hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
表皮内interleukinー1(ILー1)の役割

これまでの報告と同様にEGFでは薄い濃度で増殖し、濃くなると増殖を抑制した。plL-1とlL-1αではEGFとほぼ同様の結果を得た。βには抑制効果はなかった。〔考察〕lL-1はEGFと同様に濃い濃度でのみ増殖抑制効果を示したので、濃度が薄いと考えられるin vivoでは少なくとも抑制作用はないと考えた。今後腫瘍細胞のlL-1receptorなどを検索し増殖との関連を検討する。(II)DNFBによる遅延型接触過敏(DTH)におけるlL-1の機能:昨年までのC3H/HeNマウスの検索で、1)対象のUV照射表皮lL-1はmRNAと活性が共に増加したがDTH表皮では増加しなかった、2)DNP化した表皮細胞と感作T細胞の混合培養ではin vitroで抗原提示が確認できたが表皮細胞のlL-1mRNAは増加しなかったことなどDTHでは積極的な表皮lL-1の産生が無いことを示した。〔実験結果〕今回Western blotting法で上記表皮lL-1の成熟型と未成熟型を検索したところαとβ共に未成熟型であった。〔考察〕表皮lL-1は常に表皮に貯蔵され、DTHなどの炎症の際には新たな産生がなくとも既存のlL-1を放出し、対応できると考えた。今回は「Interleukin1(ILー1)αおよびβの培養ケラチノサイトの増殖・分化に与える影響」を検討した。1.目的。これまでの検討で、免疫組織学的にケラチノサイト由来腫瘍細胞内にILー1αおよびβが共に検出され、活性測定では主としてαが検出された。しかし、ILー1は細胞内では前駆体型で存在し、前駆体型はαしか活性が無いため固形腫瘍を材料とした場合に成熟型ILー1の機能をみるのには限界がある。そこで今回成熟型であるリコンビナントILー1(rILー1)αおよびβを使用し、培養ケラチノサイトの増殖・分化に与える影響をみた。2.方法。有棘細胞癌由来細胞株(HSCー1)を培養し、DNA合成をみて増殖の指標とした。分化(角化)は、正常ケラチノサイト培養細胞(NHEK)を用い、抗ケラチン蛋白抗体を使用して酵素抗体法やWesternblotting法を行い角化の程度を検索した。3.結果。1)細胞増殖:HSCー1をrILー1αとβをそれぞれ0.1から100ng/m1添加培養し、^3Hーチミジンの取り込みをみた。αは25ng/m1、100ng/m1の濃度で増殖抑制がみられたが、β添加培養では同じ濃度で抑制効果はなかった。2)角化:a)抗ケラチン抗体のうち認識する抗原によりPKKー1は基底層を陽性に染め、MAー904は基底層を除く有棘層全体を染める。また抗インボルクリン抗体は顆粒層を抗フィラグリン抗体は顆粒層と角化層を染める。この性質を利用し、NHEKを用いILー1αおよびβ添加培養を行って、これらの抗体で染色性を検討した。ILー1αを添加した系で角化が進行している傾向がみられた。b)Western blotting法による検討では、ILー1αの方が角化を促進させる可能性を示唆する所見を得た。3)LAF活性:rILー1αとβの効果に差をみたため、ILー1の生物学的活性の1つであるLAF活性を測定したが両者の間に有意の差は無かった。4.考察。ILー1αの方により強い増殖抑制効果および角化亢進作用があるという今回の反応の差が、実際にin vivoで反映されているかを今後検討したい。
シスプラチン腎障害に対する細胞内サイクリックAMPを介する保護作用に関する研究

ブタ腎近位尿細管由来細胞(LLC-PK_1)を用いてシスプラチン(CDDP)腎障害モデルを作成した。細胞を高濃度CDDPに一過性曝露するとネクローシスを主体とする細胞障害が発現し、superoxide dismutase活性低下とともに脂質過酸化亢進(DPPP酸化を指標)が見られた。さらに、p38MAPKリン酸化およびTNF-α産生亢進が見られ、ともに抗酸化剤により抑制された。また、TNF-α産生亢進はp38 MAPK阻害剤により抑制された。一方、cAMP誘導体のDBcAMPやPGI_2誘導体のベラプロスト(BP)はCDDPによる脂質過酸化、p38 MAPKリン酸化およびTNF-α産生亢進を抑制し、細胞保護作用を示した。一方、ラットにCDDP (7.5mg/kg)を投与すると血清中クレアチニンおよび尿素窒素が増加し、腎組織において尿細管細胞壊死、タンパク円柱およびTNF-α濃度増加が見られた。これらの血清学的ならびに病理学的変化はBP(0.3mg/kg)投与により有意に抑制された。ところで、CDDP投与ラットの腎組織において、TUNEL染色陽性細胞が確認されたことから、CDDP腎障害にはネクローシスのみならずアポトーシスも関与すると考えられた。そこで、ネクローシスおよびアポトーシスが関与するin vitroCDDP腎障害モデルを作成し、アポトーシスの発現機序について検討した。LLC-PK_1細胞に200μMCDDPを1時間暴露後、20μMの濃度で12-24時間暴露すると、ネクローシスとともにアポトーシスが発現した。前者は抗酸化剤により抑制され、酸化的ストレスによる機序が、後者はcaspase-2、-8および-3の阻害剤により抑制されたことから、caspases活性化に基づく機序が考えられた。さらに、シスプラチン暴露により、caspase-8,-9,-2 -3の活性化が見られ、caspase-8および-9活性化はcaspase-2阻害剤により抑制されること、さらに、p53阻害剤のpifithrin-αはいずれのcaspases活性化も抑制し、アポトーシスを軽減することが明らかとなった。以上の結果から、CDDP腎障害には、活性酸素/p38MAPキナーゼ活性化/TNF-α産生亢進に基づくネクローシス、ならびにp53活性化/caspase-2活性化による一連のcaspases活性化によるアポトーシスの両者が関与すると考えられた。1)ブタ腎近位尿細管由来細胞(LLC-PK_1)に高濃度シスプラチンを一過性に曝露(500μM,1時間)すると細胞障害(WST-8法)が発現したが,アポトーシス陽性細胞(Annexin V染色,TUNEL染色)は見られなかったことから,ネクローシスによる障害と考えられた。この細胞障害は,非水解性cyclic AMP(cAMP)誘導体のDBcAMP,フォルスコリン,PGI_2誘導体のベラプロストによって抑制された。

