hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
腸内細菌が有する酵素特異的な専用シャペロンによるフォールディングメカニズムの解明

アッセイの条件を検討し再度行う予定である。項目3に関して、LnbXのホモログが3つ見つかっており、それらもフォールディングの際にシャペロンを必要とするが、それらのシャペロンとの特異性を調べた。LnbYは一部のホモログに対して作用しないことがわかった。1)LnbYの局在を調べる:ビフィズス菌の菌体外に存在しているか確認His-tagを切断したLnbYを得たが、LnbYの抗体発注が遅れた。2)LnbYの構造解析およびシャペロン不要なLnbX構造への改変タンパク濃度の検討および様々な条件下でLnbYの結晶化を試みたが、結晶を得ることができなかったため。3)類似シャペロンの探索および基質特異性の解析大腸菌にそれそれのシャペロンとLnbXまたはそのホモログを組み合わせて発現し活性を調べLnbXホモログに対して作用する一部のシャペロンの特異性について調べた。1)LnbYの局在を調べる:ビフィズス菌の菌体外に存在しているか確認LnbYの抗体を用いてウエスタンブロッティングを行う。ビフィズス菌の細胞を短時間プロテアーゼ処理することで分解された場合、菌体表面に局在していることが示される。また、免疫染色法により菌体表面に局在するLnbYを顕微鏡観察する。2)LnbYの構造解析およびシャペロン不要なLnbX構造への改変結晶化の条件検討を引き続き行うと同時に、LnbYのN末、C末を削ったコンストラクトを作製し、フォールディング活性を有するコンストラクトについて発現・精製・結晶化を行う。結晶が得られなかった場合には、SAXS(X線小角散乱)を行い溶液中のLnbYの構造および変性LnbXと結合したLnbX-Y複合体の状態もSAXSを行い観察する。同様に、項目3で明らかにしたLnbY以外のシャペロンについても構造解析を行う。3)類似シャペロンの探索および基質特異性の解析無細胞in vitroタンパク質発現系を用いて、LnbYを含むそれぞれのシャペロンの特異性を明らかにする。LnbYの結晶化条件検討に想定以上時間がかかってしまったため、当該年度に発注する予定だったLnbYの抗体およびペプチド合成に計上していた費用を使用していないため次年度使用額が生じた。次年度は、LnbYの抗体およびペプチド合成を行いLnbYの局在およびLnbYが作用するLnbXの部分を明らかにする。
MALDI-MASSによる蛋白質のアトモルレベル翻訳後修飾機能解析

研究実績概要5種類のヒト結腸腺癌細胞(COLO 201,COLO 320DM,DLD-1,LoVo,WIDr)を遠心分画後、得られた粗膜画分を二次元電気泳動を行い、抗c-src抗体及び抗Myr-Gly抗体を用いてwestern immunoblot analysisを行った結果、LoVoを除く4種のヒト結腸腺癌細胞中の等電点の異なる3種類の癌遺伝子産物pp60^<c-src>(pI5,pI6,pI7)を検出することができ、その内、pI5及びpI7のpp60^<c-src>は新規合成されたものであること、更にpI6のpp60^<c-src>は細胞内に蓄積しているものであることが判った。また3種類のpp60^<c-src>は各細胞周期において発現量が変動し、特にM期においては、粗膜画分だけでなく細胞質画分にも得られたことからM期に注目し、PVDF膜にブロッティングされたpI6のpp60^<c-src>をMALDI-TOF MSを用いて解析した結果、pI6のpp60^<c-src>のアミノ末端周辺構造は翻訳時修飾であるミリストイル化を受けていることが判った。従って今回の研究から活性中間体(まだkinase活性は有しない)であるpI6のpp60^<c-src>は、アミノ末端がミリストイル化を受けており、さらにThr34及びSer72がリン酸化を受けているformであることが示唆された。また今回の研究でPVDF膜(Immobilon-P)上でのMALDI-TOF MSを用いたpp60^<c-src>の翻訳後修飾解析にはImmobilon-PよりImmobilon-CDの方がブロッティング後の蛋白質との結合力が比較的弱いために解析に向いていることが判った。
解析関数空間の不変部分空間の構造及び性質について

今年度は、Segal-Bargmann空間及び、2変数のHardy空間の不変部分空間の研究を主に行った。まずは、2変数Hardy空間の不変部分空間の研究についてについて述べる。申請時に記載した不変部分空間と逆シフト不変部分空間の交換子の関係式に関する予想に大きな進展があった。不変部分空間上のcore作用素がHilbert-Schmidtであるときに予想が正しいことが証明できた。多くの不変部分空間において、core作用素がHilbert-Schmidtとなり、全てではないが多くを網羅した結果である。これは、不変部分空間の分類を行うための一つの手がかりとして大きな意義を持ち、今後の大きな一歩となる。また、交換子のランクが1となるある不変部分空間Mについて、いつMezMがMを生成するかを考えた。一般的な問題として、1変数の場合と大きく異なるため、大きな意義があり、2変数での不変部分空間を知る上で重要である。Segal-Bargmann空間については、零点についての研究を進めてきた。8月にはK.Zhu教授のいるSUM (Albany)を訪れ、Segal-Bargmann空間についての知識やアイディアを頂いた。またcyclic vectorについてもアドバイスを頂くことができた。これらの研究は現在進行中である。
膵β細胞の分化と新生におけるFoxO1の役割

