hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
社会的スキルの発達と円滑な対人行動を促進するサイコエデュケーションの効果

1)社会的スキルの実態調査実際の日常生活における対人関係の葛藤場面において、どのようなソーシャルスキルを用いることができるのか、その発達の実態を明らかにすることを目的に、小学1年生から高校3年生までを対象にして自己評価と実際のソーシャルスキルとの関係を検討した。ソーシャルスキルを自己評定させた後、対人葛藤場面での他者の意図の読み取り、具体的な問題解決行動、具体的に用いるソーシャルスキルについて質問した。その結果、学年差が明らかになり、学年が上がるに連れて他者の視点について複数の解釈ができるようになることや、行動に個人差が見られるようになった。ソーシャルスキルが高い人は、攻撃的な言葉ではなく、主張的または娩曲的な表現が使用できることが示唆された。中学生以上では、性差が明らかになり、女子のほうが状況の解釈に幅があることや、主張的な態度の傾向が高かった。また、社会的スキルの発達にソーシャルサポートの影響が大きいことが明らかになった。2)サイコ・エデュケーションの効果(1)VLF思いやり育成プログラムの効果:幼稚園から高校生までを対象に実践が行われた。幼稚園では実践の様子をDVDにまとめ、保育学会で発表した。小学生対象には統制クラスを設けて、効果を比較したところ、VLF実践クラスの方が、従来の資料中心のクラスに比較して効果が認められた。中学生対象の実践では、年齢的に自己評価が低くなることから、授業の様子においては効果が伺えるものの、アセスメントの工夫が必要なことが明らかとなった。高校生を対象に初めて行われたが、授業の感想から高校生においても対人関係を体験的に考える授業が求められていることが明らかになった。(2)ソーシャルスキルトレーニングの効果:小集団の高校生を対象に実施され、セッションの積み重ね、ターゲットスキルの内容の決定、教師のモチベーションを上げることの重要性が示唆された。小学校1年生から大学生1000名以上を対象に、大規模な社会的スキルの調査を質問紙によって実施した。質問紙は、4種類から構成された。ひとつは、自分のふだんの社会的スキルをどのように評価しているかについて測る25項目からなる社会的スキルの質問紙、2つめは、こうした社会的スキルに関与するソーシャルサポートの質問紙で、家族からサポートを受けているかどうかを評定する11項目から構成される評定尺度、3つめは、友達からのサポートについて測る同じく11項目からなる評定尺度、4つめは、対人葛藤場面において、相手の意図、対応方法、実際に相手に伝える言葉について尋ねる自由記述の質問紙であった。4つめの対人葛藤場面は、被験者が経験しうる葛藤場面を扱っており、友達に貸したものを返してもらえない場面、自分の秘密を友達がばらしてしまった場面、バスの座席の自分の隣にあまり親しくない友達から座りたいと言われた場面、待ち合わせをしたのに友達が来ない場面、などであった。社会的スキル、家族からのサポート、友達からのサポートなどについて、学年差や性差が見られている。対人葛藤場面における自由記述については、カテゴリーに分けて、児童・生徒の認知、行動、解決方法のバリエーションを検討中であり、先の社会的スキルやソーシャルサポートをこうした実際の葛藤場面での解決方法との関係を分析する予定である。また、VLF (Voices of Love and Freedom)については、幼児と4年生を対象に実施し、4年生についてはVLF実践群と統制群における社会的スキルの比較を検討している。また、こうしたプログラムの展開や日本の子ども達の社会的スキルの問題の解決にこのVLFが及ぼす効果については、2004年11月のアメリカ道徳教育学会で発表した。○小学校1年生から6年生まで633名を対象に、小学生の社会的スキルと対人葛藤場面における行動との関連を検討した。

対人葛藤場面は4場面設定された(場面1:貸したものを返してもらえない、場面2:秘密をもらされてしまう、場面3:親しくない人からの誘い、場面4:約束を破られる)。その結果、相手の意図の解釈、自分の行動について、さらに実際にその場面で用いる言葉について学年差があることが明らかになった。相手の意図については、低学年では相手が忘れている、使っているなどの状況を予測したのに対して、高学年になると自分のことが嫌いだからなどといった友達関係に言及していた。また、行動については、中学年では積極的に行動する傾向が高くなるが、高学年では積極派と消極派に分かれたり、複数の選択を提案する割合が高くなった。実際に用いる言葉は、高学年ほど主張的な言葉が増えるものの、場面によって違いが生じることが示唆された。また、社会的スキルが高いと対人葛藤場面における行動は主張的、消極的、婉曲的となり、攻撃的ではなくなることが明らかになった。○中学校1-3年生611名を対象に、上記と同様の手続きによって社会的スキルと対人葛藤行動の関係を検討した。その結果、相手の意図の解釈については場面差や性差が見られ、秘密をもらされる場面では悪意を感じている傾向が高いことや、女子の方が意図を複合的に捉えていることが明らかになった。行動についても性差が見られ、女子より男子の方が、親しくない人の誘いを受けていた。具体的に用いる言葉は、男子の方が攻撃的である傾向がみられた。社会的スキルが高いと評価している人は、他者の存在を視点にいれた行動ができることが示唆された。○高校生1-3年生、222名を対象に同様の手続きで行った。その結果、学年差はみられず、性差が認められた。行動や実際の言葉については、女子の方が相手の理由や状況を確認していることや、傷つかない配慮がみえたが、男子の方は感情的な行動や表現が認められた。社会的スキルの評価が高い人は中学生と同様に相手から理由を聞き出そうとする努力が認められた。(以上3つの研究結果は、日本教育心理学会第47回総会で発表)○小学校から高校生まで1,415名を対象に分析し、小学生、中学生、高校生の学年差や性差を検討した。その結果、学年差が顕著にみられた。中学生が対人葛藤場面において、友人の意図を性格や人間関係に帰属する傾向が高いことや、高校生になると、過失や偶然といった対人葛藤に巻き込まれることを回避するような考え方がうかがうことができた。小学生は、中高生に比較すると、どうして友達がそのような行動をとったのか率直に聞く傾向が高くみられた。(本研究結果は、Association for Moral Educationの第31回学会(Harvard University)で発表した)。(1)社会的スキルの実態調査実際の日常生活における対人関係の葛藤場面において、どのようなソーシャルスキルを用いることができるのか、その発達の実態を明らかにすることを目的に、小学1年生から高校3年生までを対象にして自己評価と実際のソーシャルスキルとの関係を検討した。
IGF-1のIGF受容体非依存性シグナル解析による創傷治癒薬への応用

