hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
超親水性ハイドロキシアパタイト薄膜処理チタンの抗菌効果と骨形成能

人工体液中での液中放電により純チタン表面におよそ1μmのHA超薄膜コーティングが処理できる.コーティング膜は液中放電処理中に新たに形成されたチタン酸化膜にHAナノ結晶が傾斜的に埋入されているため物理的脆弱性を克服するだけでなくチタン酸化膜の親水性官能基による超親水性を示す.本HAコーティング薄膜は,歯肉縁上プラークの初期接着菌であるStreptococcus MitisおよびStreptococcus Gordoniiに対する著しい付着抑制効果を示した.したがって液中放電処理によるHA薄膜コーティングは,優れた骨結合能と抗菌性を兼ね備えた新たな歯科用インプラントの表面処理として期待できる.人工体液中での液中放電により純チタン表面におよそ1μmのHA超薄膜コーティングが処理できる.コーティング膜は液中放電処理中に新たに形成されたチタン酸化膜にHAナノ結晶が傾斜的に埋入されているため物理的脆弱性を克服するだけでなくチタン酸化膜の親水性官能基による超親水性を示す.本HAコーティング薄膜は,歯肉縁上プラークの初期接着菌であるStreptococcus MitisおよびStreptococcus Gordoniiに対する著しい付着抑制効果を示した.したがって液中放電処理によるHA薄膜コーティングは,優れた骨結合能と抗菌性を兼ね備えた新たな歯科用インプラントの表面処理として期待できる.本研究の目的は,チタンインプラントにナノスケールの親水性ハイドロキシアパタイト(田)コーティングを処理し,骨結合能と抗菌性を両立することである.ハンクス処方の人工体液中でチタンプレートを陰極とし対極に白金プレートを用いて液中放電処理を行うことにより,チタンプレート表面にハイドロキシアパタイトのナノ結晶を傾斜的に析出させることができる.In vitroで細胞培養した試料上に析出する石灰化物の物理化学的特性を顕微ラマン分光およびAFMナノインデンターにより測定した.また高分解能のラマン分光法により,サンプル表面の石灰化物から検出したアミド結合に帰属するピークを微分することにより,有機成分であるコラーゲン分子の架橋結合を定量化することが可能になった.またナノインデンテーション法では,石灰化物表面に圧子を低加重で段階的に作用させ,表面に形成された圧痕(インデント)と荷重-負荷曲線から,微小領域の硬さと弾性係数および応力ひずみ曲線を測定することが可能であり,石灰化物の物性を骨の特性と比較した.液中放電処理でHA薄膜コーティング処理したチタンプレートのin vitroでの抗菌試験および細胞培養試験を行った.HA薄膜コーティングチタン,高密度焼結アパタイト,および研磨チタンを試料として用い,歯肉縁上プラーク細菌(Streptococcus Mitis,Streptococcus Gordonii,Streptococcus mutans,Streptococcus salivarius,Streptococcu ssobrinus)をサンプル上で嫌気培養した.培養後のサンプルを血液寒天培地に浸漬し,さらにインキュベータで培養後のコロニー数をカウントすることで抗菌効果を検討した.骨の無機成分であるHAをチタンインプラント表面にコーティング処理することにより,チタンインプラントの骨結合能は飛躍的に向上することが知られている.HAコーティングインプラントが早期骨結合獲得の観点において,チタン表面改質インプラントよりも優れていることは,基礎研究や臨床データから明らかである.しかしHAコーティングインプラントの長期的生存率の低さは,歯科領域のみで顕著であり,歯周病リスクの高い患者のケースでは,HAコーティングインプラントが純チタンインプラントにくらべてインプラント周囲炎の増悪が激しいことも報告されている.歯科インプラントのみで見られる著しいHAコーティングインプラントの生存率低下は,HAの口腔細菌に対する高感受性が大きな原因と考えられる.口腔細菌の多くは細胞膜表面がマイナスに帯電しており,材料表面を親水性に改質(マイナスに帯電)することにより,電気的反発力による細菌付着抑制(抗菌)効果が報告されている.材料表面と微生物との電気的反発力は埋入後も維持されることから抗菌効果は長期間持続される.また抗菌物質を用いないことから,周囲組織の為害作用などの不安がない.我々は人工体液中での液中放電により純チタン表面におよそ1μmのHA超薄膜コーティング処理に成功した.コーティング膜は液中放電処理中に新たに形成されたチタン酸化膜にHAナノ結晶が傾斜的に埋入されているため物理的脆弱性を克服するだけでなくチタン酸化膜の親水性官能基による超親水性を示す.本HAコーティング薄膜は,歯肉縁上プラークの初期接着菌であるStreptococcus MitisおよびStreptococcus Gordoniiに対する著しい付着抑制効果を示した.したがって液中放電処理によるHA薄膜コーティングは,優れた骨結合能と抗菌性を兼ね備えた新たな歯科用インプラントの表面処理として期待できる.埋入直後の高い成功率の反面,HAコーティングインプラントは表面改質チタンインプラントにくらべて長期的な生存率が劣ることが懸念されている.この臨床的不快事項は,コーティング膜の脆性や,コーティング層とチタンインプラント表面の結合力など,生体界面での物理的脆弱性によるコーティングの剥離が主な原因と考えられてきた.HAコーティング処理は,整形外科領域のインプラント治療でも広く利用されている.しかしHAコーティングインプラントの長期的生存率の低さは,歯科領域のみで顕著であり,歯周病リスクの高い患者のケースでは,HAコーティングインプラントが純チタンインプラントにくらべてインプラント周囲炎の増悪が激しい.本研究から,歯科インプラントのみで見られる著しいHAコーティングインプラントの生存率低下は,HAの口腔細菌に対する高感受性が大きな原因であると示唆された.

