hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
月経周期のヒト生物時計におよぼす影響

かくて、プロジェステロンの同期抑制作用がPMSの病態に何らかの役割を果たしている可能性が示唆されたラットにおいて、活動量のサーカディアンリズムはエストロジェンの高い時期に位相前進、プロジェステロンの高い時期に位相後退を示し、性周期に伴って変動する。そこで、ヒトでは月経周期に伴いサーカディアンリズムが変動するのかどうか調べるために、健常女性5例、月経前緊張症(PMS)を示す女性5例の睡眠覚醒と直腸温のサーカディアンリズムを一月経周期調べた。また、卵胞期(エストロジェンの高い時期)、黄体期(プロジェンステロンの高い時期)のメラトニンのサーカディアンリズムも調べた。その結果、ヒトでは(PMSを示す一例を除いて)、睡眠覚醒と直腸温のサーカディアンリズムは月経周期に伴って変動を示さないことが分かった。しかし、メラトニンリズムは黄体期には約2時間の位相後退を示した。従って、ラットで見られるような性周期に伴うサーカディアンリズム変動は、ヒトでは、睡眠や直腸温リズムに関しては完全に抑制されているが、メラトニンリズムに関してはその抑制が弱いことが分かった。一方、PMSを示す一例においては、睡眠、直腸温、メラトニンの全てのサーカディアンリズムが卵胞期に持続的前進を示し、黄体期に持続的後退を示した。よって、この一例は「月経周期に伴うサーカディアンリズムの変動」の抑制メカニズムが障害されていることが分かった。これまで、このような睡眠障害を示す症例は報告されていなかったので、交代性位相変位症候群(APSS)と名付け、論文として報告した。この疾患メカニズムを明らかにするために、卵巣摘徐ラットにエストロジェンを投与したところ、生物時計中枢である視交叉上核(SCN)のニューロンを同期しているギャップ結合遺伝子の発現が上昇した。従って、この疾患メカニズムとして、SCNニューロンの同期障害が考えられた。
虚血脳に対する神経幹細胞移植に関する研究

脳虚血に対して、神経幹細胞を用いた脳内移植療法を実現するためには、自家の神経幹細胞を用いることが最も安全で有用な治療法の一つと考え、成体由来神経幹細胞を用いた研究を行った。まず、齧歯類や霊長類の成体脳から神経幹細胞の培養を行うことができ、移植に必要な細胞数まで増殖させ、ニューロンへ分化させることが可能であることを示した。この成体由来神経幹細胞を用いて急性期脳虚血モデル動物に対して脳内移植を行ったところ、神経保護効果を持つことを画像的(臨床機である1.5TMRIを使用)、行動学的および組織学的に示した。このメカニズムとして、移植した神経幹細胞より産生される神経栄養因子やサイトカインの組み合わせによる効果が考えられる。次に、成体由来神経幹細胞に強い神経保護効果を有するGDNF遺伝子を導入して、GDNF産生神経幹細胞を作製し、この細胞を脳虚血モデルラットに脳内移植を行ったところ、強い神経保護効果を持つことを画像的(MRIを使用)、行動学的および組織学的に示した。GDNF産生神経幹細胞は、より多くのニューロンへ分化する傾向を示し、さらに移植した中心よりより遠方まで遊走する傾向を示した。最後に、成体由来神経幹細胞を慢性期脳虚血モデル動物に脳内移植することにより、神経症状の改善および梗塞巣の修復作用を示した。この機序として、移植した神経幹細胞がニューロンへ分化し宿主ニューロンとシナプスを形成するだけではなく、移植による宿主内の微小環境の変化や分化したグリアかち産生される神経栄養因子の関与が示唆された。このように成体由来神経幹細胞の脳内移植は脳虚血に対して有用であることが判明した。脳虚血に対して神経回路の再構築や、ニューロンの再生を行うためには、神経移植や神経幹細胞を利用することが大切であると思われる。我々はこれまでマウスを用いた神経幹細胞の研究を行ってきた。そこで、まず、マウス以外の成体齧歯類や霊長類からも神経幹細胞を分離でき、より多くのニューロンへ分化できるかどうか検討した。成体ラットおよびニホンザルの側脳室周囲から神経幹細胞を分離培養した。取り出された神経幹細胞はneurosphere(神経塊)を形成し、約6か月間継代培養可能であった。また、神経幹細胞を分化させると多分化能(ニューロン、アストロサイト、オリゴデンドロサイト)を有し、さらにBDNFなどのニューロン分化促進因子投与により、非投与群にくらべて、神経幹細胞は有意に多数のニューロンへの分化を示した。次に、脳虚血モデルラットにおける梗塞巣の評価に、臨床で使用されている1.5T MRIを用いることができるかどうか検討した。特別なラット用のhead coilを作製し、一過性中大脳動脈閉塞モデルラットを経時的に梗塞巣の範囲を計測した。また、経時的に行動学的および免疫組織学的評価を行った。ニューロン脱落範囲とMRIのT2WIで示される梗塞範囲はほぼ一致し、また梗塞巣の広さとrotarodtestやsylinder testなどによる行動学的評価はほぼ一致していた。MRIによる梗塞巣の評価は神経幹細胞脳内移植の効果を検討するのに有用であると思われる。また、興味あることに、T2-WIで高信号域が経時的に消失した部分に一致して、新生ニューロンを認め、梗塞巣の自己修復と内因性神経幹細胞の関連が示唆される。今後、内因性神経幹細胞を用いた脳虚血に対する治療も考えられ、神経幹細胞移植と同様に検討していく予定である。自家の神経幹細胞を用いた治療を行う場合には、成体由来神経幹細胞が移植ドナーとして有用であるかどうか検討しなければならない。

