hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ＨＩＶ治療薬を指向した核酸アプタマーの開発

そこで、論文を参考に、阻害剤抵抗性(薬剤耐性)を示す2種の変異型HIV-PRを作製し、その酵素活性を調べたところ、これらの変異型では酵素活性が確認できたが、野生型とは異なる基質特異性を持つことが明らかとなった。現在、変異型HIV-PRの精製を行うとともに、精製した野生型および変異型HIV-PRを用いて、HIV-PR認識アプタマーのスクリーニングを行い、新規のエイズ治療薬開発へと展開させる。エイズは、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)感染が原因で発症する感染症である。HIVプロテアーゼは、ウイルスの複製に必要なHIV特有の酵素であり、HIVプロテアーゼを標的とした阻害剤がエイズ治療薬として臨床使用されている。しかし、HIVはRNAをゲノムとして持つため容易に変異を起こし、現在のところ、HIV感染を完治するまでには至っていない。特に、HIVプロテアーゼ遺伝子上の変異は、薬剤耐性と密接に関係しており、別の観点からの治療薬開発が求められている。本研究では、HIVプロテアーゼを認識する核酸アプタマーを開発し、そのエイズ治療薬への応用を目的としている。HIVプロテアーゼをマルトース結合タンパク質(MBP)との融合タンパク質として大腸菌中で発現させ、アミロースカラムを用いたアフィニティークロマトグラフィーによって、この融合タンパク質を精製した。次に、Factor Xaを用いてMBPタグを切断することによって、mg単位のHIVプロテアーゼを精製した。この精製HIVプロテアーゼは、抗HIVプロテアーゼ抗体によって認識されることを確認した。また、既報の論文を参考に、薬剤(阻害剤)に抵抗性を示す4種類のHIVプロテアーゼ変異体を作製し、その酵素活性を調べた。その結果、これらの中で2種類の変異体は野生型と同程度の活性を有していることが明らかになった。今後、精製したHIVプロテアーゼを用いて、これを認識する核酸アプタマーをスクリーニングするとともに、見出した核酸アプタマーが野生型や変異型HIVプロテアーゼの活性を阻害するか調べる予定である。現在、野生型HIV-PRと同等の性質を示す組換えHIV-PRの大腸菌中での発現に成功しており、また、多種類の一本鎖DNAからなるライブラリーの中から、標的分子に対して親和性を持つ核酸のスクリーニングも成功している。25年度が最終年度であるため、記入しない。現在、組換えHIVプロテアーゼの大腸菌中での発現とmg単位での精製に成功している。また、薬剤耐性と関係する変異型HIVプロテアーゼの作製にも成功している。ヘモグロビンのモデル実験から、アプタマーのスクリーニングには、大量のHIV-PRが必要と考えられる。現在作製している組換えHIV-PRは、タグタンパク質などが付加されていないため、いくつかのカラムを組み合わせて精製を行う必要がある。そこで、まず、大量培養を行い、単一のHIV-PRをmg単位で精製する予定である。この精製したHIV-PRをもとに、核酸ライブラリーの中から親和性を持つ核酸のスクリーニングを行う予定である。
心臓線維芽細胞を標的とした新しい拡張期慢性心不全治療の開発

慢性心不全の進行を抑制する治療の開発として、本研究では新たなサイクリックAMPの標的分子であるEpacに着目し、慢性心不全治療のターゲットになりうるかを検討した。慢性心不全ではアルドステロン分泌亢進状態にあることが知られており、デオキシコルチコイド+ナトリウム負荷で慢性心不全モデルでは、Epac1欠損マウスのみ心臓収縮、拡張障害をきたすことが明らかになり、その原因はアポトーシスの亢進にあることが示唆された。本研究は、新たなサイクリックAMPの標的分子であるEpac (Exchange Protein Activated by Cyclic AMP)の慢性心不全に及ぼす役割を検討することを目的とし、実験を行った。【方法】デオキシコルチコイド(DOCA)の錠剤(50mg)を頸部皮下に埋め込み、同時に1%NaClを飲水させることでアルドステロン+ナトリウム負荷を行った。マウスは野生型、Epac1欠損、Epac2欠損マウスを使用した。手術前、1週間、2週間、3週間、4週間後にそれぞれ心エコーを行い、手術4週後に心臓カテーテル検査、組織学的検討を行った。【結果】1. DOCA+NaCl負荷を野生型マウスと、Epac1欠損マウスに行ったところ、Epac1欠損マウスでは野生型マウスに比べて著明な心拡大を呈した。2. DOCA負荷により、Epac1欠損マウスの心臓組織でアポトーシスが著明に亢進していた。3. DOCA+NaCl負荷で、Epac1欠損マウスでは野生型マウスに比べて著明な左心室駆出率の低下を認めた。4.負荷によりEpac1欠損マウスでは心エコーにてE波のA波に対する割合が高くなった。5.負荷後4週間では、Epac1欠損マウスでのみ、心室の収縮性の指標であるMax dP/dtの低下、拡張能の低下の指標であるMin dP/dが増加した。6.負荷後4週間のカテーテル検査でEpac1欠損マウスで血圧の低下と心拍の低下が認められた。Epac2欠損マウスは各項目において野生型と差が認められなかった。【結論】アルドステロン負荷によりEpac1欠損マウスのみ心臓収縮、拡張障害をきたすことが明らかになり、その原因はアポトーシスの亢進にあることが示唆された。DOCA投与によるアルドステロン負荷でEpac1欠損マウスが著明な心不全を呈することを明らかにした。本研究は、新たなサイクリックAMPの標的分子であるEpac(Exchange Protein Activated by Cyclic AMP)の慢性心不全に及ぼす役割を検討することを目的とし、実験を行った。【結果】1.DOCA+NaCl負荷を野生型マウスと、Epac1欠損マウスに行ったところ、Epac1欠損マウスでは野生型マウスに比べて著明な心拡大を呈した。2.DOCA負荷により、Epac1欠損マウスの心臓組織でアポトーシスが著明に亢進していた。3.DOCA+NaCl負荷で、Epac1欠損マウスでは野生型マウスに比べて著明な左心室駆出率の低下を認めた。心臓への感染や圧負荷等により心筋の脱落や心機能の低下がおこり、代償性に線維芽細胞が増殖し細胞外基質を産生すると、心臓は硬直化して心機能が低下し慢性心不全へと進行する。慢性心不全の治療の開発として、本研究では新たなサイクリックAMPの標的分子であるEpacに着目し、慢性心不全治療のターゲットになりうるかを検討した。慢性心不全ではアルドステロン分泌亢進状態にあることが知られているため、デオキシコルチコイド+ナトリウム負荷で慢性心不全モデルを用いた。

1.デオキシコルチコイド負荷により、Epac1欠損マウスでは野生型マウスに比べて著明な心拡大を呈した。2.デオキシコルチコイド負荷により、Epac1欠損マウスの心臓組織でアポトーシスが著明に亢進していた。3.デオキシコルチコイド負荷により、Epac1欠損マウスでは有意な左心室駆出率の低下を認めた。また、Epac1欠損マウスでのみ、Max dP/dtの低下、Min dP/dtの増加がみられた。4.電子顕微鏡による解析ではEpac1欠損マウスでは、ミトコンドリアの膨張、構造異常が認められたが、線維化の亢進はなかった。5.Epac1欠損マウスの心臓組織を用いた発現解析ではSTAT3蛋白のリン酸化が亢進した。負荷後のEpac1欠損マウスの血清のサイトカイン(IL-1beta,IL6,IL10,IL17,KC,RANTES,TNFalpha)は変化がなかった。本研究の結果よりデオキシコルチコイド負荷では、Epac1欠損マウスでのみ心臓収縮、拡張障害をきたすことが明らかになり、その原因はアポトーシスの亢進にあることが示唆された。つまりEpac1は心不全などアルドステロン系が亢進した状態で、心臓保護的に働いていることが示唆された。
昆虫中枢神経は、休眠誘導に必要な環境情報をどのように保持するか?

