hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
食品添加物(エリソルビン酸)の生体内動態に関する研究

次いで,FZE法による血中の両者の分離定量法を試行した結果,血中のAsAおよびErAは良好に分離定量できるものと思われた.平成8年度には,この方法により食品添加物(ErA)の尿および血液による生物学的モニタリングを実施し,あわせて,尿中物質濃度の補正法等についても検討する予定である.エリソルビン酸[以下,ErAと略す]はアスコルビン酸[以下,AsAと略す]の立体異性体で,食品添加物(酸化防止剤など)として広く用いられている.これまでErAは動物実験の成績から安全であるとされているが,我々がヒトにAsAとErAをそれぞれ単独または同時に経口投与して尿中の両者の排泄経過を調べた結果,ヒトにおける両物質の吸収または排泄は相互に影響するものと思われた.この事実を確認するために,本研究では生体試料中に低濃度に存在する場合のErAとAsAの定量法を確立する目的で,現在微量定量の分野で急速に発展しているキャピラリー電気泳動法(HPCE)を用いて,先ず標準溶液とヒト尿についてErAとAsAの同時定量法を調査し,高速液体クロマトグラフィー(HPLC)の成績と比較した.成績は以下の通りである.(1)AsA,ErAの標準溶液の場合は,HPCEの泳動溶液を50mMドデシル硫酸ナトリウム(SDS)含有の10mMホウ酸緩衝液(pH=11)を用いた場合,AsAとErAのピークはそれぞれ5.7分と6.1分に移行し,両者は良く分離泳動することが認められた.ホウ酸緩衝液の濃度(10,12.5および20mM),pH(9および11),組成(SDS濃度など)について検討した結果,測定誤差は上記の50mMSDS含有10mMホウ酸緩衝液を用いて泳動する場合が最も少なかった.同一試料についてHPCEをHPLCと比べると測定に要する時間は前者が短い反面,再現性は後者が優れていた.(2)AsAとErAをヒト尿に添加し,メタリン酸溶液で抽出,希釈した試料をHPCE測定した結果,移行時間はクレアチニンが4.9分,AsAが5.2分,ErAが5.6分,尿酸が5.8分となり,AsAとErAはこれらの尿中常在成分とよく分離して泳動することが認められた.添加回収率は,AsAが98%,ErAが88%であった.
イオン液体を前駆体とする新規炭素材料開発

炭素材料は科学・工業の多くの分野で広く用いられている。その化学的安定性や高い熱的安定性、電気伝導度により触媒、浄水、ガス捕捉、エネルギー貯蔵・変換デバイスなどへ適用されている。これらの用途に応じて求められる性質(比表面積、孔体積、異種元素ドープ率など)を制御する研究が進められている。特に窒素原子をドーピングした炭素材料は高い電子伝導性や酸化安定性などを示し、触媒化学や電気化学分野で注目されている。最近ではイオン液体を含む低分子量のイオン性塩を前駆体とした炭素材料合成が報告されており、当研究グループでも硫酸イオンを有するプロトン性イオン液体を前駆体とすることで様々な性質を有する炭素材料を得ている。当該外国人特別研究員は窒素が豊富なイオン液体を前駆体として炭素材料を合成し、それをエネルギーデバイスへ応用する課題に取り組んだ。以下にその概要を示す。1高窒素含有陰イオンを有する9種類のイオン性物質を合成した。大量生産性を考慮し、ビーズミルやスプレーフラッシュ蒸発法なども取り入れた。2当研究グループで開発された「溶媒和イオン液体」にはハロゲンを含む陰イオンであることが多い。ハロゲンフリーな陰イオンを有する溶媒和イオン液体を開発した。シアノ基を有する陰イオンのナトリウム塩を2種類合成し、数種のグライム類を混合したところ、室温で液体状態のナトリウム溶媒和イオン液体を新規に開発した。3従来のリチウムイオン二次電池に取って替わるナトリウムイオン二次電池用有機電極活物質を開発した。合成したナトリウム塩を用いた電池試験では、初期容量が196mAh/g、100サイクル後も200mAh/g以上を達成した。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。炭素材料は科学的にも工業的にも様々な分野で広く用いられている材料であり、例えば触媒、ガス分離、エネルギー貯蔵/変換などで注目を浴びている。一般的に炭素材料は有機前駆体の炭素化によって作製されるが、これらの前駆体は低蒸気圧を持った物質や合成高分子などで利用に制限がある。そのため高分子前駆体の場合は複数段階の合成が必要であるため、時間的な制約がある。本研究では我々は窒素含有前駆体である有機塩を合成した。まずピクリン酸をブロンステッド酸として選択し、高い炭素含有量を示す有機塩基(アゼピン誘導体やフェニルアミン)と反応させた。得られた塩は高い熱的安定性を示し、安全に取扱いできた。得られた有機塩の同定はIR,1H NMR, 13C NMRで行い、これが窒素含有炭素材料前駆体として適していることが分かった。そして最近では、有機塩を用いた二次電池(リチウムイオン電池、ナトリウムイオン電池)用電極材料への適用に注力している。本研究の発展として我々は4,4'-スチルベンジカルボン酸のナトリウム塩を合成した。さらにこのナトリウム塩を有機電極材料として、溶媒和イオン液体である[Na(G5)][TFSA](ペンタグライムとNa[TFSA]の等モル混合物)を電解液として組み合わせることでコインセルを作製し、充放電試験を行った。この電池は可逆な充放電を示し、電流密度が50mA/gで210 mAh/gであった。200サイクル後でも130 mAh/g程度の容量を維持することを明らかとした。進捗状況については、当初の計画通り、炭素材料前駆体であるイオン液体(有機塩)の組み合わせのスクリーニングを開始しており、徐々に結果が収集できている。そして、当初提案した研究の発展として有機塩をナトリウムイオン電池の有機電極材料に適用し、コインセルを試作した。充放電試験の結果、比較的高い充放電容量を観測でき、そしてサイクル特性も比較的良好であることが確認できたため、全体として「おおむね順調に進展している」と考えている。まず炭素材料前駆体である有機塩の最適化を今まで通り進めていく。

通常炭素化は前駆体をるつぼに入れ、管状炉にて行うが、その焼結温度や時間を制御することで得られた炭素材料の性質を整理する。さらに銅粉末、酢酸銅、過塩素酸ニッケルのような触媒を利用した炭素化にも着手する。得られた炭素材料の結晶化度、窒素含有率、比表面積、孔径分布などを緻密に調査し、さらにCO2などの吸着挙動についても検討を行う。そして、有機電極材料に関する検討も並行して行う。昨年度用いた以外の溶媒和イオン液体を新たに創製し、電解液に適用する。それを作製した有機塩を電極材料として用いコインセルを試作する。従来有機電極の欠点はその低い電子伝導性にあった。そこで従来はPVdFをバインダー高分子として用いていたが、導電性高分子を適用することでその弱点を克服することを目指す。さらに新規ナトリウム有機塩の作製にも取り組む。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
RC部材とS部材で構成されるＴおよびＬ字形接合部の孔あき鋼板ジベルによる性能改善

