hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
マウスレトロウィルスー誘導免疫不全症候群(MAIDS)に於ける免疫異常の解析

MAIDSはマウスのレトロウィルスによって引きおこされる免疫不全症候群であり,AIDSと類似の症状を示す。我々は特にB細胞の多クロ-ン性活性化に着目し,その機序を解明することをめざした。C57BL/6マウスにLPーBM5マウス白血病ウィルスを感染させ,20週後にその血清中の免疫グロブリンを定量すると,5週目でIgMが約10倍となりその後しだいに減少した。一方IgAは20週後に著しく増加していた。これを裏づけるように表面にIgMを持つ細胞は,対照群56%に比して3%と1/10以下となり,逆にIgAを表面に持つ細胞は0.3%から5%へと10倍以上増加していた。我々はTGF_<ーβ>が表面IgA陰性細胞からIgA産生細胞への分化に関与していることを認めており,TGF_<ーβ>はIgA陽性細胞へのクラススイッチ因子として考えられる。そこでTGF_<ーβ>とB細胞増殖・分化因子として働くサイトカインのmRNAレベルを検討した。感染後20週の脾臓及びリンパ節からRNAを抽出し,逆転写酵素でcDNAとし,ILー2,ILー4,ILー5,ILー6,TGF_<ーβ>の各々のサイトカインに特異的なプライマ-の組み合わせを利用してPCRにより各々のmRNAレベルを検討してみたところ,脾臓,リンパ節共にTGF_<ーβ>mRNAの増加が認められた。またILーGmRNAの増加も認められた。従ってMAIDSにおけるIgA産生の増加はTGF_β産生の増加による可能性が示唆された。また我々は自己抗体産生に関与するといわれるCD5^+B細胞を欠くX染色体連鎖色疫不全マウス(C57BL/6xid)にLPーBM5を感染させ,多クロ-ン性免疫グロブリン産生が抑制されるかどうかを検討した。驚いたことにxidマウスはこのLPーBM5に感染せず,CD5^+B細胞がMAIDsウィルス自体の感染に重要な役割を果たしていることが予想された。CD5^+B細胞はILー5によって選択的に維持される細胞であり,MAIDSマウスにおいてはILー5受容溶発現細胞が消失していることも確認された。今後CD5^+B細胞のMAIDS感染と発症における役割を追求して,AIDSにおけるB細胞の役割について考察したいと思う。
海馬認知機能の比較心理学的研究

本研究は海馬認知機能を比較心理学的に解明することを目的として出発したものである。そのため、魚類、鳥類ラット、サル、ヒトの各研究チームを構成し、相互に連携をとりつつ研究を行った。魚類についてはモリス型迷路に相当するものを考案し、大脳背内側部に海馬と機能的に対応する部位を同定することができた。また、鳥類では海馬損傷が条件性弁別を阻害しないことを明らかにした。さらに、神軽毒による海馬内側部、海馬傍部、海馬全体の3種類の損傷を行い、空間弁別の形成は海馬全体の損傷においてのみ認められることを明にした。また、国外研究協力者であるH-J. Bischofとの共同研究では、キンカチョウの空間記憶における海馬機能を明らかにした。ラットではホーミング課題実験により、海馬損傷ラットの餌持ち帰り行動の失敗が観察された。また、イボテン酸による海馬CAIの選択的損傷がモリス水迷路での場所課題で障害を示すことが明らかとなった。サルでは脳虚血によるCAI損傷を行い、少数刺激セットでは見本合わせに障害が見られたが、多数刺激セットでは障害が見られず、海馬が刺激間の干渉作用を解決する機能を持つことが示唆された。ヒトでは海馬損傷患者が通常の短期記憶課題では顕著な障害を示さなかったのに対し,虚再認課題では成績の低下を示すことがわかった.この結果から,符号化時の文脈判断と意味処理に,海馬が関与する可能性が示唆された.これらの成果を踏まえて、国外から海馬研究者を招聘し、最終年度に慶應義塾大学でComparative study of hippocampal functionsという国際シンポジウムを行った。この成果は他のinvited authorsの原稿を含めてReviews in Neurosciencesの特集号として編纂作業が進んでおり、2005年中に出版される予定である。本年度は主として実験系の構築をサル、ラット、マウス、ハト、キンカチョウ、キンギョ用に行ったが、以下の実験的知見も得られた。鳥類についてはキンカチョウの空間学習形成後のイボテン酸局所注入による海馬損傷が学習保持を阻害しないことがわかった。また、ハトを用いた観察反応つき遅延交替反応では、遅延時間9秒においても海馬損傷後に良好な成績を得た。このことは、これまでの鳥類海馬が空間記憶作業記憶に関係しないという慶大研究室での鳥類海馬研究の知見と一致するものである。魚類については、従来の空間学習保持に対する大脳背内側部損傷の効果を確認するとともに学習穫得にも阻害効果があることが分かった。マウスでの研究では、視覚手掛りではなく、2個のスピーカーによる聴覚定位に基づく聴覚空間学習が可能であることがわかったが、海馬における視覚空間マップと聴覚空間マップの関係を解明するには至らなかった。なお、ヒトについても両側海馬損傷の患者について予備的な調査を行った。ハトでは海馬損傷が、哺乳類では障害が見られる条件性弁別を阻害しないことを明らかにした。さらに、神経毒による海馬内側部、海馬傍部、海馬全体の3種類の損傷を行い、連続空間弁別の形成は海馬全体の損傷においてのみ認められ、かつ、障害は新しい記憶の定着過程に生じ、課題探索過程には障害がないという機能乖離を明にした。このような乖離は基底核損傷の場合とは反対である。キンカチョウでは海馬損傷が空間記憶の獲得に関与し、保持には関係しないこともつきとめた。ラットでは、idiothetic情報を用いた空間情報処理と海馬の関係を、ラットが毎試行場所の異なるホームから出発し、餌を見つけ、ホームに持ち帰るホーミング課題実験によって明らかにしようとした。その結果、海馬損傷ラットの餌持ち帰り行動の失敗が観察された。

