hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
包括的遺伝子発現解析による抽出遺伝子を標的とした糖尿病網膜症に対する治療薬の創製

RPE細胞では、ペリオスチンとaSMA陽性細胞が共染色された。TGFB2依存性の遊走、接着は、ペリオスチンSiRNAにより抑制された(p<0.05)。以上の結果より、ペリオスチンは、増殖組織形成において、細胞の遊走や接着に関与することが示唆された。ペリオスチン標的核酸のIn vitro導入の最適化In vitro収縮、遊走能や上皮間葉移行に対するペリオスチン標的核酸の効果についてはほぼ順調に終了した。In vivoモデルでの増殖組織抑制効果と安全性の検討のうちマウス網膜血管新生モデルにおける網膜血管新生抑制効果をKOマウスおよび中和抗体を用いて確認できた。In vitro, In vivoの検討結果より、ペリオスチンは細胞の増殖や遊走に関与することが明らかとなり、網膜上増殖を正に制御することが確認できた。今後、ペリオスチン標的核酸として、nkRNAを用いて増殖抑制効果を検討する。ウサギ増殖硝子体網膜症モデルにおけるペリオスチン標的核酸による増殖組織抑制効果は未検討であり、次年度に検討する予定である。増殖組織の活動性(個性)を規定する遺伝子群の包括的抽出は包括的遺伝子発現解析により興味ある遺伝子の抽出を終了し、論文化を終えた。以上より、当該計画はおおむね順調に進展しているとした。初年度ですでに、核酸のIn vitro導入の最適化を終了できた。マトリセルラー蛋白であるペリオスチンを第一の標的として、siRNAを作製した。構成細胞の一つである培養ヒト網膜色素上皮細胞(RPE)を用いて、TGFB2刺激によるペリオスチンの発現変化を、リアルタイムRT-PCR法、Westen blot法、ELISA法、免疫染色を用いて検討した。増殖組織とTGFB2刺激RPE細胞では、ペリオスチンとaSMA陽性細胞が共染色された。ペリオスチンSiRNAの生物学的抑制効果について、増殖能をBrdU法、遊走能をCell migration法、接着能をMTT法、収縮能をCollagen gel contraction法を用いて定量した。TGFB2依存性の遊走、接着は、ペリオスチンSiRNA(10nM)により抑制された。これらのin vitroの結果をふまえて、次年度以降に、ペリオスチンSiRNAの抑制効果をin vivoモデルを用いて検討する基盤が整った。当初高機能性架橋型人工核酸Bridged Nucleic Acids(BNA)を用いたペリオスチン分子標的薬の創製を予定し、上記の実験をすすめたが、最近、「1本鎖長鎖RNA」と「分子内水素結合による特徴的な2次構造」を特徴とするRNA干渉作用をもつnkRNAが日本で開発され、我々の研究に入手可能となった。nkRNAは標準的なsiRNAと比べ、1.化学的安定性に優れる2.ドラッグデリバリーシステムが不要3.一本鎖核酸であり、TLR3と結合せず自然免疫系を惹起しない4.製造が安価・短期間5.標準的なsiRNAの既存特許に抵触せず、ライセンス費用が節約できる。などの利点がある。
２次元イッテルビウム量子縮退ガスを用いた大規模エンタングルメント状態の生成

本年度は量子気体顕微鏡の技術を活用して、原子が2次元光格子中に欠陥なく並んでいる状態を生成する段階に踏み込んだ。まず、Bose-Hubbard模型で実現される超流動状態からMott絶縁状態への相転移を、飛行時間測定法を用いて観測した。超流動状態では原子の位相が揃っているため、波動関数が拡散するとともに干渉縞が現れる。ポテンシャルの深さを徐々に上げていくとMott絶縁状態が誘起され、原子の位置が確定されると同時に位相が不確定になり、干渉縞が消えていくことが確認された。実験において相転移が生じたポテンシャル深さは、理論的な予想と一致していた。Mott絶縁状態が誘起されても、系の温度が十分に低くなっていない場合、一つのサイトに2個以上の原子が入ったり、あるいは欠陥が生じたりしてしまう。私が構築した量子気体顕微鏡は、サイト内原子数が0か1かを区別することはできるが、原子数が1か2以上かを判断することはできない。そこで、光会合技術を導入することで、同一サイト中の2原子を分子に変換・排除し、原子数の偶奇を判定することにした。実際に光会合光を照射した後、量子気体顕微鏡を使って光格子中の原子分布を直接観測したところ、各サイトの原子数が予想に反して揺らいでいることが確認された。原子数のゆらぎを抑圧するためには系の温度を1nK程度まで下げる必要性がある。別途、系の加熱レートを評価したところ、30nK/sec程度であることが判明した。超流動相からMott絶縁相への相転移を誘起し、顕微鏡で観測するためには、1sec程度の時間が必要となるため、上記した超低温度下での観測は難しいと言える。光格子を生成しているレーザーを吸収・自然放出することによる不可避な加熱レートを見積もったところ、僅か50pK/secであり、測定された加熱レートが、主に、レーザーの周波数・強度ノイズや、実験系の音響振動といった技術的なノイズによるものであることが明らかとなった。27年度が最終年度であるため、記入しない。私は、Yb原子を2次元光格子中にトラップし、大規模なエンタングルメント状態を生成することを目指している。この目的を達成するためには、Yb原子集団のボース・アインシュタイン凝縮を作った後、MottInsulator相転移を起こし、光格子の個々のサイトに原子を1個ずつ正しく並べる必要性がある。サイト内の原子にアクセスするため、分解能と集光効率を上昇させる固浸レンズ(SILと高分解能対物レンズ(NA=0.55)からなる顕微鏡システムを新たに真空系に組み込んだ。まず、冷却されたYb原子をSILの直下まで輸送し、アコーディオン手法を使うことで凝縮体ガスを200nm程度の円盤状に圧縮した。アコーディオン用のレーザー光を折り返すことで、1次元光定在波を作ることができる。同様のアコーディオン光を直交する2方向から導入すれば2次元光格子を生成することもできる。emCCDカメラの性能と顕微鏡系の集光効率を考えると、原子を蛍光観察するためには、一原子あたり1万フォトンが必要となる。しかし、原子に光を当てて励起するだけだと、大きな輻射圧を受けて原子がサイトから100フォトンも発光せずに離脱してしまう。そのため、原子を冷却しながら励起することが本質的に重要となる。この目的を達成するために私は、3準位系を利用した新たな冷却方法を考えた。アコーディオン光として(6s6p) 1P1-〉(6s7s)1SOから離調500GHz離れたレーザーを用いることで、(6s6p) 1P1状態に深いポテンシャルを作ることができる。(6s2) 1SO-〉(6s6p)1PIに共鳴した光を当てると、原子が基底状態(6s2) 1SOと(6s6p) 1P1の間でRabi振動し、平均的に深いポテンシャルを感じることになる。高分解能顕微鏡を使うことで、530nmの周期を持つ原子の空間的分布を直接観察することに成功した。また、2次元光格子にトラップされた原子についても、上記と同じ周期の2次元的な模様を確認することができた。これはいずれも世界初の成果である。私は、イッテルビウム(Yb)原子を2次元光格子にトラップすることで、大規模なエンタングルメント状態を生成することを目指している。その第一段階として、光格子に原子をトラップし、「量子気体顕微鏡」で原子の蛍光を画像化することに成功した。量子気体顕微鏡では2次元光格子にトラップされている原子に励起光を当てて、各サイトの原子が放出した蛍光をCCDカメラを使って高分解能で観測する。明瞭な画像を得るためには、1原子あたりおよそ1万個の光子が必要とされるが、光子の放出に伴い、原子が急速に加熱されることが問題となる。これまで多くの研究者がこの加熱を抑えるために、原子を冷却する必要があると考えていた。これに対し私は、100mK程度の深いポテンシャルを準備し、励起光(波長399nm)による加熱を単純に抑え込んでしまうという方法をとることにした。このように深いポテンシャルを基底状態に作ろうとすると、様々な問題が発生することが知られている。私は基底状態ではなく、励起状態に深いポテンシャルを形成するという手法をとり、問題を回避した。撮像時、励起光を照射すると、基底状態と励起状態がカップリングするため原子に対して十分深いポテンシャルを与えることができる。

