hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
堆積物中の環境DNAを用いた浮魚類の個体数復元に関する研究

地球温暖化により,サケ、サンマ等の浮魚類の分布は大きく変わることが予想されているが、その根拠・参照とすべき過去の温暖な時期における分布範囲については、その痕跡となるウロコ等の遺骸がほとんどの場合海洋堆積物中に残っていないため、これまで何の情報も得られていなかった。本研究では、過去の海洋生物の分布範囲の解明に今後期待が寄せられる堆積物中の環境DNAに着目し、日本列島周辺の有用魚種を対象に堆積物中の環境DNAが過去の浮魚類個体数を推定する方法として有用性があるかについて明らかにする。本研究では、カタクチイワシ・マイワシ・マアジについて別府湾堆積物から実際に環境DNAが検出されるかという点と鱗濃度や鱗堆積量、漁獲量との間に類似した変動を示すかどうかという点に焦点を絞って研究を進めてきた。平成29年度では、すでにカタクチイワシやマアジのプライマーを使って定量PCRで堆積物中の環境DNAの増幅と定量に成功していたが、平成30年度ではマイワシのプライマーを新たに開発し、マイワシについても海洋堆積物中から環境DNAが増幅と定量に成功した。本研究によって、環境DNAが約300年前の堆積物中に存在することが明らかとなった。また、環境DNA量と魚鱗濃度や漁獲量との間の関係を調べたところ、マイワシとマアジについては数十年規模の類似した変動を示し、魚の動態が環境DNAにより把握できる可能性が見えてきた。一方、カタクチイワシについては、魚鱗濃度と類似した変動を示さなかった。このことは、魚鱗とDNAはそれぞれ異なるシグナルを見ていることを示唆した。本研究では、カタクチイワシ・マイワシ・マアジについて別府湾堆積物から実際に環境DNAが検出されるかという点と鱗濃度や鱗堆積量との間に類似した変動を示すかどうかという点に焦点を絞って研究を進めてきた。3種とも、定量PCRで堆積物中の環境DNAの増幅と定量に成功し、海洋堆積物中から魚の環境DNAが存在することが本研究で初めて明らかとなった。また、どの種も環境DNAが約300年前の堆積物中にも存在することや、魚鱗・漁獲記録との間に数十年規模の類似した変動を捉えることができた。概ね予想した通りの結果が得られた。マイワシやマアジは単位重量当りのDNA量が少なく、定量性に改善の余地があること、カタクチイワシについては魚鱗濃度の時系列変化との不一致の原因を突き止める必要がある等の課題が残ったが、概ね研究課題の目的は達成できた。課題として、低濃度のDNAの回収率をあげることで、定量性を高める必要がある。そのために、大容量試料を用いた抽出法を開発する必要があること、PCR阻害物質の除去を行う必要がある。現在、その開発を進めている。別府湾では、過去1000年の間に日本のマイワシやカタクチイワシの個体数の数十年規模変動及び数百年規模変動が存在することがわかっている。そこで、別府湾において、これらの魚種の環境DNAが実際に堆積物中に残っているかを明らかにし、さらに堆積物中のDNA量と魚鱗記録に見られた個体数変動との間に類似する数十年規模変動及び数百年規模変動を示すかどうか調べた。平成29年度では、新たに採取した海底コア試料を使って、すでにプライマーが開発されているカタクチイワシとマアジを対象に堆積物中の環境DNA量を明らかにした。過去300年間を対象として、堆積物の環境DNAを抽出し、定量PCR法によって増幅し、DNA量を推定した。その結果、カタクチイワシ及びマアジのDNAが約300年前の堆積物中から検出されることがわかった。また、カタクチイワシについては、DNA量と魚鱗濃度との間に数年スケール変動については有意な相関は認められなかったが、100年規模変動パターンは両者の間で類似したパターンを示すことがわかった。マアジについては、検出率が低く、時系列変動を明らかにすることはできなかった。マイワシについてはプライマー開発が思うように進まなかったが、カタクチイワシやマアジについては、すでに開発されていたプライマーを使って定量PCRで堆積物中の環境DNAの増幅と定量に成功した。海洋堆積物中から魚の環境DNAが存在することが本研究で初めて明らかとなった。また、環境DNAが約300年前の堆積物中にも両種の環境DNAが存在することや、魚鱗記録との間に数百年規模の類似した変動を捉えることができた。一方、鱗が残らない堆積環境でも環境DNAが個体数復元に利用できるかについても研究課題の一つとなっているが、海底酸素濃度の異なる5つの地点で採取した表層堆積物試料を使ってDNA量と酸素濃度との関係を調べた。

空間的なバラツキが大きいが、酸素濃度の低い環境でDNA量が少ないあるいは検出できないことがわかった。地球温暖化により,サケ、サンマ等の浮魚類の分布は大きく変わることが予想されているが、その根拠・参照とすべき過去の温暖な時期における分布範囲については、その痕跡となるウロコ等の遺骸がほとんどの場合海洋堆積物中に残っていないため、これまで何の情報も得られていなかった。本研究では、過去の海洋生物の分布範囲の解明に今後期待が寄せられる堆積物中の環境DNAに着目し、日本列島周辺の有用魚種を対象に堆積物中の環境DNAが過去の浮魚類個体数を推定する方法として有用性があるかについて明らかにする。本研究では、カタクチイワシ・マイワシ・マアジについて別府湾堆積物から実際に環境DNAが検出されるかという点と鱗濃度や鱗堆積量、漁獲量との間に類似した変動を示すかどうかという点に焦点を絞って研究を進めてきた。平成29年度では、すでにカタクチイワシやマアジのプライマーを使って定量PCRで堆積物中の環境DNAの増幅と定量に成功していたが、平成30年度ではマイワシのプライマーを新たに開発し、マイワシについても海洋堆積物中から環境DNAが増幅と定量に成功した。本研究によって、環境DNAが約300年前の堆積物中に存在することが明らかとなった。また、環境DNA量と魚鱗濃度や漁獲量との間の関係を調べたところ、マイワシとマアジについては数十年規模の類似した変動を示し、魚の動態が環境DNAにより把握できる可能性が見えてきた。一方、カタクチイワシについては、魚鱗濃度と類似した変動を示さなかった。このことは、魚鱗とDNAはそれぞれ異なるシグナルを見ていることを示唆した。本研究では、カタクチイワシ・マイワシ・マアジについて別府湾堆積物から実際に環境DNAが検出されるかという点と鱗濃度や鱗堆積量との間に類似した変動を示すかどうかという点に焦点を絞って研究を進めてきた。3種とも、定量PCRで堆積物中の環境DNAの増幅と定量に成功し、海洋堆積物中から魚の環境DNAが存在することが本研究で初めて明らかとなった。また、どの種も環境DNAが約300年前の堆積物中にも存在することや、魚鱗・漁獲記録との間に数十年規模の類似した変動を捉えることができた。概ね予想した通りの結果が得られた。マイワシやマアジは単位重量当りのDNA量が少なく、定量性に改善の余地があること、カタクチイワシについては魚鱗濃度の時系列変化との不一致の原因を突き止める必要がある等の課題が残ったが、概ね研究課題の目的は達成できた。今後は、マイワシのプライマーができ次第、すでに抽出された分についてマイワシの環境DNAを定量する。さらに、カタクチイワシについては数百年規模変動が認められたが、これが複数のコア試料でも同様に認められるかどうかについて明らかにするために、平成30年度で新たにコア試料を採取し、環境DNA量を調べる予定である。課題として、低濃度のDNAの回収率をあげることで、定量性を高める必要がある。そのために、大容量試料を用いた抽出法を開発する必要があること、PCR阻害物質の除去を行う必要がある。現在、その開発を進めている。マイワシのプライマー開発が遅れていたので、マイワシDNAの分析がまだ終わっていない。また、空間的にDNA量のバラツキが大きいことがわかり、複数本のコア試料で年代毎に平均値と標準偏差を求める必要があるが、同じ分析を複数本で行う必要が生じた。
積層構造をもつ超小型偏光分離素子の開発研究

