hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
コンクリート材料の破壊力学試験法の開発

1.コンクリートにおける破壊エネルギー計測システムの開発各種コンクリートの破壊エネルギーを計測するため、くさび挿入試験法に基づく破壊試験装置を作製した。本試験装置は、電動式一軸載荷試験装置と銅製くさびを組み合わせたものである。また、荷重-開口変位曲線の計測システムとして、ロードセル、クリップ型変位計および自動デジタルひずみ測定器を組み合わせたものを用いた。荷重-開口変位曲線の囲む面積を数値積分により算定し、破断面積との比から破壊エネルギーを求めるシステムを開発した。2.コンクリートにおける引張軟化曲線解析システムの開発多直線近似法による引張軟化曲線の逆解析推定システムを開発した。本システムは、引張軟化特性を組み入れたFEM解析により荷重-開口変位を求め、この結果とくさび挿入試験法により得られた荷重-開口変位曲線が良好に一致するように引張軟化曲線を推定するものである。マイクロコンピュータによる解析システムとすることにより、計測システムより得られた結果から、引張軟化曲線を精度よく推定することが可能となった。3.各種コンクリートにおける破壊力学パラメータの解析普通コンクリートおよび鋼繊維補強コンクリートに対して本計測ならびに解析システムを適用し、破壊エネルギーおよび引張軟化曲線などの破壊力学パラメータを求めた。1.くさび挿入によるコンクリートの破壊力学試験装置の作製くさび挿入による割裂試験法を基本とした載荷装置と変位計測装置を作製した。この装置を用いることによりコンクリートの荷重-開口変位曲線をピーク以降の下降域を含めて安定的に計測出来るようにした。実験対象とする材料の種類によってはひび割れ発生後の耐ひび割れ抵抗性が大きく異なるので、このような場合にはくさび角度の異なるくさびを使用して荷重-開口変位を計測するように設計した。くさび挿入試験装置により、天然骨材および再生骨材を使用したコンクリートの荷重-開口変位を測定した。この結果より、荷重-開口変位変位曲線をピーク以降の下降域を含めて安定的に計測できることを確認した。2.破壊力学パラメータ解析システムの構築コンクリートの破壊力学パラメータとして、1)破壊エネルギー、2)引張軟化曲線の二つのパラメータを解析するシステムの構築を行った。このシステムは、計測した荷重-開口変位関係をマイクロコンピュータに取り込んで解析するシステムと有限要素解析などの数値処理システムとから構成されている。破壊エネルギーの解析では、荷重-開口変位曲線に囲まれる面積を算定するアルゴリズムを採用した。また、引張軟化曲線の推定では、有限要素解析と組み合わせた多直線近似解析アルゴリズムを採用した。1.コンクリートにおける破壊ェネルギー計測システムの開発各種コンクリートの破壊エネルギーを計測するため、くさび挿入試験法に基づく破壊試験装置を作製した。本試験装置は、電動式一軸載荷試験装置と鋼製くさびを組み合わせたものである。3.各種コンクリートにおける破壊力学パラメータの解析普通コンクリート、鋼繊維補強コンクリートおよび再生骨材コンクリートに対して本計測ならびに解析システムを適用し、破壊エネルギーおよび引張軟化曲線などの破壊力学パラメータを求めた。
小胞体ストレス反応と非感染性自然免疫応答の相互関連によるＡＩＨ慢性化機構の解析

@AIH発症時の肝内TregのmiRNAプロファイル解析と機能発現に影響を及ぼす因子の解析§miRNAプロファイル解析によるTregの分化、機能発現異常の検討:正常マウス及びモデルマウスの肝内浸潤単核球をコラゲナーゼ処理とGentleMACSにより迅速に分離、MACSTreg分離キットにより肝内浸潤Treg分画を得てtotal RNAを抽出し、Ambion社のmiRNA Isolation Kitを用いてmiRNAを抽出して得られたmature miRNAを、mature miRNAを選択的にラベル化するアジレント社のmiRNA Complete Labeling Reagent and Hyb Kitを用いてラベルし、既知の866種のマウスmature miRNA probeがコートされたアジレント社のmiRNAアレイV3に供し、包括的なmiRNA発現プロファイル解析を行った。その結果、モデルマウスでは正常マウスに比し18種のmiRNAの発現増加、28種のmiRNAの発現低下が見られた。これらのmiRNAをGO解析により免疫反応に関連したものに限定したところ、発現増加を認める7種のmiRNA、低下を認める9種のmiRNAが同定された。これらの発現をRT-PCRにより定量的に解析したところ、発現増加を認めた7種のうち5種、発現低下を認めた9種のうち6種のmiRNAが実際に増加または低下していた。現在、これらのmiRNAの標的mRNAの同定を解析ソフトにより試みている。初年度に疾患特異的な肝内TregのmiRNA発現プロファイルを明らかにすることができ、またRT-PCRにより実際に特異的に発現が増強または減弱しているmiRNAを同定することができた。しかし、その標的mRNAの同定に現在のところ難渋している。まず本年度に得られた結果から、解析ソフトにより特異的に発現増加、低下しているmiRNAの標的mRNAの同定を試みる。標的mRNAが多数存在する場合は、RNAチップによるTregのRNA発現の包括的解析を同時に行いその結果を参考にして絞り込む。ついで同定されたmiRNA、標的mRNAのTregにおける発現をRT-PCRにより定量的に解析し、チップ解析の結果がTregのRNA発現動態を正確に反映しているか検証する。この後に次の研究課題の実験に着手したい。@内因性リガンドによる非感染性自然免疫応答誘導動態と慢性化への関与の解析§肝内における内因性リガンド群、そのセンサー分子群の発現動態の検討:炎症が持続しているモデルマウスの肝内における、自己細胞が放出する内因性因子により誘導される非感染性自然免疫応答の動態を、組織内の内因性リガンド(HSP70、HMGB-1、S100A8/A9/A12)、免疫細胞のセンサー分子(TLR2、4、3、7、9、NLRP3、RAGE)の発現動態を免疫組織化学的に解析し、肝内慢性炎症状態や線維化の程度との関連を明らかにする。また細胞質内でTLR7、TLR9を小胞体から核酸認識の場のエンドリソソームに輸送し非感染性自然免疫応答誘導に関わるPRAT4A、Unc93B1の細胞内動態を、免疫電顕を用い詳細に評価する。特定の内因性リガンドの著明な発現亢進がみられた場合は、そのセンサーを発現している肝内浸潤免疫細胞を実際に刺激しているか否かを、in vitroのアッセイ系で確認する。§線維化で発現する細胞外基質による非感染性自然免疫応答誘導の検討:肝内炎症により星細胞が活性化されると、種々の細胞外基質タンパクが産生されて線維化が進行するが、テネイシンC、ヒアルロン酸、バイグリカン、ヘパラン硫酸、フィブロネクチンなどの細胞外基質やAGEなどの活性化フラグメントはTLR4、TLR9を介して発現細胞を活性化する。そこでそれらの因子の肝内発現動態と肝内浸潤免疫細胞のTLR4、TLR9発現動態を多重染色を用いた免疫組織化学的検討により解析する。また内因性リガンドで行ったのと同様の方法で、細胞外基質やその活性化フラグメントによる肝内浸潤免疫細胞刺激動態を検討する。初年度に疾患特異的な肝内TregのmiRNA

