hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ラマン分光を用いた溶融酸化物の動的解析

(1)ホットサーモカップル法の改良による、溶融薄膜を一定速度で引張する装置を試作し、溶融Na_2O-SiO_2系とK_2O-SiO_2系スラグ薄膜を種々の速度で破断するまで引っ張り、破断時における膜厚を測定した。その結果、ある所定の引張速度以上では破断膜厚は速度の2/3乗に比例して薄くなるが、それ以下では破断膜厚は速度に依存しないことを明らかにした。速度依存領域での破断厚みの引張速度依存性は薄膜内の流体力学的な流れの計算により説明することができた。低速引張速度における速度に依存しない領域での挙動は、溶融スラグ薄膜の構造に対応していると思われ、最終的にスラグ薄膜を引っ張りながらのin situラマン分光によりそのスラグ薄膜の構造解析を行う計画である。(2)溶融状態でのラマン分光を行うための第1段階として900°Cまで加熱可能な高温加熱装置を試作し、第1段階として500°Cまでの範囲で溶融硝酸塩を用いてラマン分光解析を行い、高温状態でラマン分光が安定して測定できることを確認した。今後、溶融スラグの動的特性を明らかにするため、1300°Cまでの温度で、溶融Na_2O-SiO_2系とK_2O-SiO_2系スラグ薄膜を引っ張りながら安定したラマン分光測定を可能にするため、ホットサーモカップルを改良した高温引っ張り装置の開発を行っている。(3)溶融Na_2O-SiO_2系スラグの動的な構造を解明する第1段階として、Na_2O-SiO_2系スラグを急冷したガラス試料を作成し、その試料の熱処理によるNa_2O-SiO_2系スラグの結晶化過程を連続的にラマン分光解析により追跡し、結晶化Na_2O-SiO_2系スラグと溶融Na_2O-SiO_2系スラグの構造の対応を明確にした。溶融酸化物膜の力学的、機械的特性とその溶融酸化物の構造との対応を明らかにするため、ホットサーモカップル先端に保持した溶融酸化物薄膜を一定速度で引張る装置を作成し、引張速度と薄膜の破断長さの関係を求めた。溶融酸化物膜の構造はラマン分光によりラマンスペクトルの変化を測定し、それに基づいて構造を検討した。特にその重要性にもかかわらず、明らかにされていなかった、酸素ポテンシャルの変化が酸化鉄を含む溶融酸化物の構造に及ぼす影響をラマン分光を用いて明らかにした。Na_2O-SiO_2系スラグK_2O-SiO_2系スラグおよびNa_2O-SiO_2-Fe_2O_3系スラグにおいて組成や温度を変えて引張試験を行ったが、いずれの系においてもある一定の引張速度以上では破断長さが引張り速度の2/3乗に比例して短くなったが、それ以下では破断長さは引張速度に依存せず一定であった。破断長さの2/3乗の引張速度依存性はスラグ薄膜への液流れの流体力学的計算により説明できた。破断長さが一定になる原因を明らかにするためスラグ薄膜のラマン分光を行ったが、現在まで厚さによる変化は明確でなく、今後さらに精度を高めて検討を行う。破断長さ一定の値に関してNa_2O-SiO_2-Fe_2O_3系スラグの破断長さはNa_2O-SiO_2系スラグより長くなった。Na_2O-SiO_2-Fe_2O_3系スラグにおいて酸素ポテンシャルを変化させながら、ラマンスペクトルを測定し、その変化から、3価の鉄イオンはネットワークフォーマ-として存在していることが明らかになった。このことからNa_2O-SiO_2系スラグにFe_2O_3を添加すると破断長さが長くなるのは溶融スラグ中のシリケートのネットワークが大きくなるためと考えられる。
電子パッケージ薄膜配線における特異電流/熱流束場の支配パラメータの解明と強度評価

本研究は,電子パッケージ内薄膜配線角部における特異電流/熱流束場の強さK_e,K_tをパラメータとして,熱応力に関連するマクロな視点ならびにエレクトロマイグレーション(以下EM)に関連するミクロな視点の双方から,配線の強度を評価する方法を確立することを目的とするものである。以下の項目の研究を実施した。1.理論解析によるK_e,K_tの表示の導出折れ曲がる薄膜配線の解析モデルである二次元均質等方性導電体に定常電流が流れる場合の定常電流問題ならびに定常熱伝導問題を扱った。角部近傍の電流,温度分布の漸近解を求め,K_e,K_tの表示を導出し,特異電流/熱流束場の支配パラメータを解明した。2.原子レベルのエネルギ的な考察に基づくK_e,K_tとEMの関係付け電子材料学の分野において提案されている,導体内を移動する電荷量,温度と金属原子流量の関係式を用い,角部を有し折れ曲がる配線を対象として数値計算によるEMのシミュレーションを行った。これにより,角部近傍に形成されるボイド体積は,入力電流密度または折れ曲がり角の増加にともない増加することを明らかにした。また、K_eならびに角部頂点の温度をその内部に含むパフメータを提案し,同パラメータと角部近傍のボイド体積の間に線形関係が存在することを明示した。3.実験解析によるK_e,K_tとEM発生の程度の関係付けシリコン基板上に蒸着されたアルミ薄膜配線を供試材とするEM加速試験を行った。角部近傍のボイドの電子顕微鏡写真を画像解析することによりボイド体積の定量化を行ったところ,シミュレーション結果と定性的な一致をみた。4.角部面内せん断型の特異応力場の強さとK_tとの理論的関係付けに関する検討特異熱応力場の強さとK_tの理論的関係については、配線下面からシリコン基板への熱流の考慮を含めて,現在検討を続行中である。
肝炎ウイルス感染症におけるインドールアミン酸素添加酵素の役割と新規治療法の開発

