hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
熱波動応答のロックイン赤外線計測による経年航空機構造の非破壊検査システムの開発

本研究では,経年航空機の構造安全性評価体制を確立するため,経年航空機構造において検査されるべき重要な欠陥・損傷形態である,胴部ラップジョイントのマルチサイトクラック,および腐食減肉や複合材料構造の衝撃はく離損傷を,効率的にその場検出・計測できる新しい非破壊検査システムを開発した.特に新しい非破壊評価技術として,構造物に対しパルス状あるいは周期変動する熱負荷(熱波動)を与えた時の,構造物表面の温度分布(熱波動応答)を参照信号に同期させて高精度にロックイン計測し,熱波動応答の欠陥・損傷による変化をもとに欠陥・損傷を計測するロックイン赤外線サーモグラフィ法を開発した.マルチサイトクラックに対しては,出力が周期変動する高周波誘導電流場中のき裂先端特異発熱場周りの熱波動応答のロックインサーモグラフィ計測に基づく手法を,構造物に内在する腐食減肉およびはく離損傷に対しては,短時間のパルス状キセノン光あるいは周期的に点滅するキセノン光を構造物に照射した場合の構造物表面における熱波動応答のロックインサーモグラフィ計測に基づく手法を,それぞれ開発した.開発した計測手法をステンレス鋼板およびアルミ合金板に導入したき裂状欠陥検出に適用した結果,温度変動振幅分布画像および負荷電流信号からの位相遅れ分布画像に,き裂の存在による特異性が現れ,き裂を精度良く検出できることが明らかとなり,提案した手法の有用性が確認できた.キセノンパルス光照射時の温度変動の時系列データに基づく検査法を,複合材料の衝撃剥離損傷および腐食減肉欠陥の定量計測に適用した結果,欠陥および損傷の形状・深さの定量評価が可能であることがわかった.本研究では,経年航空機の構造安全性評価体制を確立するため,経年航空機構造において検査されるべき重要な欠陥・損傷形態である,胴部ラップジョイントのマルチサイトクラック,および腐食減肉や複合材料構造の衝撃はく離損傷を,効率的にその場検出・計測できる新しい非破壊検査システムを開発した.特に新しい非破壊評価技術として,構造物に対しパルス状あるいは周期変動する熱負荷(熱波動)を与えた時の,構造物表面の温度分布(熱波動応答)を参照信号に同期させて高精度にロックイン計測し,熱波動応答の欠陥・損傷による変化をもとに欠陥・損傷を計測するロックイン赤外線サーモグラフィ法を開発した.マルチサイトクラックに対しては,出力が周期変動する高周波誘導電流場中のき裂先端特異発熱場周りの熱波動応答のロックインサーモグラフィ計測に基づく手法を,構造物に内在する腐食減肉およびはく離損傷に対しては,短時間のパルス状キセノン光あるいは周期的に点滅するキセノン光を構造物に照射した場合の構造物表面における熱波動応答のロックインサーモグラフィ計測に基づく手法を,それぞれ開発した.開発した計測手法をステンレス鋼板およびアルミ合金板に導入したき裂状欠陥検出に適用した結果,温度変動振幅分布画像および負荷電流信号からの位相遅れ分布画像に,き裂の存在による特異性が現れ,き裂を精度良く検出できることが明らかとなり,提案した手法の有用性が確認できた.キセノンパルス光照射時の温度変動の時系列データに基づく検査法を,複合材料の衝撃剥離損傷および腐食減肉欠陥の定量計測に適用した結果,欠陥および損傷の形状・深さの定量評価が可能であることがわかった.本研究では,航空機構造に対し周期変動する熱負荷(熱波動)を与えた時,熱負荷の周期に合せて変動する機体表面の温度分布(熱波動応答)を変動熱負荷の信号に同期させて高精度にロックイン計測し,熱波動応答の欠陥・損傷による変化をもとに欠陥・損傷を計測する,新しいロックイン赤外線サーモグラフィ法を開発する.本年度は,ロックイン赤外線サーモグラフィを用いた熱波動応答計測装置に,高周波誘導電流による熱波動負荷装置およびキセノンパルス光照射による熱波動負荷装置を付加した,基礎的な計測システムの試作を行った.(1)非冷却赤外線カメラを基礎に,赤外線計測データに対して熱波動負荷の参照信号に基づく相関信号処理を行うデジタルロックインプロセッサを付加した,ロックイン赤外線サーモグラフィを用いた熱波動応答計測装置を試作した.(2)ラップジョイントに発生するマルチサイトクラック計測のための,高周波誘導電流負荷装置を試作した.誘導電流負荷コイルとして上置型コイルの設計・製作を行い,機体表面からの検査を想定した基礎実験を行った.(3)マルチサイトクラックを導入したラップジョイント試験体を作成し,き裂検出・き裂計測に関する実験的検討を行った.出力が周期変動する高周波誘導電流を試験体に負荷した時の,き裂先端近傍の温度振幅および位相遅れ分布などの熱波動応答を計測し,電流変動周波数,コイル形状,負荷電流強度等,き裂検出・計測精度に及ぼす諸因子の影響を検討した.実験と並行して数値解析を行い,き裂検出・計測精度に関する検討を行った.(4)電子シャッターの周期的開閉による周期パルスキセノン光の照射により,機体表面から内部に向かう熱波動を発生させる装置を試作した.(5)腐食減肉を模擬した試験体を作成し,欠陥・損傷検出および定量計測に関する実験的検討を行った.周期パルスキセノン光照射時の表面温度の変動振幅および位相遅れなどの熱波動応答を計測し,パルス光の周波数が計測精度に及ぼす影響を検討した.(6)熱拡散性が異なる様々な材料に対して,ロックイン赤外線サーモグラフィ法を適用して,欠陥・損傷検出および定量計測に関する実験的検討を行った.本研究では、航空機構造に対し周期変動する熱負荷(熱波動)を与えた時、熱負荷の周期に合せて変動する機体表面の温度分布(熱波動応答)を変動熱負荷の信号に周期させて高精度にロックイン計測し、熱波動応答の欠陥・損傷による変化をもとに欠陥・損傷を計測する、新しいロックイン赤外線サーモグラフィ法を開発する。

