hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
口腔上皮器官形成における細胞間結合の機能とその制御

本研究では、口腔組織に由来する発生器官である唾液腺の発生過程におけるコネキシン43の発生制御メカニズムの解明を目的として研究を行った。その結果、唾液腺の発生過程においてコネキシン43は、発生の初期段階から腺房の上皮細胞特異的に発現し、その遺伝子欠損マウスでは唾液腺の形成が阻害されることを見いだした。さらに、唾液腺器官培養におけるコネキシン43の機能阻害ペプチドを用いた解析からも同様の結果が得られた。以上の結果から、細胞間結合分子(コネキシン43)が唾液腺の腺房発生において重要な分子であり、細胞同士がギャップ結合を介して緊密に接していることが、唾液腺組織の分化に必須であることが解った。歯および唾液腺におけるギャップジャンクション分子の発現と、その機能を明らかにすることを目的に研究を進めた。唾液腺の発生段階におけるギャップジャンクション分子コネキシン43の発現を免疫組織学的に検討した結果、唾液腺胚発生の初期段階から発現を認め、上皮細胞に限局した発現を示した。分岐形成が行なわれる発生後期においては、導管での発現は認められず、腺房細胞での発現を認めた。この時期においても唾液腺間葉組織での発現は認められなかった。次にコネキシン43欠損マウスにおける唾液腺発生について検討した結果、遺伝子欠損マウスにおいては、野生型と比較して40%程度唾液腺重量が低下していた。また、欠損マウス由来唾液腺器官培養においては、著しい分岐形成阻害が認められた。次にコネキシン43の機能阻害ペプチドを作製する目的で、これまで報告されているコネキシン43の立体構造解析のデータを参考に、6量体形成に関わる領域に対するペプチドを作製した。本ペプチドは添加することで、コネクソン形成を阻害し、コネキシン43の機能阻害を起こすことを明らかにした。そこで、野生型マウス由来唾液腺器官培養に、コネキシン43の機能阻害ペプチドを添加したところ、遺伝子欠損マウスと同様の結果が得られた。以上の結果から、コネキシン43は、唾液腺の発生、特に分岐形成に重要な分子であり、またコネキシン43の部分ペプチドを応用することで、コネキシンのギャップジャンクション機能を制御できることが明らかとなった。口腔乾燥やドライアイなどの腺組織に起因する疾患が増加する中で、口腔領域では唾液腺の発生についての解析は重要である。また、唾液腺の発生は歯の発生と同様に上皮ー間葉相互作用により行なわれることがわかっている。我々は平成24年度の研究で唾液腺の発生および分岐にギャップジャンクション分子コネキシン43が重要であることを明らかにした。また、我々のこれまでの研究で、上皮細胞から誘導されるPDGF-A(血小板由来成長因子)が、唾液腺間葉に作用し、FGFー10(線維芽細胞増殖因子)の発現を誘導し、このFGF-10が唾液腺上皮の細胞増殖を促進し、分岐形成を促進することがわかっている。また唾液腺の器官培養系に、細胞間結合阻害薬(Oleamide,18α-GA)を添加すると、唾液腺の分岐形成を著しく阻害することがわかっている。そこで、この細胞間結合阻害薬を用いてこれらの増殖因子の発現やシグナル伝達に及ぼす影響を検討した。その結果、阻害剤処理によって、間葉系組織におけるFGFsの発現やPDGF刺激によるERKのリン酸化には影響を及ぼさなかったが、FGF-10刺激による上皮細胞内でのERKのリン酸化の阻害を認めた。また、コネキシン43遺伝子欠損マウスを用いた解析で、唾液腺自体は形成されるもののそのサイズが小さいことや、FGF-10による分岐形成促進も認められないことがわかった。これらのことから、上皮におけるコネキシン43が、間葉からのFGF-10シグナル伝達を直接制御し、唾液腺の分岐形成を促進していることがわかり、唾液腺の分岐形成過程において、唾液腺上皮の細胞間結合が、間葉からの増殖因子刺激の受容に必須であることが明らかとなった。口腔上皮に由来する発生器官として歯および唾液腺に着目し、その中でもギャップ結合分子による発生制御メカニズムの解明を目的として研究を進めている。ギャップ結合分子は、脊椎動物においてはコネキシンとパネキシンに分類されるが、その中でもコネキシン43は、その遺伝子異常が眼歯指異形成症の原因となることから、コネキシン43の歯および唾液腺発生における役割を明らかにすることを本研究の目的としている。これまでの研究成果より、コネキシン43がエナメル芽細胞の分化、特にTGFファミリーによるアメロブラスチンの発現誘導を制御し、さらには唾液腺の分岐形成に重要な役割を演じていることが分かった。具体的には、エナメル芽細胞においてはTGF-b1やBMP2誘導性のERK1/2のリン酸化抑制に伴うRunx2のリン酸化が低下し、唾液腺上皮においてはFGF10誘導性の細胞増殖とERK1/2のリン酸化抑制が、コネキシン43欠損マウスを用いた解析から明らかとなった。そこでなぜ歯や唾液腺においてはERK1/2のリン酸化低下が生じているのかを明らかにする目的で、唾液腺器官培養系を用いて、in vivoでコネキシン43の機能阻害可能なmicroRNAや機能阻害ペプチドのスクリーニングを行い、これらの目的を達成する分子のスクリーニングに成功した。機能阻害ペプチドにおいては、唾液腺の分岐形成を特異的に阻害し、この現象はコネキシン43欠損マウスと同様であった。これらのペプチドを用いることで、コネキシン43に限らず他のギャップ結合分子の機能阻害も可能となり、細胞におけるギャップ結合を自在に制御可能となった。

