hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
妊産婦ケアにおける助産師の経験知獲得フェーズモデルの構築

本研究の目的は、妊産婦ケアにおける助産師の経験知獲得フェーズモデルを明らかにすることである。病院および助産院に勤務する助産師を対象にインタビューおよび質問紙調査を行った。助産師475名を分析した結果、経験10年以上の助産師は、妊娠期から産後の継続ケアの経験や腹部触診で児の推定体重を推測する経験、会陰保護を実施しない分娩介助経験から正常と異常を見極めや産婦の心理面を乱さないケア能力獲得していることがわった。一方、経験10年未満の助産師は、自己のケアの振り返りや先輩助産師のケアを見る経験から出産の自然経過を妨げないケアや出産で関わった女性とのコミュニケーションの重要性を学んでいることがわかった。平成21年度は、助産師経験10年以上の助産師の経験(具体的エピソードと経験年数)と経験知を明らかにうること、更に助産師経験10年未満の助産師の経験(具体的エピソードと経験年数)と経験知を明らかにするという2つの目的で取り組んだ。研究者らが行った先行研究において、経験10年以上の助産師については19名の協力が得られ、その結果、32の経験と5つの経験知:【線で観る分娩経過による医療のタイミンダの見極め】、【産婦の産む力と自然回復力】、【産婦と家族のペース気持ちに沿う満足な出産】、【出産はつなぎ目のない連続した生活のプロセスであり人生そのもの】、【医師からの信頼の獲得と交渉術】が明らかになっている。従って、本年度は10年未満の助産師に重点をおきインタビューを実施した。インタビューに協力の得られた助産師は12名で、その内訳は助産師経験5年未満が5名、5年以上10年未満が5名、10年以上が2名であった。勤務先は、12名中助産院に勤務する者が1名で、それ以外は病院に勤務する助産師であった。経験10年未満の助産師の平均年齢は29.2歳(24歳35歳)、助産師経験年数は平均4年9ケ月(2年8年)であった。データはエピソーディックインタビューの手法を用いて収集し、インタビュー所要時間は平均1時間22分(33分2時間15分)であった。経験10年以上の助産師2名の年齢は37歳と54歳、経験年数は14年と31年であった。分析は、Narrative Analysisの手法を用いて行っている。その結果、助産師が出来事を経験した助産師経験年数と経験知の関連では、妊娠-出産-産後-育児のつながりは、経験10年未満の出来事から獲得しており、出産と家族背景との関連や人生の長いつながりの一部であるという経験知は、経験10年以上の出来事から獲得していることが明らかになった。今後も経験年数と経験知の関連についての分析を進め、量的調査へと発展させる予定である。経験10年未満の助産師10名を対象に、妊産婦ケア経験と経験知を明らかにした。その結果、10年未満の助産師の語りから14の経験が抽出され、8の経験知が明らかになった。経験知は、【お産の怖さと助産師の判断力・責任の重要性】、【教科書通りに行かないケアの個別性】、【緊急時の対応】、【母子のもつ力の強さ】、【妊産婦の気持ちの理解とコミュニケーションのとり方】、【女性に寄り添う助産師の役割認識とケアの難しさ】、【経過の判断と助産技術】、【医師への報告と関わり方の工夫】であった。これらの経験知は、正常経過の妊産褥婦のケア経験、ハイリスク妊産褥婦のケア経験、対象者からのフィードバック、先輩助産師からの学びとサポートなどの経験から獲得していた。経験10年以上の助産師の経験知は、先行研究で調査した19名の他に助産師2名を追加しインタビューを行った。その結果、先行研究で明らかになった【線で見る分娩経過による医療のタイミングの見極め】、【産婦の産む力と自然回復力】、【産婦と家族のペースや希望に沿う満足な出産】、【出産はつなぎ目のない連続した生活のプロセスであり人生そのもの】、【医師からの信頼の獲得と交渉術】以外の経験知は抽出されなかった。これらの経験知は、自己の責任の重さを実感しながら産婦の側に寄り添い待つお産、妊娠期からの継続的な関わり、産婦の身体感覚や希望に添った待つお産のケア、医師との対立とサポートなどの経験から獲得していた。以上31名の助産師のインタビュー結果を基に、妊産婦ケアにおける助産師の経験と経験知の関連を調査するための質問紙を作成し、経験10年以上の助産師30名を対象にパイロットスタディを実施し、妥当性と信頼性のある質問紙を作成した。今後は、広く助産師を対象に全国調査を行い、妊産婦ケアにおける助産師の経験

知フェーズモデルの構築を行う予定である。本年度の研究目的は、前年度までに調査した助産師31名(経験10年未満の助産師10名および経験10年以上の助産師21名)のインタビュー結果を基に質問紙を作成し、全国の産科を有する医療機関および助産院に勤務する助産師を対象に量的調査を行い、助産師の妊産婦ケアにおける経験知獲得フェーズモデルを作成することである。これまでインタビュー結果を基に作成した質問紙を経験10年以上の助産師30名の協力を依頼し、パイロットスタディを行った。その結果、23人の助産師の協力が得られ、データ分析およびより適切な質問表現の検討を行っている最中である。質問紙の郵送先として933ヵ所の医療機関および449ヵ所の助産院を抽出し、施設長もしくは看護責任者あての調査依頼文、調査協力の可否を確認するための返信用はがきの準備を行った。今後は、質問紙を郵送し回収およびデータ分析を行い、妊産婦ケアにおける助産師の経験知獲得フェーズモデルを明うかにする予定である。平成24年度は、これまでの助産師対象のインタビュー助産師の経験知について病院助産師と助産院助産師の比較分析を行った。その結果、病院助産師は【正常・異常の見極めと医師とよぶタイミング】【医療介入のある分娩と自然分娩の女性の変化の違い】【女性の気持ちに添う満足な出産】【妊娠ー自然出産ー母乳育児のつながり】【医師との交渉術】という5つのカテゴリーが抽出された。助産院助産師は【妊娠ケアからの継続性に基づく分娩経過の判断】【母体搬送のタイミングの見極め】【胎児の健康状態と女性の内面の見極め】【女性の産む力と自然回復力】【女性が満足する出産】【出産は女性と家族の生活のプロセスであり人生そのもの】【医師との信頼関係の構築】という7つのカテゴリーが抽出された。病院助産師の経験知は、医療介入をできるだけ回避し自然なお産をするケア経験の積み重ねにより生み出されたものである。一方、開業助産師の経験知は、自己の裁量をもつと同時にその責任を負わなければならない立場でケアをした経験から獲得されたものであると考えられた。自己のケアの評価をダイレクトに受けることは、内省的実践の動機づけにつながり、経験からの学びをより促進するものとなることが示唆された。これらの結果を基に無記名自記式の質問紙を作成し、助産師31名を対象にパイロットスタディを行った。調査項目は、妊産婦ケアの経験について12カテゴリー93項目、助産師の経験知に関して10カテゴリー87項目設定した。質問紙は、全国の病院および診療所432ヵ所(無作為抽出)の看護責任者に調査を依頼し163ヵ所の施設から協力を得ることができた。全国の助産院410ヵ所にも質問紙を郵送し合計2794名の助産師に質問紙を郵送した結果、質問紙は1185部回収(回収率42.4%)され、現在助産師の経験知獲得フェーズモデル構築に向け分析中である。本年度は、平成22年度の調査結果をもとに質問紙を作成し、全国の産科を有する医療機関および助産院を対象に質問紙調査を行い、助産師の経験知獲得フェーズモデルの構築を行う予定であった。助産師31名へのパイロットスタディを終了し、質問紙の作成と送付先のリストアップを行うなど準備を進めている最中に東日本大震災が発生し、質問紙の郵送が困難であった事、加えて研究代表者の産休(9月)により研究遂行が困難となったため。24年度が最終年度であるため、記入しない。
温浴による皮膚生理機能の維持機構

