hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
長寿命建築物が遭遇する全ての強震動を想定したライフサイクル累積損傷評価設計法

地震・地震動に関する研究では、名古屋三の丸地区における推定新東海地震,推定名古屋浅発直下型地震,推定伏在断層に起因する想定地震を対象に計算された予測波のEW成分の中から3波を選定した。これらの大地震が単独作用と連続して作用する場合の違いを,一質点系モデルと20,30、40層多層骨組モデルを用いて、建物の層間変形角や残留変形などの最大値と,累積塑性変形倍率などの累積値に着目して評価した。また、鋼構造建物とこれらに制振構造を適用した建物に対する地震応答解析を行い、その応答結果にエネルギーの釣合に基づく耐震設計法を適用して、層間変形角や塑性率などの最大値、累積塑性変形倍率や塑性履歴エネルギー吸収量などの累積値、残留変形などの評価指標を用いて評価する損傷評価手法を提案した。次に、大地震に対応した地震観測機能と建物の長期的な特性の変化を評価するための長期モニタリング機能を有する二元観測システムを構築した免震建物の観測データの蓄積を図った。これらの観測データをもとに、地震による損傷検知のための適応回帰型システム同定の手法を提案するとともに、免震建物の水平・上下応答挙動を評価するためのモデル化手法や多点入力手法を構築した。地震・地震動に関する研究では、対象地点ごとに建物の供用期間(数百年間)内に建物の損傷に何らかの影響を与え得る地震の候補を、経験的な距離減衰式をベースとした地震危険度解析、建物の地震被害分析を踏まえて、選定する作業を始めた。また、超高層建物の設計用の標準地震動、直下型地震による地震動、海溝型巨大地震による地震動を収集・設定し、最大応答値の指標となる速度応答スペクトルSvと累積損傷値の指標となるエネルギースペクトルV_Eの関係を総合的に評価した。次に、建物の耐震性能評価に関する研究では、鋼構造破壊実験論文を収集して、建物の被害予想として層間変形角、加速度、塑性率、累積塑性変形倍率の判断基準値(安全限界値と2段階の余裕度レベル)を設定した。鋼構造耐震構造、免震・制震(振)構造などの構造種別を対象として、標準波・直下地震・長周期地震動による応答値と判断基準値の関係を考察し、被害程度を推定する方法を提案した。構造モニタリングに関する研究では、平成16年度高度化推進対象事業経費(大学院重点特別経費)「免震建物-地盤系の多点同時地震観測計画」の地震観測システムを利用して、計測機器等を追加し、地震動観測と微動長期測定からなる二元観測システムに基づく免震建物の構造ヘルスモニタリングシステムを構築した。この二元観測システムで取得した観測データに基づいて,構造ヘルスモニタリングに関する基礎的な検討を実施した。地震・地震動に関する研究では、内陸地震の1995年兵庫県南部地震の神戸海洋気象台記録を,プレート境界地震の想定関東地震の大手町模擬波と想定東海・東南海地震の新豊洲模擬波)を選定し、これらの大地震の発生順序が長寿命建物の損傷評価指標に与える影響を,一質点系モデルと20層多層骨組モデルを用いて検討した。また、日本建築学会巨大災害対応特別調査委員会で提供された長周期地震動について速度応答スペクトルSvとエネルギースペクトルVEの対応について検討した。次に、建物の耐震性能評価に関する研究では、RC造建物について、建物の被害予想として層間変形角、加速度、塑性率、累積塑性変形倍率の判断基準値について検討を行い、標準波・直下地震・長周期地震動による応答値と判断基準値の関係を調べるなど、RC建物に対する耐震性能評価に関する研究を開始した。構造モニタリングに関する研究では、地震動観測と微動長期測定からなる二元観測システムに基づく免震建物の構造ヘルスモニタリングシステムにおいて、上下方向の計測機器等を追加し、構造ヘルスモニタリングに関する基礎的な検討を実施した。さらに、既存RC校舎の耐震補強工事に際して微振動長期測定を実施し、耐震壁増設前後の建物振動特性の変化を調べた。

また、鋼構造建物とこれらに制振構造を適用した建物に対する地震応答解析を行い、その応答結果にエネルギーの釣合に基づく耐震設計法を適用して、層間変形角や塑性率などの最大値、累積塑性変形倍率や塑性履歴エネルギー吸収量などの累積値、残留変形などの評価指標を用いて評価する損傷評価手法を提案した。次に、大地震に対応した地震観測機能と建物の長期的な特性の変化を評価するための長期モニタリング機能を有する二元観測システムを構築した免震建物の観測データの蓄積を図った。これらの観測データをもとに、地震による損傷検知のための適応回帰型システム同定の手法を提案するとともに、免震建物の水平・上下応答挙動を評価するためのモデル化手法や多点入力手法を構築した。
リコンビナントウイルス様中空粒子(VLP)を用いたHIVワクチンの開発

1.リコンビナントVLP:E型肝炎ウイルス(HEV)のウイルス様中空粒子(VLP)に外来遺伝子挿入可能な位置を決定するためにTag(HSV B cell epitope)を用いVLPの形成を検討したところ、4カ所の疎水性領域でTag組み込みVLPが形成されることが示された。このことより挿入可能部位で最もVLP産制の多い部位にHIVenv中和抗体エピトープ(HIV308-322,RIQRGPGRAFVTIGK)を挿入したVLPを作製し、マウスに経口投与したところVLPに対するのと同様に消化管内および血清中にHIVenv特異抗体の産制が認められた。これら抗体は血清中よりも消化管内溶液で高く、消化管内ではIgAが中心であった。2.DNAワクチン封入VLP:HEV-VLPをHIVenv DNA添加バッファー内でEDTAでCa^<2+>をキレートし、VLPの各分子間を広げその後Ca^<2+>を添加しHIVenv DNAを封入したHIVenvDNA封入VLPを作製した。このHIVenv DNA封入VLPをマウスに経口投与したところ血清中および消化管内溶液中にHIVenv特異的抗体の産制が認められた。さらにHIVenv特異的細胞傷害性Tリンパ球(CTL)が誘導された。HIVenv特異抗体では消化管内溶液中が血清中より高く、CTLも脾細胞より腸間膜リンパ節で高く誘導された。以上のことよりVLPを用いた2法によるワクチンは全身的のみならず粘膜免疫に強い抗HIV効果をもたらすことが期待された。
プレート沈み込み帯における蛇紋岩化作用の物理化学的条件の解明