本研究課題においては、転写因子Fox01が膵細胞の分化や膵細胞型の決定に果たす役割をvivoで明らかにする為に、膵特異的Fox01欠損マウス(KO)と膵特異的Fox01トランスジェニックマウス(TG)を作成し、解析を行った。耐糖能はKOで優位に改善、逆にTGでは悪化し、一部のマウスは顕性の糖尿病を発症した。重要なことに、KOではインスリン陽性の膵管細胞と小さなサイズのラ氏島の増加が認められ、・細胞の新生が促進されていると考えられた。一方、TGでは明らかな・細胞の減少とともに、腺房細胞の著減、膵管の増加とラ氏島内血管の増加が認められた。これらの結果から、Fox01が膵細胞の分化、新生のみならず、その機能にも重要であることが明らかとなった。膵β細胞の再生,移植療法は糖尿病に対する新しい治療法として注目されているが,その確立の為には,まず膵細胞の分化メカニズムを明らかにする必要がある。本研究課題においては転写因子Fox01が膵細胞の分化に重要な役割を果たす可能性を以下の3つの系で検証した。(1)膵特異的Fox01欠損マウスの解析これらのマウスでは定量RT-PCRの結果,膵臓でのFox01の発現が90%以上低下していた。組織学的解析の結果,膵管におけるインスリン陽性細胞の数が著増しており,小さなラ氏島の数も増加していた。(2)膵特異的Fox01トランスジェニックマウスの解析これらのマウスは膵臓の形態に著しい異常を認めた。まず,膵外分泌細胞は殆ど消失し,膵管構造が著明に増加,ラ氏島細胞の構築に異常をきたし,ラ氏島内微小血管の増加を認めた。(1)と(2)の成果よりFox01が膵細胞の分化に重要な役割を果たすことが証明された為,平成20年度はさらにこれらのマウスの表現型(各種代謝パラメーターや血清学的解析,糖負荷テスト等)の解析を進める予定である。(3)培養膵管細胞からインスリン産生細胞を作成する試み膵管細胞に活性型Fox01を過剰発現させると,グルカゴンとPPの発現が誘導されたが,インスリンは発現しなかった。逆にsiRNAを用いてFox01をノックダウンしたが,インスリンもグルカゴンも発現しなかった。ただし,膵分化関連転写因子であるPdx1,NeuroD,Nkx2.2などの発現は変化した為,平成20年度には他の転写因子との併用やFox01発現のタイミングを変えてみて,膵管細胞からインスリン産生細胞の誘導を試みる予定である。以上,平成19年度の研究実績は研究代表者の仮説通り膵細胞分化におけるFox01の重要性を証明するものであり,大変意義深い。よって今後もこの研究課題をさらに推進することは非常に重要であると思われる。本研究課題においては、転写因子Fox01が膵細胞の分化や膵細胞型の決定に果たす役割をvivoで明らかにする為に、膵特異的Fox01欠損マウス(KO)と膵特異的Fox01トランスジェニックマウス(TG)を作成した(平成19年度成果)。平成20年度には、これらのマウスに高脂肪、高ショ糖食を与え、耐糖能の変化を調べた。重要なことに、KOではインスリン陽性の膵管細胞と小さなサイズのラ氏島の増加が認められ、β細胞の新生が促進されていると考えられた。一方、TGでは明らかなβ細胞の減少とともに、腺房細胞の著減、膵管の増加とラ氏島内血管の増加が認められた。また、KOをdb/dbマウスと交配させると、耐糖能はコントロールのdb/dbマウスに比し、明らかな増悪傾向を示した。これらの結果から、Fox01が膵綱胞の分化、新生のみならず、その機能にも重要であることが明らかとなり、糖尿病発症との関わりが示唆された。次に、Fox01の膵細胞分化における役割を直接検討する為に、マウスから単離培養した膵管細胞において、アデノウイルス発現系を用いてFox01の恒常的活性型変異体を発現させ、膵管細胞が膵内分泌細胞に分化移行し得るかを検討したが、グルカゴンやPPの発現は誘導されたが、インスリンの発現には至らなかった。今回得られた知見は、糖尿病におけるβ細胞障害の分子メカニズムの解明のみならず、将来のβ細胞の再生と、それを利用した糖尿病に対する細胞移植療法の開発に重要な示唆を与えるものであり、今後のさらなる研究成果が期待される。
離島・地域密着型海流発電装置に関する研究

海中浮遊式海流発電は発電装置を海面下に配置できるため、水面上に配置しなければならない洋上風力発電や波力発電に較べて、発電装置を支持する構造の重量を軽くすることができコスト削減に大変有利なコンセプトである.このような海流発電装置として二重反転式と双発式の2つのコンセプトを提案し、それぞれの性能を評価するために、シミュレーション・コードを開発した.また、そのコードの精度を模型実験により検証した.このコードによる性能評価では2つのコンセプトともに成立の可能性は高く、低発電コストが期待できることが分かった.海中浮遊式海流発電は発電装置を海面下に配置できるため、水面上に配置しなければならない洋上風力発電や波力発電に較べて、発電装置を支持する構造の重量を軽くすることができコスト削減に大変有利なコンセプトである.このような海流発電装置として二重反転式と双発式の2つのコンセプトを提案し、それぞれの性能を評価するために、シミュレーション・コードを開発した.また、そのコードの精度を模型実験により検証した.このコードによる性能評価では2つのコンセプトともに成立の可能性は高く、低発電コストが期待できることが分かった.海洋再生エネルギーを大規模に導入するためには発電コストを抑えることが重要であるが、海流発電は他の発電方式に比べ重量最小化の可能性が最も高い。本研究では係留式海流発電装置を研究対象とし、それが超すべき技術課題を模型実験と数値シミュレーションレベルで解決することを目的として以下の研究を行った。本年度は、まずコストを大きく減らすことが可能な最小構造重量の海洋エネルギー発電装置の有望な候補として2重反転タービン式海流発電装置と双発タービン式海流発電装置について考察し、基本的なコンセプトを示した。また、ここで示した装置について簡便な方法で構造重量の推定を行った。その結果、2重反転タービン式と双発タービン式の間では大きな差異は無いことが分かった。また、構造重量については発電機容量を大きくするメリットは無いことも分かった。さらに、コンセプト設計を行った、2重反転タービン式海流発電装置の運動解析の精度を向上するため、研究代表者が所有する波浪中運動解析数値計算コードを拡張し、タービンブレードに働く波浪影響の揚力成分以外の部分をモリソン式で評価し、他の研究で行われた実験結果と対比してその精度を検討した。その結果、解析コードはある程度の精度を持つことが分かった。一方、この装置を係留する係留索については、その運動を解析するためLumped-mass法に基づく係留系の計算プログラムを作成し、カテナリー係留とハイブリッド係留について計算値と実験値の比較を行った。その結果、この計算法により、実験結果を上手く再現できることが分かった。また、金属鎖と繊維索の構成比と全長を様々に変化させた場合の上端にかかるRAOと位相差、アンカー部分にかかる最大張力の関係について調べた。その結果、位置保持という観点ではハイブリッド係留は性能が劣るが、係留索の全長を短くできる可能性を見出すことができた。本年度は以下の研究を行った。昨年度作成した運動解析コードに、昨年度作成したランプド・マス法による係留系解析ルーチンを追加し、係留系の運動が正確に把握できるようにした。さらに、このコードを時系列解析が可能なように拡張し、変動流体力や大波高波浪影響を取り入れた。ただし、大波高波浪影響は厳密な意味での非線形計算を行うのではなく、モリソン式による抗力計算とフルードクリロフ力を厳密に扱うことにした。これにより波浪影響の推定や海流の変動に伴う変動流体力の影響評価を行えるようになった。この運動解析コードを用いて、海流の流速流向変化による姿勢変化、振れ回り運動、波浪による長周期・短周期運動の推定を行った。その結果、波浪による影響は大変小さいことが分かった。また、海流流速流向変化に伴う長周期の姿勢変化についても検討した結果、ウェザーベーン機能は期待できるが、浮体姿勢変化は大変緩やかで、ピッチコントロールによる姿勢制御を併用したほうが良いことが分かった。またさらに、短周期の変動に対するピッチコントロールの可能性についても検討し、短周期の変動を減らせる可能性を見出した。以上を実験で確認するため、タービン模擬装置を取り付けた海流発電装置模型と係留系模型の開発と製作を行った。これを用いて、大型水槽および回流水槽において、浮体模型の流れの中での係留試験を行った。ここでは、流向変化による浮体の姿勢変化や係留力を計測するとともに、前述の計算コードの精度検証を行った。さらに、規則波中における浮体動揺運動の計測を行うとともに、ピッチコントロールの試験も実施し、浮体運動の制御可能性を実験的にも見出した。最後に、設置、メンテナンス、アンカーの展開法、回収法を調査・検討した。それに基づき、設置、メンテナンス、回収の効率的実施法を提案した。本年度は海流発電装置のメンテナンスに関わる研究を行った。まず、双発式の海流発電装置を例にとり、洋上でのメンテナンス法のシナリオを検討した。その結果、大きな機械部品の交換は浮上した後に、浮沈式バージ船上での作業や、陸上のドック内作業が必要であるが、その他にも多くの人力によるメンテナンスの必要性があり、それらを、小型船舶で効率良く実施することがコスト削減に重要なことが分かった。そこで、小型船舶によるメンテナンスシナリオの作成に向けて、浮上時の海流発電装置の運動特性の把握を把握することとし、小型模型による波浪中動揺試験とパネル法による運動解析を実施した。