近年、トリプトファンの代謝酵素であるインドールアミン酸素添加酵素(IDO)が宿主免疫抑制に重要な役割を果たしていることが各種疾患モデルにおいて明らかにされつつある。本研究ではHBV感染におけるIDOの関与を明らかにした。HBV排除に必要なHBs抗原特異的CTLの誘導に対しては、IDOはその誘導効率を低下させていると考えられた。また、急性肝障害においては、IDOの発現は、肝障害をより増悪させ得るものと推測された。このように、HBV感染症においては、IDOは重要な役割を果たしていると考えられ、その発現・活性化を制御することは、HBV感染症における新規治療薬の開発に繋がるものと考えられた。1)IDOノックアウト(KO)マウスを用いたHBV特異的CTL誘導能の解析前年度の実験結果よりHBV抗原+α-ガラクトシルセラミドによる免疫はIDOの発現を欠損させることにより、よりHBs抗原特異的な免疫応答を誘導できることが明らかとなった。そのメカニズムとしては、リンパ節内では特にCD11b陽性細胞がIDOを発現し、抗原特異的なCTLの増殖能を抑制するため、そのIDO発現を取り除くことによりHBV特異的CTL誘導能を高めたと考えられた。また、IDOの拮抗阻害剤である1-メチルトリプトファンもHBs抗原特異的な免疫応答を増強できるできることが確認できた。前年度の結果より、HBs抗原特異的細胞傷害性T細胞移入による急性肝障害モデルにおいてIDOの欠損は、肝障害の程度を軽減させるものであると明らかにした。さらに、本モデルにおいてはトリプトファンの代謝産物であるキヌレニン、IFN-γおよびTNF-αが急性肝障害の進展に重要であり今後の治療ターゲットになり得ることが示唆された。1)IDOノックアウト(KO)マウスを用いたHBV特異的CTL誘導能の解析通常のWTマウスおよびIDOKOマウスを用い、HBV抗原単独およびHBV抗原とアジュバンドとしてα-ガラクトシルセラミドを同時に投与することにより免疫を行い、CTLの誘導能および誘導能修飾機構を検討した。IDOKOマウスにおいてHBV抗原+α-ガラクトシルセラミドの免疫により、HBs抗原特異的CD8陽性細胞の数が増加した。また、ELISPOTアッセイによる抗原特異的IFN-g産生細胞の検出においてもIDOKOマウスへHBV抗原+α-ガラクトシルセラミドを免疫することによりIFN-g産生細胞の増加がみられた。すなわち、HBV抗原+α-ガラクトシルセラミドによる免疫はIDOの発現を欠損させることにより、よりHBs抗原特異的な免疫応答を誘導できると示唆された。WTおよびIDOKOのHBVTgマウスにHBV抗原特異的CTLを移入し、肝障害を誘導し、IDOの急性肝障害時における働きを検討した。HBVTg/IDOKOマウスにCTLを移入し血清ALT値を測定したところ、HBVTg/WTマウスに比べ、ALTは低値であった。また、組織学的な検討においてもHBVTg/IDOKOマウスでは、肝障害誘導後の炎症細胞浸潤は軽度であった。リアルタイムPCRによる肝内でのmRNAの発現を検討したところ、HBVTg/IDOKOマウスにて炎症性サイトカインの発現はHBVTg/ WTマウスに比し軽微であった。以上より、本急性肝障害モデルにおいてIDOの欠損は、肝障害の程度を軽減させるものと考えられた。当初の予定通りHBV特異的CTL誘導能およびCTLにより惹起される急性肝障害モデルにおいてそれぞれIDOノックアウトマウスを使用した検討ができた。さらに、それぞれの検討においてIDOの働きを明確にできたことは大きな成果だと考えられる。現在、IDOがそれぞれの病態への修飾にどのようなメカニズムで影響を及ぼすのか解析を進めているが、現段階では不十分であり、本年度、明らかにする予定である。IDO阻害薬およびIDO発現ベクターを用いたCTL誘導能と肝障害に対する効果の検証IDOKOマウスにて解析を行った結果を十分に参考にしてWTマウスでのHBV特異的CTL誘導能および肝障害の病態に対するIDO阻害薬およびIDO発現ベクターの影響を解析する。IDOの拮抗阻害剤である1-メチルトリプトファン(1MT)を経口投与してCTL誘導能実験およびCTL移入による肝障害誘導実験を行い、1-MTのCTL誘導能(抗原特異的細胞障害性試験など)および肝障害に対する効果を検証する。また、申請者らがすでに保有しているIDO遺伝子を組み込んだベクターを用い、IDOを生体内で強発現させた後、CTL誘導能実験およびCTL移入による肝障害誘導実験を行い、IDO発現ベクターのCTL誘導能および肝障害に対する効果を検証する。本年度は、予想以上に実験がスムーズに進行でき、予備実験などの回数も減らすことができた。このため、マウス購入・維持費および各実験試薬などの購入費が抑えられ、繰越金が生じたと考えられる。しかしながら、実験結果の十分な検証は行われておらず、今後行う必要がある。

次年度の研究費に関しては、主にマウス購入および維持に使用。また、免疫学的検討に用いる各種抗体なども随時購入する。本年度は、最終年度であるため、学会での発表や医学雑誌への論文発表に必要な経費を使用する。
近代都市の拡大と自然-郊外住宅地の形成と自然環境に関する都市史的研究

平成11年度に行った宝塚市雲雀丘住宅地の調査成果をもとに,本年度は,同住宅地の開発資料に読みとれる自然環境と宅地開発との関係について考察を加えた。雲雀丘住宅地は,斜面地の住宅地開発としては最初期の事例で,その開発手法はそれまでの住宅地には見られない自然環境との整合性を配慮した内容であったことを指摘するとともに,住宅を建設する部分以外は土地を造成しないこと,既存樹木を伐採しないこと,土砂流出に備えた強固な排水路を確保すること,などが具体的方法として採られていたことを明らかにした。また,同時に生垣の設置や植樹など住民による自然環境の創出もはかられたことを解明した。本年度はさらに,雲雀丘住宅地に隣接する花屋敷住宅地,さらに北部の山地に計画された新花屋敷温泉住宅地についても調査,分析を進めた。これらの事例は,地価の安い山林に目をつけた住宅地開発であること,開発手法が既存の自然環境をできるだけ破壊しないよう配慮されていることが共通点としてあげられる。こうした開発手法が選択された理由は,技術的な限界もあったと考えられるが,比較的高級な住宅地として計画されたこれらの地域では,自然環境が住宅地の付加価値となっていたことが指摘できた。しかし,これらの開発手法は,時代が下がるに従って見られなくなり,土地全体を平坦に造成する方法が増加する。こうした変化は,北部の山地部へと住宅地が広がる過程において確認された。この一連の研究によって,長尾山系において展開された住宅地開発と自然環境とのあり方が明らかとなり,大正初期から昭和戦前期にかけての阪神間における郊外住宅地開発の一側面を把握することができた。本年度は阪神間の郊外住宅地のうち、兵庫県宝塚市に位置する「雲雀丘住宅地」について史料収集・調査を行った。大正4年に開かれた「雲雀丘住宅地」は、近代における阪神間の代表的な郊外住宅地のひとつであり、その開発において、自然環境との関わりが非常に重視された地域である。当住宅地の当初の開発計画と手法を知る史料が、宝塚市役所西谷分室に保存されていることを確認し、それらの調査と複写を8月に行った。開発を知る手がかりとなったのは、その大半が砂防指定地内での作業・開発申請書であった。文書の量は綴りで7冊程度であった。その後これらの史料を整理し、個々の文書の分析を進めた。分析の結果、自然環境をできる限り破壊しない開発方針、禿地に植林を行う計画、傾斜地であることを考慮した法面の補強などが明らかになった。西谷分室保管の行政文書分析と平行して、住民への聞き取りと個人蔵の史料の提供依頼、住宅の調査を行った。聞き取りは調査は、たどれる限り古い時期にここに住んでいた住人を5人程度ピックアップして面接形式で実施した。この調査から、昭和初期から戦後にかけての住宅地の様子や自然環境、暮らしぶりなどに関するデータを得ることができた。個人蔵の史料については、古写真を中心に200点あまりの提供を受け、これらから開発間もない頃の景観や生活などがヴィジュアルに捉えることが可能となった。住宅の調査に関しては、最初に開発された地域の住宅について実測を1軒、写真撮影を2軒行った。
人文科学領域におけるマルチメディア教材の開発と利用に関する実践的研究