口腔組織に由来する発生器官として、歯と唾液腺に着目し、その中でも細胞間結合分子の1つであるギャップ結合分子による発生制御メカニズムの解明を目的とし研究を進めている。これまで歯の上皮細胞分化においてギャップ結合分子であるコネキシン43が、TGF-b1やBMP2によって活性化されるERK1/2のリン酸化を制御している事を明らかにし、この分子シグナルが最終的にエナメル質形成に関わるエナメル芽細胞の分化誘導に必須であることを見いだした。また、同様の制御はFGF10による唾液腺分岐形成についても明らかとなった。そこで本年度では、唾液腺分岐形成過程におけるコネキシン43の役割解明について検討を行った。唾液腺において、上皮から分泌されるPDGF-AAが唾液腺間葉に作用し、唾液腺間葉から二次的に分泌されるFGF10が、唾液腺上皮の増殖を制御し、唾液腺の発生が進行する。この過程においてコネキシン43は、唾液腺上皮に発現しており、間葉組織にけるERK1/2のリン酸化には関与しないが、上皮細胞におけるERK1/2のリン酸化を制御していた。さらに唾液腺上皮細胞においてはコネキシン43が、増殖因子刺激後の細胞内カルシウムを増大させ、そのカルシウムレベルがある一定の閾値を超えると、ERK1/2をリン酸化し、分岐を促進することを見いだした。コネキシン43を阻害すると、この細胞内カルシムの上昇が認められず、細胞の増殖が低下した。このことから、細胞同士がギャップ結合を介して緊密に接していることが、組織の分化を促進する事に繋がることが解った。本研究では、口腔組織に由来する発生器官である唾液腺の発生過程におけるコネキシン43の発生制御メカニズムの解明を目的として研究を行った。その結果、唾液腺の発生過程においてコネキシン43は、発生の初期段階から腺房の上皮細胞特異的に発現し、その遺伝子欠損マウスでは唾液腺の形成が阻害されることを見いだした。さらに、唾液腺器官培養におけるコネキシン43の機能阻害ペプチドを用いた解析からも同様の結果が得られた。以上の結果から、細胞間結合分子(コネキシン43)が唾液腺の腺房発生において重要な分子であり、細胞同士がギャップ結合を介して緊密に接していることが、唾液腺組織の分化に必須であることが解った。平成26年度はコネキシン43欠損マウスの唾液腺上皮で認められた現象についてさらに解明するために、唾液腺の器官培養系を用いて機能阻害ペプチドのスクリーニングを行なった。その結果、これによって見つけられたペプチドを用いることによって細胞におけるギャップ結合を制御することまで可能にできた。27年度が最終年度であるため、記入しない。医歯薬学今後は平成2426年度の研究結果をもとにして、人為的なギャップ結合の発現や機能制御を行なうことで、より効率的な組織細胞分化や器官形成法への応用を行なっていく。平成24年度は、コネキシン43が唾液腺の発生過程において、上皮細胞特異的に発現し、その遺伝子欠損マウスでは唾液腺の分岐形成が阻害されること、さらにコネキシン43の機能阻害ペプチドを用いた解析からも、阻害ペプチドの添加により唾液腺の腺房数の減少を確認した。この事から、コネキシン43が唾液腺の分岐形成に重要な役割を果たしている事が確認できた。
ネパールヒマラヤの上昇プロセスに関する岩石学的および年代学的研究

山脈の基盤知覚を形成する造構造運動と地表隆起をもたらす造地形運動は区別されなければならない.ヒマラヤの基盤形成は古いが,その山脈上昇は新第三紀に始まる.その隆起運動はヒマラヤにみられる大規模なintrcontinetal thrust,とくに主中央衝上断層帯(MCTZ)の活動と密接に関連している.ヒマラヤの山脈上昇プロセスおよびそれとMCTZの関係を検討する目的で, MCTZの運動に伴なう変成作用と変形運動の解析, K-Ar年代やフィッション・トラック(F.T.)年代の測定を行ない,以下の結果を得た.1.ヒマラヤでは,中生代以前にも複数の変成作用が考えられるが,現在みられる岩石は,古第三紀のバロビアン型変成作用と新第三紀のMCTZの衝上運動によるせん断熱変成作用とによる複変成作用の産物である.2.変形運動はD_1_4の4時期が区分される.そのうち, D_2はMCTZの運動期にあたり,もっとも強くかつ広範にみられる. D_3・D_4は上昇期であろう.3.角内在と黒雲母から得られたそれぞれ, 61.5±3.1, 56.7±2.8MaのK-Ar年代の意味はさらに検討を要するが,現在のところ,古新第三紀に推定されるバロビアン型変成作用の冷却過程を示すと考えられる.4.F.T.年代測定は,アパタイト・ザクロ石についてはU量が少なく,測定不能であったが, 4ケ所14点のヒマラヤ片麻岩から分離したジルコンは2.20.6(±0.20.1)Maの年代を示した.これらの年代は新第三紀のMCTZの運動に伴なう変成作用の冷却過程を示すと考えれらる.5.各資料の採集高度と年代の関係から, 2.2.6Maの間で,尾根部では3.24および2.39mm/年,谷部では0.83および0.47mm/年の上昇速度を得た.ジルコンの閉鎖温度を200°C,地温勾配を30°C/kmと仮定すると,約1.9Maから現在までの上昇速度は3.56.1mm/年と推定される.これはヒマラヤの上昇が第四紀に入ってから加速していることを示唆している.山脈の基盤知覚を形成する造構造運動と地表隆起をもたらす造地形運動は区別されなければならない.ヒマラヤの基盤形成は古いが,その山脈上昇は新第三紀に始まる.その隆起運動はヒマラヤにみられる大規模なintrcontinetal thrust,とくに主中央衝上断層帯(MCTZ)の活動と密接に関連している.ヒマラヤの山脈上昇プロセスおよびそれとMCTZの関係を検討する目的で, MCTZの運動に伴なう変成作用と変形運動の解析, K-Ar年代やフィッション・トラック(F.T.)年代の測定を行ない,以下の結果を得た.1.ヒマラヤでは,中生代以前にも複数の変成作用が考えられるが,現在みられる岩石は,古第三紀のバロビアン型変成作用と新第三紀のMCTZの衝上運動によるせん断熱変成作用とによる複変成作用の産物である.2.変形運動はD_1_4の4時期が区分される.そのうち, D_2はMCTZの運動期にあたり,もっとも強くかつ広範にみられる. D_3・D_4は上昇期であろう.3.角内在と黒雲母から得られたそれぞれ, 61.5±3.1, 56.7±2.8MaのK-Ar年代の意味はさらに検討を要するが,現在のところ,古新第三紀に推定されるバロビアン型変成作用の冷却過程を示すと考えられる.4.F.T.年代測定は,アパタイト・ザクロ石についてはU量が少なく,測定不能であったが, 4ケ所14点のヒマラヤ片麻岩から分離したジルコンは2.20.6(±0.20.1)Maの年代を示した.これらの年代は新第三紀のMCTZの運動に伴なう変成作用の冷却過程を示すと考えれらる.5.各資料の採集高度と年代の関係から, 2.2.6Maの間で,尾根部では3.24および2.39mm/年,谷部では0.83および0.47mm/年の上昇速度を得た.ジルコンの閉鎖温度を200°C,地温勾配を30°C/kmと仮定すると,約1.9Maから現在までの上昇速度は3.56.1mm/年と推定される.これはヒマラヤの上昇が第四紀に入ってから加速していることを示唆している.これまで収集された岩石サンプルを整理し、顕微鏡鑑察による変成鉱物の組み合わせをもとに中央ネパールの広域的な変成分帯図を作成した。その結果によると、変成作用は低ヒマラヤ帯からその北の主中央衝上断層帯にかけて緑泥石帯、黒雲母帯、ザクロ石帯と北方(層序的上位)へ増加し、主中央衝上断層帯はザクロ石帯にほぼ一致する。主中央衝上断層帯の北側の高ヒマラヤ帯の南部はラン晶石帯(一部珪緑帯)で、北へザクロ石帯、黒雲母帯と変成度は減少する。主中央衝上断層帯北部のヒマラヤ片麻岩類の角内石-黒雲母石灰質片麻岩の角内石、白雲母-黒雲母花崗岩質片麻岩(正片麻岩)の黒雲母について、K-Ar年代を米国テレダイン社に依頼して測定した結果、61.5±3.1 56.7±2.8Maの年代を得た。

