hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
洗浄における洗剤使用量低減化の試みーナノバブル水の流動特性と洗浄性能の解明ー

なお,マクロバブル水,ナノバブル水とも,製造後経過時間による気泡の含有量低下を考慮し,実験開始から終了まで稼働し続けた.本研究は,洗浄における汚れ除去に有効な作用として洗浄液の持つ流体力に着目し,流れをより有効に活用することで,現在,洗浄液の主流である洗剤液から主成分の界面活性剤の使用量を低減化する手がかりを掴むことを目的としている.一昨年度及び昨年度は,そうした可能性のある新たな洗浄液として,微小な気泡を泡含したナノバブル水やマイクロバブル水を対象とし,流動実験装置を作成して実験を行い,界面活性剤水溶液の代替候補としての可能性をある程度見出した.最終年度は,これに引き続き,実験条件を変えて同様な流動実験を行った.実験装置は,垂直流を実現する流路を作成したもので,圧力損失測定装置,リザーバを設置して装置全体を組み立てた.流路は正方形断面を持つ矩形流路で,中央のフランジ部分に布モデル(メッシュ)を挟む構造となっている.本年度は,この布モデルを従来のポリエステルからステンレスに変更し,洗浄液中での帯電状況が圧力損失(抗力)に影響を与えるかを,水,マイクロバブル水,ナノバブル水を対象に検証した.その結果,ポリエステルと同様ステンレスでも,抗力はReの増加とともに上昇し,ほぼ1:1の線形挙動を示した.また,全ての条件下で,マイクロバブル水,ナノバブル水とも水に比べて同一Reでの圧力損失が低く,抵抗減少効果が認められた.この傾向は,マイクロバブル水により顕著で,ナノバブル水に比べて水との差が大きかった.一方,ステンレスはポリエステルに比べて同一Reでの抗力の差が小さく,さらに,メッシュの有効通過面積の違いによる差も小さく,メッシュ構造に影響されにくい特徴が認められた.以上より,気泡を含泡したマイクロ,ナノバブル水は,メッシュの材質に関わらず流動時に同様の抵抗減少効果が認められ,界面活性剤水溶液の挙動と一致したことから,代替溶液としての可能性が高まり,洗剤使用量低減化への有効性が認められた.複合領域本年度は,ナノバブル水を対象とした流動実験を本格的に行うことができた.メインの実験を行うに先立って,ナノバブル水中に含まれる空気の量を調べるために,ナノバブル発生装置の稼働時間に伴う溶存酸素を計測した.その結果,稼働前のイオン交換水に比べて稼働後は溶存酸素量が増加し,確かに気泡が含有されていることを確認した.また,稼働時間とともに溶存酸素量は増加したが,約60分以降はほぼ同じ値で増加しなかった.このことから,流動実験には,60分以上稼働させたナノバブル水を用いることに決定した.また,イオン交換水およびナノバブル水を対象溶液として流動実験を行ったところ,ほぼすべての条件下でナノバブル水の抗力はイオン交換水に比べて低く,抵抗減少効果が認められた.しかし,この抵抗減少効果はマイクロバブル水ほど顕著ではなく,水との差は僅かであった.これは,包含している気泡のサイズが影響していると推察できる.すなわち,ナノバブルはマイクロバブルに比べて非常に微小で,実験に用いた布モデルであるメッシュの各部分のサイズよりオーダーが非常に小さい.また,ナノバブル水の光透過性もイオン交換水と同じく完全に透明であることから,物理的にほとんど差がなくバブルの有無がマイクロバブル水ほど流れに影響を与えていないと解釈できる.以上より,前年度のマイクロバブル水に引き続きナノバブル水の実験を行い,ほぼ同様の傾向が認められ,最終年度に向けてイオン交換水を含めた総合的な解析ができる基盤がある程度整ったと考えている.まず,実験対象流体であるナノバブル水の製造を試みた.製造後の経過時間とともにバブル含有量が低下する懸念があったため,測定中常時稼働させた状態を保つこととし,ヘッドタンク内で直接製造できるように設置した.
植物病原糸状菌が産生するオーキシンのビオトロフィック状態での侵入菌糸伸展への役割

