hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
酸化ストレスセンサーによるＭＡＰＫカスケード活性化機構の解明

本年度は、銅による活性酸素ストレス応答を制御するKGB-1MAPキナーゼカスケードの上流を探索することにより、活性酸素を感知するセンサーおよびそれに至るまでの経路の同定を試みた。その結果、三量体Gタンパク質であるEGL-30およびホスホリパーゼCホモログであるEGL-8が線虫のプロテインキナーゼCホモログであるTPA-1を活性化し、それがMLK-1をリン酸化することによりこれを活性化することを見出した。また、別の三量体Gタンパク質であるGOA-1がEGL-30を負に制御することで、重金属耐性シグナルを負に制御することも見出した。さらにその上流で機能する因子についても遺伝学的に同定したが、この因子はin vitroで銅によって直接酸化修飾を受けることが既に報告されている因子であった。このことから、この因子こそが本研究において探し求めていた、MAPキナーゼカスケード上流の活性酸素のセンサーではないかと考えられる。一方、KGB-1 MAPキナーゼカスケードの下流については、KGB-1の下流で転写因子FOS-1がHis-richなタンパク質KREG-1などの転写制御を介して重金属耐性を制御することを発見した。さらにFOS-1がヒストンデアセチラーゼホモログであるHDA-1と複合体を形成して機能することも明らかにして、最終的に論文として発表した(業績参照)。一方、p38 MAPキナーゼカスケードについては、MAPKKKであるKIN-18とその結合因子であるCys-rich因子のASSM-1が、共に酸化ストレス応答に関与することを見出していたが、この2つの因子の結合が酸化ストレス処理により強まること、さらにその増強に他の線虫の因子は不必要であることを見出した。このことからASSM-1が酸化ストレスセンサーそのものである可能性がより強まった。24年度が最終年度であるため、記入しない。線虫C.elegansをモデルとしてJNKおよびp38型MAPキナーゼカスケードを活性化する上流因子、特に酸化ストレスセンサーを明らかにする研究を行っている。今年度は、線虫のp38型MAPキナーゼであるPMK-1 MAPキナーゼの上流因子を探索した。我々は以前、p38型のPMK-1MAPキナーゼカスケードの上流でSEK-1MAPKKが機能すること、さらにその上流ではMAPKKKのひとつであるKIN-18と、もうひとつのMAPKKKであるNSY-1と重複して機能することを見いだしていた。今回、遺伝学を用いたRNAiスクリーニングにより、KIN-18の上流で機能するセンサーの候補として新規因子ASSM-1を同定した。遺伝学的な解析から、ASSM-1はKIN-18と同一経路で機能することが示唆された。さらに、酵母ツーハイブリッド法による解析から、ASSM-1はKIN-18に結合することも見いだした。一方、JNK型のKGB-1MAPキナーゼカスケードについては、RNAiによる網羅的なスクリーニングにより、HGF様の新規増殖因子SVH-1とその受容体SVH-2がその上流で機能することを見いだした。更に、KGB-1MAPキナーゼカスケードが重金属ストレスだけでなく切断を受けた神経軸索の再生も制御していること、またSVI1-1とSVH-2がその上流で特異的に機能することも見出した。SVH-1は頭部感覚神経のひとつであるADLで特異的に発現しているのに対し、SVH-2は通常は神経での発現は見られないが、神経軸索の切断によりそれが誘導された。しかし、SVH-1およびSVH-2は重金属耐性には関与しなかった。以上の結果から、ストレス応答型MAPK経路は上流で複数のシグナルに分かれており、それにより機能を使い分けていると推測される。

このことからASSM-1が酸化ストレスセンサーそのものである可能性がより強まった。24年度が最終年度であるため、記入しない。上流の解析は順調に進んでおり、同定された新規因子の解析も進んでいる。同定したもののうち、SVH-1およびSVH-2については酸化ストレスセンサーではなかったが、神経軸索再生という新たな機能の発見につなげることができた。p38型MAPKカスケードについては、ASSM・1についてさらに解析を行う。JNK型MAPKカスケードについては、酸化ストレスセンサーの候補を引き続き探索・同定する。
日本における医療サービスと薬の消費、及び薬事法に関する社会経済的研究

本研究の目的は、日本における医療サービスと薬の消費の関係について、医療保険制度、薬事法制や医事法制の変遷のなかで、どのような変化をたどってきたのか、そしてその要因は何であったのかについて、社会経済的に明らかにすることである。本研究では、課題を「医療サービスと健康保険制度」、「一般用医薬品と薬事法制」、「医療供給」、「地域連携と住民満足度」の4テーマに分割して、その分析を行ったので、以下その成果を報告する。本研究の目的は、日本における医療サービスと薬の消費の関係について、医療保険制度、薬事法制や医事法制め変遷のなかで、どのような変化をたどってきたのか、そしてその要因は何であったのかについて、社会経済的に明らかにすることである。研究は3ヵ年において実施される予定であり、本年度は第1年度である。本年度の活動は、大きくわけて、次の3つから構成される。第1は、医療サービスの需要構造について、その現状をまとめ、評価を行うことである。本年度は特に、労働者本人と家族に注目して、愛知県内の家族を事例として、医療保険制度のなかの医療サービス需要の分析を行った。本研究の一部はすでに論文「愛知県における労働者と健康保険制度」として公表済みであり、引き続く分析と論文作成を行っている。第2は、医療サービスと薬の消費を背後で規定する、人々の健康に関する研究と活動に関するサーベイ調査である。本年度は特に沖縄県内の高齢者に関する健康・長寿に注目して、その政策展開(医療・観光連携)と合わせて、現状の取りまとめを行った。本研究の一部は近日中に公表される予定である。第3は、薬業に歴史を持つ地域の現地調査の実施である。本年度に現地調査を実施した都道府県は、北から順に北海道・富山・滋賀・奈良・佐賀・長崎・沖縄である。現在、収集した資料の整理、および追加的な論文資料の収集を行い、取りまとめを行っている最中である。最後に、来年度以降に予定されている活動計画は、次のとおりである。医療サービスに関しては、労働者本人の医療サービス需要に関する経済学的評価を行うことである。特に外来医療サービスに注目して、その価格弾力性を測定し、薬の消費構造と大きく関係を持つ代替性の特徴について明らかにしてゆく予定である。薬事に関しては、本年度に実施した現地調査のレポートを作成し、調査から明らかとなった薬事法制の特徴と、その問題点の分析を行ってゆくこととする。本研究の目的は,日本における医療サービスと薬の消費の関係について,医療保険制度,薬事法制や医事法制の変遷のなかで,どのような変化をたどってきたのか,そしてその要因は何であったのかについて,社会経済的に明らかにすることである.研究は3ヵ年において実施される予定であり,本年度は第2年度である。本年度の活動は,大きくわけて,次の3つから構成される.第1は,昨年度に実施した医療サービス需要の観察に基づき,実証的な分析とその評価を行った。本研究の一部は,「組合健保と医療保険制度改革-トヨタ自動車グループを事例として-」として学会報告を行い,論文に取りまとめ,査読つき難誌に投稿した.現段階では,審査によって求められた論文の改訂作業を行っている最中である。第2は,医療サービスと薬の消費を背後で規定する,人々の健康に関する研究と活動に関するサーベイ調査であり,その一部は論文「沖縄県における健康・長寿の現状と医療・観光連携-高齢者保養・スポーツ・海洋自然-」として公表した。第3は,薬業に歴史を持つ地域の現地調査の実施であり,その調査報告を論文「日本の薬事法制と医薬品の販売規制-薬局・薬剤師・商業組合および規制緩和-」として公表した。来年度は,改訂要求されている論文の公刊に努力し,実証的な薬事法制に関する社会経済的評価を行うこととする。本研究の目的は、日本における医療サービスと楽の消費の関系について、医療保険制度、薬事法制や医事法制の変遷のなかで、どのような変化をたどってきたのか、そしてその要因は何であったのかについて、社会経済的に明らかにすることである。最終研究年度であった本年度は、3ヵ年間の研究の総括と公表作業を中心に行った。また以下なる構成の研究報告書を作成した1.医療サービスと健康保険制度第1章愛知県における労働者と健康保険制度第2章組合健保と医療保険制度改革2.一般医薬品と事法制第3章日本の薬事法制と医薬品の販売規制第4章一般用医薬品の価格と再販制度について3.医療供給-公立病院問題を中心に-第5章公立病院の役割とエージェンシー化について第6章名古屋市における公立病院の現状と改革、その割について4.地域連携と住民満足-沖縄県と名古屋市を事例として-第7章沖縄県における健康・長寿の現状と医療・観光連携第8章名古屋市における「高齢者福祉」と「健康・医療」本研究の推進中、以上の各テーマにつき、大きな制度改革等が行われることとなり、政策的重要性が高いテーマとなった。今後、引き続き公表作業を行ってゆく考えである。
ストレス性自律生理反応を担う中枢神経伝達