DBcAMPによる細胞保護作用はA-キナーゼ阻害剤H89の前処置により消失したことから,A-キナーゼ活性化を介した作用であると考えられた。2)シスプラチン曝露により,脂質過酸化亢進(DPPP酸化を指標),superoxide dismutase(SOD)活性の低下とともに細胞内TNF-α増加が見られた。これらの反応は抗酸化剤により抑制された。一方,p38 MAPキナーゼ阻害剤はシスプラチンによるTNF-α含量の増加をほぼ完全に抑制し,さらに細胞障害も抑制した。なお,シスプラチン曝露によりp38 MAPキナーゼのリン酸化体が増加した。3)フォルスコリンによる細胞のcAMP産生増加は,シスプラチン誘発SOD活性低下をほぼ完全に抑制した。さらに,脂質過酸化の低下やTNF-α増加もほとんど見られなくなった。また,細胞内cAMP産生増加はシスプラチン曝露によるリン酸化p38 MAPキナーゼ免疫活性の増加を抑制した。以上,本研究において,シスプラチンによる腎尿細管細胞障害は,酸化的ストレスによるp38 MAPキナーゼ活性化,TNF-α産生の増加によって引き起こされること,さらに,細胞内cAMP産生の増加はSOD活性の低下を回復することにより,活性酸素種の消去,p38 MAPキナーゼを介したTNF-α産生の亢進を抑制し,細胞保護作用を示すことを明らかにした。昨年度の研究において、ブタ腎近位尿細管由来細胞(LLC-PK_1)を高濃度シスプラチン(CDDP)に一過性曝露することによるネクローシスの発現には、活性酸素の過剰産生、それに続くp38MAPキナーゼ活性化およびtumor necrosis factor-α(TNF-α)の産生亢進が関与すること、プロスタサイクリン誘導体のベラプロスト(BP)により細胞内cyclicAMP(cAMP)産生を増加させることにより、TNF-α産生が抑制され、CDDPによる腎障害が抑制されることを見出した。1)本年度の研究たおいてはin vivoによる実験を行った。ラットにCDDP(7.5mg/kg)を投与すると血清中クレアチニン(SCr)およびblood urea nitrogen(BUN)が増加し、この変化はBP(0.3mg/kg)投与により抑制された。さらに、CDDP投与ラットの腎組織中TNF-α含量が顕著に増加し、この増加はBP投与により抑制された。2)一方、CDDP投与ラットの腎組織において、尿細管細胞の壊死、タンパク円柱の発現とともに、TUNEL染色で陽性に染色される細胞があったことから、ネクローシスとともにアポトーシスの関与が示唆された。この結果をin vitro試験に反映させるために、LLc-PK_1細胞にCDDPを種々の条件で暴露した。その結果、200μMCDDPに1時間暴露後、20μMCDDPに12時間暴露することにより、ネクローシスとともにアポトーシスが発現すること、さらに、前者には酸化的ストレスが、後者には種々のcaspases活性化が関与することが明らかとなった。3)上記in vitroでのCDDP腎障害モデルにおいて、CDDP暴露によりcaspase-8,-9,-2-3の活性化が見られ、さらに、caspase-2活性化がcaspase-8および-9活性化を引き起こし、その結果caspase-3を活性化することにより核障害を引き起こすことが明らかになった。
ヒト小児二次卵胞における新しい体外培養系の開発

まず、次世代シークエンサーを用いたRNAシークエンシングによって、幼若マウスと成熟マウスの二次卵胞における遺伝子発現の差異を明らかにした。具体的には小児モデル(幼若マウス)として10-12日齢(新生仔)、成人モデル(成熟マウス)として8週齢(成獣)を使用。発現変動遺伝子はfold change > 1.5、p<0.05、95%CIオーバーラップ10%未満と定義した。得られた代表的遺伝子の発現はqRT-PCRによってRNA-seqとは異なるサンプルで確認した。13893個の遺伝子が同定され、618個が発現変動遺伝子であった。このうち438個が8週齢マウスで発現亢進しており、FiglaやSohlh2といった卵胞発育に重要な役割を果たす性腺特異的転写因子が含まれていた。パスウェイ解析では、1脂質代謝関連遺伝子、2グルタチオン代謝関連遺伝子が有意に亢進していた。現在RNAseqの解析は終了し、siRNAや、過剰発現によって、二次卵胞におけるFiglaの発現制御を行い、その影響を検討している。今後、Figlaなどの発現制御因子の作用やパスウェイ解析で同定された機序が明らかになれば、二次卵胞の体外成熟に必要な分子の候補分子を応用することで、ヒト小児の二次卵胞に適した体外培養法を見出す計画を立案する。(理由)次年度にサンプル解析を外注する予定であるため。(使用計画)次年度に予定している解析外注の費用に充当する。
気泡力学に基づくキャビテーション推定法に関する研究

一般に、キャビテーション気泡は水中に存在する微細な気泡が核になって発生するということが定説となっているのを踏まえ、キャビテーション発生の原因となる気泡核に注目したキャビテーション推定法を開発した。本研究では、一様流中に置かれた翼の前縁に半球形の微小気泡が付着した後、翼表面上に沿って翼前縁から後縁へ向かって移動すると考える。さらに、半球形気泡に対し翼表面が水平な壁面であると仮定して3鏡像を考慮し、無限流体中の球形気泡に置き換えると、球形気泡の成長方程式であるRayleigh-Plessetの式が適用でき、これを解いて得られた気泡の包絡線をキャビティ形状とみなす。この式を解く際に必要となる気泡周囲の圧力係数の時間変化は次のようにして求められる。まず、翼表面上の接線速度と圧力分布を九州大学で開発したパネル法の一種であるSQCMを用いたポテンシャル計算により求めておく。半球形の微小気泡は翼の最も前縁のパネル中心位置から翼表面上を翼表面に沿って各パネル中心位置の接線速度で移動するとし、この接線速度とパネル中心間の距離から各パネル間ごとの気泡の移動時間を計算する。これらを加算すれば場所と時間の関係が分かり、同時に気泡周囲の圧力係数が時間の関数として得られる。本研究では、山口らが実験および計算に用いた2次元翼を計算対象とし、計算結果を山口らの実験結果および非線形キャビテーション論理による計算結果と比較した結果、キャビティ後端位置は実験値とよく一致し、またキャビティ最大厚さもキャビティ長さが長い場合を除いて実験値とよく一致することが分かった。本推定法には、キャビティ長さが長くなるとキャビティ厚さが過大評価されるという問題があるが、キャビティを考慮して再度求めなおした翼表面の圧力分布の使用、翼前縁での粘性の影響や気泡の相互干渉の考慮などにより改良の余地があるように思われる。
長期報酬記憶を制御するフィードバック神経回路

