hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
高速水素のチャネリングを用いた結晶面及び表面からの距離依存励起確率の導出

実験装置は,散乱槽本体を交換すると共にイオンポンプも交換した。ベーキングの後10^<-10>Torrの真空がたやすく得られるようになった。Arスパッタ銃を作製しゲートバルブを介してとりつけ,銃運転後,中に残る不要なArガスを速やかに排気できるようにした。試料としてAlエピタキシャル薄膜を作製し,透過型電子顕微鏡を用いて,薄膜の結晶性を調べた。以下のチャネリング実験には対応できる程度のエピタキシャル薄膜を得た。試料表面処理として,作製したArスパッタ銃でスパッタ清浄化した。Arガス導入のため,試料付近の真空度が悪くなるためAl構膜に付着している自然酸化層はイオンポンプを止めた状況の高真空で削り取り,その後清浄化のため超高真空下で数原子層を目安に削った。本実験として,奈良女子大学理学部の加速器からのH^+イオンをAl薄膜にチャネリングの条件で入射した。試料薄膜は,その表面がビームに対しほぼ90°に向いているものと,30°に向いているものの2つであり,チャネリング付近での出射イオン中の中性フラクションを測定した結果,2つの膜ともにチャネリングによって減少した。さらに,これらの結果のエネルギー依存性を調べた。膜の傾きにより,エネルギー依存性に違いがみられた。対応する理論計算として,チャネリングイオンの中性フラクションをイオン軌道とともに計算した。この計算に,イオンが真空中に出た後の表面原子との衝突による寄与を加えることにより,実験結果で得られたエネルギ依存性が再現できた。本年度は本研究課題の1つであるMeV領域の水素イオンをAl単結晶試料に面チャネリングの条件で入射し,透過イオンの中性フラクションの入射角依存性を測定することを目的とし,以下の準備を進めた。第1に,昨年度作製し高真空で試験を繰り返したArスパッタイオン銃を超高真空装置に取付,試料を超高真空に保ったときに得られるArビーム量を調べた。数時間で数100Å削るために必要な数100nA/cm^2程度のArビームを得るためには,イオン銃内のガス圧を高くせねばならず,その結果試料付近での真空度も悪くなる。試料付近を10^<-8>Torr台の真空に保ったときには15nA/cm^2程度のArビームしか得られなかった。これ以上Arガスをイオン銃に挿入すれば,スパッタイオンポンプから逆にArガスの放出が起こり,真空度が脈動を起こす結果になった。このためイオンポンプを排気速度40l/sのものから300l/sのものに交換した。これとともに,散乱槽本体を小型ICF152チェンバーから,中型ICF253チェンバーへ交換した。ビューポートを2つ取り付け,チェンバーの外から試料の様子がよく見えるようになった。また,ベーキングの後10^<-10>Torrの真空がたやすく得られるようになった。イオン銃はゲートバルブを介してとりつけたので,銃運転後,中に残る不要なArガスを速やかに排気できるようになった。しかし,試料までの距離が遠くなったため,Arビームが発散し,試料付近が10^<-10>Torr台の真空で,3nA/cm^2程度のビームしか得られていない。ビームの集束方法に問題を残す結果になった。尚,これを用いた初回のチャネリング実験は本年3月に予定している。第2に,Alエピタキシャル薄膜を作製し,透過型電子顕微鏡を用いて,薄膜の結晶性を丹念に調べ直した。十分大きな単結晶領域をもつエピタキシャル薄膜はなかなか得られなかったが,目的のチャネリング実験には問題がないと予想している。奈良女子大学理学部の加速器を用い,H^+イオンを600keVに加速し,UHV散乱槽内に入れた試料のAlエピタキシャル薄膜に入射した。試料薄膜は,その表面がビームにほぼ90°に向いているものと,30°に向いているものの2つを用意した。

厚みは5000-6000Åであり,Arイオンでのスパッタリング及びアニールを繰り返し行うことで,ビーム出射面を清浄化した。この清浄化のため,昨年度までに作製したArスパッタ銃を改良し,ビーム量を増やしたが,Arガス導入のため試料付近の真空度が悪くなる問題は残った。そのためA1薄膜に付着している自然酸化層はイオンポンプを止めた状況の高真空で100原子層ほどスパツタして削り取り,その後清浄化のため超高真空下で12原子層ほどを目安に削った。これらの薄膜をチャネリング条件で出射するイオンビームの中性フラクションを磁場と半導体検出器で測定した。このさいパソコンを用いてカウンターのゲートと連動させ磁場をオン・オフするシステムを作り,加速器からのイオンビーム量の変動によるデータヘの影響をできるだけすくなくするようにした。実験の結果,2つの膜ともに中性フラクションはチャネル付近で減少した。一方,清浄表面から出射するチャネリングイオンの中性フラクションをイオン軌道とともに計算した。2つの膜で得られた実験結果を計算結果と比較して,チャネル付近に見られるフラクションのディップの形や深さまで議論するためには,さらに実験が必要である。尚,本年3月の日本物理学会に於いて,これらの結果の発表を予定している。UHV散乱槽内に入れた試料のAlエピタキシャル薄膜に,奈良女子大学理学部の加速器より600keVに加速したH^+イオンを(100)面チャネリングの条件で入射した。試料薄膜は,その表面がビームに対しほぼ90°に向いているものと,30°に向いているものの2つであり,Arイオンでのスパッタリング及びアニールを繰り返し行うことで,ビーム出射面を清浄化した。チャネリング付近での出射イオン中の中性フラクションを測定した結果,2つの膜ともにチャネリングによって減少した。さらに,試料を取り替え,400-800keV陽子ビームを用い,それまでの600keVのデータを追試するとともに,これらの結果のエネルギー依存性を調べた。90°に向けた膜では,中世フラクションはランダム入射に対する値の82±13%であり,この比の値はエネルギーによらなかった。30°に向けた膜では,低エネルギー側で50%程度であるが,高エネルギーになるに連れ90°に向けた膜の比の値に漸近する傾向がみられた。チャネリングイオン中の中性フラクションの角度依存を表面の影響を無視して計算した結果,2つの膜ともにチャネリングでランダムのときの65%程度に減少した。この計算に,イオンが真空中に出た後の表面原子との衝突による寄与を加えた。現在のところ基底状態の水素原子しか取り扱っていないが,表面原子との衝突による寄与を加えることにより,実験結果に非常によく似たエネルギ依存性が再現できた。
有害金属の脳、血液関門通過に影響を与える因子解明の実験的研究