体温、血圧、脈拍などが上昇する心理ストレス反応は視床下部背内側部から延髄へ至る神経路によって駆動されるが、本研究ではストレス信号を視床下部背内側部へ入力する上位の前脳領域を探索し、その情報伝達機構の解析を行った。ラットを用いて、神経解剖学、in vivo生理学、光遺伝学などの技術を駆使した実験を行った結果、ストレス信号は前頭前野から視床下部背内側部への直接の神経投射を介して伝達され、ストレス性交感神経生理反応を駆動することが示唆された。本研究は、心理ストレスが自律神経系などの生体恒常性維持システムに作用する脳内メカニズムを個体レベルで解明することを目的とする。研究代表者はこれまでに、ストレス性自律生理反応の惹起を担う、視床下部背内側部から交感神経系への神経伝達路を解明した。そこで今年度は、これまでに新規に確立した、特定の脳領域間を連絡する投射ニューロンを特異的にin vivoで光操作する技術などを駆使し、大脳辺縁系などの高次脳領域から視床下部背内側部へストレス信号を伝達する神経経路とその伝達機構を解明すべく実験を行った。その結果、大脳皮質系の一部と大脳辺縁系の一部において、局所刺激によって褐色脂肪熱産生が惹起される脳部位を発見した。この部位から視床下部背内側部への神経投射を特異的に光刺激すると熱産生反応が惹起された。また、この部位に薬物注入を行うことで神経活動を抑制すると心理ストレスによる熱産生反応と体温上昇が抑制された。これらの実験結果は、心理ストレス性自律生理反応の惹起において視床下部背内側部へストレス信号を入力する上位の脳領域を直接機能的に同定することに初めて成功したものである。本研究の成果は、高次精神機能が恒常性維持機構に影響を及ぼすメカニズムの核心部についての知見を与えるだけでなく、様々なストレス疾患の病態解明にも貢献しうるものである。本研究の目的は、心理ストレスが自律神経系などの生体恒常性維持システムに作用する脳内神経回路を個体レベルの実験系を通じて解析し、解明することである。研究代表者は以前に、ストレス性自律生理反応の惹起を担う、視床下部背内側部から交感神経系への神経伝達路を解明した。昨年度は、研究代表者らが新規に確立した、特定の脳領域間を連絡する投射ニューロンを特異的にin vivoで光操作する技術などを駆使し、視床下部背内側部へストレス信号を入力する脳領域として、大脳皮質系の一部と大脳辺縁系の一部を特定した。これらの上位の脳領域から視床下部背内側部への神経投射を特異的に光刺激すると熱産生反応が惹起された。また、この上位の脳領域に薬物注入を行うことで神経活動を抑制すると心理ストレスによる熱産生反応と体温上昇が抑制された。今年度は、これらの上位脳領域から視床下部背内側部への神経伝達が心理ストレスを受けたときにどのように活動するかを、組織化学的な手法を用いて解析した。その結果、ラットに社会的敗北ストレスを与えると、これらの上位脳領域から視床下部背内側部への神経伝達が活性化されることがわかった。本研究の主目的は、高次脳領域から恒常性維持に関わる視床下部領域へのストレス神経伝達メカニズムを解明することであるが、光遺伝学などの最新技術を駆使することで、新規の神経伝達路を明らかにすることができた。今年度も、この発見した新規神経伝達路がストレスによって活性化されることを見出し、この神経伝達路が心理ストレス性自律生理反応の発現に機能することが強く証明されつつある。一方、光遺伝学を利用した神経活動の光操作実験の一部で対象とする神経細胞が予想外に特殊な性質を有することが分かったため、実験例数を増やすのに時間がかかっており、本研究の実施を1年延長する必要が生じた。以上の状況に鑑み、本研究はおおむね順調に進展していると判断する。本研究の主目的は、心理ストレスが自律神経系などの生体恒常性維持システムに作用する脳内神経回路を個体レベルの実験系を通じて解析し、解明することである。研究代表者らが新規に確立した、特定の脳領域間を連絡する投射ニューロンを特異的にin vivoで光操作する技術などを駆使し、昨年度までに、視床下部背内側部へストレス信号を入力する脳領域として、大脳皮質系の一部と大脳辺縁系の一部を特定した。さらに、ラットに社会的敗北ストレスを与えると、これらの上位脳領域から視床下部背内側部への神経伝達が活性化されることがわかった。今年度は、予想外に特殊な性質を有することが判明した神経細胞の活動を光操作する実験の実験例数を増やすことに成功した。

