hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
南極氷床・海洋・気候の統合的モデリング

特に、南極氷床融解の閾値Tipping pointについての結果は予想以上に重要な結果がでた。(1)南極3次元氷床・棚氷モデルに氷流力学過程、接地線過程を導入し、氷床形状や氷床流動の観測データでモデルを検証し、境界条件の精緻化を検討した。氷床変動再現実験や基礎的動作特性実験を進めた。(2)高解像度海洋大循環モデル用いて棚氷底面融解の海洋温度や密度や海氷への依存性を調べた。南極氷床ー海洋相互作用を検討し、棚氷底面融解の定式化を試みた。(3)南大洋の気候における役割について、大気海洋大循環モデルを用いた氷期-間氷期再現実験を実施して分析した。最終氷期最盛期における海洋の炭素循環シミュレーションを実施し、氷期の大気CO2低下を説明する上で南大洋の成層化、およびそれによる炭酸塩補償過程の増幅が重要であることが分かった。(4)最終間氷期及び退氷期、過去13万年や、350万年前(鮮新世)の数値実験(大気海洋結合モデル)の実行準備、開始した。最終間氷期と現在の間氷期の南極域の温度の違いが、退氷期中の深層海洋循環の大変動の有無に起因し、現在が南極氷床融解閾値Tipping pointの一歩手前で止まっていることが予想される重要な結果を得た。(5)長期気候-氷床結合実験に必要となる軌道要素や温室効果ガス濃度、氷床地形を変更した定常応答実験を設計、実験開始した。(6)古気候および将来予測において南極氷床の融解水の影響を調べる淡水流入実験を実施した。(8)最近の南極域の気候および海氷変化解析のため、3つの大気再解析データを用いて、1979年以降の北極域と南極域のエネルギー収支に関する特徴づけと海氷変化との関連付けを調べ、南大洋の海氷変化にともなう大気海洋間のエネルギーフラックスを解析した。◆南極氷床モデリング:氷床モデルを南極用に設定し海洋ー氷床相互作用や底面過程を改良した。さらに将来予測実験ISMIP6の実行に向けた準備を行なった。棚氷底面融解を外力とする氷床の定常・非定常実験を実施。・気候モデルによる温暖化実験結果を入力に用いた実験や、長時間スケールの氷床変動再現実験を開始した。・南極変動に関わる古気候氷床実験を実施。モデルの不確定性の評価を行った。◆南極氷床の質量収支解析:・MIROCの降水量や気温や大気循環に関するデータによるモデル検証を行い。20世紀再現バイアスなどとの関係を調べた。◆南大洋モデリング:・氷期の数値実験に基づいて物理環境など各要素の再現性についての検討を進める。・底層水班と連携した南大洋における底層水形成や海氷分布などの検討を行った。生態系班と連携した南大洋での生物ポンプ過程の検討。氷床・気候班と連携した氷床コアによるCO2濃度データとモデル結果との直接の比較、氷期CO2低下の理解に向けた研究を進めた。過去及び将来における海洋酸性化に関する数値実験を実施した。氷期のCO2のモデリングについて論文執筆を進める一方、氷期から退氷期の実験の準備を進めた。◆長期気候-氷床モデリング:過去数百万年の気候と氷床の変化に関して大気海洋結合モデルMIROCの結果と南極氷床モデルを組み合わせた長期気候-氷床モデル実験を準備し、固体地球班との連携による古気候データとの比較検討によって、南極氷床と気候の変動メカニズムを調べた。概ね順調である。◆南極氷床モデリング:
アスピリン喘息鼻茸におけるL-plastinの役割

本研究以前に我々は、アスピリン喘息鼻茸において、LCP1発現陽性好酸球が有意に多いことを同定してきた。このLCP1陽性好酸球が、アスピリン喘息において、どのような役割を担っているのかを本研究で検討した。まず我々は、炎症と凝固系の相互作用に好酸球が重要な役割を担っていることに着目した。最近、喘息や慢性蕁麻疹において、好酸球はTissue factorを放出し、Tissue factorが起点となり、凝固系を活性化し炎症増悪、炎症により抗凝固系がさらに活性化するという相互作用を生じていることが報告された。そこで、好酸球におけるTissue factorの調節にLCP1が関与しているのではないかと推測した。まず多くの好酸球が実際にTissue factorを発現していることを免疫染色で明らかにした。次に、LCP1の発現をRNAiで低下させ、LCP1の発現の有無で、Tissue factorの発現部位について違いを比較した。好酸球様細胞株EoL-1にLCP1とnegative controlのsiRNAを導入を行った。RNAiの導入が難しいと言われる浮遊細胞で、ほとんどの細胞に導入でき、LCP1に対するmRNA発現を約85%低下することができた。CotrolとLCP1のRNAiを導入した細胞ごとに、サイトカイン刺激を行いTissue factorの発現を細胞免疫染色で比較した。好酸球活性化因子であるGM-CSF刺激では何も変化認めなかったが、INFγ及びIL-4の刺激では、コントロールでは細胞膜周囲にTissue Factorが移動した。しかし、LCP1の発現抑制によりTissue Factorの膜方向への移送は阻害された。つまりTissue Factorの細胞膜の分布にはLCP1が重要であることがわかった。また、mRNAレベルでもIFNγ刺激で、Tissue Factorは発現亢進していた。
内部構造に着目した連想の分類と機械的実現法

