hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
高等真核細胞におけるDNAポリメラーゼεの機能解析

その生理的意味を解析中である。DNAポリメラーゼε(polε)は、高等真核細胞において染色体DNA複製・修復そして細胞周期の進行のチェック機構に関与し、多様な機能を持つことが示唆されている。polεの機能を分子レペルで明らかにすることを目的に研究を進めている。これまでに、マウスpolεの4つのサブユニット構造の解析、各サブユニットの細胞周期や紫外線照射時の転写レベルの変動を解析した。本年度はpolεが相互作用する他の因子を同定することで、その多様な機能の解明を試みた。polεが分類されるBタイプDNAポリメラーゼの2番目のサブユニットには、保存された短い12の領域が見いだされ、機能解析に鍵となる領域と思われる。この2番目のサブユニット(DPE2)に注目し、相互作用する因子を酵母の2ハイブリットの実験系で検索した。その結果、SAP18が再現性良く相互作用した。SAP18はクロマチンの構造変換や転写調節に関与しているSin3複合体の構成因子であり、ヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)も構成因子の一つに含まれている。DPE2とSAP18を大腸菌中や高等真核細胞中で過剰発現させたものを用いて、実際に高等真核細胞の中で相互作用することを確認した。さらに、レポータープラスミドを用いた細胞内での転写活性測定法により、DPE2がSAP18と相互作用することによって、転写を抑制することが判明した。さらに、その抑制がHDACの特異的阻害剤であるトリコスタチンAの投与により一部解除され、DPE2による転写抑制にHDACが関与していることも示した。以上から、DPE2を含むpolεが、ヒストンの脱アセチル化を調節して複製や修復の際のクロマチンの構造変換に関与している可能性が示唆された。DNAポリメラーゼε(pol ε)は、高等真核細胞において染色体DNA複製・修復そして細胞周期進行のチェックポイント機構に関与し、多様な機能を持つことが示唆されている。pol εの機能を分子レベルで解析することが本研究の目的である。これまでに、マウスpol εの4つのサブユニット構造の解析、転写レベルの解析、さらに2番目に大きなサブユニット(DPE2)がSin3複合体の構成成分であるSAP18と相互作用し、pol εが複製反応中にSin3を介してクロマチン構造や転写制御に関与しているヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)を呼び込んでいる可能性を示唆した。本年度はさらにpol εとSin3複合体との相互作用の詳細な研究を展開した。DPE2の部分欠損タンパク質を用いたSAP18との共沈実験から、DPE2の177250のアミノ酸領域がDPE2とSAP18の結合に特に重要であった。この領域はBタイプDNAポリメラーゼの2番目のサブユニットに保存された配列を含んでおり、他のDNAポリメラーゼの2番目のサブユニットとSAP18との結合の可能性も示唆された。また、界面活性剤やDNaseIを用いた細胞分画から、SAP18はヘテロクロマチン領域に多く存在しpol εの挙動に近いものだった。しかしSin3自体はいろいろな分画に存在していた。細胞分画の各画分の細胞周期変動を調べると。
新型炉用汎用多種冷却材対応流量計測システムの開発

次世代の革新的原子炉として安全性の高い液体金属冷却炉等の流量計測の精度改善のため,流速分布に依存する変換係数が不必要な流量計測システムの構築をこの一年間の研究期間で実施した.測定液体金属はガリウム・インジウム・スズ(Ga/In/Sn)からなる,通称ガリンスタンと呼ばれる液体金属を利用して実施している.高さ1100mm,幅1848mm,奥行き310mmの液体金属流量測定装置を製作し,配管内径20mmの水平配管試験部を設置し計測法等の最適化を測り,今後のデータ蓄積により新型炉用汎用多種冷却材対応流量計測システム開発に資する.次世代の革新炉として安全性の高い液体金属冷却炉の流量計測は,現状電磁流量計を適用している.電磁流量計はファラディーの法則を利用し,誘電体が配管に取り付けられた電磁流量計の電場を流れることによって生じる起電力を測定し,あらかじめ求められた変換係数を用い変換することにより流量を求めている.しかしながら流れの状態に大きく影響される変換係数を乗じて流量を求めているため、汎用としては測定精度は限られ(偏差7.510%)その精度は水流量計(同13%)を大きく上回る。この改善のため流速分布に依存する変換係数が不必要な流量計測システムの構築が必須であり,過渡流速分布を直接測定し流速分布を積分することによって,未開拓分野である流速分布計測による高精度液体金属流量計測システム開発のため,新型炉用汎用多種冷却材対応の流量計測が可能な高精度流量計測システム(偏差3%)基盤技術の開発を実施している.測定液体金属はGa(68.5%)/In(21.5%)/Sn(10%)からなる通称ガリンスタンと呼ばれる液体金属を利用して実施している.ガリンスタンの沸点は1300°Cと通常の金属とほぼ変わらないが,融点はー19°Cと低く常温で液体状態である.比重は6.44,粘度は0.0024Pa(常温)である.ガラスやアクリル系材料とは相性が良く濡れ性が良いことから配管内面の固液界面での超音波の透過は良く,また可視化ができることから流量測定試験部をアクリル系材で製作した.高さ1100mm,幅1848m,奥行き310mmの鋼材枠内に,流量測定が左右両方向に選択して可能な配管内径20mmの水平配管試験部を設置し,配管両端には液体金属タンクを設けて交番に流量を流し計測法等の最適化を実施した.計測に用いた超音波ドップラー流速分布計測装置は軽水炉給水用等に本受託者らが開発してきたものを適用した.今後もデータ取得を重ねて実施する.次世代の革新的原子炉として安全性の高い液体金属冷却炉等の流量計測の精度改善のため,流速分布に依存する変換係数が不必要な流量計測システムの構築をこの一年間の研究期間で実施した.測定液体金属はガリウム・インジウム・スズ(Ga/In/Sn)からなる,通称ガリンスタンと呼ばれる液体金属を利用して実施している.高さ1100mm,幅1848mm,奥行き310mmの液体金属流量測定装置を製作し,配管内径20mmの水平配管試験部を設置し計測法等の最適化を測り,今後のデータ蓄積により新型炉用汎用多種冷却材対応流量計測システム開発に資する.原子力システム安全工学
樹木の環境ストレス応答と葉内代謝産物の変動に関する研究