また、イボテン酸による海馬CA1の選択的損傷がモリス水迷路での場所課題で障害を示すことが明らかとなった。サルの研究では脳虚血によるCA1損傷を行い、少数刺激セットでは対象遅延見本合わせ、位置遅延見本合わせともに障害が見られたが、多数刺激セットでは障害が見られず、海馬が刺激間の干渉作用を解決する機能を持つことが示唆された。海馬損傷患者および健常者に記憶の検索能力を調べる課題を実施した.用いた課題は,虚再認パラダイムであり,200語程度の単語を学習させた後に,その再認を求め,符号化時の文脈判断と意味処理の能力を調べた.その結果,海馬損傷患者においては,通常の短期記憶課題では顕著な障害を示さなかったのに対し,虚再認課題では成績の低下を示した.この結果から,符号化時の文脈判断と意味処理に,海馬が関与する可能性が示唆された.また、側頭葉内側部に損傷のある健忘患者にビデオと言語教示による町並み、道順の記憶実験をおこなったところ、どちらの場合でも顕著な障害を示さなかった。1)鳥類ではキンカチョウにおいて海馬損傷が空間学習の獲得/維持の両方を阻害することを明らかにした。このことは魚類大脳背内側損傷の結果と一致する。キイの位置を条件にした条件性色弁別は海馬損傷によって損傷されず、このことは色を条件とした条件性位置弁別の結果と一致する。また、鳥類用のWCST類似の課題を開発し、海馬損傷が各課題学習成立までの試行数を増加させるという知見を得た。2)ラットでは昨年に続き、idiothetic情報を用いた空間情報処理と海馬の関係について餌をホームに持ち帰るホーミング実験により検討した。海馬損傷ラットは餌持ち帰り行動の失敗したが、頭頂葉損傷ラットには障害が見られなかった。allothetic情報処理と海馬の関係では、CA1損傷がモリス水迷路での手掛り課題ではなく場所課題に重篤な障害をもたらすことを明らかにした。3)サル海馬CA1野に順行性標識物質注入した結果、嗅内皮質へはもちろんのこと、嗅周皮質、後部海馬傍回、下部側頭回TE野腹側部および前頭葉内側部と眼窩部に直接投射がわかった。さらに新たな投射標的部位として上側頭溝底部が見出された。両価手がかり弁別課題の一つであるTransverse Patterning Problem(TPP)は、脳虚血サルにおいて障害が示されたが、ヒトではTPP課題と同時複式弁別課題および統制課題の単一弁別課題の遂行中の脳活動をfMRIで測定し、TPP課題遂行に海馬が特異的に活動していることがわかった。4)神経心理学的アプローチでは主に記憶を中心とする高次認知機能を調べるための課題を用いた.また,記憶リハビリテーションによるそれらの機能の回復についても検討した.その結果,健忘症状を伴う海馬損傷患者と伴わない海馬損傷患者で,通常の再認課題の成績だけでなく,他の指標にも大きな乖離が見られた.この結果は,記憶における海馬の機能の制約および他の神経基盤との分散性を示唆するものである.
ハイドロダイナミック遺伝子治療装置の制御パラメータ導出手法の開発

本研究は、物理的非ウイルスベクターによる遺伝子治療の臨床応用を目指し、大型動物における効率的かつ再現性の高い局所的ハイドロダイナミック遺伝子導入のための新規導入システムの安全性確立を目的とした。導入実験後のラット肝臓の形状を3D CADによるモデリング作業を経て、内部の血管も含むラット肝臓CADモデルを作成した。FEモデルを作成し、有限要素応力解析システムを用いて解析した。その結果、FEモデルの形状変化が、実験時の実際のラット肝臓の変形と定性的かつ定量的に一致したことから、肝臓内の応力状態の推定結果に基づき、適切な薬液導入圧力を与えられる制御パラメーターの決定が可能となることが示唆された。圧力履歴の再現性評価HGD原法は用手的な急速静注を適用しており、その結果、定量注入である。これに対し高圧ガスをエネルギー源とした定圧注入によるHGDでは、当然のことながら異なる圧力履歴が生成される。いかなる内圧プロファイルが局所的なHGDにおいて対容量的に導入効率の点で優れているのかを明らかにするために、改良する導入システムを用いて、両者の圧力履歴の再現し、ラットを対象として生理食塩水で希釈されたヨード造影剤を注入した監察結果に基づいて、透視下に溶液の広がりに関して画像学的な評価を行なうとともに、注入溶液量、心電図、血圧、呼吸数、動脈血酸素飽和度を連続的に監視し、数値シミュレーションと併せて評価した。本研究は、物理的非ウイルスベクターによる遺伝子治療の臨床応用を目指し、犬やブタ等の大型動物における効率的かつ再現性の高い、局所的ハイドロダイナミック遺伝子導入のための新規導入システムの安全性確立を目的とした。すなわち、Good Clinical Practice(GCP)に準拠した遺伝子導入機を開発するための、安全にシステム制御可能なアルゴリズムの確立、特に大型動物における適用に際し安全性を確保するための事前検討の環境として、その有用性の確認を行った。すなわち、ハイドロダイナミック遺伝子導入法の遺伝子導入機の試作機を用い、ラットにおける肝臓へのハイドロダイナミック遺伝子導入時の薬液浸透効果と安全性を検証した。すなわち、研究の推進に当たり、導入実験を行ったラット肝臓の形状を3Dスキャナー(VIVID910)で計測し、3D CADによるモデリング作業を経て、内部の血管も含むラット肝臓CADモデルを作成した。さらに、遺伝子導入時の肝臓変形を再現するFEモデルを作成し、有限要素応力解析システム(ABAQUS)を用いて、解析を行った。その結果、有限要素(FE)モデルの形状変化が、実験時の実際のラット肝臓の変形と、定性的かつ定量的に一致したことから、本モデルを用いて、肝臓内の血管等各組織に作用する応力を推定可能であることを示した。また、本手法を応用することで軟部組織のフィッティング作業を容易とすることについても示した。この結果、本シミュレーション環境を駆使することで、肝臓内の応力状態を推定することが可能となり、したがって、適切な薬液導入圧力を推定し、制御パラメーターを設定することが可能となる。すなわち、疾患モデル大動物と非ヒト霊長類を用いた臨床試験前段階への移行が可能になると共に、薬物の細胞内直接送達という新規分野開拓に寄与することが示唆された。1)注入局所脈管内圧プロファイル制御装置の改良肝臓を対象としたHGD法における理想的な加圧プロファイルは、マウスにおいて確立されている尾静脈からのHGD時に肝臓で生成される加圧プロファイルに類似したものと推測した。したがって制御装置には、局所注入の対象領域のボリュームが不明で、かつ予測不能の注入溶液量が対象領域から漏出するという条件下であっても、全身的なHGD時に生成される圧力プロファイルを注入局所に再現可能であることが要求される。これまでの試作機は、カテーテル内に挿入された圧力センサからの出力値に基づき、制御回路により電動アクチュエータを的確に駆動し、臨床使用される耐圧シリンジ、既存の耐圧チューブ等を介して局所注入を実現している。本年度は、体重60kgの1%に相当する600mlを許容最大注入量と仮定し、臨床応用を鑑みて大型動物に対応可能な150ml耐圧シリンジ4本を用いる装置に改良した。2)注入部形態計測装置の試作と3次元力学的シミュレーション超音波映像装置により、注入対象となる臓器を非侵襲で形態計測可能な環境を構築した。さらに、本装置を用いた外部からの圧迫荷重に対する変形挙動観察の他に、注入部位組織切片を力学的評価を目指した。すなわち,血管を含む3次元モデリングを行い、これに前出の圧迫荷重が作用した際の変形挙動監察結果と数値シミュレーション結果を比較し、解析モデルの妥当性を評価する環境を構築した.当初計画通りに研究を推進している。すなわち、二年目にあたる今年度において、「研究実績の概要」に記したように、圧力履歴の再現性評価に関する研究を行った。結果については、日本機械学会が主催する講演会において2回にわたり講演発表した。

