hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
腎ミトコンドリア酸化ストレスをターゲットとした慢性腎臓病の治療戦略の開発

ラット腎臓髄質ヘンレのループ太い上行脚(mTAL)において、生理的刺激に対するミトコンドリアにおける活性酸素種(ROS)産生について検討を行った。アンジオテンシンII刺激はミトコンドリアROS産生上昇を介して細胞質内ROS上昇を誘導した。高濃度ブドウ糖は糖分解産物産生を介してミトコンドリアROS産生を上昇させた。低酸素はミトコンドリアROS産生を上昇させ、この消去薬であるmitoTEMPO投与は腎虚血再灌流時に低下する腎臓髄質血流量の低下を抑制した。腎髄質酸化ストレス産生に及ぼすミトコンドリアの影響を髄質ヘンレのループ太い上行脚(mTAL)を対象として検討を行った。SDラットよりmTALを単離し、ミトコンドリア内の活性酸素種をMitoSOXで、過酸化水素をMitoPY1で標識し、蛍光顕微鏡にてリアルタイムイメージングにより観察した。アンジオテンシン(AngII)はミトコンドリア活性酸素種を上昇させた。この反応はミトコンドリア呼吸鎖複合体阻害剤(rotenone, antimycin A)により阻害され、NADPHoxidase阻害剤(apocynin)は阻害せず、ミトコンドリアでの活性酸素種が産生が示唆された。AngIIがミトコンドリア酸化ストレス産生を上昇させたことから、レニンアンジオテンシン(RAS)系がミトコンドリア酸化ストレスを介して腎障害に影響すると考えられた。そこでDahl食塩感受性高血圧ラットに(プロ)レニン受容体と(プロ)レニンの結合を阻害するデコイペプチド(HRP)を持続投与し、高食塩飼料を給餌して6週間飼育した。HRPの投与は血圧には影響せず、4週目時点の尿蛋白排泄量を有意に低下させた。6週間時点での腎組織障害には顕著な差は認められなかった。糖尿病によるミトコンドリア酸化ストレス産生に及ぼす影響について検討した。高濃度L-glucoseでの単離mTAL灌流はミトコンドリア活性酸素種産生に影響しなかったが、D-glucoseの灌流では有意な上昇が認められた。カルボニル物質(メチルグリオキサール)はmTALミトコンドリア活性酸素種産生を増加させ、D-glucoseによるミトコンドリア活性酸素産生上昇はグリオキシラーゼ1を高発現するGLO1-Tgラットやカルボニル物質補足剤のピリドキサミン投与により抑制されたことから、カルボニル物質の関与が示唆された。以上の結果より、AngIIや高血糖はmTALミトコンドリア酸化ストレス産生を亢進させることが明らかとなった。また高血糖によるミトコンドリア活性酸素種産生機序の一部としてカルボニルストレスの関与が示唆された。腎臓髄質領域血流量(MBF)では総腎血流量の10%にも満たない供給下で、ヘンレのループ太い上行脚(mTAL)において酸素を消費しながらナトリウム再吸収を行っていることから、慢性的に低酸素状態となっており虚血に弱く障害を受けやすい構造となっている。MBFは圧-ナトリウム利尿機構を介したナトリウムバランス、ひいては血圧の維持に非常に重要な役割を果たしている。酸化ストレスは直血管の収縮を介してMBFを低下させるが、その産生は主にNADH oxidaseとミトコンドリアに由来するといわれる。本研究では、これまで寄与が充分に明らかにされてこなかったミトコンドリア由来酸化ストレスの腎障害への寄与について解明を試みた。Sprague Dawley(SD)ラットを対象とした急性実験において、虚血再灌流時にはMBFの低下が起こるが、ミトコンドリア特異的活性酸素(スーパーオキサイドアニオン)消去剤であるMitoTEMPOの投与はMBFの低下を回復させる作用が見出された。さらに、ミトコンドリア由来酸化ストレスが腎障害を改善する可能性について慢性実験での検討を行った。MitoTEMPOならびにミトコンドリア非特異的活性酸素消去剤TEMPOLを持続投与し、左腎臓に虚血再灌流(I/R)を行い腎障害を誘導した。1週間後にラットより腎臓を採取して腎組織障害について観察を行ったが、今回の条件下においてはMitoTEMPO群とTEMPOL群との間に顕著な組織障害の差を認めるには至らなかった。腎臓は心拍出量のおよそ20%を受けるが、腎臓内の血流量は偏在しており、髄質領域は総腎血流量の10%を受けるに過ぎない。しかしその一方で腎臓髄質領域ではヘンレのループ太い上行脚(mTAL)において圧利尿を介したナトリウムバランス調整が行われるなど重要な機能を担っている。圧利尿の調節には腎臓髄質領域の局所血流量が大きく影響するが、この血流量は腎臓髄質領域の一酸化窒素(NO)と活性酸素種(ROS)のバランスによる直血管収縮により制御されている。これまでの研究により、mTALにおけるNAD(P)H oxidaseを介したROS産生については検討されてきたが、およそ半分を担うといわれるミトコンドリア由来のROS産生については十分には検討されてこなかった。本研究では腎臓髄質領域におけるミトコンドリア由来ROS産生について検討を行うことを目的としている。麻酔下のラットを用いた急性実験においてレーザードップラー法により腎臓局所血流量を測定した。虚血再灌流は腎髄質血流量を低下させたが、ミトコンドリアROS消去薬であるmitoTEMPOの前投与は腎髄質血流量の低下を有意に改善した。また、mTALを用いたリアルタイム蛍光観察法による検討において、低酸素刺激はミトコンドリアROS産生を増加させた。この反応はmitoTEMPOならびにミトコンドリア呼吸鎖阻害薬により有意に抑制された。

以上の結果より、腎臓髄質領域においてTALでは低酸素刺激によりミトコンドリアROSが産生され、腎局所血行動態に関与しうることが明らかとなった。ラット腎臓髄質ヘンレのループ太い上行脚(mTAL)において、生理的刺激に対するミトコンドリアにおける活性酸素種(ROS)産生について検討を行った。アンジオテンシンII刺激はミトコンドリアROS産生上昇を介して細胞質内ROS上昇を誘導した。高濃度ブドウ糖は糖分解産物産生を介してミトコンドリアROS産生を上昇させた。低酸素はミトコンドリアROS産生を上昇させ、この消去薬であるmitoTEMPO投与は腎虚血再灌流時に低下する腎臓髄質血流量の低下を抑制した。これまで急性実験において明らかにしてきたミトコンドリア由来酸化ストレスによる腎機能についての影響について、慢性実験での検討・評価を行った。27年度が最終年度であるため、記入しない。腎臓生理学残念ながら、本年度の検討においてはミトコンドリア由来酸化ストレス低減による腎障害抑制作用を明らかにすることはできなかったが、今後、異なる条件下や異なるモデル動物を用いることにより、ミトコンドリア由来酸化ストレスの寄与をさらに明らかにしていく予定である。平成25年度計画をほぼ予定通りに完遂したので、引き続き予定通りに平成26年度計画を遂行する。平成26年度は主にラットを用いた急性期実験での検討を行う。
蛋白質の安定性・折れたたみ機構における水・変性剤の分子メカニズム

