hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
性・体発達に影響するストレスの季節性・耐性・メラトニンについての条件分析

実験は、現在も進行中であるが、これまでの体重発達の結果から、自然では秋・冬に向かう短日光周環境では、水のランダム50%剥奪の体重発達への阻害効果は大きく、春・夏に向かう長日環境に比べ、体重の増加は抑制される。このことは動物のストレスに対する抵抗力、すなわちストレス耐性に季節性がみられることを意味している。精巣発達の効果は、12週間暴露後に、動物を麻酔薬で安楽死させた後、重量を測定する。本年度の研究目的は老齢動物と若齢動物のストレスに対する耐性を体重発達と精巣発達を指標として、秋・冬を模した短日環境下で実験的に評価することであった。方法:雄のシリアンハムスター(実験終了時1年半以上)と若齢動物(約4.5ヶ月)を用いた。すべての動物(老齢群と若齢群)を明暗比LD12.5:11.5の光環境下に餌と水を充分与え5週間暴露した。5週間経過後動物を年齢(老齢、若者)、水剥奪(あり、なし)の組み合わせで、4群に分けた。水剥奪は11週間の実験期間中ランダムに50%の率で行われた。餌(草食動物用固形飼料)は実験の全期間をとおしてすべての動物に与えられた。これまでの私たちの研究から、水がいつ剥奪されるかを動物が予測できない事態はストレスフルに働くことが明らかとなっている。短日の光環境はLD11:13→LD10:14→LD9:15→LD8:16へと3週間ごとに段階的に、明暗サイクルの明期を短くした。つまり自然の秋分から冬への光環境の移行を動物に経験させたことになる。温度は20±2°Cであった。全実験終了の16週後に動物に麻酔薬を過剰投与し、サクリフャイスした後、直ちに両精巣を摘出した。結果:若齢群、老齢群ともに水剥奪群の精巣重量は統制群に比べ、軽くなった。つまり、精巣発達はストレス負荷により、抑制されたと言える。さらに、興味深いことは、統制群に対する抑制率を比べると、老齢群60%、若齢群15.2%と圧倒的に、老齢動物において、ストレスによって精巣発達は抑制されたと言える。体重についても同じ傾向が観察され、剥奪により両群とも体重増加は抑制されるが、若齢群では水剥奪にもかかわらず体重は増加傾向を示した。一方、老齢動物においては水剥奪により体重は減少し、ストレスによる体重抑制は顕著であると言えた。短日環境(8週間)からシリアンハムスターにとって中性的な光周期環境であるLD12.5:11.5の光周期環境へ12週間暴露したとき、および長日環境(8週間)からLD12.5:11.5へ12週間暴露した時の水剥奪によるストレスの性発達に及ぼす効果を実験検討した。その結果、精巣発達は長日環境を経験してきた群において、短日環境を経験してきた群に比べ、抑制された。これは長日経験群はLD12.5:11.5の光周期を主観的に"短日"と捉え、逆に短日経験群は主観的に"長日"と捉えたためと解釈された。このことは水剥奪によるストレスが、自然では秋・冬環境に向かう時において、春・夏に向かう時と比べ、生体に大きく作用することを意味する。つまり、過去の光周期経験によって、光環境は受け取られ方が異なった。ここでもまた、水剥奪によるストレスは特にそれが予測できない場面で、生体に大きく作用することがわかった。次の問題は明期を同じ量、減少させるが、長日→長日と長日→短日でストレスの生体に与える効果が異なるのか、を確定する必要があり、現在実験検討中である。また、ストレスを緩和させる要因として、居住環境の改善が推論される。これは動物の飼育ケージに遊具などを導入することによりデザインされ、上記の実験環境で検討中である。環境の豊富化が脳重量を増大させ、学習行動をはじめとして諸種の行動を促進することが知られている。このことから、豊かな環境で育った個体はストレスに対する耐性が増強することが期待される。
日米交渉と日本海軍

二年前から、著者Sailor Diplomat : Nomura Kichisaburo and the Japanese-American Warの執筆を、最大の研究目的としている。これは、第二次世界大戦前後の日本の外交と軍事政策において野村吉三郎海軍大将がいかなる役割を果たしたか、という評伝的研究書である。第一次上海事変に派遣された第三艦隊の長官、そして阿部信行内閣の外務大臣、真珠湾攻撃前夜の駐米大使、戦時中の枢密顧問官、後には日本海上再軍備論者のリーダーとして、1932年から1951年に至るまでの極めて重要な時期に、日本外交・軍事政策決定過程での野村の影響力は正に大きかった。しかし、その影響力をめぐり解明すべき問題はまだまだ多く残されている。私は、これらの問題の解明を試みている。そのため、防衛庁防衛研究所、海軍文庫、国立国会図書館、外務省外交資料館等に所蔵されている上記のテーマに関する史料の収集とその分析に重点をおいて研究を進めた。而して、野村の御遺族の好意により、野村の旧宅に保存されていた史料を発見することができた。この史料は主として野村が終戦後に執筆したものであるが、日本の海上再軍備に関する、初出の史料として極めて重要なものである。これらの史料の収集と分析により、野村の評伝的研究所のいくつかの章の草稿を練ることができており、近い将来の刊行を目標としている。本年度においては、「野村文書」に基づいた研究は、進捗をみせている。平成17年11月、京都大学文学部読史会大会において、「野村吉三郎文書について:占領期における野村の講和構想・安全構想」という発表をし、上記のテーマに関する論文は、Diplomacy and Statecraftという学術雑誌及びDoshisha Law Reviewに掲載される予定である。もう1つの論文はNaval War College Reviewでは、審査中である。また、永井和教授(研究代表者)とともに、野村の戦時中日記を翻刻して、遺族の承諾が得られ次第京都大学学術出版会より出版される予定である。さらに、平成17年7月には、神戸大学経済経営研究所・クラブ500日本政治外交研究会において、「豊田外相・野村大使と1941年の日本交渉」と題して口頭発表した。同発表は、論考としてまとめたうえで、蓑原俊洋編Japan' s Challenge to the International Systemに掲載される予定である。研究分担者は、1941年の日米交渉において駐米大使であった海軍大将野村吉三郎の果たした役割およびその外交思想について再検討を行うことを、ここ数年間の研究テーマとしてきた。それは、開戦過程における野村の役割を過小評価する従来の議論に大幅な修正を加えることを目標とするものであった。本年度においては、防衛庁防衛研究所図書館、海軍文庫、国立国会図書館、外務省外交史料館等に所蔵されている上記テーマに関する史料の収集とその分析に重点をおいて研究を進めた。その結果をふまえて、現在鋭意執筆中の野村の評伝的研究書、SailorDiplomat : Nomura Kichisaburo and the Coming of the Japanese-American Warの第1,2,8,9,10章の草稿を練ることができた。この評伝は近い将来の刊行を目標としており、その第8,9,10章はほぼ完成しており、その内容を要約した論文は、杉田米行編『20世紀の日米関係におけるアジア太平洋戦争の意義』に掲載される予定である。そのほか、平成16年6月、Asian Studies Conference Japan年次大会(上智大学)において「真珠湾としての『新しい歴史』:日米関係、1938-1941年と『新しい歴史教科書』」と題して口頭発表をおこなった。同発表は、Asian Cultural Studies(国際基督教大学)に掲載予定である。さらに、野村吉三郎の御遺族の好意により、野村の旧宅に保存されていた史料を発見することができた。この史料類は主として戦後に野村が作成したものであるが、日本の海軍再軍備に関する、初出の史料としてきわめて貴重なものと推測される。この史料を整理するとともに、これを活用し、戦後に野村が果たした役割についても、研究の視野を拡大する予定である。