積層形偏光分離素子(laminated polarization splitter:LPS)は、屈折率の異なる2種材料の多層膜からなる極めて小さな偏光分離素子であり、集積型光機能デバイスの重要な構成素子である。本研究では、光通信で用いられる波長1.55μm帯用および1.3μm帯用の高性能なLPS作製技術の検討をおこなった。波長1.55μm帯用では、rfスパッタリング法を用いて、厚さ200μm以上の多層膜を平坦で且つ安定に作製することができた。その結果、0.1dB/100μmの極めて低損失なLPSを達成した。波長1.3μm帯用では、プラズマCVD法におけるa-Si_<1-x>C_xとSiO_2からなる多層膜の作製条件を最適化することにより、LPSの損失を以前に比べて低減することができた。作製したLPSを平面導波路集積型光コネクトに応用し、動作確認をおこなった。また光ファイバ垂直集積デバイスとしてアイソレータアレイを試作し、本集積構造の有用性を実証した。LPS(積層構造をもつ超小形偏光分離素子)の応用デバイスとしてファイバ集積型偏波無依存アイソレータ検討している。そのために必要なLPSの偏光分離幅,素子厚さを達成するため,LPSを構成する多層膜の作製条件を改善した。膜表面の平坦化に有効なバイアス・スパッタリング(装置内で用いられる磁気回路を備品として購入)を必要最小限に用いることで,平坦でかつ膜の歪が小さい多層膜を厚さ200μmまでの達成することができた。この多層膜から偏光分離幅70μm(素子長200μm)と低損失0.1dB/100μmの高性能なLPSが得られた。また波長1.55μm用のLPSを用いたファイバ集積型偏波無依存光アイソレータおよび光スイッチの試作実験をおこない,動作確認をおこなった。a-SiCとSiO_2の交互多層膜作製装置であるプラズマCVD装置の改造をおこなった。高周波をパルス状に変調(電源を備品として購入)することや,ガス流量などの成膜条件を改善することで,平坦な膜を得ることができた。この条件により多層膜を作製し,LPSの特性向上を達成した。(スパッタリング法による各種素材の検討)低屈折率材料としてMgF_2を,高屈折率材料としてCH_4ガス導入によりるSiCなどをRFスパッタリング法により検討し,LPS材料として利用できることがわかった(宇都宮大)。LPS(積層構造をもつ超小形偏光分離素子)をデバイスに応用する際に必要な偏光分離幅、素子厚さを達成するため、LPSを構成する多層膜の作製条件を改善した。今回新たにSiO_2に水素を添加することで、歪の小さい、膜表面の平坦な多層膜を厚さ200μm以上まで厚膜化することができた。この多層膜から、デバイスへ応用するために必要な偏光分離幅、素子厚さ、口径を有するLPSが得られた。a-SiCとSiO_2の交互多層膜作製条件について、今回は多層膜境界面の平坦化のため、基板温度とSiO2成膜時における供給ガス流量の最適化をおこなった。基板温度は200°Cのとき、また、全ガス流量(SiH_4、CH_4、H_2)に対するH_2流量比を89%まで増やしたとき、平坦性の高い膜が得られることがわかった。LPSのデバイス応用作製した波長1.3μm、1.55μm帯用LPSを用いて、平面光導波路集積型光スイッチの基本的な動作実験をおこなった。また、波長1.55μm用のLPSを用いてファイバ集積型偏波無依存光アイソレータを作製し、動作確認をおこなった。積層形偏光分離素子(laminated polarization splitter : LPS)は、屈折率の異なる2種材料の多層膜からなる極めて小さな偏光分離素子であり、集積型光機能デバイスの重要な構成素子である。

波長1.55μm帯用では多層膜をrfスパッタリング法を用いて、(1)低屈折率材料にSiOx:Hを用いること、(2)バイアススパッタリングの条件を最適化すること、(3)成膜途中に表面を研磨すること、の3つの改善を行なうことで、厚さ200μm以上の多層膜を平坦で且つ安定に作製することができた。また、この多層膜から0.1dB/100μmの極めて低損失なLPSを達成した。波長1.3μm帯用では、プラズマCVD法におけるa-Si_<1-x>C_xとSiO_2からなる多層膜の作製条件を最適化することにより、LPSの損失を以前に比べて低減することができた。作製したLPSを平面導波路にハイブリッド集積し、光スイッチングの動作確認をおこなった。また光ファイバ垂直集積デバイスとしてアイソレータアレイについて、原理確認のため従来のルチルからなる偏光分離素子を用いて試作し、本集積構造の有用性を実証した。さらにLPSを用いたときの設計をおこない、特性が大幅に改善されることを確認した。
変形性膝関節症に対するヒアルロン酸と多血小板血漿を併用した関節内注射治療

申請者らは過去にPRPとHAの混合により放出される成長因子が増加することを示したが、変形性膝関節症(膝OA)患者に対するPRPとHAの併用による効果は明らかではない。本研究の目的は膝OA患者にHAおよびPRPを同時に関節投与することによる短期成績を明らかにすることである。本研究ではHA投与群、PRP投与群、HA・PRP同時投与群の3群間で、患者立脚評価、機能評価、画像評価、関節液中の炎症性サイトカインを比較する。
非天然アミノ酸を使用したin vivoでのシナプトタグミンの立体構造変化の検出