この値は従来知られているヒマラヤ片麻岩類のK-Ar年代(3015Ma)よりも明らかに古い。しかし、Rb-Srアインクロン年代では古第三紀あるいは古生代、先カンブリアの年代も報告されている。したがって、この年代は古い年代の若返りを示す可能性が強い。いっぽう、予察的に行なった上記花崗岩質片麻岩のジルコンのフィッショントラック年代測定の結果は2.2±0.2Maであった。ジルコンの閉止温度を200°C(約7Kmの深度に相当)と仮定すると、この岩石の上昇速度は約3.2Km/my(3.2mm/年)となる。これはいろいろな地質学的データから推定される更新世以降のヒマラヤの上昇速度(23Km/my)とほぼ一致する。主中央衝上断層帯の岩石について、あるいはスフィン、アパタイトなどの閉止温度の異なる鉱物についても測定は行なったが、計測、計算はまだである。なお、普遍的に産するザクロ石についてもフィッショントラック測定を試行したが、ウラン含量が少ないため誤差が多く、今後検討を要する。
社会的選好におけるゼロ効果：形式化と測定

本研究は、社会的選好(つまり、意思決定が他者へ及ぼす影響を明示的に考慮した選好)に関する意思決定理論および意思決定実験研究を行う。特に、複数個人から成る社会の所得分布に関する個人の社会的選好に注目し、その実態はどのようなものかを実験研究をとおして考察し、それはどのようにモデル化されるのかについて意思決定理論研究をとおして考察する。そして、歪みのない(少ない)社会的選好の測定方法を提案する。
希土類ドープ窒化ガリウム半導体による革新的量子センシング―高感度局所磁場計測

ランタノイドドープGaNによる光検出磁気共鳴(ODMR)に基づく量子センシングを実証するためには、効率的な発光条件(共鳴励起条件)を見出し、高い発光強度を得る必要がある。そこで2018年度では、ランタノイド(Pr、NdおよびEu)に対する最適な励起光波長を明らかにした。1μm×1μmの微少領域に注入されたランタノイドからの発光を、共焦点レーザー走査型蛍光顕微鏡によって検出し、その発光強度が励起光波長によってどのように変化するかを調べた。その結果、ランタノイド固有の共鳴励起波長が複数観測された。例えばPrの場合では、共鳴励起条件での信号・バックグラウンド比が従来の532nm光励起と比較して12倍に向上した。これにより、光の回折限界未満の領域(200nmΦ未満)に注入されたPrからの高感度発光観測が可能となった。同様に、NdやEuに対しても共鳴励起条件を明らかにした。また、フォトルミネッセンス(PL)スペクトルの励起光波長依存性を調べ、特にNdについては、励起光波長がPLスペクトルに大きく影響することを明らかにした。これは、Ndの発光サイトが複数種存在しており、励起光波長によって発光プロセスが異なっているためであると考えられる。さらに時間分解PL測定によりPrおよびNdの発光遷移寿命の同定にも成功した。発光遷移寿命は、発光中心としての輝度を示す指標のひとつであり、短いほど輝度が高いことを意味するが、ランタノイドにおいてはμ秒オーダーと比較的長いため、これを短縮させることによってさらなるランタノイドドープGaNの高強度発光を目指す必要がある。2018年度では、特にイオン注入したPrやNdを効率的に発光させる条件(共鳴励起条件)を明らかにすることを中心に研究を進め、当初の目標を達成することが出来た。また、最小100nm×100nmの領域に1E4個イオン注入したPrからの発光の観測に成功しており、さらに少ないアンサンブル数での観測が可能である見込みが得られている。加えて、発光遷移寿命やPLスペクトルの励起光波長依存性といった、当初の計画に含めていないが本研究において重要な知見を得ることに成功している。GaNにドープしたNdやPrの光学的特性は2018年度で詳しく明らかにすることができたため、今後はODMR観測を中心に取り組んでいく。GaNエピ膜の微小領域に注入したNd3+もしくはPr3+に対し、共鳴励起条件でのODMR測定を行う。高周波印加条件(周波数、強度)を最適化し、磁場や電場印加時のODMRスペクトルの変化を調べる。必要に応じて、試料を低温にし、ODMRの感度を向上させるなどの工夫を行う。上記に加え、単一ランタノイド観測に向けたNdのイオン注入条件や熱処理条件の検討を引き続き行っていく。内定年度:2017ランタノイドドープGaNによる光検出磁気共鳴(ODMR)に基づく量子センシングを実証するためには、効率的な発光条件(共鳴励起条件)を見出し、高い発光強度を得る必要がある。

必要に応じて、試料を低温にし、ODMRの感度を向上させるなどの工夫を行う。上記に加え、単一ランタノイド観測に向けたNdのイオン注入条件や熱処理条件の検討を引き続き行っていく。
在日インド系コミュニティの音楽とその動態

