hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
カイコのヘテロクロマチンとW染色体との関係

一方、クワコのW染色体断片16Kbpも、全域にわたりレトロトランスポゾン様配列が並んでいた。カイコならびにクワコのW染色体は、レトロトランスポゾンの中に、別のレトロトランスポゾンが挿入されていて、さらにそのレトロトランスポゾンの中にも、また別のレトロトランスポゾンが挿入されているといった、いわゆるレトロトランスポゾンの「入れ子」状態であった。以上の結果から、カイコとクワコのW染色体にはレトロトランスポゾンが密集していることが示唆された。また、これらのレトロトランスポゾン様配列の中に、W染色体に特異的なDNA塩基配列が存在するかどうか調べたが、W染色体に特異的なDNA塩基配列は存在しなかった。従って、W染色体を細胞組織学的に識別するためのプローブは作製できなかった。また本年度はW染色体を細胞組織学的に観察するための技術的基礎を確立するために、カイコ幼虫の卵巣より染色体標本を作製する実験を行った。カイコの雌雄はW染色体の有無によって決まるが、W染色体を顕微鏡下で形態的に識別することは極めて困難である。カイコのいろいろな組織において、雌の細胞の核にはヘテロクロマチンが観察される。ヘテロクロマチンは雄の細胞の核には観察されない。そのヘテロクロマチンは性染色体がZW型の2n雌では1個、ZZWW型とみられる4n雌では2個認められる。これらのことからヘテロクロマチンはW染色体に相当すると考えられているが、これまでのところ、直接的には証明されていなかった。本研究はヘテロクロマチンとW染色体との関係を調べることを最終目標として行われた。まずはじめに、W染色体を分子生物学的に解析するための手がかりとなる分子マーカー、すなわちランダム増幅多型DNA(RAPD)の探索を行った。その結果、W染色体に特異的なRAPDが4個得られた。このうち3つのRAPDについて、それぞれの塩基配列を含むラムダファージをゲノムライブラリーよりクローニングした。それぞれのファージ中のDNA断片をシークエンスしたところ、どれも複数のレトロトランスポゾンが、いわゆる「入れ子」状態になっていた。W染色体をFISH法により組織学的に同定するために、W染色体に発見されたレトロトランスポゾンのうち、隣接する2種類のレトロトランスポゾンを、別々の蛍光色素によって染める方法を用いた。これにより隣接する2つのレトロトランスポゾンは、顕微鏡下では2色の合成色として検出できるはずである。現在までのところ、合成色の検出に成功し、その染色体がW染色体であるか否か、確認実験を行っている。同時にヘテロクロマチンとW染色体との関係を調べるための実験も行っている。
消化器外科領域の感染症における白血球活性酸素放出能の検討と感染対策の実践

担癌患者、肝硬変、糖尿病等の患者の全血化学発光を測定、さらに開腹手術患者の術前、術後の血液を採取して全血化学発光を測定し、その推移が手術侵襲や術後感染症の発症の有無に影響を与えるか否か検討した。これらの患者に術前後を通じて化学発光を測定した場合、その推移と術後感染の有無に関連を認め、感染の早期発見とその治療・予後に有用であることが判明した。実践となる臨床の場で、全血発光測定群とコントロール群を比較すると、前者で術後感染症の早期発見が高率に可能であった。これにより、感染発症阻止薬から感染治療薬への変更がスムーズに行われ、治療費の減少に貢献したと考えられた。現有設備として当院細菌学教室に設置してある超高感度撮影カメラ(ARGUS 50:浜松ホトニクス社)と教室内機材、試薬を使用して化学発光を測定した。感染発症群においては、術当日から第3病日までpeak CLが非発症群と比較して有意に高値を示し、白血球数やCRP値よりも早期に術後感染症を予測しうることが判明した。この結果を実際の臨床の場において応用した。peakCL高値群で感染発症を強く疑う症例に対しては、各種検査・培養を提出するとともに予防的抗菌剤から治療的抗菌剤に変更したところ、術後感染症の治療期間・入院期間が短縮したため医療費の削減に貢献した。すなわち無意味な予防的抗菌剤の長期投与抑制効果や、多剤耐性菌の発生防止を実現することが可能であった。担癌患者、肝硬変、糖尿病等の患者、さらに開腹手術患者の術前、術後の血液を採取後全血化学発光を測定し、その推移が手術侵襲や術後感染症の発症の有無に影響を与えるか否かを検討している。全症例に対して炎症性サイトカインであるTNF-α、LPSの全血化学発光に及ぼすPriming効果も比較検討している。これらの患者に術前後を通じて化学発光を測定した場合、その推移と術後感染の有無に関連を認めれば、この研究が感染の早期発見とその治療・予後に有用であるといえる。実践となる臨床の場で、全血発光測定群とコントロール群を比較すると、前者で術後感染症の早期発見が高率に可能になると考えられる。したがって、感染発症阻止薬から感染治療薬への変更がスムーズに行われ、治療費の減少につながると予想される。現有設備として、当院細菌学教室に設置してある超高感度撮影カメラ(ARGUS 50:浜松ホトニクス社)と教室内機材、試薬で測定可能であり、ヘパリン加採血した全血100μlを試料とし、その中にMEM20μlとルミノール20μlを添加、37°Cで10分間保温後刺激物を加えて60分間の化学発光を測定している。刺激物質としてザイモザンA20μlを使用している。その他炎症性サイトカインとして、TNF-α10U、LPS1μgと全血を10分間Incubationしたのちに、ザイモザンAで刺激した場合の全血化学発光に対するpriming効果についても検討している。化学発光の評価は、(1)60分間の化学発光の積算値、(2)peakに達したときのpeak値をもって化学発光の強さとする。また、(3)血清オプソニン活性の指標となるpeakに達するまでの時間も測定している。手術患者は、術前、術直後、第1、3、7病日に血液を採取し、その化学発光の変動と推移を検討評価するが、現在消化器外科手術例のデータ収集行い、データベースを作成している段階である。現有設備である超高感度撮影カメラ(ARGUS 50:浜松ホトニクス社)を用いて、現在消化器外科領域の周術期(術前、術直後、第1,3,7病日)に末梢血採血を行い、化学発光による白血球活性酸素放出能を測定し、この研究が術後感染症の早期発見につながるか否かを検討中である。術後感染症を早期発見するためには、体温、白血球数、好中球数の割合、CRPなどがゴールドスタンダードな指標とされているが、実際の臨床の場では手術侵襲により術直後から前述の数値は著明に上昇するため、感染発症の有無を判断するのは非常に難しい。白血球活性酸素放出能は炎症性サイトカインの変動ともある程度相関すると予想されるが、現時点でわれわれが集積途中のデータを解析すると、術後早期に感染症を発症した症例は非発症例と比較して、オプソニン活性に大きな差異は認められないものの、活性酸素放出能(白血球貪食能)は感染発症例において術当日から第3病日まで有意に高値を示すという結果が得られている。今後データを集積したうえで、この結果が明らかなものとなれば、術当日に感染発症危険群を割り出すことが可能となり、術後抗生剤を感染発症阻止薬から治療薬へとスムーズに移行することができる。このことは、感染治療期間を短縮するだけでなく、医療費の削減、ひいては入院期間の短縮と患者サイド、医療サイドのどちらにも好結果をもたらすことになる。統計学的な有意差が得られた時点で、実際の臨床例にこれを活用し、治療期間の短縮が可能であるか検討する必要がある。

