hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
可変分割ブランクホルダー力と初期ブランク形状の多目的最適設計

本研究では薄板材の深絞り加工を対象に,成形中に材料を押さえる力であるブランクホルダー力を制御しつつ,成形後の耳が最小となるようなブランク形状の同時最適設計法を提案した.提案手法の基礎的検討を行うため,角筒を対象に可変ブランクホルダー力とブランク形状の最適設計を行い,サーボプレスで検証実験を行った.次に,複雑形状を対象に,シミュレーションで分割ブランクホルダー力とブランク形状の同時最適設計を行い,サーボプレスで検証実験を行い,整合性の高い結果を得た.自動車部品等の複雑な成形品に対し,成形不良なく成形するためには分割可変ブランクホルダー力は有効な成形法の一つであることを示すことができた.本研究では,深絞り加工を対象に,金型内への材料流入を部分的に制御して成形品の板厚分布を一様にすることを目指しつつ,成形後に生じる耳を最小とするような初期ブランク形状を決定する多目的最適成形加工法の開発を目的とした.具体的には,角筒深絞り加工を対象に,耳を最小化する初期ブランク形状とブランクを抑える力(ブランクホルダー力)をストロークに応じて変化させる可変ブランクホルダー力の軌道を求める問題を多目的最適設計問題として定式化した.耳の評価について,事前に設定したトリムラインを下回った部分の面積と,上回った部分の面積を個別に評価した,また,成形不良として考えられるしわと割れの定量的評価方法については,成形限界線図を用い,それらを制約条件とした.さらに,可変ブランクホルダー力の最適軌道については,ストロークを分割し,各ストロークにおけるブランクホルダー力を設計変数とした.塑性加工シミュレーションは一般に計算コストが大きいため,Radial Basis Functionネットワークを用いた多目的逐次近似最適化システムを構築し,それを用いて最適化計算を行った.数値シミュレーションの結果,耳が最小となるような初期ブランク形状は金型形状に大きく影響される結果となり,一方,可変ブランクホルダー力は大きく二つ存在することが明らかとなった.基準ブランクとして考えた正方形形状のブランクと比較し,大幅に耳を減らすことができており,本研究で考えた最適設計法の有効性をシミュレーションにて検証した.本研究では,角筒深絞り加工を対象に,耳を最小化する初期ブランク形状とブランクを抑える力(ブランクホルダー力)をストロークに応じて変化させる可変ブランクホルダー力の軌道を求める同時最適設計法の提案を行った.成形後に生じる耳については,事前に設定したトリムラインを上回った面積と下回った面積をそれぞれ目的関数とした.しわと割れは成形不良であるため,成形限界線を用い,しわと割れを制約条件として扱った.さらに,可変ブランクホルダー力の最適軌道については,ストロークを分割し,各ストロークにおけるブランクホルダー力を設計変数とした.塑性加工シミュレーションは一般に計算コストが大きいため,Radial Basis Functionネットワークを用いた多目的逐次近似最適化システムを構築し,それを用いて最適化計算を行った.数値シミュレーションの結果,耳が最小となるような初期ブランク形状は金型形状に大きく影響される結果となり,一方,可変ブランクホルダー力は大きく二つ存在することが明らかとなった.サーボプレスによる検証実験を行い,すべての条件において,シミュレーション結果とほぼ同等の結果が得られ,本研究で提案する手法の有効性を実証した.シミュレーションのみならず,サーボプレスを用いた検証実験を行っており,シミュレーションの結果の妥当性を検証できてきるため.深絞り加工では,薄板をダイとブランクホルダーに挟み,材料を押さえるブランクホルダー力を作用させ,金型間に薄板を流入させることで所望の立体形状を得る.自動車部品のような複雑形状を対象とした絞り加工においては,ブランクホルダーを分割し,各ブランクホルダーに独立なブランクホルダー力を作用させ,材料の流入を部分的に制御する分割ブランクホルダー力による成形の有効性が指摘されているが,有効かつ実用性のある決定法は提案されていない.本研究では,計測用トレイを対象に,成形後のフランジ部に生じる耳を最小とするような初期ブランク形状と,ストロークに応じて材料の流入を部分的に制御する分割可変ブランクホルダー力の同時最適設計を行った.分割可変ブランクホルダー力の最適軌道設計に関しては,一方のブランクホルダー力が他方のブランクホルダー力を制約することを考慮した方法を提案した.また,初期ブランク形状については,有限個の制御点を設定し,移動方向を規定することで,設計変数の増加を抑えたブランク形状を表現する方法を提案した.成形限界線図と引き込み量を基本としたシミュレーションモデルを構築し,そのシミュレーションモデルを用いて,Radial Basis Functionネットワークを用いた逐次近似最適化によって,初期ブランクの最適形状と分割可変ブランクホルダー力の最適軌道を決定し,サーボプレスを用いて検証実験を行った.実験結果から,整合性の高い結果を得ることができた.自動車部品等の複雑な成形品に対し,成形不良なく成形するためには分割可変ブランクホルダー力は極めて有効な方法の一つであり,本研究では初期ブランク形状と分割可変ブランクホルダー力の同時最適化を行い,シミュレーション結果に留まることなく,検証実験を通じその有効性を示したことは,今後の先進的薄板成形技術の発展につながると大いに期待できることを示した.本研究では薄板材の深絞り加工を対象に,成形中に材料を押さえる力であるブランクホルダー力を制御しつつ,成形後の耳が最小となるようなブランク形状の同時最適設計法を提案した.提案手法の基礎的検討を行うため,角筒を対象に可変ブランクホルダー力とブランク形状の最適設計を行い,サーボプレスで検証実験を行った.次に,複雑形状を対象に,シミュレーションで分割ブランクホルダー力とブランク形状の同時最適設計を行い,サーボプレスで検証実験を行い,整合性の高い結果を得た.