口腔細菌の多くは細胞膜表面がマイナスに帯電しており,材料表面を親水性に改質(マイナスに帯電)することにより,電気的反発力による細菌付着抑制(抗菌)効果が生じる.人工体液中でチタンを液中放電すると,およそ1μmのHA薄膜コーティングができる.コーティング膜は液中放電処理中に新たに形成されたチタン酸化膜にHAナノ結晶が傾斜的に埋入されているため物理的脆弱性を克服するだけでなくチタン酸化膜の親水性官能基による超親水性を示す.このHAコーティング薄膜は,歯肉縁上プラークの初期接着菌であるStreptococcus MitisおよびStreptococcus Gordoniiに対する著しい付着抑制効果を示した.すなわち,液中放電処理によるHA薄膜コーティングは,創傷治癒と骨結合を促進する歯科用インプラントの表面改質法として有効である.26年度が最終年度であるため、記入しない。歯科理工学26年度が最終年度であるため、記入しない。親水性コーティング膜の抗菌効果がおおむね示されたため.当初の計画通り,in vitroで細胞培養した試料上に析出する石灰化物の物理化学的クオリティーを顕微ラマン分光およびAFMナノインデンターにより測定することができた.また高分解能のラマン分光法により,サンプル表面の石灰化物から検出したアミド結合に帰属するピークを微分することにより,有機成分であるコラーゲン分子の架橋結合を定量化する.またナノインデンテーション法では,石灰化物表面に圧子を低加重で段階的に作用させ,表面に形成された圧痕(インデント)と荷重ー負荷曲線から,微小領域の硬さと弾性係数および応力ひずみ曲線を以下の原理で測定することが可能であり,各試料間や文献値と比較する可能になった.26年度が最終年度であるため、記入しない。親水性コーティング膜の抗菌効果を初期接着菌以外の口腔細菌で検討すると同時に,生体適合性を評価する.ラットの大腿骨に埋入できるミニインプラントを作成し,液中放電によるHA薄膜コーティングおよび未処理の試料を埋入する.インプラント周囲に再生される新生骨の物理化学的特性をレーザーラマン分光法およびナノインデンテーションにより測定する.26年度が最終年度であるため、記入しない。HA焼結体,HA超薄膜コーティングチタンおよび純チタンを試料とし,歯肉縁上プラーク細菌に対する抗菌効果を検討する.試料表面で骨芽細胞を培養し,リアルタイムPCRによりmRNA発現を定量することによりin vitroの骨形成能を評価する.HAコーティングインプラントによる骨結合能促進を検討するために動物実験が必要である.1つの個体で複数のサンプルを作成するためミニインプラントを作製する.最終年度は動物実験に移行し,長期経過を追及することから飼育費が発生する.さらに組織切片を作成するため必要な試薬,器具などこれら実験がルーティンに稼動した場合の最低限必要な予算を算出した.また本実験から得られるデータは学術的にも価値の非常に高いものとなることが予測されるため,国際学会発表や国際学術誌などの投稿が必要であると考えられる.
Ａｋｔキナーゼによるアクチン結合蛋白Ｇｉｒｄｉｎのリン酸化修飾と疾患

Girdinの機能、特にAktによるリン酸化が発生期でなく、生後あるいは成体期における血管新生および神経新生に重要であり、かつそれらの破綻が血管性網膜疾患、精神疾患、がんの進展に関わることを細胞レベル、個体レベルの研究により明らかにした。Aktリン酸化サイトに変異を導入したノックインマウスを用いて、GirdinのAktによるリン酸化が、がん組織周囲へ遊走するcanncer-associated fibroblasts(CAFs)の機能を介したがんの進展、神経膠芽腫の増殖、浸潤能、さらに血管障害による血管内膜肥厚(血管平滑筋の内膜への遊走による)などに関与していることを明らかにした。Aktキナーゼの基質でアクチン結合蛋白Girdinの生体内での機能を解明するため、ノックアウトマウスを作製し、研究を進めた。Girdinのノックアウトマウスは中枢神経系において、海馬歯状回の神経前駆細胞の位置異常と嗅球の形成異常を認めた。嗅球の形成異常は脳室下帯で発生する神経前駆細胞が嗅球に向かって移動する過程が遅延することが原因で、その経路であるrostral migratory stream (RMS)の幅が著しく拡大していた。本年度はノックアウトマウスにおける嗅球の形成異常をより詳細に解析を行ったところ、RMSにおける神経前駆細胞のchain-migrationに異常があることが判明した。野生型とノックアウトマウスのRMSを培養することにより神経前駆細胞の遊走能をin vitroで観察した結果、野生型のRMSからは生体内でのchair-migrationと類似の移動様式を示したのに対し、ノックアウトマウスのRMSからは神経前駆細胞の移動をほとんど認めなかった。これらの異常を引き起こすメカニズムをさらに解明する目的で、1)GirdinのAktによるリン酸化部位に変異を導入したノックインマウス(S1417Aマウス)と2)Girdinの脂質結合部位(おそらく膜結合部位)に変異を導入したノックインマウス(Basic-mutマウス)を作製し、解析を行った。興味あることにS1417Aマウスでは中枢神経系に明らかな異常を認めず、Aktのリン酸化が重要な役割を果たしていないことを示唆した。一方、Basic-mutマウスではノックアウトマウスと同様な中枢神経系の異常を生じ、Girdinの細胞膜への局在が海馬歯状回や嗅球の形成に重要であることが明らかになった。またノックアウトマウスは生後25目までにすべて死亡するのに対し、Basic-mutマウスでは40%以上マウスが2カ月以上生存することから、Basic-mutマウスを用いてGirdinの神経系における役割をより詳細に解析できる可能性がある。Girdinのノックアウトマウスでは脳室下帯で発生する神経前駆細胞が嗅球へ向かう移動が障害され、嗅球の形成異常が生じる。その移動経路であるrostralmigratorystreamにおける神経前駆細胞の形態を観察すると、必ずしも嗅球への方向性を示さず細胞極性に異常がみられる可能性が示唆された。そこで本年度は細胞の極性決定に重要な役割を果たすことが知られているPar-3とGirdinとの機能関連性について検討した。HEK293細胞を用いて内在性Par-3とGirdinの結合を免疫沈降法で検討した結果、細胞内での両者の結合を確認した。両者の結合ドメインを決定するためPar-3およびGirdincDNAをフラグメントに分割し、pull-downアッセイにより解析した結果、Par-3のC末端領域およびGirdinのC末端領域が相互の結合に必要な領域であることが判明した。両者の結合能はAktによるGirdinのリン酸化に影響をうけなかった。Girdinの細胞極性における役割を明らかにするため、Girdinの発現をノックダウンした際の遊走細胞におけるゴルジ体の位置異常について検討した。通常ゴルジ体は運動する細胞の核の運動方向側に局在するが、GirdinあるいはPar-3をノックダウンすると50%以上の細胞にゴルジ体の位置異常が認められ、Girdinが細胞極性にも関与していることが示唆された。さらに細胞極性と関連する3次元培養によるMCF10A乳腺上皮細胞の管腔形成能におけるGirdinの役割を検討した。Girdinの発現をノックダウンするとPar-3をノックダウンした時と同様に、MCF10A細胞の管腔形成能が著しく低下し、シート状に細胞が増殖するようになった。以上より、GirdinはPar-3と相互作用することにより細胞極性の決定に重要な役割を果たしていることが示唆された。今回、ヒトの乳癌組織においてAktの基質でアクチン結合蛋白であるGirdinが、乳癌細胞以外にも癌関連線維芽細胞や血管内皮細胞に発現し、活性化されていることに着目して解析を行った。乳癌、膵癌、大腸癌や前立腺癌などの充実性腫瘍の場合、癌関連線維芽細胞は腫瘍微小環境の中で最も多い細胞で、腫瘍形成における役割が注目されている。