本研究では,蛋白質の安定性・折れたたみ機構において,特に水や変性剤のもたらす溶媒効果に焦点をあて,コンピュータシミュレーションにより,その分子メカニズムを解明することを目的とした.そのために,(1)これからのスーパーコンピュータの潮流である超並列スーパーコンピュータ用の分子シミュレーションソフトウエアの開発,(2)溶媒効果,とくに,統計力学的扱いが要求される疎水効果理論の構築,(3)変性剤を導入した分子シミュレーションによる変性剤効果の解明を行った.本研究では,通信最適化や負荷分散を効率的に行えるプログラミング環境Parsleyを開発し,それを生体高分子シミュレーション(XYZ系:MARBLE,二面角系:NORMA)に応用した.XYZ系,二面角系とも,本研究により新たな並列化方式が開発された.また,分子動力学ソフトウエアMARBLEは新たに開発したもので,長距離クーロン相互作用をカットオフなしに扱うことのできるFast Multipole Methodなど,近年の分子シミュレーションの最新技術を導入したものとなっている.以上のシミュレーション技術を用い,疎水効果の物理的起源を検討した.疎水効果の起源では,従来,相対立する水の構造化説と排除体積効果説が提唱されていた.本研究では,以上の2つの対立する説を統合的に理解する理論を構築し,疎水効果の起源を明らかにした.さらに,以上の理論を変性剤(尿素)を導入した系に適用し,変性剤が疎水効果をどう変化させるかを解析した.疎水効果の自由エネルギーは,空孔生成項と溶質-溶媒の分散力項からなるが,尿素は,空孔生成項に対しては疎水効果を強め,分散力項では疎水効果を弱めることがわかった.全体として尿素の効果は,2つの項が微妙なバランスを持って疎水効果に影響していることがわかった.本研究では,蛋白質の安定性・折れたたみ機構において,特に水や変性剤のもたらす溶媒効果に焦点をあて,コンピュータシミュレーションにより,その分子メカニズムを解明することを目的とした.そのために,(1)これからのスーパーコンピュータの潮流である超並列スーパーコンピュータ用の分子シミュレーションソフトウエアの開発,(2)溶媒効果,とくに,統計力学的扱いが要求される疎水効果理論の構築,(3)変性剤を導入した分子シミュレーションによる変性剤効果の解明を行った.本研究では,通信最適化や負荷分散を効率的に行えるプログラミング環境Parsleyを開発し,それを生体高分子シミュレーション(XYZ系:MARBLE,二面角系:NORMA)に応用した.XYZ系,二面角系とも,本研究により新たな並列化方式が開発された.また,分子動力学ソフトウエアMARBLEは新たに開発したもので,長距離クーロン相互作用をカットオフなしに扱うことのできるFast Multipole Methodなど,近年の分子シミュレーションの最新技術を導入したものとなっている.以上のシミュレーション技術を用い,疎水効果の物理的起源を検討した.疎水効果の起源では,従来,相対立する水の構造化説と排除体積効果説が提唱されていた.本研究では,以上の2つの対立する説を統合的に理解する理論を構築し,疎水効果の起源を明らかにした.さらに,以上の理論を変性剤(尿素)を導入した系に適用し,変性剤が疎水効果をどう変化させるかを解析した.疎水効果の自由エネルギーは,空孔生成項と溶質-溶媒の分散力項からなるが,尿素は,空孔生成項に対しては疎水効果を強め,分散力項では疎水効果を弱めることがわかった.全体として尿素の効果は,2つの項が微妙なバランスを持って疎水効果に影響していることがわかった.
両大戦間期フランスにおけるジャポニザンの活動

研究期間全体を通じて、フランスにおける日本文学受容の実態を明らかにすることを目指し、対象とする時代を両次大戦間期(第二次大戦中を含む)に絞った上で、特にフランスのジャポニザンの活動とその周囲の状況に着目して調査・分析を行った。その際、ジャポニザンに活動の場を提供したいくつかの定期刊行物(Revue franco-nipponne「日仏評論」、France-Japon「フランス・ジャポン」、Le Mouton blanc「白い羊」など)について精査することで考察を深めることを心掛けた。その主たる成果は「フランスにおける日本文学受容の一側面ー火野葦平の場合」(『信州大学人文科学論集』第4巻、p. 141-153)や「白い羊と俳句ーフランスにおける日本文学受容の一側面」にまとめられている。前者は1939年から1940年にかけて「フランス・ジャポン」誌や「フィガロ」紙に掲載された火野葦平作品の抄訳・紹介の内実を検討するものであり、翻訳・紹介を手がけた者の思想、行動にまで考察の範囲を広げた。後者の論文は俳人ルネ・モーブランに即してフランスにおける俳句の受容を考察したものである。モーブランが関わっていた「白い羊」誌に着目することで、両大戦間期のフランスにおける俳句の流行が「モダンな古典主義」という文学的潮流と結びついたものであったことを明らかにした。どちらの論文も、これまで知られていなかった新事実の発見を含むこと、また、フランスにおける日本文学受容について考察するにあたって単に書誌的調査に終始するのではなく、フランスの社会的背景や文学的・思想的潮流と日本文学との接点を探ったことに特色があると言える。さらに最終年度には研究成果を広く発信することを心掛け、一般向けの刊行物に寄稿した。「藤田嗣治と刺青のこと」(『ふらんす』2018年7月号、p. 19-21)がそれである。「両大戦間期フランスにおけるジャポニザンの活動」の実態と意味の解明を目指した研究の一環として、当時フランスで刊行されていた仏語雑誌『フランス・ジャポン』に主に依りながら日本文学・日本文化の紹介に尽力したフランス人の活動について考究した。その際、二つの着眼点を持って作業を進めた。まず、日本で兵隊作家として脚光を浴びていた火野葦平の作品(『土と兵隊』「煙草と兵隊」)の紹介・翻訳に着目した。即ち、火野葦平作品の翻訳の内実の検討、底本となった版(英語版を含む)の特定、フランスのメディア(「フィガロ」紙など)の動静およびフランス人読者の反応を調査した。これにより、第二次世界大戦勃発の前後に、日本の戦争を扱った作品がフランスでどのように受けとめられたか、その実態の一面が明らかになった。なお、ここでは特にアルフレッド・スムラーの仕事に注目することとなった。上記の作業と並行して、フランスにおける芥川龍之介の作品の紹介・翻訳にも着目した。ここではジルベルト・ラ・ドルジュなどの仕事に光を当てることになった。以上の調査・考察を通して、まだフランスで日本文学のアカデミックな研究・教育が軌道に乗っていなかった時期に、『フランス・ジャポン』のような日本文化紹介の雑誌が、フランスのジャポニザンを育む「学校」のような役割を果たしていたことが、その実態とともに明らかになり、フランスにおける日本文学の受容の歴史の一面が解明された。フランスに紹介された日本文学作品の目録を作成するにとどまらず、日本文学の紹介がフランス側のどのような文学的・思想的動向と交差したのか、またフランスでどのような反響を生んだのかを明らかにすることを重視しているが、その実現に向けて徐々にではあるが確実に進んでいるため。「日仏文化交流の歴史」の研究の一環として、本研究はフランスにおける本格的な日本学の「黎明期」にあたる両大戦間期に着目し、当時の代表的なジャポニザンの著作とその関連資料を調査、分析するものであり、特に当該年度はルネ・モーブランについて検討を行った。より具体的に言えば、ルネ・モーブランが、1922年にフランスのリヨンで刊行された文芸雑誌『白い羊』に参加し、「モダンな古典主義」という思潮の中で自らの俳諧観を育んだことに着目し、『白い羊』の実態、『白い羊』へのモーブランの関与の内実、「モダンな古典主義」の歴史的意味、の解明を試みた。その結果、まず、これまで十分に明らかにされてこなかった『白い羊』という雑誌の出版経緯及び主張が明らかになった。また、フランス語俳句の音節数をめぐる当時の議論に、「モダンな古典主義」が少なからず関わっていることが明らかになった。さらに、ルネ・モーブランの日本文学受容の姿勢の変化も明らかになった。その成果は『信州大学人文科学論集』第五号に寄稿した論文「白い羊と俳句ーフランスにおける日本文学受容の一側面」にまとめた。『白い羊』とルネ・モーブランの関わりに着目した先行論文は皆無であったこと、また、<フランスにおける俳句受容>と「モダンな古典主義」との関わりもこれまで十分に研究されてこなかったことに鑑みて、「日仏文化交流の歴史」の解明に寄与する研究が実施できたと考える。