自動車部品等の複雑な成形品に対し,成形不良なく成形するためには分割可変ブランクホルダー力は有効な成形法の一つであることを示すことができた.角筒深絞り加工を対象に,耳を最小化する初期ブランク形状とブランクを抑える力(ブランクホルダー力)をストロークに応じて変化させる可変ブランクホルダー力の軌道を求める問題を多目的最適設計問題として定式化し,塑性加工シミュレーションと多目的逐次近似最適化を用い,一定の成果を挙げることはできたと考えている.このような研究は,薄板成形技術の先進的な研究であり,次年度の検証実験にむけ,よい結果が得られた.非対称な薄板成形物を対象に,可変ブランクホルダー力の最適軌道設計を行っていく予定である.また,耳が最小となるような初期ブランク形状としわと割れの発生を抑制するような可変ブランクホルダー力の同時最適設計を行い,事例を増やすことで,有効性の検討を行っていく.最適設計前年度に得られたシミュレーション結果の妥当性を,サーボプレス機を用いて検証実験を行う.耳の最小化について,現時点では,トリムラインを下回った部分の面積と,上回った部分の面積をそれぞれ目的関数として考えているが,トリムラインに近づくような目的関数の設定について検討する.また,耳の評価に加え,板厚変動を最小化するような3目的以上の場合も想定される.このような場合,意思決定が容易に行えるようなシステム開発を行う予定である.さらに,分割した可変ブランクホルダー力を用いて,さらなる品質向上を目指した成形加工法を,最適設計問題として定式化し,数値シミュレーションを行う必要がある.しわや割れの評価方法については,成形限界線図を用いて定量的に扱うことが妥当であると考えられるため,この評価方法を引き続き用いる予定である.ノートPCが想定よりも若干安かったため.コンピュータで作成したデータの保存用SDカードを購入予定である.
東日本大震災における市民協働による心の支援体制の構築に関する実践的研究

災害時の心のケアは、災害発生後の時間経過にともなう状況の変化に応じて支援のあり方や方法を工夫しなければならない。長期的支援においては、必要に応じて専門家の力を借りながら、地域住民が相互に身近な心の支援を行うことが求められる。そのため、適切な心理教育の内容を検討する必要がある。今回実施した心理教育プログラムは、災害時の心の危機、心のセーフティーネット、二つのアプローチと適用方法、実施上の注意等で構成され、受講者からいずれも理解しやすく有用であるとの評価を得た。初年度に引き続き、東日本大震災後の市民協働による心の支援体制(心のセーフティネット)の構築と一般市民を対象とした心の支援の心理教育プログラムの開発・作成に関する基本方針/グランドデザインについて検討と調査を進めた。一般市民に対する心の支援に関する心理教育の内容や方法について検討するために、いのちの電話を訪問して電話相談員(市民ボランティア)に対する心理教育の内容と方法について聞き取り調査を実施した。また、心の支援に関する心理教育プログラムの内容を検討するために、各種の研修会や公開講座において心の支援に関する心理教育プログラム(試案)を実践して、その内容理解や効果に関する質問紙調査を実施した。他の研究知見や成果を参考とするために、日本心理学会第77回大会と日本心理臨床学会第32回大会に参加して、東日本大震災等の災害支援における心のケアや心の支援に関する情報収集及び研究者との意見交換を行った。前年度及び今年度に実施した質問紙調査のデータ分析を行うとともに、他の調査結果を勘案しながら、心理教育プログラムの推敲作業を行った。また、最終年度の目標に向かって、一般市民を対象とした心理教育で用いる教材について検討作業を開始した。本研究の成果に関する中間報告として「東日本大震災における心の支援と心理教育ー市民協働による心の支援体制構築のための基礎的研究ー」(宮城教育大学紀要、第48巻、243-250)を発表した。東日本大震災後の心の支援を促進するために、地域における市民協働の心の支援体制(心のセーフティネット)の構築と、わかりやすい心の支援の方法に関する心理教育プログラムの開発を柱とするグランドデザインを策定した。心理教育プログラムの内容の検討を行うために、市民ボランティアに対する心理教育を行っている仙台いのちの電話と福岡いのちの電話に聞き取り調査を行った。学生ボランティアによる震災支援を行っている神戸学院大学に心理教育の内容に関する聞き取り調査を行った。また日本心理学会第76回大会と日本心理臨床学会第31回大会に参加して、東日本大震災における心の支援の取組の実態・状況に関する情報収集及び関係者との意見交換を行った。心理教育プログラムの内容の検討及び実践と成果調査のために、公開講座や研修会の機会を活用して心の支援に関する心理教育を実践して、内容理解や評価に関する質問紙調査を行った。仙台いのちの電話と宮城県東部保健福祉事務所(宮城県石巻保健所)が共催した「被災地で支援する人のための聴く力を高めるカウンセリング連続講座」に講師として参加して、心理教育の実践と内容に関する理解や評価に関する調査を行うとともに、企画内容に関する聞き取り調査を行った。さらに東日本大震災における仙台市教育局の取組について調査した。研究調査にあたっては仙台いのちの電話と仙台市教育委員会の連携協力をいただいた。本研究の中間成果については、日本ヘルスプロモーション学会第10回学術大会(平成24年12月7日)のシンポジウムで発表した。さらに宮城教育大学紀要第47巻に論文を発表した。平成26年度(最終年度)においては、前年度から引き続いて心理教育プログラムの試行的実施及び効果の検討を行うとともに、研究成果の一部として教材1「災害と心の支援ーみんなで心を支えあうために」及び教材2「災害後の生活と心のセーフティネット」を制作した。これらの教材はいずれも心理教育に活用するとともに、研究成果を社会に還元するために制作したものである。教材1は災害時の心の危機や心のケアについて一般向けにわかりやすく解説したパンフレットである。教材2はITメディアを用いた学校教育等の場面で活用することを想定したWEB版である。教材1については平成27年3月1418日に仙台市で開催された国連防災世界会議において、宮城教育大学(教育復興支援センター)の災害支援活動の取組の一環として紹介した。研究成果の発表実績は次のとおりである。1日本比較文化学会第36回全国大会シンポジウム「明るい未来社会構築のための比較文化的基礎研究に向けて」(平成26年6月14日、北九州国際会議場)において「災害支援とコミュニケーションー心の支援とコミュニティーの再生・回復をめぐってー」の題目で発表した。(『比較文化研究』No114に掲載)。2日本心理臨床学会第33回大会(平成26年8月2326日、パシフィコ横浜)において「東日本大震災における市民協働による心の支援体制の検討ーグランドデザインと心理教育をめぐって」の題目で発表した。最後に三年間の研究のまとめとして『研究成果報告書ー東日本大震災における市民協働による心の支援体制の構築に関する実践的研究』を作成した。

