hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
次世代高密度FeRAMのための理想的PZT強誘電体キャパシタを用いたインプリント特性の評価

強誘電体メモリ(FeRAM)は、現在コンピュータのメインメモリとして使用されているDRAM並みの高速動作と、電源を切っても情報が保持される不揮発性を併せ持つ"究極のメモリ"として開発された。現在日本のメーカが世界に先駆けて商品化し、低密度品がICカード等に使われている。しかしFeRAMを高密度化し、DRAMを凌駕する"真の究極のメモリ"とするためには、信頼性の向上が不可欠である。特に"インプリント"と言われる電界印加による特性の電界方向へのシフトは長年の研究でも解決できていない最大の問題である。これまでの研究アプローチは、実用化されている多結晶薄膜サンプルの結果を理論に当てはめて説明しようとするものであった。しかしサンプルの作り方等によってインプリント特性は大きく変化してしまい、完全なモデル構築はできてこなかった。本研究では、単結晶薄膜や1軸配向薄膜等の系統的なモデルサンプルを作成し詳細に解析を行うことを目的とする。こうしたアプローチはこれまでまったく行われてこなかった、非常に重要な研究である。その結果、低温で、酸素分圧の高い条件で作製した時に粒径が小さくなることがわかった。また、膜厚を薄くすることで、さらに粒径の微細化が可能なことが明らかになった。またこの上に作製したPZTはSrRuO_3の膜厚にかかわらずすべて(111)配向した。しかし薄いほうが良好な強誘電性を示すのに対し、厚いものでは、絶縁性が低下することが明らかになった。これはSrRu_3が厚くなるとPZTとの反応量が増えるためだと考えられた。本研究では、単結晶薄膜や1軸配向薄膜等の系統的なモデルサンプルを作成し、インプリント特性を詳細に解析することでモデル構築を行う。本年度は上記目的を果たすため基礎研究を行った。温度および電界印加に対して最も安定した特性が確保できるのは(111)配向である。そこで本年度は、(111)配向したSrRuO_3をPtとPZTの間に挿入することによって、安定して(111)配向したPZT作製を行った。その結果下記の結果を得た。1.MOCVD法での作製において、Pb原料の供給速度を変化させて製膜を行った結果、SrRuO_3をPt上に導入することによって、広い条件でPZT単相からなる薄膜が得られることがわかった。2.得られた薄膜では安定して残留分極値が30μC/cm^2以上が得られることがわかった。
双方向相補型外国語学習システムに関する検討

本研究においては、複数言語をターゲットとした相補型外国語学習システムを構築することを目的としている。本システムでは、WWW:World-Wide Webで普及しはじめた、VRML言語を用い、可能な限り特殊なハードウェアやソフトウェアを使用することなしに、システムを構築し、運用できるように研究を進めた。また、相補型学習メカニズム(例えば英語を学習する日本人と日本語を学習する米国人を同一の仮想世界で対峙させ、相互会話を図りながら学習ステージを高めていく方式)を用い、効果的学習方法を確立することを目的とした。この学習方法は、本学の学生、留学生をモデルに、開発したシステムを検証した。インターネットを利用することにより、いつでもどこでも気軽に、また、効率的な外国語学習を行なうことができるため、学習方法としては理想的なものであると確信する。本研究では、既存のワークステーション上に外国語学習システムのサーバ構築を行い、その基本システムにの上にユーザーアバダー及び教師アバダーの形状を構築し、その形状と動作の検証を行なった。その上で、相補型学習メカニズムの詳細な検討を行った。すなわち第1段階として日本語と英語をターゲットとし、2ケ国語相補型学習におけるユーザ間または、ユーザ・サーバ間相互リンクの効率的な方式を検討した。さらに学習者の習熟度に応じたシステムの稼動方法についても検証した。各アバダーの形状や稼動方式については特に教師アバダーの制御方式を自動で行なうために最適化する研究をおこなった。これは、教師アバダーの効率的な稼動が、学習者に対する教育効果に顕著に表れるからである。そのため学習者の習熟度、経験、学習ステージに基づいて、教師アバダーをどのように自動制御化するかを検討した。そのために自律分散方式の人工知能の開発研究を行なった。
核内構造体を構築する長鎖Ｎｏｎｃｏｄｉｎｇ　ＲＮＡの探索法の開発

