hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
21世紀型能力育成と高校改革をめざす高校総合学習の総合的研究

そのためには,高校総合学習の制度的理念を確認するとともに,実践状況の把握や典型実践の特徴を析出し,実践指針を提示することが求められる。そこで,第1に,高校総合学習の制度化や系譜に関する文献研究を実施した。第2に,高校総合学習の履修経験者(大学生)アンケート調査およびN県の各高校への実践状況調査を実施した。そして第3に,開発的取り組みを進めている各地の実践校(高校)についての訪問調査を実施した。上述の研究事項の内,第1の文献研究については,戦後幾度かの高校総合学習の系譜(戦後初期の「時事問題」,1970年代の「教育課程改革試案」に制度化された高校総合学習)が確認された。それらの先行経験の弱点をふまえたかたちで高校総合学習の時間が,自律的学習の実現をめざして制度化されたことを明確化した。第2に,質問紙調査として実施した履修者への調査では,高校総合学習の趣旨に即した実践が一部で見られるものの,進学補習や進路指導,学校行事の事前事後指導に傾斜する傾向が見られた。一方,N県での実践状況では,地域学習や主権者教育をテーマとした取り組みが見られた。これらについては,学会報告や紀要原稿への執筆というかたちで公表している。第3に,開発的取り組みを進めている各地の実践校(高校)の訪問調査を通して,高校生のニーズに対応すると共に,地域との連携が実践を支えていることが明確となった。その成果を学会報告として公表した。次年度は最終年度となるので,上記の諸成果を整理し直すと共に,新学習指導要領の高校総合学習(総合的な探究の時間)の提起に即した視点や論点も提示できるように深めていきたい。当初の予定通り進行しているが,2017年度末に高校新学習指導要領の告示となり,高校総合学習の制度改革が予定されている。その趣旨を踏まえて,最終年度となる2018年度には,新学習指導要領の趣旨に即したまとめになるように微調整を図っていきたい。2018年度は,当初3年間を予定した研究期間(2017年度で終了予定)をさらに一年延長した1年間である。延長の主たる理由は,2018年3月に高等学校学習指導要領が改定・告示となり,高等学校総合的な学習の時間(以下,高校総合学習と略記)について,一定の制度改訂が行われた。その点をふくめた検討を行うためであった。それまでの3年間を通して,高校総合学習の制度研究,歴史研究をふまえ,1中規模県での実施状況悉皆調査(質問紙),2大学生対象の高校総合学習体験調査(質問紙),3典型実践校への訪問調査等を実施してきた。それらの研究を通して,以下の点が明らかになった。1中規模県の調査によれば,主権者教育,地域学習,キャリア教育と連動した取り組みの前進が確認できる。2大学生の回顧調査によれば,高校では定型的な授業展開が多く,改革の課題に直面している。他方,生徒は,協同的で探究的な学習や自主的な自治的取り組み(行事や部活動)に意義を見いだしている。3内発的な改革を推進している高校では,生徒の探究学習やものづくり学習を組織し,学校参加にも取り組んでいる。高校総合学習の枠組みは,学校経営改革と連動することで効果を発揮している。新学習指導要領では,高校段階で,総合的な探究の時間と改称され,探究学習の中核化の確認や他課程との連動,地域との連携等が強調されている。行政側による指導資料の編集も予定されている。
寄生性原虫のリソソーム輸送における特殊性と多様性に関する解析

リソソームへの膜融合はRab7というGTPaseによって担われる。多くのモデル生物や寄生性原虫ではRab7はゲノムに1種しかコードされないが、赤痢アメーバには9種のアイソタイプが存在し、リソソーム周辺で異なる機能を担っていることを明らかにした。赤痢アメーバがリソソームに病原因子を蓄積し病原性を発揮するには、複雑なリソソーム輸送と多様な機能を担うRab7が必要なのではないかと考えられる。赤痢アメーバ症は赤痢アメーバによって引き起こされる,下痢,大腸炎,肝膿瘍を主症状とする感染症であり,国内では年間700例の感染と,数例の死亡が報告される感染症法5類の感染症である。これまでの解析により,赤痢アメーバの主要な病原因子であるシステインプロテアーゼはリソソームに蓄積されており,リソソーム周辺の細胞内輸送機構がアメーバの病原性の理解に重要であることが報告されてきた。さらに近年の赤痢アメーバのゲノムプロジェクトの終了に伴い,リソソーム輸送に関与すると予想されるRab7 GTPaseが9種(7A-7I)赤痢アメーバゲノムに存在することが分かっている。リソソームへ輸送の複雑さの意義を明らかにする目的で,それぞれのRab7アイソタイプの特殊性を解析した。まず,定常状態におけるmRNAの発現量を定量PCRによって測定したところ,最も発現量が多かったのはRab7Hであり,その次にRab7A,7E,7B,7D,7Gの順に発現量が減少した。7C,7F,7Iの発現は定常状態では非常に少なかった。各Rab7アイソタイプの発現量は貪食刺激や肝膿瘍から単離した病原株では変化が見られなかった。さらにRab7Dの細胞内局在を検討したところ,Rab7Dは貪食刺激に伴って形成される前貪食胞上に貪食開始20-30分後に局在し,Rab7Aが前貪食胞に局在する時間(10分)よりも遅かった。さらに,Rab7Dの大量発現に伴って貪食効率が低下した。Rab7Dはリソソームに常に局在するRab7Bと異なり,リソソーム上に局在することは無かった。よって,Rab7DはRab7Aとは異なるステップで前貪食胞形成に関与し,貪食効率を負に調節する機能が有ることが推測された。他種生物においてRab7はリソソームヘの輸送あるいは後期エンドソームヘの融合を調節するRabであり、多くの生物においてゲノムに1種コードされている。赤痢アメーバではRab7アイソタイプが9種と多様化しており、その機能特殊性並びに多様性を明らかにする目的で、それぞれの細胞内局在を観察した。まず、それぞれのアイソタイプに特異的な抗体を作製し、定常状態の赤痢アメーバにおける細胞内局在を間接蛍光抗体法により観察した。リソソームはLysoTracker Redを用いて酸性化オルガネラを染色することにより可視化した。その結果、定常状態でリソソームに局在したRab7アイソタイプは、Rab7B, 7E, 7Gの3種であった。そのうち7Eと7Gはリソソーム以外の小胞にも存在した。アイソタイプ間の局在を観察する為に3HA-Rab7Bを大量発現する株を作製し、抗Rab7A抗体との共局在を観察したところ、Rab7B空砲の30%、Rab7A空砲の60%が互いに共局在していた。その他の空胞については、Rab7BとRab7Aは異なる空胞に局在することが分かった。Rab7Bの役割をさらに観察する為に、ドミナントネガティブ型を発現させたところ、酸性化したRab7B空胞の消失、リソソーム酵素の細胞外への分泌、リソソームの酸性度の低下が観察された。リソソーム酵素の細胞外への分泌はRab7Bに特異的であり、Rab7Aの変異型の発現では観察されなかった。赤痢アメーバの病原性を理解する上で、リソソーム酵素の輸送は非常に重要である。よって、赤痢アメーバは宿主に寄生するにあたって、リソソームヘの輸送系を多様化する必要があったのではないかと考えている。
都市インフォーマルセクターの形成過程-ハノイ市近郊農村における出稼ぎ調査から

