hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
細線ダイヤモンドワイヤ工具による高能率スライシング加工

昨年度までの研究において,φ180μm以下の細線ワイヤ工具を連続的に試作できる電着装置並びに細線ワイヤ工具を高速走行させながらスライシングできる切断装置の試作が終了し,ワイヤ工具の縒りピッチと加工能率の関係とウェハーうねりとの関係を明らかにした.そこで,本年度においては,試作したワイヤ工具の材料強度試験や切断実験を通じて,本ワイヤ工具の加工メカニズムを検討した結果,以下の事柄が明らかとなった.1.電着時間,メッキ槽長さ,電流密度の観点から細線ワイヤ工具の最適電着条件を検討した結果,ダイヤモンド砥粒と芯線の密着度を向上させるために行う予備メッキ長さが200mm,ダイヤモンド砥粒をワイヤ表面に固着する砥粒槽長さが200mm,ダイヤモンド砥粒の突き出し量を揃える後メッキ長さ200mm,電流密度1.52.0×10^3A/m^2の時,最も長寿命なワイヤ工具となることがわかった.2.試作した細線ワイヤ工具のワイヤ強度試験を行った結果,引張り強度はワイヤ工具の断面積が従来のダイヤモンドワイヤ工具より減少しているために弱いが,ねじり強度は1.5倍向上していることがわかった.3.細線ダイヤモンドワイヤ工具の縒りピッチが加工特性に与える影響を検討した結果,ピッチ8mmの時,最も加工能率は向上した.また,縒りピッチが長い細線ダイヤモンドワイヤ工具は加工に関与するダイヤモンド砥粒数が多く,それが高切断能率の理由であることも切断実験や加工後のワイヤ工具観察から明らかにした.4.切断後のウェハーに関して加工精度の測定を行った結果,細線ダイヤモンドワイヤ工具は従来のワイヤ工具とほぼ同じ値を示した.昨年度までの研究において,φ180μm以下の細線ワイヤ工具を連続的に試作できる電着装置並びに細線ワイヤ工具を高速走行させながらスライシングできる切断装置の試作が終了し,ワイヤ工具の縒りピッチと加工能率の関係とウェハーうねりとの関係を明らかにした.そこで,本年度においては,試作したワイヤ工具の材料強度試験や切断実験を通じて,本ワイヤ工具の加工メカニズムを検討した結果,以下の事柄が明らかとなった.1.電着時間,メッキ槽長さ,電流密度の観点から細線ワイヤ工具の最適電着条件を検討した結果,ダイヤモンド砥粒と芯線の密着度を向上させるために行う予備メッキ長さが200mm,ダイヤモンド砥粒をワイヤ表面に固着する砥粒槽長さが200mm,ダイヤモンド砥粒の突き出し量を揃える後メッキ長さ200mm,電流密度1.52.0×10^3A/m^2の時,最も長寿命なワイヤ工具となることがわかった.2.試作した細線ワイヤ工具のワイヤ強度試験を行った結果,引張り強度はワイヤ工具の断面積が従来のダイヤモンドワイヤ工具より減少しているために弱いが,ねじり強度は1.5倍向上していることがわかった.3.細線ダイヤモンドワイヤ工具の縒りピッチが加工特性に与える影響を検討した結果,ピッチ8mmの時,最も加工能率は向上した.また,縒りピッチが長い細線ダイヤモンドワイヤ工具は加工に関与するダイヤモンド砥粒数が多く,それが高切断能率の理由であることも切断実験や加工後のワイヤ工具観察から明らかにした.4.切断後のウェハーに関して加工精度の測定を行った結果,細線ダイヤモンドワイヤ工具は従来のワイヤ工具とほぼ同じ値を示した.本年度の研究は以下に示すように細線ワイヤ工具の開発と細線ワイヤ工具用マルチワイヤソーの開発をそれぞれ行った.本年度の研究実施成果を以下に記す.・細線ワイヤ工具の開発細線ワイヤは通常のワイヤ工具の芯線に比して直径が小さいため,通電時の抵抗が上昇し,電着部での水素を発生しやすくなるためにピットと呼ばれるクレーター状の凹みを電着表面に生じやすい傾向がある.そのため,砥粒電着部にメッキ液の流入を促進させるような機構と細線ワイヤを縒り線にする機構を設けた電着装置を試作し,3040μmのダイヤモンド砥粒を用いて細線ワイヤ工具を作製した.その結果,1.φ58μmのピアノ線2本を縒り合わしたワイヤを芯線として用いることにより,最大径φ0.18mmのワイヤ工具を作製することができた.2.細線ワイヤ工具の引っ張り並びに捻り破断強度特性を検討し,従来ワイヤ工具と比較し,切断時の最適ワイヤ張力が7.84Nであることを明らかにした.・細線ワイヤ工具用マルチワイヤソーの開発今年度試作することができた細線ダイヤモンドワイヤ工具の加工特性実験を行うための切断装置として,ワイヤ走行方向の反転時に生じる張力変動によるワイヤへの影響を最小限にした切断装置の設計・製作が終了し,簡単な切断実験を行った結果,1.細線ワイヤ工具は砥粒1個当たりの加工圧の向上や切り屑の排除生の向上から従来のワイヤ工具の切断能率を30%向上させることを明らかにした.現在,大口径シリコンインゴットのスライシングに対しては,スラリー(水溶性切削油と砥粒を混合させた加工液)を連続供給させながらスライシングを行うマルチワイヤソー方式(遊離砥粒マルチワイヤソー)が利用されている.そこで,本研究では遊離砥粒マルチワイヤソーの大口径シリコンインゴットスライシングに対応できる長所を加味しつつ,ワイヤ表面にダイヤモンド砥粒を固着させたワイヤ工具と加工液として水を用い,環境問題にも十分に対応可能な高能率固定砥粒マルチワイヤソーを開発することを目標としている.

