hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ヘテロウィスカーからなるマイクロサイズpn接合

それぞれのウィスカーの接合にあたって、ZnOウィスカーについてはZn(C_5H_7O_2)_2を原料錯体に用いて、気化温度を120°Cに設定し、600°Cに加熱した(0001)サファイヤ単結晶基板上に大気開放型CVD法により、<0001>ZnOエピタキシャルウィスカーを20μm成長させた。550°Cに加熱したZnOウィスカー上に、Ni(C_5H_7O_2)_2を原料錯体に用い、気化温度200°Cに設定して、同様のCVD法でNiOウィスカーを36μm成長させた。得られた接合ウィスカーの形態をFE-SEMで詳細に調査した結果、ZnOウィスカーの先端部分からNiOがウィスカー形態で成長し、そのそれぞれは各方向に傾いて成長していることが確認された。X線回折の結果、NiOウィスカーは<111>配向していた。接合ウィスカーの電流電圧特性は、マニュピレーターを使って、銅電極をウィスカーに接触させ、直流電源とデジタルマルチメーターを用いて測定した。順方向電圧を印加した時の電流特性は非線形であり、500Vで223μAの電流値を示した。本研究の結果、酸化ニッケルと酸化亜鉛のウィスカー形態での接合により、ヘテロウィスカーからなるマイクロサイズpn接合の可能性を見出すことができた。
産婦人科医療における性暴力被害直後の被害者への看護実践モデルの構築

本研究は、産婦人科医療で性暴力被害者への看護実践モデルの構築を目的とし、性暴力被害女性、看護師および産婦人科医師に半構成面接を実施し、内容分析を行った。結果、【被害者が安心できる診察環境つくり】【傷つきを深めない対応ができる】【被害状況や身体精神状況に沿った必要な検査や治療の判断をし、説明ができる】【被害者の自己決定プロセスを支える】【他職種との情報共有と連携ができる】【産婦人科医師と協働し、適切な診察の介助ができる】【証拠採取の正確な方法と知識を習得し、必要時は対応できる】【今後起こりうる症状を予測し、必要な支援先を提供できる】【看護師自身が抱く思いに向かい合い、対処できる】が抽出された。性暴力は、性感染症や望まない妊娠、人工妊娠中絶のような身体的、経済的、社会的にも被害者に影響を与えるだけでなく、心的外傷後ストレス障害の発症が高い。身体的、精神的な影響を考えると、医療機関が担う役割は大きいと考えられ、被害直後からの適切な支援は被害者の回復にも影響を及ぼすと言われている。今後、医療機関における支援を充実させていくためにも、具体的な看護師の対応モデルを構築し活動していく必要がある。本研究の目的は、産婦人科医療における性暴力被害直後の被害者への看護師のケアの実際、産婦人科医師が期待する被害者支援時の看護師役割、性暴力被害者の望む被害直後の産婦人科医療を明らかにし、産婦人科医療における性暴力被害直後の被害者への看護実践モデルを構築することである。本年度は、「性暴力被害者が被害直後の産婦人科医療に望むケア」について明らかにするために研究を行った。対象者は、研究協力の得られた性暴力被害経験のある女性である。国内の性暴力被害者支援団体または自助グループに研究協力依頼を行い、研究協力の得られた団体や施設において協力者を公募した。被害直後の産婦人科医療受診時に希望する支援についてインタビューガイドを作成し、半構造化インタビューを行った。逐語録を作成し質的記述的内容分析を行っている。本研究は、1産婦人科医療における性暴力被害直後の被害者への看護師のケアの実際、2産婦人科医師が期待する被害者支援時の看護師役割、3性暴力被害者の望む被害直後の産婦人科医療を明らかにし、産婦人科医療における性暴力被害直後の被害者への看護実践モデルを構築することを目的とする。平成26年度の研究実績は以下の通りである。1に関して、性暴力被害者支援の経験がある看護師6名へのインタビュー調査が終了し、逐語録の内容を質的記述的内容分析を行っているところである。医療機関の産婦人科における性暴力被害者支援の実際の看護師の関わりが明らかになった。今後、2名の看護師への追加インタビューを予定している。3に関しては、性暴力被害の当事者へのインタビュー調査を5名終了し、逐語録の内容を質的記述的内容分析を行っているところである。被害直後に当事者がどの様な医療や支援を期待するのかが明らかになった。今後、23名の追加インタビューを予定している。平成27年度は、1・3のインタビュー調査の追加と共に、1・3で得られた研究結果を看護学会にて発表し、論文作成を行う。2に関しは、性暴力被害者支援に関わる産婦人科医師へのインタビュー調査を6名予定している。得られたデータを質的記述的内容分析し、性暴力被害者直後にある急性期の性暴力被害者支援看護モデルを構築していく予定である。本研究で得られる研究結果は、近年設置されている性暴力被害者へのワンストップセンターにおける看護師の役割の明確化につながり、性暴力被害者支援の充実に寄与すると考えられる。本研究は、1産婦人科医療における性暴力被害直後の被害者への看護師のケアの実際、2産婦人科医師が期待する日が被害者支援時の看護師役割、3性暴力被害者の望む被害直後の産婦人科医療、4性暴力被害者支援の支援者が期待する看護師の役割を明らかにし、産婦人科医療における性暴力被害直後の被害者への看護実践モデルを構築することである。平成26年度の研究実績は、1に関して、看護師6名へのインタビュー終了。3に関して、当事者6名のインタビュー終了し逐語録を作成し質的内容分析を実施した。平成27年度研究実績は、2に関して、産婦人科医師2名にへのインタビュー終了および継続。4に関して研究追加しインタビュー継続。1・3のデータの質的記述的内容分析を実施継続している。1の分析結果の国際学会での発表準備を行った。平成27年度は、性暴力被害者支援の政策として各地に性暴力救済センターとしてワンストップセンターが設立されてる。その為、看護師は医療者だけでなく相談員や支援員との連携を行う必要性がある。そのため、研究データの追加が必要と考えられ4性暴力被害者支援の支援者が期待する看護師の役割を追加したためである。本研究は、1産婦人科医療における性暴力被害直後の被害者への看護師のケアの実際、2産婦人科医師が期待する被害者支援時の看護師役割、3性暴力被害者の望む被害直後の産婦人科医療、4性暴力被害者支援にあたる相談員が求める看護師の役割を明らかにし、産婦人科医療における性暴力被害直後の被害者への看護実践モデルを構築することを目的とした。1性被害者支援における看護ケアの実際に関して、性暴力被害者支援の実績がある看護師6名にインタビューを実施した。その結果、性暴力被害が被害者に及ぼす身体的、精神的影響に配慮しながら、二次被害を生じさせない関わりを実践していた。しかし、看護ケア提供の裏で看護師らは被害者に寄り添うということに困難感を抱いていることが明らかになった。