臨床心理学当初の計画に沿って、市民協働による心の支援体制の構築に向けた基礎研究を進めているところである。前年度に予定していて実施できなかった訪問調査については今年度で行うことができた。当初計画したとおり、心の支援体制に関するグランド・デザインを策定し、それを基盤とした心理教育プログラムの開発研究に取り組んでいるところである。東日本大震災で大きな被害を受けた被災地・石巻における心理教育の実践を試みることができたことは大きな成果であったと考えている。連携機関との協力関係も順調であり、次年度以降の研究活動に活かすことができると期待している。市民協働による心の支援体制の構築に必要な心理教育プログラム(完成版)を基にした教材(パンフレット/テキスト)の作成とWEB上での提供を予定している。それらについては、震災関連の研修や支援の機会に活用する予定である。予定どおり、初年度の調査活動で得られた調査データの分析を行うとともに、心理教育プログラムの内容の検討を進める。初年度に引き続き、公開講座等の機会を活用して心のセーフティネット構築に向けた心理教育の実践と調査を行うとともに、関連学会に参加して震災における心の支援に関する情報収集と研究者との意見交換を行う。心理教育を実践している機関への訪問調査も引き続き行う予定である。予定していた「その他(会議費)」の予算を使用する必要がなかっため。最終年度の「その他(テキスト、報告書の作成等)」の予算で使用する予定である。調査データの分析を行うためのパソコン用の統計解析ソフトを購入する。情報収集や調査のための旅費、及びデータ入力や資料整理等のための人件費・謝礼について使用する予定である。その他、プリンター・カートリッジや記録用媒体等の研究に必要な物品を購入する予定である。
神経回路網形成過程における細胞内シグナル伝達機構の解析

神経発生過程において伸展中の軸索がセマフォリンなどの反発因子、ネトリンなどの誘因因子に導かれながら最終的に標的細胞とシナプスをつくることにより神経回路網が形成される。CRMPはセマフォリンなどの反発性の神経ガイダンス機構に関与する細胞内蛋白質として同定されたが、その機能は未だ不明な点が多い。以前の研究においてCRMPに結合する新規のunc-33遺伝子ファミリーに属する蛋白質CRAM(CRMP-5)を同定したが、機能解析はすすんでいなかった。今回の研究によってCRMPと異なるCRAM独特の役割について得られた知見を以下に報告する。CRAMに関する実験結果1.CRAMは海馬神経細胞においてFilopodiaに強い集積が認められた。2.CRAMを海馬神経細胞に過剰発現させるとFilopodiaの伸展と成長円錐の過剰形成が認められた。3.CRAMを過剰発現した成長円錐はセマフォリンによる崩壊活性が消失した。4.RNAi法を用いてCRAMをノックダウンすると、成長円錐の崩壊と微小管の不安定化が認められた。以上の結果よりCRAMがFilopodiaと成長円錐のDevelopmentに関与していること、そしてセマフォリンシグナルを負に制御している可能性が推測された。神経発生過程において伸展中の軸索がセマホリンなどの反発因子、ネトリンなどの誘因因子に導かれながら最終的に標的細胞とシナプスをつくることにより神経回路網が形成される。また、セマホリンは受容体であるプレキシンと共に不要になった軸索の除去機構(Axon pruning)にも関与していることが報告されている。最近、セマホリンの受容体であるプレキシンと結合し、セマホリンシグナルに必須の役割をする蛋白質として酸化還元酵素であるMICALが同定され、神経ガイダンスにレドックスが関与していることが示唆され、注目されている。一方、CRMPはセマホリンなどの反発性の神経ガイダンス機構に関与する細胞内蛋白質として同定されたが、その機能は未だ不明な点が多い。私達は以前の研究において、CRMPに結合する新規のunc-33遺伝子ファミリーに属する蛋白質CRAM(CRMP-5)を同定した。CRMPと異なるCRAM独特の役割についてこれまでに得られた知見を以下に報告する。3.CRAMを過剰発現した成長円錐はセマホリンによる崩壊活性が消失した。以上の結果よりCRAMがFilopodiaと成長円錐のDevelopmentに関与していること、そしてセマホリンシグナルを負に制御している可能性が推測された。私は以前の研究において、CRMPに結合する新規のunc-33遺伝子ファミリーに属する蛋白質CRAM(CRMP-5)を同定した。CRAMに関する実験結果・CRAMは海馬神経細胞においてFilopodiaに強い集積が認められ、海馬神経細胞に過剰発現させるとFilopodiaの伸展と成長円錐の過剰形成が認められた。・成長円錐に対するセマフォリンの崩壊活性が、CRAMを過剰発現することにより抑えられた。・RNAi法を用いてCRAMの発現を抑制すると、成長円錐の崩壊と微小管の不安定化が観察された。以上の結果よりCRAMがFilopodiaと成長円錐のDevelopmentに関与していること、そしてセマホリンシグナルを負に制御している可能性が示唆された。
ネットワーク管理者教育における遠隔型実践的学習環境の構築

本研究では、ソフトウェア開発に比べて学習機会の少ないネットワーク管理学習について、学習者が容易にアクセスできる学習環境構築手法を提案することを目的としている。具体的には、学習者の自宅LANから遠隔地にある階層型LANへのアクセス環境を作り、このLANの構成を学習者が希望する学習テーマ(DNSサーバの構築など)によって変更することで、実践的な学習環境の提供を行う。この遠隔学習支援システムは大きく分けて次の3つから構成される。(1)遠隔接続用インフラストラクチヤ(2)Webを用いた遠隔操作インタフェース(3)LAN環境自動構築支援システムこの遠隔学習支援システムでは、LAN構成が容易に増やせるよう、学習テーマごとにLAN設計情報を作成し、この設計情報からLANを自動的に構築することで学習環境を提供する。項目(3)がこの役割を担う。柔軟にLAN構成を変更するため、CPU、メモリなどの資源の範囲内において物理PC上で複数の仮想ホストの実行が可能な仮想計算機技術を用いて、LANの構成要素であるホストやルータを仮想ホスト、仮想ルータとして仮想計算機上に構築する。設計情報から作りだされた設定ファイルをこれらの仮想計算機上で更新し、VLANを用いて各計算機間で仮想配線を接続することにより、学習用LAN環境を構築する。平成19年度は、平成1718年度に構築・評価が行われた項目(3)の学習用LAN環境自動管理システムについて得られた知見をまとめ、成果発表を行った。具体的には、学習者の自宅LANから遠隔地にある階層型LANへのアクセス環境を作り、このLANの構成を学習者が希望する学習テーマ(DNSサーバの構築など)によって変更することにより、実践的な学習環境の提供を行う。(1)遠隔接続用インフラストラクチャ(2)Webを用いた遠隔操作インタフェース(3)LAN環境自動構築支援システムこの遠隔学習支援システムでは、LAN構成が容易に増やせるよう、学習テーマごとにLAN設計情報を作成し、この設計情報からLANを自動的に構築することで学習環境を提供する。平成17年度は、この項目(3)の支援システムの構築とローカルLAN環境におけるLAN構築実験を行い、評価を行った。現在、この評価結果について記述した論文の投稿を行っている。また、このシステムを用いて、LAN管理者教育学習における予備的評価実験を行い、第68回情報処理学会全国大会において発表を行った。現在、これらの支援環境は固定的なLAN管理者教育環境において展開されているため、統合的な学習環境の構築に向けて、遠隔地からのアクセス環境となる項目(1)と操作インタフェースである項目(2)の構築を並行して進めている。平成18年度は(1)の構築を主として、インフラの整備と(2)のWebを用いた遠隔操作インタフェースの構築・実験を進めた。(1)については、リモート環境からのアクセスについて安定性を確保するのに時間を要したため引き続き調整を行っている。(2)の遠隔操作インタフェースでは、多くの学習者で限りある資源を有効利用するためのLAN環境の自動管理システムについてローカルエリアネットワーク内にて実験・評価を行い、EIAE2006にて成果発表を行った。(1)遠隔接続用インフラストラクチヤ(2)Webを用いた遠隔操作インタフェース(3)LAN環境自動構築支援システム

