hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
鎌倉時代経絵の研究

鎌倉時代における経絵展開の状況全体を把握し、その中で二つの特徴的な傾向を見出した。とくにCleveland美術館とNewYorkPublicLibrary所蔵の紺紙金字法華経扉絵が示す、中世東アジアにおける仏教美術の伝播と受容のあり方が注目され、南宋・高麗・日本それぞれの問題と相互関係について重要な情報が得られた。経絵は、小さなジャンルながらこうした複数の地域や時代にまたがる転写関係を最も良く映し出すものとして、美術史や仏教史の上できわめて重要な意義を持っことを明らかにし得た。1.鎌倉時代の経絵に関する基礎的な情報の収集整理につとめ、現存作例の所在確認とデータの収集を行った。2.研究の基盤となる、平安時代および同時期の中国朝鮮の経絵に関する情報の収集と整理についても積極的に行った。特に時代によって写経の対象や契機に差異があったのかどうかについて史料による分析を進めている。3.申請に当たって重要な目標とした、既に申請者が過去の調査で作成収集済みの東アジア各国の経絵2万点におよぶ写真資料(フィルム・紙焼き)の整理とその画像データ入力を重点的に行い。本研究補助金で購入し得た処理能力に優れたPCとスキャナ等を駆使して、ほぼ8割方のデータ入力を終えることができた。この画像データベースが構築されることによって、比較検討の作業が飛躍的に容易になり、分析の精度と確度が格段に高まることは確実である。また、そのデータを逐次整理するとともに、それらの比較検討作業を進めているが、膨大なデータでもあり残り2カ年間の研究が必須である。4.主要な調査対象である経絵作例について、合衆国のNew York Public Libraryおよび奈良国立博物館などで調査撮影を実施した。前者ではあいにく展示の都合などのため予定した全資料の調査は行い得なかったが、後者では十分な時間をかけて重要な作例の検討を進めることができた。しかし、国内外ともにさらに調査が必要な作例の存在が明らかとなり、19年度に実施する予定である。5.鎌倉時代の経絵と不可分な関係にある高麗の経絵に関して、徹底した検討と分析を行い、彼我の違いとそれぞれの特質について十分な知見と今後の展望が得られ、その成果は19年4月に韓国仏教美術史学会春季大会の招待講演で発表した。19年度は、18年度に引き続き既収集写真資料の画像データベース化を進める作業を継続し、その過程でいくつかの課題を見出し、検討と分析を行った。平安時代から継続する傾向と、12世紀平安時代末から活発となる、東アジア中国朝鮮との交渉がやはり大きな影響をもたらしていることを再確認しつつ、その中で何が主要な問題なのかを明らかにするよう検討してきている。そして、その一端を2007年4月に韓国通度寺聖宝博物館で開催された第9回韓国佛教美術史学会での招待講演において発表し、韓国の研究者たちと積極的な意見交換を行った。また、二つの重要な海外調査を実施した。一つは韓国に現存する経絵を集大成した「経典変相展」がソウル市国立中央博物館で開催されたため、鎌倉時代経絵の展開に大きな関係を持つ高麗経を集中して調査する好機として、同博物館に赴き高麗経展開の概要を十分に把握し得たことは、本研究にとってきわめて有意義だった。同じく韓国では仏教中央博物館を始めとするいくつもの機関で高麗経の調査を実施することができ、資料の充実をはかることができた。あわせて、韓国の研究者と情報交換や研究上の意見交換を交わすことができ、その点でもこの調査は大きな成果をあげられた。二つ目の海外調査は、本研究の中心課題だった、合衆国Cleveland美術館およびNew York Public Library Spencer Collection所蔵の紺紙金字法華経の詳細な調査である。両館担当者の全面的な協力を得て、鎌倉時代経絵の中で最優作かつ最も複雑な背景を持つ、この2巻の紺紙金字法華経をほぼ同時に全巻詳細に調査することができ、研究を大きく進展させる多数の情報が得られた。特にCleveland美術館本はこれまで宋もしくは高麗の写経として扱われ、海外の多くの出版物でもそう記述されてきたが、明らかに日本で制作されたものであることを確認した。また、そうした比定が行われがちだった大陸風の絵画様式がなぜ意図的に行われたのか、そこにこそ鎌倉時代経絵を考える最大のポイントが存在することを確かめ得たことは、この調査を本研究の中心に据えた意図に十分応えるものだった。今後は、こうした視点によって検討を進めるとともに、鎌倉時代の一般の経絵の展開をももう一度総括して、東アジア世界における経絵の展開と伝播交渉の様相を明確にしたい。20年度は最終年度に当たるため、これまで国内および国外で実地調査してきたデータの整理と画像資料の分析を中心に行い、あわせて過去に申請者が作成した大量のアナログ画像データのデジタル化を進めた。その結果、本研究が目的としている13世紀の日本経絵の様態とその特徴的な問題を浮かび上がらせることが可能になり、特に東アジア各国の経絵との比較研究を進める上で大いに進捗が見られた。

具体的には、一見自律的に展開していると見られていた日本の経絵が平安時代中すでに東アジアの経絵から相当な影響を受けていたこと、さらに12世紀の経絵には東アジアの経絵からの直接的な影響が反映していることを確認した。13世紀鎌倉時代の経絵では二つの展開があったことを最終的に確認できた。一つは、12世紀に完成した経絵の定型的表現が形式的に反復されていたことで、紺紙金字経にのみ見られるものでなく、慈光寺経や長谷寺経など装飾経にも共通してみられるものだが、装飾経の場合はミニアチュールとしての効果が期待できるため、こうした傾向はマイナスに働かなかった。もう一つは、これまでの研究で注目されることのなかった、日本経絵が東アジア経絵と直接リンクしていたことである。具体的には請来された宋の版本および金字本写経に付された経典変相を直模する行為で、12世紀には外面的模写だったこの行為に積極的な意義を見出すことによって新たな表現を獲得している。しかし、その結これら経絵は国籍不明な状態となり、各地に残るそれらについて北宋や高麗などとさまざまな誤った比定がなされていることの問題を詳細に分析している。
癌抑制遺伝子産物APCによるG蛋白質の制御機構の解析

