hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
燃料電池材料の電子密度分布と核密度分布の温度変化

燃料電池とは化学エネルギーを電気エネルギーに直接変換する電気化学デバイスである。発電効率が高く,有害な排出ガスも殆ど無いため環境問題やエネルギー問題を解決するキーテクノロジーとして期待されている。燃料電池は電解質に用いる材料により分類されるが,電解質に酸化物を用いる固体酸化物燃料電池(Solid Oxide Fuel Cells,以下SOFCと略す)は高温で動作するため他の燃料電池と比べて電気への変換効率が高く、各国で研究開発が活発に行われている。SOFCの電解質には,高温で酸化物イオン(O^<2->)が高速で伝導する酸化物イオン伝導体を用いる。このような酸化物イオン伝導体では酸化物イオンの位置が局在化しておらず広く分布して伝導すると考えられてきた。したがって,より良いSOFCの電解質の開発と特性の向上には,酸化物イオンの分布や伝導経路を含めた精密な結晶構造の解析が必要である。しかしながら,酸化物イオンの分布と伝導経路に関する既往の研究は不十分であった。その原因は従来の結晶構造モデルでは複雑な分布を正確に調べることができなかったことにあると考えられる。一方、最大エントロピー法(MEM)を用いれば,中性子回折データから核密度(厳密には散乱振幅密度)分布を得ることができる。複雑な核密度分布を調べるには原子変位パラメータの高次項を用いるか、あるいは原子位置をいくつかに分割して分布を表現する分割原子(split-atom)モデルが用いられてきた。一方、MEM解析では対称性を満たす任意の核密度分布を求めることができるという利点がある。したがって、空間群さえ正確に指定すれば、複雑なモデルを考える必要性はあまり無い便利な手法である。そこで酸化ビスマス、セリア、ランタンガリウム酸塩などの燃料電池材料を中性子回折や放射光X線回折により研究した。燃料電池は電解質に用いる材料により分類されるが,電解質に酸化物を用いる固体酸化燃料電池(Solid Oxide Fuel Cells,以下SOFCと略す)は高温で動作するため他の燃料電池と比べて電気への変換効率が高く、各国で研究開発が活発に行われている。SOFCの電解質には,高温で酸化物イオン(O<2->)が高速で伝導する酸化物イオン伝導体を用いる。したがって,より良いOFCの電解質の開発と特性の向上には,酸化物イオンの分布や伝導経路を含めた精密な結晶構造の解析が必要である。一方、最大エントロピー法(MEM)を用いれば,中性子回折データから核密度(厳密には乱振幅密度)分布を得ることができる。複雑な核密度分布を調べるには原子変位パラメータの高次項を用いるか、あるいは原子位置をいくつかに分割して分布を表現する分割原子(split-atom)モデルが用しられてきた。したがって、空間群さえ正確に指定すれば、複雑なモデルを考える必要性はあまり無い便利な法である。

燃料電池は電解質に用いる材料により分類されるが,電解質に酸化物を用いる固体酸化物燃料電池(Solid Oxide Fuel Cells,以下SOFCと略す)は高温で動作するため他の燃料電池と比べて電気への変換効率が高く,各国で研究開発が活発に行われている。SOFCの電解質には,高温で酸化物イオン(O^<2->)が高速で伝導する酸化物イオン伝導体を用いる。このような酸化物イオン伝導体では酸化物イオンの位置が局在化しておらず広く分布して伝導すると考えられてきた。したがって,より良いSOFCの電解質の開発と特性の向上には,酸化物イオンの分布や伝導経路を含めた精密な結晶構造の解析が必要である。しかしながら,酸化物イオンの分布と伝導経路に関する既往の研究は不十分であった。その原因は従来の結晶構造モデルでは複雑な分布を正確に調べることができなかったことにあると考えられる。一方,最大エントロピー法(MEM)を用いれば,中性子回折データから核密度(厳密には散乱振幅密度)分布を得ることができる。複雑な核密度分布を調べるには原子変位パラメータの高次項を用いるか,あるいは原子位置をいくつかに分割して分布を表現する分割原子(split-atom)モデルが用いられてきた。一方,MEM解析では対称性を満たす任意の核密度分布を求めることができるという利点がある。したがって,空間群さえ正確に指定すれば,複雑なモデルを考える必要性はあまり無い便利な手法である。そこで酸化ビスマス,セリア,ランタンガリウム酸塩などの燃料電池材料を中性子回折や放射光X線回折により研究した。
流体問題における粘性係数依存性を克服する有限要素スキームとその高速求解法の確立