昨年度までの研究から、核内構造体を構築するアーキテクチュラルRNAの候補の探索には難溶性RNAの同定が有効であることを明らかにした。この成果は2017年5月15日にEMBO Journalに掲載された。その後、論文で報告した新しい難溶性RNAが構成する構造体について、その構造体形成に関与するタンパク質を探した。その結果、パラスペックルの形成に必要なある複合体が着目している新規長鎖noncoding RNAの構造体形成にも必要であることを見出した。この結果より、この複合体が様々なアーキテクチュラルRNAによる構造体形成に共通して関与することが支持された。また、難溶性の長鎖noncoding RNAが作る複数の新規構造体は、タンパク質間の疎水性相互作用を阻害する処理により、細かく分離した。この結果より、これら難溶性RNAが作る新規核内構造体は、タンパク質間の疎水性相互作用に依存して複数のRNA-タンパク複合体が集まって作られていると考えられる。様々な真核生物種における既知の6種類のアーキテクチュラルRNAは、いずれも細胞がストレスにさらされた時や特定の発生段階で発現して機能を発揮することが明らかにされている(Chujo et al., Molecules and Cells (2017))。また、ヒトには2万種類以上の機能未知ncRNAが存在する。これらの知見から、ストレスに応答して発現する新たなアーキテクチュラルRNAが存在することが期待される。そこで、ストレス下等に発現する新たなアーキテクチュラルRNAを同定するために、様々なストレスを与えた細胞や疾患モデル細胞における難溶性RNAを同定しようと考えた。このために必要な多サンプルの次世代シーケンス解析を実現するために、本研究の成果を基にして所属研究室が新学術領域先進ゲノム支援に申請して採用され、26種類のRNAサンプルの次世代シーケンス解析を依頼し、その結果を待っている状況である。29年度が最終年度であるため、記入しない。NEAT1長鎖noncoding RNAが細胞から抽出されにくい性質(難溶性)の原因を探究するために、様々なタンパク質をCRISPR/Cas9システムでノックアウトしたヒト細胞株において、NEAT1の難溶性を定量した。その結果、NEAT1の難溶性に大きく寄与する特定のタンパク質の同定に成功した。加えて、マウス細胞においてもこのタンパク質がNEAT1の難溶性に必要であることを見出した。新しいarchitectural RNAの候補を探すために、以前に難溶性RNAをゲノムワイドに探索して取得したRNAに関して、発現量が多い3種類のRNAの細胞内局在をFISH解析で調べた。その結果、いずれも核内でドット状の局在を示すことが判明した。さらに、そのうち1種類のRNA Xは、ある細胞種を特定の環境においた際に難溶性が著しく上昇することを見出した。以上の結果は難溶性RNAを探索することで、核内顆粒を形成するarchitectural RNAの候補が探索可能であることを意味する。さらに、RNA Xが難溶性を獲得する条件下で、他にも難溶性RNAが存在する可能性を想定し、RNAの次世代シーケンス解析を実施した結果、新しい難溶性RNAの候補を取得した。architectural RNAの作用機序を理解するためには、核内顆粒に含まれているarchitectural RNAの量的な情報が必須である。この点を明らかにするために、改善RNA抽出法と超解像顕微鏡を活用することで、パラスペックル1個に含まれるNEAT1の分子数を見積もった。以上の研究成果の大部分に関して、現在投稿論文を準備中である。NEAT1の難溶性の原因の究明、パラスペックル1個中のNEAT1数の同定、細胞を特定の条件に置いた際に生じる新しい構造構築RNAの候補の取得が順調に進んでいる。NEAT1長鎖noncoding RNAが細胞から抽出されにくい性質(難溶性)の原因を解明するために、前年度に様々なタンパク質をヒト細胞株においてノックアウトした結果、NEAT1の難溶性に大きく寄与するタンパク質として、NEAT1結合タンパク質であるFUSを同定していた。本年度は、FUSのタンパク質間相互作用を担うPrion-like domainがNEAT1の難溶性を引き起こすことを明らかにした。この結果より、核内ボディを構築する駆動力であるRNA-タンパク質間相互作用とタンパク質-タンパク質間相互作用が、RNAの難溶性の原因でもあると考えられ、核内ボディを構築するArchitectural RNAを探索する上で難溶性RNAに着目することの有用性が強く示唆された。新しいArchitectural RNAを同定することを目的として、HeLa細胞の難溶性RNAを次世代シーケンス解析により探索した結果、前年度には3種類の新規難溶性RNAとそれらRNAの核内顆粒様の局在を見出していた。本年度にシーケンス結果をより詳細に再解析した結果、さらに6種類の新規難溶性RNAを同定し、これら6種類の新規難溶性RNAも核内顆粒様の局在を示すことを明らかにした。また、新規難溶性RNAに関して、転写阻害時に難溶性が失われること、既知の核内顆粒と局在が重ならないこと、顆粒は転写部位のみならずその周辺にも存在すること、一部の新規難溶性RNAはNEAT1と同様にその難溶性がFUSに依存すること、スプライシングを受けないことと難溶性のつながりも見出している。

特別研究員の研究課題で得られた成果をEMBO Journalに論文投稿し、2017年3月10日(ドイツ時間で3月9日)に受理された。また上記の研究内容に関して、国際学会(Keystone Symposia)で口頭発表を行い、国際RNA学会年会と第7回IGM研究交流会でのポスター発表に対してそれぞれPoster Awardと最優秀ポスター発表賞を受賞した。さらに、共同研究の成果がJ Cell Biol及びPLoS Biolに掲載された。昨年度までの研究から、核内構造体を構築するアーキテクチュラルRNAの候補の探索には難溶性RNAの同定が有効であることを明らかにした。この成果は2017年5月15日にEMBO Journalに掲載された。その後、論文で報告した新しい難溶性RNAが構成する構造体について、その構造体形成に関与するタンパク質を探した。その結果、パラスペックルの形成に必要なある複合体が着目している新規長鎖noncoding RNAの構造体形成にも必要であることを見出した。この結果より、この複合体が様々なアーキテクチュラルRNAによる構造体形成に共通して関与することが支持された。また、難溶性の長鎖noncoding RNAが作る複数の新規構造体は、タンパク質間の疎水性相互作用を阻害する処理により、細かく分離した。この結果より、これら難溶性RNAが作る新規核内構造体は、タンパク質間の疎水性相互作用に依存して複数のRNA-タンパク複合体が集まって作られていると考えられる。様々な真核生物種における既知の6種類のアーキテクチュラルRNAは、いずれも細胞がストレスにさらされた時や特定の発生段階で発現して機能を発揮することが明らかにされている(Chujo et al., Molecules and Cells (2017))。また、ヒトには2万種類以上の機能未知ncRNAが存在する。これらの知見から、ストレスに応答して発現する新たなアーキテクチュラルRNAが存在することが期待される。そこで、ストレス下等に発現する新たなアーキテクチュラルRNAを同定するために、様々なストレスを与えた細胞や疾患モデル細胞における難溶性RNAを同定しようと考えた。このために必要な多サンプルの次世代シーケンス解析を実現するために、本研究の成果を基にして所属研究室が新学術領域先進ゲノム支援に申請して採用され、26種類のRNAサンプルの次世代シーケンス解析を依頼し、その結果を待っている状況である。細胞を特定の環境下に置いた際に難溶性を獲得することが次世代シーケンス解析で示唆されたRNAについて、本当に難溶性を有するかをRT-qPCRで確認する。次にこれら難溶性RNA細胞内局在をRNA-FISH法で解析する。さらに、細胞を特定の環境下に置いた際にその環境への適応に着目RNAが関与するかを検証する。これまでに本研究課題で確立した、RNAの難溶性に着目する手法を用いて、様々なストレス条件下の細胞、疾患細胞、分化細胞におけるArchitectural RNAの探索を計画している。また、難溶性とは異なる角度からも、Architectural RNAを探索する方法を立ち上げることを計画している。
生検標本を用いた食道扁平上皮癌のリンパ節転移予測に関する研究

