hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
一次元量子水素の直接観察/経路積分による理論モデル化

多孔性配位高分子([Ca(C4O4)(H2O)] n)(PCP 1)の一次元細孔内に制約されたH2およびD2分子について,放射光(SPring8 BL02B2ビームライン)による粉末X線構造解析,低温吸着等温線測定,およびFeynmanの経路積分法を用いた分子シミュレーションを実施した。これらの実験・分子シミュレーションにより,一次元系において分子の位置不確定性により発現する量子力学的効果を観測することに成功した。多孔性配位高分子の一種である[Ca(C_4O_4)(H_2O)]_nは,スクアリン酸を配位子とするCa錯体であり,0.34×0.34nmの一次元細孔を有している。本研究課題ではその一次元細孔内に制約された水素および重水素をMEM/Rietveld解析によって直接観察することを目的とし,in situによるX線回折パターンの測定(SPring8, BL02B2ビームライン)を行った。温度15-70Kにおいて水素ガスまたは重水素ガスを圧力100kPaまで導入し,X線回折パターンの測定を行ったところ,分子吸着によって全ての反射強度が大幅に低下する一方で,反射角はシフトしない事が分かった。すなわち,分子の吸着前後においてCa錯体のフレームワーク構造はほとんど変化せず,分子の吸着に伴う電子密度分布のコントラストの低下が,反射強度の低下をもたらしたと考えられる。ここで,水素と重水素の吸着に伴う反射強度が大きく異なることが特徴的と言える。これは,細孔内における重水素密度が水素よりも高いことを示唆しており,量子力学的効果に帰すことができる。また,各X線回折パターンのLe Bail解析を行ったところ,温度70Kでは,degas後,水素吸着後,および重水素吸着後の各反射における構造因子の相対比が完全に一致した。一方,温度が50K以下となると,degas後,水素吸着後,および重水素吸着後の各状態において,構造因子の相対比がそれぞれ異なる反射が見られる事が分かった。このことは,Ca錯体の細孔内で吸着分子の配置がより規則的となり,かつ水素と重水素で異なる構造となっている事を示唆している。現在,MEM/Rietveld解析によってCa錯体の細孔内に制約された水素および重水素分子の構造解析を行い,その位置不確定性を直接観察すると同時に,経路積分モンテカルロシミュレーションによる吸着メカニズムの解明を進めている。
フンボルトの陶冶理論に基づく教授学体系の構築

学校で教師は何をどのように教えるのかを問う教授学研究において、人間形成論は重要な観点と捉えられてきたものの、未だ学説史的検討の余地を大幅に残している。本研究は、19世紀ドイツ=プロイセンにおけるフンボルト(W.v.Humboldt)の教育改革の構想と展開に着目し、彼の陶冶理論(Bildungstheorie)に基づく教授学体系を明らかにすることで、上述の教授学的根本問題に対する歴史的解を導くことを目的としている。
歯周靭帯支持インプラントを目指した歯周靭帯内細胞の増殖・分化因子の同定

我々は骨支持インプラントを超える歯周靭帯支持の次世代インプラントを世界に先駆けて開発するため,間葉系細胞内で外腔と独立して存在する生体内で唯一の上皮細胞群であるマラッセ上皮遺残由来細胞(ME)と歯周靭帯線維芽細胞(PLF)の細胞生物学的特性を解析し,増殖・分化制御因子を遺伝子およびタンパクレベルで同定することを目指し,それぞれの細胞の無血清培養系を確立することにより検討を加えてきた。その結果,MEはFGF-7/KGF受容体であるFGFR2-(IIIb)遺伝子のみを発現していることが明らかとなった。また,PLFがFGF-7/KGF遺伝子および蛋白を発現していることも明確であったことから,我々の確立した無血清培地が細胞間での様々な蛋白因子を解明する上で極めて有用であることが示唆された。さらに,MEとPLFはFGF-7/KGF-FGFR2-(IIIb)/KGF受容体系を介した上皮-間葉相互作用によりパラクライン的に制御されている可能性が示され,歯周靭帯再生機構を解明し歯周靭帯支持の次世代インプラントを開発するうえでの有益な知見を集積することができた。平成12年度には,歯周靭帯の再生機構を解明するための基礎的知見を集積することを目指し,ヒト歯周靭帯由来線維芽細胞(PLF)およびヒト歯周靭帯由来上皮細胞(マラッセ上皮遺残由来細胞:ME)の無血清培養系を確立し,growth factorを用いたgrowth assay試験を行うことにより以下の結果を得た。3)上記無血清培養系によりgrowthfactorを用いたgrowth assay試験を行ったところ,PLFの増殖・分化にfibroblast growthfactor(FGF)-1,-2-FGF receptor(FGFR)1系が重要な働きをしていることが明らかになった。MEの増殖はFGF-1およびFGF-7/KGFにより濃度依存的に促進されたが,FGF-2では促進されなかった。一方,PLFの増殖はFGF-1,-2により促進されたが,FGF-7/KGFでは促進されなかった。
卵膜由来間葉系幹細胞を用いた炎症性腸疾患に対する新規治療法の開発

