hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
神経特異的蛋白質遺伝子の発現調節機構の解明

しかし、実際解析してみると、PLPプロモ-タ-にはMBPの転写調節に重要な役割を果たしていることの示されたNF-1様因子の結合部位が見いだされないし、5′上流域1.5kbのDNA断片に神経系の細胞特異的に転写を開始する能力を認められなかった。以上のことから脳神経系の細胞では、その高次な機能に対応するかのように、見かけ上同じ様な転写制御を受けている遺伝子でもかなり違った機構で調節をしていることが示唆された。脳神経系では多種多様の細胞が複雑でしかも整然とした構造を構築している。細胞に特有の性質を与えている根本には、その細胞で特異的に発現している蛋白質があるので我々は脳神経系で特異的に発現している蛋白質の遺伝子をクロ-ニングし、その遺伝子の発現の制御機構を解析したので報告する。われわれはニュ-ロンのマ-カ-遺伝子としてニュ-ロフィラメント(NF)遺伝子、アストロサイトはグリア線維性酸性蛋白質(GFAP)遺伝子、オリゴデンドロサイトはミエリン塩基性蛋白質(MBP)とミエリンプロテオリピド蛋白質(PLP)遺伝子を選び解析した。MBP遺伝子はグリオ-マとニュ-ロブラスト-マのハイブリッド細胞であるNG108-15細胞で効率よく転写されることが明かとなった。また、転写開始部位上流235bpあればMBPプロモ-タ-は効率よく転写されることが明かとなった。そこで上流200bpほどの部分をより細かく区切った欠失変異体が作成したところ、-139から-118に削られると、著しく活性の減少することが明かとなった。この領域には転写制御因子の1つであるNF-1の認識配列に近いboxが存在する。-89から-75に短くなっても活性がさらに減少するが、この領域にはGC box及びCAAT box様の塩基配列が存在する。次にどのような細胞因子がMBP転写に必須なのか調ベるためにin vitro転写によく用いられるHaLa細胞の抽出液でMBPプロモ-タ-領域を含むDNA断片を転写させたところ、in vivoの転写開始部位と同じ場所から転写されることがわかった。MBPプロモ-タ-領域のNF-1,GC box,CAAT box,TATAbox様の塩基配列の配列に変異を加えて解析したところ、CAAT box以外はすべて変異によって転写効率が減少し、NF-1,SP-1などの細胞因子がMBP遺伝子の転写に寄与していることが示唆された。なかでもNF-1結合部位はMBPの組織特異的な発現に必要であり、脳組織特異的なNF-1様因子の存在が示唆された。GFAP遺伝子の発現調節機構をMBP遺伝子と比較しながら解析を進めた。GFAP遺伝子は、GFAPcDNAをプロ-ブにしてマウスゲノムライブラリ-よりクロ-ニングし転写開始部位を決定し、その上流域2.5kbの塩基配列を決定した。種々の細胞でGFAP遺伝子プロモ-タ-の活性を調ベると、GFAP産生細胞で特に活性が高く、-256bp以内にこの細胞特異性を決めるcisエレメントが存在することが判明した。核内因子の結合部位をDNaseIフットプリント法を用いて解析すると、-82-104(I)、-104-124(II)、-140-163(III)の三つの領域に脳組織やC6の核内因子が結合した。Iの領域にはAPー2が、IIの領域にはNF-1が、IIIの領域にはCRE(cyclicAMP responsible element)のモチ-
人為的土地改変による液状化災害に対する脆弱性への影響評価

1)2018年9月に発生した北海道胆振東部地震における札幌市清田区の丘陵造成地(美しが丘地区と清田六条、清田七条地区)の地盤被害の分布、それらによる被害状況について、現地踏査を行い明らかにした。その結果、清田区美しが丘地区では、複数の地点において噴砂(液状化)の発生が認められ、その周囲において戸建家屋の不同沈下、アスファルト路面の波打ちなどの液状化に起因するとみられる被害が発生していた。清田区清田六条、清田七条地区においては、宅地地盤や路面における亀裂・圧縮変形(損傷)、盛土の変形などが発生し、それに伴う家屋の傾斜も生じていた。この地区の噴砂の発生は限定的であった。また、それらの発生地点の土地条件、特に人為的地形改変との関係について、多時期の地理空間情報を用いたGIS解析、SfM(Structure from Motion)解析ソフトとGISを用いた本地区造成前の地形復元・解析などを行い、検討した。その結果、美しが丘地区における液状化は、宅地造成以前には谷地形が存在し、1990年代以降に造成された盛土地において集中的に発生したことが明らかとなり、盛土材料が液状化したことが考えられた。清田六条、清田七条地区では、1960年代以降の盛土地や切土と盛土の境界部(切盛境界)において地盤被害が集中しており、盛土の地すべり的変動が生じたものと思われる。2)2011年東北地方太平洋沖地震における鬼怒川低地の液状化発生地点の土地条件について、多時期の地理空間情報を用いてGISにより解析を行った。その結果、既存研究では自然地盤における液状化発生とみなされていた地点のうち、1960年代以降の砂利採掘が行われ、採掘終了後に埋め戻され農地化された地点が多く存在していた。このことから、既存研究においては、自然地盤における液状化のしやすさを過大評価している可能性があることが指摘された。2018年北海道胆振東部地震における丘陵造成地における液状化発生地点の土地条件について、多時期の地理空間情報を用いたGIS解析、SfM解析などを行うことにより、その概要について把握することができた。これまでの研究では2011年東北地方太平洋沖地震や2016年熊本地震における低地の液状化事例を精査し、低地や台地における人為的土地改変が液状化脆弱性に与えた影響に関するデータを得てきたが、丘陵地における切土・盛土による造成地を対象とした地域での解析事例を加えたことにより、人為的土地改変による液状化脆弱性への影響をより多角的・広域的に検討することが可能となった。東北地方太平洋沖地震における液状化発生地点の土地条件について、鬼怒川低地における事例を再検討し、精査した結果、既存研究では後背湿地や旧河道等の自然地盤における液状化とみなされてきた地点のなかには、1970年代以降の砂利採掘履歴を有する地点が多数含まれていることを明示できた。これらのことから、本研究課題である人為的土地改変による液状化脆弱性への影響を見積もる際のデータについて、おおむね順調に得てきたものとみなせる。1)これまでに得えられた研究成果から、採掘跡地における液状化発生危険度は高く、既存の液状化危険度評価においてその影響が十分に組み込まれていないことが明らかとなっている。そのため、平野部の採掘跡地の抽出について、かつて砂利の採掘が盛んに行われていたことが知られているが、その詳細の分布データのない関東平野の多摩川および相模川などの河川流域を対象として、多時期の地理空間情報を用いたGIS解析、SfM解析、住民を対象とした聞き取り調査などから砂利採掘跡地等の人為的土地改変地の詳細な分布を明らかにする。また、国や自治体など各機関が保有するボーリングデータの精査から表層地盤データを得て、それらの人為的土地改変が液状化脆弱性に与えた影響を検討し、より精度の高い液状化危険度評価につなげていく予定である。2)次年度が本研究の最終年度となる予定であるため、研究成果の取りまとめを進め、学会誌や商業誌への投稿を積極的に進め、地域社会に研究成果を還元し、諸地域の液状化危険度評価に関するデータを提供していくことにより、諸地域の液状化災害への防災・減災への取り組みに貢献していきたい。2016年熊本地震により、熊本市南区の近見町から元三町にかけて南北にのびる自然堤防上の幅100m以内の細長い(帯状の)領域において、液状化被害が集中的に発生した。この「液状化の帯」の土地条件、土地履歴を明らかにすることを目的として、中世以降の文書の記述内容、絵図や地形図の描画内容などを吟味したうえで、この地域の土地条件の変遷を検討した。本研究で用いた史料は、熊本県立図書館や熊本市歴史文書資料室などが所蔵・公開している中世から近世にかけての文書や江戸期の絵図、伊能図、明治期以降の迅速測図や地形図などである。