マリアナ前弧域には、マントル由来の蛇紋岩化したかんらん岩からなる蛇紋岩海山が数多く分布する。構成する蛇紋岩類は、蛇紋石鉱物の低温相(リザダイト/クリソタイル)が形成された後で高温相(アンティゴライト)がかんらん石およびディオプサイドと共に形成され、さらにその後、再び蛇紋石鉱物の低温相が安定になるという温度履歴を持つ。一方、海山に捕獲岩として含まれる苦鉄質岩類は、その変成鉱物の共生関係と鉱物組織から,地下深部にもちこまれエクロジャイト相程度の変成作用を受けた後に藍閃石片岩相の低温部に相当する変成作用を受けている。両者の熱履歴は調和的で,沈み込み帯内部での岩石類の移動を反映したものと考えられる。マリアナ前弧には、かんらん岩由来の蛇紋岩からなる大規模な蛇紋岩海山群が分布している。これまでの研究で、3つの蛇紋岩海山、すなわちコニカル海山、南チャモロ海山、ツインピークス海山から変成岩類が回収されている。平成25年度の研究では、もっとも大量に変成岩類が産するツインピークス海山に焦点を当て、変成岩類の構成鉱物、鉱物の化学組成について調べた。その結果変成岩類は、低温高圧型変成作用を受けており、深さ20km前後から蛇紋岩により海底まで運搬されたことがわかった。これまでの研究で、コニカル海山から回収された高圧変成岩類は、中央海嶺玄武岩由来である可能性が高いとされている。ツインピークス海山の変成岩類が同様の起源をもつか否か、今後、変成岩類の全岩組成による解析を行って明らかにしたい。マリアナ前弧の蛇紋岩海山と陸上の蛇紋岩メランジュを比較するために、北海道沙流郡平取町糠平川流域の神居古潭変成岩類の調査を行った。今回の調査では、糖平山蛇紋岩体の南縁に、蛇紋岩化作用の影響を受けた可能性がある特異な組成をもつ緑色岩(変成岩)が広範囲に分布することが明らかになった。緑色岩は、海底火山活動によって形成されたもので、枕状溶岩、火砕岩が層状に分布している。現段階では緑色岩と蛇紋岩との関係は不明であるため、今後、緑色岩の組成、鉱物組合せを解析し、その起源、形成条件を明らかにする予定である。母体変成岩類およびその北部に分布する宮守超苦鉄敷く岩体は、異地性岩体と考えられている南部北上山地の縫合部にあたり、プレート境界における蛇紋岩の挙動について有意な情報を与えてくれる。そのため岩手県奥州市に広く分布する母体変成岩類について調査を行い、蛇紋岩体と付随する角閃岩、変成岩類の産状の調査を行ってそれらの産状を調べた。マリアナ前弧に分布する蛇紋岩海山のうち、変成岩を多産するツインピークス海山に焦点を当て、変成岩類の鉱物組成、鉱物の化学組成について検討を行った。変成岩はすべて塩基性岩で、その原岩に角閃岩が認められた。角閃岩起源の変成岩は初期の変成鉱物として緑色角閃石、ルチル、緑レン石を含み、二次的変成鉱物としてマグネッシオリーベック閃石、緑レン石、パンペリー石が生じている。より深部で変成作用を受けた後比較的浅部で低温高圧変成作用を受けたと考えられる。この岩石とアルカリ角閃石とローソン石を含む火山岩起源の変成岩の全岩分析を行った。共に玄武岩質であるが、前者は後者に比べMgに富みFeとREEに乏しいことがわかった。北海道平取町額平川流域の神居古潭変成岩類の調査を2度にわたって実施し、調査地域に分布する岩石類が海底火山活動の産物であること、また、ピクライト質マグマの噴出を伴うものであったことを明らかにした。昨年度の段階で、NiやCo等の適合元素に富む特異な火砕岩を見出していたが、その形成にピクライト質マグマが大きく影響していることが明らかとなった。ピクライト質岩は、従来蛇紋岩と誤認されてきたが、火山岩としての特徴を有しており、鉱物種・鉱物組織・鉱物組成で明らかに区別することができる。大阪府立大学地域連携機構に新たに導入されたEPMA(JEOL JXA-8530F)について、ケイ酸塩鉱物の分析ができるように整備し、マリアナ前弧北部に位置する風神海山、雷神海山の蛇紋岩類の分析を行った。これにより、従来測定することのできなかったかんらん石、スピネル、蛇紋石鉱物の微量元素の分析が可能となった。風神海山、雷神海山の蛇紋岩類は、ハルツバージャイトが主体をなし、そのスピネル組成、構成鉱物種から、著しく枯渇したかんらん岩起源であることが分かった。淡路島南端部にある南あわじ市沼島のトレモライト岩について,再検討を行った。このトレモライト岩は蛇紋岩の交代作用により生じたもので、緑泥石に富む反応帯にモナザイトが認められる。CHIME法により交代作用の時期を特定するために、モナザイトを多く含む試料を選び出した。トレモラ閃石岩は、マリアナ前弧南チャモロ海山から回収された青色角閃石岩およびトレモラ閃石岩と同様の成因をもつと考えられることから、沼島のトレモラ閃石岩の成因を解明することで、沈み込み帯境界部の交代作用について総括的な議論を行う準備が整いつつある。