単にフランスに翻訳・紹介された日本文学関連の書籍の目録を作成するにとどまらず、フランスのどのような知的文脈に日本文学が接ぎ木されたのか、さらには、日本文学がフランス文化にどのような影響を与えたのかを解明することを目標としているが、当時のフランスの「モダンな古典主義」と俳句との関わりを明らかにしたり、フランスのメディアに現れた日本文学関連の言説を調査・分析するといった作業を通して、その目標に向かって着実に進んでいると言えるため。ただ、これまでもっぱらアルフレッド・スムラー、ルネ・モーブランの二人の業績に着目してきたが、さらに視野を広げていくことが望ましいであろう。研究期間全体を通じて、フランスにおける日本文学受容の実態を明らかにすることを目指し、対象とする時代を両次大戦間期(第二次大戦中を含む)に絞った上で、特にフランスのジャポニザンの活動とその周囲の状況に着目して調査・分析を行った。その際、ジャポニザンに活動の場を提供したいくつかの定期刊行物(Revue franco-nipponne「日仏評論」、France-Japon「フランス・ジャポン」、Le Mouton blanc「白い羊」など)について精査することで考察を深めることを心掛けた。その主たる成果は「フランスにおける日本文学受容の一側面ー火野葦平の場合」(『信州大学人文科学論集』第4巻、p. 141-153)や「白い羊と俳句ーフランスにおける日本文学受容の一側面」にまとめられている。前者は1939年から1940年にかけて「フランス・ジャポン」誌や「フィガロ」紙に掲載された火野葦平作品の抄訳・紹介の内実を検討するものであり、翻訳・紹介を手がけた者の思想、行動にまで考察の範囲を広げた。後者の論文は俳人ルネ・モーブランに即してフランスにおける俳句の受容を考察したものである。モーブランが関わっていた「白い羊」誌に着目することで、両大戦間期のフランスにおける俳句の流行が「モダンな古典主義」という文学的潮流と結びついたものであったことを明らかにした。どちらの論文も、これまで知られていなかった新事実の発見を含むこと、また、フランスにおける日本文学受容について考察するにあたって単に書誌的調査に終始するのではなく、フランスの社会的背景や文学的・思想的潮流と日本文学との接点を探ったことに特色があると言える。さらに最終年度には研究成果を広く発信することを心掛け、一般向けの刊行物に寄稿した。「藤田嗣治と刺青のこと」(『ふらんす』2018年7月号、p. 19-21)がそれである。第一次大戦直後にフランスで提唱された「モダンな古典主義」と、フランスにおける日本文学受容の関わりについて考究する。具体的には雑誌le Mouton blancをめぐる調査・考察が鍵となる。この調査・考察によって、当時の代表的なジャポニザン(ルネ・モーブランなど)の仕事の背景と意義が明らかになるはずである。そのために、フランス国立図書館に所蔵されている当雑誌のバックナンバー等の検討に比重を置く。両次大戦間にパリ在住の日本人グループが刊行したFrance-Japon誌を主たる手がかりにして、フランスのジャポニザンの活動の広がりと多様性をさらに追究する。その際、美術史研究(藤田嗣治研究など日仏文化交流史の研究と深く切り結ぶ領域)の最新の成果を踏まえながら作業を進めることになる。
アルキル化剤に対する適応応答の分子的機構