実際に格子間隔が543nmの2次元光格子を固浸レンズの直下2μmの場所に構築し、励起光を照射することで、320nm(FWHM)という高分解能で個々のサイトを観察することに成功した。本年度は量子気体顕微鏡の技術を活用して、原子が2次元光格子中に欠陥なく並んでいる状態を生成する段階に踏み込んだ。まず、Bose-Hubbard模型で実現される超流動状態からMott絶縁状態への相転移を、飛行時間測定法を用いて観測した。超流動状態では原子の位相が揃っているため、波動関数が拡散するとともに干渉縞が現れる。ポテンシャルの深さを徐々に上げていくとMott絶縁状態が誘起され、原子の位置が確定されると同時に位相が不確定になり、干渉縞が消えていくことが確認された。実験において相転移が生じたポテンシャル深さは、理論的な予想と一致していた。Mott絶縁状態が誘起されても、系の温度が十分に低くなっていない場合、一つのサイトに2個以上の原子が入ったり、あるいは欠陥が生じたりしてしまう。私が構築した量子気体顕微鏡は、サイト内原子数が0か1かを区別することはできるが、原子数が1か2以上かを判断することはできない。そこで、光会合技術を導入することで、同一サイト中の2原子を分子に変換・排除し、原子数の偶奇を判定することにした。実際に光会合光を照射した後、量子気体顕微鏡を使って光格子中の原子分布を直接観測したところ、各サイトの原子数が予想に反して揺らいでいることが確認された。原子数のゆらぎを抑圧するためには系の温度を1nK程度まで下げる必要性がある。別途、系の加熱レートを評価したところ、30nK/sec程度であることが判明した。超流動相からMott絶縁相への相転移を誘起し、顕微鏡で観測するためには、1sec程度の時間が必要となるため、上記した超低温度下での観測は難しいと言える。光格子を生成しているレーザーを吸収・自然放出することによる不可避な加熱レートを見積もったところ、僅か50pK/secであり、測定された加熱レートが、主に、レーザーの周波数・強度ノイズや、実験系の音響振動といった技術的なノイズによるものであることが明らかとなった。アルカリ原子であるルビジウム(Rb)に対する量子気体顕微鏡が実現されて以来、フェルミオン同位体を有する原子種に対して顕微鏡を実現することが世界的に急務となった。候補となる原子種として、カリウム(K)、リチウム(Li)、イッテルビウム(Yb)が注目されていたが、Rb原子特有の冷却手法を活用できないことが大きな障壁となっていた。私は、「サイト内で原子を冷却しなければならない」という固定観念を捨て、「顕微観測中の原子の加熱に耐えうる深いポテンシャルを形成する」という全く新しい発想にたって研究を進めた。その結果、世界で初めて、フェルミオン同位体を有する新しい原子種に対して量子気体顕微鏡を構築することに成功した。本研究に関する競争の激しさは、我々が論文を投稿した後、Harvard大、MIT、そしてStrathclyde大の3グループが、ほぼ同時にK、Liに関する成果をarXivに投稿したことからも理解される。以上より、本研究が当初の計画以上に進展していると判断した。27年度が最終年度であるため、記入しない。本研究では、Yb原子が有する核スピンを利用して大規模なエンタングルメント状態を生成することを計画している。
長鎖非翻訳RNAによる歯周炎発症制御機構の解明

本研究の目的は、歯周組織構成細胞において、微生物因子・環境的因子などの外的因子による刺激に反応して機能するlncRNAを同定し、その作用機序を解明することであり、他の生活習慣病より外的要因の占める割合が高いとされる慢性歯周炎において、環境因子の蓄積がlncRNAによる動的クロマチン制御機構に与える影響、およびその感受性の違いが宿主要因となる可能性を検討する研究となる。様々な外的要因を模倣した刺激下での共通したlncRNAの動的変化を見出すことで、慢性歯周炎の特徴を規定する決定的なlncRNA群やそのクロマチン動態が新規同定できる可能性がある。
JunB発現を誘導して血管を神経と並走させる神経-血管相互作用の実体の解明

発生期の血管は末梢神経にガイダンスされ神経線維と並走することで、生体内に端然と枝分かれした血管ネットワークを構築していく。近年この過程に関わる神経からの血管誘導因子が明らかにされてきたが、神経と血管が接触した際に、どのような細胞間シグナル伝達を介して血管内皮細胞が神経と並走するのかは明らかにされていない。発生期の原子血管叢が神経と並走し、成熟した血管ネットワークを形成していく過程は次の3つのステップに分けられ、神経からの血管内皮細胞の「誘引」、神経と血管の「接触」、神経と血管の「並走」の順に進行すると考えられる。我々はこの過程の中で神経と血管の直接の「接触」シグナルが血管内皮細胞にJunBの発現を誘導し、血管内皮細胞の遊走性の亢進、血管のリモデリングを介して血管を神経と並走させることを明らかにしてきたが、現在まで神経との接触シグナルを伝える細胞膜受容体が何であるのかは不明である。本研究はJunBの活性化を指標にして(1)神経ー血管の直接接触に関わる細胞膜シグナル伝達分子を明らかにし、(2)その血管ガイダンス分子・受容体を制御することで血管の方向を調節できるのかを検証することを目的としている。本年度はまず、神経ー血管並走過程における神経と血管の接触シグナルを伝える受容体を明らかにするため、その解析系の準備を行った。JunBのプロモーターのレポーターを利用し、神経ー血管の接触シグナルに関わる遺伝子をゲノムワイドで探索できる解析系の構築を行った。JunBプロモーターレポーターとCRISPR-dCas9ライブラリーを利用した解析系の構築に多くの時間を要したため。構築した解析系を用いて神経ー血管相互作用により血管内皮細胞でJunBの発現を誘導する受容体分子を明らかにし、その分子の血管形成過程での役割を明らかにする。また、同定した分子の血管ネットワーク形成への関与を検証する。
非定型精神病の全ゲノム関連解析法を用いた遺伝学的解明