樹木のストレス耐性には種間差があり、どのような機能によってこの種間間が生じるのかを明らかにするために、樹木枯死の原因である活性酸素種を効率よく消去できる抗酸化物質に注目し、樹木葉内の抗酸化物質の機能及び環境ストレス、光合成阻害、抗酸化物質、活性酸素種との関係を明らかにすることを目的として研究を行った。全樹種のクロロフィル/全カロチノイド比は一定であり、草本植物にはほとんど見られないα-カロチン(α-Car)が多くの樹種に見出された。しかし、夏季に比べ冬季での全Carに対するβ-Car比は小さく、α-Carが夏季における熱ストレスに対して有効であることが示唆された。全樹種においてカロチノイド組成はほぼ一定であり、その葉内含量の季節変化が大きいことは、樹木全般にカロチノイドによる適応機構が存在していると考えられる。対照的に葉齢と共にその比は大きくなっており、季節的なストレスと老化ストレスとは異なっていた。落葉針葉樹のアスコルビン酸(AsA)含量を測定した結果、緩やかな季節変化に対して活性酸素の消去のためにAsAが有効に働いていたが、過剰な環境変化では葉内のAsAが急激に消費され、AsA再生系が成立せず、AsAによる活性酸素の消去能力が制限されていることが示唆された。また、常緑樹葉のAsA・トコフェロール(Toc)量の季節変化から、in vivoにおいてもAsA/Toc再生系が働いていると考えられる。秋の低温馴化により、常緑樹ではToc含量が増加しチラコイド膜の過酸化が抑制されていたことから、温度ストレスによる膜の過酸化に対してTocが有効であることが示された。また、一部の抗酸化物質が輸送タンパク質により反応部位に移動することを示した。これは、環境ストレス適応樹木が葉内抗酸化物質量を変化させることにより、ストレス耐性能を獲得し、その代謝制御が葉緑体内のストロマタンパク質により行われていることを示唆している。環境保全の観点から、酸性雨などの環境ストレスによる樹木の枯死が注目されている。植物枯死の原因とされる葉内の活性酸素を消去することができる低分子抗酸化剤(カロチン2種,キサントフィル5種,トコフェロール,アスコルビン酸)に注目し、樹種間の環境ストレス耐性能の違いと葉内抗酸化物質との関係を明らかにすることにより、抗酸化剤による樹木のストレス耐性能力の定量的な評価を行うことを目的として研究を行った。カロチノイド・トコフェロール等の葉内抗酸化物質の含量を調べた結果、草本植物にはほとんど見られないα-カロチンが多くの樹種の葉片に含まれており、常緑樹・落葉樹において全カロチンに占めるα-カロチンの割合が夏季に増加しており、対照的に秋季・冬季には大きく減少していた。また、低温ストレスに対する応答としてアスコルビン酸・トコフェロールの共役系がin vivoで観察された。さらに、トコフェロールの葉緑体内での輸送機構を調べた結果、ストロマタンパク質が大きな役割を果たしていることが明らかとなった。これらのことは樹木の葉内抗酸化物質が夏・冬季の環境ストレスに応答しており、一部の抗酸化剤が輸送タンパク質により輸送され、反応部位に移動することを表している。これは、環境ストレスに適応する樹木が葉内抗酸化剤の含量を変化させることにより、ストレス耐性能を獲得し、その代謝制御が葉緑体内のストロマタンパク質により行われていることを示唆している。
ニュ-ロブラスト-マ・グリオ-マ雑種細胞におけるシナプス形成・伝達機構

1.前年度の調査で、ジプチリ-ルcAMPやプロスタグランディンが効率よくシナプス形成を行う事を知り得たので、それらを用いてNG108-15筋スナプスを形成した。2.イノシト-ル1,4,5三リン酸の細胞内注入。ホルボ-ルジプチレ-トとブラジキニンの細胞外からの投与によるシナプス伝達効率の変化を観察し、いずれも上昇させた。3.細胞外と細胞内のCaの役割を、細胞外からのCaの流入を抑える条件下でシナプス伝達を調査した。4.脳型(m1タイプ)のムスカリン性アセチ-ルコリン受容体遺伝子を、トランスフェクトしたNG108-BM8が、PI代謝を高める事を確認したので、それらの細胞相互間で、シナプス(ムスカリン性)結合が生じないかを調査したが結果はネガティブであった。
トランスプロフェッショナル教育モデルを用いた卒前医学教育プログラム開発とその検証

本教育プログラムは、医学生への地域協働にかかる知識・スキルを学ぶ月1回の講義と年4回の合宿形式の地域の医療問題探索・解決を含む1年間のフィールドワークを構成する予定であったが、地域へ出向く負担を考え、まずは半年間隔で、講義と地域での実践を含むプログラムを複数回行っていくことが実現可能性が高いと判断した。そのプログラムを2018年度は医学部1年生を対象にした半年のプログラムを行なった。他、単発で地域医療に興味関心を高めるための講義・教育企画を行った。それぞれのプログラム・講義そのものは満足度が高いものであったことはアンケートで明らかになったが、個人能力を評価する項目ではほとんど変化なく、地域で活動を行なった際の結びつきが実感できていなかった。専門家などとの意見交換などで、講義と実践のつながりが明確ではないことが原因ではないかと考えた。今回の実践の中で、模擬体験ということでゲームを取り入れたまちづくりのシミュレーションを取り入れ、好評であったことも含め、座学と実践をできるだけ結びつけたコンテンツを加えていく必要がある。そのコンテンツ作成のため、専門家と討議を行い、2019年度はそのコンテンツ変更したプログラムの実装を行う予定である。また2018年度は低学年中心に行ったが、医学生高学年・多職種の学生にも実践し、対象者によっての違いを確かめることを検討し、他の学習企画によって、参加対象者になりうる学生と接触できた。計画した教育プログラムが想定していた効果を挙げられなかったため、さらに改良したプログラムを作成・実装する必要がでてきた。一方で、座学とフィールドワークの実践の組み合わせにおいて、その融合がシームレスにできるかどうかという点が注目すべきであるという点が明らかになった。本教育プログラムの非常に重要な点であり、解決点として、PBLやゲームベースのシミュレーションなども効果的であることが2018年度の実践で示唆された。今年度は、大学での講義を実際の地域の問題を解決するPBL・ゲーム学習にシフトを移し、地域での実践を行う。その際に大学に実習先の地域の人を呼んで、混じってもらうことで、地域での実践をイメージさせる。また地域での実践に関して、事前に課題を形成することで、問題解決の時間を多くとることで、対話の時間を増やす。その結果として、地域・学習者双方にとって、成長・改善の効果が期待でき、その測定を行う。本教育プログラムは、医学生への地域協働にかかる知識・スキルを学ぶ月1回の講義と年4回の合宿形式の地域の医療問題探索・解決を含む1年間のフィールドワークを構成する予定であったが、科研費期間終了後の持続性を考える必要が専門家より指摘された。特にフィールドワークに関しては参加者・教育者ならびに協力する地域の関係者の負担を考える必要があり、専門家、地域の行政担当者と相談の上、内容を練り直すことにした。また来年度から、半年の全学部対象のゼミを担当することになり、最初のトライアルとして教育プログラムを組むことにした。このプログラムに関して教育専門家よりアドバイスを受け、設定を行った。参加者の募集は、他の勉強会企画を通じて、本学ならびに近隣大学の地域医療に興味のある学生と面識を得ることができ、本企画への参加に関して非常に関心を持っている。来年度以降の参加者募集に関しても協力意向を示すものもおり、教育プログラムの評価がより深化する可能性がある。また他の非医療専門職の協力に関しても実施地域の行政担当者の尽力もあり、地域で実施されている町おこし勉強会の参加者の協力も得られることができた。本来であれば、1年目の後半から、教育プログラム開始予定であったが、2年目に繰り下げた。その理由として2年目である2018年4月から東北大学全学部1年生を対象にしたゼミ形式の授業を担当することになり、医学部を含めた他学部の学生を交えた教育活動が今回の研究目的に合致すると判断した。ただし、対象が1年生であることもあり、準備を十分にして、教育プログラムが円滑に行われた方がよいと判断し、予定を半年繰り下げ、準備期間をとって、2年目開始とした。準備期間中に日本以外の他地域の取り組みの文献検索、また丸森町の担当者、医療専門職・非医療専門職の協力者との打ち合わせ、地域医療や医学教育を専門とする医師との意見交換を十分に行えることができた。その結果、より教育プログラムが練られたこともあり、半年の準備期間が、今回の教育研究に対して、より意義のある効果を与えたことを踏まえ、おおむね順調に進展していると判断した。

