hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
極小熱流束点をはさむ膜沸騰、遷移沸騰における固液の接触状況と伝熱機構の実験的研究

直径100mmの銅製過熱面を用い、大気圧下で水の沸騰実験を行い、膜沸騰から遷移沸騰にかけての伝熱機構、特に固液接触と熱伝達について研究した。この大きさの加熱面では、加熱面周辺の影響はない、実験では、非定常法により沸騰曲線を得ると共に、各沸騰領域において加熱面の温度変動をマイクロサーモカップルにより詳細に調べた。膜および核沸騰域では、温度はほぼ一定し変動は少ない。これに比べ、遷移沸騰域では大きく変動し、特に、平均的温度は連続したものではなく、あるところでジャンプすることがある。この事実は、最近発表されたウィッティらの仮説(遷移沸騰には機構の異なる2つのものが存在するとの説)と関連し興味ある結果である。遷移沸騰域において、温度変動から局所的な熱流束変動を計算したところ、熱流束は時々刻々大きく変動しており、上限は核沸騰の延長に、また下限は膜沸騰の延長にあることが判明した。一方、遷移沸騰においては、局所における加熱面の温度変動は実験ごとに様々となる。このことは、遷移沸騰においては面上の状態は一様ではなく、空間的な分布のあることを意味している。従来知られるカリニンの考えに基づいて、液体の接触面積割合を計算したところ、遷移沸騰の大部分で1%程度であり、極大熱流束点近傍でやっと約70%となる。この結果は、先に電気触針法により実測した値と非常に近い。ところで、上記の結果は液体が比較的ぬれ易い面の場合のものである。接触角が大きくなると、膜沸騰がなかなか消滅せず、過熱度にして約20Kに至った後、核沸騰へ遷移する、数多くの実験の結果から、こうした状態に至るのは接触角が90度以上の場合に限られるようである。この事実は、遷移沸騰は単に固液の接触というだけでなく、ぬれ方に強く支配されることを示しており、従来報告のない興味ある事板であり、この点さらに将来詳細な研究が必要である。
ナトリウム排泄作用を介するキニン系の降圧作用と新規降圧薬の開発

1)ラット尿中キニナーゼは、血中のそれと全く異なり、carboxypeptidase Y-likekininaseとneutral endopeptidaseであることが判明しているが、それぞれのキニン分解酵素のebelactoneBとthiorphanを、ラット高血圧モデルに長期間にわたり投与した。その結果、ebelactone B投与で高血圧の発症が完全に抑制された。その際には、心重量の減少、体内ナトリウムの貯留の解消、髄液・赤血球内ナトリウムレベルの低下が認められた。高血圧予防という新しい概念の抗高血圧薬のシ-ドコンパウンドになる可能性があることが判明した。2)上記のモデルに、リポゾーム化したcarboxypeptidase Y-like kininaseのアンチセンスオリゴヌクレオチドを、腎選択的にターゲッティングし、血圧と腎電解質の排泄を、経時的に測定した。処置後、アンチセンスオリゴを投与した例で、ランダマイズドコントロールオリゴ投与例に比べて血圧の低下が認められた。それに伴って、尿中ナトリウム排泄の増大が確認された。ジーンターゲッティングの高血圧治療への応用が考えられる。3)血中カリウムイオンを極くわずかでも増大させると、尿中カリクレイン分泌が増大することが判明しているので、カリウムイオンレベルをセンスするなんらかの機構が存在することが想定された。その機構の一つとして、ATP-sensitiveカリウムチャンネルが分泌に関与する可能性が判明した。グリベンクラミドのようなATP-sensitiveカリウムチャンネルブロッカーを使うと、カリクレイン分泌が高まる。尿細管細胞がゆっくりとした脱分極を起こして、細胞内カルシウムイオンを増大させ、分泌のためのサイトスケルトンの収縮のもたらすものと推定された。1)新規尿中キニナーゼ阻害薬のラット高血圧モデルで降圧作用7週令の雄性正常およびキニン系欠損ラットの一側腎臓を摘出し、deoxycorticoster one acetate (DOCA) (5mg/kg/week)を投与し、飲用水を1%NaCl水にかえ、低レニン性高血圧を作成した。高血圧発症早期にラット尿中キニナーゼ阻害薬のエベラクトンBを投与すると、キニン生成のないラット(BN-Katholiek)では降圧作用は見られないが、キニン生成のあるラット(BN-Kitasato)では、降圧作用が見られ、新しい作用機序の降圧薬となる可能性があることが判明した。2)動脈内食塩水持続投与による血圧の増大正常ラットで血圧の増大しない量のアンギオテンシンIIを、キニン系欠損ラットに皮下投与すると、ごく早期から血圧が増大するが、その際、欠損ラットでは体内に水とナトリウムが貯留する。いわゆるボリューム負荷とナトリウム負荷が同時に見られるが、どちらの因子が血圧増大に主に関与するか調べた。無麻酔無拘束の欠損ラットに、0.15MのNaCl水を6ml/kg/hourという高速で動脈内に持続投与しても全く血圧に変化がなかったのに対し、0.3MNaCl水を同速度で投与すると、血圧の増大が認められた。このことより、ボリューム負荷よりはナトリウム体内負荷のほうが血圧増大に重要な因子であることが判明した。ラット尿中カルボキシペプチダーゼY様キンナーゼ阻害薬をSD系SPFラットでおこしたPOLA-食塩高血圧に,処置開始時より連日投与(5mg/kg/12時間)すると,高血圧の発症を完全に予防することができた。対照として用いた中性エンドペプチダーゼの阻害薬のthiorphanのプロドラッグであるBP102を用いると,同様に降圧がみとめられたが,その程度はラット尿中カルボキシペプチダーゼY様キンナーゼ阻害薬エベラクトンBに比べ弱かった。これに対し,マンギオテンシン変換酵素阻害薬リジノプリル(5mg/kg/12時間)を投与しても降圧は全くみられなかった。

