hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
長期遺伝的モニタリングに基づくイワナの繁殖成功度および放流効果の推定

次世代シーケンサーを用いて、イワナの親子判別推定に用いる3塩基および4塩基繰り返し配列の多型的マイクロサテライトDNA(msDNA)を8遺伝子座探索した。イワナの自然集団を対象とした野外調査を実施し、2005年から2013年までに採集された親個体と当歳魚のmsDNAデータをもとに親子判別推定を行った。また、継代飼育魚の次世代資源への貢献度を評価するために人工河川への移殖放流実験をおこなった。その結果、天然魚・養殖魚ともに、繁殖成功度に大きな個体差が確認され、親魚の体サイズと繁殖成功度との間に明瞭な関係は認められなかった。次世代シーケンサーを用いて、イワナの親子判別推定に用いるマイクロサテライトDNA遺伝子座を探索した。3塩基および4塩基繰り返し配列の多型的マイクロサテライトDNAを8遺伝子座探索し、マルチプレックスPCRにより全ての遺伝子座を同時に増幅する手法を確立した。同時に、サクラマスについても新規にマイクロサテライト遺伝子座を探索し、これらを原著論文にて公表した(Yamamoto et al. 2013)。イワナ自然集団を対象とした野外調査を実施し、採集された全ての個体について、イラストマー蛍光標識により個体識別を施し、さらに個体毎の遺伝子分析用組織を収集した。この調査は、申請者が2005年度より継続しているものであり、これまでに4千個体以上のDNA分析用組織を生態データとともに蓄積している。2005年度に採集した成熟個体、2006年度に採集した当歳魚を対象にマイクロサテライトDNA分析をおこない、集団遺伝学用統計ソフトColony(Wang and Santure 2009)により親子推定をおこなったところ、成熟が確認されたオス17個体のうち、翌年に子を残すことができた個体は8個体(47%)であり(95%確率)、さらに残した子どもの数にも大きな個体差が確認された。メスでは、2005年度に成熟が確認されたすべての個体に翌年の子どもが確認された。水産総合研究センター増養殖研究所内を流れる人工河川に、天然イワナのオス成熟個体5尾・メス成熟個体5尾、増養殖研究所にて継代飼育されたオス成熟個体5尾・メス成熟個体5尾を放流し、自然繁殖させた。次年度、当歳魚を採集し、遺伝子分析により天然魚と養殖魚の繁殖成功度を比較する予定である。イワナ自然集団を対象とした野外調査を実施し、採集されたすべての個体についてイラストマー蛍光標識により個体識別を施し、さらに個体毎の遺伝子分析用組織を収集した。この調査は、申請者が2005年度より継続しているものであり、2014年度は606個体分のDNA分析用の試料を追加した。また、2005年2007年の繁殖期に採集された成熟個体(2005年繁殖期、オス17尾、メス5尾; 2006年繁殖期、オス19尾、メス8尾; 2007年繁殖期、オス32尾、メス18尾)、2006年2008年に採集された当歳魚について(2006年545尾、2007年198尾、2008年312尾)、昨年度新規に開発したマイクロサテライトDNAマーカー8遺伝子座(Yamamoto and Sekino 2015)を用いて親子判別をおこなった。親子推定にはプログラムColony (Wang and Santure 2009)を用い、最尤法により確率95%以上を親候補と判定した。その結果、各年度で次世代に子を残した個体の割合は、オスが347%、メスが6100%と推定され、繁殖成功度に大きな個体差および年による違いが確認された。また、両性ともに、親魚の体サイズと繁殖成功度との間に明瞭な関係を見いだすことができなかった。このことは、競争能力が高く、またより多くの卵や精子をもつ大型の個体が必ずしも高い繁殖成功度をとげるわけではないことを示す。継代飼育魚の繁殖成功度を評価する移殖放流実験については、昨年度と同様の野外操作実験を水産総合研究センター内に設置した人工河川で継続しているころである。3塩基および4塩基繰り返し配列の多型的マイクロサテライトDNAを8遺伝子座探索し、マルチプレックスPCRにより全ての遺伝子座を同時に増幅する手法を確立した(Yamamoto and Sekino 2015)。イワナ自然集団を対象とした野外調査を実施し、遺伝子分析用組織を個体ごとに収集した。2005年2012年の繁殖期に採集された成熟個体、2006年2013年に採集された当歳魚について、新規に開発したマイクロサテライトDNA8遺伝子座を用いて親子判別をおこなった。親子判別には、集団遺伝学用統計ソフトColony(Wang and Santure 2009)を用い、最尤法により確率95%以上を親候補と判定した。野外調査によって確認された成熟個体のうち、次世代に子を残した個体の割合は、各年度でオスが029%、メスが9100%と推定され、繁殖成功度に大きな個体差および年による違いが確認された。このことは、競争能力が高く、かつより多くの卵や精子をもつ大型個体が必ずしも高い繁殖成功を遂げるわけではないことを示す。

継代飼育魚の繁殖成功度を評価する移殖放流実験については、水産総合研究センター日光庁舎に設置した人工河川に天然魚と養殖魚それぞれ10尾(オス5尾、メス5尾)ずつを放流し、彼らのDNAと翌年回収した当歳魚のDNA情報をもとに親子判別をおこなった。その結果、自然集団での調査結果と同様、天然魚・養殖魚ともに残した子の数に大きな個体差が認められ、親魚の体サイズと繁殖成功度との間に明瞭な関係は認められなかった。次世代シーケンサーを用いて、イワナの親子判別推定に用いる3塩基および4塩基繰り返し配列の多型的マイクロサテライトDNA(msDNA)を8遺伝子座探索した。イワナの自然集団を対象とした野外調査を実施し、2005年から2013年までに採集された親個体と当歳魚のmsDNAデータをもとに親子判別推定を行った。また、継代飼育魚の次世代資源への貢献度を評価するために人工河川への移殖放流実験をおこなった。その結果、天然魚・養殖魚ともに、繁殖成功度に大きな個体差が確認され、親魚の体サイズと繁殖成功度との間に明瞭な関係は認められなかった。イワナ自然集団を対象とした繁殖成功度推定のための試料収集および遺伝子分析、養殖魚の繁殖成功度評価のための野外操作実験、ともに計画にしたがい順調に進捗している。また、昨年度開発したマイクロサテライトDNAマーカーがイワナの親子判別に適用できることを確認した。魚類生態遺伝学野外生態データ、およびDNAデータの蓄積を継続するとともに、これまでのデータをとりまとめ、天然魚各個体について繁殖成功度に影響する要因を検討する。また、継代飼育魚の次世代の貢献度を評価するために、人工河川に放流した天然魚と飼育魚の繁殖成功度を比較する。野外調査、遺伝子分析ともに計画にしたがい順調に進捗している。本年度1000個体をこえる検体について遺伝子分析を実施したが、これに必要とされる各種試薬を安価で購入することができ、また今年度予定していた調査・実験を非常勤職員の新規雇用なしに実施することができ人件費が未使用となった。今年度の成果により、天然イワナの親子判別手法を技術的に確立することができた。次年度以降、これまでにとりためた遺伝子サンプルの分析を進めていくとともに、複数年度にわたる親子関係のデータを蓄積し、イワナの繁殖成功度に個体差をもたらす要因について解析する。昨年度に引き続き、イワナの親子関係を推定するための遺伝子実験試薬が多種・大量に必要であるとともに、これまでの成果を公表するための旅費が必要となる。マイクロサテライトDNA遺伝子座探索、および多型解析用に用いる遺伝子分析用試薬を安価に購入することができ、また予定していた放流実験を施設内の実験河川にて実施することができたため、旅費と調査補助にかかる人件費が未使用となった。次年度以降、数千個体におよぶサンプルについてマイクロサテライトDNA分析による親子判別を行うために、それにかかる多種・大量の遺伝子分析用試薬を購入する必要がある。
ＡＤＨＤ傾向をもつ成人の課題遂行における注意配分の特徴の解明