そこでGirdinのAktリン酸化部位に変異を導入したマウス(以下SAマウス)の皮下に癌細胞を移植する実験を行い、腫瘍微小環境におけるGirdinリン酸化の意義を検討した。Girdinのリン酸化を障害させたSAマウスでは野生型(対照)マウスと比較して、癌の増大が抑制されており、腫瘍組織に存在している癌関連線維芽細胞の数も少ないことが判明した。腫瘍血管量は両群で有意差が認められなかったことより、血管内皮細胞ではなく癌関連線維芽細胞内におけるAktシグナルが腫瘍の進展に寄与していると考えられた。SAマウスから得られた線維芽細胞や癌関連線維芽細胞を癌細胞と共にマウスへ移植した実験では、野生型マウスの線維芽細胞や癌関連線維芽細胞を用いた群と比較して癌の増大が抑制された。SAマウスから得られた線維芽細胞は、野生型マウスから得られた線維芽細胞と比較して、in vitroにおける増殖能や移動能が低下しており、このことが腫瘍の進展に影響を及ぼしているものと考えられた。癌細胞内のAktシグナル伝達系の研究は以前より多く報告されているが、癌関連線維芽細胞内のAktシグナルに関しては今まで解明されていなかった。今回の研究結果より、AktによるGirdinのリン酸化を標的とする治療は癌細胞のみならず癌関連線維芽細胞にも影響を及ぼすことで、より高い治療効果を発揮するものと期待される。海馬神経細胞におけるシナプス可塑性は様々な記憶の形成に関与していると考えられている。これまでの研究により、海馬のシナプス可塑性に関与するシグナル伝達としてBDNF/TrkB/Akt経路が重要であることが報告されているが、リン酸化酵素であるAktがどのように活動依存的な神経可塑性を制御しているかは不明であった。われわれのこれまでの研究により、GirdinがAktの基質となることが明らかとなっていたが、脳内におけるリン酸化Girdinの役割については未解明であった。本年度の研究によりGirdinが記憶に関わる新たな分子であることを細胞生物学的手法および遺伝子改変マウスを用いて明らかにした。海馬培養神経細胞をBDNFで刺激するとGirdinのリン酸化が亢進することを発見した。GirdinのAktによるリン酸化部位に変異を導入した遺伝子改変マウスの形態学的、電気生理学的解析により、変異マウスでは未熟なシナプスの形成や電気的な伝達効率を伴う可塑性の減少及び長期記憶の障害が観察された。さらに、GirdinはNMDA受容体及びSrcキナーゼと複合体を形成し、細胞の興奮性に関与することが明らかになった。したがって、BDNF/TrkB/AktシグナルによるGirdinのリン酸化は、NMDA受容体の活性化を介して海馬のシナプス可塑性の維持と長期記憶形成を担っている重要な分子であることが強く示唆された。記憶は認知症や統合失調症などの神経精神疾患で認められる認知障害に関わっており、本研究成果は神経精神疾患に認められる記憶障害の病態解明だけではなく、新規の治療薬や診断方法の開発に役立つことが期待される。1.神経膠芽腫の浸潤能およびがん幹細胞性維持におけるGirdinの役割
CERN大型電子陽電子衝突加速器LEPによる新現象の理論的研究

現在,いわゆる素粒子の標準模型により,ほとんど全ての現象が理解できたかの観があるが,それが最終的な理論でないことは周知のことである。理論の大きな前進は新現象の発見と理解によってのみもたらされる。また標準模型のパラメタの精密な決定も必要である。このプロジェクトではTRISTANで世界最高のエネルギー領域を探った実績をふまえて,より高いエネルギーでのCERNのLEP実験に関して,現地で活躍する実験家,理論家と研究交流を行い,資料を収集した。LEP実験では既に膨大な事象数のデータが得られており,これを精密に解析して新現象の可能性を探った。研究を推進していく過程で,高次の輻射補正計算を遂行するためには,散乱振幅の自動的な生成と,それにつながる数値計算や位相空間での数値積分,さらにはそれに接続するイベント・ジェネレータなどが重要であることが認識されてきた。このような認識は,CERNにおいて接触することができた他の研究者によっても示され,すぶにフランス,ロシア,ドイツ,オランダなどに同様の目標を持つ研究グループが存在することが明きらかとなった。本プロジェクトを実り多いものとするため,これらのグループとの研究交流が行われた。なお,このような目標をより効果的に追求するため,別に科研費のプロジェクト「ファインマン振幅の自動計算と高エネルギー実験へのその応用」が平成4年度からスタートし,本プロジェクトの成果の重要な部分を引き継いでいる。本年度に得られた具体的な成果を以下に列挙する。1. LEPでのе^+е^-→qqγ過程およびその1ループQCD補正をを調べた。質量特異性の処理について,日本側では質量を持ったクォークとグルオンの微小な質量による正則化を用い,フランス側は質量のないクォークで次元正則化法を用いた。結果を相互に比較し,LEP実験の結果と比べた。2. LEPでの終状態に2つのレプトンと2つの光子が現れる事象が見つかり新現象ではないかとの意見も示された。これについて自動計算システムGRACEを使って,電弱相互作用から予測されるバックグラウンドシグナルを正確に計算し,このシグナルは標準模型から期待される水準を上回ることが示された。いまのところ実験グループ間の違いもあり,新現象と断定はできないようであるが,自動計算システムの利点がこの経過で示された。3.同じく自動計算システムGRACEを使って,LEP II,JLCなどの次世代加速器で研究される,3体ないし4体の終状態の断面積が組織的に計算された。これらの結果の一部について,モスクワ大学グループと共同研究を行い,かれらのcompHEPシステムの結果との相互比較を行った。4. QCDパートンシャワー模型の結果と解析的な計算による高次補正を入れたスラスト分布を実験データと比較し,QCDの結合定数を求めた。5.このQCDパートンシャワーの手法をQEDに適用し基本的な過程に対してQEDの高次補正を汎用的に適用することが可能となった。6.ループを持つ振幅の計算で既に1ループ振幅の計算のために開発された数値的手法を2ループ振幅にも適用できるように拡張し,いくつかのグラフについて計算を行った。7.素粒子理論での計算を簡単化し出力を短縮して計算時間を大きく縮めてくれるような数式処理システムの開発が行われた。その手法をガンマ行列を含む表現の計算に適用し,いくつかの場合には式が大きく簡約化されることが示されたが,これは万能ではなく改良が必要であり,今後の研究に待つことになる。8.今後の加速器実験で新現象として期待されるような,超対称性粒子が関与する過程がいくつか調べられた。偏極電子ビームを使ったときの超レプトン生成や,電子光子衝突での超レプトン生成を調べ,期待されるシグナルの大きさを見積もった。9.数値積分の新しい方法について調べた。この結果は微分断面積の位相空間での積分などに適用可能である。

