hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
アミロイドイメージングにおける定量化、統計学的画像解析の方法の確立

本研究は,BF-227 PETアミロイドイメージグによる脳内アミロイド蛋白集積の精確な評価方法を確立することを目標とした.MRIを使用せず,標準脳BF-227テンプレートを使ってBF-227画像単独で行う解剖学的標準化は,MRIから変換パラメータを得る方法と同等以上の精度があった.標準脳上の共通領域と各個人の組織分離閾値を組み合わせた小脳参照領域の決定方法を用いることで,各診断カテゴリ間のBF-227集積度値の分離を向上させることが出来た.空間分解能補正による部分容積効果の補正は,白質・灰白質の集積の良好な分離ができず,今後のアルゴリズムの改良が必要である.本研究で開発あるいは有効性が確認された方法は,BF-227だけではなく,PiBなど他のアミロイド・イメージング剤への応用も期待される.本研究は,BF-227 PETアミロイドイメージグによる脳内アミロイド蛋白集積の精確な評価方法を確立することを目標とした.MRIを使用せず,標準脳BF-227テンプレートを使ってBF-227画像単独で行う解剖学的標準化は,MRIから変換パラメータを得る方法と同等以上の精度があった.標準脳上の共通領域と各個人の組織分離閾値を組み合わせた小脳参照領域の決定方法を用いることで,各診断カテゴリ間のBF-227集積度値の分離を向上させることが出来た.空間分解能補正による部分容積効果の補正は,白質・灰白質の集積の良好な分離ができず,今後のアルゴリズムの改良が必要である.本研究で開発あるいは有効性が確認された方法は,BF-227だけではなく,PiBなど他のアミロイド・イメージング剤への応用も期待される.本研究は,脳内アミロイド蛋白集積のBF-227 PETアミロイドイメージグによる精確な評価方法を確立することを目標としている.アミロイドPET画像の半定量法としては,SUVR(standardized uptake value ratio)値が用いられることが多い.これは,小脳など特異的結合の少ない参照領域の値で,ターゲットする領域の値を除する方法である.BF-227やPiBなどアミロイドイメージング製剤は,白質に非特異的な高集積を示す.そのため,小脳半球と言えども,白質からの信号の混入を避けることが出来ず,精確な集積評価の障害になっていた.本年度は,客観的かつ再現性のある方法で,小脳における参照領域値を得る方法を考案し,BF-227PETアミロイドイメージングの臨床データを使って,その有効性を評価した.同方法では,標準脳座標系上で設定された共通の関心領域と,個別の脳でPET値の分布(ヒストグラムおよび分布範囲)から決定した二つの閾値(白質/灰白質カットオフ値,脳/脳脊髄液カットオフ値)を組み合わせることにより,白質成分の混入のない小脳半球の灰白質における参照領域値を得た.同方法は再現性が高く,この参照領域値から得たSUVR値は,健常群とアルツハイマー病群における集積度の分布をより明瞭に分離することができた.また,異なる施設のBF-227PET画像でも,同様の有用性が確認された.同方法は,BF-227だけでなくPiBでも有効であることが予想され,特に集積度が低いより早期段階でのアミロイドPET画像の評価に有用であると考えられた.本研究は,脳内アミロイド蛋白集積のBF-227 PETアミロイドイメージグによる正確な評価方法を確立することを目標としている.BF-227は,よりmatureなアミロイドプラークに結合するなど,世界標準となっているPiBと比較して,ユニークな特徴を持つ.しかし,集積/非集積のコントラストが小さく,白質との集積比が小さいという欠点を持つ.PET画像は空間分解能が低いため,皮質に白質の信号が混入する影響(spill over effect)を受けやすい.また,アミロイドイメージングでは,特異的結合の少ない小脳皮質(参照領域)の値との比であるSUVR(standardized uptake value ratio)値が共通して使用されるが.皮質だけの参照領域値を得ることが困難なために,エラーが生じやすい.(1)新しく考案した客観的かつ再現性のある方法で,小脳における参照領域値を得る方法に関して,複数施設のBF-227 PETアミロイドイメージングの臨床データを使って,その有効性の評価をさらに進めた。同方法による参照領域値から得たSUVR値は,健常群とアルツハイマー病群における集積度の分布をより明瞭に分離することができた.PiBにも応用可能と考えられた.(2)志田原の方法(ウェーブレット法)による空間分解能改善の方法をBF-227画像に応用した.従来,FDG脳糖代謝PET画像やラクロプライドドパピン受容体PET画像と同様の条件で適用したが,良好な結果が得られなかった.そこで,パラメータを最適化するために検討を進めた結果,白質・灰白質境界において,エッジのたった画像が得られた.この効果により,白質から灰白質へのspill over effectが減じ,より正確な集積評価が可能になることが期待される.(1)アミロイドPET画像の部分容積効果補正について、詳細なシミュレーションによる検討アミロイドβの脳内蓄積が進行している段階は、アルツハイマー病診断において非常に重要であるが、白質・灰白質のPET薬剤の集積差がわずかで、部分容積効果補正が難しい。

このような病態を模擬するために白質:灰白質のBF227の集積が、1.8:2.5, 1.8:1.7, 2.0:1.7の3つのコントラストを想定したシミュレーション画像(想定FWHM = 4 mm、統計雑音付加)を作成し、既存の部分容積効果補正法の効果を評価した。その結果、GTM法はいずれのコントラストにおいても良好な補正結果を示したのに対し、SFSRR法は(白質:灰白質)=(1.8:1.7)において、白質・灰白質の集積の良好な分離ができなかった。SFSRR法は、画像ベースの部分容積補正法であることから、関心領域法と同等の精度が得られれば有用であることから、今後のアルゴリズムの改良が必要であることが確認された。また、SFSRR法については、本研究費の支援を得て、GUIを用いたソフトウェアパッケージとしてwww.noninvasive.med.tohoku.ac.jp/ShidaharaLab/SFSRR.htmlにて無償公開を行っている。(2)BF-227 PET視覚評価法の開発と評価(派生研究)。本研究で開発した方法で得た定量画像を、新考案の視覚評価法で、陽性陰性判定を行った。その結果は脳脊髄液マーカの結果とよく一致し、両方法が妥当であることを示した。参照領域法を小脳に設定する新しい方法の評価,アミロイドイメージング用の解剖学的標準化用テンプレート画像の作成とそれを用いた場合の標準化の精度評価などは,順調に研究は進行している.しかし,ウェーブレット法による空間分解能の改善に関しては,パラメータの最適化にやや手間取った.また,FDGやラクロプライドの画像と比較して,BF-227のPET画像は,白質・灰白質の集積度コントラストが乏しいため,その画像改善の効果を評価することが簡単ではないことが明らかになった.24年度が最終年度であるため、記入しない。今年度は,前年度までに進めてきたウェーブレット法を適用することにより,アミロイドイメージングPET画像に関して,分解能が改善し,定量値がより正確になることを,臨床画像とデジタルファントームの二つの方面のデータから,検討を進める予定である.24年度が最終年度であるため、記入しない。
陽電子消滅によるGaN系半導体の点欠陥の研究

