hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
認知症高齢者を抱える家族介護者の介護力獲得支援プログラムの有効性に関する研究

また企画、運営をスムーズに行うための組織づくりについては、まず多職種からなる10名のコア組織を中心に、医師、歯科医師、薬剤師、看護師、保健師、介護福祉士、社会福祉士、管理栄養士、歯科衛生士等のそれぞれ職能団体に働きかけた。そして行政関係者やNPO法人である家族会の積極的協力も得られ、他の地域でも珍しい家族介護者や一般市民が参加しての多職種連携研修会が継続的に実施できた。開催にあたり場所や時間帯、研修会の内容等について、毎月世話人会を開き十分に協議を重ね準備することができたことも順調に研修会を開催できた要因となる。また家族介護者の参加者は、家族の会の代表であり参加できない家族のニーズも専門職に直接伝えることができていた。さらに研修会終了後に研修内容を振り返り丁寧にアンケートを分析していくことで、研修会の成果と課題を明らかにすることができ、家族介護者のニーズにそった内容が検討できたと考える。H28年度の目的は、認知症を抱える家族介護者への多職種連携での支援方法について焦点化した研修会を5回(4月、7月、10月、1月、3月)開催し、家族介護者と専門職および地域住民との間で「顔が見える関係づくり」を構築することにより、家族介護者の意識の変化や介護力向上にどのように影響を及ぼすかについて検証することであった。研修会の具体的実施内容として、認知症の理解を中心に、排泄での実技、栄養サポート、口腔機能の向上、ケアマネジメント方法、在宅医との連携等、知識提供を行った後に家族介護者を交えてのグループディスカッションを行った。研修会を効果的に行うために事前に専門職間で3回にわたり協議し、家族介護者の理解力や認知力を考慮して内容を決定し準備を行っていった。排泄技術については、在宅での排泄のエキスパートに指導を依頼し実際の物品を用いて体験形式とした。5回の研修会でのグループディスカッションの記録および継続的に参加した家族介護者へのインタビュー内容について質的帰納的に分析を行い、また介護力質問紙調査については統計学的に分析中である。結果は全研修会の参加は698人で、そのうち家族介護者は56人(8.0%)、介護支援専門員が113人(16.2%)、歯科医師が97人(13.9%)、看護師が80人(11.5%)、管理栄養士が45人(6.5%)などの職種は多岐にわたっていた。満足度については全研修会において、十分満足できた115人(36.3%)、満足できた155人(48.9%)、まあまあ満足できた43人(13.6%)、そして、あまり満足できない、全く満足できない、がともに0人(0.0%)であった。認知症の理解の研修会後の家族介護者のインタビューでは、介護負担感と介護肯定感の両面からのカテゴリーが抽出されていた。現在各研修会の記録の分析と介護力についての質問紙調査の分析中である。まずやや遅れていると判断した理由として、1家族介護者を含めた多職種研修会は当初計画では月1回の1年間の予定であったが、介護力変化は1ヶ月単位では見えにくく、長期継続する必要性があると判断し、3ヶ月に1回で4年間継続する計画へと変更した。2電話での調査ではなく地域高齢者サロンに出向き、聞取り調査を実施する計画へと変更したため、家族介護者からのデータ収集と分析についてH29年度までの期間を要するためである。期間に遅れはあるものの、研修会開催によって得られる内容は当初の計画以上に質の高いものであると考える。
SFファンタジー・コンテンツの海外での受容に関する人文・社会科学の総合的研究

北米地域の研究および調査では、日本で流通するコンテンツがほぼリアルタイムに海外でも受容・享受されている現状が明らかになった。またインターネット利用者の多くを占める若年層においては、日本語はさほど大きな障害と考えられていない。日本のポップカルチャー・コンテンツは、普遍的なジャンルとしての地位を確立しつつある段階にすでに入っている。本研究は、アニメやマンガを含む日本のSFファンタジー・コンテンツが海外でどのように受容・評価されているかについて、美学的・文化史的な分析評価と法・政策・マネジメントのレベルでの議論を融合することを目指している。初年度の平成21年度は、以下の点について文献等による検討及び北米(長澤)、欧州(立岡)での現地調査を行い、以下の成果を見た。1.海外における受容の現状、受容傾向:主要なジャンルは少年マンガが中心。現地語への翻訳や現地特有のフォーマットへの適応よりも、日本での形態、内容そのままを求めるファン層は根強い。これが動機となって日本語学習・日本研究へと結び付いているケースが多くみられる。2.具体的な受容・享受の現状についての調査・分析:テレビや雑誌などの従来型媒体よりは、DVDやインターネット等の先進的メディアとの親和性が強い。日本と同様、購買力のある10代後半から20代の年代層が中心。3.海外での受容・研究の成果:専門誌の発刊や相次ぐ研究書の発行など、日本研究の中でのポップカルチャー研究はさらに理論化・精緻化している。本年度の調査の大きな成果としては、受容形態の変化が急速に進んでいることを確認できたことである。かつては各文化圏のフォーマットに合わせることで受容を促していたものが、日本のオリジナルにできるだけ近いものを歓迎する、という方向に変わりつつある。日本の現代文化の輸出にとって、大きな転換期を迎えつつあることが確認できた。二年目に当たる平成22年度は、以下の点について文献等による検討及び北米(長澤)、欧州(立岡)での現地調査を行い、以下の成果を見た。1.海外における受容の変化:マンガ(コミックスおよび雑誌)の受容は必ずしも伸びていない。出版点数および売り上げについては、頭打ちあるいは漸減傾向にあるようであるが、これはこのジャンルの人気というより出版全体の低落傾向によるものであると考えられる。2.一方、インターネットやDVDなど先進メディアによる普及はさらに進んでいるとみられる。北米でもネット上でのみ視聴可能なマンガやアニメの関連商品も販売されるなど、大手メディアや出版社による流通とは異なったルートでの拡大が見られることが、より明らかとなった。最終年度である本年度は、昨年度まで研究分担者であった四天王寺大学経営学部の立岡浩教授が、諸々の理由により研究分担者から連携研究者へと変更になったため、代表者である長澤のみによる研究成果のまとめを行った。本年度は主に、1.これまでの2年間の現地調査によって得られた情報や資料の整理、2.科研による調査の期間中に発表された内外の研究成果の収集と検討、3.研究対象である日本のポップカルチャー・コンテンツの最近の動向についての調査、以上の三点を行った。1.日本で流通するコンテンツがほぼリアルタイムに海外でも受容・享受されている現状が明らかになった。その主な流通経路としてはインターネットの普及によるところが大きい。インターネット利用者の多くを占める若年層においては、GUIを備えたコンピュータが直感的操作を可能とするために、日本語をさほど大きな障害と考えていないことも重要な要素である。2.これまでの研究、例えば中村&小野(2006)のような、旧来のメディアと流通に基づいた分析は、市場中心主義の限界や新たなデジタルコンテンツと流通のあり方への理解不足が浮き彫りとなる結果となった。今後のポップカルチャー受容については、コミックマーケットなどの巨大な同人市場も含め、アニメ、マンガを中心とした新たな文化ジャンルに展開していることを念頭に置かなければならない。3.2011年の夏にはトヨタ自動車の北米向けのテレビコマーシャルで、「初音ミク」というボーカロイド(架空のキャラクターに歌を歌わせるコンピュータソフト)のキャラクターが登場し、最近はGoogleのテレビCMでも採用されるなど、日本のコンテンツが音楽をも包含しつつある。これまで以上に日本のポップカルチャー・コンテンツが世界中で注目を集めるであろう。
Preconditioningの再灌流不整脈抑制効果とその機序に関する研究