研究代表者は本研究をスタートさせる以前に、ハノイ市で荷物運び労働に従事する女性出稼ぎ労働者の就業行動に関した論文を執筆している。本研究ではハノイ農業大学の農村開発室の協力を得て、荷物運び労働者を多く輩出しているフンイェン省の農村において出稼ぎ世帯および出稼ぎ労働者を対象とした質問紙調査を実施した。主な目的は(1)出稼ぎ労働者を送り出す農村の社会経済状況を明らかにし、(2)出稼ぎ行動については仕事の獲得方法に焦点をあて、その類型化と特徴を明らかにすることとした。そのために、出稼ぎ労働者が農村において情報を収集する際に用いるパーソナルなネットワークを抽出し、ネットワークの大きさや密度と収入の関係の分析を行った。分析枠組みとして、グラノヴェターの「弱い紐帯の強さ」を用いた。分析の結果、出稼ぎ労働者の多くが農村内で頻繁に会う人から出稼ぎ情報を得ている傾向が明らかになった。同時に、稀にしか会わない人を通じて情報を得ている人もおり、こうしたタイプの人々の収入は、頻繁に会っている人から情報を得ているタイプの人の収入よりも高く、統計的にも有意な差がみられた。このようなより収入の高い=満足度の高い仕事を探すために自分の交際範囲では手に入らないような情報や機会に接近しようとしている人々の出現が、いわゆるゲマインシャフト的な農村社会に与えるインパクトについては今後の課題としたが、今後予想される市場経済化の進展に農村社会がさらされることによって、農民がもつネットワークの構造が変化する可能性が高いことが予想された。研究の結果は、2007年11月にマレーシアで行われたASPSで報告され、また2007年度の東北大学大学院文学研究科のCOE「社会階層と不平等研究教育拠点」のAnnual Reportに掲載された。1.ベトナムHung Yen省Khoai Chau県Ham Yu村において調査票調査を行うための予備調査を行った。HungYen省KhoaiChau県Ham Yu村を選んだ理由は、研究代表者がこれまでの研究において研究対象としてきた、ハノイ市中心部で就労する荷物運び労働者を多数送り出している農村だからである。2.これまでの研究から、以下のことが明らかになっている。ハノイ市中心部で就労する荷物運び労働者の多くはハノイ市近郊の農村出身であり、1週間から3週間に一回程度帰省して家事、育児、農作業を行い、数日後に都市部に来る。そのため、都市にスラム等を形成して定着することなく、格安の宿泊施設に寝泊りする。このような出稼ぎ労働者の生態は、ごみ拾いやパン売りなど、いわゆる都市インフォーマルセクターで就労する人々が併せ持つ特徴の一つである。本研究では、このような人々の送り出し側の分析が目的である。3.予備調査では、農村の全般的な経済状況を把握するために、農家世帯だけではなく、農村の末端政府や卸売市場などで幅広く行われた。予備調査を踏まえて、ベトナム人研究者(ハノイ農業大学農村開発室)と相談しながら調査票を作成した。調査票は、A)農家世帯員の基本的属性、就業状況、B)出稼ぎ労働者の主要な転職履歴、C)農業経営状況によって構成されている。4.調査票調査は、出稼ぎ労働者が帰省する旧正月(2007年2月19日)直後に行われた。調査協力者は、ハノイ農業大学農村開発室である。収集したデータは、現在コンピュータに入力中である。
電界非接触撹拌技術を応用して血中浮遊癌細胞を捕獲する技術の開発

血中浮遊癌細胞捕獲が様々な方法で検討されてきた.しかし得られる癌細胞の純度が低く,診断や治療方針決定に応用できなかった.この研究は血液から純度の高い癌細胞を得る技術開発を目的とした.我々が開発した電界非接触撹拌技術を用いて癌細胞の回収率を検討した.結果はあまりよくなかった.電界の撹拌が均一でないことが原因であった.均一化するために撥水リングを試作した.これにより撹拌が均一化した.研究期間は終了したが,これを用いて研究をさらに継続する.血中浮遊癌細胞捕獲が様々な方法で検討されてきた.しかし得られる癌細胞の純度が低く,診断や治療方針決定に応用できなかった.この研究は血液から純度の高い癌細胞を得る技術開発を目的とした.我々が開発した電界非接触撹拌技術を用いて癌細胞の回収率を検討した.結果はあまりよくなかった.電界の撹拌が均一でないことが原因であった.均一化するために撥水リングを試作した.これにより撹拌が均一化した.研究期間は終了したが,これを用いて研究をさらに継続する.癌患者では,血液中に浮遊癌細胞(血中浮遊癌細胞)が存在することが知られている.血中浮遊癌細胞は現在までRT-PCR,Flowcytometry,密度勾配遠心,抗体固定化マグネットビーズを用いた方法で検討されてきた.しかし得られる血中浮遊癌細胞の純度が低く,得られた血中浮遊癌細胞を癌の診断や治療方針決定に応用するには限界があった.今回申請した研究は,血液から簡便に純度の高い血中浮遊癌細胞を捕獲する技術を開発することを目的としている.その方法として,研究協力者赤上が開発した電界非接触撹拌技術(低周波電界を印加して液体を撹拌する技術:以下電界技術)を応用することとした.本法により簡便に高純度の血中浮遊癌細胞を捕獲することが可能になれば,採血で癌の診断から治療方針決定,治療効果判定が行えるようになると期待される.培養肺癌細胞を蛍光標識して血液に添加し,抗EpCAM抗体を固定化したプレート上に滴下,様々な条件で電界を印加した.蛍光標識された癌細胞の数と割合を評価して条件設定検討した.以上の方法で至適な電界技術(周波数・電圧等)の調整を行った.今回の方法では回収率が良くないため,次年度は東京工業大学半田教授の研究グループで開発した磁性ビーズと電界法を組み合わせた方法を検討する予定である.癌患者では,血液中にに浮遊癌細胞(血中浮遊癌細胞)が存在することが知られている.血中浮遊癌細胞は現在までRT-PCR,Flowcytometry,密度勾配遠心,抗体固定化マグネットビーズを用いた方法で検討されてきた.しかし得られる血中浮遊癌細胞の純度が低く,得られた血中浮遊癌細胞を癌の診断や治療方針決定に応用するには限界があった.今回申請した研究は,血液から簡便に純度の高い血中浮遊癌細胞を捕獲する技術を開発することを目的としている.その方法として,研究協力者赤上が開発した電界非接触撹絆技術(低周波電界を印加して液体を撹拝する技術:以下電界技術)を応用することとした.本法により簡便に高純度の血中浮遊癌細胞を捕獲することが可能になれば,採血で癌の診断から治療方針決定,治療効果判定が行えるようになると期待される.培養肺癌細胞を蛍光標識して血液に添加し,抗EpCAM抗体を固定化したプレート上に滴下,様々な条件で電界を印加した.蛍光標識された癌細胞の数と割合を評価して条件設定検討した.以上の方法で至適な電界技術(周波数・電圧等)の調整を行った.今回の方法では回収率が良くないため,次年度は東京工業大学半田教授の研究グループで開発した磁性ビーズと電界法を組み合わせた方法を検討した.しかし現時点で回収率がよくないため,使用する抗体の種類やターゲットとする表面抗原の種類をEPCAM以外で検討する予定である.癌患者では,血液中に浮遊癌細胞(血中浮遊癌細胞)が存在することが知られている.血中浮遊癌細胞は現在までRT-PCR,Flowcytometry,密度勾配遠心,抗体固定化マグネットビーズを用いた方法で検討されてきた.しかし得られる血中浮遊癌細胞の純度が低く,得られた血中浮遊癌細胞を癌の診断や治療方針決定に応用するには限界があった.今回申請した研究は,血液から簡便に純度の高い血中浮遊癌細胞を捕獲する技術を開発することを目的としている.その方法として,研究協力者赤上が開発した電界非接触撹拌技術(低周波電界を印加して液体を撹拌する技術:以下電界技術)を応用することとした.本法により簡便に高純度の血中浮遊癌細胞を捕獲することが可能になれば,採血で癌の診断から治療方針決定,治療効果判定が行えるようになると期待される.培養肺癌細胞を蛍光標識して血液に添加し,抗EpCAM抗体固定化ビーズとともに様々な条件で電界を印加した.結果があまり芳しくなかったため,検討した結果,電界の撹拌が均一でないことが原因であることがわかった.これを均一化するためには電界印可の際に液滴が漏れないようにすることが重要であることがわかり,PTFEで内径20mmの撥水リングテープを試作した.