そこで、本年度は、成体神経幹細胞が脳虚血に対して神経保護効果を持つかどうか検討した。成体Wistarラットの脳室下帯から神経幹細胞を分離培養した。取り出された神経幹細胞は神経塊を形成し、約6ヶ月間継代培養可能であった。また、神経幹細胞を分化させると多分化能(ニューロン、アストロサイト、オリゴデンドロサイト)を有していた。この細胞を1ヶ月培養した段階で、Wistarラットの一過性中大脳動脈閉塞モデル作成1時間後に、脳梗塞境界領域の大脳皮質に成体神経幹細胞移植を行った。コントロールとして、成体線維芽細胞およびvehicleを用いた。移植1週間後のMRIで、神経幹細胞を移植した部位の周辺における梗塞巣の大きさは、コントロール群と比べて有意に減少し、その効果は1ヶ月後も持続していた。行動学的にも神経幹細胞移植群は有意にstroke scaleなどの改善を認めた。組織学的には移植した周囲に宿主ニューロンが生存し、移植した細胞はほとんどがgliaに分化したが、一部はニューロンに分化していた。興味あることに、予備実験ではあるが、胎仔由来より成体由来神経幹細胞を用いた移植の方が有意に脳梗塞巣の改善を認めた。この原因として神経幹細胞から産生される神経栄養因子などの量の違いが考えられる。現段階では、GDNFやBDNFには胎仔と成体では変化がないが、erythropoietinの産生量には違いを認めている。本年度の研究により、成体神経幹細胞は脳虚血に対して神経保護効果を有することが示し、この細胞は脳虚血急性期に対して有効なドナー細胞となりうると考えられる。成体由来神経幹細胞にGDNFを過剰産生できるように遺伝子導入し、この細胞を脳虚血モデルラットに移植し神経保護を検討した。成体ラットの脳室下帯から採取した神経幹細胞をEGF存在下で培養し、移植可能な細胞数まで増殖させ、その細胞に対して、アデノウイルスを用いてGDNFの遺伝子を導入した。一過性中大脳動脈閉塞モデルラットに対して、この成体由来GDNF産生神経幹細胞を脳内移植した。この結果、脳梗塞境界領域のニューロンに対して神経保護を得ることができた。そのメカニズムとして、移植細胞から産生させるGDNFがニューロン上に存在するGFRαに作用し、ミトコンドリアを介するカスパーゼカスケードを抑制し、抗アポトーシス効果により神経保護効果が得られたと考えられた。また、移植した細胞の周囲に多くのアストロサイトが集積していたことから宿主の細胞から何らかの因子が産生されて、神経保護効果が得られた可能性も考えられる。現在その因子を検討中である。さらに、移植されたGDNF産生神経幹細胞は、コントロールの神経幹細胞より有意に大脳皮質に生着し、ニューロン、アストロサイト、オリゴデンドロサイトに分化していた。これは、生存した神経幹細胞からGDNF以外の神経栄養因子を産生し、神経保護効果を得たと考えられた。また、GDNF産生細胞は、有意に梗塞巣の方へ遊走していた。虚血巣周囲にN-CAMの強い発現があり、これに誘引物質となり遊走したと考えられる。来年度はこのメカニズムをさらに検討する予定である。慢性期脳虚血モデルに対して成体由来神経幹細胞を移植し、梗塞巣を修復できるかどうか検討し、さらに、分子生物学的および免疫学的にその機序を解明した。
高血糖によるシクロオキシゲナーゼ2活性化機序とその制御による新規合併症治療法開発

糸球体過剰濾過は糖尿病性腎症初期の病態であり、糖尿病性腎症発症のキーステッブである。昨年度は、メサンギウム細胞において高グルコース培養はミトコンドリア由来活性酸素(mtROS)産生増加、シクロオキシゲナーゼ2(COX-2)mRNA・蛋白発現増加、プロスタグランジン(PG)E_2の産生増加を引き起こすことを確認した。本年度はmtROS産生によるCOX-2発現誘導機序を明らかにすること、さらに実際にin vivoでのCOX-2発現誘導を確認することを目的として、以下の(1)(3)を行った。(1)ルシフェラーゼを用いたリポーターアッセイにて高グルコース培養およびmtROSのCOX-2遺伝子転写活性への影響を検討した。高グルコース培養によりCOX-2遺伝子転写活性はコントロールに比し4倍の上昇を認めたが、MnSOD、UCP-1過剰発現細胞では活性上昇は認めなかった。(2)COX-2遺伝子プロモーター上の2つのNFκB結合領域に変異を導入し、転写活性への影響を検討した。変異導入により、高グルコース培養によるNFκB活性化は半減し、さらに2箇所同時の変異導入はNFκB活性化を完全に抑制した。(3)ストレプトゾトシン誘導糖尿病マウスを作成し、腎糸球体でのCOX-2 mRNA・蛋白を定量的RT-PCR法、ウエスタンブロット法および免疫染色法にて検討した。マウス腎糸球体において糖尿病マウスでは正常血糖対照マウスに比しCOX-2mRNA・蛋白の発現増加が確認され、さらに、免疫組織染色でも糖尿病マウス腎組織においてはメサンギウム領域にCOX-2蛋白の発現増加を認めた。結論として、糖尿病ではmtROS産生によるNFκB活性化を介してCOX-2発現誘導が引き起こされていること、また糖尿病マウスにおいてメサンギウム領域にCOX-2発現誘導が生じていることが確認された。本研究成果は糖尿病性腎症発症におけるmtROS、COX-2の意義を示すものであり、糖尿病性腎症の発症阻止、予防、治療法の開発に貢献することが期待される。糸球体過剰濾過は糖尿病性腎症の初期に認められる異常であり、糸球体過剰濾過に伴う腎臓への負荷の増大は、糖尿病性腎症発症のキーステップであり、治療のターゲットである。糸球体過剰濾過の機序として、ミトコンドリア由来スーパーオキサイド産生増加、およびプロスタグラシジン(PG)合成のキーエンザイムであるシクロオキシゲナーゼ2(COX-2)発現誘導の可能性を検討することを目的として、本年度は以下の(1)、(2)を行った。(2)ミトコンドリア由来スーパーオキサイド抑制効果を持つマンガネーゼスーパーオキサイドジスムターゼ(MnSOD)、脱共役蛋白質-1(UCP-)1の過剰発現メサンギウム細胞を作成し、(1)と同様の検討を行った。MnSOD、UCP-1過剰発現メサンギウム細胞においては、30mMグルコース培養により認められた細胞内活性酸素、COX-2mRNA、COX-2蛋白、PGE2の産生・発現増加はそれぞれ完全に抑制された。結論として、メサンギウム細胞においては高糖濃度培養により細胞内ROS、COX-2mRNA、COX-2蛋白、PGE_2の産生・発現増加が認められたが、MnSOD、UCP-1過剰発現細胞ではこれらの現象は抑制された。