陽電子消滅は,材料の原子および電子構造に関してナノ・オーダーの情報を与える材料評価法である.この手法の特徴として,空孔型格子欠陥に対する感度が高いこと,欠陥あるいはバルクの電子状態の研究が可能であること,非破壊であること,また,試料温度や電気的特性など実験上制約となる条件が少ないことなどが上げられる.本研究の目的は,低速陽電子ビームを用いてGaNやZnOの欠陥評価をおこない,欠陥とその光学的特性の相関を明らかにすることにある.低速陽電子ビームを用いて希土類(Eu及びTb)ドープGaNの空孔型欠陥を評価した.PL測定により,Euドープ試料では,母体GaNに関係する発光は観測されず,Eu^<3+>イオンの内殻遷移による発光のみが観測された(^5D_0→^7F_<1,2,3>).Tbドープ試料についても同様に測定した結果,Euイオンの内殻遷移による発光は観測されなかった.陽電子・電子消滅γ線ドップラー拡がり測定から,TbドープGaNについては,均一に空孔型欠陥が分布しているが,Euドープ試料では,GaN/サファイア界面近傍で欠陥の集合が起こっていることがわかった.加えて,空孔型欠陥のサイズが大きくなるほど,発光特性は上昇し,主な発光は,最も大きなサイズの空孔が集中する界面で起きていることがわかった.空孔型欠陥が導入されることによるEu近傍の対象性の低下が,内殻電子の移確率の上昇を引き起こしていると考えられる.また,欠陥サイズは複空孔以上のサイズを持つ空孔クラスターであると同定した.GaNと同様に青色発光素子として期待されているZnOについてもその特性を評価した.試料は単結晶基板とScAlMg_4およびZnO基板上にレーザーMBEで作成したZnO薄膜である.ZnO基板中には陽電子拡散を散乱する欠陥が存在するが,欠陥種は空孔型欠陥ではないことがわかった.MBEにより製作したZnO薄膜中にはZn空孔が存在するが,成長時の温度を最適化することにより,空孔密度の低減が可能であることがわかった.陽電子消滅は,材料の原子および電子構造に関してナノ・オーダーの情報を与える材料評価法である.この手法の特徴として,空孔型格子欠陥に対する感度が高いこと,欠陥あるいはバルクの電子状態の研究が可能であること,非破壊であること,また,試料温度や電気的特性など実験上制約となる条件が少ないことなどが上げられる.本研究の目的は,低速陽電子ビームを用いてGaNやZnOの欠陥評価をおこない,欠陥とその光学的特性の相関を明らかにすることにある.低速陽電子ビームを用いて希土類(Eu及びTb)ドープGaNの空孔型欠陥を評価した.PL測定により,Euドープ試料では,母体GaNに関係する発光は観測されず,Eu^<3+>イオンの内殻遷移による発光のみが観測された(^5D_0→^7F_<1,2,3>).Tbドープ試料についても同様に測定した結果,Euイオンの内殻遷移による発光は観測されなかった.陽電子・電子消滅γ線ドップラー拡がり測定から,TbドープGaNについては,均一に空孔型欠陥が分布しているが,Euドープ試料では,GaN/サファイア界面近傍で欠陥の集合が起こっていることがわかった.加えて,空孔型欠陥のサイズが大きくなるほど,発光特性は上昇し,主な発光は,最も大きなサイズの空孔が集中する界面で起きていることがわかった.空孔型欠陥が導入されることによるEu近傍の対象性の低下が,内殻電子の移確率の上昇を引き起こしていると考えられる.また,欠陥サイズは複空孔以上のサイズを持つ空孔クラスターであると同定した.GaNと同様に青色発光素子として期待されているZnOについてもその特性を評価した.試料は単結晶基板とScAlMg_4およびZnO基板上にレーザーMBEで作成したZnO薄膜である.ZnO基板中には陽電子拡散を散乱する欠陥が存在するが,欠陥種は空孔型欠陥ではないことがわかった.MBEにより製作したZnO薄膜中にはZn空孔が存在するが,成長時の温度を最適化することにより,空孔密度の低減が可能であることがわかった.低速陽電子ビームを用いてEu及びTbドープGaNの空孔型欠陥を評価した.希土類ドープGaN薄膜は,サファイヤ(Al_2O_3)(0001)面基板上にアンモニアを窒素源としたガスソースMBEにより製作した.原料は純度6Nの金属Gaと3NのEu,Tbを用い、通常のKセル(Knudsen effusion cell)より蒸発させた.RHHED測定より,EuとTbのドープ量は約2%であると決定した.また,X線回折の結果から,試料は単結晶であることを確認した.一方,(0002)に対応する回折線の反値幅はTbドープ試料よりEuドープ試料は広く,Euドープにより結晶品質が低下していることが明らかになった.PL測定により,両試料の発光特性を調べた結果,母体GaNに関係する発光は観測されず,Eu^<3+>イオンの内殻遷移による発光のみ観測された。Tbドープ試料についても同様に測定した結果,Euイオンによる発光は,Tbイオンによる発光に比べて2桁高いことがわかった.単色陽電子を試料打ち込みエネルギーを変化させながら,陽電子・電子消滅γ線ドップラー拡がりを測定した.測定したドップラー拡がりはSパラメーターで評価した.

Sとはドップラー拡がりスペクトルにおいて,狭い運動量分布を持つ電子と陽電子の消滅が起こる割合を評価するパラメーターで,欠陥種と空孔密度に依存する.測定結果から,TbドープGaN薄膜に対応するSの値は膜中で一定で,その値は,約0.465であった.一方,Euドープ試料のSの値は表面近傍で,0.490程度であり,GaN/サファイア界面では0.501程度まで上昇することがわかった.両試料とも陽電子の拡散距離は短く,陽電子はGaN薄膜中ではほとんど欠陥に捕獲されていることを示した.以上の結果から,Euドープ試料では,Tbドープ試料よりもよりサイズの大きな空孔型欠陥が導入されており,かつ,界面近傍ではそのサイズはさらに上昇すると結論できる.陽電子消滅で得られた結果より,空孔型欠陥がより多く導入されている試料では発光強度が高いことがわかり,希土類原子の発光メカニズムに空孔型欠陥が関与している可能性があることがわかった.低速陽電子ビームを用いてEu及びTbドープGaNの空孔型欠陥を評価した.希土類ドープGaN薄膜は,サファイヤ(Al_2O_3)(0001)面基板上にアンモニアを窒素源としたガスソースMBEにより製作した.原料は純度6Nの金属Gaと3NのEu、Tbを用い、通常のKセル(Knudsen effusion cell)より蒸発させた.RHHED測定より,Euのドープ量は0.1,2,16 at.%,Tbのドープ量は0.8 at.%であると決定した.また,X線回折の結果から,試料は単結晶であることを確認した.一方,(0002)に対応する回折線の反値幅はTbドープ試料よりEuドープ試料は広く,Euドープにより結晶品質が低下している.PL測定により,両試料の発光特性を調べた結果,Euドープ試料では,母体GaNに関係する発光は観測されず,Eu^<3+>イオンの内殻遷移による発光のみ観測された。それぞれの遷移は^5D_0→^7F_<1,2,3>と同定した.Tbドープ試料についても同様に測定した結果,室温ではEuイオンの内殻遷移による発光は観測されなかった.上記の試料について陽電子・電子消滅γ線ドップラー拡がりを測定した.測定したドップラー拡がりはSパラメーター及びWパラメーターで評価した.測定結果から,TbドープGaNについては,均一に空孔型欠陥が分布していたが,Euドープ試料では,GaN/サファイア界面近傍で欠陥の集合が起こっていることがわかった.加えて,空孔型欠陥のサイズが大きくなるほど,発光特性は上昇し,主な発光は,最も大きなサイズの空孔が集中する界面で起きていると結論した.空孔型欠陥が導入されることによりEu近傍の対象性の低下が,内殻電子の移確率の上昇を引き起こしていると考えられる.同時計測ドップラー拡がり測定より,欠陥サイズは複空孔以上のサイズを持つ空孔クラスターであると同定した.
消費者と市民の経済思想：戦後日本社会論の再構築