平成17年11月、京都大学文学部読史会大会において、「野村吉三郎文書について:占領期における野村の講和構想・安全構想」という発表をし、上記のテーマに関する論文は、Diplomacy and Statecraftという学術雑誌及びDoshisha Law Reviewに掲載される予定である。もう1つの論文はNaval War College Reviewでは、審査中である。また、永井和教授(研究代表者)とともに、野村の戦時中日記を翻刻して、遺族の承諾が得られ次第京都大学学術出版会より出版される予定である。さらに、平成17年7月には、神戸大学経済経営研究所・クラブ500日本政治外交研究会において、「豊田外相・野村大使と1941年の日本交渉」と題して口頭発表した。同発表は、論考としてまとめたうえで、蓑原俊洋編Japan' s Challenge to the International Systemに掲載される予定である。
プラス鎖RNAウイルス感染時におけるオートファジーの役割と分子基盤の解明

本研究では、フラビウイルスおよびアルファウイルスを材料に用い、1)ウイルス感染におけるオートファジー誘導の生理学的意義、2)ウイルス感染によるオートファジー誘導の分子機構の二つのメインテーマについて解析を進めた。最終年度までに、フラビウイルスはオートファジーの機能もしくは一部をウイルス増殖時に利用していること、その一方でアルファウイルスは、オートファジーによってウイルス増殖が抑制されていることが明らかになった。同じプラス鎖RNAウイルスと言ってもウイルス増殖機構が異なることは、分子基盤を元にした治療や創薬を目指す上でも意義深い。また分子基盤解明に有用なツールの開発や関連宿主因子の新規同定に成功した。年度別の研究実績の概要について、平成25年度には研究実施計画に基づき、オートファジー関連遺伝子(Atg16L1、FIP200、p62)欠損細胞を用いてウイルス増殖への影響を調べたところ、ウイルス増殖低下が観察された。一方、アルファウイルスではAtg16L1欠損細胞においては、逆にウイルス増殖の亢進が観察され、フラビウイルスとは異なるオートファジーの役割があると考えられる。また分子機構解析の上で有用になるツールの開発に成功した。これにより選択的オートファジーを検出でき、オートファジー機構の解明に役立つことが期待される。平成26年度には、オートファジー阻害の別の方法としてAtg4Bの変異体の過剰発現でも、前年度同様の結果を得たことからオートファジーのウイルスによる生理的役割の違いを再確認することができた。さらに本年度は、ウイルス増殖とオートファジー誘導をつなぐ新規宿主因子の同定に成功しており、現在解析を進めている。本研究では、プラス鎖RNAウイルス感染時におけるオートファジー誘導の生理的意義やその分子機構を明らかにすることを目的とする。本年度は計画に従って、(1)オートファジー阻害による以下のウイルスの増殖への影響を調べた。また平成26年度実施予定の(2)ウイルス感染によるオートファジー誘導の分子機構を解析していく中で有用になるツールの開発に成功した。(1-1)フラビウイルス科、フラビウイルス属、日本脳炎ウイルスオートファジー関連遺伝子(Atg16L1、FIP200、p62)欠損細胞を用いてウイルス増殖への影響を調べたところ、ウイルス増殖の遅延および低下が観察された。このことからフラビウイルスの宿主細胞内増殖において、オートファジーが必要であることが示唆された。(1-2)トガウイルス科、アルファウイルス属、シンドビスウイルス(1-1)と同様に、オートファジー関連遺伝子(Atg16L1)欠損細胞を用いてウイルス増殖への影響を調べたところ、ウイルス増殖が亢進した。このことからアルファウイルスが宿主細胞内分解機構であるオートファジーによって除去されている可能性、もしくはオートファジーがアルファウイルスの増殖を何らかの形で抑制している可能性が考えられる。(2)ニュージーランドのグループとの共同研究により、LC3とAtg13が直接結合することを発見し、共結晶を取得後、結合様式を詳細に解析した(Structure 2014)。その結果LC3のLys49が結合に重要であり、Lys49をAlaに変換した変異体では定常状態のオートファジー活性および細菌感染時の選択的オートファジーが全く見られなくなった。一方、この変異体は飢餓誘導性のオートファジー活性にはあまり影響しないことから、選択的オートファジーを検出できるツールとして用いることができる。研究実施の概要にも記載したが、オートファジー活性阻害時のウイルス増殖への影響を解析する手段としてオートファジー関連遺伝子欠損細胞を用いて解析を行い、ウイルス増殖におけるオートファジーの重要性が示された。ここで得られた結果を再確認するために別の阻害方法として今後Atg4Bの変異体の過剰発現やオートファジー阻害剤の影響を観察する必要がある。またオートファジー活性を亢進させるような薬剤処理や定常的に亢進している細胞を用いることによるウイルス増殖への影響も確認しておきたい。これらの確認

実験が未検討であるが、研究の出発点であるウイルス増殖におけるオートファジー活性の重要性が確認できたことが大きな成果である。また来年度実施予定の分子機構の詳細な検討を進めて行く上で有用な選択的オートファジーを検出できるツールを開発した。この発見は当初の予定にはなかったものだが、今後の研究課題解明に役立つことが期待されることから、達成度に貢献していると考える。計画では、2年目にウイルス感染によるオートファジー誘導の分子機構解明に向けて取り組むことにしている。研究実施の概要に記載したように、ウイルス感染時のオートファジーの役割といってもフラビウイルスとアルファウイルスでは異なるので、それぞれの場合において、ウイルス感染時のLC3輝点形成を、野生型のLC3と先述の選択的オートファジー能欠損LC3変異体を用いて調べる予定である。また平成25年度中に実施できなかったAtg4Bの変異体の過剰発現やオートファジー阻害剤の影響を観察する予定である。さらにオートファジー活性を亢進させるような薬剤処理や定常的に亢進している細胞を用いることによるウイルス増殖への影響も確認する予定である。
超多官能ナノ粒子からのイオン導電性・電場応答性ハイブリッドの創製

