hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
熟達化の視点に立つ説明的文章読解のメタ認知的知識に関する研究

この研究では,(1)説明的文章の読解に関するメタ認知的知識の測定ツールを用いて,児童の文章読解の発達的変容を調べること,(2)同ツールを用いて,教員志望学生や教師を対象として,熟達化による読解指導の変容を調べることを目的とした。読解方略質問紙(犬塚, 2002)をもとに小学生用の質問紙を作成し,小学校4, 5, 6年生368名を対象として,読解方略使用の学年差を調べる調査を実施した。また,同質問紙を用いて,実習による教員志望学生の学習者観の変化を調べた。この研究では,(1)説明的文章の読解に関するメタ認知的知識を記述するツールを開発し,児童生徒の説明的文章読解の発達的変容を調べること,(2)読解指導に関するメタ認知的知識を測定するツールを開発し,教員志望学生や教師を対象として,熟達化に伴うメタ認知的知識の変容を調べることを目的とする。初年度として,以下を実施した。1.児童の説明的文章読解のメタ認知的知識測定ツールの開発:読解方略質問紙(犬塚,2002)をもとに,小学生用の読解方略質問紙(質問項目数28個)を作成し,小学校4,5,6年生368名を対象に,読解方略使用と読書経験との関係を調べる調査を実施した。次年度に向けて,各学年の方略使用の実態及びそれぞれの学年における読書経験と方略の使用との関係について分析中である。2.大学生を対象とする説明的文章の読解方略使用実態調査:一般的な学習方略(伊藤,2002)と説明文の読解方略(犬塚,2002)を取り上げ,大学生を対象に,学習の自己効力感や達成動機と方略使用との関係を調べた。自己効力感と方略使用とに関連があること,自己効力感が高いほど適応的な方略を使用することなどが見いだされた。方略使用を自己制御できることは,適応的熟達の観点から重要なことであり,次年度以降の読解指導の熟達化について考える上で重要な示唆が得られた。成果の一部を「大学生の学習方略使用と達成動機,自己効力感の関係」として所属機関の紀要論文にまとめた。2年目として,以下を実施した。1.児童の説明的文章読解のメタ認知的知識測定ツールの開発:初年度に,読解方略質問紙(犬塚,2002)をもとに,小学生用の読解方略質問紙(質問項目数28個)を作成し,小学校4,5,6年生368名を対象として,読解方略使用と読書経験との関係を調べる調査を実施した。各学年の方略使用の実態及びそれぞれの学年における読書経験と方略の使用との関係について分析を継続中である。2.大学生を対象とする説明的文章の産出方略使用実態調査:文章産出過程を,文章読解と表裏一体の関係にあると考えて,大学生を対象に,文章産出方略の使用実態を測定する尺度を開発した。尺度は,実際に説明文を産出した直後に収集した内省プロトコールと読解方略質問紙(犬塚,2002)等の項目を参考に構成し,因子分析によって5因子構造の尺度を作成した。また,尺度の妥当性の検討として,実際に産出された文章の適切性の評定と方略使用の関係を調べたところ,両者に関連が見られ,尺度の妥当性が示唆された。この尺度を用いて,小学校教師を志望する学生を対象に,小学生の補習的な個別指導(認知カウンセリング)の経験年数と説明的文章産出方略の使用との関係を調査した。これらの成果の一部を「説明文産出におけるメタ認知的知識の構造」として所属機関の紀要論文にまとめた。最終年度として,以下を実施した。1.児童の説明的文章読解のメタ認知的知識測定ツールの開発:小学校4,5,6年生368名を対象とする読解方略使用の実態及び読書経験と方略の使用との関係についての調査結果を分析した。また,国語科における読解指導と児童の方略使用との関係を調査した。以上について,現在,発表準備中である。2.大学生を対象とする説明的文章

産出方略の使用実態調査:大学生を対象に文章産出方略の使用実態を測定する尺度を開発した。この尺度を用いて読み手(説明の受け手,大学生と小学生の2条件)の要因と方略使用の関係を調べ平成23年度の中国四国心理学会大会において発表した。3.児童への学習指導経験が説明文産出に及ぼす影響の調査:2で作成した尺度を用いて,教員志望の大学生を対象として,小学校児童を対象とする学習相談(認知カウンセリング)においてカウンセラー等を経験することが方略使用に及ぼす影響を調べた。小学生に実際に学習指導を行うことによって,説明文作成方略のうち,説明対象を具体的に述べるための方略の使用頻度が高まることが見出された。この成果は,平成24年度の教育心理学会総会において発表する。4.手続き的説明文の読解方略に関する研究:手続き的説明文(マニュアル文章)の読解方略使用を測定する質問紙を作成し,大学生を対象として作動記憶容量(言語性,空間性)と方略使用との関係を調べた。この成果については,発表準備中である。
思春期の抑うつ症状に関連する因子の縦断的検討