発現プロファイルを明らかにすることができ、またRT-PCRにより実際に特異的に発現が増強または減弱しているmiRNAを同定することができた。しかし、その標的mRNAの同定に現在のところ難渋している。まず本年度に得られた結果から、解析ソフトにより特異的に発現増加、低下しているmiRNAの標的mRNAの同定を試みる。標的mRNAが多数存在する場合は、RNAチップによるTregのRNA発現の包括的解析を同時に行いその結果を参考にして絞り込む。ついで同定されたmiRNA、標的mRNAのTregにおける発現をRT-PCRにより定量的に解析し、チップ解析の結果がTregのRNA発現動態を正確に反映しているか検証する。この後に次の研究課題の実験に着手したい。@内因性リガンドによる非感染性自然免疫応答誘導動態と慢性化への関与の解析§肝内における内因性リガンド群、そのセンサー分子群の発現動態の検討:炎症が持続しているモデルマウスの肝内における、自己細胞が放出する内因性因子により誘導される非感染性自然免疫応答の動態を、組織内の内因性リガンド(HSP70、HMGB-1、S100A8/A9/A12)、免疫細胞のセンサー分子(TLR2、4、3、7、9、NLRP3、RAGE)の発現動態を免疫組織化学的に解析し、肝内慢性炎症状態や線維化の程度との関連を明らかにする。また細胞質内でTLR7、TLR9を小胞体から核酸認識の場のエンドリソソームに輸送し非感染性自然免疫応答誘導に関わるPRAT4A、Unc93B1の細胞内動態を、免疫電顕を用い詳細に評価する。特定の内因性リガンドの著明な発現亢進がみられた場合は、そのセンサーを発現している肝内浸潤免疫細胞を実際に刺激しているか否かを、in vitroのアッセイ系で確認する。§線維化で発現する細胞外基質による非感染性自然免疫応答誘導の検討:肝内炎症により星細胞が活性化されると、種々の細胞外基質タンパクが産生されて線維化が進行するが、テネイシンC、ヒアルロン酸、バイグリカン、ヘパラン硫酸、フィブロネクチンなどの細胞外基質やAGEなどの活性化フラグメントはTLR4、TLR9を介して発現細胞を活性化する。そこでそれらの因子の肝内発現動態と肝内浸潤免疫細胞のTLR4、TLR9発現動態を多重染色を用いた免疫組織化学的検討により解析する。また内因性リガンドで行ったのと同様の方法で、細胞外基質やその活性化フラグメントによる肝内浸潤免疫細胞刺激動態を検討する。
アルツハイマー病のアミロイド産生に対する小胞体ストレスの影響とその治療応用の研究

我々の検討から、家族性アルツハイマー症(AD)の原因遺伝子であるプレセニリン1変異体の存在は小胞体(ER)ストレス反応の低下をきたすことが示され、ADとERストレスの関連が示唆されている。本研究はERストレスとAβ産生の関係について検討し、治療方法の開発を目指すものである。まず、変異型アミロイド前駆体蛋白(APP)を発現させたSY5Y/APPsw細胞にERストレスを負荷すると、分泌されるAβ40及びAβ42の減少する現象が見いだされた。細胞小器官分画及び免疫組織化学による検討では、ERストレス下ではAPPがlate compartmentからearly compartmentへ変異することが示され、β/γ切断酵素によるAβの切り出しが行われる部位へのAPPの分布が減る事が示唆された。免疫沈降実験よりERストレス下ではAPPとERストレスにより誘導されるシャペロンBiPが結合することが示され、これによりERストレス下ではAPPの逆行輸送がなされる可能性が示唆された。この現象は、BiPをトランスフェクトしたSY5Y/APPsw細胞で分泌Aβ40/42の減少が認められることにより、確認された。これらのことにより、ERストレスにより誘導される分子シャペロンはAβの産生の減少をもたらすことが示唆された。更に、BiPプロモーター領域を用いたレポーターアッセイ系を構築し、BiPを誘導するコンパウンドを検索し、BiP inducer X (BIX)と名付けた。このBIXの上記細胞SY5Y/APPswに添加すると、予想通り誘導されたBiPがAPPと結合し、muturationを阻害してAβ40及びAβ42の分泌を減少させることが示された。従って、BIXは新しいAD治療薬となりうる可能性が示された。我々の過去の検討から、家族性アルツハイマー症の原因遺伝子であるプレセニリン1変異体の存在は小胞体(ER)ストレス反応の低下をきたすことが示されている。また、パーキンソン病やポリグルタミン病の発症にもERストレスの関与が紹介されている。一方、アルツハイマー病の病態仮説としては「アミロイドカスケード仮説」が提唱されており、脳内におけるアミロイド蛋白(Aβ)の産生・蓄積がアルツハイマー病の病態の端緒であるとされている。従って、本研究はERストレスとAβ産生の関係について検討し、治療方法の開発を目指した。スエーデン型変異アミロイド前駆体蛋白(APP)を発現させたSY5Y/APPsw細胞をthapsigarginやtunicamycinなどのERストレス誘導剤を投与すると、分泌されるAβ40及びAβ42の減少が観察された。細胞小器官を分けたsubfractionation及び免疫組織化学による検討では、ERストレス下ではAPPがlate compartmentからearly compartmentへ変異することが示され、β/γ切断酵素によるAβの切り出しが行われる部位へのAPPの分布が減る事が示唆された。免疫沈降実験よりERストレス下ではAPPとERストレスにより誘導されるシャペロンBiPが結合することが示され、これによりAPPの逆行輸送がなされる可能性が示唆された。これらのことにより、ERストレスにより誘導される分子シャペロンはAβの産生の調節にあたることが示唆された。

