hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
独居者の軽度うつ状態早期発見支援システムの開発研究

本研究では重度うつ状態に進行する前に発見し,適切な受療を促すことで自殺等を未然に防ぐシステムを開発する.うつの発見と治療には,家族や周辺の人々にも病に対する正しい知識や理解をもってもらうことが必要であるが,現実は容易ではない.まずは,うつ病患者の100%で発症する,睡眠障害をうつ病診断の最初の手がかりとすべく,これを認知するシステムを開発した.シート状の圧力センサから得られる睡眠時の動態,つまり時間経過を伴う体圧を取得し,この圧力データをサポートベクタマシンと呼ばれる識別器を使って約78%の割合で睡眠障害を正確に検知することができた.本研究では独居者を対象とした、重度うつ状態に進行する前に発見し、適切な受療を促すことで自殺等を未然に防ぐ軽度うつ状態早期発見支援システムを開発することを目的とする。本システムの機能としては、主に精神運動機能障害検知機能、睡眠障害検知機能、摂食障害検知機能の3つである。本年度はこの機能の内、精神運動機能障害検知機能、睡眠障害検知機能の2つの実現を検討した。精神運動機能障害検知機能は室内の床面に圧力分布センサを設置し、足底面や座面圧力を計測することでシステム利用者がどの部屋に居るかや、移動の方向と速度、立ち/座り状態等を識別する機能である。この機能に関しては既にある単一の実在の独居用住宅内での実験において一定の成果は得られているものの、室内の間取りや形状によって識別精度が変わることが予想されることもあり、さらなる実験を要する。当該年度では、浴室を除くすべての部屋に可能な限りセンサを敷設することを検討し、次年度に研究を繋げる。睡眠障害検知機能はある種のセンサをベッドに設置し、寝返り等で発生する振動の有無と強弱を計測し、入眠・起床の時間とタイミング、頻繁な夜間の起床や睡眠過多、昼間の睡眠の時間と頻度等を検知する機能である。さらに起床したにも関わらずベッドから降りる気力が出ない状態も精神運動機能障害として検知するものである。この機能に関して、調査により振動センサの機能を有するエアマットレスを使用した先行研究があることが分かった。しかし、明記されていないものの、被験者に布団を掛けないなど通常の睡眠状態ではない状態での実験であることが判り、別の手法を検討した。その結果、布状の圧力センサが存在することが判り、これを用いて実験をすることを検討し、次年度に研究を繋げる。1.利用しようとしていたセンサに仕様上の不具合が見つかりメーカーへリコールを行っていたため。2.利用しようとしていたセンサに故障が見つかり修理を行っていたため。3.購入予定のセンサにおいて、当初予測していた性能に足りないことが判り、別のセンサを選定したが、購入価額の面での交渉がうまく行かず、再度、別のセンサを選定中であるため。本研究の目的は軽度うつ状態早期発見支援システムの開発である.重度うつ状態に進行する前に発見し,適切な受療を促すことで自殺等を未然に防ぐシステムを開発する.申請者等はこれまで圧力分布センサを用いて,うつ状態の自動発見を目指した行動認知の基礎研究を行ってきた.本研究はこれを基に専門医の協力の下で実用的な支援システムを開発する.うつの発見と治療には,家族や周辺の人々にも病に対する正しい知識や理解をもってもらうことが必要であるが,現実は容易ではない.未治療のうつ病患者は症状出現の原因が身体の病気や自分の能力不足であると考えることが多く,専門医での治療を受け難くしている.本研究は普段との様子の違いが気づかれ難い独居者を対象に,各種センサを用いて睡眠障害,摂食障害,精神運動機能障害,体重の異常増減,入浴の有無等を自動検知することにより,普段との行動の違いを逸早く検知したり,専門医からの知見を導入することによって,うつ状態の早期発見を支援するシステムを開発する.本システムでは様々な日常の行動をセンサで知覚し,特徴量として行動を認知するが,本年度はうつ病患者の100%で発症する睡眠障害について焦点を当て,これを認知するシステムを開発してきた.具体的にはベッドや布団などの寝具の上に敷くシート状の圧力分布センサを用い,体圧の変化,重心の移動,つまり寝相を検知することで入眠障害,中間覚醒,熟眠障害,早朝覚醒などの基本的な不眠における睡眠障害を認知し,うつ状態かどうかの診断指標の一つとする.現在までに,6名の成人男女の協力を得て,睡眠動態の実験を重ねているところである.また,圧力値で寝返りや覚醒などの体動をどのように定義するかを検討している.研究を進めるにあたり,大学内の実験室の空調に問題があり,夏に暑くて眠れないという被験者が現れたため,睡眠を取るために適切な空調機能を持つ実験環境の整備の必要が生じ,これを準備するのに時間がかかってしまった.本研究の目的は軽度うつ状態早期発見支援システムの開発である。重度うつ状態に進行する前に発見し、適切な受療を促すことで自殺等を未然に防ぐシステムを開発する。申請者等はこれまで圧力分布センサを用いて、うつ状態の自動発見を目指した行動認知の基礎研究を行ってきた。本研究はこれを基に専門医の協力の下で実用的な支援システムを開発する。うつの発見と治療には、家族や周辺の人々にも病に対する正しい知識や理解をもってもらうことが必要であるが、現実は容易ではない。未治療のうつ病患者は症状出現の原因が身体の病気や自分の能力不足であると考えることが多く、専門医での治療を受け難くしている。