本研究ではワイヤ工具の高性能化を目指してφ58μmピアノ線ワイヤを2本と3040μmのダイヤモンド砥粒を用いることによって,チップポケットを有する高能率細線ワイヤ工具(φ0.18mm程度以下)を作製し,その細線ワイヤ工具を高速走行させながら切断する加工システムの開発を目指している.そして,細線ワイヤ工具の加工特性並びに加工メカニズムの検討並びに加工精度の挙動を理論・実験の両面から研究し,実用化への可能性を追求するものである.そこで,本年度における研究成果は以下の通りである.1.試作した細線ワイヤ工具用電着装置の改良を行い,φ180μm以下のワイヤ工具が連続的に試作できるようになった.2.試作した電着装置を用いて電着時間,メッキ液濃度・温度,電流密度の観点から細線ワイヤ工具の最適電着条件を検討した結果,ワイヤの縒りピッチが28mmの範囲では,縒りピッチは長い方が高い切断能率を示し,全面にダイヤモンド砥粒を電着した従来のワイヤ工具(φ0.3mm)の1.4倍程度まで加工能率は向上することが明らかになった.3.細線ワイヤ工具で切断されたウェハーのうねりは従来ワイヤ工具よりも若干向上し,加工表面粗さは全く同じ値を示すことが明らかになった.昨年度までに,φ180μm以下の細線ワイヤ工具を連続的に試作できる電着装置並びに細線ワイヤ工具を高速走行させながらスライシングできる切断装置の試作が終了し,実験可能であることを明らかにした.そこで,本年度においては試作した電着装置並びに切断装置を用いて最適条件について検討した結果,以下の事柄が明らかとなった.1.φ58μmのピアノ線2本を縒りながらその表面に30-40μmのダイヤモンド砥粒を電着するために電流密度,予備メッキ槽長さ,後メッキ槽長さ(砥粒と砥粒の隙間を埋めるメッキ工程)を変化させてワイヤ工具を試作し,切断実験をした結果,予備メッキとしてワイヤ表面に10μm程度メッキ(本実験条件では予備メッキ槽長さ200mm)し,後メッキ後のメッキ厚さが35μm(本実験条件では後メッキ槽長さ300mm)の時,最も加工能率が高く長寿命であることがわかった.2.試作したワイヤ工具の縒りピッチが加工に与える影響を実験的に検討した結果,縒りピッチ28mmの範囲内において,縒りピッチが長い方が加工能率は高いことがわかった.縒りピッチ長さが長くなると,加工中に工作物とワイヤ工具の接触面積が増加し,加工に関与する砥粒数の増加に起因していることを見出した.3.試作したワイヤ工具の加工中の挙動を観察した結果,縒りピッチが長いワイヤ工具の方が加工中のワイヤの往復動によって,より大きく振れることが明らかとなった.4.細線ワイヤ工具と従来の太いワイヤ工具の加工精度を実験的に求めて比較した結果,加工表面粗さ,加工面うねり,加工エッジ部で発生するチッピング共にほぼ同程度の値を示すことが明らかとなり,今回試作した細線ワイヤ工具は十分実用に耐え得ることが明らかとなった.
多発性硬化症におけるTh17細胞とB細胞の相互作用の解析

多発性硬化症では、IL-17産生性CD4陽性T細胞(Th17細胞)が病原性細胞として注目されている。細胞遊走に重要なケモカイン受容体CCR2を発現し、CCR5発現を欠く細胞集団にTh17細胞が属するというデータに基づき、患者の血中・脳脊髄液中のTh17細胞について検討した。同集団は抗体産生細胞であるB細胞を活性化する機能を持っていた。また再発時の患者ではCCR2とCCR5の両者を発現する細胞が増加していたが、この細胞はIFNγとIL-17の両者を産生し、再発の引き金となる細胞である可能性が示唆された。IL-17産生性CD4陽性T細胞(Th17細胞)は難病である多発性硬化症(Multiple Sclerosis; MS)の病態への関与が示唆されている。我々は平成19年度、ケモカイン受容体の発現パターンから同細胞を含む分画としてCCR2陽性CCR5陰性の分画を同定した。この分画のMSにおける役割について、再発期・寛解期のMS患者の血液や髄液を用いて、健常者や非MS患者との比較・解析を行った.近年MSの病態への役割が注目されているB細胞についての検討では、CCR2陽性CCR5陰性分画のT細胞はB細胞のIgG産生能を高め、そのメカニーズムとして同分画の細胞が産生するIL-21が重要である可能性が示唆された。また一部のMS患者において、高い抗体産生能をもつCD180陰性のB細胞が健常者と比較して有意に高いことも判明したが、この細胞はT細胞非依存性に活性化するため、Th17細胞との関連は否定的と考えられた。Th17細胞はCCR4陽性CCR6陽性分画に多く含まれるという他施設の報告を考慮し、MS患者の末梢血中と鮭液中のT細胞のCCR2, CCR4, CCR5, CCR6の発現パターンについて検討したところ、末梢血中では再発寛解の有無にかかわらず健常者と有意な違いは認められなかったが、再発時のMS患者の髄液中においてCCR2陽性CCR5陽性分画が増加している与とがわかった。同分画はIFNγを産生するTh1細胞とTh17細胞の両者を含む分画であり、同分画がMSの再発に関与する可能性が示唆された。そのメカニズムについて今後さらに検討を進めることにより、MSに対するケモカイン受容体阻害療法の応用が考えられる。
細胞内小器官における膜輸送機構の解析に関する研究

ラット肝ミクロゾ-ム膜においてグルコ-ス-6-リン酸(G6P)輸送系と対をなして存在していると考えられているりん酸の輸送系の存在を明らかにするとともに、その質的な解析を行なうためにピロリン酸PPiの取り込みに関する実験を行なった。G6P輸送系の解析の方法と同様に40mMカュジレート緩衝液(PH6.0)、肝ミクロゾーム分画200μgと1mMPPiを0.5μci^<32>P-PPiをトレーサーとして230°Cで05分間インキュベート(final volume0.5ml)した。反応停止は反応液に氷冷した20倍量の0.25M蔗糖に50mMTris-cl Butter(pH7.5)25mMKclを含む液を注入して行なった后、直ちにガラスメンブランフィルター(whatman GF/F)上にミクロゾーム分画を集め、5mlの上記溶液で2回洗浄した。このフィルターを風乾後、液体シンチレーションカンウターで放射活性の測定を行なった。この方法ではG6Pの場合と異なり、フィルター上にミクロゾーム分画を除いた反応液を注いだだけでも高い放射活性となり、ミクロゾーム分画への取り込みが測定出来なかった。そこで洗浄の条件、洗浄液等を種々検討した結果、フィルターを50mM程度のPPiを含む反応停止液にひたしてから使用することにより、フィルターへの^<32>P・の吸着量はかなりの程度減少した。しかし、ミクロゾームへの取り込みについては、蛋白量、基質濃度、温度条件等について種々検討したが、いまだ明らかなPPiの取り込みを示唆する結果は得られていない。糖原病Ib患者の肝ではPPi phospho hydrolose活性にミクロゾーム膜破壊及び未破壊で差のあること、又PPiの輸送系の欠損によると考えられるIcの存在の報告、さらに直接取り込みを明らかにした等の報告がみられているが、現在まで我々の実験からは直接的な結果は得られていない。方法論をさらに検討するとともにIc型の発見につとめ、さらに検討したい。肝の糖新生系におけるG6P(ルユースー6-燐酸)からのグルユースの産生はサイトゾール内に産生されたG6PがG6Pに特異的なG6P輸送系により,ミクロゾーム内に転送され,そこでG6Paseによりグルユースと無機燐に分解されることによって行われる.このG6P輸送系の障害による先天代謝異常症が糖原病I6型で, G6Paseの異常によるものがIa型である.このG6Pase系にはG6P輸送系, G6Paseの他に燐の輸送系の存在が示唆されており,又この輸送系の異常によると思われる疾患の報告もあるが,詳細については不明である.G6P及びピロリン酸(PPi)を基質として,ラット肝ミクロゾームで, G6Pase,活性及びPPiase活性を膜破壊処理ミクロゾーム及び未処理ミクロゾームでは活性に差があり, PPiについてもlatencyが認められる.さらにG6P輸送系の欠損しているIb型患者肝ミクロゾームでdetergeut未処理でもPPi活性は測定出来ることより, G6P輸送系とは独立したものと考えられる.さらにG6P輸送系に対しては強くないようである.より確実に燐輸送系の存在及び性質を直接的に研究する方法として,取り込み実験を行なった. ^<32>-PPiをトレーサーとして,メンブランフィルター法を用いた. ^<32>Pの取り込みの時間的経過では^<32>Pの取り込みのsuturableな傾向は認められており, 12分でSteady Stateになっている.しかし現在の方法ではバックグウンドが高く,計量出来る状態には至っていない.今合方法の改良によりG6Pで行なったような燐輸送系の質的な解析を行い, G6Pace活性系における各要素の性質を明らかにしていく.ラット肝ミクロゾ-ム膜においてグルコ-ス-6-リン酸(G6P)輸送系と対をなして存在していると考えられているりん酸の輸送系の存在を明らかにするとともに、その質的な解析を行なうためにピロリン酸PPiの取り込みに関する実験を行なった。

