hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
神経障害性痛におけるグリア細胞の役割の解明と新規治療薬の開発

リアルタイムPCRでは、処置側の脊髄後角でMMP-9が有意に増加した。脊髄免疫染色では、処置側の脊髄後角でMMP-9陽性の細胞数が増加した。すなわち、がん性疼痛モデルにおいて、脊髄内のMMP-9が上昇し、MMP-9阻害薬投与で疼痛軽減を認めた。マウスがん性疼痛モデル(骨転移モデル)とMMPとの興味深い結果、すなわち、がん性疼痛モデルにおいて、脊髄内のMMP-9が上昇し、MMP-9阻害薬投与で疼痛軽減を認めたことから、MMPに関する研究を優先させた。本来のアクロメリン酸A誘導体GIF-2034を用いて、中枢性神経障害性痛である脊髄損傷モデル、末梢性神経障害性痛であるL5SNTモデルだけでなく、がん性疼痛モデルに対する有効性を検討する予定であったが、現時点では、がん性疼痛モデルに対する効果しか検討できていない。Balb/Cマウスの右脛骨骨髄内に4T-1マウス悪性乳腺細胞を接種し、マウスがん性疼痛モデル(骨転移モデル)を作製した。骨転移モデルを用いてがん性疼痛の発現機構を、グリア細胞とMMPに着目し行動、腫瘍、脊髄の分子解析で評価した。MMP-9阻害薬の腹腔内、髄腔内投与は、腫瘍細胞接種処置側下肢の負荷比が改善した。リアルタイムPCRでは、晩期に処置側の脊髄後角でMMP-9が有意に増加した。免疫染色では、早期に腫瘍細胞接種した脛骨で、晩期に処置側の脊髄後角でMMP-9陽性の細胞数が増加した。すなわち、がん性疼痛モデルにおいて、早期では腫瘍細胞接種部位で、晩期では脊髄内のMMP-9が上昇し、MMP-9阻害薬投与で疼痛の軽減を認めた(Evid Based Complement Alternat Med. in press.)。毒茸のドクササコ(Clitocybe acromelalga)の成分であるアクロメリン酸A誘導体の中からGIF-2034を、神経障害性疼痛治療薬の候補薬として選定した。GIF-2034で前処置したマウスを用いて骨転移モデルを作製し、がん性疼痛の発現機構を、グリア細胞に着目し行動、脊髄の分子解析で評価した。GIF-2034で前処置したマウスでは、無処置マウスに比較して、腫瘍細胞接種処置側下肢の負荷比が改善した。現在、グリア細胞の役割に関して検討中である。マウスがん性疼痛モデル(骨転移モデル)とMMPとの関係を優先して検討した結果、神経障害性痛におけるグリア細胞の役割を検討する実験が遅れた。しかし、神経障害性痛の発現機構の解明としては、多方面からのアプローチが可能となった。今後、神経障害性疼痛の治療の新たなターゲットをさらに解明すること、アクロメリン酸A誘導体GIF-2034との関連を検討する予定である。現在、がん性疼痛モデルを用いて、新たな痛みの発現機構が明らかになりつつあるため、それを遂行すること、アストロサイトとミクログリアのグリア細胞、MMPとGIF-2034の関係を解析する予定である。がん性疼痛、神経障害性疼痛治療の新たなターゲットをさらに解明すること、アクロメリン酸A誘導体GIF-2034、MMPとの関連を検討するために、次年度の助成金と合わせて、研究分担者を増やして、精力的に実験を遂行する予定である。大学院生に研究チームに加わっていただき、1カ月ごとにリサーチカンファレンスで実験の進捗状況を確認して、精力的に実験を遂行する予定である。神経障害性疼痛の治療の新たなターゲットとなる作用点を見出したので、それらの実験を優先させたためアクロメリン酸A誘導体の研究がやや遅れているため、次年度に繰り越しとなった。
メダカ近縁種の種間雑種を用いた性決定遺伝子の機能解析

本研究では、メダカ及びその近縁種の種間雑種で性転換個体が生じる現象に着目して、メダカの性決定遺伝子Dmyに始まる性決定過程に関与する遺伝子の機能について検討した。その結果、メダカ近交系Hd-rR♀とハイナンメダカ♂との雑種からは性転換個体が出現するのに対してHO4C♀とでは出現しない原因を両系統間の多型を利用して解析し、Dmyの発現量制御に関わる遺伝子が、連鎖群17上の624KBの領域に存在することを明らかにした。現在、その遺伝子の同定を目指した研究を継続している。本研究はメダカとハイナンメダカ、ルソンメダカの種間雑種を用いて、メダカの性決定遺伝子DMYとルソンメダカの性決定遺伝子GSDFに始まる性決定過程に関与する遺伝子の探索を行うものである。本年度は、近交系メダカとハイナンメダカの種間雑種性転換(XY雌)の出現は使用する近交系により異なり、HdrRのXY個体はすべて雌、HNIは雄と雌両方、HO4Cはすべて雄になることが確認された。また、発生過程の観察から、XY個体が雌になる場合には性分化初期から雌方向に分化すること、また、予備的結果ながら、DMYおよびその下流で発現するGSDFの発現量が雌を生じる種間雑種において低下していることが示された。したがって、種間雑種においてはDMYの発現誘導に関与する遺伝子の不適合が起こっていることが示唆され、今後、この原因遺伝子の探索により、DMYの上流の制御に関わる遺伝子を明らかにすることが出来ることが示唆された。また、性決定遺伝子を異にするハイナンメダカとルソンメダカの種間雑種においては、いずれかの性決定遺伝子を持つ個体は雄に分化すること、またどちらも持たない個体では雌20%雄80%の割合で両者が出現することが明らかになった。さらに、性分化過程の観察から、種間雑種においては生殖細胞の増殖はXX,XYともにふ化後30日くらいまで抑制されており、その後60日くらいにかけて増殖を開始して卵巣あるいは精巣を形成することが分かった。その間、性分化期の雄でユニークな発現様式を示すGSDF,DMRT1の発生初期過程での発現は、通常のXY個体と変わらないことから、XX個体の雄への性転換は通常の性分化制御とは少し異なる経過で生じていることが分かった。今後、両種への戻し交配個体を得て、DMYあるいはGSDFの性決定に不可欠な遺伝子の同定を試みる予定である。本研究はメダカとハイナンメダカ、ルソンメダカの種間雑種を用いて、メダカの性決定遺伝子DMYとルソンメダカの性決定遺伝子GSDFこ始まる性決定過程に関与する遺伝子の探索を行うものである。本年度は、F1XY個体がすべて♂になるHO4C系統とハイナンメダカのF1,およびF1XY個体がすべて♂に分化するHdrR系統とハイナンメダカF1の発生過程について詳細な検討を行った。その結果、雑種性転換は性分化初期過程から雌方向に分化すること、また、DMYおよびその下流で発現するGSDFの発現量が雌になる種間雑種において低下していることが示された。したがって、種間雑種性転換は、DMYの発現誘導に関与する遺伝子とハイナンメダカDMYとの不適合によることが明らかになった。現在、この原因遺伝子について、HdrRとHO4Cの間で連鎖解析を行っており、連鎖群17の特定領域に関連遺伝子が存在することが示され、さらに約2000匹のF1個体を作出して、詳細な染色体領域の特定を目指した研究を継続している。また、性決定遺伝子を異にするハイナンメダカとルソンメダカの種間雑種においては、いずれかの性決定遺伝子を持つ個体は雄に分化すること、またどちらも持たない個体では雌20%雄80%の割合で両者が出現することが明らかになっていたが、本年度はさらに、雑種F1♂をルソンメメダカ雌に戻し交配して得られるBC1世代について、その性とDMYの有無を検討した。その結果、DMYを持つ個体はすべて♂に分化することが判明した。そこで、その♂をさらに戻し交配してBC2世代を作出して、その性を調べることを計画している。本研究はメダカとハイナンメダカ、ルソンメダカの種間雑種を用いて、メダカの性決定遺伝子Dmyとルソンメダカの性決定遺伝子Gsdfに始まる性決定過程に関与する遺伝子の探索を行うものである。本年度はF1XY個体がすべて♂になるHO4C系統とハイナンメダカのF1,およびF1XY個体がすべて♀に分化するHdrR系統とハイナンメダカF1の違いの原因となっていると思われる連鎖群17にある遺伝子(Hml)を、HO4CとHdrRの遺伝的多型性を活用したファインマッピングにより探索した。

