hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ES細胞由来始原生殖細胞の増殖・分化機構の解明

平成29年度は昨年度から引き続き、ケミカルライブラリースクリーニングで見つかった化合物を用いて培養系の最適化を行い、また、新たな培養条件で増殖したPGCLCの性状解析をおこなった。その結果、新たな条件で培養したPGCLCは性決定以前の移動期PGCに相当する性質を有することが、移植実験、遺伝子発現解析等により明らかとなった。さらに、培養中のPGCLCを用いたライブセルイメージングを行い、細胞移動に関する実験系を確立しつつある。また、研究代表者が開発した培養系を用いて、試験管内で分化誘導実験を行ったところ、BMP2とretinoic acidが雌性生殖細胞への分化に必要であることが明らかとなった。PGCLCの増殖培養系のさらなる改善を見込んでいる。また、本研究計画で確立した培養系を用いて、試験管内で減数分裂を誘導することが可能な実験系を確立した。始原生殖細胞(primordial germ cell; PGC)は精子および卵子の起源となる細胞であるが、試験管内での継続的な培養系が確立されておらず、研究を進める上で大きな障壁となっていた。これまで研究代表者らはES細胞やiPS細胞から試験管内において産仔へ発生可能な機能的なPGC様細胞(PGC-like cell; PGCLC)を分化誘導することに成功してきている。本研究で研究代表者はPGCLCを用いたhigh-throughputケミカルライブラリースクリーニングを実施し、forskolinとPDE4 inhibitorを組み合わせることにより、試験管内においてPGCLCを一定期間増殖させることが可能な培養系を構築することに成功した。試験管内で増殖したPGCLCは新生仔マウスの精巣へ移植すると精子へ分化し、また、顕微授精実験により正常な産仔へ発生することを明らかにした。非常に興味深いことに、試験管内で増殖したPGCLCの遺伝子発現パターンは性決定前のPGCの性質を示し、一方、ゲノムのメチル化レベルは性決定後の生殖細胞と同程度の低メチル化レベルを示した。これらの結果は、PGCの性決定には生殖巣体細胞などからのシグナルが必要であるが、ゲノムの脱メチル化は培養下で増殖中に起こることが示された。この培養系を応用して生殖細胞の性決定機構を解析したところ、BMP2とretinoic acidが雌性生殖細胞の分化に必要であることが明らかとなった。本研究により確立されたPGCLCの培養系は、これまで解析が困難であった生殖細胞の性決定機構や減数分裂機構に関わる研究、また、他の種への応用など幅広い展開が期待できる。PGCLCの長期培養系の確立において問題となり得るEG細胞様の細胞の出現を、PGCの運命決定に必要な転写因子をPGCLCに過剰発現させることにより回避を試みる。問題点を克服できた後、PGCLCの長期培養系の確立を引き続き試みる。化合物およびサイトカインを組み合わせることによりPGCLCの長期培養系の確立を試みる。また、培養したPGCLCの機能解析を移植実験により行い、機能的な配偶子への分化能を検討する。
下肢障害者のための木材を主素材とした車いすの開発

(1)主に介護を必要とする高齢者や自宅療養者を対象にした実用化モデルを、開発に参画する生産者と共に設計試作を行う。身体を保持し、操作をする座位保持部、操作部を成形合板によって構成し、移動の機能と性能を保証する部分には金属等工業材で構成し、素材の選択を部位別に明確にした。この結果、移動の性能、信頼性が向上し、部品の生産、組立方法に合理性が加わった。昨年度と同様に老人保健施設で高齢者による試乗テストを行った。その結果、寸法的に若干の改良点が認められたが、おおむね実用に値する事が判明した。(2)開発に参画する木材成形メーカーの製作による、ユリア樹脂接着剤を用いた実用レベルの木材成形試験片の材料強度試験を従来と同様の試験項目で行った。その結果、過去2年のデータより強度は向上し、ばらつきも減り、信頼性が向上した。有限要素法による木材成形フレームの形状と強度の関係解析を、解析容量の点から東北大学機械知能学科所有の「構造解析用汎用プログラムMARC」を用いて行った。着座動作を基に3段階の動的負荷を与えた。その結果、木材成形フレームは顕著な異方性をもちながらも、最大の強度を持つ繊維方向に主たる応力がかかり安全領域にある事が判明し、木材成形フレームの形状、寸法は理に適っている事を証明した。(3)地域で個別生産が可能な生産手法に結び付ける為に、車いすのオーダーメイドの考えを、木材成形部品、金属部品の大、中、小の3レベルの寸法変化で応える事に置いた。地域はそれを入手し、地域の作り手が、地域の個々の障害者に組立、応える手法を提示した。(4)法的な認可や、長期的な使用による人間の使用上の特質、環境機能上の評価は今後の課題であるが、目的とした車いすの木製化という当面の研究目標は達成された。前年度は,構造用セラミックスにおける破壊強度と潜在欠陥との特異的関係を検討するため,4種類のセラミックスに関して実験的検討を行った.このうち窒化ケイ素に関しては負荷過程でアコ-スティック・エミッション(AE)を測定した結果,最終破壊以前にも比較的大きなAEが発生することが明らかになった.この観察結果から新たに欠陥境界層の概念を提案した.つまり,通常の欠陥は幾何学的に理想的な形状として評価できず,その周囲に微視組織に依存した不規則領域を有しているが,この領域をある特定の大きさの欠陥周囲の脆弱層として想定し,その層が最終破壊以前に分離するという仮説である.この仮説に基づいて潜在欠陥と強度との特異的な関係について考察し,さらにモンテカルロ・シミュレ-ションによって欠陥と強度との関係を推定した結果,実験結果におけるばらつきも含めて良い対応が認められた.しかし,このような欠陥境界層は物理的なイメ-ジとしては抽象的であり必ずしも捉えにくいものであることがわかった.そこで,本年度では物理的イメ-ジがより明確なモデルとして,初期欠陥(潜在欠陥や切欠き)の前方における結晶が負荷の増大に伴い破壊されていくことによりき裂成長が起きるとするモデルを提案した.このモデルでは,欠陥の前方の応力場から計算される結晶粒当りの平均のひずみエネルギ-が単結晶の表面実効エネルギ-を超えた時点でその結晶粒が分離すると仮定した.このようなモデル解析を適用することによって,強度の欠陥寸法に対する依存性および破壊じん性値の切欠きの曲率半径に対する依存性を説明できた.特に,き裂先端の結晶粒径を確率変数として変化させた場合のランダム系に対するシミュレ-ションも行った.これによって,き裂が短い場合にはき裂先端の結晶粒径の変化の影響を受けてばらつきが大きくなるが,き裂が長くなるとその影響は小さくなりばらつきもなくなることが判明した.(1)主に介護を必要とする高齢者や自宅療養者を対象にした実用化モデルを、開発に参画する生産者と共に設計試作を行う。