ADHD傾向を持つ人の不注意傾向と認知的な課題の遂行方略,および誤りとの関連を検討した。参加者は大学生であり,重さの系列化課題を用いた。ADHD傾向尺度得点が高い参加者は逆行的な注意の不足を反映する「比較1回」方略が多くみられるという仮定は支持された。加えて,順向的な注意の不足・衝動性を反映した方略である「比較0回」方略,および何度も比較を繰り返して完成に至る方略も尺度得点の高さと関連していた。この方略は「段取り不足」を,遂行中に注意を補足することで解決する方略と解釈された。ADHD傾向の高い人は,単純な認知課題を遂行する際にも注意の配分が適切に行われていないことが示された。ADHD傾向をもつ成人の課題遂行における注意配分の特徴を明らかにするという目的のもと,重さの系列化課題を用い,この課題の遂行中の誤りを分析し,不注意傾向と誤りのタイプに関連があるかどうかを検討した。この課題は推移律の能力を計る課題であり,園田らによるとこの能力は12歳頃までに完成することが確かめられている。しかし,成人においても配列の誤りを犯すことがある。成人の誤りはこの一連の流れの中で順行的あるいは逆行的な注意配分がうまくなされないために生じると仮定していた。また,注意配分の切り替えは,ワーキングメモリとも関連していると考えられる。24年5月7月に,研究計画書に基づき,データの収集を行った。対象者は大学生100名であった。課題(1)重さの系列化課題;2個7個の要素の配列を求める(計6課題)個別に実施。遂行中の行動をビデオで記録し,比較の回数および置いた位置の誤り,および最終的な配列の正確さを分析した。(2)基本的な情報処理力を計る課題として,カウンティングテスト(処理の速さ),数の順唱課題(短期記憶),逆唱課題(ワーキングメモリ)を実施した。(3)不注意傾向および不適応傾向の自己チェックリスト(複数のチェックリストを参考に作成)24項目5件法に回答してもらった。8月以降,データを分析し,衝動型の行動による比較の不足と,一回の比較後の逆行的な注意の不足による比較回数の不足に起因する誤りが不注意傾向と関連する傾向が見出された。ここまでの結果をまとめ,中間報告として,日本発達心理学会第24回大会でポスター発表を行った。園田・丸野(2011)が考案した重さの系列化課題を用い,ADHD傾向をもつ成人の不注意傾向と遂行方略の関連を検討した。この課題は対の比較を2回ないし3回行うことが必要である。「不注意」・「体調不良」・「対人関係の苦手さ」の得点が高く,ADHD傾向および日常生活における不適応傾向をもつ人は,仮説通り,逆向的注意配分の不足をあらわす「比較1回」方略を使用することがわかった。また,仮説していなかった知見として,衝動性から生じる順向的注意配分の不足をあらわす「比較0」方略による誤りも多くみられた。さらに,誤りにはつながらないが,段取り不足を補う「比較4回以上」方略も不足した注意を補いながら遂行する方略であり,日常生活における不注意・不適応と強く関連することが見出された。研究の目的は,成人AD/HDの中心的な問題である「不注意」に焦点をあて,活動のどの時点(前段階・実行中・事後評価段階)に不注意が生じやすいのかについて基礎的な研究を行うものである。本研究はADHD傾向をもつ成人が物事の遂行に困難をきたすのは,特に事後段階への注意の配分が不足しているからであるという仮説に基づき,活動前後の一連のproactive,reactiveな注意配分が必要な認知課題を考案し,その遂行において,誤りが生じる頻度が通常の成人より高いが否か,また課題遂行中のどの段階で誤りが生じやすいかを明らかにする。これによりADHD傾向をもつ成人の課題遂行プロセスにおける困難の特徴を明らかにし,より効果的な支援方法への示唆を見出そうとするものである。この研究に用いる課題として,園田・丸野(2010)の「重さの系列化課題」を用いるという計画であった。この課題は元来幼児期からの推移律の発達をとらえるために考案されたものであり,成人を対象にする場合は課題の提示方法を新たに考案する必要があった。今年度は,研究を実施するために次の点を検討・準備した。(1)課題の適切性について,予備調査的に課題の提示方法,記録方法などの検討を行った。

