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政策決定のプロセスにみる清末垂簾聴政の構造と特質

アロー戦争(1856-61)後の清朝では、垂簾聴政と呼ばれる政治体制が実施され、六歳で即位した同治帝に代わり、東西の両皇太后が政策を決めた。本研究では、19世紀後半の清朝中央における政策決定過程を検討し、垂簾聴政の構造と特質について考察した。そこでは公文書に加え、当時の官僚の日記や書簡を利用して政策決定に至る過程を復元し、垂簾聴政期と光緒帝による親政時期のそれぞれにおいて、西太后がもっていた権限について分析した。二年目となる平成25年度は、これまでに収集した史料を分析して論文にまとめると同時に、昨年度からの海外調査を継続した。そこではまず、これまで集めた史料の中から、特に日清戦争時期のものを取り出し、分析を進めた。日清戦争が起こった1890年代の清朝では、皇帝の成人に伴い、皇帝親政でありながらも西太后が一定程度の権力を握るという状況が現出した。このこと自体は、当時から知られているが、政策を決定するにあたっての二人の関係が具体的にどのようであったのかは、よく分かっていなかった。そこで、清末の中央政界にて重要な地位を占めた翁同和(もとは古字、以下同じ)の日記を分析し、それを二本の論文にまとめた。また、翁同和の日記の一つである『翁同和日記』の原本に基づく新たな版本が出されたのを受け、その特徴を他の日記とともに整理して発表した。海外調査では、昨年度の北京調査で発見した、中国社会科学院近代史研究所に所蔵される書簡の把握に努めた。この書簡は、当時の朝廷の中枢を構成していた皇族や官僚の手によるものであり、公文書には記載されない水面下の動きを知るうえで重要である。調査に出発する前に、これらの書簡の閲覧申請について調べたところ、現在は史料保存のため原本を影印出版し、その閲覧を勧めているとのことであった。そこで、調査の効率をあげるために、出版された書籍と他の関連史料の双方を持つ台湾の中央研究院を訪問することにした。本年度の調査は、まず光緒帝の生父である醇親王の手による書簡の閲覧からはじめた。現段階では、関連史料が集めきれていないこともあり、書簡の位置づけが十分にはできていないが、醇親王の地位を考えると有用であると考えられる。また未読の書簡には、他の親王や軍機大臣、および李鴻章ら地方大官のものも多く含まれる。そのため、今後のさらなる調査が必要と思われる。初年度となる平成24年度は、清末の垂簾聴政下における政策決定のあり方の考察から着手した。これに必要な史料には、公文書に加え、政策決定の中枢にいた官僚の日記、彼らの間で授受された書簡がある。そこで当初の計画にしたがい、「醇親王・軍機処往来書簡」を精査するべく、所蔵先である北京の中国第一歴史档案館を9月に訪れた。この書簡は、2009年に所在を確認していたものの、デジタル化作業のため閲覧できなかったものである。当時の館員の話では、デジタル化は12年で完了するとのことであった。しかし、訪問時に確認したところ、現在もデジタル化作業中で、閲覧不可となっていた。そこで北京滞在期間中の計画を変更し、別の図書館・文書館を調査することにした。調査は、中国人民大学の銭博士の紹介により、中国社会科学院近代史研究所を中心に行った。その結果、当時の朝廷の中枢を構成していた皇族や官僚の手による書簡が、大量に所蔵されていることが判明した。ただ、それらは授受した人物ごとに整理・保存されているものの、日付しか分からないため必ずしも時系列に並んでいるとは言えず、一部の事案に的を絞った閲覧が難しい状況にあった。そこで、まずは同研究所にある書簡の所蔵状況を把握することから始めた。その結果、当時の親王や軍機大臣、及び彼らと李鴻章ら地方官との間で授受された書簡が、少なくとも280冊程度所蔵されていることが確認された。今回の調査では、時間の都合上すべてを把握しきれなかったため、存在をつかめていない史料は、他にも存在するものと思われる。最終年度となる平成26年度は、皇太后が政策の決定権を持ち、親王ら皇族が補佐する垂簾聴政期の清朝中央における政策決定のあり方を解明し、その構造と特質を明らかにするという研究目的を達成するべく、関連史料の収集に努めた。昨年度末に発表した論文にて、皇帝が親政していたにもかかわらず、西太后が権力を握っていたと一般的に言われる1890年代の政策決定過程において、皇帝親政という建前と、政策決定への関与に意欲をみせる西太后の存在という現実の間で折り合いをつけるために、様々な工夫がなされていたことが分かった。そしてこの成果から、垂簾聴政から皇帝親政へという流れの中で、西太后がどのように位置づけられていたのかが課題の一つとして浮上してきた。

また第二の課題として、皇帝が成人した後も西太后が政策決定に関与し続けることを可能にした体制が、どのように作られていったのかという問題もある。そこで本年度の海外調査では、上記の課題にしたがって史料を収集した。第一の課題については、昨年度に引き続き中国社会科学院近代史研究所に所蔵される書簡を利用し、当時の政策決定のあり方を具体的に分析するために、既に出版されている史料の把握に努めた。とりわけ、当時の清朝中央における軍事・行政上の最高機関とされる軍機処の大臣が授受したものを閲覧した。第二の課題については、台北にある故宮博物院図書文献館に所蔵される軍機処関係の行政文書から、垂簾聴政、皇帝親政当初に実施された西太后が訓示を与えつつ政策を決定する訓政、本格的な皇帝親政という各段階への移行に際し、親王ら皇族を中心とする臣下側がどのような動きをみせ、如何なる体制を構築しようとしたのかを探るべく史料を閲覧・収集した。東洋史平成25年度は、皇太后が政策の決定権を持ち、親王ら皇族が補佐する垂簾聴政期の清朝中央における政策決定のあり方を解明し、その構造と特質を明らかにするという目的のうち、後者を開始した。方法としては、同じ西太后が権力を握っている時代とされながらも、皇帝が親政していた1890年代の政策決定過程を、これまでと同様に考察して比較対象とすることで、その特質を考えるための第一歩とすることを目指した。その結果、1890年代半ばの清朝中央では、皇帝親政という建前と、政策決定への関与に意欲をみせる西太后の存在という実態との間で折り合いをつけるために、様々な工夫をしていたことが判明した。それについては、「日清講和にむけた光緒帝の政策決定と西太后」『史学雑誌』123-3、2014年および「光緒帝親政期における西太后の政治関与」『ふびと』65、2014年に論文としてまとめ、その成果を発表した。また論文執筆において明らかとなった翁同和の各種日記に関する特徴を整理してまとめた。その成果は、「翁同和の日記とその史料的価値」『満族史研究』12として発表している。書簡の調査については、全体像の把握を最優先の課題として進めたが、膨大な量があるため、時の皇帝である光緒帝の生父醇親王のものから開始した。書簡は草書体で書かれていることもあり、予想以上に時間を要するものとなったが、ひとまず醇親王のものは、一通り目を通すことができた。平成24年度は、東西の両皇太后が政策の決定権を持ち、親王ら皇族が補佐する垂簾聴政期の清朝中央における政策決定過程のあり方を解明し、その構造と特質を明らかにするという目的のうち、前者から開始した。そこで必要になる史料の一つに朝廷の中枢にいた人物の間で授受された書簡があるが、当初予定していた中国第一歴史档案館が所蔵する「醇親王・軍機処往来書簡」の閲覧が叶わなかった。しかし中国社会科学院近代史研究所にて、新たに別の書簡を発見した。これらの史料は、双方ともに当時の政策決定過程に関わる重要なものであると推察される。そのため、両者を精査し分析することで、垂簾聴政下における政策決定過程のあり方の解明につながる事例研究が可能になると思われる。この他、大清帝国史研究の成果を取り入れた分析を行うための基礎的作業として、自身がこれまでに発表した論文をもとに当時の政策が決定される「政治空間」についてまとめ、それを18世紀以前の状況と比較検討した。これについては、The Second Congress of Asian Association of World Historians(第二回アジア世界史学会)等で報告を行い、その成果を報告書に発表した。
米国内ムスリム市民の政治志向の分析:大統領選挙および「対テロ戦争」への影響