(4)法的な認可や、長期的な使用による人間の使用上の特質、環境機能上の評価は今後の課題であるが、目的とした車いすの木製化という当面の研究目標は達成された。本年度は,エンジニアリング・セラミックスにおける破壊強度と潜在欠陥との特異的関係を検討するため,窒化ケイ素,ジルコニアおよび純度の異なる2種類のアルミナに対する既存デ-タの再整理を行うとともに,窒化ケイ素を用いた3点曲げ試験を追加実施した.その結果,本研究課題で提起した問題点,つまり破壊起点となる潜在欠陥をき裂とみなして破壊時の応力から計算される応力拡大係数は大きなき裂から求めた破壊じん性値よりも小さくなることが再確認された.このうち,特に窒化ケイ素に関しては,アコ-スティック・エミッション(AE)を試験過程でモニタ-した.AE測定の結果,最終破壊時に最大のAEが観察されるが,さらに最終破壊以前にも比較的大きなAEが発生することが今回明らかになった.この観察結果から,新たに欠陥境界層の概念を提案した.つまり,通常の欠陥は幾何学的に理想的な形状として評価できず,その周囲に微視組織に依存した不規則領域を有しているが,この領域をある特定の大きさの欠陥周囲の脆弱層として想定し,その層が最終破壊以前に分離するという仮説である.この仮説に基づいて潜在欠陥と強度との特異的な関係について考察し,さらにモンテカルロ・シミュレ-ションによって欠陥と強度との関係を推定した結果,実験結果におけるばらつきも含めて良い対応が認められた.なお,同様のシミュレ-ションを他の材料についても行った結果,強度の低い材料ほど,あるいは材料組織が粗な材料ほど欠陥境界層が大きくなることが示唆された.また,各種セラミックスの破面において観察された破壊起点の欠陥の写真をもとに,本年度購入したパソコン周辺機器およびパソコン用ソフトを用いて,潜在欠陥の画像処理を行った.この場合,欠陥の種類,つまり気孔型や粗大結晶粒などに応じて,異なる画像の処理法を適用することが画像を正確に把握する上で必要であることがわかった.セラミックスの強度評価上の問題点を説明するモデルとしては,前年度検討した初期の欠陥寸法に材料に固有な一定寸法を加えるモデルの他に,いくつか提案されている。特にこの固有寸法については,欠陥の境界層に想定したバルク部分よりも脆弱な領域の大きさとして取り扱った。このような手法は工学的な強度評価には数学的取扱いが比較的簡便で有用ではあるが,物理的なイメ-ジとしては抽象的であり必ずしも捉えにくいものであることがわかった。そこで,物理的イメ-ジがより明確なモデルとして,初期欠陥(潜在欠陥や吹欠き)の前方における結晶が負荷の増大に伴い破壊されていくことによりき裂成長が起きるとするモデルを提案した。このモデルでは,欠陥の前方の応力場から計算される結晶粒当りの平均のひずみエネルギ-が単結晶の表面実効エネルギ-を超えた時点でその結晶粒が分離すると仮定した。このようなモデル解析を適用することによって,強度の欠陥寸法に対する依存性および破壊じん性値の切欠きの曲率半径に対する依存性を説明した。まず,強度の欠陥寸法依存性に関しては,潜在欠陥と強度の関係について結晶破壊モデルを適用したシミュレ-ションの結果と前年度収集した種々の材料の実験結果とを比較した。その結果,本モデルに基づいてシミュレ-ション結果は実験結果の特異な挙動をよく表しうることがわかった。さらに,き裂先端の結晶粒径を確率変数として変化させた場合のランダム系に対するシミュレ-ションも行った。
NADH・FAD自家蛍光観察による術中心筋代謝機能イメージングシステムの開発

心臓手術において心臓表面の酸素分圧の変化を観察することは重要である。心筋細胞内のFADとNADHは自家蛍光特性を有する。酸素分圧の増加により、FAD濃度は増加するが、NADH濃度は減少する。我々は心筋代謝機能の評価のためにFAD/NADHの比率を可視化した。2波長励起光源と蛍光観察システムを用いて実験動物の心臓表面の観測を行い、システムの有効性を確認した。本年度は二波長励起によるNADH・FAD自家蛍光を撮像するシステムの試作と心筋代謝の基礎的評価を行った。NADHとともにFADの自家蛍光を併せてイメージングし、両者の蛍光強度比(FAD/NADH)より代謝機能イメージングを行うための基本システムを試作した。システムは、二波長励起光源、二波長蛍光撮像部、制御部、モニタ部、演算解析部より構成される。二波長励起光源にはNADH励起用の紫外線(375nm)とFAD励起用の青色(435nm)を用いる。紫外線LEDと青色LEDをいずれもできるだけ均一な照明になるように分散して配置したドーナツ状の照明部を設計し、基本特性を検討した。NADHとFADの二つの自家蛍光を蛍光撮像するため、可変波長フィルタを用いて二波長蛍光に対応できるCCD撮像部を試作した。NADH自家蛍光(460nm)とFAD自家蛍光(530nm)を観測できるように可変波長フィルタをコントロールすることにより、これらの二波長蛍光の撮像ができることを、基礎実験により確認した。この際、可変波長フィルタは通過帯域幅(5nm)が狭く選択性に優れている利点はあるため、選択的な蛍光観察が実現できた。しかしながら、高度な選択性によって通過光量全体の減少があった。この減少を補充するために光増幅装置の導入を行い、蛍光撮像を可能とした。また、自家蛍光強度比(FAD/NADH)演算を高画質で実施するためには、励起光の増強の必要性が確認できた。動物実験により、試作システムの性能向上のための基礎実験および臨床計測に向けたシステムのinvivo評価のための実験法について検討した。(1)各種還流液による蛍光感度の計測評価:NADHおよびFAD試薬の各種濃度溶液を作成して、試作システムを用いた蛍光観測を行った。試薬キットレベルでの計測で、十分な蛍光観察が行えることが判明したが、血液還流を想定した場合、蛍光吸収の可能性があるため、測定感度の増感の必要性がわかった。(2)ラット摘出還流心モデルによる試作システムの基礎的評価:晶質液灌流モデルを試作して、まずNADH蛍光観察を行い、晶質液灌流モデル心での蛍光観測が可能であることを確認した。還流モデルでは、必ずしも健常心モデルとはならず、低酸素還流状態の蛍光があることが判明した。そのため、健常心モデルを想定したinvivoでの動物実験の必要性が判明した。それによって、NADH蛍光の単一イメージングに比してNADH・FAD蛍光の二波長励起蛍光イメージング法の効果検証、確認する必要性がわかった。(3)試作システムの性能評価のための実験動物の検討:新生児、小児の心サイズを想定した実験動物モデルについて検討した。心臓サイズ、および冠循環の状況より、小型犬での実験が適していることが判明した。ラット心、ラビット心ではサイズが小さく、特に心臓表面曲率半径が小さいため、励起照射の状況が臨床計測での状況と大きく異なることが判明した。以上の結果とともに、開発システムの術中計測への応用に際して、観察視野の確保、術者とシステムの配置、観察所要時間等の実際面での検討も合わせて行った。病態モデル実験動物による試作システムの性能評価を実施して、臨床計測に向けたシステムの最終評価を行い、実用化に向けて臨床用システムのプロトタイプ開発を目指した。まず、実験用小動物による試作システムの総合評価を実施した。臨床計測を視野に入れて、まずラット開胸心モデルを対象として血液還流時の蛍光観察を行った。NADH蛍光の単一イメージングおよびFAD蛍光の単一イメージングとNADH・FAD蛍光の二波長励起による蛍光比(NADH/FAD)イメージングを併せて行い、総合的に性能を確認した。FAD蛍光およびNADH蛍光の個別観測は血液還流においても可能であったが、NADH・FAD蛍光の二波長励起蛍光イメージングにおいてより明確な画像が観測できることを確認した。ついで、病態モデル心における低酸素状態を想定して、呼吸停止時の蛍光観測を経時的に行った。その結果、時間経過とともにNADH・FAD比イメージの増強がみられ、また低酸素状態の部位が不均一に分布している状況が確認できた。臨床計測へのアプローチの検討のため、小児心サイズを想定した大型実験動物の心筋表面の2波長励起について検討した。蛍光観察は可能であるが、より鮮明なイメージを得るためには、励起光の増強、特に紫外線光の増強が必要であることが分かった。特に、高度照明の術野での計測においては相対的な測定感度の増加のために計測部位に対する遮光が重要であり、それにより、実用化が図れることがうかがわれた。
フォークト・小柳・原田病の病因に関する研究