三内丸山遺跡出土の緑色磨製石斧の原石であることが明らかとなった北海道沙流郡平取町額平川流域のアオトラ石が、ピクライトと玄武岩の交代作用によって形成された可能性が確実となった。従来、アオトラ石はCr, Niに富むことから蛇紋岩塊中の捕獲岩と考えられてきたが、蛇紋岩ではなくピクライトが関与したことが明らかとなった。EPMA(JEOL840A+Oxford ISIS)が老朽化により、使えなくなった。そのため、新たに大学に設置されたEPMA(JEOL JXA-8530F)でケイ酸塩鉱物が分析できるようにするために多くの時間を使い、研究は遅れ気味である。幸い、分析のルーチン化が完成したので、近々遅れは取り戻せる予定である。大阪府立大学地域連携機構に2015年度に納入されたEPMA(JEOL JXA-8530F)を用いて、マリアナ前弧に位置する雷神海山、バベル海山、ツインピークス海山、南チャモロ海山を初めとする蛇紋岩海山の蛇紋岩類の分析を、特に初生かんらん石とそれを置換する蛇紋石に注目して行った。従来、蛇紋岩化作用により、かんらん石から蛇紋石が晶出する際に前者より後者の方がのFe/Mg比が低くなるため、過剰になったFeが磁鉄鉱をつくると考えられてきた。しかしながら、分析結果はこの考えと全く矛盾するもので、磁鉄鉱を伴うことが多いにも拘わらず蛇紋石の方がFeに富む傾向が明瞭に認められた。Feの起源を求めるため、他の初生鉱物(角閃石、単斜輝石、斜方輝石)を置換する蛇紋石においても、それらよりもFe/Mg比が高いという同様の傾向が顕著に認められた。蛇紋岩化作用は、地震学的や生物学の分野でも注目されているが、蛇紋岩化作用そのものの厳密な理解が不足している。蛇紋岩化作用における流体の起源、役割、性質について、Feの挙動に注目し、再検討を行う必要がある。さらに、南チャモロ海山から回収された青色片岩(砂粒シルト大)について調べた。これら変成岩は、珪質泥質岩と蛇紋岩との境界部で形成されたと考えられるが、主要構成鉱物である角閃石にはNi, Crが含まれておらず、ジルコンやチタナイトが認められた。そのことから蛇紋岩側ではなく珪質泥質岩側の反応帯の一部をなしていたと考えられる。マリアナ前弧域には、マントル由来の蛇紋岩化したかんらん岩からなる蛇紋岩海山が数多く分布する。構成する蛇紋岩類は、蛇紋石鉱物の低温相(リザダイト/クリソタイル)が形成された後で高温相(アンティゴライト)がかんらん石およびディオプサイドと共に形成され、さらにその後、再び蛇紋石鉱物の低温相が安定になるという温度履歴を持つ。一方、海山に捕獲岩として含まれる苦鉄質岩類は、その変成鉱物の共生関係と鉱物組織から,地下深部にもちこまれエクロジャイト相程度の変成作用を受けた後に藍閃石片岩相の低温部に相当する変成作用を受けている。両者の熱履歴は調和的で,沈み込み帯内部での岩石類の移動を反映したものと考えられる。北海道神居古潭帯において、2度調査を実施し、岩石類の産状を明らかにすることができた。蛇紋岩メランジュ体の南縁に分布する特異な緑色岩について、それがピクライト質マグマが関与していることでその特異性が説明できることが明らかとなった。北海道神居古潭帯の研究に多くの時間を割く結果となったため、次年度は、マリアナ蛇紋岩海山中の蛇紋岩と変成岩の解析に主力を注ぐ必要がある。マリアナ前弧の蛇紋岩海山のかんらん岩、変成岩類について、今後、その形成条件、給源の解析をより詳細に求めていく。最終的に、マリアナ前弧全域におけるかんらん岩類、高圧変成岩類の総括に繋げていく。三波川変成帯、神居古潭変成帯等、陸上の高圧変成帯からえられる情報を結びつけ、それらの地質学的な位置づけを明らかにする。変成岩岩石学マリアナ
発生分化・増殖・アポトーシスにおけるp38MAPKの役割

MAPKの一つであるp38は、ストレスや炎症性サイトカインによって活性化されアポトーシスに役割を果たす。しかし私はp38がアポトーシスばかりでなく造血系紳胞の増殖・発生・分化にも重要な役割を持つことを明らかにしてきた。その後、p38はα,β,γ,δのファミリーからなることが明らかになった。最近p38αノックアウト(KO)マウスが造血機能の異常により胎生致死となることが報告されたが、p38のファミリー間の機能の違い、及びそれらのターゲットや発生分化における分子レベルでの機能は全く不明のままである。そこで本研究ではp38αとp38βに焦点をあて、造血系の発生分化・細胞系列・機能特異性の決定メカニズムを解明することを目的とした。KOマウスで胎生致死となる個体では機能解析が困難であるが、KOマウスから作成した胚性幹細胞(ES細胞)のin vitro分化誘導系を用いれば機能解析が可能であり非常に有効な手段である。本年度は、まず、p38αKOマウスから新たにES細胞を作成してin vitro分化誘導系において、特に巨核球・血小板への成熟分化の過程を詳細に解析した。その結果、巨核球の分化成熟過程にみられる多倍体化や血小板放出(PPF形成)はほぼ正常であった。このことは、p38βがp38αの機能を代償している、かもしくは巨核球の分化成熟過程にはp38βが特異的に機能している可能性がある。そこで、さらにこのKOマウスES細胞由来巨核球及び正常マウスES細胞由来巨核球において、p38βを特異的にKOするためRNAi法を試みた。この手法は最近注目されている大変有効な方法であるが、哺乳動物系では一部の付着細胞について最近報告されたばかりで、ES細胞由来のしかも浮遊細胞である巨核球においては私も現時点では成功に至っておらず、来年度も引続き導入条件の確立を試みる。
リンパ球細胞における転写制御因子の解析

細胞内セカンドメッセンジャーcAMP濃度が上昇すると一群の遣伝子の転写が誘導されるが、これらの遣伝子はその転写制御領域に共通のDNA配列CRE(cAMP response element:TGACGTCA)を有している。一方CREはcAMP濃度に依存しない、いわゆる構成的な(constitutive)エンハンサー活性を持っている。これまでに多くのCRE結合蛋白質がcDNAクローニングにより同定されたが、機能的にはMontminyらにより同定されたCREBと私達が同定したCRE-BP1の2つに大別できることが明らかとなってきた。すべてのCRE結合蛋白質は塩基性アミノ酸クラスターとロイシンジッパー構造からなるDNA結合ドメイン(いわゆるB-ZIP構造)を持ち、ホモダイマー又は他の蛋白質とのヘテロダイマーとしてCRE配列に結合する。CREBは細胞内cAMP濃度の上昇により活性化されたPKAによりリン酸化され、転写活性化能が上昇する。従ってCREBはCREがcAMP依在性のエンハンサーとして機能するときに作用する転写因子である。一方私達が同定したCRE-BP1の活性はPKAにより制御されず、CREが構成的なエンハンサーとして機能するときに作用する。CRE-BP1の特長はホモダイマー又はc-JunとのヘテロダイマーとしてCREに結合することである。c-Junとc-FosはCRE結合蛋白質と同様にB-ZIP構造を持ち、c-Jun/c-Fosのヘテロダイマー(転写因子AP-1)はTRE(TPAresponse element:TGAGTCA)配列に結合する。従ってCRE-BP1はc-JunをCREに作用させるための役割を持っており、cAMP経路とTPA経路間のクロストークに重要な役割を果たしていることが明らかとなってきた。HIVの感染とそれに続く増殖はAIDS発症の重要な要因であり、今日感染者数の加速度的な増加につれて大きな社会問題となっている。HIVの増殖にはウイルスLTR内の転写調節領域が大変重要な役割を担っているが、これまで私達はHIVー1のエンハンサ-領域に特異的に結合して転写を促進する蛋白質を精製してきた。今回、新たにエンハンサ-の約60塩基対上流に結合する蛋白質HIVーTF1をヒトB細胞から精製した。HIVーTF1は39kdの分子量を持ち、in vitroの転写系においてエンハンサ-結合蛋白質と協調して転写を活性化することが明らかになったが、結合配列の比較からUSF蛋白質と相同性の高いものであることがわかった。また、ホスファタ-ゼで処理するとDNA結合能が著しく減少することから、何らかの蛋白質リン酸化酵素によるHIVーTF1の修飾がDNA結合に必須であると考えられる。ヒトT細胞由来のJurkat細胞を用いたin vivoの実験からもHIVーTF1の重要性が示されたので、今後リン酸化シグナル伝達経路との関連、プロモ-タの活性化の機構を解明していきたい。一方、私達はこれまでサウスウエスタン法を用いてHIVー1のエンハンサ-領域に特異的に結合する蛋白質HIVーEP1をコ-ドするcDNAを単離してきた。今回HIVーEP1のDNA結合ドメインであるメタルフィンガ-構造をコ-ドするDNA断片をプロ-ブに用いて、関連遺伝子HIVーEP2遺伝子を単離することができた。HIVーEP2は1833個のアミノ酸からなる蛋白質であり、Ser/Thrに富む領域、メタルフィンガ-構造からなる。DNA結合ドメイン、酸性アミノ酸クラスタ-の3つの部分でHIVーEP1と高い相同性を有している。また、HIVーEP2はT細胞由来のMoltー4細胞やある種の腫瘍細胞で強い発現が見られ、TPAとPHAによる刺激でHIVーEP1と同様に発現誘導が起こることが明らかになった。Tリンパ