イネいもち病菌は生きているイネの組織に侵入する.この研究によって,侵入菌糸先端にオーキシンが存在する結果を免疫組織化学的に得た.また,オーキシン応答レポーター遺伝子を導入したイネを用いて,いもち病菌侵入菌糸周辺のイネ細胞がオーキシン応答していることが示された.この結果は,ビオトロフィック状態の時に侵入菌糸が産生するオーキシンによって,イネ組織がオーキシン応答することを示唆している.また一方で,in situ hybridization法によって宿主組織内のビオトロフィック状態の菌糸を種特異的に可視化できることを明らかにした.イネいもち病菌は生きているイネの組織に侵入する.この研究によって,侵入菌糸先端にオーキシンが存在する結果を免疫組織化学的に得た.また,オーキシン応答レポーター遺伝子を導入したイネを用いて,いもち病菌侵入菌糸周辺のイネ細胞がオーキシン応答していることが示された.この結果は,ビオトロフィック状態の時に侵入菌糸が産生するオーキシンによって,イネ組織がオーキシン応答することを示唆している.また一方で,in situ hybridization法によって宿主組織内のビオトロフィック状態の菌糸を種特異的に可視化できることを明らかにした.この研究の目的は,ビオトロフィック状態の時に植物寄生菌の産生するオーキシンが,宿主植物組織内で細胞レベルの変化を誘導し,菌糸の組織内伸展促進物質として作用していることを明らかにすることである.これまで,イネいもち病菌の侵入菌糸先端にオーキシンが存在する結果を免疫組織化学的に得ている.本研究の初年度では,以下の結果を得た. 1.オーキシン応答レポーター遺伝子(DR5 :: GUS)を導入したイネを用いることによって,いもち病菌を接種した時のイネ葉組織のオーキシン応答部位を可視化することを試みた.イネ内生オーキシンの影響を少なくするため,オーキシン極性輸送阻害剤(NPA, TIBA)と作用阻害剤(PCIB)も利用した.その結果,侵入菌糸周辺のイネ細胞にGUS活性が認められた.すなわち,イネいもち病菌侵入菌糸が産生するオーキシンに対して,周辺のイネ細胞が応答していると考えられた. 2. 18S rRNAを標的としたin situ hybridization法を用いて,ビオトロフィックに伸展している菌糸を宿主組織内で種特異的に検出する方法を,タケ類てんぐ巣病菌を供試して確立した. 3.オーキシン産生欠失株を作製することはできないと考えられるため,イネいもち病菌のオーキシン過剰産生変異株を作製することを計画した.そのために, indole-3-acetamide hydrolase遺伝子を発言させるためのプラスミドを作製した.現在は,イネいもち病菌に形質転換し,変異株の選抜を行っている.この研究の目的は,ビオトロフィック状態の時に植物寄生菌の産生するオーキシンが,宿主植物組織内で細胞レベルの変化を誘導し,菌糸の組織内伸展促進物質として作用していることを明らかにすることである.これまで,イネいもち病菌の侵入菌糸先端にオーキシンが存在する結果を免疫組織化学的に得た.さらに,オーキシン応答レポーター遺伝子(DR5::GUS)を導入したイネを用いることによって,いもち病菌侵入菌糸周辺のイネ細胞がオーキシン応答していることが示唆された.本年度予定していたオーキシン過剰産生いもち病菌の作製と侵入感染への影響は転換株が十分に得られず,実験を継続している.そのため,オーキシン極性輸送阻害剤を用いた実験も行っていない。また,イネ組織の細胞壁ミクロフィブリル構造の観察を行う予定であったが,この仮説を支持する他の実験をおこなった.すなわち,細胞壁構造が緩むのであれば,その場所にイネのエキスパンシンが発現していることが予想される.そこで,イネのエキスパンシン発現部位を組織学的に解析するため,エキスパンシン抗体を用いた免疫組織化学染色と,エキスパンシンmRNAを標的としたin situ hybridizationをおこなった.この結果,ビオトロフィックな侵入菌糸伸展時に侵入菌糸先端付近のイネ葉鞘組織にエキスパンシンが発現していることが示唆された.この実験は,次年度に継続して確証する予定である.これまでの結果は,「イネいもち病菌がビオトロフィック状態の時に侵入菌糸先端からオーキシンを産生し,その作用としてイネ組織がオーキシン応答して細胞壁構造を緩める反応が起きている」という仮説を支持するものと考えられた.この研究の目的は,ビオトロフィック状態の時に植物寄生菌の産生するオーキシンが,宿主植物組織内で細胞レベルの変化を誘導し,菌糸の組織内伸展促進物質として作用していることを明らかにすることである.これまで,抗インドール酢酸抗体を用いた免疫組織化学的手法により,イネいもち病菌の侵入菌糸先端にオーキシンが存在する結果を得た.さらに,オーキシン応答レポーター遺伝子(DR5::GUX)を導入したイネを用いることによって,いもち病菌侵入菌糸周辺のイネ細胞がオーキシン応答していることが示唆された.本年度は,ここまでの研究結果をまとめて投稿論文として学術誌に投稿した.一方で,本年度は,細胞壁構造が緩むときに植物が発現するタンパク質エキスパンシンを標的とした免疫組織化学染色をおこなった.これは侵入菌糸がオーキシンを産生するのであれば,侵入菌糸に接するイネ細胞壁にエキスパンシンが局在するという仮説を検証するためである.

ビオトロフィック状態の侵入部位のイネ葉切片を用いて反応をおこなったところ,予想に反し,侵入菌糸自体からも抗体反応が確認された.すなわち,エキスパンシン抗体に反応する抗原物質がイネいもち病菌の侵入菌糸にも存在していることを示唆している.この抗原がイネに由来するものなのか,イネいもち病菌に由来するものなのかを追求するため,現在,ビオトロフィック状態以外の条件で免疫組織化学染色を試みている.これまでの結果から,生きている宿主植物にのみ感染侵入過程が成立するビオトロフィックな植物寄生菌の侵入行動の作用の一端を示したと考えられた.
補体成分C3およびC4の前駆体のプロセシングに関与するプロテアーゼ

補体第3成分(C3)は2つのサブユニット(α,β)、第4成分(C4)は3つのサブユニット(α,β,γ)から構成されているが、いずれも元々は高分子量の一本鎖のポリペプチド(前駆体)として合成され、その後細胞内輸送の過程でサブユニットに限定分解されることが知られている。申請者はこれまで、初代培養ラット肝細胞や人肝臓癌由来のHepG2細胞を用いて、これらの補体成分の合成とそのプロセシング、分泌について検討を加え、両前駆体が細胞内輸送経路のゴルジ装置でカルシウムイオン依存性のプロテアーゼにより限定分解を受ける可能性を報告してきた。本年度の研究では、以上のことを踏まえて、ラット肝臓よりゴルジ装置を単離しその分画中に両前駆体を特異的に加水分解するプロテアーゼの検出を試みた。その結果、ゴルジ分画中にC3前駆体を完全にサブユニットに変換するプロテアーゼ活性を認めた。本酵素はカルシウムイオン依存性のプロテアーゼであり、弱酸性から中性にかけての幅広い至適pHを呈し、種々のプロテアーゼ阻害剤に対する反応性から、先ごろそのcDNAがクローニングされたフユーリン(furin)に良く似た性質を示すことが判明した。一方、C4前駆体は同じ条件下に部分的にサブユニットに変換されるだけで、しかもβ,γ鎖は成熟型と同じ分子量を示したが、α鎖はさらに分解を受け、成熟α鎖よりも低い分子量を示した。現在、α鎖の非特異的分解を抑える目的で、様々なプロテアーゼ阻害剤の影響を検討中であり、C4前駆体の変換酵素のin vitroのアッセイ系の確立を目指している。
地域の住民組織活動による健康情報・行動変容の波及効果に関する疫学的検証