実践となる臨床の場で、全血発光測定群とコントロール群を比較すると、前者で術後感染症の早期発見が高率に可能であった。これにより、感染発症阻止薬から感染治療薬への変更がスムーズに行われ、治療費の減少に貢献したと考えられた。現有設備として当院細菌学教室に設置してある超高感度撮影カメラ(ARGUS 50:浜松ホトニクス社)と教室内機材、試薬を使用して化学発光を測定した。感染発症群においては、術当日から第3病日までpeak CLが非発症群と比較して有意に高値を示し、白血球数やCRP値よりも早期に術後感染症を予測しうることが判明した。この結果を実際の臨床の場において応用した。peakCL高値群で感染発症を強く疑う症例に対しては、各種検査・培養を提出するとともに予防的抗菌剤から治療的抗菌剤に変更したところ、術後感染症の治療期間・入院期間が短縮したため医療費の削減に貢献した。すなわち無意味な予防的抗菌剤の長期投与抑制効果や、多剤耐性菌の発生防止を実現することが可能であった。
教員養成大学の理科教育における動的な自然認識を深めるための教育内容と方法の研究

1研究目的;理科教育の充実と教育目標を達成するためには、自然現象を動的に理解し、認識する能力・態度の育成が重要であり、自然を取り扱う場合の視点を明確にし、科学的に操作することができなければならないと考え、内容と教育方法の開発を試みた。本年度の研究内容と研究結果は次の通り。2研究内容と研究結果;(1)第四紀自然史研究に関連して、野外調査および室内における分析実験(鉱物分析)を実施し、1959年以来の研究資料に加えて映像教材化と指導資料作成を実施した。研究地域は主として最上川沿岸。(2)古環境の復元操作の過程、すなわち推論・仮説設定・実証等の科学の方法体得のための基礎的資料の作成を行った。取材場所は南関東地域とくに八王子市周辺を中心にし、大学理科教育法教材を完成することができた。主題は「古東京湾の変遷史の考察」という形で、全体を取りまとめた。(3)地域性に根ざした理科教育法の研究の一つとして、雪・霜等の結晶形態の観察法を取り上げた。氷雪地域の冬期間の自然観察教材として、その効果をねらったものであるが、簡易な実験法であり適切な材料であることが確認されたので、次年度から一般授業に活用する予定である。(4)植物の光合成・糖類の形成過程の追及・検出法に関する研究を推進しつゝあるが、本年度においては、簡易検出法の開発・光合成産物の移動検証実験をめぐる一連の実験系についてまとめることができた。以上主要な内容と現在までの成果の概要について記したが、次年度(昭和62年度)以降の学生指導において、さらに強化・充実をはかる計画である。
ドッキング分子が制御する哺乳動物の発生と生理機能の分子機構の解析

FRS2αノックアウトマウスは、胎生初期E9までに、胎児の前後軸形成がうまくいかないために死亡した。このとき、胎盤の原基であるExEの発達がうまくいかないことが、primarydefectであることがわかった。この時期のExEには、胎盤組織を作る幹細胞trophoblast stem(TS)細胞が存在し、FGF4によって増殖することが知られていたが、我々は、胎盤組織の幹細胞内で活性化するFGF4-FRS2α-Bmp4 pathwayが、胎児の発生に必須の役割を果たすことを明らかにした。さらに、Bmp4遺伝子を含むゲノム断片を用いたルシフェラーゼアッセイより、その5-HankingregionにFGF4に反応するelementが存在することが示唆され、FGF4は、転写レベルでBmp4の発現を誘導することが明らかになった。FRS2αShp2結合部位欠失変異マウスは、胎生致死を示すとともに、眼及び神経組織の発達に強いdefectを示した。レンズ原基でのPax6の発現が変異胎児の眼では低く、FGF-FRS2αシグナリングが眼の発生の最も初期に重要な役割を果たしていることが示唆された。また、E11.L5の胎児脳を分離して、bFGF存在下に培養すると、神経幹細胞が自己複製してneurosphereを形成するが、変異胎児脳由来のneurosphereは、非常に小さく、FRS2αが、胎児神経幹細胞の増殖に重要な役割を果たしていることが明らかになった。FRS2ノックアウトマウスは、胎生初期E8までに、胎児の前後軸ができないために死亡した。様々な解析により、胎盤の原基であるExEの発達がうまくいかないことが、FRS2ノックアウトマウスのprimary defectであることが明らかになった。この時期のExEには、胎盤の組織を作る幹細胞trophobla stem(TS)細胞が存在し、FGF4によって増殖することが知られている。我々は、in vitroでFGF4存在下にExEを培養して、TS細胞株の樹立を試みた。その結果、FRS2ノックアウト胎児からはTS細胞株の樹立は不可能であり、FRS2がTS細胞の維持に必須であることがわかった。さらに我々は、FRS2ノックアウト胎児のExEにおけるBmp4の発現が非常に弱くなっていること、またTS細胞をFGF4で刺激すると、Bmp4が強く誘導されることを見い出した。そこで、胎児の前後軸形成におけるBmp4の役割を調べるために、Bmp4 antagonistであるnogginを野生型胎児にinjectしたところ、前後軸形成が阻害された。以上より、FGFを介する胎児の前後軸形成の分子メカニズムとして、TS細胞を含むExEにおいて活性化するFGF4-FRS2-Bmp4 pathwayがcriticalであることが明らかになった。FGFシグナリングが胎児の前後軸形成に深く関与することがわかったのは、すべての動物種を考慮しても今回が初めてである。さらに、我々は、幹細胞であるTS細胞が、多分化能を保ちながら、Bmp4の発現分泌を通して、胎児のbody planの形成にも深く関与することを見い出した。このように幹細胞が、その臓器以外の発生にも影響をもちうるという発見はこれまでになく、現在様々な臓器に発見されている幹細胞の機能を理解する上で、重要な示唆を与えると考えられる。前年度、胎盤組織の幹細胞内で活性化するFGF4-FRS2-Bmp4 pathwayが、胎児の発生に必須の役割を果たすことを示唆する結果を得たが、これをさらに解析した。まず、FRS2ノックアウトマウスとBmp4ノックアウトマウスのphenotypeに類似点が多いことが見い出され、胎児内でこの経路が重要なシグナル伝達系であることが示唆された。さらに、Bmp4遺伝子を含むゲノム断片を用いたルシフェラーゼアッセイより、その5-flanking regionにFGF4に反応するelementが存在することが示唆され、FGF4は、転写レベルでBmp4の発現を誘導することが明らかになった。