近年、間葉系幹細胞(MSC)を用いた細胞治療が注目されており、その多くは自己骨髄由来のMSCが用いられている。しかしながら、急性期における必要な細胞数の確保、採取の際の身体への侵襲などの問題がある。一方、分娩時に通常廃棄されている卵膜にもMSCが存在し、非侵襲的に大量に得ることができる。本研究では、ラットdextran sulfatesodium (DSS)誘発腸炎モデルに対するヒト卵膜由来MSC移植の効果を検討した。ヒト卵膜由来MSCの投与により、DSSによる強い腸管粘膜障害が抑制されていることが示された。卵膜は細胞治療における新たな細胞ソースして期待される。ヒト卵膜由来間葉系幹細胞を分離・培養し,増殖能・多分化能を確認した.また,特徴的な表面抗原を発現していることも確認できた.炎症性腸疾患モデルの作成法を確立し,そのモデルに対してヒト羊膜由来間葉系幹細胞を投与したところ,体重減少が抑制され,疾患活動性や大腸の長さが有意に改善していることが確認された.また,細胞投与によって直腸における炎症性サイトカインの発現が抑制され,直腸におけるマクロファージ細胞の浸潤も抑制されていた.以上のことから,ヒト羊膜由来間葉系幹細胞が炎症性腸疾患モデルラットの病態を改善することが明らかとなった.前年度に動物モデルに対する卵膜間葉系幹細胞(MSC)の効果を明らかにしたが、本年度は主に培養系を用いてその機序について解析を行った。卵膜MSCによる炎症性サイトカインmRNA発現抑制の機序を詳細に検討するため、TLR4を恒常的に発現するHEK293/TLR4細胞およびマウス由来マクロファージであるRAW264.7細胞を卵膜MSCと共培養、または卵膜MSCの培養上清(MSC-CM)により培養し、LPSで刺激後のTNF-αのmRNAの発現量を調べた。MSCとの共培養、MSC-CMによる培養のいずれにおいてもTNF-αのmRNA発現が抑制されることを確認した。MSC-CM中での培養でも抑制効果を示したことから、MSCが分泌する液性因子が免疫調節作用に関与する可能性が示唆された。次に、TNF-αのmRNAの転写制御に関与するとされているNF-κB経路への影響を調べるため、NF-κB応答配列を有するレポーター遺伝子を用いてLuciferase Assayを行った。TNF-α刺激後のHEK293細胞、LPS刺激後のHEK293/TLR4細胞において、MSC-CM中での培養によりNFκB活性が抑制されることが明らかとなった。さらに、NF-κB経路の上流に位置するIκBのリン酸化に卵膜MSCが与える影響を検討するため、HEK293/TLR4細胞におけるIκBのリン酸化に対するMSC-CMによる変化をWestern Blottingを用いて確認したところ、IκBのリン酸化に変化は認められなかった。このことから、IκBのリン酸化より下流、NF-κBの応答配列への結合までの過程に、MSCが分泌した液性因子が何らかの影響を及ぼしている可能性が示唆された。初年度は,卵膜由来間葉系幹細胞の経静脈的投与がラット炎症性腸疾患モデルに対してその病態を改善することを明らかにした.また,前年度の研究では,in vitroの系で間葉系幹細胞の培養上清が抗炎症効果を示すことが明らかとなった,最終年度は,培養上清の注腸投与が炎症性腸疾患の動物モデルに対して効果を示すのか確認し,また培養上清に含まれる重要な因子を同定することを目的として実験を行った.動物モデルはラットにTNBSを注腸投与して作成し,同日より卵膜由来間葉系幹細胞から得られた培養上清を3日間連続で注腸投与した.TNBS投与7日後に屠殺し,内視鏡学的評価ならびに病理学的評価を行った.コントロール群に比べ,培養上清投与群では有意に内視鏡スコアが改善していた.病理スコアは培養上清投与群で改善傾向にあり,免疫組織染色では好中球ならびにマクロファージ,Tリンパ球の直腸への浸潤が有意に減少していた.また,直腸における炎症性サイトカインの発現を定量的PCR法で解析したところ,培養上清の投与によりTNFaの発現が有意に減少し,IL-1b, CXCL1, CCL2の発現が低下傾向を示した.以上のことから,卵膜由来間葉系幹細胞の注腸投与が炎症性腸疾患モデルラットの病態を改善することが明らかとなった.また,培養上清に含まれる重要な新規因子を幾つか同定し,そのうちの一つを炎症性腸疾患の動物モデルに投与して,その効果を解析中である.近年、間葉系幹細胞(MSC)を用いた細胞治療が注目されており、その多くは自己骨髄由来のMSCが用いられている。今年度と次年度はin vitroの系での機序解析を行う予定であったが、目標はほぼ達成できた。消化器病学in vitroの系ではMSCの培養上清で抗炎症効果を発揮したため、培養上清が動物モデルに対しても効果を示すのか確認する。

また、培養上清中に含まれる重要な因子を同定する。動物実験については,予想通りに実験がすすみ,次年度に予定していた細胞投与の実験まで行うことができた.しかしながら,vitroの実験については,ヒト骨髄細胞を得ることが難しく,比較実験を断念した.in vitroの実験が予定より早く終了し、物品費を節約できた。ヒト羊膜由来間葉系幹細胞が炎症性腸疾患モデルラットの病態を改善するメカニズムについて,さらに詳細に病理学的検討を行い,またin vitroの系を用いて確認する.また,細胞を蛍光標識して,体内分布をみていく.次年度の動物実験に用いる物品費として使用する予定である。
P. loescheiiのgly-proペプチダーゼ遺伝子のクローニング

◆歯周病関連菌のglycyl-prolyl aminopeptidase(GPase)は、申請者らのグループによって初めてP. gingivalisから分離・精製され、その後の研究により他の多くの歯周病関連菌も持っていることが解ってきた。特に、Prevotella loescheiiでは菌培養液および菌体内に非常に高い活性が認められ、しかもP. gingivalisのものとは性状を異にするものであることが判明した。本酵素のビルレンス因子として、細菌性コラゲナーゼとの共同作用によって結合組織の主要な成分、コラーゲンの破壊に関わっている可能性が示唆されており、グループの安孫子の本年度の別の報告書(一般研究C)中に述べられている。◆7年度中に得られた研究結果はおおよそ計画のように進行しており、次の通りである。サイズ分画は従来のショ糖グラジェント法よりも短時間で簡便なアガロースゲル電気泳動法を確立する事が出来たので短報での投稿を準備中である。計画ではコスミドを使って遺伝子バンクをつくる予定であったが、ファージの新しいタイプ(λZAP Express)に変更した。このファージは10以上のクローニングサイトを有し,多種の制限酵素を使える点であり、部分消化の片寄りを制限酵素の種類を変えることにより解消出来るとの考えである。PstIを用いたファージバンクからGPase活性をもつクローンが一つ得られた。しかし、DNA分析により10kbと長く高発現性プラスミドでは不安定であった。3.酵素の精製と酵素学的知見GPaseの精製は現在産生量が低く単一標品を得るに至っていない。また、酵素学的性質は粗酵素で検べたところ、ほぼP. loescheiiのものの性状に近似した結果が得られた。以上の段階であるが、現在クローンの安定化を図っており、成功すれば一挙にタンパク質およびDNAの解析が出来るところに来ており、投稿準備を急いでいる。
時効の不思議を原子の世界から探る

