hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
チロシンキナーゼ阻害薬耐性甲状腺未分化癌に対する新規治療開発研究

甲状腺未分化癌は悪性度がきわめて高く、長年にわたり治療改善がなく、新たな治療の確立もなかった。要因のひとつは未分化癌の特性を標的とした薬剤を使用していないことがあげられる。近年、放射性ヨウ素治療抵抗性・難治性の分化型甲状腺癌患者および切除不能の甲状腺未分化癌患者に対し、チロシンキナーゼ阻害薬レンバチニブが承認され、新たに使用できることになった。日常診療においては今後レンバチニブ耐性甲状腺未分化癌に対する治療法の確立が求められる。そのため、われわれが所有しているレンバチニブ感受性甲状腺株と、レンバチニブ耐性株を用いて、レンバチニブの感受性・耐性に重要なバイオマーカーを明らかにすることとともに、甲状腺未分化癌治療に有効な新規標的治療薬をバイオマーカーとともに開発に繋げることを目的としている。われわれが独自に所持するレンバチニブ感受性甲状腺未分化癌細胞株(A株)と、コントロールとしてレンバチニブ耐性甲状腺未分化癌細胞株(B株)にレンバチニブを添加するRNAを抽出した。その後aRNAを作成し、レンバチニブ添加前後の遺伝子プロファイルの差異をマイクロアレイを応用し解析した。レンバチニブ添加により変動したパスウェイおよび転写因子群を抽出する目的でGene Ontology (GO)解析とParametric Analysis of Gene Set Enrichment(PAGE)解析を実施し、われわれが今まで試行してきた解析手法を用いて、バイオマーカーの候補となる遺伝子群、パスウェイを見出すため、解析作業中である。平成30年度の研究計画の通り、レンバチニブ感受性甲状腺未分化癌細胞株(A株)と、コントロールとしてレンバチニブ耐性甲状腺未分化癌細胞株(B株)にレンバチニブを添加し、RNAを抽出した。その後aRNAを作成し、レンバチニブ添加前後の遺伝子プロファイルの差異をマイクロアレイを応用し解析している。レンバチニブ添加により変動したパスウェイおよび転写因子群を抽出する目的でGene Ontology (GO)解析とParametric Analysis of Gene Set Enrichment(PAGE)解析を実施し、われわれが今まで試行してきた解析手法を用いて、バイオマーカーの候補となる遺伝子群、パスウェイを見出す試みをし、甲状腺未分化癌に対するレンバチニブ耐性・感受性に関わるバイオマーカー探索を行っている。しかし、バイオマーカーを同定し、リアルタイムRT-PCR用遺伝子発現アッセイPrimer Array&reg;を用い、網羅的にシグナル伝達系のmRNA発現を解析し、マイクロアレイによる解析の再現性の確認をすることはできなかった。平成30年度の目的の達成度は、50%程度と考える。平成31年度はバイオマーカーの候補となる遺伝子群、パスウェイを同定し、リアルタイムRT-PCR用遺伝子発現アッセイPrimer Array&reg;を用い、網羅的にシグナル伝達系のmRNA発現を解析し、マイクロアレイによる解析の再現性の確認したい。さらに、ウェスタンブロット法によるシグナル伝達および遺伝子群発現変動の解析および標的遺伝子を絞り込み、複数の甲状腺未分化癌細胞株を使用したリアルタイムRT-PCRによるノックダウン効果の検証を行いたい。平成28年度の研究計画の通り、レンバチニブ感受性甲状腺未分化癌細胞株(A株)と、コントロールとしてレンバチニブ耐性甲状腺未分化癌細胞株(B株)にレンバチニブを添加し、RNAを抽出した。平成28年度の目的の達成度は、50%程度と考える。

要因のひとつは未分化癌の特性を標的とした薬剤を使用していないことがあげられる。近年、放射性ヨウ素治療抵抗性・難治性の分化型甲状腺癌患者および切除不能の甲状腺未分化癌患者に対し、チロシンキナーゼ阻害薬レンバチニブが承認され、新たに使用できることになった。日常診療においては今後レンバチニブ耐性甲状腺未分化癌に対する治療法の確立が求められる。そのため、われわれが所有しているレンバチニブ感受性甲状腺株と、レンバチニブ耐性株を用いて、レンバチニブの感受性・耐性に重要なバイオマーカーを明らかにすることとともに、甲状腺未分化癌治療に有効な新規標的治療薬をバイオマーカーとともに開発に繋げることを目的としている。われわれが独自に所持するレンバチニブ感受性甲状腺未分化癌細胞株(A株)と、コントロールとしてレンバチニブ耐性甲状腺未分化癌細胞株(B株)にレンバチニブを添加するRNAを抽出した。その後aRNAを作成し、レンバチニブ添加前後の遺伝子プロファイルの差異をマイクロアレイを応用し解析した。レンバチニブ添加により変動したパスウェイおよび転写因子群を抽出する目的でGene Ontology (GO)解析とParametric Analysis of Gene Set Enrichment(PAGE)解析を実施し、われわれが今まで試行してきた解析手法を用いて、バイオマーカーの候補となる遺伝子群、パスウェイを見出すため、解析作業中である。平成29年度の研究計画の通り、レンバチニブ感受性甲状腺未分化癌細胞株(A株)と、コントロールとしてレンバチニブ耐性甲状腺未分化癌細胞株(B株)にレンバチニブを添加し、RNAを抽出した。その後aRNAを作成し、レンバチニブ添加前後の遺伝子プロファイルの差異をマイクロアレイを応用し解析している。レンバチニブ添加により変動したパスウェイおよび転写因子群を抽出する目的でGene Ontology (GO)解析とParametric Analysis of Gene Set Enrichment(PAGE)解析を実施し、われわれが今まで試行してきた解析手法を用いて、バイオマーカーの候補となる遺伝子群、パスウェイを見出す試みをし、甲状腺未分化癌に対するレンバチニブ耐性・感受性に関わるバイオマーカー探索を行っている。しかし、バイオマーカーを同定し、リアルタイムRT-PCR用遺伝子発現アッセイPrimer Array&reg;を用い、網羅的にシグナル伝達系のmRNA発現を解析し、マイクロアレイによる解析の再現性の確認をすることはできなかった。平成29年度の目的の達成度は、50%程度と考える。甲状腺未分化癌は悪性度がきわめて高く、長年にわたり治療改善がなく、新たな治療の確立もなかった。
非線形モデリングに基づく力学系の定常性の定量化に関する研究

