hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
生体内脂質・蛋白の酸化・糖化変性による薬物動態変動機構の解明とその臨床への応用

腎移植患者において、酸化ストレス(OS)によってシクロスポリン(CsA)全血クリアランスが低下した。またOSモデルラットにおいて、血中における赤血球移行率、組織分布の増大と代謝能の減弱が認められた。ヒトにおいてもOSによって代謝・分布に寄与する血漿中CsAの量は低下している可能性があり、全血中濃度の評価を再検討する必要がある。肥満モデルラットにおいては、酸化ストレスの動態変動への寄与を特定することは困難であったが、酸化ストレスによる血中分布の変動が初回通過効果に影響し、経口吸収に影響を与える可能性が示唆された。ferric nitriloacetate腹腔内投与による酸化ストレスを負荷したラット(OSラット)において、全血を採取し、CsA・Tacを添加後、厳密な温度・添加後経過時間の管理のもと遠心分離によって得られた血漿中の各薬物濃度定量し、血球移行率を算出、コントロールのそれと比較検討した。また、血液の酸化度、抗酸化力をフリーラジカル解析装置Free carpe diemによって、血中か酸化脂質をチオバルビツール酸法によって評価した。OSラットのCsAにおける血球移行率は0.6倍に減少し、血中酸化度は約4倍に増加した。これらは酸化ストレスが赤血球に対するCsAの親和性・赤血球膜透過性を変化させたものと考えられる。現在、これらの結果を論文執筆中である。血球移行率の変動は、赤血球中にその多くが存在するCsAの血中分布を変動させ、組織移行や肝クリアランスに影響を及ぼすことが示唆されるため、OSラットのおけるCsAの血球移行率の変動と血中動態変動との関連を現在検討中であり、In vivoでの結果を踏まえて、論文・学会発表の予定である。Tacにおいては血漿中濃度が定量感度の不足から、臨床用量で観察される全血中濃度付近では血球移行率が算出不能であったため、定量感度を改善し、再度検討する予定である。酸化ストレスによる蛋白や脂質の変性が薬物の体内動態に与える影響を検討し、薬物の適正使用に貢献することを目的とする。酸化ストレスを負荷したラット(OSラット)において、血液酸化度は著明に増加し、また、シクロスポリン(CsA)の血球移行率は上昇した。一方、クリアランスは低下し、分布容積は増大した。これらは酸化ストレスが赤血球に対するCsAの親和性・膜透過性を増加させたためであると考えられる。なお、Tacにおいては血漿中濃度が定量感度の不足から、現有機器での正確な検討は困難であった。OSラットの肝臓、小腸CYP3Aの発現量は、特に変化は認められなかったが、その活性は低下した。また、この阻害様式は非競合阻害であった。すなわち酸化ストレスによる脂質過酸化の亢進により酵素タンパク質が変性した可能性が考えられた。高脂肪特殊飼料摂取肥満モデルラットにおけるCsAの血中濃度-時間曲線化面積は有意に増加し、分布容積、全身クリアランスは減少した。著明な脂肪肝・重量増加が観察されたが、代謝酵素活性に差は認められなかった。したがって血中濃度増加は血中脂質増加・酸化変性に伴う分布容積の減少が原因であることが示唆された。CsAによる免疫抑制療法を受けた腎移植患者13名を酸化ストレス度正常値群、やや高値群、高値群の3群に分け、投与量あたりトラフレベル平均値を比較したところ高値群で最も高く、以下やや高値群、正常値群の順であった。すなわち、強い酸化ストレスを受けている患者ほどCsAのクリアランスは低く、このことはラットでの結果を反映するものである。一方Tacが投与された患者6名においては、症例がすべて正常値の範囲であったため症例蓄積を継続し検討する。これらの結果は、酸化ストレスが赤血球蛋白、血中脂質、酵素蛋白に影響を与え、薬物動態を変動させる可能性があることを明らかにするもので、本研究結果は免疫抑制剤適正使用に貢献するものである。高脂肪特殊飼料摂取により作成した肥満モデルラットにおけるシクロスポリンの静脈内投与、小腸ループ内投与後の薬物動態を詳細に算出し、さらに肝臓の重量、脂質量、シクロスポリンの取り込み量、in vitro代謝実験による代謝能と薬物動態値との関連を検討した。血中濃度-時間曲線化面積(AUC)は有意に増加し、分布容積、全身クリアランスは減少した。また肝細胞あたりのシクロスポリンの取り込みは増加し、小腸上皮透過量の減少が認められた。肥満モデルラットでは著明な脂肪肝・重量増加が観察されたが、蛋白量あたりの代謝酵素活性に差は認められなかった。また肝取り込み量の増加と血中脂質増加によるシクロスポリン血中遊離型分率の低下が相殺され結果として肝クリアランスに差は認められなかったと推察される。したがってAUC増加は遊離型分率の低下による組織移行低下、分布容積の減少が原因であることが示唆された。

