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オースティンを中心とした18世紀イギリス小説の医学文化論及びジェンダー論的研究

18世紀後半から19世紀初頭のイギリス小説の重要なテーマであった感受性の概念は神経医学の発達の産物であり、医学知識の一般化と不即不離だった。感受性が広く大衆に受け入れられるにつれて、女性の身体的精神的か弱さは女性らしい感受性や繊細さの証拠とされた。女性自身も、理想の女性像に合わせるべく、自己の弱さを演出し、ヒステリー、拒食症、さらに漠然とした身体の不快が女性特有の病気や症状として蔓延した。これらのことを当時の医学資料を参照し、明らかにした。オースティンの全テクストを精査し、上にあげた身体症状の具体例を抽出して、電子データとして整理した結果、女性の食について着目するにいたった。オースティンの10代の頃の習作では、若い女性の大食が実にあっけらかんと書かれており、女性の旺盛な食欲は単に生理的欲求というだけでなく、当時女性の美徳として挙げられた控えめ、しとやかさといった女性の美徳への反抗の表れとして機能する。ところが、オースティンが成人になってから執筆された作品では、小食を誇らしげにアピールする女性が登場し、「食べてはいけない」という社会からの抑圧が、女性の意識の中で「食べない」という自発的行為として置換えられ、「食べられない」拒食症状を引き起こすメカニズムが描かれている。この着想を得た後、拒食症について初めて明確な記述をしたといわれるウィリアム・ガルの論文(1873年刊行)、カレン・カーペンターの拒食症の分析をし、オースティンのテクストを再読したその結果により、現代の拒食症に通じる問題点を明らかにすることができた。次に、『サンディトン』の主題である、海岸保養地の開発について、オースティンの主要作品が執筆された1810年代の後半の南東イングランド海岸地帯の地図、当時の地主の特質を分析したミンゲイなどの研究書を読み、漠然とした不安や身体的不快症状を訴えることが流行になり、それを治療しつつ娯楽を提供する海岸保養地の誕生の必然性を精査し、病が商品化される過程を明らかにした。成果の一部を日本英文学会と日本オースティン協会の大会で発表した。本研究の基礎を一層強固にするためには、女性の身体的器質的虚弱さについて著述した18世紀の医学テクストを収集整理する必要がある。そのため、9/15-9/25まで大英図書館等で資料収集と調査を行った。平成20年8月26日9月13日までイギリスに出張し、アバディーン大学、エディンバラ大学、大英図書館において資料収集を行った。研究成果の公表については、19年度の研究成果の一部が、横山茂雄編、『危ない食卓--十九世紀イギリス文学にみる食と毒』(新人物往来社、平成20年12月)に掲載された。執筆を担当したのは「第2部イギリス文学にみる〈危ない食卓〉」の「食べてはいけない、食べない、食べられない-ジェイン・オースティンの拒食症患者を診断する」(pp.136-68)、「第3部翻訳資料」の「神経性食欲不振症(ヒステリー性消化不良、ヒステリー性食欲不振症)ウィリアム・ウィズィ・ガル」(pp.259-72)である。これについては、書評やピアレビューを参考に改訂を重ね、将来的には単著の公刊を目指す。21年度の研究は最終年度にあたり、19-20年度に行ったオースティン(以下JAと略記)の作品と他の18世紀イギリス小説で取り扱われている感受性のテーマを18世紀の医学及び社会文化風土との相関関係を明確にし、JA作品が18世紀イギリス小説の笑いやユーモアを継承した上で、女性の感受性をことさらに美徳として褒め称える文化を批判し、19世紀イギリス小説の重要なテーマである女性の社会的地位の向上を先取りしていることを明らかにした。また、医学風土については、JA作品が素人療法から専門家による治療へのシフトを巧みに描いていることが判明した。研究成果の一部は、21年7月、英国チョートンで開催された学会"New Directions in Austen Studies"において発表を行った。内容は、上で述べた、素人療法から専門家による治療でのシフトである。海外の多数の研究者からの質疑応答により、それまでの研究計画・方法の修正改善に有益な示唆を得た。さらに、発表原稿に加筆し、編集者のアドバイスにより、JAの時代より前の医学書も参照し、再査読を経て、Persuasions On-Line 30巻1号に掲載となった。1冊の研究書としてまとめるには、残念ながら今年度で時間切れになり、今後さらに時間がかかるが、当初の目標であった、研究成果を英語で発表し、国際的な評価を受けることが出来た。上記に加えて、22年10月、アメリカ合衆国ポートランドで開催される北米JA協会の年次大会で研究発表をすることになった。内容はNorthanger Abbeyの中心舞台であるBathの温泉保養地としての特性とそこに集う人間に共通点-嘘つきの深層心理の分析である。
ミトコンドリアを持たない真核細胞研究のキックオフ