また、その結果、上位の脳領域から視床下部背内側部への神経伝達に使用される神経伝達物質がグルタミン酸であることをin vivoの光操作実験と組織化学実験を組み合わせて多面的に明らかにすることができた。現在、この研究成果をとりまとめているところである。これらの実験結果は、心理ストレス性自律生理反応の惹起において高次脳領域から視床下部背内側部へストレス信号を入力する神経伝達経路を同定することに初めて成功したものである。本研究の成果は、高次精神機能が恒常性維持機構に影響を及ぼすメカニズムの核心部についての知見を与えるだけでなく、様々なストレス疾患の病態解明にも貢献しうるものである。体温、血圧、脈拍などが上昇する心理ストレス反応は視床下部背内側部から延髄へ至る神経路によって駆動されるが、本研究ではストレス信号を視床下部背内側部へ入力する上位の前脳領域を探索し、その情報伝達機構の解析を行った。ラットを用いて、神経解剖学、in vivo生理学、光遺伝学などの技術を駆使した実験を行った結果、ストレス信号は前頭前野から視床下部背内側部への直接の神経投射を介して伝達され、ストレス性交感神経生理反応を駆動することが示唆された。初年度となる今年度のうちに、視床下部へストレス信号を入力し、ストレス性の交感神経反応を駆動する上位の脳領域候補の同定に成功し、次年度に実施予定であった、in vivo光刺激実験を前倒しで実施することによって、この上位の脳領域から視床下部背内側部への直接の神経連絡が自律生理反応を駆動することを直接的に証明することに成功した。こうしたことから、本研究は当初の計画以上に進展していると判断する。視床下部背内側部へストレス信号を入力する上位の脳領域とその神経連絡についての枠組みを明らかにすることができたので、今後は、その神経伝達に関わる神経伝達物質やニューロン群の組織化学的特徴などの詳細な解析を行うとともに、論文発表に向けて実験例数を増やすなどしてデータをまとめていきたい。28年度が最終年度であるため、記入しない。環境生理学視床下部背内側部へストレス信号を入力する上位の脳領域とその神経連絡についての枠組みを明らかにすることができたので、今後は、その神経連絡に関わる神経伝達物質やニューロン群の組織化学的特徴などの詳細な解析を行い、データをまとめていくことで、早急な論文発表にこぎつけたい。神経細胞の光操作実験に必要な光照射実験の検討実験において、対象とする脳領域の神経細胞が特殊な性質を有することが分かり、検討実験に予想以上の時間がかかってしまった。そのため、光操作の本実験の開始が当初の予定よりも遅れてしまったため。所属研究機関を平成27年4月1日付で京都大学から名古屋大学へ異動することとなり、動物の飼育数を平成26年度末に大きく減少させたために、その飼育コストが計画よりも少なくすんだためである。光操作実験に必要な消耗品・試薬・実験動物の購入費用、成果発表のための旅費、論文投稿料に使用する予定である。名古屋大学へ異動後、研究室のセットアップに資金が必要となるため、この余剰額はそのセットアップにおいて必要となる消耗品類の購入に使用する。
早産児の後遺症発症の減少を目指して～分子状水素を用いた新規治療法の開発～

子宮内炎症による胎仔の神経障害発症の動物モデルを形成し、このモデルの母獣に新規抗酸化剤である分子状水素を投与しその効果を検討してきた。母体炎症が、胎児の脳組織における前炎症性サイトカインの産生亢進や酸化ストレス亢進による細胞死を誘導し、神経障害発症に関与していること、またその傷害の中心に脳内の免疫応答細胞ミクログリアの過剰な活性化が関与している可能性が明らかとなった。さらに分子状水素の母体投与は、ミクログリアの過剰な活性化を抑制することにより、炎症、酸化ストレスによる神経障害を軽減する可能性が示唆された。またその効果の一部には母体胎児境界面における炎症を抑制する経路も存在することが示された。早産児の後遺障害と相関することが知られている絨毛膜羊膜炎症例と妊娠週数を一致させた産科合併症のない対照症例において、羊膜、絨毛膜、脱落膜におけるエンドセリン(子宮収縮作用あり)および関連蛋白の発現を免疫組織染色法で比較検討したところ、前者で有意な増加を認めた。またヒト羊膜を用いた実験では、これらの蛋白が大腸菌由来のリポ多糖の刺激によりToll-like receptor-4を介して、発現増加することが観察された。これらの結果から、感染による早産での病態にエンドセリンの増加が関与していることが明らかとなった。また、こうした炎症を抑える新規の治療法として、分子状水素に着目しているが、ラット動物モデルにおいて大腸菌由来のリポ多糖の投与により生じる胎仔の肺障害を母獣に分子状水素を飽和させた水素水を投与することによって軽減することが明らかとなった。こうした障害では炎症性サイトカインの上昇や酸化ストレス障害が関与していることまたこれらを抑制することにより、肺障害が軽減していることが明らかとなった。さらに早産児の後遺障害として脳障害に並んで重篤な気管支肺異形成症の病態に関係すると報告されている血管増生因子や基質分解酵素などが水素水投与によって発現変化することも明らかとなり、水素水により肺障害が改善するメカニズムが明らかとなった。また、同様のモデルをマウスで作成し、母獣に水素水を投与することによって、胎仔脳切片におけるニューロンの細胞死の減少、DNAや脂質への酸化障害の抑制が観察された。また活性型ミクログリアの増加を抑制する効果も認められた。こうした障害の減少に加え、胎仔の死亡率も軽減した。これらから、分子状水素が早産児の後遺障害の減少させる効果を有する可能性が示唆された。妊娠ラットに大腸菌由来リポ多糖を腹腔内投与した炎症モデルにおいて、構造的にも機能的にも胎仔肺障害を確認した。母獣への水素投与により酸化ストレス障害および炎症性障害が改善することが確認され、成果を論文報告した。同様に妊娠マウスを用いた炎症モデルにおいて、胎仔脳障害を免疫組織学的に証明した。またこの障害には、胎仔ミクログリア活性化が関与していることが示唆される結果を得た。母獣への水素投与により、胎仔のニューロンのアポトーシスが軽減することおよび炎症性サイトカインIL-6の亢進が抑制されることが明らかとなった。また、in vitro実験において、ミクログリアの活性化が水素添加により抑制されること、ミクログリアのニューロン攻撃作用が抑制されることが明らかとなった。胎仔脳障害に関して、妊娠中期に発症させた場合と妊娠後期に発症させた場合、いずれにおいても水素による抗炎症効果、抗酸化効果が観察され、胎仔の脳障害の軽減が観察された。また、水素による活性化ミクログリアへの抑制効果に関して、網羅的な遺伝子発現の変化を検討した結果、calciumchannel,voltage-dependen, L-type, alpha1C subunit(Cacna1c), gap junction protein,alpha5(Gja5), gap junction protein, alpha 8 (Gja8), fibroblast growth factor1(Fgf1), fibroblast growth factor receptor2(Fgfr2), leptin receptor(Lepr)の発現が有意に抑制されることが明らかとなった。これらを論文報告した。動物モデルにおいて母体炎症による胎児への障害が母体への水素投与により軽減することを証明できた。前年度に引き続き、妊娠マウスの炎症モデルにおいて、母獣に分子状水素を投与することで、仔への傷害が改善するメカニズムの解明をおこなった。炎症により、血液中に増加するET-1(エンドセリン)およびその合成に関与するECE-1(エンドセリン変換酵素)に着目した。子宮筋および卵膜、胎盤において、炎症モデルでは発現が亢進しており、水素投与群ではこれらの発現の抑制が認められた。この結果は、これまでの臨床検体を用いた検討をほぼ裏付ける結果と考えられた。したがって、仔に直接移行して効果を示すだけでなく、母体胎児境界面における炎症にも水素が抗炎症として作用し、仔への効果を示している可能性が示唆された。また、仔の機能的予後として、行動実験モデルを用いて、生後3-4週令において、自閉症スペクトラム様所見について検討したところ、炎症モデルの仔については自閉症スペクトラム様所見が認められたが、水素投与群では、改善が認められた。現在引き続き、検討中である。その他、臨床検体で、絨毛膜羊膜炎の合併がある早産胎盤と合併のない早産胎盤において、TLR5の発現が変化することが明らかとなった。これは、これまで解析してきたTLR4以外にもあらたな系が炎症モデルにおける病態に関与している可能性を示唆する結果であった。

