hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
大脳腹側部における新しい神経回路形成機構の解明

大脳腹側部における新しい神経回路形成機構を明らかにするために、線条体線維の重要性を検証する研究とこの領域に発現する新しいガイダンス分子の探索を試みた。線条体線維の重要性を検証するための研究は技術的な問題から中止をした。一方、新しいガイダンス分子の探索では、プレキシンA1とセマフォリン6Dが内包形成に重要ではないという結果を得るとともに、プロトカドヘリン9が聴覚系などの神経回路に沿って分布していることを明らかにした。大脳腹側部における未知の神経回路形成機構を明らかにするために初年度となる本年度は3つの角度から研究を始めた。1線条体でOLプロトカドヘリンを発現するトランスジェニックマウスの作製視床皮質投射における線条体線維の重要性を証明するために、竹市とともにRbp1遺伝子のプロモーターを用いたOLプロトカドヘリンのトランスジェニックマウスを作製を試みた。その結果1匹のトランスジェニックマウスの候補を得た。今後は目的の領域でOLプロトカドヘリンが発現しているかどうかを検討していく。2 DNAアレイ解析による大脳腹側部の領域特異的分子の探索大脳腹側部を線条体を含む外側部と含まない内側部に分けてDNAアレイ解析を行った。外側と内側で発現に差がみられたいくつかのガイダンス候補分子の中から、特に線条体に発現が見られるプレキシンA1とセマフォリン6Dの解析をすることにした。生体内での機能解析をするために熊ノ郷よりそれぞれの遺伝子欠損マウスを分与を受け、次年度での解析の準備をはじめた。3既知のガイダンス候補分子カドヘリンの検討カドヘリン分子群のなかから大脳腹側部で発現するものの解析をしたいと考えていたが、上記のアレイ解析からプロトカドヘリン9が外側部で強く発現していることが分かったので、この分子の解析を進めることにした。そのためにまずモノクローナル抗体の作製を行った。マルトース結合タンパクとの融合タンパクを作製しラットに免疫し、プロトカドヘリン9を強制発現させた細胞株を染色する活性のあるモノクローナル抗体をスクリーニングした。その結果12クローンのハイブリドーマが得られた。大脳腹側部における未知の神経回路形成機構を明らかにするために、前年から行ってきたことを引き継ぎ、2年目となる本年度は2つの点にしぼって研究を行った。1大脳腹側部におけるプレキシンA1とセマフォリン6Dの分布と機能解析前年度に大脳腹側部に発現が見出されたプレキシンA1とセマフォリン6Dについて免疫染色法を用いて発生過程にともなう分布を調べた。その結果、これらの分子が内包において相補的に分布し、これらが視床皮質線維のガイダンス分子として働いている可能性が示唆された。そこでその可能性を検証するために大阪大学の熊ノ郷先生に分与いただいた遺伝子欠損マウスをもちいて、それぞれのマウスの表現型の解析を行った。その結果、大脳腹側部において内包などの視床皮質線維の神経回路形成には異常は見られなかった。この結果は日本分子生物学会にて発表を行った。2発生期の脳における細胞接着分子プロトカドヘリン9の分布前年度作製したプロトカドヘリン9のモノクローナル抗体を用いて、発生過程でのマウスの脳におけるタンパクの分布の解析を行った。その結果、視床、視床皮質線維、脳梁、嗅球、網膜など神経回路の一部に分布が見られることがわかった。OLプロトカドヘリンの分布と比較すると、一部共通するものの独特の発現パターンであることがわかった。本研究は、次年度にさらに発展させ、機能解析につなげていく予定である。なお、前年試みたOLプロトカドヘリンのトランスジェニックマウスの作製については、目的の発現が見られなかった。プロトカドヘリン9についてモノクローナル抗体を用いて発生過程のマウスの神経系における分布を詳細に調べた。その結果この分子は視床、前庭神経核、上オリーブ、網膜などの様々な神経核や脳梁や内側縦束などの線維で分布していることが明らかになった。特に、嗅覚系や前庭系などの神経回路に属する多くの神経核や神経束があることがわかった。また、嗅球ではOLプロトカドヘリンとプロトカドヘリンがそれぞれ異なる糸球体のセットに分布していることが明らかになった。これらのことからプロトカドヘリン9が神経回路形成に関与していること、また他のプロトカドヘリンとは差次的に分布して機能していることが示唆された。これらの結果ついては論文にまとめ、投稿した。審査の結果、現在修正を行っている段階である。またこの分子のノックアウトマウスの繁殖ができたので現在解析を進めている。しかし、今のところ大きな神経回路の異常は見つかってはいない。今後は行動解析などを進める予定である。

プロトカドヘリン9とシナプスとの関係については、内耳などのシナプスでの局在を解析しているが、シナプシンとはごく一部しか共局在しないことがわかった。また、他のプロトカドヘリンについて解析をするために、プロトカドヘリン1と11について、ノックアウトマウスの作製を行った。現在表現型の解析をするためにもどし交配と繁殖を始めたところである。本研究で得られた結果は神経回路形成機構を明らかにするうえで基礎的な知見となるとともに、作製された抗体やマウスは今後の解析に役立つ重要な材料となることが期待される。
共生菌である根粒菌における３型分泌系の機能発現機構