今後はCOX-2発現増加の機序をより詳細に解析する目的で、COX-2プロモーター領域の検討を行う予定である。糸球体過剰濾過は糖尿病性腎症初期の病態であり、糖尿病性腎症発症のキーステップである。昨年度は、メサンギウム細胞において高グルコース培養はミトコンドリア由来活性酸素(mtROS)産生増加、シクロオキシゲナーゼ2(COX-2)mRNA・蛋白発現増加、プロスタグランジン(PG)E_2の産生増加を引き起こすことを確認した。本年度はmtROS産生によるCOX-2発現誘導機序を明らかにすること、さらに実際にin vivoでのCOX-2発現誘導を確認することを目的として、以下の(1)(3)を行った。(1)ルシフェラーゼを用いたリポーターアッセイにて高グルコース培養およびmtROSのCOX-2遺伝転写活性への影響を検討した。高グルコース培養によりCOX-2遺伝子転写活性はコントロールに比し4倍の上昇を認めたが、MnSOD、UCP-1過剰発現細胞では活性上昇は認めなかった。(2)COX-2遺伝子プロモーター上の2つのNFκB結合領域に変異を導入し、転写活性への影響を検討した。変異導入により、高グルコース培養によるNFκB活性化は半減し、さらに2箇所同時の変異導入はNFκB活性化を完全に抑制した。(3)ストレプトゾトシン誘導糖尿病マウスを作成し、腎糸球体でのCOX-2 mRNA・蛋白を定量的RT-PCR法、ウエスタンブロット法および免疫染色法にて検討した。マウス腎糸球体において糖尿病マウスでは正常血糖対照マウスに比しCOX-2 mRNA・蛋白の発現増加が確認され、さらに、免疫組織染色でも糖尿病マウス腎組織においてはメサンギウム領域にCOX-2蛋白の発現増加を認めた。結論として、糖尿病ではmtROS産生によるNFκB活性化を介してCOX-2発現誘導が引き起こされていること、また糖尿病マウスにおいてメサンギウム領域にCOX-2発現誘導が生じていることが確認された。本研究成果は糖尿病性腎症発症におけるmtROS、COX-2の意義を示すものであり、糖尿病性腎症の発症阻止、予防、治療法の開発に貢献することが期待される。
放射性物質に汚染された土地のウシによる除染技術開発

原発事故後に放牧していた東北大学の黒毛和種(B)及び日本短角種(N)の血中Cs(Bq/kg)濃度は、それぞれ121.86並びに143.14であった。品種と齢の効果は有意であり、BよりもNで、2歳以上よりも当歳牛で、有意に高かった。清浄飼料を給与していた原発警戒区域内牛の血中Cs濃度は18.1で、汚染飼料の給与後に68.8となったが、健康であった。肝臓には、銀やテルルの沈着が見られた。放牧地の空間線量率は、8ヵ月間で1.95μSv/hから80%(自然減衰より5%多い)減衰した。局所的には、総Cs量は11ヵ月間で斜面上部で当初の38%減少し、斜面下部で27%増加した。東京電力福島第一原子力発電所爆発に伴い設定された警戒区域に残されたウシを警戒区域内の一か所の牧場(9.2ha)に集め、放射性物質汚染の実態と汚染が生体へ及ぼす影響を調査しながら、草地並びに林地の除染法を開発することを目的とした。保護牛並びに放牧による草地・林地のセシウム(Cs)汚染状況を2011年11月2012年10月にかけて調査した。保護牛の血中Cs汚染状況は、冬期間に清浄飼料を給与されてきた2012年4月には18.1±14.8Bq/kg(66頭)、汚染された放牧草及び近隣から生産された汚染飼料を給与されてきた8月には68.8±28.8Bq/kg(69頭)であった。清浄飼料給与により2ヵ月程度で清浄化することが明らかとなった。草地並びに林地に関しては、地形条件と牛舎からの距離に応じて5つのサンプリング地点を設けた。対照として各地点に5×5mの禁牧区を設定し、隣接する放牧区とともに植生地上部、リターおよび土壌のサンプリングを計5回実施した。植生地上部とリターは50cm四方のコドラートで採取し、土壌はライナー採土器を用いて深さ2cmまでの表層、27cmの浅層、722cmの深層を層別に採取した。加えて4月の調査時からは放牧地を50m四方の区画に分割し、地上1mでの空間線量率をサーベイメータで測定した。空間線量率は、4月の平均1.95μSvから12月の1.55μSvまで80%減衰した。すなわち、過放牧により放牧地全体は自然減衰より5%多く減衰した。局所的には、1110月までの11ヶ月間で植生深層土壌までの総Cs沈着量は牛舎近くの斜面上部で25万Bq/m2(当初の38%相当)減少、牛舎近くの斜面下部で16万Bq/m2(当初の27%相当)増加した。増加分は土壌浅層以下へのCs沈着が多くなった。
M期開始に至るAkt/PKBを介したシグナル伝達機構の解明

細胞周期のM期への進行は、G2期にWee1/Myt1により不活化されたcyclin B・Cdc2複合体キナーゼが、Cdc25により活性化されることにより誘起されるが、その活性化の最初期段階については、多くの点が不明である。本研究では、ヒトデ卵母細胞を材料に、代表者がこれまでに見いだした卵成熟開始時に起こるCdc25の初期リン酸化制御が、Myt1の初期リン酸化制御と同様に、Akt(PKB)により行われるかを明らかにすることを目的として、in vivoおよびin vitro両面から検討した。前年度までに、Cdc25の初期リン酸化部位として、Cdc25タンパク質の188番目のSer残基(S188)を同定し、さらに、このリン酸化を特異的に認識する抗体を用いて、S188のリン酸化は、細胞内のAktの活性化に依存することを示した。本年度は、in vitroにおける解析を主に行った。Aktは確かにCdc25のS188をリン酸化し、フォスファターゼ活性の上昇をもたらしたが、リン酸化部位は複数カ所存在した。そこで、S188のみのリン酸化の影響を調べるために、他のリン酸化部位を含めた各種変異体を作製することで、Cdc25のS188のリン酸化が、Cdc25のフォスファターゼ活性を昂進することを明らかにした。これらの結果により、Aktは、Myt1の初期リン酸化制御だけでなく、Cdc25の初期リン酸化制御を並行して行うことにより、効果的にcyclin B・Cdc2の初期活性化を引き起こすことが示された。本年度はさらに、S188のリン酸化抗体を用いて卵成熟過程および初期卵割過程についても解析範囲を広げ、Cdc25のS188のリン酸化制御が、卵成熟過程の減数第二分裂開始にも関与する可能性を示した。ここから、本研究により、M期開始の分子機構の解明に一歩近づくと共に、今後、新たな展開が期待されると言える。本研究では、ヒトデ卵母細胞を材料に、代表者がこれまでに見いだしたCdc25の初期リン酸化制御が、Myt1の初期リン酸化制御と同様に、Akt(PKB)により行われるかを明らかにすることを目的として、in vivoおよびin vitro両面から検討した。本年度は、まず、Cdc25の初期リン酸化部位の決定を試み、本予算で購入した2次元電気泳動装置等を用いた解析により、Cdc25タンパク質の188番目のSer残基(S188)を同定した。この部位のリン酸化は、in vitroでは確かにAktにより起こり、さらに、Cdc25の活性に対しては、そのフォスファターゼ活性の上昇をもたらすことを見いだした。また、in vivoについては、S188のリン酸化を特異的に認識する抗体を作成して検討した結果、S188のリン酸化は、細胞内のAktの活性化に依存することが示された。また、in vivoで初期リン酸化を受けたCdc25の活性を調べた結果、こちらも約3倍に活性化しており、in vitroでの結果と一致した。本研究により、細胞周期研究においては、M期開始の分子機構の解明に一歩近づけたと言え、また、シグナル伝達の研究においては、Aktの新規ターゲットとしてCdc25を同定し、その機能として、細胞のサバイバル制御だけでなく、細胞周期のM期移行制御という新たな展開を示したと言える。