本年度は、沖縄での現地調査を実施し、宗教施設で演奏される宗教歌謡(バジャン、キールタン)の調査継続した。これらの歌謡の旋律的特徴については、成果の一部をすでに発表している(小日向,英俊. 2018.沖縄インド人コミュニティーの宗教歌謡-旋律構造(その一).伝統と創造, Vol.7, 41-54、および小日向,英俊. 2019.沖縄インド人コミュニティーの宗教歌謡-旋律構造(その二).伝統と創造, Vol.8, 25-36 )。現在、バジャンの歌詞に着目した分析を継続中である。上記バジャンの会は、基本として1週間に2回開催されており、1回はインド人コミュニティー中心,2回目はインドの聖者信仰であるサイババ派の沖縄支部としての活動である。宗教を媒介として移民社会がそのアイデンティティーを確認する場であるとともに、インドの宗教的世界、精神世界に惹かれる日本人が交流する場ともなっていることを、再確認した。また一方で、沖縄インド人コミュニティーの人々の多くが、シンディー語を話す人々である。グジャラート州アーメダーバード市でのフィールド調査も実施した。アーメダーバード市のシンディー系コミュニティーの居住区(クーベルナガルとその周辺地区)のヒンドゥー寺院およびスィク寺院の位置を確認・訪問し、宗教歌謡の実践についても関係者にインタビューを実施した。その中で興味深い事例は、沖縄インド人の宗教歌謡の楽曲の一部に酷似する歌が、ある寺院で歌われていた点である。インド国内におけるスィンディー系コミュニティーが謳う宗教歌謡が、直接・間接に、在沖縄インド人コミュニティーに伝わっている可能性も示唆しており、今後の研究のポイントにもなる示唆を得ることができた。沖縄においては、スィク教とヒンドゥー教の混淆が観察されるが、グジャラート州アーメダーバードにおいても同様の状況かについては、さらなる調査の必要性が感じられた。2018年度の当初計画では、沖縄フィールド調査を2回予定したが、諸事情により1回に止まった。また、海外調査は、予定の通りに1回実施したが、本来取るべき調査期間が諸事情により短期となったため、十分な調査が行えた状況ではない。文献探査においては、当初予想した量に比べ、シンディー系コミュニティーの宗教実践に関する先行研究が少ないことが判明した。さらなる探査の必要性が認識された。ただ、日本へのオールドカマーインド系コミュニティーとしての沖縄在インド人の音楽の旋律駅特徴については、ある程度の分析が終了している。在沖インド人の故地であるインド国内シンディー系コミュニティーの調査は、31年度(令和1年度)にも継続が必要なことが判明した。32年度(令和2年度)に予定する東東京地域のインド人コミュニティーの音楽調査と合わせて、グジャラート州での調査も継続予定である。さらに、現時点(令和1年5月)では、33年度(令和3年度)に予定する神戸地域のインド人コミュニティーの調査も予備的作業の一部を実施しており、調査内容の絞り込みを早期に行いたいと考える。

在沖インド人の故地であるインド国内シンディー系コミュニティーの調査は、31年度(令和1年度)にも継続が必要なことが判明した。32年度(令和2年度)に予定する東東京地域のインド人コミュニティーの音楽調査と合わせて、グジャラート州での調査も継続予定である。さらに、現時点(令和1年5月)では、33年度(令和3年度)に予定する神戸地域のインド人コミュニティーの調査も予備的作業の一部を実施しており、調査内容の絞り込みを早期に行いたいと考える。物品費の内、図書および視聴覚資料の購入予定が未消化となった。また旅費の内、予定した沖縄フィールドワークの回数が1回減ったため。31年度において、沖縄フィールドワークを1回追加し、図書などの購入を行う予定。
エギゾチック原子の動的過程の理論的研究

本研究課題は(1)ミュウ粒子触媒核融合反応に関する研究、(2)異常長寿命pHe+に関する研究、(3)その他核子、核外電子、ハドロン粒子の相互作用の関与する問題に関する研究に大別される。まず全体に共通する問題として広く質量の比が任意の3体系過程の取扱いの一般論がある。この一般論いついては戸嶋と石原は超球座標チャンネル結合法で境界条件を満た収束の良いコードを開発し、これを陽電子散乱過程、陽子、反陽子による散乱問題に応用した。また上村は組み替えチャンネル結合法なる方法を開発し、ガウス型関数を基底にとることで種々の応用の可能性について調べた。(1)の具体的な問題については原が[(dtm)^*dee]および[(ddm)^*dee]のオージェ過程についての計算を行った。前者は双極子相互作用の過程であるが、後者は単極子相互作用の過程である。また福島は凝縮系でのミュウオン分子生成の影響について系統的に調べている。特に固相中では気体中では禁止過程となっているエネルギー敷居値以下でも分子生成が起こり得る事を示した。永嶺は(1)の過程についてより詳細な実験を行うための装置建設を行った。(2)については島村が分子モデルでの精密なエネルギー計算を行ったが、これからさらに進めてこのモデルの妥当性についての検討を進めた。さらにいくつかの物理量の評価を行った。大槻は反陽子はどのような原子、分子に捕獲された場合が最も安定であるかを検原子モデルによって検討した。とくにNe原子の場合について詳細な検討を行った。渡部はHe+のHe原子との衝突による励起、脱励起過程についての計算を行った。(3)については赤石は負電荷を持つ重いハドロンが作るエギゾチック原子のカスケード過程を系統的に調べた。また鳴海はk中間原子での2核子吸収過程について調べた。μ粒子触媒核融合では[(dtμ)dee]の働起エネルギーの計算が重要である。島村(理研)、上村(九大)らはこのエネるギーの補正項である(dtμ)コアのサイズ効果の精密計算を行い従来よりもこの効果の大きいことを示した。原(筑波短大)とArmerらは[(dtμ)dee]のオージェ効果よるに安定化過程の粘密計算を行った。上村(九大)は木野の協力を得てtd中にある不純物Heへμ粒子が移行反応するときに重要な役割を果すd^4Heμとd^3Heμの放射性脱働起と解離性脱働起を木野の開発した新しい方法で計算した。これは永嶺らのX線の測定による実験結果とより一致を見た。福島(都立大)は固体水素中のμ触媒反応の研究を行い、スペクトル分布を調べることにより凝縮効果を解明した。pHe^+については佐々木グループ(北大)の大槻らにより分解原子コアモデルによる計算を行い、山崎(東大.核研)らとカスケード活過程についての評価を行った。島村(理研)は同じ問題をボルン・オボンパイマー近似で定式化して、この分子の活性質を計算した。前述の分極原子コアモデルについての再検討を行った。石原、戸嶋(筑波)らはTDCW法を用いてポジトロニラム生成反応の理論的解明を行った。また低エネルギーでは超付度係法による計算を行った。赤石(東大、核研)はストレンジネスを持った負電荷の粒子がつくる原子について、そのカスケード過程と粒子が核と吸収された後の現象を調べた。鳴海(福山大)はK中間子原子とおける2核子吸収過程について翁長と調べた。

