hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ポテンシャル論における自由境界問題

本研究は、自由ないし移動境界問題の中で典型的なヘレショウの流れに焦点をあて、ポテンシャル論的な手法を開発して、古典的な方法では得られなかった流れの特性を明らかにすることを目指すものである。流れの初期流域の境界上に角がある場合の研究を行ったが、角の内角が直角より小さいと一定の時間角が同じ内角のままで領域の境界上に存在し続けるが、角の内角が直角より大きいと瞬時に角は消滅する。角の内角が直角のときと全角(=360度)のときは特別であり、直角のときは必要十分条件に近いものを全角のときはいくつかのタイプに分けてそれらの生ずる十分条件を得た。各分担者は、この研究成果を得るにあたり種々の貢献をしたが、各分担者の個別の研究にも成果をあげた。それらを簡単にまとめると以下の通りである。・望月:プラズマ中の熱拡散などを記述する準線形方物型方程式に対して大域解の存在、爆発、爆発解の爆発時刻の評価、大域解の漸近挙動の研究を行った。・石井:ガウス曲率流の平坦部分の待ち時間の存在証明を与えた。・倉田:固有値問題の最適化問題などを研究し、付随する自由境界問題の定性的研究を行った。・高桑:定義域の内部に特異点を持つ調和写像全体の空間の構造について研究を行ない、特異な調和写像についてもコンパクト性定理が成り立つことを示した。・肥田野:非線形波動方程式の解の時刻が十分経過した際の漸近挙動を散乱、自己相似性、爆発の観点から研究した。・平田:一般の力学系についてポアッソン法則が成り立つための判定条件を与えた。本研究は、自由ないし移動境界問題の中で典型的なヘレショウの流れに焦点をあて、ポテンシャル論的な手法を開発して、古典的な方法では得られなかった流れの特性を明らかにすることを目指すものであるが、本年度は,流れの初期領域の境界上に角がある場合の研究に集中した.角の内角が直角より小さいと一定の時間角が同じ内角のままで領域の境界上に存在し続けるが、角の内角が直角より大きいと瞬時に角は消滅する。さらに、直角のときは、これらの二つの場合があり、それぞれのための十分条件を得た。●望月:反応拡散系の簡単なモデル方程式系の大城解の存在、非存在に関する研究を行ない、べき状の非線形項について存在ー非存在の臨界指数の決定、臨界爆発、存在時間の評価、又大域解については、時間の経過に伴う漸近挙動を調べた。●石井:ハミルトン・ヤコビ方程式に対する周期的領域上でのノイマン型とディリクレ型の境界値問題の均質化を扱い、ハミルトニアンと領域が周期的に振動するときの極限方程式を決定した。●倉田:非負解uに対しu(x)^qdxおよびu(x,t)^qdxdtがダブリング測度になることを楕円型および放物型偏微分方程式それぞれに対して示した。●肥田野:初期値が小さいときの非線形波動方程式の散乱問題をgenerator法を用いて重みつきのL^2型ソボレフ空間で研究し、空間次元2、3、4の場合に新しい知見を得た。昨年度に続き流れの初期領域の境界上に角がある場合の研究を行なったが、角の内角が直角のとき全角(=360度)のときは特別な考察を必要としている。本年度はこの特別な二つの場合を詳しく研究した。

直角のときは必要十分条件に近いものを全角のときはいくつかのタイプに分けてそれらの生ずる十分条件を得た。各分担者は、この研究成果を得るにあたり種々の貢献をしたが、各分担者の個別の研究にも成果をあげた。それらを簡単にまとめると以下の通りである。●望月:プラズマ中の熱拡散などを記述する準線形方物型方程式に対して大域解の存在、爆発、爆発解の爆発時刻の評価、大域解の漸近挙動の研究を行なった。●石井:ガウス曲率流の平坦部分の待ち時間の存在証明を与えた。●倉田:固有値問題の最適化問題などを研究し、付随する自由境界問題の定性的研究を行なった。●高桑:定義域の内部に特異点を持つ調和写像全体の空間の構造について研究を行ない、特異な調和写像についてもコンパクト性定理が成り立つことを示した。●肥田野:非線形波動方程式の解の時刻が充分経過した際の漸近挙動を散乱、自己相似性、爆発の観点から研究した。●平田:一般の力学系についてポアッソン法則が成り立つための判定条件を与えた。
DNA損傷ストレスに応答したSUMO化制御機構の解析

がん抑制遺伝子産物であるp53はDNA損傷に応答して安定化し、活性化され細胞周期を制御する。この活性化過程でp53はMDM2,p14ARFを介して核小体においてSUMO化が増大される。またトポイソメラーゼI(Topo I)は転写、複製など、さまざまなDNA代謝に関与する酵素であり、カンプトテシン(CPT)などの抗癌剤の標的タンパク質として知られる。Topo Iは細胞内で核小体に局在しているが、CPT処理によりSUMO-2/3化され速やかに核小体以外の核内へ移行することが報告されている。さらにSUMO-2/3は環境ストレスに応答してその結合が変化することが報告されている。SUMO特異的プロテアーゼSMT3IP1は核小体に局在し、SUMO-2/3の結合した基質のみに作用することからp53とTopo IのDNA損傷に応答したSUMO化制御の一端を明らかにすることを目的として、SUMO特異的プロテアーゼSMT3IP1の活性制御機構の解析を行った。SMT3IP1はin vitroにおいてSUMO-2化されたp53,Topo Iを基質としたが、in vivoではSUMO-2化されたp53は脱SUMO化できたが、SUMO-2化されたTopo Iは脱SUMO化できなかった。つぎにその特異的基質、活性制御タンパク質を明らかにする目的でSMT3IP1に結合する細胞内タンパク質を酵母Two-hybrid法により検索した。その結果、核膜孔複合体(NPC)タンパク質Nup50とこれを介してNPCと核内で結合しているmyosin-like protein (Mlp)を同定した。出芽酵母においてSUMO特異的プロテアーゼUlp1はNup60,Mlp1/2と結合し、制御されており、この脱制御によりDNA損傷ストレスに対して感受性が増大することが報告されていることから、哺乳動物細胞においても同様な制御機構が働いていることが考えられた。トポイソメラーゼI(Topo I)の、その阻害剤であるカンプトテシン(CPT)によるSUMO化と引き続き起こる核小体より核全体への局在変化へ与えるSUMOプロテアーゼの影響を調べた。培養細胞へTopo Iと各種SUMOプロテアーゼ、SUMOを過剰発現させCPTによるTopo IのSUMO化と細胞内局在変化を調べたところ予想に反して核小体局在を示すSUMOプロテアーゼSMT3IP1,3ともにSUMO化を抑制せず、局在にも影響を与えなかった。一方、他のSUMOプロテアーゼであるSENP1,SMT3IP2,SENP2によってSUMO化は抑制された。主要なSUMO化部位に変異を入れた変異体の組み換えタンパク質を培養細胞で発現させると、核小体に蓄積し、CPTによる局在変化を示さなくなることが報告されている。よってSUMO化を抑制するSUMOプロテアーゼの過剰発現は局在変化が阻害されることが期待されたが、CPTによる核全体への移行には影響は見られなかった。さらにSENP1,SENP2,SMT3IPは核小体には局在しないことからSUMO化の抑制はTopo Iの核小体からの移行後に起こったと推定された。以上の結果はTopoIのSUMO化は核小体からの移行に必須であるが、移行後、核全体に局在するのには重要ではないと考えられた。さらにTopo IのSUMO化を制御するE3リガーゼの同定を試みた。SUMO E3リガーゼとして知られるPIASファミリータンパク質はin vitro, in vivoのアッセイ系で活性を示さなかった。またTopo I結合タンパク質として知られ、Ringドメインを持つToporsについても検討したが、PIAS同様に活性を示さなかった。出芽酵母においてSUMO

