hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新製品マーケティングの展開とその成功要因に関する研究

後者については、内外の文献のレビューを通して、新製品成果についての概念的な考察を行った。特にCoopcrやSAPPHOプロジェクトの研究をはじめとして、多くの先行研究について検討を行った。また、新製品成果におけるマーケティングチャネルの構築と管理の重要性については、中国自動車企業の研究を通して考える機会を持つことができた。今年度の研究については、日本商品学会西日本合同部会(同志社大学、2002年11月)や関連する研究会(ITS研究会2002年12月等)で報告するとともに、「新製品開発の成功要因: CooperとSong & Parryの研究を中心に」として学会雑誌に発表を予定している。また、中国自動車企業の調査研究については、福岡大学研究会議(2002年12月)や中国復旦大学でのワークショップ(2003年3月)で報告してきた。本研究は、わが国企業の新製品マーケティングの実態を明らかにするとともに、新製品の開発・生産・販売を含む新製品マーケティングの成果を規定する要因を析出するために計画された3年にわたる研究である。今年度は最終年であり、前年度に引き続いて新製品マーケティングに関する実態把握の調査や文献的な考察を行ってきた。昨年度と同様に、中堅中小企業を含む企業のマーケティング活動や、新製品マーケティングについてのヒアリング調査等を行った。特に、中小企業については昨年と同様に、中国地域ニュービジネス協議会ややまぐち産業振興財団などの協力を得て進めた。今年度は、流通企業による新製品の企画や開発の問題についても調査する機会を得て、相応の成果をあげるヒとができた。加えて、山口県の協力によって、消費者のプランド観についての調査や企業に対する商品やブランド開発についての調査を行うことができた。これらは新製品マーケティングの展開やその成果規定要因の研究という本研究の課題に対して、間接的ではあるが深く関係している。また、新製品成果におけるマーケティング・チャネルの構築と管理の重要性については、昨年と同様に、中国自動車企業の研究を通して考える機会をもつことができた。本研究の成果の一部は、スエーデンで開かれたC&C研究会や日本商品学会西日本合同部会(高松大学、2003年12月)等で報告するとともに、幾つかの論文にまとめて発表することができた。C&C研究会では、本研究課題に密接に関連する報告が幾つかなされ、有意義に意見の交換をすることができた。
背景脳活動が遍歴する下でも恒常的に感覚認識できる神経計算機構の解明

脳の研究においては,ある神経細胞がどんな感覚刺激に応答するのかを調べるのが慣例であるが,近年は何も刺激が無い時の活動も注目されつつある.そして意外なことに,この背景活動は大きく変動する一方,刺激に対する応答は実は相対的に小さい事が報告された.本課題では,はたして脳は,背景活動が大変動する中,どのようにして感覚刺激を認識できるのか,の解明を目指す.背景活動を考慮した新規脳情報処理モデルの導出は,より精度の高い脳信号解読を可能とし,深層学習の設計指針を与え,脳疾患の病因解明にも繋がりうると期待される.本年度は,変動に対して恒常性を持つ脳の仕組みを明らかにする目的で,特に,背景活動成分を分離除去した残さ活動が,細胞間でどの程度同期しているか,を情報幾何学に基づいて推定できる相関の指標を新規開発した.この指標により,背景活動由来の長期成分の相関と,固有の短期成分の相関とを別々に見積もることができるだけでなく,機械学習を用いたデコーディング解析と組み合わせることで,それぞれの成分の存在が神経情報表現にとって得なのか損なのかを解明できるようになる.我々は,一次視覚野を例にして,このような解析が実際にできることを実証した.その成果は,Society for Neuroscience年会で学会発表を行なった他,同学会の学術雑誌eNeuroにおいて論文発表も行なった.またeNeuro論文に付属する資料として,R言語での計算コードを公開した.研究代表者と研究協力者(学生)による研究成果として、本研究課題の1年目にして、論文を出版する成果をあげることができた。引き続き,「はたして脳は,背景活動が大変動する中,どのようにして感覚刺激を認識できるのか?」の解明を大きな目標とする.特に,変動に対して恒常性を持つ脳の仕組みを明らかにする目的で,背景が経時変化する神経応答データにおいて,刺激判別の精度を最大化する特徴量は何かを探る.特に,これまでに研究代表者が導出した指標を含めて,現代幾何学の異なる大域整合性概念を仮説とした特徴量を比較することで,何に応答しないのかという不変性を解明する.例えば,情報幾何学で背景活動成分を分離除去した残さから相対的なチューニングカーブ(刺激と応答の対応曲線)を計算し特徴量とする.脳の研究においては,ある神経細胞がどんな感覚刺激に応答するのかを調べるのが慣例であるが,近年は何も刺激が無い時の活動も注目されつつある.そして意外なことに,この背景活動は大きく変動する一方,刺激に対する応答は実は相対的に小さい事が報告された.本課題では,はたして脳は,背景活動が大変動する中,どのようにして感覚刺激を認識できるのか,の解明を目指す.背景活動を考慮した新規脳情報処理モデルの導出は,より精度の高い脳信号解読を可能とし,深層学習の設計指針を与え,脳疾患の病因解明にも繋がりうると期待される.本年度は,変動に対して恒常性を持つ脳の仕組みを明らかにする目的で,特に,背景活動成分を分離除去した残さ活動が,細胞間でどの程度同期しているか,を情報幾何学に基づいて推定できる相関の指標を新規開発した.この指標により,背景活動由来の長期成分の相関と,固有の短期成分の相関とを別々に見積もることができるだけでなく,機械学習を用いたデコーディング解析と組み合わせることで,それぞれの成分の存在が神経情報表現にとって得なのか損なのかを解明できるようになる.我々は,一次視覚野を例にして,このような解析が実際にできることを実証した.その成果は,Society for Neuroscience年会で学会発表を行なった他,同学会の学術雑誌eNeuroにおいて論文発表も行なった.またeNeuro論文に付属する資料として,R言語での計算コードを公開した.研究代表者と研究協力者(学生)による研究成果として、本研究課題の1年目にして、論文を出版する成果をあげることができた。引き続き,「はたして脳は,背景活動が大変動する中,どのようにして感覚刺激を認識できるのか?」の解明を大きな目標とする.特に,変動に対して恒常性を持つ脳の仕組みを明らかにする目的で,背景が経時変化する神経応答データにおいて,刺激判別の精度を最大化する特徴量は何かを探る.特に,これまでに研究代表者が導出した指標を含めて,現代幾何学の異なる大域整合性概念を仮説とした特徴量を比較することで,何に応答しないのかという不変性を解明する.例えば,情報幾何学で背景活動成分を分離除去した残さから相対的なチューニングカーブ(刺激と応答の対応曲線)を計算し特徴量とする.初年度の金額のみでは、100万円程度の大型計算機を購入するには不足したため、繰越が生じた。次年度における使用計画としては、大型計算機の購入、あるいは、成果報告のための外国旅費に使用する予定である。
GABAシナプスにおけるカルシウム結合蛋白、レセプター及びトランスポーターの解析