このような観点から、おおむね順調に進展している。年度当初において,震災の影響により,研究費執行が計画通りに行うことが困難であったことから,超音波映像装置と3次元磁気センサから構成される3次元超音波スキャナーの構築を次年度に行うこととした.このため,「注入部形態計測装置の試作と3次元力学的シミュレーション」については,超音波映像装置単独で可能な範囲の組織形状観察とモデリングならび解析の環境整備を図ることとした.一方,「注入局所脈管内圧プロファイル制御装置の改良」については,当初予定以上の進展を図り,具体的には,臨床応用を目指した大型動物に対応可能な150ml耐圧シリンジ4本を用いる装置への改良のみならず,一部,実験実施に着手した.最適な圧力履歴の検討肝臓は肝静脈と門脈という2系統の独立した低圧系を有しており、豊富な脈管間交通と相俟って、注入溶液が容易に対象領域外へ漏出する。一方、肝静脈、下大静脈と門脈を一時的であっても同時に閉塞した場合、全身循環動態に与える影響は無視し得ない。下大静脈への漏出は、注入カテーテルおよびバルーンの閉塞位置が移動と、静脈径の拡大による閉塞効果の減少が推察される。よって、注入初期から急速注入を行うことは不利と考えられるため、同図中に示す複数のシグモイド波形内圧プロファイルに関して、注入溶液量と全身循環動態への影響を評価し、数値シミュレーションと併せて、必要な内圧上昇を得るのに最も循環動態への影響が少ない圧力履歴を選別・検討し、導入システムの最適制御パラメータの導出手法を確立する。1)圧力履歴の再現性評価HGD原法は用手的な急速静注を適用しており、その結果、定量注入である。これに対し高圧ガスをエネルギー源とした定圧注入によるHGDでは、当然のことながら異なる圧力履歴が生成される。いかなる内圧プロファイルが局所的なHGDにおいて対容量的に導入効率の点で優れているのかを明らかにするために、改良する導入システムを用いて、両者の圧力履歴の再現し、ブタ等を対象として生理食塩水で希釈されたヨード造影剤を注入し、透視下に溶液の広がりに関して画像学的な評価を行なうとともに、注入溶液量、心電図、血圧、呼吸数、動脈血酸素飽和度を連続的に監視し、数値シミュレーションと併せて評価する。2)最適な圧力履歴の検討肝臓は肝静脈と門脈という2系統の独立した低圧系を有しており、豊富な脈管間交通と相俟って、注入溶液が容易に対象領域外へ漏出する。
過疎と災害にresilientな妊産婦支援ネットワークの構築のための基盤的研究

1平成27年度に行った妊産婦用防災ガイドブック評価を活かしてガイドブック(案)を作成し、宮城県石巻市でNPO法人ベビースマイル石巻の協力により妊産婦に対して数回試行した。それをもとに電子ファイル版(案)を作成した。2妊婦を含む防災における多様性の配慮のため、文献研究を行い、「自然災害と人々の多様性の尊重」を共著『教育福祉学の挑戦』(せせらぎ出版)に収録し出版した。3平成27年度に「東日本大震災研究交流会」で行った報告(『第2回東日本大震災研究交流会報告書』として平成28年度に刊行)を英訳し、申請者のホームページ(http://www.tama-seminar.jp/)にアップロードした。1石巻市調査(2月)により子育て支援NPOの参与観察と今後の調査予定、平成26年度秋の共催予定のセミナー企画を打ち合わせた。参与観察と聞き取り調査は平成26年度も続け、世界社会学会大会(7月)で報告予定である。2日本女性学会大会(6月)および日本家族社会学会大会(9月)の災害にかかるシンポジウムに参加し、兵庫県の被災妊婦支援NPO代表と懇談、3月のセミナー開催について打ち合わせ。大阪府でのセミナー(3月、大阪府堺市との共催)により、岩手・兵庫、および東京(ネット利用)の子育て支援NPOを招聘し今後の妊産婦支援体制について市民と行政ともに知見を深めネットワークを形成した。3奈良県十津川村調査(2月)により妊産婦の水害被害聞き取り、および行政聞き取りを行い、石巻市の災害との大きな違いを学んだ。4「自然災害時の妊産婦のニーズと支援体制」『女性史学』23、43ー49。提言「妊娠から歴史を考える」『歴史学研究』916:27ー31。研究報告「災害時における妊産婦ケア」関西大学・大阪府立大学・大阪市立大学連携事業『震災における支援活動と防災・減災』、平成25年7月6日。5米国社会学会(8月)においてジェンダーと災害関連の部会に参加。その他関連文献を収集し、海外の災害とジェンダーに関する先行研究に学ぶとともに、日本での応用可能性について検討した。この内容は平成26年度に研究論文としてまとめる予定である。東日本大震災の被災地である宮城県石巻市において当事者NPO『ベビースマイル石巻』に妊産婦支援体制に関するインタビューを重ねた。またこのNPO・行政・災害時の医療拠点となる石巻日赤病院、地域の民間医療機関、当事者(被災妊婦2人)等と連携し、10月にシンポジウム『ママと赤ちゃんの復興・まちづくりin石巻』を開催し、今後の妊産婦支援体制づくりの課題について協議した。このシンポジウムは報告書を刊行し、電子ファイルを公開した。なお、英語版(一部略)を作成中である。当初の計画と比較すると、(1)他地域でヒアリングが実施できていない。しかし(2)石巻市においては研究が進み、ヒアリングに加えて最終年度に予定していたシンポジウム開催を先行できた。この変更は、石巻市に関しては当事者NPOおよび関係者・行政との協議の結果であり、被災地の実情に沿ったものになった結果である。このシンポジウム企画まで、パネラー(すべて石巻市民で被災妊産婦支援に関わった人々)相互が出会ったことがない場合が複数あり、また石巻市における災害と妊産婦支援体制について一同に会したことがなかった。このことから、災害から4年後においても、被災地においては妊産婦にかかわる災害と支援について独自に協議することが困難であることがわかる。パネラーは皆、このシンポジウムが妊産婦と被災、および今後の復興と防災を考える初めての機会であったと述べていた。研究者が科研費等により被災地に入ることの意義が感じられる。その後、石巻市主催の3月14日防災シンポジウムには当NPOがパネラーとなって、復興まちづくりに妊産婦の視点を入れるべきことを述べ、他大学研究者が提案する妊産婦避難所、他地域NPOとの連携による支援取り組みの導入など、数か月間に進展があった。宮城県石巻市をフィールドとし、NPO法人ベビースマイル石巻を中心とした支援ネットワーク構築に2方向から取り組んだ。ベビースマイル石巻は、妊娠中の母親支援と防災を視野に入れている、希少な存在である。第一に、平成26年秋に石巻市で開催したシンポジウム「ママと赤ちゃんの復興・まちづくりin石巻」を承けネットワーク構築のための会議を数回開催した。構想は、東北大学菅原準一教授が構想する「周産期医療における災害対応ー東日本大震災の経験から」(第4回周産期医療体制のあり方に関する検討会、H28.2.3)のなかで示された「妊婦・乳児・家族」を取り巻く環境として妊婦中心に地域社会ネットワークを描く。それによって平時の地域での関係性を強化し、災害時には妊婦が必要とする情報と物資をワンストップで解決していくことを目的とする。これについて、石巻市役所の関係部署とも懇談できたが、ネットワーク構築までに幾つかの課題が明らかになった。第二に、別の科研費(代表山地久美子「復興・防災まちづくりとジェンダー」基盤研究(B))によってNPO法人ベビースマイル石巻に委託していた業務として、防災・減災ガイドのチェックがあった。それによって明らかになったことは、妊婦の平時のつながりや防災・減災力を向上させる内容は、現存のガイドブックには少ないということである。この結果を活かし、当事者である母親(そして父親を含む家族)たち自身が作る「防災×マタニティ・子育てマップ」を構想することになった。本科研では、この結果を活かし、ネットワーク構築のツールにして、防災教育を地域で実践するという方法を検討することになった。