全ゲノム関連解析法を用いて非定型精神病患者(n=47)DNAと正常対象者(n=882)DNA情報の比較を行い疾患感受性遺伝子の探索を行った。結果として単一のSNPがgenome-widesignificance(5E-8)を超えることはなかったものの、rs245914(p=1.61E-8,CHN2gene),rs12196860(p=2.45E-8,CPVLgene),rs12105421(5.31E-8)などがtophitの多型として挙げられた。また統合失調症と同様に6番染色体上MHC領域にピークを示すことなどが明らかとなった。さらに非定型精神病患者の遺伝情報は二大精神病(統合失調症と気分障害)のうちどちらに近接するかについてVEGAS解析を用いて調べたところ、統計学的な有意差をもって統合失調症の遺伝情報に近似することが明らかとなった)。さらに非定型精神病患者の遺伝情報は二大精神病(統合失調症と気分障害)のうちどちらに近接するかをVEGAS解析を用いて調べたところ、統計学的な有意差をもって統合失調症の遺伝情報に近似することが明らかとなった。なおこれらの結果は専門誌(American Journal of Medical Genetics PartB)に既にアクセプトされ、印刷中である。今後はこの研究結果をもとにして分子遺伝学的な手法を用いて機能解析を進めると同時に、内因性精神病の枠組みを再構築してくための礎としていきたい。「非定型精神病診断基準」に則り非定型精神病と診断された60名の患者より口頭および書面による同意を受けて、末梢血よりDNA採血を行い保存した。これらを補助事業者である藤田保健衛生大学精神神経科に送付し、Genome-Wide Human SNP Array 6.0(アフィメトリックス社)を用いて各サンプルごとの解析を始めている。チップ洗浄は交付申請書通りに藤田保健衛生大学内に設置されたGeneChip Fluidics Stationを用い、チップスキャンにはGeneChip Scanner 3000 7Gを使用している。また解析用のソフトウェアにはGenotyping Console SoftwareおよびPLINKが既に備えられており、データの解析が始められようとしている。情報収集およびデータの解析には平成23年度に購入したMacBook Air(Apple社)が用いられる。対照患者データとして日本人統合失調症575名と日本人正常対照者564名のデータは既に収集済みで、60名の非定型精神病患者データが出次第、Polygenic ScoreやGene Ontologyを用いた相互比較を行い、病因の同定に当たる。また継続してサンプル収集を進めていくと同時に、得られたデータの専門誌への投稿や、学会での発表に当てていくことになっている。これらの発表の準備のためにワシントンで開かれた世界精神科遺伝会議(World Congress of Psychiatric Genetic)に共同研究者である川茂聖哉とともに出席し、新しい情報の収集に努めた。当初の予定通りサンプル収集が行え、全ゲノム関連解析という新しい手法においても共同研究者間で意思疎通が十分に図れており、データ処理などの今後の仕事も円滑に行われると考えている。論文発表、学会発表のための必要経費に当てると同時に、必要物品の購入に当てる。次年度使用額196,403円についても、上記費用に充当するため繰越しをした。
HDL-miRNAの動脈硬化発症および進展に対するバイオマーカーとしての可能性

MicroRNA(miRNA)は、翻訳あるいは転写レベルにおいて遺伝子発現の調節に重要な役割を果たしているnon-coding RNAであるmiRNAの調節不全は、急性心筋梗塞、うっ血性心不全、薬剤誘発性肝損傷およびガンのような多くの疾患と関連している。従って、血中miRNAの発現パターンは、各種疾患に対するバイオマーカーとして注目されている。また、血中のTotal miRNAだけでなく、exosome中に封入されたmiRNAも独特のバイオマーカーになるとの報告がある。exosome中のmiRNAは、卵巣ガンや肺ガンの進行度を反映し、各種疾患に対して有用な情報を提供している。近年、miRNAが高比重リポタンパク(HDL)のようなリポタンパク中に安定に存在することが明らかになった。家族性高コレステロール血症や急性冠症候群患者のHDL中miRNAプロフィールは、健常人のものと比較して有意な差があることが報告されている。従って、HDL中のmiRNA(HDL-miRNA)も各種疾病のバイオマーカーとして可能性を有している。本研究では、一般的に測定されているTotal miRNAやexosome中のmiRNAを分析するのではなく、HDL中のmiRNAを解析し、生活習慣病に起因する動脈硬化の病態進展や発症予測における新規バイオマーカーとしての可能性を検討するものである。現在、我々は某地域住民の健康診断を受診した被検者の検体を次世代シーケンサーにて網羅的に解析するために、免疫沈降法を用いたHDL精製法の検討を行っている。この免疫沈降HDL精製法は、電子顕微鏡による粒子径の観察およびウェスタンブロットによる分析により、非常に純度の高いHDLが精製されることが明らかとなった。本研究では、動脈硬化症の発症および進展に関する新たなバイオマーカーの可能性としてHDL-miRNAの可能性を検討している。今年度は、住民の健康診断を受診した被検者の検体を次世代シーケンサーにて網羅的に解析するために、免疫沈降法を用いたHDL精製法の検討を行っている。次年度は、これらの検体を次世代シーケンサーで網羅的に分析する準備もできた。これらの事から、本研究は、おおむね順調に進展していると判断した。以上のように、我々は、住民の健康診断を受診した被検者に対して、超音波検査による頚動脈の内膜中膜複合体厚(IMT)やプラーク形成などの検査を実施した。それらの結果から動脈硬化を有する群と対照群に分け、これらの検体を次世代シーケンサーによる網羅的解析を実施して、動脈硬化の病態進展と発症予測に関係するHDL-miRNAを明らかにする予定である。近年、microRNA(miRNA)は、exosomesやmicrovesicles以外に、HDLなどのリポタンパクに含まれている事が明らかになっている。また、HDL中に含まれるmiRNA(HDL-miRNA)は、血清や血漿などの体液中に非常に安定した状態で存在しており、HDL-miRNAは、家族性高コレステロール血症および冠動脈疾患患者において、健常者と比較して、有意な変化を示すとの報告がある。現在、我々は某地域住民の健康診断を受診した被検者を対象に、動脈硬化の有無を超音波検査による頚動脈の内膜中膜複合体厚(IMT)を測定し、動脈硬化症とHDL-miRNAの関係を解析した。さらに、動脈硬化症、II型糖尿病および高血圧など様々な疾患のベースとなる肥満とHDL-miRNAの関係についても検討した。その結果、動脈硬化や肥満においてHDL-miR-24, 92, 223, 486は有意な増加を認めたが、血漿中のTotal miR-24, 92, 223, 486では、有意な変化を示さなかった。また、その時の一般的な動脈硬化のマーカーとされているHDL-コレステロール濃度は、健常群と動脈硬化群の間では、有意な変化を示さなかった。従って、HDL-miRNAが動脈硬化における新規のバイオマーカーである可能性が示唆された。今年度は、動脈硬化症で変化する数種類のHDL-miRNAを見出すことに成功し、動脈硬化の前段階で起こる可能性がある肥満においても、これらのmiRNAが変化することも明らかにした。また、HDL-miRNAの測定時における精度管理上の問題も解決し、次年度に向けた準備も順調に進んだ。