本年度も、昨年度同様、4択クイズを題材にして、これを連想問題として解くことを通して、連想の機械化に取り組んだ。具体的には、問題文から抽出したキーワードと解候補(選択肢)の間の共起に基づく語彙的な関係(連想)の強さに基づく解の選択法を2つ提案し、両者の統合を行った。手法1は、語の重みに基づいて適切なキーワードを選択し、そのキーワードを利用してサーチエンジンのヒット数を求めることにより、キーワードと選択肢の連想の強さを求め、FA1位の選択肢とBA1位の選択肢のどちらかを解選択ルールによって決める手法である。ここで、FAとBAは、昨年度提案した連想の2つの指標で、前者は問題文から選択したキーワードから選択肢への連想の強さを、後者は選択肢からキーワードへの連想の強さを表す指標である。手法2は、連想の強さに基づいて、最適なキーワードと解候補を同時に選ぶという手法である。これらを組み合わせた統合手法は、まず手法2を適用し、そこで十分なスコアが得られない問題には手法1を適用するというものである。このような方法を実際に実装し、評価実験を行なった。4択クイズ「クイズ$ミリオネア」の問題のうち、連想でとける可能性のない否定及び比較の表現を含む問題を除いた問題は全体の91%であり、このうち79%の問題を上記の統合手法で正しく解くことができた。この結果は、サーチエンジンのヒット数を利用して連想の強さを測定するという最も基本的な意味的操作が、4択クイズを正しく解くのに有効であることを示しており、人間が行なっている連想の一部を近似的に実現できたと考えてよいと思われる。なお、クロスワードパズルに対しても、ウェブを用いた連想による解法を試みたが、4択クイズほど目覚ましい成果は得られなかった。本研究では、「人間の連想にはどのようなタイプがあり、それらは機械的にどのように実現可能か」ということを明らかにすることを目標としている。本年度は、当初の予定を変更して、4択クイズを題材に、これを連想問題として解くことに取り組んだ。ここで対象とした4択クイズとは、次のような問題である。Q:映画「アメリカン・グラフィティ」の監督は誰?A:ジョージ・ルーカスB:スティーブン・スピルバーグC:フランシス・フォード・コッポラD:黒澤明このような4択クイズを連想問題として解くとは、「アメリカン・グラフィティ」から最も強く連想される選択肢を4択の中から選ぶというという方法である。これを実現するためには、(1)問題文から連想の出発点となるキーワードを取り出すことと、(2)そうして取り出されたキーワードと選択肢との連想の強さを測ることが必要となる。後者の連想の強度を測るために、本研究では、サーチエンジンのヒット数を用いる。前向き連想は、キーワード(K)から選択肢の一つ(T)を連想する強さであり、fa(K,T)=hits(K and T)/hits(K)により計算する。一方、後向き連想は、選択肢の一つ(T)からキーワードを連想する強さであり、ba(T,K)=hits(K and T)/hits(T)による計算する。この2つの指標で1位となる選択肢が等しい場合、その選択肢が正解である可能性が非常に高い。2つの指標の1位が一致しない場合は、どちらの指標がより信頼できるかを判定して、解を決定する。問題文からのキーワードの抽出においても、連想の強さの指標が利用できる。すなわち、より強い連想を示すようなキーワードをよいキーワードとみなすという方法である。このような方法を実装し、実験したところ、4択問題の約70%を、正しく解くことができた。提案手法で解ける連想は、「primary association(最も強い連想)」と呼ぶべき・タイプの連想であり、たとえば、映画であれば、監督を連想するというタイプである。質問応答の答えの大半が、問題文中の重要なキーワードとこのようなタイプの連想関係にあるということは予想外の発見であり、非常に大きな知見である。また、このようなタイプの連想は、サーチエンジン(ウェブ)を用いて、実現できることがわかった。

この結果は、サーチエンジンのヒット数を利用して連想の強さを測定するという最も基本的な意味的操作が、4択クイズを正しく解くのに有効であることを示しており、人間が行なっている連想の一部を近似的に実現できたと考えてよいと思われる。なお、クロスワードパズルに対しても、ウェブを用いた連想による解法を試みたが、4択クイズほど目覚ましい成果は得られなかった。
マキアヴェリ国家論の研究(歴史的公共体の理念と制度)

本研究は、マキアヴェリの国家観を、その政体論に焦点をしぼりつつ歴史的に検討するものである。研究期間中、『ディスコルシ』の読解をつうじて、マキアヴェリの国家論のなかでの政体論と共和主義との関係を考察した。キケロらに代表される伝統的共和主義とマキアヴェリの国家論との異同が、共同性を実現する栄誉を自由と考える自由観や、共同性の維持と不可分に結合した個々の徳目観にも見いだされることを確認することができ、それをマキアヴェリ共和主義を扱った別記論文として公表した。いかなる都市も自由なくして栄誉を獲得することはできないという主張、そして共和的政治体制の維持なくして自由な政治生活を維持することはできないという主張。これらがマキアヴェリ的共和主義が伝統的共和主義から継承した政治的自由観念の中心であった。たしかに、法にしたがって形成された体制=政治体制body politicを指すのにres publica,repubblicaの語を用いていた人文主義者たちの用語法と、ときとしてstatoをも用いるマキアヴェリの用語法とは異なる。しかし共通善と共和体制を不可分と考える点はマキアヴェリも伝統的共和主義者の人文主義者たちも同じであって、共和主義的な選挙体制下でのみ公民的偉大さが発達しうるとマキアヴェリは考えていた。換言すれば、マキアヴェリにとっても、政治や国家は「差異の」自由を擁護するためではなく、公共体に「共通する」自由を擁護するためにあるのである。マキアヴェリの歴史的公共体の国家論には、こうした共和主義の要素が含まれている。本研究は、唯一の公共意志への献身という市民的徳に支えられた一様な政治共同体を前提とするルソー的な一元的共和主義の要素と、国家内での階層対立を前提とする複合的な共和主義の要素とが、マキアヴェリ共和主義のなかで同居している点に着目しつつ共和主義と近代性との関係を考察していこうとする今後の研究計画にとって、必要なステップとなった。かれの政治理念を歴史的公共体の政治思想として提示し、「近代政治思想の開幕者」「公民的共和主義の伝統の継承者」「国民国家形成期の絶対主権論を生み出した国家理性論者」といったマキアヴェリのさまざまな相貌間の緊張を調停するための一助としていきたいと考えている。本年度は、『ディスコルシ』の読解をつうじて、マキアヴェリの国家論のなかでの政体論と共和主義との関係を考察した。キケロらに代表される伝統的共和主義とマキアヴェリの国家論との異同が、共同性を実現する栄誉を自由と考える自由観や、共同性の維持と不可分に結合した個々の徳目間にも見いだされることを確認することができ、それをマキアヴェリ共和主義を扱った別記論文として公表した。これらがマキアヴェリ的共和主義が伝統的共和主義から継承した政治的自由観念の本質であった。

本研究は、唯一の公共意志への献身という市民的徳に支えられた一様な政治共同体を前提とするルソー的な一元的共和主義の要素と、国家内での階層対立を前提とする複合的な共和主義の要素とが、マキアヴェリ共和主義のなかで同居している点に着目しつつ共和主義と近代性との関係を考察していこうとする今後の研究計画にとって、必要なステップとなった。
少子化社会における子どもの仲間関係の発達メカニズムの解明:0歳からの縦断的検討