本研究では,非線形力学系理論に基づく時系列解析を適用する際に,通常暗黙の仮定として用いれている「定常性の成立」を議論するための理論を確立するということを目的としている.(1)力学系の定常性とは何か,(2)どのように定義すべきか,(3)どのように解析すべきかという観点から議論および数値実験による検討を行った.前年度においては,ある程度汎用性のある,力学系の定常性基準を提案することがほぼ出来たので,本年度は,この結果をさらに増強するために,以下の項目からの検討を行った.1.多数の力学系間の因果性をどのように導入するか.非線形力学系理論に基づく時系列解析を用いる際には,得られた観測データがいわゆる「定常」な状態にあることが仮定として用いられる.更に,通常は,「自律力学系」から生じていると考える.これらの仮定に基づいて,「力学系の埋め込み定理」を介した非線形モデリングである「局所線形近似」による解析手法が,カオスなどを含む非線形性を有するデータの定量化手法として有効である.実際に計測される時系列信号には,上述の「自律力学系からの発生」という仮定が成立していないこともむしろあることをまず指摘した.2.入出力埋め込み定理の導入次に,幾つか決定論的非線形力学系の存在を考慮にいれた「非自律力学系」の存在と,そこから生じるカオス的応答を定義するために,従来の埋め込み定理を拡張する新しい定理に関して考察し,あるシステム対する入力信号をも時間遅れ座標に用いる,「非自律力学系の埋め込み定理」を考案し,それに基づく数値実験を行った.その結果,本研究で提案する解析手法を用いると,ある二つの時系列信号が存在するときに,これらの間の因果性を議論できる可能性を示唆した.現在,上述の定理を更に拡張した「多入力系」に関する埋め込み定理について議論を行うため,これに対する数値実験を行っている.本研究では,非線形力学系理論に基づく時系列解析を適用する際に必要となる定常性の成立という仮定を検定するための理論を確立することを目的とする.(1)力学系の定常性とは何か,(2)どのように定義すべきか,更には,(3)どのように定量化されるべきかという観点から解析する.最終的には,少なくとも実験的に,汎用性の高い,力学系の定常性基準を提案することが眼目である.そのために,本年度は,以下の項目から検討を行うことで,上記の課題に対するアプローチとした.1.力学系の定常性をどのように定量化するか.非線形力学系理論に基づく時系列解析を用いる際には,得られた観測データがいわゆる「定常」な状態にあることが仮定として用いられる.この仮定に基づいて,非線形モデリングの一手法として,「局所線形近似」手法が,カオスなどを含む非線形性を有するデータのモデリング手法として有効である.実際に計測される時系列信号には,上述の定常性の仮定が成立していないことがむしろ多いと考えられる.そこで,このような非定常な信号にも対応できる「時空間局所モデリング法」を提案した.次に,このモデリング手法に基づく解析により,対象とするデータの持つ非定常性を定量化することに成功した.2.力学系の定常性とはなにか.次に,決定論的非線形力学系の存在を考慮にいれた定常性を定義するために,(弱)定常性を「平均が一定で,かつ,共分散が時間差のみの関数となる.」とする従来の定義に基づく定常性の検定手法では,非定常と見なされるデータを用いて,上で提案した「時空間非定常モデリング」を適用することで解析した.具体的な対象は,力学系の構造は全く変化しないのに,応答が間欠性カオスとなるために上記の従来基準では非定常とされてしまうデータを使用した.その結果,本研究で提案する定常性解析手法を用いると定常と判されること,従って従来の定常性の定義とは異なり,自然な形で力学系の定常性を議論できる可能性を示唆した.現在,「力学系の定常性とはなにか」の項で示唆された結果を考慮にいれた力学系の定常性に関する新しい定義(力学的定常性)に関して,より定量的な考察を行っている.本研究では,非線形力学系理論に基づく時系列解析を適用する際に,通常暗黙の仮定として用いれている「定常性の成立」を議論するための理論を確立するということを目的としている.(1)力学系の定常性とは何か,(2)どのように定義すべきか,(3)どのように解析すべきかという観点から議論および数値実験による検討を行った.前年度においては,ある程度汎用性のある,力学系の定常性基準を提案することがほぼ出来たので,本年度は,この結果をさらに増強するために,以下の項目からの検討を行った.1.多数の力学系間の因果性をどのように導入するか.非線形力学系理論に基づく時系列解析を用いる際には,得られた観測データがいわゆる「定常」な状態にあることが仮定として用いられる.更に,通常は,「自律力学系」から生じていると考える.これらの仮定に基づいて,「力学系の埋め込み定理」を介した非線形モデリングである「局所線形近似」による解析手法が,カオスなどを含む非線形性を有するデータの定量化手法として有効である.実際に計測される時系列信号には,上述の「自律力学系からの発生」という仮定が成立していないこともむしろあることをまず指摘した.2.入出力埋め込み定理の導入

次に,幾つか決定論的非線形力学系の存在を考慮にいれた「非自律力学系」の存在と,そこから生じるカオス的応答を定義するために,従来の埋め込み定理を拡張する新しい定理に関して考察し,あるシステム対する入力信号をも時間遅れ座標に用いる,「非自律力学系の埋め込み定理」を考案し,それに基づく数値実験を行った.その結果,本研究で提案する解析手法を用いると,ある二つの時系列信号が存在するときに,これらの間の因果性を議論できる可能性を示唆した.現在,上述の定理を更に拡張した「多入力系」に関する埋め込み定理について議論を行うため,これに対する数値実験を行っている.
癌関連疾患予測システムの開発と疾患パスウェイの研究