そのコンテンツ作成のため、専門家と討議を行い、2019年度はそのコンテンツ変更したプログラムの実装を行う予定である。また2018年度は低学年中心に行ったが、医学生高学年・多職種の学生にも実践し、対象者によっての違いを確かめることを検討し、他の学習企画によって、参加対象者になりうる学生と接触できた。計画した教育プログラムが想定していた効果を挙げられなかったため、さらに改良したプログラムを作成・実装する必要がでてきた。一方で、座学とフィールドワークの実践の組み合わせにおいて、その融合がシームレスにできるかどうかという点が注目すべきであるという点が明らかになった。本教育プログラムの非常に重要な点であり、解決点として、PBLやゲームベースのシミュレーションなども効果的であることが2018年度の実践で示唆された。2年目となる2018年度は、以下の三つに重点を置く。1丸森町でのフィールドワークを主体とした教育活動を複数回実施する。現在、東北大学全学部1年生の中で希望する学生に対してゼミ式の授業を行う。このゼミで医学部を含めた複数の学部の学生同士ならびにフィールドワークでは社会人である医療職・医療以外の専門職との交流による教育効果を明らかにする。また、今年は東北大学、東北医科薬科大学の地域医療に興味をもつ学生を募集し、講義・フィールドワークを行う。昨年度、興味がある学生を複数見いだすことができ、彼らの参画を得て、周辺の学生をさらに集めることが容易になる。また丸森町の非医療専門職と複数面会し、本教育プログラムの協力を得た。2上記の教育活動に参加した学生・ならびに協力いただいた専門職の方にインタビュー調査を行う。昨年度の当部の事業で、質的研究の専門家と面識を得ることができ、倫理申請やインタビューガイドの作成に関しても協力を得ることができた。今後も協力・指導を得ながら、効率的に実施する予定である。3他地域で行われている医療を超えた多職種での取り組みについての現地調査を行う。これまでの専門家のディスカッションの中で、医療職が地域を創生する取り組みに中心的に参画する取り組みが複数明らかになった。今年度は、このような取り組みによって、医療職は医療職以外から何を得ることができたか明らかにする。そのことで、現在認識していない教育効果の可能性を検討する。今年度は、大学での講義を実際の地域の問題を解決するPBL・ゲーム学習にシフトを移し、地域での実践を行う。その際に大学に実習先の地域の人を呼んで、混じってもらうことで、地域での実践をイメージさせる。また地域での実践に関して、事前に課題を形成することで、問題解決の時間を多くとることで、対話の時間を増やす。その結果として、地域・学習者双方にとって、成長・改善の効果が期待でき、その測定を行う。当該年度に教育プログラムの実施が行われなかったため、講師謝金やインタビュー謝金などの発生がなく、また打ち合わせ旅費などを本支出以外の学会出席や会議などで支出したため、その分、予定より出費が少額になった。ただし、次年度から教育プログラムを開始していく中で、講師謝金やインタビュー謝金などが発生するため、次年度に持ち越し、使用する予定である。
ヒト顎関節滑膜細胞株を用いたストレスシグナル伝達経路の解析と遺伝子治療への応用