本研究課題では、シリカやナノカーボン粒子表面へグラフトした超多分岐ポリホスファゼン末端や多分岐ポリスチレンヘスルホ基を導入することにより、超多官能性ナノ粒子の創製を試みること、およびスルホ基導入ナノ粒子と各種ハイドロゲルとの複合体を創製し、その電場応答性(アクチュエーター機能)を究明することを目的とした。その結果、シリカやナノカーボン粒子表面へ導入したカルボキシル基を核として、2, 2'-ビス(ヒドロキシメチル)プロピオン酸(BMPA)の自己縮合反応を繰り返すことにより、粒子表面へ超多分岐ポリエステルがグラフトできることを見出した。また、カルボキシル基を導入したシリカナノ粒子へのBMPAの一括添加と分割添加が超多分岐ポリエステルのグラフト率に及ぼす影響について検討した。また、シリカやナノカーボン粒子表面へ導入したアミノ基へヘキサクロロトリホスファゼンとヘキサメチレンジアミンとを交互に反応させることによる、粒子表面への超多分岐ポリホスファゼンのグラフト化手法を確立した。さらに、ポリホスファゼンは耐熱性を持つことが知られているので、シリカナノ粒子表面のグラフト鎖の耐熱性について、超多分岐ポリアミドアミンやポリエステルのそれと比較検討した。ついで、シリカナノ粒子表面へ導入したアゾ基を開始剤に用いて、スチレンとパーオキシド基含有モノマとのラジカルグラフト重合を行い、粒子表面へペルオキシ基含有ポリマーをグラフトした。ついで、この様な、ポリマーグラフトシリカの存在下において、スチレンの二次グラフト重合を行うことにより、粒子表面への多分岐ポリスチレンのグラフト化に成功した。さらに、グラフト鎖のベンゼン環をスルホ化することにより、グラフト鎖にイオン導電性を付与できることが分かった。現在、ここで得られたスルホ基導入ナノ粒子と各種ハイドロゲルとの複合体を創製し、その電場応答性(アクチュエーター機能)について検討を進めている。
脂肪酸受容体GPR120の破骨細胞形成および矯正学的歯の移動に対する影響の検討

野生型マウスの頭蓋部皮下にPBS、LPS、LPS+DHA、LPS+DHA+AH7614、DHAを注射しLPSによる破骨細胞形成およびGPR120シグナルの破骨細胞形成抑制効果を確認した。マウスの頭蓋部皮下に上記試薬を投与し屠殺後、頭蓋骨の組織切片を作成しTRAP染色を行い頭蓋骨縫合部における破骨細胞形成を評価した。LPS単独で作用させた場合、TRAP染色陽性である破骨細胞が多数確認された。一方、同時にDHAを作用させた場合は破骨細胞数が有意に減少した。さらにGPR120の阻害剤であるAH7614を一緒に注射したもので破骨細胞形成が誘導され抑制効果が減弱することを確認した。最近の研究でGPR120遺伝子が欠損したマウスで肥満や脂肪肝などが発生し、GPR120が肥満に関与していることが発見された。また、GPR120は破骨細胞前駆細胞に多く発現しアゴニストである脂肪酸が結合するとNF-κBのシグナル経路を抑制し、それに付随してNFATc1(破骨細胞形成マスター転写因子)のダウンレギュレートを起こして破骨細胞形成を抑制することが分かった。これらのことから、GPR120が破骨細形成に影響を持つことから矯正学的歯の移動にも影響することが予想される。そこで本研究では、GPR120とTNF-αによる破骨細胞形成の関連性を明らかにする。まずはWildタイプマウスの頭蓋骨に破骨細胞を誘導するLPSとGPR120のアゴニストであるDHAを注射し破骨細胞数に変化が現れるか実験を行った。5日間毎日LPS100μg単体及びLPS100μgとDHA100μgを混ぜたものをマウス頭蓋骨皮下に注射して6日目に屠殺し頭蓋骨を採取した。また同時に血清及びmRNAの採取を行った。頭蓋骨はホルマリン固定後、EDTAで脱灰し頭蓋骨を前方部、中央部、後方部の3に分けの組織切片を作成した。破骨細胞の染色ができるTRAP染色を行いLPS単体の注射群とLPSとDHAを同時投与した群の頭蓋骨の前方部、中央部、後方部の縫合部にできる破骨細胞をカウントし3箇所の平均で比較検討を行った。現在N数を増やして実験を行なっている。今後、切片を作成し解析を進める予定である。血清中の骨吸収マーカーやmRNAの発現確認は切片の破骨細胞数に有意差が出てから確認する予定である。国内業者からGPR120KOマウスを購入しようとしたところ国内にTAKONIC社のGPR120マウス購入ライセンスを持っている業者がなく、京都大学大学院薬学研究科生体分子認識学分野にGPR120マウスの譲渡をお願いした。委託業社にマウスの作成を依頼し3月に納品となった。これから順次研究を進めていく。まずin vitroにおいて破骨細胞形成に対するGPR120の作動薬であるDHAの抑制効果の検討を行った。マウスの大腿骨より全骨髄細胞を採取しM-CSF存在下で骨髄細胞由来のマクロファージに分化させた。その上でRANKLおよびTNF-alphaを加え破骨細胞分化を行い、さらにDHAを同時に作用させ破骨細胞形成へのDHAの作用の確認を行った。DHAはRANKLおよびTNF-alpha誘導の破骨細胞形成に対して共に抑制効果を示した。次に野生型マウスの頭蓋部皮下にPBS、LPS、LPS+DHA、LPS+DHA+AH7614、DHAを注射しLPSによる破骨細胞形成およびGPR120シグナルの破骨細胞形成抑制効果を確認した。マウスの頭蓋部皮下に5日連続で上記試薬を投与し6日目に屠殺し頭蓋骨およびマウスの血清を採取した。頭蓋骨のマイクロCT撮影後にEDTAによる脱灰を行い、頭蓋骨の組織切片を作成した。破骨細胞を染色できるTRAP染色を行い頭蓋骨縫合部における破骨細胞形成を評価した。またマウス頭蓋骨のμCTによる解析では組織切片の結果と同様にLPSのみ注入したものと比較してDHAを同時に注入したものでは骨表面の骨吸収像が減少傾向を示し、AH7614を注射したものでは骨吸収面積が増加した。また、血清中の骨吸収マーカーであるI型コラーゲン架橋C-テロペプチド(CTX1)をエライザにて測定したところLPS注射群ではCTX1が増加しDHAを一緒に注射した群ではLPS注射群と比較して有意に減少した。

譲渡されたマウスはヘテロタイプのためホモタイプを作成し試薬などは購入して準備してあるので早急に研究を進める。骨代謝GPR120koマウス購入の際に作成費の他に福岡からの輸送費がかかることになっていた。おおよその輸送費は聞いていたが、業者から正確な見積もりがで出るのが年度末近くということで余裕持って予算を残しておく必要があった。そのために残余金が出た。残した費用は試薬購入に充てる予定である。
結核菌イソニアジド耐性に関与する新規耐性遺伝子変異の同定とその作用機序の解明