癌関連タンパク質/遺伝子相互作用データベースCancerProView (http://cancerproview.dmb.med.keio.ac.jp)のデータとしてSMARTとNCBI Refseqからタンパク質ドメインの取得を行った。その後、疾患未同定なタンパク質について疾患関連タンパク質とのドメイン比較を行うことにより疾患の可能性を推測するプログラムの開発を行った。本研究の成果は、癌疾患の基礎研究や診断、治療などの分野で活用されると期待される。平成25年度は、1:癌関連疾患と原因遺伝子の関連付け、2:癌関連遺伝子のタンパク質ドメイン構造と遺伝子変異、癌疾患との対応付け、3:既知タンパク質・遺伝子相互作用、ドメイン構造、疾患の関連付けによる疾患予測モデル化、4:疾患未同定遺伝子のタンパク質相互作用とドメイン構造の相似性からの疾患予測、5:癌疾患予測検索システムと疾患パスウェイの作成(CancerProViewとの統合化)を行うために、HUGO Gene Nomenclature Committeeのデータベースで遺伝子記号の確認を行いながら平成24年度に作成をした1759疾患の原因遺伝子/タンパク質のリストから収集済み1033遺伝子分と遺伝子記号統合により消滅した1遺伝子を除いた725遺伝子分のタンパク質のうち87遺伝子についてSMARTによりタンパク質ドメイン検索とドメイン情報の取得を行った。それに加えてNCBIのRefseqに記述されている17456遺伝子、遺伝子の転写の多様性を含む32354タンパク質ドメインのデータをデータベース上に取り込んだ。その後、タンパク質ドメインの詳細表示の改良を行い、SMARTドメインとNCBIのRefseqに記述されているタンパク質ドメインの両方を表示できるプログラムの開発を行った。さらにCancerProView中の疾患未同定遺伝子/タンパク質についてSMARTとNCBI Refseqの両方のタンパク質ドメインを使いタンパク質ドメインの比較を行うことにより疾患の推測を行うプログラムの開発を行いトップメニューの検索部分に追加を行った。現在、遺伝子記号から関与していると考えられる疾患の一覧を表示できるようにプログラムの動作、検証中を行い調整中である。癌関連疾患と原因遺伝子のリストを作成するためにOMIM(Online Mendelian Inheritance in Man)で疾患検索を行った。その結果、CacerProViewに収録済みの疾患関連遺伝子を含む1759疾患の原因遺伝子が検索された。遺伝子記号の確認のためHUGO Gene Nomenclature Committeeのデータベースで行い遺伝子記号、疾患名の表の作成を行った。作成した疾患原因遺伝子のリストから癌関連遺伝子のタンパク質ドメイン構造と遺伝子変異、癌疾患との対応付けのため疾患関連遺伝子が産生するタンパク質のドメイン構造をハイデルベルグ大学のSMARTにより検索を行い、データの取得を行った。CancerProViewに収録済みの180癌関連タンパクを含む377疾患関連タンパク質と合わせて1033疾患関連タンパク質の関連付けを行い、遺伝子記号、タンパク質ドメイン、疾患の表を作成した後、リレーショナルデータベース上に取り込みを行った。取り込んだデータは、タンパク質相互作用、ドメイン構造、疾患の関連付けによる疾患予測モデル化を行うためにCancerProView中のタンパク質ドメインと比較を行った。タンパク質の類似のドメイン内で遺伝子変異が起き疾患原因となった場合を想定しそれを予測疾患とした場合、CancerProView中の664の疾患未同定遺伝子/タンパク質について460遺伝子/タンパク質、688疾患が推測された。それらには94癌関連疾患を含み、198遺伝子/タンパク質について乳がんとの関連性が推測された。CancerProViewの機能に関しては、タンパク質ドメイン比較のためNCBIのRefseq記述のタンパク質ドメイン構造の表示プログラムの作成を行った。さらに遺伝子変異表示の改良、タンパク質ドメイン詳細表示中にアミノ酸配列表示の機能付加を行った。タンパク質ドメインと癌関連疾患の関連性を解明するために、癌関連タンパク質/遺伝子相互作用データベースCancerProView (http://cancerproview.dmb.med.keio.ac.jp/)のデータとしてNCBIのRefseq中に記述されている17456遺伝子、32354タンパク質についてタンパク質ドメインの取得を行った。この取り込みによって疾患と関係のあるすべてのタンパク質ドメインを取得することができた。さらに疾患に関与する796遺伝子についてSMARTでドメイン検索を行い1307タンパク質のデータ取得を行った。その結果、1838遺伝子、3259タンパク質についてのドメイン情報が使用可能になった。タンパク質ドメインの収集と同時平行でタンパク質ドメインの詳細表示の改良を行い、SMARTドメインとNCBIのRefseqに記述されているタンパク質ドメインを表示できるプログラムの開発を行った。CancerProView中の疾患未同定な遺伝子/タンパク質についてSMART, NCBIタンパク質ドメインの比較を行うことにより疾患の可能性を推測するプログラムの開発を行った。その後、癌関連疾患に関するタンパク質/遺伝子相互作用図について既存の109枚の図とそれから派生した29枚の図について疾患を推測するボタンの追加を行った。さらに1枚のタンパク質・遺伝子相互作用図の追加を行った。本研究の研究成果は、CancerProViewをアクセスすることで閲覧することができる。本研究の結果と意義は、遺伝子変異から癌関連疾患が予測できる可能性がある点にある。また、タンパク質/遺伝子相互作用図にタンパク質ドメイン比較による疾患予測ポタンをつけたことにより癌関連疾患遺伝子の予測ができると考えられる。それにより疾患と遺伝子の関係を予測でき、診断、予防、予後の検討の役に立つと考えられる。

分子生物学平成25年度は、1:癌関連疾患と原因遺伝子の関連付け、2:癌関連遺伝子のタンパク質ドメイン構造と遺伝子変異、癌疾患との対応付け、3:既知タンパク質・遺伝子相互作用、ドメイン構造、疾患の関連付けによる疾患予測モデル化、4:疾患未同定遺伝子のタンパク質相互作用とドメイン構造の相似性からの疾患予測、5:癌疾患予測検索システムと疾患パスウェイの作成(CancerProViewとの統合化)を行うために、平成24年度に作成をした1759疾患の原因遺伝子/タンパク質のリストから収集済み1033遺伝子分と遺伝子記号統合により消滅した1遺伝子を除いた725遺伝子分のタンパク質ドメインの収集をSMARTから行う予定であったが、そのうち87遺伝子についてタンパク質ドメイン検索と取得を行った。それに加えて効率良くタンパク質ドメインの情報を得るためにNCBIのRefseqに記述されている17456遺伝子、32354タンパク質ドメインのデータをデータベース上に取り込んだ。その後、タンパク質ドメインの詳細表示の改良を行い、SMARTドメインとNCBIのRefseqに記述されているタンパク質ドメインの両方を表示できるプログラムの開発を行った。平成25年度に予定していたCancerProView中の疾患未同定遺伝子/タンパク質についてSMARTとNCBI Refseqの両方のタンパク質ドメインを使いタンパク質ドメインの比較を行うことにより疾患の推測を行うプログラムの開発を行いトップメニューの検索部分に追加を行った。疾患未同定遺伝子について、タンパク質相互作用図に記述してある遺伝子記号に疾患予測のボタンを付け疾患候補を表示できるようにする部分と、疾患パスウェイの表示部分の作成は開発に要する時間の都合で平成26年度に開発を行うことになった。計画全体ではおおむね予定通りである。平成24年度は、1)癌関連疾患と原因遺伝子の関連付け、2)癌関連遺伝子のタンパク質ドメイン構造と遺伝子変異、癌疾患との対応付け、3)既知タンパク質・遺伝子相互作用、ドメイン構造、疾患の関連付けによる疾患予測モデル化、4)疾患未同定遺伝子のタンパク質相互作用とドメイン構造の類似性からの疾患予測を行う予定であった。
アフォーダンス理論を応用した精神病患者に影響する住宅環境要素の実態調査