本研究では、根粒菌3型分泌系の新たなエフェクター遺伝子候補の探索ならびに分泌関連因子の同定と利用を目指して、1)転写制御のcisおよびtrans因子の解析、ならびに、2)分泌活性レポーターアッセイ系の構築により分泌シグナル配列の同定、を行った。また、エフェクター候補遺伝子の破壊実験を効率的に進めるために、3)Streptococcus pyogenes由来のCRISPR/Cas9に基づくゲノム編集技術を根粒菌と近縁のαプロテオバクテリアに適用するための新規なベクター・セットの開発を行った。1)ゲノム上のttsI遺伝子を破壊しhexaHis-TtsIを発現するプラスミドを導入したミヤコグサ根粒菌株を試料として、ChIP-seq実験を行った。平成30年度に実施した再実験においても、既知の3型分泌系遺伝子上流領域以外の配列が検出されず、新規なエフェクター遺伝子の候補は得られていない。2)深海性エビOplophorus gracilirostris由来のルシフェラーゼNlucをC末端側に付加したNopXおよびMlr6358融合遺伝子を構築し、該当3型分泌タンパク質遺伝子自身のプロモーターに下流に配置するように根粒菌のゲノム内に組み込んだ菌株を用いて、発現誘導を行い上清のルシフェラーゼ活性を定量した。3型分泌系の分泌活性測定の一般手段としての開発を目指していたが、菌体内に留まる活性が大量で溶菌物由来の活性との区別に容易ではなく、一般手段とするに至らなかった。3)CRISPR/Cas9系を根粒菌やその他のαプロテオバクテリアに適用するために、任意の20塩基対のDNA配列に4塩基ずつの接着末端を付加してcrRNAとしてCas9とtracrRNAとともに安定かつ効率よく発現させるベクターを、CRISPR/Cas9発現後に分断・除去可能なRK2由来プラスミドとして開発した。本研究では、根粒菌3型分泌系の新たなエフェクター遺伝子の同定、また分泌装置の構築や分泌に関与する因子の同定を目指して、1)転写制御のcisおよびtrans因子の解析と、2)分泌活性レポーターアッセイ系の構築により分泌シグナル配列の同定を行っている。1)TtsIに関するChIP-seq解析によるtts-boxの精密同定:ミヤコグサ根粒菌Mesorhizobium lotiのTtsIのN末端に精製タグとして(His)6配列を付加しても、ttsI欠損株内で生理活性を保つことを確認していたので、Ni-ゲルを用いてタグ付きTtsIの精製を行った。ミヤコグサ本来のNodD-TtsI誘導因子が不明なため、クローバー根粒菌のnodD遺伝子を導入した上でクローバーの因子であるナリンゲニンの添加により、タグ付きTtsIの誘導を試みた。当初用いたTK社製のナリンゲニンで誘導活性が得られず、別のSA社製の試薬により誘導可能なことが判明するまで試行錯誤を繰り返した。最終的には、ミヤコグサ根粒菌自体を宿主として、発現、菌体破砕物からのNiアフィニティクロマトグラフィおよびゲル濾過により、純度95%以上のTtsIを得た。ダイズ根粒菌Bradyrhizobium elkaniiのTtsIについても同様の実験系を構築した。2)3型分泌装置活性測定系の構築:本研究では、根粒菌エフェクターNopXとMlrのN末端60アミノ酸のC末端側に、深海性エビOplophorus gracilirostris由来のルシフェラーゼNlucを付加する融合遺伝子を構築し、該当エフェクター自身のプロモーターに下流に配置するように根粒菌のゲノム内に組み込んだ菌株を作製した。次に、上述と同様に誘導を試みたが、実際の誘導まで試行錯誤を繰り返すことになった。現在までに、Nluc付加物が細胞内で活性型となっていることまでの確認を終えた。概要に記載の通り、ttsI遺伝子をin vitroで誘導する段階で予期せぬ停滞があったため、計画に比べてやや進捗が遅れている。既知の根粒菌の3型分泌系は、共生因子合成系遺伝子の共通転写因子で有るNodDに植物側の分泌因子で有るフラボノイドが結合して活性型となり、3型分泌系遺伝子の転写因子で有るttsI遺伝子上流に結合して、TtsIタンパク質の発現を誘導することが知られている。本研究では、クローバー根粒菌のnodD遺伝子をミヤコグサ根粒菌に導入した上で、クローバー由来の分泌因子であるナリンゲニンを試薬として購入して用いた。しかしながら、誘導物質として用いたナリンゲニンが試薬メーカーおよび製造ロットの違いにより、著しく低い活性しか示さないものがあることにより、その解決までかなりの時間を費やし、転写因子関連ならびに分泌活性関連のいずれも足踏み状態が続いた。現在は、試薬メーカーを替えることにより、同問題は解決するとともに、ミヤコグサ由来フラボノイドを同定するための検出条件を検討中である。本研究では、第1に、根粒菌3型分泌系の転写因子TtsIについて結合配列を精密に同定して、関連する遺伝子候補を探索した後、破壊株作製と相補実験により発現機構の解明を目指している。このために、ttsI欠失株の3型分泌系転写誘導を相補するhexa-His付加TtsIを根粒菌内で発現させて、ホルムアルデヒドによる架橋後、NiゲルによりTtsI-DNA架橋物を精製して、配列解析に供した。現時点では、明確なコンセンサス配列が得られておらず、非特異的結合を抑える必要が有ると判断された。候補遺伝子の同定された場合に備え、並行して、根粒菌ゲノムのマーカーレス部分欠失法の改良を行った。

第2に、分泌活性の迅速かつ高感度な測定系の構築により分泌制御機構の解明を目指している。このために、レポータータンパク質としてトゲオキヒオドシエビ由来の単量体ルシフェラーゼをタンパク質工学的に改良したNlucを用い、分泌シグナルとして菌体外放出が確認されているlocus-tag mlr6358のアミノ末端部分を用い、融合遺伝子をミヤコグサ根粒菌ゲノムに組み込んだ株とプラスミドとして保持させる株を構築した。ミヤコグサの宿主側一次シグナルが未同定であるため、西洋ミヤコグサ種子の水抽出物を誘導物として根粒菌培養液に添加後、菌体および細胞外上清に分離して、ルシフェラーゼ活性を測定した結果、mlr6358'-nlucは転写、翻訳され菌体外へ出ていると判断された。しかし、菌体内にも高いルシフェラーゼ活性が認められたため、現在、T3SS欠損変異体の根粒菌および分泌シグナルを付加しないNlucをコントロールとして分泌確認実験を行いつつある。また、ゲノム配列決定済の国内株MAFF303099に加えて岩手県内で採取されたTono株のゲノム決定を行い、同株にも3型分泌系遺伝子群の存在することを確認した。今年度に検討した誘導および架橋条件では、hexa-His付加TtsIとミヤコグサ根粒菌ゲノムDNAとの結合の特異性は十分に高いものとは言えず、当初の到達目的に達していない。原因として、1) TtsIの外来プロモーターによる発現が大過剰であった、2)ホルムアルデヒド処理条件を制御できていなかった、3) hexa-His付加が結合特異性に影響を与えた、等の原因が考えられる。いずれも、1)プロモーター強度を中ないしは低強度に変更する、2)短時間且つ温和な架橋条件を検討する、3)他の分子タグあるいはTtsI抗体を用いたChIPへ実験系を変更する、などにより対応予定である。また、西洋ミヤコグサ種子水抽出物を用いたmlr6358'-nlucの発現実験でも、非誘導時の背景活性が高いことから、実験条件の検討に労力と時間を要している。ただし、ミヤコグサ根粒菌としは類縁度の低い16S rRNA配列を持つ国内株Tonoにも3型分泌系遺伝子群の全セットが含まれていることを確認できた。本研究では、根粒菌3型分泌系の新たなエフェクター遺伝子の同定と人工のエフェクター導入システムの構築を目的とした。新たなエフェクター遺伝子の同定のために、まず、ミヤコグサ根粒菌Mesorhizobium lotiの3型分泌系転写因子TtsIの結合配列をChIP-seq法により同定し、結合配列下流に存在する新規3型分泌系遺伝子候補の抽出を行った。次に、抽出された遺伝子候補の破壊株を作製して分泌活性の評価を行い、必要に応じて相補実験を行うことにより、新たなエフェクター遺伝子の同定を進行させた。並行して、候補遺伝子の破壊実験を効率的に進めるために、Streptococcus pyogenes由来のCRISPR/Cas9に基づくゲノム編集技術を根粒菌と近縁のαプロテオバクテリアに適用するための新規なプラスミド・セットの開発を進行させた。
脂質代謝の破綻による加齢性神経変性の分子基盤解明

