hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
階層ベイズモデルによる医療の質指標算出とそのための手法の新規開発

日本小児外科学会と共同で,日本小児外科学会指導医認定に関わる手術の内,12の高難度術式(ヒルシュスプルング根治術・鎖肛根治術・悪性腫瘍根治術・胆道閉鎖症根治術・胆道拡張症根治術・気管形成術・肺切除術・腸回転異常症手術・漏斗胸手術・噴門形成術・消化管穿孔手術・イレウス手術)を対象に,NCD-小児外科領(NCD-P)の2015年データを訓練データとして用いて,術前因子による術後30日の生命予後および合併症発生を予測するモデルを作成した。この結果の一部は学会にて発表した。また,先天性心疾患に対するカテーテル治療における術後の生命予後および合併症発生,および消化器癌手術における術後合併症の予測についても,それぞれの関連学会と共同で,上述の日本小児外科学会と同様のリスクモデルの構築を進めている。倫理審査を含めた解析を始めるために必要なプロセスが完了し,来年度より解析を始めることになった。また方法論の開発については,次の実績がある。最近の機械学習ではガウス過程回帰が基本的な手法となっているが,そこでよく使われるのはRBFカーネルである.これに対し,従来のベイズモデリングや状態空間モデリングにおいては,平滑化スプラインや平滑化トレンドモデル,ローカルレベルモデルなど,有限階の差分作用素に基づく事前分布が主流である.両者がどう異なるか,特に縦断的な医学データのような短い時系列データを念頭においた場合に両者に優劣があるかは興味深い.本年度の研究では,従来から知られている理論的な違いについて整理を行った.また,模擬データを用いて両者の振舞いの違いを検討中である.その他,機械学習における共変量シフトの理論と医学分野で多用される統計的因果推論の手法を比較し,両者において同様の発想に基づく交差検証法によるモデル選択の手法が提案されていることを指摘した.小児外科領域については,リスクモデルの構築と評価が完了した。モデルの汎化性能に改善すべき部分があることがわかり,モデルを改良した上で次年度内にWeb上でのリスクカリキュレーター実装を目指している。これは概ね予定していた研究計画の通りである。また小児外科領域以外の領域とも同様のリスクモデルの構築の合意がとれ,当初予定以上に対象範囲が広がった。方法論の開発については,応用上のニーズを再検討した結果,当初予定していたベイズ型生存時間分析の開発から開発対象を変更した。それを除いては方法論の提案,および模擬データによるその挙動の確認などは予定通り進んでいる。小児外科領域については,リスクモデルの構築と評価が完了した。その内容をもとに論文を作成する。また,モデルの汎化性能に改善すべき部分があることがわかり,改良したモデルで再度汎化性能を評価することとした。これで満足できる性能が確認されれば,Web上でのリスクカリキュレーター実装を目指して研究を進める。加えて,先天性心疾患に対するカテーテル治療における術後の生命予後および合併症発生,および消化器癌手術における術後合併症の予測についてもリスクモデルの構築を行う。方法論の開発においては,ガウス過程回帰と従来のベイズモデリングや状態空間モデリングの間で,縦断的な医学データのような短い時系列データを念頭においた場合に両者に優劣があるか模擬データを用いて両者の振舞いの違いを検討する。さらに機械学習における共変量シフトの理論と医学分野で多用される統計的因果推論の手法を比較し,両者において同様の発想に基づく交差検証法によるモデル選択の手法が提案されていることを受けて,それらを発展させた統計的な因果推論の方法論が提案できないかの検討を進めたい。

モデルの汎化性能に改善すべき部分があることがわかり,モデルを改良した上で次年度内にWeb上でのリスクカリキュレーター実装を目指している。これは概ね予定していた研究計画の通りである。また小児外科領域以外の領域とも同様のリスクモデルの構築の合意がとれ,当初予定以上に対象範囲が広がった。方法論の開発については,応用上のニーズを再検討した結果,当初予定していたベイズ型生存時間分析の開発から開発対象を変更した。それを除いては方法論の提案,および模擬データによるその挙動の確認などは予定通り進んでいる。日本小児外科学会と共同で,日本小児外科学会指導医認定に関わる手術の内,12の高難度術式(ヒルシュスプルング根治術・鎖肛根治術・悪性腫瘍根治術・胆道閉鎖症根治術・胆道拡張症根治術・気管形成術・肺切除術・腸回転異常症手術・漏斗胸手術・噴門形成術・消化管穿孔手術・イレウス手術)を対象に,NCD-小児外科領(NCD-P)の2015年データを訓練データとして用いて,術前因子による術後30日の生命予後および合併症発生を予測するモデルを作成した。この結果の一部は学会にて発表した。また,先天性心疾患に対するカテーテル治療における術後の生命予後および合併症発生,および消化器癌手術における術後合併症の予測についても,それぞれの関連学会と共同で,上述の日本小児外科学会と同様のリスクモデルの構築を進めている。倫理審査を含めた解析を始めるために必要なプロセスが完了し,来年度より解析を始めることになった。また方法論の開発については,次の実績がある。最近の機械学習ではガウス過程回帰が基本的な手法となっているが,そこでよく使われるのはRBFカーネルである.これに対し,従来のベイズモデリングや状態空間モデリングにおいては,平滑化スプラインや平滑化トレンドモデル,ローカルレベルモデルなど,有限階の差分作用素に基づく事前分布が主流である.両者がどう異なるか,特に縦断的な医学データのような短い時系列データを念頭においた場合に両者に優劣があるかは興味深い.本年度の研究では,従来から知られている理論的な違いについて整理を行った.また,模擬データを用いて両者の振舞いの違いを検討中である.その他,機械学習における共変量シフトの理論と医学分野で多用される統計的因果推論の手法を比較し,両者において同様の発想に基づく交差検証法によるモデル選択の手法が提案されていることを指摘した小児外科領域については,リスクモデルの構築と評価が完了した。小児外科領域については,リスクモデルの構築と評価が完了した。その内容をもとに論文を作成する。また,モデルの汎化性能に改善すべき部分があることがわかり,改良したモデルで再度汎化性能を評価することとした。
超音波ビーム交差造影エコー法による血流速度３次元ベクトル計測

