hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
複雑な構造に対する新しい進化的計算法の開発とその動画像処理への応用

本研究では,遺伝的アルゴリズム(GA)や遺伝的プログラミング(GP)に代表される従来の進化的計算法では扱うことができなかった,数値付き木構造,ネットワーク構造,グラフ構造のような複雑な構造を最適化することができる新しい進化的計算法を開発し,画像処理に応用することを目的として研究を遂行した.数値付き木構造の進化的最適化法としてGMA (Genetic Matrix Algorithm)を開発した.GMAでは,各節点に数値パラメータが付随する木構造を記述し,交叉および遺伝操作によってランダムな構造から目的に適した構造を自動生成することができる.ネットワーク構造に対しては,GIN (Genetic Image Network)を開発した.GINでは,画像フィルタをネットワーク状に組み合わせ,画像をネットワーク中に流し,適切な時期に取り出すことによって複雑な画像処理を簡潔に記述することができる.さらにプログラムの自動生成法としてGRAPE (GRAph structured Program Evolution)を開発した.本方式では,学習用データから画像処理を含む汎用プログラムを自動生成することができる.本研究では,これらの進化計算法を動画像処理,特にITSやセキュリティ画像処理に応用することで,一般に構築に膨大な労力と時間が必要とされる動画像処理の構築プロセスを画期的に短縮することができることを証明した.本研究は,従来は最適化することができなかった複雑な構造を進化的に最適化するための基礎手法を開発し,画像処理に適用して有効性を示したものであり,工学的価値があるだけでなく,産業応用も大いに期待される.本研究では,遺伝的アルゴリズム(GA)や遺伝的プログラミング(GP)に代表される従来の進化的計算法では扱うことができなかった,数値付き木構造,ネットワーク構造,グラフ構造のような複雑な構造を最適化することができる新しい進化的計算法を開発し,画像処理に応用することを目的として研究を遂行した.数値付き木構造の進化的最適化法としてGMA (Genetic Matrix Algorithm)を開発した.GMAでは,各節点に数値パラメータが付随する木構造を記述し,交叉および遺伝操作によってランダムな構造から目的に適した構造を自動生成することができる.ネットワーク構造に対しては,GIN (Genetic Image Network)を開発した.GINでは,画像フィルタをネットワーク状に組み合わせ,画像をネットワーク中に流し,適切な時期に取り出すことによって複雑な画像処理を簡潔に記述することができる.さらにプログラムの自動生成法としてGRAPE (GRAph structured Program Evolution)を開発した.本方式では,学習用データから画像処理を含む汎用プログラムを自動生成することができる.本研究では,これらの進化計算法を動画像処理,特にITSやセキュリティ画像処理に応用することで,一般に構築に膨大な労力と時間が必要とされる動画像処理の構築プロセスを画期的に短縮することができることを証明した.本研究は,従来は最適化することができなかった複雑な構造を進化的に最適化するための基礎手法を開発し,画像処理に適用して有効性を示したものであり,工学的価値があるだけでなく,産業応用も大いに期待される.本研究では,遺伝的アルゴリズムや遺伝的プログラミングなどの従来の進化的計算法の枠組みを超えた記述能力をもった新しい進化的計算法を開発するとともに,それらを主としてセキュリティカメラを用いた人物の動作認識などの動画像処理・認識の問題に適用してその有効性を示すことを目的とした研究を遂行している.平成17年度では,始めに,数値と木構造の同時最適化を実現する手法として,GMA(Genetic Matrix Algorithm)と称する進化的計算法を開発して特許出願するとともに(特願2005-274309),数値パラメータ付きのフィルタを木構造状に組み上げる画像処理に適用してその有効性を確認した.さらに,グラフ構造を最適化する新しい進化的計算法としてGIN(Genetic Image Network)を開発した(特許出願準備中).GINでは,グラフの節点に画像処理フィルタを用い,動画像のように時々刻々変化する画像を入力し,同時に複数の画像(処理画像1,処理画像2,...)を出力することが可能であり,動画像処理に最適な進化的計算法であると言える.また,人物の動作認識に関する研究を同時に進め,単眼の動画像に対する処理によって人物の動作の概略を認識する方式を開発した.これらを融合することで,従来は個別にプログラムを作成することが困難であった動画像処理・認識の処理を,事例に対する学習を通して自動獲得することが可能であると考えられる.以上のように,本研究では当初予定していた以上の研究成果を残すことができた.平成18年度は,平成17年度に開発した新しい進化的計算法を実際に動画像処理・認識に適用してその有効性を確認する予定である.また,研究成果を国際会議などにおいて積極的に公表する予定である.本研究では,遺伝的アルゴリズム(GA)や遺伝的プログラミング(GP)に代表される従来の進化的計算法では扱うことができなかった,数値付き木構造,ネットワーク構造,グラフ構造のような複雑な構造を最適化することができる新しい進化的計算法を開発し,画像処理に応用することを目的として研究を遂行した.数値付き木構造の進化的最適化法としてGMA (Genetic Matrix Algorithm)を開発した.GMAでは,2次元の行列状の染色体によって各節点に数値パラメータが付随する木構造を記述し,交叉および遺伝操作によってランダムな構造から目的に適した構造を自動生成することができる.例えばガンマ補正など,数値パラメータを必要とする画像フィルタを木構造状に配置することによる画像処理アルゴリズムの自動生成にGMAを適用してその有効性を確認した.一方,ネットワーク構造・グラフ構造に対しては,GIN (Genetic Image Network)を開発した.GINでは,画像フィルタをネットワーク状に組み合わせ,画像をネットワーク中に流し,適切な時期に取り出すことによって複雑な画像処理を簡潔に記述することができる.

例えば2箇所から取り出すことで,1枚の画像に対して異なる処理を同時に実現することができる.また,動画像処理の自動生成に非常に有効であることを確認した.本研究では,GINを動画像処理,特にITSやセキュリティ画像処理に応用することで,一般に構築に膨大な労力と時間が必要とされる動画像処理の構築プロセスを画期的に短縮することができることを証明した.以上のように,本研究は,従来は最適化することができなかった複雑な構造を進化的に最適化するための基礎手法を開発するとともに,画像処理に適用して有効性を示したものであり,工学的価値があるだけでなく,産業応用も大いに期待される.
多読が情意面および学習面に与える影響-日記研究

