hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
液晶／配向ナノファイバー複合体の構築とテラヘルツ波制御素子の実現

更に、線路型のテラヘルツ波位相制御素子としてNRDガイドの誘電体部分にPETフィルムで挟んだネマティック液晶/配向ナノファイバー複合体を利用することを検討し、デバイスの特性を評価したところ、周波数300GHzにおいてNRDガイドとして動作することを確認するととともに、電圧印加により約20度の位相変化が確認でき、そのときの応答時間が約0.6sであることが確認でき、ネマティック液晶/配向ナノファイバー複合体を用いた線路型テラヘルツ波移送制御素子が実現できた。ネマティック液晶とエレクトロスピニング法で作製した配向ナノファイバー複合素体を構築し、閾値電圧や電圧を除去したときの応答時間はナノファイバーの種類・直径及び密度に依存することを明らかにした。また、液晶分子とファイバーの平均距離と立ち下がり時間やナノファイバー密度と閾値電圧の関係がファイバーの種類と直径により決まることを明らかにした。また、この複合体を用いて周波数が260400 GHzのテラヘルツ波における透過型の移相器を提案し、位相変化量は液晶単体と比べ約半分に減少するものの、立ち下がり時間を約600分の1に減少できることを明らかにし、複合体のテラヘルツ波素子への応用の可能性を示した。現時点においては、作製した配向ナノファイバーと液晶の相互作用のシミュレーションによる検討が行われていないなど、一部の計画について遅れているものの、当初計画していた以外の材料である高分子安定化液晶やコレステリック液晶についての応答改善や新規高速応答モードについての知見が得られるなど、計画外の成果も得られており、計画は全体としておおむね順調に研究の目的を達成していると判断される。昨年度未実施であったITO付PETフィルムを基板材料とした100μm以上の液晶/ナノファイバー複合体を作製を早期に行い、この複合体を用いて電圧印加によるテラヘルツ波の位相変化を測定することにより移相器としての基本的な特性を評価し、透過型のテラヘルツ波移相器の特性評価を行う。また、テラヘルツ波の伝搬に適したガイド型の線路を用いた線路型のテラヘルツ波移相器についても、液晶/ナノファイバー複合膜を用いて実現する。更に、これらの移相器内での液晶分子の応答について、液晶の電場応答を計算できるシミュレーターを用いて計算し、複合素子内における電界に対する液晶分子の応答を明らかにする。光・電子デバイス工学今後は、ネマティック液晶/ナノファイバー複合体について現在よりも更に厚さの厚い複合体の実現と、テラヘルツ波制御素子についての特性測定を行うための測定系の構築及び、実際にその測定系を用いてネマティック液晶/配向ナノファイバーテラヘルツ波透過特性の評価を行う予定である。また、複合体については現状のネマティック液晶単体の材料だけではなく、高分子安定化液晶やコレステリック液晶を用いた特性評価を行う予定である。次年度において液晶分子の電界に対する応答を計算できるシミュレータを購入する予定があり、翌年度請求分だけでは不足するため今年度の助成金の使用を抑制し、次年度使用額を生じさせた。
血管石灰化抑制ホルモンとしてのFGF23の役割の解明

慢性腎臓病(CKD)患者では心血管イベントの発症リスクが高く、心腎連関の病態解明は重要な課題である。CKD患者では血管石灰化が顕著であり、また血管石灰化は心血管イベントの予後予測因子である。しかし、血管石灰化におけるFGF23の病態生理学的な意義は不明である。そこで、本研究は、FGF23の血管における作用について解析することによって、心腎連関におけるFGF23の役割を検討した。これまでの検討で、培養血管平滑筋細胞において、FGF23は、骨分化マーカーであるRunx2、BMP2、Msx2、ALP発現を抑制し、血管石灰化に抑制的に作用するオステオプロテジェリン(OPG)を誘導することを示した(in vitro)。しかし、これらの現象はラット血管平滑筋細胞では認めなかった。そこでin vivoのデータとして臨床データを用いて、石灰化関連因子と血液中FGF23濃度の相関を検討した。その結果、ヒト血液中FGF23濃度は、血液中OPG濃度と最も強く相関することが明らかとなった。FGF23によるOPG発現機序の検討を行った。OPGプロモーター領域を単離し、ルシフェラーゼレポーターベクターに導入し、レポーターコンストラクトを作成。それらを血管平滑筋細胞に導入し、FGF23刺激による転写活性の変化を検討したところ、ルシフェラーゼ活性は2倍に活性化された。またFGF23と同時にKlothoを加えると、協調的にOPGmRNA発現量が増加することが明らかとなった。また、Klothoに対するSiRNAを用いるとOPGのmRNA発現量は低下した。これまでの検討結果をまとめると、FGF23はKlothoと協調的にOPGを誘導し、OPGが石灰化促進に関わるRANKL/RNA結合を阻害することで、FGF23が血管石灰化に抑制的に働くのではないかと考えられた。この結果をまとめて、現在英文誌に投稿中である。CKD患者では血管石灰化が顕著となり、また血管石灰化は心血管イベントの予後予測因子である。これまでの検討で、培養血管平滑筋細胞においてFGF23が血管石灰化に抑制的に作用するオステオプロテジェリン(OPG)を誘導すること、また臨床データとして、血液中FGF23濃度とOPG濃度が強く相関すること等を示した。、また、FGF23によるOPG発現機序の検討を行った。OPGプロモータ領域を単離し、ルシフェラーゼレポーターベクターに導入し、レポーターコンストラクトを作成。また、Klothoに対するsiRNAを用いるとOPGのmRNA発現量は低下した。これまでの検討結果をまとめると、FGF23はKlothoと協調的にOPGを誘導し、OPGが石灰化促進にかかわるRANKL/RANK結合を阻害することで、FGF23が血管石灰化に抑制的に働くのではないかと考えられた。

一部予想とは異なる結果となったが、おおむね予想された実験結果が得られた。ただし、FGF23の構造がヒトとマウス・ラットでは大幅に異なるためか、in vitroにおいて、RASMC(ラット血管平滑筋細胞)にFGF23を投与しても、血管石灰化を抑制する現象は認めなかった。そのため、予定していたマウス・ラットに対するin vivoでの実験は中止した。in vitroの検討はKlothoに対するsiRNAを用いて、OPGがタンパクレベルで抑制されたかELISAにて測定する予定である。in vivoに対する検討はマウス・ラットに対する実験を中止した為、現在のヒトの血清サンプル中のOPGなどの各因子の濃度をELISAを用いて測定する予定である。FGF23の構造がヒトと異なるマウス・ラットでは、ヒトのサンプルで認めたFGF23による血管石灰化の抑制を認めなかったため、マウス・ラットを用いたin vivoの実験を中止した為。ヒトの血清サンプルの測定項目を増やし、検討を行う。そのためのELISAキット購入に充てる。
マクロファージに発現するNa+/Ca2+交換体の粥状硬化進展機序における役割