昭和60年度から昭和63年度における研究成果は下記の通りである。1.水銀化合物の脳への取り込みには、アミノ酸やセレンの修飾によって増大することを明らかにした。即ち、メチル水銀、エチル水銀、フェニル水銀それぞれにグルタチオンを同時に側脳室内に直接投与した場合、大部分の水銀は血中に流出するが、臓器、特に脳への水銀蓄積が増大し、γーGTPが関与していることが示唆された。2.有機水銀の最大無作用量を検索するため、水銀投与動物の行動量及びリズム成分変化について研究を行った。メチル水銀投与ラットの自発行動量は後肢交叉現象が出現する2日前に最小値となり、その後の行動量は、特に明期に増大した。パワースペクトルによる8時間リズムの低下と3時間以下のリズムの増大がみられた。しかし、セレン併用投与ラットの様にサーカデイアンリズムの破戒はみられなかった。最大エントロピー法で解析した場合も同一の結果であり、有機水銀中毒の指標となる可能性がある。又、他の水銀化合物投与ラットにおいても水銀の毒性の強さに依存して行動量の低下がみられ、脳各部位の水銀濃度は、エチル水銀が最も高く、フェニル水銀は低値であった。3.メチル水銀は低濃度投与によっても神経の終末に影響を与え、投与初期に黒質が最も高濃度となり、後肢交叉現象が出現した時点で大脳皮質・線条体の濃度が上昇してカテコールアミン濃度は低下した。4.カドミウムはメタロチオネインのみでなく、高分子蛋白と結合する。又、メルカプトアルブミンと結合して血清から流出し、コリンエステラーゼ活性を低下させることから、コリンエステラーゼ活性変動はカドミウム毒性の指標となる可能性が示唆された。昭和60年度に行った研究概要及びその成績は下記の如くであった。1.マンガンをラットの側脳室又は尾静脈から投与した。ラットの体重及び臓器重量は側脳室投与群の方が低下した。脳各部位でのマンガン濃度は側脳室群の方が高かったが、肝中濃度は低値となった。しかし、脳からの流出は大きい結果であった。2.0,30,40及び50μgのメチル水銀を1週間側脳室に連続して投与した。投与した水銀の大部分は血中に流出して、脳以外の臓器への蓄積がみられた。しかし、これら臓器中の水銀濃度は、投与濃度に依存して蓄積した。また他の投与方法と比べても同様の蓄積傾向がみられた。3.ラットの側脳室に高濃度のメチル水銀を連続投与し、ラットの自発行動量及び臓器中の水銀値を測定した。8日頃の脳中水銀値が最大となり、明期の自発行動量は増大した。またこの時点における日周リズムは乱れが見られ、行動量と飼料摂取量との間に相関関係がみられなくなった。4.ラットの側脳室にメチル水銀とセレンを単独又は併用して投与した。併用投与群の方が、投与部位からの流出が大きく、水銀の脳での拡散が高くなった。同時に脳の神経伝達物質であるカテコールアミンは水銀が拡散した部位でも変化し、低濃度の水銀でも影響がみられた。5.ラットにメチル水銀を連続投与し、後肢交叉現象がみられる時点までのカテコールアミン変化を追跡した。初期段階ではこれら神経伝達物質は増大したが、後肢交叉現象がみられる時点では逆に減少し神経伝達物質のターミナルでの損傷がうかがわれた。6.妊娠後期にメチル水銀を投与した仔ラットは正常であったが、日周リズムに遅延する効向がみられた。昭和61年度に行った研究概要及び成績は下記の通りである。1.メチル水銀・エチル水銀及びフェニル水銀を脳室内に1週間連続投与した場合、ラットの自発行動量は水銀の毒性に対応して行動量が低値を示し、脳画部位(10分画)の水銀濃度はメチル水銀、エチル水銀、フェニル水銀の順に蓄積した。

又体重の減少度合も毒性の強さに依存した知見を得た。2.ラットのサーカディアンリズム及びウルトラジアンリズムの解析法として最大エントロピー法を開発した。この手法で、メチル水銀とセレニウムを各々単独又は併用してラットの死亡時まで投与し、このリズムを解析した結果、メチル水銀群のサーカディアンリズムは消失しなかったが、併用ラットは消失した。また、8時間のウルトラジアンリズムが最も早く減少し水銀中毒の中毒の進行をみる有効な手段であると考えられた。3.60年度にはメチル水銀が脳内の神経伝達物質に影響することを明らかにしたが、これら神経伝達物質の前駆体の酵素に与える影響を研究した結果、チロシンから出発するこれら酵素の活性を減少することを明らかにした。このことから、神経伝達物質そのものの合成機能をメチル水銀は障害することが示唆された。4.温度環境を11°C、22°C、33°Cの三段階に分け、メチル水銀を投与したラットの脳内の神経伝達物質(ドーパミン、ノルエピネフィルン、セロトニン)の経日変化を測定し、温度環境因子によるメチル水銀発現機構について解明を試みた。5.HPLC-ICPを使って金属と結合したS化合物を分離してその金属を同時測定をすることを可能にした。この結果S化合物はグルタチオンやシスティン等のアミノ酸であることが判明したことから、アミノ酸が金属移動に関与していることが示唆された。昭和62年度における研究実績の概要は下記の如きであった.1.セレニウムはメチル水銀の毒性に対して延命効果があることで知られているが,この両物質を同時にラットに投与した場合のサーカディアンルズムは破壊され,水銀濃度も高値を示し,メチル水銀群とは異なる結果であった.このことから視交叉上核の破壊が示唆された.2.メチル,エチル,フェニル水銀を直接脳室内に投与した場合,脳の各部位における水銀濃度は,メチル水銀及びエチル水銀群は同程度の濃度であったが,フェニル水銀群はこれら群の約1/2程度であり,投与後のこれら各群ラットの行動量はフェニル水銀群が最も高く,次いでエチル水銀,メチル水銀群の順となり,水銀の毒性の対応して行動量が低下した.3.メチル水銀を3日間と6日間連続して投与し, 3日, 6日及び発症時における脳内神経伝達物質の濃確を測定した場合,脳内の水銀濃度は初期において黒質が高いが,後期には大脳皮質,線条体が高濃度となり,ノルエピネフェリン濃度は発症時に低下した.またドーパミン濃度は黒質で低下,セロトニンは脳幹部で上昇した.即ち水銀中毒の進行過程でカテコールアミン濃度に影響が見られ,カテコールアミンの増減変化が起こることが判明した.4.水銀やCdの様な金属は,無機金属イオンの状態では血清中のSアミノ酸及ペプタイドと結合して存在している. Cdの場合は大部分はメルカプトアルブミンと結合しており,過剰のCdは低蛋白と結合しているので無機水銀も同様の形態への変換の可能性が考えられた.5.中枢神経に対して毒性を現さないオゾンで暴露した場合,飲水行動が低下し,また過酸化脂質量の増加,リン脂質代謝に影響を与えた.先に報告した水銀投与ラットにおいても一部同様の結果であったことから,水銀中毒は総合的に評価する必要がある.各種有機水銀と修飾因子を同時投与し、水銀の脳血液関門通過とそれに伴う障害を行動学的・神経学的・毒性学的に検討し、下記の結果を得た。
ストレス脆弱性モデル動物における神経形態学的変化と神経可塑性異常の検討