近年、小児における抑うつ症状の罹患率が上がっている。我々は、コミュニティベースのコホート研究により、思春期における抑うつ症状と他のメンタルヘルスに関する要因の検討を行った。起立性調節障害は思春期特有の症状である。我々は、女子において、抑うつ症状とこの起立性調節障害に因果関係があることを明らかにした。また、歪んだボディイメージは抑うつ症状と関連があることが示唆されており、検討した結果、思春期の早い段階で体型に関する不満足があることが後の抑うつ症状の増加に関連していた。平成25年度も、甲州市母子保健長期縦断調査の一環として、甲州市内すべての小中学校において、小学校4年生から中学3年生約2000人を対象として、「児童生徒の心の健康と生活習慣に関する調査」(以下、思春期調査)を行った。調査内容は、生活習慣、心の健康(バールソン抑うつ評価尺度、起立性調節障害診断基準問診項目)であり、児童生徒健康診断表から、身長・体重等の身体データ抽出も行った。思春期調査を毎年7月に実施するようになってから、6年分のデータが集積された。これは、小学校4年生であった児が中学3年生になるまでの経時データが得られたこととなった。昨年と同様にして、前年度までのデータとのリンケージを行い思春期縦断データセットを作成した。また、本年度は、甲州市教育委員会から、Q-Uテスト(学校生活意欲尺度、ソーシャルスキル尺度等からなる、よりよいクラス作りのための質問紙)のデータ解析依頼があり、思春期調査データとの関連を検討した。Q-Uテストで測定されているソーシャルスキルやクラス内での人間関係は、心の健康と深く関連しており、今後の研究にとって新たに重要なデータが蓄積されたと思われる。平成25年度は、思春期における抑うつ症状とソーシャルスキルやクラス内での人間関係のつながりの強さに関連があるかどうかを検討した。また、思春期6年間の経時データを用いて、ボディイメージと抑うつ症状の変化の検討も行った結果、思春期早期にボディイメージが悪いことが、その後の思春期に継続的に抑うつのリスクとなることが明らかとなった。また、発症の増加が懸念されている起立性調節障害については、経年データを検討したところ、本研究では、明らかな増加は認められなかった。甲州市母子保健長期縦断調査の一環として、甲州市内すべての小中学校において、小学校4年生から中学3年生約2000人を対象として、「児童生徒の心の健康と生活習慣に関する調査」(以下、思春期調査)を行った。調査内容は、生活習慣(睡眠、運動週間、食習慣)、心の健康(バールソン抑うつ評価尺度、起立性調節障害診断基準問診項目)であった。さらに、児童生徒健康診断表から、身長・体重等の身体データの抽出を行った。また、前年度までに集積されている思春期調査のデータのリンケージも行った。これら、思春期の縦断データにより、この時期のメンタルヘルスの指標のひとつの起立性調節障害のリスクとなる要因の検討を行った。まず、起立性調節障害を有する割合の経年的に明らかにし、横断データによる生活習慣との関連を検討し、男女による違いなどを示す。さらに、縦断データにより、起立性調節障害を発症するリスクとなる生活習慣や、発症を予測する問診項目などを明らかにする。また、抑うつスケール得点の経年変化をトラジェクトリー解析によりグルーピングを行い、抑うつ症状を有するリスクの検討を行う予定である。また、本研究は甲州市母子保健長期縦断調査の一環として行っている。このため、母親の母子手帳届け時、乳幼児健診(1.6、3,5歳)時の身体データや睡眠、食事やおやつの摂取などの生活習慣のデータが蓄積されている。思春期調査のデータとこれらをリンケージして、より長いスパンでの縦断的解析を行うためにデータセットの作成を行った。これらのデータセットにより、胎生期や乳幼児期の生活習慣などが思春期のメンタルヘルスに及ぼす影響の検討を行う。サンプルサイズが充分となってから、乳幼児期の睡眠習慣が思春期の起立性調節障害の発症に及ぼす影響を検討する予定である。平成26年度においても、甲州市母子保健長期縦断調査の一環として、甲州市内すべての小中学校において、小学校4年生から中学3年生約2000人を対象として、「児童生徒の心の健康と生活習慣に関する調査」(以下、思春期調査)を行った。例年通りに、調査内容は、生活習慣、心の健康(バールソン抑うつ評価尺度、起立性調節障害診断基準問診項目)であり、児童生徒健康診断表から、身長・体重等の身体データ抽出も行った。また、近年トピックとなっている、インターネット依存についての調査をするために、ヤングのインターネット依存度テスト20項目も思春期調査票に加えて調査を実施した。思春期調査の実施が7年目となり、まだ十分とは言えないが、縦断データセットが蓄積されたので、本年度は、2つのテーマの解析を行った。

まず、小学6年生から4年間の縦断データセットを3学年分用いて、ベースラインのボディイメージが、その後の抑うつスコアの変化にどう影響しているかを検討した。この結果、思春期の早期に体型に対する不満を持っていると、その後の抑うつスコア増加の独立した危険因子となることが明らかとなった。また、中学1年から3年間の縦断データセットを5学年分作成し、起立性調節障害と抑うつの因果関係を検討した。この結果、男女ともに、起立性調節障害は、後の抑うつ発症のリスクとはなっていなかった。女子のみにおいて、抑うつ症状を持っていることは、後の起立性調節障害発症のリスクとなっていることが明らかとなった。今後は、これらの関連に、インターネット依存の結果も用いて、検討を行っていく。疫学平成25年度思春期調査を実施した。調査表の回収率は98.5%であった。前年度までの思春期調査データとともに、抑うつ症状や起立性調節障害の陽性率の経年変化が明らかとなった。近年トピックとなっているソーシャルスキルなどのデータも蓄積され、抑うつ症状や起立性調節障害などのメンタルヘルスとの関連において、大変有用であるデータセットの構築ができたと思われる。平成24年度思春期調査を実施した。調査票の回収率は、97.2%であった。思春期調査の縦断データにより、本コホートにおける近年の起立性調節障害や抑うつ症状などの有病率が明らかとなった。抑うつ症状は、学年や性別による割合はほぼ一定であった。起立性調節障害については、年度によって、さらにはその学年の特性が存在する可能性が示唆された。これらの特徴が、どんな要因と関連しているのかを検討する必要性が示唆された。起立性調節障害に関連する生活習慣では、横断解析において、寝つき感が悪いと起立性調節障害陽性のリスクが男子で4.6倍、女子で6.5倍と高いインパクトとなっていた。これらは、学校保健において、起立性調節障害を発見する指標になると思われる。また、縦断的解析により、就寝時刻が12時以降の生徒は、1年後に起立性調節障害を発症するオッズ比が2.3となっていた。また、同じくベースラインで、立ちくらみあるいはめまいを起こす、乗り物に酔うという2つの問診項目が、その後の発症のリスクとなっていることが明らかとなった。抑うつ症状については、経年変化による解析を進めている。研究の進捗状況としては、概ね予定通りに進行していると考えられる。思春期6年間のメンタルヘルスに関する繰り返しデータが構築できた。思春期におけるこのような長期にわたる研究はほぼ無く、抑うつ症状や起立性調節障害をアウトカムとした場合に、スコアの変化あるいは陽性か否かにするのかなど、解析方法における課題が残されている。次年度は、新たなメンタルヘルスに関係するデータも集積できたので、これらを含む経年での検討を実施する予定である。思春期と乳幼児期データのリンケージが行われ、長期にわたる縦断データが蓄積された。小児期の生活習慣がその後の様々な疾患に関連すると示唆されているが、思春期のメンタルヘルスをターゲットにしている研究はほとんど存在しない。また、思春期のメンタルヘルスは、単年のデータでは十分な検討はできないと考えられる。
胃腸管間質腫瘍(GIST)の由来組織に関する病理組織学的研究