乳幼児期の仲間関係の発達メカニズムについて、乳児期の親子間の愛着関係から強い影響を受けて進展するモデルと生後まもなくから周囲にある対人ネットワークの大きさの影響を受けて進展するモデルの両者から検討した。約300名の0歳児を3歳まで追跡調査した結果、3歳での子どもの仲間数や遊ぶ頻度の多さを有意に予測したのは、愛着に関わる要因ではなく、0歳時点の対人ネットワークの大きさや、2歳時点の託児施設の利用や親のピア・マネージメントの高さであった。昨年度は,申請した3年間の追跡研究の初年度にあたり,対象家庭への質問紙調査とインテンシブ・グループの作成および対人ネットワーク日誌の実施に従事した。母親と父親がともに回答したのは450家庭(母親641名,父親450名)であり,そのうちインテンシブ・グループとして登録されたのは50家庭であった。対象家庭の内訳は,核家族が393家庭(92.3%),拡大家族が33家庭(7.7%)であり,核家族がほとんどであった。対象児のきょうだい数は一人っ子が最も多く(61.1%),2人きょうだいが31.1%,きょうだいが2人以上いる子どもが34名(7.8%)存在した。また,0歳時点で保育所などの託児施設に預けられている対象児は49名(11.2%)であった。こうした家族形態,きょうだい数,託児施設の利用有無といった対象児の対人ネットワーク環境を示す要因や,親が子どもに抱く信頼感が,0歳時点における子どもの他者に対する親和的傾向とどう関連するかを検討した。子どもの他者に対する親和的傾向の指標には,子どものパーソナリティを測定する尺度のうち「人と一緒にいるのが好きだ」,「一人で遊ぶよりも人といっしょに遊ぶのが好きだ」,「他の何よりも人間に興味を示す」の3項目の合計得点を用いた。家族形態(核家族か拡大家族か),きょうだいの有無,託児施設の利用有無,親が子どもに抱く信頼感の高低(平均得点を基準に二分化)のそれぞれを独立変数とするt検定の結果,親の信頼感が高い群の子どもの方が,低群の子どもに比べて他者への親和的傾向が高いことが示唆された(t=-3.85,p<01)。このように,0歳時点の横断的な検討からは,Social NetworkモデルよりもAttachment-basedEpigeneticモデルの方が,子どもの後の仲間関係のあり方に影響する他者との関わりやすさの発達をより説明するモデルであることが示唆された。平成20年度は、申請した3年間の追跡研究の2年目にあたり、対象家庭への質問紙調査とインテンシブ・グループの作成、および対人ネットワーク日誌と観察調査を実施した。質問紙調査に継続して回答したのは421家庭(男子213人,女子208人)であり、インテンシブ・グループとして日誌と観察調査に参加したのは140家庭(追加募集した家庭を含む)であった。2時点にわたるアンケート調査データを解析し、1時点目(0歳)の家族の人数、きょうだい数、託児施設の利用有無、母親が子どもに抱く信頼感、子どもの他者に対する親和的傾向(「人と一緒にいるのが好きだ」など)と、2時点目(2歳)における親による子どもの仲間形成のマネージメントが、2時点目の子どもの仲間関係(仲間の数と仲間と遊ぶ頻度)に与える影響について重回帰分析により検討した。その結果、0歳のときに託児施設にいた経験があることや、2時点目の親による仲間形成のマネージメントが良質であるほど、2時点目で子どもの仲間関係が良好に形成されることが示された。その一方で、1時点目における家族やきょうだいの人数の多さは、子どもの仲間関係の形成を抑制する可能性があることも示唆された(R^2=.16, p<.01)。また、こうした変数が2歳時点での子どもの対人関係上の問題(「他の子とうまくいかない」、「よくけんかをする」など)に影響するかどうかについても検討したが、有意な影響を与える変数は見られなかった。本研究では、子どもの仲間関係の発達に関して、乳児期の親子間の愛着や信頼に求める愛着基点形成モデルと、乳児期からの多様な対人関係での経験を重視する社会的ネットワークモデルの両者の立場から比較検討を行なった。全時点の調査に参加したのは271家庭(回答者は母親)であった。また、3歳以降の仲間関係の発達について検討するため、36歳の子どものいる150家庭を対象に横断調査を実施した。縦断調査データを使用し、3歳時点における仲間関係の3側面(仲間数、仲間と遊ぶ頻度、仲間関係での問題)に影響する要因を検討した。影響可能性要因(説明変数)には、本研究での2つの仮説モデルを考慮して次の4つのカテゴリー:1属性変数(家庭年収[0:0歳時点,以下同様]、母親の学歴[0]、子どもの性別

[0]]、2子どもの気質変数(親和性[0])、3愛着・信頼変数(母親が子どもに抱く信頼感[0,2]、子どもの愛着行動[2])、4ネットワーク変数(家族形態[0]、保育施設の利用有無[0,2]、親による子どものピア・マネージメント[2])を用意した。3歳時点における仲間関係の各側面を従属変数として階層重回帰分析を実施したところ、主に次のような結果を得た。1母親の学歴の高さ(β=.17)や0歳時点での保育施設の利用(β=.23)が、2歳時点での仲間と遊ぶ頻度を高め(β=.41)、3歳時点の仲間数の多さにつながるという有意なパスが認められた。また、2歳時点の親によるピア・マネージメントの高さが、3歳時点の仲間数の多さを有意に説明していたが(β=.19)、愛着・信頼変数による有意な影響は見られなかった。2 3歳時点における仲間関係の問題(他の子とうまくいかない、よくけんかをするなど)に対しては、子どもの性別(β=.17)と親への愛着行動(β=.24)が有意に説明しており、ネットワーク変数との関連は見られなかった。
術中虚脱肺における組織障害因子の発現と防止法に関する研究

分離肺換気による肺の虚脱再膨張にともなうサイトカインの経時的変化を知ることにより、肺への障害にサイトカインが関与しているか否かについて検討し、適正な肺の換気法を検討するために以下の方法で検討した。【対象と方法】分離換気麻酔下に手術を施行する肺癌患者に対して以下の手順で採血を行い、顆粒球エラスターゼを測定した。対象:術側肺の10分毎の頻回換気群6例採血の方法:開胸前に末梢動脈血採血、以下開胸時より閉胸時まで30分毎に末梢動脈血及び術側肺静脈血を採血し第1病日、第3病日に末梢動脈血採血を行った。測定方法:顆粒球エラスターゼ測定キットを用い、マイクロプレートリーダーによる吸光度測定を行った。【結果】1.末梢動脈血採血の結果、術前値に比較し顆粒球エラスターゼ値は経時的に上昇し開胸後60分で最高値となり、120分で最低となるが第1病日で最上昇を認めた。2.肺静脈採血の結果、末梢動脈血と同様に経時的に上昇し開胸後60分で最高値となった。以上の結果より、分離肺換気による肺の虚脱再膨張が顆粒球エラスターゼ産生に関与している可能性があると考えられた。また肺の虚脱再膨張が侵襲となり肺の生態防御反応(肺水腫などの肺障害)が惹起される可能性があると考えられた。
インスリン産生細胞増殖因子Regによる細胞周期調節