(2)ADHD傾向をはかるための自己評定尺度に関する情報を収集し,用いる尺度の特定をすすめた。(3)結果の分析方法について,デジタルビデオカメラを目視するのみではなく,数量化する方法を検討し,」チェックリストを作成した。(4)実験実施補助協力者は,課題に熟知する必要があるので,協力者の募集と,応募者に対して実験実施の訓練を行った。これらの準備により,平成24年4月からデータの収集をはじめる目途がたった。ほぼ当初の計画通りデータを収集することができた。これにより,課題遂行時の誤りのパターンを分類し,順行的な注意の不足と逆行的な注意の不足が遂行方略と関連づけることができた。また,当初は逆行的な注意が主であると仮定していたが,結果より成人においても順行的な注意の不足による誤りが多いことが見出された。ただし,対象者のスクリーニングをあらかじめ行うという計画については十分事前調査ができなかった。すなわち,協力者の確保の都合により,無作為に対象者を集め,事後に対象者を「不注意傾向群」「対照群」と分けることになった。これにより,不注意傾向群のグレーゾーンが広くなり,不注意傾向との関係性が不明瞭であるという問題が残っている。申請段階では,平成23年度より,データの収集を始める計画であったが,以下の理由で2011年度内は準備期間にあて,平成24年4月からデータの収集を開始することになった。(1)用いる課題を成人向けに提示する方法の吟味・検討に時間がかかった。(2)実験実施補助協力者の募集と,課題に熟知するための訓練期間が必要であった。(3)結果を分析するために,申請書で購入を予定していた画像解析ソフト(デジタルビデオ3次元動作解析ソフト3DMADT)が,目的とする分析が可能かどうかを業者に問い合わせ,過去のデータを業者からメーカーに送付→テスト→結果のフィードバックを行うなどを行うために時間を要し,結果として画像解析ソフトは目的に合わないことが判明した。そのため,一時計画が挫折し,画像からだけではなく,課題遂行中に実験補助者がチェックリストを用いて課題遂行のプロセスを記録するための記録用紙作成などを行うこととなった。(4)上記の準備を行う間,対象となる成人(大学生)に協力を依頼する時期を逸し,スタートを次年度に繰り下げることになった。収集したデータをさらに分析し,課題遂行時の注意の配分と日常生活における不注意傾向およびワーキングメモリとの関連をさらに検討する。さらに,分析結果を注意の配分を促す支援方法の提案に結びつける。本年度は,実験を開始し,データを収集する。まず,広く対象者に自己評定によるADHD傾向尺度を実施し,その結果によって,研究群と対照群を設け,1名ずつ個別に「重さ系列化課題」を実施する。当初の計画では,不注意傾向尺度のみを考えていたが,不注意に加え,ワーキングメモリに関する課題を併せて実施し,「不注意傾向」と「ワーキングメモリ課題の成績」と,「重さの系列化課題」における誤りパターンの関連を分析し,「不注意傾向」と「ワーキングメモリ」が課題遂行におけるproactive,reactiveな注意配分とどのように関連しているかを明らかにする。24年度はデータの収集を実施することが中心となる。25年度は,この結果を詳細に分析し,不注意の起こりやすさの要因と,不注意をカバーする事前あるいは課題遂行中の課題提示方法,または不注意による誤りが起こった後の有効な対処方法について提案を行う計画である。データ分析のためのアルバイト謝金。
多価イオンとヘリウムの衝突における電荷交換過程の理論的研究

1.実験及び計算で得られている多価イオンー原子間の電子捕獲過程に関するデータの収集を行った.結果はまとめて発刊した.2.課題研究に必要な以下のプログラム群の開発,移植を行った.3.(O^<6+>+HHe)系の1電子捕獲断面積を計算.結果は(1)電子捕獲がR5ouでの入射チャネルとO^<5+>(3l)チャネルの間の動径結合によって支配されていること, (2)原子基底に基づく計算結果と中間衝突エネルギーでかなり良く一致すること, (3)低エネルギー領域ではそれまでに得られている実験値,計算値よりも我々の数値が信頼できること, (4)低エネルギー領域では衝突軌道跡として直線近似を用いると断面積が大きくなりすぎるのでクーロン型軌跡を用いなければいけないこと等を示している.4.電子捕獲断面積の入射粒子,標的粒子依存性を調べるためまず(1)(Be^<8+>+He)系, (2)(Be^<q+>+H)系, (3)(B^<q+>He)系のポテンシャルエネルギーを計算し,比較した(q=14).このうち(Be^<3+>+H)系の断面積の数値は全く得られていなかったが我々が計算したところ面白い結果が得られたので論文にまとめて投稿した(掲載が許可).更に(B^<3+>+H)系は10チャンネルで有効な1電子, 2電子捕獲がすべて考慮できるという珍らしい例である.現在計算中であるが2電子捕獲過程の新しい取り扱い方法の開発が期待できる.5.(Mg^<2+>+He)系の1電子捕獲の微分断面積, alignmentの数値を計算で求めた.6.(N^<5+>+He)系:ポテンシャル,結合項より10個の状態を考慮する必要があることがわかった.それ等に更に2個の2電子捕獲状態を加えて断面積の計算を実行中である.1.実験及び計算で得られている多価イオンー原子間の電子捕獲過程に関するデータの収集を行った.結果はまとめて発刊した.2.課題研究に必要な以下のプログラム群の開発,移植を行った.3.(O^<6+>+HHe)系の1電子捕獲断面積を計算.結果は(1)電子捕獲がR5ouでの入射チャネルとO^<5+>(3l)チャネルの間の動径結合によって支配されていること, (2)原子基底に基づく計算結果と中間衝突エネルギーでかなり良く一致すること, (3)低エネルギー領域ではそれまでに得られている実験値,計算値よりも我々の数値が信頼できること, (4)低エネルギー領域では衝突軌道跡として直線近似を用いると断面積が大きくなりすぎるのでクーロン型軌跡を用いなければいけないこと等を示している.4.電子捕獲断面積の入射粒子,標的粒子依存性を調べるためまず(1)(Be^<8+>+He)系, (2)(Be^<q+>+H)系, (3)(B^<q+>He)系のポテンシャルエネルギーを計算し,比較した(q=14).このうち(Be^<3+>+H)系の断面積の数値は全く得られていなかったが我々が計算したところ面白い結果が得られたので論文にまとめて投稿した(掲載が許可).更に(B^<3+>+H)系は10チャンネルで有効な1電子, 2電子捕獲がすべて考慮できるという珍らしい例である.現在計算中であるが2電子捕獲過程の新しい取り扱い方法の開発が期待できる.5.(Mg^<2+>+He)系の1電子捕獲の微分断面積, alignmentの数値を計算で求めた.6.(N^<5+>+He)系:ポテンシャル,結合項より10個の状態を考慮する必要があることがわかった.それ等に更に2個の2電子捕獲状態を加えて断面積の計算を実行中である.1.実験及び計算で得られている多価イオン-原子間の電子捕獲過程に関するデータを収集し、その結果を名古屋大学プラズマ研究所より発刊した。2.これまでこの研究で用いていたプログラム((1)Junkerコード,(2)ETFを含んだ結合要素計算用プログラム,(3)Close Coupling用プログラム)をスーパーコンピュータで効率よく走るよう書き直した。その結果計算に必要な時間は今までの1/10程になった。3.昨年度計算を行った【(O-He)^(6+)】系に対しチャネル数を7から8に増やしてClose Couplingの計算を行った。これは7個(始状態+【O^(5+)】(n=3)-【He^+】に相関する6個)のチャネル以外に【O^(5+)】(n=4)-【He^+】に相関するチャネルが電荷交換過程に大きく影響を与えるかもしれないという指摘があったためである。そこで【O^(5+)】(n=4)-【He^+】に相関する状態を1個ずつ8番目のチャネルとして加えた7種類の8チャンネル計算を行ってみたが両者の差はすべて3%以内であった。つまりこの系では始状態に加えて【O^(5+)】(n=3)-【He^+】のチャネルを考慮するだけで電荷交換過程が十分記述できることがわかった。この結果の一部は1986年8月20日23日のICAP-X Satellite meetingで、残りは8月24日30日のICAP-Xで発表した。又これ等の結果を論文としてまとめ、J.Phys.Bに投稿したところ掲載が認められ、現在印刷中である。4.実験家より要請のあった【(Be-H)^(8+)】系の計算を行った。