本研究は普段との様子の違いが気づかれ難い独居者を対象に、各種センサを用いて睡眠障害、摂食障害、精神運動機能障害、体重の異常増減、入浴の有無等を自動検知することにより,普段との行動の違いを逸早く検知したり、専門医からの知見を導入することによって、うつ状態の早期発見を支援するシステムを開発する。ここまでの研究を通じて、シート状の圧力分布センサを利用した睡眠障害検知システムの開発に至った。このシステムでは、ベッドシートのように設置した圧力分布センサから得られる睡眠中の被験者の体圧力データを使い睡眠時の姿勢や動きを感知して、睡眠途中での覚醒、寝返りの頻度、入眠潜時(入眠に至るまでの時間)、睡眠時間などを分析し、約80%の割合で被験者が睡眠障害を抱えているか否かを検知できる。最終年度にあたる平成29年度では、睡眠障害検知システムに関する査読付き論文を1編、査読付き国際会議論文2編を発表した。本研究では重度うつ状態に進行する前に発見し,適切な受療を促すことで自殺等を未然に防ぐシステムを開発する.うつの発見と治療には,家族や周辺の人々にも病に対する正しい知識や理解をもってもらうことが必要であるが,現実は容易ではない.まずは,うつ病患者の100%で発症する,睡眠障害をうつ病診断の最初の手がかりとすべく,これを認知するシステムを開発した.シート状の圧力センサから得られる睡眠時の動態,つまり時間経過を伴う体圧を取得し,この圧力データをサポートベクタマシンと呼ばれる識別器を使って約78%の割合で睡眠障害を正確に検知することができた.今後は交渉中のセンサの購入ができる見込みであるため、研究が進められると考える。今年度では研究協力者、及び被験者の選定が済んだので、実験を実施していく。同種のセンサを使う別研究の成果が出て、その成果を本研究に応用が出来るため、一層研究の推進速度が早まると考える。使用しているセンサと同型のものを他研究室から借り受けられる手続きを進行している.これにより,実験の実施スピードは倍増できるものと考えており,遅れを取り戻せると考える.福祉工学1.購入予定のセンサに想定の性能がないことが判り、別のセンサを検討しているため。2.使用予定のセンサに仕様上の不具合と、故障が発生したため、実験が実施できなかったため。使用する機材の選定において,目標とする性能が得られるかを十分に検討する必要があり,前年度の予算執行に間に合わなかったため.再検討したセンサを購入し、実験を実施する。機材の調達は完了してたため,今後は残予算を実験環境の使用料や人件費に充当していく考えである.
共析反応を利用したラーベス相の析出制御技術に基づくフェライト系耐熱鋼の強化法構築

当該研究では、Laves相を強化相として有効利用したフェライト系耐熱鋼の創製を見据えて、同鋼におけるLaves相の新たな析出強化法の確立を目指し、δ-Fe→γ-Fe+Fe2M(Laves)共析型反応経路におけるLaves相の析出過程とクリープ強度に及ぼすLaves相の析出形態の影響を調べることを目的とした。当該年度では、フェライト系耐熱鋼のLaves相による微細分散析出強化手法の確立を目指し,Fe-Cr-Hf三元系の共析型反応経路(δ→γ+Laves)におけるLaves相の析出反応に着目し,同合金系における高温側の相平衡と同反応経路にて生じる析出反応に及ぼすHf及びCr濃度の影響を調べ,相界面析出反応を顕在化させる指針を検討した.Cr濃度を9.5 at.%に固定し,Hf濃度を共析組成付近の0.060.12 at.%の範囲で意図的に変化させた検討では、TTT図を作製して相界面析出に及ぼすHf濃度の影響を調べ、Hf濃度の増加に伴い,δ→γ変態の開始線は長時間側にシフトしてδ→δ+Laves析出反応が顕在化するとともに,相界面析出が生じる温度範囲が高温側に拡がることを見出した.Hf濃度を約0.1%に固定してCr濃度のみを変化させた検討では、相界面析出反応に及ぼす変態の駆動力の影響を調べ,Cr濃度の減少によりδ→γ変態速度が増加してδ→δ+Laves析出反応が抑制されるが,Cr濃度を過剰に減少させると相界面析出が生じなくなることを示した.以上の結果より、本反応経路において相界面析出を顕在化させるためには,Laves相の析出に対するHf(Laves相形成元素)の過飽和度を高めるとともにδ→γ変態速度を適度に高める必要があることが示唆された.当該研究では、従来有害相とされているLaves相を強化相として有効利用したフェライト系耐熱鋼の創製を目的に、同鋼におけるLaves相の析出制御法の確立を目指し、最近申請者が着目するδ-Fe→γ-Fe+Fe2M(Laves)型反応経路におけるLaves相の析出過程とクリープ強度に及ぼすLaves相の析出形態の影響を調べる。当該年度では、Fe-Cr-Ta3元系におけるδ→γ+Fe2Mへの分解反応によるLaves相の析出速度および析出形態について検討した。具体的には、共析組成を有するFe-Cr-Ta 3元合金試料を用いて等温時効及び連続冷却実験を実施した。その結果、同合金では層状のLaves相とγ相が先進界面をもって生じるパーライト型の析出反応が生じ、その析出開始線のノーズは1000°C/30 min程度に存在することを明らかにした。この析出反応は、Fe-Cr-Hf3元系で生じる相界面析出反応に比べて3桁以上長時間側で生じ、組織制御し易いを示した。また、連続冷却速度を10 °C/s0.02 °C/sに変えた実験を行い、10 °C/sではパーライト型反応は生じないが、0.1 °C/s以下では上記の反応によるLaves相の層間隔は冷却速度の低下に伴い0.5 μm2 μmの範囲で増加した。また、上記反応によるLaves相は粒界上に優先析出する傾向は無く、高温クリープ特性において重要となる粒界被覆法についても今後検討する必要があることが示唆された。当初の研究計画・方法通りに実験が進み、成果が出ているため。当該研究では、従来有害相とされているLaves相を強化相として有効利用したフェライト系耐熱鋼の創製を見据えて、同鋼におけるLaves相の新たな析出強化法の確立を目指し、最近申請者が着目するδ-Fe→γ-Fe+Fe2M(Laves)型反応経路におけるLaves相の析出過程とクリープ強度に及ぼすLaves相の析出形態の影響を調べる。当該年度では、Laves相の析出形態を変化させたFe-Cr-Hf3元系モデル合金試料を準備し、クリープ特性に及ぼすLaves相の析出の影響について調べた。具体的には、以下の3種類の試料を準備した:1上述のδ-Fe→γ-Fe+Fe2M(Laves)型反応経路において相界面析出によりLaves相が析出した後にγ-Fe→α-Fe変態が生じる試料(相界面析出材)、2従来の耐熱鋼に認められるように、γ-Fe→α-Fe変態後にLaves相が析出する試料(焼戻し析出材)、3Laves相の析出がほとんど生じない試料(無析出材)。その結果、焼戻し析出材では、未析出材に比べて遷移域のクリープ速度が約一桁低下し最少クリープ速度が長時間側に移行して破断寿命が向上するものの破断延性・絞りが低下するのに対し、相界面析出材では遷移域のクリープ速度は未析出材と同程度であるが加速クリープの開始が遅くなり破断寿命が向上するとともに破断延性・絞りが増加することが分った。相界面析出材の破断寿命の向上は析出粒子による変態組織の安定化に起因することが示唆された。当初の研究計画・方法道理に実験が進み、成果が出ているため。当該研究では、Laves相を強化相として有効利用したフェライト系耐熱鋼の創製を見据えて、同鋼におけるLaves相の新たな析出強化法の確立を目指し、δ-Fe→γ-Fe+Fe2M(Laves)共析型反応経路におけるLaves相の析出過程とクリープ強度に及ぼすLaves相の析出形態の影響を調べる。