特異的プロテアーゼUlp1はNup60,Mlp1/2と結合し、制御されており、この脱制御によりDNA損傷ストレスに対して感受性が増大することが報告されていることから、哺乳動物細胞においても同様な制御機構が働いていることが考えられた。
食道がん細胞株におけるｍｉＲ－１２８ｂ機能解析

miR-128bが食道扁平上皮癌の予後に関与する機序の調査において、細胞の移動に関与するとされるAktの基質Girdinに着目した.食道扁平上皮癌におけるGirdinの役割の研究では、Girdinは食道扁平上皮癌の細胞の移動に関与しており、Girdinの発現が高いと食道扁平上皮癌の浸潤能が亢進することで予後が悪化する可能性があることが示唆された.Girdinが食道扁平上皮癌の予後マーカーとなる可能性,新規治療の標的となる可能性があると考えられる.2001年2004年に当教室で試行した手術標本の腫瘍の一部(ー80°Cで保存されていた)よりRNA (microRNAを含む)を抽出した。上記のRNAにRTを施行してcDNAに変換した。これまでにmiR-129と関連がある(もしくは関連している可能性がある)と報告されている遺伝子について、上記cDNAを用いてreal-time PCRを施行。さらにmiR-129のreal-time PCRも施行し、上記遺伝子とmiR-129との関係を調べた。miR-129と相関関係にある可能性が高い遺伝子TP53INP,CDK6,NOTCH1,SOX4の4種類を選択。miR-129が有する諸機能において各遺伝子がどのような役割を持つかを、ヒト食道扁平上皮癌細胞株のKYSE seriesを用いたin vitroの実験(FACSなど)で現在研究中である。SOX4はoncogeneの一種であり、各種癌において発現の上昇が報告されている。本研究でも、食道扁平上皮癌においてSOX4の発現の上昇がみられるかどうか検討中である。また、microRNA-129をtransfectionしてSOX4の発現の変化が起こるかどうか調査し、SOX4の発現に変化があれば、それに伴って細胞増殖などの変化が起こるかどうかについても検討する。miR-128の発現は様々な悪性腫瘍において認められており、転移と関与している可能性もあると報告されている.以前に当教室では、食道扁平上皮癌の切除標本から抽出したRNAを用いたPCRの結果と臨床データから、miR-128bが食道扁平上皮癌の予後に関与している可能性があることを報告した.今回、miR-128bが食道扁平上皮癌の予後に影響する機序の調査において、われわれは細胞の移動に関与するとされるAktの基質Girdinに着目し、食道扁平上皮癌におけるGirdinの働きを研究した.Girdinに対する抗体を用いた免疫蛍光染色では、EGFで食道扁平上皮癌細胞株を刺激すると、細胞は葉状仮足を形成し、その先端にF-actinとGirdinの集積が認められた.Girdinにはactinとの結合部位があるため、上記結果からは、actinと結合したGirdinが細胞の進行方向に集積することで葉状仮足を形成する可能性があると考えられた.次に食道扁平上皮癌細胞株を用いたBoyden chamberassayで、Girdinと食道扁平上皮癌細胞の移動能との関係について評価した.siRNAでGirdinをknockdownすると、有意に食道扁平上皮癌細胞の移動能は低下した.食道扁平上皮癌の手術標本を用いた実験も施行した.食道扁平上皮癌の腫瘍より抽出したGirdinのRNAは、食道の正常粘膜より抽出したGirdinのRNAよりも有意に高値であった.また臨床データとの関連では、食道扁平上皮癌の手術患者をGirdinの高発現群と低発現群に分けると、癌の深達度はGirdinの高発現群で有意に深く、予後もGirdinの高発現群で有意に不良であった.以上より、Girdinは食道扁平上皮癌細胞の移動に関与している可能性があると考えられた.また臨床においても、Girdinは食道扁平上皮癌の浸潤能を高めることで食道扁平上皮癌の予後を悪化させる可能性があることが示唆された.miR-128bが食道扁平上皮癌の予後に関与する機序の調査において、細胞の移動に関与するとされるAktの基質Girdinに着目した.食道扁平上皮癌におけるGirdinの役割の研究では、Girdinは食道扁平上皮癌の細胞の移動に関与しており、Girdinの発現が高いと食道扁平上皮癌の浸潤能が亢進することで予後が悪化する可能性があることが示唆された.Girdinが食道扁平上皮癌の予後マーカーとなる可能性,新規治療の標的となる可能性があると考えられる.ヒト食道扁平上皮癌の細胞株であるKYSE seriesにpre-miR128b,anti-miR128bを導入した。導入方法はLipofectamineを用いたlipofectionで行った。導入した細胞を24時間,36時間,72時間培養した後、それぞれの細胞よりRNeasy plus miniを用いてRNAを抽出した。上記遺伝子のターゲットとなるmRNAの発現量をRT-PCRにて測定した。導入していない細胞のmRNAの発現量と比較してlipofectionの効率を確認した。lipofection効率の評価として、さらにwestern blotによるタンパクレベルの測定も行っている。上記細胞より超音波でタンパクを抽出し、western blotでタンパクレベルを測定する。上記細胞のマウスへの移植を行っているが、手技的に難しい。現在、上記手技と移植の過程を繰り返し試みている段階である。移植の方法であるが、経口的に食道粘膜下に細胞を注射している。blindでの手技となるため、なかなか一定した結果が得られない。