本研究では、モデル真核生物である出芽酵母の鉄硫黄(Fe-S)クラスター生合成系を改変することで、酵母ミトコンドリアにおける唯一の必須機能をバイパスさせ、“ミトコンドリアを持たない真核細胞"をはじめて実験的に創り出すことを最終的な目標としている。H30年度は、バクテリアのFe-Sクラスター生合成系であるNIFマシナリーの2成分(NifSとNifU)を酵母の細胞質で発現させ、CIAマシナリーと協調してクラスターを生合成できるように改変することを目指して、以下の研究を進めた。NifSとNifUについて構造機能解析を進め、Fe-Sクラスター生合成系としての特性を検討した。NifSの活性部位の柔軟な触媒ループの構造はこれまで不明であったが、種々の条件を検討し、この触媒ループを含めた反応中間体の構造決定にはじめて成功した。これによって、NifSの触媒反応で重要となる反応中間体と活性部位のアミノ酸との相互作用や、複雑に絡み合った触媒ループが反応時に解消されるべきトポロジー変化を見出した。バクテリアのNifSとNifUを酵母の細胞質で発現させ、Western解析によって確認した。また、NifS、NifUの発現が出芽酵母の生育に影響を及ぼさないことを確認した。次に、相同組換えによってミトコンドリア内のFe-Sクラスター生合成に関与する遺伝子ATM1やNFS1の遺伝子破壊を試みた。ATM1遺伝子の破壊には成功したものの、この破壊株はNifS、NifU発現プラスミドを脱落させても生育可能であった。ATM1は必須遺伝子と報告されていたが、NifS、NifUの有無に関係なく破壊されたことから、Fe-Sクラスター生合成系の改変において、指標にはならないことが判明した。NIFマシナリーの構造と機能について解析を進め、作動機構の詳細に迫りつつある。一方、NIFマシナリーを発現させた酵母でATM1を破壊することができたものの、予想に反して、NIFマシナリーの発現とは関係が無いことが判明した。また、NFS1の破壊株は得られていないため、今後、種々の条件を検討する必要がある。NIFマシナリーを細胞質で発現させることによって、ミトコンドリアISCマシナリーの必須機能(細胞質や核のFe-Sタンパク質のクラスター形成)がバイパスできるかどうか、以下の方法で検討する。1.酵母のNFS1は必須遺伝子だが、そのプロモーターをガラクトースプロモーターにすげ替えたGal-NFS1発現制御株が構築されている。この株にNifS、NifU発現プラスミドを導入し、培地のガラクトースをグルコースに置換することによってNfs1を枯渇させ、その影響を調べる。2. NIFマシナリーは酸素に対して感受性が高いという性質が知られている。そこで、酵母に導入したNIFマシナリーを十分に機能させられるように嫌気的な発酵条件で生育させ、NFS1破壊株のスクリーニングを進める。3. NFS1に加えて、ミトコンドリア内ISCマシナリーの別の必須成分(JAC1)の遺伝子破壊を試みる。H29年度は、バクテリアのFe-Sクラスター生合成系であるNIFマシナリーの2成分(NifSとNifU)を酵母の細胞質で発現させ、CIAマシナリーと協調してクラスターを生合成できるように改変することを目指して、以下の研究を進めた。ピロリ菌のNifSとNifUについて、まず、生化学的な性質ならびに構造を解析した。NifSについては、結晶内での酵素反応によって、反応中間体の構造を捉えることに成功した。すなわち、基質L-システインがNifSの活性中心であるピリドキサール-5'-リン酸にシッフ塩基を介して結合している構造を明らかにした。NifUについては、結晶化することが困難であったため、NifU二量体とNifU-NifS複合体の構造をSAXSにより解析した。また、NifUの3つのドメインを個別に発現・精製し、NifU二量体間の会合部位やNifSとの相互作用部位を検討した。nifSとnifUをクローン化し、細胞質で発現させるよう出芽酵母に導入した。一般に、Fe-Sクラスターの生合成系を過剰に発現させると有害な影響が現れるため、タンパクの発現量を変化させて酵母細胞の生育に対する影響を調べ、NIFマシナリーの適正な発現量が担保できる条件を検討した。NIFマシナリーの2成分(NifSとNifU)について、生化学的な解析ならびに構造解析から、Fe-Sクラスター生合成系としての基本的なアウトラインを明らかにした。これにより、酵母の細胞質においても機能できる見通しが得られた。また、酵母細胞質において、これらのタンパク質を適正な量で発現させる目処が付いた。

NifSとNifUについて構造機能解析を進め、Fe-Sクラスター生合成系としての特性を検討した。NifSの活性部位の柔軟な触媒ループの構造はこれまで不明であったが、種々の条件を検討し、この触媒ループを含めた反応中間体の構造決定にはじめて成功した。これによって、NifSの触媒反応で重要となる反応中間体と活性部位のアミノ酸との相互作用や、複雑に絡み合った触媒ループが反応時に解消されるべきトポロジー変化を見出した。バクテリアのNifSとNifUを酵母の細胞質で発現させ、Western解析によって確認した。また、NifS、NifUの発現が出芽酵母の生育に影響を及ぼさないことを確認した。次に、相同組換えによってミトコンドリア内のFe-Sクラスター生合成に関与する遺伝子ATM1やNFS1の遺伝子破壊を試みた。ATM1遺伝子の破壊には成功したものの、この破壊株はNifS、NifU発現プラスミドを脱落させても生育可能であった。ATM1は必須遺伝子と報告されていたが、NifS、NifUの有無に関係なく破壊されたことから、Fe-Sクラスター生合成系の改変において、指標にはならないことが判明した。NIFマシナリーの構造と機能について解析を進め、作動機構の詳細に迫りつつある。一方、NIFマシナリーを発現させた酵母でATM1を破壊することができたものの、予想に反して、NIFマシナリーの発現とは関係が無いことが判明した。また、NFS1の破壊株は得られていないため、今後、種々の条件を検討する必要がある。NIFマシナリーを細胞質で発現させることによって、実際にミトコンドリアISCマシナリーの必須機能(細胞質や核のFe-Sタンパク質のクラスター形成)がバイパスできるかどうか、以下の(a), (b)の方法で段階的に検討する。(a)ミトコンドリア内膜の輸送体Atm1は、ミトコンドリアで作られるFe-Sクラスターの一部を細胞質へ輸送する、生育に必須なタンパク質である。この遺伝子の破壊株が得られれば、Atm1の機能がバイパスされて、細胞質だけでFe-Sクラスターが形成されることを確認することができる。なお、このAtm1破壊株ではミトコンドリアのISCマシナリーは正常に保たれるため、TCAサイクルや酸化的リン酸化は正常に機能すると考えられる。(b) ISCマシナリーの中心成分であるNfs1(システイン脱硫酵素、バクテリアIscSのホモログ)をコードする必須遺伝子を破壊することで、ミトコンドリア内のFe-Sクラスター生合成系を欠失させる。この変異株では、ミトコンドリア内のTCAサイクルや酸化的リン酸化が機能しなくなると予想されるため、生育にはラフィノースを炭素源とした富栄養培地を用いる計画である。NIFマシナリーを細胞質で発現させることによって、ミトコンドリアISCマシナリーの必須機能(細胞質や核のFe-Sタンパク質のクラスター形成)がバイパスできるかどうか、以下の方法で検討する。1.酵母のNFS1は必須遺伝子だが、そのプロモーターをガラクトースプロモーターにすげ替えたGal-NFS1発現制御株が構築されている。この株にNifS、NifU発現プラスミドを導入し、培地のガラクトースをグルコースに置換することによってNfs1を枯渇させ、その影響を調べる。
細胞微細構造,光合成色素と分子系統から探る褐藻類の初期進化と高次系統