「9.11テロ事件」以降のムスリムに対する政治的疎外、差別、嫌悪症が拡大する中で、米国のムスリムは、自身の人権や市民的自由を守るため、政治参加が積極化している。この傾向は、ムスリムによる有権者登録の促進やブロック投票の呼びかけなど、大統領選挙期間に明確に現れた。同時に、ムスリムの政治的関与の形態は一元的ではなく、アイデンティティの変化や出自・世代・イデオロギー等に起因する政治志向の多様化傾向も観察される。本研究は、米国とムスリムと社会の関係が今後の21世紀の国際関係の展開において極めて重要な位置を占めるであろうとの認識に基づき、米国内ムスリム市民の政治的志向および政治行動に注目し、これらが米国の対外政策、特に対中東・イスラーム地域政策にどのような影響を与えているのかについて分析するものである本研究において最も重要な題材となるのが、2008年の米国大統領選挙である。大統領選挙期間は米国内が最も「政治化」される時期であり、国内諸勢力・諸派の政治的志向と政治行動が最も顕著に表出される時期でもある。また米国で年々政治的影響力を増している米国内ムスリム市民の動向は大統領選挙の結果に少なからず影響を与えるものと予測される。このように、この時期の米国内ムスリムの動向をリアルタイムで追跡することにより収集・蓄積された実証的なデータは、来るべき米国新政権の国内外のイスラーム社会に対する諸政策を評価するひとつの重要な指標となるであろう。平成19年度には、研究に関連する文献の収集と情報整理、高速ネットワーク接続が可能なパソコン使用によるウェブ上で入手可能なデータの収集と整理、在米研究者あるいは研究機関からの資料・情報提供の依頼、予備的な訪問調査を行う。平成20年度には、引き続き、パソコン使用によるデータ収集と整理、現地調査による資料・情報の収集、在米研究者からのヒアリングおよび研究機関への訪問を行う。平成21年度には、これまでの作業に加えて、大統領選挙の結果に対するムスリム諸組織の反応と今後の対応を主たる調査対象とする。最終年度となる平成22年度には、収集した資料・情報の分析と、これに基づいた研究論文の執筆、研究論文の投稿、学会または研究会での口頭発表、および在米研究者との意見交換、研究成果に対するコメント・批判などフィードバックを取り入れた再検討・再考察、最終的な研究成果のとりまとめをおこなう。本年度(平成19年度)は本研究の初年度にあたるため、(1)米国ムスリム全般に関わるもの、(2)米国大統領選挙の推移に関わるもの、(3)米国の中東政策および中東情勢に関わるものの3側面に分類し、書籍、雑誌論文、公刊資料集等研究に関連する文献の収集と情報整理を第一義的に進めた。また、時事的な内容に関するものはインターネットを活用し、ウェブ上で入手可能なデータの収集と整理をおこなった。本研究に関連する、(1)米国での主要なニュース、(2)国内・国際政治を扱う研究所、(3)米国ムスリムの諸団体を中心とする各種のデータを丹念に収集し、インデックスを付けてパソコンに収録して簡便なデータベースを作成しつつある。海外研究出張に関しては、平成19年8月末から9月初頭にかけて、米国シカゴ市内のコンヴェンション・センターで開催される北米イスラーム協会(ISNA)全国大会に出席し、同協会関係者とのインタヴューおよび資料収集等を行った。さらに、平成20年2月に、米国ロサンゼルスのイスラミック・センター、サンディエゴのイスラミック・センター、およびMPAC、CAIR San Diegoなどの米国ムスリム関連組織を訪問し、関係者とのインタヴューおよび資料収集等を行った。現時点では、上記のように収集した各種の文献および情報の整理と評価に取り組んでおり、まとまった形での研究成果の報告には至っていない。ただし、暫定的な評価としては、前回の2度の大統領選挙(2000年および2004年)における米国ムスリムの政治的活動と比較すると、今回大統領選挙での米国ムスリムは、個人および組織ともに、政治的活動がやや不活性との印象を受けている。ただし、今年(平成20年)は、大統領選挙の本投票が行われる年であり、投票の11月に向けて本研究の研究対象として興味深い米国ムスリムの政治動向が観察されるものと思われる。本年度(平成20年度)は、昨年度に引き続き、(1)米国ムスリム全般に関わるもの、(2)米国大統領選挙の推移に関わるもの、(3)米国の中東政策および中東情勢に関わる書籍、雑誌論文、公刊資料集等研究に関連する文献の収集と情報整理を進めた。大統領選挙に関する時事的な情報ハインターネットを活用し、ウェブ上で入手可能なデータの収集と整理をおこなった。本研究に関連する、(1)米国での主要なニュース、(2)国内・国際政治を扱う研究所、(3)米国ムスリムの諸団体を中心とする各種のデータを収集、データベースの作成を継続している。海外研究出張に関しては、平成20年8月末から9月初頭にかけて、米国オハイオ州コロンバス市内のコンヴェンション・センターで開催される北米イスラーム協会(ISNA)全国大会に出席し、同協会関係者とのインタヴューおよび資料収集等を行った。