短期記憶・長期記憶などに分類されるように、生理学的に異なったプロセスを経て形成される記憶の成分比は、時間経過に伴って変化する。特に長期記憶は学習後一定時間経ってから形成され始めるなど、その形成過程には謎が多い。これを構成する神経細胞がいつ、どのように働くかの解明は、神経回路の発現する機能を理解するうえで不可欠である。我々は先行研究で、短期報酬記憶と長期報酬記憶は独立して形成されることを示した。さらに、長期報酬記憶を特異的に誘導するドーパミン細胞種を同定した。このドーパミン神経細胞は、昆虫の連合記憶中枢であるキノコ体の特定領域に入力する。本研究では、この領域からの出力神経が、ドーパミン入力神経に再び入力するというフィードバック回路を形成しているという仮説に基づき、その形態の詳細な解析を行った。平成27年度は記憶の形成、固定化など様々なタイミングで強制的にフィードバック回路の機能阻害または活性化を行い、各時点におけるその重要性を調査した。この結果、これに関わる神経回路に機能不全を持つハエは長期記憶を形成できないことが分かった。すなわち、報酬情報がキノコ体のフィードバック回路によって保持され、安定した長期記憶の形成に重要な役割を担うということが証明された。この成果は、Ichinose et al., eLife, 2015に代表される4編の原著論文として報告した。27年度が最終年度であるため、記入しない。脳にとって、過去の時間とは蓄積された記憶である。表出する記憶は一定であっても、その分子的・神経回路的性質は時間とともに変遷する。申請者らはショウジョウバエの嗅覚連合記憶をモデルとした以前の研究で、短期報酬記憶と長期報酬記憶は互いに独立に形成されることを示し、さらに、長期報酬記憶形成を特異的に誘導するドーパミン神経細胞種を同定した。このドーパミン神経細胞は、昆虫の連合記憶中枢であるキノコ体の特定領域に局所的に入力する。申請者らはこの特定領域から出力する神経細胞の形態を観察し、その終末領域が、上記のドーパミン入力神経の樹状突起と同様な領域に投射していることを観察した。この観察結果から申請者らは、この出力神経がドーパミン入力神経に再び入力するというフィードバック回路を形成しているのではないかという仮説に基づき、その形態の詳細な解析を行った。平成26年度は、1.二重染色法、GRASP法によりこれら二種の神経細胞種の神経突起が非常に近接しておりシナプスを形成している可能性が極めて高いこと、2.当該出力神経の神経伝達物質、を見出した。先行する生理学的研究などにより、報酬あるいは罰を伝達するドーパミン作動性神経への記憶中枢からのフィードバックの存在が予測されてきたが(prediction error仮説など)、その回路実体は不明な点が多かった。本研究により、長期記憶形成を誘導する報酬系ドーパミン神経細胞種にキノコ体からのフィードバック回路が存在することが示され、今後の機能解析につながることが期待される。申請書にあった計画通りフィードバック回路の解剖学的解析を行った。現在まで、解剖学的な観点から、長期報酬記憶形成を誘導するドーパミン神経細胞種と、特定のキノコ体出力神経細胞種がフィードバック回路を形成していることを明らかにした。申請者らの以前の研究により、このドーパミン神経細胞の長期記憶形成に対する必要性は示されており、この「報酬フィードバック回路」が長期報酬記憶形成の鍵であるという仮説が成り立つ。今後は計画通り、このフィードバック回路を構成する神経細胞種の記憶形成における機能を行動学的に解析する。これまでの解剖学的知見と総合し、長期記憶形成を誘導する神経回路メカニズムを理解する。
容量性カルシウム流入機構に関与する分子の生化学的解析

細胞内においてカルシウムイオンはセカンドメッセンジャーとして機能し,多彩な生命現象に関与する.細胞質のカルシウムイオン濃度は平常時には低く抑えられており,刺激に応答して細胞内カルシウムストアからの放出または細胞外からの流入が生じる.本研究課題では,細胞内ストアからのカルシウムイオン放出に関与するイノシトール1,4,5-三リン酸受容体(IP3R)の阻害剤としてこれまで知られていた2-aminoethoxydiphenyl borate (2-APB)が,細胞内ストアの枯渇に伴う細胞外からのカルシウム流入,いわゆる容量性カルシウム流入(SOC)をも阻害することに着目し,その作用について解析することで容量性カルシウム流入の分子機構に迫ることを目的として実施された.容量性カルシウム流入に関与する形質膜上のチャネルの実体はこれまで明らかにされていない.2-APBはSOCに対するIC50値が5μMと高く,また特異性が低いため,結合分子の探索を試みることは不可能であった.そこで,2-APB類似化合物の中から2-APBよりも結合活性が高く,かつ特異性の高い化合物の探索を試みた.166個の2-APB類似化合物を探索した結果,数個の化合物が2-APBよりも強い阻害活性や特異性を有する化合物を見出すことに成功した.特にNo.163はSOCに対するIC50が59nMであり,2-APBよりも100倍も強い阻害活性を示したが,IP3Rに対する阻害効果も有していた(IC50は2-APBが20μMであるのに対しNo.163は10μM).これに対しNo.116は,SOCに対する阻害効果はNo.163より弱い(IC50=130nM)が,IP3Rに対する阻害効果を示さなかった.これらの化合物を見出したことにより,その結合タンパク質の解析が可能となり,生化学的解析が可能となった.現在これらの成果を投稿中である.細胞においてカルシウムイオンは種々の生理現象において重要な役割を担っており、細胞内におけるカルシウム濃度を制御する仕組みの解明はそれらの生理現象の理解に重要な手がかりを与えるものと考えられる。細胞内カルシウム濃度は平常時において低く抑えられているが、細胞外または細胞内ストアからカルシウムイオンが供給されることにより上昇する。細胞内カルシウムストアからカルシウムが放出されると細胞外からカルシウムイオンを流入させることにより細胞内ストアを再充填する現象が近年注目されており、この現象は容量性カルシウム流入と呼ばれているが、その分子的実体は不明である。本研究は、容量性カルシウム流入に関与する分子の実体を明らかにすることを目的としている。これまでの知見から、2-aminoethoxydiphenyl borate(2-APB)が容量性カルシウム流入を抑制することが明らかにされているが、その特異性は低く、また阻害効果も弱い。本年度はまず、2-APBと類似の構造をもつ化合物の中に、2-APBよりも特異的であり、なおかつ強い阻害効果を持つような物質がないかどうかを探索した。その結果、上記の条件を充たすような化合物を見出すことに成功した。2-APBは細胞内からのカルシウム放出に関与するInositol 1,4,5-trisphosphate(IP3)受容体に対しても阻害効果を持つことが知られているが、本研究によりある種の2-APB analogueはIP3受容体に対する阻害効果を持たず、かつ容量性カルシウム流入を2-APBよりも強力に(2-APBのIC50が5μMであるのに対し、本研究により見出された化合物ではIC50は約58nM)抑制することを見出した。このように特異性の高い、かつIC50の小さい化合物は本研究により初めてもたらされたものである。平成15年度にはさらにIC50の小さい化合物の探索を行うとともに、探索の結果最適と思われる化合物に放射性同位元素を導入し、結合タンパク質の同定にとりかかる予定である。また、この化合物を用いて平滑筋やアストロサイトなどにおける容量性カルシウム流入の生理的意義の解明に関する実験も合わせて行う予定である。細胞内においてカルシウムイオンはセカンドメッセンジャーとして機能し,多彩な生命現象に関与する.細胞質のカルシウムイオン濃度は平常時には低く抑えられており,刺激に応答して細胞内カルシウムストアからの放出または細胞外からの流入が生じる.本研究課題では,細胞内ストアからのカルシウムイオン放出に関与するイノシトール1,4,5-三リン酸受容体(IP3R)の阻害剤としてこれまで知られていた2-aminoethoxydiphenyl borate (2-APB)が,細胞内ストアの枯渇に伴う細胞外からのカルシウム流入,いわゆる容量性カルシウム流入(SOC)をも阻害することに着目し,その作用について解析することで容量性カルシウム流入の分子機構に迫ることを目的として実施された.容量性カルシウム流入に関与する形質膜上のチャネルの実体はこれまで明らかにされていない.2-APBはSOCに対するIC50値が5μMと高く,また特異性が低いため,結合分子の探索を試みることは不可能であった.そこで,2-APB類似化合物の中から2-APBよりも結合活性が高く,かつ特異性の高い化合物の探索を試みた.166個の2-APB類似化合物を探索した結果,数個の化合物が2-APBよりも強い阻害活性や特異性を有する化合物を見出すことに成功した.特にNo.163はSOCに対するIC50が59nMであり,2-APBよりも100倍も強い阻害活性を示したが,IP3Rに対する阻害効果も有していた(IC50は2-APBが20μMであるのに対しNo.163は10μM).