臨床においては移植患者15例の血液の酸化度・抗酸化度とシクロスポリン・タクロリムスの血中動態および臨床検査値との関連を比較した。脂質量、低比重リポ蛋白量とシクロスポリンのAUCには正の相関が認められ、酸化度とは負の相関を示す傾向が認められたが公表するに足るデータには至っていない。前年度と同様に基礎実験計画書に挙げたシクロスポリンについては、その物性から予想していたような結果が得られている。しかしながらタクロリムスについては定量感度の不足から、考察するに足るデータは得られていない。臨床検討においては、昨年度に加え、移植患者検体の酸化度・抗酸化度の測定・データ収集は順調に進んでいる。31症例のデータが得られているが、前年度に引き続き、脂質量、低比重リポ蛋白量とシクロスポリンのAUCには正の相関が認められ、酸化度とは負の相関を示す傾向が認められたが、いまだ統計学的な有意差が得られるには至っていない。このことは、十分な血中での酸化度を示す検体が少ないことに起因している。しかしながら予想通りの傾向は得られており、基礎実験でのメカニズム解明とともに今後は進めていきたい。基礎実験計画書に挙げたシクロスポリンについては、その物性から予想していたような結果が得られた。しかしながらタクロリムスについては結果がネガティブであったことと、定量感度の不足から、考察するに足るデータは得られていないが、シクロスポリンとの比較、免疫抑制剤としての両薬剤の使い分けという面からはネガティブなデータもまた有用であり、総括の際に必要なデータである。臨床検討においては、順調に移植患者検体の酸化度・抗酸化度の測定・データ収集は順調に進んでいる。今までのところ症例数の不足から、統計学的な有意差が得られるには至っていないものの予想通りの傾向は得られており、基礎実験でのメカニズム解明とともに今後は進めていきたい。最終年度は、糖尿病または酸化ストレスを与えたモデルラットの血液における血中脂質・蛋白の変性に起因する血中薬物分布(蛋白結合率、血中脂質親和性)の変動をさらに検討を加え、薬物動態との関連を検討する。また、酸化ストレスは肝代謝酵素蛋白を変性させ、その活性に影響を及ぼすことも考えられ、実際、研究代表者は、OSラットにおいて、抗HIV薬アタザナビルの代謝能が変動することを明らかにしている。基礎実験計画書に挙げた酸化ストレスによる肝臓での代謝酵素の酸化変性をプロテインカルボニルの測定より評価し、肝ミクロソームを用いたin vitroの代謝実験よりその活性の変動をも検討、さらには薬物動態変動との関連を検討する予定である。また、臨床データ収集も継続し、最終的に、臨床検査値と血液の酸化度・抗酸化度と薬物動態値の関連検討のため、多変量解析を行う。次年度は、脂質異常症、糖尿病または酸化ストレスを与えたモデルラットの血液における血中脂質・蛋白の変性に起因する血中薬物分布(血球移行性、蛋白結合率、血中脂質親和性)の変動に焦点を当て、薬物動態変動との関連を検討する予定である。また、もちろん臨床データ収集も継続し、十分な例数が得られれば、臨床検査値と、血液の酸化度・抗酸化度と薬物動態値の関連検討のため、多変量解析を行う。実験動物・測定試薬等の消耗品の消費が大きいため、使用計画の大半を占める。他に国内学会発表のための旅費、論文作成のための英文校正料を予定している。
分子クローニングによるCrohn病病因解明へのアプローチ

本研究の目的は、分子生物学的方法を用いてCrohn病の病因となりうる未確認物質をクローニングし同定することである。この目的達成のため、われわれは2つのアプローチ法により研究を行なった。第1のアプローチ法は、Crohn病患者病変部腸組織よりcDNAライブラリーを作成し、crohn病患者血清によりイムノスクリーニングを行ない、Crohn病の病因に関与していると考えられる物質を同定する方法である。われわれは、この方法にて、120万個のcDNAをスクリーニングし、20個の解析可能の腸性クローンを得ることに成功した。このうちの12個の塩基配列を決定し、解析を行なったが、麻疹ウイルスやその他のウイルス、細菌遺伝子とホモロジーは認められず、Crohn病の病因に感染因子が関与している可能性は小さいことが示唆された。第2のアプローチ法は、現在Crohn病の病因に関与している可能性が強く示唆されている麻疹ウイルスに焦点を当て、RT-PCR法により、Crohn病患者病変部において麻疹ウイルス遺伝子を証明しようとする試みである。われわれは15例のCrohn病患者病変部腸組織よりRNAを抽出し、4種類の麻疹ウイルス構造蛋白遺伝子(nucleocapsid、matrix、fusion protein、hemagglutinin)に特異的なプライマーを用いてRT-PCRを行なった。その結果、Nucleocapsid遺伝子に対するプライマーを用いたRT-PCRにより、全例に陽性バンドが認められた。しかし、得られた陽性バンドの塩基配列を決定し解析した結果、陽性バンドの塩基配列と麻疹ウイルス遺伝子との間にホモロジーは認められず、陽性バンドは麻疹ウイルスに由来するものではないことが明かとなった。すなわち、麻疹ウイルスがCrohn病の病因に関与している可能性は極めて低いものと結論された。クローン病の病因となる未確認病原体を抽出するアプローチ方法として,簡易的に糞便より遺伝子RNAを抽出する方法と病変部組織より行う方法を考えた.はじめにクローン病患者の糞便中より,フェノールクロロホルム抽出法,エタノール沈澱法にて核酸を抽出し,電気泳動による解析を行ったが既存のウイルスの遺伝子はみつからなかった.一方,病変部組織の検討を行うため,クローン病患者7例(手術例3例を含む)より試料を採取し凍結保存した.組織からの遺伝子(RNA)の抽出は,フェノールクロロホルム法にグラスパウダーを用いたRNaidにて行っているが,ロタウイルスを用いた予備実験では,ゲノムRNAの回収において良好な成績が得られた.抽出したRNAの解析方法として1)クローン病の病因になんらかの関係があると考えられている既知のウイルス,バクテリアの遺伝子シークエンスを検討し,その一部を鋳型としたオリゴヌクレオチドプライマーを作成し,polymelase chain reaction(PCR)法により検討する方法. 2)病原体が未知のウイルスなどであることを想定し,その同定のため抽出したRNAをファージλgt11や,カセットプライマーを用いてクローニングし,患者血清にてイムノスクリーニングを行う方法を考えた.現在1)は,検討対象となる病原体遺伝子シークエンスを遺伝子バンクより取り出し,そのシークエンスに最適なプライマーを作成中である.2)は,カセットプライマー法の基礎実験を終了した段階で,またイムノスクリーニングに使用する患者血清を蓄積中である.今後1)2)の方法を平行して進めていく予定であるが,現段階ではその成績はいずれも発表に至っていない.Crohn病の病態は、素因のある個体に未確認の物質(抗原)が刺激となって異常な免疫反応の結果惹起されると考えられている。この目的達成のため、現在2つのアプローチ法により研究を進めている。