糖原病Ib患者の肝ではPPi phospho hydrolose活性にミクロゾーム膜破壊及び未破壊で差のあること、又PPiの輸送系の欠損によると考えられるIcの存在の報告、さらに直接取り込みを明らかにした等の報告がみられているが、現在まで我々の実験からは直接的な結果は得られていない。方法論をさらに検討するとともにIc型の発見につとめ、さらに検討したい。
原子核におけるαクラスタリングとα凝縮の構造研究

原子核の新しい存在形態であるα粒子凝縮状態の拡がりと深さを明らかにするために、^<16> Oおよび^<11>B、^<13> Cを中心に、励起状態における存在の可能性を理論的に追究した。それぞれ4αおよび2α+t、3α+n閾値近傍にクラスターガス状態が出現し、その出現機構を明らかにした。さらに、軽い核でクラスター状態を探索するのに有効な物理量がアイソスカラー型の電磁単極子遷移強度であり、その励起機構を理論的に明らかにした。(1)炭素12の原子核のホイル状態として知られている2番目の0^+状態は、宇宙における元素合成において重要な役割を果たす。この状態の構造は3つのα粒子がガス的に緩く結合し、しかもその最低エネルギー状態であるS軌道に3つのα粒子が凝縮した構造を有していることが知られている。このように原子核を構成しているクラスターがガス的構造を有し、全てのクラスターがS軌道を占有している状態をホイル類似状態と呼ぶ。このような状態が酸素16の原子核でも存在することが最近の4α直交条件模型を用いた研究によって明らかにされているが、非4n核でも存在するかどうかを理論的に探究することは非常に興味深い。本研究ではボロン11の原子核に焦点を当てて複素回転座標法や一体密度行列などを用いた構造分析を行った。この結果、α+α+t閾値近傍の1/2^+状態が、3つのクラスター(2個のα粒子、1個のトライトン粒子)が主としてS軌道を占有しているホイル類似的な構造を有する状態であることを明らかにした。(2)酸素16の原子核において、微視的波動関数(THSR波動関数)を用いて共鳴の条件を考慮に入れた構造分析を行い、4α閾値近傍の6番目の0^+状態がホイル類似状態であることを明らかにした。この結果は先行研究の半微視的模型である4α直交条件模型を用いた分析結果と非常に良く対応していることが分かった。(3)原子核のある状態がαガスの凝縮的状態であるかどうかを理論的に判定するためには、微視的波動関数からα粒子に対する一体密度行列を定義し、これからα凝縮度や単一α粒子軌道を評価する必要がある。この際、密度行列の座標定義に関して、ある研究グループより座標定義の不定性が指摘され、原子核におけるα凝縮の存在に大きな疑問を呈する論文が発表された。これに対して、我々は一体密度行列の座標は不定性なく定義できることを証明し、彼らの論拠に誤りがあることを明らかにした。炭素12原子核のホイル状態は3つのα粒子がガス的に緩く結合し、しかもその最低エネルギー状態であるS軌道に3つのα粒子が凝縮した特異的な構造を有していることが明らかにされている。ホイル状態のように原子核を構成しているクラスターがガス的構造を有し、全てのクラスターがS軌道を占有している状態をホイル類似状態と呼ぶ。このガス的状態は原子核における新しい物質形態の一つであり、この状態の存在及び運動様式の拡がりと深さを探求することは、原子核構造論の重要な課題の一つである。今年度は酸素16原子核以外に、軽い非4n核の代表であるボロン11原子核と炭素13原子核に焦点を置いて研究を進めた。得られた成果は以下の通りである。(1)ボロン11原子核の3番目の3/2-状態がクラスター構造を有していることを明らかにし、さらにα+α+t閾値近傍の2番目の1/2+状態が、3つのクラスター(2個のα粒子、1個のトライトン粒子)が主としてS軌道を占有しているホイル類似的なガス構造を有する状態であることを明らかにした。この成果は原著論文として出版された。(2)炭素13原子核ではクラスター模型を用いて、3つの励起1/2-状態のモノポール遷移強度の再現に初めて成功し、このエネルギー領域におけるクラスター自由度の重要性を示した。また、1番目の1/2+状態が中性子ハロー的な状態を有する事を理論的に明らかにし、さらに3α+n閾値近傍の3番目の1/2+状態がホイル類似構造を有することを示した。(3)酸素16の原子核において、微視的波動関数(THSR波動関数)を用いて共鳴の条件を考慮に入れた構造分析を行い、4α閾値近傍の0^+状態がホイル類似状態であることを明らかにした。この成果は原著論文として発表された。軽い核の代表例である酸素16核のアイソスカラー型単極子励起関数において、相対論および非相対論に基づいた平均場理論では比較的高いエネルギー領域(約16MeVから40MeV)の強度関数のデータを近似的に再現するが、比較的低いエネルギー領域(約16MeV以下)における強度関数の再現は、定性的ですら大きな困難を伴うという事実がある。この低エネルギー領域の強度関数が4αの直交条件模型に基づいた4体計算により見事に再現されることを23年度の研究で明らかにした。

この中で、アイソスカラー型単極子演算子は1粒子1空孔状態で特徴づけられる平均場的な状態だけではなく、クラスター構造を有する状態を励起し、酸素16核ではこれら2つの質的に異なる構造がエネルギー的に分離して励起されることを示した。さらに、酸素16核の基底状態は2重閉殻構造を有しているのにも係らず、この状態からクラスター状態が比較的強く励起される物理的機構が以下のように明らかにされた:(1)2重閉殻構造を持つ基底状態の波動関数はBayman-Bohr定理によりクラスター波動関数および4αクラスター波動波動関数と数学的に同等であることから、基底状態には平均場的な自由度以外に、α+^<12>Cや4αのクラスター自由度が内在していること、(2)アイソスカラー型の単極子演算子は核子座標に関して2次形式であるために、クラスター内核子に作用する項とクラスター間の相対部分に作用する項に分離することができ、後者は基底状態に内在するクラスター自由度を活性化して、クラスター状態を励起できること、(3)基底状態におけるαクラスター型の相関がモノポール励起強度をさらに大きくすること、である。このメカニズムは軽い核においては普遍的であると考えられるので、酸素16核以外の核(中性子過剰核も含めて)で系統的な分析を行うことの重要性を示すことができた。
英語ビジネスコミュニケーションにおける異文化の課題と対処策、教育方法の探求