本研究は、マルチメディア活用による論理的思考力の涵養と学問的体系の理解とに資する教育方法の在り方、つまり、高等教育の本来的在り方にマッチしたマルチメディア利用の方法を、人文科学領域において実践的に探ろうとする開発的研究である。その際、イメージ情報の「わかりやすさ」は同時に解釈の一面性と裏腹の関係にあることに留意し、学問研究の基本である複数の解釈の批判的吟味という思考作用の涵養に貢献するため、複数の解釈にそれぞれ整合的な複数のイメージ情報を開発するなどの工夫に努めた。研究代表者においては、平成12年度前半に、過去数年の間に蓄積してきた多量の映像データ(VHS)を授業現場で使用し易いように、静止画データもしくは動画データとして、研究分担者の助言を受けながら、デジタル化する作業を進めてきた。それらのデータを教育行政学の授業で適宜使用し、ややもすれば勧善懲悪的な社会認識に留まりがちな学生の認識枠を、ターンオーバーさせるために有効なデータやその提示のタイミングを、試行的に探ることに努めた。イメージデータは、それ自体強いメッセージ性を内包しており、社会的文脈や人々の眼差しによって条件づけられている。それゆえ、学生の初期的な認識を強化するのに有効であるし、また、逆のメッセージ性を持っているイメージデータを使うことによって、それを反転させることも可能であることが確認できた。しかし、自らの思考のバイアスに気付かせ、多面的な批判吟味能力を伸長させるためには、さらに課題が残ることも判明した。イメージデータの有効性と限界を、実践を踏まえながら理論化するため、その整理と体系化の作業をさらに継続しているところである。
骨芽細胞成熟における転写因子NF-κBを介した遺伝子制御に関する研究

転写因子NF-κBは種々の細胞における遺伝子発現を制御していることが知られている。本研究はこのNF-κBが骨芽細胞のどの遺伝子の発現を制御し、その結果として骨芽細胞の成熟に対してどのように関与するのかを明らかにするために実施した。骨芽細胞の核蛋白質はκB配列に対する結合活性を示した。また、その活性は骨芽細胞が成熟するに従って減少した。さらに、核蛋白質中のκB配列に結合する蛋白質について調べると、NF-κB構成成分のうちp50、p65、c-RelおよびRelBであることが明らかになった。骨芽細胞成熟過程におけるこれらの発現の変動について検討すると、p65、c-RelおよびRelBは細胞培養開始とともにそれらの発現量が増加するが、骨芽細胞の分化マーカーであるアルカリ性ホスファターゼ活性が上昇し始める時期をピークとしてその発現は低下した。一方、p50は細胞播種直後から骨芽細胞成熟に伴って、その発現は低下した。これらの結果は、p50が骨芽細胞成熟に過程におけるNF-κB活性の低下に深く関与している可能性を示唆するものである。一方、p50の発現低下による、NF-κB活性の低下が如何なる遺伝子の発現に影響を与えているかを調べるためにp50のアンチセンスオリゴヌクレオチドを骨芽細胞に遺伝子導入し、遺伝子発現の変化を検討した。その結果、骨芽細胞におけるインターロイキン-6(IL-6)mRNAの発現の増加が認められた。さらに骨芽細胞成熟過程におけるIL-6産生量を調べると成熟に伴って産生量の増加が明らかになった。以上の結果より、p50の発現低下によるNF-κB活性の低下によってIL-6産生量が増加し、骨芽細胞が成熟していくものと推測された。骨芽細胞は増殖、分化を経て骨形成を行う。この過程における転写因子NF-κBの関与について明らかにすることを目的として本研究を行った。骨芽細胞におけるNF-κBの活性は細胞の成熟とともに減少した。骨芽細胞核蛋白質中のDNA-NF-κB複合体の構成成分としてはNF-κBサブユニットのうちp50、p65、c-Re1、Re1BであったがNF-κBの活性と同様に細胞増殖とともに蛋白発現が減少するのはp50のみであった。一方、細胞成熟に伴った骨芽細胞のサイトカイン産出量の変動を検討した結果、インターロイキン6(IL-6)の産生が経時的に増加することが明らかになった。そこでp50発現量の減少とNF-κB活性の低下がIL-6産生を促進しているのではないかと推測し、骨芽細胞にp50アンチセンスオリゴヌクレオチドを導入してIL-6 mRNA発現の変化を検討した。その結果、p50アンチセンスオリゴヌクレオチド導入によりIL-6 mRNA発現が抑制された。IL-6を骨芽細胞に作用させるとアルカリ性ホスファターゼ(ALP)活性が上昇するという報告がある。この報告と今回の結果を総合すると骨芽細胞の成熟に伴いp50の発現が低下し、NF-κB活性が低下してIL-6産生が促進されALP活性が上昇することにより石灰化が生ずることが推測される。NF-κBはIL-6のみではなく種々の遺伝子の転写の制御を行っていることから他にも石灰化に関与する遺伝子の発現に関与している可能性がある。この点に関して現在も研究続行中である。
前駆体紡糸法による高温酸化物超伝導体の線材化

