hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
覚醒剤中毒作用におよぼすストレスの影響〓ストレス蛋白の関与

また心臓の負荷に関係するBNPはM群で有意に(p<0.05)促進した。以上,ストレスと覚せい剤の1ヶ月における生体への影響では,遺伝子発現からは障害と防御に関して観察されたが,心筋,下垂体の組織像では,ストレス下での覚醒剤使用により障害が強まることが示唆された。本年度は1)覚醒剤(MA)の大腿骨海面骨密度に及ぼす影響を検討したこと,2)MAによる神経細胞の活性化を前初期遺伝子c-Fosタンパクの発現から検討したことについて報告する。いずれも覚せい剤単独の作用である。種々のストレスを検討したが,ストレス自体の作用が非常に強く,MAの影響がマスクされてしまい現段階では満足な結果は得られていない。1)骨密度への影響を,MA 5, 10 mg/kgおよび対照群で比較検討した結果,MA 5群では、1骨形成パラメータ、2石灰化パラメータでの石灰化速度と骨形成速度、3骨芽細胞数において、MAによる骨形成の有意な亢進が認められたが、骨量や骨密度の増加は観察できなかった。他方,骨吸収パラメータおよび骨吸収マーカβ-C-terminal telopeptide of type I collagen濃度にに有意な差は認められず,MA 5群での骨形成の亢進は、MAによる一次的な作用であると思われた。MA 10群では対照群に比べ顕著な骨形成は観察されなかったが,影響の詳細はさらに検討する余地を残した。2)覚醒剤20 mg/kg投与後60分における神経細胞の影響をc-Fos陽性反応およびストレスホルモンについて検討した。その結果,線条体,視床室傍核,視索前野,外側前視床下部核,背側野,外側野などで対照群に比べ有意に高い陽性細胞数が得られた。血中コルチコステロン濃度はMA投与後60分で有意に高値を示し,120分で対照群レベルに戻ったが,血中ACTHは10分で高値の傾向を示し,その後低下した。また血中CRF濃度には変化が見られなかった。すなわち,覚醒剤によるストレスホルモンと脳特異的領域での神経細胞の活性化に強い関連が認められた。今後,1),2)ともにストレスの方法を模索し,ストレス下でのMAの影響についてさらに検討を続ける予定である。単回での急性中毒と異なり,1ヶ月での障害では生体における状態が複雑となっている為,血中データなどの障害程度を示す数値化がやや困難になる点があった。また下垂体の標本についてはその切片作製が難しく予備的検討が必要となった為,やや進展が遅れている。また,現在タンパクの組織免疫染色についても既に結果は得られているが,かなり予期しない顕著な変化のため,再現性を求めて検討をもう少し続行中である。24年度が最終年度であるため、記入しない。これまで単回処置,1ヶ月処置での心筋障害を中心に検討してきたが,さらに長期での影響について比較したい。さらに,今後は心筋の障害だけにとどまらず,大腿骨への影響,脳への影響(体温中枢など)へ対象を広げる予定である。
LD(学習障害)児における認知障害は脳機能障害と対応するか

本研究の目的は、LD児の認知機能の特徴を神経・生理心理学的な観点からとらえ、心理検査や課題遂行時の行動特徴などから推定される認知障害と、神経・生理学的指標から推定される脳機能障害との対応性を検討することにある。3ヶ年の研究経過を通じて、多くのLD児に共通した特徴として、以下の点が明らかとなった。1.脳波、SPECTからみた脳血流量、尿検査からみたホルモン分泌量など、脳機能検査から見た生理的側面では、大脳新皮質(とくに前頭葉)と同様もしくは、それ以上に基底核や視床下部などの大脳基底領域の異常が認められる児童が多いことが明らかとなり、近年報告されている自閉症などとの関連性が示唆された。2.文字抹消、系列記憶、文字や表情の弁別など、認知課題実験から見た行動的側面では、知的に高い児童でも、課題遂行成績が健常児と比べて低い傾向にあるだけでなく、課題と無関連な刺激情報に対する注意転導性が著しく、LD児における注意過程などの基本的認知機能に障害があることが明らかとなった。3.最も重要な知見は、認知課題場面における課題成績と生理指標の結果が必ずしも対応しない点であり、認知や注意に関係した事象関連電位成分が健常児より出現率の低い児童が多く、しかも各人の課題成績から予想されるより低いことが明らかとなった。従って、LD児の多くは脳機能障害の存在が強く示唆されるが、その症状と認知障害の内容や各児童の症状タイプとは必ずしも対応しないことが明らかとなった。4.ただし、これらの特徴は必ずしも固定的ではなく、中枢刺激剤による薬物効果や、課題の繰り返しによる学習効果が殆どの対象児に見られ、治療教育の可能性と今後の診断・療育体制の方向性が示唆された。本研究の目的は、LD(学習障害)児の認知機能の特徴を神経・生理心理学的な観点からとらえ、心理検査や課題遂行時の行動特徴などから推定される認知障害と、神経・生理学的指標から推定される脳機能障害との対応性を検討することにある。6名の構成メンバーは3グループに分かれ、相互に情報交換しつつ研究を推進した。初年度である平成7年度は、対象となるLD児を抽出し、行動観察や心理検査等から個々人の行動特徴を再整理するとともに、認知課題時の遂行行動の特徴や、安静時および課題場面における生理的活動の特徴を検討した。また、次年度への予備的研究として、課題遂行行動や生理的活動に及ぼす薬物投与の効果についても検討した。その結果、LD児の認識機能と脳神経機能の障害の特徴として、以下の諸点が明かとなった。1.脳神経の構造的検査(CT)では異常がなかったが、脳波の異常や、SPECTによる基底核・前頭葉領域の血流量低下など、機能的検査では、かなりの児童に異常が認められた。2.認知課題における遂行行動を信号検出理論から分析すると、見かけの正答率は高くても、課題と無関連な刺激に対する誤答が極めて多く、注意転導性の特徴が著明に認められた。3.同時に測定した事象関連電位からは、標的検出と対応した陽性電位は殆どの対象児で認められたが、電卓的注意に関連した陰性電位は多くの対象児で欠如または低振幅で、能機能障害の存在が示唆された。4.これらLD児に見られた認知障害に対して、Methylphenidateを中心した中枢刺激剤を投与したところ、行動的指標でも生理的指標でも、改善する可能性のあることが示唆された。