Al合金の時効硬化現象は1906年にWilmによりAl-Cu-Mg系合金において初めて見出された現象である。1938年にGuinierとPrestonがX線回折によりAl-Cu系合金の母相内に構造を持ったCu原子の集合体が存在することを発見し、時効硬化メカニズムを説明するための大きな指針となった。析出物と転位との相互作用を明らかにすることは、析出強化型合金の強化メカニズムを正しく理解する上で最重要課題である。室温における析出強化は、転位が析出物をせん断するcutting-モデルと、転位が析出物周囲に転位ループを形成し通過するOrowan-モデルが挙げられる。Cutting-モデルでは析出物のサイズが大きくなるほど転位のピン止め力が大きくなるが、せん断が困難なサイズまで析出物が粗大化すると転位はOrowan-モデルに従い析出物を通過し、ピン止め力は低下する。析出強化がどちらのモデルに従うかは、析出物のサイズのみならず析出物の構造や母相との整合性に依存するため、析出物の構造、形態、成長過程の解明が合金の析出強化メカニズムを明らかにするための糸口となる。合金内に分散する微細な析出物を詳細に解析するためにはTEM/STEMによるナノスケール観察が必要不可欠である。Al-Mg-Si系合金は、添加元素がAlに隣り合うMgとSiであることから解析結果に不明瞭な点が多く、現在においても微構造について議論の尽きない材料である。本研究では、原子分解能HAADF-STEM法及びSTEM-EDS法を用いた静的観察及びBF-TEM法を用いたその場加熱観察を行うことで、Cuが添加されたAl-Mg-Si系合金における析出物の形態、構造、組成、成長過程を詳細に調査した。透過型電子顕微鏡ならびに走査型透過電子顕微鏡を用いたAl-Mg-Si系合金中の析出物の高分解能解析を行い、その構造を2次元的ではあるが同定するに至っている。また、これらの成果を国際会議(IMC2019)や論文発表を行うに至っている(Scientific Reports)。透過型電子顕微鏡(TEM)ならびに走査型透過電子顕微鏡(STEM)を用いたAl-Mg-Si系合金中の析出物の高分解能解析を行う。また、TEM内その場引張実験やTEM内その場加熱実験を行うなどによる、組織変化を追求する。次年度に装置開発が見込まれるため
くも膜下出血後の遂行機能障害の客観的診断指標の創出と早期社会復帰戦略

生産年齢(20-60歳)のくも膜下出血(SAH)後の高次脳機能障害のうち特に遂行機能障害に焦点をあてその障害の程度や経過、予後に関して非侵襲的脳機能画像法(SPECT&NIRS)を用いて客観的に診断可能な方法論を確立し、その生体内情報をもとにニューロリハビリテーション的アプローチで働き盛りのくも膜下出血患者の障害回復を促し早期に社会復帰させることを目的とする。平成30年度の研究計画では、急性期慢性期SAH患者を対象に、SPECTで安静時のベースライン脳血流測定し脳血行動態への影響をグローバルに把握し、さらに脳機能面では活動時の脳反応度合いを検出するためphonemic verbal fluency test遂行時NIRS計測を相補的に組み合わせ神経心理検査とともに検討した。予想通り、SAH患者群では健常者群と比べ、語想起数が有意に少なく、phonemic verbal fluency test遂行時の前頭葉皮質oxy-Hb濃度は低下していた。しかしながら経過とともに遂行機能回復とともにSFX活動性も正常化された。SPECTでは安静時の脳灌流の異常が脳全体に及んでいることから、作業仮説である、fronto-brainstem-cerebellar-thalamic-loopを含む神経ネットワークレベルでの障害の可能性が示唆された。くも膜下出血後の高次脳機能障害、特に遂行機能障害には前頭葉、特にSFXの活動変化がなんらかの関係性を有している可能性が示唆された。特にSFX前方成分のpre-SMA領域は両側DLPFC(背側前頭前野)と双方向性の連絡があり、研究結果より、少なくとも2つの異なる非侵襲的脳機能画像を組み合わせることの有用性が示唆された。生産年齢(20-60歳)のくも膜下出血後の高次脳機能障害のうち特に遂行機能障害に焦点をあてその障害の程度や経過、予後に関して非侵襲的脳機能画像法(SPECT&NIRS)を用いて客観的に診断可能な方法論を確立し、その生体内情報をもとにニューロリハビリテーション的アプローチで働き盛りのくも膜下出血患者の障害回復を促し早期に社会復帰させることを目的とする。平成28年度の研究計画では、急性期慢性期SAH患者を対象に、SPECTで安静時のベースライン脳血流測定し脳血行動態への影響をグローバルに把握し、さらに脳機能面では活動時の脳反応度合いを検出するためphonemic verbal fluency test遂行時NIRS計測を相補的に組み合わせ神経心理検査とともに検討する。解析のポイントとして、1)SAH急性期慢性期で、神経心理検査結果を比較。2)f-NIRS計測のSFX-ROI[ox-Hb]経時変化、3)語想起数変化、4)心理検査の変化より遂行機能障害の出現境界・閾値、遂行機能障害重症度との関係、機能回復との関係を検討。5)SPECTの安静時脳灌流変化と神経心理結果との関係性の検討6)t-DCS介入前後での遂行機能への効果を神経心理結果やf-NIRS計測結果で検討。VFT-NIRS計測値はSAH後の遂行機能障害診断の客観的指標や復職指標になりうるか総合的に検討。現時点で、健常者群7名、SAH患者4名からf-NIRS計測実施した。傾向として、健常者群と比べ、word retrieval数が少なく、前頭葉皮質のoxy-Hb濃度は低下している印象を認めている。さらに、次年度以降も健常者群、SAH患者群ともn数を増やしていく。概ね予想通りの進捗状況にある。研究継続する。平成29年度の研究計画では、急性期慢性期SAH患者を対象に、SPECTで安静時のベースライン脳血流測定し脳血行動態への影響をグローバルに把握し、さらに脳機能面では活動時の脳反応度合いを検出するためphonemic verbal fluency test遂行時NIRS計測を相補的に組み合わせ神経心理検査とともに検討する。2)f-N IRS計測のSFX-ROI[ox-Hb]経時変化、3)語想起数変化、4)心理検査の変化より遂行機能障害の出現境界・閾値、遂行機能障害重症度との関係、機能回復との関係を検討。VFT-NIRS計測値はSAH後の遂行機能障害診断の客観的指標や復職指標になりうるのか総合的に検討。現時点の傾向として、健常者群と比べ、word retrieval数が少なく、前頭葉皮質のoxy-Hb濃度は低下している印象を認めている。研究継続する。