本研究は、孔あき鋼板ジベルをRC柱とS梁で構成されるTあるいはL字形柱梁接合部の鉄骨下フランジに取り付け、柱梁接合部の支圧破壊を防止することを試みる。また、申請者が提案しているTあるいはL字形柱梁接合部の力学モデルに基づいて、柱梁接合部の支圧終局耐力を理論的に評価することを試みる。実験結果から,TあるいはL字形柱梁接合部とも、PBLを取付けることによって,最大耐力が増加しかつすべりを伴う履歴性状が若干改善されることが示された。また,既往の著者らのTあるいはL字形柱梁接合部の支圧耐力式にPBLの効果を付加した耐力評価式が提案され,その耐力式によって実験結果を大概評価できることが示された。平成27年度は,柱RC・梁Sで構成されるT字形柱梁接合部に関して,S梁フランジ下面に取り付けられた孔あき鋼板ジベル(以下,PBLと言う)が,接合部の支圧破壊性能の改善に寄与できるかを実験的および理論的に検討した.実験的検討では,T字形部分骨組を6体計画した.梁長さは4,000mm,柱長さは1,000mmである.柱断面は350×350mmで,D19が柱の4隅に3本ずつ計12本配置されている.せん断補強筋はD10が50mm間隔で配筋されている.S梁断面の公称寸法はBH-300×125×9×25である.柱梁接合部の鉄骨ウェブパネル厚は16mmである.支圧板厚は12mmである.S梁フランジ下面に設けられたPBLは,厚さ12mmの鋼板で,50φの円孔が3個設けられている.実験変数は,柱梁接合部のせん断補強筋比( 0.183%,0.833% ),PBLの有無と円孔に設置される挿入筋( D13 )の有無である.実験は梁両端を単純支持し,柱端部に正負漸増繰り返し荷重を載荷した.実験結果から,PBLを設けることで支圧破壊を抑制できること,挿入筋を設置することによって最大耐力以降耐力低下の小さい安定した履歴性状を有することが示された.履歴曲線から,PBLに充填されたコンクリートは載荷初期からその効果を発揮するが,最大抵抗力発揮後,急激に抵抗力は減少する.一方,その時点から,挿入筋の抵抗力が発揮されることが示された.PBLに充填されたコンクリートの2面せん断強度は,コンクリート圧縮強度の0.7倍程度,挿入筋の2面せん断強度は挿入筋の降伏せん断強度の1.25倍程度である.支圧耐力は,内部パネルの支圧耐力と内部パネルと外部パネルとの間のねじり耐力および外部パネルのアーチ機構による耐力に基づく耐力評価法にPBLの効果を加味することによって,実験値をほぼ評価できることが示されている.平成27年度は,柱RC・梁Sで構成されるT字形柱梁接合部に関して,S梁フランジ下面に設けられた孔あき鋼板ジベルが,柱梁接合部の支圧破壊性能の改善にどのように寄与するかを実験的に検討し,孔あき鋼板ジベルに充填されるコンクリートの2面せん断強度は,コンクリート圧縮強度の0.7倍程度,挿入筋の2面せん断強度は挿入筋の降伏せん断強度の1.25倍程度であること等の客観的な基礎データを収集することができた.また,理論的な検討として,著者らが提案した鉄骨フランジ幅より内側の内部パネルの支圧耐力と内部パネルと鉄骨フランジ幅より外側の外部パネルとの間のねじり耐力および外部パネルのアーチ機構に基づく支圧耐力評価法にPBLの効果を加味することによって,実験値をほぼ評価できることを示した.平成28年度,柱RC・梁Sで構成されるL字形柱梁接合部に関して,実験および理論的に検討する.平成27年度に実施したT字形柱梁接合部と既往の十字形柱梁接合部の研究結果と合わせ,平成29年度には,当初の目的であるPBLを有する柱RC・梁Sとする柱梁接合部の簡便な設計式を構築することが可能である.平成28年度は,柱RC・梁S部材で構成されるL字形柱梁接合部に関して,S部材フランジ下面に取り付けられた孔あき鋼板ジベル(以下,PBLと言う)が,接合部の支圧破壊性能の改善に寄与できるかを実験的および理論的に検討した.実験的検討では, L字形部分骨組を6体計画した.梁長さは2,000mm,柱長さは1,000mmである.柱断面は350×350mmで,D19の異形鉄筋が柱の4隅に3本ずつ計12本配置されている.せん断補強筋はD10が50mm間隔で配筋されている.梁S断面の公称寸法はBH-300×125×9×25である.柱梁接合部の鉄骨ウェブ厚は16mmである.支圧板厚は12mmである.S部材フランジ下面に設けられたPBLは厚さ12mmの鋼板で,50φの円孔が3個設けられている.実験変数は,柱梁接合部のせん断補強筋比( 0.183%,0.833% )と円孔に設けられる挿入筋( D13 )の有無である.