本研究では,流体の運動を記述するナヴィエ・ストークス方程式と関連するオセーン方程式のための有限要素法の開発とその誤差評価を扱っている.特に,粘性係数が小さい問題を考察している.このような場合,高精度な有限要素解を得るためには,境界層を補足し,上流型スキームの考察をするだけでは十分ではない.粘性係数依存性を排する数値解の誤差評価を得るためには,流速と圧力を近似する有限要素空間を適切に選択する必要がある.一方,問題のサイズが巨大になると,計算機に要求されるメモリーの容量も大きくなるので,行列のサイズを小さくする工夫も必要とされる.本年度は,オセーン方程式のためのラグランジュ・ガレルキン法/圧力安定化法/射影法の結合手法を開発し,粘性係数依存性を排する誤差評価を導いた.区分1次多項式を用いるラグランジュ・ガレルキン/圧力安定化法は国内研究者らにより提案され,報告者により,高精度化され,粘性係数を排する誤差評価が導出されていた.本研究ではこれを射影法と結合させた.流速と圧力を分離して扱うことができ,離散化された連立一次方程式に現れる行列サイズを小さくすることができた.粘性係数が小さいテスト問題に対する数値実験を行い,提案スキームの方が良好であることを確認した.粘性係数が小さい問題に対する実用向きの高精度スキームができたといえる.一方,研究開始以前より着手していた,流速と圧力を連立させるスキームに関しても,圧力の時間に関する原始関数の粘性係数依存性を排する誤差評価を新たに導出した.射影スキームの作成,その粘性係数に依存しない誤差評価,プログラムの作成と数値実験の進捗は想定通りであった.これらのことにより,研究はおおむね順調に進展していると判断した.高速連立一次方程式ソルバーを実装する.本年度作成した射影法は流速と圧力に問題を分離できるという特長はあるが,圧力に関する離散化されたポアソン方程式の求解を必要とし,流速に関するそれと比較して,反復解法の収束に時間がかかる.従来の流速と圧力を連立させる混合型有限要素法の数値解の求解においても,それを考慮した前処理手法を考える必要がある.これらを改善する,連立一次方程式ソルバーと前処理の実装,さらに,離散化の方法の見直しを行う.本研究では,流体の運動を記述するナヴィエ・ストークス方程式と関連するオセーン方程式のための有限要素法の開発とその誤差評価を扱っている.特に,粘性係数が小さい問題を考察している.このような場合,高精度な有限要素解を得るためには,境界層を補足し,上流型スキームの考察をするだけでは十分ではない.粘性係数依存性を排する数値解の誤差評価を得るためには,流速と圧力を近似する有限要素空間を適切に選択する必要がある.一方,問題のサイズが巨大になると,計算機に要求されるメモリーの容量も大きくなるので,行列のサイズを小さくする工夫も必要とされる.本年度は,オセーン方程式のためのラグランジュ・ガレルキン法/圧力安定化法/射影法の結合手法を開発し,粘性係数依存性を排する誤差評価を導いた.区分1次多項式を用いるラグランジュ・ガレルキン/圧力安定化法は国内研究者らにより提案され,報告者により,高精度化され,粘性係数を排する誤差評価が導出されていた.本研究ではこれを射影法と結合させた.流速と圧力を分離して扱うことができ,離散化された連立一次方程式に現れる行列サイズを小さくすることができた.粘性係数が小さいテスト問題に対する数値実験を行い,提案スキームの方が良好であることを確認した.粘性係数が小さい問題に対する実用向きの高精度スキームができたといえる.一方,研究開始以前より着手していた,流速と圧力を連立させるスキームに関しても,圧力の時間に関する原始関数の粘性係数依存性を排する誤差評価を新たに導出した.射影スキームの作成,その粘性係数に依存しない誤差評価,プログラムの作成と数値実験の進捗は想定通りであった.これらのことにより,研究はおおむね順調に進展していると判断した.高速連立一次方程式ソルバーを実装する.本年度作成した射影法は流速と圧力に問題を分離できるという特長はあるが,圧力に関する離散化されたポアソン方程式の求解を必要とし,流速に関するそれと比較して,反復解法の収束に時間がかかる.従来の流速と圧力を連立させる混合型有限要素法の数値解の求解においても,それを考慮した前処理手法を考える必要がある.これらを改善する,連立一次方程式ソルバーと前処理の実装,さらに,離散化の方法の見直しを行う.本年度にメモリー容量が大きい計算機の購入を計画していた.しかし,本年度に作成した射影有限要素法により,メモリー使用量を想定よりも小さく抑えることができ,本年度に行った数値計算は,すでにある計算機で実行可能だった.本年度購入予定だった計算機を次年度に購入し,連立一次方程式ソルバーの研究と合わせ,より規模が大きい数値計算を行う.
自航型・ハイブリッド構造による海洋浮体の基本計画に関する企画調査

本研究で対象とする「自航型・ハイブリッド構造による海洋浮体」は、従来の浮体式構造物よりもはるかに大型であること、複数のユニットからなる連結体であること、自航型であること等の特徴を有している.この海洋浮体を設計する際に重要となるであろう項目を洗い出し、それらについて検討した結果を以下に要約する.1)推定外力については、風、浪、地震によるものがある.風浪に対しては観測データを元に、ある程度の予測は可能であるから、開発初期には観測データの豊富な海域に設置すべきである.2)繋留は風浪に対する剛体運動を抑制するが、地震に対しては伝播経路ともなるので注意が必要である.連結浮体を繋留するためにはドルフィンダンパ方式が最有力であるが、地震に対する免震構造を採用する必要がある.3)連結浮体の構造安全性や居住性に関する過去の研究はほとんどなく、本海洋浮体については特に、複数浮体による相互影響、さらには設置海域境界条件を考慮した動揺性能推定法を開発する必要がある.また、繋留免震構造による影響も評価せねばならない.4)飛沫帯保護及び経済性の観点からは浮体の静的挙動に対してハイブリッド型構造は有力な候補であるが、疲労強度の観点からは現状では必ずしも自航型に適しているとは言い難い.よって、主機搭載浮体だけは鋼構造とするか、もしくはずれ止めに一層の工夫を加える必要がある.5)しかし、軟着底による浮体の繋留も可能なハイブリッド型構造も捨てがたい.その際には、底の状態(例えば岩盤なのかヘドロなのか)と地震との関係も調査する必要がある.6)浮体ユニット洋上接合方式での建造では工期短縮が可能であるが、経済性の観点からはドックの制約からユニットサイズをうまく選ぶ必要がある.7)陸上とのアクセスでは、母港的設置海域には浮体式橋梁、それ以外では渡船によるのが適当と考えられる.また、災害救助をも目的とするためには、破壊された岸壁への渡橋装置を格納しておくべきである.なお、潮の干満に対応するべく、渡橋装置にもこれに追随できる機能をもたせておく必要がある。8)平常時繋留にてその機能を発揮するような大型海洋浮体では、航海能力を保持するための設備が割高となり、開発初期から狭水路での自航性能を保証するには限界がある.また、浅海域ではプロペラによって海底をかき回すことにもなる.よって、狭水路ではタグボート使用あるいは、自航専用ユニットを開発するのが望ましい.従って自航性能保持については外洋での航行に注力すべきである.本研究で対象とする「自航型・ハイブリッド構造による海洋浮体」は、従来の浮体式構造物よりもはるかに大型であること、複数のユニットからなる連結体であること、自航型であること等の特徴を有している.この海洋浮体を設計する際に重要となるであろう項目を洗い出し、それらについて検討した結果を以下に要約する.1)推定外力については、風、浪、地震によるものがある.風浪に対しては観測データを元に、ある程度の予測は可能であるから、開発初期には観測データの豊富な海域に設置すべきである.2)繋留は風浪に対する剛体運動を抑制するが、地震に対しては伝播経路ともなるので注意が必要である.連結浮体を繋留するためにはドルフィンダンパ方式が最有力であるが、地震に対する免震構造を採用する必要がある.3)連結浮体の構造安全性や居住性に関する過去の研究はほとんどなく、本海洋浮体については特に、複数浮体による相互影響、さらには設置海域境界条件を考慮した動揺性能推定法を開発する必要がある.また、繋留免震構造による影響も評価せねばならない.4)飛沫帯保護及び経済性の観点からは浮体の静的挙動に対してハイブリッド型構造は有力な候補であるが、疲労強度の観点からは現状では必ずしも自航型に適しているとは言い難い.よって、主機搭載浮体だけは鋼構造とするか、もしくはずれ止めに一層の工夫を加える必要がある.5)しかし、軟着底による浮体の繋留も可能なハイブリッド型構造も捨てがたい.その際には、底の状態(例えば岩盤なのかヘドロなのか)と地震との関係も調査する必要がある.6)浮体ユニット洋上接合方式での建造では工期短縮が可能であるが、経済性の観点からはドックの制約からユニットサイズをうまく選ぶ必要がある.7)陸上とのアクセスでは、母港的設置海域には浮体式橋梁、それ以外では渡船によるのが適当と考えられる.また、災害救助をも目的とするためには、破壊された岸壁への渡橋装置を格納しておくべきである.なお、潮の干満に対応するべく、渡橋装置にもこれに追随できる機能をもたせておく必要がある。8)平常時繋留にてその機能を発揮するような大型海洋浮体では、航海能力を保持するための設備が割高となり、開発初期から狭水路での自航性能を保証するには限界がある.また、浅海域ではプロペラによって海底をかき回すことにもなる.よって、狭水路ではタグボート使用あるいは、自航専用ユニットを開発するのが望ましい.従って自航性能保持については外洋での航行に注力すべきである.
ポルフィリンの歪みに及ぼす置換基効果