本研究は、精神病患者の住宅環境に着目し、アフォーダンス理論を応用し実態調査し精神病患者の住宅の治癒環境の創出を目的とする。気候や間取りが違う3都市で住環境の実態調査をした。精神科病院退院後に地域で生活している各都市10名を対象とした。調査項目は、部屋の各要素アンケート(窓、照明、ベッド位置)など、LASMI、GHQ、部屋の実測調査(幅・奥行・高さ、温度・湿度・騒音・照度の計測)を調査した。3都市ともに部屋の壁の薄さ、防音環境の改善が1番の希望であった。3都市は、気候、間取り、光環境が精神状態に影響していた。退院後の住環境は、音が精神状態に影響する。防音環境の改善が安心できる住環境につながる。「アフォーダンス理論を応用した精神病患者に影響する住宅環境要素の実態調査」の今年度の実績は、「治癒環境の研究」で行った研究成果及び研究方法などを踏襲し、「治癒環境の研究」で培ったネットワークである国立精神・神経医療研究センターや調査を行った精神科病院に対して意見交換を行った。また、先進事例のヒアリング調査を千葉県3箇所、北海道2箇所、静岡1箇所で行った。本年度は、事例収集、在宅外来患者の住宅環境の現状を把握することに主眼に調査を行った。研究対象者は、若者(概ね35歳まで)で入院経験が少なく、隔離室に入室したグループホームに所属する在宅外来患者を対象に行った。研究対象箇所の最終目標は、患者の自宅の個室を調査することにあるためそれを念頭に計画をたてた。また、調査対象エリアは全国とした。多種多様なケースがあり、今年度はその内容をまずは整理し、調査や実験が可能な範囲と領域を決定する事に尽力した。また、特に参考になると思われるスヌーズレン施設(静岡)を視察した。一方、在宅外来患者に直接ヒアリングする前に、在宅看護を支援している看護師に担当している患者の住環境についてアンケート調査を行った。関東を中心に100事例収集でき、現在、集計と分析を行っている。その一部は2016年度の日本建築学会九州大会に報告する予定である。先進事例のヒアリング調査を千葉県3箇所、北海道2箇所、静岡1箇所で行った。さらに先進事例を調査する予定であったが、在宅看護を支援している看護師に対するアンケート調査を研究計画上重要と判断し、次年度に繰り越した。重要と判断した在宅看護を支援している看護師に担当している患者の住環境についてアンケート調査を実施した。関東を中心に100事例収集でき、大きな成果である。現在、集計と分析を行っている。「アフォーダンス理論を応用した精神病患者に影響する住宅環境要素の実態調査」の今年度の実績は、精神病患者(通院中)に対して行うアンケートの前に健常者によるアンケートを行い、調査内容が適切かの検証を行った。また、医療関係者などの意見を聞きながら慎重に在宅外来患者へのアンケートや調査の実施計画を検討した。その後、東京都内において、2箇所のグループホームに協力を依頼し、調査協力の同意が得られた精神病患者(通院中)に対してアンケートを行い、精神病患者(通院中)の自宅の環境調査を実施している。現在調査は継続中である。その一部の成果は以下のとおりである。調査は、部屋の空間要素と活動について、都内在住の52名の精神科病院を退院後の単身で在宅生活できている精神障がい者へインタビュー調査を行った。部屋の内装ついて現状が「適切かどうか」の質問で、素材について(床、壁、天井)52.4%でアンケートの項目で1番多い改善希望がみられた。また、部屋に対する希望に関する質問では、空気清浄器37.8%,防犯設備25.1%,防音設備20.3%,消臭に関するグッズ11.7%,その他5.1%。部屋に対して無くしてほしいもの、暗さ34.4%,壁のシミ28.7%、臭い15.3%,隙間7.4%段差5.9%であった。9)自宅で安心して眠れているかの質問では、68.4%が不眠時薬を使えば安心して眠れる,22.3%が安心して眠れる。眠れない9.3%の睡眠状態であった。上記の成果の一部は、2017年度MERAの大会で2編発表する予定である。また、都内の比較対象地として、北海道、九州、沖縄において調査依頼候補施設のヒアリング調査を行った。来年度は、北海道、沖縄で在宅の調査を実施する予定である。本年度は、事例収集、在宅外来患者の住宅環境の現状をアンケートと環境調査を行った。当初想定していたより多くの施設で協力が得られ、通院患者の協力者の確保ができた。また、都内の比較対象地として、北海道、九州、沖縄において調査依頼候補施設のヒアリング調査を行い、来年度調査実施のめどが立っている。在宅看護を支援している看護師に対するアンケート調査はおおむね調査が終了し、現在詳細な分析を行っている。近年、精神病患者はますます増え、再入院数も増えている。わが国の大きな問題となっている。本研究は、当まで全く調査研究されていない精神病患者の住宅環境に着目し、アフォーダンス理論を応用し、住宅環境要素のよい影響を及ぼす要素(ポジティブ・アフォーダンスと定義)と悪い影響を及ぼす要素(ネガティブ・アフォーダンスと定義)を実態調査し、精神病患者の住宅の治癒環境の創出と手法を開発することを目的とする。

27年度の実績は、「治癒環境の研究」で行った研究成果及び研究方法などを踏襲し、「治癒環境の研究」で培ったネットワークである国立精神・神経医療研究センターや調査を行った精神科病院に対して意見交換を行った。在宅外来患者に直接ヒアリングする前に、在宅看護を支援している看護師に担当している患者の住環境についてアンケート調査を行った。関東を中心に100事例収集でき、現在、集計と分析を行っている。その一部は2016年度の日本建築学会九州大会に報告した。28年度の実績は、精神病患者(通院中)に対して行うアンケートの前に健常者によるアンケートを行い、調査内容が適切かの検証を行った。また、医療関係者などの意見を聞きながら慎重に在宅外来患者へのアンケートや調査の実施計画を検討した。その後、都内の比較対象地として、北海道、九州、沖縄において調査依頼候補施設のヒアリング調査を行った。都内のヒアリング調査の成果の一部は、2017年度MERAの大会で2編発表し、論文発表賞を受賞した。29年度は最終年度のため27年度、28年度のデータをさらに精査し分析した。患者のデー多数を増やすため都内、北海道、沖縄の3箇所で追加調査を実施した。また、患者の精神・衛生状態のヒアリング調査を追加しGHQによる精神健康の測定とLASMIによる社会生活評価の測定都内2箇所、北海道、沖縄にて実施した。その成果の一部は、WPAの学会で発表する予定である。本研究は、精神病患者の住宅環境に着目し、アフォーダンス理論を応用し実態調査し精神病患者の住宅の治癒環境の創出を目的とする。気候や間取りが違う3都市で住環境の実態調査をした。精神科病院退院後に地域で生活している各都市10名を対象とした。調査項目は、部屋の各要素アンケート(窓、照明、ベッド位置)など、LASMI、GHQ、部屋の実測調査(幅・奥行・高さ、温度・湿度・騒音・照度の計測)を調査した。3都市ともに部屋の壁の薄さ、防音環境の改善が1番の希望であった。3都市は、気候、間取り、光環境が精神状態に影響していた。退院後の住環境は、音が精神状態に影響する。防音環境の改善が安心できる住環境につながる。在宅看護を支援している看護師に担当している患者の住環境についてアンケート調査を実施し、関東を中心に100事例収集でき、大きな成果である。現在、集計と分析を行っている。その分析結果を元に、東京の世田谷を中心にグループホームの外来患者にヒアリングを行う予定である。また、次年度に繰り越した先進事例を調査する予定である。都内の比較対象地として、来年度北海道、沖縄で都内で行った調査と同じ調査を実施する予定である。全国的実施することによって、全国で見られる傾向や地域の差の傾向の知見が得られる予定である。在宅看護を支援している看護師に対するアンケート調査はおおむね調査が終了し、現在詳細な分析を行っている。来年度成果としてまとめる予定である。建築本年度は、事例収集、在宅外来患者の住宅環境の現状を把握することに主眼に調査を行った。先進事例のヒアリング調査を千葉県3箇所、北海道2箇所、静岡1箇所で行った。
ペットボトル・ハイブリッド・ロケットの教材的利用の研究