実験は、L字形部分骨組を3ヒンジラーメンに組込、梁端に正負漸増繰り返し水平荷重を載荷した.これらの実験結果から,PBLを設けることで支圧破壊を抑制できること,挿入筋を取り付けることによって最大耐力以降耐力低下の小さい安定した履歴性状を有することが示された.履歴曲線から,PBLに充填されたコンクリートは変形初期からその抵抗力を発揮するが最大抵抗力以降急激に抵抗力は減少する.一方,その時点から,挿入鉄筋の抵抗力が発揮されることが示された.PBLに充填されたコンクリートの2面せん断強度は,コンクリート圧縮強度の0.7倍程度,挿入筋の2面せん断強度は挿入筋のせん断強度の1.25倍程度である.理論的検討では,研究代表者の提案している支圧終局耐力式に,PBLの効果を加味することで,実験値をほぼ評価できることが示された.平成27年度は,S部材とRC部材で構成されるT字形柱梁接合部に関して,S部材フランジ下面に設けられた孔あき鋼板ジベルが,柱梁接合部の支圧破壊性能の改善にどのように寄与するかを実験的に検討し,孔あき鋼板ジベルに充填されるコンクリートの2面せん断強度は,コンクリート圧縮強度の0.7倍程度,挿入筋の2面せん断強度は挿入筋のせん断強度の1.25倍程度であること等の客観的な基礎データを収集することができた.また,理論的な検討として,研究代表者らが提案した鉄骨フランジ幅より内側の内部パネルの支圧耐力と内部パネルと鉄骨フランジ幅より外側の外部パネルとの間のねじり耐力と外部パネルのアーチ機構に基づく支圧耐力評価法にPBLの効果を加味することによって,実験値をほぼ評価できることを示した.平成28年度は,S部材とRC部材で構成されるL字形柱梁接合部に関して,実験および理論的に検討した.平成27年度に実施したT字形柱梁接合部と既往の申請者が実施した十字形柱梁接合部の研究結果と合わせ,平成29年度には,当初の目的であるPBLを有する柱RC・梁Sとする柱梁接合部の簡便な設計式を構築することが可能であると考えられる.本研究では、接合部ディテールとして、土木分野で用いられている孔あき鋼板ジベル(PBL)をS部材とRC部材が直交して結合されるT字形およびL字形接合部に応用することによって、鋼コンクリートハイブリッド構造接合部特有のS部材に接するコンクリートの支圧破壊の軽減を意図したものである。本研究は、提案される接合部ディテールの性能改善の効果を実験的に検討するとともに、孔あき鋼板ジベルの効果を考慮した接合部の耐力評価式を構築し、その耐力評価式に基づく合理的で簡便な耐力設計式を提示する。平成27年度は、孔あき鋼板ジベルを取り付けたS部材とRC部材で構成されるT字形接合部を対象に、孔あき鋼板ジベルの応用の可能性を実験的および解析的に検討した。平成28年度は、孔あき鋼板ジベルを取り付けたS部材とRC部材で構成されるL字形接合部を対象に、孔あき鋼板ジベルの応用の可能性を実験的および解析的に検討した。平成29年度は、孔あき鋼板ジベル(PBL)のせん断耐力を引き抜き実験によって直接求めることを試みた。以前実施した研究代表者のS部材とRC部材で構成される十字形接合部の研究、平成27年度に実施したT字形接合部および平成28年度に実施したL字形接合部に関する成果によって、建築物に想定される全ての接合部を網羅することになる.これらの十字形、T字形およびL字形接合部に関して、研究代表者が提案している力学モデルを用いて,孔あき鋼板ジベルを有する柱梁接合部の支圧終局耐力を評価する手法を提案した。それぞれの接合部の支圧耐力式を用いて、それぞれの接合部に関する簡便な支圧耐力設計式の樹立を試みた。これらの評価式によって、実験結果を精度よく評価できることが示された。本研究は、孔あき鋼板ジベルをRC柱とS梁で構成されるTあるいはL字形柱梁接合部の鉄骨下フランジに取り付け、柱梁接合部の支圧破壊を防止することを試みる。また、申請者が提案しているTあるいはL字形柱梁接合部の力学モデルに基づいて、柱梁接合部の支圧終局耐力を理論的に評価することを試みる。実験結果から,TあるいはL字形柱梁接合部とも、PBLを取付けることによって,最大耐力が増加しかつすべりを伴う履歴性状が若干改善されることが示された。
高抵抗平行平板検出器の劣化現象の研究

本研究は、高抵抗ガラス板検出器の劣化の原因を解明することを目的とする。この劣化現象は、極板として使用されているガラス板に何か物理的か、化学的な変化が生じて起こるものと考えられているが、今まで、ガスシールドに接着剤を用いていたため、検出器の解体時に、ガラス板を破損して、その原因を調べることが困難であった。そなため、本研究では、解体可能なようにアクリルのチェンバー容器にガラス板検出器を組み込み、更に、1枚のガラス板に2組の独立の電極板を取り付けた検出器を製作した.これらの極板の一方に通常運転高圧、他方に、破壊高圧を印加し、破壊高圧で運転した極板の検出効率が低下した時点で、チェンバーを解体し、ガラスの両極板部分の物理的(表面抵抗)、化学的変化を比較し、その劣化の原因を調べることを目的とする。昨年度は、(1)高抵抗測定器による使用ガラス板の表面抵抗の測定(2)ガス系、計測系の整備(3)テストチェンバーを1台製作、組み立てを終了し、標準ガスでチェンバーを運転し、宇宙線を用いてチェンバーの基本特性測定を行い、製作されたチェンバーの両極板は正常に動作していることが確認した。しかし、その後、ガス漏れが発生し、チェンバーの解体し、ガス漏れはアラルダイド接着個所からであることが分り、シリコングリースでシールドした。その後は、破壊運転のため、印加高電圧を上げていったが、HV>4300Vで放電が発生し、種々の放電対策を試みたが、効果なく、多分、チェンバー内に「ごみ」の混入があったと考えられる.そのため、今回ここで再度、チェンバーの解体・チェックをし、組み立て製作後、再テストを行うことに決定した。今年度は、(1)高抵抗測定器による使用ガラス板の表面抵抗の測定(2)ガス系、計測系の整備(3)テストチェンバーを1台製作、組み立てを終了した。現在、標準ガスでチェンバーを運転し、宇宙線を用いてチェンバーの特性測定を行っている。今までのところ製作されたチェンバーの両極板は正常に動作していることが確認された。今後は、通常、破壊運転のためのセットアップをし、(1)種々の破壊運転を行い、チェンバーの劣化が生じた時点でチェンバー解体し、両極板のチェック(2)チェンバーの改良製作、再テストを行う予定である。そなため、本研究では、解体可能なようにアクリルのチェンバー容器にガラス板検出器を組み込み、更に、1枚のガラス板に2組の独立の電極板を取り付けた検出器を製作した.

これらの極板の一方に通常運転高圧、他方に、破壊高圧を印加し、破壊高圧で運転した極板の検出効率が低下した時点で、チェンバーを解体し、ガラスの両極板部分の物理的(表面抵抗)、化学的変化を比較し、その劣化の原因を調べることを目的とする。昨年度は、(1)高抵抗測定器による使用ガラス板の表面抵抗の測定(2)ガス系、計測系の整備(3)テストチェンバーを1台製作、組み立てを終了し、標準ガスでチェンバーを運転し、宇宙線を用いてチェンバーの基本特性測定を行い、製作されたチェンバーの両極板は正常に動作していることが確認した。しかし、その後、ガス漏れが発生し、チェンバーの解体し、ガス漏れはアラルダイド接着個所からであることが分り、シリコングリースでシールドした。その後は、破壊運転のため、印加高電圧を上げていったが、HV>4300Vで放電が発生し、種々の放電対策を試みたが、効果なく、多分、チェンバー内に「ごみ」の混入があったと考えられる.そのため、今回ここで再度、チェンバーの解体・チェックをし、組み立て製作後、再テストを行うことに決定した。
ペーター・フーヘルの少数民族観と東ドイツの地域的・思想的背景