本研究の目的は、部分温浴が、非浸水の皮膚に保湿効果をもたらすことを、皮膚血流との関係から明らかにすることである。健康な成人女性18例を42°Cの恒温槽で10分間片側手部を温浴し、対側前腕で皮膚表面温度(皮膚血流の指標)、皮膚水分量、水分の蒸散量を測定した。7例には皮膚血流量計での測定も追加した。以上の結果、温浴で皮膚血流量・水分蒸散量とともに皮膚水分量も増加し、皮膚への加湿効果をもたらした。これは、体温調節のために必要な皮膚からの蒸散水は拡張した皮膚血管から与えられることが推察され、その蒸散水の皮下からの移動プロセスで生じたことを示唆した。本研究の目的は、温浴による温熱刺激が、浸水していない皮膚部分の角層水分量の増加をもたらすことを、皮下血流量増加との関係から生理学的に明らかにすることである。今回、健康な成人女性16名を対象に、42°Cに制御した恒温槽での温浴を10分間、片側手部に行った。測定は、対側前腕部で行い、温浴直前から終了後30分間、皮下血流量の指標である皮膚表面温度{深部温モニターコアテンプ(CTM205)}、角層水分量{コルネオメーター(CM825)}、水分蒸散量{テヴァメーター(TM300)}を測定した。実験環境は、室温24±2°C、湿度4060%とし、さらに測定する前腕部に温湿度制御装置を作成・装着し、測定部分の環境の同一化を図った。実験環境の問題等が影響したと考えられる4例を除いた12例から、次の結果を得た。1.皮下血流量の指標である皮膚表面温度は、温浴開始後から順調に上昇し、温浴終了30分後に最高値を示し、温浴前値との差は平均0.86°Cとなった。2.角層水分量は、温浴中は一過性に温浴前値より低下したが、温浴終了後上昇し、温浴後30分間は、最低0.33、最高1.48、平均0.9AU上昇した。以上から、温浴による角層水分量増加は、身体外部からの水分の浸透・吸水によらず、温熱刺激による皮下血流量の増加による皮下血管からの補水によって生じているという可能性が濃厚となる貴重なデータを得た。また、「冷え性」などの体質が皮下血流量・角層水分量に影響する可能性も示唆され、個人差を検討する必要性が見出せた。なお、水分蒸散量の結果については検討中である。今後は、さらに測定精度をあげ、対象者数の増加、同一対象での再実験により仮説を検証していく所存である。本研究の目的は、温浴による熱刺激が、浸水していない皮膚部分の角層水分量の増加をもたらすことを、皮下血流量増加との関係から生理学的に明らかにすることである。(実験1)健康な成人女性20名を対象に、室温24±2°C、湿度4060%に調整した環境で、温浴に適温とされる42°Cに制御された恒温槽での温浴を10分間、片側手部に行い、温浴直前から温浴後30分間の皮膚表面温度(皮下血流量の指標):深部温モニターコアテンプ(CTM205)、角層水分量:コルネオメーター(CM825)、水分蒸散量:テヴァメーター(TM300)の測定を対側前腕部で行った。結果、温浴の熱刺激で皮膚表面温度が増加し、同時に水分蒸散量、角層水分量も増加した。温浴終了により水分蒸散量は減少に転じたが残る2者は30分間一定の高値レベルを保持した。(実験2)健康な成人女性7名を対象に、血流量計(LFG-1-W)を併用し、対側の手掌部を測定し、他は実験1に準じた。血流と水分蒸散量は温浴開始とともに増加し、終了後は減少傾向に転じた。皮膚温と角層水分量は実験1と同様、30分後まで高値レベルを維持した。以上より、皮膚血流量の変化に同期する水分蒸散量の変化と異なり、皮膚温ならびに角層水分量は、皮膚血流が減少に転じても増加したことは、皮膚温は血流量の増加に伴い上昇するが、皮膚表面の空気層の断熱効果により、一定時間は熱が蓄積されることを示した。一方、角層水分量も皮膚温と同様の変化であったことから、皮膚血流量の増加が角層水分量増加をもたらし、一定時間その水分が維持されることを示唆した。つまり、温熱刺激により皮膚血流量が増加し、角層への水分供給が行われ、皮膚表面からの蒸散が増加するものと考えられた。

また、皮膚血流量が減少してもなお角層水分量が高値を保持したのは、水分蒸散量の低迷と、角質層で増加した水分の一部が、そのまま角層に保持されるためと考えられた。よって、温熱刺激による皮膚血流量の増加は皮膚角層を保湿する、ことを示唆した。
大乗仏教の起源と実態に関する総合的研究-最新の研究成果を踏まえて-