渡部(ICU)は大崎の協力を得て任意の質量比のクローン3体問題についての古転S行列法の適用考えて定式化を行った。実験グループ、山崎(東大原子核研)と永嶺(東大理,理研)はそれぞれpHeとμCFの実験を行い理論グループにホットを実験結果を提供した。そのあるものは計算された。あるものは将来の研究にゆだねられている。(1)mu粒子触媒核融合反応では上村、石原、戸嶋、原、福島らが研究した。上村は組み替えチャンネル結合法を改良し、今回はこれに新しい基底関数系を取ることにより能率的な計算が可能となった。mu粒子系の各原子過程に必要な行列要素の計算を行った。石原、戸嶋はdmu+t→d+tmuの過程を超球座標を用いた緊密結合法によって精密計算を行っている。この方法により励起状態間の信頼できる計算が期待できる。原は英国のグループと共同で[(dtmu)_<11>dee]および[(ddmu)_<11>dee]のAuger相互作用による脱励起過程の計算を行った。福島は固体水素中のミュウオン分子生成過程を計算した。その結果敷居値以下に共鳴準位のあるときには低温度量域で顕著な凝縮体効果が期待できることが分かった。(2)PHeの原子過程に関与する問題は上村,島村、渡部、大槻らが研究している。上村らは前記の組み替えチャンネル結合法を用いてエネルギー準位の計算を行った。島村らはP+He,p+Heの衝突による1重、2重イオン化断面積を分子基底による緊密結合法で計算を行いその機構を解明できた。渡部らはP+He→PHe^++eの過程の計算を行っている。今年度をその定式化を行うエネルギー準位の計算を行った。大槻はPHe^+とPNe^+,PNe^<++>のP励起状態の安定性の比較を行う目的でこれらの分子のエネルギー状態を求めオージェ遷移確率の計算を行った。(3)その他の理論的問題は赤石、鳴海が行った。赤石は重いハイペロンが作るエギゾチック原子のカスケート過程を調べそれを通して生成されるハイパー核との関係を議論した。鳴海はk中間子原子での2核子吸収についてHeの場合について計算を行い、これをdの場合についても計算中である。(4)永嶺らはカナダのTRIUMF研究所で固体水素薄膜中でのmu粒子触媒核融合反応の実験を行った。また英国Rutherford-Appleton研究所に線用ビームラインを建設している。本研究課題は(1)ミュウ粒子触媒核融合反応に関する研究、(2)異常長寿命pHe+に関する研究、(3)その他核子、核外電子、ハドロン粒子の相互作用の関与する問題に関する研究に大別される。まず、全体に関与する問題として広く質量が任意の3体系での取扱いの一般論があるこれは(1)および(2)の問題の両方、場合によっては(3)でも適用可能な手法開発の問題がある。戸嶋は超球座標チャンネル結合法で境界条件を満た収束の良いコードを開発し、これを陽電子散乱過程、陽子、反陽子による散乱問題に応用した。また上村は組み替えチャンネル結合法なる方法を開発し、ガウス型関数を基底にとることで種々の応用の可能性について調べた。(1)の具体的な問題については原が[(dtμ)^*dee]および[(ddμ)^*dee]のオージェ過程についての計算を行った。前者については双極子相互作用による過程であるが、後者については単極子相互作用による過程である。
カテゴリの共起に基づく物体の識別と検出

画像に含まれる物体のカテゴリを識別する一般物体認識の研究において,従来,一枚の画像に唯一のカテゴリの物体が存在することを陽にまたは陰に仮定することが多かった.本研究では,複数カテゴリの物体が一枚の画像に共存する様子を明示的に取り扱う枠組みを提案すると共に,カテゴリの共起しやすさというコンテキストを手掛かりとして,見えだけでは曖昧で識別の困難な物体をも識別することを目指す.具体的には,Bag of Featuresのパラダイムにおいて,局所特徴の相対度数分布の線形結合に基づく尤度とカテゴリの共起に基づく事前確率を組み合わせた事後確率を最大化することにより,回帰の枠組みで各カテゴリの存在比率を推定する.PASCALデータセットを用いた実験を行い,共起情報を組み込むことの有効性を支持する結果を得た.画像に含まれる物体のカテゴリを識別する一般物体認識の研究において,従来,一枚の画像に唯一のカテゴリの物体が存在することを陽にまたは陰に仮定することが多かった.本研究では,複数カテゴリの物体が一枚の画像に共存する様子を明示的に取り扱う枠組みを提案すると共に,カテゴリの共起しやすさというコンテキストを手掛かりとして,見えだけでは曖昧で識別の困難な物体をも識別することを目指す.具体的には,Bag of Featuresのパラダイムにおいて,局所特徴の相対度数分布の線形結合に基づく尤度とカテゴリの共起に基づく事前確率を組み合わせた事後確率を最大化することにより,回帰の枠組みで各カテゴリの存在比率を推定する.PASCALデータセットを用いた実験を行い,共起情報を組み込むことの有効性を支持する結果を得た.膨大なデジタル画像データの蓄積に伴って増大する計算機による画像の分類や検索に対する社会的ニーズと,計算機による画像の内容や意味の理解という学術的探究心から,近年,画像に含まれる物体のカテゴリを認識する一般物体認識と呼ばれる研究が活発に行われている.同一カテゴリに属する物体であっても形状や色が異なることや,同一物体であっても視点や照明などの撮影条件に依存して見えが異なることから,一般物体認識は極めて困難な問題であると考えられるが,近年の活発な研究により,自然言語処理の分野に由来するBag of Features(BoF)と呼ばれる局所特徴に基づくアプローチが有効であることについては,一定のコンセンサスが得られつつある.しかしながら, BoFに関するほとんど全ての研究は,一枚の画像に唯一のカテゴリの物体が存在することを仮定しており,様々なカテゴリの物体が共存するような一般的な画像を扱うのに適していない.本研究では,複数カテゴリの物体が一枚の画像に共存する様子を明示的に取り扱う枠組みを提案すると共に,カテゴリの共起しやすさというシーンのコンテキストを手掛かりにして,画像のみからは曖昧で認識が困難な物体をも識別する.具体的には,局所特徴ヒストグラムの線形結合に基づく尤度のモデル化,および,共分散行列による共起関係のモデル化から,最大事後確率推定により各カテゴリが画像中に存在する比率を求める. PASCALデータセットを用いた実験を行い,カテゴリの共起が物体の識別に有効に働くことを示唆する結果を得た.デジタル画像データの爆発的な増加に伴う計算機による画像の分類や検索に対する社会的ニーズ,ならびに,計算機による画像の内容や意味の理解という学術的探究心から,近年,画像を計算機に自動で認識させる「一般物体認識」と呼ばれる研究が注目を集めている.特に,計算機による自動認識という究極の目標への第一歩として,何がどこにあるのか,つまり,画像に含まれる物体の識別(カテゴリ認識)や検出(領域分割)の研究が活発に行われている.同一カテゴリに属する物体であっても形状や色が異なることや,同一物体であっても視点や照明などの撮影条件に依存して見えが異なることから,物体の識別や検出は極めて困難な問題であるが,自然言語処理の分野に由来するBag of Features(BoF)と呼ばれる局所特徴に基づくアプローチが有効であることについては,一定のコンセンサスが得られつつある.しかしながら,BoFに基づく物体の識別に関する多くの研究は,一枚の画像に唯一のカテゴリの物体が存在することを仮定しており,様々なカテゴリの物体が共存するような一般的な画像を扱うのに適していない.本研究課題では,物体識別に関して,様々なカテゴリの物体が一枚の画像に共存することを明示的に扱うと共に,カテゴリの共起しやすさというシーンのコンテキストを考慮した枠組みを提案した.具体的には,局所特徴ヒストグラムの線形結合に基づく尤度のモデル,および,共分散行列による共起関係のモデルから,最大事後確率推定により各カテゴリが画像中に存在する比率を推定する.一方,物体検出に関しては,物体カテゴリの空間的な連続性を考慮して,グラフカットを用いた枠組みを検討した.上述のようにして推定したカテゴリの存在比率を事前確率とみなすことで,ある局所特徴があるカテゴリの物体から生成される確率を計算できるために,カテゴリの共起関係を物体検出にも組み込むことができる.
子宮内膜癌におけるマイクロサテライト不安定性と抗癌剤感受性との関連