Asef2と、Asef2の結合蛋白質としてこれまでに同定したSpinophilin、およびAPCの機能を解析するため、三者が肝細胞増殖因子(HGF)シグナルの下流で働いている可能性を検討した。免疫染色により、Asef2、Spinophilin、APCのHeLa細胞における細胞内局在を検討した。その結果、Asef2は細胞質に局在が観察され、Spinophilinは細胞質や細胞膜に局在が観察され、APCや細胞質や細胞膜の突起に局在が観察された。HGFにより細胞を刺激すると、Asef2、Spinophilin、APCはHGF刺激により誘導されるラメリポディアやラッフル膜に濃縮し、三者は共局在することがわかった。また、RNAiによりAsef2、Spinophilin、APCの発現をそれぞれ抑制すると、HGF依存的な細胞運動が抑制された。また、Spinophilinの発現を抑制すると、Asef2の活性型変異体の発現により形成されるフィロポディアの数が減少した。一方、SpinophilinがAsef2のGEF活性に与える影響を検討したところ、SpinophilinはAsef2のGEF活性を制御しないことがわかった。これらの結果から、Asef2、Spinophilin、APCはHGF刺激依存的な細胞運動制御に関与しており、SpinophilinはAsef2と結合することでアクチン細胞骨格系を協調的に制御する足場蛋白質として働いていると考えられた。
子宮内膜癌の発癌・進展過程における遺伝子発現の変異についての研究

子宮内膜癌の発癌・進展課程にどのような遺伝子変異が関与するかを明らかにするために,悪性化に至る種々の段階の子宮内膜病変組織,異なった分化度の内膜癌組織における遺伝子変化の差異を検出することを目的とした。このために簡便かつランダムにmRNAの差異を比較できるdifferential display法を用いることとした.手術材料の収集と並行して基礎的検討を行った.アスベストあるいはdiethylstilbestrolによってトランスホームした造腫瘍性のないSyrian hamster embryo細胞株のうちEGF,PDGF,Insulinの添加条件下でAnchorage-Independentな増殖可能なクローン10Wsup+, DES4sup+と増殖不可能なクローン10Wsup-,DES4sup-との発見の差異の検出を試みた。各細胞株よりmRNAを抽出し4種類のpoly A+側プライマーと20種類のランダムプライマーを用いPCRを行った.PCR産物をシークエンスグルにより電気泳動を行いsup+群,sup-群に共通する差異を比較した。Sup+群に陽性でsup-群に陰性なバンドをゲルから切り出しDNAを抽出しPCRで増幅した後これをプローブとして各細胞株mRNAのノーザンハイプリダイゼニシヨンを行った.このうち一つのプロープはsup+群に陽性でsup-群に陰性と明瞭な差異が認められたのでこれのシークを行ったところtype2 collagenであった.方法の有効性は確認されたので手術材料による検討を行った。正常子宮内幕,子宮内幕増殖症,子宮内幕腺癌かmRNAを抽出し,同様の方法にてPCRを行い,PCR産物をシークエンスゲルにより電気泳動を行い泳動パターンを比較した.正常内膜に存在し子宮内膜癌に存在しないバンドをのうち4個のバンドをゲルから切り出して再び増幅しノーザンハイプリダイゼーシヨンにて検討を行つたが明らかな差は認められなかった.エストログンレセプター遺伝子とTNF-α遺伝子について癌患者と正常人との間の遺伝子多型の出現頻度の差異についての検討を行った.エストロゲンレセプター遺伝子多型はintrou 1のPvuIIとXbaI領域のRFLPを検討した.60例の子宮内膜癌患者と130例の正常人のDNAの比較を行つたが遺伝子多型出現頻度には差は認められなかった.TNF-α遺伝子についてはプロモーター領域の-238,-308,488領域についてのlleleの変異についてはspecific probeを使用したPCRを行い増幅の有無を確認した。41例の子宮内幕癌患者と57例の正常人のDNAの比較を行ったが-238,488領域では差異は認められなかった.しかし-308領域についてはA型の出現頻度が高くそのrelative riskは26倍と考えられた.子宮内膜癌の発癌・進展課程にどのような遺伝子変異が関与するかを明らかにするために,悪性化に至る種々の段階の子宮内膜病変組織,異なった分化度の内膜癌組織における遺伝子変化の差異を検出することを目的とした。41例の子宮内幕癌患者と57例の正常人のDNAの比較を行ったが-238,488領域では差異は認められなかった.しかし-308領域についてはA型の出現頻度が高くそのrelative riskは26倍と考えられた.

子宮内膜癌の発癌・進展過程にどのような遺伝子変異が関与するかを明らかにするために,悪性化に至る種々の段階の子宮内膜病変組織,異なった分化度の内膜癌組織における遺伝子変化の差異を検出することを目的とした.このために簡便かつランダムにmRNAの差異を比較できるdifferential display法を用いることとした.手術材料の収集と並行して基礎的検討を行った.アスベストあるいはdiethylstilbestrolによってトランスホームした造腫瘍性のないSyrian hamster embryo細胞株のうちEGF,PDGF,Insulinの添加条件下でAnchorage-Independentな増殖可能なクローン10Wsup+,DES4sup+と増殖不可能なクローン10Wsup-,DES4sup-との発現の差異の検出を試みた.各細部株よりmRNAを抽出し4種類のpoly A+側プライマーと20種類のランダムプライマーを用いPCRを行った.PCR産物をシークエンスゲルにより電気泳動を行いsup+群,sup-群に共通する差異を比較した.sup+群に陽性でsup-群に陰性なバンドをゲルから切り出しDNAを抽出しPCRで増幅した後これをプロープとして各細胞株mRNAのノーザンハブリダイゼーションを行った.このうち一つのプローブはsup+群に陽性でsup-群に陰性と明瞭な差異が認められたのでこれのシークエンスを行ったところtype2 collagenであった.方法の有効性は確認されたので現在収集中の手術材料による検討を進めてゆく予定である.子宮内膜癌の発癌・進展課程にどのような遺伝子変異が関与するかを明らかにするために,悪性化に至る種々の段階の子宮内膜病変組織,異なった分化度の内膜癌組織における遺伝子変化の差異を検出することを目的とした.このために簡便かつランダムにmRNAの差異を比較できるdifferential display法を用いることとした.手術材料の収集と並行して基礎的検討を行った.アスベストあるいはdiethylstibestrolによってトランスホームした造腫瘍性のないSyrian hamsterembryo細胞株のうちEGF,PDGF,Insulinの添加条件下でAnchorage-Independentな増殖可能なクローン10Wsup+,DES4sup+と増殖不可能なクローン10Wsup-,DES4sup-との発現の差異の検出を試みた.各細胞株よりmRNAを抽出し4種類のpoly A+側プライマーと20種類のランダムプライマーを用いPCRを行った.PCR産物をシークエンスゲルにより電気泳動を行いsup+群,sup-群に共通する差異を比較した.sup+群に陽性でsup-群に陰性なバンドをゲルから切り出しDNAを抽出しPCRで増幅した後これをプローブとして各細胞株mRNAのノーザンハイブリダイゼーションを行った.このうち一つのプローブはsup+群に陽性でsup-群に陰性と明瞭な差異が認められたのでこれのシークエンスを行ったところtype2 collagenであった.方法の有効性は確認されたので現在収集中の手術材料による検討を進めてゆく予定である.
都市洪水拡散シミュレーションのための都市標高モデル作成システムの開発