質量特異性の処理について,日本側では質量を持ったクォークとグルオンの微小な質量による正則化を用い,フランス側は質量のないクォークで次元正則化法を用いた。結果を相互に比較し,LEP実験の結果と比べた。2. LEPでの終状態に2つのレプトンと2つの光子が現れる事象が見つかり新現象ではないかとの意見も示された。これについて自動計算システムGRACEを使って,電弱相互作用から予測されるバックグラウンドシグナルを正確に計算し,このシグナルは標準模型から期待される水準を上回ることが示された。いまのところ実験グループ間の違いもあり,新現象と断定はできないようであるが,自動計算システムの利点がこの経過で示された。3.同じく自動計算システムGRACEを使って,LEP II,JLCなどの次世代加速器で研究される,3体ないし4体の終状態の断面積が組織的に計算された。これらの結果の一部について,モスクワ大学グループと共同研究を行い,かれらのcompHEPシステムの結果との相互比較を行った。4. QCDパートンシャワー模型の結果と解析的な計算による高次補正を入れたスラスト分布を実験データと比較し,QCDの結合定数を求めた。5.このQCDパートンシャワーの手法をQEDに適用し基本的な過程に対してQEDの高次補正を汎用的に適用することが可能となった。6.ループを持つ振幅の計算で既に1ループ振幅の計算のために開発された数値的手法を2ループ振幅にも適用できるように拡張し,いくつかのグラフについて計算を行った。7.素粒子理論での計算を簡単化し出力を短縮して計算時間を大きく縮めてくれるような数式処理システムの開発が行われた。その手法をガンマ行列を含む表現の計算に適用し,いくつかの場合には式が大きく簡約化されることが示されたが,これは万能ではなく改良が必要であり,今後の研究に待つことになる。8.今後の加速器実験で新現象として期待されるような,超対称性粒子が関与する過程がいくつか調べられた。偏極電子ビームを使ったときの超レプトン生成や,電子光子衝突での超レプトン生成を調べ,期待されるシグナルの大きさを見積もった。9.数値積分の新しい方法について調べた。この結果は微分断面積の位相空間での積分などに適用可能である。1.LEPでの光子の分布について、LAPP研究所のグル-プとe^+e^-→qq^^ーγの解析の準備を行った。2.深非弾性散乱(ep)の電弱理論に基づく輻射補正の計算を行った。3.LEPでのJ/φ生成に関するグルオン輻射効果を初めて計算した。4.e^+e^-→τ^+τ^-ff^^ー過程でτ^+τ^-の偏極相関を調べてヒッグス粒子の確証を得る方法を提案した。5.強く相互作用をするWの系に対してN/D法を適用してスカラ-共鳴のある時の散乱振副を求めた。6.超対称性粒子の探索の基礎になるminimal超対称性模型でのハンドブックを作成した。7.ル-プ計算の数値的手法を開発し、1ル-プでは断面積の計算を行い、自動計算への足がかりとした。9.新しいガンマ行列の計算法を考案して、数式処理システムGALにインプリメントした。
LAK細胞とインターロイキン2による腎癌肺転移の治療

1.LAK活性誘導の条件設定:(1)LAK細胞培養に加える血清の量を1、2.5%変更してもLAK活性に大差はなかった。(2)LAK活性は培養開始後2日目より出現し、3日目にはpeakに達した。(3)培養液中のILー2は3U/mlが至適濃度だった。(4)LAK細胞培養液に加える蛋白として、自己血漿、ヒト凍結血漿、AB serumを用いた結果ヒト凍結血漿では誘導されたLAK活性が他の2種の場合より低かった。(5)LAK細胞誘導を静置培養、回転培養により行った結果、両者について誘導されたLAK活性に差はなかった。(6)培養液中の細胞(PBL)濃度は2×10^6/mlが至適濃度だった。2.腎癌患者での知見:(1)肺転移を伴った腎癌の1例に対し1ー2ケ月に1回の割合で14ケ月間にわたりLAK細胞の全身投与2回、気管支動脈注入9回、計11回を行った。その際、5日間のILー2全身投与(2000U/day)を併用した。投与LAK細胞数は最低4×10^8個、最高3.2×10^9個だった。この間肺野の転移巣は徐々に増大してきた。(2)治療経過中にLAK細胞の殺細胞能が低下し6回目に最低になった。(対Daudi cell、E/T比50/1で39%)6回目からはLAK細胞移入前日に血漿交換を行うとともに培養液中に自己血漿を用いない様にした結果、LAK細胞の殺細胞能が上昇傾向を示した(同8回目誘導LAKで92%)。(3)同患者より誘導されたLAK細胞は、ヒト腎癌樹立細胞株CAKIー1に対してE/T比50/1で約50%の殺細胞能を示した。(4)PBLと、誘導されたLAK細胞の表面マーカーを検索した結果、後者では前者に比してCD8陽性細胞の軽度増加、ILー2レセプター陽性細胞の著名な増加を認めた。(I)基礎的検討:LAK細胞の誘導法について次のような基礎的検討を行った.評価はいずれも51Cr release assayによって誘導されたLAK細胞のcytotoxicityを測定する方法を用いた. 1.インターロイキン2(ILー2)至適濃度の検討:末梢血リンパ球を0.5u/ml,1u/ml,3u/mlの3種の濃度のILー2とともに6日間培養して得られたLAK細胞の活性を比較した結果, 3u/mlのIIー2濃度で得られたLAK細胞の傷害性が最も強かった.2.培養液中に用いる血清または血漿の種類の検討:自己血漿, ABO同型ヒト新鮮凍結血漿, AB型ヒト血清の3種を用いてLAK細胞を誘導し,その活性を比較した.結果は3者に有意差なく,実用的には新鮮凍結血漿を用いるのが妥当と考えられた.3.培養期間の検討:末梢血リンパ球を1×10^6/mlの濃度でILー2,3u/ml存在下に2日ー6週間培養し,培養の至適期間を検討した.