2年目である平成8年度は、認知機能や脳機能障害の特徴が変化し得るか否か、個人内変動性に焦点を当てた。このため同一児童を対象に、WISC-R等の標準的心理検査や文字弁別等の認知課題実験を、数週間数ケ月の間隔をおいて2回以上実施し、成長や繰り返しによる変動やmethylphenidateを中心とした中枢刺激剤投与の効果について、検査結果や認知課題時の行動的・生理的指標から検討した。その結果、以下の諸点が明かとなった。1.標準的な心理検査では、検査の繰り返しや中枢刺激剤の投与によって、殆どの児童で向上が認められたが、その現れ方は個人間で異なる場合が多く、LD児の診断や類型化の方法を再吟味する必要性が示唆された。2.認知課題実験における行動的指標では、繰り返しや中枢刺激剤の投与によって、正答率の上昇や反応時間の短縮など、殆どの対象児で課題遂行成績の向上が明確に見られた。3.生理的指標でも、事象関連電位における後期陽性成分や注意関連性成分の増大、SPECTにおける大脳基底核や前頭葉領域の血流量増加が見られたが、必ずしも全児童で一貫しては観察されなかった。4.これらのことから、行動レベルの向上と脳機能状態の改善は必ずしも対応しなかいことが明かとなった。しかし、課題に対する児童の興味や集中力の影響等もあり、課題内容の更なる吟味の必要性も示唆された。本研究の目的は、LD(学習障害)児における認知機能の特徴を神経・生理心理学的な観点からとらえ、心理検査や課題遂行時の行動特徴などから推定される認知障害と、神経・生理心理学的指標から推定される脳機能障害との対応性を検討することにある。6名の構成メンバーは3グループに分かれ、相互に情報交換しつつ研究を推進した。最終年である平成9年度は、平成8年度に引き続き、認知機能や脳機能障害の特徴が変化し得るか否か、個人内変動性に焦点を当てた。このため同一児童を対象に、WISC-R等の標準的心理検査や文字弁別、系列記憶等の認知課題実験を、数週間の間隔をおいて2回以上実施し、成長や繰り返しによる変動や中枢刺激剤の投与の効果について、検査結果や認知課題時の行動的・生理的指標から検討した。その結果、以下の諸点が明らかとなった。1.WISC-RやITPA検査では、検査の繰り返しや中枢刺激剤の投与によって、殆どの対象児で向上が認められたが、検査のどの項目に効果があるかは、各対象児の症状タイプと必ずしも対応せず、様々な要因が推測された。2.認知課題実験における行動的指標では、繰り返しや中枢刺激剤の投与によって、記憶再生能力・視覚探索能力・検出能力の上昇や反応時間の短縮など、多くの対象児で課題遂行成績の向上が明確に見られた。3.生理的指標でも、事象関連電位における注意・判断過程に関連した成分の増大、SPECTにおける大脳基底核等の血流量増加が見られたが、必ずしも全児童で一貫しては観察されず、症状タイプとの関連もなかった。4.これらのことから、行動レベルの向上と脳機能レベルの改善は必ずしも対応しないことが明らかとなった。これら3年間の知見をふまえ、教育・心理と医療・福祉が連携した新しい療育体制の必要性が示唆された。
J.デューイの科学の教育過程に関する心理学的・社会学的研究

本研究の課題は、児童生徒が科学の知識を理解・活用する認識形成過程に焦点を当てて、J.デューイの科学の教育過程を心理的・社会的両側面において明らかにすることである。この課題に次の四つの視点から取り組む。(I)デューイの科学の教育課程を教育過程(知識の獲得・活用を保障する教授学習過程)としてどのように分析するか、(II)その教育過程を支える教師の教育内容研究はどのような過程を採るのか、(III)その教育過程のどの局面に、デューイが提示する民主主義社会の成員の資質形成を読み取りうるのか、(IV)その教育過程を、デューイが批判しているロックの教育学説ではどのような点で保障できないのか。以上の作業を通して本研究は、デューイの科学の教育過程の心理的・社会的側面を描き出して、デューイの科学の教育課程に関する先行研究が教育過程(認識形成過程)研究として進められていない現状を打開して、新たな知見を提供する。本研究1年目(2018年度)における成果は次の通りである。(1)「J.デューイの経験主義における教師の専門的役割ー教師の教育内容研究の手続きに着目して『子どもとカリキュラム』を再読するー」(東北教育哲学教育史学会『教育思想』第45号、2018年、1-16頁)、(2)学会発表「J.デューイの負の「知性」論の今日的リアリティー『民主主義と教育』における学校教育の負の教育作用ー」日本デューイ学会第62回大会(2018年9月24日(月):名古屋大学:発表要旨集60-61頁)。(1)は、上述の視点(II)からの研究成果で、視点(I)にも関わっている。(2)は、上述の(III)の視点に関わって、民主主義社会の成員の資質形成の裏面を明らかにしたものである。この課題に、「研究実績の概要」の欄に記した四つの視点から取り組む。その視点(II)からの研究成果を本研究1年目は、上述の論文(「J.デューイの経験主義における教師の専門的役割」)に纏めた。これは視点(I)にも関わるものである。また視点(III)からの研究成果も上述の学会発表(「J.デューイの負の「知性」論の今日的リアリティー」)として報告した。以上が本研究1年目(2018年度)の進捗状況である。この課題の検討を、本研究1年目(2018年度)の研究成果を踏まえて、本研究2年目(2019年度)以降は、視点(I)(III)(IV)からデューイの科学の教育過程を心理的・社会的両側面を検討する。本研究2年目は、上述の学会発表(J.デューイの負の「知性」論の今日的リアリティー)を論文にまで纏める作業をはじめ、研究を進めていく予定である。

その視点(II)からの研究成果を本研究1年目は、上述の論文(「J.デューイの経験主義における教師の専門的役割」)に纏めた。これは視点(I)にも関わるものである。また視点(III)からの研究成果も上述の学会発表(「J.デューイの負の「知性」論の今日的リアリティー」)として報告した。以上が本研究1年目(2018年度)の進捗状況である。本研究の課題は、児童生徒が科学の知識を理解・活用する認識形成過程に焦点を当てて、J.デューイの科学の教育過程を心理的・社会的両側面において明らかにすることである。この課題に、「研究実績の概要」の欄に記した四つの視点から取り組む。この課題の検討を、本研究1年目(2018年度)の研究成果を踏まえて、本研究2年目(2019年度)以降は、視点(I)(III)(IV)からデューイの科学の教育過程を心理的・社会的両側面を検討する。本研究2年目は、上述の学会発表(J.デューイの負の「知性」論の今日的リアリティー)を論文にまで纏める作業をはじめ、研究を進めていく予定である。
メヒティルト・フォン・マクデブルク『神性の流れる光』の思想的、社会的背景について