当該年度では、上記の反応経路において生じる相変態過程の理解を目的として、相界面析出が生じるFe-9Cr-0.1Hf 3元合金とパーライト型の析出が生じるFe-9Cr-0.6Ta 3元合金の中間に位置するFe-9Cr-0.05Hf-0.3Ta 4元合金を準備して等温変態挙動を調べ、相界面析出反応のノーズがHf添加3元合金に比べて低温長時間側に移動し、δ相から直接Laves相が析出する反応がより促進されることを明らかにした。この結果より、本反応経路における相変態を支配する因子として、δ→γ変態の駆動力、溶質元素の拡散係数およびLaves相の析出のための過飽和度が示唆された。クリープに及ぼすLaves相の析出形態の影響に関しては、昨年度得られたクリープ特性に及ぼすLaves相の析出の影響を組織観察により検討した。すなわち、以下の3種類の試料:相界面析出材、焼戻し析出材および無析出材の比較において,焼戻し析出材が最も遷移域のクリープ速度が低く、最少クリープ速度が長時間側に移行して破断寿命が向上した結果は、焼戻し材のクリープ中断材の組織観察により、クリープ変形中に生じた析出物により転位の運動が妨害されることに起因することが示唆された。また、相界面析出材のクリープ速度は未析出材と同程度であるが加速クリープの開始が遅くなり破断寿命が向上する傾向は高温低応力側でより顕著になり、その傾向が相界面析出粒子による変態組織の安定化に起因することが結論づけられた。おおむね当初の研究計画・方法どおりに実験が進み、成果が出ているため。当該研究では、Laves相を強化相として有効利用したフェライト系耐熱鋼の創製を見据えて、同鋼におけるLaves相の新たな析出強化法の確立を目指し、δ-Fe→γ-Fe+Fe2M(Laves)共析型反応経路におけるLaves相の析出過程とクリープ強度に及ぼすLaves相の析出形態の影響を調べることを目的とした。当該年度では、フェライト系耐熱鋼のLaves相による微細分散析出強化手法の確立を目指し,Fe-Cr-Hf三元系の共析型反応経路(δ→γ+Laves)におけるLaves相の析出反応に着目し,同合金系における高温側の相平衡と同反応経路にて生じる析出反応に及ぼすHf及びCr濃度の影響を調べ,相界面析出反応を顕在化させる指針を検討した.Cr濃度を9.5 at.%に固定し,Hf濃度を共析組成付近の0.060.12 at.%の範囲で意図的に変化させた検討では、TTT図を作製して相界面析出に及ぼすHf濃度の影響を調べ、Hf濃度の増加に伴い,δ→γ変態の開始線は長時間側にシフトしてδ→δ+Laves析出反応が顕在化するとともに,相界面析出が生じる温度範囲が高温側に拡がることを見出した.Hf濃度を約0.1%に固定してCr濃度のみを変化させた検討では、相界面析出反応に及ぼす変態の駆動力の影響を調べ,Cr濃度の減少によりδ→γ変態速度が増加してδ→δ+Laves析出反応が抑制されるが,Cr濃度を過剰に減少させると相界面析出が生じなくなることを示した.以上の結果より、本反応経路において相界面析出を顕在化させるためには,Laves相の析出に対するHf(Laves相形成元素)の過飽和度を高めるとともにδ→γ変態速度を適度に高める必要があることが示唆された.当初の計画に加え、Laves相の粒界析出挙動についても併せて検討する。今年度得られたLaves相の析出形態の影響に関する結果を受けて、その検証実験及び他のLaves相の形態(ラメラ組織等)も含めてその影響について検討し、Laves相の強化相としての有効利用法の確立を目指すとともにフェライト系耐熱鋼の長寿命化・高信頼性化に有効な組織設計法を提案する。δ-Fe→γ-Fe+Fe2M(Laves)
ロバストパラメータ設計における技術方法論の開発と大規模コンピュータ実験への応用