2産婦人科医が看護師に期待する役割では、性暴力被害者支援経験のある産婦人科医に4名にインタビューを実施した。その結果、産婦人科医療の担う役割を適切な方法で、被害者に提供できるように協働する、精神的ケアや日常生活支援、多機関連携において看護師の役割を期待していた。また、より専門的なトレーニングの必要性も明らかになった。3性暴力被害当事者の産婦人科受診時の体験を6名にインタビューを実施し、「性暴力被害者の体験」および「性暴力被害者が産婦人科医療に望むケア」が明らかになった。4ワンストップセンターの相談員に、連携時に看護師に求める役割についてインタビューを実施し、被害者の生じるストレス反応を理解した関わりや専門のある看護実践が求められる役割であることが明らかになった。以上の結果から、性暴力被害直後の被害者への看護実践として、【専門的医療・治療の提供】【身体状況のわかり易い説明】【ストレス反応の説明】【サポート先の情報と連携】【家族や付き添い者へのサポート】【自分が大切にされていると感じるケア】が求められることが明らかになった。本研究は、産婦人科医療で性暴力被害者への看護実践モデルの構築を目的とし、性暴力被害女性、看護師および産婦人科医師に半構成面接を実施し、内容分析を行った。結果、【被害者が安心できる診察環境つくり】【傷つきを深めない対応ができる】【被害状況や身体精神状況に沿った必要な検査や治療の判断をし、説明ができる】【被害者の自己決定プロセスを支える】【他職種との情報共有と連携ができる】【産婦人科医師と協働し、適切な診察の介助ができる】【証拠採取の正確な方法と知識を習得し、必要時は対応できる】【今後起こりうる症状を予測し、必要な支援先を提供できる】【看護師自身が抱く思いに向かい合い、対処できる】が抽出された。本研究は、産婦人科医療における性暴力被害直後の被害者への看護実践モデルを構築することを目的とし、性暴力被害の当事者及び性暴力被害者の診察やケアにあたる産婦人科医師、看護師を研究対象としている。その中で、診察に関わる産婦人科医師へのインタビュー調査が遅れているのが研究全体の到達度に影響した。平成28年度は、3・4のインタビュー終了とデータの質的内容分析を行う。得られた14までのデータを基にデルファイ法の基礎データを作成し、性暴力被害者支援における看護師のコンセンサスモデルを得る。1・2のデータについて国内看護学会に論文投稿を行う予定である。母性看護学平成27年度は、性暴力被害の当事者および支援に関わる看護師への追加インタビューおよび、性暴力被害者への診察を実施している産婦人科医師へのインタビュー調査を遂行していく。産婦人科医師のリクルートは、性暴力被害者支援に取り組んでいる医療機関の協力を得る予定である。本年度の計画よりも遅れている。その理由として、インタビュー対象者の確保に時間を要したためである。計画では、性暴力被害者支援に関わる看護師、医師からのインタビューを予定していたが、性暴力被害当事者からへのインタビューを優先したためである。
三叉神経運動ニューロンの樹状突起における情報処理機構

三叉神経運動ニューロンは極めて発達した樹状突起を持っているが、樹状突起上に存在するカルシウムチャネルなどがシナプス後電位を増幅し、複雑な情報処理を行っている可能性が考えられる。そこで、まず二光子励起顕微鏡を用い三叉神経運動ニューロンの樹状突起各部位のカルシウムイオン動態について解析したところ、三叉神経運動ニューロンの樹状突起はシナプス入力を受動的に細胞体へと伝えるだけでなく、それ自体が興奮性を持つことによってシナプス入力情報の増幅や加工など複雑な情報統合処理を行っている可能性が明らかとなった。三叉神経運動ニューロンは極めて発達した樹状突起を持っているが、遠位樹状突起のシナプス入力であっても細胞体に伝達され情報処理がなされていると考えられ、樹状突起上に存在するカルシウムチャネルがシナプス後電位を増幅し、複雑な情報処理を行っている可能性が考えられる。そこで今年度は、二光子励起顕微鏡で観察した三叉神経運動ニューロンの樹状突起各部位のカルシウムイオン動態について、さらに詳しく解析するとともに、各種イオンチャネル拮抗薬の効果を検討した。実験には生後1-5日齢のWister系ラットを用い前頭断脳幹スライス標本を作成し、脳幹標本の三叉神経運動ニューロンの細胞体からのパッチクランプ記録を行った。パッチ電極に蛍光カルシウム指示薬のOregon Green 488BAPTA-1を封入し、細胞内カルシウム濃度の測定に用いると同時に、蛍光色素のAlexa 594も封入し樹状突起を可視化した。三叉神経運動ニューロンにパッチクランプ電極を介して細胞内パルス通電を行って活動電位を誘発し、樹状突起の各部位のカルシウムイオン濃度を二光子励起顕微鏡で観察した。細胞体に活動電位を誘発すると、蛍光強度変化率のピークは多くの樹状突起で細胞体近傍部から遠位に行くにつれて小さくなった。しかし、蛍光強度変化率が中位の樹状突起で高くなる場合が一部で観察された。さらに電位依存性ナトリウムチャネルのブロッカーであるテトロドトキシンを投与するとカルシウム濃度上昇が著しく減弱することから、このカルシウム濃度上昇には樹状突起に分布する電位依存性ナトリウムチャネルの活性化が関与していることを明らかにした。したがって、三叉神経運動ニューロンの樹状突起はシナプス入力を受動的に細胞体へと伝えるだけでなく、それ自体が興奮性を持つことによってシナプス入力情報の増幅や加工など複雑な情報統合処理を行っている可能性が考えられた。三叉神経運動ニューロンは極めて発達した樹状突起を持っているが、遠位樹状突起のシナプス入力であっても、樹状突起上に存在するカルシウムチャネルがシナプス後電位を増幅し、複雑な情報処理を行っている可能性が考えられる。そこで今年度は、生後213日齢のラット脳幹スライス標本上の咬筋運動ニューロンの樹状突起の様々な部位をケージドグルタミン酸を利用したレーザー光誘発性化学刺激法で刺激し,誘発される膜電位応答の応答パターン,応答に関わる電位依存性イオンチャネルの種類およびそれらの発育変化について電気生理学的に解析した.生後25日齢では,記録ニューロン細胞体周囲の樹状突起相当部へレーザー光を照射すると,複数の箇所で潜時の極めて短い脱分極または活動電位がすべてのニューロンで誘発された.電位依存性Na+チャネル拮抗薬のテトロドトキシン投与下では活動電位が抑制されたが,脱分極の大きさはほとんど減弱しなかった.したがって,これらの脱分極応答は,記録ニューロンの樹状突起をレーザー光により解離したグルタミン酸が直接刺激することで誘発された応答であることが示唆された.生後913日齢の幼若ラットでも,すべての記録ニューロンで,細胞体周囲のレーザー光化学刺激によって潜時の短い脱分極が誘発されたが,脱分極の持続時間と振幅が生後25日齢よりも著しく減少した.生後25日齢,913日齢のグループともに,細胞体に近い部位の樹状突起の刺激で大きな脱分極が誘発され、樹状突起の刺激が遠位に加わるほど脱分極が小さくなった.しかし,刺激の部位によっては遠位部の刺激の方が近位部の刺激よりも大きい脱分極を示す応答パターンが認められた.以上の結果から,咬筋運動ニューロンの樹状突起にはシナプス入力の増幅機構が存在し,生後発育とともに変化する可能性が考えられる.三叉神経運動ニューロンは極めて発達した樹状突起を持っているが、樹状突起上に存在するカルシウムチャネルなどがシナプス後電位を増幅し、複雑な情報処理を行っている可能性が考えられる。そこで今年度は、三叉神経運動ニューロンに活動電位を誘発した際の樹状突起各部位のカルシウムイオン濃度変化を二光子励起顕微鏡で観察することによって、樹状突起におけるカルシウムイオン動態を解析し、樹状突起における電位変化の伝播様式を明らかにすることを目的とした。実験には生後5日齢のWister系ラットを用い前頭断脳幹スライス標本を作成し、脳幹標本の三叉神経運動ニューロンの細胞体からのパッチクランプ記録を行った。パッチ電極に蛍光カルシウム指示薬のOregon Green 488