われわれは,顎関節症の発症および病態形成には,メカニカルストレスを直接受ける滑膜組織,とりわけ滑膜表層細胞が深く関与していると考え,本研究では,ヒト顎関節滑膜細胞を分離・培養して細胞株を樹立し,その特性を明らかにするとともに,滑膜細胞のメカニカルストレスおよび各種炎症性メディエーターに対する滑膜細胞の応答を解明し,顎関節症の発症および病態形成における滑膜細胞の役割を明らかにすることを目的とした.本研究では,充分なインフォームドコンセントの得られた患者から顎関節滑膜細胞の分離・培養に成功し,ヒト顎関節由来の滑膜細胞株を樹立した.樹立した滑膜細胞株は線維芽細胞様の性質を有しており,免疫二重染色の結果から滑膜表層細胞由来のB型細胞であることが明らかとなった.さらに,この培養滑膜細胞は,メカニカルストレスに応答して,種々の炎症性サイトカインや炎症性メディエーター,マトリックスメタロプロテアーゼを産生して関節破壊に関与すること,RANKL(receptor activator of NF・κBligand)を発現して破骨細胞の分化を促進すること,滑膜には多分化能を有した幹細胞様の特性を有した細胞が存在しており,関節の修復に関与している可能性があること,を明らかにした.残念ながら,滑膜細胞におけるストレスシグナルの伝達経路解明には至らなかったが,本研究の結果は,顎関節症の発症および病態形成における滑膜細胞の役割を明らかにし,顎関節症の病態解明に寄与したと自負している.われわれは,顎関節症の発症および病態形成には,メカニカルストレスを直接受ける滑膜組織,とりわけ滑膜表層細胞が深く関与していると考え,本研究では,ヒト顎関節滑膜細胞を分離・培養して細胞株を樹立し,その特性を明らかにするとともに,滑膜細胞のメカニカルストレスおよび各種炎症性メディエーターに対する滑膜細胞の応答を解明し,顎関節症の発症および病態形成における滑膜細胞の役割を明らかにすることを目的とした.本研究では,充分なインフォームドコンセントの得られた患者から顎関節滑膜細胞の分離・培養に成功し,ヒト顎関節由来の滑膜細胞株を樹立した.樹立した滑膜細胞株は線維芽細胞様の性質を有しており,免疫二重染色の結果から滑膜表層細胞由来のB型細胞であることが明らかとなった.さらに,この培養滑膜細胞は,メカニカルストレスに応答して,種々の炎症性サイトカインや炎症性メディエーター,マトリックスメタロプロテアーゼを産生して関節破壊に関与すること,RANKL(receptor activator of NF・κBligand)を発現して破骨細胞の分化を促進すること,滑膜には多分化能を有した幹細胞様の特性を有した細胞が存在しており,関節の修復に関与している可能性があること,を明らかにした.残念ながら,滑膜細胞におけるストレスシグナルの伝達経路解明には至らなかったが,本研究の結果は,顎関節症の発症および病態形成における滑膜細胞の役割を明らかにし,顎関節症の病態解明に寄与したと自負している.ヒト顎関節滑膜細胞株の樹立とその特性インフォームド・コンセントの十分得られた患者から摘出した顎関節滑膜組織から、outgrowth法によりヒト顎関節滑膜細胞株を樹立した。培養滑膜細胞は線維芽細胞様の形態をしており、倍加時間は約40時間であった。培養滑膜細胞は線維芽細胞マーカー(vimentin, prolyl-4-hydroxylase)を発現していたが、T細胞(CD4)、B細胞(CD19)、血管内皮細胞(CD31,von Willebrand factor)のマーカーは発現しておらず、線維芽細胞様の性質を有しているものと考えられた。また、すべての細胞が滑膜B型細胞のマーカーであるlamininおよびHsp 27の両者を発現しており、この細胞は滑膜B型細胞由来であることが示唆された。しかし、一部の細胞がマクロファージのマーカー(CD68)を共発現しており、A型とB型の中間型の細胞がヒト顎関節滑膜表層に存在していることが示唆された。ヒト顎関節由来の滑膜細胞のメカニカルストレスに対する細胞応答の解析過剰な伸展ストレスを加えた滑膜細胞からtotal RNAを回収してRT-PCRに供し、iNOSおよび炎症性サイトカイン(IL-1β、IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-8)の遺伝子発現を調べた。滑膜細胞に伸展ストレスを加えると、iNOS、IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8の発現が増加した。伸展刺激を加えた時間での遺伝子発現量の検討では、TNF-αは伸展刺激前では検出できなかったが、刺激後早期(30分)にその発現が最大となった。IL-1βは徐々に増加し、12時間で約8倍となった。IL-6、IL-8、iNOSは3時間6時間でその発現が最大(iNOS:約5倍、IL-6:約15倍、IL-8:約10倍)となり、その後減少していった。これらの結果から、メカニカルストレスは、滑膜細胞にiNOSおよび炎症性サイトカイン(IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8)の遺伝子発現を誘導することが明らかとなった。メカニカルストレスに応答して滑膜細胞から産生されたこれらの炎症性メディエーターが複合的に作用して顎関節症の発症および病態形成に関与している可能性が示唆された。

われわれは,平成17年度に,ヒト顎関節滑膜細胞株の樹立に成功し,その特性を明らかにした.本年度は,樹立したヒト顎関節滑膜細胞株のメカニカルストレスおよび各種炎症性メディエーターに対する応答について検討した.また,関節修復への滑膜細胞の関与を明らかにするために,骨,軟骨,脂肪への分化能を検討した.ヒト顎関節滑膜細胞のメカニカルストレスに対する応答ヒト顎関節滑膜細胞にメカニカルストレスを負荷すると,iNOSおよび炎症性サイトカイン(IL-1β,TNF-α,IL-6,IL-8)の遺伝子発現が誘導されることが明らかとなり,メカニカルストレスに応答して滑膜細胞から産生されたこれらの炎症性メディエーターが複合的に作用して顎関節症の発症および病態形成に関与している可能性が示唆された.ヒト顎関節滑膜細胞を介した関節破壊に及ぼすTNF-αの影響ヒト顎関節滑膜細胞はTNF-α刺激により,種々の炎症性メディエーター(IL-1β,IL-6,IL-8,COX-2)やマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP-1,MMP-13)を産生して,関節破壊に関与している可能性が示唆された.また,TNF-α刺激により,滑膜細胞のRANKLの発現が上昇することから,破骨細胞の分化を制御している可能性が示唆された.ヒト顎関節滑膜細胞の骨軟骨脂肪への分化能ヒト顎関節滑膜細胞を骨,軟骨,脂肪への分化誘導培地で培養すると,それぞれ骨基質の産生,軟骨基質の産生,脂肪顆粒が確認され,さらに,各分化マーカーの発現が上昇したことから,ヒト顎関節滑膜には骨,軟骨,脂肪への多分化能を有する幹細胞が存在し,滑膜細胞が破壊された関節組織の修復に関与している可能性が示唆された.
リン酸化酵素MNB/DYRK1Aの過剰発現とダウン症