インスリン様成長因子(IGF-1)等の成長因子は、皮膚の創傷治癒の過程で重要な役割を果たしている。IGF-1による表皮細胞遊走促進作用や創傷治癒促進作用は、これまでその機能が知られていないCドメイン、更にはその中の4つアミノ酸からなるSSSRペプチドによってもたらされることを明らかにしてきた。本研究ではそのメカニズムを解析し、SSSRペプチドがIGF-1受容体を活性化するのではなく、アンギオテンシン系のシグナル伝達系を活性化することを明らかにした。これらの結果は、IGF-1の機能の新たな作用メカニズムを明らかにすると共に、新たな皮膚創傷促進薬の開発に繋がるものである。本研究代表者らは、インスリン様成長因子(IGF-1)による上皮細胞遊走促進作用には、IGF受容体からのシグナルとは全く異なったメカニズムが関与することを明らかにして来た。本研究の目的は、この新たなメカニズムを明らかにし、これを利用した新たな創傷治療薬の開発につながるトランスレーショナル研究を行うことである。IGF-1は、その分子内のA及びBドメインを介してIGF受容体に結合し、多様な生理作用を示すことがよく知られている。しかし、角膜、皮膚の上皮細胞の遊走促進作用や創傷治癒促進作用は、IGF-1のこれらの部位ではなく、これまで生理作用が知られていなかったCドメイン及びその中の4個のアミノ酸のSer-Ser-Ser-Arg(SSSR)に由来する。実際、皮膚の表皮細胞の遊走促進は、合成したSSSRペプチドで認められた。この際にIGF受容体が活性されているかをその下流のAktの燐酸化で評価したところ、Akt燐酸化がSSSRペプチドにより変化しないことからIGF受容体の活性化は起こっていなかった。また、SSSRペプチドは、表皮細胞の増殖能には影響を与えなかった。さらに、SSSRペプチドは、マウスの皮膚創傷モデルにおいて創傷治癒を促進した。この際、傷害部位の再上皮化が促進されたが、表皮細胞の増殖能の亢進は認められなかった。これらの作用機序を明らかにするために種々のシグナル伝達系を皮膚の表皮細胞で解析した結果、SSSRペプチドによる細胞遊走促進作用にはTGF-betaが関与することが明らかとなった。すなわち、SSSRペプチドを処理した細胞では、活性化TGF-betaが増加することが分かった。今後、TGF-betaの上流及び下流のシグナルを明らかにして行く予定である。しかし、角膜、皮膚の上皮細胞の遊走促進作用や創傷治癒促進作用は、IGF-1のこれらの部位にはなく、これまで生理作用が知られていなかったCドメイン、更にその中の4個のアミノ酸のSer-Ser-Ser-Arg(SSSR)に由来することを明らかにして来た。実際、皮膚の創傷治癒及び表皮細胞の遊走促進は、合成したSSSRペプチドで認められた。昨年度までの研究で、このSSSRによる表皮細胞遊走促進作用には、IGF受容体が関与していないことを明らかにしている。今回、アンギオテンシンIIが、SSSRの作用に関与していることを明らかにした。即ち、SSSRの表皮細胞遊走促進作用は、アンギオテンシンIIタイプ1受容体(AT1R)の阻害薬で消失した。この際、AT1Rからの三量体G蛋白質を介した経路ではなく、βアレスチンを介したシグナル経路が関与していることを明らかにした。さらに、AT1RのみならずアンギオテンシンIIタイプ2受容体(AT2R)も同時に活性化することが必要であることも分かった。さらに、これらのアンギオテンシンII受容体の活性化は、TGF-betaを増加させてTGF-beta受容体を活性化させ、さらにEGF受容体を活性化して表皮細胞遊走促進作用を発揮することが明らかとなった。この際、EGF受容体の活性化がEGF等のリガンドを介さずに引き起こされた。これらの結果は、IGF-1のCドメイン或いはSSSRが、これまでに知られていない新しい作用機序で創傷治癒を促進することが明らかとなった。今回、明らかにしたSSSRからのアンギオテンシンII、TGF-betaを介したシグナルは、いずれも局所のオートクリン、パラクリンとして働くもので、副作用が少ないことが予測される。今後、アンギオテンシンIIの上流のシグナルを明らかにしてゆく予定である。IGF-1は多様な生理作用を示すが、角膜、皮膚の上皮細胞の遊走促進や創傷治癒促進には、これまで生理作用が知られていなかったCドメイン、更にその中の4個のアミノ酸のSer-Ser-Ser-Arg(SSSR)が必要であることを明らかにして来た。昨年度までの研究で、このSSSRによる表皮細胞遊走促進作用には、IGF受容体は関与せず、アンギオテンシンII受容体活性化が必要であることを明らかにしてきた。本年度は、さらにSSSRがどの様なメカニズムでアンギオテンシンIIのシグナル伝達系を亢進するのかを検討した。表皮細胞をSSSRで処理すると培養液中のアンギオテンシンIIの濃度が有意に増加しおり、この増加したアンギオテンシンIIが表皮細胞の遊走促進作用を惹起することが明らかになった。このSSSRによる細胞遊走促進作用は、アンギオテンシンI変換酵素(ACE)阻害薬により阻害されたが、レニン阻害薬では影響を受けなかった。