その結果、Hmlは連鎖群17上のマーカーSca164stratとSca435-1に挟まれた遺伝距離0.2cM、物理距離で624Kbの領域に存在することが明らかになった。その領域に存在が予測される27の遺伝子の性分化時期の発現解析を行ったところ、25の遺伝子でバンドが確認され、シークエンス解析から、そのうち8個は目的領域の遺伝子の発現であることが確認された。さらに、当該領域が6つのBACクローンでカバーされることが明らかになったことから、ハイナンメダカの受精卵にそれら6つのBACを遺伝子導入して、性転換個体の出現を指標にどのBAC領域にHmlが存在するかの検討を試みた。現在までに導入遺伝子を持つ個体の作出には成功しており、さらに生殖細胞を介して導入遺伝子を受け継いだ個体の作出に取り組んでいる。本年度の研究から、性決定遺伝子Dmyの発現制御に関わると思われるHmlについて、かなりの程度までの染色体領域の絞込に成功したが、未だ遺伝子そのものの同定には至っていない。今後、Insitu hybridizationによる候補遺伝子の発現解析と遺伝子導入実験から、Hmlを同定することにより、Dmyの発現制御機構の一端を明らかにすることができるものと考えている。
尋常性天疱瘡抗体による表皮細胞接着障害におけるシグナル伝達機構の解析

[目的]尋常性天疱瘡抗体(PV-lgG)がデスモグレイン3(Dsg3)に結合することによってケラチノサイト細胞間接着が障害されることは明らかにされているが、その機序の詳細は不明である。ここでは、抗体結合後のDsg3の表皮細胞内運命を追跡した。[方法]培養DJM-1細胞(ヒト扁平上皮細胞癌)を用いて、DSg3の量的変化を細胞質、膜、細胞骨格画分に分画し免疫ブロット法で分析し、細胞内分布変化を蛍光抗体法で観察した。培養細胞をPV-lgGで20分間および30時間刺激し、洗浄後生理的食塩水可溶性(細胞質)画分、トリトンX-100可溶性(膜)画分、トリトンX-100不溶性(細胞骨格含デスモソーム)画分に分画し、デスモソーム構成分子であるDsg1,Dsg3,デスモプラキン(DPK),プラコグロビン(PG)に対する抗体で免疫ブロットを行った.また、カバー硝子上に培養した細胞を-20°Cメタノール固定後、Dsg3をPV-lgGで染色(ローダミン)し、他の分子にたいする抗体(FlTC)とあわせて二重染色した。[結果] PV-lgGの結合20分で、Dsg3のみが膜画分からが消失し、30時間後には膜画分、細胞骨格画分両者から消失した。蛍光抗体法では、30時間後には細胞間橋からDsg3のみが消失し、Dsg1,DPK,PGは細胞間橋に認められた。[結論]PV-lgGが細胞表面のDsg3分子に結合するとDsg3は20分以内にそのプールから消失し、30時間後にはDsg3欠損デスモソームが形成された。この現象は、Dsg3ノックアウトマウスの結果と考えあわせると水疱形成に関与する可能性が高いと推察される。尋常性天疱瘡患者の自己抗体がデスモソーム構造の接着分子デスモグレイン3(Dsg3)に結合し水疱を形成することは明らかであるが、水疱形成機序は不明である。デスモソーム構造の接着解離においてリン酸化反応が関与している可能性がある。そこで、我々はヒト有棘細胞癌由来株(DJM-1細胞)を^<32>Pでラベルした後、尋常性天疱瘡患者血清より精製したDsg3を認識するIgGで20分間刺激し、Dsg3を認識するIgGによる免疫沈降物をSDS-PAGEで分離したところ、Dsg3にシグナルがみとめられ、細胞内で実際にDsg3がリン酸化されていることが証明された。また、リン酸化アミノ酸分析の結果からDsg3はセリン残基がリン酸化されていることを示した。われわれは、このリン酸化反応に関与するキナーゼを検討する目的で、プロテインキナーゼ活性化剤(プロテインキナーゼC(PKC)活性化剤:TPA)や阻害剤(PKC阻害剤:H7,カリュモジュリンキナーゼ阻害剤:W7)の影響を検討したが、TPAによってDsg3はリン酸化されず、スタウロスポリンは部分的のリン酸化を抑制し,W7は全く影響を与えなかった。このことからDsg3のリン酸化にはPKCやカリュモジュリンキナーゼ以外のキナーゼが関与していることが推察される。これらの結果は、自己抗体がデスモソームカドヘリンに結合することがシグナル伝達経路の入り口でありかつ、その蛋白質のリン酸化が水疱形成という出口であることを示唆し興味深い。
EIマウス脳内におけるLeucine-enkephalinの分布に関する研究