まず、変異型アミロイド前駆体蛋白(APP)を発現させたSY5Y/APPsw細胞にERストレスを負荷すると、分泌されるAβ40及びAβ42の減少する現象が見いだされた。細胞小器官分画及び免疫組織化学による検討では、ERストレス下ではAPPがlate compartmentからearly compartmentへ変異することが示され、β/γ切断酵素によるAβの切り出しが行われる部位へのAPPの分布が減る事が示唆された。免疫沈降実験よりERストレス下ではAPPとERストレスにより誘導されるシャペロンBiPが結合することが示され、これによりERストレス下ではAPPの逆行輸送がなされる可能性が示唆された。この現象は、BiPをトランスフェクトしたSY5Y/APPsw細胞で分泌Aβ40/42の減少が認められることにより、確認された。これらのことにより、ERストレスにより誘導される分子シャペロンはAβの産生の減少をもたらすことが示唆された。更に、BiPプロモーター領域を用いたレポーターアッセイ系を構築し、BiPを誘導するコンパウンドを検索し、BiP inducer X(BIX)と名付けた。このBIXの上記細胞SY5Y/APPswに添加すると、予想通り誘導されたBiPがAPPと結合し、muturationを阻害してAβ40及びAβ42の分泌を減少させることが示された。従って、BIXは新しいAD治療薬となりうる可能性が示された。
時間と空間を横断する検索セッションマネジメント方式の研究

本研究の目的は、ウェブ検索を中心とする一連の情報取得活動が時間と空間を横断して行われることに対して、そのセッションを統括して管理する方法を開発することである。目標達成のため、(1)時間的分断に対応する検索セッションマネジメントの研究、(2)空間的分断に対応する検索セッションマネジメントの研究、(3)状況の変化に対応する検索時のクエリ推薦の研究、という三つの課題について研究を行った。以下で、各課題の実績を説明する。(1)本課題では、新たに、長期間にわたって蓄積された文書コーパスを利用して、語の意味の変化をふまえた語の類似性を計算する手法について提案した。まず、期間ごとに蓄積されたコーパスにおいてword2vecによって語のベクトル化を行う。そして、複数の期間における異なるベクトル空間を横断するための変換行列を取得する。その際に、3つ以上の時代で推移性を保つことを制約として入れることで、語の意味のトラッキングを実現することが可能となった。(2)本課題では、空間的に離れている場所の類似性を計算する手法を提案した。距離が離れていても、雰囲気、意味、機能などが類似する場所が存在する。そのような場所の類似性を計算するために、SNSに投稿された位置情報付きメッセージを用いて、ある場所の意味をベクトルとして表現することを機械学習をもちいて実現する手法を開発した。(3)本課題では、ユーザが表現するクエリと検索対象のコンテンツの間に齟齬がある際の支援として、アナロジーを用いたクエリによる検索を実現するための研究を行った。ユーザが既知の領域での表現でクエリを表し、それに対して、検索対象の領域でそれを解釈するというのが本研究の課題となる。アナロジーや比喩による表現がクエリとして与えられた際に、それらが表す意味を特徴ベクトルで表現し、類似性を計算することができる手法の提案を行った。研究実施計画で提示した課題について、おおむね想定していた通りの成果が得られている。成果発表についても、論文誌での論文発表、国内外での学会発表を行うことができており、計画通りであるといえる。当初の研究計画の通り、研究を進める予定である。(1)本課題は、過去に訪問したことがある情報を再訪問することを支援する研究を行った。ユーザのウェブブラウザにおける閲覧行動と検索行動を取得するツールの開発を行い、そこで得られた情報を基にして、再訪問したいと考えられるページを推薦する仕組みを開発した。ページの閲覧時間や、ある二つのページがどの程度時間的に離れて閲覧されたかから関連度を計算し、推薦の精度を向上させる手法を提案した。(2)本課題では、ユーザが求める情報が、複数のコンテンツや、複数のデバイスなどに分断される問題について取り組んだ。たとえば、ソーシャルメディアでは、投稿されたコンテンツと、プロフィール情報、フォロー情報などは分かれている。検索システムが投稿されたコンテンツのみを考慮した場合、様々な検索意図がクエリで表現できなくなる。そこで、全体の情報をグラフとみなしてクエリ処理を行う仕組みを提案した。(3)本課題は、検索セッションが分断されたときに、クエリや検索対象のコンテンツにおいて、同一ないしは類似する内容が異なる表現で表されるということに対応することが大きな研究課題となる。そこで、表層的には異なる文章であるが、内容的には類似する文章を発見するための技術について開発を行った。具体的には、Word2Vecと呼ばれる技術を応用して、ある文が与えられたときに、同一の意味を表す別の文を発見する手法を提案した。研究実施計画で提示した四つの課題についての技術開発は、概ね予定通りの成果が得られた。成果発表についても、論文誌、国内外での学会発表を行うことができており、計画通りであるといえる。(1)本課題では、これまでに行ってきた、ユーザのウェブブラウザにおける閲覧行動と検索行動を取得するツールの改良を行った。(2)とも関係するが、検索セッションの管理を行う際には、網羅的に情報を取得することが重要となるが、それを支援する仕組みの提案と、網羅的に情報を取得しようとするマインドを育てるための方策についての提案を行った。ソーシャルメディアでは、投稿されたコンテンツ、プロフィール情報、フォロワー/フォロイー情報、フォロワー/フォロイーの特徴情報などが分断されている状態であることが多い。検索する際には、ユーザはそれらを一体として覚えていることが多いため、それらを統合して考慮する必要がある。