運動解析においては、タービン翼の影響をモリソン式によって推定し、それを運動方程式に付加する手法を用いた。これら両者の比較により、タービン翼が運動特性に大きな影響を及ぼすことが分かった。また、タービン翼に働く流体力特性の推定精度向上が波浪中運動の推定には大変重要なことも分かった。また、今回は係留索の模擬を簡単なばね系で行ったが、波向きによってはこのばね系の影響も大きいことが分かった。さらに、設置、装置起動、メンテナンス、アンカーの展開法、回収法などについても昨年度に続いて調査・検討し、設置・メンテナンス・回収のシナリオ改善を行った。最後に、この研究で得られた知見に基づいて、IEC/TC114の係留システムの設計WGにおいてガイドラインのあるべき姿について提案を行った。研究実施計画に書いた項目について、全て研究を実施し、予定どおりの成果を得た。曳航状態のシミュレーションについてのみ、メンテナンスや設置の手法調査が手間取り、シミュレーションを実施するにいたらなかった。24年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は順調に進んでおり、特におおきな変更点はない。ただ、当初予定していた波浪発電とのハイブリッドは非効率なことが判明したので、今後は海流発電に集中して取り組む。
T4ファージ尾繊維形成に関わる分子シャペロン

T4ファージの尾繊維形成に関与する分子シャペロン様蛋白質gp57Aはオリゴマ-蛋白質としては珍しくきわめて高度に熱変性や変性剤よる変性を行う。この蛋白質の解離会合に関する性質を調べることを目的として広範囲の濃度にわたって重量平均浮揚分子量を調べた。高濃度側ではレイリー干渉計、低濃度側は紫外吸収モニターを用いた。その結果、50倍の濃度領域にわたってデータを取ることが出来た。並行して低濃度側領域では220nmでの円偏光二色性による測定も行い、濃度が減少するに従って残基楕円率が減少した。沈降平衡の測定は種々の濃度の塩酸グアニジン存在下および10°Cから40°Cまでの4点の異なる温度でも行った。その結果、本蛋白質の基本会合体は二量体であること、単量体は二次構造を持たないこと、20°Cで低濃度側では2量体-6量体間の平衡にあり、高濃度側ではさらに6量体同士が会合していく傾向が見いだされた。しかし、40°Cになると特に低濃度側では単量体の存在が顕著であった。他方、化学架橋試薬による架橋反応では3量体までのオリゴマーが顕著で4量体以上の会合体はごくわずかしか見られなかった。この結果は、基本会合体中では立体構造的な理由からリシン間の架橋がかからず、架橋は6量体中のC末端側領域でのみ起こると解釈された。これらの実験と同時にテイルリゾチームgp5のオリゴマー構造が解析され、gp5のC末端ドメインは同タンパク質のベースプレートヘの分子集合の過程で3量体を形成するのに必要であって分子内シャペロン的な機能を持つことが明らかになった。テイルリゾチームは感染時には単量体として外膜内に放出される。
胎児羊膜系が関与する妊娠維持機構の解明

本研究により、糖質・鉱質ステロイド産生に関与する因子のontogenicな層別の発現挙動等から、これらの因子がヒト胎児副腎外層のステロイド産生開始に関与していることが強く示唆された。また羊水-羊膜系では、ヘパリン結合成長因子であるミッドカインが胎児肺由来の「胎児シグナル」として羊膜に作用し、COX2発現抑制を介してプロスタグランディンE2産生を制御し妊娠中期の妊娠維持に関与している可能性が示唆された。羊水中のmidkine(MK)濃度の多寡を知ることは、本研究において極めて重要である。そこで本年度の研究において、MK測定系の樹立を試みた。商業ベースで入手可能な(Peplotech社)抗体およびリコンビナント蛋白を用いてMidkine ELISA系を構築し、標準品濃度1001.56ng/mLの範囲で良好な検量線を得たが、なお測定感度を上げるための条件検討が必要と思われた。この測定条件下で妊娠中期および後期羊水のMK測定を行ったところ、Western Blotの結果と同様に、妊娠後期に比べ妊娠中期でMKはより高濃度に存在しているとの予備的結果を得た。今後、測定系をさらに至適化しデータを得る予定である。また少なくとも3種類のMK抗体を用いて行ったWestern Blotにおいて、どの抗体を用いてもMKのバンドは、単量体で推定される位置よりも高分子側で検出された。そこでこの羊水中MK高分子化の機序について、多量体化、コビキチン化、糖鎖付加等の観点から検討を進める予定である。また羊水中のMK産生源候補であるヒト胎児肺、腎臓においてMK蛋白の発現・局在を免疫組織化学により検討した。商業ベースで入手可能であった標本を用いた予備的検討では、妊娠中期胎児腎には尿細管にMK蛋白の局在を認めたが、妊娠末期肺ではMK発現は見られなかった。今後は各妊娠時期における同様の検討を連携研究者や海外研究協力者の協力も得て行う予定である。一方、ヒト胎児副腎皮質細胞のモデルとして表現型の類似したNCI295A細胞を用いて、MK添加実験を行いMKのHSD3B2mRNA発現抑制が認められるかに関して検討したが、外因性リコンビナントMK24時間添加では、HSD3B2を含めステロイド産生酵素のmRNA発現に有意な変化は得られなかった。今後、実験条件の追加・変更およびMK過剰発現実験を行う必要があるものと考えられた。Midkine(MK)が胎児由来シグナルである可能性について検討を行った。まずヒト羊水中のMK濃度測定については、ELISA測定条件を改善し、妊娠中期でMKはより高濃度に羊水中に存在していることが確認された。羊水中のMK産生源候補としては胎児腎臓が挙げられたが、早産児を含めた出生直後の児の尿中にはELISA感度以上のMK蛋白が存在しないことが明らかとなり、この可能性は否定的と考えられた。一方、妊娠中期胎児肺MK mRNAは腎臓より高発現しており、妊娠末期胎児肺では免疫組織学的にMK蛋白発現は証明できていないものの、mRNA量から推測して妊娠中期では有意な蛋白発現が見られている可能性が高い。次年度は胎児肺が主要な羊水中MK産生源である可能性をさらに追求する。胎児副腎については、機能層であるヒト胎児副腎内層(fetal zone)に選択的に発現する蛋白として、ovary-specific acidic protein(OSAP)を見いだした。OSAPはステロイド産生臓器、特に副腎に多く発現するミトコンドリア蛋白であるが、ヒト成人副腎より胎児副腎でより多く発現していることが明らかとなった。また胎児副腎皮質モデル細胞株であるNCI-H295A細胞でOSAP蛋白を一時的にknock downすると、培養液中のコルチゾールやdehydroepiandrosterone sulfate産生量が低下した。一方、非機能層であるヒト胎児副腎外層に選択的に発現する蛋白であるNGFI-Bファミリーのontogenicな発現について、laser-capture microdissectionを用いて検討を行ったところ、HSD3B2に極めて類似した発現挙動を示すことが明らかとなり、これら転写因子のHSD3B2発現制御における関与が示唆された。前年度に引き続き、胎児肺が主要な羊水中MK産生源である可能性について検討した。まずヒト胎児肺のMK発現・局在の検討では、MKはほぼ肺胞上皮細胞に発現していること、妊娠中期肺に高発現しているが妊娠末期では発現が減弱することを見いだした。これは前年度までに明らかであった羊水中MK濃度の推移と同様の結果であった。また羊膜上皮細胞培養における検討では、MK蛋白の羊水中に匹敵する濃度での添加により、子宮収縮促進物質であるプロスタグランディンE2産生量、羊膜cyclooxygenase-2(COX2)mRNA発現量がMK量依存性に抑制された。以上より、羊水中に存在するMKは妊娠中期にはCOX2の発現抑制を介して妊娠維持に働いているが、妊娠末期には羊水中濃度が減少しCOX2発現抑制効果が減弱することにより、分娩・陣痛発来機序に関与している可能性が示唆された。