本研究は、自立型ラジコンヘリにカメラを搭載し、都市内水の洪水拡散のシミュレーションに活用可能な高精度な標高モデルを作成する手法を開発し、その精度を評価した。3次元モデルを作成する手法として、SfM法(Structure from motion)を採用した。3次元モデルに位置情報を付加しなければ標高モデルとして利用できないが、基準点の数と配置と精度の関係を明らかにした。また、自立型ラジコンヘリの高度、カメラなど条件を変えて、それらのパラメータと精度の関係を明らかにした。得られた標高モデルが都市内水の洪水拡散のシミュレーションに利用できることを確認した。本研究の目的は、都市内水の洪水拡散のシミュレーションに活用可能な高精度な都市の標高モデルを整備することである。標高モデルのあるエリアに対し自立型ラジコンヘリなどで撮影し、その写真を元に高精度な標高モデルを作成するシステムを開発する。さらに、得られた標高モデルを利用して、洪水に起因する水系感染症リスクを算出し評価する。ラジコンヘリでは撮影時のカメラの位置と傾きが不明であるためカメラの位置と傾きを求めるため地上基準点を利用し、それらの情報からカメラの位置と傾きを算出する。地上基準点は、衛星測位や地上測量など精密な測量を必要とするため、地上基準点の個数を多くすれば測量に関わるコストが上昇する。そのため、地上基準点の個数を、内水の洪水拡散のシミュレーションに必要な10cm程度の精度を得るために必要な最低限の数にしたい。平成25年度は、地上基準点の個数と配置が、標高モデルの精度にどのような影響を与えるかを検討した。地上基準点の個数が多ければ精度は向上する傾向にあるが、6点以上配置しても精度が高くなる率が低下することがわかった。基準点の配置による精度の評価は、ラジコンヘリの高度が低い場合には、配置による影響が少ないことがわかった。また、異なる標高値に設置するほうが精度が高くなる傾向があった。さらに、ラジコンヘリから撮影した写真から、標高モデルを作成するアルゴリズムを開発した。詳細は、3件の研究論文として発表した。対象とする地域でドローン(自立型小型回転翼ラジコンヘリおよび自立型小型固定翼飛行機)で撮影し、その写真を元に高精度な標高モデルを作成するシステムを開発する。平成26年度は、ドローンの高度、ドローンに搭載したカメラ・レンズの特性およびシャッター速度と標高モデルの精度の関係について検討した。具体的には、カメラなど撮影条件を変えずに、ドローンの高度を変化させたときの精度検討、ドローンの高度を変えずに、レンズの特性を変化させた時の精度検証を行った。その結果、広角レンズによる撮影では、一度に広範囲のエリアを撮影できる利点があるが、画像周囲の精度劣化が激しく、それらを補正するアルゴリズムが新規に必要なことが確認できた。本研究の目的は、都市内水の洪水拡散のシミュレーションに活用可能な高精度な都市の標高モデルを整備することにある。UAV(ドローン)で、対象地域を撮影し、撮影した写真から高精度な標高モデルを作成する手法を開発した。平成27年度は、標高モデルの精度と地上測量の結果と比較してその精度を評価した。その結果、10cm以下の精度で標高データが得られることを堪忍した。これらの成果は、次の論文としてまとめた。杉山弘晃,徳永光晴,UAVによる橋梁モニタリングの有効性,日本写真測量学会平成27年度秋季学術講演会発表論文集、pp.1-2, 2015本研究は、自立型ラジコンヘリにカメラを搭載し、都市内水の洪水拡散のシミュレーションに活用可能な高精度な標高モデルを作成する手法を開発し、その精度を評価した。研究計画の通り、3次元マップ作成システムの検証・評価を行った。リモートセンシング平成27年度は研究の最終年度にあたる。平成27年度では、(1)対象エリアにて、3次元デジタルモデルを作成する。(2)作成した3次元デジタルモデルを評価する。(3)洪水時のリスクモデルを適応する。研究計画では、(1)自立型ラジコンヘリの改造、(2)基準マーカの設置方法の検討、(3)標高モデル作成アルゴリズムの開発、(4)改造した自立型ラジコンによる標高モデル作成の実証実験を予定していたが、研究実績で述べたとおり予定通り研究が進み、その成果を研究論文として公表した。ほぼ予定通りに研究が進んでおり、支出はほぼ予定通りであった。少額が残金として生じたが、研究に必要な消耗品が、必要かつ十分に入手することができたことによる。今後は、大洪水が発生している東南アジアのタイ・バンコク近郊にて開発したシステムを利用し、標高モデルを作成する予定である。現地で測量したデータと比べこのモデルの精度を評価する。さらに、標高モデルを利用して洪水シミュレーションを行う。実際の洪水被害状況と比較し,標高モデルを評価する。本研究で作成した標高モデルを利用して水系感染症のリスクを算出し,評価することを予定する。次年度使用額は、研究に必要な消耗品を購入する予定。
保険業に対する社会的信頼度の決定要因に関する日韓比較研究

主な研究内容は、保険業に対する社会的な信頼を獲得するための保険会社のコンプライアンスである。その具体的な内容は、保険会社のコンプライアンスとその履行を担保するための内部統制である。1.保険会社のコンプライアンス韓国の保険会社に対する社会的な信頼は高くない。その要因として、コンプライアンスが考えられる。コンプライアンスの価値は、保険会社間の競争が激しくなればなるほど、消費者の影響力が大きくなればなるほど、高く評価される。保険会社が社会的なルールを守り約束を誠実に履行することが、保険会社の社会的な信頼を高める一番の要因であることが確認された。したがって、保険会社の社会的な信頼を高めるためには、コンプライアンスを徹底していくことが求められる。2.保険会社の内部統制内部統制は、企業のガバナンスとコンプライアンスに重要な要素として考えられる。内部統制は、確実なコンプライアンスを可能にし、企業経営の適法性と適正性を確保させ、経営の効率を高める。これまで成功した企業または倒産した企業の事例から、内部統制が持つ重要性が確認された。金融危機による経営危機に瀕しているが、内部統制は何よりも優先すべき経営課題であり、それの投資を急ぐべきである。また、内部統制には、問題が確認された時点で、その問題を効率的に処理できる自浄能力が求められる。この自浄能力は、モニタリングから始まるものである。内部統制の効率性を高めるためには、モニタリングが重要である。
微弱近赤外光を用いた、健康指標としての臓器表面の血流変化に関する研究

