hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
骨髄間質細胞移植による緑内障性視神経障害治療の試み

本研究では,緑内障眼における障害組織の再構築および神経保護を目的として、緑内障モデルラット眼において移植骨髄間質細胞が生着、分化、そして網膜神経節細胞(RGC)死の阻止効果があるか否かについて検討した。成熟ラットの片眼に上強膜静脈結さつによる緑内障モデルを作製、僚眼をコントロールとし、種々のステージの緑内障眼、コントロール眼の硝子体中にGFP標識骨髄間質細胞(BMSC)またはphosphate buffered saline(PBS)を注入した。BMSC注入後1週において、多くの移植細胞は内境界膜部に生着、一部は網膜神経節細胞(RGC)層に認められたが視神経乳頭部内には認められなかった。また免疫組織学的検討にて、移植細胞は間葉系細胞のマーカーであるCD54は発現していたが、主要なニューロン、グリア特異的マーカーを発現しておらず明らかな分化は認められなかった。Fluorogold retrogradely labelling法によるRGC数の解析ではBMSC移植緑内障眼で明らかにRGC数減少が抑制されていた。BMSC移植による神経保護効果の検討のために、注入後2週、4週で各種成長因子の発現を解析したところ移植BMSCでは種々の成長因子が発現されておりReal-time PCRによる定量的解析にてBMSC移植緑内障眼においてはPBS注入緑内障眼に比較して有意なbFGFおよびCNTFの発現の増加が認められた。骨髄間質細胞はそのtrophic effectによりRGCの細胞死を遅延させることが示唆され、骨髄間質細胞移植は緑内障眼において神経保護治療として有用である可能性があると考えられる。今年度は緑内障モデルラット眼に対する未分化骨髄間質細胞移植効果について検討することを目標とした。緑内障モデル眼、および正常眼の硝子体中にGFP標識未分化骨髄間質細胞を注入、注入後1w8wで眼球を摘出、flat mount retinaおよび凍結切片にて移植細胞の生着部位、期間、細胞分化について組織学的に検討した。移植細胞は、正常眼に比較して緑内障眼でより多く網膜に生着する傾向が認められ、移植後1週間以降、網膜内境界膜(ILM)表面および、網膜神経節細胞層(GCL)に限局して存在したが、移植後8週間でほぼGFP陽性の移植細胞は認められなくなった。移植のもうひとつのターゲットである視神経乳頭部には移植細胞は認められなかった。視神経移植細胞の神経幹細胞、ニューロン、グリア、網膜神経節細胞への分化については各種のマーカーを用いた二重免疫染色法にて検討した。GCLに局在している移植細胞には神経突起様の所見が認められるものもあったが、今回用いたマーカーに対する陽性細胞はなく、移植細胞の分化を示す所見はえられなかった。また、近年話題となっている骨髄間質細胞とホスト細胞のFUSIONの可能性について、雌緑内障ラット眼に雄GFP標識骨髄間質細胞を移植し、Y chromosomeに対するfluorescent in situ hybridization (FISH)法にて検討を試みたが、移植効率、技術的問題より今回は検討できなかった。次に骨髄間質細胞移植によるホスト網膜、視神経乳頭部の組織の再構築、炎症、細胞異常増殖など組織学的変化をパラフィン切片にて検討した。凍結切片にて観察された所見と類似してホスト網膜のGCL付近に細胞が集積している所見が認められた。また局所的に、網膜神経節細胞(RGC)数の増加や網膜神経線維層(NFL)の肥厚が観察された。組織学的に網膜神経節細胞保護作用が示唆されたために、DiI retrolabelingにより網膜神経節細胞死について定量的に解析した。移植後4wで骨髄間質細胞移植緑内障眼ではPBS注入緑内障眼に比べて、有意にRGCの細胞死の遅延が認められ、骨髄間質細胞移植により緑内障眼における網膜神経節細胞保護効果が期待できることが示唆された。前年度の研究において未分化骨髄間質細胞(BMSC)移植緑内障眼では非移植緑内障眼に比較して、より多くの網膜神経節細胞(RGC)が認められることが明らかとなった。

