hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
クローナル造血と細胞老化の関係性の解析

1変異体(ASXL1-MT)にストップカセットをつけてRosa26座にノックインしたマウスを作成し、Vav-Creマウスと掛け合わせることによって造血細胞でのみASXL1-MTを発現するASXL1-MT-KIマウスを作成した。このマウスは若い時にはほとんど症状はないが、1年を過ぎると大球性の軽度貧血、血球の軽度形態異常を認める。またASXL1-MT-KIマウスは複製可能なレトロウイルスで5ヶ月1年で急性白血病を発症し、変異型Runx1の発現でもMDS/AMLを発症した。これらの結果はASXL1-MT-KIマウスが前MDSあるいは前白血病状態であることを示している。ASXL1-MT-KIマウスでは造血幹細胞が初期には減少するが1年以上経つと増えてくることが判明した。マウスは野生型マウスと比較して早めにミエロイド優位の造血を示し、老化型の血液像を示す。またChIPseqを用いた研究で、ASXL1のゲノムへの結合は代表的活性化マークであるヒストンH3K4me3と強く相関し、ASXL1-MTが存在するとH3K4me3が逆に著しく抑制されることが判明した。上記の結果から、我々の作成したASXL1-MT-KIマウスはクローン性造血の良いモデルと考えられる。ASXL1-MT-KIマウスが野生型マウスより早く老化型の造血を呈すること、前白血病状態にありRunx1変異体や複製可能レトロウイルスによるinsertional mutagenesisで白血病を発症することを示すことができ、論文として発表することができた(Nagase et al. J Exp Med, in press)。これらの結果はASXL1-MTの発現が造血細胞においてゲノム不安定性を誘導して二次的遺伝子変異が入りやすくなっていることが考えられる。すでに我々はDNA damageが更新していること、ミトコンドリアROSが上昇していることを見出しており、今後ASXL1変異とこれらの事象がどのように関係しているかを明らかにする予定である。一方、ASXL1-MT-KIマウスと野生型マウスのcKit陽性骨髄細胞でのクロマチン沈降法(ChIP)の結果からASXL1が従来関係が深いと言われていたヒストン抑制マークであるH3K27me3ではなく活性化マークの代表であるH3K4me3と極めて強い相関を示した。興味深いことにASXL1-MTの結合で、H3K4me3が著しく低下することが判明した。またASXL1はBAP1と共同してH2AK119Ubを脱ユビキチン化することが知られているが、今回の結果ではASXL1結合と相関していることが判明した。これらの結果は今までの知見とは異なるもので、その方向でも研究を進めている。これまでの実験でASXL1-MT-KIマウスにおいて老化が進み、前白血病状態になるのはミトコンドリアが活性化してDNAダメージが更新していることと関連があると考えている。そこで以下のような実験を行うことによって、ASXL1-MT-KIマウスにおける老化進行、易白血病移行性の分子機序を調べる。
新規リコンビナントペプチドを用いた移植前血管床構築による皮下膵島移植の生着促進

移植予定箇所の皮下に新規リコンビナントペプチド(RCP)を適用することで得られる移植膵島の生着促進効果により得られる糖尿病治癒効果が、臨床膵島移植の標準移植法である経門脈移植と比べてどの程度の位置づけであるのかを検証するために、マウス同種同系膵島移植モデルで検証した。レシピエントC57BL/6マウスの皮下にRCPを10日間または28日間留置(RCP2w群、RCP4w群)後、膵島移植を実施した。。皮下に留置したRCPを移植直前に摘出して出来たスペースにC57BL/6マウスの膵島600 IEQsを移植した経門脈移植群は600 IEQsの膵島を経門脈的に肝臓内に移植した。3群とも膵島移植7日前にレシピエントマウスにストレプトゾトシンを静脈投与して糖尿病を誘導した。移植後の血糖を測定し、血糖値200mg/dl以下を糖尿病治癒と判断した。その結果、移植後28日の糖尿病治癒率は、PCP2w群が20%(n=10)、RCP4w群が90%(n=10)、経門脈群が25%(n=12)となり、RCP4w群が、RCP2w群および経門脈移植群よりも有意(p>0.001)に高い治癒率を示した。また腹腔内糖負荷試験を実施し、糖尿病治癒マウスではその結果、健常マウス同等の血糖推移を示すことを確認した。膵島グラフト600 IEQsでRCP4w群の治癒率が90%と良好であったことから、続いでRCP4w群のグラフトを400 IEQsに減量して糖尿病マウスの治癒率を調べた。その結果、膵島量400 IEQsという非常に少ないグラフト量においても治癒率は90%(n=10)を示した。RCPを4週間皮下に留置することで、門脈移植よりも少ないグラフト量で糖尿病が治癒したことは、RCPの移植前留置による皮下膵島移植法が膵島移植の新しい移植方法となる可能性示すものであると考えられる。当初の計画どおりRCPデバイスによる移植前血管床構築による膵島生着効果を、経門脈移植確と比較するマウス移植実験で検証し、明らかにすること出来きたため。RCP導入による皮下膵島生着機序を免疫組織学的・分子生物学手法で調べる。具体的な検証項目は膵島移植後の皮下組織における血管新生マーカー(vWF,CD31)、細胞外マトリックス(コラーゲンI、フィブロネクチン、ラミニン、ヘパラン硫酸)、細胞接着因子(インテグリン、Eカドヘリン)を予定している。重症糖尿病に対する移植療法である膵島移植では、経門脈的に肝臓内に移植する現行法に変わり、アプローチが容易で低侵襲な皮下移植の実現が望まれている。しかし、皮下は乏血管性により膵島の生着が著しく不良であり、これを克服する手段として新生血管を促進するbFGF(basic fibroblast growth factor)の有用性が報告されている。しかしbFGFには出血や滲出液貯留のリスクがあるため、これに代わる安全な皮下血管床構築用デバイスが求められている。そこで本研究では、ヒトI型コラーゲンのα鎖にRGD基(Arg-Gly-Asp)配列を12個含有するRCPに着目し、皮下膵島移植における有用性を検証することを目的とした。平成29年度はRCPデバイスの皮下血管床の構築と膵島生着向上対する効果を、ストレプトゾトシン(170mg/体重)誘発糖尿病マウスへの同種同系膵島移植モデルにおいて検証した。実験はRCP留置10日間または28日間、およびシャム群の3群で実施した。マウスの背部皮下に直径15mmのRCPデバイスを10日間または28日間留置後、デバイスを抜去して出来た空隙に膵島を1,000IEQs移植し、移植後2カ月間血糖の推移を確認し、糖尿病の治癒率を調べた。また糖尿病が治癒したマウスについては移植後約60日に腹腔内糖負荷試験を行った。その結果、RCPを使用した2群において10日間留置では効果が不十分であったが、RCP28日留置群の糖尿病治癒率は高い治癒率(100%)を示した。血糖低下に要する期間は、RCP28日群で9.8日であった。また、皮下に留置したRCPは28日間残存し、留置部に浸出液の貯留や出血は見られなかった。申請の計画通り、移植予定箇所の皮下にRCPを留置することで膵島の生着が促進し、門脈移植と同等の移植成績を示すことを明らかに出来た。。