尿中ナトリウム排せつから飲水,エサから摂取したナトリウム量をさしひいた値を求めると,BP102,エベラクトンB投与例で有意に低値を示した。血清中,ズイ液中,赤血球中のナトリウム濃度をしらべると,BP102,エベラカトンB投与例で有意に位置を示すことが判明した。心理もエベラクトンB,BP102投与例で降効果を反影して明らかに低値を示した。1)ラット尿中キニナーゼは、血中のそれと全く異なり、carboxypeptidase Y-like kininaseとneutral endopeptidaseであることが判明しているが、それぞれのキニン分解酵素のebelactone Bとthiorphanを、ラット高血圧モデルに長期間にわたり投与した。その結果、ebelactone B投与で高血圧の発症が完全に抑制された。その際には、心重量の減少、体内ナトリウムの貯留の解消、髄液・赤血球内ナトリウムレベルの低下が認められた。高血圧予防という新しい概念の抗高血圧薬のシ-ドコンパウンドになる可能性がある。2)上記のモデルに、リポゾーム化したcarboxypeptidase Y-like kininaseにアンチセンスオリゴヌクレオチドを、腎選択的にターゲッティングし、血圧と腎電解質の排泄を、経時的に測定した。処置後、アンチセンスオリゴを投与した例で、ランダマイズドコントロールオリゴ投与例に比べて血圧の低下が認められた。それに伴って、尿中ナトリウム排泄の増大が確認された。ジーンターゲッティングの高血圧治療への応用が考えられる。3)血中カリウムイオンを極くわずかでも増大させると、尿中カリクレイン分泌が増大することが判明しているので、カリウムイオンレベルをセンスするなんらかの機構が存在することが想定された、その機構の一つとして、ATP-sensitiveカリウムチャンネルが分泌に関与する可能性が判明した。グリベンクラミドのようなATP-sensitiveカリウムチャンネルブロッカーを使うと、カリクレイン分泌が高まる。尿細管細胞がゆっくりとした脱分極を起こして、細胞内カルシウムイオンを増大させ、分泌のためのサイトスケルトンの収縮のもたらすものと推定された。
神経移植による認知機能回復におけるコリン作動性神経の再生とその役割の解明

認知症は脳神経細胞の損傷・欠損により認知機能に障害が生じる疾患である。現在用いられている治療方法は症状の改善を目的とした対症療法であり、損傷した神経が再生することがないため根治療法の開発が求められている。我々は神経細胞移植により認知症モデルマウスの認知機能が改善すること、神経細胞が再生することを見出している。しかし、その再生機構や再生した神経の機能についてまだ不明な点が多く残されている。そこで本研究では、神経細胞移植による神経再生機構の解明を試みる。
酸化ストレスのホスホリパーゼDを中心とする生存シグナル伝達経路の制御機構

ホスホリパーゼD(PLD)が、複雑な脂質シグナル伝達経路の相互連係、すなわち脂質シグナリングネットワークの中心的な役割を果たしていることが示唆されている。PLD1,2の過剰発現により、各種アポトーシス誘導が抑制され、PLDは生存シグナル系の活性化に関与することを示唆した。さらに、詳細なメカニズムを明らかにするために、神経系のモデル細胞であるPC12細胞を用いて、酸化ストレスによる生存シグナル系(PI3K/Akt)の活性化におけるPLDの関与について検討した。PC12細胞は、H_2O_2を作用させると初期応答としてPLDの活性化や各種シグナル酵素の強いリン酸化が認められ、H_2O_2によるPyk2のSrc依存性チロシンリン酸化が不活性型PLD2KRの導入およびPLD阻害剤である1-butanolにより抑制されたことから、Pyk2の活性化にPLD2の関与が示唆された。さらに、H_2O_2によるPI3K/Akt/p70S6Kの活性化も1-butanolやPLD2KRおよびドミナントネガチブPyk2DNの導入により抑制された。また、PLD2はSrcやPyk2に結合し、PLD2活性化が活性型SrcとPyk2の複合体形成を促進することによりPyk2の活性調節に関与することが示された。以上の結果から、PC12細胞では酸化ストレスによる生存シグナル系PI3K/Akt/p70S6Kの活性化にPLD2がPyk2/Srcの活性化を介して作用していることを明らかにした。また、PLD1は、mTOR/S6Kの活性化の促進に関与し、メラニン色素産生細胞の増殖に関与することを示した。一方、スフィンゴシンキナーゼ(SPHK)もアポトーシス抑制に関与し、抗がん剤による細胞死に抵抗性を示すヒト前立腺PC3細胞では、抗がん剤カンプトテシン処理によりSPHK1活性の増加が認められ、薬剤耐性とSPHK1の関連性が示唆された。酸化ストレスのホスホリパーゼD(PLD)を中心とする生存シグナル伝達経路の制御機構の解明を目的として、神経モデル細胞(PC12細胞)のH_2O_2(0.5mM)処理による脂質シグナリングの解析を行った。H_2O_2刺激によってPLA_2/A_1の活性化によるリン脂質脂肪酸の遊離が起こり、なかでもC20:4(アラキドン酸)がPLD2活性化因子として作用していることが示唆される。スフィンゴシンキナーゼ(SPHK)のH_2O_2刺激による活性上昇は軽度であり、PLCの活性化は認められなかった。一方、PLD2(PC12細胞の主要PLDアイソフォーム)の活性化の上流シグナルとしてERK1/2およびp38MAPキナーゼの関与を提唱しているが、p38MAPキナーゼのみがH_2O_2刺激により活性化されるAsk遺伝子導入PC12細胞を最近入手し、至適培養条件を設定した。PLD活性化を介する生存シグナルにおいてカルシウム依存症チロシンキナーゼPyk2が足場タンパク質として重要な役割を果たしていることが示された。すなわち、H_2O_2刺激によりPyk2(Y402,Y580,Y881)がチロシンリン酸化され、Srcとともに活性化されるが、EGF刺激ではSrc,Pyk2活性化はH_2O_2刺激に比して弱い。また、H_2O_2によるPyk2活性化はPLD阻害剤の1-ブタノールおよびPLD2ドミネガチブ