そのため、分断された情報の関係情報を基にしてグラフを構築し、グラフ上でユーザのクエリを処理する手法を提案した。(3)本課題では、クエリと検索対象のコンテンツの間に齟齬がある際の支援を行う。検索時にうまく機能しない状況として、商品の検索を行う際に、ユーザは経験を基にしたクエリを発行し、それに対して商品情報としては探索的属性しか存在しない際に、それらの対応関係を取得する手法を提案した。また、類推や比喩による表現が与えられた際に、それらを解釈する手法についても提案を行った。研究実施計画で提示した課題についての技術開発は、概ね予定通りの成果が得られた。成果発表についても、論文誌、国内外での学会発表を行うことができており、計画通りであるといえる。本研究の目的は、ウェブ検索を中心とする一連の情報取得活動が時間と空間を横断して行われることに対して、そのセッションを統括して管理する方法を開発することである。目標達成のため、(1)時間的分断に対応する検索セッションマネジメントの研究、(2)空間的分断に対応する検索セッションマネジメントの研究、(3)状況の変化に対応する検索時のクエリ推薦の研究、という三つの課題について研究を行った。以下で、各課題の実績を説明する。(1)本課題では、新たに、長期間にわたって蓄積された文書コーパスを利用して、語の意味の変化をふまえた語の類似性を計算する手法について提案した。まず、期間ごとに蓄積されたコーパスにおいてword2vecによって語のベクトル化を行う。そして、複数の期間における異なるベクトル空間を横断するための変換行列を取得する。その際に、3つ以上の時代で推移性を保つことを制約として入れることで、語の意味のトラッキングを実現することが可能となった。(2)本課題では、空間的に離れている場所の類似性を計算する手法を提案した。距離が離れていても、雰囲気、意味、機能などが類似する場所が存在する。そのような場所の類似性を計算するために、SNSに投稿された位置情報付きメッセージを用いて、ある場所の意味をベクトルとして表現することを機械学習をもちいて実現する手法を開発した。(3)本課題では、ユーザが表現するクエリと検索対象のコンテンツの間に齟齬がある際の支援として、アナロジーを用いたクエリによる検索を実現するための研究を行った。ユーザが既知の領域での表現でクエリを表し、それに対して、検索対象の領域でそれを解釈するというのが本研究の課題となる。アナロジーや比喩による表現がクエリとして与えられた際に、それらが表す意味を特徴ベクトルで表現し、類似性を計算することができる手法の提案を行った。研究実施計画で提示した課題について、おおむね想定していた通りの成果が得られている。成果発表についても、論文誌での論文発表、国内外での学会発表を行うことができており、計画通りであるといえる。当初の研究計画の通り、研究を進める予定である。
根本説一切有部律「律事」「雑事」における「経典」の研究

本研究が解明しようとするのは、古代インド仏教の一学派である根本説一切有部の<経蔵>の内容である。<経蔵>とは仏教の教義を伝える<経典>とよばれる文献の集成であるが、根本説一切有部の伝承した<経蔵>は現在では一部を除いて散逸している。この文献群の内容をあきらかにするためには、同派の僧院規則集すなわち<律蔵>である「根本説一切有部律」という文献が重要資料となる。本研究はこの文献から<経典>に相当する記述を抽出するとともに、<経蔵>と<律蔵>とがその成立過程においていかなる関係にあったかを考察する。本年度も、昨年度にひきつづき「律事」に含まれる経典を抽出する作業を進めたが、このなかで<経蔵>と<律蔵>の相互関係にかかわる重要な事例が複数発見された。すなわち、これらの事例ではすでに確立した<経蔵>から<経典>が取り出されて<律蔵>にとりこまれたこと、いいかえれば本来<律蔵>に存在した記述が後に<経典>となったのではないことが証明されるのである。これを国際セミナーにおいて発表したのち論文にまとめた。このほか「雑事」漢訳・チベット語訳において特異な<経典>対応記述群を発見し、その比定と分析をおこなった。これについては2019年に国内学会での発表を予定している。また比較的近年まで学界に知られていなかった「根本説一切有部律」サンスクリット語写本断片群について、概括的な報告を国内学会においておこない、この内容を雑誌論文として出版した。さらに、上記の写本断片群の一部についてはさらなる解読の可能性が開けたため、写本が保管されているノルウェーにおいて写本の現況を調査し、写真撮影等を行った。これにより、「根本説一切有部律」のなかの従来チベット語訳と漢訳でしか知られていなかった箇所から、<経典>への言及を含むかなりの量のサンスクリット原文を得ることができた。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。この文献群の内容をあきらかにするための重要な資料が、同派の僧院規則集<律蔵>である「根本説一切有部律」である。本研究はこの文献に含まれる<経典>に相当する記述を抽出するとともに、<経蔵>と<律蔵>とがその成立過程においていかなる関係にあったかを考察する。本年度は、「根本説一切有部律」の中で特に<経典>の集中する箇所である「律事」第6章「薬事」の<プラセーナジット王に語られる仏の前生譚群>部分の構造を分析した。その結果、この部分が三種類の異なる編集作業を通じて形成されたものであり、そのなかで<経典>およびさまざまな説話が<経蔵>や未知の説話集から収集されて<律蔵>の中におさめられたことがあきらかになった。この研究結果を学会発表ののち雑誌論文にまとめた。また「律事」第17章「破僧事」を対象とし、サンスクリット語テクスト、チベット語訳、漢訳からの経典抽出作業をおこなった。さらに、近年新しく同定された「薬事」のサンスクリット語写本の研究を進め、これを従来知られていた「根本説一切有部律」の唯一のサンスクリット写本であるギルギット写本と詳細に比較した。その結果、新出写本はギルギット写本にみられる誤写の修正に資するとともに、漢訳とチベット語訳の正確さを保証するという点で、きわめて重要な資料的価値をもつことがあきらかになった。この成果を学会発表ののち雑誌論文として出版した。また、上記新出写本の構造的特徴や、現存する「根本説一切有部律」資料との説話レベルでの比較を雑誌論文にまとめた。本研究は「根本説一切有部律」の中から<経典>を抽出することを具体的内容とするが、単に<経典>を収集するのみでなく、失われた<経蔵>と<律蔵>との相互関係を解明するところにも重きをおいている。本年度おこなった「薬事」の<プラセーナジット王に語られる仏の前生譚群>の研究はこの点で重要な発見をともなうものであった。これまで、同<前生譚群>は仏教説話研究の分野では広く知られたものであったが、研究者の認識は単に多くの説話がそこに含まれるということにとどまっていた。この一見雑多でまとまりのない説話群がどのように編集されたものであるか、いかにして現存テクストに見られるような形で配列されるに至ったのかということについては未解明のままであったといってよい。本研究は漢訳、チベット語訳、新出サンスクリット写本の詳細な比較検討と、他文献特に近年公刊された説話集のサンスクリット写本との比較を通して、現存資料から可能なかぎりテクストの成り立ちを説明しえたものと考える。本年度は「破僧事」「出家事」「布薩事」という三つの章の調査を行う予定であったが、上記の「薬事」研究に予想以上の時間を要したため、「出家事」「布薩事」については次年度に扱うこととした。