また羊水中MKの由来に関しては、羊膜にMKが発現していないことや胎児肺MK発現と羊水中MK濃度の挙動が一致すること等から、少なくとも一部は胎児肺に由来することが強く示唆され、胎児肺由来MKが妊娠維持シグナルとして働いている可能性が考えられた。また胎児副腎については、組織レニン-アンギオテンシン系の主要構成要素であるアンギオテンシン変換酵素(ACE)に着目して検討した。ACE mRNA発現量は、妊娠中期ヒト胎児副腎の外層DZでは内層FZに比較して高く、18週から24週にかけて2-3倍に増加した。またCYP11B2の発現量も同様な発現パターンを示した。この結果は転写因子NGF-IBとNurr1、ステロイド産生酵素HSD3B2とCYP11B2の発現パターンとも一致しており、アルドステロン産生系因子がほぼ一致した時間的・空間的発現挙動を示すことが判明した。また海外共同研究者との検討において、培養ヒト胎児副腎皮質細胞(DZ細胞)ではアンギオテンシン-II添加によりACEが発現増強することが判明し、ACEがヒト胎児副腎においてアルドステロン産生系の局所調節因子として関与していることが示唆された。
人口倫理学と世代間衡平性

人口を変数とみなして世代間衡平性の厚生経済学を研究する。非常に反直観的な結論などの望ましくない帰結を回避するためには,効用の臨界水準を正に設定した上で,臨界水準にもとづく一般化された功利主義によって経済状態を評価すべきことが示された。現在世代の利益と将来世代の利益が家父長的な利他主義によって関連する場合に生ずる全世代の効用関数の間の相互依存関係を研究し,未解決であったレイの表現問題を解いた。全世代の消費配分が決まれは各世代の効用も自動的に決まるとき,効用は家父長的であるという。他方,各世代の効用が自己の消費量のみならず将来世代の効用とともに増加するとき,世代間で非家父長的な利他性が存在するといい,効用は非家父長的であるという。このように,世代間め効用の相互依存関係には二つの形態があるが,両者の間の論理的関係は必ずしも明らかではない。特に,各世代の非家父長的が与えられたとき,それを家父長的形式に表現しなおすことが可能か否かという問題がRay[Journal of economic Theory 41:112-132,1987]によって提出されていたが,これまで未解決であった。我々は,このRayの表現問題を肯定的に解決した。その研究成果は,査読付きの国際学術誌Advances in Mathematical Economicsの第11巻に掲載された。主要な結論は以下のとおりである。第一に,非家父長的効用関数がある種の有界性の条件(各点有界性)を満たさなけれはRayの表現問題に解が存在するとは限らないことを反例で示した。第2に,各点有界性を満たす非家父長的効用関数が与えられたとき,Rayの表現問題に解が存在することを示した。非家父長的効用関数に内臓されている単調性に注目し,Rayの表現問題の解の候補からなる家父長的効用関数の空間が完備束であることを利用したことが,Rayの表現問題の解の一意性を示すことに成功した。この結果は,有限人から構成される社会における経済主体間の効用の相互依存関係を扱ったHori[Japanese Economic Review, 2001]の研究成果を無限視野経済における世代間の効用の相互依存関係の分析に拡張したものとみなせる。
温熱脱水レベルが運動時の体温調節および有酸素的・無酸素的運動能に及ぼす影響

