hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ジグザグ縫合面を持つオルティス類の形態機能と適応放散様式

このことから,ジグザグ縫合線は,殻内側で生じる流れを弱化させる機能を備えていたといえる.オルドビス紀の腕足動物を題材にした群集生態学的研究によれば,Vinlandostrophia ponderosaは,特定のニッチに制約されず,オポチュニスト的な産出傾向を示す.つまりVinlandostrophia ponderosaは,底質や流体の化学的組成などの特異的な環境要因に依存せず,殻内側の濾過水流を安定させる形態機能によってロバストな適応戦略を実現できたのかもしれない.本年度は,複数種の形態模型を用いて流水実験および流体解析に取り組む予定であった.しかし,本研究で解明されつつあるジグザグ縫合面の機能性は長年蓄積されてきた先行研究の解釈を否定することになる結果であり,本研究成果に対する多くの反論およびコメントによって想定通りの成果公表へ至らなかった.近日まで継続してきた追実験やデータの丹念な検証に加え,2018年9月に開催される国際腕足動物学会に招待されたことにより,本年度中の成果公表を実現できると予想している.現段階ではやや遅れいると判断されるが,ジグザグ縫合面の機能性に関する成果公表以降は,順調に研究が伸展してゆくだろう.オルドビス紀における生物間の相互作用や環境の細分化は,生物種の爆発的な多様性増大イベントをもたらした.中でも,腕足動物オルティス類は,このイベントを特徴づける中心的な無脊椎動物であるにも関わらず,どのような生態的特性を持って劇的な適応放散を遂げたのか未解明である.そこで本研究は,ジグザグ縫合線を備えたオルティス目プラチストロフィア科に属する腕足動物の殻形態と濾過摂食水流との関係に注目し,化石標本を用いた形態解析および流体解析を行った.プラチストロフィア科Vinlandostrophia ponderosaの殻模型を用いて簡易的な粒子追跡法による2次元流体解析を行った結果,殻形態が受動的に渦流を形成し,螺旋状の濾過器官(触手冠)を使って渦流から効果的にエサを濾過できる適応形態であった可能性を導いた.ジグザグ縫合線の機能を検証する比較実験からは,ジグザグ縫合線が殻内側で生じる流れを弱化させ,渦流を低速に保つ機能を備えていたことが明らかになった.また,外部の流れが低速の場合は,殻まわりの流向に関わらず,生物体に対して常に同じ回転方向の渦流を形成できることがわかった.緩やかな流れの中では,運ばれてくるエサの量も少なくなりやすい.殻内側で生じる渦流の方向を統一することで,そのような流水環境下でも濾過摂食を確実かつ安定に実現できたと想像される.ジグザグ縫合線をつくる放射肋の数や太さには種内変異が認められるが,この変異幅は種間で異なる.V. cyphaでは,受動的な渦流形成に寄与する殻の正中線部分に変異が認められやすく,各個体の微環境に応じて機能強度を調節していた可能性がある.V. cyphaはV. ponderosaの絶滅後も残存していたことを考慮すれば,ジグザグ縫合線の機能とその可塑性によって絶滅の明暗が分かれていたのかもしれない.異なる種の殻形態を改変させた模型を用いて,初年度に実施した水槽実験を継続する.さらに,人為的に改変した殻模型を用いた実験を行い,各形質がどのような機能性を備えていたのか明らかにする.
糸球体障害の発症・進展における膜補体制御因子の役割に関する研究

本研究計画の遂行により、補体制御膜因子が糸球体腎炎の発症・進展に果たす役割に関して以下の点がはじめて明かにされた。2ラット補体制御膜因子の機能を抑制する単クローン抗体を用いてinvivoの系で同因子の役割を調べたところ同因子の機能抑制により自己補体によるエンドトキシンショック類似の現象が見られた。このことから我々は補体制御膜因子が自己補体による障害から生体を防御し恒常性維持のために必要不可欠な分子である事を世界に先駆けて証明出来た。3 In vivoの系で補体依存性糸球体障害時における補体制御膜因子の役割を検討した結果、C3レベルおよびMAC形成レベルのいずれのステップにおいても同因子が自己補体による障害から糸球体を防御するために重要な因子であることを世界に先駆けて証明することが出来た。また、本研究計画の遂行の過程で補体制御膜因子に関する研究の今後の新たな進展の方向性を示唆する以下のような重要な事実が得られた。1補体制御膜因子は上述の成果に見られるような糸球体における役割だけではなく腎の尿細管間質領域においても重要な防御的役割を果たしていることが証明された。同因子は特に腎の皮髄境界より内側(即ち髄質側)において高度に発現されており、その生物学的あるいは病態学的意義の解明に我々の研究によりえられた知見が大きな示唆を与えている。2腎における毛細血管の透過性にも本因子は深く関わっていると考えられる実験事実が得られており、間質尿細管障害の病態の解明に深く示唆を与えるものと考えられた。腎臓における膜補体制御因子の機能を抑制する二つのマウス由来の単クローン抗体5I2(C3変換酵素レベルでの制御因子に対する抗体)および6D1(C8/9レベルつまり膜補体浸襲複合体の形成レベルでの制御因子に対する抗体)を用いて腎、特に糸球体における同因子の役割を検討した結果、以下のような新しい知見を得た。これらの知見は本研究計画をはじめるにあたって予想していた成果とほぼ一致するものである。(1)5I2および6D1で認識される膜補体制御因子の腎における分布は糸球体、尿細管、尿細管周囲毛細血管、vascular bundles、など広範囲にわたっていた。これはヒトにおける対応分子の局在とよく類似していた。次ぎに我々の開発した腎懽流法を用いて5I2または6D1を腎局所に結合させた。この時の抗体の糸球体内局在はメサンギウムおよびcapillarywallに添う形で存在していた。(2)このような状態の腎臓に補体依存生の糸球体障害を惹起するような刺激を加え、単クローン抗体で処理しない腎臓における病変と組織学的および免疫組織学的に比較検討した。その結果抗体を用いて予め膜補体制御因子の機能を抑制した状態にある腎では補体依存生の糸球体障害がより強調され、また補体成分の沈着(従って補体の活性化)も高度であった。このことから膜補体制御因子は補体依存性糸球体障害時に防御的に働いていることがin vivoの系で初めて明らかになった。膜補体制御因子はこのように腎において重要な防御因子であることが明らかになったので、その発現機構につき蛋白および遺伝子レベルで検討を加える予定である。腎臓における二種類の膜補体制御因子(C3変換酵素レベルでの制御因子ラットCrry、およびC8/9レベルつまり膜補体侵襲複合体の形成レベルでの制御因子ラットCD59)の機能を抑制する抗体5I2と6D1、およびこれらの制御因子の遺伝子プローブを用いて腎、特に糸球体における同因子の発現を蛋白レベル(免疫組織学的方法)およびmRNAレベル(northern blot法)で検討した結果、以下のような知見と結論を得た。(1)5I2および6D1で認識される膜補体制御因子の腎における発現は糸球体、尿細管、尿細管周囲毛細血管、vasclar bundles、など広範囲にわたっていた。