ヒト21番染色体のダウン症関連領域からクローニングされたリン酸化酵素MNB/DYRK1A遺伝子は、ダウン症で見られる中枢神経系の発達障害に関与している可能性が考えられているが、その細胞内の機能についての詳細は明らかでない。私達の研究から、リン酸化酵素MNB/DYRK1Aは中心体の複製に関与している可能性が示されており、本研究では中心体複製の開始するS期からM期への進行においてMNB/DYRK1Aが果たす役割について解析した。HeLa細胞をチミジンブロック法によりG1/S期に同調した。次に、チミジン除去後の各時間に細胞抽出液を調製し、MNB/DYRK1Aに対する抗体を用いたウエスタンブロット法により細胞周期の各時期におけるMNB/DYRK1Aの発現量を調べた。また、チュブリンタンパクの重合を阻害するノコダゾールをチミジン除去後に添加した細胞からも抽出液を調製して、同様の方法によってMNB/DYRK1Aの発現量を調べた。いずれの場合も発現量の変動は見られなかったが、ノコダゾール処理によりM期に停止した細胞ではMNB/DYRK1Aのバンドが高分子側に移動した。この移動はホスファターゼ処理により元の移動度に戻ることから、ノコダゾール処理によりMNB/DYRK1AがM期特異的にリン酸化されることが分かった。また、MNB/DYRK1Aのリン酸化はM期の直前に4時間ノコダゾール処理をしたときは見られたが、他の細胞周期の時期に4時間処理をしても検出されなかった。このことから、ノコダゾール処理による微小管重合の阻害を介したM期チェックポイント機構に、MNB/DYRK1Aのリン酸化が重要な役割を担っている可能性が考えられる。ヒト21番染色体のダウン症関連領域からクローニングされたリン酸化酵素MNB/DYRK1A遺伝子は、ダウン症で見られる中枢神経系の発達障害に関与している可能性が考えられているが、その細胞内の機能についての詳細はあきらかでない。私達の研究から、リン酸化酵素MNB/DYRK1Aは中心体の複製に関与している可能性が示されており、本年度は、中心体複製の開始するS期からM期への進行においてMNB/DYRK1Aが果たす役割について解析した。次に、チミジン除去後の各時間に細胞抽出液を調製し、MNB/DYRK1Aに対する抗体を用いたウエスタンブロット法により、細胞周期の各時期におけるMNB/DYRK1Aの発現量を調べた。また、チュブリンタンパクの重合を阻害するノコダゾールをチミジン除去後に添加してM期に停止させた細胞からも抽出液を調製して、同様の方法によってMNB/DYRK1Aの発現量を調べた。いずれの場合も発現量の変動は見られなかったが、ノコダゾール処理により、MNB/DYRK1Aのバンドが高分子側に移動し、このバンドはホスファターゼ処理により元の移動度にもどることが分かった。また、リン酸化チロシンを認識する抗体を用いたウエスタンブロット法の結果、非同調細胞および同調細胞のいずれにおいてもチロシン残基のリン酸化は認められなかった。以上の結果より、MNB/DYRK1AはM期においてセリン/スレオニン残基のリン酸化を受けることが明らかになった。ノコダゾール処理による微小管合成の阻害はG2/Mチェック機構を作動させ、MNB/DYRK1Aのリン酸化を引き起こし、このリン酸化がMNB/DYRK1A酵素活性を正あるいは負に調節して、細胞周期を停止させた可能性が考えられる。ヒト21番染色体のダウン症関連領域からクローニングされたMNB/DYRK1A遺伝子はリン酸化酵素をコードしているが、その細胞内の機能についての詳細は明らかでない。

私達は昨年度、細胞周期進行におけるリン酸化酵素MNB/DYRK1Aの果たす役割を調べる目的で、HeLa細胞を用いて細胞周期の各時期におけるMNB/DYRK1Aタンパク質のリン酸化について解析した。その結果、チュブリンタンパクの重合を阻害するノコダゾールでHeLa細胞を処理すると、MNB/DYRK1AはM期に特異的にリン酸化されることが明らかになった。そこで、このリン酸化の生理的意義を明らかにする目的でMNB/DYRK1Aのリン酸化部位の同定を試みた。MNB/DYRK1Aのリン酸化活性にはactivation loop内のチロシン(Tyr321)のリン酸化が必須とされている。また、219番目のチロシンをフェニルアラニンに置換するとリン酸化活性が減少するという報告がある。そこで、MNB/DYRK1AのORFをpBluescript II SK(+)に導入後、invitrogenのGeneTailor^<TM>Site-Directed MutagenesisSystem kitを用いて、219番目と321番のTyrをPheに変えた点突然変異体(Tyr219PheおよびTyr321Phe)を作製した。また、MNB/DYRK1A蛋白質のC末端側には、セリン・スレオニンが多く存在する領域があり、この領域のいずれかのアミノ酸残基がリン酸化される可能性も考えられるので、この領域を欠失させた変異体を作製した。また、C末端をさらに削りキナーゼドメインも持たない変異体を作製した。さらに、これら点突然変異型、C末端欠失変異型のMNB/DYRK1A DNAをpBluescript II SK(+)から切り出し後pcDNA3.1に組み込み、リポフェクトアミンを用いてトランスフェクションを行うことにより、HeLa細胞で発現できることが分かった。
ショウジョウバエを用いたヒト神経変性疾患遺伝子の機能解析

本研究はショウジョウバエに機能未知な哺乳類遺伝子を導入・発現し、個体におけるヒトやマウスの遺伝子の機能を、簡便に解明することを目的とした。特にヒトの病態に関連した遺伝子は、原因遺伝子(候補)として単離されてきたために、生体内生理機能が不明なものが多い。従って、個体におけるこれら遺伝子の簡便な機能解析は、発病原因解明や薬剤の開発の上で重要な知見をもたらす。本研究では、アルツハイマー病の原因遺伝子の1つとされているAPPの細胞質ドメインに結合するタンパク質X11Lの機能をショウジョウバエを用いて解析した。我々が単離したX11LはAPPに結合して、APPの代謝を制御するタンパク質であるが、その正確な生理機能はいまだに未解明である。ショウジョウバエGAL4-UASシステムを用いて、ヒトX11LのcDNAをハエの複眼成虫原基に特異的に発現させた。ショウジョウバエのX11Lに相当する遺伝子dX11Lをクローニングし、同様にcDNAをハエの複眼成虫原基に特異的に発現させた。その結果、粗眼の表現型が現れた。この原因を探る目的で、発生各ステージにおけるX11L発原効果を調べたところ、三令幼虫までは正常に発生していたが、その後、X11Lを発現している成虫元気ではアポトーシスを起こして視神経細胞が減少し、個眼の形成が不十分となってていることが、明らかになった。これらの結果から、X11LはAPPの代謝調節だけではなく、神経発生に関与する遺伝子であることが示唆された。本研究は、機能未知な遺伝子の機能をショウジョウバエを用いて解析することが有効である可能性を提示した。
等質空間と変分問題