その結果、江戸期以降の絵図、伊能図や明治期以降の迅速測図、地形図には「液状化の帯」に該当する領域に河川の存在は認められず、白川河道は現在とほぼ同位置にあったこと、「液状化の帯」の南端付近に位置する寺院に残された13世紀後期の文書(大慈寺文書)には同市南区川尻付近を白川が南流し、白川と緑川が合流していたとする記述があることから、13世紀後半には白川が「液状化の帯」に該当する領域を流下していた可能性があること、江戸初期の史料から、江戸時代初期には「液状化の帯」に該当する領域に小規模な河川(白川旧河道)が存在し、その小河川は明治期までに消失(陸化)していたこと、などが示された。また、2011年東北地方太平洋沖地震において、鬼怒川・小貝川低地では多数の地点で液状化が発生したことが既存研究において指摘され、それらは後背湿地や旧河道などにおける液状化発生とみなされてきた。それらの液状化発生地点の土地条件について、多時期の迅速測図、旧版地形図や空中写真などの地理空間情報を用いて再検討したところ、おもに1960年代以降に砂利採掘履歴を有し、そのようなかつての砂利採取場を埋め戻した領域(砂利採取場跡地)において液状化が多発していたことが明らかとなった。2016年熊本地震において液状化被害が集中的に発生した領域(液状化の帯)の土地条件について、既存研究において白川河道の変遷との関係が議論され、この「液状化の帯」に該当する領域をかつての白川が流下していたことが指摘されてきた。しかし、それを示す具体的証拠を欠いており、詳細は不明であった。本研究では、古文書、絵図、迅速測図や旧版地形図など、おもに歴史史料を用いることによって、これまで不明な点が多く残されていた「液状化の帯」と白川河道の変遷との関係について、新たな知見を得ることができた。とくに、江戸時代初期における「液状化の帯」の土地条件について、この領域にかつて白川が流下していた名残りと思われる小河川の存在が示唆されたことは、「液状化の帯」の発生要因を検討するうえで重要なことである。2011年東北地方太平洋沖地震による鬼怒川・小貝川低地における液状化発生地点の土地条件について、既存研究ではその多くが後背湿地や旧河道における液状化発生とみなしていたが、1960年代以降に造成された砂利採取場を埋め戻した領域において液状化が多発していたことを見出した。これは、多くの既存研究にはない新たな知見である。以上のことから、本研究は「おおむね順調に進展している」と判断した。1)2018年9月に発生した北海道胆振東部地震における札幌市清田区の丘陵造成地(美しが丘地区と清田六条、清田七条地区)の地盤被害の分布、それらによる被害状況について、現地踏査を行い明らかにした。その結果、清田区美しが丘地区では、複数の地点において噴砂(液状化)の発生が認められ、その周囲において戸建家屋の不同沈下、アスファルト路面の波打ちなどの液状化に起因するとみられる被害が発生していた。清田区清田六条、清田七条地区においては、宅地地盤や路面における亀裂・圧縮変形(損傷)、盛土の変形などが発生し、それに伴う家屋の傾斜も生じていた。この地区の噴砂の発生は限定的であった。また、それらの発生地点の土地条件、特に人為的地形改変との関係について、多時期の地理空間情報を用いたGIS解析、SfM(Structure from Motion)解析ソフトとGISを用いた本地区造成前の地形復元・解析などを行い、検討した。その結果、美しが丘地区における液状化は、宅地造成以前には谷地形が存在し、1990年代以降に造成された盛土地において集中的に発生したことが明らかとなり、盛土材料が液状化したことが考えられた。清田六条、清田七条地区では、1960年代以降の盛土地や切土と盛土の境界部(切盛境界)において地盤被害が集中しており、盛土の地すべり的変動が生じたものと思われる。2)2011年東北地方太平洋沖地震における鬼怒川低地の液状化発生地点の土地条件について、多時期の地理空間情報を用いてGISにより解析を行った。
架橋ヘテロ原子化合物の構築を基盤とする革新的アルカロイド不斉合成法の開拓