本研究では、大学生が記録した学習(多読)日記を主な研究材料に、多読が言語面および情意面にもたらす影響を探った。その結果、学生は多読を通して様々なリーディング方略を試していることがわかった。また、多読への関心や学習目標(オリエンテーション)が時と共に変化する様子も観察された。2010年度は、これまでに実施してきた多読活動を振り返る意味で、「多読マラソン」4年間(2007年度2010年度)のデータを分析した。2007年後期からは、図書館に「リーディングラウンジ」を開設して、学生の"本へのアクセズ"の確保にも努めてきた。教員(当研究者)が授業などで直接働きかけた学生はそれなりに読んだが、担当以外の学生を巻き込むことは難しかった。また、参加させにくい学年があることもわかった。とはいえ、自発的にエントリーする学生やリピーターも少なからず現れ始めたので、学生は一度多読の方法に親しめばその後も読み続ける可能性が高いことも示唆された。多読活動をさらに拡充するには他の教員のサポートが必須であるが、周りの理解と協力をいかに得ていくかも今後の課題となる。一方、日記研究の準備段階として、1年生クラスを対象に多読日記をつけさせてみた。ある程度形式の決まったもの(A4用紙1枚)を用意し、毎週宿題として配布して提出させたが、説明が不十分だったのか、思うようなデータが集まらなかった。来年度は目的と方法を明確にするなど改善策を講じる必要がある。学生からより多くの情報を得るためには、教師が毎回何らかのフィードバック(コメント、励まし、アドバイス、回答など)をすることが求められるだろう。今回は用紙を回収するだけに留めたので、学生も一方通行の課題にあまり意義を見出さなかったようである。学生の学習面での変化を見るためのテストは現在作成中である。文学関連の内容把握問題、コロケーション関連問題、論旨並べ替え問題などを検討している。情意面での変化を探るためには、来年度学期初めにリーディング不安とリーディングストラテジーの質問紙調査を計画している。多読に関する意識調査も含めたいと思うので、関連の文献で適切な質問を探しているところである。昨年度は、多読マラソンの4年間のデータをまとめ、エントリー数やゴール数、学生がどのような本をどの程度読んだかなどを紀要に発表したが、本年度はさらに分析を試み、夏に行われた国際学会で発表した。学年によっては多読を働きかけることも難しい学年があったが、リピータも少なからず存在した。彼らの参加期間や読み方は様々であった。中には、5学期間多読マラソンに参加して、卒業までに120万語以上読んだ学生がいた。彼は自律的読者になり得たので、多読活動の目指すべき方向性を示してくれた。一方、今回の縦断的観察からは、多読を促す要因や妨げる要因も浮き彫りになった。英語多読が情意面や学習面にどういう影響を与えるかを調査するためには、まず情意面では日記という形で情報を集めた。昨年度は日記に対してコメントやフィードバックをしなかったせいか、取れたデータは決して多くはなかったので、今回はノートに日記をつけさせるという方法に変更して、毎回コメントやフィードバックを書いて返した。また、初めて多読に特化したクラスを実施し、また別の形で日記をつけさせた。学習面での影響を見る方法としては、当初の予定を変更して、「語彙(コロケーション)テスト、意味類推・要約・空所補充テスト、長文読解テスト(随筆)」を実施した。数々の研究が多読の成功の鍵として、易しめの本をたくさん読ませること、授業内で多読の時間を作ること、図書館の環境を整えることなどを挙げている。本校の学生の読書データを分析すると、やはり総語数1,000字以下の易しい本が一番読まれていた。多読は正式にはコースのカリキュラムには組み込まれていないので、授業時間に多読をさせるといのはまだ徹底できていないが、著者が担当する授業には出来る限り多読の時間を設けた。図書館から多大な協力が得られるようになったことも、大きな成果である。今後も選書やレイアウトなどで連携を強めたい。学習日記は、言語学習の隠れた側面を発見する手法として有効であると考えられており、これまでにも動機づけ、不安感、文化的感受性、学習目標、達成感、コミュニケーションをとろうとする意欲などが、日記を通して明らかにされてきた。2012年度は、この3年間で集めた日記データの分析にあたった。まず、2010年度後期に課した多読日記から何が汲み取れるのかを探った。この時は日記に対してコメントやフィードバックを加えず、毎週A4の紙に書かせたものを回収するだけであった。クラス全体として見ると取れたデータは決して多くはなかったのだが、毎回欠かさず日記を提出した学生2名の日記を分析したところ、学生が多読を通して様々なリーディング方略を試していたことがわかった。また、個人差が見受けられたことから、彼らの学習スタイルがリーディング方略使用に影響を与えている可能性も明らかになった。

また、2012年度に実施した冊子形式の学習日記を研究材料に、大学1年生の多読への関心や学習目標(オリエンテーション)のタイプや変化を探った。今回は、教員がコメントを書いて返すことで、何か影響が見られるのかどうかも観察した。日記研究は一般化が難しいと言われているが、1年生46名分の学習日記を分析することで、大学1年生に特徴的な傾向を見出すことができるかを観察した。その結果、多読に関しては、入学時にその意義を説くことで学生にある程度のインパクトを与えることはできるが、その関心を学期中に渡って維持させ多読活動に関わらせることは容易ではないことがわかった。2011年度に実施した「語彙(コロケーション)テスト、意味類推・要約・空所補充テスト、長文読解テスト(随筆)」に関しては、学期前と後の比較でコロケーションと読解テストにスコアの向上が見られたが、残念ながら統計的に有意な差は認められなかった。平成22年度と23年度の2年間に、3種類の方法で日記データを集めた。23年度は、コロケーションや内容把握力を問うテストも実施した。多読に関するアンケートおよび語彙(コロケーション)テスト、意味類推・要約・空所補充テスト、長文読解テスト(随筆)テストも行い、データを集めた。ただし、そのデータの集計や細かい分析はこれからの作業となる。24年度が最終年度であるため、記入しない。日記データは、上述のように3種類の方法で取ったのだが、果たして十分な情報が集まったのか定かではない。その反省を踏まえ、今年度はまたさらに別の方法で日記データを取ることを考えている。どの方法が一番効果的だったのか、これから細かく分析していく必要がある。2011年度に集めたその他のデータも今後色々な方法で分析にかけ、多読と学習面の関連性、そして多読と情意面との関連性を探っていきたい。
慢性腎疾患バイオマーカーとしてのカルジオリピンの有効性の検証