中世ヨーロッパに存在したベギンと呼ばれる半僧半俗の女性達の一人であるメヒティルト・フォン・マクデブルクの『神性の流れる光』の思想的、社会的背景を探ることを目的とした。ベギンは11世紀に始まった教会改革に端を発した中世の宗教運動の流れの中で生まれ、病人の看護や死者のための取りなしの祈りを神に捧げることを重要な仕事としていた。メヒティルトの『神性の流れる光』は個人の魂を「キリストの花嫁」と見る考え方に立ち、自らの神秘体験や聖俗両界の人々に対する警告や励まし等が述べられているが、そこには彼女独特の内容と並び、他者からの少なからぬ影響も見られる。メヒティルト・フォン・マクデブルクが半僧半俗のベギンであったため、ベギンに関する資料収集と研究を主に文献基づいて行うと同時に、ベギン発祥の地と言われるベルギーのフランドル地方に現存する、当時多くのベギンたちが共同生活を送っていたベギン・ホフを数カ所訪れ、調査研究を行った。フランドル地方のベギン・ホフには大規模がものが少なからずあったが、発達した織物業故に巨万の富が当時のフランドル地方に集中したことがその背景としてあった。こうした事情がドイツ、特にメヒティルトが暮らしていたと考えられるマクデブルクにも当て嵌まるかどうかは疑問である。Simonsの研究によれば、都市の羊織物業者がベギンを安価な労働力として必要としていた一方で、ベギンは織物業者から仕事を請け負うことで自らの生活を支えていた。この業者とベギンの利害が一致していたことにより、フランドル地方に多くのベギンが存在し得たと考えられる。他方、Reichsteinの研究及び資料によれば、ドイツではベギンが機織り等の世俗的な仕事により生計を立てることに対し批判的な態度が見られ、病人看護や日々の祈祷、ミサへの参加等主教的な生活を送ることが特に義務づけられ、病人の看護を担う者としての重要性が時代を経るに従って増していった。とは言え、何れのベギンにも死者のための祈りが重要な任務とされているが、その際に大きな影響を持ったのが「煉獄」という概念であり、彼女たちの祈りにより自分や先祖たちが死後「煉獄」から救われることを期待してベギン会を創設した者が多かった。これらの成果はメヒティルト・フォン・マクデブルクの『神性の流れる光』の社会的、思想的背景を考察する上で大きな意義を持つ。メヒティルト・フォン・マクデブルクの『神性の流れる光』の思想的背景を探るために、オリゲネスやグレゴリウス一世、ベルナール・ド・クレルヴォー等の『雅歌解釈』とを比較研究した。それによって、『神性の流れる光』の独自性がより明らかになると考えたためである。「キリストの花嫁」を教会よりも、寧ろ個人の魂と見なす点に、オリゲネスとベルナール・ド・クレルヴォーの『神性の流れる光』に対する影響が認められるが、メヒティルトが彼らの著作から直接影響を受けたと言うよりは、既にこの考え方が広く流通しており、彼女も自然にその立場に立っていたと考える方が妥当であり、直接的な影響ではなく、間接的な影響を受けたと考えられる。また、メヒティルトが前人の『雅歌解釈』の影響を受けているとは言っても、『雅歌』を独自に解釈しようとしたわけではなく、寧ろ「キリストの花嫁」としての個人の魂、個人の魂の神に対する愛、という考えに基づいて、メヒティルト自身の『雅歌』を書くことを当初の目的として、『神性の流れる光』を書き始めたのではないかと筆者は考えている。言い換えれば、『雅歌』の形式を利用して自らの神秘体験を表現しようと試みたのではないか、と考えている。更に、ドミニコ会がメヒティルトとその属するベギン会を司牧していたため、その修道士の説教等を通じ、種々の影響を受けたことが指摘され、また、他の神秘主義者との関連性も指摘されているが、広範囲に及ぶため、今後も更に研究を進める予定である。尚、これまでの研究成果は今後5回程度に分け、主に雑誌論文として発表し、最終的には一冊の本にまとめるつもりである。清貧を旨とするフランシスコ会の成立及び分裂の事情(思想背景)を調べ、半僧半俗の生活をしていたベギンたちに対する同会の影響を研究した。当初は聖フランシスコの言行録がベギン運動に与えた影響を念頭に置いていたが、研究を進めるうち、既に在世中にフランシスコ及びその所謂兄弟たちの言行がヨーロッパの各地に伝わり、社会に影響を及ぼしていたことが判明した。その一方で、影響がフランシスコ会からベギンに対する一方的なものではなく、ベギンからフランシスコ会の修道士に対しても及んでいたことが分かった。

また両者の運動が、幾度も改革が行われたにも拘わらず、改革と堕落を繰り返す既存の修道院と教会に対する不信と反発から生まれた、非聖職者による当初の予想を上回る広範囲な当時の宗教的潮流の一部であることが認識できた。従って、ベギン運動とフランシスコ会の運動のみならず、当時の教会から異端視されたいくつかの宗教運動をも視野に入れて研究する必要があることが明らかとなった。ベギンたちが必ずしも宗教的情熱からのみベギンとしての生活に入ったとは考えにくい為、当時の社会状況、特にベギン発祥の地であり、ベギン運動が盛んであったとされるフランドル地方及びライン川地方の12世紀14世紀の都市の状況について研究を始めた。また、当時の宗教的潮流が男性聖職者と所謂聖女たちの相互交流から生まれ、かつ支えられていたことも明らかとなった。従って、今後研究を進める上ではこの点を視野に入れて研究することが肝要であると認識した。上記の成果はメヒティルト・フォン・マクデブルクの『神性の流れる光』の社会的、思想的背景を考察する上で、大きな意義を持つものであると考える。限現存資料が限定されていることから限界はあるものの、ベギンを取り巻く当時の社会環境や生活環境がある程度明らかになり、メヒティルト・フォン・マクデブルクの『神性の流れる光』の思想的背景の一部が明らかになってきたので、研究の進展はほぼ当初の計画通りに進んでいると考えている。当初は聖フランシスコの言行録がベギン運動に及ぼした影響を考察する予定であったが、言行録が出る以前の、フランシスコの生前から彼とその所謂兄弟たちの言行がヨーロッパ各地に伝わり、影響を及ぼしていたことが判明した為、言行録とその影響に関する研究があまり有効でないことが分かった。その一方で、フランシスコ会とベギン運動が相互に影響を及ぼしていたこと、更に両者の運動がより大きな当時の宗教的潮流の中に位置していたことが分かり、メヒティルト・フォン・マクデブルクの『神性の流れる光』の社会的、思想的背景を当初の予定よりもより広範に考察することが出来ることとなった。しかし、研究の進展に関しては、当初の計画より進んでいるわけでも、遅れているわけでもないので、概ね順調に進展していると考えている。引き続き当時の宗教運動に関する研究を進め、時代背景と思想背景をより一層明確にすると共に、オリゲネスやグレゴリウス一世、クレルヴォーのベルナールらの『雅歌解釈』に関する研究を行い、この方面からも思想的背景を可能な限り解明する予定である。今後はベギン運動と他の宗教運動との関係を当時の社会状況を考慮しながら研究するが、その際、ベギン一般に関わることと、メヒティルト・フォン・マクデブルク個人に関わることを可能な限り明確に区別しながら進めるつもりである。また、それと平行してテクストの読解を進め、オリゲネス、グレゴリウス一世及びクレルヴォーのベルナールらの雅歌解釈と『神性の流れる光』の共通点及び相違点を研究し、後者の独自な点を明確にする。主として資料収集(主に書籍)のために支出するが、収集した資料の電子化とその保存及び使用に関する機材等の購入に支出する。当初の計画ではドイツで資料収集を行う予定であったが、ドイツで収集する資料が予想以上に順調に入手できている一方で、ベルギーに現存する、当時ベギンたちが共同生活を送っていたベギン・ホフを調査し、資料を収集する必要があると判断したため、目的地をドイツからベルギーに変更し、旅費として、研究費の一部を支出する。本年度同様、資料収集(主に書籍)の為に支出し、また、電子化した資料を使用する為の機材の購入に支出する予定である。
植物による土壌重金属の吸収におけるアーバスキュラー菌根菌共生の役割