近年、脂質と神経変性疾患との関連性が多くの研究で報告されており、正常な脂質代謝の維持の重要性に対する認識がますます高まってきている。しかし、脂質代謝の恒常性が崩壊した時に、細胞内でどのような分子機構に異常が起きて神経変性が誘導されてしまうのか、その詳細は未だ解明されていない。申請者は脂質代謝の一翼を担うCDP-ジアシルグリセロール(CDP-DAG)合成酵素であるCdsAの機能欠失変異体において、ショウジョウバエ嗅覚記憶中枢であるキノコ体神経細胞で加齢性の変性が誘導される事を見出した。本年度では、CdsAによる神経変性の原因を特定する為、カスパーゼインヒビターであるp35やワーラー変性を抑制するWldsをCdsAを抑制した状態で共発現したが、神経変性は抑制されなかった。同様に、オートファジーの活性を両方向に制御しても変性は抑制されなかった。これらの結果は、CdsAによる神経変性はこれらの経路とは独立で変性を起こしている可能性を強く示唆している。また、CDP-DAG経路における各因子の合成酵素を標的にRNAiスクリーニングを行い、CDP-DAGの下流を探索した。その結果、CDP-DAGからホスファチジルイノシトール(PI)を合成するPis、及びホスファチジルイノシトール4リン酸(PI4P)からホスファチジルイノシトール4,5-ビスリン酸(PI(4,5)P2)を合成するPI4P5Kを抑制した時にCdsAをノックダウンしたときと同様の神経変性が確認された。また、PI(4,5)P2を切断し、イノシトールトリスリン酸(IP3)とDAGを産生するnorpAを抑制しても神経変性が確認されない事、CdsAとnorpAを同時に抑制すると神経変性が抑制される事から、PI(4,5)P2の減少が神経変性を引き起こす可能性を強く示唆している。多くの因子で構成されているCDP-DAG経路の中から、CDP-DAGの下流で神経変性を引き起こす因子を同定できた。また、多くのシグナル経路に関与するIP3やDAGが今回見出した神経変性に関与しない可能性が示唆されたので、PI(4,5)P2の下流を絞り込みやすくなる事が予想される。PI(4,5)P2はPI3Kによってホスファチジルイノシトール3,4,5-トリスリン酸(PI(3,4,5)P3)に変換され、Akt経路を制御する事が知られている。我々が見出した神経変性もこのPI3K/Akt経路に依存するか確認する為、PI3Kを制御した状態で神経変性が誘導されるか確認する。もし、神経変性が確認されなかった場合は、PI(4,5)P2がPI(3,4,5)P3非依存的に神経変性を誘導している為、PI(4,5)P2と結合する事が報告されているタンパク質を標的にRNAiスクリーニングを行う。近年の研究で、PI(4,5)P2と結合するタンパク質が網羅的に解析されているので、それらを候補遺伝子とする。RNAiスクリーニングを行っても下流因子が同定されない場合は、トランスクリプトーム解析を行い、PI(4,5)P2をノックダウンした時に神経細胞内でどの様なシグナル因子が変動しているか解明し、それらを候補因子としてRNAiスクリーニングを行う。また、神経変性の原因を特定する為のRNAiスクリーニングも並行して行い、上流と下流の両方からCdsAによる神経変性メカニズムの全体像の解明に挑む。CdsAのノックダウンによってPI(4,5)P2が減少する事は、他の組織では報告されているが神経系では未だ報告されていない。これを実証する為に、共焦点ラマン顕微鏡を用いる。そして、CdsAを抑制した時にPI(4,5)P2のみならず、どの様な脂質がキノコ体神経特異的に変動しているか明らかにする。共焦点ラマン顕微鏡による脂質の同定がうまくいかない場合は、質量分析を用いて脳全体での脂質の変動を明らかにする。

また、PI(4,5)P2を切断し、イノシトールトリスリン酸(IP3)とDAGを産生するnorpAを抑制しても神経変性が確認されない事、CdsAとnorpAを同時に抑制すると神経変性が抑制される事から、PI(4,5)P2の減少が神経変性を引き起こす可能性を強く示唆している。多くの因子で構成されているCDP-DAG経路の中から、CDP-DAGの下流で神経変性を引き起こす因子を同定できた。また、多くのシグナル経路に関与するIP3やDAGが今回見出した神経変性に関与しない可能性が示唆されたので、PI(4,5)P2の下流を絞り込みやすくなる事が予想される。PI(4,5)P2はPI3Kによってホスファチジルイノシトール3,4,5-トリスリン酸(PI(3,4,5)P3)に変換され、Akt経路を制御する事が知られている。我々が見出した神経変性もこのPI3K/Akt経路に依存するか確認する為、PI3Kを制御した状態で神経変性が誘導されるか確認する。もし、神経変性が確認されなかった場合は、PI(4,5)P2がPI(3,4,5)P3非依存的に神経変性を誘導している為、PI(4,5)P2と結合する事が報告されているタンパク質を標的にRNAiスクリーニングを行う。近年の研究で、PI(4,5)P2と結合するタンパク質が網羅的に解析されているので、それらを候補遺伝子とする。RNAiスクリーニングを行っても下流因子が同定されない場合は、トランスクリプトーム解析を行い、PI(4,5)P2をノックダウンした時に神経細胞内でどの様なシグナル因子が変動しているか解明し、それらを候補因子としてRNAiスクリーニングを行う。また、神経変性の原因を特定する為のRNAiスクリーニングも並行して行い、上流と下流の両方からCdsAによる神経変性メカニズムの全体像の解明に挑む。CdsAのノックダウンによってPI(4,5)P2が減少する事は、他の組織では報告されているが神経系では未だ報告されていない。これを実証する為に、共焦点ラマン顕微鏡を用いる。そして、CdsAを抑制した時にPI(4,5)P2のみならず、どの様な脂質がキノコ体神経特異的に変動しているか明らかにする。共焦点ラマン顕微鏡による脂質の同定がうまくいかない場合は、質量分析を用いて脳全体での脂質の変動を明らかにする。本研究では変異体の作製を外部に委託しており、委託時と変異体作製時の2回に分けて代金を支払うシステムとなっている。本年度中に変異体作製を完了する予定であったが、作製に時間がかかり次年度まで持ち越しとなった為、未使用額が生じた。この未使用額は変異体作製完了時の支払いに使用する予定である。
胃癌微小リンパ節転移検出に用いる新規遺伝子マーカー単離に関する研究