プラーク破裂の発生メカニズムを解明するために、ヒト内頚動脈におけるNa+/Ca2+交換体(NCX)とマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)の発現および内圧負荷によるひずみ応力分布を調べた。粥状硬化巣の線維性被膜に局在する活性化マクロファージは、NCX-1膜トランスポーターを介して細胞内Ca2+の増加が起こり、MMP-2,9を放出する。その結果、粥腫を覆う線維性被膜の菲薄化と断裂がおこると考えられる。また、線維性被膜に発生する高い応力が被膜の断裂に直接関係している可能性が示唆された。1,頚動脈プラークの病理組織学的検討:内膜剥離術で採取された頚動脈プラーク72例(2004-2006年)をホルマリン固定連続切片で光顕的に観察した。責任病変を粥腫と線維成分の割合で粥腫型(プラークに占める粥腫の割合が70%以上のもの,37例),線維型(線維成分が70%以上占めるプラーク,10例),中間型(粥腫型,線維型いずれにも含まれないプラーク,25例)に分けた。症候性プラークの割合は粥腫型53%,線維型45%,中間型40%あった。そのうち潰瘍形成を示すプラークは粥腫型93%,線維型69%,中間型0%であった。2,頚動脈プラークに出現するマクロファージにおけるNa+/Ca2+交換体(NCX)の発現:14例の頚動脈プラークの未固定標本から凍結切片を作製し,責任病変部を免疫組織化学的に観察した。頚動脈プラークでは,粥腫の辺縁と線維性被膜に泡沫化マクロファージが多数集籏していた。CD68陽性のマクロファージの多くがNCX1陽性であったが,NCX2は陰性であった。CD68またはαSMAとNCX1の二重免疫染色を行うと,CD68陽性のマクロファージの細胞質と細胞膜にNCX1が染色された。一方,αSMA陽性の平滑筋細胞はNCX1陰性であった。以上から,ヒトの頚動脈粥状硬化部では,NCX1を発現したマクロファージが粥腫の不安定化を引き起こし,臨床症候の発生に関与している可能性が示唆された。次年度では,さらに不安定プラークがどのようなメカニズムで破裂にいたるかをNCX1陽性マクロファージとの関連から検討する予定である。1.頚動脈プラークの破裂に関するtopographicalstudy:昨年度以降に内膜剥離術で採取された頚動脈プラーク17例から血管長軸に垂直の連続標本を作製し、実体顕微鏡および光顕下に観察し、破裂部位の組織分布とその性状について検討した。17例中プラーク破裂例は8例、非破裂例は9例であった。破裂例(M/F:7:1)では非破裂例(M/F:3/6)に比べ男性の割合が多かった。内膜の亀裂は、長軸方向では内頚動脈入口部に最も多く、その部を中心にプラーク内出血を認めた。垂直断面では、プラークを覆う線維性被膜に亀裂が生じ、亀裂断端部にはコラーゲンの破断と破断部への泡沫化マクロファージの浸潤を認めた。2.頚動脈プラークの破裂におけるマクロファージの関与:凍結標本を用いプラークに浸潤するマクロファージにおけるマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP1,MMP2,MMP7,MMP9)の発現を免疫組織化学的に検討した。内膜に浸潤するマクロファージにはMMP2とMMP9は強く発現したが、MMP1,MMP7は発現しなかった。3.内膜組織におけるNa+/Ca2+交換体(NCX)蛋白の発現:内膜組織を粥状硬化部と非粥状硬化部にわけ、凍結保存した。組織のホモジネートを作成し、その蛋白抽出液をSDSで展開し、Western blotting法で解析した。粥状硬化部では抗NCX1抗体に反応する105kDのバンドが観察されたが、非粥状硬化部には見られなかった。以上の成績から、ヒトの粥状硬化部のプラーク被膜に亀裂が起こり、プラーク破裂が発生する。この被膜の亀裂には内膜に浸潤するマクロファージのNa+/Ca2+交換体(NCX)蛋白発現とMMP2とMMP9の産生放出が関与していることが示された。1)頚動脈内膜組織におけるNa+/Ca2+交換体(NCX)mRNAの発現:内膜剥離術時に得られた内膜サンプルから粥状硬化部と非硬化部を採取し、凍結保存した。組織からTotal RNAを抽出し、RT-PCR法でNCX1の発現を調べた。NCX1 mRNAは粥状硬化部と非硬化部いずれにおいても検出された。

2)頚動脈内膜組織におけるマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)mRNAの発現:頚動脈内膜の粥状硬化部と非硬化部におけるMMP-1,2,8,9 mRNA発現を1)の方法と同様にRT-PCR法で調べた。粥状硬化部では、MMT-1,2,8,9 mRNAのすべてが発現していた。一方、非硬化部では、MMTL-1,2,9 mRNAは発現していたが、MMT-8 mRNAは検出されなかった。3)生理的内圧負荷による総頚動脈壁の応力・ひずみ状態の解析:剖検症例を用い、円筒状の総頸動脈に0160mmHgの内圧を負荷した。その断面形状の変化を外径と断面積から算出した。これをもとに応力-ひずみ曲線を作成し、有限要素法を用いて壁に発生するひずみ、応力を解析した。光顕標本を作製し、血管壁の組織成分の変化を調べた。アテロームを有する偏心性肥厚を有する動脈に内圧を負荷した場合、肥厚部は非肥厚部に比べ変形しにくく、壁に発生するひずみ変動量が不均一化した。その結果、偏心性肥厚の肩部付近で高い応力が観察され、また管軸の中心に近いほどひずみ変動量が大きかった。これらの力学特性が、プラーク破裂に関係している可能性が示唆された。
イヌの新規腫瘍関連ｍｉｃｒｏＲＮＡの同定による病態解明と臨床応用に関する研究