アルキル化剤は生物のDNAを傷つけ,その結果突然変異や癌を引き起こす。細胞はアルキル化剤に感受性を示すが,大腸菌などの微生物細胞を予め低濃度のアルキル化剤で処理すると,その後高濃度のアルキル化剤を与えても抵抗性を示し,その致死効果や突然変異誘起効果が現象的に減少することが知られている。この現象は一般に適応応答とよばれているが,これはアルキル化剤でDNAにできた傷がシグナルとなって,アルキル化剤によってできた傷をなおす酵素を誘導することがこれまでの研究で明らかにされた。DNAの傷はO^6-メチルグアニンとホスホトリエステルであって,この傷を認識してそのメチル基を転移するメチルトランスフェラーゼが大腸菌からヒトに至るまで調べられたほとんどすべての生物に存在する。この酵素はメチル基を自らの蛋白の一部(その特定のシステイン残基)に転移し,メチル型となった蛋白は今度は転写調節因子として活性化される。我々は大腸菌の系でこの転写活性化の機構を研究した。そのため大腸菌からこの系に異常を持つミュータントを分離し,またその遺伝子のクローニング,遺伝子産物の大量生産と精製,試験管内転写系を構築して分子レベルの反応解析などを行ない,この反応系のほぼ全容を明らかにすることができた。適応応答に関する遺伝子としてはada,alkA,alkB,aidBの4つの遺伝子を同定し,その中でada遺伝子産物がメチルトランスフェラーゼとして特定のメチル化部分の修復に関与するとともに,転写調節因子として系全体の遺伝子発現を調節していることを明らかにした。alkA遺伝子の産物は3-メチルアデニンDNAグリコンラーゼIIであって,アルキル化剤によってできる3-メチルアデニンを含むメチル化塩基をDNAから遊離するが,今回の共同研究でこの酵素はクロロアセトアルデヒドでつくられるN2,3-エテノグアニンのような特殊な修飾塩基もDNAから取り除くことが明らかになった。適応応答においてはAda蛋白(ada遺伝子の産物)が転写調節因子として中心的な役割を演じる。Adaは蛋白は354アミノ酸残基から成るが,そのCys69とCys321がメチル受容基で,それぞれDNAのメチルホスホトリエステルおよびO^6-メチルチミンも)からメチル基を受け取ることが明らかにされている。そのうち転写調節因子としての活性化に効果があるのはCys69のメチル化である。メチル化されたAdaタンパクはそれ自体の遺伝子のプロモーターに結合し,通常はそこに結合する能力の低いRNAポリメラーゼのプロモーターへの結合を促進する。メチル化されたAda蛋白とRNAポリメラーゼはDNA上で三者結合体をつくっていると考えられる。この時メチル化Ada蛋白が認識して結合する領域をフットプリンティング法および部位指定変異導入法で調ベたところ,それはプロモーターの-35ボックスより若干上流に存在するAAAGCGCAというオクタヌクレオチド配列であることが明らかになった。この転写活性化によってada遺伝子の産物が大量につくられるが,このようにして細胞内に蓄積したAda蛋白は,このレギュロンに属する他の遺伝子のプロモーターに結合してその発現を促進する。このようにしてalkA遺伝子の転写が活性化されるが,そのとき働くのはAda蛋白であってこれは必ずしもメチル化されている必要はない。そこでalkA遺伝子のどの領域にAda蛋白が結合して転写を促進させるかを,in vitroおよびin vivoの系を用いて解析した。その結果alkA遺伝子の調節に働くのは,その-35ボックスと部分的に重なって存在するAAAGCAAA配列であることが明らかになった。alkAプロモーター内にはAAAGCGCAという配列も存在するので,これよりもAAAGCAAA配列がより強いAda蛋白結合能を有し,これによってadaとalkA遺伝子において微妙に異なる転写を調節するとともに,適応応答全体としてきわめて生物的な反応をきたしているものと考えられる。適応応答は枯草菌やサルモネラ菌など他の細菌においても見られるが,その調節の機構を理解する上でも,本研究の結果は役立つと考えられる。

alkA遺伝子の産物は3-メチルアデニンDNAグリコンラーゼIIであって,アルキル化剤によってできる3-メチルアデニンを含むメチル化塩基をDNAから遊離するが,今回の共同研究でこの酵素はクロロアセトアルデヒドでつくられるN2,3-エテノグアニンのような特殊な修飾塩基もDNAから取り除くことが明らかになった。適応応答においてはAda蛋白(ada遺伝子の産物)が転写調節因子として中心的な役割を演じる。Adaは蛋白は354アミノ酸残基から成るが,そのCys69とCys321がメチル受容基で,それぞれDNAのメチルホスホトリエステルおよびO^6-メチルチミンも)からメチル基を受け取ることが明らかにされている。そのうち転写調節因子としての活性化に効果があるのはCys69のメチル化である。メチル化されたAdaタンパクはそれ自体の遺伝子のプロモーターに結合し,通常はそこに結合する能力の低いRNAポリメラーゼのプロモーターへの結合を促進する。メチル化されたAda蛋白とRNAポリメラーゼはDNA上で三者結合体をつくっていると考えられる。この時メチル化Ada蛋白が認識して結合する領域をフットプリンティング法および部位指定変異導入法で調ベたところ,それはプロモーターの-35ボックスより若干上流に存在するAAAGCGCAというオクタヌクレオチド配列であることが明らかになった。この転写活性化によってada遺伝子の産物が大量につくられるが,このようにして細胞内に蓄積したAda蛋白は,このレギュロンに属する他の遺伝子のプロモーターに結合してその発現を促進する。このようにしてalkA遺伝子の転写が活性化されるが,そのとき働くのはAda蛋白であってこれは必ずしもメチル化されている必要はない。そこでalkA遺伝子のどの領域にAda蛋白が結合して転写を促進させるかを,in vitroおよびin vivoの系を用いて解析した。その結果alkA遺伝子の調節に働くのは,その-35ボックスと部分的に重なって存在するAAAGCAAA配列であることが明らかになった。alkAプロモーター内にはAAAGCGCAという配列も存在するので,これよりもAAAGCAAA配列がより強いAda蛋白結合能を有し,これによってadaとalkA遺伝子において微妙に異なる転写を調節するとともに,適応応答全体としてきわめて生物的な反応をきたしているものと考えられる。適応応答は枯草菌やサルモネラ菌など他の細菌においても見られるが,その調節の機構を理解する上でも,本研究の結果は役立つと考えられる。アルキル化剤は生物のDNAを傷つけ、その結果突然変異や癌をひきおこす。しかし細胞を予め微量のアルキル化剤で処理すると、その後高濃度のアルキル化剤を与えてもそれに抵抗性を示すことが知られている。この現象は一般的に適応応答とよばれているが、我々はその機構を分子レベルで解明するため大腸菌を用いて研究した。
マクロファージの低酸素センサーPHDを標的とした腎疾患新規治療の開発

慢性腎臓病の多くで腎臓の機能が低下し,それが進行すると透析などが必要になる.しかしその決定的な治療は現在ない.この病気には腎臓の尿細管間質という場所の炎症(白血球などが増えて臓器に傷害を与える状態)や酸素不足が関係する.マクロファージという細胞が炎症の舵取りをし,酸素不足はPHDというタンパク質が感知するが,慢性腎臓病においてマクロファージのPHDがどのようなはたらきをするかは分かっておらず,これが治療の標的になる可能性がある.そこで,マクロファージだけでPHDをなくしたマウスを用いて慢性腎臓病のモデルを作成し,腎臓病や炎症への影響を調べることで,新しい治療に結び付くかを研究する.慢性腎臓病の多くで腎臓の機能が低下し,それが進行すると透析などが必要になる.しかしその決定的な治療は現在ない.この病気には腎臓の尿細管間質という場所の炎症(白血球などが増えて臓器に傷害を与える状態)や酸素不足が関係する.マクロファージという細胞が炎症の舵取りをし,酸素不足はPHDというタンパク質が感知するが,慢性腎臓病においてマクロファージのPHDがどのようなはたらきをするかは分かっておらず,これが治療の標的になる可能性がある.そこで,マクロファージだけでPHDをなくしたマウスを用いて慢性腎臓病のモデルを作成し,腎臓病や炎症への影響を調べることで,新しい治療に結び付くかを研究する.
強地震動の予測に関する総合的研究