次ぎに病腎における制御因子の発現の変化を見たところ、著明な変化は見られなかった。(2)このことは補体制御膜因子は糸球体にconstitutiveに発現されており、糸球体障害時でもその発現の量は大きくは変化せず、補体の活性化がこれらの制御因子の許容量を越えると補体依存性糸球体障害が惹起される事を示しており、制御因子の過剰発現や外来性の制御因子の投与等で糸球体障害を制御できる可能性が示された。(3)膜補正制御因子は我々の今回の研究から糸球体において重要な防御因子であることが明らかになったが、同因子は腎の間質尿細管障害においても自己補体による障害から腎臓を防御するための重要な因子である事を示唆する新知見が、今回の研究から得られた。腎機能(GFR)とよい相関を示すとされる間質尿細管障害の病態の解明と新しい治療法の開発のため、今後補体の面からさらに研究を進めてゆくことが重要課題であると考えられた。
接着分子発現の有無からみた好酸球のSubpopulationの研究

好酸球はアレルギー性炎症の主たるエフェクター細胞として認識されている。本研究では好酸球に発現する分子から、その活性化やsubpopulationにつき検討をおこなっている。以下、現在まで得られた結果を箇条書きにする。1)好酸球表面の接着分子ではLFA-1,Mac-1は活性化により発現が増強する。LFA-1,Mac-1の細胞表面発現量は末梢血好酸球分画の増加に伴い増加する傾向がある。2)VLA-4は発現量は不変であるが、発現の密度がむしろ好酸球の活性化に伴って低下する可能性があり、LFA-1やMac-1とは逆相関を示す。3)これらのβインテグリン接着分子を介した接着は好酸球の活性化と寿命に関与している。4)IgAレセプター、IL-5レセプター、PAFレセプター、GMCSFレセプターなどは、通常の臨床例から得られる好酸球をそのまま分析した場合には発現が低い。5)高親和性IgEレセプターは、好酸球表面には少量発現しており、その発現量は血清IgEレベルの上昇に伴って増加する。6)高親和性IgEレセプターは骨髄の好酸球内にすでに多量に存在し、末梢血から組織へと移行する間に、血清中IgEと結びつくことにより細胞内から表面に固定され、表面発現した高親和性IgEレセプターとして検出可能となるらしい。7)高親和性IgEレセプターを発現し、結合するIgEを介して抗原と結合できる。8)IgEを介した好酸球と抗原の結合により、IL-10が分泌される。9)HLA DRは好酸球表面に表出されるが、活性化好酸球が多いとされるHES症候群では必ずしも表出されておらず、好酸球におけるHLA DR発現は末梢血好酸球よりむしろ血中IgEとよい相関がみられる。好酸球増多症患者および正常人の好酸球表面のICAM-1、LFA-1β,LFA-1α,Mac-1,VLA-4,CD4,CD25,CD69,CD89、GMCSFR等の染色を行った。好酸球末梢血分画比率と前記項目の関係を検討したところ、好酸球分画の増加に伴いLFA-1α、Mac-1の増加が認められ、逆にVLA-4は減少することが判明した。さらに、前記測定項目同士の相関関係を検討したところ、Mac-1とLFA-1α,CD4,CD69,ICAM-1は正の相関を、VLA-4とMac-1,LFA-1αは負の相関をしめすことが明らかとなった。ICAM-1、LFA-1β,LFA-1α,Mac-1,VLA-4,CD4は接着分子として働いており、好酸球の骨髄からの移動、血管への流出、炎症部血管内腔への接着、間質内移動、炎症部位への到着というふうに、移動の画段階と活性化の度合いによって接着分子の発現様式に変化が生じていくことが示された。また、CD69は細胞の活性化、分化と密接に関連し、一部の細胞では活性化の指標としての有用性が示されたいる。

CD69は通常の末梢血好酸球での発現は低く、喘息などの病勢との関連までは明らかにできなかったが、好酸球分画の増加およびICAM-1、LFA-1β,LFA-1α,Mac-1,VLA-4などの接着分子との相関関係が末梢血好酸球ですでに認められたことから、組織においてより活性化された好酸球では接着分子発現の変化のみならずCD69の発現の変化が予想され、今後の研究への期待がもたれた。現在、マウス細胞を用いた新たな実験系においても検討を平行して行っており、骨髄、末梢血、脾臓、腹腔内好酸球においてもその活性化段階においても接着分子など表面蛋白発現に差が見られることを確認している。今後、これらの発現のコントロールのメカニズムについても検討を予定している。好酸球はアレルギー性炎症の主たるエフェクター細胞として認識されている。本研究では好酸球に発現する分子から、その活性化やsubpopulationにつき検討をおこなっている。以下、現在まで得られた結果を箇条書きにする。1)好酸球表面の接着分子ではLFA-1,Mac-1は活性化により発現が増強する。LFA-1,Mac-1の細胞表面発現量は末梢血好酸球分画の増加に伴い増加する傾向がある。2) VLA-4は発現量は不変であるが、発現の密度がむしろ好酸球の活性化に伴って低下する可能性があり、LFA-1やMac-1とは逆相関を示す。3)これらのβインテグリン接着分子を介した接着は好酸球の活性化と寿命に関与している。4) IgAレセプター、IL-5レセプター、PAFレセプター、GMCSFレセプターなどは、通常の臨床例から得られる好酸球をそのまま分析した場合には発現が低い。5)高親和性IgEレセプターは、好酸球表面には少量発現しており、その発現量は血清IgEレベルの上昇に伴って増加する。6)高親和性IgEレセプターは骨髄の好酸球内にすでに多量に存在し、抹消血から組織へと移行する間に、血清中IgEと結びつくことにより細胞内から表面に固定され、表面発現した高親和性IgEレセプターとして検出可能となるらしい。7)高親和性IgEレセプターを発現し、結合するIgEを介して抗原と結合できる。8) IgEを介した好酸球と抗原の結合により、IL-10が分泌される。2)VLA-4は発現量は不変であるが、発現の密度がむしろ好酸球の活性化に伴って低下する可能性があり、LFA-1やMac-1とは逆相関を示す。4)IgAレセプター、IL-5レセプター、PAFレセプター、GMCSFレセプターなどは、通常の臨床例から得られる好酸球をそのまま分析した場合には発現が低い。6)高親和性IgEレセプターは骨髄の好酸球内にすでに多量に存在し、末梢血から組織へと移行する間に、血清中IgEと結びつくことにより細胞内から表面に固定され、表面発現した高親和性IgEレセプターとして検出可能となるらしい。8)IgEを介した好酸球と抗原の結合により、IL-10が分泌される。9)HLADRは好酸球表面に表出されるが、活性化好酸球が多いとされるHES症候群では必ずしも表出されておらず、好酸球におけるHLADR発現は末梢血好酸球よりむしろ血中IgEとよい相関がみられる。
活性化オンコジーンを導入したトランスジェニックマウスによる個体発癌の研究

