hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
日本製造業の新製品開発における非公式キーパーソンの分析

人材研究の情報を得ると同時に、日本と米国との比較をしようとの提案を受けた。経営学最終的には、キーパーソン人材に関連するメカニズムを明らかにする事であるが、その糸口が実証研究を通して、少しずつ見つかっている。おおむね順調に推移していると考える根拠は、次の通りである。本研究が研究期間内に明らかにしようとしていることは、三つある。一つ目は、日本型PCの概念化とモデル化である。これについては、日本型PCと従来欧米で研究されてきたPCとの違いが次第に明らかになりつつある。一方、キーパーソンそのものの出現モデルの基本形が提示できている。今後の調査ならびに研究により、これらを併せてこの到達点に至ることが可能な段階まで来ている。次に、組織内キーパーソンの違いの明確化では、これまでの調査で、同一企業内の二人のキーパーソンをそれぞれ比較することができた。その結果、異なるキーパーソンの存在を確認することができたと同時に、新製品開発プロセスが求めるキーパーソンの違いを明らかにすることができた。また、キーパーソンのヒントとなるような実践型と支援型の違いも浮かび上がっており、従来の欧米の研究では支援型が多く報告されているが、本研究ではむしろ実践型タイプが多く見られた。これは、一点目の日本型キーパーソンの特徴とも結びつくものと考えている。最後に、キーパーソンと組織構造の関係の明確化については、キーパーソンを従来研究のように個別の新製品開発プロジェクトで考察するのでは無く、そのキーパーソンの企業内キャリア、あるいは組織がアウトプットしてきた製品の経緯、といった長期的な視点でキーパーソンをとらえることが有用であることが分かった。これはきわめて大きな成果であり、重要な視点が得られたと考えている。学会発表を通して、ミクロとしての個人(PC)とマクロとしての組織の関連性について、仮説ではあるものの基本となるモデルを提示した。参加者からは興味深い研究であるとのコメントが相次ぐと同時に、公式と非公式の定義に重要性、意思決定プロセスとの関わり、組織と個人のモチベーションの関係性、などについて指摘があり、このモデルのさらなる精緻化に貢献した。さらにこれらの指摘に配慮しながら実施したインタビュー調査では、この仮説モデルをさらに推し進め、PCの出現に関係性を有するイノベーションプロセスを定義した。前述のこの4つの段階は、PCに求められる役割や能力に影響を与え、必要となるPCのタイプを規定する可能性があることが分かった。これは、イノベーションの大きさの定義にもかかわるものである。また、これら進化した仮説モデルを他企業のPC経験者に意見を問い合わせたところ、概ねこれらのモデルに合致していることが確認された。
国境の植民地サハリン（樺太）島の近代史：戦争・国家・地域

サハリン島近代史の全体像の叙述を最終目的とし、その第1段階として日露戦争前後の時期に焦点を当てた論文集『日露戦争とサハリン島』を刊行した。本書は、帝政期ロシア領時代のサハリン島史、日露戦争サハリン戦、国境変動後の住民生活を総合的に描いたはじめての業績である。また、国際シンポジウムをほぼ毎年開催することで、サハリン島史研究の国際的ネットワークを確立させ、日露間の相互歴史認識の進展にも大きく寄与した。さらに、サハリン島史研究のための資料基盤の共有をおこない、共同研究の基盤構築を進めた。地域内関係・地域間関係・国際関係という重層的な共時的分析をサハリン島近代史において通時的におこなうという本科研の研究目的にしたがい、その第1弾として代表者を編者とする『日露戦争とサハリン島』をほぼまとめあげ、2011年度前半に北海道大学出版会より刊行予定である。本書はロシア帝国時代のサハリン史、および日露戦争サハリン戦について、まとまった形では国内にはじめて問う重要な成果であると考える。また本科研は、ロシア人研究者との共同研究、相互の成果発信を活動の中心においており、その趣旨にのっとって、まず2008年5月にユジノサハリンスク市でおこなわれた国際シンポジウム「サハリンの植民の歴史的経験」の報告集を『サハリン・樺太史研究』第1集として発表した。このシンポジウムは、本科研組織の出発点となったもので、本科研テーマに関わる日露双方の貴重な研究成果がおさめられている。なおこの論集は、本科研テーマに関わる重要資料や論考の発表媒体として、今後も継続して刊行される。また、2010年9月にユジノサハリンスク市でおこなわれた国際学術会議「アントン・チェーホフとサハリン島」に本科研メンバーの多くが参加し、現時点での研究成果を報告した。さらに10月には、国際シンポジウム「日本とロシアの研究者の目から見る日露戦争とサハリン島」を札幌市で開催し、サハリンから第一線の研究者5名を招いて、現地での最新の研究成果を吸収することができた。この2つの相互交流の経験によって、本科研の研究成果が国際的にも十分通用することが確認できた。1.出版(1)原暉之編『日露戦争とサハリン島』北海道大学出版会、2011年。(2)今西一編『北東アジアのコリアン・ディアスポラ:サハリン・樺太を中心に』小樽商科大学出版会、2011年。本年度最大の研究成果は、代表者を編者とする論文集(1)の刊行である。これまで本格的研究が日本では皆無であった全島ロシア領期(1875-1905年)、および南北分割期(1905-1945年)初期について、その全体像をはじめて描き出したものである。日本史やロシア史、ディシプリンの壁を越えた国際共同研究として19世紀後半から20世紀初頭のサハリン島の歴史像を再構成した本書は世界的にも類書のない成果である。(2)は、編者が代表をつとめる基盤研究B「19-20世紀北東アジアのなかのサハリン・樺太」との連携のもとに、サハリン朝鮮人の歴史と現状をオーラルヒストリーと文献史学の方法を組み合わせて検証したものでる。2.シンポジウム、研究会(1)国際シンポジウム「海峡をまたぐ歴史:日本とロシアの歴史家の目でみる」稚内北星学園大学、8月27日-8月28日(2)シンポジウム「帝国日本研究の課題と方法」北海道大学・小樽商科大学サテライト、12月17日-12月18日(3)サハリン・樺太史研究会(5月28日、7月16日、11月5日、3月24日)(1)は、ロシア側から3名、日本側から4名の報告者を招き、北海道内外から多数の参加者があった。日露双方の研究成果の共有と、国際的連携体制の強化という意味でも重要な意義をもつ成果といえる。(2)は、科研メンバーに加えて、道外から小笠原、沖縄、中国の専門家を招き、帝国日本研究の最先端の成果を学ぶとともに、植民地研究の方法論について活発な議論がおこなわれた。(3)では、科研メンバーだけでなく、本州、アメリカ、ロシアからの研究者も招いて、サハリン・樺太史に関する諸問題を多角的に検討することができた。1.シンポジウム、研究会1シンポジウム「植民地社会の比較史」北海道大学、8月18日8月19日2サハリン・樺太史研究会(5月12日、12月8日、1月26日)1は、帝国日本の植民地の比較研究の重要性に鑑み、とりわけ、これまで日本の研究史上で等閑視されてきたロシア極東および樺太の日本人社会史を植民地問題として提起するため、植民地朝鮮の研究者と合同のセッションを組織し、移住形態や植民地・居留地での社会形成を比較史的視野から議論することができた。