てんかんモデル動物であるEIマウスにおいて、脳内オピオイドペプタイドであるLeucin-Enkephalin(Leu-E)の含量とけいれんとの関係、およびLeu-Eの受容体であるオピオイドデルタレセプターの変化と痙攣との関係を検討した。対象と方法:生後4週より痙攣刺激を与え、痙攣性を獲得した22ー24週令のEIマウス(EI(+))を用い、対照として、同週令の痙攣刺激を与えず痙攣を発現しないE1マウス(EI(-))、およびddYマウスを用いた。Leu-Eの測定はRIAを用し、抗Leu-E血清は、New Zealand White Rabbitを用いて作製した。マウスは1週の静置期間をおいた後、痙攣前後の様々な時間に断頭により屠殺後速やかに氷上で脳を取り出し、全脳あるいは脳と各部位を-70°Cで保存した。Tissue extractionは、acidifying-methanol法により、上清は測定まで-20°Cで保存した。得られた試料は直前に0.1N NaOHで中和しRIAに供した。オピオイドデルタレセプターの測定方法は、全脳のホモジェネートを用い、Filtration methodによった。[H3]-DADLEを用い、その特異的結合能を、総結合能と10nMDADLE存在下での非特異的結合能の差として求め、Scatchard analysisを行った。結果および考案:けいれん前のEI(+)で、線条体、中脳で、Leu-E含量の低下がみられ、統計学的に有意であった。痙攣後48時間後で、Leu-E含量は脳の全ての部位で増加しており、特に線条体、視床下部で著明であった。即ち、EIマウスにおいては、Leu-Eは痙攣に対して抑制的に働いている可能性が示唆された。EIマウスのLeu-Eの受容体であるオピオイドデルタレセプターは、痙攣前は変化なかったが、48時間様ではやや増加していた。今後脳の部位別に検討する予定である。モルフィン及び内因性オピオイドペプチドの中枢神経系における役割は,未だ明らかではないが,けいれんに関与する可能性が示唆されている.遺伝性てんかんモデル動物としてしられるE1マウスでは,けいれんにより,種々のNeurotransmitterの変化が報告されているが,オピオイドペプチドに関する報告はない.E1マウスの脳内内因性オピオイドペプチドの1種であるロイシンーエンケファリン(以下Leu-Eと略)の含量とけいれんとの関係を検討した.生後4週より週1回のほうりなげ刺激を加え,けいれん性を獲得した22-24週令のE1マウス(以下E1(+)と略)を用いた.対照として,同週令のほうり投げ刺激を与えず飼育し,けいれんを発現しないE1マウス(以下E1(-)と略),及びddYマウスを用いた. Leu-Eの測定はRIAを用い,抗Leu-E血清は, New Zealand White Rabbitを用いて作製した.合成Leu-Eはペプチド研究所より, ^<125>I-Leu-EはAmersham社より購入した.

マウスは, 1週の静置期間をおいた後,けいれん前後の様々な時間に断頭により屠殺後,速やかに氷上で脳を取り出し,全脳,あるいは脳の各部位を-70°Cで保存した. Tissue extractionは, acidifying-methanol法により,上清は測定まで-20°Cで保存した.得られた試料は直前に0.1N NaOHで中和しRIAに供した.コントロール群に比し,けいれん前のE1(+)で, striatum,midbrainで, Leu-E含量の有意の低下がみられた. E1(-)ではこの減少がみられないことから,これは,くり返しおこったけいれんが原因と考えられた.けいれん後24-72時間では,全脳でLeu-E含量は次第に増加し, 48時間後に最大となり,再び減少した.けいれん後48時間では,脳のすべての部位で増加していたが,ことにStriatum,hypothalamusで著明であった.即ち, E1マウスにおいては, Leu-Eはけいれんに対して抑制的にはたらいている可能性が示唆された.てんかんモデル動物であるEIマウスにおいて、Leucine-enkephalinの受容体であるオピオイドδレセプターの変化と痙攣との関係を検討した。対象と方法:生後4週より痙攣刺激を与え、十分に痙攣性を獲得した22ー24週令のEIマウス(EI(+))の痙攣準備状態および痙攣後48時間でのδレセプターのKdおよびBmaxをEIマウスの母系であるddYマウスと比較した。測定方法は、全脳とホモジェネートを用いFiltration methodによった。Radioligandとして〔H3〕ーDADLEを用い、その特異的結合能を、総結合能と10nM DADLE存在下での非特異的結合能の差として求め、Scatchard analysisを行った。結果:E1(+)の痙攣準備状態(4検体)ではδレセプターのKd 2.032±0.900nM、Bmax 150.43±52.08fmo1/mg proteinであったが、痙攣後48時間では(5検体)では、Kd2.660±1.305、Bmax176.57±73.20でやや増加していた。ddYマウス(5検体)では、Kd2.134±0.743、Bmax 155.89±37.38で、痙攣準備状態のE1(+)マウスとほぼ同じであった。E1、ddYいずれの群においても、統計学的な有意差を認めなかった。考案:全脳のホモジェネートを用いた検討では、E1マウスの痙攣前後のレセプターの変化はみられなかった。痙攣後48時間の時点では、統計学的に有意差はないものの、Kd、Bmaxともに変化する傾向を示した。今後、脳と部位別に検討し、検体数を増して、更に検討する必要があると思われる。まとめ:てんかんモデル動物であるE1マウスにおいて、Leucine-enkephalinの受容体であるオピオイドδレセプターの変化と痙攣との関係を検討した。痙攣前は変化がなかったが、48時間後ではKd、Bmaxともにやや増加していた。
電気伝導度・残留磁化から推定する流紋岩の熱履歴