この遠隔学習支援システムでは、LAN構成が容易に増やせるよう、学習テーマごとにLAN設計情報を作成し、この設計情報からLANを自動的に構築することで学習環境を提供する。項目(3)がこの役割を担う。柔軟にLAN構成を変更するため、CPU、メモリなどの資源の範囲内において物理PC上で複数の仮想ホストの実行が可能な仮想計算機技術を用いて、LANの構成要素であるホストやルータを仮想ホスト、仮想ルータとして仮想計算機上に構築する。設計情報から作りだされた設定ファイルをこれらの仮想計算機上で更新し、VLANを用いて各計算機間で仮想配線を接続することにより、学習用LAN環境を構築する。平成19年度は、平成1718年度に構築・評価が行われた項目(3)の学習用LAN環境自動管理システムについて得られた知見をまとめ、成果発表を行った。
19世紀消費文化とアメリカ文学の相互関係について

本研究では、19世紀のアメリカ文学、特にヘンリー・ジェイムズと当時台頭しつつあった大衆消費社会との関わりについて考察してきた過去の研究を更に発展させて、次の3点に焦点をあてて研究のすそ野をひろげた。まず、同時代のイギリスの作家オスカー・ワイルドとの比較により、ジェイムズ特有の消費社会の捉え方を明らかにし、この問題について論じた論文(英文)は近刊予定の『奥田博之退官記念論集』に掲載した。次に、大衆消費を交通や万博などの他の近代的な都市の特色とからめて考察し、そのような近代都市に生活する人々の特有の心理状態が同時代に隆盛であった絵画運動の印象主義が打ち出した認識のパターンといかに酷似しているかを明らかにし、この点について論じた論文(和文)は、筆者が参加している近代都市に関する研究会が出版を予定している本のなかの「都市と消費」と題する章になる予定である。更に、大衆消費社会のなかでつちかわれた外界認識の型が印象主義のヴィジョンと緊密にからみあっているさまが実はジェイムズの後期の大作『使者たち』のなかで鮮明に表現されていることを発見し、かつこの小説ではそのような印象主義的・消費的ヴィジョンが浅薄で不十分なヴィジョンであることも暴かれている点にまで考察を進め、この研究は近刊の『英文学研究』(英文号)に掲載される予定である。なお、論文ではないが、ジェイムズの初期の小説『ある婦人の肖像』が近代的な消費都市に住む人々の(視)神経を常にはりつめた心的状態を巧みに描出している点について、1994年10月の日本アメリカ文学全国大会で口頭発表した。
ゴナドトロピン作用と卵成熟のメカニズム解明

GRP78は小胞体において蛋白が高次構造を獲得するのに関与している分子シャペロンである。LHレセプター(LHR)を恒常的に発現している細胞にGRP78を発現させるとLHRとGRP78が結合し、更にGRP78発現量依存的にLHR発現が増加することを確認した。ヒト、ラットともhCG添加に伴いGRP78 promoter活性の上昇がみられ、またhCGにエストロゲンを加えることで若干ではあるが更なるpromoter活性上昇がみられた。LH/hCGによりGRP78 promoter活性が変化し、LHR発現調節にGRP78が関与することを強く示唆する結果が得られた。ゴナドトロピンの作用は,FSHとLHに分類される。しかし,両方のレセプターのシグナル伝達は共通した部分が多く,排卵,卵成熟におけるFSHとLHは中心的な作用を持つが,それぞれの相違と共通性の詳細は不明な部分が多い。LHの特異的作用メカニズムを知るためLHレセプターの構造,発現の検討のための実験を行った。LHの作用は,コレステロールからアンドロステンダイオンを合成することが知られているが,この最終産物であるエストラジオール(E_2)がLHレセプター発現に影響することを報告してきた。今回は,このメカニズムに関して検討を行い,E_2がコレステロール合成に関連する酵素であるメバロン酸合成酵素の産生を抑制することを明らかにした。さらに,この酵素はLH-R mRNAと結合し代謝を促進することから,結局,E_2は酵素を抑制することで,LH-R mRNAの半減期を延長しLH-R蛋白の増加に寄与するとが解明された。つまり,合成されたE_2は局所でLH-Rの上昇をもたらすことでポジティブフィードバックを司っていることになる。この結果,E_2が存在するとLH-R mRNAが増加し,以前FSH-RでもE_2が増加させる効果があると示したことと合わせると,E_2の存在がFSH,LHの作用を増強することが理解でき,今後の排卵誘発法に活用されると予想される。卵の成熟,受精に関しては,卵管が果たす役割が不明のため検討を行った。今回はβ-グリカン(β-GLが卵管上位でE_2の影響を受けて発現が上昇していることをWestern blot法を用いて観察した。TGF-βのレセプターの一部であるβ-GLが卵管でホルモン的コントロール下で発現すること,特に排卵時期に一致して上昇することは排卵された卵とTGF-βが何らかの相互作用を持つことを示すと思われた。我々は、ヒトLHレセプターcDNAをクローニングした際に、短いレセプター(LH-RS)のmRNAの存在を報告した。さらに、このLH-RS蛋白が細胞内輸送においてLH-Rに対して抑制的に働くことが判明した。今回は、蛋白の細胞内移動に関与するモレキュラーシャペロンに注目し、LH-RとLH-RSに結合するシャペロンを検討すると、GRP78は、LH-Rに結合するが、LH-RSには結合しないことが判明したため、GRP78はLH-Rの発現に重要な働きをすると予想して実験を進めた。我々は、LHレセプター(LHR)を恒常的に発現している細胞(LHR ce11)にGRP78を発現させるとLHRとGRP78が結合し、更にGRP78発現量依存的にLHR発現が増加することを確認した。ヒト及びラットgenomic DNA libraryをtemplateとして、GRP78promoter領域と考えられるGRP78遺伝子上流領域をluciferasereporter vectorに組み込んだplasmidを作成した。これをLHR cellにtransfectし、ホルモンを添加した上でpromoter活性を測定した。LHR発現量変化をもたらすhCGによりGRP78 promoter活性が変化することで、LHR発現調節にGRP78が関与することを強く示唆する結果が得られた。さらに体外受精プログラムで採取されたヒト穎粒膜細胞のRT-PCR解析によると、35才以上の方のGRP78量がそれより若い方の発現に比較して減少していた。これは、外部からのhCG投与後の変化であるので、加齢による卵の成熟度の低下とhCGに対する反応性の低下が相関するかと考えられ、卵の成熟不全とGRP78量の減少の関連することが示された。
インスリン様成長因子-II(IGF-II)の生物学的作用と病態生理学的意義の検討