本研究ではイヌの各腫瘍に特徴的な発現をするmicroRNAを確認した。肝細胞癌、乳腺腫瘍、メラノーマで次世代シーケンスによるRAN-Seq解析を行った。各腫瘍、血液、細胞株で特異的に発現するマイクロRNAをリアルタイムPCRで解析した。メラノーマではmiR-205の発現低下とmiR-383の発現上昇が見られた。肝細胞癌と培養細胞ではmiR-1とmiR-122の発現低下が確認できた。同時にmiR-1とmiR-122のターゲットのc-METとIGF1Rの発現上昇も確認した。乳腺腫瘍では悪性度に依存してmicroRNAの発現が変化した。血中miR-21はリンパ節転移と関連する可能性が認められた。イヌの腫瘍におけるmicroRNAの解析は数報しか報告されておらず、多検体で網羅的解析は行なわれていない。本年度はアレイ解析で、乳腺腫瘍、末梢神経鞘腫、血管肉腫、扁平上皮癌、メラノーマ、肝細胞癌で特異的に変動する可能性のあるmicroRNAの選出を行なった。現在、それらについて個々に観察が進行中である。乳腺腫瘍に関しては腫瘍組織で特異的に発現するmicroRNAをアレイで同定し、確認が可能であった。さらに、血清中で変動するmicroRNAの変化も観察した(第156回日本獣医学会口頭発表、論文作成中)。メラノーマに関しても腫瘍組織と正常口腔組織で発現差を観察して腫瘍特異的に発現変化するmicroRNAを同定した(論文投稿中)、一方で腫瘍細胞株での発現も観察している。肝細胞癌でも腫瘍組織と正常肝臓組織で発現差のあるmicroRNAの確認が行なえている(論文作成中)。他の腫瘍に関しても臨床サンプルの蓄積を行なっており現在、各腫瘍に特異的な発現変動を示すmicroRNAの発現変化も観察している。一方で脳腫瘍を含む脳脊髄神経疾患のイヌの脳脊髄液を採取しmicroRNAの解析を行なったが、現在までに疾患に依存して変化するmicroRNAの確認には至っていない。本年度は遺伝子治療に使用するp53遺伝子導入ウイルスベクターの作製に成功している。現在までにヒトのp53遺伝子の導入は可能となっており、現在、イヌのp53遺伝子の準備を進めている。イヌのメラノーマでmiR-383が特異的に発現上昇することを発見した。これまでにイヌのメラノーマで発現が上昇するmicroRNAの報告はない(現在、投稿論文はリバイス中)。さらに乳腺腫瘍に関連して、血液中のmicroRNAと腫瘍組織で発現するmicroRNAの発現挙動を観察し、リンパ節転移や再発との関連性を検討した。本結果は論文を作成中であるが、血液中の変化を観察するために数例の追加が必要である。イヌの肝細胞癌で特異的に変化するmicroRNAを発見し、それらのターゲットの可能性のあるmRNAも同時に解析した。その結果はmicroRNAの発現減少にともない、そのターゲットである癌遺伝子METの発現の増加を確認した(第157回日本獣医学会発表)、現在、投稿論文の作成中である。細胞培養に関してはイヌのメラノーマの細胞株とリンパ腫の細胞株で培養を開始した。現在までのところ、イヌのメラノーマでは実際の腫瘍で発現が増加したmiR-383の発現増加は確認されていない。リンパ腫に関しては培養条件を変化させることで癌遺伝子の発現の変化が生じることを見出しており、これに関連するmicroRNAの探索を行う。本申請研究ではmicroRNAのイヌ腫瘍の病態解明と臨床応用を達成するために、腫瘍関連microRNAの同定と腫瘍細胞株における発現解析、臨床例でのmicroRNAの発現解析を研究した。現在までに、乳腺腫瘍、肝細胞癌、メラノーマの実際の症例(各症例3例)と各腫瘍に対応する正常組織(乳腺、肝臓、口腔内組織)の次世代シーケンス解析を行った。すべてのサンプルで良好なシーケンス結果が得られ、現在、詳細の解析を進行中である。さらに、上述の3組の比較解析サンプル群(乳腺腫瘍、肝細胞癌、メラノーマ)ではmRNAに関してもRNA-Seqにより遺伝子の次世代シーケンス解析を行った。In silico解析はCLC workbenchを導入して研究室で比較解析を進行中である。各腫瘍ではそれぞれに特異的に発現していると考えられるmicroRNAの発現をリアルタイムPCRで解析し、有意に変化するmicroRNAを数種同定した。同時に血液中のmicroRNAの発現に関しても解析を行っている。特に乳腺腫瘍に関しては良性と悪性の腫瘍で発現が異なるmicroRNAが見いだされ、ある種のmicroRNAはリンパ節転移との関連性が示唆された。次にリンパ腫、肝細胞癌とメラノーマに関してはイヌの腫瘍組織で発現が変化するmicroRNAに関して、その発現を観察した。さらに、腫瘍細胞を低酸素で培養することで、形質が変化すること(増殖促進、抗アポトーシス効果、薬剤耐性感受性)を観察した。現在はこれらの細胞株に遺伝子導入する方法を検討している。

乳腺腫瘍では悪性度に依存してmicroRNAの発現が変化した。血中miR-21はリンパ節転移と関連する可能性が認められた。複数のイヌの腫瘍において変化するmicroRNAの発見は当初の計画に従い行われている。既に血液中の変化も観察可能となっている。一方で当初の予定であるp53遺伝子ベクターの細胞への導入が遅れている。腫瘍細胞細胞株の培養条件の設定に予想以上に時間を要したことに起因している。培養が安定したら遺伝子導入は行える。次世代シーケンスによる配列のシーケンスは専用のソフトを購入して解析準備は整っている。既にサンプルは外部シーケンスに提出しているが、解析の順番を待っている状態である。サンプルの品質は問題ないのでシーケンス結果は近日中に入手できる予定である。27年度が最終年度であるため、記入しない。獣医腫瘍学既に発見されている腫瘍で変化するmicroRNAの臨床症状との関連性の確認をすることで、より臨床的に意義のあるマーカーを探求する。p53遺伝子の導入による細胞の変化を観察すると同時に、変化するmicroRNAのプロファイリングを行う。次世代シーケンス解析を進めていき、新規の腫瘍関連microRNAの発見とターゲットとなるmRNA都の統合解析を進める。本年度の結果からすでに複数のイヌの腫瘍で特異的に発現変動する可能性のあるmicroRNAのリアルタイムによる解析は行なえており論文の投稿中(1報)と論文作成中(2報)である。一方で、本研究ではイヌのmicroRNAを次世代シーケンスで網羅的に解析することを当初の最大の目的としているが、本年度はサンプルの準備が整わずに次世代シーケンス解析ができなった、遺伝子導入のベクターは作製できているが実際の導入はできていないことか、現在までの達成度の区分は(3)であると自己評価した。これらはサンプルと細胞株(既に準備済み)が整えば実施可能であり、次年度(H26年度)の早期に実施予定である。次世代シーケンス解析に多くの費用が割り当てられている。現在、サンプルは解析専門の会社にて品質管理までは終了しているが、シーケンス反応の順番待ちの状態である。そのために予算を一部繰り越している。各腫瘍のmicroRNAの解析はサンプル数の増加と治療や予後などステージに依存した変化の確認を行なう。サンプルの準備ができている複数の腫瘍組織のRNA混和と正常組織混和による次世代シーケンス解析と肝細胞癌と正常肝臓細胞による次世代シーケンス解析を行なう。既に作製している遺伝子導入のベクターを用いた遺伝子導入とそれによるmicroRNA発現変化を腫瘍細胞株で行なう。次世代シーケンス反応は既に準備段階であり、早急に行われる予定である。本年度はサンプルの準備状況が十分でなかったので次世代シーケンスによる網羅的解析が行なえなかった。
ＴＧＦーβシグナルによる転写調節とがん悪性化機構