本研究の目的は,身体の特定部位(例えば,脳や門脈)における血液量の時間的変化(以下,血流変化という)を非侵襲的に計測し身体状況との関連性を評価解析することで,被験者の健康状態を推定しうる健康指標を安全かつ簡便に得ようという構想の有用性を見極めることである.上記の目的を達成するため,平成17年度は,血中のヘモグロビンの量に応じて吸収度が変化する近赤外光の特性を利用した血流計を試作し,身体特定部位の血流変化を連続的に計測して,その傾向を個人の健康状態に関わる特性パタンとしてみなして解析した.この発想は,独居高齢者の宅内行動パタンといえども長期的に見れば健康状態の判定に役立つ情報を含むという我々の経験則に基づくもので,体内各部の血流変化の長期傾向には有益な情報が多く含まれているという確信にも基づいている.また、平成18年度には,上記の光血流計や計測結果解析用ソフトを用いて得た結果を健康指標として利用する第一歩として,下記の作業を実施した.(1)標準的計測方式の確立計測結果の相互比較を可能にするため,計測方法および身体部位の標準化を図った.(2)前頭葉における血流変化の観測計算,音読,映像鑑賞,手技,楽器演奏等における前頭前野の血流変化を計測し解析した.(3)門脈近傍における血流変化の観測摂食後の門脈における血流変化を連続的に計測し解析した.(4)血流量/血流速と近赤外光吸収量の相互関係に関する研究ラットの新鮮血を用いた人工的な血流回路において血流量/血流速をステップ状に変化させ,その場合の近赤外光の減衰率の変化からヘモグロビンの光学特性を解析した.本研究の目的は,身体の特定部位(例えば,脳や門脈)における血液量の時間的変化(以下,血流変化という)を非侵襲的に計測し身体状況との関連性を評価解析することで,被験者の健康状態を推定しうる健康指標を安全かつ簡便に得ようという構想の有用性を見極めることである.上記の目的を達成するため,平成17年度は,血中のヘモグロビンの量に応じて吸収度が変化する近赤外光の特性を利用した血流計を試作し,身体特定部位の血流変化を連続的に計測して,その傾向を個人の健康状態に関わる特性パタンとしてみなして解析した.この発想は,独居高齢者の宅内行動パタンといえども長期的に見れば健康状態の判定に役立つ情報を含むという我々の経験則に基づくもので,体内各部の血流変化の長期傾向には有益な情報が多く含まれているという確信にも基づいている.また、平成18年度には,上記の光血流計や計測結果解析用ソフトを用いて得た結果を健康指標として利用する第一歩として,下記の作業を実施した.(1)標準的計測方式の確立計測結果の相互比較を可能にするため,計測方法および身体部位の標準化を図った.(2)前頭葉における血流変化の観測計算,音読,映像鑑賞,手技,楽器演奏等における前頭前野の血流変化を計測し解析した.(3)門脈近傍における血流変化の観測摂食後の門脈における血流変化を連続的に計測し解析した.(4)血流量/血流速と近赤外光吸収量の相互関係に関する研究ラットの新鮮血を用いた人工的な血流回路において血流量/血流速をステップ状に変化させ,その場合の近赤外光の減衰率の変化からヘモグロビンの光学特性を解析した.本研究の目的は,身体の特定部位(例えば,脳や門脈)における血液量の時間的変化(以下,血流変化と称す)を体外から非侵襲的に計測し,計測結果と被験者の身体状況との関連性を解析することによって,被験者の健康状態を推定する基となる健康指標を安全かつ簡便に計測できるようにすることの妥当性を評価することである.上記目的を達成するため,体内透過時に血管内に存在するヘモグロビンの量と状態に応じて吸収度合が変化する近赤外光の特性を利用した血流計を試作し,それを用いて身体特定部位の血流変化を連続的に計測し,その長期傾向を個人の健康状態に関連する特性パタンとして捉え解析した.このような発想は,独居高齢者の宅内行動パタンですら長期スパンで見れば健康状態に関する有益な情報を含んでいるという我々の経験則に基づくもので,体内各部の血流変化の長期傾向はより有益な情報を含んでいると思われる.上記の構想の基に,本年度は光血流計の試作と,その計測結果を健康指標として利用するための適切な計測方式や身体部位を確定させるのに不可欠な以下の作業を行った.(1)光血流計の試作と計測方法の確定本研究の目的に即した光血流計の機能を洗い出し,基本仕様を定め発注した.試作機完成後,少数の被験者について計測実験を実施し機能を検証した.(2)解析ソフトの開発光血流計の基本仕様策定時に解析ソフトの仕様も定めて開発を開始し,試作機完成後,小規模な計測実験を行う過程で前記目的に対する仕様の妥当性を検証した.本研究の目的は,身体の特定部位(例えば脳や門脈)における血液量の時間的変化

(以下,血流変化という)を非侵襲的に計測し身体状況との関連性を評価解析することで,被験者の健康状態を推定しうる健康指標を安全かつ簡便に得ようという構想の有用性を見極めることである.上記の目的を達成するため,昨年度は,血中のヘモグロビンの量に応じて吸収度が変化する近赤外光の特性を利用した血流計を試作し,身体特定部位の血流変化を連続的に計測して,その傾向を個人の健康状態に関わる特性パタンとしてみなして解析した.この発想は,独居高齢者の宅内行動パタンといえども長期的に見れば健康状態の判定に役立つ情報を含むという我々の経験則に基づくもので,体内各部の血流変化の長期傾向には有益な情報が多く含まれていると確信している.本年度は,上記の光血流計や計測結果解析用ソフトを用いて得た結果を健康指標として利用する第一歩として,下記の作業を実施した.(1)標準的計測方式の確立計測結果の相互比較を可能にするため,計測方法および身体部位の標準化を図った.(2)前頭葉における血流変化の観測計算,音読,映像鑑賞,手技,楽器演奏等における前頭前野の血流変化を計測し解析した.(3)門脈近傍における血流変化の観測摂食後の門脈における血流変化を連続的に計測し解析した.(4)血流量/血流速と近赤外光吸収量の相互関係に関する研究ラットの新鮮血を用いた人工的な血流回路において血流量/血流速をステップ状に変化させ,その場合の近赤外光の減衰率の変化からヘモグロビンの光学特性を解析した.
東アジアにおけるグローバルイノベーションネットワークの空間モデルに関する研究