LAK活性は2日目より出現し, 3ー7日の間にピークに達し,以後漸減した.従って,培養期間は3ー7日が適当と考えられた. (II)患者への応用:肺転移を来した腎細胞癌術後の患者(52歳,男性)に対し,上記の基礎的検討を踏まえて昭和62年4月より12月の間に計7回のLAK療法を施行した.毎回約5リットルの患者末梢血より血液成分分取装置を用いて5×10^9前後のリンパ球を得て,培養液中に1ー2×10^6/mlの細胞濃度で3ー8日本培養した.培養液にはRIMI1640に5%の患者自己血漿もしくは患者のABO同ヒト,新鮮凍結血漿,及び3ー6u/mlのILー2を添加したものを用いた.誘導されたLAK細胞の数は4・32×10^8個で, 7回の投与により合計12.3×10^9個のLAK細胞が移入された.当初全身投与であったが, 3回目からはLAK細胞を気菅支動脈内に直接注入している.臨床的効果は肺転移巣の大きさは不変で,固形がん直接効果判定基準では今のところNO CHANGEである.2.腎癌患者での知見。1)肺転移を伴った腎癌の1例に対し前年度に引き続き1ー2ケ月に1回の割合でLAK細胞の気管支動脈注入、および5日間のILー2全身投与(2000U/day)を行った。投与LAK細胞数は最低4x10^9個で、今年度は計6回注入した。(総計11回)患者の全身状態に著変は見られないが、肺野の転移巣は増大傾向を示している。2)その間経過中にLAK細胞の殺細胞能の低下が見られた(対Daudi cell、E/T ratio50/1で39%)ことから、総計6回目からはLAK細胞移入前日に血漿交換を行うとともに培養液中にautologous plasmaを用いない様にした結果、LAK細胞の殺細胞能が上昇傾向を示した(同8回目誘導LAKで92%)。3)同患者より誘導されたLAK細胞のヒト腎癌樹立細胞株CAKIー1に対する殺細胞能はE/T ratio 50/1で約50%であった。4)PBLと、誘導されたLAK細胞の表面マーカーを検索した結果、後者では前者に比してCD8陽性細胞の軽度増加、ILー2レセプター陽性細胞の著名な増加を認めた。
ライフステージの朝型夜型リズム変化に適した世代別・時間帯別の運動プログラム開発

2017年に「時計遺伝子」がノーベル医学・生理学賞を受賞するなど、社会の注目を集めている。運動についても昨今「時間帯別の運動効果」について知見が蓄積されている。しかし日内リズムには個人差があるにも関わらず、"時間帯別の個人差"は未だ不明である。そこで本研究では、個人差および世代間の差に着目し、ライフステージの朝型夜型リズム変化に適した世代別・時間帯別の運動プログラム開発に取り組む。
シンチレーションファイバを用いたリアルタイム線量分布評価システムの開発

医療現場において、放射線分布をリアルタイムでモニタリングすることは、医療被ばくや診療の質の向上の点から重要である。本研究では、リアルタイムに線量分布を取得することを目的に、シンチレーションファイバと光検出器であるMPPCと接続した放射線検出器を作成し、その基本特性を評価した。試作した検出器ではデジタル出力からの線量評価に対し入射光子数が多いため、高線量場では数え落としが多い結果となった。適切な補正をすることで、線量への換算が可能であることが確認できた。平成25年度の本研究概要として、プラスチックシンチレーションファイバと光検出器を接続した放射線検出器を作成し、その基本特性について評価した。組織等価のプラスチックシンチレータを用いることで、組織線量を直接測定した。ファイバに放射線を照射した際、照射位置によりシンチレーションにより発生した光量がファイバ内での散乱等により照射位置により感度が20から30%程度変化することが確認され、その感度補正法について検討した。本検出器は1msec単位での線量の変化を解析可能であることが示され、リアルタイムの線量評価の可能性が示唆された。医療現場において、放射線の分布をリアルタイムでモニタリングすることは、医療被ばくや診療の質の向上の点から重要である。本研究では、リアルタイムで放射線線量分布を取得することを目的に、複数のシンチレータと光検出器の組み合わせで、線量計としての基本特性を評価した。評価にはシンチレータとして、プラスチックシンチレーションファイバ、Csいシンチレータを用い、光検出器であるMPPC(Multi Pixcel Photon Counter)と接続した放射線検出器を使用した。計数率から線量率への換算、プログラミングの作成を試みた。プラスチックシンチレーションファイバを接続したMPPCでは、デジタル出力によるパルスカウンティングモードからの線量評価に対し、シンチレーションファイバからの入射光子数が多いため、高線量場では数え落としが多く、線量が高くなるほど感度は低下した。3種類の形状のCsIシンチレータ(4.5 cm^3、2 cm^3、0.5 cm^3)とMPPCを用い、G(E)関数と波高パルス情報を掛け合わせることで、線量当量率に換算する方法を検討した。その結果約4桁の線量率直線性が確認された。またエネルギー特性に関しては、662 keVを1とした際、662 keV以下のエネルギー特性は良好であったが1117 keVで0.5程度まで感度は低下した。方向特性に関しては、ほぼ一定の値を示した。適切な補正をすることで、シンチレーション検出器でも線量への換算が可能であることが確認できた。放射線計測今年度の研究計画では、2次元の線量分布評価まで行う予定であったが、所属先の異動に伴い、研究準備の進捗が遅れ、1次元の線量評価にとどまった。しかしながら、1次元での線量評価方が確立すれば、2次元、3次元の線量分布評価はその応用であるため、最初の段階の目途がついたことで比較的スムーズに次のステップを進められると考えられる。今後は、2次元での線量分布評価を行うよう、引き続き放射線検出器の作成に取り掛かる。また1次元での線量評価においても、検出器の特性を詳細に評価することで、精度の高い線量分布取得方法を確立させる。年度途中で所属を異動した為、研究計画に遅れが生じた。初年次に購入予定であった物品を早急に購入し、当初研究計画の遅れを取り戻す。
血小板活性化因子不活化酵素遺伝子多型・活性値と肝切除後経過との関連性の検討

