hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
医学科学生の医療プロフェッショナリズム能力の評価法開発

【研究実績の概要】本研究では、医学科の学生を対象に、医療プロフェッショナリズム能力の評価法を開発し、プロフェッショナリズムの教育プログラムを提起する。H30年度は、以下の研究を行った。【医療プロフェッショナリズム能力の項目策定】<データの収集>研究代表者の所属医学部における医学科学生の3年次・4年次のグループ学習、共用試験OSCE、5年次臨床実習、並びに、カリキュラム外の活動の行為・行動の評価結果からデータを収集した。<データの分析>3年次・4年次のグループ学習並びに共用試験OSCEの評価と臨床実習での評価との関連を分析し、以下の4点が浮かび上がった。(1)4年次の共用試験OSCEの不合格者は、翌年以降にOSCEを再受験して合格し、5年次に進級した。5年次臨床実習では、評価は低いものの初年度で合格していた。(2)臨床実習の不合格者は、共用試験OSCEは受験初年度で合格していた。不合格者の不合格要因はプロフェッショナリズムに反する行為であった。不合格者は翌年、臨床実習を再履修し、反プロフェッショナリズム行為は繰り返さず、評価は低いものの合格した。(3)共用試験OSCEの不合格者と臨床実習の不合格者に重複はなく、それぞれの不合格因子は異なることが示唆された。(4)3年次グループ英会話の講師による評価並びに4年次症候学PBLグループ学習のTutorによる評価と5年次臨床実習の指導医による評価を比較した結果、3年次ー5年次、4年次ー5年次ともに正の相関を認めた、臨床実習前のグループ学習での評価が臨床実習での評価を予測し得ることが示された。【プロフェッショナリズム教育のプログラム開発】医学科1年次の早期医療体験実習における教職員による評価、学生によるプログラム評価等から、プログラムを改訂した。また、高学年学生対象のアンケート並びに聞き取り調査を行い、プログラムの有効性を検討した。本研究では、医学科の学生を対象に、医療プロフェッショナリズム能力の評価法を開発し、プロフェッショナリズムの教育プログラムを提起する。H28年度は、学内倫理委員会の承認の下で、以下の研究を行った。A.【医療プロフェッショナリズム能力の項目策定】<データの収集>研究代表者の所属医学部における医学科学生の、1年次・3年次の実習、3年次・4年次のグループ学習、共用試験OSCE、5年次臨床実習、並びに、カリキュラム外の活動の行為・行動の評価結果からデータを収集した。<データの分析>共用試験OSCEの評価と臨床実習での評価との関連を分析し、以下の3点が浮かび上がった。(1)4年次の共用試験OSCEの不合格者は、5年次の臨床実習は初年度で合格していた。(2)一方、臨床実習の不合格者は、共用試験OSCEは受験初年度で合格しており、臨床実習の不合格はプロフェッショナリズムに反する特定の行為に起因した。(3)以上より、共用試験OSCEの不合格と臨床実習の不合格は異なる因子に因ることが示唆された。臨床実習不合格判定とOSCE以外の評価との関連について、なお検討中である。続いて、4年次に10週間行っている臨床推論PBLのチューターによる学生評価と5年次臨床実習の評価の関連を分析した。両者には明らかな相関は認めなかったが、データ収集期間が1年のみなので、さらにデータを蓄積している。B.【医療プロフェッショナリズム能力の評価ツール開発】先行研究から評価ツールを収集し、比較検討を進めている。C.【プロフェッショナリズム教育のプログラム開発】国内医療教育機関の情報を得て、プロフェッショナリズム教育のプログラムを作成し、医学科初年次に導入した。過去の1年生の早期医療体験実習における教職員による評価から、学生の「良い点」、「改善が望まれる点」を1年生自身が分析し、共通項を抽出して実習に望む心構えとした。H28年度の実施計画のうち、A.【医療プロフェッショナリズム能力の項目策定】は予定したデータを収集し、分析を順調に進めている。プロフェッショナリズムに反する行為についての情報が得られたので、今後、その骨子をまとめて「医学生が身に付けるべきプロフェッショナリズム」の項目を取りまとめる段階である。B.【医療プロフェッショナリズム能力の評価ツール開発】については、先行研究の評価ツールの収集を終えており、Aの結果を取り込んで、本研究独自の評価ツール開発に着手する。C.【プロフェッショナリズム教育のプログラム開発】は、1年次カリキュラムに、ほぼ通年でプロフェッショナリズム教育を導入した。今後、プログラムを継続すると伴に、その効果について検証する予定である。以上より、Aは予定通り進捗し、Bはやや遅れているものの、Cは予定を1年先取りして導入した。総合的に見て、H28年度の研究は、おおむね順調に進展した。<データの分析

>共用試験OSCEの評価と臨床実習での評価との関連を分析し、以下の3点が浮かび上がった。(1)4年次の共用試験OSCEの不合格者9名は、翌年以降にOSCEを再受験して合格し、5年次に進級した。5年次臨床実習では、評価は低いものの初年度で合格していた。(2)臨床実習の不合格者6名は、共用試験OSCEは受験初年度で合格していた。6名はいずれも臨床実習での評価は低かったが、不合格要因はプロフェッショナリズムに反する特定の行為であった。不合格者は翌年、臨床実習を再履修し、反プロフェッショナリズム行為は繰り返さず、評価は低いものの合格が認定された。(3)共用試験OSCEの不合格者と臨床実習の不合格者に重複はなく、それぞれの不合格因子は異なることが示唆された。現在、OSCEの評価、臨床実習の評価について、統計学的分析を進めている。また、4年次の臨床推論PBLでの評価と5年次臨床実習の評価の関連を分析中である。B.【医療プロフェッショナリズム能力の評価ツール開発】先行研究から評価ツールを収集し、比較検討を進めている。C.【プロフェッショナリズム教育のプログラム開発】医学科初年次の「プロフェッショナリズムワークショップ」を継続し、早期医療体験実習における教職員による評価から、ワークショップの与える影響を検討中である。H29年度の実施計画のうち、A.【医療プロフェッショナリズム能力の項目策定】は予定したデータを収集し、分析を進めている。プロフェッショナリズムに反する行為についての情報が得られたので、今後、その骨子をまとめて「医学生が身に付けるべきプロフェッショナリズム」の項目を取りまとめる段階である。B.【医療プロフェッショナリズム能力の評価ツール開発】については、先行研究の評価ツールの収集を終えており、Aの結果を取り込んで、本研究独自の評価ツール開発に着手する。C.【プロフェッショナリズム教育のプログラム開発】は、1年次カリキュラムに、ほぼ通年でプロフェッショナリズム教育を導入した。プログラムを継続すると伴に、その効果について検証を進めている。以上より、Aは予定通り進捗し、Bはやや遅れているものの、Cは予定を1年先取りして導入して効果の検証段階である。総合的に見て、H29年度の研究は、おおむね順調に進展した。【研究実績の概要】本研究では、医学科の学生を対象に、医療プロフェッショナリズム能力の評価法を開発し、プロフェッショナリズムの教育プログラムを提起する。H30年度は、以下の研究を行った。【医療プロフェッショナリズム能力の項目策定】<データの収集>研究代表者の所属医学部における医学科学生の3年次・4年次のグループ学習、共用試験OSCE、5年次臨床実習、並びに、カリキュラム外の活動の行為・行動の評価結果からデータを収集した。<データの分析>3年次・4年次のグループ学習並びに共用試験OSCEの評価と臨床実習での評価との関連を分析し、以下の4点が浮かび上がった。(1)4年次の共用試験OSCEの不合格者は、翌年以降にOSCEを再受験して合格し、5年次に進級した。
心筋細胞を標的とする心筋選択的遺伝子導入法を応用した経静脈遺伝子治療法の開発