個体発癌におけるオンコジーンの機能を解析するために,ヒトcーHaーrasDNA(活性型およびプロト型)をマウス受精卵に導入した.個体発生を経て得られたトランスジェニックマウスは,活性型ヒトcーHaーras導入受精卵からは得られなかった.しかし, 2個の胚性腫瘍が得られたことから,活性型ヒトcーHaーras遺伝子は,胚発生の過程で発現し,その結果,胚を腫瘍化するために,正常な個体発生を完了することができずトランスジェニック胚は発生の途上で死亡したり,腫瘍として検出されることが認められた.そこで,プロト型ヒトcーHaーras DNA導入トランスジェニックマウスを作成し,活性型との比較を行なった.プロト型遺伝子導入マウスは11匹得られたが, 8匹は出産後2日以内に死亡した.原因の多くは不明であったが, 1匹は顎下腺の腫大が認められ,導入遺伝子の発現も認められた.離乳に達した3匹のうち1匹は,導入遺伝子が再配列を起し,遺伝子の機能を失なっていた.1匹は,生後約4ヶ月後に腹内出血で突然死亡したが,脾臓の腫瘍であった.その他腎臓の肥大も認められた.脾臓腫瘍はヌードマウス生着せず,悪性か否かは決定できなかった.このマウスは子孫を多く残し,その子孫のうちトランスジェニックマウスは成長がやや遅れる傾向が認められた.腫瘍の発生は, 1匹のマウスで外耳に良性の腫瘍がみられた以外は,発生が確認されたものはない.残る1匹は,左目の涙腺に腺腫瘍が認められた.成長が著しく遅れたが,成体に達してからは正常のマウスと変わらず,多くの子孫を残した.そのうち雄のトランスジェニックマウスは成長が著しく遅れるため, 7080%は成育途上で死亡したが,原因は不明であり,腫瘍は認められていない.以上のようなトランスジェニックマウスが得られたことから,これらを用いて個体発癌の過程を導入遺伝子の発現を通して解析する手懸りが得られたと考えられる.個体発癌におけるオンコジーンの機能を解析するために,ヒトcーHaーrasDNA(活性型およびプロト型)をマウス受精卵に導入した.個体発生を経て得られたトランスジェニックマウスは,活性型ヒトcーHaーras導入受精卵からは得られなかった.しかし, 2個の胚性腫瘍が得られたことから,活性型ヒトcーHaーras遺伝子は,胚発生の過程で発現し,その結果,胚を腫瘍化するために,正常な個体発生を完了することができずトランスジェニック胚は発生の途上で死亡したり,腫瘍として検出されることが認められた.そこで,プロト型ヒトcーHaーras DNA導入トランスジェニックマウスを作成し,活性型との比較を行なった.プロト型遺伝子導入マウスは11匹得られたが, 8匹は出産後2日以内に死亡した.原因の多くは不明であったが, 1匹は顎下腺の腫大が認められ,導入遺伝子の発現も認められた.離乳に達した3匹のうち1匹は,導入遺伝子が再配列を起し,遺伝子の機能を失なっていた.1匹は,生後約4ヶ月後に腹内出血で突然死亡したが,脾臓の腫瘍であった.その他腎臓の肥大も認められた.脾臓腫瘍はヌードマウス生着せず,悪性か否かは決定できなかった.このマウスは子孫を多く残し,その子孫のうちトランスジェニックマウスは成長がやや遅れる傾向が認められた.腫瘍の発生は, 1匹のマウスで外耳に良性の腫瘍がみられた以外は,発生が確認されたものはない.残る1匹は,左目の涙腺に腺腫瘍が認められた.成長が著しく遅れたが,成体に達してからは正常のマウスと変わらず,多くの子孫を残した.そのうち雄のトランスジェニックマウスは成長が著しく遅れるため, 7080%は成育途上で死亡したが,原因は不明であり,腫瘍は認められていない.以上のようなトランスジェニックマウスが得られたことから,これらを用いて個体発癌の過程を導入遺伝子の発現を通して解析する手懸りが得られたと考えられる.
血管壁細胞NAD(P)Hオキシダーゼを標的とした糖尿病合併症治療の新戦略

糖尿病血管壁における酸化ストレス亢進の機序として血管壁NAD(P)Hオキシダーゼ活性化の重要性を報告してきたが、その機序として高血糖とともに組織レニンアンギオテンシン系亢進によるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加を明らかにした。2型糖尿病モデル動物を用いた検討でも膵島においてNAD(P)Hオキシダーゼの発現増加と酸化ストレスの亢進を認め、興味あることにアンギオテンシン受容体(AT1)拮抗薬の投与により2型糖尿病モデル膵島におけるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加と酸化ストレス亢進の改善およびβ細胞の保護効果を認めることを報告した。2型糖尿病モデル膵島におけるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加に血管壁と同様に高血糖とともに組織レニンアンギオテンシン系亢進の関与が推定された。そこで、組織レニンアンギオテンシン系の重要な役割を果たしているキマーゼおよび組織アンギテンシン変換酵素(ACE)の発現動態について糖尿病動物の心血管組織および膵島において検討した。糖尿病動物の心、腎および膵島において明らかなキマーゼ発現増加を認める新知見を得ており、糖尿病における心血管障害およびβ細胞障害進展抑制のための新たな治療ターゲットとなる可能性が示唆された。そこで更に、これらのNAD(P)Hオキシダーゼ活性化機序をターゲットとした糖尿病血管合併症治療薬の可能性について糖尿病動物を用い検討した。スタチンは腎NAD(P)HオキシダーゼNOX4の発現亢進を改善し、糖尿病動物腎における酸化ストレスを改善し、蛋白尿の改善とともに腎組織の異常を改善することを示した。また、生体内物質であるビリルビンにラジカルスカベンジ作用とともにNAD(P)Hオキシダーゼ活性抑制作用があることを見いだし、疫学研究により、体質性黄疸を呈するGilbert症候群を合併した糖尿病患者では、網膜症、腎集、虚血性心疾患が著明に低率である新知見を見いだした。これらの新知見をもとに、現在NAD(P)Hオキシダーゼ活性化機序をターゲットとした創薬を展開している。糖尿病血管壁における酸化ストレス亢進の機序として血管壁NAD(P)Hオキシダーゼ活性化の重要性を報告してきたが、本年度においては臓器特異的に酸化ストレスを画像化し解析するESR-CT法を確立した。この測定系を用い糖尿病腎臓における酸化ストレスの亢進の画像化に成功し報告した。またその機序として高血糖とともに組織レニンアンギオテンシン系亢進によるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加を明らかにした。アンギオテンシン受容体(AT1)拮抗薬(ARB)投与により糖尿病腎におけるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加と酸化ストレス亢進の改善を認め、ARBにみられる糖尿病腎保護効果の一機序であることを報告した。また、血管壁のみばかりでなく膵β細胞においてNAD(P)Hオキシダーゼの構成蛋白の存在を確認した。高血糖やスルホニール尿素剤によるインスリン分泌刺激においてプロテインC(PKC)の活性化を介してNAD(P)Hオキシダーゼが活性化され酸化ストレスの亢進を惹起することを明らかに報告した。膵β細胞障害における糖毒性や疲弊の機序として注目される。2型糖尿病モデル動物を用いた検討でも膵島においてNAD(P)Hオキシダーゼの発現増加と酸化