菌根菌(AM菌)が植物による土壌中のカドミウム(Cd)の吸収・解毒・輸送・蓄積にどのように関わっているかを明らかにすることを試みた。まずいくつかの異なる菌根菌が感染した植物のCd汚染土壌への適応をポット試験で解析した。その結果、AM菌のCd耐性付与は各菌株のリン酸吸収促進と相関していること、AM菌接種によってCd耐性が増した宿主ではCd吸収は必ずしも減少していないことなどが示唆された。また、菌糸が根同様Cdを吸収・輸送している事、根が吸収したCdと菌糸が吸収したCdとでは植物内での動態が異なり、菌糸によって吸収されたCdは地上部には転流されずに地下部に留まる事が示唆された。次に植物-微生物境界領域でのCd分布や生物体内におけるCdの化学形態を解析するため、微細領域のX線蛍光分析(X-ray fluorescence analysis,XRF)およびX線吸収端微細構造分析(X-ray Absorption Fine Structure,XAFS))を、(財)高輝度光科学研究センター・SPring-8で行った。その結果、菌糸が土壌中のCdを吸収/輸送していることが直接的に証明された。また菌糸が吸収したCdは菌根内で植物細胞に受け渡されず菌糸内に留まる事が示され、ポット試験で菌糸が吸収したCdが地上部に転流しなかったメカニズムが明らかとなった。また、胞子にはCdが高濃度に蓄積されており、土壌中におけるCdの生物的利用可能性に影響している可能性が示された。さらにXAFS解析により外生菌糸内を輸送中のCdと内生菌糸中に蓄積したCdは別の化学形態を取っている事が示唆された。以上の結果は土壌中のCdの挙動を理解する上で、菌根菌の関与を考慮することが極めて重要であることを示している。先に提出した計画書に従い、アーバスキュラー菌根菌(AM菌)共生と重金属吸収の関連について、特にポリリン酸代謝と金属イオン輸送に焦点を当てて研究している。そのために通常のポット栽培実験に加え、毛状根培養系を用いた解析を行う。本年度は11月1日に来日してから5ヶ月間の間に2回のポット栽培実験を行った。最初の試験(2006.12-2007.2)では3種のAM菌の共生が異なるリン酸施肥条件下でミヤコグサのカドミウム吸収に及ぼす影響を調査した。詳細なサンプルの分析は現在進行中であるが、生育などのデータを見る限り重金属毒性の発現がAM菌共生によるリン酸栄養状態の改善と密接に関連している、という我々の仮説を裏付ける結果が得られたと期待している。2回目のポット試験(2007.2-2007.4)ではAM菌共生が出来ない変異株と野生株を同じカドミウム汚染土壌に混植し、AM菌が土壌中のカドミウムの生物摂取可能性(bioavailability)に及ぼす影響を調査している。現在3回目のポット試験の準備を行っており、ここではカドミウム安定同位体を菌糸のみが侵入可能なコンパートメント内に用いる事によって菌糸のカドミウム吸収を直接評価する予定である。これらの実験の合間に、いくつかの準備作業を行った。まず中国で分離したAM菌株の輸入と増殖を行っている。これらは後の実験で用いる予定である。また実験技術として、ICP-MSや原子吸光の測定法、リン酸の微量定量法や毛状根およびミヤコグサ根粒菌の維持・増殖方法を修得した。その他の活動として、2006年12月7-8日に畜産草地研究所(つくば)と農業環境技術研究所を訪問し、これまでの研究経歴や日本での研究計画についてセミナーで講演すると同時に、関係研究者との情報交換および実験施設の見学を行った。いくつかのポット試験によってを行って、菌根菌の共生やリン酸施肥が宿主植物のCd吸収やCd耐性に及ぼす影響を解析した。代表的な二つのポット試験について以下詳述する。1)リン酸吸収能とカドミウム汚染土壌への耐性との関連:リン酸供給能の異なる3種の菌根菌を接種、または対照として菌根菌非接種(NM)の条件下でミヤコグサを栽培し、植物のリン酸吸収とCd吸収の関連を検討した。培土にはリン酸添加区、Cd添加区(2レベル)および無添加区を設定した。菌根菌の種類によって接種効果の得られるCd濃度が異なった。生育促進はCd吸収量や地上部のCd濃度の減少とは必ずしもリンクしておらず、単位根長あたりのリン酸吸収とCd吸収には強い正の相関が認められた事から、リン酸供給能の高い菌ほどCdの吸収に寄与していると考えられた。2)植物根と菌根菌菌糸が吸収したCdの植物体内での挙動の差:菌根菌接種または非接種の条件下でミヤコグサを栽培した。その際、栽培ポットの中に入口がメッシュ(根と菌糸の両方が通過できる粗いメッシュ、または菌糸のみが通過できる細かいメッシュ)で仕切られた小容器を埋め込み、その中にCd安定同位体やリン酸を異なる濃度で施用した土を封入した。小容器内のCdは根と菌糸の両方によって効果的に吸収されたが、根によって吸収されたCdは効率よく地上部に転流されたのに対し、菌糸によって吸収されたCdは根内に留まると考えられた。また植物体のCd濃度は高リン酸条件下でより高い事も確認された。