平成30年度は2回の研究会を開催し,消費社会論および市民社会論についての共通理解を深めることに加え,各メンバーの論点をより明確にし,プロジェクト全体の成果物の構成を検討することに着手した。第1回研究会(10月13日(土)14日(日)於:新潟大学)では,畑山要介(研究分担者)「市民と消費者の邂逅と相克:フェアトレードをめぐる言説の変容を通じて」,水原俊博(研究分担者)「多様化する消費の概念的検討ー消費の情報化・脱物質主義化を中心に」,生垣琴絵(研究代表者)「ヘーゼル・カークの消費経済論2」の3報告が行われた。それぞれの論点に関するディスカッションを通じて今後の各自の論点を深めるための検討を行なった。第2回研究会(3月3日(日)於:北海道大学東京オフィス)では,生垣琴絵(研究代表者)「ヘーゼル・カークの消費経済論3」,根本志保子(研究分担者)「戦後の産消提携運動と消費者」,橋本努(研究分担者)「消費ミニマリズムの倫理」の3報告が行われた。生垣報告は,これまでの一連の報告をまとめ,カークの消費経済論が経済思想における消費者と市民社会論の源流に位置するという論点を定めることができた。根本報告では産消提携という特徴ある消費者と生産者との結びつきの背後にある思想とその実践および意味(意義)を捉えるという論点が示された。橋本報告では,消費ミニマリズム,脱資本主義などをキーワードとして現代の消費社会や消費行動の意味についての検討がなされた。研究概要に示した2回の研究会において,本年度の計画していた「前年度から続く一連の研究報告の関連を探る」という点はおおむね達成できていると考えている。また,研究目的として掲げた2つの論点(論点1:経済思想・学説における市民社会論,論点2:消費者運動の精神史構築)とメンバーの個別論点について,前年度の成果と合わせ,以下1)に示す論点については,十分な共通理解と検討が進んでいると考えている。しかし,2)にまとめた論点および,研究成果の集大成としての出版物に関して詳細を詰める必要がある。以上のことから,本プロジェクトは,「おおむね順調に進展している」と考えている。1)進展のあった論点:「日本の有機農業・産消提携の思想的再構築」(根本),「経済思想における市民社会論の批判的検討」(橋本),「グローバリズム対抗運動にみる市民的消費者の思想」(畑山),「記号的消費社会論の市民社会論的含意」(水原),「経済思想における消費者と市民社会論の源流・展開」(生垣),「近代初期の消費社会の生成過程と商品デザイン」(神野),「マクドナルド化批判とコミュニタリアン的市民社会」(伊藤),「環境ブランド消費の市民社会論的意義」(石塚)については,研究会での報告から共通理解を深めることができたため,今後の検討を進める準備が整ったと言える。については,本プロジェクトが始動した平成28年度の研究会において報告があり,29年度に論文「倫理的消費-消費者による自発的かつ能動的な社会関与の意義と課題」(『一橋経済学』第11巻、第2号、pp.1-18)として成果が得られた。以上から,論点1および論点2の両方に関わる内容の共通理解がおおむね進んでいると言える。2)今後共通理解と検討を進める論点:「70年代における『依存効果』批判と生活協同組合運動の関係」(共同)平成30年度と同様に年2回の研究会を開催する予定であり,研究成果の出版に向けた具体的な取り組みに着手する。また,経済社会学会全国大会(令和元年9月7日(土)-8日(日)於:熊本大学)において,セッション報告(橋本努・水原俊博・畑山要介・生垣琴絵)を予定している。今年度の主たる目的は,各研究者が個別の論点について論文をまとめることにあるが,その際,過去に研究会を重ねる中で確認してきた共通理解に基づいた成果を残すべく,一連の研究報告の関連を見ることに注視しつつ進めたい。(※出版に向けた調整の進捗によって研究会の開催を増やす可能性がある)【研究会開催予定】令和元年9月22日(日)-23日(月)北海道大学※執筆原稿の検討を行う令和2年3月(開催日未定)北海道大学東京オフィス※研究成果出版の最終調整平成29年度は2回の研究会を開催し,消費社会論および市民社会論についての共通理解を深めることに重点を置いた。第1回研究会(10月28日(土))では,畑山要介(研究分担者)の『倫理的市場の経済社会学:自生的秩序とフェアトレード』(学文社,2016年)の合評を通じ,社会学の動向と消費社会論との関連について共通理解を得た。また,伊藤賢一(研究分担者)による報告「現代の時間意識と消費」では,G. Ritzerのマクドナルド化理論の批判的検討とH. Rosaによる加速化論と消費社会論との関連に関する議論が,生垣琴絵(研究代表者)の報告「ヘーゼル・カークの消費経済論」では,研究目的に掲げた論点1(経済思想・学説における市民社会論)の理論的基盤と源流が示され,この論点に関する共通理解が深まった。第2回研究会(2月19日(月)-20日(火))では,神野由紀(研究分担者)「消費社会における手作りの意味ー