本研究では、致死性の再灌流不整脈に対するpreconditioningに効果、ならびにその機序、殊にadenosine recepterの関与、更にprostaglandin、bradykinin receptorの役割について検討するため、実験群として以下の10群を設け、全てに5分間冠閉塞の後10分間再灌流を行った。(1)対照群;前処置せず。(2)PC群;5分間冠閉塞に先立ち2分間虚血/5分間再灌流によpreconditioning(PC)を行った。(3)8-PT群;adenosine recepterの阻害剤8-phenyltheophyline(8PT)10mg/kgを冠閉塞10分前に静脈内投与した。(4)8-PT/PC群;(3)群と同様に8PTを投与した後にPCを行った。(5)PTX群;心筋虚血前にGi蛋白を抑制するため実験の48時間前にpertussis toxin(PTX)20ug/kgを腹腔内投与した。(6)PTX/PC群;PTXの投与後にPCを行った。(7)ASA群;cyclooxygenaseを阻害するためasprin-DL-lysin(ASA)10mg/kgを冠閉塞10分前に静脈内投与した。(8)ASA/PC群;ASAを投与後にPCを行った。(9)Hoe群;bradykininreceptorの特異的阻害剤であるHoe140 20nmol/kgを冠閉塞30分前に皮下注射した。(10)Hoe/PC群;Hoel40を投与しPCを行った。以上の各実験群で再灌流時の心室頻拍(VT)、心室細動(VF)の発生頻度、それらの持続時間を解析したところ致死性再灌流不整脈であるVTもしくはVF(以下、再灌流VT/VF)の発生率は対照群では100%であり、そのうち60%にVF(VFもしくはVFならびにVT)が発生した。PC群では再灌流VT/VFの発生率は30%と有意に抑制され、いずれもVTであった。8-PT群においても対照群と同様、再灌流VT/VFは100%に誘発され、VFの発生は11%にみられた。これに対し、8-PT/PC群では再灌流VT/VFの発生率は10%と有意に低く、またVFの発生を認めなかった。PTX群の再灌流VT/VFの発生率は100%(VFは28%)であるのに対し、PTX/PC群では22%(VFは0%)と有意に低値であった。ASA群では再灌流VT/VFが100%(VFは56%)にみられたのに対し、ASA/PC群での発生率は22%(VFは0%)と有意に低値であった。またHoe群、Hoe/PC群での再灌流VT/VFの発生率は各々100%(VFは30%)、10%(VFは0%)であり、PCによる再灌流不整脈抑制はHoe140投与下にも認められた。以上の成績より今回我々の用いたラットの実験モデルに於てはpreconditioningは再灌流不整脈を著明に抑制するが、その機序は従来報告されてきた虚血心筋壊死に対するPreconditioning効果とは大きく異なり、adenosine Al receptorの活性化やG1蛋白の機能を介さず、また内因性prostaglandinやbradykinin receptorの役割も否定的と考えられpreconditioningが虚血による心筋代謝の変化を軽減し再灌流不整脈を抑制した可能性が考えられた。

PC群では再灌流VT/VFの発生率は30%と有意に抑制され、いずれもVTであった。8-PT群においても対照群と同様、再灌流VT/VFは100%に誘発され、VFの発生は11%にみられた。これに対し、8-PT/PC群では再灌流VT/VFの発生率は10%と有意に低く、またVFの発生を認めなかった。PTX群の再灌流VT/VFの発生率は100%(VFは28%)であるのに対し、PTX/PC群では22%(VFは0%)と有意に低値であった。ASA群では再灌流VT/VFが100%(VFは56%)にみられたのに対し、ASA/PC群での発生率は22%(VFは0%)と有意に低値であった。またHoe群、Hoe/PC群での再灌流VT/VFの発生率は各々100%(VFは30%)、10%(VFは0%)であり、PCによる再灌流不整脈抑制はHoe140投与下にも認められた。以上の成績より今回我々の用いたラットの実験モデルに於てはpreconditioningは再灌流不整脈を著明に抑制するが、その機序は従来報告されてきた虚血心筋壊死に対するPreconditioning効果とは大きく異なり、adenosine Al receptorの活性化やG1蛋白の機能を介さず、また内因性prostaglandinやbradykinin receptorの役割も否定的と考えられpreconditioningが虚血による心筋代謝の変化を軽減し再灌流不整脈を抑制した可能性が考えられた。
化学修飾導入siRNAによる１遺伝子特異的ケムバイオケム型RNA干渉法の開発