本研究では、"温熱脱水レベルが運動時の体温調節および有酸素的・無酸素的運動能に及ぼす影響"について着目した。平成11年度で、脱水レベルと有酸素的・無酸素的運動能との関係について検討し、平成12年度では、脱水レベルと変動負荷運動時の体温調節および運動能についてまとめた。1)脱水レベルと有酸素的・無酸素的運動能1.血漿量と有酸素性運動能(最大酸素摂取量:VO2max)の関係循環血漿量は、T-1824(Evans'Blue dye)を0.5%溶液で5ml投与し測定した。血液量(BV)は、血漿量(PV)とヘマトクリット値(Hct)からBV=PV/(1-Hct/100)にて算出した。循環血漿量および血液量はいずれもVO2maxとの間に有意な相関を示した。また、乳酸性作業閾値(4mmol)時での酸素摂取量と循環血漿量との間には有意な相関がみとめられた。2.脱水レベルと有酸素性・無酸素性運動能運動前負荷として体重あたり3%を超える脱水負荷が課された。1時間の安静(25°C,RH40%)後、60%VO2maxの運動強度30分間の自転車運動を行った。その結果、対照と比して心拍応答および食道温で有意な高値がみとめられ、脱水による循環血漿量の低下が影響することが示唆された。Wingate testによる無酸素性運動能は、脱水によりパワー持続能に影響を受ける傾向にあった。2)脱水レベルと変動負荷運動時の体温調節および運動能変動負荷は40%80%VO_2maxの範囲で、80%VO_2maxで20秒間運動を課した。1回の強度の変化時間に約5分間かかり、45分間で繰り返し行った。その結果、間欠的高強度運動の影響が体温上昇に反映した。体温および心拍応答と血液量の関係では、血液量および持久的運動能と体温調節との間に負の相関関係がみとめられた。運動時の血漿量の変化において、相対的減少量は平均15%であった。VO2maxの約50%を超えると、血漿の筋組織への水の移動がみとめられている。血液量の多いものほど相対的に高値を示すが、絶対量で換算してみると循環血液量は安静時血液量と正の相関関係がみとめられた。本研究では、"温熱脱水レベルが運動時の体温調節および有酸素的・無酸素的運動能に及ぼす影響"について着目し、平成11年度では、脱水レベルと有酸素的・無酸素的運動能との関係について検討し、1)血漿量と最大酸素摂取量の関係、2)脱水レベルと有酸素性・無酸素性運動能の関係について解析を進めている。1.血漿量と有酸素性運動能(最大酸素摂取量)の関係循環血漿量の測定にはT-1824(Evans' Blue dye)を用いて測定した。投与量は0.5%溶液の5mlをシリンジに用意した。トレーサーを注入し、注入完了と同時に時間を計り、10分後に対側の肘静脈より採血を行った。

また、血液量(BV)は、血漿量(PV)とヘマトクリット値(Hct)からBV=PV/(1-Hct/100)にて算出した。その結果、循環血漿量および血液量はいずれも最大酸素摂取量との間に有意な相関を示した。また、乳酸性作業閾値(LT:Lactate threshold at 4mmol)と運動時血漿量の動態の関係では、LT時酸素摂取量と循環血漿量との間には有意な相関がみとめられた。2.脱水レベルと有酸素性・無酸素性運動能の関係測定は0800から開始し、被験者は来室後採血および体重を測定し、環境制御室にて運動前負荷として体重あたり3%を超える脱水負荷を課される。その後、1時間の安静(25°C,RH40%)後、60%VO2maxの運動強度30分間の自転車こぎ運動を行った。その結果、対照と比較して、心拍応答および食道温において有意な高値がみとめられ、脱水による循環血漿量の低下による影響が示唆された。無酸素性運動については、Wingate testによる30秒間の全力自転車駆動運動において、脱水により、パワー持続能に影響を受ける傾向にあった。本研究では、"温熱脱水レベルが運動時の体温調節および有酸素的・無酸索的運動能に及ぼす影響"について着目し、平成11年度では、脱水レベルと有酸素的・無酸素的運動能との関係について検討し、1)血漿量と最大酸素摂取量の関係、2)脱水レベルと有酸素性・無酸素性運動能の関係についてまとめた。平成12年度においては、脱水レベルと変動負荷運動時の体温調節および運動能について検討し、血液量と変動負荷運動時の体温調節および運動能についてまとめた。1.血液量と変動負荷運動時の体温調節および運動能変動負荷は40%VO_2maxから80%VO_2maxの範囲で強度に変化を課した。強度の変化は、2分間の40%VO_2maxから約20秒間で80%VO_2maxの強度まで増加させ、80%VO_2maxで20秒間運動をし、また20秒間で40%VO_2maxレベルまで強度を減少させる。1回の運動強度の変化に約5分間かかるが、45分間の運動時間で、この運動を繰り返し行わせた。その結果、蹴り返しの高強度運動の影響が体温(食道温)の上昇に反映した。また、体温上昇および心拍応答について血液量との関係でみると、個々のフィジカルフィットネッスレベルで比較して、血液量および持久性の運動能と体温調節との間にその関係には負の相関関係がみとめられた。運動強度に伴い最大酸素摂取量の約50%を超える運動強度から、血漿の筋組織への水の移動がみとめられている。運動時の血漿量の変化についてみると、相対的な減少量は平均で約15%であった。血液量の多いものほど高値を示すが、絶対量で換算してみると循環血液量は安静時血液量と性の相関関係がみとめられた。
リン脂質により制御される標的分子の効率的探索法の開発と応用

イノシトールリン脂質はホスファチジルイノシトールのイノシトール環3,4,5位水酸基の可逆的なリン酸化の結果生じる多様な派生体の総称であり、生体膜に存在する。中でも、ホスファチジルイノシトール3,5-二リン酸(PI(3,5)P2)は、イノシトールリン脂質の中でも最も遅れて発見された分子種であり、未だその生理機能は明らかになっていない。本研究では、PI(3,5)P2により制御されることが期待されるRabGAP候補タンパク質に着目し、候補分子であるGRAMTBC1、GRAMTBC2、GRAMTBC3が実際にRabGAPとしての活性を持つか否かを明らかにすることにより、PI3,5)P2の生理機能の解明の端を開くことを目的として研究を進めた。上記の3分子に加えて、新たに1分子のRabGAP候補タンパク質を見出した。RNA干渉法でRabGAPタンパク質の発現を抑制することで引き起こされる細胞機能の変化を捉える実験を行った。対象とした4種類のRabGAP候補タンパク質うち一つの発現を低下させると、細胞内の小胞輸送に異常を示すことを見出した。これらの分子のRabGAP活性について、試験管レベルでの実験を行った。昨年度見出した、基質として挙げられる4種類のRab分子候補への活性が、実際に、PI(3,5)P2の共存により増強されるか否かを検討しているところである。本研究で、標的分子の効率的な探索についての一つの方法論を提示することができたが、今後実際に見出された分子の生理機能を明らかにする研究の継続が必要であると考えている。本研究では、PI(3,5)P2により制御されることが期待されるRabGAP候補タンパク質に着目し、候補分子であるGRAMTBC1、GRAMTBC2、GRAMTBC3が実際にRabGAPとしての活性を持つか否かを明らかにすることにより、PI3,5)P2の生理機能の解明の端を開くことを目的とする。本年度は、多数存在するRabファミリー分子群の中から、その標的となるRab分子を効率的に同定する手法の開発を行った。Rabタンパク質および、RabGAPタンパク質は細胞内での半減期が長く、RNA干渉法の適用が困難なことが知られている。そこで、PI(3,5)P2の標的となり得るRabGAP候補タンパク質の機能を阻害する目的で、PI(3,5)P2産生酵素の遺伝子をジーンターゲティングにより欠損させることによりホモ遺伝子欠損胚性幹細胞を樹立し、本細胞株において、細胞内のPI(3,5)P2がほぼ完全に消失していることをHPLC分析により確認した。この細胞株を用いて、緑色蛍光タンパク質融合発現ベクターを利用して、Rabの細胞内局在の変化(Rabは活性化状態の変化に伴い、細胞内局在が変化することが知られている)について検討を行った。その結果、全60種類のRab分子のうち、4分子において顕著な局在の異常が見出された。これらの4種のRab分子はアミノ酸の相同性から1つのサブファミリーを形成していると考えられた。
15・16世紀フランスにおける地方高等法院の設立-多極的王国統合の特質解明-