ビーム交差方式コントラストエコー法で測定される和音・差音のドプラ周波数は、2つのビーム方向成分の関数として求められるため、第2高調波や基本波のドプラ周波数との連立方程式を解くことにより、角度補正なしに血流速度のベクトル計測が可能である。そこで、本手法の有効性を実験によって検討した.内径4 mmのシリコーン製のチューブを振動子の交差領域内に設置し,チューブ内にマイクロバブルを注入した脱気水を循環させた.ここで和音成分を5.2 MHz,高調波成分6.4 MHzとする.本手法によって測定された速度ベクトルは誤差率10%以内であった.本研究は超音波造影剤であるマイクロバブルの非線形振動を利用して、2周波数2ビーム交差方式のパルスドプラ血流計測法の有効性について実験を行って検討を行うことを目的としている。本手法の特徴は、従来のパルスドプラ法の難しかった流速度ベクトルの測定が可能となる点であり、本年度はシリコンチューブ中にマイクロバブルを含む脱気水を流して、速度ベクトル計測法の検討を行った。昨年度の研究によって、超音波照射による音響放射力に起因した速度変化の影響が無視できないことを確認している。そこで、今年度は音圧を変化させながら、ドプラ周波数と流速との関係を調査した。その結果、音圧が大きくなるとドプラ周波数は高くなり、粘性の高いグリセリン水溶液を流路に流した場合では、ドプラ周波数は水の場合より低くなった。これらのことからマイクロバブルが受ける超音波の音響放射力の影響は低い音圧と高い粘性によって抑制されることが明らかとなった。そこで、血液と同程度の粘度を有するグリセリン水溶液を作成して、それを流路に流して、マイクロバブルの非線形振動による和音のドプラ周波数と流速との関係を調査した。その結果、音圧が70kPa以下では音響放射力の影響は小さいことがわかった。そのため、音圧を70kPa以下に設定して、ドプラ周波数と流速および超音波とのなす角度との関係を調べたところ、理論式で与えられる結果と一致した。したがって、本手法によって速度ベクトル測定の可能性が示唆された。そこで、本手法の有効性を実験によって検討した.内径4 mmのシリコーン製のチューブを振動子の交差領域内に設置し,チューブ内にマイクロバブルを注入した脱気水を循環させた.ここで和音成分を5.2 MHz,高調波成分6.4 MHzとする.本手法によって測定された速度ベクトルは誤差率10%以内であった.本研究は、平成2426年度の3年間で生体内部の血流の3次元速度ベクトルを実時間で測定する手法を確立して,その測定精度を血流模擬ファントムによって確認し,本手法の臨床診断への適用可能性を検討することを目的としている。本手法は2つの超音波ビームが交差する領域において、静注された微小気泡(造影剤)の非線形振動により発生する和音・差音成分と基本波成分を用いることによって、3次元速度ベクトルの2つの方向余弦成分を測定する点を特徴としている。平成24年度では、本手法の測定原理を実証するために,超音波振動子,超音波送受信系,基本的な信号処理アルゴリズムを開発して,血流模擬ファントムによる流速測定実験システムを構築した。本研究では、静脈注射されたマイクロバブルの非線形振動を利用して、血流速度の3次元ベクトルを測定するため、マイロバブルの速度と血流速度が一致しない場合は、血流速度測定が困難となる。そこで、流路にマイクロバブルを流し、直角に交わる2つの超音波ビームの交差領域からの反射波を取得し、その和音成分のドプラ周波数を測定した。実験においては、周波数3.2MHzと2.0MHzの超音波を送波し、和音である5.2MHz成分のドプラ周波数を計測した。流速とドプラ周波数の関係を調査したところ、超音波の音圧に依存する傾向を観測した。そこで、音圧を20kPaから140kPaまで変化させたところ、20から60kPaまでは音響放射力によるとみられる効果が観測された。これは超音波の音響放射力によりマイクロバブルが移動したためであると考えられる。このデータを音圧0に外挿したところ、流速とドプラ周波数の理論値と一致した。したがって、測定されたマイクロバブルの移動速度から血流速度を推定するためには音響放射力による効果を考慮する必要があることが明らかとなった。ビーム交差方式コントラストエコー法で測定される和音・差音のドプラ周波数は、2つのビーム方向成分の関数として求められるため、第2高調波や基本波のドプラ周波数との連立方程式を解くことにより、角度補正なしに血流速度をベクトル計測が可能である。

そこで、本研究では、本手法を用いた血流の速度ベクトル計測システムを構築して本手法の有効性を検討した.測定システムは、脱気水で満たした水槽の中に周波数f1の超音波送波し、そのエコーを受波する凹面振動子を水面から下方へ超音波を送波するように設置し,周波数f2の超音波を送波する平面振動子が水中でビームが直交するように設置した.内径4 mmのシリコーン製の流路を振動子の交差領域内に設置した.2つの超音波ビームが交差する領域に流路を固定し、その流路内にソナゾイドを含む脱気水を循環させた.チューブの高位から低位方向へと水を流した。ドプラ周波数が正となる方向を正とすると流速は,-10 mm/s,-20 mm/s,-30 mm/sとした.周波数f1を3.2 MHz,超音波の音圧を20 kPa,波連長を8 cycle,周波数f2は2.0 MHz,振動子への入力電圧15 V,波連長10 cycleで駆動させた.したがって,和音成分は5.2 MHz,第二高調波成分6.4 MHzとなる.実験の結果,各設定流速値において誤差10%以内で速度ベクトルが測定された.したがって、周波数の異なる2つの超音波ビームとマイクロバブルの非線形振動によってエコー信号で和音成分が観察され、その成分と第2高調波成分のドプラ周波数から血流速度ベクトルを計測できることが示された。これらの結果を基に、3方向から超音波を流路に照射して流速の3次元ベクトルを測定する実験システムを構築した。今後はこのシステムを用いて臨床への応用を検討していくことが重要である。音響工学研究計画では1つの送受信系と2つの送信系で構成する実験システムを構築することになっているが、1つの送信系による実験システムとなっているため。1つの送信系による実験結果では高粘度低温圧条件で理論値と一致しているので、基本的には本手法の妥当性を示唆している。平成24年度に実施した実験によって、測定されたマイクロバブルの移動速度から血流速度を推定するためには音響放射力による効果を考慮する必要があることが明らかとなった。そこで、流路にマイクロバブルを流し、直角に交わる2つの超音波ビームの交差領域からの反射波を取得し、その和音成分のドプラ周波数を測定した。送波する超音波の音圧を変化させて流速とドプラ周波数の関係を調査したところ、超音波の音圧に依存する結果となった。これは超音波の音響放射力によりマイクロバブル群が流速と異なる速度で移動していることを示している。本研究では、流速測定を目的としているため、マイクロバブル群の受けている音響放射力を推定して測定値を補正する必要がある。音響放射力は音圧に依存するため、音圧を変化させて2回ドプラ周波数を測定し、その結果から流速を推定することが可能である。また、遅い流速の場合は、音響放射力の影響により流速測定値の精度は低下するが、速い流速の場合は相対的に影響が抑えられ精度の低下は小さいと考えられる。当初研究計画通り、1つの送受信系と2つの送信系で構築される実験システムによって流路の速度ベクトルを測定する。また、2つのビーム交差角度が90度でない場合についての検討を行う。これらの実験的な検討によって、本手法の有効性を明らかにする。超音波の音響放射力によるマイクロバブルの速度変化が明らかとなったので、流速速度ベクトルを測定するためには、これを補正する必要がある。そこで、音圧依存性を補正するために、音圧を変化させて2回ドプラ周波数を測定し、その結果から流速を推定する。また、遅い流速の場合は、音響放射力の影響により流速測定値の精度は低下するが、速い流速の場合は相対的に影響が抑えられ精度の低下は小さい。そこで、流速と測定精度との関係を調査して測定対象とする流速範囲を決定する。次に、3次元ベクトル計測を実現する実験システムを構築して、流路ファントムの流速分布を測定する。
抗原ペプチドトランスポーター遺伝子多型とペプチド輸送および抗原提示