本研究ではモーメント条件とその平均損失最小化による2段階設計法の最適性の特徴づけを行い,一般化SN比を導出できることを示した。ここでは,一般的な2乗損失関数のような対称ではなく非対称損失関数に基づくロバストパラメータ設計を体系化した。非対称べき損失関数から導出されたパフォーマンス測度は算術平均と調和平均の比で表現され,実務的にも扱いやすい評価測度となっている。一般に,品質改善ないしばらつき低減のための対策は(1)原因そのものを除去または(2)原因の影響を減衰のうちどちらかであるといわれている.(1)はばらつきの原因を見つけ,その原因をコントールすることで特性のばらつきを低減することである.伝統的な統計的品質管理は,問題解決型QCストーリーによる原因そのもの発見および除去を目的とする.これに対し,(2)は原因が変動しても特性が変動しないという緩衝機構を与えることにより,設計開発段階におけるばらつきの低減を行う実験的な方法である.これはロバストパラメータ設計(タグチメソッド)として知られている.ロバストパラメータ設計とは,設計開発段階で様々な使用環境条件を意図的に取り上げて実験し,それらに対しロバストな設計条件を見いだすための技術方法論である.本年度は,主に2つのテーマに関して研究を行った.1)SN比の同等性の検定方法の開発:本年度は,計測システムにおけるSN比の同等性の検定を提案した.一般に,タグチメソッドでは,そのシステムを比尺度かつ正値データをもとに,ゼロ点比例式を想定する.このとき,誤差分布として尺度分布族の一つである逆ガウス型分布を仮定すれば,SN比の同等性の検定は,分布の変動係数に一致する.本研究では,分散安定化変換を用いた等変動係数性の検定方法を提案し,検定のサイズと検出力を検証した.その結果,提案した検定方法は,保守的であり十分な大きさの検出力を持つことが示された.2)非対称損失関数に基づくロバストパラメータ設計:通常,タグチメソッドは2乗損失関数に基づいて,評価測度であるSN比は構成されてきた.本研究では,比尺度かつ正値データに対するある非対称損失関数を導入し,その平均損失最小化のためのモーメント条件と2段階最適性の妥当性を検証した.本年度は,技術開発・製品開発に必要とされる実験計画法の方法論に関する研究を行った。製品開発の初期段階では,多くの制御因子を同時に取り上げる。しかし,その一方で因子や水準数が増えれば,実験回数も増してしまう。そこで,推定精度を落とさずに,その回数を減らす効率的な方法の1つとして知られているのが直交表実験である。これは,技術的に応答曲面の関数形を推論し,その最適条件を探索するという,コンピュータ実験実験の簡便的なものとして用いられてきた。近年,CAEなどのシミュレーション実験に基づく技術開発が盛んになってきている。この種の数値実験では,繰り返し誤差はなく,実実験に比べ制御因子の水準幅を大きくすることができる。その一方で,応答曲面の形状が実実験に比べ複雑なものになる傾向がある。コンピュータ実験計画は大規模な決定論的データに対して,Box流の応答曲面モデルだけでなく,Gauss過程モデルなど高次のモデルを構築するのに大変有効である。このときシステムにおける変数間の関数関係がシミュレートできるため,ここでは,その実行可能領域でシステムの挙動を近似モデルで予測し,可視化・最適化することが目的となる。コンピュータ実験では,システム内の変数間に存在する複雑な関係をシミュレートするため,複雑なモデルになることがある。このとき,単純なBox流の応答曲面モデルではなく,Gauss過程モデルによるモデリングが有効な場合もある。本研究では,コンピュータ実験計画の1つである一様計画に基づき,システムの挙動を予測する近似モデルを構築し,そこから最適化までの方法論の研究を行った。コンピュータ実験計画は,物理法則やシミュレーションなどの決定論的なデータに対して,近似モデルをあてはめる場合に有効である。このような場合には,単純なBox流の応答曲面モデルではなく,Gauss過程モデルによるモデリングが有効である。本研究では,コンピュータ実験計画の1つである一様計画に基づき,システムの挙動を予測する近似モデルを構築した上で最適化までの方法論を体系化を行った。さらに,一様計画に基づく誤差因子がある場合の応答曲面法およびコンピュータ実験に基づくロバスト設計の有効性の検証を行った。近年、製品開発や医薬品開発において、大規模なシミュレーション実験に基づく技術開発が盛んになってきている。設計開発段階で、数値実験の結果から設計することは開発時間の短縮およびコスト低減のみならず極めて重要である。しかしながら、この方法については、次のような問題がある。第一にシステム内の変数間に存在する関数関係を有限要素法や微分方程式の数値解法に基づきシミュレートするため膨大な計算処理時間を要する。第二に、応答曲面の形状が実実験に比べ複雑なものになる傾向があり、最適設計が困難になる可能性がある。第一の問題点について:効率的な実験計画としてSpace-Filling計画の一つ一様計画(uniform design)を適用し、意図的に疎(スパース)な実験点を生成させるとよい。これは「実験空間上に一様にランダムに分布している計画で、実験回数と等しい水準数を持つ多水準系の一部実施計画」であり、Fangらより提案された。

第二の問題点について:複雑な応答関数を眺めるための非線形モデリングの手法として、Box流応答曲面モデルのみならず、高次の多項式、B-スプラインやGauss過程モデルなども有効である。これらの研究は、(1)伝統的実験計画に基づくデザイン、(2)線形システムを対象としたモデリング(3)単特性の最適化を中心に進めてきたが、本研究では、これまでの結果をさらに発展させた、大規模シミュレーション実験における非線形モデリング、さらに、ロバスト性を考慮した多特性最適化に対する品質工学的技術方法論の開発を試みた。本研究ではモーメント条件とその平均損失最小化による2段階設計法の最適性の特徴づけを行い,一般化SN比を導出できることを示した。ここでは,一般的な2乗損失関数のような対称ではなく非対称損失関数に基づくロバストパラメータ設計を体系化した。非対称べき損失関数から導出されたパフォーマンス測度は算術平均と調和平均の比で表現され,実務的にも扱いやすい評価測度となっている。ロバストパラメータ設計の理論的な体系化を継続的に研究行ってきた.田口流実験計画であるパラメータ設計は,誤差因子の変化を意図的にシミュレートし,それに対して機能のロバスト性を評価する方法論である.すなわち,従来,統計学で想定されてきた実験誤差は既知の要因とし,その変動を能動的にコントロールできる系統誤差のみであるとみなしているのである.近年,技術開発で盛んに利用されているCAE(Computer Aided Engineering)に基づくデータでは,その数値実験の結果を完全に支配していると考えてよい.本研究で提案した非対称損失関数に基づく一般化SN比などをシミュレーションで計算し,制御因子ベクトルをどちらの方向に振ればSN比が大きくなるかといった数値最適化に近い逐次実験が今後可能となると思われる.本研究課題の今後の推進方策については、大規模コンピュータ実験に対する応答曲面法およびロバストパラメータ設計に関する方法論を整理し、これまでの研究成果を単行本などにまとめていく予定である。品質管理数値実験計画は,物理法則やシミュレーションなどの決定論的なデータに対して統計モデルを作成する場合に有効である.コンピュータ実験では,変数間に存在する関係がシミュレートできるため,複雑なモデルになることがある.今後の課題としては,これらの真の関数を限られた因子の範囲でシステムの挙動を予測し,かつ比較的単純な統計モデルを構築することである.特に数値実験計画の一つである一様計画をとりあげ,その実験の計画と解析方法の開発しロバストパラメータ設計の体系を行う予定である.本年度は、年度途中に研究と関連する単行本を依頼され、その準備のため予定した学会発表ができなかったためである。本年度は,年度の途中に関連する単行本を依頼され、その準備のため予定した海外での学会発表ができなかったためである.本年度は、報告書の作成や啓発のための活動費にあてる予定である。本年度は、積極的に学会発表を行い、主にその出張旅費にあてる予定である.
表皮抗原提示細胞であるランゲルハンス細胞を埋め込んだ培養口腔粘膜組織の作成