5員環,6員環および7員環のラクタムを有するN-ジアゾアセチル誘導体をカルボニルイリド前駆体として,種々の3-(2-アルケノイル)-2-オキサゾリジノンとの不斉付加環化反応が良好なエナンチオ選択性で進行することを見出し,ポリヒドロキシインドリジジンの合成中間体として有用であることを明らかにした.また,1-ジアゾ-5-アリール-2,5-ペンタンジオンをカルボニルイリド前駆体として,N-メチルインドール誘導体との不斉付加環化反応が良好なエナンチオ選択性で進行することを明らかにした.さらに,2-ジアゾイミン誘導体を環状アゾメチンイリド前駆体とする不斉付加環化反応を開発した.前年度までに,N-ジアゾアセチルラクタム誘導体を前駆体として発生させた環状カルボニルイリドと3-(2-アルケノイル)-2-オキサゾリジノンとの不斉付加環化反応を検討し,5,6,7員環ラクタム部を有するジアゾ化合物を基質とし,キラルなビス(オキサゾリニル)ピリジン-ランタニド金属錯体(10 mol%)存在下に反応を行うと,良好なエナンチオ選択性(up to 95% ee)でexo-付加体が選択的に得られること明らかにした.本年度はCastanospermineやSwainsonineなどの光学活性インドリジジン天然物にみられる多酸素置換誘導体の不斉合成法の開発に関する検討として,引き続き,3-アセトキシプロペノイルオキサゾリジノン誘導体との不斉付加環化反応を検討したところ,78-81% eeの比較的良好なエナンチオ選択性でエポキシ架橋をもつexo-付加体が選択的に得られることを見出した.また,N-ジアゾアセチル-2-ピロリジノンとの反応で得られた付加体は,メチルエステルへの誘導,7位水酸基のTBS保護体への変換,続くWeinrebアミドへの誘導が可能であることを明らかにした.更に,Weinrebアミド誘導体をDIBALにより処理すると,Weinrebアミドを損なうことなく立体選択的にエポキシ架橋を開環することができ,6,7-ジヒドロキシ-8-アセチルインドリジジン誘導体へ変換できることを明らかにした.一方,3-アクリロイル-2-オキサゾリジノンを親双極子剤とするexo-付加環化体は,p-ブロモベンジルエステルへ誘導およびエポキシ架橋開環とBaeyer-Villiger酸化を経由して立体保持でのアセトキシ官能基への変換に成功した.また, 8-アセトキシ誘導体を水素化アルミニウムリチウムで還元すると光学活性6,8-ジヒドロキシインドリジジン体が得られることも明らかにした.5員環,6員環および7員環のラクタムを有するN-ジアゾアセチル誘導体をカルボニルイリド前駆体として,種々の3-(2-アルケノイル)-2-オキサゾリジノンとの不斉付加環化反応が良好なエナンチオ選択性で進行することを見出し,ポリヒドロキシインドリジジンの合成中間体として有用であることを明らかにした.また,1-ジアゾ-5-アリール-2,5-ペンタンジオンをカルボニルイリド前駆体として,N-メチルインドール誘導体との不斉付加環化反応が良好なエナンチオ選択性で進行することを明らかにした.さらに,2-ジアゾイミン誘導体を環状アゾメチンイリド前駆体とする不斉付加環化反応を開発した.N原子上にジアゾアセチル基を有するラクタム基質をカルボニルイリド前駆体とするアルケン類との分子内カルベノイド-カルボニル環化-1,3-双極性付加環化反応が高エナンチオ選択的に進行すれば,橋頭位にN原子を有する含窒素二環式ヘテロ環化合物の新規不斉合成法となることが期待される.そこで, N-ジアゾアセチルラクタム誘導体を前駆体として発生させた環状カルボニルイリドと3-(2-アルケノイル)-2-オキサゾリジノンとの不斉付加環化反応を検討した.2-ピロリジノンのみならず2-ピペリジノンおよびε-カプロラクタムをラクタム部として有するジアゾ化合物を基質として,キラルなビス(オキサゾリニル)ピリジン(Pybox)-ランタニド金属錯体(10 mol%)を触媒とする反応を行うと,アクリル酸誘導体を親双極子剤として用いる場合には,ラクタム環の員数により最適なランタニド金属が異なったが,置換基を有するアルケンを親双極子剤とする場合には,Laを用いた時に,最も高いエナンチオ選択性を示し,中程度から良好なエナンチオ選択性(74-95% ee)でexo-付加体が選択的に得られることが明らかとなった.N-ジアゾアセチル-2-ピロリジノンと3-アクリロイル-2-オキサゾリジノンとの反応で得られた付加体(87% ee)のオキサゾリジノン部をp-ブロモベンジルエステルへ誘導すると,クロマトグラフィーによりexo体をendo体から分離することができ,再結晶により光学的に純粋なexo体(>99% ee)を得ることができた.エポキシ架橋の開環は,トリエチルシランにより容易に進行し,目的とする開環体を単一の生成物として与えた.続いて,Barton-McCombie反応によりヒドロキシル基を除去後,水素化アルミニウムリチウムにより還元すると,光学純粋の高い(+)-Tashiromineが得られた.ジアゾイミン誘導体を環状アゾメチンイリド前駆体とする8-アザビシクロ[3.2.1]

オクタン骨格の不斉合成に関するテーマでは,2-(2-ジアゾアセチル)ベンズアルデヒドO-メチルオキシムをジアゾ基質とする2-アクリロイル-3-ピラゾリジノン誘導体との反応において,(R)-ビナフチルジアミン誘導体とトリフルオロメタンスルホン酸銅(II)から調製した錯体(20 mol%)を触媒として,反応の再現性を確立し,収率82-92%,エナンチオマー過剰率97->99% eeでexo-体のみが選択的に得られることを明らかにした.また, 2-ジアゾ-1-[2-(4,5-ジヒドロイソオキサゾール-3-イル)フェニル]エタノン誘導体を前駆体とする反応においては,イソオキサゾリン環上の5位のジメチル基やベンゼン環状上の4位メチル基に関する一般性の検討を行い, (R)-ビナフチルジイミン誘導体とテトラフルオロホウ酸ニッケル(II)六水和物から調製した錯体(20 mol%)を触媒として用いると,収率52-53%,エナンチオマー過剰率89-95% eeでexo-体のみが選択的に得られることを見出した.1-ジアゾ-5-フェニル-2,5-ペンタンジオン誘導体をカルボニルイリド前駆体とした5-ブロモ-1-メチルインドール親双極子剤との不斉環化反応においては,ジアゾ基質のベンゼン環状上のp-位の置換基が選択性に及ぼす効果を検討し,酢酸ロジウム(2 mol%)およびキラルなビス(オキサゾリニル)ピリジン-ルテチウムトリフラート錯体(10 mol%)を組み合わせた触媒系を用いる条件下,メチル基,エチル基,メトキシ基,およびブロモ基などを有する基質に対して,良好なexo選択性(exo:endo = 80:20-94:6)並びに高エナンチオ選択性(85->98%)で付加環化体が得られることを明らかにした.有機合成化学N-ジアゾアセチルラクタム誘導体を前駆体として発生させた環状カルボニルイリドの不斉付加環化と得られたエポキシ架橋付加環化体を用いる多酸素官能化インドリジジン誘導体の合成に関しては,光学活性な6,7-ジヒドロキシ-8-アセチルインドリジジン誘導体や6,8-ジヒドロキシインドリジジン体の合成に成功している.また,(S)-3-t-ブチルジメチルシリルオキシ-N-ジアゾアセチル-2-ピロリジノンより発生させた環状カルボニルイリドと3-アセトキシプロペノイルオキサゾリジノン誘導体との付加環化反応は,ルイス酸非存在下において,生成可能な4種のジアステレオマーの内1種類のexo-付加体が93%のジアステレオ選択性で選択的に得られることを見出しており,X線結晶構造解析によりその立体構造を明にした.この付加環化体のWeinrebアミド誘導体への変換にも成功しており,標的化合物であるDeoxycastanospermine,CastanospermineおよびSwainsonineの合成に向けて必要な鍵反応に関する有望な結果を得ている.環状カルボニルイリドとインドール誘導体との不斉付加環化反応に関しては,ジアゾ基質として1-アセチル-1-ジアゾアセチルシクロプロパン誘導体を基質とする検討を行い,収率はあまり高くないものの78%程度のエナンチオ選択性で,endo-付加体(endo : exo = 81 : 19)を選択的に得ることに成功している.ジアゾイミン誘導体をアゾメチンイリド前駆体とする反応に関しては若干のジアゾ基質一般性の拡張を行い,進展がみられている.ジアゾイミド誘導体をカルボニルイリド前駆体とする反応の検討に関しては,実績の概要で示した成果以外にラセミ体の付加環化体を用いて,上述したp-ブロモベンジルエステルへ誘導およびエポキシ架橋開環とBaeyer-Villiger酸化を経由する立体保持でのアセトキシ官能基への変換に成功したが,標的化合物であるCastanospermineおよびSwainsonineの合成についてはこれまでの予備的成果のほかは大きな進展はない.
単球を担体としたヒト悪性グリオーマに対する遺伝子ミサイル療法の開発