本研究は、H15年5月に開催された第48回ICES(国際東方学者会議、東方学会主催)におけるシンポジウム(「大乗仏教、その起源と実態-近年の論争と最新の研究成果から」)を皮切りに、総計10名の研究分担者がそれぞれの分担テーマに取り組み、これまでに12回の研究会、8回の講演会、印度学仏教学会等の国内学会、IAHR(国際宗教学宗教史学会)、ICANAS(国際アジア北アフリカ研究会議)、IABS(国際仏教学会)、ICES(国際東方学者会議)他の国際学会等を通して研究発表を重ね、'ここに研究成果をとりまとめるに至った。また、研究成果の一部は、H18年度の第51回ICESにおいて「大乗仏教、その虚像と実像-経典から論書へ」と題するシンポジウムにおいて公開した。本シンポジウムでの発表内容の一部は、H20年に刊行されるActa Asiatica,The Institute of Eastern Cultureの特集号(vol.96,"What is Mahayana Buddhism")に掲載予定である。本研究により、在家者による参拝という信仰形態をふまえ、新たなブッダ観・菩薩観のもとに経典運動として-既存の諸部派の中から-スタートした大乗仏教運動は、時期的には仏像の誕生とも呼応して、起源後から次第に影響力を増し、3世紀以降には最初期の経典をもとに多くの論書(大乗戒の思想を含む)を成立させるに至ったという大乗仏教の起源と実態に関する経緯の一端が明らかとなった。大乗仏教徒(mahayanika,mahayanayayin)とは、こうして成立した『般若経』『華厳経』『法華経』『阿弥陀経』等の大乗経典をも仏説として受け入れる出家、在家双方の支持者であり、これらの経典はいずれもそれぞれを支持するグループ(菩薩集団)独自のブッダ観あるいは菩薩観を、宗教文学にふさわしい物語性とともに、空や智慧、仏身論や菩薩の階梯などを論じる論書としての性格を帯びながら表明している。本研究では、これらの詳細を各研究分担者がそれぞれの専門を通して解明するという貴重な研究成果を得ることに成功した。本研究成果報告書は、いずれもこの研究期間内に研究代表者、研究分担者、および上記ICES,IAHRにおけるシンポジウムへの招聴研究者がもたらした研究成果の一端である。今年度は、まず当該研究を遂行する上で必要となる研究環境の整備ならびに基礎資料の入手に重点をおき、その上で、研究の全体計画を確認・調整したのち、各分担者は、分担テーマに関する基礎研究を着実に行った。既存の関連研究に関するビブリオグラフィーはほぼ完成し、ならびに内外の関連研究者のネットワークを実質的に構築することができた。また、平成15年5月16日には、研究代表者がコンヴィーナーとなり、東方学会主催の第48回国際学者会議(48^<th> International Conference of Eastern Studies, ICES)において、研究分担者の部(2名)に内外の関連研究者(3名)を交えて、「大乗仏教、その起源と実態-近年の論争と最新の研究成果から」と題する公開シンポジウムを開催した。このシンポジウムは、140名を越える参加者を得て、実りの多い研究集会となった。

(その概要は『東方学会報』84,2003.7,PP.17-20,およびTransactions of the International Conference of Eastern Studies 48, 2003.12,pp.85-92,129-133を参照)。以下は、そのプログラム概要である。SASAKl Shizuka佐々木閑(花園大学教授):「なにが大乗仏教の起源なのか」SHIMODA Masahiro下田正弘(東京大学大学院人文社会系研究科助教授):「大乗起源論争と仏教研究方法の転換」LEE Ju-hyong李柱亨(ソウノレ国立大学教授):「ガンダーラ美術と大乗仏教-その関連を示す新旧の証跡」ARAMAKI Noritoshi荒牧典俊(大谷大学教授・京都大学名誉教授):「大乗仏教起源論再考のために-八つの誤謬の批判と新しい作業仮説の可能性」なお、3月26日(金)に、本年度最後の研究会を開催し、研究発表(渡辺章悟研究分担者「法滅思想と大乗仏教の興起」)とともに、今年度の研究総括ならびに次年度の研究計画に関する討議を行う。本年度は、各研究分担者の分担テーマを掘り下げるとともに、研究課題に関連する海外の研究者を招聘し、最新の研究情報を交換することに主眼を置いた。6月には、近年、『宝積経』『般若心経』等の大乗経典研究を、チベット訳諸版本をもとに意欲的に進めるJonathan Silk教授(UCLA)を、また12月には、ヒンドゥー・タントリズムならびに後期インド密教研究の第一人者として著名なAlexis Sanderson教授(Oxford大)をそれぞれ招聘し、講演とともに、集中講義の担当をお願いした。またこの3月には、IAHR(国際宗教学宗教史会議第19回大会)において研究代表者が組織するパネルへの参加者として、現在、インド・チベット中観思想ならびに仏教論理学研究の分野を国際的にリードするTom Tillemans教授(Lausanne大)を招聘する。このIAHRのパネルは、「仏教における意味論の形成-ディグナーガ、バーヴィヴェーカ、ダルマキールティの影響関係を中心として」と題し、以下のような構成のもとに、最新の研究成果をふまえた議論が期待されている。(日時:3月29日11:00-13:00、会場:高輪プリンスホテル、セッションNo.13M)・コンヴィーナー・司会:斉藤明(東京大)・パネリスト:1斉藤明「バーヴィヴェーカにおける知覚論と意味論の結節点」2上田昇(目白大)「ディグナーガの意味論-その階層的sabdarthaについて」3 Tom Tillemans(ローザンヌ大)「アポーハ論、ディグナーガからダルマキールティへ-主題の一貫性をめて」・コメンテーター:桂紹隆(龍谷大)なお、今年度は、次年度の研究の下準備として、バーヴィヴェーカ大乗仏説論を展開する『中観心論』第4章およびその注釈『論理の炎』のチベット訳テキストの校訂作業を終えた。また、研究代表者ならびに2人の研究分担者は、昨年8月にモスクワで行われた第37回ICANAS(国際アジア・北アフリカ研究会議)において、それぞれの研究成果の一部を報告した。
植物の過湿ストレス耐性に寄与するトランスポーター遺伝子の機能解明

これまでに、イネ品種「日本晴」を水耕栽培し、水耕液をエアレーションした処理区と、水耕液に0.1%アガーを入れたスタグナント液を用いた処理区に分けて、24時間後に根をサンプリングした。それらからRNAを抽出し、44Kイネオリゴアレイを実施した。その結果、低酸素条件に応答して、mRNA量の変化が起きたトランスポーター遺伝子が多数同定された。その結果、24時間の嫌気処理によって、mRNA量が2倍以上増加した遺伝子は1,350個で、逆にmRNA量が2分の1以下に減少した遺伝子は1,185個であった。それらの中で養水分吸収に関わるトランスポーター、チャネル、キャリアー等の遺伝子に関しては、mRNA量が2倍以上増加したものが39個(重複しているものを除くと26遺伝子)存在し、mRNA量が2分の1以下に減少したものが83個(重複しているものを除くと50遺伝子)存在した。近年の集中豪雨の激化は、湿害/冠水害をもたらすため、作物生産においてますます深刻な制限要素になると予想される。過湿ストレスによって植物が最も影響を受けやすい器官は根であり、特に養水分吸収の低下が問題となる。現在のところ、過湿条件下における根のトランスポーターの役割および養水分の吸収の分子機構についての知見が著しく乏しい。本研究では、湛水への順応の過程で発現パターンの変化するトランスポーター遺伝子を、マイクロアレイ解析により同定する。イネの土壌環境を嫌気状態へ移行させた直後は、根の外皮付近に観察される酸素漏出のバリア(Radial O_2 Lossバリア)がまだ形成されていないために、通気組織を通して酸素が根端へ効率よく供給できない。したがって、半水生植物のイネでも湛水状態に移した直後の1,2日間は根端に嫌気ストレスがかかる。そのような環境の変化に応答して、発現パターンが変化するトランスポーター遺伝子を同定するために、44Kイネオリゴアレイを用いた解析を行った。マイクロアレイ解析の結果、24時間の嫌気処理によって、mRNA量が2倍以上増加した遺伝子は1,350個存在した。逆にmRNA量が2分の1以下に減少した遺伝子は1,185個存在した。平成19年度は、同定された遺伝子の発現解析、機能解析を行い、過湿土壌中における効率的な養水分吸収に寄与するトランスポーター遺伝子を同定する。
哺乳類におけるメラトニンおよびその前駆体の生理学的意義の解明