ストレスの亢進を確認した。興味あることにアンギオテンシン受容体(AT1)拮抗薬の投与により2型糖尿病モデル膵島におけるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加と酸化ストレス亢進の改善およびβ細胞の保護効果を認めることを明らかにした。2型糖尿病モデル膵島におけるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加に血管壁と同様に高血糖とともに組織レニンアンギオテンシン系亢進の関与が推定された。以上、2型糖尿病の進展増悪と血管合併症発症進展のいずれにもNAD(P)Hオキシダーゼ活性化による酸化ストレス亢進が重要な役割を果たす可能性が示唆された。糖尿病血管壁における酸化ストレス亢進の機序として血管壁NAD(P)Hオキシダーゼ活性化の重要性を報告してきたが、その機序として高血糖とともに組織レニンアンギオテンシン系亢進によるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加を明らかにした。また、血管壁のみばかりでなく膵β細胞においてNAD(P)Hオキシダーゼの構成蛋白の存在を確認し、高血糖やインスリン分泌刺激薬であるスルフォニル尿素剤により活性化され酸化ストレスを亢進させることを報告した。以上より、2型糖尿病の進展増悪と血管合併症発症進展のいずれにもNAD(P)Hオキシダーゼ活性化による酸化ストレス亢進が重要な役割を果たす可能性が示唆された。2型糖尿病モデル動物を用いた検討でも膵島においてNAD(P)Hオキシダーゼの発現増加と酸化ストレスの亢進を認め、興味あることにアンギオテンシン受容体(AT1)拮抗薬の投与により2型糖尿病モデル膵島におけるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加と酸化ストレス亢進の改善およびβ細胞の保護効果を認めることを報告した。そこで、組織レニンアンギオテンシン系の重要な役割を果たしているキマーゼおよび組織アンギテンシン変換酵素(ACE)の発現動態について糖尿病動物の心血管組織および膵島において検討した。糖尿病動物の心、腎および膵島において明らかなキマーゼ発現増加を認める新知見を得ており、糖尿病における心血管障害およびβ細胞障害進展抑制のための新たな治療ターゲットとなる可能性が示唆された。今後その発現異常のさらなる分子機序の解明およびこれらの機序をターゲットした新規の合併症治療およびβ細胞保護のための創薬を開始する予定である。糖尿病血管壁における酸化ストレス充進の機序として血管壁NAD(P)Hオキシダーゼ活性化の重要性を報告してきたが、その機序として高血糖とともに組織レニンアンギオテンシン系充進によるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加を明らかにした。2型糖尿病モデル動物を用いた検討でも膵島においてNAD(P)Hオキシダーゼの発現増加と酸化ストレスの充進を認め、興味あることにアンギオテンシン受容体(AT1)拮抗薬の投与により2型糖尿病モデル膵島におけるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加と酸化ストレス充進の改善およびβ細胞の保護効果を認めることを報告した。2型糖尿病モデル膵島におけるNAD(P)Hオキシダーゼ発現増加に血管壁と同様に高血糖とともに組織レニンアンギオテンシン系充進の関与が推定された。
黄体ホルモンによる子宮内膜の細胞分化の分子基盤

老化細胞は生理的に妊娠子宮に出現することが知られており、分娩後も子宮に存在することが考えられる。老化細胞の独特の性質を考えると、老化細胞の除去は産褥子宮の機能回復に重要であることが推測される。しかし、産褥子宮における老化細胞の動態や、それが過剰に蓄積した際の子宮機能障害の詳細は明らかになっていない。本研究では、産褥子宮における老化細胞の挙動とその除去機構を検討した。老化細胞は産褥子宮間質に存在し、徐々に減少して分娩後約1か月で消失した。また、Cd11b陽性細胞、NK細胞、T細胞、及び好中球は産褥子宮に認められなかった一方で、F4/80陽性マクロファージが老化細胞周囲に集積し、老化細胞のクリアランスを促進していることが示された。さらに、産褥子宮に老化細胞が過剰に蓄積するマウスモデルを用いて、老化細胞の過剰な蓄積を引き起こす子宮内微小環境の詳細を解析した。LPS誘導性早産p53-loxP/Pgr-Creマウス子宮では老化細胞のクリアランスの遅延、F4/80陽性マクロファージの減少、分娩直後の妊娠率の顕著な低下、向炎症因子の発現増加、プロゲステロン・シグナリングの亢進とエストロゲン・シグナリングの減弱が認められた。本研究により、産褥子宮には老化細胞が存在し、F4/80陽性マクロファージによって除去されること、子宮内に老化細胞が過剰に蓄積することにより妊娠障害が誘起されるほか、子宮内の炎症やプロゲステロン・シグナリング減弱によって老化細胞除去機構の障害が引き起こされることが示唆された。マウスおよびヒト検体を用いた研究が順調に行われており、その成果として本年度はプロジェクトに関連した論文を複数の英文誌に発表することができた。これらの成果をさらに発展させ、最終年度の研究進展が期待できる。順調に進展し成果を上げているため、今後の研究は進展が認められる研究計画を中心に進める予定とする。脱細胞化という組織再生技術を利用してマウス子宮の再生を行った。SDSなどの界面活性剤を用いると、細胞外基質の機能を保ったまま生体組織から細胞を除去できることが知られており、この組織から細胞を除去する処理のことを「脱細胞化」と呼ぶ。脱細胞化した生体組織を臓器移植に用いた場合、免疫拒絶反応の主体となる細胞や物質が除去されているため、通常の臓器移植で起こる拒絶反応が抑制される。また、脱細胞化組織は組織再生の足場となることが知られており、機能的再生組織を作成する技術への応用の可能性が注目されている。本研究では、摘出した野生型マウス子宮に対してSDSによる脱細胞化処理を行い、組織から細胞を取り除いた脱細胞化子宮組織を作製し、あらかじめ子宮を部分切除する処置を行った別の野生型マウスに対して、切除部分を埋めるように脱細胞化子宮の組織片を移植する手術を行った。脱細胞化子宮組織の移植部位では1か月後に完全に子宮が再生し、移植部分の再生子宮が正常な卵巣ホルモンの組織応答能を持っているだけでなく、正常な妊娠成立・妊娠維持が可能であることが明らかになった。さらにSTAT3という転写因子が子宮特異的に欠失したノックアウトマウスを用いて、このマウスに子宮の部分切除を行ったのちに脱細胞化子宮組織片を移植したところ、移植後早期の子宮内膜上皮の再生が弱まった。このことから、STAT3が子宮内膜上皮の再生を促進していることが明らかになった。また、月経後のヒト子宮や分娩後のマウス子宮において活性型のSTAT3が認められたことから、月経や分娩後の子宮組織の再構築にSTAT3が関与している可能性が示された。今回の研究により、マウス子宮の脱細胞化組織移植により、正常な機能を有する再生子宮を作製することに成功し、マウス子宮の再生・再構築の仕組みに転写因子STAT3が関わっていることが明らかになった。これらの成果をさらに発展させ、次年度以降の研究の更なる進展が期待できる。