単球を担体とした悪性脳腫瘍の新しい治療戦略を確立することを目的として、以下の実験を遂行した。1)まず、単球特異的ケモカインMCP-1を発現している腫瘍局所に単球を効率的に集積させる方法を開発するために、単球上のMCP-1受容体(CCR2)の発現を上昇させる手段について検討した。その目的で、CCR2遺伝子をクローニングして、プロモーター領域の構造的・機能的解析を行った。構造的には、CCR2のプロモーターはTATA boxを持ち、その他にGATA配列、C/EBP結合配列、オクタマー配列などの組織特異的シス配列が多数存在した。また、機能的には、ルシフェラーゼを用いてプロモーターの様々な欠失変異体や部位特異的変異を導入することで、TATA boxのすぐ上流にあるオクタマー配列と非翻訳領域内に連続して存在するC/EBP結合配列が重要な働きを行っていることが発見された。さらに、ゲルシフト・アッセイにより前者にはOct-1が、後者にはC/EBPファミリーが結合することを明らかにした(J.Biol.Chemに掲載予定)。これをもとに、CCR2の発現を変化させる刺激についてスクリーニングしたところTNF-alpha,MCP-1によりCCR2の発現が上昇すること、PMAにより発現が消失することがわかった。これらの変化にOct-1やC/EBPファミリーが如何に関与しているかについて引き続き研究を行っている。2)次に、ラットより単球を分離して蛍光色素ラベルし、これをMCP-1産生腫瘍を移植した別のラットに戻す実験を行ったところ、集積効率は低いものの、腫瘍局所に単球が浸潤している像が観察された。今後治療法として確立するためには1)の成果を基により効率を上げる必要性があると考えている。ヒト悪性グリオーマは単球遊走因子(MCP-1)を高レベルに発現する腫瘍の1つである。我々は、単球に特異的に発現する遺伝子のプロモーター(単球遊走因子受容体遺伝子のプロモーター)を利用して、その下流に細胞障害活性をもつ蛋白質を組み込んだコンストラクトを作成し、これを蛋白質球に遺伝子導入することでグリオーマを代表とするMCP-1産生腫瘍に対するターゲット療法の開発に取り組んでいる。この目的のため本年度は、単球特異的な転写活性に必要十分な5'-flanking regionの領域の解析を行った。これまでにヒト遺伝子ライブラリーから単離した単球遊走因子受容体(CCR2)のプロモーターにはTATA box, CATT boxが存在し、その他に組織特異的なcos-regulatory elementがクラスターしていることを報告した。その領域の特徴を基に作成した欠失変異体を用いたルシフェラーゼ・アッセイにより今回我々はTATA boxの上流30bpの領域と5'非翻訳領域がその活性に重要であることをつきとめた。TATA box上流の30bp領域にはoctamer sequenceが存在しており、gel shift assayにより同領域に転写因子Oct-1が特異的に結合し、転写活性を2倍に上昇させていることがわかった。一方、5'非翻訳領域にはc/FBP結合配列が存在し、CCR2の組織特異的転写活性に必須であることが確認された。半球特異的ケモカインMCP-1を発現している悪性グリオーマなどの腫瘍局所に単球を特異的かつ効率的に集積させ、腫瘍の増殖を抑える方法を開発するために、本年度は単球上のMCP-1受容体(CCR2)の発現を上昇させる手段についての検討を行った。その目的のために、既にクローニングに成功したCCR2遺伝子のプロモーター領域の構造的・機能的解析を行った。その結果、1)構造的には、CCR2のプロモーターはTATA boxを持ち、その他にGATA配列、C/EBP結合配列、オクタマー配列などの組織特異的シス配列が多数存在した。

2)機能的には、ルシフェラーゼを用いてプロモーターの様々な欠失変異体や部位特異的変異を導入することで、TATAboxのすぐ上流にあるオクタマー配列と非翻訳領域内に連続して存在するC/EBP結合配列が転写活性に重要な働きを行っていることが発見された。3)さらに、ゲルシフト・アッセイにより前者にはOct-1が、後者にはC/EBPファミリーが結合することを明らかにした(J.Biol.Chem,1999)。これをもとに、CCR2の発現を変化させる刺激についてスクリーニングしたところPMA刺激によりTHP-1細胞はマクロファージへと分化し、発現が完全に消失することがわかった。この変化にはOct-1やC/EBPファミリーのプロモーター領域への結合が抑制されることが原因であることも突き止めた。また、最近CCR2の発現を上昇させるとして報告されたIL2の影響も検討したが、我々の系ではほとんど上昇が見られなかった。
看護師の判断力評価ツール：「患者の治療決定における看護支援振り返り」尺度の洗練化

本研究の目的は、看護師の判断力評価ツールである、「患者の治療決定における看護支援振り返り」尺度の洗練化である。看護師は専門職としてたえず自身を評価し、評価の成果を得るべく努力することで、専門性を深めるといった発展が期待されている。本尺度を看護師が活用することで、患者の治療決定のために行った看護支援を評価し、判断力の向上に向けた自己学習やキャリア発達を促進する機会となりえる。本尺度の開発にあたっては、先行研究にて一定の信頼性と妥当性があることを確認しており、看護師が臨床で治療決定の支援をする場面での判断力を自己評価するツールとして活用することが可能であると考える。本研究により大規模調査を実施することで尺度を洗練し、実用化に向けた方略を検討していく。また、実用化には、影響要因による振り返りの特徴も明らかにする必要があると考えた。平成30年度は、研究計画に従い自記式質問紙による調査を行った。調査準備として、これまでの研究で得た結果を検討し、調査項目を決定した。研究対象者は看護基礎教育終了後の臨床経験1年以上で、治療決定の支援を日常的に実践している看護師とした。対象施設は個人・施設の特定回避のために複数の施設とし、全国のがん診療連携拠点病院、難病医療拠点病院、救命救急センターをもつ施設とした。調査にあたっては、対象者の所属する病院の看護部管理者に連絡し、調査にあたっての承諾を得た。承諾を得た施設の対象者に調査用紙を配布し、回収を進めている。対象者が所属する施設からの承諾を得るにあたっては、対象者の選択の負担を加味して、1施設に依頼する部数を減らし全体の施設数を増やした。そのため、対象者の人数確保が難しくなり、配布数は目標数には及ばなかった。調査用紙の回収は順調に回収がされており、解析が可能なデータ数の確保ができており、今年度は調査結果の分析と検討を予定している。調査のための支出費内容の変更に伴い全体の支出額が減少した。翌年度は、分析や発表等の準備のための費用にあてていく。
18世期中期から後期にかけてのナポリの喜劇的オペラの変容