TAP(transporter associated with antigen processing)分子は、抗原ペプチドを粗面小胞体(ER)内に能動的に輸送する機能を持つATP駆動型のトランスポーターである。HLAクラスI拘束性の抗原処理に際し、断片化ペプチドは、TAP分子によりER内へと運ばれ、β2ミクログロブリンおよびHLAクラスI分子重鎖と会合しHLA分子に結合した状態で、細胞膜表面上に運ばれ、抗原としてT細胞に提示される。ヒトTAP遺伝子は多型を呈し、TAP1遺伝子4種類以上、TAP2遺伝子8種類以上の対立遺伝子が存在する。本研究では、mismatch-PCR-RFLP法によるヒトTAP遺伝子多型解析法を開発した。ヒトTAP遺伝子多型と抗原ペプチドの輸送の選択性の関連、および選択されたペプチドのHLA分子との結合について検討する候補の一つとして、臨床型が重症であり、血中IgE値が8,000U/ml以上を示すアトピー性皮膚炎患者におけるTAP遺伝子多型の解析を行なった。しかしながら、この患者群では、TAP対立遺伝子頻度に対照との有意差を認めなかった。TAP分子が関与するHLAクラスIの抗原処理機構は、疾患発症には第一義的な役割は果たしていないと想定される。アトピー性皮膚炎では、アレルゲンと想定されていたダニ抗原の本体が、システインプロテアーゼと考えられている。TAP対立遺伝子の違いにより、抗原ペプチド輸送の選択性が異なり、抗原処理、抗原提示に影響を及ぼすと推定される。ヒトTAP遺伝子多型とペプチド選択性の関連についての検討は、現時点で皆無である。本研究では、ATP駆動型トランスポーターであるTAP分子の、遺伝子解析とともに、ペプチド輸送の直接的な解析法の確立を目指している。さらに、抗原ペプチドが抗原提示されるに至るまでの、抗原処理機構および抗原提示機構の研究の進展により、疾患の発症機序、対応抗原の解明、抗原処理および抗原提示の制御へと進むものと期待される。
カチオン性シック塩基マンガン(III)錯体の光増感DNA切断能に関する研究

1.5.5′-位にカチオン基(-CH_2-N(CH_3)_3^+)を導入したサレン型シッフ塩基マンガン(III)錯体(N,N-ブリッジ=(CH_2)_2:錯体1,(CH_2)_3:錯体2,C_6H_4:錯体3)を新規に合成した。また,カチオン基のない上記に対応の錯体4-6も合成した。錯体3の三臭化物塩(二種)のX線構造解析を行い,トランス(2Br)-型及び(2H_2O)型6配位構造を決定した。1-6のアビカル位は置換活性で,水溶液中では水に置換されることをUVスペクトルより確認した。2.1-6は水溶液中で可視光(150Wタングステン,UVカットフィルター使用)を照射すると,Mn(III)がMn(II)に還元され,シッフ塩基配位子が酸化されることがESRおよび蛍光スペクトルの測定より見いだされた。この錯体の自己酸化還元反応速度は4≦5<2<1<6≪3の順に増加し,N,N-ブリッジは(CH_2)_3<(CH_2)_2<C_6H_4の順に効果的であること,及びカチオン基を導入するとより効果的であることが分かった。酸化還元電位E_<1/2>(Mn(III)/Mn(II))はほぼ0Vvs.SCEであった。なお,この光反応では酸素の発生および過酸化水素の生成は認められなかった。3.これら錯体によるファージΦX174DNAの可視光照射下での切断について検討した。その結果,これら錯体は室温下でDNAを効果的に切断することが分った。その切断能を電気永動実験によりForm IIの生成量などから評価した結果,錯体のNDA切断活性は5≦4<6<2<1≪3となり,カチオン基を導入した錯体の方がより効果的にDNAを切断した。このことから,DNAの切断はDNAに結合した錯体への光照射によるMn(III)からMn(II)への還元に伴う酸化反応によることが分かった。最適pHは約8.5であった。3によるDNA光切断はかなり速く,今後,光療法などへの応用が考えられる。4.^<32>PでラベルしたプラスミドDNAを用いて3の切断塩基選択性について検討した結果、Tサイトに対して高い選択性(73%)を示すことを見いだした。この錯体の酸素化剤によるDNA切断ではATサイト選択性であり,光切断の高選択性の原因解明が待たれる。1.5,5'-位にトリメチルアンモニオメチル基を導入したカチオン性サレン型シッフ塩基(N,N'-ブリッジ=(CH_2)_2,(CH_2)_3,C_6H_4)を配位子とするマンガン(III)錯体(N,N'-ブリッジ=(CH_2)_2:1,(CH_2)_3:2,C_6H_4:3)を新規に合成した。錯体3の3Br^-塩のX線構造解析を行い,トランス(2Br)-型6配位構造を決定した。なお,この錯体の軸配位子は水溶液中では水に置換されることをUV-visスペクトルにより確認した。これら錯体は水中で可視光照射(150W)すると,中心金属がマンガン(II)に還元されることを見いだした。2.これら錯体によるファージΦX174DNAの可視光照射下での切断について検討した。その切断能を電気永動実験によりForm IIの生成量などから評価した結果,錯体の活性は2<1≪3となり,この活性は錯体がマンガン(II)に還元される速度の順に一致した。このことから,DNAの切断は錯体の光照射によるMn(III)からMn(II)への還元に伴う酸化反応によることが示唆された。この光DNA切断はカチオン基のないMn(III)-サレン系錯体では起こらないことから,錯体がDNAを切断するのに,カチオン基が重要は役割を果たしていることが分かった。本錯体によるDNAの光切断速度は光量,錯体濃度,溶液pH,温度などの種々の要因に依存するが,錯体3によるDNAの光切断はかなり速く,今後,光療法などへの応用が考えられる。現在,反応後の錯体の構造や錯体の酸化還元機構,および切断DNAの位置選択制などについて検討中である。