手作りインテリアをめぐる考察ー」,石塚千賀子(研究協力者)「非生活必需品のリピート販売における販売員の役割と消費者態度の変化」,丸山千賀子(研究分担者)「世界の消費者運動の動向とオーストラリアの消費団体」の3報告が行われた。神野報告では,第二次大戦後の日本における女性と手作り(手芸)の関連とその後の大量生産品に囲まれた消費社会への批判的文脈から生じるハンドメイド(DIY)の流れと本テーマとの関連が示された。石塚報告は,消費者行動研究の一つとしてのサービス・マーケティング・アプローチの有効性を示し,個別の消費者行動の分析から消費社会の像が浮き彫りにされた。丸山報告は,オーストラリアの消費者団体へのインタビューから消費者運動における政府と消費者団体との関わりに注目した実態が紹介され,研究目的の論点2(消費者運動の精神史構築)の理解を促した。研究概要に示した通り2回の研究会開催において,本年度の計画に示した「各自の研究を進め研究会で共通理解を深める」という点はおおむね達成できていると考えている。研究目的として掲げた2つの論点(論点1:経済思想・学説における市民社会論,論点2:消費者運動の精神史構築)とメンバーの個別論点についてみると,以下1)に示す論点については,十分な共通理解と検討が進んでいると考えている。しかし,2)にまとめた論点については,報告の機会を次年度に持ち越すこととなったため,共通理解および検討は今後の課題である。以上のことから,本プロジェクトは,「おおむね順調に進展している」と考えている。1)進展のあった論点:「70年代以降の国内外の消費者運動」(丸山),「経済思想における消費者と市民社会論の源流・展開」(生垣),「近代初期の消費社会の生成過程と商品デザイン」(神野),「マクドナルド化批判とコミュニタリアン的市民社会」(伊藤),「環境ブランド消費の市民社会論的意義」(石塚)については,研究会での報告から共通理解を深めることができたため,今後の検討を進める準備が整ったと言える。「日本の有機農業・産消提携の思想的再構築」(根本)については,本プロジェクトが始動した平成28年度の研究会において報告があり,29年度に論文「倫理的消費-消費者による自発的かつ能動的な社会関与の意義と課題」(『一橋経済学』第11巻、第2号、pp.1-18)として成果が得られた。以上から,論点1および論点2の両方に関わる内容の共通理解がおおむね進んでいると言える。2)今後共通理解と検討を進める論点:「70年代における『依存効果』批判と生活協同組合運動の関係」(共同),「経済思想における市民社会論の批判的検討」(橋本),「記号的消費社会論の市民社会論的含意」(水原),「グローバリズム対抗運動にみる市民的消費者の思想」(畑山)平成30年度は2回の研究会を開催し,消費社会論および市民社会論についての共通理解を深めることに加え,各メンバーの論点をより明確にし,プロジェクト全体の成果物の構成を検討することに着手した。第1回研究会(10月13日(土)14日(日)於:新潟大学)では,畑山要介(研究分担者)「市民と消費者の邂逅と相克:フェアトレードをめぐる言説の変容を通じて」,水原俊博(研究分担者)「多様化する消費の概念的検討ー消費の情報化・脱物質主義化を中心に」,生垣琴絵(研究代表者)「ヘーゼル・カークの消費経済論2」の3報告が行われた。それぞれの論点に関するディスカッションを通じて今後の各自の論点を深めるための検討を行なった。第2回研究会(3月3日(日)於:北海道大学東京オフィス)では,生垣琴絵(研究代表者)「ヘーゼル・カークの消費経済論3」,根本志保子(研究分担者)
ヒューマニティ教育をベースとした参加型研究倫理教育プログラムの構築

本研究は、薬剤師が受け身になりがちな研究倫理教育について、その必要性を認識し主体的に学ぶ意識づけにつながる様な参加型教育プログラムを構築することを目的としている。そのためには、薬剤師の現状での研究倫理に関する知識や教育機会の他、臨床研究に対する意欲についても把握する必要がある。そこで2017年度末に、全国から無作為に抽出した薬局薬剤師200名を対象としたネットによる無記名アンケート調査を実施した。その結果、薬局薬剤師は、現状では研究倫理についての知識や学習機会が乏しいことが明らかになった一方で、機会があれば学ぶ意欲はあり、基本的な知識を習得する機会の提供が重要であることが示唆された。2018年度は、これらの調査結果の一部について、日本薬学教育学会第3回大会(有田悦子、小倉未来、竹平理恵子、薬局薬剤師を対象とした“研究倫理教育"に関する意識調査、日本薬学教育学会第3回大会、2108.9.2)、および日本薬学会第139年会(盛岡正博、竹平理恵子、小倉未来、有田悦子、薬局薬剤師が主体的に学び続けるために学習意欲に関する志向性から、日本薬学会第139年会、2019.3.22)にてポスター発表を行った。また臨床研究支援者を対象とした研究倫理教育ワークショップも開催し、ヒューマニティ教育をベースとした教育プログラムの有用性について検証を行い、第18回CRCと臨床試験のあり方を考える会議にてポスター発表を行った(有田悦子、氏原淳、桃井章裕、青野寛之:CRAを対象としたよりよい研究倫理教育のあり方に関する検討、第18回CRCと臨床試験のあり方を考える会議2018.9.17)。2018年度は、更に病院薬剤師、医師を対象とした意識調査を実施し、現在解析を行っている。2018年度の目的であった薬局薬剤師の臨床研究や研究倫理に対する現状把握に関しては、順調に解析も進み、その結果について学会発表(「有田悦子、小倉未来、竹平理恵子、薬局薬剤師を対象とした“研究倫理教育"に関する意識調査、日本薬学教育学会第3回大会、2108.9.2」、「盛岡正博、竹平理恵子、小倉未来、有田悦子、薬局薬剤師が主体的に学び続けるために学習意欲に関する志向性から、日本薬学会第139年会、2019.3.22」)を行った。また、現況調査の一環として、病院薬剤師や医師を対象とした意識調査も実施し、現在解析を行っている。教育プログラム構成の検討としては、臨床研究支援を職務としているCRAを対象とした研究倫理教育ワークショップを開催し、ヒューマニティ教育をベースとした教育プログラムの有用性について検証を行い、その結果について学会発表(「有田悦子、氏原淳、桃井章裕、青野寛之:CRAを対象としたよりよい研究倫理教育のあり方に関する検討、第18回CRCと臨床試験のあり方を考える会議2018.9.17」)を行った。一方で、薬剤師を対象としたインタビュー調査については、意識調査の解析結果を踏まえた半構造化面接を予定しているため、次年度に実施予定である。2019年度は、これまでの意識調査結果を論文としてまとめる他、これまでの調査をもとに教材を作成し、第52回日本薬剤師会学術大会にて薬局薬剤師を対象とした研究倫理教育ワークショップを開催する予定である。また、薬局薬剤師および病院薬剤師を対象としてインタビュー調査を行い、研究倫理を学ぶ意識付けにつながる要因を明らかにしたいと考えている。本研究では、臨床心理やコミュニケーションなどのヒューマニティ教育をベースとし、薬剤師が研究倫理を学ぶ意識づけにつながる参加型教育プログラムの構築を目指している。1年目にあたる本年度は、薬局薬剤師の職能団体である日本薬剤師会の研究倫理教育に関する情報を収集し、現状分析を行うことを目的として研究活動を行った。日本薬剤師会の研究倫理啓発活動としては、平成25年度より「臨床および疫学研究に関する倫理審査に関わる検討委員会」を設置し、平成26年度には「研究倫理e-ラーニングコンテンツ」が公開されている。また、平成28年度から設置された「臨床研究推進委員会」では、全国都道府県薬剤師会を対象とした倫理審査の取り組み状況調査の他、平成28年度第49回日本薬剤師会学術大会の一般演題の検討を行い、一般演題678演題のうち倫理審査が必要と判断される演題は63%を占めるが、実際に倫理審査を行っている演題が少ない現状が報告されている(平成29年度研究倫理に関する全国会議資料平成29年12月8日)。平成31年度第52回日本薬剤師会学術大会より、演題のエントリー時に倫理審査の有無を登録することが義務付けられる。それらの背景を受け、平成30年3月には「研究倫理審査申請準備ガイド研究計画書の記載方法」が作成され、全会員に配布されている。このように全国薬剤師会を対象とした研究倫理教育の取り組みは急速な勢いで進んでいる一方で、その結果、ここ数年、全国の薬剤師会に対する啓発活動は進んでいるものの、個々の薬局薬剤師までは浸透しきれていないことが明らかになった。そこで、全国の薬局薬剤師を対象に臨床研究や研究倫理に関する認識や教育経験等について、ネットによるアンケート調査を実施し200名から回答を得た。結果について現在解析中である。1年目にあたる本年度は、日本薬剤師会を代表とする機関より提示された薬剤師を対象とした研究倫理教育に関する情報を収集し、現状分析を行うことを目的として研究活動を行った。臨床研究法の法制化の時期と重なり、薬剤師を対象とした研究倫理教育の機運が高まっていることも幸いし、本研究を進める上で協力的な対応を得られた。そこで、薬局薬剤師の臨床研究や研究倫理に対する意識調査を実施した。