昆虫休眠は、各々の昆虫が経験した日長時間や気温といった環境条件を認知記憶し、種に固有の発育段階で誘導される生理現象である。本研究では、特に、短日条件で休眠誘導される昆虫において、その短日記憶が中枢神経系でどのように保持されるかを明らかにすることを目的とする。そのため、蛹休眠性のヨトウガを実験材料に用い、休眠誘導に関係すると考えられる2つのファクター、ドーパミンとGBP(growth-blocking peptido)、の中枢神経系における分布及び濃度の変動を解析した。結果を各々のファクター毎に記す。<ドーパミン>ヨトウガのドーパミン生合成酵素dopadecarboxylaseに対する抗体を作成し、組織免疫染色を行った。その結果、脳内では片側おおよそ4カ所にドーパミン産生細胞群が、食道下神経節及び前顎神経節に産生細胞が各々4個と3個存在することが明らかになった。脳内ドーパミン産生細胞の中には、短日飼育条件化でdopadecarboxylase濃度がより高まる傾向を示す細胞も存在する。ただ、現時点では、まだどの細胞あるいは細胞群が、短日条件と休眠誘導を直接結び付けているものか明らかになっていない。<GBP>ヨトウガGBPmRNAをプローブに用いin situ hybridizationをおこなった。その結果、GBPmRNAは、脳表層に近いタイプ1及びタイプ2グリア細胞で発現していることが明らかになった。さらに、その発現量は、短日条件飼育によって増加することが明らかになった。短日飼育下での脳内ドーパミン濃度の上昇、および、単離脳培養系におけるGBPの脳内ドーパミン濃度上昇活性については、これまでの研究によって証明している。今回明らかにした短日条件飼育による脳内GBPmRNAの発現量増加の事実は、短日→GBP発現上昇→ドーパミン濃度上昇を間接的にではあるが証明したことになる。
日本中世の民衆運動に関する史料の蒐集と研究

1987年度から、1989年度にかけて、日本中世の民衆運動に関する史料の蒐集と研究をおこなった。日本中世の民衆生活・思想などに関する研究は、西岡虎之助、林屋長三郎氏らの段階を経て、近年、横井清・三浦圭一、網野善彦らの仕事によって多くの成果を生みだしている。本研究は、これらの成果に学びつつ、日本中世における民衆の生活、生産、思想、芸能、宗教、闘争などを民衆運動として総合的に把握し、その特質を解明しようとした。作業の第一歩は、民衆運動に関する史料を調査し、それを蒐集することからはじめられた。東京大学史料編纂所、京都府立総合資料館などにおいて史料を調査した。ついで、民衆運動の展開した地域におもむき、文献史料の残存状況、伝承などの残存状況を調査した。1987年度は若狭国太良荘(現福井県小浜市)、備中岡上原郷(現岡山県総社市)などの調査をおこない、1988年度は、若狭国太良荘、1989年度には、京都府、および、近紀岡葛川(現滋賀県大津市)などの調査をおこなった。その結果、太良荘地域において3点の新史料を発見した。なお、各年度ともに、中世民衆運動についての関連文献リストを作成し、1989年度において研究報告書を作成した。なお、今後、このような研究を深めるためには、つぎのようなアプロ-チが必要となろう。すなわち、中世民衆の武装の問題、対領主意識の変化、闘争参加のさいの「いでたち」(服装)、当該段階の権力の本質などを追究することである。さらに、アジア諸国やヨ-ロッパ諸国の封建社会における階級闘争と対比させつつ、日本中世の農民闘争のもつ階級闘争としての成果と現限とを明らかにすることが必要である。このことは、日本中世の民衆運動の本質を解明するための基礎作業となるであろう。日本中世の民衆生活・思想などに関する研究は,西岡虎之助(『民衆生活史研究』1948年福村書店),林屋辰三郎(『中世文化の基調』1959年東京大学出版会)らの研究を経て,近年,横井清(『日本中世の生活文化』1975年東京大学出版会),網野善彦(『日本中世の民衆像』1980岩波書店),三浦圭一(『中世民衆生活史の研究』1981年思文閣出版)らの仕事をつうじて,多くの成果を生みたしつつある.しかし,これらの研究は,なお個別研究の枠にとどまり,これを止揚し,総合する仕事はまだ現われていない.1987年の8月から9月にかけて東京大学史料編集所において史料蒐集と検討をおこなう一方・若狭国太郎〓(福井県小浜市),備中国上原郷(岡山県総庇市)の現地調査をおこなった. 10月には伊勢国宇治山田(三重県宇治山田市), 12月には和泉国日松野〓(大阪府泉佐野市)を訪れた.現在は,まだ,史料蒐集と現地調査をおこなった段階にとどまっているか,今後,新しくえた知見を加えて,史料の分析と検討をおこない,民衆運動の総合的把握を試みる予定である.日本中世社会における民衆の、生産・生活・闘争などに関する従来の研究史を把握することにつとめるとともに、関連史料の調査、蒐集をおこない、さらに可能なかぎり、現地調査をおこないつつある。現在の民衆運動史研究を代表する横井清「中世民衆の生活文化」(東京大学出版会1974年)・「的と胞衣」(平凡社1988年)、三浦圭一「中世民衆生活史の研究」(思文閣出版1981年)、網野善彦「無縁・公界・楽」(平凡社1978年)、「日本中世の民衆像」(岩波書店1980年)

