hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
「水」を抽出溶媒とした環境調和型アスファルト抽出試験の開発と展開

本研究は、人体や環境に有害な溶剤を用いることなく、「水」を溶媒としてアスファルト混合物からアスファルトを抽出する抽出技術の開発と展開を目的としている。以下に、本研究期間における成果を開発と展開の目的に区別して概説する。抽出試験の開発に向けた平成2627年度の研究により、350°Cの亜臨界水を用いて多様なアスファルトを迅速かつ厳密に抽出できることを究明し、安全かつ効率的な試験法および自動化装置を開発した。抽出技術の展開を目指した平成28年度の研究により、亜臨界水反応によってアスファルトが軽質化する傾向を確認し、劣化アスファルトの性状回復技術として展開の可能性を究明した。本研究期間(平成2628年度)では、水を溶媒として迅速かつ正確にアスファルトを抽出する環境調和型アスファルト抽出試験の開発に向け、一次三次目的を段階的に達成していく。平成26年度においては、一次目的に沿った課題A、Bを解決する基礎検討として、亜臨界水抽出試験の実用性を検証するデータの集積と解析に取り組んだ。一次目的:多様な素材および混合物に対する亜臨界水の抽出性能を究明し、適用性と実用性を検証する。課題A:各種の改質アスファルトや剥離面積率の異なる骨材、劣化程度の異なる再生骨材等を用いて、混合物用素材の性状が亜臨界水の抽出性能に及ぼす影響を明らかにする。課題B:アスファルト量や骨材合成粒度、再生骨材配合率等の異なる各種のアスファルト混合物を用いて、供試体の配合および質量が亜臨界水の抽出性能に及ぼす影響を明らかにする。以下に、平成26年度の実施内容および成果の概要を報告する。代表的な舗装用素材(アスファルト:ポリマー改質アスファルトII型・III型など、骨材:新規骨材、再生骨材など)および特徴的な混合物(細粒度アスファルト混合物、ポーラスアスファルト混合物など)を対象とした亜臨界水抽出試験を実施し、多様な材料と品質に対する適用性を検証した。試験は、既報研究と同様に抽出条件を350°C・16.5MPa、15分とし、アスファルト量および骨材合成粒度の測定精度を供試体配合時との比較によって評価した。この結果、本技術は新規の骨材や混合物の種類に影響を受けず、アスファルト量および骨材合成粒度を迅速かつ正確に測定できることを確認した。一方、再生骨材に対しては旧アスファルトの劣化が測定精度に悪影響を及ぼす可能性があり、事前に熱水養生を追加することでこの問題を解決している。以上から、平成26年度の成果として、多様な素材および混合物に対する亜臨界水抽出試験の実用性を概ね確認した。以下に、本研究期間(平成2628年度)ならびに平成27年度における研究の目的と課題を挙げる。本研究期間では、水を溶媒として迅速かつ正確にアスファルトを抽出する環境調和型アスファルト抽出試験の開発に向けて、一次三次目的を段階的に達成する。平成27年度においては、平成26年度の成果に基づいて以下の二次目的に沿った課題C、Dによる装置の開発と試験法の確立に取り組んだ。二次目的:日常的な品質管理試験として実用に適した装置を開発し、安全かつ効率的な試験法を確立する。課題C:加熱・冷却装置等の改良による試験時間の短縮や、内部(二槽構造)容器による試験手順・操作の簡略化等について具体的に検討し、より安全かつ実用的な亜臨界水抽出試験装置を開発する。課題D:抽出後アスファルト(膜状)の確実な造成・回収方法や、抽出後骨材の簡便な回収・乾燥方法等について検討し、より安全かつ効率的な亜臨界水抽出試験法を確立する。以下に、平成27年度における研究の実施内容と成果を報告する。平成27年度では、本技術の品質管理試験としての実用を視座とした各工程(加熱・冷却・保温・回収)の簡素化、試験方法・手順の効率化の検討と並行して、基礎検討(平成26年度の成果)に基づく試験装置の安全対策を考慮した。具体な実施内容としては、電熱装置や冷却管の改良による加熱・冷却能の向上と試験時間の短縮等を期待し、これらが測定結果に及ぼす影響を多種の混合物を対象に確認している。また、内部容器や保温ジャケットの適用性などについても実証実験を行っており、実用化に向けた新たな知見を得ている。以上の研究成果として、安全性や効率化に配慮した試験方法を概ね確立するとともに、水を抽出溶媒とした自動アスファルト抽出装置を試作し、平成28年度の実証実験および応用実験へと展開する。平成27年度における成果では、平成26年度の基礎検討に基づいて当初計画どおり前述の課題C、Dを解決し、試験方法の確立および試験装置の開発によって二次目的を達成している。また、現時点での成果物である試験装置は、これまでの知見に基づく各工程の最適化により、自動化に成功しており、本技術の実用化を大きく前進させている。ただし、課題Dにおける抽出後アスファルトの回収方法や抽出後骨材の乾燥方法に関しては、今後も試作装置を用いた改善検討を行う必要があり、次年度ではより多角的な実証実験と更なる改良を試みる。以上の成果を踏まえて、平成27年度までの達成度区分を「おおむね順調に進展している」と評価し、本研究期間(平成2628年度)の目標達成に向けて次年度研究を当初計画どおりに遂行する。平成28年度研究実施計画では、「具体目標:3抽出・回収したアスファルトの性状と品質を評価し、回収試験としての応用の可能性を確認する。」を達成するためのIII.応用検討として、以下の検討課題:Eを解決・究明する。E)