さらに、平成21年2月に、米国ニューオーリンズ市内のイスラミック・センターなど米国の南部都市でのムスリム関連組織を訪問し、関係者とのインタヴューおよび資料収集等を行った。平成20年11月に行われた大統領選挙(本選挙)では、民主党オバマ候補が勝利した。今回の選挙に関しては、米国ムスリムの多くが民主党オバマ候補を支持した。これは前政権である共和党ブッシュ大統領の諸政策に反対する意思表明であった。この反対の意思表明が非常に強かったため、前回の大統領選挙の際に見られた米国ムスリムの候補者選定における逡巡というものがほとんど見られなかったといえる。このような米国ムスリムの政治行動に関して、詳細な数的データ(世論調査、投票率、出口調査など)を収集し、さらにインタヴューによって米国ムスリムの政治的態度を探った。現在このような収集データの整理と評価を継続しており、平成23年度初頭に論文および学会発表が可能となるよう作業を進めている。昨年度より継続する作業として、米国ムスリム全般に関わるもの、および米国大統領選挙の推移に関わるもの、さらに米国の中東政策および中東情勢に関わる書籍、雑誌論文、公刊資料集等研究に関連する文献の収集を行った。また、米国大統領選挙に関する時事的な情報はインターネットを活用し、ウェブ上で入手可能なデータの収集と整理をおこなった。本研究に関連する、米国での主要なニュース、また国内・国際政治を扱う研究所、さらに米国ムスリムの諸団体を中心とする各種のデータを収集し、パソコンを活用したデータベースの作成を継続している。海外研究出張に関しては、平成21年7月上旬に、米国ワシントンDCのコンブェンション・センターで開催される北米イスラーム協会(ISNA)全国大会に出席し、同協会関係者とのインタビューおよび資料収集等を行った。今回の大会は、首都ワシントンDCでの開催ということで、オバマ政権高官の出席もみられるなど、例年と比較してワシントン政治との関連が強く感じられた。米国ムスリムの政治行動に関して、詳細な数的データ(世論調査、投票率、出口調査など)を収集し、インタヴューによって米国ムスリムの政治的態度を探った。2008年の大統領選挙に関しては、各種の資料・データは出尽くしたと判断できる。したがって、今年度はこのような収集データの整理と評価に集中し、平成23年度初頭に論文および学会発表が可能となるよう作業を進めている。なお、本研究の一部を成すものとして、南アジア地域のイスラーム諸国から米国に移民するムスリムの動向についての分析を行い、雑誌論文として公刊した。本研究の最終年度となる平成22年度では、継続的な作業として、2008年米国大統領選挙の評価、米国ムスリムの動向、および米国ムスリムと米国政治との関連について、新規に刊行された書籍および発表された研究誌論文の収集と分析を行った。また、インターネットを用いて、本研究に関連する膨大なデータを検索し、過去3年間のものと合わせて簡易なデータベースとして蓄積した。この作業により、過去数年にわたる米国ムスリムと米国政治外交との関連文献とデータは概ね集積できたと考えられる。
気管支喘息患者の気道リモデリングにおけるIL-24の新たな作用に関する研究

IL-24陽性細胞を同定する目的で気管支粘膜生検組織に免疫染色を行った。気管支喘息患者から採取した凍結切片を用いてIL-24の免疫染色を行ったものの、今回の実験でははっきりと染色部位を確認することが困難であった。気管支喘息患者だけでは症例数に限りがあるので肺機能が低下した患者というくくりで患者対象を広げCOPD患者もふくめることとし、また予備的な実験として、検体が入手しやすい、気管支喘息患者、およびCOPD患者の血液を用いて、IL-24をELISAで測定した。当初は呼吸機能が低下している患者群に増加していることを予測していたが、これまでの実験結果では優位差を認めるものではなかった。予備実験では肺機能が低下した喘息患者群における気管支洗浄液中のIL-24は肺機能が保たれている喘息患者群より増加していることは確認したが、今回COPDモデルのマウスの気管支洗浄液中のIL-24をコントロール群のマウスと比較したがこれまでの実験結果では優位差を認めるものではなかった(ただマウスに関しては肺機能は測定困難であり、あくまで喫煙をさせたマウスで解剖御肺の気腫化を認めたものをCOPDとして取り扱っている)。全体的に当科へ通院する気管支喘息患者数が減少傾向にあり、また負荷の大きい気管支鏡検査に同意いただける患者数も減っており新規での組織入手が困難となりつつある。そのため気管支粘膜生検組織の免疫染色はこれまでに採取した凍結切片をも用いて、IL-24の免疫染色を施行することとしたが、凍結したことが原因なのかどうか判断が困難ではあるが、現状では実患者の検体ではIL-24陽性細胞の同定が困難であった。また予備実験では肺機能が低下した喘息患者群における洗浄液中のIL-24は肺機能が保たれている喘息患者群より増加していることは確認したが、当院における新規喘息患者の減少もあり新規での検体入手が困難により検体を入手しやすい血液を用いて、IL-24を測定して、新たな切り口を模索しているが現時点では優位差を認めるものはなかった。今後は当院の現状を考え見て、検体の入手しやすから気管支喘息(及びCOPD)を合併している癌患者の手術検体を用いることができないか模索中である、ただし、その場合癌によって、IL-24が影響されている可能性があるので、喘息合併のない患者の手術検体をコントロール群として用いることを検討している。気管支喘息患者は気道リモデリングの進行により肺機能低下と気道過敏性の亢進がおこるため著しくQOLが低下する。しかし現在その詳細な機序については解明されていない点が多く、本質的な治療は行えない状況にある。IL-24についてはこれまで創傷治癒過程における役割や、腫瘍に対する放射線感受性増強効果についての報告はされているが、気管支喘息などアレルギー性気道炎症、さらに呼吸器炎症性疾患全般における役割は未だ明らかではない。予備実験で気管支喘息患者の中で、喫煙歴が無く喘息以外に呼吸器疾患のない患者において、肺機能検査において異常を認めないか、または予測値の80%以上を示す軽度の気流制限のある患者と、気管支拡張薬吸入後の肺機能検査で1秒量、予測1秒量、1秒率などが予測値の80%未満を示す中等度から重度気流制限のある患者を対象に気管支洗浄液と気管支粘膜生検組織を採取施行し、肺機能が低下した喘息患者群における洗浄液中のIL-24濃度が、肺機能が保たれている喘息患者群のそれに比し高いことを確認している。IL-24が気道リモデリングに果たす役割を明らかにすることを目的とし、気管支喘息患者の気管支生検組織においてIL-24産生細胞を同定することを念頭に免疫染色を行った。2017年度は時間的制約もあり、新規での気管支喘息患者の検体も入手も困難であったため。気管支喘息患者の検体は使用せず、肺癌患者、間質性肺炎などの患者の手術検体をパラフィン包埋の肺組織を用いての予備実験的に免疫染色を行った。また今後気管支喘息患者の凍結検体を免疫染色する予定であり、マウスの肺凍結検体をクライオスタットで切片を作成し、免疫染色を行い手順を確認した。2017年4月より、岩手県立中部病院へ第一呼吸器科長として赴任。同院は岩手県人口10万人規模の基幹病院であるにもかかわらず、呼吸器科常勤医として自分も含めて3人(内一人は後期研修医)しかおらず、その人数で土日も含めて急患対応をする必要があった。中部病院から大学までは50km程度離れており、急患が発生した場合の対応を考慮すると大学に行くこと自体がなかなか難しく、またまとまって研究する時間を確保するのが非常に困難であった。そのため単発的は技術確認及び論文検索を行うにとどまった状況である。