本研究は、15・16世紀フランス王国において、いくつもの高等法院(王国の最高裁判所)が設立された過程を検討することを通じ、当時の国王支配の特質を明らかにするものである。時々の王権はパリからの距離、王領編入時における当該地域と王権との関係、そして裁判組織に関する在地諸身分の要望などを考慮して、地方高等法院導入の是非を決定した。こうして王は、各地で長い伝統をもつ裁判慣行を維持、調整しながら、統一的な裁判体系の確立を目指したことを明らかにした。本年度は当初の計画にしたがって、フランス学会における近年の研究成果の検討と基本的な史料の収集に重点をおいた。絶対王政を大小様々な地方的権力や身分団体に支えられた社団国家と捉える新しい認識のもと、各地において王の最高裁判権を行使した地方高等法院に関しても、1980年代以降関心が高まっている。法院設立においては、当地の権力関係にそくした多様な局地的利害が絡み、王権がこうした利害に、パリおよび設立地の時々の情勢に応じて対処したことを確認できる。たとえば、15・16世紀に設立された6か所の高等法院は、かつて栄えた諸侯国の最上級裁判所を再編するかたちで設立された。一方、王国西部ポワティエの都市政府のように、法院設立を革命前夜まで請願しつづけた地方もみられ半その要求は実現しなかったものの、王の最高裁判所を地元にもつという希望が根強かったことが指摘されている。こうして各地における法院設立の多様な姿が示されるなか、王国全土に及んだ国王裁判権そのものに関しても再考の機運が高まる反面、近年の諸研究は社団国家論の強い影響下にあるためか、高等法院が設立されたあるいはこれを要求する地方側への関心が高く、もう一方の要素である王権やパリ高等法院の利害への関心が低いことも確認された。とくに重要と思われるのは、15・16世紀設立の地方高等法院のうち、トゥルーズとルーアンの法院は諸侯国の王領併合から150200年後に出現したのに対し、デョジョンやレンヌほか4つの法院は王領併合の直後に設立された。ここには英軍のパリ占拠やイタリア戦争など王権側の事情が密接に絡んでいると考えられ、次年度以降の課題として検討する。こうした検討については、今年度の史料調査・収集かち、トゥルーズ、ディジョン、レンヌの法院を事例とすることで、具体的な検討が可能であることが判明した。本研究の目的は、1516世紀のフランスにおいて、王国内にいくつもの最高裁判所(以下、高等法院)が設立された過程を解明することを通じて、王国諸地域の多種多様な権力がどのような仕組みによって国王支配下におかれ、全体としていかなる権力秩序が形成されたかを探求することである。本年度の研究内容としては、王国の中心地パリ以外に設立された7つの高等法院に関して、(1)主にJ.プマレド編の論文集を手がかりに、地域ごとに多様な展開を示した高等法院の設立過程の類型化を試みるとともに、(2)王の勅命や国王役人と地方諸身分の合意文書などを収集することができたブルゴーニュに関して、その具体相を検討した。これらの研究の結果、パリから離れた地域に高等法院が設立されるか否かは、百年戦争終結直後の15世紀後半の時点で、当該地域が王権とどのような関係を有したかに深く関わることを明らかにした。すなわち、ブルゴーニュやアキテーヌのように、15世紀末における王領編入の直前まで王権と鋭く敵対していた地域では、王は王領編入を断行するのと並行して、旧来の裁判組織を早急に高等法院へと再編した。ここでは、王権は高等法院を導入することで、地元民に王権下での良き統治をアピールしたといえる。一方、ラングドックのように長く王領であった地域において、王は戦時の協力と引き換えに地元諸身分の嘆願を聞き入れるかたちで、高等法院の設立を承認した。ここでは、王権がその直接支配を再強化する一環として、地元諸身分との政治的妥協の結果、高等法院が設立されている。このように高等法院という統一的な裁判機構の形成の背景に、各地の状況に応じた王権の多様な統合政策を明らかにしたことの意義は大きい。以上、各地域の類型化については『秋大史学』第56号に論文を公表し、ブルゴーニュの特殊な事例については秋田大学史学会において発表を行った。
皮膚指向性成熟Ｔ細胞腫瘍においてＦｒａ－２－ＳＯＸ４経路が担う発癌機構の解明

これまでに我々は、成人T細胞白血病/リンパ腫(ATL)や皮膚T細胞リンパ腫(CTCL)でFra-2が一貫して発現し、CCR4発現誘導や細胞増殖に関与することを明らかにしてきた。本研究では、ATLとCTCL発癌におけるSOX4発現とその役割について検討した結果、ATLとCTCLにおいて、Fra-2-JunDが直接SOX4の転写活性を促進し、SOX4下流標的遺伝子として見出したGCKR、NAP1、HDAC8を発現誘導することでこれらの腫瘍の細胞増殖能を高めることを明らかにした。したがって、これらの知見からFra-2-SOX4経路はATLとCTCL発癌において重要な役割を有することが示唆された。これまでに我々は、成人T細胞白血病/リンパ腫(ATLL)においてFra-2が細胞増殖に寄与することを明らかにし、また、Fra-2の下流標的遺伝子として原癌遺伝子c-Myb、MDM2、Bcl-6、SOX4を同定した(Oncogene 2008)。これらの原癌遺伝子の中で、SOX4は肺癌や前立腺癌など様々な悪性腫瘍の発癌に関与することが報告されているが、造血器腫瘍におけるその発現や役割については不明である。前年度我々は、ATLおよび皮膚T細胞リンパ腫(CTCL)の細胞増殖においてFra-2-SOX4経路が極めて重要な役割を果たすことを明らかにし、それはGCKR/MAP4K5、NAP1/AZI2やHDAC8など細胞増殖に関与する新規下流標的候補遺伝子群の発現をFra-2-SOX4経路が制御しているためであることを示唆した。本年度は、Fra-2-SOX4経路の新規下流標的候補遺伝子として得られたGCKR/MAP4K5、NAP1/AZI2、HDAC8に着目し、ATLLおよびCTCLにおける発現解析、SOX4による発現誘導機構の解析、そして、これらの標的候補遺伝子の細胞増殖あるいはアポトーシス抵抗性に関わる分子機構の解析を行った。これらのことから、ATLLやCTCLにおいて、SOX4は重要な発癌因子の一つであることが明らかとなり、Fra-2-SOX4経路がこれら腫瘍において鍵となる発癌機構であることが示唆された。これまでに我々は、成人T細胞白血病/リンパ腫(ATL)においてFra-2が細胞増殖に寄与することを明らかにし、また、Fra-2の下流標的遺伝子として原癌遺伝子c-Myb、MDM2、Bcl-6、SOX4を同定した(Oncogene 2008)。前年度までに我々は、ATLおよび皮膚T細胞リンパ腫(CTCL)の細胞増殖においてFra-2-SOX4経路が極めて重要な役割を果たすことを明らかにし、このことはFra-2-SOX4経路が制御しているGCKR/MAP4K5、NAP1/AZI2やHDAC8など細胞増殖に関与する下流標的遺伝子群の発現誘導が関与していることを示した。本年度は、ATLとCTCLでのFra-2-SOX4経路の役割における相違点について検討した。その結果、ATLおよびCTCLにおいて、1)ATL細胞株では一貫してSOX4とその標的遺伝子の発現がみられたが、SOX4が発現していないCTCL細胞株でもHDAC8などのSOX4下流標的遺伝子の発現がみられること、2)臨床検体においてSOX4が高頻度かつ強発現しているATLと比較して、CTCLでは低中頻度で発現強度も弱いものが多かったことを明らかにした。これらのことから、ATLにおいて、SOX4は重要な発癌因子の一つであることが明らかとなり、Fra-2-SOX4経路がこれら腫瘍において鍵となる発癌機構であることが示唆された(Blood, 121(18):3640-9, 2013)。また、CTCLにおいてはSOX4の発現に関係なくその下流遺伝子であるHDAC8の発現がみられることから、ATLとは異なるHDAC8発現誘導経路が存在することも示唆された。本年度