本研究はカルジオリピンが慢性腎臓病における新たなバイオマーカーになりうるか検証することを目標としている。大きく3つのフェーズがあり、1標品の合成、2定量系の確立、3臨床検体の分析からなる。昨年度中に行った内容は、1と2にあたる部分であり、具体的には1)合成経路の確立、2)新規合成経路の探索、3)定量測定系の確立に向けた検討の3つである。それぞれについて簡単に述べる。1)合成経路の確立に関しては、申請時に計画していた合成経路が汎用的であることを異なる脂肪酸を有する化合物を合成することで確認することができた。現在までに奇数鎖脂肪酸のC15、不飽和脂肪酸のオレイン酸、リノール酸の計3種類の合成に成功している。合成経路で難易度が高い点は、ホスホジエステル結合を構築する骨格形成反応と脱保護である。2)新規合成経路の探索に関しては、1)の問題点として挙げた骨格形成反応を簡略化することを主眼としたものである。すなわち、脂肪酸の種類を変える度に骨格形成反応を行う必要がない経路の開発を目指す。保護グリセロールとの骨格形成反応は低収率ながら目的物が得られており、今後の検討によって実践的なものへ改善することができることが見込まれる。今後は基質の保護基を検討する必要があると考えている。3)の定量測定系に関しては、標品を用いて系の確立に向けた実験を進めている。検量線は良好な直線性を示すことを確認しており、今後は系のバリデーションのため添加回収試験が必要と考えている。昨年度中にて、1骨格構築反応ではN-PhenylImidazoliumTriflateが触媒として最適であること2脱保護条件として、90%トリフルオロ酢酸が最適であることを見出した。特に、不飽和脂肪酸を有するカルジオリピンの場合は酸に不安定であり、この条件以外では目的物を得ることが困難であった。2)新規合成経路の探索:保護グリセロールとの骨格形成反応は低収率ながら目的物が得られており、今後の検討によって実践的なものへ改善することができることが見込まれる。ジフェニルケタール保護グリセロールを基質として用いた場合には、目的物が得られなかったが、1,2-ベンジリデン保護グリセロールの場合はわずかであるが目的物が得られた。この結果よりこの反応は立体障害に敏感であることが予想されるため、イソプロピリデンなどより小さな保護基が適しているのではないかと考えている。検量線は良好な直線性を示すことを確認しており、簡易的にヒト血清中および培養細胞中のカルジオリピン量を測定した。

2)新規合成経路の探索に関しては、1)の問題点として挙げた骨格形成反応を簡略化することを主眼としたものである。すなわち、脂肪酸の種類を変える度に骨格形成反応を行う必要がない経路の開発を目指す。保護グリセロールとの骨格形成反応は低収率ながら目的物が得られており、今後の検討によって実践的なものへ改善することができることが見込まれる。今後は基質の保護基を検討する必要があると考えている。3)の定量測定系に関しては、標品を用いて系の確立に向けた実験を進めている。検量線は良好な直線性を示すことを確認しており、今後は系のバリデーションのため添加回収試験が必要と考えている。第一に進める点は、定量系のバリデーションを取ることである。現在1種の内部標準物質と2種の標準物質を調製できているため、それらを用いて分析系の再現性を確認する。それと共に、新規合成経路の探索も行う。昨年度中にきっかけとなる結果が得られたため、それを元に改善を行う予定である。今年度から始めなければならない点としては、病院と具体的な研究プランを共有することである。どのような検体で、どの程度の数を対象とするかなどを詰める必要がある。それを元に次年度の研究を推進する予定である。年度末に使用があり今年度に含まれなかったこと、学会に学生を同伴する予定であったが該当する学生がいなかったこと、申請者の異動があり研究費の返還が途中で決まったこと、があげられる。
日本語教育用辞書作成に向けた「外来語の文法」の記述的研究

本課題では,現代日本語の外来語の記述的研究を行うとともに,日本語教育分野への応用を前提とした分析のモデル構築を行った。主たる成果として,意味と形式の対応を重視する「外来語の文法」という視点から,外来語が文中で共起する名詞や動詞のタイプ,ヴォイスやアスペクト等の述語要素,現れる構文タイプや従属節のタイプといった分析の観点を示したことが挙げられる。また,外来語の意味・用法に関する文献目録を作成・公開した。本課題の主たる研究テーマは,[A]基本的な外来語の意味・用法に関する詳細な記述,[B]外来語の文法的・構文的側面の重点的記述,[C]日本語教育に有益な意味・文法情報の探索と検討,である。本年度は,このうち[A][B]に関する研究を推進した。[A]に関しては,本年度は外来語サ変動詞を分析対象としており,国立国語研究所による『現代日本語書き言葉均衡コーパス』(BCCWJ)を用いて,具体的な記述の対象とする動詞の検討作業と,いくつかの語について意味・構文両面からの事例研究を行った。記述対象の検討においては,BCCWJにおける高頻度の外来語サ変動詞を調査した。事例研究では,動詞「マークする」と「ヒットする」について分析を行い,前者については,その成果を第4回コーパス日本語学ワークショップにおいて,ポスター発表の形で公表した。さらに,興味深い振る舞いを見せるいくつかの外来語サ変動詞を抽出しており,分析を進めるために既存の外来語辞典における記述とコーパスにおけるデータの整理を行った。[B]に関しては,本課題によって具体化することを目指している「外来語の文法」研究の方向性と必要性について,第10回筑波大学応用言語学研究会(招待講演)において発表することができた。さらに,外来語研究の基盤整備のために,現代日本語の外来語の意味・用法に関する研究文献約300編を収集・整理した。これらは,文献目録の形で公開することを目指している。[A]に関しては,本年度は,外来語サ変動詞に加え,新たに外来語名詞の分析を行った。事例研究は,動詞「マークする」と名詞「ピーク」について分析を中心に行った。前者は,昨年度のポスター発表の成果を論文として公表した。後者は,その一部を第259回筑紫日本語研究会において発表することができた。また,前年度から継続する形で,興味深い振る舞いを見せる外来語の抽出とデータの整理を行った。[B]に関しては,本課題によって具体化を目指す「外来語の文法」研究の方向性と必要性について,日本語教育学会第7回研究集会(四国地区)(招待講演)等の場において3回の発表をすることができた。また,外来語と類義の和語・漢語の比較を開始し,名詞「ピーク」については,形成するコロケーションと意味の相関関係を分析した。さらに,外来語研究の基盤整備のために,現代日本語の外来語の意味・用法に関する研究文献を収集・整理し,2014年9月に「外来語の意味・用法に関する文献目録」として公開した。2015年3月時点で,127語に関する文献計103編の情報を掲載している。そのノウハウの一部は,日本語文法学会第15回大会チュートリアルで公開し,学界に還元した。最終年度にあたる本年度は,[A][B][C]すべてに関する研究を推進した。[A][B]に関して,本年度は,昨年度まで継続して行ってきた外来語サ変動詞および外来語名詞の事例研究を論文にまとめ,公表した。また,興味深い振る舞いを見せる外来語の収集の結果の一部を,高校生向けの研究紹介としてまとめた。[C]に関しては,日本語文型辞典や日本語学習者用教材における外来語の記述の現状を整理し,本研究課題で行った分析内容との突き合わせを行った。また,これを踏まえ,研究レベルで用意しておくべき豊かな記述の内容を検討した。さらに,現代日本語の外来語の意味・用法に関する研究文献を収集・整理し,昨年度からウェブ公開している「外来語の意味・用法に関する文献目録」に反映させた。また,昨年度の講演資料「日本語文法研究のための文献探索」もウェブ公開した。本課題は,現代日本語の外来語研究を「外来語の文法」という新たな視点から推進し,同時にその応用の基盤を作ることを目的として行われた。3年間に公表した成果は,雑誌論文3編,発表6件(うち招待講演3件)である。今後の外来語研究の基盤整備のために作成・公開した「外来語の意味・用法に関する文献目録」は,最終的に217語(計118編)を掲載することができた。

