hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
高サイクル熱疲労き裂進展挙動の観察と高温下き裂進展則に関する総合的検討

き裂に対してはレ-ザ干渉法によるき裂開閉口計測も行ったが表面においては全開口となっていることが確認された.本年度は昨年度製作したサ-マルストライピング試験装置をさらに改良し,種々の条件におけるき裂進展試験を行うとともに,その進展挙動を観察した.特に大年度はオ-ステナイト系ステンレス鋼の中でも耐環境特性の良好なSUS304Lを試験対象材料とし,高サイクル熱疲労領域の試験を行うために比較的小さい応力振幅条件下すなわち小温度変動条件下におけるサ-マルストライピング条件下のき裂進展を観察することとした.試験条件としては昨年度行ったと同様,試験片両端自由と両端拘束(圧縮荷重重畳条件下)の2種類とした.本年度の試験条件では試験部表面のごく表層において発生する熱応力のみが降伏応力を越え,試験の大部分の領域において弾性き裂となるような条件を実現することができた.この温度条件のもとで試験を行った結果,拘束・両端自由の両条件下ともある程度き裂が進展した後,繰返し数が数万回程度でき裂は停留した.停留き裂の長さは拘束条件下におけるものの方が短く,特に深き方向のき裂進展量は極度に少なかった.表面方向のき裂進展観察結果と,破面観察によるアスペクト比から深さ方向のき裂進展の様子を調べ,両方向のき裂進展速度を応力拡大係数幅で整理した結果,これらのデ-タは500°C下SUS304鋼における微小き裂の進展曲線と良い一致をみた.また進展停止後,レ-ザスペックル相関法によりき裂開閉口挙動を観察した結果,停留き裂の開口レベルは極めて高いことが明らかとなった.またこのき裂開口レベルからき裂停留時の下限界応力拡大係数を計算した結果,進展停止の条件についても単一温度単一応力比条件下で得られた値と良く対応していることが明らかとなった.高サイクル熱疲労試験装置を完備させ、SUS304鋼平板試験片につきサーマルストライピング条件下のき裂進展試験を行った。この結果を一定高温下における疲労き裂進展データを用いて、そのき裂進展則について検討した。具体的な成果は以下の通りである。(1)熱疲労下のサンプル内部の正確な温度評価、熱応力分布評価を行うために、サーモビジョンを用いて薄板試験片裏面の温度データを採取し、この条件下における温度分布を明らかにするとともに、数値解析のために必要な試験片表面における冷却時の熱伝達率などの各種定数を実験的に評価した。(2)有限要素解析より冷却領域近傍の温度が試験部全体の温度状態を代表していることを明らかにするとともに、この温度を一定に保つような温度制御することにより、安定したサーマルストライピング条件を実現した。また熱サイクルにより発生する熱応力のみでなく、外部から機械的に軸荷重や曲げを加える治具を作成し、数種の最高温度、平均温度条件下でサーマルストライピング試験を実施した。(3)試験片の計測面が正反射しない粗面である場合に、応用できるレーザスペックルき裂開口計測システムを開発し、本研究のような苛酷な条件下にあるき裂の開閉口挙動を明らかにすることができた。サーマルストライピング条件下で進展するき裂の開閉口レベルは進展とともに上昇し、これに伴い有効応力拡大係数幅はき裂進展とともに減少した。き裂進展速度の減速傾向はこの有効応力拡大係数幅の変化傾向と良く対応することを明らかにした。(4)油圧サーボ疲労試験機をベースとした疲労き裂進展シミュレーション試験システムを開発した。このシステムを用いて、熱疲労下のサンプルの温度分布ならびにこれより評価される応力拡大係数の計算結果に基づき、熱疲労下のき裂進展シミュレーション実験を行った。
代数多様体の数論の研究

今年度は主に,局所体上の代数多様体のε-因子及び周期積分の行列式について研究した.代数体上定義された代数多様体に対し,そのHasse-Weil L関数は,基本的な研究対象である.これは一般に関数等式を満たすと予想され,その関数等式の符号が定義される.まず多様体の次元が偶数の時にこれについて研究した.この場合にはp進Hodge理論を用いて符号は常に+であることを示した.次元が奇数のときは主に曲線について研究した.これはMordell-Weil群についてのBirch-Swinnerton予想とも関連する重要な問題である.一般に符号は各素点での局所符号の積と予想される.この局所符号は,代数幾何的に微分形式を用いて定義される判別式で表されるという予想の正確な定式化及びその部分的な証明を行った.予想の定式化は微妙な問題であったが,Koszul複体の理論と相対標準層とGrothendieck双対性の理論を使って解決した.その予想を,1.還元が馴な場合.2.正標数の場合.3.あるFermat曲線の商の場合.に示すことができた.周期積分の行列式は,都立大の寺杣氏との共同研究である.これは結果自体はすでにわかっていたが,それをまとめる段階でtame symbolやDeligneのRiemann-Rochとの関係が明らかになってきた.特に後者を使ってLoeser-Sabbah,寺杣氏らの結果の精密化ができそうであるので,これは今後の課題である.局所体上の高次元の多様体の安定還元定理についても研究した.これは局所体上の多様体は,定義体の適当な有限次拡大の後に,安定還元をもつかと言う問題である.これはmoduliのcompact化などとも関係する重要な問題である.この問題の一般化である有限次拡大の後に馴な還元をもつかという問題を研究した.これについては還元についてのある条件の下で肯定的な結果を得た.今年度は主に,局所体上の代数多様体のε-因子及び周期積分の行列式について研究した.代数体上定義された代数多様体に対し,そのHasse-Weil L関数は,基本的な研究対象である.これは一般に関数等式を満たすと予想され,その関数等式の符号が定義される.まず多様体の次元が偶数の時にこれについて研究した.この場合にはp進Hodge理論を用いて符号は常に+であることを示した.次元が奇数のときは主に曲線について研究した.これはMordell-Weil群についてのBirch-Swinnerton予想とも関連する重要な問題である.一般に符号は各素点での局所符号の積と予想される.この局所符号は,代数幾何的に微分形式を用いて定義される判別式で表されるという予想の正確な定式化及びその部分的な証明を行った.予想の定式化は微妙な問題であったが,Koszul複体の理論と相対標準層とGrothendieck双対性の理論を使って解決した.その予想を,1.還元が馴な場合.2.正標数の場合.3.あるFermat曲線の商の場合.に示すことができた.周期積分の行列式は,都立大の寺杣氏との共同研究である.これは結果自体はすでにわかっていたが,それをまとめる段階でtame symbolやDeligneのRiemann-Rochとの関係が明らかになってきた.特に後者を使ってLoeser-Sabbah,寺杣氏らの結果の精密化ができそうであるので,これは今後の課題である.局所体上の高次元の多様体の安定還元定理についても研究した.これは局所体上の多様体は,定義体の適当な有限次拡大の後に,安定還元をもつかと言う問題である.これはmoduliのcompact化などとも関係する重要な問題である.この問題の一般化である有限次拡大の後に馴な還元をもつかという問題を研究した.これについては還元についてのある条件の下で肯定的な結果を得た.
マニピュレータ機能を有する磁気プローブ顕微鏡の開発