本年度は、東京、およびイタリア・ナポリにおいて在外研究を行った。具体的には、前年度より行ってきたナポリ銀行文書館における1770年代、そして90年代の民間劇場支配人の銀行取引記録の調査、ナポリ音楽院付属図書館、および東京・国立音楽大学において対象とする同期の喜劇オペラ楽譜の調査である。上記の調査において、国立音楽大学コレクションにおいて発見したチマローザ作曲《秘密の結婚》(1792、ウィーン初演)楽譜を、これまで消失したと考えられてきた1793年のナポリ初演版楽譜であることを同定することができた。そして、そこに含まれる知られざる2曲の差し替えアリアのうち1曲は、現時点における世界唯一の現存例となっている。さらに山田は、この1793年のナポリ上演時の興行師をG.コレッタであると特定しながら、ナポリ銀行歴史文書館において、コレッタの銀行口座の調査を行うことで、国立音楽大学に見つかったナポリ版楽譜を演奏した歌手、演奏家たちの名前すべてを明らかにした。その結果、この差し替えアリアを歌った覆面歌手をテレーサ・ベルティノッティであると明らかにし、関係者の待遇(賃金)をも明らかにしたが、さらにこの数値を、筆者が前年度までに完了していた1770年代の賃金水準と賃金水準と比較することにより、この20年の間、器楽奏者の賃金は一定であったのに対し、歌手の賃金は何と約8倍にも高められていたことを同定し、本研究テーマである"喜劇オペラ"の変容(高踏化)を、経済史の観点からも実証することに成功した。以上の成果は、イタリア音楽学会SIdM第12回大会(ペーザロ音楽院)、バーリ音楽院で口頭発表されたほか、次ページに記すように内外の学術誌において発表され、高い評価を受けた。またこの《秘密の結婚》ナポリ版は、山田の監修・校訂のもと、2007年2月に関西二期会により尼崎において復活初演されることが決定した。本年度は、主にイタリア・ナポリにおいて研究を行った。具体的には、ナポリ銀行歴史文書館(Archivio Storico dell Istituto Banco di Napoli-Fondazione)における1770年代、1790年代の民間劇場興行師の銀行取引記録の調査、ならびにナポリ音楽院付属図書館において対象とする同期の喜劇オペラの楽譜に基づく作品研究を中心とする史料研究である。その成果は次頁に記す通り、日本とイタリア両国における査読誌において公表されたほか、イタリア音楽学会全国大会(SIdM)、バーリ音楽院主催シンポジウム、日本音楽学会全国大会など、国内外の専門学会においても口頭発表が行われた(来年度論文として公表予定)。本年度の特徴は、代表者がナポリ銀行史料から歴史的位置付けを確定し、パリ、ブリュッセル、ボローニャ等において楽譜・台本を収集・発掘したピッチンニ作曲、3幕の喜劇オペラ『アメリカのナポリ人』(1768、ナポリ)の楽譜校訂を行ったことである。これをうけ、この時代のオペラ上演を専門とするアントーニオ・フローリオ率いるナポリのバロック・オーケストラ《ピエタ・デイ・トゥルキーニ》、並びにフランス政府、バーリ音楽院は、2005年10月フランスのアンブロネAmbronay古楽祭において約240年ぶりの本作品の復活上演を決定し、本校訂譜もまたイタリアにおいて出版されることとなった。上記の活動により、2005年度には既にイタリア音楽学会全国大会等における招待研究発表が予定されるほか、史料研究においてもナポリ劇場史における第一人者であるイタリア・アヴェリーノ音楽院パオロジョヴァンニ・マイオーネ教授、ならびにアメリカ・ノースキャロライン大学アンソニー・デルドンナ助教授と共同プロジェクトを組み、国際的連携の元、対象とする当該研究をさらに推進させることとなった。
言語的・非言語的コミュニケーションを活用する社会的スキル向上の研究

1)3者間会話における発話行動と他者認知との関係話し合いの進め方について、互いに親しくなることを意図させた親密条件、あるいは、話題を提示し、結論を出すように話し合う討論条件を設定して(18分間、対面状況で男女同性3人による)行った会話データ(23組)を用いて、逐語記録化し、発話行動のコード分析(トピックの開始、情報追加、具体化、要約等)を行い、両条件間の比較を行った。討論条件では、具体化、要約などの比率が多く、話を深化させるのに対し、親密条件では浅いが多様な情報交換の特徴を示す。また、親密条件では発話量が多いことは話しやすさと結びついており、発話スタイルと他者認知との関係についていくつかの知見が得られた。2)解読実験上記会話実験データの中から、討論、親密化条件、男女各1組の話し合い場面を各2分間抽出し、これを男女大学生393名(1群:202、2群:191名)に提示し、話し合いのまとめ、和やかさ、緊張度についての評定、その手がかりとしての非言語的コミュニケーション(NVC)・チャネルについての評定を求めた。なお、提示に際し、既知・未知との情報を操作して、この情報との関連も検討した。その結果、まとめの程度の判断は手の動きの多寡、和やかさではうなずきと顔面表情、緊張度は視線、発言が手がかり性を有していた。非言語的表出性の高い人は場をまとめているという評定をより強く行う傾向も認められた。いくつかのチャネルについては、性差も認められた。3)会話行動に見られる同調傾向と印象形成との関係初対面16組のデータを基にして、NVCの類似化の現象、および、うなずき、視線行動が会話満足度や対人的な印象にどう関係するのかについて検討した。うなずきは討論条件で会話満足度や好印象と、親密条件では笑顔が好印象をもたらす(討論条件では逆)など、NVCの機能が脈絡依存であることが認められた。また、二者・三者が同じにうなずくことが会話満足度と有意な相関を示すことなども示された。4)社会的スキル・トレーニング参加募集に応じた男女大学生2群(15、16名)を対象として、週1回9セッションのコミュニケーション・スキル向上を目指した実習を行った。その結果、実習前後で、積極性、表現力等の有意な上昇が確認された。さらに、個人差との関係を勘案してプログラム内容の改良を検討しつつある。1.3人間コミュニケーション実験話し合いの進め方について、互いに親しくなるように(親和化条件)あるいは、話題を提示し、結論を出せるように話し合い(討論条件)を設定した(18分間、対面状況で男女同性3人による)。対象組数は、23組(69名)。話し合い後には、他のメンバーについての印象評定、参加の積極性等についての評定を求めた。この結果を基に、発話逐語記録から、発話のラリー、内容分析、視線、ジェスチャーのパターンを条件との関連で、分析中である。