マウスをモデル動物としてメラトニンの生理学的な役割を明らかにするために、メラトニンを合成できるマウス、メラトニンを作れないが前駆体のN-アセチルセロトニン(NAS)は合成できるマウス(NAS+)、どちらも作れないマウスを作製することに成功した。これらのマウスの概日時計に関わる行動を調べたが、違いがなかった。また、寿命にも劇的な違いはないことが判明した。行動学的解析では、特にNAS+のマウスにおいて尾懸垂試験で無動時間が短い、記憶の保持が良くないこと、などのいくつかの違いを見出した。NAS+では神経新生が亢進しているデータも得ることができ、これで説明できるだろう。マウスをモデル動物としてメラトニンの生理学的な役割を明らかにするために、本研究ではまず、C56BL/6J系統(メラトニン合成系の最終酵素HIOMTと最後から2番目の酵素AANATとの両方の活性を失っている)とMSM/Ms系統(両酵素とも活性を保持している)のマウスを掛け合わせ、メラトニンを合成できるマウス(MEL+)、メラトニンを作れないが前駆体のNASは合成できるマウス(NAS+)、どちらも作れないマウス(none)を作製した。遺伝的な背景が均一となるように、C56BL/6J系統またはMSM/Ms系統にコンジェニック化を行った。10回以上のバッククロスを行い、ゲノムワイドに設定した80100カ所のマーカーを調べて、コンジェニックが完了したことを確認した。得られた各種の遺伝子型のマウスから、夜間に松果体および血漿をサンプリングしてメラトニンを測定した。その結果、想定通り、遺伝子型によってメラトニンが生合成できる/できないことを確認した。C56BL/6Jコンジェニックマウスに関しては、予備的に3群のマウス(MEL+、NAS+、none)の輪回し行動解析を行い(合計16匹)、明暗周期下における行動パターン、恒暗条件下における概日時計のフリーラン周期等を調べた。予想通りであるが、メラトニン合成能は影響を与えないことが分かった。ただし、きわめてわずかな違いがあるのではないかという期待もあり、来年度以降、匹数を増やしてさらに詳細に調べる予定である。また、来年度以降の解析に供することができるように、3群のマウスを多数増やし始めた。ここで開発したコンジェニックマウスが、多くの研究者に利用してもらえるよう、理化学研究所バイオリソースセンターに寄託した(すでに2件の分与希望があった)。昨年度までに開発したメラトニンを合成できるC57BL/6Jコンジェニックマウスについて、さまざまな時間帯にサンプリングして松果体および血中のメラトニン濃度を精査した。遺伝子型としてはメラトニンを合成できるマウスに関して、その松果体内のメラトニン量は、メラトニン合成能を維持している野生由来系統のマウスと同じような日内変化および存在量であった。しかし、血中濃度は非常に低いレベルであった(ただし、検出・定量は可能であり、メラトニン合成能を失っている純粋なC57BL/6Jマウスとは大きく異なる)。血中のメラトニンの分解が速いのか、松果体から血中に分泌されにくいのかなど、調べる必要があるだろう。ただ、昨年度行った行動テストバッテリーでは、記憶やうつ様行動に変化が見られることや、(標準的な)メラトニン受容体は脳内(視床、視床下部、下垂体など)に局在していることを考慮すると、脳脊髄液中のメラトニン濃度は野生由来系統のマウスと同等に夜間に増加していると期待される。しかし、脳脊髄液中レベルに関しても測定する必要が今後あるだろう。また、メラトニンやその前駆体(N-アセチルセロトニン、NAS)の生理学的な役割について、いくつかの示唆的なデータをさらに得た。オスマウスとメスマウスを同居させて交配・繁殖させる際に、メラトニンやNASを合成できるマウでスは妊娠が成立するのに日数がかかることに気が付いた。また、チミジンのアナログであるEdUを用いて神経新生を調べたところ、メラトニンやNASを合成できるマウスの海馬の歯状回において神経新生が亢進していた。マウスをモデル動物としてメラトニンやその前駆体であるN-アセチルセロトニン(NAS)の生理学的な役割を明らかにするために、C56BL/6J系統(メラトニン合成系の最終酵素HIOMTと最後から2番目の酵素AANATとの両方の活性を失っている)とMSM/Ms系統(両酵素とも活性を保持している)のマウスを掛け合わせ、メラトニンを合成できるマウス(MEL+)、メラトニンを作れないが前駆体のNASは合成できるマウス(NAS+)、どちらも作れないマウス(none)を作製した。

遺伝的な背景が均一となるように、C56BL/6J系統またはMSM/Ms系統にコンジェニック化を行った。10回以上のバッククロスを行い、ゲノムワイドに設定した80100カ所のマーカーを調べて、コンジェニックが完了したことを確認した。3群のマウス(MEL+、NAS+、none)の輪回し行動解析を行ったが、概日リズムに関するさまざまな行動のパラメータには違いがなかった。しかし、その他の行動学的解析では、特に、NAS+のマウスにおいていくつかの違いを見出した。NAS+マウスは、尾懸垂試験では無動時間が有意に短かった。また、社会性接触の亢進や、記憶の保持が良くないことを示唆するデータを得ることができた。多くの実験マウスの系統は長い間、飼育されてきた中で、NASを合成する能力を失ってしまった(Aanat遺伝子に変異が生じて固定された)が、NASが多く分泌されることは、馴化・愛玩化に邪魔だったかもしれない。想定通り、マウスのコンジェニック化が順調に完了することができた。マウスの繁殖能力等にも問題なく、メラトニン合成能の異なるマウスを現在増やしている段階である。25年度が最終年度であるため、記入しない。N-アセチルセロトニン(NAS)を合成できるがメラトニンに代謝できずにNASを分泌するマウス(NAS+)が、予想していたよりも、多様な表現型を示すことができた。反対に、メラトニン合成能を持つマウス(MEL+)に関しては、すでに報告した性成熟の早熟以外の表現型をこれまでに見出せていない。NASの生理的な役割、NASの合成能に関わるAanat遺伝子の飼育舎内進化に、今後は注目していくべきだという、研究を進めるべき方向性が見えてきた。本研究で開発したマウスを学会等で話したところ、多くの研究者の興味を引くことが分かり、このマウスを分与して広く共同研究を行うことが、本研究課題の最終的な目標でもあり課題名でもある「哺乳類におけるメラトニンおよびその前駆体の生理学的意義の解明」に早く有効的につながるだろう。本研究課題の当初の研究計画を変更することはないが、それ以上の解析が可能になり、また、自分の研究課題の遂行にフィードバックできるだろう。本研究では、2遺伝子の遺伝子型の組み合わせによって、比較すべき3種類のマウス群を作成しているが、このような複雑な遺伝子型のマウスの交配をすることは、実験に使用するマウスの数を増やすことにつながる。使用数を抑制するためには、別の研究手法も用いることを考慮中である。すなわち、遺伝的にメラトニンやNASの合成能が決まっているマウスを作出するのではなく、それらの合成能がないマウスにメラトニンやNASを投与する方法を利用する。ただし、離乳前あるいは胎児期のマウスに投与するには母獣を介することになるが、同腹のコントロール(非投与群)を作ることが難しい、という欠点がある。投与による方法と遺伝的に合成能を規定する方法は、得られた結果の解釈にあたって、相補的に役立つと考えられる。
古代末期から初期中世期におけるキリスト教殉教概念変遷史の政治史的解明