3年目は、2年目に引き続き3Dプリンターによる燃料内形状や他要素のロケット性能へ与える影響を検討した。その結果、例えば直径10mm単孔で長さ400mm相当の内表面積を有する3Dプリンターによるマルチポート型燃料では長さ150mmで1.5倍程度の総推力を得られることを明らかにした。さらに、引き続き、酸素ノズルやスロート径の総推力に与える影響も評価した。これらの成果により、教材としての用途に応じた推力のバリエーションを増やすことが可能になることが確認できた。また、ハイブリッド・ロケットの教材としての安全性を保障するため、燃料の繰り返し利用が推力性能や安全性に与える影響に関して評価し、さらに異なる条件での地上燃焼実験および飛翔実験を繰り返し、教材としての問題点を抽出した。さらに通常クラス理科授業(埼玉県加須北中学校)と、募集に基づいた理科授業(ひらめき・ときめきサイエンス、さいたま市青少年宇宙科学館若田宇宙飛行士アカデミースペースコース、愛媛県松山市おもしろ理科教室)で、小学生、中学生または高校生を対象に、ペットボトル・ハイブリッド・ロケット体験授業および授業評価アンケートを実施し、提案する本ペットボトル・ハイブリッド・ロケットの理科・技術科教材としての有用性等についてさらに検討した。加えて、6軸加速度・ジャイロセンサー、メモリー、マイコン等の電子部品を基板上にはんだ付けした低価格な小型マイコンボードおよび回収パラシュートシステムを試作し、ロケット内にそのマイコンボードおよびパラシュートを設置し打ち上げ実験およびロケット飛翔中のデータ収集を行った。さらに小型カメラをハイブリッド・ロケットに搭載し、飛翔中のロケットから地上映像も取得した。初年度となる本年度は、身近にあるペットボトルを用いたハイブリッドロケットシステムを、理科および技術分野のための新教材にするために、次の事項を主に検討した。推力を増減調整できる教材ロケットシステムを確立するために、燃料内に段差を設けると推力が向上する傾向にあることを明らかにしたこれまでの成果を踏まえ、まず、特に内径形状について検討を行った。その結果、段差を1段だけではなく複数段付けるとさらに推力が向上することを明らかにできた。さらに、3Dプリンターを用いて、通常の機械加工では製作不可能な複雑なグレイン形状を有する燃料の製作を試みた。その結果、これまでのポリエチレンで製作した燃料と同様に、酸素ノズルおよび主ノズルと接合が可能で、0.7MPa程度まで気密が保てられる複雑グレイン形状を有する燃料燃焼室を、3Dプリンターで製作する手法を確立した。さらに、その手法で試作した燃料が、ポリエチレンと同等のロケット推力を発生することを確認した。一方、ロケット飛翔中のデータ計測を可能にするために、ロケットに搭載した電子機器の落下時の破損を防ぐ必要がある。そこで、本年度はロケットに設置された落下傘によりロケットを地面に軟着陸させるシステムについて検討した。その結果、ロケット降下時に開花する落下傘を試作することができた。さらに、教材として有効性を検証するために、中学生のみならず小学生を対象とした理科教室を実施した。その結果、ロケットの模擬打ち上げ実験時に、特に小学生の低学年にロケットの作動が怖いと感じる児童がいることがわかった。このことから、対象とする生徒や児童に合わせて、初期推力や酸素タンクサイズを、調整する必要があることを認識することができた。「研究実績の概要」で述べたように、当初の計画のとおり、最適な燃焼室形状を設計するために必要な、燃料グレイン形状について検討した。さらに、圧力波形から推定した推力の妥当性を検証するために、ひずみゲージまたはロードセルを用いた推力計測法の構築も試み、ロケットの性能予測の精度向上法についても検討できた。また、3Dプリンターを用いた燃料棒の製作法についても問題点を明らかにできた。さらに、ロケットにマイコンボードとセンサーなどを搭載できるようにするために、落下傘降下システムについて検討し試作を行えた。2年目は、初年度に引き続き、ロケットの諸要素や3Dプリンターによる燃料内形状がロケット性能へ与える影響を検討するとともに、教材としての有用性についても検討した。その結果、3Dプリンターを用いて、機械加工では不可能なような複雑な燃料形状の試作を試み、従来からあるいわゆるマルチポート型、さらにガスの燃料内部での滞留時間を大きくすることにより燃焼効率の増大を目指した螺旋型や衝突型と称する独自の燃料形状を開発することができた。そして、これら3Dプリンターにより作成した燃料が教材としても安全に燃焼させることは可能であることを確認した。また、教材として推力を変化させる諸要素としては、2年目は酸素ノズルやスロート面積について総推力や作動時間に与える影響を明らかにした。また、ロケット性能を評価する上で重要な推力の計測精度の向上を目指し、ロードセルを用いた燃焼実験システムの開発に着手した。その結果、系の振動などを押さえ精度良く推力を計測できる装置を構築できた。一方、ロケットの飛翔中のデータを計測するための小型低価格な加速度・ジャイロセンサーとメモリーとArduinoマイコン電子回路をハイブリッド・ロケット内のブレッドボード上に搭載したロケットを試作し、ハイブリッド・ロケットの小・中学校のプログラミング教育の実践的教材への利用も目指し開発を続けている。さらに、ハイブリッド・ロケットの空力設計および開発中の落下傘の開花確度の向上を目指し、飛翔実験を実施した。ここでは、高速度カメラなども用いて発射直後の飛翔体の運動特性を計測し、これまでに地上実験で得られた推力データと比較検討を試みた。また、引き続き試作したロケットを、中学校通常授業および小中学生を対象とした理科教室を開催し、教材として実践的に評価をした。「研究実績の概要」で述べたように、当初の計画のとおり、3Dプリンターを用いた教材システムの開発や最適な燃焼室形状を設計するために必要な、燃料内形状について検討した。