本研究は、地域の住民組織活動(保健推進委員会などの住民活動)に着目し、活動による周囲への健康情報・行動変容の波及効果の程度や範囲を、質問票を用いた縦断調査により疫学的に検証することを目的とする。主な研究実施地域は長野県K町(人口約4,700人)とし、高血圧予防を目的とした町の保健推進委員会活動(2年任期で65人)による、住民への血圧関連知識や健康行動の波及効果を検証する。平成30年度は、平成29年度に実施したベースライン調査、および効果を検証するための保健推進委員会の活動(健康学習会、啓発ツールの作成と配布、地区の健康教室開催)に引き続き、追加の保健推進委員活動(町の健康まつりでのトイレットペーパー配布[平成30年10月]、および地区の集会所の健康教室開催[平成30年11月])と事後調査(質問票による追跡調査[平成31年1月])を実施した。事後調査の実施対象者および調査方法はベースライン調査と同様とし、質問項目には、ベースライン調査と同様の血圧関連知識、および血圧計利用などの健康行動等とともに、この1年半の間に、保健推進委員活動やツールにどの程度接したかを含めた。町の40歳以上の住民3,038人に質問票を配布し、平成31年3月時点で1,850人から回答を得た(回収率60.9%)。さらに、保健推進委員を対象として、この1年間の活動状況(活動をどれだけ積極的に行ったか等)に関する質問票調査も実施し、65人中58人から回答を得た(回収率89.2%)。研究実施地域であるK町について、当初の研究計画であった保健推進委員会活動と事後調査を実施できた。ただし、事後調査の実施時期が、町の事情により当初計画より約半年遅れてしまった。そのため、結果の検証と総括は次年度に行う。次年度は事後調査の検証と総括を行う。具体的には、事後調査の結果、および保健推進委員を対象とした調査結果について、ベースライン調査結果と連結し、保健推進委員やその活動に接した頻度と、血圧関連知識や健康行動の変化との関連を検証する。さらにその結果について、学会発表や論文による成果発表や、町の広報誌などによる住民への成果還元を実施したい。平成29年度はまず、住民の血圧関連知識や健康行動を把握するため、ベースライン調査を実施した。質問項目には高血圧の原因や関連する疾病、血圧基準値などに関する知識、および血圧計利用などの健康行動、健康状態や日常生活などを含めた。調査は平成29年8月に実施し、町の40歳以上の住民3,181人に調査票を配布し、1,893人から回答を得た(回収率59.5%)。分析の結果、高血圧の基準値や認知症との関連、血圧測定時の適切な腕の位置などについての認知度が低いと考えられた。また、回答者の約75%は家庭血圧計を持っているが、そのうち週1日以上利用しているのは約34%程度であることがわかった。その後、効果を検証するための保健推進委員会の活動として、平成29年12月平成30年3月の間に、町の保健師・管理栄養士との協働により「保健推進委員を対象とした健康学習会」「高血圧予防のための啓発ツール(チラシとトイレットペーパー)の作成と各世帯への配布」「地区の集会所を活用しての健康教室開催」の事業を実施した。それぞれの活動は、ベースライン調査において認知度が低いと考えられた血圧関連知識の普及や血圧計利用促進に重点を置いた。研究実施地域であるK町について、当初の研究計画であったベースライン調査と事業実施が概ね実現したため。

さらに、保健推進委員を対象として、この1年間の活動状況(活動をどれだけ積極的に行ったか等)に関する質問票調査も実施し、65人中58人から回答を得た(回収率89.2%)。研究実施地域であるK町について、当初の研究計画であった保健推進委員会活動と事後調査を実施できた。ただし、事後調査の実施時期が、町の事情により当初計画より約半年遅れてしまった。そのため、結果の検証と総括は次年度に行う。次年度は事後調査を実施する。実施対象者および調査方法はベースライン調査と同様とする。また、保健推進委員(65人)を対象として、この1年間の活動状況に関する質問票調査も実施する。これらの調査結果について、ベースライン調査結果と連結し、保健推進委員やその活動に接した頻度と、血圧関連知識や健康行動の変化との関連を検証する。さらにその結果について、学会発表や論文による成果発表や、町の広報誌などによる住民への成果還元を実施したい。次年度は事後調査の検証と総括を行う。具体的には、事後調査の結果、および保健推進委員を対象とした調査結果について、ベースライン調査結果と連結し、保健推進委員やその活動に接した頻度と、血圧関連知識や健康行動の変化との関連を検証する。平成29年度に実施した質問票調査の実施に関わる費用(質問票印刷費、郵送費、データ入力費)や啓発ツール(チラシとトイレットペーパー)作成費について、当初予定していた額を抑えることができたため、次年度使用額が生じた。次年度は事後調査を実施予定であり、また、研究成果の公表や住民への還元を実施するため、その費用(調査実施費用、学会発表費用、論文投稿料、報告書作成費等)に充当する。事後調査の実施が当初計画より遅れたため、結果検証と公表に関わる費用について次年度使用額が生じた。次年度は、研究成果の公表や住民への還元を実施するため、その費用(学会発表費用、論文投稿料、報告書作成費等)に充当する。
パラボド目における底棲性鞭毛虫の多様性及び魚介類寄生虫の進化的起源の解明