2018年度は研究計画に従い、古代末期から中世へとキリスト教会における殉教者記録と言説が伝承する過程を分析した。具体的には、4世紀の教会史家エウセビオスが記録した殉教記録の元資料をどのように入手したのか、想定される経路を検証することで、古代末期までの殉教記録の形成・収集の一端を明らかにした。同時に、エウセビオス自身がその殉教記録をどのように加工し、自身の歴史叙述上に配置したのかを彼の執筆した『教会史』『パレスチナ殉教伝』を素材として検証した。その上で、エウセビオスの残した歴史書が中世ヨーロッパ社会に受容され、キリスト教化される社会の中で人々のアイデンティティ形成に活用された事例を考察するという作業を行った。これらの研究成果のうち、特にエウセビオスの殉教記録の加工ならびにエウセビオスの残した歴史書がキリスト教化される中世ヨーロッパ社会で受容される経路については、日本における専門研究者との妥当性検証だけでなく、世界的なレベルでの専門研究者の意見を反映したいと考え、2018年9月に岡山大学で開催された初期キリスト教研究に関する国際学会で研究報告を行い、研究報告の妥当性を確認した。特にエウセビオス史書のラテン語翻訳者であるルフィヌスの研究に関して、同時代のキリスト教テキストにおけるヘブライ語ーギリシア語ーラテン語史料研究に関する各国の専門家たちからアドバイスを受けることができた。エウセビオスによる殉教記録の加工に関しては、特に彼が活用した前時代の歴史家であるユリウス・アフリカヌスやヘゲシッポス等の史料、また新約聖書収録文書を中心に研究が進展したため、その妥当性を問うため東京大学で開催された国内学会の西洋史部会で研究報告を行った。これらの研究成果に前年度までの研究実績を併せ、二本の欧文論文を年度末に投稿した。所属研究機関を変更したことで、科研費執行が8月後半以降にずれ込むなどの一時的な中断期間を置かざるを得なかったが、新旧の所属研究機関の協力のおかげを持ち、その後科研費執行が可能となり研究体制が整った。9月には国際学会での研究報告を予定通り行い、11月には国内学会での研究報告を行うことができた。上述の理由により論文を学術誌等に投稿する時期が年度後半にずれこんでしまったため、今年度中に刊行された成果は少ないが、次年度以降に公開される予定である。本研究の目的はローマ帝政初期のキリスト教会において形成された「殉教」の基準に存在した「法廷におけるキリスト教信仰の保持による有罪判決」という客観的規定が、古代末期から初期中世にかけて変質した過程を明らかにすることである。そのため本年は391年アレクサンドリアの修道士アンモニオスの殉教者称号付与論争の研究を実施し、ローマ帝国官憲によって拷問死させられたこの修道士が殉教者称号を獲得できなかった理由を解明するため、当時のキリスト教社会で大きな問題となっていた、キリスト論論争と教会間の対立とは異なる、古代的な殉教基準と中世的な殉教概念の揺らぎが現れたケースとして検証した。本研究においてはコンスタンティノポリスのソクラテス著『教会史』とニキウのヨハネス著『年代記』という、当時対立していた教会陣営(コンスタンティノポリス教会、アレクサンドリア教会)の両方の立場を示す史料を検証し、この修道士が殉教者称号を獲得できなかった理由は神学論争ではなく、古代的殉教基準が当時のキリスト教共同体に残存していたことを確認した。本研究は現在、論文として公表するため準備中である。また、本研究の目標である、古代末期から初期中世にかけて殉教の基準が変質した過程を明らかにするためには、初期中世社会における古代の殉教の理解の実像を解明しなければならない。そこで、科研費申請時には391年アレクサンドリア修道士殉教者称号付与論争についての経過報告を行う予定であった、国際学会Asia-Pacific Early Christian Studies Society Conferenceにて、6世紀の司教トゥールのグレゴリウスが残した教会史史料、殉教者集成史料を通じて中世期におけるローマ期史料の受容に関する研究を報告した。本研究は現在、海外査読誌にて掲載されるべく、査読を受けている段階である。当初の予定では391年アレクサンドリアの修道士殉教者称号論争についての論文を本年度内に公表したいと考えていたので、計画としては若干の遅れがある。しかし、国内学術誌に論文を一本公表し、当初予定していた計画から新たに派生した論点である、初期中世における古代史料の受容については、出席を予定していた国際学会のテーマにより沿っていたため、こちらの遂行により比重を置き、その結果評価を受け、海外学術誌へ論文投稿がかなったので、一定の成果を得ることはできた。古代から中世へのキリスト教殉教概念変遷を政治史的に解明する本研究は今年度以下のように進められた。2世紀に現在のフランス・リヨンにあたるルグドゥヌムで発生したキリスト教徒迫害事件は4世紀のエウセビオスによるギリシア語『教会史』ならびに『古の殉教集成』に記録された。しかし古代から中世への殉教概念変遷を政治史的に解明する本研究は今年度以下のように進められた。しかし6世紀トゥールのグレゴリウス『歴史十巻』が執筆された時代には、5世紀のルフィヌスによるラテン語訳版『教会史』の改竄的な記述と、散逸した『古の殉教集成』の断片的な情報が不完全な形で2世紀の事件が伝わり、実際には発生していない殉教の記述が混乱した内容で『歴史十巻』に書き加えられるようになった。こうした伝承過程を明らかにし、国際学術誌に発表した。