複素空間形内の部分多様体に関する積分幾何学は、その多重Kahler角度という概念を導入しこれを使って詳しく調べられることを代表者は以前に示した。複素射影平面の場合はさらに詳しい積分公式(Poincareの公式)が得られることを姜との共著論文で示した。これらのPoincareの公式の応用として、実曲面上のKahler角度の積分と面積の間の不等式を得た。この不等式からある種の変分問題の最小解が得られる。さらに、Lie群上の積分を、対称対を使って計算することにより、実曲面と余次元2の部分多様体に関するPoincareの公式も完成し発表した。Lie群上の積分を、対称対を使って計算する方法は複素射影空間以外の等質空間におけるPoincareの公式を定式化するときにも有効になることを代表者は示した。等質概Hermite多様体の概複素部分多様体に関する積分幾何学の研究を代表者は高橋、姜、酒井と共同で行なった。共著論文では等質概Hermite多様体の概複素部分多様体のPoincareの公式を定式化した。線形イソトロピー群が接ベクトル空間の外積代数に既約に作用している場合のPoincareの公式は、二つの概複素部分多様体の交点数の積分がそれぞれの体積の積の普遍定数倍になるという最も簡単な形になり、Santaloの示した複素空間形におけるPoincareの公式の一般化になっている。より一般的な設定のもとでも同様の積分公式が成り立つことを酒井は証明した。また酒井は、実空間形の場合の2次不変多項式から定まる積分不変量に関する交叉積分公式について、二つの部分多様体の不変量による具体的な表示を与えた。これはChern-FedererおよびC.S.Chenによる交叉積分公式のある種の拡張にあたる。研究代表者は積分幾何学の手法を等質空間内の変分問題に応用するために、Poincareの積分公式の具体的な表示に関する研究を進めた。今までに複素射影空間内の一般次元の実部分多様体に対するPoincareの公式を表示するためにKahler角度を拡張した概念:多重Kahler角度を導入し、多重Kahler角度による一般の部分多様体のPoincareの公式の表示の一般論を作ってきた。この一般論を利用していくつかの低次元または低余次元の部分多様体に関するPoincareの公式を具体的に表示することに成功した。この結果、部分多様体の多重Kahler角度の積分と体積に関する不等式を導くことができ、これらの幾何学的量に関する変分問題を扱うための道具が整ってきた。多重Kahler角度は部分多様体の基本的な量であり、Poincareの公式の表示以外にも活用が期待できる。さらに複素射影空間以外のRiemann等質空間におけるPoincareの公式の表示も分担者:間下と共同で求めることができた。これらの研究では群作用の軌道の幾何学が積分公式の具体的表示を得るために有効であることがわかった。群作用の軌道の幾何学はPoincareの公式だけではなくそれ以外の交叉積分公式を定式化する際にも有効であることが明かになってきている。これまでの研究はPoincareの公式より一般的な交叉積分公式に関する今後の研究の基盤になるものと思われる。特に本研究は平成15年度に継続することになっているので、平成14年度の研究は成果を上げるとともに平成15年度の研究に基盤を作ったことにもなる。研究代表者は積分幾何学を等質空間内の変分問題に応用するために、Poincareの積分公式とCroftonの積分公式の具体的な表示に関する研究を進めた。

今までに複素空間形内の一般次元の実部分多様体に対するPoincareの公式を表示するためにKahler角度を拡張した概念:多重Kahler角度を導入し、多重Kahler角度による部分多様体のPoincareの公式を表示するための一般論を作ってきた。この一般論を利用していくつかの場合に部分多様体に関するPoincareの公式を具体的に表示することに成功した。この結果、部分多様体の多重Kahler角度の積分と体積に関する不等式を導くことができ、これらの幾何学的量に関する変分問題を扱うための道具が整ってきた。多重Kahler角度は部分多様体の基本的な量であり、Poincareの公式の表示以外にもHerimite多様体内の部分多様体への活用方法がわかってきた。さらにその他のRiemann等質空間におけるPoincareの公式の表示も求めることができた。これらの研究では群作用の軌道の幾何学が積分公式の具体的表示を得るために有効であることがわかった。さらに非コンパクト型Riemann対称空間内の鏡映部分多様体によるcroftonの公式の定式化にも有効であることがわかってきた。群作用の軌道の幾何学はPoincareの公式だけではなくそれ以外の交叉積分公式を定式化する際にも有効であることが明かになってきている。これまでの研究はPoincareの公式より一般的な交叉積分公式に関する今後の研究の基盤になるものと思われる。
光学分割機能を有する多糖誘導体の合成と液体クロマトグラフィーへの応用

セルロースと種々の塩化置換ベンゾイルおよび置換フェニルイソシアナートを反応させ、相当するセルローストリベンゾエートとフェニルカルバメート誘導体を合成した。各誘導体をシリカゲルに吸着させ、高速液体クロマトグラフィー用の充填剤を調製し、種々のラセミ体に対する光学分割能を評価した。その結果、ベンゾエートについては、置換基として電子吸引性基より電子供与性基を導入した方が高い光学分割能を示し、特に、3ーメチルベンゾエートは広範囲のラセミ体を分割し得る有用な充填剤を与える事を見出した。セルローストリスフェニルカルバメート誘導体については、30種類の誘導体の分割能を系統的に調べた。その結果、光学分割能はカルバメート基の極性とセルロース誘導体の高次構造に強く依存することが明らかになった。高い光学分割能を示す誘導体としては、3,5ージメチルフェニルカルバメート、4ーtーブチルフェニルカルバメート、3,5ージクロロフェニルカルバメートが見出された。特に、最初の二つは極めて実用性の高い充填剤であり、多くの医薬品等に対しても高い光学分割能を示し、今後、広く利用されると思われる。アミロースについても15種のトリスフェニルカルバメート誘導体を合成し、その光学分割能を評価した。これらのうちでは、3,5ージメチルフェニルカルバメート誘導体が高い光学分割能を示す実用性の高いキラル充填剤を与えた。このアミロース誘導体の下斉識別能は、相当するセルロース誘導体のそれとは大きく異なっており、セルロース誘導体で光学分割できなかったラセミ体をかなりの確率で分割することができ、このカラムも今後、広く利用されると思われる。セルロースとアミロースのトリス(3,5ージメチルフェニルカルバメート)を用いて、大量分取に使用できる充填剤を調製し、その実用性を評価することができた。各誘導体を元素分析,分光学的手法で調べた結果、いずれも三置換体であることが明らかとなった。これらの誘導体をシリカゲルに吸着させ、高速液体クロマト用の充填剤を調製し、種々のラセミ体に対する光学分割能を評価した。ベンゾエート,カルバメートいずれについても、その光学分割能は置換基の種類に大きく依存した。ベンゾエートについては、置換基としてメトキシ,メチル,クロロ基等を導入したが、全般に電子吸引性の置換基より供与性のメチル基の方が、高い光学分割能を有する充填剤を与えた。特に、3位にメチル基を持つ誘導体は、広範囲のラセミ体の分割に有用であることが明らかとなった。しかし、2位に置換基を導入した誘導体は極めて低い分割能しか示さなかった。置換フェニルカルバメート誘導体については、20種類の誘導体の分割能を系統的に調べた。9種類のパラ置換体のうちでは、メチル,エチル基のような電子供性の置換基あるいはクロロ,トリフルオロメチル基のような電子吸引性の置換基を有するもののいずれかが無置換のものより、より高い高学分割能を示すことが明らかとなった。しかし、メトキシやニトロ基のようなヘテロ元素を含む置換基は好ましくなかった。これらの結果をもとに、3.5-ジメチルおよび3.5-ジクロロ置換体を調製したが、これらは極めて優れた光学分割能を有していた。特に、前者は耐久性もよく、実用性の高い充填剤となり、アトロピン,β-ブロッカーなどの医薬品に対しても良好な分割能を示した。これらのセルローストリスフェニルカルバメート誘導体のうち、高い光学分割能を示すものは、いずれも液晶形成能を有し、シリカゲル上では規則的な構造をとっていることが明らかになった。