さらに、圧力波形から推定した推力の妥当性を検証するために、ロードセルを用いた推力計測装置を構築でき、ロケットの性能予測の精度向上法についても検討できた。また、3Dプリンターを用いた燃料棒の製作法についても問題点を明らかにできた。一方、ロケットの飛翔中のデータを計測するために、ハイブリッド・ロケット内に小型低価格な加速度・ジャイロセンサーとメモリーそしてArduinoマイコンを搭載した電子回路をブレッドボード上に試作した。加え安全かつ確実にハイブリッド・ロケットおよび搭載装置を回収するための落下傘降下システムについての検討を引き続き実施している。しかし、数回飛翔実験を試みたが、現在飛翔データの取得までは至っていない。ただし、室内では問題なく作動している。小・中学校のプログラミング教育の実践的教材も目指しているが、現在は、Arduino開発環境を用いてプログラム開発を行っている。他方、小学生、中学生さらに高校生をも対象とした理科教室(松山市おもしろ理科教室、ジュニアドクター育成塾、高大連携を利用した小学校プログラミング教育、ひらめき・ときめきサイエンス、加須北中学校理科体験教室、三郷工業技術高校ロケット体験教室等)を開催し、教材としての有用性および教育効果についても検証をはじめた。3年目は、2年目に引き続き3Dプリンターによる燃料内形状や他要素のロケット性能へ与える影響を検討した。その結果、例えば直径10mm単孔で長さ400mm相当の内表面積を有する3Dプリンターによるマルチポート型燃料では長さ150mmで1.5倍程度の総推力を得られることを明らかにした。さらに、引き続き、酸素ノズルやスロート径の総推力に与える影響も評価した。これらの成果により、教材としての用途に応じた推力のバリエーションを増やすことが可能になることが確認できた。また、ハイブリッド・ロケットの教材としての安全性を保障するため、燃料の繰り返し利用が推力性能や安全性に与える影響に関して評価し、さらに異なる条件での地上燃焼実験および飛翔実験を繰り返し、教材としての問題点を抽出した。さらに通常クラス理科授業(埼玉県加須北中学校)と、募集に基づいた理科授業(ひらめき・ときめきサイエンス、さいたま市青少年宇宙科学館若田宇宙飛行士アカデミースペースコース、愛媛県松山市おもしろ理科教室)で、小学生、中学生または高校生を対象に、ペットボトル・ハイブリッド・ロケット体験授業および授業評価アンケートを実施し、提案する本ペットボトル・ハイブリッド・ロケットの理科・技術科教材としての有用性等についてさらに検討した。加えて、6軸加速度・ジャイロ
液晶性遷移金属カルベン錯体の合成と性質に関する研究

金-イソシアニド錯体にアルコールを付加させることにより安定なエナンチオトロピック液晶性を示す初めての金属-カルベン錯体の合成に成功した。金-カルベン錯体はN=C結合による幾何異性体(E体及びZ体)が存在するため、それらを分離し、液晶性挙動を構造面から検討した。クロロホルム-エーテル及び塩化メチレン-ヘキサン混合溶媒を用い、数回再結晶によりそれぞれ純粋な異性体を単離することができた。そして、NMRスペクトル及びX-線結晶構造解析によってE体、Z体を区別し、それぞれの液晶相転移温度について考察した。その結果、E体、Z体の融点はそれぞれ異なるが、同じ透明点を示すことがわかった。その理由としては、最終的に溶液状態と同じくE:Z=ca.3:1の平衡混合物になったことによるものと考えられる。金-カルベン錯体の合成において、アルコール以外の求核剤をも用いて反応を行い、得られた錯体の性質について検討した。一方、ベンゼン中ビス(イソシアニド)白金錯体と1級アミンとの反応によりビス(カルベン)白金錯体が得られた。更にこの錯体はアミンによって分子内オルトメタレーションが誘発され、新しい白金-炭素結合を有するビス(カルベン)錯体が生成することがわかった。しかし、同様にビス(イソシアニド)白金錯体と2級アミンとの反応で得られたビス(カルベン)錯体ではオルトメタレーションが起こらない。そこで、ビス(カルベン)錯体の構造による反応性の相違を錯体化学的に解明するため、これらの錯体の生成過程を詳細に検討した。また、1級アミンを付加させることによって初めて合成できた中性トランス-ビス(カルベン)白金錯体の液晶性挙動について考察した。
ヒト人工染色体を用いた血友病の新規治療法の開発

