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ジェンダーの視点から見た戦前における女子体育教師の確立過程：個人史の立場から

他の女子中等学校同様,教員養成を目的とする官立学校出身者が次第に減少し、短期養成の私立学校出身者に代わって行くが,他の女子中等学校より官立学校出身者の割合が高く、1926(大正15)年が37. 5%で最も低くなるものの、昭和になっても微増し4割以上を維持していることが明らかになった。他の女子中等学校より,女子師範学校の教育が重視されたと思われ,官立出身者が優先的に配置されていたことを論文にまとめた。外地の1926(大正15)年以降の戦前の師範学校・女子師範学校の女子教員配置状況,受持ち教科数,受持ち教科名,出身校等について体操科教員を中心として内地と比較しながら中国で開催された国際学会でポスター発表した。次に、体操科と他教科との勤続年数を比較するため、全教科の女子教員の勤続年数を分析中であるが、1939(昭和14)年度の全高等女学校およそ1万人におよぶ女子教員の卒業年と卒業学校を基に分析中であり、まだ終えていない。1906(明治39)年には体操科を担当していた教員が1939(昭和14)年には作法と裁縫を受け持ち、勤務し続けている事例などを確認できており、個人史料を収集し個人史をまとめている途中である。三カ年の研究期間の二年目にあたる平成29年度の研究進捗状況は、昨年度同様やや遅れている。昨年度の遅れを取り戻すことができなかった。本研究のエフォート率35%を守れなかった決して言い訳にはならない第一の原因は、本課題以外に科研費研究成果公開促進費学術図書の交付を受けて、出版の校正作業に追われたことである。第二の原因は数個の学会の会長や役員等の仕事、特に体育学研究編集委員の仕事量が膨大であったことである。本研究自体の遅れの原因は、史料収集と分析に時間を予想より要したことである。本研究の目的は、個人史の立場から戦前における女子体育教師の確立過程をジェンダーの視点から検討することであった。官立学校では、女高師国語体操専修科(1903-1911)と第六臨教家事科第一部、体操家事科(1914ー1939)のみが体操科教師を養成していた。本年度は両校の卒業生の在職期間、在職学校、職業継続と結婚の関係、異動状況、体操科と国語、体操科と家事科の担当状況を一連の両校の「一覧」や各女学校史料や学校史、年各度『中等教育諸學校職員録』などを用いて明らかにした。ここでは職業継続と結婚、担当教科のみを述べる。国語体操専修科卒業生は、各期とも卒業後次第に在職者数が減少し、卒業後7年から12年、25歳から30歳程度で過半数が非役となっていた。例えば、1923(大正12)年までの未婚者中、15人(44.1%)が継続していたが、既婚者54人(61.4%)中、中断せずに継続した者は3人(5.6%)に過ぎなかった。採用のために国語と体操を併せて学んだが、4期88人中40人は体操科のみの教員免許状を得ていた。長年在職している場合は、国語と体操科併任から体操科のみの担当になっていた。第六臨教家事科第一部、体操家事科卒業生の在職率は卒業後次第に低くなり、特に既婚者の在職率が低かった。1939(昭和14)年で見ると、未婚者53.6%、既婚者22.8%の在職率であった。体操科と併せた担当教科を見ると、家事、裁縫のほか、音楽、国語、作法等の免許外教科も受け持っていた。そして、これらの教科は体操科、家事科に加えて、長い間、女子教師が活躍する教科となっていく。ジェンダーの視点から見て、結婚が職業継続を困難にし、女子体育教師が養成されてもその数は増えなかった。しかし、1939(昭和14)年において、体操科担当として長年職業継続した極少数の女子教師によって、女子体育教師が確立されようとしていた。昨年度の進捗状況の遅れを反省し、学会運営の業務を辞退したことにより、昨年度より時間を取れる体制に入っている。本年度は、昨年度の遅れた分を取り戻しながら今年度の研究を進めて行きたい。
包括的スコアリング・システムによるロールシャッハ・テストの標準化に関する研究

本研究は、近年、わが国においても導入され始めた包括的スコアリング・システムにより大学生を対象にロールシャッハ・テストを実施し、大学生の標準標本を得るとともに、本スコアリング・システムの問題点を明らかにしようとしたものである。地域文化差を考慮して、東北、関東、上越、東海に位置する7つの大学で調査を実施し、男子39名、女子43名の計82名のデータを得ることができた。その結果、以下のような知見を得た。1.個性的な反応が多く、従来のスコアリング基準では現実検討の低下と判断されるような反応も多く認めるものの、性反応や作話反応といった類の反応は認めなかった。2.理系と文系では、文科系の学生に反応が多く産出されていた。3.包括的システムでは全体的に形態水準が低下しがちで、形態水準のスコアリングに際してアメリカでの基準をそのまま採用する場合には、解釈にあたって基準値に若干幅をもたせる必要があろう。4.反応領域の分類に関しては、従来のシステムに比べて包括的システムは大学生の反応をよく説明している。5.言語の違いにより、すなわち英語では反応が単数か複数かがすぐわかるが日本語ではわからず、ペア反応の産出が少ない。6.同様に、文化的な要因によるものと思われるが、反応内容では植物反応は比較的多く、本システムでは自然反応と風景反応とで孤立指標を想定しているが、この指標の解釈にあたっては慎重さが求められよう。7.結局、本スコアリング・システムが解釈を進める際、数量的アプローチを取っていることを考慮すれば、形態水準、ペア反応そして孤立指標の解釈にあたっては注意が必要である。
精細管における脂肪酸代謝の特異性の解析