移植後の血糖を測定し、血糖値200mg/dl以下を糖尿病治癒と判断した。その結果、移植後28日の糖尿病治癒率は、PCP2w群が20%(n=10)、RCP4w群が90%(n=10)、経門脈群が25%(n=12)となり、RCP4w群が、RCP2w群および経門脈移植群よりも有意(p>0.001)に高い治癒率を示した。また腹腔内糖負荷試験を実施し、糖尿病治癒マウスではその結果、健常マウス同等の血糖推移を示すことを確認した。膵島グラフト600 IEQsでRCP4w群の治癒率が90%と良好であったことから、続いでRCP4w群のグラフトを400 IEQsに減量して糖尿病マウスの治癒率を調べた。その結果、膵島量400 IEQsという非常に少ないグラフト量においても治癒率は90%(n=10)を示した。RCPを4週間皮下に留置することで、門脈移植よりも少ないグラフト量で糖尿病が治癒したことは、RCPの移植前留置による皮下膵島移植法が膵島移植の新しい移植方法となる可能性示すものであると考えられる。当初の計画どおりRCPデバイスによる移植前血管床構築による膵島生着効果を、経門脈移植確と比較するマウス移植実験で検証し、明らかにすること出来きたため。当初の計画通り、至適化したRCPデバイスによる皮下血管床構築プロトコールを適用することで、皮下における膵島の生着がどの程度向上するのかを、経門脈移植、および皮下膵島移植において膵島生着促進効果が確認されているbFGF徐放デバイスとの比較実験により検証する。さらに、移植前血管床構築による膵島生着促進効果の機序を免疫組織学的、分子生物学的手法により検証する。RCP導入による皮下膵島生着機序を免疫組織学的・分子生物学手法で調べる。具体的な検証項目は膵島移植後の皮下組織における血管新生マーカー(vWF,CD31)、細胞外マトリックス(コラーゲンI、フィブロネクチン、ラミニン、ヘパラン硫酸)、細胞接着因子(インテグリン、Eカドヘリン)を予定している。次年度使用額が生じた理由としては、予定していた実験が効率的に進み、当初の計画よりも消耗品費が少なかったことが挙げられる。次年度以降の研究費を合わせた使用計画としては、動物購入と免疫組織学的検証に必要な抗体の購入費用等の消耗品として使用することを計画している。マウス移植実験が当初の計画より効率的に進み動物の使用数が大幅に少なく、また、2年度に購入予定であった免疫染色用の抗体を購入しなかったために次年度使用額が生じた。このため3年度は抗体購入をメインに、マウス購入、膵島分離酵素の購入費用に充てる計画である。
抗精神病薬誘発性糖代謝異常および体重増加に関する薬理ゲノム研究

内科領域における大規模genome-wide association studyにより同定されたエビデンスレベルが高い糖代謝異常や肥満の脆弱性遺伝子と、抗精神病薬が惹起する糖代謝異常や体重増加との関連を調べた。そして、糖代謝やBMIと関連する遺伝子多型は同定できなかったが、i)抗精神病薬の種類によってインクレチン・インスリン分泌系に与える影響が違う可能性について、ii)Trib1遺伝子と脂質代謝異常との関連、iii)GIPR遺伝子と脂質代謝異常との関連、などを同定した。抗精神病薬は糖代謝異常や体重増加などの代謝性副作用を引き起こし、これが統合失調症患者における心血管疾患さらには死亡率の増加につながるとされ非常に大きな問題となっており、そのメカニズム解明は急務である。本研究では、内科領域における大規模genome-wide association studyにより同定されたエビデンスレベルが高い糖代謝異常や肥満の脆弱性遺伝子と、抗精神病薬が惹起する糖代謝異常や体重増加との関連を調べるという手法により、そのメカニズム解明を目指す。また、インクレチンであるGIPに関しても検討を進めているが、その中で、オランザピン治療と胃がん術後のダンピング症候群の悪化およびGIP過剰分泌との関連が疑われた症例を経験し学会報告した。糖代謝への影響が強いと考えられているオランザピンが、インクレチンにどのような影響を及ぼすのか検討を続けている。抗精神病薬は糖・脂質代謝異常や体重増加などの代謝性副作用を引き起こし、これが統合失調症患者における心血管疾患さらには死亡率の増加につながるとされ非常に大きな問題となっており、そのメカニズム解明は急務である。本研究では、内科領域における大規模genome-wide association studyにより同定されたエビデンスレベルが高い糖・脂質代謝異常や肥満の関連遺伝子と、抗精神病薬が惹起する糖・脂質代謝異常や体重増加との関連を調べるという手法により、そのメカニズム解明を目指している。本年度は、前年までにサンプリングが終了しているものと合わせて、抗精神病薬内服群約350例、健常群約300例を本研究にエントリーした。そして、各症例の血液サンプルからDNAを抽出した。また、前年までのMC4R、ADRA2A、GIPR、ARL15、adiponectin、KCNQ1、TCF7L2、GIPなどの候補遺伝子に加え、MC4R、Trib1、NYP、FTO、GCG、GLP-1などの遺伝子も候補遺伝子として解析を行っている。そして、それらのゲノム情報と糖代謝の各パラメーター(fasting glucose・insulin、HOMA-IR、OGTTデータなど)、臨床情報(性別、年齢、BMI、ウエスト径、内服状況など)を対応させたデータベースを構築し網羅的解析を進めている。さらに、糖代謝異常や肥満とともにメタボリックシンドロームの診断基準に含まれている脂質の各パラメーター(LDL、HDL、TGなど)も本年度は解析対象とした。また、インクレチンであるGIPに関してもデータ収集・解析を継続した。本年度は、オランザピン治療とGIP過剰分泌およびダンピング症候群との関連について論文発表した。さらには、Trib1遺伝子と抗精神病薬内服がHDLに及ぼす影響について学会発表した。本研究では、内科領域における大規模genome-wide association studyにより同定されたエビデンスレベルが高い糖・脂質代謝異常や肥満関連遺伝子と、抗精神病薬が惹起する糖・脂質代謝異常や体重増加との関連を調べるという手法により、そのメカニズム解明を目指している。抗精神病薬内服中の統合失調症群における耐糖能異常の頻度について、脂質代謝とTrib1およびGIPR遺伝子との関連、体重増加とGIPR遺伝子との関連など同定した。遺伝子型のタイピングが予定よりわずかに遅れている部分はあるが、全体としては概ね順調に進んでしる。精神医学予定通り、遺伝子型のタイピング、データベースの構築・解析を進めて行く。H27年度中にさらに論文発表を行う予定である。健常群のサンプリングが予定よりわずかに遅れているが、全体としてはおおむね順調に進んでいると考えている。遺伝子型のタイピングが予定よりわずかに遅れているため。予定通り、サンプリングと遺伝子解析、データベースの構築・解析を進めて行く。また、内科領域の遺伝学的研究の糖代謝異常に関する新しい知見についても検索し、必要があれば新たな遺伝子も研究対象としていきたい。次年度使用額の約80万円は、上記の理由に挙げ遺伝子型のタイピングに充てる予定である。タイピングしたSNPが予定より少なかったこと理由である。H26年度に、次年度使用額を利用して、新たなSNPを20か所(70000円×20)をタイピングする予定である。
全角運動量が制御されたモノサイクル域光渦パルスによる新規非線形光学の開拓