2.1-6は水溶液中で可視光(150Wタングステン,UVカットフィルター使用)を照射すると,Mn(III)がMn(II)に還元され,シッフ塩基配位子が酸化されることがESRおよび蛍光スペクトルの測定より見いだされた。この錯体の自己酸化還元反応速度は4≦5<2<1<6≪3の順に増加し,N,N-ブリッジは(CH_2)_3<(CH_2)_2<C_6H_4の順に効果的であること,及びカチオン基を導入するとより効果的であることが分かった。酸化還元電位E_<1/2>(Mn(III)/Mn(II))はほぼ0Vvs.SCEであった。なお,この光反応では酸素の発生および過酸化水素の生成は認められなかった。3.これら錯体によるファージΦX174DNAの可視光照射下での切断について検討した。その結果,これら錯体は室温下でDNAを効果的に切断することが分った。その切断能を電気永動実験によりForm IIの生成量などから評価した結果,錯体のNDA切断活性は5≦4<6<2<1≪3となり,カチオン基を導入した錯体の方がより効果的にDNAを切断した。このことから,DNAの切断はDNAに結合した錯体への光照射によるMn(III)からMn(II)への還元に伴う酸化反応によることが分かった。最適pHは約8.5であった。3によるDNA光切断はかなり速く,今後,光療法などへの応用が考えられる。4.^<32>PでラベルしたプラスミドDNAを用いて3の切断塩基選択性について検討した結果、Tサイトに対して高い選択性(73%)を示すことを見いだした。この錯体の酸素化剤によるDNA切断ではATサイト選択性であり,光切断の高選択性の原因解明が待たれる。
化学合成生物群集における共生関係の進化についての分子古生物学的研究

本研究では、培養菌および現世の海洋底のメタン湧出地点に生息するメタン生成菌、試料について分析を行い、バイオマーカーによる特徴付けを行った。これはメタン生成菌種をその脂質分析によって決定しようという試みである。その結果、メタン生成菌の化学組成分類であるANME-1の炭化水素画分からはクロセタンと飽和および不飽和PME,エーテル結合性脂質からはフィタンのみでビフィタンは検出されなかった。これに対して、ANME-2については,炭化水素画分から飽和および不飽和PMEのみでクロセタンを含まず,エーテル結合性脂質からはフィタンと3種のビフィタンが検出された。さらにANME-2については、C13およびC18のイソプレノイドケトンを特徴的に含むことが示された。この結果を用いて、北海道白亜系の5つの石灰岩、横浜市栄区の石灰岩(更新世)および稚内沖の炭酸塩クラスト(現世)についてバイオマーカー分析を行った。その結果、白亜系ではANME-1が卓越するが、特に下部白亜系においてはANME-1のみならずANME-2の共存が認められた。これに対して、横浜市栄区の更新世石灰岩では、ANME-2のみの活動が検出された。また、稚内沖の炭酸塩クラストでは、ANME-1が支配的であった。さらにメタン湧出地点に観察される炭酸塩沈殿について、以下のような考察を行った。硫酸還元細菌とメタン生成古細菌の活動による嫌気的メタン酸化の結果であり、直接的には炭酸塩イオンで沈殿が促進されると共に、間隙水中では炭酸塩沈殿の妨害イオンである硫酸イオン濃度の低下とアルカリ度の上昇が生じるため、炭酸塩沈殿が生じている。北海道白亜系の化学合成生物群集と共生するメタン細菌は、下部白亜系ではAMNE-1に近い種であり、上部白亜系さらに現世ではAMNE-2が卓越する。このように本研究の目的であった共生関係の進化を確認することが出来た。本年度の研究は、化学合成生物群集をエネルギー的に支える微生物をバイオマーカーによって決定することを試みた。用いた試料は現世の海洋底から採取した独立栄養細菌であり、これについてバイオマーカー分析を行った。具体的には、「ドルフィン3K」第506潜行および「しんかい2000」第1363潜行において、黒島海丘の6地点から採取した泥質堆積物およびメタン湧出に関係して生息しているバクテリアマットについて有機地球化学分析を行い、メタン菌、メタン酸化菌および硫酸還元菌についてバイオマーカーを用いた特徴付けを試みた。本研究では、通常のバイオマーカー分析に引き続いて、抽出物の極性画分についてHl/LiAlH_4処理を行いエーテル結合性炭化水素について分析を行った。抽出性炭化水素画分については、ドルフィン3Kにて採取した試料から以下のバクテリア起源と考えられる特徴的なバイオマーカーが検出された。すなわち、(1)偶数優位性を持つn-alkane、(2)奇数炭素数の3,7-dimethylalkane、(3)偶数炭素数のalkylcyclopentane、(4)個別炭素同位体組成はphytaneを除いて-25‰から-27‰の狭い範囲に入る。これに対して、極性成分のHl/LiAlH-4処理後のエーテル結合性炭化水素画分は、軽い炭素同位体組成を持つphytaneで特徴付けられる。このphytaneはphytyl diethersに由来し、メタン細菌の存在を示唆している。以上のバイオマーカー分析の結果をバクテリア種のデータを結びつけて、バイオマーカーを用いたバクテリア種の特定を試みた。

今年度は、現世の試料を分析することによって各細菌類とその分泌物・細胞膜構成部質を起源とする化学化石の組成・構造とを一対一対応させることを試みた。用いた試料は、竜洋海底谷および黒島海丘より採取したバクテリアマットである。試料採取にはしんかい2000およびドルフィン3000を用いた。試料は通常の溶媒抽出を行なった後に、極性画分についてHI/LiAlH4処理を行ない、エーテル結合性バイフィタンの分析を行なった。その結果、非極性画分はクロセタン、PME,さらにその不飽和、3,7-dimethylalakne, alkylcyclopentane, alkylcyclohexaneおよびmid-chain-branched-alakneによって、マットは分類できる。さらにこれらは、極性画分についてHI/LiAlH4処理によって放出されるエーテル結合性バイフィタンによって、cyclopentane環を持たないバイフィタン、cyclopentane環を一つ、二つ、さらに三つ持つバイフィタンの組み合わせ、(さらにはその量比によって)によって細分されることが明らかになった。ここで問題になるのが、海底堆積物表面に分布するため、ウオーターコラムから沈んで堆積した表層から中層に生息する生物起源のバイオマーカーと区別しなくてはならないことである。この識別のために、GC/IR/MSを用いた個別化合物炭素同位体組成の分析を行なった。基本的にメタン湧出に関与した微生物起源の化合物は-90‰を下回る軽い炭素で特徴付けられる。この考え方を基にしてバクテリア、アーケア起源の化合物と類似した構造を持つイソプレノイド、具体的にはC25HBI, C30HBIについて個別同位体分析を御行なった結果、-25‰程度の値が得られた。このように試料に含まれる化合物が化学合成細菌起源のバイオマーカーであるか否かの判断は、個別炭素同位体で容易に認定が可能であった。メタンに代表される炭化水素を含む冷湧水は,メタンや硫化水素をエネルギー源とする細菌,古細菌と共生する底生の生物群集へエネルギーを提供している。これらの生物群集は,高い個体生息密度,化学合成細菌と共生した大型生物,光合成に依存しない生態系を特徴としている。本研究では、現世の海洋底のメタン湧出地点に生息するメタン生成菌、が硫酸還元菌と栄養共生してメタン酸化を行っている試料について分析を行い、バイオマーカーによる特徴付けを行った。メタン生成菌の化学組成分類であるANME-1の炭化水素画分からはクロセタンと飽和および不飽和PME,エーテル結合性脂質からはフィタンのみでビフィタンは検出されなかった。これに対して、ANME-2については,炭化水素画分から飽和および不飽和PMEのみでクロセタンを含まず,エーテル結合性脂質からはフィタンと3種のビフィタンが検出された。この後、北海道白亜系の5つの石灰岩、横浜市栄区の石灰岩(更新世)および稚内沖の炭酸塩クラスト(現世)についてバイオマーカー分析を行った。その結果、白亜系ではANME-1が卓越するが、特に下部白亜系においてはANME-1のみならずANME-2の共存が認められた。これに対して、横浜市栄区の石灰岩(更新世)では、ANME-2のみの活動が検出された。また、稚内沖の炭酸塩クラストでは、ANME-1が支配的であった。
ラッサウイルスに対する非増殖型の新規組換えウイルスワクチンの開発