アンギオテンシンIはレニン非依存的にも作られることが報告されており、SSSRがレニン非依存的にアンギオテンシンIを増加させているか否かを調べるため、培養液中のアンギオテンシンIの測定を行った。その結果、SSSRはアンギオテンシンI産生を増加させなかった。以上の結果は、SSSRがACEの活性化を介してアンギオテンシンIIのシグナル伝達系を亢進させ、表皮細胞の遊走促進を引き起こしていることが明らかになった。これらの結果から、IGF-1のCドメイン或いはSSSRがこれまでに知られていない新しい作用機序で創傷治癒を促進していることが明らかとなった。SSSRは局所のアンギオテンシン系のシグナルを介して効果を発揮するため、副作用等はほとんど認められない。今後、新たな創傷治癒促進薬への応用が期待される。インスリン様成長因子(IGF-1)等の成長因子は、皮膚の創傷治癒の過程で重要な役割を果たしている。IGF-1による表皮細胞遊走促進作用や創傷治癒促進作用は、これまでその機能が知られていないCドメイン、更にはその中の4つアミノ酸からなるSSSRペプチドによってもたらされることを明らかにしてきた。本研究ではそのメカニズムを解析し、SSSRペプチドがIGF-1受容体を活性化するのではなく、アンギオテンシン系のシグナル伝達系を活性化することを明らかにした。これらの結果は、IGF-1の機能の新たな作用メカニズムを明らかにすると共に、新たな皮膚創傷促進薬の開発に繋がるものである。IGF-1のIGF受容体非依存性シグナル解析において、これまで機能の知られていないCドメイン内の4つのアミノ酸からなるSer-Ser-Ser-Argが創傷治癒促進作用を担っていること、さらに、この作用がこれまでに知られていないアンギオテンシンII、TGF-beta受容体、EGF受容体を介する新たなシグナル伝達系を介することを明らかにした。これらは、創傷治癒促進薬の開発につながる大きな成果であると共に、IGF-1の生理作用の新たな分子メカニズムの解明に貢献するものである。薬理学SSSRペプチドによる創傷治癒促進効果について、アンギオテンシンIIを介することから、その上流シグナルを明らかにしてその全容を解明する。さらに、このシグナル伝達系が、in vivoの創傷治癒過程でも働いていることをシグナルに関与する蛋白質のノックアウト・マウスを用いて明らかにする予定である。IGF-1のIGF受容体非依存性シグナル解析において、これまで機能の知られていないCドメイン内の4つのアミノ酸からなるSer-Ser-Ser-Argが担っていることが、角膜のみならず皮膚など上皮細胞に普遍的であることが明らかになった。また、合成した4アミノ酸からなるSSSRペプチドがin vivoでの皮膚の創傷治癒促進に著明な効果があることを明らかにした。これは、創傷治癒促進薬の開発につながる大きな成果である。さらに、これらの作用に活性化TGF-betaの増加が関与することを突き止め、作用機序解明に向けての手がかりが得られている。SSSRペプチドによる創傷治癒促進効果について、活性化TGF-betaの増加を手掛かりに、その上流並びに下流のシグナルを明らかにしてその全容を解明する。
ベンゾチアゾールーTTF複合分子を用いた高い磁気転移温度を示す磁性伝導体の開発

1,3-ベンゾチアゾール(BTA)部位を付加させた複合TTF分子の各種誘導体のうち、エチレンスペーサーを有する分子1について、磁性遷移金属M(hfac)_2(M=Cu,Co,Mn,Ni)への配位錯体1_2 M(hfac)_2の作製を行い、その構造と物性について検討した。一方、磁性遷移金属錯体1_2Cu(ReO_4)_2錯体の構造と物性について検討したところ、(1_2)^+Cu^+(ReO_4^-)_2の部分酸化状態の電荷分布を持つ錯体であることが明らかとなり、活性化エネルギー0.07eVを有する半導体であることが判った。1,3-ベンゾチアゾール(BTA)部位を付加させた複合TTF分子の各種誘導体のうち、エチレンスペーサーを有する分子1について、M(hfac)_2への配位錯体の作製を行い、その構造と伝導性・磁性などの各種物性について検討した。ドナー分子1がM(hfac)_2(M=Cu,Co,Mn,Ni)へ配位した錯体の合成はシクロヘキサン中で両者を混合後、シクロヘキサン/ヘキサンから再結晶することにより行った。以下に得られた錯体のうち、Cu錯体の構造と磁気的性質を示す。結晶学的に独立な1個のドナー分子と半分のCu(hfac)_2分子が存在し、組成比は2:1である。錯体中のドナー分子の結合距離は中性分子の構造解析結果にほぼ一致し、ドナー分子は中性であると考えられる。Cu(hfac)_2分子は二つのドナー分子に囲まれるように存在し、Cu原子の上下に原子間距離2.49AでN原子が位置している。結晶中で、(1)_2・Cu(hfac)_2錯体はa軸方向に配列し、配列間でTTF部分同士が面間距離3.74A(S-S接触:4.02A)で重なり合っている。ちょうど、TTF部分同士、BTA_2Cu(hfac)_2部分同士がそれぞれ分離積層したような構造を構築している。TTFカラム内でTTFペア同士は長軸方向に大きくずれながら積層しているため、良好な伝導カラムは形成されておらず、絶縁体であった。また、磁気的性質を測定したところ、Cu^<2+>スピン(g=2.19,S=1/2)のみが存在し、Cu^<2+>スピン間には相互作用は見られなかった。M=Co,Mn,Niの錯体についても、構造解析結果から、Cu錯体と同様の分子構造を有していることが明らかとなっているが、金属中心と窒素原子間の距離については、Ni錯体のみ結合距離に対応する短い値が観測された。また、Co錯体ではTTF部位同士によるカラムが構築されていた。1,3-ベンゾチアゾール(BTA)部位を付加させた複合TTF分子の各種誘導体のうち、エチレンスペーサーを有する分子1について、平成21年度に引き続き各種磁性遷移金属錯体の作製を行い、その結晶構造と伝導性・磁性などの各種物性について検討した。ドナー分子1の磁性遷移金属錯体錯体の合成はクロロベンゼン/エタノール混合溶媒中で電気分解法により行った。以下に得られた錯体のうち、1_2Cu(ReO_4)_2錯体の構造と磁気的性質を示す。この錯体では裸の銅原子に対し、2つの分子1のベンゾチアゾール部位の窒素原子がtrans方向から互いに直接配位し、N-Cu間距離が1.88Åと非常に短くなっている。結晶中でTTF部位同士は二量化しているが、二量体がα軸方向に一次元的に配列し、二量体間の硫黄原子同士には3.88Åの比較的短い接触があった。また磁気的性質を調べた結果、磁化率の温度依存性は1次元ハイゼンベルグ模型に従ったため、局在S=1/2スピン間にJ=-37Kの磁気的相互作用が存在し、スピンが一次元的に均一に並んでいることが分かった。結晶構造と比較検討した結果、錯体中の銅原子は非磁性の+1価のイオンとして存在する一方、TTF二量体上に1つのπスピンが存在し、そのπスピンがa軸に沿って一次元的に等間隔に配列することにより、1次元ハイゼンベルグ模型に従う磁化率の温度依存性を示したことが明らかとなった。そのため、分子1は+0.5価の部分酸化状態となり錯体全体としては(1_2)^+Cu^+(ReO_4^-)_2の電荷分布を持つことが分かった。このように伝導パスとキャリヤーの存在が示唆されたので、その単結晶試料の電気伝導性を測定した結果、室温の電気伝導度は450μS/cmであり、室温から半導体的挙動を示し、その活性化エネルギーは0.07eVと求められた。
医療従事者の二次感染予防に関する医療従事者、事業者、一般人の3視点からの検討