球細胞に潜伏感染しているHIVの転写がある種の刺激により活性化されると,ウイルス産生,AIDS発症に至る。したがってこの転写誘導に関与する転写因子を解析し,メカニズムを理解することはAIDS発症を抑制するために有用であると考えられている。転写因子のうちもっとも重要なものはHIVエンハンサーに結合するNF-κBであり,その活性はTPAなどにより促進される。私達はHIVエンハンサーに結合する別の転写因子をcDNAクローニングにより同定し,HIV-EPと名付けた。HIV-EP遺伝子ファミリーは1,2,3,の3つのメンバーから成り,いずれもメタルフィンガー構造を含む約250kDの蛋白質である。現在までのところHIV-EPが明らかな転写活性化能を持つ知見は得られておらず,HIV-EPはNF-κBと拮抗するリプレッサーである可能性が示唆される。
ニューロンの刺激伝達に影響する化合物の化学合成

ニューロンの刺激伝達に影響する天然有機化合物のうちで、ピクロトキシニンの合成の完成をみた。すなわち、左旋性カルボンから出発し、それに対するフェニルセレノールのナトリウ塩の共役付加を鍵反応とする合成によって、5β-ヒドロキンカルボンを得た。このヒドロキンカルボンをビニルエーテル化し、ケトンカルボニルを水酸基に還元した後、加熱してクライゼン転位させて必要な位置に立体選択的にホルミルメチル基を導入した。この側鎖の炭素を1つ増炭してアセトニル基とした後、閉環させてピクロトキシニンの基本炭素骨格であるインデノン誘導体へと導いた。その後は、この炭素構造上にもう一炭素を加え、また環上の酸素官能基の変換によって、ラクトン酸素、水酸基、エポキン基等の導入を行った。この変換過程ではフェニルセレノールのナトリウム塩を試薬とするエポキシクトンの効率的なβ-ヒドロキンラトンへの新変換反応を見出し、それが効果的に使用されている。このようにして約30段階でカルボンをピクロトキシニンへと変換した。さらに前述、鍵中間体であるインデノン誘導体は他のピクロトキサノイド合成の前駆体としても使いうるので、ピクロトキシニン以外のピクロトキサノイドの合成も検討している。
矯正力に対するラット切歯歯根膜内機械的受容器の形態変化に関する免疫組織化学的研究

歯根膜線維における機械的受容器の特殊神経終末であるRuffini様神経について、神経細胞の比較的太い神経線維、さらに特殊神経終末をも染色するProtein Gene Product9.5(PGP9.5)を用いた組織化学的研究によりその神経分布が明らかになりつつある。本研究ではラット上顎切歯に矯正力を加え、切歯歯根膜内に分布する機械的受容器がどのような動態変化を示すかを検索した。実験材料として4050日齢の雄性ウイスター系ラットを用いた。実験群においては上記ラットの上顎切歯に幅5ミリのバンドを作成し0.014インチのステンレススチールワイヤーでスプリングを作成後、バンドにろう着。ラットを泡水クロラールにて腹腔内麻酔後約30グラム重の切歯離開力が作用するようスプリングを調整し矯正用スーパーボンドにて歯頚部より5ミリの部位にバンドを合着した。またSham群においてはスプリングをアクチベートせず、矯正力が加わらないようにした状態でバンドを切歯に装着した。両群とも装置装着後12時間、1日、2日目に泡水クロラールにて腹腔内麻酔後、左心室より0.1Mのリン酸で緩衝した4%パラホルムアルデヒド固定液にて灌流固定後、同液にて24時間浸漬固定した。その後、上顎骨を取り出し、10%EDTAにて34週約4°Cで脱灰を行った。脱灰後、30%シュークロース含リン酸塩溶液に24時間浸漬し凍結ミクロトームにて厚さ50ミクロンの連続切片を作成した。その後、PGP9.5に対するポリクロナール抗体を利用してアビチン-ビオチンコンプレックス法により、免疫染色を施し検鏡した。その結果、本方法はWaldo法にくらべ力の作用が弱く、より臨床的な矯正力に近いモデルであることが判明した。また、12時間後においてはRuffini様神経に変化がみられなかったものの1日および2日目において神経終末に変化が認められた。
日本産渦鞭毛藻プロトセラチュウム・レティキュラトゥムの天然と培養での形態変異