第1のアプローチ法は、Crohn病病変部腸組織および正常腸組織を用いてサブトラクション法によりCrohn病に特異的なcDNAライブラリーを作成し、Crohn病患者の血清等によりイムノスクリーニングを行ない、Crohn病の病因に関与していると考えられる物質を同定する方法である。現在研究はcDNAライブラリーの作成がほぼ完了した段階にあり、今後イムノスクリーニングを進めていく予定である。第2のアプローチ法は、現在Crohn病の病因として疑われている物質に焦点を当て、それが真にCrohn病の病因に関与しているか否かを遺伝子レベルで証明することである。われわれは第2のアプローチ法においては、現在麻疹ウイルスに焦点を当て研究を進めている。すなわちCrohn病病変部腸組織よりRNAを抽出し、麻疹ウイルス遺伝子に特異的なプライマーを用いてRT-PCRを行ない、Crohn病病変部より麻疹ウイルス遺伝子を同定する実験を行なっている。現在研究はRT-PCRを終了し、得られたバンドが真に麻疹ウイルスに由来するものであるか否かを、核酸の塩基配列を決定することにより確認しつつあり、この作業が終了すると、麻疹ウイルスがCrohn病の病因に真に関与しているか否かが遺伝子レベルで明らかにされるものと考えられる。本研究の目的は、分子生物学的方法を用いCrohn病の病因となりうる未確認物質をクローニングし同定することである。この目的達成のため、われわれは2つのアプローチ法により研究を行なった。第1のアプローチ法は、Crohn病患者病変部腸組織よりcDNAライブラリーを作成し、Crohn病患者血清によりイムノスクリーニングを行ない、Crohn病の病因に関与していると考えられる物質を同定する方法である。われわれは、この方法にて、120万個のcDNAをスクリーニングし、63個の陽性クローンを得ることに成功した。現在われわれは、この63個の陽性クローンの全塩基配列を決定すべくさらに研究を進めている。第2のアプローチ法は、現在Crohn病の病因に関与している可能性が強く示唆されている麻疹ウイルスに焦点を当て、それが真にCrohn病の病因に関与しているか否かを遺伝子レベルで証明する方法である。すなわち、RT-PCR法により、Crohn病患者病変部における麻疹ウイルス遺伝子の証明を試みた。われわれは15例のCrohn病患者病変部腸組織よりRNAを抽出し、4種類の麻疹ウイルス構造蛋白遺伝子(Nucleocapsid、matrix、fusion protein、hemagglutinin)に特異的なプライマーを用いてRT-PCRを行なった。その結果、Nucleocapsid遺伝子に特異的なプライマーを用いたRT-PCRにより、全例に陽性バンドが認められた。そのため、われわれは得られたRCR陽性バンドの全塩基配列の決定を行ない、麻疹ウイルス遺伝子とのホモロジーを調べたが、両者間にホモロジーは認められず、陽性バンドは麻疹ウイルスに由来するものではないことが明かとなった。この結果は、麻疹ウイルスがCrohn病の病因に関与している可能性が極めて低いことを示唆するものと考えられた。
ヒト-ブタの関係性からみる人間の家畜への態度とその位置付け

19年度は、前年度までに実施したトンガ王国における長期フィールドワークで得られたデータを整理、分析し、それを国際的な場において発表することに重点を置いて研究を進めた。具体的な成果としては、ブタをはじめとする多くの伝統財が贈与交換された国王葬儀や宗教行事を比較研究し、2007年6月に開催された第21回太平洋学術会議においてContinuity and Change of Gift and Tribute:Spectacular Practice in the Modern Kingdon of Tongaのタイトルで、英語ポスター発表を行った。また、雑誌Research in Economic Anthropologyへ投稿した論文、Economics Emerging Between Religious Faith and Practice:A Microanalysis of a Donation Event in the Kingdon of Tonga(現在査読中)の執筆をおこない、現代のトンガ王国において、依然として顕著な現象として見られる宗教的贈与について、信仰と経済活動とがどのように人びとの日常生活を織りなしているのか、村落調査で得られた詳細なデータをもとに分析、検討した。年度末にはこれまでのトンガ王国での調査をさらに深めるべく、トンガとは地理的、文化的に隣接していながらも、現在はニュージーランドの自治領であることから島内の過疎化が進行しているニウエ島での短期調査を実施し、王制を維持しているトンガとニュージーランド本島の影響を強く受けているニウエ島の生活が、ブタ飼養や贈与交換のありかたなど、さまざまな点においてかなり異なったものであることが確認された。本年度前期は調査地の言語であるトンガ語の習得に主眼を置き、国内での研究活動に専念した。7月にはNGO団体での講演活動をおこない、研究者のみならず広く社会一般の方々に、これまでの研究成果を地域研究の観点から発表させていただいた。また、出版物として、『フィールドワークへの挑戦』[菅原2006]のうちの一章、「生きものを屠って肉を食べる-私たちの肉食を再考する試み」を執筆し、現在進めているトンガにおける豚飼養研究の基礎ともなった、沖縄の豚肉食文化研究の成果を記した。2005年12月初旬から2006年2月初旬にかけては、トンガ王国でのフィールドワークと、ニュージーランドでの資料収集を行った。トンガでの調査は、キリスト教国家であるこの国において、クリスマスから年頭にかけて開催される各種教会行事を参与観察することが目的であった。調査中はそれら行事への参加と参加者へのインタビューに専念すると共に、各世帯における豚飼養に関する基礎データの収集も並行して実施した。そこから得られたデータは、トンガの人びとがどのように豚を評価しているのか、その財として、家畜としての意味を知るための重要な手がかりとなった。また、豚という存在を立脚点として、トンガにおいて盛大に繰り広げられる贈与交換を理解し、総合的な民族誌を書き上げる展望を開くことができた。ニュージーランドのオークランド大学ではトンガ、ポリネシア関連の貴重な文献資料を入手し、精読中である。これら一連の調査の成果発表は、次年度6月開催の文化人類学会での発表、また日本オセアニア学会学会誌"People and Culture in Oceania"に現在投稿準備中である。そして現在は、本年度の成果を踏まえ、次年度の長期フィールドワークに向けての計画を進めている。本年度前期は、昨年度末のトンガ王国におけるフィールドワークで得られたデータ、資料を分析し、そのとりまとめと成果の発表をおこなった。ここでは年末年始にキリスト教会で実施された行事とそれにともなう饗宴、豚をはじめとする食物贈与がいかに実施されたのか、そのデータをもとに、この地においてめまぐるしく繰り広げられる宗教的贈与を検討し、その成果は6月の日本文化人類学会研究大会において「『神への贈与』再考-トンガ王国における教会への献金と献身を手がかりとして-」というタイトルで発表した。その後2006年10月から2007年2月まで再びトンガを訪れ、約5ヶ月間にわたる継続的なフィールドワークを行った。この調査によって、豚をはじめとする伝統材の贈与交換について、共同体、教会、王権社会といった多様な角度からとらえるためのデータが収集された。特に、同年の前国王の崩御にともなう国家規模の儀礼について村レベルでの綿密な聞き取り調査を行ったこと、滞在中に発生した民主化運動に端をなす首都暴動について情報収集したことなどは、ヒト、豚の関係をみる、という基本調査にとどまらず、モダニティの波が急速に押しよせる現代トンガ社会を考察するうえで特に重要な成果となった。この首都暴動と民衆の反応については、帰国後3月の日本オセアニア学会研究大会のフォーラム「現代オセアニアにおける政治的混乱と都市暴動」において「トンガにおける民主化運動と暴動の背景」というタイトルで発表し、政治家、知識人ではない民衆にとっての民主化と改革がどのような意味をもつのか、調査地からのミクロな視点を提示した。これらの18年度の調査で得られたさまざまな研究成果は19年度中に相次いで論文として発表する予定である。