本研究は前駆体法による線維紡糸技術を用いて高温酸化物超伝導体の線材化を行い、実用線材に必要な77Kで高いJ_C値を持つ線材の開発を目指して、各種の酸化物超伝導体に対して添加元素及び熱処理条件を検討する事、熱処理時における長尺化の可能性を検討すること及び多芯線化を目指す事を目的とする。具体的にはY又はNd,Ba,Cuの酢酸塩をポリ・ビニルアルコール水溶液中に溶解し、紡糸ドープを作製する。この紡糸ドープを乾式紡糸して細い線材とし、熱処理条件を検討して77K,OTで高いJ_Cを示す線材を作製する条件を見出す事を検討した。その結果、77K,OTで10^5A/cm^2のJ_Cを持つY系酸化物超伝導体が作製出来るようになった。さらに50cmの均熱帯を持つチ-ブ炉を購入し長いY123超伝導繊維の構造を検討した結果、酸素中で部分溶融凝固処理をして、77K,OTでJ_C=10^4A/cm^2を示す長さ20cmの連続した超伝導繊維を作ることが出来た。短い繊維試料のJ_Cの磁場特性を東北大学金研で77K,10Tまでの磁場中で測定した。Y系超伝導繊維及び水銀系酸化物超伝導体繊維で77K,10Tの磁場中で10^2A/cm^2以上のJ_C値を観察した。低酸素分圧下で溶融結晶成長したNd123線維のJ_Cの磁場依存性は酸素中での後処理条件や前駆体繊維の組成に依存した。Nd123繊維のJ_Cの磁場依存性はY123繊維よりも良く77K,10Tで10^3A/cm^2以上を維持した。最後に高温酸化物繊維の金属中への複合化を検討した.Al,In,Ag等をマトリックスとして、焼結したY123繊維を埋め込んだ。銀ペーストを塗布して酸素中で熱処理する事で超伝導特性の劣化のない機械的性質の優れた複合体を作製できた。現有の紡糸装置により溶液紡糸法により連続したY_1Ba_2Cu_3O_X前駆体繊維を作成した。紡糸条件及び熱処理条件を検討することにより、77K,0Tで10^5A/cm^2を越える最大のJc値を得ることができた。溶融凝固処理した繊維のJcの磁場依存性を測定した結果77K,4Tで10^3A/cm^2以上を示すことが認められ、熱処理条件を検討することにより有効なピンニング点を導入することが出来ることが明らかとなった。そこで、50cmの均熱帯を持つチ-ブ炉を購入し長い超伝導繊維の製造を検討した。始めに長さ30cmの前駆体繊維を450°Cまで30°C/hで加熱して有機物を取り除いた所20cmに収縮した。加熱した繊維を長さ20cmの白金容器の上に浮かせてのせ、部分溶融凝固処理をした。従来の炉に比較して加熱部分が大きいため高いJcを示す加熱条件を検討した。酸素量を多く流すこと、溶融温度を10°C上げることなどにより繊維の長さ方向にJcの変動がなく、77K,0TでJc=10^4A/cm^2を示す長さ18cmの連続した超伝導繊維を作ることが出来た。今後加熱容器をさらに長くすることで高いJcをもつ20cm以上の超伝導繊維を作ることは可能と考えられる。

銀ペーストを塗布して酸素中で熱処理する事で超伝導特性の劣化のない機械的性質の優れた複合体を作製できた。昨年度は50cmの均熱帯を持つチ-ブ炉を購入し長いY123超伝導繊維の製造を検討し、酸素中で部分溶融凝固処理をして、77K,0TでJ_C=10^4A/cm^2を示す長さ20cmの連続した超伝導繊維を作ることが出来た。本年度は始めに短い繊維試料で77Kで10Tまでの磁場中でのJ_C特性を測定した。その結果繊維の直径方向にランダムに結晶が存在するもので、J_Cが4Tで10^3A/cm^2以上、10Tで10^2A/cm^2の優れた特性をもつものを観察した。そこで繊維の長さ方向は結晶粒が配向し、直径方向にはランダムになる組織を持つY123の長い繊維を作成することと、また溶融凝固温度を下げて熱処理中に繊維保持材(Pt線)との反応をおさえることを目的として長いY123部分溶融凝固処理中の雰囲気の影響を調べた。空気中及びAr中で長い前駆体繊維を部分溶融凝固処理を行い、その後酸素処理して高いJ_Cを示す条件を探した。その結果空気中、Ar中で処理した繊維はそれぞれ溶融温度を45°C,95°C下げることができたが、空気中では繊維の組織は柱状や棒状と成り、Ar中では網目組織を示し、繊維の長さ方向に結晶粒を連続して配向させることが難しく、J_Cは77K.0Tで4500A/cm^2しか達成できなかった。しかしその再現性は非常に良い。低酸素分圧下で溶融凝固処理(OCMG)したNd123超伝導体は高磁場下でY123超伝導体より高いJ_cを示す事が報告されているため、その線材化が期待されている。そこで本年度は繊維状Nd123超伝導体のOCMG処理について検討した。Nd_<1.18>Ba_<2.12>Cu_<3.09>O_x(1)、Nd_<1.25>Ba_<2.05>Cu_<3.10>O_x(2)前駆体繊維をNd,Ba,Cuの酢酸塩の均一なPVA水溶液から乾式紡糸により紡糸して作成した。得られた前駆体繊維を酸素中で仮焼し、0.1%O_2+Ar或いは1%0_2+Ar中で部分溶融凝固処理し、最後に酸素中で後処理した。熱処理後の繊維(1)及び繊維(2)のT_cはそれぞれ94.5Kと88.5Kであった。繊維(1)は急速に加熱して部分溶融凝固すると繊維中に空孔を発生するため、500°C/hで加熱した。熱処理条件を最適化する事で、繊維(1)、(2)でそれぞれJ_c=2.4x10^4A/cm^2と1.8x10^4A/cm^2(77K,0T)の最高値に達した。しかし繊維(2)の最適な熱処理条件の幅は狭くJ_cの再現性も乏しかった。高いJ_cを達成するためには前駆体繊維の組成をコントロールする事が鍵となった。繊維のJ_cの磁場依存性は酸素中の後処理条件や前駆体繊維の組成に依存し、繊維(1)のJ_cの磁場依存性はY123よりもよく77K,10Tで10^3A/cm^2以上を維持した。最後に高温酸化物繊維の金属中への複合化を検討した。Al,In,Ag等をマトリックスとして、焼結したY123繊維を埋め込んだ。
札幌農学校1～5期生の漢文学習の実態とそれが英語熟達度に与えた影響と要因の解明

明治初期の代表的英語学習成功者群である札幌農学校15期生を対象とし,幕末維新期の大規模調査結果,及び各郷土史,学校史,子孫訪問による局地的収集データを併用して,その漢学学習の実態を体系的,かつ実証的に解明,その特徴を分析して,第二言語習得研究の理論的枠組みを用い,調査項目ー教育機関(規則,教科課程,学生,教師),教授法(授業計画[目的,教材,活動,教師と生徒の役割],方法[手順,方略,振る舞い]),学習(学習スタイル,学習方略),結果(熟達度,信念,態度,動機付け)ーにおけるいかなる要素が,いかなる要因によって英語熟達度の伸長に影響を及ぼしたのかにつき検討する。
ヒストナセチル化を制御する遺伝子のクローン化

分裂酵母SchizosaccharomycespombeのトリコスタチンA(TSA)感受性変異株tss1-72株に野生株分裂酵母のゲノムDNAライブラリーを導入し、多コピーで親株のTSA感受性を相補する遺伝子のスクリーニングを行った。その結果、TSA感受性を野生株並に相補する形質転換体を5株取得した(TSR2、TSR5、TSR11、TSR13、TSR32)。これらの形質転換体の形質がプラスミド由来であることを確認した後に他の薬剤に対する多剤耐性を調べたところ、調べた限りの他の薬剤に対する耐性は示さなかったが、唯一もう一つのヒストンデアセチラーゼ阻害剤であるトラポキシン(TPX)に対してのみ親株であるtss1-72の25倍程度の耐性を賦与した。5株からプラスミドの回収を試みた結果、うち1株(TSR11)はゲノムDNAに挿入されていることが明らかとなった。残り4株についてプラスミドを回収し、制限酵素地図を作成したところ、3株が同一の領域約3.7kbpを含む遺伝子断片(pTSR2、pTSR5、pTSR13)を持っていることが明らかとなった。これら3つに共通な領域約3.7kbpの塩基配列を決定したところ、同一方向に近接して並んだ3つのORFと思われる領域を見いだした。3つの各ORFと既知の蛋白質との間にホモロジーは見られなかった。これらのORFが実際にヒストンアセチル化調節に関与しているかは現在のところ不明であるため、遺伝子破壊やcDNAの取得、ヒストンデアセチラーゼ活性測定などの生化学的解析を行う準備を現在進めているところである。また、もう一つのプラスミド(pTSR32)は約7kbpの挿入断片を持ち、現在塩基配列を決定しているところである。
カテゴリー分析法とエスノグラフィー法の併用による剣道の授業分析研究