血液凝固第VIII因子の遺伝子異常により発症する血友病Aでは、主にウイルスベクターを用いた遺伝子治療法の開発が進められてきたが、抗ウイルス抗体の出現やがん化の懸念などが払拭できない。本研究は、宿主染色体とは独立かつ安定に保持され、自律複製するヒト人工染色体ベクター(HAC)を用いて、安全性の高い遺伝子治療法を開発することを目的としている。本年度は、VIII因子搭載HACを血友病Aモデルマウス由来iPS細胞(前年度に樹立済み)に微小核細胞融合法を用いて導入し、得られたクローンの解析を行った。細胞融合後に出現した薬剤耐性クローンのうち、ゲノムPCR法により搭載したVIII因子遺伝子の存在を確認でき、また、キナクリン・ヘキスト染色および蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH)解析にて正常核型かつVIII因子搭載HACを独立保持するクローンを4つ取得した。免疫染色法およびRT-PCR法にて初期化4因子の発現消失が認められ、かつ未分化マーカーの発現を認めた2クローンでOP9共培養法によるin vitro分化誘導を行い、RT-PCR法にて巨核球・血小板へ分化したサンプルのみでVIII因子の発現を確認した。本ベクターは巨核球・血小板特異的な発現を誘導するplateletfactor-4(PF4)プロモーターを用いていることから、in vitroにおいてではあるが、組織特異的にVIII因子の発現を誘導することを示した。一方、前年度に構築したVIII因子搭載マウス人工染色体(MAC)もまた同モデルマウス由来iPS細胞に導入して同様にクローンを8つ取得し、モデルマウスを用いたin vivoでの治療効果の検証のために使用可能なクローンを選定した。実際の治療効果の検証まではできなかったが、本年度までの研究でそのための資材を揃えることができた。凝固第VIII因子の遺伝子異常により発症する血友病Aでは、主にウイルスベクターを用いた遺伝子治療法の開発が進められてきたが、抗ウイルス抗体の出現や癌化の懸念などが払拭できない。本研究では、安定に自律複製するヒト人工染色体(HAC)ベクターを用いて、高性能な遺伝子組換え製剤および安全性の高い遺伝子治療法を開発することを目的とし、当該年度は、マウスiPS細胞にVIII因子搭載人工染色体(FVIII-HAC)を導入し、キメラマウスを用いた発現解析を行った。また、in vitroにおける分化系を確立し、構築したベクターのVIII因子発現レベルを評価した。VIII因子に対する中和抗体産生の抑制を期待し、血小板特異的にVIII因子を発現させるためにPlatelet factor 4 (PF4)プローモーターを選択し、その下流にVIII因子遺伝子を配置した発現カセットをタンデムに4コピー搭載したHACベクターを微小核細胞融合法によりiPS細胞に移入した。このFVIII-HACが宿主染色体とは独立に保持されていることを蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH)解析により確認した。さらに、iPS細胞を用いてキメラマウスを作製し、VIII因子の発現解析を行った。種々の臓器のRT-PCRの結果、骨髄においてのみVIII因子の発現が認められた。また、骨髄細胞および血小板の免疫染色の結果より、IIb/IIIa陽性細胞すなわち巨核球/血小板のうち、一部の細胞でGFP陽性(HACベクター上にはGFPが搭載されている)細胞が見られ、その細胞においてはすべてVIII因子の発現が認められた。他方、iPS細胞をIn vitroにおいて巨核球/血小板へ分化誘導し、本ベクターの有用性をトロンビン合成基質法により検討したところ、機能的なVIII因子の発現が確認できた。上記のほか、マウスを用いた本治療法の有効性の検証を行うため、同様のVIII因子発現カセットを4コピー搭載したマウス人工染色体ベクター(FVIII-MAC)も構築した。当該年度の研究で、巨核球/血小板特異的にVIII因子を発現する有用なFVIII-HACベクターの構築に成功した。凝固第VIII因子の遺伝子異常により発症する血友病Aでは、主にウイルスベクターを用いた遺伝子治療法の開発研究が進められてきたが、抗ウイルス抗体の出現やがん化の懸念などが払拭できない。本研究では、安定に自律複製する人工染色体ベクターを用いて、安全性の高い遺伝子治療法を開発することを目的とする。当該年度は、VIII因子搭載マウス人工染色体ベクター(FVIII-MAC)の構築と血友病モデルマウス由来のiPS細胞の作製を行い、FVIII-MACをiPS細胞へ移入した。VIII因子に対する中和抗体産生の抑制を期待し、血小板特異的にVIII因子を発現させるためにPlatelet factor 4(PF4)プロモーターを用いたヒト人工染色体ベクター(FVIII-HAC)を構築してきたが、前年度までの研究で、マウスの骨髄細胞ではHACベクターの保持率が著しく低下していることが明らかとなった。これはヒトとマウスの種差によるものと考えられることから、当該年度は、マウスを用いた本治療法の有効性の検証を行うために、同様の発現カセットをタンデムに4コピー搭載したマウス人工染色体(MAC)ベクターを構築した。他方、血友病モデルマウス由来線維芽細胞および血友病患者由来滑膜細胞に4遺伝子(Oct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc)のセンダイウイルスベクターを導入してiPS細胞を作製した。

取得したマウスiPS細胞およびヒトiPS細胞のキナクリン・ヘキスト染色による核型解析を行い、染色体に異常がないことを確認したのち、微小核細胞融合法を用いてマウスiPS細胞に構築したFVIII-MAcを移入した。FISH解析によりMACベクターが宿主染色体とは独立して保持されていることが確認でき、遺伝子治療用ベクターを保持するiPS細胞の作製に成功した。血液凝固第VIII因子の遺伝子異常により発症する血友病Aでは、主にウイルスベクターを用いた遺伝子治療法の開発が進められてきたが、抗ウイルス抗体の出現やがん化の懸念などが払拭できない。本研究は、宿主染色体とは独立かつ安定に保持され、自律複製するヒト人工染色体ベクター(HAC)を用いて、安全性の高い遺伝子治療法を開発することを目的としている。本年度は、VIII因子搭載HACを血友病Aモデルマウス由来iPS細胞(前年度に樹立済み)に微小核細胞融合法を用いて導入し、得られたクローンの解析を行った。細胞融合後に出現した薬剤耐性クローンのうち、ゲノムPCR法により搭載したVIII因子遺伝子の存在を確認でき、また、キナクリン・ヘキスト染色および蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH)解析にて正常核型かつVIII因子搭載HACを独立保持するクローンを4つ取得した。免疫染色法およびRT-PCR法にて初期化4因子の発現消失が認められ、かつ未分化マーカーの発現を認めた2クローンでOP9共培養法によるin vitro分化誘導を行い、RT-PCR法にて巨核球・血小板へ分化したサンプルのみでVIII因子の発現を確認した。本ベクターは巨核球・血小板特異的な発現を誘導するplateletfactor-4(PF4)プロモーターを用いていることから、in vitroにおいてではあるが、組織特異的にVIII因子の発現を誘導することを示した。一方、前年度に構築したVIII因子搭載マウス人工染色体(MAC)もまた同モデルマウス由来iPS細胞に導入して同様にクローンを8つ取得し、モデルマウスを用いたin vivoでの治療効果の検証のために使用可能なクローンを選定した。実際の治療効果の検証まではできなかったが、本年度までの研究でそのための資材を揃えることができた。VIII因子搭載MACベクターの構築および血友病モデルマウス由来iPS細胞の作製に成功し、マウスを用いた治療効果の検証へと移行する段階まで到達できたことから、順調に進展していると評価した。次年度は、VIII因子搭載MACベクターを保持し核型に異常のないマウスiPS細胞を用いてキメラマウスを作製し、血友病モデルマウスを用いた本治療法の有効性の検証を行う。ヒトiPS細胞にはVIII因子搭載HACベクターを導入して、in-vitroにおけるVIII因子の発現解析を行う。
六足作業ロボットの開発と協調制御に関する研究