本研究において,我々は走査型プローブ顕微鏡の研究として装置本体、電子回路全般及びソフトウェアを開発し,それを用いた新たな薄膜表面の測定法や超精密加工法を確立してきた。これらの基礎技術を利用することにより、磁気力をコントロール可能なプローブを有する磁気プローブ顕微鏡を開発し、表面のナノスケール観察、加工に加え、微小物体の磁気トラップによる操作・組立を可能にするナノスケールマニピュレータ機能を有する新奇なプローブ顕微鏡システムを設計し,装置を試作した。この装置製作に関してはプローブ先端の動きがモニタできるようにプローブ顕微鏡ユニットを倒立顕微鏡と組み合わせたシステムを設計・試作した。また磁気制御を行うための電子回路の設計及び探針制御の光学系を設計・試作した試作した装置を改良・調整し,安定した観察と加工,操作を可能にするシステムへと発展的改良を施し,プローブ先端の磁気力が制御できるようにプローブ材質は純鉄などの軟磁性体材料からなる金属細線を電界研磨などの微細加工により実現した。磁気分布の観察や磁気力を用いたマニピュレーションには磁力を変調及び制御する必要がある。このためプローブにはマイクロソレノイドを巻きつけ、印加電流量を制御することで、磁力を制御できるように開発した。プローブとしてAFMカンチレバ探針にNiなど軟磁性体材料などをスパッタコートしたプローブ等も試作し,実験を試みた。これらの観察や操作が安定して行えるようにプローブと試料表面間の距離制御にはプローブ先端に働く原子間力等の力学的相互作用により高さを位置決め制御するタッピング距離制御手法を採用し,実現させた。また実験パフォーマンスとしてナノスケール磁気微粒子の補足・再配列などの操作法開発や磁気微粒子操作を行った。本年度はこれまでにノウハウのある走査型トンネル顕微鏡(STM)や原子間力顕微鏡(AFM)などの装置本体、電子回路全般及びソフトウェアを基礎として,装置開発を行った。具体的には磁気力をコントロール可能なプローブを有する磁気プローブ顕微鏡を開発し、表面のナノスケール観察、加工に加え、微小物体の磁気トラップによる操作・組立を可能にするナノスケールマニピュレータ機能を有する新奇なプローブ顕微鏡システムを設計・開発した。特にプローブ先端の動きがモニタできるようにプローブ顕微鏡ユニット内に対物レンズを組み込み、倒立顕微鏡配置としてシステムを設計・製作した。また磁気制御を行うための電子回路の設計及び探針制御の光学系を設計・製作した。新奇な磁気マニピュレータ・プローブ顕微鏡システムの試作ユニット本体はこれまでに製作してきたプローブ顕微鏡装置をベースにマニピュレーション機能として磁気プローブを装着可能なユニット本体を新たに試作・開発した。マニピュレーション時にプローブ顕微鏡先端の高精度位置決めが可能になるように倒立顕微鏡配置としている。プローブ先端の磁気力が制御できるようにプローブ材質は純鉄などの軟磁性体材料からなる金属細線を電界研磨により先端径100nmを実現した。この磁気プローブを用いた顕微鏡によるプローブと試料表面間の距離制御にはプローブ先端に働く原子間力等の力学的相互作用により高さを位置決め制御するがそのダンピングから制御する方法やプローブをカンチレバ型に作製することでタッピングにより距離制御を行う手法を採用した。プローブの振幅減衰の検出にはレーザダイオードを用いた光学的検出法やチューンフォーク水晶振動子を用いた圧電的検手法を用いた。

これらの基礎技術を利用することにより、磁気力をコントロール可能なプローブを有する磁気プローブ顕微鏡を開発し、表面のナノスケール観察、加工に加え、微小物体の磁気トラップによる操作・組立を可能にするナノスケールマニピュレータ機能を有する新奇なプローブ顕微鏡システムを設計し,装置を試作した。この装置製作に関してはプローブ先端の動きがモニタできるようにプローブ顕微鏡ユニットを倒立顕微鏡と組み合わせたシステムを設計・試作した。また磁気制御を行うための電子回路の設計及び探針制御の光学系を設計・試作した試作した装置を改良・調整し,安定した観察と加工,操作を可能にするシステムへと発展的改良を施し,プローブ先端の磁気力が制御できるようにプローブ材質は純鉄などの軟磁性体材料からなる金属細線を電界研磨などの微細加工により実現した。磁気分布の観察や磁気力を用いたマニピュレーションには磁力を変調及び制御する必要がある。このためプローブにはマイクロソレノイドを巻きつけ、印加電流量を制御することで、磁力を制御できるように開発した。プローブとしてAFMカンチレバ探針にNiなど軟磁性体材料などをスパッタコートしたプローブ等も試作し,実験を試みた。これらの観察や操作が安定して行えるようにプローブと試料表面間の距離制御にはプローブ先端に働く原子間力等の力学的相互作用により高さを位置決め制御するタッピング距離制御手法を採用し,実現させた。また実験パフォーマンスとしてナノスケール磁気微粒子の補足・再配列などの操作法開発や磁気微粒子操作を行った。
軟質裏装材を使用した全部床義歯の咀嚼運動に関する研究