本年度は、光渦発生ならびにサイクル域光パルスに関する以下の成果を得た。1.チタニウムナファイアレーザー発振器からの50fsの光パルスを、2次元空間位相変調器により作製したホログラムに入射、回折させることにより、50fsの光渦パルスを発生させた。この発生した光渦パルスの空間分解スペクトルを測定し、空間チャープを評価した。その結果、50fs程度の光パルスでは、空間チャープが無視できるほど小さいことを明らかにした。2.50fsのエルミートガウシアンビームパルスを参照光とし、これを被測定対象である50 fs光渦(ラゲールガウシアン)ビーム内で集光・走査することにより、空間分解された相互相関周波数分解ゲート信号を測定し、光渦パルスの時空間特性を定量的に評価した。この結果は光渦パルスを用いた分光測定などの応用の際、重要となる。3.光渦に非対称欠陥を導入することにより、トポロジカル位相の一種であるグイ位相の、集光にともなうシフトを直接観測する手法を開発した。この手法は、従来の干渉による手法とは異なり、簡便に光渦の本質的物理量であるグイ位相を求めることができる。4.断面内に、2つの光渦が存在するようなビームを発生させ、その空間発展を観測した。ビーム焦点付近で通常の渦運動と異なる新たな振る舞いを発見した。現在、そのメカニズムの解明を進めている。1.2次元空間位相変調器を用いて、0次光を分離しやすいホログラムを生成することにより、トポロジカルチャージが100といった大きな場合でもクリーンな光渦(ラゲールガウシアンビーム)の発生に成功した。この方法は、光渦を用いた応用研究に重要な要素技術となる。2.光渦(ラゲールガウシアンビーム)に非対称欠陥を導入することにより、トポロジカル位相の一種である、集光時のグイ位相シフトを観測する手法を開発した。この手法は、従来の干渉による手法とは異なり、簡便にグイ位相シフトを求めることができる。3.偏光の特異性を持つ偏光渦から、位相の特異性を有する光渦への変換を行う素子の提案を行った。また、実際に光弾性効果を用いた偏光渦からの光渦の発生実験を行い、成功した。4.微細構造ファイバーであるフォトニック結晶ファイバー中にフェムト秒光パルスを伝播させることにより、480-1000nm超広帯域スペクトルを発生させ、変形スペクトル干渉位相電場再生システム、フィードバック位相補償システムを組み合わせたフィードバック位相補償を行い、フォトニック結晶ファイバーからでは世界最短の4.9fsの高繰り返し光パルスの発生に成功した。このパルスは、サイクル域光渦発生の光源となるものである。
ヒト大脳皮質における感覚情報処理様式の解明

脳磁図を用いて触覚(Inui et al. Cereb Cortex 2004)、痛覚(Inui et al. Cereb Corex 2006b)、視覚(Inui & Kakigi JNP 2006; Neuroimage 2006)及び聴覚(Inui et al. Cereb Cortex 2006a)情報処理について検討し、以下のような共通点を見いだした。1)感覚情報は基本的に隣接する領野へ約5ミリ秒の潜時で順次伝えられ、その結果一定方向へ向かう処理の流れを形成する。例えば触覚では約4ミリ秒の間隔で、3b野、1野、5野が順に活動する。2)並行する複数の処理経路がある。例えばV1-V2-V4の視覚腹側路とV1-V6,V1-V2-V5の背側路などであり、並列階層処理の概念に矛盾しない。3)初期活動は全て活動の向きを約10ミリ秒間隔で逆転させ、共通する層内伝導様式を示唆する。初めの活動が大脳皮質第IV層への入力を反映しているものと考えられる。この知見は、動物での電流源密度解析を用いた研究結果と極めて類似し、ほ乳類に共通する処理様式であると推定される。4)複数の初期活動の後、持続の長い後期活動が生じる。活動潜時、活動様式が初期活動とは異なり、異なる処理を分担していると考えられる。初期活動が、最小単位で受容された情報を洗練する過程、後期活動が一定レベルまで洗練されまとまった情報を受け取り、認知に関わる過程ではないかと考えている。以上の知見は動物での解剖学的あるいは電気生理学的手法を用いた階層性研究と合致し、ヒトでの.階層的処理を支持するのみならず、各感覚系に共通する基本的情報処理様式の一部を明らかにした。触覚情報処理については集積データを活動のタイミングに絞って解析し、並行する少なくともこ二つの処理経路が存在することを明らかにした。即ち、第一次体性感覚野(SI)の3b野から始まり中心後回を後方へ流れる経路(3b野-1野-2野-5野)と、SIから第二次体性感覚野(SII)へ向かう経路である。いずれの経路でも、ある興奮が次のステップへ伝えられる潜時は約4ミリ秒である。また刺激後概ね50ミリ秒以内の活動は金て類似した3相構造を示した。この結果は初期情報処理が皮質部位を問わず共通したメカニズムで行われることを示している。これらの結果は学術誌に報告したInui etal.Cereb Cortex 2004)。次いで聴覚についても同様の研究を行い、初期情報処理様式が触覚の場合と極めて類似することを見いだした。1)少なくとも二つの処理経路が存在する。一つは第一次聴覚野(PAC)から外側、さらに後方へ向かう流れであり(PAC-belt-pSTG-PPC)、いわゆるwhere parthwayに相当する。もう一つはPACから外側、前方へ向かう流れであり(PAC-belt-aSTG)、おそらくwhat pathwayに相当する。2)連続する活動の時間差は約4ミリ秒である。3)初期活動は全て3相構造を示す。これらの結果より、上記触覚情報処理にみられた基本処理様式がそのまま聴覚情報処理にもあてはまることが確認された。このことはこれらの様式が感覚系を問わず感覚情報処理に共通した処理様式であることを伺わせる。結果は学術誌に発表予定である(Inui K at al.Cereb Cortex, in press)。聴覚情報処理については初期情報処理様式が触覚の場合と極めて類似することを見いだした。