食道、胃、小腸、大腸の菲上皮性腫瘍106例を臨床病理学的、病理組織学的、免疫組織化学的、電子顕微鏡的に検討した。組織学的に狭義の胃腸管間質腫瘍(Gastrointestinal Stromal Tumor;GIST)は73例、平滑筋性腫瘍は29例、神経鞘腫は4例であった。その結果、食道発生の非上皮性腫瘍はほとんどが平滑筋性腫瘍でQISTは少なく、逆に胃、小腸ではGISTが多く、平滑筋性腫瘍は少ないという、特徴的な解剖学的分布をしていた。GISTは、さまざまな組織パターンを呈するものの、鍍銀染色などを用いれば通常の光顕的観察でかなりの症例において平滑筋腫瘍と鑑別可能と考えられた。また、GISTは免疫組織化学的に特徴ある表現型を示していた。すなわち、ビメンチン、CD34、bcl-2、CD117(c-kit)が高率に陽性で、筋原性マーカー(デスミン、筋特異性アクチン、平滑筋特異性アクチン)や神経性マーカー(S-100蛋白、ニューロフィラメント、GFAP、NSE、シナプトフィジン、Leu7)は多くの症例で陰性であった。したがって、GISTは平滑筋性腫瘍や神経鞘腫とは異なる独立した腫瘍(群)と考えられた。このことは電顕的検察からも裏づけらた。さらにこれらのマーカーを用いれば鑑別は容易であると判断された。GISTの由来組織については、CD117の発現が消化管のカハールの介在細胞に見られるとの報告があり、本研究の結果はこれを支持するものであった。しかしながら、免疫電顕的検討では十分な結果が得られず、検索方法の改善が望まれた。ret遺伝子産物の発現は認められなかったので、ret遺伝子はGISTの発生、増殖において重要な働きをしていないものと考えられる。食堂、胃、小腸、大腸の胃腸管間質腫瘍(Gastr ointestinal Str omal Tumor;GIST)72例、及び消化管の平滑筋腫瘍22例、消化管の神経鞘腫2例を用いて、病理組織学的ならびに免疫組織化学的検討を行った。その結果、以前には平滑筋腫瘍(平滑筋腫、平滑筋肉腫、平滑筋芽腫)と診断されていた腫瘍の多くのものが、現在の診断基準ではGISTと分類すべき腫瘍であった。免疫組織化学的には、GISTではビメンチンとCD34が高率に陽性で、筋特異性アクチン、平滑筋特異性アクチン、S-100蛋白は若干の症例で陽性であった。しかし、デスミン、ケラチン、EMA、GFAPは陰性であった。一方、今回の検討で平滑筋腫瘍に再分類された腫瘍は、筋特異性アクチン、平滑筋特異性アクチンが強陽性であるだけでなく、デスミンも陽性であり、平滑筋への分化が明かであった。消化管神経鞘腫は症例数が少ないものの、S-100蛋白が強陽性、CD34や筋原性マーカーが陰性で、免疫組織化学的にもGISTや平滑筋性腫瘍と明らかに異なっていた。いくつかのGISTでは筋原性マーカーであるアクチンが陽性であるが、その発現強度は平滑筋性腫瘍のそれに比べて弱く、デスミン陰性であることを合わせ考えると、真の平滑筋への分化を示していないことが示唆された。また、CD34はGISTの良いマーカーになると考えられた。今後、GISTの組織由来を明らかにするために、各種組織特異的マーカーの発現を検討する他に、遺伝子的検索も重要と考えられる。
筋線維芽細胞の脱分化とアポトーシス誘導による線維化抑制の分子機構

1.bFGFもよるα-SMA発現抑制と脱分化能高度のα-SMA発現を示すRMFとRMFL細胞ではbFGF添加24と120時間目でα-SMA発現性の減少が確認された。RMF細胞とRMFL細胞ではbFGF処理後72時間目に,α-SMAmRNAの有意な減少がみられた。bFGF添加120時間目ではRMFとRMFL細胞の細胞形態の変化が確認された。したがって両者の細胞ではbFGFによるα-SMA発現抑制効果による脱分化能が示された。2.bFGFによるERK1/2の活性化bFGF処理後0,5,10,60と120分におけるRMFとRMFL細胞におけるERK1/2の活性化はともに投与後増加したが、その減少パターンが異なり筋線維細胞間で異なるERK1/2の活性化を示した。bFGFによる皮膚漬瘍創におけるα-SMAの発現変化をbFGF投与後3,7,10,18と25日目で観察すると術後18日目からのα-SMA陽性筋線維芽細胞が減少率がbFGF投与創において非投与創に比べて有意な増加がみられた。したがってin vivoにおいてもbFGFによるα-SMA発現抑制効果が確認できた。1.筋線維芽細胞の樹立とその特異性(1)ラット皮膚線維芽細胞株の単離とその細胞特性:Wistarラット皮膚全層切開縫合創組織を培養器に移し初代培養後クローニングする。その後細胞を回収し、線維芽細胞の特異的マーカー(Pro1y1-4-hydroxylase)や間葉系細胞の特異的マーカーの発現性(Vimentin, Desmin)をウエスタンブロット法で確認し、その発現特異性から線維芽細胞を選別した。(2)TGF-β1による筋線維芽細胞の誘導:上記の線維芽細胞にTGF-β1を投与し、経時的にα-SMAの発現性をウエスタンブロット法で確認し、α-SMAの発現増加を指標にして筋線維芽細胞株4株(1-0,1-10,2-0,2-10)樹立した。さらに倒立顕微鏡にてこれら筋線維芽細胞の形態的観察や共焦点レーザー顕微鏡によるα-SMAの細胞内分布パターンを観察し個々の筋線維芽細胞の分化誘導能を判定した。2.bFGFによる筋線維芽細胞のアポトーシス誘導TGF-β1により分化誘導された筋線維芽細胞株4株に血清除去を施行し、bFGFを添加後0,24,48,96時間目にTUNEL染色でアポトーシス誘導能を観察した。このアポトーシス発現過程で経時的に蛋白を回収し、活性化カスパーゼ3の発現性を解析した。その結果2-0と2-10細胞に96時間目に活性化カスパーゼ3の発現増加がみられ、bFGFによる筋線維芽細胞のアポトーシス誘導能亢進が確認された。bFGFによる皮膚潰瘍創におけるα-SMAの発現変化をbFGF投与後3,7,10,18と25日目で観察すると術後18日目か6のα-SMA陽性筋線維芽細胞が減少率がbFGF投与創において非投与創に比べて有意な増加がみられた。
超高温、耐環境性材料としてのMoSi_2系シリサイドの開発