神経細胞内でのカルシウム結合蛋白parvalbuminPVの局在を明らかにするため小脳のPurkinje細胞をモデルとして選び、コロイド金(直径15nm)標識二次抗体を用いた、いわゆるコロイド金免疫電顕を行なった。直接倍率1万倍で撮影し、写真上でPurkinje細胞及び他の細胞の各部位を同定し、単位面積(1mm^2)当たりのコロイド金粒子数を測定した。コロイド金免疫電顕におけるコロイド金密度と抗原密度との相関について調べる目的で、既知量のPVを含有している標準試料を作製した。ラットの筋肉からHPLCを用いてPVを精製し、牛血清アルブミンに一定量の精製PVを溶解し、固定液(グルタールアルデヒド)を混合して固定した。固定した標準試料は脳組識と全く同様の方法でLowicry1樹脂包理し、電顕レベルでの包理後免疫細胞化学を行なった。コロイド金密度(粒子数/μm^2)は細胞体及び樹状突起で15-20、軸索及び軸索終末50-60であり、明らかに細胞内におけるPVの濃度差があった。速筋であるm.gastronemiusでは生化学的解析により細胞内のPV濃度が300-550μMと推定されるがコロイド金免疫電顕でのコロイド金密度をPV標準試料のCalibration curveで検討したところ筋内PV濃度は400μMであると推定された。このことからPV標準試料のCalibration curveが一般の生物試料に適用できることが明らかになった。これに基づいてPV濃度を細胞体樹状突起では50-100μM、軸索及び終末部では1-2mMであろうと推定した。PVは小脳Purkinje細胞内分布での解析から、ニューロンの出力部である軸索及び軸索終末により高濃度存在していることが示唆された。このことはPVの発現が発生的にはニューロンの成熟と平行して増加してくることも含めて、その機能を考える上で重要な意味を有していると思われる。
サイトカイン共通受容体(γc鎖)を介した細胞内情報伝達機構

IL-2受容体からの増殖シグナル伝達には、チロシンキナーゼ分子とそれらの基質蛋白分子が重要な役割を担っている。本研究ではIL-2受容体に会合するチロシンキナーゼの下流のシグナル伝達に関わる分子の同定を行った。その結果、IL-2刺激後速やかにチロシンリン酸化を受ける分子量70kDaの蛋白分子(pp70)を同定し、その遺伝子を単離した。pp70は分子内にSH3ドメインやITAM領域を有しており、新規のシグナル伝達アダプター分子と考えられることから、"STAM(Signal Transducing Adaptor Molecule)"と名付けた。STAMはIL-2受容体γc鎖に会合するJak3やGM-CSF受容体βc鎖に会合するJak2と直接会合し、これらチロシンキナーゼの下流のシグナル伝達、特に細胞増殖やc-myc誘導に関わっている可能性が示唆された。
泥干潟底棲生物の生息環境と水―底質環境改善を目指した特殊堤開発の試み

今年度の実施結果は以下の通りである.1.佐賀県鹿島市七浦地区の現地干潟域にて逆T字形構造物を設置し,堤内部での浮泥の堆積状況の観測を行った.計測開始後,1,2ヶ月経過後2,3cmの浮泥堆積が観測された.その後も観測を継続したが,9月期の台風の影響による構造物の破壊・流失のため,計測を中止した.特殊堤流失前の調査結果および別途実施した浮泥流入の計算結果から,堤内構造としては凹状よりもマウンド状にすることで浮泥の沈積を緩和させうるとの結果を得た.2.泥干潟面上に流向・流速計,クロロフィル・濁度計を設置し,大潮小潮大潮の半月周期にわたるモニタリングの結果,干潟底面上付近のSSは、上げ潮開始時と下げ潮の干潟干出前に高濃度を示した。上げ潮開始時のSS濃度のピークは,干潟面を通過する水流による強い攪乱のために生じ,下げ潮のそれは、巻き上げられた粒子が底面に沈積せず、その近傍で高濃度の懸濁液として存在することと水位低下を伴うためと考えられる.3.上げ潮では、巻き上げ限界流速Vc(ここでは,≒10cm/s)を閾値としてSSの急激な増加現象が見られた。下げ潮では、流速減速時に高いSSが現れる。これは、巻き上げられた底泥粒子の沈降速度が小さく、かつ凝集性や粒度組成などのため、SSと流速にヒステリシス的関係が生じるからである.4.泥干潟上のChl-a濃度は干潟のない海域での値の数倍程度大きく、干潟干出時における付着珪藻類の干潟面での増殖および泥干潟に生息する底棲生物にとってその餌場としての干潟の役割を示している。また,干潟上に設置したセンサーによるデータのうちSSとChl-aには、強い相関関係が見られた。これは日中干潟が干出している際、干潟表層の付着珪藻類が干潟面で増殖し、干潟が冠水し始める上げ潮初期に、底泥の巻き上げとともに水中に供給されたものと考えられる。
学習者とともに学ぶ持続可能性日本語教育教員養成プログラムの構築