本研究課題では、シナプスの機能に対する理解を深めるため、神経伝達物質の放出に中心的な役割を担っているシナプトタグミンの構造変化を捉えることが目的である。カルシウム依存的な構造変化を捉えるためには、生体内で行わざるを得ないため、体が透明なゼブラフィッシュの稚魚を用いて、シナプトタグミンに蛍光プローブを導入することで構造変化を蛍光輝度の変化として検出する。蛍光プローブはアミノ酸類似物質であり蛍光を持つAnapと呼ばれる分子を使い遺伝コード拡張法を利用して部位特異的に導入する。そのためにまず、Anap専用のtRNAおよび、AnapをtRNAに結合するための酵素であるアミノアシルtRNA合成酵素(aaRS)をコードするプラスミドを構築した。まずこの遺伝コード拡張法がゼブラフィッシュで機能するかどうか調べるため、GFPの遺伝子の途中にAnapを組み込みGFPの蛍光の有無で遺伝コード拡張法が機能しているかどうか調べる実験系を構築した。プラスミドおよび、GFPのmRNAをゼブラフィッシュの受精卵に顕微注入をしたところ、ほとんどGFPの蛍光は観察されなかった。tRNAの発現量が組み込み効率に大きく寄与していると考え、tRNAとaaRSをRNAとして受精卵の顕微注入し、それぞれの注入量をコントロールできるようにした。tRNAの量を大幅に増加させたところGFPの蛍光を確認することができた。これはゼブラフィッシュの生体内で遺伝コード拡張法が利用できることを示した数少ない知見である。当初の予定ではシナプトタグミンに蛍光ラベルを導入する予定だったが、ゼブラフィッシュの体内で遺伝コード拡張法を機能させる方法を見出すのに時間がかかったので、やや遅れているとした。GFPの蛍光を利用してゼブラフィッシュの体内で遺伝コード拡張法を機能させる方法を開発させることに成功した。次は実際にシナプトタグミンにAnapを導入し、カルシウム依存的な蛍光変化を測定することを試みる。運動神経特異的に機能するhb9プロモーターの下流に導入部位をTAGのコドンに変異させたシナプトタグミン遺伝子を繋いだプラスミドを構築し、これを受精卵にtRNA, aaRSと共に顕微注入する。数日発生させた後に麻酔下で、ゼブラフィッシュの幼魚全体に電場をかけて神経活動を刺激しながらAnapの蛍光を検出する。本研究では生きたゼブラフィッシュの中で、タンパク質の立体構造変化を捉えることを目的としているが、そのためにはまず目的タンパク質の特定部位に蛍光を持つ非天然(人工)アミノ酸(Anap)を導入する技術を確立する必要がある。非天然アミノ酸、Anapを導入するにはAnapを認識するアミノアシルtRNA合成酵素(aaRS)およびtRNAを持つゼブラフィッシュの系統を樹立し、その後目的タンパク質とAnapを生体内に導入し目的タンパク質にAnapを取り込ませる。系統を樹立するにはaaRSとtRNAをコードするプラスミドを初期胚にmicroinjectionをすることで行うが、うまく胚にプラスミドが導入されたかどうか、また胚が発生しこの形質が次世代に受け継がれ系統化出来たかどうか判別するために蛍光マーカーが必要となる。そのため本年度は、プラスミドに蛍光マーカーを導入し、これをmicroinjectionすることで系統化の確立を試みた。しかしながらAnapの組み込み必要な各遺伝子は次世代に受け継がれず系統化は出来なかった。またAnapを組み込む目的タンパク質としてアセチルコリン受容体が利用できるかどうか検討するため、過去に組み込みが上手く行った実績のあるXenopus oocyteの発現系を利用してアセチルコリン受容体の様々な部位にAnapを組み込んだ。その結果、ligand結合部位付近にAnapを導入した際に構造変化に伴う蛍光信号を捉えることに成功した。非天然アミノ酸Anapを利用できるゼブラフィッシュの系統化はまだ出来ていないが、蛍光マーカーをプラスミドに組み込むことに成功した。またligand結合部位にAnapを組み込むことで、発現系を利用した実験ではあるが構造変化に応じた蛍光信号を捉えることが出来た。よって、おおむね順調に進展しているとした。本研究課題ではシナプス前週末において、神経伝達物質の放出に中心的な役割を果たしているシナプトタグミンと呼ばれるタンパク質が、実際に神経伝達物質を放出する際にどのような構造変化を伴い機能を発揮するのか、生体内に存在する状態のまま構造変化を蛍光を利用して捉えることを最終的な目標として推進している。実験動物としてゼブラフィッシュを用いている。ゼブラフィッシュはモデル動物として広く利用されており、特に幼魚は透明なため、生きた状態で体内の蛍光シグナルを検出することができ、かつ遺伝子導入や遺伝子改変などの方法論も確立されつつあり本研究に適した実験動物である。ゼブラフィッシュの体内で特定のタンパク質を蛍光ラベルするために、本研究では蛍光を持つ人工アミノ酸(Anap)を組み込むことを計画した。人工アミノ酸の組み込みには人工アミノ酸のみを認識するtRNA、およびこのtRNAに人工アミノ酸を付加する酵素が必要であり、本実験の遂行にはこれらのものを恒常的にゼブラフィッシュの体内で発現するトランスジェニック動物の構築が必要となる。そのために本年度、tRNAと酵素をコードするプラスミドを構築した。このプラスミドにはゲノムへの挿入効率が非常に高くなると報告されているTol2 transposaseを用いた方法が使える配列も組み込んであり、これをゼブラフィッシュの受精卵に顕微注入することで、数か月後にトランスジェニック動物が完成するものと考えられる。本研究の遂行に重要であるトランスジェニック動物の作成の目途がつきつつある。よっておおむね順調に進展しているとした。

カルシウム依存的な構造変化を捉えるためには、生体内で行わざるを得ないため、体が透明なゼブラフィッシュの稚魚を用いて、シナプトタグミンに蛍光プローブを導入することで構造変化を蛍光輝度の変化として検出する。蛍光プローブはアミノ酸類似物質であり蛍光を持つAnapと呼ばれる分子を使い遺伝コード拡張法を利用して部位特異的に導入する。そのためにまず、Anap専用のtRNAおよび、AnapをtRNAに結合するための酵素であるアミノアシルtRNA合成酵素(aaRS)をコードするプラスミドを構築した。まずこの遺伝コード拡張法がゼブラフィッシュで機能するかどうか調べるため、GFPの遺伝子の途中にAnapを組み込みGFPの蛍光の有無で遺伝コード拡張法が機能しているかどうか調べる実験系を構築した。プラスミドおよび、GFPのmRNAをゼブラフィッシュの受精卵に顕微注入をしたところ、ほとんどGFPの蛍光は観察されなかった。tRNAの発現量が組み込み効率に大きく寄与していると考え、tRNAとaaRSをRNAとして受精卵の顕微注入し、それぞれの注入量をコントロールできるようにした。tRNAの量を大幅に増加させたところGFPの蛍光を確認することができた。これはゼブラフィッシュの生体内で遺伝コード拡張法が利用できることを示した数少ない知見である。当初の予定ではシナプトタグミンに蛍光ラベルを導入する予定だったが、ゼブラフィッシュの体内で遺伝コード拡張法を機能させる方法を見出すのに時間がかかったので、やや遅れているとした。系統の確立を優先的に取り組む。本年度はトランスジェニックゼブラフィッシュを作成することを試みたが上手く行かなかった。次年度はより確実性の高い方法として、最近開発されたゲノム編集を行うことで系統化の確立を試みる。トランスジェニック動物の作成には数カ月時間がかかるが、作成後はまず人工アミノ酸の挿入に必要なtRNAおよび酵素がゼブラフィッシュの体の中で実際にどの程度機能し得るか検討する。その後にシナプトタグミンに人工アミノ酸を導入することを目指して研究を進めていく予定である。GFPの蛍光を利用してゼブラフィッシュの体内で遺伝コード拡張法を機能させる方法を開発させることに成功した。次は実際にシナプトタグミンにAnapを導入し、カルシウム依存的な蛍光変化を測定することを試みる。運動神経特異的に機能するhb9プロモーターの下流に導入部位をTAGのコドンに変異させたシナプトタグミン遺伝子を繋いだプラスミドを構築し、これを受精卵にtRNA, aaRSと共に顕微注入する。数日発生させた後に麻酔下で、ゼブラフィッシュの幼魚全体に電場をかけて神経活動を刺激しながらAnapの蛍光を検出する。
放射線のひきおこす遺伝子活性の変化