本研究により、産褥子宮には老化細胞が存在し、F4/80陽性マクロファージによって除去されること、子宮内に老化細胞が過剰に蓄積することにより妊娠障害が誘起されるほか、子宮内の炎症やプロゲステロン・シグナリング減弱によって老化細胞除去機構の障害が引き起こされることが示唆された。マウスおよびヒト検体を用いた研究が順調に行われており、その成果として本年度はプロジェクトに関連した論文を複数の英文誌に発表することができた。これらの成果をさらに発展させ、最終年度の研究進展が期待できる。順調に進展し成果を上げているため、今後の研究は進展が認められる研究計画を中心に進める予定とする。
水素クラスターの機能化-高密度水素貯蔵と準室温超伝導の両面から-

水素クラスター型(錯体)水素化物としての「軽量金属(M)-ホウ素(B)-水素(H)系材料」や「軽量金属(M)-チッ素(N)-水素(H)系材料」などの研究を更に発展させた。本年度は、アルカリ(土類)金属に加えて遷移金属や希土類金属も含めた広範な種類の金属Mを用いてそれぞれの水素化物を合成するとともに、それらの機能性を大幅に向上させた。主な成果を以下に示す。1)当該水素化物の熱力学的安定性は、電気陰性度を考慮したMの選定によって実効的に制御できることを見出した。例えば、M-B-H系材料の場合、Mとして電気陰性度が比較的小さな元素群(アルカリ金属や希土類金属、など)を用いることで水素化物が安定化する。この場合、水素放出温度が300°C以上に設定できるので、高密度水素の物性を利用した中性子遮蔽機能などを付与することができた。一方、Mとして電気陰性度が比較的大きな元素群(遷移金属元素、など)を用いることで、水素化物が適度に不安定化する。この場合、水素放出温度が200°C以下に設定できるので、燃料電池技術をはじめとした水素利用技術において重要となる可逆的な高密度水素貯蔵機能を付与することができた。2)当該水素化物の昇温過程では、B-H系気体やN-H系気体などの水素以外の気体が放出される可能性がある。これらの不純物放出は、水素貯蔵機能や中性子遮蔽機能をはじめとした機能化に際して阻害要因となりうる。そこで水素以外の不純物放出の要因を検討することにより、B-H系気体に関してはMの電気陰性度を適正化すること、N-H系気体に関しては他の錯体水素化物あるいは水素化物と複合化すること、などによりこの不純物放出が抑制できることを実証した。その他、ペロブスカイト水素化物やアルミニウム水素化物での多様な水素クラスターに関する研究も進め、結晶構造に強く依存した水素放出特性や伝導特性に関する基礎的知見を得た。本年度は、水素クラスター型(錯体)水素化物のうち水素貯蔵機能の観点で重要な「リチウム-ホウ素-水素系」および「リチウム-チッ素-水素系」に注目して、高圧水素中での反応焼結を利用した合成技術を開発した。更に、これらの多様な水素化物での局所原子振動モードなどのナノ・サブナノ領域での物性測定を進めることにより、脱水素化反応の促進にも成功した。・新たに設計したガズ圧縮ブースターとインコネル製反応容器とを組み合わせた高圧水素中での反応焼結により、LiBH_4やLiNH_2などの水素化物の合成が可能となった。この合成技術の確立により、LiをMgなどで(部分)置換した新たな水素化物の合成にも世界で初めて成功した。・これらの水素化物に対する顕微レーザーラマン分光測定により、B-HやN-H間の局所原子振動モードを測定することができた。その結果、水素化物を構成する陽イオンの電気陰性度と原子振動エネルギーの大きさに正の相関があることを見出した。・更に、水素雰囲気中での熱重量示差熱分析により、これらの水素化物の脱水素化反応温度を系統的に評価したところ、陽イオンの電気陰性度と反応温度には負の相関があることも見出した。すなわち、電気陰性度の大きな陽イオンでの(部分)置換が、低温での脱水素化反応の促進に有効である、という重要な材料設計指針を得ることができた。・実際に、LiをMgで(部分)置換した新たな水素化物を合成してその脱水素化反応を評価したところ、従来材料より180°Cも低い100°C以下の温度領域からでも脱水素化反応が進行し始めることが確認できた。その他、成膜(真空蒸着)法での合成技術との組み合わせにより、固体高分子型燃料電池への応用を目指した新たな水素クラスター型水素化物を合成して、その水素貯蔵機能を評価した。水素クラスター型(錯体)水素化物としての「軽量金属(M)-ホウ素(B)-水素(H)系材料」や「軽量金属(M)-チノ素(N)-水素(H)系材料」などに注目して、これらの錯体水素化物に対して適切な金属水素化物(あるいは他の錯体水素化物)を複合化することによって極めて有用な水素貯蔵機能が発現することを予測した。そして実際に水素クラスターを有する新たな複合材料の合成とその評価を進めた。1)錯体水素化物と金属水素化物との複合化に関しては、「低温で分解する錯体水素化物」と「錯体水素化物からの副生ガスとの反応性が高い金属水素化物相」との複合化か有効であることを理論的に予測した。そして、たとえば3Mg(NH_2)_2+12LiH⇔Mg_3N_2+4Li_3N+12H_2に示す可逆的反応が進行することを実験的に確認した。この反応では、従来材料の35倍の質量水素密度に相当する9質量%以上の高密度水素を貯蔵することも可能であり、さらなる基礎物性の解明と応用展開が期待される。2)錯体水素化物同士の複合化に関しては、新しい反応経路の設計か重要であることを見出した。