RNA interference (RNA干渉)とは、小さな2本鎖RNA (small interfering RNA, siRNA)が、相同な塩基配列をもつmRNAと対合して切断することで、遺伝子発現を抑制するという現象であり、簡便な遺伝子ノックダウン法として広く利用されている。しかしながら、その臨床応用などへの実用化という観点からは、特異性や安定性などにおいて、まだ解決すべき重要な問題を抱えている。本研究では、siRNAの核酸対合の化学的性質(ケム)がサイレンシングの程度を規定するという我々の生物学的な研究成果(バイオ)に基づき、RNAに適切な化学修飾(ケム)を導入することでRNA干渉における問題点を克服し、目的とする1遺伝子特異的ノックダウン法を開発することを目指した。我々は、先行研究において、siRNAの限られた領域とmRNAとの塩基対合力(熱力学的安定性)を調節することで、標的とする1遺伝子に対して特異的にRNA干渉作用を示すsiRNAを選択できる手法を確立している。しかしながら、塩基配列にもで対合力を調節することには限界があり、塩基配列よりも大きな効果が期待できる化学修飾によって塩基対合力を変動させることを検討した。化学修飾としては、DNA, 2′-O-methyl(2′-OMe), phosphorothioate(PS),DNA-PS, locked nucleic acid(LNA), Unlocked nucleic acid (UNA)を用いた。2種類のレポーターアッセイとマイクロアレイ解析を行い、これらの化学修飾はすべてguide strandのオフターゲット効果を減弱する作用があることが明らかになった。しかし、passenger strandのオフターゲット効果は、LNAおよびDNA修飾では、未修飾siRNAと同程度であったが、2'-OMeおよびPS修飾では増強されていると考えられ、LNAおよびDNAは非常に有効な化学修飾であると考えられた。この後は実用化にむけて、生体内での特異性などについて検討する必要がある。27年度が最終年度であるため、記入しない。RNA interference (RNA干渉)とは、小さな2本鎖RNA (small interfering RNA, siRNA)が、相補的な塩基配列をもつmRNAと対合して切断することで、遺伝子発現を抑制するという現象であり、簡便な遺伝子ノックダウン法として利用されている。しかしながら、その臨床応用などへの実用化という観点からは、特異性や安定性などに置いてまだ解決すべき重要な問題を抱えている。本研究では、siRNAの核酸対合の科学的性質(ケム)がサイレンシングの程度を規定するという我々の生物学的な研究成果(バイオ)に基づき、RNAに適切な化学修飾(ケム)を導入することでRNA干渉における問題点を克服し、目的をする1遺伝子特異的ノックダウン法を開発することを目指している。すなわち、本研究では、siRNAへ化学修飾を入れることで、塩基配列を制限することなく、塩基対合の安定性を効率よくコントロールできる手法を構築する。その結果、今回用いたsiRNAに対する化学修飾は、すべて標的遺伝子特異性を向上させるという結果が得られた。それらの中でも、DNA、LNA修飾が導入されたsiRNAは未修飾siRNAと比べて、RNA干渉作用を損なわないまま、効率的にオフターゲット効果を回避する化学修飾の有力な候補であることが明らかになった。今回は、いくつかの化学修飾を導入したsiRNAを用いたレポーターアッセイとマイクロアレイ解析を行った。まず、レポーターアッセイの結果より、guide strandの標的遺伝子に対するRNA干渉効果は、用いた化学修飾のうち、DNA-PSとUNAを除いて、未修飾siRNAと遜色ないと考えられる結果が得られた。Passenger strandの標的遺伝子に対するRNA干渉効果は、用いたすべての化学修飾で未修飾siRNAより強い作用は認められなかった。

また、オフターゲット効果については、今回用いた化学修飾である2'-OMe、PS、DNA、DNA-PS、LNA、UNAはすべてオフターゲット効果を減弱するという予想以上の効果があることがわかった。また、マイクロアレイ解析の結果、siRNAの標的遺伝子に対するRNA干渉効果は、DNA-PSとUNAを除き、2'-OMe、PS、DNA、およびLNA修飾をguide strandに導入しても、未修飾siRNAと同程度の十分なRNA干渉効果が認められた。一方、guide strandのオフターゲット効果は、2'-OMe、PS、DNA、LNAのすべてでオフターゲット効果を減弱する作用があると考えられた。また、passenger strandのオフターゲット効果は、LNAおよびDNA修飾では、未修飾siRNAと同程度であったが、2'-OMeおよびPS修飾では増強されていることが明らかになった。以上の結果から、今回用いた化学修飾の中では、DNA、LNA修飾が導入されたsiRNAは未修飾siRNAと比べて、RNA干渉作用を損なわないまま、効率的にオフターゲット効果を回避する化学修飾の有力な候補であるという有用な結果が得られた。27年度が最終年度であるため、記入しない。今回のマイクロアレイの結果から、2'-OMe修飾ではguide strandのオフターゲット効果は弱くなっているのに対し、passenger strandのオフターゲット効果が強くなっていることがわかった。2'-OMeは熱力学的安定性が増加する化学修飾である。我々の先行研究では、guide strandのシード領域の熱力学的安定性が低く、塩基対合力が弱いsiRNAはオフターゲット効果が減弱することを示している。このことは、siRNAは5'側から一本鎖化したRNA strandがRISCに取り込まれやすいことと、シード部分とオフターゲット遺伝子との塩基対合力が弱いと、オフターゲット効果は弱いことを示している。Guide strandのシード領域に2'-OMeの化学修飾を導入すると、guide strandの5'側の安定性が増加すると考えられるが、これは相対的にpassenger strandの5'側の安定性が減少することを意味している。そのため、5'側と3'側の安定性のバランスが逆転し、1本鎖へunwindingする過程でRISCに残る一本鎖siRNAとしてguide strandが減少し、passenger strandが増加したため、guide strandのオフターゲット効果が弱くなり、passenger strandの効果が強くなった可能性が考えられた。LNAも2'-OMeと同様に熱力学的安定性を増加させる化学修飾であり、同様の効果が認められた。
入出力データに基づくシステム表現とロバスト制御方式