これらの結果は11月に三重大学で開催された菌根研究会2007で報告した。また受入研究機関内で実施された研究チームセミナーでも二度の研究発表を行った。菌根菌(AM菌)が植物による土壌中のカドミウム(Cd)の吸収・解毒・輸送・蓄積にどのように関わっているかを明らかにすることを試みた。まずいくつかの異なる菌根菌が感染した植物のCd汚染土壌への適応をポット試験で解析した。その結果、AM菌のCd耐性付与は各菌株のリン酸吸収促進と相関していること、AM菌接種によってCd耐性が増した宿主ではCd吸収は必ずしも減少していないことなどが示唆された。また、菌糸が根同様Cdを吸収・輸送している事、根が吸収したCdと菌糸が吸収したCdとでは植物内での動態が異なり、菌糸によって吸収されたCdは地上部には転流されずに地下部に留まる事が示唆された。次に植物-微生物境界領域でのCd分布や生物体内におけるCdの化学形態を解析するため、微細領域のX線蛍光分析(X-ray fluorescence analysis,XRF)およびX線吸収端微細構造分析(X-ray Absorption Fine Structure,XAFS))を、(財)高輝度光科学研究センター・SPring-8で行った。その結果、菌糸が土壌中のCdを吸収/輸送していることが直接的に証明された。また菌糸が吸収したCdは菌根内で植物細胞に受け渡されず菌糸内に留まる事が示され、ポット試験で菌糸が吸収したCdが地上部に転流しなかったメカニズムが明らかとなった。また、胞子にはCdが高濃度に蓄積されており、土壌中におけるCdの生物的利用可能性に影響している可能性が示された。さらにXAFS解析により外生菌糸内を輸送中のCdと内生菌糸中に蓄積したCdは別の化学形態を取っている事が示唆された。以上の結果は土壌中のCdの挙動を理解する上で、菌根菌の関与を考慮することが極めて重要であることを示している。
がん遺伝子パネル検査の実装が患者・市民に及ぼす倫理的・法的・社会的課題の検討

がんに関連する遺伝子を網羅的に調べるがん遺伝子パネル検査は、医療への応用が急速に進んでおり、近い将来がんの診断・治療の在り方を抜本的に変えることが予想される。本研究は、がん患者や市民におけるがんゲノム医療やがん遺伝子パネル検査に関する懸念や期待等の意識を明らかにし、今後、がんゲノム医療を適切に推進するために必要な社会的基盤等について検討することを目的としている。2018年度は、がん患者、がん患者家族、市民を対象として実施したがんゲノム医療やがん遺伝子パネル検査に関するインターネット調査のデータを分析し、がんゲノム医療のELSIについて検討した。その結果、がん患者、がん患者家族、市民のいずれにおいても、がん遺伝子パネル検査の認知度が低いことが明らかとなった。がん遺伝子パネル検査に関するベネフィットと懸念について、がん患者とがん患者家族は、市民よりもがんの個別化治療に関するベネフィットを高く認識している一方で、検査費用や所得による医療格差について懸念していることが明らかとなった。検査結果のデータベースへの登録について、多くのがん患者とがん患者家族が検査精度の向上に役立つと考えている一方で、約半数がデータベースに登録された検査結果データの適切な利用について懸念していることも明らかとなった。また、がん遺伝子パネル検査の検査結果のうち、遺伝性腫瘍に関する結果について、がん患者とがん患者家族の約78割が家族との結果の共有を希望していることが明らかとなった。がんゲノム医療の適切な推進のために、がん患者や患者の家族、市民に向けたがん遺伝子パネル検査に関するベネフィットや限界についての情報提供の充実と、検査データが登録されるデータベースの利用状況等に関して透明性を確保するための体制構築が喫緊の課題であると考えられた。これらの研究成果を論文としてまとめ、公表した。初年度に予定していたがんゲノム医療に関するインターネット調査(量的調査)のデータについて分析を行い、その研究成果を口頭発表や論文を通して公表できたため。2019年度も、引き続きがんゲノム医療に関するインターネット調査(量的調査)のデータの分析を行い、がんゲノム医療およびがん遺伝子パネル検査に関する態度や、ゲノムリテラシーに関連する社会経済的要因やその他の要因について検討する。さらに、2019年度に予定されているがん遺伝子パネル検査の保険適用に関する状況を把握しつつ、量的調査のデータ分析や、文献研究により明らかになったがんゲノム医療に関する倫理的・法的・社会的課題(ELSI)について、フォーカス・グループ・インタビュー等の質的調査により深く掘り下げて検討する。他事業で実施されたインターネット調査のデータを本研究に利用できたため、次年度使用額が生じた。2019年度に実施する予定のフォーカス・グループ・インタビュー等の調査に使用する。
光の質と個人特性がヒトの生理機能に及ぼす影響

低色温度・低照度環境では特性不安得点と暗算タスク時の拡張期血圧変化に正の相関が認められた。夏期のcore interthreshold zone(CIZ)は冬期より2倍程度大きく,温白色光曝露時のCIZは赤色光や青色光曝露時より大きいことが示された。午前中の単波長光曝露は夜間の睡眠に影響を及ぼし,その光が青色の場合に夜型傾向の強い個人ほど直腸温の低下を抑制することが示された。中枢神経機能,自律神経機能,体温調節機能などの生理反応に及ぼす光の質の影響と,それらを修飾する性格特性,形態的特性,行動特性などの個人の特性の影響について明らかにすることを目的として,本年度は以下の研究を実施した。1.458 nmと550 nmの単波長光を朝と夜に暴露し,概日変化に及ぼす光の影響を検討した。12名の朝型・夜型中間タイプの被験者で検討した結果,α波減衰係数は朝より夜の方が高いこと,P300振幅は458nmで朝が夜より低く,550 nmでは夜が朝より高いことなどが認められた。2.色温度,照度を組み合わせた4条件の光環境下で,8名の健康な青年男性を被験者として,足し算タスクおよびホワイトノイズ騒音(80dBA)を付加した時の生理反応を測定した。騒音暴露では心拍数,一回拍出量などに光環境の有意な効果が見出された。さらに被験者の性格特性による生理反応の差異を検討している。3.赤色,青色,および白色光環境で健康な若年男性5名を対象に,運動負荷を与えて発汗を促し,その後,冷水循環スーツにより体温を下げてふるえを誘発した。直腸温の発汗閾値とふるえ閾値を求め,その差であるCore Interthreshold Zone(CIZ)を求めた。白色光のCIZは0.37°Cと小さく,青色と赤色ではそれぞれ0.67°C,0.52°Cと大きいことが明らかとなった。また,季節差が存在する可能性が示唆された。4.睡眠解析を行うための実験システムの構築を行い,青色と赤色の単波長光および白色光を就寝前2時間に暴露し,睡眠中の脳波,筋電図等を測定した。光条件によって睡眠が質的影響を受ける可能性が示され,行動特性(朝型/夜型)の異なる被験者を用いて睡眠の質に関する交互作用を検討すべきであることが示された。1.色温度,照度を組み合わせた4条件の光環境下で,足し算タスクおよび騒音を付加した時の生理反応を検討した。その結果,左前額の酸素化ヘモグロビン量に照度の影響を認め,高照度光は酸素化ヘモグロビンの増加をもたらすことが示された。知的ストレスに対するP300潜時の変化には色温度の影響を認め,前頭野と左前額において,高色温度光はP300潜時の延長をもたらした。一方,情動的ストレスに対するP300振幅の減少は,後頭野において,高色温度光は低色温度より大きい傾向が示された。2.夏期と冬期に,赤色,青色,および白色光(5000K)環境で健康な若年男性10名を対象に運動負荷を与えて発汗を促し,その後,冷水循環スーツにより体温を下げてふるえを誘発し,Core Interthreshold Zone (CIZ)を求めた。昨年の冬期に行われた結果と本年度の結果より,照明条件がCIZに影響を及ぼすことが明かとなった。また,夏期と冬期では反応が異なり,夏期では白色,赤色,青色の順に値が小さくなる傾向があったが,冬期では全体的にCIZが半減し,他の条件より青色で有意に大きい結果が示された。3.様々な個人属性をもつ被験者において午前中の単波長光曝露が夜間の睡眠に与える影響を明らかにするために,10名の被験者で実験を行った。被験者は午前中に465nm(青),523nm(緑),638nm(赤)のいずれかの単波長光に曝露され,その後は一定の光環境で生活し,夜間に通常通り睡眠をとった。その結果,睡眠ポリグラフにおいて,睡眠ステージの推移に光条件間の差の可能性が認められた。光の質と個人特性が生理機能に及ぼす影響について明らかにすることを目的として,本年度は以下の研究を実施した。1.色温度,照度を組み合わせた4条件の光環境下で,足し算(MA)タスクおよび騒音(WN)を暴露した時の生理反応について,今年度新たに被験者6名を加え,検討した。その結果,MAタスク中の血圧上昇は高色温度環境で有意に大きいことが示された。