本研究課題は、1)医療従事者の皮膚・粘膜曝露と個人防護具に関する意識・実践調査、2)事業者の労働安全対策に関する取り組みに関する調査、3)医療従事者の個人防護具使用に関する一般人の認識調査の3つの調査により、医療従事者、事業者、一般人の3視点から、医療従事者の二次感染予防に有効な介入策を検討し提案することを目的としている。平成30年度は、2)事業者の労働安全対策に関する取り組みに関する調査、3)医療従事者の個人防護具使用に関する一般人の認識調査を行った。これらの研究項目は倫理審査委員会の承認後に開始した。研究項目を進めるにあたり、文献レビュー、関連学会にて国内外の最新情報を収集した。2)事業者の労働安全対策に関する取り組みに関する調査では、職員の血液・体液曝露対策に関わる担当者を対象に質問紙調査を行った。本調査により、病院における血液媒介病原体による職業感染予防のための安全風土の醸成に関わる取り組みと担当者が認識する職員に対する職場の物的環境と対人関係を含む人的環境を明らかにした。3)医療従事者の個人防護具使用に関する一般人の認識調査では、医療の受け手である20歳以上の人々を対象にインターネット調査を行った。本調査から医療従事者が手袋、マスク、エプロン、ガウン、ゴーグルを着用することによる印象、必要性、影響に関する人々の見解を明らかにした。平成30年度の本研究成果は、医療従事者の血液・体液曝露による二次感染対策を組織的、社会的側面から推進していくことに貢献するものと考える。本研究の目的は、医療従事者、事業者、一般人の3視点から、医療従事者の二次感染予防に有効な介入策を検討し提案することである。本研究では、1)医療従事者の皮膚・粘膜曝露とPPEに関する意識・実践調査、2)事業者の労働安全対策に関する取り組みに関する調査、3)医療従事者のPPE使用に関する一般人の認識調査を予定している。平成27年度は皮膚・粘膜曝露と個人防護具(PPE)使用に関する医療従事者の意識と実践、事業者が行う皮膚・粘膜曝露に関する労働安全対策としてのPPEの整備や取り組み、および一般の人々の医療関連感染に関する認識について、網羅的な文献検討を行った。医療従事者、事業者、一般人の3視点から検討された先行研究はなかった。医療従事者のPPE装着率では手袋3690%、エプロン・ガウン2057%、サージカルマスク80%、ゴーグル等アイプロテクション3744%であり、事業者の労働安全対策に関する取り組みでは、職場安全風土があることでPPEの装着率が23倍上昇すると報告されていた。また一般人に対する医療従事者のPPE使用に関する認識に関連した先行研究では、患者を対象としたものでケア時の手袋着用には肯定的であった。これらの文献検討より、現在1)、2)の調査票を作成している段階である。3)については一般人を対象とするため、より多くのデータを収集するための方法を検討中である。一般人に対する医療従事者のPPE使用に関する認識に関連した先行研究は、患者を対象としたものでケア時の手袋着用には肯定的であった。これらの文献検討をもとに現在1)、2)の調査票を作成している段階である。3)については一般人を対象とするため、より多くのデータを収集する方法を検討中である。当初の想定より学内業務が増加したことにより、エフォート配分に狂いが生じた。そのため本研究に費やす時間が予定より減じてしまい進捗がやや遅れている。前年度に行った医療従事者の皮膚・粘膜曝露と個人防護具(Personal Protective Equipment: PPE)使用に関する文献検討より、事業者の労働安全対策に結びつくものとして、職場の安全風土があることでPPEの装着率が23倍上昇することが報告されていた。そこで28年度は、PPE使用に関する医療従事者(看護師)の認識と実践および事業者が提供する労働安全対策を医療従事者が知覚する職場の安全風土として既存尺度を用いて明らかにし、PPE使用に関連する要因を探索することを目的に調査を行った。調査は100床750床の病院に勤務する看護師を対象とした。調査項目はPPE使用に関する医療従事者の認識に関する14項目、PPEの実践に関する15項目、職場の安全風土に関する33項目、職業感染予防に関する6項目、個人属性に関する9項目、血液媒介病原体への曝露歴に関する3項目で構成した。調査票の回収が終了し、回収率は61%であった。回答者の属性は90%以上が女性、年齢平均は33歳、勤務場所は病棟が74%、外来13%、手術室7%で、看護師になってからの経験年数の平均値は10年であった。また過去1年間における眼または口腔への血液・体液の飛散経験があるものは45名、過去1年以内に針刺しを経験したものは49名、過去1年以内に鋭利物による切創を経験したものは72名いた。現在、看護師のPPE使用の認識および実践状況と職場の安全風土に関する詳細なデータの解析作業を進めている段階である。また一般人を対象とした本課題の調査方法について検討中である。学内業務の増加により、エフォート配分どおりに研究計画が進まない状況が持続した。28年度に実施した医療従事者(看護師)の個人防護具使用の認識・実践および安全風土に関する調査」のデータ解析を行った。本調査では、研究目的1)医療従事者の皮膚・粘膜曝露と個人防護具に関する認識および実践状況と、2)事業者の労働安全対策に関する取り組みを実践者である医療従事者が知覚する安全風土として測定し明らかにした。