本年度はさらに、S188のリン酸化抗体を用いて卵成熟過程および初期卵割過程についても解析範囲を広げ、Cdc25のS188のリン酸化制御が、卵成熟過程の減数第二分裂開始にも関与する可能性を示した。ここから、本研究により、M期開始の分子機構の解明に一歩近づくと共に、今後、新たな展開が期待されると言える。
茨城県における超過滞在者への対応を考慮した外国人に対するエイズ対策の検討

茨城県内の市町村役場外国人登録係、保健所、保健センター、社会福祉事務所、その他の公的な保健医療・生活相談窓口に対して、外国人への対応に関する質問紙調査を実施した。上記相談窓口等での外国人への対応場面では、特に英語以外の言語において言葉が通じないことによる対応の困難さを訴える声が多数を占めたが、その割に国際交流協会や地域のNGO等の通訳可能な人の活用がされていない傾向にあり、電話による通訳体制の整備を希望する意見が多数あった。又、健康保険やその他の保健医療福祉制度の活用についても、外国人への適応に関して知識・情報不足により適切に紹介・活用されていない状況にあることがうかがえた。県内の工場、中小企業、飲食店等に対して無作為に、外国人の雇用および生活や保健医療上の問題に関する質問紙調査を実施したところ、採用時健康診断や雇用後の定期健康診断は実施されていない状況があった。更に、外国人を雇用していることが明らかな飲食店に対しても同様の質問紙を送付したが、前者の無作為に送付したものは約5割の返信あったのに比べ、ほとんど返信がなかった。こういった返信してこない飲食店に勤務する外国人の間に生活上および健康上の問題点が集積していることが予測される。日本における外国人へのHIV/AIDSに関する対応を検討する際には、外国人が享受できる保健医療福祉制度を適正に活用できるように、市町村役場や保健所、保健センターの職員への研修が必須であること考える。また、特に英語以外の通訳の確保が困難な状況にあるので、電話による通訳体制の整備が早急に望まれる。滞日外国人のHIV/AIDS対策に関る際、人権、外国人の滞在資格、健康保険、保険医療福祉制度の適用といった問題にも直面するので、HIV/AIDS対策を切り口に生活全般にわたる滞日外国人への適正な対応が実現するように包括的に検討されることが必要である。これまでに国内で実施されてきたHIV/AIDS対策及び外国人医療に関する文献調査、国・地方自治体の対応、NGOの活動についてレビューを行った。HIV/AIDS対策及び外国人医療は、地道な努力が積み重ねられてきているものの、未だ偏見や差別の中、適切な保健医療福祉サービスが提供されているとは言い難い。茨城県内における外国人のHIV/AIDS診療に関する医療機関への質問紙調査については、当初、全医療機関に対する調査を計画していたが、外国人へのHIV/AIDS診療を行っている医療機関は限られているため、関係者からの聞き取り調査を実施した。県内の市町村での対応およびNGO活動については、現在、調査継続中である。茨城県内市町村における在日外国人登録をしている外国人およびその家族に対する保健、教育分野でのサービスの提供は、改善されてきている。しかしながら、外国人登録をしていない外国人およびその家族については、考慮されていないため、問題点が外国人コミュニティの中で内包されているようである。また、HIV/AIDS医療に関しては、特に外国人登録をしていない患者への対応は、NGOや大使館を通じて医療費の捻出、本国への帰国の手続き等が実施されているが、ひとりの患者が抱える問題が、医療のことのみならず生活全般にかかわるため、対応に苦慮しているところである。茨城県では、つくば保健所において外国人医療相談(英語、タイ語)が実施されている。その相談にあたっているタイ人通訳者を医療機関へ派遣する制度ができたことにより、それまで、HIV陽性告知や本国への帰国の相談等、深刻かつ複雑な内容を伝えるべきときに適切な通訳者の確保が困難であったが、少なくとも、緊急時のタイ語通訳に関しては、改善されてきた経緯がある。長期的な支援体制については今後更に検討、充実が望まれる。外国人が勤務する事業所等への調査に関しては、現在、事業所側が研究者を敬遠しているような状況にあり、調査の進展を望めないため、来年度の課題としたい。外国人の本国のHIV/AIDS対策の現状を把握し、相互の関係構築に努める点については、ブラジルのリオデジャネイロ、サンパウロ、ブラジリア(保健省)を訪問し、国、州、市レベルの対策およびNGO活動について情報収集した。世界のモデルと言われるブラジルのHIV/AIDS対策と呼ばれる要因には次のようなことが考えられる。(1)AIDS治療薬を国が無料提供(全てのブラジル国民は、医療を無料で受ける事が出来る)、(2)AIDS治療薬の大半を国内生産することで、医療費削減に成功、(3)疫学、検査、治療の情報システム、(4)大規模なキャンペーンを含む予防教育、(5)NGO活動の充実。これらの内容については、厚生科学研究「HIV感染症の医療体制に関する研究班」による「第4回HIV/AIDS患者支援通訳養成セミナー」にて報告した。日本国内における日系ブラジル人をはじめとする中南米出身者への対応についても特に通訳派遣制度の充実が望まれる。