H24年度は、持続可能性日本語教育のシラバス・教材試作と実践での運用を国内で行い、グローバル化社会を生きる「群像」と、自他が一蓮托生なことを実感する「食」に関するテーマが、自他・世界の関係とそこでの生き方を意識化させると確認した。H25年度は、海外の日本語教師研修での教材の応用と教師の意識を調査し、教師が世界認識醸成の必要性と教師の役割に対する不安を感じていることを示した。H26年度は国内の実践を対象とし、学生に対する教師のフィードバックを分析した。教師自身の自問自答プロセスを学習者に提示、学び手の思考を承認しながら、情報提供や精緻化、自発する問いの促進、などがその特徴として見られた。グローバル化社会を生きるための力を育む言語教育としての持続可能性日本語教育の展開として、平成25年度は、第一に、海外で日本語教育に従事する教員に対する働きかけを行なった。具体的には、台湾、韓国で講演及び教師研修(ワークショップ)を行ない、持続可能性日本語教育に関する情報発信と実践・研究の普及に努めた。その際、今後の教材開発に反映させるため、グローバル世界における各国のローカルな事情を調査し、様々な文脈での日本語教育に汎用するための方法を追究した。第二に、持続可能性日本語教育を担う`同行者としての教師'がどのようにグローバル世界を捉え、どのように人材を育成しようとしているかを分析した(第34回異文化間教育学会、韓國日語教育学会第24回国際学術大会で発表)。分析の結果、`同行者としての教師'がグローバル世界の現状に向き合う姿勢が醸成され、その姿勢が教師としての資質につながることが示唆された。第三に、学部生対象のリベラルアーツ科目を対象としたデータ分析を行ない、学生と教員の相互作用のありようを調査した(京都大学高等教育研究推進センター第20回大学教育研究フォーラムで発表)。分析の結果、教室内で教員がグローバル世界の具体的な見え方を一人の人間として情報発信することが、学生が教室外でグローバル世界を能動的に捉えようとする姿勢を促し、さらに学生のグローバル世界に対する認識に対するふり返りコメントに対し、教員がグローバル世界の状況をさらに具体的に考察し、それを学生と共有するという一連のやりとりが見られた。このことから、グローバル世界を生きる一対一の人間としてグローバル世界を捉え、そのことを教員と学生が共有することが、互いの認識の醸成に相互に働きかけることが示唆された。日本国内の大学を主なフィールドとして、持続可能性日本語教育の実践に基づくシラバス・教材試作を行なった。研究協力者との協働で、学部生を対象とするリベラルアーツ科目の教室実践に従事し、シラバス・教材を作成したほか、各協力者が個別に持つ国内フィールド(大学における日本語教員養成科目・留学生科目、外国人研修生を対象とする講座など)への応用可能性を検討した。また、こうした比較的長期的な実践に加え、国外を含む各所にて、ワークショップなどのスポット的な実践を試みた。これらの実践において、受講生によるワークシート、内省レポート、教室での話し合いなどをデータとして収集した。すでに、これらのデータを一部分析し、研究大会等で知見を発信している。平成24年度においては、第一に、受講生の学びのありようを分析し、本プロジェクトで試作したシラバス・教材の有効性を示した。第二に、様々なシラバス・教材を比較検討し、持続可能な展望を醸成するシラバス・教材がどのようなものであるか、その傾向を提示した。国内のフィールドにおける持続可能性日本語教育のシラバス・教材試作の意義は、グローバル化の下予測不能な時代を生きる国内外の若者が、展望を持って主体的に生きる力を醸成することを目指し、大学における学びの質を転換させるための一方向性を示す点にある。シラバス・教材開発は、その主軸を担うと考える。本研究の最終目標である持続可能性日本語教育教員養成プログラムの構築のためには、開発のプロセスをメタ的に捉え、可視化する必要があるが、その出発点として有用なシラバス・教材がどのようなものであるかを示したのが、平成24年度の成果である。グローバル化社会を生きるための力を学習者と教師がともに醸成しあう言語教育、持続可能性日本語教育の展開として、平成26年度は、第一に教師研修、第二に研究成果の発信を行なった。教師研修は、国内および海外で行なった。国内では、早稲田大学日本語教育センター主催のワークショップにおいて、持続可能性日本語教育とは何かを問い、その体験と体験に対する内省を重視する教師研修を行なった。海外では、台湾において教師研修(協働学習導入日語教学実践研究社群:協働の理念と実践ワークショップ)を行なった。学習者とともに学ぶ同行者性を獲得する手がかりを示すことを目的とし、学習者とともに学ぶ姿勢を醸成するための協働力を、まずは教師間で培うためのワークショップを行なった。研究成果は、主に以下二点である。

第一に、日本語教育の国際研究大会(シドニー日本語教育国際研究大会)において研究成果の発信を行なった。日本語教員養成科目を対象として、学部生による毎回のふり返りレポートとそれに対する教員のコメントの相互作用を分析し、学部生の内省を教師の内省が支えていた様相を示すことで、教師が学習者とともに学ぶ同行者性が学習者の学びに還元される可能性を示唆した。第二に、台湾(協働学習導入日語教学実践研究社群)において、韓国の日本語教師による同行者性に対する認識について発表した。平成25年度に韓国で行なった教師研修で収集した「教師の同行者性」に対する認識をKJ法で分析し、同行者性に対する考え方を実践において実現する際の困難点を示すとともに、困難点を克服するための教員ネットワークのあり方について一試案を提示した。日本語教育計画通り海外の日本語教育における持続可能性日本語教育の応用可能性を追究することができた。また、平成24年度実施分の実践についても順調にデータ分析ができた。研究実施計画に述べたとおり、平成24年度は国内フィールドにおける持続可能性日本語教育のシラバス・教材開発の試作を実行した。また、国外(大韓民国、台湾)での応用可能性も視察から窺い知ることができており、平成24年度の実績を軸として平成25年度の実践・研究を行なえると考えている。平成25年度に行なった海外における日本語教育への持続可能性日本語教育の応用可能性を教材開発という形で展開していく。その際、平成24年度に国内で行なった実践との比較を行ない、国や対象を考慮に入れる。教材開発に並び、平成25年度実施分の実践で得られたデータを分析し、教材開発同様国内との比較を通じて研究として成果を発信していく。今後は、平成24年度に試作した持続可能性日本語教育のシラバス・教材が、国外で応用可能かを探る。そのために、平成24年度にシラバス・教材の試作に従事した研究協力者らと、研究協力者の母国である中国、韓国、台湾などの大学においてワークショップや研修を行ない、適宜修正・追加をしていく。当初の計画では、海外の日本語教育における波及先としてルーマニアを候補としていたが、候補先の人員配置変更により、ルーマニアでの実現が難しく、台湾に変更となった。その分旅費の支出が少なくなった。データ分析のため、録音した音声データの文字起こしを専門業者に委託する。また、教材開発後、パイロット版として今後使用するために、種類別に原本を数冊製本する。さらに、最終年度のため、成果発表を国内外で行なっていく。国外での実践を行なうため、主に代表者および研究協力者の旅費、ワークショップ・研修に必要な文房具などの消耗費に使用する予定である。また、データ分析のための図書購入、謝金への運用も必要となる。
真核細胞のDNA複製開始因子に関する研究