研究目的:大量肝切除術後の肝不全、他臓器不全は未だに重篤な合併症である。血小板活性化因子(Platelet-activating factor:PAF)の過剰産生が一因とされる。PAF不活化酵素PAF acetylhydrolase(PAF-AH)は産生されたPAFを不活化するが、血漿PAF-AH活性値は遺伝子多型によって異なり、低活性・無活性型は炎症性疾患の発生や治療に影響するとされる。本研究の目的は、PAF-AH遺伝子多型や肝切除周術期血中PAF-AH活性値と術後合併症との関連を調べることである。研究方法:術前・術後に採取した末梢血2mlを用いて、(1) Allele-specific PCR(AS-PCR)法によりPAF-AH遺伝子多型を解析、(2)血漿中PAF-AH活性値を測定、(3) Vitalsignの変動、一般的な血液検査、周術期合併症を記録、上記を総合的に検討した。研究結果:平成17年3月から平成19年7月までに、肝切除、開腹下腫瘍焼灼術を施行した37名の患者を対象とした。患者の疾患は、肝細胞癌24例、転移性肝癌9例、胆道癌4例であった。(1) PAF-AH遺伝子多型は高活性型27例、低活性型10例で、無活性型はなかった。転移性肝癌などの正常肝群と慢性肝疾患を背景とする障害肝群の間で、低値型の割合に差はなかった。(2)周術期のPAF-AH活性値は、低活性型では変動が少ない。高活性型では術前と較べ、第1病日に1030%PAF-AH活性値が低下したが、第7病日には術前値に復した。術後に高活性型のPAF-AH活性値が低活性型を下回ることはなかった。高活性型と低活性型の間で血液データの周術期変動に差はないが、第1、5、6病日の日中最高体温は低活性型で有意に高かった。研究目的:大量肝切除後の感染症に起因する肝不全、他臓器不全は未だに重篤な合併症で、その病態には血小板活性化因子(Platelet-activating factor : PAF)が関与している。本研究は、PAF不活化酵素であるPAF acetylhydrolase (PAF-AH)の遺伝子多型と肝切除周術期PAF-AH活性値変動や肝切除術後経過・合併症との関連を調べることである。研究結果:解析終了は15例である。(1)PAF-AH遺伝子多型は高値型11例、低値型4例だった。(2)大腸癌肝転移など正常肝を有する6例は全例高値型であったが、肝細胞癌9例中4例が低値型で、肝障害を有する症例では低値型が多い傾向がみられた。(3)低値型では周術期のPAF-AH活性値に変動はないが、高値型では術前と較べ、第1病日に1030%PAF-AH活性値が低下した。(4)高値型と低値型の2群間では白血球数、好中球数、CRP、肝酵素などの周術期変動に差はないが、第1、46病日の日中最高体温は低値型で有意に高かった。(5)現在の15例全例、術後合併症の発生がなく、高値型・低値型の2群間での合併症発生頻度の統計検討は不可能であった。

今後の方向性:検体を保存し、現在解析中のものが15例あり。今後、20例を同様の研究に対して追加する予定。肝細胞癌症例は、遺伝子多型高値型-低値型の間で術後無再発生存率などを用いて予後の比較検討を行なう。また、可能であれば、発癌していないC型肝炎、B型肝炎患者を対象に遺伝子多型を調べ、prospectiveに発癌率を遺伝子多型間で比較検討する。研究目的:大量肝切除術後の肝不全,他臓器不全は未だに重篤な合併症である。血小板活性化因子(Platelet-activating factor:PAF)の過剰産生が一因とされる。PAF不活化酵素PAF acetylhydrolase(PAF-AH)は産生されたPAFを不活化するが、血漿PAF-AH活性値は遺伝子多型によって異なり,低値、無活性型は炎症性疾患の発生や治療に影響するとされる。本研究の目的は、PAF-AH遺伝子多型や肝切除周術期血中PAF-AH活性値と術後合併症との関連を調べることである。研究方法:術前、術後に採取した末梢血2mlを用いて,(3)Vital signの変動,一般的な血液検査,周術期合併症を記録,上記を総合的に検討した。研究結果:平成17年3月から平成19年7月までに,肝切除,開腹下腫瘍焼灼術を施行した37名の患者を対象とした。患者の疾患は,肝細胞癌24例,転移性肝癌9例,胆道癌4例であった。(1)PAF-AH遺伝子多型は高値型27例,低値型10例で,無活性型はなかった。転移性肝癌などの正常肝群と慢性肝疾患を背景とする肝障害群の間で,低値型の割合に差はなかった。(2)周術期のPAF-AH活性値は,低値型では変動が少ない。高値型では術前と較べ、第1病日に1030%PAF-AH活性値が低下したが,第7病日には術前値に復した。術後に高値型のPAF-AH活性値が低値型を下回ることはなかった。高値型と低値型の間で血液データの周術期変動に差はないが,第1,46病日の日中最高体温は低値型で有意に高かった。(3)低値型の2例で重篤な合併症があり,1例は再手術を要した。しかし統計学的には,高値型、低値型の間での合併症発生頻度に差は認められなかった。
EPR効果に基づく活性酸素生成型高分子薬の固形癌ターゲティング療法

