代表者においては、アクチノロジン(ACT)生合成の関連化合物及びテトラサイクリン類のUHPLC分析条件を新規に検討した。ODS系コアシェルカラムを選択したところ、ACT関連化合物はテーリングが、テトラサイクリン類はリーディングが酷かった。テトラサイクリン類に関しては移動相にギ酸を10%まで添加することでピーク形状の改善が認められたものの、分離能は不十分であった。学会、論文等の調査結果から、メタルフリーカラムの使用でピーク形状及び分離能が改善する事例が多いことが判明した。一方、研究分担者においては、ACT生合成に関わるエノイル還元酵素ActVI-2と、その相同性酵素で機能未知のActVI-4を、C-末His-tag融合タンパクとして発現、精製することに成功した。ActVI-2の失活速度が想定以上に速かったが、迅速に精製し・アッセイすることで基質特異性について検討できた。以前の我々の研究から推定されていたActVI-2の機能、即ち「生合成中間体(S)-DNPAを基質とし14,15位の二重結合を立体特異的に還元し6-deoxy-dihydrokalafungin (DDHK)を生成する」ことを実験的に証明できただけでなく、補酵素としてNADHではなくNADPHを要求すること、(S)-DNPAのエナンチオマーである(R)-DNPAも基質として認識し、同様に立体特異的還元し3-epi-DDHKを生成することを始めて示すことができた。これに対してActVI-4は、(S)-DNPAをはじめとする基質となり得る化合物を一切還元しなかったが、ACT生合成のシャント化合物の一つ、DHK-OHの誘導体の構造を変化させる可能性が示唆された。変化後の化合物の構造については、今後さらなる検討を要する。研究代表者が初年度に所属を異動したことから、初年度に計画していた実験を十分に行うこと多できなくなった。加えて、新設の研究室であるため備品・設備の整備に時間がかかったこと、他の業務へのエフォートが大きいことから、全体的に研究の進捗が遅れている。とはいえ、研究課題申請時に連携研究者であった市瀬浩志教授(武蔵野大学)に研究分担者になっていただいたことで、本年度の大きな成果であるActVI-2及びActVI-4の精製と酵素機能の検討を達成できた。本成果は、当初の予定では初年度にされる予定であったので、2年目にさらに大きく進捗が遅れた、ということはないと考える。実験計画1については、まず基質DDHKの収率向上のため、前駆体(S)-DNPAの還元反応条件や後処理の方法について再検討する。十分な量の基質DDHKを調製後、真の基質を用いての反応条件最適化を行い、酵素学的パラメーターの算出を試みる。実験計画2については目的酵素の発現量の向上、可溶化促進のため、PCR条件から再検討する必要があるが、代表者が行うのは困難な状況である。
内部熱回収スクリーンによる高温断熱層の有効エネルギ抽出システムの研究

1.多孔質スクリーンはアルミニウム製で厚さ2mm、高さ23.5mm、長さ310mmのものを等間隔に数枚平行に並べ、電子恒湿循環装置により一定湿度に設定された循環水をその内部に流入・流出させた。2.実験によれば、熱抽出が局所規模の対流およびその対流の揺動を生じ易いことが観察された。この揺動は、局所的な対流に対し密度の異なるもう一方の層からの流れの引き込み及びスクリーン通過時冷却(加熱)の効果により、下降(ないし上昇)プルームの浮力が変化するため、冷却面(加熱面)に形成される熱境界層の不安定化をもたらすことによる。3.熱抽出に伴う対流パターン、湿度分布、速度分布の変化、そしてその際の不可逆損失の低下に関して大型計算機による数値解析を行った。熱抽出を行うと、実験で観察されたように、水平方向湿度分布の均一化のため対流パターンは局所規模になり易い傾向にあり、また条件によっては、時間的に規則性のある振動的変化を生じることも確認できた。4.下から加熱された均質多孔質層内の二次元対流に対し、エントロピ生成、不可逆損失の解析的表現を求め、数値解析結果と比較した。