本研究では、火山体を構成する岩石の電気物性と磁気物性を同時に検証した。流紋岩が高温で溶融する際、その試料を電気伝導度で“その場観察"すれば、溶融の度合いに関するデータを得る事ができる。一方、高温下の流紋岩も磁性を大きく変化させる。申請者等は、火山体下の状態を実験により再現し、電気伝導度・磁化の2つの視点から岩石の熱履歴を捉える研究を試みた。実験から得られた岩石の電気伝導度・磁化データを、電磁場観測から得られた電気伝導度構造解析結果や磁力計によって観測されたマクロな火山体の磁化構造などと直接対比することにより、観測結果と実験結果との相互検証が可能となった。本研究では、火山体を構成する岩石の電気物性と磁気物性を同時に検証する。申請者等は、火山体下の状態を実験により再現し、電気伝導度・磁化の2つの視点から岩石の熱履歴を捉える研究を試みる。実験から得られた岩石の電気伝導度・磁化データを、電磁場観測から得られた電気伝導度構造解析結果や磁力計によって観測されたマクロな火山体の磁化構造などと直接対比することにより、観測結果と実験結果との相互検証が可能になる。本研究では、これまでの研究からさらに一歩踏み込み、火山岩の電気伝導度と磁化の両方の特性を組み合わせることにより岩石が受けた熱履歴を明確にする研究を推進する。従前に収得した無水岩石・無水鉱物の電気伝導度と対比からは、流体を含んだ岩石の溶融の度合いまで見積もる事を計画している。流紋岩の溶融と含水量に関しては、未解明な事が多く、これまで申請者等が行ってきた電気伝導度測定結果と新しい測定データの連結により、定量的な解釈が発展する。磁化特性からは、対象試料のキューリー点や熱履歴が明確になる。岩石の電気伝導度・磁化を測る事は、室内実験において物性の弾性波速度を測る事と独立して地球内部物性の研究に多大な貢献ができる。又、岩石内部の流体や溶融の定量的な存在比率が明確になれば、火山体下の熱構造が解明される。本研究とこれまで蓄積されてきた研究成果は、地球内部の電気伝導度構造・磁化構造を総合的・系統的に解釈する上での両輪となる。平成27年度は、変質鉱物が少なく、また鉱物サイズが比較的均一なニュージーランド・タウポ火山帯からの岩石を入手し、試料合成を試みた。電気伝導度測定用試料は、細粒に粉砕し、ピストンシリンダーで加圧し、合成した。又、磁化測定用には、スピナー磁力計に適合する試料を加工した。マルチアンビルを用いた高温・高圧での電気伝導度測定は岡山大学地球物質科学研究センターで行った。一方、他の流紋岩の磁化測定は岡山大学教育学部で行なった。予備実験では、流紋岩の溶融が想定される600°Cー1000°Cの範囲で電気伝導度測定を行った。一定の圧力条件を保ちながら温度条件を変化させ、試料の電気伝導度をインピーダンスアナライザーで測定した。マルチアンビルと圧力媒体等の絶縁性は十分に確認した。今年度は、流紋岩の電気伝導度を圧力条件(1GPa,2GPa,3GPa)を変化させて電気伝導度測定を行なうことも試みた。さらに流紋岩の含水率も電気伝導度測定前後で定量的に評価し、温度・圧力・含水率を変化させた多様な電気伝導度測定が可能となった。平成28年度は火山体下で実際におこりうる環境を想定した高温・高圧実験を行った。この際、試料内の空孔、そこに含まれる水の厳密な定量評価をしなくては,真の電気伝導度測定値を得ることはできない。その為に、様々な材質を用いた試料封入ケースを作りだすことができることを目指した。特に水を含んだ試料の場合、周囲のカプセル材料との反応性が問題となるため、テスト用の試料を高温・高圧領域で電気伝導度を測定した後、走査型電子顕微鏡で試料およびカプセルの観察をおこなった。具体的には、高温領域まで、火山岩試料と反応性が少ないと推定される、アルミナ、BN、クオーツなど数種類のカプセルで反応性を精査した。同時に火山体下に存在しうる水を含む岩石の電気伝導度測定を行った。又、磁化測定では、実際の火山体下で岩石が受ける680°C以下における熱履歴データを取得した。実験では、スピナー磁力計・磁化率計等の装置を駆使して測定を行なった。本年度は測定対象試料を流紋岩と安山岩にしぼり実験をおこなった。その結果、含水率を変化させた各試料が溶融する温度以下で、微細な電気伝導度変化が観察された。この微細な電気伝導度変化は粘性から推定されるガラス転移点付近に近いことが判明した。そのため、この微細な変化を精査し、この領域での電気伝導度のメカニズムがどのように変化するかを解明する実験を次年度も継続して行う予定である。さらに流紋岩と安山岩の磁化測定試料も増やし、温度ごとの熱履歴も精査する予定である。平成28年度は、流紋岩・安山岩の電気伝導度測定実験の手法は多数の予備実験によりほぼ確立した。

多結晶岩石の電気伝導度測定の困難な点は、いかに絶縁し、溶融した状態で試料を測定するかである。その為、試料封入ケースの開発が研究の成否を左右する。今年度はこのための予備実験に多く時間を費やし、含水率を変えた試料の電気伝導度測定も多数おこなった。しかしながら、ピストンシリンダーで行なう測定用試料の合成は成功しないこともあり、試料内部の鉱物の粒径や均一性なども精査しながら慎重に実験を行った。実際の電気伝導度測定実験においては、温度・圧力条件を変えながら、測定を行なった。電気伝導度測定前後での含水率測定は、フーリエ変換型の赤外分光光度計(FT-IR)を用いた。ピストンシリンダーによる試料合成、マルチアンビルによる電気伝導度測定及びFT-IRに含水評価の一連の実験をルーチン化することができた事は本年度の成果である。平成29年度は火山体下で実際におこりうる環境を想定した流紋岩と安山岩の電気伝導度測定をおこなった。測定前後では、試料に含まれる水の厳密な定量評価をしなくては,真の電気伝導度測定値を得ることはできない。その為に、FT-IRを用いて様々な条件での含水率評価をおこなった。又、電気伝導度測定の際には、水を含んだ試料と周囲のカプセル材料との反応性が問題となるため、テスト用の試料を高温・高圧領域で電気伝導度を測定した後、走査型電子顕微鏡で試料およびカプセルの観察をおこなった。具体的には、高温領域まで、火山岩試料と反応性が少ないと推定される、アルミナ、BN、クオーツなど数種類のカプセルで反応性を精査した。又、磁化測定では、一枚の流紋岩溶岩について、採取可能な範囲で可能な限り広域のサンプリングを行い,その残留磁化方向の均一性を観察した。併せて等温残留磁化獲得実験,磁化率異方性の測定,および研磨薄片の観察を行い,溶岩におけるこれらの情報の空間分布と残留磁化方向を比較した。最終年度に得られた成果は2点である。含水率を変化させた流紋岩と安山岩のが溶融する温度以下で、微細な電気伝導度変化が観察された。この微細な電気伝導度変化は粘性から推定されるガラス転移点付近に近いことが判明した。又、本研究に用いた流紋岩は、キュリー温度以下において、複数回の変形運動を経験しても、冷却時の全ての変形運動が終了した後に獲得した磁化成分は地球磁場の方向を正確にとらえている可能性が高いことが判明した。本研究では、火山体を構成する岩石の電気物性と磁気物性を同時に検証した。流紋岩が高温で溶融する際、その試料を電気伝導度で“その場観察"すれば、溶融の度合いに関するデータを得る事ができる。一方、高温下の流紋岩も磁性を大きく変化させる。申請者等は、火山体下の状態を実験により再現し、電気伝導度・磁化の2つの視点から岩石の熱履歴を捉える研究を試みた。実験から得られた岩石の電気伝導度・磁化データを、電磁場観測から得られた電気伝導度構造解析結果や磁力計によって観測されたマクロな火山体の磁化構造などと直接対比することにより、観測結果と実験結果との相互検証が可能となった。平成28年度の本実験では、流紋岩の溶融時の固相と液相がいかに反応するかを電気伝導度・磁化で“その場観察“をしながら、その変化を捉えることである。ある温度条件以上では、溶融の特性により、電気伝導度が変化するポイントと磁化特性が急激に変化するポイントが存在することが予想される。電磁場観測から得られた電気伝導度構造解析結果や磁力計によって観測されるマクロな火山体の磁化構造と本実験から得られたミクロな岩石電気伝導度データ及び磁化データを対比することが重要になることが予想される。又、流紋岩と組成のことなる安山岩についても、比較対照の試料として利用することを検討している。
ラット糸球体硬化症モデルを用いた微小循環動態解析