研究成果は、平成28年3月14日「東日本大震災研究交流会」および同月26日「神戸大学RCUSSオープンゼミナール」において公開した。またスウェーデン研究者と妊産婦・女性支援システムの構築について研究交流を行った。科研代表者が役職に就き非常に多忙となったため、採択期間中(および継続の平成28年度)に研究の進捗が遅れた。また、被災地である石巻市の現況によっても、復興・防災の取組みがなかなか困難であると思われる。最終年度である平成28年度には、1平成27年度に行った妊産婦用防災ガイドブック評価を活かしてガイドブック(案)を作成し、宮城県石巻市でNPO法人ベビースマイル石巻の協力により妊産婦に対して数回試行した。それをもとに電子ファイル版(案)を作成した。2妊婦を含む防災における多様性の配慮のため、文献研究を行い、「自然災害と人々の多様性の尊重」を共著『教育福祉学の挑戦』(せせらぎ出版)に収録し出版した。3平成27年度に「東日本大震災研究交流会」で行った報告(『第2回東日本大震災研究交流会報告書』として平成28年度に刊行)を英訳し、申請者のホームページ(http://www.tama-seminar.jp/)にアップロードした。以上の今年度の成果、および平成25年度から27年度の研究成果(奈良県十津川村調査、岩手県花巻市調査、宮城県石巻調査、および文献調査)を通じて、以下の結論を得た。防災/減災教育を不可欠の要素とする平時の妊産婦支援ネットワークの形成を早急に、市民組織の活動と自治体行政の全庁的連携支援のもとで行うことの必要性が確認された。今後、その取組を行う際には、阪神・淡路大震災や東日本大震災後に調査で明らかにされた妊産婦特有のニーズを重要な柱として充足できるよう設計すること、そして原則として自助が肝要であることから妊産婦自身のエンパワメントをこれと並行して目的とする防災/減災教育を実現すること、以上の2点が必須の課題である。なお、避難先として遠隔地に母子避難所を開設することについて、家族から離れて避難する妊産婦の心理的なストレスへのケアが必要であることが分かった。開設者の受入準備体制においてこれを考慮すべきである。また、過疎地における妊産婦支援ネットワークは、平時の当事者同士による構築が非常に困難であり、これを克服することは今後の検討課題となる。1平成27年度に行った妊産婦用防災ガイドブック評価を活かしてガイドブック(案)を作成し、宮城県石巻市でNPO法人ベビースマイル石巻の協力により妊産婦に対して数回試行した。
新たな溺死診断手法の開発に関する研究

本研究は、溺死体の血液などから藍藻類が産生する毒素ミクロシスチンを検出して、適正な死因究明を行う新たな溺死診断方法の開発を目的とした研究である。溺死は、溺水時に生存していたか否かの判断が重要であるため、古くから溺死診断には、溺水に混入している珪藻類のプランクトンを検出する検査が行われてきた。これは生存していれば溺水とともに体内に入ったプランクトンが肺臓から血液を経由して肝臓などの臓器に達するため、臓器内のプランクトンの有無を確認する方法である。一般的には、強酸で臓器を溶解して残渣を検鏡し、確認する壊機法が行われている。ところが壊機法は、安全面、環境面、設備面などに大きな問題があることから、これに代わる方法が模索されている。そこで湖沼などに発生する「アオコ」といわれる藍藻類が産生する毒素ミクロシスチンに着目した。ミクロシスチンは、高速液体クロマトグラフィーで検出が可能であることから、溺死体内からミクロシスチンを検出して溺死診断を行う方法について検討した。まずミクロシスチン解析システムを構築した。さらに、諏訪湖岸の定点から採水してミクロシスチン解析システムで検出を行ったところ検出が可能であり、溺水から検出する有効性を確認することができた。さらに過去5年間に当教室で施行した司法解剖から溺死体66体の血液、臓器、溺水についてミクロシスチンの検出と壊機法による珪藻類のプランクトンの検出を行ったところ、珪藻類のプランクトンは確認できたがミクロシスチンは検出できなかった。溺水は数十倍から数百倍に濃縮できることから検出可能であるが、採取血液などは少量のため濃縮できず、検出限界以下であることが要因のひとつと考えられる。引き続き低濃度でも対応できる高感度のシステム構築などの検討を続けているところである。溺死は、溺水時に生存していたか否かの判断が重要になっている。そのため、溺死体の臓器からプランクトン(珪藻類)の検出・検査をする壊機法が一般的に行われている。しかし壊機法は、設備面、安全面、環境面などに大きな問題点があることから、これに代わる方法が模索されている。本研究では、湖沼、河川で発見となった溺死体の血液などから、溺水中に含まれているミクロシスチンという「アオコ(藍藻類)」によって生産される代表的な毒素を検出して溺死診断を行ない、短時間で適正、確実な死因究明の一手段として活用することを目的としている。本研究は、1分析方法の確立、2過去の法医解剖で取り扱った溺死体の血液、臓器等の分析、3試料と対照水との濃度分布による相関、4従来から実施している壊機法によるプランクトン検出結果との比較、5ミクロシスチンの濃度による死亡時季、死亡場所の推定、を実施する。ミクロシスチンは、極低濃度で分布しているため、通常よりも高感度の分析・解析をする技術が必要であり、平成29年度は、ミクロシスチンの分析方法を確立するために、分析機器の選定、メソッドの構築、前処理方法の選択等を繰り返して慎重に測定方法を検討してきた。その結果、高速液体クロマトグラフ(HPLC)を使用して、検出器は簡便で高効率なフォトダイオードアレイ吸光度検出器(PDA)よりもタンデム質量分析計(MS/MS)が適しており、メソッドと試料の前処理は、法医解剖の薬毒物検査で日頃使用しているメソッドをそのまま使用して、前処理は固相抽出法(Oasys HLB)、QuEChERS法が最適であることが判明してきた。溺死体は、死後変化を受けた多種類の試料が対象であることから、ミクロシスチンの分布についても明らかにするための定量分析が必要であり、今後バリデーションを行って信頼性のある測定値を評価したのちに分析へと進んでいくところである。当初の予定では、分析方法を確立して過去の法医解剖で取り扱った溺死体の血液、臓器等の分析を進めていくところであるが、血液などの試料中に含有するミクロシスチンは検出限界付近での存在が多いためバリデーションがとりづらく、難航していることからやや遅れていると判断した。信頼できる測定値が確認できたところで、次の測定に進んでいく。