生産年齢(20-60歳)のくも膜下出血(SAH)後の高次脳機能障害のうち特に遂行機能障害に焦点をあてその障害の程度や経過、予後に関して非侵襲的脳機能画像法(SPECT&NIRS)を用いて客観的に診断可能な方法論を確立し、その生体内情報をもとにニューロリハビリテーション的アプローチで働き盛りのくも膜下出血患者の障害回復を促し早期に社会復帰させることを目的とする。平成30年度の研究計画では、急性期慢性期SAH患者を対象に、SPECTで安静時のベースライン脳血流測定し脳血行動態への影響をグローバルに把握し、さらに脳機能面では活動時の脳反応度合いを検出するためphonemic verbal fluency test遂行時NIRS計測を相補的に組み合わせ神経心理検査とともに検討した。予想通り、SAH患者群では健常者群と比べ、語想起数が有意に少なく、phonemic verbal fluency test遂行時の前頭葉皮質oxy-Hb濃度は低下していた。しかしながら経過とともに遂行機能回復とともにSFX活動性も正常化された。SPECTでは安静時の脳灌流の異常が脳全体に及んでいることから、作業仮説である、fronto-brainstem-cerebellar-thalamic-loopを含む神経ネットワークレベルでの障害の可能性が示唆された。くも膜下出血後の高次脳機能障害、特に遂行機能障害には前頭葉、特にSFXの活動変化がなんらかの関係性を有している可能性が示唆された。特にSFX前方成分のpre-SMA領域は両側DLPFC(背側前頭前野)と双方向性の連絡があり、研究結果より、少なくとも2つの異なる非侵襲的脳機能画像を組み合わせることの有用性が示唆された。スケジュール:以下の3期間にわたり長期フォローアップしていく。Phase1:急性期当院入院期間中(エントリー後から約1ヶ月)SAH患者(介入群、sham群)手術治療後、身体訓練、日常生活動作(ADL)訓練、認知訓練、臨床心理検査と急性期SPECT、f-NIRS計測後、t-DCS(anodal mode, intensitiy;1.5mA, duration 20 min)を週13回のペースで最大10回、患者SFX直上に施行。Phase2):慢性期1回復期病院転院期間(エントリー後2ヶ月ー6ヶ月)転院後も回復期リハビリテーション病院と提携し、身体訓練、ADL訓練、認知訓練継続し心理検査も定期的にフォローアップ(1ヵ月毎) Phase3):慢性期2回復期病院退院後(エントリー後6ヶ月以降)当院リハビリテーション科外来リハビリテーションにて定期的にf-NIRS検査(回復期病院退院後、以降約1ヵ月毎にフォロー)と神経心理検査結果次第ではt-DCS(1ヶ月ごと)を併用した認知訓練の継続。Phase2):慢性期1回復期病院転院期間(エントリー後2ヶ月ー6ヶ月)転院後も回復期リハビリテーション病院と提携し、身体訓練、ADL訓練、認知訓練継続し心理検査も定期的にフォローアップ(1ヵ月毎) Phase3):慢性期
核支配ミトコンドリア蛋白質遺伝子の構造と発現

1.ラット・オルニチントランスカルバミラーゼ(OTC)染色体遺伝子の単離と構造解析.OTCは尿素サイクル酵素の1つであり肝および小腸粘膜に局在する.本酵素は先ずミトコンドリア外部で分子量が3600ほど大きい前駆体として合成された後にミトコンドリアに移行して成熟酵素に転換される.すでに単離したcDNAをプローブに用いて遺伝子ライブラリーをスクリーニングし,遺伝子全長を含むファージクローンを単離した.制限酵素地図作成,サザンブロット分析により,本酵素遺伝子は75Kdにおよび, 10個のエクソンにより成ることが明らかとなった.延長ペプチドの32アミノ酸残基の26残基が第一エクソンにのっており,ミトコンドリア移行のシグナルとして働く延長ペプチドはエクソンシャフリングにより生じたと考えられる.転写開始部位上流から第一イントロンにかけてヒトとラットで高い相同性が見られ,この領域が本酵素遺伝子の発現制御に関与する可能性が考えられた.2.ミトコンドリア型3-ケトアシルCoAチオラーゼcDNAの構造解析.本酵素は例外的に延長ペプチドを持たず,成熟酵素と同じサイズで合成される.したがって成熟酵素蛋白質内部にミトコンドリア移行を指令するシグナルが存在すると考えられる.この内在性ミトコンドリア識別シグナルの構造を明らかにする目的でcDNAクローニングおよび一次構造の決定を行った.その結果,本酵素は397アミノ酸残基よりなる分子量42000の蛋白質であり,分子量およびアミノ酸組成は精製酵素の分析結果とよく一致した.またN端の14アミノ酸残基およびN端から130-145にかけて複数の塩基性アミノ酸が出現し,酸性アミノ酸がない部位が存在し,前駆体の延長ペプチドの構造とよく似ており,これらの部位がミトコンドリア識別に関与する可能性がある.1.ラット・オルニチントランスカルバミラーゼ(OTC)染色体遺伝子の単離と構造解析. OTCは尿素サイクル酵素の1つであり肝および小腸粘膜に局在する.本酵素は先ずミトコンドリア外部で分子量が3600ほど大きい前駆体として合成された後にミトコンドリアに移行して成熟酵素に転換される.すでに単離したcDNAをプローブに用いて遺伝子ライブラリーをスクリーニングし,遺伝子全長を含むファージクローンを単離した.制限酵素地図作成,サザンブロット分析により,本酵素遺伝子は75Kdにおよび, 10個のエクソンにより成ることが明らかとなった.延長ペプチドの32アミノ酸残基の26残基が第一エクソンにのっており,ミトコンドリア移行のシグナルとして働く延長ペプチドはエクソンシャフリングにより生じたと考えられる.転写開始部位上流から第一イントロンにかけてヒトとラットで高い相同性が見られ,この領域が本酵素遺伝子の発現制御に関与する可能性が考えられた.2.ミトコンドリア型3-ケトアシルCoAチオラーゼcDNAの構造解析.本酵素は例外的に延長ペプチドを持たず,成熟酵素と同じサイズで合成される.したがって成熟酵素蛋白質内部にミトコンドリア移行を指令するシグナルが存在すると考えられる.この内在性ミトコンドリア識別シグナルの構造を明らかにする目的でcDNAクローニングおよび一次構造の決定を行った.その結果,本酵素は397アミノ酸残基よりなる分子量42000の蛋白質であり,分子量およびアミノ酸組成は精製酵素の分析結果とよく一致した.またN端の14アミノ酸残基およびN端から130-145にかけて複数の塩基性アミノ酸が出現し,酸性アミノ酸がない部位が存在し,前駆体の延長ペプチドの構造とよく似ており,これらの部位がミトコンドリア識別に関与する可能性がある.
マスト細胞におけるmi転写因子の機能とその異常の分子病理学的解析