また、子宮動脈減少させることによる酸化ストレスで妊娠高血圧腎症様の所見を呈するラットのモデルを用いて、母獣への分子状水素を投与することで、血圧上昇、血管内皮障害のsflt-1の減少などが認められ、妊娠高血圧腎症の胎盤絨毛を組織培養も行い、正常妊婦の胎盤絨毛よりも、産生亢進を認めたsflt-1が、組織培養中に水素添加することで産生が減少することを示した。子宮内炎症による胎仔の神経障害発症の動物モデルを形成し、このモデルの母獣に新規抗酸化剤である分子状水素を投与しその効果を検討してきた。母体炎症が、胎児の脳組織における前炎症性サイトカインの産生亢進や酸化ストレス亢進による細胞死を誘導し、神経障害発症に関与していること、またその傷害の中心に脳内の免疫応答細胞ミクログリアの過剰な活性化が関与している可能性が明らかとなった。さらに分子状水素の母体投与は、ミクログリアの過剰な活性化を抑制することにより、炎症、酸化ストレスによる神経障害を軽減する可能性が示唆された。またその効果の一部には母体胎児境界面における炎症を抑制する経路も存在することが示された。大腸菌由来のリポ多糖投与による胎仔の障害モデルを確立し、新規治療法として着目した分子状水素で効果を確認することができた。また、肺障害に関しては、細胞実験も行い、水素の作用機序の一部を明らかにすることができた。脳障害に関しては、今後ミクログリアに着目し、その分子メカニズムを解明していく手がかりを得た。ヒトにおいては羊膜実験にて水素を投与し変化を確認する前段階として、今年度は絨毛膜羊膜炎でのエンドセリンの増加および羊膜実験でのエンドセリンの増加を確認することができた。臨床検体を用いた検討およびヒト羊膜細胞を培養して水素添加した効果を検討していき、臨床応用への効果を検討していく。産婦人科学動物モデルにおいて母獣への水素水投与による胎仔障害の抑制効果は明らかとなってきたので、今後はそのメカニズムを解明していくことを目標とする。また、一方で臨床応用に向けて、妊娠中の水素投与による安全性の評価、発症前投与のみでなく発症と同時あるいは発症後投与の効果や様々な水素濃度も検討していき、水素のより効果的な投与法を検討していく。
修飾シクロデキストリンを用いたDNAインターカレータの研究

本研究は、グルコースが複数個環状に結合しその疎水性空洞に種々の有機化合物を取り込みコンプレックスを形成する能力を有するシクロデキストリンに対し、適当な残基を導入することによりDNAインターカレート能を有する修飾シクロデキストリンを合成し、DNAに対する相互作用や、ドラッグ・デリバリー・システム、ドラッグ・ターゲッティング・システムに対する利用、応用などを検討することを目的とした。グルコースが7個からなるβ-シクロデキストリンに、構造の異なるリンカー鎖を介したアントラセン修飾シクロデキストリンを種々合成した。得られた化合物を用いて、化合物単体およびゲスト化合物添加時の立体構造の解析、および、DNAインターカレート能について検討を行なった。化合物単体ではアントラセン残基がシクロデキストリン空洞内に取り込まれた自己包接体を形成しているため、DNAに対し、なんら相互作用を示さないが、ゲスト化合物を添加することにより、アントラセン残基の空洞外への移動が起こり、DNAインターカレート能が発現することが明らかとなった。また、リンカー鎖の構造の違いが、各化合物の立体構造の差異およびDNAインターカレート能に影響を及ぼしていることが明らかとなった。以上のように、ゲスト添加によりDNAインターカレート能を発現するスィッチング機能を有するアントラセン修飾シクロデキストリンを種々合成することに成功し、その構造の差異によるDNAインターカレート能に対する影響に関する知見を得ることに成功した。近年、DNAと相互作用を有する化合物に関する研究が、生体系でのDNA認識のメカニズムの模倣、モデル化合物として注目されている。また、DNAを位置特異的に切断する機能や、位置特異的に認識する、またはインターカレートする機能などは、制癌剤を初めとする新規薬剤の重要な新しい機能性の一つとして注目、要求されている。本研究は、グルコースが複数個環状に結合しその疎水性空洞に種々の有機化合物を取り込みコンプレックスを形成する能力を有するシクロデキストリンに対し適当な残基を導入することによりDNAインターカレート能を有する修飾シクロデキストリンを合成し、DNAに対する相互作用(認識・切断)や、ドラッグ・デリバリー・システム、ドラッグ・ターゲッティングに対する利用、応用などを検討することを目的としている。本年度は、グルコース7つからなるβ-シクロデキストリンの一級水酸基側にアントラセン残基を一つ導入した化合物を合成することに成功した。得られた修飾シクロデキストリンは水溶液中では通常アントラセン残基がシクロデキストリン空洞に取り込まれた自己包接体を形成していることがNMRや円二色性スペクトルの測定などから明らかとなった。この状態ではアントラセン残基はシクロデキストリンに保護された形となり、DNAとの相互作用はなんら観測されなかった。この系にシクロデキストリンの空洞に強く包接される性質を有する1-アダマンタノールを添加すると、競争的効果によるアントラセン残基のシクロデストリン空洞外への移動が観測された。この状態の場合、アントラセン残基とDNAとの相互作用が、UVスペクトルや蛍光スペクトルの測定より観測された。以上のように、ゲスト化合物との包接複合体形成に伴う修飾残基の移動によるDNAインターカレート能発現機能を有する修飾シクロデキストリンの構築に成功した。昨年度、グルコース7つからなるβ-シクロデキストリンの1級水酸基側にアントラセン残基を一つ導入した化合物を合成し、DNAに対する認識能についての検討を行なった。