これは当初の計画において、「予期しないテクスト上の問題が発見される」場合を想定して定めておいた措置である。本研究の趣旨にとって「薬事」の問題がきわめて重要であったことからして、この計画変更は合理的なものであると考える。「薬事」の成果は当初の計画では想定していなかった新たな発見であった。また新出サンスクリット写本の研究は順調に学会発表、論文掲載に至った。したがって本年度の研究全体として、当初の計画以上の進展を得たということができる。本研究が解明しようとするのは、古代インド仏教の一学派である根本説一切有部の<経蔵>の内容である。<経蔵>とは仏教の教義を伝える<経典>とよばれる文献の集成であるが、根本説一切有部の伝承した<経蔵>は現在では一部を除いて散逸している。この文献群の内容をあきらかにするためには、同派の僧院規則集すなわち<律蔵>である「根本説一切有部律」という文献が重要資料となる。本研究はこの文献から<経典>に相当する記述を抽出するとともに、<経蔵>と<律蔵>とがその成立過程においていかなる関係にあったかを考察する。本年度も、昨年度にひきつづき「律事」に含まれる経典を抽出する作業を進めたが、このなかで<経蔵>と<律蔵>の相互関係にかかわる重要な事例が複数発見された。すなわち、これらの事例ではすでに確立した<経蔵>から<経典>が取り出されて<律蔵>にとりこまれたこと、いいかえれば本来<律蔵>に存在した記述が後に<経典>となったのではないことが証明されるのである。これを国際セミナーにおいて発表したのち論文にまとめた。このほか「雑事」漢訳・チベット語訳において特異な<経典>対応記述群を発見し、その比定と分析をおこなった。これについては2019年に国内学会での発表を予定している。また比較的近年まで学界に知られていなかった「根本説一切有部律」サンスクリット語写本断片群について、概括的な報告を国内学会においておこない、この内容を雑誌論文として出版した。さらに、上記の写本断片群の一部についてはさらなる解読の可能性が開けたため、写本が保管されているノルウェーにおいて写本の現況を調査し、写真撮影等を行った。これにより、「根本説一切有部律」のなかの従来チベット語訳と漢訳でしか知られていなかった箇所から、<経典>への言及を含むかなりの量のサンスクリット原文を得ることができた。「現在までの進捗状況」に述べたとおり、本年度対象とする予定であった章のうち「出家事」「布薩事」については次年度に扱うこととする。したがって、次年度は「律事」の9つの章「出家事」「布薩事」「安居事」「随意事」「皮革事」「衣事」「コーシャンビー事」「パーンドゥローヒタカ事」「臥具事」を対象として調査を行い、最終的に「律事」全体におけるすべての経典のリストを作成し、論文としてまとめる。「出家事」「布薩事」が加わったことから、当初の予定に入れていた「雑事」前半部分は当面、年度内に扱う対象からは外す。ただし各章にどれだけの時間がかかるかは経典の含有状況により、予測のつかない部分が大きいため、臨機応変に対処することとする。次年度には、特に「根本説一切有部律」に存在する<相応阿含>相当の経典についての学会発表、雑誌論文執筆もおこなう予定である。今年度の調査範囲においても、予期しないテクスト上の問題が発見されたり、あるいは経典と律との関係について、それ自体単独に発表すべき知見を新たに得たりする可能性がある。
聴覚障害学生の主体的な学びを支える情報保障システムの開発と評価

平成30年度は、前年度抽出された授業場面での情報保障ニーズに対して、聴覚障害学生が主体的に学べるための技術要件の検討並びに情報保障システム(パソコンノートテイク)の運用方法の検討を行った。まず、技術要件としては、(1)授業場面等での発話から文字表示までに要する時間(タイムラグ)に関するフィードバックを全参加者に対して行うこと(2)全参加者の発言の文字化を可能にすること(3)意見表出の方法を確保すること、を満たすことを検討することとした。次に、情報保障システムの運用方法を検討し、(a)授業実施前に聴覚障害学生が学ぶ際に使用する情報保障システムの仕組みを全参加者に理解させるためのコンテンツを作成すること、(b)授業実施時の運用方法についてのマニュアルを作成すること、(c)特に、ディスカッション場面における情報保障上の留意点に関するコンテンツを作成すること、を目指すこととした。このうち、特に(b)(c)については、授業の実施責任者である教員向けに、発話からどのような流れで文字が表出されるかと、文字化されている状況のフィードバック情報を確認することに留意することで、健聴学生と聴覚障害学生の情報取得のタイミングの差異を理解し、効果的なディスカッション進行のための配慮について記載するものとする。また、聴覚障害学生の意見表出の方法については、音声・文字入力など複数の方法が想定されるため、個々の学生の表出方法を確認した上で、最終的に文字化されることで仮に複数名の聴覚障害学生が参加していた場合でも情報を相互に享受できることを確保できるようにすることに留意することなどを記載することとする。平成30年度までに、システム開発まで実施する計画であったが、技術要件の整理と情報保障システムの運用上の工夫に関する情報収集に時間を要したため、計画よりやや遅れている状況である。研究の最終年度である平成31年度(令和元年度)には、情報保障システムの開発と評価を実施する。(1)システム開発:平成30年度に抽出された技術要件を満たすシステムの開発を実施する。特に、聴覚障害学生からの意見表出の方法について、システムに組み込む。同時に、システム評価のための運用マニュアル案を作成する。(2)システム評価:模擬的に用意したディスカッション環境において、テーマに沿ったディスカッションを行い、教員役からの議論の充実度の評価、伝達内容の即時性ならびに正確性の評価、聴覚障害学生の自主的な発言の機会の確保の評価、聴覚障害学生の学習の習熟度、などを通して開発されたシステムを評価し、技術的な課題と、運用上ユーザが留意するべき点の整理を実施する。平成29年度は、実際の授業場面等の映像データやインタビュー調査により聴覚障害学生や授業担当教員の情報保障ニーズと現状の課題の抽出を実施した。まず、授業場面の情報保障状況の映像収集を行い、パソコンノートテイクの表出が遅くなる状況について、発話から文字表示までに要する時間の計測(即時性)や、発話内容と表示内容との相違の計測(情報の保障度)などを行い、分析した。その結果、聴覚障害学生がパソコンノートテイクを受けながら授業を受ける際に、文字の表出が遅くなる状況について、いくつかの要因を特定することができた。表出が遅くなればなるほど、授業への参加の即時性が損なわれ、ひいては質問をするタイミングを逃すこととなる。本研究で目指している、聴覚障害学生が主体的に学べる状況にないことがうかがえ、適切なタイミングで質問や意見を述べられる必要性があることがわかった。次に、ディスカッション時の情報保障についての情報収集を行った。上述したように、議論への参加のタイミングが難しい状況にあることから、発言権や即時性を担保するために、これまで実施されてきた事例を収集した。具体的には、運用ルールをしっかり決めてから発言権の移譲を行っている例や、文字通訳ではなく手話通訳の情報保障手段で通訳者が機能的な働きをしていることなどがわかった。パソコンノートテイクをディスカッションに導入した事例では、パソコンを見ながら発言者の表情や様子をつかむことが難しく、情報を受けるだけにとどまる傾向があることなどがわかった。当初予定していた講義の映像収集やインタビュー調査を実施できたことと、ディスカッション時の映像収集や参加者の詳細な情報保障ニーズの収集の点で若干作業が遅れている部分があることから、おおむね順調に進んでいると判断した。