BAPTA-1を封入し、細胞内カルシウム濃度の測定に用いると同時に、蛍光色素のAlexa 594も封入し樹状突起を可視化した。三叉神経運動ニューロンにパッチクランプ電極を介して細胞内パルス通電を行って活動電位を誘発し、樹状突起の各部位のカルシウムイオン濃度を二光子励起顕微鏡で観察した。細胞体に4発の活動電位を誘発すると、蛍光強度変化率のピークは細胞体近傍部よりも中位の樹状突起の方が高くなった。さらに遠位へと移動してもピークの値は中位の樹状突起からわずかに増加するのみであった。また、蛍光強度変化の潜時は樹状突起のそれぞれの部位で差はなかった。以上の結果から、細胞体だけでなく遠位の樹状突起上においても活動電位発生時に脱分極が起こり、カルシウムイオンチャネルを介したカルシウムイオンの流入が起こっていることが明らかとなった。これらの三叉神経ニューロンの細胞体や樹状突起に見られるカルシウムイオンの流入が細胞の情報処理に関わっている可能性がある。平成24年度は、2光子励起顕微鏡で観察した樹状突起のカルシウム動態についてさらに詳細に解析を行うとともに、各種イオンチャネル拮抗薬を投与した効果を検討し、樹状突起の情報処理メカニズムにどのようなイオンチャネルが関与しているかを明らかにすることを目的とした。「研究実績の概要」で記載した通り、三叉神経運動ニューロンにパッチクランプ電極を介して細胞内パルス通電を行って活動電位を誘発し、樹状突起の各部位のカルシウムイオン濃度を二光子励起顕微鏡で観察した。その結果、カルシウム濃度上昇が中位の樹状突起で高くなる場合が一部で観察されたことから、一部の樹状突起でシナプス入力の増強が行われている可能性が明らかとなった。さらに電位依存性ナトリウムチャネルのブロッカーであるテトロドトキシンでカルシウム濃度上昇が著しく減弱することから、このカルシウム濃度上昇には樹状突起に分布する電位依存性ナトリウムチャネルの活性化が関与していることが明らかなった。したがって、本研究課題はおおむね順調に進展していると評価できる。平成23年度は、2光子励起顕微鏡を用いて樹状突起の刺激やカルシウム動態の記録をきわめて高い空間解像度で行い、三叉神経運動ニューロンの樹状突起におけるシナプス後電位の殿堂様式を調べて、樹状突起の情報処理メカニズムを明らかにすることを目的とした。その結果、細胞体に4発の活動電位を誘発すると、蛍光強度変化率のピークは細胞体近傍部よりも中位の樹状突起の方が高くなるが、さらに遠位へと移動してもピークの値は中位の樹状突起からわずかに増加するのみであった。また、蛍光強度変化の潜時は樹状突起のそれぞれの部位で差はないという実験結果を得ている。
梅物の防御反応を誘導するペプチドのコンビナトリアル化学の手法による探索