切除標本の免疫染色で,Osteopontin,Cytokeratin14,Statiminの蛋白発現で有意にリンパ節転移とリンパ管侵襲との関連性を認め,生検標本の免疫染色では,有意にリンパ節転移との関連性を認めた.切除標本の免疫染色で,Ep-cam, ColA71の蛋白発現で壁深達度とリンパ節転移との関連性を認めた.しかし,生検標本の免疫染色では,臨床病理学的因子との関連性を認めなかった.切除標本の免疫染色で,Osteopontin,Cytokeratin14,Statiminの蛋白発現で有意にリンパ節転移とリンパ管侵襲との関連性を認め,生検標本の免疫染色では,有意にリンパ節転移との関連性を認めた.切除標本の免疫染色で,Ep-cam, ColA71の蛋白発現で壁深達度とリンパ節転移との関連性を認めた.しかし,生検標本の免疫染色では,臨床病理学的因子との関連性を認めなかった.Microarrayから得られた癌細胞のみに特異的に発現増強・発現減弱するリンパ節転移関連遺伝子情報をもとに生検標本の蛋白発現を検討し,画像診断だけでは捉えられない,リンパ節転移予測の診断を行うことを高発現遺伝子群の産物蛋白発現を切除標本内で確認し,発現分布状況およびリンパ節転移との関連性を検討し,臨床応用への候補分子を集積する.術前に生検標本が得られ,根治切除手術症例の切除標本・郭清リンパ節のプレパラートが得ることのできる食道扁平上皮癌で,同意が得られている症例を対象とする.Microarryの結果で得られたリンパ節転移関連遺伝子のなかで発現増強していた上位5遺伝子の蛋白発現を,免疫染色法で,切除標本の蛋白発現を検索した.また,リンパ節転移については,通常の病理検査だけでなく,切除症例の郭清リンパ節の微小転移の有無についてCytokeratin AE1/3抗体による免疫染色法も用いて検索した.その結果,以下の知見が得られた.1.進行食道癌の術前補助療法を行った症例と術前未治療の症例との間でリンパ節微小転移は,有意に術前補助療法を行った群が少なかった(P<0.01).予後については有意差を認めなかった.2.高発現遺伝子SPP-1の産物であるOsteopontinの蛋白発現は,根治切除標本において,有意にリンパ節転移とリンパ管侵襲との関連性を認めた.3. Osteopontinの蛋白発現を生検標本の免疫染色により検索し,リンパ節転移と関連性を認める傾向にあった.しかし,症例数がまだ少ないため,さらなる症例の蓄積が必要である.Microarrayから得られた癌細胞のみに特異的に発現増強・発現減弱するリンパ節転移関連遺伝子情報をもとに生検標本の蛋白発現を検討し,画像診断だけでは捉えられない,リンパ節転移予測の診断を行うことを高発現遺伝子群の産物蛋白発現を切除標本内で確認し,発現分布状況およびリンパ節転移との関連性を検討し,臨床応用への候補分子を集積する.術前に生検標本が得られ,根治切除手術症例の切除標本・郭清リンパ節のプレパラートが得ることのできる食道扁平上皮癌で,同意が得られている症例を対象とする.Microarryの結果で得られたリンパ節転移関連遺伝子のなかで発現増強していた上位5遺伝子の蛋白発現を,免疫染色法で,切除標本の蛋白発現を検索した.また,リンパ節転移については,通常の病理検査だけでなく,切除症例の郭清リンパ節の微小転移の有無についてCytokeratin AE1/3抗体による免疫染色法も用いて検索した.その結果,以下の知見が得られた.1.高発現遺伝子SPP-1の産物であるOsteopontinの蛋白発現は,根治切除標本の染色症例を追加し,有意にリンパ節転移とリンパ管侵襲との関連性を認めた.2.Osteopontinの蛋白発現を生検標本の免疫染色により検索し,リンパ節転移と関連性を認めた.3.Cytokeratin14,Statiminの蛋白発現について検索したところ、現時点でリンパ管侵襲と関連性を認めたが、リンパ節転移との関連性を認めていない。4.Cytokeratin 14,Statiminの蛋白発現を生検標本の免疫染色により検索しているが,臨床病理学的因子と関連性を認めていないが、症例数が少ないため,さらなる症例の蓄積が必要である.Ep-cam,Co17Alについては,切除標本において免疫染色を行う症例の追加中である.Microarrayから得られた癌細胞のみに特異的に発現増強・発現減弱するリンパ節転移関連遺伝子情報をもとに生検標本の蛋白発現を検討し,画像診断だけでは捉えられない,リンパ節転移予測の診断を行うことを高発現遺伝子群の産物蛋白発現を切除標本内で確認し,発現分布状況およびリンパ節転移との関連性を検討し,臨床応用への候補分子を集積する.術前に生検標本が得られ,根治切除手術症例の切除標本・郭清リンパ節のプレパラートが得ることのできる食道扁平上皮癌で,同意が得られている症例を対象とする.Microarrayの結果で得られたリンパ節転移関連遺伝子のなかで発現増強していた上位5遺伝子の蛋白発現を,免疫染色法で,切除標本の蛋白発現を検索した.また,リンパ節転移については,通常の病理検査だけでなく,切除症例の郭清リンパ節の微小転移の有無についてCytokeratin AE1/3抗体による免疫染色法も用いて検索した.その結果,以下の知見が得られた.1.Osteopontinの蛋白発現を生検標本の免疫染色により検索し,リンパ節転移と関連性を認めた。

2.Cytokeratin 14, Statiminの蛋白発現について切除標本の検索したところ、リンパ管侵襲とリンパ節転移との関連性を認めた。3.Cytokeratin 14, Statiminの蛋白発現を生検標本の免疫染色によりリンパ飾転移との関連性を認めた。4.Ep-cam,Co17Alの蛋白発現について切除標本の検索したところ、壁深達度とリンパ節転移との関連性を認めた。5.Ep-cam,Co17Alの蛋白発現について生検標本の免疫染色により、臨床病理学的因子との関連性を認めていないが、症例数が少ないため,さらなる症例の蓄積が必要である.6.生検標本を免疫染色を行うことが可能であった症例の予後について追跡中である。Microarrayから得られた癌細胞のみに特異的に発現増強・発現減弱するリンパ節転移関連遺伝子情報をもとに生検標本の蛋白発現を検討し,画像診断だけでは捉えられない,リンパ節転移予測の診断を行うことを高発現遺伝子群の産物蛋白発現を切除標本内で確認し,発現分布状況およびリンパ節転移との関連性を検討し,臨床応用への候補分子を集積する.術前に生検標本が得られ,根治切除手術症例の切除標本・郭清リンパ節のプレパラートが得ることのできる食道扁平上皮癌で,同意が得られている症例を対象とする.Microarryの結果で得られたリンパ節転移関連遺伝子のなかで発現増強していた上位5遺伝子の蛋白発現を,免疫染色法で,切除標本の蛋白発現を検索した.また,リンパ節転移については,通常の病理検査だけでなく,切除症例の郭清リンパ節の微小転移の有無についてCytokeratin AE1/3抗体による免疫染色法も用いて検索した.その結果,以下の知見が得られた.1. Osteopontinの蛋白発現を生検標本の免疫染色により検索し,リンパ節転移と関連性を認めた.2. Cytokeratin 14, Statiminの蛋白発現について切除標本の検索したところ、リンパ管侵襲とリンパ節転移との関連性を認めた。3. Cytokeratin 14, Statiminの蛋白発現を生検標本の免疫染色によりリンパ節転移との関連性を認めた。4. Ep-cam, Col7A1の蛋白発現について切除標本の検索したところ、壁深達度とリンパ節転移との関連性を認めた。5. Ep-cam, Col7A1の蛋白発現について生検標本の免疫染色により、臨床病理学的因子との関連性を認めなかった。6.生検標本を免疫染色を行うことが可能であった症例の無再発期間、再発形式、予後について追跡中である。リンパ節転移関連遺伝子の高発現上位5遺伝子の蛋白発現を,免疫染色法で行っているが、抗体の選定、その抗体に対する染色条件設定に難渋していること、生検標本ブロックの標本量が少なく、免疫染色可能なプレパラート作成に時間を要している。24年度が最終年度であるため、記入しない。抗体の選定・染色条件設定については、5遺伝子の蛋白の条件決定できているため、染色を行っていくことは可能である。新たな症例については、生検標本量については、標本量がとれるように、数回の生検を行っている。治療を行った症例の生検標本量が十分でない場合については、前医でのブロックを取り寄せ、免疫染色可能なプレパラート作成を行う。
平和構築プロセスにおける国連の役割: 南スーダン共和国の事例