また,外来語の意味・用法に関する文献目録を作成・公開した。平成26年度は,研究計画時に予定していたデータの整備と分析,関連領域の研究者との意見・情報交換,文献の整理と分析をおおむね実施することができた。特に,研究代表者の異動に伴い保留になっていた文献目録の公開が実現できたことが大きい。また,当初予定していた発表に加え,招待講演によって研究成果を公表し,日本語教育分野の研究者との意見交換を行うことができた。日本語学平成27年度は,これまでに整理したデータを活用し,引き続き事例研究の成果を論文の形で公表する予定である。また,文献目録の改訂も順次進めていく。平成26年度の研究代表者の異動に伴い,利用できる日本語教科書・教材が減ったため,これらの調査を縮小せざるをえないが,弾力的に対応していきたい。平成25年度は,研究計画時に予定していたデータの整備と分析,関連領域の研究者との意見・情報交換,文献の整理をおおむね実施することができた。(研究代表者の異動が控えていたため,文献目録の公開は実現できなかったが,異動先の環境が整い次第,公開作業を進める予定である。)また,当初予定していた発表に加え,招待講演によって研究成果を公表することができた。平成26年度は,平成25年度に整理したデータを活用し,論文の形で成果を公表する予定である。また,文献目録の公開準備を進めていく。ただし,研究代表者の異動に伴い,コーパスや研究データ以外のすべての研究環境に変化が生じた。まずはこれらの整備を行っていかなければならないため,予算の配分に関しては,当初の予定から弾力的に変更し,対応していきたい。
空間データベースにおけるアクセス管理機構およびビユ-機構

3D空間情報を扱う空間データベースにおけるビューおよびアクセス制御の機構のためのモデルの設計を行った。このような3D空間データベースは、従来の文字や数値のデータを扱うデータベースと比べ、同じデータを表示するにもどの程度詳細に表示するかという点で表示の仕方が何通りもあるという特徴がある。そこで、この研究ではこの点を考慮したアクセス制御とビュー機構のモデルを設計した。より具体的には、まずグラフィクスデータの持つ複数の詳細度を利用し、各ユーザに対してそのユーザに許される範囲の詳細度でデータを表示するアクセス制御およびビューのモデルを設計する。このモデルでは、従来の「表示する、または全く表示しない」というall-or-notingのアクセス制御に比べて柔軟な制御が可能になる。しかし、このように任意の詳細度のデータを用いてデータの表示を行おうとする場合、データ間の複雑な依存関係や衝突関係が問題になる。そこで、われわれの枠組みでは、各ユーザのアクセス権と、データ間の依存関係や衝突関係の双方を考慮して、各ユーザに見せるべき適切な詳細度を決定する。このようなモデルを設計するために、まず、データ間の詳細度の大小関係、依存関係、衝突関係の表現を含む汎用的なデータモデルを定義した。そして、この上で各ユーザがデータの表示の要求を出した場合に、ユーザに見せるべき適切な詳細度を形式的に定義し、さらにこれを計算する手続きを設計した。また、この手続きによって求められる結果が、どのような性質を持つか、また、この手続きの意味が明確に与えられるには、データ間の関係がどのような条件を満たす必要があるかについて明らかにした。
マルトリンパ腫における末梢血腫瘍マーカーの検討

FDG-PETでのSUV集積強度と,悪性リンパ腫で最多のDLBCLでは発生由来に伴う病理組織学的悪性度には相関関係は認めなかったが,解糖系亢進の一要因と思われるGLUT-1と非常に強い相関性を認めた.DLBCLでのFDG取り込みは,解糖系の亢進程度をみているにすぎないのかもしれないことが判明した.MALTリンパ腫は悪性度の低いリンパ腫と言われているが、その病勢を示す基準となるものがしられておらず、腫瘍マーカーの検討を行うこと。FDG-PETでのSUV集積強度と,悪性リンパ腫で最多のDLBCLでは発生由来に伴う病理組織学的悪性度には相関関係は認めなかったが,解糖系亢進の一要因と思われるGLUT-1と非常に強い相関性を認めた.DLBCLでのFDG取り込みは,解糖系の亢進程度をみているにすぎないのかもしれないことが判明した.昨年度は症例の蓄積を行い,マルトリンパ腫初発例の末梢血を放射線治療前後で採取し,表面マーカー解析を行い, CD20・CXCR3陽性細胞割合を確認しているところである.残った検体は本研究費にて購入したディープフリーザーで凍結保存している.また,生検標本の免疫染色が必要となるため,予備実験を適宜行った.胃に発生したマルトリンパ腫症例では除菌前後でのCD20・CXCR3陽性細胞をみる予定としていたが,放射線治療に紹介になる時点で,既に除菌療法が行われていたり,除菌不応例などが紹介されたりと統一性が困難と判断した.このため,発生部位を問わずに放射線治療前後での末梢血液中CD20・CXCR3陽性の推移を診ることが若干の変更点である.昨年度はその時間のほとんどを症例の蓄積に費やしたが,5例程度とマルトリンパ腫で放射線治療を行った症例が少なかった.放射線治療が如何に安全かを示すことができれば,多くのマルトリンパ腫症例が放射線治療に紹介されると判断し,頻度の多い胃悪性リンパ腫における放射線治療の合併症頻度を検討する研究を行った.2008年4月に横浜で開催された第62回日本医学放射線学会総会に於いて「胃悪性リンパ腫放射線治療後の胃晩期副作用について:アンケート調査報告」の演題名で口演発表を行い,胃リンパ腫に対する放射線治療関連の副作用が637例中わずかに5例(0.78%)で,副作用を生じた症例も全例保存的加療で改善しており,非常に稀で安全な治療であることを報告した.マルトリンパ腫は低悪性度のリンパ腫であるが、実際には晩期再燃する症例があり、報告によたては10%近いとするものもあるため、活動性を表す指標(マーカー)が必要と考えている。病理学的にマルトリンパ腫と診断された無治療症例に対し,末梢血液を採取,表面マーカーの解析を行った。その末梢血液中CD20・CXCR3陽性細胞の存在割合を調査し,検体を凍結保存している。昨年度までは症例があまりおらず、研究自体の遂行を危ぶんだ状態もあったが、本年度は比較的順調に症例の蓄積を得ることができたと考えている。実際には、放射線治療前後での末梢血CD20・CXCR3陽性細胞の存在割合をみている状況であるが、その際、胃に対する放射線治療後にGAVE様の特殊な粘膜障害が出現する症例があることが判明した。こうした副作用はこれまで報告がないため、昨年行った全国アンケートを基にまとめて、9月にスウェーデン、ヨーテボリで行われたヨーロッパ放射線腫瘍学会(ESTRO : Europian society for therapeutic ratiology and oncology)において学会報告を行った。その結果、胃悪性リンパ腫に対する放射線治療での晩期副作用は0.67%(5/637例)程度であり、非常に安全な治療方法のひとつであることが判明すると共に、非常にまれながらも処置を有するGAVE様粘膜炎の存在を世界に知らしめることができたと考えている。悪性リンパ腫の中で、MALTリンパ腫はindolentな性質を有するとされている。しかし、晩期にかけて再燃する症例があり、その活動性を示す指標として末梢血液中のCXCR3/CD20陽性細胞の推移を治療前後でみていくことで、腫瘍マーカーの一助となることを想定し、症例蓄積を行ってきた。しかし、症例の発生が少なく予定症例数に不足する危険性が危惧されたため、当初の症例蓄積を行うと同時に以下の研究を併せて行った。(1)MALTリンパ腫の長期追跡に関する全国調査を行った。胃初発症例で、我々が先に行った前向き臨床試験189例を長期追跡調査を行い、74例のMALTリンパ腫症例中5年で13.3%、10年で28.2%の主に遠隔再燃が存在することを発見し、第69回日本医学放射線学会総会で報告し、高い関心を得るとともに、CXCR3/CD20陽性細胞の関与を示唆することが出来た。また、予定症例に満たない危険性に備え、MALTリンパ腫に対するマーカーの一助となる可能性があるのとして、腫瘍内解糖系の亢進状態を併せてみる方針とした。具体的には久留米大学PETセンターで2004年から2008年の期間に初回検査をうけた未治療症例中、当院で生検診断および治療まで施行された173例を抽出し、実際の生検部位のFDG最大集積部位などを計測し直した。