少数民族に関する東ドイツの地域的・思想的背景としてつぎの点を挙げることができる:・フーヘルが60歳で亡命するまで住んだブランデンブルク州のヴェンデン人は、ザクセン州に住む同じスラブ系のゾルベン人に対して共同意識と対立意識をもち、また、ドイツ民主共和国時代には社会主義的民族政策のなかでゾルベン人に包摂されたことで、ヴェンデン人としてのアイデンティティを強くもつようになった。・東ドイツのジプシー(Sinti/Roma)は、ナチス時代に迫害を受け、さらに、ドイツ民主共和国時代には少数民族保護政策からはずされた。・ドイツ民主共和国では、ナチス時代のユダヤ人迫害は西側の資本主義者の責任とされた。ユダヤ人は社会主義者とともに迫害され、戦い、社会主義国家を作った者とみなされたが、同時に、アメリカ合衆国やイスラエルとの結びつきから社会主義国家の敵ともみなされた。また、ユダヤ人は、社会主義的民族理論にしたがって、ユダヤ教を信じる宗教集団と位置づけられた。上の点がフーヘルの少数民族観および詩作品につぎのように反映している:・フーヘルはヴェンデン人を原風景の重要な形象としている。そして、ゾルベン人とは区別している。第2次世界大戦直後においては少数民族および民衆の象徴的存在と位置づけた。しかし、ドイツ民主共和国時代には体制に保護されたヴェンデン人(ゾルベン人)に背を向けた。・ジプシーはナチス時代ばかりではなく、ドイツ民主共和国時代も迫害されたが、同じように迫害されたフーヘルは、自分をジプシーに投影するようになった。・フーヘルは、ナチスによるユダヤ人迫害については言及していない。1度だけ自分の詩の注釈に「Auschwitz」を用いたことがあるが、この語もユダヤ人迫害問題とは関係ない。また、フーヘルは、現実世界のユダヤ人の形象ではなく、旧約聖書のユダヤ人の形象を詩に用いた。文学のなかの少数民族研究は、ひとつの思想的観点からおこなわれることが多かった。場合によっては、「ナチス・ドイツ=加害者、ユダヤ人=被害者」という座標で、文学者の少数民族観を無理やり検証して、評価することさえあった。しかし、ひとりの人間の少数民族観は、さまざまな要素をあわせもち、ひとつの観点からだけでとらえることはできない。本研究は、戦後ドイツ文学の東側の中心にいたフーヘルの少数民族観を、(1)フーヘルの原風景のなかの少数民族像、(2)ナチスの少数民族虐殺と旧ドイツ帝国東部領からのドイツ人追放問題、(3)ナチスの少数民族虐殺に関する東ドイツの歴史観、(4)東ドイツの社会主義的民族理論、という4つの複合的観点から究明する。これによって、フーヘルの少数民族観の全体像を初めて明らかにするばかりではなく、戦後ドイツ文学が少数民族問題に関して本来有していた複雑な問題意識を解剖することになる。しかし、フーヘルの少数民族観の核心に迫る決定的資料が不足している。今年度は、ベルリンのStiftung Archiv der Akademie der Kunste Berlinで、フーヘルの作品の異稿・前段階原稿・創作メモ、そして未刊行の手紙類を閲覧した。また、フーヘルが少年時代をすごしたAlt-Langerwischを中心にして、少数民族の生活・民俗・歴史を取材し、フーヘルの詩のなかに登場する少数民族のさまざまな生活道具を調査した。このようにして、フーヘルの少数民族観と直接結びついた少数民族の実態を調べるフィールドワークをおこなった。さらに、フーヘルが東ドイツ時代に住み、また、文学雑誌『意味と形式』の編集部があったポツダムのPeter-Huchel-Hausを訪問して資料を収集した。

その一方で、図書資料やCD-ROM資料にあたり、フーヘルの少数民族観とその背景の解明をおこなった。本研究は、戦後ドイツ文学の東側の中心にいたフーヘルの少数民族観を、(1)フーヘルの原風景のなかの少数民族像、(2)ナチスの少数民族虐殺と旧ドイツ帝国東部領からのドイツ人追放問題、(3)ナチスの少数民族虐殺に関する東ドイツの歴史観、(4)東ドイツの社会主義的民族理論、という4つの複合的観点から究明する。上の文献調査と現地調査によって、東ドイツには少数民族についてこの地域特有の地域的・思想的背景があることが確認できた。しかも、スラブ系のヴェンデン人であるか、SintiもしくはRomaであるか、ユダヤ人であるかによってその背景が大きく異なる。特に、この地域のヴェンデン人は、ザクセン州に住む同じスラブ系のゾルベン人に対する共同意識と対立意識をもち、ドイツ民主共和国時代には民族政策のなかでゾルベン人に包摂されたことで、ヴェンデン人としてのアイデンティティを強くもつようになっている。この点はフーヘルの詩にも反映している。2年間の研究のまとめとして、報告書「ペーター・フーヘルの少数民族観と東ドイツの地域的・思想的背景」を作成した。さらに、論文「ペーター・フーヘルの詩集のなかの少数民族形象-ヴェンデン人・ジプシー・ユダヤ人の形象について-」を作成した。
CYP2A6のpharmacogenomics的研究

我々はチトクロームP450 (CYP)の1分子種であるCYP2A6が4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone (NNK)などのたばこ煙中のがん原性N-ニトロソアミン類を代謝的に活性化すること,および喫煙歴を有する肺がん患者においてCYP2A6の遺伝子多型である全欠損型変異を有するヒトの頻度が対照と比較して有意に低いことを明らかにした.これらの事実から,CYP2A6がたばこ煙中のN-ニトロソアミン類を代謝的活性化し,肺がんを誘発する可能性が示唆された.したがって,CYP2A6が上述のN-ニトロソアミン類を代謝的に活性化するか否かをin vivoで検討することは非常に重要である.そこで本研究ではヒトCYP2A6 cDNAを導入したトランスジェニックマウスを樹立し,CYP2A6がたばこ煙中のN-ニトロソアミン類を代謝的活性化し,発がんに寄与しているか否かをin vivoで解明することを目的とした.CYP2A6の開始コドンからpoly(A)付加シグナルまでを含むCYP2A6 cDNAの全長を単離し,プロモーター,エンハンサーおよびインスレーターが導入された発現プラスミドを構築した.続いて,断片化した発現プラスミドを受精卵へ注入した後,偽妊娠マウスへ移植した.誕生したマウスの尾からゲノムDNAを抽出し,PCR法にて導入遺伝子を検出した.このようにしてF0世代を樹立した.F0マウスを通常マウスと交配することにより,F1世代を得た.現在,導入遺伝子が検出されたF1世代マウスを用いて,導入遺伝子コピー数の揃った個体同士を交配させ,F2世代を作成中である.導入CYP2A6遺伝子をホモで持つ動物F2マウスが計画どおりに作出されれば,本研究の究極的な目標により一層近づくことができると考えられる.このヒト型Tgマウスを用いると,発癌性試験におけるヒトの酵素の役割や,作出したヒト型マウスを他のin vivoでの遺伝子変異検出系マウスとの交配などによって,このCYP2A6研究領域のさらなる進展が期待される.CYP2A6はヒトにおける薬物代謝酵素チトクロームP450(CYP)分子種の1つであり,以前我々は本酵素が,煙草煙中のニコチンの主要代謝酵素であることを明らかにしている.また,喫煙によってニコチンから生成する煙草特異的ニトロソアミンである4-(メチルニトロソアミノ)-(3-ピリジル)-1-ブタノン(NNK)の究極発がん物質への代謝的活性化反応に関与することが知られている.また,CYP2A6活性には著しい個体差があり,日本人においてCYP2A6を完全に欠損しているヒトの遺伝子解析から,その原因がCYP2A6遺伝子の全翻訳領域を欠損する遺伝的多型であることを明らかにした.以上の背景を基に,CYP2A6遺伝的多型と肺がんのリスクの個体差との関連性を検討している際に,偶然CYP2A6遺伝子全欠損型多型を有するヒトの頻度が年齢の上昇と共に増加する現象を見出した.そこで本年度は,別の集団においてこの現象が再現されるか否かについて検討を行った.以前の予備的検討では年齢を20代,40-50代,70代以上に分けて解析しており,両性をランダムに含んでいたが,今回はCYP2A6の遺伝的多型に性差がある可能性を想定して,前回の検討で傾向がより強く出た女性に限定して解析することにした.また検討の効率化をはかるために,20代と70代および80代に限定して解析を行った.これにより,想定される交絡要因を避け,検体数を数倍に増やした解析が可能である.なお,本研究は北大大学院薬学研究科に設置されている生命倫理委員会の承認を得た後に行った.対象地域に居住する20代,70代および80代女性各166名,125名および190名のCYP2A6遺伝子型を判定した.解析の結果,CYP2A6遺伝子全欠損型多型をホモ接合体で有するヒトの頻度は,それぞれ2.4%(20代),2.4%(70代),2.6%(80代)であり,前回の予備検討の結果を再現することができなかった.アリル頻度からHardy-Weinberg則によって計算される期待値と生データを照らし合わせても特に大きな違いが認められないため生き残りバイアスは考えられず,データの信頼性は高いと考えられた.我々はチトクロームP450(CYP)の1分子種であるCYP2A6が4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone(NNK)などのたばこ煙中のがん原性N-ニトロソアミン類を代謝的に活性化すること,および喫煙歴を有する肺がん患者においてCYP2A6の遺伝子多型である全欠損型変異を有するヒトの頻度が対照と比較して有意に低いことを明らかにした.これらの事実から,CYP2A6がたばこ煙中のN-ニトロソアミン類を変異原活性化し,肺がんを誘発する可能性が示唆された.したがって,CYP2A6が上述のN-ニトロソアミン類を代謝的に活性化するか否かをin vivoで検討することは非常に重要である.そこで本研究ではヒトCYP2A6 cDNAを導入したトランスジェニックマウスを樹立し,CYP2A6がたばこ煙中のN-ニトロソアミン類を変異原活性化し,発がんに寄与しているか否かをin vivoで解明することを目的とした.