昨年度までの研究において、コンビケム手法によって作製したペプチドライブラリから植物の防御反応を誘導するペプチドを効率的に探索することを目的とした、ハイスループットスクリーニング法を構築した。今年度は、新規活性ペプチドの探索を目的として、すべてランダムなアミノ酸配列を有するライブラリを作成し、スクリーニングを行なった。ライブラリの配列に含まれるアミノ酸がすべてランダム化された場合、そこに含まれるペプチドの種類は膨大なものとなる。そこで、まず4残基のランダムペプチドライブラリを作成し,スクリーニングに供した。このライブラリは、含まれる配列をすべて合成し、スクリーニングに供することができる残基数である。スクリーニングの結果、この4残基ライブラリからは、活性ペプチドは見出されなかった。その理由として、このライブラリに含まれるペプチドは短く直鎖状であるため構造が固定化されていないことが考えられた。そこで、両末端にCys残基を導入し環状化させることにより構造を固定化したライブラリを作製し、スクリーニングに供したが、このライブラリからも活性ペプチドは見出すことができなかった。これらの結果から、残基数の少なさが大きな要因であると考え、6残基の直鎖ペプチドライブラリを作製した。この場合、すべての配列の組み合わせからなる理論上のペプチドの種類すべてを網羅することは不可能であり、今回はその1%相当(約47万種類)をスクリーニングに供した。その結果、数種のペプチドがスクリーニングにおいて陽性反応を示した。しかしながら、本方法ではペプチドの配列決定を活性検出後に行なうが、これらのペプチドはいずれも構造決定に至らなかった。これらのペプチドは合成途中に副反応により修飾された可能性もあり、エドマン分解以外の方法で配列決定を行なうことが必要であると思われた。植物に防御反応を誘導する新規ペプチドの探索を目的として、コンビナトリアルペプチドライブラリに適応するハイスループットスクリーニング法の構築を行った。植物材料としてタバコ懸濁培養細胞を用い、過酸化水素の発生を指標としたスクリーニング法について検討を行った,本研究では、ペプチドはビーズに固定した状態で取り扱うが、細胞を用いて活性を測定するため、活性測定時にはペプチドは遊離している必要がある。そのため、温和な条件で切断反応が行え、その切断量を制御しやすい光切断型リンカーを有するビーズを用いることとした。ペプチドビーズ約1000個(ポジティブコントロールであるflg15を数個含む)をシャーレ上で0.8%アガロース中に分散させて固定した後、1分間UV(365nm)照射することで、一部のペプチドのみ(10%)をビーズから遊離させた。このアガロース層を、予め作製しておいたタバコ懸濁培養細胞層上に重層して密着させた後、過酸化水素検出試薬(DA-64)をその上より加えた。その結果、DA-64処理15分後には、細胞層上にいくつかの青緑色の発色円が観測された。発色した部位のアガロース中には1020個程度のビーズが含まれていたため、再度上記と同様の操作を繰り返し行い、活性を示すペプチドビーズを特定した。このビーズを回収し、結合しているペプチドのアミノ酸配列をエドマン分解法により決定したところ、flg15のものと一致した。以上のことから、光切断型リンカーを用い、植物培養細胞層上での過酸化水素の発生を指標とした本手法は、1回に約1000個のペプチドの効率的スクリーニングが可能であり、一般的に数千数万種類のペプチドを含んでいるコンビナトリアルライブラリーのスクリーニング法として十分であることがわかった。今年度は、本スクリーニング法の有効性を確認するため、エリシター活性を有することが知られているフラジェリンペプチドの配列をもととして、そのN末端の3残基をランダム化したペプチドライブラリ(配列:X_1X_2X_3SAKDDAAGLQ,X_nはCysを除く19種類のアミノ酸)を作製し、スクリーニングに供した。このライブラリには理論上19x19x19=6,859種類のペプチドが含まれている。スクリーニングの結果、合計25種類の活性ペプチドが見いだされた。これらの活性ペプチドのランダム化した部位の配列を見ると、X_2位にはLeu、Ile、Valのような枝分かれのあるアルキル基を側鎖にもつアミノ酸が、またX_3位には一つを除いてすべてAsnが含まれていることが分かった。X_1位にはすべての種類のアミノ酸が出現し、特に傾向は見られなかった。このフラジェリンペプチドの本来の配列はX_1=Arg、X_2=Ile、X_3=Asnであることから、この結果は妥当なものであると考えられ、本スクリーニング法による活性の判定が正確であることを示している。特にX_3位にはAsnのみ見いだされたことから、フラジェリンペプチドのAsn残基の活性発現に対する重要性も明らかとなった。以上の結果から、本研究で考案したスクリーニング法は、コンビナトリアルライブラリから植物の防御反応を誘導する新規化合物を探索する方法として十分機能するものであることが分かった。

ライブラリの配列に含まれるアミノ酸がすべてランダム化された場合、そこに含まれるペプチドの種類は膨大なものとなる。そこで、まず4残基のランダムペプチドライブラリを作成し,スクリーニングに供した。このライブラリは、含まれる配列をすべて合成し、スクリーニングに供することができる残基数である。スクリーニングの結果、この4残基ライブラリからは、活性ペプチドは見出されなかった。その理由として、このライブラリに含まれるペプチドは短く直鎖状であるため構造が固定化されていないことが考えられた。そこで、両末端にCys残基を導入し環状化させることにより構造を固定化したライブラリを作製し、スクリーニングに供したが、このライブラリからも活性ペプチドは見出すことができなかった。これらの結果から、残基数の少なさが大きな要因であると考え、6残基の直鎖ペプチドライブラリを作製した。この場合、すべての配列の組み合わせからなる理論上のペプチドの種類すべてを網羅することは不可能であり、今回はその1%相当(約47万種類)をスクリーニングに供した。その結果、数種のペプチドがスクリーニングにおいて陽性反応を示した。しかしながら、本方法ではペプチドの配列決定を活性検出後に行なうが、これらのペプチドはいずれも構造決定に至らなかった。これらのペプチドは合成途中に副反応により修飾された可能性もあり、エドマン分解以外の方法で配列決定を行なうことが必要であると思われた。
呼吸ゲート胸部SPECT画像からの動き補償画像の作成およびそのCT画像との融合