本研究の主たる目的は,HVJ-リポソーム法を用いた,心筋細胞を標的とした遺伝子導入法の確立と心保護への応用である.平成10年度には,これまでに確立した経冠動脈的導入法を用いて,遺伝子導入による心筋賦活化および保護効果を検証した.まず,ラットの肥大心筋に対し,β-アドレナリンレセプター遺伝子を投与したところ,心筋におけるβアドレナリン作用薬に対する感受性の有意な向上と,それによる有意な心機能の上昇を示した.次に,ラット腹部異所性心移植モデルを用いた虚血再潅流心に対して,同じく経冠動脈的に肝細胞増殖因子(HGF)遺伝子を導入した.その結果,左室拡張末期圧,dp/dt,冠動脈流量などを指標とする心機能は,コントロールに比し有意に改善し,虚血再潅流障害の抑制効果を認めた.これらの実績を踏まえ,平成11年度は臨床における心筋を標的とした遺伝子治療の可能性を検討するため,大動物モデルを用いて遺伝子導入実験をおこない,その有用性とともに安全性を評価した.左冠動脈結紮によるビーグル犬心筋梗塞モデルに対し,虚血領域にHGFを融合したHVJ-リポソームを直接注入し,4週後に虚血領域局所心機能と心筋血流量の有意な改善を示し,直接注入による心筋への遺伝子導入の可能性とその効果を確認した.以上より,HVJ-リポソーム法を用いた遺伝子導入の応用により,虚血再潅流心,不全心,あるいは冠動脈病変による虚血心に対する遺伝子治療の推進が可能であり,今後有力な治療戦略の一端を担い得ると考えられた.本研究の主たる目的は,HVJ-リポソーム法を用いた,心筋細胞を標的とした遺伝子導入法の確立と心保護への応用である.平成10年度には,これまでに確立した経冠動脈的導入法を用いて,遺伝子導入による心筋賦活化および保護効果を検証した.まず,ラットの肥大心筋に対し,β-アドレナリンレセプター遺伝子を投与したところ,心筋におけるβアドレナリン作用薬に対する感受性の有意な向上と,それによる有意な心機能の上昇を示した.次に,ラット腹部異所性心移植モデルを用いた虚血再潅流心に対して,同じく経冠動脈的に肝細胞増殖因子(HGF)遺伝子を導入した.その結果,左室拡張末期圧,dp/dt,冠動脈流量などを指標とする心機能は,コントロールに比し有意に改善し,虚血再潅流障害の抑制効果を認めた.これらの実績を踏まえ,平成11年度は臨床における心筋を標的とした遺伝子治療の可能性を検討するため,大動物モデルを用いて遺伝子導入実験をおこない,その有用性とともに安全性を評価した.左冠動脈結紮によるビーグル犬心筋梗塞モデルに対し,虚血領域にHGFを融合したHVJ-リポソームを直接注入し,4週後に虚血領域局所心機能と心筋血流量の有意な改善を示し,直接注入による心筋への遺伝子導入の可能性とその効果を確認した.以上より,HVJ-リポソーム法を用いた遺伝子導入の応用により,虚血再潅流心,不全心,あるいは冠動脈病変による虚血心に対する遺伝子治療の推進が可能であり,今後有力な治療戦略の一端を担い得ると考えられた.経静脈的遺伝子導入による遺伝子治療の基礎実験として,ラット心不全モデルを用いて冠動脈よりの注入による遺伝子治療を試みた。Sprague-Dawleyラットを麻酔下に開腹し、下行大動脈を露出し、腹腔動脈直下でbandingして容圧負荷モデルを作成した。5週間後に、そのラット心に心筋保護液を注入し、心停止とした後、心臓摘出を施行した。肥大した心筋に大動脈経由で冠動脈にβ2adrenergic receptorのcDNAをHVJリポソーム法により注入、遺伝子導入を施行した。遺伝子導入した心臓は、同系ラットに移植した。遺伝子導入4日目に心臓を摘出し、免疫組織染色による導入遺伝子の発現確認及びLangendorff潅流による心機能評価を施行した。免疫染色によるIigand binding assayにより遺伝子導入心筋ではβreceptorの発現が多く認められた。心機能においては、isoproterenolへの反応は遺伝子導入群においてcontrol群に比し、有意に収縮能の向上を認めた。以上から、心不全心への遺伝子導入の効果が示された。本実験では、心臓摘出後に冠動脈経由で遺伝子導入を施行しているが、大動物においては、経皮的冠動脈口または、冠静脈洞からの注入が可能と思われる。臨床現場においては、すでにHeart Port Accessによる開心術が施行されており、大腿動静脈からの遺伝子導入が可能であると思われる。近年,虚血性心疾患に対する内科的,外科的治療は向上したが,依然としてPTCAやバイパス術の適応とならない,狭小冠動脈症例が存在する.肝細胞増殖因子(HGF)は、強力な血管増殖因子としての有用性が近年報告されており,心筋虚血領域におけるその応用が期待される.そこで本年度は,心臓における遺伝子治療の臨床応用をめざし,ビーグル犬心筋梗塞モデルに対するHGF遺伝子の心筋への直接注入による遺伝子導入法を試みた.ビーグル犬を麻酔下に開胸し,冠動脈左前下行枝を第一対枝分岐直後で結紮し,心筋梗塞モデルを作成した.4週間後に再度開胸し,梗塞範囲と正常範囲との肉眼的境界を虚血領域,回旋枝の灌流域を正常対照領域とした.両領域の心機能(局所壁運動能,局所血流量)を計測の後,虚血領域の心筋内にHGFもしくはコントロールとしてLacZのcDNA plasmidを直接注入した.

