hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
複雑な景気循環現象が発生するメカニズムの数理的解明とその応用

概ね申請書の通りに研究を進めるとともに,前年度で得られた研究成果の学術論文誌での発表に向けて準備を進める.また,「現在までの達成度」の項に記載した矢野・古川両先生との新しい共同研究のモデルに対しては一層の理論的な分析,さらに数量的な分析を行うことで,理論・実証の両面からR&Dモデルのビジネスサイクルを検討する.申請書(3-4頁,平成25年度研究計画)に記載した非最小位相系(時間遅れ)の役割に関する研究について文献調査を行った結果,新古典派成長モデルに時間遅れを導入した分析がSzidarovskiとMatsumotoによって2010年ごろから行われていることが分かった.時間遅れの程度をコントロールすることでビジネスサイクルの存在・不在が変化する構造が示されており重要な研究である.本研究課題は最適モデルの分析が目的であり,最適行動の帰結として時間遅れが起こる構造を見つけることを目的としているが,彼らの結果を参考にすることで有益なアイデア,分析手法へのヒントが得られるものと考えている.特にR&Dのプロセスに組み込まれている審査期間,保護期間という時間構造がこのような時間遅れを生じさせる可能性を検討し,矢野・古川両先生とのモデル分析との関連についても分析を進めていく.25年度が最終年度であるため、記入しない。
金属カルベン及びカルバインを基盤とした新規有機合成反応の開発

面不斉アレーンクロム錯体とFischer型カルベン錯体を併せ持つ光学活性二核α,β-不飽和Fischerカルベン錯体の合成を行い,その両方の金属錯体の特性を複合的に活用した立体選択的な有機合成反応の開発を行ってきた。我々は,新たに合成した光学活性ホモ二核カルベン錯体に対して,アリルアルコールとNaHを作用させ,空気酸化を行うと1,3-メタルシフトを伴うアリル転移が起こり,97%eeでα-アリルエステルを合成できることを見出した。一方,光学活性ヘテロ二核カルベン錯体に対して,同様の反応を行うと,今度はアンチアルドール型生成物であるa^-アリルーβ-ヒドロキシエステルが92/8drで得られてくることが分かった。一方,金属配位子を持たない従来のα,β-不飽和Fischerカルペン錯体に対して,同反応を適用すると1,2-メタルシフトが進行して,β-アリルエステルが生成することかち,二核カルペン錯体に由来する独自の反応性であることが分かった。これまで面不斉アレーンクロム錯体とFischer型カルベン錯体を併せ持つ光学活性二核α,β-不飽和Fischerカルベン錯体の合成を行い、その両方の金属錯体の特性を複合的に活用した立体選択的な有機合成反応の開発を行ってきた。一方、近年、このような6族の金属カルベン錯体と後周期遷移金属との間でカルベン交換が進行することが報告され注目を集めている。例えば、6族金属カルベン錯体に対して、パラジウムを作用させると、系中でパラジウムカルベン種が生成し、新たな分子変換反応が可能となることが報告された。この報告を契機に、その後、Cu,Ni,Rhでカルベン交換に成功した例が相次いで報告され、それぞれの金属の性質に基づくユニークな有機合成反応が報告されています。今回、我々は面不斉二核α,β-不飽和Fischerカルベン錯体と後周期遷移金属とを組み合わせることで、初めて可能となる立体選択的有機合成反応に展開することを目的として検討を行った。そこで、面不斉二核カルベン錯体とアルキンとの反応を検討した。一般に、α,β-不飽和カルベン錯体とアルキンとの反応を行うと、Dotz反応が進行し、この場合、ビアリールビスクロム錯体が得られることが期待される。これに対して、この反応系に量論量のNi(cod)_2を加えて反応を行ったところ、興味深いことにビアリールクロム錯体とは異なる単一の生成物を得た。X線により構造確認を行い、この錯体は、新たに生成したヘプタトリエンクロム錯体とからなる二核錯体であり、さらに、ベンジル位に中心不斉を、ヘプタトリエン環には面不斉を有する錯体であった。我々は面不斉を有する二核カルベン錯体を用いジアステレオ選択的に生成物を得ており、光学活性体として合成することにも成功した。また,アレーンクロム錯体とヘプタトリエンクロム錯体のそれぞれの面不斉を活用した立体選択的合成反応を行うことにも成功した。
分子動力学を基盤とした剛直キラルドーパントが有するらせん誘起力の理論的予測