本年度は、ロックイン赤外線サーモグラフィを用いた熱波動応答計測装置に、キセノン断続光照射およびキセノンパルス光照射による熱波動負荷装置を付加し、き裂状欠陥、剥離状欠陥および腐食減肉欠陥の計測を行った。(1)冷却型高精度赤外線カメラおよび非冷却赤外線カメラに、時系列温度変化応答計測装置、熱波動負荷の参照信号に基づく相関信号処理を行うデジタルロックインプロセッサを付加した、ロックイン赤外線サーモグラフィシステムを構築した。(2)パルス加熱および断続加熱時の熱応答を、熱拡散性の異なる種々の材料に対して検討した。(3)腐食減肉を模擬した試験体を作成し、欠陥・損傷検出および定量計測に関する実験的検討を行った。キセノンフラッシュパルス光照射時および断続キセノン光照射時の、材料表面温度の変動を詳細に計測し、加熱時間、加熱周波数、材料の熱伝導特性等が欠陥計測精度に及ぼす影響を検討した。さらに、加熱後の熱波動応答に関して、温度分布変動波形をフーリエ級数により評価し、欠陥寸法、材料の熱伝導特性による温度分布変動波形の変化を調べた。(4)腐食減肉欠陥に対しては、赤外線応力計測結果から欠陥を同定する手法を開発した。本研究では,航空機構造に対し周期変動する熱負荷(熱波動)を与えた時,熱負荷の周期に合せて変動する機体表面の温度分布(熱波動応答)を変動熱負荷の信号に同期させて高精度にロックイン計測し,熱波動応答の欠陥・損傷による変化をもとに欠陥・損傷を計測する,新しいロックイン赤外線サーモグラフィ法を開発することを目的とした.最終年度である本年度は,キセノンパルス光照射時の温度変動の時系列データをもとに,剥離状欠陥および腐食減肉欠陥の定量計測を行う手法を開発した.(1)パルス加熱後の熱波動応答に関して,温度分布変動波形をフーリエ級数展開した場合の各次数の係数から欠陥形状および深さを定量計測する手法の開発を行った.(2)腐食減肉を模擬した試験体を作成し,欠陥・損傷検出および定量計測に関する実験的検討を行った.キセノンフラッシュによるパルス加熱時の温度変動曲線をフーリエ解析し,これをもとに欠陥形状・欠陥深さを定量評価した.(3)航空宇宙用複合材料の衝撃剥離損傷検出を行った.様々なレベルの衝撃荷重によりCFRPに導入された剥離損傷の定量計測に関する実験的検討を行った。パルス加熱時の温度変動曲線をフーリエ解析し,衝撃剥離損傷の形状・深さを定量的に評価した.(4)パルス加熱時の温度変動に関して,健全部および欠陥部の温度上昇比をもとに欠陥深さを簡便に計測できる手法を提案した.
水素吸蔵金属(合金)を用いる新規な電気化学システムの構築と反応場三次元化の試み

研究代表者らは、以前に、Pd薄板電極や水素吸蔵合金薄板電極を用いて、スチレンの水素化反応が連続的に進行する電気化学システムの構築に成功した。本研究においては、種々の不飽和有機化合物に対する本電気化学水素化反応システムの適用可能性ならびに水素化反応速度や反応選択性に及ぼすPd薄板電極の水素化反応側の三次元化の影響について検討した。2年間にわたって得られた知見を総括すると以下のようになる。1.研究代表者らが開発した電気化学的水素化反応システムを用いて、種々の炭素-炭素、炭素-酸素、窒素-窒素不飽和結合を有する無機・有機化合物の水素化反応を行ったとき、反応速度に違いが見られるものの、いずれの場合にも連続的に反応の進行することが明らかになった。これらの結果から、本電気化学的水素化反応システムは不飽和有機化合物全般に適用可能であることが明らかになった。2. Pd薄板電極の水素化反応側にPd黒を担持するとその担持量に依存して4-メチルスチレンや2-オクテンなどの水素化反応速度は数十倍速くなることがわかった。このような反応性の向上は、反応面積の増大に起因することが電子顕微鏡観察により明らかになった。さらに、PtやAuを担持した場合にも水素化反応速度は飛躍的に増大することがわかった。3. PdあるいはPd黒付きPd薄板電極にPt、Au、Cu、Niなどの遷移金属を担持して三次元化すると、二酸化炭素や硝酸イオンの還元反応速度が飛躍的に向上するだけでなく、担持金属の特性に依存すると考えられる反応選択性が発現することを見出した。本研究においては、スチレン以外の不飽和有機化合物に対する本電気化学システムの適用可能性ならびに水素化反応速度に及ぼす薄板電極の水素化反応側の三次元化の影響について検討した。本研究により得られた知見を総括すると以下のようになる。1.研究代表者らが開発した電気化学システムを用いて、α-メチルスチレン、4-メチルスチレン、1-オクテン、2-オクテン、シクロヘキセンなどのオレフィンならびにアセチレンなどのアルキンの水素化反応あるいは二酸化炭素の還元反応を行ったとき、反応速度に違いが見られるものの、いずれの場合にも連続的に反応の進行することが明らかになった。これらの結果から、本電気化学システムは不飽和有機化合物全般の水素化に適用可能であることが示唆された。2.Pd薄板電極の水素化反応側にPd黒を担持するとその担持量に依存して4-メチルスチレンや2-オクテンなどの水素化反応速度は数十倍速くなることがわかった。また、Pd黒は担持時間の増大とともに三次元的に成長していくことが走査型電子顕微鏡により観察され、反応性の向上が反応面積の増大に起因することが示唆された。昨年度は、研究代表者らによって構築された新規な電気化学的水素化システムがスチレンを始めとする種々の不飽和有機化合物に適用できることおよびPd薄板電極の水素化反応側にPd黒を担持するとその担持量に依存して水素化反応速度が速くなることを明らかにした。本年度では、炭素-炭素二重結合以外の不飽和結合を有する有機・無機化合物の水素化反応に本電気化学的水素化システムが適用可能かどうかおよびPd薄板の水素化反応側に種々な遷移金属を担持することによる反応場三次元化の影響について検討した。1.本電気化学的水素化反応システムを用いてジアゾ基を有する染料であるアマランスの水素化反応を行ったとき、赤紫色のアマランス溶液は脱色されることがわかった。

しかも、脱色の原因は、ジアゾ基の水素化分解によるものであることが明らかになった。2.本電気化学的水素化反応システムを用いて炭素-酸素二重結合を有する二酸化炭素の還元反応を行ったとき、ギ酸が生成し、その速度はPd黒の担持量に依存して速くなることがわかった。しかも、Pd黒付きPd薄板電極にCuやRuを担持することにより、ギ酸だけでなくメタンも生成することが明らかになった。3. PdあるいはPd黒付きPd薄板電極にPt、Au、Cu、Niなどの遷移金属を担持して三次元化すると、目的とする水素化反応の反応性が飛躍的に向上するだけでなく、担持金属の特性に依存すると考えられる反応選択性が発現することを見出した。
Gタンパク質共役型受容体によるリゾファスファチジン酸分子種識別機構の解明