遺伝子導入により抑制されることが示された。さらに、免疫沈殿法によりPLD2がPyk2,Srcと共沈することから、これら3者が複合体を形成していることが明らかにされた。一方、生存シグナル系で重要なPI3K/Akt/S6キナーゼ系がPLD2活性抑制状態(阻害剤、ドミネガ遺伝子)では十分に作動しないことが示され、PLD2活性がこの生存シグナリングに密接に関与していることを明らかにした。H_2O_2刺激でEGFレセプターを介するERK1/2活性化は起こるが、PI3K/Akt系は活性化されない。過酸化水素(H_2O_2)刺激による酸化ストレスによってホスホリパーゼD(PLD)、PI3キナーゼ(PI3K)が活性化され、PLDが酸化ストレスの初期応答における複雑な脂質シグナル伝達経路の相互連係、すなわち脂質シグナリングネットワークの中心的な役割を果たしていることが示唆されているが、その詳細な調節機構については十分明らかでない。今年度は、神経系のモデル細胞であるPC12細胞を用いて酸化ストレスによる生存シグナル系(PI3K/Akt)の活性化におけるPLDの関与について検討した。PC12細胞はvanadate存在下でH_2O_2を作用させるとPLDの活性化や各種シグナル酵素の強いリン酸化が認められた。H_2O_2によるPyk2のSrc依存性チロシンリン酸化が不活性型PLD2KRの導入およびPLD阻害剤である1-butanolにより抑制されることから、Pyk2の活性化にPLD2の関与が示唆された。さらに、H_2O_2によるPI3K/Akt/p70S6Kの活性化も1-butanolやPLD2KRおよびドミナントネガチブPyk2DNの導入により抑制された。一方、ERKの活性はEGFレセプターのトランスアクチベーションを介して活性化されるが、PLDs阻害剤により影響されなかった。また、PLD2はSrcやPyk2に結合し、PLD2活性化が活性型SrcとPyk2の複合体形成を促進することによりPyk2の活性調節に関与することが示された。以上の結果から、PC12細胞では酸化ストレスによる生存シグナル系PI3K/Akt/p70S6Kの活性化にPLD2がPyk2/Srcの活性化を介して作用していることを明らかにした。スフィンゴシンキナーゼ(SPHK)もアポトーシス抑制に関与することが知られているが、PC12細胞の酸化ストレスに対しては顕著なSPHK活性変化は認められなかった。一方、抗がん剤による細胞死に抵抗性を示すヒト前立腺PC3細胞では、抗がん剤カンプトテシン処理によりSPHK1活性の増加が認められ、薬剤耐性とSPHK1の関連性が示唆された。
肝性脳症におけるCCKの脳内分布:新しい神経伝達物質としての意義

1.DMN急性肝不全犬とエック瘻犬は,症状,血液アンモニアの増加,血漿遊離アミノ酸レベル(Tyr,Pheの芳香族アミノ酸の増加)から,脳症のモデルとして適切であった.2.健常犬の大脳皮質には192-345pmol/g wet weightに及ぶ大量のCCK-8IRが認められ,前頭葉が最も高値であった.視床では前頭葉の約1/3,中脳では約1/9の低値であった.3.急性肝不全犬およびエック瘻犬において脳のCCK-8IRは減少した.すなわち,急性肝不全犬では側頭葉と頭頂葉で健常犬のそれぞれ65%と47%に,エック瘻犬では大脳皮質全体で健常犬の6239%に有意に減少した.また急性肝不全犬は視床で,エック瘻犬では視床と中脳で健常犬に比し有意の減少を示した.4.CCKの大脳皮質内分布を蛍光抗体間接法を用いて検討したが,エック瘻犬では健常犬に比しCCK陽性細胞は著しく減少していた.5.血液と髄液のCCK-8IRは急性肝不全犬,エック瘻犬とも健常犬と差がなかった.6.急性肝不全犬とエック瘻犬では,脳のTyrとPheは健常犬お約23倍に増加した.ことにエック瘻犬で著しく, Pheで著しかった. 7.エック瘻犬では大脳皮質CCK-8IRと血液および髄液のアンモニアとは有意の負の相関を示した.8.急性肝不全犬およびエック瘻犬ともに大脳皮質CCK-8IRと髄液および脳内の芳香族アミノ酸(Tyr, Phe)との相関は認められなかった.9.脳症での大脳皮質CCK-8IRの著明な減少は偽性神経伝達物質と関連のあるTyr, Pheとは無関係に生ずるものと考えられる.1.DMN急性肝不全犬とエック瘻犬は,症状,血液アンモニアの増加,血漿遊離アミノ酸レベル(Tyr,Pheの芳香族アミノ酸の増加)から,脳症のモデルとして適切であった.2.健常犬の大脳皮質には192-345pmol/g wet weightに及ぶ大量のCCK-8IRが認められ,前頭葉が最も高値であった.視床では前頭葉の約1/3,中脳では約1/9の低値であった.3.急性肝不全犬およびエック瘻犬において脳のCCK-8IRは減少した.すなわち,急性肝不全犬では側頭葉と頭頂葉で健常犬のそれぞれ65%と47%に,エック瘻犬では大脳皮質全体で健常犬の6239%に有意に減少した.また急性肝不全犬は視床で,エック瘻犬では視床と中脳で健常犬に比し有意の減少を示した.4.CCKの大脳皮質内分布を蛍光抗体間接法を用いて検討したが,エック瘻犬では健常犬に比しCCK陽性細胞は著しく減少していた.5.血液と髄液のCCK-8IRは急性肝不全犬,エック瘻犬とも健常犬と差がなかった.6.急性肝不全犬とエック瘻犬では,脳のTyrとPheは健常犬お約23倍に増加した.ことにエック瘻犬で著しく, Pheで著しかった. 7.エック瘻犬では大脳皮質CCK-8IRと血液および髄液のアンモニアとは有意の負の相関を示した.8.急性肝不全犬およびエック瘻犬ともに大脳皮質CCK-8IRと髄液および脳内の芳香族アミノ酸(Tyr, Phe)との相関は認められなかった.9.脳症での大脳皮質CCK-8IRの著明な減少は偽性神経伝達物質と関連のあるTyr, Pheとは無関係に生ずるものと考えられる.慢性肝性脳症モデルとしてのエック瘻犬について検討した。1.血液アンモニアはエック瘻犬117.8±34.0(mean±SD,μg/dl,各4頭)、正常犬26.7±5.5、髄液アンモニアはエック瘻犬89.3±7.8、正常犬34.7±6.0であり、それぞれエック瘻犬で有意の増加を示し、このモデルは肝性脳症モデルとして適していた。2.脳CCK-8IRの部位別差異:エック瘻犬(正常犬)のCCK-8IR(mean±SEM,Pmol/gwwt)は、前頭葉183.3±17.3(345.0±53.4)、側頭葉172.9±26.4(281.0±24.5)、頭頂葉100.4±26.4(244.7±38.1)、後頭葉74.3±13.4(192.0±37.7)、視床34.6±5.8(130.5±28.4)、中脳17.0±3.2(43.5±4.1)、延髄9.6±1.4(14.3±1.8)であった。すなわち脳CCK-8IRは健常犬では大脳皮質で高濃度であり、エック瘻犬では大脳皮質と中脳、延髄にて正常犬の1/21/3に有意に減少した。3.脳遊離アミノ酸:

Tyr,Pheの芳香族アミノ酸はエック瘻犬では正常犬の23倍に増加し、ことにPheの増加が著明であった。4.血液と髄液のCCK-8IRは、エック瘻犬と正常犬で差がなかった。5.脳CCK-8IRと脳遊離アミノ酸との相関:脳各部別ではTyr、PheとCCK-8IRとの相関は、負の傾向を示すも、明確でなかった。7.CCKの脳内分布の組織化学的検討:螢光抗体間接法を試みており、染色結果は非特異染色はみられるものの、従来の報告(Kubota,Y.et al:Neuroscience 9;587,1983)とほぼ同様の染色性を得ている。8.ヒト(剖検例)の脳については、材料を集めている段階であり、来年度測定の予定である。
小脳が担う認知・情動機能の解明