調査にあたっては、当初日本薬剤師会の協力を得ることを検討したが、回答者選択における偏りを防ぐためにネットアンケートを用い、全国から無作為抽出した薬局薬剤師200名から回答を得ることができた。一方で薬局における臨床研究の具体例や課題についての情報収集は未だ途上であり、薬局薬剤師へのインタビュー等は次年度に実施予定である。本研究は、薬剤師が受け身になりがちな研究倫理教育について、その必要性を認識し主体的に学ぶ意識づけにつながる様な参加型教育プログラムを構築することを目的としている。そのためには、薬剤師の現状での研究倫理に関する知識や教育機会の他、臨床研究に対する意欲についても把握する必要がある。そこで2017年度末に、全国から無作為に抽出した薬局薬剤師200名を対象としたネットによる無記名アンケート調査を実施した。その結果、薬局薬剤師は、現状では研究倫理についての知識や学習機会が乏しいことが明らかになった一方で、機会があれば学ぶ意欲はあり、基本的な知識を習得する機会の提供が重要であることが示唆された。2018年度は、これらの調査結果の一部について、日本薬学教育学会第3回大会(有田悦子、小倉未来、竹平理恵子、薬局薬剤師を対象とした“研究倫理教育"に関する意識調査、日本薬学教育学会第3回大会、2108.9.2)、および日本薬学会第139年会(盛岡正博、竹平理恵子、小倉未来、有田悦子、薬局薬剤師が主体的に学び続けるために学習意欲に関する志向性から、日本薬学会第139年会、2019.3.22)にてポスター発表を行った。また臨床研究支援者を対象とした研究倫理教育ワークショップも開催し、ヒューマニティ教育をベースとした教育プログラムの有用性について検証を行い、第18回CRCと臨床試験のあり方を考える会議にてポスター発表を行った(有田悦子、氏原淳、桃井章裕、青野寛之:CRAを対象としたよりよい研究倫理教育のあり方に関する検討、第18回CRCと臨床試験のあり方を考える会議2018.9.17)。2018年度は、更に病院薬剤師、医師を対象とした意識調査を実施し、現在解析を行っている。2018年度の目的であった薬局薬剤師の臨床研究や研究倫理に対する現状把握に関しては、順調に解析も進み、その結果について学会発表(「有田悦子、小倉未来、竹平理恵子、薬局薬剤師を対象とした“研究倫理教育"に関する意識調査、日本薬学教育学会第3回大会、2108.9.2」、「盛岡正博、竹平理恵子、小倉未来、有田悦子、薬局薬剤師が主体的に学び続けるために学習意欲に関する志向性から、日本薬学会第139年会、2019.3.22」)を行った。また、現況調査の一環として、病院薬剤師や医師を対象とした意識調査も実施し、現在解析を行っている。教育プログラム構成の検討としては、臨床研究支援を職務としているCRAを対象とした研究倫理教育ワークショップを開催し、ヒューマニティ教育をベースとした教育プログラムの有用性について検証を行い、その結果について学会発表(「有田悦子、氏原淳、桃井章裕、青野寛之:CRAを対象としたよりよい研究倫理教育のあり方に関する検討、第18回CRCと臨床試験のあり方を考える会議2018.9.17」)を行った。一方で、薬剤師を対象としたインタビュー調査については、意識調査の解析結果を踏まえた半構造化面接を予定しているため、次年度に実施予定である。
染色体DNA複製開始機構の制御-リン酸化によるMCM複合体の活性化と不活性化