致死的な出血熱であるラッサ熱にはいまだ有効なワクチンがない。本研究では安全性が高く、細胞性免疫を強く惹起する非増殖性ラブドウイルスベクターが有効な手段となりうるかについて、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)のモデル系を用いて個体レベルの解析を行った。確立済みのP遺伝子欠損非増殖型狂犬病ウイルスベクターの系を用いて、LCMVの主要抗原遺伝子GPCを発現する組換えウイルス⊿P-GPCを作出した。⊿P-GPCがGPCを発現していることを蛍光抗体法およびウェスタンブロッティングにより確認した。マウスを用いた致死的感染防御試験において、⊿P-GPCは80%の防御効果を示した。【研究目的】致死的な出血熱であるラッサ熱にはいまだ有効なワクチンがない。さらにその感染防御には液性免疫ではなく細胞性免疫が非常に重要である事が分かっている。そこで、本研究ではラッサウイルスの感染防御ワクチンとして、非増殖性狂犬病ウイルスベクターが有効な手段となりうるかについて、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)のモデル系を用いて個体レベルの解析を行うことを目的とする。【研究実施計画】本研究は当初2年間を予定していたが進行に遅れが出たため,3年間に変更した.本年度は実験1:LCMVの抗原蛋白質である糖蛋白質(GPC)の組換えバキュロウイルスによる発現およびそれに対する抗体の作製、実験2:LCMVのGPCを発現する組換え狂犬病ウイルスの作製、実験3:LCMVのGPCを発現する組換えアデノウイルスの作製、4:組換えウイルスの培養細胞での性状解析を行う予定であった.【研究成果】実験1については前年度得られたバキュロウイルスにおいてGPCの発現が確認出来ずコンストラクト等を変えて検討していたが,結局目的のウイルスを得る事が出来なかった.そこで,ハイブリドーマを分譲してもらいGPCに対するモノクローナル抗体を精製することが出来た.実験2については組換えウイルスの作出に成功し,高力価ウイルスストックを作製中である.実験3についても同様に組換えウイルスを得て高力価ウイルスストックを作製中である.実験4については実験2および3で得られた組換えウイルスが培養細胞でGPCを発現している事をモノクローナル抗体を用いて蛍光抗体法により確認した.また,組換え狂犬病ウイルスの培養細胞での至適培養条件について検討した.【研究目的】致死的な出血熱であるラッサ熱にはいまだ有効なワクチンがない.さらにその感染防御には液性免疫ではなく細胞性免疫が非常に重要である事が分かっている.そこで,本研究ではラッサウイルスの感染防御ワクチンとして,非増殖性狂犬病ウイルスベクターが有効な手段となりうるかについて,リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)のモデル系を用いて個体レベルの解析を行うことを目的とする.【研究実施計画】本研究は当初2年間を予定していたが進行に遅れが出たため,3年間に変更した.本年度は実験5:感染防御試験,実験6:末梢血を用いた細胞性免疫反応の解析および有効性の解析を行う予定であった.【研究成果】実験5についてマウスへの接種を行うため,高力価ウイルスストックの作製を行った.P遺伝子欠損非増殖性狂犬病ウイルスベクターにLCMVのGPCを挿入した⊿P-GPCウイルスおよびemptyの⊿Pウイルス液を大量に調整し,濃縮・精製を行い,両ウイルスの精製ウイルス液を得た.次にLCMVの強毒株であるWE株を用いてマウスでの感染防御試験を行った.5週齢のC57BL/6jマウスに⊿P-GPCまたは陰性対照として⊿Pを1週間間隔で2回筋肉内または腹腔内接種し,その1週間後に致死量の強毒のWE株を脳内接種した.筋肉内接種した群では,⊿P接種群が全頭死亡したのに対し,⊿P-GPC接種群は5匹中4匹が生残した.腹腔内接種群においては,⊿P接種群では,3匹中1匹のみが生残したのに対して,⊿P-GPC接種群は5匹中4匹が生残した.どちらにおいても約80 %の防御効果が確認できた.実験6については期間内に実験を終えることが出来なかった.致死的な出血熱であるラッサ熱にはいまだ有効なワクチンがない。【研究実施計画】