核18S rDNA配列からGiraudyopsis stellifera(クリソメリス目)と近縁と考えられるNZ産多細胞黄色植物につき、培養下での形態、微細構造、光合成色素組成、分子系統学的解析を行った。本種の栄養細胞は粘質からなる細胞壁様構造を有し、成熟すると内部に1個の遊泳細胞を生じる。遊泳細胞は西洋梨形で顕著な眼点を持つ1個の葉緑体と不等長の側生2鞭毛を持つ。遊泳後基物に付着すると、基物に密着する匍匐糸状体に発達し、次いで分枝し柔組織様で高さ約10mmに達する直立細胞糸を発出する。葉緑体はガードルラメラで包まれた3重のチラコイドラメラを持ち、埋没型のピレノイドを有する。HPLC解析では、Chl.a, c、フコキサンチン、ヴィオラキサンチン、ディアトキサンチンなどの存在が確認された。Giraudyopsis属の含まれるクリソメリス目は、その綱レベルの所属が明らかではないが、葉緑体rbcL遺伝子による解析では、黄緑藻綱、褐藻綱、シゾクラディア藻綱、ファエオタムニオン藻綱などと近縁だが、いずれの綱にも属さず、Tetrasporopsis(所属不詳)とクレードを作る。一方ギリシャ産の褐藻Discosporangiumの培養株と豪州産の乾燥標本についてrbcL遺伝子による解析を行った結果,本属はこれまで褐藻で最も祖先的とされていたChoristocarpusと最も近縁であり,褐藻の中で最も早くに分岐することが示された。またギリシャ産と豪州産は遺伝的に顕著に異なり,種レベルで異なる可能性が示された。一方,両種の高次分類についてはSchmidt(1937)がD.mesarthrocarpumに基づきディスコスポランギウム科およびディスコスポランギウム目を提唱しており,命名法上これらの分類群を採用することになると考えられる。本年度は星状の配列をした葉緑体と,内部へ細胞質が陥入したピレノイドを持つ褐藻スキトタムヌス目の種のうち,Scytothamnus sp.,Splachnidium sp.を対象にピレノイドの微細構造を調べるとともにルビスコの局在を解析した。その結果,これらのピレノイドの細胞質陥入は葉緑体包膜部分で起こっており,葉緑体ER膜の部分で起こっているとするこれまでに報告とは異なることを明らかにした。この違いはこれまでの研究が通常の固定を行っていたのに対し,本研究では長里千香子博士(日本学術振興会特別研究員)の協力を得て,凍結置換法による構造解析を行ったことによると考えられる。また,Asteronemaでは,複数の葉緑体が集合して星形に見えるが,この際,ピレノイドの一部の葉緑体ER膜の部分で接着が起こることが示された。また,いずれの分類群においても,ほとんどのルビスコ分子はピレノイドに局在していることがルビスコ抗体による観察で示された。これらの結果は同じ褐藻類でも系統的に遠い関係にあるカヤモノリ目の場合と共通している。Schizocladia同様,褐藻類に近縁な海産の多細胞黄色植物を各地の沿岸から探索した。その結果,いくつかの候補種を得て,電子顕微鏡観察と分子系統学的解析を行うために現在単藻化を行っている。また,Schizocladia ischiensisについて,HPLC法によるカロチノイド類の色素分析を行い,現在近縁種との比較を進めている。

本年度は星形の葉緑体を持つ種である,Asterocladon interjectumの凍結置換法を用いた葉緑体微細構造の観察を行うとともに,蛍光抗体染色によるルビスコ分子の局在の観察を行った。また,原始的な褐藻類におけるカロチノイド類の色素分析を行うため,分子系統解析により最も初期に分岐することが示されているコリストカルプス科のChoristocarpus,同じく初期に分岐するイシゲ科のIshige,ファエオタムニオン科のPhaeostrophionなどの系統株の培養を行った.一方,褐藻類と近縁と考えられる,新規の海産多細胞黄色植物をニュージーランドより単離し,単藻培養株を確立した。この種につき,培養により生活史,光顕レベルの形態の観察を行い,またルビスコ遺伝子を用いた分子系統学的解析を行った。また,本種について,HPLCによるカロチノイドおよびクロロフィルの分子種の解析を行った.これらの解析の結果,本種はこれまでに知られている分類群としてはファエオタムニオン藻綱,褐藻綱,シゾクラディア藻綱と近縁であることが示された。このうち,ファエオタムニオン藻綱は多系統であることが示唆されているが,本種はファエオタムニオン藻綱のうちタイプを含まないクレードと最も近縁であったため,ファエオタムニオン藻綱には含まれない。したがって,その綱レベルの帰属については今後さらに解析が必要であることが明らかになった.核18SrDNA配列からGiraudyopsis stellifera(クリソメリス目)と近縁と考えられるNZ産多細胞黄色植物につき、培養下での形態、微細構造、光合成色素組成、分子系統学的解析を行った。本種の栄養細胞は粘質からなる細胞壁様構造を有し、成熟すると内部に1個の遊泳細胞を生じる。遊泳細胞は西洋梨形で顕著な眼点を持つ1個の葉緑体と不等長の側生2鞭毛を持つ。遊泳後基物に付着すると、基物に密着する匍匐糸状体に発達し、次いで分枝し柔組織様で高さ約10mmに達する直立細胞糸を発出する。葉緑体はガードルラメラで包まれた3重のチラコイドラメラを持ち、埋没型のピレノイドを有する。HPLC解析では、Chl.a, c、フコキサンチン、ヴィオラキサンチン、ディアトキサンチンなどの存在が確認された。Giraudyopsis属の含まれるクリソメリス目は、その綱レベルの所属が明らかではないが、葉緑体rbcL遺伝子による解析では、黄緑藻綱、褐藻綱、シゾクラディア藻綱、ファエオタムニオン藻綱などと近縁だが、いずれの綱にも属さず、Tetrasporopsis(所属不詳)とクレードを作る。一方ギリシャ産の褐藻Discosporagiumの培養株と豪州産の乾燥標本についてrbcL遺伝子による解析を行った結果,本属はこれまで褐藻で最も祖先的とされていたChoristocarpusと最も近縁であり,褐藻の中で最も早くに分岐することが示された。またギリシャ産と豪州産は遺伝的に顕著に異なり,種レベルで異なる可能性が示された。一方,両種の高次分類についてはSchmidt(1937)がD.mesarthrocarpumに基づきディスコスポランギウム科およびディスコスポランギウム目を提唱しており,命名法上これらの分類群を採用することになると考えられる。
A.ストロークの興業にみる音楽マネジメントの近代