1.文献レビューを通じた現状把握を行った。都市圏構造を対象とした実証研究を中心に文献を収集してレビューを行った。まずは、都市圏分析に関して、EU都市圏の分析と日本国内における研究などの先行研究を収集した。また、理論的画面で空間分析とネットワーク分析を組み合わせた取り組みを収集し、最新の手法を確認した。2.データベースを構築した。特許公報は、各国で入手可能であり、最も体系化しているイノベーション成果データであるので、今回の研究でも使用した。日本、韓国、中国、台湾の特許公報を照会し、発明者と出願者のデータベースを構築する作業を行った。作業にあたって、大量のデータ構築が簡単ではないため、多方面でのイノベーションネットワークデータ、例えば全国イノベーションデータなどの企業データも利用可能か確認している。3.まずは日本と韓国における特許ネットワークデータベースを通じたネットワーク分析の結果を随時、学術論文と国際学会で発表を行った。ネットワークのノードの特性を把握できる指標である、中心性指標、クラスター指標、コミュニティ指標などを利用し、分析した。その際、ネットワークにおける重要なハブと役割を分析し、それらの発明者が立地している地域の特徴を考察した。また、コミュニティ分割を利用し、サブグループの抽出を行い、ネットワークでのクラスターを抽出した。今後、他の国とのネットワークデータに関しても追加分析を行う予定である。データベースの構築にかかる時間が予想以上であったのが、第1の理由である。研究活動スタート支援の場合、交付決定が他の科研より遅くなされているにも関わらず、予算を使用する必要があるため、そのための事務的な手続きの時間で研究の進捗が遅れた。とりわけ、中国の特許データの収集でウェブサイトの問題やデータの信頼性などの問題が浮かび、丁寧にチェックしているため、予想以上の時間を費やしてしまった。一方で韓国と日本のデータベースは順調に構築していることと、国際特許を中心に構築し直す方策なども考えているため、おおむね予定通りに研究を随行できると思われる。平成29年度から引き続き、特許データベースの構築を完了する。その後、ネットワークを実際の空間構造へ反映する。その際に空間情報として、出願者と発明者の住所を用い、Geocodingにより地図上の座標を収得し、発明者と出願者を追跡する。これらの分布の空間情報データを地域範囲で類型化する。周辺地域とコア地域に分類し、特徴を把握しておく。分析において、データマイニングの手法を通じた特許データの解析と空間情報処理に関して国内外の研究協力者との積極的な意見交換を通じて発展させる。その結果を踏まえて、ネットワーク変容過程と要因を考察する。変容過程を分析する際に、ネットワーク全体の指標である、集中度(全体ネットワークのノードがネットワーク中心部に位置するノードに集中している程度を示す指標)、SMI指数(グループ内密度を相対的に比較する指標)を用いる。主なネットワーク形成要因として技術分野の違いによる差異、企業立地などによる産業構造の変化、交通距離の変化などについて、考察する。とりわけ、技術分野による違いを分析することにより、より政策的示唆を得られると考えられる。要因分析の結果を踏まえ、ネットワークダイナミックにおける先行研究(BAモデル、Small world modelなど)を参考とし、モデル化を行う。分析の成果を生かし、国内外の政策をレビューした上で、今後の地域計画の戦略の提案を行う。提案は、地域を体系的に分類する。一例として産業における特徴を持っている都市圏に分けて整理する。1各ネットワークの長・短所、2ネットワークモデルによるシナリオ導出、3シナリオ達成のための計画手段を導き、提案する流れである。

その際に空間情報として、出願者と発明者の住所を用い、Geocodingにより地図上の座標を収得し、発明者と出願者を追跡する。これらの分布の空間情報データを地域範囲で類型化する。周辺地域とコア地域に分類し、特徴を把握しておく。分析において、データマイニングの手法を通じた特許データの解析と空間情報処理に関して国内外の研究協力者との積極的な意見交換を通じて発展させる。その結果を踏まえて、ネットワーク変容過程と要因を考察する。変容過程を分析する際に、ネットワーク全体の指標である、集中度(全体ネットワークのノードがネットワーク中心部に位置するノードに集中している程度を示す指標)、SMI指数(グループ内密度を相対的に比較する指標)を用いる。主なネットワーク形成要因として技術分野の違いによる差異、企業立地などによる産業構造の変化、交通距離の変化などについて、考察する。とりわけ、技術分野による違いを分析することにより、より政策的示唆を得られると考えられる。要因分析の結果を踏まえ、ネットワークダイナミックにおける先行研究(BAモデル、Small world modelなど)を参考とし、モデル化を行う。分析の成果を生かし、国内外の政策をレビューした上で、今後の地域計画の戦略の提案を行う。提案は、地域を体系的に分類する。一例として産業における特徴を持っている都市圏に分けて整理する。1各ネットワークの長・短所、2ネットワークモデルによるシナリオ導出、3シナリオ達成のための計画手段を導き、提案する流れである。
高等植物の減数分裂における染色体構造の解析

減数分裂における相同染色体の対合はシナプトネマ構造(SC)と呼ばれる染色体構造によって安定に維持される。SCは蛋白質を主体とした構造物であるが、現時点においてその分子構築に関する知見は乏しい。本研究では大型の染色体を有するユリ花粉母細胞を実験材料として、SCの物質的構成とその機能を解明することを最終的な目標としている。本年度はユリ花粉母細胞よりSCを分離するための条件設定と単離したSCの蛋白質の分析をおこなった。SCの分離は、花粉母細胞核の分離精製、DNAの分解酵素によるクロマチンの分解と除去、そしてSCを密度勾配遠心により純化するという三段階から成る。本研究においては、単離核からクロマチンを除去するためにDNaseIIを使用した。単離核を中性緩衝液に懸濁し、DNaseIIを作用させると、断片化したSC様の構造が核から遊離してきた。DNaseIIで処理した核をナイコデンツの連続密度勾配に重層して遠心した結果、密度1.201.24の画分にSC様構造を濃縮することができた。SC様構造に含まれる蛋白質について、SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動および二次元ゲル電気泳動を用いて分析した。その結果、SC様構造には、100200キロダルトンの分子量を有する10種類の蛋白質が濃縮されていた。しかも、それらの蛋白質は等電点が7.0以下の中性から酸性の蛋白質であった。本年度の研究によりSCを分離するための条件設定は完了することができた。今後は純化したSC様構造をもとに、SCに特異的なモノクロ-ン抗体を作製し、SCを構成する蛋白質分子の特定とその生化学的な機能の解析をおこなう予定である。
再訪調査による東日本のミズナラ林の30-40年間の植生変化とその要因の解明