さらに4週間後に再び開胸し,前回同様に心機能を計測した後,犠牲死させ抽出した心筋の凍結切片を作成し,Von Willebrand抗体による免疫染色をおこない血管新生効果を確認した.遺伝子投与前後の虚血領域の局所壁運動能は,LacZ投与群で変化しなかったのに対し,HGF投与群では有意な改善を示した.また,虚血領域の局所血流量もLacZ投与群では変化なく,HGF群では正常領域同等にまで有意に増加した.また,免疫染色では新生血管の増殖による心筋内毛細血管数は,HGFを投与した虚血領域では対照領域に比し有意に増加していた.以上より,HGF遺伝子の心筋内直接注入は,心筋における新生血管増殖を促し,血流量の増加と局所心機能の改善をもたらすと考えられる.このことから,心筋における血管新生を目的としたHGF遺伝子導入は,遺伝子の直接注入によって達成され,今後虚血性心疾患に対する新しい治療戦略となる可能性があると思われる.
歯周炎患者の歯肉溝滲出液中のIL-1とIL-1raの動態に関する研究

1995年に、愛知学院大学附属病院歯周科に来科した歯周炎患者のうち特記すべき全身疾患がない患者7名を疾患者として用いた。臨床所見に関しては通常の診査項目に加えレントゲン写真による歯槽骨吸収率(ABL)を測定した。歯槽骨吸収率が20%未満のものを軽度歯周炎群とし、20%以上から35%未満のものを中等度歯周炎群とし35%以上のものを高度歯周炎群とした。歯肉溝滲出液(GCF)はペリオペ-パ-に吸湿採取した。採取終了後、10分間遠心し、その上清をGCFサンプルとした。IL-1α、IL-1βおよびIL-1raの測定はELISAにて測定しそれぞれ絶対量で表した。IL-1活性度を(IL-1α+IL-1β)/IL-raで表し、歯周炎の進行度との間に相関が認められるか否かを検討した。IL-1α量とIL-1β量は炎症の程度が重症になるに従い増加した。IL-1ra量は重症度との間で相関が認められなかった。次にIL-1活性度で比較したところ軽度歯周炎群では4.6±1.0、中等度歯周炎群8.4±1.6、高度歯周炎群では27.2±5.8となり、軽度歯周炎群と高度歯周炎群あるいは中等度歯周炎群と高度歯周炎群の間で統計学的な有意性が認められた。さらにPD、ABL、GIとIL-1活性度の間でも統計学的に相関係数の有意性が認められた。IL-1活性度がPD,GIなどGCF量に直接影響される診査項目に比例するだけではなく、骨吸収との間に相関が認められたことはIL-1活性度測定が歯周炎の程度を正確に把握するうえで極めて有効な方法であることが示唆された。今後、治療に対する反応性、難治性の歯周炎などについても測定を続けていく予定である。
表現運動・ダンスのクロス・カリキュラムへの試み

3年間における研究の結論実験協力校である5つの小学校において「表現運動・ダンスのクロス・カリキュラムへの試み」の実践的研究を行った結果、次の結論を得た。1.魂をゆさぶる表現のためのクロス・カリキュラムは国語、社会、音楽、図画工作、保健(心のバランスをとる)の中から23教科との構成を試みたが、教科のちがいによる効果の差はみられなかった。2.クロス・カリキュラムの実施において、各教科のプログラムは7因子が中核になる構成であり、7因子はそれぞれの条件が満たされている活動内容であることが好効果を生みだしていた。条件とは、Playはアゴーン、アレア、ミミクリ、イリンクスの要素を2つ以上、Improvisationはテーマかイメージのある即興表現であり、Relaxationは筋肉の弛緩、技能の向上を要求しない、同一化による安定感、ある程度の選択の幅をもった自由の保障、呼吸が自然にできる状態の活動の要素から3つ以上、Communicationは教師と児童、児童と児童の2つの関わりが成立していること、Combinationは表現の方法が歌を歌う・踊るなどのように2つ以上が絡み合っていること、Optionはひとつの活動を起こすのに3種以上の選択権が保障されていることであり、Demonstrationは教師による実演であり、それは児童の発想の転換や活動を刺激するものでなければならない。3.クロス・カリキュラムが有効であるためには教師がクロスされる教科において質の高い指導力を必要とする。本研究は「魂をゆさぶる表現」のあり方の実戦研究の2期めにあたる。1期の研究結果として表現運動・ダンスにおける表現は身体言語による方法では子供の心(感性)の育成は十分になされないことが明らかにされた。したがって2期においては他領域とクロスさせ、表現科的な発想に基ずいて教育現場での実践を行った。第1研究校、山形大学教育学部付属小学校では国語科・音楽科・体育科を中心にクロス・カリキュラムを作成し、学年全体で実践を行った。表現素材は宮沢賢治の「銀河鉄道」で、研究対象の4学年の126名は国語科で多様な読み取りをした。その後児童たちは自分の表現欲求に応じて、次の学習内容から自己選択を行った。1、表現運動2、言語による表現、3、音楽による表現(歌または楽器演奏)学習結果は平成9年2月に父兄や全校児童にたいして発表された。校外に向けての発表は公開研究会において1クラスの授業としてなされた。第2研究校新圧市立北辰小学校、第3研究校長井市立西根小学校でも表現素材は異なるがクロス・カリキュラムでの実践を行った。3つの研究校における共通の成果は、児童たちが表現を高めてく過程で心身を解放させていき人間関係が良好になったことである。さらに、自発的な表現が許容されることから、無気力な児童が意欲的に学習に取り組むようになったことである。本研究は「魂をゆさぶる表現」の指導あり方の実践研究の3期めである。国内外の情報や歴史をとうして「合科」「統合」学習が主張される背景を探った。その結果、フランスのフレネ教育やシュタイナ-教育の理念に合い通ずるものがあることの発見があった。しかし、本研究は古代ギリシャのギムナステックの考えを現代の教育環境の中で実践することの研究であるため、教育の中心は「舞踊」であり、指導要領の「表現運動:ダンス」である。古代ギリシャの舞踊教育はまさにクロスカリキュラムであった。今年度の実践は山形大学教育学部附属小学校の丸山一裕、花輪千秋先生が中心で行われた。さらに、長井市西根小学校では梅原恵子先生が中心になり三学年が実践研究を行い、研究発表をした。丸山・「赤い花、青い星」は国語、体育、道徳をクロスさせた。花輪・「風の又三郎」は国語、体育、音楽をクロスさせた。梅原・「泣いた赤鬼」は国語、体育、音楽、図画工作をクロス差せた。その結果、子供たちは物語の主人公になりきり、人間がどのように生きていくか、価値ある生き方はどうあるべきかを感動をもって体得した。

研究会の参加者の一人であった佐藤学氏(東京大学)は子供たちの踊る姿を「鳥肌がたつ」と絶賛された。平成8、9年度の成果や指導法を踏まえて、山形大学教育学部付属小学校において、全校児童による総合表現「虹のかなた」「駒姫物語」をおこなった。特に6年生による駒姫物語は児童たちの自己選択よる表現教科の学習から始められ、クロスされた地点が総合表現となった。さらに、表現を進めていく中で、新たな課題が浮き彫りとなった。心の健康との関わりなしでは学習が成立しにくいという児童の実態が生じたのである。「保健学習」と表現運動のクロスカリキュラムを新たに試た。心理テスト〔PST〕を実験学年に行い、問題点を明らかにしてダンスセラピー的な表現運動をプログラミングした。〔PST〕の結果で最も問題を内在している学級にたいして指導がなされた。その結果、心に内在する悩みの強い児童や登校拒否ぎみだった児童が短期間に、良好な変容がみられた。特に人間関係のひろがりが著しい。閉鎖的になりがちな人間関係はみんなでスキンシップのある動きをすることによって、開かれていった。
卵胞発育・排卵過程におけるM-CSFの役割とその臨床応用