日本人が英語を使って多様な文化・言語背景をもつ人とコミュニケーションをするには、英語力だけでなく、異文化への理解や配慮が不可欠である。本件は、グローバル化のもと、多文化が混在する場で共通語としての英語を使って仕事をする際に、日本人が文化の違いをめぐりどのような課題に直面し、どう解決しようとしているかを、実社会で英語を使って仕事をしている人の経験談の質的分析を通して明らかにする。また、将来ビジネス等で、共通語としての英語を使うであろう学生が、日本のコミュニケーション文化を相対的に理解し、多様な文化の人と効果的なコミュニケーションをする方法を学ぶような、英語と異文化を統合した教育方法を探求する。
網膜血管内皮細胞に対する障害因子の形態学的研究

網膜血管内皮細胞をウシ眼より分離培養して種々の負荷下における形態学的変化について検討した。1)対照(無負荷)培養開始後3日目頃より血管片周囲に細胞が出現しはじめ,培養7日目で血管片周囲に円形の核をした核小体の明瞭な細胞が認められた。培養4週目になると敷石状に細胞が配列した。さらに継続して培養すると,同一培養皿内に細胞突起を延ばし重層化を示す線維芽細胞様の細胞群も出現してきた。これをのぞくため初代培養2週間日に細小血管片をのぞき,培養4週目に最小希釈法によりクローニングを行い血管内皮のみを分離した。これは第VIII因子関連抗原陽性が免疫組織化学的に確認されて血管内皮細胞であることが確認された。2)糖負荷の影響培養35代目のウシ網膜血管内皮細胞をチャンバースライド内にまき,ローグルコース濃度が100mg/dl,200mg/dl,400mg/dlの培養液で3週間培養した。グルコース100mg/dlで7日間培養すると細胞密度の疎な部分が混在した。F-アクチン染色では細胞集塊は平面的に接合しており細胞間に比較的均一に染色されている。グルコース200mg/dlでは,内皮細胞が重層化し,立体的な細胞集塊がみられ,この集塊の中に基底模様物質の集積がみられた。F-アクチン染色では,細胞集塊突起部に濃く染色された。グルコース400mg/dlでは,細胞密度が低く,変性した細胞が多く認められるようになったが,立体的細胞集塊はかえって多くみられた。走査電顕では,グルコース100mg/dlでは細胞接合部に指嵌像がみられたが,400mg/dlでは細胞間が大きくあいていた。ガラクトース負荷でも上記グルコースと同様の変化がみられた。インスリン負荷のみでは今回検討した濃度では対照と有意差がみられなかった。
抗菌性分子を徐放する生分解性シルク縫合糸の創出

本課題では、緩やかな生分解に伴い抗菌性分子を徐放する生分解性シルク縫合糸の創出を目的とする。これまで、シルクのタンパク質二次構造を変化について検討しており、この技術を縫合糸へ適応し、シルク縫合糸に様々な生分解特性を付与する。さらに、手術部位感染の低減を目指し、抗菌スペクトルが広く安全性が高い抗菌性分子を縫合糸に固定化し、創部からの徐放を制御する。得られた知見より、「生分解性」と「抗菌性」を兼ね備えた縫合糸の創出につなげる。
ニューファンドランドと北大西洋世界史―決裂と妥結のカナダ連邦加入交渉の分析

ニューファンドランドは、イギリス帝国最古の海外植民地として、大陸側のカナダとは異なる歩みをたどってきた。カナダが自治領(ドミニオン)となった1867年の連邦結成では、ニューファンドランドは代表を送ったが、加入を見送った。その後、断続的な交渉が続いたものの決裂した。1940年代に再開された交渉でようやく妥結し、1949年、カナダに加入した。本研究は、ニューファンドランドがカナダに加入するまでの過程を、1940年代の妥結した交渉のみならず、それ以前の決裂した交渉をも視野に入れ、しかも、ニューファンドランドとカナダだけでなく、イギリスやアメリカ合衆国の動きも視野に入れることで、北大西洋世界の長期的な歴史的動態を考察することをめざしている。2年目にあたる2018年度は、ニューファンドランド全般の歴史を概観した前年度の実績を踏まえたうえで、ニューファンドランドのカナダ加入をめぐる交渉のうち、決裂した交渉の一端を考察した。特に重点をおいたのは、ニューファンドランドを行政管理統治に導いた歴史的文書である『アムルリー報告書』(1933年)の検討である。同報告書を作成したアムルリー委員会が、ニューファンドランドの現状をどのように把握していたのか、そして、カナダへの加入を見送ったのは何ゆえなのか、について考察した。その結果、カナダ、イギリス双方の消極的な姿勢に加えて、ニューファンドランドとカナダの間にある根強い相互不信が、カナダ加入への大きな足かせであったことを確認した。これは、ニューファンドランドがカナダとは異なる歴史を歩んできたことを示した前年度の研究成果と合致するものであった。本年度は、単訳書と共訳書の計3冊の刊行に多くの時間を割いたため、史料の収集・読解に十分な時間がかけられなかった。とはいえ、カナダの人権史を扱った単訳書も、グローバルな歴史を扱った共訳書も、分析の視角・視点や題材の選択が非常にユニークであり、本研究課題の研究遂行においてヒントが得られたことは、大きな収穫であった。ニューファンドランドのカナダ加入をめぐる交渉(決裂、妥結とも)について、前年度に引き続き、決裂した交渉に関する史料収集を実施する。特に、1895年の交渉について重点的に調査する予定である。イギリス帝国最古の海外植民地ニューファンドランドは、カナダとは異なる歩みをたどってきた。カナダ連邦結成(1867年)の協議においては、代表を送ったものの、加入を見送り、その後1890年代まで続いた交渉も決裂した。1940年代に再開された交渉では、ついに妥結に至り、1949年、カナダに加入した。本研究は、ニューファンドランドのカナダ連邦加入をめぐる186090年代の「交渉決裂」と1940年代の「交渉妥結」の双方について、英米加の関係に留意して考察し、それによって、カナダ周縁部からみた「もう1つのカナダ史」を描くだけでなく、19世紀後半20世紀中葉の北大西洋世界の重層的構造や多重的関係の変容を明らかにすることで、英米関係を過度に重視してきた従来の北大西洋世界像の修正を試みるものである。初年度にあたる平成29年度は、ニューファンドランド全般の歴史(大航海時代から1949年のカナダ連邦加入まで)の概要把握・執筆に重点をおいた。特に、カナダが「植民地からドミニオンへ、ドミニオンから主権国家へ」という歩みをたどったのに対して、ニューファンドランドは「植民地から(限りなく植民地に近い)ドミニオンへ、ドミニオンから(限りなく従属地に近い植民地である)行政管理統治へ」という道をたどったことを明らかにした。これによって、「ドミニオン」概念の多義性も明らかにすることができ、「もう1つのカナダ史」に加えて、「もう1つのイギリス帝国史」の一端を示した。本年度は、ニューファンドランド全般の歴史に関する概説書の刊行に専念したため、カナダ連邦加入交渉(決裂、妥結とも)について、具体的に踏み込んだ史料収集に時間をかけることができなかった。