昨年度までの成果として、キネトプラスチダ類パラボド目に属する寄生性鞭毛虫Trypanoplasma borreli(魚介類住血虫)に加え、マボヤの「被嚢軟化症」原因寄生虫であり、Hirose et al. Dis. Aquat. Organ., 97(3):227-235, 2012にてパラボド目との近縁性が示唆されたAzuminobodo hoyamushiそれぞれの大量培養を行い、Illumina Hi-seq 2000によるシーケンシングから大量のトランスクリプトームデータを得た。最終年度であるH26年度では、まず上記トランスクリプトームデータのアセンブリを行った。アセンブリ後、先行研究(Deschamps et al. Mol. Biol. Evol. 28(1):53-58. 2011)を参考に、リボソームタンパク質遺伝子など系統間で保存的な遺伝子の網羅的探索を行うことで、計43遺伝子データの取得に成功した。それぞれの遺伝子について、自由生活性鞭毛虫を含むキネトプラスチド類12種より遺伝子アライメントを構築し、計6,842アミノ酸座位からなる大規模分子系統解析用データセットを作成した。このデータセットに基づく分子系統解析により、キネトプラスチダ類内部の系統関係およびT. borreliおよびA. hoyamushiの系統的位置を頑健に推測することに成功した。最終的に、T. borreliおよびA. hoyamushiはそれぞれパラボド目、ネオボド目という異なる系統に属し、これらの寄生種への進化が独立に起こったことが示された。さらに、T. borreliがパラボド目内部の底棲性自由生活虫であるProcryptobia solokiniに最も近縁であったのに対し、A. hoyamushiは宿主であるマボヤに同じく共生するCruzellamarinaに最も近縁であることも示され、両者の寄生性獲得経緯に違いがあることが示唆された。26年度が最終年度であるため、記入しない。平成24年度は、過去の先行研究において行われた、パラボド目を対象に含んだ分子系統解析に用いられた2つのデータセット、(1)LSU及びSSUrRNA、(2)64個のタンパク質コード遺伝子(Deschampsetal. MolecularBiology and Evolution. 28(1):53-58.2011)のそれぞれについて最新のデータを独自に収集し、解析データにi)塩基組成やアミノ酸組成の配列間における不均一性や、ii)系統間での進化速度の不均一性など、解析結果に悪影響を及ぼすバイアスが存在するか否か、複数の手法に基づく徹底的な検証を行った。これは、今後本研究において取得された配列データを加え新たに系統解析を行う場合、基盤となるデータセットに既にバイアスが含まれていると、最終的に誤った知見を導きかねないためである。この検証の結果、先行研究において使用されたデータセットについては、塩基・アミノ酸組成に配列間で大きな不均一性は検出されなかった。しかしながら、これらのデータセットには系統的に離れた生物種由来の配列が多く含まれており、また「従属栄養」「寄生」「片利共生」と全く異なる生活様式をもつ鞭毛虫由来の配列が混在していた。このため、申請者はこれらのデータセットに対し「系統間での進化プロセスの不均一性を適切に考慮した手法」を用いて再解析を行う必要性があると判断し、モデル選択等の基準に基づき適切な解析方法を選定した。この際、既存の系統解析プログラムではこれらの解析手法を試すには計算負荷が大きく、現実的な時間内で解析を終えることができない、という問題が発生したため、申請者自らがソースコードの改訂を行い、実用に耐える系統解析プログラムを作成した。現在、この改訂版プログラムを用い、配列データの再解析を行っている最中である。また、タンパク質コード遺伝子配列の収集に伴い、既にEST解析によってトランスクリプトームデータが明らかとなっている底棲性鞭毛虫(Bodo caudatus)を対象に、その遺伝子構成などについてデータ整理を行った。今後、寄生性鞭毛虫(Trypanoplasma borreli)のEST解析を実施する予定であるので、今回整理したデータを基盤にパラボド目鞭毛虫間でのトランスクリプトームデータの比較解析を行う予定である。パラボド目鞭毛虫の内部系統関係を解明するには、多様な生活様式をもつ鞭毛虫由来遣伝子配列が混在する大規模データセットに基づき分子系統解析を行う必要がある。このような分子系統解析において頑健な進化系統樹を得るためには、進化プロセスの不均一性を適切に考慮できる「Non-Homogeneous置換モデル(以下NHモデル)」の適用が不可欠である。しかし、NHモデルを用いた分子系続解析は計算コストが非常に大きく、大規模遺伝子配列データに基づく分子系統解析への適用が困難であった。そこで、本年度ではNHモデルを実装した分子系統解析プログラムの並列化に中心的に取り組み、超並列計算技術を活用することで高速かつ高精度な大規模分子系統解析の実現を目指した。結果、100種以上10,000座位以上からなる大規模遺伝子配列データの解析においても、1,000以上のCPUを用いることで、従来に比べ400倍もの速度向上を達成することに成功した。これにより、最終年度で実施する「パラボド目鞭毛虫の大系統解析」において、高速かつ高解像度なデータ解析を行うための基盤を完全に整えることができた。上記の方法論的研究に加え、本年度ではパラボド目寄生性鞭毛虫Trypanoplasma borreliおよび新奇発見

鞭毛虫Azumiobodo hoyamuShiの大量培養およびトランスクリプトーム解析を完了した。A. hoyamushiはマボヤの被嚢軟化症を引き起こす寄生性鞭毛虫であり、形態的特徴からパラボド目と同じくキネトプラスチド類に属することが示唆されているが、その系統的位置は未だ不明瞭なままである。従って、本研究で行う大規模分子系統解析に用いるデータセットにA. hoyamushi由来遺伝子配列を加え、本鞭毛虫の系統的位置を決定することで、パラボド目の内部系統関係や同目における従属栄養性生活⇒寄生性生活の進化経緯などに関し、非常に有用な知見を得ることが期待できる。上記2種のトランスクリプトームデータについては、現在アセンブル作業を鋭意進めている。昨年度までの成果として、キネトプラスチダ類パラボド目に属する寄生性鞭毛虫Trypanoplasma borreli(魚介類住血虫)に加え、マボヤの「被嚢軟化症」原因寄生虫であり、Hirose et al. Dis. Aquat. Organ., 97(3):227-235, 2012にてパラボド目との近縁性が示唆されたAzuminobodo hoyamushiそれぞれの大量培養を行い、Illumina Hi-seq 2000によるシーケンシングから大量のトランスクリプトームデータを得た。最終年度であるH26年度では、まず上記トランスクリプトームデータのアセンブリを行った。アセンブリ後、先行研究(Deschamps et al. Mol. Biol. Evol. 28(1):53-58. 2011)を参考に、リボソームタンパク質遺伝子など系統間で保存的な遺伝子の網羅的探索を行うことで、計43遺伝子データの取得に成功した。それぞれの遺伝子について、自由生活性鞭毛虫を含むキネトプラスチド類12種より遺伝子アライメントを構築し、計6,842アミノ酸座位からなる大規模分子系統解析用データセットを作成した。このデータセットに基づく分子系統解析により、キネトプラスチダ類内部の系統関係およびT. borreliおよびA. hoyamushiの系統的位置を頑健に推測することに成功した。最終的に、T. borreliおよびA. hoyamushiはそれぞれパラボド目、ネオボド目という異なる系統に属し、これらの寄生種への進化が独立に起こったことが示された。さらに、T. borreliがパラボド目内部の底棲性自由生活虫であるProcryptobia solokiniに最も近縁であったのに対し、A. hoyamushiは宿主であるマボヤに同じく共生するCruzellamarinaに最も近縁であることも示され、両者の寄生性獲得経緯に違いがあることが示唆された。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究の最終的な目的を達成するためには、適切な手法に基づく分子系統解析によって進化系統樹を得ることが不可欠である。H24年度では、今後分子系統解析を行うにあたり基盤となる「バイアスの少ない配列データセット」を構築することができ、またそのデータセットに対する適切な解析手法も選定した。
乳幼児の聴覚的ジョイント・アテンションに関する研究