家族性高コレステロール血症や急性冠症候群患者のHDL中miRNAプロフィールは、健常人のものと比較して有意な差があることが報告されている。従って、HDL中のmiRNA(HDL-miRNA)も各種疾病のバイオマーカーとして可能性を有している。本研究では、一般的に測定されているTotal miRNAやexosome中のmiRNAを分析するのではなく、HDL中のmiRNAを解析し、生活習慣病に起因する動脈硬化の病態進展や発症予測における新規バイオマーカーとしての可能性を検討するものである。現在、我々は某地域住民の健康診断を受診した被検者の検体を次世代シーケンサーにて網羅的に解析するために、免疫沈降法を用いたHDL精製法の検討を行っている。この免疫沈降HDL精製法は、電子顕微鏡による粒子径の観察およびウェスタンブロットによる分析により、非常に純度の高いHDLが精製されることが明らかとなった。本研究では、動脈硬化症の発症および進展に関する新たなバイオマーカーの可能性としてHDL-miRNAの可能性を検討している。今年度は、住民の健康診断を受診した被検者の検体を次世代シーケンサーにて網羅的に解析するために、免疫沈降法を用いたHDL精製法の検討を行っている。次年度は、これらの検体を次世代シーケンサーで網羅的に分析する準備もできた。これらの事から、本研究は、おおむね順調に進展していると判断した。以上のように、我々は、動脈硬化および肥満で変動する数種類のmiRNAを同定しているが、今後はサンプル数を増やし、肥満から始まる動脈硬化の発症や進展に関する有用なマーカーとしてのHDL- miRNAを検証していく予定である。以上のように、我々は、住民の健康診断を受診した被検者に対して、超音波検査による頚動脈の内膜中膜複合体厚(IMT)やプラーク形成などの検査を実施した。それらの結果から動脈硬化を有する群と対照群に分け、これらの検体を次世代シーケンサーによる網羅的解析を実施して、動脈硬化の病態進展と発症予測に関係するHDL-miRNAを明らかにする予定である。平成30年度以降に使用する予定です。次世代シーケンサーの費用が高額なので、その費用に充てる。
芸術と社会-オディロン・ルドンの作品研究-

19世紀後半から20世紀初頭の美術をめぐる社会動向を考慮しながら、ルドンが晩年に様式変化を見せた要因を探ってきた。第一に、ゴブラン製作所から受けた注文制作をもとに、美術制度改革やフランス伝統芸術復興の動きとルドン芸術に対する社会的評価とのかかわりを考察し、この注文によって画家は重要な影響を受けたことを指摘した。第二に、1894年のデュラン=リュエル画廊における個展以降、美術批評家および象徴主義作家から美術愛好家へと入れ替わったルドン芸術受容者層の変化と拡大のメカニズムを探った。第三に、ルドンが生涯を通じて手がけた100点を超す肖像画の表現と受容者との緊密な関係、それと画家のテキストとの関係を確認した。画家はレンブラントこそは肖像画芸術の頂点であるとみなし、光を制御し細部を省略する方法と精神の表出を第一とする態度を手本とした。しかし1898年以降、ルドンが新しい顧客のために用いた光と色彩に満ちた表現はその理想と矛盾を見せている。ルドンが変化を強める一方で、テキストによって同時代のレアリスム画家たちの肖像画を厳しく批判し、彼らをレンブラントの対極にあるフランス・ハルスの系譜に位置づけた意図は、自らの正統性を主張することにあったと考えられる。作品とテキストとのあいだの矛盾、テキストの戦略性を指摘した(日仏美術学会口頭発表、2006年12月1日)。第四に、ルドンの作品《出現》の源泉に関する調査結果を現在まとめている。この作品についてはモローの《サロメ》からの影響が指摘されてきたが、この女性像は、1877年からブーローニュの森の馴化公園で一般公開された小部族の相貌との関連を見せている。また「切断された頭部」は、ルドンが「眼球」を発展させた球体モチーフのひとつである。《出現》に描かれたのは、進化論を象徴する「眼球」(=頭部)が混沌から突如現れ出る瞬間、すなわち生命の起源のテーマであり、この作品には、人間の起源への社会的関心と、ダーウィニスムへの共感が認められる。19世紀後半から20世紀初頭に活躍したフランス人画家オディロン・ルドンの芸術に関し、今年度は第一に方法論的考察を行った。難解で謎めいたモチーフに満ちたルドンの作品を解明するに際し、視覚芸術と文学との関係を考察する図像学的研究は有効な方法だが、その結果はいずれも推測の域を出ず、限界が見出される。これを乗り越えるために、作品の受容関係の解明が必要と思われた。ガンボーニはその研究において1880年代の批評家・文学者ら同時代の解釈者による受容を問題としたが、本研究では1890年代より晩年までを支えたさまざまな職種の愛好家たちによる受容にまで範囲を拡げ、画家を取り巻いた環境の変容を考察した。1890年代以前には、受容者(解釈者)と画家とが作品に対し相互に解釈を与えあう関係が見られた。90年以降にも、画家が特権化した一部の受容者によりその他の受容者が選ばれ、解釈は管理され続けたが、画廊の仲介と展覧によって受容者層は拡大した。1900年頃にルドン芸術に大きな変化が見られたのは、その結果、多様な解釈にさらされたためであると考えられる。第二に、ルドン芸術受容の研究の一つとして、フランス政府から受けた注文制作作品(ゴブラン織り下絵)について調査、考察を行った。オディロン・ルドンは晩年に画廊及び顧客から注目を集める一方、それまでまったく評価を得ることのなかったアカデミックな美術界からも一定の評価を得た。この注文をめぐり調査を進め、画家に作風の変化(装飾的傾向)を促した要因と考えられる受容者の拡大をめぐり、その社会的背景を探った。その結果の一部を、昨年度、学会誌に発表したところ、2004年5月に美術史学会論文賞を受賞した。今年度もこの研究を継続し、画商-展覧会-顧客の連携による新しい美術市場が活発に機能しつつあった19世紀後半における、画家評価のメカニズムを具体的に検討した。フランス人画家オディロン・ルドンの芸術に関する研究を継続している。平成17年度には、フランス美術史研究所、フランス国立図書館、フランス国立美術館図書・資料室を中心に調査を行った。調査の結果、これまで所在が不明であったロワベ作《ワルトネーの肖像》の複製を発見し、関連の美術批評や同時代出版物を確認することができた。現在、その成果を「(仮題)ルドンと肖像画-ロワベ、マネ、ハルス、レンブラント解釈を手がかりに-」にまとめている。この論考の目的は第一に、ロワベ作《ワルトネーの肖像》をルドンが厳しく批判したことの意味を明らかにすることである。ルドンは、ロワベ批判を通して、フランツ・ハルス的な手法を特徴とする同時代のレアリスム絵画、とくにマネやドガの肖像画を痛烈に批判している。第二に、ルドンにとってハルスの芸術は何を意味したのかを明らかにすることである。ルドンはハルスを絵画専一の画家と位置づけ、比較することによって、レンブラントの豊かな精神性を強調した。ルドンがそのオランダ絵画論において二人を比較したのは、同時代のトレ=ビュルガーとフロマンタンから影響を受けたものと考えられる。第三に、ルドンの生涯を通じて100点以上も描かれた肖像画のなかで、1900年頃に現れた変化の意味を明らかにすることである。