また、雑誌Research in Economic Anthropologyへ投稿した論文、Economics Emerging Between Religious Faith and Practice:A Microanalysis of a Donation Event in the Kingdon of Tonga(現在査読中)の執筆をおこない、現代のトンガ王国において、依然として顕著な現象として見られる宗教的贈与について、信仰と経済活動とがどのように人びとの日常生活を織りなしているのか、村落調査で得られた詳細なデータをもとに分析、検討した。年度末にはこれまでのトンガ王国での調査をさらに深めるべく、トンガとは地理的、文化的に隣接していながらも、現在はニュージーランドの自治領であることから島内の過疎化が進行しているニウエ島での短期調査を実施し、王制を維持しているトンガとニュージーランド本島の影響を強く受けているニウエ島の生活が、ブタ飼養や贈与交換のありかたなど、さまざまな点においてかなり異なったものであることが確認された。
L-セレクチンを介したβ_2-インテグリンのシグナル伝達機構から捉える歯周病病態

我々は以前に,β_2-インテグリン発現異常のある2名の早期発症型歯周炎(EOP)患者を発見した。この研究結果から,β_2-インテグリンは歯周病を規定しているマーカーとなりうることが示唆された。β_2-インテグリン遺伝子を歯周病の遺伝子診断のマーカーとして確立するためには,歯周病患者におけるβ_2-インテグリンのシグナル伝達機構を解析する必要がある。白血球の組織浸潤過程におけるrollingからstickingへの運動は,L-セレクチンを介してシグナルが伝達され,β_2-インテグリンが活性化されることによって誘導されることが分かっている。我々はまず,上記のEOP患者を含む歯周病患者由来のB細胞株を用いて,β_2-インテグリンの発現をL-セレクチンの発現機能との関わりにおいて調べた。被験細胞として,13名の被験者(EOP患者9名および健常者4名)の末梢血から樹立したEBウィルストランスフォームB細胞株を用い,以下の結果を得た。1.無刺激時のL-セレクチンの発現量は,被験細胞株間で差がなかった。β_2-インテグリン発現異常のあるEOP患者を含む4被験細胞では,PMA刺激によるL-セレクチンの発現減少の割合が,健常者を含む他の9被験細胞に比べて少なかった。2.PMA刺激時の上記の4被験細胞では,B細胞培養上清のsoluble L-セレクチン量が健常者を含む他の9被験細胞に比べて少なかった。以上の結果から4名のEOP患者由来のB細胞株は,他のEOP患者および健常者のそれらとはL-セレクチンの発現量に違いがあり,L-セレクチンの発現機序が異なっていると考えられる。本研究において,L-セレクチンを介したβ_2-インテグリンのシグナル伝達機構のなかで,L-セレクチンの発現機能が一般的でないEOP患者4名が存在することが分かったので,それらの病態を規定する遺伝子が分子生物学的に調べるなら,“歯周病関連遺伝子"の解明となる。
PAD4を標的とした好中球細胞外トラップの阻害と炎症性疾患の病態への影響

ペプチジルアルギニンデイミナーゼ4(PAD4)は、核内タンパク質シトルリン化酵素であり、ヒストンH3をシトルリン化して転写を制御する。PAD4は、好中球において高い発現があり、好中球細胞外トラップにおいてヒストンシトルリン化は必須であることが報告されている。本研究では、PAD4欠損マウスを用いて急性肺障害におけるPAD4欠損の影響を調べた。その結果、PAD4欠損により急性肺障害における炎症性サイトカインの発現が顕著に抑制されることが分かった。また、PAD4は炎症性細胞への分化を促進することが示唆された。これらの結果から、PAD4は生体の炎症応答に重要な役割を担うことが示唆された。急性肺障害(ALI)では、肺胞中にエラスターゼなどのタンパク質分解酵素が放出され肺組織が損傷し短時間で死に至る。しかしながらエラスターゼ阻害剤はALIに対する効果が低いことが分かっている。慢性、急性によらず、炎症性疾患では重度の組織障害がその症状を悪化させる。好中球より放出されるプロテアーゼはエラスターゼだけでなく、カテプシンGなど、他にも様々な酵素が存在する。また、好中球細胞外とラップ(NETs)がALIなど様々な炎症性疾患に関与することが近年明らかとなってきた。したがって、NETsを阻害し好中球からの顆粒の放出を抑制することで、組織の損傷を防ぐことができると考えられる。ペプチジルアルギニンデイミナーゼ4(PAD4)によるヒストンシトルリン化は、NETsにおいて重要な制御因子であることが報告されている。本研究の目的は、PAD4の阻害によるNETsの抑制が、ALIにおける組織損傷を防ぐかどうか検討し、関節リウマチ等の自己免疫疾患や他の炎症性疾患も含め、PAD4を標的とした治療応用への可能性を明らかにすることである。現在までに、PAD4欠損マウスにおいてLPSの気管内投与による急性肺障害モデルを作成し、肺における炎症性サイトカインの発現を調べた。その結果、IL-6やIL1bなどのサイトカインの発現が野生型に比べ低いことが明らかとなった。また、肺胞洗浄液中のエラスターゼの活性も同様に低いことが示された。これらの結果は、PAD4欠損により好中球からの顆粒の放出が阻害され、肺組織の炎症が抑えられていることを示唆している。しかしながら、エラスターゼ阻害剤はALIに対する効果が低いことが分かっている。好中球より放出されるプロテアーゼはエラスターゼだけでなくカテプシンGなど、他にも様々な酵素が存在する。また、好中球細胞外トラップ(NETs)がALIなど様々な炎症性疾患に関与することが近年明らかとなってきた。したがって、NETsを阻害し好中球からの下流の放出を抑制することで、組織の損傷を防ぐことができると考えられる。PAD4欠損マウスにおいてLPSの気管内投与による急性肺障害モデルを作製し、肺における炎症性サイトカインの発現を調べた。その結果、IL-6やIL1bなどのサイトカインの発現が野生型に比べ低いことが分かった。また、肺胞洗浄液のエラスターゼ活性も低いことが示された。これらの結果はPAD4阻害により好中球からの顆粒の放出が阻害され、肺組織の炎症が抑えられていることを示唆している。ペプチジルアルギニンデイミナーゼ4(PAD4)は、核内タンパク質シトルリン化