平成15年度の研究にinformed consentが得られた進行胃癌患者は44例であった。手術摘出標本から正常組織と腫瘍組織を採取し、RNAを抽出した。このうち肉眼的にリンパ節転移陽性と判断した2症例に対しては転移リンパ節も採取し、RNAを抽出した。この際、14年度の臨床病理学的な検討結果から、占居部位が大弯側の症例は大弯側の肉眼的転移陽性リンパ節を、その他の部位は最も近傍の転移リンパ節を採取した。平成14年度に採取した症例も加えて肉眼的リンパ節転移陽性進行胃癌症例の腫瘍組織と正常組織のmRNAを用いてPCR-Selected Subtraction Hybridizationを行った。まず、対象症例の中で特に高度にリンパ節転移を来していた症例を優先的に選択した。選択した症例のTotal RNAをmRNApurification kitを用いて可及的にpureなmRNAを抽出し、PCR-Selected Subtraction kit (Clontech)のmanualにしたがって実験を進めていった。腫瘍組織をTargetに、正常組織をDriverに設定し、それぞれから抽出したmRNAを用いて2nd stralnd cDNAを作製した。次いで両cDNAをRsa1で消化し、Target cDNAにはAdapterをligationした。これらの各工程でエタノール沈殿による精製を行っているために予想していたより多くのDNAをlossしてしまった。また、Adapterのligation効率が未だ良好といえず、Hybridization後に解析に用いるほど遺伝子の単離が行えていないのが現状である。今回申請した研究期間は本年度で終了であるが、step by stepに各工程を検証しつつ、再実験中であり、是非とも癌組織に高発現している遺伝子群を単離して臨床に役立たせたい。平成14年度における当科の胃癌手術症例は、133例であった。正常組織の混入を可及的に減少する目的で対象をinformed consentが得られた進行胃癌患者40例とし、手術摘出標本から1)正常組織、2)腫瘍組織を採取し、各組織からRNAを抽出した。このうち肉眼的にリンパ節転移陽性と判断した7症例に対しては転移リンパ節も採取し、RNAを抽出した。すなわち、採取した組織を可及的速やかに凍結保存し、RNA変性を予防する目的で採取後1週間以内にRNAを抽出し、-80°Cにて保存した。当教室で経験した胃癌症例の臨床病理学的因子を解析し、個々の症例に術前および術中にリンパ節転移を認めないと診断したが、data解析上リンパ節転弯移頻度が最も高いリンパ節を臨床病理学的因子から推測可能か否かを検討してみた。その結果、胃大弯に位置した胃癌は大沓側リンパ節に最初に転移を認めることが示唆されたが、それ以外の部位では、癌占居部位とリンパ節転移部位との間に一定の傾向は認められなかった。したがって、平成15年度の標本採取では、第1群リンパ節全てをを高頻度癌転移リンパ節として採取することが望ましいが、術後の病理組織学的検査の重要性を考慮すると、もっとも近傍のリンパ節を高頻度癌転移リンパ節として検討することが妥当と考えられた。現在、上記の方法で得られた肉眼的リンパ節転移陽性進行胃癌症例の腫瘍組織と正常組織のmRNAを用いてPCR-Selected Subtraction Hybridizationを行い、腫瘍組織に特異的に発現している遺伝子を単離中である。
保育職のキャリア形成と結婚・家族形成のライフコース経路とその促進・阻害要因

これまでのインタビュー調査のデータ分析をおこなった。質問紙調査の調査項目を選定し、調査票を作成した。計画していた調査については、異動のため研究体制を整えることができず、データ収集を行うことができなかった。研究代表者および分担者1名が所属機関を異動したため、研究体制を再構築する必要があった。また、研究拠点となる地域が変わったため、新たな研究協力者、協力先を見つけることが難航しており、計画通りに研究を進めることができていない。2019年度には、研究分担者の1名が所属機関を異動したため、早急に研究体制を整える。遅れているデータ収集を行い、分析を進めたい。平成27年度には,保育職のキャリア形成と結婚・家族形成のライフコース経路,経路選択に影響を与える促進要因,阻害要因を記述するために,保育職経験者のライフコース・インタビューを実施した。プレ調査を行った上で,保育職経験者6名(女性5名,男性1名)に複数回のインタビュー実施した。保育職の志望から,就業,結婚・出産,退職,再就職に至る各段階での選択やその選択に影響した要因について,のべ12時間程度の語りを得た。インタビューの語りのトランスクリプトを作成するとともに,TEM図を作成した。現在,語りの内容の分析を進めているところである。分析結果の1部は,平成28年度に発表予定である。また,現在保育職として就業している者に調査を実施する機会を得たため,幼稚園教諭および保育士239名に質問紙調査を実施した。保育職の結婚の困難,結婚後の保育職継続の課題やそのために必要な支援等について自由記述の質問紙調査を実施した。現時点では,保育職の結婚においては,業務量や労働時間が大きな問題になること,出会いの少なさも結婚の困難に結びついていることが示されている。今後,得られた記述を分析して,平成28年度中に発表予定である。養成校学生のライフコース展望の質問紙調査については,保育者養成課程の大学生を対象に項目選定のための予備調査を実施した。保育職の継続や結婚についての将来展望,および保育職のイメージについて調査を行った。平成27年度には,「保育職経験者のライフコース・インタビューの1部」「新任保育者のライフコース・インタビュー(1回目)」「養成校学生のライフコース展望の質問紙調査」を実施する予定であった。保育職経験者のライフコース・インタビューについては,おおむね計画通り調査が進行している。質問紙調査については,予備調査を実施して項目の選定を行い調査を進行している。新任保育者のライフコース・インタビューについては,研究代表者が平成28年度に所属を異動することになり,当初計画していた縦断調査を実施することが費用的に,時間的に難しくなることが予想されたため,実施を延期した。平成28年度から調査を実施できるように,調査に継続して参加可能な協力者を新たに確保した。したがって,平成27年度に開始予定であった新任保育者のライフコース・インタビューは,平成28年度より開始することとなった。平成27年度に現職保育者239名(女性223名,男性16名)を対象に実施した,保育職の結婚困難,結婚後の保育職継続の課題,保育職継続のための支援に関する質問紙調査の分析を行った。結婚の困難や問題と結婚後の保育職継続の問題や障害に共通して,家事育児と仕事の両立,持ち帰りの仕事,残業・サービス残業といった回答が多くみられた。結婚後の保育職継続のために必要な支援としては,休みを取りやすい環境が多くみられた。一方で,賃金の低さを問題と考える意見は少なく,現在の保育士不足への対策への示唆が得られた。この結果の一部を学会発表するとともに,保育教諭養成課程研究に論文を掲載した。また,現職保育者を対象に,保育職の継続を促進する要因と阻害する要因に注目しながら,保育職の就業と結婚に関するライフコースインタビューを実施した。平成27年度に実施したインタビューのデータと合わせて分析を行った。その結果,結婚後に就業を続けにくい職場環境があり,職場の理解やサポートが重要であることが示唆された。また,子育てをしながらの保育職の再就職は時間的にパートしかできず,保育職以外の職を見つけることも難しいという再就職における課題が見いだされた。さらに,保育職就業3年目くらいで保育の楽しさを感じるが、将来の結婚や出産についても考えるようになるといった「保育職のやりがいと結婚との葛藤」がみられた。これらの成果の一部を,平成29年度の日本保育学会において発表予定である。所属機関を異動したため、研究体制を整えるのに時間を要した。また、静岡県から東京都の大学に移ったことで、当初予定していた研究協力者から協力を得ることが難しくなり、新たな協力者を探すのに時間を要したため。保育職のキャリア形成と結婚・家族形成のライフコース経路と,経路選択に影響を与える促進要因,阻害要因を記述するため,昨年度までに行ったインタビュー調査のデータ分析を行った。結婚退職後に保育職に再就職した者を対象に,インタビューの語りからTEM図を作成するとともに,保育職の結婚退職およびその後の保育職への再就職を促進,阻害する要因を分析した。結婚時に保育職の継続を促進する要因として,周囲のサポート,職員同士の人間関係,子どもの存在,保育の効力感,周囲の引き留め,仕事の楽しさ,といった要因がみられた。