まずは、hMG反応不良排卵障害症例に対する卵胞発育改善効果に関し、より効果的なM-CSFの投与量や投与期間の検討を行った。過去のhMG療法において成熟卵胞発育が全く認められないか、認められてもわずか1個であったhMG poorresponder症例で、informed consentの得られた症例に対して、hMGとともにM-CSF(ロイコプロール)の併用療法を行った。事前に、各症例の内因性GHの分泌予備能をみるためにクロニジンテストを施行した。hMG 150 iu/dayをday3より開始し、M-CSF 800万単位をday3より隔日3回、あるいは隔日7回点滴静注した。なお、IVF-ET症例においてはGnRHa(スプレキュア)をshort protocolでday2より併用投与している。その結果、クロニジンテスト正常群(内因性GHの分泌予備能が正常)では7/8例、7/9周期において径18mm以上の卵胞発育を少なくとも2個以上認め、hMG使用量も減少した。このうち2例に妊娠が成立し、1例は分娩に至り、健児を得ている。クロニジンテスト低反応群(内因性GHの部分的分泌不全)では3/5例、3/6周期において径18mm以上の複数の卵胞発育を認めた。一方、クロニジンテスト無反応群(内因性GHの分泌不全)では5例、6周期においてM-CSF併用療法を行ったが、18mm以上の卵胞発育を認めたのは1例、1周期のみであった。以上の結果から、M-CSFは卵胞発育に促進的に作用し、特にGH分泌予備能が保たれているpoor responder症例に対して有効と考えられ、現在、さらなる症例の追加ならびに各発育段階にある卵胞や顆粒膜細胞におけるM-CSF・c-fmsの発現とその局在についても検討を進めている。過去のhMG療法において成熟卵胞発育が全く認められないか、認められてもわずか1個であったhMG poorresponder症例で、informed consentの得えられた症例に対して、hMGとともにM-CSF(ロイコプロール)の併用療法を行った。hMG 150 iu/dayをday3より開始し、M-CSF800万単位をday3より隔日3回、あるいは隔日7回点滴静注した。

以上の結果から、M-CSFは卵胞発育に促進的に作用し、特にGH分泌予備能が保たれているpoor responder症例に対して有効と考えられ、現在、さらなる症例の追加ならびに各発育段階にある卵胞や顆粒膜細胞におけるM-CSF・c-fmsの発現とその局在についても検討を進めている。まずは、hMG反応不良排卵障害症例に対する卵胞発育改善効果に関し、より効果的なM-CSFの投与量や投与期間の検討を行った。過去のhMG療法において成熟卵胞発育が全く認められないか、認められてもわずか1個であったhMG poor responder症例で、infomed consentの得られた症例に対して、hMGとともにM-CSF(ロイコプロール)の併用療法を行った。事前に、各症例の内因性GHの分泌予備能をみるためにクロニジンテストを施行した。hMG 150iu/dayをday3より開始し、M-CSF800万単位をday3より隔日3回、あるいは隔日7回点滴静注した。なお、IVF-ET症例においてはGnRHa(スプレキュア)をshort protocolでday2より併用投与している。その結果、クロニジンテスト正常群(内因性GHの分泌予備能が正常)では7/8例、7/9周期において径18mm以上の卵胞発育を少なくとも2個以上認め、hMG使用量も減少した。このうち2例に妊娠が成立し、1例は分娩に至り、健児を得ている。クロニジンテスト低反応群(内因性GHの部分的分泌不全)では3/5例、3/6周期おいて径18mm上の複数の卵胞発育を認めた。一方、クロニジンテスト無反応群(内因性GHの分泌不全)では5例、6周期においてM-CSF併用療法を行ったが、18mm以上の卵胞発育を認めたのは1例、1周期のみであった。
随意性眼球運動の制御における内側および腹側視床の役割の解明

交付を受けた研究助成金により、サルの慢性実験用のシステムを構築して2頭のサルを訓練し、行動解析および運動性視床からの単一神経細胞外記録をおこなった。訓練と並行して行った行動実験では、行動のモニターに運動系のどのレベルの信号が用いられるのか、眼球運動系における小脳学習課題によって調べた。この実験ではふたつの視標を短時間提示し、サルはこれらが消えた後にそれぞれの位置向かって順にサッカードをするように要求された。このとき、ひとつ目のサッカードのベクトルは視標の網膜座標に一致するが、ふたつ目のサッカードは視標の網膜位置から直前の眼球運動を引き算して計算される。ひとつ目のサッカードを学習課題によって変化させたところ、ふたつ目のサッカードの振幅が変化した。この結果から、小脳より下流から発し、運動性視床を介して大脳皮質に至る上行性の経路が随意性眼球運動の制御に重要であることが示された。この成果は現在投稿中てある。また、これらのサルの運動性視床から眼球運動に関連した神経活動を記録し、サッカード、眼球位置、遅延期間などに特異的に応答するニューロン群を見いだした。サッカードに関連するものの多くは運動に遅れて活動を変化させ、眼球位置に関連するものはその方向選択性が水平または垂直方向にほぼ限られていた。このことは視床が運動の発現よりもその評価に関係している可能性を示唆し、その信号は脳幹からの上行性の投射によってもたらされていると考えられる。また、遅延期間に応答するニューロンの一部は滑動性眼球運動の際にも活動を変化させた。今後はこれらの神経活動の定量的な解析をおこない、その信号が運動の制御にどのように用いられるのかを調べていく必要がある。
ヒト好酸球の増殖と分化に関する研究