また、聴覚障害学生の意見表出の方法については、音声・文字入力など複数の方法が想定されるため、個々の学生の表出方法を確認した上で、最終的に文字化されることで仮に複数名の聴覚障害学生が参加していた場合でも情報を相互に享受できることを確保できるようにすることに留意することなどを記載することとする。平成30年度までに、システム開発まで実施する計画であったが、技術要件の整理と情報保障システムの運用上の工夫に関する情報収集に時間を要したため、計画よりやや遅れている状況である。平成30年度以降は、前年度に抽出された課題を解決するために、主にディスカッション場面で参加者全員が平等に参加できる環境を実現するための情報保障手段を検討する。それらのうち、情報保障ニーズを満たすための技術要件を抽出しシステム開発を行い、システム評価と改善を実施する。具体的には、平成30年度に情報保障の即時性ならびに充足度と聴覚障害学生の発言の機会の増加、が挙げられる。これらを改善するためには、技術的用件と運用面での工夫の両者が必要で、これらの条件を抽出し、システム開発を行う。その後、平成31年度に開発されたシステムの評価と分析を行い、抽出された課題点の改善を行い最終的なアウトプットとして運用上の工夫も併せたマニュアル作成を行う予定である。研究の最終年度である平成31年度(令和元年度)には、情報保障システムの開発と評価を実施する。(1)システム開発:平成30年度に抽出された技術要件を満たすシステムの開発を実施する。特に、聴覚障害学生からの意見表出の方法について、システムに組み込む。同時に、システム評価のための運用マニュアル案を作成する。(2)システム評価:模擬的に用意したディスカッション環境において、テーマに沿ったディスカッションを行い、教員役からの議論の充実度の評価、伝達内容の即時性ならびに正確性の評価、聴覚障害学生の自主的な発言の機会の確保の評価、聴覚障害学生の学習の習熟度、などを通して開発されたシステムを評価し、技術的な課題と、運用上ユーザが留意するべき点の整理を実施する。平成30年度に情報保障システムの技術要件の明確化まで進み、システム開発のフェーズが次年度に繰り越すこととなったため。
東アジアにおける古文書資料の調査研究-11世紀以前を中心に-

本年度の研究活動とその成果は、次の通りである。1.昨年度に引続き、東アジアの11世紀以前の古文書・石刻資料について、次の5研究班と組織して調査研究を行った。(1)、敦煌・居延・武威出土漢簡研究。(2)、敦煌・吐魯番出土漢語古文書研究及び隋唐石刻資料研究。(3)、敦煌及び東トルキスタン地域出土チベット語古文書研究。(4)、同前地域出土ウイグル語古文書研究。(5)、朝鮮半島出土古文書・石刻資料研究。2.昨年度に引続き、本研究課題に則したシンポジウムを平成元年7月7日から同月10日まで、下記の如く開催した(於箱根静雲荘)。特に、今回は、中国唐代史研究会の2名の代表者、東北師範大学歴史系教授呉楓氏、上海〓旦大学歴史系教授徐連達氏を迎えて、国内外の専門研究者・大学院生等約50名が出席のもと、活発な研究成果の交換・質疑討論が行われた。なお、シンポジウムに際しては、4名の研究者による基調報告があった。研究報告:(a)呉楓「関干唐代歴史文献的再認識」司会、池田雄一・堀敏一(b)徐連達「隋唐官員的階級職・散・勲・爵制度」司会、気賀沢保規(c)岡野誠「敦煌発見唐宋時代の放妻書について」司会、高橋継男(d)小田義久「敦煌三界寺の『見一切入蔵目録』について」司会、蛎波護(e)池田温「敦煌における土地税役制度をめぐって」司会、土肥義和(f)浜田耕策「新羅の碑碣・石刻、資料研究の現況」司会、鈴木靖民3.昨年及び本最終年度に各研究分担者が行った研究成果を、平成2年度中に論文集として出版するための原稿を作成した。本書の公刊によって、今後、本研究課題が一層発展することを期したい。昭和63年7月8日から11日まで本研究課題に則したシンポジウムを箱根強羅で開催した。報告者は4班から1名ずつ選び、下記の報告について、それぞれに司会者をたてて討論を行った。参加者は研究分担者のほか、唐代史研究会の専門研究者・各地域の大学院生などの参加をえて、50名に達した。この成果は次年度の本研究で活字化されるであろう。1.永田英正(木簡班)「簡牘から見た漢代文書政治-簡牘の古文書学的アプローチ」(司会)池田雄一2.中村裕一(漢語古文書班)「唐代上奏の文書的考察」(司会)礪波護3.梅村坦(ウィグル語古文書班)「中国におけるウイグル遺文の現況と研究」(司会)菊池英夫4.鈴木靖民(新羅古文書班)「好太王碑の倭をめぐる研究動向」(司会)古賀登上記のシンポジウムにおいては、前年度に1年間、新疆維吾尓自治区博物館の留学した梅村坦のウイグル古文書の調査、更に同じく1年間吉林大学に留学して東北地区の新出史料を調査した鈴木靖民の報告は、中国内地の歴史を研究主体とする木簡班や漢語古文書班にとって、他の諸民族との文化交流の歴史を具体的に考察する上で極めて示唆に富むものである。

