hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
消滅危惧土壌を含めた土壌型に関するデータベース化とモノリス作成に関する基礎的研究

本研究は、種々な土壌型に関する立地関係の情報の収集、特に消滅の危機にある低地の土壌型に関する情報の収集、つまりレッドデータブックの作成。土壌モノリスの作成に関する情報の収集、消滅の危機にある土壌を中心に各種の土壌型の土壌モノリスの収集、展示技術を収集し展示の可能性をさぐること。以上の基礎的な面の研究を目的とする。今年度は昨年に続き、各種の土壌型が置かれている状況の情報を集めるために、ペドロジストを中心に昨年の結果の検討のためにアンケートを送り、さらに約50種の消滅の危機におかれている土壌に対する情報が集まった。これらの粗データを、昨年度までのデータベースに加えた。これらの情報は、様々な危機段階と土壌型が混ざり、その地点や消滅危惧の理由も様々である。それらをまとめると、大きく3種類にグループ化できた。第1は消滅の危機にある土壌群、第2は学術的に貴重な土壌群、第3は長年水田畑等で、特殊な試験を続けてきた試験地の土壌である。第1のグループに関しては、非常に早急に現地調査をし把握する必要がある。また学術的に貴重であり、消滅の危機にある土壌型もあり、残された時間は少ない。第2グループは、消滅の危機に直面してはいないが、保全の必要な土壌が多く含まれる。第3グループは国や、県の農業研究の方針が変更になり廃止の方向に進んでいるもので、長いものは戦前からの研究の累積があり、学術的にも貴重な土壌である。戦前からの履歴がはっきりしているために、環境関係の指標として使えるために、もっと多面的に対応する必要がありそうだ。これらの諸問題に検討を加えて整理し、消滅危惧土壌を中心とする粗データベースができた。今年度は、北海道の農業構造改良による消滅の危機にある土壌、や岩手県、長野県駒ヶ岳を中心に断面モノリスの採取と消滅危惧の現状調査を行った(調査旅費、消耗品)。調査研究の結果、相当の土壌型が、緊急な保全並びにモノリスを確保しなければならないことが明らかになった。
転写調節因子を介するDNA転写制御の機構を観る

1,メチルコランスレン(MC)刺激後のダイオキシン感受性培養肝細胞におけるダイオキシン受容体(AhR)及びHSP90の細胞内動態を免疫細胞化学-高感度化学発光反応検出系および蛍光抗体二重染色/レーザー顕微鏡法で調べた。はじめAhRとHSP90は細胞質の同一部位に検出されたが、FLET法では、分子結合による蛍光減衰は著明でなく、両分子の結合が疎であるか、または間に別の物質が介在する可能性が示された。メチルコランスレン(3MC)投与によりHSP90は細胞質に残存し、AhRは核に移行した。しかしながら、細胞質におけるHSP90の発光/蛍光強度は一時的にコントロール群の約30%程度またはそれ以下に減弱し、AhRと解離した後に構造が変化したか、または他の物質がHSP90抗体が認識するエピトープ付近に結合している可能性が示された。(調書記載の研究計画1-3項に対応)。また、この手法を用いて、内分泌細胞に特異的に発現するユビキチンリガーゼファミリーに属する新規蛋白の細胞内局在の解明に成功した(調書記載の研究計画3項の応用)。2,CYP2B2について、ラット肝細胞におけるこれらのタンパクおよびそのmRNAの高感度定量解析をおこない、CYP2B2分子の合成と小胞体膜リン脂質合成酵素の間に密接な関係があり、同種の転写因子によって両者の転写が制御されている可能性が示された(調書記載の研究計画2および3項に対応)。また、ローズベンガル色素を注入後に光酸化したラット脳を用い、光酸化回復過程における神経細胞のc-fos発現モデルを確立し、C-fos発現とプロモータ領域の構造変化との関係解明を試みた(調書記載の研究計画3項の応用)。3.CYP1A1 genomic DNAに発光レポーター(luciferase)遺伝子を繋いだハイブリッドDNAを作成し、転写因子結合後の転写活性をフォトンとして捉えることができた。次に、同DNAの5'-flankingフラグメントと転写調節因子とを、プロモータ制御因子(Sp1,CBP/p-300)の存在下または非存在下で反応させ、DNA構造の変化を光子検出と原子間力顕微鏡で調べたが、著明な変化は観察することができなかった。(調書記載の研究計画4-6項に対応)。1.ダイオキシン感受性の肝細胞由来株化培養細胞(H-4-II-E cell)の培養液にDMSOに溶解したメチルコランスレン(MC)を加えて経時的に採材し、Cy2標識抗ダイオキシン受容体(arylhydrocarbon receptor : AhR)抗体及びCy5標識し抗HSP90抗体を用いて2重染色の後に共焦点レーザー走査顕微鏡で観察した。MC刺激前、AhRとHSP90は細胞質に相互に近接して散在していた。MC刺激後10-20分でHSP90とAhRは離れてAhRは核に移行した。HSPが核に移行得るかどうかについては、現在、ECL試薬を用いた高感度化学発光反応(3を参照)に検出系を変えて検討中であるが、AHRが少なくともHSP90とヘテロマーを形成したまま移行してはいない可能性が示された。2.ラット肝細胞cDNA