平成12年度と13年度において、早稲田大学文学部発達心理学研究室で12歳児とその母親を対象に、子どものジョイント・アテンションの実験観察を縦/横断的に検討してきた。現在の(平成14年2月8日)の時点では、横断的データとして、9か月児群:12名、12か月児群:13名、15か月児群:17名、18か月児群:11名、21か月児群:10名、24か月児群:8名、27か月児群:14名、30か月児群:8名を得ている。さらに縦断研究群として30組の母子を追跡している。横断研究、縦断研究ともに現在も引き続きデータを獲得し続けている段階だが、中間報告としてすでにいくつかの研究成果を公表してきた。それらは視覚刺激(鯨の縫いぐるみ)と聴覚刺激(鳥の鳴き声)を使った2つの場面で見せる子どものジョイント・アテンション行動について、(1)母親がそれらの刺激に気づかない振りをする場面、(2)母親が刺激に気づいて共有しようとする場面、(3)刺激が消失した場面でその刺激を母親と一緒に探す場面、の3場面で検討された成果である。最初の場面では、子どもが母親の注意を刺激に方向づけようとする「誘導的ジョイント・アテンション行動」の発達が、第2の場面では、子どもが母親と一緒に刺激に注意を向ける「ジョイント的関わり」の発達が、第3の場面では、消失した刺激を思い浮かべて母親と一緒に探そうとする「表象的ジョイント・アテンション行動」の発達が検討された。第1場面で検討された聴覚刺激にも母親に対しても十分に注意を配分する「意図共有的/誘導的ジョイント・アテンション行動」の出現は15か月以降、第2場面で検討された「意図共有的ジョイント的関わり」は18か月以降、第3場面で検討された「意図共有的/表象的ジョイント・アテンション行動」も18か月以降に出現しやすくなることが見出されている。平成12年度においては、研究実施計画どおり、早稲田大学文学部発達心理学研究室にビデオシステムを設置し、12歳児とその母親に対し研究への参加をもとめた。現在(平成13年2月9日)の時点では、本研究の参加者として登録された母子は60組であり、研究参加の同意書を得て、すでに研究に参加した母子は47組である。その内、21組が3か月間隔で行われる縦断的研究への参加を希望しており、この3月には最初の縦断研究終了者が出る予定である。観察対象にしている月齢は、9か月、12か月、15か月、18か月、21か月、24か月、27か月、30か月である。観察場面は、1.鳥の鳴き声を母親が無視する場面(約30秒)、2.母親も鳥の鳴き声に気づき子どもと一緒に探す場面(約1分間)、3.鳴かなくなった鳥を母親が子どもと一緒に探す場面(約2分間)の3種類である。これらの3場面で、子どもが母親と鳥の鳴き声をどのようにジョイント・アテンション(共有注意)しようとするかがビデオ記録され、訓練された複数のコーダーによって行動のコーディングが行われている。本研究で使用されているコードは、この分野で定評のあるAdamson(1999)の状態コードを参考にして、上記の場面での使用が可能なように筆者によって新たに考案されたものである。3場面とも6種類のコードが使用されており、子どもが鳥に無関心な状態から、シンボルを利用して鳥を母親と共有しようとする状態までをカバーしている。尚、聴覚的刺激と視覚的刺激を比較するため、この聴覚的ジョイント・アテンションの実験場面と同じ振る舞いを母親にもとめている視覚的ジョイント・アテンション実験も同時に行なってきている。平成13年度も計画どおり引き続き実験を継続し、データの収集と分析に努めたい。

第1場面で検討された聴覚刺激にも母親に対しても十分に注意を配分する「意図共有的/誘導的ジョイント・アテンション行動」の出現は15か月以降、第2場面で検討された「意図共有的ジョイント的関わり」は18か月以降、第3場面で検討された「意図共有的/表象的ジョイント・アテンション行動」も18か月以降に出現しやすくなることが見出されている。
血流下の血小板血栓に白血球系細胞が関与する機序の検討

平成11年度に、血小板を血流に曝露するとvon Willebrand因子依存性に血小板が活性化されて、表面に白血球と接着する蛋白であるP-selectinを発現することを明らかにしたことを踏まえて、よりin vivoに近い条件で血小板と白血球の相互作用のメカニズムを検討した。内皮が損傷された血管のモデルとしてコラーゲンを固相化したガラス板を用いた。血小板と白血球を蛍光標識して、様々な血流条件でコラーゲン上を潅流した。150s-1以下の低いずり速度下にて、選択的なGP IIb/IIIa受容体阻害薬であるtirofibanの存在下では、コラーゲンに接着した血小板上を、白血球がローリングする現象が見られた。血小板上をローリングした白血球の一部は、血小板上に停止したため、血液の潅流時間が増えるにしたがって、コラーゲン上に血小板を介して結合した白血球数は増加した。VWF-GP Ibの相互作用を抑制するモノクローン抗体の存在下では、少数の血小板がコラーゲンに固着した場合でも、血小板と白血球の相互作用は見られなかった。GP IIb/IIIa受容体阻害薬の中でも、GP IIb/IIIaのみならず、白血球上のMAClをも阻害するabciximabの存在下ではローリングは見られなかった。血流下で、血小板は損傷血管壁と白血球の相互作用を仲介する役割を果たす場合があること、白血球と血小板との相互作用が起るためには、血小板がvWF依存性のメカニズムにより活性化される必要があること、GPIIb/IIIa受容体阻害薬には血小板と白血球の相互作用を抑制する薬物と抑制しない薬物が存在することを、明らかにした。これらの研究成果は日本心臓病学会誌、日本循環器学会などで発表した。血流下で形成された血小板血栓に白血球系細胞が関与する機序を検討するために、血小板膜表面上に活性化とともに発現し、白血球と接着することのできる蛋白であるP-selectinに着目した。抗P-selectin抗体をFITCにて蛍光標識し、flow cytometryにて血小板表面上のP-selectin分子数を定量した。非活性化時には計測可能なP-selectin分子は血小板膜表面上には存在しなかった。ADP,Epinephrineにて刺激すると単一血小板上に1521±521分子のP-selectin分子が発現した。血小板をvon Willebrandfactor(vWF)の存在下で血流のずりに曝露すると9,000s-1以上の高いずり速度に曝露した時には、ADPなどの活性化物質が存在しなくてもP-selectin分子が血小板表面上に発現した。モノクローン抗体を用いてvWFと血小板膜糖蛋白GPIbの相互作用を阻害するとP-selectinの発現は抑制された。また、vWFとGP IIb/IIIaの結合を阻害する抗体の中にもP-selectinの発現を抑制するものがあった。血小板浮遊液中の血小板数を減少させるとP-selectinの発現は起こらなくなった。以上より1)血流下で血小板はvWFと相互作用するとP-selectin分子を発現する、2)P-selectinの発現には、vWFとGP Ib、vWFとGP IIb/IIIaの相互作用と、血小板同士の相互作用が必須であった。以上の結果を、日本循環器学会、米国心臓学会などで発表した。論文は投稿中である。また、平成11年度の成果を踏まえて、平成12年度に予定しているflow chamberを用いた実験の予備実験も施行した。
前工業の乳児死亡率・出生率推計のためのマイクロシミュレーションプログラムの開発