熱伝達最大の条件とエントロピ生成最大の条件が一致することがわかった。5.熱抽出を行うと局所規模の対流が生じるので、「全層対流」と「局所対流」の形での対流発生、その温度分布、速度分布、熱伝達特性に及ぼす熱抽出の影響を解析的に検討して、数値解析及び実験と比較した。抽出層の熱伝達、抽出層厚さの影響を含むにもかかわらず、数値解析における抽出温度レベルのエントロピ生成に及ぼす影響は、理論解析に近い値を示し、また温度の振動的変化は最適抽出温度θ_<Eopt>近傍では消失し、温度レベルのずれが大きくなるにつれて振動の周期が短くなる。6.以上により、断熱層内熱移動と流体摩擦に伴う不可逆損失に、熱抽出の基本的パラメタが、いかに依存するかをほぼ計画通り解明できた。
抗菌蛋白βディフェンシン発現細胞によるS.mutans増殖抑制効果の検索

本年度の研究概要として、本研究を遂行するにあたって基礎的データーとなる、生体におけるβディフェンシンの発現および局在の解析を以前から行ってきたが、本研究費を用い「小児歯肉におけるヒトβディフェンシン-1、-2、-3 mRNAの発現および局在」という実験を完了させ、小児歯科学雑誌第42巻1号2004に掲載が決まっている。本研究の進行状況としては、human βディフェンシン3発現KB細胞のみならず、βディフェンシン1発現KB細胞およびβディフェンシン2発現KB細胞をも作製し、これらの細胞の特性を検索した。βディフェンシン発現KB細胞はコントロールと比較し有意に細胞増殖および細胞遊走の性質を抑制し、これらの細胞増殖はCyclin dependent kinase inhibitorであるp21/waflおよびp27/kiplに制御されていること示し、第83回歯科国際学会(ハワイ3/103/13,2004)で発表した。βディフェンシン蛋白は単に抗菌作用のみならず免疫系に深くかかわることが最近報告されているが、本研究により細胞増殖にも関与することが示唆された。本年度はβディフェンシンの特性について検索し成果を得たが、来年度はう蝕原生菌S.mutansへの抗菌作用と、それに伴う細胞の特性を検索しう蝕予防へ応用するための成果を得たいと考えている。またヒト口腔上皮由来細胞株で発現しているβディフェンシン蛋白をsiRNAを用いてknock downし、βディフェンシンと細胞増殖の関係を検索する予定である。
鋼・コンクリート複合構造ずれ止めの数値モデルの構築と結合部の性能照査

従来行われてきたせん断試験において避けることのできなかった界面端部で生じる応力集中を回避するためのねじりせん断試験を提案した.さらに,提案したねじりせん断試験により,鋼・コンクリート界面の付着強度を評価した.本試験により,界面端部の応力集中が回避され,既往の研究より大きい,界面が本来有していると思われる付着強度が得られた.また,コンクリートの圧縮強度を変化させることによって,圧縮強度と付着強度の関係を明らかにした.従来行われてきたせん断試験において避けることのできなかった界面端部で生じる応力集中を回避するためのねじりせん断試験を提案した.さらに,提案したねじりせん断試験により,鋼・コンクリート界面の付着強度を評価した.本試験により,界面端部の応力集中が回避され,既往の研究より大きい,界面が本来有していると思われる付着強度が得られた.また,コンクリートの圧縮強度を変化させることによって,圧縮強度と付着強度の関係を明らかにした.近年,簡易な設計が困難な鋼コンクリート複合構造の結合部など複雑な構造を有する部位において,有限要素解析による直接的な性能照査に対する要望が高まっている.結合部の有限要素解析による直接的な照査を行うためには,異種材料界面における付着・剥離・摩擦といった現象を精緻に再現可能な数値モデルが必要となる.