これは、ニューファンドランドがカナダとは異なる歴史を歩んできたことを示した前年度の研究成果と合致するものであった。本年度は、単訳書と共訳書の計3冊の刊行に多くの時間を割いたため、史料の収集・読解に十分な時間がかけられなかった。とはいえ、カナダの人権史を扱った単訳書も、グローバルな歴史を扱った共訳書も、分析の視角・視点や題材の選択が非常にユニークであり、本研究課題の研究遂行においてヒントが得られたことは、大きな収穫であった。カナダ連邦加入交渉(決裂、妥結とも)について、特に決裂した交渉に関する史料収集を実施する。次年度は、特に、アムルリー委員会報告書を重点的に調査し、それ以前に行われ決裂した交渉を同委員会がどのようにとらえていたかについて考察する予定である。ニューファンドランドのカナダ加入をめぐる交渉(決裂、妥結とも)について、前年度に引き続き、決裂した交渉に関する史料収集を実施する。特に、1895年の交渉について重点的に調査する予定である。
幼児の社会-情緒的問題のスクリーニング尺度-日本語版BITSEA‐の標準化

本研究の目的は、1歳から3歳未満の幼児の社会-情緒、行動上の問題をスクリーニングする尺度である日本語版Brief Infant-Toddler Social and EmotionalAssessment(BITSEA)の信頼性・妥当性の検討、標準得点・カットオフ値の設定、使用マニュアルの作成を行い、日本語版BITSEAを我が国の臨床現場で活用可能な尺度として確立することである。今年度は、昨年度に引き続き、データの二次分析による日本語版BITSEAの信頼性・妥当性の検討を行うとともに、自閉症スペクトラム(ASD)群及びグレーゾーン群のデータ収集に取り組んだ。具体的には以下の通りである。1)尺度の信頼性・妥当性の検討:既存データの二次分析を行い、再テスト法における級内相関係数の算出、評定者(夫婦)間一致率の算出、日本語版BITSEAの評定と既存尺度(子どもの行動チェックリスト:CBCL2/3、Pervasive Developmental Disorders Autism Society Japan Rating Scale:PARS)の評定及び子どもの行動上の問題に対する養育者の不安の評定との間の相関係数の算出を行い、日本語版BITSEAが十分な信頼性・妥当性を有することを確認した。また、PARSの得点においてカットオフ値を超える群は、そうでない群と比較して、問題領域の得点が有意に高く、能力領域の得点が有意に低いことを確認した。2)臨床群のデータ収集:ASD群、グレーゾーン群のデータは、既に収集されてデータと統合し、ASD群28例、グレーゾーン群23例、計51例のデータ収集を完了した。これら臨床群のデータを健常児群50例のデータと比較することで、日本語版BITSEAのカットオフ値を検討していく予定である。平成29年度が最終年度であるため、記入しない。1歳から3歳未満の幼児の社会-情緒、行動上の問題を有する子どものスクリーニング尺度である日本語版Brief Infant-Toddler Social and EmotionalAssessment(日本語版BITSEA)の標準化を行う目的で、今年度は先行研究で得られたデータの二次分析を実施した。埼玉県内に居住する1歳から3歳未満の幼児とその養育者1500名を層化二段抽出法により無作為に抽出した上で質問紙を配布し、回答が得られた659名のうち(回収率43.93%)、欠損値のみられた81名を除外し、578名のデータを分析対象とした(有効回答率87.71%)。性別は男児261名(45.16%)、女児317名(54.84%)、居住地域は政令指定都市部が99名(17.13%)、市部が440名(76.12%)、町村部が39名(6.75%)であった。日本語版BITSEAにおけるCronbachのα係数は問題領域、能力領域ともに0.7以上であり、十分な内的整合性が確認された。また、日本語版BITSEAの得点には有意な性差および月齢差があり、この結果は、原版BITSEAにおける知見とも一貫性があった。また、米国の標準サンプルの得点との比較において、社会-情緒、行動上の問題および能力における有意な文化差が明らかとなった。以上より、日本語版BITSEAの基準値の設定において、性差、月齢差、文化差を考慮に入れる必要性があることが示唆された。日本語版BITSEAのテスト-再テスト法による信頼性、既存尺度との併存妥当性については、現在分析中である。日本人の標準サンプルにおける日本語版BITSEAの得点分布、性差、月齢差、文化差、内的整合性について検討し、国内外の学術集会にて結果を発表した。テスト-再テスト法による信頼性および既存尺度との併存妥当性についてはデータの分析中であるため、継続して分析を進める必要がある。また、日本語版BITSEAのカットオフ値の設定においては、臨床群およびコントロール群のデータ収集の進捗が遅れているため、目標のサンプル数が得られるよう計画的に実施していく必要がある。

これら臨床群のデータを健常児群50例のデータと比較することで、日本語版BITSEAのカットオフ値を検討していく予定である。日本語版BITSEAのカットオフ値の設定を行うため、小児科クリニック及び児童精神科クリニックにおいて、ASD群、グレーゾーン群、コントロール群の3群のデータ収集を行っていく。3群のデータに基づいて、日本語版BITSEAにおける性別および月齢別のカットオフ値を設定する。本研究で得られた結果を統合した上で、日本語版BITSEAの使用マニュアルの作成に着手する。平成29年度が最終年度であるため、記入しない。
目撃者証言の心理学的研究-日常文脈における顔の認知と記憶-