メソ位に2、6-ジフルオロフェニル基と2、6-ジクロロフェニル基を持つポルフィリンのβ位に順次フェニル基を導入した一連のポルフィリンをピロールおよびジフェニルピロールと2、6-ジフルオロベンズアルデヒドまたは2、6-ジクロロベンズアルデヒドとの混合縮合により合成した。アリル基の数が4、6、8(2つの異性体が存在する)、10、12個のポルフィリンをそれぞれTXPP、HXPP、trans-OXPP、cis-OXPP、DecXPP、DXPP(X=F or CL)と略記する。紫外可視スペクトルの測定から、フェニル基の増加に伴いソーレー帯が長波長側へシフトすることが観測された(TXPP<HXPP<trans-OXPP<cis-OXPP<DecXPP<DXPP)。しかしX=FとX=Clではフェニル基の増加に伴うソーレー帯の長波長側へのシフトの度合いが明らかに異なっていた。これはポルフィリン環の歪みの程度が両者で異なっていることによると考えられる。X=Fではフッ素原子の孤立電子対とポルフィリンπ軌道の相互作用がポルフィリン環とメソフェニル基の共役がポルフィリン環の歪みと密接に関係していることが推測される。まtがTXPP(X=FとX=Cl)でモノカチオン状態が非常に安定であることが判明した。メソ位に2、6-ジフルオロフェニル基と2、6-ジクロロフェニル基を持つポルフィリンのβ位に順次フェニル基を導入した一連のポルフィリンの合成を現在行っている。アリル基の数が4、6、8(2つの異性体が存在する)、10、12個のポルフィリンをそれぞれTXPP、HXPP、trans-OXPP、cis-OXPP、DecXPP、DXPP(X=F or Cl)と呼ぶことにする。これらのポルフィリンはピロールおよびジフェニルピロールと2、6-ジフルオロベンズアルデヒドまたは2、6-ジクロロベンズアルデヒドとの混合縮合により合成し、それぞれ6種のポルフィリンの混合物をカラムクロマトグラフィーにより分離・精製を行う。現在X=Fのものについては6種すべて純粋なポルフィリンの単離に成功しNMR、紫外可視スペクトル等の測定を行った。現在これらのポルフィリンはいずれ数十ミリグラムしか保有していないので大量合成を行い種々の物理化学データとポルフィリン環の歪みとの関係を調べる予定である。X=ClのものについてはHClPP、trans-OClPP以外のものについてはほぼ単離が完了し、DecClPP以外のものはスペクトル等の測定を行った。HClPP、trans-OClPPについてはカラムクロマトグラフィーにおける分離条件を検討中であり、DecClPPについては再度カラムクロマトグラフィーをおこない適切な再結晶条件を検討すれば純粋な結晶が得られるとおもわれる。メソ位に2、6-ジフルオロフェニル基と2、6-ジクロロフェニル基を持つポルフィリンのβ位に順次フェニル基を導入した一連のポルフィリンの合成を行った。アリル基の数が4、6、8(2つの異性体が存在する)、10、12個のポルフィリンをそれぞれTXPP、HXPP、trans-OXPP、cis-OXPP、DecXPP、DXPP(X=ForCl)と呼ぶことにする。X=Fのものについては6種すべて純粋なポルフィリンの単離に成功しNMR、紫外可視スペクトル等の測定を行ったことを昨年度報告した。本年度はX=Clのものについて6種すべて純粋なポルフィリンの単離に成功しNMR、紫外可視スペクトル等の測定を行った。紫外可視スペクトルの測定から、X=FとX=Clではフェニル基の増加に伴うソーレー帯の長波長側へのシフトの度合いが明らかに異なっていた。X=Fではフッ素原子の孤立電子対とポルフィリンπ軌道の相互作用がポルフィリン環の歪みを減少させている可能性がある。

酸塩基化学的性質からポルフィリン環とメソフェニル基の共役がポルフィリン環の歪みと密接に関係していることが推測される。またTXPP(X=FとX=Cl)でモノカチオン状態が非常に安定であることが判明した。
芳香族化合物がπ配位した新規銀錯体の合成、構造及び物性:新しい銀錯体化学の展開

対称性の比較的高いテトラフェニレン(tphe)を配位子に、金属イオンにAg(ClO_4)用いて、p-xylene中で、Ag(I)錯体[Ag(tphe)(ClO_4)(p-xylene)](1)の合成に成功した。Agには、tpheの2つのフェニル基にη^1とη^2様式で配位し、さらにClO_4^-のO原子とp-xyleneがη^2様式で配位した4配位4面体構造を有する単核錯体である。この錯体の特徴は、tpheの4つのフェニル基のうち2つのみがAgに配位し、残りの2つのフェニル基が配位していないことである。o-及びm-xyleneがAgに配位した例は報告されているが、p-xylene配位は報告されいなかったので、この錯体はp-xylene配位した最初の例である。錯体1では溶媒に使用したp-xyleneがAgに配位するため、単核錯体を生成したので、Ag(I)に配位する可能性の少ない1,3,5-trimethylbenzeneを用いることで、Ag(I)錯体ポリマー[Ag_2(tphe)(ClO_4)_2]_n(2)の合成に成功した。Agはいずれも2つのフェニル基がη^1とη^2様式で配位している。さらに2分子のClO_4^-のO原子が配位した4配位4面体構造をとっている。錯体全体としては、AgとClO_4^-で形成されたジグザグ1次元鎖が、tpheで架橋されることにより2次元シート構造を形成している。この錯体の特徴は、tpheの4つのフェニル基が2個のAgと結合していることである。次にAg(ClO_4)変わりにAg(CF_3SO_3)用いても二次元Ag(I)錯体ポリマー[Ag_4(tphe)(CF_3SO_3)_4]_n(3)の合成にも成功した。このように溶媒や対アニオンで錯体ポリマーの構造が制御できることを明らかにした。[2,2]-paracyclophaneの発見以来、約半世紀にわたって、これをプロトタイプとしてベンゼン環を縦方向に繋いだ多層構造化合物の合成研究がなされているが、現在までのところ僅か7層構造のシクロファン型の合成に成功しているにすぎない。一方、我々は多環式芳香族化合物がAg(l)にη^2配位した全く新しいタイプの多層構造(W型サンドイッチ構造、2重ヘリックス構造、トリプル・デッカー構造及びマルチ・デッカー構造)の構築に成功しているが、本研究では、全く新しいタイプのダブル・デッカー(二層)構造のAg(l)π錯体集合体の合成に初めて成功した。すなわち、benzo[ghi]perylene(bper)の二核Ag(l)錯体[Ag_4(bper)_4(ClO_4)_4](toluene)(1)である。1は二分子のbperを2個のAgが架橋した二層構造を形成しており、二層構造のAgはさらにClO^-_4で架橋された一次元鎖を形成している。1ではbperによるπ-π相互作用が分子内(3.38Å)、分子間(3.47Å)ともに存在し、これによりカラム状芳香環スタッキングを形成し、錯体全体としては二次元構造をとっている。しかも、bperは分子内π-π相互作用のため内側に反っており、分子の中央部分で約0.07Åbentしている。1の微結晶をペレットにして、二端子法で室温で電気伝導率(σ)を測定したところ、注目されることに、2.1Xl0^<-2>Scm^<-1>という極めて高い伝導機能を示した。さらに、1はg=2.003に有機ラジカルのESRシグナルを与え、Ag(l)からbperヘ、わずか(0.2%)ではあるが電子移動していることが明らかになった。