【目的】Reg(Regenerating gene)遺伝子は144アミノ酸の分泌蛋白質、Reg蛋白質をコードし、Reg蛋白質は膵β細胞のReg受容体にオートクリン・パラクリンに作用して再生増殖を引き起こす。Reg蛋白質を糖尿病モデル動物に投与すると、膵β細胞が再生増殖し、糖尿病が治癒することが示され、糖尿病の再生治療への応用も期待されている。本研究では、Reg蛋白質による細胞周期調節を検討した。【方法・結果】膵β細胞株のRINm5F細胞の培地にReg蛋白質を添加、刺激したところ、(1)サイクリンD1量、サイクリンD1 mRNAの増加、(2)サイクリンD1プロモーターの活性化が認められた。(3)サイクリンD1プロモーターの活性化は上流-60までを含む場合は保たれたが、-57-52の転写因子ATF-2結合配列に変異を導入すると、消失した。(4)ドミナントネガティブ型ATF-2の発現によりReg蛋白質によるサイクリンD1プロモーターの活性化が抑制された。(5)PI3キナーゼ阻害剤によりReg蛋白質によるATF-2のリン酸化とサイクリンD1プロモーターの活性化が抑制された。(6)抗PI3キナーゼ抗体による免疫沈降物は用量依存的にATF-2をリン酸化した。(7)Reg遺伝子欠失(KO)マウスを作製した。KOマウスラ島では、リン酸化ATF-2、サイクリンD1、リン酸化Rb、BrdU取り込み、がいずれも著明に減少していた。【考察・結論】Reg蛋白質刺激により膵β細胞でPI3キナーゼの活性化が起こり、PI3キナーゼによりATF-2がリン酸化される。リン酸化ATF-2はサイクリンD1プロモーターに結合してサイクリンD1の転写を活性化する。この結果サイクリンD1量が増加し、サイクリン依存性リン酸化酵素の活性化が起こり、膵β細胞の細胞周期がG1からSへと移行すると考えられた。Regは申請者らが見出した分子量14kDaの分泌蛋白質で、インスリン産生膵β細胞再生増殖因子である。本研究の目的はRegがどのような細胞内シグナルを働かせてインスリン産生細胞の細胞周期を動かして、再生増殖を引き起こすのかを明らかにすることである。具体的には、Regがその受容体に結合した後、どのリン酸化シグナル伝達系路が活性化されるのかを明らかにし、その情報伝達系路で細胞周期を制御するどの分子が活性化されるのかを明らかにすることである。平成14年度の研究では以下の成績を得た。(1)cFos、CHOP、Elk1、cJun、CREB、ATF-2のトランスアクテイベーション領域とGAL4のDNA結合領域の融合蛋白を発現するキメラ発現プラスミドとGAL4結合配列の下流にルシフェラーゼ遺伝子を結合したレポータープラスミドをラットインスリン産生膵β細胞株、RINm5Fβ細胞にコトランスフェクションし、培養培地中にRegを添加してルシフェラーゼ活性を測定し、Reg刺激がどのような細胞内情報伝達系路に作用するかを検討し、ATF-2が活性化される事を明らかにした。(2)Reg刺激によりRINm5Fβ細胞のcyclin D1の量が増加した。レポーター遺伝子アッセイによりこのcyclin D1の増加はcyclin D1遺伝子の転写活性化によることが明らかになった。(3)ATF-2発現ベクターをRINm5Fβ細胞に導入するとReg刺激時と同様にcyclin D1遺伝子の転写活性化が認められた。(4)ATF-2のドミナントネガテイブ型発現ベクターをRINm5Fβ細胞に導入するとReg刺激を加えてもcyclin D1遺伝子の転写活性化が起こらなくなった。

リン酸化ATF-2はサイクリンD1プロモーターに結合してサイクリンD1の転写を活性化する。この結果サイクリンD1量が増加し、サイクリン依存性リン酸化酵素の活性化が起こり、膵β細胞の細胞周期がG1からSへと移行すると考えられた。
宿主要因を考慮した食事由来の炎症とがんリスクとの関連を評価する大規模分子疫学研究

【背景】食事由来の炎症プロセスの制御ががんの発症リスクと関連していることが示されてきました。我々は、複数の栄養素摂取量を用いて炎症性に関する食事の質を総合的に評価する指標のひとつであるdietary inflammatory index (DII)を測定し、食事由来の炎症と頭頚部、食道がんリスクとの関連を症例対照研究にて評価した。【方法】対象者は、愛知県がんセンターを受診した、1028名の頭頚部・食道がん患者と性、年齢を適合させた3081名の非がん患者である。DIIスコアは、自記式食物摂取頻度調査票から推定した主要栄養素および微量栄養素量に基づき算出し、さらにコントロール群の分布に基き四分位数に分類した。DIIの四分位を暴露、頭頚部食道がんをアウトカムとし、条件付きロジスティック回帰モデルを用い交絡要因で調整したオッズ比と95%信頼区間(CI)を推定し、関連を評価した。【結果】DII高値と頭頚部・食道がんリスクとの間に正の関連が観察された。頭頚部・食道がん全体では、DIIの最低値群に比べ最高値群のオッズ比は、1.73(95%CI: 1.37-2.20)、頭頚部がんでは1.92 (95% CI: 1.42-2.59)、食道がんでは1.71 (95% CI: 1.54-1.90)であった。さらに詳細に部位を分けたところ、上咽頭がんおよび下咽頭がんリスクは大幅に上昇しており、オッズ比はそれぞれ4.05 (95% CI: 1.24-13.25)、4.99 (95% CI: 1.14-21.79)であった。【結論】頭頚部・食道がんにおいて、炎症性がより強い食事はリスク上昇に関連することが示された。喉頭を除く全ての部位において、DIIのスコアが上昇するのに伴い、がんリスクが上昇していた。がんの発症に持続感染との関連が知られている部位において、リスク上昇が顕著だった。頭頚部・食道がんにおいて、予定通り症例対照研究を実施し、DIIとの関連を評価できたから大腸がん、胃がん、肺がんにおいての同様の解析を行い、DIIとの関連を評価する。さらに、炎症性サイトカインの遺伝子多型の測定を開始し、遺伝・環境要因の交互作用を評価するための準備に入る。平成30年度に予定していた遺伝子多型測定に着手せず、DIIと頭頚部、食道癌との関連について、成果をまとめたため、次年度使用額が生じた。。平成30年度に予定していた遺伝子多型測定について、使用しなかった研究費を使い、次年度に実施する予定である。
社会的自己同一性の確立および崩壊の機制と一性確立の意義