一つは第一次聴覚野(PAC)から外側、さらに後方へ向かう流れであり(PAC-belt-pSTG-PPC)、いわゆるwhere parthwayに相当する。もう一つはRACから外側、前方へ向かう流れであり(PAC-belt-aSTG)、おそらくwhat pathwayに相当する。2)連続する活動の時間差は約4ミリ秒である。3)初期活動は全て3相構造を示す。これらの結果より、触覚情報処理にみられた基本処理様式(Inui et al. Cereb Cortex 2004)がそのまま聴覚情報処理にもあてはまることが確認された。このことはこれらの様式が感覚系を問わず感覚情報処理に共通した処理様式であることを伺わせる。結果は学術誌に発表した(Inui et al. Cereb Cortex,2006)。さらに、これらの処理様式の類似性が視覚情報処理についてもあてはまるか否かを検討した。上記1-3の類似点は視覚情報処理についても確認され、これらの処理様式が広く、ヒト感覚情報処理に適用されることが明らかとなった。即ち、視覚刺激による皮質処理は、1)所謂背側と腹側路に相当する並行する経路で行われる、2)連続する皮質活動の時間差はおよそ4-5ミリ秒である、3)早期成分は全て10ミリ秒間隔で2回位相を逆転させる3相構造を示すが、その後出現する後期活動は位相逆転がなく持続が長い、などである。結果の一部は学術誌に発表予定であり(Inui et al. Neuroimage, in press)、他の感覚系との比較も含めた詳細な検討結果は現在投稿中である(Inui et al. J Neurophysiol)。痛覚については、触覚による疼痛抑制が生じるレベルを検討し、関門制御説が推定するような脊髄レベルでの抑制ではなく、皮質レベルでの抑制であることを見いだし、学術誌に報告した(Inui et al. Cereb Cortex, in press)。聴覚情報処理については活動のタイミングに絞って解析し、並行する少なくとも二つの処理経路が存在することを明らかにした。即ち、第一次聴覚野(AI)から始まり側頭葉平面を外側へ流れる経路(AI-AII一上側頭回)と、AIからAIIを経て頭頂連合野(PPC)やplanum temporaleへ向かう経路である。いずれの経路でも、ある興奮が次のステップへ伝えられる潜時は約4ミリ秒である。また刺激後概ね50ミリ秒以内の活動は全て類似した3相構造を示した。この結果は初期情報処理が皮質部位を問わず共通したメカニズムで行われることを示している。また、これらの活動様式は触覚および痛覚処理と極めて類似した。これらの結果は学術誌に報告した(Inui et al. Cereb Cortex 2006a)。次いで視覚についても同様の研究を行い、初期情報処理様式が触覚の場合と極めて類似することを見いだした。1)少なくとも二つの処理経路が存在する。一つは第一次視覚野(V1)からV2、V4へと下面を前方へ向かう流れであり、いわゆるwhat parthwayに相当する。もう一つはV1から上方、前方へ向かう流れであり(V1-V6,MtV5)、おそらくwhere pathwayに相当する。これらの結果より、上記触覚、痛覚および聴覚情報処理にみられた基本処理様式がそのまま視覚情報処理にもあてはまることが確認された。
HGF(肝細胞増殖因子)を用いたAlport症候群の遺伝子治療法の検討

1.筋肉へのHGF遺伝子導入による血流を介したHGFの腎障害進展に対する抑制効果の検討。ヒトHGF(hHGF)は僅か4週間の発現期間であるにもかかわらず有効性を発揮していたこと、hHGFと比較してmouse本来のHGFは抗体産生の可能性がなく長期投与が可能であることから、本年度はAlport症候群モデルマウス(Col4a4 Koマウス)にmouse HGF(mHGF)をエレクトロポレーション法により反復導入して有効性を検討した。尿蛋白/クレアチニン比は無治療群に比べ、8週齢、12週齢、16週齢においてmHGF遺伝子導入群で有意に抑制された。さらに生存期間はmHGF導入群で有意に延長した。また、HGFが筋肉細胞特異的に発現・分泌されるHGF tgマウスをCol4a4 Koマウスと交配し、HGF tg/Col4a4 koマウスを作成した。このマウスの尿蛋白と腎病理組織などを経時的に検討し、対照群にHGF tg(-)/Col4a4 koマウスを用いた。蛋白尿は、12週齢のHGF tg/Col4a4 ko群で有意に抑制された。病理組織では、8週齢での糸球体上皮細胞数の減少および12週齢での半月体形成のいずれもが、HGF tg/Col4a4 ko群で有意に抑制された。さらに12週齢のHGF tg/Col4a4 ko群の電顕像では、糸球体基底膜(GBM)の肥厚および層状化は僅かで、上皮細胞の足突起も保たれていた。また、HGF tg/Col4a4 ko群では、糸球体でのTGF-β1,PDGFの増加が抑制された。生存期間は、HGF tg/Col4a4 ko群で有意に延長した。2.研究の総括。モデルマウスでは、腎糸球体でのTGF-β1の発現増加が糸球体上皮細胞障害の増悪因子であると考えられ、HGFは、このTGF-β1の発現を抑制することが示唆された。本研究から、HGFは、本症の初期変化であるGBMの変性および上皮細胞障害を抑制できることが明らかになった。1)筋肉へのHGF遺伝子導入による血流を介したHGFの腎障害進展に対する抑制効果の検討。1.hHGF遺伝子の発現期間の検討:RT-PCRによる発現期間の検討では、hHGF遺伝子の筋肉での発現は、エレクトロポレーション法では約3週間持続すると考えられた。2.遺伝子導入によるCol4a4ノックアウトマウスの腎症への効果の検討:まず遺伝子導入を1回のみとして検討した。4週齢に遺伝子導入した群では、尿蛋白/クレアチニン比は、12週齢で無治療の対照群と比べ有意に抑制された。光顕でも、hHGF遺伝子導入群で、12週齢での半月体形成は対照群に比較して有意に抑制され、線維性変化をきたした糸球体も少なかった。しかしながら、8週齢に遺伝子導入した群では、尿所見、病理組織所見共に対照群に比較して差を見い出されなかった。以上から早期の遺伝子導入によるHGFの効果が認められた。2)腎皮質へのHGF遺伝子導入によるHGFの腎障害進展に対する抑制効果の検討。1.hHGF遺伝子の発現期間の検討:RT-PCRによる発現期間の検討では、hHGF遺伝子の皮膜下での発現は、エレクトロポレーション法では筋肉への導入と同様、約3週間持続すると考えられた。2.導入遺伝子の腎皮質での発現の局在:遺伝子導入後、LacZ遺伝子の発現部位をX-gal染色を用いて検討した。皮質表層の間質に導入遺伝子を認め、糸球体には導入されなかった。3.遺伝子導入によるCol4a4ノックアウトマウスの腎症への効果の検討:4週齢、8週齢遺伝子導入群ともに尿所見、病理組織所見共に対照群に比較して差を見い出されなかった。筋肉への導入法に比べ、侵襲が強い方法であること、左腎のみの遺伝子導入であったことが、効果を得られなかった原因とも考えられた。17年度は、筋肉へのHGF遺伝子の反復導入による腎障害進展に対する抑制効果の検討を計画している。

