hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
導波路型光ゲートを用いる超高速光信号処理

目的は、パルスレーザーから発射される単発のパルスの波形を実時間的に測定するシステムを光集積回路の形で実現することにある。そのため、光ファイバを遅延路に、Austonスイッチとバルク型ポッケルスセルをゲート素子とする方法を考案・試作し、一応の成功を収めているが時間分解能は、500ピコ秒に止まった。本研究は、この光遅延路および光ゲートを電気光学結晶の基板上に形成された光導波路に置き換えることにより、時間分解能を10ピコ秒台に向上させることを目的とする。本年度では、基本技術である光導波路の形成のためのプロセスの開発と複数チャンネルの光信号に対して同時に作用する集積光スイッチの設計を行った。1.タンタル酸リチウム基板上への光導波路の形成光損傷に強いとされるタンタル酸リチウムを基板材料に、また拡散温度の低くて済む銅イオンをドーパントに選び、内拡散法による導波路形成を試みた。スラブ導波路を形成した後、不要部を除き去るリブ型導波路および、最初にCuOをスパッタしたうえで導波路の形にパターニングしたうえで熱により内拡散するチャンネル型導波路の2つを試み、結局後者の形で導波路の成形に成功した。2.集積光スイッチの設計複数の光チャンネルに対し、1つの制御電気信号により、数十ピコ秒度ずつ正確な時間差をもって働く光ゲートを設計した。結局、電極としては基板を表裏から狭む集行波形導波路、およびY型分岐を持ち、電極の電位によって制御される全反射を利用する分岐型光ゲートを組み合わせることと、光ゲートの幾何学的配置を工夫することにより、約40ピコ秒の時間分解能と16のチャンネル数が得られるものと判断された。
Genome informaticsに基づいた新しい糖尿病の分類体系の確立

糖尿病の病態はインスリン抵抗性とインスリン分泌不全に大別される。我々はadiponectinやaquaporinがインスリン抵抗性に、hepatocyte nuclear factorがインスリン分泌に関与していることを明らかにしてきた。本研究はインスリン抵抗性、分泌不全の形成に重要な遺伝子群の解析を行うことにより多因子疾患としての糖尿病の新しい分類体系を確立を試みようとするものである。本年度の検討により、adiponectinの血中濃度は2型糖尿病では血中濃度が低下しており、本分子の血中濃度低下はクランプ法によるインスリン抵抗性と密接に関連することが判明した。また、糖尿病動物ではadiponectin遺伝子発現が低下しており、PPARγ活性化により発現が誘導されること、さらにこの調節はプロモーターレベルでおこることを明らかにした。また、オーファン核内受容体であるSHPがPPARγのアクチベーターとして作用することも明らかにした。一方、aquaporin adipose (AQPap)は脂肪細胞に高発現するグリセロールチャネル分子で脂肪細胞からのグリセロール放出を促す。その発現はインスリンで抑制されるが、インスリン抵抗性状態では調節が障害され糖新生基質であるグリセロール放出が亢進している。本遺伝子の発現調節領域内にインスリンによる負の調節領域を決定した。また、インスリン分泌に関連するHNF-1αの標的遺伝子としてglucose transporter type2 (GLUT2)、HNF-4αの新規コアクチベーターとしてthyroid receptor interacting protein 3 (TRIP3)をそれぞれ同定した。TRIP3の遺伝子多型性について検討したところ、イントロン内に2種類の多型性を同定した。
虚血ならびに慢性梗塞における心筋・交感神経・副交感神経バイアビリティの解析

心筋虚血・梗塞後の残存心筋機能を温存する手法の開発を最終目標に、まずはラット心筋に微小透析膜を貫通させ、心筋虚血により傷害された細胞から漏れ出る心筋逸脱蛋白質や酵素、神経伝達物質の濃度応答を解析した。次に細胞傷害誘発剤(高濃度デシピラミン)を傷害度の違う心筋に投与した際の心筋逸脱蛋白濃度を測定したところ、その濃度応答が残存心筋(心筋バイアビリティ)の指標となり得ることが確認できた。本測定法を用いて虚血プレコンディショニングによる心保護効果を確認したところ、虚血梗塞後の心筋バイアビリティが温存されていることが示唆された。虚血・再灌流ならびに慢性心筋梗塞においては傷害が心筋のみならず周囲に分布する交感神経・副交感神経にまでおよび、こうした傷害が致死的な不整脈の発生や心不全の増悪因子となり生命維持にとってきわめて重大な影響を及ぼす。我々は現在までに心臓マイクロダイアリシス法をラット心筋に適用し、心筋間質透析液中の神経伝達物質や逸脱蛋白を連続的に測定することで心筋傷害の程度を推測できる系を完成させてきた。本法は、麻酔下ラットを左開胸し、拍動下左室心筋にマイクロダイアリシスプローベを植え込み、その透析液を15分ごとに採取する。プローベを植え込んだ領域の冠動脈を30分間閉塞・60分間再灌流して心筋透析液の神経伝達物質(ノルエピネフリン・アセチルコリン)、細胞傷害逸脱蛋白(ミオグロビン・AST・CK)およびグルコースを測定した。その結果、ミオグロビン、AST応答が傷害の指標として適しており、CKは感度以下であった。グルコースは血流の途絶により低値を示したままであった。以前より行っている副交感神経の虚血再灌流時のデータに今回の心筋細胞保護効果を加味して解析した結果、有意に保護効果有することが証明できた。次に我々は心筋バイアビリティを測定するために、薬理学的細胞傷害を引き起こすシアン化ナトリウム(30mM)あるいはデシピラミン(100mM)を投与した際のミオグロビン濃度応答を測定することを試み、両者ともに測定できることも判明した。現在は虚血再灌流傷害と心筋バイアビリティの関係について、虚血・非虚血部での測定を進めている。またグルコースの再吸収を用いて残存心筋エネルギー代謝から見た心筋のバイアビリティについても検証を開始した。我々は初年度に虚血再灌流後の残存心筋細胞機能を心臓マイクロダイアリシス法による透析液中の神経伝達物質・逸脱蛋白酵素・グルコース等様々な物質について測定し、その物質毎に有用性を検討してきた。その結果、測定の簡便性や感度、特異度からミオグロビンが最も実験に適していることを確認した。その方法を用いて30分間の冠動脈閉塞と60分間の再灌流時のミオグロビン応答を測定し、心筋細胞膜傷害の指標として使用可能であることを証明した。さらに薬理学的細胞傷害を引き起こすシアン化ナトリウム(30mM)あるいはデシピラミン(100mM)を透析膜経由で投与することで透析液ミオグロビンが上昇し、血行動態によらない細胞傷害モデルを作成することに成功した。次に、虚血再灌流傷害による心筋バイアビリティを計測するために、コントロール(結紮なし)、3分間、30分間の冠動脈結紮を行ったのち、結紮解除3時間後のデシピラミン投与時の男透析液ミオグロビン濃度を測定した。その結果、3分間群はコントロール群と同レベルであったが、30分間群では低値を示した。この結果から、デシピラミン投与による残存心筋細胞を推測できる手法となり得ると考えられた。そこで、30分虚血前に虚血プレコンディショニング(3分間虚血3回繰り返し)を前処置後、30分間冠動脈結紮を同様に行った際のデシピラミン投与によるミオグロビン濃度応答は前処置しなかった群と比して上昇し、虚血プレコンディショニングが心筋バイアビリティを温存していると考えられた。現在は、この心筋バイアビリティと薬理学的心保護法(とくに麻酔関連薬剤)の関係を検証中である。虚血・再灌流ならびに慢性心筋梗塞においては傷害が心筋のみならず周囲に分布する交感神経・副交感神経にまでおよび、こうした傷害が致死的な不整脈の発生や心不全の増悪因子となり、きわめて重大な影響を及ぼす。我々はこの2年間で心臓マイクロダイアリシス法をラット心筋に適用し、心筋間質透析液中の神経伝達物質や逸脱蛋白を連続的に測定することで心筋傷害の程度を推測できる系を完成させてきた。具体的にはプローベを植え込んだ領域の冠動脈を30分間閉塞・60分間再灌流して心筋透析液の細胞傷害逸脱蛋白を測定し、その濃度応答を細胞障害の指標として使用できることを確立した。