うまく粘膜下に移植できたマウスは、10週間後にsacrifeceされる。食道,肝,肺などの臓器を摘出。main tumor周囲のsatellite tumorを評価する他、肝,肺などの遠隔臓器はホルマリンで固定した後、転移腫瘍について評価している。当初の計画ではマウスを使用した動物実験も行う予定であったが、マウスの食道に細胞がなかなか生着せず、動物実験が頓挫してしまっている状態である。マウスの食道に遺伝子を導入した細胞をマウスの食道に移植しようと試みているが、手技が安定せず難しい。動物実験はいったん中止して、現在は細胞株を使用してmiR-129に関連があると思われる遺伝子についてFACSなどの実験を行って研究中である。前年度の報告書にも記載したように、動物実験はマウスの皮下への移植に変更することも検討している。細胞のマウスへの移植は、最初の予定通り皮下への移植へ変更することも検討中である。移植後は腫瘍の発育,生存日数などにて遺伝子導入の影響を評価する予定である。PCRのプライマーに60万円程度。その他のPCRの試薬に40万円程度を要する。海外学会への発表に30万円程度を使用する予定。マウスへの移植細胞に導入するmiRNA(anti-とpre-の両方)の作製に50万円程度使用する予定。さらにlipofection効率の確認のためのwestern blotとPCRに50万円程度使用する予定。海外学会への発表には20万円程度使用する予定。
壁面粗さの影響を考慮した境界層遷移予測の高精度化に関する研究

粗さレイノルズ数が5以下の微小振幅の壁面粗さ(壁面凹凸)が境界層遷移の始まりを支配するT-S波動の増幅に及ぼす影響を零圧力勾配下の境界層で実験的に調べた.二次元と三次元の壁面粗さの影響を滑面の場合と比較した結果,二次元粗さが強い不安定化効果を示すのに対し,三次元粗さでは二次元粗さに比べ不安定効果がかなり弱くなることが示された.このような二次元粗さと三次元粗さの安定性に対する影響の違いは,平面ポアズイユ流においても実験と数値計算の両面から調べられた.粗さレイノルズ数が5以下の微小振幅の壁面粗さ(壁面凹凸)が境界層遷移の始まりを支配するT-S波動の増幅に及ぼす影響を零圧力勾配下の境界層で実験的に調べた.二次元と三次元の壁面粗さの影響を滑面の場合と比較した結果,二次元粗さが強い不安定化効果を示すのに対し,三次元粗さでは二次元粗さに比べ不安定効果がかなり弱くなることが示された.このような二次元粗さと三次元粗さの安定性に対する影響の違いは,平面ポアズイユ流においても実験と数値計算の両面から調べられた.本研究は、翼の層流化制御や境界層遷移の予測能力の向上に不可欠な、翼の製作上避けることができない微小な壁面粗さが乱流遷移に及ぼす効果の解明と、壁面粗さを考慮したより現実的な遷移予測手法の確立を目指した基礎研究である。本年度は、二次元的に分布した微小壁面粗さが境界層遷移の始まりを支配ノするトルミーン・シュリヒティング波動の成長に如何に影響を与えるかを、零圧力勾配境界層ならびに平面チャネル流を対象として実験と数値計算により調べた。平面チャネル流においては、数値シミュレーションにより、二次元矩形状分布粗さがレイノルズ応力を増加させ流れの不安定化に導くという重要なメカニズムが明らかにされ、また、壁面の僅かなステップの影響がかなり下流まで続くことも示された。実験では、二次元配列と斜行配列の矩形分布粗さについて、流れの安定性に及ぼす影響が比較され、二次元粗さで見られたトルミーン・シュリヒティング波動の増幅が斜行粗さでは弱まることが示された。圧力勾配の無い境界層においては、微小振幅の正弦波状の壁面粗さ(波打ち)が境界層の安定特性に及ぼす影響が実験的に調べられ、チャネル流と同様に弱い壁面波打ちがトルミーン・シュリヒティング波動の増幅を促すことが示された。さらに、進行波状の壁面波打ちについても境界層の安定性への効果が調べられ、進行波の伝播速度がトルミーン・シュリヒティング波動の位相速度に近づくにつれトルミーン・シュリヒティング波動の増幅を抑制することが示された。本研究は、翼の層流化制御や境界層遷移の予測能力の向上に不可欠な、翼の製作上避けることができない微小な壁面粗さが乱流遷移に及ぼす効果の解明と、壁面粗さを考慮したより現実的な遷移予測手法の確立を目指した基礎研究である。本年度は、二次元的および三次元的に分布した正弦波状の微小壁面粗さが境界層遷移の始まりを支配するトルミーン・シュリヒティング波動(T-S波動)の増幅に及ぼす効果の違いを、零圧力勾配境界層を対象として実験的に調べた。二次元波状壁においては、実験のすべての周波数の撹乱(T-S波動)の増幅率は滑面壁での値を上回り,かつ不安定領域は拡大し、境界層を不安定化することが示された。不安定化の促進は、壁面凹凸のごく近傍での速度分布の変化(変曲点型)によるものと考えられる。一方、同振幅の三次元波状壁上の境界層においては不安定化は促進されず、T-S波動の増幅・減衰特性は滑面の場合とほとんど変わらないことが見出された。この結果は、翼の層流化を考える際の重要な知見を与えている。即ち、後退翼のように三次元境界層が発達する場合においてはわずかな表面粗さが横流れ不安定を励起するため遷移レイノルズ数に影響を与えるが、遷移がT-S波動の成長に支配される二次元境界層においては表面粗さに対する許容度は大きく、翼の層流化を現実化させる可能性を大いに示唆するものである。本研究は,翼の層流化制御の実現や境界層遷移の予測能力の向上に不可欠な,翼の製作上避けることができない微小な壁面粗さが乱流遷移に及ぼす効果を解明し,壁面粗さを考慮したより現実的な遷移予測を行うための基礎研究である.本年度は,微小振幅の三次元正弦波状粗さ(正弦波上の壁面凹凸)が境界層遷移の始まりを支配するトルミーン・シュリヒティング波動(T-S波動)の増幅に及ぼす効果を零圧力勾配下で実験的に調べ,二次元正弦波状粗さと比較するとともに,今回の実験結果を基に従来乱流摩擦抵抗の視点から定義されている流体力学的滑面の概念を層流境界層の安定性の視点から検討した.二次元粗さと三次元粗さでは層流境界層の安定性に及ぼす影響は大きく異なり,二次元粗さ(二次元正弦波上の壁面凹凸)が極めて小さな粗さ高さ(凹凸振幅)に対しても強い不安定化作用を示すのに対し,三次元粗さ(三次元正弦波上の壁面凹凸)では不安定性の促進効果がかなり弱くなる.ただし,境界層排除暑さの10%程度の振幅の三次元凹凸でも不安定性に作用する.