大腸菌では放射線や化学物質にさらされて死の危険が生ずると新しい遺伝子群の活性が高まり死をまぬがれようとする(SOS反応)。同じような反応がはたして高等な哺乳類の細胞でもみられるかどうかを知るためにクローン化されたいくつかの遺伝子を用い放射線被曝後その転写産物であるmRNAの量に変化がないかどうか主にNorthern法を使って調べた。まず始めに、使用するマウス白血病細胞L5178Yで様々な遺伝子が通常状態で発現しているかどうかチェックしたが、調べたhouse-Keeping遺伝子(DHFR,アクチン,SOD),内因性ウィルス(AKV,xenatropic virus,VL-30,IAP),癌遺伝子(C-myc,N-myc,myb,ras)のいずれもが発現していたがC-fosの発現はみられなかった。次にこの細胞にX線あるいはガンマ線を5200Gy照射し、その後15及び60分後にmRNAのレベルがどのように変わるかを調べたが、調べたすべての遺伝子で有意な変化はみられなかった。ただC-fosだけは15分の時点で22KbのmRNAが一過性に現われ、その後はみられなくなった。この現象の確認のために追試を重ねるうちある時は0°C処理だけの非照射群でもC-fosの誘導のみられることが判り、その原因を追求したが、現時点ではL5178Yの培養時、瓶の底についている一部の細胞が非分裂期に入り、それがC-fos誘導の原因になっていることが孝えられる。現在この点を克服するための条件を摸索している。今後その新しい条件下でC-fosの誘導があるかどうか検討する予定である。一方遺伝子の発現と密接は関係があると考えられているDNAのメチル化がC-myc遺伝子領域で放射線照射によって変化する事を見出した。これと遺伝子発現との関連も調査中である。
近世期の越後・佐渡における書籍の流通に関する研究

【研究実績の概要】本研究の目的は、日本の近世社会がどのような文化水準のもとにあったのかを解明する一環として、近世期の越後・佐渡地域における書籍の流通実態を明らかにすることである。具体的には、越後・佐渡地域の書肆(本屋・書籍商)がどのようにして形成されてきたかを、以下のような方法で調査した。(1)すでになされている全国的な調査から、同地域の書肆をリストアップした。(2)同地域内で出版された書籍の奥付等の調査から、書肆名をリストアップした。(3)同地域内の著名な文人関係資料から出入りの書肆を明らかにした。(4)旅案内書等から書肆の所在を確認した。このうち、本年度の研究においては、(3)の調査を中心的に実施した。なお、当初の予定であった(5)同地域の大規模書店の調査については、残念ながら有力な資料を得るに至らなかった。以上の調査の結果、越後・佐渡地域においても、遅くとも18世紀後半には書肆が営業を始めており、近世期を通じて62軒の書肆が確認されること、さらに明治以後においては、明治以前の書肆を中核としつつも、明治10年代に書籍商形成上の飛躍が見られ、明治期を通じて260軒を超える書肆の存在が確認されることなどが判明した。今次調査においては十分に解明できなかった、近世期から存在する有力な書肆の経営実態とその変遷、明治期以後については、書籍商の活性化と深いつながりがあると思われる学校教育との具体的な関係などを調査・検討することが、今後の課題として残された。
慢性関節リウマチ滑膜における特異的発現遺伝子の多型解析による検討

Idは細胞の分化、血管新生に関わる分子で、ID3はRAの疾患感受性遺伝子候補領域に位置する。滑膜組織における検討では、ID1, ID3はRAでOAに比して3-10倍の発現増加が確認され、特にId1分子はRA滑膜の血管内皮細胞での発現が著明であった。ID遺伝子のRAとの疾患感受性を検討する目的で、ID3遺伝子の遺伝子多型を検索したところ、イントロン1に1か所、エクソン2に1か所、エクソン3の非翻訳領域に2か所の多型を見いだしたが、いずれの多型も有意な疾患関連性は認められなかった。FRPはRA患者の自己抗原として報告され、破骨細胞での発現も注目されている。FOSBは骨芽細胞の発現やT細胞の分化の調節にかかわる転写因子であり、RA滑膜において遺伝子発現の増強が確認された。興味深いことに、RA滑膜ではFOSBに対して、スプライシングアイソフォームであるΔFOSBの発現が相対的に増加していた。FOSBは近年骨芽細胞の発現レベルでの制御やT細胞の分化の調節などとの重要な関連が報告されており、RAの病態に重要な役割を持つ可能性が示唆される。現在RA滑膜中で発現しているFOSB遺伝子のアイソフォームの機能を検討中である。慢性関節リウマチ(RA)の関節滑膜における特異的発現遺伝子をdifferential display法により検討した。11の同定された候補遺伝子断片のうち、興味深いものとしてinhibitor of differentiation 1(ID1)遺伝子を検討した。ID遺伝子はID1-4のファミリーを成しており、細胞の分化、増殖や血管新生において重要な遺伝子として注目されている。我々は、ID1およびRAの疾患感受性遺伝子領域の一つである1p36に位置するID3について滑膜でのmRNAの発現を半定量的RT-PCRで検討した。結果、RA13例の滑膜では変形性関節症(OA)6例に比較して平均でID1は9.6倍、ID3は3.3倍と有意な発現増強が認められた。また、蛋白レベルでのIdの発現増強と局在について免疫組織染色を行ったところ、RA滑膜において滑膜(線維芽)細胞におけるId1およびId3の発現の増強が確認された。ID遺伝子のRAに対する疾患感受性を検討する目的で、ID3遺伝子の遺伝子多型を検索した。健常者93例、RA88例、全身性エリテマトーデス30例では、イントロン1に1か所(IVS1+19A>G)、エクソン2に1か所(c.313G>A:p.A105T)、エクソン3の非翻訳領域に2か所(c.^*144A>G,c.^*260T>C)の多型を見いだした。このうちエクソン2の多型はアミノ酸置換を伴う多型で、RA患者に1例のみ見られた。いずれの多型も有意な疾患関連は認められなかった。現在、ID3の発現を調節するプロモーター領域の多型を検索中である。
細胞壁構築と形態形成