近年、小脳が認知や情動に寄与することが注目されている。その神経回路とメカニズムを解明するため、Cbln1欠損マウスを用いて検討を行った。Cbln1は小脳顆粒細胞に強く発現するが、in situ hybridizationや免疫組織化学的解析により、前脳にも微弱だが有意な発現を認めた。そこで、前脳及び小脳特異的Cbln1欠損マウスを作成して解析を進めたところ、前者では文脈及び手掛り依存的恐怖条件付けに障害があったが、後者では手掛り依存的恐怖条件付けのみが障害されていた。Cbln1は平行線維ープルキンエ細胞シナプスの形成と可塑性を担うことから、この回路が恐怖条件付けに関与することが明らかになった。我々は、小脳におけるシナプス形成とその可塑性に重要なCbln1ーデルタ2グルタミン酸受容体(GluD2)シグナリング経路と運動学習との関連を解明してきたが、最近、小脳が認知、情動にも関与することが注目され、さらに自閉症などの機能性精神疾患への小脳の寄与を示唆する報告が増加している。我々もヒトのGluD2遺伝子の異常が、運動失調に加えて、認知、言語、情動などの脳高次機能に関与することを明らかにした。そこで、Cbln1ーGluD2シグナリング系をモデルとして、小脳におけるシナプス分子の異常がどのような神経回路を介して、高次機能や精神症状の発現に繋がるのかを解明するために、H27年度はCbln1欠損マウスを用いて、恐怖条件付けの解析を行った。Cbln1の欠損マウスは、恐怖条件付けの獲得に障害が見られ、文脈依存的及び手掛り依存的恐怖条件付けに障害が見られた。Cbln1は小脳顆粒細胞に圧倒的に強く発現するタンパク質であるが、in situ hybridization及び免疫組織化学的解析から、小脳以外にも前脳に微弱ながら有意な発現が見られたため、前脳特異的及び小脳特異的Cbln1マウスを作成し、これらのマウスの恐怖条件付けを検討した。前脳特異的Cbln1欠損マウスでは、文脈、手掛り依存性恐怖条件付け双方に障害が見られたが、小脳特異的欠損マウスでは、手掛り依存的恐怖条件付けのみが障害されていた。これらの所見は、小脳がげっ歯類においても運動以外の学習に関与していること、そして、Cbln1は平行線維ープルキンエ細胞シナプスの形成およびその可塑性に関与していることから、この回路が手掛り条件付けに関与することを示している。認知・情動機能に関与する小脳領域を特定するために、Arc-dVenusトランスジェニックマウスや野生型マウスを用いて、神経活動依存性なVenusあるいは内因性Arc、c-Fos、c-Junの発現を探索した。恐怖条件付けや、腹腔内あるいは小脳へのカイニン酸投与によって、海馬では上記タンパク質の神経活依存的な発現上昇が見られたが、一方、予想に反して、小脳ではこれらの発現に有意な変動が見られなかった。即ち、前脳において用いられている神経活動性マーカーが小脳では利用できないことが判明した。近年、小脳が運動機能以外にも、認知、情動にも関与することが注目され、さらに自閉症などの精神疾患への小脳の寄与を示唆する報告が増加している。そこで、Cbln1ーGluD2シグナリング系をモデルとして、小脳におけるシナプス分子の異常がどのような神経回路を介して、高次機能や精神症状の発現に繋がるのかを解明するために、H27H28年度は、Cbln1の遺伝子改変動物を用いて小脳の恐怖条件付けへの関与についての研究を行った。Cbln1は小脳顆粒細胞に圧倒的に強く発現するタンパク質であることが分かっているが、in situ hybridization及び免疫組織化学的解析による詳細な解析から、小脳以外にも前脳に微弱ながら有意な発現が見られたため、前脳特異的及び小脳特異的Cbln1欠損マウスを用いて、これらのマウスの恐怖条件付け検討した。これらの所見は、げっ歯類においても小脳が運動以外の学習に関与していること、そして、Cbln1は平行線維ープルキンエ細胞シナプスの形成およびその可塑性に関与していることから、この回路が手掛り条件付けに関与することを示している。以上の成果はThe Journal of Neuroscienceに発表し、同誌のfeatured articleでも紹介された。また、認知機能に関与する小脳の領域を特定するために、小脳における活動依存性マーカーを探索しているが、前脳でよく用いられているArcは小脳では活用できないことが分かったので、現在、他の分子を探索中である。研究代表者の研究機関の異動のため、異動先での研究体制を整備、遺伝子改変動物の移送及び繁殖に時間を要している。また、小脳ニューロンの活動依存性マーカーは、前脳で知られている既存の遺伝子を利用できない可能性が大で、新たな活動依存性マーカーの同定に予定以上の時間を要している。近年、小脳が認知、情動にも関与することが注目され、さらに自閉症などの精神疾患への小脳の寄与を示唆する報告が増加している。

そこで、小脳におけるシナプス分子の異常がどのような神経回路を介して、高次機能や精神症状の発現に繋がるのかを解明するために、Cbln1の遺伝子改変動物を用いて小脳の恐怖条件付けへの関与についての研究を行った。Cbln1は小脳顆粒細胞に圧倒的に強く発現するタンパク質であるが、in situ hybridization及び免疫組織化学的な解析から、小脳以外にも前脳に微弱ながら有意な発現が見られた。そこで、前脳特異的及び小脳特異的Cbln1欠損マウスを作成して、これらのマウスの恐怖条件付け検討した。前脳特異的Cbln1欠損マウスでは、文脈、手掛り依存性恐怖条件付け双方に障害が見られたが、小脳特異的欠損マウスでは、手掛り依存的恐怖条件付けのみが障害されていた。これらの所見は、げっ歯類においても小脳が運動以外の学習に関与していること、そして、Cbln1は平行線維ープルキンエ細胞シナプスの形成およびその可塑性に関与していることから、この回路が恐怖条件付けに関与することを示している。以上の成果はThe Journal of Neuroscienceに発表し、同誌のfeatured articleでも紹介された。さらに認知機能に関与する小脳の領域を特定するために、小脳における活動依存性マーカーを探索した結果、前脳でよく用いられているArcは小脳では活用できないことが明らかになった。カイニン酸投与によるてんかんモデルラットでは、real time PCR及びin situ hybridizationにより、プルキンエ細胞及び顆粒細胞にc-fosの発現が上昇することを確認したので、今後、これを活動性マーカーに利用することで、小脳における高次機能の責任領域を明らかにしてゆく。近年、小脳が認知や情動に寄与することが注目されている。その神経回路とメカニズムを解明するため、Cbln1欠損マウスを用いて検討を行った。Cbln1は小脳顆粒細胞に強く発現するが、in situ hybridizationや免疫組織化学的解析により、前脳にも微弱だが有意な発現を認めた。そこで、前脳及び小脳特異的Cbln1欠損マウスを作成して解析を進めたところ、前者では文脈及び手掛り依存的恐怖条件付けに障害があったが、後者では手掛り依存的恐怖条件付けのみが障害されていた。Cbln1は平行線維ープルキンエ細胞シナプスの形成と可塑性を担うことから、この回路が恐怖条件付けに関与することが明らかになった。恐怖条件付け以外の認知・情動行動の異常をGluD2、Cbln1欠損マウスあるいはその部特異的欠損マウスで引き続き探索する。また、小脳での責任部位特定し、因果関係を追及するには、小脳における神経活動性マーカーを新たに見い出す必要がある。恐怖条件付け以外の認知・情動行動の異常をGluD2、Cbln1欠損マウスあるいはその部特異的欠損マウスで引き続き探索するが、特に社会性をターゲットとする。小脳での活動依存性マーカーには、現在のところ得られているいくつかの候補遺伝子を検証する。これらが活用できないと判明した場合は、マイクロアレイを用いた解析を行う。神経科学マウス飼育や試薬に要する費用が、予定より下回ったため。研究代表者の研究機関の異動のため、当初の予定よりも試薬、マウス飼育等への支出が減じた。小脳の活動の操作にオプトジェネティクスの技術を利用するため、その光源を備品として購入する。
新しい超高速光スウィッチ機構の探索