本研究はフォークト・小柳・原田病の病因と発症機序について、臨床および実験病理学的に明らかにし、本症の予防および治療法の確立に寄与することを目的としたものである。1)平成3年度フォークト・小柳・原田病患者の眼球を病理学的に検討した。夕焼け状眼底になっている状態でも脈絡膜にはリンパ球の浸潤があり、炎症は持続していることを明らかにした。残っている脈絡膜のメラノサイトにはHLAクラスII抗原が発現し、メラノサイトが炎症の標的になっていた。フォークト・小柳・原田病患者では脳波に異常があることを明らかにした。視細胞間結合蛋白(IRBP)を構成するペプタイドの一部(R4)をラット足蹠に注射して、実験的自己免疫ぶどう膜炎モデルを作成した。2)平成4年度フォークト・小柳・原田病患者皮膚白斑を免疫病理学的に検討した。皮膚ではメラノサイトが減少し、血管の周囲にリンパ球が浸潤していた。その多くはTリンパ球で、CD4陽性細胞とCD8陽性細胞の比は約3:1であった。皮膚の白斑でも活性化Tリンパ球が病変の形成に重要な役割を演じていた。実験的自己免疫ぶどう膜炎では、角膜内皮細胞の表面に細胞接着分子(Intercellular Adhesion Molecule-1:ICAM-1)が発現していた。3)平成5年度実験的に眼内炎症を繰り返し起こさせることによって脈絡膜新生血管が発生した。そこで、臨床的および実験病学的に眼内血管新生の機序について検討した。ベーチェット病患者の23例25眼の摘出眼球を病理学的に検討し、眼内血管新生が鋸状縁から起こり易いことを明らかにした。フォークト・小柳・原田病の臨床所見および病理学的特徴を総説にまとめた。本研究はフォ-クト・小柳・原田病の病因と発症機序について、免疫組織化学などの技術を駆使して病理学的に検討し、本症の予防および治療法の確立に寄与することを目的としたものである。フォ-クト・小柳・原田病発症後数年して悪性腫瘍のために死亡した患者の眼球を剖検時に摘出し、病理組織学的および免疫組織学的に検討した。臨床的には夕焼け状眼底を示し、ぶどう膜の炎症は治っているかにみえたが、病理組織学的にはぶどう膜にリンパ球の浸潤を伴った炎症が残存していた。ぶどう膜のメラノサイトは著しくその数が減少していた。残っているメラノサイトにはHLAクラフII抗原の発現が免疫組織化学的手法によって実証された。このことは、フォ-クト・小柳・原田病ではぶどう膜メラノサイトが炎症の標的になっていることを示すものであり、本症における夕焼け状眼底の発生機序を解明する上で非常に重要な知見である。また、フォ-クト・小柳・原田病患者の皮膚白斑を生検して、免疫組織化学的に検討し、ぶどう膜とほぼ類似の炎症反応がおこっていることを証明した。フォ-クト・小柳・原田病患者では、急性期および再発期のいずれにおいても、多くの症例で脳波に異常が検出された。これは本症のぶどう膜炎症状と中枢神経症状との関連を考慮する上で重要な所見である。実験的慢性ぶどう膜炎の研究では、実験動物としてラットを使用して、視細胞間結合蛋白(IRPB)を構成するペプタイドの一部(R4)をぶどう膜炎誘発物質として用い、確実にぶどう膜炎をおこすことができた。今後、この実験ぶどう膜炎において、ぶどう膜メラノサイトにHLAーDR抗原の発現があるのか否か、またこのぶどう膜炎が慢性的に持続した場合に肉芽腫性炎症を形成するか否かを検討する予定である。