BMSCのtrophic effectによりRGCの細胞死が抑制された可能性を検討する為に、移植後2、4週の緑内障眼の凍結切片に免疫染色を施行し、BMSCでの発現が報告されている成長因子、およびRGCの生存に重要であると考えられる成長因子(bFGF,CNTF,GDNF,BDNF,SDF-1,HGFα)の発現を解析した。その結果、移植後2週のBMSCにおいてCNTF,GDNFの発現が認められ、移植後4週のBMSCにおいてbFGF,BDNF、HGFα、SDF-1の発現が認められた。次に移植眼の硝子体、網膜を単離し、real time PCR法により前述の成長因子の発現について定量的解析をおこなった。その結果、移植後2、4週におけるbFGF,CNTFの発現がBMSC移植緑内障眼においてPBS注入緑内障眼に比較し有意に増加していることが明らかとなった。両成長因子は共に緑内障眼において発現が減少しており、その2者の発現が、BMSC移植により特異的に増加することはBMSCが緑内障による欠落因子を補う形でRGC保護に関与している可能性を示唆する。BMSCによる神経保護効果が示唆される一方、BMSCの神経細胞、およびグリアへの分化が認められなかったことより、次に神経細胞への分化を誘導したBMSCを緑内障眼に移植した。未分化なBMSC移植眼に比較し、神経誘導BMSC移植眼では多くの移植細胞が網膜表面に生着していたが、生着部位は未分化細胞同様、網膜表面から内層に限局しており、視神経乳頭への生着は認められなかった。また神経、グリア特異マーカーのうちneurofilamentの発現は認められたが、RGC特異マーカーの発現は認められなかった。
ある種の差分方程式と遅延微分方程式との関係と数値計算

数理生物モデルに関連する離散ハングリー可積分系の性質に基づき、収束性に関する解明や異種の方程式に基づく新たなアルゴリズムを提案している。最終年度にかけては可積分系の代表的な手段である超離散化手法を用いて、保存量の導出に関して、先行研究とは異なる手順を見出し、新たな箱玉系の提案まで至っている。一方、遅延項を含む連続型病理モデルに正値性を保つ離散化を施し、その安定性を議論するとともに、離散可積分系との関連性を考えるために、独自の離散化手法を経由した遅延項のない超離散型病理モデルを提示し、その大域安定性を調べた。この手順は遅延項を持つモデルにも適用が十分に期待される。近年,ある種の病理モデルに対し,既に多くの成果が与えられている連続型モデルではなく,特有の離散化で正値性を保てる離散型モデルでの定性的性質を幾つか示している.一方で,可積分な離散ハングリー系(ある種の差分方程式)に基づく固有値計算アルゴリズムの導出や方程式の性質の解明を共同研究で精力的に進めている.これらの離散可積分系には,数理生物モデルに由来する離散ハングリーロトカ・ボルテラ(dhLV)系があり,これに基づくアルゴリズムの定式化のみならず,方程式の性質や相関は既に解明している.特に今年度は,積型と呼ばれるdhLV系に基づくアルゴリズムに対し,その収束の終盤における局所的な安定性について,中心多様体理論を用いた成果を得ている(13.研究発表の雑誌論文1番目と学会発表2-4番目).本課題の目的は,相異なる差分方程式同士の関連を見出すことであり,達成に向けて,以下の検証を今年度も続けてきた.数理生物モデルの中でも,ある種の病理モデルの遅れを含まない例を取り上げ,可積分系の1手法である超離散化によって得られた差分方程式に対し,安定性の条件の導出を試みている.通常,連続型モデルでの安定性の条件と同等のものは単純な離散化では得られない.しかし,検証を進めるうちに,類似な条件が出ることがわかってきた.まだ現状では精査の必要があるが,次年度(最終年度)には本成果の論文投稿と,遅れを含めた場合との違いまで明らかにすることで,ある種の差分方程式と遅延微分方程式の関連まで示したい.昨年度の終わりに見通しが出始めた病理モデルに対する超離散化とその安定性に関する成果をまとめ、今年度終わりに英論文として投稿した(雑誌のスコープと合わずに返却され、現在は別の雑誌に投稿すべく原稿を修正中である)。通常は連続型で議論される病理モデルに対し、独自の正値性を保つ離散化とさらに超離散化を施すことで、今までにない超離散型モデルでの解の安定性の議論ができた。この手順は他のモデルにも応用可能であり、遅延項を持つモデルにも適用が図れる。ただし、病理モデルでは条件の判別があまりにも煩雑で識別しづらいため、超離散ロジスティック方程式などで遅延項の判別を検討している。次年度以降、この問題解決も含めた新規課題において、完全解決を図る予定である。なお、分担者と大学院生の積極的な協力により、超離散ハングリーロトカ・ボルテラ系に対する新たな保存量の導出方法の提案に成功し、別方程式の適用による新たな箱玉系も見出し始めている。学会や国際会議で発表し、年末には保存量の導出方法に関して、まずは英論文を投稿した。引き続き性質の解明を進め、次年度に新しい箱玉系に関する英論文を投稿すべく準備を進めている。本課題によって、今まで手付かずだった幾つかの超離散型方程式に関する研究が大幅に進んだ。