1500°C近傍の超高温における使用に耐え得る耐熱材料として、結晶構造、溶融温度、耐酸化性等を考慮した結果、その候補材料として遷移金属シリサイドを選択した。これらのシリサイドのうち、本研究においてはC116型、C40型およびD8_8型シリサイドとしてMoSi_2、WSi_2、CrSi_2、TaSi_2およびTi_5Si_3系シリサイドをとり挙げ、その単結晶を用いた高温強度、加工性等の変形挙動および変形機構を明らかにするとともに、その結果に基づき、第3元素添加等による変形能改善の可能性について調べた。MoSi_2およびWSi_2は900°Cを越える高温領域で変形可能となり、特に、1200°C近傍の高温領域では著しい加工性の改善が認められる。その変形は体心正方晶としての特徴が現われ、そのすべり系の数という面では問題はないが低温での加工性の欠如は超格子転位の易動度が小さいことに起因している。しかし、Cr、Ta等C40型構造を安定化する元素の添加により、積層欠陥エネルギ-を低下させ、新たなすべりを活性化させることにより著しく加工性を改善することが出来た。CrSi_2、TaSi_2等の六方晶系シリサイドは単相状態では底面での変形しか起らず、そのため多結晶状態で単相としての使用は困難である。しかし、C11b型シリサイドとの擬二元あるいは三元系としてその欠点を補うことが可能である。またTi_5Si_3は主に双晶形成により変形が進行する。このシリサイドは高温強度に優れているためTiSi_2あるいは他のシリサイド相との複合相の強化相として使用可能である。これら一連の高融点シリサイドは耐酸化性という意味では1500°C、大気中の長時間使用においても問題はない。また実用的に重要なクリ-プ強度も優れており、そのクリ-プは転位クリ-プによって支配される。そのため微細粒子分散等その組織制御により更にクリ-プ強度を改善することが可能である。1500°C以上の温度の使用に耐え得る超高温耐熱材料として、結晶構造、溶融温度等を考慮してC11_bおよびC40型シリサイドのうちMoSi_2およびCrSi_2について単結晶を用い、その変形挙動および変形機構を明らかにするとともに、その変形能改善の可能性について調べた。MoSi_2結晶は900°Cを越える高温領域で変形可能となり、その変形は比較的低い温度では〈3^^ー31〉{110)および〈3^^ー31〉{103}すべりが、また高温では〈110]、〈100]転位が活性化する。これに伴い変形能は改善される。1/4〈111〉転位の運動により(110)面上に積層欠陥が形成されると、(110)面上の原子配列はC40型構造の(0001)面上のそれと等価となる。そのためC40型構造を安定化する元素を添加すれば、1/4〈111〉転位の運動が活性化され、変形能が改善される可能性がある。事実、Cr添加によりその効果が認められた。またCrSi_2は約600°Cから変形可能となり、その変形は(0001)面で起こることが明かとなった。

これらのシリサイドのうち、本研究においてはC11b型、C40型およびD8_8型シリサイドとしてMoSi_2、WSi_2、CrSi_2、TaSi_2およびTi_5Si_3系シリサイドをとり挙げ、その単結晶を用いた高温強度、加工性等の変形挙動および変形機構を明らかにするとともに、その結果に基づき、第3元素添加等による変形能改善の可能性について調べた。MoSi_2およびWSi_2は900°Cを越える高温領域で変形可能となり、特に、1200°C近傍の高温領域では著しい加工性の改善が認められる。その変形は体心正方晶としての特徴が現われ、そのすべり系の数という面では問題はないが低温での加工性の欠如は超格子転位の易動度が小さいことに起因している。しかし、Cr、Ta等C40型構造を安定化する元素の添加に添加により、積層欠陥エネルギ-を低下させ、新たなすべりを活性化させることにより著しく加工性を改善することが出来た。CrSi_2、TaSi_2等の六方晶系シリサイドは単相状態では底面での変形しか起らず、そのため多結晶状態で単相としての使用は困難である。しかし、C11b型シリサイドとの擬二元あるいは三元系としてその欠点を補うことが可能である。またTi_5Si_3は主に双晶形成により変形が進行する。このシリサイドは高温強度に優れているためTiSi_2あるいは他のシリサイド相との複合相の強化相として使用可能である。これら一連の高融点シリサイドは耐酸化性という意味では1500°C、大気中の長時間使用においても問題はない。また実用的に重要なクリ-プ強度も優れており、そのクリ-プは転位クリ-プによって支配される。そのため微細粒子分散等その組織制御により更にクリ-プ強度を改善することが可能である。
消化管における水チャネルの発現と機能に関する基礎的研究

1.ラット消化管からの水チャネルの発現2.ラット脾、肝からの新しい水チャネルのクローニングラット脾mRNAより新しい水チャネルcloneを得た。RNase protection assay法により肝にも存在することが判明、ラット肝Libraryより会長のcDNAをクローニングし、シークエンスを決定し、GenbankにAQP8として登録した。アフリカツメガエル卵細胞を用いた発現系により水チャネルとしての機能を確認した。さらに、Nothern blot、RNase protection assay法によりラット肝、脾のほか大腸、唾液腺に存在することを明らかにした。3.ラットAQP8に対する抗体作製ラットAQP8のC末端(10ペプチド)に対する抗体作製は、titerが低いため、Expression vectorにAQP8の一部をcodeするcDNAを組み込み、recombinant peptideを作り精製した。これを用い、ウサギで抗体を作製中である。4.ラット小腸大量切除モデルにおける水チャネルmRNAの発現ラット小腸大量切除モデルを作製し、コントロール(空腸の切離・再吻合)群、正常ラットと消化管各部位での4種類の水チャネル(AQP1,3,4,8)のmRNAの発現量の変化についてRNase protection assay法を用いて比較した。小腸大量切除術後では空腸のAQP8の発現が一時的に増加する傾向が認められた。(1)クローニングラット大腸よりmRNAを抽出し、既知の水チャネルmRNA配列に基づいて作製したdegenerate primerを用いてRT-PCRクローニングを行った。その結果、3種類の水チャネルクローン(アクアポリン:AQP-1、AQP-3、AQP-4)が得られた。各々のクローンを用いてラジオアイソトープラベルのプローブを作製してRNase Protection Assay法を行いラット消化器管における水チャネルmRNAの分布を調べた。さらにDigoxigeninを用いて非放射性プローブを作製し、in situ hybridization法により消化管組織内における水チャネルmRNAの局在を調べた。その結果、ラット消化管には少なくとも3種類の水チャネルが存在し、消化管における分布はチャネルごとに特徴があり、組織においては上皮細胞に豊富に存在することが判明した。(第33回日本外科代謝栄養学会発表)さらに、新たな水チャネルの可能性のあるクローンも得られ、現在解析中である。(2)ラット腸切モデルにおける水チャネルの発現ラット小腸大量切除モデル(90%小腸切除)において、術後1、2、4週目に消化管のtotal RNAを抽出し、前述の3種の水チャネルRNAについてRNA Protection Assay法を用い、現在解析中である。1.ラット消化管からの水チャネルの発現2.ラット膵、肝からの新しい水チャネルのクローニングラット膵mRNAより新しい水チャネルcloneを得た。RNase protection assay法により肝にも存在することが判明、ラット肝Libraryより全長のcDNAをクローニングし、シークエンスを決定し、GenbankにAQP8として登録した。さらにNothern blot、RNase protection assay法によりラット肝、膵のほか大腸、唾液腺に存在することを明らかにした。小腸大量切除術後では空腸のAQP8発現が一時的に増加する傾向が認められた。
高脂血症が変形性膝関節症の進行に与える影響について