本研究では,入出力データに基づくシステム表現と制御方式に関して,データが不確かな場合が取り扱えるロバスト制御方式へと,理論的枠組を拡張することを最終的な目的としている.この目的に沿って,本年度は,以下のような成果を得た.まず,不確かさを扱う場合に鍵となる強正実性を取り上げ,外乱から制御出力へのシステムの特性が強正実となる制御系設計のための行列不等式条件について検討した.このとき,行列不等式条件は数値計算が困難な等式制約を含むが,これを回避する取り扱い方を論文発表した.これら知見は,不確かな(不等式で記述される)入出力データの(等式による)拘束をシステム表現とみなす,入出力データに基づくロバスト制御へ応用できると思われる.次に,不確かなデータに基づいて構成されるモデル集合の大きさについて理論的な検討を加えるために,セットメンバシップ同定に注目し,データの個数と集合の大きさの関係についても考察した.そして,外乱や不確かさが適当な確率的条件を満たすとき,集合の大きさを信頼度付きで与えられることを明らかにし,学会発表を行った.これら確率的な考察は,不確かな入出力データに基づくロバスト制御を,適切に定式化する方法に適用できると思われる.さらに,不確かなデータを自然に取り扱いうるランダマイズドアルゴリズムについて考察した.問題が可解であるときに解を求めるアルゴリズムは既に提案されているが,問題が可解でないときにそれを知ることのできるアルゴリズムは知られていない.そこで,双対問題が可解であれば元問題が可解でないことを知ることができることに着目して,確率的な双対性を導入し,元問題に双対な問題を明らかにし,学会発表を行った.本研究では,入出力データに基づくシステム表現と制御方式に関して,研究代表者らによるこれまでの研究成果をふまえて,データが不確かな場合が取り扱えるロバスト制御方式へと,理論的枠組を拡張することを最終的な目的としている.この目的に沿って,本年度は,基礎的な理論研究を行い,以下のような成果を得た.まず,観測される入出力データが不確かな場合について,現在までに検討してきた結果をまとめ,学術雑誌にて論文発表を行った.そこでは,システムダイナミクスが変動する場合について考察し,収集したデータを適当な論理判断に基づき更新すれば,入出力データに基づく適応制御が可能であることを明らかにした.さらに,データに基づく制御仕様としては,H_2ノルムやH_∞ノルムが考えられることから,対象システムの入出力データのみに基づいて,これらのノルムの値を計算する方法について考察した.そして,これらの計算が,データに基づいて構成される線形行列不等式を解く事に帰着できることがわかった.これらの結果については,学会発表を準備中である.また,不確かさを自然に考慮しうるアルゴリズムとしては,ランダマイズドアルゴリズムが有望である.そこで,それをデータに基づくシステム表現に用いるための基礎的検討として,データに依存するシステム表現であるLPVシステムを取り上げ,ランダマイズドアルゴリズムの有用性について検討した.そして,ランダマイズドアルゴリズムを用いれば,任意の非線形なパラメータの依存関係を自在に取り扱うことができることを明らかにし,国内,国外にて学会発表を行った.本研究では,入出力データに基づくシステム表現と制御方式に関して,データが不確かな場合が取り扱えるロバスト制御方式へと,理論的枠組を拡張することを最終的な目的としている.この目的に沿って,本年度は,以下のような成果を得た.まず,不確かさを扱う場合に鍵となる強正実性を取り上げ,外乱から制御出力へのシステムの特性が強正実となる制御系設計のための行列不等式条件について検討した.このとき,行列不等式条件は数値計算が困難な等式制約を含むが,これを回避する取り扱い方を論文発表した.これら知見は,不確かな(不等式で記述される)入出力データの(等式による)拘束をシステム表現とみなす,入出力データに基づくロバスト制御へ応用できると思われる.次に,不確かなデータに基づいて構成されるモデル集合の大きさについて理論的な検討を加えるために,セットメンバシップ同定に注目し,データの個数と集合の大きさの関係についても考察した.そして,外乱や不確かさが適当な確率的条件を満たすとき,集合の大きさを信頼度付きで与えられることを明らかにし,学会発表を行った.これら確率的な考察は,不確かな入出力データに基づくロバスト制御を,適切に定式化する方法に適用できると思われる.さらに,不確かなデータを自然に取り扱いうるランダマイズドアルゴリズムについて考察した.問題が可解であるときに解を求めるアルゴリズムは既に提案されているが,問題が可解でないときにそれを知ることのできるアルゴリズムは知られていない.そこで,双対問題が可解であれば元問題が可解でないことを知ることができることに着目して,確率的な双対性を導入し,元問題に双対な問題を明らかにし,学会発表を行った.
イネ数種野生種間の第4染色体長腕末端領域の精細な比較遺伝学的解析

イネ野生種Oryza longistaminataに特異的な地下茎に関する遺伝子分析を行った.国際イネ研究所から導入したC105204系統と栽培イネとの交雑で地下茎が分離することが判明し、地下茎は1個の優性遺伝子によって支配され、その遺伝子は第4染色体に座乗し、lgと連鎖していることが明らかとなった.第4染色体長腕末端領域に座乗するイネ科共通の特徴である葉舌を支配する遺伝子、Lg遺伝子についてイネのトウモロコシLg1相同遺伝子の構造を推定するとともに,イネのLg遺伝子座の突然変異を有する変異体のゲノミック配列を明らかにした.推定されるアミノ酸は414残基で、イネのLgの遺伝子構造は3個のエクソンからなっていると推定された.Lg座の突然変異体について,Lg遺伝子3635塩基について解析を行った.その結果,葉舌を有するT-65はGuang Lu Ai-4の配列とほとんど同じであった.一方,葉舌を持たないT-65 lgの配列もT-65と100%同じであった.葉舌はできるものの非常に短くなる85ACC152 lg-aは第1エクソンと第1イントロンの間のスプライスサイトでTがCと変異していた.また,YH lgは第1イントロンと第2エクソンのスプライスサイトのGがAに変異し,第2イントロンのTCの反復配列が1組増加していた.85ACC152 lg-aとYH lgはいずれもスプライスサイトの塩基配列に変異があることが明らかになったものの,T-65 lgでは解析した配列中には変異が認められず,この配列の上流側に変異がある可能性が考えられた.イネ紫葉系統から第4染色体に座乗するPl^w遺伝子の単離を試みた.トウモロコシB-Peru遺伝子をプローブにしてPl^w型イネの葉身由来cDNAライブラリーをスクリーニングし、2つのcDNA(OSB1,OSB2)を単離した。これら両cDNAはRFLP解析によりPl遺伝子座と連鎖しており、Pl遺伝子座は2つ以上の相同遺伝子から構成されたコンプレックスであると考えられた.イネ野生種Oryza longistaminataに特異的な地下茎に関する遺伝子分析を行った.国際イネ研究所から導入したC105204系統と栽培イネとの交雑で地下茎が分離することが判明し、地下茎は1個の優性遺伝子によって支配され、その遺伝子は第4染色体に座乗し、lgと連鎖していることが明らかとなった.第4染色体長腕末端領域に座乗するイネ科共通の特徴である葉舌を支配する遺伝子、Lg遺伝子についてイネのトウモロコシLg1相同遺伝子の構造を推定するとともに,イネのLg遺伝子座の突然変異を有する変異体のゲノミック配列を明らかにした.推定されるアミノ酸は414残基で、イネのLgの遺伝子構造は3個のエクソンからなっていると推定された.Lg座の突然変異体について,Lg遺伝子3635塩基について解析を行った.その結果,葉舌を有するT-65はGuang Lu Ai-4の配列とほとんど同じであった.一方,葉舌を持たないT-65 lgの配列もT-65と100%同じであった.葉舌はできるものの非常に短くなる85ACC152 lg-aは第1エクソンと第1イントロンの間のスプライスサイトでTがCと変異していた.また,YH lgは第1イントロンと第2エクソンのスプライスサイトのGがAに変異し,第2イントロンのTCの反復配列が1組増加していた.85ACC152 lg-aとYH lgはいずれもスプライスサイトの塩基配列に変異があることが明らかになったものの,T-65 lgでは解析した配列中には変異が認められず,この配列の上流側に変異がある可能性が考えられた.イネ紫葉系統から第4染色体に座乗するPl^w遺伝子の単離を試みた.トウモロコシB-Peru遺伝子をプローブにしてPl^w型イネの葉身由来cDNAライブラリーをスクリーニングし、2つのcDNA(OSB1,OSB2)を単離した。これら両cDNAはRFLP解析によりPl遺伝子座と連鎖しており、Pl遺伝子座は2つ以上の相同遺伝子から構成されたコンプレックスであると考えられた.イネ野生種間における染色体4のlg座近傍の比較遺伝学的解析を行うため,1g座近傍の遺伝子を探索した.その結果,野生種Oryza longistaminataの有する地下茎を支配する遺伝子がlg座近傍にあることが明らかになった.すなわち,野生種Oryza longistaminataの地下茎は急な傾斜地での陸稲生産地帯にあって,45年の株確立において必要な形質であると指摘されている(IRRI,1989).しかしながら,O.longistaminataとO.sativa間には強い生殖的隔離機構があり,それに係わる遺伝子との連鎖により地下茎のO.sativaへの導入が困難とされている(Ghesquiere,1991).しかしながら,IRRIから導入したC105204(エチオピア)とT-65lgとの間で交雑が成功し,Flはわずかに地下茎が観察された(B型).F2では,地下茎を有するものと通常の株を形成するものに分離でき,その分離比は3:1に適合した.なお,地下茎を示す個体群の中には,顕著な地下茎を示すもの(A型)とわずかに観察されるもの(B型)があった.