予備実験では肺機能が低下した喘息患者群における気管支洗浄液中のIL-24は肺機能が保たれている喘息患者群より増加していることは確認したが、今回COPDモデルのマウスの気管支洗浄液中のIL-24をコントロール群のマウスと比較したがこれまでの実験結果では優位差を認めるものではなかった(ただマウスに関しては肺機能は測定困難であり、あくまで喫煙をさせたマウスで解剖御肺の気腫化を認めたものをCOPDとして取り扱っている)。全体的に当科へ通院する気管支喘息患者数が減少傾向にあり、また負荷の大きい気管支鏡検査に同意いただける患者数も減っており新規での組織入手が困難となりつつある。そのため気管支粘膜生検組織の免疫染色はこれまでに採取した凍結切片をも用いて、IL-24の免疫染色を施行することとしたが、凍結したことが原因なのかどうか判断が困難ではあるが、現状では実患者の検体ではIL-24陽性細胞の同定が困難であった。また予備実験では肺機能が低下した喘息患者群における洗浄液中のIL-24は肺機能が保たれている喘息患者群より増加していることは確認したが、当院における新規喘息患者の減少もあり新規での検体入手が困難により検体を入手しやすい血液を用いて、IL-24を測定して、新たな切り口を模索しているが現時点では優位差を認めるものはなかった。2018年4月より岩手医科大学へ帰任した。また通常業務時間内にも研究時間の確保を配慮いただいた。今年度以降は着実の研究をすすめていく予定である。今後は残り研究期間を考慮し、新規の患者の気管支鏡検査追加は行わず、これまでに採取し、保存していた凍結検体を用いて、IL24抗体で染色し、IL-24陽性細胞を同定を行う。また、気管支線維芽細胞の核内においてIL-13の刺激によりSTAT 1がリン酸化されIL-24のプロモーター部へ結合、IL-24 mRNAとタンパクの産生が開始されると考えられるのでそのためIL-13環境下におけるIL-24の気道上皮細胞の障害修復に対する抑制作用の検討目的で、気管支線維芽細胞を培養皿内で培養し、共培養用のチャンバーを上部に挿入し気道上皮細胞を播種する。上皮細胞がコンフルエントになった時点でMMP-2あるいはTGF-βを添加し、上皮細胞をピペットチップの先で直線状に剥離しチャンバー底を露出させる。その後培養皿内の線維芽細胞をIL-13で刺激し、24・48時間後の損傷部の間隔を比較する予定である。今後は当院の現状を考え見て、検体の入手しやすから気管支喘息(及びCOPD)を合併している癌患者の手術検体を用いることができないか模索中である、ただし、その場合癌によって、IL-24が影響されている可能性があるので、喘息合併のない患者の手術検体をコントロール群として用いることを検討している。2017年度に地方病院出張のため研究がおもうようにすすめられず、必要な備品の購入も行わなかったため、今年度以降より速やかに研究に必要な共培養用の細胞培養皿、上皮細胞・線維芽細胞培養液、刺激用サイトカイン、細胞固定液・蛍光抗体(培養細胞免疫染色)など可溶性IL24受容体、IL24抗体・IL24受容体抗体の購入を行うためである。現状ではまだ研究結果を公表できるほどのデータが作成できておらず、関連学会発表への旅費や参加費などを予定より使用されていない。また現在新規患者の検体入手が当初より遅延しており、検体数が伸び悩みサンプル数が当初よりも少ないことなどから消耗品の使用も計画当初よりも少ない量になっている。
検証アンコール・ワットへの道

アンコール王朝期に完成をみた東南アジア大陸部のネットワークを、史料(碑文)・考古資料・図像・建築様式や技術に基づき、アンコール王朝の中央と周縁の関係性を分析した。具体的な調査対象遺跡はアンコール王朝を起点とした場合の西限にあたるムアン・シン遺跡Muang Singh(タイ)、北東限のワット・プー遺跡Wat Phu(ラオス)、そして南東のバヤン遺跡Bayan(カンボジア)である。碑文によって寄進と下賜の関係がより具体的に明らかになり、踏査によって現実的に可能な経路を提案できた。それらに加え現存する儀礼や伝承の収集と分析から、文化圏の認識に関わる領域・境界性を検証するための材料を得ることが出来た。本研究の2つの研究目的:(1)碑文情報検証研究、(2)碑文に記載された3か所の遠隔地遺跡の調査、についてH25年度は次の通り研究を実施した。具体的には、(1)アンコール王朝の最盛期と考えられる12世紀から13世紀にかけての史料であるカンボジア碑刻文を、最近の収集資料も含め検証対象とし、リスト化、解釈再検討、を進めた。さらに碑文の出土分布状況を整理した。更に(2)2013年8月後半に、アンコール地域における考古資料及び碑刻文資料の調査、続いて2014年2月後半、アンコール地域(カンボジア)から西方ルートの王道沿いに碑文と関わり合いのある遺跡の調査を実施した。以下、詳細をまとめる。[詳細]ムアン・シン寺院検証研究調査(2014年2月20日-28日):ムアン・シン遺跡は、現在のタイ国内西端のミャンマーとの国境近くに在り、歴史上アンコールとは1191年の仏像(観世音菩薩)奉納における接点が指摘されている。今回の海外調査では、研究分担者及び研究協力者はアンコール(カンボジア)を陸路出発し、西側王道ルート沿いの12-13世紀碑文が出土する遺跡を踏査し、最終的にムアン・シンへ至った。途中、スドック・カク・トム碑文で有名な同遺跡を通過し、プラチン・ブリでは出土碑文資料や同時代の物質文化等を博物館で実見する機会を得た。ムアン・シンではジャヤヴァルマン7世紀の寺院建築の他、周辺地域の東西物流ネットワークの痕跡を現在の道路に見出すことができた。アンコールから西側の王道を中心に、碑文、建築、考古、さらに石橋や道路などの土木事業を比較検証した結果、アンコールという中央と、周縁(H25年度はアンコールからみて西側)という地方との関係や、物流、さらにそれぞれの特徴(地方色)等にある方向性を見出すことができた。また研究課題として、中央と周縁の関係を更に検証していくことも必要でああることが確認された。1.研究会1(通算第5回)2014年5月19日(月)17時ー18時半(上智大学2ー510)三輪悟氏(上智大学アジア文化研究所共同研究員/本補助事業研究協力者)「カンボジアの伝統木造民家」(カンボジア南東部、メコン河流域の伝統木造民家の調査を通じ、基層文化のひとつの顕著な例としての木造民家の技術・生業を明らかにした。当該地域のアンコール期の諸遺跡との比較検証をおこなった。)2(通算第6回)2014年7月16日(水)18時ー19時半(上智大学2ー510)松浦史明氏(日本学術振興会特別研究員PD(上智大学)/本補助事業研究協力者)「周達観の来た道ーアンコール南部の歴史と水上交通」(『真臘風土記』にみられる中国からアンコール・ワットにいたる往時の水上交通ルートから地図上に示し、メコン川デルタ地帯の「真臘の境域」からアンコール王朝南部にかけての地域の歴史を、碑文史料に基づいて報告。交通ルートの解明から地方統治のあり方について言及した。)3(通算第7回)2015年1月22日(木)18時半ー20時(上智大学L-912)朝日由実子氏(日本女子大学人間社会学部現代社会学科助教)「カンボジアにおける絹織物業と民族性」(メコン下流域の絹織物業の技術及び人的ネットワークを歴史的に考察した。本補助事業にとって、社会学からの地域研究手法が参考になった。)*なお、各研究会開催直前に分担研究者と協力者との打ち合わせ会議を開催し、相互の研究進捗状況を報告した。2.海外調査1カンボジア(基礎調査)2014年8月4日ー9月10日(アンコール遺跡発掘調査、博物館資料調査、クメール建築施工技術調査)、2カンボジア(総合調査・踏査)2015年2月19日ー27日(カンボジア南部地域先アンコール期の洞窟遺跡を中心とした踏査)I.目的の達成研究目的である古代アンコール朝時代のネットワーク検証について、史料・構築物・考古資料の資料収集に取り組み、検証を進めた。事業対象年度であるH25ーH27の3年間を通じて、古代道路の痕跡をアンコール地域を起点とた、タイ及びムアン・シン遺跡へ通じる東西古代道(H25)、ワット・プー遺跡へ通じる北東古代道を調査(H27)、及びカンボジア南東部からベトナム南部地域(H26)を調査した。史料については調査地資料館にて新収蔵碑文資料を取集し、連携研究者によって現在その翻訳及び解釈が進められている。構築物のうち、古代道路及び橋脚の痕跡はドンレーク山脈以西、及び以北において共にその痕跡を観察することが難しいがこれは地域間の地理的条件の相違に起因するものであろう。さらに寺院建築等建物等については伽藍配置、工法、さらに意匠に見られる相違に、道路網と地域間の特徴が表れていることを結論づけた。