近年,血管内皮における酸化低比重リポ蛋白(ox-LDL)の特異的受容体として同定されたLOX-1(レクチン様酸化LDL受容体1)が軟骨細胞にも発現していることが示され,軟骨変性との関連が示唆されている.そこで本研究では高脂血症負荷が軟骨変性を促進するかどうかをin-vivoにおいて検討することとし,遺伝性高脂血症ウサギ(KHC)とコントロールとして日本白色ウサギ(JW)を用いて膝前十字靭帯と内側半月を切除して実験的変形性膝関節症を作成し,軟骨変性を組織学的に評価し,また免疫染色法によりox-LDLの局在とLOX-1の発現を検討した.その結果,KHCではSham手術側においても軟骨変性の進行を認めた.また手術側においてJWでは軟骨の表層・移行層の繊維化や細胞数増多が特徴的に認められたのに対し,KHCでは軟骨の菲薄化・細胞数減少が顕著であった.免疫染色ではKHC軟骨のSham側と両群の手術側にox-LDL,LOX-1の局在がみられた.塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)は軟骨細胞の重要な成長因子であるが,免疫染色でbFGF陽性細胞率を検討したところKHCでは手術側,Sham側ともに有意に低下していた.また,JWより採取した培養軟骨細胞で検討したところ酸化LDLは経量的・経時的にbFGFmRNA発現を抑制した.本研究により高脂血症負荷は実験的変形性関節症を促進させることが示され,その増悪にはox-LDLの蓄積とLOX-1の発現,およびそれらによるbFGF発現抑制も関与している可能性が示された.本研究は近年世界的に肥満との関係などが注目されている関節症を,生活習慣病の一つである高脂血症負荷という観点からin-vivoにおいて捉えた報告ということができる.近年,血管内皮における酸化低比重リポ蛋白(ox-LDL)の特異的受容体として同定されたLOX-1(レクチン様酸化LDL受容体1)が軟骨細胞にも発現していることが示され,軟骨変性との関連が示唆されている.そこで本研究では高脂血症負荷が軟骨変性を促進するかどうかをin-vivoにおいて検討することとし,遺伝性高脂血症ウサギ(KHC)とコントロールとして日本白色ウサギ(JW)を用いて膝前十字靭帯と内側半月を切除して実験的変形性膝関節症を作成し,軟骨変性を組織学的に評価し,また免疫染色法によりox-LDLの局在とLOX-1の発現を検討した.その結果,KHCではSham手術側においても軟骨変性の進行を認めた.また手術側においてJWでは軟骨の表層・移行層の繊維化や細胞数増多が特徴的に認められたのに対し,KHCでは軟骨の菲薄化・細胞数減少が顕著であった.免疫染色ではKHC軟骨のSham側と両群の手術側にox-LDL,LOX-1の局在がみられた.塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)は軟骨細胞の重要な成長因子であるが,免疫染色でbFGF陽性細胞率を検討したところKHCでは手術側,Sham側ともに有意に低下していた.また,JWより採取した培養軟骨細胞で検討したところ酸化LDLは経量的・経時的にbFGFmRNA発現を抑制した.本研究により高脂血症負荷は実験的変形性関節症を促進させることが示され,その増悪にはox-LDLの蓄積とLOX-1の発現,およびそれらによるbFGF発現抑制も関与している可能性が示された.本研究は近年世界的に肥満との関係などが注目されている関節症を,生活習慣病の一つである高脂血症負荷という観点からin-vivoにおいて捉えた報告ということができる.高脂血症自然発症(KHC)ウサギを用いて、高脂血症負荷が変形性膝関節症・軟骨変性の進行に与える影響を検討することを目的に実験的膝関節症を作成し、組織学的な検討を行った.コントロールの日本白色ウサギと実験群の高脂血症自然発症(KHC)ウサギの右膝関節において前十字靭帯切離・内側半月切除手術を行い変形性膝関節症を誘発した。術後8週でウサギを堵殺し、大腿骨遠位荷重部骨軟骨を摘出した。これらのHE染色、サフラニン0染色を行いModified Mankin scoringsystemにより軟骨変性の程度を評価した。その結果、日本白色ウサギ(JW)とKHCウサギのModified Mankinscoreはそれぞれ15.5 (SD=4.8,n=6)および23.0 (SD=1.8,n=6)で有意な軟骨変性の進行を認めた(p<0.01)。さらに、脂肪体の部分切除のみを行った左膝(sham手術側)においても、また、JWウサギとKHCウサギのModified Mankinscoreはそれぞれ2.5 (SD=2.0,n=6)および6.5 (SD=1.4,n=6)で有意な軟骨変性を認めた(p<0.05)。手術側スコアの項目では、JWでは軟骨表面の繊維化・軟骨の細胞増殖反応が目立つのに対して、KHCウサギでは軟骨細胞の脱落・軟骨組織の菲薄化が目立ち、軟骨細胞の機械的ストレスに対する細胞反応の低下・修復能力の低下がスコアの低下の主因であることが示唆された.ラット培養軟骨細胞において酸化LDLとLOX-1の結合がAktのリン酸化を阻害し、細胞活性の低下、非アポトーシス性細胞死をもたらすことが知られている.