当初の遅延方程式に関しては想定通りにならなかったが、離散可積分系に関する共同研究からヒントを得て、別方向から解明が進んだことは次への大事な成果といえる。数理生物モデルの定性的性質については連続型モデルに対するものがほとんどであり,離散型モデルについてはあまり与えられていない.それに対し,我々はモデルの正値性を保つように離散化を工夫することで,連続型モデルで用いられている証明方法がそのまま適用できることを示してきた.本年度は,ワクチン投与を考慮した時間遅れを持つSIRモデルに対する成果が論文として掲載された(13.研究発表の雑誌論文1番目).一方でここ数年,数理生物モデルに起因する可積分な離散ハングリーロトカ・ボルテラ系に基づく固有値計算アルゴリズムの共同研究を進めている.方程式が煩雑なために未解明だった,離散ハングリー系と呼ばれる幾つかの方程式同士の変数変換を行列の相似変換と関連付けることで見い出すことに成功し,特に平成23年度は可積分な離散ハングリーロトカ・ボルテラ系の積型と呼ばれるタイプの性質を調べ,掲載決定となった(雑誌論文2番目).さらに,収束を早めるための常套手段である原点シフトを導入(雑誌論文4番目),他のアルゴリズムを提案した論文も投稿している.

なお,上記の離散ハングリーロトカ・ボルテラ系に基づく固有値計算アルゴリズムの局所的な収束性の議論に有効な中心多様体の存在も見い出しており(雑誌論文3番目),性質の解明を続けている.離散可積分系の研究では,病理モデルに対する超離散化の成果がすでに幾つか与えられている.我々が提案している正値性を保つ病理モデル,特に遅れを含む場合に対して,超離散化をどのように行うか,どのような関連性が出てくるのか?を引き続き模索する.今年度は数理生物モデルの中で,可積分な積型離散ハングリーロトカ・ボルテラ系に関し,既に定式化されていた固有値計算アルゴリズムの局所解析について,具体的な成果を得た.しかしながら,研究課題の目標達成にはまだ至っていない.やや遅れているように見えるが,ある種の病理モデルの超離散化を試み,得られた差分方程式の解の安定性の条件を導出したことで,今年度の終わり頃になってようやく,通常の連続型モデルの安定性の条件と同様の結果を出す見込みがわかってきた.よって,これらを精査することにより,次年度(最終年度)には遅れを含む問題まで視野に入れた目標達成の見込みがあると思われる.研究実績の概要で述べたように,特に時間遅れを含む離散型病理モデルに対する成果を,ここ数年,出している.また,離散ハングリー系として与えられている差分方程式の性質の解明も着々と進めており,双方の関連性を見出すための準備は整いつつある.よって,達成度はおおむね順調と考える.次年度には,遅れを含む離散型病理モデルが離散可積分系,特に超離散化した場合に,どのように対応するのかを具体的に検討する.それらから研究課題にあるように,差分方程式同士の関連を具体的に見い出す作業へと進める.上記の「現在までの達成度」欄で述べたように,数理生物モデルに起因する差分方程式を利用して,数値計算に関する安定性の研究成果は着々と得られている.次年度は最終年度となるため,目標をできるだけ達成するために以下をさらに推進する.ある種の遅れを含まない病理モデルの超離散化と安定性の条件の導出を試みたことで,まだ精査する必要はあるが,遅れを含んだ場合で同様の手続きを経ることにより,関与する箇所を見つけて,目標達成まで進めたい.現在までの達成度の欄で書いたように,1年目に双方の成果が色々と出ている.次年度は差分方程式同士の関連性が見い出せるように,できるだけ簡単なモデルをそれぞれ取り上げて,もう少し具体的に比較・検討を始める.引き続き,得られた成果は論文として投稿したり,国内外で発表を行う.次年度(最終年度)は離散可積分系の成果発表のみならず,課題に関する論文投稿には,病理モデルの専門家との議論が重要になると考える.したがって,研究打合せの招聘分も含め,旅費を多めに見積もっている.また,数値実験や資料収集などの謝金も見積もっている.平成23年度は大震災があり,秋まで70%交付という制約もあって,謝金の申請を控えたり調整して使用した.次年度は資料の整理や差分方程式に対する数値実験など,院生の協力が必要になる部分もあるため,謝金は必要となる.また,旅費は引き続き,多めに見積もっている.離散可積分系に関する共同研究を精力的に進めたことで多くの成果が導けた経緯もあり,研究打合せのための旅費は必要といえる.さらに平成23年度は,得られた成果を積極的に国際会議で発表した.その結果,アメリカやスペインの専門家が具体的に興味を持って,有意義な質問やコメントをくださった実績もある.