マウスのmi遺伝子座はbasic-helix-loop-helix-leucinezipper型の転写因子(以下MITF)をコードしている。MITFがマスト細胞の分化過程に影響することはmi/miミュータント・マウスの組織でマスト細胞が少なく、その分化形質が異常であることからも明らかである。本研究では、MITFによりその発現が影響を受ける遺伝子を、正常(+/+)マウス由来のマスト細胞とmi/miマウス世来のマスト細胞を比較することによって調べ、候補として得られた遺伝子については、その遺伝子のプロモーター領域にMITFなどbasic-helix-loop-helix-leucinezipper型転写因子が結合しうるCANNTG配列があるか、さらにその遺伝子のプロモーター領域をルシフェラーゼ遺伝子の上流に結合した際、ルシフェラーゼ遺伝子の転写を亢進させるかどうか調べた。nerve growthfactor(NGF)の受容体の1種p75、マスト細胞プロテアーゼ(MMCP-4)、グランザイムB、セロトニン合成に重要な役割をはたすトリプトファン・ヒドロキシラーゼなどの上流にあるCATTGA配列にはMITFの結合がみられ、これら遺伝子のプロモーター領域をルシフェラーゼ遺伝子の上流につなぐと、MITF存在下でルシフェラーゼ遺伝子の転写の亢進が認められた。これらMITFにその転写が影響されると思われる遺伝子のうち、グランザイムBとトリプトファン・ヒドロキシラーゼのcDNAは、+/+マウスの培養マスト細胞から得たcDNAライブラリーからmi/miマウスより得たcDNAライブラリーをサブトラクションすることにより得られたものである。このサブトラクション・ライブラリーはその転写にMITFの影響を受ける遺伝子を探索するにあたって有用であることが実証された。マウスのmi遺伝子座はbasic helix-loop-helix leucinezipper (bHLH-Zip)型転写因子(以下mi転写因子)をコードしている。mi突然変異遺伝子は、basic領域に列ぶ4個のアルギニンのうち1個が欠失しており、ホモのmi/miマウスではマスト細胞の数が正常(+/+)マウスの1/3に減少するとともに、その分化形質の異常を示す。我々はマスト細胞の減少が、マスト細胞の最も重要な増殖因子であるstem cell factor (SCF)の受容体であるc-kitの発現の低下のためであることを報告していたので、本年はmi転写因子がc-kitの転写に関与しているかどうかしらべた。mi/miマウスと対照の+/+マウスから培養マスト細胞を得て、c-kitのmRNA発現量をくらべるとmi/mi培養マスト細胞で有意に低い。このmi/mi培養マスト細胞に正常のmi転写因子をコードするcDNAを導入するとc-kit・mRNAの発現は正常化するが、アルギニン1個を欠失する異常のmi転写因子のcDNAを導入したのでは、c-kit・mRNAの発現は低下したままである。c-kit遺伝子の5'上流にはbHLH-Zip型転写因子により認識されるCANNTG配列が存在する。我々は正常のmi転写因子がこの配列を持つオリゴヌクレオチドに結合すること、さらにc-kit遺伝子のプロモーターをルシフェラーゼ遺伝子の上流につないだものと、正常のmi転写因子をコードするcDNAを同時にNIA/3T3細胞に導入すると、ルシフェラーゼの活性が有意に上昇することを示した。我々はすでにマスト細胞特異的プロテアーゼの1つマウス・マスト細胞・プロテアーゼ6(MMCP-6)の転写がmi/mi培養マスト細胞で著明に低下していることを報告していたが、本年度はMMCP-6遺伝子の発現もmi転写因子により実際に支配されていることを示した。
繰返し配列DNAを認識する制御蛋白質の高次構造研究

制御蛋白質としてヒトインターフェロン調節因子であるIRF-2のDNA結合ドメインに注目して、その遺伝子光学的な大量調製を行った。精製の段階で、このドメインが空気酸化されて二量体を形成することが判明したので、大量のメルカプトエタノール(50mM)で還元状態を保って精製する系を確率し、資料の調製を行った。このドメインが認識するDNAとしては、種々の配列をもつDNAオハコマ-との共結晶科の結果13dと呼ばれるDNA,と共結晶化し、それが結晶成長する条件を見い出すことができた。現在の条件では、0.2mm程度の大きさまで、数日間で成長できる。この13dのDNAの誘導体DNAをも合成し、それとの共結晶化を試してみるとともに、13dとの複合体結晶の予備的なX線の回折実験を現在行っているところである。
ヒトiPS 細胞培養中における脱未分化現象の解明および新規培養プロセス開発

本研究では,細胞組織工学における基盤技術として,ヒトiPS細胞培養における未分化状態からの逸脱現象の解明し,さらにそれらの生物的現象を用いて,培養プロセス開発の応用を示した.特に,ヒトiPS細胞のコロニー内の未分化状態からの逸脱現象は,細胞遊走による細胞ー細胞間と細胞ー基質間接着のバランスを不均衡により生じることを明らかにした.細胞遊走と増殖の役割を利用したiPS細胞の未分化維持培養プロセスの開発への応用が期待される.本研究では,細胞組織工学における基盤技術として,ヒトiPS細胞培養における未分化状態からの逸脱現象の解明し,さらにそれらの生物的現象を用いて,培養プロセス開発の応用を示した.特に,ヒトiPS細胞のコロニー内の未分化状態からの逸脱現象は,細胞遊走による細胞ー細胞間と細胞ー基質間接着のバランスを不均衡により生じることを明らかにした.細胞遊走と増殖の役割を利用したiPS細胞の未分化維持培養プロセスの開発への応用が期待される.ヒトiPS細胞研究の実用化のためには,ヒトiPS細胞の脱未分化現象を理解した上,制御し,未分化維持のための増幅培養プロセス開発することが重要である.平成25年度では,ヒトiPS細胞の培養中の自発的に発生する細胞分化現象に着目し,ヒトiPS細胞培養における脱未分化現象の解明および異なるフィーダー上でのその速度論的解析を行った.SNLフィーダー細胞上では,コロニーが大きくなると必然的に逸脱現象が生じており,コロニー中心部分でアポトーシスを伴う逸脱細胞が発生した.一方,MEFフィーダー上では,iPS細胞の遊走が活発となり,コロニー中心部分での逸脱現象が見られないが,周辺部において,逸脱した細胞が偶発的に発生している現象が見られた.これらの現象は,異なるフィーダー上でのヒトiPS細胞の遊走反応の違いがコロニー中心部または周辺部で脱分化細胞を発生させることが分かった.以上の結果から,フィーダー細胞が提供している培養環境下での細胞遊走性の違いによる細胞ー基質間接着と細胞ー細胞間接着のバランスの変化からヒトiPS細胞の未分化状態からの逸脱現象が生じていると考えられた.細胞の遊走は細胞外からのシグナルに応答してダイナミックに変化しており,このような細胞遊走は増殖・分化などの様々な生命活動において中心的な役割を担っている.ヒト幹細胞研究において,未分化・分化の制御は,最も重要な課題の一つであり,細胞遊走は,その制御に深く関与している.そこで本研究では,ヒトiPS細胞が持つ『未分化性』,『多分化能』といった優れた特性の仕組みを明らかにし,得られた知見を実用的かつ有効な培養システムの開発を目指した.さらに,育む技術として実用化を目指した培養面作成,ならびにその設計方針を確立することにより,医療用途の細胞を培養できるシステム開発を行った.工学本研究は,細胞組織工学における基盤技術として,ヒトiPS細胞の培養中の自発的に発生する細胞分化現象を解明し,さらにそれらの技術を用いて,培養プロセスを確立するものである.当初計画予定で基礎的なiPS細胞未分化維持機序や速度論的解析などは既に明らかになっており,1篇の論文を発表している.これらの成果は,より実用性の高い応用研究に向け展開することを考えている.ヒトiPS細胞の未分化維持に関する作用機序などの基礎的研究は既に明らかになっており,今後,ヒトiPS細胞未分化維持のための細胞外環境の設計に展開する.また,培養プロセス開発に不可欠な培養面の効率性,安定性等のより実践的試験を中心とした段階さらに汎用性を目指した幹細胞への適用と実践的な課題に取り込む.また,本申請の目標設定は,予備的な検討が終了していること,などから実現可能なものと判断できる.本研究で用いる実験装置類は,すべて用意されているため比較的速やかに対応可能であったため,資金的,時間的なロスが生じるリスクを極力低減することができた.そのため,申請者は,次年度研究計画である細胞挙動観察,蛍光染色,遺伝子・タンパク質発現解析に基づいた細胞評価で多くの高価な試薬を必要とするために,次年度に持ち越すことにした.染色用の蛍光試薬については,細胞増殖,分化,細胞骨格形成などの試薬を必要とする.分析用の染色試薬については,1品目当たり平均4.5万円と考え,年間使用量を合計で60万円の予算を計上した.培養面作成は研究の進行に伴い多量に使用する場合には購入する必要があると考え,消耗品費には,培養装置の試作品材料費と合わせ,50万円を計上した.
可溶性LR11による脂肪細胞病的トランスディファレンシエーションの検査基盤の同定