本研究は、既知のLPA受容体では説明できないLPAの多種多様な作用、さらには細胞によってLPA分子種認識に違いが生じるメカニズムを明らかにすることを目的とし、これまでの研究で新規LRA受容体p2y5/LPA6の同定に成功した。当該年度の研究実施計画は、1)欠損マウスを用いた非Edg型LPA受容体の生理機能解析、また2)貧毛症につながるp2y5/LPA6のアミノ酸変異体の解析であった。1.当教室で樹立されたLPA4欠損マウスを用いて、高脂肪食負荷実験を行なった。欠損マウスは野生型マウスと比べ、脂肪肝の抑制、アディポネクチン高値、脂肪細胞の小型化、脂肪組織慢性炎症の軽減、インスリン抵抗性の改善が認められた。LPA4は前駆脂肪細胞に強く発現しており、マウス胎児繊維芽細胞を用いた脂肪細胞分化実験において、欠損マウスの細胞で脂肪細胞分化の亢進が認められた。これらの結果は、欠損マウスは脂肪細胞分化の亢進により、上記表現型をもたらすことを示唆するもので、LPA4はメタボリックシンドロームの新しい治療標的として強く期待できると考える。2.ヒト貧毛症につながるいくつかのアミノ酸変異が報告されている。今回これらの変異体p2y5/LPA6の発現ベクターを作製し、その機能解析を行なった。1つの変異体では野生型受容体と同様にLPAによる細胞内応答が認められたが、その他の8つの変異体では細胞内応答は認められず、うち4つの変異体は細胞膜へ輸送されずにプロテアソーム系で分解されていることがわかった。そのうち1つの変異体において、p2y5/LPA6に対する合成アゴニストが薬理的シャペロンとしてはたらき、その細胞膜発現を回復することを見いだした。この結果は、p2y5/LPA6の合成アゴニストが特定のヒト貧毛症患者において、治療薬として使える可能性を強く示唆するものである。本研究は、これまでに同定されたLPA受容体だけでは説明できないLPAの多種多様な作用、さらには細胞によってLPA分子種認識に違いが生じるメカニズムを明らかにすることを目的とする。今年度(平成20年3月31日)の研究実施計画は、1.現在同定されているLPA受容体、すなわちLPA1-5の発現細胞株等を用い、様々な分子種のLPAに対するリガンド認識の違いを評価するというもの、また2.ヒト血小板に存在するLPA受容体の性質を明らかにするというものである。1.LPAI-5のそれぞれを安定に発現するRH7777細胞株を樹立し、そのカルシウム応答を観察し、各種受容体のリガンド選択性について検討した。また、LPAアナログの影響を検討した結果、LPA1-3選択的アゴニストやLPA4、5選択的アゴニストを見いだした。また、私はLPA1-5とは異なるリガンド選択性を示す新規のLPA受容体の同定にも成功した(未発表)。2、LPAはヒト血小板において強い凝集促進効果があること、この作用おいてアルキル型LPAが強い活性を示すことが古くから知られていたが、そのリガンド選択性プロファイルと同様のプロファイルを示すような受容体は未同定であった(血小板型LPA受容体)。今回、LPAによるヒト血小板の凝集作用とそのリガンド選択性について、検討を行った。既報通り、アルキル型のLPAがヒト血小板凝集反応を強く引き起こすことが確認された。上記1)での検討の結果、アルキル型LPAに対して強い選択性をもつLPA受容体がLPA5であることを見出しており、血小板型LPA受容体の本体がLPA5である可能性が示唆された。また、上記1)の各種LPAアナログの血小板に対する作用を確認したところ、LPA5過剰発現細胞を用いて得られたリガンド活性プロファイルと同一のプロファイルが確認された。私はヒト赤芽球性自血病細胞株(HEL細胞)もアルキル型LPAに強く活性化されること、LPA5を強く発現していることを明らかにしているが、同細胞株のリガンド選択性においても、LPA5過剰発現細胞で得られた選択性と同一のプロファイルが認められた。以上の結果より、LPA5が長年未同定であった血小板型LPA受容体の本体であると考えられる。昨年度(平成21年3月31日)の研究実施計画は、1)血小板型LPA受容体としてのLPA5の機能解析、また2)新たに同定したLPA受容体の機能解析であった。1)マウスの血小板においてLPAは他のアゴニストによる凝集を抑制することが報告された。欠損マウスのデータ等からLPA1-3では説明ができない現象であり、LPA4やLPA5、また新規同定したp2y5/LPA6(下記参照)の関与が示唆された。当教室のLPA4欠損マウスを用いて検討したところ、凝集抑制はLPA4以外の受容体を介していることがわかった。マウス血小板にLPA5が発現していることもわかり、LPA5を介する可能性が示唆されたので、今後LPA5欠損マウスを用いて検討していく。2)血小板のLPA応答以外にも、LPA1-5では説明できない現象がある。

HUVECはLPA1-5のうちLPA1を発現しているものの、LPA1受容体拮抗薬でLPAに対する応答が抑制されないため、第6のLPA受容体の存在が示唆された。今回、申請書研究計画にも記載した方法により、つまりオーファン受容体の中からLPAに応答する受容体を検索していくアプローチにより、オーファン受容体p2y5がLPA受容体であることを明らかにした。その後の解析の結果、低分子量Gタンパク質Rhoに専らシグナルを送る特殊な受容体であることがわかった。さらに、HUVECのLPA応答は実際にp2y5を介して起こることをsiRNAにより明らかにした。上記の研究成果は国際生化学誌に投稿し、現在改訂版の審査中である。今回の研究により、私はp2y5が第6のLPA受容体であり、LPA6と呼ぶことを提唱している。本研究は、既知のLPA受容体では説明できないLPAの多種多様な作用、さらには細胞によってLPA分子種認識に違いが生じるメカニズムを明らかにすることを目的とし、これまでの研究で新規LRA受容体p2y5/LPA6の同定に成功した。当該年度の研究実施計画は、1)欠損マウスを用いた非Edg型LPA受容体の生理機能解析、また2)貧毛症につながるp2y5/LPA6のアミノ酸変異体の解析であった。1.当教室で樹立されたLPA4欠損マウスを用いて、高脂肪食負荷実験を行なった。欠損マウスは野生型マウスと比べ、脂肪肝の抑制、アディポネクチン高値、脂肪細胞の小型化、脂肪組織慢性炎症の軽減、インスリン抵抗性の改善が認められた。LPA4は前駆脂肪細胞に強く発現しており、マウス胎児繊維芽細胞を用いた脂肪細胞分化実験において、欠損マウスの細胞で脂肪細胞分化の亢進が認められた。これらの結果は、欠損マウスは脂肪細胞分化の亢進により、上記表現型をもたらすことを示唆するもので、LPA4はメタボリックシンドロームの新しい治療標的として強く期待できると考える。2.ヒト貧毛症につながるいくつかのアミノ酸変異が報告されている。今回これらの変異体p2y5/LPA6の発現ベクターを作製し、その機能解析を行なった。1つの変異体では野生型受容体と同様にLPAによる細胞内応答が認められたが、その他の8つの変異体では細胞内応答は認められず、うち4つの変異体は細胞膜へ輸送されずにプロテアソーム系で分解されていることがわかった。そのうち1つの変異体において、p2y5/LPA6に対する合成アゴニストが薬理的シャペロンとしてはたらき、その細胞膜発現を回復することを見いだした。この結果は、p2y5/LPA6の合成アゴニストが特定のヒト貧毛症患者において、治療薬として使える可能性を強く示唆するものである。
血液循環腫瘍DNAを用いたメラノーマ患者の遺伝子解析