管理放棄が進行した197080年代から現在までの30年40年間に、東日本のミズナラ林で植物の種組成や種多様性にどのような変化が生じたのかを再訪調査によって明らかにした。組成変化では草原生植物の減少、森林林床生植物の増加が認められた。また調査区当たりの出現種数は、197080年代よりも北海道では減少、東北地方では微増していた。北海道ではシカの影響のない調査区の方が減少率が高く、α多様性の変化にニホンジカの影響が関係していた。NMDSによる序列化では、1軸スコアは積雪日数やWIと,2軸のスコアはWIとの相関が高かった.また,第1軸のスコアの変化量と出現種数の増減には有意な相関があった.東日本の主要な二次林であるミズナラ林において、管理放棄が進行した197080年代から現在までの30年40年間に植物の種組成や種多様性にどのような変化が生じたのかを、197080年代に申請者が植生調査を行った地点に再訪して同一方法で調査を実施する再訪調査という手法を用いて研究を行っている。本年度は、事前情報整理と北海道および東北地方での再訪調査を実施した。事前の情報整理としては、調査予定の調査地の過去の植生調査資料と調査地点の記入された1/5万の地形図を確認し、GISを用いて調査地点のデジタル航空画像から調査地点の植生変化状況を把握した。再訪調査は北海道の道東、道北地方で47地点、東北地方では、八甲田山・青森市周辺、北上山地、阿武隈山地西部、磐梯・吾妻地域で26地点、合計73地点の植生調査資料を収集した。北海道ではかつて林内に生育していた草原生の植物が大きく減少していることがわかった。また、林自身が消失した地点はミズナラの大径木があった地点であり、伐採されたものと考えられた。北海道東部や十勝地域ではエゾシカによる食痕が確認された調査地が多く確認され、知床半島や昆布森などでディアラインの形成やスズタケの退行が確認された。東北地方の八甲田山や北上山地、吾妻山、磐梯山周辺ではシカの影響は顕著ではなかった。シカの影響があった調査地では植生の階層構造の変化は顕著であったが、種構成への影響は甚大ではなかった。会津地域ではカシノナガキクイムシによるナラ枯れが発生した調査地点を確認し、再訪調査を行った。研究では過去に植生調査が行われた地点を特定し、植生調査を行うことが最も基本的で重要な研究内容となる。その点ではGISを用いておおよその場所を確認できたことなどで効率的に調査を行うことができた。得られたテータの入力も終了し、一時解析も行っており、予定していた計画にしたがって進捗していると判断している。東日本の主要な二次林であるミズナラ林において、管理放棄が進行した197080年代から現在までの30年40年間に植物の種組成や種多様性にどのような変化が生じたのかを、197080年代に申請者が植生調査を行った地点に再訪して同一方法で調査を実施する再訪調査という手法を用いて研究を行っている。本年度は、前年度に収集した植生調査資料を集計・解析して植生学会大会で発表を行うとともに北海道および東北地方での再訪調査を実施した。再訪調査は北海道の道北・道央と道南地方で67地点、東北地方では、青森県の津軽地域秋田の鹿角地域・岩手県二戸地域で11地点、合計78地点の植生調査資料を収集した。昨年度に北海道東部地域を中心に得られた再訪調査の調査資料60点をもとに植生変化を解析した結果、北海道ではかつて林内に生育していた草原生の植物が大きく減少していること、これに変わって森林林床生の植物が増加していることがわかり、森林の発達による林内環境の変化が種組成変化に大きくかかわっていると考えられた。また、調査区当たりの出現種数であらわされる種の豊かさは、197080年代よりも減少しており、減少率はシカの生息痕跡や食痕などが認められる調査区よりも、シカの影響のない調査区で減少率が高くなっていた。これら一連の成果を2016年10月23日に開催された植生学会第21回大会においてポスター発表を行った。その後、2016年に北海道で得られた資料も加えて解析を進め、北海道東部で確認された植生変化の傾向が北海道全体でも認められることが分った。北海道での現地再訪調査は順調に進んでいるが、東北地方での調査が今年度は十分に進めることができなかった。データの解析や結果の取りまとめについては順調に進んでいる。本年度は、北海道および東北地方での追加の再訪調査を実施するとともに、前年度までに収集した植生調査資料を集計・解析して植生学会大会および日本生態学会大会で発表を行った。北海道ではかつて林内に生育していた草原生の植物が大きく減少していること、これに変わって森林林床生の植物が増加していることがわかり、森林の発達による林内環境の変化が種組成変化に大きくかかわっていると考えられた。

また、調査区当たりの出現種数であらわされる種の豊かさは、197080年代よりも減少しており、減少率はシカの生息痕跡や食痕などが認められる調査区よりも、シカの影響のない調査区で減少率が高くなっていた。これら一連の成果を2017年10月22日に開催された植生学会第22回大会においてポスター発表を行った。また、これまでに東北地方で得られた資料をもとにも解析を進め、東北地方のミズナラ林では管理放棄に伴う遷移の進行によると考えられる植生変化が進行し、植生変化の大きさを表す組成変化量は多雪地や高標高域で少ないことが明らかとなった。この成果は2018年3月23日に開催された日本生態学会大会で発表した。管理放棄が進行した197080年代から現在までの30年40年間に、東日本のミズナラ林で植物の種組成や種多様性にどのような変化が生じたのかを再訪調査によって明らかにした。組成変化では草原生植物の減少、森林林床生植物の増加が認められた。また調査区当たりの出現種数は、197080年代よりも北海道では減少、東北地方では微増していた。北海道ではシカの影響のない調査区の方が減少率が高く、α多様性の変化にニホンジカの影響が関係していた。NMDSによる序列化では、1軸スコアは積雪日数やWIと,2軸のスコアはWIとの相関が高かった.また,第1軸のスコアの変化量と出現種数の増減には有意な相関があった.今後は、未調査地点である北海道道南地域や道北地域と東北地方日本海側を調査を行う。関東・中部地域の調査については一部に2009年2010年に再訪調査した地点があることから、資料のない地点を中心に現地調査を予定している。また、平成28年度には北海道のミズナラ林のデータを解析して学会発表を行うことにしている。最終年度となる今年度は、未調査地点となっている東北地方日本海側の再訪調査を行う。2015年と2016年に収取した北海道の植生調査資料を解析して、2017年6月にイタリア・パレルモで開催される第60回国際植生学会で発表するとともに、解析やとりまとめ、論文執筆を進め、Journal of vegetation scienceへの投稿を予定している。さらに、東北地方の植生調査資料も加えて、この30年間の気温上昇の影響がミズナラ林の種組成に影響しているの否かを指標性のある植物種の挙動の解析を通して検証する。植生管理学物品費の見積額より安価に購入でき、執行額との間に差が生じたため。翌年度の物品費に加えて執行する。
訪花性昆虫における赤受容型視物質の分光学的・分子進化学的解析