酵素であり、ヒストンH3をシトルリン化して転写を制御する。PAD4は、好中球において高い発現があり、好中球細胞外トラップにおいてヒストンシトルリン化は必須であることが報告されている。本研究では、PAD4欠損マウスを用いて急性肺障害におけるPAD4欠損の影響を調べた。その結果、PAD4欠損により急性肺障害における炎症性サイトカインの発現が顕著に抑制されることが分かった。また、PAD4は炎症性細胞への分化を促進することが示唆された。これらの結果から、PAD4は生体の炎症応答に重要な役割を担うことが示唆された。動物実験はほぼ終わり、後は培養細胞を用いた実験によりPAD4と炎症に関する検証を行っていく。分子細胞生物学培養細胞を用いてPAD4の炎症への関与を検証していく。当該年度中に職場を異動したことにより、実験の進行がやや遅れた。ほぼ全額使用したが、小額残ったため。これまでの実験はLPSを用いていたが、他にもブレオマイシン刺激等による肺障害を検討する。また、今後は、PAD4欠損による肺組織の状態を詳細に観察していく。さらに、培養細胞を用いてPAD4による炎症応答の関与を解析する。実験のための物品費や学会発表時の旅費等に当てる。想定よりも学会発表等に関する旅費がかからなかった。次年度において、物品費あるいは研究成果発表のための費用として使用する。
男女平等教育をめぐる教員研修制度・内容の改善を目指す基礎的調査研究

本研究では,ジェンダーと教育に関する問題を検討する視座として「教員研修」に着目し,都道府県・指定都市・中核市の教育センター(2010年度)を対象に法定研修の内容・項目等に関する調査を実施し,「男女平等教育・男女共同参画」に関する研修の現状と課題を検討した。その結果,実践的内容重視の風潮により,当該研修枠が確保されにくく,実施可能な場合も,「人権教育」等の枠で実践的な意味づけをしながら,研修が設定・実施されるような側面があった。本研究は、男女平等教育に関する教員研修プログラムに着目し、(a)教育行政における教員研修の実際(マクロ分析)、(b)教師個人の文脈での男女平等教育実践の実際(ミクロ分析)を調査により明らかにするものである。これにより、教員研修の実際と教育現場の課題の「ねじれ」を明らかにし、教育行政の男女平等教育に関する研修プログラムの批判的検討とジェンダー研究に依拠した教師文化論からの教員研修の課題を提案することを試み、「ジェンダーと教育」研究と教育現場の「協働」の構築を提案する。本年度においては、上記(a)教育行政における教員研修のマクロ分析として、「男女平等教育の実現を目的とした「教員研修」に関するデータ・資料の全体図の作成」を目指し、以下に示すような、都道府県・政令都市・中核市別のデータ・資料の収集を行った。第一に、教員研修のうち、男女平等教育やジェンダーの視点からの教育と関連する資料として、研修実施要領や要項の提供を依頼、協力対象県市からの情報提供を得た。また、該当研修が設定されていない場合、そのことについて研修担当者にヒアリング調査を行った。第二に、上記と併せて、調査協力を頂いた県市を対象に、教員研修における「男女共同参画」「男女平等教育」の位置づけや実際の講義・講演内容、県市での課題の状況について質問紙調査を行った。また、ジェンダーに敏感な視点からの教員研修項目の現状について、既存資料や先行調査等で明らかになった点について、紀要や学術学会で発表・報告した。これにより、教員研修の実際と教育現場の課題の「ねじれ」を明らかにし、教育行政の男女平等教育に関する研修プログラムの批判的検討とジェンダー研究に依拠した教師文化論からの教員研修の課題を提案することを試み、「ジェンダーと教育」研究と教育現場の「協働」の構築を提案することを目指す。本年度においては、前年度までに教育センターを対象に実施した「電話調査」及び「質問紙調査」をもとに、次のように研究を遂行した。すなわち、上記(a)教育行政における教員研修のマクロ分析については、男女平等教育・男女共同参画に関する研修の現状を分析し、(b)男女平等教育・男女共同参画に関する研修・教育実践の実際等に関するミクロ分析については、調査データ及び研修資料などをもとに、研修をめぐる現在の状況を整理した。具体的には以下のとおりである。第一に、都道府県・政令指定都市・中核市の教育センターから得られた教員研修の実態に関する調査データをもとに、統計的手法を用いて、男女平等教育・男女共同参画に関する研修の内容・項目、研修の位置づけなど、当該研修の現状を分析した。第二に、県市の特徴と併せて、各県市から得られた当該研修をめぐる状況についての資料や個別の電話によるインタビュー調査から得られた知見を整理した。以上から、当該研修の実施や設定をめぐる教育センター(教育行政側)の状況について、その特徴や現状を明らかにした。これらの成果は、日本教育社にて報告した。本年度は、前年度までに教育センターを対象に実施した「電話調査」及び「質問紙調査」をもとに、次のように研究を遂行した。すなわち、(a)に関する男女平等教育・男女共同参画に関する研修の現状分析と、(b)男女平等教育・男女共同参画に関する研修・教育実践の実際等に関する調査データ及び研修資料などをもとに、研修をめぐる現在の状況に関する最終的な整理を行った。具体的には次のようである。第一に、都道府県・政令指定都市・中核市の教育センターから得られた教員研修の実態に関する調査データをもとに、統計的手法を用いて、男女平等教育・男女共同参画に関する研修の内容・項目、研修の位置づけなど、当該研修に関する再検討を行った。第二に、県市の特徴と併せて、各県市から得られた当該研修をめぐる状況についての資料や個別の電話によるインタビュー調査から得られた知見を整理し、上記と照らしあわせて最終的な成果をまとめた。

以上から、「男女平等教育・男女共同参画」に関する教員研修の実施状況の実施や研修の設定をめぐる教育センター(教育行政側)について、その特徴や現状を明らかにするとともに、課題を明らかにした。これらの成果は、北海道教育大学紀要(教育科学編)第63集にまとめた。本年度までに実施予定のデータ収集及びヒアリングについては、十分に実施できている。また、それらをもとにした分析から得られた知見は関連学会で報告した。24年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、調査データ分析によって、男女平等教育・男女共同参画に関する教員研修の実施や設定に関する現状が明らかになってきた。それと同時に、当該研修の実施・設定の困難な側面と、今後の研修の広まりにつながる可能性のある側面も示唆されつつある。今後は、これらの点についてさらに焦点を当てて研究を遂行するつもりである。
タンパク質立体構造の比較・予測・デザイン