変化とは、画面の中央に人物のみを単彩で描いていたのをやめ、花を中央に、人物を端に置くという反伝統的な構図を取り入れるとともに、色鮮やかな花を画面全体に浮遊させるようになったことである。同様の構図とモチーフを用いたドガやマネとは異なり、ルドンは描かれた草花の現実感を消し、空間の整合性を意図的になくすことによって精神の表出をめざした。そこに使われたのは、レンブラントから継承した省略法と誇張法である。これを、日仏美術学会で口頭発表し、論文投稿する予定である。19世紀後半から20世紀初頭の美術をめぐる社会動向を考慮しながら、ルドンが晩年に様式変化を見せた要因を探ってきた。第一に、ゴブラン製作所から受けた注文制作をもとに、美術制度改革やフランス伝統芸術復興の動きとルドン芸術に対する社会的評価とのかかわりを考察し、この注文によって画家は重要な影響を受けたことを指摘した。第二に、1894年のデュラン=リュエル画廊における個展以降、美術批評家および象徴主義作家から美術愛好家へと入れ替わったルドン芸術受容者層の変化と拡大のメカニズムを探った。第三に、ルドンが生涯を通じて手がけた100点を超す肖像画の表現と受容者との緊密な関係、それと画家のテキストとの関係を確認した。画家はレンブラントこそは肖像画芸術の頂点であるとみなし、光を制御し細部を省略する方法と精神の表出を第一とする態度を手本とした。しかし1898年以降、ルドンが新しい顧客のために用いた光と色彩に満ちた表現はその理想と矛盾を見せている。ルドンが変化を強める一方で、テキストによって同時代のレアリスム画家たちの肖像画を厳しく批判し、彼らをレンブラントの対極にあるフランス・ハルスの系譜に位置づけた意図は、自らの正統性を主張することにあったと考えられる。作品とテキストとのあいだの矛盾、テキストの戦略性を指摘した(日仏美術学会口頭発表、2006年12月1日)。第四に、ルドンの作品《出現》の源泉に関する調査結果を現在まとめている。この作品についてはモローの《サロメ》からの影響が指摘されてきたが、この女性像は、1877年からブーローニュの森の馴化公園で一般公開された小部族の相貌との関連を見せている。また「切断された頭部」は、ルドンが「眼球」を発展させた球体モチーフのひとつである。《出現》に描かれたのは、進化論を象徴する「眼球」(=頭部)が混沌から突如現れ出る瞬間、すなわち生命の起源のテーマであり、この作品には、人間の起源への社会的関心と、ダーウィニスムへの共感が認められる。
即発γ線分析によるコンクリート中の塩化物イオン濃度分布の現場非破壊測定方法の開発

本研究は中性子を試料に照射して放出されるガンマ線を測定すると多くの元素を同時に分析できる方法を利用して、ビーム状の中性子をコンクリートの表面に角度を徐々に変えて照射することにより、コンクリート構造物の塩害と呼ばれる鉄筋腐食による劣化の進行の予測に必要なコンクリート中の塩化物イオン濃度を非破壊で測定する方法を提案し、任意の塩化物イオン濃度分布に対して適用が可能で、その方法が妥当であることを示している。本研究は即発γ線分析によりコンクリート内部の塩化物イオンの濃度分布を測定する技術を、現場での非破壊計測方法に発展させることが目的である。現場計測を可能とするため、中性子水分計で利用されている移動可能な中性子線源であるカリフォルニウムを用いて、コンクリート内部の塩化物イオンの濃度分布の測定について検討する。カリフォルニウムからあらゆる方向に出ている中性子を原子炉からの中性子ビームと同じように所定の測定位置に照射する方法を検討する。また、カリフォルニウムでは半減期で知られているように経時変化があるので、その影響を検討する。さらに、即発γ線のエネルギースペクトルを得るためには一般にGe検出器が用いられるが、現場計測での取り扱いやすさとGe検出器に比べて安価であることを考慮して、エネルギー分解能は劣るがNaI検出器を用いた即発γ線分析を行い、耐久性診断に利用できる精度を確保して塩化物イオンの濃度分布の測定をする方法を検討する。本年度は中性子ビームを用いて、測定対象物の表面にダミー試料を取り付けて一枚ごと外して即発γ線を計測することにより、コンクリート内部の塩化物イオン濃度の表面からの深さ方向の分布を非破壊で測定することができた。ただし、測定精度にばらつきがあり、精度向上の検討が必要である。また、中性子ビームでなく現場での計測を考慮して水分計などで使用されているカリフォルニウムを用いて塩化物イオンの測定を試みたが、明確な即発γ線が計測できなかった。カリフォルニウムを用いた即発γ線の計測については次年度以降の課題である。従って、次年度はNaI検出器を用いた即発γ線分析を予定していたが、変更してカリフォルニウムとGe検出器での検討を行うこととした。昨年度提案した測定対象物の表面にダミー試料を取り付けて一枚ごと外して即発γ線を計測する方法では測定精度を改善する必要があったため、本年度は中性子ビームの照射角度を変えることにより、徐々に測定範囲を供試体の表面から深くすることにより、任意の塩化物イオン濃度の分布を評価することができた。測定精度は昨年度の方法よりは改善されたが、まだ精度を良くする必要がある。測定精度に関しては即発γ線分析の測定時間などの測定条件も関係しているため、来年度は測定条件の観点からも検討する予定である。また、即発γ線分析を用いて従来の方法に比べて試料の調整などを必要とせずにコンクリートの配合分析ができることが分かった。次年度は配合分析についても検討する予定である。一方、本年度も昨年度同様に、中性子ビームでなく現場での計測を考慮して水分計などで使用されているカリフォルニウムを用いて塩化物イオンの測定を試みたが、種々の工夫を試みたが、明確な即発γ線が計測できなかった。中性子ビームを用いた場合にはある程度の精度で塩化物イオン濃度分布を測定できることから、カリフォルニウムを用いた即発γ線の計測については、既往の研究で提案されている装置を参考にして、上述の方法が適用できるかどうかを次年度に検討する予定である。本研究は即発γ線分析によりコンクリニト内部の塩化物イオンの濃度分布を測定する技術を、現場での非破壊計測方法に発展させることが目的である。昨年度提案した中性子ビームの照射角度を変えることにより、徐々に測定範囲を供試体の表面から深くすることにより、任意の塩化物イオン濃度の分布を評価することができた。本年度は現場計測に関する課題および中性子ビームの角度を変える方法の精度を改善することについて検討した。現場計測への展開に関して、昨年度と同様に中性子ビームでなく水分計などで使用されているカリフォルニウムを用いて塩化物イオンの測定を試みた。しかしながら、種々の工夫を試みたが、水分計などで用いられているカリフォルニウムは移動に関しては問題ないが、中性子の強度が弱く、塩化物イオンの測定には適さないことが分かった。米国でコンパクトな携帯用の中性子ジェネレーターが開発されており、その携帯用中性子ジェネレーターを用いた実験はできなかったが、即発γ線によるコンクリート中の塩化物イオン分析の第一人者であるメリーランド大学R.A.Livingston教授との議論から本研究で提案する中性子ビームの角度を変える方法は携帯用中性子ジェネレーターにも適用可能であることを確認できた。ただし、実証は今後の課題である。また、中性子ビームの照射角度を変えることにより、徐々に測定範囲を供試体の表面から深くすることにより、任意の塩化物イオン濃度の分布を評価する方法において、測定精度を改善するためには設定している測定範囲よりも奥から発生する即発γ線を考慮する必要がある。