初対面討親既知討親男33女55男11女41計23組2.解読実験上記実験データの中から、討論、親密化条件、男女各1組の話し合い場面を各2分間抽出し、これを男女大学生202名に提示し、話し合いの積極度、親密化促進度、緊張度についての評定、その手がかりとしてのコミュニケーション・チャネルについての評定を求めた。なお、提示に際し、既知・未知との情報を操作して、この情報との関連も検討している。結果については、現在分析中。他の提示条件についての実験は、引き続き実施する。3.苦手、得手の場面、他者との関係について調査男女大学生221名を対象に苦手(得意)とする対人場面に関する自由記述の内容と社会的スキル(ACTによる)との関連性を検討した。初対面の人と、年長者との接し方、顔見知り程度の人との会話に苦手意識を抱いていた。また高ACT男性は、より積極的・主張的な対人行動に苦手意識を感じていた。得意な場面としては、その場限りの相手に対するマニュアル的な行動が多く挙げられた。女性は身内との関係が円滑で、低ACT男性は自分の支配力の及びやすい関係を挙げていた。4.顔面表情表出の実験感情表出の社会的要因の影響を探るために、感情教示法と写真教示法、及び単独条件と同室条件における怒りと悲しみの表情について、FACSに基づくAU単位の分析を行った。その結果、悲しみの表情では単独条件と同室条件において示された。怒りと悲しみとでは異なる教示・条件の差が表れることが見出された。これらの結果から、社会的スキルのモジュールを抽出し、次年度のトレーニングプログラム作成の展開に備える。1)3者間会話における発話行動と他者認知との関係話し合いの進め方について、互いに親しくなることを意図させた親密条件、あるいは、話題を提示し、結論を出すように話し合う討論条件を設定して(18分間、対面状況で男女同性3人による)行った会話データ(23組)を用いて、逐語記録化し、発話行動のコード分析(トピックの開始、情報追加、具体化、要約等)を行い、両条件間の比較を行った。討論条件では、具体化、要約などの比率が多く、話を深化させるのに対し、親密条件では浅いが多様な情報交換の特徴を示す。また、親密条件では発話量が多いことは話しやすさと結びついており、発話スタイルと他者認知との関係についていくつかの知見が得られた。2)解読実験上記会話実験データの中から、討論、親密化条件、男女各1組の話し合い場面を各2分間抽出し、これを男女大学生393名(1群:202、2群:191名)に提示し、話し合いのまとめ、和やかさ、緊張度についての評定、その手がかりとしての非言語的コミュニケーション(NVC)・チャネルについての評定を求めた。なお、提示に際し、既知・未知との情報を操作して、この情報との関連も検討した。その結果、まとめの程度の判断は手の動きの多寡、和やかさではうなずきと顔面表情、緊張度は視線、発音が手がかり性を有していた。非言語的表出性の高い人は場をまとめているという評定をより強く行う傾向も認められた。いくつかのチャネルについては、性差も認められた。3)会話行動に見られる同調傾向と印象形成との関係初対面16組のデータを基にして、NVCの類似化の現象、および、うなずき、視線行動が会話満足度や対人的な印象にどう関係するのかについて検討した。うなずきは討論条件で会話満足度や好印象と、親密条件では笑顔が好印象をもたらす(討論条件では逆)など、NVCの機能が脈絡依存であることが認められた。また、二者・三者が同じにうなずくことが会話満足度と有意な相関を示すことなども示された。
アルツハイマー病における終末糖化物質の神経細胞毒性に関する研究

本研究の遂行により以下の成果を得た。(1)終末糖化物質(以下AGEと略す)が、glucose以外の少なくとも5種類の還元糖から形成されることを明らかにした。これらの事実は生体内で形成されるAGEは単一でなく、異なる経路から生成され、複数の受容体がそれらの認識に関与している可能性を示唆した。この研究成績はMol Med2000,6:114-125に報告した。(2)さらに、各種還元糖由来のAGEを胎児ラット大脳皮質より初代培養して得た神経細胞に添加したところ、いずれの場合にも暴露されたAGE濃度依存的に神経細胞死が誘導された。とくにglyceraldehyde由来のAGE(以下、AGE2とする)で顕著な神経細胞毒性が認められ、核クロマチンの凝縮など形態学的にアポトーシスの所見が認められた。これらの作用はAGE2に対する特異的な抗体の前処置で完全に中和された。この研究成績はJNeuropatholExp Neurol,2000,59:1094-1105に報告した。(3)健常者ならびに糖尿病性腎不全透析患者血清中のAGEを解析したところ、各種AGEを含む分子量の異なる3つの画分が検出された。それぞれのAGE画分を含む患者血清を神経細胞に添加したところ、細胞障害作用が再現され、これらの作用もAGE2に対する抗体の前処置で完全に中和された。以上より、生体内には各種還元糖に由来するAGEが存在し、糖尿病性腎不全透析患者でそれらが増加することが明らかとなった。生体内においては各種AGEの中でもglyceraldehyde由来のAGE2が特異的に神経細胞障害を引き起こし、アルツハイマー病の発症、進展に関与することが示唆された。この研究成績はCurr Mol Med(印刷中)に報告した。本研究の遂行により、以下の成果を得ている。1.神経変性疾患に終末糖化物質(以下AGEと略す)形成の原因となるMethylglyoxalや3-Dexyglucosoneが病因に深く関与する成績を得た。この研究成績はJ Neurosci Res 1999,57:280-89に報告している。2.AGEは単一の物質ではなく、様々な糖やその分解産物から形成されることが知られている。主要なAGE構造体であるcarboxymethyllysine以外のAGEが生体内にも存在することを確認した。この研究成績はMol Med 1999,5:393-405に報告している。3.5種類のAGEおよびそれらを特異的に認識する抗体を作成し、糖尿病患者血液中にそれらが存在することを証明した。この研究成績はMol Medに報告している(印刷中、2000年2月予定)。4.前述5種類のAGEおよび糖尿病透析患者血清から分離したAGEが海馬/大脳皮質神経初代培養細胞において血清AGEおよび2種のAGEが細胞障害性を有することを認識した。さらにそれぞれのAGE特異的な抗体により細胞障害(アポトーシスを含む)が除去されることも証明した。現在この研究成績は投稿中である。この研究成績はMol Med 2000,6:114-125に報告した。

とくにglyceraldehyde由来のAGE(以下、AGE2とする)で顕著な神経細胞毒性が認められ、核クロマチンの凝縮など形態学的にアポトーシスの所見が認められた。これらの作用はAGE2に対する特異的な抗体の前処置で完全に中和された。この研究成績はJ Neuropathol Exp Neurol,2000,59:1094-1105に報告した。(3)健常者ならびに糖尿病性腎不全透析患者血清中のAGEを解析したところ、各種AGEを含む分子量の異なる3つの画分が検出された。それぞれのAGE画分を含む患者血清を神経細胞に添加したところ、細胞障害作用が再現され、これらの作用もAGE2に対する抗体の前処置で完全に中和された。以上より、生体内には各種還元糖に由来するAGEが存在し、糖尿病性腎不全透析患者でそれらが増加することが明らかとなった。生体内においては各種AGEの中でもglyceraldehyde由来のAGE2が特異的に神経細胞障害を引き起こし、アルツハイマー病の発症、進展に関与することが示唆された。この研究成績はCurr Mol Med(印刷中)に報告した。
セラミド多様性を創出・維持する代謝経路とその破綻に起因する病態の分子機構の解明