本研究はフォークト・小柳・原田病の病因と発症機序について、免疫組織化学などの技術を駆使して、臨床および実験病理学的に明かにし、本症の予防および治療法の確立に寄与することを目的としたものである。1)フォークト・小柳・原田病患者の皮膚白斑部を病理学的および免疫組織化学的に検討し、下記の点を明かにした。皮膚白斑部では、上皮ではメラニン顆粒が減少し、皮下組織の汗腺、毛包、血管の周囲にリンパ球が浸潤していた。リンバ球の多くは抗T-Cell抗体陽性で、CD4陽性細胞とCD8陽性細胞の比は約3:1であった。血管内皮細胞、毛包、上皮に浸潤したいずれのリンパ球もクラスII(HLA-DR)抗原陽性であった。したがって、皮膚白斑部に浸潤したリンパ球は活性化されたhleper/inducer T-Cellである。これはフォークト・小柳・原田病患者のぶどう膜に浸潤したリンパ球サブセットとほぼ同様の結果を示すものである。皮膚の白斑でも活性化Tリンパ球がその病変形成に重要な役割を演じているとことがわかった。2)視細胞間結合蛋白(IRBP)を構成するペプタイドの一部(R4)をラット足蹠に注射して、実験的自己免疫ぶどう膜炎モデルを作成した。このモデルを用いて、実験的ぶどう膜炎の免疫組織化学的検討を行い、下記の点を明かにした。実験的ぶどう膜炎では、虹彩、毛様体、前房に炎症細胞浸潤がおこり、角膜内皮細胞には角膜後面沈着物が付着していた。沈着物が付着していた角膜内皮細胞表面には細胞間接着分子(Intercellular Adhesion Molecule 1:ICAM 1)が発現していた。ICAM 1の発現は炎症11日目からみられ、14日目がもっとも著明で、以後徐々に減少し、18日目にはほぼ完全に消失した。この結果から、ぶどう膜炎で高頻度に観察される角膜後面沈着物は角膜内皮細胞に発現するICAM 1によって調節されていることがわかった。本研究はフォークト・小柳・原田病の病因と発症機序について、臨床および実験病理学的に明かにし、本症の予防および治療法の確立に寄与することを目的としたものである。1)フォークト・小柳・原田病は再燃を繰り返した場合には、網膜脈絡膜の著しい変性や網膜下の血管新生を伴った増殖組織を形成して、視機能が著しく低下する。すなわち、炎症の再燃の有無が本症の視力予後に重大な関係をもっている。そこで、実験的に眼内炎症を繰り返し起こさせるために視細胞間結合蛋白(IRBP)を構成するペプタイドの一部(R4)をラット足蹠に注射して、実験的自己免疫ぶどう膜炎モデルを作成した。【.encircled1.】実験的に眼内炎を繰り返すことによって脈絡膜新生血管が発生した。眼内炎症の再燃によって眼内血管新生を起こすことができたので、これは今後本症の後期合併症の研究に有益な実験動物モデルになりうる。【.encircled2.】フォークト・小柳・原田病の臨床所見および病理学的特徴について総説にまとめた。2)眼球内では、角膜、前房、硝子体、網膜下などは生理的な状態で無血管である。眼内炎症では、これらの無血管組織に新生血管が形成されて、眼組織の構築が破壊され、重篤な視機能障害を起こす。そこで、臨床的および実験病学的に眼内血管新生の機序について検討した。【.encircled1.】ベーチェット病患者の23例25眼の摘出眼球を病理学的に検討し、眼内血管新生が鋸状縁から起こり易いことを明らかにした。
兵庫県家島町方言アクセントの動態に関する社会言語学的調査研究

研究課題は「家島町方言アクセント」であるが、今年度の研究では特に坊勢島若年層のアクセントについて調査研究を行なった。当初の計画では、各年代にわたって、アクセントの年代差について調査・研究する予定であったが、準備調査の結果、若年層におけるアクセント変化は予想以上に大きかった。中年層・高年層のアクセントが一般的な京阪式アクセントとほぼ同じものであることは確認できたので、今年度の研究では、家島町若年層(20歳前後)におけるアクセント変化の動向を詳細に記述することに重点を置くこととした。家島町坊勢方言若年層のアクセントについて、研究代表者は平成5年3月に一部報告を行なっているが、今年度の研究では、さらに調査語彙を増やし、16拍体言・25拍用言の約7200語について、アクセントの音声学的記述を行なった。若年層話者数名を対象に調査を行なったが、そのうちの1名の資料『兵庫県家島町坊勢方言若年層のアクセント資料』(上記7200語を収録)を研究成果刊行書として作成した。若年層アクセントの記述を行なった結果、現時点においては、次のような点が指摘される。1.同様の変化は岡山県真鍋島方言でも報告があるが、関連性については今のところ不明である。2.中・高年層との各アクセント型所属語彙の構成には大きな異同は無いが、音調が大きく変わりつつある。3.具体的な音調変化とは「下がり目の後退化」と「特殊拍・母音拍の機能低下=アクセント単位のシラビーム化」が指摘される。今後継続して研究すべき課題としては、「新しい音調の出現年層の究明」、「小中学生の状況」、「新音調の音韻論的解釈」などがあげられる。
コンジェニック・マウス味細胞を用いた味覚刺激変換機構の研究

マウスは系統によって味応答特性が異なることが知られている。例えばC57BL/6の塩応答は強いアミロライド感受性を示すが、BALB/cは弱い感受性しか示さない。この2系統およびそれらのコンジェニック系マウスの味覚応答特性の違いを味細胞レベルで明らかにすることを試みた。この際、味細胞を味蕾から完全に単離してしまうのではなく、できるだけ生体内の環境に近い条件で味細胞の活動を記録する方法が必須であった。これは舌皮下に2mg/mlエラステ-スを注入することによって得られた味蕾を含む剥離上皮標本から、吸引によって小上皮片を含む味蕾を採取することにより達成された。結果を以下に記す。1.塩応答発生機構には、アミロライド感受性および非感受性のコンポーネントが含まれている。2.塩応答は、(1)両コンポーネントが単一の味細胞で同時に発現する場合(タイプ1)、(2)アミロライド感受性コンポーネントだけが発現する場合(タイプ2)および(3)アミロライド非感受性コンポーネントだけを発現する場合(タイプ3)の3タイプに分けられた。3.タイプ1と2は、C57BL/6とBALB/cの両系統で観察されたが、タイプ3は後者のみに観察された。BALB/cマウスは、C57BL/6と比較して、より高い食塩に対する忌避濃度閾値を示すので、アミロライド非感受性変換経路はアミロライド感受性経路とは異なる味覚情報の伝搬経路に関与しているのかも知れない。甘味応答に関しては、D-フェニールアラニン感受性の味細胞が非常に少ないことがわかった。少数の反応した味細胞では、5'-GMPやサッカリンによって増強作用も観察された。結果を以下に記す。例えば、C57BL/6の塩応答は強いアミロライド感受性を示すが、BALB/cは弱い感受性しか示さない。このほか、甘味や苦味に対しても系統差の存在することが知られている。本年度は、この2系統のマウスの味覚応答特性の違いを味細胞レベルで明らかにするために、味細胞の基本的な膜特性を比較することを試みた。これは、舌皮下に2mg/mlエラステ-スを注入することによって得られた味蕾を含む剥離上皮標本から、吸引によって小上皮片を含む味蕾を採取することにより達成された。結果を以下に記す。(1)剥離上皮内の味蕾ではシナプス構造がよく保存されていた。(2)ルシファー・イエロ-を充填したパッチ電極を用いて味蕾内の細胞からホールセル記録を行い、味細胞の形態的特徴と細胞膜の電気的特性を同時に観察することができた。(3)味蕾にはその全長にわたって突起を伸ばす細胞と味蕾の底部に位置する球形の細胞のいずれかが染め出された。前者の中に味細胞が含まれており、後者は基底細胞であろう。(4)電気刺激に対し基底細胞は強い外向きのK^+電流を示したが、味細胞は一過性のTTX感受性の内向き電流をも生じた。以上の性質は2系統で共通であった。(5)アミロライドに対する感受性は両系統で認められたが、BALB/cでは約半数の味細胞は非感受性であった。したがって、両系統のアミロライド感受性の相違はアミロライド感受性細胞と非感受性細胞との比率の相違によるのであろう。前年度において確立した剥離上皮標本の非単離味細胞を用いて、引き続きマウスの塩応答発生機構の系統差による比較を行った。その結果以下のことがわかった。1.アミロライド