中性子ビームの角度が測定対象物体の表面から小さい場合には測定値の1割程度をノイズとして差し引いて、角度が大きくなるにつれて、ノイズとして差し引く割合を少なくする方法を提案した。既往の測定結果を用いれば、この方法により測定精度を改善することができた。ただし、多くのケースについて検討する予定であったが、東日本大震災の影響により日本原子力研究開発機構の試験装置が使用できなかったため、十分な検証データの蓄積はできなかった。
蛍光性三脚型6座配位子の新規合成と細胞観察用蛍光プローブへの応用に関する研究

生長に必要な鉄の細胞内への取り込みは,一般的な細菌から病原性細菌に於いて幅広く見られる現象である。従って,新規な細胞観察用蛍光プローブを開発することは,鉄取り込み機構の解明のみならず病原性細菌の研究を通した医薬品の創製に於いて必要不可欠である。本研究では、新規な蛍光性2座および三脚型6座配位子を合成し,鉄錯体形成による消光と配位子解離による蛍光の回復,すなわち蛍光のON-OFFを利用し,菌体を用いた鉄取り込みの蛍光顕微鏡を用いた直接観察を目的とした。この2年間の研究で,以下のような成果が得られた。1.6-アミノ-2,3-ジモルホリノキノキサリンに3-ヒドロキシ-4(1H)-ピリジノンが直結した新規な蛍光性2座配位子(a)およびカテコールがメチレンを介して結合した蛍光性2座配位子(b)を合成した。2.L-プロリナールを用いた還元的アルキル化反応により蛍光性の光学活性キノキサリン(c)を合成した。3.6位と8位にアリール基が置換した蛍光性イミダゾピラジン(d)を合成した。4.蛍光性三脚型6座配位子は中間体の溶解性が予想以上に低かったため合成できなかった。5.蛍光性2座配位子(a)はFe(III)と3:1錯体を形成すること及びFe(III)の添加と共に著しい静的消光が起こることがわかった。また,強力な鉄キレーターを添加すると蛍光が回復することもわかった。6.2座配位子(b)では塩基性条件下でカテコール部位からキノキサリン環への分子内電荷移動に基づく吸収帯が観測された。7.光学活性キノキサリン(C)は高感度な光学純度決定試薬に成り得ることが明らかとなった。8.イミダゾピラジン(d)は活性酸素の一種であるスーパーオキシドラジカルアニオンの高感度検出だけでなくpHセンシングも同時に行えることが明らかとなった。本研究では、新規な蛍光性2座および三脚型6座配位子を合成し,鉄錯体形成による消光と配位子解離による蛍光の回復,すなわち蛍光のON-OFFを利用し,菌体を用いた鉄取り込みの蛍光顕微鏡を用いた直接観察を試み,新規蛍光性配位子が細胞観察用の新しい蛍光プローブに成り得るかを評価することを目的とした。平成15年度は,蛍光性2座配位子の合成と蛍光特性の評価を中心に研究を進めた。その結果,以下のような成果が得られた。1.2,3-ジクロロ-6-ニトロキノキサリン(a)から2段階の反応を経て,6-アミノ-2,3-ジモルホリノキノキサリン(b)を合成した。2.キノキサリン(b)と3-ベンジルオキシ-2-メチル-4-ピロンから2段階の反応を経て,3-ヒドロキシ-4(1H)-ピリジノンが直結した蛍光性2座配位子(c)を合成した。3.キノキサリン(b)と2,3-ジヒドロキシベンズアルデヒドから2段階の反応を経て,カテコールが結合した蛍光性2座配位子(d)を合成した。

4.2座配位子(c)は,Fe(III)と3:1錯体を形成すること,及びFe(III)の添加とともに著しい静的消光が起ることがわかった。5.2座配位子(c)-Fe(III)錯体の溶液に強力な鉄キレーターであるDFBやEDTAを加えると蛍光の回復が見られ,蛍光のON-OFFが可能であることがわかった。これまでの研究成果の一部は有機合成化学協会誌に論文として発表し,一部は日本化学会第84春季年会でポスター発表する。生長に必要な鉄の細胞内への取り込みは,一般的な細菌から病原性細菌に於いて幅広く見られる現象である。従って,新規な細胞観察用蛍光プローブを開発することは,鉄取り込み機構の解明のみならず病原性細菌の研究を通した医薬品の創製に於いて必要不可欠である。本研究では、新規な蛍光性2座および三脚型6座配位子を合成し,鉄錯体形成による消光と配位子解離による蛍光の回復,すなわち蛍光のON-OFFを利用し,菌体を用いた鉄取り込みの蛍光顕微鏡を用いた直接観察を目的とした。平成16年度は,蛍光性2座および三脚型6座配位子の合成と蛍光特性の評価を中心に研究を進めた。その結果,以下のような成果が得られた。1.6-アミノ-2,3-ジモルホリノキノキサリンにカテコールがメチレンを介して結合した新規な蛍光性2座配位子(a)を合成した。2.L-プロリナールを用いた還元的アミノ化反応により新規な蛍光性の光学活性キノキサリン(b)を合成した。3.6位と8位にアリール基が置換した新規なイミダゾピラジン(c)を合成した。4.蛍光性三脚型6座配位子は中間体の溶解性が予想以上に低かったため合成できなかった。5.2座配位子(a)では塩基性条件下でカテコール部位からキノキサリン環への分子内電荷移動に基づく吸収帯が観測された。6.光学活性キノキサリン(b)は高感度な光学純度決定試薬に成り得ることが明らかとなった。7.イミダゾピラジン(c)は活性酸素の一種であるスーパーオキシドラジカルアニオンの高感度検出だけでなくpHセンシングも同時に行えることが明らかとなった。これまでの研究成果の一部は有機合成化学協会誌Heterocycles誌,Luminescence, J. Biol. & Chem. Luminescence誌などの学術雑誌に,一部は第34回複素環化学討論会で発表した。
シャペロニンダイナミクスの1分子イメージング