これは考古資料(特に建築に関連する瓦等)の調査成果とも対応するもので、両調査成果の総合的な検証は、報告書にて議論されることとなる。研究目的は、3年間の調査・研究を経て、個別の資料検証が多くを占めたが7割程度の目的が達成された。II.実施報告1.メンバーによる研究打ち合わせ会議(於上智大学アジア人材養成研究センター)計8回、2.海外調査(於カンボジア、プレア・ヴィヒア州からラオス、チャンパサック地方):2016年2月20日-28日、3.研究成果の一般公開(2016年9月から公開予定)JMOOC日本オープンオンライン教育推進協議会提供オンライン講義(全4週、45回:「アンコール・ワット研究:「人間」を考える総合学問としての新地平」を作成(講義収録は2016年3月末終了。編集作業等を経て9月1日開始予定。)。講師を研究代表者石澤、分担者丸井、他本科研連携研究者が担当し、調査成果の一部を披露。アンコール王朝期に完成をみた東南アジア大陸部のネットワークを、史料(碑文)・考古資料・図像・建築様式や技術に基づき、アンコール王朝の中央と周縁の関係性を分析した。具体的な調査対象遺跡はアンコール王朝を起点とした場合の西限にあたるムアン・シン遺跡Muang Singh(タイ)、北東限のワット・プー遺跡Wat Phu(ラオス)、そして南東のバヤン遺跡Bayan(カンボジア)である。碑文によって寄進と下賜の関係がより具体的に明らかになり、踏査によって現実的に可能な経路を提案できた。それらに加え現存する儀礼や伝承の収集と分析から、文化圏の認識に関わる領域・境界性を検証するための材料を得ることが出来た。おおむね順調に計画通り進んでいる。1.研究目的且つ目標が具体的であった。碑文に関わる地理情報の収集と記録化は、H25年度およびH26年度の海外調査を経て順調に蓄積されている。また、代表者石澤、協力者松浦、同ニム・ソティーブン(上智大学アジア文化研究所客員所員)によって日本においてはアンコールの碑文目録の読み直しが進められている。相互の連携がうまく取れている。この成果の一部は『佛教藝術』誌337号(アンコール研究特集号)に掲載された。2.海外調査のための各機関との連携がよかった。海外調査は今年度はカンボジアのみで2度実施した。いずれも常時よりカンボジア側文化芸術省、アプサラ機構、王立芸術大学、プノンペン大学等と学術協定などを交わしているために便宜供与を最大限引き出すことが出来た。また、調査時には必ずカンボジア側研究者が加わり、現地におけるトラブルを避けることができた。27年度が最終年度であるため、記入しない。歴史学[研究会]年度前半に2回、年度後半には研究会を1回、さらにシンポジウム形式の会を1回開催予定。[海外調査]基礎調査としてのカンボジアにおける調査を夏期に1回、海外調査・踏査をカンボジア北部(プレア・ヴィヒア周辺)からラオス南部(チャンパサック地方:ワットプー遺跡など)で実施する。海外調査・踏査の概要は次のとおり:アンコール王朝発祥の地ラオス南部のワット・プーは、コー・ケー(現カンボジア・プレア・ヴィヒア州)経由で歴代の王達から莫大な寄進品が届けられていたことが碑文によりわかっている。
早産におけるケモカインシステムの分子病理学的研究

本研究はケモカインネットワークに着目し、早産におけるケモカインシステムの関連を解明しようとしている。まず最初にLPS腹腔内投与によるマウス早産モデルを確立した。早産モデルを用いてCX3CR1欠損マウスと野生型マウスで早産率を比較するとCX3CR1欠損マウスで有意に早産率が低くなることが分かった。そのメカニズムを解明するため、羊水や胎盤などの妊娠組織を解析したところ、CX3CR1欠損マウスで子宮へのマクロファージの遊走が抑制されており、炎症性サイトカインの産生も抑制されていた。また早産妊婦に血清中ではCX3CL1が有意に上昇しており、その結果を踏まえ、野生型マウスに抗CX3CL1抗体を投与すると早産が抑制されることも同定できた。現在、所有している他のケモカイン・ケモカインレセプター欠損マウスを用いて、野生型との早産率の比較を行っている。早産への関与が考えらえるケモカイン及びケモカインレセプターが同定されれば、Real time(RT)-PCR法、免疫組織学染色、ELISA法及びフローサイトメトリー法を用いてサンプルを解析する予定である。早産におけるCX3CL1-CX3CR1システムの関与についての論文を完成させ、アクセプトされた。早産におけるCX3CL1-CX3CR1システムの関与についてさらに解明を深めるため羊水や頸管粘液などのヒトサンプルの解析を進める。マウス実験においては複数のケモカイン・ケモカインレセプター欠損マウスで野生型との早産率の差を比較中であり、有意差がでればサンプリングし解析を進める予定としている。
スペクトル理論のコンピュータビジョンへの応用