DNA Untwisting/Unwinding Factor(DUF)は、二重鎖DNAに負のひねりを加え、かつ二重鎖を巻き戻すことによって、in vitroでDNA複製を開始させる因子として、筆者らによってXenopus卵抽出液から単離された。この因子は、140kDaと96kDaの2種のサブユニット1:1から成る。これまでの研究で、96kDaサブユニット(DUF96)の全アミノ酸配列を決定し、これがマウスT160(V(D)J組換えのシグナル配列に結合する因子)およびヒトSSRP1(抗癌剤シスプラチン付加によって修飾されたDNAに結合する因子)と高い類似性を有することを明らかにした。本研究では、140kDaサブユニット(DUF140)の全アミノ酸配列を決定した。さらに、DUF140に対する抗体を作成し、DNA複製に対する効果を見た。(1)DUF140は出芽酵母のCDC68と約30%の類似性を持ち、N-末端近くには、DNAヘリカーゼモチーフと似た配列が、C-末端付近には酸性アミノ酸に富む部分と核移行シグナルと考えられる塩基性アミノの連続配列が存在することが分かった。E.coli内で発現させたDUF140の部分フラグメントを抗原として、抗-DUF140抗体を作成した。この抗体を用いてXenopus卵無細胞抽出液からDUFを除くと、抽出液のDNA複製活性が顕著に減少することが分かった。また、この抗体を用いてXenopus培養細胞A6を染色すると、低密度で増殖中の細胞は、核が強く染色されたが、高密度の細胞では核の染色が減少することが分かった。このことは、DUF量が細胞増殖能と密接に関連することを示唆する。さらに、増殖中のA6細胞では、かなり顕著な核小体の染色が見られ、DUFが核小体中での転写にも関与する可能性が示唆された。
微分方程式の漸近解析

1。内山は双曲型偏微分方程式の初期値問題の特異摂動のL^2理論を展開した。問題が適切になるための特性根の分離条件のもとで解の漸近展開の誤差評価に必要な高次のSobolevノルムによる解のエネルギー評価を与え、論文を発表した。ついで、解の漸近展開における補正項が消散的であるとき、各項の構成と評価を行い、微小パラメータに関する漸近展開が任意の高次Sobolevノルムで成立することをしめした。(論文投稿中)。複素WKB理論の応用を目的として微分方程式のGalois理論の検討をした。これは今後の研究課題である。2。大内は複素領域において、2階Fuchs型線形偏微分方程式の解の積分表現式を得て解の接続をし(近刊)、ある種の漸近展開をもつ関数を線形偏微分方程式の非同次項に与えると解も同様の漸近展開をもつことを示した。(近刊)。非線形方程式の形式解の評価をした。田原はFuchs双曲型方程式のGevrey族関数における適切性の論文を発表し、非線形偏微分方程式の可積分性を示し(近刊)、複素領域における正則解と特異解を決定した(近刊)。吉野は指数関数的に増大する正則関数に対するGevrey漸近展開の応用を行った(論文準備中)。3。関連する研究。西沢は共同で代数方程式に対するNewton法の収束領域の幅の下からの評価を与え、実3次多項式のmoduliについて計算機による実験的考察をした。(詳細は近刊)。西沢、関口、吉野はGalois群によって多項式の力学的挙動と代数的整数を関連づける論文を発表し、齋藤は多変数多項式の近似因数分解のアルゴリズムに関する共著論文を発表し、笠嶋は共同で微分方程式系の変換の正準性を数式処理で検証し、森本、小林は計算機を用いた円分数の素因数分解の研究の続編を共著(3名)の講究録として発表し、和田は共同でイデアル類群を計算機で決定した。関口は付値環のつくる局所環空間を研究した。(近刊)。1。(論文投稿中)。2。(近刊)。3。関連する研究。(詳細は近刊)。(近刊)。
病型分類別にみたプリオン蛋白の重合度解析と蛋白化学的異常化の評価

種々の病型のヒトプリオン病において、遠心ゲル濾過法を用いてプリオン蛋白オリゴマーを分取し、その性状を検討した。調べ得た全ての病型(孤発性クロイツフェルト・ヤコブ病(CJD)、E200K変異を伴うCJD、V180I変異を伴うCJD、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病、コドン178番2塩基欠失を伴うプリオン病)において、オリゴマー分画にはプロテイナーゼK抵抗性プリオン蛋白が多く含まれていた。低分子量のプロテイナーゼK抵抗性プリオン蛋白も同様の性状を示した。我々の実験結果より、プロテイナーゼK抵抗性プリオン蛋白はオリゴマー形成を示す事が示唆された。近年、プリオン病において強い感染性や神経細胞毒性を有しているプリオン蛋白オリゴマーの重要性が認識されるようになった。これまでに我々は、プリオン蛋白のオリゴマー分画が分取可能であるゲル濾過遠心カラム法を開発しており、その手法を用いてヒトプリオン病の各種病型に対する検討を継続中である。現在までに、孤発性プリオン病においてオリゴマー分画にPK抵抗性プリオン蛋白が多く含まれ、モノマー分画には正常型プリオン蛋白が多い事を見出した。更に、病理学的にプリオン蛋白陽性である小プラークを有する遺伝性V180I CJDに対しても検討を加え、オリゴマー分画において通常のPK抵抗性プリオン蛋白以外に、約13kDのPK抵抗性の異常プリオン蛋白を新たに見出した。ヒトプリオン病の確定診断は病理解剖が不可欠である。病型分類はプリオン蛋白遺伝子変異およびコドン129M/V多型に加え、剖検脳のwestern blotによるプロテアーゼ抵抗性プリオン蛋白(PrPres)の検出とバンドパターンの組み合わせが必要である。近年、強い感染性や神経細胞毒性を有しているプリオン蛋白オリゴマーが注目されている。我々は、プリオン蛋白のオリゴマー分画が分取可能であるゲル濾過遠心カラム法を開発しており、その手法で各種病型の検討を継続している。今年度は、新たに4例のプリオン病の剖検依頼があった。剖検したプリオン病症例は88例であり、そのうち50例で凍結脳標本を保存している。現在までに孤発性クロイツフェルト・ヤコブ病(sCJD)やV180I変異を伴うCJD (V180I CJD)、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病(GSS)において通常のwestern blotとオリゴマー分画の解析が終了している。sCJDではPrPresをオリゴマー分画に多く認め、モノマー分画には認めなかった。V180I CJDではオリゴマー分画に約10kDの低分子量PrPresをみとめ、これは新規の発見であった。GSSではオリゴマー分画においてsCJDにもみられるPrPres以外に、約8kDのPrPresを認めた。更に我々は、発症に17年の差を認めたGSSの一卵性双生児の姉妹例を検討した。発症に17年の差を認めるも、発症が早い姉にはレビー小体がみられ、発症が遅かった妹にはアルツハイマー病理がみられた。一方で、プリオン蛋白の沈着様式は似通っておりオリゴマー分画の解析においても姉妹間のPrPresのパターンは類似していた。プリオン蛋白の組織学的・蛋白生化学的な性状は類似していたが、臨床経過や合併する病理変化には違いがみられた。一卵性双生児におけるオリゴマー分画の解析は新規の所見である。ヒトプリオン病の確定診断には病理解剖が不可欠である。病型分類には、プリオン蛋白遺伝子の変異やコドン129M/V多型、剖検脳のwestern blotによるプロテアーゼ抵抗性プリオン蛋白の検出とバンドパターンが重要である。近年、強い感染性や神経細胞毒性を有しているプリオン蛋白(PrP)オリゴマーの重要性が注目されている。本研究では、ゲル濾過遠心カラム法でPrPオリゴマーを分取し、プロテイナーゼK抵抗性PrP (PrPres)も含め蛋白生化学的性状を明らかにし、その病型や組織像との関連を検討した。孤発性クロイツフェルト・ヤコブ病(sCJD)、V180I変異を伴うCJD(V180I CJD)、P102L変異を伴うゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病(P102L GSS)、178番2塩基欠失プリオン病(178 Prion)を検討した。sCJDは中枢神経に異常なPrPのシナプス型沈着が観察され、分取したオリゴマー分画には無糖鎖型、一糖鎖型、二糖鎖型のPrPresがみられた。V180I CJDではシナプス型と小球状のPrP沈着を認め、オリゴマー分画には無糖鎖型と一糖鎖型のPrPresに加え、10kDa付近のPrPresも認めた。P102LGSSではプラークとシナプス型のPrP沈着を認め、オリゴマー分画にsCJDと同様のパターンを示すPrPresと9kDaのPrPresを認めた。178 Prionでは粗大なPrP凝集が多数みられ、オリゴマー分画に9kDaのPrPresを多く認めた。いずれの病型でも、PrPresはオリゴマー分画にみられており、その重合する傾向が示された。