これまで,界面の数値モデルを構築するために,押し抜きせん断試験などの要素試験によって付着特性の評価が行われているが,これらの試験においては界面せん断方向の境界部分で応力集中が生じることから,付着力やせん断力-ずれ変位関係が正確に計測できていない可能性がある.そこで本年度の研究では,そのような境界面の影響を極力排除した要素試験を考案し,付着力およびせん断力-ずれ変位関係の定量評価を試みた.そのために,円柱型の鋼材の周面を,直方体のコンクリートが覆った試験体を製作した.コンクリートを固定した上で,丸鋼を円周方向に回転させることで,丸鋼の側面とコンクリート間のずれ変位を測定する.この試験方法では,境界面が連続となるため,界面せん断方向の境界が存在しないことから,純粋な付着力が測定できると考えた.試験の結果,付着応力は,支圧応力OMPaにおいて0.29MPa,支圧応力1MPaにおいて0.72MPaとなり,従来の押し抜きせん断試験の結果の25%から200%ほど大きな付着応力が計測された.このことから,考案した試験により本来有している付着力とずれ変位の挙動を正確に測定できたと考えられる.異種材料間の界面における支圧・付着・摩擦挙動を考慮した複合構造の有限要素接触解析を行うために,もっとも一般的な分子間ポテンシャルであるLennard-Jonesポテンシャルを用いた界面の付着・摩擦モデルを提案した.従来の完全弾塑性モデルと本研究で提案したモデルを用いて,鋼とコンクリートの押し抜き試験の解析を行った.これらの結果を実験結果と比較することにより,本研究で提案する付着・摩擦モデルは従来の完全弾塑性モデルに比べて以下のような利点を有することが確認できた.1.本研究で提案したモデルは,従来の完全弾塑性モデルに比べ,実験を定性的によく再現することができた.2.従来の完全弾塑性モデルでは,要素分割や荷重ステップなどの付加的な解析条件により解析結果が変化していたのに対して,本研究で提案したモデルでは付加的な解析条件が結果に及ぼす影響は非常に小さかった.鋼コンクリート間の微視的な付着強度を正確に測定するために,従来行われてきたせん断試験において避けることのできなかった界面端部で生じる応力集中を回避するためのねじりせん断試験を提案した。さらに,提案したねじりせん断試験により,鋼・コンクリート界面の付着強度を評価した.本試験により,界面端部の応力集中が回避され,既往の研究より大きい,界面が本来有していると思われる付着強度が得られた.また,コンクリートの圧縮強度を変化させることによって,圧縮強度と付着強度の関係を明らかにした.鋼コンクリート複合構造の設計において結合部の結合部における応力伝達機構は,合成桁のような比較的単純な構造を除いて,明らかになっていない.そのため,現在では非線形有限要素解析による結合部の性能照査に対する期待が高まっている.この非線形有限要素解析には,鋼コンクリート界面の精緻な数値モデルの構築が必要とされる.界面の力学特性の解明と数値モデル構築のために,従来は押し抜きせん断試験による研究が行われてきたが,界面境界部でのせん断応力の集中により,界面の力学特性が正確に評価できないことが問題となっていた.そこで,本研究では,従来行われてきた押し抜きせん断試験において避けることのできなかった界面端部で生じる応力集中を回避するため,コンクリートブロックとその中心に埋め込まれた鋼円柱からなる,ねじりせん断試験を提案した.モルタルコンクリート強度および支圧応力をパラメータとして,計31体の試験体に対して提案したねじりせん断試験を行い,鋼コンクリート界面の付着強度を評価した.この結果,付着強度はコンクリート強度の1/20程度であることがわかった.これは既往の押し抜きせん断試験の結果の47倍程度の大きさであった.このことから,本試験では界面端部の応力集中が回避され,既往の研究より大きい,界面が本来有していると思われる付着強度を得ることができたと結論付けられる.これらは,非線形有限要素解析に基づく鋼・コンクリート複合構造の結合部の性能照査手法に欠かせないものである.