錯体全体としては、AgとClO_4^-で形成されたジグザグ1次元鎖が、tpheで架橋されることにより2次元シート構造を形成している。この錯体の特徴は、tpheの4つのフェニル基が2個のAgと結合していることである。次にAg(ClO_4)変わりにAg(CF_3SO_3)用いても二次元Ag(I)錯体ポリマー[Ag_4(tphe)(CF_3SO_3)_4]_n(3)の合成にも成功した。このように溶媒や対アニオンで錯体ポリマーの構造が制御できることを明らかにした。
頭頸部骨格形成におけるHoxコードの役割とその分子実態の解明

咽頭弓におけるHoxコードの未解決の課題の一つとして、Hoxコードの責任組織の解明が挙げられる。私は従来のマウス咽頭弓におけるHox遺伝子の過剰発現の実験が不十分であったことを考慮して、マウス咽頭弓におけるHoxコードの書き換え実験を行うことでHox遺伝子の性質の解明に取り組んできた。具体的にはHoxa2をCAGプロモーター-loxP-STOP-loxPの配列の後につなぎ、ROSA26遺伝子座に相同組み換えで組み込んだマウスを作製し、Wntl : Creマウス(Wntl::Cre)と掛け合わせることで神経堤細胞特異的にHoxa2を発現させたマウス(CAG-flox-Hoxa2 ; Wntl::Cre)を作製し、第1咽頭弓などに遊走する本来Hoxネガティブな神経堤細胞にHoxa2を異所性に発現させることを試みた。その結果、神経堤細胞の由来依存的に2種類の表現型が確認された。まず、菱脳由来の神経堤細胞について、第1咽頭弓由来の構造の第2咽頭弓へのホメオティック変異が確認された。具体的には、ツチ骨・キヌタ骨・鼓膜輪・偶骨などの第1咽頭弓由来の骨構造が欠失し、その位置に舌骨・茎状突起、アブミ骨などの第2咽頭弓由来の骨構造が現れた。また、マイクロアレイを用いて遺伝子発現も解析してCAG-flox-Hoxa2 ; Wntl : Creマウスの第1咽頭弓の遺伝子発現プロファイルが第2咽頭弓のものに変化していることを明らかにし、それをin situ hybridizationにより裏付けた。以上のことから神経堤細胞特異的なHoxa2の発現が第1咽頭弓の第2咽頭弓へのホメオティック変異に十分条件であることが明らかになった。このことはHoxa2の神経堤細胞特異的ノックアウトマウスの解析の結果(Santagati et al Development 2005)と合わせると、神経堤細胞におけるHoxa2が第2咽頭弓の位置情報の必要十分条件であることを示唆する。また、中脳由来の神経堤細胞においては構造の低形成が確認された。従来のHoxa2過剰発現実験においては一見して矛盾するような表現型が報告されてきたが、今回の研究の進展によって、それを統合的に整理して理解することが出来るようになったと言える。(抄録なし)Hox遺伝子は頭尾軸沿いのコンパートメント構造に位置情報を与える。諸々のHoxのノックダウン・異所性発現の実験の結果から、Hox遺伝子群が位置情報のマスターレギュレーターであることは疑い無い。しかし、in vivoでの劇的な表現型に比べ、分子メカニズムの解明はまだまだ未解明であり、ゲノム上のターゲット遺伝子ですらほとんど知られていないのが現状である。私は、頭頚部のHox異所性発現の系を用いてHOxがin vivoで働く際の分子メカニズムを解析してきた。具体的にはHOxa2をCAGプロモーターとloxP-stop-loxPにつなげたコンストラクトをROSA26の遺伝子座に相同組み換えで挿入し、神経堤細胞特異的にCreを発現させるWnt1::Creマウスと掛け合わせることで本来Hoxネガティブの神経堤細胞にHoxa2を過剰発現させた。その結果、今まで哺乳類では確認されたことの無かった第1咽頭弓の第2咽頭弓へのホメオティック変異が確認された。さらに重要な点として、咽頭弓は神経堤細胞だけでなく、内胚葉、表皮外胚葉、コア中胚葉などによっても形成されており、どの組織におけるHox遺伝子が位置情報を与えるのに重要なのかが今までは明らかになっていなかったが、今回の神経堤細胞特異的なHoxの発現でホメオティック変異が確認されたことで神経堤細胞が責任組織であることが明らかになった。また、以前HOxa2やHoxa3をEdbraの遺伝子座に挿入した時に確認したような異所性のHoxの影響が背腹のコンテクストに依存するという現象が最確認された。これはHoxとDlxのクロストークの可能性を示唆するが、実際HoxのノックインマウスとDlx5/6のノックアウトマウスの鰓弓の転写産物のマイクロアレイデータを取得することでHoxとDlxが遺伝子制御において拮抗していることを発見した。さらにHOxが鰓弓においてどのように遺伝子制御をしているかを解明するために、第1鰓弓の上顎突起、下顎突起、更に第2鰓弓をH3K4triMeの抗体を使いChIP-seqを行いエピジェネティックな修飾の解析を行った。