本年度は細胞傷害を誘発するデシピラミンのマイクロダイアリシスファイバー介した投与により心筋透析液ミオグロビン濃度応答を測定することで血流の途絶の影響を受けずにその周囲の心筋細胞の細胞膜の健全性を推測出来る手法を確立した。その濃度応答が直前の虚血強度と負の相関をもつことから、心筋虚血傷害後の残存心筋バイアビリティの指標となることが証明できた。現在、虚血再灌流傷害時の交感神経・副交感神経調節系の修飾が心筋傷害や残存心筋バイアビリティに及ぼす影響について検証を行っている。特に虚血時の心筋傷害を助長する因子として交感神経過剰興奮状態が示唆されていることから、ファイバーを介して高濃度ノルアドレナリンを投与した際のミオグロビン濃度応答および、その後のデシピラミン投与による濃度応答を測定したが、明らかな心筋障害の進展や残存心筋バイアビリティの減少は見られなかった。また、副交感神経過剰興奮状態による細胞障害抑制効果の有無を心筋傷害と残存心筋バイアビリティの両面から検証しはじめたところである。さらに、虚血心筋障害の主因であるCa^<2+>の細胞内流入機転と心筋傷害や心筋バイアビリティの関連についても検証を始め、細胞保護の分子基盤の解明にも取り組んでいる。
ラット脳内自己刺激行動を用いた精神疾患治療薬における意欲改善効果の評価

本研究では、当研究室で開発した実験装置により薬物の意欲への影響を評価し、意欲のメカニズムを解明する基礎データを構築することを目的として研究を実施した。その結果、報酬や気分に関係する脳内の神経伝達に使われるドーパミンが重要な役割を示すことが明らかになった。また、薬物依存や抑うつ気分の実験モデルと比較したところ、意欲と薬物依存、抑うつ状態には異なる神経メカニズムが関与している可能性が明らかとなった。平成22年度は、脳内自己刺激行動のRun-Way法を用いた意欲や動機づけの評価系モデルにおける神経伝達物質の寄与を解明するため、ドーパミン関連薬物の関与について検討を行った。選択的ドーパミン取込み阻害薬であるGBR12909を用いた検討において、GBR12909は用量依存的にRun-Wayの走行スピードを上昇させた。したがって、GBR12909は意欲や動機づけの低下を改善する作用がある可能性が考えられた。さらに、GBR12909による走行スピードの上昇は、ドーパミン受容体拮抗作用のあるハロペリドールによって有意に拮抗された。以上のことから、本評価系モデルにおけるGBR12909の意欲および動機づけの改善作用は、主にドーパミン神経を介した作用であることが確認された。一方、本評価系モデルにおいて抗うつ薬のImipramineの作用を検討した結果、用量依存的にRun-Wayの走行スピードを低下させることが明らかとなった。このことから、本評価系モデルは抗うつ薬が効果を示す神経作用点と異なる神経系を介した行動変化を評価している可能性があると考えられた。これらの研究成果は、第49回日本薬学会・日本薬剤師会・日本病院薬剤師会中国四国支部学術大会(平成22年11月6日、米子)にて発表した。現在、意欲や動機づけの改善におけるドーパミン受容体サブタイプの関与を詳細に解明するため、GBR12909の作用に対するRaclopride(ドーパミンD2受容体選択的拮抗薬)、SCH23390(ドーパミンD1受容体選択的拮抗薬)およびNafadotride(ドーパミンD3受容体選択的拮抗薬)の影響を検討中である。さらに、本評価系モデルと抗うつ薬の評価系モデルとの異質性を明確なものとするため、GBR12909ならびに各種ドーパミン関連薬物の強制水泳実験に対する影響について検討する予定である。これまでの検討により、脳内自己刺激行動のRun-Way法において選択的ドーパミン取込み阻害薬であるGBR12909は走行スピード(即ち本動物モデルにおける動機付け)の低下を改善させることが明らかとなった。本年度は、GBR12909による走行スピードの改善作用に対するドーパミンD2受容体選択的拮抗薬であるRacloprideの影響を検討し、さらに動機付けを評価する本動物モデル行動薬理学的特性を明らかにするため、汎用されている他の情動関連動物モデルにおけるGBR12909および中枢神経作用薬の作用を比較検討した。その結果、GBR12909による走行スピードの上昇は無作用量Racloprideの前処置により有意に拮抗された。したがって、GBR12909による走行スピードの上昇にはドーパミン受容体サブタイプのうち、D2受容体が主に関与する可能性が示唆された。また、意欲や情動に関連深い精神疾患である、うつ病や薬物依存の評価系動物モデルである強制水泳試験ならびに条件付け場所嗜好行動試験を用いてGBR12909および各モデルにおける標準薬の薬効を評価した結果、以下の内容が明らかとなった。強制水泳試験ではGBR12909および抗うつ薬として汎用されているImpramineはともに不動時間を短縮し、抗うつ様効果を示した。これまでの検討結果をあわせて考えると、本実験モデルは抗うつ様作用のうち意欲の改善作用を特に評価できるモデルであると考えられた。さらに、嗜好性薬物であるNicotineを比較対象とした場所嗜好性試験においてGBR12909は場所嗜好行動を惹起しなかった。したがって、脳内自己刺激行動は依存性薬物の評価にも用いられるが、本実験モデルにおける動機付け行動には依存性行動と異なるメカニズムの関与が考えられた。前年度までの検討により、選択的ドーパミントランスポーター阻害薬であるGBR12909は脳内自己刺激行動のRun-way法における動機づけ行動を促進し、その促進作用はドーパミンD2受容体拮抗薬であるRacloprideにより拮抗されることを明らかにした。本年度は、本動機づけ行動におけるドーパミン受容体の関わりを、より明確とすることを目的に、選択的D1受容体作動薬SKF38393および選択的D2受容体作動薬quinpiroleを用いて、受容体刺激実験を行った。その結果、SKF38393あるいはquinpiroleのいずれの薬物を単独投与した場合でも、用量依存的な走行スピードの低下が認められた。さらに、これらの薬物の、単独では有意な作用を示さなかった用量を同時投与した場合にも、走行スピードは有意に低下した。