本研究では、「ストレス適応破綻状態からうつ状態を呈し、脳内において神経可塑性が障害される」「母親の養育行動が神経可塑性に影響を与え、ストレス脆弱性に関与する」という「うつ病のストレス脆弱性・神経可塑性障害仮説」を、モデル動物を用いて検証することを目的としている。モデル動物として我々がこれまでに見出した生来的にストレス脆弱性を有する純系のFischer344(F344)ラットを用いて、軽度のストレス負荷で引き起こされるストレス破綻状態(うつ病態モデル)における神経可塑性障害ならびにその障害に対する養育行動の影響を統合的に検討した。その結果、SDラットにF344ラットを養育させた場合に、本来みられるストレス脆弱性が消失したことから、F344ラットにおけるストレス脆弱性の形成は、母親の養育行動に起因していることが示唆された。また、母仔分離ストレス負荷によって前頭前野領域における神経可塑性関連遺伝子群の発現に変化が認められた。さらに、これらの遺伝子発現制御に関与している因子としてREST4を同定し、REST4を脳内に過剰発現させたマウスでは成獣になってからの慢性ストレスに適応できない、つまりストレス脆弱性の亢進が認められた。以上の結果から、REST4の機能異常による神経可塑性異常がうつのリスクファクターとなり得る可能性が示唆された。本研究により、脳発達段階における遺伝子発現制御ネットワークの異常がその後のストレス脆弱性を決定している重要な因子の1であることが示唆された。本研究では、うつ病の神経可塑性障害仮説(ストレス適応破綻状態から脳内の神経可塑性が障害され、神経細胞死・神経新生障害が生じ、結果としてうつ状態を呈する。抗うつ薬はその神経可塑性障害を抑制・回復させる。)をストレス脆弱性モデル動物であるFischer344(F344)ラットを用いて検証することを目的とする。平成20年度は、F344ラットに軽度の慢性ストレスを負荷し、引き起こされるストレス適応破綻状態における神経可塑性関連遺伝子群発現量、ならびに海馬神経新生への影響を検討した。その結果、F344ラットは慢性ストレス負荷に対して視床下部室傍核における神経可塑性マーカー遺伝子であるc-fos mRNAおよびリン酸化型CREB発現量が非ストレス群に比べて有意に増大していた。さらに海馬歯状回における増殖細胞数を免疫染色法とウェスタンブロット法を用いて検討したところ、慢性ストレス負荷後のF344ラットにおける増殖細胞数は非ストレス群に比べて有意に低下していた。以上の結果から、F344ラットにおける慢性ストレス負荷後の神経可塑性異常が示唆された。これは、ストレス脆弱性動物さらにはうつ状態における神経可塑性異常の存在が強く示唆され、気分障害発症機序の一端の解明に繋がる可能性があり、本研究結果の精神医学的意義は大きい。平成21年度は、モデル動物として我々がこれまでに見出した生来的にストレス脆弱性を有する純系のFischer 344 (F344)ラット(後述)を用いて、軽度のストレス負荷で引き起こされるストレス破綻状態(うつ病態モデル)における神経可塑性障害ならびにその障害に対する養育行動の影響を統合的に検討した。さらに、cross-fostering実験の結果から、F344ラットにおけるストレス脆弱性の形成は、母親の養育行動に起因していることが示唆された。
黒毛和種子牛の母乳性白痢に関する研究

母牛の飼料を変更することによる子牛白痢の発症試験を行った。分娩直後の5頭の黒毛和種牛母子を供試し、連日、母牛の飼料摂取量、泌乳量、胃汁、血液、乳汁と子牛の血液、糞便について、子牛の白痢発症まで追跡した。その結果、子牛全頭が母牛の飼料変更後57日に白痢を発症した。すなわち、デントコーンサイレージの給与開始後13日に子牛の糞便が軽度に変化した(前駆症状発現日)。この前後にルーメン液中の大型・中型原虫数が増加した。この日に乳汁中Mg、Ca、長鎖飽和脂肪酸濃度が高値を示し、乳汁のpHと脂肪酸組成が不安定になった。同時に子牛の血中TGが増加し始めた。白病発症前日には、母牛のルーメンの大型・中型原虫が減少し、小型原虫が著増し、血中リン脂質(PL)、BUNが増加した。白痢発症日には大量のルーメン微生物が消化・吸収され、母牛の血液(TG、PL、糖、BUN)および乳汁(乳脂肪率、脂肪酸組成、pH)に大きな変化が生じ、これを哺乳した子牛は脂肪消化不良便である白痴を発症した。これは飼料の変更によるルーメンコンディションの変化に起因する。"母乳性白痢"であることが推定された。そこで白痢の直接の原因と推定された長鎖脂肪酸を添加した代用乳を子牛に哺乳させ、その臨床症状、糞便中脂肪酸組成、血液性状を検討した。23週齢のホルスタイン子牛20頭を5頭ずつ、無投与コントロール群(C群)、パルミチン酸投与群(P群)、ステアリン酸投与群(S群)、オレイン酸投与群(O群)とした。体重の5%量の代用乳に代用乳の2%量の脂肪酸をそれぞれ添加して、試験日の朝タ2回、12時間間隔で哺乳させた。その結果、P群とO群の全頭とS群の2頭で48時間以内に白痢が発症した。血液成分では、P群とS群でTGの増加傾向を示した。またP群とS群では投与脂肪酸の排出増加による糞便中TGの増加を示し、O群では糞便中水酸化脂肪酸の増加傾向が見られた。以上の成績より、長鎖飽和脂肪酸投与による糞便性状の変化は、吸収率の悪い長鎖飽和脂肪酸の増加により、吸収できなかった脂質が水分の分泌を促進して排出されたものと推定された。長鎖不飽和脂肪酸投与(O群)による糞便性状の変化は、腸内常在菌による脂肪酸の水酸化が進行して吸収不良に陥るとともに、水分の分泌が促進されて生じたものと推定された。子牛白痢発症の一つの要因と推定された低でんぷん飼料給与母牛へのデントコーンサイレージ追加給与後の子牛白痢の発症再現試験を行った。