従来の滑面の定義は乱流摩擦抵抗に関する実験値を基になされていて,粗さレイノルズ数(粗さ高さと壁面摩擦速度に基づく)が5という値が流体力学的滑面の臨界値として多くの文献に引用されているが,本研究で着目している層流境界層の線形安定性からの基準では,粗さレイノルズ数=5でも分布粗さが境界層の不安定性を十分促進し得るという結果が得られた.
IL-6,G-CSFによる癌組織血管新生

HUV-EC-C(ヒト由来血管内皮細胞)とMS1 VEGF(マウス由来血管内皮細胞)を使用した。MS1 VEGFはMS1に遺伝子導入をおこないVEGF産生を亢進させたマウス血管内皮細胞である。【HUV-EC-CおよびMSI VEGFを7日間通常培養し下記の結果を得た。】1:VEGFを産生するMS1 VEGFはHUV-EC-Cより高い増殖能を認めた。2:炎症性サイトカインG-CSFおよびIL-6を血管内皮細胞培養上清中に添加しても、いずれの血管内皮細胞の増殖に変化認めなかった。【血管内皮細胞の3次元培養システムの確立:この培養環境では生体内のように血管形成をえることが可能である。】1:ラブテックIIチャンバースライドを使用、2:フィブリノーゲン液200μLを注入、3:トロンビン液133μL重層、4:37°C、湿度100%、60分、5:HUV-EC-CまたはMS1 VEGF細胞を5×10^4 cells/mLに調整、6:細胞浮遊液1mL重層、7:フィブリノーゲン液200μL重層、8:トロンビン液133μL重層、9:37°C、湿度100%、5分、10培養液37°C、湿度100%、培養【血管内腔形成能:HUV-EC-CおよびMS1 VEGFを下記の3次元培養環境をもちいて3日間培養し下記の結果を得た。】まとめ:VEGFは血管形成に深く関与している。今回の結果ではVEGFは血管内皮細胞の増殖に関与し亢進をさせた。しかしVEGFを過剰に発現する血管内皮細胞の増殖能は高いが、bFGF、PMAで刺激をしても血管内腔形成を認めなかった。VEGFの過剰産生は血管内皮細胞の増殖を促進するが、血管腔形成などの成熟には関与せず、場合により抑制している可能性がある。VEGF産生が認められる癌組織中の未熟な腫瘍血管の構築の原因となっているものと推察された。頭頸部癌細胞株培養上清中のIL-6とG-CSFの検出頭頸部癌細胞株MMSI-1とNKO-1いずれの培養上清中にもIL-6とG-CSFをELISAで確認できた。臨床的にG-CSF産生腫瘍と判断されなかった患者より樹立した頭頸部癌細胞株培養上清中においてもG-CSFが確認できたことは、いずれの頭頸部癌細胞もG-CSFの産生能を有している可能性がある。G-CSF産生能が高い結果高濃度のG-CSFが産生された場合に臨床的にG-CSF産生腫瘍と診断されてきたのでは推測する。患者生検材料を用いた検討頭頸部癌組織を用いてIL-6とG-CSFの発現を免疫染色で検討した。癌細胞と癌組織に浸潤するリンパ球にIL-6の発現を認めた。一方G-CSFの発現は認められなかった。次にIL-6レセプターとG-CSFレセプターの発現を免疫染色で検討した。癌組織中の血管内皮細胞、間質の細胞にIL-6レセプターの発現を認めたが、G-CSFレセプターの発現は認めなかった。VEGFの発現を免疫染色で検討すると、癌細胞にVEGFの発現を認めた。IL-6の発現を認める癌細胞と浸潤リンパ球に近接する血管内皮細胞や間質の細胞にIL-

6レセプターの発現を認め、同部位の癌細胞にVEGFの発現を認めた。このことはIL-6とVEGFの関連性が強いことを示唆するものであり、癌組織中の血管新生にIL-6の関与しているのではないかとが示唆された。血管内皮細胞の培養現在血管内皮細胞の安定した培養の確立の準備をおこなっている。【背景】臨床的にG-CSF産生腫瘍は局所再発および遠隔転移を高率に生じ予後が非常に悪い。G-CSF産生癌細胞は癌が存在する微小環境において癌細胞の浸潤能および転移能を向上させる機序が存在する。癌細胞自身ならびに癌細胞周囲間質細胞の中で特に血管内皮細胞の生物学的活性に対するG-CSFおよびIL-6の影響を下記のごとく検討した。●高濃度G-CSF産生頭頸部癌細胞株はIL-6も高濃度に産生する。癌組織中と血清中に認められるIL-6およびG-CSF濃度は相関した。癌細胞にIL-6レセプターの発現を認めた。●高濃度IL-6および高濃度G-CSF産生頭頸部癌細胞株はinvasion chamberを用いてのinvasion assayにおいて高い浸潤能を示した。IL-6濃度依存性に細胞増殖は抑制されたが浸潤能は亢進した。【G-CSFおよびIL-6によるマウス血管内皮細胞の生物学的活性の変化】●マウス血管内皮細胞にG-CSFおよびIL-6レセプターが存在するかを現在検討中である。●G-CSFおよびIL-6投与によりマウス血管内皮細胞の増殖には何ら影響を及ぼさなかった。●G-CSFによりマウス血管内皮細胞の浸潤能の変化を認めなかった。しかしIL-6によりマウス血管内皮細胞の浸潤能は亢進した。【VEGFによるマウス血管内皮細胞の生物学的活性の変化】●高濃度VEGF産生のマウス血管内皮細胞はヌードマウス皮下に腫瘤形成能をもつ。●高濃度VEGF産生のマウス血管内皮細胞は他のマウス血管内皮細胞と比較し増殖速度が速い。●高濃度VEGF産生のマウス血管内皮細胞は他のマウス血管内皮細胞と比較し浸潤能が向上している。【抗癌薬の血管内皮細胞に対する影響】●Fibrin Gelを用いて、マウス血管内皮細胞の三次元培養実験系を確立した。●bFGFやVEGFを投与するとマウス血管内皮細胞の管腔形成が認められた。●抗癌薬を培養液に添加し、マウス血管内皮細胞の管腔形成の状態を検討中である。抗癌薬の癌新生血管に対する抗腫瘍効果を検討している。HUV-EC-C(ヒト由来血管内皮細胞)とMS1 VEGF(マウス由来血管内皮細胞)を使用した。MS1VEGFはMS1(マウス由来血管内皮細胞)に遺伝子導入をおこないVEGF産生を亢進させたマウス血管内皮細胞である。VEGF,G-CSF,IL-6の血管内皮細部増殖能への影響HUV-EC-CおよびMSlVEGFを7日間通常培養し下記の結果を得た。・VEGFを産生するMSlVEGFはHUV-EC-Cより高い増殖能を認めた。・炎症性サイトカインG-CSFおよびIL-6を血管内皮細胞培養上清中に添加しても、いずれの血管内皮細胞の増殖に変化認めなかった。血管内皮細胞の3次元培養システムの確立この培養環境では生体内のように血管形成をえることが可能である。1:ラブテックII
T細胞共刺激因子B7.2による抗腫瘍細胞障害性T細胞の誘導増強機構の解析