・「日本中世の非農業民と天皇」(岩波書店1984年)氏らの仕事が、第二次世界大戦前における西岡虎之助氏や柳田国男氏らの研究と密接にからみあい深化されていること、さらにはヨーロッパ中世史の研究法(いわゆる社会史的手法、たとえば、阿部謹也氏の「ハーメルンの笛吹き男」〈平凡社1974〉)を摂取していることを理解した。本年度は、南北朝時代から室町時代にかけて展開した民衆運動について、生活・生産・闘争などの分野を重視し、東京大学史料編纂所、京都総合資料館をはじめ、各県市の文書館、図書館などで関連史料の調査と蒐集をおこなった。民衆運動の展開した地域の調査に関しては、若狭国太良荘(現福井県小浜市)、近江国葛川荘(現滋賀県大津市)において主として聞き取り調査をおこなった。とくに、太良荘では、当該時点にかかわる三点(康永2年、永和元年、永享10年)の文書史料を発見した。しかしながら、文化財破壊の問題と関連して、中・近世社会にさかのぼって、民衆の生活・生産などの実態を追求することは困難な状況になりつつある。中世の民衆運動を総合的に理解し、その特質を解明する作業は、可能なかぎりすみやかに、隣接諸科学との連携を密にして、おこなうことが必要であろう。平成元年度は、昭和63年度が南北朝・室町時代の民衆運動を検討したのにつづいて、室町時代から戦国時代にかけて展開した民衆運動について、宗教・意識・闘争などの分野を重視して研究をおこなった。東京大学史料編纂所・京都府立総合資料館において関連史料の調査と蒐集をおこない、さらに、民衆運動の展開した地域に赴き現地調査をおこなった。現地調査において、京都八坂神社の御霊会にかかわる祇園祭を見学した。祇園祭が応仁の乱によって中断したのち、明応9年(1500)に京都町衆の力によって復活したこと、戦国争乱のなかで室町幕府が祭の中止を決定した時、町衆が山鉾の巡行のみはおこないたいと主張したことなどは周知の事実であるが(『祇園執行日記』)、民衆運動の展開という視座から、その歴史的意義がさらに追究されなければならないであろう。近江国葛川(現滋賀県大津市)の坊村の調査では、葛川の谷々のみならず、近隣の村々(久多荘・朽木庄)にまつられている信古淵神の宗教思想上の意味を検討した。なお坊村の明王院において中世以来の多数の参篭札を見学し、さらに、未整理の文書類が多数残存していることを確認した。本年度は、当該研究の最終年度にあたるので、報告書(冊子体)を作成した。なお、今後このような研究を深めるためには、中世民衆の武装の問題、対領主意識の変化、闘争参加のさいの「いでたち」(服装)、当該段階の権力の本質を追究することが必要である。さらに、アジア諸国やヨ-ロッパ諸国の封建社会における階級闘争と対比させつつ、日本中世の農民闘争のもつ階級闘争としての成果と限界とを明らかにする必要がある。そのことが中世の民衆運動の本質を解明するための第一歩である。
イヌリンパ腫の病態におけるＣＤ４４およびそのバリアントアイソフォームの役割

本研究は犬リンパ腫の病態において、CD44バリアントアイソフォーム(CD44v)を発現する細胞が薬剤耐性に関わり、再発や予後の悪化に繋がる事を証明することを目的としている。本年度はCD44v発現細胞の性状解析およびその発現制御メカニズムの解明を中心として行った。まず、CD44vが高発現だったリンパ腫症例から合計8種類のCD44vの塩基配列を決定し、その機能変化を解析した。その結果、CD44v6発現細胞株ではドキソルビシンおよびビンクリスチンに対する感受性が低下した。さらに、CD44v6発現細胞株ではHGF刺激によってPDK1およびAktの発現量が変化し、Akt阻害薬を添加することによってドキソルビシンおよびビンクリスチンに対する感受性が回復することが示された。次にリンパ腫症例からCD44v高発現症例および低発現症例を選抜し、cDNAマイクロアレイ解析に供し、CD44v高発現群と低発現群間で群間で2倍以上かつP<0.05の発現量の遺伝子を抽出した。発現量が変化していた上位5遺伝子について症例ごとに比較したところ、SCMLとESRP1の2遺伝子ではCD44v高発現群における最低値が低発現群における最高値を大きく上回っていた。そこで、ESRP1の機能解析を行ったところ、ESRP1の発現誘導に伴ってCD44vのタンパク質の発現亢進が認められ、ドキソルビシンおよびビンクリスチンに対する感受性の低下が認められた。さらに、多中心型高悪性度B細胞リンパ腫47頭の腫瘍細胞におけるESRP1の発現量を定量したところ、ESRP1高発現群における無増悪生存期間はESRP1低発現群よりも有意に短縮した。本研究により犬のリンパ腫におけるCD44vにおける発現量の違いは分子マーカーによって層別化を可能にし、治療反応性の悪い多中心型高悪性度B細胞性リンパ腫の予後を改善できる新たな治療戦略が示された。28年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は犬リンパ腫の病態において、通常型CD44(CD44s)およびそのバリアントアイソフォーム(CD44v)を発現する細胞が薬剤耐性に関わり、再発や予後の悪化に繋がる事を証明することを目的としている。本年度は臨床例におけるCD44s, CD44vの検出とその予後評価とCD44sおよびCD44v発現犬リンパ腫細胞株の作出および性状解析を行った。まず犬におけるCD44v発現量を相対比較したところ、犬の高悪性度B細胞性リンパ腫ではCD44v3, v6, v7の発現量が高い症例群が存在し、それらでは治療奏効率の低下、無増悪生存期間および全生存期間の短縮が認められた。これらの結果からCD44v3, v6, v7が高発現の症例は予後が悪いことが示唆された。またCD44v高発現症例のリンパ節では既存の抗がん剤耐性に関わる遺伝子であるABCB1, ALDH1, MGMT, MVP, SOD2の発現量に有意な差は存在しなかった。続いて臨床例におけるCD44vパターンの発現を探査した。バリアント領域を増幅するプライマーを設計し、配列決定したところ複数の配列を得た。これらの配列は健常犬とリンパ腫犬では異なるパターンを示した。これらはヒトやマウスで発現しているCD44v3-10などと異なり、犬では比較的短い配列が発現していることがわかった。さらにCD44v3, v6, v7の全ての発現量が高い4症例と発現量の低い5症例のcDNAマイクロアレイ解析を行った。これによりCD44v高発現症例ではESRP1遺伝子の高発現を認めた。その定量解析のため、CD44v高発現16症例、低発現31症例のESRP1遺伝子発現量をReal-time PCRで解析したところ、CD44v高発現症例で有意に高い発現量を認めた。これらの結果より、CD44vの発現調節はヒトやマウスと同様にESRP1が担っている可能性が示された。今年度の計画はCD44vの細胞株の作出とその性状解析を中心とし、臨床例における解析は症例数を集め次年度以降に行う予定であったが、病院との密な連携により臨床例の蓄積が比較的早期に確保できたため、CD44v高発現症例は予後が悪いという結果が示すことができた。またCD44v高発現症例ではヒトやマウスと異なるバリアントが発現していることが示された。CD44v高発現細胞株は犬において存在しなかったため、新規に全長をクローニングし複数のCD44vに対する強制発現系を作出した。これらの系ではCD44vタンパク質の発現も確認できており、一部の細胞では薬剤耐性を評価する試験も完了している。また当初では予想されなかったが、ESRP1がCD44vの発現調節を行っている可能性を実際の症例犬から見い出し、ESRP1強制発現系におけるCD44v発現変化の実験も進行中である。さらに次世代シークエンサーにおける解析は各症例における変異解析まで完了しており、残る作業は群間における変異を比較することのみである。