呼吸ゲートSPECTによって取得した各呼吸相の再構成画像において,呼吸に伴う肺の動きを補正する手法を考案した.本手法は,呼吸の各相で得た再構成画像における画素値の一致度と,変形の滑らかさに関する2つの目的関数を定義し,シミュレーテッドアニーリングにより変形を最適化させるものである.また,変形後の画素値を,肺の局所的な変形に伴うトレーサー粒子の密度変化に対応させるための伸張係数を導入し,より高精度な動き補正を行うことが可能となった.本手法を計算機ファントム,実ファントム,臨床データにそれぞれ適用し,適切な肺の動き補正が行えることを確認した.具体的には,計算機ファントムを用いた実験では,呼吸による変形を想定して体軸方向に最大18cm引き伸ばした画像データを計算機発生し,これに提案手法を適用したところ,ノイズ存在下でも,1画素6.4mmの分解能に対して位置補正精度2mm以下が実現できることが示された.また加算する吸気位相数を増やしていくことでノイズ抑制効果が高まることが確認できた.すなわち,このシミュレーションにより動き補正された各呼吸相の再構成画像を加算することによって,撮影時間を短くした場合に再構成画像に発生するノイズの影響を低減することが可能であることが示された.実ファントムを使った実験では,直径10mm,25mmのカプセルをコールドスポットとして複数配置したファントムに約185MBqの99m-Tc-Pertecnetateを注入して,呼吸ゲート撮影を模したデータ収集および非ゲートのデータ収集を行い,再構成画像により両者を比較した.この結果,提案手法によりコールドスポットが明瞭に描出されるなど,その効果が示された.さらに,呼吸ゲート法で得られた臨床データに適用したところ,呼気相と吸気相間の適切な動き補正が可能であることが示された.呼吸ゲートSPECTによって取得した各呼吸相の再構成画像において,呼吸に伴う肺の動きを補正する手法を考案した.本手法は,呼吸の各相で得た再構成画像における画素値の一致度と,変形の滑らかさに関する2つの目的関数を定義し,シミュレーテッドアニーリングにより変形を最適化させるものである.また,変形後の画素値を,肺の局所的な変形に伴うトレーサー粒子の密度変化に対応させるための伸張係数を導入し,より高精度な動き補正を行うことが可能となった.本手法を計算機ファントム,実ファントム,臨床データにそれぞれ適用し,適切な肺の動き補正が行えることを確認した.具体的には,計算機ファントムを用いた実験では,呼吸による変形を想定して体軸方向に最大18cm引き伸ばした画像データを計算機発生し,これに提案手法を適用したところ,ノイズ存在下でも,1画素6.4mmの分解能に対して位置補正精度2mm以下が実現できることが示された.また加算する吸気位相数を増やしていくことでノイズ抑制効果が高まることが確認できた.すなわち,このシミュレーションにより動き補正された各呼吸相の再構成画像を加算することによって,撮影時間を短くした場合に再構成画像に発生するノイズの影響を低減することが可能であることが示された.実ファントムを使った実験では,直径10mm,25mmのカプセルをコールドスポットとして複数配置したファントムに約185MBqの99m-Tc-Pertecnetateを注入して,呼吸ゲート撮影を模したデータ収集および非ゲートのデータ収集を行い,再構成画像により両者を比較した.この結果,提案手法によりコールドスポットが明瞭に描出されるなど,その効果が示された.さらに,呼吸ゲート法で得られた臨床データに適用したところ,呼気相と吸気相間の適切な動き補正が可能であることが示された.
19世紀半ばにおけるジョン・ブライトと急進派議員のネットワークに関する研究

まず、前年度までに調査・分析したジョン・ブライトと急進派議員の間の書簡や関連する新聞記事を主たる証言として、ブライトと反穀物法運動や自由貿易運動の関わりについて考察し、その成果を2018年5月の日本西洋史学会にて研究報告した。次に、2018年7月より12月まで、英国、レスター大学都市史研究所において、客員研究員として、資料調査、資料分析、研究報告、研究交流、研究論文作成を進めた。第一に、資料調査では、レスター大学の電子資料の検索だけでなく、イギリス都市史・地方史の世界的なコレクションを調査し、近現代イギリスの統治体制、ミドルクラス、ジョン・ブライトに関す文献等を検討し、研究に必要な資料の複写や記録等を入手できた。第二に、レスター大学以外の文書館、英国図書館、フレンド協会(クエーカー)図書館、マンチェスタ中央図書館、アルフレッド・ジレット・トラスト文書館で、ジョン・ブライトと他の急進派議員に関する証言を示す資料を調査した。第三に、調査・収集した資料を分析し、ジョン・ブライトと消費社会、ブライトと民主主義、ブライトと平和主義に関する有益な証言を得ることができた。第四に、レスター大学を拠点にして、ジョン・ブライト研究に関する研究交流を行い、元レスター大学教授で、現在、デ・モントフォート大学Robert Colls教授、レスター大学都市史研究所所長Simon Gunn教授、エセックス大学Peter Gurney教授らと今後の研究成果の共有と相互発展、また、成果の公開方法について検討した。また、上記都市史研究所だけでなく、バーミンガム大学にて、ジョン・ブライトの選挙区で会ったバーミンガムの市史と都市統治に関する英文での研究報告を行い、貴重な助言だけでなく、公開方法についての助言を得た。そして、上記の点をふまえて英語の投稿論文を作成し、2019年4月現在、査読が進んでいる。英国ロンドンの英国図書館にて、ジョン・ブライトに関する手稿資料の調査を行った。特に、ブライトと、ウィリアム・グラッドストン、ジョゼフ・スタージ、リチャード・コブデン、リポン卿をはじめとする政治家や政治運動家等の間の書簡について調査し、一部を電子的に記録することができた。これらの調査を通じて、同時代におけるブライトの政治構想や社会観が、コブデンやグラッドストン等といった議員や政治運動家との間で、形成されたことを示す証言を得ることができた。さらに、ブライトが関わった知識への課税に反対する社会運動の結社に関する資料の調査を行い、ブライトの知識・出版・課税に関する見解や活動について確認できた。そして、上記の資料調査、文献調査と考察、新聞データベース等の分析を通じて、ジョン・ブライトの活動やネットワークについて、消費社会という観点から考察を進めるという新たな視角を生み出すことができた。2016年11月には、ブライトも深く関わった自由貿易運動に関する最新の研究書の翻訳(フランク・トレントマン『フリートレイド・ネイション』NTT出版)刊行記念のセミナーにて、原著者Frank Trentmannの報告に対してコメントを行うことにより、英国の自由貿易や市民社会に関する見識を深めるだけでなく、自由貿易史に関する見解の交換を行った。これらの調査や研究活動に関連して、ジョン・ブライトとバーミンガムの討論団体の関わり等について考察したShaping Civic Culture through Public Discussionという題の論文を英国の学術雑誌Midland Historyにて掲載しただけでなく、ブライトの出身選挙区のバーミンガムについて、『バーミンガム史』の形成、という題にて、日本にて学術論文を刊行した。本研究に関連した研究成果を刊行し、研究成果に関する報告準備や投稿準備も行っている。よって、研究調査と精緻かつ綿密な資料分析を進めれば、今後も研究成果を公開できる見込みである。他方で、英国ストリートの文書館に所蔵されている大部の未刊行資料の調査や英国図書館における手稿資料の調査だけでなく、新聞をはじめとするデータベースの検索・考察や本研究に関連する最新の研究成果の入手・検討については、引き続き進める必要がある。英国ロンドンの英国図書館の貴重書部にて、ジョン・ブライトや彼と親交のある急進派のリチャード・コブデンが関与していた反穀物法運動の運営団体に関する定期刊行物、3種類(Anti-Bread Tax Circular, 1841-3; The League, 1843-6; Bazaar Gazette, 1845)、手稿部では、ジョン・ブライトの書簡について、調査した。これらの調査を通じて、上記の刊行物の形態や目的が変化したことが明らかとなっただけでなく、同時代におけるブライトの政治構想や社会観が、1840年代を通じて形成されたことが確認できた。さらに、反穀物法運動におけるブライトやコブデンの位置や役割が、1840年代初めから半ばにかけて、変化したことも判明した。また、上記に関連したブライトの動向や判断についても、ブライトと政治運動家の間の書簡から、確認できた。これらの定期刊行物の証言や書簡の証言は、同刊行物の発行中に出版が開始された競合誌であるEconomistの証言と比較検証する必要性があることも判明した。そこで、関連する定期刊行物や新聞のデータベースを活用した結果、反穀物法運動とジョン・ブライトやリチャード・コブデンとの関係が、より具体的に明らかとなった。上記の資料調査、文献調査、資料・文献分析を通じて、ジョン・ブライトと消費社会の関連は、反穀物法運動の展開、急進派の政治家や運動家との関係、自由貿易の運動、政治や経済改革の運動、といった展開や背景の中で、考察される必要性が明らかとなった。以上の調査や研究活動に関連して、John Bright and consumerismという題にて、英文の研究報告を行い、本研究に関連する文献の書評等を刊行した。本研究に関連した研究報告John Bright and Consumersim:を英文にて行い、有益なフィードバックを得た。