2では、科研メンバーだけでなく、本州、アメリカからも、政治史・社会史・言語学など多様なディシプリンをもつ研究者を招き、サハリン・樺太史に関する諸問題を多角的に検討することができた。2.出版準備1『サハリン・樺太史研究第2集日露戦争とサハリン島資料集』2『第一次大戦・シベリア出兵とサハリン島』1は、平成23年度に出版した、原暉之編『日露戦争とサハリン島』(北海道大学出版会)の編纂過程で発掘した日本語およびロシア語の重要史料を翻刻・翻訳し、今後の研究の基盤構築に資するものである。現在編集の最終段階に入っており、平成25年度中に公刊される。2は、上記論文集の続編で、これまでまったく光が当てられてこなかった北樺太保障占領期(19201925年)の総合的研究を目指すものである。本科研分担者を中心にすでに執筆段階に入っており、平成26年度中の出版を予定している。本年度においては、執筆内容の構想について共同討議、および資料調査を、東京、大阪、北海道、ロシア(ウラジオストク、サハリン)で実施した。なにより、『日露戦争とサハリン島』という共同研究の成果を出版することができた。研究年2目で、一定の水準の書物を世に問うことができたことは「順調」と判断するに足る成果だと考える。また、国際シンポジウムを含む活発な研究会活動は、分担者間の連携を強化し、国内外の研究者とのネットワークもひろがり、本研究を中心とするサハリン島史研究の基盤構築をより強固にすることができた。24年度が最終年度であるため、記入しない。本研究の次の目標は、戦間期サハリン島史の編纂である。とくに大きな課題となるのは、前半期が日本軍による保障占領下にあり、その後ソ連の施政下に移った1920年代北サハリンの歴史像の再構成である。資料が国内外に分散しており、未解明な問題も多い。課題の達成にあたり本研究にとって有利となるのは、これまでに築いてきた、サハリンをはじめとするロシア極東地域の大学、文書館との協力体制である。本年度は、積極的に現地での調査をおこない、資料基盤の整備につとめたい。
色素細胞系幹細胞の増殖・分化・移動過程におけるSteel因子の機能

神経堤細胞に由来する色素細胞は、分化・増殖しながら移動し、マウスでは最終的に真皮や毛皮に定着する。由来が明らかで様々な突然変異体が記載されているこの細胞では、それぞれの現象を支配している分子にたどり着ける可能性が高く、より複雑な組織・器官形成のモデルにもなり得ると考えられる。本研究ではSteel因子が色素細胞でいつ、どこで必要とされるかの詳細な解析を完成させ、皮膚を移動していくという色素細胞の際だった性質にSteel因子が必要かどうかを明らかにすることをめざし、以下のことを明らかにした。1)色素細胞の分化には複数のc-Kit依存性およびc-Kit非依存性のステージがあり、色素細胞の移動に伴ってc-Kit依存性およびc-Kit非依存性のステージが交互に現れる。2)Steel因子をサイトケラチン14遺伝子のプロモーターを用いて皮膚に強制発現させたトランスジェニックマウスを作成した。胎仔の一時期に限られているSteel因子を継続して発現させることにより、実際新生仔の表皮において色素細胞前駆細胞の顕著な増加が認められるとともに、マウスの発育に伴って本来色素細胞が存在しない四肢の掌や歯茎に色素細胞が認められるようになった。生後間もないトランスジェニックマウスの掌や歯茎の表皮には前駆細胞が存在すること、同腹仔の相当部位には前駆細胞は全く存在しないことを考えると、表皮にectopicに発現させたSteel因子が前駆細胞の移動を促進したと結論された。
環カリブ海交易ネットワークの成立とユカタン植民地の商業活動との関係について

本年度は、17世紀のカリブ海において、新たな商業勢力として登場するイギリス、オランダ、フランスの貿易のあり方について検討を加え、これら新勢力がスペイン領カリブ世界で展開したいわゆる密貿易の構造を明らかにすることを試みた。利用した史料は、前年度までに収集したスペイン語圏、オランダの行政、公正文書に加え、今年度新たにロンドンで閲覧・複写をおこなった英国の商業関係文書である。これらの史料を分析した結果、1650年代からカリブ海では密貿易活動が活発化し、その活動ネットワークは、カリブ海、ブラジル、ブエノスアイレスなどアメリカ大陸大西洋岸に広く広がり、さらにカナリア諸島とイベリア半島、そして北ヨーロッパへといたることがまず明らかになった。そして、このネットワークの中で、ユカタン半島は、主としてベラクルスとその後背地であるメキシコの各都市への密輸商品の再分配地点としての役割を果たしており、その商品の大部分は、ユカタン半島に到着する以前に、すでに合法商品であるかのような細工が施されていることがわかった。こうした仕組みを可能にしたのはユカタン半島とベラクルスとの両地点の税関担当者が、現地商人の圧力を前にして、こうした商品の通関を認めていることである。つまり、密貿易の展開は、スペイン領の行政官と現地住民との人間関係に大きく依存していることが大きい。以上のような検討を通じて、カリブ海交易ネットワークの変化に伴って、ユカタン半島がひとつの密輸中継地点へと変貌を遂げていく様子を明らかにすることができた。本年度は、カリブ海に形成された国境を超えた交易、すなわち当時のスペイン側からすれば密貿易に当たる商業行為に焦点を絞って分析を進めた。研究の手順として、まず大西洋貿易における各国勢力の参入状況を、収集した二次文献をもとにして検討することで、大西洋貿易と密接にかかわるカリブ海貿易の動向を貿易全体の動きの中で捉える作業を行った。つぎに、この作業を基礎として、カリブ海に関するスペイン側資料、とくにユカタン植民地に関する史料をデータベース化し、解析作業をおこなった。その次に、スペイン側の資料と比較検討するべく、オランダのアムステルダム市公文書館にて同国のカリブ海におけるスペインとの貿易活動に関する史料の収集を行った。なお、以上の作業において必要な、文献購入、データベースプログラム、オランダでの調査費用を当研究費補助金より支出した。以上のような研究作業を通じて明らかになったのは三点で、(1)17世紀を通じて密貿易の担い手はポルトガル、オランダ、イギリス、フランスという順番で交代していること、(2)カリブ海で各国が密貿易を展開は、主としてスペイン本国における各国の貿易活動の状況と反比例しており、スペイン本国での活動が困難になったり、その貿易のコストが上昇した場合に、各国のカリブ海での貿易活動が顕著になる。(3)このうちオランダ商人のカリブ海における貿易の形態としては、スペインの貿易管理者の目を盗んで行われる住民との非公認な貿易手段よりも、スペインの官僚を買収しておこなわれる半ば公認された貿易手法が好まれた。なお、これらの研究成果の一部は、2002年のカリブ学会(AMEC)の年次大会で報告したほか、メキシコの研究誌へ掲載されることが決定している。
胃術後逆流性食道炎の病態解明と再建術式および治療法の確立