したがって,O.lomgostaminataの地下茎は基本的には1個の優性遺伝子で制御されているものと推定し,Rhz(t)(Rhizomes)の遺伝子記号を付した.次に,Rhz(t)他の遺伝子との連鎖関係を調べたところ,C105204/T-65lg:1F2で染色体4のlgと37.9%の組換え価が得られた.本年度は、lg遺伝子と連鎖するPl遺伝子座の各対立遺伝子による組織特異性を明らかにするために、まずPl遺伝子の構造を明らかにすることを試みた.これまでの研究からPlのアリルであるPlwを用いて、典型的なmyc型転写因子をコードするcDNA(OSB1,OSB2)を得ている。今年度はゲノムライブラリーのスクリーニングによりOSB2のゲノミック構造を決定した。その結果、OSB2には約7kbと13kbの非常に長いイントロンが含まれた特異な構造をしていることが明らかとなった.さらに,インド型イネI-102からlg+-Pli領域を台中65号に導入したBC7F1で不稔が生じることが判明した.しかも,全F1個体が半不稔を示しているため,細胞質雄性不稔の可能性が考えられた.これらの自殖後代BC7F2において,lgの分離を調べたところ,いずれも過少分離となった.これらのことから.I-102由来のlg+-Pli領域にはI-102由来の雄性不稔細胞質に対して,部分的に稔性を回復させる遺伝子があって,この遺伝子がlgと連鎖していることが推定された.一方,lg遺伝子解析も試みた.まず,イネとトウモロコシのシンテニーからイネのlg遺伝子はトウモロコシのlg1遺伝子とオーソログであると推定された.そこで,既に単離されているトウモロコシのlg1の3'末の塩基配列を基にプライマーを設計し,台中65号のゲノミックDNAを鋳型に増幅させた.その結果,設計したプライマーで増幅した断片は722bpで,イントロン2個を含んでいた.本年度は、lg遺伝子と連鎖するPl遺伝子座の各対立遺伝子による組織特異性を明らかにするために、まずPl遺伝子の構造を明らかにすることを試みた。これまでの研究からPlのアリルであるPlwを用いて、典型的なmyc型転写因子をコードするcDNA(OSB1,OSB2)を得ている。今年度はこの2種のcDNAがPlwの原因遺伝子であるか否かを確かめるために、イネの完熟種子の糊粉層を用いたトランジェントアッセイ系を確立した。この系を用いて確かめたところ、OSB1,OSB2ともに糊粉層でアントシアニン発現させることが明らかとなり、Pl遺伝子座は2つの因子からなる複合遺伝子座であることが判明した。一方,lg遺伝子については5'側の配列も明らかとなり、しかも第4染色体のBACライブラリーが明らかにされたことにより、ゲノミック構造も明らかとなった。その結果、lg遺伝子は約3.4kbpあり、exonが4個、intronが3個あり、特に、intron1は約2kbpの長さがある特徴的な構造をとっていることが明らかとなった。さらに、イネの染色体4の長腕末端領域の座乗するをマーカーとして数種の系統からPl-lg領域をT-65に導入して,Pl-lg領域の精細なマップを構築すると共に,抽出される遺伝子の特徴付けを行った。T-65lg×Y-1 F1を雌性親に用いた戻し交雑集団において,lg-Ph-Plwの順に座乗していることが明らかとなった.
植物におけるβ-1,3-グルコオリゴサッカライドエリシターの受容機構

本研究ではジャガイモで見出されたβ-1,3-グルコオリゴサッカライドによるフェノール性アミド化合物の誘導メカニズムの解明を試みた。1)ジャガイモにフェノール性アミド化合物誘導活性を示す市販のラミナリンは藻類由来のβ-1,3-グルコオリゴ糖であるが、その構造にはまだ不明な点がある。エリシター活性を示すオリゴ糖成分を明らかにするために、市販のサンプルを各種クロマトグラフィーを用いて分画し、その構造を各種スペクトル分析及び化学的な手法を用いた分析で検討した。2)市販されている様々な重合度を持ったβ-1,3-グルコ糖のフェノール性アミド化合物誘導活性を検討した。その結果、酵母の細胞壁に由来するザイモサンにエリシター活性が見られた。動物の免疫機構を活性化するザイモサンが植物の誘導抵抗反応も誘導することは極めて興味深い。また、直鎖β-1,3-グルコ糖の7量体に弱いエリシター活性が見られたことから、β-1,3-グルカン構造が活性発現に重要であると考えられた。3)ラミナリンが持つβ-1,6-分岐が活性におよぼす影響を検討するために、β-1,6-分岐を持たない直鎖β-1,3-グルコ糖(重合度約20)の調製を試みた。カードランは分子量が数万を越える直鎖のβ-1,3-グルコ多糖であるが、これを熱水中で加水分解することで、適当な重合度を持つ直鎖β-1,3-グルコオリゴ糖を得ることができた。この加水分解物のエリシター活性の詳細を検討した。5)フェノール性アミド化合物生合成経路中の4種の酵素の活性を測定した。その結果PAL,4CL,THT,TyrDCいずれもエリシター処理で一時的に活性化することが明らかとなった。ジャガイモに対してエリシター活性を示すβ-1,3-グルコサッカライドの重合度と活性の関係を検討するため,市販ラミナリン(藻類由来オリゴサッカライドの混合物)をバイオゲルP-10(分画範囲1500-2000)カラムクロマトグラフィーにより分画し重合度分布の異なる4つのオリゴサッカライド画分を得た。それぞれの画分のエリシター活性をフェノール性アミド化合物(パラ-クマロイルオクトパミン,p-coumaroyloctopamine)の誘導量を指標として検定したところ,いずれにも同程度の活性がみられた。このことからラミナリンのもつエリシター活性は単一のオリゴ糖に依存するのではなく,構成するオリゴ糖は全般的に活性発現に必要な条件を有していることがわかった。しかし,市販の重合度13のβ-1,3-グルコサッカライドを同様に検定したところ活性は非常に弱く,活性発現にはやはりある程度以上の重合度が必要と考えられた。一方,NMR分析よりラミナリンにはβ-1,6分岐糖鎖構造が存在することが判明したため,分岐のないβ-1,3-グルコサッカライドを土壌細菌由来の直鎖グルカンであるカードランの部分加水分解により調製した。分解物はバイオゲルにより精製し,平均重合度約30のオリゴ糖を得た。NMR分析により,このオリゴ糖がほとんど分岐構造をもたないことを確認した後,ジャガイモに対するエリシター活性を調べたところラミナリンと同程度の活性がみられ,活性の発現には糖鎖のβ-1,6分岐は必須でないことがわかった。