精子発生における脂肪酸β酸化系の役割を明らかにするために、精上皮におけるミトコンドリア脂肪酸β酸化系酵素の局在を解析した。研究開始当初、精細管に脂肪酸β酸化系はほとんどない、あるいは極端に少ないと思われた。しかしその後の検討の結果、精上皮ではミトコンドリアの脂肪酸β酸化系がSertoli細胞にのみ存在し、一方で精子発生細胞(精祖細胞・精母細胞・精子細胞)には存在しないということが明らかになった。【目的】精巣における脂肪酸β酸化系の特異性という観点から、ラット精子発生過程の生殖細胞における栄養代謝の変化を解析し、形態形成や運動能など精子の質との関係を明らかにする。その第一歩として、精細管における脂肪酸代謝系関連遺伝子群の発現の動態を記載する。【成果】1.ラット精巣において、脂肪酸β酸化系酵素群の局在の解析を行った。蛍光抗体法および免疫電顕法により、脂肪酸β酸化系酵素群は精巣問質に多く検出され、また精細管の精上皮にもわずかに見られた。精上皮における局在を詳細に解析すると、脂肪酸β酸化系酵素群の多くはセルトリ細胞に局在し、生殖細胞には見られなかった。また、いくつかの酵素については生殖細胞にも局在が見られたが、それは精祖細胞および一部の精母細胞に限定されており、それ以降の発生過程の精子細胞には見られなかった。2.ラット精巣より分離した精細管および精巣問質のホモジネートを用いて、ウェスタンブロッティングによる脂肪酸β酸化系酵素蛋白の定量を行った。多くの蛋白の量は、精細管では精巣間質に対してほぼ10分の1以下であった。3.ラット精巣より分離した精細管および精巣間質から抽出したRNAを用いて、DNAマイクロアレイによる遺伝子発現の綱羅的解析を行った。脂肪酸β酸化系酵素群の多くは精細管では精巣問質の数分の1であり、ウェスタンブロッティングの結果と一致した。一方、いくつかの酵素は精細管において精巣間質の数倍多く検出された。精細管と精巣問質の2倍以上の発現差が検出された遣伝子は約10,000個あり、そのうち栄養代謝(糖、脂肪酸、ケトン体、乳酸、TCA回路)に関連するものは約50個あった。【意義】脂肪酸代謝の観点から、精細管内では栄養代謝が特殊であると考えられる。特に、セルトリ細胞より構成される血液精巣関門を境にして大きく異なることが示唆された。【研究の目的】精上皮におけるミトコンドリアβ酸化系の役割を明らかにする。【研究の成果】研究開始当初、精細管に脂肪酸β酸化系はほとんどない、あるいは極端に少ないと思われた。しかしその後の検討の結果、精上皮ではミトコンドリアおよびペルオキシゾームの脂肪酸β酸化系がSertoli細胞にのみ存在し、一方で精子発生細胞(精祖細胞・精母細胞・精子)には存在しないという中間的結論を得た。現在、Sertoli細胞のミトコンドリア脂肪酸β酸化系が存在するという内容で論文を執筆中である。【現在の実験】分離した精細管、単離したSertoli細胞および精子発生細胞において、Western blot法、蛍光抗体法、免疫電顕法、およびDNAマイクロアレイ法により、脂肪酸β酸化系を含む栄養代謝関連系(脂肪酸輸送系、脂肪酸分解系、ケトン体代謝系、解糖系など)の遺伝子発現量および蛋白量を計測・比較し、その存在について検討している。【研究の意義】従来、精上皮における栄養代謝は、解糖系とそれに続く乳酸・ピルビン酸代謝によると考えられてきた。しかし本研究により、脂肪酸β酸化系も関与することが示唆された。脂肪酸β酸化系が一般的な栄養代謝系であるにもかかわらず、精上皮ではSertoli細胞にのみ存在し精子発生細胞では欠落している意義について、Sertoli細胞と精子発生細胞との相互作用の観点から考える必要がある。培養Sertoli細胞や生殖幹細胞などin vitroにおける脂肪酸β酸化系の存在を調べると共に、精子発生におけるSertoli細胞での脂肪酸β酸化系の役割を解析する必要がある。
西アフリカにおける援助活動による住民組織化へのインパクトに関する研究

本研究は異なる学問分野つまり文化人類学、環境デザイン学、住居計画学を専攻する4人の研究者により組織され、学際的な方法で西アフリカにおける住民参加型開発と住民組織の形成の問題を解明することを目的として実施され、具体的な研究過程で二種のアプローチがとられた。その第一は、西アフリカ諸国で展開されている住民参加型開発に関する資料・文献の収集におかれた。とくに、マリ国、ギニア国、ギニア・ビサウ国、ケープ・ベルデ国などについて、国内外の非政府組織の活動事例を中心にデータが収集された。各国で民主化の進行や地方分権化政策の浸透の影響で、都市部や村落で住民組織化が活発に行われていることが判明した。またフランスのECOFACやCUREFACなどの国際的な援助機関や研究機関で資料を収集し、国際的な援助の導入に関し地元における政治文化的な対立が存在し、それらの情報を予め確認する必要が判明した。第二としては、マリ共和国の中部および南部の各地で現地調査を実施した。南部の農村地域では、近年の地方分権化政策の導入によって、多様な形態の住民組織が誕生していた。それらは基礎教育、成人教育、保健衛生、医療、環境保全などを目的にしているが、自助努力を目標とする女性組織が多数を占める傾向の中、障害者の組織や、地方の伝統文化維持・保全の組織の登場が注目に値する。歴史都市ジェネの調査では、生活改善、環境保全、文化資源の活用など都市保全や居住環境の問題が存在することが判明した。台湾など東アジアの研究の成果から、地域の活性化の支援策を提言した。近代的な建築が建設されつつある首都バマコでは建設現場でのヒアリングの調査から、地方から伝統的な職人が移住し、みずからの組織を形成するなどの変化が進行していることを明にした。研究代表者赤阪は研究の統括とともに、西アフリカで展開中の内外NGO/NPOの活動や住民参加型開発の事例から住民組織化の問題に関する資料収集に努めた。マリ国南部地域において住民組織化の調査を実施した結果、地方分権化政策で結成されたコミュンの各農村において、基礎教育、成人教育、保健医療や環境保全等の分野で、多種多様な住民組織の自立・自助努力に向けた活動実態を把握し、中でも貧困撲滅のスローガンを掲げた女性組織の結成が特筆された。研究分担者三橋は発展途上地域の近代化に伴う水辺環境の変化、都市衛生環境の悪化、建造物修復、学校教育等の諸課題に関する資料収集に努めた。マリ中部地域を対象に女性の識字教室、石けんづくり、藍染め、泥染めの共同生産組合等の活動に関する調査を実施し、機械導入による女性労働の軽減、伝統技術の保存と活用、高齢者の役割等、内発的発展に向かう可能性について認識を新にした。砂漠化に直面するジェネの場合には、生活・環境改善のための適正技術開発、伝統的文化資源の保全と活用、住民のCapacity Buildingの推進等、内発的発展に寄与すべき支援の重要性を指摘した。竹内はカーボベルデ国の社会文化状況に関する文献収集を実施した。国際協力機構(JICA)の水産技術及び地下水開発に対する援助に関して担当職員から聞取り調査をおこない、同国にはアフリカに文化的シンパシーを持つ南部諸島とヨーロッパに文化的シンパシーを持つ北部諸島の間で政治文化的な対立状況があり、開発援助に際してこのような対立状況の把握が前提となることが看守された。サコはマリの歴史的都市ジェネにおける都市保全や居住環境の改善問題に取り組む住民活動に関する資料の収集に努める傍ら、マリの首都バマコ地域において伝統的な職人組織と近代的な建築業者との間で生じつつある諸問題について都市計画学の視点から実態調査を実施した。