シェーグレン・ラルソン症候群(SLS)は皮膚神経疾患であり,原因遺伝子はアルデヒドデヒドロゲナーゼALDH3A2である。ALDH3A2はセラミドの分解過程で生じる長鎖アルデヒドの代謝に関与する。ALDH3A2は脳において神経細胞とオリゴデンドロサイトに発現していた。Aldh3a2 KOマウスではミエリンの脱髄は観察されなかった。Aldh3a2 KOマウスは光に対する不安様行動の増加,うつ様行動の低下を示した。Aldh3a2 KOマウスの皮膚では齧歯類特異的なアイソザイムAldh3b2の発現のため,皮膚バリア異常は示さなかった。一方,Aldh3a2 Aldh3b2二重KOマウスは,経皮水分蒸散量の亢進,色素の浸透の亢進,過角化などSLSの皮膚症状に類似した表現型を示した。フィトセラミドの代謝過程におけるアルファ酸化に関わるMpo1の酵素学的性質を調べた結果,Mpo1は鉄イオンを補酵素とする新規ジオキシゲナーゼであることが明らかとなった。また,Mpo1の基質は長鎖から極長鎖の鎖長を有する2-ヒドロキシ脂肪酸であった。フィトセラミド産生酵素遺伝子Degs2のKOマウスをイミキミド誘発性乾癬モデルで解析したが,IL-17などのサイトカインの産生量に影響はなかった。また,Degs2 KOマウスで減少するセラミドーXはグルコシルフィトセラミドのIn-source decayであることが判明した。哺乳類の長鎖塩基の1種,スフィンガジエンは広範な組織に存在する。スフィンゴジエンの代謝について調べたところ,哺乳類で最も多く存在するスフィンゴシンと同程度の効率でセラミド,長鎖塩基1-リン酸に代謝されることが明らかとなった。また,長鎖塩基1-リン酸の分解に関しては,スフィンガジエン1-リン酸はスフィンゴシン1-リン酸と同程度の効率で脱リン酸化されるものの,リアーゼによる開裂は受けづらいことが明らかとなった。このことは,スフィンガジエンがグリセロリン脂質へ代謝されにくいことを示している。本研究において作成した2つのSLSモデルマウス(Aldh3a2 KOマウス及びAldh3a2 Aldh3b2二重KOマウス)のそれぞれの利点(Aldh3a2 KOマウス,生存可能,神経症状あり;Aldh3a2 Aldh3b2二重KOマウス,新生致死,皮膚症状あり)を有効に活かし,SLSの皮膚と神経症状の両方のそれぞれの分子機構の解明に向けて大きな手がかりを得た。また,本研究はこれまで全く不明であった小胞体における脂肪酸アルファ酸化の分子レベルでの解明に大きな寄与を果たした。スフィンガジエンは古くから存在が知られていたものの,その代謝に関する知見は全くなかった。本研究では,スフィンガジエンのセラミドや長鎖塩基1-リン酸への代謝という直接の代謝だけでなく,長鎖塩基1-リン酸よりさらに先の代謝に至るまで詳細に解明した。Aldh3a2 Aldh3b2二重KOマウス中でのSLS様の皮膚バリア異常を引き起こす分子機構を解明するために,表皮バリア形成に関わる各種セラミド分子種のリピドミクス解析を行う。産生の低下が観察されたセラミド種に関してはその原因となる酵素の活性測定,遺伝子発現解析を行っていく。フィトセラミド代謝経路におけるアルファ酸化酵素である酵母Mpo1は新規のファミリーに属する酵素なので,触媒残基が不明である。そこでMpo1中の保存性の高いアミノ酸残基の変異体を作成して明らかにしていく。また,哺乳類のアルファ酸化酵素HACL2に関してはCRISPR/Cas9システムを用いてKOマウスを作成し,その表現型を調べることで生理機能を探る。スフィンガジエンの代謝産物であるスフィンガジエン1-リン酸のスフィンゴシン1-リン酸受容体に対するリガンド活性を調べるなど,スフィンガジエン代謝物の機能を解析する。また,脂肪酸不飽和化酵素ファミリー(FADS1-7)を候補として,スフィンガジエン含有セラミドの生合成に関わる遺伝子の同定を目指す。

哺乳類の長鎖塩基の1種,スフィンガジエンは広範な組織に存在する。スフィンゴジエンの代謝について調べたところ,哺乳類で最も多く存在するスフィンゴシンと同程度の効率でセラミド,長鎖塩基1-リン酸に代謝されることが明らかとなった。また,長鎖塩基1-リン酸の分解に関しては,スフィンガジエン1-リン酸はスフィンゴシン1-リン酸と同程度の効率で脱リン酸化されるものの,リアーゼによる開裂は受けづらいことが明らかとなった。このことは,スフィンガジエンがグリセロリン脂質へ代謝されにくいことを示している。本研究において作成した2つのSLSモデルマウス(Aldh3a2 KOマウス及びAldh3a2 Aldh3b2二重KOマウス)のそれぞれの利点(Aldh3a2 KOマウス,生存可能,神経症状あり;Aldh3a2 Aldh3b2二重KOマウス,新生致死,皮膚症状あり)を有効に活かし,SLSの皮膚と神経症状の両方のそれぞれの分子機構の解明に向けて大きな手がかりを得た。また,本研究はこれまで全く不明であった小胞体における脂肪酸アルファ酸化の分子レベルでの解明に大きな寄与を果たした。スフィンガジエンは古くから存在が知られていたものの,その代謝に関する知見は全くなかった。本研究では,スフィンガジエンのセラミドや長鎖塩基1-リン酸への代謝という直接の代謝だけでなく,長鎖塩基1-リン酸よりさらに先の代謝に至るまで詳細に解明した。Aldh3a2 Aldh3b2二重KOマウス中でのSLS様の皮膚バリア異常を引き起こす分子機構を解明するために,表皮バリア形成に関わる各種セラミド分子種のリピドミクス解析を行う。産生の低下が観察されたセラミド種に関してはその原因となる酵素の活性測定,遺伝子発現解析を行っていく。フィトセラミド代謝経路におけるアルファ酸化酵素である酵母Mpo1は新規のファミリーに属する酵素なので,触媒残基が不明である。そこでMpo1中の保存性の高いアミノ酸残基の変異体を作成して明らかにしていく。また,哺乳類のアルファ酸化酵素HACL2に関してはCRISPR/Cas9システムを用いてKOマウスを作成し,その表現型を調べることで生理機能を探る。スフィンガジエンの代謝産物であるスフィンガジエン1-リン酸のスフィンゴシン1-リン酸受容体に対するリガンド活性を調べるなど,スフィンガジエン代謝物の機能を解析する。また,脂肪酸不飽和化酵素ファミリー(FADS1-7)を候補として,スフィンガジエン含有セラミドの生合成に関わる遺伝子の同定を目指す。
アデノウイルスベクターによる悪性脳腫瘍遺伝子治療の研究