昆虫視物質の試験管内再構成法を確立することを目的に、アゲハ、モンシロチョウの視物質の培養細胞系における発現を試みた。その結果、モンシロチョウPrBとPrVの再構成を確認できた。差吸収スペクトルから、PrB、PrVは青色光を照射することにより、吸収極大が長波長シフトした光産物を生じ、これに緑色光を照射すると元の視物質が光再生された。この反応は可逆的で、PrB、PrVはbistable pigmentであることが示唆された。次に吸収スペクトルの詳細な解析のため、大量発現後、発現蛋白質の精製を行ない、吸収スペクトルを測定した。その結果、PrBとPrVはそれぞれ450nm、420nm付近に吸収極大を持つことがわかった。さらに精確な吸収極大波長を明らかにするために、ヒドロキシルアミン存在下で光照射、加えて、Govardovskiiのノモグラムを用いて作成した様々な視物質の吸収スペクトルとのフィッティングにより、吸収極大波長を推定した。その結果、PrB、PrVの吸収極大はそれぞれ447nm、420nmであることが分かった。電気生理学的実験から予測されているPrB、PrVの吸収極大波長はそれぞれ453nm、425nmであり、予測と実測とが良く一致した。私はこれまでに、雄モンシロチョウでPrVを発現する紫受容細胞の分光感度生成には、420nm付近の光を吸収するフィルターが重要であることを示唆していた。今回、PrVの実測スペクトルが得られたことにより、これを実験的に証明することができた。モンシロチョウとおなじシロチョウ科に属するモンキチョウの視物質に関する研究にも参加した。モンキチョウでも2つの青視物質(CeV1、CeV2)が見つかり、青視物質の重複はシロチョウ科の特徴と考えられる。しかしCeV1、CeV2は共にモンシロチョウの紫型PrVのオーソログであり、PrBに対応するものは見つからなかった。インサイチュ・ハイブリダイゼーションの結果、この2つは常に重複して発現しており、この点でもモンシロチョウとは著しく異なることが分かった。本研究で確立することができた昆虫視物質の試験管内再構成法をCeV1とCeV2に応用して両者の吸収スペクトルを得ることで、シロチョウ科における色覚系の進化に関して新しい知見が得られると期待される。非常に困難であるとされている昆虫視物質の試験管内再構成法を確立することを目的として、アゲハ視物質(PxB, PxL1-3)の培養細胞系での発現を試みた。まず、それぞれの遺伝子の翻訳領域をPCRにより増幅した。この際、発現タンパク質精製のためにC末端にウシロドプシンの単クローン抗体(rho 1D4)のエピトープタグが付加されるようプライマーを設計した。増幅した遺伝子断片は、発現ベクターpcDNA3.1とSRαにそれぞれ組み込み、シークエンス解析により、変異を含まないクローンを選抜した。それぞれの遺伝子を組み込んだ発現ベクターは、リン酸カルシウム法によりHEK293細胞にトランスフェクションし、2日間培養した。培養後、細胞を界面活性剤で溶解し、細胞粗抽出液とした。これに発色団11-cis retinalを加え、視物質として再構成し、吸収スペクトルを測定した。その結果、PxBを発現したものに関しては、非常にわずかながらスペクトルを検出できたが、PxL1-3については視物質由来のスペクトルが観察できなかった。PxL1-3を発現させた細胞の粗抽出液から視物質由来のスペクトルが検出できなかった原因を確認するために、それぞれの細胞粗抽出液についてrho 1D4抗体を用いたウェスタンブロットを行った。その結果、いずれの視物質も発現していることが確認された。したがって、発現タンパク質の変性により発色団が結合できず、視物質として再構成されていなかったことが示唆された。同様に、PxBも大部分が発色団と結合する前に変性していたと考えられる。現在は、発現タンパク質を発色団といち早く結合させるために、発色団やその類似レチノイド存在下で遺伝子導入後の細胞を培養することや、異なるプロモーターを持つ発現ベクターを用いて発現を行うことを計画している。昆虫視物質の試験管内再構成法を確立することを目的として、アゲハ視物質(PxUV,PxB,PxL1,PxL2,PxL3)、モンシロチョウ視物質(PrUV,PrB,PrV,PrL)の培養細胞系における発現を試みた。まず、それぞれの遺伝子をPCRにより増幅した。この際、発現タンパク質精製のためにC末端にウシロドプシンの単クローン抗体(rho 1D4)のエピトープタグを付加した。増幅した遺伝子断片は、発現ベクターpcDNA3.1、SRα、pEFにそれぞれ組み込んだ。発現ベクターをリン酸カルシウム法によりHEK293細胞にトランスフェクションし、2日間培養した。細胞回収後、暗中で発色団11-cis retinalを加え視物質として再構成した後に、界面活性剤で発現蛋白質を含む膜分画を抽出した。これを細胞粗抽出液とし、その吸収スペクトルを分光光度計にて測定した。その結果、PrBとPrVの再構成を確認することができた。差吸収スペクトルから、PrB、PrVは青色光を照射することにより、吸収極大が長波長シフトした光産物を生じ、これに緑色光を照射すると元の視物質が光再生することが分かった。

この反応は可逆的であり、PrB、PrVはショウジョウバエなどの視物質と同様なbistable pigmentであることが示唆された。次に吸収スペクトルの詳細な解析を行うため、発現蛋白質をrho 1D4ビーズを用い精製し、その吸収スペクトルを測定した。その結果、PrBとPrVはそれぞれ450nm、410nmに吸収極大を持つことが明らかになった。電気生理学的実験から予測されているPrB、PrVの吸収極大波長はそれぞれ453nm、425nmである。PrBは予測と良く一致したが、PrVは15nmの開きがあった。この差が何に起因するものか現時点では明確に説明できない。これまでの実験では、再構成に11-cis retinal(A1)を用いた。ところが実際は、モンシロチョウの生体内における視物質の発色団は11-cis 3-OH retinal(A3)である。ウシロドプシンを用いた実験では、異なる発色団(A1またはA3)を使用することにより、吸収極大波長に12nmの差が生じることが知られている。モンシロチョウ視物質でも発色団による吸収極大の変化が起こるか確認するために、今後A3を用いた再構成実験を早急に行う予定である。昆虫視物質の試験管内再構成法を確立することを目的に、アゲハ、モンシロチョウの視物質の培養細胞系における発現を試みた。その結果、モンシロチョウPrBとPrVの再構成を確認できた。差吸収スペクトルから、PrB、PrVは青色光を照射することにより、吸収極大が長波長シフトした光産物を生じ、これに緑色光を照射すると元の視物質が光再生された。この反応は可逆的で、PrB、PrVはbistable pigmentであることが示唆された。次に吸収スペクトルの詳細な解析のため、大量発現後、発現蛋白質の精製を行ない、吸収スペクトルを測定した。その結果、PrBとPrVはそれぞれ450nm、420nm付近に吸収極大を持つことがわかった。さらに精確な吸収極大波長を明らかにするために、ヒドロキシルアミン存在下で光照射、加えて、Govardovskiiのノモグラムを用いて作成した様々な視物質の吸収スペクトルとのフィッティングにより、吸収極大波長を推定した。その結果、PrB、PrVの吸収極大はそれぞれ447nm、420nmであることが分かった。電気生理学的実験から予測されているPrB、PrVの吸収極大波長はそれぞれ453nm、425nmであり、予測と実測とが良く一致した。私はこれまでに、雄モンシロチョウでPrVを発現する紫受容細胞の分光感度生成には、420nm付近の光を吸収するフィルターが重要であることを示唆していた。今回、PrVの実測スペクトルが得られたことにより、これを実験的に証明することができた。モンシロチョウとおなじシロチョウ科に属するモンキチョウの視物質に関する研究にも参加した。モンキチョウでも2つの青視物質(CeV1、CeV2)が見つかり、青視物質の重複はシロチョウ科の特徴と考えられる。しかしCeV1、CeV2は共にモンシロチョウの紫型PrVのオーソログであり、PrBに対応するものは見つからなかった。インサイチュ・ハイブリダイゼーションの結果、この2つは常に重複して発現しており、この点でもモンシロチョウとは著しく異なることが分かった。本研究で確立することができた昆虫視物質の試験
血小板GPIV欠損者における抗GPIV抗体産生機構の遺伝子工学的解明