レンズ原基でのPax6の発現が変異胎児の眼では低く、FGF-FRS2αシグナリングが眼の発生の最も初期に重要な役割を果たしていることが示唆された。また、E11.5の胎児脳を分離して、bFGF存在下に培養すると、神経幹細胞が自己複製してneurosphereを形成するが、変異胎児脳由来のneurosphereは、非常に小さく、FRS2αが、胎児神経幹細胞の増殖に重要な役割を果たしていることが明らかになった。
偏極中性子による微小スピン揺らぎの高精度検出

現在、これまでには考えられなかったほどの微小なスピンが、物質中で安定に存在することが知られている。このような微小スピンの起源を探るには、感度が良く高精度で測定を行うことができる偏極中性子散乱実験が不可欠である。このような微小スピンを観測するためには、中性子の強度を上げることと、偏極中性子実験を行うために微妙な外部磁場の制御が、絶対条件であるので、高エネルギー物理学研究所ブ-スター利用中性子散乱施設に設置した偏極中性子分光器(TOP)と、原研3号炉、6Gに設置されたTOPAN(東北大学中性子分光装置)の偏極中性子オプションの増強を行った。TOPに対しては、高性能Fe/Siスーパーミラーを使用した偏極中性子導管を新たに導入し、長波長領域でも95%以上の偏極効率維持しながら、試料位置での偏極中性子強度を約2倍に増強することができた。これを使って共同利用実験を開始し、Fe/CeやCo/Cu人工格子の偏極中性子反射実験、金属微粒子の界面磁性を調べるための小角散乱実験、スピングラスの磁区形成を観測するための透過中性子偏極度解析実験等を行った。一方、TOPAN分光器に対しては、試料まわりの磁場を精密に制御するためのソフトウエアを開発し、従来の分光器制御ソフトに組み込んで、TOPANでの偏極中性子オプションを完成させた。実際に測定を始めてみると、偏極アナライザーの性能に不満足な点があることがわかったので、現在、結晶に熱処理を施すことで、性能を向上させることを考えている。これを除けば、装置は順調に仕上がっており、Crの磁気励起の問題や、酸化物超伝導関連物質に関するスピンゆらぎに関する研究を行うことができた。特にCrに関しては、全く新しい知見を得ることができ、大きな成果をあげることができたので、今後も引き続き偏極中性子を使った研究を発展させていきたいと考えている。高エネルギー物理学研究所ブースター利用中性子散乱施設に設置した偏極中性子スペクトロメーター(TOP)に偏極導管を取り付けて偏極効率の上昇と強度の増強を計った。偏極導管は、新しい原理を応用したもので、偏極効率を良くするために、スーパーミラーをV字型に配した直導管型のもので、磁化と同じ向きの中性子は、直管に対して30'の角度をもつV字型の壁で全反射するが、反対向きの中性子は透過することで、偏極中性子を得ようとするものである。3月に行われた性能試験では、予定の95%の偏極度には到達していないので、偏極効率の性能テストを続けて行わなければならない。しかし、長波長側の偏極度の上昇が見られるので、偏極子の性能に帰属していないように思われる。短波長側の偏極度が上がらない結果については、未だ検討が充分でないので、新年度の性能試験を待たざるを得ない。原研3号炉、6Gに設置されたTOPAN(東北大学中性子分光装置)に、ホイスラー単結晶からなる偏極子を取り付け、さらにアナライザー並びに偏極スピンを制御する磁石群の取り付けと、偏極中性子の方向(偏極スピンの方位)と偏極スピンの反転を行わせる制御機構、磁性体試料の磁化方向制御機構などのハードウエアとソフトウエアの整備を進めてきて、このところ順調に実験ができるようになった。このようにパルス中性子と定常中性子を使って偏極中性子の散乱や偏極度解析の実験がようやくできるように装置が整備されてきたので、これからは実際の実験を通して研究の成果を見てもらいたいと考えている。昨年度購入した磁気鏡中性子導管偏極子(PNG)を高エネルギー研究所のTOP中性子分光装置に取り付け、PNGの性能テスト及びPNGによって偏極された中性子を用いて超伝導の磁束ダイナミックスの研究を行った。

それと共に昨年度までに原研JRR3号原子炉のTOPAN中性子分光装置に取り付けられた偏極解析装置を使って、Crのスピン揺らぎのモード分析を行うなど、本年度は一定の研究成果があがった年となった。以下研究の成果について概括する。1.PNGは白色中性子を広い波長バンドで一挙に偏極する方法としてこの研究課題で提案し実際実験を行った。その結果、バンド幅は当初の予想よりも狭かったが、偏極度並びに中性子強度は当初の予想通以前に比べると大幅に改善が見られた。バンド幅が狭いのはPNGの中性子の全反射を行う多層膜の構造が理想的でないことも判明した。従って、この部分を改善することを考えている。高温超伝導を示すYBCOの単結晶を用いて外磁場から侵入した磁束格子を見る実験を行った。侵入する臨界磁場が磁化測定の結果と低温に置いて相当異なることを発見した。これは重要なことであるので引き続き測定を続けている。2.Crの反強磁性状態はSDWと呼ばれる新しいスピンの秩序状態であるが、その状態からの磁気励起をきちんとしらべた実験は未だない。そこで、磁気励起のスピンの偏極方向の決定を偏極中性子用いた非弾性散乱研究によって行った。その結果、低温の縦波SDWの状態での励起はスピン波ではないことを見つけた。これを基にしてさらに高いエネルギーの状態を探っている。前年度中に、高エネルギー物理学研究所ブ-スター利用中性子散乱施設に設置した偏極中性子スペクトロメーター(TOP)への偏極中性子導管の設置を終了したので、今年度は、その性能の評価と、実際にそれを用いた偏極中性子散乱実験を行った。偏極導管は、以前の偏極子に比べて、長波長領域でも、95%以上の偏極効率を持つことが確かめられた。また、試料位置での偏極中性子強度も、従来のものに比べて、約2倍に増強することができた。ただし、11Å以上の中性子が全く使えなくなったが、もともと、中性子強度の弱いところであるので、使用の際とくに問題となるわけではない。どの波長まで偏極することができるかは、偏極子として使っている特殊な鏡(偏極スーパーミラー)の性能で決まる。現在の偏極スーパーミラーには、偏極中性子導管の製作を始めた2年前に比べて、飛躍的な性能の進歩があり、このミラーを使って、さらに偏極導管の性能向上をめざす作業が進行中である。TOPは、共同利用の分光器であるため、我々が、占有することができないが、今年度は、実際の実験として、Co/Cu人工格子の反射率測定を行うことができた。原研3号炉、6Gに設置されたTOP AN(東北大学中性子分光装置)での偏極実験については、偏極子として使用しているホイスラ-結晶に熱処理を加えることで、その性能が飛躍的に向上するとの情報が、フランスのILL研究所よりもたらされた。そのため、ILLに熱処理を依頼したが、思うような結果を得ることができなかった。現在、結晶の性能回復に向けての、最適な再熱処理条件を探る実験が進行中で、早期の実験再開にむけて努力しているところである。これからも、実験装置の性能向上に力を注ぎつつ、偏極中性子を用いた研究成果を出していきたいと考えている。
海産無脊椎動物レクチンの構造多様性に基づく新規機能解明とその応用