病理組織では、8週齢での糸球体上皮細胞数の減少および12週齢での半月体形成のいずれもが、HGF tg/Col4a4 ko群で有意に抑制された。さらに12週齢のHGF tg/Col4a4 ko群の電顕像では、糸球体基底膜(GBM)の肥厚および層状化は僅かで、上皮細胞の足突起も保たれていた。また、HGF tg/Col4a4 ko群では、糸球体でのTGF-β1,PDGFの増加が抑制された。生存期間は、HGF tg/Col4a4 ko群で有意に延長した。2.研究の総括。モデルマウスでは、腎糸球体でのTGF-β1の発現増加が糸球体上皮細胞障害の増悪因子であると考えられ、HGFは、このTGF-β1の発現を抑制することが示唆された。本研究から、HGFは、本症の初期変化であるGBMの変性および上皮細胞障害を抑制できることが明らかになった。
胸線腫内リンパ球の2color flow cytometryによる解析

胸腺腫は、重症筋無力症(MG)を始めとする自己免疫疾患の合併率が高く、免疫学的機能に異常を与えている可能性が考えられる。そこで、細胞性免疫の主役であるTリンパ球の分化の場である胸腺に着目し、胸腺、胸腺腫内Tリンパ球の細胞表面抗原を2種類の蛍光標識した抗体で染色し、FACStarで解析する事(2 color flow cytometry)により、胸腺腫に特有な変化がないかどうかを検討した。対象は、正常例(心臓又は胸部手術を受けた非免疫性疾患患者)胸腺、MG合併胸腺腫及び非合併胸腺腫例とし、胸腺、胸腺腫内リンパ球の細胞表面抗原の表現型を調べた。その結果、1)正常例の胸腺では、年齢と胸腺内リンパ球のCD4^+CD8^+cell(double positive cell)の割合の間に負の相関関係を認めた。この所見は、従来から言われている加令とともに胸腺組織が萎縮していく事と一致していた。3)MG合併胸腺腫と非合併胸腺腫内リンパ球を比較すると、MG合併胸腺腫は、single positive cell即ち、mature cellが多かった。このmature cellが自己免疫疾患の発現に関与しているかもしれないと考えられた。尚、胸腺及び胸腺腫内リンパ球の1週間培養後の細胞表面抗原の解析に関しては、培養後細胞数が少ない事とdebrisの混在が多くて、十分な解析ができず、一定の傾向も認めなかった。
生体機能性ポリマー鎖を用いた半導体ナノ結晶の配列制御

本研究は、半導体ナノ結晶がポリマー鎖を介在して結合した系を形成し配列させることを目的としている。前年度、生体ポリマー鎖を介在して結合したCdSナノ結晶と有機色素分子の系において約40%のエネルギー移動が起こっていることを示した。この系の時間分解スペクトルを研究した結果、このエネルギー移動はDexter型の共鳴エネルギー移動でありCdS有機色素間距離の6乗に反比例する事が明らかになった。そしてエネルギー移動の大きさからこの距離を見積もると数ナノメートルとなり、実際の距離と同程度の大きさになる事がわかった。これらの結果は、エネルギー移動を利用した生体センサーを開発していく際の設計指針を与えるものであると考えられる。CdSナノ結晶のみで有機色素が入っていない系では、異なる大きさのCdSナノ結晶間でのエネルギー移動はストークスシフトが大きいため起こりえないと考えられる。しかし、この系でCdS濃度を大きくしていくと発光ピークエネルギーが高エネルギー側へシフトすることが明らかになった。ここでも各ナノ結晶間で何らかの相互作用が起こっている可能性があると考えられる。また、CdSeナノ結晶コロイドの発光特性を調べた結果、発光-再吸収過程に基づく、異なる大きさのナノ結晶間でのエネルギー移動が起こっていることが明らかになった。Siナノ結晶のコロイドを作成する試みに関しては、液体中でのレーザアブレーション法により発光効率の高いナノ結晶のコロイドを得ることができた。Siナノ結晶の存在は電子顕微鏡やラマン分光測定から確認した。またこの系の発光特性を解析したところ、強い発光はSiCからである可能性が高い事が明らかになった。Siナノ結晶とSiCの両者が共存した系が形成されているものと思われる。本研究は、半導体ナノ結晶表面を生体ポリーマー鎖で修飾した試料を用いることによって、半導体ナノ結晶がポリマー鎖を介して結合した系を形成し配列をめざすものである。その一環として、アビジン-ビオチン反応を用いて生体ポリマー鎖を介在させ、CdSナノ結晶に有機色素分子を結合させた系を作成した。この系が電子状態としても結合しているかどうかを調べるため、この物質に対して発光スペクトルと時間応答特性を測定しナノ結晶から有機色素へのエネルギー移動過程を調べた。半導体ナノ結晶を光励起した場合には、有機色素の直接励起も同時に起こり、これら2励起の間の分離は容易ではない。有機色素の時定数がナノ結晶の時定数よりもかなり早いため、このことを利用して2励起の分離を行い、半導体ナノ結晶から色素分子へのエネルギー移動の割合を調べた。その結果、半導体なの結晶と色素分子は電子的に結合していること、約40%のエネルギー移動が起こっていることが明らかになった。これはアビジン-ビオチン反応を用いればナノ結晶結合系の構築が可能であることを示す。今後はアビジン-ビオチン反応を用いることによってナノ結晶の結合系、ひいてはナノ結晶の配列を試みる。このようにCdSに関しては生体機能性を利用して結合を行う研究は比較的進んでいる。しかし、CdSと比較するとSiは生体との適応性からより魅力的な材料であるが、その結合を利用するような研究は進んでいない。本研究では、Siのコロイドをパルスレーザーアブレーション法によって作成することを試みた。その結果我々の技術を用いれば発光効率の高いナノ結晶シリコンを作成することが可能となった。したがって、CdSで得た技術を利用して、今後はシリコンのナノ結晶に関しても結合状態の形成を試みる。
関数型言語における他言語ソフトウェア部品の利用