そこで現在、酸化ボスファチヂルコリンに対するモノクローナル抗体およびLOX-1に対する抗体を用いて、それぞれ酸化LDLおよびLOX-1の免疫染色を現在行っている.高脂血症自然発症(KHC)ウサギを用いて、高脂血症負荷が変形性膝関節症・軟骨変性の進行に与える影響を検討することを目的に実験的膝関節症(前十字靭帯切離・内側半月切除手術モデル)を作成し、組織学的な検討を行った.コントロールの日本白色ウサギ(JW)との比較においてKHCウサギでは軟骨細胞の脱落・軟骨組織の菲薄化が目立ち、軟骨細胞の機械的ストレスに対する細胞反応の低下・修復能力の低下がスコアの低下の主因であることが示唆された.ラット培養軟骨細胞において酸化LDLとLOX-1の結合がAktのリン酸化を阻害し、細胞活性の低下、非アポトーシス性細胞死をもたらすことが知られている.そこで、LOX-1に対する抗体および酸化ボスファチヂルコリンに対するモノクローナル抗体を用いて、それぞれLOX-1およびの酸化LDL免疫染色を行った.LOX-1の免疫染色では、手術側のJWの染色性は軟骨の全層に認められるも、KHCでは細胞が脱落しているため、軟骨の深層を中心に染色性が認められる。Sham側はJW・KHC共に、軟骨組織移行層から深層にかけて染色性が認められた。酸化LDL免疫染色では、手術側ではJWとKHCともにLOX-1染色とほぼ同部位での染色性が認められた。Sham側のKHCでは、LOX-1とほぼ同部位での染色性を認めるが、JWではほとんど染色性を認めなかった.さらに、軟骨細胞における主要な増殖因子の一つであるbFGFの免疫染色を行った.JWの手術側ではほぼ全層にわたって軟骨細胞に強い染色性が認められた。JWのSham側でも放射状層を中心に染色性が認められた。KHCの手術側でも放射状層を中心に染色性が認められるが、JWに比較して陽性細胞数は少なかった。KHCのSham側では殆どbFGF染色性が認められなかった。以上より、KHCウサギにおける軟骨細胞の機械的ストレスに対する細胞反応の低下・修復能力の低下には、bFGFの産生低下の関与が示唆された.現在、ウサギ軟骨を培養系に移し、酸化LDLとLOX-1の結合が軟骨細胞の活性に与える影響、bFGFの産生能に与える影響について検討している.高脂血症自然発症(KHC)ウサギを用いて、高脂血症負荷が変形性膝関節症・軟骨変性の進行に与える影響を検討することを目的に実験的膝関節症(前十字靭帯切離・内側半月切除手術モデル)を作成し、組織学的な検討を行った.コントロールの日本白色ウサギ(JW)との比較においてKHCウサギでは軟骨細胞の脱落・軟骨組織の菲薄化が貝立ち、軟骨細胞の機械的ストレズに対する細胞反応の低下・修復能力の低下がスコアの低下の主因であることが示唆された.塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)は軟骨細胞の重要な成長因子である.そこで免疫染色でbFGF陽性細胞率を検討したところKHCでは手術側・Sham側ともに有意に低下していた.IMCのSham側では殆どbFGF染色性が認められなかったことより、KHCウサギにおける軟骨細胞の機械的ストレスに対する細胞反応の低下・修復能力の低下には、bFGFの産生低下め関与が示唆された.そこで、ウサギ軟骨を培養系に移し、酸化LDLとLOX-1の結合が軟骨細胞の活性に与える影響、bFGFの産生能に与える影響について検討した.JWより採取した軟骨組織より得た培養軟骨細胞で検討したところ酸化LDLは経量的・経時的にbFGF mRNA発現を抑制した.本研究により高脂血症負荷は実験的
蝸電図及びABRを用いた聴覚時間分解能の客観的評価

音の入力に対し,蝸牛から中枢に出力される情報は,周波数情報と時間情報があり,語音の認知には時間情報が重要な役割を果たしていることがわかってきた.その観察手段として,一次聴ニューロンの同期的発火である蝸電図のCAPの時間パターンを調べることでヒト蝸牛での時間情報処理をある程度推測できると考え,短母音[a]無声子音[ka],有声子音[ma],[ba],[da]を刺激音とした蝸電図を記録しその時間情報を観察した.そのCAPの特徴は,母音部基本周波数に一致する周期的CAPを認める.(1)[m],[b],[d]開始部のCAPは,弱く,(2)[m]の有声子音部は周期的CAPを認めた.(3)[k],[b],[d]の破裂部で強いCAPを認めた.このように有声子音を刺激音としたCAPの発火パターンはそれぞれ特徴があり.無声子音[k]あるいは短母音[a]とも異なっており,このような時間情報の違いが語音の認知に寄与していると考えられる.語音の時間情報をより効果的に蝸牛に入力させる手段として不定長時間窓ごとの時間領域における音圧レベル圧縮増幅法(TD-1圧縮増幅)を開発した.本方式による刺激音で内耳性難聴者12例において語音蝸電図のCAPを指標として蝸牛から出力される語音の時間情報を観察した.その結果,[ka]を刺激音とする蛸電図で全例正常耳と異なるCAPの発火パターンを認め,[ka]をTD-1型圧縮増幅した刺激音により,7例で[k]の開始部CAPが認められるようになり,計8例が開始部で正常耳と同じCAPの発火パターンをとり,1例で母音部のCAPの開始時間が改善し,4例で開始部と母音部のCAPが正常耳と同じパターンになり,TD-1型圧縮増幅で語音.特に子音部の時間情報が効率的に蝸牛から出力されることが各観的観察できた.音の入力に対し,蝸牛から中枢に出力される情報は,周波数情報と時間情報があり,語音の認知には時間情報が重要な役割を果たしていることがわかってきた.その観察手段として,一次聴ニューロンの同期的発火である蝸電図のCAPの時間パターンを調べることでヒト蝸牛での時間情報処理をある程度推測できると考え,短母音[a]無声子音[ka],有声子音[ma],[ba],[da]を刺激音とした蝸電図を記録しその時間情報を観察した.そのCAPの特徴は,母音部基本周波数に一致する周期的CAPを認める.(1)[m],[b],[d]開始部のCAPは,弱く,(2)[m]の有声子音部は周期的CAPを認めた.(3)[k],[b],[d]の破裂部で強いCAPを認めた.このように有声子音を刺激音としたCAPの発火パターンはそれぞれ特徴があり.無声子音[k]あるいは短母音[a]とも異なっており,このような時間情報の違いが語音の認知に寄与していると考えられる.語音の時間情報をより効果的に蝸牛に入力させる手段として不定長時間窓ごとの時間領域における音圧レベル圧縮増幅法(TD-1圧縮増幅)を開発した.本方式による刺激音で内耳性難聴者12例において語音蝸電図のCAPを指標として蝸牛から出力される語音の時間情報を観察した.その結果,[ka]を刺激音とする蛸電図で全例正常耳と異なるCAPの発火パターンを認め,[ka]をTD-1型圧縮増幅した刺激音により,7例で[k]の開始部CAPが認められるようになり,計8例が開始部で正常耳と同じCAPの発火パターンをとり,1例で母音部のCAPの開始時間が改善し,4例で開始部と母音部のCAPが正常耳と同じパターンになり,TD-1型圧縮増幅で語音.特に子音部の時間情報が効率的に蝸牛から出力されることが各観的観察できた.我々がヒトの声を聞き取りその内容を理解するまでのあいだに,末梢聴器から聴覚中枢までの聴覚路で様々な処理がなされている.聴覚路のどこかで障害を受けると聞こえる音が小さくなり,音声処理能力も低下する.この能力には周波数選択能と時間分解能があり,特に時間分解能は語音弁別に密接に関係しており,この評価は語音認知のメカニズムを知るうえで重要である.従来から時間分解能はギャップテストという方法で自覚的に評価されていた.今までの研究で我々は既にこれを聴覚の電気生理学的検査である蝸電図と聴性脳幹反応(ABR)を用いた他覚的評価法を開発した.これによって,従来の方法では被検者の集中力や知能に左右されていたギャップテストを客観的に評価できるようになった.本研究では,蝸電図及びABRを用いた客観的ギャップテストを聴力正常者16名に同時施行した.刺激波形は持続時間50msecの4khz正弦波の第1音と,同じ周波数で長さ2msecの第2音の間にギャップ(無音部)を置いたもので,ギャップの長さは20msecより1msecまで作成した.第2音の立ち上がりで誘発される複合活動電位およびABR第V波の閾値を客観的時間分解能の値とした.その結果,ギャップ閾値は内耳レベルと下丘レベルとで約4msecと一致した.