本年度は実験1:LCMVの抗原蛋白質である糖蛋白質(GPC)の組換えバキュロウイルスによる発現およびそれに対する抗体の作製、実験2:LCMVのGPCを発現する組換え狂犬病ウイルスの作製、実験3:LCMVのGPCを発現する組換えアデノウイルスの作製、実験4:組換えウイルスの培養細胞での性状解析を行う予定であった。【研究成果】実験1について発現GPC蛋白が思った様に得られていないが,現在LCMV感染マウス血清を使用して,GPCを検出する系を用いて実験2,3および4については対応可能となっている.実験2および3のGPC発現組換えウイルスベクターの作製については,必要なプラスミドおよびコスミドの調整を済ませ,現在組換えウイルスを作製中である.これらプラスミドおよびコスミドに組込まれたGPC遺伝子をCAGプロモーター制御下で哺乳類細胞に一過性発現させた結果,上記LCMV感染マウス血清により認識されることを確認した.実験4:組換えウイルスの培養細胞での性状解析については組換えウイルスが得られていないため実施していない.全体的にやや遅れているが組換えウイルスが得られれば当初目的を達成出来るものと考えられる.これまでに,LCMVの抗原遺伝子GPCを挿入した組換え狂犬病ウイルスおよびアデノウイルスの作出に成功した.また,ハイブリドーマ細胞を入手し,GPCに対するモノクローナル抗体を精製することが出来た.そこで,モノクローナル抗体を用いて,組換え狂犬病ウイルスおよびアデノウイルスが培養細胞において,GPCを発現している事を蛍光抗体法により確認した.また,GPC発現組換え狂犬病ウイルスの培養細胞での最適な培養条件および濃縮・精製方法について検討した.現在この方法を用いて高力価精製ウイルス液の作製を行っている.本年度は,実験1のLCMVの抗原蛋白質GPCのバキュロウイルスによる発現とそれに対する抗体の作製,について発現蛋白質の大量調整が予定通りに進んでおらず当初計画より遅れている.しかし, LCMV感染マウス血清を使用して発現GPC蛋白質を確認することが出来ており,実験2および3の組換えウイルスによるGPC蛋白質の発現は確認出来る体制が出来ている.実験2のLCMVのGPCを発現する組換え狂犬病ウイルスの作製ついて目的遺伝子のサブクローニングおよび構造確認,組換え狂犬ウイルスゲノムプラスミド等の構築および構造確認は完了している.しかし,組換えウイルスがまだ回収出来ておらず,当初計画よりやや遅れている.実験3:LCMVのGPCを発現する組換えアデノウイルスの作製について組換えアデノウイルス作製に必要なコスミドベクターの作製および構造確認は完了している.現在組換えウイルスを作製中であり,当初計画よりやや遅れている.今年度は,実験5:感染防御試験,実験6:末梢血を用いた細胞性免疫反応の解析および有効性の解析を行う予定である.特に動物を使用した実験はP3実験施設を使用するため,実験施設の空き状況を考慮しながらLCMVを使用しない部分についてはP2動物実験施設で実験を行うなど柔軟に対応していく予定である.GPC蛋白質に対する抗体については,現在LCMV感染マウス血清を用いて実験を進めているが,今後動物個体での免疫反応の解析等においてはGPCに対する抗体を使用する事が望ましい.適当なバキュロウイルスクローンが得られなかった原因としては,コンストラクトやタグが適当でなかった可能性があるため,現在コンストラクト等を変えて検討しているところである.組換え
ミエリンにおける生理活性脂質リゾホスファチジン酸の機能解析

当該年度において私は、自ら確立したオートタキシン(ATX)阻害抗体をもちいて新たな表現系を模索し。解析することを目的とした。その結果、ATXが難病である特発性肺線維症に関与することを見いだした。肺線維症は肺間質における炎症とそれに伴う線維化を主徴とする疾患である。そのうち特発性肺線維症は原因不明の疾患であり、これまでに有効な治療法や、病態進行を反映する血中マーカーは確立されていない。ATXは生理活性脂質であるリゾホスファチジン酸(LPA)を産生するリゾホスホリパーゼDである。LPAは種々の細胞において炎症性サイトカインの発現を亢進させること、線維芽細胞の運動性を亢進させることから、炎症や組織修復に関わることが示唆されてきたが、LPAが生体内においてそれらの役割を持つかはこれまで明らかになっていない。本研究において私はLPA産生酵素ATXが肺線維症の進行に重要な役割を持つことを示した。特発性肺線維症患者における血清中や肺胞洗浄液中のATXレベルは健常人に比べて有意に高かった。そこで本疾患におけるATXの機能を明らかにする目的でマウス血中ATXを除去する活性を有するモノクローナル抗体を確立し、ブレオマイシン誘導型肺線維症モデルにおいて投与したところ、肺の線維化は顕著に抑制された。さらに病態進行過程である肺胞中への炎症細胞の浸潤や肺における血管透過性の亢進は、抗ATX抗体投与により顕著に抑制された。最近LPA受容体の一つであるLPA1が本疾患の病態進行に大き<関わることが示されており、本研究によりATX-LPAが肺線維化に重要な役割をもつことが強<示唆された。リゾホスホリパーゼD/Autotaxinは血中において生理活性脂質であるリゾホスファチジン酸(LPA)を産生する酵素として同定された。これまでに、本酵素およびそれにより産生されるLPAの生理的な機能を明らかにするために、Autotaxinの阻害抗体の確立を行い、生体内においてAutotaxinを阻害することに成功している。これまでにAutotaxinが血液中でどの程度LPA産生に寄与しているかについては不明であった。これは血中LPAが非常に微量であり、また代謝が非常に速いため、その測定が困難であったためである。そこで固相抽出カラムおよび酵素発色法による定量を組み合せた新たな測定法を構築した。その結果、血液中のLPA濃度はこれまで考えられていたものより低く、およそ50nM程度であることを明らかにした。また上記の阻害抗体投与下においてはLPAが0となったことから、血液中のLPA産生が完全にAutotaxinにより担われていることが明らかとなった。一方でin vitroにおいてAutotaxinは別の生理活性脂質であるsphingosine1-phpshate(SIP)を産生する活性を有しているが、Autotaxinのheteroノックアウトマウスの血中SIPを抽出してHPLCにより測定したところ、野生型と変化がなかったことから、少なくとも血中SIPの産生についてはAutotaxinの寄与は小さいと考えられた。また血清をlysophophatidylcholineとともに加温するとLPAと非常に構造の似た生理活性脂質であるcyclic phosphatidic acid(cPA)が産生されるが、抗Autoataxin抗体をもちいて免疫学的にAutotaxinをdepleteした血清ではcPAの産生が見られなくなったことから、Autotaxinが血中においてcPAの産生を担う酵素であるという全く新しい活性が明らかになった。またこれまでの解析から、Autotaxinが悪性腫瘍に高発現していることを見いだしていたので、細胞レベルの解析をさらに進めた。マウス脳腫瘍由来の培養細胞203gのAutotaxin安定発現株を作製したところ親細胞株に比べ細胞遊走活性の向上が認められた。また内在的にAutotaxinを高発現していヒト脳腫瘍由来の培養細胞SNB78に対して、RNAi法を用いてAutotaxinの発現を落としたところ、その細胞遊走活性の著しい低下が認められた。以上の結果はAutotaxinが脳腫瘍の浸潤および転移能に寄与していることを示唆しているものと考えられる。生理活性脂質リゾボスファチジン酸(LPA)は血液中においてリゾボスファチジルコリン(LPC)にリゾホスホリパーゼD/autotaxin(ATX)が作用することにより産生される。LPAの生体内における機能を明らかにする目的で、その産生酵素であるATXに着目し解析を行っている。LPAは血小板の活性化されたような状況でよく産生され、種々の細胞でサイトカインの発現を誘導し、また細胞の増殖・運動性を促進することから、創傷治癒において何らかの機能を有しているものと考えられている。そこで抗ATX阻害抗体投与下においてマウズの皮膚創傷モデルを行ったところ、創傷治癒の進行に遅れが認められた。血小板の活性化の生じる創傷の初期炎症過程においてATXがLPA産生を介して何らかの機能を有していると予想し、炎症初期の血管反応および血球浸潤に着目した解析を行っている。これまでに抗ATX抗体投与下において創傷にともなう好中球浸潤が抑制されること、またLPAをマウス皮内に投与すると血管透過性が亢進することを明らかにしている。