本研究では、ネマチック液晶に剛直骨格のキラルドーパントを混合した系に対する分子動力学シミュレーションによって、キラルドーパントの液晶に対するらせん誘起力を理論的に求める手法の確立を目的としている。初年度、2年目では、複数のネマチック液晶とキラルドーパントの組み合わせについて、分子動力学シミュレーションを用いた手法によって、キラルドーパントのホスト液晶に対するらせん誘起力を十分な精度で求めることができた。研究計画最終年度では、中心骨格がわずかに異なるキラルドーパントについても本手法の有効性を検証した。らせん誘起力の大きさ、符号共に、実験と良い一致を示した。また、光学実験で観察されていたゲスト分子であるキラルドーパント、あるいはホスト液晶に依存的ならせん反転現象の機構解明を目指して、分子動力学シミュレーションによってドーパント分子近傍の液晶分子の配向構造解析を行った。その結果、ドーパント分子と液晶分子との立体的相互作用と静電的相互作用の競合によって、形成されるらせんの巻き方向が決定されているということを明らかにした。これにより、目的のらせん誘起力を有する剛直骨格のキラルドーパント分子を設計する上で重要な一つの指針が得られた。さらに、ある一つの置換基を変えることで液晶との相溶性が劇的に向上したドーパント分子についてもシミュレーションを用いた解析を行った。そして、分子形状の類似性が相溶性に大きく寄与していることを報告している。本研究では、ネマチック液晶に剛直骨格のキラルドーパントを混合した系に対する分子動力学シミュレーションによって、キラルドーパントのらせん誘起力を理論的に求める手法の確立を目的としている。初年度では、ネマチック液晶/キラルドーパント混合系の分子動力学シミュレーションのモデル構築に取り組んだ。まず、ホスト液晶のみの系に対するシミュレーションでは、系全体の配向秩序パラメータは実験値と非常に良い一致を示す結果が得られた。また、キラルドーパントとして選択したRu錯体分子については、シミュレーションによって結晶構造を再現することで、最適な力場パラメータを求めた。これらの結果をもとに、ネマチック液晶にRu錯体分子の光学異性体を同数混合したラセミな系に対し、分子動力学シミュレーションを行った。配位子の置換基が異なる数種類のRu錯体分子について十分な計算時間のシミュレーションを実行済みであり、配向秩序パラメータをはじめとする物性値は、実験系を十分に反映している結果となった。更に、そのうちの幾つかの系においては、Surface Chiralityモデルの秩序テンソルに対応するパラメータを解析している。求めた秩序テンソルと、分子形状より計算可能なねじれテンソルとを用いることで、キラルドーパント分子が有するらせん誘起力を算出した。そして、求めたらせん誘起力の理論値は実験値と良く一致していることが確かめられた。既にホスト液晶が異なる系についても、構築したモデルの妥当性の検証を始めているが、次年度ではホスト液晶とキラルドーパントの組み合わせが異なる複数の系に対しても行う予定である。更には、異なる分子構造のRu錯体キラルドーパントに対してもらせん誘起力を理論的に求め、実験値と比較することで、より汎用性の高い手法となるように適宜モデルの修正に取り組んでいく。当初予定していた分子動力学シミュレーションのモデル構築を早い段階で完了し、複数の系について計算を実行済みである。また、次年度で予定していたらせん誘起力の理論値の算出にも取り組んでおり、それらについて実験値との整合性も確認できている。ゆえに当該研究は、計画以上に進展していると言える。初年度で構築したシミュレーションモデルを用いて、複数のネマチック液晶とキラルドーパントの組み合わせに対して分子動力学シミュレーションを実行した。ネマチック液晶は誘電率異方性の符号が異なる代表的な棒状液晶を、キラルドーパントにはRu錯体分子を選択した。シミュレーションで得られた平衡構造から、キラルドーパント周囲におけるホスト液晶分子の局所的な配向構造を定量的に解析した。これにより、Surface Chiralityモデルにおける秩序テンソルが得られ、キラルドーパント分子が種々のホスト液晶に対するらせん誘起力を求めた。求めた値が実験値と良く一致していたことから、本手法は中心骨格が剛直なキラル錯体分子のらせん誘起力を予測する上で汎用性のある有用な方法であることを確認した。また、本モデルではシミュレーションセル中の分子数を2,000程度としているが、その妥当性についてもホスト液晶のネマチックー等方相転移温度の再現という観点から検討を行った。そして、2,000分子程度で十分な精度で実現可能であることが分かった。研究計画最終年度である次年度は、中心骨格がわずかに異なるキラルドーパント分子についても分子動力学シミュレーションを行い、らせん誘起力を求めることで、本手法が適用可能かどうかを検証する。さらに、キラルドーパントのもう一つの重要な物性であるホスト液晶との相溶性についても新たな知見が得られないかを検討する予定である。次年度に予定していたネマチック液晶とキラルドーパント分子の異なる組み合わせの系について分子動力学シミュレーションを実行し、提案した手法の汎用性、及び現実系との整合性も確認している。また、当初は研究計画には盛り込まれていなかったホスト液晶との相溶性についても取り組み始めており、当該研究は計画以上に進展していると言える。

本研究では、ネマチック液晶に剛直骨格のキラルドーパントを混合した系に対する分子動力学シミュレーションによって、キラルドーパントの液晶に対するらせん誘起力を理論的に求める手法の確立を目的としている。初年度、2年目では、複数のネマチック液晶とキラルドーパントの組み合わせについて、分子動力学シミュレーションを用いた手法によって、キラルドーパントのホスト液晶に対するらせん誘起力を十分な精度で求めることができた。研究計画最終年度では、中心骨格がわずかに異なるキラルドーパントについても本手法の有効性を検証した。らせん誘起力の大きさ、符号共に、実験と良い一致を示した。また、光学実験で観察されていたゲスト分子であるキラルドーパント、あるいはホスト液晶に依存的ならせん反転現象の機構解明を目指して、分子動力学シミュレーションによってドーパント分子近傍の液晶分子の配向構造解析を行った。その結果、ドーパント分子と液晶分子との立体的相互作用と静電的相互作用の競合によって、形成されるらせんの巻き方向が決定されているということを明らかにした。これにより、目的のらせん誘起力を有する剛直骨格のキラルドーパント分子を設計する上で重要な一つの指針が得られた。さらに、ある一つの置換基を変えることで液晶との相溶性が劇的に向上したドーパント分子についてもシミュレーションを用いた解析を行った。そして、分子形状の類似性が相溶性に大きく寄与していることを報告している。今後は、構築したシミュレーションモデルを用いて、ホスト液晶とキラルドーパントの種類を系統的に変えた系に対しても分子動力学計算を行い、らせん誘起力を求める。そして、剛直骨格を有する有機分子についても同様の手法でらせん誘起力が十分な精度で算出可能かについても検証する予定である。今後は、中心骨格が異なる錯体分子や剛直な骨格を有する有機分子についてもシミュレーションを実行し、それらのキラルドーパント分子のらせん誘起力も精度良く求められるかを検証する。また、複数のネマチック液晶との相溶性についても理解を深め、理論的な予測が可能かについて検討を進める。支出を予定していた旅費が国内開催ということもあり、使用額が当初よりも少なくなった。支出を予定していた国際学会参加に係る海外旅費が予定よりも少なくなったが、当初計画以上に進展しているため、最終年度では複数の学術雑誌に論文を投稿予定であり、繰越分はその投稿費や英文校正費などに使用予定である。当初計画以上に進展しているため、次年度においてより多くのシミュレーションを実行する予定であり、計算機サーバ関連の物品費として使用予定である。
長期温阻血死体腎の保存およびその生着能の保持に関する研究