昨年度にひきつづき,ラミナリン(藻類由来のオリゴサッカライド)とカードラン(土壌細菌由来の直鎖β-1,3-グルカン)を用いて,β-1,3-グルコオリゴサッカライドの重合度およびβ-1,6-分岐の頻度とエリシター活性との関係を調べた。ラミナリンおよびカードラン加水分解物を完全メチル化し、これをエレクトロンスプレーイオン化法を用いた質量分析に供したところ、ラミナリンの重合度は15-30、カードラン加水分解物は重合度10-20であった。またメチル化後の加水分解により構成糖の組成を調べた結果、ラミナリンにはβ-1,6-分岐が10.5%の割合で存在するのに対し、カードラン加水分解物では1.6%と少ないことが示された。ついで、これらの活性をジャガイモに対するクマロイルオクトパミン誘導能を指標として検討したところ、高濃度処理(10mg/ml)では有意差は見られなかったが、低濃度処理では(1.0mg/mL)ラミナリンがカードラン加水分解物に比べて3倍程度強い活性を示したことから、β-1,6-分岐が活性の発現に有利であることが示唆された。さらに種々のβ-1,3-グルコ糖を用いて,その重合度とエリシター活性との関連の検討を試みた。エリシター活性を、クマロイルオクトパミンの誘導能を指標として検討したところ,重合度7の直鎖β-1,3-グルコオリゴサッカライドであるラミナリヘプタオースにラミナリンの約1/20の弱い活性がみられたことから、やはりβ-1,3-結合が活性に重要であることが示された。一方、100を越える重合度をもつカードラン、パラミロン、リケナンには全く活性が見られず、高重合度は活性の発現に不利であることがわかった。また、エンドウやイネなどでエリシター活性を示すキトサンペンタマーも無活性であり、これらの植物とジャガイモでは異なるエリシター認識機構があると考えられた。一方、酵母細胞の不溶性画分であり,動物免疫機能活性化作用をもつザイモサンにラミナリンの約1/3のエリシター活性があることを見出した。哺乳動物の免疫機能を活性化するザイモサンが、植物の病害抵抗反応を引き起こすことは大変興味深い。
静電液体アクチュエーション技術を用いたDNAファイバー展開チップの開発

本研究の目的は細胞中染色体のDNAを基板上にファイバー状に展開し,遺伝子地図の作成やDNAの配列解析,または分子手術による遺伝子操作といった生化学プロセスを数センチ角のチップ上で行う"DNAファイバー展開チップ"を開発することである。このようなマイクロチップを実現するためには,1)ファイバー展開させるべき細胞の位置をミクロンオーダーで正確に制御する。2)基板上に配置された細胞に,ファイバー展開を行うための試薬を定量的に導入する。といった,"細胞と試薬の精密な操作技術"が必要不可欠となる。そこで本研究では上記の操作技術を達成するための方法として,単一細胞を微小液滴に含ませ,その液滴を精密に操作することにより細胞の位置を制御し,またこのような単一細胞が含まれた液滴と,別の場所で作成された試薬液滴とを融合させることにより,個々の細胞に定量的に試薬を導入する"液滴駆動型細胞・液体操作システム"を提案し,上記システムに必要な液滴駆動技術の開発を行った。液滴駆動の方法として,疎水的な基板上に液滴を配置し,それを基板上に作成された電極により静電的に駆動する新しいシステムを提案し,実験的に実証した。すなわち,非対称な魚の骨状の形状を持っ電極に,液滴表面の自由振動数の1/2の周波数の交流電圧を印加することにより,液滴を周期的に扁平化させ,この扁平化が電極に沿う方向に大きな変位をもたらすことを利用して,液滴を目的の位置へ駆動するというものである。また,単なる平行ストリップ電極によって液滴を駆動するメカニズムとして,液滴の移動後に基板上に残る水分子の吸着層が電界をシールドすることにより,液滴を自己推進(self-propelling)的に駆動する現象を発見し,その液滴駆動システムへの応用を検討した。
マクロ経済動向のインディケータとしての金融指標の役割に関する理論・実証分析