県内の工場、中小企業、飲食店等に対して無作為に、外国人の雇用および生活や保健医療上の問題に関する質問紙調査を実施したところ、採用時健康診断や雇用後の定期健康診断は実施されていない状況があった。更に、外国人を雇用していることが明らかな飲食店に対しても同様の質問紙を送付したが、前者の無作為に送付したものは約5割の返信あったのに比べ、ほとんど返信がなかった。こういった返信してこない飲食店に勤務する外国人の間に生活上および健康上の問題点が集積していることが予測される。日本における外国人へのHIV/AIDSに関する対応を検討する際には、外国人が享受できる保健医療福祉制度を適正に活用できるように、市町村役場や保健所、保健センターの職員への研修が必須であること考える。また、特に英語以外の通訳の確保が困難な状況にあるので、電話による通訳体制の整備が早急に望まれる。滞日外国人のHIV/AIDS対策に関る際、人権、外国人の滞在資格、健康保険、保険医療福祉制度の適用といった問題にも直面するので、HIV/AIDS対策を切り口に生活全般にわたる滞日外国人への適正な対応が実現するように包括的に検討されることが必要である。
18世紀後半のドイツ探検旅行記をめぐる博物学と植民地主義に関する研究

本年は、3年にわたる最後の研究機関にあたるために、総仕上げをする年度であった。先年までにゲッティンゲンのパウリーナー協会旧大学図書館で多くの文献を収集したが、本年度はゲッティンゲンと縁の深いハノーヴァーのライプニッツ図書館ならびにヴォルフェンビュッテルのアウグスト公図書館でさらなる文献収集して、旅行記および人種論に関する自然科学関連の資料をかなり補完することができた。昨年度にドイツのカッセル大学ゲオルク・フォルスター学会の国際シンポジウムでおこなった口頭発表を加筆して学術論文としたものが、本年度発行の機関誌であるGeorg-Forster-Studien第12号第2分冊に掲載された。また関西大学東西学術研究所での国際シンポジウム「アジア・世界をつなぐ海の回廊-文化の出会い-」(2007年1月1920日)において、口頭発表「クックがみたタヒチの食と儀礼」をおこなった。内容は、ヨーロッパ人航海者たちの航海記を基礎として、南太平洋諸島の住民の食習慣を恣意的に解釈しようとする植民地主義的視点の分析であって、これまでに収集した資料を駆使して、古典的原典資料を、現代の文化人類学の視点によって分析しながら、文明と文化の対比と将来的な多文化共生社会のあり方を考察するものであった。その一方で、近代の旅行記や航海記の研究と関連して、ヨーロッパ中世における文化交流、紀行文学、キリスト教を調査していたが、その過程で、非常に興味深い文献であると判断したマルギット・バッハフィッシャーのMusikanten, Gukler und Vaganten(Augsburg, Battenberg,1998)を共訳で出版した。フォルスターの『世界周航記』にみられる博物学的な記述のうち、とくに南太平洋諸島の住民たちに関するものは、ヨーロッパにおける初期の「民族学」あるいは「人類学」ともいうべき性質をもっている。このばあい、フォルスターは、自身のフィールドワークによってデータを集積する「記述民族学」をおこなっているといえる。これに対して、もうひとつの民俗学の方法論をとっているのが、ジャン-ジャック・ルソーである。レヴィ-ストロースによれば、ルソーこそが最初の人類学者という位置づけである。ルソーの『人間不平等起原論』で展開されているオラン・ウータン論は、人間性の起源について探究するものであるが、ルソーは、厖大な旅行記の情報をもとにして、これを立論している。すなわち、かれは収集された事実について考察する人類学である「文化人類学」の方法論をとっているということであって、「記述民族学」と「文化人類学」というバイナリズムに、ルソーとフォルスターの方法論や記述の差異を還元できるのである。しかし、非ヨーロッパ社会や住民に対する両者の見解は、<文化進化主義>という点で軌を一にしている。現代では、両者のこうした視点をヨーロッパの視点から批判しているのは、レヴィ-ストロース初期の著作『人種と歴史』(1961)における反文化進化主義の思考である。したがって、フォルスターとルソーによるふたつの著作は、その後のヨーロッパの植民地主義の方向性を決定づけるのに寄与したといえるだろう。そして、フォルスターにおけるこのような<文化進化主義>の視点は、南太平洋諸島の住民たちの「身体」の記述にも色濃くあらわれている。その「身体」描写もまた、かれによって低い文明/文化とみなされた「未開人」の劣性を根拠づけ、非ヨーロッパ世界の住民をヨーロッパとの対比において、「優劣」の図式に配列する言説を形成してしまうのが明らかなのである。研究期間の2年目である平成17年度は、前年度にドイツ・ゲッティンゲンのパウリーナー教会図書館で収集してきた文献を読みながら、分析を進めてきた。17年度に、本研究課題に関係しておこなった学会発表は2件で、それぞれが関連する学会から2006年度に刊行される論集に収録されることが決定している。1件は、2005年5月3日に開催された日本独文学会春季研究発表会のシンポジウム「18世紀にみる<秩序>」で発表した「未開の自然にある庭園フォルスター『世界周航記』における自然描写」である。本発表は、ゲオルク・フォルスターのテクストにおける自然描写が、同時代の庭園理論書や文学テクストとインターテクスチュアルな関係のなかで形成されてきたものであって、コロニアリズムともいくらか結託したものでもあることを述べたものである。もう1件は、2005年7月28日のHumboldt-Kolleg in Kyotoにおける発表Grenzen zwischen Fiktion und Non-Fiktion : Robinsonade und wissenschaftlicher Diskurs im 18.Jahrhundert(和訳:フィクションとノンフィクションとの境界:18世紀におけるロビンソン風物語と科学的ディスクール)は、さまざまな航海記や旅行記のテクストがフィクションである小説に援用されていく過程で、ロビンソン風物語の発展に寄与する一方で、コロニアリズムの言説形成にも影響を与えていたことを明らかにしたものである。本年度もまた、ドイツにおける調査をおこなった。前年度同様にゲッティンゲンのパウリーナー教会図書館はもとより、今回はおもにシュレスヴィヒ、シュトゥットガルト、カッセル、ルードルシュタット、ヴェールリッツ、ビーレフェルト、ドイツ各地に残っているヴンダーカンマー(驚異陳列室)といった自然史博物館を来訪し、多くの文献資料を収集することができた。これらの資料を用いた分析は、最終年度である来年度にまとめて成果として結実させる予定である。