IGF-IIの生物作用と病態生理的意義を明らかにするため以下の検討を行った。1)低血糖を呈する膵外腫瘍(NICTH)におけるIGF-IIに関する検討:IGF-IIを産生するNICTHにおける大部分のIGF-IIは大分子量IGF-II(1118kDa)であるが,この大分子量IGF-IIの本体は未だ明かでない。我々はNICTHの大分子量IGF-IIも健常人でみられる大分子量IGF-II同様にO-glycosylationをうけており,NICTHでは症例により糖鎖のサイズが異なっていることを明かにした。この大分子量IGF-IIの生物活性についても脂肪細胞を用いた系で検討したが,Zapfらの報告同様anthentic IGF-IIと差を認めなかった。しかし,インスリン受容体が豊富な脂肪細胞の系のみでは大分子量IGF-IIがより強い生物活性を持たないと結論することはできず,IGF-I受容体を豊富に有する筋細胞での検討が必要と考え実験計画中である。IGF-II遺伝子はgenomic imprintingされているが,ある種の胎児性腫瘍でloss of imprinting(LOI)されていることが報告されている。IGF-II産生NICTHでも検討したところ6例中5例でLOIを認め,このLOIがIGF-IIの過剰発現に関与している可能性が考えられた。2)インスリン抵抗性肥満マウスにおけるIGF-IIの低血糖作用に関する検討:この肥満マウスではIGF-I,IGF-IIとも血糖降下作用を示した。更に,IGF-I,インスリン,IGF-IIの各受容体への親和性を変化させたIGF-IIの誘導体を用いて検討したところ,IGF-I/インスリン受容体の親和性に比例して血糖降下作用は大であった。この成績はインスリン抵抗状態においてIGF-I受容体を介して血糖降下をきたすと考えられた。3)現在行われているIGFの測定にはIGF結合蛋白(IGFBP)が干渉し,その測定値に影響を及ぼしている。そこで,IGF-IIをIGFBPsの干渉なしに高感度に検出しうるドットブロット法を確立した。この系を用いて脳脊髄液中のIGF-II量を簡便に評価することが可能となった。1)低血糖を呈する膵外腫瘍(NICTH)の多くの症例でIGF-IIを産生し,産生されるIGF-IIの大部分は大分子量IGF-II(1118kDa)であることが知られている。この大分子量IGF-IIが低血糖の発症機構に関与している可能性が論じられているが,大分子量IGF-IIの本体は未だ明かでない。Daughadayらは少数例の検討であるが,NICTHでの大分子量IGF-IIは健常人の大分子量IGF-II(11kDa)と異なり,O-glycosylationされていないと報告しているが,今回の検討において,NICTHの大分子量IGF-IIはO-Glycanase処理により,9.5kDaとサイズは減少した。この成績はNICTHの大分子量IGF-IIはO-glycosylationをうけており,症例により糖鎖のサイズが異なっていることを示唆した。

NICTHの大分子量IGF-IIの生物活性については脂肪細胞を用いた系ではZapfらの報告同様authentic IGF-IIと差を認めなかった。しかし,インスリン受容体が豊富な脂肪細胞の系のみでは大分子量IGF-IIがより強い生物活性を持たないと結論することはできず,IGF-I受容体を豊富に有する筋細胞での検討が必要と考えて実験計画中である。2)骨でのIGF-IIの作用を検討するため,まず骨芽肉腫細胞でのIGF-IIの作用について検討したが,IGF-II,-1,エストロゲン,Vit D_3の添加によって,明らかなオステオカルシン,Alpの変化は認めず,現在,手術標本より得られた培養骨芽細胞で検討を進めている。3)現在行われているIGFの測定にはIGF結合蛋白(IGFBP)が干渉し,その測定値に影響を及ぼしている。そこで,IGF-IIをIGFBPsの干渉なしに高感度に検出しうる(50pg)スロットブロット法を確立した。この系を用いて体液,培養液のIGF-IIの動態を検討している。IGF-IIの生物作用と病態生理的意義を明らかにするため以下の検討を行った。1)低血糖を呈する膵外腫瘍(NICTH)におけるIGF-IIに関する検討:IGF-II遺伝子はgenomic imprintingされているが,ある種の胎児性腫瘍でloss of imprinting(LOI)されていることが報告されている。IGF-II産生NICTHでも検討したところ6例中5例でLOIを認め,このLOIがIGF-IIの過剰発現に関与している可能性が考えられた。更に,NICTH以外の腫瘍についても検討し,副腎腫瘍,胃神経線維腫でLOIを認めた。これら腫瘍におけるIGF-IIのLOIと腫瘍発育の関係についても検討を進める予定である。2)インスリン抵抗性肥満マウスにおけるIGF-IIの低血糖作用に関する検討:IGF-1,IGF-IIともインスリン抵抗性肥満マウスにおいて血糖降下作用を示した。この作用機序を明かにするため,IGF-I,インスリン,IGF-IIの各受容体への親和性を変化させたIGF-IIの誘導体を用いて検討したところ,IGF-I/インスリン受容体の親和性に比例して血糖降下作用は大であった。この成績はインスリン抵抗状態においてはIGF-I受容体を介して血糖降下をきたすと考えられた。3)現在行われているIGF-IIのRIA測定にはIGF結合蛋白(IGFBP)が干渉し,その測定値に影響を及ぼしている。現時点でIGFBPを分離するためのRIA測定の前処理として優れているのはゲル濾過法である。そこでIGFBPsの干渉なしに高感度にかつ簡便にIGF-IIを検出しうるWestern dotblot(WDB)法を確立した。このWOD系を用いて脳脊髄液中のIGF-IIを測定し,ゲルろ過で前処理してRIAで測定したIGF-IIを比較した。WODで測定したIGF-IIはゲルろ過処理RIA値と良く相関し(r=0.96),脳脊髄液中のIGF-II値はWODにより簡便に評価しうると考えられた。
経頭蓋交流電気刺激による運動野への可塑性の誘導：刺激周波数と位相依存性効果の検討