これに対しNo.116は,SOCに対する阻害効果はNo.163より弱い(IC50=130nM)が,IP3Rに対する阻害効果を示さなかった.これらの化合物を見出したことにより,その結合タンパク質の解析が可能となり,生化学的解析が可能となった.現在これらの成果を投稿中である.
中皮腫マーカー・インテレクチン-1の転写制御因子の同定

本研究の過程で、我々は中皮腫を高精度かつ高感度に検出できるマーカー・HEG1を発見した。HEG1はインテレクチン-1を含む既存のすべての中皮腫マーカーよりも優れた特異性(99%)と感度(92%)を有していた。また、HEG1の発現を抑制すると中皮腫細胞の増殖が抑制され、HEG1は中皮腫の発がんや増殖に関与していると考えられた。本研究成果は、中皮腫の病理診断精度の向上に貢献し、新しい治療法の開発に繋がると考えられる。1)研究実施計画に従って、悪性胸膜中皮腫(中皮腫)細胞株におけるOctファミリーおよびSoxファミリーの発現を解析した。複数の中皮腫細胞株を用いて、インテレクチン-1および各転写因子のmRNAの発現プロファイルを解析したところ、各分子の発現は細胞株とその培養状態に大きく影響を受け、この解析からインテレクチン-1の発現制御に関わる因子を絞り込むことは困難であった。そこで、エンハンサー領域に結合する転写因子を直接精製、解析するために、インテレクチン-1を大量に発現し、かつ増殖の速い中皮腫細胞株の亜株の選抜を試み、目的とする細胞株(Acc-Meso4HG)を得ることに成功した。現在、Acc-Meso4HGの細胞可溶化液を用いて、エンハンサー領域に結合する転写因子の精製を試みている。2)Acc-Meso4HGに発現し、インテレクチン-1の発現制御に関与する可能性のある中皮腫に特徴的な分子に対するモノクローナル抗体の作製を試みた。中皮腫細胞株、および中皮腫病理切片を用いたスクリーニングを行い、極めて高い特異性と感度を示すクローンの樹立に成功した。中皮腫、各種がん、健常組織の病理検体の組織切片を用いて詳細に解析を行ったところ、この抗体の特異性と感度は、インテレクチン-1を含む既存のすべての中皮腫マーカーよりも優れていることが明らかとなった。現在、細胞可溶化液を用いて、この抗体の認識抗原の同定を試みている。研究の過程で得られた抗中皮腫抗体SKM9-2について、感度と特異度を詳しく解析した。95症例の中皮腫を用いた免疫組織染色の解析から、インテレクチン-1を含む既存のすべての中皮腫マーカーよりも優れた感度(92%)と特異度(99%)を示すことが明らかとなった。また、主要な正常臓器での反応は確認されなかった。従って、SKM9-2は中皮腫の病理診断において優れたマーカー抗体として使用でき、中皮腫の診断精度の向上に貢献すると考えられた。SKM9-2はHEG1を認識しており、HEG1の発現抑制により中皮腫細胞株の増殖が強く抑制されることが見いだされた。HEG1の発現を強力に抑制するsiRNAを開発し、中皮腫細胞株を用いて細胞増殖への効果を解析したところ、複数の細胞株で増殖抑制効果が確認された。一方で、HEG1の発現量の低い細胞では増殖抑制効果は確認されなかった。これらの結果より、HEG1を高発現する中皮腫細胞ではHEG1依存的な増殖が起こっており、HEG1の発現が中皮腫の発がんと増殖に関与することが考えられた。HEG1の発現をRT-PCRにて解析したところ、中皮腫のほかに心臓や肺でも少量のmRNAの発現が見られた。インテレクチン-1の発現分布とは一致しなかった。心臓や肺はSKM9-2で免疫染色されず、HEG1は中皮腫特異的な翻訳後修飾を受けていると考えられた。HEG1の糖鎖解析を行ったところ、多数のO型糖鎖修飾が確認され、HEG1がムチン様の蛋白質であることが明らかとなった。ムチン様蛋白質は優れた体液性がんマーカーとなりうることが知られており、HEG1も中皮腫の体液性がんマーカーとして応用できる可能性が考えられた。本年度の解析から、HEG1が中皮腫のがん関連蛋白質であり、HEG1を介した中皮腫特異的な発がんと増殖機構が存在する可能性が見いだされた。平成26年度に行った各転写因子のmRNAの発現解析では、インテレクチン-1の発現制御に関わる転写因子を絞り込むことが困難であった。そのため、当初の研究計画で予定してたOctファミリーとSoxファミリーに重点を置いた解析では、中皮腫におけるインテレクチン-1遺伝子の発現調節機構を明らかにするのは困難であると考えられた。そこで、平行して実施を予定していた転写因子を直接精製、解析する手法に重点を移し、現在解析を進めている。一方、抗体作製という異なるアプローチを試みる際に得られた抗体が、インテレクチン-1を含む既存のすべての中皮腫マーカーよりも優れた性質を持つことが示唆され、予定外の研究成果が得られている。