先年までにゲッティンゲンのパウリーナー協会旧大学図書館で多くの文献を収集したが、本年度はゲッティンゲンと縁の深いハノーヴァーのライプニッツ図書館ならびにヴォルフェンビュッテルのアウグスト公図書館でさらなる文献収集して、旅行記および人種論に関する自然科学関連の資料をかなり補完することができた。昨年度にドイツのカッセル大学ゲオルク・フォルスター学会の国際シンポジウムでおこなった口頭発表を加筆して学術論文としたものが、本年度発行の機関誌であるGeorg-Forster-Studien第12号第2分冊に掲載された。また関西大学東西学術研究所での国際シンポジウム「アジア・世界をつなぐ海の回廊-文化の出会い-」(2007年1月1920日)において、口頭発表「クックがみたタヒチの食と儀礼」をおこなった。内容は、ヨーロッパ人航海者たちの航海記を基礎として、南太平洋諸島の住民の食習慣を恣意的に解釈しようとする植民地主義的視点の分析であって、これまでに収集した資料を駆使して、古典的原典資料を、現代の文化人類学の視点によって分析しながら、文明と文化の対比と将来的な多文化共生社会のあり方を考察するものであった。その一方で、近代の旅行記や航海記の研究と関連して、ヨーロッパ中世における文化交流、紀行文学、キリスト教を調査していたが、その過程で、非常に興味深い文献であると判断したマルギット・バッハフィッシャーのMusikanten, Gukler und Vaganten(Augsburg, Battenberg,1998)を共訳で出版した。
プロスタグランディンＥ受容体ＥＰ４シグナル制御による大動脈瘤の治療開発

大動脈瘤は血管壁内の炎症と弾性線維をはじめとした細胞外基質の分解を特徴とする、進行性の致死性疾患である。炎症と細胞外基質の分解により血管壁が脆弱化すると、血管内圧力のために大動脈の直径は拡大し、破裂時の死亡率は30%以上と非常に高い。しかしながら現在、対処療法である外科的治療以外の根本的治療は存在しない。本研究では、プロスタグランディンE受容体EP4シグナルを抑制することで、大動脈瘤の進行を抑制する初めての薬物治療の開発を目的とした。先行研究にて、ヒト大動脈瘤ではEP4発現と弾性線維分解に正の相関を認め、ヒト大動脈瘤組織を用いた検討ではEP4活性化がMMP-2やIL-6の発現を誘導すること、EP4拮抗薬がこれらの分子群の発現、活性を抑制することを示した。さらにEP4欠損マウスやApoE・EP4ダブル欠損マウスにおける大動脈瘤の解析を通じて、大動脈瘤の進行にPGE2-EP4シグナルが関与すること、EP4拮抗薬が大動脈瘤の進行抑制薬、治療薬として有効である可能性を示唆した。本研究ではさらに、大動脈瘤組織の器官培養の上清の質量分析を行い、ヒト大動脈瘤の進行に強くかかわる分泌蛋白の網羅的解析を行った。大動脈瘤組織をプロスタグランディンE、EP4アゴニスト、またはプロスタグランディンE+EP4アンタゴニストで刺激し、EP4シグナルによって病変組織において分泌が制御されるタンパクを検索したところ、インターロイキン6やマトリクスメタロプロテアーゼをはじめとする各種プロテアーゼが検出され、ヒトの病変組織でもプロスタグランディンEーEP4シグナルが疾患増悪に強く関与している可能性が示された。また、これらのうち大動脈瘤患者の血漿中で分泌がみられ、かつステント留置により大動脈瘤の縮小があった症例では有意に減少していることが示され、疾患活動性を判定するバイオマーカーの候補となりえると考えられた。26年度が最終年度であるため、記入しない。また、これらのうち大動脈瘤患者の血漿中で分泌がみられ、正常ボランティア血漿では検出されないタンパクもあり、疾患進行を予測するバイオマーカーの候補となりえると考えられた。

また、これらのうち大動脈瘤患者の血漿中で分泌がみられ、かつステント留置により大動脈瘤の縮小があった症例では有意に減少していることが示され、疾患活動性を判定するバイオマーカーの候補となりえると考えられた。26年度が最終年度であるため、記入しない。大動脈瘤の病変組織の器官培養の質量分析の条件設定が完了し、7例のサンプルを用いて疾患進行に関連すると考えられるタンパクを検出でき、さらにそれらのうちバイオマーカーとしての可能性があることが示唆できた。これらの進捗は当初の予定を上回るものである。本年度は、大動脈瘤患者と正常者、動脈硬化性病変を持つが大動脈瘤のない患者の3群でそれぞれ30例以上を目標として血漿検体を収集し、先に挙げた候補タンパクの疾患活動性バイオマーカーとしての有用性を検討する。また、EP4拮抗薬の大動脈瘤治療への有効性をさらに検討するため、大動脈瘤をすでに形成させた疾患モデルマウスにEP4拮抗薬を投与してその治療効果と進行抑制効果を検証する。現在大動脈瘤の進行を予測できるバイオマーカーは確立したものがないため、本研究によりこれを得ることができれば、EP4拮抗薬の臨床試験の効果判定にとっても有用である他、薬剤の投与の適応を決定するうえでも有効であると考えられ、大動脈瘤治療薬の臨床応用の実現に貢献できると考えられる。
厳密な多成分拡散理論を用いた拡散火炎の反応動力学的数値解析と選択拡散の影響評価