感受性に関しては低感受系のBALB/cマウスと等価のコンジェニック・マウスの味細胞においても、約50%の確率でアミロライド感受性が観察された。このことは、前年度の結果から示唆された両系統のアミロライド低感受性がアミロライド感受性味細胞の低出現率に起因するとの仮説を支持する。2.塩応答発生機構には、アミロライド感受性および非感受性のコンポーネントが含まれている。3.塩応答は、(a)両コンポーネントが単一の味細胞で同時に発現する場合(タイプ1)、(b)アミロライド感受性コンポーネントだけが発現する場合(タイプ2)および(c)アミロライド非感受性コンポーネントだけを発現する場合(タイプ3)の3タイプに分けられた。4.タイプ1と2は、C57BL/6とBALB/cの両系統で観察されたが、タイプ3は後者のみに観察された。5.アミロライド非感受性コンポーネントは更に、カリウム・チャネルの遮断によるものとカチオン・チャネルの開口によるものと少なくとも2つのコンポーネントに分けられる。カリウム・チャネルの遮断による脱分極は、甘味やうま味応答の発生機構として提唱されてきた。アミロライド低感受性であるBALB/cマウスは、高感受性のC57BL/6と比較して、より高い食塩に対する忌避濃度閾値を示すことが行動実験で知られている。それゆえに、この味刺激変換経路はアミロライド感受性の経路とは異なる味覚情報の伝搬経路を関与しているのかも知れない。甘味応答に関しては、D-フェニールアラニン感受性の味細胞が非常に少なかった。このような味細胞では、5′-GMPやサッカリンによる増強作用も観察されなかった。
インド・イスラーム表象の観光化と芸術化：テーマパークとモダンアートを中心に

平成30年度は、前年度までに収集した世界各地のテーマパークにおける「イスラーム風アトラクション」「宗教ナショナリズム的アトラクション」「愛国アトラクション」等に関するデータの整理と分析を継続するとともに、インターネットや文献資料を通じて最新の関連情報を収集した。また、スペイン王国、トルコ共和国、ドイツ連邦共和国、チェコ共和国、ハンガリー、オーストリア共和国、インドネシア共和国、マレーシア、シンガポール共和国において、宗教・民族・国家・歴史・自文化ならびに異文化がどのように表象されているかに関する現地調査・資料収集をおこなった。これらの国々におけるテーマパーク・遊園地等に関して、全体的なコンセプトや個々のアトラクションに、ナショナリズム的要素や宗教的色彩が顕著に見られたのはトルコとインドネシアのみであった。しかし、どの国のどの遊園施設においても、特定の国や地域の特徴や文化をステレオタイプ化して表象する際には、宗教や民族が前景化することも珍しくないことが分かった。とはいえ、本研究課題の中心をなすインドのテーマパークでは、排他的宗教民族ナショナリズムの思想が複数の事例において暴力的に表明されている。今回の通文化比較を通じて、現代インドのテーマパークの特殊性だけでなく、娯楽・観光のなかで政治性が表面化する契機や場面に注目することの重要性を再認識するに至った。他方、現代インドのテーマパーク研究において、日本国内の身近な事例について見聞を深めることは、研究成果の「文化の翻訳」に大きな意味をもつ。そこで、群馬県内の遊園地を対象として現地調査・資料収集をおこなった。この調査研究の成果は、高崎経済大学地域科学研究所発行のブックレットを通じて一般に公開した。テーマパークにおける「イスラーム風アトラクション」「宗教ナショナリズム的アトラクション」「愛国アトラクション」に関する調査研究は、ほぼ予定通りに進めることができた。また、国内の身近な事例について見聞を深めたことで、「文化の翻訳」に有益な語彙や情報の収集が可能となった。そして、その成果は高崎経済大学地域科学研究所発行のブックレットに結実した。この執筆作業には、予想外に多くの時間を費やすこととなったため、「イスラーム的モダンアート」に関する現地調査と事例分析が、計画通りに進まなかった。平成31年度は、前年度に計画していた「イスラーム的モダンアート」に関する現地調査と事例分析をおこなう。テーマパーク調査に関しては、必要に応じて補足調査を実施するにとどめ、これまでに収集したデータの整理・分析に専念する。その際、国や地域の経済や産業の状況、文化や民族あるいは宗教による特徴や傾向なども考慮しつつ比較することができるデータベースを完成させる。この作業を通じて、インドの事例の特殊性を検討する。こうして整理・分析できたデータに基づき研究発表をおこなうほか、参考文献の読解を通じて解釈枠組みの精緻化を図り、論文や書籍という形での研究成果の社会還元に取り組む。平成27年度は、研究実施計画にしたがって、世界各地のテーマパークにおける「イスラーム風アトラクション」に関して、これまでに収集したデータ(具体的には、ムンバイ郊外のアドラブズ・イマジカ、ダッカ郊外Fantasy Kingdom、香港ディズニーランド、東京ディズニーシー、ウィーンのプラーター遊園地、ストックホルムのティヴォリ・グローナ・ルンドなどの事例)を整理し、分析するとともに、インターネットや文献資料等を通じて最新情報の収集に取り組んだ。同時に、宗教政治の領域と商品経済の領域が重層的に交差する「宗教ナショナリズム的アトラクション」や「愛国アトラクション」にも注意を払いつつ、データの整理・分析ならびに関連情報の収集をおこなった(具体的には、ニューデリーのDilli Haat、Akshardham、グルガーオンのKingdom of Dreams、ハイデラバード郊外Ramoji Film City、ムンバイのキッザニア、ムンバイ郊外Essel WorldおよびWater Kingdomなど)。この過程で、現代インドの状況と比較可能な類似の事例を収集する必要が生じ、台湾のテーマパークにおける現地調査と資料収集を試みた。具体的には、高雄市に位置する台湾最大のテーマパーク「義大遊楽世界」と、同じく高雄市に位置するテーマパーク化した仏教施設「佛光山仏陀紀念館」、さらに台北市に位置する比較的小規模なアミューズメントパーク「台北市立遊園地」を訪問し、非日常性を演出または展示する各種アトラクションが、現代インドの場合と同様に、「国や宗教の歴史」「美食や消費の快楽」「伝統と未来のイメージ」を体験する文化装置となっている様子が確認できた。この調査報告は、テーマパークや宗教施設における文化的・宗教的な自己/他者表象のあり方の政治性をめぐる小論を通じて一般に公開する予定である。テーマパークにおける「イスラーム風アトラクション」、そしてその鏡像としての「宗教ナショナリズム的アトラクション」に関する調査研究はほぼ予定通りに進んでいるが、「イスラーム的モダンアート」に関する基礎調査を予定通りに進めることができなかった。現地調査のための時間を確保することができず、資料と文献の収集が実現できなかったためである。効率のよい調査研究の方法を試行錯誤のなかで見出していきたいと考えている。平成28年度は、研究実施計画にしたがって、前年度までに収集した世界各地のテーマパークにおける「イスラーム風アトラクション」「宗教ナショナリズム的アトラクション」、そして「愛国アトラクション」等に関するデータの整理と分析を継続するとともに、インターネットや文献資料を通じて最新の関連情報を収集した。さらに、インドにおいて現地調査・資料収集をおこなった。具体的には、イスラーム表象の観光化について、マハーラーシュトラ州のコーポーリー、プネー、テランガーナ州のハイデラバード、首都ニューデリーの各地で、テーマパーク、ショッピングモール、ギフトショップなどを調査するとともに、ゲストやスタッフにインタビューをおこなった。他方、イスラーム表象の芸術化の事例に関しては、ハイデラバードにおいて、イスラーム・アートに従事するアーティスト5人および関係者5人にインタビューをおこなった。さらに、イスラーム・アートの現場として、ハイデラバードの高名なムスリム聖者の墓廟なども訪問することができた。