これらの結果から、本動機づけ行動においてドーパミントランスポーター阻害薬によるドーパミン神経伝達の促進、あるいは内因性ドーパミン伝達の増強は動機づけ行動の促進に働くが、ドーパミン受容体作動薬による刺激によっては本動機づけ行動は促進されず、逆に抑制されることが明らかとなった。さらに本年度は、これまでに得られた結果から論文を作成し、Behavioural Brain Research誌にて発表した。動機付けに関わる神経機構のうち、ドーパミン神経系の機能について明らかにすることができた。さらに、うつ病や薬物依存の評価系行動薬理学モデルとの表現形の違いを明らかにできたため。24年度が最終年度であるため、記入しない。本動物モデルに対する脳内神経メカニズムの関与をより詳細に解明するため、組織学的および生化学的検討を行う。これまでの検討で、ドーパミン神経の関与が明らかとなっていることから、ドーパミン神経の投射領域である中脳辺縁系および中脳皮質系、黒質-線状体系に属する、各神経領域の活性化の有無について検討する。
人口動態に基づく住宅ストックの地域格差の実態とその将来的推移

本課題はこれまで把握が困難であった都道府県レベル以下の住宅ストックの実態ならびにその地域格差を把握する手法を検討することを目的とした。まず人口動態に着目し、住宅需要の変動と住宅ストックの実態を結びつけるべく検討を重ねた。ここからDID人口の動態に基づいて地域を類型化することを導き、それとストックの諸相との相関を検証した。住宅ストックの諸元のうち、空き家率と住宅寿命については地域類型との対応関係を詳細に分析している。最終的に、都道府県以下の対象地域については地域類型にあてはめて、実態を推測する方法を提案している。合わせて視察調査も実施し、住宅ストックの実態把握と将来的施策の在り方を検討した。本年度は2つ目の課題として設定した「人口動態別地域類型と住宅ストックの関係分析」について前年度に引き続いて分析を進めた。現状では最新の2008年の統計において、推定される住宅寿命は人口減少地帯において長期化・短期化のまったく異なる傾向を示すが、その理由を明らかにすることを目的とした。検討の結果、都市的地域においては人口や世帯の絶対数の増減あるいは構成の変化が原因の一つと考えられることがわかった。これらの変化についていくつかの類型を設定した上で住宅ストックの実態と結びつける作業に着手しており、現在は地域別の住宅ストックの特徴ならびにその将来的な推移について検討を加えている。住宅寿命の長期化については、空家率も大きな影響を及ぼしている可能性が高い。空き家については市場在庫ではなく、いわゆる放置されている空家が住宅寿命を押し上げている可能性があり、人口・世帯の減少に比して住宅寿命が長期化している地域については、空家率の推移ならびにその実際の存続状況との比較が必要であるとの認識に至った。今年度はこれまでに視察・調査を進めている大阪や千葉また九州や東北の過疎地域に加えて、中規模の地方中心都市における空き家の実態についても調査を進めるべく、高松や松山などの四国の瀬戸内地域の都市にについても視察を行い今後の分析対象として検討を加えている。また、兵庫県洲本市を人口漸減傾向の小規模都市の典型例と位置づけ、空家の集積状況とその周囲の住宅ストックに与える影響について実態調査を進めた。その他、GISシステムを使った住宅寿命などの諸元の実態把握・表示についても作業に着手し、データの入力体制などを整えて試験的なシステム構築を行っている。本年度は研究計画に述べた課題1「人口動態に着目した地域の類型化とストックの分析単位の検討」ならびに課題2「人口動態別地域類型と住宅ストックの実態の関係分析」を主な研究対象とした。また課題3「地域別の住宅ストックに関わる問題の把握と将来的施策の検討」についても、計画に先だって着手している。課題1については、「人口動態に関する統計資料の分析とこれに基づく地域類型の抽出」ならびに「各県における人口動態別地域類型の分布と構成比の把握」を具体的な課題としている。前者については、基本的な人口動態に関するデータ入力と整理を行い、主としてDID地区の発展・衰退傾向に基づく類型の設定を試みている。後者については、各県別レベルで人口動態に基づく地域類型を抽出し、隣接する件を地域としてまとめてその域内で人口動態別の地域類型がどのように分布するかを検討した。これは、住宅ストックの質について、従来の県別レベルでの分析が必ずしも実態に即した物とならないという研究の基本的な立脚点に基づく作業である。課題2については、具体的な研究対象として近畿地方を取りあげて分析を行った。大阪府については府レベル以下の空き家率などの住宅ストック関連指標について、人口動態との相関関係の分析を行った。その過程で具体的な住宅ストックの質(建物の形態や密度、周辺環境)についても分析の必要性が認められたため、適宜現地視察・調査も実施した。課題3については、地域別の住宅ストックに関わる問題把握について調査を開始し、主として空き家対策に関わる基礎自治体の取り組みについて情報収集を行った。特に空き家バンク事業については、山梨の事例を中心に事業の持続可能性などの検討を行っている。本研究では1人口動態に着目した地域の類型化と住宅ストックの分析単位の検討、2人口動態別地域類型と住宅ストックの実態の関係分析、3地域別の住宅ストックに関わる問題の把握と将来的施策の検討、を通じて我が国の住宅ストックの実態を詳細に把握し、その将来的な推移について蓋然性の高いシナリオを提示することを目的とした。本年度は課題3を実施し、研究をとりまとめた。統計調査については、課題2も継承し、これまでの内容に加えて住宅ストックの質や地域ごとのストックの蓄積状況の違いについて、これを明確に説明し得る指標を導き出すべく検討を加えた。例えば人口集中地区の内外における住宅ストック数の比率などと人口・世帯数の動態を組み合わせることで、ストック存続状況について新たな類型化を試みた。これらの検討からストックの管理状況が問題となり得る都市を抽出し、臨地調査を行った。