高校と大学の剣道授業を、教師行動と学習者行動をカテゴリー別に分析し、学習者の授業評価結果とエスノグラフィー法の手法によるインタビューの結果を検討した。M高校では、教師主導の一斉指導スタイルで展開しており、相互作用の時間量が少なかった。授業後のインタビューの結果、生徒は剣道の授業に対して痛い、くさい、疲れる、つまらないという否定的感想をもった。生徒による形成的授業評価では、特に意欲・関心次元の評価が低かった。その原因として、毎授業で強制された正座、繰り返し行われる基本練習、匂いの強い剣道具、小手を打たれた痛さがあげられる。I大学の剣道授業では、学習者にとって「よい授業」と評価されていた。しかし、インタビューによる本音から、まだ問題点が存在していたことが判明した。今後の改善事項:・初学者は単純な動作でも難しいと感じており、授業者の見解と相違があった。・成功しないままであると、学習者はいい加減な動作でその場を切り抜けていた。・自分の動作が有効であったのかどうかについて、自己評価ができなかった。・竹刀が脇の下に当たったときの痛み対策がとられていなかった。・面の装着に時間がかかった。・足裏が汚れることに不快感を持っていた。体育授業における教師の相互作用行動を研究対象とした教材の内、剣道は末だ取り上げていない。また、剣道学習では、竹刀を持ち、剣道具を身につけるという非日常的な状態で学習を行うため、課題の達成には他の種目以上の困難がともなうことが予想される。高橋は、体育の授業改善をめざした研究における今後の課題の一つとして「単元全体を対象にした事例的研究」(高橋、2000)の重視を指摘している。そこで平成12年度における本研究では、高校の剣道単元すべての授業を事例的に取りあげて観察・分析し、教師の相互作用行動と学習者の授業成果の関連について検討していくことにした。研究対象は、平成12年9月から翌年2月にかけてI県立M高等学校で行われた1年生男子1クラスの剣道授業(10時間単元)である。高橋ら(1989)の開発した教師の相互作用行動観察法を用いて、VTRカメラ(ソニーDCR-VX2000)で撮影した映像をもとに教師の相互作用の分析を行った。また、教師の授業中の言葉すべてを逐語記録できるように、無線送受信マイク(ソニーWRR-805,WRT-805)を装着させ、VITRカセットテープに同調録音した。一方、学習者については毎時間1人ずつ抽出し、授業時間中の学習行動をVTRに収録し、言葉活動をも逐語記録できるように、無線送受信マイクを装着させ、VTRカセットテープに同調録音した。さらに毎時間授業終了後、観察対象となった学習者に対して、彼らが授業についてどのように感じていたのかについてインタビューを行った。また、毎時間の授業成果を知る手がかりとして、高橋ら(1994)が作成した形成的授業評価票を実施した。同時に剣道授業についてのアンケート調査を学習者全員に実施し、剣道授業に対する態度の変容をも把握した。現在、映像・音声・アンケートのデータを分析中である。今後は、I大学の剣道授業を研究対象としていくので、各地の大学における剣道授業の実態の聞き取り調査をもとに、授業計画案を作成中である。今後の分析では、高校と大学での教師行動・学習者行動の比較検討、学習者の授業評価との関連性を明らかにしていく予定である。高校と大学の剣道授業を、教師行動と学習者行動をカテゴリー別に分析し、学習者の授業評価結呆とエスノグラフィー法の手法によるインタビューの結果を検討した。しかし、インタビューによる本音から、まだ間題点が存在していたことが判明した。今後の改善事項:

・初学者は単純な動作でも難しいと感じており、授業者の見解と相違があった。・成功しないままであると、学習者はいい加減な動作でその場を切り抜けていた。・自分の動作が有効であったのかどうかについて、自己評価ができなかった。・竹刀が脇の下に当たったときの痛み対策がとられていなかった。・面の装着に時問がかかった。・足斑が汚れることに不快感を持っていた。
役君小角伝承に関する基礎的研究

平成8年度に行って来た基礎的な調査研究成果を踏まえ、平成9年度は、役君小角の原像を構築するため、明治時代以来の先学諸賢の研究成果を分析し、従来から知られている諸史料を再検討するということを行った。前年度に調査した役小角関係史料についても、再度確認のための調査を実施し、その伝承の中に含まれている史実を見出すため、武田祐吉博士らの著作集を購入し、その研究成果の検討も併せて行った。前年度からの懸案事項でもあった『扶桑略記』に関する調査研究は、十分に行うには至らなかったが、この確認調査の中で、新たに見出した『日本名僧伝』逸文については、それを、『日本宗教文化史研究』第1巻第1号(創刊号、1997年5月)及び『國書逸文研究』第30号(1997年10月)の誌面に、それぞれ報告し、大方の批判を賜ることとした。本研究による成果のうち、役君小角の関係史料に関しては、『研究成果報告書』の中に、詳細に整理してあり、また新たに明らかにした点も同様である。簡潔に整理すれば、従来から知られていた『続日本記』『日本霊異紀』『三宝絵』以外に、『扶桑略記』に引かれた2つの伝承があり、それらの中には、貞観15年以前に成立をみたものもあり、上記の3つの概知の史料の中に位置づけることができ、これまでの役行者小角伝承関係史料を大きく広げ、またその位置づけを明確にすることができた。さらにこの新たに確認した2つの史料によって、実在する人物役小角像についても、幾分かではあるが、明らかにすることもできたのではないかと自負している。後世、修験道の開祖として知られる役君小角とその伝承について、伝承の原形を考察しながら、併せてその歴史と風土についての研究も行うのが、この研究課題の主たる目的である。備品として購入した諸文献、例えば、『吉野町史』などが記す点、『日本霊異記』などの説話文学作品の中に見える役行者伝説、また、修験道関連史科に散見する役行者小角の伝説などについて、これまでの研究成果及びその関連史科について、資料カードに取り、それらをつぶさに検討を加えながら、役君小角の伝承の基礎的な部分を検討し、また、新たな役君小角像とその伝承の過程などを明確にすることに努めた。新たな役君小角像を求めるため、これまで知られている史料及びその関連伝説以外のものも追求することに努め、調査に赴いた機関などにおいて、『扶桑略記』古写本の転写本などを見出だすことなどができ、吉野の実地踏査では、役君小角伝承を生んだ風土とその歴史について、その実際をいくらかではあろうが、確かめることもできた。前年度に調査した役小角関係史料についても、再度確認のための調査を実施し、その伝承の中に含まれている史実を見出だすため、武田祐吉博士らの著作集を購入し、その研究成果の検討も併せて行った。前年度からの懸案事項でもあった『扶桑略記』に関する調査研究は、十分に行うには至らなかったが、この確認調査の中で、新たに見出だした『日本名僧伝』逸文については、それを『日本宗教文化史研究』第1巻第1号(創刊号、1997年5月)及び『國諸逸文研究』第30号(1997年10月)の誌面に、それぞれ報告し、大方の批判を賜ることとした。