胃癌の手術成績が向上するに伴い、術後の逆流性食道炎が注目されるようになってきている。その一つに、下部食道括約筋(以下LES)周辺が大きく障害されることが大きな問題となっている。今回著者らは、胃切除前後の食道胃接合部の解剖学的変化および食道運動機能さらに逆流性食道炎のメカニズムについて検討した。対象:幽門側胃切除術を施行した胃癌症例21例で、男性13例、女性7例である。再建方法はいずれもBillroth I法である。方法;術前および術後23週に食道内圧およびLES圧をAndorfer capillarysystemとDent sleeve catheterを用い手、圧トランスヂューサーを介して、記録計およびコンピューターに接続し解析した。なお嚥下誘発にはdry swallow(空嚥下)とwet swallow(水嚥下)を計各10回ずつ行った。結果;1.LES静止圧は、dry swallow時、wet swallow時ともに、術前に比べて術後低下する傾向にあった。2.蠕動性収縮圧はdry swallow時,wet swallow時ともに、食道上部、食道中部、食道下部のいずれの部位でも、術後有意に低下した。3.蠕動性収縮波の伝播速度はdyr swallow時には食道上部、食道中部、食道下部の各部位で術後有意に低下したが、wet swallow時には術後の有意な低下は認められなかった。以上より幽門側胃切除術後には、LES静止圧が低下する傾向にあり、また食道運動障害が起こることが認められ、LESの変化と食道クリアランスの低下が逆流性食道炎発症の要因であるこよが示唆された。近年、胃癌の手術が多くの施設で行われるようになってきた。しかし、その反面なんらかの不定主訴を抱えている患者も少なくない。その一つに胃切後の逆流性食道炎が大きな問題となっている。噴門周囲を郭清することにより下部食道括約筋が障害されることが逆流性食道炎を引き起こす要因と考えている。この病態および治療法を確立するためには食道、LESおよび胃の生理、機能的診断法が必要となってくる。そこでLES機能を評価するのに適しているcapillary perfusion methodとDent sleeve catheterをもちいて食道、下部食道括約筋の生理的意義を検討するとともに、胃切後患者の残胃食道運動機能を健常者と比較検討することで、逆流性食道炎の発生機序の解明に努めた。胃癌にて幽門側胃切除を行った15症例のLES圧および食道内圧測定を行った。対象群として下部食道括約筋に器質的疾患のない20例を健常人とし、幽門側胃切除術群と同様に測定し比較検討した。(結果)LES圧は胃切除術群では14.5±2.7mmHgであり健常人の19.6±1.4mmHgと比較し有意に低値を示した。また食道内圧測定において、胃切除術では下部食道の伝潘速度の遅延、および収縮圧の低値が認められ食道機能運動の低下が示唆された。このように胃切除術により下部食道括約筋、食道運動機能が障害されることが逆流性食道炎を引き起こす原因と考えられた。さらに食道内PH測定にてアルカリの食道内逆流を認めたことから、膵液および胆汁の逆流が食道炎の主因を占めるものであることが示唆された。このことより、胃切除後は胃食道接合部の逆流防止機構を作製することが重要であると考えられた。対象群として下部食道括約筋に器質的疾患のない20例を健常人とし、幽門側胃切除群と同様に測定し比較検討した。(結果)

LES圧は胃切除群では14.5±2.7mmHgであり健常人の19.6±1.4mmHgと比較し有意に低値を示した。また食道内圧測定において、胃切除術では下部食堂の伝潘速度の遅延、および収縮圧の低値が認められ、食道運動機能の低下が示唆された。このように胃切除術により下部食道括約筋、食道運動機能が障害されることが逆流性食道炎症を引き起こす原因と考えられた。さらに食道内PH測定にてアルカリの食道内逆流が著名にみとめられたことから、膵液および胆汁の逆流が食道炎の主因をしめるものであることが示唆された。このことより、胃切除後は胃食道接合部の逆流防止機構を作成することが重要であると考えられた。胃癌における胃切除術後の逆流性食道炎の成因を解明する目的で、平成6年度はLES圧食道内圧をArndorfer capillary perfusion systemとDent sleeve catheterを用いて測定し、さらに食道内容の分析を行った。以上の研究にて、胃切除術後逆流性食道炎の病態をある程度解明することができた。今後はさらに症例数を増やし、gastrin,cerureinなどの薬物投与を行い、ホルモン動体からも病態の検討を加える必要があるものと考えられた。胃癌の手術成績が向上するに伴い、術後の逆流性食道炎が注目されるようになってきている。その一つに、下部食道括約筋(以下LES)周辺が大きく障害されることが大きな問題となっている。今回著者らは、胃切除前後の食道接合部の解剖学的変化および食道運動機能さらに逆流性食道炎のメカニズムについて検討した。対象:幽門側胃切除術を施行した胃癌症例21例で、男性13例、女性7例である。再建方法はいずれもBillroth I法である。方法;術前および術後23週に食道内圧およびLES圧をAndorfer capillarysystemとDent sleeve catheterを用いて、圧トランスヂューサーを介して、記録計およびコンピュータに接続し解析した。なお嚥下誘発にはdry swallo(空嚥下)とwet swallo(水嚥下)を計10回ずつ行った。結果;1.LES静止圧は、dry swallo時、wet swallow時ともに、術前に比べて術後低下する傾向にあった。2.蠕動性収縮圧がdry swallo時,wet swallow時ともに、食道上部、食道中部、食道下部のいずれの部位でも、術後有意に低下した。3.蠕動性収縮波の伝播速度はdry swallo時には食道上部、食道中部、食道下部の各部位で術後有意に低下したが、wet swallow時には術後の有意な低下は認められなかった。以上より幽門側胃切除術後には、LES静止圧が低下する傾向にあり、また食道運動障害が起こることが認められ、LESの変化と食道クリアランスの低下が逆流性食道炎発症の要因であることが示唆された。
RNAiレトロウィルスを用いた遺伝子ノックダウンマウス作製法の開発