下顎顎堤の吸収が進んだ上下顎無歯顎者に通法に従って全部床義歯を製作した。義歯調整終了約1ヶ月後義歯を回収し、上下顎義歯の臼歯部咬合面を咬合接触が検知可能な金属咬合面に置換した。約1.5Vの直流電流を上下金属咬合面に通電し、咬合時の電圧に達したものを咬合接触と見なした。また、シロナソグラフを用いて下顎全部床義歯切歯部の運動を測定した。被験食品としカマボコ、ニンジン、ピ-ナッツを用いた。計測項目は、顎運動に関して咀嚼回数、咀嚼周期、咬合接触に関して、咬合接触時間、咬合接触回数、咀嚼回数に対する咬合接触回数の比(以下、咬合接触率)、各測定部位における咬合接触開始の時間差(以下、time lag)とした。続いて、下顎全部床義歯を軟質裏装材(クレペ-トドウ)にて裏装し(以下、S-type)、同様の計測を行った。通法により製作した義歯(以下、Control)におけるデータと比較検討したところ、1.S Typeでの咀嚼回数は、Controlに比べカマボコでわずかに増加、ニンジン、ピ-ナッツで減少する傾向を示した。2.S Typeの咀嚼前期における非咀嚼側大臼歯部の咬合接触時間は、Controlに比べ全被験食品において有意に短い傾向を示した。3.S Typeの非咀嚼側における大臼歯部と小臼歯部とのtime lagは、Controlに比べ全期間短い傾向を示し、非咀嚼側における義歯の動揺が、S Typeの方が小さいことが示唆された。さらに、咀嚼側小臼歯部で接触のみられたカマボコ右咀嚼の前期および中期において、非咀嚼側大臼歯部と咀嚼側小臼歯部のtime lagが、S Typeの方が小さく、S Typeの方が動揺が少ないことが示唆された。以上のことから、下顎顎堤の吸収が進んだ上下顎無歯顎者の全部床義歯に軟質裏素材を使用すると、義歯の動揺が少なくなり軟質裏装材の利用が義歯装着者の咀嚼機能に有効であることが示唆された。当教室の咀嚼時における全部床義歯の動態を調べるシステムでは、臨床評価に必要な大量のデーター処理を行うことが困難である。そこで大量のデーター処理を可能にするため、解析装置(パーソナルコンピュータ)およびデーター比較のため短時間で大量印刷可能なプリンターを購入し,システムのヴァージョンアップを行った。続いて、正常有歯顎者において予備実験を行い、試験食品咀嚼時の顎運動および咀嚼筋筋電図を計測した。繰り返し予備実験を行った結果、大量のデーター処理を可能にすることのできるシステムに関してはほとんど確立することができた。さらに、無歯顎者患者に実験義歯を製作、装着し予備実験を行った結果、正常有歯顎者に比べ顎運動および咀嚼筋筋電図に関して不安定であることが確認できた。しかし、予備実験において計測に多くの時間を要し、被験者が高齢無歯顎者であることを考えあわせると、計測を短時間で終了させることが必要なため、現在、全部床義歯の動態を反映しているパラメータの選択を検討し、臨床実験に移るまでに計測システムに熟練するようにしている。さらに、得られた大量のデーターの中から軟質裏装材を使用した全部床義歯の咀嚼運動を明確、簡便に解析するソフトを開発中である。現在、平成8年度以降の臨床実験の前準備として、顎口腔系に以上の認められない上下顎無歯顎者を選択し、床用軟質裏装材を使用した実験義歯を製作、咀嚼機能の安定を考慮し、全部床義歯を調整中である。調整終了後少なくとも2ケ月以上経過した後、実験義歯を回収し、臼歯部を交換可能な金属咬合面に置換することにより義歯を改良し、臨床実験を行う予定である。

2.S Typeの咀嚼前期における非咀嚼側大臼歯部の咬合接触時間は、Controlに比べ全被験食品において有意に短い傾向を示した。3.S Typeの非咀嚼側における大臼歯部と小臼歯部とのtime lagは、Controlに比べ全期間短い傾向を示し、非咀嚼側における義歯の動揺が、S Typeの方が小さいことが示唆された。さらに、咀嚼側小臼歯部で接触のみられたカマボコ右咀嚼の前期および中期において、非咀嚼側大臼歯部と咀嚼側小臼歯部のtime lagが、S Typeの方が小さく、S Typeの方が動揺が少ないことが示唆された。以上のことから、下顎顎堤の吸収が進んだ上下顎無歯顎者の全部床義歯に軟質裏素材を使用すると、義歯の動揺が少なくなり軟質裏装材の利用が義歯装着者の咀嚼機能に有効であることが示唆された。下顎顎堤の吸収が進んだ上下顎無歯顎者に通法に従って全部床義歯を製作した。義歯調整終了約1ヶ月後義歯を回収し、上下顎義歯の臼歯部咬合面を咬合接触が検知可能な金属咬合面に置換した。約1.5Vの直流電流を上下金属咬合面に通電し、咬合時の電圧に達したものを咬合接触と見なした。また、シロナソグラフを用いて下顎全部床義歯切歯部の運動を測定した。被験食品としてカマボコ、ニンジン、ピ-ナッツを用いた。計測項目は、顎運動に関して咀嚼回数、咀嚼周期、咬合接触に関して、咬合接触時間、咬合接触回数、咀嚼回数に対する咬合接触回数の比(以下、咬合接触率)、各測定部位における咬合接触開始の時間差(以下、time lag)とした。続いて、下顎全部床義歯を軟質裏装材(クレペ-トドウ)にて裏装し(以下、S Type)、同様の計測を行った。通法により製作した義歯(以下、Control)におけるデータと比較検討したところ、1.S Typeでの咀嚼回数は、Controlに比べカマボコでわずかに増加、ニンジン、ピ-ナッツで減少する傾向を示した。以上のことから、下顎顎堤の吸収が進んだ上下顎無歯顎者の全部床義歯に軟質裏装材を使用すると、義歯の動揺が少なくなり軟質裏装材の利用が義歯装着者の咀嚼機能に有効であることが示唆された。
子どもの社会性発達に焦点をあてた学童期への影響要因解明と支援的応用に関する研究