その中で【(Be-H)^(3+)】系に対しては特に面白い結果が得られたので論文にまとめJ.Phys.Soc.Japanに投稿した。5.【(B-He)^(3+)】系の2電子移行を含めた電荷交換断面積を計算中である。この系は厳密な計算例がほとんどない2電子移行過程に相当するチャネルが比較的エネルギーの低い所にあるためこれまでの方法を用いてそれを計算することができる特別な系である。
正標数の代数的閉体上で定義されたファノ多様体についての研究

2018年度も,正標数の代数的閉体上定義された代数多様体の特殊な構造について,局所的視点,および大域的視点の双方に立った研究を行った.局所的視点からの研究として,2017年度までは主に曲面上に現れる有理二重点の変形空間の構造を調べていたが,今年度は対象を広げて任意次元の単純特異点の変形空間に注目した.標数が3以上の場合,単純特異点の定義方程式は有理二重点の方程式のサスペンションとしてほぼ自明に得られ,変形空間の構造も自然に拡張されるが,標数が2のときは奇数次元と偶数次元で全く状況が異なるため,それぞれにおいて計算を行わなければならない.そこで1次元単純特異点について,変形空間の構造,および中心ファイバーと同型な特異点が生じるファイバーを持つ点の軌跡を調べ,A,D,Eのすべての型についてその局所的な方程式をほぼ明らかにすることができた.これについては,すでに得られた偶数次元の単純特異点に関する結果と合わせ,現在論文を準備中である.一方大域的視点からの研究としては,2017年度に引き続いてF分裂しないデル・ペッツォ曲面および3次元ファノ多様体を調べた.デル・ペッツォ曲面については次数1の場合が残されており,特に標数が5の場合を中心にF分裂性を持たないものの特徴づけを目指して考察を行った.フェダーの判定条件を用いることで定義方程式に一定の条件が課されることは明らかになっているが,それ以上の詳しい結果はまだ得られていない.また3次元ファノ多様体については,具体例の計算などをいくつか試みたものの,2018年度は特段の知見は得られなかった.研究にあたっては,国内外の研究者と議論および情報収集を行うことを目的として,函館で行われた研究集会で講演を行ったほか,高知大学,東京大学などで行われた研究集会やカンファレンスにも赴き,他の参加者と活発な議論を行った.2018年度は,正標数,特に標数2の体上定義された単純特異点の変形空間について特に力を入れて研究を行い,その結果,各特異点の型に対して変形空間およびその中の等特異変形空間の構造を明らかにすることができた.一方,F分裂性を持たないデル・ペッツォ曲面および3次元ファノ多様体の特徴づけについては,具体例の計算や特定の標数における考察などを行ったものの,全体としては大きな成果は得られなかった.以上のように,研究内容によって進捗状況に差は出ているものの,全体としてはおおむね順調に進展していると考えられる.局所的視点からの研究として,正標数の単純特異点の変形空間の構造を引き続き調べる.特に奇数次元の単純特異点の等特異変形空間について残された部分を解明することを目指すほか,単純特異点の各タイプそれぞれについての最大タウ軌跡がどのような階層構造を持つかを調査したい.一方,大域的視点からの研究として,3次元ファノ多様体のF分裂性についても調べる.当該多様体の直線のヒルベルトスキームとF分裂性との間に何らかの関連がないかを考察したい.また次数1のデル・ペッツォ曲面についても引き続き,有理楕円曲面の分類から研究を進めたいと考えている.本年度は,3次元代数多様体に現れる1次元の標準特異点が有理二重点の非自明な変形として生じるという正標数特有の現象に注目し,有理二重点の変形空間において中心ファイバーと同型な特異点が生じるファイバーを持つ点がどのような軌跡をなすかについての研究を中心に行った.標数3以上の場合は先行研究で構造がほぼ解明されているので,残された標数2の場合について局所的な計算を実行した.すでに一部は以前から計算を進めていたが,今年度は非常に複雑なD型を完全に調べた結果,A,D,Eのすべての型に対して,こうした軌跡の次元,およびその局所的な方程式を求めることができた.さらに,変形空間においてTjurina数τがなす階層構造についても調べ,中心ファイバーとτが等しい特異点がファイバー上に存在するような変形空間内の軌跡(最大τ軌跡)についても計算を行った.E_8^0, E_6^0型など,最大τ軌跡内で各特異点に対する軌跡が線形な階層構造を持つものがある一方,E_6^1型のように最大τ軌跡が既約でない場合も起こることが明らかになった.一方,正標数の代数的閉体上定義されたデル・ペッツォ曲面および3次元ファノ多様体でF分裂しないものについても研究を行った.デル・ペッツォ曲面については次数1の場合が残されているが,次数2以上の場合のような簡明な特徴づけを得ることは難しく,引き続き調査が必要である.また3次元ファノ多様体については,これまでに得られた具体例から,多様体上の直線と関連があると予想しているが,まだ具体的な成果は得られていない.研究にあたっては,国内外の研究者と議論および情報収集を行うことを目的として,東京理科大学で行われたシンポジウムで講演を行ったほか,高知大学,法政大学などで行われたワークショップや研究集会にも赴き,他の参加者と活発な議論を行った.本年度は正標数の有理二重点の変形空間について特に力を入れて研究を行い,その結果,標数2のすべての有理二重点の型に対して変形空間内における等特異変形空間の構造を明らかにすることができた.特にD型の場合はきわめて計算が煩雑で長い時間を要するものであっただけに,その等特異変形空間を完全に記述できたことは大きな進展と言える.さらに各特異点の最大τ軌跡についても計算を行った結果,当初の想定を超えていくつかの特異点についてその階層構造を具体的に記述することができた.