本研究では生体内糖鎖を特異的に認識することによって様々な生理機能に重要な役割を果たしている糖結合タンパク質レクチンの構造と機能の解明を行っているが,本年度は海産無脊椎動物の中でも,これまでにあまり研究が進んでいない二枚貝類のレクチンについて重点的に研究を行った。対象としたウチムラサキ(Saxidomus purpuratus)由来レクチンであるSPL-1とSPL-2は,N-アセチルグルコサミン(GlcNAc)及びN-アセチルガラクトサミン(GalNAc)の2種類のアミノ糖を強く認識するが,このようにグルコースとガラクトースの両者の関連糖との結合性を有するレクチンは珍しいことからその糖との複合体のX線結晶構造解析を行った。その結果,両レクチンの基本構造はCa2+依存性レクチンであるC型レクチンファミリーに属するにも関わらず,糖との結合にはCa2+を介さず糖のアセトアミド基を直接アミノ酸残基側鎖が認識していることが明らかになった。両レクチンはそれぞれA-鎖とB-鎖のヘテロ二量体(SPL-1)及びB-鎖のホモ二量体(SPL-2)から成っていることから,それぞれのサブユニットの糖特異性をより詳細に調べるために,これらの組換えサブユニットを大腸菌により発現させ,そのオリゴ糖への結合性の違いを,グリカンアレイを用いて明らかにすることができた。一方,その他の海産無脊椎動物に関しても新奇な構造と特性を有するレクチンを見出すことを目的として,ラッパウニ(Toxopneustes pileolus)及びイシワケイソギンチャク(Anthopleura japonica)のトータルRNAを次世代シークエンサーにより解析を行った。その結果,多数のC型レクチン様配列を見出すとともに,レクチンに関連した多くの生理活性タンパク質の配列情報を得ることに成功した。これまでに知られていない特徴を有する新しい海産無脊椎動物レクチンを発見しその特性を立体構造解析の結果から解明するとともに,遺伝子クローニング及び組換え体の発現を通じて,機能変換の基礎となるデータを得られたことが理由としてあげられる。また,次世代シークエンサーを用いることにより,これまでの技術では困難であった特定の生物が発現する生理活性タンパク質を網羅的に解析することにも成功しており,今後,多様な構造を持つことが予想される海産無脊椎動物レクチンの構造と機能を解明するための重要な基盤が得られた。これらの結果から本研究は順調に進展しているものと評価できる。今後は引き続きこれまでに得られたレクチン類の詳細な機能解明を行っていくとともに,トータルRNAの網羅的解析により新しく見出された新奇な海産無脊椎動物レクチン類の検索ならびに微生物による発現を重点的に行っていく。また,これらの研究に付随して,無脊椎動物以外の魚類や細菌類からの興味あるレクチン類の存在が示唆されていることから,それらの構造機能解析にも新たに取り組んでいく予定である。本研究は,生体内糖鎖を特異的に認識し,生物の様々な生理機能に結びつけるために中心的な役割を果たしている糖結合タンパク質レクチンの構造と機能を,特に海産無脊椎動物由来のものを対象として研究を行った。海産無脊椎動物の一種である棘皮動物に属するウニの中でも,ラッパウニ(Toxopneustes pileolus)の叉棘に含まれる新規なレクチンとしてSUL-Iを見出し,そのcDNAクローニングを行うことにより,遺伝子配列及びアミノ酸配列を明らかにした。さらに得られたcDNAを用いて大腸菌により組換えSUL-Iを発現させ,得られたタンパク質を活性型として精製することに成功した。得られた組換えSUL-Iは糖の一種であるL-ラムノースに対する強い結合特異性を示すとともに,アミノ酸配列において,これまでに魚類の卵中に多く見いだされているラムノース結合レクチン(RBL)との相同性が認められた。しかしながらSUL-Iは2つのドメインから成る魚類RBLとは異なり,3つのドメインから成るこれまでに知られていない立体構造を持つことをX線結晶構造解析から明らかにした。さらに糖鎖マイクロアレイを用いることにより,ラムノース以外にガラクトースを末端に有するオリゴ糖鎖にも親和性を示すことを明らかにした。一方,二枚貝に属するウチムラサキからも新規なレクチンSPL-1,SPL-2を単離し,そのcDNAクローニングと組換え体発現を行った。その結果,SPL-1とSPL-2はアミノ酸配列上の相動性がほとんど見られないにも関わらず,その立体構造はC型レクチンと非常に類似していること,またC型レクチンと異なり,糖との結合にカルシウムイオンを必要としないことなどを見出した。海産無脊椎動物レクチンの構造と機能を解明するために重要となるcDNAクローニングが順調に進んだことで,目的タンパク質の一次構造が明らかになるとともに,データベースと比較によって,それらのタンパク質の機能を推定することが可能になった。また,微生物を用いた組換え体発現も技術的に確立されており,微量にしか存在しないタンパク質についても活性タンパク質を調製したうえで立体構造解析が進んだ。