また、殉教者に関する歴史記述が生成される状況を考察するため、4世紀のパレスチナで作成されたエウセビオス『教会史』における、同時期エジプトでの目撃情報の処理についての研究をアメリカでの国際学会において報告した。殉教者概念の変遷と殉教者称揚・崇敬とが古代末期の政治状況と密接に関連し、歴史叙述にもその影響が表れる点を、ローマ皇帝コンスタンティヌスにかかわるエウセビオスの『教会史』・『コンスタンティヌス帝の生涯』を素材に指摘し、オーストラリアでの国際学会において報告した。これらは現在、国際学会誌での論文査読、あるいは査読後の修正作業中である。古典古代から古代末期にかけての殉教者関連史料から浮かび上がる当時の人々の宗教観念を、奥山広規・志内一興の協力を得て、一般公開講演会でのシンポジウム発表し、本研究の成果の一部から社会還元を行った。今年度は古代末期地中海世界と初期キリスト教史という二つの分野での国際学会で研究報告を行うことができ、アメリカ、オーストラリアの研究成果の国際発信が順調に進んだ。また、仙台市の東北学院大学における市民公開講座に招待され、これまでの研究成果を一般社会に還元する機会を得られたことは大きい。論文成果は国際学術誌での掲載を着実に実現できている。研究計画において予定していた古代アレクサンドリア市における殉教者照合付与にかかわる研究は、論文として国際論文集に掲載されるべく作業を進めている。査読中・査読を受けての修正作業中の研究論文については、着実に成果発表できる見通しが立っている。2018年度は研究計画に従い、古代末期から中世へとキリスト教会における殉教者記録と言説が伝承する過程を分析した。具体的には、4世紀の教会史家エウセビオスが記録した殉教記録の元資料をどのように入手したのか、想定される経路を検証することで、古代末期までの殉教記録の形成・収集の一端を明らかにした。同時に、エウセビオス自身がその殉教記録をどのように加工し、自身の歴史叙述上に配置したのかを彼の執筆した『教会史』『パレスチナ殉教伝』を素材として検証した。その上で、エウセビオスの残した歴史書が中世ヨーロッパ社会に受容され、キリスト教化される社会の中で人々のアイデンティティ形成に活用された事例を考察するという作業を行った。これらの研究成果のうち、特にエウセビオスの殉教記録の加工ならびにエウセビオスの残した歴史書がキリスト教化される中世ヨーロッパ社会で受容される経路については、日本における専門研究者との妥当性検証だけでなく、世界的なレベルでの専門研究者の意見を反映したいと考え、2018年9月に岡山大学で開催された初期キリスト教研究に関する国際学会で研究報告を行い、研究報告の妥当性を確認した。特にエウセビオス史書のラテン語翻訳者であるルフィヌスの研究に関して、同時代のキリスト教テキストにおけるヘブライ語ーギリシア語ーラテン語史料研究に関する各国の専門家たちからアドバイスを受けることができた。エウセビオスによる殉教記録の加工に関しては、特に彼が活用した前時代の歴史家であるユリウス・アフリカヌスやヘゲシッポス等の史料、また新約聖書収録文書を中心に研究が進展したため、その妥当性を問うため東京大学で開催された国内学会の西洋史部会で研究報告を行った。これらの研究成果に前年度までの研究実績を併せ、二本の欧文論文を年度末に投稿した。
血管内皮幹細胞システムを基軸とした糖尿病網膜症および加齢黄斑変性症の病態解明

糖尿病網膜症や加齢黄斑変性症は中途失明に関わる疾患であり、その発症および進行には虚血および病的血管新生が密接に関連することが知られている。本研究では、既存血管に存在して血管新生に中心的な役割を果たす特殊な血管内皮細胞を同定し、血管新生との関連を解明することにより、血管新生を制御する新規治療法の開発を目指すことを目的としている。我々は、これまでの研究において、フローサイトメトリーおよび蛍光モノクローナル抗体を用いた精度の高い血管内皮細胞単離法を確立し、さらにDNA結合色素Hoechstを用いたSide population (SP)法を行い、血管新生の際に中心的な役割を果たす可能性のある潜在的増殖活性の高い血管内皮細胞として血管内皮SP細胞を同定した(EMBO J 2012, IOVS 2013)。さらにDNAマイクロアレイを用いてマウス血管内皮SP細胞に特異的に発現する分子としてCD157(Bst1)を新たに同定した。平成29年度の研究では、CD157で血管を免疫染色したところ、CD157陽性血管内皮細胞は毛細血管には存在しておらず、太い血管(主に静脈)に散在していることが分かった。CD157陽性の血管内皮細胞とCD157陰性の血管内皮細胞を回収し、Vitroで培養したところ、CD157陽性の血管内皮細胞は多数の血管内皮細胞を作り出す能力があることが分かった。また生体内において1個のCD157陽性血管内皮細胞が多数の血管内皮細胞からなる毛細血管を作り出すことが判明した。これらの成果は2018年Cell Stem Cell誌に報告した。平成30年度の研究では、CD157陽性の血管内皮細胞が実際に生体内で血管新生に貢献するかを調べるために、CD157遺伝子座に対してCreERT2コンストラクトを直接ノックインしたマウスを作製した。CD157遺伝子座に対してCreERT2コンストラクトを直接ノックインしたマウスの作製に時間を要している。CD157遺伝子座に対してCreERT2コンストラクトを直接ノックインしたマウスを作製することによりCD157陽性血管内皮細胞をVivoで標識し、そこから血管新生が生じるかにつき検討を行う。我々は、これまでの研究において、フローサイトメトリーおよび蛍光モノクローナル抗体を用いた精度の高い血管内皮細胞単離法を確立し、さらにDNA結合色素Hoechstを用いたSide population(SP)法を行い、血管新生の際に中心的な役割を果たす可能性のある潜在的増殖活性の高い血管内皮細胞として血管内皮SP細胞を同定してきた(EMBO J 2012, IOVS 2013)。さらにDNAマイクロアレイを用いてマウス血管内皮SP細胞に特異的に発現する遺伝子Xを同定した。平成28年度の研究では、血管内皮SP細胞が生体内で実際に血管新生に貢献するかにつき検証するため、、SP細胞に最も特異性が高い特定のX遺伝子座に対して、CreERT2コンストラクトを直接ノックインしたマウスを作製した。具体的には、ターゲティングベクターを作成しES細胞へ導入した。相同組換えES細胞から3ラインのキメラマウスを得た。さらにキメラマウスを野生型マウスと交配することで、生殖系列(ジャームライン)へ移行した目的の遺伝子改変マウスを得た。今後レポーターマウスと交配することでin vivoにおいて血管内皮SP細胞特異的分子をEGFPで標識することを目指す。血管新生に中心的な役割を果たす血管内皮SP細胞に最も特異性が高い特定のX遺伝子座に対して、CreERT2コンストラクトを直接ノックインしたマウスを作製できた。今後、レポーターマウスと交配することでマウス生体内において血管内皮SP細胞特異的分子をEGFPで標識することを目指すことができる。