結果として、MALTリンパ腫は5.4程度の値に対し、濾胞性リンパ腫は8.4,瀰漫性細胞性B細胞性リンパ腫は14.8など細胞学的悪性度に比例して解糖系が更新していることを発見した。解糖系が更新する機序としてグルコース、ナトリウムトランスポーターの存在があるが、関連性が疑われているGLUT1、GLUT3、GLUT4およびヘキソキナーゼなどの関与がある可能性を考え、現在免疫染色を施行するために標本を作製している状況である。福岡で行われた第一回および第二回リンフォーマPET診断カンファレンスで報告している。本研究の目的は,マルトリンパ腫初発例の末梢血を治療前後で採取した表面マーカー解析で,CD20・CXCR3陽性細胞の推移を評価することで,結果的にMALTリンパ腫の腫瘍マーカーを推察することができるかもしれないということだった.本研究が始まった四年前を前後として,血液内科的にMALTリンパ腫に対して抗CD20抗体であるリツキシマブを標準的に用いるようになり,リツキシマブの効果にてCD20陽性細胞が消失することとなった,このため,MALTリンパ腫症例において治療前後でCXCR3・CD20陽性細胞の推移をみることが不可能な状況が確認され,研究方針の多大なる変更を余儀なくされた.昨年の報告ではこうした状況を危惧し,リンパ腫の細胞学的悪性度とFDG-PETの取り込み度合いをみることで,metabolic(biological)tumor markerとして用いることが可能でないかと推察した.本年度は症例の多いDLBCL(diffuse large B-cell lymphoma)で検討した.細胞学的悪性度の低いとされるgerminal center由来のDLBCL37例とgeminal center間から発生した悪性度の高いDLBCL59例をCD10,MUM-1,bcl-6の免疫染色を全例行うことにより判別した.発生由来ではFDGの取り込み程度を示すSUVmax値に差は認めていなかった.しかし,GLUT-1(glucose transporter)では陽性細胞割合とSUVmax値に有意な相関関係を示し,GLUT-3でも弱い関連性があるという結果となった.他に染色したglucose transporterは明らかな関連性を示していなかった.これは,悪性リンパ腫(DLBCL)に関してのFDG取り込み程度は細胞学的悪性度をみているとは言い難く,結果として解糖系の亢進程度をみているにすぎないという結果を示した.リンパ腫におけるFDG-PETの意味合いを示した論文は非常に少なく,今回我々が発見した事項についての報告は調べ得た範囲でみられない.この結果をふまえて平成22年10月のリンフォーマ井戸端会議(福岡)で報告した.その後,英語論文を作成し,現在投稿中の状態である.
共役エンジアレンのタンデム環化反応による多環式芳香族化合物の高効率的合成

平成16年度には、ベンゼンスルフェニルクロリドとエン-ビス(プロパルギルアルコール)から、エンジアレン及びオルトキノジメタンの連続的形成、続く分子間或いは分子内[4+2]環化付加反応が首尾よく進行し、多環式芳香族化合物が一挙に得られることを明らかにした。今年度は、本反応の生理活性物質合成への応用の一環として、ステロイド骨格の構築を検討した。求ジエン体としてビニル基を備えたD環を連結したエン-ビス(プロパルギルアルコール)を合成し、ベンゼンスルフェニルクロリドと処理した結果、望みのタンデム環化反応が進行し、環化付加体を得ることができた。最後にラネーニッケルを用いてスルフィニル基を除去し、エストラ-1,3,5(10)-トリエン-17-オンの合成を完了した。一方、芳香環を有するエン-ビス(プロパルギルアルコール)において、ベンゼンスルフェニルクロリドの代わりにクロロジフェニルホスフィンを反応させると、求ジエン体存在の有無に関わらず、3,8-ビス(ジフェニルホスフィニル)ナフトシクロブテンが高収率で得られることを見出していたが、今回本成績体の脱ホスフィニル化反応の開発に成功した。すなわち、水素化リチウムアルミニウムとジオキサン中加熱還流すると、二つのホスフィニル基が除去されたナフトシクロブテンが、水素化リチウムアルミニウムと四塩化チタンを2:1で組み合わせると、一つのみホスフィニル基が除去されたナフトシクロブテンが得られることを明らかにした。これにより、ナフトシクロブテン誘導体の一般合成法を確立した。エンジアレンは穏和な条件下で環化し、オルトキノジメタンを与えることが知られているが、これを有機合成に利用している例はほとんどない。そこで著者は、エンジアレンの形成を経るオルトキノジメタンの[4+2]型付加環化反応の開発に着手した。エンジアレンの生成法として、ベンゼンスルフェニルクロリドを用いるプロパルギルアルコール誘導体の[2,3]-シグマトロピー転位を利用することとし、2つのプロパルギルアルコールユニットをベンゼン環のオルト位に配置した化合物を基質に設定して、またフマル酸ジメチルを求ジエン体として上記タンデム環化反応を検討した。その結果、トリエチルアミン存在下、テトラヒドロフラン中-78°Cでビスプロパルギルアルコール誘導体にベンゼンスルフェニルクロリドを滴下し,徐々に昇温することにより,室温以下の温度で転位,エンジアレンの環化,[4+2]型付加環化が進行し、目的の環化体が高収率で生成することを見出した。本反応では、フマル酸ジメチルのみならず各種電子不足アルケンや電子豊富なアルケンも求ジエン体として利用可能であることがわかった。また,芳香環を持たない鎖状の基質でもタンデム環化反応は問題なく進行し、さらには分子内[4+2]型付加環化反応にも展開することができた。一方、芳香環を有する基質において、ベンゼンスルフェニルクロリドの代わりにクロロジフェニルホスフィンを[2,3]-シグマトロピー転位に利用すると、求ジエン体存在の有無に関わらずナフトシクロブテンが高収率で得られることを見出した。本反応は反応機構的にも興味深いが、炭素-リン結合を切断することができれば、新規シクロブテン合成法としても利用価値の高い反応になるものと考えている。
ナトリウム・重炭酸共輸送体における輸送様式と分子構造の相関