例えば、約12質量%もの高密度水素を貯蔵するLiBH_4とLiNH_2の複合材料では、LiBH_4+2LiNH_2⇒Li_3BN_2+4H_2に従う反応により錯体水素化物の水素クラスターが分解され、LiBH_4単独の場合より150200°Cも低い温度領域で水素放出反応が進行することを見出した。現状では再水素化反応などに技術的課題が残されているが、錯体水素化物同士の適切な複合化によって単独の場合と比較してより優れた水素貯蔵機能を設計できることを示したはじめての反応例であり、新たな材料設計指針として注目できる。さらに、関連構造としてのペロブスカイト型錯体水素化物の合成にも成功しており、水素化・脱水素化反応の可逆性および水素欠損にともなう伝導特性の変化なども評価・解析した。水素クラスター型(錯体)水素化物としての「軽量金属(M)-ホウ素(B)-水素(H)系材料」や「軽量金属(M)-チッ素(N)-水素(H)系材料」などの研究を更に発展させた。本年度は、アルカリ(土類)金属に加えて遷移金属や希土類金属も含めた広範な種類の金属Mを用いてそれぞれの水素化物を合成するとともに、それらの機能性を大幅に向上させた。主な成果を以下に示す。1)当該水素化物の熱力学的安定性は、電気陰性度を考慮したMの選定によって実効的に制御できることを見出した。例えば、M-B-H系材料の場合、Mとして電気陰性度が比較的小さな元素群(アルカリ金属や希土類金属、など)を用いることで水素化物が安定化する。この場合、水素放出温度が300°C以上に設定できるので、高密度水素の物性を利用した中性子遮蔽機能などを付与することができた。一方、Mとして電気陰性度が比較的大きな元素群(遷移金属元素、など)を用いることで、水素化物が適度に不安定化する。この場合、水素放出温度が200°C以下に設定できるので、燃料電池技術をはじめとした水素利用技術において重要となる可逆的な高密度水素貯蔵機能を付与することができた。2)当該水素化物の昇温過程では、B-H系気体やN-H系気体などの水素以外の気体が放出される可能性がある。これらの不純物放出は、水素貯蔵機能や中性子遮蔽機能をはじめとした機能化に際して阻害要因となりうる。そこで水素以外の不純物放出の要因を検討することにより、B-H系気体に関してはMの電気陰性度を適正化すること、N-H系気体に関しては他の錯体水素化物あるいは水素化物と複合化すること、などによりこの不純物放出が抑制できることを実証した。その他、ペロブスカイト水素化物やアルミニウム水素化物での多様な水素クラスターに関する研究も進め、結晶構造に強く依存した水素放出特性や伝導特性に関する基礎的知見を得た。
肺炎球菌性肺炎の重症化に関わる新規疾患感受性遺伝子の探索と解析

肺炎球菌性肺炎に関してマウス肺炎モデルを用いて重症化に関わる疾患感受性遺伝子の探索を行った。肺炎球菌に対する致死感受性の高いCBA/JNマウスと抵抗性であるC57BL/6マウスを用いて連鎖解析を実施したところ、第1染色体上の約10cMの範囲内に疾患感受性遺伝子が存在する可能性を見出した。その範囲内には肺炎に関わると考えられる複数の因子(免疫グロブリン関連、アポトーシス関連など)が含まれることが分かった。本研究では、既に申請者らのグループが構築した肺炎球菌によるマウス重症化肺炎モデルを用いて、1)肺炎球菌およびその莢膜型に関わる疾患感受性遺伝子を特定し、2)重症化機序に関わる責任遺伝子(群)の役割を解析する。本年度は、連鎖解析を中心に責任遺伝子の特定を目標に以下の項目を実施し、いくつかの重要な知見を得た。連鎖解析に用いる交配マウス種の決定:疾患感受性マウス(CBAIJ)と比較してPhenotype、Genotypeが明らかに異なり、かつ解析に必要となるマーカーの種類が多いC57BL/ 6マウスを連鎖解析に使用するマウス種として選別した。F1、F2マウスを用いた肺炎球菌感受性試験: CBAIJとC57BL/6マウスの交配により得られたF1マウス(16匹)およびこれらのインタークロスであるF2マウス(250匹)を用いて感染実験を実施し、肺炎球菌感受性・抵抗性の存在比(60 : 190)から、本疾患は単一遺伝子によるものである可能性が非常に高いことを見出した。連鎖解析の実施: 60匹の肺炎球菌感受性であったF2マウスのゲノムDNAを用いて連鎖解析を実施し、第1染色体上の約6cMの領域内に責任遺伝子が存在する可能性を見出した。DNAマイクロアレイを用いた発現解析:肺炎球菌感染および非感染マウス(CBA/J)の肺より得られたRNAを用いて、DNAマイクロアレイを用いた発現解析を実施した。発現変動の高い遺伝子について、上記連鎖解析により絞り込まれた範囲内に存在する遺伝子との比較を行ったが、責任遺伝子の特定には至らなかった。本研究では、既に申請者らのグループが構築した肺炎球菌によるマウス重症化肺炎モデルを用いて、1)肺炎球菌およびその莢膜型に関わる疾患感受性遺伝子を特定し、2)重症化機序に関わる責任遺伝子(群)の役割を解析することを目的としている。これまでに(1)連鎖解析に使用する交配マウス種を決定(C57BL/6、CBA/JN)し、(2)F1およびF2マウスを作出して感染実験を実施し、肺炎球菌感受性・抵抗性の存在比(60:190)から、本疾患は単一遺伝子によるものである可能性が非常に高いことを見出している。さらに(3)責任遺伝子座の絞り込みに成功し、本結果とも合わせて(4)網羅的遺伝子発現解析を実施したが、責任遺伝子の特定には至らなかった。そこで上記(3)に関して、さらなる絞り込みを実施することを目的として、各マウス種のマーカーとなるSNP(Single Nucleotide Polymorphism)をPCR法により検出することによって、さらなる連鎖解析を実施した。第1染色体上の特定の位置に対して約20種類のSNPマーカーを使用して責任遺伝子の絞り込みを行った結果、責任遺伝子の存在範囲を絞り込むことができた。今後、絞り込まれた範囲に存在する遺伝子に関して、シークエンスを含めた詳細な解析を実施する予定である。これとは別に、CBA/JNに対して遺伝的背景が非常に近いにもかかわらず、明らかに疾患感受性の異なるマウス種(CBA/J)を選別することができた。上記知見とも合わせて本マウス種を用いることにより、より効率よく比較解析を実施できるものと期待している。本研究では、肺炎球菌およびその葵膜型に関わる疾患感受性遺伝子を特定し、重症化機序に関わる責任遺伝子(群)の役割を解析することを目的とし、研究実施計画を基に以下の検討を行った。連鎖解析の実施:前年度までの検討の結果、第1染色体上の特定の位置(約10cM程度)に責任遺伝子が存在することを見出した。本年度はさらなる絞り込みを行うため、マウスのSNPを利用した責任遺伝子座の特定を試みた。具体的には、上記10cM程度の範囲およびその前後にマーカーとなるSNPを17個選別し、PCR法による連鎖解析を実施した。しかし責任遺伝子の特定には至らなかった。責任遺伝子の単離と同定:絞られた領域の候補遺伝子について、これまでに実施した網羅的遺伝子解析のデータ、および既存の情報(GEOより抽出)を基に、責任遺伝子の特定を検討した。候補領域およびその周囲に肺炎球菌による肺炎と関連性のあると予測される遺伝子(免疫グロブリン関連、アポトーシス関連、自然免疫関連、など)の選抜に成功した。これらに関してはリアルタイムRT-PCR法を用いて肺炎球菌感染との関連性を解析している。責任遺伝子の機能メカニズムの解析:責任遺伝子自体による制御メカニズムではなく、microRNAを介して責任遺伝子を制御している可能性も考慮し、肺炎球菌感染マウスの肺よりRNAを抽出し、microRNAの網羅的解析を実施した。
統合失調症におけるD-セリン血清濃度を制御している分子基盤の解明