担癌状態にしたマウスの脾細胞を、B7.2ともに培養したところ、一部の腫瘍系は高率に細胞障害性T細胞(CTL)を誘導出来た。免疫寛容を誘導すると考えられるCTLA-4の効果を打ち消してもあまり誘導には影響しなかった。これにより我々の実験系では、B7.2によるCD28への刺激がCTL誘導への主な経路であると思われた。また我々は抗腫瘍CTLの更なる増強を目指し、免疫を賦活する栄養剤を投与することによる増強効果についても検討をすすめているところである。研究の目的1.悪性腫瘍の治療法として、手術療法、化学療法、放射線療法があるが、第4の治療として、抗腫瘍免疫療法が注目されている。しかしながら癌細胞の巧妙な免疫回避機構により、既存の治療と比して高い治療成績を残せていないのが現状である。申請者らは以前に、B7.2-免疫グロブリン融合タンパク(以下B7.2)をin vivoで担癌マウスへ投与することにより、a)IL-4依存性、b)CD8+細胞傷害性T細胞(以下CTL)媒介性による腫瘍拒絶が誘導されることを報告し、in vitroにおいても、B7.2でのCTL誘導機構にはIL-4が必要である事を報告した。2.本研究は、T細胞共刺激因子B7.2-Igによる抗腫瘍CTLの誘導増強機構を当さらに解析し、悪性腫瘍に対する抗腫瘍免疫療法の臨床応用に向けた抗腫瘍免疫応答の誘導機構を解明することを目的とする。研究は、in vivoでマウス扁平上皮癌細胞(NR-S1)または免疫原性の非常に強いマウス白血病細胞(LSTRA)を接種し担癌状態にしたマウスの脾臓から、脾細胞全画分をin vitroでB7.2の存在下で培養しCTLを誘導を試みたところ、CTL細胞障害テスト(DNA fragmentation assay)において、LSTRAに対しては高率にCTLを誘導することが出来た。一方NR-S1においては、CTLの誘導が充分に行えなかった。それは免疫原性の低さあるいは、免疫回避機構に起因すると思われた。そこで、以降の研究をLSTRAを使用した実験系を採用し継続している。(脾細胞からCTLの培養)脾細胞全画分あるいは調整した細胞集団(5×106)を予めB7.2あるいはIL-12、を10μg/wellコーティングした24穴プレートで10% FCS、2-mercaptoethanolを含む2mlのRPMI 1640培養液中、37°C、5% CO2の条件下にて15日間培養しCTLを作成する。in vivoでマウス扁平上皮癌細胞(NR-S1)または免疫原性の非常に強いマウス白血病細胞(LSTRA)を接種し担癌状態にしたマウスの脾臓から、脾細胞全画分をin vitroでB7.2の存在下で培養し細胞障害性T細胞(CTL)を誘導を試みたところ、CTL細胞障害テスト(DNA fragmentation assay)において、LSTRAに対しては高率にCTLを誘導することが証明出来た。一因としては白血病細胞に比して扁平上皮癌細胞の免疫原性が低いことが考えられた。同じくB7.2と結合することにより免疫寛容を誘発すると考えられるCTLA-4に対して、それを無効化するために抗CTLA-4抗体を添加し、CTLの誘導増強を試みたが、本実験系ではCTLの誘導増強は認めなかった。これにより本系ではB7.2によるCD28への刺激がCTL誘導への主経路であると強く示唆された。また本系において、免疫を賦活する栄養剤を投与することによって抗腫瘍CTLが誘導増強できる可能性についても検討を重ねている。二つの異なる腫瘍系において、同様に高率に細胞障害性T細胞の誘導を試み、至適条件を決定使用としたが、一つの腫瘍系において、CTLIの誘導が困難であったため。24年度が最終年度であるため、記入しない。高率にCTLを誘導できたLSTRAの実験系を用いて、抗腫瘍免疫応答動態を検討する。In vivoで担癌マウスにCTLを投与するためのCTLの安定培養を試みる。またin vivoの実験系においては、T細胞に抑制性のシグナルを伝達するCTLA-4も実験系に加え、検討を行う。
日本語学習者における日本語のモ-ラ音素習得上の問題点と教授法

マッキントッシュコンピュータ上でハイパーカードを用い、促音の習得のための教材を試作した。先行研究によれば、日本語の促音の知覚には、子音区間の持続時間が関与していることが明らかにされている。これと共に、昨年までのタイ語とインドネシア語の実験結果から、先行母音と後続母音の持続時間が日本語と異なる長さで現れることがわかったので、子音区間の持続時間に加え、先行母音の持続時間、後続母音の持続時間を取り上げた。そしてこの3種類の音響的特徴をそれぞれ独立に変化させた音声を作成し、教材に用いている。教材作成時に考慮した点は、学習者にとって操作の仕方がなじみやすいもので(操作性)、促音の聞き分けができない理由が学習者にわかり、学習効果が自分でも確認できること(動機付け)、また、特殊な装置無しで一般的なパソコン上で練習に使える(共通性)である。今後、実験に使用しながら改善を加えてゆく予定である。さらに、今年度は日本語のモ-ラ音素の中の、いわゆる撥音について研究を開始した。インドネシア語とタイ語について、日本語の撥音に類似の音声を収録した。その過程で、日本語学習者に対する撥音の教え方に問題点があることが明らかになった。日本語のいわゆる撥音は音韻論的に1つの音素に当たるものと概考えて差し支えないのだが、音素というのは異音を持ち、それらは条件によって現れる場合が異なる(相補分布)。日本人にとっては同じ「音」であるためか、1つの音声のみを示し、条件による音声の違いを教えられていない学習者があることがわかった。これを考慮し、撥音の音声上の問題の中で、音声の知覚の仕方の違いによって起こる問題と、教え方による問題を分けることを検討している。
インプラントの超早期荷重を可能にする因子に関する遺伝子工学的アプローチ