将来の超高速光コンピューターをはじめとする高速光情報処理システムの開発のために、高感度かつ超高速な応答を示す非線形光学材料ならびにその機能設計の研究が盛んに行われている。光スウィッチに求められる特性として、(1)高い光学非線形性、(2)速いon-off時間、(3)高繰り返し動作の3要素がある。我々は、タイプII型量子井戸を用いた光-光スウィッチの研究により、これらの問題の解決の手段を探ってきた。量子井戸を右まわり円偏光で励起するとσ_+遷移が起き、価電子帯m=-3/2の準位に正孔が生成され、伝導帯m=-1/2の準位に電子が生成される。このような電子・正孔対の生成過程は、タイプI型量子井戸と全く違いがなく、励起直後に得られるタイプII型量子井戸の光学非線形性(ブリーチ)の大きさは、タイプI型量子井戸のそれと同程度である。m=-1/2の準位に生成された電子は、層間Γ-X散乱によって障壁層X点へ約1psの時定数で散乱され、井戸層には正孔のみが残される。井戸層に残ったm=-3/2の準位の正孔はやがてm=3/2の準位へと散乱される。この緩和はエネルギー緩和を伴わずスピン緩和と呼ばれる。正孔のスピン緩和時間は、室温では約1psと極めて速くなる。我々は、この速いスピン緩和を光-光スウィッチに応用することを試みた。高速スピン緩和を利用して、タイプII型量子井戸を超高速光スウィッチ素子として動作させるため偏光を用いた高感度ポンプ・プローブ分光実験を行った。実験により得られた結果をまとめると、(1)非線形性の立ち上がり、および緩和時間は、約1psである。(2)高感度な動作を示し、3nJ/cm^2の制御光強度による非線形動作を確認した。(3)高繰り返し非線形動作を確認し、連続動作の可能性を示した。これらの結果は、タイプII量子井戸中のスピン緩和を利用した非線形動作により、高繰り返し超高速光-光スウィッチ動作が実現している事を示している。
新たな心筋保護因子としてのカルシウムセンサーＮＣＳ－１の役割とその分子機構の解明

心筋細胞のサバイバル/アポトーシス経路を理解することが心不全の予防に重要である。申請者らは、心臓に発現しているが機能不明であったCa2+センサーNCS-1の心筋におけるサバイバル作用について検討を行った。各種ストレスに対する抵抗性を野生型(WT)およびNCS-1欠損(KO)心筋で比較した結果、KO心筋は虚血ー再灌流障害や代謝・酸化ストレスに対し脆弱であることがわかった。詳しい解析から、NCS-1を欠損すると酸化ストレスを解毒するミトコンドリア機能が低下し、ATP合成量やAktサバイバル経路の活性化が減少することにより、ストレスに対する抵抗性が低下することが明らかとなった。心筋細胞のサバイバル/アポトーシス経路を理解することが心不全の予防に重要であるが、その全容は未だ明らかでない。申請者らは、心臓に発現しているが、その機能が不明であるCa2+センサーNCS-1の遺伝子欠損(KO)マウスの解析から、NCS-1がストレス下の心筋細胞のサバイバルを促進させる働きがある可能性を見出した。本研究では、1)NCS-1の心筋サバイバル因子としての機能を様々な観点から確認し、2)その作用の詳細な分子機構を明らかにすることを目的する。昨年度までに、NCS-1のKOマウス由来の心筋細胞が野生型(WT)に較べ様々なストレスに対し脆弱であることを見出し、このことからNCS-1がストレス下の心筋細胞のサバイバルに寄与することを確認した。またその分子機構として、NCS-1がイノシトールリン酸キナーゼPI4Kの活性化などを介し、心筋内の主なサバイバル経路であるPI3K/Akt経路を活性化するためであることがわかった。今年度はこれに加え、ストレスを受けた際、細胞内Ca2+レベルが制御できるかについて調べた。その結果、KOマウス心筋では様々なストレス(血清除去、酸化ストレスなど)により細胞内Ca2+濃度の制御破綻が生じやすいことがわかった。さらに、ストレスにより細胞内ATPレベルの低下がおこるが、KOマウス心筋ではより低下しやすいことがわかった。以上の結果から、NCS-1はPI4Kを介しサバイバル経路を活性化する一方で、ストレス下でも細胞内Ca2+レベルを正常に保つことによりCa2+過剰負荷による細胞死を軽減し、またCa2+レベル依存的なミトコンドリアにおけるATP合成やPI3K/Akt経路の活性化を保つことにより、サバイバル作用を示すのではないかと考えられた。申請者らは、心臓に発現しているが機能が不明であったCa2+センサーNCS-1の遺伝子欠損(KO)マウスの解析から、NCS-1がストレス下の心筋細胞のサバイバルを促進させる働きがある可能性を見出した。本研究では、1)NCS-1の心筋サバイバル因子としての機能を様々な観点から確認すること、2)NCS-1によるサバイバル作用の分子機構を明らかにすることを目的としている。NCS-1のKOマウス由来の培養心筋細胞を用いて、様々なストレスに対する抵抗性を、LDH放出、核の断片化などを指標に野生型(WT)と比較した。その結果、KOグループでは血清除去、グルコース除去、またH2O2などのような酸化ストレスなどに対し、脆弱であることがわかった。また、主なサバイバル経路のひとつであるAktの活性化がKO心筋で顕著に低下していることを見出した。そこでNCS-1の標的タンパク質として、PI3K/Akt経路の上流にあるPI4Kに焦点を絞った。PI4Kは神経などにおいてNCS-1と相互作用してシナプス伝達に寄与することが知られている。NCS-1は心臓においてもPI4Kと結合、共局在していた。またNCS-1の高発現により、PI4Kの活性化産物であるPI4Pやその下流のシグナル分子PI(4,5)P2などのイノシトールリン酸の生成量や生成速度が上昇した。またPI4Kを活性化できないNCS-1の変異体G2Aではサバイバル作用は認められなかった。さらにsiRNAによるPI4Kのノックダウンにより、WT心筋細胞においてもストレスに対し脆弱になることがわかった。以上の結果より、NCS-1のサバイバル作用のメカニズムとして、PI4Kの活性化が重要であることが明らかとなった。