1.EGFP(-)ラットを放射線照射し、EGFP(+)骨髄移植を行って骨髄キメラ・ラットを作成する。このラットに糸球体硬化症に至る糸球体腎炎を惹起し、糸球体血管再生に骨髄由来内皮前駆細胞が関与している事が判明した(Ikarashi K et al.Kidney International 2005, in press)。これまでのメサンギウム細胞だけでなく、内皮細胞も骨髄由来細胞が傷害修復に関与していることを見つけ出した意義は大きい。2.上述の骨髄キメラ・ラットに腎炎を惹起し、EGFP(+)ラットの骨髄細胞を移入(静注)する。その結果、糸球体硬化病変形成への進行抑制が抑制され、腎不全で死亡することも抑制された(Li B et al.論文投稿中)。3.EGFP(-)ラットに糸球体硬化症に至る糸球体腎炎を惹起し、EGFP(+)ラットの骨髄細胞を静注、あるいは腎動脈より注入し、硬化病変への進行阻止の有無、EGFP(+)ラットの骨髄細胞の糸球体内局在について検討した。腎動脈に注入された場合のみ骨髄細胞が有意に糸球体に局在し、治療効果も認めた(論文作成中)。4.実験的糖尿病性腎症、及び上述の糸球体硬化モデルにおける糸球体微小循環動態を解析した。糸球体における過剰かん流、血流異常が病変進行に大きく関与し、アンギオテンシンII受容体阻害剤がこれを抑制することが判明した(Li B et al.KidneyInternational 66:1939-1948,2004)。
フランス現象学を背景とした後期レヴィナスの人間観の歴史的・体系的研究

本研究は、E・レヴィナスが1960年代後半以降の後期思想において標榜する「他者の人間主義」の内実と独自性を明らかにすることを目的とする。レヴィナスは同時期のフランスの現象学者たち(M・デュフレンヌら)と思想的に対話することを通じて自らの思索を深めていった。この点に着目し本研究は、人間をめぐる後期レヴィナスの思索を体系的に分析すると同時に、フランス現象学者たちの人間観の布置を描きそこにレヴィナスの思索を位置づけることにより、人間と自然の関係および人間固有の特性である自己性について後期レヴィナスの人間観の内実と独自性を解明し、「人間であるとはどういうことか」という問いに一つの哲学的応答を提供する。本研究は、E・レヴィナスが1960年代後半以降に展開する「他者の人間主義」の思想の内実と独自性を明らかにすることを目的として、(1)人間をめぐる後期レヴィナスの思索を体系的に分析すること、そして同時に(2)1960年代のフランス現象学者たちの人間観の布置を描き、そこにレヴィナスの人間観を位置づけること、この二点を方法の柱として、「自然と人間の関係」と人間固有の特性としての「自己意識」の二点について、後期レヴィナスの人間観を研究するものである。本年度は、研究計画どおり「自然と人間の関係」を主題とする研究から開始した。レヴィナスの論文集『実存の発見』および『他者のヒューマニズム』やM・デュフレンヌ『ア・プリオリの概念』『人間の復権』の読解・検討を行い、その結果、後期レヴィナスが自然と存在の結びつきを強調する背景に、主観性を「存在なき一」として提示する思考と密接に連関していることを明らかにした。本年度途中より、当初の計画では来年度の研究主題としていた、「自己意識」をめぐるレヴィナスの思考の分析にも取り掛かった。その成果の一部として、『現象学年報』第34号に学術論文「引き裂かれた現在ーレヴィナスのフッサール『内的時間意識』の解釈をめぐってー」を発表した。本論文は、起源的な自己意識の分析でもあるフッサール時間論をレヴィナスがどのように読解したかを分析し、主観性の固有性たる起源的な自己関係がレヴィナスにおいて、隔たりにおける自己との一致であることを明らかにした。この分析を深化させた学術論文を『レヴィナス研究』に投稿し、来年度に公刊される予定となっている。また、来年度に公刊される予定であるフランス哲学・思想に関する事典に、レヴィナスおよびフランス哲学についての項目の執筆を行った。当初の計画では来年度に研究を行うことにしていた主題に本年度途中から取り掛かり始めることができた点、学術雑誌での論文の発表を行うことができた点から、当初の計画以上に進展していると判断することができる。とりわけ、人間固有の性格である自己意識をめぐるレヴィナスの思考の内実と独自性を明らかにした学術論文が『現象学年報』第34号に発表されたこと、そこで行った分析を深化させた学術論文が『レヴィナス研究』に来年度に公刊される予定となっていることが評価される。また、来年度に公刊される予定であるフランス哲学・思想に関する事典に、レヴィナスおよびフランス哲学についての項目の執筆を行ったことにより、今後本研究に深みと広がりがもたらされることが期待される。また、アウトリーチ活動としてフランス哲学についてのコラムを執筆した点も、上記の判断の根拠となる。2019年度は、今年度の研究の進展に伴い、「自己意識」についてのレヴィナスの思考およびフランス現象学者たちの思考の読解・検討をさらに進めていく。後期レヴィナスは人間固有の特性としての「自己」に関して、「私」の自己同一化に先立って、他者から呼びかけられる受動性において成立する「対格の自己se」という概念を導入する。この概念の内実を明らかにすることを目的として、「私」と「自己」をめぐる後期レヴィナスの思索を考察する。その際、以下の二点を方法上の柱とする。(1)上記のように後期レヴィナスは「自己」を「私」よりも構造的に先立つものとし、しかも「自己」を受動性においてとらえるが、このことは、どのような内実を有し、また人間の倫理的なあり様を思考する上でどのような意義を有するのかを明らかにする。(2)レヴィナスが後期著作において言及し高く評価している、同時期に活躍していたフランスの現象学者も、「私」に先立つ「自己」を提示することを自らの哲学的思索の課題としていた。そこでデュフレンヌ、ドゥロム、アンリが展開した「自己」をめぐる思索を読解し、これらフランス現象学者たちの自己論の布置を描きとり、そこに自己をめぐるレヴィナスの思索を位置づけ、その独自性を明らかにする。レヴィナスによるこれらの著作への言及の意義はまだ本格的に検討されておらず、またデュフレンヌおよびドゥロムについてはその思索自体も十分に研究が進んでいないため、特に丁寧に読解を行う。