本研究では、一次運動野(M1)に対する10 Hzと20 Hz tACSの刺激中効果(オンライン効果)や刺激後効果(オフライン効果)について運動誘発電位(MEP)を指標に検討した。その結果、オンライン効果として20 Hz tACSは位相依存的にMEP振幅を増大させたが、オフライン効果としてその促通効果はあまり持続しないことを確認した.次に、我々は視覚野に対しても10 Hzと20 HzのtACSで刺激し、視覚誘発電位(VEP)と安静時脳波、視覚行動課題を指標にそのオフライン効果を検討した。その結果、10 Hz tACSでは、VEPの振幅が刺激後30分以上増大し、安静時のα活動の増大と視覚行動課題の成績向上が観察された。一方、20 Hz tACSでは、安静時のα活動が増大するも、VEPの振幅は変化しなかった。これまでの運動野と視覚野におけるtACSの検討から、tACSは刺激する脳部位によって最適な刺激周波数が異なることが示された。また、tACSのオフライン効果については、10 Hzや20 Hzの刺激周波数を用いた場合、視覚野の方が運動野よりも持続的な可塑的変化を誘導できる可能性がある。29年度が最終年度であるため、記入しない。一次運動野(M1)に対する経頭蓋交流電気刺激(tACS)の刺激後効果(オフライン効果)について、運動誘発電位(MEP)の振幅を指標に検討した(対象は健常右利き成人12名)。結果として、10 Hzと20 HzのtACS後において一時的にMEPの振幅に差がみられたが、期待された持続的なオフライン効果は確認されなかった。そのため、10 Hzや20 HzのtACSのみでは持続的な効果をM1に誘導することは難しいと考えられた。一方で近年の報告では、視覚野に対して10 Hzあるいはα帯域のtACSを行った場合に、刺激後にα帯域の振動活動が増大し、その効果が持続することが示唆されている。そのため10 Hzや20 HzのtACSでは運動野よりも視覚野でより明瞭な刺激後効果を誘導できる可能性があると考えた。そこで本研究では、視覚野に対して10 Hzと20 HzのtACSを行い、刺激前後の視覚皮質の興奮性変化を視覚誘発電位(VEP)にて評価することとした(対象は健常成人13名)。VEPはPattern Reversal VEP (PR-VEP)とFocalFlash VEP (FF-VEP)の2種類を用いた。その結果、10 HzのtACSでは20 HzのtACSと比較し、刺激後にPR-VEPのN75-P100の振幅を有意に増大させ、その効果は刺激後30分以上持続した。このことから、10 HzのtACSは視覚システムの特異的なチャネルを選択的に活性化させ、さらにその効果がより持続したことから、tACSによる可塑的変化は視覚野において誘導されやすい可能性が示唆された。一次運動野に対するtACSの刺激後効果の検討において、期待した持続的な可塑性の誘導は確認されなかった。しかし、刺激部位によって効果の持続性が変化すると仮説を立て一次視覚野を刺激した結果、より持続的な可塑性を誘導することができた。これらの結果はtACSの新たな可能性を示す大きな研究成果であり、適切な作業仮説の立案と研究に対する臨機応変な取り組みによるものである。一次運動野(M1)に対して10 Hzと20 Hzの経頭蓋交流電気刺激(tACS)の刺激後効果(オフライン効果)について検討してきた。しかし、これまでの研究からその効果はあまり持続しないことが示唆された。このことから運動野に持続的な可塑性を誘導するためには、単純な刺激のみでなく反復経頭蓋磁気刺激(rTMS)など他の非侵襲的な脳刺激法と組み合わせていくことも検討する必要がある。しかし、tACSでは刺激強度や刺激部位のでなく、周波数や位相など様々な刺激要因が存在し、その交互作用によってtACSの効果が変化すると考えられる。新たな刺激方法を開発するためには、tACSの刺激要因が刺激中効果(オンライン効果)にどのように影響するのかを評価する必要がある。そこで我々は、tACSの周波数と位相に注目し、そのオンライン効果について検討することとした。M1に対して10 Hzと20 HzのtACSを行い、異なる位相の効果を運動誘電位(MEP)を用いて評価した。その結果、10 Hzと20 HzのtACSでは90°の位相特異的にMEPの振幅に差がみられた。この刺激位相の効果は、他の刺激周波数(5 Hzと40 Hz)では認められなかった。また、偽刺激との比較から20 Hz tACSの90°の位相では、M1の皮質興奮性を有意に増大することが示された。以上から、M1に対するtACSは、刺激周波数と位相依存的にその効果が誘導され、オンラインの刺激を行う上では、これらを考慮する必要がある。前年度、M1に対するtACSの刺激後効果の持続性は短いことが示された。より効果的なtACSの刺激手法を開発するため、オンライン効果に注目し、tACSの刺激周波数と位相がオンライン効果に与える影響を検討した。その結果、tACSのオンライン効果は、刺激周波数と位相依存的にM1の興奮性を調整することが示された。この結果は、今後のtACSの発展につながる研究成果である。