本総合研究では,平成5年度より3年間で,将来の大地震に対する現時点での強振動の予測について地震学および地震工学双方の研究成果を横断的に比較検討し,更に精度よい強地震動予測手法を確立する指針を探ることを目的としてきた.本研究期間においては,1993年釧路沖地震,北海道南西沖地震,1994年北海道東方沖地震,三陸はるか沖地震,そして1995年兵庫県南部地震と様々な地震動災害を引き起こした大巨大地震が連続した.これらの地震動災害の中で,我々の研究グループのメンバーを中心として,従来から存在する強震動データベースをもとにした研究だけではなく,北海道南西沖地震震源域付近や釧路市,兵庫県南部地震震源域における共同強震観測を実施し,強震動データベースの構築及び地盤資料の収集を行い,強震動研究を進めてきた.特に阪神・淡路大震災を引き起こした兵庫県南部地震に対しては,本研究グループを中心とした強震動研究者が,理論的・経験的・観測的手法に基づいてその地震動災害生成原因の解明と,都市直下地震時の震源域における強震動予測手法の確立に取り組んだ.これらの研究成果により,震源特性,地盤震動特性等を考慮することにより今回の地震動災害を引き起こした地震動の強さを定量的に評価することができた。研究成果は平成8年1月に研究シンポジウムの形で公表され,本研究グループの研究分担者だけではなく,国内外の研究協力者,地震学者,地震工学研究者が参加,研究発表及び討議を行った.更に研究シンポジウムでの発表内容を中心に,最新の強地震動予測,評価に関する研究報告を本研究の研究成果報告書としてまとめた.本総合研究では,平成5年度より3年間で,将来の大地震に対する現時点での強振動の予測について地震学および地震工学双方の研究成果を横断的に比較検討し,更に精度よい強地震動予測手法を確立する指針を探ることを目的としてきた.本研究期間においては,1993年釧路沖地震,北海道南西沖地震,1994年北海道東方沖地震,三陸はるか沖地震,そして1995年兵庫県南部地震と様々な地震動災害を引き起こした大巨大地震が連続した.これらの地震動災害の中で,我々の研究グループのメンバーを中心として,従来から存在する強震動データベースをもとにした研究だけではなく,北海道南西沖地震震源域付近や釧路市,兵庫県南部地震震源域における共同強震観測を実施し,強震動データベースの構築及び地盤資料の収集を行い,強震動研究を進めてきた.特に阪神・淡路大震災を引き起こした兵庫県南部地震に対しては,本研究グループを中心とした強震動研究者が,理論的・経験的・観測的手法に基づいてその地震動災害生成原因の解明と,都市直下地震時の震源域における強震動予測手法の確立に取り組んだ.これらの研究成果により,震源特性,地盤震動特性等を考慮することにより今回の地震動災害を引き起こした地震動の強さを定量的に評価することができた。研究成果は平成8年1月に研究シンポジウムの形で公表され,本研究グループの研究分担者だけではなく,国内外の研究協力者,地震学者,地震工学研究者が参加,研究発表及び討議を行った.更に研究シンポジウムでの発表内容を中心に,最新の強地震動予測,評価に関する研究報告を本研究の研究成果報告書としてまとめた.1993年は1月15日釧路沖地震(M7.8),2月9日能登半島沖地震(M6.6),7月12日北海道南西沖地震(M7.8)と連続して被害地震が生じ,北海道南西沖地震では主に津波により死者・行方不明者200人を越す人的被害がでた。1月の釧路沖地震では,釧路気象台において気象庁87型電磁式強震計が導入されて以来初めての900galを越す大加速度が観測されたが,同気象台をはじめとする建物には軽微な被害をうけたものの,大破には至らなかったことが最大加速度値と被害との関連を再検討させる動機となった。1992年3月に第2回ESG国際研究集会が神奈川県小田原市で行われた際の実行委員会メンバーが中心となって,釧路における表層地質と地震動の関係を精査するための共同微動観測が93年8月に行われ,同時に共同強震観測網が設置された。我々の研究グループは,そのほとんどの構成メンバーがなんらかの形で釧路での共同微動/地震観測に参加していることもあり,本総合研究遂行のためのテストサイトのひとつとして釧路をあげ,本研究経費によって地震観測点を設けて地震観測網の1点を担うとともに,データの共有化をはじめとする共同研究を開始した。また,1994年1月28,29日両日にわたり平成5年度総合研究(A)「強地震動の予測に関する研究」シンポジウムが大工大摂南大学創立60周年記念館で開催され,釧路での微動/地震観測報告,解析結果をはじめとして,研究分担者,研究協力者による研究発表が行われた。当日は研究グループのみならず,強震動予測研究に携わる研究者がのべ60名以上参加し,研究発表,議論,次年度への研究課題の意見交換が活発に行われた。なお,「強地震動の予測に関する研究」シンポジウムで発表された論文を中心に本研究に関連した論文を集約し,研究成果報告書として出版した。本研究は3年間の総合研究として平成5年度より開始した.目的は,将来の大地震に対する強震動の予測について地震学および地震工学双方の研究成果を横断的に比較検討することにある.

平成5年1月15日におこった釧路沖地震により釧路市周辺で得られた強震動特性を定量的に評価するために,釧路市周辺をテスト地域として本研究経費による1観測点を含む23観測点を配備し,平成6年10月北海道東方沖地震を含む記録が得られている.この地震において釧路では震度6を記録し,釧路沖地震に匹敵する強震記録が高密度のアレイで観測されたため,貴重なデータとして解析が進められている.更に平成7年1月に神戸に未曾有の地震災害をもたらした兵庫県南部地震に対しても,地震直後に現地調査や強震記録の解析を進めるとともに,本研究グループのメンバーが中心となって臨時共同強震観測,微動観測を行い,特に神戸市内における震災集中地域の生成要因を解明する共同研究が進められた.これら多くの研究成果は雑誌論文に投稿されているが,時間的に現在のところ公表されてはいない.しかしながら,兵庫県南部地震に関する研究報告会を地震直後の1月末に開催し,調査報告の意見交換を行うとともに,兵庫県南部地震に関する研究,釧路アレイ地震記録を用いた研究,更に数値シミュレーション手法に関する新手法開発等を中心とした強地震動予測に関する基礎的な研究成果をまとめ,本年度の研究報告書として公表した.本総合研究では,平成5年度より3年間で,将来の大地震に対する現時点での強震動の予測について地震学および地震工学双方の研究成果を横断的に比較検討し,更に精度よい強地震動予測手法を確立する指針を探ることを目的としてきた.本研究期間においては,1993年釧路沖地震,北海道南西沖地震,1994年北海道東方沖地震,三陸はるか沖地震,そして1995年兵庫県南部地震と様々な地震動災害を引き起こした大巨大地震が連続した.これらの地震動災害の中で,我々の研究グループのメンバーを中心として,従来から存在する強震動データベースをもとにした研究だけではなく,北海道南西沖地震源域付近や釧路市,兵庫県南部地震震源域における共同強震観測を実施し,強震動データベースの構築及び地盤資料の収集を行い,強震動研究を進めてきた.特に阪神・淡路大震災を引き起こした兵庫県南部地震に対しては,本研究グループを中心とした強震動研究者が,理論的・経験的・観測的手法に基づいてその地震動災害生成原因の解明と,都市直下地震時の震源域における強震動予測手法の確立に取り組んだ.これらの研究成果により,震源特性,地盤震動特性等を考慮することにより今回の地震動災害を引き起こした地震動の強さを定量的に定量的に評価することができた.研究成果は平成8年1月に研究シンポジウムの形で公表され,本研究グループの研究分担者だけではなく,国内外の研究協力者,地震学者,地震工学研究者が参加,研究発表及び討議を行った.更に研究シンポジウムでの発表内容を中心に,最新の強地震動予測,評価に関する研究報告を本研究の研究成果報告書としてまとめた.
口腔癌の分子細胞生物学的特性に基づいた遺伝子診断法の開発とその応用