また生体内において1個のCD157陽性血管内皮細胞が多数の血管内皮細胞からなる毛細血管を作り出すことが判明した。これらの成果は2018年Cell Stem Cell誌に報告した。CD157陽性の血管内皮細胞が実際に生体内で血管新生に貢献するかを調べるために、CD157遺伝子座に対してCreERT2コンストラクトを直接ノックインしたマウスを作製した。マウス作製と解析に時間を要し、現時点でCD157陽性血管内皮細胞を網膜や脈絡膜で標識することはできていないが、今後の検討によりCD157陽性血管内皮細胞をVivoで標識し、そこから血管新生が生じるかにつき検討を行う。血管新生に中心的な役割を果たす血管内皮SP細胞に最も特異性の高い遺伝子であるCD157(Bst1)を同定し、CD157陽性血管内皮細胞が太い血管に局在すること、CD157陽性血管内皮細胞が高い増殖活性を有し血管新生に貢献することを解明し、2018年Cell Stem Cell誌に報告した。糖尿病網膜症や加齢黄斑変性症は中途失明に関わる疾患であり、その発症および進行には虚血および病的血管新生が密接に関連することが知られている。本研究では、既存血管に存在して血管新生に中心的な役割を果たす特殊な血管内皮細胞を同定し、血管新生との関連を解明することにより、血管新生を制御する新規治療法の開発を目指すことを目的としている。我々は、これまでの研究において、フローサイトメトリーおよび蛍光モノクローナル抗体を用いた精度の高い血管内皮細胞単離法を確立し、さらにDNA結合色素Hoechstを用いたSide population (SP)法を行い、血管新生の際に中心的な役割を果たす可能性のある潜在的増殖活性の高い血管内皮細胞として血管内皮SP細胞を同定した(EMBO J 2012, IOVS 2013)。さらにDNAマイクロアレイを用いてマウス血管内皮SP細胞に特異的に発現する分子としてCD157(Bst1)を新たに同定した。平成29年度の研究では、CD157で血管を免疫染色したところ、CD157陽性血管内皮細胞は毛細血管には存在しておらず、太い血管(主に静脈)に散在していることが分かった。CD157陽性の血管内皮細胞とCD157陰性の血管内皮細胞を回収し、Vitroで培養したところ、CD157陽性の血管内皮細胞は多数の血管内皮細胞を作り出す能力があることが分かった。平成30年度の研究では、CD157陽性の血管内皮細胞が実際に生体内で血管新生に貢献するかを調べるために、CD157遺伝子座に対してCreERT2コンストラクトを直接ノックインしたマウスを作製した。CD157遺伝子座に対してCreERT2コンストラクトを直接ノックインしたマウスの作製に時間を要している。今後の研究方針として、血管内皮SP細胞に最も特異性が高い特定のX遺伝子座に対して、CreERT2コンストラクトを直接ノックインしたマウスと、レポーターマウスとを交配することでマウス生体内において血管内皮SP細胞特異的分子をEGFPで標識することを目指す。
エルビニア族細菌の産生するバクテリオシン産生制御機構

Erwiniacarotovorasubsp.carotovota Erは、nalidixic acid、mitomycin Cあるいはbleomycinの攻撃にさらされたときに、carotovoricin Erを産生し、類縁バクテリアを殺菌する。このcarotovoricinによる殺菌作用は微生物農薬への応用が期待される.今日まで、Hoa Anh Nguyen博士が明らかにした点は(1)tail fiberのC末端の5アミノ酸残基がcarotovoricin抗菌スペクトルを左右する。(2)世界に先駆け黄色ブドウ球菌毒素の標的細胞崩壊機構のリアルタイムでの解明に威力を発揮した「1分子計測技術」を用いて外殻牽引開始の作用機序解明のための毒素分子を用いたモデル実験を行った。以下の成果を上げた。(i)標的細胞膜上における水可溶LukFのプレステム領域の水不溶ステムへの劇的な構造変化を伴うステムの標的細胞膜貫通機構を解明した.(ii)さらに『プレスム保有ヘテロ7量中間体』を発見し,BADAN蛍光色素標識毒素成分を調製すると共にHlg2成分共同での膜孔形成過程を追求し、プレステムからステムへの移行タイミングを決定した.そして、膜上における『超チャネル』の形成機構は,(1)LukFの初発の膜への結合⇒(2)Hlg2のLukFへの結合⇒(3)[LukF-Hlg2]複合体形成⇒(4)[LukF-Hlg2]複合体3分子集合・6量体形成⇒(5)LukFもしくはHlg2の6量体への組込み・7量体プレステム中間体形成⇒(6)ステムの伸長・膜孔形成⇒(7)膜孔集合・超チャネル形成,であることを証明した。以上の結果は、膜タンパク質の構造変化を伴う膜への組込みタイミングを世界に先駆けての発見であると共に、本成果はcarotovoricin Erの細菌膜への組込み機構の解明に大いに役立つことが期待される。植物病原菌Erwinia carotovoraの産生するカロトボリシンは、バクテリオファージ尾部状構造を有するバクテリオシンである。本研究においては、9株のErwinia carotovoraのカロトボリシン遺伝子領域、特に、カロトボリシンの主要な構成成分であるsheath、core、および、tail fiber遺伝子を解析して以下のことを明らかにした。1.Sheathおよびcore遺伝子は全ての株で高い相同性を示した。しかし、各Erwinia carotovora株のtail fiber遺伝子の塩基配列は、3'末端側領域において大きく異なっており、tail fiber遺伝子の3'末端領域がカロトボリシンの抗菌スペクトルを決定することが明らかになった。2.同一のErwinia carotovora株が2種類の異なるカロトボリシンを産生することが見出し、その原因がtail fiber遺伝子の3'末端部分におこるDNA inversionであることを明らかにした。3.カロトボリシンは、Escherichia coli、Enterobacter cloacae、Salmonella typhimurium、およびSerratia marcescensを殺菌した。4.Erwinia carotovoraのリポ多糖がカロトボリシンを不活化すること、および、Salmonella typhimuriumのLPS変異株に対して異なる抗菌スペクトルを示したことから、LPSがカロトボリシンのリセプター(あるいは、レセプターの一部)であると考えられる。以下の成果を上げた。
医療・医師への信頼性の向上に関する調査研究