我々は遺伝子導入効率の高いアデノウイルスを用いて大腸菌cytosine deaminase(CD)およびuracil phosphoribosyltransferese(UPRT)遺伝子などの薬剤変換酵素遺伝子を導入しprodrug投与にて治療を行う、いわゆる薬剤感受性遺伝子治療を悪性グリオーマの治療に応用すべく基礎研究を行ってきた。実験的脳腫瘍モデルでのこれらの有効性や副作用については種々の学会および雑誌で発表してきた。より効率的に遺伝子導入を行うためにベクターの改良を行うことが本研究の目的の一つである。従来の非増殖型アデノウイルスに変えて増殖型アデノウイルスをベクターとして用いる実験を試みている。増殖型アデノウイルスを用いると感染効率が上がることは確認されたが、ウイルスの持つ毒性が問題となりこの点を検討中である。もう一つの研究はCDやUPRTを用いた遺伝子治療を行う場合の細胞内で起こっているapoptosisのメカニズムの研究である。グリオーマ細胞を用いて細胞周期やapoptosisを制御している細胞内因子の発現をmRNAと蛋白レベルで検討し関与するカスケードの探究を行っている。結果の一部は学会などで発表を行っている。アデノウイルスベクターは高効率で遺伝子導入ができる方法の一つで、遺伝子治療の分野において研究のみならず臨床でも使用されるようになってきた。我々はこのアデノウイルスベクター用いて悪性脳腫瘍に対する遺伝子治療の試みを行ってきた。また一方で種々のsuicide genetherapyを試みた結果、cytosine deaminase(CD)遺伝子の導入と5-fluorocytosine(5-FC)の全身投与が最も有効であると考えられた。他臓器腫瘍でもこの組み合わせの有効性が多数報告されている。しかし今回の動物実験結果ではCD/5-FC療法は抗腫瘍効果は高かったものの、周囲正常脳に対する毒性が強く、これを軽減する目的で次の実験を行った。着目したのはuracil phosphoribosyltransferase(UPRT)で、本酵素は5-FUをFUMPへ変換する活性を持っており5-FCをさらに効率的にactive metaboliteに変換することが予想された。In vitro実験ではCDとUPRTの両遺伝子の導入で親細胞に比べ数千倍の5-FC感受性を示した。このdataをもとにラット脳腫瘍実験を行った結果、より少ないベクターの投与で十分な抗腫瘍効果を示し、周囲正常脳に対する毒性も軽減され、本方法の有効性が示唆された。なおこれらの詳細な結果は誌上掲載されている。従来の非増殖型アデノウイルスに変えて増殖型アデノウイルスをベクターとして用いる実験を試みた。増殖型アデノウイルスを用いると感染効率が上がることは確認されたが、ウイルスの持つ毒性が問題となりこの点が臨床応用するためには課題と考えられた。グリオーマ細胞を用いて細胞周期やapoptosisを制御している細胞内因子の発現をmRNAと蛋白レベルで検討し関与するカスケードの探究を行った。結果の一部は学会などで発表を行ってきた。
経営モニタリング・システムの抜本的改革-非欧米型企業システムの開発-

1本研究は、株式会社の資本多数決を利用した一種の財産管理の仕組みととらえることによって、所有と経営の関係を、「所有と経営の分離」という分離の側面からだけでなく、「所有(の一部)と経営の連携」という側面からも把握できることを明らかにした。その結果、株式会社のもっとも基本的な特性は、「所有と経営の分離」を前提にしつつ、「所有(の一部)と経営の連携」することにあり、この理論を基礎にするとき、株式会社のモニタリング・システムを抜本的に改革できることを明らかにした。2本研究のモニタリング・システムは、以下の三点で、抜本的な改革を含むことになる。(1)第一に、モニタリングの対象を、質的に拡大しうることである。すなわち、「経営者に対するモニタリング」にとどまらず、「企業運営チームに対するモニタリング」が必要であることを提示した。ここに企業運営チームとは、経営者とその経営者を選任する資本多数決管理株主によって構成される。(2)第二に、モニタリングの担い手としては、現行の監査役、取締役会以外に、従業員(中間管理職)が選任する中立監査役を導入すべきである。この中立監査役を基礎にして従業員救済制度を整備すれば、初期消火体制を確立でき企業の自浄能力を飛躍的に強化することができる。(3)所有と経営の間の関係は、「経営とそのモニタリング」という役割分担のみではない。会社支配理論を再構成することで、所有と経営の関係性の多様性とダイナミズムを認識でき、会社法の柔構造化を実現することができる。この会社法の柔構造化によって、公正性のみならず、効率性の観点からも、実効性の高い仕組みが可能となることを明らかにした。1これまで株式会社モデルにより、すなわち等質株主結合型か異質株主結合型かのいずれを前提とするかにより、伝統的理論と異なる新たな会社法理論を構築できることを論証してきた。2今年度の研究により、この新たな会社法理論は、さらに企業生理の法理としてリファインしていくことが可能になった。この成果は、『会社法におけるダイナミズムの法化-会社病理の法理と会社生理の法理」(菅原古稀記念所収予定)として公表(近刊予定)。3企業生理の法理としての会社法理論によれば、会社法は比較優位な企業システムを創りうるものでなければならない。こうした観点から、自民党小委の商法改正試案骨子を検討した。この成果は、「コ-ポレート・ガバナンスと日本の企業システムの行方」として公表(ジュリスト1122号)。4比較優位な企業システムの立ち上げのためには、中立監査役構想が重要な役割を果たす。この構想を実践するさいの問題点を簡単にスケッチした(金融法務事情1507号オピニオン)。5現在中立監査役構想のもつ実践的意義を経営者の責任論の観点から検討しつつある。1中立監査役構想を法改正なくしても生かせる方法として、専門家による中立サポーターシステムを取り入れることができることを明らかにした。2現実の企業に中立サポターシステムを導入したとき、どのようにコーポレート・ガバナンスの改善を図れるかを、監査役、経営者、弁護士、研究者とともに研究した。3主要な研究会は、トヨタ常勤監査役井上輝一、久保利英明弁護士、永野周志弁護士、加護野忠男神戸大学経営学部教授をメンバーとした実践的監査機構研究会である。4この実践的監査機構研究会で、実効性の高い監査システムとはどのようなもので、どのようにして実現できるかを討議した。5肥後銀行、住友生命、日本タングステン、西日本プラント工業等の経営者、監査役とも個別に、あるいは共同で討議した。6これらの研究の成果は、九州生産性本部、九州監査業務研究会、オリココーポレーション全国顧問弁護士会議で、報告する機会を得、高い関心と共感を得た。7この研究成果は、別記の論文でも明らかにしている。