プレフォルディンは、変性中間状態にあるタンパク質を捕捉(アレスト)して、グループII型シャペロニンに受け渡す機能を有する新しい分子シャペロンである。6つのサブユニット(α_2β_4)がそれぞれコイルドコイルを形成し、くらげのような構造をしている。それぞれの足(サブユニット)の先端で変性中間状態の蛋白質を結合し、グループII型シャペロニンに受け渡すと考えられているが、変性タンパク質やシャペロニンをどのように認識しているかは明らかになっていない。私は超好熱性古細菌由来グループII型シャペロニン、プレフォルディンを用いて、それらの協調機構の解明を行った。本研究では、1分子蛍光イメージング、SPRセンサーを用いることにより、シャペロニン、プレフォルディンの相互作用メカニズムの解明の糸口を得ることに成功した。超好熱性古細菌Pyrococcus horikoshii OT3由来プレフォルディンは豚心臓由来クエン酸合成酵素(CS)の熱変凝集を阻害し、酸変性したGFPの自発的凝集を阻害する。一方、実際にプレフォルディンとシャペロニンが物理的に相互作用していることは、1分子イメージングや、SPRセンサーによる解析の結果証明された。また、X線結晶構造からN-及びC-末端部分が、変性タンパク質認識やシャペロニンとの結合に重要な部位であることを示唆されているので、α、βサブユニットの末端欠損体から、変性タンパク質結合部位及びシャペロニンへの結合部位の特定を試みた。その結果、βサブユニットのC末6-8残基が変性タンパク質認識に重要な部位であり、PhPFDαC末8残基、βC末5残基に、シャペロニンとの結合に重要な部位が存在することが示唆された。
原発不明癌の骨転移症例に対する血清あるいは尿を用いた原発巣の診断法の樹立

悪性腫瘍の再発・転移に関する因子の研究成果として、胃消化管間質腫瘍(GIST)においてPPP2R1Aという脱リン酸化酵素の遺伝子変異が生命予後に影響を与える因子であることを見出した(Toda-Ishii, et al. Mod Pathol, 2016)。また、弧在性線維性腫瘍(SFT)では、腫瘍特異的な融合遺伝子のタイプによって生命予後に差が出ることを示し、また腫瘍の悪性度が急激に上がる脱分化現象にTERT promoter変異とTP53変異が関与している可能性を示した。残念ながら、直接の癌の早期発見に繋がるような因子の同定は本研究期間中には困難であった。骨転移は、乳癌・前立腺癌・腎癌・肺癌を含めた多くの癌でよくみられる現象である。しばしば遭遇する原発不明癌の骨転移における原発巣の診断は、臨床的に非常に重要な意味を持つが困難であることも多く、また様々な精査を行った末に原発巣がわからず、最終的に原発不明癌として治療されることも少なくない。2002年から2014年までの間に経験した2641例の骨転移症例のうち、癌の既往の有無などを含めた臨床情報から原発巣が不明であった原発不明癌骨転移症例286例に対し、後向きコホート研究を行い、原発巣の診断に有力な検査の同定、最終的に原発不明癌骨転移と診断される割合、また原発不明癌骨転移症例における各原発腫瘍別の生存率を算出した。その結果、88.8%の症例に原発巣が同定されtが、11.2%の症例は結果として原発巣が同定されなかった。原発巣として最も多かったものは、肺腺癌であり約1/4を占めていた。原発不明癌患者の平均生存期間は20ヶ月であり、単発骨転移症例および多発骨転移症例の平均生存期間は、各々39ヶ月、16ヶ月であった。原発不明癌骨転移症例において、前立腺原発と診断された患者の平均生存期間は120ヶ月である一方、肺腺癌と診断された患者の平均生存期間は9ヶ月であった。最終的に原発不明癌と診断された患者の平均生存期間は11ヶ月であった。原発不明癌骨転移症例においては、最終的に原発不明癌と診断される患者以上に予後不良を呈する肺腺癌患者が最も多かったことからは、原発不明癌骨転移症例の治療の際には、診断の確定にこだわらず、早期に治療を開始することが重要であると思われた(Takagi et al. PLOS One in press)。骨転移は、多くの癌でよくみられる現象である。しばしば遭遇する原発不明癌の骨転移における原発巣の診断は、臨床的に非常に重要な意味を持つが困難であることも多い。我々は、昨年度、後向きコホート研究を行い、原発不明癌骨転移症例における各原発腫瘍別の生存率を算出した。その結果、88.8%の症例に原発巣が同定されたが、11.2%の症例は結果として原発巣が同定されなかった。原発不明癌骨転移症例においては、最終的に原発不明癌と診断される患者以上に予後不良を呈する肺腺癌患者が最も多かったことからは、原発不明癌骨転移症例の治療の際には、診断の確定にこだわらず、早期に治療を開始することが重要であることを示した(Takagi, Saito et al. PLOS One 2015)。近年、このような患者にまず用いられる治療薬は、破骨細胞による骨破壊を抑制する分子標的治療薬denosumabである。今年度、我々は、denosumabによる骨破壊の抑制に破骨細胞由来のMMP-9の分泌が重要な役割を果たしていることを見出した(Mukaihara, Saito et al. PLOS One, 2016)。この結果は、原発不明癌細胞由来のMMP-9の分泌の多いものに関しては、denosumabの治療効果が乏しくなる可能性があり、これらの腫瘍に関しては別に治療方針を考える必要性があることを示唆している。研究担当の大学院生の約1年間の海外出張により研究の遂行に遅延を生じた。研究担当の大学院生の帰国さらに新規にグループに加入した大学院生など研究人員の増加により本年度は進捗が期待される。最終年度は、悪性腫瘍における予後に影響を与えるような因子の解析を行った。胃消化管間質腫瘍では、PP2Aという脱リン酸化酵素の一部をなすタンパク質をコードする遺伝子であるPPP2R1Aの変異が高頻度にみられ、その変異が存在している腫瘍では基質となるタンパク質のリン酸化が亢進し、腫瘍の再発率が上がり、また生命予後が短くなるといった腫瘍の悪性度と相関することを示した(Toda-Ishii et al. Mod Pathol, 2016)。本研究期間を通じた成果としては、残念ながら、直接の癌の早期発見に繋がるような因子の同定は本研究期間中には困難であった。しかしながら、多数例の原発不明癌の骨転移症例を用いた臨床研究において、確定診断のつく前に早期に治療を始めることの重要性を導き出した。