『成熟細胞の病的フェノタイプ変換』は病態検査学の基礎研究課題である。これまでに研究代表者は、可溶性受容体LR11が血管平滑筋細胞をシンセティックフェノタイプに、皮下脂肪細胞をブラウニングフェノタイプに、それぞれトランスディファレンシエーションさせ、その遺伝子をノックアウトすると血管傷害後の動脈硬化や過食による肥満に著しい抵抗性を示すことを報告した。本研究の目的は、成熟脂肪細胞の病的フェノタイプ変換におけるネガティブレギュレータLR11を介したブラウニング細胞へのトランスディファレンシエーション制御を明らかにすることである。また、糖尿病と肥満症におけるエネルギー消費を反映する肥満症細胞マーカーとしての血中可溶性LR11濃度の検体検査学的意義を多施設共同研究により検討する。本年度は、LR11ノックアウトマウス及び野生型マウス白色脂肪、褐色脂肪から均一化した前脂肪細胞を調整した。それぞれの種類の細胞株を用いて褐色脂肪化条件で分化誘導した成熟脂肪細胞における褐色脂肪機能に関わる特徴的な遺伝子発現の定量解析を行い、細胞株の樹立が成功したことを確認した。次年度は平成30年度に得られた脂肪細胞株を不死化処理して分化成熟能を検証し、生体に近い立体環境と従来の環境で褐色分化誘導した成熟脂肪細胞のメタボローム解析を行い、遺伝子発現と代謝産物を網羅的に解析し、両者の代謝機序の差異について、LR11の関与の視点から解明する。また、糖尿病患者で異常値を示すことが明らかになった血中可溶性LR11の検体解析のために共同研究施設である中国延辺大学で約300名のデータを収集することができた。次年度引き続き収集を継続し、病態と可溶性LR11の関係について解析を行う。本研究計画は、1可溶性LR11によるブラウニング調節機序(LR11ノックアウトマウス白色脂肪、褐色脂肪、および対照として野生型マウスの皮下脂肪と褐色脂肪から均一化した前脂肪細胞を調整し、それぞれ不死化細胞を樹立し、褐色脂肪化条件で分化誘導した成熟脂肪細胞における褐色脂肪機能に関わる特徴的な遺伝子発現の定量解析を行う)、2血中可溶性LR11濃度の検体解析(検体研究を展開し、糖尿病合併症症例、肥満症治療症例の血中可溶性LR11値の病態関連解析を行う)であり、初年度、計画通り、課題1のための野生型マウス、LR11ノックアウトマウス白色脂肪、褐色脂肪から初代前脂肪細胞を調整し複数のクローンの樹立に成功し、褐色機能に関わる遺伝子発現の定量解析を行った。また、課題2のために中国延辺大学の健常人と糖尿病、糖尿病合併症の患者の検体を計約300名収集することができ、解析中である。以上より、初年度の研究計画をおおむね順調に達成したと考える。初年度、研究計画に沿って、LR11ノックアウトマウスと野生型マウスの白色脂肪、褐色脂肪から均一化した前脂肪細胞を調整に成功した。計画通りに、それをもとにSV40を導入した不死化処理を行い、複数のクローンを樹立する。これまでの代表的な解析結果から増殖能、分化能は十分であり、実験に用いられる特性を有すると判断されることから今後、不死化細胞を様々な培養条件下で分化能や脂肪細胞形態、細胞代謝について解析する。とりわけ、野生型細胞とLR11ノックアウトマウス由来白色脂肪細胞の褐色脂肪分化条件における反応性、LR11ノックアウトマウス由来脂肪細胞の褐色脂肪分化条件における反応性(スーパー褐色細胞)を定量的に解析する。また、東邦大学医療センター、中国延辺大学で着手した糖尿病合併症における血中LR11値の意義(脂肪細胞ブラウニング検出)を明らかにする検体収集を継続し関連解析を進める。