研究代表者赤阪は、研究の統括とともに西アフリカで展開中されている種々の非政府組織が関与する住民参加型開発の事例を収集することに努めた。また、昨年度実施したマリ国南部地域における住民組織化の補充調査を実施した結果、地方分権化政策のもと農村地域のコミュンにおいて多種多様な住民組織が結成され、基礎教育、成人教育、保健医療や環境保全等の分野で自立・自助努力に向けた活動が展開される実態を把握した。いっぱんに女性組織の結成が多い中に、障害者の自助組織や地方の伝統文化維持を唱える組織などユニークな活動も注目にあたいされる。研究分担者三橋は日本・台湾など東アジア地域において地域文化振興の拠点となる住民組織の研究を実施してきたが、その成果をふまえアフリカにおける地域活性化支援の方策に関して具体的な提言を用意した。また、昨年度マリ国中部地域において実施したジェネの事例報告において、砂漠化に直面し生活・環境改善のための適正技術開発、伝統的文化資源の保全と活用、住民の能力開発の推進等、内発的発展に寄与するため必要な支援の具体策を提示した。研究分担者竹内は前年度にひきつづきギニア・ビサウ、カーボベルデなど旧ポルトガル植民地諸国に関する資料収集を継続した。さらに、フランスにおいてEUの援助・研究機関(ECOFAC)や中央アフリカにおける森林生態保存・合理的利用を目的とする国際機関(CUREFAC)が実施しているNGOとの連携について聞き取り調査を実施した。国際的な援助に関して地元にヨーロッパにたいする文化化的シンパシーの有無をめぐり深刻な政治文化的な対立状況があり、開発援助に際してこのような状況の把握が前提となることが改めて確認された。研究分担者サコは都市計画学の視点から従来実施してきた歴史的都市における都市保全や居住環境の改善問題に取り組む住民活動に関する研究を踏まえ、マリの首都バマコ地域における建設現場でのヒアリング調査から、近代的な建築の現場で地方の伝統的な職人組織が移行しつつあることを確認し、近代化のプロセスの中で伝統的組織のインパクトが存在する実態を指摘した。
配慮を要する学生を対象とした大学内就労移行支援システム創出の試み

目的:配慮を要する学生の卒業期支援として学内に就労移行支援体制を創出する。方法:1キャリア支援センター・学内外受入機関等と連携したプログラム作成、2特別支援クラス34年生・既卒生、教職員紹介によるクラス編成、3週1回ワーク、学内就労体験、移行事業所見学、本人・保護者面接等を行う。結果:プレワーククラス登録者17名中、卒業生・退学生13名中、就職3名、アルバイト2名、移行事業所通所6名、大学院進学1名、未決定1名(決定率92%)となり、就労行動段階スコアでは全員が上昇し、13名の平均値は6.1/7となった。考察:就労が困難な精神・発達障害学生を在学中から支援する試みとして一定の成果を得た。本研究は、近年急増する配慮(大学不適応、身体・精神・発達障害等)を要する学生への卒業期支援として、卒後就労への橋渡しを担う就労移行支援施設と同等のシステムを学内に創出し、正規就労につなぐ移行の道筋と実体験の場を在学中に学内で提供することにより、特に就労が困難な精神障害や発達障害学生の就労促進を教育的支援の視点から支援するシステム構築を目的としてスタートした。H27年度研究計画のフレームは、STEP1:就労体験先確保、ネットワーク構築、STEP2:キャリアクラス設置、社会性演習開講STEP3:就労体験プログラム実施の3段階を予定。本研究がヒトを対象とした研究に該当することから、学内の倫理委員会での承認を受ける必要があったため、実施許可がおりた平成27年9月中旬以降に研究を開始した。H27年度後期に実施した活動は以下の通りである。1、参加学生のピックアップ、学生・保護者に面接及びインフォームドコンセント2、キャリア(プレワーク)クラス設置(初年度登録8名)3、社会性演習開講(毎週月曜日34時限に実施)4、就労体験先確保(計3ヶ所学内提携企業2社:食堂運営会社、施設設備管理会社、学内部所:図書館)5、ネットワーク構築(キャリア支援センター事務部長、課長、障害学生担当主任とのミーティング、学外就労移行支援施設3ヶ所との連携)6、就労支援プログラム実施(上記学外就労移行支援施設からの出張講座1回、就労移行支援施設訪問3回、合同企業説明会参加1回)7、学内特別支援インターンシップ実施(参加学生延べ計7名)、受入先担当者とのフィードバックミーティング8、全体活動に関する振り返り、学生の個別面談(週1回)開始が大幅に遅れたため、初年度の計画内容(上記18)はやや遅れて進行している。初年度プレワーククラス登録者7名(4年次生6名、3年次生1名)のうち、3名は就労移行支援施設に登録・通所、3名はキャリアトライアルクラス(既卒生のキャリア支援クラス)へ進み継続、1名は3年次生であったため4年次に進級し継続となった。一通りのプログラム計画は実施したが、反省点として、1研究代表者と学修支援コーディネーターという少数体制では限界があること、2すべてが小規模であったため次年度はもう少し幅広く学生を集めたい。キャリア支援センターとの連携に関しては、事務担当者・障害学生担当者とも初めてのミーティングで配慮を要する学生対応の件で実務のお話を聴くことができたこと、キャリア支援センターの月曜日に学修支援コーディネーターがいることなど、ようやく認知されてきている。ただ、実務レベルでの連携稼動には時間を擁すると思われる。1、プレワーククラスおよびプログラムの基本体制実施日:ワークプログラム毎週月曜日3限・個別面談毎週月曜日4限・その他学内外同行は随時、場所:キャリア支援センター、対象:配慮(障害)学生、ピアコミュニケーション受講、ピアルーム利用学生、教職員・学生相談室からの紹介学生、主に3・4年生・既卒生など、参加要件:本人の意欲及び文部科学省「人を対象とした研究に関する倫理規定」により本人・保護者の同意があること、期間:2016年10月2017年3月2、プレワーク活動報告(H27年度後期H28年度))実施回数:プレワーククラス56回(登録者数22名、参加人数320人・延べ数)、個別面接95名(延べ)、活動62回活動内容:学内就労体験(図書館3名、書店1名、学食6名、清掃2名、パン屋1名)・依頼相談・事前打合せ・振り返り、就労移行支援事業所見学(13回・23名、以下移行事業所)・体験(12名)、移行事業所学内出張講座(6回)、合同会社説明会同行等3、結果クラス登録者17名(実数)中、就職決定者(障害者枠)3名、アルバイト1名、移行事業所通所決定者5名、大学院進学1名、在学生4名、卒業生・退学生13名中進路未決定3名(進路決定率81%)となった。また、プレワークによる就労への行動様相変化をスコア化した段階指標(0:プレワーク参加申請・保護者同意、1:プレワーク参加、2:発表等の自己表現達成、3:学内就労体験、4:移行事業所見学、5:移行事業所体験、6:移行事業所通所決定、7:進路決定)では、全員が27までにアップし、平均値は5.2と移行事業所体験という高い結果となった。4、考察とまとめ特に就労が困難な精神障害や発達障害学生の就労促進を、教育的支援の視点に立ち在学中から支援する学内就労移行支援プログラムによる新たな社会参加モデル創出という目標に対し、一定の成果が見られた。方法:

1キャリア支援センター・学内外受入機関等と連携したプログラム作成、2特別支援クラス34年生・既卒生、教職員紹介によるクラス編成、3週1回ワーク、学内就労体験、移行事業所見学、本人・保護者面接等を行う。結果:プレワーククラス登録者17名中、卒業生・退学生13名中、就職3名、アルバイト2名、移行事業所通所6名、大学院進学1名、未決定1名(決定率92%)となり、就労行動段階スコアでは全員が上昇し、13名の平均値は6.1/7となった。考察:就労が困難な精神・発達障害学生を在学中から支援する試みとして一定の成果を得た。次年度の課題として、1参加者の増員(15名程度)、2プレワーク&キャリアトライアルプログラムの充実、学外プログラムの導入、3キャリア支援センター教職員向けの障害学生就労支援に関するFDの開催と理解の浸透、4学外就労移行支援施設・就労支援センターと大学キャリア支援センターの直接のネットワーク形成を行い、最終的に、5キャリア支援センター内へのキャリア支援コーディネーターの常勤化、及び大学内の障害学生就労支援体制の構築を目指す。今後遂行する上では、外部の移行支援機関の力を借りて関西圏では多くの私立大学が実施している外部機関と大学の直接契約による移行支援プログラムの出張講座などを通して、キャリア支援センター所長・部長への障害学生支援の重要性のレクチャーを行い、大学全体の課題として認識していただくという課題がある。臨床心理学(青年期臨床、学生支援、キャリア教育支援、グループワーク)インターンシップでの就労体験に関して当初は学生への賃金の支払を検討し執行予定にいれていたが、就労体験の意味をふまえ、科研費から執行しないこととしたこと、また倫理委員会からの実施許可後のスタートとなったことにより研究の期間がずれ、就労移行支援施設との契約費・出張費、学会発表などの旅費や参加費が次年度にずれこんだため。就労移行支援施設との契約費・出張費、学会発表のための旅費・参加費、等に使用する。
未踏電子相がもたらす強相関電子系ナノワイヤー金属錯体の機能変革

本研究では、平均原子価(AV相)と混合原子価(MV相)という二種類の電子状態が競合している擬一次元ハロゲン架橋金属錯体(MX錯体)と呼ばれるナノワイヤー金属錯体に着目する。AV相は、他に類を見ない「一次元強相関電子系」となるはずであるが、AV相の実現は一部の例に限られていた。そこで、我々が近年開発したいくつかの化学的手法により、最も機能性や構造設計性に優れると予想されるPt錯体でもAV相を実現する。また、この錯体のヘテロ接合における界面の電子状態と物性の解明、多孔性の導入による化学ドーピングの実現にも取り組む。これにより、世界最大の三次非線形光学応答などの革新的機能の創出に挑む。
やる気・意欲の可視化・数値化に関する研究（若者のモラトリアム脱却に向けて）

本研究では注視線計測と心拍変動を用いることにより、被験者の軽作業(似顔絵描画)時における、描画視線率および1分当たりの平行な視線移動回数を比較・検討することによって、作業時の集中度合い・観察レベルを数値化・可視化し、定量的に評価できる可能性を示した。絵の描画スキルを持つ人は、持たない人よりも集中度合いが高くなることや、速いテンポの音楽聴取時は遅いテンポよりも有意に観察レベルが高くなることを確認した。その他の生体情報では計測不可能とされていた集中力のわずかな向上の可視化に成功した。これらの作業環境を制御し、若者のやる気・意欲を育成することによって、モラトリアム脱却への第一歩になると考えらえる。本プロジェクトでは「やる気・意欲の可視化・数値化に関する研究(若者のモラトリアム脱却に向けて)」を遂行するにあたり、H27年度において、やる気・意欲と深く関係する生理指標の獲得をおこなった。これまでに著者らは、アイトラッキングシステムを用いて、似顔絵の上手な人とそうでない人との特徴およびその差異の抽出に成功している。本研究課題では、その知見より、絵を描くスキルを持つ被験と持たない被験者において、似顔絵描画時の注視点座標の抽出をおこない、そのときの1分当たりの視線移動回数の違いについて分析した。また、各被験者の似顔絵描画の作業画面を動画として撮影し、似顔絵描画後に光トポグラフィーを装着してその状態を想起してもらった。その結果、絵を描くスキルを持つ被験は持たない被験者に対して1分当たりの視線の移動回数が多くなること、また前頭前野部の酸化ヘモグロビン濃度変化が大きく上昇することを確認した。さらに、スキルを持つ被験者が輪郭の描画および眼・鼻・口を描画・調整しているときは、よりいっそう酸化ヘモグロビン濃度変化が大きくなることから、これらの作業をしているときはより集中状態になり、やる気レベルが上昇することを示した。この成果は、「アイトラッキングと近赤外光脳機能計測による集中力・やる気の可視化の検討」,大西厳,浅野裕俊,荒生弘史,第17回日本感性工学会大会,文化学園大学・新都心キャンパス,(2015.9)において公表している。現在10名程度の被験者からデータを獲得し解析中であるが、近赤外光脳機能計測装置(Spectratech社製OEG-16)の故障による実験の停滞によって研究の進行に遅れを生じている。その間、やる気・意欲に関する生体指標を計測した結果、モデルとキャンバス間の1分当たりの視線の移動回数、酸化ヘモグロビン濃度変化以外にも、サーモグラフィーを用いた鼻部皮膚温度、心拍変動においても相関があることを確認した。また、実験開始前と終了後におこなう質問紙による心理評価尺度を作成した。H28年度より、これらの生理指標を加えた実験を開始し、データが獲得できしだいその解析を実施する計画である。本研究課題「やる気・意欲の可視化・数値化に関する研究(若者のモラトリアム脱却に向けて)」を遂行するにあたり、平成27年度に引き続き、やる気・意欲と密接な関係を持つ生理指標の獲得および特徴量の抽出をおこなった。平成28年度において申請者らは、注視線計測システムを用いることにより、非接触・非拘束の状態で被験者に似顔絵を描いてもらう実験をおこない、似顔絵の上手な人と下手な人との特徴およびその差異の抽出を詳細に分析した。その結果、似顔絵の上手な人は下手な人と比べて、描画対象モデルを十分に観察しながら描くことや、輪郭および顔構成パーツの特徴やそれらの相対的位置関係を獲得し模写の要領で少しずつ確認・修正しながら描くことを、描画視線率および1分当たりの視線移動回数で数値化して示すことに成功した。また、似顔絵の下手な人は、描画時の注意力が散漫になり、集中力が欠損する傾向があることや、モデルの輪郭や左髪のハネなど見落としている特徴が多いことを可視化して示した。これらの成果は「注視点計測による似顔絵を上手に描くための特徴量抽出」大西厳,柏尾俊樹,依藤周,河内綾香,正司強,日本感性工学会論文誌, vol.15, No.4, pp.553-561,(2016.8).において公表している。また、視線と同時にサーモグラフィーを用いて被験者の鼻部表面温度を測定することによって、似顔絵描画時の集中レベルの時間変化および作業要素によるストレスの変化を数値化・可視化できる可能性を示唆した。この成果は「鼻部表面温度計測による似顔絵描画時の集中レベルの検討」大西厳,河内綾香,依藤周,荒生弘史,浅野裕俊,第12回日本感性工学会春季大会・上田安子服飾専門学校,(2017.3).において発表している。現在、遅れ気味であった実験による被験者からの生体情報および主観評価データの獲得がほぼ終了し、そのデータ解析を実施している。研究分担者の生体情報解析用計算機の不具合などが発生しているが、平成28年度に実施予定であったデータ分析に着手することができた。まだ分析の途中ではあるものの集中レベルや意欲を数値化するために、1分当たりの視線移動回数や描画視線率が有効であることを示した。さらには、サーモグラフィーを用いて鼻部表面温度を同時計測することにより、作業時の緊張レベルや集中度合いを評価できる可能性も示唆している。本研究課題「やる気・意欲の可視化・数値化に関する研究(若者のモラトリアム脱却に向けて)」を遂行するにあたり、H28年度に引き続き、H29年度も脳波以外に顕著にその特徴が出現する生体情報の獲得し、やる気・意欲レベルを向上させる外的刺激因子の特定をおこなった。