細胞は一回の細胞周期で一度きりの正確なゲノム複製を行う。そのゲノム複製の制御に関与する因子のうち、Mcm(minichromosome maintenance)蛋白質群は特に重要な役割を果たしている。Mcmは6個[Mcm2-7]の構造的に類似したタンパク質からなる複合体で、ライセンス因子の本体であり、複製開始に必須である。我々はMcm蛋白質の生化学的な解析を行い、Mcm複合体を構成する6種類のサブユニットの中で、組み換え蛋白質Mcm4/6/7複合体が内在的に二本鎖DNAを巻き戻す機能(DNAヘリカーゼ)、DNA結合能、DNA依存性ATP加水分解能をもつことを明らかにした(You et al.MCB 1999)。また、Mcm4/6/7ヘリカーゼの変異体解析から、Mcm4とMcm6のATP結合ドメインはそれぞれDNA結合およびATP結合に関与すること、Mcm7のATP結合ドメインはMcm4/6/7ヘリカーゼ活性に必須であること、およびMcm4のZinc-fingerは安定なMcm4/6/7六量体の形成に関与することを明らかにし報告した(You et al.JBC 2002)。さらに、Mcm4/6/7ヘリカーゼがTの連続配列により特異的に活性化されることを見出した。DNA複製開始部位には多くの場合、AT-richな配列が存在することが示唆された。この結果から、我々は、T-rich配列によるMCMヘリカーゼの活性化が、複製開始領域を決定するという仮説を提出した(You et al.EMBO J.2003)。すなわち、Mcm4/6/7複合体は二量体として複製起点領域に選択的に結合し、複製フォークで効率よいヘリカーゼとして二本鎖DNAの巻き戻しを行なう可能性を示唆する。本年度は、複製開始領域をmimicするバブル構造において、Mcm4/6/7複合体はダブルヘキサマーとして左右対称に両分岐点の5'側に隣接している25ヌクレオチドの一本鎖領域に結合することを明らかにした。片方strandのチミン残基を欠損するとDNA unwinding効力はかなり減少されることから、double-hexameric Mcm4/6/7が同時双方向にフォークを効率的に解くことを示した。また、ヘリカーゼ活性が3' tailのチミンの含量に関与し、最大のレベルは50%以上のチミンがあることによって達成されます。さらに、活性化されたMcm4/6/7複合体のヘリカーゼ活性がGC-richな二本鎖DNAによって阻害されることを見出した。現在論文を投稿中である。そのゲノム複製の制御に関与する因子のうち、Mcm (minichromosome maintenance)蛋白質群は特に重要な役割を果たしている。我々はMcm蛋白質の生化学的な解析を行い、Mcm複合体を構成する6種類のサブユニットの中で、組み換え蛋白質Mcm4/6/7複合体が内在的に二本鎖DNAを巻き戻す機能(DNAヘリカーゼ)、DNA結合能、DNA依存性ATP加水分解能をもつことを明らかにした(You et al. MCB 1999)。つまり、Mcmは複製ヘリカーゼというゲノム複製の中心的反応に関与する可能性を指摘した。また、我々は6量体のMcm4/6/7のヘリカーゼ活性がMcm2と3,5サブユニットとの相互作用およびMcm4のリン酸化により負に制御されることを発見した。さらに、Mcm4/6/7ヘリカーゼの変異体解析から、Mcm4とMcm6のATP結合ドメインはそれぞれDNA結合およびATP結合に関与すること、Mcm7のATP結合ドメインはMcm4/6/7ヘリカーゼ活性に必須であること、およびMcm4のZinc-fingerは安定なMcm4/6/7六量体の形成に関与することを明らかにし報告した(You et al. JBC 2002)。すなわち、各サブユニットがDNAヘリカーゼに対して異なる貢献をしていることを明らかにした。本年度は、Mcm4/6/7は、フォーク構造にダブルヘキサマーとして結合し、その結果そのヘリカーゼ活性が著しく促進されることを見出した。また、申請者は、McmヘリカーゼがTの連続配列により特異的に活性化されることを見出した。さらに、ヒトの複製起点であるlaminB2 originに存在するT-rich一本鎖配列によってもMCMは強く活性化された。この配列中のT(チミン)をG(グアニン)に変化させると活性化は完全に失われた。この結果から、我々は、T-rich配列によるMCMヘリカーゼの活性化が、複製開始領域を決定するという仮説を提出した(You et al. EMBO J.2003)。

我々はMcm蛋白質の生化学的な解析を行い、Mcm複合体を構成する6種類のサブユニットの中で、組み換え蛋白質Mcm4/6/7複合体が内在的に二本鎖DNAを巻き戻す機能(DNAヘリカーゼ)、DNA結合能、DNA依存性ATP加水分解能をもつことを明らかにした(You et al.MCB 1999)。また、Mcm4/6/7ヘリカーゼの変異体解析から、Mcm4とMcm6のATP結合ドメインはそれぞれDNA結合およびATP結合に関与すること、Mcm7のATP結合ドメインはMcm4/6/7ヘリカーゼ活性に必須であること、およびMcm4のZinc-fingerは安定なMcm4/6/7六量体の形成に関与することを明らかにし報告した(You et al.JBC 2002)。さらに、Mcm4/6/7ヘリカーゼがTの連続配列により特異的に活性化されることを見出した。DNA複製開始部位には多くの場合、AT-richな配列が存在することが示唆された。この結果から、我々は、T-rich配列によるMCMヘリカーゼの活性化が、複製開始領域を決定するという仮説を提出した(You et al.EMBO J.2003)。すなわち、Mcm4/6/7複合体は二量体として複製起点領域に選択的に結合し、複製フォークで効率よいヘリカーゼとして二本鎖DNAの巻き戻しを行なう可能性を示唆する。本年度は、複製開始領域をmimicするバブル構造において、Mcm4/6/7複合体はダブルヘキサマーとして左右対称に両分岐点の5'側に隣接している25ヌクレオチドの一本鎖領域に結合することを明らかにした。片方strandのチミン残基を欠損するとDNA unwinding効力はかなり減少されることから、double-hexameric Mcm4/6/7が同時双方向にフォークを効率的に解くことを示した。また、ヘリカーゼ活性が3' tailのチミンの含量に関与し、最大のレベルは50%以上のチミンがあることによって達成されます。さらに、活性化されたMcm4/6/7複合体のヘリカーゼ活性がGC-richな二本鎖DNAによって阻害されることを見出した。現在論文を投稿中である。
薬剤排出ポンプによる薬剤認識・排出メカニズムの分子解析

薬剤排出ポンプは、ガンの多剤耐性に関与し、その治療を困難にしている。その特異的阻害物質(多剤耐性克服物質)は、ガンに治療に有効と考えられる。私は、酵母をモデルとして取得に成功した微生物由来の多剤耐性克服物質を精製し、その構造・機能解析を行なった。多剤耐性克服物質を精製し、新規と予想される物質、KPI(Kitasatospora Pdr5 inhibitor)の構造を明らかにした(投稿準備中)。本物質は、興味深いことに多数の水酸基よりなる親水性に富んだ部分と、トリエン構造よりなる疎水性の部分よりなることが明らかとなった。阻害活性に必須な部分はトリエンの逆側に位置しており、酸に不安定であった。本物質の分子量は1193であり、既報の酵母Pdr5阻害物質であるFK506とは明らかに異なっていた。本物質は新規物質であると予想される。本物質は、シクロヘキシミドやセルレニンの様なPdr5によって排出される薬剤と併用した場合にのみ酵母の増殖を阻害した。一方、酵母Snq2の機能は阻害しなかったことから、Pdr5特異的に作用していると推察された。本物質は、Pdr5によって排出されることが明らかとなっている蛍光物質ローダミンの細胞外排出を阻害し、細胞内への蓄積を認めた。そこで、本物質がpdr5遺伝子の発現を阻害しているか、機能を阻害しているか否かを精査するため、pdr5遺伝子のプロモータにβガラクトシダーゼ遺伝子を連結したレポーター遺伝子を用い、精製した阻害剤を添加した結果、発現には影響しないことが明らかとなった。また、ウエスタンブロッティングによっても発現には影響しないことが明らかとなった。従って、新規な本阻害物質は、Pdr5の薬物排出機能を阻害していることが明らかとなった。
柑橘果皮中の薬効成分分離を目指した溶媒循環型超臨界抽出‐精留法の開発