南スーダン共和国は、2011年7月にスーダンから独立、193番目の国連加盟国となった。しかし、そのわずか2年後の2013年12月15日、首都ジュバにて武力紛争が勃発し、南スーダン人が南スーダン人を殺戮する内戦が始まった。これは、南スーダン政府と国連が協働してきた平和構築と開発計画の両方の失敗を意味した。事実、南スーダンの平和構築プロセスは、国連の介入も虚しく、今日まで難航、複雑化を続けている。現在の南スーダンは、国外避難民約230万人、国内避難民約190万人、食料不足に苦しむ人々600万人以上を抱え、国も崩壊寸前の状態にある。本研究はこの南スーダンの平和構築における国連の役割を問い直す。
分極無機材料による電場と二元系高分子添加による炭酸カルシウムメソ結晶集合体の創製

目的:分極無機材料の電場による有機高分子の自己組織化を制御することにより、ナノからマクロスケールで構造および機能がデザインされた高機能な材料の創製を目指すことである。この課題に取り組む切り口として、分極無機材料による電場と二元系高分子の添加による炭酸カルシウムメソ結晶集合体の創製とその構造制御とした。方法:分極処理にされたカルサイト単結晶((00.1)と(10.4)の配向結晶)を炭酸カルシウムの結晶成長を制御する電場提供源及び核形成基板として用いた。二元系高分子としては、ポリアスパラギン酸-ポリグルタミン酸系とポリアスパラギン酸-アルギン酸系の二系統について、それぞれの濃度および混合割合を変えて実験した。実験系はCaCl_2-vaporCO_2 from Solid(NH_4)_2CO_3 systemを用いた。成果:有機物添加による階層構造を有する炭酸カルシウムメソ結晶集合体による薄膜を創製することができた。ポリアスパラギン酸-アルギン酸系ではアルギン酸(Ca^<2+>ionsと結合して、アルギン酸カルシウムを形成)の添加割合が高い場合、トウモロコシ状カルサイト集合体(c軸配向)による均一な薄膜の上に半球状のカルサイト集合体が形成する階層構造の薄膜が形成した。アルギン酸の添加割合を減少させるポリアスパラギン酸添加で形成される特徴的な自己相似構造を持つ三方星形の表面形状を持つc軸配向カルサイト柱状結晶集合体による薄膜形成割合が増加した。ポリアスパラギン酸-ポリグルタミン酸系ではポリアスパラギン酸添加で形成されるカルサイト柱状結晶集合体とポリグルタミン酸添加で形成される菱面体カルサイトがc軸配向した集合体による均一な薄膜が形成し、その上に半球状のカルサイト集合体が形成する階層構造の薄膜が形成した。均一な薄膜を構成している集合体の形態は添加割合に比例して添加物に付随する形態を示す集合体の割合が増加した。均一な薄膜の厚さは負電荷に帯電している基板上で増加し、(00.1)配向基板上で優勢であった。
10代母親の逆境的小児期体験(ACE)を踏まえた妊娠期からの訪問プログラム開発

本研究は、10代母親が持つ逆境的小児期体験(ACE)と、ACEが育児にもたらす影響について明らかにし、その特徴を踏まえた妊娠期からの家庭訪問による支援プログラムを開発する。具体的には1海外の家庭訪問研究者との連携・情報収集、2ACE質問紙の作成、3妊婦面接・訪問従事者への研修、4家庭訪問による10代妊婦・母親のACE体験別にみた育児の特徴比較、5プログラム開発を行う予定である。
「在日外国人」のメディア消費とトランスナショナル・アイデンティティーの構築