その結果、神経堤細胞の由来依存的に2種類の表現型が確認された。まず、菱脳由来の神経堤細胞について、第1咽頭弓由来の構造の第2咽頭弓へのホメオティック変異が確認された。具体的には、ツチ骨・キヌタ骨・鼓膜輪・偶骨などの第1咽頭弓由来の骨構造が欠失し、その位置に舌骨・茎状突起、アブミ骨などの第2咽頭弓由来の骨構造が現れた。また、マイクロアレイを用いて遺伝子発現も解析してCAG-flox-Hoxa2 ; Wntl : Creマウスの第1咽頭弓の遺伝子発現プロファイルが第2咽頭弓のものに変化していることを明らかにし、それをin situ hybridizationにより裏付けた。以上のことから神経堤細胞特異的なHoxa2の発現が第1咽頭弓の第2咽頭弓へのホメオティック変異に十分条件であることが明らかになった。このことはHoxa2の神経堤細胞特異的ノックアウトマウスの解析の結果(Santagati et al Development 2005)と合わせると、神経堤細胞におけるHoxa2が第2咽頭弓の位置情報の必要十分条件であることを示唆する。また、中脳由来の神経堤細胞においては構造の低形成が確認された。従来のHoxa2過剰発現実験においては一見して矛盾するような表現型が報告されてきたが、今回の研究の進展によって、それを統合的に整理して理解することが出来るようになったと言える。Hoxa2の過剰発現マウスの作出に成功した。このマウスが鰓弓におけるHox遺伝子の役割の解析に非常に有用であることが明らかになった。具体的には今まで確認されたことの無い哺乳類における第1鰓弓の第2鰓弓化が確認され、神経堤細胞におけるHoxコードが位置情報を与える必要十分条件であることが明らかになり、さらにHox遺伝子とDlx遺伝子のクロストークの解析が相当に進んだ。胎児組織へのChlP-seqも成功し、この一年でHoxの機能解析が非常に進展したと言える。Hoxa2の過剰発現マウスの解析をさらに進め、鰓弓におけるHoxコードの役割を明らかにする。またChlP-seqをH3K4triMe以外のピストン修飾、さらにHox遺伝子やDlx遺伝子に対しても行いこれらのマスターレギュレーターが働く分子機序を明らかにしていきたい。(抄録なし)
述語抽象化検証による大規模組込みシステム向きオブジェクト指向設計自動検証手法

リアルタイムオブジェクト指向言語を開発して、オブジェクトが生成消滅するシステムに対して、構造と時間の抽象化精錬で直接に検証できる、動的リアルタイムCEGARの開発と実装に取り組んだ。その結果、動的リアルタイムCEGARの実現により、オブジェクトの生成消滅といった構造の変化及びリアルタイム性を同時に抽象化精錬して、リアルタイムオブジェクト指向システムの効率的なモデル検査が実現できることを明らかにした。本年度は、以下の基礎理論を構築した。(1)オブジェクト指向手法の中で、ステートチャートの検証は極めて重要である。本研究で、ステートチャートの検証において、並列と階層の状態を述語抽象化して、検証コスを削減する理論を構築した。さらに、偽反例かどうかを判定する手法を構築して、述語の洗練手法を構築した。以上により、ステートチャートの述語抽象化連戦検証理論を構築して、実証実験により、その有効性を実証した。(2)リアルタイム性の検証も重要である。本研究で、タイミング制約を表現する述語を用いて、述語抽象化して、検証コスを削減する理論を構築した。以上により、リアルタイムシステムの述語抽象化連戦検証理論を構築して、実証実験により、その有効性を実証した。今後は、以上の(1)と(2)とを融合して、組込みシステム向きのオブジェクト指向仕様の述語抽象化洗練検証手法を構築する予定である。本年度は前年度に構築したステートチャートの設計検証理論を発展させて、最重要な動的再構成可能組込みシステムをターゲットとして、設計検証手法を開発した。動的再構成可能組込みシステムは構成要素の生成と消滅があり、オブジェクト指向におけるオブジェクトの生成と消滅の概念によりモデル化できることに着目した。動的再構成可能プロセッサの設計検証に関しては以下の技術を開発した。(1)構成要素の生成と消滅を表現するために、オブジェクト指向のオブジェクトの生成と消滅の概念を含む仕様記述言語を開発した。(2)動的な構成の変化毎に周波数が変化することを表現するために、ハイブリッドオートマトンの概念を含む仕様記述言語を開発した。(3)構成要素の内部動作が複雑であるので、ステートチャートの概念を含む仕様記述言語を開発した。(4)構成要素の動的な生成と消滅を検証するために、生成される最大の構成要素を用意して、生成されるとアクティブにして、消滅するとインアクティブにするように構成要素を記述して、従来の静的なシステムに帰着して検証を実現した。現在、述語抽象化精錬による自動検証手法を検討中である。本年度は、19年度のステートチャートの構造の抽象化精錬検証方式の開発と実装及び時間ステートチャートの構造と時間の抽象化精錬検証方式の開発と実装、20年度のリアルタイムオブジェクト指向言語の設計とその検証方式の開発を受けて、オブジェクトが生成消滅するシステムの抽象化精錬で直接に検証できる、動的リアルタイムCEGARの開発と実装に取り組んだ。これは、リアルタイムシステムの効率的な検証方式の実現可能性を実証したばかりではなく、広くオブジェクト指向システムの効率的な検証方式の実現可能性を実証しており、Javaなどのオブジェクト指向言語で記述されたインターネット上のソフトウェアの効率的な検証方式の実現可能性を示唆しているといった重要な意義のあるものである。来年度は、本研究の成果を広く適用させるために、広くオブジェクト指向システムの効率的な検証方式の解明に取り掛かる予定である。
骨代謝におけるカップリング作用を応用した矯正学的歯の移動のコントロール