Circulating tumor DNA(ctDNA)はがん患者において腫瘍の状態を反映する新しいバイオマーカーである。末梢血中のctDNAは微量なので高感度な検出法が必要である。我々はcastPCR法やdropletdigital PCR法を用いて悪性黒色腫患者のBRAF変異やNRAS変異をもつctDNAを定量解析した。ctDNAは進行期の腫瘍量が多い患者で検出され、予後と関係していた。また、抗PD1抗体やBRAF阻害薬の治療前後にctDNAをモニタリングしたところ、ctDNAの変化は画像評価と相関した。以上よりctDNAは治療効果や再発を反映できる有用なマーカーとなりうる。血液循環腫瘍細胞(ctDNA: circulating tumor DNA)は、リアルタイムに体内の病勢を反映できる新たなバイオマーカーとして期待されている。本研究では、メラノーマ患者の血液中のcfDNA(cell free DNA)やBRAFV600E-ctDNAを解析し、癌治療に臨床応用できることを目指す。すでに様々な癌腫についてctDNAに関する研究は報告されているが、血液検体からのDNA抽出方法やその定量法はまちまちで標準化されていない。まず健常人(5人)の血清と血漿を用いて最適条件を決定した。2.抽出したDNAの定量:分光光度計(Eppendorf)と蛍光色素計(Promega)を用いて定量した。(1)血清の方が血漿より抽出できるDNA量は多かった。血清では処理前に壊れた血球由来のDNAが含まれることが考えられた。(2)分光光度計で測定したDNA量は、蛍光色素計での測定値より10から100倍高かった。分光光度計による測定では、dsDNA以外にRNAやssDNAも計測してしまうため値が高くなってしまうことが考えられた。(3)抽出に用いた検体量とDNA濃度は比例しなかった。同様に抽出バッファー量とDNA濃度も比例しなかった。カラムにDNAが残存するなど抽出過程でロスがおこると考えられた。以上より、血液検体2mlから60μLのバッファーで抽出し、蛍光色素計でDNAを定量すると決定した。1.castPCR法の感度と特異度の検討:メラノーマ培養細胞を用いてのBRAFV600E検出感度は0.5%、健常人の血漿を用いての特異度は100%だった。2.組織検体の遺伝子型の検討:Sanger法にて12人の内6人にBRAFV600Eが検出された。4.結果:組織にてBRAF変異があり、かつ多臓器転移の患者にctDNAが検出された。ctDNAの変化は腫瘍量と相関し、LDHや5-SCDよりも鋭敏にその腫瘍量を反映した。ctDNAが検出された患者は7か月以内に死亡したことから、予後マーカーになりうると考えられた。組織にてBRAF変異があり、かつ多臓器転移の内の1例は、ctDNAが検出されなかった。この患者は原発巣にはBRAF変異だったが転移巣は野生型だった。メラノーマのheterogeneityによると考えられた。1年目に研究のプロトコールを確立でき、2年目にはこれまでに準備しておいた臨床検体を用いてスムーズに研究を進めることができた。血液循環腫瘍細胞(ctDNA: circulating tumor DNA)は全身の腫瘍巣からアポトーシスやネクローシスなどを経て血液中に漏れ出ている腫瘍由来のDNAである。したがって癌細胞と同様の遺伝子異常を有している。ctDNAは採血で得ることができるため手術や生検に比べ低侵襲である。また、画像評価に比べ頻回に評価することが可能である。以上よりリアルタイムに体内の病勢を反映できる新たなバイオマーカーとして期待されている。本研究では、メラノーマ患者の血液中のctDNAを解析し、癌治療に臨床応用できるかを検討した。BRAF変異もしくはNRAS変異を有する進行期メラノーマ患者についてctDNAをモニタリングした。ctDNAは腫瘍量が多い患者にのみ検出され、画像評価とほぼ相関していることが明らかとなった。またctDNAの変化はニボルマブやベムラフェニブなど治療効果や再発と相関した。症例によっては他の血中のマーカーであるlactate dehydrogenase (LDH)、5-S-Cysteinyldoma (5-SCD)よりも鋭敏に変化した。以上より、ctDNAは、進行期メラノーマ患者について病勢や治療に対する反応・再発を反映する有用なマーカーとなりうると考えた。本研究では、患者の血液検体からDNAを抽出し、その内の腫瘍由来のBRAF変異DNAの定量解析を行い、バイオマーカーとしての有用性を検討する。血液内にはDNAは微量にしか含まれず、その内の腫瘍由来DNAはさらにごく微量にしか含まれない。したがって、より効率よくDNAを抽出することが重要である。

健常人の血液検体から、採血量、使用検体量、抽出バッファー、DNAの定量法まで様々な条件で検討を重ね、最適条件を決定することができた。・症例数を増やす・採血時期を決める・治療に対する反応、薬剤耐性、再発の早期発見などにマーカーになりうるかの検討・BRAFV600E以外の遺伝子変異を有する患者に対する検討メラノーマの遺伝子異常・メラノーマ培養細胞ならびにプラスミドを用いて、PCR法での感度、特異度、精度の検討を行う。・患者検体を用いて、ctDNAやcfDNAを測定し、時系列変化、腫瘍の病期との関連、原発巣の遺伝子型との比較などで検討を行う。当初計画で見込んだより安価に研究が進んだこと、学会発表のための国内外出張が研究進捗状況から次年度に実施する予定となったため。当初計画で見込んだより安価に研究が進んだこと、当初予定していた発表のための国内出張が研究進捗状況により次年度実施することになったこと、などから次年度使用額が生じた。次年度使用額は平成28年度請求額とあわせて、実験消耗品、実験機器、旅費、論文校正などで使用する。次年度使用額は、平成27年度請求額とあわせて、実験消耗費として使用するとともに旅費として使用する。
表現が精密化可能なデータを対象とするソフトウェアの始祖学習による構成