この抗体は中皮腫に対し極めて特異性が高いことから、認識抗原は中皮腫の増殖や発がん過程に関与している可能性がある。従って、本抗体の解析は「中皮腫の発がんと増殖機序の解明」という本研究目的と合致すると考えられ、本研究内で解析を進める意義があると考えられた。腫瘍検査学OctファミリーとSoxファミリーに重点を置いた解析では、研究目的の遂行が困難であると考えられたため、転写因子を直接精製、解析する手法に重点を移し解析を進める。また、本研究目的と合致する新たな中皮腫マーカー抗体が得られ、既存の中皮腫マーカーよりも優れた特性を示すことから、本抗体の解析(認識抗原の同定)は中皮腫の発見と治療に大きな貢献を果たしうると考えられる。認識抗原の同定法は、転写因子を精製する手法と材料や手法がほぼ同一で相互に流用が可能であるため、平行して研究を推進することが可能と考えられる。当初予定していた発現解析を行う研究手法では研究目的の達成が困難であると考えられたため、研究手法の変更を行った。その結果、予定していた消耗品の購入費に変更が生じ、当該助成金が生じた。研究手法の変更により、培養と精製に関する物品費の必要額が増加すると考えられる。そのため、繰り越された当該助成金を次年度の消耗品の購入に充てる。
嚥下困難度の評価法の確立と嚥下困難者用とろみ剤の開発

誤嚥防止には飲食物に適度な粘度を付与することが有効であることが経験的に知られているが、そのためには各種増粘多糖類の粘度特性を知り、それらの組み合わせによりどのような制御が可能になるかを知ることが必要である。本研究においては、各種多糖類および市販されているいくつかのトロミ剤についてレオロジー特性を解明した。また、造影剤とトロミ剤の混合系について、トロミ剤の添加量、粘度、降伏応力の変化が嚥下過程に及ぼす影響についてビデオ嚥下造影検査法により調べ、トロミ剤の添加量が少ない場合には、粘度および降伏応力が非常に小さく、咽頭反射が出現する前に咽頭を通過し、誤嚥しやすく、添加量が多すぎると降伏応力が大きくなりすぎ、咽頭蓋谷に貯留してしまう傾向があることが分かった。嚥下物の粘度と嚥下量を変化させた時の口腔期から咽頭期への移行段階での送り込み運動の調飾様相を口蓋帆挙筋ならびに口蓋舌筋活動を指標にして検討した.(1)水嚥下時での両筋の活動は,個人至適嚥下量を中心にして,個人ごとに固有の範囲内で嚥下量に応じて筋活動は変化し,その変化の様相はsigmoid状であった.(2)日常の食物での状態をシミュレーションするために粘性を賦与した場合,嚥下量と粘度は負の相関関係を示した.(3)粘度を変化させた際,口蓋帆挙筋活動は粘度と嚥下量を説明変数とする重相関式によって説明できたが,口蓋舌筋活動では2変数以外の変数も考える必要があることが示唆された。増粘剤を添加したニンジンのきざみ食の嗜好特性とキサンタンガムのレオロジー的性質におよぼす濃度(0.6,1.2,2.0%)と固有粘度(15.6,16.0,16.5,20.0dl/g)の影響について粘度、動的粘弾生および官能評価より検討した。キサンタンガムを添加したきざみ食の咀嚼回数・時間は、増粘剤を添加しないきざみ食に比べ減少した。高齢者パネルは、キサンタンガム(固有粘度15.6dl/g)を0.6%添加したきざみ食が、増粘剤を添加しないきざみ食と角切りに比べて、まとまりがよく、飲み込みやすいと評価した。総義歯装着高齢者では角切りが一番噛みやすく、ニンジンのきざみ食は小さすぎで噛みにくいと評価した。嚥下機能評価に用いられているビデオ嚥下造影検査法により、造影剤に粘弾性調整剤を添加した場合のレオロジー特性が嚥下過程に与える影響について検討した。

粘弾性調整剤の添加量が少ない場合には、粘度および降伏応力が非常に小さく、咽頭反射が出現する前に咽頭を通過し、誤嚥しやすく、添加量が多すぎると降伏応力が大きくなりすぎ、咽頭蓋谷に貯留してしまう傾向があることが分かった。物性と「のどごし」の関係を咽頭への送り込み運動の調節様相によって検討した.(1)5種の増粘剤を,糖度8.9%の蒸留水に混和し,調整時からの物性の変化を検討した結果,増粘剤Aは経時的に安定していたが,その他の増粘剤では経時的に粘性が上昇した.(2)至適嚥下量が粘度によって変化するかを,増粘剤Aの溶解比を変えた4種の被験食,加糖蒸留水,粥により検討した結果,粘度が上昇すると至適嚥下量は低下した.(3)至適嚥下量を基準に嚥下量を変化させた時の口蓋舌筋と口蓋帆挙筋の活動を検討した結果,嚥下量の変化に口蓋舌筋はsigmoid状に対応し,口蓋帆挙筋は嚥下量と相関した.キサンタンガム(0.6,1.2,2.0%)のレオロジー的性質とキサンタンガムを添加したニンジンのきざみ食の嗜好特性について、粘度、動的粘弾性および官能評価より検討した。キサンタンガムを添加したきざみ食の咀嚼回数・時間は、キサンタンガムを添加しないきざみ食に比べ減少した。高齢者パネルにおいて、1.2%キサンタンガムを添加したきざみ食は、口の中での粘り、まとまりがあり、飲み込みやすく、総合的な好ましさにおいて良い評価が得られた。誤嚥防止には飲食物に適度な粘度を付与することが有効であることが経験的に知られているが、そのためには各種増粘多糖類の粘度特性を知り、それらの組み合わせによりどのような制御が可能になるかを知ることが必要である。本研究においては、各種多糖類および市販されているいくつかのトロミ剤についてレオロジー特性を解明した。また、造影剤とトロミ剤の混合系について、トロミ剤の添加量、粘度、降伏応力の変化が嚥下過程に及ぼす影響についてビデオ嚥下造影検査法により調べ、トロミ剤の添加量が少ない場合には、粘度および降伏応力が非常に小さく、咽頭反射が出現する前に咽頭を通過し、誤嚥しやすく、添加量が多すぎると降伏応力が大きくなりすぎ、咽頭蓋谷に貯留してしまう傾向があることが分かった。水よりも粘性が高くなった被験食品摂取時の嚥下過程における口腔期から咽頭期への移行段階での口蓋帆挙筋,口蓋舌筋活動の調節について検討した.その結果,被験者に共通して,口蓋帆挙筋活動は粘度と嚥下量を説明変数とする重相関式(重相関係数:0.795-0.869)で説明でき,また標準偏回帰係数は,各被験者とも粘度と嚥下量で近似した値となっていた.すなわち,移行段階での口蓋帆挙筋活動の変化は粘度と嚥下量で60%以上を説明できることが示された.一方,口蓋舌筋活動は重相関式で説明できるものの,重相関係数は0.562-0.745であり,偏回帰係数は,変数ごとに符号ならびに値も被験者により多様であった.すなわち,口蓋舌筋活動の調節には粘度と嚥下量以外の変数も関与する可能性が伺われた.固有粘度の異なるキサンタンガムのレオロジー的性質とキサンタンガムを添加したきざみ食の嗜好特性について検討した。キサンタンガムA,B,C,Dの固有粘度はそれぞれ15.6,16.0,16.5,20.0dl/gを示した。若年者パネルによる官能評価より、キサンタンガムDを添加したきざみ食は、キサンタンガムAを添加したきざみ食に比べ、口の中での粘りがあり、まとまりが良く、飲み込みやすい評価を得たが、総合評価では好ましくなかった。高齢者パネルは、キサンタンガムAを添加したきざみ食が、増粘剤を添加しないきざみ食と角切りに比べて、まとまりがよく、飲み込みやすいと評価した。総義歯装着者は角切りが一番噛みやすく、ニンジンのきざみ食は小さすぎて噛みにくいと評価した。
現代視覚表象におけるメディア的身体の研究