宗教政治の領域と商品経済の領域が重層的に交差する施設や芸術に関し、現代インドの状況と比較可能な類似の事例を収集する必要が生じたため、スペインとポルトガルにおいても、アミューズメントパークおよび世界遺産等の観光施設や芸術等において観察されるナショナリズムと宗教性に関する現地調査と資料収集をおこない、キリスト教表象とイスラーム表象の関係のあり方に、インドとは異なる形態での宗教間の非対称性を発見することができた。この調査報告は、テーマパークや宗教施設における文化的・宗教的な自己/他者表象のあり方の政治性をめぐる小論を通じて一般に公開する予定である。テーマパークにおける「イスラーム風アトラクション」、そしてその鏡像としての「宗教ナショナリズム的アトラクション」あるいは「愛国アトラクション」に関する調査研究はほぼ予定通りに進めることができた。「イスラーム的モダンアート」に関する基礎調査も予定通りに進めることができた。平成29年度は、研究実施計画にしたがって、前年度までに収集した世界各地のテーマパークにおける「イスラーム風アトラクション」「宗教ナショナリズム的アトラクション」「愛国アトラクション」等に関するデータの整理と分析を継続するとともに、インターネットや文献資料を通じて最新の関連情報を収集した。そして、これまでの研究成果の一部を「インドにおけるテーマパーク産業の発展と課題:アドラブズ・イマジカのアトラクションに関する人類学的考察」というタイトルで『産業研究(高崎経済大学地域科学研究所紀要)』第53巻に発表した。他方で、三重県の「志摩スペイン村」などにおいて、日本のテーマパークにおける異文化表象のあり方に関する現地調査・資料収集をおこなった。日本のテーマパークは、Hendry, Joyが著書'The Orient Strikes Back: A Global View of Cultural Display'で指摘するように、「外国村」(Foreign country village)として外国の町並みや文化、さらに外国人が、可能なかぎり本物に近いかたちで展示されることが多いため、インドとは異なる意味合いでの非対称的な異文化表象の事例を収集することにつながった。
能動的ドラマ体験を生成する知的ゲームキャラクタ基盤技術