ここでは特にストックの荒廃に関して、地割やその歴史的背景など統計外の要素の影響がうかがえ、新たな知見として整理した。既存の県あるいは市区町村を単位とした統計調査は我が国の住宅ストックの実態を示す上で必ずしも適当なものとは言えず、人口や世帯数、あるいは年齢構成などの実数や動態に着目した地域類型別に調査範囲を再設定する必要がある。本研究では世帯数などに着目し、減少地域や停滞地域などのいくつかの枠組みを試験的に設定した。それらをもとに住宅ストックの指標を分析した結果、住宅寿命や空き家率、そしてその動態には幅があり、これらが地域格差として指摘できた。一方で臨地調査からは地域ごとの差異にそれぞれの歴史的経緯による影響も見受けられ、将来的な推移の検討については人口動態にとどまらない分析の必要があることも把握した。既存の住宅関連統計は対象を総体として示すもので、個別の実態を正確に描ききれていない。施策の立案についてはこの点に留意する必要がある。建築計画および建築生産当初設定した目標についてはおおむねカバーしているものの成果については一段の深化が望まれる状況である。しかし一方で、学生等の協力を得ながらフィールド調査にも着手することができ、分析の幅が広がっているため、研究全体としてはおおむね順調に進展しているものと判断している。本年度の研究計画は研究計画書に示した課題1と課題2の一部についての調査・分析であり、その点についてはほぼ順調に研究が進展していると判断している。ただし、いずれについても本年度は作業補助を依頼する大学院生の確保が思わしくなく、いずれも資料整理やデータ入力・分析の範囲でいっそうの努力が必要であると認識している。この点については次年度に積極的な研究作業の実施をもって目標を満たすように努力したい。その一方で、本年度は当初予定していなかった課題3についても研究を進めることができており、全体としての進捗状況はほぼこれで相殺されるものと思われる。次年度は最終年度であり、若干拡散傾向にある研究成果のとりまとめに注力したい。その一方で、人口動態の類型別に地域の問題の特性とその対処方法についても検討する必要があり、具体的なフィールド調査も深める必要がある。住宅ストックの実態把握については、簡易的ながらGISの導入を試み、成果のビジュアルな表現についても検討したい。計画通り課題2の残り部分と課題3について研究を進めることとする。一方で、課題1の積み残し部分である、データ入力や分析については、年度の早い段階で消化するように計画している。課題2については「地域類型と住宅ストック関連諸元の関係分析」が課題となる。これについては前年度に対象とした近畿地方の分析を継続し、新たに中国地方ならびに東北地方、また首都圏についても分析を開始する予定である。
英国１８世紀の人生の物語に関する研究：個人の経験・物語の共有・公共心

18世紀の人々の日常を書きとめる欲求、コミュニケーションへの渇望、書かれたものへの愛着に注目し、特に人生の物語の提示が社会と文化のなかで果たしていた役割を考察した。それにあたって、手紙や日記や文学作品を使って、個人の内省描写や個人が自分の人生を語ることによってつくっていこうとする人間関係に着目して、個人的記録の中にみられる社会の構成員の市民としての責任感に焦点をあてた。18世紀の社会が可能にした私的な慈善の場は、金銭を介して、自らの立場の正当性を示したり、不当な状況の是正を求める人々に判断が下される場であった。小説の中での回想の使い方について、18世紀及び19世紀の流行と変化を論じた。この研究は、書くという行為の文化的意味を考察するという大きな構想の重要な一部分をなすことを意図している。今年度は、資料分析や文学研究の成果を学術誌に投稿することを目標にし、部分的に紀要に載せたが、査読付き学術誌への投稿にむけて現在まだ準備が続いている。デヴォンシャ侯爵夫人の詩の出版やその他の公の場に出る機会の場合と比較しながら、小説が代表するとされる中産階級の価値観と貴族的価値観の相互の関係から生じた事象と表象についてとりあげている。遅延のひとつの理由は、議論の素材としている文献の著者にかかわる問題が解決されないことにある。その解決のためのアーカイヴでのリサーチについては、イギリス、ダービシャのチャッツワースに滞在し、そこのアーカイヴにあるスペンサー伯爵夫人の日記・手紙や娘のデヴォンシャ侯爵夫人の資料を短い滞在期間でできる限り読んできたが、現在準備中の論文にかかわる直接的証拠を十分に手に入れたとはいえず、次年度もアーカイヴでの研究を継続する必要がある。論文では、証拠がこれ以上でてこない場合に合わせて議論を組み立て、伝記作家たちの記述の傾向についての考察を加えながら進めている。一方、17世紀の教育に関する文献集は、解説をつけて出版することができた。これは、本研究の重点のひとつである内省的な描写と深くかかわるピューリタニズムをはじめとするプロテスタント改革者による教育書を中心に諸文献を選定したもので、これまで個人的に手薄になっていた宗教的側面からのこども観・人間観について考察することができ、今後の本研究に有益と考えている.他に、家庭内で書き留められ、私的に伝達される知識の記録を主に考察した論文「近代イギリスの家庭の薬・薬の知識」を『くすりの小箱:薬と医療の文化史』湯之上隆・久木田直江編(南山堂、2011)pp.112-26に発表した。今年度の目標は、資料分析を進めることと、文学研究の成果を学術誌に投稿するということであった。資料分析はある程度進めているが、学術誌への投稿が思うように進んでいない。資料は、主にスペンサー伯爵夫人が、ほぼ毎日手紙を交わしていたキャロライン・ハウとの間の双方の書簡をはじめとして、多くの人々と交わした手紙(出版されておらず、そのまま残っている)や彼女がつけていた記録である。具体的に書き進めている1本(過去を語ることの手法や意味について)については、海外の査読付き学術誌への投稿に向けての準備に目途がたってきたが、当初の目標は、今年度中に出版だったので、遅れている。デヴォンシャ公爵夫人の詩の出版や公の場に出る機会と小説の出版についての態度のとりかたと、その母のスペンサー伯爵夫人の「著者」の立場に関する考え方を比較して、出版物にかんする価値観を考察する論文については、求めていた決定的な証拠がアーカイヴで得られなかったために、構想を新たにして準備中である。今年度の研究実施計画の3点目に挙げた宗教と文学をめぐる議論については、昨年度の教育書からの視点とは違った側面から新たに研究構想の範囲内に入れたい事項を探ることができた。デヴォンシャ公爵夫人の孫にあたるGeorgiana Fullerton(1812-85)の著作である。彼女の場合は、詩作と翻訳から始めたが、編集者の忠告に従い、散文の著作に切り替え、最初の小説から宗教色の濃いものであったが、カトリックへの改宗を経て、16世紀の日本のキリスト教徒を題材にした作品も出版した。この人物と作品を主体にした研究を行うつもりはないが、書くという行為と出版に関して、18世紀から19世紀のスペンサー伯爵夫人からつながる家系の女性たちの世代間の差異を、宗派による差異を考慮しながら論考に組み込んでいきたい。他に、既に校正を済ませて来年度初めに出版予定の論考と、審査にかかっている書評がある。これまでの研究成果の一部を口頭発表及び論文として発表することができた。