Turner(1976)は、本当の自己と見なされる自己が、制度すなわち社会に共有されている目的の達成に係り集合体の課す義務に従う時に見出されると本人自身に了解される制度的自己と、他の拘束を受けることなく自己の自発的な行動によって自己の欲求の充足に向かう時に自己の存在感を見出す衝動的自己を区別する必要があること指摘している。一方、孤独感の研究から出発したRubenstein&Shaver(1982)は、心理的な親密感が欠如することによって生じる情緒的孤立に基づく孤独感と、社会的な活動への参画の欠如に基づく社会孤立感を背景とする孤独感を区別している。この二つの仮説を基礎として、社会的な自己同一性の確立のためには社会的な参画感をもたらす社会的役割の取得が必要であること、しかし今日の日本の社会においてはアメリカと同様に、社会的な参画を求めるよりは、衝動的欲求の充足を求める傾向が顕著に生じていること、それにも拘らず、衝動的欲求の充足による自己の確認からは社会的自己同一性は確立され得ないことを予測し、今日の社会に特有のさまざまな現象例えば、血液型性格関連説への関心の高まりなどもこのような観点から説明することが可能であるとの仮説を構成した。30歳代から65歳の範囲の女性184名を対象した調査によって、仮説検証を試みた結果は、ほぼこの仮説が妥当することが示された。平成4年度は、(1)大学生および4050歳代の男女を対象として、これらの人々がどのような属性によって自己をとらえているのか、またそのとらえ方が社会的な適応と関連すると思われる「孤独感」とどのように関係するかを明らかにすることを目的とする調査を実施し、あわせて、(2)客観的な行動レベルから自己同一性の拠どころとなる自己概含のの推定を試みることと社会行動に関係する巨視的変数をどのようにとらえるかの方法的検計をも意図した研究者集団における共同研究グループの形成に関する調査を実施した。(1)については、現在データークリーニングと概括的な集計の段階にあり、(2)については粗集計をほぼ完了したところである。以上の結果、i)社会的文〓に応じて社会的自己同一性の拠りどころとなる自己概念は変動すること、ii)とくに青年層においては、伝統的な社会的自己同一性の拠りどころと考えられていた「性」「年令」「職業」「卒業または在学中に学校」「出自」などによって自己を位置づけようとするものが少いこと、iii)しかし、それにもかかわらず、個人的あるいは人格的属性によって自己を定位する場合には適応的には不安気であること、また、iv)過去30年間の間に、研究者集団において、出身校、所属、師弟関係の有無が共同研究グループ形成の要因としては、大幅に意義を失うに至っていること、など多大の貴重な示唆が得られている。3件の調査を実施した。経過、主要な知見は以下の通りである。1.自己概念と適応の指標としての孤独感を大学生男女、4050歳代の女性を対象として調査した。予備的調査の結果は、社会性をもった概念によって自己を定位することが自己同一性の確立上必要であることが示唆され、この事実は、理論的にも重要な問題であること、例えば、いわゆる血液型性格関連説を巡る心理学者のこれまでの接近に欠落していた、多くの人々が如何なる理由で、血液型性格関連説に関心を示すかの社会心理学的問題への回答が示唆されるなど、巨視的社会現象を理解する手掛かりとなるものと思われる。2.社会性をもった自己概念の性質を明らかにするための調査を男女大学生および4050歳代の女性を対象として実施した。孤独感を指標としたいわゆる自己同一性の確立のためには、職業、公式的な所属集団との関係等で、自己を定位できることが重要であることを示唆する結果を得、従来の自己概念研究が私的レベルでの自己概念にのみ注目していたことの問題が示唆された。

3.人文系の研究者集団の共同研究グループ構成の原理が、1950年代以降、私的レベルの自己概念の基礎となる属性(私的親密さなど)を基礎とする傾向が見らるようになった時期があること、これはいわゆる日本社会の大衆社会化現象を示すと同時に、最近においてはこれに逆行する傾向も見られること、これが自己同一性の拠所としての社会性をもった概念による自己定位への欲求と関係することが示唆され、社会心理現象の個体内過程-社会過程という微視的現象と巨視的現象を関連づける理論構成への手掛りが得られた。
アコースティック・エミッション法の波形解析によるコンクリート破壊機能の解明

コンクリート構造物の維持管理を合理的に行うために,構造物の状態を的確に把握することが重要であり,特に,ひび割れの進展状況を把握することは,その後の補修・補強工事の時期を決定する上で重要な項目となる.コンクリートのひび割れ監視は,アコースティック・エミッション(AE)法により定量的に評価可能であり,さらにひび割れ識別(引張型,せん断型)を行うことができる.(社)日本建材産業協会によれば,ひび割れ識別はAEパラメータ解析(RA値と平均周波数の関係)により識別可能とされている.しかし,RA値と平均周波数の比率に関する指標は未だ明確に示されていない現状にある.一方,AE波形解析のSiGMA解析は,弾性波動論に基づいて理論的にひび割れの種類を識別可能である.本研究では,AE波動の基礎理論に基づいたSiGMA解析結果とAEパラメータ解析結果を比較・検討することにより,RA値と平均周波数の比率決定について考察を行った.その結果,ひび割れ進展速度が比較的速いコンクリートの載荷試験では,RA値と平均周波数の比率を1:50に,鉄筋腐食によるコンクリートのひび割れなどのひび割れ進展速度が緩やかな場合には1:80にすることでSiGMA解析のひび割れ識別結果と一致することが明らかとなった.これは,載荷試験の場合に検出されるAE波の特徴が,鉄筋腐食起因のコンクリートひび割れ形成時のAE波と比較して,平均周波数が低く,立上り時間が長いAE信号を多く含んでいるためであり,実構造物においてAEパラメータ解析を適用しひび割れ識別を行う際には,ひび割れ発生原因を事前に把握することが重要であると考えられる.ただし,限られた供試体数,試験条件からの結果であるため,更なるデータの蓄積が今後必要であると考えられる.コンクリート構造物の非破壊検査手法であるアコースティック・エミッション(AE)法に基づいたSiGMA解析によれば、微小破壊源(AE源)の発生位置や形成モード、方向を知ることが可能である。AE源の発生機構を明らかにすることは、すなわち材料の破壊機構を明らかにすることに繋がり、SiGMA解析によって目視困灘なコンクリート内部の破壊進行状況を機構的かつ可視的に明らかにすることが可能である。しかし、現行のSiGMA解析では検出されたAE波形からAE波の到達時間および初動振幅値を手作業によって読み取る必要性があることから、莫大な時間と労力が必要とされていた。さらに、解析結果が解析者の主観に左右される可能性を含んでおり、迅速かつ信頼性のあるAE波初動部の自動読み取り法が必要とされていた。本研究では、SiGMA解析の汎用性拡大を目的とし、AE波初動部の自動読み取り法の開発を行った。従来法の手作業による波形読み取りでSiGMA解析を行った結果と自動読み取り法によるSiGMA解析結果を比較したところ、両者の解析結果はほぼ同様な傾向を示すことが確認された。また、両解析結果の信頼性をPost-Analysisにより評価したところ、両者の信頼性がほぼ等しいことが確認され、自動読み取り法がSiGMA解析に適用可能であることが明らかとなった。さらに、自動読み取り法によれば従来の手作業によるSiGMA解析に必要とされた時間の10分の1程度の時間でSiGMA解析を終了できることがわかり、大幅な時間短縮に繋がった。以上のことから、本年度の研究目的は達成されたものと考える。コンクリート構造物の維持管理を合理的に行うために,構造物の状態を的確に把握することが重要であり,特に,ひび割れの進展状況を把握することは,その後の補修・補強工事の時期を決定する上で重要な項目となる.コンクリートのひび割れ監視は,アコースティック・エミッション(AE)法により定量的に評価可能であり,さらにひび割れ識別(引張型,せん断型)を行うことができる.(社)日本建材産業協会によれば,ひび割れ識別はAEパラメータ解析(RA値と平均周波数の関係)により識別可能とされている.しかし,RA値と平均周波数の比率に関する指標は未だ明確に示されていない現状にある.一方,AE波形解析のSiGMA解析は,弾性波動論に基づいて理論的にひび割れの種類を識別可能である.本研究では,AE波動の基礎理論に基づいたSiGMA解析結果とAEパラメータ解析結果を比較・検討することにより,RA値と平均周波数の比率決定について考察を行った.その結果,ひび割れ進展速度が比較的速いコンクリートの載荷試験では,RA値と平均周波数の比率を1:50に,鉄筋腐食によるコンクリートのひび割れなどのひび割れ進展速度が緩やかな場合には1:80にすることでSiGMA解析のひび割れ識別結果と一致することが明らかとなった.これは,載荷試験の場合に検出されるAE波の特徴が,鉄筋腐食起因のコンクリートひび割れ形成時のAE波と比較して,平均周波数が低く,立上り時間が長いAE信号を多く含んでいるためであり,実構造物においてAEパラメータ解析を適用しひび割れ識別を行う際には,ひび割れ発生原因を事前に把握することが重要であると考えられる.ただし,限られた供試体数,試験条件からの結果であるため,更なるデータの蓄積が今後必要であると考えられる.
膵癌神経浸潤を中心とした癌微小環境における脂質合成・代謝機構の解析