本研究は医療並びに医師に対するマクロな社会的“信頼"とパーソナルなレベルでのミクロの“信頼"について,概念構造の可視化を試み,信頼醸成のための方策を医療現場並びに医学教育に携わる医療者に還元・普及するまでを目的としたものである.医療に対する信頼にかかる過去資料の検証,並びに社会調査にかかる準備が整い今年度実施予定である.当初の予定では平成29年・30年度中に社会調査を行う予定であったが信頼を構成する客観的・主観的構成要件要素が複雑であり,要件の理論的枠組みの同定に時間を有したため,やや遅延している.今後は,社会調査の結果がまとまり次第,構造化に取り組む予定である.社会調査にかかる準備は整ったため、31年度は調査結果をもとに解析を行い分析を進める.また結果を踏まえ適切な枠組みを構築するうえで必要であれば追調査等も検討し信頼の可視化実現に注力する。本研究は医療並びに医師に対するマクロな社会的“信頼"とパーソナルなレベルでのミクロの“信頼"について,統計解析及び社会心理・哲学的見識から信頼のメカニズムを分析し,概念構造の可視化を試み,信頼醸成のための方策を医療現場並びに医学教育に携わる医療者に還元・普及するまでを目標としている.平成29年度は本調査研究に不可欠な信頼の分析枠組み及び概念枠組みについて検討を進めるとともに,医療・医師への信頼を取り戻すための過去の様々な取り組みについて検証を行い,また逆に医療の信頼を損なうよう事案で社会的問題として浮上したものについて事実関係を網羅的に精査し,社会が医療に対して信頼感や不信感を抱くまでの社会的認知構造の解明を目的に取り組んだ.具体的には,1医療・医師に対する信頼に関するテキストデータを集積し,信頼感や不信感を抱く要素の抽出する.2次年度以降の社会調査並びに,ヒアリング調査において必要な設問事項を抽出のうえ確定する.3各インフォーマントへの聞き取り対象者のリクルートを29年度予定していた。1の医療・医師に対する信頼の社会的認知構造の解明にかかる,テキストデータの集積は現在集積中であり,今後は学術論文のみならずマスメディアの報道等にも対象を広げ,当該テキストデータの収集を検討している.23についてはデータの集積作業とともに並走して実施している.最終的には,各調査結果より,医療・医師に対する信頼の規定因を抽出のうえ,社会が医療に対して信頼感や不信感を抱く社会的認知構造概念のモデル化を目指す。平成29年度は本調査研究に不可欠な信頼の分析枠組み及び概念枠組みを検討するにおいて,非常に重要な,医療・医師への信頼を取り戻すための過去の様々な取り組みについて検証を行い,また逆に医療の信頼を損なうよう事案で社会的問題として浮上したものについて事実関係を網羅的に精査し,社会が医療に対して信頼感や不信感を抱くまでの社会的認知構造の解明を目的に取り組んだ.医療・医師に対する信頼の社会的認知構造の解明にかかる,テキストデータの集積は現在集積中であり,対象の範囲を拡大したこともあり,やや遅れている.本研究は医療並びに医師に対するマクロな社会的“信頼"とパーソナルなレベルでのミクロの“信頼"について,概念構造の可視化を試み,信頼醸成のための方策を医療現場並びに医学教育に携わる医療者に還元・普及するまでを目的としたものである.医療に対する信頼にかかる過去資料の検証,並びに社会調査にかかる準備が整い今年度実施予定である.当初の予定では平成29年・30年度中に社会調査を行う予定であったが信頼を構成する客観的・主観的構成要件要素が複雑であり,要件の理論的枠組みの同定に時間を有したため,やや遅延している.今後は,社会調査の結果がまとまり次第,構造化に取り組む予定である.今後の研究推進の方策について,平成30年・31年度は以下を計画している.1社会調査;社会調査はインターネットを用いた電子的調査情報収集法を予定.この社会調査は次年度に実施予定のヒアリング調査を見据えた予備調査として位置づけて実施を予定している.2ヒアリング調査;本研究の目的に合致した医師をリストアップする.適正なケースについて調査対象となりうる候補者とコンタクトを取り調査の主旨を説明し承諾を得る.3共分散構造分析を用いた信頼の規定因の検討;実態調査で得られた知見を参照しながら因果関係の仮設をたて潜在変数を導入し,共分散分析により医療・医師への信頼の規定因を析出し医療と医師への信頼の構造のモデル化を試みる.4社会心理・社会哲学的見識からの検討;共分散分析の結果及び聞き取り調査の結果をもとに,さらに社会心理・哲学的視座から信頼の規定因を検討のうえ特定し,概念構造を整理する.この際,関連領域の有識者に意見を仰ぎ正確な概念構造モデルが構築できるように努める.社会調査にかかる準備は整ったため、31年度は調査結果をもとに解析を行い分析を進める.また結果を踏まえ適切な枠組みを構築するうえで必要であれば追調査等も検討し信頼の可視化実現に注力する。医療・医師に対する信頼の社会的認知構造の解明にかかる,テキストデータの集積作業に時間を要したため,社会調査並びにヒアリング調査のリクルート作業まで進めることが出来ず当初計画していた予算を繰り越すこととなった.社会調査に取り掛かるまでの準備に時間を要したためその費用が繰り越されることとなった。本年度は社会調査を実施し、その結果の分析並びに検討を行う予定であり、当該費用はその活動に使用予定である。
プレニル化フラボノイドの新規歯周病治療薬としての有効性評価

歯周病の発症・進行に関わる主要な病原性細菌は、グラム陰性菌のPorphyromonas gingivalis (ジンジバリス菌)である。ジンジバリス菌はジンジパインと呼ばれる強力なシステインプロテアーゼを分泌し、タンパク質分解・アミノ酸取り込みによりエネルギーを獲得する。ジンジパインは、ジンジバリス菌増殖に重要であるとともに、フィブリノーゲン、サイトカインなどの血漿タンパク質の分解や細胞傷害により、全身疾患を誘発する病原因子でもある。我々の研究グループでは、機能性食品の開発を目標として、植物性食品に多く含まれるカテキンやケルセチンの様なフラボノイドと共にプレニル化フラボノイドの機能性を解析している。その過程において、プレニル化フラボノイドが強いジンジパイン阻害活性を有することを見出した。これまでに、生薬のイカリソウより精製したプレニル化フラボノイドであるEpimedokoreanin B等が、非競合的にジンジパインを阻害することを明らかにしている。さらに、ジンジバリス菌培養液中にプレニル化フラボノイドを添加したところ、ジンジバリス菌の増殖を抑制することが出来た。しかしながら、歯周病が誘発する全身疾患への効果は確認出来ていないため、本研究課題では平成28年度からの3年間で、ジンジパイン及びジンジバリス菌が誘発する1血液循環系への障害、2細胞への傷害、3炎症性サイトカインネットワーク破壊、の3点に着目して、プレニル化フラボノイドの抑制効果を検討している。平成30年度までに、Epimedokoreanin Bのジンジパインによる宿主タンパク質分解抑制能抑制を明らかとしており、さらにモルモットを使用した血管透過性亢進アッセイにより、Epimedokoreanin Bがジンジパインによる血管漏出を抑制しうることを明らかとした。当初の計画通りに進展している。ルイビル大学Dr. Potempaとの共同研究により、歯周病菌(Porphymonas gingivalis)よりシステインプロテアーゼRgp及びKgpの粗精製、カラム精製を行った。Hisタグ付加Rgp及びKgp発現P. gingivalis菌株をH2チャンバー内でeTSB培地を用いて培養後、培養液の濃縮、硫酸アンモニウム濃縮、Hisカラム等により精製を行った。4月に発生した熊本震災の影響を受け、大学の設備、実験機器、試薬類に損傷があったため。しかしながら、歯周病が誘発する全身疾患への効果は確認出来ていないため、我々はプレニル化フラボノイドのさらなる有効性を実証する必要性を感じている。そこで本研究課題では平成28年度からの3年間で、ジンジパイン及びジンジバリス菌が誘発する1血液循環系への障害、2細胞への傷害、3炎症性サイトカインネットワーク破壊、の3点に着目して、プレニル化フラボノイドの抑制効果を検討している。