ライブラリよりAhRのcDNAを得てPCRで増幅し、E.ColiにトランスフェクトしてインタクトなAhRおよび核移行シグナル領域を欠いたAhrを得た。核移行シグナルを欠いたAhRは核に移行しなかったが、その後の解析で、AhRの細胞内輸送がAhRのシグナルだけを認識しているのではなく、核への輸送タンパクを介している可能性が示された。現在、この機構の詳細について調査中である。3.高感度化学発光反応を用いた組織/細胞レベルにおける機能性タンパクおよび核酸(現段階ではm-RNAのみ)の光子計測による計測法をほぼ確立した(投稿準備中)。本方法を用いて、今回研究対象としたAhRを介するMC誘導型タンパクの転写産物であるCYP1A1およびその類縁の分子種CYP2B2について、ラット肝細胞におけるこれらのタンパク(酵素)およびそのmRNAの高感度定量解析をおこなった(論文作成中)。1.DMSOに溶解したメチルコランスレン(MC)を加えて培養したダイオキシン感受性肝細胞由来株化培養細胞(H4-II-E cell)を抗ダイオキシン受容体(AhR)抗体及び抗HSP90抗体と反応させ、ECL試薬を用いた高感度化学発光反応検出系を用いて細胞内動態を観察した。加えて、インタクトなAhRおよび核移行シグナル領域を欠いたAhRを用いてAhRの細胞内動態を調べた。AhRはHSP90と細胞質で解離し、核移行シグナルを欠いたAhRは核に移行せず、また、AhRの細胞内輸送が、HSP90解離後にAhRに新たに結合するタンパク(少なくとも2種)を介することが示された(論文作成中)。2.昨年度に開発した高感度化学発光反応および高感度定量的酵素組織化学法を用いた組織/細胞レベルにおける機能性タンパクおよびm-RNAの測定法を用いて、今回の研究対象としたAhRを介するMC誘導型タンパクの転写産物であるCYP1A1およびその類縁の分子種CYP2B2について、ラット肝細胞におけるこれらのタンパク(酵素)およびそのmRNAの高感度定量解析をおこなった。また、その結果を、これらのタンパクの局在の場である小胞体の量(電子顕微鏡レベルの形態計測法にて測定)および微細構造の変化(原子間力電子顕微鏡と電子顕微鏡にて観察)と比較した。その結果、CYP2B2について、CYP2B2分子の合成と小胞体膜リン脂質合成酵素の間に密接な関係があり、おそらく同種の転写調節因子によって両者の転写が制御されている可能性が示された。3.上記の生理的条件下での実験系に加えて、新たに組織酸化実験モデル系を用いて、転写制御とDNA高次構造変化との関係解明に着手した。実験モデルとしてローズベンガル色素を注入後に光酸化したラット脳を用い、まず、光酸化刺激からの回復過程における神経細胞のc-fos遺伝子発現を調べて解析対象とする脳領域を決定した。現在、同領域におけるc-fos発現と、発現時のC-fos遺伝子プロモータ領域の高次構造変化との関係を形態的手法を用いて解析中である。1)AhRのカルボキシル基末端に蛍光色素Cy5標識抗HSP90抗体およびCy3標識抗AhR抗体で肝の切片を二重染色後、レーザー顕微鏡でHSP90、AhRの局在を記録した。コントロール群ではAhRとHSP90は細胞質の同一部位に検出され、蛍光はほとんど重なった。この結果は、HSP90とAhRが細胞質においてヘテロダイマーを形成しているという仮説を支持する。
超平坦界面を有する半導体理想量子細線・井戸構造における励起子ダイナミクスの解明

へき開再成長(CEO)法とその成長表面での成長中断アニール法により原子平坦なヘテロ界面をもつGaAs/AlGaAs(110)量子井戸・T型量子細線構造を作製し、その量子構造内での励起子の光物性を顕微発光計測法により調べた。T型量子細線に関しては、昨年度に引き続き、1次元電子正孔系の高密度状態・多体効果を調べた。今回、スペクトログラフ手法を用いた空間・エネルギー分解分光測定を行うことで、発光スペクトルへのキャリア拡散・不均一空間分布の影響を極力減らし、より精密にその励起強度依存性(電子-正孔対密度依存性)を得ることが出来るようになった。これにより、これまで主張してきた励起子分子状態を経由した励起子状態から高密度電子正孔プラズマへのクロスオーバー的な移り変わりの様子をより詳細に示した。また、細線発光の飽和強度を元に、励起子分子形成、プラズマ形成のキャリア密度をそれぞれ3.6x10^3cm^<-1>、1.2x10^5cm^<-1>と見積もった。原子平坦界面量子井戸に関しては、励起子発光をプローブとして、その発光像(発光パターン)測定を行い、その空間分布の様子からヘテロ界面に保存される特異なアニール表面構造を原子層分解能で調べた。また、発光像と発光スペクトルとの対応を試料全体にわたって調べた。また、更なる高品質な超平坦界面量子井戸・細線構造実現のために、成長中断アニール条件の最適化をより進めた。650°Cへアニール温度を上げることで、成長時に形成された表面ラフネスが著しく減少し、平坦化が促進されることを確認した。また、AFM観測された結晶軸方向に依存した原子ステップエッジの特徴的形状とその解析から、ステップエッジの安定性を議論し、(110)面での平坦化メカニズムについての考察を進めた。へき開再成長(CEO)法とその成長表面での成長中断アニール法により原子平坦なヘテロ界面をもつ量子井戸・T型量子細線構造を作製し、その量子構造内での励起子の光物性を顕微発光計測法により調べた。まず、この方法で作製した原子平坦界面(110)GaAs量子井戸構造の顕微分光、画像計測を行い、量子構造内での励起子の空間分布を調べた。発光像には量子井戸の成長層厚に依存する特徴的な形状の発光パターンが観測され、アニール時(やへき開時)に形成された特異な表面構造がヘテロ界面に保存されることがわかった。また、その界面構造での量子化エネルギー分布の違いを反映した励起子流れ込み効果を観測した。観測された発光像から励起子の拡散長を評価した。また、T型量子細線構造の顕徴発光計測を行い、1次元励起子の多体効果について調べた。量子細線からの発光の励起強度依存性(電子-正孔対密度依存性)において、励起子状態(弱励起)から電子正孔プラズマ状態(強励起)への遷り変わりを観測し、その変化が相転移のような急激な変化ではなく、励起子分子状態を経由した連続的なものであることを明らかにした。一方で、超平坦界面を持つより高品質な理想量子井戸・細線構造の実現のために、成長中断アニール条件、特に、基板温度の最適化を行った。これまでの600°Cから650°Cへと基板温度を上げることで、以前のアニール表面で観測されていた周辺より23原子層高い島構造が消失し、平坦化が促進されることを確認した。その結果、より広い原子平坦表面を形成することに成功した。この最適化されたアニール条件を適用することで、構造中の励起子ダイナミクスをより効果的に評価できようになった。また、アニール表面で観測された成長層厚に依存した特徴的な表面構造から成長中断アニール時の表面平坦化メカニズムについての考察も行った。

また、AFM観測された結晶軸方向に依存した原子ステップエッジの特徴的形状とその解析から、ステップエッジの安定性を議論し、(110)面での平坦化メカニズムについての考察を進めた。
ものづくり経営における販売現場の役割に関する実証研究