温度と塩分の異なる条件でProtoceratium reticulatumシストの発芽を試みたが成功せず,この種は温度と塩分の異なる条件に順応不可能であったと考えられた.このために,発芽実験用標本は形態的に類似した隠蔽種(cryptospecies)ではないかとの仮説の基に,天然シストを詳細に観察し,かつP.reticulatumのプランクトン細胞とシストのrDNA塩基配列を調査した.その結果,プランクトン細胞とシストの対応関係を得た.この実験結果は従前のP.reticulatumプランクトン細胞とシスト対応関係を支持していた.すなわちOperculodiniun centrocarpum sesuWallとされてきたシストはP.reticulatumであった.カナダ(東部:バフィン湾,西部:バンクーバー島)(日本;北海道,九州),デンマーク;カテガット)など異なる地点から採取したプランクトン単細胞と単一のシストのSSU,ITSおよびLSU塩基配列を明らかにした.その結果,ITS領域では配列に顕著な違いがある事が判明した.これが隠蔽種であるのか否かが今後の検討課題となった.北太平洋表層堆積物中のP.reticulatumシストの刺の長さの変化を詳細に計測した.平均刺の長さは毎年の海水密度と逆相関を示した:σt annual=1000+(-0.8476 x average process length+29.094)(R^2=0.84). Effingham Inlet in BritishColumbiaでのセディメント・トラップ試料では海水密度変化と平均プロセス長さの変化は北太平洋と同じ関係を示した.バルト海-スカゲラク海峡地域では平均の刺の長さ変化は海水密度と以下の関係式で示された.σt annual=1000+(3.5184 x average process length-6.686)(R^2=0.87).それぞれの関係式は一致しなかった.それは海水密度や栄養塩環境に地域特性があり,それに適応した隠蔽種が存在するか,あるいは他の未知の環境要因が寄与している可能性があるのかが今後の検討課題として残された.とりわけ豊産した大型球形で,無色のシスト壁を持ち,多数のtapering突起を備えた生シストについて,発芽培養実験を行ったところゴニオラックス類Spiraulaxと同定できる遊泳細胞を得た.このシストはこれまでに東南アジアの熱帯から亜熱帯海域の表層堆積物からしばしば検出されていたが,その遊泳細胞は不明であった.採取した試料に含まれていたLingulodinium machaerophorumやO.centrocarpumの表面装飾物である刺の長さを測定したところ,それらの長さは日本周辺での他海域のそれと比較すると短いことから,刺の長さそのものは従来から考えられていた塩分のみに影響されるのではなく,水温も規制要素の一つであると推察できた.温度と塩分の異なる条件でProtoceratium reticulatumシストの発芽を試みたが成功せず,この種は温度と塩分の異なる条件に順応不可能であったと考えられた.このために,発芽実験用標本は形態的に類似した隠蔽種(cryptospecies)ではないかとの仮説の基に,天然シストを詳細に観察し,かつP.reticulatumのプランクトン細胞とシストのrDNA塩基配列を調査した.その結果,プランクトン細胞とシストの対応関係を得た.この実験結果は従前のP.reticulatumプランクトン細胞とシスト対応関係を支持していた.すなわちOperculodiniun centrocarpum sesuWallとされてきたシストはP.reticulatumであった.カナダ(東部:バフィン湾,西部:バンクーバー島)(日本;北海道,九州),デンマーク;カテガット)など異なる地点から採取したプランクトン単細胞と単一のシストのSSU,ITSおよびLSU塩基配列を明らかにした.その結果,ITS領域では配列に顕著な違いがある事が判明した.これが隠蔽種であるのか否かが今後の検討課題となった.北太平洋表層堆積物中のP.reticulatumシストの刺の長さの変化を詳細に計測した.平均刺の長さは毎年の海水密度と逆相関を示した:σt annual=1000+(-0.8476 x average process length+29.094)(R^2=0.84). Effingham Inlet in BritishColumbiaでのセディメント・トラップ試料では海水密度変化と平均プロセス長さの変化は北太平洋と同じ関係を示した.バルト海-スカゲラク海峡地域では平均の刺の長さ変化は海水密度と以下の関係式で示された.σt annual=1000+(3.5184 x average process length-6.686)(R^2=0.87).それぞれの関係式は一致しなかった.それは海水密度や栄養塩環境に地域特性があり,それに適応した隠蔽種が存在するか,あるいは他の未知の環境要因が寄与している可能性があるのかが今後の検討課題として残された.
遺伝性色素異常症病因遺伝子の機能の解明

稀な疾患である遺伝性色素異常症症例の集積に努め、100症例以上の遺伝子診断を行ない、遺伝子変異型と臨床症状との関連性を明らかにし、その結果をデータベース化した。また、遺伝性対側性色素異常症(DSH)の病態解析を行い、(1)DSH発症にウイルス感染の関係を強く示唆する結果を得た。(2)DSHの患者では健常人に比べIFN-1の下流に位置するいくつかの遺伝子の発現が過剰になっていることを示した。国際的な遺伝性色素異常症遺伝子解析センター的な機能を継続して行った。その結果、国内から遺伝性対側性色素異常症15症例、眼皮膚白皮症22症例、Waadenburg症候群疑い2症例の遺伝子診断を行なった。その結果、一部については既に遺伝子変異が明らかとなっている。遺伝性対側性色素異常症では5例がミスセンス変異であり、その部位はいずれも酵素活性領域に局在していた。これは従来の報告を支持するものである。Waadenburg症候群疑い2症例についてはいずれもSOX10遺伝子に変異が見つかった。原因遺伝子が未だ明らかになっていない症例については現在も解析中である。日本人でこれまでに報告の無い眼皮膚白皮症3型症例を、以前に我々は明らかにした。その症例において認められたミスセンス変異が病的であるかどうかの確認実験を行なった。まず、正常ヒトTYRP1cDNAをクローニングし(wild cDNA)、その中に変異を導入し(mutant cDNA)した。そして、双方のcDNAを哺乳類発現ベクターに組み込み、OCA3のモデルマウスより確立されたmelan-bにtransfectし、発現させた。その後、安定発現株を得ることにより、導入効率の低さを補った。こうして得られたいくつかの安定発現株の細胞のメラニン合成量を測定し、変異cDNAのメラニン合成能を正常タイプのcDNAのメラニン合成能と比較検討したところ、本症例に認められた変異は病的であることが明らかになった。我々は以前より、日本人のみならず、海外からも広く眼皮膚白皮症(OCA)症例や遺伝性対側性色素常症(DSH)症例の遺伝子診断依頼に対して対応してきた。その結果、下記の結果が得られた。(1)OCAの遺伝子診断:これまでに当大学にコンサルトされた85症例の解析を行なった。その結果、1型13例(15%)、2型4例(5%)、3型1例(1%)、4型12例(14%)、HPS1型13例(15%)、HPS4型1例(1%)、不明例41例(48%)の結果であった。軽症の症例が多く、依然として原因遺伝子不明例が多い。(2)OCA3症例の遺伝子診断:症例は1歳女児。生下時より頭髪が金色、褐色の眉毛と虹彩、両親に比べ白色の皮膚を呈した。磐部には小さいながらも蒙古斑が認められた。他の症状としては、眼振はなく、わずかに日焼けによる色素沈着も認め、OCAとしては軽症であった。OCA3の原因遺伝子であるTYRP1にc. 88T>C, p. C30Rとc .1100delG, p. 367fsX384の変異を認めた。これらはいずれも新規遺伝子変異であった。後者のフレームシフトを伴う変異については明らかに病的変異であるが、前者のミスセンス変異についてはメラニン合成機能消失について明らかでなかったため、OCA3型モデルマウスより樹立した培養メラノサイトを使用してin vitroでメラニン合成活性能の消失を確認した。以上より、本症例をOCA3のcompoundheterozygoteと診断した。日本人で初めての報告である。(3)遺伝性対側性色素異常症症例の遺伝子診断を行ない、16種類の新規遺伝子変異を明らかにした。A)遺伝性色素異常症の遺伝子診断を行った。眼皮膚白皮症(OCA)についてはこれまでに101人の患者を集積し、遺伝子診断により下記のようなサブタイプを明らかにした。OCA1 17人(16.8%), OCA2 7人(6.9%), OCA3 2人(2.0%), OCA4 17人(16.8%),HPS1 16人(15.9%), HPS4 2人(2.0%),原因遺伝子不明40人(39.6%)。OCA1とOCA4、ならびにHPS1の頻度が高いことはこれまでの報告通りであるが、OCA3やHPS4が複数例明らかになったことが注目される。また、原因遺伝子不明例が40%存在することから、上記以外の未知の遺伝子が日本人眼皮膚白皮症の主要遺伝子の1つであることが示唆される。B)遺伝性対側性色素異常症に関しては、43例の患者試料の集積を行い、うち31名に原因遺伝子であるADAR1遺伝子に病的変異を認めた。一方で、12名には変異を認めなかった。これらの症例の臨床症状はいずれも非典型例であった。C)