ヒト・ランゲルハンス細胞の取得及び培養実験であるが、ボランティアから採血した末梢血液よりFicoll法にて単球を分離後MACSシステム(磁気活性化細胞分離システム)にて分離した。マイクロビーズ付着のCD1a抗体より単離した単球からCD1a陽性細胞を分離した。得られた細胞はFACSにて分析し樹状細胞の前駆細胞であることが確認できている。培養培地は血液系細胞様無血清培地であるX-VIVO15とFSC含有RPMI培地双方を用いて分化能の実験を行った。双方とも3日間のCD1a陽性細胞を培養した後X-VIVO15培地へは細胞増殖因子であるGS-CSF,IL-10,TGF-b1を添加し、最適な濃度を検索中である。現在の所GS-CSFは10ng/ml,IL-10は25ng/ml,TGF-b1 1ng/mlで添加した場合、形態的に仮足を伸ばした細胞を認めた。今後FACSおよび蛍光免疫染色にてランゲルハンス細胞であることを確認する予定としている。培養粘膜は完成している為、ランゲルハンス細胞を分化できた後は、この粘膜と共培養する予定である。当大学での倫理委員会への研究許可を得た後、組織から粘膜上皮細胞を単利する場合の細菌汚染及び単層培養による口腔粘膜上皮細胞の安定培養法を獲得した。それによると口腔粘膜組織から血餅を十分にとること、ゲンタマイシン/ファンギソン=12.7mg/ml/192μg/mlの濃度に調整したPBS溶液(組織洗浄溶液)に3時間浸漬し、さらに同洗浄溶液で機械的に洗浄することにより汚染による失敗を10%以下へ抑制できた。以上のデータを元にしSchaffoldであるAlloDerm【○!R】上へ粘膜上皮細胞を播種した3次元培養による再生口腔粘膜粗織を完成させている。通法による組織切片作成・HE染色では生体と同一の組織構造を持つ粘膜を作成できており、アメリカ・ミシガン大学で作られているものとまったく変わらないものが得られた。ヒト・ランゲルハンス細胞の取得及び培養であるが、口腔粘膜組織から採取する場合その数が余りに少なく更に、細胞自体がすでに分化終了したものであるために上記した再生粘膜への埋め込みに支障をきたす事が他大学の報告及び論文でわかった。したがって、末梢血よりランゲルハンス細胞の前駆細胞である樹状細胞をMACSシステム(磁気活性化細胞分離システム)にて分離する計画に変更となった。また、無血清培地によるランゲルハンス細胞培養も現段階では満足の得られる培地が開発されておらず、今回の実験ではRPMI培地及び低濃度血清を使用することとなった。今年度はボランティアからの採血によるランゲルハンス前駆細胞の分離および培養と、再生粘膜へ導入する際の無血清培地使用の可能性を探索する予定である。
環境及び院内由来薬剤耐性菌におけるMLST解析を指標とした包括的監視体制の構築

薬剤耐性菌の世界的な蔓延の防止対策には,ヒト,動物,環境の包括的な対策(one health)の概念をもとに取り組まれている。研究代表者らは,これまでに医療関連感染で問題となっているESBL産生大腸菌群の都市河川(多摩川)への流出の実情を明らかにし,河川が薬剤耐性菌のリザーバーとなっている危険性を提唱した。この薬剤耐性菌による公衆衛生学上の伝搬防止戦略を構築するためには,経年的なモニタリング及び詳細かつ多様な分析を行う必要性がある。2018年度はMRSA,ESBL産生大腸菌群,カルバペネマーゼ産生大腸菌群(CPE)に加え,VRE及びC. difficileの検出及び遺伝子型の分析を行った。その結果,MRSA及びVREは検出されなかった。ESBL産生大腸菌の経年的な検出頻度は,2017年度からの春季及び秋季の計3回の調査において,それぞれ,総大腸菌株のうち3.1%(10株/320株),6.0%(30株/500株)及び4.1%(52株/1268株)と経年的及び年間を通じて検出され,本河川は本耐性菌のリザーバーであることを証明した。ほかにESBL産生Klebsiellaを8株,CPEは,Enterobacer属の1菌株(IMPー1型)を検出したが,検出数は低い傾向を認めた。また,分離菌株の遺伝子解析結果は,ESBL産生大腸菌株では,CTX-M-9群, CTX-M-1群及びST131, ST38の特定の菌型の検出が優勢に認められ,医療関連感染において問題となっている菌株の型と類似性が高く,これらの特定の菌株による自然環境への拡散が示唆された。また,C. difficileでは,ToxinA+toxinB+産生株及びリボタイプの002が優勢に検出され,臨床由来株と相似していた。以上の関連性を見出すために薬剤耐性遺伝子及びMLST解析を含めた監視システムの有用性が示された。当初計画した2018年度の課題は,「薬剤耐性菌株が保有する遺伝子の検出およびMLST解析」である。ESBL大腸菌株においてはすでに2017年度より薬剤耐性関連遺伝子およびMLST解析に取り組み,2018年度には菌株の分離から遺伝子解析に至るまでの一連のフローチャートを構築することができた。また,C. difficileの一部の菌株においても産生毒素型およびリボタイピングを行い,解析を行うに至った。そのほかの耐性菌においては,検出株数が少ないあるいは検出されないことから遺伝子解析を行うまで至っていない。以上のことから,薬剤耐性遺伝子およびMLST解析(またはリボタイピング含む)を予定通り実施し,解析を進めている。また,2018年度も新たに学会発表を行っている点でお概ね順調に成果をあげていると判断される。1)引き続き対象とした薬剤耐性菌株の分離・収集を行い,遺伝子解析を行っていく。しかし,2019年度は春季のみとし,それまで収集した菌株について,薬剤耐性関連遺伝子のほかに,病原因子関連遺伝子および血清型別を行い,データベースの作成を行う。2)通年で薬剤耐性菌株が河川に流出していることが判明したことを受けて,下流から河口へと流れて行くことから,海水および魚介類における本菌株の挙動調査を行う。対象菌株は,検出頻度の高いESBL産生大腸菌株およびToxinB産生C. difficile株とする。これらのことから,ヒトー自然環境における循環経路を明らかにする目的で検討する。3)海水調査において遊泳可能区域を対象に調査を行う。このことは,もっともヒトへの感染が考えられる場所である。4)各薬剤耐性菌において,これまでのデータベースの作成および分析を行い,測定フローチャートの作成を経て,今後も継続的かつ実行可能な監視システムを構築する。近年,医療関連施設における薬剤耐性菌による感染や死亡事例といった社会性のある問題が世界的に増加し,その対策は,医療現場だけの問題ではなく,すでに社会生活を営む健常人を含めた環境問題として包括的な対策(one health approach)が重要である。ゆえに,研究代表者らは,多摩川河川が東京都民の水道水源およびレクリエーションなどの場であることからその重要性に鑑み,薬剤耐性菌株のヒト-環境間における循環の解明及び感染予防に役立たせるための汚染状況の調査を行った。2017年度は,MRSA,ESBL産生大腸菌群,カルバペネマーゼ産生大腸菌群(CPE)及びキノロン耐性Stenotrophomonas maltophiliaの薬剤耐性菌株の検出を行った。河川水の採水(中流域;春季に1回)及び前処理(メンブレンフィルター法)は,環境省が定めた試験方法に準じて行った。その際に各薬剤耐性菌株を効率的に検出するために市販の選択培地を用いた。検出した菌の菌種同定は,従来法及びMALDI-TOF MS法を使用し,薬剤耐性株の判定はCLSIに準拠し行った。その結果,MRSA及び高度キノロン耐性S. maltophilia株は検出されなかった。ESBL産生大腸菌の検出率は,総大腸菌株のうち3.1 %(10株/320株)を占め,ESBL遺伝子型は,CTX-M-9が40%,CTX-M-1が30%と有意であった。大腸菌を除く,ESBL産生大腸菌群ではKlebsiella pneumoniaeが最も有意に検出された。一方,CPE株はCMI判定ではすべて陰性であった。