幾つかの温度・圧力条件によって抽出・回収した膜状のアスファルトを比較分析し、こららの組成と性状、品質から、高温高圧水技術の回収試験としての応用の可能性を確認する。平成28年度研究では、上記計画に基づき、I.基礎検討(平成26年度実績)において回収したアスファルトの分析から、亜臨界水が各種アスファルトの性状に及ぼす影響を評価し、回収試験としての応用の可能性を検証した。この結果、亜臨界水抽出後のアスファルトは、抽出前(加熱混合後)に比べて化学的・物理的性状とも試験条件に応じて変化すること、今回条件ではアスファルトの変質を避けることができず、回収試験としての応用は困難であることを確認した。しかし同時に、高温高圧水の温度、圧力、時間を制御することにより、アスファルトを所用の性状へと改質できる可能性が認められ、舗装発生材の再材料化技術やアスファルトの改質技術への応用の可能性を確認することができた。本研究では、発がん性や生殖毒性が懸念される溶剤に頼らず、水を溶媒としてアスファルトを迅速かつ厳密に抽出する「環境調和型アスファルト抽出試験」の開発を目的とし、研究期間全体(平成2628年度)を通じて以下の研究成果を得ることができた。1.多様な素材及び混合物に対する高温高圧水の抽出性能、ならびに適用性、実用性を検証した。2.日常的な品質管理試験として実用に適した装置を開発し、安全かつ効率的な試験法を確立した。3.抽出・回収したアスファルトの性状を評価し、再材料化技術等への応用の可能性を確認した。なお、アスファルト抽出技術、再材料化技術としての成果を研究論文として発表している。本研究は、人体や環境に有害な溶剤を用いることなく、「水」を溶媒としてアスファルト混合物からアスファルトを抽出する抽出技術の開発と展開を目的としている。以下に、本研究期間における成果を開発と展開の目的に区別して概説する。抽出試験の開発に向けた平成2627年度の研究により、350°Cの亜臨界水を用いて多様なアスファルトを迅速かつ厳密に抽出できることを究明し、安全かつ効率的な試験法および自動化装置を開発した。抽出技術の展開を目指した平成28年度の研究により、亜臨界水反応によってアスファルトが軽質化する傾向を確認し、劣化アスファルトの性状回復技術として展開の可能性を究明した。平成26年度の実績として、多様な素材および混合物に対する亜臨界水抽出試験の実用性を検証し、当初計画どおり課題A、Bの解決により一次目的を概ね達成することができた。しかし、課題Bに含まれる各種混合物の供試体質量に関しては、旧アスファルトによる影響の解明と対策に時間を要したため、平成26年度の成果は基本条件である500gの検証に留まっている。これにより、研究の実施内容に一部変更が生じ、研究費の未使用分が発生しているが、再生骨材に対する試行錯誤で得られた新たな知見は、今後の問題発見・解決の手がかりとして、試験装置の開発と試験方法の確立を推進するものと確信している。以上を踏まえて、現在までの達成度区分を「おおむね順調に進展している。」と評価し、次年度以降の研究実施・成果を一層加速する。平成28年度では、以下の三次目的に沿った課題Eに対する応用検討として、高温高圧水技術による抽出試験の確立および回収試験への応用に向けた研究を進める。
触ミラー情報フィードバック機構を有する静摩擦覚ディスプレイ

本研究では,触知覚情報を精確にヒトに与えることを目的として,ヒト指に呈示された触知覚情報をモニタし,これをディスプレイの駆動にフィードバックする機構を有する触知覚ディスプレイ,触ミラーの開発研究を行った.ヒトが母指と示指でつまみ把持を行うことを想定して,両指のための指紋付人工皮膚(以下FS(フィンガスキン))の設計を行った.触ミラーは,グローブ外側の静摩擦覚センサと把持物体の間の接触状態をディスプレイによってヒト指に呈示する.そのため,静摩擦覚センサとディスプレイのFSの構造を別々に設計した.設計の際,健全者男子3名の母指および示指について,指とアクリル平板を接触させたときの面積を測定し,ヒト指に呈示するために必要なFSの大きさを決定した.人工マイスナー小体の小型化による検出感度の低下が見られた.すなわち,FS内の人工マイスナー小体から生じる信号のS/N比が低いため,スケールダウンしたFSを従来実績のある検出回路と結合するだけでは困難が生じることが分かった.この問題を解決すべく多段の増幅回路を設計することにより,検出回路のS/N比の向上に成功した.また,ヒト指のマイスナー小体およびパチニ小体の周波数特性と同等の性能を有する人工マイスナー小体および人工パチニ小体の開発を行い,その特性を確認・比較した.そして,X-Y-θステージを主として構成した実験装置に人工マイスナーおよびパチニ小体を組み込んだFSを搭載して,ヒト指とFSの接触面に生じる初期局所滑りを検出できる手法,および初期局所滑りが全体滑りに遷移する前にステージを動作させ,それを防ぐ手法を確立した.この手法は,力覚センサを用いたPD制御よりも,約90ms早くFS上のヒト指の動き始めを検出できるという意味で有用であり,この時間はヒトが認識できる時間であることが心理物理実験により確認された.同様に,これまで提案されてきた触知覚に関するフィードバックを有さない触知覚ディスプレイと比較して,触知覚情報に関するフィードバックを用いることの有用性を示すことができた.最終的に,静摩擦覚ディスプレイをSkilMate等へ実装することを想定して,3軸方向に駆動できる小型のディスプレイを開発した.本研究では,触知覚情報を精確にヒトに与えることを目的として,ヒト指に呈示された触知覚情報をモニタし,これをディスプレイの駆動にフィードバックする機構を有する触知覚ディスプレイ,触ミラーの開発研究を行った.ヒトが母指と示指でつまみ把持を行うことを想定して,両指のための指紋付人工皮膚(以下FS(フィンガスキン))の設計を行った.触ミラーは,グローブ外側の静摩擦覚センサと把持物体の間の接触状態をディスプレイによってヒト指に呈示する.そのため,静摩擦覚センサとディスプレイのFSの構造を別々に設計した.設計の際,健全者男子3名の母指および示指について,指とアクリル平板を接触させたときの面積を測定し,ヒト指に呈示するために必要なFSの大きさを決定した.人工マイスナー小体の小型化による検出感度の低下が見られた.すなわち,FS内の人工マイスナー小体から生じる信号のS/N比が低いため,スケールダウンしたFSを従来実績のある検出回路と結合するだけでは困難が生じることが分かった.この問題を解決すべく多段の増幅回路を設計することにより,検出回路のS/N比の向上に成功した.また,ヒト指のマイスナー小体およびパチニ小体の周波数特性と同等の性能を有する人工マイスナー小体および人工パチニ小体の開発を行い,その特性を確認・比較した.そして,X-Y-θステージを主として構成した実験装置に人工マイスナーおよびパチニ小体を組み込んだFSを搭載して,ヒト指とFSの接触面に生じる初期局所滑りを検出できる手法,および初期局所滑りが全体滑りに遷移する前にステージを動作させ,それを防ぐ手法を確立した.この手法は,力覚センサを用いたPD制御よりも,約90ms早くFS上のヒト指の動き始めを検出できるという意味で有用であり,この時間はヒトが認識できる時間であることが心理物理実験により確認された.同様に,これまで提案されてきた触知覚に関するフィードバックを有さない触知覚ディスプレイと比較して,触知覚情報に関するフィードバックを用いることの有用性を示すことができた.最終的に,静摩擦覚ディスプレイをSkilMate等へ実装することを想定して,3軸方向に駆動できる小型のディスプレイを開発した.ヒトが母指と示指でつまみ把持を行うことを想定して,両指のための指紋付人工皮膚(以下FS(フィンガスキン))の設計を行った.触ミラーは,グローブ外側の静摩擦覚センサと把持物体との間の接触状態をディスプレイによってヒト指に呈示する.そのため,静摩擦覚センサとディスプレイのFSの構造を別々に設計する必要があり,以下の4種類のFSを作成することとした.すなわち母指FSセンサ,母指FSディスプレイ,示指FSセンサ,示指FSディスプレイである.設計の際,健全者男子3名の母指および示指について,指とアクリル平板を接触させたときの面積を測定し,ヒト指に呈示するために必要なFSの大きさを決定した.