インプラント治療は予知性の高さから欠損補綴治療の重要なオプションとして注目されている。インプラントの安定には36か月以上の安静期間が必要とされており、この期間の短縮が為されれば、QOL向上に対する寄与は計り知れない。そのため近年、インプラント埋入後即時負荷をさせる手法が臨床の場に導入されているが、経験的に行われているに過ぎず、科学的エビデンスによる裏付けはなされていない。そこで本研究では、初期のosseointegration成立に安静期間の短縮が可能と仮説をたて、負荷開始時期、負荷の量(荷重)と骨の治癒との関連について検討することを目的とした。初年度は、コンピュータを用いて、顎骨内に埋入されたインプラントにどのような手法で応力を作用させればよいか、また、どのような応力が骨内に伝わるかについて綿密なシミュレーションを行った(有限要素法を用いて行った)。その結果を踏まえ、実験動物を準備し、インプラント埋入に先立つ抜歯を行った。続いて最終年度に負荷期間の違いによるインプラント周囲組織に関する知見を把握し、負荷を作用させた際にインプラント周囲組織にどのようなタンパクが発現するかを網羅的に解析した。まず、イヌに埋入された2本のインプラント間に一定の応力を作用させ、周囲組織の変化を経時的に検討したところ、7日経過以降ではインプラント周囲骨の、破骨細胞によらないと見られる破壊が観察された。そのため、本研究では応力負荷後1日、7日目におけるインプラント周囲のタンパク質発現をマイクロアレイ法を用いて網羅的に解析した。その結果、応力を作用したために発現に変化を来したタンパク質が多数認められた。これらのタンパク質はosseointegrationの成立阻害に重要な役割を果たしていることが示唆された。近年、インプラント治療は、その予知性の高さから補綴治療の重要なオプションとして注目されている。インプラントの長期的成功には、osseointegrationの獲得とその維持が重要であると認識されているが、そのためには36ヶ月以上の安静期間が必要とされており、この治癒期間の短縮が為されれば、quality of life向上に対する寄与は計り知れない。そのため、より早期のosseointegrationの獲得が望まれている。現在、この安静期間を短縮させるべく、インプラント材料、成長因子の応用などの研究が幅広く行われているが、早期負荷を行うためのin vivoでの研究報告はほとんどないため、安静期間をどれだけ短縮できるかについて科学的根拠がない。今年度は、まずコンピュータを用いて、顎骨内に埋入されたインプラントにどのような手法で応力を作用させればよいか、また、どのような応力が骨内に伝わるかについて綿密なシミュレーションを行った(有限要素法を用いて行った)。今後、インプラントを埋入、当初のプロトコール通り試料を採得し、応力、期間と周囲組織の変化に関して、まず組織学的、組織形態計測学的に検討を加えていく予定である。インプラントの安定には36ヶ月以上の安静期間が必要とされており、この期間の短縮が為されれば、QOL向上に対する寄与は計り知れない。

今年度は、負荷期間の違いによるインプラント周囲組織に関する知見を把握すること、負荷を作用させた際にインプラント周囲組織にどのようなタンパクが発現するかを網羅的に解析することを目的とした。まず、イヌに埋入された2本のインプラント間に一定の応力を作用させ、周囲組織の変化を経時的に検討したところ、7日経過以降ではインプラント周囲骨の、破骨細胞によらないと見られる破壊が観察された。そのため、本研究では応力負荷後1日、7日目におけるインプラント周囲のタンパク質発現をマイクロアレイ法を用いて網羅的に解析した。その結果、応力を作用したために発現に変化を来したタンパク質が多数認められた。これらのタンパク質はosseointegrationの成立阻害に重要な役割を果たしていることが示唆された。
ピルビン酸キナ-ゼアイソザイムの遺伝子発現の制御機構

ピルビン酸キナ-ゼアイソザイムの遺伝子発現を制御するシス作用領域について解析し、以下の知見を得た。1.肝細胞でのL型の発現に必要なシス作用領域をCATアッセイで調べた結果、2ケ所の領域が必要であることが判明した。これらの領域は-99-76、-170-126に存在し、それぞれPKL-I、PKL-IIと名づけた。これらの領域はエンハンサ-としての性質を有し、両者が共存すると相乗作用を示した。両領域の活性はK562細胞では認められなかったので、L型の肝細胞での発現に重要な役割を果たしていると考えられる。PKL-Iは肝特異的転写因子のLF-B1の結合部位と相同性の高い配列を含み、PKL-IIは別の肝特異的転写因子のLF-A1と19塩基からなるパリンドロ-ム様配列を含んでいた。2.L型アイソザイムのインスリン反応性に関与する領域は、上記のCATの一過性発現にもとづく方法では、転写開始点から上流3.2kbまでに、その存在を認めることはできなかった。しかし、上流3kbまでの断片とのCAT融合遺伝子をもつトランスジェニックマウスでは、インスリン反応性が認められた。3.R型の転写制御領域を1と同様な方法で調べた。その結果、-108-79に存在することが示唆された。4.1と同様にM遺伝子(M_1型とM_2型)の転写制御領域を調べた結果、-358286に負の制御領域が、-286-68に正の制御領域が存在することが示唆された。解糖系律速酵素ピルビン酸キナーゼは哺乳動物ではL型、R型、M_1型、M_2型の4種のアイソザイムが存在し、組織特異的に発現しているが、この発現は分化、発達過程で調節されている。また、L型の肝で発現はインスリンとグルカゴンによって転写レベルで制御されている。これらのアイソザイムは2種類の遺伝子から合成される。すなわち、M_1型とM_2型のmRNAはM遺伝子の転写産物のスプライシングの違いにより、またL型とR型はL遺伝子から転写開始点の違いにより生成する。本研究は、このようなピルビン酸キナーゼ遺伝子の発現の制御機構を分子レベルで解明することを目的とし、今年度は以下の点を明らかにした。1.L遺伝子からL型とR型の転写を制御するシス作用領域の同定をCATアッセイにより行った。L型の制御領域は転写開始点の上流-185bpまでに存在していた。このうち、-185bpから-152bpまでには正の制御領域が存在し、これは組織特異的発現に係わるエンハンサーとしての機能を有していた。このエンハンサーが働くためには下流にある-94bpからー62bpまでの領域が必要であった。この2つの領域をさらに欠損させて調べると、各々の領域にある約18bpのパリンドローム構造の配列が重要と考えられた。一方、R型の転写制御領域はR型の転写開始点上流-108bpからー79bpまでに存在することが示唆された。2.1と同様にM遺伝子の転写制御領域を調べた結果、-358bpから-286bpまでに負の制御領域が、-286bpから-68bpまでに正の制御領域が存在することが示唆された。本年度はL型ピルビン酸キナ-ゼ(LPD)の肝細胞特異的発現を制御するシス作用領域とインスリン反応性に関与するシス作用領域の解析を行った。LPK遺伝子のL型の転写開始点を含む上流の種々の断片をCAT遺伝子に結合した融合遺伝子を作製し、肝細胞に導入してCAT活性を測定した。その結果、肝細胞でのL型の発現には少なく共、2ケ所の領域が必要であることが判明した。