また,MAタスク時の低色温度・低照度(3000K/200lx)環境では,被験者の特性不安得点と拡張期血圧変化に有意な正の相関が認められた。WN暴露中の血圧上昇は高照度環境で少ないことが示された。2.光の質がoore interthreshold zone(CIZ)に及ぼす影響に関して本年度は未実施であった夏期の1,000lxにおける赤色光,青色光に曝露した時の測定を追加し検討した。その結果,温白色光曝露時のCIZは0.27±0.19°C,赤色光曝露時のCIZは0.14±0.19°C,青色光曝露時のCIZは0.12±0.23°Cであることを確かめた。よって,CIZは照明条件の違いで異なり,赤色光や青色光に曝露された場合はゾーンが狭くなり,体温調節反応が鋭敏になる傾向があることが示唆された。3.午前中3時間の単波長光(465nm(青),523nm(緑),638nm(赤))曝露が夜間の睡眠に与える影響を明らかにするために,継続して実験を行った。その結果,赤色より青色,緑色暴露で夜間の深部体温低下が少なく,青色暴露で夜間のメラトニン分泌が他の色より抑制することなどが明らかとなった。
東アジアの港湾諸都市における建築コンバージョンのデザイン手法と都市文化の継承

本応募研究は、都市の更新技術として重要な意味を持つ建築コンバージョン(用途変更を伴う建築改修)について、急激な発展を遂げている東アジアの中でも、我が国と関係の深い中国、台湾、そして韓国において、近代から現代にかけて都市構造が大きく変化してきた港湾都市を対象とする。そして、これらの都市における建築コンバージョンの事例調査およびそのデザイン手法の分析に基づき、建築の再利用と都市発展との関係を考察するものである。これにより、今後の我が国の都市発展における既存建築ストックの活用に際した建築コンバージョンという手段を、都市戦略上にも活かせるものとして位置付け、今後の発展に寄与することを目的とする。
宇宙空間における放射線照射による絶縁材料帯電機構の解析及び診断システムの開発

(1)高エネルギー電子線照射中実時間の空間電荷測定装置を実現宇宙電子線エネルギーはおおよそ10300kVであるので、このエネルギーの電子線照射装置を借用して、照射中実時間の空間電荷測定を行った。そのために、照射装置の照射空間に挿入できるサイズの測定装置に改良した。さらに、照射中に蓄積電荷を測定できるように、測定システムはコンピューターによる自動計測ができるように改良した。以上のようにして帯電診断システムを開発し、照射中実時間の空間電荷測定に供した。(2)高エネルギーの電子線照射中実時間の蓄積電荷分布の測定結果電子線は10300kV間のエネルギーを可変し、照射中実時間のPMMA高分子材料中に蓄積される空間電荷分布を測定した。位置分解能が3%で、時間分解能10秒で、照射中および照射後の実時間の蓄積空間電荷分布経時変化を測定できた。電子線照射エネルギー200kVの場合、1分以内では照射側から浅い位置から電子が蓄積され、蓄積電荷ピーク位置が徐々に深い位置に侵入し、そのピーク位置は220μm、最大侵入位置は315μmとなり約5分で平衡に達していた。このように実時間で電荷蓄積分布を観察できたことは初めてである。本研究では、まずパルス静電応力(PEA)法を用いて高温測定用の高分解能の空間電荷分布測定装置を開発した。また、電子線を照射したアクリル樹脂PMMA(Poly-methyl-methacrylate)中の電荷分布をこの装置により測定した。さらに、この装置を改良して高温中で電荷分布と外部回路電流を同時測定するシステムを開発し、電子線照射PMMA中の電荷分布の温度上昇にともなう変化と外部回路電流を同時測定した。この実験結果を用いて、試料中を流れる真の伝導電流を導出する解析手法を開発した。この解析により、電子線を照射したPMMA中では、電子線照射により電子線が通過した劣化領域と電子線未通過である健全領域の電子の移動度が著しく異なり、劣化部分の移動度が健全部のそれに比べて大きいことを確認した。さらに、この解析法を改良して、電子線照射によりトラップ深さとトラップの位置的分布の算出を試みている。上記の開発とは別に、圧電素子誘起圧力波(PIPWP)法を用いて測定装置の高分解能化を行い、従来15μm程度であった試料の厚さ方向分解能を9μm程度まで向上させた。これにより、従来の測定装置では正確に測定できなかった厚さ約135μmのポリイミドに電子線を照射した試料の電荷分布を測定することに成功した。ポリイミドフィルムは実際の人工衛星などの宇宙機の熱制御材料等として利用されている耐熱性プラスチックである。このフィルムに電子線を照射して電荷分布の経時変化を測定した。この測定結果では、PMMA等の場合と異なり、一旦電荷が試料内に蓄積すると数日経過しても電荷分布にほとんど変化が見られず、長期に渡り電荷が蓄積することが分かった。(1)照射中実時間の空間電荷測定装置を実現宇宙電子線エネルギーはおおよそ10300kVであるので、このエネルギーの電子線照射装置を借用して、照射中実時間の空間電荷測定を行った。そのために、照射装置の照射空間に挿入できるサイズの測定装置に改良しあた。さらに、照射中に蓄積電荷を測定できるように、測定システムはコンピューターによる自動計測ができるように改良しあた。(2)照射中実時間の蓄積電荷分布の測定結果電子線は10300kV間のエネルギーを可変し、照射中実時間のPMMA高分子材料中に蓄積される空間電荷分布を測定した。
NPOの法と経済の分析