その結果は,母指FSセンサの場合で厚さ1.5mm,幅18mm,長さ10mmとなった.当初,厚さ0.9mmで計画を行ったが,感度を高める必要性からFS内に収めるPVDFフィルムトランスデューサに関し,構造上支障がないと判断される0.6mmほどのスケールアップが行われた.X-Y-θステージをベースとして構成した静摩擦覚ディスプレイにFSを装着し,制御プログラムをディスプレイの駆動ために実装した.ディスプレイの動作としては,FS表面に初期局所滑りが生じるまではX軸方向にステージを動作させ,初期局所滑りが生じた際には,ステージを止める.これらの動作を実際に確認した.人工マイスナー小体の小型化による検出感度の低下が見られた.すなわち,FS内の人工マイスナー小体から生じる信号のS/N比が低いため,スケールダウンしたFSを従来実績のある検出回路と結合するだけでは困難が生じることが分かり,この点に関する改善が次年度の課題として残った.研究初年度においては,指紋付人工皮膚(以下FS(フィンガスキン))内に組み込む人工マイスナー小体の小型化によって,検出感度が低下することが課題としてあげられた.本年度は,この問題を解決すべく多段の増幅回路を設計することにより,検出回路のS/N比の向上に成功した.また,ヒト指のマイスナー小体およびパチニ小体の周波数特性と同等の性能を有する人工マイスナー小体および人工パチニ小体の開発を行い,その特性を確認・比較した.そして,X-Y-θステージを主として構成した実験装置に人工マイスナーおよびパチニ小体を組み込んだFSを搭載して,ヒト指とFSの接触面に生じる初期局所滑りを検出できる手法,および初期局所滑りが全体滑りに遷移する前にステージを動作させ,それを防ぐ手法を確立した.この手法は,力覚センサを用いたPD制御よりも,約90[ms]早く初期局所滑りを検出できるという意味で有用であり,この時間はヒトが認識できる時間であることが心理物理実験によって確認された.同様に,これまで提案されてきた触知覚に関するフィードバックを有さない触知覚ディスプレイと比較して,触知覚情報に関するフィードバックを用いることの有用性を示すことができた.さらに,FS内に対称に配置された人工マイスナー小体から得られる信号の増幅率を異なる値にすることにより,ヒトのマイスナー小体では検出できない滑り方向を特定することができた.静摩擦覚ディスプレイをSkilMateへ実装することを想定して,3軸方向に駆動できる小型のディスプレイを開発した.動力源として小型のモータを用いており,モータに連動されたステージが動作することにより,ヒト指に接触情報が呈示される.
FRETを用いる低分子脂溶性活性物質レセプターの動態イメージング

グルココルチコイドレセプター(GR)はデキサメサゾン、コルチコステロン、アルドステロンに対しては細胞質・核移行を生じたが、エストロゲンには反応しなかった。ミネラルコルチコイドレセプター(MR)はデキサメサゾン、コルチコステロン、アルドステロンの他に、プロゲステロンに対しても細胞質・核移行を行った。これはプロゲステロンが化学構造的にアルドステロンと近似しているからと考えられた。細胞質・核移行にどのような分子シャペロンが関るのか検索した。geldanamycinは熱ショックタンパクHSP90と結合することによって、シャペロン機能を阻害する薬物である。Cos細胞において、GRとMRはいずれもgeldanamycin投与によってリガンド投与による細胞質・核移行が阻止されたことから、HSP90がその輸送に強く関っていることが明かとなった。共焦点レーザー顕微鏡によってGRとMRは核内での分布がほぼ同じ領域に認められたため、FRET解析を行った。リガンド添加による時間経過とともにFRETの頻度が増したことから、核内でのリガンド添加によるヘテロダイメライゼーションの形成が強く示唆された。性ホルモン受容体であるエストロゲンレセプターERも同様の方法で細胞内動態を解析した。また、ER(α、β)やPRなどはリガンドがない状態でもすでに核に分布しており、リガンドが作用すると核内のリセプター分布様相が変化し、ほぼ均一に分布していたレセプターが細かい粒状の斑点状になった。ER(α、β)の斑点はRNApolymeraseIIの部位とは一致せず、クロマチンのリモデリングに関る分子であるBrgと一致していた。また、ERαとβはリガンド添加(エストラジオール)によって核内でほぼ同じ部位に存在し、両者によるFRET形成が観察されたことから、これらもヘテロダイメライゼーション化していることが示唆された。平成12年度においては、GFPの改変型であるCFP(cyan fluroscent protein、励起波長433/453nm、蛍光波長475/501nm)とYFP(yellow fluroscent protein、励起波長513nm、蛍光波長527nm)を用いて、各種核内レセプターについて検索した。glucocorticoid receptor(GR)やmineralocorticoid receptor(MR)、androgen receptor(AR)はリガンドと作用しない場合は通常細胞質内に存在していたのに対して、estrogen receptor(ER)a/b、progesterone receptor(PR)は核に分布していた。また、共役因子であるSRC-1やp300などはその機能からも核に分布していることが容易に予想されるが、これらのことを培養細胞による遺伝子発現系で確かめた。FRETはそのバックグラウンドをいかに処理するかに正否がかかっており、リガンドが作用しなくても核に存在する(ER)a/bと共役因子をCFPとYFPで標識し、リガンド添加によって核内でのFRET値を算出した。FRET値は供与体と授与体の蛍光強度から授与体の蛍光強度を差し引き、その値を授与体の値で割ったものとなるとした。FRET値が上昇するものは核内で一定の領域に留まるものと、さまざまな領域に変移するものに分けられた。これらは核内でのそれぞれの働きを動的にしめしていると考えられた。
主鎖のみに不斉構造を持つキラルらせんフェニルアセチレン高分子の第3の合成法と機能