平成18年度は、L-セリンからD-セリンを合成する酵素をコードしているセリンラセマーゼについて、マウスの遺伝子を解析した。平成17年度のヒト遺伝子解析と同様に、まず5'-RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)法を用いて転写開始点およびプロモーター領域の確定を行った。興味深いことに、この遺伝子は脳では転写開始点の違いにより少なくとも5種類のmRNAアイソフォームが存在することが判明した(ヒトでは4種類)。そして、少なくとも2種類のプロモーターがあることが示唆された。次に、アイソフォーム毎に、脳における発現を前頭葉、海馬の2箇所で、オス・メス、そして胎生期、成人期の異なる発達段階で調べた。その結果、各アイソフォームの発現は、領域特異的、発達段階特異的に制御されていることが判明した。近郊系マウスのC57B/6(B6)とC3H/He(C3)の間で、統合失調症のエンドフェノタイプと言われているプレパルス抑制(PPI)に差があることを見いだしたが、PPIが低いC3系統では、アイソフォーム1+2の合計の発現量がB6に比較して、前頭葉、海馬の両部位で有意に減少していることを見いだした。さらに、両系統でセリンラセマーゼをコードするゲノム領域の変異検索を行ったところ、プロモーターと思われる領域に1つのSNP(single nucleotide polymorphism)を検出した。今後は、(1)このSNPが機能的意味を持つか、(2)ヒトサンプルで、血中D-セリン濃度とPPIは相関するか、に焦点を当てて解析することが重要と考えられた。平成17年度は、L-セリンからD-セリンを合成する酵素をコードしているセリンラセマーゼを解析の対象とし、まず5'-RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)法を用いて転写開始点およびプロモーター領域の確定を行った。興味深いことに、この遺伝子は脳では転写開始点の違いにより少なくとも4種類のmRNAアイソフォームが存在することが判明した。次に、すべてのアイソフォームをカバーするゲノム領域の変異検索、SNP (single nucleotide polymorphism)データベース検索から、4つのSNPを同定した。これらのうち2つは多型性が低かったので、その後の解析からはずした。残り2つのSNPを用いて統合失調症との関連を独立した3つのサンプルパネル(1つは家系サンプル、残り2つはケースコントロールサンプル)で検討した。結果は、統合失調症への関連を認めなかった。さらに、セリンラセマーゼのSNPと血清中D-セリンの濃度との関連を調べたが、これも相関を認めなかった。第2の候補遺伝子として、D-セリンを分解する酵素であるD-アミノ酸オキシダーゼを取り上げ、上記と同じように統合失調症に対する関連および血清中D-セリンの濃度との相関を調べたが、結果はネガティブであった。ただ、今回血清中D-セリンの濃度を統合失調症と正常対照群で比較したところ、Hashimotoらが2003年に報告したように、統合失調症でD-セリン濃度の低下、全セリン中のD-セリンの割合の低下を再現した。以上の結果から、統合失調症におけるD-セリン代謝の障害は確かに存在するが、責任遺伝子はさらに他のものを検索していく必要があると思われた。
血液幹細胞に特異的に発現されるTIE受容体のリガンドの検索

(1)血液幹細胞のin vitro増幅が可能になると、骨髄移植や遺伝子治療を大きく進展させると思われる。我々は、新規の受容体型チロシンキナーゼ(RTK)TIEを解析し、それらの結合因子を同定できれば、将来、幹細胞の試験管内増幅も可能になると考え、以下の検討をおこなった。FACSにより純化した血液幹細胞から、TIEおよびTEK RTK遺伝子をクローニングした。両者は約50%の相同性をしめし、細胞外は、免疫グロブリン、EGF、フィブロネクチン様ドメインよりなり、細胞内には、短いinsertionをもつキナーゼドメインがみられた。両者ともに、血液幹細胞に選択的に発現され、分化とともに発現が低下するのが認められた。RT-PCR法による幹細胞からのチロシンキナーゼ遺伝子のクローニングは、有効でこのほかにも、METファミリーに属すると考えられるSTK/RONやCSKにホモロジーを示すHYLなどの新しい遺伝子が同定された。(2)TIE遺伝子にFLAGをつなぎ、細胞外ドメインからなる可溶性TIE蛋白を発現させた。これを用いて、抗FLAG抗体により、リガンドを発現しているとおもわれるストロマ細胞との結合を検討しているが、いまだ有意の結合を確認していない。今後、TIE-免疫グロブリンキメラ遺伝子の作成、中和活性をもつTIE抗体の作成が必要と考えられる。これと平行して、ES細胞のin vitro gene targetingなどにより、幹細胞由来の新規のチロシンキナーゼ遺伝子の造血における役割を、明らかにしたい。全体として、構造解析は、進んだが、機能解析は、緒についたばかりである。
技術者コンピテンシー育成のための教育プログラムの開発

本研究は工学教育における各段階での技術者コンピテンシーを育成する教育プログラムを開発する.工学教育の各段階での教育プログラムのモデルとして(1)基礎科学・専門教育などいわゆる講義型授業,(2)PBL型授業,(3)実験・研究活動における技術者コンピテンシー育成のための教材・教授法の開発と授業の実践と技術者コンピテンシーの評価手法を確立する.本年度は計画通りに(1)講義型授業での技術者コンピテンシー育成のための教材・教授法の開発と実践を中心に研究を進めた.具体的には自然科学基礎科目において知識の定着と活用を促す協同学習を組み込んだ授業モジュールを設計し実践した.学生同士教えあう協同学習を組み込むことで,知識の定着にも大きな効果がみられた.またコミュニケーション力,チームワーク力等の育成を目的とした授業動画作製演習やストーリーボード演習のための大判テンプレート教材等を開発して実践した.作製した成果物についてルーブリックを設定した教員評価,学生の自己評価・相互評価を行った.また(2)について課題解決型PBL,ハッカソン用の課題分析(PMI、SWOT分析等)を組み込んだ大判テンプレート教材等を開発してPBL科目で実践した.また開発した大判テンプレート教材を使用して2019年3月に新潟県長岡市高専・大学合同のアイデアソン(地域食材を使った地域活性化)を開催した.また技術者コンピテンシー評価について,工学系のジェネリックスキル試験の試作版を使用して複数の高専生の解答データを分析した.当初の計画通りに本年度は特に基礎科学・専門教育などいわゆる講義型授業に関する技術者コンピテンシー育成の教材・教授法の開発と実践を行った.知識の定着とともに知識を活用する能力の育成を目的として協同学習を組み込んだ授業モジュールを設計して実践した.また次年度の実施準備としてPBL科目における教材・教授法の開発も進め,一部は先行実施した.2019年度は計画通りにPBL科目等での技術者コンピテンシー育成のための教材・教授法の開発と実践、評価を中心として研究を行う.今年度より開講するPBL科目で実践し,結果を分析して教材・教授法の改良を行う.また前年度の結果をうけて講義型科目の教材・教授法の改良や,実験・実習や研究活動における技術者コンピテンシー育成のための教育手法開発のための準備も進めていく.本研究は工学教育における各段階での技術者コンピテンシーを育成する教育プログラムを開発する.工学教育の各段階での教育プログラムのモデルとして(1)基礎科学・専門教育などいわゆる講義型授業,(2)PBL型授業,(3)実験・研究活動における技術者コンピテンシー育成のための教材・教授法の開発と授業の実践と技術者コンピテンシーの評価手法を確立する.本年度は計画通りに(1)講義型授業での技術者コンピテンシー育成のための教材・教授法の開発と実践を中心に研究を進めた.具体的には自然科学基礎科目において知識の定着と活用を促す協同学習を組み込んだ授業モジュールを設計し実践した.学生同士教えあう協同学習を組み込むことで,知識の定着にも大きな効果がみられた.またコミュニケーション力,チームワーク力等の育成を目的とした授業動画作製演習やストーリーボード演習のための大判テンプレート教材等を開発して実践した.作製した成果物についてルーブリックを設定した教員評価,学生の自己評価・相互評価を行った.また(2)について課題解決型PBL,ハッカソン用の課題分析(PMI、SWOT分析等)を組み込んだ大判テンプレート教材等を開発してPBL科目で実践した.また開発した大判テンプレート教材を使用して2019年3月に新潟県長岡市高専・大学合同のアイデアソン(地域食材を使った地域活性化)を開催した.また技術者コンピテンシー評価について,工学系のジェネリックスキル試験の試作版を使用して複数の高専生の解答データを分析した.当初の計画通りに本年度は特に基礎科学・専門教育などいわゆる講義型授業に関する技術者コンピテンシー育成の教材・教授法の開発と実践を行った.知識の定着とともに知識を活用する能力の育成を目的として協同学習を組み込んだ授業モジュールを設計して実践した.また次年度の実施準備としてPBL科目における教材・教授法の開発も進め,一部は先行実施した.2019年度は計画通りにPBL科目等での技術者コンピテンシー育成のための教材・教授法の開発と実践、評価を中心として研究を行う.今年度より開講するPBL科目で実践し,結果を分析して教材・教授法の改良を行う.また前年度の結果をうけて講義型科目の教材・教授法の改良や,実験・実習や研究活動における技術者コンピテンシー育成のための教育手法開発のための準備も進めていく.計画では学外の研究分担者との会議を複数回予定していたが,日程調整等の問題により1回分をスカイプ会議に変更した.その旅費分を残額として次年度に繰り越した.次年度の研究分担者への打ち合わせ会議の旅費に使用する.
新人事訴訟手続法の理論的研究