トランスジェニックマウスは,遺伝子の過剰発現を通じて生体機能を解析するための実験系として確立された.その特徴は異なった動物の遺伝子を発現することが可能なことである.また,導入遺伝子以外の全ゲノムの働きは正常とみなせるので,導入遺伝子による生体全体の反応を知ることができる.トランスジェニックマウスを作出する際の導入遺伝子はタンパク質に翻訳される領域だけでなく,プロモーター,エンハンサー,インスレーターおよびpoly(A)付加シグナルを配置する必要がある.そこで,まずCYP2A6の開始コドンからpoly(A)付加シグナルまでを含むCYP2A6 cDNAの全長を単離し,プロモーター,エンハンサーおよびインスレーターが導入された発現プラスミドを構築した.続いて,断片化した発現プラスミドを受精卵へ注入した後,偽妊娠マウスへ移植した.誕生したマウスの尾からゲノムDNAを抽出し,PCR法にて導入遺伝子を検出した.現在,Fl世代を得るため,導入遺伝子が検出されたマウスを野生型マウスと交配している.我々はチトクロームP450 (CYP)の1分子種であるCYP2A6が4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone (NNK)などのたばこ煙中のがん原性N-ニトロソアミン類を代謝的に活性化すること,および喫煙歴を有する肺がん患者においてCYP2A6の遺伝子多型である全欠損型変異を有するヒトの頻度が対照と比較して有意に低いことを明らかにした.これらの事実から,CYP2A6がたばこ煙中のN-ニトロソアミン類を代謝的活性化し,肺がんを誘発する可能性が示唆された.したがって,CYP2A6が上述のN-ニトロソアミン類を代謝的に活性化するか否かをin vivoで検討することは非常に重要である.そこで本研究ではヒトCYP2A6 cDNAを導入したトランスジェニックマウスを樹立し,CYP2A6がたばこ煙中のN-ニトロソアミン類を代謝的活性化し,発がんに寄与しているか否かをin vivoで解明することを目的とした.CYP2A6の開始コドンからpoly(A)付加シグナルまでを含むCYP2A6 cDNAの全長を単離し,プロモーター,エンハンサーおよびインスレーターが導入された発現プラスミドを構築した.続いて,断片化した発現プラスミドを受精卵へ注入した後,偽妊娠マウスへ移植した.誕生したマウスの尾からゲノムDNAを抽出し,PCR法にて導入遺伝子を検出した.このようにしてF0世代を樹立した.F0マウスを通常マウスと交配することにより,F1世代を得た.現在,導入遺伝子が検出されたF1世代マウスを用いて,導入遺伝子コピー数の揃った個体同士を交配させ,F2世代を作成中である.導入CYP2A6遺伝子をホモで持つ動物F2マウスが計画どおりに作出されれば,本研究の究極的な目標により一層近づくことができると考えられる.このヒト型Tgマウスを用いると,発癌性試験におけるヒトの酵素の役割や,作出したヒト型マウスを他のin vivoでの遺伝子変異検出系マウスとの交配などによって,このCYP2A6研究領域のさらなる進展が期待される.
色素性乾皮症の高頻度紫外線発癌における紫外線免疫抑制の関与

色素性乾皮症(以下XP)患者の高頻度皮膚発癌における腫瘍免疫異常の関与を明らかにする目的で、XP遺伝子欠損マウス(以下XPマウス)のin vivoでの腫瘍排除能、及び腫瘍排除能に対する紫外線の影響を検討し、野生株マウスと比較した。[方法]XPマウス由来の紫外線誘発性皮膚腫瘍から樹立したcell line 18を、両群マウスに皮下注し、経時的に腫瘍部を生検し組織学的に比較した。また、紫外線誘導性免疫抑制性cytokinesの一つであるTNF-αの皮膚での産生を比較した。[結果](1)非照射マウスに腫瘍細胞を皮下注した場合には、両群ともに6日目をピークに腫瘍塊に炎症細胞浸潤がみられ,その後腫瘍は壊死に陥り3週間後にはほぼ消退した。浸潤細胞の主体は好中球と単核球であった。(2)紫外線照射後に皮下注した場合には、野生株マウスでは非照射時と同様に腫瘍は消退した。XPマウスでは、炎症細胞浸潤はみられるものの腫瘍塊の一部が壊死を免れて残存し,残存腫瘍細胞が成長・増殖した。(3)紫外線照射後の表皮に抗TNF-α抗体に対する染色性が認められた。XPマウスではより少量の紫外線照射でも染色性が検出された。また、紫外線照射後の皮膚をhomozinateしてELISAで組織中のTNF-α蛋白量を定量したところ,野生株マウスでは検出できなかったが,XPマウスでは24時間後に上昇していた。[結論]XPマウスの免疫学的腫瘍排除能は、非照射状態では野生株マウスと同等であるが、紫外線照射により容易に障害される。その機序として,浸潤細胞の抗腫瘍殺傷能の低下の関与が組織学的に示唆された。また,XPマウスの皮膚での紫外線照射によるTNF-αの過剰産生も関与すると思われる。[方法]XPマウス由来の紫外線誘発性皮膚腫瘍から樹立したcell line18を、両群マウスに皮下注し、経時的に腫瘍の大きさを比較した。また、紫外線誘導性免疫抑制性cytokinesの一つであるIL10の皮膚での産生を皮膚免疫組織化学で、末梢血中濃度をELISAで、比較した。[結果](1)非照射マウスに腫瘍細胞を皮下注した場合には、両群ともに6日10日目をピークに腫瘍は増大し、その後は退縮して、3週間後にはほぼ消退した。(2)紫外線照射後に皮下注した場合には、野生株マウスでは非照射時と同様に腫瘍は消退したが、XPマウスでは、60%程度の動物で腫瘍が退縮せず増大を続け、一部のマウスは腫瘍死に至った。(3)紫外線照射後の表皮に抗IL10抗体に対する染色性が認められた。また、紫外線照射後の末梢血中のIL10は、野生株マウスでは検出できなかったが、一部のXPマウスでは上昇していた。[結論]XPマウスの免疫学的腫瘍排除能は、非照射状態では野生株マウスと同等であるが、紫外線照射により容易に障害された。その機序として、免疫抑制性cytokinesの一つであるIL10が、紫外線照射により皮膚及び末梢循環中に大量に産生されることが示された。
排卵に関与する遺伝子の動態の検索による排卵機構の解明