本年度は他言語との接続部の開発を続けながら、主に型システムと操作意味論の改良に務めた。特に成果を収めた分野は次の二つである。多相ヴァリアント型他言語との接続を型安全にするために、各部品固有の細いデータの使い方を型に反映させなければならないが、多相ヴァリアント型が不可欠になる。関数型言語で使われる型推論は型システムに単項性という性質を求めており、従来のヴァリアント型ではそれが完全に得られていなかったので、従来のシステムを局所制約という概念を用いて拡張し、それを形式化した。オプショナル引数の意味論C++や動的型付言語において、オーバーローディング(多重意味)がライブラリの簡素化のために大きな役割を果している。ただし、そういうアプローチを用いると型非依存性という重要な性質が失われる。オーバーローディングの重要な使い方であるオプショナル引数に型非依存な操作意味論を与え、それをObjective Camlで実現した。それぞれの進歩は当方で作ったLablTk、LablGL、LablGTKという他言語接続ライブラリで使われる他、Objective Camlの利用者に幅広く新しいライブラリの開発に使われている。本年度は主に様々な他言語ソフトウェア部品の接続実験を行った。現在までにできたインターフェースとして次の三つがある。LablTK Tcl/TKのGUIライブラリとのインターフェースです。実装は前から行われていたが、最近は標準のObjective Camlから利用可能にし、多くの人の反応が得られた。そこでこのライブラリの特徴であるシンタクスの柔軟さの重要性が確認できた。逆によく議論になる型チェックの厳しさは、型安全なインターフェースであることにも関わらず、問題にならなかった。LablGL OpenGLの3Dグラフィックスライブラリとのインターフェースです。ここでも型安全性が利用を難しくしないことが確認できた。LablGTK GTK+というGUIライブラリとのインターフェースです。実装を今年度中に行い、オブジェクト指向モデルに基いたライブラリの扱いにくさを実感した。Objective Camlのオブジェクトシステムの複雑さの影響もあるかも知れないが、継承があるが故に、隠蔽が弱くなるなど、型システムだけで安全性が得られにくい。最終的に選んだモデルはオブジェクト指向でありながら、元のライブラリの継承関係を全面的に受け継がないことで安全性と使い易さの向上を計っている。今年度中に関数型言語Objective Camlとそれに様々な拡張を施しているObjective Labelを合流させる作業も行った。それによって、今回実験のために開発した様々なインターフェースが幅広く利用されることが期待できる。
Development of an intelligent dynamic docking pipeline for improving molecular docking simulations

我々は、薬理学に基づく予測パイプラインネットワークを開発した。分子経路に関与するタンパク質に対する試験化合物の結合可能性を正確・効率的に予測できる。予測スコアと実験的結合親和性は、R>0.8と良好なパフォーマンスを示した。更に既知のバイオアッセイ結果と比較することにより、様々なキナーゼ阻害剤の選択性を予測した。この結果も高い一貫性を示している。インパクトの高い学術誌に発表し、システム生物学研究所や東京大学医科学研究所とのプロジェクトでも、創薬分子を同定するためこのツールを使用した。さらに、創薬関係者をはじめとした社会全体へ貢献できるよう、オープンアクセスでsystemsDockを公開した。
災害レジリエンス向上の定量評価と震災復旧戦略検討システムへの応用

大規模広域災害に被災地域が対応するには,被害を防ぐ(防災)・減らす(減災)対策に加えて,被災から早期に回復する「縮災(災害レジリエンス)」を考慮した総合的な対策が必要である.しかし,縮災の概念や災害レジリエンス向上のモデルは提唱されているが,具体的な社会実装はいまだ不十分である.本研究では,研究代表者が開発する震災時の道路ネットワーク復旧計画策定手法に,災害レジリエンス向上モデルを導入した,震災復旧戦略検討システムを開発する.本研究により,災害レジリエンス向上という観点で,防災・危機管理対策の効果が定量的に評価できれば,効果的な被害低減対策への活用が期待できる.大規模広域災害に被災地域が対応するには,被害を防ぐ(防災)・減らす(減災)対策に加えて,被災から早期に回復する「縮災(災害レジリエンス)」を考慮した総合的な対策が必要である.しかし,縮災の概念や災害レジリエンス向上のモデルは提唱されているが,具体的な社会実装はいまだ不十分である.本研究では,研究代表者が開発する震災時の道路ネットワーク復旧計画策定手法に,災害レジリエンス向上モデルを導入した,震災復旧戦略検討システムを開発する.本研究により,災害レジリエンス向上という観点で,防災・危機管理対策の効果が定量的に評価できれば,効果的な被害低減対策への活用が期待できる.
民俗世界における身体観と受療行動に関する研究 -現代バリの呪術・儀礼・死生観