遺伝性対側性色素異常症(DSH)の病態解析については、メラノーマ細胞で安定ノックダウン細胞を樹立し、各種ウイルス(計18種類)に関する感受性を調べた。その結果、ある種のウイルスに対して、ノックダウン細胞でコントロール細胞に比べ感受性が高くなる現象が認められた。現在その詳細を検討中である。DSH発症に関する病態とウイルス感染の関係を強く示唆するものである。D)DSHの病態に関連して、原因遺伝子であるADAR1はINF-1の反応を抑制する機能が報告されてきたが、DSHの患者では健常人に比べINF-1の反応が大きく影響されており、INF-1の下流に位置するいくつかの遺伝子の発現が過剰になっていることを示した。眼皮膚白皮症や遺伝性対側性色素異常症症例の集積は順調であり、遺伝子診断も順調に進んでいる。今回日本人で初めて見つかった眼皮膚白皮症3型についての解析も問題なく終了した。24年度が最終年度であるため、記入しない。遺伝子色素異常症の遺伝子診断をさらに組織的に行なっていく共に、広く日本中に周知していく。
多角化ディスカウントの実証研究-日本の大規模企業の財務報告とガバナンスのあり方

国内外の資本市場において、(A)事業多角化(製商品・サービス分野の多角化)および(B)地域多角化(生産・販売拠点のグローバル化)が進展しているほど、株価が安値に陥っている、という現象が観察されている。本研究の目的は、(a)多角化ディスカウントは、実際、生じているかどうか、(b)いかなることが原因となっているかどうか、(c)多角化ディスカウントに陥っている企業群は、どのような会計情報開示行動あるいは経営行動をとるべきかどうかという三つの課題を実証的に明らかにすることである。本研究の結果、第一に(a)については、両多角化ともディスカウント評価されていること、第二に(b)については、多角化企業は、情報の非対称性が大きいためにディスカウントされていること、さらに第三に(c)については、質の高い会計情報を提供することによってディスカウント評価は緩和されるものの、非関連多角化など過度に多角化が進展している場合には情報開示効果は見られないことなどを発見した。国内外の資本市場において,(A)多角化企業(事業の多角化が進展している企業群)および(B)国際化企業(事業の国際化が進展している企業群)ほど,株価が安値に陥っている,という現象が観察されている。かかる現象は,多角化ディスカウント(またはコングロマリット・ディスカウント)と称され,機関投資家およびアナリスト等,投資専門家の間で共有されている1つの見方である。本研究の目的は,(a)多角化ディスカウントは,大量の観察データに照らして,本当に生じているのかどうか,(b)多角化ディスカウントは,どのようなメカニズムに従って,生じるものなのかどうか,(c)多角化ディスカウントに陥っている企業群は,どのような会計情報開示行動あるいは経営行動をとるべきかどうかという3つの課題を実証的に明らかにすることである。本年度は,これらの課題を解明するに際して,米国等海外および日本における先行研究を網羅的に調査した。その結果,上記(A)の研究は日本を含め相当程度蓄積されているものの,(B)の研究は十分蓄積されておらず,日本には全く存在していないことが明らかとなった。これらのことを踏まえ,次年度には,上記(A)および(B)の研究を網羅した実証研究を実施する。また,本研究では,セグメント情報の有用性が大きく関係していることから,日本のセグメント情報の有用性を検証し,それを支持する結果を得た。国内外の資本市場において、(A)事業多角化(製商品・サービス分野の多角化)および(B)事業多角化(生産・販売拠点のグローバル化)が進展しているほど、株価が安値に陥っている,という現象が観察されている。本研究の目的は、(a)多角化ディスカウントは、実際、生じているかどうか、(b)いかなることが原因となっているかどうか、(c)多角化ディスカウントに陥っている企業群は,どのような会計情報開示行動あるいは経営行動をとるべきかどうかという3つの課題を実証的に明らかにすることである。本年度は、日本の上場企業(2000年2009年)のデータに基づいて、これらの点について、実証した。第一に、(a)については、両多角化ともディスカウント評価されていることを発見した。第二に、(b)については、多角化企業は、情報の非対称性が大きいためにディスカウントされていることを発見した。第三に(c)については、質の高い会計情報を提供することによってディスカウント評価は緩和されるものの、非関連多角化など、過度に多角化が進展している場合には情報開示効果は見られないことを発見した。これらの発見について、学会発表を行った。次年度、論文として発表する予定である。また、本研究では、事業構造の複雑性という点で、SPE(特別目的事業体)の連結および開示問題も関連していることから、それらの研究発表も行った。国内外の資本市場において、(A)事業多角化(製商品・サービス分野の多角化)および(B)地域多角化(生産・販売拠点のグローバル化)が進展しているほど、企業価値が低くなっている、という現象が観察されている。かかる現象は、多角化ディスカウントと称され、機関投資家およびアナリスト等、投資専門家の間で共有されている一つの見方である。本研究の目的は、(a)多角化ディスカウントは、実際、生じているかどうか、(b)いかなることが原因となっているかどうか、(c)多角化ディスカウントに陥っている企業群は、どのような会計情報開示行動あるいは経営行動をとるべきかどうか、という三つの課題を実証的に明らかにすることである。