まず、CD44vが高発現だったリンパ腫症例から合計8種類のCD44vの塩基配列を決定し、その機能変化を解析した。その結果、CD44v6発現細胞株ではドキソルビシンおよびビンクリスチンに対する感受性が低下した。さらに、CD44v6発現細胞株ではHGF刺激によってPDK1およびAktの発現量が変化し、Akt阻害薬を添加することによってドキソルビシンおよびビンクリスチンに対する感受性が回復することが示された。次にリンパ腫症例からCD44v高発現症例および低発現症例を選抜し、cDNAマイクロアレイ解析に供し、CD44v高発現群と低発現群間で群間で2倍以上かつP<0.05の発現量の遺伝子を抽出した。発現量が変化していた上位5遺伝子について症例ごとに比較したところ、SCMLとESRP1の2遺伝子ではCD44v高発現群における最低値が低発現群における最高値を大きく上回っていた。そこで、ESRP1の機能解析を行ったところ、ESRP1の発現誘導に伴ってCD44vのタンパク質の発現亢進が認められ、ドキソルビシンおよびビンクリスチンに対する感受性の低下が認められた。さらに、多中心型高悪性度B細胞リンパ腫47頭の腫瘍細胞におけるESRP1の発現量を定量したところ、ESRP1高発現群における無増悪生存期間はESRP1低発現群よりも有意に短縮した。本研究により犬のリンパ腫におけるCD44vにおける発現量の違いは分子マーカーによって層別化を可能にし、治療反応性の悪い多中心型高悪性度B細胞性リンパ腫の予後を改善できる新たな治療戦略が示された。今後はCD44v強制発現株における各種抗がん剤への感受性を調べるとともに、これらタンパク質によるシグナル変化を探査する予定である。共発現解析用にGFP融合CD44v強制発現系の作出も完了しており、より精密に相互作用などを調べられるようになった。シグナル変化を観察できることにより、シグナルの阻害物質により予後の悪い犬のCD44v高発現高悪性度B細胞性リンパ腫に新たな治療ターゲットが見つかる可能性が考えられる。また次世代シークエンサーによる解析によってCD44v高発現の原因となる遺伝子変異が見つかる可能性があり、これより初診時において遺伝子変異を検出することによって予後の悪い症例を識別できる可能性があるものと考えている。28年度が最終年度であるため、記入しない。
舞踏の独自性を解明するための比較演劇学的研究

本研究の目的は,歴史的および比較演劇的視点から,芸術様式としての舞踏に明確な定義を与えることにあった.その際,特に,舞踏の草創期である1960年代から発展期である1980年代までの日本のシェイクスピア作品を参照し,舞踏を日本の演劇風土の中において内面表現の特徴と外面表現の革新性を明らかにすることで舞踏の独自性を明確化しようとした.その際,具体的に三つの方法をとった.1〈舞踏の草創期に活躍した担い手たちから直接証言を得る〉については,中嶋夏,ビショップ山田,小林嵯峨,雪雄子,大野慶人,上杉満代の6人にいずれも3時間を超えるロングインタヴューを実施できた.2〈シェイクスピア上演を通じて舞踏の独自性を解明すること〉については,土方巽振付・劇団雲『マクベス』上演(1972)の調査報告,前衛演劇の文脈でシェイクスピア上演を続ける山の手事情社主宰・安田雅弘との対談による実態調査および公開,瀬戸宏『中国のシェイクスピア』の書評,東京におけるRSC公演『リチャード三世』(1993)の再考察と再公開,そして2018年8月には,マレーシア大学上級講師Su Mei Kokとの国際共同研究「東南アジアにおける舞踏シェイクスピア」"Butoh Shakespeare in SoutheastAsia"を開始した.なお,Su Mei Kokはマレーシアにおいて2019年度よりこのテーマで住友ファンデーションの助成を得ることが出来た.又,日本人身体と演劇との関連について,若手研究者の助力を得て,国際学会において包括的なアンケート調査も行った.3〈研究成果の公開〉について,期間全体を通じて,舞踏家への上記インタヴューと安田雅弘との対談に限って言えば6件,その他2件の学術誌掲載記事を公開することができた.2018年度は,共著書1件,論文3件,国際学会発表1件,国内学会発表1件を行った.本研究の目的である「舞踏の草創期である1960年代から発展期である1980年代までの日本のシェイクスピア作品を参照し、舞踏を日本の演劇風土の中において内面表現の特徴と外面表現の革新性を明らかにすることで舞踏の独自性を明確化する」に即して、平成27年度は、舞踏の創始者土方巽が振付をした唯一のシェイクスピア作品である劇団雲『マクベス』の調査を行い論文として発表できたことは大きな成果である。また、本課題についての、基礎的な調査として、現代日本演劇を代表する演出家である安田雅弘(山手事情社主宰)にインタヴューできたこと、さらには、60年代から80年代に舞踏の開拓に関わった第一世代のインタヴューを実施できたことが大きな成果であった。前者については、すでに論文として慶應義塾大学アート・センターのブックレットにおいて公刊され、後者についても中嶋夏については慶應義塾大学の研究紀要『言語・文化・コミュニケーション』において公刊され、ビショップ山田、小林嵯峨については、事実確認と編集が進行中である。いずれも本人の積極的な協力が得られ、校正段階に至るまで事実確認を行っており、その意味では、一次資料としてのこの分野の研究に大きく貢献ができた。国際学会においては、ストックホルムでの国際演劇学会(IFTR)、メルボルンでの国際パフォーマンス・スタディーズ学会(PSi)、さらにインドでの国際演劇学会ワーキンググループなどで資料の収集と情報交換ができた。いずれにおいても情報収集だけではなく、共同、または単独での研究発表あるいは討論を伴うものである。海外における研究協力者であるピーター・エッカソール(ニューヨーク市立大学),キャサリン・メジュールとは、上記IFTRおよびPSiで実際に会って情報交換をし、文化人類学者のマリリン・アイヴィー(コロンビア大学)とはフェイスブックでつながっている。「研究実績の概要」に記したが、中嶋夏、ビショップ山田、小林嵯峨など、創始者土方巽の元で、舞踏をけん引した第一世代の思いのほか積極的な協力が得られたことはたいへん大きな意味を持っている。これは、舞踏第一世代が高齢化し、土方巽はもとより、大野一雄、元藤燁子、室伏鴻などが鬼籍にあって、草創期の舞踏の理念を伝えられずに舞踏が衰退、変質していくのではないかという危機感が彼らにあるからである。皮肉なことにこの危機感が、調査研究上は幸いした。また、それらを公刊する媒体に恵まれたことが、研究の進展においては大きく影響した。これは、慶應義塾大学日吉キャンパス、慶應義塾大学教養研究センター、慶應義塾大学アート・センターなどの大学内組織の研究へのバックアップによるものである。また、慶應義塾大学日吉キャンパスで行われた舞踏公演を慶應義塾デジタル・メディア研究所の協力を得てDVD(大野慶人レクチャー記録映像収録)として残せたことは、大野慶人もまた高齢化している今、後の研究者の資料として価値あるものと考える。本研究の目的は,「歴史的および比較演劇的視点から,芸術様式としての舞踏に明確な定義を与えること」である.それを達成するために,1インタヴューによって舞踏家自身の証言を得ること,2シェイクスピアを意識した演劇作品を参照すること,3研究成果を国内外において積極的に発表することで内容を再精査し,新たな証言者を発掘することを研究方法として意識した.1については,土方巽の薫陶を受け,麿赤児,唐十郎などアングラ運動の指導者と深い関係があったビショップ山田の長時間インタヴュー,および,土方舞踏の「三人娘」と称された小林嵯峨の長時間インタヴューを共に公刊できたことで,本研究にかかわる一次資料を記録に残すことができた.2については,当初,哀哭表現を中心に内容的な共通性を探る予定であったが,より広い視点が必要と考え,その手掛かりとして2016年に刊行された瀬戸宏