100800床規模の病院に勤務する看護師(看護管理者を除く)1,814名を対象として、80項目からなる調査票を用いて調査を行った。有効回答率は59.9%であった。回答者は9割以上が女性で、所属部署は病棟が75%、外来が13%、手術室が7.4%であった。看護師経験年数は中央値で7年、現在の所属部署での勤続期間は中央値で3年であった。針刺し、血液・体液曝露の可能性がある時の個人防護具の必要性の認識は高いが、実践場面ではエプロン/ガウン、アイプロテクション使用が十分でないことが明らかになった。また約半数の回答者は、個人防護具の選択には迷うことがあると回答した。13.5%の者が過去1年間に、血液・体液への曝露を経験していた。職場の安全風土については、血液・体液曝露経験の有無による統計学的有意差は認めなかった。なお、本結果は2018年2月に開催された日本環境感染学会(東京)において口頭演題として公表した。学内業務多忙に加えて家族の介護に要する時間が増大したため、計画通りに進めることが困難となった。平成29年度で終了予定であったが、当初計画を完遂するため延長申請を行った。本研究課題は、1)医療従事者の皮膚・粘膜曝露と個人防護具に関する意識・実践調査、2)事業者の労働安全対策に関する取り組みに関する調査、3)医療従事者の個人防護具使用に関する一般人の認識調査の3つの調査により、医療従事者、事業者、一般人の3視点から、医療従事者の二次感染予防に有効な介入策を検討し提案することを目的としている。平成30年度は、2)事業者の労働安全対策に関する取り組みに関する調査、3)医療従事者の個人防護具使用に関する一般人の認識調査を行った。これらの研究項目は倫理審査委員会の承認後に開始した。研究項目を進めるにあたり、文献レビュー、関連学会にて国内外の最新情報を収集した。2)事業者の労働安全対策に関する取り組みに関する調査では、職員の血液・体液曝露対策に関わる担当者を対象に質問紙調査を行った。本調査により、病院における血液媒介病原体による職業感染予防のための安全風土の醸成に関わる取り組みと担当者が認識する職員に対する職場の物的環境と対人関係を含む人的環境を明らかにした。3)医療従事者の個人防護具使用に関する一般人の認識調査では、医療の受け手である20歳以上の人々を対象にインターネット調査を行った。本調査から医療従事者が手袋、マスク、エプロン、ガウン、ゴーグルを着用することによる印象、必要性、影響に関する人々の見解を明らかにした。平成30年度の本研究成果は、医療従事者の血液・体液曝露による二次感染対策を組織的、社会的側面から推進していくことに貢献するものと考える。本研究では、1)医療従事者の皮膚・粘膜曝露とPPEに関する意識・実践調査、2)事業者の労働安全対策に関する取り組みに関する調査、3)医療従事者のPPE使用に関する一般人の認識調査を予定している。28年度は1)、2)について調査票を完成させた後、データ収集および解析を行う予定である。また3)については28年度中にデータ収集方法を決定し、調査の準備を進める予定である。
菌体蓄積性を考慮した高原子価金属ポルフィリン類の合成と光殺菌作用の解明

本研究は、PやSbなどの高原子価金属ポルフィリン錯体の軸配位子を修飾することで、両親媒性光増感剤(PS)を合成し、軸配位子の構造と菌体に対する集積性との関係を明らかにし、菌体の光不活性化(PDI)活性の向上を目的としている。最終年度は、大腸菌に対するPDIについて、軸配位アルキルピリジニウム基を導入したP錯体(P型)の最適化を検討した。また、酵母菌を標的としたグルコース型P錯体の合成とその集積性を検討した。さらに、P-ポルフィリン錯体への水素添加によってP-クロリン錯体へ変換した。一方、PSと菌体の細胞膜との相互作用を明らかにするため、モデル系であるリン脂質リポソームに対する吸着挙動を調べた。期間全体として、以下の成果が得られた。(i)非病原性の大腸菌をグラム陰性菌のモデルとし、PDI活性に対するP型錯体へのアルキル基導入効果を調べ、アルキル基の最適化に成功した。また、P型錯体をヒト血清アルブミンと複合化させることで、酵母菌に対するPDI活性が向上した。一方、ヘパリンとの複合化ではPDI活性が大きく抑制され、PDI後に不必要となったPSの除去方法を提案した。(ii)生体組織に干渉されない可視光域に吸収帯を有するPSとして、P-水素化ポルフィリン錯体を提案し、P-ポルフィリン錯体への水素添加による変化方法の確立を目指した。光安定性と長波長可視光照射での一重項酸素生成能を評価した結果、P-イソバクテリオクロリン錯体が有力な発色団であることを見出した。この様に、P錯体の誘導化の簡便性を生かしたPSの最適化によってPDI活性を向上させるとともに、新規発色団への変換方法の提案を行った。薬剤耐性菌の出現で問題となっている抗生物質に代わる新たな感染症治療法としてのPDIについて、P-ポルフィリン錯体類は有力なPSの候補であることを提案できたものと考えられ、意義深い成果が得られた。本研究は、PやSbなどの高原子価金属ポルフィリン錯体の軸配位子を修飾した光増感剤(PS)を合成し、軸配位子の構造と菌体に対する集積性との関係を明らかにし、菌体の光不活性化(PDI)活性の向上をはかることを目的としている。本年度は、(1)グラム陰性菌である大腸菌に対するPDIについて、多価カチオン性錯体をPSとして合成し、菌体へのPSの集積性およびPDI活性に対するN-アルキル基の導入効果の検討、および、(2)真菌である酵母菌に対する多価カチオンPSによるPDIについて、ヒト血清アルブミン(HSA)の添加効果を検討して報告した。さらに、(3)P-ポルフィリン錯体へのmeso位水素添加によるP-フロリン錯体の合成を行った。特に(1)については、P-錯体の軸配位子にアルキルピリジニウム(Apy)基を導入した三価カチオンP-およびSb-錯体、および、ポルフィリン環周囲の一部のフェニル基をApy基とした二価カチオン錯体を合成した。meso位にApy基を有する二価カチオン性のPSでは、暗所毒性が見られた。一方、軸配位子にApy基を有する三価カチオン性のPSでは暗所毒性は見られず、モノカチオン性よりも高いPDI活性を示した。さらに、N-アルキル基の炭素数の増加に伴ってPDI活性が上昇し、ヘプチル基を導入した場合に最も高いPDI活性を示した。PSを添加した大腸菌の蛍光顕微鏡観察から、Apy基に適度な炭素数のアルキル基を有することで、PSの菌体への集積性が向上し、高いPDI活性が得られることが明らかとなった。病原菌も多く知られるグラム陰性菌に対するPSの開発は、抗生物質耐性菌の感染症治療に重要である。(1)で合成した錯体は、グラム陰性菌に対するPDI用薬剤として意義深いと考えられる。本年度は、(1)多価カチオン性PSの合成と大腸菌に対するPDI、および、(2)酵母菌に対するPDIのHSA添加効果の検討、さらに、(3)P-錯体への水素添加によるP-フロリン錯体の合成を目的とした。(1)については、新物質を含めた14種類について合成し、大腸菌に対する親和性およびPDI活性を調べることができ、学会発表および論文発表を行った。また、(2)については、酵母菌に対するPDIのHSA添加効果を、PSの菌体集積性の観点で検討し、論文発表に至った。(3)については、β水素化物の合成法の確立には至らなかったものの、P-ポルフィリン錯体から、meso位水素化物であるP-フロリン錯体への変換方法を確立できた。以上のことから、評価区分2と判断した。本年度は、(1)グラム陰性菌である大腸菌に対するPDIについて、軸配位アルキルピリジニウム基を導入したP錯体(P型)の最適化、および、このPDIに対するヘパリン添加効果を検討した。また、(2)P-ポルフィリン錯体へのmeso位水素添加によるP-