(1)受精卵に対するウイルスベクター導入方法の検定これまでの数少ない報告では、透明帯をタイロード液で除去した後にウイルス液に浸潤させ感染させる方法と、透明帯と受精卵の間の卵黄周囲腔にパッケージングしたウイルスを注入する方法が報告されているが、卵黄周囲腔にパッケージングしたウイルスを注入した方が効率が高いとの報告がある。そこで今年度は導入方法について検討した。サイレンシングを受けにくいモロニーウイルスベクターベースのレトロウイルスベクターでは遺伝子は、透明帯をタイロード液で除去した後にウイルス液に浸潤させ感染させる方法と、透明帯と受精卵の間の卵黄周囲腔にパッケージングしたウイルスを注入する方法の両方で、遺伝子がほとんど導入されないことが明らかとなった。GCDsapの遺伝子導入能力を確認するために、内部細胞塊と同様の性状を有するES細胞(129/Sv由来およびC57BL/6J由来)に蛍光タンパク質遺伝子を有するGCDsapを培養液中で感染させたところ、非常に効率良く遺伝子を導入すうことが出来た。従って現在のところ、1細胞期の受精卵でなぜ感染が起こらないかは不明であるが、胚盤胞期の受精卵にGCDsapをインジェクションする方法が有効である可能性がある。また、標準マウス系統であるC57BL/6JおよびNでレトロウイルスを用いた遺伝子導入を可能にするために、生殖細胞系列に伝達するES細胞を樹立するとともに、RNAiの検定が可能な蛍光物質恒常的に発現するC57BL/6J由来のES細胞を樹立した。研究計画(2)RNAiレトロウイルスを用いた遺伝子発現抑制の解析については遺伝子導入系が確立できなかったため、実施できなかった。(1)受精卵に対する高効率遺伝子導入法の確立のためのベクターの選定受精卵に対する導入効率は、ウイルスベクターの特性により大きく異なることが予想されるので、モロニーウイルスベクターベースのGCDsapやHIV由来のpSUPERおよび理化学研究所の三好博士が開発したベクターCII-CMV-MCSを用いて、どのベクターが受精卵に対する遺伝子導入効率が高いかを明らかにした。その結果、GCDsapはES細胞に対する遺伝子導入効率は非常に高く、ES細胞からキメラマウスを作製、germlineを通過したものでも、非常に安定した発現が持続されることが明らかとなった。ウイルスベクターによる遺伝子導入では、遺伝子が導入された場合でも、メチル化により遺伝子発現が抑制されることが知られており、GCDsapはこの点で非常に優れたベクターであることが実証された(研究発表)。受精卵に対する遺伝子導入においても大変期待されたが、受精卵に対する導入効率は非常に低いことが明らかとなった。一方CII-CMV-MCSについては、受精卵に対して遺伝子を導入できることが明らかとなった。(2)受精卵に対するウイルスベクター導入方法の選定これまでの数少ない報告では、透明帯をタイロード液で除去した後にウイルス液に浸潤させ感染させる方法と、透明帯と受精卵の間の卵黄周囲腔にパッケージングしたウイルスを注入する方法が報告されているが、卵黄周囲腔にパッケージングしたウイルスを注入した方が効率が高いとの報告がある。そこで本申請では上記の研究で一番導入効率が良いと考えられたベクターについて、2つの導入方法について検討した。導入するレトロウイルスには、全身性に発現するプロモーターにGFPを結合したものを用い、遺伝子発現をGFPでモニターした。その結果、卵黄周囲腔にパッケージングしたウイルスを注入した方が、その後の操作が容易であり、有望であることが明らかとなった。
黄疸肝におけるバクテリアル・トランスロケーションのメカニズム解明と制御

胆道閉鎖症動物モデルとして、総胆管結紮ラットモデルを使用し、大建中湯(TU-100)による効果について検討した。大建中湯投与群では、総胆管結紮のみの群と比較して3日目のGPT値、14日目のヒアルロン酸値およびBT発生率が低値・小腸粘膜構造が保たれ・肝線維化およびαSMA発現も抑制された。さらに、総胆管結紮ラットから単離した星細胞を用いたin vitro実験では、大建中湯投与により有意に活性化抑制効果を認めた。以上より、胆道閉鎖症に伴う肝線維化の進行にはBTによるHSCの活性化が関与している可能性があり、大建中湯はその両者の抑制することで肝障害を改善することが期待される。【研究の目的】胆道閉鎖症は胆汁排泄障害に伴うIgA分泌低下により腸管粘膜バリアが破綻し、バクテリアルトランスロケーション(BT)を来す可能性がある。一方で大建中湯(DKT)は近年、抗炎症作用などが報告されている。本研究では、ラットを用いて胆道閉鎖症(閉塞性黄疸)におけるBT発生の機序を解明し、さらに抗炎症作用を有する薬剤投与により病態制御が可能か否かを検討し、胆道閉鎖症における病態増悪の予防に繋げることを目的とする。【これまでの研究成果】Wister系雄性ラット(6週齢,250-300g)を用い、以下の3群(各n=5)に分けた。Group1:control群、Group 2 :総胆管結紮モデル群、Group 3 :総胆管結紮+ DKT投与群(DKT 300mg/kg/dayを3,7,14日間、経口投与)。Group2,3においては、総胆管を結紮後3,7,14日目にsacrificeを行った。検討項目は、(1)血液検査(T-bil、AST、ALT、ヒアルロン酸、総胆汁酸)、(2)腸間膜リンパ節培養によるBT発生率を評価した。結果(2)BT発生率は、control群では0%, Group2では3,7,14日後いずれの群でも100%であったのに対して、Group3では3日後100%,7日後20%,14日後0%と時間依存的に有意に抑制された(7,14日後でp<0.01)。このように、DKT投与により胆道閉鎖症モデルにおけるBT発生が有意に抑制され、胆道閉鎖症におけるBT予防にDKTが有用である可能性が示唆された。【研究の目的】胆道閉鎖症モデル(閉塞性黄疸)におけるBT発症の機序解明を目指し、さらに抗炎症作用を有する薬剤投与により病態制御が可能か否かを検討し、胆道閉鎖症における病態増悪の予防に繋げることを目的とする。【研究実施計画】平成24年度:閉塞性黄疸モデルラットの作成・病態解明・閉塞性黄疸モデルラットにおける薬剤(DKT)投与の効果検討平成25年度以降:閉塞性黄疸モデルラットにおけるBT・肝線維化とDKTによる予防効果に関する機序解明【研究実績と展開】(I)これまでの研究実績(方法)Wistar系雄性ラットを用い、以下の3群(各n=5)に分けた。Group1: Control群、Group2 : BDL群、Group3 : BDL+DKT投与群(300mg/kg/dayを術当日から経口投与)。Group2,3においては、総胆管を結紮後3,7,14日目に犠死させた。(結果)(1)血液生化学検査では、Group3において、3日目のGPT値、14日目のヒアルロン酸値がGoup2と比較し有意に低値であった。(2) BT発生率は、Group1では0%, Group2では3,7,14日目いずれの群でも100%であったが、Group3では3日目100%, 7日目20%, 14日目0%と時間依存的に抑制された。(7,14日目でp<0.05)(3)小腸絨毛数・絨毛高は、Group2では時間依存的に減弱するが、Group3では有意に保たれた(7,14日目でp<0.01)。(4)肝線維化およびαSMA発現は、Group2では時間依存的に進行するが、Group3では有意に抑制された。(結論)胆道閉鎖症に伴う肝線維化の進行にはBTによるHSCの活性化が関与している可能性があり、DKTは、その両者の抑制することで肝障害を改善することが期待される。(II)これからの展開閉塞性黄疸モデルラットにおけるDKTによる肝線維化