植物細胞壁は、その構築を通して個体の形態形成に様々な影響を及ぼしている。細胞壁はセルロース微繊維をキシログルカンが架橋した超高分子ネットワークからなる。架橋分子キシログルカンの構造変化は構築過程で重要な役割を果たすと考えられているが、その詳細は明らかではない。私たちは細胞壁構築の制御機構を解明するため、(1)キシログルカンの繋ぎ換えを触媒するエンド型キシログルカン転位酵素(EXT)をコードする遺伝子(EXGT)のクローニングと構造解析、(2)キシログルカン代謝に関わるEXTホモログのcDNA探索を行い、下記の成果を得たので報告する。まず、EXGT遺伝子の発現調節機構を解析するために、シロイヌナズナのEXGT遺伝子のクローニングと塩基配列の解読を行った。その結果、EXGT遺伝子のコード領域は3つのイントロンで分断されていることが明らかとなった。また、TATA配列の上流100bp付近にイネ科植物のアミラーゼ遺伝子で見つかったジベレリン応答配列(GARE)の類似配列が存在することが明らかとなった。近年、EXTによく似たタンパク質やそれをコードする遺伝子の存在が報告され、これらが1つのファミリーを構成することが明らかとなってきた。そこで細胞壁中で起きているキシログルカン代謝の全容を解明するため、EXTホモログのcDNAクローニングを進め、アズキEXTのアイソザイムcDNA(EXT2:アズキEXTとの相同性:DNAレベル,75%;アミノ酸レベル,86%)の単離に成功した。さらに、EXT2-mRNAの器官別の存在量を調べると、オリジナルのEXT(EXT1)-mRNAのパターンと異なり、根における存在量が多いことが明らかとなった。以上の結果はアズキ植物がEXTのアイソザイムを複数持ち合わせて、それらを器官別に使い分けていることを示しているのかも知れない。
グロモフ・ハウスドルフ収束と幾何解析

ほとんど滑らかな多様体に対して,Bakry-Emery条件を考察した.特にその条件が,任意の(次元が異なってもよい2次元以上の)二つのコンパクトRiemann多様体を一点でくっつけた空間上でで成り立つことを示し,RCD条件とBakry-Emery条件は決定的に異なることを示した.特にBakry-Emery空間では期待される比較定理が成り立たないことがわかった.この内容を一本の論文にまとめ,投稿し,出版された.また,L. Ambrosio氏,J. W. Portegies氏,D. Tewodrose氏と共同でRCD空間の熱核によるL^2空間の埋め込み問題を考察し,一本の論文にまとめ,雑誌に投稿した.その埋め込みによる引き戻し計量の漸近挙動において,多様体上で知られていた収束結果は,特異点があっても収束位相を弱めることによって成り立つことがわかった.この考察によって,多様体上ですら新しい,熱核の埋め込み評価を与えることができ,さらにその評価(収束位相)がシャープであることも示すことができた.また前年度までに行ってきた研究成果である,熱核の短時間漸近挙動(L.Ambrosio氏,D. Tewodrose氏と共同),局所スペクトル収束の特徴づけ(L. Ambrosio氏と共同),非線形スペクトル収束(L. Ambrosio氏,J. W. Portegies氏と共同),および種々の楕円型方程式のmGH収束での連続性,の内容を含む5本の論文が,当該年度に出版された.最初に予定していた問題である,BV関数の安定性などは初期の段階で解決することができ,その発展で,熱核の埋め込み問題や,Bakry-Emery条件の判定法など,予想外の研究も多く出来てきたため.熱核の埋め込みによるRiemann計量の近似定理は,RCD空間の幾何構造の研究に応用できると考えられるのでそれを推進する.それに関連した応用とも関係する埋め込み問題も扱う.Luigi Ambrosio氏と共同で,一般された意味でのRicci曲率が有界な測度付き距離空間の測度付きGromov-Husdorff収束列に対して,ソボレフ関数,BV関数,ヘッシアンの収束を示した.応用として,p-Laplacianの正の第一固有値やCheegerの等周定数が測度付きGromov-Hausdorff収束に関して連続に振舞うこと,曲率次元条件の新しい安定性を得ることができた.これを一本の論文にまとめて,アクセプトされた.また,同じくLuigi Ambrosio氏と共同で,局所スペクトル収束が成り立つための必要十分条件を与えた.応用として,Anton Petruninが10年以上前に与えた,Gromov-Hausdorff収束するAlexandrov空間上の調和関数の振る舞いに関する問いに対して,肯定的な答えを与えた.これも一本の論文にまとめて,アクセプトされた.Luigi Ambrosio氏とDavid Tewodrose氏と共同で,熱核の短時間挙動について調べた.応用として,Ricci曲率が下に有界な測度付き距離空間上のWeylの漸近公式が成り立つための必要十分条件を与えた.なお,これによってWeylの漸近公式が成り立たない例はこれまで知られていないことがわかった.特にAhlfors正則性が成り立たないがWeylの漸近公式が成立する例を与えた.これも一本の論文にまとめて,雑誌に投稿した.最後に単著で,Riemann多様体の極限空間に向き付け可能の概念を与え,その基本的性質を与えた論文を書いて,雑誌に投稿した.応用として,Riemann多様体の極限であるが,向き付け可能な空間で近似できない例を与え,また,向きを定める微分形式の収束とカレントの収束との関係を与えた.BV関数の収束を予定通り,しかもより一般の設定で示すことができ,それに引き続く研究でWeylの漸近公式や,局所スペクトル収束など,予想外の結果も多く得られたため.Finsler多様体を典型例として含む非線形の設定で,測度付きGromov-Hausdorff収束に関してLaplacianの固有値が連続に振舞うことをLuigi Ambrosio氏(Scuola Normale Superiore)とJacobs Portegies氏(Eindhoven University)との共同研究で証明した.これは高次の固有値をどのように捕まえるかが鍵であり,それをLusternik-Schnirelmann categoryと関係するKrasnoselskii種数を用いて実現した.それらを一つの論文にまとめて雑誌Calculus of Variations and Partial Differential Equationsに投稿し,アクセプトされた.また前年度まで行っていた研究結果の論文(微分形式やテンソル場に対するスペクトル収束,関数の局所スペクトル収束,Weylの漸近公式,特異空間上の向け付け可能性とその応用など)は当該年度中までに全てアクセプトされた.また,熱核による測度付き距離空間の埋め込み問題を推し進め,論文の最終チェック段階に入った.それによって,熱核が与えられたRiemann計量をつかまることがわかり,また,与えられたRiemann計量のよい摂動をその熱核を用いて与えることができた.そのよい摂動ではRiemann計量は測度付きGromov-Hausdorff収束位相に関して非常によく振舞うこともわかった.これらの証明においては上で述べた論文の成果(特に局所スペクトル収束のもの)が本質的に用いられる.今後はその摂動の応用,特に特異空間上の自然なRiemann計量の正則性を考えていく.