一方,保育職の継続を阻害する要因として,家庭との両立,配偶者の意向,結婚退職慣習,転居,周囲の圧力,技術不足,自分の子どもを自分で育てたいという思い,辞める理由づけ,といった要因がみられた。再就職において保育職を選択さえる要因として,「これまでの経験が生かせる」「求人が多い」「パートであれば給与が高く,土日に休める」,「他の職種への就職へのためらい」といった要因がみられた。これらの結果から,保育職のキャリア継続のために,職場環境,勤務条件の改善とともに,キャリア教育やスキルアップのための研修の充実の必要性が示唆された。また,管理職が,保育職のキャリア形成,結婚・家族形成やその支援,働きかけについてどのように考えているかを調査するため,幼稚園の園長1名にインタビュー調査を実施した。調査結果については、現在分析中である。研究代表者が、2年目、3年目の年度に2年続けて所属研究機関を異動した。また、研究分担者の一名が3年目の年度に異動した。そのため、研究実施体制を新たに作り直す必要があり、また、データ提供をしてくれる調査協力者を新たに探す必要があった。これまでのインタビュー調査のデータ分析をおこなった。質問紙調査の調査項目を選定し、調査票を作成した。計画していた調査については、異動のため研究体制を整えることができず、データ収集を行うことができなかった。研究代表者および分担者1名が所属機関を異動したため、研究体制を再構築する必要があった。また、研究拠点となる地域が変わったため、新たな研究協力者、協力先を見つけることが難航しており、計画通りに研究を進めることができていない。平成27年度に引き続き,保育職経験者のライフコース・インタビューを実施し,データを蓄積するとともに,分析を進めていく計画である。また,「新任保育者のライフコース・インタビュー」「養成校学生のライフコース展望の質問紙調査」については,新たな協力者を確保できたため,平成28年度前半に調査を開始する。これまでに引き続き保育職経験者へのライフコースインタビューを実施し,保育職のキャリア形成と結婚・家族形成のライフコース経路と,経路選択に影響を与える促進要因,阻害要因を記述する。養成校学生のライフコース展望の質問紙調査を実施し,養成校入学から,就職1年目までの5年間でライフコース展望がどのように変化するか,またその変化に保育職の現実に関するイメージが影響しているかを分析する。保育現場の管理職にインタビュー調査を実施し,管理職における,保育職のキャリア形成,結婚・家族形成の意識や支援,働きかけの調査について調査を行う。今年度は,保育職のキャリア形成に関するインタビュー調査,管理職の意識,支援についてのインタビュー調査を引き続き実施し,データを充実させる。また,新任保育者を対象にライフコース展望のインタビューを実施する。さらに,養成校学生を対象としたライフコース展望の質問紙調査を実施する。2019年度には、研究分担者の1名が所属機関を異動したため、早急に研究体制を整える。遅れているデータ収集を行い、分析を進めたい。
戦後日本社会における〈老い〉と〈高齢化〉をめぐる表象と記憶の政治