EoL-1は好酸球性白血病患者末梢血より世界で初めて樹立された好酸球様細胞株であり、ヒト好酸球の機能や分化の研究に対し有用な材料を提供すのものと期待される。種々の細胞膜刺激に対し反応して活性酸素を酸生する能力は顆粒性白血球の主要な分化機能である。そこで本研究で我々は主に活性酸素産生能を指標としてEoL-1の分化と活性化を解析して来た。活性酸素の測定には高感度のルミノール依存性化学発光を用いた。各種組換え型サイトカインを用いてEoL-1を5日間処理し、フォルボールエステル(TPA)により誘発される活性酸素産生に対する効果を検討したところIFN-γ,-αA及びTNFは単独で強い増強効果を示した。更にIFN-γとTNFには強い相乗効果があった。一方正常好酸球に対して活性化作用の報告されているIL-5及びGM-CSFはEoL-1に対し単独ではほとんど効果を示さなかった。しかしIL-5はIFN-γの作用を増強した。細胞学的にはTNF処理によりEoL-1の好酸性顆粒産生が増加し、IFN-γは、TNFの効果を増強した。またIFN-γ、-αAあるいはTNFで処理したEoL-1H細菌由来遊走因子のアナロブであるfMLPに対しても反応して活性酸素を産生するようになった。この場合もIFN-γとTNFは相乗効果を示した。TPAに対する細胞レセプターであるCキナーゼの量を^3H-PDBu結合法で、またfMLPに対する細胞膜レセプターを^3H-fMLP結合法で定量すると、EoL-1をIFN-γとTNFで5日間処理することにより前者は著明に増加しており、また後者も検出レベル以下の状態から正常白血球に近いレベルまで発現が誘導されていた。EOL-1は好酸性白血病患者末梢血より世界で初めて樹立されたヒトの好酸球様細胞株である. EOL-1は解明の進んでいない好酸球の機能や分化に関し重要な研究材料を提供するものと期待される.細胞膜に加えられた種々の刺激に対して反応し,活性酸素を産生する能力は顆粒性白血球の主要な機能である.そこで我々はEOL-1の活性酸素産生能に関して,感度の高いルミノール依存性ケミルミネッセンス(CL)法を用いて検討した. EOL-1は非特異的で強力な膜刺激物質であるフォルボールエステル(TPA)に対し長時間持続するCL反応を示した.このTPAにより誘発されるCL反応はEOL-1をインターフェロン(IFN)や腫瘍壊死因子(TNF)で数日間処理することにより著明に増強された. IFN-〓とTNFの効果は相乗的であり,一方IFN-αAとTNFのそれは相加的であった.TPAで誘発されるEOL-1のCL反応はスーパーオキシドジスムターゼ(SOD)によりほぼ完全に阻止されることからO<(1)2>の産生が必須であり,好中球の場合とは異なる好酸球の特徴を示している.またIFN-〓, -αA,あるいはTNFで処理したEOL-1は細菌由来の遊走因子のアナログであるフォルミルメチオニルロイシルフェニルアラニン(fMLP)に対してもCL反応を示すようになった.この場合もIFN-〓とTNFの効果は相乗的であり, IFN-αAとTNFのそれは相加的であった.

細胞学的にはTNF処理によりEOL-1の好酸性顆粒産生が有意に増加し, IFN-〓はTNFのこの作用を促進した.以上よりIFN-〓, IFN-αAあるいはTNFはEOL-1の活性酸素産生能を著明に増強すること,特にTNFにはEOL-1の分化を誘導する作用があることが明らかになった.我々はこれまでにヒト好酸球性白血病株E_0L-1を用いて、フォルボールエステル(TPA)で刺激したときに誘発される活性酸素の産生能はIFN-γ、αAあるいはTNFによる処理で著明に増強されること、IFN-TNFは相乗的に働くこと、またTNFにはE_0L-1の好酸球顆粒産生を誘導する作用があり、IFN-γとはこのTNFの効果を増強すること、等を明らかにして来た。そこで本年度は細菌由来走化因子のアナログであるfMLPに対する反応性をやはり活性酸素の産生を指標として検討したところ、E_0L-1をIFN-γ、-αAあるいはTNFで処理することによりfMLPに対する反応性が出現すること、及びこの時もINF-γとTNFは相乗作用を示すことを見出した。このようにINF-γとTNFの同時処理でTPAやfMLPに対する反応性が著明に増強される機構を分子レベルで解析するためにまずTPAに対する細胞レセプターであるCキナーゼを^3H-PDBu結合法で、またfMLPに対する細胞膜レセプターを^3H-fMLP結合法で定量したところ、Cキナーゼの量は著明に増加しており、またfMLPレセプターの発現も検出レベル以下の状態から正常白血球に近いレベルにまで誘導されていた。次に正常好酸球に対し活性化作用が報告されているIL-5とGM-CSFのE_0L-1に対する効果についても同様の検討を行なったところ両者とも単独ではE_0L-1のTPAに対する活性酸素産生反応に増強効果をしめさなかったが、IL-5はIFN-γの効果を強める作用を示した。またIFN-γゃ特にTNFがE_0L-1の細胞増殖を強く抑制するのと異なり、IL-5やGM-CSFはともにE_0L-1に対し若干の増殖促進作用を示した。IL-5は好酸球に対する増殖分化促進因子と考えられており、今後E_0L-1を用いてIL-5の作用を解析することが可能であると期待される。
化学物質の初期胚におよぼす点火および遅発影響の検出-初期胚の培養と移植系の応用-

研究目的:近年、初期発生において、たとえ点火影響(Initiation)としては軽微なものであってもそれが潜在化し、後の発育過程において重大な異常として顕在化する可能性が指摘されている。この晩発性の影響を検出する目的で、まず【◯!1】マウス着床前胚の培養系を用いメチル水銀(MMC)の毒性機構に関し検討し、次いで【◯!2】妊娠3日目のマウスにアクリジン・オレンジ(AO)投与し、胚の発育への影響の有無ならびに雄マウスにAO投与し、交配・受精によるAOの移行の有無について検討した。さらに【◯!3】4NQO,Mitomycin Cにて胚盤胞を処理しその後に仮親に移植し発育への晩発影響についても観察をした。結果と考察:【◯!1】前回はアミノ酸のうちとくにCystine添加によりMMCの毒性発現が促進されることを認めたが、今回はCysteine(0.5-1.0mM)のみの添加を試みたが、胚盤胞の発育阻害が明らかに認められた。次に、MMCとCystineを培地に添加し、さらにGSHの合成を特異的に阻害するButhioninesulfoximine(BTO)を添加することにより、MMCの毒性発現は抑制された。Cystine添加によりGSHの合成は促進されるが、BTOの添加によりGSHの合成ならびにCystineの移送阻害が生じ、MMCの毒性発現に影響を与えたものと考えられる。【◯!2】母獣へAO20mg/Kg投与ではその後の発育に影響は認められず、40mg/Kg投与で胎仔の発育遅延、60mg/Kg投与では母獣7匹中1匹が死亡した。また、雄マウスにAO40mg/Kg投与の2時間後に採取した精子には明らかにAOによる蛍光が認められた。同じ処理の雄を無処理の雌と交配し、えられた前核期胚を暗視野蛍光顕微鏡で観察すると胚の自家蛍光の他に明らかにAOによる蛍光が認められた。【◯!3】4NQOおよびMitomycin C処理により胚盤胞細胞の姉妹染色分体交換の頻度が増加した。4nqo処理後仮親子宮に移植の場合は明らかにその後の発育遅延がみとめられた。
動特性測定手法を用いた未臨界度モニターの開発