さらに過去5年間に当教室で施行した司法解剖から溺死体66体の血液、臓器、溺水についてミクロシスチンの検出と壊機法による珪藻類のプランクトンの検出を行ったところ、珪藻類のプランクトンは確認できたがミクロシスチンは検出できなかった。溺水は数十倍から数百倍に濃縮できることから検出可能であるが、採取血液などは少量のため濃縮できず、検出限界以下であることが要因のひとつと考えられる。引き続き低濃度でも対応できる高感度のシステム構築などの検討を続けているところである。今後は、予定どおり過去の法医解剖で取り扱った溺死体の血液、臓器等の分析、対照水の分析などを進め、溺死体とミクロシスチンの関連性について検討するとともに、濃度分布、すでに実施した壊機法によるプランクトン検出結果との比較など、広く死因究明の一手段として活用できるかについて検討していく。
インターロイキン２７による慢性炎症の抑制と糖尿病発症機序の解明

インターロイキン27(IL-27)は免疫抑制作用を示すサイトカインであり、糖尿病の発症に関与していると報告されている。インスリン抵抗性にIL-27が関与するかを検討するために通常マウス、IL-27受容体ノックアウト(il27raKO)マウスに高脂肪食を投与したところ、IL27RAKOマウスでは著明な高インスリン血症、耐糖能異常が惹起された。肝臓において炎症性サイトカインの上昇を認めた。Il27raKOマウスでは、高脂肪食負荷後の非常に早い時期からインスリン抵抗性が生じることが認められた。抗生剤投与によりインスリン抵抗性が改善し、腸内細菌叢も変化していたことより腸内細菌叢の関与が示唆された。インターロイキン27(IL-27)は免疫抑制作用を示すサイトカインであり、近年糖尿病の発症にも関与していることが示されている。IL-27が膵島炎や糖尿病の発症を抑制するという報告がされており、インスリン抵抗性についてもIL-27が関与するかを現在検討している。通常マウス、WSX1KOマウス、EBI3KOマウスに高脂肪食負荷を16週間行った。高脂肪食負荷前の検討ではこれらのマウスにインスリン抵抗性の差異は認められなかったものの、高脂肪食負荷後4週に、WSX1KOマウスでは著明な高インスリン血症が惹起された。RT-PCRにて高脂肪食負荷16週後の各臓器の遺伝子発現を解析したところ、肝臓においてIL-1b, IL-6, MCP1などのサイトカインの上昇を認めた。また、各臓器の。そこで、早期の変化を比較検討するために、高脂肪食負荷を行い、1週ごとに随時血糖とインスリン値を計測した。その結果、WSX1KOマウスでは、高脂肪食負荷を行った1週後よりインスリン値が上昇し、徐々にその差が開くことが観察されたことより、高脂肪食負荷後の非常に早い時期からインスリン抵抗性が生じることが認められた。現在、早期のインスリン抵抗性発症のメカニズムを解析しているところである。IL-27が膵島炎や糖尿病の発症を抑制するという報告がされており、インスリン抵抗性についてもIL-27が関与するかを検討した。通常マウス、IL-27受容体ノックアウト(il27raKO)マウスに高脂肪食負荷を16週間行った。高脂肪食負荷前の検討ではこれらのマウスにインスリン抵抗性の差異は認められなかったものの、高脂肪食負荷後4週に、il27raKOマウスでは著明な高インスリン血症が、高脂肪食負荷後16週には高インスリン血症のみならず、高血糖が惹起された。その結果、il27raKOマウスでは、高脂肪食負荷を行った1週後よりインスリン値が上昇し、徐々にその差が開くことが観察されたことより、高脂肪食負荷後の非常に早い時期からインスリン抵抗性が生じることが認められた。早期のインスリン抵抗性は腸内細菌の変化によるものではないかと考え、抗生剤投与実験を行った。抗生剤投与により耐糖能異常は改善された。また、腸内細菌叢を解析したところ、腸内細菌群の変化が認められたことより、腸内細菌が腸管免疫を介してインスリン抵抗性を惹起した可能性が考えられた。発現解析にてil27raは高脂肪食負荷にて主に大腸で発現が上昇していた。また、免疫染色を行ったところ、il27raは大腸の粘膜や粘膜下層に発現し、高脂肪食負荷にて発現が増加していた。現在、アデノウイルスベクターを作製し、経肛門的投与を行っている。糖尿病研究の目的は、1)IL-27の作用を抑制することでインスリン抵抗性が生じることは、IL-1bなど他の炎症性サイトカインが関与している可能性、2)WSX1KOマウスによりインスリン抵抗性が生じるのは、骨髄由来細胞以外である可能性、3)IL-27受容体を活性化する物質があれば糖尿病の新しい治療法が確立できる可能性である。1)に関しては、すでに実証しており、現在、肝臓以外の臓器についても探索をしているところである。また、2)に関しては、骨髄移植を行っている。WSX1KOマウスは骨髄移植後の感染症に弱く、第1群では体重減少が激しかった。

そのため、抗生剤などの条件を改善し、また、移植後に体重が回復するまで時間をおくこととしたため、やや解析が遅れている。また、インスリンクランプ試験を行い、肝臓や筋肉の糖新生や糖の取り込みを解析している。3)に関しては、まずは、アデノウイルスベクターでの発現実験を行う予定としている。現在、骨髄移植を行ったマウスに対し高脂肪食負荷を行っており、その随時血糖とインスリン値の変化を観察している。今後、このマウスに対し、ブドウ糖負荷試験、インスリン負荷試験を行う予定としている。また、アデノウイルスベクターにIL-27の構成タンパク質であるEBI-3、IL27p28をアンカーで結合した結合タンパク質を発現させるアデノウイルスと、WSX1を発現させるアデノウイルスを作成し、高脂肪食負荷をしたマウスに投与する。標的臓器を検索するため、インスリンクランプ試験を予定している。高脂肪食を行ったマウスのDEXA解析により全身の脂肪含量を行う。また、各臓器重量を計測予定である。平成25年度の実験で、早期にインスリン抵抗性を生じることが示されたことより、今後、そのメカニズムを解明するために、骨髄移植、インスリンクランプ試験を行う。また、IL-27は腸炎を生じることも報告されており、腸管の炎症や、腸管細菌叢の変化を含め、全身検索を行う予定としている。
超高分解能暗視野STEMを用いた非晶質半導体の金属媒介結晶化の原子直視的研究