投資家の資産選択行動が金融資産価格の影響を与える側面を明確にし、これと企業の投資行動を結合させて動学的な景気循環理論を構築させた上で、経済の不安定性が生じることは不可避であることを明らかにした。またニュー・ケインジアンの分野で議論されている情報の非対称性に着目し、エージェンシー・コストを用い、経済の変動プロセスをフィナンシャル・アクセラレータ仮説に基づき考察した。ここでも企業の資本構成、金融仲介機関の貸出供給態度が、企業の投資決定に重要な要因となり、マクロ経済活動を加速的に変動させる可能性があることを確認した。Minskyの金融不安定性仮説とフィナンシャル・アクセラレータ仮説は、各々、別々の分野で議論が展開されている。上記2つの理論分析は決して対立するものではなく、金融的要因として、企業の資本構造・将来期待・投資家の資産選択行動・金融仲介機関の資金供給行動に焦点を当て、異なった側面からアプローチしているものであり、両者の議論は補完的な関係にあると位置づけることができる。また、わが国における経済動向と、貸し手リスクおよびエージェンシー・コストが反映された貸出供給量の関係についての検証を通じて、両理論の現実妥当性が明らかになった。本年度の研究では、マクロ経済動向のインディケータとして金融指標の役割と重要性について研究し、とりわけマクロ経済活動に先行する金融指標(マネーサプライ、広義信用量、リスクプレミアム)に着目し、どのような金融指標が前者と安定的な関係にあるのかについてマクロ経済モデルを構築し理論分析を行い、さらに実証分析を通じて検証し以下の結論を得た。1、金融自由化が進展し証券化がすすむほど、マネーサプライの将来経済の動向に対するインディケータとしての役割は低減していき、一方広義信用量が金融先行指標としての役割を増していくこととになる。これは、マネービューに対してクレディットビューを支持するものである。証券化が進めば、金融機関の融資なくして、企業と家計の間の資金移動で、企業の資金調達が可能になる。従ってマネーサプライが一定であっても、企業の投資が増加させることができる機会が生じるためである。2、マネーサプライおよび総信用量の経済成長に関する相関性を、どのような金融政策のフレーム枠の下で変化するのかをマクロ経済モデルを構築し分析すれば、中央銀行がハイパワードマネー一定政策・金利一定政策のどちらを採用しても、総信用量の方が相関関係が高いことが判明した。3、総信用量のマクロ経済活動との相関性は、家計がどのような資産選択行動をしているかに依存することが確認された。家計の資産選択行動において、相対的危険回避度が富の減少関数であるならば、総信用量の大きな変化を通じてマクロ経済活動も大きく変動することが明らかとなった。また危険回避度が可変的あることも実証分析を通じて確認された。このことは将来の金融政策運営のあり方についての重要な示唆を与えるものである。また期待が通常のリスクではなくケインズ的不確実性の特徴を有する場合、資本構造が企業の設備投資水準に影響を与え経済結果を不安定にする可能性があることを明確にした。
マーカー酵素の免疫学的比活性を用いた野生魚類への殺虫剤曝露の高感度・高精度検出法

新たなバイオモニタリング技術として、国内の河川・湖沼などの野外調査によく用いられるコイのアセチルコリンエステラーゼ(Acetylcholinesterase)をマーカー酵素として、その「免疫学的比活性」を用いて、有機リン系殺虫剤による曝露の有無を高感度・高精度で検出する技術の開発を行うことが本研究の目的である。平成20年度は、以下の研究実績をあげた。1.酵母細胞を用いたコイのアセチルコリンエステラーゼ分泌生産と発現産物の特徴解析酵母Pichia pastorisに分泌生産させたコイのアセチルコリンエステラーゼ"遺伝子組換え触媒サブユニット"を培養液から単離・精製し、特徴解析を行った。組換え酵素はN結合型糖鎖付加を受けていただけではなく、その一部がプロテアーゼによる切断を受けていることが示された。組換えコイアセチルコリンエステラーゼは,高い基質濃度範囲で基質阻害を受けることや至適pH、至適温度、基質特異性と阻害剤(殺虫剤を含む)に対する感受性などは,天然本酵素とほぼ同じであったが、各基質に対するキネティックパラメーターは大きく異なっていることが明らかとなった。2.大腸菌を用いたコイのアセチルコリンエステラーゼ生産と抗体作成大腸菌を用いて,コイのアセチルコリンエステラーゼ"遺伝子組換え触媒サブユニット"を生産した。組換え酵素は多量に発現したが封入体を形成した。そこで、封入体から組換え酵素を単離・精製し、それを抗原として、ウサギに免疫して抗体を作製した。得られた抗体は大腸菌で生産させた組換えコイアセチルコリンエステラーゼだけではなく,天然コイ本酵素と,酵母で生産させた組換えコイ本酵素も認識し,アセチルコリンエステラーゼの免疫学的検出に使用可能であることが示された。新たなバイオモニタリング技術として、国内の河川・湖沼などの野外調査によく用いられるコイのAcetylcholinesteraseをマーカー酵素として、その「免疫学的比活性」を用いて、有機リン系殺虫剤による曝露の有無を高感度・高精度で検出する技術の開発を行うことが本研究の目的である。平成19年度は、以下の研究実績をあげた。1.コイAcetylcholinesterase遺伝子のクローニングすでに報告されている他生物種由来のAcetylcholinesteraseアミノ酸配列を比較し、保存性の高いアミノ酸配列部分をもとにプライマーを設計し、コイの筋組織から調製したcDNAを鋳型にして、設計したプライマーを用いてPCRを行い、Acetylcholinesterase遺伝子の内部断片を単離下。更に、Rapid amplification of cDNA ends法により、本酵素遺伝子の5'および3'末端領域を増幅・単離し、本酵素の全長遺伝子を単離した。2.コイAcetylcholinesterase遺伝子の酵母細胞での大量分泌発現新たなバイオモニタリング技術として、国内の河川・湖沼などの野外調査によく用いられるコイのアセチルコリンエステラーゼ(Acetylcholinesterase)をマーカー酵素として、その「免疫学的比活性」を用いて、有機リン系殺虫剤による曝露の有無を高感度・高精度で検出する技術の開発を行うことが本研究の目的である。
非均質並列プロセッサ用コンパイラの最適化方式に関する研究

計算機のコストパフォーマンスを向上させるために、非均質並列プロセッサが重要になりつつある。このようなプロセッサの能力を有効に引き出すためには、命令スケジューリングやレジスタ割り当てといった並列化コンパイラの最適化技術が大切である。しかし、スケジューリングによる命令の並列性はレジスタ割り当てによるレジスタの再利用性とのトレードオフとなり、大きな課題となっている。本研究は、レジスタ割り当てを考慮した命令スケジューリングの手法を確立することを目的とするものである。本研究では、命令スケジューリングの本格的な研究の準備として、まず、非均質並列プロセッサにおける資源競合による命令間の依存制約を分析し、おのおのの命令の実行可能な範囲を求めた。そして、スケジューリングの時間を制限したりその結果を評価したりするために用いられる命令列の実行時間の下界計算式を導いた。この研究成果は、第7回並列分散計算システムに関するIASTED/ISMMの国際会議の論文集に掲載された。次に、並列プログラムの特徴を詳細に検討し、クリティカルパス上にある命令の実行遅延の伝搬性に着目した新しいプログラムの実行時間の分析手法を提案した。この研究の論文は情報処理学会の論文誌(96年4月号)に印刷中である。本研究では、時間の関係もあり、レジスタ割り当てと命令スケジューリングとの融合に関する詳細な検討まで行なうに到らなかった。レジスタ割り当てと命令スケジューリングは並列プロセッサ用コンパイラにおいて極めて重要な技術であり、精力的な研究が必要である。本研究では、これまでの研究結果を踏まえて、レジスタ割り当てを考慮したスケジューリング方式の開発に取り込んでいきたい。
「情報が日常生活や社会に与える影響を考えさせる」授業設計モデルの開発