1.課題本研究は,日本の歴史人口学において最も頻繁に資料として使用される宗門改帳から,出生率と乳児死亡率をいかに正確に推計するのかを課題とした。宗門改帳は諸外国には存在しない貴重な史料である一方,その基本的性格は静態統計であり,記録日と記録日の間に生まれ死亡した乳児はその痕跡を止めない。したがって,宗門改帳から算出される乳児死亡率と出生率は実際のものより過少に評価されるということは,研究者の間では共通の認識であった。しかしながら,この過少評価がどの程度のものなのかということが,日本の歴史人口学における未解決の問題として残されていた。2.手法この問題を解決するために,本研究ではマイクロシミュレーションの手法を採用した。この手法により,従来考慮されなかった出生の季節変動や乳児の月別死亡確率を考慮することが可能となり,より現実的な出生から乳児死亡のモデルを再現することができた。本研究で用いたシミュレーションのためのモデルとそのプログラムは,厚生省人口問題研究所で開発されたものを基本とし,主に出生の季節変動,乳児の月別死亡率を中心に手を加えた。インプットしたデータとしては,死亡率と有配偶率が山形県天童市内旧山家村の宗門改帳から算出さたものを用い,出生の季節変動および乳児の月別死亡確率については明治期末期から大正期の人口動態統計からのデータを使用した。3.結果シミュレーションの結果,宗門改帳に記載される乳児数は実際に生まれた乳児数の8288%であり,1218%の乳児はその痕跡を宗門改帳に残さないということが判明した。ゆえに宗門改帳から算出された値を1.151.22倍すれば,現実的な乳児死亡率と出生率が得られるという結論に至った。平成6年度は、次年度に作成される出生過程を再現するシミュレーションプログラムのための資料・文献調査に焦点が絞られ、年度の前半はシミュレーション自体に関するもの、後半はシミュレーションに入力するデータに関して調査が進められた。前者に関しては、米国のPopulation Councilやプリンストン大学人口研究所で作成されたプログラムが存在し、日本においても厚生省人口問題研究所によって作成されたものがあることが確認されたが,それぞれのプログラムは各々特殊な目的のために作成されており、本研究の目的のためには、これらのプログラムの大幅な修正が必要であることも判明した。また文献調査を通じて、人口集団における個人差、特に受胎力(fecundability)の分布を考慮に入れなければ、現実的なモデルは構築されないということも明らかになった。当初、集団における受胎力の一様な分布を想定していたため、どのような受胎力の分布を想定するかが次年度の課題となった。後者のシミュレーションに入力するためのデータ収集に関しては、主に江戸期および明治前期の出生、乳児死亡の季節変動を中心に文献調査が進められた。両者には明白な季節変動が存在することが確認されたが、特に出生の季節変動は顕著であり、56月および101月に2つの出生ピークがあるものが多く存在した。このような状況から、次年度の本研究の成果は、出生の季節分布を一様と仮定した従来の研究を一歩進めることができるものと考えられる。このことは、(1)記録日まで生き延びることのできた乳児のみが宗門改帳に記録される一方、記録日と記録日の間に生まれ、かつ死亡した乳児はそこに足跡を一切残さないという宗門改帳の静態統計としての性格、および(2)宗門改帳が村々によって異なる月に記録されていたという事実を考え合わせると重要な意味を持つものと言える。

宗門改帳は諸外国には存在しない貴重な史料である一方,その基本的性格は静態統計であり,記録日と記録日の間に生まれ死亡した乳児はその痕跡を止めない。したがって,宗門改帳から算出される乳児死亡率と出生率は実際のものより過少に評価されるということは,研究者の間では共通の認識であった。しかしながら,この過少評価がどの程度のものなのかということが,日本の歴史人口学における未解決の問題として残されていた。2.手法この問題を解決するために,本研究ではマイクロシミュレーションの手法を採用した.この手法により,従来考慮されなかった出生の季節変動や乳児の月別死亡確率を考慮することが可能となり,より現実的な出生から乳児死亡のモデルを再現することができた。本研究で用いたシミュレーションのためのモデルとそのプログラムは,厚生省人口問題研究所で開発されたものを基本とし,主に出生の季節変動,乳児の月別死亡率を中心に手を加えた。インプットしたデータとしては,死亡率と有配偶率が山形県天童市内旧山家村の宗門改帳から算出されたものを用い,出生の季節変動および乳児の月別死亡確率については明治期末期から大正期の人口動態統計からのデータを使用した。3.結果シミュレーションの結果,宗門改帳に記載される乳児数は実際に生まれた乳児数の8688%であり,1214%の乳児はその痕跡を宗門改帳に残さないということが判明した。ゆえに宗門改帳から算出された値を,1.141.16(86%88%の逆数)倍すれば,現実的な乳児死亡率と出生率が得られるという結論に至った。
幼児の園生活理解の発達過程:家庭での様子からの検討