水素を燃料とした軸対称層流拡散火炎を対象とし,多成分拡散を厳密に評価した場合と有効拡散係数を用いた場合の解との比較によって,計算法の精度に関する検討を行い,以下の結果を得た.(1)燃料が体積比H_2:N_2=30:70の混合気の場合,有効拡散係数を用いた解析結果と厳密に多成分拡散を評価した場合の結果とはほぼ一致した.(2)燃料が純水素の場合,主要化学種に関して,有効拡散係数D_<im>=(1-w_i)/Σ_<j≠i>(X_j/D_<ij>)(w_i:質量分率,X_i:モル分率,D_<ij>:2成分系拡散係数)を用いた計算では,平均分子量の勾配を無視しているため,純水素を燃料とした場合のように平均分子量の変化が大きな場では精度が悪くなる傾向がある.(3)有効拡散係数としてD_<im>=(1-X_i)/Σ_<j≠i>(X_j/D_<ij>)を用いた場合,厳密に多成分拡散を考慮した場合と比較して,全体的に精度よく計算できるが,主要化学種の計算結果において火炎が存在する領域で精度が多少悪くなる傾向がある.(4)微小成分においてはいずれの有効拡散係数を用いた場合でも,一般に精度はかなり高くなると考えられる.しかし,微小成分であっても,主要成分の濃度勾配が大きな領域で,精度が多少悪くなる場合がある.また,純メタンを燃料とした噴流拡散火炎について,空気中に燃料を吹く通常火炎と,逆に燃料中に空気を吹く逆火炎を対象とし,選択拡散を考慮した場合としない場合とについて反応動力学的数値解析を行った.C/H比の分布の変化から,純粋な燃料であっても反応過程で拡散特性の異なった種々の成分が生成され,それらの選択拡散の影響によって火炎温度が平衡火炎温度よりも高い,または低い値になる.水素を燃料とした軸対称層流拡散火炎を対象とし,多成分拡散を厳密に評価した場合と有効拡散係数を用いた場合の解との比較によって,計算法の精度に関する検討を行い,以下の結果を得た.(1)燃料が体積比H_2:N_2=30:70の混合気の場合,有効拡散係数を用いた解析結果と厳密に多成分拡散を評価した場合の結果とはほぼ一致した.(2)燃料が純水素の場合,主要化学種に関して,有効拡散係数D_<im>=(1-w_i)/Σ_<j≠i>(X_j/D_<ij>)(w_i:質量分率,X_i:モル分率,D_<ij>:2成分系拡散係数)を用いた計算では,平均分子量の勾配を無視しているため,純水素を燃料とした場合のように平均分子量の変化が大きな場では精度が悪くなる傾向がある.(3)有効拡散係数としてD_<im>=(1-X_i)/Σ_<j≠i>(X_j/D_<ij>)を用いた場合,厳密に多成分拡散を考慮した場合と比較して,全体的に精度よく計算できるが,主要化学種の計算結果において火炎が存在する領域で精度が多少悪くなる傾向がある.(4)微小成分においてはいずれの有効拡散係数を用いた場合でも,一般に精度はかなり高くなると考えられる.しかし,微小成分であっても,主要成分の濃度勾配が大きな領域で,精度が多少悪くなる場合がある.また,純メタンを燃料とした噴流拡散火炎について,空気中に燃料を吹く通常火炎と,逆に燃料中に空気を吹く逆火炎を対象とし,選択拡散を考慮した場合としない場合とについて反応動力学的数値解析を行った.C/H比の分布の変化から,純粋な燃料であっても反応過程で拡散特性の異なった種々の成分が生成され,それらの選択拡散の影響によって火炎温度が平衡火炎温度よりも高い,または低い値になる.
犬の糖尿病の合併症に関する基礎的ならびに臨床的研究

本研究は犬の糖尿病に併発する疾患のうち血管病変を主体とし,毛細血管瘤などを示す糖尿病性網膜症や糸球体硬化などを示す糖尿病性腎症に注目し,これらの発症機序ならびにその病態を明らかにすることを目的として以下の点について検討した.1)インスリンの作用不足に関する検討:赤血球インスリンレセプターについて検討した結果,糖尿病犬のレセプター数は健常犬のそれと比較して増加しており,インスリン治療により減少することが明らかとなった.このことから,犬の赤血球インスリンレセプターについてもclownあるいはup regu-lationが認められ,犬の糖尿病の病態を知る上でもインスリンレセプターの検討が必要であると考えられた.2)病態に関する検討:自然発症糖尿病犬1例についてフォスフォスルフォンフタレイン(PSP)負荷試験を行って,腎機能を検討した.すなわち, 6mgのPSP試薬を静脈内投与し,投与後20分間の尿全量を回収して尿中のPSP濃度を測定した. PSPの排泄率は47%と健常犬と比較して差は認められなかった.糖尿病性腎症の早期発見にはPSP負荷試験よりもさらに鋭敏な検査法を検討する必要があるものと考えられた.3)病理組織学的検討:持続的な高血糖・尿糖を示した犬10例について検討し, 9例に膵壊死,慢性膵炎,ラ氏島の萎縮・減数,あるいは島細胞の空胞化などを認めた.また全例に腎糸球体の結節性あるいはび慢性硬化病変,毛細血管瘤などの血管病変ならびに滲出病変や観察された.網膜については1例で検討したが,毛細血管の拡張ならびに血管壁の肥厚が認められた.本研究は犬の糖尿病に併発する疾患のうち、血管病変を主体とする毛細血管瘤などの網膜症ならびに糸球体硬化症などの腎症に注目し、これらの発症機序および病態を明らかにすることを目的とした。まず昭和61年度はその基礎的段階として以下の点について検討を加えた。1.インスリン作用不足に関する検討:膵B細胞の培養系を確立することを試みたが、インスリン分泌を観察しうる培養細胞を得るには至らなかった。この原因の一つには、培養に供試した膵細胞が成犬由来のものであったため細胞増殖が不十分であったものと考えられた。2.発症機序に関する検討:グルコース代謝異常の観点からアルドースリタクターゼの測定系を検討中である。また自然発症糖尿病犬について血管病変の原因の一つと考えられる血中過酸化脂質濃度を測定し、検討中である。3.病態に関する検討:自然発症糖尿病犬について蛍光眼底検査を行った。すなわち2.5ml5.0mlの蛍光色素を静脈内投与したのち網膜血管への蛍光色素の発現状態ならびに網膜血管の〓行などについて観察した。動静脈相において毛細血管床閉塞野を示す低蛍光部位ならびにその周囲に細小血管瘤を示す点状蛍光が認められた。また蛍光色素の漏出は観察されなかった。これらの蛍光眼底像はヒトの非増殖性糖尿病性網膜症における所見と同様であった。4.病理組織学的検討:高血糖尿糖を呈した犬10例中9例で、膵壊死、慢性膵炎または〓の萎縮減数、〓細胞の空胞化などを認めた。また全例に腎糸球体の結節性あるいはび慢性硬化病変、毛細血管瘤などの血管病変ならびに滲出病変が観察された。網膜については1例で検討したが、毛細血管の拡張ならびに血管壁の肥厚が認められた。本研究は犬の糖尿病に併発する疾患のうち血管病変を主体とし,毛細血管瘤などを示す糖尿病性網膜症や糸球体硬化などを示す糖尿病性腎症に注目し,これらの発症機序ならびにその病態を明らかにすることを目的として以下の点について検討した.1)インスリンの作用不足に関する検討:赤血球インスリンレセプターについて検討した結果,糖尿病犬のレセプター数は健常犬のそれと比較して増加しており,インスリン治療により減少することが明らかとなった.このことから,犬の赤血球インスリンレセプターについてもclownあるいはup regu-lationが認められ,犬の糖尿病の病態を知る上でもインスリンレセプターの検討が必要であると考えられた.2)病態に関する検討:自然発症糖尿病犬1例についてフォスフォスルフォンフタレイン(PSP)負荷試験を行って,腎機能を検討した.すなわち, 6mgのPSP試薬を静脈内投与し,投与後20分間の尿全量を回収して尿中のPSP濃度を測定した. PSPの排泄率は47%と健常犬と比較して差は認められなかった.糖尿病性腎症の早期発見にはPSP負荷試験よりもさらに鋭敏な検査法を検討する必要があるものと考えられた.3)病理組織学的検討:持続的な高血糖・尿糖を示した犬10例について検討し, 9例に膵壊死,慢性膵炎,ラ氏島の萎縮・減数,あるいは島細胞の空胞化などを認めた.また全例に腎糸球体の結節性あるいはび慢性硬化病変,毛細血管瘤などの血管病変ならびに滲出病変や観察された.網膜については1例で検討したが,毛細血管の拡張ならびに血管壁の肥厚が認められた.
卵母細胞および発生初期の胚におけるプロテインキナ-ゼC・アイソザイムの証明