本研究はナトリウム・重炭酸共輸送体(NBC1)の機能と構造の相関を解析し、NBC1の生理的・病態的意義をさらに明らかにするために立案された。そのため申請者らは眼症状を伴う近位尿細管性アシドーシス症例のcDNAスクリーニングにより新規NBC1変異を同定した(a2311x, T485S, A799V, R881C)。既報の変異と合わせ、NBC1変異には現在までのところ特定の集積部位(hot spot)は見出せなかった。またアフリカツメカエル卵母細胞において発現実験を施行した結果、近位尿細管性アシドーシスを生じるためにはNBC1機能が著しく低下すること(少なくとも野生型機能の半分以下)が必要なこと、および変異体によっては卵母細胞膜への発現障害が生じることなどが判明した。また比較的機能が保たれている変異体では野生型NBC1と比べてその輸送特性(Na親和性、stoichiometryなど)に大きな変化がないことも示された。一方、特異的抗体を用いて行ったヒトおよびラット膵臓の免疫組織化学的解析により、膵管かちの重炭酸分泌機構において膵型輸送体(pNBC1)が極めて重要な役割を果たすことが確認された。近位尿細管性アシドーシス症例における高アミラーゼ血症と合わせNBC1変異と膵機能障害の関連が強く示唆された。またヒト正常腎臓においては腎型輸送体(kNBC1)が近位尿細管基底側膜に限局して発現し、重炭酸再吸収経路として機能することが示された。さらにkNBC1は腎癌組織においては細胞膜および細胞質内に豊富に発現していることが初めて示され、NBC1輸送体が腎癌の悪性転化もしくは転移機構に関与すること示唆された。我々はNa-HC03共輸送体(NBCl)の変異により眼症状および膵機能障害を伴う近位尿細管性アシドーシス(pRTAが生じることを報告した。NBC1には腎型輸送体(kNBC1)および膵型輸送体(pNBC1)の2種類のvariantがある。これらのvariantの機能低下とpRTA症例の腎臓および腎外症状との関連は必ずしも明らかでない。そこでNBC1 variantに対する特異的抗体を用いて免疫組織科学的検討を行い、腎近位尿細管基底側膜にはkNBC1のみが発現していることを確認し、この部位の重炭酸再吸収はkNBC1によっていることを明らかにした。一方、膵管の基底側膜には逆にpNBC1のみが発現しており、この部位の重炭酸分泌はpNBC1が担っていることを明らかにした。また我々は過去にNBClの共通領域の変異によりkNBC1の機能が低下することを報告したが、今回この変異によりpNBC1の機能も障害されることを確認した。これらの知見からpNBC1の機能低下により膵の重炭酸分泌が障害され膵障害が引き起こされる可能性が示唆された。一方、現在までにpRTAを生じるNBC1変異はごく少数しか同定されておらず、NBC1の構造と機能の相関には不明の点が多く残っているが、我々は新規pRTA症例において新しいNBC1変異を数個同定した。これらの一つはNBC1の共通領域にstop-codonを形成し、実際に行った機能解析でもNBCIの輸送活性を完全に失活させることを確認した。また他の変異もNBC1の機能を大幅に低下させることを明らかにした。これらの知見はNBClの著しい機能低下によりpRTAが生じることを確認するものである。また現在までのところNBC1変異に特定領域への集積傾向は認めていない。そのため申請者らは眼症状を伴う近位尿細管性アシドーシス症例のcDNAスクリーニングにより新規NBC1変異を同定した(a2311x,T485S,A799V,R881C)。

既報の変異と合わせ、NBC1変異には現在までのところ特定の集積部位(hot spot)は見出せなかった。またアフリカツメカエル卵母細胞において発現実験を施行した結果、近位尿細管性アシドーシスを生じるためにはNBC1機能が著しく低下すること(少なくとも野生型機能の半分以下)が必要なこと、および変異体によっては卵母細胞膜への発現障害が生じることなどが判明した。また比較的機能が保たれている変異体では野生型NBC1と比べてその輸送特性(Na親和性、stoichiometryなど)に大きな変化がないことも示された。一方、特異的抗体を用いて行ったヒトおよびラット膵臓の免疫組織化学的解析により、膵管からの重炭酸分泌機構において膵型輸送体(pNBC1)が極めて重要な役割を果たすことが確認された。近位尿細管性アシドーシス症例における高アミラーゼ血症と合わせNBC1変異と膵機能障害の関連が強く示唆された。またヒト正常腎臓においては腎型輸送体(kNBC1)が近位尿細管基底側膜に限局して発現し、重炭酸再吸収経路として機能することが示された。さらにkNBC1は腎癌組織においては細胞膜および細胞質内に豊富に発現していることが初めて示され、NBC1輸送体が腎癌の悪性転化もしくは転移機構に関与することが示唆された。
神経芽腫におけるBMP応答性とDANおよびp53ファミリー遺伝子等の機能的役割