研究成果として、第一に、戦後日本社会における老いの現代史を描くことができたことである。これによって戦後日本社会における高齢化をめぐる歴史的ダイナミズムを示すことができた。第二に、そうした知見を具体的な成果として発表した。平成20年度から平成23年度の4年間において、単著『〈老い衰えゆくこと〉の社会学〔増補改訂版〕』、『老い衰えゆくことの発見』の2冊を刊行し、編著として、『社会学のつばさ』、『老いを治める』、『差異の繋争点』の3冊を刊行した。その他にも、共著・分担執筆の論文は40本、学術論文40本以上、書評・シンポジウム記録・その他が50本以上にもなり、この4年間で圧倒的な成果をおさめた。本研究の目的は、第一に、戦後の日本社会における高齢者政策の歴史的文脈を俯瞰した上で、それらの歴史的・政策的文脈のもとにあって、様々な高齢者関連団体・組織などをはじめとする各種団体・組織はいかなる活動・要求・異議申し立てなどの実践を行ってきたのか、そして、それらの団体・組織の実践を通じていかにして政策は変容してきたのかを実証的に明らかにする。第二に、そうした歴史的・政策的文脈と各種の団体・組織のせめぎあいを通じて、あるいはせめぎあいの中にありながらも、戦後日本社会の〈老い〉と〈高齢化〉をめぐる表象と記憶は形成されてきたのかを解読することである。要するに、私たちはいかにして戦後日本社会における〈老い〉と〈高齢化〉を語ってきたのかを明らかにする。本研究の目的は、戦後の日本社会において、とりわけ1970年代以降という時代的文脈において、様々な高齢者関連団体・組織における活動・要求・異議申し立てなどの実践と、それらの団体・組織の実践を政策的に複層的に規定し、また他方ではそれらの団体・組織の要望や異議申し立てに戦略的に対処してきた各時代における日本社会との政治的調整や交渉を通じて形成される<老い>と<高齢化>をめぐる表象と記憶の政治を解読し、戦後日本社会における高齢者関連団体・組織はいかなる歴史的・時代的文脈において実践してきたのか、あるいはそのことを通じて人々は<老い>と<高齢化>をいかに語ってきたのかを明らかにすることにある。上記の目的を達成するため、本年度は、はじめに戦後日本社会における<老い>と<高齢化>をめぐる言説を広範かつ詳細に明らかにするためにも広範な先行諸研究の文献研究を行った上で、こうした広範かつ長期的なレビュー作業を下地に論文を完成させた(研究成果参照)。また、これらをもとにした論考を平成21年度中に単著として刊行する予定である。第二に、そうした歴史的・政策的文脈と各種の団体・組織のせめぎあいを通じて、あるいはせめぎあいの中にありながらも、戦後日本社会の<老い>と<高齢化>をめぐる表象と記憶は形成されてきたのかを解読することである。要するに、私たちはいかにして戦後日本社会における<老い>と<高齢化>を語ってきたのかを明らかにする。上記の目的を達成するため、平成21年度は、平成20年度に引き続き、戦前ならびに戦後日本社会における<老い>と<高齢化>をめぐる言説を広範かつ詳細に明らかにするためにも広範な先行諸研究の文献研究を行った上で、こうした広範かつ長期的なレビュー作業を下地に論文を完成させた(研究成果参照)。また、これらをもとにした論考を平成22年度中に複数の単著・編著を刊行する予定である。加えて、上記の高齢者関連組織・団体による政治的・社会的活動を広範かつ長期に調査した上で、当該組織・団体のメンバーあるいはスタッフへの直接面接法を中心とした緻密な調査を実施した。また、戦後日本社会において、とりわけ1970年代以降における社会政策・社会保障制度に関する先行諸研究を概括し、その歴史的な展開と政治性を論考している。これらは平成22年度中にまとめられることになる。

第二に、そうした歴史的・政策的文脈と各種の団体・組織のせめぎあいを通じて、あるいはせめぎあいの中にありながらも、戦後日本社会の〈老い〉と〈高齢化〉をめぐる表象と記憶は形成されてきたのかを解読することである。要するに、私たちはいかにして戦後日本社会における〈老い〉と〈高齢化〉を語ってきたのかを明らかにする。上記の目的を達成するため、平成22年度は、平成20年度・平成21年度に引き続き、戦前ならびに戦後日本社会における〈老い〉と〈高齢化〉をめぐる言説を広範かつ詳細に明らかにするためにも広範な先行諸研究の文献研究を行った上で、こうした広範かつ長期的なレビュー作業を下地に論文を完成させた(研究成果参照)。また、これらをもとにした編著を2011年3月20日に刊行した。また、単著を2011年5月に1冊、7月に1冊と続けて刊行する予定になっており、その成果は確実に結実していると言えよう。加えて、上記の高齢者関連組織・団体による政治的・社会的活動を広範かつ長期に調査した上で、当該組織・団体のメンバーあるいはスタッフへの直接面接法を中心とした緻密な調査を実施した。また、戦後とりわけ1950年代1960年代に照準した上で、社会政策・社会保障制度に関する先行諸研究を概括し、その歴史的な展開と政治性を論考している。これらは平成23年度中に著書・論文としてまとめる。本研究の目的は、第一に、戦後の日本社会における高齢者政策の歴史的文脈を俯瞰した上で、それらの歴史的・政策的文脈のもとにあって、様々な高齢者関連団体・組織などをはじめとする各種団体・組織はいかなる活動・要求・異議申し立てなどの実践を行ってきたのか、そして、それらの団体・組織の実践を通じていかにして政策は変容してきたのかを実証的に明らかにする。第二に、そうした歴史的・政策的文脈と各種の団体・組織のせめぎあいを通じて、あるいはせめぎあいの中にありながらも、戦後日本社会の<老い>と<高齢化>をめぐる表象と記憶は形成されてきたのかを解読することである。要するに、私たちはいかにして戦後日本社会における<老い>と<高齢化>を語ってきたのかを明らかにする。上記の目的を達成するため、平成23年度は、平成20年度・平成21年度・平成22年度に引き続き、戦前ならびに戦後日本社会における<老い>と<高齢化>をめぐる言説を広範かつ詳細に明らかにするためにも広範な先行諸研究の文献研究を行った上で、こうした広範かつ長期的なレビュー作業を下地に論文を完成させた(研究成果参照)。また、天田城介・北村健太郎・堀田義太郎編『老いを治める--老いをめぐる政策と歴史』(生活書院、2011年3月20日)の刊行を契機に合評会企画や各種の研究会での相互批評を重ね、今後の新たな研究の展開を構想することができた。そこで提示された研究上の課題を踏まえた上で、単著『老い衰えゆくことの発見』(角川学芸出版、2011年11月20日)を刊行すると同時に、2012年3月には天田城介・村上潔・山本崇記編『差異の繋争点--現代の差別を読み解く』(ハーベスト社、2012年3月20日)を上梓した。2013年度中にも単著3冊、編著1冊を刊行する予定であり、本研究は飛躍的に発展してきている。それらの成果の一部は国際シンポジウムや国際社会学会大会で発表する予定である。
δ-プロトカドヘリンの中枢神経系および頭部器官の発生・構造維持における機能的意義