H29年度において、申請者らはアイトラッキングによる注視線情報、サーモグラフィーによる鼻部表面温度と心拍変動を獲得することにより、非接触・非拘束の状態で被験者に似顔絵を描いてもらう実験をおこない、被験者の集中レベルおよびやる気をより高い精度で抽出できる可能性を示した。これまでの研究成果より、似顔絵の上手な人と下手な人との特徴およびその差異を抽出しているが、さらに、作業時に外部刺激としてテンポの異なる音楽を呈示すると、Fastテンポ(150bpm)とSlowテンポ(75bpm)で有意な差を確認した。このことからFastテンポ音楽の呈示が、やる気・意欲をより向上させる可能性を示した。この成果は若者のやる気・意欲を養生するための第一歩になると考えられる。本研究では注視線計測と心拍変動を用いることにより、被験者の軽作業(似顔絵描画)時における、描画視線率および1分当たりの平行な視線移動回数を比較・検討することによって、作業時の集中度合い・観察レベルを数値化・可視化し、定量的に評価できる可能性を示した。絵の描画スキルを持つ人は、持たない人よりも集中度合いが高くなることや、速いテンポの音楽聴取時は遅いテンポよりも有意に観察レベルが高くなることを確認した。その他の生体情報では計測不可能とされていた集中力のわずかな向上の可視化に成功した。これらの作業環境を制御し、若者のやる気・意欲を育成することによって、モラトリアム脱却への第一歩になると考えらえる。やる気・意欲に関する生体指標を抽出するため、モデルとキャンバス間の1分当たりの視線の移動回数、酸化ヘモグロビン濃度変化、鼻部皮膚温度、心拍変動が有効であることを確認している。H28年度において、被験者を30名程度に増やして測定し、それらの生体情報を獲得することによって、より汎用性のある評価指標を構成する。さらに、それらの指標の相関などを用いてより明確に、やる気・意欲を数値化・可視化する。また、H29年度において、本プロジェクトで提案するやる気・意欲の評価指標が妥当であることを示すための、汎用化実験をする計画であるが、その準備および実験環境構築をH28年度の12月より実施していく予定である。平成28年度において、集中レベルや意欲を数値化するために、1分当たりの視線移動回数や描画視線率が有効であることを示し、さらにはサーモグラフィーによる鼻部表面温度を同時計測することにより、作業時の緊張レベルや集中度合いが評価できる可能性を示唆した。平成29年度は、これらの生体情報からより詳細なやる気および意欲の度合いを数値化・可視化し、やる気・意欲の評価指標を確立する。さらに、被験者にどのようなサポートをすれば、やる気・意欲レベルが向上するのかを解析する予定である。感性情報工学浅野裕俊(香川大学・研究分担者)の光トポグラフィーが実験中に故障し、その修理費用がH26年度中に見積れなかったため、次年度使用額がプラスとなってしまった。浅野裕俊(香川大学・研究分担者)の生体情報解析用計算機に不具合が発生し、その修理費用が平成28年度中に見積ることができなかったため、次年度の使用額がプラスになってしまった。次年度において、実験環境を整えるための実験用消耗品費用として組み入れる計画である。
転写因子によるイネ科オオムギの多様性と進化

オオムギの進化解析のため、世界に分布する栽培オオムギおよび野生オオムギの遺伝的多様性を代表するコレクションを用いて、vrs1の上流域および構造遺伝子領域のDNA塩基配列解析を行った。その結果、昨年までに明らかにされていた3種類の対立遺伝子に加え新たに一つの対立遺伝子を発見し、その原因遺伝子がおそらく遺伝子調節領域に存在すると予想した。六条性遺伝子Vrs1と他の条性遺伝子との相互作用を調べるため、六条性突然変異体vrs1,vrs2、vrs3、vrs4、int-c各変異体系統におけるVrs1遺伝子の発現レベルを解析した。その結果、このうちの一変異系統について極端なVrs1遺伝子の発現レベルの低下が認められたため、その突然変異の野生型対立遺伝子がVrs1の転写を促進していると考察した。六条性遺伝子領域のゲノム進化様式を解明することを目的に、イネ、Triticum、Brachypodium、トウモロコシZea属、およびソルガムSorghum属使って比較解析をおこなった。その結果、Vrs1のホモログとして新たに見つかったHvHox2遺伝子のゲノム領域のほうが他のイネ科植物との共直線が高度に保たれアミノ酸配列も高く保存されていることが明らかになった。以上のことから、Vrs1はHvHox2から遺伝子重複によって生じた、オオムギ特異的遺伝子である事が示唆された。六条性遺伝子が農業形質に与える多面的影響を調べるために出穂日や桿長、収量等を調査した。その結果六条性変異は20%50%の収量増をもたらす同時に桿を有意に短かくすることが明らかとなった。これらの形質変化の有利性から栽培化過程で六条性オオムギが優先種となり得たと考えられる。以上のように転写因子によるイネ科オオムギの多様性と進化の研究で大きな成果をあげることができ、今後の研究領域の開拓にもつなげることができた。作物の栽培起源に関しては「いつ」「どこで」栽培化されたかという観点から多くの証拠が蓄積されてきているが、今日的に重要な質問は「どのようにして」である。オオムギの起源はオオムギがどのような戦略で自己を人間に選抜・利用せしめたか、という興味ある問題を提示している。Hordeum属32種の中で、H.vulgareのみが人間に作物として利用された。なぜこの種だけか、分水嶺的なイベントは何か。オオムギの小さな転写因子をコードするvrs1遺伝子の研究は、オオムギのみならず、おそらくイネ科の進化と栽培化にも関係するなど、関連研究領域の発展に大きく貢献すると考えられる。vrs1遺伝子調節領域の解析のため、構造遺伝子領域には変異のない事がわかっている6条突然変異体を用いて、交配による対立性検定を行った。その結果、9系統のうち5系統では調節領域の変異が原因と示唆され、3系統は非対立遺伝子、1系統は構造遺伝子に変異があることが明らかになった。vrs1の上流域の構造を六条品種と二条品種間で比較するため、新たな交配をおこなった。遺伝子発現パターンと小穂原基の発達過程との関係を明らかにするため、オオムギ形質転換系による機能低下実験をおこなったところ、vrs1遺伝子が6条突然変異の原因であることがあきらかになった。BAC塩基配列を用いた六条品種(Morex)と二条品種(はるな二条)の比較解析は進行中である。オオムギの進化解析のため、世界に分布する野生オオムギの遺伝的多様性を代表するコレクションを用いて、vrs1の構造遺伝子領域のDNA塩基配列解析を行った。その結果、新たにひとつの六条オオムギの系譜が明らかになり、さらに計4つの六条オオムギの系譜の祖先型となる野生種が見つかった。得られた多型データの進化パターンをもとに、従来の遺伝学的・考古学的データ等を加え、オオムギの栽培化における人間との関係、および人間が作り出した環境との相互関係を総合的に考察する予定である。