本研究では、矯正学的歯の移動時における骨代謝の解明ならびに、骨代謝のコントロールによる歯の移動実験を行うこととした。研究成果として、"マウス"を用いた歯の移動実験法を確立し、現在までのところ一週間までの持続的矯正力の付与が可能となった。また、本研究では骨代謝の変化がより明らかに現れることを想定し、OPG-/-マウスを使用して実験を行っている。このOPG-/-マウスを用いることによって、Wild typeマウスに比較し歯の移動速度が大きく、移動3日後から歯根膜における破骨細胞数が上昇し、周囲歯槽骨の吸収が多く認められた。以上の結果から、破骨細胞の活性は、歯の移動において重要であり、骨芽細胞の活性化にも極めて重要な役割を担っていることが考えられた。また、周囲歯槽骨を維持するためにも破骨細胞の活性の制御は重要であることが考えられた。今後は、この破骨細胞の活性を抑制する薬剤を投与し、実験を継続していく予定である。矯正歯科治療において『固定』の概念は非常に重要である。骨代謝自体をコントロールすることにより、歯の移動を制御するという、新しい矯正治療法の確立を本研究の目的とし、実験的歯の移動時における骨代謝の解明と骨代謝のコントロールによる歯の移動実験をおこなうこととした。すなわち、歯の移動におけるきわめて重要な役割を演ずる破骨細胞の分化、成熟に焦点をあて、そのコントロールをすることによって、歯の移動のコントロールをしようとするものである。平成18年度の研究実績として、破骨細胞に作用する蛋白ならびに薬剤の選択として、まず、OPG蛋白を選択することとした。動物投与実験を行うにあたり、大量にOPGが必要になるため、OPG蛋白の作成実験を行うこととし、リコンビナントOPGの作成にとりかかった。各種ベクターや大腸菌など、蛋白発現システムを構築中である。今後も継続して蛋白作成実験を試みる予定である。また、同時に、動物を用いた矯正学的歯の移動実験を行っている。これまでの歯の移動実験は、ラットを用いたものが多かったが、遺伝子的な解析を含めることを考慮し、OPGノックアウトマウスなど、より遺伝子的解析が行いやすい"マウス"を用いた実験を現在遂行中である。しかしながら、ラットの十分の一程度の体重しかないことからも、マウス臼歯は、ラットに比較して著しく小さく、新たな手法が必要である。現在までのところ、1週間までの持続的矯正力の付与が可能となっている。引き続き、本研究も継続していく予定である。歯科矯正治療において、『固定』の概念は非常に重要である。装置の使用など、患者の協力を得ることなく術者の意志どおりに歯を移動できることは、これまでの矯正治療の概念を変える新しい治療法と考えられる。そこで、本実験では、骨代謝をコントロールする事で、歯の移動量や移動速度を制御する事を目的とし、矯正学的歯の移動実験を行い、骨代謝の解明を行うこととした。すなわち、歯の移動におけるきわめて重要な役割を演ずる破骨細胞の分化、成熟に焦点をあて、歯の移動のコントロールをしようとするものである。平成19年度の研究業績として、平成18年度に引き続き、破骨細胞に作用する蛋白ならびに薬剤の選択として、OPG蛋白を選択し、動物投与実験を行う際に必要なリコンビナントOPGの作成にとりかかっている。各種ベクターや大腸菌など、蛋白発現システムを現在も構築中である。また、同時に、動物を用いた矯正学的歯の移動実験も行っている。本実験での歯の移動実験は、より遺伝子的解析が行いやすいと考えられる"マウス"を用いた実験を現在遂行中である。しかしながら、ラットと比較して体重が非常に小さく、マウス臼歯の大きさも著しく小さい。その為、新たな手法が必要であるが、本年度の研究実施計画にあるような、特殊な小型器具と改良した矯正用顎間ゴムを挿入し、1週間までの持続的矯正力の付与が可能となり、この間の組織学的検討を行い、OPG KOマウスでは、破骨細胞の形成が著しく早いとともに、骨芽細胞にもなんらかの促進作用をもたらしていることが確認され、今後は、歯の移動実験時における骨代謝の変化がより明らかに現れるよう、破骨細胞の活性を全身的に上昇させる実験を考えており、予備実験として卵巣摘出術を行った。このマウスを用いた歯の移動も引き続き、継続していく予定である。

歯科矯正治療において、『固定』の概念は非常に重要であり、移動が必要な歯だけではなく、移動してはいけない歯までもが動いてしまうことが問題となる。そこで、本研究では、骨代謝を薬理学的にコントロールする事によって、歯の移動量や移動速度が制御可能になるのではないかと仮説を立て、矯正学的歯の移動時における骨代謝の解明ならびに、骨代謝のコントロールによる歯の移動実験を行うこととした。平成20年度の研究業績として、昨年度に引き続き、破骨細胞に作用する蛋白ならびに薬剤として、OPG蛋白に注目し、各種ベクターや大腸菌など、蛋白発現システムを用いてリコンビナントOPGの作成を行っている。また、in vivoにおいての実験では、過去の様々な実験はラットを用いたものが多かったが、本研究では将来的に、遺伝子的な解析を含めることを考慮し"マウス"を用いた歯の移動実験を行っている。マウス臼歯は、ラットに比較して著しく小さく、装置装着が困難であったが、現在までのところ、一週間までの持続的矯正力の付与が可能となった。また、本研究では骨代謝の変化がより明らかに現れるよう、OPG KOマウスを使用し実験を行っている。OPG KOマウスは、破骨細胞抑制因子であるOPGが遺伝子的に欠損していることから破骨細胞の活性が全身的に上昇しているモデルマウスである。このOPG欠損マウスを用いることによって、Wild typeマウスに比較し歯の移動速度が大きく、移動3日後から歯根膜における破骨細胞数が上昇し、周囲歯槽骨の吸収が多く認められた。以上の結果から、破骨細胞の活性は、歯の移動において重要であり、また、周囲歯槽骨を維持するためにも破骨細胞の活性の制御は重要であることが考えられた。今後は、この破骨細胞の活性を抑制する薬剤を投与し、実験を継続していく予定である。
神経変性疾患における超早期タンパク蓄積寄与因子の解明

本研究では、申請者の先行研究によりマーモセット嗅球においてシヌクレイン凝集体形成が起こること、それらが26歳の比較的短期間に起こる現象であることに着眼し、凝集体形成に至る一連のメカニズムを解明するアプローチとしてマーモセット嗅球をツールとしたタンパク蓄積課程研究を計画した。2歳、4歳、6歳のマーモセット嗅球を収集し、片側を免疫染色により組織解析、片側をプロテオーム解析に使用した。事前の組織解析により、2歳ではシヌクレインの蓄積は認めず6歳でシヌクレインの凝集体が検出されていたが、その中間の4歳では6歳と同様のシヌクレインの凝集は検出されなかった。組織でのシヌクレイン蓄積レベルを踏まえた上で、反体側の嗅球についてプロテオーム解析を行い、より詳細なタンパク発現変化を調べた。今回比較した3930種類のタンパクのうち、2歳に比べ6歳で発現が上昇した620、低下した517のタンパクが同定された。そのうち4歳で既に変化があったタンパクが発現上昇230、発現低下263種類検出された。中でも低下した群にはプロテアソームの構成タンパクが多く含まれていた。一部は4歳で既に2歳に比べ半分以下の量まで低下していた。そのため、プロテアソーム系の異常がマーモセット嗅球におけるタンパク蓄積に関わっていたことが推測されるが、まだ蓄積を認めない4歳で既に変化を認めていることから、早期の変化である可能性も考えられる。しかしながら、プロテアソーム系の異常が引き金である可能性を示すには更に検証が必要である。また増加した群では、SOD1など細胞内ストレスを軽減する因子やhnRNPなどの核局在RNA結合タンパクが含まれていた。本研究では、申請者の先行研究によりマーモセット嗅球においてシヌクレイン凝集体形成が起こること、それらが26歳の比較的短期間に起こる現象であることに着眼し、凝集体形成に至る一連のメカニズムを解明するアプローチとしてマーモセット嗅球をツールとした蓄積過程研究を計画した。平成29年度は、マーモセット嗅球組織のタンパク収集とそれらの組織染色を行い、各個体・年齢ごとの基礎情報を得ることを目的に解析を行った。マーモセット脳のタンパクサンプル採取については、これまでに3歳以下のサンプルを4匹、46歳のサンプルを3匹分収集した。そのうちの一部ではタンパクサンプル採取と同時に同一個体で組織染色用サンプルも採取しており、シヌクレインの発現状態を比較した。更に当初の予定では26歳のサンプルに集中して解析を行うことを主としていたが、これに加えて10歳の高齢サンプルも収集することができた。これを用いて、6歳で起きる凝集の更にその先の変化について情報を得る。先行研究では、2歳から6歳の間に嗅球での劇的なシヌクレイン凝集が起こることが分かっていたが、その間の状態については未確認であった。プロテオーム解析に先立ち病理変化を調べたところ6歳未満ではあるが近くの年齢でも凝集まで至っていない個体もあることが分かり、現在N数を重ねて検証中である。また、4歳の段階でも凝集体形成が進んでいる個体も認めたため、反側の病理像を元に今後プロテオーム解析を行うサンプルを選択する必要がある。マーモセット嗅球をタンパク及び組織染色の両方の目的で同一個体から採取できる技術が完全には確立できておらず不十分な採取となった事例があったが、採取方法の変更により安定して採取ができるようになった。具体的には、当初還流固定せずに未固定の状態で開頭し組織の構造が崩れてしまうことがあったが、方法を検討し開頭せずに嗅球のみを取り出すことができるようになったため、解決された。また、今年度の結果により予想以上に個体差があることが推測されたが、これについては計画時の回避方針通り反側の病理情報を蓄積レベルの判断基準として対応するタンパクサンプルに対してプロテオーム解析に進める。