1日齢の新生児マウスからDRGを採取し、安定して培養することに成功した。マウスDRGの培養上清を回収し、膵癌細胞株(MIA PaCa-2,BxPC-3,Panc-1)に添加した。MIA PaCa-2では細胞増殖が活性化されたが、BxPC-3,Panc-1では細胞増殖に変化を認めなかった。また、MIA PaCa-2では遊走能も亢進することが明らかとなった。マウスDGRと膵癌細胞株を共培養することによって、浸潤能も亢進することが明らかとなった。ヒト膵癌組織の免疫組織染色を行い、神経周囲浸潤に関与する因子としてTenascin Cを見いだした。Tenascin C高発現群と低発現群の臨床病理学的因子を比較したところ、Tenascin C高発現群では局所再発を起こす頻度が高く、手術後の無再発生存期間ならびに全生存期間は有意に短かった。Tenascin Cを添加した状態でマウスDGRと膵癌細胞株を共培養すると、神経線維の伸張・癌細胞の浸潤ともに亢進し、相互親和性が増していた。以上の内容をまとめ、現在論文投稿中である。また、膵癌細胞株にマウスDGRの培養上清を添加し、その後膵癌細胞株から脂質を抽出した。脂質の網羅的解析を行い、リン脂質の組成が変化していることを見いだした。現在、責任遺伝子の同定を行っている。また、膵癌細胞株にマウスDGRの培養上清を添加し、抽出したDNAを用いてNGS解析を行った。現在、網羅的遺伝子解析の結果を検討中である。科研費申請時点での研究計画書では、平成29年度に1DRGと膵癌細胞株(Miapaca-2、Panc-1)を共培養し、遊走能や浸潤能を解析する。2回収したDRG培養上清添加による膵癌細胞株の増殖能や細胞周期などの変化を解析する予定となっていた。1、2ともに実験を行い、予想された結果が出た。平成30年度には、神経浸潤に関わる因子としてTenascin Cを見いだした。これらの結果をまとめ、現在論文投稿中であるため、計画は概ね順調に経過していると判断している。現在投稿中の論文の査読結果によって、追加実験を行う予定である。マウスDRGの培養上清を膵癌細胞株に添加した状態で脂質を抽出し、LC-MSで脂質分子の変化を網羅的に解析した。主にリン脂質や中性脂肪の分子種毎に変化量を測定し、一定の分子種では増加または減少することが確認された。現在、結果の統計解析を進めている。また、マウスDRGの培養上清を膵癌細胞株に添加した状態でRNAを抽出し、NGSの解析が出来るようにサンプル調製を行っている。1、2ともに実験を行い、予想された結果が出ているため、順調に進展していると判断している。

科研費申請時点での研究計画書では、平成29年度に1DRGと膵癌細胞株(Miapaca-2、Panc-1)を共培養し、遊走能や浸潤能を解析する。2回収したDRG培養上清添加による膵癌細胞株の増殖能や細胞周期などの変化を解析する予定となっていた。1、2ともに実験を行い、予想された結果が出た。平成30年度には、神経浸潤に関わる因子としてTenascin Cを見いだした。これらの結果をまとめ、現在論文投稿中であるため、計画は概ね順調に経過していると判断している。マウスDRGの培養上清を膵癌細胞株に添加した状態で脂質を抽出し、LC-MSで脂質分子の変化を網羅的に解析した。今後、結果の統計解析を進めていく。マウスDRGの培養上清を膵癌細胞株に添加した状態でRNAを抽出し、NGSの解析が出来るようにサンプル調製を行った。今後、NGSで網羅的な遺伝子解析を行う予定である。現在投稿中の論文の査読結果によって、追加実験を行う予定である。
異なるヘルパーＴ細胞による腸管ＩｇＡの変化と腸内細菌叢への影響の検討

26年度が最終年度であるため、記入しない。
モノクローナル抗体や一本鎖人工抗体を用いた遺伝子導入法による癌の遺伝子治療

癌の遺伝子治療のためには、生体内で様々な存在様式を示す癌をターゲッティングし効率的に外来遺伝子を導入できる手段を開発しなければならない。本研究はこれを実現するため、2つの目標を追求した。第1は独自に開発し培養細胞レベルでターゲッティングに成功した新しい遺伝子運搬体「抗体/DNA複合体」イムノジーンを用い、個体レベルでの扁平上皮癌の遺伝子治療法を確立することである。研究過程で抗ヒトEGFレセプター抗体B4G7のFab断片を使用する(Fabイムノポーター)ことにより抗体全体を利用する50倍以上高い遺伝子導入効率が得られることが判明した。腫瘍移植ヌードマウスにおいて、レポーター遺伝子を用いたこのFabイムノジーンにより、腫瘍特異的な遺伝子導入が確認された。またFabイムノポーターでHSV-TK遺伝子を導入する(TK-Fabイムノジーン)とガンシクロビル(GCV)に対するLD50が非導入細胞の1/100-1/1000となり、著しい薬剤高感受性を示した。さらにTK-FabイムノジーンとGCVの併用により、腫瘍移植ヌードマウスにおいて顕著な抗腫瘍効果が認められた。第2の目標は、抗体/DNA複合体を効率よく作製しかつ臨床での有効性を高めるため複合体の抗体部分を人工一本鎖抗体と置き換えることである。そのため、ハイブリドーマB4G7のmRNAからRT-PCR法を用い一本鎖抗体遺伝子を作製し全塩基配列を決定した。その産物はB4G7抗体と競合した。メタノール資化性酵母Pichia pastorisを用いた発現系では、大腸菌の20-100倍に相当する培地1リットル当たり20mg-100mgの一本鎖抗体が得られた。本研究で、イムノジーン法は生体内の特定細胞へのターゲッティングも可能な遺伝子導入法であることが示され、人工抗体の利用も合わせ将来の遺伝子治療に有効なの技術として期待できる。
ハエトリソウの記憶機構の解明