本成果報告書の内容は大きく3つに分かれている。それぞれについて、その概要を説明していく。第1部は、NPOの本質・特性をいかに理解するかについての理論的・哲学的考察である。第1章では従来のNPO理解を整理するとともに、特に新古典派的なゲーム論的アプローチにより、利他主義が市場経済における囚人のジレンマの解消に役立つことを論証している。NPOが利他主義的な認識を陶冶する場としての社会的機能を果たすとしたら、こうしたNPOの育成は、市場の失敗に対する有効な処方箋となることを示唆するものとなっている。しかしこの新古典派的アプローチは、NPOがいかなる意味論的メカニズムによって、このような利他主義または市民社会的価値の陶冶の場になりうるのかを何ら具体的に考察していない。この点をより積極的に、認識論的経済哲学の視点から新たに考察したのが、第2章と第3章である。第2部の第4章と第5章は、こうしたNPOに対して、いかに経済社会的な「規律づけ」を行うかを、法学的・経済学的視点から論じている。これはNPOが営利企業とは異なって、市場原理による「規律づけ」を受けないことから、非効率性とモラルハザードに浸食されやすい点をいかに補完するかを考えるという理論的意義を有している。最後の第3部の第6章・第7章は、グラスルーツにあるNPOの経済社会的意義を具体的に明らかにするために、特にNPOと地域通貨発行の関連性を考察した。第6章は、平成13年度の夏に、アメリカ・カナダにおいて行った地域通貨実態調査の結果を含むものとなっている。なおNPOの考察を通じて得た知見をさらに拡大して、経済社会の「再生」をいかに理解すべきかの問題については、分量が多大のため、本年4月に刊行された著書(岩波書店)を直接参照されたい。本研究の目的は,市民社会の不可欠な認識論的役割を果たすNPOの機能を明らかにするために,新たなるアプローチを提不することである.理論的に言うと,NPOの経済学を「1つの特殊研究」として展開するのではなく,専ら「経済効率性」の側面からしか考察しえない従来の経済学に対して,方法論的な再検討を要請するものでなければならない.この共同研究では,具体的なNPOの理論分析・実証分析を通じて,新たな認識論的分析が可能であることを示そうと考えた.法体系も「1つの意味論システム」と解釈できるから,「法と経済」というアプロチをとることが,われわれの目的遂行には有効であると考えた.本年度は研究の初年度であるが,こうした大きな研究目的のための出発点を確立しようとさまざまな工夫を凝らした.1つの試みとしては新たなる側面として,NPOが発行する「地域通貨」の問題に焦点を当てた.研究代表者の中込は,アメリカ・カナダにおける地域通貨の実態調査を実施し,帰国後その成果を「なぜ地域通貨問題を重要と考えるか」という論文にまとめた.(さらに新たな論文を執筆中である.)また,地域通貨の法的問題についても,現在,内野が中心となって研究を進めており,次年度中に新しい論文が完成する予定である.これらによりNPOが有する市民社会的な意味論的意義が浮き彫りにできると考えている.また,芹田はNPOマネジメントをやはり金融的側面に佳占を絞ってミクロ経済学的に考察中であり,宮原はNPOと政府の関連性を大きなマクロ的視点から考察中である.これらはともに次年度,海外での研究を計画しており,その内容については研究者同士の議論を繰り返し行うことで,より質的に高度なものとなるよう努力中である.次年度以降も,これら基本路線を維持しつつ,さらに研究の深化が達成できるようお互い協力して努力していきたいと考えている.本年度も研究目標に沿って,具体的な成果が達成できるように努力した。

実際に完成し出版された論文以外にも,多くの論文および著作が進行中である。研究者は相互に連絡を取りながら研究を進めているが,各自の分担部分での成果の概要は次の通りである。中込は,研究発表欄に記載の2つの論文を完成させ,さらに未発表であるが1冊の著作(単著)を書き上げた。(『「自由」を超えて:内発性の経済学』)これらの研究はともにNPO研究の基礎となる認識論的哲学からの考察であり,最終年度には他の研究者の成果との理論的関連性をさらに突き詰めて深く考えていく予定である。芹田はNPOのミクロ経済学的分析を担当しており,具体的にはNPOの資産運用の問題を取り上げて考察を加えている。「日本の公益法人に対する資産運用規制の影響の実証分析」と「公益法人に対する最適な資産運用規則」(ともに仮題)という論文の作成が進行中である。宮原はNPOを主にマクロ経済学的視点から考えていくことを主眼としている。「NPOとGDP : NPOの生産力効果」と「政府の失敗とNPO・NGO」(ともに仮題)という論文の執筆が進行中である。内野は,法学的視点をも取り入れて考察を行っている。今年度は研究発表欄に記載の論文を1つ完成させたが,さらに「非営利法人の税制上の優遇措置の当否に関して」,「法人形態の効率性に関する取引費用アプローチ」,「日本の法人制度改革」(ともに仮題)の分析もめざしている。こうした理論的・実証的問題が,NPOの認識論的特性といかなる内在的関連性をもって考察できるのか。研究期間はあと1年あるので,相互の議論を通じて一層深い知見が得られるように努力していきたい。本年度は研究最終年度であり、現在3年間の研究の成果報告書を作成中である。ここではとりあえず平成15年度の研究成果に限って説明する。本年も研究目標にそって、研究員相互で議論しあい、具体的な成果の達成に努力してきた。実際に完成した論文・著作は、現時点(3月初旬)では、以下に示す2点であるが、3月未から4月にかけて、さらに4つの論文の完成を予定している。中込は、今までの2年間の研究成果を基礎とし、さらにその一部の知見を応用して、以下に示す1冊の著作を書き上げた。岩波書店から3月未-4月にかけて出版予定である。ここでの知見をさらに応用したものであるので、その著作の題名は本研究との関係が見えにくいものとなっているが、しかし基本的な考察視点は共通である。つまり市場経済の発展・再生のためには、単なる機械論的な効率性概念の追求だけでは不十分であり、広い意味での公共性意識の陶冶が不可欠であると主張されている。この点において、市民社会的価値観・公共的意識の陶冶の場としてのNPOという理解とつながっている。芹田はミクロ的視点から具体的にはNPOの資産運用の問題を考察している。「日本の公益法人に対する資産運用規制の影響の実証分析」と「公益法人に対する最適な資産運用規則」(仮題)という論文の作成が進行中である。宮原はNPOを主にマクロ的視点から考えている。「NPOとGDP : NPOの生産力効果」と「政府の失敗とNPO・NGO」(仮題)という論文の執筆が進行中である。内野は法と経済学の視点から本年度は1つの論文を完成させた。以下の「米国非営利団体税制の経済学と制度の実態」という論文である。
ガ類性フェロモン産生に関わるアルコールアセチルトランスフェラーゼ遺伝子の機能解析