今年度は、A.ストロークの戦前、戦後の音楽マネジメントについて、これまでの研究成果を単著『亡命者たちの上海楽壇:租界の音楽とバレエ』(音楽之友社、2019年2月発行)の第4章にまとめ刊行した。刊行にいたる執筆過程において、これまで発表してきた学術論文、口頭発表などにおけるストロークの興行活動リストに不足していた情報を見出し、現時点での「ストローク・全興行活動」の情報を更新することができた。次に、今年度はストロークの戦後のマネジメントについて、大阪朝日会館での公演プログラムに関しては、入手しうる全てのプログラムをスキャンし、精査することができた。1937年に日中戦争勃発のため興行活動の中止をよぎなくされた彼は、1951年のメニューヒン全国ツアーを契機に1956年まで米国の「オーケストラ・オブ・ジ・エアー」、「デ・ポーア黒人合唱団」をはじめとしてハイフェッツ、コルトーなど数々の世界的アーティストの公演のマネジメントを行っていた。いずれも破格の高額入場料であり、戦前の大型興行の手法を完全に復活させていたことが明らかになった。このストロークの戦後の活動拠点となった「大阪朝日会館」については、ストローク同様に戦時上海で活動していた「上海人脈」につらなる人々が戦後いち早く音楽、バレエ公演を行っている。小牧正英を中心に1947年『白鳥の湖』(国内初演は1946年の東京公演)、朝比奈隆、服部良一と小牧正英による1950年創作バレエ公演『グランドバレエ・アメリカ』、小牧バレエ団による1951年『ペトルーシュカ』国内初演と、バレエにおける記念碑的公演が相次いでいる。戦前、戦時に上海で培われた人的ネットワークが戦後の日本の楽壇とバレエ界を支えていたことが明らかになった。これまでのA.ストローク研究の成果を単著としてまとめることができた。まず第一に、A.ストロークの戦前、戦後の全興行リストを完成させる。これまでの興行確定作業、すなわち上海発行の外国語新聞情報を再度精査し、上海公演(日本公演がその前後に実施されていた)のアーティスト、会場、公演日、公演内容を確定する。そのリストに基づき、これまでに収集したストローク・プロデュース公演のプログラム(日本公演)および新聞広告(上海公演)のウェブ上公開に向けて、必要となる日本語、英語による解説の作成を進める。次に、戦後1947年から50年代にかけての大阪朝日会館における上海人脈による音楽、バレエ公演について、プログラム以外の関連雑誌記事などを収集し、公演の全体像の把握につとめる。もう一点として、ストロークを中心とした上海、大阪、その他アジア諸都市を結ぶ「貫戦期のアジア音楽ネットワーク」について、近年著しい進展をみせる上海史研究の海外研究者の協力を得て、さらなる一次資料を収集する。上海フランス租界関連の一次資料が本国フランスに存在することはわかっているが、劇場公演に関わる一次資料の有無や詳細を調査し、資料が確実に入手できると判断できる場合、フランス国内での資料調査を実施する。この資料調査には現地での共同調査者が不可欠であるため、在フランスの上海史研究者との協力関係を構築し、短期での集中的資料調査にむけて協議を続ける。今年度は、8月14日から21日までラトヴィア共和国を訪問、現地研究者とともに興行主、A.ストローク(Awsay Strok)の出生に関する現地調査を行った。その結果、国立ラトビア図書館のアーカイブに所蔵されているストロークの出生記録ならびに1897年に実施された帝政ロシアによる国勢調査に記載された家族構成、生誕地(ダウガフピルス市)を確認できた。そこでダウガフピルス市内の生誕地跡を国勢調査の地名にもとづき確認した。20世紀初頭にラトヴィア国内ではユダヤ人排斥運動が広がり、ストロークが生まれたユダヤ人集落もおよそ100年前には消滅していた。また、これまでストロークの生年は墓石などから1876年とされていたが、実際には1875年であったこと、また末弟のタンゴ作曲家、オスカー・ストロークについてはリガ市内やダウガフピルス市内でその功績が今日なお顕彰され続けていることが確認できた。資料調査としては、これまでに進めてきたストロークの興行一覧を再度、上海発行の外国語新聞により精査し、戦前の彼のマネジメントは1941年1月まで続いていたことが判明した。さらに戦後、メニューヒン招聘をきっかけに再開されたアジアツアーについては、東京公演の写真、および大阪公演のプログラムを確認し、それらの画像、文字データを入手することができた。ラトヴィア、および日本国内での資料調査の成果のなかで浮かび上がってきたストロークのビジネスパートナーであり、オーケストラ・マネージャーであった原善一郎(1900年生、1951年没)の活動と二人による共同マネジメントについては日本音楽学会第68回大会(京都教育大学)にて発表した。ラトヴィア共和国での資料調査は、現地研究者の協力を得たことで、短期間で最大の収穫をえることができた。ストロークの生誕地を訪ねることで、20世紀初頭にラトヴィア国内のユダヤ人人口が激減し、集落が消滅していたことが確認できた。アウセイ・ストロークは故国では忘れられているが、弟のタンゴ作曲家、オスカー・ストロークについては博物館展示や記念コンサートなど顕彰活動がさかんであることも判明した。当初予定していた、ストロークが主催した大阪公演のデータは、管理上の理由によって、その入力作業およびアーカイブ化ができなかったため次年度にもちこすこととなった。

刊行にいたる執筆過程において、これまで発表してきた学術論文、口頭発表などにおけるストロークの興行活動リストに不足していた情報を見出し、現時点での「ストローク・全興行活動」の情報を更新することができた。次に、今年度はストロークの戦後のマネジメントについて、大阪朝日会館での公演プログラムに関しては、入手しうる全てのプログラムをスキャンし、精査することができた。1937年に日中戦争勃発のため興行活動の中止をよぎなくされた彼は、1951年のメニューヒン全国ツアーを契機に1956年まで米国の「オーケストラ・オブ・ジ・エアー」、「デ・ポーア黒人合唱団」をはじめとしてハイフェッツ、コルトーなど数々の世界的アーティストの公演のマネジメントを行っていた。いずれも破格の高額入場料であり、戦前の大型興行の手法を完全に復活させていたことが明らかになった。このストロークの戦後の活動拠点となった「大阪朝日会館」については、ストローク同様に戦時上海で活動していた「上海人脈」につらなる人々が戦後いち早く音楽、バレエ公演を行っている。小牧正英を中心に1947年『白鳥の湖』(国内初演は1946年の東京公演)、朝比奈隆、服部良一と小牧正英による1950年創作バレエ公演『グランドバレエ・アメリカ』、小牧バレエ団による1951年『ペトルーシュカ』国内初演と、バレエにおける記念碑的公演が相次いでいる。戦前、戦時に上海で培われた人的ネットワークが戦後の日本の楽壇とバレエ界を支えていたことが明らかになった。これまでのA.ストローク研究の成果を単著としてまとめることができた。初年度はニューヨークあるいは上海での資料調査を予定していたが、確実に新資料が得られるラトヴィア共和国に調査地を変更した。次年度には当初予定していた公演プログラム等関係する資料所蔵地を現地調査する予定である。まず第一に、A.ストロークの戦前、戦後の全興行リストを完成させる。これまでの興行確定作業、すなわち上海発行の外国語新聞情報を再度精査し、上海公演(日本公演がその前後に実施されていた)のアーティスト、会場、公演日、公演内容を確定する。そのリストに基づき、これまでに収集したストローク・プロデュース公演のプログラム(日本公演)および新聞広告(上海公演)のウェブ上公開に向けて、必要となる日本語、英語による解説の作成を進める。次に、戦後1947年から50年代にかけての大阪朝日会館における上海人脈による音楽、バレエ公演について、プログラム以外の関連雑誌記事などを収集し、公演の全体像の把握につとめる。もう一点として、ストロークを中心とした上海、大阪、その他アジア諸都市を結ぶ「貫戦期のアジア音楽ネットワーク」について、近年著しい進展をみせる上海史研究の海外研究者の協力を得て、さらなる一次資料を収集する。上海フランス租界関連の一次資料が本国フランスに存在することはわかっているが、劇場公演に関わる一次資料の有無や詳細を調査し、資料が確実に入手できると判断できる場合、フランス国内での資料調査を実施する。この資料調査には現地での共同調査者が不可欠であるため、在フランスの上海史研究者との協力関係を構築し、短期での集中的資料
自立支援法施行後の保健部門の保健師による精神保健活動の個別支援のあり方の導出