本年度は、これらの点に関する研究成果を論文として公表した。発見事項は、次のとおりである。第一に、上記(a)については、両多角化ともディスカウント評価されていることを発見した。第二に、(b)については、多角化企業は、情報の非対称性が大きいためにディスカウントされていることを発見した。第三に(c)については、質の高い会計情報を提供することによってディスカウント評価は緩和されるものの、非関連多角化など、過度に多角化が進展している場合には情報開示効果は見られないことを発見した。また、本研究では、事業構造の複雑性という点で、連結利益に対する市場評価も関連していることから、学会発表および論文を発表した。国内外の資本市場において、(A)事業多角化(製商品・サービス分野の多角化)および(B)事業多角化(生産・販売拠点のグローバル化)が進展しているほど、株価が安値に陥っている,という現象が観察されている。かかる現象は,多角化ディスカウント(またはコングロマリット・ディスカウント)と称され,機関投資家およびアナリスト等,投資専門家の間で共有されている1つの見方である。本研究の目的は、(a)多角化ディスカウントは、実際、生じているかどうか、(b)いかなることが原因となっているかどうか、(c)多角化ディスカウントに陥っている企業群は,どのような会計情報開示行動あるいは経営行動をとるべきかどうかという3つの課題を実証的に明らかにすることである。すでに、本研究では、第一に上記(a)については両多角化ともディスカウント評価されていること、第二に(b)については、多角化企業は情報の非対称性が大きいためにディスカウントされていること、第三に(c)については、質の高い会計情報を提供することによってディスカウント評価は緩和されるものの、非関連多角化など過度に多角化が進展している場合には情報開示効果は見られないこと、を発見し論文として発表している。本年度は、上記(a)および(b)について別の視角から検証を重ね、これまでの検証結果が頑健であることを確認した。その成果を論文として執筆し、査読誌に掲載された。また、本研究課題に関連することとして、2010年3月決算期以降、日本企業のセグメント情報が刷新されている。本年度はその開示実態について計量的に把握し、その成果を論文としてまとめ、学会および雑誌において発表した。(a)多角化ディスカウントは、実際、生じているかどうか、(b)いかなることが原因となっているかどうか、(c)多角化ディスカウントに陥っている企業群はどのような会計情報開示行動あるいは経営行動をとるべきかどうか、という当初の研究課題についてほぼ解明できており、その研究成果の論文作成および発表が一部残るという状況にある。24年度が最終年度であるため、記入しない。研究最終年度であるため、まだ公表が終了していない研究成果について、専門学術誌において発表する予定である。また、研究計画当初は予定していなかったが、セグメント情報開示基準が改訂されたため、多角化ディスカウントにどのような効果を及ぼしているかについて追加的に検証する予定である。
非行化した被虐待少年の神経学的リカバリーメカニズムの解明

研究協力施設の1年間の入所者は約30名であり、順調に入園時と退園時のデータを集積している。MRI撮影施設との協力関係も良好であり、診察医および撮影技師も対象児童の特性をよく理解した上で、検査に当たってもらっている。2018年度には、全国児童自立支援施設研究大会で基調講演を行い、研究の趣旨や目的、方法等について概説した上で、研究結果の一部を報告した。研究協力施設で得られたデータの部分的な解析であるが、入園時と比較して退園時にはIQが平均して20程度上昇した。またCBCLにおける行動と情緒の評価でも、顕著な改善が認められている。今後はMRI画像データとこれらの認知的・行動的・心理的完全との関連を精査していく。これまでの中間解析によると退園時のIQは、入園時と比較して、約20以上も上昇していた。またCBCL(子どもの行動チェックリスト)による評価においても、顕著な改善が認められた。さらに、退園した児童(実際には中学卒業と同時に退園することが多い)らの予後は概ね良好であり、再犯率も低レベルに落ち着いている。このような周辺的状況からも、児童自立支援施設の矯正教育効果は極めて高いことが推察される。これまでには、特に夫婦小舎制度における矯正教育効果は実証的に検討されることがほとんどなかったが、少年らの心理、認知、行動、神経学的評価を組み合わせて矯正教育効果を検討することは画期的であると思われる。一層のデータ蓄積が望まれる。2018年度はやや入所者が少なかったが、丁寧にデータはとり続けており、年に1,2回程度、施設側との研修を通して、研究結果のフィードバックを行っている。MRIを実施する病院およびスタッフとの連携により、順調にデータが蓄積されている。その解析はこれからであり、脳の体積的変化と他の行動指標との関連を分析していくこととなる。最近の30年間、少年非行は急激に減少傾向を示しており、約80%も低下している。30年前でも国際的に見れば非行率は極めて小さかったことを踏まえると、これは驚くべき象である。この要因として、家庭教育や学校教育の質の高さは当然として、ハイリスクな子ども達を教育する、矯正教育機関が果たしてきた役割に目を向ける必要がある。しかしながら、矯正教育の効果評価研究は、これまでに体系的なエビデンスを蓄積してきたとは言えない。入所時と退所時の行動、心理、情緒、学力の変化など、包括的な矯正教育の効果評価研究はこれまでに十分実施されてこなかった。今回本研究では、入所時と退所時の行動、心理、情緒、学力の変化などに加えて、生物学的な変化、すなわちMRI撮影を通じて脳の物理的な変容を評価している。今後、行動等の変化と脳の物理的変容の関連について、精査していく必要がある。特に本研究対象施設の入所者は、ほぼ全員が広い意味での被虐待児であり、入所して安定的な人間関係を構築しつつ、実質的にトラウマの治療も行っているといってよい。夫婦小舎制の施設での矯正教育の効果評価研究は極めてインパクトがあり、世界的にも貴重である。今後更に本研究を発展させ、少年院でも同様な研究が可能か、探っていく必要がある。本研究の重要性は、非行化した少年(多くは不適切な養育を受けてきた)らが、夫婦小舎制度を採用している児童自立支援施設に入所し、生活しつつ非行性を除去する中で、どのような心理的、行動的、神経学的変容を示すのかを検証することである。本研究の目的は、「入所児童・少年」が疑似家族的な環境で学習し、生活し、また社会生活を営む上で、どのような改善を示すのかを検証することである。日本の矯正教育の効果検証研究としては極めてユニークかつ重要であると考えられる。対象施設との十分な連携および協力を基盤として、かつ対象少年とその保護者らへの十分な説明を実施した上で、以下のような調査を実施している。入所児童、少年らに対して、入所時と退所時に1CBCL(子どもの行動チェックリスト)2各心理尺度(自尊感情尺度、うつ尺度、解離得点など)3精神医学的構造面接(MINI-KID)4構造的MRI撮影このような評価を通して、子どもたちの施設入所期間中の、行動的、心理的、精神医学的、および神経学的変容を評価する。我々の仮説とは、「疑似家族的な環境で生活した子どもたちは、学習・運動・社会性・健康面において劇的な改善を示す」というものである。これらのことを検証するために、多くの質問紙や検査を実施し、この施設の矯正教育効果を検証する。これまでにこのような多面的評価を用いた研究は見当たらず、またMRIを使用した、矯正教育効果評価研究も極めて稀である。よってこれらのことからも本研究の重要性が明瞭である。研究協力施設との協力態勢は万全であり、入所時および退所時の心理検査データは蓄積されている。また同意のとれた少年に対するMRI撮影のデータ収集も順調に進んでいる。今年の3月には、研究協力施設で職員研修を行った。その内容は、本研究データの中間報告であり、分析された結果の一部が報告された。職員間で特に注目されたのは、入所児童・少年は平均して約1年施設で生活するが、IQが平均して20上昇したことである。これについては相当数の対象児の分析から明瞭になっており、この施設の矯正教育効果を示すものとして注目される。