本研究では、一次運動野(M1)に対する10 Hzと20 Hz tACSの刺激中効果(オンライン効果)や刺激後効果(オフライン効果)について運動誘発電位(MEP)を指標に検討した。その結果、オンライン効果として20 Hz tACSは位相依存的にMEP振幅を増大させたが、オフライン効果としてその促通効果はあまり持続しないことを確認した.次に、我々は視覚野に対しても10 Hzと20 HzのtACSで刺激し、視覚誘発電位(VEP)と安静時脳波、視覚行動課題を指標にそのオフライン効果を検討した。その結果、10 Hz tACSでは、VEPの振幅が刺激後30分以上増大し、安静時のα活動の増大と視覚行動課題の成績向上が観察された。一方、20 Hz tACSでは、安静時のα活動が増大するも、VEPの振幅は変化しなかった。これまでの運動野と視覚野におけるtACSの検討から、tACSは刺激する脳部位によって最適な刺激周波数が異なることが示された。また、tACSのオフライン効果については、10 Hzや20 Hzの刺激周波数を用いた場合、視覚野の方が運動野よりも持続的な可塑的変化を誘導できる可能性がある。一次運動野に対するtACSの効果の検討について、今後はtACSと反復ペア経頭蓋磁気刺激とを組み合わせた刺激など、よりM1の可塑性を誘導できる刺激方法について検討していきたい。また、視覚野に対するtACSの効果については、今後VEPと脳波の測定を行い、tACSの効果機序の解明を行っていきたい。本研究で得られたtACSのオンライン効果の結果をもとに、tACSの刺激周波数と位相を考慮した他の非侵襲的脳刺激法との組み合わせ刺激など新たな刺激手法の検討をしていきたい。また、視覚野に対するtACSの効果も前年度確認しているため、視覚誘発電位と脳波を用いてtACSの効果機序の解明を行っていきたい。29年度が最終年度であるため、記入しない。
I型カゼインキナーゼ依存的な減数分裂型コヒーシンRec8の切断制御機構の研究

減数分裂では姉妹動原体が一方向性を有することにより、第一分裂時にペアとなる姉妹染色分体は分離せず同一極へと分配される。この現象は還元分配と呼ばれ、連続する二回の染色体分配を経て安定的に半数体の配偶子を形成するための前段階の機構として非常に重要な役割を持っている。還元分配のときの姉妹動原体の一方向性には、減数分裂機特異的な動原体タンパク質Moa1によって、動原体にやってくるPlo1キナーゼが必要であることが知られており、また、姉妹動原体の一方向性が、本質的にはセントロメア領域におけるコヒーシン複合体依存的な姉妹染色分体間の接着によって成立していることも明らかにされてきた。これらの知見から、コヒーシン複合体が動原体のPlo1キナーゼの標的になっている可能性を予想し、様々なコヒーシン関連因子にPlo1キナーゼのキナーゼドメインを融合して、減数分裂の染色体分配を評価したところ、予想に反してコヒーシンの機能が、融合したPlo1キナーゼのキナーゼ活性依存的に低下する現象がよく見られた。このほか、セントロメアにコヒーシンローダーとして知られるSsl3タンパク質を過剰局在させ、コヒーシンがセントロメアに過剰量やってくるようにすると、姉妹動原体の一方向性に異常を生じた。このことから、セントロメア領域における過剰なコヒーシンの局在、機能が姉妹動原体の一方向性を壊し、Plo1はコヒーシンの機能を抑制することでそれを防いでいるというモデルが推測できる。このモデルは、moa1遺伝子の破壊株で動原体の一方向性が失われるとともにセントロメアのRec8の局在量が増加するという先攻研究における観察結果にも当てはまる。研究の目的は、昨年度から「動原体の一方向性」のメカニズムの解明に移行している。コヒーシン関連因子に当たりを付けて、Plo1キナーゼによってリン酸化される部位の特定、変異の導入を行っているが、手法が効率化されておらず、一つの因子にかなりの時間を割くことになったため、やや遅れが生じたと考えている。今後も基本的には現在のようなコヒーシン関連因子のリン酸化部位の探索を行っていく予定である。現在の候補因子の解析により目的の表現型が得られなかった場合、iTRAQラベリングを用いて野生型株とmoa1遺伝子破壊株との間で網羅的なタンパク質のリン酸化比較を行い、リン酸化の差が見られたものの中で、その他の姉妹染色分体の接着に関連した因子や動原体因子などを候補因子として解析していきたいと考えている。減数第一分裂におけるシュゴシンSgo1に依存したセントロメア特異的な減数分裂型コヒーシン(Rec8)の保護機構の実態は、そのリン酸化制御であることが示唆されており、この知見に対し我々は、I型カゼインキナーゼがRec8に対して被切断性を高めるようなリン酸化を付加することで、減数分裂を正常に進行させる過程に寄与することを見出してきた。また、最近の当研究室の先行研究から、減数第一分裂における姉妹動原体の一方向性がセントロメア中央部のRec8に依存した接着によって成立していることが明らかにされており、この現象がPlo1キナーゼの活性に依存することも分かってきた。これらのことを受けて、Plo1キナーゼがRec8のリン酸化に寄与する可能性を考え、in vitroによる標的残基の特定を行った。するとセリン450番が標的残基として同定されたため、この残基の非リン酸化型変異株の染色体分配を観察したところセントロメアのRec8に対する保護機能がなくなっていることが分かった。この表現系はすぐ隣の残基であるセリン449番においても見られ、S449、S450の2箇所にリン酸化模倣型変異を導入すると、逆に染色体腕部のRec8が異所的に切断から保護されることが分かった。また、in vivoにおけるS450のリン酸化を実際にPlo1キナーゼが担っており、特にセントロメア付近でその作用が強いということがリン酸化抗体を用いたChIP法によって明らかになった。今回同定したRec8上のPlo1キナーゼの標的残基は動原体の一方向性の制御に寄与するものではなかったが、それとは別に、Rec8がそのリン酸化によってSgo1依存的な保護を受けることができるかどうかが決定されるという未知の制御メカニズムを明らかにすることが出来た。本研究の結果はRec8保護機能をセントロメアに限定する際にSgo1の局在制御のみでは不十分であることを示唆しており、上記のメカニズムはそれを補い、異所的なRec8の保護によって染色体不分離を生じることを防ぐために重要であると考えられる。これらの知見から、コヒーシン複合体が動原体のPlo1キナーゼの標的になっている可能性を予想し、様々なコヒーシン関連因子にPlo