遺伝子診断の技術を口腔癌に応用するためには、この癌に特徴的な分子細胞生物学的な特性を明らかにする必要がある。われわれは、口腔癌の大部分を占める扁平上皮癌細胞に的を絞り、その分子細胞生物学的特徴を検索した。1)口腔扁平上皮癌における遺伝子異常で最も高頻度に見られるものは癌抑制遺伝子p53の変異であった。p53遺伝子エクソン5から8の変異をPCR-SSCP法で調べたところ63%にミューテーションが認められた。この変異とp53蛋白の免疫染色性を比較するために変異の明らかな口腔癌細胞をSCIDマウスに移植し調べたところ、mis-sense mutationを持つもののみが染色性を示した。このことは、免疫染色のみでp53の変異を論ずることの限界を示すものと考えられた。2)新たに樹立した口腔癌細胞株におけるerbB-1遺伝子の増幅の頻度は25%であった。erbB-1遺伝子の増幅とEGFレセプターの発現を比較したところ、遺伝子増幅や転写の亢進が見られないにも関わらずEGFレセプターが過剰発現している例が明らかとなった。この例を詳しく調べたところ、EGFレセプターの分解過程の遅延が原因であることが明らかとなった。3)EGFレセプター過剰発現細胞の転移形成におよぼすEGFの影響をSCIDマウスを用いた転移モデルを作製し調べたところ、明らかな影響は与えないことが明らかとなった。しかし、EGFの投与は難治性口腔粘膜疾患モデル兎における治癒促進効果を示した。4)口腔癌の生物学的特性を蛋白分泌の面から検索した。その結果、正常細胞に比較して癌細胞で減少する蛋白および増加している蛋白をそれぞれ認識するモノクローナル抗体を作製した。今後これらの蛋白の遺伝子クローニングにより口腔癌の新しい性質が明らかになっていくことが期待される。口腔癌の大部分を占める扁平上皮癌の分子細胞生物学的特性について解析を進めた。その結果、上皮成長因子受容体(EGF-R)の過剰産生が認められたが、その遺伝子であるc-erbB-1の増幅は20%以下であった。一方、線維芽細胞成長因子様物質をコードしているといわれるint-2およびhst-1の遺伝子増幅の頻度は40%程であった。また、int-2およびhst-1の増幅は常に同時に起こっていたが、c-erbB-1の増幅とは独立していた。これらの遺伝子増幅を簡便かつ正確に検出するためのDifferential PCR法の開発に関する面では、公開されている染色体の塩基配列に関する情報が少なく、PCRプライマーの設計を現在続けている段階である。p53およびras遺伝子の解析において、ras遺伝子の点突然変異の頻度は非常に少なく(3%)、この遺伝子の異常の口腔扁平上皮癌への関与はあまり多くはないことが推測されたが、これに対しp53遺伝子の変異が非常に多いことが明らかとなってきた。培養口腔扁平上皮癌細胞では、90%以上に、口腔癌組織においても60%余りにこの遺伝子に異常が起こっていることが明らかとなった。しかもその遺伝子異常は、そのほとんどがエキソン5から8の点突然変異であった。さらに、変異の明らかとなった細胞をSCIDマウスに移植し、形成された移植腫瘍を材料として免疫組織学的にp53蛋白質を検索したところmissense変異を生じている例のみが染色されることが明らかとなった。また、この結果を基礎に臨床材料におけるp53蛋白質の検索を行ったところ癌と判定することのできない白板症症例においても陽性例が認められた。

このことは、p53の異常が口腔癌のかなり早期の段階で起こっている可能性を示唆するものと考えられた。以上の研究成果からも口腔癌領域における遺伝子診断法の開発および臨床への導入の必要性が高まっていると思われる。本研究年度において最も進んだ研究は、口腔扁平上皮癌細胞における1)EGFレセプターの過剰発現機構の解析、2)p53遺伝子変異とp53遺伝子産物発現の関連、3)モノクローナル抗体による分泌蛋白の解析、4)細胞接着因子の発現と細胞および組織の形態学的特徴の関連、および5)研究材料としての新しい口腔癌細胞株の樹立に関するものであった。それぞれの研究成果は、以下のごとくであった。1)口腔癌細胞におけるEGFレセプターの過剰発現機構には、今まで知られていたerbB-1遺伝子の増幅、転写の亢進のほかにレセプター蛋白の分解過程の異常に起因する例があることが明らかとなった。2)ヌードマウスおよびスキッドマウスを用いた研究により、p53遺伝子変異と動物における造腫瘍性との間には関連がないこと、p53遺伝子産物の免疫組織学的染色性はp53遺伝子のmissennse mutationと強い相関があることが明らかとなった。3)Ca9-22PF細胞の無蛋白培養上清を抗原とし、この細胞に特徴的な130kDaの蛋白を認識するモノクローナル抗体を作成した。4)E-カドヘリンの発現量をRIAで測定したところ、E-カドヘリンの発現量とin vitroの形態およびin vivoの浸潤様式に強い関連があることが明らかとなった。5)初代培養法を改良することにより、新たに4種の口腔癌細胞株の樹立に成功した。1)昨年度に樹立に成功した口腔扁平上皮癌細胞株4種の分子細胞生物学的特性を検索した。その結果、これら4株はすべて異数性の染色体を有し、軟寒天培地中においてコロニーを形成した。HOC512およびHOC1.19の2細胞株はSCIDマウスに対して造腫瘍性を有していた。また、HOC519およびHOCI-19は、無蛋白培地PF86-1での増殖が可能であった。c-erbB-1遺伝子をサザンブロット法で調べたところHOC512に明らかな遺伝子増幅が認められたが、遺伝子の再配列は明らかではなかった。2)同一患者の臨床経過とともに現れた4カ所の病変より独立した扁平上皮癌細胞株を樹立した。この癌細胞株の分子細胞生物学的特性の違いを調べることにより口腔癌の転移形成に関する基礎的な知見が得られる可能性が期待される。3)モノクローナル抗体CPMG-1によって認識される抗原の解析を行った。CPMG-1のエピトープは糖であった。この抗原は、口腔扁平上皮細胞の癌化の過程において分泌が減少している可能性が示唆された。この抗原は、正常口腔粘膜上皮細胞から多く分泌されるが粘膜下結合織由来の線維芽細胞は全く産生していなかった。しかし、免疫染色の結果からこの物質は、上皮下に局在していた。この結果から、この物質が正常上皮が分泌する細胞外基質の1種であることが示唆される。ウエスタンブロットの結果、この物質は、分子量約66,000の糖蛋白であり、エンドグリコシダーゼH処理により分子量は、約63,000となった。
西洋古典文学における「変身物語」と、近代文学におけるその受容