本年は,表現が精密化可能なデータとして実数を取り上げ,実数の表現(コード化)を用いて実数値関数を学習する始祖学習システムRealMISの構築を行った.そして,連続性を持つデータの始祖学習には,負例の提示と質問の利用が効果的であることを示した.本研究を開始する前に研究分担者の立木は,実数のGrayコード表現を用いると,論理プログラミング言語によって実数の計算が表現可能であることを示していた.この事実に基づいて,実数の近似表現となる論理式(項)に対する,精密化を定義した.すなわち,ある実数の近似値の精度が増すことを,精密化という論理的手法によってに表現可能とした.論理を用いたGayコードに基づく実数の近似値表現(Grayコード・パターンとよぶ)を入出力とする論理プログラムの始祖学習システムを構築するにあたっては,仮説の変更の他に,データの精度が上昇したことによる仮説の変更を認める必要がある.データの精度上昇は,Grayコード・パターンの精密化への代入によって表現されるが,これを例として用いると問題が生じる.すなわち,精度が低いときには正しいと考えられていた事実が,精度が高くなると,必ずしも正しくならなくなるという状況が生じる.そこで,Model Inference System (MIS)で用いられた質問と矛盾点追跡の組み合わせを,目標プログラムの探索だけではなく,例の精密化に対しても利用することにより,この問題を解決し,あるクラスの論理プログラムを推論するシステムRealMISを開発した.本研究は,研究代表者である山本が過去2年間に本領域で行ってきた研究と研究分担者の立木が行ってきた実数表現の理論を論理によって組合せることにより,データ表現の発展性を扱えるソフトウェア発展モデルを構築する.帰納推論の枠組みとしては,論理と帰納学習を連続的に接続する極限同定モデルを採用し,始祖学習とよぶ.本年度は,実数値の計算を極限同定学習の立場から考察を行うことから始めた.極限同定学習では,(1)概念空間,(2)仮説空間,(3)訓練例の提示方法,(4)仮説生成アルゴリズム,(5)極限同定という設定を用い,さらに訓練例の提示方法として,例の無限列を仮説生成プログラムに与え続け,仮説生成プログラムはその時点までに受取った例の集合から仮説の無限列を出力し続ける,と設定する.このモデルを,「仮説生成プログラムは入力ストリームを介して例の無限列を受取り,出力ストリームを介して仮説の無限列を返す」と捉えることが,実数計算を帰納推論として解釈することに繋がると考え,実際に実数の符号付き2進表現を用いると,実数計算と帰納推論の対比を素直に実現することを示すことができた.次に,立木が従来に行ってきた通常の2進表現ではない実数表現(グレイコード表現)について,論理と始祖学習への応用という視点から検討を行った.グレイコード表現では,高々1回の不定元の使用を認めるが,これを論理変数に対応させることが実数表現の論理化への鍵である.そこで,データとして変数を含む一階述語論理項に対する始祖学習を考察し,その実現手法を検討した.一方,始祖学習自身の意味づけとして,論理と帰納的学習の連続的接続について,数学と統計学の接続と比較することを行った.そして,帰納的な推論における仮説候補の生成と選択に用いられる基準を嗜好性とよぶことにより,論理に限定せず,形式言語や帰納関数論などの記号的な手法を用いた帰納的学習において,記号論的な嗜好性がどのように用いられているかについて検討した.そして,帰納的学習における嗜好性が,統計的推定における尤度として機能していることを示した.本年は,表現が精密化可能なデータとして実数を取り上げ,実数の表現(コード化)を用いて実数値関数を学習する始祖学習システムRealMISの構築を行った.そして,連続性を持つデータの始祖学習には,負例の提示と質問の利用が効果的であることを示した.本研究を開始する前に研究分担者の立木は,実数のGrayコード表現を用いると,論理プログラミング言語によって実数の計算が表現可能であることを示していた.この事実に基づいて,実数の近似表現となる論理式(項)に対する,精密化を定義した.すなわち,ある実数の近似値の精度が増すことを,精密化という論理的手法によってに表現可能とした.論理を用いたGayコードに基づく実数の近似値表現(Grayコード・パターンとよぶ)を入出力とする論理プログラムの始祖学習システムを構築するにあたっては,仮説の変更の他に,データの精度が上昇したことによる仮説の変更を認める必要がある.データの精度上昇は,Grayコード・パターンの精密化への代入によって表現されるが,これを例として用いると問題が生じる.すなわち,精度が低いときには正しいと考えられていた事実が,精度が高くなると,必ずしも正しくならなくなるという状況が生じる.そこで,Model Inference System (MIS)で用いられた質問と矛盾点追跡の組み合わせを,目標プログラムの探索だけではなく,例の精密化に対しても利用することにより,この問題を解決し,あるクラスの論理プログラムを推論するシステムRealMISを開発した.
マウス個体を用いたmab21遺伝子群の機能解析

mab21l1ノックアウトマウスの解析mab21l1ノックアウトホモ個体雄は野生型雌マウスとの間でも子供を作らない。ノックアウト雌もほぼ不妊であるが、きわめて低い頻度で野生型雄マウスとの間に子供を作ることが明らかになった。しかし、この子供は生後2日以内にすべて死亡していることから、母マウスの母性行動の異常が考えられる。不妊の原因は、試験管内授精の結果から、雄、雌共に生殖細胞の形成は正常であると考えられること、雄の包皮腺に形成異常があること、mab21l1遺伝子の発現が、鋤鼻器官、副嗅球、扁桃体、視床などの鋤鼻嗅覚神経系で観察されることなどから、性行動の異常によるものと考えて、上記の組織で特異的に発現している遺伝子群のノックアウトマウスでの発現解析を進めている。mab21遺伝子産物の機能解析mab21遺伝子産物にはこれまでに報告されているモチーフ等が全くなく、アミノ酸配列等からその生化学的機能を予測することはできない。そこで、mab21遺伝子産物の分子機能を明らかにするためにいくつかの実験をおこなった。mab21遺伝子産物に対する特異的抗体を用いた解析から、mab21蛋白は、マウス個体組織中で核に局在していることが明らかになった。また、mab21遺伝子の強制発現実験から、mab21蛋白は培養細胞内でも主として核に局在することが明らかになった。さらに、GSTタグを結合したmab21遺伝子産物を用いて精製した蛋白群を質量分析機を用いた解析を行った結果、mab21遺伝子産物と相互作用する蛋白として、importin, transportin, Sam68などの蛋白やRNAの細胞内輸送に関わるいくつかの蛋白や、Prl, LIM, Etsファミリーなどに属する多くの転写因子が同定された。これらの遺伝子産物との機能的相互作用を解析するため、培養細胞を用いた遺伝子導入実験をおこなったところ、mab21遺伝子産物は、遺伝子発現調節およびRNAの輸送に関わっていることが明らかになった。1.mab2112ノックアウトマウスの解析mab2111遺伝子は脊椎動物ゲノム中でmab2112と遺伝子ファミリーを形成している。また、マウス発生過程における両遺伝子の発現は、鰓弓、肢芽、網膜など多くの領域で重複していことから、両遺伝子機能のマウス形態形成過程における冗長性が想像できる。実際ノックアウトマウスは、mab2111遺伝子の発現が観察される多くの領域で異常は観察されない。mab21遺伝子群の個体レベルでの機能を明かにするためmab2112ノックアウトマウスを作成し解析を行なった。ノックアウトホモ個体は胎生致死であり(E11-13で死亡)、眼(レンズおよび網膜)および体壁の形成異常が観察された。網膜の形成過程においてmab2112遺伝子はChx10の発現を制御していること、またBrdUの取り込みの解析から、網膜および体壁の形成過程においてmab2112遺伝子が細胞増殖の制御を行っていることが明らかになった。これはmab2111遺伝子のレンズ形成過程における機能と同じであり、形態形成過程において両遺伝子が共通の機能を果たしていることが明らかになった。2.mab2111/mab2112ダブルノックアウトマウスの解析mab2111、mab2112両ノックアウトマウスの解析を行なった結果、いくつかの形態異常が観察された。しかし、それぞれの遺伝子が発現している多くの領域で異常は見られなかった。これは両遺伝子の発現領域が重複しており、遺伝子産物のアミノ酸配列が類似していることから、機能の冗長性によりものと考えられる。そこで、mab21遺伝子群の発生過程における機能を明らかにするため、mab2111/mab2112ダブルノックアウトマウスの作製を行なった。このダブルホモマウスはmab2112ホモマウスと同様に胎生致死であり、死亡時期も形態異常もmab2112ノックアウトマウスと大きく違わない。このことは、mab2111遺伝子がmab2112の機能を補償できないということを示しているとも考えられるが、頭部、神経管など両遺伝子が重複して発現している領域の一部に小さな異常が観察されており、詳細な解析を行っている。