対象としたウチムラサキ(Saxidomus purpuratus)由来レクチンであるSPL-1とSPL-2は,N-アセチルグルコサミン(GlcNAc)及びN-アセチルガラクトサミン(GalNAc)の2種類のアミノ糖を強く認識するが,このようにグルコースとガラクトースの両者の関連糖との結合性を有するレクチンは珍しいことからその糖との複合体のX線結晶構造解析を行った。その結果,両レクチンの基本構造はCa2+依存性レクチンであるC型レクチンファミリーに属するにも関わらず,糖との結合にはCa2+を介さず糖のアセトアミド基を直接アミノ酸残基側鎖が認識していることが明らかになった。両レクチンはそれぞれA-鎖とB-鎖のヘテロ二量体(SPL-1)及びB-鎖のホモ二量体(SPL-2)から成っていることから,それぞれのサブユニットの糖特異性をより詳細に調べるために,これらの組換えサブユニットを大腸菌により発現させ,そのオリゴ糖への結合性の違いを,グリカンアレイを用いて明らかにすることができた。一方,その他の海産無脊椎動物に関しても新奇な構造と特性を有するレクチンを見出すことを目的として,ラッパウニ(Toxopneustes pileolus)及びイシワケイソギンチャク(Anthopleura japonica)のトータルRNAを次世代シークエンサーにより解析を行った。その結果,多数のC型レクチン様配列を見出すとともに,レクチンに関連した多くの生理活性タンパク質の配列情報を得ることに成功した。これまでに知られていない特徴を有する新しい海産無脊椎動物レクチンを発見しその特性を立体構造解析の結果から解明するとともに,遺伝子クローニング及び組換え体の発現を通じて,機能変換の基礎となるデータを得られたことが理由としてあげられる。また,次世代シークエンサーを用いることにより,これまでの技術では困難であった特定の生物が発現する生理活性タンパク質を網羅的に解析することにも成功しており,今後,多様な構造を持つことが予想される海産無脊椎動物レクチンの構造と機能を解明するための重要な基盤が得られた。これらの結果から本研究は順調に進展しているものと評価できる。今後は新規なC型レクチンが得られた二枚貝についてさらに研究を進め,その糖結合特異性を詳細に調べる。また,ラッパウニ叉棘毒液からは,レクチンを始め様々な生理活性タンパク質が単離されているが,SUL-Iのように同様な生理活性タンパク質が魚類等の海産動物にも存在している可能性が高く,多くの海産動物試料よりcDNA配列の網羅的解析を行うことによって,新規なレクチン等の生理活性タンパク質の発見と構造・機能解析を進めていく予定である。今後は引き続きこれまでに得られたレクチン類の詳細な機能解明を行っていくとともに,トータルRNAの網羅的解析により新しく見出された新奇な海産無脊椎動物レクチン類の検索ならびに微生物による発現を重点的に行っていく。また,これらの研究に付随して,無脊椎動物以外の魚類や細菌類からの興味あるレクチン類の存在が示唆されていることから,それらの構造機能解析にも新たに取り組んでいく予定である。物品費については,ほぼ予想通りの必要額であったが,多忙のため当初の計画より発表の機会が少なくなったことなどにより,研究発表のための旅費の支出が少なくなり未使用額が発生した。次年度については,これを含めて研究発表の機会をより多く持つことを目指す。
極限環境下における遷移金属酸化物の量子相転移と磁気励起の研究

1.マグネタイト(Fe304)のFe2価、3価の電荷秩序に関連したフェルベー転移について、酸素濃度の異なる2種類の単結晶について高圧効果を調べた。いずれも68GPaの圧力下で絶縁体-金属転移を示すことを見い出した。2.非磁性材料(NiCrAL合金)を用いたNMRの低温・超高圧発生装置を開発し、ラダー系Sr-Ca-Cu-0高圧誘起超伝導状態におけるNMRルの観測に成功した。3.約1Kに超伝導転移を示すパイロクロア型酸化物Cd_2Re_2O_7についてRe原子核の核四重極共鳴をゼロ磁場で行い、核磁気緩和率に顕著なコヒーレンス・ピークを見出し、S波の弱結合BCS超伝導体であることを検証した。4.同じくCd_2Re_2O_7の単結晶試料について、磁場方位を精密に制御しながらCd原子核の核磁気共鳴スペクトルを測定することにより、200K付近で起こる構造相転移に伴い、Cdサイトの微視的な電子状態がどのように変化するかを明らかにした。5.スピン・ギャップを持ち、高磁場で量子化された磁化プラトーを示すことから注目されているSrCu_2(BO_3)_2について、フランス・グルノーブルの強磁場実験施設との共同研究により、1/8の磁化プラトーに対応する26テスラ以上の高磁場中でCuおよびB原子核の核磁気共鳴の測定を行った。この結果、26テスラ付近で1次転移により長周期磁気構造をもった秩序相に転移することが見出され、この相でのスピン構造が決定された。1)ダイマー1重項が厳密な基底状態であるというユニークな性質を持つ2次元スピンギャップ系SrCu_2(BO_3)_2において、^<11>B核のNMR測定を行なった。特にグルノーブル強磁場実験施設との共同研究で、飽和磁化の1/8において磁化過程のプラトーが生じる28テスラまでの磁場中での核スピン格子緩和率、スピンエコー減衰率を測定した。スピン格子緩和率の温度依存性はピークを示し、またスピンエコー減衰率は温度低下と共に単調に増大した。これらの結果は、磁場によって誘起された磁化が温度の低下とともに局在化することによる考えられる。2)PrBa_2Cu_4O_8はイットリウム系高温超電導体においてYをPrでおきかえた化合物であるが、この物質の電気伝導は1次元的なジグザグ鎖によって担われている。鎖内の銅原子核のスピン格子緩和率、スピンエコー減衰率を核4重極共鳴(NQR)を用いて測定したところ、両者共に電場勾配の揺らぎに起因する巨大なピークが観測された。ピークの生じる温度が両者で異なることから、電荷の揺らぎが徐々に遅くなり一部の電荷が凍結していることが結論された。この物質は1/4バンドが詰まった系に特有の電荷秩序相に非常に近いところに位置していることが示唆される。3)太古から人類に知られている磁性体であるマグネタイトが示す金属絶縁体転移(Verwey転移)は長い間電荷の秩序化によると考えられてきたが、最近それに反する実験が報告されている。本研究ではマグネタイトに均一な圧力をかけると、絶縁体への転移が抑えられ、8Gpa以上の圧力では低温まで完全に金属的な伝導を示すことが始めて観測された。
分裂酵母のピルビン酸転移酵素変異体を用いた新奇糖鎖の酵素合成と糖鎖工学への応用