我々は、ATLLおよび皮膚T細胞リンパ腫(CTCL)発癌機構におけるFra-2-SOX4経路の役割を解明するため、ATLLおよびCTCLにおけるSOX4の発現解析、原癌遺伝子Fra-2によるSOX4発現誘導機構の解析、さらにSOX4の細胞増殖あるいはアポトーシス抵抗性に関わる分子機構の解析を行った。その結果、ATLLおよびCTCLにおいて、1)Fra-2-JunDヘテロダイマーがSOX4の転写活性に関与すること、2)SOX4がFra-2の直接的な標的遺伝子であること、3)SOX4が細胞増殖において極めて重要な役割を果たしていること、4)細胞増殖に関与するGCRK/MAP4K5、NAP1/AZI2やHDAC8などがSOX4の新規下流標的候補遺伝子群に含まれることを明らかにした。これらのことから、成熟T細胞性腫瘍であるATLLやCTCLにおいて、SOX4は重要な発癌因子の一つであることが明らかとなり、Fra-2-SOX4経路がこれら腫瘍において鍵となる発癌機構であることが示唆された。また、近年、HDAC inhibitorはリンパ腫の新規治療薬として注目されており、SOX4の下流標的候補遺伝子であるHDAC8は造血器腫瘍の主要な分子標的である可能性が示唆される。これらの本年度研究成果は、JSICR-MMCB2011(2011年5月、泉佐野)にて発表した。当初の我々の想定通り、ATLLおよびCTCLにおいてSOX4がHDAC8の発現を制御し、HDAC8がその細胞増殖に関与することを強く示唆する結果が本年度の研究成果から得られた。また、GCKR/MAP4K5とNAP1/AZI2においても、これらの遺伝子に対するsiRNAを用いた発現抑制実験より、HDAC8と同様に細胞増殖に関与する結果が得られた。これらの結果から、SOX4は実働的な複数の細胞増殖関連因子の発現制御に関わることが明らかとなり、皮膚指向性の末梢成熟T細胞腫瘍におけるSOX4の発現制御機構と細胞増殖に関わる分子機構の一端を明らかにすることができたと考えられる。これらは本年度の研究計画通りの結果であり、よって、本研究計画は順調に進展していると思われる。当初の我々の想定通り、ATLLおよびCTCLにおいてFra-2-JunD経路がSOX4の発現を制御し、SOX4がその細胞増殖に関与することを強く示唆する結果が本年度の研究成果から得られた。また、SOX4が転写因子であることから、実際にATLLやCTCLの細胞増殖に寄与する実働的な因子を見出すため、SOX4発現抑制系を用いたDNAマイクロアレイ解析を行った結果、SOX4標的候補遺伝子群の中にHDAC8をはじめ細胞増殖関連遺伝子が複数存在することが確認できた。したがって、我々はこれら皮膚指向性の末梢成熟T細胞腫瘍におけるSOX4の発現制御機構と細胞増殖に関わる分子機構の一端を明らかにすることができたと考えられる。これは本年度の研究計画通りの結果であり、よって、本研究計画は順調に進展していると思われる。本年度は、研究計画通りに進めることができた。しかしながら、臨床検体において、ATLLではSOX4発現量およびその発現頻度が非常に高かったが、CTCLではSOX4の発現がみられないものも含めて、それらの傾向にばらつきがみられた。それにもかかわらず、SOX4標的遺伝子の発現はATLLと同様に検出されたことから、一部のCTCLではSOX4の発現制御を介さないSOX4標的遺伝子発現経路が存在することが考えられる。よって、CTCLにおける本研究で同定したHDAC8をはじめとするSOX4標的遺伝子の発現制御経路を再検討する必要があり、次年度の研究計画に組み入れたいと思う。
蛋白質生合成を翻訳レベルで調節するヘム関連キナーゼのX線結晶構造解析