一方,F分裂性を持たないデル・ペッツォ曲面および3次元ファノ多様体の特徴づけについては,具体例の計算などで予想の傍証を得られたものの,全体としては大きな成果は得られなかった.以上のように,研究内容によって進捗状況に差は出ているものの,全体としてはおおむね順調に進展していると考えられる.2018年度も,正標数の代数的閉体上定義された代数多様体の特殊な構造について,局所的視点,および大域的視点の双方に立った研究を行った.局所的視点からの研究として,2017年度までは主に曲面上に現れる有理二重点の変形空間の構造を調べていたが,今年度は対象を広げて任意次元の単純特異点の変形空間に注目した.標数が3以上の場合,単純特異点の定義方程式は有理二重点の方程式のサスペンションとしてほぼ自明に得られ,変形空間の構造も自然に拡張されるが,標数が2のときは奇数次元と偶数次元で全く状況が異なるため,それぞれにおいて計算を行わなければならない.そこで1次元単純特異点について,変形空間の構造,および中心ファイバーと同型な特異点が生じるファイバーを持つ点の軌跡を調べ,A,D,Eのすべての型についてその局所的な方程式をほぼ明らかにすることができた.これについては,すでに得られた偶数次元の単純特異点に関する結果と合わせ,現在論文を準備中である.一方大域的視点からの研究としては,2017年度に引き続いてF分裂しないデル・ペッツォ曲面および3次元ファノ多様体を調べた.デル・ペッツォ曲面については次数1の場合が残されており,特に標数が5の場合を中心にF分裂性を持たないものの特徴づけを目指して考察を行った.フェダーの判定条件を用いることで定義方程式に一定の条件が課されることは明らかになっているが,それ以上の詳しい結果はまだ得られていない.また3次元ファノ多様体については,具体例の計算などをいくつか試みたものの,2018年度は特段の知見は得られなかった.研究にあたっては,国内外の研究者と議論および情報収集を行うことを目的として,函館で行われた研究集会で講演を行ったほか,高知大学,東京大学などで行われた研究集会やカンファレンスにも赴き,他の参加者と活発な議論を行った.2018年度は,正標数,特に標数2の体上定義された単純特異点の変形空間について特に力を入れて研究を行い,その結果,各特異点の型に対して変形空間およびその中の等特異変形空間の構造を明らかにすることができた.一方,F分裂性を持たないデル・ペッツォ曲面および3次元ファノ多様体の特徴づけについては,具体例の計算や特定の標数における考察などを行ったものの,全体としては大きな成果は得られなかった.以上のように,研究内容によって進捗状況に差は出ているものの,全体としてはおおむね順調に進展していると考えられる.局所的視点からの研究として,正標数の有理二重点の変形空間の構造を引き続き調べる.すでに等特異変形空間についてはほぼ解明できたので,特に複雑な構造を持つと思われるD型やザリスキタイプでないE型について最大τ軌跡がどのような階層構造を持つかを調査したい.一方,大域的視点からの研究として,3次元ファノ多様体の直線のヒルベルトスキームに注目することで,直線の多さとF分裂性との間に何らかの関連がないかを調べる.また,次数1のデル・ペッツォ曲面についても,有理楕円曲面の分類から研究を進めたいと考えている.さらにこれと並行して,小平次元1の準楕円曲面の多重標準線形系から定まる写像がファイブレーションの構造射をいつ与えるかという問題についても調査を行う.
フィールドオリエンテッドな知見から紐解く高pH環境下での陰イオンの挙動とその応用

本年度はヨウ素の炭酸塩鉱物相への分配メカニズムの理解のため、これまでに明らかにしてきた重要な素反応過程について、現地の温泉水と地表水を利用してのin situの混合実験や、実験室での合成、吸着、収着実験を行った。さらに、それらをモデリングに適用可能な定量的理解につなげることを目的とした。室内実験より,カルシウム炭酸塩鉱物によるヨウ化物イオンの取り込みには吸着反応ではなく収着反応が有効であることが明らかとなった。また、その収着は鉱物表面,もしくは粒子界面における外圏型錯体の形成が主であった。外圏型錯体であるにも関わらず,吸着反応よりも収着反応において高い分配量が得られた要因として,反応の初期に生成する短命な熱力学的に不安定な相の影響が挙げられる。準安定相は安定相よりも化学的な反応性が高く,微量元素の取り込みにおいて優れており、また,準安定相において取り込まれた元素は相変化後の安定相の微量元素組成にも影響を与えることがこれまでに明らかとなっている。よって,カルシウム炭酸塩鉱物相によるヨウ化物イオンの取り込みが吸着反応よりも収着反応において顕著であり,吸着されたヨウ素が固相の洗浄を経ても保持され続けたのは,初期に生成した熱力学的により不安定な相であるファーテライトやモノハイドロカルサイトに、外圏型錯体として吸着された後に相変化,及び結晶成長の過程において粒子界面に取り込まれたためであると考えられる。オマーンの高アルカリ泉周辺に生成が確認される沈殿物に含まれる各鉱物相のヨウ化物イオンに対する分配係数および収着機構を明らかにするため、天然環境の複雑さを排した条件での炭酸塩鉱物の室内合成実験および合成で得たヨウ素を高濃度に含む炭酸塩鉱物に対するXAFS分析を実施した。室内合成実験として、異なる濃度で添加されたヨウ化物イオン存在下で、試薬を使用した共沈法により炭酸塩鉱物の多形であるカルサイトおよびアラゴナイトを合成した。その後、合成された沈殿物に含まれるヨウ素濃度を明らかにするため、ICP-MSによるヨウ素濃度測定を行なった。従来、固体中に含まれるヨウ素濃度の分析においては加熱分解法が広く利用されてきたが、炭酸塩鉱物試料に対しては、より簡便である酸分解法が適用可能であることを見出し、これを利用した。求めたヨウ素濃度から、カルサイトおよびアラゴナイトそれぞれの分配係数には濃度依存性があり、特に高濃度(10000ppm)条件下ではアラゴナイトがカルサイトの分配係数を大きく上回ることが明らかとなった。XAFS分析からは、合成から分析に至る工程でヨウ化物イオンが他の化学種に変化していないことが確認された。これにより、ヨウ化物イオンに対する2種類の炭酸塩鉱物の分配係数を正確に求めることができたことになる。また、各試料に対するXANESスペクトルのパターンフィッティングから、カルサイトとアラゴナイトがヨウ化物イオンに水を配位した状態で収着することが明らかとなった。aragoniteに分配されたヨウ化物イオンの長期挙動を明らかにするため,河岸段丘堆積物の鉱物組成やヨウ化物イオン濃度の分析,C-14年代測定を行なった。Faydh地域では異なる生成年代を示す試料が採取された。比較的生成が新しい試料では,沈殿物中の鉱物組成と同様にaragoniteが主成分である。一方,比較的生成が古い試料ではcalciteが確認された。これは,準安定相として生成したaragoniteが,時間が経過するにつれて安定相のcalciteに相変化したものと考えられる。生成年代の古いcalcite中のヨウ素の濃度は,新しいaragoniteのそれに比べて低いことが確認された。このことは,aragoniteがcalciteへ相変化する場合に,収着ヨウ素を溶出する可能性があることを示す。また、実験室におけるaragoniteおよびcalciteに対するヨウ素の吸着及び共沈実験を行なう過程でカルシウム炭酸塩鉱物の準安定相であるmonohydrocalcite及びvateraiteの生成が確認され、これらがヨウ素の挙動に強い影響を与える可能性が示唆された。aragoniteがヨウ素を長期間保持できないことがわかったが、実処分環境において今まではゼロと見積もられていた分配係数に値を与えることができることの意義は大きい。また、ヨウ化物を濃集させないことも隆起などのシナリオを考えた場合には必要となるため、短期間の移行の遅延がどのようなインパクトを持つか更なる検討をするため、前述の準安定鉱物の性質を含めデータベースを拡充していく必要がある。また準安定相鉱物が共沈メカニズムに与える影響を明らかにすることは、放射性廃棄物研究だけでなく他の有害イオンによる諸問題の解決に新たな手段を与えると考えられる。