臨床がん治療薬へ実用化を目指して、PEG-ZnPPの薬理作用、ADME試験、in vivo毒性実験、及びinVivo細胞毒性実験、特に光照射によるPDTの可能性を検討した。PEG-ZnPPはヒト正常細胞においてIC_<50>>100μM、多種のヒトがん細胞においてIC_<50>=14.3±6.4μMを示し、PEG-ZnPP治療の腫瘍特異性及び安全域が広いことが明らかになった。さらに、ヒトCML細胞では、IC_<50>=510μMと高い感受性を示した。Glevec耐性のCML株においても同様な感受性が見られた。体内動態解析により、PEG-ZnPPの大幅な血中半減期の延長、EPR効果による時間依存的な腫瘍への集積、緩やかな糞便からの排泄、各組織中での時聞依存的な分解が明らかになった。In vivo毒性実験において、90mg/kg(ZnPP相当)では、急性および慢性毒性がほとんど認められなかった。PEG-ZnPPを実用化する時のコストを考える上、PEG-2000を用いてPEG(2000)-ZnPP合成した。PEG(2000)-ZnPPは体内動態、代謝及び毒性試験においてPEG(5000)-ZnPPと同様な値を示した。さらに、PEG(2000)-ZnPPは顕著な抗癌活性を示し、Xenon光源の照射により薬効が大幅に増強されることが分かった。このことから、PEG-ZnPPが薪規抗癌剤としての実用性が高いものであることが益々明らかになった。次に、ブタ型recombinantD-アミノ酸酸化酵素(rDAO)の大量生産系を確立した。PEG-rDAOは従来のPEG-DAOより活性・安定性が高いことが分かった。腫瘍組織はカタラーゼ活性が正常組織と比べて低く、この治療に対する感受性が極めて高いことが明らかとなった。さらに、PEG-rDAOのin vivo抗腫瘍活姓は多種のマウス腫瘍モデルにおいて、優れた抗腫瘍効果が得られた。ところが、この治療において、DAOの補酵素であるFAD及び基質であるD-アミノ酸(D-プロリン)の投与の量とタイミングが非常に大事であるが認識され、今後の研究はFADとより強く結合するDAOの作製について検討したい。(1)SMA-アントラサイクリンミセルの調製:既にドキソルビシンとスチレンマレイン酸コポリマー(SMA)ミセルの作成に成功しているが、さらに高性能のSMA-ピラルビシンミセルの大量作成を行った。これを用いて下記の動物モデルの評価を行って所期の結果を得た。(2)PEG-ZnPP:ポルフィリン骨格にエチレンジアミンを結合し、アミノ基を導入した後、アミノ基反応性のPEG誘導体を反応させることにより、PEGプロトポルフィリンを合成した。得られたPEGポルフィリンに亜鉛を導入し、PEG-ZnPPを得た。各反応段階においては、赤外吸収、NMRと分子量測定(LC-MASS,MALDI-TOF-MASS)、UV/visible分光測定、光散乱測定装置による粒度分布の測定を行い化合物の同定を行った。(3)SMA-ZnPPミセル作成と抗腫瘍効果:下記の担癌動物にSMA-ZnPPを投与し、腫瘍サイズの変化ならびに生存率を経時的に測定し、抗腫瘍活性を検討した。我々は既にPEG結合キサンチンオキシダーゼおよびD-アミノ酸酸化酵素が、その活性酸素生成により強力な抗腫瘍活性を示すことをみているが、PEG-ZnPPと他剤との併用効果の解析も行った。同様にSMA-ピラルビシンミセルとの併用効果についても検討した。また、後者のマウスでの強い制癌作用を確認した。さらに後者はウサギのVX-2腫瘍を肝に移植したモデルで検討したところ、5mg/kgで腫瘍の完全懐死を確認した。(5)SMA-ローズベンガルの作成:EPR効果と光増感作用を有するSMA-ローズベンガルを作成し、化学的性状を中心にin vitroでの検討を行った。腫瘍選択性の強い新たな高分子制癌剤のモデル化合物(SMA-ミセル)のいくつかを合成し、それらのin vitro/in vivoの有用性、物理化学的性状を明らかにした。今回、ZnPPとPEG-5000の結合物は静脈注射としての粘度がやや高く実用化の観点から、さらにPEG-2000を用いたZnPPのミセル化物を作製した。これらSMA-ミセルのうち、SMA-THPおよびPEG-ZnPP、SMA-ZnPPの体内動態、腫瘍内、血中濃度の時間的推移を明らかにした。また、SMA-ZnPPの立体構造のエナジーミニマム計算を行い、その分子構造を推定した。次に、DMBAによる化学発癌のラット乳癌モデルでも両者とも薬効を示した。さらに、ZnPPがレーザー光以外のXenon光源の照射によっても一重項酵素を放出し、ヒト食道がんや大腸がんに対し、薬効が大幅に増強され、通常の内視鏡光源の光照射による臨床応用も考えられた。一方、ZnPPミセルのヒトCML培養細胞に対するIC_<50>をみたところ、5-10μMで、Glevec耐性のヒトCML株10株も同様のIC_<50>で高い感受性を示した。このとき、オンコジーンのABLおよびBCR、さらにHO-1活性は1/10以下に抑制した。このことからZnPPのもつ多面的な抗腫瘍メカニズムが考えられた。

次に、ヒト型DAOをヒト腎細胞に誘導し、そのDAO-mRNAより、そのr-DNAを大腸菌にプラズミドベクター[pET3chDA06-16]を用い導入し、得られたリコンビナントE.coliを大量培養し、ヒト型DAOの精製を行った。正常細胞と腫瘍細胞を用いて、このPEG化DAOのIC_<50>をみたところ、癌細胞は正常細胞に対し、数倍感受性が高く、EPR効果による高い腫瘍毒性(集積性)と低い抗ROS活性とあわせ、極めて有望な制癌剤になる可能性が益々明らかになった。臨床がん治療薬へ実用化を目指して、PEG-ZnPPの薬理作用、ADME試験、in vivo毒性実験、及びinVivo細胞毒性実験、特に光照射によるPDTの可能性を検討した。PEG-ZnPPはヒト正常細胞においてIC_<50>>100μM、多種のヒトがん細胞においてIC_<50>=14.3±6.4μMを示し、PEG-ZnPP治療の腫瘍特異性及び安全域が広いことが明らかになった。さらに、ヒトCML細胞では、IC_<50>=510μMと高い感受性を示した。Glevec耐性のCML株においても同様な感受性が見られた。体内動態解析により、PEG-ZnPPの大幅な血中半減期の延長、EPR効果による時間依存的な腫瘍への集積、緩やかな糞便からの排泄、各組織中での時聞依存的な分解が明らかになった。In vivo毒性実験において、90mg/kg(ZnPP相当)では、急性および慢性毒性がほとんど認められなかった。PEG-ZnPPを実用化する時のコストを考える上、PEG-2000を用いてPEG(2000)-ZnPP合成した。PEG(2000)-ZnPPは体内動態、代謝及び毒性試験においてPEG(5000)-ZnPPと同様な値を示した。さらに、PEG(2000)-ZnPPは顕著な抗癌活性を示し、Xenon光源の照射により薬効が大幅に増強されることが分かった。このことから、PEG-ZnPPが薪規抗癌剤としての実用性が高いものであることが益々明らかになった。次に、ブタ型recombinantD-アミノ酸酸化酵素(rDAO)の大量生産系を確立した。PEG-rDAOは従来のPEG-DAOより活性・安定性が高いことが分かった。腫瘍組織はカタラーゼ活性が正常組織と比べて低く、この治療に対する感受性が極めて高いことが明らかとなった。さらに、PEG-rDAOのin vivo抗腫瘍活姓は多種のマウス腫瘍モデルにおいて、優れた抗腫瘍効果が得られた。ところが、この治療において、DAOの補酵素であるFAD及び基質であるD-アミノ酸(D-プロリン)の投与の量とタイミングが非常に大事であるが認識され、今後の研究はFADとより強く結合するDAOの作製について検討したい。
中華圏における福祉NGOのネットワーク形成に関する研究