本研究の主要な目的は以下の3点であった。1)移植専門外の医師が腎提供者の心停止後、摘出チームが到着するまでの間、どこの病院にもある器具・薬剤等を用いた簡単に施行可能な腎保存の方法を見いだし、その方法を確立すること。2)阻血による障害のため移植後機能回復が不可能の腎を、移植前識別できるマーカーを見いだすこと。3)阻血障害を有する移植腎に対する腎毒性を有するサイクロスポリンやFK-506の至適投与量を決定することである。動物実験、臨床経験の結果から、次の事項が導き出された。1)心停止後、腹部を氷、および冷却水により単純に冷却した場合は、そのまま室温に放置した場合と比べて、腎保存の効果が明らかに得られた。また心停止後用手的に心マッサージを行うことにより腎保存の効果を高めることができた。2)心停止直後、ヘパリン、ステロイド剤の大量投与は効果的であった。3)心停止後、摘出チームにより冷却液による体内灌流が行われ開腹されるが、次に事項が摘出腎のviabiltyを評価する上で、最も実際的、現実的である。すなわち、開腹時腸管の脱血が十分であり(腸管の白色となっている)、かつ腸管が十分冷却されていること(手術用手袋を通して腸管が冷たく触れる)、また摘出した腎の灌流状態が良好であること(1m水柱圧で流してスムーズに灌流できる)である。さらに、摘出時の腎の迅速病理による検索がviabityの評価の裏付けになった。4)阻血障害の高度な移植腎では、免疫抑制剤であるサイクロスポリンやFK-506の投与量は、利尿出現時まで、通常の期待されるtrough levelの半値になるようにし、その他の免疫抑制剤(アザチオプリン、ミゾリビン、ALG)の併用投与を行うのが現状では最善である。以上の結果より、本研究の課題はある程度解決されたが、死体腎の単純・容易な保存法を目指し、今後さらに研究を深化させる必要がある。本研究の目的を以下の3点である。1)移植専門外の医師が腎提供者の心停止後摘出チームが到着するまでの間、どこの病院にもある器具・薬剤等を用いた簡単に施行可能な腎保存の方法を見いだし、その方法を確立すること。当該年度は、動物実験等により、以下のことが判明しつつある。1)心停止後、腹部を氷、および冷却水により単純に冷却した場合は、そのまま室温に放置した場合と比べて、腎保存の効果がみられる傾向にある。2)同様に、心停止直後、ヘパリンの血中投与を行った方が、腎保存の効果が得られるようである。3)心停止後腎摘出まで、心マッサージを行うことは、腎保存の上でかなり効果的である。4)摘出直前の血中LDHが摘出腎のviabiltyを評価する上で、最も実際的、現実的のようである。前述の結果から本研究の次の方向性が示された。すなわち、心停止後、全身へパリン化をおこない、腹部全体を冷却し、心マッサージを摘出まで行うことは、腎保存の上で有効である可能性がある。また、腎摘出時の血中LDHを測定することによりviabiltyを評価することが可能であることが示された。

今後上記の事項について、さらに具体的な方法・指標等の確立が必要である。本研究の主要な目的は以下の3点である。1)移植専門外の医師が腎提供者の心停止後、摘出チームが到着するまでの間、どこの病院にもある器具・薬剤等を用いた簡単に施行可能な腎保存の方法を見いだし、その方法を確立すること。2)阻血による障害のため移植後機能回復が不可能の腎を、移植前識別できるマーカーを見いだすこと。3)阻血障害を有する移植腎に対する腎毒性を有するサイクロスポリンやFK-506の至適投与量を決定することである。当該年度は、動物実験、臨床経験の結果等により、以下のことが判明されしつつある。1)心停止後、腹部を氷、および冷却水により単純に冷却した場合は、そのまま室温に放置した場合と比べて、腎保存の効果がみられる傾向にある。また心停止後心マッサージを行うことにより腎保存の効果が得られる。2)心停止直後、ヘパリン、ステロイド剤の大量投与は効果的である。3)心停止後、摘出チームにより冷却液による体内灌流が行われ開腹されるが、次の条件が摘出腎のviabiltyを評価する上で、最も実際的、現実的である。すなわち、開腹時腸管の脱血が十分であり(腸管が白色となっている)、かつ腸管が十分冷却されていること(手術用手袋を通して腸管が冷たく触れる)、また摘出した腎の灌流状態が良好であること(1m水柱圧で流してスムーズに灌流できるである。さらに、摘出時の腎の迅速病理による検索がviabiltyの評価の裏付けになる。4)阻血障害の高度な移植腎では、免疫抑制剤であるサイクロスポンジやFK-506の投与量は、利尿出現時まで、通常の期待されるtrough levelの半値になるようにし、その他の免疫抑制剤(アザチオプリン、ミゾリビン、ALG)の併用投与を行う。
ドナー・アクセプター蛍光色素の自己会合を鍵とした生体蛍光検出

本研究では、ドナー・アクセプター色素を基盤とした生体蛍光検出について検討した。水溶性ベンゾチアジアゾール・トリフェニルアミン分子にガラクトース・糖質部を導入し、水溶性向上により蛍光度を低下させた後に、ガラクトシダーゼ・糖質分解酵素を添加したところ、蛍光強度の向上が認められた。酵素の触媒作用により色素母体より糖質部位が切断されることで、疎水性向上に基づきドナー・アクセプター色素が発光性の会合体に変化した結果である。本研究成果より、蛍光OFF-ON変化により生体蛍光検出の可能性を見出すことができた。1年目は、水溶性官能基を導入した種々のドナー・アクセプター分子を合成し、100%水系で会合発光システムを構築した。当研究室で開発しているトリフェニアミン・ベンゾチアジアゾールを基盤としたドナー・アクセプター分子に対し、水溶性付与を目的としてヘキサエチレングリコール鎖の導入を行った。1本のヘキサエチレングリコール鎖を導入した分子では、極性溶媒への溶解度が向上しメタノールへの可溶を示したが、水には不溶であった。100%水中への溶解は、2本のヘキサエチレングリコール鎖の導入により達成できた。本2本鎖化合物は100%水中で赤色発光を発現し、メタノール中での消光状態と比べて発光が著しく向上している。メタノール中で溶媒和により消光していた分子が、会合体を形成し発光性に変化した結果である。本会合体形成は、吸収帯の長波長シフトと発光帯の短波長シフトから支持され、更に電子顕微鏡観察において3-5 nmサイズの球状会合体の形成が確認できた。蛍光寿命測定に基づく速度論的解析の結果より、発光発現のメカニズムが会合体形成に起因した溶媒和消光過程の抑制であることが判明している。以上の結果より、ドナー・アクセプター分子への2本の水溶性ヘキサエチレングリコール鎖の導入により、100%水系で会合発光システムの構築に成功した。更に、1本のヘキサエチレングリコール鎖のみの導入においても、鎖末端にアンモニウムイオン官能基を導入することで、水溶性及び赤色発光の発現が確認されている。2年目は、引き続き会合発光システムを構築すると共に、1年目で合成した水溶性蛍光色素の生体蛍光検出の可能性を検討した。生体検出対象としては、広く研究され情報収集が容易な糖質分解酵素・ガラクトシダーゼを選択した。まず、1年目に合成したトリフェニルアミン・ベンゾチアジアゾールを基盤とした水溶性蛍光色素にガラクトピラノース・糖質部を導入し、水溶性向上によるモノマー消光発現を検討した。糖質部を導入した色素は溶媒の極性増大に伴い発光帯の長波長シフトと蛍光量子収率の低下を示し、特にメタノール中では著しい消光が発現した。糖質部導入においても、母体色素部位のドナー・アクセプター特性が維持された結果である。水中では、糖質部の導入前と比較しての蛍光量子収率の大きな低下が認められたが、完全な消光は発現しなかった。本結果は、糖質部導入により完全なモノマー解離は進行していないが、会合体の安定性は大きく低下したことを示唆している。電子顕微鏡観察及び光散乱測定において、明確な会合体の形成が確認できなかった結果からも、会合体の安定性低下が支持されている。以上の結果より、完全なモノマー消光は達成できなかったが、糖質部導入により高発光状態から弱発光状態に発光強度を大きく変化できることが判明した。本成果は、導入した糖質部の切断に基づき発光特性を低強度から高強度に制御することで、糖質分解酵素の蛍光検出が可能となる知見を提供している。予備実験より、糖質分解酵素の添加後に糖質部が切断されことで、発光強度が向上する結果が得られている。当初の予定通り、糖質部を導入した水溶性ドナー・アクセプター分子を合成し、糖質部導入前後での発光強度の制御に成功している。その結果、糖質部の導入と切断に起因して、モノマー消光OFF状態から会合発光ON状態に転移できる発光システムの基盤が構築されつつある。今後は、本発光OFF-ONシステムを改良することで、糖質分解酵素活性を会合体の形成・解離に基づく発光変化で検出できるシステムの構築に繋がる。最終年度は引き続き、モノマー状態で消光し、会合状態で発光する色素を見出すことで発光OFF-ONシステムの基盤を構築すると同時に、本システムの生体蛍光検出の可能性を調査した。まず、昨年度までの知見を基に糖質部を導入した水溶性トリフェニルアミン・ベンゾチアジアゾール蛍光色素の分子設計を再度検討し、水中で顕著な消光を示すシステムの構築を目指した。その結果、疎水性を低下させた母体色素にガラクトース・糖質部を導入した系が、水中で微弱な発光を示すことが判明した。昨年度までの系と比較して、蛍光強度を大きく低下できた。電子顕微鏡観察及び光散乱測定において明確な会合体の形成が確認できなかった結果からも、疎水性低下より会合体の安定性が低下し、蛍光強度の低下につながったことが支持された。次に、ガラクトース分解酵素の蛍光検出を検討した。これまでに合成したガラクトース部位を導入した色素の緩衝溶液にガラクトース分解酵素を添加したところ、蛍光スペクトルの時間変化が進行すると同時に、蛍光強度の向上が認められた。飽和した発光スペクトルがガラクトース部を有しない色素と一致した結果、更に発光帯が短波長側にシフトした知見より、ガラクトース部が切断されたことが示唆された。