1)ゲームキャラクタの行動制御技術ゲームキャラクタのジェスチャと表情を生成するときに,ジェスチャの意味と時間的整合性を保ちなが複数の要素動作を協調させることで人間的振る舞いを生成した.感情や対人関係によって要素運動の活性度を制御して多様な感情表現をダイナミックに生成した.モーションキャプチャのデータを利用してアルゴリズムの有効性を確認した.また,視覚的非言語情報の中の一として,トラッキングセンサや画像処理により利用者の注視位置を検出し,注視位置から注意対象を推定した.更に,ゲームキャラクタの行動制御をリアクション,エピソード,スケジュールの3つの階層によって統合的に行う基本手法を提案するとともに基盤ソフトウェアを実現した.2)アクション動作の模倣学習法プレイヤーの操作を模倣学習することができるゲームシステムを構築して,プレイヤーの操作系列の中から一連のアクション動作を制御する行動グラフを抽出することができた.また,複数プレイヤーの操作パターンを比較してキャラクタによる動作の個性を抽出する手法を実現した.3)第二言語教育への応用知的ゲームキャラクタの有効性を検証するために,第二言語教育(英語)をインタラクティブに学ぶことができるシステムを実験的に構築した.キャラクタが意味交渉(negotiation of meaning)による会話を行うとともに,道案内などを行うことが可能であることを確認した.1)ゲームキャラクタの行動制御技術ゲームキャラクタのジェスチャと表情を生成するときに,ジェスチャの意味と時間的整合性を保ちなが複数の要素動作を協調させることで人間的振る舞いを生成した.感情や対人関係によって要素運動の活性度を制御して多様な感情表現をダイナミックに生成した.モーションキャプチャのデータを利用してアルゴリズムの有効性を確認した.また,視覚的非言語情報の中の一として,トラッキングセンサや画像処理により利用者の注視位置を検出し,注視位置から注意対象を推定した.更に,ゲームキャラクタの行動制御をリアクション,エピソード,スケジュールの3つの階層によって統合的に行う基本手法を提案するとともに基盤ソフトウェアを実現した.2)アクション動作の模倣学習法プレイヤーの操作を模倣学習することができるゲームシステムを構築して,プレイヤーの操作系列の中から一連のアクション動作を制御する行動グラフを抽出することができた.また,複数プレイヤーの操作パターンを比較してキャラクタによる動作の個性を抽出する手法を実現した.3)第二言語教育への応用知的ゲームキャラクタの有効性を検証するために,第二言語教育(英語)をインタラクティブに学ぶことができるシステムを実験的に構築した.キャラクタが意味交渉(negotiation of meaning)による会話を行うとともに,道案内などを行うことが可能であることを確認した.1)ゲームキャラクタの複合動作生成ゲームキャラクタのジェスチャと表情を生成するときに,ジェスチャの意味と時間的整合性を保ちなが複数の要素動作を協調させることで人間的振る舞いを生成した.また感情や対人関係によって要素運動の活性度を制御して多様な感情表現をダイナミックに生成した.モーションキャプチャのデータを利用してアルゴリズムの有効性を確認した.2)ユーザの注意方向を利用したゲームキャラクタのインタラクション生成視覚的非言語情報の中の一として,トラッキングセンサや画像処理により利用者の注視位置を検出し,注視位置から注意対象を推定した.同時にマイクロフォンからの発話情報を取得し,会話状況とプレーヤの注意対象の2つの要素から,ゲームキャラクタの能動的な動作を生成することを確認した.3)目や頭部の協調動作によるゲームキャラクタの表情生成ゲームキャラクタの対話状態を発話時,聴取時,待機時の三状態にわけ,それぞれの状態における頭部・視線動作のルールを体系化した.また,印象評価技術の適用によって,キャラクタの性格,個性,心理状態,興味度と頭部・視線パラメータの統計的な対応付けを行った.4)第二言語教育への応用ゲームキャラクタとの会話によって英語をインタラクティブに学習できるシステムについて検討を進めた.教育分野の専門家と連携して,タスク構成法を明らかにするとともに,意味交渉(negotiation of meaning)を可能にする会話生成法を実装して予備実験を行った.1)アクション動作の模倣学習プレイヤーの操作を模倣学習することができるゲームシステムを構築して,プレイヤーの操作系列の中から一連のアクション動作を制御する行動グラフを抽出することができた.また,複数プレイヤーの操作パターンを比較してキャラクタによる動作の個性を抽出する手法を実現した.2)ゲームキャラクタの反応的エピソード行動制御ゲームキャラクタの行動制御をリアクション,エピソード,スケジュールの3つの階層によって統合的に行う基本手法を提案するとともに基盤ソフトウェアを実現した.また,複数のキャラクタによる反応動作を見て他のキャラクタが更に反応を行う,相互リアクション機能を実現した.プレイヤーがあるキャラクタに働きかけたときに,対象となるキャラクタ以外にも反応が波及することを確認した.また,エピソード行動に,ポーズ,ジェスチャ,しぐさなどのキャラクタの心理や構成を表す会話動作表現や,頭部・視線の動作を協調させた注意動作を追加できることを確認した.3)第二言語教育への応用知的ゲームキャラクタの有効性を検証するために,第二言語教育(英語)をインタラクティブに学ぶことができるシステムを実験的に構築した.キャラクタが意味交渉(negotiation of meaning)による会話を行うとともに,道案内などを行うことが可能であることを確認した.またwebから得られた情報を感情表現ゆたかに会話することでユーザーの興味を向上させることができることを確認した.
ノルウオ-クウイルス胃腸炎に関するウイルス学的および疫学的研究

ノルウオ-クウイルス(NV)は主に成人に食中毒様の急性胃腸炎を引き起こす主要要因ウイルスである。近年米国においてNVのgene cloningが成功し、様々な研究法が開発された。本研究では、ELISA法、Dot Blot Hybridization法によるNV検出法を確立し、また既に確立されていたPT-PCR法も併用して以下の検討を行った。NVと他の小球型ウイルスとの遺伝子学的関連性を検討した結果、ELISA法ではヒトカリシウイルス、ネコカリシウイルス、音更因子関連ウイルスとの関連はみられなかった。Dot法ではRNA polymeraseを含んだprobe、5'-側のprobeを用いるとヒトカリシの一部の株、音更因子関連ウイルスが陽性となり、なんらかの関連性が示唆された。今後、塩基配列の決定を行いNVとの比較検討が必要である。日本の乳幼児期の急性胃腸炎に対するNVの関与をELISA法とDot法で検討したが、NV検出率は非常に低率であった。この結果は、年齢別のNV抗体保有率が7才未満では約10%と低いことと相関しており、日本において乳幼児期の胃腸炎ではNVの関与は低いことが示唆された。また血清疫学的検討の結果、日本ではNVは普遍的な感染因子であるが、乳幼児期ではその関与は低く、NVの感染は学童期から始まり成人期でも感染を繰り返していることが示唆された。日本、東南アジアにおいてはNV感染症が普遍的であると考えられた。学童期から成人にみられた急性胃腸炎の集団発生18事例に対するNVの関与について検討した。3事例はNVによる急性胃腸炎といえるが、ELISA法のみで検索し陰性と判定された15事例をより感度の高いRT-PCR法で検討し直す必要がある。NVのprototypeとは異なるNV関連ウイルスを検出するためには、感度が高いRT-PCR法やDot法が適当と思われるが、塩基配列の解析を考慮すると前者が最適と思われる。ノルウオークウイルス(NV)は食中毒様急性胃腸炎の主要起因ウイルスであるが、組織培養による増殖系が確立されていないため適当な検出法がなく、日本でのNV感染症に関する報告は殆どなかった。最近米国でNVに対するcDNAが作成され、様々な検出方法が可能となってきている。本研究では下記の様なNV検出法を確立し、種々の検討を行った。Dot blot法でヒト及びネコカリシウイルス、音更因子関連ウイルスについて検討したが陰性であり、NVとの遺伝子学的関連性は低いことが示唆された。Dot blot法及びELISA法での日本の乳幼児期のSRSV胃腸炎糞便検体からのNV検出率は非常に低率であった。北海道における年令別のNVに対する抗体保有率は乳幼児期では低く、学童期から上昇し、成人では高い保有率であった。日本の5道府県の健康成人では地域差なく高い保有率であった。以上より日本においてNVは普遍的な感染因子であるが、乳幼児期ではその関与は低いことが示唆された。今後はさらにPCR法によるNVの検出とその産物のシークエンスによる解析を進める予定である。本研究では平成4年度に確立したDot blot hybridization法とELISA法を用いて引き続き種々の検討を行った。