太陽電池に代表されるように、非晶質半導体に最近注目が集まっている。結晶性半導体と金属との間に“シリサイド問題′′があるのと同様、非晶質半導体とそれに接する金属の間にも“金属媒介の低温結晶化′′という問題がある。この問題は非晶質半導体からの導線の接触抵抗の変化という実用的な面のみならず、非晶質→結晶質への相変態という観点からも興味深い問題を提供する。しかしこれまでの研究では結晶化がおこる界面の1個1個の原子の動きを追跡していないため、明確な結論が得られていなかった。本研究では、大角度散乱電子検出暗視野走査透過電子顕微鏡法(HAADF-STEM)を用いて、金属に媒介された非晶質→結晶相変態を1個の原子レベルで追跡し、相変態のメカニズムを明らかにすることを目標にする。上記の目標を達成するために平成10年度行ったことは、(1)a-Si-V、a-Si-Ti半導体-金属スパッタリング膜の作製とそのHAADF-STEM観察、および(2)超高真空蒸着法によるAu/a-Ge/MgO試料の作製と昇温による結晶化の原子直視TEM観察である。まず(1)については、非晶質半導体を動的に暗視野像観察する準備として、米国オークリッジ国立研究所の300kVの加速電圧のHAADF-STEM装置を使用し、非晶質Si中のVクラスターの可視化とそれを用いてのSi-V膜の金属-絶縁体相転移のメカニズムの解明を行った(2)については非晶質半導体の金属媒介結晶化の研究のために、a-GeをAuクラスターの存在下で昇温によって結晶化させ、その過程をTEMで原子直視動的観察した。その結果、80°Cで結晶化が始まり、Geの結晶化領域はD=1.6程度のフラクタル図形で示し、最終的にAu_4Geとc-Geからなるきのこ状の粒子ができることを確認した。
嫌気性菌による有用物質生産のための高度な発酵制御法

Zymomonas mobilisを用いるエタノールの連続発酵プロセスにおいて、degital balanceを用いるコンピュータ制御では、pH dependent法による基質フィードにおいて残糖を低く保つことはできなかった。しかし、大きなdilution rateを設定できれば、培養液における希釈効果が大きくなり、product inhibitionが軽減することがはっきりと認められた。そこで、大きなdilution rateを保ちながら残糖濃度も低く維持できるようなシステムの構築をめざすことにした。hollow fiber moduleによるcell recyclingを組み込み、高密度培養を行ってこの目的を達成することができた。菌濃度約5g/lhにおいて残糖濃度約0.9g/lhを維持しながら26g/lhという極めて高い生産性が達成された。今までZymomonas mobilisの連続発酵プロセスの生産性は、包括固定化法によって得られた18g/lhが最高値である。従って、今回の記録は世界最高となる。従来の評価法では、包括固定化法は固定化がコスト高である上、包括固定化された菌体の活性持続や新しい菌との入れ替えが制御できない難点があるとされていた。Zymomonas mobilisは低い菌濃度で高いエタノール生産性が得られる特徴があり、cell suspensionによる発酵法でも菌体生産のための基質ロスは微量ですむ。このように、Zymomonas mobilisは細胞を固定化せず、常に活性の高いfreshな菌で連続培養を行い、しかもシステムを高い安定性とすくない基質流出に制御できることが可能なことが示された。このシステムは安価な原料を確保できれば、実用化可能な有望なbiofuel生産法である。乳酸菌Lctococcus lactis IO-1によるL-乳酸発酵の連続発酵の制御法に関して検討した。L-乳酸発酵はエタノール発酵同様厳しい最終生産物阻害を受ける。従って培養液のL-乳酸濃度はできる限り低くする必要がある。そのため、我々は培養中に培養液に乳酸を電気透析によって除去しながら培養する電気透析培養法を検討し、その効果大なることを明らかにしてきた。一方我々は、嫌気性菌の連続発酵法は好気性菌と異なる別の理論に基づく必要があることも明らかにしてきた。その結果、嫌気性菌の連続基質フィードでは、pH上下限制御法であるpH-dependent feed法が最も有効であることを見いだした。さらに生産性を上げる目的で、レーザー濁度計を用いたturbidity control法によって菌濃度を高め、高い菌濃度による連続発酵を試みた。この方法では菌濃度の上昇に伴ってdilution rateの上昇が起こり、それによって(大きなDが得られることにより)乳酸濃度が低下して阻害が低減して大きな生産性が得られることを見いだした。これにより、電気透析培養を行わずに十分それに匹敵する生産性を得ることができることを確認した。されに現在キシロース乳酸発酵において、同様の理論で連続培養できるかどうか検討している。一方、エタノール発酵細菌Zymomonas mobilisにおける連続基質フィードによる実験系で嫌気性菌連続培養の制御理論を明確にするための実験を行った。すなわち、嫌気性菌の増殖では基質資化にともなう定量的プロトン変化が観察されるべきことから、プロトン変化の積算値を培養液糖濃度管理と基質フィードの制御パラメータに使用する制御法の開発を試み、成功させた。その成果は1996年アメリカ化学会春期大会で発表する。高速、有効率型L-乳酸発酵の開発の一環として、キシロースを糖源とする乳酸発酵へce11-recycling turbidity control pHdependentfeed法の適用を試みた。用いた菌はLactococcus lactis 10-1で、turbidity controlはレーザー濁度計による方法を用いた。キシロースを糖源とする場合でも、グルコースを糖源とする場合同様、pH dependent feedでpH設定差を小さくするほど生産性が大きくなった。