【はじめに】排卵の機構は、いまだ明らかではない。本研究は、排卵時に変動する遺伝子をDNA micro-arrayを用いて分析して、その中で注目すべき遺伝子について、免疫組織化学的染色を施して、卵細胞のどの細胞に、何時、発現または消退しているのかを観察して、排卵機構を検討した。【材料と方法】【結果】第一群では、生後0日目から3日目までと、生後25日目から30日目までの二回、卵は、apoptosisにより選別された。【考案ならびに結語】DNA micro-array分析の結果、変動がみられた多くの遺伝子は、現在、排卵時に関与するといわれているものと同じであった。本研究で明らかになったことは、第一に、未成熟期において、卵は、二回の選別を受けた後、成熟して一定の性周期を向かえること、第二に、排卵直前(hCG投与後)に種々のS100蛋白が著明に増加することが判明した。S100蛋白の卵巣での作用機序は未だ明らかではなく、S100蛋白の機序解明が、今後の研究課題として与えられた。排卵は、ホルモン、サイトカイン、活性酸素種(ROS)などの種々の生体内物質が関与している。すなわち、細胞増殖系や血管新生系等の多くの遺伝子の発現や消退を伴った現象である。卵は、卵巣内に何万個といった数が産生されるが、排卵時にはその中の一つ(主席卵胞)の卵が選択され、残りの多くはapoptosisにより消去される。近年、卵胞の細胞がandrogenやestrogenなどの性ステロイドホルモン(ssh)の産生能を得た卵だけが排卵されると報告されている。また、申請者らは、これまでに排卵時にはROSが関与することを報告してきた。以上の経過から申請者らは、排卵に関与する多くの遺伝子のなかで、sshとROSに関与する遺伝子を中心に系時的なup and downregulationをマイクロアレー(MA)と免疫組織染色法により検討すべくラット過排卵モデルを用いて研究中である。実験は、Wistar系雌性ラット(24日齢)を用いてpregnant mare serum gonadotropin (PMSG)10U/匹腹腔内(ip)投与48時間後にhuman chorionicgonadotropin (hCG)10U/匹ip投与後、6、9、12、18、24時間目(排卵前後)の卵巣をネンブタール麻酔下に摘出した。摘出された卵巣は、MA分析用にRNAを調整するとともに、組織染色用にパラフィン包埋を行っているところである。対照の卵巣は、無処置ラット(26日齢)と、PMSG ip投与48時間後に摘出した。MA分析用および組織染色用の試料は、それぞれ試料採取時に各5匹から卵巣を摘出した。現在、MA分析用に系時的に取り出した卵巣からRNAを調整しつつ、免疫組織学的にestrogen receptor (ER)βは、顆粒細胞に、ERαは、莢膜細胞に強く発現すること、さらには、ssDNA抗体により一部の卵にapoptosisの出現を認めているところである。今後、いままでに採取した試料より種々の遺伝子の系時的なup and downregulationを、MA分析と免疫組織染色により明らかにし、排卵に関与する遺伝子の動的関係を検討していく予定である。【はじめに】研究は、未成熟期における卵胞の成熟と閉鎖の発生状況と、その機序の解明を目的として、雌性Wistar系ratを用いて、生後35日目までと、生後24日目にPMSG ip 48時間後にhCG ipし、その10時間後に、それぞれ、経時的に卵巣を摘出して卵胞細胞のapoptosis(Ap)、細胞周期蛋白、estrogen受容体(ER)、血管形成について組織化学的に観察すると伴に、PMSG ip後とhCG ip後には、卵巣内の遺伝子の変動をDNA micro arrayを用いて解析した。【結果】1.生後03日目には、多くの卵そのものが、さらに、生後2530日目には約50以上の卵胞においては、その顆粒細胞がApを生じ、閉鎖卵胞に陥ることが観察され、未成熟期においては卵巣内の卵は、二段階の整理を受けること、また、生後520日目には全ての卵巣細胞は、成熟することが判明した。

2.生後24目目からPMSGおよびhCG(gonadotropin(Gn))を投与した時には、卵胞内顆粒細胞にApは、認められず、全ての卵胞は成熟して排卵に至ることが認められた。Gn投与後の遺伝子の変動は、増加したものが、TNFなどのcytokine類など他、約40種類があり、減少した遺伝子は、ILGFなど他、約40種類が検出された。【考案ならびに結語】1.生後03日目に出現した卵のApの機序は、本研究からは明らかではないが、生後2530日目に認められた卵胞内顆粒細胞のApから閉鎖卵胞を起こす機序は、血液中のFSHが減少し、卵胞周囲の血管形態が維持出来なくなるとともに、顆粒細胞でのestrogenの産生が減少した結果、閉鎖卵胞を招いたと考えられる。2.生後5日目からは血管形成も認められ始め、血液中のFSHも増加することから、全ての卵胞細胞は、成熟し、卵胞も大きくなっていったと考えられる。[血液中FSHの量については、Dohlerら(1975)による]3.生後24日目にGnの投与を行うことにより、卵胞周囲の血管形成・形態は維持され、卵胞内顆粒細胞においてestrogenの産生が増加し、卵胞は成熟し、排卵を招いたと考えられる。本研究でmicro array分析の結果からGnを投与することにより、数多くの遺伝子が増・減することが判明し、排卵には種々の多くの遺伝子が関与していることが明らかとなった。Gn投与後に増・減した遺伝子の組織(細胞)内での局在に関しては、今後、in situ hybridizationなどの分析方法を用いて明らかにし、排卵への関わり合いについて検討していく。
TGF-βスーパーファミリーの受容体型セリン・キナーゼの機能解析