アクチビンはTGF-βと類似の作用を発揮すると考えられているが、実際にはTGF-βとは異なる作用を発揮することが多い。PalbociclibなどのCDK4/6阻害薬はホルモン受容体陽性・HER2陰性乳がんの治療薬として注目されている。我々はPalbociclibはアクチビンと相加的に細胞増殖を抑制することを見出した。またChIPシーケンスによりPalbociclibがSmad2のDNAへの結合を増強することを示した。さらにPalbociclibによるアクチビン-Smadシグナルの増強にはSmad2の標的遺伝子としてCCNG2が重要であることを見出し、Palbociclibの乳がんにおける新たな作用機構を明らかにした。TGF-βの長期刺激ではEMT表現型を誘導し安定化する。安定化EMTでは幹細胞様の表現型と抗がん剤に対する耐性の亢進がみられた。乳がん細胞を用いた実験では、安定化EMTではmTORシグナルの活性化がみられ、新規mTOR阻害剤の投与により幹細胞様変化や足場非依存性増殖、抗がん剤耐性の抑制などがみられた。がん転移巣の形成においては短期刺激に比べて長期刺激の方が転移巣形成までに時間を要することが明らかとなり、転移巣の形成にはMETが起こることが重要であることを示唆する所見を得た。(3)がんの浸潤・転移を促進するTGF-βの多彩な作用の解明組織透明化技術を用いてがん細胞を可視化し、TGF-βによってEMTが誘導されたがん細胞は、自身の細胞の浸潤能を高めるほか、周囲のがん細胞の悪性形質も亢進させることを示唆する結果を得た。また分裂中のがん細胞を特異的レポーター遺伝子を用いて可視化し、がん転移巣における増殖・静止期の細胞の局在を検討した。組織透明化技術の導入により、研究開始時には予想しなかった1細胞レベルでのがんの浸潤・転移機構の解析が可能となった。これによりTGF-βによってEMTが誘導されたがん細胞は、自身の細胞の浸潤能を高めるほか、周囲のがん細胞の悪性形質の亢進にも寄与することを示唆する結果を得たことは当初予想しなかった成果である。さらに国際共同研究でTGF-βによる長期刺激により安定化EMTという表現型を確認した。安定化EMTではTGF-β-Smadシグナルに加えてmTORシグナルの重要性が明らかとなり、新規mTOR阻害剤が効果を示したことは当初予想しなかった成果である。最終年度にあたることから計画に沿って研究を継続し成果を取りまとめることを第一の目標とする。一方で、組織透明化技術を用いた実験などではこれまで予期しなかった成果も見られることから、さらに大きな発展を目指して研究を行う。(1)TGF-β-Smadのダイナミックな転写調節機構の解明:TGF-βとRasがん遺伝子の協調作用とp53ファミリー(p53とp63)との関連を中心に明らかにした。p53に遺伝子変異を有するヒト表皮細胞を用いてp63の2つのスプラインシングアイソフォームの一つのΔNp63のDNA結合パターンをChIP-seq法などで解析した。活性型RasとTGF-βシグナルの存在下では変異型p53がユビキチンープロテアソーム経路で分解され、その結果ΔNp63の結合部位が増加することが明らかとなった。(2)TGF-βによるEMTの調節機構と多彩な表現型の解析:乳がん細胞株MDA-231-DなどでZEB1の転写制御機構を網羅的に明らかにした。ZEB1はこれまで知られていた標的遺伝子に加えて、炎症関連遺伝子群の発現を制御すること(ZEB1関連分泌、ZEB1-SP)を見出した。ZEB1-SPのがん進展における関与を明らかにするためマウス乳がん細胞4T1を用いて検討したところ、ZEB1過剰発現により転移を促進する細胞群が腫瘍に集積していることが観察された。RNAの選択的スプライシングに関わるタンパク質ESRPはEMTに大きな影響を与える。腎臓がん細胞ではESRP2が発現しており、ESRP2の標的遺伝子の発現パターンがユビキチンリガーゼArkadiaの発現と相関していることが明らかとなった。ArkadiaはESRP2と結合してESRP2をユビキチン化し、協調して腎臓がん細胞の増殖を抑制した。(3)がんの浸潤・転移を促進するTGF-βの多彩な作用の解明:肺腺がんで新たに同定したTGF-β標的遺伝子Tuft1とRBM47の機能解析を行った。RBM47は転写因子Nrf2の作用を介して、酸素消費量やがん幹細胞の割合、マウスモデルでの腫瘍増大速度を制御していることが明らかとなった。当初の計画に従い研究を順調に推進している。いくつかの興味深い成果が得られ、英文原著論文を発表または投稿準備中である。平成27年度はZEB1標的遺伝子の同定と機能解析の結果、当初の予想に反し、ZEB1関連分泌現象(ZEB1-SP)という炎症・免疫関連分子の分泌を誘導する現象が明らかとなったことから研究費の繰越を行なったが、その後研究は順調に進行した。(1)TGF-β-Smadのダイナミックな転写調節機構の解明:H27年度に続きTGF-βとRasがん遺伝子の協調作用とp53ファミリー(p53とp63)との関連を中心に明らかにした。p63のスプラインシングアイソフォームΔNp63の標的遺伝子をスクリーニングしたところ、脱リン酸化酵素DUSP6とDUSP7がΔNp63で誘導されることが明らかとなった。

さらにDUSP6、DUSP7が細胞運動や浸潤を促進することを確認し、TGF-βがRasとp53ファミリーの協調作用によりがんの進展に関与する機構を明らかにした。(2)TGF-βによるEMTの調節機構と多彩な表現型の解析:乳がん細胞株でZEB1の転写制御機構を網羅的に検討した結果、ZEB1は炎症関連遺伝子群の発現を制御すること(ZEB1関連分泌、ZEB1-SP)を見出した。ZEB1のノックダウンによってこれらの炎症関連因子のタンパク発現が低下し、逆にZEB1の過剰発現によって分泌因子の発現が上昇することを見出した。このZEB1の作用は、これまでに知られていたTGF-βシグナルとZEB1の関係によるものとは独立したメカニズムによることが示唆された。我々はFAIRE-seqを用いて、クロマチンの変化に伴うTGF-β刺激後の遺伝子発現の変化をがん遺伝子Rasシグナルの存在下でマウス乳腺上皮細胞を用いて網羅的に検討した。TGF-βとRasは協調してCdh1やEsrp2などの上皮細胞関連遺伝子、Cdh2、Fn1などの間葉系細胞関連遺伝子などのクロマチン構造に特徴的な影響を与えた。TGF-βとRasシグナル存在下でETSファミリーの転写因子のEtv4やEtv5の発現が認められ、クロマチンへの結合が示唆された。Gene Ontology解析によりEtv4とEtv5がMmp13の発現や細胞浸潤能に関与していることが明らかとなった。当初の計画に従い研究を順調に推進している。いくつかの興味深い成果が得られ、英文原著論文を発表または投稿準備中である。1) TGF-β刺激により発現が誘導され、肺腺がん、乳がん、スキルス胃がんなどの予後不良因子として働く因子としてTUFT1を見出した。TUFT1発現の抑制によりがん細胞運動能・増殖能やマウス移植モデルでの腫瘍形成能・転移能が低下した。TUFT1結合タンパクとしてRabファミリーのGAPであるRABGAP1を見出した。TUFT1はRABGAP1のGAP活性を上昇させることでmTORシグナルを活性化すると考えられた。2) TGF-βのIII型受容体TGFBR3 (Betaglycan)の役割を腎臓がん細胞で検討した。TGFBR3の発現は腎臓がん細胞で低下しており、予後不良との関連、腫瘍形成能と転移能の上昇が見られた。TGFBR3はALDH1陽性のがん幹細胞の減少、TGF-βシグナルに依存しないFAK-PI3K経路に関連した細胞運動能の低下と関連することが明らかとなった。3)がん転移の観察方法として、マウスモデルにおいて臓器透明化を応用し、1細胞レベルでの解析をin vivoで観察できる系を確立した。蛍光タンパク質を安定的に発現したがん細胞をマウスへ移植し、マウス全身もしくは摘出した臓器を透明化することで、マウス全身でのがん細胞の局在を検出すると同時に、肺への転移を1細胞レベルで可視化することに成功した。肺腺がん細胞A549をマウス尾静脈から投与して転移形成能を経時的に確認したところ、TGF-βで処理したA549細胞はマウスに投与24時間後における肺への集積が非処理細胞に比べて有意に増加していた。さらに投与14日後の転移巣形成もTGF-βで処理したA549細胞は非処理細胞に比べて有意に亢進していた。
凸代数幾何を用いた最適化問題の成す多様体の研究