地下岩盤構造物建設時の地下水挙動予測手法の開発に関する研究

高レベル放射性廃棄物の地層処分に関する天然バリアについて,シミュレーションにて岩盤の性能を検討するために,亀裂ネットワークによるモデル化技術の構築が重要となる.この技術の確立のためには,岩盤における亀裂特性について調査研究を行い,その結果および考察をモデル化技術に反映させることが必要となる.本研究では,これまで調査研究を行ってきた岩盤の亀裂特性の情報に加えて,節理や断層を含んだ不連続面の特性を幅広く精査することで亀裂特性を明らかにし,亀裂ネットワークモデルの信頼性を評価する手法を開発した.具体的には次の通り.・日本全国のトンネルや大規模地下空洞(地下発電所や地下備蓄基地)にて観察された亀裂データを収集・整理し,その中の3サイトでのデータについて亀裂解析を実施することにより,他地域における花崗岩の亀裂特性ならびに花崗岩以外の岩種における亀裂の方向性や大きさなどについて,その特性を明らかにした.・亀裂の方向性に関して,花崗岩以外の岩種では亀裂に方向性が認められないが,花崗岩地域では互いに直交する方向に亀裂が卓越することが確認された.・我が国の亀裂のトレース長に関しては,数m数100mのスケールにおいては,トレース長の累積頻度が岩種にかかわらず対数軸上でほぼ一直線に分布することが確認された.これより,亀裂の大きさはべき乗分布に従うことの妥当性が検証された.この結果より,核種移行の支配的な経路となる岩盤内の亀裂特性の把握および,それに基づく亀裂ネットワークモデルの構築技術を確立することが可能となった.高レベル放射性廃棄物の地層処分に関する天然バリアについて,シミュレーションにて岩盤の性能を検討するために,亀裂ネットワークによるモデル化技術の構築が重要となる.この技術の確立のためには,岩盤における亀裂特性について調査研究を行い,その結果および考察をモデル化技術に反映させることが必要となる.本研究では,これまで調査研究を行ってきた岩盤の亀裂特性の情報に加えて,節理や断層を含んだ不連続面の特性を幅広く精査することで亀裂特性を明らかにし,亀裂ネットワークモデルの信頼性を評価する手法を開発した.具体的には次の通り.・日本全国のトンネルや大規模地下空洞(地下発電所や地下備蓄基地)にて観察された亀裂データを収集・整理し,その中の3サイトでのデータについて亀裂解析を実施することにより,他地域における花崗岩の亀裂特性ならびに花崗岩以外の岩種における亀裂の方向性や大きさなどについて,その特性を明らかにした.・亀裂の方向性に関して,花崗岩以外の岩種では亀裂に方向性が認められないが,花崗岩地域では互いに直交する方向に亀裂が卓越することが確認された.・我が国の亀裂のトレース長に関しては,数m数100mのスケールにおいては,トレース長の累積頻度が岩種にかかわらず対数軸上でほぼ一直線に分布することが確認された.これより,亀裂の大きさはべき乗分布に従うことの妥当性が検証された.この結果より,核種移行の支配的な経路となる岩盤内の亀裂特性の把握および,それに基づく亀裂ネットワークモデルの構築技術を確立することが可能となった.