その結果、親水性のガラクトース部の除去により、微弱な発光状態から発光性の会合状態に変化できた。特に、今年度新規に合成した色素による蛍光検出では、蛍光量子収率が約3倍に向上することに成功した。母体色素の疎水性低下が、大きな発光変化に繋がった結果である。以上の研究成果より、蛍光OFF-ON変化によるガラクトース分解酵素の蛍光検出の可能性を見出すことができた。本研究では、ドナー・アクセプター色素を基盤とした生体蛍光検出について検討した。水溶性ベンゾチアジアゾール・トリフェニルアミン分子にガラクトース・糖質部を導入し、水溶性向上により蛍光度を低下させた後に、ガラクトシダーゼ・糖質分解酵素を添加したところ、蛍光強度の向上が認められた。酵素の触媒作用により色素母体より糖質部位が切断されることで、疎水性向上に基づきドナー・アクセプター色素が発光性の会合体に変化した結果である。本研究成果より、蛍光OFF-ON変化により生体蛍光検出の可能性を見出すことができた。当初の予定通り、水溶性ドナー・アクセプター分子を基盤とした会合発光システムの構築に成功している。水溶性官能基の種類や本数に基づく、水溶性発現及び会合発光発現の一般性が確立されつつある。今後、本会合発光システムを改良することで、糖質分解酵素活性を会合体の形成・解離に基づく発光変化で検出できるシステムの構築に繋がる。最終年度は、引き続き発光OFF-ONシステムの構築、及び本システムの生体蛍光検出の可能性を探求する。まず、昨年度までの知見を基に糖質部を導入した水溶性蛍光色素の分子設計を再度検討し、水溶性向上によりモノマー消光を示すシステムの構築を目指す。モノマー消光発現では、糖質部及び水溶性官能基の導入位置と数を制御することが重要である。それらのスクリーニングに着手し、ドナー・アクセプター分子がモノマーとして単分散する系を構築し、その結果、消光状態を発現させる。最後に、糖質部を導入した蛍光色素の糖質分解酵素活性を評価する。反応部位として糖質部位を導入したドナー・アクセプター色素は、糖質分解酵素との反応後は反応部位が切断されるため、疎水性向上により会合体形成が可能となり、強い蛍光を発する。すなわち、糖質分解酵素添加後に会合発光が確認できれば、切断が進行したと判断できる。本評価は、昨年度までに確立した会合特性・発光特性の評価に従い、効率的に遂行する。本知見を基に、様々な糖質部位を導入したドナー・アクセプター系の糖質分解酵素活性を検討し、消光から発光に変わる「OFF-ON型の蛍光検出」の可能性を探求する。化学2年目以降は、引き続き会合発光システムを構築すると共に、1年目で合成した水溶性蛍光色素の生体蛍光検出の可能性を探求する。生体検出対象としては、広く研究され情報収集が容易な糖質分解酵素を選択する。まず、1年目に合成した水溶性蛍光色素に糖質部を導入し、水溶性向上によりモノマー消光を評価する。モノマー消光発現では、糖質部の導入位置を制御することが重要である。それらのスクリーニングに着手し、ドナー・アクセプター分子がモノマーとして単分散する系を構築し、その結果、溶媒和消光状態を発現させる。本モノマー消光の評価は、1年目で確立した会合特性・発光特性の評価に従うことで、効率的に遂行する。
フラーレンポリマーを用いた重合制御型分子トランジスタの基礎研究