博物学グループ(郷、由良、輪湖、美宅、西川、梅山):2次構造の空間配置に着目した立体構造の比較による分類によって「類似立体構造に進化・機能的類縁関係が認められない場合、その立体構造には分子内点対称性がある」という「対称性ルール」を発見した(郷)。ポリメラーゼと転写因子に共通して見られるりん酸結合モジュール、ペルオキシダーゼの基質特異性を決定するモジュールを発見した(由良)。微細な原子レベルの類似性を同定する方法によってまったく異なった全体構造の中に共通の構造を持つ機能部位(ATP結合部位)を発見することができた(郷)。部分構造(モチーフ)を環境の情報を含んだ形でコード表現する方法を開発した(輪湖)。Thredingの評価関数(3D-1Dポテンシャル)を使ってグロビンの保存残基を解析し、Threding法による2次構造予測法の開発を行い高い精度を上げることを証明した(西川)。一方、膜タンパク質の立体構造予測では、バクテリオロドプシンの立体構造を正しく予測する方法論を確立した(美宅)。自動的に高精度でホモロジーモデリングをするプログラムシステムの構築を完成させた(梅山)。デザイングループ(石森、四方):カタラーゼに対するランダムなアミノ酸変異の実験から、熱安定性、活性、はアミノ酸置換に対して極めてrobustであり、進化工学的機能最適化は、鎖長を長くすることによる配列空間の増大により、飛躍的な向上をもたらすことができることが分かった(四方)。モジュールを入れ替えたヘモグロビンのキメラタンパク質(モジュール置換タンパク質)の機能・構造を研究によって、ヘモグロビンの機能はモジュールを構造単位として実現していることが示された(石森)。1.「比較・予測」タンパク質のアミノ酸配列・立体構造のデータベースにアクセスし、1)アミノ酸配列・立体構造を比較する事により合理的な分類法を確立し、2)その知見に基づき立体構造予測法を開発する。このことを目的とし、以下の研究を行った。相同蛋白質の立体構造を比較し、アミノ酸残基の欠失/挿入位置と頻度との相関関係を見いだしそれに基づくアラインメント法を開発し、膜貫通型チロシンフォスファターゼに適用し予測された構造から生物学的知見を得た。(野口)蛋白質2次構造要素の空間的配置の比較法を開発し、グルタチオン合成酵素等と類似な部分構造を検索し、検出された部分構造の機能的意義について議論した。(郷)相同蛋白質の立体構造の動的な性質に着目した分類法をファージ434Croとリプレッサーに試みた結果、立体構造の微妙な違いが動的構造に大きく反映されることを見いだした。(輪湖)膜蛋白質の立体構造をヘリックス間の極性相互作用に着目して予測する方法を開発し、ロドプシンの構造を予測した。膜蛋白質の一次配列のデータベースの作成を開始した。(諏訪)環境情報を付加した側鎖構造のライブラリーを作成し、血液凝固系第VIIa因子のホモロジーモデリングを行い、その阻害因子との親和性について価値ある知見を得た。(梅山)2.「デザイン」タンパク質立体構造の構築原理を、新しいタンパク質をデザインし、実際にそのタンパク質を作ることによって、合成的に検証する。この目的のために、遺伝子工学による変異リゾチームや抗体の作成を行い、「安定性・ダイナミックス・折れたたみ機構」班と共同して構造安定性の解析を行った。(熊谷)また、ヘモグロビンαサブユニットとミオグロビンのモジュール置換によるキメラ体の作成に成功し、それがβサブユニットと2量体を形成することを確認した。(森島)本重点領域計画班「比較・予測・デザイン」は二つのグループ、「比較・予測」と「デザイン」からなる。「比較・予測」

グループ:このグループの課題はデータベース中に大量に蓄積されているタンパク質の立体構造を用いて、(1)それらを比較することにより立体構造を「基本型」に分類し、(2)その知見に基づいて立体構造予測法を開発することである。これまで立体構造の分類と構造予測法の開発を行ってきたが、本年度はそれらを応用する段階に入った。異なる立体構造を持つ一群のタンパク質に同一の立体構造を持つ機能部位を発見した(郷)、二つのまったく異なる配列を持つタンパク質が類似立体構造を持つことを発見した(西川)、類似立体構造の動的構造の違いを示した(輪湖)、というような成果が得られた。方法論のとしても、比較、予測の方法の改良、拡張を行うとともに(郷、西川)、側鎖構造の予測(梅山)、膜タンパク構造の予測(諏訪)の方法論が完成し、応用への段階に入った。「デザイン」グループ:このグループの課題は、「比較・予測」グループ及び「安定性・ダイナミクス・折れたたみ」班(A02班)の研究によって明らかにされたタンパク質立体構造の構築原理に基づいて人工的なタンパク質をデザインし、実際にそのタンパク質を作ることによって原理を検証することにある。これまでに多くの種類の変異タンパク質を作成しその安定性を議論してきた。本年度は、ファージディスプレイによるランダム配列をA02班で最もよく研究されているリゾチームに導入することに成功し、リゾチームの安定性と機能についての最適アミノ酸配列を探索する方法を確立した(熊谷)。また「比較・予測」グループの提出した基本的な構造単位である「モジュール」の概念をキメラタンパク質として実現したモジュール置換ミオグロビンを作成し、「モジュール」という構造単位が機能に果たす役割を解明した(森島)。本研究班「比較・予測・デザイン」は二つのグループ、「比較・予測」と「デザイン」からなる。「比較・予測」このグループの課題は、データベース中に大量に蓄積されているタンパク質の立体構造を用いて、〔1〕それらを比較することにより立体構造を「基本型」に分類し、〔2〕その知見に基づいて立体構造そしてその機能を予測する方法を開発することである。9年度は、今まで2年間の成果である分類で得られた基本構造を種々の構造レベルで記述した。記述のレベルは、全体構造レベル(木寺)、部分構造レベル(輪湖)、モジュールレベル(由良)、原子レベル(郷)の4種類である。そして、その基本構造の結果を用いた構造予測法を開発した。構造予測法は、大まかな立体構造を予測するthreading(西川)、類縁タンパク質の立体構造を予測するホモロジーモデリング(横山)、膜タンパク質の膜貫通へリックスの配置を予測する方法(美宅)である。「デザイン」このグループの課題は、「比較・予測」グループ及び「安定性・ダイナミクス・折れたたみ」班(A02班)の研究によって明らかにされたタンパク質立体構造の構築原理に基づいて人工的なタンパク質をデザインし、実際にそのタンパク質を作ることによって原理を検証することにある。9年度は、モジュール置換タンパク質の安定性、立体構造の解析(石森)、ラクトアルブミンのアミノ酸置換による立体構造と安定性とアミノ酸を変異したリゾチームと抗体との相互作用の解析(熊谷)、ランダム配列のタンパク質の物性と配列との相関の解析(四方)を行った。
降圧系生理活性ペプチドの機能増強個体の臨床疫学的同定と解析