分娩直後の5頭の黒毛和種雌牛とその子牛を供試し、連日の飼料摂取量と泌乳量を・掌握しながら、母牛の胃汁、血液および乳汁と子牛の血液および糞便について、子牛の白痢発症まで追跡した。その結果、供試牛の子牛全頭が母牛へのデントコーンサイレージ給与開始後57日に白痢を発症した。すなわち、デントコーンサイレージの給与開始後13日に子牛の糞便に軽度の変化が認められた。この日を前駆症状発現日とすると、この前後にルーメン液中の大型および中型原虫数が増加した。この日に乳汁中Mg、Caおよび高級飽和脂肪酸濃度が高値を示し、乳汁のpHおよび脂肪酸組成が不安定になった。同時に、子牛の腸管内での脂肪酸塩形成による乳成分の滞留によると思われる子牛の血中TGの増加が始まった。白痢発症前日には、母牛のルーメン原虫のうち大型および中型原虫数が減少しはじめ、小型原虫が著しく増加した。それに呼応して血中リン脂質(PL)およびBUNの増加が認められた。白痢発症日には大量のルーメン微生物の消化・吸収の一過性の亢進により母牛の血液(TG、PL、糖、BUN)および乳汁(乳脂肪率、脂肪酸組成)成分および乳汁pHに一時的に大きな変化が生じ、この乳汁を哺乳した子牛はこれを脂肪消化不良便として排出することで白痢が発症したものと推定された。以上のことから、低でんぷん飼料を給与されていた母牛にデントコーンサイレージが追加給与されることによって生じたルーメンコンディションの変化が、母牛の血中脂質の変化を引き起こし、その乳汁を補乳した子牛が"母乳性白痢"を発症することが明らかとなった。子牛に特定脂肪酸を添加した代用乳を哺乳させ、その臨床症状と糞便中脂肪酸組成および血液性状の変動について検討した。23週齢のホルスタイン子牛20頭を5頭ずつ4群に分け、無投与コントロール群(C群)、パルミチン酸投与群(P群)、ステアリン酸投与群(S群)、オレイン酸投与群(O群)とした。体重の5%量の代用乳に代用乳の2%量の脂肪酸をそれぞれ添加して、試験日の朝夕2回、12時間間隔で哺乳させた。採血および糞便の採取は試験日の朝の投与前から48時間まで経時的に行った。血液生化学検査はTG、βLipo、FFA、Tcho、PL、TBA、BUNおよびGluについて行った。糞便は微生物検査を行うとともに、凍結糞便を用いて糞便中TG量およびその脂肪酸組成の分析を行った。その結果、C群の1頭、P群の5頭、S群の2頭、O群の5頭で糞便性状または色調の変化が見られた。糞便性状の変化時に腸内細菌数の有意な変化は見られず、ロタウイルス抗原は終始陰性であった。血液成分では、P群およびS群でTGの増加傾向、Tcho、Gluの低値、O群でFFA、TBAの増加、Tchoの低値を示した。また、P群およびS群では投与脂肪酸の排出増加による糞便中TGの増加を示し、O群では糞便中水酸化脂肪酸の増加傾向が見られた。以上の成績より、長鎖飽和脂肪酸投与(P群、S群)による糞便性状の変化は、吸収率の悪い長鎖飽和脂肪酸の増加により、吸収できなかった脂質が水分の分泌を促進し、排出されたものと推定された。長鎖不飽和脂肪酸投与(O群)による糞便性状の変化は、腸内常在菌による脂肪酸の水酸化が進行して吸収不良に陥るとともに、水分の分泌が促進されて生じたものと推定された。
シバヤギ繁殖集団の実験動物としての遺伝的純化に関する研究

東京大学農学部附属農場由来のシバヤギについて名古屋大学農学部附属山地畜産実験実習施設および名古屋大学医学部附属動物実験施設において繁殖集団を育成した.前者についてはチンチラおよび白色毛色のラインを確立し(SSG),後者ついては近交6世代(DSG)を得た.1)育成中のシバヤギの主要組織適合抗原クラスI領域のDNA変異を調査するため,シバヤギのDNAを制限酵素で切断しマウスの主要組織適合抗原(H-2)のDNAプローブを用いてRFLPを検出し,またその断片の斉一性について検討したが,その明確な変異は見い出せなかった.2)SSGラインについて細かな染色体変異をみるために精巣において減数分裂時のシナプトネマ構造を観察したところ,相互転座ヘテロ個体(個体番号SSG-LIV)を見い出した.この個体は4月齢で体重4.0kg,精巣重量2.0g(正常同腹個体SSG-LIIIは体重8.1kg,精巣14.4g)であった.このラインについては今後検討をつづける予定である.3)DSGラインは兄妹交配6代であるが,今のところ繁殖に障害はみられず,成長もよく,4月齢で雄20kg,雌16kgに達する.一方,SSGラインは生後すぐの死亡が多く,悪性の下痢が見られ,また雄雌ともに体重は4月齢で6-8kg程度であった.これは遺伝的な差ではなく,飼料も含めた飼育環境のちがいが影響しているものと考えられた.4)小腸の二糖類水解酵素活性を調べたところスクラーゼ・イソマルイターゼおよびトレハラーゼの欠損が見られたがこれは種としての特徴と考えられた.東京大学農学部附属農場由来のシバヤギについて名古屋大学農学部附属山地畜産実験実習施設および名古屋大学医学部附属動物実験施設において繁殖集団を育成した.前者についてはチンチラおよび白色毛色のラインを確立し(SSG),後者ついては近交6世代(DSG)を得た.1)育成中のシバヤギの主要組織適合抗原クラスI領域のDNA変異を調査するため,シバヤギのDNAを制限酵素で切断しマウスの主要組織適合抗原(H-2)のDNAプローブを用いてRFLPを検出し,またその断片の斉一性について検討したが,その明確な変異は見い出せなかった.2)SSGラインについて細かな染色体変異をみるために精巣において減数分裂時のシナプトネマ構造を観察したところ,相互転座ヘテロ個体(個体番号SSG-LIV)を見い出した.この個体は4月齢で体重4.0kg,精巣重量2.0g(正常同腹個体SSG-LIIIは体重8.1kg,精巣14.4g)であった.このラインについては今後検討をつづける予定である.3)DSGラインは兄妹交配6代であるが,今のところ繁殖に障害はみられず,成長もよく,4月齢で雄20kg,雌16kgに達する.一方,SSGラインは生後すぐの死亡が多く,悪性の下痢が見られ,また雄雌ともに体重は4月齢で6-8kg程度であった.これは遺伝的な差ではなく,飼料も含めた飼育環境のちがいが影響しているものと考えられた.4)小腸の二糖類水解酵素活性を調べたところスクラーゼ・イソマルイターゼおよびトレハラーゼの欠損が見られたがこれは種としての特徴と考えられた.
パラジウム触媒によるCO挿入反応を用いた生物活性物質の合成研究