抑制の機序について、ラット肝星細胞を単離することでin vitroでの機序解明を行う。平成24年度1)閉塞性黄疸モデルの作製2)閉塞性黄疸モデルでのBTの確認と病態解明平成25年度3)閉塞性黄疸モデルラットにおける薬剤(DKT,MHN-02)投与の効果検討を行う予定としていた。閉塞性黄疸モデルの作製:ラットの総胆管を結紮し、閉塞性黄疸モデルを作製した。コントロール群(n=5)では、血清T-bil値が正常であったのに対して、総胆管結紮モデル群(BDL群)では、術後1日目・3日目・5日目・7日目・14日目の群で有意にT-bil値が高値であり、閉塞性黄疸モデルの作製に成功した。2)閉塞性黄疸モデルでのBT確認:コントロール群(n=5)では、腸間膜リンパ節培養が陰性であったのに対してBDL群では、術後1日目・3日目・5日目・7日目・14日目・28日目のいずれにおいても腸間膜リンパ節培養にて腸内細菌群が陽性(BT発生率100%)であり、閉塞性黄疸モデルでのBT発生を確認した。3)閉塞性黄疸モデルにおける薬剤(DKT)投与の効果検討: BT発生率は、コントロール群では0%, BDL群では3,7,14日後いずれの群でも100%であったのに対して、総胆管結紮+DKT投与群では3日後100%,7日後20%,14日後0%と時間依存的に有意に抑制された(7,14日後でp<0.01)、DKTの閉塞性黄疸モデルにおけるBT抑制効果を示唆する結果が得られた。このように、H24年度終了時点で、H25年度に予定していた閉塞性黄疸モデルにおける薬剤(DKT)投与の効果検討を行うことができたことから、本研究は概ね順調に進展していると考えられる。25年度が最終年度であるため、記入しない。H24年度に作製した閉塞性黄疸モデルを用いて以下の病態解明のための研究を行う予定である。便のマイクロビオームでの腸内細菌叢の多様性の評価を行う。DKTによる肝線維化抑制効果についての検討:HE染色・Azan染色・Sirius Red染色にてBDL群・DKT群における肝線維化の評価を行う。また、DKT投与量を1000mg/kg/dayに増量し、dose dependentな実験を行うとともに、MHN-02投与モデルについても実験を行い、改善効果を検討していく予定である。
数値相対論の初期データ計算法の発展的研究

本研究では,数値相対論的シミュレーションの初期データとして利用される高密度天体の平衡解や準平衡解を求めるための新たな定式化の研究と数値計算コードの開発を行った。特に,これまでに開発を進めてきた初期データ計算コードCOCALコードを発展させて,多様で現実的な高密度天体の計算を行った。定式化については,相対論的電磁流体等の保存則と時間発展をハミルトニアン形式を用いて統一的に導くことに成功した。初期データ計算については,自転を伴う連星中性子星,3軸不等形状に変形した高速回転高密度星,様々な差動回転をする高密度回転星,新しい状態方程式を利用した高速回転クォーク星などの計算に成功した。本研究課題では,高密度天体の平衡・準平衡解計算コードCOCAL(Compact Object CALculator)の発展的な開発とこれを用いた研究を行っている。当該年度は,Antonios Tsokaros氏(フランクフルト大学・イリノイ大学研究員)を本基金を利用して1か月間招聘し,準平衡円軌道にある連星中性子星の初期データ計算コードの開発を共同で行った。この研究では空間的共形平坦性を仮定した下で,特に中性子星の自転を取りいれた準平衡解を計算するコードを開発し,解の系統的な計算を行い結果を論文にまとめた。現在この解を連星中性子星合体の初期データに利用したシミュレーションを行っている。このような初期データを計算できるコードは世界的にも少ないため,非等質量連星の場合等への拡張をした後,数値シミュレーションを行うグループにデータを提供できるようにしたい。次に,吉田慎一郎氏(東大)と協力し高速回転中性子星の計算コードの改良をおこない,系統的な計算を行った。この研究では,メトリックの全成分を解くwaveless定式を用いて軸対称及び3軸不等の回転高密度星の計算を行った。また,差動回転の度合いを従来よりもさらに自由に与えることのできる新しい差動回転則を導き,これを用いた差動回転高密度星の解を系統的に計算した。Waveless定式を用いた差動回転高密度星の解系列の系統的な計算や,3軸不等な回転高密度星の準平衡解の計算に世界で初めて成功した。この結果を論文にまとめ,現在この計算コードを応用した研究を継続中である。最後に,吉田至順氏(東北大)と協力し,磁場入り回転星の計算法の定式化の改良と,計算コードの開発を開始した。特に,中性子星内部と外部の真空中の電磁場を矛盾なく直接的に計算できるような定式化を導いた。この研究は次年度の中心的な課題として継続する予定である。本基金応募の段階では重力波を含む連星中性子星や連星ブラックホールの計算法を始めに開発する予定であったが,応用上重要な新たな差動回転則を利用した相対論的高密度星の計算コードの開発に成功したことと,3軸不等の高密度回転星の重力波天文学への応用の新たなアイデアを得たことから,方針を変更し,回転星の系統的な計算を中心に行った。連星中性子星の計算についても,世界的にまだあまり行われていな自転の効果を取り入れることに成功した。これらの結果を2本の論文にまとめて出版をすることができたことと,磁場入り回転星も含めて,これらの研究が継続的に進んでいることから,進捗状況はおおむね順調に進展しているとした。昨年度に引き続き,高密度天体の平衡・準平衡解計算コードCOCAL(Compact Object CALculator)の開発と,これを用いた高密度天体の研究を行った。まず,Antonios Tsokaros氏(イリノイ大)と協力し,COCALコードで求めた初期データ用いた連星中性子星合体の数値相対論的シミュレーションを行った。これまでに広く利用されてきたLoreneコードによる初期データから開始した数値シミュレーションの結果と比較することで,我々の方法も同様に精度の良い初期データを与えていることを示した。この研究により,COCALコードのデータを世界で最も多く利用されているEinstein Tool Kit (Cactusコード)上で利用できるようになった。次に,3軸不等の一様回転高密度星の系統的な計算をCOCALコードを用いて行った。現実的な中性子星の状態方程式の性質と考えられる,星の中心付近(inner core)が柔らかく,その外側(outer core)が硬い状態方程式を区分的に近似した状態方程式を用いて,このような高密度回転星の準平衡解を系統的に計算した所,この場合には一様な硬さの状態方程式の場合と異なり,3軸不等の回転星の最大質量が球対称星の最大質量より大幅に増加することを発見した。さらに,この3軸不等の回転星のデータを上で述べた数値相対論的シミュレーションコードに用いて,この様な回転星の力学的安定性を調べている。この他に,重い星のコアの重力崩壊後にできる原始中性子星や,連星中性子星合体後に生成する超質量中性子星などに見られるより現実的な差動回転則を取り扱えるように,昨年度開発した差動回転星計算コードの拡張を行った。また,磁気流体の保存則とその時間発展法の定式化についても研究を行った。今年度もCOCALコードの開発は順調に進展した。特に,COCALコードの初期データをEinstein Tool Kit上で利用するためのサブルーチンを開発したことにより,今後COCALのデータをより多くの研究者に利用してもらう可能性が広がったと同時に,新たな初期データを計算した際にすぐに数値シミュレーションを行う体制が整った。実際,3軸不等の一様回転高密度星の準平衡解のシミュレーションを,比較的短期間の間に実行することが出来ている。