結核菌は、特定の遺伝子の変異によって薬剤耐性を獲得する。結核菌薬剤耐性に関与する遺伝子変異とその分子機構を解明することは、薬剤耐性結核の診断・治療法開発のための基盤である。国立病院機構共同研究として、我が国の薬剤耐性結核の治療実態及び薬剤耐性(イソニアジドまたはリファンピシン耐性)結核臨床分離株の収集解析が実施されている(2016年4月2018年3月)。申請者は、収集した臨床分離株の薬剤耐性遺伝子の解析を進めている。これまでの解析から、既知の薬剤耐性遺伝子変異では説明できないイソニアジド耐性臨床分離株が8%存在することが明らかになってきた。本研究の目的は、これらのイソニアジド耐性結核菌株の薬剤耐性に関与する遺伝子変異とこの変異がもたらすイソニアジド耐性機序を明らかにすることである。具体的には、全国で分離された薬剤耐性結核菌254株の全ゲノム情報を解析し、その性状や分布、遺伝子系統、薬剤耐性に関与する遺伝子について解析した。これらの254株は5つのLineageに分類され、日本人と外国人の患者由来結核はそれぞれ異なる分布であった。イソニアジド(IHN)耐性結核は188株、リファンピシン(RFP)耐性TBは12株、IHNとRFPに耐性を示す多剤耐性結核は54株だった。これらの多剤耐性結核のうち、他の主要薬剤に耐性がある超多剤耐性結核は9株で、全ての株が日本人患者由来であった。臨床分離株の収集・解析は順調に進展している。その結果、全国で分離された薬剤耐性結核菌254株の全ゲノム情報を解析できた。イソニアジド(IHN)耐性結核188株のうち、既知のイソニアジド耐性遺伝子変異では説明できない結核菌株12株を絞り込んだ。これらの株の遺伝子変異で対象に、イソニアジド耐性機構を推定し合理的な説明ができる遺伝子変異を特定した。これらの遺伝子に関しては、マイコバクテリオファージを用いた特殊形質導入法を用いて、遺伝子変異を再構築した実験結核菌株を作成と薬剤感受性試験などの生物活性の決定する予定である。今後の研究の方針として、結核菌イソニアジド耐性に関与する新規遺伝子変異を特定することである。そのためには、既知の遺伝子では説明できないイソニアジド耐性臨床分離株12株を特定した。今後はこれらの臨床分離株を用いて候補となる遺伝子変異を特定し、その変異がどのようにイソニアジド耐性に関与するのかを明らかにする。最終的には、実験結核菌株に変異遺伝子を再構築することでアイソジェニック結核菌株を作成し、新規遺伝子変異がイソニアジド耐性に直接関与することを実証する。臨床分離結核菌を用いて、そのイソニアジド耐性機構を可能な限り完全に実証する。これらの結核菌株のイソニアジド耐性機構を解明する。これらの多くが、これまでの疫学研究で報告はあるが、イソニアジド耐性に関与するかどうかの実証はない遺伝子変異を持つ菌株と推定される。これらの変異がイソニアジド耐性に関与するのかどうかをすべて明らかにする。疫学研究のデータも含めて既知のイソニアジド耐性の関与が疑われる遺伝子変異が全く検出されないイソニアジド耐性株(すでに2株存在)に関しては、RNA-seq解析による発現解析からイソニアジド耐性に関与する遺伝子発現系を絞り込み、候補遺伝子変異を特定してゆく。予備的な解析では、oxyR'-ahpCオペロンに複数の変異を検出している。これらの変異はいずれも本研究ではoxyR'(偽遺伝子)-ahpCオペロン変異がイソニアジド耐性に関与するという作業仮設を立て、ペルオキシダーゼAhpCの機能解析(イソニアジド活性化に関与するのかどうか)やAhpC発現調節に関する遺伝子変異の役割を検証する。

臨床分離株の収集・解析は順調に進展している。その結果、全国で分離された薬剤耐性結核菌254株の全ゲノム情報を解析できた。イソニアジド(IHN)耐性結核188株のうち、既知のイソニアジド耐性遺伝子変異では説明できない結核菌株12株を絞り込んだ。これらの株の遺伝子変異で対象に、イソニアジド耐性機構を推定し合理的な説明ができる遺伝子変異を特定した。これらの遺伝子に関しては、マイコバクテリオファージを用いた特殊形質導入法を用いて、遺伝子変異を再構築した実験結核菌株を作成と薬剤感受性試験などの生物活性の決定する予定である。今後の研究の方針として、結核菌イソニアジド耐性に関与する新規遺伝子変異を特定することである。そのためには、既知の遺伝子では説明できないイソニアジド耐性臨床分離株12株を特定した。今後はこれらの臨床分離株を用いて候補となる遺伝子変異を特定し、その変異がどのようにイソニアジド耐性に関与するのかを明らかにする。最終的には、実験結核菌株に変異遺伝子を再構築することでアイソジェニック結核菌株を作成し、新規遺伝子変異がイソニアジド耐性に直接関与することを実証する。臨床分離結核菌を用いて、そのイソニアジド耐性機構を可能な限り完全に実証する。これらの結核菌株のイソニアジド耐性機構を解明する。これらの多くが、これまでの疫学研究で報告はあるが、イソニアジド耐性に関与するかどうかの実証はない遺伝子変異を持つ菌株と推定される。これらの変異がイソニアジド耐性に関与するのかどうかをすべて明らかにする。疫学研究のデータも含めて既知のイソニアジド耐性の関与が疑われる遺伝子変異が全く検出されないイソニアジド耐性株(すでに2株存在)に関しては、RNA-seq解析による発現解析からイソニアジド耐性に関与する遺伝子発現系を絞り込み、候補遺伝子変異を特定してゆく。予備的な解析では、oxyR'-ahpCオペロンに複数の変異を検出している。これらの変異はいずれも本研究ではoxyR'(偽遺伝子)-ahpCオペロン変異がイソニアジド耐性に関与するという作業仮設を立て、ペルオキシダーゼAhpCの機能解析(イソニアジド活性化に関与するのかどうか)やAhpC発現調節に関する遺伝子変異の役割を検証する。
急性肺傷害におけるI型肺胞上皮傷害の機序および重症度に関する検討