近年、ヘムやヘムリガンド(酸素分子、一酸化炭素、一酸化窒素等)の濃度変化を感知して、これを細胞シグナルへと変換するヘムセンサーと呼ばれる新しいヘムタンパク質ファミリーが次々と見つかり、注目を浴びている。本研究では、未だ不明であるヘムセンサータンパク質のセンシング機構を解明するため、いくつかのヘムセンサータンパク質について結晶構造解析を行った。本研究ではまず、ストレス(ヘム濃度低下)に応答してmRNAから蛋白質への翻訳を阻害するheme-regulated eIF-2αkinase(HRI)に着目した。HRIは基質である翻訳制御因子(eIF-2α)をリン酸化することによって、mRNAから蛋白質への翻訳を阻害するキナーゼであり、そのN末端領域(約140残基)がヘム結合部位としてストレスセンサーとして働いていると考えられている。HRIの分子内シグナル伝達の初期段階での構造変化を解明するために、HRIのN未端ヘム結合ドメインのX線結晶構造解明を目指し、そのN末端ドメインの結晶化を試みた。様々な結晶化スクリーニングキットと結晶化用恒温装置を用いた4°Cと25°Cでの条件検索により、ヘム結合状態において、微結晶を得ることができた。その後結晶化の最適条件をスクリーニングしているが、X線結晶構造に適した大きな結晶を調整するには至っていない。また、本研究では大腸菌のヘムセンサータンパク質であるヘム制御ホスホジエステラーゼ(EcDOS)のヘムセンサードメインの結晶化も並行して行い、その結晶化に成功した。そして、活性型の還元型、不活性型の酸化型の両方についてその構造解析に世界で初めて成功した。高分解能の結品構造解析から、ヘムの酸化還元状態の違いによってヘムリガインドの交換が起こり、これがのEcDOSヘムセンサードメインの三次元構造を変化させていることが明らかとなった。この構造変化がホスホジエステラーゼの活性制御に関わっていることが強く示唆された。広義の蛋白質生合成、すなわち遺伝情報の発現過程は、DNAからmRNAへの転写段階ぱかりでなく、転写後も様々な調節を受けている。この中でも翻訳段階での調節は、ヒートショックや栄養欠乏といったストレスへの応答という観点からも重要で、近年、盛んに研究がなされている。本研究ではストレス(ヘム濃度低下)に応答してmRNAから蛋白質への翻訳を阻害するheme-regulated eIF-2αkinase (HRI)に着目した。本研究ではHRIの分子内シグナル伝達の初期段階での構造変化を解明するために、HRIのN末端ヘム結合ドメインのX線結晶構造解明を主な目的としている。結晶化には一般的に大量の蛋白質サンプルが必要であるが、HRIヘム結合ドメインに相当するフラグメントは大腸菌による大量発現系が確立している。高純度に精製した蛋白質サンプルを用いて結晶化のスクリーニングを行った。今後は更に結晶化条件を検討し、X線結晶構造に適した大きな結晶を調整する予定である。
総合周産期母子医療センター内助産システムを中核とする新規地域産科医療モデルの構築

地域医療の中核として運用可能でかつ臨床的有用性の高い、新しい総合周産期母子医療センターにおける院内助産システムを確立し、これを中核とした今までにない地域産科医療ネットワークモデルを構築することを目的に、最終年度である本年度の研究を遂行した。2016、2017年度の計2年間の研究成果をもとに構築した、総合周産期母子医療センター内助産システムを中核とする新規地域産科医療ネットワークモデルの、茨城県つくば・県西ブロック内で前方視的運用を2018年4月より遂行した。その結果、計101名が本地域産科医療モデルを通じて本総合周産期母子医療センターにおいて院内助産システム下で分娩した。これらの女性の管理経験、および母児に対する安全性や患者満足度を含む分娩に関連する臨床的事項の後方視的検討を通じて、以下の2点が明らかとなった。1)この総合周産期母子医療センターにおける院内助産システムのその母児に対する安全性は、通常の医師主導の産科管理のそれに劣らない。2)本研究で構築した総合周産期母子医療センター内助産システムを中核とする新規地域産科医療ネットワークモデルは、わが国の地域の産科医療提供体制の一部として非常に有用であり、地域産科医療学の発展に寄与する。なお、研究実績の一部は日本周産期・新生児医学会雑誌(第54巻3号,809ー813頁,2018年)に原著論文として発表した。これ以外の研究成果については、現在論文投稿準備中である。地域医療の中核として運用可能でかつ臨床的有用性の高い、新しい総合周産期母子医療センターにおける院内助産システムを確立し、これを中核とした今までにない地域産科医療ネットワークモデルを構築することを目的に、研究を遂行した。まず、筑波大学附属病院において平成26年度からスタートさせている院内助産システムを基盤として、システムプロトコール原案の作成を行った。その上で、当院における分娩を希望し受診した妊娠女性のうち、そのプロトコールにて対象となりうるローリスク妊娠の女性全員の中から同意が得られた女性を対象に、同システムでの妊娠・分娩・産褥管理を行った。対照群としては、ローリスク妊娠ながら同意が得られなかった女性とした(これらの女性については通常の医師主導産科管理で妊娠・分娩・産褥の管理を行った)。その結果、年度内に分娩が終了した対象女性は115名だった。システムの最も大きな前提は、母児に安全であることであるため、第一にこれについて解析した。その結果本院内助産システムの母児に対する安全性は、通常の医師主導の産科管理のそれに劣らないことが明らかとなった。そして、これらの研究遂行に並行して行ったプロトコールの検討、修正によって、最終的なプロトコールを完成させることができた。なお、研究実績は平成29年4月開催の第69回日本産科婦人科学会学術講演会で発表した。また、平成29年10月に開催予定の第58回日本母性衛生学会学術集会での発表を計画している。実施計画自体に問題はなく、「研究の目的」の達成度としては順調に進展しているものの、本研究の対象女性(対照群を含む)の数が当初の予定よりやや少なく、当初の計画以上とはいえない達成度の考えられる。また、地域産科医療への展開という意味での、茨城県つくば・県西ブロック内の産婦人科医療機関との協議は端緒についたばかりであり、その意味でも当初の計画以上の進展とはいえない。地域医療の中核として運用可能でかつ臨床的有用性の高い、新しい総合周産期母子医療センターにおける院内助産システムを確立し、これを中核とした今までにない地域産科医療ネットワークモデルを構築することを目的に、本年度も研究を遂行した。昨年度に引き続いて、同意が得られたローリスク妊娠の女性を対象に、院内助産システムでの妊娠・分娩・産褥管理を行った。これらの女性の管理を通じて、その母児に対する安全性は、通常の医師主導の産科管理のそれに劣らないことを今年度も確認することができ、そして、これまで2年間の研究成果をもとに、総合周産期母子医療センター内助産システムを中核とする新規地域産科医療モデル試案を構築することができた。さらに、その茨城県つくば・県西ブロック内での前方視的運用を平成30年4月より開始する準備を整えることができた。また、これと並行して、わが国の地域産科医療システムと院内助産に関する全国調査を行った。本研究で確立を目指す新規地域産科医療モデルはわが国の実態に適合した現実的なものである必要があり、そのための重要な調査と位置づけられるものである。その結果、地域の産科医療提供体制の一部として院内助産は有用であると考えている各地域の中核産科施設が多く、本研究での新規地域産科医療モデル構築への期待があることが明らかとなった。さらに各地域での実態を詳しく知ることができ、調査結果をふまえたモデル試案の修正を行うことができた。なお、研究実績は平成30年5月開催予定の第70回日本産科婦人科学会学術講演会で発表予定であり、平成30年10月開催予定の第59回日本母性衛生学会学術集会での発表も計画している。実施計画自体に問題はなく、「研究の目的」の達成度としては順調に進展しているものの、本研究の対象女性(対照群を含む)の数が当初の予定よりやや少なく、当初の計画以上とはいえない達成度と考えられる。なお、地域産科医療への展開という意味での新規地域産科医療モデル試案の構築は、当初計画のロードマップ通りである。