ナメクジの嗅覚―味覚連合学習系における神経回路可塑性の解明

ナメクジは高度な嗅覚一味覚連合学習を行う.この学習は前脳によって担われていると考えられているが,そのメカニズムはほとんど明らかになっていない.本研究は,実験条件のコントロールが容易なin vitro中枢神経標本において嗅覚学習が可能な実験条件を見いだし,それを用いて学習の神経機構を解析することを目的としている.単離脳-触角標本を用いて,すでに同定した外套膜収縮運動神経(p-VN)の活動を忌避性行動の指標として記録し,触角に対する匂い刺激を条件刺激,唇神経束の電気刺激を無条件刺激として,両者を同時に与えることにより条件付けを行ってp-VNの活動性の変化が生じるかどうかを調べた.その結果,条件付け前には条件刺激に対してp-VNの発火はほとんど生じなかったが,条件付け後には条件刺激に対してp-VNの発火が有意に増大した.これは,in vitro標本において嗅覚学習が可能であることを示した初めての結果である.そこで次にin vitro学習系を用いて,条件付け前後での前脳神経活動の変化を検討した.前脳神経は同期して膜電位振動を生じており,その振動数が匂い刺激によって変化することが知られている.この振動数変化の程度は,条件付け前に比べて条件付け後では顕著に増大した.このことは,前脳の膜電位振動が学習によって引き起こされる運動出力の変化と関係していることを示唆している.ナメクジは高度な嗅覚一味覚連合学習を行う.この学習は前脳によって担われていると考えられているが,そのメカニズムはほとんど明らかになっていない.本研究は,実験条件のコントロールが容易なin vitro中枢神経標本において嗅覚学習が可能な実験条件を見いだし,それを用いて学習の神経機構を解析することを目的としている.単離脳-触角標本を用いて,すでに同定した外套膜収縮運動神経(p-VN)の活動を忌避性行動の指標として記録し,触角に対する匂い刺激を条件刺激,唇神経束の電気刺激を無条件刺激として,両者を同時に与えることにより条件付けを行ってp-VNの活動性の変化が生じるかどうかを調べた.その結果,条件付け前には条件刺激に対してp-VNの発火はほとんど生じなかったが,条件付け後には条件刺激に対してp-VNの発火が有意に増大した.これは,in vitro標本において嗅覚学習が可能であることを示した初めての結果である.そこで次にin vitro学習系を用いて,条件付け前後での前脳神経活動の変化を検討した.前脳神経は同期して膜電位振動を生じており,その振動数が匂い刺激によって変化することが知られている.この振動数変化の程度は,条件付け前に比べて条件付け後では顕著に増大した.このことは,前脳の膜電位振動が学習によって引き起こされる運動出力の変化と関係していることを示唆している.
栄養成分による神経変性疾患の防御に関する研究

脳を短時間の虚血状態にすることにより、海馬の神経細胞が選択的に脱落することが知られており、この神経細胞死はカルパイン、カテプシンB、Lといった細胞内プロテアーゼの活性化が引き金となることが明らかとなっている。本研究では、ラットの虚血による神経細胞死を主に用い、蛋白質・アミノ酸栄養による生体レベルでの神経細胞死の防御効果について検討したところ、システイン摂取により細胞内プロテアーゼの活性化を抑制する傾向は見られたが、神経組織の維持や記憶・学習能力の維持までは効果を見いだすことはできなかった。【目的】これまでに脳を短時間の虚血状態にすることにより、海馬のCA-1領域の神経細胞が選択的に脱落することが明らかとなっている。この虚血に対する神経細胞の脆弱性を示す典型的実験モデルは「遅発性神経細胞死」として知られており、カルパイン、カテプシンB、Lといった細胞内プロテアーゼの活性化が関与していることが明らかとなりつつある。本研究では、脳老化のモデルとしてこの一過性虚血による神経細胞死を用い、蛋白質・アミノ酸栄養による神経細胞死への防御効果について検討した。【方法と結果】8週齢Wistar系雄性ラットをAIN-93G組成に基づいた20%カゼイン飼料で4日間予備飼育した後、体重により2群に分け、20%カゼイン飼料あるいは20%カゼイン飼料に1.5%のシステインを添加した飼料を与え飼育した。それぞれの飼料による飼育開始後7日目に5分間の脳虚血を行った。5分後血液を再還流させ、虚血から12時間後、24時間後及び72時間後に脳を摘出し、海馬を採取した。