低分子量PrPresは、PrPプラークや粗大凝集が見られる病型に特徴的であったが、その構成成分の詳細や毒性に関しては今後の検討課題である。なお、全ての症例においてモノマー分画は正常型PrPのみであった。種々の病型のヒトプリオン病において、遠心ゲル濾過法を用いてプリオン蛋白オリゴマーを分取し、その性状を検討した。調べ得た全ての病型(孤発性クロイツフェルト・ヤコブ病(CJD)、E200K変異を伴うCJD、V180I変異を伴うCJD、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病、コドン178番2塩基欠失を伴うプリオン病)において、オリゴマー分画にはプロテイナーゼK抵抗性プリオン蛋白が多く含まれていた。低分子量のプロテイナーゼK抵抗性プリオン蛋白も同様の性状を示した。我々の実験結果より、プロテイナーゼK抵抗性プリオン蛋白はオリゴマー形成を示す事が示唆された。現在までに孤発性クロイツフェルト・ヤコブ病(sCJD)やV180I変異を伴うCJD (V180I CJD)、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病(GSS)において通常のwestern blotとオリゴマー分画の解析が終了している。V180I CJDではオリゴマー分画に約10kDの低分子量PrPresをみとめ、これは新規の発見であった。更に我々は、発症に17年の差を認めたGSSの一卵性双生児の姉妹例を検討した。発症に17年の差を認めるも、プリオン蛋白の沈着様式は似通っておりオリゴマー分画の解析においても姉妹間のPrPresのパターンは類似していた。一方で、姉にはレビー小体がみられ妹にはアルツハイマー病病理がみられた。プリオン蛋白の組織学的・蛋白生化学的な性状は類似していたものの、臨床経過や合併する病理変化には違いがみられていた。一卵性双生児におけるこれらの所見は新規のものであり、オリゴマー分画の解析に併せて現在も検討を進めている。総合領域現在までに孤発性クロイツフェルト・ヤコブ病(sCJD)やV180I変異を伴うCJD (V180I CJD)、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病(GSS)、またGSSの一卵性双生児症例ににおいて通常のwestern blotとオリゴマー分画の解析が終了している。それぞれのオリゴマー分画において、特徴的なPK抵抗性プリオン蛋白のバンドパターンが得られた。現在、CJD type 2症例やE200K変異、178番変異プリオン病、硬膜移植後CJDなどに関しても検討を進めている。保存期間に制限ある抗体製材を次年度に購入するため。これまでに、ゲル濾過遠心法でオリゴマー分画のプリオン蛋白を評価する事によって、オリゴマー分画にPK抵抗性異常プリオン蛋白が多いことや、V180I CJDにおいて13kDの異常プリオン蛋白を新たに見出した。プリオン蛋白オリゴマーの解析は、孤発性CJD type 1や孤発性CJD type 2、GSS、E200K変異を伴うCJD、178番変異を伴うCJD、また硬膜移植後CJDなどの症例も施行予定であり、病理所見や症状との関連を検討予定である。各種抗プリオン抗体や2次抗体、およびWestern blottingに使用する物品の購入にあてる。保存期間に制限ある抗体製剤を次年度に購入するため。
FDG-PETテクスチャ解析法を用いた新たな子宮肉腫予後予測バイオマーカーの開発