また、電気透析培養などで阻害物質を透析外液として除去することも効果はあるが、Cell-recyclingによって薗濃度を高め、turbidity controlで高密度を維持することによってdilution rateを大きくし、希釈効果で生産物阻害を軽減することがより大きな効果をあげることが確認された。同じく嫌気性菌のZymomonas mobilisによるエタノール発酵では、昨年糖消費にともなうプロトン変化があることを利用する連続基質制御法として、電子天秤を用いるアルカリフィード量と糖フィード量および流出培養液量を制御するシステムを開発した。しかしこの方法では培養液の糖濃度を制御することができない。とくに、dilution rateを大きくとって、乳酸発酵と同様希釈効果を大きくし、生産性の大きな培養を行うには培養液糖濃度の厳密な制御が必要である。そこで、自動糖分析計によるフィードバックコントロールで培養液の糖濃度を制御する培養法を試みた。Biott社製の透析型グルコース分析計は嫌気性菌の培養液でも正しく糖を分析することができた。この分析計を用いる連続フィードシステムで、エタノール生産性20g/1hという世界最高の値を得た。これは従来最高とされていた包括固定化法の値よりも高い生産性である。Zymomonas mobilisを用いるエタノールの連続発酵プロセスにおいて、degital balanceを用いるコンピュータ制御では、pH dependent法による基質フィードにおいて残糖を低く保つことはできなかった。しかし、大きなdilution rateを設定できれば、培養液における希釈効果が大きくなり、product inhibitionが軽減することがはっきりと認められた。そこで、大きなdilution rateを保ちながら残糖濃度も低く維持できるようなシステムの構築をめざすことにした。hollow fiber moduleによるcell recyclingを組み込み、高密度培養を行ってこの目的を達成することができた。菌濃度約5g/lhにおいて残糖濃度約0.9g/lhを維持しながら26g/lhという極めて高い生産性が達成された。今までZymomonas mobilisの連続発酵プロセスの生産性は、包括固定化法によって得られた18g/lhが最高値である。従って、今回の記録は世界最高となる。従来の評価法では、包括固定化法は固定化がコスト高である上、包括固定化された菌体の活性持続や新しい菌との入れ替えが制御できない難点があるとされていた。Zymomonas mobilisは低い菌濃度で高いエタノール生産性が得られる特徴があり、cell suspensionによる発酵法でも菌体生産のための基質ロスは微量ですむ。
実世界を行動するエージェントの空間認識能力と行動決定則の同時学習

本年度は、初年度の成果である空間の知識を持たないロボットに動作を教える手法「PFoE」について、手法自体や用途を拡げる研究を行った。他、昨年度の成果を国際学会であるIEEE International Conference on Robotics and Automation(5月。オーストラリア、ブリスベン)において発表した。本年度の取り組みとしては、具体的には、1:ロボットにセンサ特性の事前知識を持たせずに動作を教えることを可能にする方法の考案、2:現行の移動ロボットでよく用いられるセンサである2次元、3次元のレーザスキャナとPFoEを組み合わせ、より複雑なタスクの教示を可能とする方法の考案に取り組んだ。1については、ロボットに動作を教えているときに得られたセンサデータから機械学習の方法を使ってセンサの特性を得る手法を考案し、査読付きの国内学会(第24回ロボティクスシンポジア)において発表を行った。2については未だ良い方法が得られず、継続して研究中である。昨年度の実験では4つの距離センサから4つの値をロボットへのセンサ入力として、これを行動決定のための情報としていたが、レーザスキャナでは値が100を超える。そのため、計算量の面での工夫が必要となる。また、センサの解像度が高くなると、PFoE中でのセンサ値同士の比較のときに、どうなれば似ていて、どうなれば似ていないか、を数値化することが難しくなる。これらの問題を解決できそうな比較の計算式を実装して評価したが、良好な結果は得られていない。当初の研究計画では、アルゴリズムの改良とともに「哺乳類の脳との比較」など学術的な研究を行うとしていたが、開発したPFoEが細かいチューニングをしなくてもロバストに実機で機能したので、より実用に向けた研究にシフトしている。その中で、少しずつPFoEの改良が進んでいるが、難しいタスクやより広範囲を移動する動作の教示のためには新しいアイデアが必要であり、模索していた一年であった。昨年度の成果が良好であったため全体としては進捗しているが、本年度はこのような状況であるので評価区分を一つ下げた。PFoEをより難しいタスクに適用できる方法を粘り強く探っていく。教示される動作がどのような構成要素から成り立つのかを考え、部分的な動作に分解する手法を考案し、ロボットが分脈に応じた動作を取れるようなアルゴリズムを考案する。部分的な動作が何であるか、という隠れた情報を推論するベイズ的なアプローチが有効であると考えている。また、他の手法(主に人工ニューラルネットワークを使うもの)との比較実験を行う。本研究はロボットで別々に扱われることが多い空間認識技術と学習技術を「記憶」をキーワードに統合し、新たなアルゴリズムを考案することを目的としている。平成29年度の計画では、ロボットが得たセンサ情報と実際に行った行動を記録した「記憶」に対して、記憶中の各部分と空間中の特徴を対応づける研究を行う予定を立てた。平成29年度、実際に得られた成果は1)「教示のためのエピソード上のパーティクルフィルタ(教示のためのPFoE)」の実装と実験による有効性の確認、2)教示のためのPFoEで使う「記憶」のグループ化(クラスタリング)機能の実装と有効性の確認であった。1)の「教示のためのPFoE」は当初計画になかったものであるが、これによって、ロボットが自身のタスクと空間に対する知識を同時に学習する際の学習効率を大幅に向上させることが可能となった。本手法によって、マイクロマウス型のロボットが、ゲームコントローラで教示されたいくつかの動きを再現することを確認している。2)については、1)で作成した「教示のためのPFoE」に、記憶をクラスタリングするアルゴリズムを追加することで、ロボットがタスク中に、自身がタスクのどの段階にいるのかを認識できるようにした。また、この認識結果を使って、ロボットがタスク中に必要な行動をショートカットする問題を緩和することに成功した。当初計画していなかった「教示のためのPFoE」が得られたことにより、ロボットが、空間の知識を持たない状況からの行動学習が容易になった。これにより、ロボットに与えるタスクのレベルが向上し、平成29年度内はシミュレーションのみでアルゴリズムを考案、検証する予定であったが、実機において学習しながら空間の知識を得ていくという過程を一部実現できた。また、予定していた2件の国内学会における発表を前倒しで行えた。さらに、採択されることが難しいことで知られるIEEE ICRAに採択された。

また、センサの解像度が高くなると、PFoE中でのセンサ値同士の比較のときに、どうなれば似ていて、どうなれば似ていないか、を数値化することが難しくなる。これらの問題を解決できそうな比較の計算式を実装して評価したが、良好な結果は得られていない。当初の研究計画では、アルゴリズムの改良とともに「哺乳類の脳との比較」など学術的な研究を行うとしていたが、開発したPFoEが細かいチューニングをしなくてもロバストに実機で機能したので、より実用に向けた研究にシフトしている。その中で、少しずつPFoEの改良が進んでいるが、難しいタスクやより広範囲を移動する動作の教示のためには新しいアイデアが必要であり、模索していた一年であった。昨年度の成果が良好であったため全体としては進捗しているが、本年度はこのような状況であるので評価区分を一つ下げた。平成29年度の成果についてより詳細な実験を行って投稿論文にまとめると同時に、PFoEで可能となるタスクの高度化と、より多くのタスク、ロボットに対するPFoEの適用を行っていく。当初計画で予定していた屋外移動ロボット(i-Cart mini)の他、マニピュレータ等への適用を検討する。PFoEでできるタスクを高度化するために、教示で得られた記憶から環境の地図生成を行い、その上でタスクを達成するための行動則を獲得する手法を考案し、実機実験を行う。PFoEをより難しいタスクに適用できる方法を粘り強く探っていく。教示される動作がどのような構成要素から成り立つのかを考え、部分的な動作に分解する手法を考案し、ロボットが分脈に応じた動作を取れるようなアルゴリズムを考案する。部分的な動作が何であるか、という隠れた情報を推論するベイズ的なアプローチが有効であると考えている。また、他の手法(主に人工ニューラルネットワークを使うもの)との比較実験を行う。主に国内学会の旅費を学校費から支出したことが理由で次年度使用額が生じた。使用計画については、採択された国際学会IEEE ICRA2018の旅費に充てる。投稿論文をオープンアクセスにするための費用が、投稿論文が未だ採択されておらず残っている状況である。投稿論文が通れば計画通りに使用する。採択に至らない場合には研究内容をより充実させるために、ロボットなどの購入代に充てる。
関係性の構築・維持を支える普遍的メカニズムの研究