当然ながら施設職員や、寮担当職員らも驚くと共に、自信を持たれたようであった。平成29年度には、この研究領域の研究者らと、ストックホルム犯罪学会でシンポジウムを実施する予定である。また国内学会でもシンポジウムを開催する予定であり、MRIの結果を含め、研究結果を還元していく。研究協力施設の1年間の入所者は約30名であり、順調に入園時と退園時のデータを集積している。MRI撮影施設との協力関係も良好であり、診察医および撮影技師も対象児童の特性をよく理解した上で、検査に当たってもらっている。2017年度はストックホルム犯罪学会でシンポジウムを開催し、中間発表を行った。その際、児童自立支援施設関係者らとそれぞれの矯正教育効果について報告を行い、出席者らと討論した。研究協力施設で得られたデータの部分的な解析であるが、入園時と比較して退園時にはIQが平均して20程度上昇した。またCBCLにおける行動と情緒の評価でも、顕著な改善が認められている。今後はMRI画像データとこれらの認知的・行動的・心理的完全との関連を精査していく。これまでの中間解析によると退園時のIQは、入園時と比較して、約20以上も上昇していた。またCBCL(子どもの行動チェックリスト)による評価においても、顕著な改善が認められた。さらに、退園した児童(実際には中学卒業と同時に退園することが多い)らの予後は概ね良好であり、再犯率も低レベルに落ち着いている。このような周辺的状況からも、児童自立支援施設の矯正教育効果は極めて高いことが推察される。これまでには、特に夫婦小舎制度における矯正教育効果は実証的に検討されることがほとんどなかったが、少年らの心理、認知、行動、神経学的評価を組み合わせて矯正教育効果を検討することは画期的であると思われる。一層のデータ蓄積が望まれる。研究協力機関と良好な関係で推進できている。また施設の入園時と退園時のデータも揃いつつある。MRI撮影に関しては全員ではないが、堅実に進めている。2018年度には、全国児童自立支援施設研究大会で基調講演を行い、研究の趣旨や目的、方法等について概説した上で、研究結果の一部を報告した。
Six遺伝子群による発生プログラムと遺伝子病の病態

本研究では、Six遺伝子群の個体発生における役割と遺伝子ネットワークの解明及び筋緊張性ジストロフィー(DM1)の病態への関わりを明らかにするために、Six遺伝子欠損マウスの解析、Sixタンパク質の標的遺伝子のスクリーニングおよびSixの協同作用因子であるEyaとDachの分子機能の解析を行った。1 Six4/Six5遺伝子二重変異マウスホモ個体のうち約半数は生後数時間以内に死亡するが、形態的組織学的異常は見いだせなかった。Six1遺伝子欠損ホモマウスは生直後に死亡し、内耳、鼻、腎臓、胸腺の形成が著しく損なわれる。いずれの器官においても胎生10-11日の時期から異常が見られ、Six1遺伝子がこれらの器官の形成に必須の役割を果たすことが示唆された。2 Six5タンパク質の標的遺伝子として、中胚葉分化に伴って発現する転写因子やシグナル分子及びそのリセプター、また神経系で発現する転写因子やシグナル分子、さらに神経伝達物質の輸送体や受容体遺伝子などがP19細胞で同定された。筋芽細胞では、myogeninやミオシン、トロポニン、アセチルコリン受容体等の骨格筋特異的な遺伝子が多く同定された。レンズ上皮細胞においては、白内障との因果関係が直接的に証明された遺伝子も候補として同定された。これらの標的遺伝子の発現異常を介してDM1の諸症状が引き起こされる可能性が強く示唆された。3 Gal4-Eyaタンパク質とDach1タンパク質による協同的な転写活性化にはCBPが関与することを明らかにした。CBPはDach1およびGAL4-Eya3両者の存在下にクロマチンに結合した。また、Dach1タンパク質が、GAL4-Eya3タンパク質の存否にかかわらず、クロマチンおよび裸のDNAにも結合することを見いだした。クロマチンに対する結合の方がより安定であった。さらに、Dach1のDD1ドメインがDNA結合能を担うことを明らかにした。(1)Six4遺伝子欠損マウスを用いて、Six4遺伝子の詳細な発現部位を明らかにした。脳神経節や骨格筋での顕著な発現が見られ、Six1遺伝子の発現パターンときわめてよく似ていることがわかった。Six4遺伝子欠損ホモ個体の発生における形態異常を精査したが、異常は見つからなかった。このことは、他のSix遺伝子との機能的な重複によると考えられる。既に作成したSix4/Six5二重変異マウスは生後数時間以内に死亡する個体が半数以上現れる。死亡の原因を検討中である。一方、Six4/Six1二重変異マウスはES細胞が単離でき、現在キメラマウスを作成中である。(2)VP16-Six5融合蛋白質を発現する組み換えアデノウイルスを構築し、同ウイルスの感染によって発現誘導の見られる遺伝子をマイクロアレーにてスクリーニングした。P19細胞では、シグナル分子(Igf2,Igfbp5、Wnt11、Nodal)、転写因子(Mdfi、Six2およびSix5)、アクソンガイダンス分子(Sema3C、Sema4C)等の遺伝子の発現が数倍活性化された。これらのうち、Igf2やIgfbp5は筋肉の分化や増殖に密接にかかわることが知られており、同遺伝子の発現異常を介して、筋緊張性ジストロフィーの発症に至る可能性が考えられた。(4)Six4上流8Kbpを有するトランスジェニックマウスの発現は概ね内在性のSix4の発現と一致するので、同領域内に重要な発現調節エレメントの存在が示唆された。本研究では、筋形成におけるSix遺伝子の役割と遺伝子ネットワークの解明及びDMの病態への関わりを明らかにすることを目的とする。