西洋文学の中で、「変身物語」は特異な位置を占めている。紀元前1世紀の終わり頃に書かれたオウィディウスの『変身物語』が最も有名であるが、その400年ほど前、すでにギリシア文学の中で、神や人間の変身をテーマとする物語群が成立していた。本研究では、現存する最古の変身物語集である、アントニーヌス・リベラーリスの『変身物語』(紀元前4世紀)を取り上げ、研究を行った。本書はオウィディウスを始めとする多くの文学者に多大な影響を与えたにもかかわらず、これまであまり顧みられることがなく、これまでに日本語の翻訳書も出版されていない。そこで本研究ではまず、アントニーヌス・リベラーリスの『変身物語』の翻訳を試みた。また、翻訳に際しては次のような視点を考察しながら、詳細な訳註を付けた。(1)古代ギリシア精神のなかで、「変身」という概念がなぜ生まれたのか。人間を「死すべき者」と規定したギリシア人にとって、「変身」とはいかなる意味をもっていたのか。個としてのアイデンティティーは、変身後も維持されると考えたのか。(2)オウィディウスは『変身物語』を作成するにあたって、アントニーヌス・リベラーリスの『変身物語』の影響をどのように受け、またそれらの伝統的な素材をどのような意図のもとに改変し、独自性を生み出したのか。このような西洋古典文学における変身物語の概念や伝統が、後のヨーロッパ文学にいかなる影響を与えたのか、という問題に関しては未だ十分な考察が行われたとはいえない。今後の研究課題としたい。なお、本研究で行ったアントニーヌス・リベラーリスの『変身物語』の翻訳は、本邦初訳として近日中に講談社より出版される予定である。現存する最古の変身物語である、アントニーヌス・リベラーリスの『変身物語』(AD2世紀、原文ギリシア語)について研究した。本書には比較的短い41の変身物語が収められている。これらはひとつの統一的思想に基づいて編纂されているというよりはむしろ、個々の変身物語の、カタログ的な傾向をもっている。物語を掲載する順序についても、前後の物語との因果の糸はみられず、それぞれ独立している傾向が強い。この点は、後のローマ時代に書かれたオウィディウスの『変身物語』と大きく異なっている。話の内容としては、人間が鳥に変身する物語が多くの割合を占める。興味深いのは、変身の理由が、大別して2つに分けられることである。ひとつは何らかの悪行に対する懲罰、いまひとつは死の運命を免れるための、救済や慰めによる変身である。この問題は今後さらに詳しく検討し、古代ギリシア人の思想のなかで、「変身」の概念がいかなる意味をもつのか、ギリシアの叙事詩や悲劇とは、どのような関わりをもつのか等の点について考察を続けたい。本書はこれまでに一度も日本語に翻訳されたことがないので、これを翻訳し、出版する準備も進めている。オウィディウスの『変身物語』にも多大な影響を与えたとみられる本書が出版されれば、ヨーロッパにおける変身物語の源流を探るうえで、貴重な資料となると期待される。本文の翻訳作業はほぼ終わったので、来年度は、訳注をつけ、解説を記す作業を進めたい。

本書はオウィディウスを始めとする多くの文学者に多大な影響を与えたにもかかわらず、これまであまり顧みられることがなく、これまでに日本語の翻訳書も出版されていない。そこで本研究ではまず、アントニーヌス・リベラーリスの『変身物語』の翻訳を試みた。また、翻訳に際しては次のような視点を考察しながら、詳細な訳註を付けた。(1)古代ギリシア精神のなかで、「変身」という概念がなぜ生まれたのか。人間を「死すべき者」と規定したギリシア人にとって、「変身」とはいかなる意味をもっていたのか。個としてのアイデンティティーは、変身後も維持されると考えたのか。(2)オウィディウスは『変身物語』を作成するにあたって、アントニーヌス・リベラーリスの『変身物語』の影響をどのように受け、またそれらの伝統的な素材をどのような意図のもとに改変し、独自性を生み出したのか。このような西洋古典文学における変身物語の概念や伝統が、後のヨーロッパ文学にいかなる影響を与えたのか、という問題に関しては未だ十分な考察が行われたとはいえない。今後の研究課題としたい。なお、本研究で行ったアントニーヌス・リベラーリスの『変身物語』の翻訳は、本邦初訳として近日中に講談社より出版される予定である。
聴覚障害者対応字幕の制作過程における情報共有と豊かな表現手法の開拓