手術に際して肺機能が低下した際の診断法の開発し、より早期に治療的な介入ができるように、Receptor for Advanced Glycation End Products(RAGE)の肺傷害マーカーとしての臨床的意義の検討を行った。周術期に採血し、血液中で、手術を契機にRAGEをはじめとするいくつかの因子の濃度がどのように変化するかを検討した。血中のRAGE濃度は、術直後をピークに上昇し、上昇度と人工呼吸器期間やICU滞在期間の間に草加案があることが示された。術直後のRAGEレベルは、肺の臓器機能傷害の指標として使用できることが明らかとなった。移植に用いることのできなかったヒト肺を用いた潅流標本において、肺循環潅流液や肺胞注入液中のRAGE濃度を測定すると、RAGE濃度と、肺における水分クリアランスには、逆相関があり、肺胞上皮が傷害された状態で、RAGEがこれらの液中に遊離してくることが示唆された。また、片肺移植、両肺移植、および心肺移植を行う患者20名を対象に、肺の再潅流4時間後に患者から採血し、血清RAGE濃度を測定し、血清RAGE濃度と患者の予後について検討した。血清RAGE濃度高値は、術後の人工呼吸時間やICU滞在期間と相関があり、RAGEが移植患者の予後予測に役立ちうることが示された。また、平成19年度を初年度とし、3年間の予定で周術期患者における血清RAGE濃度測定が計画され、胸部大動脈瘤に対する人工血管置換術(胸腹部大動脈瘤を含む)や心臓手術を対象とした臨床研究を現在進行させている。また、平成19年度を初年度とし、3年間の予定で周術期患者における血清RAGE濃度測定が計画され、胸部大動脈瘤に対する人工血管置換術(胸腹部大動脈瘤を含む)や心臓手術を対象とした臨床研究をを行った。血清RAGE濃度は、人工心肺を用いた手術で術後に上昇する傾向があり、上昇度の大きい症例の中で、死亡例や人工呼吸期間の長い症例が存在し、これらの患者において、Surfactant Protein Dやvon-Wilbrand Factor等の有意な変化を伴っていなかったことからも、肺における組織障害を示唆する因子としての可能性が示された。
校内研修における授業研究の支援方略に関する研究―モデルの開発・実装・効果検証

本研究は、研究者がキーパーソンとして直接参与しない形で校内研修における授業研究の質を高める支援方略を明らかにすることを目的としている。この目的のために、一つの授業改善コミュニティに関わる多様な学校群(16の県市町教育委員会、約300の小中高等学校)を対象に授業研究支援方略の開発、実装、効果検証を行い、モデルケースを提出するとともにその実装における成果と課題を示す。またこれにより、今後全国で地域の大学や教育委員会をベースに実施される様々な条件下の学校群に対する授業研究支援の基盤となりうる知見の提出を目指す。
ストレス刺激によるＦＧＦ２１脂質代謝制御機構の解析

FGF21(Fibroblast Growth Factor 21)は肥満・糖尿病モデルマウスで全身のインスリン感受性の改善などへの関与が知られている分泌性線維芽細胞増殖因子である。前年度における研究結果より、FGF21が薬剤刺激による小胞体ストレスを軽減する作用を有する因子であることが示唆された。そこで今年度は薬剤以外に小胞体ストレスを惹起する刺激として知られる再摂食条件においても同様の効果が確認されるかを検討した。野生型およびFGF21欠損マウスに3時間の再摂食実験を実施した結果、FGF21欠損マウスにおいて絶食及び再摂食による小胞体ストレス応答因子の遺伝子発現が野生型マウスと比較して上昇傾向にあった。さらにアデノウイルスを用いてFGF21を過剰発現させたFGF21欠損マウスに絶食再摂食刺激を与えたところ、再摂食によるBiPやERAD遺伝子の発現上昇が減弱した。以上の結果より、FGF21は薬剤以外の小胞体ストレスに対する軽減作用を有していることが示唆された。前年度において、脂肪肝発症モデル食餌で慢性的な小胞体ストレスを誘発することが知られているメチオニンコリン欠乏(MCD)食を4週間摂取させたFGF21欠損マウス肝臓中トリグリセリド量を測定した結果、有意な蓄積増大が見られ、PPARgの発現が増加していた。PPARgの発現は脂肪肝で高いことが知られている。そこで、FGF21欠損マウスで見られたMCD食誘導性脂肪肝におけるPPARgの関与を調べるため、PPARg阻害剤をMCD食摂取マウスに投与する実験を実施した。PPARg阻害により、野生型マウスでは肝臓トリグリセリド量の変動は認められなかったが、FGF21欠損マウスでは肝臓トリグリセリド量が低下していた。以上のことから、FGF21欠損マウスにおけるMCD食誘導性脂肪肝にはPPARgが一部寄与していることが示唆された。27年度が最終年度であるため、記入しない。前年度における研究結果より、C57BL/6Jマウスに小胞体ストレス誘導剤であるツニカマイシンを経口投与したところ、肝臓におけるFGF21のmRNA発現の亢進及び血中へのFGF21の分泌亢進が確認された。そこで、今年度はストレス誘導下でのFGF21の発現亢進が及ぼす影響を解析するため、FGF21ノックアウトマウスを用いた実験を行った。まず、ツニカマイシンを野生型およびFGF21ノックアウトマウスに経口投与し、肝臓における小胞体ストレス応答遺伝子の発現変動をRT-realtime PCR法やウエスタンブロッティング法により対照群と比較した。その結果、ミスフォールディングタンパク質の折畳に関与するシャペロンタンパク質BiPなどのストレス応答マーカーや小胞体関連分解(ERAD)関連遺伝子のmRNA発現がFGF21欠損により発現増大していた。以上の結果より、野生型マウスに比べFGF21ノックアウトマウスではストレス耐性が弱くなっている可能性が考えられた。次に、FGF21をレスキューすることでFGF21欠損による影響が打ち消されるかの検証を試みた。FGF21を発現するアデノウイルスをFGF21ノックアウトマウスに感染させ、その後ツニカマイシンを経口投与し肝臓における小胞体ストレス応答遺伝子の発現変動を対照群と比較した。その結果、対照群で見られたストレス応答因子の発現亢進がFGF21過剰発現により減弱していた。したがって、FGF21がストレス軽減作用を有する因子であることが示唆された。今後は薬剤以外に小胞体ストレスを惹起する刺激においても同様の効果が確認されるかを検討する予定である。

PPARg阻害により、野生型マウスでは肝臓トリグリセリド量の変動は認められなかったが、FGF21欠損マウスでは肝臓トリグリセリド量が低下していた。以上のことから、FGF21欠損マウスにおけるMCD食誘導性脂肪肝にはPPARgが一部寄与していることが示唆された。当該年度における研究活動で得られた成果を投稿論文として仕上げる準備段階まで進展できたため27年度が最終年度であるため、記入しない。当該年度は主に人工的な刺激下での機構解析を行ったため、翌年度はより生理的条件下に近い刺激での機構解析を試みる27年度が最終年度であるため、記入しない。
薬用食品を素材とした肝糖代謝亢進作用を標的とする新規抗糖尿病作用成分の探索