進行子宮内膜癌症例では術後補助治療が必要となる場合も多く、化学療法または放射線療法のいずれを選択すべきかについてのevidenceはまだ得られていない。そこで、腫瘍の個性診断に基づくオーダーメード化医療の確立の指標として、マイクロサテライト不安定性(MSI)が有用であるか否か検索した。1.MSI:(1)子宮内膜癌細胞株および臨床腫瘍材料より抽出したDNAを用い数種類のmarkerをPCR増幅して解析すると、MSI陽性頻度は約35%で、大腸癌の陽性頻度より高い事実が判明した。(2)ミスマッチ修復(MMR)遺伝子のうちhMLH1、hMSH2、hMSH6遺伝子産物に対する抗体を用いた免疫組織化学検索にて、MSI陽性例では有意に高率に蛋白発現低下が認められた。しかし、hMLH1遺伝子変異は1例(MSI陽性内膜癌の6%)にナンセンス差異を認めたのみで、hMLH1遺伝子promoter領域のメチル化はMSI例にて有意に高率に確認されたことより、内膜癌のMSIの主たる要因はhMLH1遺伝子promoter領域のメチル化によると考えられた。2.Histoculture Drug Response Assay(HDRA)法による薬剤感受性検査:殺細胞効果判定にはMMT assayを用いて各検体に対する各薬剤のIC50値を算出し、低感受性群と高感受性群に群別した。体癌MSI陽性15例におけるcisplatin低感受性頻度は93%でMSI陰性群より有意に高く、MSI陽性群がcisplatin低感受性を示す事実を臨床検体を用いて初めて確認した。また、複数の子宮内膜癌細胞株でメチル化されたhMLH1promoter領域を脱メチル化処理すると、cisplatin感受性が改善する事実も確認され、hMLH1遺伝子のメチル化の有無が術後補助療法の選択に重要な情報であることが判明した。1.Microsatellite Instability (MSI):(1)子宮内膜癌細胞株および臨床腫瘍材料に対して、抽出したDNAを用い数種類のmarker部分をPCR増幅して、オートシークエンサーにて解析したところ、MSI陽性頻度は約35%であり、大腸癌のMSI陽性頻度より高いことが判明した。(2)ミスマッチ修復(MMR)遺伝子のうちhMLH1、hMSH2、hMSH6の遺伝子産物に対する抗体を用いた免疫組織化学検索にて、MSI陽性例では有意に高率にMMR遺伝子蛋白発現低下が認められた。しかしながら、hMLHI遺伝子の変異は1例(MSI陽性内膜癌のわずか6%)にcodon100のナンセンス差異を認めたのみで、hMLH1遺伝子promoter領域のメチル化はMSI例にて有意に高率に確認されたことより、内膜癌のMSIの主たる要因はhMLH1遺伝子promoter領域のメチル化によると考えられ、同蛋白の免疫染色がMSIの簡便な検出に有用であることが判明した。現在、同意が得られた11例の子宮体癌患者由来の子宮内膜細胞診液状検体を使用し、hMLH1遺伝子のプロモーター領域の高メチル化をメチル化特異的PCR法(MSP)により解析を実施し、その約30%にhMLH1遺伝子のメチル化を検出している。2.Histoculture Drug Response Assay (HDRA)法による薬剤感受性検査:殺細胞効果判定にはMMT assayを用いて各検体に対する各薬剤のIC50値を算出し、低感受性群と高感受性群に群別するためのカットオフ値を算出したところ、体癌MSI陽性15例におけるcisplatin低感受性の頻度は93%でMSI陰性群より有意に高く、MSI陽性群がcisplatin低感受性を示す事実を臨床検体を用いて初めて確認した。

進行した子宮内膜癌症例では、術後補助治療が必要とされる場合も多く、化学療法または放射線療法のいずれを選択すべきかについてのevidenceはまだ得られていない。このような現状の中で、個々の症例毎に予後に影響を与える分子生物学的因子を検索し、腫瘍の個性診断を行い、それに基づくオーダーメード化医療の確立が切望されており、マイクロサテライト不安定性(MSI)が内膜癌の術後治療の選択において重要な情報となり得る可能性が高いと考えられる。そこで、MSIがどのようにシスプラチン感受性に関連しているかを、さらにタキサン製剤など他の抗癌剤への感受性とMSIとの関連を検索した。Histoculture Drug Response Assay(HDRA)法による薬剤感受性検査では、殺細胞効果判定にはMMT assayを用いて各検体に対する各薬剤のIC50値を算出し、低感受性群と高感受性群に群別するためcut-off値を算出した。体癌MSI陽性15例におけるcisplatin低感受性の頻度は93%でMSI陰性群より有意に高く、MSI陽性群がcisplatin低感受性を示す事実を、臨床検体を用いて初めて確認した。また、複数の子宮内膜癌細胞株でメチル化されたhMLH1遺伝子のpromoter領域を脱メチル化処理をかけることにより、cisplatin感受性が改善するin vitro系の事実も確認され、hMLH1遺伝子のpromoter領域のメチル化の有無が術後補助療法の選択において重要な情報であることが判明した。
劇症肝炎患者血漿中の肝再生因子の精製とその生理的意義に関する研究