目的:神経芽腫はp53遺伝子の変異がほとんど認められない腫瘍の一つである。しかし、最近の報告では、神経芽腫の約2%にp53の変異が存在することが判った。我々の研究においても神経芽腫細胞株30種類のうち6種類において機能消失したp53の変異を認めた。その中で、SK-N-ASはN-mycの増幅および1p lossがないにも関わらず薬剤耐性を示した。神経芽腫のBMPあるいはシスプラチン等に対する反応性ならびにp53等の関与を検討した。特に、SK-N-ASの新しいp53の構造を見出しその機能解析を行った。方法および結果:SH-SY5YおよびSK-N-ASを用いてシスプラチン処理による変化をMTTアッセイ、TUNEL染色およびFACScanにより検討したところ、SH-SY5Yはシスプラチン処理により細胞死が誘導されることが判ったが、SK-N-ASは、細胞死は誘導されず細胞増殖抑制が認められた。次に、シスプラチン処理によるp53およびその下流遺伝子の解析を行った。SH-SY5Yはシスプラチン処理によりp53,p21^<WAF1>,Bax,PUMAの発現誘導、p53の15番目のセリンのリン酸化が認められたが、SK-N-ASはp21^<WAF1>の発現増加のみであった。SK-N-ASをBMP処理した場合も細胞死は認められず、細胞増殖抑制が誘導された。SK-N-ASのp53の構造をRT-PCR法、PCR法およびアレーCGH法によって解析した。その結果、核移行配列を含むC末端のホモ欠失が示唆された。C末端欠失のp53を作成し、SK-N-ASに過剰発現させp53の細胞内局在性を検討した。導入された変異型p53は核には殆ど認められなかった。以上の結果から、SK-N-ASの新しいタイプのp53(ホモ欠失)を見出し、神経芽腫のp53ステイタスによりシスプラチンに対する反応性(細胞死あるいは細胞増殖抑制)が異なる可能性が示唆された。しかし、最近の報告では、神経芽腫の約20%にp53の変異が存在することが判った。これまでに我々は神経芽腫細胞株30種類のうち6種類において機能消失したp53の変異を認めた。神経芽腫由来のSK-N-AS細胞ではN-mycの増幅および1p lossがないにも関わらず多剤耐性を示した。そこで、SK-N-AS細胞におけるp53の構造ならびに機能と多剤耐性獲得との関連性について検討を行った。方法および結果:SK-N-AS細胞を細胞質および細胞核に分画しウエスタンブロット解析を行ったところ、分子量の小さなp53が細胞質に限局して発現していることが判明した。RT-PCR、PCRおよびアレーCGH法によってSK-N-AS細胞のp53の構造を検討した。その結果、核移行配列を含むC末端を欠損している可能性ならびにC末端のホモ欠失が示唆された。次に、SK-N-AS細胞に野生型p53および変異型p53を過剰発現させたところ、野生型p53は細胞質と細胞核に発現が認められたが、変異型p53は核には認められなかった。

また、野生型p53を過剰発現させた細胞では、p53の15番目のセリンのリン酸化、p21^<WAF1>ならびにp53AIP1の発現誘導、さらに細胞増殖能抑制が認められた。これらの結果から、SK-N-AS細胞においてp53の細胞質局在はp53の構造異常によるもの、p53依存性の細胞増殖抑制あるいは細胞死が誘導され得ることが示唆された。p53のC末端に変異を持つSK-N-AS細胞はシスプラチン処理によってG2/M期で停止しアポトーシスに陥らなかった。また、p21^<WAF1>の発現誘導は認められたが、p53の安定化およびBaxの発現昂進は検出されなかった。したがって、SK-N-AS細胞の薬剤耐性はp53の構造異常に起因すると考えられた。目的:神経芽腫はp53遺伝子の変異がほとんど認められない腫瘍の一つである。しかし、最近の報告では、神経芽腫の約20%にp53の変異が存在することが判った。神経芽腫をBMP等で処理し、細胞死あるいは細胞増殖抑制が誘導されるか、それはp53に起因するか等は不明である。SK-N-ASの新しいp53の構造を見出しその機能解析を行った。方法および結果:神経芽腫細胞株SH-SY5YおよびSK-N-ASを用いてシスプラチン処理による変化をMTTアッセイ法、TUNEL染色法およびFACScan法により検討したところ、SH-SY5Yはシスプラチン処理により細胞死が誘導されることが判ったが、SK-N-ASは細胞増殖抑制が認められた。次に、シスプラチン処理によるp53およびその下流遺伝子の解析を行った。SH-SY5Yはシスプラチン処理によりp53, p21^<WAF1>, Bax, PUMAの発現誘導、p53の15番目のセリンのリン酸化が認められたが、SK-N-ASはp21^<WAF1>の発現増加のみであった。SK-N-ASをBMP処理した場合も細胞死は認められず、細胞増殖抑制が誘導された。また、SK-N-ASは、野生型p53より分子量の小さなp53が主に細胞質に発現していることが判明した。SK-N-ASのp53の構造をRT-PCR法、PCR法およびアレーCGH法によって解析した。その結果、核移行配列を含むC末端のホモ欠失が示唆された。C末端欠失のp53を作成し、SK-N-ASに過剰発現させp53の細胞内局在性を検討した。導入された変異型p53は核には殆ど認められなかった。以上の結果から、SK-N-ASの新しいタイプのp53(ホモ欠失)を見出し、神経芽腫のp53ステイタスによりシスプラチンに対する反応性(細胞死あるいは細胞増殖抑制)が異なる可能性が示唆された。
特定商業集積整備法の検証を通して考察する商業・まちづくりの理論的・実践的展望