この値は従来の自覚的ギャップテストの閾値とほぼ同じであった.内耳における第2音に対する反応がそのまま自覚的なギャップの認知を決定すると判断された.以上の事より,聴力正常者では内耳レベルで時間分解能が規定されており,内耳より中枢の聴覚路には時間分解能に影響を及ぼす部位が無いと考えられた.耳から入った音声情報は,蝸牛において周波数情報と時間情報に選別される.言語音のように経時的にへんかする音声信号では時間情報が重要なことが知られているが,これまでは,内耳における言語の時間情報を客観的に観察評価されていなかった.今回,蝸牛での時間情報を蝸電図の複合活動電位(以下CAP)を指標として観察することができ,母音/a/無声子音/k/有声子音/m//b//d/を刺激音とした蝸電図波形がそれぞれでちがうパターンをしめし,このそれぞれ異なる時間パターンが語音の認知に深く関与している可能性が推察された.また,内耳性難聴者では蝸牛における語音の時間情報の中枢への出力が低下しておりそれが語音の認知が正常者より劣っている一因と考えられる.そこでわれわれが開発した時間情報を強調するような時間領域の音圧圧縮増幅法を用いることにより実際に内耳性難聴者の蝸牛より出力される時間情報が,正常耳のパターンに改善されることを単母音/a/CV音節/ka/のCAPを代表例にして確認することができた.蝸牛における時間情報の客観的評価が語音蝸電図により可能であり,語音認知における時間情報の必要性・内耳性難聴者における時間情報の改善の客観的指標を明らかにすることができた.音の入力に対し,蝸牛から中枢に出力される情報は,興奮の起こった一次聴ニューロンの周波数情報と,その発火パターンでとしてコーディングされる時間情報があり,語音の認知に関してこの時間情報が重要な役割を果たしていることがわかってきた.その観察手段として,一次聴ニューロンの同期的発火である蝸電図のCAPの時間パターンを調べることでヒト蝸牛での時間情報処理をある程度推測できると考え,有声子音[ma],[ba],[da]を刺激音とした蝸電図を記録しその時間情報を観察した.その結果Secker-Walkerらがネコのデータをもとに[ba][da]を刺激音として一次聴ニューロンの発火を表したneurogramから予想される一次聴ニューロンの複合的電気反応と,今回の[ba][da]を刺激音としたCAPの結果が合致し,語音の時間情報を観察に有用であることが確認できた.有声子音によるCAPの特徴は,母音部基本周波数に一致する周期的CAPを認める.(1)[m],[bコ,[d]開始部のCAPは,[kコ,[a〕と違って弱い(無声子音[k]と短母音[a]を刺激音としたとき,[a][k]とも開始部の強いCAPと,母音持続部で基本周波数に÷致したCAPであることが以前の研究でわかっている).(2)[m]の有声子音部でも[kコではない周期的CAPを認めた(3)[b],[dコの破裂部で[kコ開始部(=破裂部)と同様に強いCAPを認め,この点が[m]と大きく異なっているものであった.このように有声子音,無声子音,母音を刺激音としたCAPの発火パターンはそれぞれ特徴があり,有声子音間でも[m]と[b],[d]では異なっており,このような時間情報の違いが語音の認知に寄与していると考えられる.
一貫指導を基盤としたサッカー育成年代ゴールキーパーのコーチング能力形成過程の解明