また増加した群では、SOD1など細胞内ストレスを軽減する因子やhnRNPなどの核局在RNA結合タンパクが含まれていた。今後の推進方策としては、収集したサンプルについてまず1正常発現時、2局在変化前、3局在変化発生時、4局在変化及び凝集体形成時の4点のタイミングを推測する。しかし平成29年度の結果により個体差の考慮が必要であることから、反側の組織を病理解析できたもののみをプロテオーム解析の解析対象とする。プロテオーム解析には、複数サンプル間でのタンパク質発現量を一度に網羅的に比較解析できるiTRAQ法を用いる予定である。解析結果により抽出されたタンパク質について、抗体がある場合は組織染色により局在やシヌクレインとの相互関係を調べる。平成29年度は国際学会への参加のため海外渡航費を計上していたが、招待講演となり主催者負担となったため旅費分を次年度使用分とした。次年度への移動分は、解析や抗体・染色に使用する試薬などの消耗品に充てる。
全斗煥政権期のオーラルヒストリー調査

本研究が明らかにしたのは、全斗煥政権が当時の状況に対して、如何なる主観的認識を持ち、どう対処しようとしたか、それが結果として、当時の韓国社会におけるどのようなイデオロギー的変化を齎したか、である。その結果は次のように要約する事が出来る。1)同政権は1980年代初頭における政治的弾圧をも駆使した結果得られた、政治的安定を大きく評価し、ゆえに多少の民主化運動の許容は、政権の基盤を揺るがさないものと考えた。2)政権内部にではこのような理解には大きな対立はなかった。3)しかしながら、実際にはこの結果行われた民主化運動は政権側の予想を超えて拡大した。4)この誤算が韓国の民主化実現に大きく貢献した。平成23年度においては、本格的なインタビュー調査の準備作業を行うと共に、その部分的な実行に着手した。具体的には、研究計画において述べたように、朝日新聞、毎日新聞、日本経済新聞、朝鮮日報、東亜日報等、日韓両国のマスメディア関係者や、政府関係者との会合を行うことにより、インタビュー対象者の絞込みを行い、併せてその接近方法について決定した。この結果として、第一に、第5共和国期に政治部記者として活躍した東亜日報元記者、現韓国放送通信委員会の金忠植氏に対して、第5共和国期の政治状況について第一次のインタビューを行い、当時の政治状況全般に対する聞き取りを行うと共に、当時の政治的重要人物の所在情報を入手した。第二にこれらの情報収集に基づいて、4人の人物について聞き取り調査を行った。一人目は、元労働部長官の南載煕氏であり、彼からは、当時の与党民主正義党の結党時の状況と、どのような形で与党政治家の選択と、綱領策定が行われたかについての情報を入手した。民主正義党の結党の経緯については、これまで如何なる言語においても研究が存在せず、貴重な情報となった。二人目は、許文道元統一部長官である。許文道氏に対しては、当時の文化広報政策についての聞き取りを行い、結果として、その政策に二つの要素、即ち、朴正煕政権からの世代交代と、彼等の日本経験が重要な役割を果たしている事が明らかになった。続いて、許和平元議員に対して調査を行い、このような理解の正確性を確認した。最後に、当時朝鮮日報東京特派員で、現韓国輪壇社長の李度?氏に対してインタビューを行い、1982年の第一次教科書問題の展開過程とその後の克日運動について調査を行った。この結果として、当時の政権とメディアの関係の実態が明らかになり、また、民族主義の浮上過程が明らかになった。平成25年度は研究計画3年目であり、精力的に研究を行った。研究代表者である木村は、研究分担者である金等と頻繁に連絡を取り合い、インタビュー計画を策定すると共に、東京やソウルに滞在する、鈴置、澤田等の協力を得、インタビューを現実化するための、ネットワーク作りを行った。この結果として、3月に行われた全斗煥政権期の大統領府秘書官に対するものをはじめとする当時の要人に対するインタビューが可能となった。平成25年度の韓国においては、本研究プロジェクトが対象とする全斗煥政権期の政治に対する批判が再び高まる状況にあり、彼等に対する学術調査は困難であるという声が大きかった。にも拘らず、本研究が順調に進んでいる事は、本プロジェクトの意義とセットアップの適切性をよく示している。平成24年度においては、本格的なインタビューを実行した。具体的には、研究計画において述べたように、朝日新聞、毎日新聞、日本経済新聞、朝鮮日報、東亜日報等、日韓両国のマスメディア関係者や、政府関係者との会合を行うことにより、インタビュー対象者の絞込みを行い、併せてその接近方法を決定した。本年度における主体インタビューの対象者はマスメディア関係者であった。まず第一に第5共和国期に特派員として滞在した二人の日本人記者にインタビューを行った。即ち、一人は元毎日新聞ソウル支局長の永守良孝氏である。永守氏に対しては、当時の政治状況全般に対する聞き取りを行うと共に、当時の政治的重要人物の所在情報を入手した。二人目は、元共同通信ソウル支局長であり、現在は産経新聞ソウル駐在特別記者兼論説委員である、黒田勝弘氏である。黒田氏は、80年代から今日までソウルに駐在する、日本人韓国専門記者としては最も長い経歴を持つ人物である、この黒田氏に対しては、主として80年代初頭の政治状況について質問を行うと共に、当時の社会の状況についても聞き取り調査を行った。調査は韓国人ジャーナリストに対しても向けられた。対象となったのは、元月刊朝鮮編集局長であり、現在は趙甲済ドットコムを経営する、韓国で最も影響力を有する趙甲済氏である。趙氏は、80年代韓国の政治状況について多くのルポルタージュも執筆しており、インタビューはそのルポルタージュの内容に沿って行われた。この結果として、当時の政権とメディアの関係の実態が明らかになり、また、経済発展が如何に民主化運動の展開に影響を与えたかが明らかになった。5月に全体の研究会を開催した後、その決定に従って、研究代表者及び研究協力者が数字にわかる聞き取り調査を行った。また、韓国国内の政治的事情の変化により、聞き取り調査を巡る環境が悪化したことをも踏まえ、聞き取り調査の対象を、第5共和国時の政治家や官僚、さらにはジャーナリストのみならず、当時の日韓関係に関わる運動を展開した人々にも広げ、平成27年度の最終調査に対する準備を行った。