分裂酵母の糖タンパク質糖鎖には、ピルビン酸化されたガラクトースが存在する。分裂酵母のピルビン酸付加に重要なピルビン酸転移酵素について諸性質の解析を行った。本酵素はβ結合のガラクトースに特異的で、ラクトース(Gal-Glc)のガラクトースにはピルビン酸を付加できるが、Gal-GlcNAcには付加できないことがわかった。そこでPvg1タンパク質のX線構造解析を行った所、還元末端のグルコースの2位の位置に168番目のヒスチジンが極めて隣接していることが予想された。解析の結果、Pvg1H168A変異体はPvg1野生型が転移できなかったGal-GlcNAcへピルビン酸を転移できることが明らかになった。本研究の目的は基質特異性を改変した分裂酵母のピルビン酸転移酵素Pvg1を用いて新奇なピルビン酸含有N-結合型糖鎖および糖タンパク質を合成する手法を確立する。さらにピルビン酸含有糖タンパク質が高等動物生体内でどのような動態を示すのか明らかにすることである。分裂酵母において糖鎖中の唯一の酸性残基としてピルビン酸である。糖タンパク質糖鎖へのピルビン酸の付加は、真核生物では全く報告が無い。申請者は分裂酵母Pvg1タンパク質がホスホエノールピルビン酸を基質としてガラクトースへピルビン酸を転移する活性を有していることを明らかにした。本酵素の基質特異性を調べたところ、ラクトース(Galβ1,4Glc)のガラクトースへはピルビン酸を付加できたが、ヒト複合型糖鎖の基本骨格であるGalβ1,4GlcNAcへは転移することが出来なかった。そこで本酵素の反応メカニズムや基質認識機構をさらに詳細に解析を行うため、大腸菌で生産した組換えPvg1タンパク質のX線構造解析を行った。その結果、本酵素の立体構造を明らかにすることができた。本酵素の活性中心付近の構造解析から、基質となりうる二糖としてラクトースを配置した所、還元末端のグルコースの2位の位置に168番目のヒスチジンが極めて隣接していることが予想され、ヒスチジン残基がGalβ1,4GlcNAcへのピルビン酸の転移を阻害していることが示唆された。今回、168番目のヒスチジンを19種全てのアミノ酸に置換した変異体を作成したところ、システインに置換した変異体が最も効率良く、Galβ1,4GlcNAcへピルビン酸を付加することがわかった。そこで本変異体を用いてアシアロ2本鎖ヒト複合型糖鎖へピルビン酸の転移を試み、実際に2つの非還元末端ガラクトースにピルビン酸が付加した新奇糖鎖を酵素合成することができた。現在、これらの糖鎖の特性について解析を行なっている。本研究では、分裂酵母糖鎖の末端にピルビン酸を付加する酵素であるPvg1を用いて、新たなピルビン酸含有糖鎖の酵素合成を試みることを目的としている。これまでの研究で、Pvg1はヒト複合型糖鎖の末端に糖鎖を付加することは出来ないが、Pvg1タンパク質の立体構造解析により、基質特異性の改変に成功してピルビン酸含有複合型糖鎖の合成が可能となった。今年度は明らかにしたPvg1タンパク質の構造から点変異体を作成することで、酵素の触媒活性に重要なアミノ酸の同定を行うことができた。ピルビン酸が付加されたヒト複合型糖鎖を効率良く糖タンパク質へ転移させるために、ヒト複合型糖鎖に作用して糖鎖を遊離できるエンドグリコシダーゼをキノコ類のゲノムから見いだし、本酵素変異体が高い糖鎖転移活性を持っていることを証明した。さらに本酵素変異体の諸性質について明らかにすることができた。Pvg1を用いてパラニトロフェニル化ピルビン酸ガラクトース(pNP-PvGal)の合成を行い、本化合物を用いてピルビン酸化ガラクトースを分解する新奇酵素の探索を行なった。その結果、土壌より単離したBacillus属細菌の培養液が、pNP-PvGalを分解する活性を持つことを見出した。本菌の全ゲノム塩基配列を高速シーケンサーにより解読し、候補遺伝子について大腸菌での発現・生産により同定を試みた。候補遺伝子の中でGH2ファミリーに属するグリコシダーゼがpNP-PvGalからPvGalを遊離することが出来ることを明らかにした。・ピルビン酸含有複合型糖鎖については、Pvg1変異体により数ミリグラムの糖鎖を調製することができたため、糖鎖アレイ解析によりヒトに普遍的に見られるα2,6-結合したシアル酸と類似した特性をもつことを明らかにできた点は大変興味深い。・ピルビン酸含有糖鎖をタンパク質へ転移可能な新たなエンドグリコシダーゼをキノコ類の中から選別できたこと。さらに本酵素により効率良くピルビン酸含有糖タンパク質の合成が可能になったことは当初予想していたよりも新たな成果を得ることができた。・これまで誰も合成していなかったパラニトロフェニル化ピルビン酸ガラクトースをPvg1により酵素合成できたこと、また本酵素を用いて土壌微生物から新たなグリコシダーゼを発見することができたのは予期していない新たな成果である。以上の点から当初の研究計画はおおむね順調に進展しており、さらに本研究により当初の予想以上に新たな進展もあった。

さらにピルビン酸含有糖タンパク質が高等動物生体内でどのような動態を示すのか明らかにすることである。今年度までの研究で以下のことについて明らかにすることができた。(1)分裂酵母の糖鎖へのピルビン酸付加に重要なPvg1/ピルビン酸転移酵素の立体構造を明らかにできた。これは糖鎖へピルビン酸を転移する酵素としては初めての報告である。本酵素の活性中心付近の構造解析から、活性に重要なアミノ酸も特定され、実際にこれらのアミノ酸をアラニンに置換すると酵素活性が著しく低下することもわかった。基質となりうる二糖としてラクトースを配置した所、還元末端のグルコースの2位の位置に168番目のヒスチジンが極めて隣接していることが予想され、ヒスチジン残基がGalβ1,4GlcNAcへのピルビン酸の転移を阻害していることが示唆された。(2)立体構造結果をもとにPvg1変異体を作成してN-結合型糖鎖にピルビン酸を転移できる変異体を作ることができた。Pvg1タンパク質の立体構造解析結果から、168番目のヒスチジン残基をアラニンに点変異させたPvg1H168A変異体を作製した。解析の結果、Pvg1H168A変異体はPvg1野生型が転移できなかったGalβ1,4GlcNAcへピルビン酸を転移できることが明らかになった。さらにGalβ1,4GlcNAcを基本骨格に持つ高等動物由来のアシアロ複合型N-結合型糖鎖(Gal)2(GlcNAc)2(Man)3(GlcNAc)2-Asnへも転移効率は低いがピルビン酸を転移できることがわかった。(3)実際に糖タンパク質糖鎖にシアル酸の代わりにピルビン酸が付加されたネオ糖タンパク質の合成を試みた。その結果、少量ではあるがヒトトランスフェリンの糖鎖末端にピルビン酸が付加された糖タンパク質を酵素合成することができた。分裂酵母の糖タンパク質糖鎖には、ピルビン酸化されたガラクトースが存在する。分裂酵母のピルビン酸付加に重要なピルビン酸転移酵素について諸性質の解析を行った。本酵素はβ結合のガラクトースに特異的で、ラクトース(Gal-Glc)のガラクトースにはピルビン酸を付加できるが、Gal-GlcNAcには付加できないことがわかった。そこでPvg1タンパク質のX線構造解析を行った所、還元末端のグルコースの2位の位置に168番目のヒスチジンが極めて隣接していることが予想された。解析の結果、Pvg1H168A変異体はPvg1野生型が転移できなかったGal-GlcNAcへピルビン酸を転移できることが明らかになった。本申請を行なった当初は分裂酵母のピルビン酸転移酵素Pvg1の立体構造解析が終了したところで、なぜラクトースのガラクトース残基にはピルビン酸を転移できるがGalβ1,4GlcNAcへは転移できないのか、不明であった。立体構造解析結果から168番目のヒスチジンがGalβ1,4GlcNAcのGlcNAc2位のアセチル基と立体障害を引き起こしている可能性が示唆された。実際にこのヒスチジンをシステインに変換することで、本酵素の基質特異性を変化できたことは立体構造解析の大きな成果である。そして今年度の研究で、実際にシアル酸の代わりにピルビン酸を付加した2本鎖複合型糖鎖を合成することができた。この糖鎖はこれまで誰も合成したことがなく、新たなバイオ医薬品のツールとして、非常に期待できる。
消化器癌に対するTGF-βsiRNA導入樹状細胞による新規免疫遺伝子治療の開発