本研究計画は、1可溶性LR11によるブラウニング調節機序(LR11ノックアウトマウス白色脂肪、褐色脂肪、および対照として野生型マウスの皮下脂肪と褐色脂肪から均一化した前脂肪細胞を調整し、それぞれ不死化細胞を樹立し、褐色脂肪化条件で分化誘導した成熟脂肪細胞における褐色脂肪機能に関わる特徴的な遺伝子発現の定量解析を行う)、2血中可溶性LR11濃度の検体解析(検体研究を展開し、糖尿病合併症症例、肥満症治療症例の血中可溶性LR11値の病態関連解析を行う)であり、初年度、計画通り、課題1のための野生型マウス、LR11ノックアウトマウス白色脂肪、褐色脂肪から初代前脂肪細胞を調整し複数のクローンの樹立に成功し、褐色機能に関わる遺伝子発現の定量解析を行った。また、課題2のために中国延辺大学の健常人と糖尿病、糖尿病合併症の患者の検体を計約300名収集することができ、解析中である。以上より、初年度の研究計画をおおむね順調に達成したと考える。初年度、研究計画に沿って、LR11ノックアウトマウスと野生型マウスの白色脂肪、褐色脂肪から均一化した前脂肪細胞を調整に成功した。計画通りに、それをもとにSV40を導入した不死化処理を行い、複数のクローンを樹立する。これまでの代表的な解析結果から増殖能、分化能は十分であり、実験に用いられる特性を有すると判断されることから今後、不死化細胞を様々な培養条件下で分化能や脂肪細胞形態、細胞代謝について解析する。とりわけ、野生型細胞とLR11ノックアウトマウス由来白色脂肪細胞の褐色脂肪分化条件における反応性、LR11ノックアウトマウス由来脂肪細胞の褐色脂肪分化条件における反応性(スーパー褐色細胞)を定量的に解析する。また、東邦大学医療センター、中国延辺大学で着手した糖尿病合併症における血中LR11値の意義(脂肪細胞ブラウニング検出)を明らかにする検体収集を継続し関連解析を進める。
ゲーム間の連結メカニズムの解明

非血縁間での大規模な相互協力は、人類の社会の最も大きな特徴の一つである。最も有名な定式化は社会的ジレンマ(SD)であるが、その解決はこれまで困難であった。本研究では、連結という新たな解決策に着目し、SDと一般交換の連結を引き起こす心理メカニズムを検討した。その結果、連結についての共有信念は必要ではなく、人々は内的属性の推測や印象評定により連結をとっていることが明らかになった。次に理論研究では、SDと一般交換との連結については均衡となり得ることが明らかになったが、SDと直接交換の連結は均衡とはならないことが明らかにされた。この結果は実証データとは不整合であり、今後の課題として残された。非血縁間でも大規模な相互協力を達成可能であることは、人類の社会の特徴であり、様々な学問領域で中心的な研究テーマとして取り上げられてきた。そのような研究のほとんどは、それぞれ特定の状況を設定し、そこで相互協力がいかに達成されるかを扱ってきた。これに対し近年、人間は実際には同時に複数の状況に埋め込まれており、相互に独立した複数の個別の状況ではなく、相互依存性のある複数の状況のセットを分析すべきだという指摘がなされるようになった。先行研究に倣い、状況間が独立ではなくなることを本研究でも「連結」と呼ぶことにする(Aoki, 2001)。しかし、連結がどのような心理メカニズムで可能となるのかは、未だ明らかになっていない。そこで24年度は、実験室実験を行った。古典的ゲーム理論に基づくAoki (2001)は、社会的ジレンマ(SD)状況での非提供者に対しては社会的交換において協力しないということが共有信念として存在している場合、合理的な推論の結果として実際にそのような連結がナッシュ均衡となることを示した。しかし、通常人間がそのような複雑な推論を行っているとは考えられないため、そのような共有信念をブロックしても連結が生じるかどうかを、SDと2者間の囚人のジレンマ(PD)を繰り返すという実験を用いて検討した。その結果は、共有信念をブロックしてもなお、連結がはっきりと示されるというものであった。このような結果を引き出した心理メカニズムとして考えられるものの一つが、参加者は相手のSDでの行動をその人の内的属性に帰属し、そこからPDでの行動を予測する、というものである。そこで25年度には、同じ協力行動でも内的属性の推測が可能かどうかを操作した実験を行い、内的属性の推測が確かに連結を引きおこすこと、しかしそれ以外の要因が存在する場合には連結は生じにくくなることが示唆された。非血縁間でも大規模な相互協力を達成可能であることは、他の種と比較したホモ・サピエンスの社会の特徴であり、様々な学問領域で中心的な研究テーマとして取り上げられてきた。そのようなこれまでの研究のほとんどは、それぞれ特定の状況を設定し、そこで相互協力がいかに達成されるかを扱ってきた。これに対し近年、人間は実際には同時に複数の状況に埋め込まれており、他の状況と相互に独立した個別の状況ではなく、相互依存性のある複数の状況のセットを分析すべきだという指摘がなされるようになった。そこで24年度は、まず予備的な研究として場面想定法質問紙実験を行った。具体的には、一般交換、限定交換、信頼ゲーム等の様々なゲーム状況と社会的ジレンマ(SD)のセットについて、それらを想起させるシナリオを作成し、実際に人々が連結を示すかどうかを探索的に検討した。その結果、強制的プレイPDゲームと一般交換ゲームでは連結が見られた。また、連結は相手の行動予測やその他の複数の心理的要因によって影響されることも示唆された。そこで次に、実験室実験を行った。古典的ゲーム理論に基づくAoki (2001)は、SD非提供者には社会的交換において非協力するということが共有信念として存在している場合、合理的な推論の結果として実際にそのような連結がナッシュ均衡となることを示した。しかし、通常人間がそのような複雑な推論を行っているとは考えられないため、そのような共有信念をブロックしても連結が生じるかどうかを、SDとPDを繰り返すという実験を用いて検討した。その結果はやはり、共有信念をブロックしてもなお、連結がはっきりと示されるというものであった。非血縁感でも大規模な相互協力を達成可能であることは、人間社会の特徴であり、様々な学問領域で中心的な研究課題として取り上げられてきた。