柑橘果皮中の薬効成分分離を目指した溶媒循環型超臨界抽出-精留法の開発を目的とし,2010年度は溶媒循環型超臨界流体抽出-精留装置の開発,2011年度は構築した装置とモデル化合物2種を用いた実験的評価,2012年度は実サンプルとして柑橘果皮成分への応用を検討した.まず,温度付与型精留塔の妥当性評価のため標準物質として入手可能な化合物2種(7-hydroxy flavoneおよびAnthracene)を選定し,精留実験を実施した結果,CO_2-Ethanol系の気液平衡関係に従ってそれぞれ2種の化合物が親水性の尺度のもと精留塔塔頂と搭底より連続的かつ高度に分離されることを確認した.2012年度は引き続き基礎データの蓄積とさらなる応用のため青島温州果皮成分へと方法論を展開した結果,抽出物のノビレチンやその他ポリメトキシフラボンにも本法が適用できることが確認された.特に,水を添加した抽出-精留実験では,ノビレチンを含む透明な液体が塔頂から,その他光合成色素を含む着色した液体が塔底からそれぞれ回収できることが判明し,本法の有用性が実証された.柑橘果皮中の薬効成分分離を目指した溶媒循環型超臨界抽出-精留法の開発を目的とし,2010年度は溶媒循環型超臨界流体抽出-精留装置の開発,2011年度は構築した装置とモデル化合物2種を用いた実験的評価,2012年度は実サンプルとして柑橘果皮成分への応用を検討した.まず,温度付与型精留塔の妥当性評価のため標準物質として入手可能な化合物2種(7-hydroxy flavoneおよびAnthracene)を選定し,精留実験を実施した結果,CO_2-Ethanol系の気液平衡関係に従ってそれぞれ2種の化合物が親水性の尺度のもと精留塔塔頂と搭底より連続的かつ高度に分離されることを確認した.2012年度は引き続き基礎データの蓄積とさらなる応用のため青島温州果皮成分へと方法論を展開した結果,抽出物のノビレチンやその他ポリメトキシフラボンにも本法が適用できることが確認された.特に,水を添加した抽出-精留実験では,ノビレチンを含む透明な液体が塔頂から,その他光合成色素を含む着色した液体が塔底からそれぞれ回収できることが判明し,本法の有用性が実証された.柑橘果皮中に含有されるフラボノイドやカロテノイドには、抗酸化作用、抗炎症作用、糖尿病抑制、抗癌作用、抗認知症作用を示すものがあり、これらを漢方薬やザプリメント素材として、安全・安心・効率的に分離する方法として、超臨界CO_2と水、エタノールのみを使用する超臨界抽出・精留法に基づく新しい分離法を開発することが目的である。まず柑橘果皮からの超臨界抽出実験データの解析に必須である溶解度の把握を目的とし,その基礎データの蓄積と推算法を検討した。1.エントレーナを含む超臨界流体系へ適用できる溶解度測定装置を新たに組み立て、入手可能な標準物質を用いた溶解度データの効率的な収集を行い、ノビレチンに類似の構造を有するフラボンおよびフラバノンの溶解度データを各種温度・圧力・密度条件で取得した。2.得られた溶解度データはChrastilの式による推算値と合致した.すなわち,両対数軸において溶解度と密度データとの線形性が得られ,測定データの信頼性が評価された.3.超臨界流体中への溶解度を,融点・融解熱という熱物性とSP値に基づき推算するもので希少価値の高い天然成分も対象系として想定されている.本研究にて獲得したノビレチンを含むフラボノイド8種の溶解度データに対して本モデルを適用したところ計算結果は実験結果を良好に再現した。さらに、得られた計算結果を25°C,大気圧,すなわちCO_2密度≒0に外挿することでフラボノイドのSP値を求めたところ,得られた値は有機溶媒にて推定された値と矛盾しないことが判明し,推定値として精度が向上した。今年度は,前年度に開発した超臨界流体抽出-精留装置を用いて温度,エントレーナーなどの操作条件の影響を調査し,未利用柑橘果皮由来ノビレチン濃縮実験への応用を図った.これまでの成果より,前段の超臨界-エントレーナー(エタノールおよび/または水)抽出を均一相系に保持し,後段の精留プロセスに温度勾配を付与し系内の相分離と自然還流を誘導した結果,例えばフラボノイドの1種である7-Hydroxyflavone(7HF)とその類似化合物であるAnthracene(ANT)の混合物を対象とした実験では,圧力12MPa,エタノール濃度11.5%,抽出部温度363K,精留部温度353358Kにおいて,塔頂での高度な成分分離が確認された.すなわち,定常後に塔頂から得られる7HFはUV-vis分光分析の検出限界以下となり,より低極性なANTが塔頂から独立して得られる新しい実験結果を得た.また,得られた基礎データに基づき操作条件を精査した結果,エタノール濃度の低下に伴いANTの回収率が向上しており,これは系内の気相割合の調整による制御法を示唆するものであった.最終的に,類似の条件で青島温州みかんの凍結乾燥果皮を対象としたノビレチンの分画を検討した結果,エタノール添加系において塔頂からノビレチンおよびカロテノイドがクロロフィルと分離して得られていた.

次年度は,さらに水添加系の実験を実施することで目的としたノビレチンのさらなる選択的分離についての検討を行う予定である.H24年度は,H22年度に開発した溶媒循環型超臨界流体抽出-精留装置およびH23年度に実施したモデル物質の抽出-精留実験の結果に基づき,実サンプルとして柑橘果皮成分を対象とした方法論への応用展開を検討した.まず始めに検討した青島温州果皮由来の抽出実験からは,高圧CO2にエタノールをエントレーナーとして添加することで,目的薬効成分であるノビレチンやその他ポリメトキシフラボンの抽出率が高まることが示唆された.続いて,前段で得られた抽出物を,後段の温度勾配を付した精留塔へと連続的に供給した結果,塔頂からはノビレチンやカロテノイドを含む黄色の液体が,搭底からクロロフィルを含む緑色の液体が選択的に回収できることが示唆された.一方,水を添加した抽出-精留実験からは,ノビレチンを含む透明な液体が塔頂から,上述した光合成色素を含む液体が塔底より選択的に回収されることが判明した.以上より,助溶媒種や濃度を適切に調整することにより柑橘果皮成分が高選択的に分離されることが示唆された.また,本法が特にポリメトキシフラボン類やカロテノイド類の濃縮分離に極めて有用であることも示唆された.ただし、収率については、分離性能と相反する傾向があり、目的とする濃縮率と収率との兼ね合いで、操作条件の最適化が図られるべきであることを示唆された同時展開している抗認知症向けの神経細胞のCRE(Cyclic AMP Response Element)依存型転写活性試験からは,若干量のエタノールおよび水添加系において転写活性が高まることも示唆されており,今後は得られた抽出物の活性評価も含めた総合評価が必要と考えている.本研究で開発した抽出-精留プロセスにおいてノビレチンの高収率・高選択的分離法が合目的的に確立されたことに順調な成果獲得の進展を見ることができた。また,特に分離が難しいカロテンなどの低極性夾雑分を抑制した操作条件の特定に想定以上の成果を確認することができる。24年度が最終年度であるため、記入しない。今後は,さらなる運転条件の最適化にむけ、基礎となる相平衡(分離係数)などのデータに基づいて、抽出精留プロセスのシミュレーションを可能とする手法を開発する。そのシミュレーションにより、操作変数の感度解析を行い、最適化設計手法を提案する。また、同時に実験で得られた超臨界抽出物の薬理活性試験などについて基礎研究を引き続き検討し、目的に合致した濃縮組成の設定指針についての知見を蓄積する。
夏期渇水期における山地河川の流量及び水質の日変動と蒸発散