1研究の目的授業実践,教員研修に係る研究成果等を踏まえて,「情報が日常生活や社会に与える影響を考えさせる」授業設計モデルを開発する。授業設計モデルをWebサイト等で公開することにより,教員がこの分野の授業を設計する際の手順,授業構成の仕方,教材化や指導内容作成のノウハウを参照できるようになる。2研究方法(1)先行研究に倣い,「授業構成モデル」と「授業設計の手順モデル」を組み合わせて授業設計モデル示すこととした。(2)既存の実践やメディアが伝える情報の分析活動を取り入れた消費者教育の授業構成モデルを生かしたり,フィンランドのメディア教育授業者へのインタビュー調査から得られた知見を踏まえたりして,授業構成モデルを試作した。(3)インストラクショナルデザインの先行研究や,メディアが伝える情報の分析活動を取り入れた消費者教育の授業設計のための手順モデルを踏まえて,授業設計の手順モデルを試作した。(4)5名の実践経験者に,試作した授業設計モデルに関して自身の知見と整合性があるか,モデルとして活用しやすいものかをインタビュー調査した。(5)授業設計モデルを活用した「情報が日常生活や社会に与える影響を考えさせる学習活動」に関する教員研修を行い,参加者にモデルの評価を受けた。3研究成果3段階で授業展開を構成した授業構成モデルと5ステップで構成した授業設計の手順モデルを組み合わせた,「情報が日常生活や社会に与える影響を考えさせる」授業設計モデルが開発できた。開発した授業構成モデルは「情報が日常生活や社会に与える影響を考えさせる」授業を設計する際に有効な参照情報となることが示された。授業構成モデルはWebサイトへ公開し,この分野の授業を設計する際の手順,授業構成の仕方,教材化や指導内容作成のコツを参照できるようにしている。また今後,教材の開発や普及啓発のために行うワークショップ・教員研修に利用することも想定している。
ＤＩＳＣ－Ｍが制御する遺伝子ネットワークの同定と精神疾患発症機序解明への応用

均衡型染色体転座をもつ特異な統合失調症症例のゲノムDNAを用いて次世代シークエンサにより切断点を塩基レベルで決定した。患者由来細胞では、切断染色体からの切断点近傍遺伝子DISC-Mの発現が亢進していた。統合失調症関連行動異常を示すDisc-m KOマウスの脳では、様々な遺伝子の発現に異常を認めた。DISC-M遺伝子産物が転写調節複合体を形成することを証明した。双極性障害で発見されたミスセンス変異をもつDISC-Mは細胞内に蓄積した。DISC-Mは、下流遺伝子の発現制御を介して脳の正常な発達を支え、その異常は統合失調症、双極性障害の発症リスク形成に関わる可能性が考えられた。均衡型染色体転座を持つ統合失調症症例を起点として転写因子をコードすると考えられるDISC-M遺伝子を同定し、その機能解析を継続中である。前年度までにDisc-M KOマウスが一部統合失調症様行動変化を起こすことを明らかにしてる。主な異常は恐怖条件付け不能および過活動性である。本年度は、統合失調症モデルマウスとしての正当性をさらに評価するため、そのような行動異常が抗精神病薬で改善するかどうかを詳細に検討したところ非定型抗精神病薬クロザピンの急性投与により、認知学習課題(恐怖条件付けテスト)、陽性症状関連行動異常(オープンフィールドにおける過活動性)が顕著に改善した。従ってこのマウスは統合失調症モデルマウスとして、予測妥当性(predictive validity)を満たすと考えられた。Disc-Mが引き起こす転写物制御異常によりどのような脳内ネットワークのみだれ、さらにはそれが行動異常に反映するのかを理解するため、脳内各所に記録電極を埋め込み自由行動下で脳波観察を行った。その結果、統合失調症との関連が指摘されて久しい前頭前野から記録される脳波に明瞭な異常を認めた。さらに前頭前野から側座核への連絡が不良である可能性が示唆された。c-fosタンパク質の発現を指標とした場合、恐怖条件付けにより扁桃体では野生型とKOマウスとの間に顕著な神経活動性の違いを見いだすことはできなかった。また発端者ゲノムDNAの次世代シークエンサによる解析を行い、転座点(4番側、13番側)を塩基レベルで決定することに成功し、切断点の最も近傍にある遺伝子がDISM-Mであることが、この解析からも明らかになった。DISC-M (Disrupted In Schizphrenia, Matsuzawa)つまり、LDB2遺伝子は家族歴の無い統合失調症患者に見いだされた染色体転座点付近に存在する、転写調節因子をコードすると考えられる遺伝子であるが、その(特に脳での)機能はほとんど明らかになっていない。Ldb2ノックアウトマウスには、過活動、NMDAブロッカー、ドーパミン作動薬に対する過感受性など統合失調症の陽性症状との関連を示唆する行動異常が現れることを見いだしていたが、さらに甘みを呈する物質に対する嗜好性が顕著に低下しており、これは陰性症状としてしばしば現れる無快楽症(anhedonia)に類するものと考えられた。さらに恐怖条件付け異常等、認知学習障害を伺わせる所見をも見いだしてきた。我々はその行動異常の発症メカニズムを生化学的、生理学的、分子生物学的に明らかにしようと試みているが、我々が新規に作製した特異抗体による分析により、少なくともGABAニューロンに選択ていに発現してる可能性を見いだした。統合失調症の病態メカニズムにGABA系が関与していることは、すでに多くの知見が集まっている。これらの結果をふまえ、より詳細で、具体的なメカニズム解析の為にLdb2抗体によるクロマチン免疫沈降のための予備的検討を終えた。Ldb2はamygdalaに発現していることからamygdalaの機能異常がLdb2ノックアウトマウスに生じていることを想定したが、形態的な特徴、条件付け後のc-fosの反応性といった指標では、明瞭な異常は見いだせなかった。最終年度には、下記1),2)を中心に解析を進めた。1) HEK293T細胞での高発現系を用いた免疫沈降実験の結果、DISC-Mは、LHXファミリー、SSBPファミリー、LMOファミリーといったタンパク質群と機能的複合体を形成することが明らかになった。これらの遺伝子の脳内発現パターンはDISC-Mと重なる部分が大きいことから、脳内においても機能的転写調節複合体を形成しうることが判明した。一部の双極性障害で見出したDISC-Mのミスセンス変異の影響を検討したところ、そのうちの一つはDISC-Mタンパク質の安定性に影響を与えた。一方で、これらのミスセンス変異は、上記タンパク質との結合には明瞭な効果を及ぼさなかった。2)発端患者のゲノム構造をFISH実験と次世代シークエンサ解析により詳細に検討し、4番染色体側の切断点はDISC-M遺伝子のexon 1上流約30kbpに存在することが判明していた。