1)今年度はNV genomeの3つの領域から作成したsense、anti-sense RNA probeを用いてヒトカリシウイルス(HuCV)、ネコカリシウイルス、音更因子関連ウイルスについて遺伝子学的関連について検討した。RNA polymerase部分から作成したprobeにてHuCVと音更因子関連ウイルスの一部が陽性となり、NVとの関連性が示唆された。2)平成4年度に確立したELISA法で、札幌市において昭和62年から平成2年までの4シーズンに急性胃腸炎散発例の乳幼児の患児より得られた糞便109検体よりNVの検出を行ったところ1例のみが陽性であった。また愛媛県において昭和59年から昭和63年までの5シーズンに急性胃腸炎散発例の患児より得られた糞便50検体より同様にNVの検出を行ったが陽性例はなかった。以上より日本における乳幼児期の急性胃腸炎においてはNVの関与は少ないことが示唆され、平成4年度の血清疫学的検討の結果を裏付けするものであった。今後は、急性胃腸炎集団発生例についての検討も必要であり、また、日本各地で検出された小球形ウイルスに対しPCR法にてもNVの検出を試みているが、PCR産物の解析についても進める必要がある。ノルウオ-クウイルス(NV)は主に成人に食中毒様の急性胃腸炎を引き起こす主要起因ウイルスである。近年米国においてNVのgene cloningが成功し、様々な研究法が開発された。本研究では、ELISA法、PT-PCR法、Dot Blot Hybridization法を用いて、1987年4月から1991年5月までに発生した、学童期から成人にみられた急性胃腸炎の集団発生18事例に対するNVの関与について検討した。愛知県下で発生した急性胃腸炎の集団発生18事例から得られた158検体を対象にELISA法で検討すると、3事例32検体からの7検体がNV陽性であった。この結果3事例がNVによる集団発生の可能性があるが、1事例(5/(14);35.7%)を除くとその陽性数が1/7;14.3%、1/(11);9.1%と少なかった。そこで、3事例32検体についてRT-PCR法で検査したところ、それぞれ(13)/(14)、7/7、7/(11)、全体では(27)/(32);84.4%と高率にNVが検出された。これに対してRNAprobeを用いたDot Blot Hybridization法では(10)/(14);71.4%が陽性で、やはりELISA法に比べて高率にNVを検出することが出来た。この結果は、今回用いたBaculovirusに発現させたNV capsid proteinを使ったELISA系は、prototypeのNVに対して特異性が非常に高い反面感度が低いことを示唆する。また、RNA polymeraseの部位を増幅するRT-PCR法とRNA polymerase部位のRNA probeを用いたDot法は、RNAウイルスの保存された領域を検出している可能性があり、感度が高まったと考えられる。以上、3事例はNVによる急性胃腸炎といえるが、ELISA法のみで検索し陰性と判定された15事例をより感度の高いRT-PCR法で検討し直す必要がある。
肺癌の増殖におけるCdc25蛋白の役割

近年Cdc25Bはホルモンレセプターのco-activatorでもあることが示されているが、増殖因子のシグナル経路とエストロゲンレセプター(ER)との間にはcross talkが存在し、特に乳がんではホルモン不応性にこのcross talkが関与している。そこでHer2/neuを介したheregulin(HEG)-β1によるCdc25B発現誘導と、Cdc25B-ER-αの相互作用に対する影響を検討した。Her2/neu発現肺がん細胞株A549や乳がん細胞株MCF-7において、HEG-β1曝露によりCdc25B蛋白はCdk1の脱リン酸化を伴って発現誘導され、HER2/neuチロシンキナーゼ阻害剤であるAG879やMEK阻害剤であるU0126により阻害を受けた。次にHEG-β1曝露によるCdc25BのER-αへの作用を乳がん細胞株MCF-7で検討したところ、ホルモンフリーの培養系においてCdc25BとER-αの蛋白結合はHEG-β1濃度依存性に増強され、ER-αのターゲット遺伝子であるCyclin D1やc-mycの発現誘導を伴っていた。このCdc25B-ER-αの蛋白結合は17β-estradiolの濃度依存性に阻害された。さらにCdc25B-ER-αの蛋白結合もAG879やU0126により阻害された。以上の結果から、ホルモン濃度低下状態においては、増殖因子によるMAPKシグナル経路活性化を介して、Cdc25B蛋白のER-αのco-activatorとしての働きが増強され、ホルモン低下時の細胞増殖に関与する可能性が示唆された。肺がんにおいても近年ホルモンがその増殖に関わる報告がなされており、上記の現象が肺がんにおいてもその増殖に役割を果たしているか否か、現在検討中である。Her2/neu発現肺がん細胞株A549や乳がん細胞株MCF7において、HEG-β1曝露によりCdc25B蛋白はCdk1の脱リン酸化を伴って発現誘導され、HER2/neuチロシンキナーゼ阻害剤であるAG879やMEK阻害剤であるU0126により阻害を受けた。
HTLV-1に対するペプチドワクチンの開発

まず、前年度までに同定していたHTLV-1の主な中和エピトープ(principle neutralizing determinant,HTLV-1 gp46 amino acid 187-199)を含む種々の長さのペプチドを合成した。ペプチドはPoly-lysineにconjugationして、Multipe Antigen Peptide System(MAP)のペプチドワクチンを作製した。ワクチンは、1回100-500ugを初回は完全フロイントアジュバントとともに、2,3回目は不完全フロイントアジュバントとともに皮下に免疫した。この内、MAP181-210が、ラビットや種々の系統のラットに8倍から320倍の中和抗体を誘導した。また、MAP181-210で免疫したラットのTリンパ球のペプチドに対する反応性から、ラットのT cell helperepitopeは、gp46a.a.196-212にクラスターして存在していることが、また、HTLV-1感染者末梢血のペプチドに対する反応性から、種々のHLAハプロタイプを持つヒトにおいても、HTLV-1 helperTcell epitopeがgp46a.a.194-212にクラスターして存在していることが明かとなった。以上より、MAP181-210は、中和エピトープと“universal T cell helper epitope"を含み、ヒトにも応用可能な初めてのHTLV-1ペプチドワクチンと考えられる。また、ペプチドワクチンの投与により8-32倍のHTLV-1中和抗体価を有するラビットは、HTLV-1感染細胞(ILT8M2細胞5×10^7)のチャレンジから感染防御された。このことから、HTLV-1ペプチドワクチンは感染防御に十分な中和抗体価を誘導し得ることが示された。さらに、最近、gp46 a.a.196-209にDRw16拘束性のCTL epitopeが同定され、MAP181-210によるCTLの誘導実験を開始している。まず、前年度までに同定していたHTLV-1の主な中和エピトープ(principle neutralizing determinant,HTLV-1 gp46aminoacid 187-199)を含む種々の長さのペプチドを合成した。