本研究の目的は、障害者自立支援法(以下、自立支援法)施行後の行政の保健部門に所属している保健師による精神保健活動における個別支援の実態を明らかにし、今後のあり方への示唆を導出することである。市町村の保健部門に所属している保健師3名に半構成的面接を実施し、個別支援の内容を聴取し、予防的意義の観点から質的帰納的に検討した。全体分析の結果、「電話や面接ではわからない生活実態を把握し、それについて本人や家族と自分の共通認識を取るために、家庭訪問という手段を用いる」など11の予防的意義の高い個別支援の実態が明らかとなった。保健師は、行政保健師としての強みを活かして、支援を行うという特徴が考えられた。産休及び育休取得に伴い研究を中断していたため、平成24年度の研究実績はない。保健部門が担う精神保健活動の中でも、保健師の特徴である予防的対応を念頭に置いた、予防的意義が高いと考えられる個別支援に着目することで、より詳細な実態が明らかになると考える。本研究は2つの調査により構成されていたが、支援対象者の了解を得られない等の倫理的配慮により、調査2を実施することができず、調査1のみとなった。【調査1】自立支援法施行後の保健部門の保健師による精神保健活動における個別支援の実態の把握<方法>(1)調査対象者:市町村の保健部門に所属している保健師。(2)調査方法及び調査項目:半構成的面接による面接調査により、個別支援の内容、自立支援法施行前と施行後の違い、自立支援法があることによるメリット、個別支援における、自分が考える予防的意義等を聴取した。(3)分析方法:対象者ごとに、聴取した内容から個別支援の実態を整理し、予防的意義の観点から質的帰納的に検討した。個別分析の後、全体分析を行った。<結果>(1)対象者:市町村の保健部門に所属している保健師3名。(2)全体分析:『家庭訪問という手段を通し、電話や面接ではわからない本人の生活実態を把握する』『本人だけでなく、家族や関係者に対しても支援を行う』などの『予防的意義の高い個別支援』の実態があった。<考察>保健部門の保健師は、自立支援法だけでなく、法律や当該自治体の制度を熟知し、そのメリットを存分に生かしながら、個別支援を行っているという特徴があった。また話を聞くだけではなく、自分の目で実態を把握することを重視し、そのために家庭訪問という行政保健師ならではの手段を活かして、支援を行うという特徴も考えられた。本研究の目的は、障害者自立支援法(以下、自立支援法)施行後の行政の保健部門に所属している保健師による精神保健活動における個別支援の実態を明らかにし、今後の在り方への示唆を導出することである。精神保健福祉活動において、平成18年4月に自立支援法が施行され、福祉部門が担う業務が多くなった。しかし福祉部門では申請や相談があって初めて対象者に関わるという措置的な対応が主となり、予防的に対応することが難しい。予防的対応は保健師活動の特徴であり、その予防的対応が生かされるのは保健部門であると考える。したがって、保健部門の保健師による精神保健活動における個別支援の実施に際しては、「保健部門の保健師が担う必要がある」という判断が存在すると考える。つまり、措置的な対応を主とした個別支援ではなく、保健部門の保健師が実施する個別支援は、予防的対応を念頭に置いた予防的意義の高い個別支援であると考えられる。本研究は、2つの調査で構成される。本年度は初年度として調査1に取り組んだ。調査1では、自立支援法施行後も、精神保健活動における個別支援を行っている保健部門の保健師を対象とし、自立支援法施行後の保健部門の保健師による精神保健活動における個別支援の実態を明らかにすることを目的としている。方法として、国内外の文献および先行研究の知見の整理を行うとともに、本研究に関連する自らの先行研究を学術集会にて発表することで、本研究に関連する意見交換や情報収集を行った。それらより、自立支援法施行前と施行後の精神保健活動における個別支援の内容等について整理を行った。次年度は、調査1を実施しながら、随時調査2と全体分析を進めていく。調査2では、調査1で明らかになった実態が、対象のニーズに即しているかという観点からの検証を行う予定である。平成23年度の時点でやや遅れており、かつ産休及び育休の取得に伴い、平成24年度は研究を中断していたため。当初の目的としては、平成23年度中に、調査1のインタビュー調査まで終了する予定であった。

しかし調査自治体の選定がなかなか進まず、インタビュー調査に至らず、文献検討と自らの先行研究の学術集会での発表にとどまった。研究計画・方法は変更しない。次年度は調査1を引き続き実施し、随時調査2と全体分析を進めていく。次年度は調査1及び調査2のインタビュー調査のための旅費の支出が、増加することが見込まれる。調査に伴い、データ整理補助やテープ起こし等に関わる費用の増加が見込まれる。よって、次年度使用額も含め、予定通りの遂行が見込まれる。本年度は、インタビュー調査に伴う旅費の支出が予定よりも下回ったため、次年度使用額が生じた。
DNAプローブによる住血微生物感染症の早期診断と鑑別法の開発

本研究は、高感度で特異性の高い家畜の住血微生物病診断法の開発を目的として、DNA診断法(DNAプローブ、PCR)の開発と実用化を目指した試験研究である。Theileria sergentiについては、2種の蛋白質(p32、Hsp70)をコードするの遺伝子をクローニングしてその全塩基配列をそれぞれ決定した。特に、p32遺伝子をDNAプローブとして、末梢血液中の原虫の高感度検出を可能にした。さらに、T.sergenti遺伝子多型もこのDNAプローブを用いて解析を行い、野外株での多型性を明らかにした。これに引き続き、p32遺伝子を標的としたPCR法を開発した。本法を多数の野外検体に応用した結果、感度、特異性とも十分であることが確認された。また、T.sergenti p32の複数の対立遺伝子(Allele)型を特異的に増幅できるPCR法も開発し、これにより実験継代株あるいは野外株中に複数の遺伝子型が混在していることを明らかにした。また、本法によって、牛における持続感染や牛・ダニ間での感染サイクル中で原虫集団の変換が起こることが明らかにされた。このように、本研究で開発されたDNAプローブおよびPCRによる原虫検出法は、特異性・感度の点で極めて優れているのみならず、原虫遺伝子型解析も可能とした。本法は小型ピロプラズマ病の診断のみならず、各種の分子疫学的研究にも使える方法で、将来のワクチン開発へ向けての基礎的研究、野外の実態調査に広く応用できる方法であろう。なお、本研究で開発されたPCR法は実用化の段階まで開発が進み、野外での小型ピロプラズマ感染症の高感度診断法として普及しつつある。本年度はまず、染色体DNAプローブをビオチン化し、その反応性を検討した。このプローブを用いた場合、原虫感染後約7日目から特異的な反応が認められた。また、国内の分離株12株を試料とした場合、ドットブロットハイブリダイゼーションで0.10.2μgのDNAが検出できた。つぎに、すでにcDNAクローニングと塩基配列が決定されている原虫表面の主要抗原であるp32の遺伝子配列(平成4年度一般C課題番号04660314)から、PCR用プライマーを設計した。このプライマーを用いて原虫DNA(70ng70μg)を鋳型としてPCRを実施したところ、852塩基対の断片が検出できた。この増幅産物はp32cDNAプローブとドットブロット法で反応したことから、p32DNA遺伝子が特異的に増幅されたものであることが確認された。全国各地から収集した株、および韓国、豪州から入手したタイレリア株のDNAを調製し、PCRを行ったところ同一の長さのDNA断片が検出された。また、他のウシ由来住血微生物、バベシアおよびアナプラズマのDNAからの増幅は陰性であり、PCRの特異性が確認された。検出限界は、感染血液100μ1を用いての検出系では寄生率0.0004%であった。また、PCR反応産物をマイクロプレートに固相化し、ビオチン化cDNAとハイブリダイズさせ、酵素標識アビジンと基質により検出するマイクロプレート法を検討した。この方法でも、PCR産物とプローブとの特異的反応が検出できた。さらに、ピロプラズムの70kDa蛋白質抗原遺伝子をクローニングし、塩基配列を決定したところ、本蛋白質が生物に広く存在する熱ショック蛋白質(hsp70)であることが判明した。そのアミノ酸あるいは塩基配列の非保存領域が診断等に利用可能かさらに検討を加えている。ウシの赤血球寄生性原虫であるTheileriasergentiおよびBabesia ovataのリボゾームRNA遺伝子の塩基配列を決定するため、その保存領域の塩基配列情報をもとにプライマーを設計しPCR法で染色体DNAからその一部を増幅した。