本研究による成果のうち、役君小角の関係史料に関しては、『研究成果報告書』の中に、詳細に整理してあり、また新たに明らかにした点も同様である。簡潔に整理すれば、従来から知られていた『続日本記』『日本霊異記』『三宝絵』以外に『扶桑略記』に引かれた2つの伝承があり、それらの中には、貞観15年以前に成立をみたものもあり、上記の3つの既知の史料の中に位置づけることができ、これまでの役行者小角伝承関係史料を大きく広げ、またその位置づけを明確にすることができた。さらにこの新たに確認した2つの史料によって、実在する人物役小角像についても、幾分かではあるが、明らかにすることもできたのではないかと自負している。
朝鮮三国の王都の構造と機能に関する研究

朝鮮三国それぞれの王都の構造と機能に関する個別研究をすすめ、それを総合的に考察した。まず高句麗については、後代(中期・後期の前半)において知られている、平地の王城と、その背後の山城とのセット関係が、前期にまでさかのぼって存在したことを確認した。後期の問題については、そうしたセットのうちの王城の位置に関して考察し、あわせて遷都(平壌への)の背景について検討した。両者がセットをなす、そうした構造は、高句麗の伝統的な都城のありかたといえるものであるが、後期になって、中国的都城制と融合するかたちに変化していった。次に百済であるが、百済については、前期の王城の位置について考察し、また後期の王都をめぐる諸問題について、再考した。百済においても、高句麗の場合と同様に、後期になって、中国的都城制と融合する都城のありかたに変化していった。ついで新羅であるが、新羅については、全時代をとおして一度も遷都しなかったことが、王京の特質であり、そうした王京の特質について追究した。また地方におかれた五つの小京についても検討した。五つの小京は王京の再現といえるものであった。新羅王は、地方において、王京のミニチュア版を再現したものであった。最後に、それらの個別研究を総合的に考察した。三国はそれぞれが独自の都城制を発展させた。その変遷は、三国それぞれの歴史の変化と密接に関わるものであった。そして中国的な都城制を導入しながらも、独自なありかたを残したところに特徴があった。本年度の目的であった資料の蒐集であるが、地籍図の入手は困難であり、写真を利用してデータ化を進めた。5000分の1地形図は、韓国で直接購入したが、決済の関係で自費負担とした。またこれまで撮影した関係遺跡・文字資料等の資料化もすすめた。さらに百済の故地の研究機関を訪問し、調査の現状に対する認識を深めた。こうした作業と並行して進めた作業で得られた成果は、まず「百済後期王都泗〓城をめぐる諸問題」である。そこでは、進出の木簡・扶餘博物館旧蔵瓦銘等を用いて、百済の後期王都の構造を再検討し、王都の五部の配置、および五部の下の巷制に対する具体的な構造について考えた。五部は、高句麗のそれとほぼ同じく、中部を中心にして前部・後部・上部・下部がそれぞれ南・北・東・西に配され、その各部に同様な配置の五巷が属した、とみた。また王城扶蘇山城に対する発掘調査報告書をふまえて、その造営が遷都前に始まっていたこと、および城壁の構造が文献にみえる「〓」にあたるのではないかと考えた。その他、泗〓城の、朝鮮古代都城史における位置づけについての私見に対する批判に答えて、羅城は高句麗よりも先行し、かつ中国制導入の一環としてとらえることができることを再論した。次に「新羅五小京の成立と国原小京」では、新羅人のなかで総体として特権支配層を形成いていた王京人の問題を確認するためにも、地方に設置された小京の設置目的と背景について検討した。その場合、いち早く設置された国原小京を中心にして考察し、小京人にも王京人と同じく京位が与えられていること、およびそれが小京優遇策であることを述べた。また新羅の統一後の小京設置は、すでに王京の変質後であり、それに伴って小京の意義・位置づけも異なることを明らかにした。本年度は、写真資料・地図の整理を行い、考察は特に高句麗の王都研究について進めた。その中心となる「高句麗の平壌遷都」と題する論考は、現在投稿中であるが、その内容は、次の通りである。427年の平壌遷都をめぐる諸問題を総合的に検討することを目的として、「一遷都以前の平壌」、「二平壌遷都の背景」、「三平壌前期王都の構造」「四坊里制をめぐる問題」の四章構成で執筆した。

一章では、従来から背定否定両論のあった343年の平壌・東黄城への移居を是認し、平壌附近に居住する流入中国人との関係のもとで、王が一時的に移居したものととらえ、平壌遷都の前提となることを述べた。二章では、背景として高句麗の北方領土の確定と対中国外交の安定化により、南方への積極的な進出が容易となり、対百済・新羅対策の一環という側面を重視した。また343年の移居をふまえ、衛氏朝鮮・楽浪郡以来の伝統をもつ平壌を選定したと考えた。三章では、従来の研究で問題となっている安鶴宮址の性格を中心に検討し、それが高句麗の離宮ではなく、高麗の文宗時代に造営された左官にあたることを論じ、高句麗時代の王都の構造としては、大城山城と清岩里土城のセットでよいことを述べた。四章は、それに伴って、安鶴宮址附近に想定されている坊里制の問題点を指摘した。また現在、「高句麗前期王都論」(仮題)を執筆中であり、これは高句麗前期の王都である卒本をめぐって、高句麗の初期国家を構成する部族集団(那集団という)との関係および、当時の王都の構造について検討するものである。朝鮮三国それぞれの王都の個別研究をすすめ、いくらか総合的な検討もすることができた。高句麗については、まず前期王都卒本の平面構造について考察した。中期および後期の前半の王都は、平地における王の居城と、その背後の「逃げ城」としての山城とのセット関係が、基本構成要素であることが知られているが、前期についても、遼寧省桓仁県の〓哈城と五女山城とのセットが、基本であることを示し、そうした伝統が、高句麗の興起当初にさかのぼることを確認した。後期王都平壌への遷都については、そこに至る前史、おおび遷都の背景を考察し、現在も根強く主張されている、平壌東郊の安鶴宮宮殿遺構を当時の王宮であるとみる考え方を批判・否定し、それが高麗時代の左右宮の左官にあたることを述べ、王城としては清岩里土城のほうが妥当であることを確認した。その上で、後期後半の長安城の築造と遷都の問題を追究すれば、高句麗王都の変遷について見通しを得ることができる。簡単な見通しは既に述べているが、伝統的な都づくりから、中国制をかなり意識し、その要素を導入した後期後半の長安城への展開が、高句麗の政治発展と対応するものととらえることができる。百済については、前期王都の位置や構造をめぐる問題に言及し、既に発表している後期王都をめぐる問題と合わせて、全体の変遷観を示すことができた。百済の場合も、最後の段階になって中国制の導入の問題がおこる。それまでは、高句麗同様、伝統的な王都であり、そうした伝統的なありかたと中国制の導入との関係が問題となる。新羅については、王都慶州が、高句麗・百済と違って、ほかに移ることなく千年の都としてつづいたことの意義が特に問われる必要があるが、それについて持論を述べ、最近の成果を整理した。
ナイーブT細胞から高機能なHIV-1特異的CD8陽性T細胞を誘導する機序の解明