全脳重量はカゼイン群とシステイン添加群ともに虚血12時間後、24時間後と72時間後で大きな変化は見られず、群間で有意差は見られなかった。また海馬重量についてもカゼイン群とシステイン添加群で大きな差は見られなかった。カルパイン及びカテプシンB、Lの活性を測定したところ、システイン添加群で活性の低下する傾向が見られた。現在それぞれのプロテアーゼについてm-RNA発現量を測定しているところである。また、海馬の組織切片を作成し、神経細胞の組織学的観察も合わせて行っており、21年度も解析を続ける予定としている。これまでに脳を短時間の虚血状態にすることにより、海馬の神経細胞が選択的に脱落することが知られており、この神経細胞死はカルパイン、カテプシンB、Lといった細胞内プロテアーゼの活性化が引き金となることが明らかとなっている。本研究では、脳老化のモデルとしてラットの虚血による神経細胞死を主に用い、栄養条件、特に蛋白質・アミノ酸栄養による生体レベルでの神経細胞死の防御効果について解明することを目的として行った。本年度は前年度に得られた結果を基に、前年度までに達成できなかった計画について検討した。虚血曝露後のラット脳海馬を組織染色にて形態観察を行ったところ、カゼイン飼料群ならびにシステイン添加飼料群共に虚血による海馬組織の萎縮が観察されたが、萎縮の程度は両群間に大きな差は認められなかった。また、海馬は知的活動や運動能力に大きく関与している組織であるため、記憶・学習試験は海馬の機能維持を評価するのに適した試験であると思われる。そこで記憶・学習試験としてMorris水迷路試験を用いたが、システイン添加により記憶の保持が高くなる傾向は見られたものの、有意差が見られるほどの顕著な差ではなかった。以上の結果から、本研究における蛋白質・アミノ酸栄養による虚血神経細胞死への防御効果について総合的に評価するとシステイン摂取により細胞内プロテアーゼの活性が低下する傾向は見られるが、その効果は小さく、今回はその後の組織観察や行動解析にまでは効果を見いだすことはできなかった。
多孔質球状タンニン樹脂吸着剤の各種クロマトグラフィー用樹脂への変換

市販ミモザタンニン粉末に含まれる非タンニン成分を除くために、市販タンニンをアルカリで処理することによって非タンニン成分を加水分解した後、酢酸エチルでタンニンを抽出精製した。精製タンニンの水溶液とホルムアルデヒドとの反応により、多孔質性の異なる無処理球状タンニン樹脂(タンニン濃度38.0%、43.5%、50.0%)を調製した。また、この精製タンニンのスルホン化物、カルボキシル化物、アミノ化物、およびトリクロロ酢酸によってフラボノイド骨格のベンジルエーテル環を解裂したトリクロロ酢酸処理タンニンを調製し、これらの前処理タンニンとホルムアルデヒドとの反応によりそれぞれ38.0%濃度の樹脂を調製した。上記各種タンニン樹脂のうち無処理タンニンからの球状樹脂を用いて、現在、タンパク質あるいはフェノール樹脂を試料としてサイズ排除クロマトグラフィー用樹脂としての性能についての検討を行っている。すなわち、種々のpHあるいはイオン強度の緩衝溶液に溶解したタンパク質やフェノール樹脂を、カラムに充填した球状樹脂に対して注加し、同じ緩衝溶液を溶離液として流下させた。タンパク質は、一部樹脂に吸着される為分画条件の検討が必要であるがフェノール樹脂は分画できる。今後、ほかの樹脂によるイオン交換あるいはアフィニティークロマトグラフィーなどについても検討する。なお、この研究費交付認定が10月下旬だった為、現段階で研究は余り進んでいないが、今後も継続して研究する。
映像メディアを使用した番組制作を通して養う読解・表現力に関する実践的研究

1、研究目的研究目的は、学習者がニュース番組制作とドキュメンタリー番組制作を通して読解・表現力を育成できるということを実証することである。これまでも国語科の授業実践の中で、ニュース番組制作は行われてきたが、主としてそれは取材を通じてわかったことや考えたことを発表する「表現」の手段として行われていた。しかし、映像メディアを使用した番組制作は「表現」スキルの向上だけではなく、「読解力」を高める手段としても有効である。なぜなら番組の構成や編集意図、叙述されている文体や画像や音楽、語られていることと語られていないこと、象徴されていること、等といった映像テクストを読み解く方略はご活字テクストを読み解く場合にもいかされ、相互に作用し、読解力を高めることにつながると考えたからである。