準安定相は安定相よりも化学的な反応性が高く,微量元素の取り込みにおいて優れており、また,準安定相において取り込まれた元素は相変化後の安定相の微量元素組成にも影響を与えることがこれまでに明らかとなっている。よって,カルシウム炭酸塩鉱物相によるヨウ化物イオンの取り込みが吸着反応よりも収着反応において顕著であり,吸着されたヨウ素が固相の洗浄を経ても保持され続けたのは,初期に生成した熱力学的により不安定な相であるファーテライトやモノハイドロカルサイトに、外圏型錯体として吸着された後に相変化,及び結晶成長の過程において粒子界面に取り込まれたためであると考えられる。アルカリに特化したデータベースの構築がカルシウム炭酸塩をはじめ、ケイ酸塩、硫酸塩、水酸化物でも実施することができた。XAFSを用いた分光学的な理解は当初の計画よりも進展している。当初想定をしていたaragoniteやcalciteといったカルシウム炭酸塩の他にmonohydrocalciteやvateriteといった他の多形によるヨウ素の収着が重要だということが明らかになった。当初の計画に加えてこれら2種の鉱物による収着挙動を明らかにすることでより網羅的なデータベースの構築ができるものと考える。手法は今までに使用してきたものをそのまま利用できると考えられる。
タンパク質複合体の立体構造と機能の予測

立体構造のデータベース解析(1)All-βタンパク質の立体構造分類:トポロジーの`Ring'型の構造と`Zipper'型の構造に注目する新規のAll-βタンパク質の立体構造分類法を提案した。実際、All-βタンパク質の92%が`Ring'型を、60%が`Zipper'型の構造を取っている。この分類結果は、大きなcontact orderを持つAll-βタンパク質のフォールディング経路との関わりがある。(2)確率的アラインメント法:アミノ酸配列と立体構造を確率的に表現する確率的アラインメント法を開発した。有限温度におけるエントロピーのバイアスは周期境界条件によって防がれている。この方法を用いて、円順列配列を持つTIM-barrelとβ-trefbil構造の内部対称性と、遠い進化的類縁関係を正しく検出することができた。分子機能のシミュレーション解析(1)超並列高速分子動力学計算ソフトウェアMARBLEの開発1超並列計算機で高速な計算を可能にする分子動力学計算プログラムを開発した。そこでは、部分剛体法がsymplecticな積分の元で実現している。また、様々なアンサンブル、NPT, NPAT and NPγT、を実現するアルゴリズムが十蔵されている。(2)水チャネルアクアポリンファミリーの分子動力学シミュレーション:分子動力学シミュレーションを4種類のアクアポリン(AQP1,AQPZ, AQP0, GlPF)について実行した。その結果、水の透過効率は、GlpFAQPZ>AQP1>>AQP0となり、チャンネルのサイズ、GlpF>>AQP1>AQPZ>>AQP0と異なっていた。これは水透過では、長距離の相関に基づくsingle-file性が重要であるためであると解釈された。(3)分子結合に伴うタンパク質構造変化の線形応答理論:基質結合による構造変化を線形応答理論に基づいて記述する理論を提案した。これは、リガンド結合を摂動と考え、応答関数が平衡状態のゆらぎによってあたえられるとするものである。この理論の妥当性をいくつかの結晶構造について示した。立体構造ダイナミクスの実験的解析(1)中性子散乱スペクトルの解析方法の開発:中性子非弾性散乱におけるBosonピークの起源をタンパク質ダイナミクスの低温における動的構造転移の観点から明らかにした。基質認識(木寺担当):モノヌクレオチド、糖の蛋白質結合部位についてのデータベースをほぼ完成した。結合部位立体構造のグラフ理論に基づいた総当たりの立体構造の比較結果を、Correlation mapという方法によって分類した。その際に、モノヌクレオチドに関しては、リン酸、フラノース、塩基の部分に分割し、それぞれについて、解析を行った。また、糖は、単糖、多糖の場合に分け、多糖については、単糖ごとの解析を行った。フォールドの比較法に関しては、確率的アラインメント法を確立した。また、β蛋白質、α/β蛋白質の通常のフォールドを越えるより広い枠組みの分類法を提案した。

立体構造変化(北尾担当):立体構造データベース解析では、2つのイムノグロブリン(Ig)ドメインからなる蛋白質のうち、(Iセットドメイン+C2セットドメイン)および(Vセットドメイン+C2セットドメイン)の場合についてドメイン間の結合様式を解析したが、結合のパターンには機能との相関は見られなかった。NMR解析では、CD2分子のように1つのIgドメインで他の分子と結合する場合には、CDRにある程度局所的だが協奏的に1013残基がゆらぐパターンが見られた。TCR(T Cell Receptor)のように2つのIgドメインが結合に関与する場合には、局所的な構造のゆらぎに加えて、更にドメイン間のゆらぎが現れることが分かった。(1)タンパク質複合体の構造予測基質結合に伴うタンパク質の立体構造変化を研究した。Protein Data Bankには、基質結合状態と非結合状態の両者の立体構造がそろっているタンパク質が数多く蓄積されている。それらを用いて構造変化の一般論を定式化することがここでの目的である。第1次近似として、基質結合に伴う応答を線型のレベルで扱い、以下の定式化を得た。<Δr_i>_1,=βΣ_j<Δr_iΔr_j>_0f_jここで、<Δr_i>_1は基質結合に伴う原子iの構造変化、<Δr_iΔr_j>_0は非摂動状態でのゆらぎの分散共分散行列、f_jは原子jにかかる外力である。このように、線型的な描像では、応答の挙動は非結合状態のゆらぎによって決まる。基質結合前後のふたつの結晶構造を用い、多くの例で上式の予測が、結晶構造の差を説明し得ることを示した。この理論によって、タンパク質複合体の立体構造を単体の構造から予測する道が開けたと言える。(2)実験情報の解析NMRの実験データに基づく蛋白質の動的立体構造決定法の改良を進め、翻訳開始因子への応用を開始した。また、中性子散乱スペクトルの予測を分子シミュレーションに基づいておこない、測定装置の解像度・配置の提言をおこなった。タンパク質複合体の立体構造と機能の予測を目指した研究を異なった三つの方向から行った。バイオインフォマティクス研究(木寺担当):機能同定における最も重要な方法であるダイナミックプログラミングを有限温度に拡張した確率的アラインメント法という相同性検索の方法を開発した。この方法は、比較においてふたつの配列のみを用い、相同配列を用いることがないにもかかわらず、ダイナミックプログラミングの標準法であるBLASTをはるかに超える検出感度を与えるものである。従って、相同配列が見つからないgeneに関しては、psi-BLASTよりも高精度で相同性検索をすることが可能である。分子シミュレーション研究(池口担当):基質認識における一般論としての線形応答理論の開発を行っている。昨年度は、2面角形への拡張を行った。多くの場合構造変化は、回転運動として起こるため、従来の直交座標系の直線的なベクトル表記の線形応答理論ではずれが出てきてしまう。
流動力学環境下に観察する新規抗凝固薬の抗血栓性と、急性拮抗薬の決定