これにより今まで均一でなかった電界による撹拌挙動が均一化することが分かった.本年度で研究期間は終了するが,研究を継続してPTFE作成した撥水リングテープを用いて抗EpCAM抗体固定化ビーズにより癌細胞を補足する方法を確立したい.電界と東京工業大学の半田研究室で開発した磁性ビーズを組み合わせて検討を行っているが,予定した癌細胞の回収率を得られていない.24年度が最終年度であるため、記入しない。現在使用している抗EPCAM抗体の種類を変更して検討を行う.あるいはEPCAMにこだわらずに癌細胞の表面抗原の種類を変えて検討するなどして,癌細胞の回収率を上げたい.24年度が最終年度であるため、記入しない。
等質空間の幾何学について

今年度の研究項目は1.位相幾何学的手法により,非コンパクトリー群の等質空間への作用の構成と分類を行う,2.等質空間上のハミルトン力学系の積分可能性を考察し,またその離散力学系について調べる,3.等質空間上のフーリェ解析及び微分作用子環を研究する,4.非コンパクト等質空間の間の調和写像を解析的手法および1の成果を用いる手法により研究を進める,の4つであった.1について,大池は92年発行の論文「Twisted linear actions on complex Grass-mannians」の成果をふまえて複素グラスマン多様体上への半単純でない非コンパクトリー群の作用を考察中であり,成果が得られる見通しである.2について,井伊は対称空間上のハミルトン力学系の積分可能性を研究中であり,河村は1次元力学系のカオス性について,ヒルベルト空間への線型作用素表現を用いて研究中であるが既に成果が1つ発行されており,続く成果も口頭発表を終えて論文を準備中である.3について,佐藤はコンパクト可換群上のフーリェマルチプライヤー作用素のなす空間上の作用関数を考察し、またヤコビーラゲ-ル多項式展開におけるマルチプライヤー作用素のなす空間の性質を調べた.前者についてはその成果をTohoku Math.J.に発表しており,後者についてはその成果を間もなく,Proc.Amer.Math.Soc.に発表する.4について,上野は2つの成果をTokyo Journal of Math.に発表した.今年度の研究項目は1.位相幾何学的手法により,非コンパクトリー群の等質空間への作用の構成と分類を行う,2.等質空間上のハミルトン力学系の積分可能性を考察し,またその離散力学系について調べる,3.等質空間上のフーリェ解析及び微分作用子環を研究する,4.非コンパクト等質空間の間の調和写像を解析的手法および1の成果を用いる手法により研究を進める,の4つであった.1について,大池は92年発行の論文「Twisted linear actions on complex Grass-mannians」の成果をふまえて複素グラスマン多様体上への半単純でない非コンパクトリー群の作用を考察中であり,成果が得られる見通しである.2について,井伊は対称空間上のハミルトン力学系の積分可能性を研究中であり,河村は1次元力学系のカオス性について,ヒルベルト空間への線型作用素表現を用いて研究中であるが既に成果が1つ発行されており,続く成果も口頭発表を終えて論文を準備中である.3について,佐藤はコンパクト可換群上のフーリェマルチプライヤー作用素のなす空間上の作用関数を考察し、またヤコビーラゲ-ル多項式展開におけるマルチプライヤー作用素のなす空間の性質を調べた.前者についてはその成果をTohoku Math.J.に発表しており,後者についてはその成果を間もなく,Proc.Amer.Math.Soc.に発表する.4について,上野は2つの成果をTokyo Journal of Math.に発表した.
オートファジーの膜動態：分子機構と疾患との関わり