本研究では、子どもの社会性発達に焦点をあてて学童期への影響要因の解明と専門職との協働による支援プログラムの開発および効果検証を目的とし、本年度は社会性発達モデルとプログラムの効果測定について、経年データの統計解析を行うとともに、プログラム実施手順を洗練させるための方法について、専門職との討議を行い、子どもの感性に働きかけるプログラムの重要性、多世代交流によるアプローチにより、子どもの祉会性のみならず、子どもをとりまく育児環境の質の向上や養育者サポート、保育ケアに地域の人的資源や社会的資源が活用され、子どもを支援する豊かな社会環境整備につながる可能性が示唆された。さらに、国内外学会参加により介入プログラムと評価に関する発表と情報収集を行い、専門職との協働による支援プログラム実施は、子どもの社会性向上と家庭における子どもとのかかわり機会の促進など育児環境の質向上を促す可能性を報告した。取得したデータは、国内外の研究者との討議の結果を踏まえ、「祉会性発達」、「気になる行動」、「育児環境」、など科学的に検証されている指標を用いて定量化するとともに、それ以外の変化、効果についても質的データとして同様に整理し、介入プログラムの効果について量的、質的トライアンギュレーション研究により多角的な検証を行った。具体的には、「社会性発達」、「気になる行動」、「育児環境」などへの効果に関する量的研究に加え、介入プログラムの効果に関する専門職を対象とした質的研究により、子どもの社会性発達への効果が示唆された。本研究により、経年的なコホート分析の結果、就学前および学童期の社会性発達には乳幼児期の育児環境、特に養育者による社会情緒的なかかわりや養育者へのサポートが重要な要因の一つであることが明らかになり、成果の一部は学術論文や書籍、学会において公表した。量的質的研究の知見より、専門職と協働し、子どもの感性に働きかけ、地域を巻き込む介入は、子ども自身と養育者、専門職、地域社会の人や文化、自然との絆を深め、バラエティに富んだ刺激や社会経験の機会につながることで、子どもの社会性発達の支援に活用できる可能性が示唆された。(抄録なし)本研究では、子どもの社会性発達に焦点をあてて学童期への影響要因の解明と専門職との協働による支援プログラムの開発および効果検証を目的とし、本年度はまず、国内外の関連文献の収集、検討を行い、国内外の関連文献を収集し、複数の専門職と協議を行った。並行して経年的な統計解析を実施し、コホートデータを用いた複合分析と、専門職と協働による支援プログラムの開発および効果検証に向けた検討を実施した。先行研究レビューより、乳幼児期の家庭養育環境の重要性と、保護者以外の社会とのかかわり、とくに保護者に対する社会的サポートの重要性が示唆された。保護者と子どもを支援する多世代交流プログラムの必要性については、主に、保育園や学童保育にかかわる専門職より、子どもの社会性発達および養育者支援の効果を期待する意見が得られた。コホートデータを用いた乳児期の養育環境がその後の社会性発達に及ぼす影響の検討では、「養育者が子どもとのふれあいを楽しいと感じている場合、子どもの性別や母親の育児ストレスの影響を調整してもなお、子どもの社会能力得点が高い」、「家庭における1歳時のかかわりの質は、5歳時の自己表現発達に関連する」傾向がみられ、子どもの社会性発達に影響する育児環境要因のひとつとして重要であることが示唆された。レビューと解析結果を踏まえ、専門職及び地域住民との協働に基づき、保護者と子どもを支援する多世代交流プログラムの開発に取り組み、保育園における親子を対象とした木育プログラムの実施およびグループインタビュー調査を実施した。プログラムの実施効果として、五感を通じた心地よい刺激や、子どもと保護者の良好な関係性が報告された。さらに、プログラムを通じて地域在住高齢者と園の交流が活発化し、子どもがものづくりの技術や文化を体感するなど、バラエティに富んだ刺激や社会経験により、子どもの社会性発達につながる可能性が示唆された。

本研究により、経年的なコホート分析の結果、就学前および学童期の社会性発達には乳幼児期の育児環境、特に養育者による社会情緒的なかかわりや養育者へのサポートが重要な要因の一つであることが明らかになり、成果の一部は学術論文や書籍、学会において公表した。量的質的研究の知見より、専門職と協働し、子どもの感性に働きかけ、地域を巻き込む介入は、子ども自身と養育者、専門職、地域社会の人や文化、自然との絆を深め、バラエティに富んだ刺激や社会経験の機会につながることで、子どもの社会性発達の支援に活用できる可能性が示唆された。研究目的の達成に向けて、文献検討およびコホートデータを用いた複合分析を行い、社会性発達に影響する要因について社会性発達モデル構築につながる示唆を得ることができた。さらに、構築中の仮説および専門職との討議に基づき、多世代交流による子どもと養育者の支援のプログラム開発に取り組み、実施に携わった専門職より、バラエティに富んだ刺激や社会経験が子どもの社会性発達につながる可能性などプログラムの効果が示唆されているため。本研究の今後の推進方策について、就学前の養育環境が学童期に及ぼす影響について引き続きコホートデータを用いた検討を行うとともに、介入プログラムの実施方法について、専門職との検討と改訂を行い、プログラム実施による効果検証を行う予定である。効果検証は複数の手法を併用することにより多角的な検討が可能であり、研究遂行においては、プログラムに携わる専門職や地域住民など当事者の主体性を尊重し、養育者や子ども、支援者自身の力を引き出すことにより、プログラムの効果と継続的な実施可能性を高めることが可能になると考えられる。(抄録なし)
Bacillus pumilusのキシラナーゼの構造解析

Bacillus pumilusのキシラナーゼの3次元構造を明らかにするため、結晶のX線解析を2.2〓分解能で行った。キシラナーゼ分子の大きさは30×40×35〓で、主にβシートから成り、中央に基質が結合し得る大きな溝があり、ここに活性部位が存在すると推定された。キシラナーゼとリゾチームは共に糖のβ-1,4結合を加水分解することより、類似の作用機作が推定される。重原子置換、化学修飾の結果からも活性中心として酸性アミノ酸2残基が候補に挙げられた。一方、活性中心のような重要な残基は起源の異なるキシラナーゼ間でも保存されていると考えられ、バチルス属、担子菌、カビのキシラナーゼのアミノ酸配列の比較から、Asp^<21>、Glu^<93>、Asp^<121>、Glu^<182>の4残基に限定された。Asp^<121>は分子の溝には面しておらず、さらに基質のサイズに適した残基間の距離を考慮するとGlu^<93>とGlu^<182>が活性中心の可能性が最も高い。この2残基の部位特異的変異を行う前に以下の遺伝子操作を行った。構造遺伝子は分泌のシグナルをコードしているので、これを除去し、5′側に開始コドンのみを付けた遺伝子を合成オリゴヌクレオチドを用いて作成した。また遺伝子を3断片のカセット式になるように制限酵素部位を改変した。これを大腸菌高発現ベクター、pKP1500に連結することにより、大腸菌の全可溶性タンパク質の約30%がキシラナーゼとなった。前述の考察に基づきGlu^<93>とGlu^<182>をAsp又はSerに変換した。変異酵素を大腸菌抽出液より精製し比活性を比較すると、Glu^<93>→Asp以外は活性が天然酵素の10^<-4>10^<-5>の検出限界以下に低下した。Asp^<93>に改変したものは僅かに活性が認められたが、Kmは天然酵素とほゞ変らず、Vmが著しく低下していた。以上の結果からGlu^<93>とGlu^<182>が活性中心の可能性が高いと結論された。Bacillus pumilusのキシラナーゼの結晶(0.4×0.3×0.2mm, space group P21,単位セルの格子定数a=40.8Å, b=66.8Å, c=34.7Å,ベータ=103Å)の2.9Å解像力でのX線解析の結果,このタンパク分子は大きいドメインと小さいドメインから成り,その間にキシラン分子が入り得る約15Åのクレフトが存在した.