直接作用型抗凝固薬(DOAC)の急性拮抗方法は確立されていない。本研究では、血流環境下でDOACと血栓形成制御の相互関係を解明し、拮抗薬剤の効果を評価した。ダビガトラン、リバロキサバン、アピキサバンに対して、各種拮抗薬は静的検査項目を改善したが、フローチャンバー装置による動的評価では新鮮凍結血漿による血栓形成能の改善がプロトロンビン複合体製剤に比較して低かった。原因に、新鮮凍結血漿による血液希釈効果が考えられた。プロトロンビン複合体製剤はDOACに対する急性拮抗薬剤として有効であること、フローチャンバー装置による動的血栓形成能評価は急性拮抗の有用なモニタリングになり得ることが示唆された。健常人から採取した血漿検体を用いて、リバロキサバン、ダビガトラン、エドキサバン、アピキサバンの急性拮抗試験をトロンビン生成試験およびトロンボエラストメトリーで評価した。添加薬剤は、3 factor-プロトロンビン複合体製剤、4 factor-プロトロンビン複合体製剤、遺伝子組み換え活性型第7因子製剤、FEIBA、FVIIa/FX合剤、新鮮凍結血漿を使用した。トロンビン生成測定にはThrombinoscope、発色蛍光基質(Z-Gly_gly-Arg-AMC)を用い、tissue factor高濃度および低濃度によるトロンビン測定量を定量した。トロンボエラストメトリーはNATEM (no activation)、EXTEM assay (tissue factor)、INTEM assay (ellagic acid)により活性テストを行なった。従来の結果からは、アピキサバンやエドキサバンといった抗Xa薬のプロトロンビン複合体製剤の有効性が指摘されているが、トロンビン生成試験やトロンボエラストメトリを用いた本研究結果では、FVIIa/FX合剤の拮抗効果がより高い結果となった。FVIIa/FX合剤は、新規抗凝固薬の急性拮抗に有効である可能性が指摘される。近年、利用可能な新規抗凝固薬は経口薬、静注薬ともに増加している。これらの薬剤には、ワルファリンといった従来の薬剤に比較すると脳出血等の出血性合併症が少ないとされる。一方で、ひとたび出血が生じるとその臨床像は非常に重篤であり、またその急性拮抗薬は確立されていない。本研究では、血流環境下で形成された血栓を多面的に観察するで、新規抗凝固薬と血栓形成制御の相互関係を解明することを目的とした。最終年度は、抗トロンビン薬および抗Xa薬による血漿検体をもちいた拮抗実験を、静的な凝血学的マーカー、および全血検体をもちいた流体下観察によりおこなった。ダビガトラン、リバロキサバン、アピキサバンすべての抗凝固薬に対して、各種拮抗薬は静的な凝血学的検査所見を改善することが示されたが、プロトロンビン時間は第7因子の影響を強くうけることから、トロンビン生成試験で得られる結果との相関が弱かった。一方で、流体下実験ではトロンビン生成量の増加に応じて、拮抗薬による血栓形成能の上昇が得られたため、フローチャンバー装置は新規抗凝固薬の拮抗時におけるモニタリングとして有用である可能性が示唆された。また、新鮮凍結血漿による拮抗はプロトロンビン時間等の検査所見は改善するが、動的な血栓形成能を十分に回復させないことも確認された。本研究ではフローチャンバー装置を用いて流動力学下の拮抗効果を最終の目的としているが、実験系の確立には未だ時間を要している状況である。今後は静的実験系での結果を動的実験モデルで証明することを目的に研究を進めていく。血液凝固トロンビン生成試験やトロンボエラストメトリーの静的実験系での結果を動的実験モデルで証明する。次に、各種抗凝固薬を投与された患者検体を使用する研究へ展開し、健常者モデルの結果が患者検体と同様の結果を得られるかを検討する。また、本研究で使用したフローチャンバー装置の各種圧パラメータと、その他の凝血学的検査所見の結果を統計学的に検討することで、同装置における拮抗効果のモニタリング精度を検討する。フローチャンバー装置を用いた流体下実験が当初の予定より遅れているため、使用するマイクロチップの費用を次年度へ繰り越した。フローチャンバー実験に使用するマイクロチップおよび試薬の購入代に使用する。
増殖型アデノウイルスベクターおよびキャリアー細胞を用いた膀胱癌に対する遺伝子治療

膀胱壁筋層に浸潤する膀胱癌の約50%は、すでに癌の微小転移を有しており、1年以内に臨床上、明らかな転移巣を呈するといわれている。近年の医学の進歩、特に多剤併用抗癌化学療法の確立にも関わらず、それらの患者のほとんどは2年以内に死亡する。現在、遺伝子治療を代表とする分子標的療法が大きな注目を集めているが、膀胱癌を対象としたそれらの新しい治療法の開発も切望されるところである。従来の非増殖型ウイルスベクターについては、その遺伝子導入効率において限界が指摘されており、癌細胞においてのみ複製される腫瘍特異的な増殖型ウイルスベクターが盛んに研究されている。本研究で用いる増殖型ウイルスベクターはウイルスの複製に必要な遺伝子、E1aを腫瘍特異的プロモーターにより制御し、腫瘍内でのみ増殖可能としたアデノウイルスベクターである。Cox-2はサイトカインや発癌プロモーターなどの刺激により、マクロファージ、血管内皮細胞、癌細胞などにおいて誘導され、炎症反応、血管新生、発癌などに関与すると言われ、膀胱癌や大腸癌など多くのヒト癌細胞での発現増強が確認されている。我々はCox-2プロモーターを組み込んだ増殖型アデノウイルスベクター、AdE3-cox-2-327を既に作製した。本ベクターはCox-2を強発現する膀胱癌などの癌細胞においてのみ増殖可能であり、癌細胞内で複製を繰り返すことにより細胞融解を引き起こし癌細胞を特異的に殺傷する。平成16年度、われわれはAdE3-cox-2-327の膀胱癌に対する抗癌作用をIn vitro, In vivo双方で確認した。また平成17年度、AdE2-cox-2-327をキャリアー細胞、A549細胞に感染させヒト膀胱癌細胞KK47を接種して作成したマウスの皮下腫瘍に直接、投与することにより抗腫瘍効果が高まることを確認した。本研究で用いる増殖型ウイルスベクターはウイルスの複製に必要な遺伝子、Elaを腫瘍特異的プロモーターにより制御し、腫瘍内でのみ増殖可能としたアデノウイルスベクターである。
金属酵素モデル錯体を用いた酸素分子活性化機構の解明