動特性測定手法を用いた未臨界度モニターの開発研究を、複数架台方式の京都大学臨界集合体実験装置(KUCA)を利用して、実験的に行った。本研究では、未臨界度モニターに適用する動特性測定手法として、中性子検出器間コヒーレンス法とファインマンα法の二つの方法を取り上げて検討した。本研究の結果、ファインマンα法を用いた未臨界度モニターの開発は成功した。しかし、中性子検出器間コヒーレンス法を未臨界度モニターに適用するには、検出器の感度を飛躍的に高めるなどの手だてを講じなければならないことが判明した。ファイマンα法を用いた未臨界度モニターの開発に当たっては、マルチチャンネルスケーラとパーソナルコンピュータを組み合わせたシステムを測定系の中心に据え、高速データ処理法の開発等を行い、未臨界度の実時間測定が実現できることをKUCAの固体減速架台を用いて実証した。また、未臨界度測定の精度を向上させるために、検出器位置及び測定系の不感時間が測定値に及ぼす影響等について実験的に検討を行った。さらに、KUCAの固体減速架台において未臨界度を系統的に変えた測定を行い、核燃料サイクル施設の設計において基準として用いられる多群モンテカルロ計算コードKENO-IVにより求めた未臨界度と比較・検討し、未臨界度測定の精度を評価した。今年度の科学研究費補助金で購入した高速フーリエ変換器とデータレコーダを京都大学臨界集合体実験装置(KUCA)保有のパーソナルコンピュータと接続して制御することにより、中性子検出器間コヒーレンス測定に必要な計測系が整備された。現在、上記の中性子検出器間コヒーレンス測定系と、従来よりKUCAで用いてきたファイマンα測定系とを使用して未臨界度測定を行い、未臨界度測定における検出器位置依存性と検出器不感時間の影響について実験的に検証を行いつつ、両者の結果を比較・検討するとともに、核計算コードを用いた実験解析結果との比較・検討も併せて行っているところである。これまでのところ、両手法とも充分に未臨界度測定に使用でき、未臨界度モニターとして使用し得る可能性があることが判明したが、実時間測定に用いるにはデータ取得・処理法を含めていくつかの開発要素が残されている。未臨界度測定の精度向上に関しては、前述の検出器位置依存性について理論、実験の両面から検討することが必要不可欠であり、検出系の不感時間の影響についても考察し、必要に応じて不感時間の補正をすることが必要である。実時間測定に関しては、より高速のデータ取得・処理法を開発する必要がある。従って、次年度は、今年度の成果に立脚して、高速演算可能な高速データ制御・処理装置の導入と不感時間を精度よく測定できる高速マルチチャンネルスケーラの導入を図り、未臨界度測定の精度向上と未臨界度測定時間の短縮を最重点課題として取り組むことを考えている。この課題が達成された後は、未臨界体系の中性子スペクトルを系統的に変えるなどしながら、未臨界度モニターとしての総合特性を把握することに努める予定である。今年度購入した高速演算可能な高速データ処理・計測制御装置を昨年度購入した高速フーリエ変換器及びデータレコーダと接続し、また京都大学臨界集合体実験装置(KUCA)保有の4入力マルチチャンネルスケーラと接続することにより、中性子検出器間コヒーレンス測定系とファイマンα測定系の高速化が実現し、未臨界度の実時間測定に向けて大きく前進した。さらに、ナノ秒オーダーの速い現象が測定できる高速マルチチャンネルスケーラ及び電源を今年度購入したことによって、高い精度で検出系の不感時間を測定することが可能となり、不感時間補正の方法を開発したこともあって、未臨界度測定の精度が向上した。検出器の位置依存性については、今年度も,KUCAを用いて実験を行い、データを収集するとともに、昨年度測定したデータをも併せて解析し、相互に比較・検討した結果、ファイマンα法の方が中性子検出器間コヒーレンス法に比べて位置依存性はかなり小さいことが判明した。現在のところ、中性子検出器間コヒーレンス法により精度の高い未臨界度を得ようとするとデータの収集にかなりの時間を費やさなければならないことがわかり、短時間の実時間測定に向けては一つの障害に突き当たっている。

一方、ファイマンα法ではα値を繰り返して測定し、いくつかのα値の平均操作を行うことによって、数分間隔でかなり精度の高い実時間測定を行えるめどが立ってきた。今後はファイマンα法を中心にしながら、KUCAにおいて未臨界体系の中性子スペクトルを系統的に変え、未臨界度モニターとしての総合特性を把握すべく研究を継続する予定である。今年度は、昨年度までに本科学研究費補助金で購入した機器と京都大学臨界集合体実験装置(KUCA)で保有する機器を組み合わせ、KUCAに臨界あるいは未臨界の体系を組んで、中性子検出器間コヒーレンス法とファイマンα法を用い、未臨界度等の実時間測定が実現できることを実証することに力を注いだ。また、これと同時に、昨年度までに取得した未臨界度測定データの解析を行い、未臨界度測定の精度を検討するとともに、これまでにKUCAで設備した核計算コードシステムを用いた計算結果との比較・検討を行うこととした。その結果、残念ながら、中性子検出器間コヒーレンス法では、検出器の効率等を飛躍的に高めるなどの手だてを講じなければ、未臨界度測定にかなりの時間を要するので、現在のところ実時間測定が実現できなかった。一方、ファイマンα法では、約1分の測定時間で未臨界度が一定の精度で求められることが判明し、臨界あるいは未臨界状態で制御棒を動かして体系の反応度を変化させたときも、測定量がその反応度変化に対応して変化することが確認され、所期の目標であった実時間測定が実現した。また、ファイマンα法では、不感時間補正の方法を開発したこともあって、未臨界度測定の精度が向上し、モンテカルロ計算との比較を通じて、-5%Δk/k程度までの未臨界度であれば、正確に測定できることを確認した。今後は、未臨界度の算出に用いる即発中性子寿命等の動特性パラメータの計算精度を向上させるために理論的・数値的な検討を加えるなど、深い未臨界度の測定精度を向上させるための研究を続けるとともに、KUCAにおいて未臨界体系の中性子スペクトルを系統的に変えるなどして、未臨界度モニターとしての総合特性を把握するための研究を進める必要がある。
化学療法を受ける乳がん患者の味覚障害に対する客観的評価を用いた看護援助の検討