本邦をはじめとする世界諸国において糖尿病の罹患者数は,増加の一途を辿っており,早急な対策が必要な疾病の一つである.また,糖尿病初期や肥満を呈している場合には,脂肪肝を併発していることが多く,脂肪肝ば食後過血糖の増悪,脂質代謝異常症の発症・進展に重要である.研究代表者は本課題の研究において,Rosa canina(ローズヒップ)種子に含まれるアシル化フラボノール配糖体trans-tiliroside (1)のマウスへの経口投与が,体重増加の抑制,肝臓中中性脂肪含量および内臓脂肪重量の顕著な低下および耐糖能の改善を示すことを明らかにした.また,本作用は,肝臓内において脂質代謝酵素群の発現を制御している核内受容体型転写因子PPAR-αのmRNAの発現増加が関与していることを明らかにした.研究代表者は,1の作用機序において,肝臓内での脂肪代謝の促進が重要であると考え,1の化学構造と薬理活性の相関を明らかにする目的で,非糖部をkaempferolからquercetinに変え,さらに1のアシル基であるp-coumaroyl基から,o-およびm-coumaroyl基などを導入した計5種の1誘導体を合成するとともに,ヒト肝癌細胞HepG2を用いた脂肪酸誘発肝細胞内中性脂肪蓄積に与える影響について検討した.その結果,アシル化フラボノール配糖体の脂肪蓄積抑制活性には,非糖部の構造よりもむしろ,糖鎖に結合するアシル基の存在が重要であることを明らかにした.さらに,同細胞を用いて既に蓄積された脂肪に対する細胞内脂肪代謝に対する作用を検討した結果,脂肪蓄積に対する作用と同様にアシル基の存在と化学構造の差異により,活性が変化すること,特に非糖部の構造がkaempferolからquercetinに変化することでより強い薬理活性を示すことなどを明らかにした.申請者な本課題の研究において約80種類の薬用食物由来抽出エキスに対してマウス初代培養肝細胞中の中性脂肪含量に与える影響を指標にスクリーニング試験を実施した.その結果,Rosacanina果実(ローズヒップ)から得られる抽出物が肝細胞中の中性脂肪含量を有意に低下させることを明らかにした.ローズヒップ(果実)は,果皮(果肉)および種子から構成されることから,主薬理活性成分を含有する部位を明らかにする目的で,それぞれ当該部位から得られる抽出物の薬理活性について,成熟マウスでの2週間連続投与試験での体重推移,内臓脂肪重量および摂餌量などに与える影響を検討した.その結果,種子由来抽出物は摂餌量に影響を与えることなく体重および内臓脂肪の増加を抑制することを明らかにした.そこで,各種クロマトグラフィーにより種子由来抽出物中の含有成分を精査した結果,traps-tilirosideなどの6成分を単離・同定した.これら成分の内,主成分trans-tilirosideのマウスへの連続投与試験の結果,本化合物は体重および内臓脂肪の増加を抑制するだけでなく,本化合物の投与は,糖負荷試験での,耐糖能についても有意に改善させることを明らかにした.次に本薬理活性の発現に必須な構造を明らかにする目的でtrans-tilirosideの部分構造であるkaempferol-3-O-glucoside, kaenpferolおよびp-coumaric acidとの薬理活性を比較検討した.その結果,kaempferol-3-O-glucosideにp-coumaroyl基が結合した構造が重要であることを明らかにした.また,trans-tilirosideのマウスへの経口投与(単回投与)は,脂質代謝酵素群の発現を制御する核内受容体型転写因子PPAR-αmRNAの発現を増加させることを明らかにした.本邦をはじめとする世界諸国において糖尿病の罹患者数は,増加の一途を辿っており,早急な対策が必要な疾病の一つである.また,糖尿病初期や肥満を呈している場合には,脂肪肝を併発していることが多く,脂肪肝ば食後過血糖の増悪,脂質代謝異常症の発症・進展に重要である.研究代表者は本課題の研究において,Rosa canina(ローズヒップ)種子に含まれるアシル化フラボノール配糖体trans-tiliroside (1)のマウスへの経口投与が,体重増加の抑制,肝臓中中性脂肪含量および内臓脂肪重量の顕著な低下および耐糖能の改善を示すことを明らかにした.また,本作用は,肝臓内において脂質代謝酵素群の発現を制御している核内受容体型転写因子PPAR-αのmRNAの発現増加が関与していることを明らかにした.研究代表者は,1の作用機序において,肝臓内での脂肪代謝の促進が重要であると考え,1の化学構造と薬理活性の相関を明らかにする目的で,非糖部をkaempferolからquercetinに変え,さらに1のアシル基であるp-coumaroyl基から,o-およびm-coumaroyl基などを導入した計5種の1誘導体を合成するとともに,ヒト肝癌細胞HepG2を用いた脂肪酸誘発肝細胞内中性脂肪蓄積に与える影響について検討した.その結果,アシル化フラボノール配糖体の脂肪蓄積抑制活性には,非糖部の構造よりもむしろ,糖鎖に結合するアシル基の存在が重要であることを明らかにした.さらに,同細胞を用いて既に蓄積された脂肪に対する細胞内脂肪代謝に対する作用を検討した結果,脂肪蓄積に対する作用と同様にアシル基の存在と化学構造の差異により,活性が変化すること,特に非糖部の構造がkaempferolからquercetinに変化することでより強い薬理活性を示すことなどを明らかにした.
健康寿命延伸に向けた住環境整備と住まい方に関する研究 -QOLに着目して-

健康寿命を延伸させる住まい方の提案を目指し、住宅内の温熱環境と居住者の生活行動、体力などの実測調査から、温熱環境が健康や生活の質(QOL)に与える影響を加齢に伴うフレイル(要介護状態の前段階に位置する虚弱な状態)との関連から検討する。また、個人の節電意識や温熱的特性と住まい方の関係や、住まい方が温熱環境の形成に及ぼす影響を解明することで、個人にあった環境改善を図る住まい方を模索する。
アルキリデンカルベン発生を鍵反応とする複素環化合物の合成