出版物と、出版を意図せずに書かれた個人の記録を対象として、書くことそしてそれを記録として保存するということの文化的意味を考察する研究のなかで、個人の内省描写や個人が自分の人生を語ることよって作る人間関係に注目し、個人的記録にみられる社会のなかの市民としての責任感について、そして、文学の世界と、一般の人々が請願書や手紙で形成している書き物の世界の間の関連を探ることにより、「長い18世紀」英国文学文化研究への貢献をある程度果たすことができたと考えている。『18世紀イギリス文学研究第5号』(2015年刊行予定)にスペンサー伯爵夫人の慈善について、富者の論理と、請願者の救援に値することを示そうとする語り方を考察した論文が掲載されることが決まっており、初稿の校正を終え、出版にむけて準備が進んでいる。6月の口頭発表の内容を発展させて論文にし、それを静岡大学の『人文論集』に掲載した。他に推敲中の論文が3点ある。今年度の目標は、資料分析を進めることと、文学研究の成果を学術誌に投稿するということであった。学術誌への投稿及びその準備は思うようには進んでいないが、少しずつ進展している。資料は、主にスペンサー伯爵夫人が、ほぼ毎日手紙を交わしていたキャロライン・ハウとの間の双方の書簡をはじめとして、多くの人々と交わした手紙(ごく少数の一部のものを除いて多くが出版されておらず、そのまま残っている)や彼女がつけていた記録である。「茶の流行と警戒心: When Something Exotic `Singularly' Prevailed」が『日本ジョンソン協会年報』36(May 2012)に掲載された。これは、当初、本研究とは別の研究と考えていたが、ここで注目した経済的繁栄にまつわる警戒と悪徳としての金銭欲や物欲についての考察は、2013年1月のイギリス18世紀学会(テーマ:「信用、金銭、市場」)にスペンサーの慈善と経済的成功に値すること、援助に値する貧者についての論文発表を計画する契機となった。この学会発表では、貴重な意見・助言を得ることができ、今後の研究のために非常に参考になる。なお、今年度は海外での学会発表が1件のみに終わった。英語による書評は、『英文学研究』89(Dec 2012)に掲載された。これは、動物寓意や物品の冒険などの奇想をこらしながら、人間社会を論じた作品を扱ったLaura BrownのHomeless Dogs and Melancholy Apesという研究書を論じた。人間と動物などの相違と類似から、人間のアイデンティティと近代を考察するという大きな目的をもった書物であったため、本研究への刺激になった。年度末には、日本語論文であるが、スペンサー伯爵夫人の慈善と請願者たちの手紙を分析した考察を投稿し、それは審査を受けている最中である。個人の日記や手紙などの記録の語りに注目することに変りはないが、2014年度は、物語や技法に関する議論だけでなく、宗教的側面や、政治的動向など、これまで手薄になっていた社会の動きに対する反応や思想的影響などに着目していくことを目標とした。宗教的側面については、まだリサーチが浅く、論文にまとめていくことができるような段階に至っていない。政治的側面については、一つの緒をつかむことができた。数日という短期間であったがアメリカのコロンビア大学で18世紀の人々が残した手紙などの記録についてリサーチすることができ、社会の混乱・暴動・革命を全体のテーマとした1月の英国18世紀学会にて、`Personal and Civic Concerns:for a proper and
イネ葉における光呼吸窒素代謝系関連酵素遺伝子の窒素による発現調節

炭素と窒素の接点に位置するグルタミン合成酵素(GS)とグルタミン酸合成酵素(GOGAT)には、光呼吸窒素代謝系で主に機能しているGS2とFd-GOGAT他に、まだ機能が解明されていないGS1とNADH-GOGATの分子種がある。本年度は、イネのNADH-GOGATの機能を解明することを主目的とし、免疫組織学的な解析を行い、以下の成果を得た。NADH-GOGATタンパク質は、未熟な葉身と玄米に多く発現していたことから、各々をパラフィン包埋し横断切片を作成後、抗体染色を行って組織内分布を調べた。その結果、未熟葉身では大維管束と小維管束に分布しており、維管束組織内では篩部および木部柔細胞とメストム鞘細胞に局在していた。一方、玄米では背部維管束組織の篩部および木部柔細胞、珠心突起細胞、珠心表皮細胞、およびアリューロン細胞にNADH-GOGAT抗原の強いシグナルが認められた。これらの細胞群は、通導組織と原形質連絡で結ばれている物質の流路に相当していることから、若い組織へ主にグルタミンの形態で輸送されてきた窒素を再利用する初期過程において、NADH-GOGATが極めて重要な機能を果たしていることが、非常に強く示唆される。これに対し、Fd-GOGATは、プラスチドの発達している葉身の葉肉細胞や玄米果皮の横細胞に主に存在しており、NADH-GOGATとは全く異なる組織分布を示し、機能分担をしていることが示唆された。
スポーツ栄養計算サイトの作成と公開:ITの基盤整備に呼応した大学研究窒

栄養学においては各個人の栄養摂取状況を把握することが必須であり、従来は栄養士が食品成分表に基づいて計算業務を代行することが多かった。本研究ではIT(information technology)の基盤整備の進行と、生活習慣病の一次予防として食事に対して自己責任を持つという意識の変化を踏まえて、スポーツマンに対象を絞り、インターネット上につぎのような機能を担う栄養計算サイトを立ち上げることを目的として本萌芽研究を行なった。1)使用者の入力に基づいて栄養計算を行い、スポーツマンの要求を満たす。2)インターネット・サイトを栄養調査法として活用する方法の確立をめざす。3)サイトの公開を通して、ITの基盤整備に呼応した大学としての社会的役割を負う。本サイトは栄養計算プログラムと集計プログラムから構成されており、平成16年度までに利用者の入力情報に基づいて栄養計算および統計処理を自動的に行うプログラムを作成した。平成16年11月にサイトをウェブ上に公開することが出来、本申請の最低限の条件を充たす事ができた。また、併せて栄養計算結果の自己評価のための栄養摂取目安量のサイトも開設した。今後はスポーツ栄養の基礎知識を提供するサイトなどを併設することでより充実したコンテンツを学内外のアスリートに提供するための基盤整備ができたと考えている。また、栄養計算で取り上げている食品数の増大やサイトの利用者からのフィードバックに基づいてサイトを更新する作業など、持続的な努力が本申請の成果をより高めるために必要であると考えており、研究室もそのことを踏まえての運営し、申請時に掲げた「ITの基盤整備に呼応した大学研究室」を作ってゆきたい。1)インターネット上に既にアップロードされている栄養計算サイトインターネット検索エンジン(Yahoo!Japan, MSN Web Search BIGROBEサーチ等)で「栄養計算」、「栄養診断」あるいは「カロリー計算」などのキーワードで検索すると延べ2000件を越えるサイトが検出できる。そのうちの500件について分析すると、栄養計算ソフトの宣伝サイト(113件)、ダウンロード可能な栄養計算サイト(17件)、栄養計算についての解説(24件)、栄養に関するサイトリンク(69件)、栄養計算を行っている団体の紹介(81件)などに分類された。ダウンロード可能な計算サイトには無料で栄養計算ができるものが多数含まれているが登録されている品目や栄養素が市販の計算ソフトに比べて少ない。また、入力・計算画面の見ずらいサイトが殆どであった。またアスリート専用の栄養計算サイトは今回の調査では検出されなかった。1)栄養計算サイトの立ち上げ栄養学においては各個人の栄養摂取状況を把握することが必須であり、従来は栄養士が食品成分表に基づいて計算業務を代行することが多かった。平成16年度までに利用者の入力情報に基づいて栄養計算および統計処理を自動的に行うプログラムを作成した。本サイトは栄養計算プログラムと集計プログラムから構成されている。しかしながら目標として掲げてていたサイトの公開までには技術上の問題から至っていない。平成17年度には栄養計算サイトの試験的公開を行い、不備を点検する。この試験公開はまず大学内の学生を対象として3ヶ月間行い、この間に見込まれる約50名の利用者の利用状況を分析する。この試験期間の後に学外からのアクセスを許可し、この期間に1)新たな食品(約500品目)についての栄養成分をプログラムに追加し、2)食品項目名は検索頻度に応じて入力作業が容易となるよう並び変える。
ピルビン酸キナーゼの発現型の変化を利用した膵臓癌治療法の開発