両ドメインとも殆どベーターstrandで構成されている特殊な構造を有し,これはCDスペクトルからも支持された.またカルボジイミドとウラニウムによる化学修飾の結果,酸性アミノ酸が1ないし2残基修飾されると活性が消失したことから, Asp及び/又はGluが活性中心である可能性が強い.種々のキシラナーゼ,セラーゼ遺伝子の塩基配列から導かれるアミノ酸配列を,構造と機能の関係が明らかにされているリゾチームのアミノ酸配列と比較すると,リゾチームの活性中心であるGluとAps付近と類似の配列が本キシラナーゼのAsp^<98>とGlu^<124>に見出された.そこでAps^<98>→Glyへの変換を部位特異的変異により行った.しかし精製変異酵素は野性型酵素の約1/8の比活性を有しており, Asp^<98>が活性中心である可能性は低いと結論された.即ち,アミノ酸配列の類似生の比較から正確な分子機能を予測するのは困難であると思われた.結晶のX線解析の解像度を更に上げ,現在1.7Åでの解析を進行中である.アミノ酸の側鎖の配位も明らかになりつつあるが,予備的結果では先述のAsp^<98>とGlu^<124>はクレフトの端に存在し,むしろAsp^<21>とGlu^<176>(又はGlu^<182>)が触媒中心の可能性が強い.この両アミノ酸の部位特異的変異を行い,その効果を検討する予定である.Bacillus pumilusのキシラナーゼの3次元構造を明らかにするため、結晶のX線解析を2.2〓分解能で行った。キシラナーゼ分子の大きさは30×40×35〓で、主にβシートから成り、中央に基質が統合し得る大きな溝があり、ここに活性部位が存在すると推定された。キシラナーゼとリゾチームは共に糖のβー1.4結合を加水分解することより、類似の作用機作が推定される。重原子置換、化学修飾の結果からも活性中心として酸性アミノ酸2残基が候補に挙げられた。一方、活性中心のような重要な残基は起源の異るキシラナーゼ間でも保存されていると考えられ、バチルス属、担子菌、カビのキシラナーゼのアミノ酸配列の比較から、Asp^<21>、Glu^<93>、Asp^<121>、Glu^<182>の4残基に限定された。Asp^<121>は分子の溝には面しておらず、さらに基質のサイズに適した残基間の距離を考慮するとGlu^<93>とGlu^<182>が活性中心の可能性が最も高い。この2残基の部位特異的変異を行う前に以下の遺伝子操作を行った。構造遺伝子は分泌のシグナルをコードしているので、これを除去し、5′側に開始コドンのみを付けた遺伝子を合成オリゴヌクレオチドを用いて作成した。また遺伝子を3断片のカセット式になるように制限酵素部位を改変した。これを大腸菌高発現ベクター、pKP1500に連結することにより、大腸菌の全可溶性タンパク質の約30%がキシラナーゼとなった。前述の考察に基づきGlu^<93>とGlu^<182>をAsp又はSerに変換した。変異酵素を大腸菌抽出液より精製し比活性を比較すると、Glu^<93>→Asp以外は活性が天然酵素の10^<-4>10^<-5>の検出限界以下に低下した。Asp^<93>に改変したものは僅かに活性が認められたが、Kmは天然酵素とほぼ変らず、Vmが著るしく低下していた。以上の結果からGlu^<93>とGlu^<182>が活性中心の可能性が高いと結論された。
特別活動の時間を利用した小学校向け情報能力カリキュラムと教材パッケージの開発

小学校の高学年を対象として、教科教育カリキュラムに縛られない特別活動の時間もしくは課外活動の時間を利用した、情報能力育成のためのカリキュラムを作成した。作成に当たっては、すべての児童が教育の機会を得られるよう、カリキュラム内容を工夫するとともに、そのカリキュラムに沿った教材パッケージおよび教員用の指導マニュアルを作成して、経験の少ない教師でも取り組めるように工夫した。さらに、研修用のビデオ教材についても試作作品を作成した。カリキュラム内容として本研究で提供するものは、Logo、およびパソコン通信に関するものである。Logoによるカリキュラムは、基本的に、Logoそのものについて基礎的な学習を行う基礎編と、Logoを利用して、問題解決を行う応用編から成る。応用編では、コンピュータの基本的な機能や有効性が体験的に理解できるように、データベースや、作画、作表、シミュレーション、ゲーム等の簡単なプログラムを作成させ、それ等の原理を簡単に理解させるとともに、作成したプログラムを実際の問題解決に利用させるよう、テキストを構成した。作成した教材は、実際に小学校で利用し、その効果を調査した。また、教員研修用に、指導マニュアルと研修用VTR教材を試作した。パソコン通信に関しては、パブリック・ドメインのソフトウェアとして公開されているBBSホスト・ソフトウェアを利用して、家庭内電話交換器を利用したBBSシステムを作成し、運用実験を行い、それを学校現場で利用するためのマニュアルを作成した。さらに、パソコン通信を利用して効果的に学習することを支援するために、パソコン通信学習の診断・支援システムについて研究を行った。
本土大衆文化の影響にみる近現代沖縄の盆踊りに関する基礎的研究