また、mab21遺伝子の強制発現実験から、mab21蛋白は培養細胞内でも主として核に局在することが明らかになった。さらに、GSTタグを結合したmab21遺伝子産物を用いて精製した蛋白群を質量分析機を用いた解析を行った結果、mab21遺伝子産物と相互作用する蛋白として、importin, transportin, Sam68などの蛋白やRNAの細胞内輸送に関わるいくつかの蛋白や、Prl, LIM, Etsファミリーなどに属する多くの転写因子が同定された。これらの遺伝子産物との機能的相互作用を解析するため、培養細胞を用いた遺伝子導入実験をおこなったところ、mab21遺伝子産物は、遺伝子発現調節およびRNAの輸送に関わっていることが明らかになった。
リンパ形質細胞性リンパ腫での腫瘍幹細胞の陽性マーカー同定及びその動態解析

MWCL-1(LPL細胞株)は、CD20及びCD138抗体を用いたFCM解析で、CD20ーCD138ー, CD20+CD138ー, CD20+CD138+に分けられる。MWCL-1のCD20ーCD138ー(LPLの腫瘍幹細胞候補)で発現する陽性マーカーと、それらが増加する微小環境を検討すると、CXCR7が陽性マーカーであり、低酸素およびCXCL12-CXCR7シグナルでそれらが増加することが分かった。また、プラズマ照射培養液(PAM)のLPL細胞株への効果を検討すると、PAMによりPRDM1α(形質細胞分化を誘導する転写因子)を介して形質細胞(CD138陽性)分化が促進されることが分かった。MWCL-1(リンパ形質細胞性リンパ腫細胞株)をB細胞(CD20陽性)と形質細胞(CD138陽性)を認識する抗体でフローサイトメトリー解析すると、大半の細胞はCD20或いはCD138が陽性であるが、CD20陰性CD138陰性細胞群が少数存在し、このCD20陰性CD138陰性細胞群は未熟で多分化能を有し、コロニー形成能が高く、アポトーシス抵抗性であることを既に報告した(Lab Invest, 2014)。今回、MWCL-1を低酸素条件で培養し、フローサイトメトリー解析を行ったところ、CD20陰性CD138陰性細胞群が増加した。遺伝子発現マイクロアレイ解析とウエスタンブロット解析でCD20陰性CD138陰性細胞群とCD20及び/或いはCD138が陽性の細胞群とを比較検討した結果、CD20陰性CD138陰性細胞群に高発現するケモカインレセプター・CXCR7を同定した。CXCR7のリガンドであるCXCL12をMWCL-1に加えて培養すると、CD20陰性CD138陰性細胞群が増加した。MWCL-1を低酸素条件で培養し、CXCL12細胞内発現量を測定したところ、CXCL12細胞内発現量も増加していた。これらより、CXCR7がMWCL-1のCD20陰性CD138陰性細胞群で発現する陽性マーカーの候補であり、低酸素条件およびCXCL12-CXCR7シグナル下でCD20陰性CD138陰性細胞群が増加することが分かった。MWCL-1のCD20陰性CD138陰性細胞群で発現するマーカーを同定し、さらに、どのような条件下でこの一群の細胞が増加するかを検討するのが研究目的だが、今回、CXCR7がCD20陰性CD138陰性細胞群で発現する陽性マーカーの候補であり、低酸素条件およびCXCL12-CXCR7シグナル下でCD20陰性CD138陰性細胞群が増加することが分かった。MWCL-1[リンパ形質細胞性リンパ腫(LPL)細胞株]をB細胞(CD20陽性)と形質細胞(CD138陽性)を認識する抗体でフローサイトメトリー解析すると、大半の細胞はCD20或いはCD138が陽性であるが、CD20陰性CD138陰性細胞群が少数存在し、このCD20陰性CD138陰性細胞群は未熟で多分化能を有しアポトーシス抵抗性あることを既に報告した(Lab Invest, 2014)。そして、CD138陽性の分化細胞群が他の細胞群よりアポトーシス試験に脆弱で、LPL臨床検体でもCD138陽性細胞の多くがアポトーシスマーカー陽性であることも既に報告した(Lab Invest, 2014)。MWCL-1のCD20陰性CD138陰性細胞群で発現する陽性マーカーと、どのような条件下でCD20陰性CD138陰性細胞群が増加するかを検討したところ、CXCR7がCD20陰性CD138陰性細胞群で発現する陽性マーカーの候補であり、低酸素条件およびCXCL12-CXCR7シグナル下でCD20陰性CD138陰性細胞群が増加することが分かった(Lab Invest, 2016)。一方、プラズマ照射による傷病組織の治癒・再生、細胞分化に関する有用な効果が近年報告されているので、プラズマ照射培養液(PAM)のLPLへの効果を検討したところ、LPL細胞株でPAM培養によりCD138陽性の形質細胞分化が促進されることが分かった。これらの結果は、CXCR7を標的としたLPL治療法の開発や、PAMによるLPLの分化誘導療法につながる可能性がある。MWCL-1のCD20陰性CD138陰性細胞群で発現する陽性マーカーを同定し、どのような条件下でCD20陰性CD138陰性細胞群が増加するかを検討するのが研究目的だが、CXCR7がCD20陰性CD138陰性細胞群で発現する陽性マーカーの候補であり、低酸素条件およびCXCL12-CXCR7シグナル下でCD20陰性CD138陰性細胞群が増加することが分かった。そのうえで、MWCL-1のCD20陰性CD138陰性細胞群で発現する他の陽性マーカーの同定を試みている。或いはLPLでCD138陽性の形質細胞分化を促進する因子について検討している。MWCL-1[リンパ形質細胞性リンパ腫(LPL)細胞株]をB細胞(CD20陽性)と形質細胞(CD138陽性)を認識する抗体でフローサイトメトリー解析すると、大半の細胞はCD20或いはCD138が陽性であるが、CD20陰性CD138陰性細胞群が少数存在し、このCD