トリメチルシリルジアゾメタンのリチウム塩(TMSC(Li)N_2)とカルボニル化合物から容易に発生できるアルキリデンカルベンの複素環化合物合成への応用を検討し,以下の知見を得た.1.2-オキソ-3-ピロリンおよび3-ピロリン類の新合成法:TMSC(Li)N_2とN,N-ジアルキル-α-ケトアミドを反応させるとアルキリデンカルベンが分子内でC-H挿入反応を起こして2-オキソ-3-ピロリンが好収率で得られることを見いだした.またN,N-二置換α-アミノケトンとの反応を検討したところ,この場合も反応は円滑に進行して3-ピロリンが得られることを見いだし,2-オキソ-3-ピロリン類および3-ピロリン類の一般合成法を確立した.2.2-ピロリン類の新合成法:アルキリデンカルベンの分子内N-H挿入反応による2-ピロリンの合成を検討した.すなわちTMSC(Li)N_2とβ-アミノケトンを反応させると,予想どおり発生したアルキリデンカルベンが分子内でN-H挿入反応して2-ピロリンが得られることを見いだし,その一般合成法を確立した.3.ベンゾフラン類の新合成法:o-シロキシベンズアルデヒドおよびo-シロキシアセトフェノン類より二工程でベンゾフランを合成する新規方法を検討した.すなわちTMSC(Li)N_2とo-シロキシベンズアルデヒドまたはo-シロキシアセトフェノンを反応させると高収率で対応するo-シロキシフェニルアセチレンが得られた.このものをテトラブチルアンモニウムフルオリド(TBAF)で処理すると容易に閉環してベンゾフランが得られることを見いだした.また反応系内にアルデヒドを共存させるとの3位にヒドロキシメチル基が導入された3-ベンゾフランメタノールが得られることも見いだし,ベンゾフランおよび3-ベンゾフランメタノール類の一般合成法を確立した.トリメチルシリルジアゾメタンのリチウム塩(TMSC(Li)N_2)とカルボニル化合物から容易に発生できるアルキリデンカルベンの複素環化合物合成への応用を検討し,以下の知見を得た.1.2-オキソ-3-ピロリンおよび3-ピロリン類の新合成法:TMSC(Li)N_2とN,N-ジアルキル-α-ケトアミドを反応させるとアルキリデンカルベンが分子内でC-H挿入反応を起こして2-オキソ-3-ピロリンが好収率で得られることを見いだした.またN,N-二置換α-アミノケトンとの反応を検討したところ,この場合も反応は円滑に進行して3-ピロリンが得られることを見いだし,2-オキソ-3-ピロリン類および3-ピロリン類の一般合成法を確立した.2.2-ピロリン類の新合成法:アルキリデンカルベンの分子内N-H挿入反応による2-ピロリンの合成を検討した.すなわちTMSC(Li)N_2とβ-アミノケトンを反応させると,予想どおり発生したアルキリデンカルベンが分子内でN-H挿入反応して2-ピロリンが得られることを見いだし,その一般合成法を確立した.3.ベンゾフラン類の新合成法:o-シロキシベンズアルデヒドおよびo-シロキシアセトフェノン類より二工程でベンゾフランを合成する新規方法を検討した.すなわちTMSC(Li)N_2とo-シロキシベンズアルデヒドまたはo-シロキシアセトフェノンを反応させると高収率で対応するo-シロキシフェニルアセチレンが得られた.このものをテトラブチルアンモニウムフルオリド(TBAF)で処理すると容易に閉環してベンゾフランが得られることを見いだした.また反応系内にアルデヒドを共存させるとの3位にヒドロキシメチル基が導入された3-ベンゾフランメタノールが得られることも見いだし,ベンゾフランおよび3-ベンゾフランメタノール類の一般合成法を確立した.我々はトリメチルシリルジアゾメタンのリチウム塩(TMSC(Li)N_2)がカルボニル化合物からアルキリデンカルベンを発生させるための良い反応剤であることを見いだし、すでにこの反応を利用してβ-シロキシケトンよりオキソニウムイリド中間体を経てジヒドロフランおよび2-ケトアニリドよりシクロヘプタ〔b〕ピロールの新規構築法を開発している.本研究では、アルキリデンカルベンの複素環化合物合成への応用をさらに拡大する目的でアルキリデンカルベンの分子内C-H挿入反応を利用する3-ポロリン類の一般合成法を検討した.すなわち、まずN,N-ジアルキル-2-ケトアミドとTMSC(Li)N_2の反応を検討したところ、生成したアルキリデンカルベンが容易に分子内でC-H挿入反応を起して好収率2-オキソ-3-ピロリンが得られることが判明した.次にN,N-二置換2-アミノケトンとの反応を検討したところ、この場合も円滑に反応が進行して反応する3-ピロリンが得られた.また3-ピロリンは二酸化マンガンで酸化するとピロールに変換できることも判明した.以上のようにTMSC(Li)N_2とカルボニル化合物より発生させたアルキリデンカルベンは分子内でチッ素原子2位のC-Hへ挿入反応することが明らかとなり、N,N-ジアルキル-2-ケトアミドおよびN.N-二置換2-アミノケトンより3-ピロリン類の一般合成法を確立することができた.前年度に引き続きトリメチルシリルジアゾメタンのリチウム塩(TMSC (Li) N_2)とカルボニル化合物から容易に発生できるアルキリデンカルベンの複素環化合物合成への応用をさらに検討した.

まずアルキリデンカルベンの分子内でのN-H挿入反応を利用する2-ピロリンの合成を検討した.すなわちβ-アミノケトンとTMSC (Li)N_2の反応を検討したところ予想どうりアルキリデンカルベンが分子内でN-H挿入反応を起し2-ピロリンが好収率で得られ,その一般合成法を確立することができた.また2-ピロリンは二酸化マンガン(CMD, Chemical Manganese Dioxide)で酸化するとピロールに効率良く変換できることも明かとした.次にo-シロキシベンズアルデヒドおよびo-シロキシアセトフェノン類より二工程でベンゾフランを合成する新規方法を検討した.すなわちTMSC (Li)N_2とo-シロキシベンズアルデヒドあるいはo-シロキシアセトフェノンを反応させると高収率で対応するo-シロキシフェニルアセチレンが得られた.このものをテトラブチルアンモニウムフルオリド(TBAF)で処理すると容易に閉環してベンゾフランが得られることを見いだした.また反応系内にアルデヒドを共存させるとの3位にヒドロキシメチル基が導入された3-ベンゾフランメタノールが得られることを見いだし,ベンゾフランおよび3-ベンゾフランメタノール類の一般合成法を確立した.
教育基本法の教育目的観-田中耕太郎の人格概念に基づいて-