次年度はこの成果を一層発展させ、別の視角から、即ち、唐代の諸制度が実際にどのように運営されたか、この問題を解明するための文書史料が現在どの程度残存しているか、更に中国王朝と朝鮮半島の王朝との関係を具体的に知ることができる新羅文書の検討などを試みたい。(敬称省略)本研究を実施するに当って、(1)漢簡班、(2)漢語古文書班、(3)チベット語古文書班、(4)ウィグル語古文書班、(5)新羅古文書班の5研究班を組織した。両年度の研究成果は、昭和63年7月8日-7月11日及び平成元年7月7日-7月10日の2期間に、箱根静雲荘において下記の夏期シンポジウムを開いて、国内外の専門研究者・大学院生に一般公表するとともに意見の交換を行った。特に平成元年度のシンポジウムには中国唐代史研究会の2名の代表者を迎え、日中両国学界の研究成果を確認し、かつ、今後の課題を確かめあったことは大きな成果であった。昭和63年度シンポジウム:(1)永田英正(漢簡班)「簡牘から見た漢代文書政治」司会池田雄一。(2)中村裕一(漢語班)「唐代上奏の文書的考察」司会砺波護。(3)梅村坦(ウイグル班)「中国におけるウイグル遺文の現況と研究」司会菊池英夫。(4)鈴木靖民(新羅班)「好太王碑の倭をめぐる研究動向」司会古賀登。平成元年度シンポジウム:(1)徐連違(上海〓旦大学教授)「隋唐官員的階級職・散・勲・爵制度」司会通訳気賀沢保規。(2)岡野誠(漢語班)「敦煌発見唐宋時代の放妻書について」司会高橋継男。(3)小田義久(漢語班)「敦煌三界寺の『見一切入蔵経目録」司会砺波護。(4)呉楓(東北師範大学教授)「関予唐代歴史文献的再認識」司会池田雄一、通訳任大煕・気賀沢保規。(5)浜田耕策(新羅班)「新羅の碑碣・石刻資料研究の現況」司会鈴木靖民。(6)池田温(漢語班)「敦煌における土地税役制度をめぐって」司会土肥義和。以上、本研究の研究成果は、各研究分担者によって論文或は覚書としてまとめられたものを、平成2年度中に総括的な論文集として公刊する。本書の刊行によって、今後、当該研究課題が多角的かつ総合的な研究に一層発展することを期したい。
ヒト造血幹細胞を標的とした、導入遺伝子の長期に渡る充分な発現手法の開発

本研究では、FMEVタイプのレトロウイルスベクターを用いて、遺伝子発現に関する検討を行なうため、以下のことを行なった。(1)標的細胞の検討ヒトCD34陽性分画の細胞を標的に遺伝子導入し、SRCへの遺伝子導入効率、遺伝子発現量を、従来のモロニー白血病ウイルスを土台としたベクターと比較検討した。その結果、FMEVタイプのベクターでは、より幼弱な造血系細胞でより多くの遺伝子発現が認められた。また、その他の、組織においてもベクター間での遺伝子発現の違いを検討した。その結果、肝臓細胞で、FMEVタイプのベクターの強い遺伝子発現が確認できた。(2)導入遺伝子の長期に渡る発現の観察種々のLTRを持つベクターを用いて、造血細胞株に遺伝子導入し、長期にわたる発現量の変化を評価検討中である。(3)遺伝子発現細胞の再濃縮制癌剤耐性遺伝子を用いて、生体内で、遺伝子発現細胞を再濃縮することを目指している。薬剤耐性遺伝子として、ヒトO6-alkylguanine-DNA alkyltransferaseの変異体であるP140Kが、有用であることを確認し、この遺伝子を組み込んだベクターを作成した。(4)種々のLTR、ベクターの作成種々のレトロウイルス・ベクター、種々のウイルスのLTRの部分を用いたキメラLTR、SFFVの部分欠失LTRを作成し、これらのLTRを持つベクターを作成した。これらを用いた解析結果から、SFFVのLTRのU3領域に、強いcis活性があることを見いだした。更に、解析を進めた結果、転写因子NFAT5の結合する、新たな転写制御領域を同定した。本研究では、FMEVベクターを用いて、遺伝子発現に関する検討を行なうため、以下のことを行なった。(1)標的細胞の検討ヒトCD34陽性分画、及び、各種分化マーカー陰性かつCD34陰性分画の細胞を標的に遺伝子導入し、これらの分画間での、SRCへの遺伝子導入効率、遺伝子発現量を比較することを試みた。しかし、各種のサイトカインの組み合わせを用いても、各種分化マーカー陰性かつCD34陰性分画の細胞への遺伝子導入は、効率良く行なえなかった。現在、新たな方法を用いて、この分画の細胞への遺伝子導入を再度、試みている。(2)導入遺伝子の長期に渡る発現の観察種々のLTRを持つベクターを用いて、ヒト造血幹細胞(SRC)に遺伝子導入し、NOD/SCIDマウスの生体内での遺伝子の発現を観察中である。しかし、ヒト造血幹細胞(SRC)への遺伝子導入効率が低いため、発現量の変化を評価することが、困難であることが明らかとなった。遺伝子導入効率を上げるための方法を検討中である。その結果、肝臓細胞で、PMEVタイプのベクターの強い遺伝子発現が確認できた。(2)導入遺伝子の長期に渡る発現の観察種々のLTRを持つベクターを用いて、造血細胞株に遺伝子導入し、長期にわたる発現量の変化を評価、検討中である。

(3)遺伝子発現細胞の再濃縮制癌剤耐性遺伝子を用いて、生体内で、遺伝子発現細胞を再濃縮することを目指している。薬剤耐性遺伝子として、ヒト06-alkylguanine-DNA alkyltransferaseの変異体であるP140Kが、有用であることを確認し、この遺伝子を組み込んだベクターを作成した。(4)種々のLTR、ベクターの作成種々のレトロウイルス・ベクター、種々のウイルスのLTRの部分を用いたキメラLTR、SFFVの部分欠失LTRを作成し、これらのLTRを持つベクターを作成した。これらを用いた解析結果から、SFFVのLTRのU3領域に、強いcis活性があることを見いだした。更に、解析を進めた結果、転写因子NFAT5の結合する、新たな転写制御領域を同定した。
血管異常収縮の原因分子である新規スフィンゴ脂質の産生メカニズムの解明