人々がどのように親密な関係を結び・維持しているかについて、社会的移動性が低い伝統型人間関係を維持している鳥羽市答志地区で聞き取り調査を、また現代型人間関係としてインターネット上で交流するSNS参加者を対象としWEB調査を実施した。その結果、どちらも対面を基本として親密関係が形成・維持されていること、関係相手の選択権の有無や初期の好意感情は必要条件ではなく、むしろ相互扶助を必要とする生態学的必然性が影響力をもつことが判明した。本研究は伝統型人間関係として寝屋子(三重県鳥羽市答志地区)と現代型人間関係としてWEB上のSNSを選定し、そこで人々が関係性を構築し維持する仕方と動機づけのメカニズムを明らかにすることを目的とした。初年度のH21年度は、まず答志地区を数回にわたって訪問し、調査への基幹協力者を見いだしラポールを構築した。続いて、14名から聞き取りを実施した。これまでのところ、寝屋子に組み込まれた場合、親戚以上の非常に濃密な関係を築きまたそれを「よいもの」として肯定する。他方、何らかの事情でその「資格」がない、成員性維持のコストを払えそうもないとみなされた場合は加入を拒否され、集団の境界線を鮮明なものとして凝集性を維持していることが判明した。ここから単なるゲマインシャフト的関係ではなく利得の合理的判断が働いている部分が示唆される。他方、産業・社会構造の変化から寝屋子存続の必然性の基盤が揺らいでおり、それでも成員らは「よいものは維持したい」として、存続のあり方を模索している。WEBを介した人間関係に関する調査は20代30代の男女約1100人からの回答を得て、分析を進めているところである。詳細はまだ明らかにされていないが、これまでのところ、性別と職業(大学生・社会人)などの要因によって交流の様相が異なるようであるものの、WEB上の人間関係は実社会でのそれと重複し、経済的時間的コスト負担を軽減しつつ居場所と情報確保を保持するための「現代の寝屋子」的機能をもたせていることが伺える。伝統的人間関係については、前年度から調査対象としている三重県鳥羽市答志島答志地区を2度にわたり訪問し、人間関係の結び方・維持について聞き取り調査を実施した。今年度は、親密関係を結ぶ相手およびその交流において、自分自身には選択の余地がなく、個人的感情を超えて付き合っていくものだと受け止めている、という点が現代的あるいは近代的親密関係と大きな特徴となっていることをみいだした。現代型人間関係については、今年度新たに無職者を対象にしたWEB調査を実施した。無職者は職場あるいは職を通じた交流が乏しいと考えられるが、実際見知らぬ他者とwebを介した交流をしている者が有職者に比べて多かった。また、実社会よりweb上の交流社会に、自分の重要な他者がいると答える傾向があるものの、そこでは不安を感じ、絆を確信し得ていないことが見いだされ、実社会での人間関係をwebを通じた交流で代替することはできないことが示唆された。2つの研究を総合すると、交流相手を選択する自由が逆につきあいの不安を高めている可能性が考えられる。心理学の領域では、親密関係はミクロレベルで捉えられることが多い。すなわち誰とどのように関係を結びそこから何を得るかは個人の問題とみなされる傾向がある。しかし、親密関係はそれを取り巻く社会の有ようと密接に関わっており、それゆえ時代や文化によって親密関係の様相や意義は異なるのである。本研究は、今日の社会・個人に混在している多層な人間関係の中から、自由意思によって関係を結ぶ相手を選択する現代型人間関係と、自由意思による選択権がない伝統型人間関係を取り上げ、そこでの人間関係の形成・維持のプロセスを探り、共通点と相違点を明らかにすることを目的とした。現代型人間関係はSNS(mixi)上での交流についてインターネット調査を首都圏(成人)と関西圏(大学生)で、また伝統型人間関係については、三重県鳥羽市の離島答志(寝屋子)での数度にわたる聞き取り調査を実施した。その結果、現代型伝統型のどちらも親密関係は対面での交流を基本としていること、親密関係は安定的であるかぎり、個人が安心・心理的安全を感じ、いわゆる安寧を提供する機能を担っていること、しかし自己選択によって親密関係相手を選択する現代型においては、相手もまたつきあう他者を選択でき、そのため自分が選ばれなくなる可能性があるという不安定さを必然的にかかえるため、対面交流だけでなく常時他者に向けてアンテナをはるべく、インターネットが補助手段として使用されていることが判明した。これに対して、伝統型においてはつきあう他者は慣習によって割り当てられ離脱できないシステムとなっており、人間関係の安定性がもたらす肯定的側面と否定的側面の双方が認められた。
Bc1−2遺伝子の髄液内導入による脳保護療法

Hvj-lacZ 10μgをSDラット大槽に注入し、7日後に灌流固定した。脳を取り出し、40μmの切片を作成し、脳内に取り込まれたlacZ遺伝子発現を検索するために、β-Gal染色した。lacZ遺伝子発現は脳幹、小脳、上位頸髄に強く、多数の細胞に観察され、脳幹の深部の細胞まで発現していた。注入部位よりも吻側の海馬の神経細胞にも発現が観察された。より吻側の大脳には発現はまばらであった。Neurofilamentと二重染色してみると、lacZ遺伝子発現している細胞の多くが、形態的にも、neurofilament発現もともなうことから、神経細胞であると考えられた。一方GFAPとの二重染色では明らかなグリア細胞へのlacZ遺伝子取り込みは見られなかった。Hvj-bcl-2 10μgを同様に注入して、抗bcl-2抗体による免疫染色を行っても、分布はlacZ遺伝子発現と同様であった。Hvj-lacZ 100μgをメスニホンザルの大槽に注入し、7日後に灌流固定し、脳を取り出し、40μmの切片を作成し、脳内に取り込まれたlacZ遺伝子発現を検索するために、β-Gal染色した。lacZ遺伝子発現は上位頸髄、脳幹、小脳、海馬に観察されたが、ラットに比べると、発現は弱い印象であった。従来、Hvj liposome法では分裂しない細胞への遺伝子導入効率が良くないとの指摘がなされてきたが、今回の我々の実験では、新型のHvj-AVE liposomeを使用したことで、非常に良い遺伝子導入効率の結果を得た。