胚から成体までδ-カドヘリンの中枢神経系・頭部器官の発生や構造維持における機能を示すことを本計画目的とした。そのために胚から成魚までのスケールの標本に対して高スループットで立体的に形態解析する方法の開発に臨んだ。4、5ミリメートルから数センチメートルまでの標本については良好な画像を得る技術が完成し、遺伝子改変動物の形態的スクリーニングに応用した。より高解像度の画像を得るための技術開発をし、拡大率1:2までは良好な画像を得られ、これによりゼブラフィッシュ成魚の3Dデータを蓄積した。それ以上の拡大には課題が生じた。現在は、装置の改善と染色や包埋法のベストプラクティスを検索する過程にある。平成27年度はゼブラフィッシュ成魚の形態を3D画像で解析する方法を調査・開発し、結果を米国細胞生物学会と日本解剖学会で発表した(*)。1.クライオスタットを用いたシリアルブロックフェイスイメージング:一般的なクライオスタット(凍結切片作成装置)に市販のデジタル一眼レフカメラを取り付け、試料ブロックの切削面をマクロ撮影した。この際、クライオスタットのモーターとカメラとを同期させる装置を自作し、自動的に連続撮影できるようにした。撮影した画像をボリュームデータ(xyzの3方向の画像データ)にまとめ、医療用の画像処理ソフトウエアを用いて任意断面像や3D像を作成した。2.滑走式ミクロトームを用いたシリアルブロックフェイスイメージング:滑走式ミクロトーム(ナイフが試料上を滑走するタイプの切片作成装置)を用い、上と同様に試料の切削面を連続撮影した。樹脂包埋した試料の場合、試料が半透明なために切削面だけの良好な画像が得られなかった。そのため、滑走式ミクロトームに取り付けられる凍結装置を用い、凍結試料を使った。試料がぶれないので良好なボリュームデータを得られた。次の理由により、進捗がやや遅れた。1.当初予定していた滑走式ミクロトーム(既存)が故障し修理不能になったため、次年度に計画を先送りすることになった。2.切片作成装置とカメラとを同期させる装置の制作で、電気的な不整合の解決に手間取った。本研究計画の目的は、非クラスタ型δ-プロトカドヘリンが脊椎動物の中枢神経系および頭部器官の発生と構造維持にどう関わっているかを解明することである。そのために、高スループット3D画像解析法を開発し、ゼブラフィッシュをモデルとして、δ-プロトカドヘリンの発現を調べる。平成28年度までに、3D画像解析法の開発が一応の完了をみた。この方法では、クリオスタットに撮影装置を組合せて同期させ、連続的に薄切像を撮影する。ゼブラフィッシュの撮影データを3Dソフトウエアに取り込んで3D画像を作成した。現在はゼブラフィッシュのほか、マウスなどほかの実験モデルにも応用し、データを蓄積している。この過程でまとまった成果は学会で発表した。平成27年度に故障したミクロトームの代替機を平成28年度に新規調達したことにより、当初計画していた3D解析機の開発がずれ込んだため。本研究計画の目的は、非クラスタ型δ-プロトカドヘリンが脊椎動物の発生と構造維持にどう関わっているかを解明することである。そのために胚から成体まで顕微鏡的に解析できる技術が必要だった。そのため、クライオスタットとデジタル一眼カメラを組み合わせた高スループット3D画像解析法を開発した。これによって標本全体から3D画像を得られるだけでなく、任意の位置で切片を採取してより細かく調べることも可能になった。ゼブラフィッシュのほかマウスなどほかの実験モデルにも応用し、データを蓄積した。成果の一部は論文や学会で発表した。また、その技術情報および3D画像を公開するためのリポジトリ<http://pandora.med.gunma-u.ac.jp>を設置して公開した。3D画像解析法の開発は一応の完了をみたが、通常のマクロレンズでは胚など小さな標本の解析には倍率が不足することは明らかだった。そのためより高精細な画像を得るための改良を行った。具体的には高倍率な特殊なマクロレンズを数種検討して可能性を検討した。これにより像面上で5倍までの拡大撮影が可能になった。ただし装置の振動などによる画像の劣化も明らかになり、それらの解決するための装置の改良を計画した。その実施と胚への応用が今後に残された。平成28年度以降は次のように研究を推進する。1.滑走式ミクロトームを用いたシリアルブロックイメージングの完成:新規の滑走式ミクロトームを導入し、それを用いたシリアルブロックイメージングの開発を継続し、完成させる。2.シリアルブロックフェイスイメージングによる遺伝子発現解析技術の開発:ゼブラフィッシュ成魚や胚の全載標本について、遺伝子染色技術を開発し、シリアルブロックフェイスイメージングによって解析する。

平成28年度までに3D解析器の開発が一応の完了をみたので、データの蓄積を進める。研究成果を随時発表する中でデータそのものの有用性も期待されたので、オープンデータへの貢献方法も検討する。研究成果の一部はオープンデータとしてwebページで公開した。解剖学、発生学、発生生物学、細胞生物学当初予定した滑走式ミクロトーム(既存)が故障し使用不能になったため、それに関する計画を中断し、次年度にミクロトームを新規購入することとしたため。物品費等の端数により差額が生じたため。滑走式ミクロトームを新規購入する。物品費などに充てる。本研究計画を含む実験方法をまとめたwebページを作成した。
「科学教育の文化研究」に関する国際研究ネットワークの構築

研究代表者を中心とする研究グループは,Culture Studies in Science Education(科学教育の文化研究)という新しい研究領域を開拓してきており,本研究では,近い将来の大型研究費へチャレンジするための国際的な研究基盤・研究連携ネットワークの確立をめざした企画調査活動を実施した.まず,この分野の中核的な研究者15名を内外から招聘して,この研究領域の研究枠組,研究方法論,研究手法に関する短期集中型の共同討議を神戸で実施したところ,共通認識を確立できたので,国際研究ネットワーク(International Research Network for Culture Studies in Science Education)の設立を宣言し,研究代表者がネットワークの代表者に選任された.また,この研究領域の研究に個別的に取り組んでいる世界各地の研究者の発掘と,本研究ネットワークの広報啓蒙活動を実施するために,国内メンバーは,世界各地で開催された国際会議等に参加し,広報パンフレットの配布,ミニ集会,個人的な勧誘活動などを行った.同ネットワークのメーリングリストは神戸大学に,またHPを茨城大学に設立した(http://daikan.edu.ibaraki.ac.jp/CSSE/).メンバーシップは,メンバーの推薦を条件とし大学院生以上の研究者に限定している.メーリングリストもメンバー内部に限定して,研究討議,グラント申請計画などを行ってきている.現在,メンバーは約35名である.当面は,各メンバーが個別に各国で研究グラント,会議参加旅費などの申請を行い,グラントが得られたところに可能なメンバーが集合して研究活動を展開していくことになっている.個別の研究成果が出てきた時期にあわせて,各国で大型研究費の申請を開始するという戦略が確認されている.研究代表者を中心とする研究グループは,Culture Studies in Science Education(科学教育の文化研究)という新しい研究領域を開拓してきており,本研究では,近い将来の大型研究費へチャレンジするための国際的な研究基盤・研究連携ネットワークの確立をめざした企画調査活動を実施した.まず,この分野の中核的な研究者15名を内外から招聘して,この研究領域の研究枠組,研究方法論,研究手法に関する短期集中型の共同討議を神戸で実施したところ,共通認識を確立できたので,国際研究ネットワーク(International Research Network for Culture Studies in Science Education)の設立を宣言し,研究代表者がネットワークの代表者に選任された.また,この研究領域の研究に個別的に取り組んでいる世界各地の研究者の発掘と,本研究ネットワークの広報啓蒙活動を実施するために,国内メンバーは,世界各地で開催された国際会議等に参加し,広報パンフレットの配布,ミニ集会,個人的な勧誘活動などを行った.同ネットワークのメーリングリストは神戸大学に,またHPを茨城大学に設立した(http://daikan.edu.ibaraki.ac.jp/CSSE/).メンバーシップは,メンバーの推薦を条件とし大学院生以上の研究者に限定している.メーリングリストもメンバー内部に限定して,研究討議,グラント申請計画などを行ってきている.現在,メンバーは約35名である.当面は,各メンバーが個別に各国で研究グラント,会議参加旅費などの申請を行い,グラントが得られたところに可能なメンバーが集合して研究活動を展開していくことになっている.個別の研究成果が出てきた時期にあわせて,各国で大型研究費の申請を開始するという戦略が確認されている.
ザムエル・シャイトの声楽作品研究―「ドイツオルガン音楽の父」再評価への試み