本研究の仮説は、降圧ペプチドのANP、BNPおよびアドレノメデュリン(AM)の血中濃度が高値を示し、心血管・腎臓疾患を発症しない「降圧ペプチド機能増強個体」の存在である。本事業では、住民健診をとおした機能増強個体の同定と機能増強の機序解明を試みた。降圧ペプチド濃度と血圧変化との関連の解析により、相対的にANPやBNP濃度が高く、高血圧を発症しない個体の存在が観察された。現在、同成果を基盤に対象者数を増やしつつ追跡調査中である。一方、慢性腎臓病(CKD)発症との関連の検索により、降圧ペプチド濃度が高い住民からのCKD発症が高頻度であることが判明し、CKDマーカーとして有用である可能性が判明した。アドレノメデュリン(AM)および心房性と脳性ナトリウム利尿ペプチド(ANPとBNP)は、降圧ペプチドであり、高血圧、心血管疾患および腎疾患の発症進展に対して抑制的に作用する。これらの血中濃度は、血圧上昇や疾患重症度に関連して上昇するが、濃度上昇や機能が不十分であることが1つの要因となり、結果として高血圧や心血管・腎疾患を発症すると考えられている。一方、降圧ペプチドが必要かつ十分に機能して、これらの疾患を発症しない「機能増強個体」を同定したとの報告はない。本研究では、健診受診者のなかから、AM、ANPまたはBNPの機能が十分に発揮され、高血圧や心血管・腎疾患を発症していないと判断される健常人(降圧ペプチド機能増強群)の同定を試みる、そのうえで、循環調節因子のプロフィールを含めて機能増強群の臨床的特徴を明かにし、機能増強に関する循環生理学的および遺伝的分子生物学的背景を解明することを目的としている。平成24年度までに、代表者らは、1)地元自治体の健康診査受診者を対象に、研究実施に関する書面同意を得て、降圧ペプチド測定のための採血を実施した(n=248)。2)既に採血して保管されている血漿サンプルのAM、ANP、BNP、NTproBNPの測定を行った(n=1015)。3)AM、ANP、BNP、NTproBNPの測定結果と健診より得られた臨床データを基に、解析の基盤となるデータベースを構築した。そのうえで、慢性腎臓病(CKD)の発症をエンドポイントに、7年間の追跡調査をした。Kaplan-Meier解析およびCox解析により、ANP高値はCKD発症と関連していることが判明した。現在、ANPが高値であり、かつCKD発症無しの対象者の臨床的特徴を解析中である。心房性と脳性ナトリウム利尿ペプチド(ANPとBNP)およびアドレノメデュリン(AM)は、降圧ペプチドであり、高血圧や心血管・腎臓疾患の発症進展に対して抑制的に作用する。本研究では、これらの降圧ペプチドの血中濃度が高値を示し、心血管・腎臓疾患を発症しない「降圧ペプチド機能増強個体」を、地元自治体住民の健診事業をとおして同定し、機能増強の機序を解明することを目指した。地元自治体の健診受診者の降圧ペプチド濃度を測定して、血圧およびその後の血圧変化との関連を解析したところ、血圧に対して相対的にANPまたはBNP濃度が高く、高血圧を発症しない個体の存在が観察された。一方、慢性腎臓病(CKD)の発症と降圧ペプチド濃度の関連を検索する過程で、降圧ペプチド濃度が高い住民からのCKD発症が高頻度であることが判明した。以上、降圧ペプチド機能増強個体の同定には至っていないが、本研究にて得られた成果を基盤にして、研究コホートのサンプル数を増やしつつ追跡調査を継続中である。一方、降圧ペプチド濃度とCKD発症の関係より、降圧ペプチド濃度がCKD発症のマーカーとして有用である可能性が判明した。研究背景:アドレノメデュリン(AM)および心房性と脳性ナトリウム利尿ペプチド(ANPとBNP)は、降圧ペプチドであり、高血圧、心血管疾患および腎疾患の発症進展に対して抑制的に作用する。これらの血中濃度は、血圧上昇や心血管・腎疾患の重症度に関連して上昇するが、濃度上昇や機能が不十分であることが1つの要因となり、結果として高血圧や心血管・腎疾患を発症し進展させると考えられている。一方、降圧ペプチドが必要かつ十分に機能して、高血圧や心血管・腎疾患を発症しない「機能増強個体」を同定したとの報告はない。研究目的:1)健診受診者のなかから、AM、ANPまたはBNPの機能が十分に発揮され、高血圧や心血管・腎疾患を発症していないと判断される健常人(降圧ペプチド機能増強群)の同定を試みる、2)循環調節因子のプロフィールを含めて機能増強群の臨床的特徴を明かにする、3)機能増強に関する循環生理学的および遺伝的分子生物学的背景を解明する。

研究方法:地元自治体の健康診査受診者を対象に、血中AM、ANP、BNP濃度を測定して、35年間、毎年、同健診により追跡調査し、降圧ペプチド濃度が一定レベル以上に上昇し、かつ観察期間中に高血圧、心血管疾患および腎疾患を発症しない住民(増強群)を検索する。そのうえで、増強群の循環生理学的、代謝内分泌学的、臨床および分子遺伝学的背景の検索を試みて、降圧ペプチドの機能増強の機序解明を目指す。1)解析の基盤となるデータベースを構築し、データベースのvalidityを確認することができた。2)慢性腎臓病(CKD)の発症をエンドポイントとした追跡調査の解析結果が得られた。降圧ペプチドの測定とデータベースの構築:1)地元自治体の健康診査受診者を対象に、研究実施に関する書面同意を得て、降圧ペプチド測定のための採血を実施した(n=109)。2)既に採血して保管されている血漿サンプルのAM、ANP、BNP、NTproBNPの測定を行った(n=623)。3)AM、ANP、BNP、NTproBNPの測定結果と健診より得られた臨床データを基に、解析の基盤となるデータベースを構築した。解析結果と考察:上記3)で得られたデータベースを用いて、測定結果の妥当性の検討を行った。1999年、2008年、2009年に得られたサンプルの測定結果に関して、AMは年齢、BMI、血清クレアチニン値と正に相関し、ANP、log(ANP)、BNP、log(BNP)、NT-proBNP、log(NT-proBNP)と年齢、収縮期血圧との間に正の相関関係が観察された。すなわち、従来観察されている統計的関係が再現性をもって観察され、データベースのvalidityが確認された。1)健康診査時に得られた血漿サンプルのうち、未測定の血漿AM、ANP、BNP、NTproBNP濃度を、IRMA、CLEIAまたはECLIAを用いて測定する。2)測定結果を用いてデータベースを構築し、サンプルサイズを大きくする。3)構築したデータベースを用いて、AM、ANPまたはBNPの機能が十分に発揮され、高血圧、心血管疾患および腎疾患を発症していないと判断される健常人(機能増強群)の同定を試みる。4)機能増強群の循環調節因子のプロフィールを含めて機能増強群の臨床的特徴を明かにする。2)上記測定のための試薬やチューブ等の消耗品購入(400千円)3)データ処理およびデータベース構築のための謝金(100千円)4)研究打合せおよび研究発表のための旅費(100千円)1)血漿AM、ANP、BNP、NTproBNP濃度のIRMA、CLEIAまたはECLIAによる測定(300千円)2)上記測定のための試薬やチューブ等の消耗品購入(400千円)3)データ処理およびデータベース構築のための謝金(100千円)4)研究打合せおよび研究発表のための旅費(100千円)
認知症高齢者を介護する家族介護者の離職に関する現状分析とサポートシステムの構築