多糖の一種であるアミロースと,メトキシ,メチル,エチル,クロロ,ブロモ,ニトロなどの置換基を有する10種類のモノあるいはジ置換フェニルイソシアナートとを反応させ,アミローストリスフェニルカルバメート誘導体を合成した.これらのカルバメート誘導体をシリカゲルに吸着させて高速液体クロマトグラフィー用充填剤とし,トランスースチルベンオキシド,トレガー塩基,ベンゾイン, 2ーフェニルシクロヘキサノン,フラバノンなどに対する光学分割能を評価した.その結果,充填剤の光学分割能は置換基の影響を強く受け,置換基としては電子供与性のアルキルあるいは電子吸引性のハロゲンが好ましく,特に, 3,5ージ置換体が良好な分割結果を与えた.中でも, 3,5ージメチル誘導体は,分割可能なラセミ体の範囲が広く,上述のラセミ体の多くを完全分割することができた.この充填剤は,先に見出した実用性の高い充填剤であるセルローストリスー3,5ージメチルフェニルカルバメートに匹敵する有用な充填剤と思われる.また,アミロース誘導体の光学分割能は,セルロース誘導体の分割能とは異なり,これまでセルロース誘導体で光学分割できなかったラセミ体のいくつかを完全分割することができた.アミローストリスー3,5ージクロロフェニルカルバメートはプロメタジン,ジクロロイソプレテノールなどの医薬品に対して,特異的に優れた分割能を示した.キトサン,キシランについても3,5ードメチルフェニルカルバメート誘導体を合成し,その光学分割能を評価した.キトサン誘導体については特によく分割される化合物は見当らなかった.キシラン誘導体は,特徴のある光学分割能を示し,トレガー基やコバルトのトリスアセチルアセトナート錯体をセルロースやアミロースのカルバメート誘導体よりかなりよく分割することができた.セルロースおよびアミロースのトリス(3,5ージメチルフェニルカルバメート)を粒径20μm、孔径100nmのシリカゲルに吸着させて高速液体クロマトグラフィー用のキラル充填剤を調製した。各充填剤を分取用カラム(内径2cm、長さ50cm)にスラリー充填し、種々のラセミ体に対する光学分割能を評価した。その結果、これらのキラルカラムは、より高価な10μmのキラル充填剤を充填した分析用カラム(内径0.46cm、長さ2.5cm)とほぼ同じ理論段数と光学分割能を示した。セルロース誘導体のカラムを用いてラセミのプロプラノロールとオキシプレノロールの分割を行ったところ、それぞれ一度に100mg、400mgを完全に分けることができ、これらのキラル充填剤が分取用に有用であることが明らかになった。新規らセルローストリスフェニルカルバメート誘導体としてトリス(4ーtーブチルフェニルカルバメート)ならびにトリス(3,5ージーtーブチルフェニルカルバメート)を合成し、その光学分割能を評価した。その結果、トリス(4ーtーブチルフェニルカルバメート)誘導体は、これまで実用性の高いキラル固定相として知られているセルローストリス(3,5ージメチルフェニルカルバメート)とは異なる不斉識別能を有する極めて有用なキラル充填剤を与えることが明らかとなった。この新しいキラルカラムを用いると、これまでのセルロース誘導体では光学分割が困難であったニカルジピンが完全に分割できた。
子どもの製作活動における発話と非認知的能力の発達に関する研究

本研究の目的は,保育における子どもの造形的な製作活動が多様な子どもの発話や非認知的能力の伸長を促すことを実践的に明らかにすることにある。方法としては,子どもの製作活動の質や創造性と,それによって促される発話や非認知的能力の5つの指標(安心,主体性,共同性,興味,創造性)の発達との相関を分析し,チャートによってその結果を可視化した。研究対象としては,以下の事例を対象に分析を行った。・天童東幼稚園:「土ねんどでつくる」および,「ダンボールでつくる「きょうりゅうワールド」」(年長児)・山形大学附属幼稚園:「誕生日の掲示物」(年中・年長児)「おりょうりプレート」(年少児)結果として,質の高い製作活動を促すことが子どもの発話や非認知的能力の活性化にとって有効であることを明らかにした。「誕生日の掲示物」や「おりょうりプレート」においては,作品について子どもから聞き取りを行うなかで,子どもが製作活動に持つイメージや物語が,作品に対する発話を生み出し,またそのようなイメージや物語が作品製作を促進する原動力であることが確認された。質の高い製作活動は,見立てや工夫,試行錯誤といった創造的行為を内包するとともに,発話や非認知的能力の発達につながる行為を促している。子どもの製作活動における創造性と非認知的能力の伸長を架橋するのはイメージの力であり,保育者は製作活動を促進するイメージを子どもたちが形成し,共有していくよう支援する必要があると考察した。本研究の成果の一部を,「子どもの製作活動における発話と非認知的能力の活性化」として論文化し,大学美術教育学会誌『美術教育学研究』第51号(2019年3月)に投稿し,採択された。天童東幼稚園における実践研究では,事例の記録および分析をもとに,製作活動による非認知的能力の活性化について評価を行い,その有効性をチャートによる5つの指標によって可視化することができた。また,質の高い造形活動を促す支援(声がけや環境設定)などが,結果として造形活動に伴う非認知的能力の活性化に有効であることを検証できた。また,山形大学附属幼稚園の実践においては,「誕生日を示す掲示物」や「おりょうりプレート」の製作を通じて,子どもの多くの発話を促すことができ,またそれによる保育者の子どもの理解の伸張,およびその結果として子どもの非認知的能力に対する有効な支援の検討を行うことが可能となった。また,製作物の造形的な特質と,発話の質量とを分析することにより,両者の相関の高さが明らかになった。子どもの育てたい非認知的能力の見取りや評価の客観性を高めていくことや,素材やテーマの吟味も含め,どのような製作活動およびその積み重ねが発話や非認知的能力を伸長させていくのかを継続的に研究していくことが必要である。また,今年度の研究では,個々の事例を質的に分析することに重点を置いていた。そのため,以下の方策が必要である。1)発話と育てたい非認知的能力との相関について分析をおこなうこと:発話の内容を分析し,どのような言葉が育てたい非認知的能力の5項目(安心,主体性,共同性,興味,創造性)にあてはまるのか,またどのような発話がそれぞれの項目の質的な高まりを示すのかが明確になれば,看取りや評価の客観性が高まると考えられる。今後は発話のデータマイニングなどの手法も取り入れた分析を行い,評価の客観性を高める必要がある。2)製作活動による発話や非認知的能力の活性化を段階的に示すカリキュラムの開発:幼児期は子どもの諸能力の伸張が時期によって大きく異なることから,幼児期の終わりまでに育てたい姿を視野に入れたうえで,年少・年中・年長それぞれの時期にどのような非認知的能力をどこまで育てるのか明確にし,それぞれの時期における有効な活動を選択する必要がある。そのため,製作活動をはじめとする幼児の諸活動における発話や非認知的能力の発達の分析から,それぞれの時期における諸能力の発達を可視化するチャートの標準的な姿を明確にし,それぞれの時期にふさわしい製作活動を配置したカリキュラムを策定したい。製作活動のどのような特性が非認知的能力のどの面の伸張に関して有効であるのか,また発達段階との相関からどの段階でどのよぷな製作活動を行うことが非認知能力の伸張にとって有効なのかを明らかにすることにより,カリキュラムにおける製作活動の位置づけに対して有効な提言を行うことができるものと考える。