わが国の人事訴訟法の成立過程については、ある程度の知見を得、それなりの理論的構築を得ることができた。この総論的な部分については、家庭裁判月報に小論文を掲載した。手続法的には、訴訟事項と非訟事項の組み合わせが興味深いところであり、ドイツ法のように峻別する立法例もあるが、わが国では主として実務上の便宜から旧法と同様に混在化する立場を採ったことに基本的には賛成するが、理論としては残念なところもある。政策的に大きな争点となったものは、非公開審理であるが、その結論には賛成するものの、非公開審理を採る理由付けには賛同しがたい面もある0学説からも提起されていなかった観点に基づくからである。が、根本の人事訴訟法における公益性とは何かについては、まだ思考が完成していない。今後とも追究すべき課題である。解釈論を磨くことも目的であったが、こちらについては、いくつかの点で思索を深めることができた。人事訴訟法における証拠法が、その1つである。基本的には、通常の民事訴訟法と異なるところはないが、職権探知主義の部分が異なる。しかし、これは、かってのドイツ法のように過大視すべきものではない。各論的となるが、遺言執行者の当事者適格についても思索を深めることができた。近時、いわゆる「相続させる旨の遺言」に関係して、判例が揺らぎの生じたところであるが、基本的には遺言執行者に当事者適格を認める方向で考えるべきだという結論に至った。また、養子縁組が無効だという主張があるときに離縁無効確認の訴えに確認の利益を認めるべきかという長年の懸案についても、思索を深めることができた。結論は、確認の利益を認めることができるが、判例の理由付けはやや不十分というものである。いまだ追究すべき課題もなお多い。さらに精進を続ける所存である。体系書につながるよう努力したい。本年度は,法制審議会民事・人事訴訟法部会,人事訴訟法分科会での議論を,正確に跡づけることに力点を置いた。すなわち,審議会議事録を精読し,関係資料を読み込んだ。大阪弁護士会の報告書が,意外に立案過程で顧慮されていることを再確認し,大阪の弁護士からもヒアリングを行なった。他方,東京の裁判官,弁護士に対してもヒアリングを実施し,実務家の関心のありかを探った。人事事件の地方裁判所から家庭裁判所への移管は,家庭裁判所創設時から声があったが,他面では,家庭裁判所が訴訟によって堅苦しい雰囲気となることを懸念する声もあり中々実現しなかったのであるが,今日では,家庭裁判所で訴訟を行なうことへの抵抗感はほぼ消失したことは実務家へのヒアリングによって確認することができた。むしろ,今日では,家庭裁判所に移管する事件を狭義の人事事件に限定せず,家庭に関係する事件を広く移管させるべきだ(たとえば,遺産をめぐる訴訟,婚約破棄を理由とする慰謝料請求訴訟)という意見も強く,これに対抗する議論が法制審議会では白熱したことを確認することができた。また,離婚に伴う財産分与,監護に関する処分という非訟事件事項と離婚そのものという訴訟事件事項との関係付けが,立法技術的には困難であったことも確認した。また,法制審議会では最後まで,非公開審理につき議論が割れていたことも確認することができた。立法は成立したのであるが,その解釈論上の課題,必要性は相当程度,絞り込むことができた。解釈論を磨くことが次年度の課題である。

手続法的には、訴訟事項と非訟事項の組み合わせが興味深いところであり、ドイツ法のように峻別する立法例もあるが、わが国では主として実務上の便宜から旧法と同様に混在化する立場を採ったことに基本的には賛成するが、理論としては残念なところもある。政策的に大きな争点となったものは、非公開審理であるが、その結論には賛成するものの、非公開審理を採る理由付けには賛同しがたい面もある。学説からも提起されていなかった観点に基づくからである。が、根本の人事訴訟法における公益性とは何かについては、まだ思考が完成していない。今後とも追究すべき課題である。解釈論を磨くことも目的であったが、こちらについては、いくつかの点で思索を深めることができた。人事訴訟法における証拠法が、その1つである。基本的には、通常の民事訴訟法と異なるところはないが、職権探知主義の部分が異なる。しかし、これは、かつてのドイツ法のように過大視すべきものではない。各論的となるが、遺言執行者の当事者適格についても思索を深めることができた。近時、いわゆる「相続させる旨の遺言」に関係して、判例が揺らぎの生じたところであるが、基本的には遺言執行者に当事者適格を認める方向で考えるべきだという結論に至った。また、養子縁組が無効だという主張があるときに離縁無効確認の訴えに確認の利益を認めるべきかという長年の懸案についても、思索を深めることができた。結論は、確認の利益を認めることができるが、判例の理由付けはやや不十分というものである。いまだ追究すべき課題もなお多い。さらに精進を続ける所存である。体系書につながるよう努力したい。