本研究では,パラジウム触媒を用いたカルボニレーションと続く環化反応を用いて天然物合成を行なった。まずイソクマリン化合物の合成法を確立し,legioliulinと8-hydroxy-6-methoxy-3-pentyl-1H-isochromen-1-oneおよびfusariumin類縁体である6,8-dimethylfusariuminの合成を行った。続いて(+)-altholactoneの合成を行い,高収率で合成を達成した。一方,オイデスマン型セスキテルペン類に関しては,反応中間体としてアレン化合物を用いたが,複雑な混合物を与えたため,末端二重結合を用いて反応を検討している。Pd触媒によるCO挿入反応では水酸基やアミノ基によりアシルパラジウム錯体を求核付加してラクトンやラクタムを合成する反応は多く報告されている。しかし,ケトン体のO -エノラートにより環化する方法の天然物合成への応用は限られている。本研究ではカビ毒や植物病原菌の毒素に見られるイソクマリン化合物を本手法を用いて効率的に合成することを目的とし,fusariumin,legioliulinなどの合成研究を行った。まずlegioliulinの合成を行った。合成戦略としては共役二重結合を含む側鎖をアルキンのヒドロメタル化続いてクロスカップリングを用いて構築する方法を採用した。しかし,ヒドロジルコニウム化がうまく進行しなかったので後述する方法に合成戦略を変更した。3-Methoxyphenylacetic acidを出発物質として3工程でオルト位にヨウ素を導入した芳香族アルデヒドを合成した。続いてGrignard反応によるアリルアルコールを導入し,2級水酸基を酸化してエノンを得た。この化合物に対してCO存在下でカルボニレーションおよびO -エノラートによる環化反応を行った。反応条件を種々検討したところ,酢酸ナトリウムを塩基として用いた場合に57%の収率で目的物が得られた。続いて側鎖導入のためHeck反応を行ったところ,P(t-Bu)3をリガンドとして用いたところ66%の収率で目的物が得られた。最後に三臭化ホウ素で処理し,legioliulinの合成を達成した。一方,fusariuminに関しては側鎖の導入を達成したので数工程を経て合成ができると考えている。パラジウム触媒によるCO挿入反応,続くO-エノラートによる環化反応を用いたイソクマリン化合物であるfusariumin,legioliulinの合成ではほぼ合成経路を確立した。しかし当初の予定にあった学会発表と論文発表には至っていない。また,セスキテルペン化合物の合成はCO挿入反応と環化反応における反応条件の最適化を行っている段階である。全体的には当初の目標より「やや遅れている」と判断した。パラジウム触媒を用いた一酸化炭素挿入反応,続く環化反応を用いたイソクマリン化合物の効率的な合成方法を確立する事を目的とし,肺炎の原因菌の一種であるレジオネラ菌から単離されたlegioliulinとフザリウム菌より単離されたマイコトキシンであるfusariuminの合成研究を行った。3-Methoxyphenylacetic acidを出発物質として,LiAlH4による還元,オルト位にヨウ素化を行いDess-Martin酸化,Grignard反応,再びDess-Martin酸化を行い環化前駆体を得た。続いて鍵反応であるパラジウム触媒を用いた一酸化炭素挿入反応,続く環化反応を行い,57%の収率でイソクマリン骨格を構築した。最後にHeck反応を用いて側鎖を導入してlegioliuliの合成を達成した。一方,fusariuminの合成研究は3,5-dimethoxyphenyl acetic acidをアルデヒドに変換後,別途合成した側鎖をリチオ化して反応させ,側鎖を導入したアルコール体を得た。続いてDess-Martin酸化を行い環化前駆体を得た。パラジウム触媒を用いた一酸化炭素挿入反応,続く環化反応では反応温度を50°Cで行ったところ高収率で目的物を得ることができた。現在最終工程であるメトキシ基の脱保護を行っている。Fusariuminの絶対構造に関しては比旋光度の値がごく小さいため推定にとどまっている。本研究で得られたfusariuminのジメトキシ体の旋光度は再現性のある値を示しているため,天然物からジメトキシ体に誘導することで絶対構造が決定できることを明らかにした。さらにこの研究の過程でTessmannia densifloraより単離された天然物である8-hydroxy-6-methyl-3-pentyl-1H-isochromen-1-oneの合成も行った。パラジウム触媒を用いた一酸化炭素挿入反応続く環化反応を用いたイソクマリン化合物の効率的な合成方法を達成し,論文発表および学会発表を行った。しかし,セスキテルペン化合物の合成ではまだ鍵反応の収率を最適化している段階である。従って当初の目標より「やや遅れている」と判断した本研究では,パラジウム触媒を用いたカルボニレーションと続く環化反応を用いて天然物合成を行なった。咋年度はイソクマリン化合物の合成法を確立し,本年度はHeterocycles誌と第59回天然有機化合物討論会で発表した。今年度はイソクマリン化合物に加えて,(+)-altholactoneと環状アシルパラデーションを用いたオイデスマン型セスキテルペン類の合成研究を行なった。まず(+)-altholactoneの合成は,D-gulonolactoneを出発物質として1,2-ジオールをアセトニドで保護し,フェニル基の導入,生じた3級水酸基の還元的除去と1,2-ジオールの開裂によりアルデヒドを得た。