「誕生日の掲示物」や「おりょうりプレート」においては,作品について子どもから聞き取りを行うなかで,子どもが製作活動に持つイメージや物語が,作品に対する発話を生み出し,またそのようなイメージや物語が作品製作を促進する原動力であることが確認された。質の高い製作活動は,見立てや工夫,試行錯誤といった創造的行為を内包するとともに,発話や非認知的能力の発達につながる行為を促している。子どもの製作活動における創造性と非認知的能力の伸長を架橋するのはイメージの力であり,保育者は製作活動を促進するイメージを子どもたちが形成し,共有していくよう支援する必要があると考察した。本研究の成果の一部を,「子どもの製作活動における発話と非認知的能力の活性化」として論文化し,大学美術教育学会誌『美術教育学研究』第51号(2019年3月)に投稿し,採択された。天童東幼稚園における実践研究では,事例の記録および分析をもとに,製作活動による非認知的能力の活性化について評価を行い,その有効性をチャートによる5つの指標によって可視化することができた。また,質の高い造形活動を促す支援(声がけや環境設定)などが,結果として造形活動に伴う非認知的能力の活性化に有効であることを検証できた。また,山形大学附属幼稚園の実践においては,「誕生日を示す掲示物」や「おりょうりプレート」の製作を通じて,子どもの多くの発話を促すことができ,またそれによる保育者の子どもの理解の伸張,およびその結果として子どもの非認知的能力に対する有効な支援の検討を行うことが可能となった。また,製作物の造形的な特質と,発話の質量とを分析することにより,両者の相関の高さが明らかになった。子どもの育てたい非認知的能力の見取りや評価の客観性を高めていくことや,素材やテーマの吟味も含め,どのような製作活動およびその積み重ねが発話や非認知的能力を伸長させていくのかを継続的に研究していくことが必要である。また,今年度の研究では,個々の事例を質的に分析することに重点を置いていた。そのため,以下の方策が必要である。1)発話と育てたい非認知的能力との相関について分析をおこなうこと:発話の内容を分析し,どのような言葉が育てたい非認知的能力の5項目(安心,主体性,共同性,興味,創造性)にあてはまるのか,またどのような発話がそれぞれの項目の質的な高まりを示すのかが明確になれば,看取りや評価の客観性が高まると考えられる。今後は発話のデータマイニングなどの手法も取り入れた分析を行い,評価の客観性を高める必要がある。2)製作活動による発話や非認知的能力の活性化を段階的に示すカリキュラムの開発:幼児期は子どもの諸能力の伸張が時期によって大きく異なることから,幼児期の終わりまでに育てたい姿を視野に入れたうえで,年少・年中・年長それぞれの時期にどのような非認知的能力をどこまで育てるのか明確にし,それぞれの時期における有効な活動を選択する必要がある。そのため,製作活動をはじめとする幼児の諸活動における発話や非認知的能力の発達の分析から,それぞれの時期における諸能力の発達を可視化するチャートの標準的な姿を明確にし,それぞれの時期にふさわしい製作活動を配置したカリキュラムを策定したい。製作活動のどのような特性が非認知的能力のどの面の伸張に関して有効であるのか,また発達段階との相関からどの段階でどのよぷな製作活動を行うことが非認知能力の伸張にとって有効なのかを明らかにすることにより,カリキュラムにおける製作活動の位置づけに対して有効な提言を行うことができるものと考える。
日本における保険医療カードシステムの評価の研究

・保険医療カードシステムの調査我が国での健康・福祉分野におけるカードシステムの利用についての試みは30件を越えている。その内20件については、企画、研究、開発、または試行の段階にあるものであり、その中の5件は中断ないし計画の再検討をしている。中断ないし計画再検討の理由は、システム環境の未成熟、事業主体の未決断、機器の性能上の不備であった。一方、実用を志向するシステムは10件あり、このうち4件は既に実用段階にあるとしている。用いられているカードメディアは枚数で光カード、インテリジェントカード、メモリーカードの順に多くなっている。・評価モデルについてカードシステムの実用性に対する評価モデルは技術的側面、経済的側面、医療的側面のそれぞれから考えなければならい。それぞれのモデルを構成する要素は互いに密接に関連し合っている。また、これらを総合したカードシステムの利用例として基準薬局を想定した病院からの院外処方にカードを用いる実験システムを総合的な評価モデルの適用例とした。まず、技術的観点では、カードの記憶容量、読み書きに要する時間、各端末機器でのユーザインターフェイス、標準化への準拠状況、機密保護、データの保全などの要素が含まれる。経済的にはカードメディアや端末機器の価格、端末機器の普及程度による効果などが考えられる。医療的側面では何よりそのカードシステムの適用対象によって全体の評価モデルが異なってくる。主要な要素としては、処方や検査結果などのカードに記憶させるべき項目の種類とその履歴範囲、すなわち過去にどれだけ遡って経過が辿れるか、あるいは重要なデータだけを抜粋して記憶させるか、がある。また、これらのデータの収集に要する機構あるいは労力、内容の表現・記述の統一性などがある。現在の評価モデルはこれらの項目を列記して主観的なスコアを数えるにとどまっている。カードシステムに対するアンケートでは法的問題や倫理的問題などが取り上げられており、今後はさらに患者自身の意識改革への影響といった種々の要因を含める必要があろう。