本研究は、沖縄県民が近現代において国民という枠組みのなかに置かれながら、「他者」の文化を持ち、「自文化」と「他文化」をどのように実践してきたのか、芸能研究の側面から解明することを目的としている。本研究では、それらを「エイサー」と「盆踊り」に置き換え、2つの芸能が沖縄県民に果たしてきた役割を明らかにしていく。平成30年度は、戦後に始まったエイサーコンクールの開始初期までを一つの区切りとして、新聞等の史資料の整理を行った。前年度の調査研究を踏まえ、戦前から戦後にかけて「盆踊り」の移入および定着に関しては連続性がないことが明らかとなっていて、本年度の調査では戦後復興の、とりわけエイサーコンクールが始まる前から寺院や琉米文化会館(那覇・うるま市・名護市)を中心にして「盆踊り」が沖縄のなかで行われていたことを明らかにした。それはこれまでアメリカ統治下において、本土の文化を排して沖縄文化を奨励してきた動きと相反するものでもあって、改めて琉米文化会館が持つ社会的な機能等と文化の関係性を検証する必要性があることを確認するものとなった。また、沖縄市で始まったエイサーコンクールは、初期の数年にわたって「盆踊り」を取り入れて行っていた。注目すべきは、戦後復興による本土からの土木・建築業関係者らの影響による本土式「盆踊り」と、ハワイ移民やその子弟となる帰沖二世らによるハワイの本土式「盆踊り」の2つの導入経路があったことである。この点については「沖縄における「盆踊り」の移入と定着、その後の影響について」(第69回東洋音楽学会全国大会:大正大学)で発表を行った。前年度までの進捗をとり戻すために、戦後の史資料を中心にデータベース化を進めることができた。しかし、予定していたシンポジウム等のエイサー関連研究者との連携が不十分であることと、戦後の社会的な背景に関する調査内容の論文執筆が遅れていることから、やや遅れていると判断し次年度を最終年度と改めることとした。本課題の最終年度として、エイサーコンクールから「盆踊り」が「排除」されるまでを一つの区切りとして、エイサー関連施設および公文書館等での資料調査を行い、「エイサー」と「盆踊り」の果たしてきた役割について比較検討し、学会発表のほか論文執筆を行う。また、本研究の学術的な位置付けや、それらの役割や影響関係について検討の余地を探るため、関連研究者との情報交換の場(シンポジウム)を予定している。具体的には、戦前から本土復帰までを対象とし、沖縄県内の「エイサー」と「盆踊り」に関する資史料を収集し、データベース化をはかる。そのデータをもとに、1)政治的、文化的なコンテクストのどのような変化のもとで「盆踊り」が導入され、2)政府・企業・地域共同体がどのように後押しを行い、3)県民が「自文化」と向き合いながらアイデンティティを(再)構築してきたのかを明らかにする。今年度は、戦前の沖縄における「盆踊り」の歴史的な変遷をつかみ、実践内容を個別的に解明するための基礎史料として地元紙を収集し、以下史料のデータベースの作成を進めた。史料は、記事及び広告欄にもとづいて抜出し、「盆踊り」の主催や目的などの年代ごとの変化、ならびに社会的な背景を解明するための基礎史料をめざした。1『琉球新報』(明治31年から大正7年、大正13年から昭和6年)2『沖縄毎日新聞』(明治42年から大正3年)盆踊りの実践の場を調査しつつ基礎史料の収集・データベース化に取り組んだが、史料群整理に予想以上の時間を要した。また、親族の看病と介護のために一時的に研究が中断し進捗に遅れがでた。平成29年度は、前年度に引き続き、戦前の資史料を収集し、関連記事のデータベース化をすすめた。新聞記事では戦前から「エイサー」と「盆踊り」を同義語として用いる傾向が強いことに加え、沖縄の実演家たちもまた、沖縄芝居のなかで「エイサー」を「盆踊り」と称して題材や演目に取り入れているものがあることがわかった。戦前の本土式盆踊りの動向については、実践の面でかなり不明な点が多いものの、1941年に八重山地方では、国民意識の醸成を目的とした側面を含みながら、農村地域における健全娯楽や作物増産を背景にして、本土式盆踊りが演じられていたことがわかった。その一方で、同じ盆踊り会場では、八重山出身の実演家らが八重山舞踊をモティーフにした新しい盆踊りを披露する様子もみられた。このように、芸能を実践する場は、社会的・政治的な目的の達成としての導入のみならず、「自文化」の創作を生み出すきっかけとなっている可能性が高いことがわかってきた。また、現代に通じる「盆踊り」の実践として、石垣市白保ではイタシキバラ(旧盆後の邪気払い)のなかに「盆踊り」があり、民俗芸能のなかにも本土式の「盆踊り」の影響が残されていることがわかった。

現代的な影響を総合的に考察するために、民俗芸能等への影響を含めながら進めていきたい。本年度では、昨年度の進捗の遅れを取り戻すために戦前の新聞記事や市町村史等の収集と分析に取り組み、概ね完了することができた。しかし、本年度予定していた戦後の新聞資料のデータベース化までは完了することができなかった。また、関連する資料調査が不十分で、とりわけ琉球政府関連資料の収集が遅れている。本研究は、沖縄県民が近現代において国民という枠組みのなかに置かれながら、「他者」の文化を持ち、「自文化」と「他文化」をどのように実践してきたのか、芸能研究の側面から解明することを目的としている。本研究では、それらを「エイサー」と「盆踊り」に置き換え、2つの芸能が沖縄県民に果たしてきた役割を明らかにしていく。平成30年度は、戦後に始まったエイサーコンクールの開始初期までを一つの区切りとして、新聞等の史資料の整理を行った。前年度の調査研究を踏まえ、戦前から戦後にかけて「盆踊り」の移入および定着に関しては連続性がないことが明らかとなっていて、本年度の調査では戦後復興の、とりわけエイサーコンクールが始まる前から寺院や琉米文化会館(那覇・うるま市・名護市)を中心にして「盆踊り」が沖縄のなかで行われていたことを明らかにした。それはこれまでアメリカ統治下において、本土の文化を排して沖縄文化を奨励してきた動きと相反するものでもあって、改めて琉米文化会館が持つ社会的な機能等と文化の関係性を検証する必要性があることを確認するものとなった。また、沖縄市で始まったエイサーコンクールは、初期の数年にわたって「盆踊り」を取り入れて行っていた。注目すべきは、戦後復興による本土からの土木・建築業関係者らの影響による本土式「盆踊り」と、ハワイ移民やその子弟となる帰沖二世らによるハワイの本土式「盆踊り」の2つの導入経路があったことである。この点については「沖縄における「盆踊り」の移入と定着、その後の影響について」(第69回東洋音楽学会全国大会:大正大学)で発表を行った。前年度までの進捗をとり戻すために、戦後の史資料を中心にデータベース化を進めることができた。しかし、予定していたシンポジウム等のエイサー関連研究者との連携が不十分であることと、戦後の社会的な背景に関する調査内容の論文執筆が遅れていることから、やや遅れていると判断し次年度を最終年度と改めることとした。当初予定していた戦前の史料の未完分のデータベース構築作業を行うとともに、引き続き夏季には盆踊りの実践の場の調査を進めていく。また、平成29年度に予定している戦後のデータ整理にもただちに着手する。さらに平成29年度は、これらの研究成果を発表するとともに、遅れを取り戻す予定である。1最終年度は遅れている戦後の新聞記事等資史料のデータベース構築作業および関連資料の収集を完了させる。2戦前に本土式盆踊りが演じられていた地域(八重山地方)で関係者を探し、その前後の展開について聞き取り調査を行う。3成果発表としてシンポジウムの開催を予定していたが、研究の進捗状況によってはデータベースの作成に注力することとし、論文または学会発表等のなかで公表を目指す。
短期大学における保育者育成モデルとサーモグラフィによる教育効果検討の可能性