現在、システム生物学の中心はgenomics、proteomicsだが、新たな分子イメージング法を用いたRadiomics解析法の登場で、細胞や時間で推移する複雑な生命現象をよりダイナミックに理解できる可能性がある。Radiomics解析法の一つであるテクスチャ解析とは、粗い、滑らかといった一般的な質感などの情報を数量化する試みで、従来は人工衛星からのリモートセンシングなどに用いられている。子宮肉腫は非常に稀な予後不良の疾患であり、外科的に摘出しても高率に肺転移を生じる。効果的な治療法開発のため新たな予後予測のツールが必要不可欠である。我々は、Radiomics解析法の一つであるテクスチャ解析を用い、3つのステップに分けて子宮肉腫の新たな予後予測バイオマーカー開発を目指している。1)臨床検体での子宮肉腫テクスチャ解析と予後予測に有用な特徴量をピックアップする。2)テクスチャ特徴量が何に起因するものかを動物モデルで検証する。3)新規予後予測バイオマーカーを樹立する。29年度は28年度に得られた臨床献体でのテクスチャ解析結果から子宮肉腫と子宮筋腫の鑑別に従来から用いられている一次特徴量であるSUVmaxだけでなく、二次特徴量でも良好な鑑別能を示していることを論文投稿で報告した。また、動物モデルに使用する子宮肉腫の細胞株の基礎的な解析を行った。30年度は子宮肉腫の細胞株をヌードマウスに移植し解析を行う予定であったが、子宮肉腫細胞株での実験が予定通り進まず、cell lineの数も限られていることから、他の癌種で検討を行うこととし、次年度まで研究を継続することとした。使用している子宮肉腫細胞株のヌードマウスへの導入実験が進んでいないため、予後良好株と予後不良株の樹立が行えなかった。このためanimal PETを用いたテクスチャ解析の実験が行えなかった。平成29年度までで、臨床検体によるテクスチャ解析はある程度完了し論文投稿も行ったため、今後は引き続き細胞株や動物実験を用いた基礎的な研究を進める。現在、テクスチャー解析を含むRadiomicsの領域は、ゲノム情報を考慮したradiogenomicsという分野に発展している。そこで、子宮肉腫においてもゲノム情報を追加して検討していく必要がある。子宮肉腫の細胞株は種類が限られており、その取り扱いも難しいものが多い。そこで、すでに広くゲノム解析が進んでいる他の癌細胞株を用いた解析を追加する予定である。本年度は臨床献体でのテクスチャ解析において、子宮筋腫と子宮肉腫の鑑別能と子宮肉腫の予後予測に有用かを調べた。子宮肉腫と子宮筋腫の鑑別においては、一次特徴量であるSUVmaxだけでなく、二次特徴量であるnormalized grey-level co-occurrence matrix (NGLCM)から計算したentropyやcorrelationといった特徴量が良好な鑑別能を示すことがわかった。また、予後予測に関しては、子宮肉腫症例に対しテクスチャ解析を行いKaplan-Meier曲線による単変量解析を行った。entropy、SUVmax、SUV kurtosis高値及びhomogeneity低値と予後不良が関係している可能性が示唆された。今後は、論文作成と共に動物モデルでの検討を行っていく。我々はRadiomics解析法の一つであるテクスチャ解析を用いた宮肉腫の新たな予後予測バイオマーカー開発を目指している。1つ目のステップである1)臨床検体での子宮肉腫テクスチャ解析と予後予測に有用な特徴量をピックアップを事前の想定通りに行うことができ、予後予測に有用と思われるいくつかの特徴量を見いだすことができた。子宮肉腫と子宮筋腫の鑑別においては、一次特徴量であるSUVmaxだけでなく、二次特徴量であるNGLCMから計算したentropyやcorrelationといった特徴量が良好な鑑別能を示した。予後予測に関しては、Kaplan-Meier曲線による単変量解析でentropy、SUVmax、SUV kurtosis高値及びhomogeneity低値と予後不良が関係している可能性が示唆された。今後は、子宮肉腫肺転移モデルマウスを用いた検討を行っていく予定である。

子宮肉腫は非常に稀な予後不良の疾患であり、外科的に摘出しても高率に肺転移を生じる。効果的な治療法開発のため新たな予後予測のツールが必要不可欠である。我々は、Radiomics解析法の一つであるテクスチャ解析を用い、3つのステップに分けて子宮肉腫の新たな予後予測バイオマーカー開発を目指している。1)臨床検体での子宮肉腫テクスチャ解析と予後予測に有用な特徴量をピックアップする。2)テクスチャ特徴量が何に起因するものかを動物モデルで検証する。3)新規予後予測バイオマーカーを樹立する。29年度は28年度に得られた臨床献体でのテクスチャ解析結果から子宮肉腫と子宮筋腫の鑑別に従来から用いられている一次特徴量であるSUVmaxだけでなく、二次特徴量でも良好な鑑別能を示していることを論文投稿で報告した。また、動物モデルに使用する子宮肉腫の細胞株の基礎的な解析を行った。30年度には動物モデルを作成し、新規予後予測バイオマーカーの樹立を目指す。28年度に得られた結果を解析し、子宮肉腫と子宮筋腫の鑑別においては、一次特徴量であるSUVmaxだけでなく、二次特徴量であるNGLCMから計算したentropyやcorrelationといった特徴量が良好な鑑別能を示したことを論文投稿で報告した。また、動物実験モデルに関して、使用する子宮肉腫細胞株のp53のステータスなど基礎的な解析を始めている。現在、システム生物学の中心はgenomics、proteomicsだが、新たな分子イメージング法を用いたRadiomics解析法の登場で、細胞や時間で推移する複雑な生命現象をよりダイナミックに理解できる可能性がある。Radiomics解析法の一つであるテクスチャ解析とは、粗い、滑らかといった一般的な質感などの情報を数量化する試みで、従来は人工衛星からのリモートセンシングなどに用いられている。30年度は子宮肉腫の細胞株をヌードマウスに移植し解析を行う予定であったが、子宮肉腫細胞株での実験が予定通り進まず、cell lineの数も限られていることから、他の癌種で検討を行うこととし、次年度まで研究を継続することとした。
地域ブランドの認知における選択的情報処理の検討

本研究では、地域ブランドの認知において、地名と製品カテゴリの概念マッチングの良さを購買に用いるとする「イメージ・マッチング」説、地域名とカテゴリが強固に結びついた状態を用いる「イメージ・アソシエーション」説について、実験的検討を行った。また、自治体のアンテナショップ等を活用し、実際場面におけるこれら情報処理についてインタビュー調査を行った。本研究の結果から、地域ブランドの認知におけるマッチングやアソシエーションの存在は確認したものの、現実場面では消費者の地域認識が曖昧(不正確)であることが示唆され、今後アンテナショップ側のイメージ発信戦略等が重要になることが明らかになった。24年度は「地名(地域ブランド)と資源名の概念的なつながり(例:信州-りんご)と購買行動の関係性」を測定するため、「『DRMパラダイム』を応用して地域ブランドにおける地域-製品間の概念の結合状況を測定する手法の開発を行った。DRMパラダイムは、一般に心理学分野において虚記憶の実験的検討に用いられる手法である。実験では、参加者がある地域に関する資源リスト(例:じゃがいも・流氷・旭川・・・+ダミー語等の12語程度)を学習した後、記憶保持を阻害する妨害課題を実施し、再度資源リストを見せられ事前に学習した語かどうかを判断する再認課題を行った。再認課題は4種類の単語で構成されており、[1]事前学習と同一語(例:じゃがいも)[2]事前学習で非表示の地域名(北海道)[3]事前学習で非表示の関連地域資源(例:メロン)[4]事前学習で非表示の低意味関連語(例:バナナ(果物カテゴリ))、[5]無関連語(例:新潟)であった。実験仮説として無関連語([5])に対して見たという判断が行われず、非表示の地域名([2])が誤って高確率で想起(虚記憶)されれば、我々は地名を起点として地域資源との間に強い概念的結合を有しており、さらに事前学習で非表示の他の地域資源([3])が想起されれば、地名の虚記憶想起と共に関連領域へと活性化が波及していた判断できると予測した。実験結果は、仮説を裏付けるものであり、事前学習時に非表示であった地域ブランド名を誤って想起する者が多く見られ、非表示の関連地域資源に対しても誤って見たと回答する割合が一定量みられた。一方、無関連語での虚記憶はほとんど見られなかった。このことから我々は地域ブランドに対して地名を起点とする集約型のネットワークを有しており、関連の低い地域資源等を新たにブランドのネットワークに取り入れるかどうかは概念の親和性や典型性が重要となる可能性が示された。本研究は、地域ブランドの購買場面における2つのステレオタイプ的認知について心理学的実験手法を用いて検証することであった。平成23年度の研究1では、地域と商品の概念同士の適合の良さ(例:信州とリンゴの概念の親和性)を消費判断に活用するとした「マッチング仮説」を検証した。「感情誤帰属手続き」を用いて検討した結果、高知名度の地域名の付与は判断速度を高める一方で、低知名度の地域名の付与は安心感等の判断時間を遅延させることが示された。ただし、知名度の高低と商品のポジ/ネガ判断には明確な差が得られなかった。平成24年度の研究2では、地域と商品の概念の連合強度(例:信州-リンゴという概念の確立)を消費判断に活用するとした「アソシエーション仮説」を検証した。虚(誤)記憶研究で用いられる「DRMパラダイム」を応用して検討した結果、高い認知度を有している地域ブランド商品は地域-商品に明確な概念の結合が存在しており、これが商品に対する信頼感や安心感を確信させることにつながることが示された。平成25年度の研究3では、実際のアンテナショップでの購買場面を通じて2つの方略に関する消費者の内省を調査した。その結果、訪問経験や居住の縁故など地域に対する関与があり、対象の購買や消費経験がある者ほど「アソシエーション仮説」を用いる傾向が伺えた。ただし、消費者が正しい連合に関して正確な知識や豊富な知識を持っているかどうかは別問題であることも示された。またよりローカルな地域ブランドについては上位の地域名の影響があることも示され、今後それらの関係性を検討する必要性・手法の開発が課題として示された。また、本研究成果を用いた発展研究として、原発事故や疫病等による風評被害について消費者の認知メカニズムを明らかにする研究に着手することも可能になった。本研究の目的は、地域商品の購買における地域ブランド情報の利用について2つの情報処理方略を検討するものである。一つはイメージ・マッチング仮説(適合方略)であり、地域と商品の適合感や親和性の良さなど感性・感情情報を地域ブランドの評価に利用すると考える説である。平成23年度は、感情誤帰属手続き(AMP:Affect Misattribution Procedure)を用いて検討を行った。