本研究では画像認識で重要なスケールスペース空間をPCAを用いて効率化を図る。スケールスペース空間は連続のスケールパラメータで定義されるため、顔認識で用いられる離散的なPCAはそのまま使えない。そこでPCAの一般化であるスペクトル分解をスケールスペースに適用した。具体的にはスケールの3次の多項式で近似して求めた。スペクトル分解をガウシアンスケールスペースおよびScale Normalized LoG空間に適用して,その具体的な固有解を求めた。SIFTへの応用にて,提案手法が良い再現性を得ることがわかった。関数解析学の分野で知られるスペクトル分解をコンピュータビジョンの諸問題に応用する研究を進めている。具体的には,ガウシアンフィルタで入力画像を様々なスケールでぼかして、それを画像解析に用いるスケールスペースに本理論を応用する。上記のボケ画像の枚数を増やすほどスケール分解能が上がり,画像解析の精度が向上するが,計算面で不利になる。そこで,複数のボケ画像を主成分分析を用いて圧縮する方法が考えられるが,スケールパラメータは連続量であるためボケ画像は無数に存在するために,従来の共分散行列を用いた主成分分析は使えない。そこで,行列ベースの主成分分析を無限次元に一般化したスペクトル分解を用いて,スケールスペースの圧縮,その固有解の導出および解析を進めた。また,これらの結果の画像解析への応用を試みた。25年度では,等方的な1パラメータのGaussian filter,Derivative Gaussian filterおよびScale-Normalized Laplasian of Gaussian filter (sLoG)の3種の解析を進め,これらの固有解を3次多項式で近似し,その具体的な解を求めた。基底数(固有フィルタ)が4程度で,コンピュータビジョンの応用で十分な近似精度が得られた。具体的には,任意のスケールのボケ画像が34枚の固有フィルタの畳み込みによって高精度に復元できた。また,sLoGの固有フィルタを用いたSIFT検出器(Scale Normalized Feature Transform)を開発した。従来のSIFTと同程度の計算時間となり,Oxfordデータセットにてrepeatabilityを評価した結果,従来SIFTと比べて最大で10%程度向上し,結果が悪くならないことを確認した。スペクトル分解を用いたスケールスペース空間の情報圧縮に関する研究を進めている。1パラメータのガウシアンスケールスペースおよび、Scale Normalized LoG空間(sLoG)のSIFT特徴点検出器の応用を進めた。具体的には、(1)Oxfordデータセットを用いた評価実験を進め、従来のSIFT、SURFよりも良い再現性が得られることを確認した。(2)固有関数の基底をB-Spline区分多項式で近似することで、より広範囲のスケールの画像特徴を抽出する手法を開発した。従来の画像ピラミッドによる方法ではリサイズ時のアーチファクトが問題であったが、提案手法ではこれを抑えつつ、広範囲のスケールの特徴を抽出できることを確認した。(3)sLoG等の固有フィルタがXY分離不可なフィルタリング操作が必要なため、FFTが必要といった欠点があったが、固有フィルタをガウシアンの和で近似する手法を開発し、高速かつ良好に近似できることを確認した。(4)多パラメータのスケールスペースとして、アフィン・スケールスペースのスペクトル分解手法の検討を行った。特異値分解を用いて楕円状のガウシアンフィルタのスペクトル分解を行った。その後、基底関数を多項式および三角関数で近似し、少ない次数で良好に近似できることを確認した。研究成果としては、国内学会で2件の発表およびCVPR2014での口頭発表、ICIP2014でのポスター発表等を行った。アフィン不変なキーポイント検出手法を検討・開発した。Scale Normalized LoGの場合のように,1パラメータではなく複数のスケールパラメータを含むため,単純な多項式での展開は困難であった。そこで,三角関数や多項式を組み合わせた固有フィルタの分解を行った。具体的にはSVDで様々な形状のフィルタを分解した後に,フィッティングを行った。これにより,4913個のフィルタが高々14個程度で良好に近似できることを確認した。また,キーポイント検出における局値探索において,パラメータの対称性を利用した効率的な探索方式を考案した。これは従来のSIFTでのオリエンテーション探索の一般化に相当する。OxFordデータセットおよびSpectrum magazineデータセットで検出性能実験を行い,従来手法よりも良好な検出性能を得た。本成果はコンピュータビジョン分野で有名な会議であるICCV2016に採択された。アフィン・スケールスペース解析に関して、共同研究者の参加によって、大きく進展した。画像処理開発したSIFTがSURFよりも高速かつ高精度であることを確認している。この応用例を検討する。理論解析および応用事例による検証も順調に進んでいる。応用事例の幅が広いため(たとえば,画像検索,マシンビジョン等),様々な評価実験を試行することで,有用性を検証していく。申請者が他の研究費採択(JSTテニュアトラック事業)により,人件費および旅費の支出が軽減されたため。実験装置(プロジェクタ,フレーム)および備品(工作機等)を拡充する。
ディーゼルエンジンの燃料噴射ノズル内キャビテーション現象に関する研究

ディーゼルエンジンの燃料噴射ノズル内の燃料挙動を中性子ラジオグラフィによって可視化する装置を試作し、韓国原子力研究所の研究炉HANAROのIRポートで実験を行った。ノズル及び燃料噴射ポンプは実機の部品を軽油は市販されているものを用い、実機と同程度の200MPaの圧力で噴霧し可視化を行った。モーターで燃料ポンプのカムとチョッパーを同軸で回転させ、チョッパーで可視化したいカム角の時間だけノズルに中性子を照射し、透過した中性子はコンバータで可視光に変換され、鏡を介して冷却型CCDカメラで多重露光して積分画像が得られる。撮像時刻はカムとチョッパーのスリットの角度で設定でき、カム角を少しずつ変えることによって噴射中の時系列の画像を得た。スリット角を3.6度とし、1.67msから1msのシャッタースピードで露光でした。画像のノイズを低減するため、同一条件で20秒の画像を7枚取り、非線形フィルター処理を行ってから積分し、合計140秒の撮像によって良好な画像を得た。ポンプの回転数を360rpmから600rpmまで変化させ、また燃料噴射量は最大と最小について実験を行った。ノズルホールでは、いずれの条件でもキャビテーションが生じていると思われる画像が得られた。また燃料噴射量が最大の条件では燃料噴射に遅れが生じ、その条件における時系列画像を撮影した。この遅れはノズルのシート部におけるキャビテーションが原因と推定され、アーベル変換を行うことによりシート部の燃料挙動を可視化した。遅れてカムが上昇しているにもかかわらず燃料噴射が遅れ、噴射しない状態ではシート部には燃料は観察されず、キャビテーションが生じていることが推定された。以上により、従来から推定の域を出なかった燃料噴射ノズル内のキャビテーション現象に対して、ノズルホールでキャビテーションが生じていること、シート部でキャビテーションが生じると燃料噴射に遅れが生じることを、実機を用いて実証した。燃料噴射時のノズル内燃科挙動を多重露光により撮像できる装置の試作を行った。ノズル及び燃料噴射ポンプは実機の部品を軽油は市販されているものを用い、実機と同程度の200MPから300MPaの圧力で噴霧した。撮像時刻はカムとチョッパーのスリットの角度で設定でき、カム角を少しずつ変えることによって噴射中の時系列の画像を得ることができるように設計されている。燃料の噴射やキャビテーションの状態はカオス的であり、毎回若干異なることが予想されるので、多重露光によりノズル内の燃料画像のアンサンブル平均が得られることになる。実験は韓国原子力研究所のHANAROの7Rポートで行ったが、実験時間の制約のため時系列画像までは得られず、ノズルが最も開かれている状態でのみ可視化を行った。ポンプの回転数を360rpmから600rpmまで変化させ、スリット角を3.6度とし、1.67msから1msのシャッタースピードで露光でした。画像の積分枚数は、840枚から1400枚に相当する。ノズルホールでは、いずれの回転数でもキャビテーションが生じていると思われる画像が得られ、来年度以降、時系列画像を撮像し、ホール径の異なった実験も行っていく予定である。この遅れはノズルのシート部におけるキャビテーションが原因と推定され、現在得られた画像の解析を行い検討している。