フロリン錯体の合成を行った。さらに、(3)酵母菌に対してPDI活性を示したエチレングリコール型P錯体(E型)のがん細胞株に対する光線力学活性(PDT)への適用を検討した。特に、(1)では、これまでに合成した3-(1-アルキル-4-ピリジル)-1-プロピル基を有する錯体(P1型)よりも高いPDI活性を有するPSの探索を行うため、5-(3-アルキル-1-ピリジル)-3-オキサペンチル基導入錯体(P2型)について、アルキル基導入効果を調べた。P1型錯体では、アルキル鎖の炭素数nの増加とともにPDI活性が向上し、n= 7で最大となった。一方、P2型錯体では、n= 2で最大となり、nの増加とともに減少した。結論として、大腸菌に対するPDI活性は、エチル基を導入したP2型錯体において、最も高いPDI活性を見出した。また、P1型錯体について、ポリアニオン生体高分子であるヘパリンの添加効果を検討した。P1型錯体とともにヘパリンを添加して場合、PDI活性を低く抑えられることを見出した。P1型錯体がヘパリンと複合体を形成することで、PSが菌体内に入り込めなくなった結果、PDI活性を示さなくなったものと考えられる。PDI後に不必要となったPSの生体高分子による除去方法の提案を行え、意義深い成果が得られた。本年度は、(1)大腸菌に対するPDIにおける多価カチオン性P型錯体PSの最適化、および、PSの除去方法の提案と、(2)P-錯体への水素添加によるP-フロリン錯体の合成、および、(3)E型錯体のがん細胞PDT、(4)糖を軸配位子として導入したG型錯体およびアルキルアミン(Aam)を軸配位子として導入したAam型錯体の合成を目的とした。(1)については、新物質5種類について合成し、最も高いPDI活性を有するP型錯体を提案し、学会発表および論文発表を行った。また、PSであるP型錯体の除去方法を提案し、論文発表に至った。(2)については、P-ポルフィリン錯体から、meso位水素化物であるP-フロリン錯体への変換方法により3種類の異性体を合成できた。(3)については、酵母菌に対して高活性なE型錯体のがん細胞に対するPDT活性を医工連携によって確認し、学会発表および論文発表を行った。(4)については、2糖であるラクトース導入G型錯体の合成、および、3-(ヘキシルジメチルアミノ)-1-プロピル基を軸配位子に導入したAam型錯体の合成に成功した。以上のことから、評価区分2と判断した。本研究は、PやSbなどの高原子価金属ポルフィリン錯体の軸配位子を修飾することで、両親媒性光増感剤(PS)を合成し、軸配位子の構造と菌体に対する集積性との関係を明らかにし、菌体の光不活性化(PDI)活性の向上を目的としている。最終年度は、大腸菌に対するPDIについて、軸配位アルキルピリジニウム基を導入したP錯体(P型)の最適化を検討した。また、酵母菌を標的としたグルコース型P錯体の合成とその集積性を検討した。さらに、P-ポルフィリン錯体への水素添加によってP-クロリン錯体へ変換した。一方、PSと菌体の細胞膜との相互作用を明らかにするため、モデル系であるリン脂質リポソームに対する吸着挙動を調べた。期間全体として、以下の成果が得られた。(i)非病原性の大腸菌をグラム陰性菌のモデルとし、PDI活性に対するP型錯体へのアルキル基導入効果を調べ、アルキル基の最適化に成功した。また、P型錯体をヒト血清アルブミンと複合化させることで、酵母菌に対するPDI活性が向上した。一方、ヘパリンとの複合化ではPDI活性が大きく抑制され、PDI後に不必要となったPSの除去方法を提案した。(ii)
重合反応の多重制御-リビング性・立体特異性・モノマー選択性・位置選択性

1.t-BuLiと嵩高いアルミニウムフェノキシドbis(2,6-di-t-butylphenoxy)methylaluminum[MeAl(ODBP)2]の組合せからなる開始剤によるトルエン中低温のメタクリル酸アルキルの重合で高度にヘテロタクチック(ht-)なポリマーが得られることを見出した。ht-ポリメタクリル酸アリルをパラジウム触媒を用いてht-PMMAに変換し、これを熱処理することによって結晶化することを見出した。2.メタクリル酸アリルのht-オリゴマーから超臨界流体クロマトグラフィー(SFC)を用いて単離した均一オリゴマーの立体構造を^<13>CNMRで調べたところ、奇数重合度のほうが高い規則性を有することを見出した。3.1級および3級のメタクリル酸エステルの共重合、アクリル酸エステルとメタクリル酸エステルの共重合をt-BuLi/MeAl(ODBP)_2を用いてトルエン中低温で行ったところ、モノマー選択的リビング共重合が起こってブロック共重合体が一段階で得られることを見出した。4.t-BuLi/MeAl(ODBP)_2を用いて、トルエン中低温でメタクリル酸ビニル、N,N-ジメチルアミノエチル、N,N-ジエチルアミノエチル、N,N-ジイソプロピルアミノエチルの重合を行ったところ、側鎖へのMeAl(ODBP)_2のため、立体規則性はシンジオタクチックに変化し、ことに、N,N-ジイソプロピルアミノエチルエステルの重合ではrr含量90%のポリマーが得られた。5..MeAl(ODBP)_2のアルキル基をエチル基に替えたEtAl(ODBP)_2を用いると、アクリル酸1級エステルのリビング重合が可能なことがわかった。アクリル酸ブチルとメタクリル酸メチルとの共重合ではモノマー選択的な共重合によって、ブロックポリマーが得られた。6.同一分子内に第1級および第3級エステル基を含むジメタクリレートの位置選択的重合で(A)側鎖に反応性基を有する可溶性ポリマーが得られた。1. t-BuLiと嵩高いアルミニウムフェノキシドbis(2,6-di-t-butylphenoxy)methylaluminum[MeAl(ODBP)_2]の組合せからなる開始剤を用いてトルエン中低温で、種々のメタクリル酸アルキルの重合を行った。一級エステルの重合を低温で行うと、高度にヘテロタクチック(ht-)なポリマーが得られることを見出した。なかでも、-95°Cでのメタクリル酸アリルの重合ではへテロタクチック3連子含量96%のポリマーが得られた。2. ht-ポリメタクリル酸アリルをパラジウム触媒存在下でピロリジンと反応させるとポリメタクリル酸に変換できた。これをジアゾメタンでメチル化してht-PMMAを合成した。このポリマーは熱処理によって結晶化し、165°Cに融点を示した。3. t-BuLiとMeAl(ODBP)_2によるメタクリル酸アリルのオリゴマー化反応を行い、得られたオリゴマーから超臨界流体クロマトグラフィー(SFC)を用いて重合度ごとに分別し、均一オリゴマーを単離した。各オリゴマーの立体構造をl3CNMRで調べたところ、その規則性に明瞭な偶奇性が見られ、奇数重合度のほうが高い規則性を有することを見出した。4.第1級アルキルエステルとメタクリル酸トリメチルシリル(TMSMA)などの共重合をt-BuLi/MeAl(ODBP)_2を用いてトルエン中低温で行ったところ、一級エステルがMcAl(ODBP)_2によって優先的に活性化されて重合し、その後TMSMAの重合が引き続き起こって、ブロック共重合体が一段階で得られることを見出した。この方法を第1級アルキルエステル、TMSMAとメタクリル酸t-ブチルの3元共重合に適用したところ、この順に重合が進行してトリブロック共重合体が得られた。第1級アルキルエステルとアクリル酸t-ブチルの共重合を行い、得られた共重合体の^<13>CNMR測定による立体規則性ならびに連鎖の解析、オンラインSEC/NMR測定による組成の分子量依存性の解析から、低温では後者が優先して重合し、立体規則性ブロック共重合体が得られ、高温では分子量分布の狭いランダム共重合体が生成することを明らかにした。