PCR産物はプラスミドベクターに組み込み、クローニング後、塩基配列を決定した。その結果、2種の原虫のrRNA遺伝子のうち約300塩基対の配列が解読できた。これを、遺伝子データバンクに登録されているマラリア、タイレリア原虫などのsmall subunit rRNA遺伝子塩基配列と比較したところ、保存されている塩基が約70%であり、種特異的な配列も確認された。前年度に開発したT. sergenti特異的プライマーによるPCR法について、野外応用の可能性について予備的な実験を行った。すなわち、北海道新得畜産試験場で生産飼養されている牛についてPCR法による原虫検出を行った。その結果、5月中旬の放牧以前にPCR陽性となる個体がしばしば認められた。疫学的な追跡調査の結果、多くは冬期間の舎内飼養時に何らかの機会に感染を受けていることが明らかとなった。今後その感染経路を明らかにすることが、本病防除の上で不可欠と考えられた。また、形態、生物学的に牛小型ピロプラズマに類似する馬のBabesia equiについてもDNA診断、ウシのタイレリア、バベシアとの鑑別点を明らかにするために、プローブ開発を目的として遺伝子クローニングを行った。cDNAクローニングの結果、2種のcDNAクローンを得ることができた。そのうち、70kDAの蛋白質をコードする遺伝子は前年度クローニングしたT. sergentiのHsp70とサザンブロット法で反応することから、Hsp70と同定された。前年度までにTheileria sergentiの高感度検出を可能とする主要表面抗原(p32)遺伝子を標的としたPCRを開発した。p32遺伝子には現在まで3種の対立遺伝子(allele)の存在が知られているが、PCRでの型別が可能か、また小型ピロプラズマ感染症の疫学研究に応用しうるかを今年度は主に検討した。すなわち池田型、千歳型、buffeli型のalleleに特異的な塩基配列からプライマーを設計し、PCRの反応条件を検討した結果、3つの型が特異的に増幅しうることが確認された。型の特異性は増幅産物を制限酵素で切断したパターンによって確認した。さらに、日本国内で分離された野外株および実験継代株計29株について本法で検査したところ、5株を除いて複数のp32 alleleが検出され、多数の株は複数のT.sergenti原虫が混在していることが明らかとなった。また、中国、韓国など東アジア諸国で分離されたT.sergenti株のDNAを解析したところ、いずれも池田型、千歳型、buffeli型の2-3型の混合であることが明らかにできた。また、本PCR法によって、持続感染牛体内で優勢に出現する原虫のalleleの変換が起こること、ダニ・牛間での病原体の伝播によっても同様な現象が起こることも確認できた。今回開発されたallele特異的PCR法は野外での小型ピロプラズマ感染症の分子疫学的調査に極めて有効な手法で、今後のワクチン開発と効果判定など防圧法の開発上重要な解析データを提供しうる手法である。本法はほぼ実用化の段階に達していると考えられ、今後野外調査での普及を図ってゆく。
芸術・文化の発信・交流を促す学習環境のデザインとワークシヨップ教材の実践・評価

異文化理解・総合・マルチメディアパッケージ教材の開発・実践・評価に関する2年間の研究は、以下のように整理できる。1.「子どもによる子どものための芸術・文化発信プロジェクト」の教材開発として、「お茶箱プロジェクト」(インドネシア共和国・バリ・ウブド小学5年生対象、イタリア共和国・フィレンツェ市小学1年生対象、越後妻有アートトリエンナーレ)と「なりきりえまきプロジェクト」(同・フィレンツェ大学語学センター学生対象、同トリエンナーレ)の2つの異文化理解ワークショップを開発し、各地で実践し、ワークショップという共同的/協働的な学びの有効性を実証し、確認できた。2.「お茶箱プロジェクト」では、日本の茶道の仕組み(しつらい)を使って、ものの来歴を「語る」ということを通して、ことば(語り合う・表現し合う)と学習環境のデザインの関係を明らかにした。「なりきりえまきプロジェクト」では、日本美術独特の絵巻を題材にして、絵画における時間表現(現代のアニメに通じる)を登場人物に変身する(なりきる)という身体化と重ねて行うワークショップを開発した。これらは、異文化理解教育の方法に有効であった。3.研究成果の社会還元の方法として、展覧会に注目し、上記の内容を「越後妻有アートトリエンナーレ2006」(新潟県十日町市)で「学びの繭」展として発表した。会場での空間及び映像展示は非常に美しく心地よいという参観者の評価を得た。同時に、会場当番にあたった制作スタッフ・学生スタッフと来場者との多様なコミュニケーションによって、研究の経過の公開と共有の場のみならず、さらなる共同の学びの場となるという「(学びの)入れ子構造」がつくられることがわかった。今年度の目標である、I.芸術・文化の発信・交流を促す学習環境のデザインとワークショップ教材の開発・実践・評価に関する基礎理論及び調査研究とII.芸術・文化の発信・交流を促すワークショップ・パッケージの開発とプロジェクトの実践について、以下のようなワークショップ実践を通して考察した。(1)「これもつかえる・あれもつかえる身体をつつむかたち」(鹿児島大学総合研究博物館第5回自然体験ツアーの小学生・衣服ワークショップ、2005.7.30、茂木・佐藤・下原)(2)「お茶箱プロジェクト-わたしのおもてなしレシピ-」(インドネシア共和国・バリ・ウブドの小学生の異文化理解・ワークショップ、2005.8-18-19、茂木・佐藤・下原・原田・上田)(3)「モンゴル・ソロンゴ・プロジェクト」(「こども国際会議2005」の実施。2005.8.4、8.21,8.27-28。モンゴルと香川県の小中学生が異文化理解を目的としたテレビ会議を実施。苅宿・上田)(4)「国際美術教育実践交流アート・ランチ・プロジェクト」(世界9カ国以上の美術教育研究者・実践者を結んで、それぞれの国の特色あるランチのデザイン・プロジェクト。福本)(5)「キッズゲルニカ・プロジェクト」(ゲルニカ・サイズのキャンバスに平和の壁画を描く国際プロジェクト。(2)と同時に、展覧会・ワークショップを実施。2005.8-15-20。阿部)(6)その他(「ラーニングアート」を2005.12.3-4にCSKで実施。上田・佐藤・苅宿・原田・宮田。「文化の壁を超えて創造的に学ぶ能力」を身に付けるのに有効な学習環境の構築)をテーマとして、「Meta-Cognitive Video(映像制作ワークショップ)」等のワークショップを実施。宮田」。茂木・福本・阿部・佐藤は、上記の成果について、InSEAポルトガル大会2006(於ポルトガル・Viseu)において発表。1.