本研究は日本に居住する中国、韓国、フィリピン、ペルー、ブラジル系住民のメディア消費の実態の基礎調査をすることで、「日本」という枠組みでは捉えることのできないあらたな「トランスナショナル」なつながり、関係性、帰属意識/アイデンティティーが多文化社会・日本においてどのように生成し構築されているのか考察した。具体的には、中国、韓国、フィリピン、ペルー、ブラジル系住民がメディアとどう接しているのかについて、当方で作成した質問表をもとに開き取り調査を行うとともにペルー系のインターネットメディア、Nikkeinet-asとフィリピン系活字メディア、The Philippines Todayの制作・内容に関する調査、民放テレビ番組「ここがヘンだよ日本人」の生産・表象・受容分析、地上波商業放送編制担当者へのアジア地域テレビ番組放映の可能性に関するアンケート調査を行った。調査で得られた主な知見は、1)現在様々なメディアの受容消費が日本国内で可能になってきており、日本(語)以外のメディアに関しては特にインターネットが情報収集や意見交換の場として一層大きい役割を果たしている。2)それぞれのコミュニティーのなかで、年令、ジェンダー、職業、日本語能力・住居年数・地域などでメディア受容に大きな多様性が確認された。3)日本国内の「エスニックマイノリティーメディア」は、人々の国境を越えた往来が頻繁になっていることを反映して、その生産形態・内容ともに日本とそれぞれの国をまたいだ「トランスナショナル」なものになってきている。4)こうしたメディア生産・受容の多様性と越境性は従来の「エスニック」メディアという固定化された括り方の限界と問題を浮き彩りにした。5)また、その一方で、多くから、日本のメディアが言語的・内容的に国内に存在する多文化状況をほとんど考慮に入れておらず、むしろ「外国人」のイメージが繰り返しステレオタイプ的に描かれていることへの強い不満が指摘された。今後は、複数化する国文化への帰属(意識)、接するメディアの種類との多様さ、様々な社会的属性と社会・文化資本などを横断する多元的な位相を視野に入れて、多文化社会・日本におけるメディアをとおした社会参加・帰属意識とアイデンティティ構築についてのさらなる質的調査研究をしていくことが求められる。今年度は移民/マイノリティーのメディア消費とトランスナショナルなアイデンティティー構築に関して、中国、韓国、フィリピン、ペルー、ブラジル系住民がメディアとどう接しているのか、当方で作成した質問表をもとに聞き取り調査を行った。調査票は記述式の設問も含んだため聞き取り時間が長くかかることから、30-50を目標数にしたが、フィリピン系住民からは100以上の解答を得た。目標解答数が比較的少ないのは、大規模な社会調査と異なって本調査の目的が一般化することになく、来年度の焦点を定めた調査の予備調査として位置付けられているからである。現時点において本年度の調査結果の分析は完了していないが、少なくともいくつかの重要な傾向が浮き彫りにされた。1)母国のメディアに関しては有料の衛星放送よりもビデオや新聞/雑誌などのほうが消費されている。2)年令、ジェンダー、滞在年数、職業、日本語能力などにより、メディアとの接し方にコミュニティー内で多様性が認められる。3)外国籍住民の多くは日本と母国の双方のメディアに接している。しかし、日本社会のニュース・情報に関心を持っていても、言語能力が十分でない人たちにとってその欲求をみたすメディアが日本にあまり存在していない。4)中国、韓国系の住民は高い日本語能力、日本社会に関する予備知識を有している人が多く、また母国が距離的に近くて在日コミュニティーが大きいため母国の情報を容易に入手できている。

コミュニティーはより分散化されており、母国のメディア消費への関心が薄く、日本メディアと接する時間が長い。来年度は今年度の調査結果からコミュニティーごとに問題を絞り込み、メディアと人の国境を越えた動きがグローバル化のなかで恒常化するなかで、どのようなトランスナショナルな繋がりと帰属意識/アイデンティティーが芽生えているのかを、インタビュー、参与観察を通して特定の事例から考察していく。今年度は移民/マイノリティーのメディア消費とトランスナショナルなアイデンティティー構築に関して、中国、韓国、(日系)ペルー、(日系)ブラジル系住民がメディアとどう接しているのかを、当方で作成した質問表をもとにさらなる聞き取り調査を行った。それに加えて、フィリピン系メディア、The Philippines Today、の生産・内容分析、テレビ番組「ここがヘンだよ日本人」の生産・表象・受容分析、地上波商業放送編制担当者へのアジア地域テレビ番組放映の可能性に関するアンケート調査を行った。調査内容が多岐に渡っているが、以下のような、いくつかの大きな傾向と発見が認められた。1)年令、ジェンダー、職業、日本語能力・住居年数・地域などでメディア受容に多様性が見られ、出身国による単一の「コミュニティー」、そしてそれを代表する「エスニックメディア」という括り方をしてしまうことでその多様性が見損なわれる危険性がある。2)日本国内のエスニックマイノリティーメディアは、人々の国境を越えた往来が頻繁になっていることを反映して、その生産・内容ともに日本とそれぞれの国をまたいだ「トランスナショナル」な傾向が強くなっており、この点でも従来の「エスニック」メディアという捉え方では収まらなくなっている。3)外国籍住民の多くから、日本のメディアが言語的・内容的に国内に存在する多文化状況をほとんど考慮に入れていないこと、そして「外国人」をステレオタイプ的に描くことへの強い不満が指摘された。4)インターネットが情報収集や意見交換の場として一層大きい役割を果たすようになっている。5)中国、韓国系の住民は高い日本語能力を有する人が多いうえに、出身国のメディア商品や情報の入手も比較的容易であるため、日本で多様なメディアに頻繁に接することが可能となっている。
三相データの同時プロクラステス分析に関する研究

N(ソース)×η(対象)×m(変数)の3相配列の各ソースκ(=1,...,N)に対応するn(対象)×m(変数)のデータ行列X_κに主成分分析を適用すると,n×p(成分)の成分行列G_κとm×pの負荷行列B_κが得られるが,S_κを任意のp次正則行列とすると,X_κ〓G_κB_κ′=F_κA_κ′,ただし,F_κ=G_κS_κ,A_κ=B_κS_κ^<-1>′となる.成分と負荷のソース間比較を可能にするS_κ同定するために,平成18年度には,目的関数φ=(Nn)^<-1>‖F_κ-F‖^2+(Nm)^<-1>‖A_κ-A‖^2=(Nn)^<-1>‖G_κS_κ-F‖^2+(Nm)^<-1>‖B_κS_κ^<-1>′-A‖^2を最小にするF(ソースに共通の成分),A(共通負荷),および,変換行列S_κ(κ=1,...,N)を求める方法(同時プロクラステス分析,JPA)のアルゴリズムを開発した.このアルゴリズムは,S_κをその特異値分解を用いてS_κ=P_κΛ_κQ_κ′とリパラメトライズするもので,四時方程式を解くことと,既成の多変量解析法の交互反復に帰着される.以上のアルゴリズムのプログラムをFORTAN言語によって作成し,シミュレーションによって,その精度を確認した.平成19年度には,得られた解の解釈指標の整備,および,実データへの適用によるJPAの有用性の評価を目的として,以下の(1)(4)の研究を行った.(1)FとAの両者に同時に単純構造を与える回転法を考案した.(2)成分F_κのソース間変動と負荷A_κのソース間変動の大きさを表す分散指標を考案した.(3)F_κおよびA_κのソース間変動の態様を把握するために,ソース・対象・変数を同一空間内にプロットするバイ・トリ・プロット法を考案した.(4)印象評定データに,JPA,および,その比較対象として既成の三相主成分分析法の一つであるTUCKER2を適用した.その結果,データへの適合度が高いこと,および,F_κのソース間分散とA_κのソース間を比較できる点などで,JPAが優れることが例証された.N(ソース)×η(対象)×m(変数)の3相配列の各ソースκ(=1,...,N)に対応するn(対象)×m(変数)のデータ行列X_κに主成分分析を適用すると,n×p(成分)の成分行列G_κとm×pの負荷行列B_κが得られるが,S_κを任意のp次正則行列とすると,X_κ〓G_κB_κ′=F_κA_κ′,ただし,F_κ=G_κS_κ,A_κ=B_κS_κ^<-1>′となる.成分と負荷のソース間比較を可能にするS_κ同定するために,平成18年度には,目的関数φ=(Nn)^<-1>‖F_κ-F‖^2+(Nm)^<-1>‖A_κ-A‖^2=(Nn)^<-1>‖G_κS_κ-F‖^2+(Nm)^<-1>‖B_κS_κ^<-1>′-A‖^2を最小にするF(ソースに共通の成分),A(共通負荷),および,変換行列S_κ(κ=1,...,N)を求める方法(同時プロクラステス分析,JPA)のアルゴリズムを開発した.このアルゴリズムは,S_κをその特異値分解を用いてS_κ=P_κΛ_κQ_κ′とリパラメトライズするもので,四時方程式を解くことと,既成の多変量解析法の交互反復に帰着される.以上のアルゴリズムのプログラムをFORTAN言語によって作成し,シミュレーションによって,その精度を確認した.平成19年度には,得られた解の解釈指標の整備,および,実データへの適用によるJPAの有用性の評価を目的として,以下の(1)(4)の研究を行った.(1)FとAの両者に同時に単純構造を与える回転法を考案した.(2)成分F_κのソース間変動と負荷A_κのソース間変動の大きさを表す分散指標を考案した.(3)F_κおよびA_κのソース間変動の態様を把握するために,ソース・対象・変数を同一空間内にプロットするバイ・トリ・プロット法を考案した.(4)印象評定データに,JPA,および,その比較対象として既成の三相主成分分析法の一つであるTUCKER2を適用した.その結果,データへの適合度が高いこと,および,F_κのソース間分散とA_κのソース間を比較できる点などで,JPAが優れることが例証された.N(ソース)×N(対象)×m(変数)の3相配列の各ソースk(=1,...,N)に対応するn(対象)×m(変数)のデータ行列