この点に着目し本研究は、人間をめぐる後期レヴィナスの思索を体系的に分析すると同時に、フランス現象学者たちの人間観の布置を描きそこにレヴィナスの思索を位置づけることにより、人間と自然の関係および人間固有の特性である自己性について後期レヴィナスの人間観の内実と独自性を解明し、「人間であるとはどういうことか」という問いに一つの哲学的応答を提供する。本研究は、E・レヴィナスが1960年代後半以降に展開する「他者の人間主義」の思想の内実と独自性を明らかにすることを目的として、(1)人間をめぐる後期レヴィナスの思索を体系的に分析すること、そして同時に(2)1960年代のフランス現象学者たちの人間観の布置を描き、そこにレヴィナスの人間観を位置づけること、この二点を方法の柱として、「自然と人間の関係」と人間固有の特性としての「自己意識」の二点について、後期レヴィナスの人間観を研究するものである。本年度は、研究計画どおり「自然と人間の関係」を主題とする研究から開始した。レヴィナスの論文集『実存の発見』および『他者のヒューマニズム』やM・デュフレンヌ『ア・プリオリの概念』『人間の復権』の読解・検討を行い、その結果、後期レヴィナスが自然と存在の結びつきを強調する背景に、主観性を「存在なき一」として提示する思考と密接に連関していることを明らかにした。本年度途中より、当初の計画では来年度の研究主題としていた、「自己意識」をめぐるレヴィナスの思考の分析にも取り掛かった。その成果の一部として、『現象学年報』第34号に学術論文「引き裂かれた現在ーレヴィナスのフッサール『内的時間意識』の解釈をめぐってー」を発表した。本論文は、起源的な自己意識の分析でもあるフッサール時間論をレヴィナスがどのように読解したかを分析し、主観性の固有性たる起源的な自己関係がレヴィナスにおいて、隔たりにおける自己との一致であることを明らかにした。この分析を深化させた学術論文を『レヴィナス研究』に投稿し、来年度に公刊される予定となっている。また、来年度に公刊される予定であるフランス哲学・思想に関する事典に、レヴィナスおよびフランス哲学についての項目の執筆を行った。当初の計画では来年度に研究を行うことにしていた主題に本年度途中から取り掛かり始めることができた点、学術雑誌での論文の発表を行うことができた点から、当初の計画以上に進展していると判断することができる。とりわけ、人間固有の性格である自己意識をめぐるレヴィナスの思考の内実と独自性を明らかにした学術論文が『現象学年報』第34号に発表されたこと、そこで行った分析を深化させた学術論文が『レヴィナス研究』に来年度に公刊される予定となっていることが評価される。また、来年度に公刊される予定であるフランス哲学・思想に関する事典に、レヴィナスおよびフランス哲学についての項目の執筆を行ったことにより、今後本研究に深みと広がりがもたらされることが期待される。また、アウトリーチ活動としてフランス哲学についてのコラムを執筆した点も、上記の判断の根拠となる。2019年度は、今年度の研究の進展に伴い、「自己意識」についてのレヴィナスの思考およびフランス現象学者たちの思考の読解・検討をさらに進めていく。後期レヴィナスは人間固有の特性としての「自己」に関して、「私」の自己同一化に先立って、他者から呼びかけられる受動性において成立する「対格の自己se」という概念を導入する。この概念の内実を明らかにすることを目的として、「私」と「自己」をめぐる後期レヴィナスの思索を考察する。その際、以下の二点を方法上の柱とする。
閉塞性細気管支炎における筋線維芽細胞の役割とその制御機構の解明

閉塞性細気管支炎(Bronchiolitis obliterans, BO)に対する治療標的を同定するためのマウスBOモデルを用いた研究。同モデルでは傷害期(d17)、炎症期(d714)、リモデリング期(d1428)を経て完全な気道閉塞に至る。我々はリモデリング期の筋線維芽細胞の増殖抑制がBOの進行を止めることが可能になると考えた。本研究の目標は、imatinib投与でも抑えきれない筋線維芽細胞の増殖に重要なシグナルを検証することである。しかし、imatinibが気道閉塞を抑えるメカニズムは明らかではなく、imatinibの治療標的を探索する実験により、以下が判明した。1Allograftにimatinib 10mg/kg(day128)を投与しday28で評価したところ、vehicle投与群に比べてimatinib投与群で気道閉塞が有意に抑えられた。リモデリング期(d1528)投与群では、気道閉塞率はvehicle群と差がなかった。BOモデルにおいて気道閉塞を抑えるには、移植直後よりimatinibを投与開始する必要があることが判明した。2筋線維芽細胞の由来を調べるため、GFP-Tgマウスを用いてBOモデルを作成し、移植d28で摘出した移植気管を評価した。GFP-Tgマウスの骨髄をC57BL/6-WTに移植したキメラマウスを作成し、このマウスの背部にBALB/cの気管を移植したところ、移植気管閉塞部分に浸潤した細胞はGFP陽性であった。以上より、BOモデルの気道閉塞に骨髄由来の前駆細胞(fibrocyte)が関与していることが示された。我々は、閉塞性細気管支炎(Bronchiolitis obliterans, BO)に対する治療標的を同定するために、マウスBOモデルを用いた研究を行ってきた。同モデルでは傷害期(day17)、炎症期(day 714)、リモデリング期(day 1428)を経て完全な気道閉塞に至る。我々は、リモデリング期の筋線維芽細胞の増殖を抑えることによりBOの進行を止めることが可能になると考えた。しかし、imatinibが気道閉塞を抑えるメカニズムが明らかでないため、まずはimatinibの治療標的を探索するため以下の実験を開始した。●BOの気道閉塞を抑えるには、imatinibを移植早期より投与開始する必要がある。Allograftにimatinib 10mg/kg(day 128)を投与しday 28で評価したところ、vehicle投与群に比べてimatinib投与群で気道閉塞が有意に抑えられた。しかし、imatinib10mg/kgをリモデリング期(day 1528)に投与したところ、気道閉塞率はvehicle群と差がなかった。BOモデルにおいて気道閉塞を抑えるには、移植直後よりimatinibを投与開始する必要があることが分かった。●ドナー骨髄由来前駆細胞がBOの気道閉塞に関与する筋線維芽細胞の由来を調べるため、GFP-Tgマウスを用いてBOモデルを作成し、移植day 28で摘出した移植気管を評価した。以上より、BOモデルの気道閉塞に骨髄由来の前駆細胞(fibrocyte)が関わることが示された。骨髄由来前駆細胞(fibrocyte)がBOモデルの気道閉塞に関与していることが判明した。Fibrocyteは移植早期に遊走されることから、現在imatinibがfibrocyteの治療標的となりうるか否かを検証中である。1imatinibはBOの気道閉塞を抑える。移植早期にimatinibの治療標的が存在する。

2BOモデルの気道閉塞に骨髄由来前駆細胞(fibrocyte)が関与している。以上のことが明らかとなってきている。Imatinibが気道閉塞を抑えるメカニズムを明らかにする。そのひとつとして、imatinibがfibrocyteを制御するかどうかを検証する。骨髄由来fibrocyteがリモデリング期の筋線維芽細胞にどう関与するかを検証する。平成26年度に筋線維芽細胞の増殖シグナルを検証する予定だったが、上記のごとくimatinibの気道閉塞抑制メカニズムの検証を先に行ったため、次年度に行うことになった。それに伴う経費を繰り越しとした。未使用額は、平成27年度配分額と併せて、imatinibによるfibrocyte制御機構や筋線維芽細胞との関わりを検証するために、使用する予定である。
単電子デバイスとその高密度集積化