今年度は、リンカー鎖としてエチレンジアミンおよび、1,4-ジアミノブタンを導入したβ-シクロデキストリンに対し、カップリング反応によりアントラセン残基の導入を試み、新たに2種類のアントラセン修飾シクロデキストリンを得ることに成功した。得られた2種類の化合物を用い、リンカー鎖長による機能性の差異についての検討を行なった。リンカー鎖長の差異により、アントラセン残基のシクロデキストリン空洞に対する配向が異なることが、NMR、CDスペクトルの測定より明らかとなった。また、DNAに対する認識能にも差異が現れることが、UVスペクトルの測定より示された。以上のように、構造の異なる2種類のDNAインター力レート能を有する修飾シクロデキストリンの構築に成功し、その構造の差異による異なった機能性に対する知見を得ることに成功した。近年、DNAと相互作用を有する化合物に関する研究が、生体系でのDNA認識のメカニズムの模倣やそのモデル化合物として注目されている。また、DNAを位置特異的に切断する機能や、位置特異的に認識する、またはインターカレートする機能などは、制癌剤を始めとする新規薬剤の重要な新しい機能性の一つとして注目、要求されている。本研究は、グルコースが複数個環状に結合しその疎水性空洞に種々の有機化合物を取り込みコンプレックスを形成する能力を有するシクロデキストリンに対し適当な残基を導入することによりDNAインターカレート能を有する修飾シクロデキストリンを合成し、DNAに対する相互作用(認識・切断)や、ドラッグ・デリバリー・システム、ドラッグ・ターゲッティングに対する利用、応用などを検討することを目的としている。昨年度までに、、グルコース7つからなるβ-シクロデキストリンの1級水酸基側にアントラセン残基を一つ有しリンカー鎖の構造が異なる2種類の化合物を合成した。この2種類の化合物は、化合物単体においてもアントラセン残基のシクロデキストリン空洞に対する配向が異なっていることが確かめられたが、ゲスト化合物を添加した後もアントラセン残基のシクロデキストリン空洞に対する配向が異なっていることが、NMR、円二色性スペクトルの測定などより明らかになった。これは、リンカー鎖の構造によるアントラセン残基の移動の自由度との差異と、シクロデキストリン空洞の疎水性とバルクな水層との環境差のバランスによるものと思われる。また、このような構造の違いが、DNAとの相互作用に影響を及ぼしていることも明らかとなった。現在は、さらに、アントラセン残基に対し大きな自由度を与えるため、リンカー鎖としてジエチレントリアミンを用いた化合物の合成を行なっている。以上のように、構造の異なる種々のアントラセン修飾シクロデキストリンを構築し、単体、およびゲスト化合物添加時の構造の差異による異なったDNAインターカレート能に対する知見を得ることに成功し、さらに発展させることを試みている。DNAと相互作用を有する化合物に関する研究は、生体系でのDNA認識のメカニズムの模倣やそのモデル化合物として注目されている。
昆虫類の高次系統の再検討-内顎類全3目の内顎口の比較発生学的検討

六脚類(広義の昆虫類)の高次系統「内顎類-外顎類システム」はこれまで広く支持されてきたが、近年、内顎類、欠尾類の単系統性を疑問視する系統仮説が提出されている。本研究は、内顎類3目の重要な共有派生形質である内顎口の形成過程を厳密に比較することにより、内顎類の単系統性、3目の系統関係を検証しようとするものである。結果、カマアシムシ目とトビムシ目の内顎口の相同性は支持されるが、カマアシムシ目/トビムシ目とコムシ目の内顎口の相同性は認められなかった。すなわち、欠尾類は妥当であるが、内顎類の単系統性は支持されない。従来の六脚類(広義の昆虫類)の高次系統は、最近、多方面からのチャレンジを受けている。近年の分子進化学的アプローチを含め、議論は定まらず、争点は「内顎類」のステータスとそれを構成する3目の類縁関係、コムシ目の単系統性に関わるものである。本研究は、内顎類の唯一、最重要とされてきた、内顎類構成群の「共有派生形質」である「内顎口」の形成過程を、内顎類全3目、コムシ目の全2亜目、トビムシ目全2亜目を対象に詳細に比較検討することにより、上記の問題に切り込もうとするものである。本研究からもたらされるであろう成果は、昆虫類のベーサルクレードの系統関係に関する議論に大きなインパクトを与えるものであり、昆虫類の高次系統の再構築に繋がるものである。本年度は、カマアシムシ目およびコムシ目の内顎口形成の検討と、次年度以降のトビムシ目の検討のため準備を目指した。まず、カマアシムシ目の内顎口形成を検討した結果、下唇背板が内顎口後壁を形成し、他の内顎類すなわちトビムシ目、コムシ目のいずれともかなり異なるプランで内顎口が形成されることが明らかになってきた。コムシ目に関しては、構成する2亜目の内顎口形成を比較した。その結果、トビムシ目、カマアシムシ目ともまったく異なる、両亜目で同様な内顎口形成様式が認められた。トビムシ目に関しては、デカトゲトビムシ卵を定常的に確保できるようになり、その卵を基に、トビムシ目の内顎口形成を観察すべく、手法の開発を試み、ほぼ成功した。本年度は、カマアシムシ目およびコムシ目の内顎口形成様式を解明すること、トビムシ目の内顎口形成の概略を把握することを目指した。まず、カマアシムシ目の内顎口形成を検討した結果、内顎口後壁は下唇背板由来であり、最近、分子系統学的検討からカマアシムシ目の姉妹群と示唆されるコムシ目におけるプランとはまったく異なる様式で、内顎口が形成されることを明らかにした。側基板も従来の見解と異なり、下唇基節由来であることも明らかになった。以上の結果は、第8回国際無翅昆虫類学セミナー(イタリア)で招待講演として発表された。トビムシ目に関しては、デカトゲトビムシ卵を用いて、その内顎口形成の概略を把握することができた。その結果、従来の理解とはまったく異なって、下唇背板が内顎口の後方域を形成することが明らかになり、この点において、カマアシムシ目と同様の様式で内顎口が形成されることが明らかとなった。現在、さらに確証を得ることを目指し、透過型電子顕微鏡で下唇背板の挙動を検討している。