『中国のシェイクスピア』を精査し,長編の書評として公表した.また,1993年RSCによる『リチャード三世』の上演批評を,再点検して新たに公刊できたことも成果である.さらに,舞踏のイメージ調査を国際アンケートという手法によって実施し,それを論文として公刊し,それを発展させる形で,新たに,演劇における「日本身体」(Japanese Body)のプロジェクトを立ち上げ,同様の国際アンケート調査に着手した.3については,積極に国際学会での発表に取り組み,ハンブルクで行われたPerformance Studies international(PSi)では,発表およびパネルをコーディネート,サンパウロでのInternational Federation for Theatre Studies (IFTR)では研究発表を行い,本年2月のマニラにおけるIFTRでは,アジア演劇におけるパネルにおいてディスカッサントを務めた.上記研究目的を遂行するため,まず,インタヴューによって舞踏家自身の証言を得るという方針を立てたが,これは舞踏家による積極的な協力によって,2017年中にはビショップ山田と小林嵯峨という重要な2本の証言が公刊でき,さらに1本に進行中であることは予想以上の進展であった.但し,本研究に理解を示し,協力を惜しまなかった舞踏家和栗由紀夫の急死は非常に残念であり,インタヴューを取っておかなかったことが悔やまれる.当初,内容的な方法論として挙げた,シェイクスピアを意識した演劇作品を参照することについては,日本演劇学会の学術誌『演劇学論集』に『中国のシェイクスピア』に関する書評論文を掲載したこと,『演劇を問う,批評を問う』(論創社)に1993年の『リチャード三世』の舞台批評を再公開できたことは成果と考えるが,その過程で,シェイクスピアに限ってしまっては舞踏を解明するにはあまりにも視野が狭くなることに気が付き,国際アンケートという手法をとることにより,舞踏および日本人の身体のイメージ調査を実施することにした.この部分は,当初からの方針転換である.これは予想以上の成功を収め,論文としても公刊することができた.したがって,研究計画の修正ではあったが,目的の遂行には資するところが大きかったと判断する.さらに,研究成果を国内外において積極的に発表することで内容を再精査し,新たな証言者を発掘するという方法論においては, PSiとIFTRを中心に2本の研究発表と1回のディスカッサントとしてのコメントを重ねることができ,これに伴って,国際的にも国内的にも研究協力者が得られたことは,大きな僥倖であった.本研究の目的は,歴史的および比較演劇的視点から,芸術様式としての舞踏に明確な定義を与えることにあった.その際,特に,舞踏の草創期である1960年代から発展期である1980年代までの日本のシェイクスピア作品を参照し,舞踏を日本の演劇風土の中において内面表現の特徴と外面表現の革新性を明らかにすることで舞踏の独自性を明確化しようとした.その際,具体的に三つの方法をとった.1〈舞踏の草創期に活躍した担い手たちから直接証言を得る〉については,中嶋夏,ビショップ山田,小林嵯峨,雪雄子,大野慶人,上杉満代の6人にいずれも3時間を超えるロングインタヴューを実施できた.
腫瘍免疫における制御性B細胞の役割および作用機序についての解析

B細胞と共培養した場合のT細胞のサイトカイン産生能の解析を行った。悪性黒色腫(B16F10メラノーマ)を皮下注射したB細胞特異的PTEN欠損マウスの脾臓を採取し、この組織から磁気細胞分離装置を用いて制御性B細胞を30%以上含む分画であるCD5+ B細胞、制御性B細胞を2%未満しか含まない分画であるCD5- B細胞を抽出した。これらそれぞれをin vitroでT細胞と共培養(36時間)した。その際、放射線照射処理(7000rads)した悪性黒色腫細胞を添加した場合と、添加しない場合の2通りの共培養条件を設定した。これをフローサイトメトリーで解析した結果、放射線照射処理した悪性黒色腫細胞を添加した場合には、CD5- B細胞と共培養したCD8+ T細胞におけるIFN-γおよびTNF-αの産生が、CD5+ B細胞と共培養した場合および共培養しなかった場合と比較して有意に亢進していた。一方で、放射線照射処理した悪性黒色腫細胞を添加した場合のCD4+ T細胞においては、CD5+ B細胞・CD5- B細胞いずれかと共培養した場合、もしくは共培養しなかった場合のいずれにおいてもIFN-γおよびTNF-αの産生に有意差はなかった。さらに放射線照射処理した悪性黒色腫細胞を添加しなかった場合には、CD8+ T細胞およびCD4+ T細胞におけるIFN-γおよびTNF-αの産生は、CD5+ B細胞・CD5- B細胞いずれかと共培養した場合、もしくは共培養しなかった場合いずれにおいても有意差はなかった。以上の実験結果より、CD5- B細胞は、悪性黒色腫の抗原特異的にCD8+ T細胞のTh1サイトカイン産生を亢進させる可能性が示唆された。B細胞と共培養した場合のT細胞のサイトカイン産生能解析は予定通り遂行することができた。この実験結果からは腫瘍免疫における制御性B細胞の機能を推察するというよりも、制御性B細胞を2%未満しか含まないCD5- B細胞という特定の細胞分画が抗原特異的に悪性黒色腫に対する腫瘍免疫反応を亢進させる可能性を示唆する知見を得ることができた。一方、マウスの成育が予定より遅れたため、B細胞特異的PTEN欠損マウスのリンパ組織におけるリンパ球のサブセット解析は次年度に行うこととなり、計画の達成度はやや遅れていると自己評価した。平成30年度では行うことのできなかったB細胞特異的PTEN欠損マウスのリンパ組織におけるリンパ球のサブセット解析を行う予定である。また、腫瘍組織におけるケモカイン(とくにB細胞関連ケモカインであるCCL19、CCL21、CXCL12)産生の評価を行う予定である。腫瘍組織におけるこれらケモカインの産生量が健常皮膚に比べて増加していることが確認できれば、いずれかを抑制することにより腫瘍増生がどのように変化するのかを検討する。

また、腫瘍組織におけるケモカイン(とくにB細胞関連ケモカインであるCCL19、CCL21、CXCL12)産生の評価を行う予定である。腫瘍組織におけるこれらケモカインの産生量が健常皮膚に比べて増加していることが確認できれば、いずれかを抑制することにより腫瘍増生がどのように変化するのかを検討する。
ディーゼル機関から排出されるSOF成分の触媒による低減