オートファジーの膜動態の分子機構及び病態との関わりの解析を行った。その結果、リン脂質脱リン酸化酵素のINPP5Eが、リソソームにおけるアクチン重合を介してオートファゴソームとリソソームの融合を促進することを示した。さらにINPP5Eの変異により脳の形成不全が生じるジュベール症候群が、オートファジーの低下によって起こっている可能性も明らかになった。また内皮細胞は上皮細胞と異なり細胞内に感染した病原細菌をユビキチン化できず選択的オートファジーによって殺せないという事実を明らかにした。本年度は以下の成果を得た。1)選択的オートファジーにおける膜動態の分子機構:トランスフェクション試薬をコートしたビーズが細胞内でオートファゴソームに包まれることを利用し、このビーズを細胞から精製抽出し、産総研との共同研究によりプロテオミクス解析を行った。その結果、選択的オートファジーに関わると思われる候補たんぱく質を数百同定できた。2)がん細胞におけるオートファジーの役割の解析:数十種類の様々なヒトがん細胞株のオートファジー活性化状態を検討すると同時に、オートファジーたんぱく質のsiRNAを用いてオートファジーを阻害したときに細胞増殖がどうなるかを調べた。その結果、がん細胞株の種類によって、オートファジー依存性が高くオートファジーを阻害すると増殖が著しく低下するものがあることが判った。依存性とオートファジー活性状態に相関は無かった。3)オートファジーの膜動態を制御する低分子化合物の解析:理研との共同研究により、オートファジーを制御する低分子化合物のスクリーニングを理研が所有する化合物ライブラリーNPDepoを用いて行った結果、複数の候補化合物を得た。そのうちのひとつについて解析を進め、その化合物がオートファジーたんぱく質のAtg16LのWDリピートドメインに結合し、飢餓誘導オートファジーを阻害することを見出した。他のオートファジーたんぱく質LC3の局在異常を起こすことが阻害の原因であると考えられる。興味深いことに選択的オートファジーは阻害しない。4)オートファジーの新規制御タンパク質の同定:ドイツEMBLのグループが開発したsiRNAライブラリーによる機能遺伝子スクリーニング系を用いオートファジーを制御する新規タンパク質の探索を当該グループに当研究室の学生を派遣し実施した。その結果、数十の候補たんぱく質を得た。1)オートファゴソーム膜創生の解析:オートファゴソーム膜創生におけるミトコンドリアの役割を解析する予定であったが、他の計画に注力するため実施しなかった。2)選択的オートファジーにおける膜動態の解析:前年度に同定した数百の候補たんぱく質について更に絞り込みを行うために、siRNAスクリーニングを計画している。本年度は、スクリーニング系を確立するための試行錯誤を行い、siRNA固相法及び選択的オートファジーアッセイ系を組み合わせた高S/N比で再現性の高いシステムの構築に成功した。3)がん細胞におけるオートファジー:ある種のがん細胞はオートファジー依存性が高いことが判ったので、どのような場合に依存性が高くなるのか検討したが判明には至っていない。4)オートファジーを制御する低分子化合物の解析:オートファジーを抑制的に制御するたんぱく質であるRubiconに結合する低分子化合物が、予想に反してオートファジーを抑制することを見出した。抑制はRubiconの発現量を増加させるためではなかった。5)オートファジーの新規制御たんぱく質の同定と解析:ドイツEMBLとの共同研究により行ったsiRNAライブラリーのスクリーニングで得られた候補について、各種のオートファジー解析を実施し数個まで絞り込みを行った。あるリン脂質脱リン酸化酵素が、リソソームに局在し、特定リン脂質の代謝を介してリソソームとオートファゴソームの融合に寄与していることを明らかにした。この酵素の変異を原因とする遺伝性疾患が知られているので、患者の細胞を入手し解析する予定である。(1)選択的オートファジーにおける膜動態の分子機構の解析これまでにプロテオミクス解析により、選択的オートファジーのマシナリー候補のタンパク質を数百同定している。今年度はこの候補について、siRNAスクリーニングを実施し選択的オートファジーの制御因子かどうかを検討した。その結果、約20個が選択的オートファジーに必要であることが示された。(2)オートファジーの膜動態と病態との関わりの解明年度計画書に記載したがん細胞の解析については進展が無かったが、それとは別にヒトの遺伝性神経疾患の原因となることが知られているリン脂質脱リン酸化酵素とオートファジーとの関わりに大きな進展があった。リソソーム膜に存在するある特定のリン脂質がこの酵素で脱リン酸化されることが、あるアクチン重合制御タンパク質の活性化に重要で、その活性化によってアクチン重合が進むとリソソームとオートファゴソームの融合が起こる。今後病態との関係が明らかになることが期待される。(3)オートファジーの膜動態を制御する低分子化合物の探索新たな化合物スクリーニングは開始に至らなかった。また既に得た候補化合物について、培養細胞をこの化合物で処理すると、オートファゴソーム形成に必要なAtg16Lの細胞内局在に異常が生じることが明らかになった。(4)オートファジーの新規制御タンパク質の同定オートファジーはメンブレントラフィックの一種であるため、他のメンブレントラフィックで用いられている制御タンパク質がオートファジーにも関与する可能性が高い。新規のオートファジー制御因子を探索するため、分泌経路に関わるタンパク質のsiRNAラブラリーのスクリーニングを行った。その結果、数個のタンパク質がオートファジーを正または負に制御することが判明した。

スクリーニングによる制御タンパク質の同定や同定済の低分子化合物の解析は、順調に進展している。がん細胞の解析や化合物スクリーニングが遅延しているが、当初予想していなかった遺伝病の原因遺伝子産物によるオートファジー制御を明らかにすることに成功し大きな成果が出ている。1)オートファゴソーム膜創生の解明:我々はオートファゴソームが、小胞体とミトコンドリアの接触部位(MAM)で形成されることを突き止めており、MAMを細胞分画法で抽出し、オートファジー誘導の有無でプロテオミクス解析を行った。その結果、オートファジー誘導条件下で特異的に増える分子を複数同定した。これらはオートファゴソーム形成に関与する因子の候補と考えられる。またオートファゴソーム形成に必要な膜タンパク質であるAtg9の解析を行い、Atg9が再循環エンドソームから輸送されることがオートファゴソーム形成に必要であることを示した。その輸送に必要なAtg9のアミノ酸配列中のモチーフも同定した。2)選択的オートファジーにおける膜動態の分子機構の解析:トランスフェクション試薬をコートしたビーズを細胞に取り込ませると、エンドソームに入りその膜を損傷する結果、エンドソーム膜ごとオートファゴソームに包まれる。これまでに、このビーズを細胞から精製抽出しプロテオミクス解析を行い、選択的オートファジーのマシナリー候補について、siRNAスクリーニングを実施した。その結果、選択的オートファジーの初期過程で働くユビキチン化酵素(E3リガーゼ)複合体などを同定した。3)オートファジーの膜動態と感染症などの病態との関わりの解明:我々は今までに、上皮細胞に侵入したA群レンサ球菌がオートファジーによって効率よく殺されることを報告している。本研究にて、内皮細胞はオートファジー機能を正常に有するにもかかわらず、細胞内に侵入したA群レンサ球菌を殺すことができないことが判明した。4)オートファジーの膜動態を制御する低分子化合物及び内在性タンパク質の探索:低分子化合物並びにsiRNAスクリーニングによって既に得た候補化合物や内在性タンパク質について作用の分子機序の解析を行い、幾つかの知見を得た。計画の各項目について、新たな関与たんぱく質を同定するなど進展があった。1)オートファゴソーム膜創生の解明我々はオートファゴソームが、小胞体とミトコンドリアの接触部位(MAM)で形成されることを既に突き止めている。このMAMを細胞分画法で抽出し、オートファジー誘導の有無でプロテオミクス解析を行った。オートファジー誘導条件下で特異的に増えるたんぱく質を複数同定した。その中にオートファゴソーム形成に必須のものがあったのでさらに解析したところ、この分子がオートファゴソーム形成に必須のAtgたんぱく質複数をMAMに結合させる役割を持つことが判明した。
滑脳症及び精神発達遅滞原因遺伝子Arxによる介在ニューロン移動制御機構の解明