今年度は、中華圏の福祉NGOの状況について把握するために、シンガポールと香港をフィールドとして調査をおこなった。シンガポールにおいては、Seniors activity centerやCare home for theagedなどの多くのNGOが高齢者施設や障害者施設の運営に携わっており、地域住民のニーズに応じてサービスを展開していることが明らかになった。そしてそのサービス提供エリアは政府により地域別に分かれており、NGOが独自に地域福祉サービスを展開するのではなく、主に政府の主導により地域ごとに細分化された運営がなされていることが明らかになった。そのため、今後、シンガポール政府の福祉政策とNGOの関係について調べる必要があった。また、シンガポールでは、華僑会館が各地に設置されており、この活動についても把握することに努めた。現在のところ、地域の福祉サービスの提供をおこなっている会館は多くはなく、同郷、同氏、中華圏の社会とのネットワークを大切にした文化的事業や、後世への継承活動を主なものとしていることが明らかになった。一方、この華僑会館のつながりは、中国大陸や台湾、日本など広範にわたっていることから、この華僑会館の活動を一つの切り口として、今後の本研究を深めていきたい。香港においては、政府の福祉事業の大部分をNGOが独自のサービス提供組織として、になっていることが明らかになった。大小のNGOを含め非常に多くのNGOが高齢者福祉、障害者福祉、児童福祉などの各福祉サービスを提供していた。NGOが小学校など学校運営をしていることからも、NGOが政府機関の一部として役割を担っていることを示している。また、NGOのソーシャルワーカーの位置づけは、わが国のそれとは大きく異なり、社会的地位など、今後の香港の社会福祉、社会政策を考えるために重要と考えられた。本研究は、中華圏の福祉NGOの活動とそのネットワークについて現地調査と文献調査をおこなっている。今年度は、シンガポールと香港のNGOの活動について、現地のNGOを主宰する方々に活動内容や歴史性などについて多くの話を聞くことができた。そのため今年度の活動は、今後、多地域で実施する実際の現地のサービス利用者へのインタビューやアンケート調査の基盤づくりとして位置付けた。海外での調査活動は現地における研究協力者のアドバイスや繋がりを抜きにしては実現することが難しい。その点は、当初の研究計画にあった研究協力者との連携を事前に綿密におこなっていたことから、今後の活動はより充実した調査活動を実施することが可能と考えている。また、そのためには、今後も研究協力者と調査地のフィールドとの関係をより良いものにしていく必要があると考えている。これまでの研究においてシンガポールと香港のフィールドワークの基盤ができたことから、今後の研究活動ではこの現地における福祉サービス利用者へのインタビューやアンケート調査を具体的に実施していく。同時に、中国大陸、台湾の研究協力者に福祉NGOの調査フィールドについて綿密に連携をとりながら、調査実施のための福祉NGOの選定をおこなっていく予定であり、その活動に取り組んでいる。研究計画では4年間の研究において、毎年、シンガポール、香港、台湾、中国とそれぞれのフィールドを調査するものであるが、実際の研究活動においては、調査地との調整が必要であるため、それぞれの調査フィールドを同時並行に連絡をとりつつ、調査をおこなっていく必要がある。そのため、調査においては、まずはそれぞれのフィールドにおいて基本的なインタビューを行うことを第一と考えている。そして、アジア圏でおこなわれる学会に多く参加することで、中華圏の福祉政策、福祉NGOの情報を得て、さらにその情報をもとに本研究活動を発展させていく予定である。

その点は、当初の研究計画にあった研究協力者との連携を事前に綿密におこなっていたことから、今後の活動はより充実した調査活動を実施することが可能と考えている。また、そのためには、今後も研究協力者と調査地のフィールドとの関係をより良いものにしていく必要があると考えている。これまでの研究においてシンガポールと香港のフィールドワークの基盤ができたことから、今後の研究活動ではこの現地における福祉サービス利用者へのインタビューやアンケート調査を具体的に実施していく。同時に、中国大陸、台湾の研究協力者に福祉NGOの調査フィールドについて綿密に連携をとりながら、調査実施のための福祉NGOの選定をおこなっていく予定であり、その活動に取り組んでいる。研究計画では4年間の研究において、毎年、シンガポール、香港、台湾、中国とそれぞれのフィールドを調査するものであるが、実際の研究活動においては、調査地との調整が必要であるため、それぞれの調査フィールドを同時並行に連絡をとりつつ、調査をおこなっていく必要がある。そのため、調査においては、まずはそれぞれのフィールドにおいて基本的なインタビューを行うことを第一と考えている。そして、アジア圏でおこなわれる学会に多く参加することで、中華圏の福祉政策、福祉NGOの情報を得て、さらにその情報をもとに本研究活動を発展させていく予定である。今年度は、研究調査地であるシンガポールと香港において、研究協力者とフィールドの選定と今後インタビューやアンケート本調査を実施するための、基礎調査段階と位置付けた。その基礎的成果を現段階でまとめているところであり、当初予定した研究成果の発表の場である国際学会に参加することを見送り、そのための余剰金が発生した。しかし、次年度はすでに研究成果について国際学会で発表することが決まっているため、この余剰金などを有効活用して学会に参加して、多くの参加者と議論を交わしていきたいと考えている。
2009年皆既日食中の地球潮汐で誘発される2008年中国四川地震の余震の探索

2009年7月、中国・?川地震(2008年、Mw7.9)による余震域の上空を皆既日食が通過した。これは地球潮汐が小規模地震を誘発するかどうか調べる貴重な機会となった。2008年5月から2009年9月までの期間の余震について中国地震局のデータを調べたところ、M1.3以上の地震は4万回を超えていた。われわれはスペクトル解析やスタッキング法などいくつかの方法を使って16ヶ月分のデータを研究し、潮汐の振幅の大きい日食期間中のものはとくに詳しく調べた。その結果、スペクトル解析においては、12時間の地球潮汐との弱い相関関係を見つけることができた。われわれは断層地域に掘られたボアホールでハイドロフォン観測を行うことも計画していた。しかし、ボアホールの完成が5ヶ月も遅れたため、日食に合わせて計器を設置することができなかった。その後、ボアホールに設置された地震計は多くの小規模地震を記録している。ここでも、われわれは12時間の地球潮汐との弱い相関関係を見つけることができた。