本研究では,あるクラスの最適化問題に対して,特異な最適化問題を点として持つ代数多様体を構成し,多様体内での個々の問題の持つ幾何的特徴,また,他のクラスの最適化問題を点として持つ代数多様体との関係を調べる.そのため,まず先行研究の豊富な行列補完問題に対して,コーダルグラフと半正定値計画問題の正則性の関係を代数幾何的に再考察する.また,特性類を用いた最適化問題の代数的次数計算に関する先行研究を応用し,具体的な応用例から得られるより狭いクラスの最適化問題の代数的次数を求め,最適化問題を点として持つ代数多様体の大域的な性質を調べる.本研究では,あるクラスの最適化問題に対して,特異な最適化問題を点として持つ代数多様体を構成し,多様体内での個々の問題の持つ幾何的特徴,また,他のクラスの最適化問題を点として持つ代数多様体との関係を調べる.そのため,まず先行研究の豊富な行列補完問題に対して,コーダルグラフと半正定値計画問題の正則性の関係を代数幾何的に再考察する.また,特性類を用いた最適化問題の代数的次数計算に関する先行研究を応用し,具体的な応用例から得られるより狭いクラスの最適化問題の代数的次数を求め,最適化問題を点として持つ代数多様体の大域的な性質を調べる.
言語コミュニケーションが困難な患者に対する副作用モニタリング評価ツールの開発

【目的】構音障害を有する患者や日本語に不慣れな外国籍患者に対して薬剤師が薬剤管理指導を行う際、言語による会話での意思疎通が困難なケースが散見される。言語による会話での意思疎通が困難な場合、対応する薬剤師の心的負担のほか、患者からの訴えや症状を十分にフォローできず、副作用の見落としといった医療安全上の問題となる可能性が危惧される。そこで、言語での意思疎通が困難な場合の円滑な薬剤師の業務支援を目的に、発語が困難な日本人を想定した症状モニタリングツールの開発を行った。【方法】<ツールの作成>症状モニタリングツールはオフラインでも広く活用できるようPDF形式とした。症状はイラストおよび文字を用いて部位別・症状別から選択できるようにした。<ツールの有用性の評価>岡山大学病院(以下当院)薬剤部所属の薬剤師のうち、18人を対象に実施した。対象者を発語困難な薬剤師役(9人)、患者役(9人)に割り付けた。患者役は新薬学教育モデル・コアカリキュラムで挙げられた代表的な8疾患のうち、がん患者を模擬症例とした。症例は患者背景および模擬症例に生じている副作用症状について十分に教育した上で実施した。薬剤師役は本ツールを用いて患者役の症状を聴取し、事前に設定した5つの聴取項目について、聴取できた項目数を点数化し評価した。また患者役と薬剤師役それぞれに5段階評価および自由記述アンケートを実施した。【成果】本ツールを用いることで、薬剤師役は患者役の症状を平均して4.9点聴取することができた。操作性は平均して薬剤師役3.6点、患者役3.8点であった。また本ツールを用いることで発語が困難で意思疎通が可能な患者とコミュニケーションが取りやすくなり(薬剤師役4.7点、患者役4.3点)、本ツールの有用性が示唆された。
中国の民事紛争処理における合意と強制-人民調停手続きを手掛りに

本研究は、中国の裁判外紛争処理制度の一つである人民調停制度の利用を題材として、今まで好んで利用されてきた当該制度が、なぜ利用されなくなったのかを解明することを目指すものである。理論的、実証的に考察するため、本研究では、制度の分析と利用状況に関するデータの分析という二つの側面から、当該問題へのアプローチを試みてきた。当該制度は、建国前の革命根拠地において樹立され、建国してからは、それを規定する三つの条例が公布されてきた。それぞれの時期において公布された条例の比較を通じて、制度の設計者の当該制度に対する期待が変化していることが明らかになってきた。また、人民調停制度の利用についてのデータを分析する際、その対比軸に、民事第一審の利用データも整理した。整理した16年分の両者利用データの比較分析からは、調停から訴訟への移行を実証的に証明することができた。また、紛争類型別にみた利用データの両者比較からは、棲み分けの現象が生じていることも明らかになった。作業を進めるにつれ、制度ないしデータの分析では、制度設計者の狙いと、調停利用が減少している状況を把握することができた。また、「なぜ人民調停が使われなくなったのか」という本研究の課題にも一応の答えを出すことに至った。論文の内容について、講座内の論文報告会において報告をした。内容について若干の調整を加え、近々北大法学論集に投稿する予定である。しかし、作業を進めるにつれ、制度ないしデータの分析では、たしかに制度設計者の狙いと、調停利用が減少している状況を把握することができるとはいえ、「なぜ人民調停が使われなくなったのか」という本研究の課題に答えを出すことは困難であるということも判明した。的確な答えを出すためには、具体的な事案処理に焦点を絞り、個別紛争処理における当事者の制度利用の動機、期待、ならびに制度の担い手である調停員の制度運用の実態を明らかにすることが必要であると思われる。これまでの制度の分析、利用に関するデータの考察を基礎として、次年度に向けて、若干の軌道修正をしつつ、研究を進めていく予定である。
含ビスマス-インターエレメント化合物の研究