1)TGFβ型受容体セリン・キナーゼの細胞外領域とヒトIgG定常領域のキメラ蛋白を作製・精製し、機能阻害活性を検討した。ALK3(BMP type I受容体)-IgGは、MC3T3-El(骨芽細胞)、PA6(脂肪前駆細胞)のストローマ細胞において、20ng/mlのBMP4によるアルカリ・フォスファターゼ活性誘導を濃度依存性に抑制し、1μg/mlで完全に阻害した。また、東レの須藤博士より供与された、TGFβRII-IgGは、血管内皮細胞において、5ng/mlのTGFβによる細胞外基質蛋白の転写活性誘導を50ng/mlで完全に抑制した。これらのキメラ蛋白は可溶性であり、他のリガンドの作用は阻害せず、生理的なリガンドに特異的に働く。また、モノクローナル抗体作製の際の免疫原としても有効である。2)多能性幹細胞から細胞外基質蛋白でコートしたシャーレの使用やストローマ細胞株OP9との共培養により、Flk-1陽性の血液細胞、血管内皮前駆細胞を分化誘導する実験系を開発している。BMP4,TGF-βが、この系において、分化誘導の抑制、分化維持の阻害作用があることを見いだした。3)受容体型セリン・キナーゼの保存されたキナーゼ領域に対するプライマーを合成し、PCR反応を行い、新規の膜貫通型セリン・キナーゼを同定した.TGFβタイプI受容体、アクチビンタイプIB受容体と、細胞内キナーゼ領域で80%以上の相同性を有する新鋭のタイプI受容体セリン・キナーゼ(ALK7)を同定した。ALK7のmRNAは、ラットにおいて脳組織、特に、前脳、基底核、小脳で高い発現が見られた。生理的なリガンドは、不明であるが、その構造上、TGFβファミリーのタイプI受容体として、機能すると考えられる。
混合溶媒を用いた準希薄溶液中で形成されるミクロ相分離構造とレーザー共振器への応用

現在までに低閾値ヒーザー発振の開発にはブロック共重合体やコロイド結晶、コレステリック液晶などをレーザー共振器として用いて行われている・これまでに申請者らは2つの高分子阯の屈折率差が比較的大きなPS-b-PXUAを用い・それらをTHFと水の混合溶卿に溶力・すだけとい熔易な方法で非常に高配向な周瀦造(グレイ購造)の形成を実Iiiしている。そして巨大なグレイン構造をレーザー共振器(DFB型)として用い、低閾値高強度レーザー発振を実現しよっ仁研究を重ねてきた。しかし、半導体レーザー並の低閾値化は達成できておらず、工業化するには更なる閾値の低下が求められる・そのレーザー発振閾値の低下のために必要とされるのが、より大きな娠器のサイズと二相問の屈折率差である・より大きな共振器サイズはcmサイズのグレイン構造をレーザー共振器として用いることで解決できるしかし、準希薄溶液中であるために大量の溶媒により二相間の屈折率差は低下しており、その差が非常に小さい(現在0.02程度)という問題が解決されていないままである。レーザー発振の低閾値化のためには、準希薄溶液中でグレイン構造を形成し、かつ二相間の屈折率差を広げる必要性がある。そこで異なる選択性を有する混合溶媒の組み合わせについて系統的に研究を行うことで準希薄溶液中でのミクロ相分離挙動を自在に制御でき、その結果として二相間の屈折率差が広がる混合溶媒系を生み出すことが可能であると考えた。本年度は共通溶媒としてトルエン(屈折率差: 1.50),非溶媒としてメタノール(屈折率差: 1.33)を用いた。混合溶媒中のミクロ相分離構造の形態や各成分の溶液中での空間分布状態を明らかにするために小角X線散乱測定や小角中性子散乱測定を行った。その結果、混合溶媒中のミ網分離構造の形態と各成分嚇中での空間分布状態を明らかになりに相間の屈折率差を算出することができた。(抄録なし)現在、低閾値レーザー発振の開発にはブロック共重合体やコロイド結晶、コレステリック液晶などを用いて行われている。これまでに申請者のグループでは超高分子量PS-b-PMMAもしくはPS-b-PtBMAを用いてTHFと水の混合溶媒中で非常に大きな高秩序構造(グレイン構造)の形成を実現している。そして巨大なグレイン構造をレーザー共振器(DFB型)として用い、低閾値高強度レーザー発振を実現しようと研究を重ねてきた。しかし、半導体レーザー並に低閾値化は達成できておらず、工業化するには更なる閾値の低下が求められる。そのレーザー発振閾値の低下のために必要とされるのが、より大きな共振器のサイズと二相間の屈折率差である。より大きな共振器サイズはcmサイズのグレイン構造をレーザー共振器として用いることで解決できる。しかし、準希薄溶液中であるために大量の溶媒により二相間の屈折率差は低下しており、その差が非常に小さい(現在0.02程度)という問題が解決されていないままである。そこで異なる選択性を有する混合溶媒の組み合わせについて系統的に研究を行うことで準希薄溶液中でのミクロ相分離挙動を自在に制御でき、その結果として二相関の屈折率差が広がる混合溶媒系を生み出すことが可能であると考えた。本年度は、屈折率差の大きなブロック共重合体であるPS-b-PtBMAまたはPS-b-PMMAを研究室内に既設の真空ラインを用いて真空下逐次アニオン重合法により合成した。得られたブロック共重合体を混合溶媒に溶かすことで形成するミクロ相分離構造を研究室内に既設のUV可視分光測定器や小角X線散乱装置を用いて構造解析を行った結果、混合溶媒中で形成するミクロ相分離構造の詳細が分かった。

そこで異なる選択性を有する混合溶媒の組み合わせについて系統的に研究を行うことで準希薄溶液中でのミクロ相分離挙動を自在に制御でき、その結果として二相間の屈折率差が広がる混合溶媒系を生み出すことが可能であると考えた。本年度は共通溶媒としてトルエン(屈折率差: 1.50),非溶媒としてメタノール(屈折率差: 1.33)を用いた。混合溶媒中のミクロ相分離構造の形態や各成分の溶液中での空間分布状態を明らかにするために小角X線散乱測定や小角中性子散乱測定を行った。その結果、混合溶媒中のミ網分離構造の形態と各成分嚇中での空間分布状態を明らかになりに相間の屈折率差を算出することができた。屈折率差の大きなブロック共重合体であるPS-b-PtBMAまたはPS-b-PMMAの合成には成功し、一部の混合溶媒中で形成するミクロ相分離構造の構造解析には成功したが、屈折率差が大きく異なる混合溶媒系を実現するには至っていないため。また、論文投稿や学会等による研究成果の発表が十分に行えたとは言えないため。様々な組み合わせの混合溶媒系を用いてブロック共重合体の二相間の屈折率差が大きく異なる実験系の最適化を行う。そのためにブロック共重合体の二相間における各ポリマー成分と溶媒成分の分配状態をシミュレーションソフトSUSHIを用いて計算し、屈折率差が大きく広がる混合溶媒系を効率よく見つけ出すことを行う。また、ミクロ相分離構造の構造解析を行う際に、研究室に既設の小角X線散乱装置を用いるだけでなく、大型放射光施設SP-ring8内の小角X線散乱装置を用いることでミクロ相分離構造の構造解析を速やかに行う。(抄録なし)
無限アーベル群論へのトポロジーの応用の研究