本研究ではものづくり経営において販売現場が果たす役割を明らかにしその重要性を検証するために、日本の自動車販売店舗を対象に研究を行う。特に、効率的な組織づくりによるホワイトカラーの労働生産性向上や、顧客との継続的な関係構築によるアフターサービスからの安定収益獲得モデル等について示唆を得て、日本の製造業企業の競争力強化の一助となる研究を目指す。本年度は、研究代表者は台湾を訪問し複数の自動車販売業界の会社を訪問するとともに、台湾の国立成功大学で研究成果の発表を行った。台湾には日本の最大手の自動車メーカーが進出し大きなシェアを獲得している一方で、少子高齢化など日本と類似した問題に直面しているため、日本と台湾のディーラーを比較しつつ双方の歴史と現状について把握した。また、ゼミ生が関西圏の自動車ディーラーの代表取締役、本部役員、店舗、中部圏の自動車販売会社の取締役を訪問しヒアリングを行いその報告をした。日本の自動車の新車販売は1980年代には、600万台市場となり、1990年前後の最盛期に向けて拡大期を迎える。拡大期であるため新車をどれだけ売るかを重視し、サービスには目が届かない状況であった。90年代に入りバブル経済が崩壊すると、新車の販売台数も減ってきた。しかし、90年代までに店舗や人材に多額の投資をしてきたため、それを回収したり、どのように活用するのかが課題となった。90年以前は店舗のサービス課が客を呼び込む接客応対と技術的なメンテナンスとの分業体制がはっきりしていた。90年代以降は、新車販売の営業スタッフと店舗でのサービスを同じ担当が引き受けることが、顧客満足につながると考えられるようになった。自動車販売店舗は、営業担当者を送り出す営業所から、顧客を迎える店舗という意識への変化も生じた。2018年4月には、関西地方の自動車メーカーの拠点となっている工場への見学・質疑応答を行った。これは、自動車問題研究会の活動の一環として行ったが、この見学を通して面識を持ったメーカーの方から、滋賀県内のこのメーカーのディーラーをご紹介頂きゼミ生による調査の機会を得た。また、2018年5月には関東地方の自動車販売会社に務めていた実務家経験のある研究者と調査に関する相談や、相互の調査内容・計画の共有を行った。ここでは、自動車販売会社の営業スタッフの行動を詳細に観察し、どのような段階にどの程度の時間を掛けるのかを把握する重要性が示された。そして、価値を生み出す活動の流れを把握し、活動全体のうち、不要な作業を削り、必要だが直接価値を生むわけではない活動を最小化する必要がある。価値を生む作業の時間を伸ばし「打率」を高めることが必要だと思われる。また、8月には愛知県への工場見学を行った。この会社は現在は主にフォークリフトを製造しており、日本の大手自動車メーカーの親会社である。その工場の見学においては、生産を効率的・安全に行いコストカットをするとともにムダな原料の使用や廃棄を省き環境に貢献するための改善活動について把握した。ここでは、現場の作業員たちによる様々な改善の実例に触れ、小規模な改善から大規模な改善について知見を得た。また、改善活動の地盤を整え奨励するリーダーの役割の重要性を再確認し、それは販売活動にも通じるものがあると思われた。以上を通して、日本の自動車販売会社の現状や課題を多面的に把握した。自動車販売業は、メーカーによる独占的な販売チャネルの形成などにも見られるように独自の特徴を持った業界といえる。本年の調査結果はそこにおいてアンケートによる定量調査を行うにあたって、様々なコントロールすべき変数について把握する意味を持っていよう。本研究では「販売力」を計り、ホワイトカラーの生産性の向上やアフターサービス収益強化について引き続き研究をするが、同時に少子高齢化で悩む日本や台湾をはじめとする多くの国や地域が直面する重要な課題においても有用な対策を導き出せる研究にできることがこれまでの研究活動を通じてわかった。特に、営業スタッフとサービススタッフの協調やそれら店舗のスタッフによる店舗のサービスの改善の重要性は示されたものの、これらのメカニズムや相互作用について深掘りをする必要があることもわかった。少数の事例に基づく、本研究の現在までの成果の普遍性についてはさらなる検討が必要と思われるため、それに答える必要がある。また、従業員満足や顧客満足などステークホルダーとの関わりについても検討する必要がある。したがって、予定していたアンケート調査の実施を先延ばし、事例研究を続けることとした。本研究の3年目までの成果を踏まえつつ、アンケート調査に展開する前に、4年目においても事例の数を増やしながら事例研究を継続して行なう。その際に、営業力(販売力)や車の商品力という大枠を意識しつつ、マネージャーのリーダーシップやディーラーを取り囲む地域性などより具体的な項目を探索しその意味・重要性を検討していきたい。それら管理上の要因が、従業員満足や顧客満足などの中間成果を通して、売上や競争力などの最終成果にどのようにつながるのか、広く把握するための準備を行っていきたい。2016年度行った活動としては、以下の通りである。2016年4月から2017年1月まではヘラー研究室所属の大学院生の協力を得て横浜市内の様々なブランドの自動車ディーラー15店舗ほどを訪問し、その成果をヘラー研究室所属の木田世界著(2016)「サービス提供における従業員満足と顧客満足の両立に向けてー営業スタッフの協働に関する課題ー」(横浜国立大学大学院国際社会科学府経営学専攻修士論文)にまとめた。

2017年23月では本論文を協力したデーィラーの方々にフィードバックしながら加筆修正を行い、2017年度の2つの学会報告(5月米国、7月滋賀県)を準備した。以上の修士論文では、定性データを用いて横浜市に立地されたある自動車販売ディーラーの4つの店舗の比較事例研究を通して従業員満足と顧客満足の関係を調べました。ESとCSの不一致(片方高、片方低)が起こる理由を2つを発見した。1ES低、CS高のケース:従業員の協働が店長の方針で進められているため、個人中心で進めてきた営業スタッフにチームプレーが押し付けられESが下がった。2ES高、CS低のケース:スタッフの能力が高くスタッフ個人による対応の顧客評価や業績は高いが、協働によるサービス提供が不十分であった。また、メーカーからみるものづくり経営については、2016年10月27日に名古屋市の企業訪問を通して、トヨタ生産システムの源流やトヨタ生産システムの販売業への応用に関して調査を行った。同日に地元のトヨタ系の自動者販売会社の社長と面会しヒアリングを行った。以上のように、本年度は概ね当初の計画通り、文献収集や機材の準備、現場の訪問を通して研究の構想を深め、次年度に神奈川県の三大都市(横浜市・川崎市・相模原市)の自動車販売店舗に、ものづくり経営における販売現場の役割に関するアンケート調査の実行を実施するための準備を行った。本年度は概ね当初の計画通り、文献収集や機材の準備、現場の訪問を通して研究の構想を深めた。ディーラーによる自動車販売の歴史および地域社会への影響について調べ、報告を行った。地域社会第2次世界大戦前のGMは、世界中の自動車メーカーが採用している販売方法「ディーラーのフランチャイズ制度」に大きく貢献した。しかし、戦後のGMの最も栄えた60年代を経て、A.P.スローンが築いた経営コアフィロソフィー(すなわちディーラーを含む多様なステークホルダーをも重要視すること)を継承しないで、株主への金銭的なリターンに偏る経営に落ちた結末としてGMは2009年に倒産した。日本の自動車メーカーやディーラーへの教訓として自動車開発・製造・販売、いわゆる本業において従業員と顧客の満足を目当てにし、改善活動を続けて行なう必要があることを学会報告した。また、地域に貢献しながらディーラの従業員満足と顧客満足の両立は日本においてどのように追求できるか事例研究の成果を報告した。6月にISA所属のSouth Carolina大学のGerald McDermott教授との会議を東京に行った。アメリカの自動車産業や自動車ディラーの状況を教えてもらった。ヘラー研究室所属の博士課程後期の木田世界さんが11月に首都大学大学東京で行われた組織学会の年次大会に、12月に現代経営学勉強会に参加した。自動車販売店舗を20箇所以上訪れた。自動車ディラーシステムの生成や発展時期を調査した。自動車問題研究会では自動車販売について自動車業界の様々な関係者と多方面からの意見交流を行った。自動車販売に影響を与えるプロダクトインテグリティ(製品の一貫性)は、自動車およびその部品の開発・製造と深く影響しているため自動車メーカーと部品サプライヤーの工場見学も行った。
複数の疾患バイオマーカー同時測定による妊娠高血圧腎症の病態生理評価法の確立