上流の領域は-170から-126までに存在し、下流の領域は-94から-76までに存在した。これらの領域をそれぞれ、PKL-II、PKL-Iと名づけたが、PKL-IIは逆向きに同種や、異種のプロモ-タ-に結合しても、また位置を変えても有効であった。従って、エンハンサ-としての性質を有すると考えられる。PKL-Iもプロモ-タ-活性を促進したが、両者が共存すると著明な相乗効果が認められた。両領域の活性は肝細胞に比べて、H4IIE細胞ではずっと低く、dRLh84やK562細胞では認められなかった。これらの活性は内因性のLPKmRANレベルを反映した。従って、両領域はLPKの肝細胞での発現に重要な役割を果していると考えられる。PKL-Iは肝特異的転写因子のLF-B1の結合部位と相同性の高い配列を含み、PKL-IIには2つの特徴的な配列が存在した。1つは肝特異的転写因子のLF-Alの結合部位で、もう1つは19塩基からなるパリンドロ-む様配列であった。一方、インスリン反応性領域については、CATの一過性発現にもとづくCATアッセイではLPK遺伝子の転写開始点から上流3.2kbまでに、その存在を認めることはできなかった。しかし、上流3kbまでの断片とのCAT融合遺伝子をもつトランスジェニックマウスを作製して調べたところ、インスリン反応性が認められた。
蝸牛の発生・分化を司る遺伝子システムにおけるTis21遺伝子の役割解明

聴覚において重要な働きを担う蝸牛のラセン神経節細胞の発生・分化のメカニズムについては未だ不明な点が多く、当研究はそのメカニズムの一部を明らかにすることを目的としてTis21遺伝子に着目した。Jackson研究所(アメリカ)より購入したTis21欠失マウスの頭部凍結切片を作製し、免疫染色、in situ hybridizationを施行し、胎生期内耳におけるTis21蛋白の発現について検討を行った。今後は、内耳発生に関与しているとNgn1、NeuroD、Atoh1などの遺伝子との関連についても、免疫染色などを用いて調べる予定である。申請者らはこれまでに、増殖抑制遺伝子の一つであるTis21PC3/BTG2(Tis21はマウス、PC3はラット、BTG2はヒトに対応する相同遺伝子であり、以後Tis21と表記する)に着目し、内耳の発生・分化におけるTis21の役割について研究を行ってきた。Tis21遺伝子は、BTG/Tobファミリーと呼ばれる増殖抑制遺伝子群のひとつであり、WEHI-231細胞(マウスリンパ腫細胞)を用いた研究において細胞増殖抑制作用を有し(Hata K, Exp Cell Res, 2007, PMID17466295)、PC12細胞(神経分化モデル細胞)を用いた研究においてアポトーシス抑制作用を有していることが報告されている(el-Ghissassi F, Oncogene, 2002, PMID12360398)。また、マウスの小脳においてTis21がサイクリンD1、Atho1を介して小脳顆粒細胞の発生を制御していると報告されている。これ以外にもTis21が神経の発生・分化にかかわっているとする報告は多い。本研究においては、Tis21ノックアウトマウスを米国Jackson研究所より購入した。Tis21ノックアウトマウス個体を入手後、繁殖、ジェノタイピングを行い、その後実験に必要な個体数を得るために繁殖を行った。Tis21遺伝子は、脳、小脳領域において神経細胞の発生・分化を制御していることが知られているが、内耳の発生・分化における機能についての報告はない。Jackson研究所(アメリカ)よりTis21欠失マウスを購入し、繁殖を行った。野生型マウスと比較して妊孕性が非常に低く、比較的妊孕性の高い個体を選別して、繁殖を行ったため実験に必要な個体数を確保するのに時間を要した。十分量の個体数を確保した後、Tis21欠失マウス同士を交配してTis21欠失胎児マウスを得た。Tis21欠失マウスの頭部凍結切片を作製、免疫染色、insitu hybridizationを施行し、胎生期内耳におけるTis21蛋白の発現について検討を行っている段階である。今後はTis21欠失マウスの形態的評価(蝸牛形態、蝸牛有毛細胞数、ラセン神経節細胞数など)を行い、機能障害の病態について検討を行う予定である。また、内耳発生に関与しているとNgn1、NeuroD、Atoh1などの遺伝子との関連についても、免疫染色やin situ hybridizationなどを用いて調べる予定である。Tis21ノックアウトマウスを米国Jackson研究所からの入手までに予定より長い時間を要したため。聴覚Tis21遺伝子欠失マウスの形態評価、聴覚機能評価に加え、詳細なメカニズムについて検討を引き続き行っている。Tis21ノックアウトマウスを米国Jackson研究所からの入手が予定より遅れたため、予算の使用も遅れた。予定の研究を実行するために本年度使用予定の額を次年度に合わせて使用する予定である。
色覚特性者のための視覚的顕著性に基づく注視誘導による生活支援基盤の実現