モーターで燃料ポンプのカムとチョッパーを同軸で回転させ、チョッパーで可視化したいカム角の時間だけノズルに中性子を照射し、透過した中性子はコンバータで可視光に変換され、鏡を介して冷却型CCDカメラで多重露光して積分画像が得られる。撮像時刻はカムとチョッパーのスリットの角度で設定でき、カム角を少しずつ変えることによって噴射中の時系列の画像を得た。スリット角を3.6度とし、1.67msから1msのシャッタースピードで露光でした。画像のノイズを低減するため、同一条件で20秒の画像を7枚取り、非線形フィルター処理を行ってから積分し、合計140秒の撮像によって良好な画像を得た。ポンプの回転数を360rpmから600rpmまで変化させ、また燃料噴射量は最大と最小について実験を行った。ノズルホールでは、いずれの条件でもキャビテーションが生じていると思われる画像が得られた。また燃料噴射量が最大の条件では燃料噴射に遅れが生じ、その条件における時系列画像を撮影した。この遅れはノズルのシート部におけるキャビテーションが原因と推定され、アーベル変換を行うことによりシート部の燃料挙動を可視化した。遅れてカムが上昇しているにもかかわらず燃料噴射が遅れ、噴射しない状態ではシート部には燃料は観察されず、キャビテーションが生じていることが推定された。以上により、従来から推定の域を出なかった燃料噴射ノズル内のキャビテーション現象に対して、ノズルホールでキャビテーションが生じていること、シート部でキャビテーションが生じると燃料噴射に遅れが生じることを、実機を用いて実証した。
転写因子AP－1と細胞表面受容体Ephによる骨形成制御機構の解析

本研究課題では受容体型チロシンキナーゼEphA2による骨石灰化制御機構解明を目指し、EphA2欠損マウスやEphA2阻害剤、compound1(com1)と2(com2)を用いた。EphA2欠損マウスは対照群に比べ骨量が増加しており、未石灰化骨である類骨量が有意に減少していることから、EphA2欠損による骨石灰化亢進が考えられた。そこで成体長管骨培養系を樹立し、EphA2阻害剤を加えたところわずか24時間以内にcom2存在下において、72時間後にはcom1とcom2の両者において、2次海綿骨密度が増加した。骨密度増加にともない培養液中のCa濃度が減少した。またCa指示薬カルセインの骨基質への取り込みが対照群に比べ増加した。カルセインラベル表面には活性型骨芽細胞が観察された。以上より、EphA2シグナル抑制により急速な骨石灰化が起こると考えられた。そこで、in vitroで分化誘導したマウス頭蓋骨由来成熟骨芽細胞に3日間EphA2/4阻害剤を加えたところ、濃度依存的にカルシウム沈着の亢進が認められた。EphA2欠損またはEphA2阻害剤添加後の骨芽細胞では、Caやリンを取り込み、ハイドロキシアパタイト結晶生成の場である基質小胞が対照群より大きい事を電子顕微鏡により観察した。また、flow cytometryにより大きな基質小胞ではALPの活性が増加した。現在、これらの研究成果をまとめた論文を国際科学雑誌に投稿している。また、平成23年度より、イギリス、ケンブリッジ大学Gurdon研究所のAzim Surani博士の研究室に訪問し、細胞の分化と転写制御をこれまでとは別の視点から据えるべく、生殖細胞の発生・分化に着目し研究を行っている。受容体型チロシンキナーゼEphA2による骨石灰化制御機構解明を目指した。実験系にはEphA2欠損マウスやEphA2阻害剤、compound1(com1)と2(com2)を用いた。EphA2欠損マウスは対照群に比べ骨量が増加していた。また、未石灰化骨である類骨量が有意に減少し、EphA2欠損による骨石灰化亢進が考えられた。そこで成体長管骨培養系を樹立し、EphA2阻害剤を加えたところわずか24時間後にcom2存在下において、72時間後にはcom1とcom2の両者において、2次海綿骨密度が増加した。そこで、マウス頭蓋骨由来骨芽細胞をin vitroで分化誘導した成熟骨芽細胞に3日間EphA2/4阻害剤を加えたところ、濃度依存的にカルシウム沈着の亢進が認められた。大きな基質小胞ではALPの活性が増加した。膜タンパクcaveolin-1は、骨芽細胞にてEphA2/4阻害剤存在下でEphA2と相互作用し、基質小胞上に発現していた。さらに、caveolin-1の過剰発現により、基質小胞の巨大化と石灰化の亢進、EphA2阻害剤との付加的石灰化亢進を認めた。以上より、EphA2はcaveolin-1と相互作用し骨芽細胞の基質小胞の大きさを制御して骨石灰化を調節し、骨やミネラルの代謝を制御すると考えられた。