暖候期の渇水期の雨竜川源頭部において、流出量と川水の比電導度の双方が、晴天日の夕刻に極小、早朝に極大となる日変動を示すことをみいだした。さらに川水の化学成分を精査し、流量と水質の長期変動及び日変動における挙動に検討を加え渇水期の流出機構をより明確にした。1)渇水期における一時的降水による増水は融雪期の増水に比べて非常に早い減衰を示し、23日で流量は長期の減衰動向に戻る。同時に水質も降水による一時的変質から長期動向に戻る。2)川水のイオン分析をHCO_3^-、Cl^-、SO_4^=、NO_3^-、Na^+、K^+、等について行った。総イオン濃度のうち当量において、約2/3をHCO_3^-が占め、約1/3をCl^-が占める。比電導度の日変動は主としてHCO_3^-濃度の変動によることが判明した。3)降水による一時的出水後の流量の減衰及びHCO_3^-、Cl^-イオン濃度の変動を利用して渇水期流出の2成分分離を行った。その結果、降水の浅い滲透水の流出によると推定される早い減衰の水と無降水時のより深い地中水の遅い減衰とに分かれる。4)蒸散による上記の浅層深層からの流出成分比の日変動が、渇水期の水質の日変動を生じる要因になっているものと推察される。5)天塩川支流の問寒別川支流においても流量、水質の日変動を観測した。6)札幌近郊の森林2流域及び新潟県十日町市の森林流域において流量は日変動を示したが、水質は日変動しなかった。渇水期の森林流域における水質の日変動の原因については、地中水の化学成分の植生による選択吸収の可能性もある。水質の日変動しない川も多く、渇水期の流出過程に関して未解明の部分が多い。研究の手法が判明しつつあり今後の研究が楽しみである。(1)日中の蒸散により日中から夕刻にかけて川の流量が減少するとともに川水の比電導度が減少(総イオン濃度が減少)したが、中には、逆に濃度の増加したイオン(例、SO_4^=)がみつかった。この原因解明は今後の課題である。(2)渇水期の流量、比電導度(比電導計1式購入)川水のイオン濃度の日変動のデ-タは、北海道の2流域及び十日町市の1流域において、順調に集積しつつある。(3)蒸発計の予備実験は終了した。(4)川水中の酸素の同位体δ^<18>Oの日変動には有意の差が認められないことが判明したので、以降の分析は中止する。(5)川水中のイオン濃度の変動において逆位相を有するイオン(SO_4^=等)が見いだされた。よって、植栽ライシメ-タ-中の地中水の植物根によるイオンの選択的吸収の有無の実験を計画した。(6)昭和60年度から設置した石狩川支流雨龍川源頭部、天塩山地、及び平成元年設置の十日町市山地等の試験流域において、流量を精測するとともに、川水の電導度を連続測定し、流量と水質の日及び径日変動と林地の蒸発量との関係を追究する計画を新たに立てた。(1)日中の蒸散により日中からタ刻にかけて川の流量が減少するとともに川水の比伝導も減少(総イオン温度が減少)したが、中には、SC_4^=、NO_3^ー等、その挙動が、伝導度と異なるものが見いだされた。

川近傍の植生との関係を解明中である。(母子里)(2)上記の流量と伝導度の関係は問寒別でも確認された。(3)湧水においては、流量は日変動するものの、伝導度は変動しない(母子里)。川における同様の関係は、十日町においても観測された。(4)ライシメ-タ-による蒸散の日変動を6月10月にかけて母子里において、連続観測した。従来測定に困難であった、1時間値のデ-タが得られた。気象デ-タと照合中である。これ等の結果は、川の流量変動とつきあわせて解析中である。(5)札幌近郊の小河川においても流量と水質の変動を観測した。結果は解析中である。これ等の結果は森林流域の水収支の解明に有用であるとともに、未だ解明されていない渇水期の川の流出機構を論ずる上で重大な手がかりを与えつつある。従来渇水流出は地中の深い場からの流出にのみ着目していたが、浅層からの流出も、かなりの部分を占める可能性が指摘された。暖候期の渇水期の雨竜川源頭部において流出量と川水の比電導度の双方が、晴天日の夕刻に極小、早朝に極大となる日変動を示すことを先に報告した。今回は川水の化学成分を精査し、流量と水質の長期変動及び日変動における挙動に検討を加え渇水期の流出機構をより明確にした。1)渇水期における一時的降水による増水は融雪期の増水に比べて非常に早い減衰を示し、23日で流量は長期の減衰動向に戻る。同時に水質も降水による一時的変質から長期動向に戻る。2)川水のイオン分析をHCO_3^-、Cl^-、SO_4^=,NO_3^-、Na^+、K^+、等について行った。総イオン濃度のうち当量において約2/3をHCO_3^-が占め、約1/3をCl^-が占める。比電導度の日変動は主としてHCO_3^-濃度の変動によることが判明した。3)降水による一時的出水後の流量の減衰及びHCO_3^-、Cl^-イオン濃度の変動を利用して渇水期流出の2成分分離を行った。その結果降水の浅い滲透水の流出によると推定される早い減衰の水と無降水時のより深い地中水の遅い減衰の水とに分かれる。4)蒸散による上記の浅層と深層からの流出成分比の日変動が、渇水期の水質の日変動を生じる要因になっているものと推察される。5)天塩川支流の問寒別川支流においても流量、水質の日変動を観測した。6)札幌近郊の森林2流域及び新潟県十日町市の森林流域において流量は日変動を示したが、水質は日変動しなかった。渇水期の森林流域における水質の日変動の原因については、地中水の化学成分の植生による選択吸収の可能性もある。水質の日変動しない川も多く、渇水期の流出過程に関して未解明の部分が多い。研究の手法が判明しつつあり今後の研究が楽しみである。
炎症性腸疾患発症/持続/寛解/再燃時における腸炎惹起性メモリーT細胞動態の可視化

炎症性腸疾患(クローン病と潰瘍性大腸炎)は再燃を繰り返す難治性の疾患であり、未だ根治療法は存在しない。我々はこれまでの研究において、この疾患を根治させるためには、腸管粘膜局所および、リンパ節、骨髄において半永久的に維持される腸炎惹起性メモリーT細胞を排除する必要があることを証明してきた。今回我々は新たに開発した生体の内部を直接観察できるIn vivo live imagingシステムを用いて、炎症性腸疾患の発症、寛解、再燃時における腸炎惹起性メモリーT細胞動態の可視化を行う。疾患記憶の制御が可能であれば本疾患のみではなく、自己免疫疾患や感染症、悪性腫瘍など幅広い疾患にも応用可能である。