HIV-1感染において、高機能なHIV-1特異的CD8陽性T細胞を誘導することは予防ワクチンの開発やリザーバーウイルスを排除するために非常に重要である。しかし、これまでにナイーブT細胞から高機能なHIV-1特異的CD8陽性T細胞を誘導する方法は確立していない。本研究ではSTINGリガンドcGAMPによってウイルス抑制能の強いHIV-1特異的CD8陽性T細胞をナイーブT細胞から効率的に誘導できることを明らかにした。このことからSTINGリガンドがCTL誘導型AIDSワクチンの開発や根治療法にとって有効である可能性が示された。HIV-1感染者を対象とした解析で、生体内でHIV-1を強く抑制しているエピトープ特異的CTLが報告されている。強いウイルス抑制能を持つCTLを誘導できるエピトープはCTL誘導型HIV-1ワクチンの抗原候補となる。一方で、どれだけ抗ウイルス活性の強い抗原特異的T細胞をプライミングできるかがワクチンの効果判定の1つとして重要であるが、これまでナイーブT細胞から誘導されたHIV-1特異的CD8陽性T細胞のウイルス抑制機能についての報告はない。本研究はHIV-1非感染者のナイーブT細胞から強いウイルス抑制能を持つHIV-1特異的CD8陽性T細胞を効率的に誘導する方法とその誘導機序を解明することを目的としている。Flt3リガンドとTLR4リガンド(LPS)またはSTINGリガンド(cGAMP)を使ったin vitroプライミング実験系でHLA-A*24:02陽性の日本人HIV-1慢性感染者で高頻度に検出さるNef138-10エピトープ特異的CD8陽性T細胞をHLA-A*24:02陽性HIV-1非感染者のナイーブT細胞から誘導できた。特異的CD8陽性T細胞の誘導効率は同程度であるにも関わらず、LPSで誘導できたNef138-10特異的CD8陽性T細胞はエフェクター細胞にまで分化しているにも関わらずHIV-1感染者由来の特異的T細胞と比べHIV-1を抑制する能力が非常に弱いことが分かった。一方でcGAMPで誘導できた特異的T細胞は強いウイルス抑制能を持っていることが分かった。Nef138-10エピトープを使ってHIV-1特異的CD8陽性T細胞を誘導できるin virtoプライミングのシステムを確立した。また誘導されたHIV-1特異的CD8陽性T細胞の誘導効率や感染細胞を用いたHIV-1抑制能評価系よって、強いウイルス抑制能を持つHIV-1特異的CD8陽性T細胞をナイーブ細胞から誘導できるリガンドを見出すことができた。HIV-1を強く抑制できる機能をもつ高機能なHIV-1特異的CD8陽性T細胞をナイーブT細胞から誘導することはエイズ予防ワクチンや根治療法にとって重要である。しかしながら、これまでナイーブT細胞から誘導されたHIV-1特異的CD8陽性T細胞のウイルス抑制機能の詳細な解析は行われていない。そこで本研究ではHIV-1非感染者のナイーブT細胞から高機能なHIV-1特異的CD8陽性T細胞を効率的に誘導する方法の開発とその誘導機序を解明することを目的としている。昨年度の研究からin vitroプライミング実験系にて他のリガンドと比較してSTINGリガンドcGAMPはウイルス抑制能の強いHIV-1特異的CD8陽性T細胞をHIV-1非感染者のナイーブT細胞から効率的に誘導できることを明らかにした。今年度はSTINGリガンドで誘導されたHIV-1特異的CD8陽性T細胞がどのような機構でウイルス抑制能が強いT細胞を誘導できているのか、ウイルス抑制能の低いLPSで誘導したT細胞と比較し解析を行った。STINGリガンドで誘導したHIV-1特異的CD8陽性T細胞はLPSで誘導したT細胞に比べてサイトカインの産生能が高く多機能性持っていた。さらにSTINGリガンドで誘導したT細胞はウイルス抑制能に相関してパーフォリン、グランザイム、T-betの発現量が高いことも分かった。一方でSTINGリガンドとLPSで誘導したT細胞のTCRの結合能の高さには有意な差はみられず、TCRクロノタイプの解析からSTINGリガンドが高機能なTCRクロノタイプをナイーブT細胞から選択的に誘導しているわけではないことが示された。以上の解析によりSTINGリガンドは細胞内のエフェクター分子の発現量を高めることによってウイルス抑制能の強い高機能なHIV-1特異的CD8陽性T細胞をナイーブT細胞から誘導できることを明らかにした。TLR4リガンドおよびSTINGリガンドでナイーブT細胞からそれぞれ誘導されたNef138-10特異的CD8陽性

T細胞の詳細な機能解析およびTCRの解析を進める。具体的にはサイトカイン・ケモカインの産生能を調べpolyfunctionalityを評価、テトラマーによるTCR結合能を測定、さらにグランザイムやパーフォリンおよびこれらの発現にかかわる分子の細胞内での発現量を調べ、ウイルス抑制能と相関のあるファクターを調べる。またシングルセルレベルでTCRの解析を行いウイルスを強く抑制できるナイーブ細胞由来特異的T細胞のTCRクロノタイプを同定する予定である。感染免疫学複数の健常人からHIV-1特異的CD8陽性T細胞をプライミングして、まずどのリガンドが強いウイルス抑制能を持つ特異的T細胞を誘導できるか検討し明らかにすることが必要であったため、その他の解析が遅れ予算が次年度に繰り越された。TCR遺伝子解析用の試薬、サイトカイン細胞内染色やテトラマー染色に使用する抗体・試薬および器具などの物品費に使用する予定である。また国内外での研究成果発表にかかる旅費を算出した。
植物のミトコンドリアｍＲＮＡ制御機構の解明