本研究の目的は、PKM2の膵癌化・進展への関与を検証し、PKMの発現型の変化が膵癌発生を阻止できるか、PKM2あるいはその標的分子が膵癌進展に対する治療標的となるかを確認することである。膵癌手術検体を用いた解析及び膵癌細胞株を用いた解析の結果、PKM2の発現はWarburg効果を促進し膵癌細胞の増殖に関与している可能性が示唆された。癌特有の代謝(Warburg効果、酸素が十分にある状態でも好気性ではなく嫌気性呼吸を行う)にピルビン酸キナーゼtypeM2 (PKM2)が関与している。我々の基礎検討により膵癌においても癌の進展にはPKM2が関与していることが明らかとなった。さらに、PKMの発現型の癌化への関与や癌代謝への役割を追求すべく、我々は世界に先駆けてPKM1、PKM2それぞれのノックインマウスの作製に成功した。このマウスを用いPKM発現型の膵癌化への関与を検証し、PKM2の発現抑制あるいはPKM1の発現上昇によるPKMの発現型の変化が膵癌発生・進展を阻止できるかを確認することが本研究の目的である。本年度は:1)ヒト手術検体の膵癌癌病変と非癌上皮をマイクロダイゼクションにより削りだしPKM2の発現を検討;2)PKM2発現抑制膵癌細胞とコントロール細胞において網羅的にメタボローム解析を行った。その結果、膵癌病変でPKM2の発現が高いことが確認された。また、メタボローム解析にては、解糖系産物の貯留がみとめられ解糖系が抑制していることが明らかとなった。PKM2下流のシグナルを同定すべく、cDNAマイクロアレイによる網羅的解析も施行し、現在その結果を解析中である。本邦において2003年2005年に診断された膵癌患者の5年相対生存率は7%と報告されている。この生存率はあらゆる癌種の中で最も低く、20%を下回るのは膵癌のみである。19931996年に診断された膵癌例の5年相対生存率は6.5%であり、様々な診断法や新しい抗がん剤が開発されてきた10年の時を経ても、生存率に大きな改善はみられていない。膵癌患者の予後改善のためには、転移細胞や高度の悪性化形質を獲得した癌細胞を相手にした画期的な治療戦略を立てる必要がある。このマウスを用いPKM発現型の膵癌化への関与を検証し、PKM2の発現抑制あるいはPKM1の発現上昇によるPKMの発現型の変化が膵癌発生・進展を阻止できるかを確認し、膵癌の治療標的と成りえるか検討することが本研究の目的である。前年度はヒト膵癌病変においてPKM2が高発現していること、膵癌細胞においてPKM2の発現抑制にて解糖系が抑制されることを明らかにした。本年度は、PKMの発現型の膵癌化への影響を解析すべく、PKM1およびPKM2ノックインマウスそれぞれとPdx1-cre; K-ras G12Dを交配させ、継時的に癌化との関連を検討している。PKMの発現変化による代謝の変化を同定するとともに、PKM1あるいはPKM2のみを発現する遺伝子改変膵癌マウスの作製が順調であるため。PKMのスプライシングを標的にした膵癌の新しい治療法開発を最終目標に以下のことを行った。1)膵癌手術検体を用いたPKM1とPKM2の発現膵癌手術摘出検体10例の癌部と正常膵管をマイクロダイゼクションを用いて削りだし、RNAを抽出した。Real-time RT-PCRによってPKM1とPKM2の発現を比べた。その結果、PKM2の発現は正常膵管、癌部ともにPKM1と比べ有意に高発現していた。また、PKM2の発現値は癌部で正常膵管に比べ有意に高値を示した。2) PKM2の標的分子の同定siRNAを導入してPKM2の発現を抑制した膵癌細胞株とそのコントロールを用いてcDNA arrayにて網羅的遺伝子解析を行った。その結果、細胞周期関連遺伝子がPKM2の下流に存在することが示唆された。また、同様にメタボローム解析を行うと、PKM2の発現抑制によって乳酸の産生が抑制されるとともに、ポリアミンであるspermineの産生が低下していた。以上より、PKM2の発現はWarburg効果を促進し膵癌細胞の増殖に関与している可能性が示唆された。3) PKMの発現型の膵癌化への影響PKM1ノックインマウスとPdx1-cre;K-ras G12Dを交配させ、PKM2の発現がない状態で膵癌癌化を検討した。その結果、膵癌は形成された。現在、コントロールと詳細に比較して、PKM2発現の有無が膵癌化に及ぼす影響を解析中である。以上より、PKM2の発現は、膵癌の悪性化機構に重要な役割を果たしていることが明らかになった。

本研究の目的は、PKM2の膵癌化・進展への関与を検証し、PKMの発現型の変化が膵癌発生を阻止できるか、PKM2あるいはその標的分子が膵癌進展に対する治療標的となるかを確認することである。膵癌手術検体を用いた解析及び膵癌細胞株を用いた解析の結果、PKM2の発現はWarburg効果を促進し膵癌細胞の増殖に関与している可能性が示唆された。PKM2の膵癌検体での発現上昇の確認、メタボローム解析による解糖系への関与を確認できた。PKMの発現型の相違が膵癌化、癌進展にどのように関与しているのか遺伝子改変マウスを継時的に解析する。また、分子機序について網羅的遺伝子解析を行う。消化器外科学PDX-1-cre; KrasG12DマウスとPKM1ノックインマウスの交配を行い、膵癌化へのPKMの関与を明らかにしていくとともに、マイクロアレイの結果を解析しその下流のシグナルを同定する。網羅的遺伝子解析の頻度が少ないため。メタボローム解析の回数が予定より少なかったため。PKM発現型の異なる遺伝子改変膵癌マウス病変からRNA、microRNAを抽出し網羅的遺伝子解析やメタボローム解析を行う。メタボローム解析をさらに行い、マウスの遺伝子解析を行う。
携帯電話双方向通信を用いた産後女性への骨盤底筋訓練支援による尿失禁の改善と予防