保育者が問題と考えている自分自身の"対人的不安"傾向と保育者としての熟達とに関連性がみられた。また、短期大学在学中の「保育者としての自己評価」の変化過程を検討したところ、授業や実習によって自己評価が高まるだけでなく、一時的に低下が見られることもあり、その低下は不安傾向の高い者に、より見られる傾向があった。一方、授業の成績の芳しくない学生には、自分自身を過大評価する傾向がみられた。さらに、歌唱指導やストーリーテリング指導時の顔面眉間部の皮膚温を赤外線サーモグラフィで測定した結果、不安感や自律神経系の反応性と皮膚温の変化とに関連がみられた。1.保育者が「問題」と考えることに関する具体的記述の収集および分析保育経験者425名に対して、"日常の保育、子どもに関すること"、"自分の能力、適性などに関すること"、"園内の人間関係"、"保護者との問題に関すること"、"勤務条件に関すること"、"経営方針に関すること"の6項目に対して、どのような具体的な事柄について困ったり、悩んだり、考えたりしたかを自由記述で求めた。この記述を315項目にまとめ、保育経験者293名に6段階評価を求め、予備分析を経た150項目について因子分析をおこなった。この結果、"保育能力"、"園長との関係"、"先輩との関係"、"困った保護者との関係"、"多忙感"の5因子を得た。さらに、保育能力に関する73項目について、因子分析を行い"子ども理解と援助"、"劣等感"、"クラス運営"、"指導的対人能力"の4因子を得た。これらの結果をもとに、保育能力についての自己評価項目ならびにストレス反応の生起を伴う項目を選別し、尺度化を試みた。2.歌唱指導時における顔面皮膚温度変化についての予備的検討暑耐性値(Dienstbier,1987;三根,1994)が標準より低い者の歌唱指導時における顔面鼻部の皮膚温度変化を暑耐性値が標準的な者および比較的高い者の変化と比較した。声楽の科目担当者によって、発声練習、既知の校歌練習、新曲練習(着席、起立)の指導が約30分間行われた。暑耐性値が比較的高い者では、開始時に多少の皮膚温の上昇が認められたが、以後は変化がなく、標準的な者では漸増が認められた。一方、耐性値の低い者では、新曲の練習開始時より約10分間温度低下が見られ、以後、回復がみられるが、起立により、再度、温度低下が生じた。暑耐性値が標準より低い者については、一般的に自律系の調節能力の低さ、不安感の高さが認められるが、歌唱指導時においてもこれに準じた結果が得られたと考えられる。1保育者成長尺度作成に向けて(1)昨年度収集した保育者が「問題」と考えることに関する具体的記述を分析した結果について学会発表を行うとともに、これらの結果を参考にして項目を整理し、これをもとに作成したアンケートを、本学で行う現職保育者を対象とした研修会参加者に対して実施した。(2)「保育士のための自己評価チェックリスト」を使用して、入学1年目の学生に対して4月、10月、1月末の3回、継続して自己評価を求め、このデータについて分析中である。次年度、2年目の評価データをこれらに加えて、保育者としての成長過程を評価できる尺度構成のための基礎データとする予定である。2 "ストーリーテリング"発表体験の効果について「保育内容(言葉)」の授業に関連してなされる"ストーリーテリング"発表体験の効果について検討するため、サーモグラフィと質問紙を用いて、2年生103名を対象とした調査を行った。"ストーリーテリング"実施前後における学生の発表に対する自己評価を求めるとともに、実施中の顔面皮膚温度(眉間部)の変化をサーモグラフィで測定した。また、新版STAI状態不安尺度を発表直前に実施し、新版STAI特性不安尺度と寒暑耐性尺度を授業終了後に実施した。状態不安得点の高さによって、発表に対する自己評価、顔面皮膚温度に差異的な結果が得られた。状態不安A尺度得点と実施前「十分、発表の準備が出来ている」「うまく発表できる」「発表の準備をするのが楽しい」、実施後「発表がうまく出来た」「実力が発揮できた」「発表は楽しかった」の得点間には負の相関関係が、一方、実施後「発表は緊張した」の得点とは正の相関関係があった。しかしながら、P尺度得点とは、いずれの自己評価項目の得点とも有意な相関は得られなかった。

在学中の保育者としての成長過程を測定するための試みとして、2007年度入学者を対象として、「保育士のための自己評価チェックリスト」冊子(200項目)を用いて、1年次2007年4月、10月、2008年1月、2年次2008年4月、7月、2009年1月の計6回、6段階法による自己評価を求めた。本実習を終えた後の2年生7月における評価得点を用いて、保育の方法・内容に関連する分類ごとに尺度化を試みた。この結果、保育内容5領域(健康、人間関係、環境、言葉、表現、言葉)については各1尺度、養護、乳児保育、障害児保育については各2尺度、長時間保育、子どもの人権各1尺度の計13尺度が得られた。全尺度得点で有意な継時的増加が認められ、自己評価が在学中に上昇していることが確認された。しかし一方で、関連する授業を受講することや実際に施設、保育所、幼稚園での実習を体験することによって、自己評価が高まるだけではなく、これらの経験が今までの自分自身の理解を省みる契機となり、一時的に自己評価が低下する場合もある可能性が示唆された。また、教科の成績と自己評価(保育内容5尺度の平均)との関連を検討するため、各教科(在学生9割以上受講科目)の成績に対して因子分析を行い、「知識の習得」と「原理の理解」に関連する2因子を得た。両因子間には有意な正の相関が見られた。入学直後の1年生4月の時点では「知識の習得」得点の高い者の方が、低・中得点者より自己評価が低いが、その後、有意な差はなくなる。一方、「原理の理解」得点の低い者は、実習体験後に自己評価が上昇し、卒業前には、中・高得点者に比べて自己評価が有意に高くなった。すなわち、自己評価の高さが成績のよさと直接的に関連しているとは言い難いようである。以上の本調査結果は、学生自身の自己評価を保育者としての成長の直接的測度として用いることの難しさ、危険性を示唆するものと考える。
麻酔薬、アルコールのカナビノイド受容体に対する作用解析

カナビノイド(CB)受容体はマリファナの主成分であるカナビノイドをリガンドとする受容体として同定された。現在までにカナビノイド受容体は2種の受容体、CB1及びCB2受容体がクローニングされ、どちらの受容体もG蛋白質共役型受容体であり、G蛋白としては主にGiに共役することが判明しているが、それ以降の細胞内情報伝達系は詳細にはされていない。最近麻酔薬の麻酔作用のひとつに、中枢神経系に発現しているG蛋白共役型受容体を抑制することが関与しているという報告がなされ、同じG蛋白共役型受容体であるCB受容体に対しても麻酔薬による何らかの影響が予想される。今までの研究においてはCB1,CB2RNAとGi/GqのキメラG蛋白RNAをアフリカツメガエル卵母細胞発現系に注入し発現させ、CB受容体からのGi蛋白を介したシグナルがGi/Gq蛋白の共発現により、Ca^<2+>依存性Cl^-チャネルを介した電流を測定できるか確認した。今年度はこのアッセイ系を用いて吸入麻酔薬や静脈麻酔薬がCB受容体にどのように作用するかを検討した。その結果吸入麻酔薬ハロセンはCB受容体1機能を抑制することを確認した。現在さらにイソフルラン,エンフルランなどの他の吸入麻酔薬や静脈麻酔薬にも影響があるのかどうかを確認している。さらに、これらの作用が蛋白質リン酸化酵素を介したものかどうかを解析する予定である。もしリン酸化酵素の関与が認められれば、受容体がリン酸化を受けると考えられるセリン・スレオニンの特定部位をリン酸化をうけないアミノ酸に変換させ、mutation受容体を作成し麻酔薬がこのmutant受容体に果たして作用するかどうかを検討し、mutantカナビノイド受容体をもった遺伝子変異マウスが他のラボから作成されているので、麻酔薬の作用についてその行動薬理的を解析したいと考えている。カナビノイド受容体はマリファナの主成分であるカナビノイドをリガンドとする受容体として同定された。現在までにカナビノイド受容体は2種の受容体、CB1及びCB2受容体がクローニングされ、CB1は主に中枢神経系に、CB2は末梢に発現していることがわかっている。どちらの受容体もG蛋白質共役型受容体であり、G蛋白としては主にGiに共役することが判明しているが、それ以降の細胞内情報伝達系は詳細にはされていない。最近、麻酔薬の麻酔作用のひとつに、中枢神経系に発現しているムスカリン受容体などのG蛋白共役型受容体を抑制することが関与しているという報告がなされ、同じG蛋白共役型受容体であるカナビノイド受容体に対しても麻酔薬による何らかの影響が予想される。本年度の研究においてはカナビノイド受容体に及ぼす麻酔薬の作用機序を明らかとする。CB1,CB2受容体はGiを介して作用していると報告されているので、まず、cDNAより作成したRNAをGi/GqのキメラG蛋白RNAと同時にアフリカツメガエル卵母細胞発現系に注入し発現させ、カナビノイド受容体からのGi蛋白を介したシグナルがGi/Gq蛋白の共発現により、Ca^<2+>依存性Cl^-チャネルを介した電流を測定できるか確認した。その結果、カナビノイド受容体と同様な構造を持つ、SSTR受容体やM2受容体に関してはGi蛋白を介したシグナルがGi/Gq蛋白の共発現により、Ca^<2+>依存性Cl^-チャネルを介した電流を測定できるか確認し(現在投稿中)、現在カナビノイド受容体の発現に着手している。