抗がん剤化学療法を受けている乳がん患者の味覚について主観的尺度および味覚調査ろ紙を用いて継続的に調査を行い、治療開始前から治療終了後までの味覚障害の状況と味覚障害によるQOLへの影響を明らかにし、味覚障害への効果的対処を促す看護援助を検討することを目的とする。平成30年度は、平成29年度から引き続き化学療法を受ける乳がん患者の味覚障害とQOLの状況を把握するため、化学療法を受ける乳がん患者を対象に、治療開始前から治療終了時まで継続的にTaste stripsを用いた味覚検査と質問紙調査(CiTAS、QOL-ACD)を実施した。調査と並行し、研究分担者・研究協力を依頼するがん看護専門看護師との会議を重ね、調整方法と内容について吟味を実施した。研究計画の吟味と、各施設での調整と並行して、調査結果の共有と予備的分析とともに、調査の在り方についての検討を行った。毎週治療を実施するウィークリーパクリタキセルを受ける患者については、対象者の負担が大きく、ドロップアウトする事例が見られたため、4週に一度治療を受けるレジメンに調査を限定することとした。その結果、十分な対象者確保が困難な可能性が出現したため、平成31年度には調査施設を増やすことを検討中である。味覚の客観的測定のために使用するTaste strips作成については、聖隷三方原病院薬剤部の協力を得て試薬を作成し、質の高い調査ツールの確保を行った。各対象者についての調査期間はおおむね8か月前後が必要であるため、調査は現在進行中である。乳がんで化学療法を受ける患者の治療前から治療終了後3か月までにおいて、味覚の状態を多角的に調査し、さらにそのQOLへの影響を追求するもので、一人一人の対象について継続的データの確保を目指している。対象とした患者によっては、治療が中断されたり、調査への参加を中止したりすることも生じるため、良質なデータ確保のため、平成31年度にかけてさらに調査を続行する予定である。本研究は、1対象者について約8か月の継続的調査期間を要する。そのため、現在、臨床現場の看護師の研究協力を得て、それぞれのフィールドにおいて対象者を確保し、調査を行うように調整を図っている。フィールドにおいて、化学療法を受ける乳がん患者の数は変動し、また治療途中での研究参加の辞退や、治療そのものの中断等もあった。研究倫理にのっとり、対象者の状況に合わせてできるだけ負担のない形での協力を依頼を行っている。同時に、直接調査にあたる臨床の看護師の負担軽減をはかるために調査フィールドの拡大や、協力看護師の追加を平成31年度には実施することとなり、倫理審査中である。本研究は、化学療法を受けている乳がん患者の味覚について主観的および客観的指標を用いて継続的に調査を行い、治療開始前から治療終了後までの味覚障害の状況と味覚障害によるQOLへの影響を明らかにし、味覚障害への効果的対処を促す看護援助を検討することを目的とする。平成29年度から平成30年度は、化学療法を受ける乳がん患者の味覚障害とQOLの状況を把握するため、化学療法を受ける乳がん患者30名を対象に、治療開始前から治療終了時まで継続的にTaste stripsを用いた味覚検査と質問紙調査(CiTAS、QOL-ACD)を行うことを目標とした。平成29年度は研究開始年度であるため、調査開始に先立ち、研究分担者・研究協力を依頼するががん看護専門看護師との会議を重ね、調査方法と内容について吟味を実施した。研究計画の吟味と、各施設での調整と並行して、味覚の客観的測定のために使用するTaste strips作成のための調整を実施した。本研究は、簡便で臨床活用が行い易いTaste Stripsを用いることを重要なポイントの一つとしているが、Taste Stripsは市販されていないため安定した品質でこの測定具を作成・確保するために薬学部の専門家へのコンサルティングを実施した。さらに平成29年度は各調査施設との調整・倫理審査実施を経ての調査開始となった。調査においてはそれぞれの対象者について、治療開始前から治療終了後3か月までと、おおむね8か月前後が必要である。そのため、計画では30名の対象確保を平成29年から30年に実施することにしており、現在進行中である。本研究は、乳がんで化学療法を受ける患者の治療前から治療終了後3か月までにおいて、味覚の状態を多角的に調査し、さらにそのQOLへの影響を追求するもので、一人一人の対象について継続的データの確保を目指している。対象とした患者によっては、治療が中断されたり、調査への参加を中止したりすることも生じるため、目標としている30名の対象者確保のため、2年以上の期間が必要であると考え、平成30年までの調査期間を想定しているおり、調査を続行する予定である。

研究計画の吟味と、各施設での調整と並行して、調査結果の共有と予備的分析とともに、調査の在り方についての検討を行った。毎週治療を実施するウィークリーパクリタキセルを受ける患者については、対象者の負担が大きく、ドロップアウトする事例が見られたため、4週に一度治療を受けるレジメンに調査を限定することとした。その結果、十分な対象者確保が困難な可能性が出現したため、平成31年度には調査施設を増やすことを検討中である。味覚の客観的測定のために使用するTaste strips作成については、聖隷三方原病院薬剤部の協力を得て試薬を作成し、質の高い調査ツールの確保を行った。各対象者についての調査期間はおおむね8か月前後が必要であるため、調査は現在進行中である。乳がんで化学療法を受ける患者の治療前から治療終了後3か月までにおいて、味覚の状態を多角的に調査し、さらにそのQOLへの影響を追求するもので、一人一人の対象について継続的データの確保を目指している。対象とした患者によっては、治療が中断されたり、調査への参加を中止したりすることも生じるため、良質なデータ確保のため、平成31年度にかけてさらに調査を続行する予定である。現在、臨床で活動するがん看護専門看護師3名の協力を得て、それぞれのフィールドにおいて対象者を確保し、調査を行うように調整を図っている。化学療法を受ける乳がん患者の数は変動し、また治療途中での研究参加の辞退や、治療そのものの中断等もあるため、対象者の状況に合わせて、できるだけ負担のない形での協力を依頼する。同時に、直接調査にあたる臨床の看護師の負担軽減をはかるために調査フィールドの拡大や、協力看護師のの追加について、研究代表者・分担者で検討中である。本研究は、1対象者について約8か月の継続的調査期間を要する。そのため、現在、臨床現場の看護師の研究協力を得て、それぞれのフィールドにおいて対象者を確保し、調査を行うように調整を図っている。フィールドにおいて、化学療法を受ける乳がん患者の数は変動し、また治療途中での研究参加の辞退や、治療そのものの中断等もあった。研究倫理にのっとり、対象者の状況に合わせてできるだけ負担のない形での協力を依頼を行っている。同時に、直接調査にあたる臨床の看護師の負担軽減をはかるために調査フィールドの拡大や、協力看護師の追加を平成31年度には実施することとなり、倫理審査中である。本研究での調査は、乳がんで化学療法を受ける患者である。一人の対象者に対して継続的に調査することが必要であるため調査期間が長期にわたることに加え、一斉に調査を行うことができない。対象となる患者が得られるかどうかはコントロールができないためあらかじめ29年から30年にかけて継続的に調査をすることを予定しており、平成29年度繰り越しとなった額については、平成30年度の患者調査に使用予定である。乳がん化学療法を受けている患者を対象とし、その有害事象を調査する本研究においては、対象者の心身の状況によっては調査や治療自体の中断が生じることがあり、実際に生じている。そのため、平成29年、30年において目指していた対象者の確保が予定より遅れた。さらに、1対象者に対する調査期間が8か月と長期間にわたるため、調査期間の延長が必要となっている。
ALS/FTLDおよびタウオパチーに共通する病態基盤の解明