以上のことから,本河川はESBL産生大腸菌群による汚染が認められ,薬剤耐性菌のリザーバー及び循環の源となっている可能性について継続的なモニタリングを行っていく予定である。当初計画した今年度の課題は,1採水時期と採水地点の固定,2採水した河川水からの薬剤耐性菌株の分離方法の検討,3調査の対象とする薬剤耐性菌のスクリーニングの方法の検討, 4薬剤耐性菌の菌種名の同定及び薬剤耐性遺伝子検出方法の検討,の4点である。1に関しては,環境省の定める時期に準拠するとともに,採水地点については先行論文と同一の場所を選択し,再現性の良い結果が得られている。23に関しては,市販のMRSA選択培地を,薬剤耐性大腸菌群の検出には,特定酵素基質培地であるECC寒天培地,クロモアガーESBL培地及びクロモアガーmSuper CARBA生培地を使用することにより対象菌を鑑別することに有効な培地であることがわかったが,MRSA選択培地を除く培地は,多数の抗菌薬に自然耐性を示す自然環境生息菌のブドウ糖非発酵菌(GNFR)及びエロモナスなどの汚染菌の発育を認め,目的菌の集落の釣菌に支障が発生した。そこで,継代培養に嫌気培養を追加して行い,オキシダーゼテストの併用によりこれらの汚染菌を効率的に除外し,その支障を除去することが可能であった。4に関しては,当菌種同定には当初の16S rRNAシーケンス法の実施を変更し,MALDI-TOF MS法により迅速かつ低コストな実験が可能であった。また,薬剤耐性遺伝子解析も予定通り実施し,検討を進めている。以上を総合すると,これらのすべての項目について実験を実施し,検討を行い,これまでに学会発表を行っている点で概ね順調に成果をあげていると判断される。薬剤耐性菌の世界的な蔓延の防止対策には,ヒト,動物,環境の包括的な対策(one health)の概念をもとに取り組まれている。研究代表者らは,これまでに医療関連感染で問題となっているESBL産生大腸菌群の都市河川(多摩川)への流出の実情を明らかにし,河川が薬剤耐性菌のリザーバーとなっている危険性を提唱した。この薬剤耐性菌による公衆衛生学上の伝搬防止戦略を構築するためには,経年的なモニタリング及び詳細かつ多様な分析を行う必要性がある。2018年度はMRSA,ESBL産生大腸菌群,カルバペネマーゼ産生大腸菌群(CPE)に加え,VRE及びC. difficileの検出及び遺伝子型の分析を行った。その結果,MRSA及びVREは検出されなかった。ESBL産生大腸菌の経年的な検出頻度は,2017年度からの春季及び秋季の計3回の調査において,それぞれ,総大腸菌株のうち3.1%(10株/320株),6.0%(30株/500株)及び4.1%(52株/1268株)と経年的及び年間を通じて検出され,本河川は本耐性菌のリザーバーであることを証明した。ほかにESBL産生Klebsiellaを8株,CPEは,Enterobacer属の1菌株(IMPー1型)を検出したが,検出数は低い傾向を認めた。また,分離菌株の遺伝子解析結果は,ESBL産生大腸菌株では,CTX-M-9群, CTX-M-1群及びST131, ST38の特定の菌型の検出が優勢に認められ,医療関連感染において問題となっている菌株の型と類似性が高く,これらの特定の菌株による自然環境への拡散が示唆された。また,C. difficileでは,ToxinA+toxinB+産生株及びリボタイプの002が優勢に検出され,臨床由来株と相似していた。
新規分子標的抗腫瘍薬としてのサリドマイドを用いたオーダーメイド卵巣癌治療戦略