サッカーのゴールキーパー(GK)育成プログラムは技術,体力,戦術的アプローチがあるが,GK固有の「コーチング能力」の具体的な育成方針が十分に示されていない問題を抱えている.本研究では主に国内外のサッカー育成指導者(GKコーチ含)への面接調査と,各育成年代GKが試合中に展開する「指示」を実態調査し,逐語記録化した音声(指導者の語りやGKの指示)を手掛かりにテキストマイニング手法を用いて各育成年代GKの「コーチング」の実態と構造を分析する.また,それらの結果を基盤にU-12年代から段階的なGKの「コーチング能力」形成過程を解明し,戦術的思考能力の指導方針及び指導モデルを理論的・実践的に創出する.サッカーのゴールキーパー(GK)育成プログラムは技術,体力,戦術的アプローチがあるが,GK固有の「コーチング能力」の具体的な育成方針が十分に示されていない問題を抱えている.本研究では主に国内外のサッカー育成指導者(GKコーチ含)への面接調査と,各育成年代GKが試合中に展開する「指示」を実態調査し,逐語記録化した音声(指導者の語りやGKの指示)を手掛かりにテキストマイニング手法を用いて各育成年代GKの「コーチング」の実態と構造を分析する.また,それらの結果を基盤にU-12年代から段階的なGKの「コーチング能力」形成過程を解明し,戦術的思考能力の指導方針及び指導モデルを理論的・実践的に創出する.
ドパミンおよびアドレナリン受容体が側坐核のアセチルコリン神経活動制御に果たす役割

口腔ジスキネジアは舌の突出を伴う顎顔面の異常な反復運動である。口腔ジスキネジアの発症機構は不明だが,げっ歯類の反復性顎運動誘発への側坐核のドパミン(DA)神経亢進の関与が行動実験から示されている。本研究では側坐核のDA放出制御におけるアドレナリン受容体サブタイプの役割について無麻酔非拘束ラットを用い,in vivo微小透析法により検討した。我々は内因性μ受容体agonist候補物質のendomorphin(EM)-1とEM-2は側坐核のDA放出を促進することを報告している。側坐核のアセチルコリン(Ach)神経にはμ受容体が発現しているため,EM類がAch放出に及ぼす効果についても解析した。側坐核への電依存性Na+チャネル阻害薬のTTX(480 pmol)の灌流投与により,同部位から回収した試料中のAchは70%以上消失した。つぎに側坐核へEM-1,EM-2(6,30 nmol)を灌流投与したところ,同部位のAchは用量依存的に約3050%減少した。選択的μ受容体antagonistのCTOP(3 nmol)の側坐核への投与は同部位のAchにほとんど影響を与えなかったが,EM-1とEM-2がそれぞれ誘発したAchの減少をいずれも強く抑制した。以上の結果から,本実験条件下で側坐核から得たAchはその大部分が神経活動依存性に細胞外へ放出されたものであることが示された。また,EM-1またはEM-2による側坐核のμ受容体刺激は同部位のAch放出を減少させることが示された。側坐核においてアセチルコリン神経と密接な機能的相互作用を示すドパミン(DA)神経の活動制御機構について,アドレナリン受容体サブタイプの役割の面から検討した。青斑核および延髄腹側部のノルアドレナリン(NA)神経は,中脳-辺縁系DA神経が投射する側坐核へ入力している。我々は側坐核のα1受容体は同部位のDA神経活動を抑制的に調節することを報告している(Saigusa et al., 2012)。α1受容体にはα1A,α1B,α1Dのサブタイプがあるが,α1受容体作動薬のmethoxamineが誘発した側坐核のDA神経活動の低下におけるこれら受容体サブタイプの関与は明らかでない。そこで本研究では,α1受容体の各サブタイプの選択的拮抗薬はmethoxamineが誘発した側坐核のDA放出低下を抑制するか否かを指標として,α1受容体サブタイプがDA神経活動抑制において果たす役割について検討した。実験にはS-D系雄性ラット(体重約200 g)を用い,無麻酔非拘束の条件下で,脳微小透析法により側坐核から回収した細胞外液中のNAおよびDAをHPLC-ECD法で20分毎に定量した。使用薬物は灌流液に溶解し,透析プローブから逆透析で側坐核に局所灌流投与した。その結果,methoxamineによるDA放出減少は,基礎NAおよびDA量に影響がない用量の5-methylurapidil(α1A受容体拮抗薬),cyclazosin(α1B受容体拮抗薬),BMY7378(α1D受容体拮抗薬)をそれぞれ前処置したところ,いずれの拮抗薬の投与でもほぼ完全に消失した。以上の結果からα1受容体刺激による側坐核DA神経活動抑制には,同部位のDA神経終末上のα1A,α1B,α1Dの各受容体を同時に刺激する必要があることが示唆された。薬理学側坐核のμ受容体の選択的刺激が同部位のAch神経に及ぼす影響について,側坐核の細胞外Ach量を指標として,無麻酔非拘束ラットを用いたin vivo脳微小透析法により検討した。その結果,側坐核から得たAchはその大部分が神経活動依存性に細胞外へ放出されたものであることが示された。これらの実験から得られた成果の一部を2014年3月に宮城県で行われた日本薬理学会で発表を行うことができた。すでに本研究成果の一端は2014年3月に宮城県で行われた日本薬理学会で発表した。当該年度は,かねてより課題としていたμ受容体を介した側坐核におけるAch神経活動の制御機構の解明のほか,EM-2の側坐核への灌流投与がopioid受容体刺激を介さずに誘発したDAの細胞外放出促進作用は,physostigmineの灌流液への添加を行っていない条件下で観察されたものである。

昨年度の研究結果ではphysostigmineの灌流液へ添加の結果,側坐核へ灌流投与したEM-2が同部位のμ受容体刺激を介したAch放出抑制作用を示した。そこで今後は,physostigmineの灌流液への添加がEM-2の誘発したμ受容体非依存性の側坐核のDA神経促進効果に及ぼす影響を観察し,この内因性μ受容体agonist候補物質の非opioid作用の発現機構について側坐核のAch神経の関与の面から解明に取り組むことを計画している。またこれらの研究成果を,2014年6月22から26日にかけて5日間にわたりCanadaのVancouverで行われるCINP(国際神経精神薬理学会)にて発表する予定である。【役割分担】統括,神経化学・行動学・組織学実験の遂行:青野悠里(研究代表者),実験の遂行:関野麗子(研究協力者),滝口旗一(研究協力者),田口寛子(研究協力者),木口友里(研究協力者),研究の助言:三枝禎(研究協力者),J. L. Waddington(海外研究協力者)当初予定していた実験が終了したため、114,441円を使用せずに残した。次年度へ繰り越す114,441円と次年度経費のうち100万円を実験のための物品費として使用することを計画しており,実験動物,試薬,HPLC消耗品の購入に充てる。このほかに40万円を旅費として使用し,2014年6月22から26日にかけて5日間にわたりCanadaのVancouverで行われるCINP(国際神経精神薬理学会)における研究成果の発表のための交通費と現地での滞在費(6泊8日)に充てることを計画している。