妊娠高血圧症候群(HDP)は妊娠20週以降の妊婦に合併する高血圧症であり、発症前早期診断法の開発が望まれている。この目的のために我々はHDP患者血清中の生体内ペプチドに着目し、疾患と相関して変動するペプチドを探索した。探索によって得られたペプチド群が実際に多くのHDP患者において疾患と相関しているかを確認する手法として我々はマルチプルリアクションモニタリング法と呼ばれる高感度質量分析測定法を用いて各ペプチドの一斉定量系を確立した。この方法により本疾患の診断法の効率化が期待される。妊娠高血圧症候群は母児双方の生命に重大な影響を及ぼす産科重要疾患の一つであるが、その病態生理は不明の点が多く早期診断法もない。本研究では妊娠高血圧症候群をより正確にモニターできる疾患バイオマーカーを確立するため、疾患により変動する血中ペプチドをバイオマーカー候補として同定し、その測定法を確立することを目的とする。平成27年度は先行研究により得られていた疾患マーカー候補ペプチドのうち、アミノ酸配列の決定されている7種類のペプチドについて質量分析装置を用いた定量法の検討を行った。はじめに各ペプチドの標準品を化学合成した。質量分析装置によるペプチドの定量測定にはマルチプルリアクションモニタリング法が適しているため、各ペプチドのプリカーサーイオンおよびプロダクトイオンの質量値パラメーターをMS/MS測定により決定した。このパラメーターを用いることにより、合成した各ペプチド標準品を検出できることを確認した。次に、複数のペプチドを一斉分析するための方法として質量分析装置に導入する前段階に用いる液体クロマトグラフィーでの分離条件を検討した。逆相C18カラムを用いた場合、7種類のペプチドのうち、5種類のペプチドについては順調に条件を決定できたが、2種類のペプチドについてはカラムに保持できなかった。そのため、引き続きクロマトグラフィー条件の検討を行うこととした。並行して、各ペプチドを血液試料から調製する条件を検討した。健常人血清からタンパク質除去処理を行った画分において、測定条件が決定した各ペプチドが存在することが確認された。しかし、回収率などの検討は現段階ではできておらず、引き続き検討することとした。以上のように、今年度は疾患マーカー候補ペプチドの一斉分析系を構築するための諸条件が決まりつつあり、次年度以降の研究計画につながる実績を得ることができた。本研究の年次計画では、(I)妊娠高血圧患者血清の採取と病態の把握、および(II)血清ペプチド画分の調製法の確立を行い、さらに(III)妊娠高血圧診断マーカー候補ペプチドのマルチプルリアクションモニタリング測定条件の決定のための標準ペプチド試料の合成と未同定候補ペプチドの配列決定、および、LC-MS/MSによる各ペプチドのマルチプルリアクションモニタリング法の測定条件決定を、H27年度からH28年度半ばにかけて行う予定としていた。これらの研究計画のうち、(I)患者血清の採取と病態の把握については順調に進行している。(II)血清ペプチド画分の調製法の確立では、各ペプチドを検出できる試料を調製することはできたが、異なる除タンパク法を比較検討することにより、対象ペプチド抽出条件のさらなる最適化を行っている。(III)については配列が決定している標準ペプチド試料はすでに合成済みであり、今後配列を決定するペプチドについては順次合成を進める予定である。以上のように、本研究は当初の計画に対しておおむね順調に進展している。平成28年度は、前年度に分析条件の検討を始めた7種類の疾患マーカー候補ペプチドについて質量分析装置を用いた定量法を確立した。また、血清からのマーカー候補ペプチドの抽出法を検討した。まず、前年度に合成した各疾患マーカー候補ペプチドの標品を用い、マルチプルリアクションモニタリング(MRM)測定法を用いた液体クロマトグラフィー/質量分析(LC-MRM/MS)により各ペプチドの定量が可能であることを確認した。その際、7種類のペプチドの感度を最適化するためには、液体クロマトグラフィー(LC)の条件により二分することが有効であった。今年度に新たに合成した安定同位体標識の各疾患マーカー候補ペプチド標品を内部標準品として加えることで、各ペプチドの絶対定量が可能であることを確認した。各ペプチドを血液試料から調製する条件を検討し、試料前処理用のデバイスの変更、血清試料使用量の縮減、またLC-MRM/MS分析条件の改善により、感度の低かったペプチドの抽出・検出効率が改善された。以上のように、平成28年度は疾患マーカー候補ペプチドの一斉分析系を構築するための諸条件が決まり、次年度以降に実検体の測定を行うための準備がほぼ完了した。本研究の年次計画では、平成28年度までに(I)妊娠高血圧症候群患者血清の採取と病態の把握、(II)安定同位体標識ペプチドを用いたMRM分析法の確立、(III)血清試料の前処理法の確立、および(IV)MRM法を用いた疾患マーカー候補ペプチドの一斉定量解析系の構築を行う計画であった。研究実績の概要に記載した通り、これらの研究計画はほぼ順調に進んでいる。並行した計画として7種類の疾患マーカー候補ペプチドに加えてさらに可能であれば候補ペプチドを増やすことを目標としていたが、それは叶わなかったことから、今後はこの7種類のペプチドに絞って解析を行う予定である。