1)5価ビスマスポルフィリンの研究:アンチモンまでの軽い元素のポルフィリンは一般に5価の状態が安定で、3価の第15鉄元素ポルフィリンは空気酸化されて5価になることが多い。ところが、唯一ビスマスポルフィリンだけは3価の化合物しか知られておらず、5価の化合物は合成不可能と思われていた。Bi(III)-TPP(No_3)(1)のCVスペクトルは、銀標準電極に対して+844,+962mVにピークを持つ半可逆の酸化波を示した。そこで、900mVで定電位電解を行いながら可視吸収を測定すると、1の470nmのソーレー帯の吸収が減少し442nmの吸収が増大した。この吸収の変化はSb(III)TPPがSb(V)TPPに酸化されるときの変化と非常に類似している。完全に470nmの吸収が消失した後、生成物を単離し黄緑色の固体(2)を得た。CV,UV,NMRの結果から、化合物2は5価のビスマスポルフィリンである可能性が高い。(2)第15族元素N-混乱ポルフィリンの合成:N-混乱ポルフィリンは、ポルフィリンのピロール環のひとつが反転して窒素原子がβ-位に位置しているポルフィリン異性体の1種である。従来の第15族元素ポルフィリンではポルフィリン環が2価の配位子であるため、中心の第15族元素はカチオン状態となり対アニオンを持たざるを得ない。ところが、N-混乱ポルフィリンは構造上二価・三価のどちらの配位子としても働く可能が有り、電荷的に中性の第15族元素ポルフィリン類縁体得ることができる。Sb(V)(OMe)_2-N-混乱ポルフィリンを合成し、その単結晶X線結晶解析をおこなったところ対アニオンが無いことから、N-混乱ポルフィリンは三価の配位子として働いており中性の分子であることが確認できた。
人工椎間板の動的環境下での力学的・組織学的検討

本研究では生体活性セラミックスで表面処理した多軸三次元立体織物形状の人工椎間板(以下:人工椎間板)の生体内での経時的変化を生体力学的・組織学的に調査し、今後の臨床応用に向けての基礎的データを蓄積する。平成8年度より人工椎間板の基本構造の設計と人モデル人工椎間板の力学特性、移植実験用羊人工椎間板の力学的特性(引張-圧縮、捻り、粘弾性、疲労特性)の検討および適正化、羊モデルにおける人工椎間板移植およびその短期成績の確認、臨床応用に向けた人腰椎椎問板の三次元形態計測、人工椎間板と椎体界面の骨形態計測学的検討、骨癒合後の界面強度の測定、生体内吸収性内固定材料を応用した人工椎間板置換術の1年以上成績の検討を施行した。結果、本人工椎間板は引張-圧縮、捻り、粘弾性特性において生体腰椎椎間板に類似した力学的特性を有し、優れた疲労特性を示した。人腰椎椎間板の三次元形態計測により人臨床モデル設計のための詳細なデータベースが完成した。生体内吸収性材料による人工椎間板の固定は、良好な初期安定性をもたらし、さらに術後6ヶ月以降に吸収性材料の加水分解による強度低下が起こり、15ヶ月までに全例で三次元的な椎間可動性が獲得された。組織学的には椎体骨梁は人工椎間板繊維内に三次元的に進入し、間隙なく接していた。このmechanical interlockingがもたらす界面の引っ張り破断強度は経時的に増加し、術後15ヶ月では同様な設定で手術されたセラミックス材料の界面強度をはるかに上回っていた。以上の一連の結果から、本人工椎間板は臨床応用が期待できる有望な生体材料であることが明らかとなった。本研究では動的環境下におかれた高密度ポリエチレン加工(生体活性セラミックをスプレーコーティング処理)人工椎間板(以下;人工椎間板)の経時的変化を生体力学、組織学的手法を用いて調査し、今後の臨床応用へ向けての基礎的データを蓄積する。成羊を用いた長期動物実験を開始した。平成8年度は成羊腰椎を用いた本実験に向けた予備実験として以下の3項目を行った。(1)成羊腰椎の解剖学的計測および実験用人工椎間板の設計、(2)羊用人工椎間板と羊椎間板のの力学的特性の比較および適正化、(3)人工椎間板を成羊腰椎に移植し、手術手技の検討および短期成績を確認。上記(1)、(2)による綿密な確認作業の後、実際の人工椎間板移植は現在のところ、4頭、合計8椎間に行った。すべての動物が最大4ヶ月生存中で、移植人工椎間板の脱転、移動もなく順調な経過である。以下の項目について観察中であり。(1)経時的な腰椎の力学特性、(2)レントゲン上の経時的変化、(3)人工椎間板と骨界面の組織学的(光顕および走査電子顕微鏡を使用)評価を通して、骨との接合界面の形態、界面の生化学的変化、人工椎間板の変性等について検討する。上記を通して、人工椎間板の生体内での動的特性とその推移、および骨との接合特性について明らかにする。今後はより多数の動物を使用した長期動物実験を開始予定である。本研究では動的環境下におかれた高密度ポリエチレン加工(生体活性セラミックをスプレーコーティング処理)人工椎間板(以下;人工椎間板)の置換後の経時的変化を生体力学的、組織学的手法を用いて調査し、今後の臨床応用へ向けての基礎的データを蓄積する。平成10年度は成羊32頭を用いた本実験を以下の4群で施行した。第1群:内固定非使用群、第2群:内固定使用群、第3群:吸収性ロッド使用群、第4群:粘着性吸収性高分子材料固定群である。