昨年度の研究結果から,カルシウムセンサータンパク質を導入したハエトリソウの感覚毛を接触刺激すると、葉身の細胞で細胞内カルシウムイオン濃度が上昇することが分かっていた。この濃度上昇は葉身辺縁部の分枝している葉脈から中央脈にかけての範囲で観察された。パラフィン切片を作製し、分枝している葉脈と葉身閉合時に曲率が変化する組織を比較したところ、曲率の変化は中央脈から分枝している葉脈の間で正負が変化することが分かり、中央脈から分枝している葉脈の間の部位の裏側が運動時に凹面から凸面へ変化していることが分かった。以上のことから、カルシウムシグナルは運動時に凹面から凸面に変化する部位とほぼ一致していることが分かった。このカルシウムイオンの濃度上昇が運動に寄与するのかをロジスティック回帰分析によって評価したところ一度目、及び、二度目の接触刺激後の最大輝度が共に運動に寄与していることが分かり、細胞内カルシウムイオン濃度には運動を引き起こす特定の閾値が存在することが分かった。更に、刺激後に上昇したCa2+濃度がどのように減衰するのか経時変化を調べたところ、ハエトリソウが1度目の刺激情報を保持しておくことの出来る時間と細胞内カルシウムイオン濃度が閾値似下まで減衰するまでにかかる時間が一致することが分かった。以上の結果から、細胞内カルシウムイオン濃度は感覚毛への接触刺激で上昇すること、運動を引き起こす特定の閾値を持つこと、減衰する時間が記憶情報を保持できる時間と一致することが分かった。これらの3つの性質は既往研究で推定されていたハエトリソウの記憶物質が持つ3つのクライテリアを満たしており、以上のことからカルシウムイオンが記憶物質としての性質を満たす分子であることがわかった。以上の研究の成果をまとめ,国内外の学会にて報告した。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。これまでの研究結果から,アグロバクテリアを用いた形質転換を試みたところ,外来遺伝子を導入した細胞からは植物体が得られなかった。外来遺伝子を発現した細胞から茎頂分裂組織が形成されないために形質転換体が得られなかったのではないかと考え,分化多能性を有するカルスを用いてハエトリソウの形質転換技術の確立を目指した。合成サイトカイニン(6-ベンジルアミノプリン)及び合成オーキシン(2,4-ジクロロフェノキシ酢酸)を添加した培地中で種子を培養することで,ハエトリソウのカルス作製に成功した。更に,このカルスを外植片としてアグロバクテリアを用いて形質転換したところ,十分な感染効率が得られることが分かった。感染させたカルスを連続暗期で培養することで形質転換体したシュートの作製に成功した。既に,黄化した葉を外植片に用いることでカルシウムセンサータンパク質GCaMP6fを発現させたハエトリソウ株の作製に成功していたことから,この株を用いてカルシウムのライブイメージングを行った。その結果,カルシウムイオンの蓄積は,「辺縁部の棘状突起を除いた葉身と感覚毛の刺激受容部位」で観察され,これらの組織が2度目の刺激後,運動時に顕著なカルシウムイオン流入が起こる細胞群であることが分かった。ハエトリソウは2度目の刺激後に直ちに閉合運動することから,記憶情報を蓄積している記憶部位は運動部位の近傍にあることが推定される。このため,「辺縁部の棘状突起を除いた葉身と感覚毛の刺激受容部位」の細胞群が記憶部位であると推定された。さらに,カルシウムチャネルの阻害剤であるLa3+イオンを含んだ溶液を葉に吸収させたところ,運動機能が濃度依存的に有意に阻害されたことから,特定のタンパク質ではなく,カルシウムイオン自体が記憶分子として機能している可能性があることが分かった。

ハエトリソウの形質転換およびカルシウムイメージングに成功し,記憶部位の推定に成功した。また,細胞内カルシウムイオン濃度は二度の接触刺激で増加し,カルシウムチャネルの阻害によって運動が阻害されたことから,特定のタンパク質ではなくカルシウムイオン自体がハエトリソウで記憶分子として働いている可能性が示唆され,次年度に行う予定であった記憶分子候補の絞り込みに成功した。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。以上の結果から,特定のタンパク質ではなく,カルシウムイオン自体が記憶分子として機能しているという仮説が支持された。そのため,トランスクリプトームによる遺伝子の探索ではなくカルシウムイオン動態の解析が必要となった。ハエトリソウにおいてカルシウムイオンが記憶分子としての性質を満たすのかを評価するため,細胞内カルシウムイオン濃度に運動を引き起こす閾値が存在するのか,記憶の保持時間が細胞内カルシウムイオン濃度の減衰と一致するのかを評価する。カルシウムイオンがハエトリソウの記憶に果たす役割を解析し,国内外の学会及び学術雑誌において発表する。
日英語対訳コーパスからの統語的不一致情報抽出とその活用

さらに、PACLIC 2018にて、"Utilization of Dependency Type per Sentence to Identify Differences among Genres of English Texts"と題して研究発表を行った。これは、1センテンス当たりでの各依存関係タイプの使用頻度(Type per sentence, TPS)をひとつのメトリックとして、異なるジャンルの英文間でどのような依存タイプが異なるTPS値を見せるか、あるいはジャンル横断的に高い/低いTPS値を見せる依存タイプは何か、という観点でジャンル間の差異を明確化することを目的とした研究である。顕著な結果として、科学技術分野の英文では、複合名詞つまり名詞に別の名詞が依存している関係の頻度や、形容詞が名詞に依存している関係の頻度が、他のジャンルと比較して高いことなどが明らかとなり、これは先行研究での結果を跡付けるものであった。そして、当学会で研究成果を公表することで有益なフィードバックを得ることが出来た。当発表の予稿集はオンラインで公表予定である。コーパスデータを活用した依存文法の枠組みに基づく英語統語構造の特徴量抽出については研究が進んだが、日英語間の統語的不一致に関しては研究が進んでいないため今後の課題となる。現在までの進捗状況を踏まえ、日英語間の統語的不一致に関する研究を進めていく必要がある。具体的には、この論点について日英語対訳ペア例文を通じて分析を加えた論文が校正の最終段階にあり、これを発表することが当面の目的である。しかしながらこの論文では日英語間の統語的不一致の同定を手作業に頼っているものであり、日英語対訳コーパスから統語的不一致情報を自動的に同定する方法については未着手である。従って、この方法を提案するべく研究することが必要とされる。『英語コーパス研究』第24号にて、"Syntactic Divergence Patterns among English Translations of Japanese One-Word Sentences in a Parallel Corpus"と題した論文を発表した。これは、日英パラレルコーパスに見られる日本語の一語文(単語一つから成る文)が対応する英文でどのように翻訳されているのかを、依存木の構造的不一致の観点から分類し、どのような不一致が頻出するかを計算し、日英翻訳における文脈情報の重要性を指摘した。この研究は、さらに多くの単語数を持つ日本語文がどのように英文へ翻訳され、その依存木間の構造的不一致の実態を知るという最終的目標を達成するにあたって、最も単純な構造を持つ日本語一語文から取り掛かるという初期的目標として位置づけられるものである。さらに、英語コーパス学会第43回大会にて『日英対訳コーパス中の「ことになる」構文とその英訳文間の構造的不一致』と題して研究発表を行った。これは、日本語の「ことになる」構文が、対応する英文ではどのように翻訳されているのかを構造的不一致の観点から分類した結果を発表した。これは、日本語と英語との間で逐語訳的な対応関係を持たず一義的な翻訳が不可能な場合に、どのような翻訳可能性があり、それらの可能な翻訳文を恣意的にではなく一定の原理に沿って分類することが出来るのかについて、客観的なデータに基づいた示唆を与えるものであった。日英語パラレルコーパス全体の構文解析は終了しているが、その次の段階である主要な依存木間構造的不一致の抽出・頻度計算については進んでいない。さらに、英語学習者が産出した英文エッセイをまとめたコーパス中の依存関係タイプの使用実態についても研究テーマとして興味関心を持ち始め、構文解析・理論的考察を進めたため、本研究課題に取り組む時間がやや少なくなった点も指摘できる。日英語パラレルコーパスと英語学習者産出による英文コーパスの分析を並行して行い、その結果得られた知見を積極的に国内外の学会にて発表および論文執筆に取り組んでいく。具体的には、2018年6月にAsia TEFLにて研究発表を行い、その際に国内外の研究者から得たフィードバックをその後の研究に活用していく予定である。