また,コード開発の進展により様々な平衡・準平衡解を計算できるようになって来ており,これによって新たな物理的な発見も徐々に得られるようになっている。上に述べた3軸不等の一様回転高密度星の計算はこの一例で,このような高密度星の最大質量が状態方程式に依存して,場合よっては球対称星の最大質量を超える,という結果はこれまで見過ごされてきた興味深いものである。現在,軸対称回転高密度星の差動回転則の一般化に取り組んでいる。新たなアイデアに基づく相対論的な差動回転則の定式化に成功し,コード開発と数値計算を行っている。既に,これまで計算されたことのないタイプの差動回転星の解の計算に成功しており,さらに連星中性子合体直後の複雑な差動回転をする超大質量中性子星のモデル化に取り組んでいる。この研究から更なるコード開発の進展と,物理的に興味深い計算結果が得られることが期待できる。以上に述べた成果は2本の論文として出版済みであり,3軸不等回転星のシミューレションについてはプレプリントを書き上げた所である。この他に,理論的な研究として,磁気流体の保存則とその時間発展法の定式化についてのプレプリントも書き終えた。これらのことから,本研究課題の進捗状況はおおむね順調に進展しているとした。本研究計画ではAntonios Tsokaros氏と共同で高密度天体の平衡・準平衡解計算コードCOCAL(Compact Object CALculator)の開発を進めている。昨年度これを用いて求めた,3軸不等形状の一様回転高密度星の初期データの時間発展の様子を,Illinois大学のStu Shapiro氏らによって開発された数値相対論コードでシミュレーションした。このような3軸不等の高密度星のシミュレーションを完全に一般相対論の効果を取り入れて計算したのは,この研究が初めてである。この計算から,このような天体の力学的安定性や,放出される重力波を正確に求めることに成功した。次に,これまでに開発した軸対称回転星の初期データを求めるコードを拡張し,様々な差動回転をする相対論的回転星の解を計算した。これまで高速回転星の差動回転則としては,星の回転軸付近から星の赤道表面方向に向かって単調に減少する回転則しか考えられていなかった。しかし,重力波放出による連星中性子星合体後の超質量中性子星においては,星の回転軸付近で回転角速度が一度増加した後,減少するような回転則を示すことがシミュレーションによって示されている。このような差動回転則を平衡状態の計算に取り入れることに世界で初めて成功した。これにより,合体後生成される超質量中性子星が力学的平衡状態に達した際のモデルをより精密に計算するための基礎を確立した。この他の共同研究として,Harris Markakis氏らと電磁流体系の一般的な保存則とその時間発展についての新しい定式化を導いた。また,Enping Zhou氏,Antonios Tsokaros氏らと共同で,COCALコードにクォーク物質の状態方程式を実装し,これを用いた軸対称及び3軸不等の回転クォーク星の計算に成功した。本研究では,数値相対論的シミュレーションの初期データとして利用される高密度天体の平衡解や準平衡解を求めるための新たな定式化の研究と数値計算コードの開発を行った。
思春期の摂食障害傾向の形成に及ぼす身体的発達とメディア情報摂取の影響の検討

平成13年度(Time 2)は、昨年度に実施した質問紙調査の追跡調査を一部郵送により行った。併行して、平成12年度(Time 1)に行った調査のデータ解析を継続して行った。分散分析を用いた横断的検討と重回帰分析を用いた縦断的検討から以下の点が明らかになった。1.Time 1の時点では、身体的発達段階が進んでいる児童ほど、身体への不満足感が強く、摂食障害傾向が高く、メディア情報摂取量が多く、自己の女性性を強く評価していた。このことは、既潮群と未潮群の比較だけではなく、未潮群においても、身体的発達がより進んだ段階にある児童のほうが心理的適応度が低かったことから、初潮経験以前においても思春期の身体発育が摂食障害傾向に結びついている可能性が示唆された。2.身体的発達段階が進んでいる児童は、Time 2の時点においても身体不満足感が強く、摂食障害傾向が高かった。しかし、メディア情報摂取量を統計的に統制すると、身体的発達と身体不満足感、および食行動異常度との関連は弱くなることから、身体的発達と摂食障害傾向の関連は少なくとも部分的にメディア情報摂取量が媒介していると考えられる。3.描画法による自己像を検討した結果、Time 1、Time 2を通じ、既潮群のほうが未潮群よりも女性的特徴を抑制した自己像を描いていることがわかった。このことは、シルエット画身体像での現実像と理想像のずれにも反映されるように、身体的発達が進んだ女子児童における痩身願望を表していると考えられた。平成12年度は、まず、質問紙調査の準備として、メディア情報摂取尺度を作成し、信頼性と妥当性の検討を行った。また、児童用の性役割観スケール(Boldizar,1991)の日本語訳を作成した。次に、これらの尺度と身体的発達、身体像(描画とシルエット画)などからなる調査票を作成し、小学校5,6年生の女子児童412名を対象に実施した。データ入力は終了し、現在SPSSを用いて解析中である。現時点での主な解析結果は以下の通りである。1.身体的発達の段階が進んでいる児童ほど、自己の身体像への不満が強く、問題摂食がやや多く、全体として摂食障害傾向が高いといえる。既潮群(対象者の約60%)と未潮群の比較では、既潮群のほうが摂食障害傾向が高かった。これらの結果は、中学生以上を対象としたこれまでの研究結果から予測された通りであるが、小学生においても痩身願望と問題摂食が蔓延していることを裏付ける結果となった。2.身体的発達の段階が進んでいる児童ほど、メディア情報の摂取量が多く、メディアにより多くの関心を向けていることが示唆された。メディア情報摂取量と身体像の間にも関連が認められ、自己の身体像への不満が強い児童ほどメディア情報の取り込みも多いことがわかった。今後の解析では、身体的発達段階、メディア情報摂取量、および摂食障害傾向の関連を重回帰分析を用いて検討する。さらに、性役割観がメディア情報摂取量と摂食障害傾向との間の介在因子として働く可能性についても検討する。平成13年度の研究計画本年度の調査対象者に対し、10ヶ月後に追跡調査を行い、本年度の結果をふまえて縦断に検討する。
メタルクラスターの理論的研究