産後に一般的におこなわれている骨盤底筋訓練の指導を受けた褥婦に登録翌日から8週間、毎日、システムから骨盤底筋訓練を支援するメールを携帯電話へ自動配信し、褥婦から骨盤底筋訓練実施回数を返信してもらう機能を備えた双方向通信システムの構築をおこなった。その結果、携帯電話双方向通信システムを使用した褥婦の骨盤底筋訓練の実施率、1週間あたりの実施日数が有意に向上し、このシステムの有効性が示唆された。本研究の目的は、産後女性への骨盤底筋訓練を支援するツールとして携帯電話双方向通信を用いることで骨盤底筋訓練のコンプライアンスを向上させ、尿失禁を改善、予防することである。本年度は、大阪大学医学系研究科保健学専攻の倫理審査の承認を受けた後、産科診療所1か所を研究実施施設として予備調査を開始した。研究実施施設の研究協力者との数回の打合せにより研究プロトコールの微調整をしながら対象者への研究説明文書、同意書、携帯電話双方向通信システム登録方法マニュアル、IDカード、FUISQ(尿失禁種類と重症度判定問診票)を盛り込んだ調査票、返信用封筒を完成させた。同時に骨盤底筋訓練支援研究の携帯電話双方向通信システムを株式会社アールタイムとともに立ち上げ、システムの構築を重点的におこなっている。また、日本助産学会へ参加し、研究に関する情報収集もおこなった。予備調査の具体的内容は、研究実施施設で1週間に1度開催される集団指導後に、研究代表者が対象者のリクルートをおこない、携帯電話双方向通信システムへの登録作業を進めることと、研究実施施設で分娩した全褥婦へ研究協力者が調査票を配布し、回収することである。次年度は、さらなる症例数を増やし、予備調査の集計結果を報告する予定である。この研究の意義と重要性は、従来おこなわれてきた産後の保健指導の方法に携帯電話双方向通信を活用することによって、指導内容のコンプライアンス向上、尿失禁の有病率の低下、尿失禁で悩む産後女性のQOLの向上が期待できることである。本年度は、昨年度に引き続き、産科診療所1か所を研究実施施設として予備調査における対象者のリクルートをおこなった。同時に対象者への研究説明文書、同意書、携帯電話双方向通信システム登録方法マニュアル、IDカード、FUISQ(尿失禁種類と重症度判定問診票)を盛り込んだ調査票、返信用封筒を追加作成した。次年度は、さらなる症例数を増やし、予備調査の集計結果を報告することと、株式会社アールタイムとともに本調査用の骨盤底筋訓練支援研究の携帯電話双方向通信システムの改良、実施を予定している。本研究の目的は、産後女性への骨盤底筋訓練の支援と管理を携帯電話双方向通信(メール機能)を用いておこない、骨盤底筋訓練のコンプライアンスを向上させ、尿失禁を改善・予防することである。また、産後に多忙な女性に携帯電話による双方向通信が保健指導の管理や記録として活用できるかについての可能性を探求することで、今後の新しい保健指導のあり方を探索することである。本年度は阪大学医学系研究科保健学専攻の倫理審査の承認を受けた後、携帯電話双方向通信システムの有効性を検証するため、産科診療所1か所を研究実施施設として臨床試験を開始した。研究実施施設の研究協力者との数回の打合せにより研究プロトコールの微調整をしながら対象者への研究説明文書、同意書、同意撤回書、携帯電話双方向通信システム登録方法マニュアル(ドメイン解除マニュアル)、骨盤底筋訓練指導用リーフレットを作成した。また、スマートフォンの普及により大きなデータ通信が可能となったためFUISQ (尿失禁分類判定用問診票)を盛り込んだ調査票や基礎データ収集を双方向通信システム上で収集できるようにシステムの再構築をおこなった。また、大阪大学医学部付属病院未来医療開発部データセンターにサンプルサイズの算出を依頼し、被験者数など設定をおこない無作為に被験者を割り当てられるようにした。得られたデータは大阪大学看護学雑誌に論文掲載し、International Council of Nursing 25th Quadrennial Congress (ICN)で発表した。この研究の意義と重要性は、従来行われてきた産後の保健指導の方法に携帯電話双方向通信システムを活用することによって指導内容コンプライアンスの向上、産後女性の尿失禁有病率の低下、尿失禁で悩む産後女性のQOLの向上が期待できることである。

本研究の目的は、産後女性への骨盤底筋訓練の支援と管理を係蹄電話双方向通信システム(メール機能)を用いておこなうことで、骨盤底筋訓練のコンプライアンスを向上させ、尿失禁を改善・予防させることが目的である。本年度は、552名を対象に産後直後と産後8週間の尿失禁症状、骨盤底筋訓練の実施状況を質問紙調査票を用いて実態を把握した。通常の産後ケアとしておこなわれている骨盤底筋訓練のコンプライアンスが把握できる貴重なデータとなった。また、20名の対象に携帯電話双方向通信システムを用いて骨盤底筋訓練支援の介入予備調査を終了させた。携帯電話だけでなくスマートフォンに対応するシステムへ改良する必要性が浮き彫りとなった。現在、システムの改良作業を進めている。スマートフォンへシステムを移行することにより、質問紙を使用していた調査内容をWeb上で調査することが可能となり、さらに多くの症例数の獲得も期待できる。得られたデータは、第2回(第26回)日本助産学会、第53回日本母性衛生学会、16th The East Asian Forum of Nursing Scholars (EAFONS)に参加し、結果を発表した。この研究の意義と重要性は、従来行われてきた産後の保健指導の方法に携帯電話双方向通信システムを活用することによって、指導内容ンコンプライアンスの向上、産後女性の尿失禁有病率の低下、尿失禁で悩やむ産後女性のQOLの向上が期待できることである。現時点でのデータの一次解析で、携帯電話の双方向通信を使用することは、骨盤底筋訓練のコンプライアンス向上に寄与していることが示唆されている。そのため、目的はおおむね順調に進展していると考えている。25年度が最終年度であるため、記入しない。平成22年度から24年度に、携帯電話双方向通信システム構築と介入予備調査が終了し、当初の計画通りに進行しているため。現時点で予備調査のデータ収集は終了している。育児休業取得により、研究遂行が1年間中断されるが、復職後、速やかに本試験を開始できる準備を整えている。次年度は、携帯電話双方向通信システムをスマートフォンに対応できるよう改良を進めており、本試験であるランダム化臨床試験を展開予定である。本試験の倫理審査の申請準備も進んでおり、研究実施計画に従い順調に進展している。
神経障害性化学物質の作用機序と毒性予測