腫瘍の局所の免疫環境では,腫瘍から産生されるTGF-βにより,細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の増殖の抑制とその細胞傷害活性が阻害され,さらに, Treg細胞の増加を引き起こすと報告されている.そこでTGF-βsiRNAを腫瘍局所に投与することにより,腫瘍からのTGF-βの発現を抑制することで腫瘍抗原導入DCを用いたワクチン療法などの抗腫瘍ワクチン療法の効果増強が得られると考えられる.この研究は、ヒト腫瘍抗原CEAの遺伝子を導入したCEA tansgenicマウスのDCに, TGF-βsiRNAを組み込んだアデノウイルスベクターを用いてTGF-βsiRNAを導入し,このDCを担癌マウスに投与し,抗腫瘍効果の増強効果を検討した.その結果, TGF-βsiRNAの発現が非常に不安定であるため,期待される程の抗腫瘍効果の増強は認められなかった.今後、さらに安定したsiRNAの発現法を検討し、強力な抗腫瘍ワクチンの開発を目指す必要がある.腫瘍の局所の免疫環境では,腫瘍から産生されるTGF-βにより,細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の増殖の抑制とその細胞傷害活性が阻害され,さらに, Treg細胞の増加を引き起こすと報告されている.そこでTGF-βsiRNAを腫瘍局所に投与することにより,腫瘍からのTGF-βの発現を抑制することで腫瘍抗原導入DCを用いたワクチン療法などの抗腫瘍ワクチン療法の効果増強が得られると考えられる.この研究は、ヒト腫瘍抗原CEAの遺伝子を導入したCEA tansgenicマウスのDCに, TGF-βsiRNAを組み込んだアデノウイルスベクターを用いてTGF-βsiRNAを導入し,このDCを担癌マウスに投与し,抗腫瘍効果の増強効果を検討した.その結果, TGF-βsiRNAの発現が非常に不安定であるため,期待される程の抗腫瘍効果の増強は認められなかった.今後、さらに安定したsiRNAの発現法を検討し、強力な抗腫瘍ワクチンの開発を目指す必要がある.本研究は、癌局所の免疫環境において,細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の誘導を増強させる一方、免疫抑制作用を有するTGF-βの作用を制御することにより消化器癌の癌免疫療法の有効性を高めることを目的としている。1.TGF-βsiRNAおよびヒトCEA発現adenovirus vectorの作製および調整本年度はベクターの作製に予想外の時間を費やすことなり,当初の計画目標には達しないが,次年度は,TGF-βsiRNAの発現確認,遺伝子導入DC接種TgCEAにおけるCTLの誘導能の検討,および皮下腫瘍モデルにおける抗腫瘍効果の検討を行う予定である.本研究は、癌局所の免疫環境において,細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の誘導を増強させる一方、免疫抑制作用を有するTGF-βの作用を制御することにより消化器癌の癌免疫療法の有効性を高めることを目的としている。本年度は、まず、遺伝子導入DC接種TgCEAにおけるCTLの誘導を行った。TgCEAの背部皮下に,TGF-βsiRNA,CEA遺伝子,TGF-βsiRNAとCEA遺伝子のそれぞれ3種の遺伝子導入DC(5×10^5個)を接種し,14日後に脾細胞を採取し,in vitroにてX線照射(100Gy)で非働化したMC-38.CEA(CEA遺伝子を導入したC57BL/6由来大腸癌細胞株MC-38)と5日間混合培養し,MC-38.CEAをtargetとした4時間<51>^Cr-release assayにてCTL活性を測定した。また、それらを用いた皮下腫瘍モデルにおける抗腫瘍効果の検討も行った。しかし、共に有意なデータが導けず、TGF-βsiRNA発現adenovirus vector(AxTGF-βsiRNA)のTGF-βsiRNAの発現が不十分な可能性があり、その解析、および、vectorの至適moiを再検討中である。また、臨床応用に向けて,ヒトにおける抗腫瘍免疫応答を検討するため、ヒトTGF-βsiRNA発現adenovirus vectorの作製を同時に行った。本年度はベクターを作製したにもかかわらず、予想される結果が導けず、当初の計画目標には達しないが,次年度は早急にTGF-βsiRNAの発現の再確認を行い,遺伝子導入DC接種TgCEAにおけるCTLの誘導能を再度検討し、皮下腫瘍モデルにおける抗腫瘍効果の再検討、ヒトTGF-βsiRNA発現adenovirus vectorを用いた抗腫瘍免疫応答の検討を行う予定である.本研究は、癌局所の免疫環境において,細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の誘導を増強させる一方、免疫抑制作用を有するTGF-βの作用を制御することにより消化器癌の癌免疫療法の有効性を高めることを目的としている。本年度は、前年度施行した研究で有意なデータが得られなかったことを反省し、TGF-βsiRNA発現adenovirus vector(AxTGF-βsiRNA)のTGF-βsiRNAの発現が不十分な可能性を考え、vectorの再検討を行った。MC-38.CEAにAxTGF-βsiRNAを感染させ,TGF-βの産生を定量的RT-PCR法で検討し、最も効率よくTGF-β産生抑制が認められる条件を検討した。さらにDCにAxTGF-βsiRNAを感染させ,マウスCD8+T細胞と混合培養し,TGF-βの刺激によるIFN-γの誘導について検討した.そ結果vectorの至適moiを再確認したが、発現が極めて不安定であることが判明した。