本研究は教育基本法の教育目的観を、その立案者である田中耕太郎の人格概念に遡って明らかにすることを目的とした。本研究の結果として、先行研究に加えられた知見は次の三点である。第一は田中の教育目的観の出発点が、東京帝国大学法学部長として新入生歓迎講話で述べた人間・政治の究極目的としての「道徳的人格の完成」にあることを明らかにしたことである。第二に、田中の「道徳的人格の完成」に至るまでの思想の変遷を、とくに田中の青年期から出発して、跡づけたことである。田中の青年期の思想をこれまで一般に知られてこなかった二資料、大学時代に友人と翻訳出版した『生ひ立ちの記』、および無教会主義時代に内村鑑三のもとで行った講演「律法の成就」を用いて明らかにしたことはその成果の一端である。第三に、研究の最大の成果は、田中の人格概念がフランスのトマス主義哲学者、ジャック・マリタンの人格理論に大きく依拠していることを実証的かつ論理的に明らかにすることができた点にある。第二次大戦以前から戦後文部大臣を辞任するまで、田中は公に一度もマリタンの名前に言及したことがなく、これまで、教育基本法制定以前の田中とマリタンの関係を主張するには、戦後に書かれた田中の回想、状況証拠および両者の思想の内的関連に基づくよりほかなかった。本研究の結果、フランス・コルプスハイムにあるマリタンの研究センターに、1931年に田中からマリタンに宛てられた手紙が保存されていることが判明した。この手紙には田中がマリタンを知るに至った経緯、マリタンに対する評価、カトリシズムの思想家田中の抱負などが記されており、マリタンの人格理論が田中に与えた影響を実証的に明らかにする上で最大の根拠となった。(1)田中耕太郎とジャック・マリタンの影響関係について田中耕太郎はジャック・マリタン著、岩下壮一訳『近代思想の先駆者』(同文舘、1936年出版)を通して初めて、人格性と個別性の概念に基づくマリタンの形而上学的人格論に接した。同じく1936年に、田中はフランス・ムードンのマリタン邸を訪れ、それ以来マリタンとの親交を深めて行った。田中の還暦記念論文集の『自然法と世界法』(1954)年にマリタンが寄稿しているのはその一つの証左である。マリタンの人格論の田中への影響は、『平和の法哲学』(1954年)、「法の本質」(1956年)、『教育基本法の理論』(1961年)に見ることができる。とくに『教育基本法の理論』においては、個性の概念を物質性を基盤に理解しており、そこにはマリタンの形而上学的な個別性理解の影響を明白に見て取ることができる。他方、マリタンの人格論と田中の解釈の間には、微妙なズレがあり、それが田中の人格論の特質を示しているものと思われる。(2)田中耕太郎の人格と個性の概念について「人格」は重要な法概念であり、それは商法学者であった田中にとっても同様である。また田中は、「個性」の概念を自らの商法理論(商的色彩論)を構築する重要な鍵概念として用いている。マリタンの「人格性」「個別性」の概念と田中の「人格」「個性」の概念の影響関係を明らかにするには、田中の商法学者時代の「人格」と「個性」の概念の用い方を十分検討する必要がある。(1)田中耕太郎の人格概念について田中耕太郎が「人格の完成」という概念をいつ、どのような契機で用い始めたかを田中の主要著作について検討した。その結果、1937年、東京帝国大学法学部長として新入学生に向けて講話を行ったときに、政治が「道徳的人格の完成を目的とする」と述べたのがその最初であることを明らかにした。

同時に、この講話が大学令の第一条を根拠に展開されたものであること、同条の「人格ノ陶冶」と田中の「人格の完成」に関連があることを明らかにした。戦後教育理念の象徴とも言える「人格の完成」の概念と戦前の大学令第一条との結びつきが明らかになったのは、これが初めてである。(2)田中耕太郎とジャック・マリタンの影響関係について平成16年度の国内文献に基づく研究によって、田中耕太郎がジャック・マリタンをフランスに訪ねた1936年を、田中とマリタンの直接的な関係の開始と考えていた。しかし、平成17年度にフランス・コルプスハイムにあるジャック・マリタン資料館において資料調査を行い、そこで田中がマリタン宛てに書いた1931年3月19日づけの手紙を発見した。これによって田中とマリタンの直接的関係は5年遡ることになり、上記の法学部長講話との関係も視野に入れて、マリタンの田中に対する影響がどのようなものであったかを再吟味することが必要となった。本年度の研究で新たに明らかになったのは、特に次の三点である。(1)田中耕太郎とジャック・マリタンの出会いの時期について田中が、ジャック・マリタンを哲学者として初めて認知したのは、1926年発行のボンヌカースの著作『法学入門』を通してであることが、田中がマリタン宛に出した手紙(1931年3月付)から明らかになった。また既にこの手紙が出された時点で、田中がマリタンの人格論が展開されている『三人の改革者』を読んでいたことも同時に明らかになった。(2)マリタンの人格・個性概念の田中への影響について岩下壮一はその論文「キリスト教の世界観と教育」(1932年6月)において、人格・個性概念を用いて、新教育批判を行っているが、これは岩下が1930年に既に訳了していた『三人の改革者』のルター論の人格・個性概念を用いたものと思われる。この論文を田中は熟読しており、戦後教育改革期に田中が同じく人格・個性の概念を用いて、自由主義的教育批判を行ったことには、この岩下論文の影響が認められる。マリタンから田中への直接的影響に加えて、田中が最も信頼を置いていた岩下壮一がこの概念を用いた影響は大きかったと思われる。(3)「道徳的人格の完成」について田中は1937年に政治の目的は「道徳的人格の完成」であるという表現を初めて用いた。田中が「人格の完成」に道徳的という形容詞を付加したことは、田中の立場が安倍次郎に代表されるような、自由主義的な人格主義と異なることを示している。また教育基本法要綱案に見られる田中の教育目的案「真理の探究と人格の完成」が、単なる「人格の完成」でないことも、田中の人格主義の立場の特殊性を示したものと解することができる。
海外の初・中等教育の日本語教育におけるバイリンガル/イマージョン教育に関する研究

近年オーストラリアの初・中等教育では、「CLIL(内容と言語の統合的学習)」の手法を用いた日本語教育が盛んに行われるようになってきた。特に英語と日本語のバイリンガル/イマージョン教育を実施している学校では、日本語教師が日本語で各教科を教えているが、現段階では効果的な教材や教室活動など具体的な教授法、及び日本語能力の評価法が確立されてはいない。本研究では、オーストラリアの初等・中等教育を対象に「英語と日本語のバイリンガル/イマージョン教育」における効果的な日本語教授法を考察し、学習者の日本語能力の評価方法を開発する。
ヒト染色体6q16.3-21に存在する新規癌抑制遺伝子の同定と単離

染色体の特定の領域の欠失は、悪性腫瘍にしばしば観察される異常であるが、こうした染色体の欠失領域には癌抑制遺伝子座が存在することが予想される。ヒト染色体の6q15-23の領域は急性リンパ性白血病や非ホジキンリンパ腫の4%から20%に観察される異常であるが、また乳癌、前立腺癌、悪性黒色腫や膵臓癌など非造血腫瘍においてもしばしば観察される異常であることから、同領域にはこれら多くの腫瘍の発症に関与する癌抑制遺伝子が存在する可能性が示唆される。本研究において我々は6q15-23にマップされる多数のPAC/BACクローンを単離し、これらをプローブとしてFISH法により造血器腫瘍検体における同領域の欠失の解析を行った。造血器腫瘍検体352例について欠失解析を行った結果、61例に欠失が確認された。欠失地図の解析から、6q15-23領域にはDO(6q23-telomere)、Dl(myb領域近傍;6q23)、D2(D6S408の近傍;6q22-23)、D3(D6S4066近傍;6q21-22)、D4(D6S1653近傍;6q21-22)、D5(D6S283近傍;6q16.3-6q21)、およびD6(S6S275-centromere;6q15-15)の少なくとも7つの独立した欠失領域が同定された。欠失頻度はD5の領域で最大を示し(47/352;13%)ついでD3の領域(44/352;12.5%)で高い欠失頻度が観察された。DlおよびD5領域に関してはこれらを含むPAC/BACによるcontigを作成し、その全塩基配列を同定した。これらの塩基配列を用いた腫瘍検体におけるホモ接合性欠失の検討ではこれを見いだし得なかったが、同僚域には複数のdbESTエントリーが見いだされており、現在これらのESTについてそのcDNAの全長の単離と変異解析が進行中である。