健常者16人のGPIV欠損者を見いだした。GPIV欠損者の血小板凝集はいずれも正常であった。従来、GPIVはcollagenの受容体であるとされるが、我々の成績はこれに否定的であった。血小板にはGPIV以外にもcollagen受容体が知られているので、これらの蛋白がcollagenの受容体として寄与していると考えられる。16名のGPIV欠損者の単球の膜上のGPIVをOKM5を用いてflowcytometerにて検討した。14例においてGPIVが陽性であることが明らかになった。これをtypeIIとした。しかし、残り2例においては単球にもGPIVは存在しなかった。これをtypeIとして区別した。TypeIのGPIV欠損のうちNa.Sの血清には抗GPIV抗体が存在していることが明らかになり、GPIVが完全に欠損であるtypeIの欠損者にはイソ抗GPIV抗体が産生されことが確認された。GPIV欠損の機序を明らかにするにはtypeIとtypeIIを区別し血小板と単球のそれぞれについてmRNAの解析をすることがGPIV欠損の機序を解明の重要であると考えられた。そこで、typeIIのGPIV欠損者の単核球分画とり、この分画から常法によりmRNAを分離しPCR増幅法により検討したところ、GPIV欠損者の単球には、1.6kbpのcDNAが検出され完全なGPIVのmRNAが存在することが明かとなった。TypeII欠損者Ta.KのGPIV欠損者の単球に79番目にC-A置換と、1632番直後にAGTAの4塩基の挿入を観察した。しかし、これらは直接GPIVの欠損とは関係ないと考えられる。TypeIのGPIV欠損者の遺伝子解析については今後の課題である。骨髄移植対象者でGPIV欠損の患者で移植後のGPIV抗原の血小板への表現についての研究では二年間に70名の骨髄移植対象者と対象候補者を調べ、一人のGPIV欠損者を発見することができた。しかし、経過観察中に急変し死亡したため、精査できなかった。以上、この研究で明らかになった2型式のGPIV欠損の存在は、今後更にGPIV欠損の機序を遺伝子工学適に解明する上で重要になると思われる。健常者340人のスクリ-ニングで16人のGPIV欠損者を見いだした。このうち7人の血小板凝集能を調べた。その結果、collagen凝集(0.5-3μg/ml)において、両グル-プには著明な差は認められなかった。また、thrombin ADP、アラキドン酸による凝集能にも差を認めなかった。これらの成績から、従来からの報告であるGPIVがcollagenの産容体でありかつ活性化の最初のステップに重要であるとする考えに疑問を投げかけるものであった。(Brit J Haematol印刷中)これら16名のGPIB欠損者の単球の膜上のGPIVをOKM5を用いてflowcytameterにて検討した。その結果、14例においてGPIVが陽性であることが明らかになった(Type II)。しかし、残り2例においては単球にもGPIVは存在しかなった。(Type I)(第54回日本血液学会にて報告)。

このtype IのGPIV欠損のうち一名(Na.S)の血清には抗GPIV容体が存在していることが判った。この成績からGPIVが完全に欠損であるtype Iの欠損者にはイソ抗GPIV抗体が産生されことが確認された。Type IIのGPIV欠損の患者のbuffy coatをFicollーPacquで遠心法により分離し、単核球分画とり、この分画から常法によりmRNAを分離し、PCRの増幅法により検討したところ、GPIV欠損者の単球には、1.6KbpのcDNAが検出され、シ-クエンスによりほぼ完全なGPIVのmRNAが存在することが明かとなった。Type IのGPIV欠損者については今後の課題である。骨髄移植対象者でGPIV欠損の患者が発見できたなら、移植経過の観察と、移植後のGPIB抗原の血小板への表現などの観察を予定していた。本年度は45名の骨髄移植対象者と対象候補者をスクリ-ニングしたが、一人もGPIV欠損者を発見することができなかった。本研究は継続予定である。健常者354人のスクリーニングにより16人のGPIV欠損者を見いだした。これら16名のGPIV欠損者の単球の膜上のGPIVをOKM5を用いてflowcytometerにて検討した。14例においてGPIVが陽性であることが明らかになった。これをTypeIIとした。しかし、残り2例においては単球にもGPIVは存在しなかった。これをTypeIとして区別した。TypeIのGPIV欠損のうちNa.Sの血清には抗GPIV抗体が存在していることが判った。この成績からGPIVが完全に欠損であるtype1の欠損者にはイソ抗GPIV抗体が産生されことが確認された。このようにGPIV欠損には2つの型式が存在することが明かとなった。とくに、GPIV欠損の機序を明らかにするにはtypeIの血小板と単球について、mRNAの解析をすることが解明の重要な鍵であるととが明らかになった。しかし、typeIIの単球ではGPIVの発現量がGPIV陽性の単球に比し減少していることが明らかになり、この遺伝子解析も興味がもたれる。TypeIIのGPIV欠損の患者のbuffy coatをFicoll-Pacquで遠心法により分離し、単核球分画とり、この分画から常法によりmRNAを分離し、PCRの増幅法により検討したところ、GPIV欠損者の単球には、1.6kbpのcDNAが検出され、シークエンスによりほぼ完全なGPIVのmRNAが存在することが明かとなった。Ta.KのGPIV欠損者の単球に79番目にC-A変化と、1632番直後にAGTAの4塩基の挿入を観察した。しかし、これらは直接GPIVの欠損とは関係ないと考えられる。Type1のGPIV欠損者の遺伝子解析については今後の課題である。骨髄移植対象者でGPIV欠損の患者が発見できたなら、移植経過の観察と、移植後のGPIV抗原の血小板への表現などの観察を予定していた。二年間に70名の骨髄移植対象者と対象候補者をスクリーニングし、一人のGPIV欠損者を発見することができた。しかし、経過観察中に急変し死亡したため、精査できなかった。