「子どもによる子どものための芸術・文化発信プロジェクト」の教材開発として、「お茶箱プロジェクト」(インドネシア共和国・バリ・ウブド小学5年生対象、イタリア共和国・フィレンツェ市小学1年生対象、越後妻有アートトリエンナーレ)と「なりきりえまきプロジェクト」(同・フィレンツェ大学語学センター学生対象、同トリエンナーレ)の2つの異文化理解ワークショップを開発し、各地で実践し、ワークショップという共同的/協働的な学びの有効性を実証し、確認できた。2.「お茶箱プロジェクト」では、日本の茶道の仕組み(しつらい)を使って、ものの来歴を「語る」ということを通して、ことば(語り合う・表現し合う)と学習環境のデザインの関係を明らかにした。「なりきりえまきプロジェクト」では、日本美術独特の絵巻を題材にして、絵画における時間表現(現代のアニメに通じる)を登場人物に変身する(なりきる)という身体化と重ねて行うワークショップを開発した。これらは、異文化理解教育の方法に有効であった。3.研究成果の社会還元の方法として、展覧会に注目し、上記の内容を「越後妻有アートトリエンナーレ2006」(新潟県十日町市)で「学びの繭」展として発表した。会場での空間及び映像展示は非常に美しく心地よいという参観者の評価を得た。同時に、会場当番にあたった制作スタッフ・学生スタッフと来場者との多様なコミュニケーションによって、研究の経過の公開と共有の場のみならず、さらなる共同の学びの場となるという「(学びの)入れ子構造」がつくられることがわかった。
花のホメオティック遺伝子のエピジェネティックな発現制御に関わる分子機構の解明

ペチュニアのクラスCホメオティック遺伝子pMADS3は、雄ずいおよび雌ずいに特異的に発現し、その発現は第2イントロン中の転写制御領域を介して制御されている。pMADS3のゲノム配列を含むDNA断片(pMADS3:GUS)をペチュニアに導入すると、花弁、がく片、茎葉に内在性pMADS3がエクトピック発現する現象(ect-pMADS3)を見出した。類似の現象の報告はなく、新奇なタイプのエピジェネティック転写制御と考えられたため、分子機構解明を行った。ect-pMADS3表現型発現には、pMADS3第2イントロン(4kb)が導入遺伝子に含まれることが必須であり、導入遺伝子を失った後代個体にもect-pMADS3表現型が持続した。さらに、第2イントロンのセンスおよびアンチセンス配列をそれぞれ含む異常RNAの蓄積が認められた。これらのことから、我々は、本現象にRNA-directed DNA Methylation (RdDM)の関与を推測した。その検証のため、第2イントロンの部分配列を標的とした逆反復配列(Inverted repeat, IR)発現によってRdDMを誘導し、ect-pMADS3現象誘導の有無を調べた。その結果、部分領域II(1kb)を標的とした形質転換系統において特異的に、pMADS3エクトピック発現が誘導された。さらに、領域IIを細分したDNA領域をIRの標的とすることにより、pMADS3エクトピック発現誘導に必要十分な300bpの部分配列を特定した。また、pMADS3エクトピック発現を示した系統では、IRの標的としたDNA配列のメチル化が確認された。これらの結果は、pMADS3のエクトピック発現に転写制御領域を含むDNA配列のRdDMを介した制御が関与し、DNAメチル化が遺伝子の転写抑制だけでなく、転写活性化を誘導する場合もあることを示している。本研究では、ペチュニアの花のクラスCホメオティック遺伝子pMADS3の転写制御領域を含むイントロン2を含む部分ゲノムDNA配列をペチュニアに導入すると、内在性pMADS3が花弁、がく片、葉にエクトピック発現する現象を解析している。本年度は下記の結果を得た。1.T0世代のpMADS3エクトピック発現系統(ect-pMADS3系統)において、二つの対立pMADS3遺伝子座の発現を個別にRT-PCRで解析した結果、両遺伝子座は独立にエピジェネティック制御を受けていることが明らかになった。2.T1世代ではT0世代とは異なる遺伝子座がエクトピック発現することがわかり、世代交代時にリセットされていることが示唆された。3.ect-pMADS3系統において、pMADS3配列を含むdsRNAおよびsiRNAが検出され、これらのRNA分子がect-pMADS3形質発現の引き金となっていることが示唆された。4.ect-pMADS3現象におけるdsRNAおよびsiRNAなどのRNAトリガー分子の関与を証明するため、4kbの長さをもつpMADS3イントロン2を1kbずつに4分割し、それぞれの領域に対応する逆反復配列をCaMV35Sプロモーターの制御下に発現させてRNAi様の反応を発動させるための形質転換体の作製に着手した。5.pMADS3イントロン2領域のDNAメチル化を配列非特異的メチル化感受性制限酵素mcrBCを用いて解析したが、現時点ではect-pMADS3現象と関係づけられるDNAメチル化は検出されていない。6.ect-pMADS3現象へのcurly leafホモログの関与について調べるため、3種類のPhCLF1,2,3のそれぞれのcDNA配列約400bpをバイナリーベクターpHELLSGATE8またはpKANNIBALに組み込んだ形質転換用コンストラクトを作製した。

ペチュニアのクラスCホメオティック遺伝子pMADS3は雄ずいおよび雌ずいに特異的に発現し、その組織特異的発現はイントロン2中の転写制御領域を介して制御されている。pMADS3のゲノムDNA断片をペチュニアに導入することにより、pMADS3サイレンシング系統、および、花弁とがく片、茎葉に内在性pMADS3がエクトピック発現する(ect-pMADS3)系統が見出され、新規なエピジェネティック転写制御であると考えられた。昨年度までの解析により、ect-pMADS3表現型の発現には、pMADS3イントロン2が導入遺伝子に含まれていることが必須であり、分離によって導入遺伝子を失った後代にもect-pMADS3表現型が現れることなどが示されている。さらに、ect-pMADS3表現型を示す形質転換体では、イントロン2配列を含む異常RNAの蓄積が認められたことから、RNA-directed DNA Methylation(RdDM)の関与が推測された。今年度は、これについて検証するため、イントロン2の部分配列を標的とした逆反復配列を発現させて、RdDMを誘導することにより、ect-pMADS3現象を再現することができるか検討した。その結果、イントロン2(4kb)の部分配列(1kb)の逆反復配列を発現させた形質転換系統において、pMADS3エクトピック発現が誘導されることが示された。また、これらの系統では、逆反復配列の標的としたDNA配列がメチル化されていることが確認された。これらの結果は、pMADS3のエクトピック発現に、転写制御領域を含むDNA配列のRdDMを介したエピジェネティック制御が関与していることを示している。
RNA修飾によるがん悪性化機構の解明