本研究の目的はC60ポリマーの可逆的な重合反応制御により電気伝導性を著しく変化させる新しいタイプのトランジスタの動作原理を実験的に明らかにし、得られた基礎的知見をもとにしてプロトタイプのトランジスタ・デバイスを作製・評価することにある。2年間にわたって行われた実験の主な成果は次のとおりである。1. C60溶液から銀基板上に、電気化学的プロセスにより、ポリマー化した金属C60化合物膜を析出することに成功した。2.アルカンチオール基を持つC60誘導体を合成した。ベンゼン溶液中に溶解した、このC60誘導体を金基板上に吸着させるプロセスを開発し、吸着反応の自己停止作用を応用して、自己組織単分子膜(SAM)の作製に成功した。3.分子線蒸着法によるC60薄膜成長プロセスを詳しく検討し、比較的低温のVolmer-WeberタイプからFrank-van der Merweタイプへの移行過程を明らかにした。結果として、最適基板温度250°Cにおいて、約10nm厚の表面平滑な超薄膜作製に成功した。4.得られたC60の析出膜、SAMならびに超薄膜の微細構造観察を行い、成長機構を考察した。5.得られた一連のC60超薄膜の電気伝道特性ならびにそのポリマー化による変化を測定し、電気伝導の温度依存性に異常を見出した。C60ポリマーが注目されており、紫外線、圧力あるいは金属イオン等によって可逆的な重合反応制御が可能であることが明らかにされつつある。申請者は電解合成法によるAlC60(A:金属)ポリマー膜作製プロセスを独自に開発し、膜の基礎物性について報告している。その中で、C60ポリマーの重合度により電気伝導性が著しく変化する可能性を見出し、これを応用する新しいタイプの重合制御型分子トランジスタを提案している。本研究では最終的に分子トランジスタの試作を目指すが、本年度はその要素技術を確立するため、C60ポリマー膜の作製プロセスを含め、電子材料・物性的評価研究を中心に行った。本年度の代表的成果はポリマー化に関する新しい知見が得られたことである。溶液から析出した、比較的厚い膜に関して、従来報告されていた1価のアルカリ金属だけでなく、2価のアルカリ土類金属あるいは3価の金属によっても、C60ポリマー化反応が進行する可能性が見い出された。しかも、その種の反応は1次元的というより、むしろ2次元的拡がりを持つことも明らかにされた。したがって、電気伝導性を変化させるための重合制御を行う場合、材料的制限が緩やかにできることが期待される。現在、この結果を発展させるため、極めて薄い単分子的C60薄膜の合成に取り組んでいる。そのため、分子線エピタキシャル法ならびに自己組織膜形成等のアプローチを検討中である。
眼球関連情報の非接触計測に基づく覚醒水準のリアルタイム推定に関する研究

「覚醒水準のリアルタイム推定」と「眼球関連情報の非接触測定」の2つの課題に対して下記の実績を得た。<覚醒水準のリアルタイム推定について>・サッカード指標の有効性を検証する心理物理実験を実施した。『単位時間あたりの視覚情報取得量』という独自パラメータを導入し、視覚機能とサッカード特性との関係を調べ、これまでにない知見を得た。これらの研究成果を国内学会で2回、海外の学会で1回発表した。現在は、論文投稿の準備中である。・備品購入したDSP (TMS320C6701)を用いて、眼球運動モニタの出力から覚醒水準指標をリアルタイムで算出する系を新たに構築した。過去使用していたDSPにおいては、入力部のフィルタ特性の関係から入力波形が歪んでしまい、覚醒水準指標が正確に算出できないという大きな問題を抱えていた。新しい系では、入力の前段でA/D変換し、ディジタル信号をDSPに転送することでこの問題に対処した。・DSPを用いて覚醒水準指標をリアルタイム推定する系に、サッカードと瞬きを弁別する機能を付加した。本研究では覚醒水準の推定指標としてサッカードの速度波形の形状に着目をしているが、眼球運動モニタの出力にはサッカードの他、瞬きが混在している。そこでサッカードと瞬きを自動弁別するアルゴリズムを新たに考案し、DSPに実装し覚醒水準指標の算出精度を向上させた。この成果は平成15年度に国内学会にて発表する。<眼球関連情報の非接触測定について>・2台のカメラを用いてステレオ画像計測を実施際に必要となる、キャリブレーション方法について検討した。本研究では計測範囲をより広く確保するために、カメラを並行に設置せずに2台が少し向き合う位置に設置している。これに対応するため、キャリブレーション時に撮影画像からカメラパラメータを推定し、キャリブレーション結果を補正する手法を考案した。「覚醒水準のリアルタイム推定」と「眼球関連情報の非接触測定」の2つの課題に対して下記の業績を得た。<覚醒水準のリアルタイム推定について>・サッカード指標の有効性を検証する心理物理実験を実施するため、新たに視標呈示系・計測系を構築した。視標呈示系では、眼球運動モニタのキャリブレーション用プログラムおよび視標呈示用プログラムを作成した。計測系においては、A/D変換器の制御用プログラムを作成した。・「単位時間あたりの視覚情報獲得量」というパラメータを新たに導入し、心理物理実験を通して視覚機能とサッカード特性との関係を調べ、これまでにない知見を得た。個人差の少ない覚醒水準の評価指標を提案するための重要な結果であることから、来年度に国際会議で発表したのち、論文を投稿する予定である。・DSK(DSP Starter Kit)の周波数特性を計測し、入力部のローパスフィルタのカットオフ周波数が高いため、眼球運動モニタの出力を直接DSKに入力できないことを確認した。また、これに対処するため入力部の前段に2段の微分回路を導入した。・眼球運動の加速度信号入力からサッカード指標を算出し、閾値処理で覚醒水準を2段階ステージングするアルゴリズムをDSKに実装し、リアルタイム処理を実現した。・模擬サッカード発生回路を製作し、サッカード特性の変化(覚醒水準の変化を反映する)に応じて、DSKのLED出力が変化することを確認した。<眼球関連情報の非接触測定について>・2台のカメラからステレオ画像を取得し、眼球の回転角度を自動算出する系をPCベースで構築した。・模擬眼を使用した評価実験を実施し、回転角度をある程度反映した量を計測できることを確認した。・30Hzの入力画像に対しては、ステレオ画像の取得と瞳孔重心の算出を実時間で行えることを確認した。・構築した系で、60Hzのフィールド毎に画像を取得できることを確認した。
治療し得る虚血性細胞障害について