マウス嗅球介在ニューロンは成体においても常に新生されRMSと呼ばれる経路を通り嗅球へ到達して新たな神経回路を形成している。滑脳症の原因遺伝子であるArx遺伝子の嗅球介在ニューロンにおける機能を明らかにするために、レンチウイルスを用いてArx遺伝子の機能を抑制すると嗅球介在ニューロンの移動に異常が見られた。このことから新生ニューロンの移動にArx遺伝子が必要な遺伝子であることが明らかになった。さらにArx遺伝子の下流において新生ニューロンの移動を制御する遺伝子を探索するために、野生型とArx遺伝子欠損マウスの嗅球においてRNA Seqによる発現比較解析を行った。解析の結果Arx遺伝子欠損マウスの嗅球においていくつかの膜タンパク質や分泌分子の発現の減少が見られた。これらの遺伝子についてin situ hybridization法を用いて野生型とArx遺伝子欠損マウスの嗅球において実際の発現パターンの解析を行った。解析の結果、実際にいくつかの膜タンパク質や分泌分子の遺伝子についてはArx遺伝子欠損マウスの嗅球介在ニューロンにおいて発現量の減少が観察された。マウス嗅球介在ニューロンは成体においても常に側脳室周辺で新生されRMSと呼ばれる経路を通り嗅球へ到達して新たな神経回路を形成している。滑脳症・精神遅滞の原因遺伝子であるArx遺伝子は転写因子であり、大脳皮質の介在ニューロンの移動を制御していることが知られている。このArx遺伝子の嗅球介在ニューロンにおける機能を明らかにするためにレンチウイルスを用いたArx遺伝子の機能解析実験を行った。これまでの解析からマウス新生仔の側脳室にレンチウイルスを感染させると、新生嗅球介在ニューロンに効率よく遺伝子導入できることが明らかになっている。このレンチウイルスの系を用いて新生嗅球介在ニューロンにArx遺伝子の強制発現を行うと、コントロールに比べて効率よく新生介在ニューロンが嗅球内の神経回路へと組みこまれることが明らかになった。一方、RNAiによって新生嗅球介在ニューロンにおいてArx遺伝子の発現を抑制すると、新生介在ニューロンが嗅球のRMS内で停留するニューロンの移動の異常が見られた。また、Arx遺伝子のDNA結合ドメインのみをレンチウイルスによって新生介在ニューロンに過剰発現を行うと、Arx遺伝子のRNAiの場合と同様に新生介在ニューロンが嗅球のRMS内で停留するニューロンの移動の異常が見られることが明らかになった。これらの結果からArx遺伝子は大脳皮質の介在ニューロンのみならず、嗅球介在ニューロンのRMSから嗅球への移動も制御している転写因子であることが明らかになった。初年度の計画にあるArx遺伝子の機能解析のためにレンチウイルスを用いて嗅球介在ニューロンにおいてArx遺伝子の過剰発現と発現抑制を行った。その結果、Arx遺伝子を過剰発現した場合には嗅球介在ニューロンの移動が促進され、Arx遺伝子の発現を抑制した場合には嗅球介在ニューロンの移動が嗅球内で停止していた結果が得られた。成体新生嗅球介在ニューロンの移動にもArx遺伝子が必要であることが明らかになった結果が得られ、順調に計画が進んでいるといえる。レンチウイルスを用いた実験からArx遺伝子が嗅球介在ニューロンのRMSから嗅球への移動も制御していることが明らかになった。Arx遺伝子は転写因子であるため嗅球介在ニューロンの移動を制御する遺伝子の発現を制御していると考えられる。そこで、野生型及びArx遺伝子欠損マウスの嗅球からそれぞれRNAを単離してRNA Seq解析を行う。発現の変動している遺伝子群の中で、ニューロンの移動に関与すると思われる遺伝子について、野生型及びArx遺伝子欠損マウスの嗅球において実際に発現が変動しているかをin situ hybridizationによって明らかにする。発現の変動がin situ hybridizationによって確認された遺伝子についてはレンチウイルスの系を用いた機能解析実験を行う。野生型とArx遺伝子欠損マウスの嗅球からRNAを抽出してRNA Seq解析を行う予定であったが、レンチウイルスによるArx遺伝子の機能解析を詳細に行う必要があり、RNA Seq解析を行う時間がなくRNA Seq解析にかかる費用分を腎炎度に持ち込むため。次年度において当初前年度中に実施予定であった野生型とArx遺伝子欠損マウスの嗅球におけるRNA Seq解析を行う。このRNA Seq解析にかかる試薬費、実験動物費、受託解析費に次年度使用額を用いる予定である。
プロダクト型イノベーションの普及に係る定量分析

本研究は、プロダクト型イノベーションの普及のメカニズムを定量的に明らかにし、その普及によって生み出される経済的・社会的な価値を測定することを目的とした。2008年秋の世界金融危機後、日本を始め先進国での需要不足が深刻化する中で、新たな需要を掘り起こすような新製品や新技術の創出・普及が望まれている。しかしながら経済学の分野において実証的にプロダクト型イノベーションの普及に着目した分析は、その技術的な難しさもあり研究が出遅れている状況にある。ここでは構造型推定手法を用いることで、こうした技術的な課題の克服を試みると同時に、3つの新製品・新技術を事例として取り上げて実証分析を行うことで、補助政策の役割や補完財の重要性など、普及に影響を与える様々な要因の定量的インパクトも明らかにすることを目的としている。研究計画初年度にあたる平成22年度においては、本研究にて取り上げるプロダクト型イノベーションを選定することからはじめた。文部科学省科学技術政策研究所にて実施された「科学技術振興による経済・社会・国民生活への寄与の定性的評価分析」(NISTEP Report No.80,89)にて言及されている310の技術リストを吟味し、太陽光発電、脂質異常症治療剤、高精細度デジタルテレビ(HDTV)技術という3つの技術を取上げることとした。その上で、3つの選定技術の1つである太陽光発電について、データ収集を開始し合わせて構造推定を用いるためのモデル構築を行った。より詳細な分析は平成23年度に引き続き行われることになるものの、太陽光パネルの技術的な特性とその学習効果の存在について配慮をしつつ、都道府県別のデータを用いて、太陽光発電の普及の現状を需要及び供給の側面から解明をするモデルを作成し、今後はデータとのマッチングを行う作業に入ることにしている。
ヒト癌における組織特異的alternative splicingの脱制御の検証

1.フィブロネクチンmRNAで認められた可変的スプライシング(alternative splicing)の癌組織における脱制御が、可変的スプライシングを受ける他の遺伝子においても認めらる現象かどうかを、腫瘍の間質で発現が顕著に増加するテネイシンの場合について検討した。方法は、テネイシンmRNA上の1.9kbの可変領域を部分的にカバ-する1本鎖cDNAをプロ-ブとするヌクレア-ゼプロテクション法を用いた。その結果、1.9kbの可変領域を含むバリアント1mRNAの発現率は、正常線維芽細胞に比べ、ウイルスによる形質転換細胞で顕著に増加していること、また、ヒト胎児肺では成人肺に比べてバリアント1mRNAの発現率が同様に増加していること、が判明した。次に、組織型の異なる種々のヒト肺癌組織について、バリアント1mRNAの発現率をその周囲の正常組織と比較した。大細胞癌、小細胞癌ではバリアント1mRNAの有意な増加が観察されたが、腺癌、扁平上皮癌では増加が認められる症例の他に、変化がない症例やかえって減少する症例も見つかり、単純な相関関係は見いだせなかった。また、腺癌、扁平上皮癌の場合、分化度とバリアント1mRNAの発現率の間にも有意な相関性は認められなかった。2.フィブロネクチン分子上の2つの可変領域、EDーA,EDーB、のヒト肝癌組織における発現を、各可変領域に特異的な単クロ-ン抗体を用いて、組織化学的に検索した。非癌肝組織では、これらの抗体との反応性がほとんど認められなかったが、肝癌組織では、陽性の反応を示す症例が多数観察された。これらの抗体との反応性を+++(80%以上で陽性)、++(2080%で陽性)、+(520%で陽性)、ー(05%で陽性)に分けて評価したところ、抗EDーA抗体との反応性が+++である症例の割合は、高分化肝細胞癌で27%、中分化肝細胞癌で64%、低分化肝細胞癌で80%であり、分化度と抗EDーA抗体との反応性の間に高い相関性が認められた。抗EDーB抗体の反応性に関しても同様の結果がえられた。
hPEDF(ヒト色素上皮由来因子)による視細胞保護効果の分子メカニズム解析