このアルデヒドに対して,Corey-Fuchs反応等を用いた末端三重結合の導入を試みた。しかしながら反応がうまく進行しなかったため,Wittig反応によりZ体のビニルヨージド体を高収率で得ることができた。この化合物に対してパラジウム触媒を用いたカルボニレーションと続く環化反応を行ったところ,反応が進行し,高収率で(+)-altholactoneの骨格を構築することができた。その後数工程で(+)-altholactoneを合成した。本合成法は高価なD-gulonolactoneを出発物質に用いていることと合成中間体のベンジル基の除去に課題が残ったことから出発物資をグルコースに変え,保護基の検討も行なっている。一方,オイデスマン型セスキテルペン類の合成研究に関しては,反応中間体としてアレン化合物を用いたが,カルボニレーションと続く環化反応は複雑な混合物を与える結果となった。おそらく反応性が高すぎたためと考えられたので,末端二重結合を用いて反応を検討し,現在反応の最適化を行なっている。本研究では,パラジウム触媒を用いたカルボニレーションと続く環化反応を用いて天然物合成を行なった。まずイソクマリン化合物の合成法を確立し,legioliulinと8-hydroxy-6-methoxy-3-pentyl-1H-isochromen-1-oneおよびfusariumin類縁体である6,8-dimethylfusariuminの合成を行った。続いて(+)-altholactoneの合成を行い,高収率で合成を達成した。一方,オイデスマン型セスキテルペン類に関しては,反応中間体としてアレン化合物を用いたが,複雑な混合物を与えたため,末端二重結合を用いて反応を検討している。パラジウム触媒によるCO挿入反応,続くO-エノラートによる環化反応を用いたイソクマリン化合物に関しては合成の最終段階に来ているので直ちに合成を完了させ,学会発表と論文発表を行う予定である。また,セスキテルペン化合物の合成はPd触媒とリガンドのスクリーニングおよびCOの圧力に関して反応条件の最適化をまず行う予定である。反応条件の最適化が達成されれば全合成を完成する予定である。遅れているセスキテルペン化合物の合成ではまだ鍵反応の収率の最適化を行い,天然物合成への応用を展開する。特にパラジウム触媒のリガンドのスクリーニング,一酸化炭素の圧力や反応温度を中心に条件検討を行う。生物有機化学
変形性関節症発症機序の解明に向けた軟骨変性制御機構における糖鎖機能解析

申請者は、これまでの研究成果より軟骨変性早期の糖鎖変化は可逆的変化であるという仮説を立てた。本研究では、in vivoおよびin vitro軟骨変性モデルを用いてこの仮説を証明し、変形性関節症(OA)早期の病態解明と新規治療法開発のための分子基盤の構築を目指した。ウサギ膝関節内および軟骨器官培養系への高マンノース型糖鎖分解酵素の投与により早期OA変化を導くという結果を得た。さらに、酵素の投与中止により組織変性は回復を認めた。今後、得られた可逆的OA修復メカニズムを解明するための研究を推進していく方針である。変形性関節症(以下、OA)病変の首座である軟骨の変性は、プロテオグリカン中の糖鎖構造の破壊から始まるとされている。本研究の最終ゴールは、軟骨中の糖鎖がOAの発症および早期病態において重要な機能を担っているという仮説を証明し、OA早期の病態解明と新規治療法開発のための分子基盤の構築を目指すことである。申請期間内の具体的目的は、1)ウサギ膝関節に糖鎖分解酵素を投与し、軟骨変性変化を組織学的および分子生物学的手法により評価する、2)マウス関節軟骨の器官培養系に糖鎖分解酵素を投与して1)と同様の評価を行う、最終的に3)軟骨変性およびその可逆性変化-修復現象-が証明されたうえで、変性ならびに修復メカニズムを糖鎖生合成過程における代償機構に注目し、解明することである。高マンノース型糖鎖特異的分解酵素であるマンノシダーゼをウサギ膝関節内に投与することで組織学的にOA変化を生じさせることができた。さらに、分解酵素投与後の軟骨組織の経時的観察を行ったところ、本研究仮説である軟骨変性の可逆性変化ー自然修復現象ーが確認された。修復メカニズム解明のためのマウス軟骨を用いたin vitro変性モデル(器官培養系にマンノシダーゼを添加)において、組織学的および分子生物学的観点からも本現象をサポートする結果が得られた。現在、in vitroモデルの軟骨組織中の網羅的糖鎖構造解析であるグライコブロッティング法を行いて糖鎖関連分子の発現変化とそれに関連する糖鎖分解・合成酵素の遺伝子発現変化を追跡している。本研究仮説である、マンノシダーゼ投与により高マンノース型糖鎖が分解されることで軟骨変性が生じるが、糖鎖生物学的に何らかの代償機構が働き変性変化が停止もしくは修復に向かう、という仮説がほぼ証明された。おおよそ申請した計画通りに、研究は進んでおり、平成29年度は糖鎖生物学的代償機構の解明を行う予定である。平成28年度内に、本研究の作業仮説であるマンノシダーゼ投与により高マンノース型糖鎖が分解されることで軟骨変性が生じるが、糖鎖生物学的に何らかの代償機構が働き変性変化が停止もしくは修復に向かう、という点は証明された。平成29年度はin vitroモデルを用いて、マンノシダーゼ投与後の軟骨中の糖鎖発現変化をグライコブロッティング法を用いて解析する。さらに、糖鎖関連酵素の遺伝子発現変化も追跡する。これらの結果よりターゲット糖鎖分子を同定する。最終的には、同定した糖鎖分子の軟骨変性および修復過程における機能解析を行ことで、上述したメカニズムを解明する。整形外科
ナノ表面制御可能な超臨界ナノプレイティングにおける電導機構の解明

本申請者は、超臨界二酸化炭素は電解質溶液とは混合しないが少量の界面活性剤を添加することによりエマルジョン化が可能であることを見いだした(特許JP3571627)。このエマルジョン化により液面が上昇し、系全体が通電し、プレイティングが均一に行われることを発見した(Chem.Lett.,1086-1087,(2002))。この方法は超臨界流体技術とめっき技術を融合させたものであり、低環境負荷型超臨界流体ナノプレイティングシステム(SSNP)と命名した。SSNP法により得られたニッケル金属皮膜は従来のめっき法で作製された膜と異なり、ピンホールが無くレベリングも高く、更に金属粒径が10nmと非常に細かく緻密であり硬度も高いことが明らかとなっている。また、通常電気めっきは面粗度が悪化する方向に皮膜成長が行われるのに対し、面粗度が33nmの基板の上にSNP法によるめっきを行うと、面粗度20nmを達成する均一な高性能膜が生成することがわかっている。本研究では、このSSNP法により得られる皮膜の硬度や面粗度向上などの特殊性を、高圧容器中の超臨界流体エマルジョン場に微細な端子を入れミリ秒単位の電流を計測すると同時に、この測定で得られた皮膜を電子顕微鏡で観察し、この特異な電気化学反応場と得られる皮膜の相関を明らかにすることを計画・実行した。この結果、超臨界流体エマルジョン場を通る電流値の振幅が、析出金属の粒界の大きさと相関があることが明らかとなった。この結果により、12nmから9nmまでの析出金属粒界制御が可能となった。また、さらにSSNP皮膜により得られた皮膜の硬度や耐摩耗性を測定し、従来のめっき法と比較し、優れた機械的特性を有することを明らかにした。本研究開発の結果、SSNPはナノテクノロジーのための微細な金属部材の形成に有効であり、高い制御性を有する金属材料作成方法であることがわかった。本研究では、低環境負荷型超臨界流体ナノプレイティング(SSNP)法により得られる皮膜の硬度向上や面粗度向上などの電気化学反応の特殊性をナノレベルで解明することが課題である。SSNP法により得られた金属皮膜は従来のめっき法で作製された膜と異なり、ピンホールが無くレベリングも高く、更に金属粒径が10nmと非常に細かく緻密であり硬度も高いことが明らかとなっている。また、通常電気めっきは面粗度が悪化する方向に皮膜成長が行われるのに対し、面粗度が33nmの基板の上にSNP法によるめっきを行うと、面粗度20nmを達成する均一な高性能膜が生成することをわかっている。平成16年度では、このSSNP法により得られる皮膜の硬度や面粗度向上などの特殊性を、高圧容器中の超臨界流体エマルジョン場に微細な端子を入れミリ秒単位の電流を計測すると同時に、この測定で得られた皮膜を透過型電子顕微鏡で観察し、この特異な電気化学反応場と得られる皮膜の相関を明らかにすることを計画・実行した。このナノ構造は、アモルファス金属とナノ組織金属の境界領域に相当し、その構造が制御可能であるということを明らかにした点で新規性・独創性がある。
ベネズエラとコロンビアの比較小説研究から見た文学のアイデンティティ形成への寄与