2018年度には、フィードバックを参照しつつ改訂した成果を日本西洋史学会とイギリスの大学の研究セミナーで研究報告する予定であり、これらの報告を基礎とした学術論文も作成中である。また、ジョン・ブライトに関する手稿資料と刊行資料の継続した調査と綿密な資料分析を進めれば、今後もジョン・ブライトとリチャード・コブデンのような急進派議員の間のネットワークに関する研究成果を公開できる見込みである。今後も、英国ストリートの文書館等に所蔵されている大部の未刊行資料の調査、英国図書館やその他の文書館に所蔵されている未刊行の手稿資料の調査は、引き続き進める必要がある。同時に、国内外において、19世紀の定期刊行物や出版物に関する電子データベースも関連した用語や視点から網羅的に検索し、収集した証言を精査する必要がある。まず、前年度までに調査・分析したジョン・ブライトと急進派議員の間の書簡や関連する新聞記事を主たる証言として、ブライトと反穀物法運動や自由貿易運動の関わりについて考察し、その成果を2018年5月の日本西洋史学会にて研究報告した。次に、2018年7月より12月まで、英国、レスター大学都市史研究所において、客員研究員として、資料調査、資料分析、研究報告、研究交流、研究論文作成を進めた。第一に、資料調査では、レスター大学の電子資料の検索だけでなく、イギリス都市史・地方史の世界的なコレクションを調査し、近現代イギリスの統治体制、ミドルクラス、ジョン・ブライトに関す文献等を検討し、研究に必要な資料の複写や記録等を入手できた。第二に、レスター大学以外の文書館、英国図書館、フレンド協会(クエーカー)図書館、マンチェスタ中央図書館、アルフレッド・ジレット・トラスト文書館で、ジョン・ブライトと他の急進派議員に関する証言を示す資料を調査した。第三に、調査・収集した資料を分析し、ジョン・ブライトと消費社会、ブライトと民主主義、ブライトと平和主義に関する有益な証言を得ることができた。第四に、レスター大学を拠点にして、ジョン・ブライト研究に関する研究交流を行い、元レスター大学教授で、現在、デ・モントフォート大学Robert Colls教授、レスター大学都市史研究所所長Simon Gunn教授、エセックス大学Peter Gurney教授らと今後の研究成果の共有と相互発展、また、成果の公開方法について検討した。また、上記都市史研究所だけでなく、バーミンガム大学にて、ジョン・ブライトの選挙区で会ったバーミンガムの市史と都市統治に関する英文での研究報告を行い、貴重な助言だけでなく、公開方法についての助言を得た。そして、上記の点をふまえて英語の投稿論文を作成し、2019年4月現在、査読が進んでいる。
被寄生アワヨトウ蛾終齢幼虫血清中から単離した成長阻害ペプチド

成長阻害ペプチド(Growth-blocking Peptide,GBP)は、元々寄生蜂によって寄生され、その発育が終齢幼虫期で停止している、即ち、蛹への変態が阻害されている幼虫血清から単離精製された生理活性ペプチドである。今年度は、主に、GBP遺伝子のクローニングを試みた。精製ペプチドのアミノ酸配列に対応する合成オリゴヌクレオチドプローブを用い、寄生後2日目のアワヨトウ蛾終齢幼虫から抽出したmRNAを元に作成したcDNAライブラリーから5万個以上のプラークをスクリーニングしたが、結局、目的のGBPcDNAはクローニングできなかった。そこで、cDNAをλgt11等の発現ベクターに組み込み、抗体でスクリーニングを行うことにした。その為、先ず、GBPをBSAに修飾しウサギに免疫してポリクローナル抗体を作成したが、GBPにのみ特異的な抗体を得ることはできなかった。次に、同じ抗原(BSA-conjugated-GBP)をマウスに免疫し、モノクローナル抗体の作成を試みた結果、GBP特異的抗体産生クローンを3種得ることができた現在、この内、最も抗体価の高いクローンから抗体を多量に調製しようと進めている際中であり、このモノクローナル抗体が十分使用できるようになれば、cDNAのスクリーニングは勿論、現在も尚はっきりしないGBP合成、分泌器官の同定も可能になるものと期待している。これとは別に、GBPの誘導機構についての実験によって、GBPはストレスによって誘導されるストレス蛋白質である可能性が高まってきた。未寄生アワヨトウ終齢幼虫を15°C(通常は25°C飼育)に数日間置くと、その血清中にGBP様活性が高まることが観察されたからである。今後、GBP遺伝子のクローニングが成功した暁には、各種ストレス(勿論、寄生も含む)でGBP遺伝子がどのように発現するものかを集中的に研究する積りである。
テニスコートの違いによる競技用車椅子の摩擦影響