本研究は、現代の視覚表象における身体イメージの問題を映画や写真、マンガなどの現代的メディアを対象に検討したものである。阿部宏慈は、特に2011年の東日本大震災後のドキュメンタリー映画における映像の受容の問題を可傷性の概念を中心に検討した。研究分担者の中村唯史は、マンガ的描写における主観的視点表現の問題を現代の日本マンガ作品を中心に研究した。同じく清塚邦彦は、これらの行論の哲学的理論的基盤をなす議論によって研究会を主導し、この間、関係学会等で発表をおこなった。本研究の成果は、研究会等で研究に協力した他の研究者との共著論集『現代視覚表象におけるメディア的身体の研究』によって発表された。第二年度は、具体的な視覚表象の事例調査と分析を進めた。阿部は、7月にマルセイユ映画祭に参加し、現代ドキュメンタリー映画における身体的表象の問題を研究し、映画祭に参加した研究者、批評家、作家と意見交換をおこなった。7月2日には映像作家大久保拓朗氏を招き、研究会を開催した。10月には、山形国際ドキュメンタリー映画祭において、チリの映画作家イグナシオ・アグエロ監督の作品上映と討議を日本映画大学と共催した。分担者の中村唯史は山形大学人文学部山崎彰教授らとともに「東欧ドキュメンタリー映画の現在ー冷戦終了後の世界」を主催し、東欧、ロシア、ドイツなどの研究者と意見交換をおこなった。清塚邦彦は、芸術作品を贋作の可能性の有無に応じてautographicな作品とallographicな作品とに分類するネルソン・グッドマンの古典的な議論について批判的検討を行ない、芸術ジャンルごとの作品の存在様態の相違について基礎的な整理を行った。中村唯史は、山形大学人文学部高橋和・山崎彰両教授と『映像の中の冷戦後世界:ロシア・ドイツ・東欧研究とフィルム・アーカイブ』(山形大学出版会、2013年)を共編し、「事実と記録のあいだ:ロシア/ソ連ドキュメンタリー映画をめぐる言説と実践について」と題する論考を書いた。ドキュメンタリー映画の現実再現性をめぐる1920年代ソ連における論争や実践を考察した。また論考「マイトレーヤとレーニンのアジア:無国籍者レーリヒの世界図」を発表し、その中でレーリヒが描いた四枚の絵画の分析を行った。その他、日本マンガの分析として、こうの史代の表現技法の考察を進めた。平成26年3月8日には、東北大学情報科学研究科の森田直子氏を講師として招き、日本文学研究の森岡卓司氏、表象文化論研究の大久保清朗氏他の参加も得て、マンガ的視覚表象の起源をめぐっての研究会を開催した。研究初年度にあたる平成24年度は、特に研究資料を収集するとともに、全体の理論的探究の方向づけをおこなうことを目的とした。阿部は全体の研究を統括し、「メディア的身体」という問題提起のもとに、研究分担者である清塚邦彦、中村唯史とともに、複数回の研究会を開催して、検討をおこなった。またライプツィヒ(ドイツ)の映画祭において調査をおこなった。清塚邦彦は分析美学の立場から、現代表象メディアにおける身体の問題の理論的な問題点を検討した。さらに中村唯史は、ロシア・フォルマリズムの史的定位の再検討を試み、その過程でフォルマリストたちの思考が、映画やグラムフォンなど同時代の視聴覚メディアの発達に対する反応としての側面を強く持っていたことを指摘した。研究会では、まず全体の研究方針と期間内における研究の方法、共同研究の計画について検討した。六月には人文学部の教員であり映画の研究をおこなっている大久保清朗氏とともに、アニメーション研究家の藤津亮太氏を招いてアニメーション映画における「心と体の距離」というタイトルで、講演と討論をおこなった。特に現代のメディアにおける身体的なるものと心的なるものの表象の問題を理論的に探究した。さらに、九月には清塚邦彦の主催で哲学研究者の森功次氏を招き、ジャン=ポール・サルトルや分析哲学と美学的探究を基盤とした身体論の新たな理論的展開の可能性について共同討議をおこなった。最後に十二月には、ロシア・フォルマリズムの研究家である八木尚人氏を招き、ロシア・フォルマリズムや、20世紀初頭ロシアの思想や理論と当時のメディア環境との関係について論じてもらい、それをもとに共同討議をおこなった。これらのシンポジウムや共同討議などを通じて、メディア的身体という概念の浸透を図り、同時にその提起する問題の幅や射程距離を確認することにより、第二年度以降の研究のための重要な布石となった。計画の第三年度にあたる平成26年度は第二年度までの研究成果の相互的な確認と討議を中心に進めた。