本研究の目的は、特定商業集積整備法の運用実態と効果の検証を通して、コミュニティとしての商業集積整備の課題を明らかにするとともに、これからの商業まちづくりの理論的・実践的な課題と可能性を検討することにある。本研究の結果、1特定商業集積整備法の運用実態と政策効果の検証、2商業集積における商業施設と都市施設の併設の効果の検証、3商業まちづくりにおける理論的・実践的な課題と可能性の検討、以上に関する成果を得るに至った。本年度は、研究プロジェクトの初年度として、本研究における分析視角の構築、予備調査も含めた現地調査の実施、関係資料・データの収集、研究ネットワークの構築、以上を主な目的に調査研究を進めた。具体的に行った事項は、主に次の4つである。第1は、文献資料及び既存研究のサーベイによる特定商業集積整備法の運用実態と現状の整理である。研究代表者である石原の統括のもと本研究プロジェクトの基礎となる資料収集と整理・検討を行った。また、あわせて、調査対象となりうる集積・施設のリストアップと選定を行った。第2は、現地調査の実施による実態把握と関係資料・データの収集である。当初は、高度商業集積型と地域商業活性化型の各1件ずつ程度を予定していたが、青森エリアから5箇所(五所川原、弘前、十和田、下田、青森)及び彦根エリアからは2箇所(八日市、彦根)に位置する関係商業集積・施設について、研究組織メンバー全員参加のもとで、現地視察及びヒアリング調査を実施した。第3は、商業統計データの収集.整備である。研究分担者である石淵により、集積の魅力度の分析に必要となるデータの選定とともに、1991年2007年までの商業統計メッシュデータの収集を行った。第4は、研究ネットワークの形成と研究会の実施である。研究ネットワークとしては、本研究組織に加えて、研究協力者として濱満久(名古屋学院大学)、渡邉孝一郎(新潟産業大学)、松田温郎(大阪経済大学)の3名の参画を得るに至っている。また、研究会については、上記メンバーを中心に、関連領域の研究者の参加のもとで、3回の研究講演会を実施した。各回とも、特定商業集積整備法の制定や運用に携わった専門家を招聘し、同法の制定の背景や運用実態等に関する専門的知識や資料・データの提供を受けるとともに、本調査研究に関する論点の整理や今後の研究の展開に関する議論を深めた。本年度は、研究プロジェクトの2年目として本格的な調査研究を進めた。具体的な実施事項は、主に次の3つである。第1は、特定商業集積整備法(以下、「特集法」という)の運用実態と効果検証のための現地調査の実施である。昨年の検討で整理された対象の中から、福井地区(「ショッピングシティベル」)、富山地区(「福野ショッピングセンターアミュー」、「あさひショッピングセンターアスカ」)、新潟地区(「柏崎ショッピングモールフォンジェ」、「しばたショッピングモールコモタウン」及び周辺商業集積)、山口地区(「サンパーク阿知須」及び周辺商業集積)、熊本地区(「あらおシティモール」)、以上の5つの地区の特定商業集積及び周辺の関連商業集積・施設に関する現地視察とヒアリング調査を実施した。また、高度商業集積型の核店舗(大型店)の調査としては、株式会社平和堂の調査協力を得て、関連のヒアリング調査を実施した。なお、調査にあたっては、本研究組織の4名に、研究協力者(あるいは連携研究者)として、濵満久(名古屋学院大学)、渡邉孝一郎(新潟産業大学)、松田温郎(大阪経済大学)、新島裕基(専修大学大学院)の4名を加えた、計8名の体制で進めた。第2は、商業基盤施設の設置を中心とした集積の魅力度分析の実施である。研究分担者である石淵により、昨年に引き続き商業統計データの収集・整備を進めるとともに、集積の魅力度の分析を実施した。あわせて、研究メンバーによる研究会を開催し、特集法適用地域の動態的変化の実態を共有するとともに、研究課題等に関する議論を進めた。第3は、特業法の運用に携わった専門家を招聘した研究会の実施である。特集法の運用時に現場に関わった専門家を招聘し、同法の運用実態等に関する専門的知識や資料・データの提供を受けるとともに、本調査研究に関する論点の整理や今後の研究の展開に関する議論を深めた。本年度は、研究プロジェクトの最終年度として、必要となる調査研究を引き続き実施するとともに、研究成果の整理・発信を進めた。具体的な実施事項は、主に次の4点である。第1が、前年度までの調査に残されている特定商業集積及び周辺の商業施設・集積の実態調査の実施である。前年度までの調査に残された箇所として、笠間地区、下松地区、社地区、加賀地区、三好地区が挙げられる。これらの各地区の特定商業集積等について、現地関係者へのヒアリング及び現地視察を中心とした実態調査を行った。具体的には、笠間地区は「笠間ポレポレシティ」、下松地区は「ザ・モール周南」、社地区は「やしろショッピングパークBio」、加賀地区は「アビオシティ加賀」、三好地区は「アイ・モール三好」である。

なお、調査にあたっては、本研究組織の4名に、連携研究者として濵満久(名古屋学院大学)、渡邉孝一郎(九州産業大学)、松田温郎(山口大学)、また、研究協力者として新島裕基(専修大学大学院)の4名を加えた計8名の体制で進めた。第2が、特定商業集積整備法の制定や運用実態に関する専門家へのヒアリングの実施である。当時の政策担当者及びコンサルタントにヒアリングを依頼し、同法の制定の背景や運用実態等をはじめとした専門的知識の提供を受けるとともに、関連資料やデータの収集を行った。第3が、研究会の実施である。これまでに行った調査データのもと、研究メンバーによる研究会を開催し、特定商業集積整備法の運用実態や政策効果の検証、理論的意義の検討など、本研究課題に関する論点整理を行うとともに、研究課題に関する議論を進めた。第4が、本調査研究から得られた成果の整理と発信である。これまでに収集したインタビュー・データ、統計データ及び関連資料等を整理・編集及び分析する作業を進めるとともに、各種学術誌等への論文投稿等により、得られた成果の発信を行った。26年度が最終年度であるため、記入しない。商学26年度が最終年度であるため、記入しない。現地調査について、当初は調査対象とする集積・施設を限定した予備的な調査とすること想定していたが、2つのエリアにおいて、関係者からのヒアリングも含めた網羅的な調査を実現するに至っている。また、本年度の研究成果として、研究初年度であるが、雑誌論文6件、学会発表2件の研究発表を得るに至っている。現地調査について、当初は23地区での現地調査の実施を計画していたが、5つの地区における7つの特定商業集積及び関連小売企業1社を対象に、関係者からのヒアリングも含めた網羅的な調査を実現するに至っている。また、商業統計データの収集と分析も進められている。当初計画に基づき、分析視角・調査枠組みの精緻化、特定商業集積の実態調査の実施、集積の魅力度に関する調査の実施、得られた成果の発信及び研究会の実施、以上を中心とした研究活動を進めていく。当初計画に基づき、特定商業集積の実態調査の実施、集積の魅力度に関する調査分析の実施、調査結果の分析・検討と理論構築、得られた成果の発信及び研究会等の実施、以上を中心とした研究活動を進めていく。
センチニクバエ由来NF-kB様転写因子5-kDa蛋白質のX線結晶構造解析

これまでにT7プロモータを含む発現ベクターにSRAMのORFを導入し、全長に続いてHis-Tag(His x6)をC末端側に付加したリコンビナント蛋白質を大腸菌により発現させた。このリコンビナントSRAM単独で結晶化条件の探索を試みたが結晶は得られなかった。DNA結合蛋白質の場合DNAとの共結晶化を行ったほうがよい結果を得られる場合が多いことが知られている。そこで、共結晶化に適したDNA配列を結合活性の強弱によって探索するため、各種kB様配列との結合活性をゲルシフトアッセイによって確認した。その結果kB様配列とSRAMとの結合ではGGGxxxxCCCという配列がGGGやCCCの部分が変化しているkB様配列に比べて結合活性が明らかに高いことがわかった。しかしながら、この全長で発現させたリコンビナントSRAMと結合活性の強弱を参考にして作製した様々なkB様配列を用いて共結晶化を行ったにもかかわらず結晶は得られなかった。そこで、V8(Glu-C)プロテアーゼおよびトリプシンによるSRAMの限定分解によりドメイン構造を調べた結果、Relホモロジードメインに続く核移行シグナルと、一つ目のAnkyrinリピートドメインとの間で分解され、それぞれのドメイン構造は分解されずに安定した構造をとっていることが分かった。この因子の特徴の一つにAnkyrinリピートを有したまま核移行する点があるが、今回の結果は核移行シグナルがAnkyrinリピートなどのC末端側の領域に覆い隠されていないことを示唆している。また、2つのドメイン構造を持っていることが結晶化の妨げとなっていると考えられることから、限定分解によって分解された部位を参考にしてT7プロモータによる発現系を用いたRelホモロジードメインのみのリコンビナントSRAMコンストラクトを作製した。しかし、リコンビナントSRAMの発現が確認できないことから、現在他のコンストラクトでの作製を試みている。