妊娠高血圧症候群は母児双方の生命に重大な影響を及ぼす産科重要疾患の一つであるが、その病態生理はいまだに不明な点が多く、早期診断法も開発されていない。本研究では妊娠高血圧症候群の発症と予後をより正確に診断可能な疾患バイオマーカーを確立するため、疾患によって変動する血中ペプチドをバイオマーカー候補として同定し、その測定法を確立することを目的とする。平成29年度は、前年度までに構築したバイオマーカー候補ペプチド定量系のさらなる改良と、実際の血清検体を用いて試料調製・分析を行った場合に生じた問題点を元に血清からのペプチド抽出方法の改善を行った。まず、本研究で分析対象としたバイオマーカー候補ペプチドには親水性ペプチドが含まれていたことから、試料前処理用のデバイスを親水性ペプチドが回収できるものを併用するように変更し、それに合わせてペプチドの逆相カラムへの保持条件の再検討を行い、LC-MRM/MS分析条件を一部改変して高感度化を図った。実際の血清検体ではタンパク濃度や脂質の量、濁度などさまざまであり、検体によって当初用いていた変性除タンパク過程で予想外に充分な沈殿が生じない場合があった。そのため、変性除タンパク時の条件をより強い条件に変更し、ペプチド回収操作を効率化した。以上の条件のもと、妊娠高血圧症候群の患者血清、および健常妊婦血清について現在各ペプチド量の定量測定を行っているところである。本研究の成果はすでに発表済みのものに加え、さらに進めた内容について現在論文投稿準備中である。妊娠高血圧症候群(HDP)は妊娠20週以降の妊婦に合併する高血圧症であり、発症前早期診断法の開発が望まれている。この目的のために我々はHDP患者血清中の生体内ペプチドに着目し、疾患と相関して変動するペプチドを探索した。探索によって得られたペプチド群が実際に多くのHDP患者において疾患と相関しているかを確認する手法として我々はマルチプルリアクションモニタリング法と呼ばれる高感度質量分析測定法を用いて各ペプチドの一斉定量系を確立した。この方法により本疾患の診断法の効率化が期待される。今後も当初の研究計画にしたがって研究を遂行する予定である。現在達成されていない項目は、配列未同定ペプチドのアミノ酸配列決定である。配列を決定するには該当するペプチドを抽出して解析する必要があるが、その方法はまだ確立されていない。そのため、種々の抽出法によりペプチド試料を調製し、その試料からデータ依存的MS/MS測定を行い、該当する質量数に相当するペプチドを同定することとする。H28年度中には可能な限りの種類の診断マーカー候補ペプチドについて測定系を確立し、H29年度初頭には予定通り患者検体の測定を始められるよう計画する。
ディジタル制御系のポスト・モダン周波数応答理論

本研究は,近年の活発な研究によってその基礎理論が構築された,ディジタル制御系のサンプル点間応答を直接考慮した解析・設計理論(サンプル値系の制御理論)について,これをさらに発展させることを目的とするものである.とくに,サンプル値系の周波数応答の概念が多くの制御問題に対して見通しのよい統一的な道具立てを与えることに着目し,この概念を軸にしてサンプル値系におけるさまざまな重要問題を取り上げ,その解答を与えたことに大きな成果があると考えられる.サンプル値系の周波数応答を議論するための理論的基盤としては,リフティングと呼ばれる考え方に基づくものと,Rオペレータと呼ばれる考え方に基づくものがある.研究の前半では,後者に基づいた議論を主に行い,サンプル値系のロバスト安定問題,ならびに絶対安定問題などの非線形問題について重要な理論的成果を得た.これらに引き続き,後半では,周波数応答のゲイン(ノルム)や特異値を計算するための方法について検討を行った.これらを計算することができれば,・サンプル値系のボード線図を描くことができ,工学上,極めて有用であるが,そのためには無限ランクのオペレータの特異値を計算する必要がある.本研究では.FRオペレータならびにリフティングの考え方に基づき,これらの特異値を効率よく計算するための方法を与えた.現在,これらの方法をさらに改善するべく,研究を進めている段階であるが,これまでにすでに得られている方法はすでにMATLABで利用可能な形にまで整備されており,実用上,十分に利用可能なレベルにまで達していると考えられる.本研究は,近年の活発な研究によってその基礎理論が構築された,ディジタル制御系のサンプル点間応答を直接考慮した解析・設計理論(サンプル値系の制御理論)について,これをさらに発展させることを目的とするものである.とくに,サンプル値系の周波数応答の概念が多くの制御問題に対して見通しのよい統一的な道具立てを与えることに着目し,この概念を軸にしてサンプル値系におけるさまざまな重要問題を取り上げ,その解答を与えたことに大きな成果があると考えられる.サンプル値系の周波数応答を議論するための理論的基盤としては,リフティングと呼ばれる考え方に基づくものと,Rオペレータと呼ばれる考え方に基づくものがある.研究の前半では,後者に基づいた議論を主に行い,サンプル値系のロバスト安定問題,ならびに絶対安定問題などの非線形問題について重要な理論的成果を得た.これらに引き続き,後半では,周波数応答のゲイン(ノルム)や特異値を計算するための方法について検討を行った.これらを計算することができれば,・サンプル値系のボード線図を描くことができ,工学上,極めて有用であるが,そのためには無限ランクのオペレータの特異値を計算する必要がある.本研究では.FRオペレータならびにリフティングの考え方に基づき,これらの特異値を効率よく計算するための方法を与えた.現在,これらの方法をさらに改善するべく,研究を進めている段階であるが,これまでにすでに得られている方法はすでにMATLABで利用可能な形にまで整備されており,実用上,十分に利用可能なレベルにまで達していると考えられる.本研究は,ディジタル制御系の周波数領域における解析・設計手法としてすでに我々が基本的成果を得ているFRオペレータに基づく新しい理論をさらに発展させ,理論的観点からも実用的観点からも,より完成度の高いものとすることを目的としている.3年間の研究期間の初年度である本年度は,以下のような研究成果を得た.1.FRオペレータに基づくボード線図描画アルゴリズムの導出とそのMATLAB上での実装2.非線形ディジタル制御系の取り扱いのための基礎の構築その詳細は概ね以下の通りである.1.はFRオペレータの理論に基づき,(サンプル点間応答を考慮した意味での)ディジタル制御系のボード線図を描画する方法についての成果である.ボード線図は,実際的な諸問題を検討する上で,直観的な判断材料を与える基礎的な概念であるが,その描画に際しては,本質的に無限次元性を伴う厄介な計算が必要であった.本研究では,有限次元での計算によってその近似値(下界値・上界値)を得る方法を導くとともに,近似の次数を大きくすることで下界値と上界値が互いに漸近し,したがって所望の値が任意の精度で計算できることを明らかにしている.この方法に基づく数値計算アルゴリズムをMATLAB上に実装し,ボード線図が容易に描画できるようになったことで,実用性が高まった.一方,2.は次年度以降の研究を行う上での理論的基盤を整備するための研究である.具体的には,非線形ディジタル制御系も対象として,ロバスト安定性やロバストパフォーマンスの問題を取り扱うための基礎固めを行い,サンプル点間応答を考慮したディジタル制御系におけるメイン・ループ定理とでも呼ぶべき成果を得た.本研究は,ディジタル制御系の周波数領域における解析・設計手法としてすでに我々が基本的成果を得ているFRオペレータに基づく新しい理論をさらに発展させ,理論的観点からも実用的観点からも,より完成度の高いものとすることを目的としている.3年間の研究期間の初年度である昨年度は,以下のような研究成果を得ていた.1.FRオペレータに基づくボード線図描画アルゴリズムの導出とそのMATLAB上での実装2.非線形ディジタル制御系の取り扱いのための基礎の構築本年度の研究により,これらの成果をさらに大きく発展させることができた.とくに,1.は,(サンプル点間応答を考慮した意味での)ディジタル制御系のボード線図を描画する方法を与えたものであり,工学的意味は大きいが,数値計算の観点からは,極端に大きなサイズの行列を扱う必要が生じる場合があり得るため,必ずしも望ましくない点が残されていた.