この最終チェックが終わり次第雑誌に投稿する予定である.BV関数の振る舞いなど予定していたいくつかの目標はすでに達成され,当該年度で得られた非線形Laplacianのスペクトル収束,昨年度得られた局所スペクトル収束,そして現在推し進めている熱核による埋め込み問題など,予想していた方向とは異なる方向にも研究が大きく進んだため.ほとんど滑らかな多様体に対して,Bakry-Emery条件を考察した.特にその条件が,任意の(次元が異なってもよい2次元以上の)二つのコンパクトRiemann多様体を一点でくっつけた空間上でで成り立つことを示し,RCD条件とBakry-Emery条件は決定的に異なることを示した.特にBakry-Emery空間では期待される比較定理が成り立たないことがわかった.この内容を一本の論文にまとめ,投稿し,出版された.また,L. Ambrosio氏,J. W. Portegies氏,D. Tewodrose氏と共同でRCD空間の熱核によるL^2空間の埋め込み問題を考察し,一本の論文にまとめ,雑誌に投稿した.その埋め込みによる引き戻し計量の漸近挙動において,多様体上で知られていた収束結果は,特異点があっても収束位相を弱めることによって成り立つことがわかった.この考察によって,多様体上ですら新しい,熱核の埋め込み評価を与えることができ,さらにその評価(収束位相)がシャープであることも示すことができた.また前年度までに行ってきた研究成果である,熱核の短時間漸近挙動(L.Ambrosio氏,D. Tewodrose氏と共同),局所スペクトル収束の特徴づけ(L. Ambrosio氏と共同),非線形スペクトル収束(L. Ambrosio氏,J. W. Portegies氏と共同),および種々の楕円型方程式のmGH収束での連続性,の内容を含む5本の論文が,当該年度に出版された.最初に予定していた問題である,BV関数の安定性などは初期の段階で解決することができ,その発展で,熱核の埋め込み問題や,Bakry-Emery条件の判定法など,予想外の研究も多く出来てきたため.現在,高次の非線形スペクトル収束の問題を研究しているのでそれを推し進める.また本年度得られた熱核の短時間漸近挙動を用いた新しい空間の摂動理論の建設を始めたので,それを推し進める.以上はすでに部分的な結果が得られており,時期をみて発表,雑誌に投稿する予定である.熱核の埋め込み問題の論文の応用を考える,種々のスペクトル収束の応用を考える,といったことを行う.熱核の埋め込みによるRiemann計量の近似定理は,RCD空間の幾何構造の研究に応用できると考えられるのでそれを推進する.それに関連した応用とも関係する埋め込み問題も扱う.日本学術振興会の頭脳循環を加速する戦略的国際研究ネットワーク推進プログラムで2016年5月から2017年3月までイタリアのピサに滞在していたため.代表者の講演に関わるほとんど全ての出張は頭脳循環プロジェクトのサポートを受けていたため.次年度に海外出張など,すでに決まった大きな出費があったため,できるだけ節約したためである.主に前年度得られた成果発表に関する出張,すなわち旅費に用いる.
寿命と発生を制御するシグナル伝達ネットワーク

前年度に引き続き、線虫を用いて、重金属ストレス、浸透圧ストレス、飢餓ストレスなどのストレス刺激が寿命と酸化ストレス耐性に与える影響を詳細に解析した。親世代で獲得した形質の子世代以降への継承に関与する因子として、エピジェネティクス制御因子並びにシグナル因子を同定した。さらに、獲得した形質の継承に関与する体細胞ー生殖細胞組織間コミュニケーションを見出し、各組織で機能するエピジェネティクス制御因子並びに転写因子の解析を行った。前年度に引き続き寿命制御転写因子DAF-16の発現制御するシグナル伝達経路の解析を行った。DAF-16がヒストンアセチル化酵素により発現制御され、その分子機構を用い寿命並びにストレス耐性を制御していることを線虫で明らかにた。さらに、ヒト培養細胞を用いて解析を行うことで、その分子機構がヒトにおいても保存されていることを明らかにした。前年度に引き続き、アフリカツメガエル初期胚発生を制御する栄養関連シグナル伝達経路の分子機構について、複数の候補因子に着目して解析を進めた。さらに前年度に引き続き、アフリカツメガエル初期胚の表皮形成を制御するシグナル伝達経路、特に新規MAPキナーゼファミリー分子ERK3によって構成されるシグナル伝達経路の解析を進め、E-カドヘリンやケラチンなどの上皮関連遺伝子の発現を制御することが知られていた転写因子TFAP2AがERK3経路に関与すること、そしてERK3およびTFAP2Aがヒト培養細胞の上皮構造形成にも重要であることを明らかにした。また、アフリカツメガエル幼生の尾の再生に関与するシグナル伝達経路について解析を進めた。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。線虫において、飢餓ストレス、重金属ストレス、浸透圧ストレス、熱ストレスなどの種々のストレスが寿命に与える影響について詳細に解析した。また、ある一定の条件下で親世代が獲得した寿命延長形質が子世代に継承される現象を観察した。寿命制御におけるmiRNAの役割の解析を開始し、miRNAが寿命制御に一定の役割を有していることを明らかにし、さらに、その詳細な分子機構についての解析を開始した。また、線虫の寿命制御において、神経伝達物質の産生を担う酵素が重要な役割を有していることを明らかにした。ヒストンアセチル化酵素が線虫の寿命制御に密接に関与することを示し、その分子機構の解析を開始した。アフリカツメガエルを用いた胚発生の実験において、低栄養によって活性化するタンパク質キナーゼAMPKのノックダウンが初期胚発生に対して阻害効果を有することを見出した。その分子機構の解析を開始した。アフリカツメガエルの発生過程における表皮分化を解析し、新たな転写調節因子並びに新たなタンパク質キナーゼの表皮分化における関与を明らかにし、それら2つの因子がどのようにして表皮分化を制御するかについて解析を行い、その基本メカニズムを明らかにした。1.前年度に引き続き、線虫を用いて、飢餓ストレスを含む種々のストレスが寿命に与える影響を詳細に解析した。また、親世代が獲得した形質が子世代以降に継承されることを見出したので、その現象の詳細な解析を進めた。2.寿命制御における神経伝達物質の役割を解析し、「食餌のないとき」に放出される神経伝達物質の寿命及びストレス耐性に及ぼす効果について解析した。また、寿命制御転写因子の発現を制御するシグナル伝達経路の解析を行い、前年度において関与の示されたエピジェネティック酵素についての解析を行った。3.初期発生を制御する栄養シグナル伝達の分子機構をアフリカツメガエルを用いて解析し、前年度までに得られていた、栄養状態によって活性の制御されるキナーゼのノックダウンにより発生異常が生じることの再現性を確認し、その分子機構を解析し、ターゲットタンパク質の一つを同定した。4.前年度までに、表皮分化を制御する新たな因子の同定に成功したので、それら因子の作用機構について、さらに解析を進めた。線虫を用いた寿命制御の研究においては、種々のストレスによる寿命延長条件の詳細な解析とストレス耐性に及ぼす影響の解析を行うことができた。また、親世代において獲得された形質が子世代に継承される条件を詳細に検討した。寿命制御におけるmiRNAの重要性について、明確な証拠を示すことができた。また、神経伝達物質やヒストンアセチル化酵素のストレス耐性や寿命制御における役割野詳細な解析を行った。アフリカツメガエルを用いた初期発生の分子メカニズムの研究において、低栄養によって活性化するタンパク質キナーゼAMPKの関与を示し、そのターゲットタンパク質の同定に成功した。表皮分化の解析において、新しい転写調節因子と新しいタンパク質キナーゼの関与を明らかにし、その分子機構の詳細を解析した。以上のように、線虫を用いた寿命制御の研究とアフリカツメガエルを用いた初期胚発生の研究の双方において、おおむね順調に研究は進展した。1.前年度に引き続き、線虫を用いて、重金属ストレス、浸透圧ストレス、飢餓ストレスなどのストレス刺激が寿命と酸化ストレス耐性に与える影響を詳細に解析した。オス親にストレス刺激を与えた場合やメス親(雌雄同体)にストレス刺激を与えた場合のそれぞれについて詳細に解析した。特に、オクトパミンの役割を詳細に解析した。また、寿命制御転写因子の発現を制御するシグナル伝達経路の解析を行い、前年度において関与の示されたエピジェネティック酵素についての解析をさらに進め、その作用機構について解析を行った。