1.水素結合可能基とバルキーキラル置換基を持つモノマーと水素結合可能基を持つアキラルモノマーの共重合とその後の膜状態でのキラル置換基の定量的な除去による主鎖のみに不斉構造を持つ安定キラルらせんフェニルアセチレン高分子の第3の合成法の確立平成19年度(1年目)に見出した主鎖のみに不斉構造を持つ安定キラルらせんフェニルアセチレン高分子の第3の合成法を確立した。2. 1で得られた方法(第三の方法)の不斉誘起効率の評価1で確立した方法の不斉誘起効率の評価をらせん選択重合により同一の組成の片巻きらせん高分子を合成し、比較することで行い、この方法の優位性を見出した。3.水素結合可能基とバルキーキラル置換基を長くて剛直なスペーサーを介して持つモノマーの単独重合とその後の膜状態でのキラル置換基の定鼻的な除去による主鎖のみに不斉構造を持つ安定キラルらせんフェニルアセチレン高分子の第3の合成法の確立主鎖のみに不斉構造を持つ安定キラルらせんフェニルアセチレン高分子の第3の合成法の可能性を見出した。1で確立した方法を単独十号に展開し、第三の方法の汎用性を示すことが出来た。1.水素結合可能基とバルキーキラル置換基を持つモノマーと水素結合可能基を持つアキラルモノマーの共重合水素結合可能基とバルキーキラル置換基を持つ新規フェニルアセチレンモノマーを数種合成した。この単独重合体は不溶となり、らせん選択重合は確認できなかった。しかし、この新規モノマーと水素結合可能基を持つアキラルモノマーとの共重合を種々の仕込み割合で行い、らせん選択共重合が確認された。2.1で得られたキラル置換基を持つキラルらせんフェニルアセチレン共重合体膜(キラル置換基を持つフェニルアセチレン仕込み量の多い場合)よりのキラル置換基除去得られたキラル置換基を持つキラルらせんフェニルアセチレン共重合体を製膜し、自立膜を得ることができた。膜状態での脱置換基にも成功した。脱置換基後の膜にCD信号を確認し、目的とする主鎖のみに片巻きらせんを持つアセチレン高分子の合成に成功した。これにより主鎖のみに不斉構造を持つ安定キラルらせんフェニルアセチレン高分子の第2の合成法を確立した。ただし、このポリマーは溶媒には不溶であった。3.1で得られたキラル置換基を持つキラルらせんフェニルアセチレン共重合体膜(キラル置換基を持つフェニルアセチレン仕込み量の少ない場合)よりのキラル置換基除去得られた主鎖のみに不斉構造を持つ安定キラルらせんフェニルアセチレン高分子は可溶であった。しかも、溶液中でも安定な主鎖のみに不斉構造を持つキラルらせんフェニルアセチレン高分子を得ることが出来た。主鎖のみに不斉構造を持つ安定キラルらせんフェニルアセチレン高分子の第3の合成法の可能性を見出した。
モンゴル国牧民の季節遊動における社会的ネットワーク生成過程と家畜管理技法

46月には前年度の調査研究の成果をまとめて日本民族学会第36回研究大会(6/1-6/2、金沢大学文学部)で「集団化期モンゴルにおける家畜に対する管理と価値付け:モンゴル国ドンドゴビ県デレン郡の事例より」として発表し、それまで経済的側面のみから論じられてきた集団化期(1950-80年代)における家畜の価値を見直した。従来研究が分析対象とした「共有家畜」(牧畜協同組合の所有とされた)は管理上、類としての側面が強調され一元的に商品利用されたのに対し、本研究が注目した「私有家畜」(牧民の手元に少数残された)の分析からは、これが人間との相互交渉的な関係を通して贈与や過去の記憶を喚起する記号の役割といった重層的な価値をも担っていたことが明らかとなった。79月の成果は、モンゴル国のa)ドルノト県バヤンドン郡、b)ドンドゴビ県デレン郡、c)トゥブ県バヤン・ツァガーン郡でのフィールドワーク(9/18-10/5)の準備と実施である。a)では、○集団化期に国家主導の家畜管理システムが地方の牧民にどのように受容されていたか、○人間と家畜の関係は民営化(1992-)によっていかに変化したか、○学校教育は牧民の居住様式や社会関係にどのような影響を与えるか、を調査検討した。収集したデータは、【郡役場から】人口、家畜数統計、地図等、【牧民からの聞き込み】民主化以前と以降の、家畜管理技術、家畜個体に対する認識、家畜を媒介とした牧民どうしの社会関係、等である。b)では同上調査に加え、現郡長と社会主義期の郡長(から、国家の牧畜政策の変化に対応した地方レベルでの家畜管理制度の運用の変遷と、牧民の季節移動を支える土地(牧地)利用権の制度的側面に関する聞き込みを行った。b)に隣接するc)では前述の土地利用権制度に関連する補足調査を行い、両郡間には社会主義期より郡、県を越境する季節移動および通婚が頻繁にあり、これは現在では両郡間で結ばれる牧地利用協定に支えられているという知見を得た。10月以降の下半期には、上記フィールドワークで収集したデータを整理、分析し、論文としてまとめている。
NGF誘起神経突起伸長におけるコリン燐脂質代謝亢進の分子メカニズム

ホスホリパーゼD(PLD)は細胞増殖、分泌応答など種々の生理応答に密接に関与している可能性が指摘されており、コリン作動性ニューロンモデルPC12細胞のカテコラミン分泌に伴い活性化がみられることから、PC12細胞におけるPLDの活性調節メカニズムについての検討を行った。PLDの活性調節因子として、プロテインキナーゼC(PKC)、チロシンキナーゼ(PTK)、カルシウム、GTP結合蛋白質など諸因子の関与が指摘されている。本細胞をカルバコール刺激した際にみられるPLD活性化に対して、PKC阻害剤、PKCダウンレギュレーションはほとんど抑制作用を示さず、PKCの作用は少ないことが示された。一方、細胞外カルシウムを除去すると著しいPLD活性化の低下がみられ、逆に高カリウムの添加により脱分極性に細胞内カルシウム濃度を上昇させたり、カルシウムイオノホア添加によりPLD活性化がみられることから、カルシウムが重要な制御因子であることが明らかとなった。ゲニスタイン、チロホスチンなどのPKT阻害剤はPLD活性化を阻害することから、PLD活性化へのPTKの関与が示唆された。カルバコール刺激による蛋白質チロシンリン酸化は細胞外カルシウムに影響を受け、また細胞内カルシウム濃度を上昇させるような刺激では蛋白質チロシンリン酸化がみられることから、カルシウムにより制御されるPTKがPLD活性化を調節している可能性が高い。現在、カルシウムにより制御されるPTKの解析を進めている。また、透過性細胞ではGTPγSによりPLD活性化がみられることから、GTP結合蛋白質も重要な活性制御因子と考えられ、Arf、RhoAなどの効果を調べるために、in vitroの再構成系を現在検討している。
心磁界計測による不整脈発生源の推定