従って、この方法を提案するべく研究することが必要とされる。2017年度は当初計画と異なり国際学会への参加が無くその分を次年度に用いるのが理由である。2018年度はマカオ大学で行われるAsia TEFLでの研究発表が決定しており、その旅費・宿泊費にあてる予定である。また今後、国際学会での研究発表も計画中である。2018年度は物品費が0であった。
プロラクチン分泌細胞の増殖を調節する視床下部ホルモンの同定

1下垂体前葉細胞の無血清培養系がプロラクチン産生細胞の増殖を検定するのに適しているかを調べた。培地に10nMのエストラジオールを添加すると、インスリン低濃度の条件下ではプロラクチン産生細胞の増殖が促進されたが、インスリン高濃度下では逆に抑制された。また、10uMのドーパミンを添加すると、インスリン濃度に関係なくプロラクチン産生細胞の増殖が著明に抑制された。2本研究においてプロラクチン産生細胞増殖促進作用を調べた視床下部ペプチドは甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン(TRH)、luteinizing hormone releasing hormone(LHRH),vasoactive intestinal peptide(VIP)、オキシトシンであった。LHRHは調べられた濃度の範囲内ではプロラクチン産生細胞の増殖に対して影響はなかった。TRHは予想に反して抑制的に作用することが明らかになったが、無血清培地に0.1%牛血清アルブミンを添加した培養条件下では予想通りTRHは100pMの濃度でプロラクチン産生細胞の増殖を促進することがわかった。しかし、牛血清アルブミン添加無血清培地でさらにVIP、オキシトシンの作用を調べたが、10^<-6>-10^<-12>Mの濃度の範囲では効果は認められなかった。3視床下部ホルモンのプロラクチン産生細胞増殖促進作用のsecond messenger分子と考えられるcyclic AMPの細胞内作用機序に関しても検討した。細胞内cyclic AMP増加によってプロラクチン産生細胞の増殖も促進され、これはかなりの部分mitogen-activated protein kinaseに依存していた。また、このcyclic AMPの促進作用は抑制性視床下部ホルモンのドーパミンのアゴニストであるbromocriptineでは抑制されなかった。6週令雌ラットより得られた下垂体前葉細胞を2日間血清含有合成培地にて前培養後、3日間無血清培地で培養した。この無血清培地による培養時に視床下部ホルモンを添加し、プロラクチン分泌細胞の増殖に対する影響を調べた。培養終了324時間前にブロモデオキシウリジン(BrdU)を倍地に添加し、増殖細胞を標識した後、培養細胞のプロラクチンとBrdUを二重蛍光免疫染色法にて染色し、増殖プロラクチン分泌細胞を同定した。プロラクチン分泌細胞の増殖率はプロラクチン分泌細胞1000個中のBrdU陽性細胞の割合より求めた。1下垂体前葉細胞の無血清培養系がプロラクチン分泌細胞の増殖を検定するのに適しているかを調べた。培地に10nMのエストラジオールを添加すると、インスリン低濃度の条件下ではプロラクチン産生細胞の増殖が促進されたが、インスリン高濃度の条件下では逆に抑制された。また、10uMのドーパミンを添加すると、インスリン濃度に関係なくプロラクチン分泌細胞の増殖が抑制された。2増殖作用を調べる予定であった視床下部ホルモンの中で、性腺刺激ホルモン放出ホルモンおよび甲状腺刺激ホルモン放出ホルモンに関して検討を行った。性腺刺激ホルモン放出ホルモンは調べられた濃度の範囲内ではプロラクチン分泌細胞の増殖に対していかなる影響も及ぼさなかった。一方、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン1uMを添加すると、予想に反してプロラクチン分泌細胞の増殖が抑制された。現在、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモンの作用に関して、時間経過、濃度依存性を調べている。6週令雌ラツトより得られた下垂体前葉細胞を血清含有培地にて前培養後、3日間無血清培地で培養した。この無血清培地に視床下部ホルモンを添加し、プロラクチン分泌細胞の増殖に対する影響を調べた。培養終了前にbromodeoxyuridine(BrdU)を培地に添加し、増殖細胞を標識した後、培養細胞のプロラクチンとBrdUを2重染色し、BrdU陽性プロラクチン陽性細胞を増殖プロラクチン産生細胞とした。

1今年度においてプロラクチン産生細胞増殖促進作用を調べた視床下部ペプチドは甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン(TRH)、vasoactive intestinal peptide(VIP)、オキシトシンであった。昨年度の研究でTRHは予想に反して抑制的に作用することが明らかになったが、無血清培地に0.1%牛血清アルブミンを添加した培養条件下では予想通りTRHは100pMの濃度でプロラクチン産生細胞の増殖を促進することがわかった。しかし、牛血清アルブミン添加無血清培地でさらにVIP、オキシトシンの作用を調べたが、10^<-6>-10^<-12>Mの濃度の範囲では効果は認められなかった。2増殖促進効果が認められたTRHとエストロゲンとの協同作用が存在するか否かを調べると、エストラジオール非存在下では認められたTRHの増殖促進効果は10nMエストラジオール存在下ではむしろ消失していた。3視床下部ホルモンのプロラクチン産生細胞増殖促進作用のsecond messenger分子と考えられるcyclic AMPの細胞内作用機序に関しても検討した。細胞内cyclic AMP増加によってプロラクチン産生細胞の増殖も促進され、これはかなりの部分mitogen-activated protein kinaseに依存していた。また、このcyclic AMPの促進作用は抑制性視床下部ホルモンのドーパミンのアゴニストであるbromocriptineでは抑制されなかった。