それに対し近年、人間は実際には同時に複数の状況に埋め込まれており、相互に独立した複数の個別の状況ではなく、相互依存性のある複数の状況のセットを分析対象とすべきだという指摘がなされるようになった。先行研究にならい、複数の状況間が独立ではなくなることを本研究でも「連結」と呼ぶことにする(Aoki, 2001)。しかし、連結がどのような心理メカニズムで可能となるのかは、未だ明らかになっていない。2425年度は、連結が存在しているという共有信念をブロックする実験を行い、それでもなお連結が生じることを示した。更に、同じ協力行動でも内的属性の推測が可能かどうかを操作した実験を行い、内的属性の推測が連結を引き起こすことを示した。このことは、ゲーム理論で想定されているような先読みの合理計算は必要条件ではなく、人々の連結実装メカニズムは相手の行動予測や印象評定であることが明らかとなった。以上の研究において主に扱われてきたのは社会的ジレンマ(SD)と直接交換(DE)の間の連結である。しかし、社会には様々な状況が存在しており、どの状況間で連結が生じるのかは不明である。そこで26年度は、実証研究を行う前段階として、理論的にどのような状況のペアにおいて連結が生じるのかを明らかにするシミュレーションを行った。その結果、SDと一般交換(GE)の間では、先行研究とは異なるものの、連結が均衡となり得ることが示されたが、SDとDEの間では均衡とはならないことが明らかになった。この結果は、実証データとは不整合であり、今後の研究課題として残された。社会心理学連結を引き起こす心理メカニズムを同定することが本研究の目的であるが、それに向かって着実に前進した。実証データにより、ゲーム理論で想定されるような先読みの計算は必要条件ではなく、相手の行動予測や印象評定が心理メカニズムの候補として浮上し、それらについて実証データで検討した。連結を引き起こす心理メカニズムを同定することが本研究の目的であるが、それに向かって着実に前進した。実証データにより、ゲーム理論で想定されるような先読みの計算は必要条件ではなく、相手の行動予測や印象評定が心理メカニズムの候補として浮上した。最終年度である26年度は、何が連結する状況としない状況を分けるのかを明らかにすることを目的とする。様々な状況にはそれぞれ固有の構造が備わっている。そのような構造のどの側面が連結を引きおこすのかは、未だ明らかにされてはいない。これまでの研究で扱われてきたゲーム状況は主にSDとPDであるが、これらはそもそも利得構造が似ているために連結してしまっていた可能性がある。そこで、26年度はまず、様々なゲーム状況のペアにおいて、どのペア間で連結が生じるのかを検討する。それにより、状況に備わっているどのような性質が連結を引きおこすのかが明らかになるだろう。そこで次に、そもそも全く連結が生じないような二つの状況の間で連結を生じさせるためには、何が必要かを検討する実験を行う。これにより、ゲーム間連結メカニズムの解明に向けて、大きく前進することが可能である。25年度は、連結を引き起こす心理メカニズムの特定を目指す。まず、相手に対する印象を形成することにより連結が生じるのかどうかを検討する実験室実験を行う。
視聴覚の相互作用とそのメカニズムの研究

Streaming-bouncing現象は、2つの視対象が接近し、重なり、離れていく際に、すれ違っていくように見えたり、跳ね返って見えたりする曖昧な知覚現象である。視覚対象が遮蔽物の後ろを通り抜ける際に、網膜上では像が消えるが脳内では、注意の働きによりその表象が維持され、対象の存在と運動の連続性が保たれることが、このstreaming-bouncing現象によって実験心理学的に示された(G. B. Remi jn, H. Ito, Perceptualcompletion in a dynamicscene : An investigation with an ambiguous motion paradigm. Vision Research, 47(14), 1869-79, 2007))。また、この動的物体の補間は遮蔽物の視認性によって大きく影響を受けた。さらにこの現象を用いることによって、時間的側面から視覚と聴覚の相互作用の範囲を調べた。上記現象は視覚刺激に加え、衝突時に聴覚刺激を提示することによって、bouncing知覚が促進されることが知られている。それらの統合可能な時間の幅は広く、提示順序が時間的に逆(音が後)であっても、視覚の解釈に影響が及ぶなど、脳における視聴覚情報の相互作用の柔軟さが、心理物理学的実験により明らかになった。次に、光のフラッシュと短い音を使った時間的な順序判断の実験を行った。通常、音に対する処理は光に対する処理より早いことが知られているが、時間的順序の判断は、単独の光と音のみによってなされるとは限らず、複数の音刺激と光刺激がある場合には、時間的なグルーピングなどの文脈効果によって影響を受けることがわかった。この結果は2007年のEuropean Conference on Visual Perception (Arezzo, Italy)において発表した(Remi jn & Ito, Perception, 36, supplement, 2007)。これらの結果から、脳における視覚と聴覚の情報の統合が単にタイミングのみに依存するものではなく、ある時間範囲の中で文脈等による影響を受けつつ総合的に処理されるものであることが示された。2つの視対象が物理的に接近し、重なり合い、通過していくようなディスプレイにおいて、知覚的な曖昧性が生じる。つまり視対象が互いをすりぬけて通過していく(streaming)、あるいは跳ね返る(bouncing)という2つの知覚的解釈が可能となる。この現象は、純粋に視覚的な現象というわけではなく、聴覚情報や触覚情報までとりいれて知覚的解釈が変化することが知られている。Streaming-Bouncing Displayのさまざまな視覚的特性をもとに、その視覚的メカニズムをさぐるとともに、この現象が聴覚情報によってどのような影響を受けるのかを実験的に検討した。物理的に接触する直前に遮蔽物の後を通過すると、bouncingの知覚が促進されることが明らかになった。しかし、その輝度コントラストを操作した結果、遮蔽物が輝度差によって明示されていない場合には、streamingの知覚が優勢であった。遮蔽の影響は、物理的な衝突の直前の限られた時間に限定されることもわかった。聴覚刺激が衝突前後の限られた時間に提示された場合、これらのbouncingの知覚へのバイアスをさらに加算的に促進する効果があった。これらのことから、遮蔽による知覚的補間に注意の資源が配分されることが、聴覚刺激等と同様の注意の中断効果となり、bouncingの知覚を促進させたものと解釈した。これらの結果の一部は、Vision Research誌に掲載予定である。
大城立裕における組踊の伝統と現代性に関する研究

本研究は大城立裕による創作組踊作品について、台本資料や公演記録の映像資料などを用いて作品分析を行い、その伝統と現代性を明らかにすることを目的としたものである。沖縄の古典芸能である組踊については、「朝薫の五組」を中心に芸能史・演劇史・脚本研究・諸写本調査などの観点から研究が進められてきた経緯があり、「国立劇場おきなわ」を主な拠点として古典作品を中心に上演も多く行われている。その一方で、少数ながら新作組踊も創作・上演されるようになってきており大城は現在21作品の新作組踊を創作しているが、小説家としての大城研究は行われているものの創作組踊に関する研究はほとんど行われていないのが実情である。そのような中で大城による創作組踊に着目し古典作品との比較を行うことで、現代の創作組踊における伝統と現代性について調査・研究を行った。具体的には、古典作品および大城による創作作品について台本資料を用いた作品分析を行い、作品の主題や表現方法などの観点から比較を行った。また、映像資料を用いて舞台芸術や身体表現として作品を作り上げる方法や手法についても比較を行った。いくつかの観点において現代の創作組踊における伝統の継承と新たな現代性を見出すことができたが、これらは今後、組踊というジャンルにおける伝統と現代性を分析・研究する足掛かりとなるものと考えている。