難治性の卵巣癌である明細胞腺癌に特異的に高発現しているHNF-1betaの機能を解析することによって、サリドマイドに類似した抗腫瘍物質を探索しようとした。HNF-1betaは腫瘍の浸潤能、抗アポトーシスおよび抗がん剤抵抗性に関与していることが判明した。さらに細胞周期に関するHNF-1betaの機能を解析した。その結果、HNF-1betaがchk1のリン酸化を持続させることにより癌細胞の持続的なチェックポイントの活性化を引き起こし、ひいては卵巣明細胞腺癌の抗癌剤抵抗性の要因の一つとなることが判明した。癌細胞の多くはDNA修復をG2/Mチェックポイントに依存しているとされ、G2/Mチェックポイントに関与するchk1は卵巣明細胞腺癌に対する新規治療薬のターゲットとなる可能性があると考えられる。癌細胞が浸潤、転移するための細胞外マトリックスや基底膜を酵素学的に破壊する物質としてウロキナーゼがある。我々は、サリドマイドがウロキナーゼ受容体蛋白の発現を低下させ、その結果、細胞増殖・浸潤を抑制することを明らかにした。今回、癌浸潤関連因子およびその受容体の発現低下作用をターゲットとした、より副作用の少ない分子標的抗腫瘍薬の開発をめざして研究を行っている。卵巣明細胞腺癌は既存の抗癌剤に抵抗性であり、卵巣癌の中でも予後が悪いとされている。その卵巣明細胞腺癌に、転写因子であるhepatocytenuclear factorl beta(HNFl-beta)が、他の卵巣癌に比して高発現していることを我々は明らかにした。そこで卵巣明細胞腺癌の細胞株を用いてHNFl-betaのmRNAの発現を確認した後、mRNAをノックダウンした。そしてノックダウンした細胞のアノイキス抵抗性と細胞浸潤能を、ノックダウンしていない細胞と比較した。その結果、HNFl-betaをノックダウンするとアノイキス抵抗性や細胞浸潤能は低下した。それ故、HNFl-betaは細胞浸潤能や抗アポトーシス能に密接に関与していると考えられる。サリドマイドによる血管新生阻害作用もMMPやウロキナーゼが関与しており、HNFl-betaと何らかの関連がある可能性がある。そこで、現在ノックダウンした細胞のDNAマイクロアレイ解析をおこなって、HNFl-betaの下流遺伝子を同定し、既知の癌細胞浸潤関因子と比較して新たなターゲットを探索中である。さらに、過去に我々が同定したサリドマイドが規定するシグナル伝達経路とHNFl-betaのシグナル伝達経路にクロストークがある可能性について研究する予定である。サリドマイドがウロキナーゼ受容体蛋白の発現を低下させ、その結果、細胞増殖・浸潤を抑制することを明らかにした。その作用機序を解明するためにマイクロアレイ実験を行ったところ、下流遺伝子としてhepatocyte nuclear factor (HNF)-1betaを同定した。癌細胞株にsiRNAを導入してHNF1-betaをノックダウンした結果、組織修復、抗アポトーシス、ストレス反応に関連する遺伝子が変動した。特に、卵巣明細胞腺癌株ではその傾向が顕著であった。さらに細胞内のシグナル伝達物質の変化をDNAマイクロアレイ、ノーザンプロット、リン酸化蛋白アレイおよびウェスタンブロット法、シグナルパスウエイ解析、Gene Ontology解析で網羅的に解析した結果、グリコーゲン代謝と密接に関与していた。これは明細胞腺癌に特徴的な病理形態を示すものと考えられる。次にHNF-1betaの下流遺伝子の探索から組織再構築と密接に関連する遺伝子群が発見された。これは上皮間葉系移行EMTといってがん細胞が上皮系細胞から間葉系細胞に変化し、浸潤・転移しやすい能力を発揮することと密接に関連している。これにはSlugやSnailといった特徴的遺伝子群が検出された。したがって、サリドマイドによる癌転移抑制にはEMTを制御することにより予後を改善している可能性が示唆された。今後我々はHNF1-betaをターゲットとしたより副作用の少ない分子標的抗腫瘍薬の開発をめざすことを考えている。前年度の研究成果として、癌細胞株にsiRNAを導入してHNF1-betaをノックダウンした結果、組織修復、抗アポトーシス、ストレス反応に関連する遺伝子が変動した。卵巣明細胞腺癌は既存の抗がん剤に抵抗性があり、新たな治療法の開発が望まれている。そこで、今年度はHNF1-betaをノックダウンした卵巣明細胞腺癌細胞株を使用して、卵巣明細胞腺癌におけるHNF1-betaの生物学的な意義を検討した。

その結果、ノックダウンした細胞株では、アノイキス抵抗性、細胞浸潤能および抗アポトーシスのが低下した。また、薬剤抵抗性について検討したところ、ノックダウンした細胞株では抗がん剤であるCPT-11に対する感受性が増強した。さらに抗がん剤感受性とHNF-1betaの関係を調べるため、HNF1-betaノックダウン群と非ノックダウン群で細胞周期の変化を検討した。その結果、HNF1-beta非ノックダウン群ではノックダウン群に比べ、G2期作動薬であるbleomycinの添加によりG2/M arrestの持続を認め、S期作動薬であるsn38の添加によりG1/Sarrestの持続を認めた。これらの細胞では、チェックポイント機構の活性化に関与するタンパクのうちchk1のリン酸化が持続していた。よって、HNF-1betaがchk1のリン酸化を持続させることにより癌細胞の持続的なチェックポイント活性化を引き起こし、ひいては卵巣明細胞腺癌の抗癌剤抵抗性の要因の一つとなると考えられた。癌細胞の多くはDNA修復をG2/Mチェックポイントに依存しているとされ、G2/Mチェックポイントに関与するchk1は卵巣明細胞腺癌に対する新規治療薬のターゲットとなる可能性があると考えられた。
三次元空間の細胞遊走におけるWASPファミリータンパク質の機能解析

がん細胞の浸潤は、細胞外基質中での細胞の遊走現象である。三次元基質下で培養されたがん細胞を経時観察すると、その遊走様式は、線維状アクチンに富む仮足を伸展しながら遊走する間葉性遊走、アクチンの集積の少ない膜ブレビングを足場として遊走するブレビング遊走、この二つの様式を併せ持つ中間型、この三者に分類される。我々はまず、様々ながん細胞がこの三種の遊走形態に大別できることを見出し、それぞれの遊走形態を司る細胞内シグナルを探索した。従来、細胞遊走は、Arp2/3複合体が重合核となって急速なアクチン重合を引き起こし、それが細胞膜を押し出すことで前進すると考えられてきた。しかし、RNAi法によりArp2/3複合体を発現抑制すると、間葉性遊走は抑制されるのに対し、中間型やブレビング遊走は全く抑制されなかった。一方、ブレビング遊走はROCK/Rho kinase阻害薬で抑制されることが分かった。すなわち、ブレビング遊走はミオシンによる収縮力を駆動力として遊走していると考えられる。当初、中間型はArp2/3複合体やROCKのどちらにも依存しないと考えられたが、遊走形態を観察すると、興味深い観察が得られた。Arp2/3複合体の発現抑制をした場合、中間型はブレビング遊走へと変化し、ROCK阻害薬存在下では間葉性遊走へと変化することが分かった。そして、中間型はその両者のシグナルを同時に遮断したときのみ、遊走が抑制された。この結果は、がん細胞の浸潤・転移を防ぐためには、Arp2/3複合体によるアクチン重合とアクトミオシン収縮の双方を抑える必要があることを示している。また、ブレビング遊走は三次元培養下でのみ頻繁に見られ、三次元での解析が重要であることを意味する。細胞生物学的には、Arp2/3複合体を介さない遊走が広範に見られ、従来考えられてきた遊走の分子機構に新たな概念をもたらす点で興味深い。がんの浸潤は、細胞外基質中での細胞の遊走現象である。三次元空間下(コラーゲンゲル基質中)で培養されたがん細胞を経時観察すると、その遊走様式は細胞によって異なる。ある種のがん細胞は基質中に線維状アクチンに富んだ仮足を伸展しながら遊走する(間葉性遊走)のに対し、他の種はアクチンの集積の少ない膜ブレビングを足場として遊走する(ブレビング遊走)。また、これらの様式を併せ持つタイプ(中間型遊走)も存在する。私はこれら異なった細胞遊走がどのような細胞内シグナルによって制御されているのか調べている。細胞遊走は、遊走先端部でArp2/3複合体による推進力の発生が必要と考えられており、Arp2/3複合体を活生化するWAVE2は遊走に必須の因子と考えられてきた。実際、本研究課題で三次元的な遊走に必要なシグナル伝達分子を調べたところ、間葉性遊走はRac-WAVE2のシグナルを必要とすることが判ったが、膜ブレビング遊走はWAVE2の活性を必要とせず、WAVEシグナルとはまったく別のシグナル伝達系、Rho/ROCKシグナルによって制御されることを見出した。更に、中間型遊走を示すHT1080ヒト線維肉腫細胞では、ROCKとWAVE2が共に遊走を制御し、どちらか一方のシグナルを遮断すると、他方への依存性が強まることを見出した。すなわち、ROCKインヒビター、あるいは、WAVE2のノックダウン単独ではHT1080細胞の遊走を抑制できないが、両者で同時に処理した時のみ、ET1080細胞の遊走は抑制された。この結果により、がん細胞は複数のシグナル伝達系を利用し、浸潤という悪性形質を獲得していると考えられる。また、三次元下での細胞遊走が複数の独立した分子機構によって制御されていることは、従来考えられてきた遊走の分子機構に新たな概念をもたらすという点で意義深い。今後は様々な細胞遊走形態が腫瘍の病理的進展過程や、それだけでなく、生体の発生過程などの生理的過程でどのような意味を持つのかを研究していきたいと考えている。