本研究が明らかにしたのは、全斗煥政権が当時の状況に対して、如何なる主観的認識を持ち、どう対処しようとしたか、それが結果として、当時の韓国社会におけるどのようなイデオロギー的変化を齎したか、である。その結果は次のように要約する事が出来る。1)同政権関係者は先立つ朴正煕政権の継承者としての地位を強く意識すると同時に、その末期における限界性を強く憂慮していた。2)このような朴正煕政権に対する微妙な距離の背景には、彼等が日本統治期以後に高等教育を受けた世代であり、朴正煕政権を支えた軍人たちとの思想的距離を大きく感じていたことがあった。3)このような意識から同政権関係者は、政権獲得時から光州事件に見られるような民主化運動の弾圧と同時に、朴正煕政権時における過剰に抑圧的な制度に民主主義的な要素を加える形での制度改革を行った。4)その後の総選挙における圧勝もあり、同政権関係者は自らの「改革」とそれにより得られた政治的安定を大きく評価し、政権の基盤を揺るぎないものになったと考えた。5)このような判断が1982年に以降、同政権が民主主義的な活動を許容していく理由になった。政権内部にではこのような理解には大きな対立はなかった。6)しかしながら、実際には、この結果行われた民主化運動は政権側の予想を超えて拡大する事となった。85年における国会議員選挙での野党の躍進はその結果であった。7)しかし、この段階において同政権は幾つかの理由で弾圧を行う事ができなかった。その一つはソウル五輪により国際社会の目が韓国に大きく向けられていた事である。8)最終的には同政権は、民主化勢力内部の金泳三系勢力と金大中系勢力の分裂を見て、来るべき大統領選挙での勝利は可能だと判断し、韓国の民主化を許容した、本研究が明らかにしたのは、全斗煥政権が当時の状況に対して、如何なる主観的認識を持ち、どう対処しようとしたか、それが結果として、当時の韓国社会におけるどのようなイデオロギー的変化を齎したか、である。1)同政権は1980年代初頭における政治的弾圧をも駆使した結果得られた、政治的安定を大きく評価し、ゆえに多少の民主化運動の許容は、政権の基盤を揺るがさないものと考えた。2)政権内部にではこのような理解には大きな対立はなかった。3)しかしながら、実際にはこの結果行われた民主化運動は政権側の予想を超えて拡大した。4)この誤算が韓国の民主化実現に大きく貢献した。韓国国内においては、第5共和国時の政治家の不正を巡る追求が激化しており、そのために当時の直接的な関係者に対するインタビューに関する制約は増加している。しかしながら、その聞き取りのターゲットをジャーナリストや運動家にも広げた結果、当時の状況に関わるより多面的な聞き取り調査を行うことに成功している。27年度が最終年度であるため、記入しない。政治学平成27年度は最終年度であり、研究のとりまとめに向けての作業を行う。このために年1度の全体会議を11月頃をめどに行うとともに、この全体会議に向けた最終聞き取り調査を遂行する。また、研究代表者の木村はこの成果を利用した出版を行うべく、出版社等の最終作業を行う。マスメディア人脈を全面的に利用した結果として、当初の予定より円滑、且つ迅速に当時の政権内の重要人物に対するインタビューを実施する事ができている。
針葉樹培養細胞における二次代謝産物の生成の発現と制御機構

改変MS寒天培地上で培養した褐色(DB),半褐色(MDB),および白色(DW)のイチョウ培養細胞と葉とを含水アセトンで抽出し、得られた抽出液から酢エチ可溶層(Et-S層)と不溶層(Et-I層)を得た。このうちEt-S層中に含まれる物質をHPLCで分析した結果、前三者に目だった3つのピークが見られ、これらのピークの保持時間はそれぞれ同じであった。この3つの物質は葉のEt-S層にもすべて含まれており、それらの濃度はMDBが最も高かった。これは褐変に伴いこれらの物質が培養細胞中で一時的に増加するが重合も進行するため、生長阻害が起こり培養細胞は褐変・枯死することが示唆された。また、葉では培養細胞よりもその量がかなり多いことが分かった。これらの物質を検索し、カテキンとガロカテキンを同定した。葉およびDBのEt-S層の培地への添加実験において、葉のEt-Sを添加した場合は少量でも激しい褐変と生長阻害が起こった。一方、BのEt-Sを添加した場合は、少量では逆に生長が促進され、白色の柔らかい良好な培養細胞が形成された。HPLCの結果から、培養細胞に含まれている物質は葉にも含まれており、それらの物質の中にカテキンとガロカテキンの存在が確認された。このほかにフラバノールモノマーかその二量体が含まれている可能性を得た。また、これらの物質は葉に多く含まれることから、前述の添加実験の結果はこれらの物質の濃度が起因しているものと推察した。実際、市販のカテキンを40mg/l添加した実験では褐変が引き起こされることが分かった。以上の結果から、褐変を引き起こす原因物質として考えられているフラバノール・モノマーやプロアントシアニジン類は低濃度では褐変を防ぐ働きをし、高濃度では褐変を引き起こす作用をもつことが示唆された。1.フラボノイドおよびタンニン生成の制御について(1)イチョウ葉柄部から誘導したカルスを用いて懸濁培養を行い、培養液中に分泌される二次代謝産物の一つであるフェノール性物質、特にフラボノイド類、縮合タンニン類について調べた。培養液の酢エチ可溶画分にフラバノール類が含まれることがTLC、HPLC等の機器分析により明かになった。(2)培養細胞(カルス)中のフラボノイド類を調べた結果、イチョウカルスにはプロアントシアニジン類のうち、主にプロデルフィニジンが多く生成され、一方クロマツ、スギカルスにはプロシアニジンが生成されることがわった。2.フラボノイドやタンニンの生成と褐変現象との関連性について(1)カルスの酢エチ可溶画分についてのHPLC分析より、イチョウの白色(未褐変)カルスには比較的低分子量(二量体以下)のものが低い割合で存在し、褐変カルスにはモノマー(カテキン、エピカテキン、ガロカテキンなど)の量が高い割合で存在することがわかった。モノマーが漱次重合して行くに伴って褐変現象も進行してゆくものと推察される。(2)カルスからの抽出成分の中でどの画分が褐変化を引き起すかを調べるため、分別抽出を行い酢エチ可溶画分と不溶画分とに分けた。それぞれの画分の一定量を培地に添加して培養した結果、いずれの画分を添加した培地で培養したイチョウカルスも褐変化は起らず、むしろ逆に生長の促進が見られた。