幼児の園生活理解の発達過程をとらえるために、幼稚園の3歳児クラス入園直前から卒園までの3年余りの間に、保護者を対象として8回の質問紙調査と2回の日誌調査を実施した。結果、子どもが家庭でみせる様子は、時期により異なること、個人差があることがわかった。また、保護者は子どもの様子の意味を推測してさまざまな対応をすると同時に、心配したり安心したりと感情が揺れ動いており、子どもが家庭に持ち込む園生活に保護者自身が巻き込まれていることが示唆された。幼稚園に3歳クラスから入園する子どもたちとその保護者を対象として、家庭で保護者に把握される子どもの様子、家庭での子どもの様子にもとづく保護者の心配とその解消へのとりくみについての質問紙調査を、卒園までの3年間にわたって縦断的に行う。また、平行して、園での子どもたちの生活の様子の観察と、保育者への面接調査を実施する。これらの資料を基に、明らかにしたいことは以下の3点である。(1)園生活に適応していく様子や不適応に陥りやすい時期や契機を明らかにする。園生活に戸惑うのは、3歳児クラス入園直後のみではなく、4歳児クラス・5歳児クラス進級時にも、同様の戸惑いが見られるであろう。また、こうしたクラス移行時のみではなく、大きな行事などに取り組む際にも、何らかの戸惑いが生じる可能性がある。こうした戸惑いを生じる時期と契機とを、園での観察と保護者からの家庭での様子の報告から、3年間にわたって縦断的にとらえていく。(2)(1)でとらえた適応していく時期や戸惑いの時期に、子どもたちが家庭ではどのような様子を見せるのか、家庭では園生活について何をどのように語るのかについて整理する。適応や戸惑いの様子と、家庭での様子や保護者に語る内容とがどのような対応関係にあるのかを検討することで、園生活理解のプロセスについての示唆を得る。特に、藤崎(2002)では、3歳クラス児が言語的には園独自の生活の流れについて報告できない一方で、入園2・3ヶ月でほぼスムーズに生活できていることを、園での観察や保育者への面接調査でとらえている。この両者の間のずれをどのように考えればよいかの知見も得たい。(3)幼児の園生活理解を促し、支えるために保護者がどのような取り組みを行っているのかを整理する。幼児の園生活理解を促し、支えるための保護者の有効な取り組みを整理するとともに、保護者が有効な取り組みを行うためには保育者がどのように支援すればよいのか、あるいは外部の心理の専門家がどのように支援しうるのかを検討する。幼稚園3歳クラス入園児の園生活適応過程を、入園式翌日から1週間にわたり41名の保護者が記録した家庭での様子から検討した。入園後1週間の子どもの様子を整理すると、大きく4つのタイプが設定できた。第1は、入園直後から園生活を楽しみに通う<園生活エンジョイタイプ>であり、26名中14名(54%)が該当した。このタイプでは、1)兄・姉が同じ園に通っている(通っていた)ことにより、送迎や行事で園に出入りしていた、2)該当園が実施している週1回2時間の就園前保育に参加していた、などの理由から、園についての知識はすでに獲得していたようである。第2は、登園時は泣いているのだが、帰宅時にはにこにこ顔で「楽しかった」と言う<行ってみれば楽しかったタイプ>である。6名(23%)いた。保護者は、心が痛みつつ子どもを送り出すが、帰宅時のにこにこ顔や園での楽しい経験の報告を通して、園で楽しく過ごしたのであろうと推測してほっとする、という日々を過ごしている。第3は、家族と離れてひとりで通うことに不安を感じている様子の<不安タイプ>である。2名いた。大泣きするというよりも「どうしてお母さんは行かないの?」「どうして**(子の名前)だけ行くの?」とたずねている。子どもたちにとって、保護者が一緒でないおでかけというのは無かった経験であり、とまどっていると言えるかもしれない。帰宅時に母からたずねられて「楽しかった」とは答えるものの、表情は寂しそうであるので、保護者を不安にしている。第4は、今回の資料では1名だけだが、園生活についての知識を積極的に収集しようとする<園生活探索タイプ>である。園での経験を詳細に報告するほか、「つうえんバックのつうって何のこと?」などをはじめ、いろいろ保護者にたずねている。これらのタイプが、園生活経験とともにどのように変化していくのかを検討することが、今後の課題である。幼稚園3歳クラス新入園児の保護者に、入園式翌目からの1週間分の家庭での日誌記録調査(以下、1週間後調査と呼ぶ)、1ヶ月後の日誌記録調査(以下、1ヶ月後調査)、7月初旬に家庭での様子を尋ねる質問紙調査(以下、3ヶ月後調査)を実施して、子どもの入園後3ヶ月間の園生活適応過程を縦断的に検討した。

まず、1週間後調査では、19年度の分析で見出した4タイプー入園直後から園生活を楽しみに通う<園生活エンジョイタイプ>、登園時は泣いているが帰宅時にはにこにご顔の<行ってみれば楽しかったタイプ>、ひとりで通うことに不安を感じている様子の<不安タイプ>、園生活についての知識を積極的に収集しようとする<園生活探索タイプ>-が確認できた。1週間後・1ヶ月後・3ケ月後調査の関連;1)1週間後調査時に<園生活エンジョイタイプ>だった子どもの3分の1は、1ヶ月後調査では、全体として楽しそうに登園するものの、日によって泣いたり、疲れた様子が顕著であったりして保護者を心配させていた。ただし、3ヶ月後調査では、毎日楽しみに登園していた。2)1週間後調査で<行ってみれば楽しかったタイプ>だった子どもの40%程度は、1ヶ月後調査では<園生活エンジョイタイプ>となっていたが、その他はやはり登園時に泣いていた。ただし、これらの子どもも3ヶ月後調査では「時々楽しみに登園」という回答だった。3)1週間後調査時に<不安タイプ>だった子どもは、1ヶ月後は、<行ってみれば楽しかったタイプ>となっており、3ヶ月後調査では、「ほとんど毎日」楽しみに登園していた。入園後3カ月たつころには、ほとんどの子どもが登園を毎日、あるいは時々楽しみにするようになることが確認できた一方で、園生活適応過程には、個人差のあることがわかった。21年度は、幼稚園3歳児クラス入園児の保護者に対する、入園直前から卒園に至る3年余りの間に8回実施する質問紙調査と2回実施する日誌記録調査からなる縦断研究の、1・2回目の質問紙調査および1回目の日誌記録調査から得られた資料にもとづく分析を主に行った。まず、家庭と園との生活時間の調整(起床・就寝時刻、昼寝の有無、生活習慣上の配慮、家族全体への影響)に注目した分析を行った。その結果からは、入園後の園生活の経過の中で、主に登園時間を意識して、生活時間が調整されていく様子と共に、園生活適応に向けての調整は家庭全体を巻き込んで進んでいく過程であることが明らかとなった。一方、幼稚園入園直後の1週間に、保護者が家庭でとらえた園生活にかかわる子どもの様子とそれへの保護者の反応の日誌記録の分析からは、園生活適応のタイプとしてくエンジョイ>・<涙とにこにこ>・<不安>の3つが見出された。入園当初より、園生活を楽しみに登園する子どもが多いものの、登園時には大泣きする子どもや、不安な様子を示す子どももいることが確認できた。こうした家庭でとらえられる子どもの様子に対して保護者は、子どもの行動やことばの意味を推測したり、その推測に基づいて対応したりといつた配慮していたが、これは、冷静・客観的に行われるものではなく、保護者自身の感情が動いていることが明らかとなった。保護者も、子どもが行動やことばを通して家庭に持ち込む園生活に巻き込まれていくようである。1.幼稚園3歳児クラス入園児の保護者が記載した日誌記録の分析結果を論文としてまとめた。この成果により、入園最初期の子どもの園生活理解の様子と、保護者も子どもが行動やことばを通して家庭に持ち込む園生活に巻き込まれていくこととが明らかとなり、入園時の子ども支援・保護者支援の必要性が示唆された。2.幼稚園3歳児クラス入園児の保護者に対する、入園直前から卒園に至る3年余りの間に8回実施した質問紙調査のうち、子どもの様子への不安についての質問内容を分析し、その成果を保育者向けテキストに組み入れた。
腎機能調節における遠位部尿細管管腔側からのホルモン作用の役割