高等植物シロイヌナズナのミトコンドリアのmRNA安定制御に関わると考えられるpolyA特異的RNA分解酵素AHG2/PARNとpolyA付加酵素AGS1の機能解明を進めている。平成24年度は、主にahg2-1変異株のミトコンドリアの性状について解析を行った。そのひとつに、タンパク質の変動を調査した。核ゲノムコードのミトコンドリア局在タンパク質とミトコンドリアゲノムコードのタンパク質についてwestern blottingを行い、蓄積量を調査した。その結果、変異株ではミトコンドリアゲノムコードのタンパク質の増加が認められた。また、Blue-Native-PAGEを用いてミトコンドリア複合体のタンパク質量を調査した。その結果、変異株では、複合体の量が変動していることが確認された。このことから、mRNAの蓄積がタンパク質の増加を引き起こし、それがタンパク質複合体の量比を混乱することにより、呼吸に必要な複合体形成が阻害もしは不安定化を引き起こしていると推察される。また、ミトコンドリアDNA量、RNA量をqPCRを用いて、解析し、変異株では核あたりのミトコンドリア量が増加ていること、更にミトコンドリアDNAあたりのmRNA量が増加していることを明らかにした。また、予備実験としてAHG2, AGS1それぞれと相互作用するタンパク質の同定を試みた。それぞれのGFP結合タンパク質を発現する形質転換体からミトコンドリアを抽出し、供沈殿するタンパク質を質量分析装置を用いて、解析した。この懐石には理化学研究所の支援研究を利用させていただいた。その結果、それぞれ、ミトコンドリアで機能するRNA制御因子との相互作用が認められた。これらのデータを出すとともに、当該年度は論文の執筆を行った。現在、投稿した論文はrevise中で、まもなく投稿する予定である。24年度が最終年度であるため、記入しない。シロイヌナズナのミトコンドリアのmRNA安定制御に関わると考えられるpolyA特異的RNA分解酵素AHG2/PARNとpolyA付加酵素AGS1の機能解明を進めている。当該年度は、主に以下の2点について成果を得た。1)これら因子のミトコンドリア局在これまで、プロトプラストを用いた一過的発現系でのタンパク質の細胞内局在を調査してきたが、これら因子のミトコンドリア局在を明確に示す実験結果は、なかなか得られなかった。そこで、これらの遺伝子を含むゲノミッククローンを用いてGFP融合遺伝子を作成し、シロイヌナズナ形質転換体を作出した。その結果、AHG2,AGS1双方とも、根の伸長領域に於いて強いGFP蛍光が観測され、それらの多くはミトコンドリアに局在することが確認された。また、ミトコンドリア移行シグナルを含むと思われるN末を欠失したこれら因子では、ミトコンドリアmRNAのpolyA付加への影響が認められなくなり、機能的にもミトコンドリア局在が強く示唆された。2)これら因子の機能解析これらの因子活性を明らかにするために、もともとミトコンドリアmRNAのpolyA付加が確認されていない出芽酵母でこれら因子を発現させ、ミトコンドリアmRNAのpolyA状況を調査した。まず、これらの因子双方とも出芽酵母内ではミトコンドリアに局在することを、GFP結合タンパク質を用いて確認した。AGS1を出芽酵母で発現させるとCOX3mRNAにpolyAが付加されることが認められた。これに対し、N末欠失または変異型AGS1では、その活性は認められなかった。このことからAGS1は単独でミトコンドリア内でmRNAにpolyAを付加する活性があることが実証された。一方AHG2のpolyA除去活性はまだ認められていないが、確実にミトコンドリア局在を誘導させ、実験を試みる予定です。

24年度が最終年度であるため、記入しない。ミトコンドリア局在に予想以上に時間がかかったが、この問題は研究成果の本質に関わる問題であり、明確な結果が必要であるので、やむを得ないと考える。その一方で、出芽酵母での機能再構築実験はAGS1のみではあるが、予想以上に明確な結果が得られ、実験系の早期確立が望めるので、全体の研究の進展具合はほぼ予定通りと考える。今後、ミトコンドリア局在について生化学的解析(抗体を用いた解析)、変異株のミトコンドリアの生化学的解析、AHG2の出芽酵母での機能発現、出芽酵母を用いてのAGS1,AHG2のバランス制御解析を行う。これら因子の抗体は既に作成済みであり、ミトコンドリア精製実験方法も確立できているので、これらの実験の遂行には大きな問題はなく、次年度中には成果を論文として公表できると考える。
加熱併用型超音波マイクロ・インクリメンタル・フォーミングによる難加工材の微細造形

難加工材であるステンレス箔上に種々の微細なピラミッドをマイクロ・インクリメンタル・フォーミングにより造成し,成形限界を求めた.超音波スピンドルを使用し,動力計により加工力を測定した結果,箔に加工力を効率よく伝え,成形限界の大きな微細加工を実現するためにはスプリングバックを効果的に抑制する方法の開発が極めて重要であることが分かった.また成形限界を与える条件が,ステンレス箔とアルミ箔では大きく異なることを明らかにした.難加工材であるステンレス箔上に種々の微細なピラミッドをマイクロ・インクリメンタル・フォーミングにより造成し,成形限界を求めた.超音波スピンドルを使用し,動力計により加工力を測定した結果,箔に加工力を効率よく伝え,成形限界の大きな微細加工を実現するためにはスプリングバックを効果的に抑制する方法の開発が極めて重要であることが分かった.また成形限界を与える条件が,ステンレス箔とアルミ箔では大きく異なることを明らかにした.マイクロスケールの素子や要素は,製品や部品のキーエレメントとして,重要な機能を担うようになってきた.近年では,それらに対する要求が多様化し,フレキシブルでかつ迅速に,しかも必要量だけ製造するための種々の方法が模索・検討されている.そこで本研究では,金型もバッキングプレートも使用しないフレキシブルなマイクロ塑性加工技術(マイクロ・インクリメンタル・フォーミング)を用い,エネルギー関連材料として,また生体適合材料として多用されているステンレス鋼の立体的な膜状微細素子の効率的な加工技術について研究した.またマイクロ塑性加工におけるステンレス箔の特異な破壊機構や成形限界を実験的に検討した.ステンレス鋼は,成形性の悪い難加工材であるので,超音波スピンドルを使用し工具・工作物間の潤滑状態を改善した.しかし厚さ8ミクロンのステンレス箔に対し良好な結果が得られる工具回転速度は毎分2000回転であり,アルミ箔の最適速度に比べると非常に遅いことが分かった.ステンレス箔ではスプリングバックが生じやすいので,潤滑がよすぎると,箔の塑性変形に必要な応力を与えることができず,箔の表面だけを擦って加工効果させるため,却って塑性変形の効率が下がることが分かった.よってステンレス箔のマイクロ塑性加工では,適度な加工力を与える加工条件,加熱条件を選択することが肝要であることが明らかとなった.また成形中の加工力の測定結果から,加工力はスプリングバックの影響を受けやすく,軸方向送りを多少増加させても加工力は大きく変化しないことが明らかとなった.このことから,加工力を適切に制御するためにはスプリングバックを効果的に抑制する方法の開発が極めて重要であることが分かった.その他,レーザ顕微鏡を用いて微小ピラミッドの形状精度を検討した.また成形限界を与える条件が,ステンレス箔とアルミ箔では大きく異なることを明らかにした.