そのため、TgCEAの背部皮下に,CEA遺伝子,TGF-βsiRNAとCEA遺伝子のそれぞれの遺伝子導入DCを接種し得られたCTLのMC-38.CEAに対するCTL活性にはわずかに活性を認めるものの有意差は認めなかった。mGM-CSF遺伝子併用効果は認められた。皮下腫瘍モデルにおける抗腫瘍効果もわずかに認めるのみであった。ヒトにおける抗腫瘍免疫応答を検討するため、ヒトTGF-βsiRNA発現adenovirus vectorの作製を同時に行ったが、やはりvectorのTGF-βsiRNAの発現が不安定で、有意な結果が得られなかった。本研究の問題点として、TGF-βsiRNAの作用機序、siRNAを組み込んだadenovirus vector自身の作用動態に根本的な問題があると考え、現在、TGF-βsiRNA、およびsiRNAの遺伝子導入法の改良に取り組んでいる。
近代的演奏会の成立と変遷からみる作曲家の活動と市民の音楽享受の実態

世界最古の市民オーケストラであるドイツのライプツィヒ・ゲヴァントハウス管弦楽団の創立(1781年)以来のプログラムの実物コピーを年月日順に整理し、完全データ化した。また1830年迄を精査し、当時、オーケストラ演奏会にもかかわらず独奏や独唱があったこと、オペラの簡略版ともいえるスタイルを持つこと、交響曲をメインに据えるスタイルが出現しはじめることを解明した。市民と音楽受容の実態を考えるには複眼的な視点が必要であると考え、萌芽期のドイツに加えて現代日本における西洋クラシック音楽の受容実態についても調査した。日本におけるクラシック音楽CDの消費の変遷、音楽批評誌言説について口頭発表を行った。世界最古の市民オーケストラであるドイツのライプツィヒ・ゲヴァントハウス管弦楽団の創立(1781年)以来のプログラムの実物コピーを、年月日順に整理し、その内容を調査することが研究計画の主軸である。すでに収集済みの資料を8月にすべて整理し終え、主に1830年頃までの特徴、すなわち、オーケストラ演奏会にもかかわらず声楽作品を演奏すること、オペラの簡略版ともいえるスタイルを持つこと、交響曲をメインに据えるスタイルが出現することについて、11月に日本音楽学会全国大会にて発表した。今後(25年度中に)、プログラムの内容を更に精査して論文としてまとめ、日本音楽学会の学会誌である『音楽学』に投稿予定である。プログラム内容を精査するために、情報をデータ化する作業に現在取り組んでいる。また、メンデルスゾーンの未出版ピアノ作品の楽曲分析をすすめ、所蔵先不明と断片をのぞいた全作品に関して、ドイツのラーバー社より作品内容を分析した解説を出版予定であるが、以下の4つの章に分けて執筆している途中である。1.1825年までに作曲された作品(29曲)、2.生前に作品番号無しで一度出版された作品(9曲)、3.1840年代の未出版作品(9曲)、4.その他の作品(7曲)。この内、一つめの章は単独執筆で現在ドイツ語校正中であり、残りの三つの章はハンブルク大学のフベルタス・ドレイヤー氏との共同執筆で、私の担当分は2月に終了し、残部を委託済みである。近代的演奏会(公共演奏会)は市民社会の台頭と共に現れた。それまで教会や宮廷を主な舞台としていた音楽は、入場料収益を前提とし、演奏会専用のホールで開催される公共演奏会を舞台とするようになったのだ。そこに介在したのは、まぎれもなく商業主義であった。本研究は、この「近代的演奏会」の成立の過程と変遷を検証することにより、作曲家の創作活動が、実際には音楽マーケットと不可分な関係にあることを実証するものである。演奏会用序曲の楽譜出版は、多くの場合、オーケストラスコアにさきがけてピアノ連弾版でなされたことが判明している。これは家庭音楽としての受容の実態を示すものとして重要だ。つまり、本来オーケストラ作品である演奏会用序曲が、オーケストラ作品としてよりもまず、ピアノ連弾用作品として市民に提供されていたのである。この受容実態の解明をすすめるうち、出版や消費に都合のいい作品、つまり、長過ぎず(印刷出版の経費が抑えられ、またディレッタントが無理すること無く自分で弾ける)、演奏するのに難しすぎず、なおかつ演奏効果が高い(演奏技術が簡便でありつつ本物(演奏会場でのオーケストラ演奏)の再現力が大きい)という作品が巧妙に選ばれていることがわかった。この事実は現代社会においても同様ではないかと考え、日本における西洋クラシック音楽の消費実態(受容実態)を明らかにすべく、CDの製作数、売り上げランキング、音楽批評誌における評論・評価の相互連関について調査した。結果としては、音楽批評誌での評価に著しい偏り(作曲者への偏好)があることがわかり、しかもそれが一時的にではあるが、売り上げに大きな影響を与えている事がわかった。一報で、製作には明確な連関を認めることができなかった。さらに英、独、米等諸外国の事情も比較考察した結果、それぞれ異なるバイアスで価値判断をおこなってきている事実が明らかとなった。ライプツィヒ・ゲヴァントハウス管弦楽団の創立以来、つまり1781年からのプログラム資料は膨大であり、また、古いドイツ文字や書き込みの筆記体の解読は容易ではない。それゆえ、作業時間が大変長くかかり、データの正確な処理にはたいそう時間がかかっているのが現状である。さらには、統計的処理での事実判断のため、確認作業にも大変神経を使い、時間がかかっている。そのため、口頭発表にまではこぎつけたが、論文発表にはいたっておらず、限られた時間の中で、いかに早く正確な研究成果を発表できるかが、目下、今後(今年度)の課題である。25年度が最終年度であるため、記入しない。24年度までの進め方では時間がかかりすぎるのが問題点である。しかし、能率アップには限界がある。そこで、25年度は、4月より研究補助者との共同作業でデータ処理に取り組んでいる。

これは、単純にマンパワーというだけでなく、複数の目での確認作業が、細かな情報処理に際する読み取りミスや入力ミスを最小限に抑えられるという意味でも、非常に大きな効果をすでに実感しているところである。9月を目標にデータ入力を終了させ、次の段階(内容の精査)へと進捗させたい。また、市民と音楽享受の実態を考えるには、ライプツィヒ・ゲヴァントハウスだけでなく、複眼的な視点が必要であると考え、日本におけるCD受容のありかたについても、主にライプツィヒ・ゲヴァントハウスとの関連でオーケストラ作品に焦点を絞って、調査をすすめる予定である。25年度が最終年度であるため、記入しない。