1キナーゼのキナーゼドメインを融合して、減数分裂の染色体分配を評価したところ、予想に反してコヒーシンの機能が、融合したPlo1キナーゼのキナーゼ活性依存的に低下する現象がよく見られた。このほか、セントロメアにコヒーシンローダーとして知られるSsl3タンパク質を過剰局在させ、コヒーシンがセントロメアに過剰量やってくるようにすると、姉妹動原体の一方向性に異常を生じた。このことから、セントロメア領域における過剰なコヒーシンの局在、機能が姉妹動原体の一方向性を壊し、Plo1はコヒーシンの機能を抑制することでそれを防いでいるというモデルが推測できる。このモデルは、moa1遺伝子の破壊株で動原体の一方向性が失われるとともにセントロメアのRec8の局在量が増加するという先攻研究における観察結果にも当てはまる。研究の目的は、昨年度から「動原体の一方向性」のメカニズムの解明に移行している。コヒーシン関連因子に当たりを付けて、Plo1キナーゼによってリン酸化される部位の特定、変異の導入を行っているが、手法が効率化されておらず、一つの因子にかなりの時間を割くことになったため、やや遅れが生じたと考えている。今後も基本的には現在のようなコヒーシン関連因子のリン酸化部位の探索を行っていく予定である。現在の候補因子の解析により目的の表現型が得られなかった場合、iTRAQラベリングを用いて野生型株とmoa1遺伝子破壊株との間で網羅的なタンパク質のリン酸化比較を行い、リン酸化の差が見られたものの中で、その他の姉妹染色分体の接着に関連した因子や動原体因子などを候補因子として解析していきたいと考えている。
不斉な場をもつクレフト構造を有する化合物による金属イオン捕捉と不斉合成反応の研究

今回、不斉な場をもつクレフト構造を有する化合物による金属イオン捕捉と不斉合成反応への応用を目的として化合物1┣D5┫5の合成を行った。化合物1┣D5┫5は、不斉エポキシ化反応を鍵反応としてシクロペンテノールより7段階で合成した。ついで1┣D5┫5を用いて、金属イオンの取り込みと各種不斉合成反応を試みたが、いずれも期待した結果は得られなかった。下に一例を示す。下に一例を示す。
小笠原諸島史の基礎的研究

近世以降の小笠原諸島の歴史研究に関わる近年発見の新史料の開拓と整理に取り組み、現代語訳による史料活用に向けた条件整備を行った。(1)新発見の「小花作助日記」(全6冊)の第一冊(慶応2年分)を復刻し、同時に、本史料を通して得られた幕末維新期の幕府外交を支えた外国方官僚の動向を、小花作助(最後は外国奉行支配組頭、その後明治政府に採用)の行動を通じて明らかにした。(2)小普請組所属の無役の小花作之助は、外国方に登用され、小笠原諸島(当時は、無人嶋・ボニン諸島)回収に従事し、小笠原からの一斉引き揚げ後は、慶応元年の遣仏英使節団に随行、築地の居留地や製鉄所の建設などにも携わった。幕臣の多くが駿府移住する一方で、新政府側の一員に登用された。その立場で周囲の幕臣の動きや江戸市内の混乱状況を冷静な目で記録にとどめた。幕臣個人の私的な日記であり、蔵米収入や運用など家計全般、家族や縁者、同僚幕臣の日常、近隣の騒擾も克明に記録している。今回の現代語訳と刊行はその第一冊分である。(3)小笠原諸島を発見した阿波・浅川浦船(徳島県海部郡)や、幕末、多国籍の外国人の小笠原島居住の事実を我が国に知らしめた陸奥国小友浦船(岩手県陸前高田市広田)などの出身地で現地調査を行い、小友浦では、沖船頭三之丞らが建立した無人島漂流と生還の経緯を刻み込んだ「生還記念碑」二基(金比羅権現碑、船玉碑)を発見した。
血管新生の調節による関節破壊抑制について

VEGFは最も強力な血管新生因子の一つであり、血管内皮細胞に比較的特異的に作用すると考えられている。一方成人の関節軟骨は高度に分化した軟骨細胞から構成され、無血管である。VEGFには5種のアイソフォームがあるが、変形性関節症(OA)の関節軟骨が121,165,189アミノ酸から構成されるアイソフォームを産生することを証明した。またその産生量は正常軟骨に比し、OA軟骨で有意に高く、軟骨変性が進行するにつれ高くなることが判明した。興味深いことにVEGF受容体は正常軟骨では発現せず、OA軟骨で発現していた。基本的に無血管であるOA軟骨がVEGF受容体を発現したため、軟骨細胞から産生されたVEGFが軟骨細胞自身に作用する可能性が示唆された。VEGFの軟骨細胞に対する作用は報告がなく、まず軟骨細胞に対する増殖作用の有無を検討したが、有意な作用を認めなかった。次に軟骨細胞からのマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)産生に対する効果を検討したところ、VEGFはMMP-1およびMMP-3の産生を有意に促進した。従って、VEGFは軟骨細胞に対しては血管新生因子としてではなく、OAでの関節破壊が進行するにつれ、VEGFの産生が高まり、MMP-1,MMP-3の産生を促進することによって軟骨の細胞外マトリックスの分解に関与して、OAにおける関節破壊の病態に関わることが判明した。尚、本研究の成果は平成12年日本整形外科学会基礎学術集会、平成13年日本軟骨代謝学会、2001年Annual Meeting of Orthopedic Research Society(アメリカ整形外科基礎研究学会、サンフランシスコ)にて発表した。Annual Meeting of Orthopedic Research SocietyではNew investigator Recognition Awardの候補に選出された。イーストtwo-hybridsystemにより、VEGFと分子間相互作用を示す可能性のある分子がスクリーニングされた。その中には細胞外マトリックス成分の分子も含まれており、現在その中の数分子について、リコンビナント蛋白を作製している。これらの分子につき、今後蛋白レベルでの相互作用を検討する予定である。一方で軟骨組織におけるVEGFについては現在までに成長軟骨以外に報告がない。軟骨組織に存在するVEGFには外因性と内因性の二種が存在すると考えられる。外因性VEGFはおもに滑膜組織由来と推測されるが、成人軟骨組織由来のVEGFの発現については報告がなく、不明である。これまでに変形性関節症患者に対する人工関節置換術時に得られた軟骨組織を用いてRT-PCR、in situ hybridization器官培養、細胞培養などでVEGFのmRNAレベルおよび蛋白レベルでの発現とその局在についても検討してきた。現在までのところmRNAレベルでは二種のアイソフォームの発現をRT-PCRで確認し、組織での発現をin situ hybridizationで確認した。蛋白レベルでも器官培養および細胞培養で実際にVEGFが産生されていることをELISAで確認している。現在、軟骨由来VEGFの標的細胞およびその作用について検討中である。さらにその作用に対して、スクリーニングされた分子が修飾作用を有するかについても検討したい。