本研究は、内顎類の唯一、最重要とされてきた、内顎類構成群の「共有派生形質」である「内顎口」の形成過程を、内顎類全3目、コムシ目の全2亜目、トビムシ目全2亜目を対象に詳細に比較検討することにより、上記の問題に切り込もうとするものである。本研究からもたらされるであろう成果は、昆虫類のベーサルクレードの系統関係に関する議論に大きなインパクトを与えるものであり、昆虫類の高次系統の再構築に繋がるものである。最終年度であった本年度は、カマアシムシ目およびコムシ目の内顎口形成様式に関して、補完すべきデータを集めることを一つの目的とした。これに関しては、コムシ目に関して新たにナガコムシ亜目を検討するなど、ほぼ目的を果たすことができた。トビムシ目の内顎口形成に関しては、一方のマルトビムシ亜目に関して詳細なデータを得ることはできなかったが、ほぼ、同目の内顎口形成のグラウンドプランを明らかにすることができた。以上を基に、カマアシムシ目とトビムシ目の内顎口形成は同様のグラウンドプランをもつ一方、コムシ目のそれはこれらとは大きく異なっていることが明らかになった。したがって、欠尾類は支持されるものの、内顎類の単系統性は再検討されるべきものであると結論づけられた。以上の成果は、第5回ドレスデン昆虫系統学ミーティングで4題め招待講演として発表された。これらの成果を論文にすべく、現在準備中である。
成人肝植手術におけるホスホジエステラーゼの効果

肝移植レシピエント患者45症例を対象とした。アムリノン群、PGE1群、プラセボ群に無作為に割り付けをした。アムリノン群では4γで、PGE1群は0.02γにて麻酔導入から、手術終了まで投与した。肝機能の機能はICG血漿消失率で蛍光法にて評価した。その他乳酸値、アミノトランスフェラーゼ、血液ガスのベースエクセスの血液データを解析した。さらに血圧、心拍数などの血行動態の他、心係数や末梢血管抵抗などのスワンガンツデータを分析した。全ての測定は、麻酔導入後、阻血開始直前、肝切除終了直後、肝切除終了直後60分の4ポイントで行った。アムリノンは血行動態には影響を与えなかった。ICG血漿消失率と乳酸値はプラセボ群とアムリノン群との間で有意差を認めた。一方で、PGE1群と対象群では両因子とも有意な差を認めなかった。本モデルにおいて肝阻血再灌流障害軽減にアムリノンが寄与している可能性が示唆された。[方法]Rat冷阻血+温阻血+再灌流モデルを作成した。すなわち、ラット間でKamada法に準じて、同所性肝移植を施行する。生体部分肝移植に近いモデルを目指し、ドナーはWinstar系雄性ラット4週齢、200g程度、レシピエントは6週齢Lewis系雄性ラット、300g程度を選択する。全肝グラフトは摘出後、冷生理的食塩水で経門脈的に還流した後、UW液に1時間保存する。全肝グラフト摘出後、すばやく、レシピエント手術を行った。レシピエントラットの左外頸静脈にポリエチエンチーブ(PE-90)をカニュレーションし、再灌流後120分間、5γ、10γでアムリノンの持続静注を行う。プラセボ群では生理的食塩水を8ml/kg/hrで投与する。アムリノン群では持続静注に先立ち8ml/kgのアムリノンを筋注投与した。[結果](1)心拍出量、血圧、脈拍等の血行動態、グラフト血流に群間差を認めなかった。(2)細胞間接着因子(ICAM-1)、アポトーシス(TUNEL法)は、5γ、10γのアムリノン群で対照群に比較して、著明に抑制されていた。(3)血液中のICAM-1、肝逸脱酵素(AST、ALT)についても5γ、10γのアムリノン群で対照群に比較して、著明に抑制されていた。[考察]ホスホジエステラーゼ選択的阻害剤は、心筋や血管平滑筋細胞内のcAMPを増加させる作用が知られており、急性心不全の治療薬として使用されている。その一方で阻血再灌流障害にも有効である可能性が本実験により示唆された。(3)血液中のICAM-01、肝逸脱酵素(AST、ALT)についても5γ、10γのアムリノン群で対照群に比較して、著明に抑制されていた。

その他乳酸値、アミノトランスフェラーゼ、血液ガスのベースエクセスの血液データを解析した。さらに血圧、心拍数などの血行動態の他、心係数や末梢血管抵抗などのスワンガンツデータを分析した。全ての測定は、麻酔導入後、阻血開始直前、肝切除終了直後、肝切除終了直後60分の4ポイントで行った。アムリノンは血行動態には影響を与えなかった。ICG血漿消失率と乳酸値はプラセボ群とアムリノン群との間で有意差を認めた。一方で、PGE1群と対象群では両因子とも有意な差を認めなかった。本モデルにおいて肝阻血再灌流障害軽減にアムリノンが寄与している可能性が示唆された。
ウニ病原細菌Flexibacter SP.の生存戦略に関する研究