4.t-BuLi/MeAl(ODBP)_2を用いて、トルエン中低温でメタクリル酸ビニル、N,N-ジメチルアミノエチル、N,N-ジエチルアミノエチル、N,N-ジイソプロピルアミノエチルの重合を行ったところ、側鎖へのMeAl(ODBP)_2のため、立体規則性はシンジオタクチックに変化し、ことに、N,N-ジイソプロピルアミノエチルエステルの重合ではrr含量90%のポリマーが得られた。5..MeAl(ODBP)_2のアルキル基をエチル基に替えたEtAl(ODBP)_2を用いると、アクリル酸1級エステルのリビング重合が可能なことがわかった。アクリル酸ブチルとメタクリル酸メチルとの共重合ではモノマー選択的な共重合によって、ブロックポリマーが得られた。6.同一分子内に第1級および第3級エステル基を含むジメタクリレートの位置選択的重合で(A)側鎖に反応性基を有する可溶性ポリマーが得られた。1.メタクリル酸1級エステルのヘテロタクチックリビング重合に有効なt-BuLiと嵩高いアルミニウムフェノキシドbis(2,6-di-t-butylphenoxy)methylaluminum[MeAl(ODBP)_2]の組合せからなる開始剤を用いて、トルエン中低温でメタクリル酸ビニル、N,N-ジメチルアミノエチル、N,N-ジエチルアミノエチル、N,N-ジイソプロピルアミノエチルの重合を行ったところ、側鎖へのMeAl(ODBP)_2のため、立体規則性はシンジオタクチックに変化し、ことに、N,N-ジイソプロピルアミノエチルエステルの重合ではrr含量90%のポリマーが得られた。2.MeAl(ODBP)_2のアルキル基をエチル基に変えたEtAl(ODBP)_2を用いると、アクリル酸1級エステルのリビング重合が可能なことがわたった。3.同一分子内に第1級および第3級エステル基を含むジメタクリレート(A)を合成し、t-BuLi/MeAl(ODBP)_2による重合を行った。重合は第1級エステル基側で位置選択的に起こり、側鎖に反応性基を有する可溶性ポリマーが得られた。また、-78°Cでメタクリル酸メチルとのブロック共重合体を合成し、ついで反応温度を0°Cに上げることによって、(A)ブロックの側鎖2重結合の反応を利用した架橋で星形ポリマーを段階的に合成することに成功した。
口唇口蓋裂初回口唇形成術時の自己臍帯血由来間葉系幹細胞移植による顎裂閉鎖の研究

口唇口蓋裂は胎児診断率が高く,出産時に臍帯由来間葉系幹細胞と臍帯血清を採取して体外で増幅培養し,出生36か月頃に施行される口唇口蓋形成術時に顎裂部に骨細胞に分化させて移植する,という治療の可能性を探る研究を行った。現在の治療法では510歳頃に腸骨海綿骨を移植して良好な顎骨が得られるが,臍帯由来の幹細胞は腸骨海綿骨由来の幹細胞とは性質が異なり,骨に分化しにくい傾向が認められた。骨への分化傾向をもつ臍帯由来幹細胞を免疫不全マウスの顎裂欠損モデルに移植しても,幹細胞移植のないモデルと比較して顎骨形成に差は認められなかった。移植細胞だけではなく移植床周辺環境の検証も重要であると考えられた。自己臍帯由来間葉系幹細胞Mesechymal Stem Cell(MSC)を,ヒト臍帯から効率よく採取,培養することにすでに成功している。さらに,ウシ胎児血清を用いた培地による3継代程度の培養で,NOD-SKIDマウスの顎欠損モデルへの移植に十分な細胞が確保できることが分かった。現在n=23でMSCの培養を進行中であり,実際にこれらの細胞を用いてNOD-SKIDマウスへの移植を展開中である。顎欠損に臍帯由来MSC移植を行う動物実験モデルの作成では,顕微鏡下の操作でマウス上顎骨に直径2mmの骨欠損を作成して移植を行う歯肉粘骨膜形成術Gingivoperiosteoplasty (GPP)モデルが完成している。細胞の多分化能についても検証中であるが、臍帯由来MSCは骨分化能が低いという他施設の報告もあることから,骨に分化させないMSCの移植でも骨に分化させた細胞の移植と同等の骨形成能を有するかについて検証中である。足場材料(キャリア)としては,PLLA,PLGAを用いた検証も行っている。将来的には,胎児診断された唇顎口蓋裂患者自身の臍帯血血清,臍帯MSCを分娩時に採取し,自己血清と自己MSCだけを用いて増幅培養,骨に分化誘導し,生後34カ月で行われる歯肉粘骨膜形成術Gingivoperiosteoplasty (GPP)の際に,本人に戻す形での移植医療につなげたい。自己臍帯由来間葉系幹細胞Mesechymal Stem Cell(MSC)を,ヒト臍帯から効率よく採取し,同時に採取した臍帯血血清を用いた増幅培養でもウシ胎児血清と同等の増幅効果が得られることを確認した(n=29)。臍帯採取から初回分離細胞播種までの時間と関係なく,3継体までの培養で細胞の増殖能に個体差が大きく,活性の低い臍帯由来MSCしか採取できない個体が存在する可能性が示唆された。FACSによる細胞特性解析では,CD73,CD90は陽性であるが,CD105が検出されない傾向があり,骨髄由来MSCとは性質が大きく性質が異なることが予想された。分化誘導培地を用いる分化能の検証でも,脂肪,軟骨への分化傾向は骨髄由来MSCとの差を認めなかったが,骨への分化傾向に乏しいことが確認された。顎欠損に臍帯由来MSC移植を行う動物実験モデルの作成では,顕微鏡下の操作でマウス上顎骨に直径2mmの骨欠損を作成して移植を行う歯肉粘骨膜形成Gingivoperiosteoplasty (GPP)モデルを作成した。MSCそのもの,骨への分化誘導を行ったMSC,MSC移植なし(コントロール)という条件でヌードマウスの同顎欠損モデルへの移植を行ったが,移植細胞の性質による骨欠損部の骨再生に差を認めなかった。細胞の性質,移植法が同じ条件であるはずの群内で骨再生に差が認められることから,手技的な問題で移植条件が一定していない可能性があると考えられた。この結果から骨再生は移植法(移植部周辺環境)によって大きく違うことが示唆され,移植部周辺環境の検証は移植細胞と同程度に重要であると考えられる。現在n=7でMSCの培養を進行中であり,実際にこれらの細胞を用いてNOD-SKIDマウスへの移植を展開中である。