X_kに主成分分析を適用すると,n×p(成分)の成分行列G_kとm×pの負荷行列B_kが得られるが,S_kを任意のp次正則行列とすると,X_k〓G_kB_k'=F_kA_k',ただし,F_k=G_kS_k,A_k=B_kS_k^<-1>'となる.すなわち,解に正則変換に関する不定性があるため,成分と負荷のソース間比較ができない.これらのソース間比較を可能にするS_kを同定するために,目的関数を最小化するF(全ソースに共通の成分),A(共通負荷),および,変換行列S_k(k=1,...,N)を求める方法を考える.ここで,αとβは,α=(Nn)^<-1>およびβ=(Nm)^<-1>といった定数である.上記の目的関数φの最小化を同時プロクラメテス分析(JPA)と呼ぶことにする.JPAのアルゴリズムの開発,プログラムの作成,および,シミュレーションによるアルゴリズムの精度の評価などが,本年度の研究目的であった.所与のS_kのもとで関数φを最小にするFとAを求める「FAステップ」と,所与のFとAのもとでφを最小化するS_k(k=1,...,N)を求める「Sステップ」を交互に反復するアルゴリズムを構成した.ここで,Sステップは,φがパラメータめ行列S_kとその逆行列S_k^<-1>の関数であるため,直接的な扱いが困難なステップである.この困難を克服するため,S_kを,その特異値分解を用いて,とリパラメトライズする方法を考えた.この方法によるSステップの最小化は,四時方程式を解くことに帰着されるΛ_kの算出と,直交および重みつきプロクラステス回転に帰着されるP_kおよびQ_kの算出の交互反復によって達成される.以上のアルゴリズムのプログラムをFORTRAN言語によって作成した.真のF,A,S_k(k=1,...,N)から生成したG_kとB_kに,以上のJPAアルゴリズムを適用するシミュレーションの結果,満足できる精度で,真の行列を再現できることが確認された.N(ソース)×n(対象)×m(変数)の3相配列の各ソースk(=1,...,N)に対応するn(対象)×m(変数)のデータ行列X_kに主成分分析を適用すると,n×p(成分)の成分行列G_kとm×pの負荷行列B_kが得られるが,S_kを任意のp次正則行列とすると,X_k〓G_kB_k'=F_kA_k',ただし,F_k=G_kS_k,A_k=B_kS_k^<-1'>となる.成分と負荷のソース間比較を可能にするS_kを同定するために,目的関数φ=(Nn)^<-1>‖F_k-F‖^2+(Nm)^<-1>‖A_k-A‖^2=(Nn)^<-1>‖G_kS_k-F‖^2+(Nm)^<-1>‖B_kS_k^<-1'>-A‖^2を最小にするF(ソースに共通の成分),A(共通負荷),および,変換行列S_k(k=1,...,N)を求める方法(同時プロクラステス分析,JPA)のアルゴリズムを昨年度に開発した.本年度は,得られた解の解釈指標の整備,および,実データへの適用によるJPAの有用性の評価を目的として,以下の(1)(4)の研究を行った.(1)JPAの解は直交回転ができるので,FとAの両者に同時に単純構造を与える回転法を考案した.(2)成分F_kのソース間変動と負荷A_kのソース間変動の大きさを表す分散指標を考案した.(3)F_kおよびA_kのソース間変動の大きさ(量)ではなく態様(質)を把握する目的のために,ソース・対象・変数を同一空間内にプロットするバイ・トリ・プロット法を考案した.(4)複数被験者(ソース)が刺激(対象)を形容語尺度(変数)によって評定した印象評定データに,JPA,および,その比較対象として既成の三相主成分分析法の一つであるTUCKER2を適用した.その結果,データへの適合度が高いこと,および,F_kのソース間分散とA_kのソース間を比較できる点などで,JPAが優れることが例証された.
肝栄養代謝における小胞体ストレス応答の分子機構解明