エゾバフンウニ斑点病原因菌Flexibacter sp.の低水温環境における生残性、VBNC状態にある本菌の検出法およびVBNC状態からの蘇生を検討した。得られた主なる成果は以下の通りである。1.本病原因菌は、75%ASW中5°Cで保持すると、約15日でコロニー形成能を消失した。この状態の菌体は、VBNC状態にあることが明らかになった。VBNC状態移行菌体は、短桿状または球状に近い形態を呈し、ウニに対する病原性は消失していた。2.VBNC細胞を特異検出するためのプライマーセットを、16S rRNAの塩基配列から作成した。本プライマーセットは、原因菌およびそのVBNC細胞以外には増幅産物が見られなかったことから、原因菌の特異検出の可能性を示唆した。3.VBNC状態からの蘇生を検討した。塩化第二鉄溶液を0.0017%(約60μM鉄濃度)の割合で加えた75%ASWの系とウニ成分を添加した75%ASWの系で5°Cから25°Cへの温度のシフトアップにより蘇生がみられた。ウニ成分添加75%ASWの系では、鉄添加の系では鉄無添加の系でよりもより長いVBNC状態からの蘇生がみられた。蘇生細胞は、主なる性状、元株抗血清との凝集性、ウニに対する病原性、細胞形態などの点で元細胞と一致した性状を示した。以上の結果から、本病原因菌は、低水温期にVBNC状態となりウニ個体表面などに付着して生残し、高水温期にVBNC状態から蘇生して、再び本病を発生せしめる可能性が強く示唆された。エゾバフンウニ斑点病原因菌Flexibacter sp.は、海水温が20°C以上となる夏季には種苗生産施設内外の種々の試料から検出されるが、冬季にはいずれの試料からも検出されなくなる。そこで、本研究では、本菌の低水温環境における生残性について検討して、以下の結果を得た。1.本病原因菌Flexibacter sp.F-2株は、対数増殖期中期の細胞を用いて、75%人工海水中に懸濁して5°Cで保持すると、約15日でコロニー形成能を消失した。コロニー形成能を失った菌体は、生理活性を保持しており、生きているが培養できない状態(VBNC状態)へ移行していることが明らかになり、高水温期に発生する斑点病の潜在的要因となっている可能性が示唆された。2.VBNC状態へ移行した菌体は、光学顕微鏡による観察では、10μm以上の長桿状から2μm以下の短桿状への形態変化が観察された。電子顕微鏡観察では、短桿状または球状に近い形態となる過程がより明確に観察された。しかし、コロニー形成能を失った球状細胞は細胞の表面構造はほぼ正常に保たれていた。3.VBNC状態になった細胞はウニに対する病原性は消失していた。また、菌体構成蛋白質のSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動およびウエスタンブロッティング法による結果から、VBNC状態へ移行した本菌は、凝集能あるいは病原性との関連が示唆される約90kDaと約74kDaの易熱性抗原関連のもの、および約38kDaの耐熱性抗原関連のものと推察されるタンパク質バンドが消失していることが判明した。本年度は、通常の培養法では検出できない生理状態にある斑点病原因菌Flexibacter sp.を検出するための手段として、同菌の16S rRNAの塩基配列からの特異プローブの作成を試みた。2.データベースに登録されているFlexibacter属、Cytophaga属、Flabvobacterium属細菌の16S rRNAの塩基配列との比較から、原因菌に特異的な塩基

配列部分、大腸菌のnumbering 454番目から478番目に相当する20塩基を見出した。3.この20塩基をforwardprimerとし、riverse primerとしてユニバーサルプライマーである1540Rプライマーを用いたプライマーセットを作製した。4.F-2株を含む斑点病原因菌6株、F-2株のVBNC細胞、Flexibacter属菌4株、Cytophaga属菌9株、Flabvobacterium属菌8株、Vibrio属菌8株およびウニ個体・ウニ飼育施設から分離した原因菌類似菌30株を供試してPCRを行ない、前記プライマーセットの特異性を検討した。5.その結果、原因菌およびF-2株のVBNC細胞以外には増幅産物はみられなかったことから、前記プライマーセットを用いたPCRにより、斑点病原因菌Flexibacter sp.の特異検出の可能性を示唆した。本年度は、エゾバフンウニ斑点病原因菌Tenacibaculum sp.(formerly, Flexibacter sp.)のVBNC状態からの蘇生を、75%ASWとホモジナイズしたウニを添加した75%ASWの2つの系を用いて以下項目について検討した。1)保持温度のシフトアップ、2)原因菌培養上清の添加、3)熱ショック、4)ウニ個体体腔内への接種、5)酵母エキスの添加、6)塩化第二鉄溶液の添加。その結果、以下の結果を得た。1.75%ASWのみの系では、5°Cから25°Cへの温度のシフトアップ、本菌培養上清の添加、ヒートショック、ウニ個体体腔への接種、酵母エキスの添加ではいずれも蘇生しなかったが、この系に塩化第二鉄溶液を0.0017%(約60μM鉄濃度)の割合で加え、5°Cから25°Cへの温度のシフトアップによりVBNC状態に以降後、4日目までの細胞で蘇生がみられた。2.ホモジナイズしたウニを添加した75%ASWの系では、鉄を加えた系は勿論、鉄無添加の系においても5°Cから25°Cへの温度のシフトアップにより蘇生がみられた。この場合、鉄無添加の系ではVBNC状態に以降後、3日目までの細胞で蘇生がみられたが、それ以降の細胞では蘇生がみられなかったのに対して、鉄添加の系では15日目までの細胞でも蘇生がみられた。なお、1.同様その他の検討項目では蘇生はみられなかった。1.および2.の結果から、蘇生には鉄の存在が大きな役割を果たしていることが示唆された。3.蘇生細胞は、主なる性状、元株抗血清との凝集性、ウニに対する病原性、細胞形態などの点で元細胞と一致した性状を示した。以上の結果から、本病原因菌は、低水温期にVBNC状態となりウニ個体表面などに付着して生残し、高水温期にVBNC状態から蘇生して、再び本病を発生せしめる可能性が強く示唆された。
近世東北地方における自然資源の利用・管理と地域社会に関わる歴史学的研究