顎欠損に臍帯由来MSC移植を行う動物実験モデルの作成では,顕微鏡下の操作でマウス上顎骨に直径2mmの骨欠損を作成して移植を行う歯肉粘骨膜形成術Gingivoperiosteoplasty (GPP)モデルが完成している。NOD-SKIDマウスを用いてこのような移植を行って取得される標本に対して免疫組織学的,遺伝組織学的に検証することで,移植したヒト由来細胞が骨に分化してマウス上顎に生着して骨再生に貢献するのか,移植部位には生着しないが骨誘導因子を放出することで骨再生に貢献するのか,といった解析が可能になる。移植に用いる足場材料(キャリア)と手技の開発に関しては,PLLA,PLGAを用いて検証を行う。将来的には,胎児診断された唇顎口蓋裂患者自身の臍帯血血清,臍帯MSCを分娩時に採取し,自己血清と自己MSCだけを用いて増幅培養,骨に分化誘導し,生後34カ月で行われる歯肉粘骨膜形成術Gingivoperiosteoplasty (GPP)の際に,本人に戻す形での移植医療につなげたい。移植実験のサイクルが最短で2か月と長く、前回移植実験の結果をフィードバックした移植を次に行いたいため、時間がかかっている。移植実験に必要なMSCを常時入手,培養するシステム構築が完了している。あとはこの研究の後半部分である移植実験と,取得標本の解析を遂行していくだけである。当施設の附属病院にはCell Processing Center(CPC)が併設されており,実際の臨床応用に向けてCPC内でMSC培養を行い,臨床応用を行う上での問題点を収集する作業を同時に行っていくのがよいのではないかと考えられる。これらの問題点を,並列して行う基礎研究で解決していくような研究スタイルが理想である。移植実験が中心になるため,実験動物と,取得標本の観察のための備品や試薬の購入が中心になる予定である。
c-kitレセプターチロシンキナーゼの恒常的活性化と腫瘍原性に関する研究

c-kitレセプターチロシンキナーゼ(KIT)は、kinasc領域とjuxtamembranc領域の変異により、恒常的に活性化される。c-kit変異による二量体形成、恒常的活性化ならびに増殖シグナル伝達における細胞外領域、細胞膜貫通領域、細胞内チロシンキナーゼ領域の役割を検討するため、(a)juxtamembrane領域に変異を有するc-kit変異(KIT-G559)、kinase領域に変異を有するckit変異(KIT-V814)ならびに野生型c-kit(KIT-WT)の細胞外領域領域を欠失したDel-KITミュータント、(b)細胞外領域ならびに細胞膜貫通領域を欠失させ、細胞内領域とsrc N-terminal myristylation signalを結合させたsrc-KITキメラをそれぞれ作製し、IL-3依存性細胞株へ導入した。導入細胞において、細胞外を欠失させたDel-KIT-G559、Del-KIT一V814とも恒常的なチロシンリン酸化が認められIL-3非依存性増殖を促したが、Del-KIT-WTではほとんどリン酸化が認められず増殖刺激能も認められなかった。一方、src-KIT-G559、src-KIT-V814、src-KIT一WTでは、すべてのキメラともに恒常的リン酸化が認められたが、IL-3非依存性増殖はsrc-KIT-G559とsrc-KIT-V814のみに認められた。さらに、細胞外領域と細胞膜貫通領域を欠失したDel-KIT-G559、Del-KIT-V814、src-KIT-G559、src-KIT-V814は、細胞内領域で野生型KITと会合し共沈した。以上の結果より変異による恒常的活性化や下流へのシグナル伝達には、細胞外領域や細胞膜貫通領域は必須ではないと考えられた。
細胞周期調節分子の分解制御に関する研究-マウスSCF複合体の遺伝子クローニングと解析-

細胞内に存在する分子の分解制御は、多方面にわたる医学生物学領域の蛋白分子の機能に重要な働きを果たしている。今まで、いくつかの蛋白分解機構が報告されているが、特に、酵母におけるユビキチン依存性プロテアソーム介在性蛋白分解に関する研究により、Skp1、Cul-1、F-box蛋白複合体(SCF複合体)と言われるユビキチン化を実行する酵素複合体は、細胞周期をはじめ、さまざまな細胞機能に関与する分子の発現調節(分解調節)を行っていることが明らかになった。この構成成分のなかで、F-box蛋白が基質分子をユビキチン化させるための基質特異性を担っていることが推定されている。我々は、酵母におけるアナロジーを利用して、マウスにおけるSkp1、Cul-1及び複数のF-box蛋白を同定した。特に、我々がFWD1/β-TrCP(1つのF boxと7つのWD40リピートを有する)として同定したF-box蛋白は、免疫学上重要であるNF-κBの抑制分子であるIκBαと、細胞接着もしくは癌の分野で注目されるβ-cateninのユビキチン化、及び分解に関与していることが判明した。IκBαとβ-cateninの発現量にかかわるアミノ酸配列に存在するセリン/スレオニンをリン酸化する上流のシグナル及びキナーゼは異なるが、そのモチーフ自体は非常に似ており、リン酸化が起こった場合、FWD1/β-TrCPは、IκBαとβ-cateninのどちらにも結合し、ユビキチン化を遂行する。つまり、SCF^<FWD1/β-TrCP>は、IκBαとβ-cateninに分解されるべきシグナルが入った場合に、それらの分子の分解を実行する中心的なシステムであることがわかった。この結果は、酵母以外の真核細胞におけるSCF複合体によるユビキチン化介在性分解の初めての報告となる。