さらに、麻酔薬のG蛋白共役型受容体への影響としてはステロイド系麻酔薬アルファキサロンがムスカリン受容体を抑制することを確認し現在カナビノイド受容体への影響を観察しているところである。来年度は、麻酔薬のカナビノイドの作用機序を明らかにしていく予定である。カナビノイド受容体はマリファナの主成分であるカナビノイドをリガンドとする受容体として同定された。現在までにカナビノイド受容体は2種の受容体、CB1及びCB2受容体がクローニングされ、CB1は主に中枢神経系に、CB2は末梢に発現していることがわかっている。どちらの受容体もG蛋白質共役型受容体であり、G蛋白としては主にGiに共役することが判明しているが、それ以降の細胞内情報伝達系は詳細にはされていない。最近麻酔薬の麻酔作用のひとつに、中枢神経系に発現しているムスカリン受容体などのG蛋白共役型受容体を抑制することが関与しているという報告がなされ、同じG蛋白共役型受容体であるカナビノイド受容体に対しても麻酔薬による何らかの影響が予想される。本年度の研究においては昨年度に引き続きカナビノイド受容体に及ぼす麻酔薬の作用機序を明らかとする。CB1,CB2受容体はGiを介して作用していると報告されているので、まず、cDNAより作成したRNAをGi/GqのキメラG蛋白RNAと同時にアフリカツメガエル卵母細胞発現系に注入し発現させ、カナビノイド受容体からのGi蛋白を介したシグナルがGi/Gq蛋白の共発現により、Ca^<2+>依存性Cl^-チャネルを介した電流を測定できるか確認した。その結果、カナビノイド受容体と同様な構造を持つ、SSTR受容体やM2受容体に関してはGi蛋白を介したシグナルがGi/Gq蛋白の共発現により、Ca^<2+>依存性Cl^-チャネルを介した電流を測定できるか確認し(現在一部Pharmacology誌にリバイス中)、現在カナビノイド受容体の発現に着手している。さらに、麻酔薬のG蛋白共役型受容体への影響としてはステロイド系麻酔薬アルファキサロンがムスカリン受容体を抑制することを確認し現在カナビノイド受容体への影響を観察しているところで、予備的な結果であるが抑制している結果を得ている。来年度は、麻酔薬のカナビノイドの作用とそのメカニズムを中心に明らかにしていく予定である。カナビノイド(CB)受容体はマリファナの主成分であるカナビノイドをリガンドとする受容体として同定された。現在までにカナビノイド受容体は2種の受容体、CB1及びCB2受容体がクローニングされ、どちらの受容体もG蛋白質共役型受容体であり、G蛋白としては主にGiに共役することが判明しているが、それ以降の細胞内情報伝達系は詳細にはされていない。最近麻酔薬の麻酔作用のひとつに、中枢神経系に発現しているG蛋白共役型受容体を抑制することが関与しているという報告がなされ、同じG蛋白共役型受容体であるCB受容体に対しても麻酔薬による何らかの影響が予想される。今までの研究においてはCB1,CB2RNAとGi/GqのキメラG蛋白RNAをアフリカツメガエル卵母細胞発現系に注入し発現させ、CB受容体からのGi蛋白を介したシグナルがGi/Gq蛋白の共発現により、Ca^<2+>依存性Cl^-チャネルを介した電流を測定できるか確認した。今年度はこのアッセイ系を用いて吸入麻酔薬や静脈麻酔薬がCB受容体にどのように作用するかを検討した。
骨癒合遷延をもたらすmicroRNA抑制による新たな骨折分子治療の確立

未だ有効な早期診断や治療法が確立されていない骨折後の骨癒合遷延に対し、標的となるmicro RNAを同定することで早期からの診断法を確立すると共に、学術的・社会的に高い意味を持つ新しい分子標的治療を実現させることである。
線虫における糖鎖シグナルによる細胞間コミュニケーション

糖鎖生物学研究のための最良の実験動物のひとつと考えられる線虫C.elegansのガレクチンについて多角的研究を行った。ゲノムプロジェクトの完成により、C.elegansには少なくとも11種類のガレクチン関連遺伝子が発見されたが、それらをすべてリコンビナントタンパク質として発現させ、糖結合特性を含む諸性質を解明した。糖結合に関しては最近われわれが大幅に改良したフロンタルアフィニティークロマトグラフィー法を駆使し、多数の糖鎖に対する解離定数を測定することより比較検討した。その結果、脊椎動物のガレクチンとの対比が明らかになり、生物種の進化およびタンパク質の進化の過程で、何が保存され、何が変化したのか等の差異が示唆された。線虫は最初にタンデムリーピート型ガレクチンが発見された生物でもあるが、このようなガレクチンの存在意義を解明するために、2つの糖結合部位のそれぞれ一方のみを含む半分子をリコンビナントタンパク質として発現させ、それぞれについて糖結合特性を詳細に検討した。それにはわれわれが開発した特異的相互作用解析法であるフロンタルアフィニティークロマトグラフィー法、キャピラリーアフィノフォレシス法が有効に利用された。その結果、2つの結合部位はそれぞれが独自の特異性を示し、タンデムリピート型ガレクチンは構造の異なる複合糖質間を架橋しうること、すなわちヘテロ2価性架橋分子であることが示唆された。