心磁図は、心起電力により生じる磁界の変化を捉えたもので、心電図と同様の情報を含んでいる。心電図法によると、肺、筋肉など身体各部位の透電率が異なるため、体表面上の心電図から心起電力を推定するいわゆる「逆方向問題」の検討が困難であるが、透磁率は身体各部位で差がなく、心磁図法では比較的容易に行える特徴がある。今回の検討では、従来のI素子の磁束計を用いてWPW症候群の磁界分布図を作成し、最小自乗法を用いて電流源を推定するシステムを作成した。また、MRIを用いて磁界図で求めた福伝導路の位置の確認を行った。これらの結果は従来の方法によりもとめた結果と一致し、本法が有用なことが示された。これらの結果は日本循環器学会総会、世界生体磁気学会などで発表し、論文としてもまとめて報告した(研究発表参照)。さらに、現在、共同研究施設において手術時に心表面興奮伝播過程を検討することにより副伝導路の位置を確認し、これらの症例を重ねている。今後は、副伝導路の手術による切断でなく、カテ-テルによる切断を可能とする技術を臨床応用することを目指し検討を加えていく予定である。また、我々は既に多チャンネルの磁束計を導入し、磁界図自動作成、心起電力の逆方向問題を検討するシステムを完成させた。これらのシステムは多誘導点で同時に計測が可能なことより、WPW症候群のみならず、心室性不整脈の起源の推定にも有用である(本年度の生体磁気学会で発表予定)。心室頻拍、心室細動などの心室性不整脈は突然死の原因となることが多く、しかも、その発生頻度は年々増加しており、社会的にも大きな問題となっている。これら不整脈の治療法の1つとして外科的に不整脈源を除去する方法がある。この外科療法を行うためには、不整脈源の正確な把握が必要である。今回のシステムは、外部磁場を計測することによりこの不整脈の発生源を推定し、外科手術の際に役立たせるシステムを作成することである。
メタロミセルの化学環境の理解と高効率水中触媒反応への応用

界面活性を有するN-ヘテロサイクリックカルベン及び、これを配位子とするパラジウム触媒(メタロサーファクタント)を合成した。これらは水中において、難溶性の有機物を可溶化・分散化させ、コロイド状の化学反応場を与えた。その結果、水中での溝呂木-ヘック反応が効率的に進行し、界面活性剤化していない一般的なNHC配位子を用いて反応を行う場合よりも、高収率で目的生成物を与えた。界面活性剤と金属触媒が一体化したメタロサーファクタントは、水中で基質と触媒活性点が自発的に近接する特異な化学反応場「メタロミセル」を与える。本研究では、界面活性剤型N-ヘテロサイクリックカルベン(NHC)配位子を新たに設計し、これが水中でパラジウムと錯形成することにより得られるメタロサーファクタントを活用した水中触媒反応の開発を行った。まず、本年度はイミダゾールを原料に、親水基と疎水基を段階的に導入することにより親水/疎水バランスの異なる4種類のNHC配位子を合成した。また、合成したNHC配位子と酢酸パラジウムを水中で反応させることにより、メタロサーファクタントを複数の異性体の混合物として得た。続いて、NHC配位子とメタロサーファクタントの界面活性能を表面張力測定(ウィルヘルミー法)により評価した。その結果、NHC配位子及びメタロサーファクタントは、水の表面張力を低下させ、これらが水中で界面活性剤として機能することが分かった。また動的光散乱測定より、メタロサーファクタントは水中でメタロミセルを形成することを明らかにした。さらに、メタロサーファクタントを水中での溝呂木-Heck反応に適用した。すなわち、水中において、NHC配位子と、油状基質であるハロゲン化アリールとオレフィンを加え撹拌したところ、油状基質が水に分散安定化した乳化物が得られた。ここにトリエチルアミン、酢酸パラジウムを加え、70 oCで24時間反応させたところ、クロスカップリング体が定量的に得られた。同様の反応を、市販の界面活性剤と一般的な金属触媒を別々に混合した系で行うと、その転化率は中程度に留まったことから、金属触媒と界面活性剤の一体化により水系溝呂木-Heck反応の効率が大幅に向上することが明らかとなった。水を媒体として用いる触媒反応は、低環境負荷で安全性の点で優れた化学プロセスである。本研究課題では、金属触媒と界面活性剤が一体化したメタロサーファクタントを設計し、水中で金属触媒が集積したミセルやエマルションなど、コロイド状の反応場を構築することにより、高効率な水中触媒反応を開発することを目的とした。金属触媒の拡張・量産化が可能で、かつ水中で高い触媒活性を示す配位子としてN-ヘテロサイクリックカルベン(NHC)に注目し、このものの親水/疎水バランスやパラジウムとの反応を制御することにより界面活性剤との一体化を試みた。平成27年度は、前年度に合成した界面活性剤型NHC配位子とともに、アミン系単座配位子を用いて異性化や分解等を制御することにより、水中においても構造が安定化されたNHC-パラジウム触媒(メタロサーファクタント)を合成することに成功した。合成したメタロサーファクタントが水中で形成する反応場内部の化学環境を評価した。表面張力測定や動的光散乱測定の解析によって、界面活性剤型NHC配位子とパラジウムが錯形成することにより反応場の自発的な形成が促進されることを明らかにした。平成27年度は、核磁気共鳴スペクトル測定によって、その内部空間には種々の油溶性基質が可溶化されることを明らかにし、最大可溶化量や可溶化位置に関する知見と合わせて、水系触媒反応に最適な条件を見出した。メタロサーファクタントが形成する反応場を用いた水系触媒反応の開発を行った。最適な基質量と組成、温度で設定した反応場を用いた溝呂木-Heck反応や鈴木-宮浦カップリング反応などを検討した結果、高い触媒活性を示すことを見出した。ベンチマーク反応として溝呂木-Heck反応をより詳細に検討した結果、一連の水系触媒反応においては、反応場の界面に触媒となるパラジウムが配置されることが重要であることを明らかにした。平成26年度では、1)界面活性剤型NHC配位子及びメタロサーファクタントの合成、2)界面活性剤型NHC配位子及びメタロサーファクタントの界面物性評価、3)当初の目標であったメタロサーファクタントを活用した水中クロスカップリング反応を達成した。項目1)は本研究の重要な基盤項目であり、親水/疎水バランスの異なるNHC配位子の合成を重点的に検討した。その結果、安価な原料から短工程(2から4工程)で4種類の界面活性剤型NHC配位子を合成することに成功した。これによって、項目2)-3)の研究成果を順調に遂行することができた。