20陰性CD138陰性細胞群は未熟で多分化能を有しアポトーシス抵抗性あることを既に報告した(Lab Invest, 2014)。そして、CD138陽性の分化細胞群が他の細胞群よりアポトーシス試験に脆弱で、LPL臨床検体でもCD138陽性細胞がアポトーシスマーカー陽性を伴うことも既に報告した(Lab Invest, 2014)。MWCL-1のCD20陰性CD138陰性細胞群で発現する陽性マーカーと、どのような条件下でCD20陰性CD138陰性細胞群が増加するかを検討したところ、ケモカインレセプターであるCXCR7がCD20陰性CD138陰性細胞群で発現する陽性マーカーの候補であり、低酸素条件およびCXCL12-CXCR7シグナル下でCD20陰性CD138陰性細胞群が増加することが分かった(Lab Invest, 2016)。一方、プラズマ照射による傷病組織の治癒・再生、細胞分化に関する有用な効果が近年報告されているので、プラズマ照射培養液(PAM)のLPLへの効果を検討したところ、LPL細胞株でPAM培養によりPRDM1α(形質細胞分化を誘導する転写因子)を介してCD138陽性の形質細胞分化が促進されることが分かった(Pathol Res Pract, 2017)。これらの結果は、CXCR7を標的としたLPL治療法や、プラズマ照射によるLPL分化誘導療法の開発につながる可能性がある。MWCL-1(LPL細胞株)は、CD20及びCD138抗体を用いたFCM解析で、CD20ーCD138ー, CD20+CD138ー, CD20+CD138+に分けられる。MWCL-1のCD20ーCD138ー(LPLの腫瘍幹細胞候補)で発現する陽性マーカーと、それらが増加する微小環境を検討すると、CXCR7が陽性マーカーであり、低酸素およびCXCL12-CXCR7シグナルでそれらが増加することが分かった。また、プラズマ照射培養液(PAM)のLPL細胞株への効果を検討すると、PAMによりPRDM1α(形質細胞分化を誘導する転写因子)を介して形質細胞(CD138陽性)分化が促進されることが分かった。平成27年度の研究成果を積極的に学会発表し、discussionを積み重ねつつ、MWCL-1のCD20陰性CD138陰性細胞群で発現する他のマーカーの同定を試みる。これまでの研究成果を学会発表し、discussionを積み重ねつつ、MWCL-1のCD20陰性CD138陰性細胞群で発現する他の陽性マーカーの同定を試みる。或いはLPLでCD138陽性の形質細胞分化を促進する因子について更に検討する。悪性リンパ腫本研究にかかる費用は抗体などの試薬代、消耗品費が多くを占める。これらの費用は研究の試行錯誤に依存し、研究を進めてみないと幾らかかるか厳密には分からない。結果、次年度使用額が0より大きくなった。本研究にかかる費用は抗体などの試薬代、消耗品費が多くを占める。その結果、次年度使用額が生じた。抗体などの試薬代、消耗品費を当初の使用計画以上に使う余裕があるので、研究の試行錯誤を十分に行う。抗体などの試薬代、消耗品費を当初の使用計画以上に使う余裕が少しあるので、その分、研究の試行錯誤をより行う。
暗黙的な看護技術獲得過程とその影響要因に関する理論構築

明らかな生命徴候の変化によらず近い将来の患者の死期を予見できる看護師の存在ならびに、かかる看護技術の特性、獲得様式を明らかにするために調査を実施した結果、(1)このような患者の死期を認識した経験のある看護師は経験年数との有意な関連が認められること、(2)生命徴候の明らかな変化によらない患者の死の予見のほとんどが看護記録に残されていないが「その予感を他のスタッフや家族に話した」「他のナースからその予感について聞かされた」など、確認可能な事実を以て事前にその死を予感していたケースがあること、(3)看取り以外にも、せん妄、転倒・転落などのリスクを暗黙的な技術で評価している可能性が示された。平成25年度は、明らかな生命徴候の変化を伴わない患者の死期を予見できる看護職(保健師、助産師、看護師、准看護師)について、1事実性、2特性、3判断の根拠を明らかにするために、質問紙および聞き取り調査を実施した。首都圏4か所の医療関係施設等(一般病院病棟勤務看護職25名、精神科病院勤務看護職110名、私立看護大学の看護資格を有する教員、大学院生99名、看護協会主催の認定看護管理者教育課程参加者43名)で質問紙調査を実施した結果、168名(61%)から回答が得られた。明らかな生命徴候の変化によらずに患者の死期を予見した経験がある看護職は57名(34%)、そのような看護職を知っていると回答した者も63名(38%)存在していた。患者の死期を予見した経験のある看護職は、大卒/短大卒が専門学校卒より、看護師免許を持つ者が持たない者より、看護師としての経験年数が多いほど、有意に多い傾向が示された。かかる判断の根拠としては「においや死臭」「鼻が尖る」などの【看護職の認知した患者の変化】や「感謝のことば」「生まれた家に帰りたい」などの【患者の発言】、「胸騒ぎ」「肩が重い」などの【看護職自身の身体感覚】、「なんとなく」「いつもと違う」などの【言語化困難事象】に類型化された。明らかな生命徴候の変化によらず患者の死期を予見する看護師の存在は、自分に実際にその技術があるかどうかにかかわらず、3割以上の看護職に知られているという事実からは、看護現場においては一般的なエピソードであることを支持している。また、経験年数や教育背景、使用免許によって分布が異なることからは、かかる能力が後天的に身についたものであることを支持する。判断の根拠が誰でも認知可能ではない点からは、純粋な物理現象の変化ではなく、経験を積んだ看護職の認知活動の産物である可能性がある。これらを踏まえ、26年度にはさらなるデータの蓄積を行う。患者の死期を予知する技術の獲得に関して、平成25年度に収集したデータに加えて追加の質問紙調査を実施した。それらのデータについて、死期が近いという情報に至るデータ処理過程ないしデータ収集過程、当該処理を可能とする技術の獲得過程、認知バイアスの可能性などの視点から多角的に分析を進め、情報科学、認知科学、心理学系の学会で発表を行い、他分野ないし学際領域の他の研究者らと意見交換を行った。結果として、技術習得過程は、その部分的な知識獲得の段階(=技術要素の習得)とその全体的な統合の段階(=ホリスティックな技術の完成)という二段階からなるという仮説を導出するに至った。これは、学校で教授される「すべての」形式知の習得の上に、実際の経験がそれらの暗黙的な全体性の獲得を促すことで看護師の真の技術習得がなされると仮定すると、現代日本の看護教育における「すべての看護技術は教授できまた習得可能である」という前提による教育の現実性と、経験が実力を表す指標として重視される実態、そして、経験のみから患者の容体変化を予測できる看護師が存在するという、一見すると矛盾しているように見える3つの事象が、技術獲得における部分と全体、形式と暗黙という対立軸上の座標として説明可能となることの帰結である。当該仮説を傍証するためのフォーカスグループインタビュー(以下FGI)の実施に先立ち、FGIを円滑に進めるためのデバイス(iOS版ファイルメーカアプリケーション)を開発した。FGIは参加者の自由な討議を通じてより豊かな情報を引き出すための技法であるが、他の参加者の意見に迎合したり、もしくは言いにくいなどの理由で、参加者個人特有の経験を引き出すことが場合によっては困難な場合、匿名で意見を述べたり選択肢式の設問に答えたりすることを可能にするものである。看護師による看取りまたは急変の予測が能力として成立するためには、予測が的中した割合のデータが必要となる。しかし、従来の回顧的、記憶依存の調査では、方法論的にそれらを確認することができず、むしろ、後知恵バイアス、仮説確証バイアスなどのヒューリスティックな思考を用いた時の歪みを除去しきれないことが後ろ向き調査の限界である。そこで、都内の病院の一般病棟に勤務する看護師を対象に、入院中の患者に対し、1転倒・転落2せん妄3病状の悪化4病状の変化5看取りのいずれかを予測した場合に情報端末を使用して記録をするよう依頼した。29名の看護師により情報端末への入力があった。予測が的中した看護師は14名、回数は40回(的中率39%)であった。