LPAによる血管透過性の亢進は部分的にはマスト細胞の活性化を介していることがわかり、また内皮細胞への作用の寄与もあることが示されている。血管透過性の亢進は創傷治癒のもっとも初期の段階であり、ヒスタミンやPGE_2などこれまでにいくつかの因子が報告されているが、これら既知の因子との関係を抗ATX抗体を用いて明らかにできると考える。また、確立したモノクローナル骨体をもとにlysoPLD/ATXのSandwich ELISA定量系を確立した。様々なヒト臨床サンプルの定量を行ったところ、肝障害時に血中のレベルが高くなること、また血中ATXレベルが栄養アセスメントマーカーと相関が有ることが明らかになった。今後、ATXとこれら病態、生理現象との関連をマウスを用いた実験を行うことにより明らかにできると考える。また、ATXノックアウトマウスは胎生致死であるが、成体におけるATXの機能を明らかにすべく、tamoxifen誘導型のATXコンディショナルノックアウトマウスを作製し確立した。今後このマウスを用いて発達脳のミエリン形成におけるATXおよびLPAの機能を明らかにしたい。当該年度において私は、自ら確立したオートタキシン(ATX)阻害抗体をもちいて新たな表現系を模索し。解析することを目的とした。その結果、ATXが難病である特発性肺線維症に関与することを見いだした。肺線維症は肺間質における炎症とそれに伴う線維化を主徴とする疾患である。そのうち特発性肺線維症は原因不明の疾患であり、これまでに有効な治療法や、病態進行を反映する血中マーカーは確立されていない。ATXは生理活性脂質であるリゾホスファチジン酸(LPA)を産生するリゾホスホリパーゼDである。LPAは種々の細胞において炎症性サイトカインの発現を亢進させること、線維芽細胞の運動性を亢進させることから、炎症や組織修復に関わることが示唆されてきたが、LPAが生体内においてそれらの役割を持つかはこれまで明らかになっていない。本研究において私はLPA産生酵素ATXが肺線維症の進行に重要な役割を持つことを示した。特発性肺線維症患者における血清中や肺胞洗浄液中のATXレベルは健常人に比べて有意に高かった。そこで本疾患におけるATXの機能を明らかにする目的でマウス血中ATXを除去する活性を有するモノクローナル抗体を確立し、ブレオマイシン誘導型肺線維症モデルにおいて投与したところ、肺の線維化は顕著に抑制された。さらに病態進行過程である肺胞中への炎症細胞の浸潤や肺における血管透過性の亢進は、抗ATX抗体投与により顕著に抑制された。最近LPA受容体の一つであるLPA1が本疾患の病態進行に大き<関わることが示されており、本研究によりATX-LPAが肺線維化に重要な役割をもつことが強<示唆された。
二次元ゾルーゲル法による無機薄膜のナノオーダ構造制御と光・電気化学特性

本研究は,気水界面でのゾルーゲル反応とLangmuir-Blodgett(LB)法を組み合わせた新しい酸化物超薄膜作製法"二次元ゾルーゲル法"を用いて種々の金属酸化物超薄膜を作製し,さらに得られる薄膜の光・電気化学的特性を解明することを目的としている。昨年度までの研究において,二次元ゾルーゲル法によりTiO_2,ZrO_2,Nb_2O_5超薄膜,(TiO_2/ZrO_2)_nヘテロ積層薄膜が作製できることを明らかにしている。今年度は,得られたゲルおよびTiO_2超薄膜の構造,光・電気化学物性について調べた。以下に,主な研究成果を示す.1.入射角依存反射率測定より,得られたTiO_2超薄膜の屈折率は2.1であり,TiO_2結晶部分が占める体積充填率は単結晶薄膜を仮定したときの8090%程度と見積もられ,本系では非常に高密度のTiO_2超薄膜が形成されていることが明らかとなった。2.水面上ゲル薄膜についてもin situで入射角依存反射率測定を行い,安定化剤としてn-オクタデシルアセトアセテート(C_<18>AA)を加えたテトラブトキシチタン溶液を展開し,二次元圧縮すると,C_<18>AA単分子膜の水相側界面にTiO_2ゲル連続層が形成されていることが示唆された。3.二次元ゾルーゲル法で作製した100nm以下の膜厚のTiO_2超薄膜に紫外光を照射すると,膜厚に比例した光電流の発生が認められ,その量子効率は一般にゾルーゲル法で得られる厚膜の値より大きなものであった。今年度は,TiO_2,ZrO_2,Nb_2O_5超薄膜の二次元ゾルーゲル合成とTiO_2超薄膜の光電変換特性について検討を行った。以下に,研究成果の概要を示す.1.オクタデシルアセトアセテート(C_<18>AA)を安定化剤として添加した金属アルコキシド溶液を出発溶液として,膜厚が数十から数百ÅのTiO_2,ZrO_2,Nb_2O_5超薄膜が得られた。2.表面圧-面積曲線,in-situ UV-Visスペクトル測定より,二次元圧縮に伴い水面上でゲル超薄膜が形成されるが,金属アルコキシド/C_<18>AAの比が3のときが,均一なゲル連続薄層形成の最適条件であることがわかった。3.水面上に形成させたゲル超薄膜を基板上にヘテロ累積することにより,各層が百Åの膜厚からなる(TiO_2/ZrO_2)_nヘテロ積層薄膜を作製することにも成功した。4.入射角依存反射率測定より求めた金属酸化物超薄膜の屈折率はバルク酸化物と同程度の値であり,二次元ゾルーゲル法により高密度の金属酸化物超薄膜が作製できることが明らかになった。5.二次元ゾルーゲル法で作製したTiO_2超薄膜について紫外光照射による光電流の発生が認められ,その光電流の値は,膜厚にほぼ比例して増加した。
古・中期インドアーリヤ語韻律の形成と発展