位相空間Xから離散整数群Zへの連続関数全体が作るアーベル群C(X,Z)とその双対群について研究した。位相空間Xの部分空間Yに関して,群C(Y,Z)から群C(X,Z)への準同型である拡張子hの中で,C(Y,Z)の任意の要素fに対し,h(f)の値域がfの値域の凸包に含まれるものを標準的な拡張子と呼ぶ。標準的な拡張子の存在について,次の1の成果を得た。また,関連して,下の2と3に述べる研究成果を得た。1.Z-コンパクト空間(=離散空間Zの直積の閉部分空間)Xの部分空間Yに対し,群C(Y,Z)から群C(X,Z)への標準的な拡張子が存在すれば,YはXのレトラクトであることを証明した。この結果は,整数値連続関数に対するDugundjiの意味の拡張定理は,レトラクトである自明な場合に限り成立することを示す。2.非可算濃度kより小さい順序数の空間と離散空間Zの直和をk+Zで表す。空間k+Zが擬コンパクト空間に零集合として埋蔵されることはk-towerの存在と同値であることを証明した。したがって,連続体濃度より大きい濃度kに対して,空間k+Zと,どんな擬コンパクト空間にも零集合として埋蔵されない。この結果は,コンパクト空間のG-delta稠密な部分空間は,擬コンパクト空間(=任意のコンパクト化の中でG-delta稠密である空間)に零集合として埋蔵出来るかという問題に否定的に答える。3.位相空間Xの閉集合全体からなる集合に有限位相を与えて得られる空間をF(X)で表す。任意のパラコンパクト空間Xに対し,F(X)は完備な一様系を持つことを証明した。この結果は,零次元パラコンパクト空間とリンデレ-フ空間に対して知られていた定理を同時に拡張する。
IL-13Rα2を標的とした膵臓癌転移抑制と生命予後の延長

ヒト膵臓癌の切除検体を用いてIL-13Ralpha2の発現と生命予後の関係を検討した。国内2施設の膵臓癌切除標本、計236検体におけるIL-13Ralpha2の発現を評価したところ、IL-13Ralpha2の高発現群で生命予後の短縮が見られた。またIL-13Ralpha2の発現と腫瘍の神経浸潤との相関を認め、IL-13Ralpha2が神経浸潤を促進している可能性が示唆された。また緑茶に含まれるEpigallocatechin gallate(EGCG)は膵臓癌細胞においてIL-13Ralpha2の発現を抑制し、膵臓癌モデルマウスに対してEGCGを投与することにより宿主の生存期間を延長した。本研究で、臨床検体を用いて膵臓癌におけるIL13Rα2の発現が腫瘍の転移、患者の生命予後と関連しているかを調べ、その結果に基づき、IL13Rα2の発現を意図的に調節することにより転移を抑制し生命予後を改善できるかを検討することを目的としている平成25年度の研究目的は膵臓癌手術標本を用いて癌細胞のIL13Rα2の発現を調べることにより転移の状態や予後とIL13Rα2の発現との関連性を検討することであった。大学病院での手術標本を使用した解析は終了しIL13Rα2のタンパク発現と予後には負の相関がみられた。この結果を検証するため別施設で確認の実験を行っている。現在膵臓癌手術検体をスライドに起こし、免疫染色を施行中である。別のセットのサンプルにて再現性が得らると期待している。また確認のためin-situ hybridizationを行いRNAレベルでの発現を検討することとしている。また本年度は当初の研究計画にのっとり膵臓癌マウスモデルを用いてIL13Rα2の発現を意図的に調節した際、マウスの予後が改善されるかを検討する。具体的にはIL13Rα2の発現に大きくかかわっているHistoneのアセチル化、AP-1転写因子をターゲットとした各種阻害剤を投与して、腫瘍におけるIL13Rα2の発現を変化させ、転移の抑制、生命予後を解析する予定である。本実験のための膵臓癌細胞株の準備、動物実験の計画書の作成などを行っている。本研究で臨床検体を用いて膵臓癌におけるIL13Ralpha2の発現が腫瘍の転移、患者の生命予後と関連しているかを調べ、その結果に基づき、IL13Ralpha2の発現を意図的に調節することにより転移を抑制し生命予後を改善できるかを検討することを目的としている。平成26年度の研究目的は、1膵臓がん手術標本を用いて癌細胞のIL13Ralpha2の発現と生命予後との関係を調べる、2膵臓癌マウスモデルを用いてIL13Ralpha2の発現を意図的に調節した際にマウスの予後が改善するかを検討することであった。現在の研究の進行状況としては、1に関してIL13Ralpha2の発現の評価は終了しており、統計的な評価を加えて結論を検討している段階である。2に関してはヒト膵臓癌細胞を用いて、様々な健康食品に含まれる成分による、ヒストンアセチルトランスフェラーゼ(HAT)阻害、ヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)促進効果がIL13Ralpha2の発現にどのように働くかを検討している。IL13Ralpha2の発現を抑制する成分を数個に絞込み、近日行う予定であるマウスモデルでの腫瘍の増大抑制効果を確かめるため、投与経路、薬剤濃度、投与期間を検討中である。本研究では平成25年度から27年度にかけて、1膵臓がんにおけるIL-13Rα2の発現が腫瘍の転移と患者の生命予後が関連しているかを調べ、その結果に基づき2IL-13Rα2の発現を意図的に調節することにより転移を抑制し生命予後を改善できるかを検討することを目的としている。1に関しては横浜市立大学医学部付属病院とNTT東日本関東病院の膵臓癌手術検体におけるIL-13Rα2の発現と生命予後を比較した。IL-13Rα2の発現が強い群で有意に生命予後の短縮がみられ、IL-13Rα2の発現が強い予後規定因子であることを見出した。また、IL-13Rα2の発現は神経浸潤と相関を認め、IL-13Rα2が膵臓癌の神経浸潤を促進させている可能性が示唆された。この結果は現在、論文投稿中である。1の検討でIL-13Rα2自身が膵臓癌の浸潤、転移を促進している可能性が高いことが分かったため、このIL-13Rα2の発現を低下させることが膵臓癌の予後の改善につながるのではないかと考えた。我々の以前の検討でHDAC inhibitorがIL-13Rα2の発現を亢進することがわかっていたので、逆の働きをするHAT inhibitorがIL-13Rα2の発現を低下させると思われた。本年度の検討で健康食品中に含まれるポリフェノールの一種がIL-13Rα2の発現を低下することを見出し、膵臓癌皮下移植マウスモデルによる膵臓癌の転移抑制実験を遂行中である。しかしvitroで期待されたほどの転移抑制効果は得られていないため、今後薬の投与経路、投与量のさらなる検討が必要である。またマウスモデルに関しても膵臓癌同所モデルの方が転移を再現しやすいため、膵臓癌にGFP等の体外より評価可能なマーカーを導入しReal timeで評価できるモデルを作成中である。