一方、メタロミセル内部の微視的極性と基質の空間配置は未だ明らかではなく、次年度では、これらの研究データを蓄積し、これを反応機構の考察や、触媒の回収・再利用技術の確立へと発展させる。化学本研究課題では、界面活性剤型NHC配位子を新たに設計・合成し、これが水中でパラジウムと錯形成することにより得られるメタロサーファクタントを活用した水中溝呂木-Heck反応を開発した。一方で、メタロミセル内部の微視的極性と基質の空間配置等の詳細な反応メカニズムについてはまだ明らかになっていない。これらの界面物性と触媒活性の相関関係を解明することが出来れば、当該分野のブレークスルーとなる発見にもつながるため意義深い。そこで今後は、高分解能TEMを用いたメタロミセルの形状観察やNMRによる緩和時間測定、速度論的解析を駆使することにより、メタロミセル内部がどのような化学環境にあるのか、基質はどのように配向しているのか、基質と金属の近接場効果などを体系的に評価する。また、触媒の回収・再利用技術の確立についても検討する。次年度の消耗品購入の予算として使うため。平成27年度の研究費は、主として有機溶媒や遷移金属塩、基質等の試薬類の購入に使用する予定である。また、研究成果の発表を行うための学会参加費および旅費についても予算を計上する。
fsnマウスを用いた赤血球分化機構の解明

赤血球が骨髄で作られる過程で細胞核を捨て去ることを脱核という。赤血球を工業的に生産する上で障害となっている脱核効率の低さを克服するためには、脱核の分子機構の理解が不可欠である。赤血球の分化と脱核に異常を有するflaky skin (fsn)マウスの原因遺伝子Ttc7の機能解析を通して、脱核の謎に迫る研究を行った。fsnマウスの骨髄において赤血球分化が異常であることを明らかにした。fsnマウスの胎児から長期間培養可能な赤血球の幹細胞を単離し、培養条件で脱核することを確認した。Ttc7に結合するタンパク質を同定した。fsnマウスの赤血球の分化にどのような異常があるか骨髄細胞をフローサイトメーター(Ter119抗体+CD71抗体+SYTO59三重染色)により調べた。その結果、通常網状赤血球の段階で認められるCD71の急速な発現低下が認められず、中等度の発現を示す細胞集団が増加していることが認められた。このパターンは正常マウスの胎児肝臓における造血細胞と類似しているので、fsnマウスでは成体型造血に欠陥があり、胎児型造血が再動員されている可能性が考えられた。この可能性を検討するために、造血細胞を体外で培養し、培養条件下に脱核を誘導する手法を試行中である。これが確立できれば、fsnマウスの骨髄細胞に正常なTtc7を遺伝子導入することが可能となり、Ttc7の脱核への関与を証明できると思われる。マウスTtc7に対するモノクローナル抗体を作成し、ウェスタンブロッティングと免疫染色に使えることを示した。Ttc7の機能を明らかにするため、Ttc7に結合するタンパク質を同定する実験を行った。HeLa細胞にTtc7タンパクを強制発現させ、抗体を用いてTtc7と相互作用するタンパク質を精製し、ポリアクリルアミドゲル電気泳動法により分離したバンドを質量分析器で解析した結果、Ttc7に結合する新規のタンパクを同定できた。これらのタンパク質が赤血球の脱核に関与するかどうかを、上記の骨髄細胞培養系で調べる予定である。造血細胞にTtc7を遺伝子導入する際、造血細胞をしばらく体外で培養する必要があった。この培養系の確立に予想外の時間がかかったため、遺伝子導入による機能評価ができていない。マウス胎生12.5日の胎児肝臓より長期間培養可能な赤血球幹細胞extensively self-renewingerythroblasts (ESRE)を樹立した。1年以上継代培養可能で、表面抗原の解析からCFU-Eに近い前赤芽球であることがわかった。脱核誘導培地で培養すると3日間で20%の細胞が脱核することを確認した。ESREは凍結保存に耐え、1年間継代培養しても最終分化を経て脱核する能力を維持していた。ESREは遺伝子導入とクローニングが可能であり、赤芽球最終分化を研究する上で有用な細胞であると言える。ESREは生存にSCFとEpoを必要とするが、我々はこれらの遺伝子を導入することで、培地中へのサイトカイン添加が不要となることを示した。Ttc7を欠損するfsnマウスの胎生12.5日の胎児肝臓よりESREを樹立した。fsn/fsnESREは野生型同様の増殖速度で分裂した。昨年度作成した抗Ttc7モノクローナル抗体でウェスタンブロットを行った結果、fsn/fsnESREにはTtc7タンパク質は存在しないか、あっても正常に比べて極めて少量しか存在しないことが確認できた。脱核誘導条件で培養すると野生型同様の効率で脱核したことから、脱核はTtc7タンパク質がなくても起こることが判明した。Ttc7とパラログをなすTtc7Bに対するポリクローナル抗体を作成し、ESREにおける発現を検討したところ、fsn/fsnESREでは野生型と同レベルのTtc7Bタンパクが存在することがわかった。fsn/fsn ESREが脱核できるのはTtc7BによってTtc7欠損が補償されている可能性がある。今後、ESREでTtc7とTtc7Bの両方を発現抑制した上で脱核を誘導してみる予定である。造血細胞を培養する技術を用いて、脱核におけるTtc7の関与、相互作用するタンパク質とTtc7の機能的な関連を明らかにし、脱核の分子機構の解明につなげて行きたい。また、脱核を効率よく誘導するための、シグナル伝達経路も明らかにする。上皮や免疫細胞におけるTtc7の機能を解明する。生化学造血細胞を培養する実験系の確立が予想外に遅れたため、画像解析のための培養補助システムが必要となる時期が先送りされた。平成28年度には造血細胞の培養系が確立できる見込みであり、必要な機材の購入に充当する。
細胞内プラチナ濃度を制御するｈCTR1とATP7Bに着眼した難治性卵巣癌治療戦略