本年度は、チトクロームP-450活性中心モデル錯体の合成について主に検討を加えた。オクタヒドロキシフェニルポルフィリンを基本とし、不斉ビナフタレンをポルフィリンの片面に2分子ずつ計4分子修飾した。こうして形成された一方の面のキャビティー内にはチオレート配位子を共有結合により固定し、他方には水酸基を導入する酵素活性中心モデル錯体を目標とした。合成経路中、特にキ-ステップとなる次の3段階において、進展が得られ、合成の最終目標であるチオレート配位のポルフィリン鉄錯体の合成は完了間近となり、酸素分子活性化機構の解明を続いて行う予定である。1.オクタメトキシフェニルポルフィンの合成法改良ピロールとベンズアルデヒド誘導体をプロピオン酸中で加熱する方法では、前駆体であるオクタメトキシフェニルポルフィンの収率は7%程度に止まっていたが、酸を含浸させたモンモリロナイトK-10を酸触媒に用いることで収率が最高23%に向上され、さらに精製も簡便となり、効率が大幅に改善された。2.ポルフィリンとビナフタレンの縮合反応の改良1段階で8個ものエーテル結合の形成を必要とするポルフィリンとビナフタレンの縮合反応においては、従来合計収率が15%程度であった。詳細な質量分析法によって、ビナフタレンがポルフィリンに2あるいは3分子結合した反応未完の中間体が反応混合物中に多く含まれることがわかり、適宜、ビナフタレンを追加することにより収率が30%に向上された。3.チオレート軸配位子の固定保護されたチオフェノール誘導体をビナフタレン修飾ポルフィリンのキャビティー内の水酸基との共有結合を介して、収率60%以上で導入することに成功し、脱保護と鉄イオンの挿入を残すのみとなった。
『舞の本絵巻』を中心とした幸若舞曲の絵入り本の調査研究

本計画は、室町後期に流行した語り物芸能である幸若舞曲が、江戸期に入って芸能としては消滅したが、絵巻や絵本、屏風絵など視覚文芸として新たに享受された様相を具体的にとらえ、文化的な展開を明らかにすることを目的とする。幸若舞曲の絵入り本に関しては、すでに基礎的研究として、現在確認される作例を「幸若舞曲の絵入り本一覧稿」に集成していたが、本計画ではそれ以降に発見紹介された資料を博捜し、個人蔵や地方所在の資料を加えてリストの充実をはかり増補改定版を刊行することができた。また、チェスタービーティ・ライブラリー『舞の本絵巻』や海の見える杜美術館『舞の本絵本』を調査し、江戸前期の絵入り本史に位置付けた。幸若舞曲の絵入り本に関しては、すでに基礎的研究として、現在確認される作例を「幸若舞曲の絵入り本一覧稿」(『中世劇文学の研究ー能と幸若舞曲』平成13年)として作成しており、本年度はそれ以降に発見紹介された資料を捜索し、リストの一層の充実化をはかった。今回新たに、石川透氏蔵の「しずか」絵本、同「百合若大臣」絵巻、同幸若舞曲関係の絵本断簡、徳田和夫氏蔵の「堀川夜討」図、富山県黒部市宮崎記念館の「敦盛」絵巻、京都市古裂会に出品された「源平図扇面貼交屏風」(「堀川夜討」「笈捜し」がモチーフの扇面画)などを調査と撮影し、一覧に加えることができた。宮崎記念館の絵巻資料は幸若舞曲の「敦盛」ではなくお伽草子の「小敦盛」であったが、体裁(小絵巻)や内容などから重要な伝本の一つである可能性を有するもので、今後詳しく検討を加える予定である。また、8月29日にスロベニア共和国のリュブリャナ大学で行われたEAJS国際研究集会でシンポジウム「変革期における幸若舞曲の展開ー絵画化を軸としてー」を企画し、ケラー・キンブロー(コロラド州立大学デンバー校)、パトリック・シュウェマー(法政大学能楽研究所研究員)、井戸美里(東京大学東文研助教)の三氏とともに研究報告を行ない、幸若舞曲の視覚化と文化展開について問題提起をするとともに、国内外の研究者と有意義な意見交換を行った。さらに、同時代の芸能である能・狂言の絵画化にも着目し、幸若舞曲との位相を比較検討した。幸若舞曲の絵入り本(絵巻・絵本・絵入り版本)に関しては、すでに基礎的な研究作業として、現在確認される作例を「幸若舞曲の絵入り本一覧稿」(『中世劇文学の研究ー能と幸若舞曲』平成13年、三弥井書店)としてリストアップしており、本年度は前年に引き続き、新たに発見された資料を博捜して、リストの充実をはかった。今回は、手銭記念館蔵の『烏帽子折図屏風』、都立中央図書館加賀文庫蔵の大型絵本『ゑぼしおり』・大型絵本『大しよくはん(大職冠)』・大型絵本『夜うちそが』、須磨寺蔵(神戸市立博物館寄託)の絵巻『敦盛』、中尾松泉堂蔵の大型絵本『伏見常盤』などを調査の上で加えることができた。上記の内、手銭記念館の『烏帽子折図屏風』は絵巻の「烏帽子折」を切断して、六曲一双の屏風に貼った珍しい作例で、貼られた絵巻は室町末期にまでさかのぼる古写本であり、挿絵はもちろん本文的な価値も高いと思われる。また、念願であった北野天満宮蔵の『うしわか鞍馬出の物語』を調査することができた。この資料は、期待していた絵入り本ではなかったが、幸若舞曲の「未来記」と「鞍馬出(関原与一)」を一体に書写した室町末にさかのぼる古写本で、幸若舞曲の享受を考える上で重要な資料となると思われる。また、幸若舞曲の絵入り本と平行して調査をしている能の絵画資料では、楽劇学会のシンポジウム「絵画から見た楽劇史」において「能の絵画資料」という題で発表するとともに、中世・近世芸能の絵画化についてパネリスト達と有効な議論を交わすことができた。なお、前年に調査を行った宮崎文庫記念館蔵の「敦盛」絵巻を分析検討した上で、その成果を大東急記念文庫が刊行する『かがみ』46号に論文にまとめ、翻刻とともに掲載した。1幸若舞曲を題材にした絵巻・絵本や屏風絵の調査と研究の成果としては、個人蔵や展示会に出品された新たな作例を調査・研究し、基礎的資料リストである「幸若舞曲の絵入り本一覧稿」に十数点を追加することができた。3『舞の本絵巻』の未見資料であるドイツのベルリンの東アジア美術館に所蔵される「烏帽子折」絵巻については、その所在を確認し美術館に正式に閲覧を申し込んだところ、未発表とのことで断られた。今回の研究目的の一つに現存する『舞の本絵巻』の確認と調査があるので、ベルリン本に関する詳しい情報の入手を考える必要が出てきた。4幸若舞曲の絵入り本と平行して、同時代の芸能である能や狂言の絵入り本も調査した。とくに国立能楽堂が所蔵する狩野柳雪筆の『能之図』は絵師が明らかな作例で、十分に研究資料となり得ると判断し、楽劇学会のシンポジウム