媒質中での電子の多重散乱は,自由空間中での散乱に倣って,リップマン・シュウィンガー型の方程式で定式化できる。その解はg-行列と呼ばれ,媒質中での2電子間の近距離相関の効果を有効相互作用として表したものに相当する。本研究では,2次元及び3次元電子系におけるg-行列を微視的に求め,それらが系の応答関数にどの様な影響を与えるのかを調べた。まず,2次元電子系において乱雑位相近似における誘電関数に対し,クーロン力の交換項を正しく取り込む事により,量子モンテカルロ計算で得られた静的誘電関数の性質をほぼ説明する事に成功した。これは,静的な誘電関数が金属程度の密度を持つ2次元電子系では広い運動量領域に対して負になるという結果であり,高温超電動とも関連して注目を集めている。この一致は,電子の多重散乱プロセスから生じる近距離相関(g-行列)を正しく考慮することによりさらに良くなった。これらの計算を吟味した結果,静的な誘電関数が負になるのは,(遮蔽された)応答関数の極の影響であることがわかった。現在,3次元電子系に対して同じ研究を進めており,g-行列を使ってメタルクラスターの微視的な構造計算を行う予定である。g-行列のもつ強い非局性の為に,これまでのハートレーフォック計算とはかなり違った結果がでるものと期待している。
プログラムを仕様とするハードウェアの設計検証手法

近年の集積回路技術の進歩は、高速で大規模な論理回路の実現を可能にした。それに伴い、設計レベルの抽象化が進み、C/C++あるいはJavaなどのプログラミング言語を用いた高いレベルの機能記述から最適な回路を合成する手法の研究が盛んに行われている。大規模集積回路では、製造に大きな費用と日数を必要とするので、設計のレベルで回路機能の正しさを検証することがこれまで以上に重要である。本研究では、このプログラミング言語を仕様とし、最適化前後あるいは合成前後で、形式的に機能の正しさを検証する手法の研究を行った。また、機能ばかりでなく、製造検証容易性を考慮した設計手法などについても研究を行った。まず変数の代入関係に着目して等価性を判定する論理に関する手法に着目し、それに関連する研究のサーベイと等価性判定システムのサーベイを行った。その後、現状の判定システムを演算回路の検証に適用し、適用限界を明確にした。また、並列化やパイプライン化などの前後で等価性を証明する手法の研究を行った。等価性判定のアルゴリズムに関しては、その基本演算である論理演算を効率よくプロトタイピングできる再構成可能デバイスの研究を行った。プログラムの仕様に関しては、ハードウェア化の時点で種々の最適化が行われることを考慮し、とくにデータパスのビット幅の最適化に着目して最適化手法とその前後での等価性保証の研究を行った。データパスのビット幅については、整数演算を含むデータパスだけでなく、浮動小数点演算を含むものについても研究を行い、プログラムに対して演算結果の誤差を解析する手法を提案した。また、製造検証容易性については、高位の機能モジュール単位で印加されるパターンの数を最適化する手法の研究を行い、パターン数削減の付加回路構成法を提案した。近年の高位合成技術の進歩により、C言語やJavaなどのプログラムを仕様としてハードウェアを設計するという手法が普及しつつある。これに伴い、ハードウェアシステムの検証レベルが高度化し、これまでに無い高位レベル検証手法の開発が急務である。本研究では、プログラムを仕様とするハードウェアの設計検証について、以下の研究を行なった。まず第一には、視線推定や顔の向きの判定などの具体的なマルチメディア処理について、C言語レベルでのアルゴリズム設計とハードウェア設計を行ない、その過程で必要とされる検証手法の調査を行なった。第二には、CのプログラムからControl Data Flow Graph (CDFG)を生成するプログラムを作成し、それを用いてプログラムの特性を解析する手法の研究を行なった。とくに、設計段階で、浮動小数点演算を固定小数点演算に変換するという処理が多いことがわかったので、それに対して固定小数点化した前後で必要な精度が保証されているかどうかの判定手法および最適化を行なう手法の研究を行なった。第三に、高位合成が再構成可能アーキテクチャ向けに行なわれることが多いことから、再構成可能アーキテクチャの構造解析と検証を行なう手法の研究を行なった。第四に、CのプログラムをCDFGに変換し、二つのCDFGを関数評価無しに等価性を判定する論理を用いて等価検証する方式の検討を行なった。今後は今回の設計データを用いながら、再構成可能向けの検証手法およびCDFGの等価検証手法の研究を発展させる。近年の高位合成技術の進歩により、C言語やJavaなどのプログラムを仕様として大規模なハードウェアを設計するという手法が普及しつつある。そこで本研究では、プログラムを仕様とするハードウェアの段計検証手法の確立を目的として、本年度は以下の研究を行なった。