自然環境での災害救助・後片付けなどにおける岩石や木材の堀り出し・持ち上げ・運搬等の作業を想定して,前脚を腕として用いることができる六足作業ロボットの開発を行った.作業対象がロボットと同程度の場合,1台のロボットで扱うことは困難であり,複数台のロボットによる協調作業が必要となる.作業目標をあらかじめロボットに与え,具体的で細かい目標を1人の人間が操作する操縦装置によって与えることを考えたとき,1人で複数台のロボット全部を同時に操縦することは困難である.そこで,人間は1台のロボット(Prime Mover)の操作のみを行ない,他のロボット(Assistants)はPrime Moverに対して協調を行なうシステムを提案し,人間が操縦するロボットと協調して作業を行うことができるロボットのための基本システム構成と「動作理解による補助」の実験を行なった.協調作業の計画と実行は以下の手順で行われる.(1)作業目標(岩石や木材の堀り出し・持ち上げ・運搬等)は作業開始時にあらかじめ与えられているが,具体的な対象物・場所等は作業中に人間がPrime Moverを操縦することにより与えられる.(2)Assistantsは作業目標から作業計画をたてる.この作業計画は,Prime Moverが行なうであろう動作の予測と,それに対するAssistantsの細部が未定な不完全な動作計画から構成される.(3)Assistantsは協調作業の各ステップで,作業計画に基づいてPrime Moverの動作予測と確認を行ない,Prime Moverの動作に対して適切に同期をとり,Assistantsの不完全な動作計画の細部を決定して完全な動作計画をたて,これを実行する.協調システムとして,Smalltalk-80を拡張し,ロボット間の通信も通常のメッセージ・パッシングにより統一的に行うことができるマルチロボット用制御システムを開発した.このシステムを用いるとAssistantsは個別の通信プロトコルを設定することなく自由にPrime Mover側のすべてのデータ(オブジェクト)をアクセスすることができるので,AssistantsによるPrime Mover側の事象検出のためのプログラミングは単一ロボットと同様に簡単に行なうことができる.自然環境での災害救助・後片付けなどにおける岩石や木材の堀り出し・持ち上げ・運搬等の作業を想定して,前脚を腕として用いることができる六足作業ロボットの開発を行った.作業対象がロボットと同程度の場合,1台のロボットで扱うことは困難であり,複数台のロボットによる協調作業が必要となる.作業目標をあらかじめロボットに与え,具体的で細かい目標を1人の人間が操作する操縦装置によって与えることを考えたとき,1人で複数台のロボット全部を同時に操縦することは困難である.そこで,人間は1台のロボット(Prime Mover)の操作のみを行ない,他のロボット(Assistants)はPrime Moverに対して協調を行なうシステムを提案し,人間が操縦するロボットと協調して作業を行うことができるロボットのための基本システム構成と「動作理解による補助」の実験を行なった.協調作業の計画と実行は以下の手順で行われる.(1)作業目標(岩石や木材の堀り出し・持ち上げ・運搬等)は作業開始時にあらかじめ与えられているが,具体的な対象物・場所等は作業中に人間がPrime Moverを操縦することにより与えられる.(2)Assistantsは作業目標から作業計画をたてる.この作業計画は,Prime Moverが行なうであろう動作の予測と,それに対するAssistantsの細部が未定な不完全な動作計画から構成される.(3)Assistantsは協調作業の各ステップで,作業計画に基づいてPrime Moverの動作予測と確認を行ない,Prime Moverの動作に対して適切に同期をとり,Assistantsの不完全な動作計画の細部を決定して完全な動作計画をたて,これを実行する.協調システムとして,Smalltalk-80を拡張し,ロボット間の通信も通常のメッセージ・パッシングにより統一的に行うことができるマルチロボット用制御システムを開発した.このシステムを用いるとAssistantsは個別の通信プロトコルを設定することなく自由にPrime Mover側のすべてのデータ(オブジェクト)をアクセスすることができるので,AssistantsによるPrime Mover側の事象検出のためのプログラミングは単一ロボットと同様に簡単に行なうことができる.
肝胆膵領域悪性腫瘍の化学療法抵抗性に対するアポートシスの役割

化学療法抵抗性とアポトーシスの関連性について、GEM(ゲムシタビン)と5FU系薬剤を中心に検討を行ったところ、胆道癌ではGEM抵抗性とアポトーシスが関連していることが明らかになった。これについてメカニズム解析を行い、関連候補蛋白を探った。肝胆膵領域悪性腫瘍の化学療法抵抗性に対するアポトーシスの役割を探るために、まず、肝胆膵領域の癌細胞7種とそれ以外の部位の癌細胞2種(肺・胃)について化学療法抵抗性とアポトーシスの関連性について探った。特に治療法の確立していない胆道癌に対しての研究を進めるため、胆道癌で認可されているゲムシタビンと5FU系薬剤を中心に検討を行った。まずは化学療法抵抗性を検索するために、各薬剤についてのIC50を求めるために、MTTアッセイを起こった。胆道癌細胞では他の癌種よりもGEM抵抗性であり、5種類の細胞株のうち、半数以上がGEM抵抗性を示した。続いて薬剤投与濃度を決定し、アポトーシスとの関連性を探った。胆道癌細胞では他の癌種と異なり、胆道癌ではゲムシタビン抵抗性とアポトーシスが関連していることがわかった。残念ながら5FU系薬剤との関連はなく、胆道癌以外の癌種、すなわち膵癌・肝臓癌・肺癌・胃癌でのゲムシタビン抵抗性・5FU抵抗性とアポトーシスの関連性も示されなかった。さらにそのメカニズムとしてBcl-2ファミリー、IAP、CaspaseやCell Survival Signalについて解析を行ったところ、Bcl-2ファミリーのうち、ある2種類の蛋白が関連していることがわかった。この関連性については胆道癌以外の癌種では認められなかった。今後はこの2つの蛋白の他の蛋白との関連性、また、胆道癌でのRegulationについて探る予定である。肝胆膵領域の癌細胞7腫とそれ以外の部位の癌細胞2種(肺・胃)について化学療法抵抗性とアポトーシスの関連性について探った。特に治療法の確立していない胆道癌に対しての研究を進めるため、胆道癌で認可されているGEM(ゲムシタビン)と5FU系薬剤を中心に検討を行ったところ、胆道癌ではGEM抵抗性とアポトーシスが関連していることが明らかになった。この関連性については胆道癌以外の膵癌・肝臓癌・肺癌・胃癌では認められなかった。また、メカニズムの解析のために、該当細胞株に対して、GEM作用下にWestern Blottingを行ったところ、Bc12ファミリーだけでなく、RBやStatのリン酸化が認められたことから、これらのPathwayを介した系が重要であることがわかった。まず、Statの系を掘り下げるために、その上流のIL6の阻害剤として、コマーシャルに使用できるIL6R-antagonistic antibodyを用いて、GEM感受性を検討したところ、IL6の化学療法抵抗性への関連性が示唆された。すでに、胆道癌細胞ではIL6によるAuto Paracrineシステムが示唆されていることから、IL6の刺激により、化学療法抵抗性が生じている可能性が示唆された。