厳島は目撃証言に影響する諸要因のうち,現在もっとも研究が蓄積されている「事後情報効果」についてレビューを行い,誤情報効果(事後情報効果)と呼ばれる記憶の歪みを生み出す記憶のメカニズムを検討した.そして,オリジナルの出来事の記憶の変容に関する理論には,事後情報の内容によって元のオリジナルの記憶が失われるとする置き換え仮説(Loftus & Loftus 1980),McCloskey & Zoragoza(1985)のバイアス仮説,共存仮説,モニタリングエラー仮説のあることを指摘し,今後の研究方向を示唆した.これは認知科学誌に論文として発表された.事後情報研究の新しい方法として,厳島は反復プライミングの方法を使用して,事後の情報として顔の部分情報を提示する方法で既知顔の認識メカニズムを検討した.ここでは反復プライミング量(判断の促進の量)を測度とした.その結果,顔の部分が先行して提示され,その後同一顔の全体が提示されて既知性判断を行う場合の方が,先行して全体顔,次に部分顔を提示する場合に比較して処理が速いことを認め,部分顔による認識では顔の初期情報の処理に影響が出ること(言い換えれば,部分から全体の処理が必要なこと)が明らかになった.この結果は第2回ICOM(International Conference on Memory,Italy)で発表された.山田と厳島は,顔の表情の認識を取り上げ,特に顔面表情のカテゴリー化がどのようなメカニズムで生起するのか,従来の説明モデルを吟味して実験的検討を行った.その結果から,所与の表情のカテゴリー判断は,まず感情的意味空間のいずれかの位置に表象される,次に同じ空間に定位される各感情カテゴリーの表情のプロトタイプからの距離が計算される,そしてその計算結果としてもっとも距離的に接近したプロトタイプを所有するカテゴリーに分類される,というプロセスを経る可能性が示唆された.厳島は目撃証言に影響する諸要因のうち,現在もっとも研究が蓄積されている「事後情報効果」についてレビューを行い,誤情報効果(事後情報効果)と呼ばれる記憶の歪みを生み出す記憶のメカニズムを検討した.そして,オリジナルの出来事の記憶の変容に関する理論には,事後情報の内容によって元のオリジナルの記憶が失われるとする置き換え仮説(Loftus & Loftus 1980),McCloskey & Zoragoza(1985)のバイアス仮説,共存仮説,モニタリングエラー仮説のあることを指摘し,今後の研究方向を示唆した.これは認知科学誌に論文として発表された.事後情報研究の新しい方法として,厳島は反復プライミングの方法を使用して,事後の情報として顔の部分情報を提示する方法で既知顔の認識メカニズムを検討した.ここでは反復プライミング量(判断の促進の量)を測度とした.その結果,顔の部分が先行して提示され,その後同一顔の全体が提示されて既知性判断を行う場合の方が,先行して全体顔,次に部分顔を提示する場合に比較して処理が速いことを認め,部分顔による認識では顔の初期情報の処理に影響が出ること(言い換えれば,部分から全体の処理が必要なこと)が明らかになった.この結果は第2回ICOM(International Conference on Memory,Italy)で発表された.山田と厳島は,顔の表情の認識を取り上げ,特に顔面表情のカテゴリー化がどのようなメカニズムで生起するのか,従来の説明モデルを吟味して実験的検討を行った.その結果から,所与の表情のカテゴリー判断は,まず感情的意味空間のいずれかの位置に表象される,次に同じ空間に定位される各感情カテゴリーの表情のプロトタイプからの距離が計算される,そしてその計算結果としてもっとも距離的に接近したプロトタイプを所有するカテゴリーに分類される,というプロセスを経る可能性が示唆された.目撃者証言の心理学的研究の中でも本研究では日常文脈の顔の認知と記憶を検討することを目的とするため,本研究では,目撃者証言における記憶の歪みを検討したElizabethF. Loftusの一連の研究で示された事後情報効果の研究とそれ以降の事誤情報研究の流れをレビューして,事誤情報効果のメカニズムを説明する理論を明確にする作業を行ったこの作業は,厳島の論文"誤情報効果研究の展望-Loftusparadigm以降の発展"にまとめられ,研究雑誌「認知科学」第3巻第1号,1-14ページに掲載された.この検討をもとに,厳島・山田は目撃における顔認知の正確さを規定する要因として,通行人がスリをする行為をシミュレーションした目撃事象としての出来事をビデオ刺激として作成し,これを被験者に観察させ,スリを行った人物を同定する実験を行った.刺激は画面に登場する人物の数を変数に2水準を用意し,また記憶再認までの時間も直後と一時間後の2水準を容易した.再認においてはブランクラインアップを採用した.結果は出来事の時間評価が極端に過大評価され,人物が写真の中にいないにも関わらず,多くの被験者がラインナップから誤って識別する傾向が認められた.また,顔認識の基礎的処理過程を検討するために,顔の反復プライミング効果を検討する実験も行った.これは顔認識における人物同定ノードの機能を明らかにするもので,プライミング課題には職業分類課題を,本実験では既知性判断課題を採用した.既知性判断課題では職業分類課題で使用した刺激顔の部分情報を提示し,人物同定ノードと初期段階の知覚処理が明らかになるように実験計画を立案した.実験結果は初期知覚の段階には顔の部分情報の処理に時間がより必要なものの,反復プライミング効果は部分情報にも認められ人物識別ノードと初期の知覚処理が明確に分離され得ることを示した.

厳島は目撃証言に影響する諸要因のうち,現在もっとも研究が蓄積されている「事後情報効果」についてレビューを行い,誤情報効果(事後情報効果)と呼ばれる記憶の歪みを生み出す記憶のメカニズムを検討した.そして,オリジナルの出来事の記憶の変容に関する理論には,事後情報の内容によって元のオリジナルの記憶が失われるとする置き換え仮説(Loftus & Loftus1980),McCloskey & Zaragoza(1985)のバイアス仮説,共存仮説,モニタリングエラー仮説のあることを指摘し,今後の研究方向を示唆した.これは認知科学誌に論文として発表された.事後情報研究の新しい方法として,厳島は反復プライミングの方法を使用して,事後の情報として顔の部分情報を提示する方法で既知顔の認識メカニズムを検討した.ここでは反復プライミング量(判断の促進の量)を測度とした.その結果,顔の部分が先行して提示され,その後同一顔の全体が提示されて既知性判断を行う場合の方が,先行して全体顔,次に部分顔を提示する場合に比較して処理が速いことを認め,部分顔による認識では顔の初期情報の処理に影響が出ること(言い換えれば,部分から全体の処理が必要なこと)が明らかになった.この結果は第2回ICOM(Internatinal Conference on Memory, Italy)で発表された.山田と厳島は,顔の表情の認識を取り上げ,特に顔面表情のカテゴリー化がどのようなメカニズムで生起するのか,従来の説明モデルを吟味して実験的検討を行った.その結果から,所与の表情のカテゴリー判断は,まず感情的意味空間のいずれかの位置に表象される,次に同じ空間に定位される各感情カテゴリーの表情のプロトタイプからの距離が計算される,そしてその計算結果としてもっとも距離的に接近したプロトタイプを所有するカテゴリーに分類される,というプロセスを経る可能性が示唆された.
光受容タンパク質を利用したタンパク質の局在と活性の制御