本年度は、血管異常収縮の原因分子であるスフィンゴシルボスホリルコリン(SPC)が、活性酸素の一種であるOHラジカル依存的に、スフィンゴミエリン(SM)から産生されることを、分子・細胞レベルで証明するための研究を行い、以下の成果を得た。1.分子レベル:OHラジカル依存的なSPC産生が特異的な反応であるかどうかを検討するため、SM分解産物について、インフユージョン導入法によるLC-MS分析を行った。これまでのSPC産生溶液においては、SMを完全に溶解させるため、TritonX-100を含む溶液を用いていたが、直接的なインフユージョン導入法では分析を阻害するため、TritonX-100を含まない溶液を用いて反応を行った。LC-MS分析の結果としては、SPCのm/zである465.3付近にシグナルの僅かな増加が認められ、また、それ以外のいくつかのm/zにおいても増加が認められた。以上のことは、OHラジカル依存的に複数のSM分解産物が生じている可能性、および、SPC産生量については、溶液組成の影響を受ける可能性を強く示唆している。2.細胞レベル:本研究では、SPC産生メカニズムの基盤として、マクロファージのライソゾーム中における赤血球消化を想定している。そこで、ヒト単球系細胞THP-1を、や融刺激によりマクロファージ様細胞に分化させた後、赤血球(オプソニン化あり・なし)や赤血球膜ゴーストを食食させ、細胞内に生じるOHラジカルの量を蛍光指示薬であるHPFを用いて検出した。結果としては、これまでの実験でSPCが産生された条件である、オプソニン化赤血球を食食させた場合のみ、OHラジカルの著明な増加が認められた。以上のことから、ヘモグロビンを含む赤血球の食食・消化の過程でOHラジカルが産生され、そのOHラジカルが赤血球膜のSMに作用してSPCが生じている可能性が強く示唆された。本年度は、血管異常収縮の原因分子であるスフィンゴシルホスホリルコリン(SPC)が、OHラジカル依存的にスフィンゴミエリン(SM)から産生されることを、分子・細胞レベルで証明するための研究を行い、以下の成果を得た。1)分子レベル:フェントン反応で発生させたOHラジカルによって、SMからSPCが産生されることを直接証明するため、OHラジカルおよびSPCを物質として直接定量化した。即ち、ESR測定法によりOHラジカルを同定・定量化し、また、安定同位体元素を標識したSPCを内部標準としたMS/MS測定法(MRM)を用いて、SPCを定量化し、以下の結果を得た。(1)フェントン反応の基本条件である『鉄イオン・過酸化水素・酸性側pH』という条件において、OHラジカルが著明に産生され、その反応溶液中にSMが存在する場合、SPCが経時的に産生された。(2)フェントン反応の抑制剤存在下では、(1)のSPCの産生量が顕著に抑制された。以上より、OHラジカル依存的にSPCが産生されることが直接証明された。2)細胞レベル:本研究では、SPC産生メカニズムの基盤として、酸性側pH且つ過酸化水素が豊富な、マクロファージのライソゾーム中における赤血球消化を想定している。そこで、ヒト単球系細胞THP-1を、PMA刺激によりマクロファージ様細胞に分化させた後、オプソニン化した赤血球を貪食させ、SPC産生量を測定した。現在、貪食時間等を最適化している段階ではあるが、通常の赤血球を貪食させた場合では、SPC産生量が増加するのに対し、ヘモグロビン不含の赤血球膜ゴーストを貪食させた場合では、SPC産生量は増加しないという結果を得ることに成功した。さらに、ライソゾーム中でのSMの分解という点において、本仮説によるSPC産生と競合するASMaseのsiRNAによるノックダウンを目指し、ウエスタンブロット条件の検討を行い、結果として、微量サンプル中でのASMaseの検出に成功した。本年度は、血管異常収縮の原因分子であるスフィンゴシルポスホリルコリン(SPC)が、活性酸素の一種であるOHラジカル依存的に、スフィンゴミエリン(SM)から産生されることを、分子・細胞レベルで証明するための研究を行い、以下の成果を得た。1.分子レベル:OHラジカル依存的なSPC産生が特異的な反応であるかどうかを検討し、以下の結果を得た。(1)OHラジカル以外の代表的な活性酸素(窒素)種(パーオキシナイトライト、一重項酸素、スーパーオキシドアニオン、一酸化窒素、パーオキシラジカル)をSMに作用させた後、反応溶液中のSPC量を質量分析計で測定した結果、パーオキシラジカルに極僅かなSPC産生作用があるものの、その他の活性酸素(窒素)種にはほぼSPC産生作用が無いことが確かめられた。(2)SMの分解産物として、SPC以外にスフィンゴシン-1-リン酸(SIP)やスフィンゴシン(SP)が考えられたので、質量分析計による測定を行ったところ、SIPとSPはほぼ測定されなかった。以上より、OHラジカル依存的なSPC産生は特異的な反応であることが、強く示唆された。そこで、ヒト単球系細胞THP-1を、PMA刺激によりマクロファージ様細胞に分化させた後、赤血球(オプソニン化あり・なし)や赤血球膜ゴーストを貪食させ、SPC産生量を測定した。

結果としては、オプソニン化ありの赤血球を貧食させた場合のみSPCが産生され、そのSPC産生は貧食阻害剤であるサイトカラシンDにより完全に抑制された。以上より、ヘモグロビンを含む赤血球の貪食・消化の過程でSPCが産生されていることが、強く示唆された。本年度は、血管異常収縮の原因分子であるスフィンゴシルボスホリルコリン(SPC)が、活性酸素の一種であるOHラジカル依存的に、スフィンゴミエリン(SM)から産生されることを、分子・細胞レベルで証明するための研究を行い、以下の成果を得た。1.分子レベル:OHラジカル依存的なSPC産生が特異的な反応であるかどうかを検討するため、SM分解産物について、インフユージョン導入法によるLC-MS分析を行った。これまでのSPC産生溶液においては、SMを完全に溶解させるため、TritonX-100を含む溶液を用いていたが、直接的なインフユージョン導入法では分析を阻害するため、TritonX-100を含まない溶液を用いて反応を行った。LC-MS分析の結果としては、SPCのm/zである465.3付近にシグナルの僅かな増加が認められ、また、それ以外のいくつかのm/zにおいても増加が認められた。以上のことは、OHラジカル依存的に複数のSM分解産物が生じている可能性、および、SPC産生量については、溶液組成の影響を受ける可能性を強く示唆している。2.細胞レベル:本研究では、SPC産生メカニズムの基盤として、マクロファージのライソゾーム中における赤血球消化を想定している。そこで、ヒト単球系細胞THP-1を、や融刺激によりマクロファージ様細胞に分化させた後、赤血球(オプソニン化あり・なし)や赤血球膜ゴーストを食食させ、細胞内に生じるOHラジカルの量を蛍光指示薬であるHPFを用いて検出した。結果としては、これまでの実験でSPCが産生された条件である、オプソニン化赤血球を食食させた場合のみ、OHラジカルの著明な増加が認められた。以上のことから、ヘモグロビンを含む赤血球の食食・消化の過程でOHラジカルが産生され、そのOHラジカルが赤血球膜のSMに作用してSPCが生じている可能性が強く示唆された。本年度は、1)溶液中でのOHラジカルによるSPC産生の特異性の検討、および2)マクロファージの赤血球貧食によるSPC産生の証明、を主な研究実施計画としており、それぞれの検討課題について確実に実施し、結果を得ることができた。今後は、細胞レベルでのOHラジカルによるSPC産生を証明するための補足データを得ることを第一目標とする。特に、マクロファージが赤血球を貧食する際に、実際にファゴソーム中にOHラジカルが発生していることを、活性酸素検出用蛍光試薬を用いて視覚的に捉えることができれば重要な補足データになると考えている。また、分子・細胞レベルでの研究結果を個体レベルでの実験に繋げていくのは容易ではないが、くも膜下出血モデル動物(ラット、イヌなど)を用いて、赤血球とマクロファージの動態について解析していきたいと考えている。