このうち15頭を術後4または6カ月で屠殺し、内10頭の力学試験、組織学的検討を終了した。現在、人工椎間板と骨界面の走査電子顕微鏡を使用した評価を通して、骨との接合界面の微細形態を検討している。これらの結果を本年の学会に発表し、第一報として論文発表予定である。また他の3群についても、平成10年度秋までに力学試験と一部の組織学的検討を終了予定である。現時点では、当初の難題であった人工椎間板と椎体界面の生物学的癒合は部分的に達成され、今後はこの癒合率を上昇させ、かつ癒合した人工椎間板と椎体複合体の物性をより正常に近づけていく段階に達している。これらと並行して、人工椎間板自体の生体内での劣化の有無と生体力学的変化を詳細に検討中である。また、将来的な臨床応用を考慮した内固定を省くための新しい生体活性のある吸収性材料についても、引き続き研究を進めている。本研究では生体活性セラミックで表面処理した高密度ポリエチレン繊維形状の人工椎間板(以下;人工椎間板)のさまざまな動的環境下での置換後の経時的変化を生体力学的、組織学的手法を用いて調査し、今後の臨床応用へ向けての基礎的データを蓄積する。平成10年度は平成9年度に引き続き、成羊35頭を用いた本実験を以下の4群で施行した。第1群:内固定非使用群、第2群:内固定使用群、第3群:吸収性ロッド使用群、第4群:粘着性吸収性高分子材料固定群である。このうち30頭を術後4または6カ月で屠殺し、内23頭の力学試験、組織学的検討を終了した。これらの結果は平成11年2月に開催されたアメリカ整形外科学会・基礎学会でそれぞれ発表した。現在、人工椎間板と骨界面の走査電子顕微鏡を使用した評価を通して、骨との接合界面の微細形態および人工椎間板と骨との癒合過程を検討している。当初の難題であった人工椎間板と椎体界面の生物学的癒合は達成され、今後はこの骨癒合率を上昇させ、かつ癒合した人工椎間板と椎体複合体の物性をより正常に近づけていく段階に達している。これらと平行して人工椎間板自体のより詳細な生体力学的特性(せん断、疲労、粘弾性)、椎体一人工椎間板界面の破壊試験を実施している。また、将来的な臨床応用を考慮した内固定を省くための新しい生体活性のある吸収性材料、内視鏡的アプローチによる人工椎間板置換術についても、研究を進めている。本研究では生体活性セラミックスで表面処理した多軸三次元立体織物形状の人工椎間板(以下:人工椎間板)のさまざまな動的環境下での経時的変化を生体力学的・組織学的に調査し、今後の臨床応用に向けての基礎的データを蓄積する。平成10年度までに、羊用人工椎間板と羊正常椎間板の力学的特性(引張-圧縮、捻り、粘弾性、疲労特性)の比較および適正化、人工椎間板移植および短期成績の確認、臨床応用に向けた人腰椎椎間板の三次元形態計測を施行した。平成11年度は本実験第3群である吸収性材料固定群の移植1年以上の成績を調査するとともに、人工椎間板と骨界面の走査電子顕微鏡を使用した評価を通して、骨との接合界面の微細構造および人工椎間板と骨との癒合過程を検討した。また1年以上経過例の人工椎間板-椎体界面の強度試験を施行した。結果、吸収性材料による人工椎間板の固定は、良好な初期安定化をもたらした。さらに術後6ヶ月以降に吸収性材料の加水分解による強度低下が起こり、15ヶ月までに全例で椎間可動性が獲得された。組織学的には、界面の成熟は特有な配向をもつ線維軟骨組織を通して起こり、組織形態学的計測の結果から、成熟した界面ほど密な幅の広い骨梁が形成されることがわかった。
遍歴電子メタ磁性鉄系化合物の新規高性能機能性材料への応用と基礎物性に関する研究

本研究ではLa(Fe_xSi_<1-x>)_<13>化合物の水素吸収によるキュリー温度の制御を利用した新規高性能機能性材料の開発を行なうと共に、基礎研究の立場から水素吸収によるメタ磁性転移の変化と磁気体積効果の関係を議論し、材料開発の原理的解明を行なうことを目的としている。Fe濃度の増加に伴いLa(Fe_xSi_<1-x>)_<13>化合物のキュリー温度は低下し、磁気熱量効果は向上する。しかし、LaとFeは非固溶なので、x>0.90の組成範囲において本化合物を作製することは困難である。そこで本年度はLa(Fe_xSi_<1-x>)_<13>化合物およびその水素吸収化合物のメタ磁性転移に伴った巨大磁気熱量効果の向上と動作温度範囲の低下制御に関する研究を行った。その結果、La(Fe_<0.90>Si_<0.10>)_<13>化合物のLaをCeで部分置換することで磁気体積効果により、キュリー温度は低下し、磁気熱量効果が向上することが明らかとなった。La(Fe_<0.90>Si_<0.10>)_<13>化合物のLaは20%程度までCe部分置換でき、La_<0.8>Ce_<0.2>(Fe_<0.90>Si_<0.10>)_<13>化合物はキュリー温度173K直上で-34J/kg Kの磁気エントロピー変化を示す。つまり、Ce置換によりキュリー温度は11K程度低下し、磁気エントロピー変化は20%程度増加する。さらに注目すべきことは、La_<0.8>Ce_<0.2>(Fe_<0.90>Si_<0.10>)_<13>化合物の磁気熱量効果は水素吸収後においても保持されることである。このことは、水素吸収La(Fe_xSi_<1-x>)_<13>H_y化合物の磁気熱効果もCe部分置換で向上することを意味している。従って、La_<1-z>Ce_z(Fe_xSi_<1-x>)_<13>化合物およびその水素吸収化合物は170Kから室温の温度範囲において磁気冷凍作業物質として有望である。本年度はLa(Fe_xSi_<1-x>)_<13>化合物およびその水素吸収化合物に温度計を取り付け、断熱的磁場変化により生じる磁気熱量効果である断熱温度変化の実測を行った。La(Fe_<0.88>Si_<0.12>)_<13>化合物は、磁気冷凍作業物質の実用の目安である1Tあたり約2Kの断熱温度変化を超える2Tで約6.5Kの断熱温度変化を示すことが磁化および比熱測定により予測されている。実測においても、磁化および比熱測定から予測される値とほぼ同程度の5.2Kの断熱温度変化が確認された。また、本化合物の断熱温度変化は磁場印加後1秒程度で発生する。さらに、水素吸収によりキュリー温度を室温に制御されたLa(Fe_<0.88>Si_<0.12>)_<13>H_<1.0>化合物において、水素吸収前と同様の実測結果が室温で確認された。従って、La(Fe_xSi_<1-x>)_<13>化合物およびその水素吸収化合物が室温を含む広い温度範囲で磁気冷凍作業物質として有望であることが明らかとなった。さらに、本年度はLa(Fe_<0.88>Si_<0.12>)_<13>化合物およびその水素吸収化合物と、室温近傍において巨大磁気熱量効果が報告されているGd、MnAs、Gd_5Si_2Ge_2の熱伝導率および熱拡散率を明らかとした。高効率な磁気冷凍を実現するには、磁気冷凍作業物質が熱源と速やかに熱交換を行う必要がある。La(Fe_xSi_<1-x>)_<13>H_y化合物の室温近傍における熱伝導率はGdとほぼ同程度であり、MnAsおよびGd_5Si_2Ge_2よりも大きい。また、La(Fe_xSi_<1-x>)_<13>H_y化合物の室温近傍における熱拡散率はGdおよびGd_5Si_2Ge_2とほぼ同程度であり、MnAsよりも大きい。このことは、La(Fe_xSi_<1-x>)_<13>合物およびその水素吸収化合物が、熱輸送特性の観点からも優れた磁気冷凍作業物質であることを意味いる。従って、La(Fe_xSi_<1-x>)_<13>化合物およびその水素吸収化合物は巨大磁気熱量効果と優れた熱輸送特性の両方を兼ね備えた、これまでに無い優れた磁気冷凍作業物質であることが明らかとなった。