本年度は,この難点に対して,ボード線図上の各点の近似値として,上界および下界値を効率よく計算する方法を与えるとともに,それらが真値に十分近いため,実用的にはこの近似計算法で十分な場合が多いと考えられることを明らかにした.この方法により,計算時間を短縮させることができるとともに,信頼性の高い計算結果を得ることができるようになった.一方、2.に関しても,非線形ディジタル制御系の安定性に関する基本的結果を得るとともに,扱える非線形性のクラスを拡張することにより,より実用的な成果とすることができた.本研究は,近年の活発な研究によってその基礎理論が構築された,ディジタル制御系のサンプル点間応答を直接考慮した解析・設計理論(サンプル値系の制御理論)について,これをさらに発展させることを目的とするものである.とくに,サンプル値系の周波数応答の概念が多くの制御問題に対して見通しのよい統一的な道具立てを与えることに着目し,この概念を軸にしてサンプル値系におけるさまざまな重要問題を取り上げ,その解答を与えたことに大きな成果があると考えられる.サンプル値系の周波数応答を議論するための理論的基盤としては,リフティングと呼ばれる考え方に基づくものと,FRオペレータと呼ばれる考え方に基づくものがある.研究の前半では,後者に基づいた議論を主に行い,サンプル値系のロバスト安定問題,ならびに絶対安定問題などの非線形問題について重要な理論的成果を得た.これらに引き続き,後半では,周波数応答のゲイン(ノルム)や特異値を計算するための方法について検討を行った.これらを計算することができれば,サンプル値系のボード線図を描くことができ,工学上,極めて有用であるが,そのためには無限ランクのオペレータの特異値を計算する必要がある.本研究では,FRオペレータならびにリフティングの考え方に基づき,これらの特異値を効率よく計算するための方法を与えた.現在,これらの方法をさらに改善するべく,研究を進めている段階であるが,これまでにすでに得られている方法はすてにMATLABで利用可能な形にまで整備されており,実用上,十分に利用可能なレベルにまで達していると考えられる.
直線磁化プラズマにおける乱流・流れ・孤立渦の3体系ダイナミクスの解明

本研究では、直線磁化プラズマ乱流実験において、乱流(ドリフト波)と流れ(帯状流)に加えて乱流よりも寿命が長く、周方向及び径方向にローカルな構造である“孤立渦"間のダイナミクスを解明することを目標としている。平成30年度では、以下の成果を得た。孤立渦の減衰において、新たに、乱流よりも寿命が短く、周方向及び径方向にローカルな構造である“飛沫"構造が関与する可能性が得られた。“飛沫"の2次元構造を新規解析手法で導出し、孤立渦と同じ周方向及び径方向に形成することを明らかにした。バイスペクトル解析により、“飛沫"は、孤立渦と非線形結合していることがわかった。また、孤立渦と“飛沫"の振幅の変化を比較したところ、“飛沫"は孤立渦の形成より遅れて生成することがわかった。加えて、孤立渦は内向きの粒子輸送に対して、“飛沫"は外向きの粒子輸送となることがわかった。これらにより、“飛沫"は孤立渦による速度勾配に起因する不安定性により励起される可能性が得られた。不安定性の候補をいくつか検討したが、いずれも孤立渦を減衰する効果を持つ不安定性であり、“飛沫"は孤立渦の減速に寄与する役割をもつと考えられる。平成29年度までの成果で、孤立渦は流れを加速し、また流れは乱流を介して孤立渦を形成することが明らかになっている。これは、流れおよび孤立渦構造がより強くなる過程を示している。本研究成果によって、孤立渦の減速過程の可能性が得られたことにより、孤立渦が流れに与える影響が“飛沫"の形成で小さくなり、また、流れが乱流を介して孤立渦の形成を弱める過程が明らかになった。平成30年度は、乱流・流れ・孤立渦構造に加え、新たに飛沫構造を加えた解析を行い、バイスペクトル解析や構造ごとの時空間構造の変化を観測することで構造間の駆動・減衰、輸送を得た。特に、平成30年度では、平成29年度の成果で得た流れと孤立渦の構造形成を強める過程とは逆の、流れと孤立渦の構造形成を弱める機構が得られたことにより、乱流・流れ・孤立渦構造間の因果関係の描像がより明らかとなった。これは、本研究目標へ向けて大きな進展となった。加えて、無摂動な手法である、レーザー誘起蛍光法(LIF法)を用い、描像の検証と定量化へ向けた観測を進めている。実験の効率的な運用のため、レーザー伝送計の見直しや、散乱光計測フィルターの交換などを行った。しかし、乱流揺動測定に必要なS/Nが現状得られていないため、直接計測であるマッハフローブを校正する形で乱流測定を行うこととし、校正のための初期データを得た。一方で、LIF法の改良を行なう中で、大幅なS/N改善のためトモグラフィーの技術を応用した新規LIF測定システムの考案を行った。以上を踏まえ、実験において遅れはあるものの、本研究目標達成に向けては順調であるため、おおむね順調に進展していると判断した。今後は、平成30年度の成果を元に、乱流・流れ・孤立渦及び飛沫間のダイナミクスの系統的な整理を行う。別途、マッハプローブによる乱流測定結果を無摂動な手法であるLIF法を用いて校正し、得られた成果の検証を行なう。また、新規LIF法により乱流揺動測定による直接検証及び定量化を試みる。得られた成果は学術論文として発表すると同時に学会等で発信していく。本研究では、直線磁化プラズマ乱流実験において、乱流(ドリフト波)と流れ(帯状流)の2体系に、“孤立渦"を加えた3体系のダイナミクスを解明することを目標としている。平成29年度は、3体系における孤立渦の役割を明らかにする為に、既存の計測装置であるラングミュアプローブ(径方向多点プローブ、周方向多点プローブ)を用いて、外部制御パラメータである磁場強度と中性粒子ガス圧及びプラズマ生成パワー制御を行い、種々の乱流状態について系統的に観測を行った。加えて、無摂動な手法である、レーザー誘起蛍光法(LIF法)の開発を行った。開発においては、ヨウ素セルを用いたレーザー波長計測の高時間分解能化と蛍光計測における受光フィルターの狭帯域化及び高透過光ファイバーの採用、アイソレーションアンプの採用により、ノイズ低減・高信号化を行い、S/N(信号とノイズの強度比率)の改善を行った。さらに、静電プローブを持いた流れ計測手法である、マッハプローブをLIF法で補正可能な位置に新たに設置した。具体的な成果として、孤立渦の生成・消滅が、主に乱流とその高調波が位相変調されることに起因することが明らかになった。位相変調は、流れの変動と同期していることも分かった。乱流の振幅も流れによって変調される結果が得られたが、振幅変調だけでは、孤立渦の生成・消滅を説明できなかった。これにより、流れによって乱流の位相変調を引き起こすことが、孤立渦の生成・消滅に重要な役割を果すことが明らかとなった。本成果を発表した、Plasma Conference 2017において、2017年度プラズマ・核融合学会賞若手学会発表賞を受賞した。本研究計画では、乱流(ドリフト波)・流れ(帯状流)・孤立渦の3体系における孤立渦の役割を明らかにする為に、3体系のエネルギー分配則、3者間の駆動・減衰力の変化、孤立渦の直接的な輸送への寄与を求める。