本研究は平成8-11年度にわたって設定された特定領域研究「単電子デバイスとその高密度集積化」に関して、総括班を構成し、本特定領域研究の成果のとりまとめを行うことを目的とした。本特定領域研究は、A01)単電子輸送と単電子ナノ構造形成の物性論的基礎、A02)ナノ構造の表面・界面の制御と単電子トンネル障壁の最適化、A03)単電子デバイスの創出とその回路・アーキテクチュアの検討、A04)単電子デバイスの高密度集積化のための新技術の開拓次、の4つの主要研究項目を設定し、厳選された計画研究班と特色ある公募研究者によって研究を推進してきた。平成12年度は、これらの主要研究項目を中心に、本特定領域研究を総括し、その成果の取りまとめを行った。(2)各班の研究代表者が中心となって、A01A04の主要研究項目ごとに研究成果・研究業績等の取りまとめを行った。(3)(2)の結果に基づいて、本特定領域研究に参加した班員全員の研究成果を取りまとめ、本特定領域研究の総括を含めた「研究成果報告書」を作成した。本研究は、平成811年度に設定された重点領域研究「単電子デバイスとの高密度集積化」に関して、総括班を構成し、研究の課題、進捗状況、成果について、点検と評価を行い、重点領域研究が最大限の成果を挙げるよう、指導・助言・企画調整を行うことを目的とする。本年度の活動実績を以下にまとめる。<研究会>第1回研究会平成8年10月16日、機械振興会館(東京)で開催した。主として第2班・第4班の公募研究について、これまでの成果および今後の研究計画の報告を受け、質疑討論を行った。第3回研究会平成9年1月20日21日にわたり、東京大学生産技術研究所で開催した。量子ドットの物理と単電子デバイスの回路応用についてチュートリアルを行うとともに、主として第1班・第3班の公募研究について、これまでの成果および今後の研究計画の報告を受け、質疑討論を行った。第4回研究会平成9年2月24日25日、機械振興会館(東京)で開催した。本重点領域研究の平成8年度研究成果報告会とし、計画研究27件、公募研究16件の成果報告が行われた。<研究推進会議>第1回研究推進会議平成8年10月16日、機械振興会館(東京)で開催した。主として第2班・第4班の公募研究について、今後の研究計画の討論を行った。第2回研究推進会議平成9年1月21日、東京大学生産技術研究所で開催した。主として第1班・第3班の公募研究について、今後の研究計画の討論を行った。<総括班全体会議>第1回を平成8年11月5日に京王プラザホテル(札幌市)で、また、第2回を平成9年2月24日に東京プリンスホテルで開催し、研究の課題、進捗状況、成果について、点検と評価を行った。本研究は、平成811年度に設定された重点領域研究1単電子デバイスとその高密度集積化」に関して、総括班を構成し、研究の課題、進捗状況、成果について、点検と評価を行い、重点領域研究が最大限の成果を挙げるよう、指導・助言・企画調整を行うことを目的とする。<研究会>第1回研究会:平成9年8月2122日にわたり、テルメインターナショナルホテル札幌で開催した。結晶成長による立体量子構造の形成と単電子デバイスの回路応用について2件のチュートリアルを行うと共に、第2班・第4班を中心に22件の研究発表が行われた。第2回研究会:平成9年10月23日24日にわたり、東京大学物性研究所および生産技術研究所で開催した。物理、回路応用および微小ジョセフソン接合について3件のチュートリアルを行うと共に、第1班・第3班を中心に17件の研究発表が行われた。第3回研究会:平成10年1月26日27日にわたり、名古屋大学ベンチャービジネスラボラトリ-で開催した。単電子デバイスの現状と問題点およびVLSlMOSデバイスの将来展望についてチュートリアルを行うとともに、23件の研究発表が行われた。第4回研究会:平成10年3月5日6日にわたり、弘済会館(東京)で開催した。本重点領域研究の平成9年度研究成果報告会とし、計画研究27件、公募研究22件の成果報告が行われた。<研究推進会議>第1回をテルメインターナショナルホテル札幌(平成9年8月22日)、第2回を東京大学物性研究所(平成9年10月24日)、第3回を名古屋大学ベンチャービジネスラボラトリ-(平成10年1月27日)、第4回を弘済会館(東京、平成10年3月6日)において開催し、各班の研究計画、研究協力体制、9年度の研究会開催、次年度の研究体制について討論した。<総括班全体会議>平成10年3月5日にホテルニューオ-タニ(東京)で開催し、研究の課題、進捗状況、成果について、点検と評価を行った。本研究は、平成811年度に設定された特定領域研究(A)「単電子デバイスとその高密度集積化」に関して、総括班を構成し、研究の課題、進捗状況、成果について、点検と評価を行い、特定領域研究が最大限の成果を挙げるよう、指導・助言・企画調整を行うことを目的とする。<研究会>第2回研究会:平成10年10月29日30日にわたり、東京大学物性研究所で開催した。

シリコン単電子デバイスと光支援量子輸送現象について2件のチュートリアルを行うと共に、17件の研究発表会が行なわれた。第3回研究会:平成11年1月25日26日にわたり、筑波大学ベンチャービジネスラボラトリーで開催した。単電子輸送、量子井戸中のホットエレクトロン、結晶表面の物理についてチュートリアルを行うとともに、平成10年度の成果報告として22件の研究発表が行われた。第4回研究会:平成11年2月22日23日にわたり、弘済会館(東京)で開催した。量子ドット中のキャリア緩和とシリコン単電子メモリについてチュートリアルを行うとともに、平成10年度の成果報告として32件の研究発表が行われた。<研究推進会議>第1回を東京大学物性研究所(平成10年10月30日)、第2回を筑波大学ベンチャービジネスラボラトリー(平成11年1月26日)、第3回を弘済会館(東京、平成11年2月23日)において開催し、各班の研究計画、研究協力体制、10年度の研究会開催、次年度の研究体制について討論した。<総括班全体会議>平成11年2月22日にホテルニューオータニ(東京)で開催し、研究の課題、進捗状況、研究組織、成果のとりまとめについて,点検と評価を行った。本研究は、平成811年度に設定された特定領域研究(A)「単電子デバイスとその高密度集積化」に関して、総括班を構成し、研究の課題、進捗状況、成果について、点検と評価を行い、研究が最大限の成果を挙げるよう、指導・助言・企画調整を行うことを目的とする。本年度の活動実績を以下にまとめる。<研究会>第1回研究会:平成11年8月18日19日にわたり、千歳市で開催した。量子コンピューティングについて2件のチュートリアルを行うとともに、15件の研究発表が行われた。第2回の研究会:平成11年11月4日5日にわたり、東京大学生産技術研究所で開催した。量子ドットの物理と光学特性について4件のチュートリアルを行うとともに、15件の研究発表が行われた。第3回研究会:平成12年1月26日27日にわたり、大阪大学コンベンションセンターで開催した。量子情報デバイスと半導体マイクロキャビティについてチュートリアルを行うとともに、17件の研究発表が行われた。第4回研究会:平成12年2月28日29日にわたり、弘済会館(東京)で開催した。平成11年度研究成果報告会として、52件の研究発表が行われた。<研究推進会議>第1回を平成11年8月19日(千歳市)、第2回を平成11年11月5日(東京大学)、第3回を平成12年1月27日(大阪大学)、第4回を平成12年2月28日(弘済会館)において開催し、研究会の開催日程・方式、各班の研究計画、研究の取りまとめ方策について討論した。<総括班全体会議>平成12年2月28日にホテルニューオータニ(東京)で開催し、研究組織、研究会の開催状況、研究成果の概要、および領域全体の成果の取りまとめ方策について、点検と評価を行った本研究は平成8-11年度にわたって設定された特定領域研究「単電子デバイスとその高密度集積化」に関して、総括班を構成し、本特定領域研究の成果のとりまとめを行うことを目的とした。本特定領域研究は、A01)単電子輸送と単電子ナノ構造形成の物性論的基礎、A02)ナノ構造の表面・界面の制御と単電子トンネル障壁の最適化、A03)単電子デバイスの創出とその回路・アーキテクチュアの検討、A04)
チタン酸化物系湿式光電池の創製