蛾類昆虫の性フェロモン生合成に関わるアルコールアセチルトランスフェラーゼ(AAT)は未同定であり、また、他の動物でもAAT遺伝子は同定されていないことから、ホモロジーを利用したAAT遺伝子の同定はできない。一方、AATはアワヨトウにはあるが、カイコガにはないことから、両種のフェロモン腺ESTクローンを比較し、アワヨトウでのみ見出され、かつ既知の性フェロモン生合成に関わる脂肪酸不飽和化酵素と同じ部位で発現する3種類の新規遺伝子を得た。アワヨトウフェロモン腺からアルコールアセチルトランスフェラーゼ(AAT)遺伝子を効率よく単離するためには、この遺伝子の転写レベルが最も高い時期のフェロモン腺を用いてcDNAライブラリーを作製すべきであるが、AAT遺伝子の発現時期は不明である。一方、これまでのカイコガの研究から、desatlやpgFARのようなフェロモン生合成酵素遺伝子は同調的に転写レベルが上昇することが分かっており、実際に両遺伝子の転写レベルの最も高い羽化一日目のカイコガフェロモン腺cDNAライブラリーからは、desatlやpgFARを含むフェロモン産生関連遺伝子のESTクローンが多数得られている。そこでアワヨトウでも同じ事象が見られると仮定し、まずdegenerate RT-PCRなどによりアワヨトウフェロモン腺からΔ11脂肪酸飽和化酵素遺伝子の単離を試みた結果、カイコガdesatlを67.1%の相同性を有するcDNAクローンを得た。さらにバキュロウイルス発現系を利用して機能解析を行った結果、この酵素がΔ11脂肪酸飽和化活性を有していることが明らかとなった。またRT-PCR解析を行った結果、この遺伝子の転写レベルが羽化3日目に最も高いことがわかったことから、羽化3日目のメスのアワヨトウ1,009頭からフェロモン腺を含む腹部末端組織を摘出してtotalRNAを調製し、これをもとにノーマライズドcDNAライブラリーを作製した。さらにランダムに選抜した約2,000クローンについて5'末端の塩基配列解析を行った。現在、これらのESTクローンとカイコガフェロモン腺のESTクローンの比較を行っており、これまでにAAT遺伝子の候補となる15個のアワヨトウ特異的ESTクローンが得られた。アワヨトウ(Pseudaletia separata)の性フェロモンの主要成分(Z)-11-hexadecenyl acetateは、パルミチン酸から連続した3段階の反応、すなわち(1)11位の不飽和化、(2)アシル基の還元、および(3)末端OH基のアセチル化によって生合成され、それぞれの反応には脂肪酸不飽和化酵素、アシル基還元酵素、およびアルコールアセチルトランスフェラーゼ(AAT)が関与する。一方、カイコガの性フェロモン生合成経路では(1)と(2)の反応はあるが(3)の反応がないことから、両ガ類のフェロモン腺ESTクローンを比較した場合、AATはアワヨトウでのみ見出されるはずである。そこで前年度は、アワヨトウフェロモン腺のノーマライズドcDNAライブラリーからランダムに選抜した約2,000クローンについて塩基配列解析を行い、さらにそれらについてカイコガのESTデータベースを用いて相同性検索を行った。次にその一部についてアワヨトウでのみ見出されるクローンをAAT喉補遺伝子として選抜した結果、15の候補遺伝子が得られた。今年度は引き続きAAT候補遺伝子の選抜を行った結果、新たに23の候補遺伝子が得られたことから、計38の候補遺伝子に特異的なプライマーを用い、様々な組織についてRT-PCR解析を行った。その結果、フェロモン腺を含むアワヨトウ腹部末端で優先的に発現する5つの遺伝子が明らかとなった。そのうち、最も転写レベルの高い遺伝子に着目し、3'末端および5'末端の塩基配列を決定した結果、この遺伝子は384アミノ酸残基からなる蛋白質をコードしていることが明らかとなった。アワヨトウ(Pseudaletia separata)の性フェロモン主要成分(Z)-11-hexadecenyl acetateはパルミチン酸から連続した3段階の反応、すなわち(1)11位の不飽和化、(2)アシル基の還元、および(3)末端OH基のアセチル化によって生合成され、アルコールアセチルトランスフェラーゼ(AAT)は(3)に関与する。カイコガの性フェロモン生合成経路では(1)と(2)はあるが、(3)がないことから、この2種のガのEST解析でAATはアワヨトウでのみ見出されるはずである。そこで前年度までにアワヨトウ腹部末端のtotal RNAを用いて標準化cDNAライブラリーを作成し、他の組織に比べて腹部末端で優先的に発現し、かつカイコガESTクローンと相同性が無い5種類の新規遺伝子を得た。今年度は腹部末端における詳細な発現部位解析を行ったところ、前述の5種類の新規遺伝子のうち2種類が(1)に関わる遺伝子(PsΔ11、論文執筆中)と同じ部位で発現していることが分かり、これらをAAT候補遺伝子とした。

その一方で、根本的な問題として上述の2,000クローン中にPsΔ11が見出されなかったことから、改めてPsΔ11の発現レベルの高い腹部末端の部位を外科的に摘出してpoly(A)+RNAを抽出し、cDNAライブラリーを再作製した。ランダムに選んだ1,000クローンについてEST解析した結果、新しいライブラリーからPsΔ11などカイコガフェロモンESTクローンと相同性,が高いクローンを多数得た。そこでAAT候補遺伝子を探索した結果、ヨトウガ(Mamestra brassicae)でのみ単離されている機能未知遺伝子と相同性が高いクローンを得た。ヨトウガのフェロモン生合成経路にも(3)があることから、これを3つ目のAAT候補遺伝子とした。