生活習慣病の病態基盤と考える肝臓の脂肪化にストレス応答が関与するという現象のメカニズムを以下のごとく明らかにした.培養肝細胞にpalmitic acid (PA), oleic acid (OA), docosahexanoic acid (DHA)を処理し,肝臓からのVLDL-apoB分泌に対する影響を検討した.PAはセラミド合成経路を一部に介し小胞体ストレスを亢進させapoBの分泌を阻害する.一方,DHAは小胞体ストレスよりはむしろ酸化ストレスの亢進を介しapoB分泌を阻害する.脂肪酸は種類によって,共通あるいは固有の小胞体ストレスあるいは酸化ストレス経路を介してapoBの分泌を阻害し,脂肪肝や脂質異常症を発症させると考え更に解析を進めている.生活習慣病の病態基盤と考える肝臓の脂肪化にストレス応答が関与するという現象のメカニズムを以下のごとく明らかにした.培養肝細胞にpalmitic acid (PA), oleic acid (OA), docosahexanoic acid (DHA)を処理し,肝臓からのVLDL-apoB分泌に対する影響を検討した.PAはセラミド合成経路を一部に介し小胞体ストレスを亢進させapoBの分泌を阻害する.一方,DHAは小胞体ストレスよりはむしろ酸化ストレスの亢進を介しapoB分泌を阻害する.脂肪酸は種類によって,共通あるいは固有の小胞体ストレスあるいは酸化ストレス経路を介してapoBの分泌を阻害し,脂肪肝や脂質異常症を発症させると考え更に解析を進めている.過栄養・肥満がもたらす生活習慣病の発生と維持において,栄養代謝の中枢である肝臓の役割を明らかにするため,本研究では次の課題(A, B)に基づいて研究を行っている.すなわち, A :過栄養がもたらす小胞体ストレス応答の分子機構解明, B :過栄養における肝脂質代謝機能の破綻が非アルコール性脂肪肝炎(NASH)・インスリン抵抗性を発症する機序である.過栄養では肝へ過剰に流入した脂肪酸がERストレスを誘導し,アポリポ蛋白B(apoB)の分泌を減少させ脂肪肝が促進するという現象(Ota T et al, J Clin Invest 2008)および課題Aに関して,次のことを明らかにした.肝臓へ流入する脂肪酸はその種類によって,共通あるいは固有の小胞体ストレス経路あるいは酸化ストレス経路を介してapoBの分泌を阻害し,脂肪肝や脂質異常症を増悪または改善させることがわかり,その研究成果は2008年欧州糖尿病学会議(EASD)にて発表した.さらに,どのようなストレス応答分子がその標的分子となるかを検討していく予定である.また課題Bに関し,インスリン抵抗性の進展に伴い,脂肪のみならず肝臓への炎症細胞の浸潤が惹起され,薬剤により肝臓における炎症の改善がNASHの進展阻止につながることを見出した(Hepatology 2008).肝臓への炎症細胞の浸潤がインスリン抵抗性によってもたらされるNASHの進展に重要であると考えられた.今後,肝臓の脂質代謝の破綻が炎症(NASH)や全身のインスリン抵抗性を誘導・形成する機序を中心にモデル動物(高脂肪食摂取マウス,遺伝的肥満モデルマウス)を用いて検証していく予定ある.過栄養・肥満がもたらす生活習慣病の発生と維持において,栄養代謝の中心である肝臓の役割を明らかにするため,本研究では次の課題に基づき研究を遂行してきた.すなわち,1)過栄養がもたらす小胞体ストレス応答の分子機構解明,2)過栄養における肝脂質代謝機能の破綻が非アルコール性脂肪肝炎(NASH)・インスリン抵抗性を発症する機序である.これまでに,過栄養・肥満場体では肝へ過剰に流入した脂肪酸が小胞体ストレスを誘導し,アポリポ蛋白B (apoB)の分泌を減少させ脂肪肝が促進するという現象を明らかにし,そのメカニズムに関してpalmitic acid (PA)はセラミド合成経路を一部に介し小胞体ストレスを亢進させapoBの分泌を阻害すること,一方,DHAは小胞体ストレスよりはむしろ酸化ストレスの亢進を介しapoB分泌を阻害することを見出した.すなわち,脂肪酸はその種類によって,共通あるいは固有の小胞体ストレスあるいは酸化ストレス経路を介してaPOBの分泌を阻害し,脂肪肝や脂質異常症を発症させうる.また,インスリン抵抗性の進展に伴い肝臓への炎症細胞の浸潤が惹起され,抗アレルギー薬により肝臓における炎症の改善がNASHの進展阻止につながることを見出した.また,飽和脂肪酸のPAは肝細胞においてミトコンドリア由来の活性酸素種を過剰に産生し,ストレスキナーゼであるJNKをリン酸化し,インスリン受容体基質IRS-2リン酸化の阻害を介してインスリンシグナルを低下させることを明らかにした.
ヒト造血細胞でのゲノム編集技術基盤の確立と血液腫瘍病態解析への応用