治療行為を受ける際に、基盤となるのが身体である。それはバリでも同じだが、彼らの場合、生身の肉体のほかに、「みえない身体(魂)」という概念を設定し、これが健康に大きく影響すると考える。「身体」がどのように概念化されているのかを知ることは、身体観のみならず健康観、病観、社会的成熟、身体に関する民俗的な浄と不浄、さらには死生観にまで連関して理解することが必要となる。本研究では、通過儀礼・葬送儀礼・治療儀礼の事例から民俗世界における身体観を明らかし、なにゆえ儀礼にまつわる身体観を表現する文化的イディオムが存在するのかを考察した。本年度、申請者は各所で文献調査を行い、2013年3月に17日間のフィールドワークをおこない「民俗医療」「呪術」「魂と身体」などに関する儀礼について調査を行った。本研究では、(1)バリの人々が、どのように民俗医療と近代医療を利用しているのか、受療行動の様式と「病」の認識の在り方(2)バリの通過儀礼や葬送儀礼での「身体」の扱いや言説を整理し、身体の社会的成熟を解明(3)バリの人々の「身体」と「魂」をめぐる言説や儀礼の解明について並行的に研究を行った。この調査によりバリの人々が、「病」や「障害」に対してどのような言説を用いて説明を行い、具体的な行動を起こすのか、さらに儀礼が関わる「宗教的身体」と近代医療が担当する「生物学的身体」がどのように相互補完性をもち、彼らの(近代医療も含む)受療行動の傾向と死生観がいかに構築されているのかに関する事例を収集した。さらに詳細な内容としては1なにを「病」としてとらえているのかの事例収集と分析2「身体」とみえない世界との関係性についての語りの分析3「病」に対する受療行動の事例収集の分析4通過儀礼と葬送儀礼の身体観と遂行責任、パフォーマンス分析となっている。この調査結果は、大阪体育大学で開催された総合人間科学研究会研究大会において前年度までの調査と文献調査をまとめたものを発表した。またこの成果を学術雑誌『学際連携研究文化と社会』に発表する予定になっている(掲載決定済)。本研究はいまだ明らかになっていない「バリの人々の身体観を通じた受療行動や死生観」を解明し、代替医療や開発医療などの研究に応用できるような基盤的な研究になったと考える。本研究は、研究史的には民俗医療、儀礼論、死生観など、多岐に展開する研究となっています。これらに通底するテーマが身体観です。これらの研究はそれぞれ個別に多くの蓄積がありますが、これらを総合的に記述研究した例は、管見によれば皆無に等しい状況でした。計画していた本研究の特徴的なテーマと調査内容として、以下の4つの点があります。平成23年8月20日から2011年9月9日の期間にインドネシアのジャカルタにおいて研究者交流、バリにおいてフィールドワークを行い、以下のような知見を得ています。1.民俗医療の側面:身体を通して「病観」を明らかにするために民俗医療者、近代医療者、クライアント、そして家族の「語り」がどのように相互参照され、「病」の概念を形成するのかを調査しました。2.儀礼の側面:バリの赤子に対する入魂儀礼、成人儀礼である削歯儀礼、結婚儀礼、葬送儀礼、祖霊の浄化儀礼における身体観を調査しました。現在までの研究では、「ケガレ」の概念で分析されることが多かったが(たとえば入魂儀礼では赤子の血のケガレなどの解釈論)、本研究ではバリの人々がどのような語りと行動をもって、社会的成熟の印とするのか。儀礼と身体の成熟の関係性を、死後まで含めて考察する資料を集めました。3.バリの人々の心身二元論:バリの人々は重病に陥ったり事故にあうと魂が身体を離れたと考えます。魂の遊離が即、死につながるわけではありませんが、彼らの健康に大きな影響を与えるとされています。我々日本に住む人々の多くは、健康や病を語る際、生物学的な身体のみを問題にしますが、バリの人々は身体だけではなく「魂」を含めて考える傾向にあります。身体と魂の関係性を明らかにすることで、彼らの心身二元論を定義するための資料を集めました。平成24年度の調査で補強資料を収集し、論文などのまとめに向かいたいと考えております。本研究の計画では、(1)バリの人々が、どうのように民俗医療と近代医療を利用しているのか、受療行動の様式と「病」の認識の在り方(2)バリの通過儀礼や葬送儀礼での「身体」の扱いや言説を整理し、身体の社会的成熟を解明

(3)バリの人々の「身体」と「魂」をめぐる言説や儀礼の解明について並行的に研究する予定でしたが、平成23年度の調査において、研究テーマに沿った儀礼や民俗医療の現場、インフォーマントのインタビューから(1)(3)にかかわる資料をおおむね得ることができました。暫定的な分析・考察ではありますが、学会発表および学術雑誌への論文投稿によって、現段階でのまとめをおこなうことができたと考えております。平成23年度では、一度のフィールド渡航(インドネシア:ジャカルタ・バリ)と研究発表(平成23年12月総合人間科学研究会)のための国内旅行、物品費等の諸雑費を適切に使用することができました。平成24年においても、昨年の使用に準じた方法で研究費を使用する予定です。ただし本年度は研究成果をまとめることに専念するため、インドネシアだけではなく、シンガポールにある東南アジア研究最大の文献資料が収集されているISEASライブラリーにて文献渉猟を行うことを予定しています。そのうえで国内における学会で随時フィールド資料の分析のまとめを発表、また学術雑誌への論文投稿を随時行っていきたいと考えています。平成24年度の計画は以下の通りです。(1)4月上旬(国内)では、平成23年度のフィールドでの収集資料に基づく第2時調査準備(調査協力者との打ち合わせを含む)を行い、収集資料と問題点の洗い出しを行う。(2)8月初旬から下旬(インドネシア、もしくはシンガポール)。バリ島における受療行動と身体観の参与観察、シンガポールの図書館・機関における資料の追加収集(調査協力者・インフォーマントに対する謝金・コピー代・書籍費発生)。(3)9月10月(国内)において収集資料(含む撮影写真)の整理。(4)11月初旬3月(国内)に論文、報告書の作成を行う。
脂質代謝動脈硬化関連遺伝子転写因子作用機構の分子生物学的解明

アセチルCoAはミトコンドリア内においては酸化的リン酸化によるエネルギー産生に使われる一方、細胞質ではコレステロール・脂肪酸合成の前駆体として利用される生体にとっては必要不可欠な物質である。細胞質におけるアセチルCoAの産生経路はクエン酸を基質とし分解するATPクエン酸リアーゼによる触媒経路が主たるものと考えられていたが、近年、酢酸をCoAとライゲーションする事でアセチルCoAを合成するアセチルCoA合成酵素(AceCS1)のcDNAクローニングがなされ(Fujino et al J Biol. Chem. 2001, Luong et al J Biol. Chem. 2000)、アセチルCoA産生の新たな経路の存在が明らかとなった。アセチルCoAを合成するAceCS1のmRNAの発現は、繊維芽細胞から脂肪細胞の分化に伴い上昇する。また個体レベルでは絶食でその発現は低下し、再食で絶食前のレベル以上に上昇する。このようにAceCS1は栄養代謝・脂肪細胞において重要な役割を担っていると考えられるが、その代謝経路における位置付けや生理的意義、またその転写調節機構は明らかではない。そこで今回我々はAceCS1のプロモーターをクローニングし転写調節機構の解析を行った結果、転写因子sterol regulatoryelemennt binding protein(SREBP)がその転写調節の中心を担っていることを明らかにした。プロモーター領域には8個のSREがクラスターを形成して存在し、その下流に隣接するGC-boxとがシナジスティックに転写を調節していることが明らかとなった。さらにGC-BoxにはSp1とSp3が結合しうることがゲルシフトアッセイで示され、かつSp3による転写活性はSp1に比べ低いことからSREBPを介した転写活性はSp1/Sp3の比率で調節されているものと考えられた。
電位勾配を有するルテニウム三核錯体多量体