実験結果では、地域名を付与された商品の認知において、高知名度の地域名が付与された商品では適合判断の反応速度が速まったり、逆に低知名度の地域名が付与された商品では安心感の反応速度が遅れることが示された。ただし、予測した知名度の高低によるポジティブ/ネガティブ反応の差異が明確化には現れなかった。そのため現在実験手続きの改良試行中である。もう一方のイメージ・アソシエーション仮説(連合方略)は、地域に関する諸知識や地域と商品の関係性についての知識を地域ブランド評価に利用すると考える説である。平成23年度は、虚記憶研究におけるDRMパラダイムを用いて検討を進めた。実験結果では、地域資源のブランド連想に基づく地域名の誘発(虚記憶)が確認され、我々が地域に関してパタン化された知識を有していることが示された。また、これら二つの処理方略は独立したものではなく、相互に関連しあうと考えられるが、両者の利用バランスは当該の地域名に対する「知名確信度」によって変化すると予測される。現在DRMパラダイムでの研究結果からは、地域と資源の結び付きを強く認識するほどブランド連想が利用されやすい可能性が示唆されている。24年度は、これら2つの研究結果を統合的に比較できるよう実験を精緻化すると共に、処理方略と購買意図や行動との関連性を明確化する予定である。本研究の目的は、地域ブランドの認知情報処理として1地域名と製品の「概念連合(結び付き)」を利用する方略と2地域名と製品の「概念適合(典型性)」を利用する方略について、購買判断に与える影響を検討するものである。また、その際に主観的な確信度が両手法の選択に対してどのような影響を与えるのかを検討することも目的としている。23年度(初年度)は、本研究課題を明らかにするための研究手法の探索的な検討を行い、潜在概念連合テスト(IAT)や感情誤帰属手続き(AMP)、DRMパラダイムなど概念連合を測定する心理学実験手法を中心に検討した結果、DRMパラダイムが有効な手法となる可能性を確認した。24年度(中間年度)は、DRMパラダイムを用いた実験を開始し、地域名と製品名の連合と適合の状況について検討を行った。概ね検討に必要な範囲は実験済みではあるが、実験過程において生じた回答者属性による「ひいき効果」などの検証を加える必要が生じているため、被験者の追加や実験刺激等を変更して25年度に実験を追加することを予定している。初年度である平成23年度には、実験室実験について予定通り実施した。設定した研究課題を検証する点においては、予想以上に興味深いデータが得られており順調に進んでいる。ただし、再度実験手法の検討を行い、研究データを取得する上でより妥当性の高いと考えられる実験手法に変更を行った。その結果、実験刺激やプログラムの作成、プレテストの時期に変更が生じたが、結果の学会発表・論文執筆には問題がない範囲で進捗している。一方、23年度に予定していた質問紙調査については、上記変更に伴い内容や対象の再検討を行う必要が生じたため、実施を24年度に繰り越して実施することとした。25年度(最終年度)は、実験の最終目的として、これら地域名と製品名のつながりが地域ブランドの購買行動に対してどのような影響を与えるのかを検討することになる。
Alzheimer病の病態修飾薬の開発と臨床応用