血清除去刺激により、アポトーシス誘導因子(AIF)がミトコンドリアから核内へ移行することが明らかとなった。また、ヒト色素上皮由来因子(hPEDF)はミトコンドリア膜の安定化させることで、AIFのミトコンドリアからの放出を抑制しており、この作用によりアポトーシスが抑制されていることが明らかとなった。さらに、網膜変性モデル動物であるRCSラットでも同様に、アポトーシスを生じた視細胞においてAIFの核内移行が生じており、hPEDFの遺伝子導入により、視細胞におけるAIFの核内移行が抑制され、最終的にアポトーシスが抑制されていることが明らかとなった。1.組換えhPEDFタンパクを用いたin vitro系を用いた保護効果とメカニズムの検証網膜構成細胞由来の培養細胞(R28細胞)を用いて、血清除去刺激による細胞死(アポトーシス)に対するhPEDFの抑制効果を検討し、細胞内シグナルや転写因子についての候補を絞り込む。A)hPEDFによるcell viabilityの変化血清除去刺激に対し、rhPEDFタンパクを0-2500ng/mlの各濃度加え、濃度依存的に細胞死を抑制できることが明らかとなった。また、この効果はhPEDFの中和抗体により消失した。血清除去刺激に対し、TUNEL染色を用いてアポトーシスに陥った細胞を同定し、定量した。血清除去刺激に対するアポトーシスがcaspase非依存性経路を介するものであることが明らかとなった。C)アポトーシス抑制のメカニズム解析血清除去刺激により、アポトーシス誘導因子(AIF)がミトコンドリアから核内へ移行することが明らかとなった。また、hPEDFはBcl-2の発現亢進を介し、ミトコンドリア膜の安定化させることで、AIFのミトコンドリアからの放出を抑制しており、この作用によりアポトーシスが抑制されていることが明らかとなった。2. SIV-hPEDF遺伝子導入によるin vivo系を用いた保護効果の検証既に保護効果が確認できているRCSラットを用い、SIV-hPEDFを3週令ラットの網膜下に注入し、2週間後に眼球を摘出して検討をおこなった。In vitroの結果と同様に、RCSラットにおいても、アポトーシスを生じた視細胞においてAIFの核内移行が生じていることが明らかとなった。また、SIV-hPEDFの遺伝子導入により、視細胞におけるAIFの核内移行が抑制され、最終的にアポトーシスが抑制されていることが明らかとなった。1.組換えhPEDFタンパクを用いたin vitro系を用いた保護効果とメカニズムの検証アポトーシス抑制のメカニズム解析血清除去刺激により、アポトーシス誘導因子(AIF)がミトコンドリアから核内へ移行することが明らかとなった。3.網膜変性モデル動物における視細胞死のメカニズム検証これまでの結果より、網膜変性における視細胞死にAIFが重要な役割を担っていることが明らかとなったが、さらにその上流に位置するシグナルについて網膜変性モデル動物(RCSラット、Rd10マウス)の網膜組織を用いて検討した。免疫組織化学染色により、PARP (poly (ADP-ribose) polymer polymerase)やCalpain経路の活性化が明らかとなった。今後は、この上流に位置するシグナルを検索する。
鼻咽腔粘膜における好中球機能とTLR4およびTREM-1の協調的作用について

鼻咽腔にインフルエンザ菌を感作させることにより好中球のTREM-1の発現を誘導し,TREM-1の発現は、鼻汁の細菌クリアランスおよび好中球の活性化に関連すると考えられた。また、TLR4は炎症の初期段階で蛋白・RNAレベルでTREM-1の発現を活性化させると考えられた。従って、鼻咽腔においてTLR4は好中球上のTREM-1と協調的に作用することにより自然免疫応答を増強し中耳炎を含む上気道感染に対する防御能の一面を担っていると考えられた。自然免疫の中心的役割を担う好中球におけるTriggering receptor expressed on myeloid cells (TREM-1)はToll-like recepter4(TLR4)と協調的に働くことにより、細菌の貪食能を含めた自然免疫応答を増強すると報告されており、上気道においても重要な役割を担っているものと推測される。今回、鼻咽腔におけるインフルエンザ菌に対する局所粘膜免疫応答につき、TREM-1およびTLR4を中心として細胞生物学的および分子生物学的手法を用いて解析を行った。TLR4wild typeであるC3H/HeNマウスおよびTLR4 mutant C3H/HeJマウスを用い,インフルエンザ菌を鼻腔投与後6, 12, 24, 72hrにマウス鼻咽腔洗浄液を採取し、インフルエンザ菌生菌数を計測した。またFlowcytometryにより鼻咽腔に遊走して来た好中球数の発現強度を各マウスにおいて解析したところ、C3H/HeNマウスにおいては、インフルエンザ菌投与後、経時的に細菌数の低下を認め、C3H/HeJマウスと比較して細菌クリアランスの増加を認めた。また、鼻腔内に浸潤した好中球数については、C3H/HeNマウスにおいてC3H/HeJマウスと比較して明らかに浸潤数の増加を認めており、細菌クリアランスの増加に伴い減少した。インフルエンザ菌感染後ではTLR4 mutant C3H/HeJマウスは有意に細菌クリアランスが低下しており、鼻腔においてTLR4が細菌クリアランスに関係していることが推測された。昨年度はTREM-1とTLR4の協調的作用を実証するために、C3H/HeNマウスおよびC3H/HeJマウスを用いて研究を行い、C3H/HeNマウスにおいては、インフルエンザ菌投与後、経時的に細菌数の低下を認め、C3H/HeJマウスと比較して細菌クリアランスの増加を認めたこと、および鼻腔内に浸潤した好中球数については、C3H/HeNマウスにおいてC3H/HeJマウスと比較して明らかに浸潤数の増加を認めており、細菌クリアランスの増加に伴い減少した事を報告した。今年度は追加実験とし、鼻汁内のTREM-1濃度をフローサイトメトリー及びRT-PCRにて測定し、C3H/HeNマウスにおいてC3H/HeJマウスと比較して6.12hrで明らかな有意差があることを証明し、TREM-1の発現強度が増加していることから、TREM-1とTLR4が協調的に作用し細菌クリアランスを促進していることが推測された。以上よりTREM-1とTLR4は協調的に働くことにより、炎症早期における好中球の遊走能や貪食能を含めた自然免疫応答を増強するものと考えられた。今年度の研究でTLR4が細菌クリアランスに関係していることが推測されたため、今後はフローサイトメトリーにてTREM-1の発現強度を測定し、またRT-PCRにてTREM-1の定量的解析も行い、TLR4とTREM-1の関与を解析する。耳鼻咽喉科学本年度行った実験に用いた試薬などは、研究室にあった在庫を用いたため新たに購入しなかった。国際学会についてはヨーロッパの情勢が不安定であり、参加・発表を見送った。また、マウス解剖・試料採取用のルーペ及びデータ解析用のパソコンは次年度購入予定としたため繰り越し額が生じた。TREM-1測定・解析のために、TREM-1抗体などの各種試薬及びRT-PCR用の試薬キットを購入する。
気候変動による脆弱性と効果修飾因子の相互作用に関する大規模疫学研究