車いすテニスにおいて、健常者が靴を履きかえるように車いすのタイヤを交換する選手は少ない。本研究は、異なるサーフェイスにおいてタイヤの違いがどの程度車いす駆動に影響するのか調査することを目的とした。テニス用車いすにて実験を行い、2種類のタイヤと、4種類のサーフェイス(ハードコート、オムニコート、天候型陸上トラック、コンクリート)のころがり摩擦力を計測した。車いす重量によってどのように変化するかについても比較を行った。以上の実験により、ハードコートが最も直進性における摩擦力が少ないことが明らかになったが、テニス競技は直進性のみでない為、今後は回転における動きを検討する必要が示唆された。本研究は、異なるサーフェイスにおいて、タイヤの違いがどの程度車いす駆動に影響するのか調査し測定した摩擦係数から適切なタイヤの選択と最適なサーフェイスを明らかにする。そして、実際の動きへの活用を検討することを目的としている。24年度での調査をもとに各国の車椅子形状を踏まえて、国内選手の傾向と合わせ実験に使用する競技用車いすの選定を行い購入した。タイヤの大きさ、車いすシート高、キャンバー角は日本人使用者の平均的な基準に近づけた。25年度は、車いすテニス選手の日本代表合宿にて調査を行った。使用タイヤについての調査とダッシュ測定を行い、画像分析ソフト(Frame-DIASIV)での画像解析を実施した。その後、選手にデータをフィードバックした。駆動フォーム、パワーに関して、今後画像から分析する予定である。また、使用タイヤについては、代表選手は同じメーカーを使用しているため、それ以外のメーカーとの違いを検討する。タイヤの摩擦係数測定に関しては、実験用車いすを用いて静摩擦係数の測定について、現在予備実験を計画中である。動摩擦係数に関しての測定法については現在検討中である。また、ソチパラリンピック競技大会にて、他競技での車いすタイヤ使用の状況を調査した。冬季種目の出場者や観戦者の多くは、大きく溝ができているタイヤを使用しており、夏季競技との違いが大きく見られた。さらに、会場や町においての路面は、アスファルトではあったが路面が悪く、砂利や砂の道も多く見られた。バリアフリー化されていない部分はあったが、車いす使用者においては個別に車での移動手段を用意しているといった対応がみられていた。今後実施するタイヤの摩擦係数測定においては、溝が多い普段用のタイヤを比較用として入れたいと考えている。そして、実際の動きへの活用を検討することを目的とした。24年度では、ロンドンパラリンピック実施年でもあり、各国選手の車椅子形状の調査を行った。競技用車椅子のシート高やキャンバー角は、障害によって様々であった。また各国によって使用車いすメーカー、タイヤは異なっていた。また、体を車椅子に固定し、上半身の動きや体重移動によってターンが行いやすいように作られていた。特にヨーロッパの国々は、シートをソケット式で作られている傾向があった。各国の車椅子形状を踏まえて、国内選手の傾向と合わせ実験に使用する競技用車いすの選定を行った。車いすテニスにおいて国内シェアトップである車椅子メーカー、OX社に依頼し実験用車椅子を購入した。研究報告としては、8月に本研究での基礎研究として昨年度まで調査を行っていた車いす駆動の内容について学会発表を行った。またパラリンピックでの調査結果については12月に行われた日本車いすテニス協会コーチ講習会にて、車椅子形状の講習とともに報告を行った。本実験に使用する装置に関しては、水口らの簡易計測方法を参考にし、よりよい測定装置を現在調査・検討中である。健常者のテニス競技では、サーフェイスの違いによって靴を履きかえる選手が多いが車いすテニスではそういったことはなく、どのサーフェイスでもほぼ同じタイヤを使用していることが分かった。また、タイヤによってどのような影響がなされるのか研究はされていない。そこで本研究では、異なるサーフェイスにおいて、タイヤの違いがどの程度車いす駆動に影響するかを調査し、測定した摩擦係数から適切なタイヤの選択と最適なサーフェイスを明らかにすること、そして直線だけではなく実際の動きへの活用を検討することを目的としている。現在、日本国内では車いすテニスの国際大会は、北九州オープン、ジャパンオープン、神戸オープン、神奈川オープン、大阪オープン、ピースカップ、仙台オープンの全部で7大会ある。その内、ハードコートが4大会、オムニコートが3大会で実施されている。研究については、24年度から25年度は日本人使用者の平均的なテニス用車いすを作成し、使用タイヤの調査と日本代表合宿でのダッシュタイム分析を行った。26年度は、競技用車いすを使用した予備実験の方法を検討し、フォースゲージ(FG-5020)を購入し予備実験を行った。タイヤに関しては現在まだ1種類のみを使用し、測定を行っているため、今後は種類を増やして測定を行うこと、また重量に応じた静摩擦の変化についても測定を行う予定である。また、予備実験で計測した1種類のタイヤでのデータを平成27年度の学会にて発表を行う予定となっている。本研究は、異なるサーフェイスにおいて、タイヤの違いがどの程度車いす駆動に影響するかを調査し測定した摩擦係数から適切なタイヤの選択と適切なサーフェイスを明らかにすることを目的とした。24年度では、ロンドンパラリンピック競技大会にて車いすテニス競技の各国の車いす形状、タイヤ調査を行い、それを踏まえて国内選手の傾向と合わせ実験に使用する競技用車いすの選定を行い購入した。タイヤの大きさ、車いすのシート高、キャンバー角は日本人使用者の平均的な基準に近づけた。

8月には基礎研究として行っていた車いす駆動動作について学会発表を行った。25年度は、車いすテニス選手の日本代表合宿にて調査を行った。使用タイヤについての調査とダッシュ測定を行い、画像分析ソフト(Frame-DIASIV)での画像解析を実施し、選手にデータをフィードバックした。26年度は、テニス用車椅子(OX製)にて、フォースゲージ(FG-5020)を使用して重量に応じた静摩擦の変化について計測を行った。タイヤは2種類、サーフェイスは4種類を選択し、タイヤは、国内選手が多く使用している2種類で、溝があるものとないものを選択した。タイヤの大きさは26インチ、測定したサーフェイスは、テニス用ハードコートとオムニコート、陸上用タータン、コンクリートの4種類とし、重量によってどのように静摩擦係数が変化するかを比較した。2種類のタイヤにはいずれのサーフェイスにおいても差がみられなかった。4種類のサーフェイスにおいては、オムニコートの係数が高く、タータンとコンクリートには違いがなく、ハードコートが係数が低い結果となった。27年度は、測定データについて学会発表を行った。今後は動摩擦係数の測定方法を検討し、実際の駆動動作につなげたいと考えている。車いすテニスにおいて、健常者が靴を履きかえるように車いすのタイヤを交換する選手は少ない。本研究は、異なるサーフェイスにおいてタイヤの違いがどの程度車いす駆動に影響するのか調査することを目的とした。テニス用車いすにて実験を行い、2種類のタイヤと、4種類のサーフェイス(ハードコート、オムニコート、天候型陸上トラック、コンクリート)のころがり摩擦力を計測した。車いす重量によってどのように変化するかについても比較を行った。以上の実験により、ハードコートが最も直進性における摩擦力が少ないことが明らかになったが、テニス競技は直進性のみでない為、今後は回転における動きを検討する必要が示唆された。競技用車いすを使用した予備実験の方法に関して検討に時間を要してしまった。静摩擦と動摩擦を検討していたが、まずは静摩擦を出すことを進め、予備実験までに至った。静摩擦係数から導き出せる内容をさらに検討し、実際の動作までつなげる予定である。複合領域フォースゲージ(FG-5020)を用い、静摩擦係数の本実験測定を行い、サーフェイスの違いで生じるタイヤの摩擦係数を算出する。サーフェイスは、オムニコート、ハードコート、アスファルト、タータンの4種類とする。データを学会発表し、実際のダッシュ動作についても、タイヤを変えて測定し、駆動パワーを算出し調査する。駆動時の肘関節、ヘッドの角度等については、画像分析ソフト(Frame-DIASIV)を用いる。
テロメラーゼ活性を誘導または抑制する新規因子の探索