認知症の多くを占めるアルツハイマー病(AD)の病態解明と治療法開発およびその臨床応用のための基礎的研究を行った.新たに開発したAbetaエピトープを発現する遺伝子組み換えダイズ食品を用いて,AD動物モデルで経口免疫を行った.Abeta特異抗体の産生が見られ,Morris水迷路試験で記憶障害の予防効果があり,Abeta oligomer蓄積とアミロイド斑出現は抑制されていた.出血や炎症などの副作用はみられなかった.病態修飾薬として有望な結果が得られた.弘前家系の構成員は285名であり,43人が発症し,発症年齢は平均48歳,経過は10年であり,女性でより長いことを確認した.大豆11Sグロブリンの3カ所にAbetaのB cell刺激部位4-10を挿入したM1または大豆のみ1mgをCRND8マウスに,3月齢からcholera toxin subunit B 10μgと共に週1回ゾンデで経口投与を開始し,14ヶ月齢まで継続した.CRND8マウス大量飼育した.Morris水迷路試験でCRND8マウスで,各月齢のマウスで連続10日間の水迷路試験を毎月初めに行い,統計的な有意差を評価するした.CRND8および対照マウス脳から可溶性の異なる分画としてルーチンに使用されるTBS, SDS,ギ酸による連続抽出をおこない,各分画のAbeta40,Abeta;42 monomerとoligomerをELISAとWestern blotで測定し,APPおよびsAPP各分画の測定とAbeta amyloidosis改善効果を検証した.脳組織のパラフィン包埋切片を作成し,Abeta蓄積,副作用などの病学的変化,Iba1免疫染色によるミクログリア出現に検討を加えた.2つの異なる抗Abeta oligomer抗体72D9と82E1を用いて新たに開発した高分子Abeta oligomer測定系を用いて,モデルマウス脳と血液・脳脊髄液におけるAbeta oligomerの蓄積過程およびM1経口免疫予防介入によるAbeta oligomer蓄積機序および抑制効果に検討を加えた.M1経口免疫を行ったCRND8マウスの腸管リンパ節,脾臓,血液から得られた培養リンパ球にM1抗原刺激を行い,上清に増加するサイトカイン種を測定した. M1抗原,Abeta oligomerを抗原としたELISAでCRND8マウス血液中の産生された抗体力価を検討した.平成27年度に予定した計画を概ね遂行できたため.Alzheimer病(AD)ではAbeta; oligomerとTauopathyによる認知症の発症病態とバイオマーカーの自然経過が明らかにされ,病態修飾薬の開発が熱望されている.本研究では1)新たな病態修飾薬(Abeta4-10エピトープを発現する遺伝子組み換え大豆食品による経口免疫)を2) CRND8マウスの行動実験とAbetaおよび関連分画の網羅的定量で検証し,Abeta oligomerの役割と治療介入に有用なマーカーを明らかにして,根本的な治療薬開発を行う.弘前のPSEN1 H163R家系の経過観察研究おこない,国際臨床治験への参入準備を行う事を目的に,平成28年度までに以下の研究を行った.平成27年度中に確立した,M1蛋白による経口免疫を検討し,Morris水迷路試験で認知機能障害の発症と進行を予防できた.平成28年度は,脳Abetaの測定をELISAでおこない,TBS,SDS,ギ酸抽出に有意差はなかったが,Abeta oligomerの選択的低下を認めた.tauやAP代謝に変化はみられなかった.組織学的には炎症などの副作用は認めず,びまん性老人斑の有意な減少が見られた.抗Abeta抗体が産生され,細胞性免疫も誘発された.以上のことから,M1蛋白による経口免疫は,Alzheimer病発症の予防に有用と考えられた.M1蛋白による経口免疫の解析はほぼ終了し,平成29年度は常染色体優性遺伝家系の解析を開始できるため.Alzheimer病(AD)ではAbeta oligomerとTauopathyによる認知症の発症病態とバイオマーカーの自然経過が明らかにされ,病態修飾薬の開発が熱望されている.本研究では1)新たな病態修飾薬M1(Abeta4-10エピトープを発現する遺伝子組み換え大豆食品による経口免疫)を2) CRND8マウスの行動実験とAbetaおよび関連分画の網羅的定量で検証し,Abeta oligomerの役割と治療介入に有用なマーカーを明らかにして,根本的な治療薬開発を行う.弘前のPSEN1 H163R家系の経過観察研究をおこない,国際臨床治験への参入準備を行う事を目的に,平成27年度はM1蛋白の経口免疫によるMorris水迷路試験によって12週から著明になる認知機能低下の予防効果を解明し,平成28年度は脳内Abeta Oligomerの蓄積を予防し,高分子Abeta Oligomerのsequestrationの機序を明らかにした.また,組織学的にもAbetaの蓄積進行の予防が可能であることを明らかにした.平成29年度はAPP代謝や副作用の各カスケードの解析を行い,いずれも神経障害性の副作用は起こらないことを明らかにした.以上より,新たな病態修飾薬としてM1が有望である事を解明し,国際学会発表を行い,雑誌に投稿中である.Hirosaki家系の解析については,すべての構成員の発症と非発症および経過を解析し,発症は平均48歳,経過は10年であり,女性でより長いことを確認した.遺伝子カウンセリング,バイオマーカーのシステムを確立し,国際的なDIAN研究と共同研究をおこなった.

認知症の多くを占めるアルツハイマー病(AD)の病態解明と治療法開発およびその臨床応用のための基礎的研究を行った.新たに開発したAbetaエピトープを発現する遺伝子組み換えダイズ食品を用いて,AD動物モデルで経口免疫を行った.Abeta特異抗体の産生が見られ,Morris水迷路試験で記憶障害の予防効果があり,Abeta oligomer蓄積とアミロイド斑出現は抑制されていた.出血や炎症などの副作用はみられなかった.病態修飾薬として有望な結果が得られた.弘前家系の構成員は285名であり,43人が発症し,発症年齢は平均48歳,経過は10年であり,女性でより長いことを確認した.平成28年度以降の予定を遂行する.すなわち,シナプス機能,免疫機序の解析のため,PSD95,Drebrinなどのシナプス関連蛋白の定量免疫染色とNissl染色による神経細胞数評価で検討する.Western blotによる検証を行う.Tauopathyの変化をGallyas-Braak神経原線維変化染色,Tau/リン酸化Tau免疫染色も用いて,Abeta老人斑周囲変性神経突起におけるTau蓄積を定量する.次に,弘前AD家系の家系解析,病歴調査の開始をおこなう.1シナプス機能として,PSD95,Drebrinなどのシナプス関連蛋白の定量免疫染色とNissl染色による神経細胞数評価で検討する.Western blotによる検証を行う.Tauopathyの変化をGallyas-Braak神経原線維変化染色,Tau/リン酸化Tau免疫染色も用いて,Abeta老人斑周囲変性神経突起におけるTau蓄積を定量する.2弘前AD家系の家系解析,病歴調査の開始弘前大学神経内科もの忘れ外来に通院する家族性AD (弘前家系;PSEN1 H163R)は江戸時代から続く7世代約241名からなる大家系で,このうちのM家系,T家系,F家系が現在弘前大学に通院している.他の家系構成員の追加情報・病歴を含めて調査を行う.それぞれに家族歴,理学・神経学的検査,ルーチン血液,生理学的検査,X-線学的検査を行った後に,遺伝学的検査の行われていない方に対してはガイドラインに準拠して,書面による同意の後に採血を行いApoE genotype,APP, PSEN1の遺伝学的検索を行う.脳脊髄液および血液Abeta40/42,tau/リン酸化tauのELISAによる測定を行う.NIA/AAによるAD dementia,MCI,preclinical ADの診断基準に準拠した神経心理学的検査をおこなう.頭部MRIは毎年,FDG-PET,アミロイドPETは撮像を希望された例で施行を予定する.神経内科学旅費と人件費が当初予算より節約できたため.当初,予定の測定数より少数で,統計的有意差がでたため,一部の測定を中止したため.次年度に物品費として使用論文作成に当たって,再試験が必要な実験に充当する.