卵巣癌は、予後不良の婦人科悪性腫瘍の一つである。その予後改善の一つの方法は、抗がん剤であるプラチナ製剤に対する耐性卵巣癌の治療方針である。そこで本研究の目的は、細胞内プラチナ濃度を制御するhCtr-1(human Cupper transporter-1)に着眼した、卵巣がんにおけるシスプラチン(抗がん剤)耐性機序の解明とその改善である。hCtr-1の蛋白発現が、上皮性卵巣癌のプラチナ製剤の感受性や臨床的病理学的予後因子に相関する可能性が示唆された。今後、抵抗性株のhCTR-1発現を誘導し、抵抗性卵巣癌を感受性卵巣癌に変換することを培養細胞と動物モデルを使い試みる予定である。研究の最終目的は、細胞内プラチナ濃度に着目した新規プラチナ抵抗性卵巣癌治療法の開発である。その中で、本年度は、1培養細胞によるプラチナを細胞内に運び込む膜輸送蛋白hCTR1 (human Copper Transporter)の機能検討と2卵巣癌患者の摘出標本の免疫染色によるhCTR1蛋白発現と臨床データとの相関を検討した。1hCTR1の培養細胞による検討では、A2780(シスプラチン感受性細胞株)と2780CP(シスプラチン抵抗性株)を使用した。そして、最初に、両者の細胞株の特徴を再度検討した。倍加時間や形態を観察した。そして、それぞれのIC50(Inhibitory concentration)を検討した。その結果、両者の細胞株でIC50に18倍の大きな差を認めた。そこで、hCTR1の阻害薬を使用したところ、感受性株では有意差を持ってIC50の増悪を認め、抵抗性株では差を認めなかった。つまり、抵抗性株では、すでにhCTR1遺伝子の低下がある可能性が示唆された。(研究期間外であるが2013年12月に開催された)アジア腫瘍学会で口頭発表した。そして、確認実験を行い、現在、論文に執筆中である。2免疫染色法を使用したhCTR1蛋白発現と臨床データとの比較検討を行った。研究に対するインフォームドコンセントを得られた患者からの摘出検体のhCTR1蛋白発現は、予後・再発期間に有意差はなく、唯一、組織型により差を認めた。さらに、抗がん剤治療前後の発現にも差はなく、後天的に獲得する抵抗能に関与するものでなく、先天的に獲得しているものの可能性が示唆された。しかし、プラチナを細胞外に排出する膜輸送蛋白ATP7B (Cu-transporting ATPasa )には、変化を認めなかった。1と2も結果を論文に執筆予定である。研究目的は、細胞内プラチナ濃度に着目した新規プラチナ抵抗性卵巣癌治療の開発である。研究は、培養細胞と臨床データと動物実験の3つを進めている。培養細胞では、抗がん剤感受性細胞株と抗がん剤抵抗性株を使い、hCTR1の働きを確認している。現在までの結果では、hCTR1の働きは確認している。具体的には、シスプラチンのIC50を繰り返し確かめ、可能であれば、臨床データで検証された明細胞腺癌細胞株を分けてもらい、実験を進める予定である。現在、ATP7Bの働きについての検討する予定である。臨床の現場では、一昨年の日本産婦人科学会に発表した組織型におけるhCTR1の発現の違いを症例数を増やし検討している。さらに、再発腫瘍でのhCTR1の発現も検討していく予定である。研究の計画には入れていなかったが、癌性腹水から採取される腹水の細胞診で、hCTR1の発現が確認できないか試みている(組織を採取する事なく非侵襲性で、臨床応用の際のメリットと考える)。動物実験は、28年度予定しており、現在、当施設の動物実験施設に動物実験の申請中である。具体的には、ヌードマウスに、抗がん剤感受性細胞株と抗がん剤抵抗性株を移植し、シスプラチンの反応の違いを観察。さらに、感受性株とhCTR1ノックダウン感受性株を移植し、シスプラチンの反応の違い観察する。同様な実験をATP7Bでも行っていく予定である。今年度は、臨床データを発表していき、動物実験のデータが揃ったところで、論文発表を行う予定である。培養細胞実験に時間がかかり、動物実験がやや遅れている。そこで本研究の目的は、細胞内プラチナ濃度を制御するhCtr-1(human Cupper transporter-1)とATP7Bに着眼した、卵巣がんにおけるシスプラチン(抗がん剤)耐性機序の解明とその改善である。方法は、1臨床検体を利用した解析と2基礎実験からの解明である。前者1は、摘出した卵巣癌組織を免疫組織化学的技法を使いhCtr-1蛋白発現・ATP7B蛋白発現と臨床経過や病理学的予後因子とを比較検討した。後者2は、2つの培養細胞株であるA2780(シスプラチン感受性卵巣癌株)と2780CP(シスプラチン耐性卵巣癌株)を使い、耐性株を感受性株に変換することを試みた。結果は、1抗がん剤の感受性とhCtr-1蛋白発現に差を認めた。詳細な検討では、組織型により差を認めた。具体的には、抗がん剤耐性の明細胞癌は、抗がん剤感受性の漿液性がんと比較して、hCtr-1蛋白発現が低いことが証明された。

2培養細胞であるA2780と2780CPを使った検討では、hCtr-1遺伝子のノックダウンにより、感受性株を抵抗性株に変換できる可能性が示唆された。考察は、hCtr-1の発現が、プラチナ製剤の感受性に関与し、臨床的病理学的予後因子とも相関する可能性が示唆された。具体的には、有効な治療法のないプラチナ製剤抵抗性の明細胞癌に大きく関与する可能性が示唆された。今後、抵抗性株のhCTR-1発現を誘導し、抵抗性卵巣癌を感受性卵巣癌に変換することを培養細胞と動物モデルを使い試みる予定である。さらに、子宮内膜癌に応用することを考えている。卵巣癌は、予後不良の婦人科悪性腫瘍の一つである。その予後改善の一つの方法は、抗がん剤であるプラチナ製剤に対する耐性卵巣癌の治療方針である。そこで本研究の目的は、細胞内プラチナ濃度を制御するhCtr-1(human Cupper transporter-1)に着眼した、卵巣がんにおけるシスプラチン(抗がん剤)耐性機序の解明とその改善である。hCtr-1の蛋白発現が、上皮性卵巣癌のプラチナ製剤の感受性や臨床的病理学的予後因子に相関する可能性が示唆された。2培養実験では、ATP7Bの阻害実験が遅れている。現在、siRNAを使い行う準備を行っている。(物品は購入した。)今後は、培養細胞では、卵巣明細胞癌細胞株を入手予定であり、それを使い、臨床データの確認を行う。並行して、動物実験を遂行していく。課題は、hCTR1蛋白に特化して、ATP7Bの実験が遅れていることである。解決策として、まずは、hCTR1のみの実験を終了させることを優先することを考えている。H26年度に成果報告が可能であったが、H27年度は成果報告ができなかった。今年度は、研究のアドバイザーである、米国MD Anderson Cancer CenterのSiddik教授と今年度以上に頻繁にやりとりし、実験を円滑に進め、今年度は積極的に成果を報告していく予定である。婦人科腫瘍培養実験では、1RNAの発現を検討すること。2卵巣明細胞がん細胞株を入手しWesternblottingによる蛋白発現を検討し、臨床データとの相関を見る。臨床データでは、腹水中の癌細胞の細胞内プラチナ濃度を専門家のアドバイスをもらい進めていく。H27年度後半から動物実験を開始する。ここまでのデータを論文にし投稿する。残り一年で成果を出すため、研究を早急に進めるため。臨床検体の免疫染色に使用する抗体を購入した。
アメリカ思春期小説にみる男性性の研究