本課題では,色覚特性者に対して自然かつ効果的な注視誘導を行うため,視覚的顕著性に基づき,無意識的な視覚的注意である誘目性に影響を及ぼす画像の特徴を明らかにし,色覚特性の型に応じた誘目性モデルの構築を行った。また,得られた誘目性モデルに基づいて画像を加工し,色覚特性者の注視を自然に誘導可能であることを確認した。これまでに、色覚特性者のための色覚バリアフリーシステムや画像の再配色法が提案されている。しかし、色覚特性者に関する無意識的な視覚的注意の引かれやすさである誘目性についての研究はほとんどない。我々は、色覚特性者に対して自然かつ効果的な注視誘導を行うため、視覚的顕著性に基づき、無意識的な視覚的注意である誘目性に影響を及ぼす画像の特徴を明らかにし、様々な色覚特性の型に応じた誘目性モデルの構築を目的とする。さらに、我々が提案した画像の再配色手法に対して、誘目性モデルによる注視誘導技術を適用することにより、異なる視覚的注意からなる新しい概念のカラーユニバーサルデザイン基盤技術を提案し、その有効性を示す。本年度では、人の注視を遮ることなく、より自然に視線を誘導する視線インタフェースの実現を目指して、視覚的顕著性に基づく違和感のない画像修正法を提案した。見る対象の様子によって注視のしやすさは変わるという発想に基づき、注視の引き込みやすさを示す指標として、ittiらによって提案された視覚的顕著性マップの計算モデルを利用した。そして、画像中で指定した領域の視覚的顕著性が最も高くなるように輝度と色相を画素ごとに調整することで、自然かつ効果的な注視誘導を行う技術を実現した。さらに、提案手法の有効性を検証するため、視線計測装置を用いて意図した領域に視線を誘導できているか検証した。また、提案手法を用いて修正した画像が、従来法よりも被験者に違和感を与えないことを確かめるため、主観評価実験を行った。本課題では,色覚特性者に対して自然かつ効果的な注視誘導を行うため,視覚的顕著性に基づき,無意識的な視覚的注意である誘目性に影響を及ぼす視覚特徴を明らかにし,色覚特性に応じた誘目性モデルの構築を行った。(1)色覚特性者の視覚的顕著性モデルの構築色覚特性者の注視を誘導するため,色覚特性者の注視の移動と一致するような視覚的顕著性の計算モデルを提案した。我々は,混同色線理論を容易に適用することを考慮し,Lab表色系に基づいてモデル化を行った。また,混同色線理論に基づいて,L成分とb成分から得られる特徴を用いた視覚的顕著性マップを提案した。さらに,提案手法の有効性を確認するため,視線計測を行い,被験者の視線データと視覚的顕著性マップの一致度を求めた。結果として,従来モデルよりも色覚特性者の注視行動を高精度に推定可能であることを確認した。(2)色覚特性者のための視覚的顕著性に基づく注視誘導任意の領域へ違和感を与えることなく被験者の注視を誘導するため,視覚的顕著性に基づくColorベースの画像加工法を提案した。また,計算処理の高速化を行い,リアルタイム処理を実現した。最後に,提案手法の有効性を示すため,視線計測と主観評価実験により注視誘導効果と被験者に与える違和感について検証を行った。結果として,提案手法は色覚特性者に対する注視効果が高く,実利用を想定した場合の自然性と処理時間に関しても問題ないことを確認した。画像工学本年度は、主に以下に示す3つの項目について研究を行った。1)人の注視を遮ることなく、より自然に視線を誘導する視線インタフェースの実現を目指して、視覚的顕著性に基づく違和感のない画像修正法の改善2)視線計測装置を用いて意図した領域に視線を誘導できているか検証するための評価実験3)色覚特性者に対する再配色手法の改善前年度は実施順序を多少変更し「視線誘導技術の早期確立」に向けて研究を行った。今年度は、視線誘導技術の精度向上に加え、色覚特性者に対する誘目性に関する指標である視覚的注意のモデル化に関する研究を行った。全体としておおむね順調に進展している。本年度は、主に以下に示す3つの項目について研究を行った。

1)人の注視を遮ることなく、より自然に視線を誘導する視線インタフェースの実現を目指して、視覚的顕著性に基づく違和感のない画像修正法を提案2)視線計測装置を用いて意図した領域に視線を誘導できているか検証するための評価実験環境の構築3)色覚特性者に対する再配色手法の改善実施順序に関して、視線誘導技術を早期に確立するため、交付申請書の研究計画に記載した内容から多少変更した。しかし、全体としてはおおむね順調に進展している。今後の研究計画として、基本的には当初の申請書通りに進める予定である。特に、平成26年度は、これまでに提案した注視誘導技術と色覚特性の誘目性モデルに基づく、色覚特性者に対する注視誘導技術の確立とその有効性をの検証を行う。また、評価実験の被験者を募り、様々な視覚的情報に対する色覚特性者の視線情報を収集後、提案手法の有効性を検証するための評価実験を実施する予定である。特に、平成25年度は、色覚特性に応じた誘目性モデルの構築(誘目性に寄与する特徴の解析)を行うため、我々は、様々な視覚的情報に対する色覚特性者の視線情報を収集後、ノイズを除去するため時系列分析を行う。そして、色覚特性者の視線移動モデルと最も一致するような顕著性マップを求め、得られた最適な顕著性モデルのパラメータをもとに、色覚特性の型に応じた誘目性モデルを構築する。一方、より実環境下での利用を想定した誘目性モデルの向上を目的とし、人間の視覚特性において時間方向のダイナミクスを示す現象として知られる復帰抑制と、空間に対する特性である周辺視野特性のモデル化を行う。さらに、被験者やシーン内オブジェクトの移動を考慮し、シーン内で発生する運動javascript:onSave();の変化量を求め、周辺視野特性の動的変化を数理モデル化し誘目性モデルに導入する予定である。今年度は、主に被験者実験を重点的に行った。そのため、旅費(調査研究旅費)や物品費が当初の予定よりも少なかった。この差額分については、当初の予定通り、今後、研究分担者との連携をさらに密にし、慶應大学での評価実験を行うための調査研究旅費として使用する予定である。また、平成26年度分の研究費については、計画通りに執行する予定である。なお、研究経費の旅費の一部については、国内外で開催される学術研究会での研究成果発表に関する大学院生(岡山県立大学大学院有田里美、国井達彦、人見修平)の旅費等にあてる。本年度に購入した視線検出装置が比較的安価であったため、旅費(調査研究旅費)や参加登録費などが当初の予定より必要となったものの、全体としては予定していた支出よりも少なかった。この差額分については、今後、視覚特性に基づく誘目性モデルの提案・評価を行うにあたり、共同分担者との連携を密にするため、調査研究旅費として使用する予定である。当初予定していた平成25年度分の研究費については、計画通りに執行する予定である。なお、研究経費の旅費の一部については、国内外で開催される学会での研究成果発表に関する大学院生(岡山県立大学大学院電子情報通信工学専攻有田里美、国井達彦)の旅費等に当てる。