六条性遺伝子が農業形質に与える多面的影響を調べるために出穂日や桿長、収量等を調査した。その結果六条性変異は20%50%の収量増をもたらす同時に桿を有意に短かくすることが明らかとなった。これらの形質変化の有利性から栽培化過程で六条性オオムギが優先種となり得たと考えられる。以上のように転写因子によるイネ科オオムギの多様性と進化の研究で大きな成果をあげることができ、今後の研究領域の開拓にもつなげることができた。
両生類変態をモデルとした消化管上皮幹細胞のニッチ形成機構の解明

両生類幼生の小腸では、変態期に甲状腺ホルモン(TH)の作用により、Ror2を特異的に発現する細胞(予定幹細胞)が成体幹細胞へと脱分化し、その周囲にニッチが形成される。本研究は、アフリカツメガエルの小腸を実験材料として用い、幹細胞ニッチを形成する分子基盤の解明を目指している。本年度は、独自に作製したトランスジェニックカエル(Tg)の小腸を使い、Ror2を指標に予定幹細胞を同定し、予定幹細胞とそれ以外の上皮細胞(THにより細胞死を起こす幼生固有細胞)との間でTH受容体(TR)の発現やヒストン修飾にどのような違いがあるかを免疫組織化学的に解析した。その結果、予定幹細胞はTRaを発現するが幼生固有細胞は発現しないこと、予定幹細胞では変態期にTH濃度の上昇に伴ってヒストンのアセチル化が促進されること等を見出した。これらの結果は、予定幹細胞の脱分化にはTRaが中心的な役割を果たしており、TRaの発現量の違いにより予定幹細胞と幼生固細胞の間で幹細胞出現前にepigeneticな違いが生じていることを示唆している。この他、Hippoシグナル伝達経路に関連する遺伝子の発現解析も始めた。現在までに、Hippo経路の主要な遺伝子であるYap1の発現がTHにより誘導され、幹細胞出現時には幹細胞自身とその近くの繊維芽細胞でYap1が発現していることを明らかにした。さらに、これら幹細胞近くの繊維芽細胞では、ヒアルロン酸合成酵素の1つであるHAS2も発現し、標準Wnt経路を活性化して幹細胞の発生を促進することを見出した。これらの結果は、幹細胞出現時にその近くに密集する繊維芽細胞が、Hippo経路を含む複数の経路を介して、幹細胞ニッチの形成に重要な役割を果たしていることを強く示唆している。Ror2遺伝子の転写調節領域に蛍光タンパク質GFPをドライブさせたコンストラクトを導入してTgカエルを作製し、この幼生の小腸では、GFPを検出することによりRor2を発現する予定幹細胞を容易に同定できることを蛍光顕微鏡下で確認した。このTgカエルの小腸を使うことにより、当初の計画通り研究は順調に進んでいる。今後、Taz、LATS等、Yap1以外のHippo経路に関連する遺伝子についても発現解析を進め、各遺伝子の発現パターンと幹細胞発生との時間・空間的関連について明らかにする。また、Yap1は不活性化すると核移行して標的遺伝子の転写を促進することが知られているため、Yap1蛋白質の核局在の有無についても免疫組織化学的に調べ、その働きを予測する。さらに、予定幹細胞を含む培養系を使ってYap1の阻害実験を行い、Hippo経路が他の経路に及ぼす影響や幹細胞の発生に果たす役割を免疫組織化学およびRNA-seq解析等により明らかにしていく。また、本年度の結果より、ニッチ形成には幹細胞近くに密集する繊維芽細胞が重要であることが示唆されたことから、これらの繊維芽細胞に着目し、その分子細胞学的解析を行う。さらに、予定幹細胞を含む培養系を使い、各種の抗体や阻害剤を用いて幹細胞周辺の結合組織を変化させ、どのような繊維芽細胞や細胞外マトリックスの変化が、Hippo経路や幹細胞の発生にいかなる影響を及ぼすのかを解析する。以上の実験結果を基に、幹細胞ニッチ形成に関わるシグナルネットワークの全容を明らかにしていく。

今後、Taz、LATS等、Yap1以外のHippo経路に関連する遺伝子についても発現解析を進め、各遺伝子の発現パターンと幹細胞発生との時間・空間的関連について明らかにする。また、Yap1は不活性化すると核移行して標的遺伝子の転写を促進することが知られているため、Yap1蛋白質の核局在の有無についても免疫組織化学的に調べ、その働きを予測する。さらに、予定幹細胞を含む培養系を使ってYap1の阻害実験を行い、Hippo経路が他の経路に及ぼす影響や幹細胞の発生に果たす役割を免疫組織化学およびRNA-seq解析等により明らかにしていく。また、本年度の結果より、ニッチ形成には幹細胞近くに密集する繊維芽細胞が重要であることが示唆されたことから、これらの繊維芽細胞に着目し、その分子細胞学的解析を行う。さらに、予定幹細胞を含む培養系を使い、各種の抗体や阻害剤を用いて幹細胞周辺の結合組織を変化させ、どのような繊維芽細胞や細胞外マトリックスの変化が、Hippo経路や幹細胞の発生にいかなる影響を及ぼすのかを解析する。以上の実験結果を基に、幹細胞ニッチ形成に関わるシグナルネットワークの全容を明らかにしていく。
走行速度差のある環境下でのドライバーのストレス軽減方策に関する研究