本研究はルテニウム三核錯体,[Ru30(RCO2)6(L)3]n^+を4,4'-bipyridineにより架橋したデンドリマー型十量体の末端配位子や架橋カルボン酸を変化させ,電位勾配を有する十量体を合成することおよび類似のデンドロンタイプの多量体を合成しその機能(特に多電子移動能)を調べることを目的としている。昨年度に引き続きdibutylaminopyridineを末端配位子として持つデンドリマーがた十量体を合成し,その電気化学的拳動を調べた。掃引速度を変えて微分パルスボルタモグラム(DPV)を測定したところ,中央ユニットに関するピークについて,ピーク位置の掃引速度依存性が掃引方向によって若干異なっていた.しかし,溶媒や支持塩などを変えて測定を行った結果,この変化は非常に小さいため,明らかな効果が観測されたとは言えないと結論付けた。また,傾斜型のデンドリマーの応用として,部分構造であるデンドロン型7量体を電子プールとする多電子移動触媒を合成し機能を評価した。以前,傾斜のないデンドロン型7量体にCoポルフィリンを連結した錯体を合成しその触媒能を調べたが,触媒効率がそれ程良くなかった。そこで,電子プールからのポルフィリン部への電子移動速度を速くするためにデンドロン部に傾斜をつけた物を合成し,その錯体の酸素の四電子還元に対する触媒能を回転リング電極を用いて調べた。しかし、残念ながら触媒能の向上は見られなかった,これは連結部のRu三核ユニットを安息香酸イオン架橋のものとしたため,Coポルフィリンよりも正電位になり逆に電子移動が遅くなったためではないかと考えられる。本研究はルテニウム三核錯体,[Ru3O(RCO2)6(L)3]n+を4,4'-bipyridineにより架橋したデンドリマー型十量体の末端配位子や架橋カルボン酸を変化させ,電位勾配を有する十量体を合成することを目的としている。本年度は4-dialkylaminopyridineを合成し,これを末端配位子とし,中央部のRu三核ユニットとして安息香酸架橋のユニットを配した錯体を合成し,その電気化学的挙動を調べた。まず始めにアルキル基をドデシル基(C11H23-)としたデンドリマーを合成し,そのサイクリックボルタモグラム(CV)を測定した.ボルタモグラムはこれまでのCVと異なり非常にシャープなピークを示した.特に分岐ユニットのRu3(III,III,III)/Ru3(III,III,II)過程の再酸化波が対応する還元波に比べて異常にシャープになっている.これはアルキル鎖長を長くしすぎたために,作用電極と相互作用が大きくなったために,逆に吸着波に近い挙動を示したと考えられる.そこでアルキル鎖長を中程度としたBu誘導体を合成した.そのCVはこれまでに合成したdmap誘導体と同様のCVを示した.しかし,dmapの場合と異なり掃引速度を変えても新たなピークは出現しなかった.そこで,掃引速度を変えて微分パルスボルタモグラム(DPV)を測定した.中央ユニットに関するピークについて見ると,還元方向の掃引ではピーク位置は掃引速度に依存していないにもかかわらず,酸化方向では非常にわずかではあるが掃引速度を増加させると正電位側にシフトしている様に見える.しかし,この変化は非常に小さいため,溶媒,支持塩作用電極を変化させて測定を行い確かめる必要があると考えられる.本研究はルテニウム三核錯体,[Ru30(RCO2)6(L)3]n^+を4,4'-bipyridineにより架橋したデンドリマー型十量体の末端配位子や架橋カルボン酸を変化させ,電位勾配を有する十量体を合成することおよび類似のデンドロンタイプの多量体を合成しその機能(特に多電子移動能)を調べることを目的としている。
日本人地域住民における血圧変動と心血管病・認知症に関する研究：久山町研究

(1)心血管病、認知症発症の追跡調査、データベースの作成、検証福岡県久山町では、1961年以降、町の健康診断の受診者を対象に時代の異なる複数の追跡集団(コホート)を構築し、心血管病および認知症発症についての追跡調査を行っている。本年度は、毎年の健康診断、追跡調査を行うとともに、1988年に健康診断を受診した60歳以上の住民1193人を対象に、追跡調査の成績を用いて、17年間にわたる認知症発症のデータベースの検証を行った。また、同年の健診を受診した40歳以上の住民2634人を対象に、追跡調査の成績を用いて、24年間の心血管病八署のデータベースの更新を行った。(2)体位による血圧変動と認知症発症との関連の検討(1)で検証を行ったデータセットを用いて、1988年に座位、臥位それぞれの体位で測定した血圧値を用い、体位による血圧変動と認知症発症との関連について検討した。対象者を座位血圧値、臥位血圧値により、正常群(座位血圧・臥位血圧とも140/90 mmHg未満)、座位高血圧群(座位血圧140/90 mmHg以上、臥位血圧140/90 mmHg未満)、臥位高血圧群(座位血圧140/90 mmHg未満、臥位血圧140/90 mmHg以上)、両体位高血圧群(座位血圧・臥位血圧とも140/90 mmHg以上)の4群に分類し、認知症との関連を検討すると、正常群に比し、臥位高血圧群、両体位高血圧群では、全認知症の発症リスクが有意に高かった。解析に必要なデータセットを整備し、体位による血圧変動と認知症発症との関連に関する統計解析に着手することができた。(1)体位による血圧変動と心血管病との関連についての検討今回整備を行った1988年の追跡集団を用いて、心血管病との関連についても検討する。(2)2007年の追跡集団を用いて、血圧の日間変動・日内変動または測定環境による変動と心血管病・認知症発症との関連についてCox比例ハザードモデルなどを用いて検討する予定である。(理由)平成30年度の当初の計画では、研究補助者に支払う人件費を支出する予定であったが、実際には研究補助員を雇用する必要がなかった。(使用計画)平成31年度は、本研究をさらに推進するため、必要な研究補助員を雇用予定であり、その人件費、また研究成果を学会等で公表するため旅費として、使用予定である。