砂ネズミに一過性前脳虚血を加えると海馬に神経細胞の選択的脱落が発性する.このモデルを用いて,虚血により加わった神経細胞障害の可逆性に関する実験を行なった.動物に5分間の虚血を負荷し,その直後にペントバルビタール,ジアゼパム,ニゾフェノンを投与した.いずれの薬物も,海馬のCAI領域錐体細胞の数で判定すると有意な保護作用を示した.この中で,ペントバルビタールを用い,投与の時期を虚血直後から, 15分,30分,1時間後とずらしていった場合の効果を調べた.その結果,虚血直後から投与時間をずらすと,薬剤の有意な効果がみとめられなくなることが判明した.海馬の錐体細胞がなぜ特別に虚血に対して脆弱なのかは不明な点が多い.グルタミン酸などの興奮性神経伝達物質の作用が強く疑われてきたが,グルタミン酸やアスパラギン酸などの毒作用では説明しがたいことが多い.そこで,海馬と同様な虚血に対する選択的脆弱性を示す部位として小脳をとりあげた.しかし小脳に虚血を加えるためには必然的に脳幹にも虚血が加わるため,これまで小脳虚血の実験的研究の報告はほとんど皆無に近い.われわれは,人工呼吸下にラットの頭蓋内圧を急速に上昇させるモデルを用いて小脳の病変を観察した.その結果, 10分間の全脳虚血により小脳プルキンエ細胞の破壊が認められた.しかし,海馬の選択的脆弱性の場合と全く異なり,細胞は虚血負荷後に急速に崩壊像を呈し,異なるメカニズムの存在を示した.この点については今後の研究が必要である.次に,臨床的にしばしば遭遇する局所脳虚血の実験を行なった.このモデルでは,全(又は前)脳虚血と全く異なり虚血の加わった部位に急速に脳梗塞が進展した.その後の長期的観察では虚血と直接関係の無い遠隔部(視床・黒質)に広汎な変性が発生した.局所脳虚血による脳傷害とその可逆性を実験するため,現在一過性局所脳虚血をラットに負荷する実験を行いつつある.砂ネズミに一過性前脳虚血を加えると海馬に神経細胞の選択的脱落が発性する.このモデルを用いて,虚血により加わった神経細胞障害の可逆性に関する実験を行なった.動物に5分間の虚血を負荷し,その直後にペントバルビタール,ジアゼパム,ニゾフェノンを投与した.いずれの薬物も,海馬のCAI領域錐体細胞の数で判定すると有意な保護作用を示した.この中で,ペントバルビタールを用い,投与の時期を虚血直後から, 15分,30分,1時間後とずらしていった場合の効果を調べた.その結果,虚血直後から投与時間をずらすと,薬剤の有意な効果がみとめられなくなることが判明した.海馬の錐体細胞がなぜ特別に虚血に対して脆弱なのかは不明な点が多い.グルタミン酸などの興奮性神経伝達物質の作用が強く疑われてきたが,グルタミン酸やアスパラギン酸などの毒作用では説明しがたいことが多い.そこで,海馬と同様な虚血に対する選択的脆弱性を示す部位として小脳をとりあげた.しかし小脳に虚血を加えるためには必然的に脳幹にも虚血が加わるため,これまで小脳虚血の実験的研究の報告はほとんど皆無に近い.われわれは,人工呼吸下にラットの頭蓋内圧を急速に上昇させるモデルを用いて小脳の病変を観察した.その結果, 10分間の全脳虚血により小脳プルキンエ細胞の破壊が認められた.しかし,海馬の選択的脆弱性の場合と全く異なり,細胞は虚血負荷後に急速に崩壊像を呈し,異なるメカニズムの存在を示した.この点については今後の研究が必要である.次に,臨床的にしばしば遭遇する局所脳虚血の実験を行なった.このモデルでは,全(又は前)脳虚血と全く異なり虚血の加わった部位に急速に脳梗塞が進展した.その後の長期的観察では虚血と直接関係の無い遠隔部(視床・黒質)に広汎な変性が発生した.局所脳虚血による脳傷害とその可逆性を実験するため,現在一過性局所脳虚血をラットに負荷する実験を行いつつある.砂ネズミ、ラットに一過性全脳虚血を加えると海馬に神経細胞の脱落が発生する。この現象に着目し、主に砂ネズミを用いて実験を行なった。上記の虚血性海馬病変は可逆性のものである。動物に虚血を負荷し、その直後に薬剤を投与すると海馬の神経細胞の崩壊が著明に防止し得る。有効な薬剤は、ペントバルビタール,ジアゼパム,ニゾフェノンであった。この中で、特にペントバルビタールを用い、投与を遅れさせた場合の薬剤効果を調べた。薬剤を、動物の虚血を解除した直後に投与すると薬効が認められたが、投与を15分以上遅延させると全く効果を失なった。従って、何らかのメカニズムが虚血直後に作用を開始し、急速にニューロンに不可逆的損傷を与えるものと考えられた。現時点では、このような機構の主役を演じるのはグルタミン酸ではないかと考えられている。しかし上記の3つの薬剤がいずれもGABAレセプターと密接に関連していることを考慮すると、GABAの関与している可態性を否定し去ることはできない。そこで、現在半定量的方法ではあるがGABAの免疫染色をこの実験系に用いている所である。

このような治療可能なタイプの神経細胞障害は、海馬以外の部位に存在するのであろうか。たとえばラット中大脳動脈閉塞モデルにおいてはこのようなタイプの神経細胞障害を見出すことは困難で、虚血部位は脳梗塞となってしまう。この点を更に明確にするために、一過性のラット中大脳動脈閉塞モデルを作成し、時間を追って観察を行なっている。海馬の他に同様な虚血に対する選択的脆弱性を示す部位としては小脳皮質がよく知られている。しかし小脳虚血を負荷するためには必然的に脳幹虚血が加わるため、これまでこの点に関する報告は皆無に近い、我々はこの点を明確にするため、人工呼吸下にラットに頭蓋内圧上昇による全脳虚血を負荷し、標本を検討中である。
腫瘍免疫におけるTSP-1によるPD-1, PDL-1への作用機序の解明

本研究はTHBS-1/TSP-1による免疫チェックポイントへの作用と機序を解明し、THBS-1/TSP-1を癌免疫療法への応用するための研究基盤を確立することが目的である。胃癌症例において、PD-1、THBS-1 double positive群では予後不良であった。さらにPD-1・THBS-1発現はTGFβ発現と相関していた。粘膜萎縮とTHBS1発現を検討したところ粘膜萎縮あり、多発癌の症例でTHBS1が高値を示した。CD36、TGFβレセプター2、STAT3はTHBS1高値群で高値を示していた。多発癌ではTHBS1,TGFβR2が有意に高値であり、CD36・STAT3が高い傾向を示した。我々は進行胃癌においてThrombospondin1(TSP-1)の発現が血管新生やTGFβを介し再発予後と相関することや、CD133、Histone deacetylase1との関連することを解明してきた。また、胃癌において免疫チェックポイント分子であるProgrammed cell death protein 1(PD-1)が予後や制御性T細胞のマスター遺伝子であるFoxp3の発現に関与することを解明してきた。これまでTSP-1が血管新生抑制、血小板凝集炎症反応、創傷治癒、腫瘍発育など多彩な生理活性を有することや、T細胞や樹状細胞の抑制やマクロファージの貪食抑制などの腫瘍免疫への関与が報告されているが、TSP-1と免疫チェックポイントとの関連は明らかにされていない。本研究はTSP-1による免疫チェックポイントへの作用と機序、それを介した抗腫瘍効果を解明し、TSP-1を癌免疫療法への応用するための研究基盤を確立することが目的とし、実験を遂行中である。現在までに胃癌、大腸癌におけるPD-1・PD-L1発現の意義を確認し、さらにトリプトファン代謝酵素であるIDOについても検討を行っている。さらに今後はさらにTSP1との関連について検討を進めていく。今後はTSP-1、CD47の免疫チェックポイントへの作用と機序を解明し、TSP-1を癌免疫療法への応用するため基盤となる研究を行う。研究の進め方として、1.[In vitro]CD4+T細胞におけるTSP-1, CD47の免疫チェックポイントに対する作用と機序を解明する。2.[In vivo]生体内におけるCD4+T細胞のTSP-1,CD47の免疫チェックポイントに対する作用と機序を解明する。当初の実験計画書に基づいて実験を遂行中である。IDO発現と予後、Tregとの関連を確認することができた。研究の進め方として、1.[In vitro]CD4+T細胞におけるTSP-1,CD47の免疫チェックポイントに対する作用と機序を解明する。我々は進行胃癌においてThrombospondin 1(TSP-1)の発現が血管新生やTGFβを介し再発予後と相関することや、CD133、Histone deacetylase 1との関連することを解明してきた。また、胃癌において免疫チェックポイント分子であるProgrammed cell death protein 1 (PD-1)が予後や制御性T細胞のマスター遺伝子であるFoxp3の発現に関与することを解明してきた。2. [In vivo]生体内におけるCD4+T細胞のTSP-1, CD47の免疫チェックポイントに対する作用と機序を解明する。