本年度は、以下のような実績を得た。(1)2018年6月2122日に、東北大学災害科学国際研究所に集合のうえ、代表者である高橋・分担者・高橋陽一、協力者・佐藤大介による、これまで収集した史料の概要説明と当該年度に一関市で行う調査計画、さらに今後の研究方針についてミーティングを行った。とくに一関市藤沢町・首藤家文書や同町・皆川家文書について情報交換を行うと同時に、夏期に実施する調査の準備作業を行った。(2)2018年8月2426日に、本研究で分析素材のひとつとしてきた一関市大東町・金家に伺い、史料返却および整理状況の説明を申し上げるとともに、一関市博物館にて当該地域の大肝入を勤めた鳥畑家文書の撮影を行った。また8月27日には佐藤氏から得た震災後の歴史資料保全活動の説明を踏まえ、仙台市内の被災地の巡見を行った。(3)2018年9月1011日に、本研究の比較対象地域を広げることを意識し、近世の山林関係史料を豊富に残すみなかみ町旧新治村地域での概要調査を行った。(4)2019年3月22日に東北大学川内北キャンパスにおいて、本研究収集・分析史料に基づき、「山林資源と仙台藩-18世紀前半の史料から見る仙台藩の御林-」と題した講演を行った。本研究調査対象地である一関市を含む仙台藩北部における山林資源の利用状況を、同藩における産業発展や都市消費の拡大と関わらせつつ整理した。当日は155名の参加者を得、地域の人びとの関心の高さを知ることができた。また、前日3月21日には、研究分担者・協力者と、今後の研究計画についてミーティングを行った。(5)仙台藩を事例とした本研究との対比を意図し、豆州内浦地域を対象として分析を進め、「近世における海洋回遊資源の資源変動と地域の自然資源利用-豆州内浦湾沿岸地域を主な事例として-」(『日本史研究』672、2018年8月)を得た。本研究は、東北地方、なかでも仙台藩領を主なフィールドに、沿岸地域と内陸地域の二つの地域を拠点とすることで、藩の林政や流域史なども意識しながら、地域の自然資源の利用・管理や地域社会史に関する歴史的資料の発掘・整理と分析を進めることを目的としている。1、沿岸地域の森林資源の利用・管理に関する研究としては、東日本大震災の被災からレスキューされた女川町横浦・木村家文書などの分析を行い、研究代表者が2016年2月に蕃山房から『仙台藩の御林の社会史三陸沿岸の森林と生活』を刊行した。2、内陸地域の研究拠点では、一関市大東町金家文書の整理・分析を進めた。具体的には、次のような作業や企画を実施した。(1)6月21日・7月26日・8月29日8月31月に、同家にて所蔵資料の整理・撮影作業を実施した。また、史料の一部は借用のうえ、東北大学災害科学国際研究所歴史資料保存研究分野にて整理・撮影を進めた。(2)これらの作業に基づいて、6月20日には一関市大東コミュニティセンターにて「磐井の江戸時代をほりおこす」と題した現地報告会兼シンポジウムを開催することができた。(3)今後の研究の拡がりも射程に入れ、7月2526日には、大東町内の歴史資料を確認するための巡見を地元資料館(芦東山記念館)・地元郷土史家の方々とともに実施した。(4)2月2829日には、現在、金家の資料整理を協同して進めているメンバーが集まり、研究分担者の所属する東北大学を会場に目録の作成を実施した。本研究は、東北地方、なかでも仙台藩領を主なフィールドに、1.沿岸地域と2.内陸地域の二つの地域を拠点とすることで、藩の林政や流域史なども意識しながら、地域の自然資源の利用・管理や地域社会史に関する資料の発掘・整理と分析を進めることを目的としている。1.については、1「牡鹿郡女川町木村家文書」、2「同町丹野家文書」、3「同町須田家文書」のほか4「桃生郡名振浜永沼家文書」を素材に、史料の収集・分析を進めることを一年目の作業課題としていた。前述したように、研究代表者がこれらの作業を行うとともに、2016年2月に蕃山房から『仙台藩の御林の社会史三陸沿岸の森林と生活』を刊行することができた。2.については、「一関市大東町金家文書」の整理・撮影活動を進めることと、史料調査の概要や史料紹介を内容とした地元での説明会を実施することを本年度の課題としていた。これについては、(1)6月21日・7月26日・8月29日8月31月に、同家にて所蔵資料の整理・撮影作業を実施するとともに、(2)6月20日には一関市大東コミュニティセンターにて「磐井の江戸時代をほりおこす」と題した現地報告会兼シンポジウムを開催することができた。2月2829日には、資料整理を協同して進めているメンバーが研究分担者の所属する東北大学に集まり、資料の目録の作成作業を実施したただし、所蔵者宅での史料の整理・撮影のための作業集団が20名以上に及び、所蔵者にご負担を与えるなどの問題も生じた。次年度はこの点に配慮し、所蔵者の御了解をいただいたうえで、史料の一部を借用のうえ、東北大学にて整理・撮影を進めるほか、現地調査をする際には作業集団の規模を縮小する必要性があると考えている。

本年度は、以下のような実績を得た。1.2016年11月19日に、東日本大震災からの復興を進めている女川町(於:女川町まちなか交流館)において、本研究の成果に基づき「大肝入文書から見る江戸時代の女川-村と人びとの生き残り戦略-」と題する講演を行った。2.前年度の作業を継続し、一関市大東町金家文書の整理・撮影・分析を進めた。具体的には、次の(1)(4)のような作業や企画を実施した。(1)9月16 18日に、東北大学災害科学国際研究所において、同家文書の簡易目録の作成と報告書作成の準備を行った。また、17日には、史料所蔵者宅に伺い、借用史料返却と新たな未撮影史料の借用を行った。(2)11月19日に開催した女川町での講演の翌20日には、東北大学災害科学国際研究所において同家文書の簡易目録の作成と報告書作成の準備を行った。(3)1月1819日には、東北大学東北アジア研究センターにおいて、同家文書の簡易目録の作成と報告書作成の準備を行った。(4)3月810日には、東北大学東北アジア研究センターにおいて、同家文書の簡易目録の作成と報告書作成の準備を行った。3.仙台藩を事例とした本研究との対比を意図し、同じく海洋での漁業を基幹的な生業としつつも、沿岸地域に森林資源を豊かに持った豆州内浦地域を対象として分析を進めた。この分析を通して、2016年9月に、「近世における水産資源変動と山林・獣害ー豆州内浦を事例としてー」(渡辺尚志編『生産・流通・消費の近世史』勉誠出版に所収)を発表した。この論文は、本科研を通して提起した論点を、東北地方を超えた地域的な広がりのなかで位置づけていくことを意図して作成したものである。本研究は、東北地方、なかでも仙台藩領を主なフィールドに、1.沿岸地域と2.内陸地域の二つの地域を拠点とすることで、藩の林政や流域史なども意識しながら、森林資源の利用と管理に関する資料の発掘・整理と分析を進めることを目的としている。1.については、仙台藩領の1「牡鹿郡女川町木村家文書」、2「同町丹野家文書」、3「同町須田家文書」のほか4「桃生郡名振浜永沼家文書」を素材に、史料の収集・分析を進めることとしていたが、これについては、昨年度、『仙台藩の御林の社会史三陸沿岸の森林と生活』(蕃山房)を刊行し、本年度はその成果をもとに女川町において講演会を開催することができた。また、本年度は、東北地方との比較を意図し、大部の活字資料が蓄積されている伊豆半島沼津市の内浦沿岸地域を事例とした分析を進め、論考を発表することができた。2.については、「一関市大東町金家文書」の整理・撮影を進めることを課題としているが、本年度もこの方針を継続した。ただし、昨年度、史料の整理・撮影のための作業集団が20名以上に及び、所蔵者宅にご負担を与えるなどの問題も生じたため、本年度は、この点に配慮し、所蔵者の御了解をいただいたうえで、史料の一部を借用のうえ、東北大学災害科学国際研究所歴史資料保存研究分野にて撮影を進めた。また、本科研期間中に所蔵者に史料の概要な内容の一部なりとも還元することを意図し、一点ごとの目録を作る方針をひとたび控え、史料の概要目録の作成と報告書作成のための準備を本年度より開始した。本年度は、年度半ば以降、研究代表者である高橋が家族の事情により研究を進めることができなくなったため、年度後半は共同研究者である高橋陽一および研究協力者である佐藤大介による作業が中心となった。実績は以下のとおりである。1.5月27日、高橋美貴が石巻市河北総合センターにて、「古文書から見る江戸時代の追波の森林と村びとたち」と題して、被災史料を用いた地元講演会を実施した。