また、孤立渦の生成・消滅時における、これらの時間的変化を得ることで3者間の因果関係を明らかにする。平成29年度は、3体系における孤立渦の役割の変化を明らかにするため、外部制御パラメータスキャンにより、乱流状態が異なる状態について系統的に観測を行った。現在、観測結果を用いて解析を進めている。特に、上記で示した通り、孤立渦の形成・消滅が、流れによって乱流とその高調波の位相変調を引き起こすことに起因することが明らかになり、3者間の因果関係解明へ大きな一歩となった。一方で、揺動は、中心部においてラングミュアプローブによる摂動の影響を受ける可能性があるので、無摂動な手法で検証を行う為、レーザー誘起蛍光法(LIF法)の開発を行った。乱流揺動を測定するために、レーザー波長測定の高速化や受光系の外部ノイズ削減により、高時間分解能化とS/N改善を行った。マッハプローブによる乱流揺動測定も同時に可能とするため、マッハプローブの設置を行った。以上を総合し、おおむね順調に進展していると考えている。本研究では、直線磁化プラズマ乱流実験において、乱流(ドリフト波)と流れ(帯状流)に加えて乱流よりも寿命が長く、周方向及び径方向にローカルな構造である“孤立渦"間のダイナミクスを解明することを目標としている。平成30年度では、以下の成果を得た。孤立渦の減衰において、新たに、乱流よりも寿命が短く、周方向及び径方向にローカルな構造である“飛沫"構造が関与する可能性が得られた。“飛沫"の2次元構造を新規解析手法で導出し、孤立渦と同じ周方向及び径方向に形成することを明らかにした。バイスペクトル解析により、“飛沫"は、孤立渦と非線形結合していることがわかった。また、孤立渦と“飛沫"の振幅の変化を比較したところ、“飛沫"は孤立渦の形成より遅れて生成することがわかった。加えて、孤立渦は内向きの粒子輸送に対して、“飛沫"は外向きの粒子輸送となることがわかった。これらにより、“飛沫"は孤立渦による速度勾配に起因する不安定性により励起される可能性が得られた。不安定性の候補をいくつか検討したが、いずれも孤立渦を減衰する効果を持つ不安定性であり、“飛沫"は孤立渦の減速に寄与する役割をもつと考えられる。平成29年度までの成果で、孤立渦は流れを加速し、また流れは乱流を介して孤立渦を形成することが明らかになっている。これは、流れおよび孤立渦構造がより強くなる過程を示している。本研究成果によって、孤立渦の減速過程の可能性が得られたことにより、孤立渦が流れに与える影響が“飛沫"の形成で小さくなり、また、流れが乱流を介して孤立渦の形成を弱める過程が明らかになった。平成30年度は、乱流・流れ・孤立渦構造に加え、新たに飛沫構造を加えた解析を行い、バイスペクトル解析や構造ごとの時空間構造の変化を観測することで構造間の駆動・減衰、輸送を得た。特に、平成30年度では、平成29年度の成果で得た流れと孤立渦の構造形成を強める過程とは逆の、流れと孤立渦の構造形成を弱める機構が得られたことにより、乱流・流れ・孤立渦構造間の因果関係の描像がより明らかとなった。これは、本研究目標へ向けて大きな進展となった。加えて、無摂動な手法である、レーザー誘起蛍光法(LIF法)を用い、描像の検証と定量化へ向けた観測を進めている。実験の効率的な運用のため、レーザー伝送計の見直しや、散乱光計測フィルターの交換などを行った。しかし、乱流揺動測定に必要なS/Nが現状得られていないため、直接計測であるマッハフローブを校正する形で乱流測定を行うこととし、校正のための初期データを得た。
神経ガス中毒における標的タンパク質の構造解析と死因解明への応用に関する研究