まず第一は、高位での設計検証について、CのプログラムからControl Data Flow Graphを経て等価論理の式を生成する手法の研究を行い、生成された式を用いて、仕様となるハードウェアと設計されたハードウェアの等価性の検証を行った。式の生成の方法により、等価性判定の効率が大きく異なることがわかり、計算時間の点で効率の良い式を生成する方式の研究を行った。実際の大規模回路への適用は今後の課題である。第二に、高位設計で浮動小数点演算を固定小数点演算へ人手変換した場合の正当性の検証に関して、打ち切り誤差の解析に基づく手法を提案し、変換後の固定小数点数のビット幅が十分あるかどうかを上から抑える手法を提案した。とくに、演算の中間結果の各変数の打ち切り誤差について、Control Data Flow Graphの情報から非線形方程式を抽出し、それを非線形のソルバを用いて解く手法を適用して、最適解に近い結果が得られた。第三に、再構成可能ハードウェアを用いたエミュレーションによる、高位・大規模回路の機能検証について、ビットデータを高速に処理できる新しい演算回路を提案し、それを装備したプロセッサアーキテクチャの研究を行った。バレルイクスチェンジャと名付けたその演算回路により、32ビットデータの全置換の処理が、単なるプロセッサに比較して12倍の高速化になるという結果を得た。近年の高位合成技術の進歩により、C言語やJavaなどのプログラムを仕様として大規模なハードウェアを設計するという手法が普及しつつある。これに伴い、ハードウェアシステムの検証レベルが高度化し、高位レベル検証手法の開発が急務である。そこで本研究では、プログラムを仕様とするハードウェアの設計検証手法の確立を目的として、以下の研究を行なった。まず第一に、高位での設計検証について、CのプログラムからControl Data Flow Graphを経て等価論理の式を生成する手法の研究を行い、生成された式を用いて、仕様となるハードウェアと設計されたハードウェアの等価性の検証手法の提案を行った。式の生成の方法を最適化すると同時に、近年進歩の著しいSAT手法の適用について研究を行った。第二に、高位設計で浮動小数点演算を固定小数点演算へ人手変換した場合の正当性の検証に関して、誤差の解析に基づく手法を提案し、変換後の固定小数点数のビット幅が十分であることを上から抑える手法を提案した。とくに、変数の誤差評価問題を、Control Data Flow Graphの情報から非線形最適化問題に帰着し、非線形のソルバを用いて解く手法を提案した。さらに、正の誤差と負の誤差の導入、定数の誤差についての詳細な解析および、演算器の面積を評価式に入れる手法を用いることで、最適解に近い結果が得られることを示した。第三に、LSIの製造検証について、付加回路を加えて製造検証のためのパターン数を削減する手法の提案を行った。いくつかの回路に対して本手法を適用し、手法の有効性を示した。
三量体Gタンパク質G12/13を介した生理活性脂質の生体制御

A: LPA4-KOマウスの白色脂肪細胞におけるミトコンドリア(mt)について通常食を給餌したLPA4-KOマウスの精巣上体周囲白色脂肪組織(eWAT)において、mtの生合成関連遺伝子の発現が抑制されていた。そこで、eWATに含まれるmtDNAの量(核のDNA量で補正)を調べたところ、野生型マウスに比べLPA4-KOマウスで高かった。また、eWATに含まれるmtの機能(基礎酸素消費量率)はLPA4-KOの方が高かった。以上の結果は、LPA4-KOマウスの白色脂肪細胞において、mtの数と機能が亢進していることを示唆する。B:LPA4-KOマウスの表現型とアディポネクチン(Adipoq)についてLPA4-KOマウスで亢進するAdipoq産生を抑制したときの、LPA4-KOマウスの表現型に及ぼす影響をin vivoで検討した。Adipoq-KOマウスをLPA4-KOマウスと交配して二重KOマウスを作製した。通常食を給餌した二重KOマウス、LPA4-KOマウス、Adipoq-KOマウス、野生型マウスの計4群(30 g前後の体重)でeWAT重量(対体重比)、肝臓重量(対体重比)を調べた。過去の結果と矛盾なく、LPA4-KOマウスの血中Adipoq濃度は野生型マウスよりも高い値を示した。eWAT重量比・肝臓重量比はともに、LPA4-KOマウスで野生型マウスよりも低かった。また、LPA4-KOマウスと二重KOマウスの間に差は認められなかったことから、LPA4-KOマウスに対しAdipoqをKOしても影響はほとんどないと考えられた。なお、Adipoq-KOマウスのeWAT重量比と肝臓重量比は、野生型マウスと同等であった。以上の結果は、LPA4-KOマウスで観察される二つの代謝関連組織重量の比の低下が、Adipoq産生上昇非依存的に形成されることを示唆する。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。LPA4のG12/13に由来する細胞内シグナルが引き起こす「PPΑRγに対する機能抑制」の機序を明らかにするために、以下の実験を行った。マウス白色脂肪組織由来のRNAを使って、「脂肪細胞の成熟(脂肪生成)に寄与する遺伝子の群」の発現レベルをRT-PCR法で解析したところ、通常食摂餌(Chow)及び高脂肪食摂餌(HFD)とも野生型マウスに比べLPA4-KOマウスの方が多くの遺伝子で発現レベルが有意に高かった。さらに、白色脂肪組織由来のタンパク質をウェスタンブロッティング法で解析したところ、Chow・HFD両食餌条件でKOマウスの方がPPΑRγの112番目のセリンのリン酸化レベルが有意に低下していることが明らかとなった。このリン酸化はPPΑRγの機能を抑制する働きのあることが過去に報告されているが、実際白色脂肪組織における「PPΑRγリン酸化によって発現制御を受ける遺伝子群」の発現レベルをRT-PCR法で解析すると、Chow・HFD両食餌条件でKOマウスの方が多くの遺伝子で発現レベルが有意に上昇していた。次に、脂肪細胞に分化させたマウス間葉系C3H10T1/2細胞をLPA4選択的に刺激したところ、KOマウスの結果と矛盾なく「脂肪細胞の成熟(脂肪生成)に寄与する遺伝子の群」及び「PPΑRγリン酸化によって発現制御を受ける遺伝子群」の多くで発現レベルの有意な低下が認められた。以上の結果から、LPA4シグナルが白色脂肪組織のリモデリングを抑制すること、そしてその機序としてLPA4シグナルによる脂肪生成プログラムの直接阻害という現象が部分的に寄与することを示唆された。実験系の確立は順調であり、研究課題の達成に支障を来す問題は生じていない。今年度以降は、実験を繰り返し論文発表に向けてデータを蓄積する予定である。A:PPARγがLPA4-KOマウスの表現型へ寄与する度合いについてピオグリタゾンなどのPPARγアゴニストをマウスに投与すると、脂肪細胞のPPARγの機能を薬理学的に亢進させ、血中アディポネクチン濃度を上昇させることができる。本研究ではKubotaらの方法(Sci. Rep. 6, 34707 [2016])に従って、オリエンタル酵母社製マウス通常餌MFの粉末に重量比で0.02%の割合でピオグリタゾンを加え、これを個別飼育の野生型マウスとLPA4-KOマウスに1週間摂取させた。この措置によって、LPA4-KOマウスとWTマウスは同等のアディポネクチン濃度の上昇を示すことが明らかとなった。一方、ピオグリタゾン不含餌を摂取させた陰性対照群では、過去の結果と同様に、LPA4-KOマウスではWTマウスよりも血中アディポネクチン濃度は高かった。結果、ピオグリタゾンを摂取したLPA4-KOマウスの血中アディポネクチン濃度は、依然としてWTマウスよりも高い状態が維持されていた。以上の結果は、LPA4-KOマウスの脂肪細胞では、PPARγの活性化とは別のメカニズムでアディポネクチンの産生上昇が起きることを示唆している。