3.初期発生を制御する栄養シグナル伝達の分子機構をアフリカツメガエルを用いて解析し、前年度までに得られていた、栄養状態によって活性の制御されるキナーゼのノックダウンにより発生異常が生じることの再現性を確認し、その分子機構を解析し、ターゲットタンパク質の同定を進めた。同定されたターゲットタンパク質の機能についての解析に着手した。4.前年度までに、表皮分化を制御する新たな因子の同定に成功したので、それら因子の作用機構について、遺伝子発現の制御に着目して、さらに解析を進めた。線虫を用いた寿命制御の研究においては、重金属ストレス、浸透圧ストレス、飢餓ストレスなどの種々のストレス刺激による寿命延長条件の詳細な解析とストレス耐性に及ぼす影響の解析を行うことができた。また、親世代において獲得された形質が子世代に継承される条件を詳細に検討した。特に、オス親のみ、あるいはメス親(雌雄同体)のみに刺激を与えた場合について、詳細な解析を行うことができた。また、神経伝達物質オクトパミンやヒストンアセチル化酵素のストレス耐性や寿命制御における役割についての詳細な分子的解析を行った。アフリカツメガエルを用いた初期発生の分子メカニズムの研究において、低栄養によって活性化するタンパク質キナーゼの関与を示し、そのターゲットタンパク質の同定に成功した。また、そのターゲットタンパク質の機能についての解析に着手できた。表皮分化の解析において、新しい転写調節因子と新しいタンパク質キナーゼの関与を明らかにし、その分子機構の詳細を解析を順調に進めることができた。以上のように、線虫を用いた寿命制御の研究とアフリカツメガエルを用いた初期胚発生の研究の双方において、おおむね順調に研究は進展した。1.前年度に引き続き、線虫を用いて、重金属ストレス、浸透圧ストレス、飢餓ストレスなどのストレス刺激が寿命と酸化ストレス耐性に与える影響を詳細に解析した。また、親世代が獲得した形質が子世代以降に継承されることを見出したので、その現象の詳細な解析を進めるとともに、その現象に関与する遺伝子の探索を行った。オス親にストレス刺激を与えた場合やメス親(雌雄同体)にストレス刺激を与えた場合のそれぞれについて詳細に解析し、その違いを明確に示した。2.寿命制御における神経伝達物質の役割を解析し、「食餌のないとき」に放出される神経伝達物質オクトパミンの役割を詳細に解析し興味深い結果を得た。また、寿命制御転写因子の発現を制御するシグナル伝達経路の解析を行い、前年度において関与の示されたエピジェネティック酵素についての解析をさらに進め、その作用機構を明らかにした。3.初期発生を制御する栄養シグナル伝達の分子機構をアフリカツメガエルを用いて解析し、前年度までに得られていた、栄養状態によって活性の制御されるキナーゼのノックダウンにより発生異常が生じることの再現性を確認し、その分子機構を解析し、ターゲットタンパク質の同定を行った。
キサンタンガムの分子構造に由来する物理・化学的性質と抗酸化性の関係

キサンタンガムは微生物が生産する多糖類であり、その水溶液は低濃度で高粘性、チキソトロピーの性質を示し、広く増粘安定剤として用いられている。近年、大豆油に対して酸化を抑制することが明らかとなった。この研究においては、キサンタンガムの分子構造に由来する物理・化学的特性の両面から抗酸化機構についての検討をおこなった。1.キサンタンガム>ペクチン>グア-ガム≧トラガントガムの順で溶存酸素の減少が抑えられ、キサンタンガムが最も強い抗酸化力を示した。キサンタンガムはpH46において多の多糖に比べて強い鉄結合能を保持していた。多糖の鉄結合能は溶存酸素減少速度すなわち抗酸化能と対応した。鉄結合能のないグア-ガムの濃度(粘度)と溶存酸素減少速度の関係を調べたところ、粘度が上昇するにつれて溶存酸素の減少が抑えられたが、同粘度のキサンタンガムに比べて抗酸化力は弱かった。エマルションの粒子サイズと抗酸化性との関係は認められなかった。2.キサンタンガムはTrichoderma viride由来のセルラーゼにより最も低粘度化され、また脱アセチル化サキンタンガムはさらに低粘度化した。分子量分布を測定すると、脱アセチル化キサンタンガムの方がより低分子化していた。両低分子化キサンタンガムはピルビン酸残基が減少せず、Fe^<2+>結合能を保持し、そのキレート能(解離定数、最大結合数)も変化が認められなかった。低分子化キサンタンガムは未処理のキサンタンガムと同程度の抗酸化力を保持し、強い抗酸化性を示した。低粘性(低分子化)のキサンタンガムにおいても抗酸化機能を保持することから、キサンタンガムの強い抗酸化能はまず第一に高いキレート能による金属不活性作用によるものであり、付加的に高い粘性も抗酸化に寄与していることが明らかとなった。エマルション系におけるキサンタンガムの抗酸化能を調べるために,これまで過酸化物価とTBA値で評価してきた.しかし,これらの方法は結果がでるまでに長時間を要する.そこで,迅速な測定法である溶存酸素測定法の検討をおこない,Fe^<2+>添加濃度,多糖濃度等の条件を確立した.キサンタンガムとその他の多糖の抗酸化力の有無,その抗酸化力について調べたところ,キサンタンガム>ペクチン>グア-ガム≧トラガントガムの順で溶存酸素の減少が抑えられ,キサンタンガムが最も強い抗酸化力を示した.これら多糖のFe^<2+>結合能を調べると,キサンタンガムはpH46において他の多糖に比べて強い鉄結合能を持ち,ペクチンpH56,トラガントガムはpH6において鉄結合能を保持していた.中性多糖であるグア-ガムは鉄結合能がなかった.このような多糖の鉄結合能は溶存酸素減少速度すなわち抗酸化能と対応しており,キサンタンガムの強い抗酸化力はそのキレート作用に起因していると推察された.エマルションの水相の粘性の抗酸化に対する影響を調べるために,鉄結合能のないグア-ガムの濃度(粘度)と溶存酸素減少速度との関係を調べたところ,水相の粘度が上昇するにつれて溶存酸素の減少が抑えられたが,同粘度のキサンタンガムに比べて抑制力は弱かった.