本年度は、神経ガス曝露を証明する目的で、昨年度のサリンアダクトの分析に引き続き、ヒト血液中のブチリルコリンエステラーゼ-神経ガスアダクトのLC-MS/MSによる分析法を検討した。精製ヒトブチリルコリンエステラーゼ(BuChE)に神経ガスを添加し、アダクトを形成した。SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動の後BuChEに相当する86kDa付近のバンドを切り出し、キモトリプシンを用いてin gel digestionを行い、その後、Micromass Q-TOF2およびAgilent LC-MSD Trapを用いたLC-MS分析を行った。サリン、ソマン、VXアダクトの消化物のLC-MSの結果、m/z1068.5,1054.5,1110.5の抽出イオンクロマトグラム(EIC)上、22.3分、20.1分、26.2分にそれぞれ新たにピークが観測され、アルキルメチルホスホニル化したペプチド断片と認められた。ソマンアダクトについてはm/z1026.5のEIC上、21.9分にもピークが観測され、aging産物であると認められた。MS/MSスペクトルを測定したところ、プレカーサイオンを除いてほぼ同一のフラグメントパターンが得られた。このことから、MS/MS分析のコリジョンに際しては、まずアルキルメチルホスホン酸(またはメチルホスホン酸)部位が脱離することが判明した。ヒト血漿にVXを加え、精製を行った試料からもVX付加ペプチドを検出した。血漿に低濃度のVXを加え部分的にBuChE活性を阻害した試料を作成し、5mLの血漿試料から精製を行った場合に、VXアダクトペプチド断片が検出可能なVXの濃度およびその際の最低検出可能活性阻害度(Minimum Detectable Inhibition Level)を概算したところ、約2×10-8M、1%活性阻害であった。本年度は、化学兵器であるサリンによる曝露を証明する目的で、ヒト血液中のブチリルコリンエステラーゼ-サリンアダクトのLC-MS/MSによる分析法を確立した。ヒト血漿より単離した精製ヒトブチリルコリンエステラーゼ(BuChE)10μgにサリン100ngを添加し、サリン-BuChEアダクトを形成した。サリン処理したBuChEおよび未処理BuChEそれぞれをSDS-PAGEにかけ、BuChEに相当する86kDa付近のバンドを切り出した。切り出したゲルについて、キモトリプシンを用いてin gel digestionを行い、その後、Micromass Q-TOF2を用いたLC-MS分析を行った。その結果、サリン未処理の試料からは活性中心のセリン残基を含む断片(m/z949)が、また、サリン処理のものからはサリンが結合し、質量数が120増加したペプチド断片(m/z1069)がそれぞれ検出、同定された。さらに、これらのペプチドのLC-MS/MS分析を行い、アミノ酸一次構造を解析した。さらに、実際の試料を想定し、ヒト血漿(2mL)にサリン(100ng)を加えてアダクトを形成し、プロカインアミドアフィニティクロマトグラフィーおよびSDS-PAGEを用いてBuChEの精製を行い、得られた試料について上記の方法に従ってLC-MS分析を行った。その結果、精製BuChE-サリンアダクトと同様のアダクトに相当するペプチド断片(m/z1069)が確認され、実試料へも応用が可能であると考えられた。
16世紀トスカーナ大公国の祝祭と都市-1589年の婚礼祝祭と大公国内の都市整-

本研究は1589年の大公フェルディナンド1世とクリスティーナ・ディ・ロレーナの婚礼に際する婚礼巡幸と新婦が経由した都市における空間整備の関係について、都市史的観点から分析した。その結果、領域的視野をもった大公の領域設計において重点的な整備をなされた第二の首都ピサ、そして宮廷移動のインフラとしての役割を担ったヴィラ・アンブロジャーナにおいて、婚礼巡幸と空間整備の緊密な相関関係を見いだすことができた。【内容】・調査の時期:平成21年9月(2週間)・調査地:マルセイユ、フィレンツェ1589年にフェルディナンド1世と結婚したクリスティーナが、フィレンツェに至るため訪問都市における本研究において、本年度は旅の起点となったマルセイユ、終点であるフィレンツェで史料収集を行った。マルセイユ歴史図書館においては16世紀マルセイユで刊行された歴史書、都市図、古地図を収集した。当時のマルセイユの記録を所蔵するエクス・アン・プロバンスのアルボー図書館においては、1589年のクリスティーナの来訪を記す希少史料であるR. Ruffi, Memoiresを入手した。フィレンツェでは、Gualterotti, R.やPavoni, G. Rossi, B.といった1589年の祝祭に関して詳細な記述を残した複数の記録を入手した。【意義】・マルセイユの史料を分析することによって、1589年当時のマルセイユの政治的、宗教的混乱、クリスティーナの来訪が公的文書に記されていないことが明らかになった。・1589年当時のマルセイユの古地図、絵図を得たことで、クリスティーナの市内への入市経路、出帆までの流れの分析が可能となった。・1589年のフィレンツェ側が出版した史料から、1589年の婚礼に関するフィレンツェ側の政治的意向、全体計画を掌握することが可能となった。【重要性】今年度の調査は、トスカーナ大公国外のフランス側の都市において、クリスティーナの婚礼祝典の捉えられ方を明らかにするために基盤となる調査であった。当時のマルセイユの政治的背景から、クリスティーナの来訪が公文書に記録されていなかった点は注目すべきであり、トスカーナ側と、フランス側、そしてマルセイユ側が、各々どのような立場でこの婚礼を捉えていたかを再確認することができた。【内容】・調査の時期:平成23年2月(3週間)・調査地:フィレンツェ、ピサ、リヴォルノ1589年にフェルディナンド1世と結婚したクリスティーナが、フィレンツェに至るため訪問都市における本研究において、本年度はピサ、リヴォルノを対象に史料収集を行った。ピサは1540年代以降、コジモ1世によって都市の復興整備が進められ、経済、産業、軍事の拠点としてトスカーナ大公国第2の都市として重要視された都市であり、リヴォルノは特にフェルディナンド1世が力を入れた海港都市である。ピサでは、1589年にフィレンツェに向かう途中、ピサで行われた結婚祝祭を詳細に記録したCarvoni,G.の第一次史料を入手し、その際、祝祭の中心となったピサの伝統イベント、ジョコ・デル・ポンテCioco del Ponteに関する史料を渉猟した。リヴォルノでは、フェルディナンドによる海港整備に関する資料を得たほか、16世紀にピサとリヴォルノ両都市間をつなぐ主要運河であったナヴィチェッリ運河の現況を確認した。【意義】・ピサにおける1589年の結婚祝祭に関する史料を入手し、川と橋という都市形状と祝祭との関係に着目、分析を行ったこと。・リヴォルノにおける1589年の結婚祝祭の記録は、史料が極めて乏しく、その限界から1589年の結婚祝祭は開催されておらず、訪問都市とはいえ単なる降船港であった可能性が高いことが示されたこと。【重要性】ピサにおける1589年の結婚祝祭記録は、トスカーナ大公国内のフィレンツェ以外の都市における記録として極めて希少なものであり、この分析を通じて、トスカーナ大公国における都市祝祭の差異を浮かび上がらせることができた。特に、ジョコ・デル・ポンテというピサの伝統祝祭が、新たな支配者の慶事に際して用いられたことは、都市支配と整備に関する新たな視点をもたらしたことは、本研究課題において重要である。【具体的内容】本研究は、トスカーナ大公国における地方都市の整備および領域支配を婚礼巡幸の面から明らかにすることを目的にしている。対象としているのは1589年のフェルディナンド1世との婚礼に際し、新婦クリスティーナがフランスからフィレンツェに至るまでに巡幸した都市である。今年度の調査都市は1)カッシーナ、2)ポンテデラ、3)サン・ロマーノ、4)エンポリ、5)アンブロジャーナ、6)ポッジョである。これら6つの小都市は、内陸フィレンツェと海港都市ピサを結ぶアルノ川流域に立地しており、現地資料からも16世紀以降のアルノ川流域における治水、物流、水車施設などを確認することができた。なかでも、新婦が宿泊した2つのヴィラのうち1つであるヴィラ・アンブロジャーナの資料、現地調査を進めることができた。【意義】