近年、色素増感型光電池と呼ばれる色素修飾したチタニア(TiO_2)と白金電極を組み合わせた湿式の電池が注目を集めている。効率は研究室レベルにおける最高値でさえ10%と低く、寿命という点でもやや信頼性に欠ける面があるが、作用極・対極・電解質溶液・光増感材といった幾つもの材料の組合せによって様々な特性を持つ光電池を構成することができ、これからの可能性を秘めている。そこで本研究では、近年の表面処理技術やナノスケールセラミックス微粒子合成技術の発展の成果を取り込んで特殊な三次元構造を有するチタン酸化物系材料を電極に用い、単純なTiO_2-Pt系では得られない可視光応答特性を持つ湿式光電池の合成を試みた。研究の概要として以下の成果を得た。(1)各種チタン酸の合成条件の確立チタニア粉末を高温(150250°C)のKOH水溶液中で反応させることにより種々のチタン酸カリウムを合成した。同反応条件で金属チタン板を水熱酸化処理し、チタン酸薄膜の合成条件を確立した。反応はステンレス製オートクレーブを用い、層状4チタン酸カリウム、層状6チタン酸カリウム等の単一相の合成に成功した。(2)各種チタン酸の薄膜化と電極の特性評価上記の手法により合成した4チタン酸カリウムをガラス基板上に薄膜化し、光電極特性を調査した。近年、新規光電池と呼ばれる色素修飾したチタニア(TiO^2)と白金電極を組み合わせた湿式の電池が台頭してきた。そこで本研究では、近年の表面処理技術やナノスケールセラミックス微粒子合成技術の発展の成果を取り込んで特殊な三次元構造を有するチタン酸化物系材料を電極に用い、単純なTiO_2Pt系では得られない可視光応答特性を持つ湿式光電池の合成を目的とする。初年度の実績として以下の成果を得た。[各種チタン酸の合成条件の確立]チタニア粉末を高温(100250°C)のKOH水溶液中で反応させることにより種々のチタン酸カリウムを合成した。同反応条件で金属チタン板を水熱酸化処理し、チタン酸薄膜の合成条件を確立する。反応は現有の設備であるステンレス製オートクレープを用い、これまでのところ層状4チタン酸カリウム、層状6チタン酸カリウムの単一相の合成に成功している。
抗肝細胞膜モノクロナール抗体に対する抗イデォタイプ抗体による自己免疫性肝炎の誘導

1.8D7モノクローナル抗体(MoAb)の対応抗原の解析8D7MoAbとアシアロ糖蛋白レセプター(ASGPR)の反応について、ヒト肝臓から精製したASGPRを用いたELISA法により検討した。8D7抗体はヒトASGPRと特異的に反応し、8D7MoAb認識抗原は、肝細胞膜特異抗原と考えられるASGPRであることが明らかとなった。次に、肝細胞癌においてヒトASGPRの局在が肝細胞表面でどのように変化するかを、8D7MoAbを用いて免疫組織化学的に検討したところ、癌細胞の分化度と増殖能に密接に関連した肝癌細胞におけるASGPRの発現の変化が観察された。8D7抗体にてマウスを免疫し、8D7抗体に特異的に反応するハイブリド-マクローン3C8を得た。3C8MoAbのアイソタイプは、IgM、κであった。免疫組識染色、ELISA法などによる結合阻止実験で3C8MoAbは、8D7MoAbの肝細胞模への結合を阻害した。さらに、3C8MoAbに対する抗イデオタイプMoAbを作成したところ、3C8MoAbにより肝細胞膜粗分画に反応する抗体を産生するクローンが誘導された。以上から、3C8MoAbは8D7抗ASGPRMoAbのイデオタイプの中でパラトープを認識する抗イデオタイプ抗体であり、抗原であるASGPRに対するインターナルイメージを有するMoAbが作成された可能性が高いものと考えられる。新生児BALB/Cマウスの胸腺を生後3日後に摘出した胸腺摘出マウスを、3C8MoAbにてアジュバントとともに免疫し、肝障害が誘導可能かどうか検討中である。1.8D7モノクロ-ナル抗体の精製。プリスタン処理したBALBCマウスに、すでに申請者が開発しているラット肝細胞膜と特異的に反応するモノクロナ-ル抗体(8D7モノクロナ-ル抗体)産生ハイブリド-マを腹腔内投与し、腹水を採取し、プロテインAアフィニティカラムを用いて、8D7モノクロ-ナル抗体を精製分離した。2.抗8D7イデオタイプ抗体検出のためのELISA法の設定。1)サンドイッチ法:精製した8D7モノクロ-ナル抗体に、horseradish peroxidaseまたはbiotinを標識した。ELISAプレ-トに、精製8D7モノクロ-ナル抗体を固相化したのち、検体を反応、続いて標識8D7モノクロ-ナル抗体を反応させ、biotin化抗体の場合はさらにstreptoavidin標識horseradish peroxidaseと反応させ発色、吸光度計にて測定した。2)8D7モノクロ-ナル抗体F(ab')2分画を用いる方法:精製した8D7モノクロ-ナル抗体マウスIgG1を、pepsinにてFc部分を除去し、F(ab')2分画を精製、これをELISAプレ-トに固相化し、検体と反応、続いてhorseradish peroxidase標識抗マウスIgGFc抗体と反応後発色、吸光度を測定した。3.抗8D7イデオタイプ抗体の作成。精製8D7モノクロ-ナル抗体マウスIgG1を、cationized BSAまたはKeyhole Limpet Hemocyaninに結合し、アジュバンドとともにマウスを免疫した。数回の免疫の後、前述のELISAにてマウス血清を測定し抗体産生のあるマウスの脾細胞を取り出し、ミエロ-マ細胞と細胞融合し、ハイブリド-マを作成した。3回の細胞融合で216個のコロニ-が形成され、培養上清を前述のELISA法にてスクリ-ニングしたところ、うち2個のwellの培養上清が陽性であった。現在、この2つのクロ-ンについてサブクロ-ニングするとともに、その性状について解析中である。1.8D7モノクローナル抗体の対応