我々はこれまでの研究でRNAのメチル化酵素の一つであるMETTL3の発現が膵がんの悪性化に繋がることを明らかにしている。すなわち膵がんの自然発がんマウスにMETTL3を過剰発現すると、がんの増殖が非常に早く、さらに肝臓などへの遠隔転移も引き起こすことを明らかにした。ヒトの臨床検体を用いた解析においてもMETTL3が高発現の膵がん患者は予後が悪く、マウスのデータと一致していることを確認している。我々はさらにMETTL3の発現レベルが予後に影響を与えるがん種はそのほかに胃がん、肺がんであることを確認している。そこで本研究ではRNAのメチル化がこれらのがん種において悪性化を促すメカニズムの解明を目的とする。
ヒト毛盤の形態学的基盤の確立

メルケル細胞・神経複合体が密集する触覚受容器である毛盤の頻度と大きさに注目し、肉眼解剖実習体の側腹部と前腕部からそれぞれ得られた皮膚について走査電子顕微鏡で観察した。毛盤の頻度は前腕部の方が側腹部よりも高く、毛盤の面積は側腹部の方が前腕部よりも大きかった。さらに皮膚生検を施行し、血管血流観察用顕微鏡で確認できた白色調の領域は毛盤に相当することを確認した。ヒト毛盤の頻度や大きさを算出し、非侵襲的に同定する方法を診断学的分野で確立することを目指した。毛盤は哺乳動物の皮膚にみられる触覚受容器のひとつで、メルケル細胞・神経複合体が表皮基底部に密集する構造である。毛盤の形態は種によって異なり、ラットでは1本の剛毛の周囲を包む明瞭な構造であるが、ヒトでは曖昧な隆起として存在する。申請者はこれまでに、ヒトにおける毛盤の存在とその微細構造を光学顕微鏡(光顕)や走査電子顕微鏡(走査電顕)を用いて初めて明らかにした(Orime M et al., J Invest Dermatol, 2013, 133: 2108-11)。一方でヒトの毛盤では毛包を必ずしも伴わないこと、隆起がなだらかである点が識別を困難にしており、改めて形態学的同定法を検討し確立する必要があり、さらに毛盤の分布や密度についても採取面積の広い調査が必要である。また、メルケル細胞やケラチノサイトに分布する無髄神経線維の微細分布はまだ不明な点が多く、構造と機能の連関に関して研究すべき課題が多く残されている。さらに、毛盤が単純な触覚受容器だけでなく自由神経終末の関与する痛覚やかゆみなどを含めた複雑な感覚器として働いている可能性がある。そこで、肉眼解剖実習体(64歳男性と65歳女性)の腹部と前腕部からそれぞれ得られた皮膚について走査電顕で観察した。その結果、毛盤の頻度については個体間でばらつきがあるものの、前腕部が腹部よりも高かった。毛盤の大きさについては個体間で差がみられなかった。64歳男性における毛盤の面積については、前腕の毛盤の方が腹部より有意に小さかった。未知の問題が多く残されている、有毛部皮膚の感覚受容器である毛盤について、本研究では形態学的な観点から問題を解決し、皮膚の感覚器としての毛盤の基盤を確立する。個体差はあるものの、ヒトの有毛部において毛盤の分布にはある程度の傾向があると予想される。1度の走査電子顕微鏡で観察できる皮膚面積は約3x3mm2であり、毛盤の分布や頻度を解析するために有意な面積を観察するには相当の時間と労力がかかる。しかし、この方法は実際に毛盤の立体構造を確認できるので光顕で観察を行うより正確で、間違えが少ないと考えられる。このような方法にもかかわらず2個体それぞれにおいて2部位を解析できたことは、概ね順調は進歩状況と判断できる。申請者はこれまでに、ヒトにおける毛盤の存在とその微細構造を光学顕微鏡(光顕)と走査電子顕微鏡(走査電顕)を用いて初めて明らかにした(Orime M et al, J Invest Dermatol, 2013, 133: 2108-11)。一方でヒトの毛盤では必ずしも毛包を伴わない点や隆起がなだらかである点が識別を困難にしており、改めて形態学的同定法を検討し確立する必要がある。そこで、肉眼解剖実習体(64歳男性、65歳女性、73歳女性)の側腹部と前腕部からそれぞれ得られた皮膚について走査電顕で観察した。その結果、毛盤の頻度はいずれの個体においても前腕部の方が側腹部よりも高く、毛盤の面積については側腹部の方が前腕部よりも大きい傾向がみられた。毛盤の頻度と皮膚感覚の鋭敏さは関連していると考えられた。また、過去の報告と比較すると、本研究の方が毛盤の頻度は高く、平均面積は小さかった。走査電顕を用いることで光顕では判別できない小さな毛盤も検出できたためと考えられた。さらに非侵襲的にヒト毛盤を同定する手法を確立するため、血管血流観察用顕微鏡を用いて31歳男性の前腕部皮膚表面を観察したところ、内部にごく細い血管を伴う、全体には血流の乏しい白色調の領域が確認できた。同部分を皮膚生検し走査電顕で観察したところ、毛盤を囲む太い表皮突起の部分が血管カメラで白色調の領域として観察され、毛盤内を走行している血管が血管カメラで細い血管として観察された。ヒト毛盤の頻度や大きさを算出し、さらに非侵襲的に同定する方法を診断学的分野で確立したことにより、複雑な感覚受容器と考えられる毛盤における感覚メカニズムの解明に大いに貢献できる。

ヒト毛盤の頻度や大きさを算出し、非侵襲的に同定する方法を診断学的分野で確立することを目指した。今後は、部位数を増やすことで毛盤の頻度・大きさを正確に算出する、また、メルケル細胞やケラチノサイトに分布する無髄神経線維の微細分布はまだ不明な点が多く、構造と機能の連関に関して研究すべき課題が多く残されている。さらに、毛盤が単純な触覚受容器だけでなく自由神経終末の関与する痛覚やかゆみなどを含めた複雑な感覚器として働いている可能性がある。今後はバイオプシー標本を得て侵害受容器としての関与を透過電子顕微鏡等を用いて詳しい解析を行う予定である。皮膚科学今年度の研究内容では、肉眼解剖実習体の皮膚について走査電子顕微鏡で分布と頻度を調べたので、試料作成や観察にかかる費用を抑えることができたため。次年度はヒト皮膚の生検標本を用いて、走査電子顕微鏡に加えて透過電子顕微鏡を用いた観察、研究を行う。