ドライバーは運転中、対向車両や流入車両など様々な種類の視覚的情報から精神的に影響を受ける。このような影響は、ドライバーに対してストレスを発生させ、発見の遅れによる急ブレーキなど、交通流を乱す原因を生み出している。したがって、ドライバーのストレスはどのような状況でどのように発生するか明確にすることが重要と考えられる。本研究では、運転中のドライバーが視覚的情報、車両挙動から受けるストレスを明らかにし、ストレス発生に影響を与える要因、また、信号待ち時のストレス変化を明確にすることを目的に、瞬間的ストレス、断続的ストレスの2つの観点から分析を進めた。ここで、瞬間的ストレスとは、ドライバーがある状況を迎えて即時に発生するストレスをさし、断続的ストレスとは、ドライバーが低速車両を長い時間追従することにより次第に蓄積されるであろうストレスをさす。実験データをもとに、ストレス発生に影響を与える要因、信号待ち時のストレス変化の明確化について分析した結果、瞬間的ストレスについてみると、「前方車のブレーキ」が最もドライバーのストレス発生に影響を与えていることがわかった。また、ストレスをこれら要因の発生頻度と関連づけて分析すると、その発生回数の少ない方がストレス上昇が大きいことを確認している。一方で、断続的ストレス要因については、信号待ちが長くなるとストレスが大きくなることを明確にしている。今回の実験では、分析対象とした道路区間はほぼ直線道路の起伏のあまりないものであったため、今後は、道路線形の影響も見ることが課題としてあげられる。本研究では、低速車両に追従する状況下でのストレス緩和方策の一つとして、双方の情報コミュニケーションが重要と考え、大型車・パトロールカー等の先行車に低速走行や退避を知らせるステッカーをつけることで、後続車両のストレスがどのように変化するか定量的に評価し、車種別にみた効果的な情報提供法を把握した。ストレスが最大となる時間に着目し、RRI最大値・最小値を分析したところ、速度情報の提示が諦めを促すことにつながり効果的であることを明らかにできた。また、車種別に見た情報提供による変化としては、乗用車・大型車の一般車両において速度表示により諦める傾向を示した。一方で標識車では、情報提供の有無に関わらずストレスが蓄積される傾向にあることから、退避までの時間を考慮する必要がある。RRI値の変動に着目した分析から、情報提供の必要性を明らかにすることができた。中でも積極的情報提供である退避情報の提示が効果的との知見を得た。一方で大型車両への速度表示はストレスを高める結果となっていた。その結果、車種別の効果的な情報提供内容としては、乗用車および大型車については退避情報の提示、標識車については退避までの時間を考慮した退避情報といえる。さらに、積極的情報提供法が、消極的情報提供法以上にドライバーから求められることも明らかにできた。RRI値の分散に着目した分析では、ストレスの増加したドライバーと追越を行いストレスを意図的に下げたドライバーのRRIの分布が異なる傾向を示すことが明らかになった。また、RRIの分布を定量化することで、積極的情報提供である待避情報が消極的情報提供である速度情報に比ベストレスを抑えるという結果がえられ、待避情報のストレスを軽減に対する有用性を示すことができた。
胸腺内免疫寛容誘導法におけるシグナル伝達機構の解析と大動物への応用

本研究では胸腺内ドナー特異的寛容誘導モデルを用いて胸腺内未熟T細胞のアロ抗原認識におけるの詳細な解析行うことを目的とした。心移植モデルにはラット同種異所性(腹腔内)心移植を用い、胸腺内免疫寛容誘導のため、LEW心移植の21日前に25×10^6個のLEWドナー脾細胞をBUFレシピエント胸腺内に、また、同時に1mlのALSを腹腔内に投与した(IT+ALS)。チロシンキナーゼ阻害剤(ゲネスチン)、カルシニューリン阻害剤(サイクロスポリンA、タクロリムス)を用いた寛容誘導阻害実験にて、胸腺内免疫寛容誘導に必須の胸腺細胞内蛋白を同定を進め、心移植片生着日数および細胞傷害活性、IL-2産生能を調べた。さらに、ALSによるリンパ球減少効果と胸腺細胞発達に与えるこれらの薬剤の影響を調べるため、経時的にリンパ球数計測およびフローサイトメトリーによる細胞分画の割合計測を行った。IT+ALSによりドナー特異的免疫寛容が誘導されることを再確認した。寛容誘導時でのチロシンキナーゼ阻害剤投与では寛容誘導が阻害され、カルシニューリン阻害剤投与では寛容誘導が阻害されないという結果が得られた。チロシンキナーゼ阻害剤投与による寛容誘導阻害は寛容誘導早期のみに認められ、IT+ALS処置7日目以後の投与ではこれが見られなかった。また、チロシンキナーゼ阻害剤投与やカルシニューリン阻害剤投与はALSによる末梢や胸腺内のリンパ球減少効果は影響を受けていないことも明確になった。さらに、ゲネスチン、サイクロスポリンAは胸腺細胞発達段階において胸腺細胞分画に影響を与えていなかったが、タクロリスムはポジティブセレクションを障害することを示唆する結果が得られた。以上より、我々のモデルにおける寛容誘導にはレシピエント胸腺細胞内のチロシンキナーゼの活性化は必須であるが、カルシニューリンの活性化は必須ではない考えられた。抗リンパ球血清(ALS)の一回投与でレシピエントの成熟したT細胞を一過性に抹消すると同時にドナー脾細胞のレシピエント胸腺内へ投与することにより、ラット同種心移植におけるドナー特異的寛容を誘導することができる。本研究ではドナー特異的寛容誘導モデルを用いて胸腺内未熟T細胞のアロ抗原認識におけるの詳細な解析行うことを目的とする。心移植モデルには、ドナーにLEW(RT1^1)、レシピエントにBUF(RT1^b)、およびサードパーティーとしてACI(RT1^a)によるラット同種異所性(腹腔内)心移植を用いた。胸腺内免疫寛容誘導のため、LEW心移植の21日前に25x10^6個をLEWドナー脾細胞をBUFレシピエント胸腺内に、また、同時に1mlのALSを腹腔内に投与した(IT+ALS)。特異的細胞内蛋白阻害剤(チロシンキナーゼ阻害剤、カルシニューリン阻害剤)にを用いた寛容誘導阻害実験にて、胸腺内免疫寛容誘導に必須の胸腺細胞内蛋白を同定を進めている。現段階では、寛容誘導時でのチロシンキナーゼ投与では寛容誘導が阻害され、カルシニューリン投与では寛容誘導が阻害されないという結果が得られている。また、チロシンキナーゼ投与やカルシニューリン投与はALSによる末梢や胸腺内のリンパ球減少効果は影響を受けていないことも明確になってきた。以上より、我々のモデルにおける寛容誘導にはレシピエント胸腺細胞内のチロシンキナーゼの活性化は必須であるが、カルシニューリンの活性化は必須ではないと推察される。

本研究では胸腺内ドナー特異的寛容誘導モデルを用いて胸腺内未熟T細胞のアロ抗原認識におけるの詳細な解析行うことを目的とした。心移植モデルには、ドナーにLEW(RT1^l)、レシピエントにBUF(RT1^b)、およびサードパーティーとしてACI(RT1^a)によるラット同種異所性(腹腔内)心移植を用いた。胸腺内免疫寛容誘導のため、LEW心移植の21日前に25x10^6個のLEWドナー脾細胞をBUFレシピエント胸腺内に、また、同時に1mlのALSを腹腔内に投与した(IT+ALS)。チロシンキナーゼ阻害剤(ゲネスチン)、カルシニューリン阻害剤(サイクロスポリンA、タクロリムス)を用いた寛容誘導阻害実験にて、胸腺内免疫寛容誘導に必須の胸腺細胞内蛋白を同定を進めた。心移植後14日目のBUFレシピエントリンパ節細胞のLEWドナーあるいはサードパーティーであるACIリンパ節細胞に対する細胞傷害活性およびIL-2産生能を調べた。さらに、チロシンキナーゼ阻害剤、カルシニューリン阻害剤のALS投与後の胸腺細胞発達に与える影響を調べるため、フローサイトメトリーにより経時的に細胞分画の割合計測を行った。今回のin vitro実験でもIT+ALSによりドナー特異的免疫寛容が誘導され、チロシンキナーゼ阻害剤投与で寛容誘導が阻害され、カルシニューリン阻害剤投与では寛容誘導が阻害されないという結果が得られた。また、ゲネスチン、サイクロスポリンAは胸腺細胞発達段階において胸腺細胞分画に影響を与えていなかったが、タクロリムスはポジティブセレクションを障害することを示唆する結果が得られた。以上より、我々のモデルにおける寛容誘導にはレシピエント胸腺細胞内のチロシンキナーゼの活性化は必須であるが、力ルシニューリンの活性化は必須ではないと推察された。
星間物質構成元素の同位体存在度に関するデータベース作成