昨年度までの研究で、KOマウス由来の培養心筋細胞は酸化ストレスや低グルコースに対し、野生型(WT)に較べて脆弱であること、また酸化ストレスなどに応答して活性化されるサバイバル因子Aktの活性化がKO群では起こりにくいことが明らかとなっている。本年度では、これらの解析をさらに進め、KOマウス心筋において細胞内ATPレベルが低下していることを見出した。そこで、細胞外フラックスアナライザーを用いて酸化ストレス前後におけるミトコンドリアの機能を解析したところ、基底状態においてミトコンドリア呼吸量がKO群で顕著に減少しており、またH2O2添加により更に低下することがわかった。詳細な解析により、基底状態ではミトコンドリア機能に異常が有るというよりはミトコンドリア量が低下しており、H2O2添加時では、それを中和する働きのあるプロトンリーク活性が上昇しないことにより、H2O2が除去できないのでないかと考えられた。さらにこのようなKOマウスのストレスに対する脆弱性は、心筋虚血ー再灌流モデルでも認められた。以上の結果から、NCS-1がミトコンドリアの機能維持を介してストレスへの抵抗性に寄与しているという新規の役割が明らかとなった。心臓の細胞生理本研究目的である、“NCS-1の心筋サバイバル因子としての機能を様々な観点から確認すること"に関しては単離心筋細胞を用いて様々な細胞死測定法により確認できた。また2番目の目的である、“NCS-1によるサバイバル作用の詳細な分子機構を明らかにすること"に関しても、現在までにPI4KがNCS-1の標的タンパク質の一つであること、その結合がCa2+濃度依存的であること、またNCS-1はストレス下でも細胞内Ca2+レベルを適正の範囲に保つことにより、細胞死を軽減する一方でサバイバル経路を活性するという、新たな分子機構も明らかとなった。本研究目的である、“NCS-1の心筋サバイバル因子としての機能を様々な観点から確認すること"に関しては、様々なストレスに対し、いくつかの細胞生死判別法によりKO心筋がストレスに対して脆弱であることを明らかにできた。また現在、細胞実験のみならず、丸ごと心臓を用いたストレス実験、例えば虚血ー再灌流障害などに対しても、KOマウスが脆弱であるか検討中である。次に2番目の目的である“NCS-1によるサバイバル作用の分子機構を明らかにする"ことに対しても、NCS-1の標的タンパク質としてPI4Kが心筋サバイバルに寄与していることを見出した。すなわち、NCS-1はPI4Kと結合し、NCS-1の高発現によりPI4Kが活性化し、またPI4KのノックダウンによりNCS-1のノックアウトと同様、ストレスに対し脆弱になることがわかった。このように、2つの目的のうち両方とも最も重要な課題が明らかになったと考えている。今後は、さらに詳細なメカニズム解明のための、詰めの実験を行う予定である。今後は細胞実験のみならず、丸ごと心臓を用いたストレス実験、例えば虚血ー再灌流実験などを試みう予定である。その中で、1)KOマウス心筋が虚血ー再灌流障害に対し脆弱であるか?2)虚血ー再灌流後のAktやその下流のシグナルの活性化はどうか?
組織間協働による新任訪問看護師の暴力・ハラスメント防止教育プログラムの開発

本研究は、訪問看護の現場において、より被害を受けやすい状況にあると推察される新任訪問看護師を対象とした暴力・ハラスメント防止教育プログラムを開発する。プログラム開発のプロセスにおいて、地域の各組織と協働し、1訪問看護ステーションを広域的に支援している組織団体との協働による啓発活動(広域的支援)、2訪問看護ステーションの暴力・ハラスメント対策の整備支援(事業所での支援)、3新任訪問看護師の対処力を高める教育プログラム案の実践(個人の取り組み支援)を重層的に行い、プログラム案の有用性と、体制整備が図れるか検証する。
新規含窒素ヘテロ環カルベン型配位子の創製及び触媒的不斉合成への応用