1.【校訂譜の入力】ザムエル・シャイト全集第4巻『カンツィオネス・サクレCantiones sacrae』は1933年に出版されたものの、絶版のまま現在に至っている。所収曲全38曲のうち、合唱ピースのかたちで個別に出版されていない作品、あるいはIMSLP等のパブリックドメインに未だ公開されていない作品を優先して、楽譜ソフトの入力、校訂作業を進めた。一方、本プロジェクトの前に取り組んだ平成2729年度のプロジェクト(15K702195)において作成した校訂譜(SSWV19とSSWV32)をさらに精度を上げる必要があることが判明した。成果発表演奏の際に演奏協力者から指摘された音の間違い、楽譜の使い勝手等を反映させるため、この2曲の校訂譜の再編成し、改訂版作成にも着手することとなった。2.【演奏実践に関する情報整理】『カンツィオネス・サクレ』は8声の複合唱曲であり、その初版譜(1620年)は8冊のパート譜で出版された。ベルリン国立図書館所蔵の『カンツィオネス・サクレ』パート譜の筆写譜(マイクロ資料)と初版譜(1620年)とを並べて表示し、当時の歌い手がパート譜から書き写して演奏用の楽譜を作成していたことの実例を示す資料を作成した。3.【論文執筆】15K702195のプロジェクトでの成果発表を再構成し、さらに本プロジェクトの展望を盛り込み、論文を執筆した。この論文は日本オルガン研究会年報『オルガン研究2018』(2019年5月発行)に巻頭論文として掲載された。校訂譜の作成が当初の予想以上に複雑であり、研究会補助者への楽譜ソフト入力の指示に関する検討を行っていたため、作業に遅れが生じている。しかし、次年度は遅れの挽回ができる見通しである。1.【当該史資料の現物確認調査】『カンツィオネス・サクレ』とともに本プロジェクトの研究対象としている『コンツェルトゥス・サクリConcertus sacri』(SSWV71-82,全14曲)の初版譜(1622年)の現物確認をレーゲンスブルク司教座中央図書館において行なう。楽譜の装丁、紙質、インク、使用状況、書き込みの有無、サイズ等を調査し、17世紀前半ドイツにおける楽譜出版事情を知るための手がかりとしたい。2.【史資料のデジタル画像化】『コンツェルトゥス・サクリ』は合唱と器楽合奏群とオルガン通奏低音から成る大規模な編成の曲集であり、そのパート譜は合計17冊に及ぶ。ベルリン国立図書館所蔵の『コンツェルトゥス・サクリ』筆写譜のデジタル画像化を依頼し、入手する。ベルリン国立図書館ではSSWV71, 73, 79, 82の4曲を所蔵している。3.【スコア作成】『カンツィオネス・サクレ』の初版譜と1933年版を照らし合わせながら、楽譜の入力作業を進めていく。楽譜の体裁については、随時、研究協力者である声楽家と検討を加えながら、整えていく。4.【研究発表演奏】2020年1月ないし2月に『カンツィオネス・サクレ』の研究発表演奏を立教大学諸聖徒礼拝堂において行なう予定である。演奏予定曲目(8曲程度を予定)は研究協力者と協議の上、2019年7月までに確定する。5.【演奏形態検討】本プロジェクトの最終年度となる2021年1月ないし2月には『コンツェルトゥス・サクリ』の中からも1曲を演奏する予定である。器楽合奏を伴う大規模な編成となるため、楽器編成、使用楽器についての検討を進めていく。1.【当該史資料の現物確認調査】

『カンツィオネス・サクレ』とともに本プロジェクトの研究対象としている『コンツェルトゥス・サクリConcertus sacri』(SSWV71-82,全14曲)の初版譜(1622年)の現物確認をレーゲンスブルク司教座中央図書館において行なう。楽譜の装丁、紙質、インク、使用状況、書き込みの有無、サイズ等を調査し、17世紀前半ドイツにおける楽譜出版事情を知るための手がかりとしたい。2.【史資料のデジタル画像化】『コンツェルトゥス・サクリ』は合唱と器楽合奏群とオルガン通奏低音から成る大規模な編成の曲集であり、そのパート譜は合計17冊に及ぶ。ベルリン国立図書館所蔵の『コンツェルトゥス・サクリ』筆写譜のデジタル画像化を依頼し、入手する。ベルリン国立図書館ではSSWV71, 73, 79, 82の4曲を所蔵している。3.【スコア作成】『カンツィオネス・サクレ』の初版譜と1933年版を照らし合わせながら、楽譜の入力作業を進めていく。楽譜の体裁については、随時、研究協力者である声楽家と検討を加えながら、整えていく。4.【研究発表演奏】2020年1月ないし2月に『カンツィオネス・サクレ』の研究発表演奏を立教大学諸聖徒礼拝堂において行なう予定である。演奏予定曲目(8曲程度を予定)は研究協力者と協議の上、2019年7月までに確定する。5.【演奏形態検討】本プロジェクトの最終年度となる2021年1月ないし2月には『コンツェルトゥス・サクリ』の中からも1曲を演奏する予定である。器楽合奏を伴う大規模な編成となるため、楽器編成、使用楽器についての検討を進めていく。校訂譜作成のための楽譜ソフト入力を研究代表者自身が行なったため、研究補助者への人件費が発生していない。次年度は研究補助者への楽譜ソフト入力を依頼する分量を増やす予定である。また研究協力者との演奏に関する協議を重ねていく。年度末に研究発表演奏を実施する予定であり、演奏者への謝礼、リハーサル会場費等に充てることになる。