遺伝子の変異や欠損により発症する造血器腫瘍の成り立ちを理解するために、造血細胞でゲノム編集手法を確立し、病態を解析することを目的とした研究を実施した。主に対象とした遺伝子は、DDX41遺伝子である。この遺伝子は造血器腫瘍の一定の割合で生殖細胞系列変異もしくは体細胞変異が認められるが、現在に至るまで、造血細胞におけるDDX41分子の生理的な役割や、遺伝子変異の病的意義についてはまだ全容が明らかになっていない。CRISPR/CAS9システムを用いて作成したDDX41を発現しない細胞は、増殖が抑制されるなどの表現型を示した。これがリボソーム生合成の障害に起因すると考え、引き続き検証を進めている。本研究は、ヒトCD34陽性造血幹・前駆細胞を用いた、ゲノム編集による造血器腫瘍発症モデルを確立することを目的とし、遺伝子変異/遺伝子欠損の造血器腫瘍への関与を、ヒト造血細胞を用いて、より直接的に解明することを目指すものである。これまで、造血器悪性腫瘍の解析には、白血病細胞株や初代培養造血細胞、およびマウス(遺伝子改変マウス・骨髄移植モデル)が有用なツールとして汎用されてきた。しかしながら、細胞への変異遺伝子導入やマウス骨髄移植は、多くの場合、内在的な発現レベルを大きく超えた過剰発現系での解析となってしまうという問題点がある。また、腫瘍抑制因子の欠損を再現する場合には、shRNAなどを用いた発現抑制法が頻用されるが、この場合も必ずしも発現レベルの調節が容易ではない。こうしたことを背景に、本研究では正常ヒト造血幹・前駆細胞でのゲノム編集手法の確立を進めることとした。初年度はまず最適なベクターの構築を図るため、白血病細胞株を用いた基礎検討を行っている。当初、これまでに十分な経験を有するレトロウイルス系を用いることを想定してきたが、初代培養細胞への導入のため、並行してレンチウイルスベクターを用いた方法も検討している。一方、ゲノム編集の対象とする遺伝子は、最近造血器腫瘍で体細胞遺伝子変異と生殖細胞系列変異の両方が発見された、DDX41遺伝子を主なターゲットに据えることとした。本遺伝子の場合、生殖細胞系列変異としては主にフレームシフトが起こり、機能喪失型の変異に至ると想定される。一方、体細胞遺伝子変異はほぼp.R525Hに集中していることから、機能獲得型変異である。一部の症例では生殖細胞系列変異に体細胞遺伝子変異が加わることで腫瘍化が導かれることが判明しており、ゲノム編集による遺伝子破壊と変異遺伝子の強制発現を同時に行う良いモデルとなると考え、システム構築を進めている。研究申請後に所属大学の異動が生じ、新たに研究室を立ち上げることとなった。これに伴う準備にやや時間を要し、実験基盤の再構築に若干の遅れが生じたものの、年度内後半にはほぼ研究室の整備が終了し実験に注力したため、総体的には当初の達成目標に近いレベルに達することができたと考えている。次年度は、さらにベクター及び遺伝子導入手法の最適化を図り、より高効率のシステム構築を進める。本研究は、ゲノム編集による造血器腫瘍発症モデルを確立することを目的とし、遺伝子変異/遺伝子欠損の造血器腫瘍への関与を、ヒト造血細胞を用いて、より直接的に解明することをめざすものである。これまで、造血器悪性腫瘍の解析には、白血病細胞株や初代培養造血細胞、マウスモデルが有用なツールとして汎用されてきた。また、腫瘍抑制因子の欠損を再現する場合に頻用されるノックダウン手法も、必ずしも発現レベルの調節が容易ではない。このため、遺伝子変異導入や発現抑制により起こる細胞表現型の変化を疾患と対比させて考える場合には、十分な注意が必要である。ノックアウトマウスモデルはこれを回避できる優れた実験系と言えるが、マウスモデルの作製には多くの専門的技術を要し、コストも無視できない。こうしたことを背景に、本研究では造血細胞に対するゲノム編集手法の確立を進めることとした。最適なベクターの構築を図るため、現在、白血病細胞株を用いた基礎検討を進めている。当初、レトロ・レンチウイルスによるベクター導入を実施してきたが、少なくとも細胞株においてはNucleofectorが最も簡便かつ効率的に遺伝子導入できることが判明したため、本装置を用いた実験系を構築している。一方、ゲノム編集の対象とする遺伝子は、DDX41遺伝子を主なターゲットに据えている。本遺伝子の場合、生殖細胞系列変異としては主にフレームシフトが起こり、機能喪失型の変異に至る。一方、体細胞遺伝子変異はほぼp.R525Hに集中していることから、機能獲得型変異である可能性が高い。今後、このふたつの変異を組み合わせたコンパウンドヘテロ細胞の作成と表現型解析を進め、実験手法開発を基軸とした病態解明をめざす。本研究申請後に所属大学の異動が生じ、新たに研究室を立ち上げることとなったため、スタート時期にやや遅れが生じたのは否めない。しかしながら、その後研究室の整備も進み、各種の実験が再開可能な状態になったため、2年目にはほぼ所期のペースで研究が進んでいる。最終年度には修士課程学生の入学が見込まれるので、さらにペースアップが期待できる。なお、研究開始当初はゲノム編集によるモノソミー7モデルの作成を計画していたが、2016年に我々が論文発表したDDX41遺伝子変異が、導入の容易さや病態解析の点でより適したターゲットと考えるようになり、現在は主な対象をこちらにシフトさせている。

次年度は、さらにベクター及び遺伝子導入手法の最適化を図り、より高効率のシステム構築を進めるとともに、より導入困難な初代培養細胞でのゲノム編集を視野に入れる。本研究は、ヒトCD34陽性造血幹・前駆細胞を用いた、ゲノム編集による造血器腫瘍発症モデルを確立することを目的とし、遺伝子変異/遺伝子欠損の造血器腫瘍への関与を、ヒト造血細胞を用いてより直接的に解明することを目指したものである。これまで、造血器悪性腫瘍の解析には、白血病細胞株や初代培養造血細胞、およびマウス(遺伝子改変マウス・骨髄移植モデル)が有用なツールとして汎用されてきた。しかしながら、細胞への変異遺伝子導入やマウス骨髄移植は、多くの場合、内在的な発現レベルを大きく超えた過剰発現系での解析となってしまうという問題点がある。また、腫瘍抑制因子の欠損を再現する場合には、shRNAなどを用いた発現抑制法が頻用されるが、この場合も必ずしも発現レベルの調節が容易ではない。ノックアウトマウスモデルはこれを回避できる優れた実験系と言えるが、多くの専門的技術を要し、時間的・金銭的コストも無視できない。こうしたことを背景に、本研究では正常ヒト造血幹・前駆細胞でのゲノム編集手法の確立を進めてきた。まず最適なベクターの構築を図るため、白血病細胞株を用いた基礎検討を行った。当初は、これまでに十分な経験を有するレトロウイルス系を用いることを想定してきたが、初代培養細胞への導入のため、並行してレンチウイルスベクターを用いた方法も検討し、後者によるCas9発現が安定的であることを確認した。一方、ゲノム編集の対象とする遺伝子は、最近造血器腫瘍で体細胞遺伝子変異と生殖細胞系列変異の両方が発見された、DDX41遺伝子を主なターゲットに据えてきた。本遺伝子の場合、生殖細胞系列変異としては主にフレームシフトが起こり、機能喪失型の変異に至ると想定される。一方、体細胞遺伝子変異はほぼp.R525Hに集中していることから、機能獲得型変異である。H30年度以降は、DDX41にフォーカスした研究費申請のもと解析を続ける。遺伝子の変異や欠損により発症する造血器腫瘍の成り立ちを理解するために、造血細胞でゲノム編集手法を確立し、病態を解析することを目的とした研究を実施した。主に対象とした遺伝子は、DDX41遺伝子である。この遺伝子は造血器腫瘍の一定の割合で生殖細胞系列変異もしくは体細胞変異が認められるが、現在に至るまで、造血細胞におけるDDX41分子の生理的な役割や、遺伝子変異の病的意義についてはまだ全容が明らかになっていない。CRISPR/CAS9システムを用いて作成したDDX41を発現しない細胞は、増殖が抑制されるなどの表現型を示した。これがリボソーム生合成の障害に起因すると考え、引き続き検証を進めている。次年度は、白血病細胞株をモデルとしたゲノム編集手法の確立を終了し、これを応用した初代培養造血細胞でのゲノム編集に着手する予定である。DDX41 p.R525H変異単独の初代培養造血細胞への強制発現実験はすでに終了しているが、この変異は造血細胞の核小体ストレスを惹起し、リボソームの生合成を負にシフトさせ細胞増殖を抑制させた。