初年度は、軽負荷時におけるHCおよびSOF成分の低減を目的とし、噴射系の仕様を変更した場合の解析を進めてきた。本年度は、形成された混合気をより効果的に燃焼させるために燃焼室形状および燃焼室の保温性に重点を置いて実験を進めた。また、触媒の利用方法についても検討を行った。燃焼室変更の一つは、燃焼室壁に突起を取り付け、空気との接触面積を増大させる方法である。10数種類の形状のものを試作し実験を進めた結果、ガス流動との相互作用を利用すれば、HC等の低減の可能性のあることが確認できた。もう一つの方法は、燃焼室壁面を保温するものであるが、ピストン材料の熱伝導率の向上ばかりでなく、燃焼室とピストンベースの間に断熱材をはさめたり、ピストン裏面に空気層を設ける等で燃焼室壁面の温度上昇を試みた。その結果、保温性を高めれば軽負荷時のHC成分は低減できるものの、多くの場合、高負荷においてNOの上昇、スモ-クの悪化と言うデメリットが生じている。この解決方法として、燃焼室側壁のように燃料が直接衝突する部分を保温するのではなく、間接的な保温が効果的である事が判ってきた。今回、設備の関係で実験を行っていないが、ヘッド面の保温も重要と考えられ、実験の準備を進めている。なお、現状ではまだ排気触媒を利用しなくて良いほどのレベルに達しておらず、触媒利用システムについても実験を行っている。この中で、メイン触媒の前に小容量の触媒を取り付けることによって、触媒の反応開始時間が大幅に短縮されることを明らかにしている。ディーゼル機関から排出される種々のガス成分のうち、軽負荷運転時の未燃分は、噴霧特性や燃焼室形状によって変化する。本年度はこのうち噴霧特性との関係について検討を行い、低減の方向とその原因を明らかにしている。実験に用いた機関は6気筒、行程容積6.5lの直接噴射式機関で、噴射ノズルは、開弁圧16MPa、5噴孔のホール形が標準となっている。本研究ではこのノズルの噴孔仕様を次の3グループについて試作し、標準タイプとの比較実験を行った。(1)5噴孔の一部の噴孔の径を変更する。...4種類(2)5噴孔全体の径を小さくする。...2種類(3)噴霧と燃焼室壁面の衝突角を変更する。...2種類これらのうち最も効果があったのは、(3)の噴霧方向を変更したものであり、この場合、燃焼室壁面あるいはヘッド上面との距離が長くなり、付着燃料が減少している。次に効果のあるのが噴孔径を絞ったもので、噴孔径が小さくなるほど噴射圧が高くなり、微粒化が進むため壁面への付着燃料が減少する。(1)のタイプのものに効果を期待していたが、標準に比べ未燃分の排出を抑えることは可能であるが、(2)、(3)のような効果はなかった。以上のような方法で、標準に比べると2030%未燃分の低減効果が期待できる。しかし、まだ十分低いレベルに達しておらず、次年度は燃焼室形状を変更し、より一層の低減を図る予定である。その上でも目標のレベルに達しない時には、触媒システムの装着を考えている。

もう一つの方法は、燃焼室壁面を保温するものであるが、ピストン材料の熱伝導率の向上ばかりでなく、燃焼室とピストンベースの間に断熱材をはさめたり、ピストン裏面に空気層を設ける等で燃焼室壁面の温度上昇を試みた。その結果、保温性を高めれば軽負荷時のHC成分は低減できるものの、多くの場合、高負荷においてNOの上昇、スモークの悪化と言うデメリットが生じている。この解決方法として、燃焼室側壁のように燃料が直接衝突する部分を保温するのではなく、間接的な保温が効果的である事が判ってきた。今回、設備の関係で実験を行っていないが、ヘッド面の保温も重要と考えられ、実験の準備を進めている。なお、現状ではまだ排気触媒を利用しなくて良いほどのレベルに達しておらず、触媒利用システムについても実験を行っている。この中で、メイン触媒の前に小容量の触媒を取り付けることによって、触媒の反応開始時間が大幅に短縮されることを明らかにしている。
量子ホール効果領域における二次元電子系の発光理論

二次元電子系における量子ホール効果状態の研究は,輸送現象に加えて,磁気ルミネッセンスや非弾性光散乱など光プローブを用いた励起構造や新しい電子相の研究が進展している.本研究は量子ホール効果領域にある二次元電子系の発光理論を構築し,発光エネルギーの特異な磁気振動の起源を明らかにすることを目指してきた.成果を次の3点にまとめる;(1)電子の自己エネルギーの遮蔽交換効果項とクーロン・ホール項の磁気振動位相は打ち消しあい、電子自己エネルギーは磁場依存しない.一方、クーロン・ホール項のみの光励起ホール自己エネルギーは顕著な磁気振動を示し,発光エネルギーの振動の様相を決める.(2)電場誘起非対称量子井戸の光励起自由ホール再結合発光,電子遮蔽効果は電子とホールの位置関係に非常に敏感である.電場強度に応じて電子とホールの位置関係が変化し遮蔽効果が変わる.電場誘起の振動位相の反転を予測した.(3)不純物に束縛された光励起ホール再結合発光,ヘテロ接合界面からある距離隔たった位置に添加されたアクセプタ不純物に束縛された光励起ホールとの再結合発光エネルギーの磁気振動を計算した.Kukushkinらによりなされた測定結果と半定量的な比較を行うことができた.今後、数値的対角化法の結果と摂動論にもとづく自己エネルギーの比較から磁気振動現象へ電子相関や分極遮蔽の効果がどの様に関与するかを明らかにできよう.二次元電子系における量子ホール効果状態の研究は,輸送現象に加えて,磁気ルミネッセンスや非弾性光散乱など光プローブを用いた励起構造や新しい電子相の研究が進展している.本研究は量子ホール効果領域にある二次元電子系の発光理論を構築し,発光エネルギーの特異な磁気振動の起源を明らかにすることを目指してきた.成果を次の3点にまとめる;(1)電子の自己エネルギーの遮蔽交換効果項とクーロン・ホール項の磁気振動位相は打ち消しあい、電子自己エネルギーは磁場依存しない.一方、クーロン・ホール項のみの光励起ホール自己エネルギーは顕著な磁気振動を示し,発光エネルギーの振動の様相を決める.(2)電場誘起非対称量子井戸の光励起自由ホール再結合発光,電子遮蔽効果は電子とホールの位置関係に非常に敏感である.電場強度に応じて電子とホールの位置関係が変化し遮蔽効果が変わる.電場誘起の振動位相の反転を予測した.(3)不純物に束縛された光励起ホール再結合発光,ヘテロ接合界面からある距離隔たった位置に添加されたアクセプタ不純物に束縛された光励起ホールとの再結合発光エネルギーの磁気振動を計算した.Kukushkinらによりなされた測定結果と半定量的な比較を行うことができた.今後、数値的対角化法の結果と摂動論にもとづく自己エネルギーの比較から磁気振動現象へ電子相関や分極遮蔽の効果がどの様に関与するかを明らかにできよう.本研究の目的は、量子ホール効果領域における二次元電子の発光理論の構築と発光エネルギーの特異な磁場依存性を明らかにすることにある。本年度の研究実績として次の点を挙げることができる。(1)アクセプタ添加の単一ヘテロ接合の発光エネルギーの磁気振動の解明アクセプタに束縛された光励起ホール状態と二次元電子系の線形遮蔽効果を変分法と乱雑位相近似をもとに調べた。電子状態にはFang-Howardの変分波動関数を用いた。この系はKukushkinらにより電子結晶を探るべく作成され、磁気発光の測定がなされた。我々の結果は磁気振動の期限を明らかにした。(2)傾斜単一量子井戸の発光エネルギーの磁気振動の予測電子とホールとがともに傾斜単一量子井戸にあり、その両端に束縛されている場合を調べた。我々の予測では電子自己エネルギーは殆ど磁場依存を示さないが、光励起ホールのエネルギーは自由な場合を束縛されている場合とでは大きく異なり、発光エネルギーの磁気振動に位相の反転が期待できる。現時点では、当初計画した研究の2/5を遂行できた。(2)の研究の予測が実験的に検証されると我々の計算のモデルの妥当性が確認されることになろう。本研究は、強磁場下における2次元電子系の発光理論の構築と発光エネルギーの特異な磁気振動の起源を明らかにすることを目的とする。これまでの研究で明らかにしてきたことは、遮蔽交換効果とクーロン・ホール項の相殺のために基底状態電子への電子間相関効果の磁場依存性は弱く、振動せずにほぼ一定である、一方、光励起ホールへの多体効果は顕著な磁場依存性を示し、振動位相の方向を決定する。本年度の研究により明らかにできた点は1.アクセプタ添加の単一ヘテロ接合における束縛光励起ホール再結合と電場誘起の非対称量子井戸の自由ホール再結合発光エネルギーの計算を行い、GaAs/AlGaAsヘテロ接合の実験との比較を行った。このことから光励起ホールの置かれた状況を介して磁気振動の位相を制御できる可能性があることを示した。2.電場印加の傾斜(非対称)量子井戸の2次元電子系の磁気発光エネルギーの計算を行い電場強度による振動位相の変化の予測を行った。光励起ホールと2次元電子ガスの位置関係により振動の位相が完全に反転することを示した。この挙動が観測されるなら我々の予測の正しさを確認できる。当初計画した分数量子ホール効果領域の研究は本質的に多体問題であり、解決が難しく進展していない。