本研究は、言語学と文献学の両面から、古・中期インドアーリヤ語文献における韻律の実態を調査し、歴史的展開を解明することを課題とする。これまでに本研究者が蓄積した原典の韻律分析結果を再検討し、リグヴェーダから中期インド語最終段階にあるアパブランシャ語文献までの韻律を対象に、その形成・発展過程を具体的かつ体系的に著すことを目指す。最終年度である平成30年度には以下の研究活動を行った。1.平成25年度から29年度の4年間に、ヴェーダ語文献(リグヴェーダ、アタルヴァヴェーダ、ヤジュルヴェーダ、ブラーフマナ、ウパニシャド)、叙事詩(マハーバーラタ、ラーマーヤナ)、パーリ語・仏教梵語・西北インド方言等による仏教文献(初期仏典と初期大乗仏典)、アルダマーガディー語を中心とする初期ジャイナ教典の韻文を対象に、韻律と言語に関し再検討を行った。30年度は、それらの検討結果を統合し、韻律の歴史的発展を考察し、その道筋を明らかにした。2.韻律の発展に、休止、音節、マートラー、軽重、音楽演奏、古インドアーリヤ語から中期インドアーリヤ語への音韻変化などの要因が大きな役割を果たしたことを、研究計画の当初から予測していたが、具体的に文献の上で確認した。3.上記の研究成果として得られた、「古・中期インドーアーリヤ語の韻律発展史」の概要を日本語と英語の論文にまとめた。日本語版はほぼ完成している。英語は校閲段階にある。研究年度内での出版には間に合わなかったが、速やかな出版を目指している。4.本年度は、これまでの研究成果の取りまとめに時間と労力を集中したため、学会発表や出版は行わなかった。本研究は,言語学と文献学の両面から,古・中期インドアーリヤ語文献における韻律の実態を調査し,歴史的展開を解明することを課題とする。これまでに本研究者が蓄積した原典の韻律分析結果を再検討し,リグヴェーダから中期インド語最終段階にあるアパブランシャ文献までの韻律を対象に,その形成・発展過程を具体的かつ体系的に著すことを目指す。初年度である平成25年度には以下の研究活動を行った。1.本年度全体を通じて、本研究代表者がこれまでに読み集めてきたヴェーダ韻文の資料(リグヴェーダ、アタルヴァベーダ、ヤジュルヴェーダ・サンヒターのマントラ部分、ブラーフマナに引用されるマントラとシュローカ、ウパニシャッドに引用されるシュローカ、韻文ウパニシャッド)のうち、約半数を再検討し、韻律分析を行った。2.2013年11月に東北学院大学文学部総合人文学科ファカルティー・フォーラムに招待され、「古典が私たちに語るものー古代インド『リグヴェーダ』讃歌に見る人間と死の起源」のテーマのもとに共同講演した。3.2014年1月にインド(ケーララ州、コジコード)において開催された第6回国際ヴェーダ学会に招待され“Symbolism of Hair and Beard in the Vedic Rituals"を発表し、高く評価された。その後、口頭発表をさらに詳論して同名の論文を執筆した。上記学会のProceedingsに掲載される予定である。4.2011年に日本印度学仏教学会学術大会にて口頭発表した「音節とマートラーインド韻律の基礎概念ー」に新たな資料を加えて再検討し、学術論文としてまとめた。2013年12月末の締め切り後に原稿が完成したため、次年度「論集」(印度学宗教学会出版)に掲載される予定である。第2年度である平成26年度には以下の研究活動を行った。1.本研究者がこれまでに読み集めてきたヴェーダ韻文資料(リグヴェーダ,アタルヴァヴェーダ,ヤジュルヴェーダ・サンヒターのマントラ部分,ブラーフマナに引用されるマントラとシュローカ,ウパニシャッドに引用されるシュローカ,韻文ウパニシャッド)のうち,約半数を前年度に扱ったが,本年度はその残りの部分の韻律を検討し,分析した。2.ヴェーダ期から古典期にかけての韻律学,音声学,文法学に関する著作を収集し,それらにおいて,韻律の基本概念,特に音節の構成,軽重,マートラー,休止等がどのように規定されているかを調査し,どのような歴史的変化を遂げたかに関して考察した。3.本研究者が平成24年に龍谷大学において行った講演に基づき,同大学現代インド研究センター(RINDAS)より単著「生命エネルギー循環の思想ー『輪廻と業』理論の起源と形成ー」を刊行した。ヴェーダから叙事詩,古典サンスクリット,仏教に至る広範な原典の研究に基づく100ページを越える著作であり,本研究者の20年にわたる文献学的思想研究の一つの成果であるが,基礎資料となる原典の大半が韻文であるので,それらの韻律の検討と分析を行った。またヴェーダ文献の韻律分析が問題解決の鍵となるテーマについて,2回の学会発表を行った。4.パーリ仏教聖典における韻律の検討・分析を開始し,全体の約3割を終了した。「研究実績の概要」3.に記載したように,著書

「生命エネルギー循環の思想ー『輪廻と業』理論の起源と形成ー」が結果的に非常に大規模なものとなったため,その刊行のために多くの時間と労力を費やすこととなり,交付申請書において平成26年度に計画していた「パーリ文献における韻律の検討」を終了することができなかった。本研究は,言語学と文献学の両面から,古・中期インドアーリヤ語文献における韻律の実態を調査し,歴史的展開を解明することを課題とする。これまでに本研究者が蓄積した原典の韻律分析結果を再検討し,リグヴェーダから中期インド語最終段階にあるアパブランシャ文献までの韻律を対象に,その形成・発展過程を具体的かつ体系的に著すことを目指す。第3年度である平成27年度には以下の研究活動を行った。1.本年度全体を通じて、本研究代表者がこれまでに読み集めてきたパーリ語および仏教梵語文献の韻文のかなりの部分を再検討し、韻律分析を行った。2.仏教梵語文献の韻律資料の中でも,「無量寿経」は韻律の多様さと,異読の多さ,言語の特殊性により,韻律分析が特に困難である。また,浄土教の最古の文献資料として,思想的にも大きな重要性を持つ。この研究に基づき,平成28年1月に京都光華女子大学により招待された光華講座で,「『真実』を『信』に献供するー古代インド祭式から念仏へー」と題して講演した。講演に基づく論文が京都光華女子大学「真宗文化」(平成28年度)に掲載される予定である。3.平成27年9月に日本印度学仏教学会学術大会(高野山大学)にて「『断食』から『真実(語)』へー祭主のVrata『責務』の転換(Satapatha-Brahmana I 1,1)」を発表した。Vrata「責務,誓戒」はインド宗教の根幹とも言える重要な概念であり,リグヴェーダに既に現れ,バラモン教・仏教・ジャイナ教・ヒンドゥー教へと継承され,現代インドの宗教生活にも生きている。インド宗教史という広い視野に立ち,後期ブラーフマナにおいてVrataの意味が本質的に転換したことを明らかにした。発表に基づく論文は同学会誌のページ制限を超過したため,別の学術雑誌に掲載する予定である。1.本研究の対象は,研究者が過去45年間の研究生活において収集し,検討・分析した韻律文献であるが,研究者自身の知識・経験の増加や,文献学全般の発展にともない,今回の研究では,新たな解釈に気づき,類似資料を集めて比較し,以前と異なる結論に至ることがある。また,韻律分析の結果の変更が,テキストの読み(異読の選択,語形の再建)に結びつき,思想内容に関しても新たな考察を引き起こすことが稀ではない。韻律分析と文献批判と思想研究の絡み合いのなかで,当初に予想した以上に,一つ一つの韻文の分析に手間取っているのが実情である。2.韻律研究と並んで,本研究者のライフワークであるヴェーダから仏教・ジャイナ教・ヒンドゥー教を経て現代宗教に至るインド宗教思想の発展に関して,大学や学会から講演および出版を依頼されることが,最近,増加している。また本研究のための韻律文献再検討が,インド思想史上の重要な発見をもたらし,その成果を学会発表することも度々起こっている。その結果,研究計画作成時の予定よりも,本研究にあてることができる時間(エフォート)が減少した。