この治療においては、denosumabという破骨細胞の分化・機能を抑制する薬剤が使われるが、同じくdenosumabが分子標的薬として使われる骨巨細胞腫において、denosumabの作用機序を初めて明らかにした(Mukaihara et al. PLOS One, 2016)。また、原発不明癌の骨転移症例においては、肺癌(腺癌)が最も多いことを見出し、これは、研究代表者らが以前に示した肺腺癌における分泌タンパクであるGalectin-4の予後予測マーカーとしての重要性との関連性が高く、今後も悪性度に関わるタンパク質発現・遺伝子変異の同定、さらには新規治療の探索へと繋げていきたい。悪性腫瘍の再発・転移に関する因子の研究成果として、胃消化管間質腫瘍(GIST)においてPPP2R1Aという脱リン酸化酵素の遺伝子変異が生命予後に影響を与える因子であることを見出した(Toda-Ishii, et al. Mod Pathol, 2016)。また、弧在性線維性腫瘍(SFT)では、腫瘍特異的な融合遺伝子のタイプによって生命予後に差が出ることを示し、また腫瘍の悪性度が急激に上がる脱分化現象にTERT promoter変異とTP53変異が関与している可能性を示した。残念ながら、直接の癌の早期発見に繋がるような因子の同定は本研究期間中には困難であった。本年度は、原発不明癌骨転移症例における臨床病理学的な解析を行った。その結果から、肺腺癌が最も頻度が高く、また最も予後が悪い癌腫であることが判明し(Takagi et al. PLOS One, in press)、まずは肺腺癌の検出マーカーの検索を重点的に行っていくことにした。また、肺腺癌の転移巣では、我々が昨年度に同定した肺腺癌の転移予測マーカーであるGalectin-4の発現が亢進しており、予後予測マーカーであると同時に、骨転移の際の原発巣推定マーカーとなりうることを示すことができた。以上より、研究計画はほぼ順調に進展していると判断した。これまでの研究成果に基づき、今年度は腺房型肺腺癌転移巣の症例にGalectin-4とTTF-1の免疫染色を施行し、転写因子であるTTF-1とGalectin-4の発現の関連を調べた。腺房型肺腺癌ではGalectin-4とTTF-1の発現が有意に逆相関しており、肺腺癌の転移巣では、TTF-1の陽性率が約58%と低かった。Galectin-4陽性例5例は全てTTF-1陰性であり、Galectin-4とTTF-1の発現は有意に逆相関していた。原発不明癌の原発巣の診断の際に、その中で最も頻度の多い肺腺癌の診断をする際には、転移を来すような肺腺癌はTTF-1 (-)という発現型が比較的多いことから、TTF-1陰性でも肺腺癌の転移巣である可能性を容易に除外しないことが重要であるとともに、Galectin-4の発現が原発不明癌骨転移症例における診断補助として有用である可能性を示している(Hara, Saito et al. under submission)。また、甲状腺乳頭癌における臨床病理学的解析を行い、転移・再発に関わる予後不良因子として、TERT promoterの変異を同定した(Nasirden, Saito et al. Virchow Archives in revision)。これらの結果は、血清あるいは尿を用いた原発不明癌の原発巣の推定には直ちには役立たないと思われるが、このような患者においておそらく存在している原発不明癌由来の血液中のcirculating tumor
近世日本における書籍・摺物の流通と享受についての研究

1.書籍の流通業者について(a)貸本屋に関するデータの収集図書館・文庫、また個人蔵書から貸本印のデータ収集を行い、また引札等から本屋の貸本営業に関する記事を収集した。(b)仕入印データの収集図書館・文庫、また個人蔵書から、そこに押捺してある仕入印のデータを収集した。その成果の一部として、日本近世文学会平成10年秋季大会において「仕入印と符牒」と題する研究発表を行った。(c)売弘書肆データの収集主として明治初期刊本に備わる売弘書肆一覧記事を収集し、データ化した。(d)上記収集データの総合地域ごとに配列した書商の名寄せの形で上記データを総合し、冊子体の報告書とした。2.書籍の享受についての調査・研究松本市安西家・上松町武居家・小千谷市高橋家・同田中家・同大滝家の蔵書調査を行った。その内武居家の蔵書についての研究は「木曽上松宿武居家の蔵書」と題して『中央大学国文』第42号に発表した。3.近世日本を中心とする書籍・摺物の出版・流通・享受に関する文献目録の作成研究成果公開促進費(一般学術研究)の交付を受け、『近世書籍研究文献目録』と題し、ペりかん社より刊行、収集データを公開した。1)書籍の流通業者について(a)貸本屋の印記の収集架蔵本・中央大学所蔵本を中心に約130件のデータを収集し、印影を画像データに、また、その他文字化しうるデータをcsv形式で入力した。(b)仕入印データの収集架蔵本・中央大学所蔵本を中心に、約140件のデータを収集し、印影を画像データに、また、その他文字化しうるデータをcsv形式で入力した。(c)売弘書肆データの収集明治初期の板本を中心に、売弘書肆一覧記事を収集し、csv形式でデータ入力した。レコード数にして、4000件以上のデータが入力済みである。以上の作業を通じ、板元以外の書肆についての網羅的把握がある程度可能となったが、来年度以降も同様の作業を継続していく必要があろう。2)書籍・摺物の享受について(a)新潟県小千谷市に現存する錦絵の調査を五軒についておこなった。また、滝沢家所蔵の古書籍について予備調査を行った。(b)長野県木曽郡須原西尾家の蔵書について予備調査を行った。3)書籍・摺物の出版・流通・享受に関する文献目録について(a)近世日本を中心とする書籍・摺物の出版・流通・享受に関する文献目録の充実を図った。これについては、研究成果公開促進費(一般学術図書)を申請中であり、うまくいくと来年度中には『近世書籍文献目録』として公刊される予定である。【1】書籍の流通業者について(a)貸本屋の印記の収集架蔵本・中央大学所蔵本を中心に本年度は約40件のデータを収集し、印影を画像データに、またその他文字化しうるデータをcsv形式で入力した。(b)仕入印データの収集架蔵本・中央大学所蔵本・松本市高美家所蔵本を中心に、約400件のデータを収集し、印影を画像データに、また、その他文字化しうるデータをcsv形式で入力した。約530件のデータが収集済みである。本年度はレコード数にして約3800件を追加し、7800件のデータ量となった。(d)松本市高美書店の文書・在庫の調査を行った。板元以外の書肆についての網羅的把握がある程度可能となったが、流通経路を明かにするためには、仕入印を中心に、来年度以降も同様の作業を継続していく必要があろう。【2】書籍・摺物の享受について(a)新潟県小千谷市に現存する錦絵の調査を四軒についておこなった。