本年度は本研究プロジェクトの最終年であり、研究成果の公表及びその集大成としての研究書の執筆に重点を置いた。平成16年6月のラテンアメリカ学会においては、20世紀前半のラテンアメリカ小説に着目し、その受容を文化政策との関連から考察する発表を行った。同年11月ベネズエラの文学研究者グレゴリー・サンブラーノ氏をまじえたシンポジウム「現代ベネズエラ小説」では、ベネズエラ小説における政治暴力と小説創作の関係を考察し、発表した。さらに17年1月には、これまでの研究成果を一冊の本にまとめた研究書「La novelistica de laviolencia en America Latina」の執筆を終え、ベネズエラのロス・アンデス大学出版局に提出した。17年9月までには単行本としてベネズエラ、コロンビア両国で発表される予定である。本書は主としてベネズエラ、コロンビア、メキシコ三国における政治的事件と小説創作の関係を考察したものであり、三者の比較研究から社会に対する小説家の役割、さらには小説が社会に与える影響を具体的な作品分析から明らかにしている。また、小説と文化政策、文化的アイデンティティ形成との関連についても具体的な展望を示しており、これまでの研究の集大成というのみならず、今後にもつながる成果と考えられる。スペイン語での執筆ということになったが、近いうちに日本語訳も行う予定である。この研究書の発表をもって、ラテンアメリカにおける小説と社会の関係に主眼をおいた本研究プロジェクトは、十分な成果をあげたものと確信する。今年度は主として基本資料の収集に尽力した。コロンビア、ベネズエラ両国において、当地研究者、研究助手の助けを得て、大学図書館、公営の資料館等から入手困難な貴重な小説作品、研究資料を集めることができた。大半はすでに整理を終えており、今後の研究の資料的土台はほぼ固まったと言える。また、並行して学生へのアンケート、研究者、作家へのインタビューも相当量実施することができた。なかでもベネズエラの一流作家エドノディオ・キンテーロとのインタビューなどは雑誌などにも極めて少数しか出ておらず、今後の研究には貴重な資料となる。ベネズエラ、コロンビアの一流の研究者と多くの交流を持つことができたのも今後の研究には大きな意味がある。本研究に理解を示し、協力を申し出てくれる研究者も多く、彼らの示唆をえながら広い視点から今後の研究を進めることができよう。基本資料の収集、整理に力をいれたため、本年は具体的な研究成果は少なかったものの、研究論文も一本完成することができた。これは、研究対象として重要な文学作品をコロンビア文学史のコンテクストに位置づけながら分析したものであり、今後の個別の作品分析のための一つの指針を示すことができたと言える。論文は3月末にコロンビア文学研究における最高の雑誌に受理されており、近々刊行年月日、巻号が伝えられる予定である。また、平成14年10月には、国際的学会組織ALFAにおいて、コロンビアの女流文学について研究発表をした。これまで見逃されがちだったコロンビアの女流作家二人を、20世紀のコロンビア小説の潮流のなかに位置づけて新たな視点からとらえなおしたもので、学会からも高い評価を受けた。こちらは平成15年度中に刊行されるはずであるが、詳細は未定である。今年度20世紀前半から60年代にかけてのコロンビア、ベネズエラ両国の小説に着目し、特に研究の重点を政治的事件についての小説に絞り、その創作と受容の両側面から作品の分析を進めた。具体的には、コロンビアの内戦を巡る暴力小説、ベネズエラの独裁政権に反発する告発小説の数作を中心に研究を行った。ここでは、当初ルポルタージュ的な働きをしていた小説が、ジャーナリズムから断絶し、次第に芸術ジャンルとして自己完結していく過程が見られる。これに従って小説の社会的役割も変化し、これがどのように国民文化形成のプロセスと結びついていくのか、この点を十分に考察することが今後の課題となる。平行して両国の文学についての資料収集も続け、この点についてはほぼ必要とする作業はおえたものと判断している。また、コロンビア、ベネズエラ両国で、学術雑誌にスペイン語で論文を掲載することに成功し、研究発表という点でも十分に成果を上げることができた。さらに、これまでの論文を一冊の本にまとめてLiteraturas al margenというタイトルでベネズエラ、メリダの出版社から論文集として出版した。また、ベネズエラ、ロス・アンデス大学出版部より、本研究プロジェクトの成果をまとめて一冊の本として出版する申し出を受けた。来年度末までに最終原稿を提出し、再来年9月には本研究の集大成となる研究書がベネズエラで出版されることになる。

スペイン語での執筆ということになったが、近いうちに日本語訳も行う予定である。この研究書の発表をもって、ラテンアメリカにおける小説と社会の関係に主眼をおいた本研究プロジェクトは、十分な成果をあげたものと確信する。
収縮中後期僧帽弁逸脱における左室・僧帽弁連関（乳頭筋の異常上方運動）の役割