本研究課題の初年度であった昨年度は,imidazol-2-ylidene(以下,カルベン配位子と記す)を持つ0価ニッケル錯体の調製法の開発に成功し,ニッケル-カルベン錯体を用いたシラン存在下の1,3-ジエンとアルデヒドとの分子間カップリング反応の開発に成功した.本反応ではこれまで検討してきたニッケル-ホスフィン錯体を用いた反応とは全く異なる立体選択性を示し,Z-配置のオレフィンを有するホモアリルアルコールが立体選択的に生成することが分かった.本結果は,カルベン配位子がホスフィン配位子と全く異なる反応性を示すことを意味している.そこで引き続き本年度は,新しい配位子であるカルベン配位子の特性を明らかにすべく,ニッケルと同族の10属元素であるパラジウム-カルベン錯体に焦点を絞り検討を行った.その結果,パラジウム-カルベン錯体を用いた,1)π-アリルパラジウム中間体を経由する辻-Trost反応の開発,2)シリルスタナンを用いたエニンのビスメタル化反応の開発,に成功した.1)の辻-Trost反応ではimidazol-2-ylidene骨格の窒素上の置換基が重要であり,立体的に嵩高いアリール基を持つカルベン配位子を用いた場合に収率良く生成物を与えた.また2)の反応ではイミダゾールの部分還元体のイミダゾリニウム塩から調製したimidazolidin-2-ylideneを用いた場合に反応速度は最も加速され,収率良くビスメタル化された閉環体を与えることが明らかとなった.これらの反応においてカルベン配位子を用いた反応例は全く報告されておらず非常に興味が持たれる.現在,光学活性イミダゾリウム塩,及びイミダゾリニウム塩を種々合成し,1)及び2)の反応の触媒的不斉反応への展開を試みており,予備的実験結果ながら生成物が光学活性体として生成するという知見も得られており,今後更に継続して活発に検討を行っていきたい.まず今年度は,imidazolium-2-ylidene(以下,カルベン配位子と記す)を持つ0価ニッケル触媒の調製法の開発を目指し,検討を行った.その結果,カルベン配位子前駆体であるイミダゾリウム塩と安定な2価の塩化ニッケルをブチルリチウムで処理すると,容易に0価ニッケルーカルベン錯体が調製できることを見い出し,その生成を^<13>C-NMRでも確認することができた.一方,すでに我々はニッケルーホスフィン錯体を用いた,シラン存在下の1,3-ジエンとアルデヒドとの分子間カップリング反応の開発に成功しており,この反応によってE-配置のオレフィンを有するホモアリルアルコールが立体選択的に生成することを報告している.カルベン配位子を持つニッケル錯体の反応性を探索する目的で,この1,3-ジエンとアルデヒドとのカップリング反応に,0価ニッケルーカルベン錯体を用いてみた.その結果,これまでのニッケルーホスフィン錯体を用いた反応とは全く異なる反応性を示し,Z-配置のオレフィンを有するホモアリルアルコールが立体選択的に生成することを見い出した.本結果は,カルベン配位子がホスフィン配位子と全く異なる反応性を示すことを意味しており,極めて興味がもたれる.また,Z-配置のオレフィンの生成は,従来までのπ-アリルニッケル中間体経由の反応機構では全く説明できないため,反応機構の観点からも非常に興味がもたれる.来年度以降は反応機構の解明,並びに光学活性カルベン配位子の創製と触媒的不斉合成への適用に力を注いでいく予定である.本研究課題の初年度であった昨年度は,imidazol-2-ylidene(以下,カルベン配位子と記す)を持つ0価ニッケル錯体の調製法の開発に成功し,ニッケル-カルベン錯体を用いたシラン存在下の1,3-ジエンとアルデヒドとの分子間カップリング反応の開発に成功した.本反応ではこれまで検討してきたニッケル-ホスフィン錯体を用いた反応とは全く異なる立体選択性を示し,Z-配置のオレフィンを有するホモアリルアルコールが立体選択的に生成することが分かった.本結果は,カルベン配位子がホスフィン配位子と全く異なる反応性を示すことを意味している.そこで引き続き本年度は,新しい配位子であるカルベン配位子の特性を明らかにすべく,ニッケルと同族の10属元素であるパラジウム-カルベン錯体に焦点を絞り検討を行った.その結果,パラジウム-カルベン錯体を用いた,1)π-アリルパラジウム中間体を経由する辻-Trost反応の開発,2)シリルスタナンを用いたエニンのビスメタル化反応の開発,に成功した.1)の辻-Trost反応ではimidazol-2-ylidene骨格の窒素上の置換基が重要であり,立体的に嵩高いアリール基を持つカルベン配位子を用いた場合に収率良く生成物を与えた.また2)の反応ではイミダゾールの部分還元体のイミダゾリニウム塩から調製したimidazolidin-2-ylideneを用いた場合に反応速度は最も加速され,収率良くビスメタル化された閉環体を与えることが明らかとなった.これらの反応においてカルベン配位子を用いた反応例は全く報告されておらず非常に興味が持たれる.現在,光学活性イミダゾリウム塩,及びイミダゾリニウム塩を種々合成し,1)及び2)の反応の触媒的不斉反応への展開を試みており,予備的実験結果ながら生成物が光学活性体として生成するという知見も得られており,今後更に継続して活発に検討を行っていきたい.
転換期にある要支援高齢者の介護予防ケアに効果的な社会活動尺度の開発と有用性の検証

本研究は要支援男性高齢者の社会活動の実態を明らかにするため、まず、インタビュー調査を実施し、要支援男性高齢者の社会活動として4カテゴリ、社会活動の目的として5カテゴリを抽出した。この質的研究の結果をもとに、要支援男性高齢者の社会活動尺度を開発した。次に、申請者が既に開発した要支援女性高齢者の社会活動尺度と、今回開発した要支援男性高齢者の社会活動尺度を統合し、介護予防ケアに有用な要支援高齢者の社会活動尺度を開発した。本研究は要支援高齢男性の社会活動の実態を明確にし、その実態を反映させた要支援高齢男性の社会活動尺度を開発する。次に、申請者が既に開発した要支援高齢女性の社会活動尺度と、今回開発する要支援高齢男性の社会活動尺度を統合し、要支援高齢者の社会活動尺度を開発する。平成26年度は、要支援高齢男性の社会活動の現象を明らかにするため、質的研究方法を用いてデータ収集を行った。対象地域にはA県の都市部と地方の2箇所を選定し、要支援高齢男性16名を対象に60分程度の半構成的面接による個別インタビュー調査を行った。データ収集方法は、1普段の生活の様子、2生活における人との接触や交流、3生活における社会とのかかわりなどで構成した。対象者の語りから、要支援高齢男性の社会活動は「定年退職前の時期」、「定年退職後の時期」、「要支援認定を受けた時期」で違いがみられた。3つの時期における社会活動は、かかわる人や内容に異なりを示していたが、社会活動に対する目的や考えに大きな変化はみられなかった。要支援高齢男性は社会活動の目的を遂行するため、加齢や体調による変化に応じながら実施内容を変えて維持していた。今後は詳細のデータ分析を実施する。分析には質的記述的分析を用い、分析結果は公衆衛生看護学の学識経験者である研究代表者と研究分担者、保健福祉介護の実践者である研究協力者と検討し、要支援高齢男性の社会活動の特徴を抽出する。平成27年度は平成26年度に質的研究方法を用いて収集したデータを分析し、尺度項目案を作成した。A県内に在住する要支高齢男性約20名を対象に、半構造化面接によりデータ収集をし、質的記述的分析を用い分析した。結果、要支援高齢男性の社会活動の特徴を有する4カテゴリーと社会活動の目的を示す4カテゴリーを抽出した。社会活動4カテゴリーと先行研究をもとに4要素40項目からなる尺度試案を作成した。また、社会活動の関連を確認するため、社会活動の目的4カテゴリーから7変数を作成した。これらの項目で構成された尺度試案について、共同研究者である公衆衛生看護学の専門家チェックを受けた後、要支援高齢男性約10名に予備調査を実施した。予備調査の結果、表面妥当性は概ね確保されていたことから、今後は基準関連妥当性を検証するための外的基準を国内の先行研究をもとに定める。また、海外文献をもとに要支援高齢男性の社会活動について文献検討をし、日本の要支援高齢男性の社会活動の特徴を明確にしていく。そして、要支援高齢男性の社会活動尺度試案をもとに本調査を実施し、要支援高齢男性の社会活動尺度を完成させる。昨年度要支援高齢男性のインタビュー調査の日程調整に時間を要したことにより、データ分析の実施時期が遅れたため。平成28年度は平成26年度に実施した質的研究結果、要支援高齢男性の社会活動として、【生活に安らぎを与える、気心の知れた人たちとのかかわり】、【かかわる相手や活動内容が明確なサービスやプログラム等の参加・利用】、【全盛期の就労時代が反映される職場関係者とのかかわり】、【身近な暮らしの場で行う自分の気持ちや生活を豊かにする活動】(平野ら,2017)が抽出された。この研究結果をもとに要支援高齢男性の社会活動尺度項目案を作成し、精選した。共同研究者間で先行研究をもとに尺度項目案を検討した結果、3つの要素で構成する「要支援高齢男性の社会活動尺度案」を作成した。平成28年10月平成29年3月、A県の4つの自治体に在住する要支援男性高齢者200名を対象に調査を実施した。分析は探索的因子分析を実施し、因子数は概念枠組みおよびスクリープロット基準をもとに3因子に設定し、プロマックス回転を行った。項目の選定に際しては、因子負荷量が0.4以上であることを条件とした。結果、家族とのつきあい、会やサービスを通じたかかわり、近所や友人等とのつきあいといった3因子が抽出され、信頼性係数はα=0.7以上であった。今後、さらに解析を進め、既存尺度を用いた基準関連妥当性の検討、G-P分析、I-T相関の分析を行い、尺度を検証する。