本研究では、字幕制作者や映画製作者からの要望が高い、字幕内容に関する聴覚障害者からの意見のフィードバック方法の課題に取り組んだ。聴覚障害者への聞き取り実験と盲ろう者への調査の結果、映画鑑賞時やテレビ放送などの情報番組視聴時、字幕検討会などの幅広い場面で、字幕の見直し機能の有用性を確認した。さらに、ヘッドマウントディスプレイ(HMD)を用いたクローズド型字幕提示システムの生体影響評価実験より、眼精疲労やめまいなどの観点からも適切な字幕量調整の必要性が示唆された。そこで本研究では、HMDに搭載可能な自発性瞬目を用いた認知負担度のモニタリング手法を検討し、字幕のユーザーフィードバック手法を提案した。初年度は、日本における聴覚障害者対応字幕の制作環境について、字幕制作者および映画製作者への聞き取り調査からスタートした。現在日本では、100%の字幕付与を目指して法整備や字幕化が進んでいる。こうした字幕化の動きの中で、字幕提示技術に関しても新たな展開が生まれつつある現状を確認できた。「音声電子透かし技術を使った聴覚障害者用字幕表示上映システム」という技術である。これは、映画業界や映画鑑賞者に新たな負担を強いることなく、現在の映画館で導入可能な新技術として、高い評価を得ているシステムであり、実用化に向けた改良や検証やガイドライン作りが着々と進められている。一方、こうした字幕提示技術の急速な進展の傍らで、字幕としての表現それ自体の質の向上が喫緊の課題となっているにも関わらず、より良い字幕制作に繋がるような、聴覚障害者からの字幕に関する意見のフィードバックや字幕制作者間での情報共有の仕組みが十分でない現状も見えてきた。そこで初年度は、字幕提示に関する新しい技術動向に目を向け、本研究の目的とする「字幕制作過程における情報共有」や「豊かな表現手法の開拓」に向けて次年度以降に提案または開発すべき技術要素を検討するため、映画鑑賞新技術の開発団体と聴覚障害者50名を対象とした調査を実施した。関連団体への調査からは、映画鑑賞新技術が字幕制作に与える影響として、主な2点を確認できた。スマートフォンやHMDなどのセカンドディスプレーへの提示に適した字幕の加工や修正が必要となる点と、上映間際まで字幕編集が可能となる点(公開間近まで内容修正が行われるアニメ作品などでは特に有効と考えられる)である。一方、聴覚障害者を対象とした調査を通して、字幕の必要性だけでなく、字幕自体の見落とし度合いや見落とした際の対処法を聞き取ることで、聴覚障害者の視点を字幕制作にフィードバックする糸口を探ることができた。研究の2年次は、初年度のサーベイに基づき、聴覚障害者の見落とし字幕を検出し、その特徴を分析した上で字幕制作にフィードバックさせるためのアプリケーションを試作した。OSやPC環境によらずに使用できるようにするため、HTML5、JavaScript、CSS3を用いて開発した。試作したアプリケーションを用いて、聴覚障害者を対象に字幕映像の内容に関する正答率を指標とした予備実験を実施した。実験後にアプリケーションや評価方法に関して詳しくヒヤリングを行った結果、見落とし易い字幕の特徴や、見落とした字幕が気になる場合とそうでない場合、また、巻き戻すだけでなく早送りがしたい場合など、アプリの有用性を確認することができた。その一方で、評価方法に課題があることが分かった。聴覚障害者ならではの利用方法や利用価値を見い出すためには、映像内容の理解度や正答率を指標とするだけでなく、より深い視点で映像と聴覚障害者との関係を整理した上で評価方法を定める必要がある。一例として、テレビ放送などの情報入手のための映像と、映画などの文学的作品世界を鑑賞するための映像とでは、映像に対する見方やスタンスも異なることが想定される。すなわち、映像に含まれる情報を出来る限り正確に取得したい場合と、映像の流れや文脈をしっかり理解したい場合とでは、字幕の見方や重要となる字幕の質も変わってくると考えられる。これらの予備実験を通じて、本研究で提案する技術を有益なものとするための重要な知見を得ることができた。また、これと並行して、聴覚障害者の映像鑑賞支援を考える上で重要な盲ろう者(視覚と聴覚の両方に障害を有する方々)に対する調査も実施した。盲難聴や弱視難聴など、視覚の障害に加えて聴力も低下している方々も多くいる。そのような方々からは、音声ガイドを聞き逃して困ることがあるという声を聞くことができた。本研究のスタート時には、「字幕制作者が参照しやすい“分類"と“見やすさ"によって過去の字幕作品への探索を『字幕マッピング』の開発により実現する」ことで、これまでに欠けていた字幕制作におけるノウハウの共有と蓄積を促し、さらに、その視覚的な効果を活かして聴覚障害者からの字幕作品へのアクセスを容易にすることで、制作者と当事者の間の交流を生み出すことを目的としていた。しかし、初年度の字幕制作環境の現状調査を進める中で、国内における字幕制作技術の新しい動向を知り、「字幕マッピング」の試作にすぐに取り掛かるよりも、このような技術動向も踏まえて字幕制作支援手法を再検討することにした。新技術の展開や現在の字幕制作実態を加味した字幕制作支援技術の検討に時間を要したため、初年次に予定していた字幕制作支援技術の試作が2年次となってしまった。また、聴覚障害者を対象とした予備実験を通じて、試作アプリケーションを用いた実験方法の確立にも課題があることが分かったため、その改善にも時間を要している。そのため、研究目的の達成度を「(4)遅れている」とした。

しかし、このような研究計画の見直しを行ったことで、聴覚障害者にとっての字幕と映像の関係をより深い視点から分析することが可能となった。この点は、これまでに知られていない新規な点であり、本研究で提案する技術開発においても非常に有益な点である。また、盲ろう者へのヒヤリングも実施することができたため、字幕だけでなく音声ガイド制作においても、ユーザーアクションの記録と分析とフィードバックにより当事者と制作者間の「情報の循環」を生み出すというコンセプトが有益である可能性を見出すことができた。研究の3年次は,初年次の字幕提示技術および字幕制作状況の最前線に関する調査,および,2年次の字幕巻き戻し機能を搭載した映像再生ソフトウェアの試作と見落としやすい字幕および巻き戻し要求に関する予備評価を通じて得られた成果をもとに,字幕や音声ガイドに対するユーザーフィードバック手法の具体的検討を進めた.はじめに,本手法の幅広い可能性を探るために,字幕だけでなく聞き逃した音声ガイドを巻き戻すことにより,ユーザーアクションの記録とそのフィードバックにより当事者と制作者の間に「情報の循環」を生み出すというコンセプトが視覚障害者の音声ガイドに対しても役立つか確認した.音声ガイドの巻き戻し機能を備えた映像再生ソフトウェアを試作し,日常的にスクリーンリーダーを使用している視覚障害者を対象にデモとヒヤリングを実施した.ここでは,本編と同期提示される音声ガイドと巻き戻し音声ガイドの切り分けや,時間的な重なりによる聞き難さや紛らわしさが懸念された.そこで,巻き戻し用の音声ガイドとして,本編の音声ガイドとは異なる話速や声質の合成音声を用いた.その結果,それらのパラメタを適切に調整することで違和感や誤認識を低減し,映画本編を鑑賞しながらでも音声ガイドの聞き直しを認知処理できる可能性が確認できた.次に,字幕のユーザーフィードバック手法の改善策を検討した.実際の映画や映像鑑賞中の操作を想定した場合には,映像鑑賞への集中を妨げない手法を見出す点も重要である.そこで,3年次の後半では,今後の発展が期待されるHead Mounted Display (HMD)を用いた字幕提示による映画鑑賞の試写会を通じて,よりストレスの少ない直感的な巻き戻し制御,および,その記録手法を探った.また,巻き戻し操作中の認知的負担度を評価するために,HMD使用時でも計測が容易な自発性瞬目を用いた認知負担度評価方法を検討した.本研究では,はじめに,聴覚障害者や字幕制作者および映画製作者へのヒヤリング調査を通じて,字幕に対する聴覚障害者からのフィードバックの重要性および必要性を認識した.そこで,国内の字幕制作環境の現状と新しい字幕提示技術の動向に即した形で,映画および字幕鑑賞者のユーザーアクションの記録と分析およびフィードバックにより当事者と制作者間の「情報の循環」を生み出す方法を探ることとした.最初の試みとして“字幕の見落とし"および“字幕の見直し動作"に着目した.2年次には見落とし字幕を検出するための字幕巻き戻しソフトウェアを試作し,聴覚障害者を対象とした予備評価を実施した.