これを除くなら、研究のほぼ3/5を終了したことになる。本年度は本研究-強磁場下における2次元電子系の発光の理論的研究-の最終年度である。まとめの年でもあり昨年度から続く問題の解決と将来の課題の整理を行った。次の2項目にまとめることができる。1.電子間多体効果のうち遮蔽交換効果とクーロン・ホール効果項の相殺のために基底電子状態への効果は小さい。一方、光励起ホールへの多体効果は顕著な磁場依存性を示し、磁気振動位相の方向を決定する。2.非対称量子井戸での磁気振動の計算に加え、2重量子井戸構造での磁気振動構造の計算を試みた。当初計画した分数量子ホール効果領域のルミネッセンス特異な振る舞いの解釈は難しく将来の課題として残る。
プロポフォールの樹状細胞刺激作用の生体防御、免疫病理への影響

樹状細胞は最も強力な抗原提示細胞として免疫応答の始動と調節に重要な役割を果たす。申請者は今までに鎮静薬と麻酔薬が樹状細胞機能と樹状細胞によって惹起される免疫応答に焦点を当てて研究してきた。本研究では最も頻用される麻酔薬であるプロポフォールの樹状細胞機能にに与える影響を詳細に解析を行った。プロポフォールは樹状細胞の分化成熟を促進してリンパ球のTh1への分化を促進した。さらに個体レベルのTh1型の免疫応答を促進した。この免疫刺激作用はプロポフォール製剤の脂質懸濁液成分に由来するものであることが強く示唆された昨年度までに臨床的に使用されているプロポフォール製剤が樹状細胞を介してTh1型免疫応答を促進するように作用することを見出した。本年度はこの現象が臨床的な状況にどのように影響するのかを明らかにする実験の準備に費やした。実験モデルとしては自己免疫性心筋炎モデルを実験計画書のとおり用いることとした。このモデルは心筋の自己抗原であるミオシン抗原を骨髄由来の樹状細胞にとりこませて通常マウスに投与すると自己免疫機序によって心筋炎が誘導されてくるというモデルである。今年度はこのモデルの誘導の確立と評価を中心におこなった。申請者らの実験で今まで用いてきたマウス骨髄由来の樹状細胞にミオシン重鎖フラグメントを取り込ませたものをリポ多糖(LPS)で処理して成熟分化させる。この抗原を取込ませ分化成熟した樹状細胞を通常のマウスに1週間の間隔をあけて2回投与する。最終投与より10日目にマウスを殺処分し、心臓を固定して組織像を評価することで心筋炎の有無と重症度を評価した。上記のミオシン重鎖フラグメントを取り込ませた樹状細胞で免疫したマウスは組織学的に細胞浸潤を認めており心筋炎の発症を確認できた樹状細胞は最も強力な抗原提示細胞として免疫応答の始動と調節に重要な役割を果たす。この免疫刺激作用はプロポフォール製剤の脂質懸濁液成分に由来するものであることが強く示唆された臨床に使用される脂質懸濁液の状態のプロポフォールの樹状細胞への作用の検討を行った。プロポフォールは樹状細胞に発現される副刺激分子の発現を増強し、かつインターロイキン12の分泌を亢進させた。これらの樹状細胞への影響が樹状細胞機能に影響しているかをリンパ球と樹状細胞の混合培養法(MLR法)による評価を行った。MLR法によってプロポフォール処理をした樹状細胞はリンパ球の増殖を増加させ、さらにインターフェロンγの分泌を亢進させ、Th-1への分化を促進する結果となった。次にプロポフォールが樹状細胞の性質にあたえる影響の結果として個体レベルでの免疫応答への影響が変わるのかを、樹状細胞の移植によって生じる接触性過敏症のモデルによる評価を行った。ハプテンを取り込ませた樹状細胞を通常マウスに移植することで耳介が腫れるという接触過敏反応が生じるところ、プロポフォールで樹状細胞を処理しておくと免疫応答は変化するかを評価した。接触過敏症モデルを用いた解析ではプロポフォールで処理した樹状細胞は接触過敏反応による耳介の腫れが減少した。接触感敏症モデルは主としてTh1型の免疫応答によって生じると考えられているが、プロポフォールは樹状細胞によるTh1への分化を抑制して接触過敏症の発症を抑制したと考えられた。(1)昨年度までにプロポフォールが樹状細胞の分化成熟を促進してTh1型免疫応答を亢進させることを試験管内の実験で示してきた。本年度はそこから進めて個体レベルでの免疫応答に影響を与えるのかを免疫疾患モデルを用いて解析を行った。使用したモデルは代表的なTh1型免疫応答モデルである接触過敏症モデルを用いた。ハプテンを取り込ませておいた樹状細胞を通常マウスに移入して免疫しておき、数日後に同じ抗原性を有するハプテンを投与すると接触過敏症が誘導されて、塗布部位(耳)が腫張するというモデルである。ハプテンを取り込ませる樹状細胞をプロポフォールの存在下で成熟分化させたものにしておくと、誘導されてくるTh1型免疫応答(耳介の腫張)は増強した。樹状細胞が免疫応答の開始と極性ずけに大きな作用を果たすことから考えると、本研究で明らかになったTh1型免疫応答の促進作用は実際ん臨床現場でも起こっている可能性があると考えている(2)さらに本年度は臨床における重要な鎮静薬であるベンゾジアゼピン系薬物の免疫系への作用メカニズムに関する解析を行った。対象としてマクロファージの細胞株であるRAW264を用いて試験管内での解析を遂行した周術期管理医学申請書に記した実験計画にそって実験を進めている。期待した実験結果を得ている当初の計画通りにプロポフォールの樹状細胞への細胞を試験管内での直接作用、試験管内での免疫応答への影響、個体レベルでの免疫応答への影響の3つの視点からの解析するという実験の目標は順調に進んでいる。当初解明を目的としていた範囲の実験は行うことができ結果を得ており予想していた通りの結果を得ている。