申請者らは,研究実施に基づいて研究を行ない,以下のような成果を得た.(1)初代培養ラット肝細胞を用いて, 20例の劇症肝炎患者血清および血漿のDNA合成促進活性を測定すると, 1例を除いた全例で正常者の数倍数十倍のDNA合成促進活性が認められた.DNA合成活性は患者の昏睡度と関連があり,昏睡度の進行とともに著名な上昇が認められた.(3)最終精製標品はSDS-PAGEで分子量約8万前後に数本のバンドを示したが,そのいずれもが染色度に応じた肝細胞増殖活性を有していた. hHGFは還元すると分子量約6万と約3万の二種のバンドに分かれたことから,これがS-S結合してhHGFを形成しているものと考えられる.(4)hHGFのDNA合成促進活性は1ng/mlで認められ, 10ng/mlで最大となりhEGF(human epidermal growth facter)あるいはinsulinよりも強力であった.またhHGFはhEGFやinsulinと相加的あるいは相乗的に働いた.このことはhHGFがhEGFとは異なる新しい増殖因子であることを示唆する.(5)さらに申請者らは最近,得られた精製hHGFでBALB/Cマウスを免疫し,その脾臓細胞とミエローマ細胞を融合させたモノクローナル抗体を作製することに成功した.現在モノクロナール抗体を用いて, hHGF産生臓器を検討中である.申請者らは,研究実施に基づいて研究を行ない,以下のような成果を得た.(1)初代培養ラット肝細胞を用いて, 20例の劇症肝炎患者血清および血漿のDNA合成促進活性を測定すると, 1例を除いた全例で正常者の数倍数十倍のDNA合成促進活性が認められた.DNA合成活性は患者の昏睡度と関連があり,昏睡度の進行とともに著名な上昇が認められた.(3)最終精製標品はSDS-PAGEで分子量約8万前後に数本のバンドを示したが,そのいずれもが染色度に応じた肝細胞増殖活性を有していた. hHGFは還元すると分子量約6万と約3万の二種のバンドに分かれたことから,これがS-S結合してhHGFを形成しているものと考えられる.(4)hHGFのDNA合成促進活性は1ng/mlで認められ, 10ng/mlで最大となりhEGF(human epidermal growth facter)あるいはinsulinよりも強力であった.またhHGFはhEGFやinsulinと相加的あるいは相乗的に働いた.このことはhHGFがhEGFとは異なる新しい増殖因子であることを示唆する.(5)さらに申請者らは最近,得られた精製hHGFでBALB/Cマウスを免疫し,その脾臓細胞とミエローマ細胞を融合させたモノクローナル抗体を作製することに成功した.現在モノクロナール抗体を用いて, hHGF産生臓器を検討中である.申請者らは本年度の研究実施計画に基づいて研究を行ない、以下の様な成果を得た。(1)成熟ラット初代培養肝細胞を用いて、20例の劇症肝炎患者血清または血漿のDNA合成促進活性を測定すると、1例を除いた全例で正常者の数倍数十倍のDNA合成活性の増加が認められた。DNA合成活性は患者の昏睡度と関連性がみられ、昏睡度の進行とともに著明な上昇が認められた。(2)DNA合成促進活性の高い症例の血漿交換療法時に得られた血漿から、肝細胞増殖因子(human Hepatocyte Groth Factor:h.HGF)の完全精製に成功した。患者血漿を加熱(56°C,15分)、遠心した後その上清を硫安分画(1.15-2.05M)し、さらにアフィゲルブルー、ペパリン-セファロース及びヒドロキシアパタイトの各クロマトグラフィーによってhHGFを約21万倍に精製することができた。収率は約20%で、1lの血漿から約40μgのhHGFが得られた。(3)精製標品はSDS-PAGE(非還元)で分子量約8万前後に数本のバンド(銀染色)を示したが、未染色のゲルから溶出して活性を測定すると、いずれのバンドも染色度に応じた肝細胞増殖活性を有しており、これら数本のバンドはいずれもhHGFの多様な分子型を示していると思われる。溶出された数本のバンドは、還元後のSDS-PAGEでいずれも分子量約6万と3万前後の二種のバンドに分かれたことから、これらがS-S結合で結合してhHGFを形成しているものと考えられる。(4)精製hHGFは1ng/mlの低濃度でDNA合成促進活性が認められ、7ng/mlで最大活性を示した。この最大活性値はmEGFやインスリンによるそれよりも高い値を示した。またhHGFは最適濃度のmEGFやインスリンと相加的または相乗的に作用した。
神経伝達物質放出における超高速小胞融合プロセス制御

神経伝達物質の過剰放出や不足は、てんかん、統合失調症、鬱等の様々な神経疾患を引き起こす。神経伝達物質の放出量は、シナプス小胞が連続した素過程(融合小胞の選別、ターゲッテイング、ドッキング、プライミング、膜融合)を経て、シナプス前膜に超高速で融合することで厳密に管理されている。本研究では、素過程とその順序を構成、制御する分子基盤の解明を行い、得られた知見に基づき、長年不明であった素過程と超高速膜融合に至る膜構造変化との機能関係を明らかにすることを目的とする。超高速膜融合の制御メカニズムの1つとして、小胞膜および標的膜に存在するSNAREタンパク質の分子数による制御(=生合成の制御)の可能性が示唆されているが、そのメカニズムは不明な点が極めて多い。SNAREタンパク質のうち、小胞に存在するVAMPや標的膜に存在するシンタキシンは、C末に1回の膜貫通領域を持つ尾部アンカー型膜タンパク質に属しており、生合成過程において、尾部アンカー型膜タンパク質はシグナル配列がリボソームの外へ出てくる前に翻訳が終了するため、トランスロコンによる小胞体膜への挿入が物理的に不可能である。このため必然的に翻訳後に膜挿入されなければならないが、その非トランスロコン型膜挿入装置の実態は長年の間不明のままであった。そこで本年度はSNAREタンパク質の生合成制御に着目して研究を行った。その結果、尾部アンカー型膜タンパク質の非トランスロコン型膜挿入装置の分子実態が小胞体膜タンパク質CAMLとWRBと細胞質ATPアーゼTRC40 (ASNA1)からなる3者複合体(CAML複合体)であることを明らかにし(Yamamoto et al., Molecular Cell (2012))、長年不明であったSNAREタンパク質の生合成メカニズムを解明することに成功した。24年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では、素過程とその順序を構成、制御する分子基盤の解明を行う。得られた知見に基づき、超高速膜融合に至る全過程を世界に先駆けて試験管内で再構成する。これにより長年不明であった素過程と超高速膜融合に至る膜構造変化との機能関係を明らかにすることを目的とする。本年度は膜融合を制御するSNAREタンパク質、ターゲッテイングを制御するRab3、ドッキングを制御するトモシンに着目し、以下の結果を得た。1)SNAREタンパク質の生合成を制御する新規小胞体膜タンパク質p38を同定し、性状解析を行った。その結果、p38が小胞体膜上で全く新しい膜挿入装置を構成すること、この装置がASNAl ATPaseと結合してSNAREタンパク質の小胞体への膜挿入を調節していることを明らかにした(Yamamoto et al.論文投稿中)。2)Rab3 GTPase活性促進タンパク質(Rab3GAP)に結合する分子として筋萎縮性側索硬化症の原因遺伝子の1つを同定した。この分子は小胞体膜上でRab3GAPと複合体を形成することを明らかにした。3)トモシンとシナプス小胞上のカルシウムセンサータンパク質シナプトタグミンの結合が、融合する小胞数の決定するメカニズムを明らかにするため、トモシンとシナプトタグミンの結合部位を決定した。得られた知見に基づき、シナプトタグミン結合能を欠失したトモシンの変異体を作製した。このように本年度は、神経伝達物質放出の素過程の調節機構について当初の計画以上の成果をあげることができた。