また、平成23年度より、イギリス、ケンブリッジ大学Gurdon研究所のAzim Surani博士の研究室に訪問し、細胞の分化と転写制御をこれまでとは別の視点から据えるべく、生殖細胞の発生・分化に着目し研究を行っている。EphA2の石灰化制御を解析する当初の期待より、明らかな急速な石灰化を認めたこと。また、急速石灰化の機構の一つとして基質小胞の大きさが大きくなっている事を見出した。さらには、分子メカニズムとして、EphA2がcaveolin-1と相互作用する事、さらにcaveolin-1も基質小胞の巨大化に寄与しEphA2欠損と付加的に骨石灰化を亢進することを見出した事は計画以上の進展であり、現在論文をまとめ掲載を目指している。今後は、現在得られている結果を補強するデータの蓄積に重点を置く。マウスin vivo骨解析でのマウスの数を増やし、骨量増加と類骨現象の表現系を確実にする。また、骨器官培養は、我々がはじめて行った実験であり、培養後の細胞のviabilityなどを確認する必要がある。これまで、主にEphA2欠損マウス、EphA2阻害剤を用いて実験を行ってきたが、その他のEphA2阻害ペプチドなどを用いて同様の効果が認められるかを検討する必要がある。既存の骨石灰化関連遺伝子のEphA2による制御の可能性を検討する。さらに、in vitroで認められたEphA2欠損骨芽細胞による基質小胞の巨大化がin vivoでも認められるか、北海道大学網塚教授の研究グループのご協力のもと電子顕微鏡を駆使し観察する予定である。
ゲノムワイドな新規マラリアワクチン抗原探索ストラテジー

熱帯熱マラリアゲノム情報が明らかとなった今、マラリア流行地の成人に防御抗体を誘導する原虫抗原を網羅的に同定することができれば、新規マラリアワクチン開発の突破口となると考えられている。しかし、大腸菌等既存の方法では熱帯熱マラリア原虫組換えタンパク質の網羅的な合成は非常に困難であったため、そのような試みはこれまで全く実施されてこなかった。そこで申請者らは、これまでの研究で原虫の組換えタンパク質合成への有用性が確認されていたコムギ胚芽無細胞タンパク質合成法を用いて、メロゾイト期の完全長cDNAライブラリーからプロテインアレイを作製し、少量のマラリア流行地住民血清で実施可能なハイスループットなワクチン候補抗原スクリーニング手法を開発することを目的に本研究を実施した。1.コムギ胚芽無細胞系を用いたハイスループットなビオチン化プロテインアレイの作製メロゾイト期原虫のプロテインアレイを作製するため、前年度に作製したcDNAクローンから、コムギ無細胞タンパク質合成法を改変してビオチン化組換えタンパク質をハイスループットに合成出来る系を用いて、ビオチン化組換えタンパク質の合成を行い、熱帯熱マラリア原虫メロゾイト期のタンパク質約100種類以上小スケールで合成した。2.アルファ・スクリーン法を用いた新規メロゾイト抗原のスクリーニング昨年度に確立した高感度、小スケール、ハイスループットな抗原抗体反応測定系を用いて、上記メロゾイト期タンパク質100種類以上と、マラリア免疫血清約20人分を用いて、新規抗原のスクリーニングを行った。その結果、多くのマラリア免疫血清と反応する抗原タンパク質を同定することに成功した。熱帯熱マラリアゲノム情報が明らかとなった今、マラリア感染者に防御抗体を誘導する原虫抗原タンパク質を同定することができれば、新規マラリアワクチン開発の突破口となると考えられる。そこで申請者らは、コムギ胚芽無細胞タンパク質合成法を用いて、マラリア原虫cDNAライブラリーからプロテインアレイを作製し、少量のマラリア流行地住民血清で実施可能なハイスループットなワクチン候補抗原スクリーニング手法を開発することを目的に本研究を実施した。1.熱帯熱マラリア原虫の完全長cDNAライブラリーの作製熱帯熱マラリア原虫培養株から完全長cDNAライブラリーを作製した。得られたライブラリーからランダムに1万クローンを選抜し、マラリアゲノムデータベースを参考に、各クローンに含まれている遺伝子を同定しデータベース化した。その結果、現在までに約1,200個の独立した原虫cDNAが確認された。2.コムギ胚芽無細胞系を用いたハイスループットなビオチン化プロテインアレイの作製メロゾイト期原虫のプロテインアレイを作製するため、上記cDNAクローンから、コムギ無細胞タンパク質合成法を改変してビオチン化組換えタンパク質をハイスループットに合成出来る系を確立した。3.アルファ・スクリーン法を用いたマラリアワクチン候補抗原のスクリーニング系の確立高感度、小スケール、ハイスループットな抗原抗体反応測定系を作成するため、アルファ・スクリーン法と上記無細胞ビオチン化組換えタンパク質合成法を組み合わせて、スクリーニング系を作成した。少数の既知抗原をモデルとして、この系の有用性を検討し、測定系としての至適化が完了した。
覚醒ネコの水平性および垂直性視運動性眼振の定量的解析

視覚機能を安定化するのに重要な視運動性眼振(OKN)および後眼振(OKAN)の性質を覚醒ネコを用いて解析した。眼球位置・速度信号および視覚刺激信号を、実験時コンピューター(Apple,Power Macintosh)にデータ記録解析用ソフトを用いて記録・解析した。また解析結果をレーザープリンター(EPSON,LP-9100PS2)を用いて出力した。視運動刺激の開始直後、OKNの緩徐相速度(SPV)は急速に増加し、その後水平刺激ではSPVは徐々に増加し定常状態に達した。上方刺激ではSPVの緩徐増加は水平刺激のそれより小さいが認められ、下方刺激ではほとんどみられなかった。40°/sまでの水平刺激に対し、定常状態のSPVは刺激速度の増加に伴い直線的に増加したが、それ以上では減少した。上方刺激では20°/sまでの刺激に対してSPVは増加したが、水平よりも小さかった。一方、下方刺激では刺激速度を上げても数°/sまでしか誘発されなかった。OKANは水平刺激の場合の方が、垂直刺激よりも強く誘発された。また下方刺激よりも上方刺激で強く誘発された。次に、側臥位のネコに左右方向および上下方向のOKNを誘発して正常頭位と比較した。垂直性OKN、OKANのSPVは側臥位で正常頭位より増大した。水平性OKN、OKANは側臥位で減少した。上下方向を比べると、側臥位では上向き刺激によるOKNは下向きの場合より大きく、正常頭位と同様に上方向の優位性が認められた。水平性OKNでは側臥位の場合、重力方向に向かう刺激で誘発されるSPVは低値を示し、重力方向と反対向きでのSPVは高値を示した。頭部傾斜により、OKNとOKANのSPVが修飾を受け、重力方向における反応が減少することが示唆された。
Comprehensive Omics analysis and functional characterization of the role of nervous system in the larval settlement of barnacle cyprids

アカフジツボは発電所や船底に付着し大きな被害をもたらす海産無脊椎動物です。プランクトン幼生期と付着生活を送る成体期を持ち、プランクトン幼生期の最後はキプリス幼生と呼ばれ、付着に特化し、付着防除研究にとって最も重要な時期です。本研究では、キプリス幼生の行動や付着の制御機構を明らかにする目的で、キプリス幼生に発現する神経ペプチドを網羅的に調べました。その結果、キプリス幼生では、神経ペプチド前駆体をコードする11種の遺伝子の発現が明らかになりました。特にC末端にSIFamideを持つ神経ペプチドは発現量が高く分布が特徴的なことから、今後付着行動との関連を詳しく調べる必要があることが判明しました。海洋分子細胞生物学