本年度は当初の実験計画書にあるとおりプロポフォールで処理した樹状細胞による免疫によって疾患モデルを誘導した場合、生じてくる実験的自己免疫性心筋炎の病像に変化が現れるのかを検討する予定である今後は樹状細胞に対するプロポフォールの影響を3つの観点から解析する。一つは脂質懸濁液で構成されるプロポフォールのうち脂質懸濁液成分とプロポフォールそのもののいずれが樹状細胞への作用に影響をしているかを明らかにする。二つ目は樹状細胞への作用を樹状細胞の分化成熟過程で重要な分子メカニズムである、MAPK経路とNF-κB経路のいずれに効果を表しているかを評価する。さらに3つ目は樹状細胞の個体レベルでの免疫応答への影響が生体防御と免疫病理的にどのような意義が有るのかを動物個体レベルの実験モデルでの検討によって明らかにすることを今後の目標としている。免疫病理的な意義付けに関しては樹状細胞の移植によって生じる実験的自己免疫性心筋炎の病態にプロポフォールがどのように影響するのかを検討する本年度は上述した実験の推進方策のうち前に述べた二つを中心に研究を推進する。すなわち、脂質懸濁液で構成されるプロポフォールのプロポフォール成分と脂質懸濁液成分とにわけてプロポフォール製剤の樹状細胞への影響を解析する。解析は初年度と同様に樹状細胞への直接の影響、試験管内で再構成される免疫応答への影響、樹状細胞によって動物個体レベルで誘導される免疫応答の3つのレベルでの解析を行う。次に樹状細胞の分化成熟過程への影響をMAPK経路とNF-kB経路の二つの経路への影響から解析する。これには樹状細胞よりそれぞれ可溶性タンパク質と核抽出液を調整してしてウエスタン解析によってタンパク質レベルでの解析を行う。さらに実験が順調に進行すればじ年度に行う予定の免疫病理への影響の解析の過程で必ず必要になる、実験的自己免疫性心筋炎モデルの確立の予備的実験を施行する。
金属クラスターの反応化学

既存の「単核錯体の反応化学」を超越する新分野を開拓し、合成化学の分野を飛躍的に進化させるため、その基盤となる「金属クラスターの反応化学」分野を創製し、この五年間その体系化に取り組んできた。研究は順調に推移し、クラスターの合理的合成、クラスター反応場の電子状態制御、クラスター反応の開発と解析、クラスター触媒反応の開発といった主要課題を達成することができた。加えて、研究機関中に研究上の処女地ともいえる「ポリヒドリドクラスターの光化学」に取り組み、二核クラスターについてすでに二つの新反応を発見することができた。(1)五核および六核ポリヒドリドクラスター(Ru_4M, Ru_5M)の合成と電子状態の評価五核および六核クラスターを新たに合成し、プロトン化やヒドリド化を通じて電子状態を評価する。(2)アルコールなどプロティック溶媒中でのクラスターの挙動解明と反応性評価pK_a値の異なる種々のアルコール中での各種のポリヒドリドクラスターの挙動を分光学的手法を用いて解明するとともに、種々の基質との反応を検討する。(3)前周期金属と後周期金属を含む異種金属クラスターの合成とその反応性4族金属であるZr, Hfと9族金属のIrを含むポリヒドリド錯体を合成し、炭化水素のC-H結合の活性化に着いて検討する。(4)クラスター触媒反応の開発本申請研究ではピリジンの触媒的脱水素カップリング反応を開発することができた。反応効率の向上を目指して、反応機構を解明する。ルテニウムの三核ポリヒドリドクラスター{(η^5-C_5Me_5)Ru}_3(μ-H)_3(μ_3同H)_2(1)はアルカンと加熱条件下で反応し、その炭素-水素結合を切断する能力を有する。本年度はアルカン官能基化達成の第一歩として、アルカン由来の錯体への官能基導入を検討した。錯体1と2-メチルブタンの反応生成物であるジルテナアリル錯体に官能基を直接導入することは困難であるため、錯体1を酸化してカチオン錯体としたのち求核剤の導入をはかった。錯体1をフェリシニウム塩を用いて二電子酸化すると配位した炭化水素の骨格転位が起こり、Ru_3骨格上にC_3リングが配位したトリスカルベン錯体の2価カチオン2が生成した。トリスカルベン錯体2と水との反応により生成するモノカチオン性架橋ヒドロキソジルテナアリル錯体3をジエチルアミンで処理すると脱プロトン化とともに炭素-酸素結合生成反応が進行し、クラスター上の炭化水素配位子への酸素官能基導入が達成された。さらに、ルテニウムの二核ポリヒドリドクラスターを触媒とするピリジンの脱水素二量化反応を開発した。触媒量のテトラヒドリド錯体{(η^5-C_5Me_5)Ru}_2(μ-H)_4(4)あるいはボスフィドヒドリド錯体{(η^5-C_5Me_5)Ru}_2(μ-PR_2)(μ-C_6H_6)(μ-H)(5)の存在下、4位に置換基を持つピリジン類を飽和炭化水素溶媒中で加熱すると、位置選択的に2位の炭素-水素結合が切断されたのち、引き続いてピリジル基の還元脱離が起こりビピリジンが生成することを見出した。本反応は電子供与性置換基を持つピリジンから電子求引性置換基を持つピリジンまで幅広く適用可能であり、従来法を凌ぐ優れた合成手法であるばかりでなく、クラスター錯体の特長を活かした反応であり、クラスター化合物の有用性を示すものである。本触媒反応で得られるイソニコチン酸エステルの二量体は太陽電池の研究には欠かせない化合物である。本反応の重要性を考え特許を出願した。投稿論文は準備中である。平成19年度の研究計画の第1項目目に挙げた「架橋シクロペンタジエニル配位子を有する四核ルテニウムポリヒドリド錯体の合成」に関しては、C_6鎖で連結されたCp*系、シクロヘキサンジイルを含む炭素鎖で結ばれたCp*系の2つの系について、ルテニウムポリヒドリドフラグメント導入を達成し、X線回折によって構造を決定することができた。現在投稿準備中である。また第2項目の「五核および六核ポリヒドリドクラスターの合成」に関しては、四面体型Ru_4クラスターをもとにして三方両錐型およびピラミッド型Ru_4Mクラスターの合成を達成した。さらにピラミッド型Ru_5クラスターを出発原料に用い正八面型Ru_5Mクラスターを高選択的に合成する方法を開発した。この成果についてはすでに学会発表し、現在投稿準備中である。