そして、中間型はその両者のシグナルを同時に遮断したときのみ、遊走が抑制された。この結果は、がん細胞の浸潤・転移を防ぐためには、Arp2/3複合体によるアクチン重合とアクトミオシン収縮の双方を抑える必要があることを示している。また、ブレビング遊走は三次元培養下でのみ頻繁に見られ、三次元での解析が重要であることを意味する。細胞生物学的には、Arp2/3複合体を介さない遊走が広範に見られ、従来考えられてきた遊走の分子機構に新たな概念をもたらす点で興味深い。
中国書画の印刷出版環境をめぐる諸問題の文化史的研究

「中国書画の印刷出版環境をめぐる諸問題の文化史的研究」の成果報告の一部として、「中国の書画伝来の一側面真跡から印刷へ」について考察した。書画の世界では、「真跡」は一点しか書き残さない、と考えるのが通例である。現存する王献之の「書跡」はすべて尺牘であり、同一の手紙を複数通書き残したとは考えられないからである。それゆえ書跡(墨跡本)は珍奇であり貴重である。古代の中国人は、一点しか現存しない「真跡」を、永久に手元において置くためや、学書の対象とするためには、どうしても「搨模本」や「臨写本」といった「副本」を作成しなければならなかった。それゆえ唐代では「搨模」が行われ、専門の「搨書人」を宮中に抱えたのである。宋代以降は、書画の文化が市民に浸透し、大衆化が進む中で、多くの書画愛好者が登場し、「刻本(翻刻本)」が数多く出現した。宋代の《淳化閣帖》原刻(992)、《大観帖》(1109)、《絳帖》(刻年不明)、《二王帖》(1206)、明代の《宝賢堂集古法帖》、陳元瑞《玉煙堂帖》、《餘〓齋法帖》続編(1613)、清代の楊守敬《鄰蘇園帖》、江標模刻などはみな《鴨頭丸帖》を刻入している。この文化現象は、一点しか現存しない「真跡」を少しでも多くの収蔵家が共有するための手段にほかならない。そして清末以降、「印刷本,(影印本)」が流布するようになるが、これもより多くの一般の愛好者に廉価で供するためだったのである。このように考えると、書画真跡の「墨跡本」の伝来は、「搨模本」や「臨写本」といった「複本」を作成する目的から出発して、「刻本」へ、さらに「印刷本」へと大衆化の流れを辿って来たと言える。言い換えれば、中国の印刷出版環境全体を象徴する変遷になろう。現代中国および台湾では、「書法は中国文化の精華である」と認識される。書法が会得できれば、中国文化に精通できるという考え方である。中国人はなぜこのように考えるのか、その理由を考察した。その方法論として、名筆とされる「書跡」を取り上げ、形態・造形上の比較検討と、「書論」と呼ばれる中国人の書法に対する理論上の考察を通じて、<形>と<心>の両面から追いかけた。実例として、東晋の書家、王献之筆《鴨頭丸帖》を取り上げた。《鴨頭丸帖》は「墨跡本」が上海博物館に伝来し、また石に刻して拓本に採り、冊子に仕立てた「法帖」による「刻本」も伝来する。明末に刻された《餘清齋法帖》はその代表である。この「墨跡本」と「刻本」の両者は非常に似通っており、他の刻本は一見すると同じよう見えるが、仔細に比較すると差異があることに気づく。この点は<形>が変容した証左になる。書法の場合、「書跡」の<形>から、書いた人の<心>を、ある程度推測することは可能であろうが、凡人にはなかなか分からないと思われる。大雑把に言えば、公私の二種類の<心>になるが、<形>はどれが本物で、どの程度本来の精神面貌を得ているのか分からない場合があるだけに、判断がつきかねることが往々にして存在する。もっとも中国の「書跡」は、政治に関与した人が書いたものが多いから、公私の別の「書跡」を見ることができよう。また「文人」の書跡は「私心」の好個の例である。「書跡」は<形>から<心>を見るしか方法が無い。しかし、同じ書跡であっても、<形>が変容する場合があるので、どの<形>から<心>を見るかが肝要である。よって普段から真跡(本物)をできる限り目にし、鑑賞し、原形・真形を脳裏に焼きつかせておかなければならない。この体験を積み、多くの<形>を把握してはじめて、書跡の<心>が見え始めるのである。

宋代の《淳化閣帖》原刻(992)、《大観帖》(1109)、《絳帖》(刻年不明)、《二王帖》(1206)、明代の《宝賢堂集古法帖》、陳元瑞《玉煙堂帖》、《餘〓齋法帖》続編(1613)、清代の楊守敬《鄰蘇園帖》、江標模刻などはみな《鴨頭丸帖》を刻入している。この文化現象は、一点しか現存しない「真跡」を少しでも多くの収蔵家が共有するための手段にほかならない。そして清末以降、「印刷本,(影印本)」が流布するようになるが、これもより多くの一般の愛好者に廉価で供するためだったのである。このように考えると、書画真跡の「墨跡本」の伝来は、「搨模本」や「臨写本」といった「複本」を作成する目的から出発して、「刻本」へ、さらに「印刷本」へと大衆化の流れを辿って来たと言える。言い換えれば、中国の印刷出版環境全体を象徴する変遷になろう。