研究代表者がこれまでに、独自に同定・解析した新しい光受容タンパク質の光スイッチ系を発展させ、より広くタンパク質活性や生体分子の制御に利用できる可能性を探った。具体的には、クリプトクロム分子の細胞内局在制御およびクリプトクロムの大量発現系の構築を目指した。その結果、哺乳類細胞膜上に蛍光シグナルを観察することに成功した。また、出芽酵母を用いた安定発現系において、発色団を保持した状態のクリプトクロムの高発現を見いだし、精製、分光解析、および生化学的解析に成功した。生物は進化の過程で多様な光応答システムを発達させ、巧みに生体を制御する仕組みを獲得してきた。研究代表者はこれまでに、独自に同定・解析した新しい光受容分子を光スイッチ分子として利用し、光による遺伝子発現制御系を構築した。本研究では、この系をさらに発展させ、より広くタンパク質活性や生体分子の制御に利用できる可能性を探るために、これまでに同定したクリプトクロム分子とその相互作用系を使い、任意のタンパク質の細胞内局在や解離・会合状態を制御することによって、生命科学分野における画期的新技術を提供することを目指した。タンパク質活性の光制御系として、タンパク質膜局在をスイッチングする系を構築するために、細胞内にて相互作用するクリプトクロムを膜に固定して可視化することを試みた。クリプトクロムのC末端に膜局在化シグナルを付加し、同時に蛍光タンパク質と融合させて発現させることによって、哺乳類細胞膜上に蛍光シグナルを観察することに成功した。現在、この系を利用し哺乳類細胞においても光スイッチを実現するための条件スクリーニングを行っている。また、in vitroにおけるクリプトクロムの光スイッチングを検出するために、クリプトクロムを培養細胞において大量発現・精製する系の構築を試みた。その結果、広く利用されている哺乳類培養細胞株や昆虫細胞・バキュロウィルス発現系、あるいは大腸菌を用いた系では、光吸収活性のあるクリプトクロムをほとんど発現することができなかった。しかしながら、出芽酵母を用いた安定発現系において、1mg/mL以上の発現量を認めることができ、発色団を保持した状態のクリプトクロムの精製とスペクトル測定に成功した。さらに、精製したタンパク質を用いたスペクトル解析により光サイクルを同定、並行して特異的抗体を用いた生化学的解析により、試験管内での構造変化を検出することに成功した。本研究では、申請者がこれまでに独自に同定・解析した新しい光受容分子を光スイッチ分子として利用し構築した、光による遺伝子発現制御系をさらに発展させ、より広くタンパク質活性や生体分子の制御に応用する系の確立を目指している。研究計画に記載の計画に沿って研究を遂行し、現在までに下記の成果を得た。タンパク質の膜局在の制御に向け、青色光受容体の候補分子であるクリプトクロム(CRY)にGPIアンカーシグナルを付加し、さらにGFPを融合することによって細胞膜に局在化させることに成功した。現在、これを各種の細胞に導入しつつ、相互作用タンパク質の局在を光で制御できるかどうかを検証している。これと並行して、インビトロのスイッチング制御に向けた解析として、抗CRYモノクローナル抗体の作成およびCRYの大量発現を試みた。CRYとして、ニワトリ・ゼブラフィッシュ・アフリカツメガエルのCRYを用い、アミノ酸多様性の高いC末端領域を抗原にして抗体作成を試みた。その結果、ニワトリCRY2, CRY4、ゼブラフィッシュCRY4に対するモノクローナル抗体が複数得られ、ニワトリCRY4に対する抗体の一つは光依存的にCRYと反応した。発現系に関しては、酵母を宿主とする系を検討したところ、GAL4を転写活性化因子とする恒常発現系を構築することに成功した。この系では10Lの培養液より数mgのニワトリCRY4タンパク質が得られ、上記のモノクローナル抗体を用いて、高純度に精製することに成功した。さらに、精製したタンパク質を分光解析したところ、青色光を吸収する酸化型のFADを結合していると推定された。青色光により2段階の光還元が観察されたことから光活性をもつことが明らかとなった。今後は、作成したモノクローナル抗体および精製タンパク質を用いた生化学的解析により、インビトロでの相互作用系の完成を目指す。本研究では、研究代表者らが独自に解析し、構築した光スイッチング系をタンパク質分子に応用することを目指している。これまでに、遺伝子のスイッチングは達成していたが、より直接的な相互作用を検出するには、インビトロでの実験が不可欠である。これまでに、大量発現系を検討し、頻用される大腸菌や昆虫細胞ではうまくゆかなかったものの、酵母を用いた独自性の高い系を構築して、発色団が結合した活性のある状態でクリプトクロムタンパク質を発現単離することに成功している。本研究の当初の目的とは異なるが、この系は、真核細胞発現系でありながら、他の系にくらべて、格段にコストが低く、また、恒常発現系であるため、非常に簡便であり応用性が高い。

一方、相互作用分子として、クリプトクロムに対するモノクローナル抗体産生株を多数樹立しており、特に、そのうちの一つは、光依存的にクリプトクロムと相互作用するため、スイッチング素子として利用可能である。得られた抗体の抗原部位も決定されており、その情報ならびに、分光解析の結果等から、クリプトクロム分子の光依存的な構造変化の分子機構にも迫ることができる点においても、独自性将来性の高い成果がでている。以上のように、抗体と発現タンパク質を用いたインビトロ解析の準備がほぼ完了しており、本研究で目的とするタンパク質の光制御が目前となっており、順調に推移していると判断できる。概ね、研究計画に記載した通りに研究を進める。膜局在の制御については、クリプトクロム相互作用分子の蛍光標識タンパク質を発現し、光による相互作用変化をリアルタイムで観察する。一方、インビトロでの相互作用解析系は特に、発現タンパク質を用いた解析の将来性・応用性が高いため、現在成功したニワトリクリプトクロム4以外の分子についても応用したい。これまでに、分光解析により、タンパク質の光依存的な酸化・還元のみならず、タンパク質分子の構造変化に由来すると思われる光サイクル中間体の観察に成功している。作成した抗体のエピトープ解析と合わせて、抗体存在下での光サイクル中間体の変化を調べ、構造変化のメカニズムも探りたいと考えている。このような解析によって、これまでに得られている暗状態でのみ結合する抗体に加えて、特定の中間体でのみ相互作用する抗体が特定できる可能性もある。つまり、抗体を用いた分光解析によって、分子内光情報伝達経路を探ることだけでなく、インビトロにおける相互作用素子としても利用可能と期待できる。本年度と同様に、概ね80-90%を試薬等の物品費として使用し、残る10-20%を旅費として使用する。具体的には、物品費として、酵母培養のための培地類と、新たに発現を試みるクリプトクロムをサブクローニングする際に必要な、制限酵素やベクター等の分子生物学試薬類である。また、モノクローナル抗体を大量に得るために、ハイブリドーマの培養、マウスへの投与等が必要であり、そのための血清や培地類、培養用のプラスチック器具類が必要である。旅費は、研究成果発表のために参加する生物物理学会(京都)および分子生物学会(神戸)への参加に使用する予定である。
反芻家畜の内分泌機能賦活系を介するアミノ酸の増乳作用