阿部宏慈は、研究全体の総括をおこなうとともに、26年度後半は、本研究の成果をおさめる論集『現代視覚表象におけるメディア的身体の研究』の準備のために、中村唯史とともに、研究に協力した森田直子(東北大学)、大久保清朗(山形大学)、成田雄太の各氏と研究情報の交換等をおこない、論集の形式による研究成果の発表に向けて準備をおこなった。また、阿部宏慈は、モントリオール国際ドキュメンタリー映画祭において、映画祭関係者およびカイエ・デュ・シネマ誌ステファーヌ・デュ・メスニルド氏他の研究者、リシャール・ブルイエットをはじめとするドキュメンタリー映画作家と意見交換をおこない、さらにモントリオール大学において、同大学の研究者シュザンヌ・ベトとともに、震災以降の日本のドキュメンタリー映画の現状について報告討議をおこなった。研究の成果については、阿部はドキュメンタリー映画における身体表象の問題について論考を執筆し本科研費の研究会参加者との共同執筆による論集の一章として発表した。中村唯史は、特にマンガの身体表現に関する考察を行い、その結果を上記論集所収の論文として発表した。また上記論集の編集に従事した。清塚邦彦は2014年度は前半期においては、フィクション概念を哲学的論議の中で代表的な見解の一つとされるカリーの言語行為論的な理論について踏み込んだ検討を行い、その成果を論文(1)において発表した。後半期においては、主に画像表象の問題に焦点を置きつつ、存在論的、認識論的な検討を行った。とりわけ、画像表象に目を向けた場合にそこに見える内容(知覚内容)と、絵に描かれていると見なされる内容(表象内容)との間の関係についてやや踏み込んだ検討を行った。その成果については著書(共著)において発表の予定となっている。表象文化論本研究の目的は、特に現代のメディア的状況の展開の中において、写真、マンガ、ドキュメンタリー映画といった視覚表象の領域における、新たな「身体的リアリティー」の可能性をさぐることである。表象作用の担い手となる作品は、固定的な物として存在するわけではなく、多分に流動的で、受け止める側の関心に応じて変動するような存在である。こうした流動性をはらんだ作品概念が、電子的な複製技術が進展する中でさらにどのような様相を呈することになるのか。また、そのことが作品の表象内容のとらえ方にどのように影響するか。そして、そのような時代においてなお、<身体>的なるものは、いかなる形式を、あるいは形象をまというるのか。これらの課題について、分析哲学による理論的研究、ドキュメンタリー映画を中心とする映像研究、さらにマンガやアニメーションの研究のそれぞれの領域において、理論的かつ分析的研究を実施することがその主眼である。年度計画に提示されていた山形国際ドキュメンタリー映画祭における国内外の研究者、映画作家との研究交流および情報交換も順調に成果を挙げ、講演会、シンポジウム等も60名から100名の参加者を得て、活発な討議と情報交換、さらには冊子体による研究成果の公表もおこなわれ、研究はおおむね順調に推移していると言える。当初の計画では、三回の研究会を開催し、それぞれに研究分担者が研究状況を報告し討論をおこなう筈であったが、それぞれに最新の研究成果に触れるために、若手の研究者をゲストとして招いて、情報交換をおこないながら四回の研究会シンポジウム等をおこなうことができたため、当初尾予定以上の進展を見たと判断できる。今後の推進計画については、三年度計画の最終年度である平成26年度においては、第二年度までの研究成果の相互的な確認と討議を中心に進める。
非正規性をもつ単調欠測データに対する汎用的かつ高精度な統計解析法の理論研究と応用

本研究課題では,対称な分布族として知られる楕円分布族を母集団分布とし,その母集団から得られた単調欠測データを基にした多変量統計解析法を提案する.特に,実用上重要であると考えられる統計解析法(平均ベクトルに関する仮説検定,判別分析等)に着目し,母集団分布の確率密度関数や,欠測が生じる確率モデル(欠測データメカニズム)についての制約を緩めた下で,高い汎用性と精度を保つ統計解析法の提案を行う.また,提案する仮説検定方式の検出力や判別規準の誤判別確率に対する高精度な近似式も併せて導出することにより,標本サイズの設計や非正規性の影響に関わる重要な知見を得ることも目指す.本研究課題では,対称な分布族として知られる楕円分布族を母集団分布とし,その母集団から得られた単調欠測データを基にした多変量統計解析法を提案する.特に,実用上重要であると考えられる統計解析法(平均ベクトルに関する仮説検定,判別分析等)に着目し,母集団分布の確率密度関数や,欠測が生じる確率モデル(欠測データメカニズム)についての制約を緩めた下で,高い汎用性と精度を保つ統計解析法の提案を行う.また,提案する仮説検定方式の検出力や判別規準の誤判別確率に対する高精度な近似式も併せて導出することにより,標本サイズの設計や非正規性の影響に関わる重要な知見を得ることも目指す.
アノテーション技術に基づく新しいeラーニングパラダイムの構築

コンテンツ処理の一手法であるアノテーションの概念を適用して,教材コンテンツを豊饒化するための基礎研究を行った.教育者,学習者が教材に対して付与するアノテーションだけではなく,両者間の対話データ,様々なWebサービスが提供する情報もエージェントが付与するアノテーションとみなし,同様に教材へ融合するシステムを提案した.また, Ajaxのコードを教材の(X)HTMLコードに適切に埋め込むことで,インタフェースの貧弱性が指摘されるWeb型教材のリッチコンテンツ化や非同期通信機能による提示教材の制御なども可能とした.計算機によるデータの自動的な改変は元となる教材データが正しく構造化されている必要があり,さらに既存のLMSでも,その意味的なタギングがなされないため,情報の検索,再利用は容易ではなかった.さらに今年度は,オープンソースのLMSであるMoodle上でアノテーションを作成,管理する環境を実現した.管理の面で大きな役割を果たすMoodleに,アノテーションを活用した教材コンテンツ作成機能を組み込むことで,魅力的な学習環境が簡単に構築できるようになった.加えて,自然言語処理を併用して自由記述のアノテーションを評価するのを支援する仕組みや,多くのweb翻訳サービスの翻訳結果をアノテーションととらえ,もっとも適当と思われる翻訳を選別する仕組みについて研究した.実装システムは本学の情報系科目の授業にて利用し,受講者から高い評価を受けた.コンテンツ処理の一手法であるアノテーションの概念を適用して,教材コンテンツを豊饒化する仕組みについて研究を行った.教育者,学習者が教材に対して付与するアノテーションだけではなく,様々なWebサービスが提供する情報もエージェントが付与するアノテーションとみなし,同様に教材へ融合するのが特徴である.アノテーションはRDFで管理し,またコンテンツに対してGDA(言語情報を記述するためのXMLタグセット)により言語解析情報をデータの生成時あるいは,計算機の遊休時に行いGDAタギングしておくことで,ユーザが言語情報に基づく処理が必要な際,高速に処理できる仕組みを構築した.さらに,Ajaxのコードを教材の(X)HTMLコードに適切に埋め込むことで,インタフェースの貧弱性が指摘されるWeb型教材のリッチコンテンツ化や非同期通信機能による提示教材の制御なども可能とした.計算機によるデータの自動的な改変は元となる教材データが正しく構造化されている必要があり,これが既存システムにおける大きな欠点になっていたが,常にvalidな(X)HTMLが生成されるWYSIWYG型のエディタを実装することで,これを解決した.また既存のLMSでも,その意味的なタギングがなされないため,情報の検索,再利用は容易ではない.そこで,Web構造化手法の一つであるmicroformatsを適用し,情報の構造化と活用の展望について検討した.実装システムは本年度,実験的に担当授業にて利用した.コンテンツ処理の一手法であるアノテーションの概念を適用して,教材コンテンツを豊饒化するための基礎研究を行った.教育者,学習者が教材に対して付与するアノテーションだけではなく,両者間の対話データ,様々なWebサービスが提供する情報もエージェントが付与するアノテーションとみなし,同様に教材へ融合するシステムを提案した.また, Ajaxのコードを教材の(X)HTMLコードに適切に埋め込むことで,インタフェースの貧弱性が指摘されるWeb型教材のリッチコンテンツ化や非同期通信機能による提示教材の制御なども可能とした.計算機によるデータの自動的な改変は元となる教材データが正しく構造化されている必要があり,さらに既存のLMSでも,その意味的なタギングがなされないため,情報の検索,再利用は容易ではなかった.さらに今年度は,オープンソースのLMSであるMoodle上でアノテーションを作成,管理する環境を実現した.管理の面で大きな役割を果たすMoodleに,アノテーションを活用した教材コンテンツ作成機能を組み込むことで,魅力的な学習環境が簡単に構築できるようになった.加えて,自然言語処理を併用して自由記述のアノテーションを評価するのを支援する仕組みや,多くのweb翻訳サービスの翻訳結果をアノテーションととらえ,もっとも適当と思われる翻訳を選別する仕組みについて研究した.実装システムは本学の情報系科目の授業にて利用し,受講者から高い評価を受けた.
天体熱核^<12>C(α,γ)^<16>O反応のクロン分解法による研究