認知症高齢者を介護する家族が介護に対するポジティブな感情を抱く経験が、仕事と介護とを両立させていく上での重要な要因となっている可能性が伺えた。特に、介護者が介護を始める以前から現在に至るまで変わらずに一貫してその人らしくあり続けられているという実感と、さらに、介護に関する様々なストレスがあっても、それを乗り越えているという克服体験としての実感が得られているということが、離職をはじめとする様々な介護上の課題に対し、ポジティブに向かう重要な要因であることが示された。これらの視点がどのようなサポートとして具体的に企業や地域において実現可能であるのかを明らかにしていくことが今後の課題である。平成25年度においては、介護離職を経験した方々への聞き取り調査を行い、介護離職に至った状況や離職に至るまでの経緯を明らかにしていくことを目標においた。親や親族の介護問題は一夜にして生じる状況ではなく、介護という状況を引き受けてから離職という決断をするまでのプロセスには、様々な契機やそこにおける個々の対処などがあったはずである。そうした介護離職に至るプロセスの特徴を明らかにし様相を描き出す事が出来れば、介護という状況が始まったとしても仕事を続けていく事が可能となる対策等の手がかりが得られると考えている。今年度は当初の計画に従い、介護離職を経験した4名の方々にインタビューを行った。対象者は、母親を介護していた男性1人、父親を介護していた女性2人、母親を介護していた女性1人であり、IT企業の研究所、大学事務職、飲食関連、生産関連企業に勤務していた方々である。インタビューの内容としては、介護者本人の基本的属性をはじめとし、要介護者の状況とその変化、介護の始まりと経緯、さらに介護と仕事の両立に関して困難だったことや相談先、社内制度の活用等の内容を半構造的な面接により聞き取りを行った。現在、インタビューした内容を逐語録に起こし、その内容を整理分析中である。その中で、介護に関わる家庭内での様々な出来事に対してのコミットメントレベルが、ある出来事を契機に高まることがあること、社内における相談相手があまり存在していないこと、また、積極的に社内の同僚に相談を持ちかける事もないということ、休職などの社内制度をあまり活用していないこと、活用したとしても職場復帰に様々な障害もあること、診察をしている医師など医療機関の対応に大きな影響を受けていることなどが明らかとなってきている。今後は、これらの結果をさらに精査・整理し、重要なポイントをまとめつつさらにインタビューを積み重ねていく計画である。平成26年度は、介護離職に至った状況や離職に至る経緯の明確化を目標に、前年度に行った介護離職を経験した方々へのインタビュー調査をさらに積み重ね、介護離職に至る様々な契機や個々の対処方法などの特徴を明らかにし、離職せずに仕事を継続していくための手がかりを導き出す計画であった。しかし、前年度インタビューの内容分析を進める中で、離職経験者もそうでない対象者も、抱える状況が様々と多岐にわたり、その中で共通する特徴や影響要因を導き出すことは非常に困難であり、インタビュー調査を重ねるだけその多様性が拡大していくことが懸念された。そこで、平成26年度においては分析の中から見えてきた介護離職に至る経過に影響をあたえる一要因に着目して調査を行い、分析を進めていくこととした。その要因とは、介護家族が抱くポジティブ感情である。介護離職に関するインタビュー調査において、介護に関して似たような状況にあっても仕事を辞める人と辞めない人がいること、また、似たような状況あっても、介護に対して異なる思いを抱く状況があることがわかってきた。すなわち、認知症高齢者への介護が仕事を圧迫し始める状況に置かれた時においても、その人が介護に対してどのような感情を抱いているのかという捉え方によって、その後の対応や経緯に大きな違いが表れてくる可能性が考えられたのである。そこで平成26年度は、認知症高齢者を介護する介護家族が、実際に介護を通してポジティブな感情を抱くことがあるのか、またどのような時に「介護をしていて良かった」といった感情を抱くのかを調査し、分析を行った。結果、約半数近くの対象者が介護をしていてうれしいと感じるようなプラス感情を抱く経験をしており、介護者に対する被介護者への笑顔や労いの言葉などが、介護に対するプラス反応を感じる時である事がわかった。この結果については、第15回日本認知症ケア学会で報告を行った。最終年度である平成27年度は、平成26年度に行った介護経験から得られるポジティブ感情に関する調査の結果を受け、認知症と生きる人を介護する家族が、介護というストレスフルな体験からどのような内的変化を起こしているのか、その実情をポジティブな変化という視点から捉えていく調査と分析を行った。このことは、離職に至るような介護経験をしている家族の中にも、「介護をしていて良かった」といったポジティブな感情を有していることが離職の抑止力となる可能性が平成26年度の調査結果から伺えたための発展的調査であった。今年度の調査における調査項目としては、「ストレス関連成長」という家族の介護経験を通じた自己成長感に着目し、一般性自己効力感、首尾一貫性感覚、健康レベルや介護環境などの要因との関係性を明らかにすることから、介護経験からの内的変化に家族支援の手がかりを見出していくことを目指した。調査は、認知症の人を支える家族の会に所属する介護家族500名を対象に実施した。その結果、介護経験を通じて対象者が自己成長感を少なからず感じている状況が明らかとなった。また、現在介護を続けている家族と、以前に介護を行っていた経験のある家族とでは、同じ自己成長感を示しているように見えてもその具体的な内容に違いがあることも明らかになった。