神経障害性化学物質の作用機序を明らかにし、神経毒性未知物質の作用の予測を可能にするため、各種神経培養細胞系の確立、それによる神経障害の評価およびin vivoにおける神経毒性との比較をおこなって以下の成績を得た。1.各種神経培養系の確立(1)ニューロブラストーマおよびシュバノーマ:それぞれのセルライン。(2)網膜細胞神経突起:ニワトリ胎児の網膜細胞神経突起培養を確立した。(3)脊髄神経節細胞:ラット胎児の脊髄神経節培養系を確立した。(4)胎児大脳神経細胞:ラット胎児大脳より神経細胞培養系を確立した。2.各種化学物質の神経毒性作用(1)アクリルアミド誘導体の作用:上記各種神経培養系に対する誘導体の作用をしらべ、これとin vivoの神経毒性とを比較した。誘導体は、ニューロブラストーマに形態変化と成長阻害を、またシュバノーマには成長阻害をもたらした。網膜細胞神経突起に対しては、突起伸展阻害と変性をおこした。脊髄神経細胞に対しても阻害有効濃度と神経毒性が高い相関を示した。大脳神経細胞についても同様の結果を得た。しかし、ビスアクリルアミドのみは神経毒性と細胞毒性が一致せず、in vitroの評価法の限界も明らかとなった。(2)アルコール、アセトアルデヒドの作用:これらの大脳神経細胞への作用をしらべ、アセトアルデヒドの強い阻害作用とGSHの保護作用を認めた。(3)各種無機重金属の作用:水銀、鉛他9種の無機重金属のニューロブラストーマ、シュバノーマおよび大脳神経細胞への毒性は、イオンポテンシャル、ケミカルソフトネスと高い相関を示すことが明らかとなった。3.毒性予測各種培養神経細胞に対する化学物質の作用は、動物に対する神経毒性と相関が強く、有用な毒性予測法となる。1.アクリルアミドと関連誘導体のニューロブラストーマ及びシュワノーマへの毒性を調べて以下の結果を得た。(1)細胞毒性はE【D_(50)】で比較すると、9化合物中アクリルアミドとN-ハイドロキシメチルアクリルアミドが強かった。(2)アクリルアミドはニューロブラストーマに変性を起し、かつ細胞成長も阻学し、シュワノーマに対しては形態に変化を起すことなく細胞成長を阻害した。(3)ジブチリルサイクリックAMP(dBcAMP)はアクリルアミドの毒性を軽減した。(4)【^(14)C】-アクリルアミドの細胞によるとりこみ実験から、両細胞系には高親和性と低親和性の結合部位があり、細胞をdBcAMP処理した細胞では高親和性部位が消失していた。(5)【^(14)C】-アクリルアミドの細胞内分布をみると、大部分の放射活性は15,000g×20分上清に存在した。(6)以上の結果から、幼若細胞は成熟細胞に比べアクリルアミドに対してより影響を受けやすいと考えられた。2.アクリルアミドと関連誘導体の網膜細胞の神経突起伸展への影響を調べて以下の結果を得た。(1)培養系にアクリルアミドを0-5mM加えると、濃度依存的に突起伸展を阻害した。(2)あらかじめ突起を持った細胞にアクリルアミドを添加すると、神経突起の変性が認められた。(3)同様の結果が神経毒であるN-ハイドロキシメチルアクリルアミドで得られ、非神経毒であるクロトンアミドでは得られなかった。このことから本培養系は神経毒物のスクリーニングに有用と考えられた。3.今後せき髄神経節等に対する誘導体類の毒性を、神経障害性,代謝,毒性修飾因子等との関連で調べる。1.アクリルアミドと関連誘導体のせき髄神経節(DRG)への毒性を調べて以下の結果を得た.

(1)DRGに神経成長因子を添加すると神経突起伸展が認められ,この伸展に対する化合物の毒性はED_<50>で比較すると, 7化合物中アクリルアミドとNーハイドロキシメチルアクリルアミドが強かった.(2)ED_<50>とラットのLD_<50>との間に有意の相関が認められたことから,本培養系は毒性スクリーニングに有用と思われた.(3)ATPとADPはアクリルアミドのDRGへの毒性を軽減したが,ピルビン酸は無効であった.(4)アクリルアミドは解糖系酵素を阻害することから,培養細胞のATP産生を抑制すると考えられ,その結果DRGからの突起伸展が低下すると考えられた.一方, ATPやADPは細胞にとりこまれ, ADPはATPに変換された後にアクリルアミドによって減少したATPを補うので,突起伸展が持続すると考えられた.2.ニューロブラストーマとシュワノーマへの鉛,水銀,タリウムの毒性をしらべた.細胞毒性はED_<50>で比較すると,いずれの細胞でも鉛が最も強かった.両細胞は金属類の毒性実験にも有用と思われた.3.アクリルアミドは小脳星状膠細胞の増殖を著明に抑制した.無処置及びインターロイキン1処置後のチミジンのDNAへのとりこみが著明に抑制され,細胞分裂阻害剤処置後はDNAへのとりこみに変化なく,また蛋白量も減少が見られなかったことより,アクリルアミドの効果は主に星状膠細胞の細胞分裂抑制にあると示唆された.この培養細胞系も,化学物質の神経障害機序および毒性予測の研究に有用と判断された.神経障害性化学物質の作用機序および毒性予測の研究のため、本年度は以下の研究をおこなった。1.ラット胎児大脳神経細胞培養法の基礎的検討(1)妊娠日令の検討:妊娠期間の異なる母親ラットから摘出した胎児について、大脳神経細胞の培養をおこなった結果、妊娠1718日令から得た胎児大脳が最も培養に適していることが明らかとなった。(2)ポリリジンによるディッシュコーティングの検討:培養ディッシュのポリーL.リジン(PLL)によるコーティングの最適条件を検討し、2μg/mlホウ酸緩衡溶液によるコーティングで最も良好な結果を得た。(3)血清添加の検討:血清含有培地を細胞分裂阻害下で用いるよりは、無血清培地を用いた場合、より良好な培養結果を得ることが判った。2.アクリルアミド誘導体の神経毒性作用1.の基礎的検討によって確立した大脳神経培養系に対する作用を調べた。誘導体の作用は濃度に依存し、in vivoの神経毒性と高い相関を示した。しかし誘導体の1つであるメチレンビスアクリルアミドは、培養系に対して強い作用を示したが、動物に対する投与では神経毒性を示さず、物質によっては細胞系による毒性評価は慎重でなければならない。3.アルコールおよびアセトアルデヒドの作用大脳神経細胞に対する2物質の作用をしらべ、アセトアルデヒドの強い阻害作用と、これに対する還元グルタチオンの保護作用を認めた。4.各種無機重金属の毒性作用同上系を用いて、水銀、鉛、亜鉛、カドミウム、タリウム、銅、マンガン、クロム、鉄、ニッケル、アルミニウムの作用を調べた。これら金属の毒性は、そのイオンポテンシャル、ケミカルソフトネスパラメータと有意な相関を示し、金属の神経毒性予測に有用なことが判った。