1.卵母細胞におけるプロテインキナ-ゼC(以下Cキナ-ゼ)・アイソザイムの証明(1)B6C3F_1マウスの一次卵母細胞(細胞全体)および二次卵母細胞(凍結切片)に、Cキナ-ゼ・アイソザイムI型、II型およびIII型にそれぞれ特異的な単クロ-ン抗体MCー1a、MCー2aおよびMCー3aを用いて免疫蛍光光染色を施したところ、MCー2aおよびMCー3aとの反応による蛍光が観察され、MCー1aとのインキュベ-ションによって特異的な蛍光は認められなかった。すなわち、マウスの一次および二次卵母細胞には、Cキナ-ゼ・アイソザイムII型とIII型が存在することがわかった。(2)アフリカツメガエルの二次卵母細胞のホモジェネ-トを10万×gで遠心分離して得た上清について、DEAEセルロ-スカラムクロマトグラフィ-およびSDSーPAGEを経て、上記の3種類の単クロ-ン抗体を用いてイムノブロッティングを行ったところ、いずれの抗体によっても分子量約8万の位置にバンドが出現した。このことから、アフリカツメガエルの二次卵母細胞の可溶性画分には、Cキナ-ゼ・アイソザイムI型、II型およびIII型のすべてが存在することが明らかとなった。2.着床前のマウス胚におけるCキナ-ゼ・アイソザイムの証明B6C3F_1マウスの1、2、4細胞期胚(凍結切片)および胚盤胞(胚全体)に、MCー1a、MCー2aおよびMCー3aを用いて免疫蛍光染色を施したところ、すべてのステ-ジの胚で、MCー2aおよびMCー3aとの反応による蛍光が割球および残存している極体の細胞質に観察され、MCー1aとのインキュベ-ションによっては特異的な蛍光は認められなかった。本研究により、マウスでは一次卵母細胞から胚盤胞までは、Cキナ-ゼ・アイソザイムの少なくとも2種類(II型、III型)が存在することがわかった。
フォトニック結晶に向けたフェムト秒レーザーによるナノボイド周期構造体の作製と評価

本研究では、ワイドバンドギャップ酸化物結晶(BO_3^<3->やPO_4^<3->分子基をもつ真空紫外域まで透明なホウ酸塩ガラスおよび結晶に対して(1)フェムト秒パルスレーザーを材料に集光照射し、微細なナノ構造(直径数百nm程度)の作製と形態を観察する。加えて比較のために電子線リソグラフィーによる微細加工(EB描画)による周期構造の作製と評価(2)ナノホール形状のパルスエネルギー依存性とガラスと結晶との形態を比較しナノ周期構造によるフォトニック結晶の実現可能性を探る。研究の成果:(1)ナノ構造周期体の作製を目指し、同じ組成をもつLi_2O・2B_2O^3(LTB)ガラスとLi_2B_4O_7(LTB)結晶表面にフェムト秒レーザーアブレーションによりホールを作製した。アブレーションによって、LTBガラスでは、ビームプロファイルを反映したほぼ円形(楕円状)のホールが、LTB結晶では、プロファイルとは異なり、結晶の構造(正方晶)を反映したと考えられる四角形状のホールが形成されることを見出した。その加工断面は{hho}型面となっているとみられた。また、LTBガラスおよびLTB結晶ともに、ホールサイズはレーザーフルーエンスの減少とともに小さくなること、閾値加工であることが分かった。フルーエンス4.7J/m^26.4J/cm^2の場合、内部のホールサイズは、ビームスポット径(約2μm)および波長以下のナノホール(LTBガラス:直径500nm,LTB結晶:一辺165200nm)が形成できることが分かった。(2)電子ビームによるリソグラフィーでは、LTBガラスについては3角格子で比較的大きさの揃ったナノホール(平均直径220nm)が形成されたが、ホール断面が円柱状とはならなかった。描画された2次元ホールアレイを基にシミュレーションした結果、波長9901050nmの近赤外用域で完全PBGが存在する可能性を示した。
日本語の文章理解におけるキーワードによる内容予測の効果に関する研究

本研究は、日本語学習者の文章理解を促進し効率的な読解活動が行えるようにするための指導法を見い出すことを目的として行った。近年、認知心理学の研究から読解の過程が明らかにされ、文章を理解するにはトップ・ダウン処理とボトム・アップ処理の両方の処理がうまく促進されなければならないことがわかってきた。外国語学習においてもそのような読みのプロセスに沿った読解指導が必要であると言われており、さまざまな試みがなされている。その一つのアプローチとして、読みに入る前の活動として様々な先行オ-ガナイザーを学習者に提示することによりスキーマを活性化する指導法が有効であると言われている。そこで本研究ではスキーマを活性化させる方法として、文章中のキーワードから文章内容を予測させ、キ-コンセプトに結び付ける語彙ネットワーク形成活動を取り上げ、文章理解の実験を実施した。実験は、中級前期の学習者を(1)文章を自分で読んで問題を解く群、(2)読解前活動として文章中の6つのキーワードを順次提示し文章内容を予測してから読み、問題を解く群、の統制群と実験群の二つに分けて行った。各グループの学習者には、読解力を調べるための読解問題をやってもらい、グループ間の等質性を調べた。また文章読解後、文章理解問題を実施し、処遇の効果を調べた。今回の実験では実験群の事後テストの平均点が統制群より高いという結果は得られたが、統計的な有意差は認められなかった。しかし、文章を読む前にキーワードにより内容を予測していくという活動は、学習者には面白かったと好意的に受け止められた。本実験において有意な差が認められなかった要因として、被験者の出身地域に偏りが見られたこと、読解材料が被験者のレベルに適していなかった可能性があること、キーワードの提示の方法などが考えられる。今後その点を考慮しさらに研究を続けていくことが課題である。また語彙ネットワーク形成活動は、事後直後の結果だけではなく、何日か後の記憶に影響を与える可能性も高いため、リコールテストを加えた効果を測ってみる必要があると考えている。