2、研究方法大阪教育大学附属池田中学校の生徒(3年時)を対象に国語の授業を行い、実践研究を進めた。2012年4月5月:前年度のニュース番組制作の振り返り2012年6月12月:文学的文章・説明的文章(活字テクスト)の読解と映像表現との比較2013年1月3月:ドキュメンタリー番組制作3、研究成果(1)学習者の、国語に対する関心・意欲・態度の向上と読解・表現力の向上本研究は、学習者の創造意欲を刺激するものになったうえ、ニュース番組制作で習得した力をドキュメンタリーで活用できたという実感も学習者自身が持つことができた。また、読解活動においても、表現活動においても、構成や表現を常に考える学習者に育った。(学習者のアンケートより)(2)評価方法の深化評価規準表(ルーブリック)を毎回提示し、指導者だけでなく学習者も評価することを通じて、評価の観点を精選することができた。
フランス・モダニズム研究―ダダ・シュルレアリスムの周辺

本研究を構成する5つの柱に則して、平成12年度平成14年度の成果を以下にまとめる。1.レーモン・ルーセル研究-『アフリカの印象』における挿絵から出発して、活人画、写真、映画と比較しつつ、ルーセルの作品に頻出する停止した運動のイメージに焦点を絞り、それが彼独特の死と再生のテーマにかかわっていた可能性を検討して、仏語の論文にまとめた。2.アルチュール・クラヴァン研究-これまで謎に包まれてきたこのダダの先駆者アルチュール・クラヴァンについての調査を一冊にまとめた。同書では、クラヴァンの周辺の動きについても取上げたので、20世紀初頭のモダニズムを見通す試みにもなったはずである。3.ミシェル・レリス研究-モダニズムにこだわりつづけたレリスにおける「現代性」の問題を、彼独特のリアリズムとも関連づけつつ、presenceという概念のあり方を中心に検討した。また、民族学にも携わっていたレリスにとって、モダニズムは必然的にエキゾティシズムとも関係してくる点に注目し、とりわけ憑依の問題などについての研究を進めつつある。4.ダダ・シュルレアリスム研究-日常生活において無用なものとして棄てられた廃物を新たな意味の網目のなかに拾いあげるという観点から眺めるとき、ベンヤミンとシュルレアリスムの類似点が見えてくる。これは無意識の問題とも関係するわけだが、その点で、無意識をもたらす装置とベンヤミンが見なした写真や映画は、当然ながら、ダダやシュルレアリスムと深い関係にある。5.20世紀文化・社会・思想研究-われわれの問題意識のなかで、モダニズムはエキゾティシズムとの密接な関係を呈してきている。これは、一方でポスト・コロニアリズムの問題につながるとともに、「外の思考」とも絡まり、「無意識」や「身体牲」といった理性的主体にとっての一種のエキゾティシズムを20世紀の視覚芸術のうちに探る試みへとわれわれを誘った。本研究を構成する5つの柱に則して、今年度の成果を以下にまとめる。1.レーモン・ルーセル研究-ルーセルの『新アフリカの印象』は、括弧を何重にも使ったその形式が注目されがだが、むしろテーマの面から、たとえば彼のおこなった旅行との関係などの解明を試みつつある。そのことによって、現実を拒否した作家とみなされがちのルーセルの新たな一面が見えてくるはずである。2.アルチュール・クラヴァン研究-本年度は、とりわけスペイン時代、アメリカ時代のクラヴァンについて調べ、ようやく彼の活動の全貌が明らかになりつつあるが、同時に、1910年代後半にパリ、バルセロナ、ニューヨークの各地で展開されたモダニズム運動間の関係も明確になってきた。3.ミシェル・レリス研究-レリスはモダニズムにこだわりつづけた作家であるが、その彼が一方で民族学にも携わっていたことを思い出すなら、そこにはエキゾティシズムの問題が横たわっていることがおのずと明らかになってくる。モダニズムとエキゾティシズムという新たな問題系が呈示されたといえよう。そこにも、モダニズムとエキゾティシズム、つまり「新しさ」と「距離」の問題が潜んでいる。5.20世紀文化・社会・思想研究-すでに述べてきたように、われわれたの問題意識のなかでエキゾティシズムが重要になってきているが、これは20世紀の文化・社会・思想を考える上でも大切なテーマであり、たとえばクレオールや複数文化の問題などと関連づける必要があろう。