[背景]乳頭筋の収縮期異常上方運動が収縮後期僧帽弁逸脱(以下MVP)の原因かどうかを検討する。[方法および結果]健常15例,全収縮期MVP10例と収縮後期MVP14例において、乳頭筋基部・先端および僧帽弁輪間の距離を心エコースペックルトラッキング法で計測し、弁接合点の高さを断層心エコー法で計測した。弁接合点の収縮期上方移動は、乳頭筋先端の上方移動と相関した(r=0.80, p<0.0001)。乳頭筋先端の収縮期上方移動は、乳頭筋基部の上方移動および乳頭筋収縮の減少と相関した(r=0.52, p=0.0007)。[結論]収縮後期MVPは弁下部乳頭筋の収縮期上方移動および収縮低下と相関した。収縮中後期僧帽弁逸脱(MVP)では、弁逸脱が収縮早期にはなく(あるいは軽く)収縮中期から後期にかけて逸脱が見られる。その機序は未だ解明されていない。正常者の乳頭筋・僧帽弁輪の位置関係は次のようである。収縮早期から収縮後期にかけて乳頭筋基部と僧帽弁輪間の距離は短縮する、また乳頭筋自体も短縮する。この結果、僧帽弁輪面から乳頭筋先端までの距離は殆んど変化せず一定に保たれる。このために正常者では左室が収縮期に縮小し、乳頭筋基部と僧帽弁輪間の距離が短縮してもMVPは出現しない。収縮後期にMVPが増悪するためには乳頭筋が僧帽弁方向に移動するか、あるいは腱索が収縮期に延長するか、この二つの可能性しかない。腱索は硬い線維成分で主に構成されておりストレスが加わっても延長しないと考えられる。以上をふまえて以下の仮説「全収縮期MVPにおいて僧帽弁輪から乳頭筋先端までの距離は収縮早期から後期にかけて一定に保たれるが、収縮中後期MVPにおいては乳頭筋先端が収縮期に僧帽弁輪方向(上方)へ異常に移動し、収縮中後期MVPに合致した運動を呈する。」を提唱した。我々は収縮後期MVP15例において心エコー図のスペックルトラッキングを用いて乳頭筋先端・乳頭筋基部と僧帽弁輪間の位置関係を評価し、同時に乳頭筋の収縮を測定した。収縮後期MVPにおいては、乳頭筋先端は収縮期に僧帽弁輪方向へ近づく異常運動が見られた。また、乳頭筋基部も同様の異常運動が見られ、乳頭筋の収縮は低下していた。これらの異常は全収縮期MVPや正常者では見られず、乳頭筋の異常動態が収縮後期MVPと関連していることが判明した。(背景)僧帽弁逸脱(以下MVP)では、弁尖・腱索組織が延長し、収縮期に弁尖が左房内に入り込み逆流を出現させる。MVPには全収縮期に出現するものと収縮中後期に出現るが、これらのき機序は未だ解明されていない。本研究の仮説は「全収縮期MVPにおいて僧帽弁輪から乳頭筋先端までの距離は収縮早期から後期にかけて一定に保たれるが、収縮中後期MVPにおいては乳頭筋先端が収縮期に僧帽弁輪方向(上方)へ異常に移動し、収縮中後期MVPに合致した運動を呈する。」である。(方法)年齢および性別をマッチさせた健常対照者15名、全収縮期MVP10例および収縮中後期MVP15例において定量的心エコー図解析(組織トラッキングを含む)を行った。(結果)1)僧帽弁接合位置は、健常対照者でも全収縮期MVPでも同様に、収縮早期から収縮後期にかけて左心房方向へ僅かに移動したが、収縮中後期MVP例においてはこの移動が有意に増大していた(p<0.01)。2)乳頭筋基部および先端の位置は、健常対照者でも全収縮期MVPでも同様に、収縮早期から収縮後期にかけて左心房方向へ僅かに移動したが、収縮中後期MVP例においてはこの移動が有意に増大していた(p<0.01)。3)乳頭筋基部・先端間距離は、健常対照者でも全収縮期MVPでも同様に、収縮早期から収縮後期にかけて12%前後短縮(収縮)したが、収縮中後期MVP例においてはこの短縮(収縮)が有意に減少していた(p<0.01)。(結論)収縮中後期MVP例では、弁下部乳頭筋が収縮期に異常に上方へ(僧帽弁に向かって)移動し、乳頭筋収縮(短縮)も有意に減弱しており、これらが収縮中後期MVPの機序となっている可能性がある。[背景]僧帽弁逸脱(以下MVP)では、弁尖・腱索組織が延長し、収縮期に弁尖が左房内に入り込み逆流を出現させる。

MVPは一般には全収縮期に出現するが、収縮後期に出現することがある。「なぜMVPが全収縮期ではなく収縮後期に出現するのか?」は未だ解明されていない。本研究では、乳頭筋が収縮期に異常上方運動をすることが収縮後期MVPの原因であることを証明する。[方法]健常15例,全収縮期MVP10例と収縮後期MVP14において、1)乳頭筋基部・先端および僧帽弁輪間の距離を心エコースペックルトラッキング法で計測し、2)僧帽弁輪から見た僧帽弁接合点の高さを断層心エコー法で計測した。[結果]1)僧帽弁接合点の収縮期における左房方向への移動、乳頭筋基部および先端の収縮期における左房方向への移動、乳頭筋の収縮期短縮(縦方向)の減少は健常例や全収縮期MVPと比べて収縮後期MVPにおいて有意に顕著であった(p<0.05)。多変量解析により僧帽弁接合点の収縮期における左房方向への移動は、乳頭筋先端の収縮期における左房方向への移動と独立して有意に相関していた(r=0.80, p<0.0001)。さらに乳頭筋先端の収縮期における左房方向への移動は、乳頭筋基部の収縮期における左房方向への移動および乳頭筋の収縮期短縮の減少の両方と独立して有意に相関していた(r=0.52, p=0.0007)。[結論]収縮後期MVPは弁下部構造の収縮期における不安定性を伴っていた。乳頭筋基部および先端の収縮期における左房方向への異常移動および乳頭筋の収縮期短縮(縦方向)の減少が弁下部構造不安定性の特徴であった。循環器内科15例ほどの解析が済んでおり、概ね仮説通りの結果が得られている。症例数は目標に届いていないが、仮説を支持する結果がすでに得られている。僧帽弁手術前後の解析を加えるとさらにメカニズムが判明するので、収縮後期MVPの手術前後での解析を加えたい。研究は症例数が目標に届いていない点を除けると、順調に来ていると考えます。症例数を目標(全収縮期MVP20例・収縮中期MVP15例および健常対照者20名)まで増やす。そして研究論文をまとめることが今後の方針です。情報収集のための学会出張等が予定外の仕事(救急医療への対応や予期せぬ学生教育関連の仕事)により行えなかったり、データ解析のための機器やプログラムが既存のもので思考可能であったりして購入の必要がなかったりしたため。研究遂行にかかる必要な消耗品・備品を購入し、情報収集のための出張費にも使用し、論文作成を目指す。そして研究論文をまとめることが次年度の方針でもあります。症例数が目標に達していない理由の一つは、組織トラッキングに適した良好な画像を持った症例が少なかったことです。次年度には達成できると考えています。学会発表や画像を集める費用が、症例不足で予定より少なくなり、繰越金が生じました。次年度には達成出来ると考えています。