1.実験的研究理研SMARTスペクトロメーターの第2焦点面位置検出器の開発のため、高速MWDCのテスト器を製作した。また。その背面に設置するプラスチックシンチレーター検出器を製作した。この高速MWDCにより、^<16>0分解反応片(α,^<12>C)の10^5cps以上での同時測定が、実現すると期待される。線源(^<55>Fe,Sr/Y)によるテストの後、核研で陽子ビームによるテスト、放医研でα,^<12>Cビームによるテストを予定している。このタイプの検出器は、米国ブルックヘブン研究所やKEKにおいてK^-,π^-粒子の高速検出の実績はあるものの、重イオン検出の実績はなく、基礎データの収集が待たれる。2.理論的研究(1)^<16>Oの核構造桜木、平林により、岡部のOCM波動関数を用いたチャンネル結合法の計算が行なわれ、テキサスA&M大学の30MeV-^<16>O分解反応データが分析された。核力とクローン力の競合、多段階過程の効果が定量的に評価された。3.公表1.実験的研究理研SMARTスペクトロメーターの第2焦点面位置検出器の開発のため、高速MWDCのテスト器を製作した。また。3.公表
子どもの言語報告の特徴について：司法面接における報告相手の相違による影響の検討

平成26年度前半は、前年度ドイツ・ミュンヘンにおいて聞き取り調査を実施した、異文化における子どもおよび保護者の心理や学校機関における防犯活動についての報告書を作成し、日本発達心理学会ニューズレターにて発表した。また、前年度に引き続き、実験データの整理活動を行った。具体的には、(1)親子を対象とした会話に関する実験と、(2)大学生を対象とした質問紙調査のデータ、そして(3)子どもへの事実確認面接を業務として行っている実務家を対象とした意識調査のデータを整理・分析した。(1)および(2)の成果は、平成26年7月にフランス・パリで開催されたICAP(International Conference of Applied Psychology)にて発表された。(3)子どもへの事実確認面接に関わる実務家を対象とした調査では、司法面接訓練研修を受講する前の実務家に協力を依頼し、意識調査を行った。子どもの事実確認面接を行う際に、実務家たちがどのような点に留意していたかを調べ、それが司法面接法のスタンダードな視点とどの程度乖離しているのか、そしてどのように実務家たちの事前知識や臨床体験が司法面接法の取得の困難さに影響を与えているかを検討した。この研究成果は、北海道大学で開催された日本社会心理学会第55回大会にて発表された。さらに、実務家の意識と保護者の意識との比較検討を行った。平成26年度後半は、親子会話実験における具体的な親子会話データの文字起こしおよびコーディング作業を行い、量的分析を行った。その研究成果は、司法面接支援室通信2014年度特別版にて発表した。また、前年度に引き続き、文献検索活動を行った。“親子会話"“目撃証言"“子どもの被暗示性"“司法面接"“ネガティブな出来事の記憶"といったキーワードを基に検索を行い、200本以上の論文を抽出し、整理した。26年度が最終年度であるため、記入しない。平成24年度前半は、主に実験データ収集活動と文献検索活動を行った。まず親子を対象とした会話に関する実験と、大学生を対象とした質問紙調査を実施した。親子会話実験では、幼児ないし児童56名に個別にDVD映像を視聴させ、その内容について各保護者89名が聞き取る過程を録音した。この聞き取りは、DVD視聴直後と1週間後の2回行った。聞き取り後、保護者は質問紙に回答し、子どもから話を聞き取る際の留意点や子育て観、子どもから話を聞き取るのに適している立場の人はどのような人か、といったことを調査した。また、大学生117名に対しても同様の項目で回答させた。保護者と大学生との比較分析結果は、平成25年度の国際学会にて発表予定である。親子会話の録音データは、現在文字に書き起こし作業の最中である。文献検索活動では"親子会話""目撃証言""子どもの被暗示性""司法面接""ネガティブな出来事の記憶"等のキーワードを基に検索を行い、約200論文を抽出・整理した。これらを基に"親子の会話と司法面接"をテーマとしたレビュー論文を作成中である。平成24年度後半は、ドイツ・ミュンヘンにて、異文化における子どもおよび保護者の心理や学校機関における防犯活動についての聞き取り調査を実施した。学校法人ミュンヘン日本人国際学校(Japanische Internationale Schule Munchen e.V.)の山本泰教頭へのインタビューでは、学校の設備面における防犯対策や児童に対する防犯指導についての現状、現地の諸機関との連携についての情報を得た。また、カウンセラーであるYuki Kawato Weissoertel氏からは、異文化における児童や保護者の不安の現状、そしてその具体的な対策案、異国におけるカウンセリングの難しさ、国民性の違いによってもたらされる諸問題などについての話を伺った。平成25年度前半は、平成24年度と引き続き、ドイツ・ミュンヘンに滞在し、異文化における子どもおよび保護者の心理や学校機関における防犯活動についての聞き取り調査を実施した。バイエルン州公認私立・ミュンヘン日本人幼稚園(Munchen Japanese Kindergarden)の園長Yukiko Hinrichsmeyerへのインタビューでは、異文化における幼児教育の諸問題や解決策、そして幼児の発達時期における保護者の関わり方についての建設的なアドバイスなどの情報を得た。また、ドュッセルドルフ応用科学大学(FH-Dusseldorf/ University of Applied Sciences Dusseldorf)のDenis Kohler博士の下では、ドイツにおける大学教育や研究者養成の実情についてや、子どもへの面接方法に関わるドイツでの現状について、情報を得た。また、オランダ・ロッテルダムで開催された学会(Society for Applied Research in Memory and Cognition)大会にも参加し、研究発表を行った。平成25年度の後半は、日本において、これまでに収集した実験データの整理活動を行った。具体的には、平成24年度に実施した、親子を対象とした会話に関する実験と、大学生を対象とした質問紙調査のデータを整理した。親子会話実験では、幼児ないし児童56名に個別にDVD映像を視聴させ、その内容についてその保護者89名が聞き取りを行い、その聞き取り過程を録音する、という手続きを用いていた。また、聞き取り後、保護者は質問紙に回答した。この質問紙は、大学生117名に対しても同様の項目で回答させた。これらのデータについて、詳細に比較分析を行った。親子会話の録音データは、現在、文字起こし作業が継続中である。