その結果、尾部アンカー型膜タンパク質の非トランスロコン型膜挿入装置の分子実態が小胞体膜タンパク質CAMLとWRBと細胞質ATPアーゼTRC40 (ASNA1)からなる3者複合体(CAML複合体)であることを明らかにし(Yamamoto et al., Molecular Cell (2012))、長年不明であったSNAREタンパク質の生合成メカニズムを解明することに成功した。24年度が最終年度であるため、記入しない。世界に先駆けてp38膜挿入装置の発見、同定に成功した。この解析を推し進めることにより、これまで全く不明であったSNAREタンパク質の分子数制御のメカニズムを解明できる可能性が高いと考えている。さらにRab3GAPに結合する分子として筋萎縮性側索硬化症の原因遺伝子の1つを同定した。この結合は全く予想外のものであり、解析を推し進めることで神経伝達制御の新しい概念の創出に繋がると考えている。このように本研究は、当初の計画以上に進展していると判断している。1)p38膜挿入装置によるSNAREタンパク質の生合成制御と神経伝達との機能関係を明らかにし、この過程の試験管内再構成を行う。これにより超高速膜融合に必要なSNAREタンパク質の分子数制御のメカニズムを解明する。2)Rab3GAPと筋萎縮性側索硬化症の機能関係を明らかにする。超高速膜融合に必要なターゲッテイングの実態、その破綻と疾患の関係を解明する。3)シナプトタグミン結合能を欠失したトモシンの変異体を用いて、融合小胞数の制御過程の電気生理学的解析および試験管内再構成を行う。これにより超高速膜融合に必要な融合小胞数制御のメカニズムを明らかにする。4)得られた知見を総合して、超高速膜融合に至る全過程を世界に先駆けて試験管内で再構成し、長年不明であった素過程と超高速膜融合に至る膜構造変化との機能関係を明らかにする。
ピペット吸引による血管壁の非線形局所力学特性の測定に関する研究

1.はじめに血管壁の大変形時の弾性特性を知るための新たな測定法として、二軸引張装置により予めひずみを与えた状態でピペット吸引を行うことで試料の大変形時の弾性係数を推定する方法を提案した。また、内圧負荷試験を併せて行い両試験法による結果を比較・検討した。2.方法ブタ胸部下行大動脈(外径約20mm、壁厚約2mm)から40x40mm程度の十字型試料を、主軸を血管壁の軸および円周方向に一致させながら十字型金型で打ち抜いた。試料を内腔面を上にして自作の二軸引張装置に固定し、周囲を室温の生理食塩水で満たした。ネジ送りステージを調節して軸および円周方向の伸び比を1.01.5程度の範囲で0.1ずつ変化させながら、内径800μmのガラスピペットで試料表面を吸引した。ピペット内の試料の変形量はビデオマイクロスコープを通してモニタ上で二値化して求めた。一方、軸および円周方向の試料のひずみはCCDカメラで撮影し、試料表面の標線を二値化して求めた。弾性率Eは実験から得られた吸引圧-変形量関係を有限要素法解析から得られた同様の関係と比較することで求めた。また、別途比較のため同一個体の円筒状試料に対して従来法の内圧負荷試験を行い増分弾性係数H_<θθ>を求めた。3.結果および考察軸方向伸長比λ_zが一定の場合、Eは円周方向伸長比λ_θが増加するに伴い単調に増加した。一方H_<θθ>は指数関数的に増加した。ブタ大動脈の生理状態におけるλ_θの平均値に相当する1.3程度の範囲までEとH_<θθ>はよく一致していた。本法では試料は均質等方性の超弾性体と仮定しているが、実際には血管壁は異方性は有しさらに変形の進行に伴い異方性の程度が大きくなると考えられる。これがλ_θ>1.3で両者が一致しない原因の一つとして考えられる。
血圧調節因子としてのレニン結合タンパク質の機能解析

レニンは非常に特異性の高いアスパルティックプロテアーゼで、主に腎臓において生合成され、様々な刺激で血中に放出され血圧調節を行っている。一方、レニン結合タンパク質(RnBP)はレニンの唯一の内在性阻害物質であり、RnBPはレニンと結合し高分子型レニンを形成することによりレニン活性を強く阻害する。今回、ブタ及びヒトRnBPの大腸菌での発現ベクターを構築するとともに、発現RnBPの精製法を確立した。両RnBPの発現ベクターとしては、我々が開発したtacプロモーターと多コピーのpUC oriを持つpUK223-3を用いた。構築したブタ及びヒトRnBPの発現プラスミドを大腸菌JM109細胞にトランスフォームし、その発現を確認するとともに大腸菌菌体より、超音波破砕、イオン交換クロマトグラフィー、ゲルろ過やMono Q FPLCなどによりRnBPを精製した。組換え型ブタRnBPの場合には、湿重量32gの菌体より約5mgの精製標品を、また、組換え型ヒトRnBPの場合には、湿重量28gの菌体より約1.3mgの精製標品を取得した。さらに、組換え型ヒトRnBPの抗体を作成し、アビジン-ビオチン系を用いたサンドイッチ法による酵素免疫測定法を確立した。本法の測定感度は、2ng RnBP/wellであり、ヒト各臓器でのRnBPの定量が可能と考えられた。一方、ラットRnBP体細胞遺伝子を単離し、その構造を明らかとした。ラットRnBP遺伝子の全長は約9kbで、11個のエクソンで構成されていた。既に我々により構造が示されているヒトRnBP遺伝子との比較より、翻訳領域のエクソンは両遺伝子で同じ長さを持つことが明らかとなった。したっがて、RnBP遺伝子は種を超えてその構造が保存されていることが示唆された。
分子の高さが規程する免疫チェックポイント分子TIGITのシグナルソーム形成と機能

がん免疫療法の機構解明に向け、免疫受容体の高さが受容体の細胞表面の分布を決定し、免疫細胞の活性化を担うシグナル伝達の単位「シグナルソーム」を制御する、構造の違いが生理活性を直接制御する新たな概念の創出を目的とした。分子間の高さの違いを利用しそれを調節することによって、第3のチェックポイント分子TIGITの機能を制御し、抗腫瘍効果をあげる新たな方法論に結び付く新規性の高い研究である。