隕石を始めとする,星間物質に源を持つ物質中の元素の同位体存在度については,すでに多くの測定が行われている.しかし,データの質,量共に隕石とその他の地球外物質とでは大きな違いがある.これらを整理することは,宇宙科学の次の過程への発展のために必須である.ここでは隕石で求められたデータと,その他の物質中のデータを別々に取り扱うこととし,隕石のデータは,同位体変動を起させる原因毎に次のように分類した.1.質量分別効果,2.核反応,3.核壊変,4.元素合成時.これらの項目はさらにそれぞれ2-4種類に細分化した.その他のものはそれぞれの対象物質,即ち,1.宇宙塵,2.太陽,3.宇宙線,4.惑星と衛星,5.低温星,6.星間物質,7.ハレー彗星,にわけ,それぞれの物質中では元素毎の分類のみにとどめた.これらの収集したデータは,パラドックスというソフトを用いて,逐次データベース化すると共に,現在総説としてまとめはじめている.隕石を始めとする,星間物質に源を持つ物質中の元素の同位体存在度については,すでに多くの測定が行われている.しかし,データの質,量共に隕石とその他の地球外物質とでは大きな違いがある.これらを整理することは,宇宙科学の次の過程への発展のために必須である.ここでは隕石で求められたデータと,その他の物質中のデータを別々に取り扱うこととし,隕石のデータは,同位体変動を起させる原因毎に次のように分類した.1.質量分別効果,2.核反応,3.核壊変,4.元素合成時.これらの項目はさらにそれぞれ2-4種類に細分化した.その他のものはそれぞれの対象物質,即ち,1.宇宙塵,2.太陽,3.宇宙線,4.惑星と衛星,5.低温星,6.星間物質,7.ハレー彗星,にわけ,それぞれの物質中では元素毎の分類のみにとどめた.これらの収集したデータは,パラドックスというソフトを用いて,逐次データベース化すると共に,現在総説としてまとめはじめている.
病理組織検体を用いた安定したmicroRNA検出法の確立と肝癌診断への応用

近年、microRNAを組織切片上で検出可能な手法としてLNAプローブを用いたISH法が報告された。しかし、基礎的な手法の検討は十分になされておらず、組織形態とmicroRNAの安定した検出が困難であった。本研究で改良を加え、microRNAの良好な検出と組織形態保持を両立するISH法を確立した。HCCでは腫瘍胞巣周囲にmiR-21強陽性小型HCC細胞集塊が存在し、それらは免疫組織化学的に胆管細胞マーカーや肝幹細胞/前駆細胞マーカーを発現することが明らかとなった。また、CK19陽性HCCでは通常型HCC比べてmiR-21発現が高頻度にみられ、細胞増殖能や浸潤能へ関与していると考えられた。確立した手法を用いて、HCC52例におけるmiR-21発現細胞の局在と免疫組織化学的特徴を明らかにするとともに、臨床病理学的因子との関連について検討した。HCC 52例中31例(59.6%)において腫瘍細胞でmiR-21の発現が同定され、HBV感染、分化度との関連を認めた。さらに、miR-21陽性HCC 31例中16例(51.6%)においてmiR-21強陽性を示す小型HCC細胞集塊がみられ、腫瘍内線維化の程度との関連を認めた。miR-21強陽性小型HCC細胞集塊はN/C比の高い細胞で構成され、腫瘍胞巣周囲の線維性間質に接して存在していた。また、予想していなかったことであるが、これら小型HCC細胞16例中13例で免疫組織学的に肝幹細胞/前駆細胞マーカーが陽性を示したことより、形態学的および免疫組織学的に肝幹/前駆細胞あるいは癌幹細胞の性質を有する可能性が考えられた。前年度の検討で、HCCにおいて腫瘍胞巣周囲の線維性間質に接した位置にmiR-21強陽性を示す小型HCC細胞集塊が存在することとそれらの細胞がCK19を含む肝幹/前駆細胞マーカーを発現していることを明らかにした。本年度は前年度確立した手法を用いて、転移・再発率が高いと報告されているCK19陽性HCCの臨床病理学的特徴とmiR-21発現について検討した。CK19はHCC50例中10例(20%)で陽性を示し、肝内転移および門脈侵襲のある群、隔壁形成のある群、腫瘍内線維性間質陽性(≧10%)群で有意に多く認められた(p<0.05)。一方、miR-21は50例中29例(58%)で陽性を示し、CK19と同様に肝内転移、隔壁形成、腫瘍内線維性間質との関連が見られた他、B型肝炎ウイルス感染群、分化度が中または低分化度群で有意にmiR-21の発現が認められた。また、CK19陽性HCCではCK19陰性HCCに比してmiR-21の発現頻度が有意に高いという結果が示された(p<0.05)。本年度の検討により、CK19とmiR-21の同様の臨床病理学的意義が示されたとともに、両者の関連が示唆された。前年度の検討で腫瘍胞巣周囲の線維性間質に接した位置にmiR-21強陽性を示す小型HCC細胞集塊が存在し、それらの細胞が形態学的、免疫組織学的にstem cell類似の性質を有する可能性が考えられたが、本年度の結果は前年度の結果と合致すると考えられた。しかし、臨床病理学的意義においても異なる点を含んでいることや現時点ではCK19とmiR-21の直接的な相互作用の有無については報告がないため、今後の検討課題と考えている。HCCとCCはSNAIL、ZEB1、vimentinの発現で有意な違いを認めた。CK19HCCはSNAIL発現でHCCと同様の傾向を示したが、ZEB1及びvimentinではHCCとCCの中間の発現頻度であり、EMTがHCCとCCの中間的な状態である可能性が示唆された。症例数を増やすと共にEMT関連miRNAの発現について検討を進めている。また、確立したmiRNA ISH法を用いて膵癌及び膀胱癌におけるmiR-21発現について検討した。膵癌では腫瘍間質miR-21高発現群で腫瘍径が有意に大きかった。膀胱癌では腫瘍細胞及び腫瘍間質miR-21発現と癌の進行度で有意な関連がみられ、miR-21高発現群で患者生存期間が有意に短かった。膵癌及び膀胱癌で腫瘍間質miR-21が癌の進展に関与することが示唆された。1.胆管細胞形質を発現する肝細胞癌を中心に癌の浸潤や転移機序の一つであるEpithelial mesenchymal transition(EMT)に関連するmicroRNAの腫瘍内での発現分布や組織細胞形態との関連性を詳細に検討し、そのメカニズムについて迫ることを目標として研究を進めている。