H6年度は、経上皮電位測定の効率改善のための実験装置改良と管腔側作用物質のスクリーニングを当初計画した。前者については必要機材の設置を終え、実験中にreal timeで電位の記録がコンピューターに取り込まれ、記録保存が可能となった。ただし、実験中の突発的なノイズの発生の際に生じる撹乱の処理がいまだ不十分であり、引続きプログラムの調整中である。管腔側作用の整生理性物質の検索では、prostaglandin E2がウサギ皮質部集合管において明らかな管腔側作用をあらわすことを確認したため、平成67年にかけて、他のホルモンの管腔側作用の検索より、このprostaglandin E2の管腔側作用の解明を優先して行った。その結果:1)管腔側Prostaglandin E2の管腔側系が経上皮電位(Vt)を一過性の過分極につづいて脱分極させる,2)Vt変化作用は基底膜作用とはちがう固有の作用であり、飽和濃度(2μM)の基底膜側prostaglandinE2存在下でもみられ,3)また管腔側バゾプレシン存在下でもみられる,4)prostaglandin I2は基底膜からはE2類似のVt変化を来すが、管腔側からはVtを変化させない,5)Vt変化作用はInMから見られはじめ、1μMで最大反応を示す,6)Vt変化作用はNa^+/K^+-ATPases阻害剤であるouabain(基底膜側)や、Na channel阻害薬amiloride(管腔側)存在下では消失するがK channel阻害薬barium(管腔側)では抑えられない,7)Vt脱分極は管腔側から基底膜側への経上皮Na輸送を抑制する,8)Vt脱分極時期に尿細管上皮の水透過性が有意に亢進する。ただし程度は弱い。以上のごとく管腔側rostaglandin E2の作用は我々が既に報告した管腔側バゾプレシンの作用とは、Vt変化のパターン、ouabain感受性、Na輸送、水透過性への作用の点で明らかに異なった固有の作用であり、生体内においても尿産生調節に関与している可能性が示唆された。平成7年は、細胞内電位測定のための機材設置、調整を開始し、また中断していた管腔側作用を持つホルモンの検索を再開した。前者は現在機材設置調節中である。管腔側作用を持つホルモンの検索では管腔側オキシトシン、ブラディキニン、ドパミン、アドレナリンに経上皮電位の変化をみとめ、管腔側アンギオテンシンII、アデノシンでは変化が見られなかった。今後は前者のホルモンについて管腔側作用のより詳細な検討を進め、またバゾプレシンとprostaglandin E2の基底膜側、管腔側からの相互作用を検討する予定である。ただし程度は弱い。

H6年度は、経上皮電位測定の効率改善のための実験装置改良と管腔側作用物質のスクリーニングを当初計画した。前者については必要機材の設置を終え、H6年7月以降正確な電位の記録がとれるようプログラムの調節を行っているが、データサンプリングのタイミング、頻度調節とノイズの混入防止との兼ね合いが難しく今のところ本実験に全面的に使用する段階に至っていない。引続き、従来のアナログの電位記録法と同時にデジタル記録を行い比較しつつプログラムの調整をおこなっている段階である。管腔側作用の生理活性物質の検索では、prostaglandin E2がウサギ皮質部集合管において以下のような明らかな管腔側作用をあらわすことを確認した:1)管腔側Prostaglandin E2の管腔側系が経上皮電位(Vt)を一過性の過分極につづいて脱分極させる,3)また管腔側バゾプレシン存在下でもみられる,5)Vt変化作用は1nMから見られはじめ、1μMで最大反応を示す,6)Vt変化作用はNa+/K+-ATPases阻害剤であるouabain(基底膜側)や、Na channel阻害薬amiloride(管腔側)存在下では消失するがK channel阻害薬barium(管腔側)では抑えられない,7)Vt脱分極は管腔側から基底膜側への経上皮Na輸送を抑制する,8)Vt脱分極時期に尿細管上皮の水透過性が有意に亢進する。ただし程度は弱い。以上のごとく管腔側prostaglandin E2の作用は我々が既に報告した管腔側バゾプレシンの作用とは、Vt変化のパターン、ouabain感受性、Na輸送、水透過性への作用の点で明らかに異なった固有の作用であり、生体内においても尿産生調節に関与している可能性が示唆された。これらの結果はAmerican Journal of Physiologyに近々掲載される予定である。前者については必要機材の設置を終え、実験中にreal timeで電位の記録がコンピューターに取り込まれ、記録保存が可能となった。ただし、実験中の突発的なノイズの発生の際に生じる攪乱の処理がいまだ不十分であり、引続きプログラムの調整中である。管腔側作用の生理活性物質の検索では、prostaglandin E2がウサギ皮質部集合管において明らかな管腔側作用をあらわすことを確認したため、平成67年にかけて、他のホルモンの管腔側作用の検索より、このprostaglandin E2の管腔側作用の解明を優先して行った。その結果:1)管腔側prostaglandin E2の管腔側系が経上皮電位(Vt)を一過性の過分極につづいて脱分極させる,2)Vt変化作用は基底膜作用とはちがう固有の作用であり、飽和濃度(2μM)の基底膜側prostaglandinE2存在下でもみられ,3)また管腔側バゾプレシン存在下でもみられる,4)prostaglandin I2は基底膜からはE2類似のVt変化を来すが、管腔側からはVtを変化させない,5)変化作用は1nMから見られはじめ、1μMで最大反応を示す,6)Vt変化作用はNa^+/K^+-ATPases阻害剤であるouabain(基底膜側)や、Na channel阻害薬amiloride(管腔側)存在下では消失するがK channel阻害薬barium(管腔側)では抑えられない,7)Vt脱分極は管腔側から基底膜側への経上皮Na