1.FUSとSFPQの結合変化についての疾患横断的検討:FUSとSFPQの核内での結合変化について、FUS/SFPQ機能異常が病態を反映する疾患スペクトラムを明らかに目的で、非神経疾患剖検脳、ALS/FTLD、進行性核上性麻痺(PSP)、アルツハイマー病や大脳皮質基底核変性症(CBD)、Pick病などの剖検脳におけるFUS・SFPQの微小局在の変化について、海馬歯状回切片を用いて疾患横断的に比較検討を行った。その結果、FUSとSFPQの結合性の変化はALS、PSP、CBDで対照群と比較して有意に低下していたが、アルツハイマー病では変化を認めなかった。この結果から、FUS・SFPQの神経細胞核内における微小局在は広義のFTLD疾患スペクトラムにおいて障害されていることが明らかになった。2.FUSとSFPQのMAPTの選択的スプライシングを制御するメカニズムの解明:FUSおよびSFPQがMAPTの選択的スプライシングを制御するメカニズムの詳細を明らかにするために、MAPT ex10の前後のexonおよび200-300bpほどの隣接intronを含むmini-geneを作成し、それに結合するタンパク質profileを作成した。FUSおよびSFPQ以外に、多くのRNA結合タンパク質がprofileに含まれることが明らかになった。3.孤発性ALSに認められたSFPQ変異についての機能解析: JaCALSで確認した孤発性ALSにおけるSFPQの変異についてFUSの結合性の変化およびMAPTの選択的スプライシングなどRNA代謝における影響を明らかにする目的で同定した点変異を導入した変異SFPQを発現する神経細胞株(N2a)の遺伝子編集を用いた作成に着手した。FUSとSFPQの結合変化についての疾患横断的検討においては、非神経疾患剖検脳、ALS/FTLD、進行性核上性麻痺(PSP)、アルツハイマー病の症例をそれぞれ25-30症例解析が終了し、FUSとSFPQの結合性が広義のFTLDスペクトラムであるALS、PSP、CBDで対照群と比較して有意に低下していることを明らかにし、これらについて論文化に着手した。また、FUSとSFPQのMAPTの選択的スプライシングを制御するメカニズムの解明、孤発性ALSに認められたSFPQ変異についての機能解析についても、研究の基盤となるシステムの構築が進んでおり、予定通りの進捗状況と考える。1.FUSとSFPQの結合変化についての疾患横断的検討:2018年度の病理学的解析をもとに論文化を進める。2019年度からはこれまでの知見をもとに、実際にFUS・SFPQの機能不全がどのように高次脳機能障害を引き起こしているかについて、よりヒトに近いマーモセットにおいてFUS抑制を行ったモデルを作出し、その回路以上をtractographyなどで解析することで、分子メカニズムと疾患の発症機序の関連性を明らかにしていく。2.FUSとSFPQのMAPTの選択的スプライシングを制御するメカニズムの解明:MAPT同定したMAPT pro mRNAに結合するタンパク質profileの中で、実際にex10のsplicingに関与する分子を同定する。また剖検脳におけるFUSとの結合性などから病的意義を持つ分子群を同定する。ここで得られたタンパク質profileの変化を、FUS・SFPQ抑制、4R-tauが優位になる生理的条件(serum deprivationなど)などで明らかにし、剖検脳を用いてFUSとの結合性を検討する。3.孤発性ALSに認められたSFPQ変異についての機能解析:同定した点変異を導入した変異SFPQを発現する神経細胞を用いて、FUSとの結合性やMAPT exon10選択的スプライシングそのものに与える影響を評価する。

FUSとSFPQの結合変化についての疾患横断的検討においては、非神経疾患剖検脳、ALS/FTLD、進行性核上性麻痺(PSP)、アルツハイマー病の症例をそれぞれ25-30症例解析が終了し、FUSとSFPQの結合性が広義のFTLDスペクトラムであるALS、PSP、CBDで対照群と比較して有意に低下していることを明らかにし、これらについて論文化に着手した。また、FUSとSFPQのMAPTの選択的スプライシングを制御するメカニズムの解明、孤発性ALSに認められたSFPQ変異についての機能解析についても、研究の基盤となるシステムの構築が進んでおり、予定通りの進捗状況と考える。1.FUSとSFPQの結合変化についての疾患横断的検討:2018年度の病理学的解析をもとに論文化を進める。2019年度からはこれまでの知見をもとに、実際にFUS・SFPQの機能不全がどのように高次脳機能障害を引き起こしているかについて、よりヒトに近いマーモセットにおいてFUS抑制を行ったモデルを作出し、その回路以上をtractographyなどで解析することで、分子メカニズムと疾患の発症機序の関連性を明らかにしていく。2.FUSとSFPQのMAPTの選択的スプライシングを制御するメカニズムの解明:MAPT同定したMAPT pro mRNAに結合するタンパク質profileの中で、実際にex10のsplicingに関与する分子を同定する。また剖検脳におけるFUSとの結合性などから病的意義を持つ分子群を同定する。ここで得られたタンパク質profileの変化を、FUS・SFPQ抑制、4R-tauが優位になる生理的条件(serum deprivationなど)などで明らかにし、剖検脳を用いてFUSとの結合性を検討する。3.孤発性ALSに認められたSFPQ変異についての機能解析:同定した点変異を導入した変異SFPQを発現する神経細胞を用いて、FUSとの結合性やMAPT exon10選択的スプライシングそのものに与える影響を評価する。(理由)すでに発注している輸入試薬が4月以降の納品となるため本年度未使用額が発生した。(使用計画)未使用額については、令和元年度に予定している輸入試薬の必要な動物実験に使用する予定である。
オセアニア地域モンゴロイド系諸集団の系統関係

東南アジアから南太平洋にいたるオセアニア地域に由来する総計100を越える人類集団について、関係文献の検索作業や国内外の関連分野の研究者との情報交換を通じて、古人骨の頭顔部の計測値と形態小変異の出現頻度、生体計測値、血液型の出現率、手足の皮膚流線紋パターンの出現頻度などの身体形質に関する既報データおよび原データの収集に努めてきた。また、これら以外にも、オセアニア地域の先史および現生の集団について、自然人類学に関係した文献資料をできる限り広く収集してきた。身体形質に関するデータについては、対象集団の地域性、時代性、集団としての諸特性、データの信頼性などをチェックしたのちに、随時データシートを作成する作業を進めてきた。そして、文献資料については、統一的な登録様式の検討と試行をくり返したのちに、現在まで入手した合計150点のものについて、文献検索用のデータベースとして構築する作業を概ね完了した。古人骨データに関連した作業は片山が、また生体計測などの現生集団のデータに関係した作業は多賀谷が、主として分担できたのであるが、当初予定していた作業はほとんど順調に消化してきたと言ってよい。次年度以降は、関係文献をほぼ完璧に網羅できるように文献資料のデータベースをより充実させること、身体形質に関するデータシートをデータベースに入力して、オセアニア地域のモンゴロイド系諸集団の類縁関係を実際に分析できるように準備していくこと、などによって研究の展開が図られる予定である。