テロメラーゼ活性は、触媒遺伝子であるhTERTの発現によって制御されている。hTERT promoter 1.8kbpの下流に緑色蛍光タンパク質GFPあるいはルシフェラーゼ遺伝子を連ねてプロモーター活性をモニターするレポーター遺伝子配列を構築し、ベクターとしてレトロイウルスあるいはレンチウイルを用いて遺伝子導入系の確立を行った。その結果、種々のガン細胞や初代培養細胞などの細胞に高効率に遺伝子導入できた。hTERTを発現している大腸ガン細胞株RKOからは、RKO-TRPGFP細胞をhTERT転写活性モニター細胞として樹立した。正常細胞では有限分裂寿命により持続的なhTERT転写活性モニターが不可能になることから、内因性のhTERT promoter活性とは独立した強制発現系による恒常的なhTERT発現で不死化したものを用いた。正常細胞MRC-5およびNHFの2種類の線維芽細胞から、持続的にhTERT転写活性をルシフェラーゼ活性でモニターできるMRCT-TRPluc細胞、NHFT-TRPLuc細胞細胞を構築した。目的のレポーター遺伝子の導入は、使用したウイルスベクター特異的なプライマーを用いてジェノミックPCRにより確認した。ガン細胞株由来のモニター細胞RKO-TRPGFP細胞では緑色蛍光が、RKO-TRPLuc細胞では強いルシフェラーゼ活性が検出された。テロメラーゼ活性が検出できない正常細胞由来のMRCT-TRPLucおよびNHFT-TRPLuc細胞では、ルシフェラーゼ活性は全く検出されなかった。以上の結果から、ガン細胞および正常細胞でhTERT promoterの転写活性を持続的にモニターできる細胞を樹立することに成功した(特許申請中)。また、これらの細胞を用いてhTERT promoterの転写活性を変化させる天然物化合物をスクリーニングし、最終的に強い阻害活性を持つ2種類の天然化合物を得ることができたが、その阻害機構についてはさらなる検討が必要である。しかし、このようなhTERTの転写活性を下げるタイプの化合物は今まで無く、今後様々ながんの抗癌剤の候補として寄与するものと考えている。テロメラーゼを抑制あるいは誘導する因子をスクリーニングする目的で、テロメラーゼの触媒サブユニットのhTERT遺伝子のプロモーターにGFP(緑色蛍光遺伝子)をつなげたコンストラクトを作成した。これを、テロメラーゼ活性があるがん細胞RKOに導入し、緑色蛍光がある細胞(hTERTが活性化している細胞)をセルソーターによって単離し、細胞一個単位でhTERTの転写活性をモニターできる細胞を樹立した。同様の手法により、hTERT遺伝子を導入してテロメラーゼ活性をもち不死化した正常繊維芽細胞NHF-hTERTにhTERTプロモーター-GFPのコンストラクトを導入した。この細胞では、内因性のhTERTの発現はきわめて低いので緑色蛍光を全く見られなかった。hTERTの転写抑制因子MeninのsiRNAを細胞に処理すると、NHF-hTERTモニター細胞で緑色蛍光が見られたことから、hTERTの発現を誘導する因子をスクリーニングするよいモニター細胞の樹立ができた。RKO細胞のhTERTモニター細胞を用いた実験では、モニター細胞に正常細胞のcDNAライブラリー(hTERTを抑制する遺伝子が含まれている)を導入して緑色蛍光が低下した細胞をセルソーターを用いて、20個づつ24穴マルチウエルプレート10枚に集めた。これらの細胞を増やして、DNAを単離し、PCRによって導入したcDNAを回収した。現在これらのcDNAクローンの二次スクリーニング、塩基配列の決定を行い、hTERTの転写を抑制する因子を絞り込んでいる。

hTERT promoter 1.8kbpの下流に緑色傾向タンパク質GFPあるいはルシフェラーゼ遺伝子をつなげて、レトロイウルスあるいはレンチウイルスのベクターを用いてこれらを種々に遺伝子導入できる系の確立を行った。その結果、種々のガン細胞、初代培養細胞などの様々な細胞に高効率に遺伝子導入できた。大腸ガン細胞株RKOからは、RKO-TRPGFP細胞をhTERT転写活性モニター細胞として樹立した。正常細胞は、寿命があるため持続的にhTERTの転写活性をみることが不可能になるため、内因性のhTERT promoter活性とは独立した強制発現系をもちいて恒常的にhTERTを発現させて正常細胞を不死化させたものを用いた。正常細胞MRC-5およびNHFの2種類の線維芽細胞を用いて、それぞれMRCT-TRPluc細胞、NHFT-TRPLuc細胞を持続的にhTERTの転写活性をルシフェラーゼの活性でモニターできる細胞の構築した。hTERTの発現しているガン細胞株RKO由来のモニター細胞RKO-TRPLuc細胞では、緑色蛍光または強いルシフェラーゼ活性が検出された。テロメラーゼ活性が検出できない正常細胞由来のMRCT-TRPLucおよびNHFT-TRPLuc細胞ではルシフェラーゼ活性は全く検出されなかった。目的のレポーター遺伝子の導入は、使用したウイルスベクター特異的なプライマーを用いてジェノミックPCRにより導入を確認した。以上の結果から、ガン細胞および正常細胞でhTERT promoterの転写活性を持続的にモニターできる細胞を樹立することに成功した(特許申請中)。また、この細胞を用いてhTERT promoterの転写活性をあげる天然物化合物をスクリーニングしその候補となる化合物候補を数種類同定した。