Fe濃度の増加に伴いLa(Fe_xSi_<1-x>)_<13>化合物のキュリー温度は低下し、磁気熱量効果は向上する。しかし、LaとFeは非固溶なので、x>0.90の組成範囲において本化合物を作製することは困難である。そこで本年度はLa(Fe_xSi_<1-x>)_<13>化合物およびその水素吸収化合物のメタ磁性転移に伴った巨大磁気熱量効果の向上と動作温度範囲の低下制御に関する研究を行った。その結果、La(Fe_<0.90>Si_<0.10>)_<13>化合物のLaをCeで部分置換することで磁気体積効果により、キュリー温度は低下し、磁気熱量効果が向上することが明らかとなった。La(Fe_<0.90>Si_<0.10>)_<13>化合物のLaは20%程度までCe部分置換でき、La_<0.8>Ce_<0.2>(Fe_<0.90>Si_<0.10>)_<13>化合物はキュリー温度173K直上で-34J/kg Kの磁気エントロピー変化を示す。つまり、Ce置換によりキュリー温度は11K程度低下し、磁気エントロピー変化は20%程度増加する。さらに注目すべきことは、La_<0.8>Ce_<0.2>(Fe_<0.90>Si_<0.10>)_<13>化合物の磁気熱量効果は水素吸収後においても保持されることである。このことは、水素吸収La(Fe_xSi_<1-x>)_<13>H_y化合物の磁気熱効果もCe部分置換で向上することを意味している。従って、La_<1-z>Ce_z(Fe_xSi_<1-x>)_<13>化合物およびその水素吸収化合物は170Kから室温の温度範囲において磁気冷凍作業物質として有望である。
終脳特異的膜表面認識分子テレンセファリンの神経回路形成における役割

(1)終脳特異的膜表面認識分子テレンセファリンのリガンド分子の同定テレンセファリンのN末端から8つのIg様ドメインは、免疫系での細胞間相互作用で重要な役割を果たすICAM-1およびICAM-3のIg様ドメインと非常に高いアミノ酸配列相同性を有している。ICAM-1及びICAM-3はLFA-1(CDlla/CD18)インテグリンを共通のリガンド分子(カウンタレセプタ)としていることより、テレンセファリンもLFA-1と結合するのではないかと予想された。そこで、LFA-1を細胞表面に高レベルで発現しているHL-60細胞株と、精製リコンビナントテレンセファリン蛋白を用いて上記の可能性を確かめた。テレンセファリンをコートしたウエルにPMAで活性化したHL-60細胞をインキュベートすると、強く接着することが観察された。テレンセファリンへのHL-60細胞の接着はいくつかの抗CDllaおよび抗CD18モノクローナル抗体により阻害されたことにより、テレンセファリンはHL-60細胞上のLFA-1と結合したと考えられる。LFA-1は白血球に広く発現する他に、脳内では各種の脳疾患時に活性化されたミクログリアで強く発現する。従って上記の結果は、ミクログリア-終脳ニューロン、あるいは白血球-終脳ニューロンの相互作用にテレンセファリンが関与することを示唆している。(2)テレンセファリンの機能解析テレンセファリンがシナプス伝達の長期変動に関与しているのではないかとの予想のもとに、海馬CAl領域の錐体細胞へのシェ-ファー側技からのシナプス入力の長期増強にテレンセファリンが役割を担っている可能性をチェックした。ラット海馬切片上のCAl領域に抗テレンセファリン抗体、もしくは精製リコンビナントテレンセファリンを注入すると、シェ-ファー側技からのシナプス入力の長期増強が顕著に抑制された。この結果は、CAl領域におけるシナプス伝達長期増強の形成および維持にテレンセファリンが関与していることを示している。
尿毒素としての腸内細菌産生フェニルアセチルグルタミンの法医剖検診断の意義の解明

本研究は、法医解剖例における血中フェニルアセチルグルタミン(PAG)の病態生理、診断意義を解明と剖検診断への応用を目的とする。LC-MS/MSによる測定に加えて、より汎用性の高いGC-MSによる高感度の測定系の改良に取り組む。死後48時間以内の剖検症例について、尿からPAGが検出された症例を集積し、症例の基礎データ(性別、年齢、死後経過時間等)、死因、解剖所見、病理検査、薬毒物分析、その他の検査結果をまとめてデータベースを作成する。これらの症例の血中、尿中、臓器中PAG濃度を測定する。測定結果と法医解剖症例データベースとの関係を統計学的に検討し、PAGの法医解剖の診断への応用を図る。
表現論の代数解析的研究

本年度の成果のうち,最も著しい点は,実簡約代数群の指標がみたす微分方程式系をD加群として構成したこと(これを指標D加群と名付ける)である.その応用として,複素簡約群の巾単表現を,その指標のモノドロミーの点から特徴付けることが出来た.既約指標は,いわゆるハリッシュ・チャンドラの微分方程式をみたすことは古くから知られており,従来の研究の主な部分もこの方程式を通じて行われていた.ところが,一般にはこのハリッシュ・チャンドラの方程式は,指標ではない超関数をもその解とするため,本当に指標だけをその解とする微分方程式を実際に捉えることが望まれていた.D加群の言葉でいえば,その剰余加群をつくることに当る.我々は,群上の適当なガウス・マシン系を構成することにより,それを完全に遂行することができた.この指標D加群は,いわゆる正則ホロノミーD加群になっており,柏原・河合らによりうち立てられた理論を最も良く応用することができる.指標D加群のモノドロミーによる分解は,ワイル群のセル表現を用いて完全に表示することが出来,既約指標とある種の特異な様体のサイクルとの著しい関係が発見された.また,複素簡約群の巾単表現という不思議な表現のクラスを,この立場で観ることにより,そのセルとの関係が明確になった.他に,分担者谷崎によるホッジ加群の理論の表現論への応用,森田によるp進L関数の研究,小田による代数的特異点の研究,石田によるトーリック多様体の研究,清水によるホッジ構造及び数論的コンフォーマル場の理論の研究等がある.本年度の成果のうち,最も著しい点は,実簡約代数群の指標がみたす微分方程式系をD加群として構成したこと(これを指標D加群と名付ける)である.その応用として,複素簡約群の巾単表現を,その指標のモノドロミーの点から特徴付けることが出来た.既約指標は,いわゆるハリッシュ・チャンドラの微分方程式をみたすことは古くから知られており,従来の研究の主な部分もこの方程式を通じて行われていた.ところが,一般にはこのハリッシュ・チャンドラの方程式は,指標ではない超関数をもその解とするため,本当に指標だけをその解とする微分方程式を実際に捉えることが望まれていた.D加群の言葉でいえば,その剰余加群をつくることに当る.我々は,群上の適当なガウス・マシン系を構成することにより,それを完全に遂行することができた.この指標D加群は,いわゆる正則ホロノミーD加群になっており,柏原・河合らによりうち立てられた理論を最も良く応用することができる.指標D加群のモノドロミーによる分解は,ワイル群のセル表現を用いて完全に表示することが出来,既約指標とある種の特異な様体のサイクルとの著しい関係が発見された.また,複素簡約群の巾単表現という不思議な表現のクラスを,この立場で観ることにより,そのセルとの関係が明確になった.他に,分担者谷崎によるホッジ加群の理論の表現論への応用,森田によるp進L関数の研究,小田による代数的特異点の研究,石田によるトーリック多様体の研究,清水によるホッジ構造及び数論的コンフォーマル場の理論の研究等がある.