本研究は、日本全国47都道府県のインフルエンザ患者1,851万人、感染性胃腸炎患者1,598万人、救急搬送患者3,552万人、病院外心肺停止患者約118万人を対象とし、気候変動による脆弱性が、地域や個人の効果修飾因子によってどのように異なるかについて、環境疫学的手法と社会疫学的手法を融合して解明することを目的とする。本研究により、効果修飾因子による気候変動への脆弱性の違いを全国規模で定量的に推定することが可能となり、地域や個人の特性に応じた気候変動ー疾患発症予測モデルの構築、早期警報システムへの応用、疾病予防管理プログラムの改善、医療機関における医療従事者の確保や設備整備等、日本における気候変動適応策を進める上で重要な意義があると考えられる。研究開始の初年度であった平成30年度については、(1)文献レビューによる先行知見の整理、(2)研究デザイン、解析方法、アウトカム等の具体的な検討、(3)データの取得、データクリーニング、データセットの突合、データベースの構築、を行った。文献レビューによる先行知見の整理については、気候変動による健康影響(感染症、救急搬送、病院外心肺停止)について、国際誌を中心とした文献レビューを行い、先行知見について整理した。また、文献レビューの結果をもとに、研究デザイン、研究対象、データ収集、解析方法について検討し、具体的な絞り込みを行った。さらに、気候変動の指標として、地域の気象変化(気温、相対湿度、降水量等)のデータを、アウトカムの指標として、感染症発生動向調査に基づく患者情報、全国救急業務実施状況調査に基づく救急搬送データ、ウツタイン調査に基づく病院外心肺停止データをそれぞれ入手し、データベースを構築した。今年度予定していた文献レビューによる先行知見の整理やデータベースの構築については、予定どおり作業が進んでいることから、おおむね順調に進展しているものと考えられる。平成30年度に構築したデータベースを用い、気候変動による健康影響について、統計学的手法を用いて定量的に明らかにする。また、解析結果をもとに、本研究で得られた知見について整理し、論文化を進める。当初予定していた海外の関係機関への資料収集及び専門家との協議・打合せについて、業務多忙のため実施することができなかったことから、次年度使用額が生じたもの。次年度使用額については、海外の関係機関への資料収集及び専門家との協議・打合せを実施するために使用する予定である。
自律機能調節に関わる大脳皮質出力系と扁桃体出力系の前脳領域における連関

本研究は、順行性標識法と逆行性標識法を併用し、辺縁下皮質、島皮質、および扁桃体中心核からの投射線維と、脳幹自律神経中枢のうち特に孤束核へ投射するニューロンとの分布が一致する領域を視床下部において光顕下で検索し、さらにこれらの投射線維とニューロンとの間に形成されるシナプス結合を電顕下で詳細に解析した。その結果、外側視床下部の最外側部において、辺縁下皮質線維、島皮質線維および扁桃体線維の終止領域と孤束核投射ニューロンの分布域の一致が見られた。この領域を電顕下で観察すると、両皮質線維の軸索終末部は孤束核投射ニューロンの遠位樹状突起および樹状突起棘に非対称性のシナプスを、扁桃体線維の軸索終末部は孤束核投射ニューロンの細胞体のみならず近位および遠位樹状突起にも対称性のシナプスを形成していた。次に、順行性二重標識法を用いて、視床下部外側部における島皮質および扁桃体中心核からの投射線維の収束様態を光学顕微鏡ならびに電子顕微鏡的に解析するとともに、順行性標識法とpost-embedding immunogold法を併用して、扁桃体中心核からの投射線維がGABAを含有するかどうかを電子顕微鏡にて検索した。その結果、島皮質線維および扁桃体線維の終末野は、外側視床下部の最外側部で視床下核と大脳脚を取り囲む領域においてよく一致していた。この領域を電顕下で観察すると、島皮質線維と扁桃体線維の軸索終末部が同一ニューロンの樹状突起および樹状突起棘にシナプスを形成する例が観察された。さらに、扁桃体線維の軸索終末部はGABAを含有することが明らかになった。以上の結果より、島皮質、辺縁下皮質および扁桃体中心核から視床下部外側部を介して孤束核に至る神経路が存在し、このうち、島皮質からの興奮性出力と扁桃体中心核からの抑制性出力は視床下部外側部の孤束核投射ニューロンに収束する可能性が示唆された。本年度は、順行性標識法と逆行性標識法を併用し、島皮質および扁桃体中心核からの投射線維と、脳幹自律神経中枢のうち、特に孤束核へ投射するニューロンとの分布が一致する領域を視床下部において光顕下で検索し、さらにこれらの投射線維とニューロンとの間に形成されるシナプス結合を電顕下で詳細に解析した。まず、島皮質にビオチン化デキストランアミン(BDA)を、孤束核にコレラトキシンBサブユニット(CTb)をそれぞれ注入し、BDA標識線維の終末野とCTb標識ニューロンの分布域が一致する領域を検索した。その結果、外側視床下部の最外側部で視床下核と大脳脚を取り囲む領域に分布域の一致を見た。この領域を電顕下で観察すると、BDAで標識された皮質線維はCTbで標識された孤束核投射ニューロンの遠位樹状突起および樹状突起棘に非対称性のシナプスを形成していた。次に、扁桃体中心核にBDAを孤束核にCTbをそれぞれ注入すると、上記と同じような領域にBDA標識線維の終末野とCTb標識ニューロンの分布域の一致を見た。また電顕下では、BDA標識扁桃体線維はCTb標識孤束核投射ニューロンの細胞体のみならず、近位および遠位樹状突起にも対称性のシナプスを形成していた。