当初の実験計画書に基づいて実験を遂行中である。今後はTSP-1、CD47の免疫チェックポイントへの作用と機序を解明し、TSP-1を癌免疫療法への応用するため基盤となる研究を行う。研究の進め方として、1.[In vitro]CD4+T細胞におけるTSP-1, CD47の免疫チェックポイントに対する作用と機序を解明する。2.[In vivo]生体内におけるCD4+T細胞のTSP-1,CD47の免疫チェックポイントに対する作用と機序を解明する。医歯薬学
自然体験療法における軽度発達障害のある生徒の障害特性と心理的成長の検討

本研究は、軽度発達障害の生徒を対象に自然体験療法(Outdoor Experiential Therapy)を試み、障害特性と心理的成長の関連について検討した。プログラムに参加した発達障害児の自己概念は、自尊感情の低さと、他者からの評価の意識が高いことが特徴であった。自我発達の質的側面の変化における検討では、プログラム前後の変化は、自閉症スペクトラム障害児で大きい変化を示す事例が認められた。自然体験療法プログラムは、自閉症スペクトラム障害児の内的世界形成にきわめて有効であることが事例から示された。本研究の目的は、軽度発達障害児の特性と自然体験療法における効果の関連を検討し、自然体験療法が軽度発達障害児の心理的成長に及ぼす影響について明らかにすることである。平成25年度は、自然体験療法における1)軽度発達障害児(n=16)の自己概念の変化の特徴を定型発達児との比較から検討し、さらに、2)自閉症スペクトラム(ASD:n=9)と注意欠陥多動性障害(ADHD:n=7)の2つの異なる発達障害児の自己概念の変化の特徴について検討した。定型発達児との比較は、先行研究における定型発達児のデータと比較することで行ったが、発達障害児の自己概念の変化は、飯田ら(1992)における定型発達児の変化と類似した変化パターンを示した。しかし、自己概念の得点の平均値は、発達障害児では、定型発達児に比較してプログラム前後の自信と自己受容(Self-confidence)の得点が低く、他者のまなざし(Perceived-self)の得点が高かった。発達障害児の自己概念は、自尊感情の低さと、他者からの評価の意識が高いことが特徴と言えよう。本研究の自然体験療法においては、このような意識を改善することはできなかった。したがって、このような低い自尊感情や高い自己意識を肯定的に変化させるために、発達障害児が成功体験を繰り返し何度も得られるようなプログラムを計画し検証することが課題として示唆された。また、ASDとADHDの2つの異なる発達障害の比較では違いは認められなかった。したがって今後は、事例研究などの質的な観点からその異同について検証する必要性が示唆された。本研究の目的は、軽度発達障害児の特性と自然体験療法における効果の関連を検討し、自然体験療法がクライエントの心理的成長に及ぼす影響について明らかにすることである。そこで、平成24年度は、軽度発達障害の生徒の自然体験療法における自己概念に及ぼす影響から、その特性について検討を行った。自然体験療法プログラムは、18日21日間に渡るプログラムであり、インテーク面接、原始的な野外生活、冒険的な活動、フォローアップキャンプを含むものであった。冒険的な活動として、マウンテンバイク、沢登り、カヌー、ロッククライミング、登山を実施した。調査対象者は、これまでにプログラムに参加したクライエント男子16名(平均13.7歳)であった。調査対象者の障害の内訳は、注意欠陥多動性障害(ADHD)、アスペルガー症候群(AS)、学習障害(LD)であった。自己概念の調査は、自己成長性検査(梶田,1980)を用いた。自己成長性検査は、「他者のまなざし」「達成動機」「自信と自己受容」「努力主義」の4つの下位尺度から構成されている。データ収集は、プログラムの事前、事後、1か月後に実施した。その結果、クライエントの自己概念は、キャンプの前後において改善が認められた。下位尺度では、達成動機においてプログラムの前後において統計的に有意な差が認められた。しかし、努力、自信、他者のまなざしにおいては有意差は認められなかった。一般的に発達障害の青少年は、健常発達の青少年に比較して自己概念が低いことが報告されているが、本研究におけるクライエントの自己概念は、ほぼ同程度の得点を示した。また、本研究では自己概念とプログラム過程、発達障害の特徴との関連について個別の事例も検討した。本年度は、軽度発達障害児の特性と自然体験活動における効果の関連について、描画法である風景構成法(Landscape Montage Technique)から検討した。分析の対象は、過去にプログラムに参加した軽度発達障害の生徒17名(平均年齢13.7歳、SD=1.0)が描いた風景構成法であった。風景構成法は、Pre(オリエンテーション時)、Post1(プログラム直後)、Post2(1ヶ月6ヶ月後)に実施したものであった。風景構成法の中学生以降に見られる構成型の特徴は、IIII型(自己中心的段階)はまれか、あっても非常に少なく、最も多いのはV型(自我の対象把握可能な段階)で25%50%を占め、次いでVI型で30%強、VII型は10%弱であるといわれている。本研究では、IIII型に占める割合が、59%でありきわめて低い構成段階を示し、定型発達における構成型の分布とはかなり様相が異なっていた。自我発達の観点からいえば、自分の見たまま、思ったままを描く自己中心的な自我にとどまっている者が多かった。また、Post1では、17例中6例において上位の構成型への変化が認められ、III型とIV型が増加した。しかし、質的に異なるV型以上へは1例しか増えなかった。本研究の発達障害児の風景構成法は、構成型に示された通り、同じ構成から抜け出ることが難しい事例が多かった。また、描画自体の内容も定型の発達レヴェルからみればかなり拙いものであった。しかしながら低い構成段階(IIII型)であっても、描画の内容が変化してゆく事例も数例認められた。