さらに,エマルションの油粒子のサイズの影響について調べたところ,抗酸化性との関連は認められなかった.以上の結果より,キサンタンガムの強い抗酸化能はまず第一に高いキレート能による金属不活性作用によるものであり,付加的に高い粘性も抗酸化に寄与していることが明らかとなった.天然食品添加物であるキサンタンガムは水溶液における粘度が高いことから、増粘剤や安定剤として使用されている。しかし、その反面、高粘性を必要としない食品には利用できず、応用範囲が狭められている。キサンタンガムは大豆油エマルションの油自動酸化を強く抑制することを以前報告した。そこで、低粘度特性をもつキサンタンガムの調製と、調製した低分子化キサンタンガムの抗酸化特性について検討を行った。キサンタンガムはTrichoderma viride由来のセルラーゼにより最も低粘度化され(反応温度:50°C、反応時間:24時間)、また脱アセチル化キサンタンガムはさらに低粘度化した。GPC-LALLS法にて低分子化キサンタンガムの分子量分布を測定すると、脱アセチル化キサンタンガムの方がより低分子化していた。両低分子化キサンタンガムはピルビン酸残基が減少せず、Fe^<2+>結合能を保持し、そのキレート能(解離定数、最大結合数)も変化が認められなかった。低分子化キサンタンガムを添加した大豆油エマルションを37°Cで30日間保存し、POV、TBA値を測定した結果、両低分子化キサンタンガムは未処理のキサンタンガムと同程度の抗酸化力を保持し、強い抗酸化性を示した。低粘性(低分子化)のキサンタンガムにおいても低分子化前のキサンタンガムと同程度の抗酸化機能を保持することから、キサンタンガムの強い抗酸化能はまず第一に高いキレート能による金属不活性化作用によるものであることが明らかとなった。
日本における国際的新教育運動の受容に関する比較教育史的研究

本研究は20世紀初頭に展開された国際的な新教育運動の潮流の中での、日本の大正新教育の位置づけをはかることを目指したものである。なかでも、大正新教育の著名な実践校である池袋児童の村小学校の理論と実践の関係を解明することを目的とした。理論面では校長の野口援太郎の教育思想に注目し、海外の教育情報の影響を考察した。また実践面では野口が受容した新教育情報がどのように児童の村の教育実践に反映されたのか、訓導の野村芳兵衛への影響を考察した。本年度は、産前産後休暇及び育児休業中であったため、研究実績なし。本研究では、20世紀初頭に世界各地で広く展開された国際的新教育運動において、日本の大正新教育の位置づけを図り、その特質を明らかにすることを目的としたものである。具体には、大正新教育の一事例として、池袋児童の村小学校の理論と実践の関係を解明することを目指している。本年度は、「受容」という側面に着目し、1「受容される教育情報がどのような背景で、どのように生成されたものか」、2「どのような過程を経て受容されるに至ったか」という二点を主軸に研究の基盤固めを行った。2に関しては、野口援太郎と新教育連盟との関係性を時系列に沿ってまとめる中で、日本における新教育連盟の実態についても整理することができた。また、本年度より発足し毎月開催された日本の新教育思想研究会で、本研究に関わる研究報告を三度にわたって行った。毎回、報告後の討論では、大正期の日本の哲学界と新教育思想との関係性や、「自由」「自然」概念のとらえ方などについて多くの示唆を得ることができ、野口がなぜドクロリー教育法や「活動学校」論に魅かれたのかという課題の考察に新たな視点を加えることができた。本研究は、20世紀初頭に展開された国際的な新教育運動の潮流の中での日本の大正新教育の位置づけを図ることを目指したものである。なかでも、大正新教育の一事例として、池袋児童の村小学校の理論と実践の関係を解明することを目的とした。最終年度である本年度は、本研究に必要なドクロリー教育法及びアドルフ・フェリエールによる「活動学校」論に関する先行研究の整理や関係資料収集を進め、児童の村小学校校長であった野口援太郎が立ち上げた新教育連盟と、世界教育協会との関わりを検討した。野口の教育思想については、野口が得ていた新教育情報の中から、とくに「自然」「訓練」「自由」「生活」概念についていかなる影響があったのかを分析した。それを踏まえ、野口によって受容された情報が、どのように実践にうつされたのかという観点に重きを置き、同校訓導の野村芳兵衛の教育実践について考察した。その際、従来の研究で示されていた児童の村小学校内部の影響関係についても再検討をおこない、児童の村における野口援太郎の役割の確認、野村との教育思想の比較を試みた。さらに、収集した資料の日記や雑誌論考、著作等の分析から、両者の交流を具体的にし、勉強会の様子などを通じ野口からの新教育情報の教授という点を明らかにした。それにより、野村の生活教育思想および教育実践への影響を明らかにすることができた。教育学平成25年度の産前産後休暇及び育児休業を取得に伴い、平成26年度に研究を延長させていただいていたため。妊娠に伴う体調不良のため、研究の遂行に多大な影響が出た。切迫流産・切迫早産の危険があったため、航空機での移動による研究調査の出張や学会発表をキャンセルせざるを得なかったことが大きな要因である。とくに10月14日に教育思想史学会では「歴史と思想のあいだー新教育を素材に教育思想史の可能性を探るー」と題して発表を行う準備を進めていたが、断念せざるを得ない状況となった。ただし、平成24年度前半までに収集することができた資料をもとに、研究の基盤となるデータ作りは継続して行うことが出来た。本研究に必要なドクロリー教育法及びアドルフ・フェリエールによる「活動学校」論に関する先行研究の整理や、国会図書館等の資料からの関係資料収集なども、ある程度目途をつけることは出来た。平成24年度に妊娠に伴う体調不良のためにキャンセルせざるを得なかった資料調査を実施したい。とくに、野口援太郎の蔵書や執筆原稿の類、また野村芳兵衛の日記等について資料調査などを実施する。また、野口が立ち上げた新教育連盟と、世界教育協会との関わりを考察するための資料収集や分析も継続して行う。実施計画で予定していた通り、受容された情報はどのように実践にうつされたのかという観点に重きを置き、野村芳兵衛の教育実践にスポットを当て、その内実を明らかにする。まずは、平成24年度に妊娠に伴う体調不良のためにキャンセルせざるを得なかった資料調査を実行したい。