以上の結果より、島皮質および扁桃体中心核から視床下部外側部を介して孤束核に至る神経路が存在し、このうち皮質性出力は興奮性、扁桃体性出力は抑制性である可能性が示唆された。本年度は順行性二重標識法を用いて、視床下部外側部における島皮質および扁桃体中心核からの投射線維の収束様態を光学顕微鏡ならびに電子顕微鏡的に解析した。さらに、順行性標識法とpost-embedding immunogold法を併用して、扁桃体中心核からの投射線維がGABAを含有するかどうかを電子顕微鏡にて検索した。まず、同一ラットにおいて扁桃体中心核にビオチン化デキストランアミン(BDA)を、島皮質にPhaseolus vulgaris-leucoagglutinin(PHA-L)を電気泳動的に微量注入した。その結果、BDAで標識された皮質線維とPHA-L標識扁桃体線維は、視床下部外側部の最外側部で視床下核と大脳脚を取り囲む領域に分布域の一致を見た。この領域を電顕下で観察すると、皮質線維の軸索終末部は多数の球形シナプス小胞を含有し、視床下部ニューロンの遠位樹状突起および樹状突起棘に非対称性のシナプスを形成していた。一方、扁桃体線維の軸索終末部は多数の多形性シナプス小胞に加えて少数の有芯小胞を含有し、視床下部ニューロンの細胞体のみならず、近位および遠位樹状突起にも対称性のシナプスを形成していた。さらに、これらの皮質線維と扁桃体線維が同一ニューロンにシナプスを形成する例も観察された。次に、扁桃体中心核にBDAを注入したラットにおいて、視床下部外側部におけるBDA標識終末の大部分がGABAを含有することが明らかになった。以上の結果より、島皮質からの興奮性出力と扁桃体中心核からの抑制性出力は視床下部外側部ニューロンに収束する可能性が示唆された。
自立型最高エネルギー宇宙線検出器の開発

専用ネットワークに依存することなく、自立して動作する宇宙線検出器システムの開発を行った。読み出し回路系は東京大学宇宙線研究所付属明野観測所との共同開発で、小型ボックス内に、FADC, CPU,記憶装置、電源を内蔵した独立装置を開発、現在試験を行っている。検出器としては1cm厚薄型シンチレータとwavelength-shifterを組み合わせたファイバー集光系から較正される持ち運び可能な1m^2面積小型観測装置を開発した。シンチレーション光を受ける光電子増倍管も複数種を購入、試験して最終スペックを決定済みである。組み上げた検出器は千葉大学内で基礎測定を行った後、明野観測所に移動して、読み出し回路装置と接続、宇宙線測定を開始した。現在環境ガンマ線からのノイズを落とす作業を行っている。最終目標である自立型検出器で較正される最高エネルギー宇宙線観測網実現のための要素検出器として十分使用可能である。ただし現在のところ、宇宙線ミューオンをセルフトリガーで測定しているのみであり、最終的には実際の空気シャワー事象を捉えることが必要と考えている。そのためAGASA(明野広域空気シャワーアレイ)検出器との同時観測及び、別財源からさらに4台の検出器を追加して追試用空気シャワーアレイを構築する予定である。
大学院におけるＯＳＣＥを用いた専門看護師の看護実践能力評価プログラムの開発

大学院におけるOSCEを用いた急性・重症患者看護専門看護師(以下,CNS)の看護実践能力評価プログラムの開発を目的に,現在わが国のCNS教育課程を持つ看護系大学院における看護技術教育の調査と,CNSが考える高度看護実践とは何かを明らかにすべくグループフォーカスインタビューを行った.その結果,大学院における看護技術教育の内容や評価は大学院によって異なっていた.また,CNSが考える高度看護実践能力は27のサブカテゴリーと,9つのカテゴリーが抽出された.今後は,抽出されたカテゴリーの妥当性を再確認しながら,高度な看護実践能力を客観的に評価可能なプラグラムの開発を検討して行きたい.専門看護師教育課程における高度な看護実践能力の総合的な評価に向けて、本研究はクリティカル領域で必要とする看護技術の中から、専門看護師教育課程で教育・評価すべき看護技術を抽出・選定し、それらの到達度を明確にしたOSCEによる急性・重症患者看護専門看護師実践能力評価プログラムを開発することを目的とする。本年度は、昨年の結果を踏まえて、抽出された看護実践項目を基盤としたOSCEシナリオ作成に向けた基盤作りを行った。まず1つ目に、シナリオ作成に向けて、OSCEの基盤となる教育デザインに関する研究のリサーチ、ならびにインストラクショナルデザインをもとにした学習の視察を行った(琉球大学クリニカルシミュレーションセンター)。また、関連学会に参加し、シミュレーション教育に精通されている諸先生から研究に向けてご示唆を頂いた。2つ目に専門看護師が考える「高度な看護実践」とは何かを検討した。昨年度は、専門看護師が大学院教育において学習されるであろう看護実践について調査した。その結果、看護技術に関する項目は抽出されたものの、その技術に関する質的な研究までには至らなかった。また、日本看護協会は「高度な看護技術」と唱っているが、「高度な」の意味合いにおいてまでは言及されていない。先行文献等のリサーチでは、「看護実践」と何かを明示した概念分析研究は散見されたものの、専門看護師の「高度看護実践」に関する概念枠組みとなる研究は見当たらなかった。専門看護師教育課程における高度な看護実践能力の総合的な評価に向けて、本研究はクリティカル領域で必要とする看護技術の中から、専門看護師教育課程で教育・評価すべき看護技術を抽出・選定し、それらの到達度を明確にしたOSCEによる急性・重症患者看護専門看護師実践能力評価プログラムを開発することを目的とする。昨年度は専門看護師が大学院教育において学習されるであろう看護実践について調査した。よって、本年度は、専門看護師が考える高度実践とは何かを抽出すべくグループフォーカスインタビューを実施した。大学院教育で行われている看護技術教育と、専門看護師が考える看護実践のマトリックスを開発し、OSCE基盤の資料となった。1)視察(1)韓国赤十字大学:韓国赤十字大学のシミュレーションラボセンターを視察した。施設見学と実際にオペレーションスキルの講習を受けた。また、施設にはシミュレーションを専門とする研究者がおり、シミュレーション教育における課題についてディスカッションした。(2)韓国カトリック大学:韓国カトリック大学の医学シミュレーションセンターを視察した。ここでは、救急部と兼務されている医師にレクチャーを受け、医学教育や医療人を育成するためのシミュレーション教育についてディスカッションした。2)大学院における看護実践教育のカリキュラム構成(1)海外の大学院におけるシミュレーション教育は、フィジカルアシスタントやナースプラクティショナーを対象にし行われている。しかし、専門看護師を特定したシミュレーション教育は見当たらなかった。(2)専攻研究で、わが国においては、大学院で専門看護師を対象にOSCEを行っている施設はない。(3)専門看護師に必要なスキルで、シミュレーション教育を活用できる看護技術を特定する必要がある。これら(1)(3)のことから、国内で急性・重症患者看護専門看護師を育成している大学院を対象に、大学院カリキュラムでの看護技術について調査を行った。上位は危機介入に関する看護技術、家族支援に関する看護技術、フィジカルイグザミネーションやアセスメントに関することが検出された。