このような事例においては、プログラム後の描画において、風景の内容が微妙に変化していくことが示された。特に、それぞれのアイテムが関連をもって構成されてゆく様子が理解された。これらは、クライエントの世界形成(世界の見えや世界との関わり)の進展(あくまでも平面的な世界形成であるが)を示していると考えられた。最終年度である平成27年度は、軽度発達障害の児童生徒の心理的成長について、事例研究から検討した。事例研究の対象は、自然体験療法に参加した軽度発達障害の児童生徒の中から、本研究者からみて効果が大きいと判断された3名を抽出した。事例研究のためのデータは、事前、事後の面接、自然体験療法プログラム中の参与観察、また、事前事後に実施した描画法(風景構成法)から収集された。事例研究では、事例の対象者の自然体験療法プログラムにおける、心理的成長と体験過程はどのように理解することができるかについて検討された。その結果、事例1では、プログラムを通じて、これまで持っていたこだわりや認識をあらためるような体験が観察された。一般的に発達障害者のこだわりは変容しにくいことが知られているが、プログラムの中では、こだわりや信念に近い認識を変えることも可能であることが理解された。また、人間関係能力に関する自己意識の改善が認められた。次に、事例2は、いじめの経験から対人的な不安感の強い生徒の事例であった。事例2は、スタッフにおける受容される体験とグループの仲間に受容される体験を重ねることで、被受容感を高めることが可能となったことが理解された。このような体験から自己イメージの変容が認められた。事例3は、自己中心性や衝動性などからグループ内で孤立することがしばしば認められる事例であった。プログラムのグループ活動を通じて、徐々に自己中心的な考えや行動が修正され、グループに適応してゆくことが観察された。このような発達障害児の事例では、個性化と社会化がバランスをとりながら進展することが理解された。以上の3例の事例研究から、発達障害と呼ばれる児童生徒であっても、それぞれに個別の課題を示し、自然体験療法プログラムにおいては、それぞれの課題に取組みながらも、課題に関連した心理的成長を示すことが理解された。本研究は、軽度発達障害の生徒を対象に自然体験療法(Outdoor Experiential Therapy)を試み、障害特性と心理的成長の関連について検討した。プログラムに参加した発達障害児の自己概念は、自尊感情の低さと、他者からの評価の意識が高いことが特徴であった。自我発達の質的側面の変化における検討では、プログラム前後の変化は、自閉症スペクトラム障害児で大きい変化を示す事例が認められた。自然体験療法プログラムは、自閉症スペクトラム障害児の内的世界形成にきわめて有効であることが事例から示された。データ収集及びデータ分析は、研究計画の通り行っており、おおむね順調に進展している。しかしながら、分析されたデータの考察において若干の課題と疑問点があり、検証作業を重ねており、そのため論述がやや遅れている。従って論文として公表することにおいては、十分ではないと考えている。
モンゴロイドに多発する難治性ぶどう膜炎の人類遺伝学的、分子生物学的発症機構の解析

今年度の海外学術調査研究はシリア、ヨルダン、モンゴル、そしてポルトガルの4か国で行なった。シリアおよびヨルダンではベーチェット病患者が多数みられ、眼科、リウマチ科ではベーチェット病が重症例の大半を占めていた。しかし原田病はみられず、日本とは異なっていた。シリアではまだこれら難治性のぶどう膜炎を集中的に治療する体制はできておらず、この点について今後の研究協力をすすめるために助言を行なった。これにたいしヨルダンではベーチェット病専門病院が整い、50名を越えるベーチェット病典型例を診察することができた。HLA-DNAタイピンクのための採血もスムーズにでき、分子遺伝学的検素材料を持ち帰ることができた。一方、モンゴルでは日本とほぼ同様の難治性ぶどう膜炎患者がみられ、典型的なベーチェット病、原田病が診断できた。しかしサルコイドーシスはみられなかった。今回の調査により、今後の共同研究のための基礎が確立された。シルクロードの西端に位置するポルトガルには、他の地中海沿岸諸国と同様に多くのベーチェット病が見出された。しかし原田病やサルコイドーシスは多発傾向がみられなかった。今回の調査により、ポルトガルのベーチェット病患者も我々が日本人患者で見出したHLA-B51との相関を有することが明らかにされた。次回の共同調査時には、HLA-B*5101との相関の有無を調べる必要がある。このほか、今年度はこれまでに収集したサウジアラビアやギリシャでのぶどう膜炎患者の分子遺伝学的解析をすすめ、人種を越えたHLAクラスIとの同一相関を見出した。本年度はこれまでの国際学術調査の一環として平成七年度までに訪れたギリシャ,イタリア,サウジアラビアの3か国でHLAの血清タイピングを行ったベーチェット病,原田病および原因不明のぶどう膜炎患者の結果をまとめ,さらに日本に持ち帰った検体について,DNAタイピングを始めとする分子遺伝学的解析を行った。従来日本でベーチェット病の疾患感受性遺伝子と考えられているHLA-B51の頻度はギリシャ74%(健康成人17%),イタリア67%(14%),サウジアラビヤ85%(27%)と,明らかな上昇がみられた.今回訪れたイランのベーチェット病患者から得た検体のDNAタイピングは現在解析中である.また未知の遺伝子を同定することを目的として,これらの検体についてHLA-B,-C遺伝子を含むYACクローン(Y109)を用いてHLAクラス1遺伝子領域の構造解析を行った.その結果HLA-B,-Cを含む230kbの全塩基配列を決定し,ノザンハイブリダイゼーションにより新しい遺伝子を5個(NOB1-5:New organization associated with HLA-B5)を同定した.さらに場所の不明であったP5-6遺伝子をこの領域に同定し,また,MICAのコーディング領域(TM領域)に反復単位が3塩基のマイクロサテライト多型性(6アリル)を見出した.原田病については一昨年度にアルゼンチンの患者の解析結果でDRB1遺伝子ではHLA-DRB1*04(0404)という日本人と共通の遺伝子相関がみられたのに対し,DQ遺伝子ではDQB1*0302と,日本人とは異なる相関がみられた事から,原田病の疾患感受性遺伝子はDRB1*04遺伝子と考えられ,昨年度訪れた3か国の検体について解析を行っているところである.また,アメリカ在住の日系人ぶどう膜炎患者について,アメリカの各研究センターでの予備調査を行っている.これまで我々はモンゴロイドに多発する難治性ぶどう膜炎のうちベーチェット病と原田病について特にの人類遺伝学的、分子生物学的発症機構の解析を行いこれらの疾患がHLA遺伝子と相関する事を明らかにしてきた。ベーチェット病はHLA-B51抗原との相関が示されてきたが、日本民族のみならず中国、中東、南欧、南米諸民族においても共通であることが明らかとなった。中国のカザフ族、ウイグル族、北方漢