本研究では、Mark TwainのThe Adventure of Tom Sawyer,Adventure of Huckleberry Finnにすでに現れていた、思春期少年の性アイデンティティにまつわる不安が、世紀転換期の通過点に位置するL.Frank BaumのThe Wizard of Ozで、男性性の表象に継承されていることを検証した。その後、J.D.SalingerのThe Catcher in the RyeとRobert CormierのThe Chocolate Warの思春期文学に継承された同種の問題が、第二次世界大戦後のアメリカ社会の思春期少年の性アイデンティティ危機の問題として投影されていることを、John KnowlesのA Separate Peaceのテキスト分析で示した。少年の「無垢の喪失」という文学的テーマが、大戦後「大人」として覇権主義をとるアメリカの国際的立場ゆえに、政治的意味合いを濃厚に帯びたことを、テキストの社会文脈的読解で示した。さらに、黒人作家Walter Dear MyersのScorpionsでは、伝統的アメリカの物語のヒーロー像から「他者」として排除されてきた黒人少年を扱った。白人「アメリカのアダム」の「無垢の終焉」は、植民化され差別されてきた黒人にとって、白人中心の伝統的アメリカの物語の解体を意味し、それに伴い、黒人主人公の性アイデンティティ確立についての独自の物語(ナラティヴ)が黒人の「声」で語られる。アメリカン・ヒーローの男性性に生ずる不協和音や不安は、WASP男性によるアメリカの物語の変質と大きく関わっていることが明らかとなった。アメリカの物語の主筋に与える「他者」の影響が、プロットそのものを変質させるにつれ、伝統的アメリカン・ヒーローの男性性も変容を迫られる。換言すれば、アメリカ社会が人種的、性的他者の権利を承認し、アメリカの国民性に「他者性」を容認する従い、帝国アメリカの「男性性」が変容せざるを得なくなり、アメリカン・ヒーローの男性性も変化するのである。上記の研究の延長線上で、思春期の若者を描くJohn KnowlesのA Separate Peace(1957)を取りあげ、The Catcher in the Rve(1952)、A Rebel Withouta Cause(1955)など、思春期の若者を扱う文芸・映像文化の文脈で研究した。『人間文化研究』第7巻(広島大学総合科学部紀要)に研究結果を「A SeparatePeaceにおける男性性のゆらぎ--50年代アメリカの不安、皮肉、逆接の自画像」として発表した。本論文では、この思春期小説でテーマ「無垢」(innocence)と「平和」(peace)の相克が、単にアメリカ文化内での「無垢の終焉」を意味するばかりか、帝国アメリカの国内外の政治と深く関わっており、同時にアメリカの中心勢力WASP男性の男性性の課題でもある、という知見を得た。さらに、帝国アメリカの男性性の表象として、L.Frank BaumのThe Wizard of Oz(1900)の男性の登場人物に焦点を合わせ、世紀転換期のアメリカ社会、経済との関連から、不安を訴える「男性」を研究した。この研究成果は、『欧米文化研究』第5号(広島大学大学院社会科学研究科紀要)に「夢の国の陰で-『オズの魔法使い』の悩める男たち」として発表した。以上の三作品ではWASP男性の男性性を体言する登場人物をアメリカ社会・文化の文脈で分折した。これらの作品では共通して、WASP男性に脅威、不安を与える人種的、性的「他者」が見えかくれする。平成11年度の研究では、黒人作家Walter Dean Myersの作品を取り上げて、人種的他者、ベトナム戦争と男性性、スラム街での暴力と男性性の関係を探る。まず、「グリム童話の変容とアメリカ文化」では、グリム童話翻案とアメリカ人の男性性について考察した。

Walt Disneyは、経済不況下のアメリカで映画『白雪姫と七人の小人』(1938年)を制作・発表したが、グリム版「白雪姫」では周縁的存在だった小人に勤勉に勤勉な労働者の性格を与え、より多くの場面に登場させることで、不況で覇気をなくした男性や共和国アメリカの「男性性」に活気を与えるメッセージを込めた。また、白馬の王子を物語りの最初と最後に登場させ、王子の物語の枠組みを設けることで、男の物語へとパラダイム・シフトした。8090年代にかけて、自信喪失に陥ったアメリカ人男性は、再びグリム童話により気力の回復を図ろうとした。詩人で男性運動の指導者Robert Blyがグリム童話「鉄のハンス」に基づき、男性向けの啓蒙書『アイアン・ジョンの魂』(1990年)を発表した。この本は、フェミニズムや革新的思想に対する反撃の潮流のなかで、男性性に不安をもつ多くの男性の読者を得た。さらに、黒人の児童文学作家Walter Dean MyersのScorpionsを取り上げ、都市中心部のハーレムで育つ黒人少年とギャング団との関係が、男性性をめぐっていかに表現されているかを分析した。社会学者は、若年の黒人男性が「絶滅の危機に瀕した種」であり、スラム街の「貧困の文化」により破滅的な人生を歩まざるを得ない状況に陥れられてきたと主張する。アカデミズムやジャーナリズムにより喧伝された「危険で劣等な黒人男性」という類型的な黒人男性像がアメリカ社会で流布する現実のなかで、マイヤーズは、劣悪な環境のなかで苦闘しながら自らの男性性を模索する少年に「声」を与え同情的に描く。アメリカの物語に共通する少年の「無垢」の喪失のモチーフはこの作品にもみられるが、人種的他者のそれは、白人の主人公の場合とは違った意味をもつ。