また、基本属性をもとに要支援高齢男性の社会活動に関連する要因についても検討する。平成26年度実施した質的研究のデータ収集、分析に時間を要し、質的研究の結果をもとに作成する尺度案の完成が遅れた。そのため、尺度開発に関する量的調査実施が27年度末まで要した。本研究は要支援高齢男性の社会活動の実態を明確にし、その実態を反映させた要支援高齢男性の社会活動尺度を開発した。A県に在住する65歳以上の要支援男性高齢者134名を対象に、個別面接よる無記名質問紙調査を実施し、有効回答数は121であった。構成概念妥当性は探索的因子分析を用い検討され、基準関連妥当性は高齢者の社会活動指標をもとにスピアマンの順位相関係数を使用して検討された。信頼性はCronbach alpha信頼性係数を用いた。「知人との日常的なつきあい」「家族との親密なつきあい」「活動プログラムを通じた他者とのつきあい」3つの下位尺度からなる要支援高齢男性の社会活動尺度(SASOMS)が作成された。SASOMSと高齢者の社会活動指標の相関はr=0.557であり、基準関連妥当性が確認された。また、SASOMSのα係数は0.791であり内的整合性が確認された。SASOMSは信頼性と妥当性を有することが確認され、要支援男性高齢者特有の社会活動を測定できる指標であることが示された。また、サービス提供者がSMSOMSを用いて要支援男性高齢者を支援することの有効性が示唆された。今後は、SMSOMSの有用性を高めるため、縦断研究による尺度の妥当性を検証する必要がある。本研究は要支援男性高齢者の社会活動の実態を明らかにするため、まず、インタビュー調査を実施し、要支援男性高齢者の社会活動として4カテゴリ、社会活動の目的として5カテゴリを抽出した。この質的研究の結果をもとに、要支援男性高齢者の社会活動尺度を開発した。次に、申請者が既に開発した要支援女性高齢者の社会活動尺度と、今回開発した要支援男性高齢者の社会活動尺度を統合し、介護予防ケアに有用な要支援高齢者の社会活動尺度を開発した。要支援高齢男性のインタビュー調査の日程調整ならびにデータ収集に時間を要したため。現在、要支援高齢男性の社会活動の実態に関する質的研究の結果をもとに、「要支援高齢男性の社会活動尺度原案」が完成した。今後は、要支援高齢男性200名を対象に「要支援高齢男性の社会活動尺度」の調査を実施し、尺度の信頼性・妥当性を検証する。さらに、要支援高齢男性と要支援高齢女性を対象に「要支援高齢男性の社会活動尺度」の拡大調査を実施し、尺度の妥当性ならびに有用性を検証する。今回の量的調査の分析結果をもとに、対象者を要支援高齢男性と要支援高齢女性に拡大し、「要支援高齢男性の社会活動尺度」の検証に関する調査を実施し、尺度の妥当性ならびに有用性を検討する。公衆衛生看護学要支援高齢者の社会活動および、平成26年度実施した要支援高齢男性の社会活動の実態に関する質的研究の結果をもとに「要支援高齢男性の社会活動尺度原案」を作成し、研究組織で検討する。検討後、要支援高齢男性200名を対象に「要支援高齢男性の社会活動尺度」の予備調査を実施し、尺度の信頼性・妥当性を検証する。さらに、要支援高齢男性500名を対象に「要支援高齢男性の社会活動尺度」の本調査を実施し、尺度の有用性を検証する。
Epstein-Barrウイルス感染からみた悪性リンパ腫初期病変の解析

非腫瘍性リンパ節病変では、膿瘍形成性肉芽腫性リンパ節炎(AFGL)と伝染性単核球症(IM)において、他の単純性反応性リンパ節炎、菊池病、結核性リンパ節炎などに比し著しく高率にEBER-1陽性細胞がみられることを明らかにした。またAFGLにおいては、かなりの症例で少数ではあるがZEBRAあるいはBHLF-1陽性細胞が認められ、EBVの再活性化が起こっていることが示唆された。AFGLにおけるEBER陽性細胞のCD21、CD23、HLA-DRのようなB細胞活性化抗原の発現の程度は、IMの場合に比し明らかに低く、EBVの潜伏感染状態の維持に関与しているものと考えられた。このような非腫瘍性疾患におけるEBVの潜伏感染状態が、EBVの再活性化あるいは悪性リンパ腫発生にどのように関連しているかについては本研究においては未だ明らかにされておらず、今後の課題である。悪性リンパ腫においては、B細胞リンパ腫276例中49例、T細胞リンパ腫100例中31例、NKリンパ腫1例中1例、ホジキン病32例中17例にEBER-1陽性細胞を検出したが、殆ど全ての腫瘍細胞が陽性であるものは非ホジキンリンパ腫(NHL)10例に過ぎなかった。また、2重染色を行ったNHL26例中、EBER陽性細胞が腫瘍細胞とは異なることが判明したものが15例あった。これらのことは、NHLにおいては腫瘍細胞よりも非腫瘍性リンパ球の方により高頻度にEBVが感染していることを示しており、EBVの病因的役割については更なる研究が必要である。