事象別には「転倒・転落」は15名の看護師が37回予測し3名の看護師が4回的中、「せん妄」は10名の看護師が16回予測し7名の看護師が9回的中、「病状の悪化」は11名の看護師が32回予測し10名の看護師が20回的中、「病状の変化」は3名の看護師が3回予測し的中は0回、「看取り」は4名の看護師が15回予測し3名の看護師が7回的中していた。看護師の予測について、在籍する看護師数>予測できる看護師数>予測が的中する看護師数という関係が成立していた。今回選択した事象は、看護師なら誰でも予測できるものではなく、同じ病棟の中でも限られた看護師のみが予測できることが客観的に示された。「転倒・転落」の的中率が低い理由は予測した時点で防止対策をしてしまうからであると考えられた。的中率が低い事象は的中していないのではなく、転倒しないための対策が当該「予測」をもとになされていると考えられた。その他の事象については看護師が防止対策を行うことが困難であることを考慮すると、的中率の妥当性を支持するものと考える。明らかな生命徴候の変化によらず近い将来の患者の死期を予見できる看護師の存在ならびに、かかる看護技術の特性、獲得様式を明らかにするために調査を実施した結果、(1)このような患者の死期を認識した経験のある看護師は経験年数との有意な関連が認められること、(2)生命徴候の明らかな変化によらない患者の死の予見のほとんどが看護記録に残されていないが「その予感を他のスタッフや家族に話した」「他のナースからその予感について聞かされた」など、確認可能な事実を以て事前にその死を予感していたケースがあること、(3)看取り以外にも、せん妄、転倒・転落などのリスクを暗黙的な技術で評価している可能性が示された。平成26年度の計画は、1平成25年度中に収集したデータのさらなる解析ならびに学会等における有識者との意見交換による暗黙的な技術習得過程理論の構築と、21の精練、精緻化を目的としたフォーカスグループインタビュー(FGI)において、参加者の意見を匿名で即時集約/集計するデバイスの開発ならびに実際のFGIの実施である。1については、ほぼ予定通り進行し、日本認知心理学会第12回大会(2本)、日本医療情報学会看護学術大会(2本)、日本心理学会(1本)で計5本の発表を行い、当該事象に関心のある看護学、認知科学系の研究者らと有用な討議を行った。2については、平成26年6月までに収集したデータを踏まえ、いかなる世代の看護師にも操作が容易という観点からハードウエアならびにソフトウエアの仕様の再検討プロセスに時間を費やしたため、平成26年度はデバイス開発を完了させるにとどまった。当該デバイスを利用した実際のデータ収集については平成27年度に行う予定である。看護情報学上記進捗のため、本研究プロジェクトは1年間延長し、構築した理論の精緻化と検証を目的としたFGIについては平成27年度に実施する。また、FGIの結果含め、平成26年度以降に本研究プロジェクトで新たに得られた知見についても27年度中に学会発表ならびに論文投稿によってすみやかに社会還元していく予定である。平成25年度は、1)患者の死期を予見する能力をもつ看護師への聞き取り調査と、2)26年度に予定している看護師へのフォーカスグループインタビューに使用するツールの開発、を計画していた。1)については、聞き取り調査に加え、病院看護職等への質問紙調査を行ない、かかる事象に関する多くの情報を収集することができた。2)に関しては第一段階としてアプリケーションの仕様の策定をすすめた。いずれも、ほぼ計画通りの進捗である。
看護職の病棟組織文化に内在する機能と組織文化のありように関する研究

本研究の目的は、病棟の組織文化に内在する恥の機能に着目することによって、病棟組織文化のありようを明らかにすることである。具体的には、次の2点を解明する。1病棟における看護職の組織文化に埋め込まれているインシデント報告に対する恥や避難の実態を明らかにする。2インシデント報告やインシデント報告書の活用に改善できる、組織文化のありようを明らかにすることである。平成30年度は以下の2点に取り組んだ。1.文献検討国内外の文献を検討し、恥の意味、捉えかた、看護師組織における恥の意味、組織文化の定義やインシデント発生時の心理的影響などについて、研究者間で検討を行った。恥は多様な意味をもち、他者との心理的な距離感、関係性において、恥の感じ方が異なること、また、インシデント報告の心理的影響に関しては、国外文献において、他者から恥である、非難を受けるという実態があることが明らかになった。2.病棟の参加観察および看護職へのインタビュー調査文献検討をもとしに、実際に病棟の中で看護師がどのような状況で恥を意識するのか、組織文化の影響があるのかなどを明らかにすることを目的として、フィールドワークおよび看護師へのインタビュー調査を計画した。研究参加協力が得られた病棟にて、フィールドワークおよび病棟看護師にインタビュー調査を実施した。次年度もデータ収集と分析を継続し、得られた知見をまとめて学会発表および論文作成を行う予定である。・文献検討により概念分析まで行う予定であったが、論文としてまとめるまでに至らなかった。・データ収集については、予定通りフィールドワーク、インタビュー調査が実施できている。・前年度と同じ病棟でのフィールドワーク、インタビュー調査を継続して実施し、データ分析を結果に基づいて、病棟の組織文化に内在化する恥の機能を明らかにする。・文献検討結果についても論文としてまとめ、国内外の学会発表および学会誌に論文として投稿する。・病棟の組織文化のあり方を検討するためのワークショップを企画する。対象者は有識者、関係するテーマの研究者、臨床現場の看護職など、幅広い対象者を検討する。・文献収集において、他の研究費、私費で購入した図書があったため、次年度使用額が発生した。・論文投稿が行えなかったため、投稿にかかる英文校正費用が発生しなかったため。