GH,インスリンおよびグルカゴンは、体内における摂取エネルギーの分配を調節する主要なホルモンであり、反芻家畜の泌乳に深く関わっていると考えられている。また、これらのホルモンの分泌調節にアミノ酸が関与している。本研究では、ヤギの静脈内にこれらのホルモンの分泌調節作用を有するアミノ酸を投与し、泌乳期におけるホルモンの分泌反応および代謝産物濃度に及ぼす影響を検討した。泌乳はホルモン処理により誘起した。実験1では、乳期に応じて2段階に飼料を給与した。実験2では3段階に飼料を給与し、最高泌乳期に飼料多給状態にした。いずれの場合も4種類のアミノ酸(アスパラギン酸、ロイシン、アラニン、グリシン)を乾乳期および最高泌乳期に単独で頸静脈内に30分間注入した。実験3では、実験1の飼料給与条件下で、6日間にわたり2種類のアミノ酸を連続的に注入した。実験1では、最高泌乳期にアミノ酸注入による血漿アミノ態N濃度の上昇は減少したが、血糖濃度とFFA濃度の上昇は増大した。アミノ酸に対するGH分泌反応は高まったが、インスリン分泌反応は低下した。グルカゴン分泌反応は同程度であった。また、アミノ酸による血漿IGF-I基礎濃度と乳量との間に正の相関が認められた。実験2では、実験1と異なり、最高泌乳期にアミノ酸に対するGH分泌反応は低下し、グルカゴン分泌反応は増大した。また、インスリンとグルカゴンの基礎濃度は上昇した。実験3では、連続注入6日目には、いずれのホルモン基礎濃度も上昇していた。以上のことから、最高泌乳期のヤギは異化促進的な代謝傾向にあるものの、体重増加が認められるような泌乳条件下では同化促進的な代謝傾向を保つようなホルモン分泌状態にあったと考えられる。しかし、今回の実験では泌乳量や乳成分に変化が認められず、より長期な投与法やアミノ酸の種類などの検討が今後の課題である。反芻家畜の乳生産量は、摂取飼料エネルギ-が体内において同化の方向により強く分配されるか、また、異化方向に利用されるか、両者のバランスの上に成立する。泌乳時にさまざまに変動する各種の代謝調節性ホルモンの分泌動態は、エネルギ-分配を調節する主要因である。本年度は、乳期の推移にともなうアミノ酸刺激内分泌反応の変動について検討した。先ず、ヤギの誘起泌乳法について、Headらの方法を修正し、成雌ヤギ2頭にEstradiolー17β(0.5mg/kg/d)、Progesterone(1.25mg/kg/d)を17日まで連日、Hydrocortisone(50mg/d)を18,19,20日に投与して良好な泌乳開始および泌乳曲線を得た。泌乳曲線から泌乳開始後約4565日を最高泌乳期と決定した。次いで、ザ-ネン種および雑種成雌ヤギ6頭を供試し20°C、24L照明下に、上記のホルモン処理を行なって泌乳を誘起した。ホルモン投与前の乾乳期および最高泌乳期に、次の通りのアミノ酸刺激内分泌反応測定実験を行なった。アスパラギン酸、ロイシン、アラニン、グリシンの250mM溶液を調製し、それぞれのアミノ酸を3mmol/kg/30minの用量にて頚静脈より30分間定速連続注入した。アミノ酸注入は1日1種とし、各動物のアミノ酸注入順位を無作為化して4日毎に注入実験を行なった。血漿の成長ホルモン、インスリン様成長因子、インスリン、グルカゴン、グルコ-ス、遊離脂肪酸、αーアミノ態窒素を測定するために、注入の前後に頚動脈ル-プより経時的に採血した。

目下、ホルモンについてはラジオイムノアッセイにより、また、血漿代謝産物についても分析中である。これらの注入実験に先立って、アラニン投与量を決定するための予備実験を乾乳成雌ヤギ5頭について行い、0.5、1.0mmol/kg/30minではインスリンおよびグルカゴン分泌反応が小さく、その結果からアラニン注入量を3mmol/kg/30minとした。反芻家畜の乳生産は泌乳期における代謝調節性ホルモンの分泌動態と密接に関連する。本年度は、乾乳期および泌乳期において、4種のアミノ酸投与時のホルモン分泌反応を、飼料給与量を変えて2種の実験を行った。いずれの実験においても、まず、乾乳期においてAsp、Leu、Ala、Glyを3mmol/kgBW/30minにてそれぞれ単独に静脈内に注入し、血中ホルモン、代謝産物濃度を測定し、次いでホルモン処理によって泌乳を誘起し、泌乳開始後45日以後約35日間の最高泌乳期において乾乳期と同様の測定を行った。I:体重維持の状態における泌乳。アミノ酸注入後の血漿アミノ態N濃度上昇の程度は最高泌乳期において低下した。Leu、Glyに対するGH分泌反応は亢進し、一方Leuに対するインスリン分泌反応が低下した。グルカゴン分泌は乾乳・泌乳期で同程度であった。Asp、Ala、Gly投与後の血糖上昇は、最高泌乳期において増大し、また、Asp投与後のFFA濃度上昇が大きくなった。血漿IGFーI基礎濃度と乳量に正の相関が認められ、IGFーI濃度の高い個体において乳量が多い傾向にあった。II:体重増加状態における泌乳。Iと同様に最高泌乳期においてアミノ酸注入後の血漿アミノ態N濃度上昇が低下した。しかし、GH分秘反応(Asp、Gly)はIとは逆に、最高泌乳期において乾乳期より低下した。Leuに対するインスリン分泌反応は最高泌乳期において低下せず、一方Ala、Glyに対するグルカゴン分泌反応が増大した。また、インスリン、グルカゴンの基礎濃度が最高泌乳期で上昇した。AspによるFFA濃度上昇は最高泌乳期で乾乳期より抑制された。以上の結果から、体重維持の状態で泌乳する場合の代謝調節性ホルモンの分泌動態は、異化促進的傾向にあり、泌乳と同時に体重が増加する場合には、同化促進的なホルモン分泌状態を示すものと考えられる。近年成長ホルモン(GH)投与が反芻動物の泌乳量増加に劇的な効果をもたらすなど、代謝調節に関与する各種ペプチドホルモンと生産性のかかわりが注目されている。GHの増乳効果は異化作用によって動員された基質が産乳に利用されるものと考えられるが、グルカゴンなども同様の作用を持ち、これらのホルモンはアミノ酸による分泌調節を受ける。本研究では、泌乳反芻動物の腸管内にアミノ酸を連続投与し代謝調節ペプチドホルモン分泌を観察する前段階の実験として、静脈内へ2種類のアミノ酸を連続注入して泌乳量や血漿ペプチドホルモン濃度に及ぼす効果について検討した。ホルモン処理による誘起泌乳ヤギ3頭を供試した。アミノ酸(L-アラニン、L-アスパラギン酸)を、頚静脈内に7.2mmol/kg/dayで6日間連続注入し、6日目に以下の9項目の測定を行なった。a)血漿α-アミノ態N濃度、b)血漿グルコース濃度、c)血漿FFA濃度、d)血漿GH濃度、e)血漿インスリン濃度、f)血漿グルカゴン濃度、g)血漿IGF-I濃度、h)乳量、i)