新しい咬耗センシング法による咀嚼機能と口腔形態の解析とその応用

歯科学、人類学、工学の3分野の研究者14人を集めて、咬耗、咀嚼機能、口腔形態の解析を総合的に研究を行う研究を3年間行い、以下のような成果を得た。(1)咬合力、歯の相対動きセンサの開発(江刺・黒江・井上・桑原)マイクロマシンの技術を使って、静容量変化による咬合力センサ、磁気結合による相対動き測定センサを製作した。これらを実験用義歯に内蔵させ、各種の食物を食べるときの咬合力、および歯の動きを測定した。これらのセンサを歯科学研究での各種測定に応用した。(2)パターン投影法による顎運動の精密測定(吉澤・黒江・井上)制度0.1mm、1/60秒おきの測定方法を開発し、大人、子供、幼児の咀嚼時の顎運動の動きを三次元的に測定した。(3)歯のマイクロ磨耗の測定方法の開発(本多・毛利)義歯にTiメッキを施し、電子線を照射して発生した特性X線の強度測定により10オングストロームの精度で歯の磨耗が測定できることを確かめ、入院患者の食事と歯の磨耗との関係を確かめた。(4)エナメル質の三次元分布の測定(諏訪)開発した方法を用いて、現代人の大臼歯のエナメル質の三次元分布を再構築し、その諸特徴を明らかにすると共に、先行研究に見られる切断面上での厚さ計測の意義を考察した。(5)咬耗、頭蓋3次元構造間の関係解析(溝口)頭蓋3次元構造が咬耗や椎骨形態と関連をもつことを多変量解析により確認した。(6)類人猿とヒトの咬耗の比較(内田)現在および中新世ヒト上科の下顎臼歯形態の変異を分析した。(7)センサによる咀嚼機能の臨床診断法の開発(伊藤・黒江・井上)江刺の考案したセンサにより,咀嚼時の咬合力と歯の動きを測定し,咀嚼機能の高制度の臨床検査法を開発した。(8)乳幼児の咀嚼器官の発育評価と食生活との関係(井上・坂下)幼児の口腔模型より咬耗を評価し、咀嚼機能検査、食生活調査の結果とあわせ検討し関連を調べた。歯科学、人類学、工学の3分野の研究者14人を集めて一つの研究テーマのもとで総合的研究を行なう第一年目であったので、それぞれに予備的な研究からスタートし、2ヶ月に一度、年6回の研究会を開催し、情報を交換しながら研究を進め、以下のような成果を得た。(1)咬合力、すべりセンサの開発(江刺)マイクロマシンの技術を使って、実験用義歯に内蔵させる大きさ3mm角程度の静電容量変化による咬合力センサ、磁気結合による歯のすべりを測定するセンサを開発した。(2)パターン投影法による顎運動の精密測定(吉澤)基準格子パターンを投影し、その像をCCDカメラでとらえ、コンピュータ解析により、精度0.1mm、1/60秒おきの顎運動を測定する測定機を開発した。(3)歯のマイクロ摩耗の測定方法の開発(中島、本多、毛利)

義歯にメッキを施し、電子線を照射して、反射X線により0.1μm、また原子間力顕微鏡による0.02μmのマイクロ摩耗が測定できることを確かめた。(4)実験用義歯の試作(桑原、佐田)金属床義歯で、咬耗測定のため取りはずし可能な義歯を開発した。(5)歯のエナメル質分布の測定(諏訪)レーザ光によりエナメル質の外側形状、脱灰した後の象牙質の外側形状をディジタル化して測定し、エナメル質の厚さを2%以下の精度で測定できることを確かめた。(6)咬耗、頭蓋3次元構造間の関係解析(溝口)頭蓋の3次元構造と咬耗程度を37体について測定した。(7)類人猿とヒトの咬耗の比較(内田)ゴリラ、オラウータンの臼歯咬頭面の写真をコンピュータ内に取り込み、咬頭プロポーションの変異を集団、亜種、種レベルで比較した。(8)咬耗評価による咀嚼機能の臨床診断法の開発(伊藤、黒江)顎機能解析装置を用いて顎運動と咀嚼筋電図とを同時記録し、また感圧フィルムにより咬合圧も測定し、咀嚼機能の診断法を開発した。(9)乳幼児の咀嚼器官の発育評価と食生活との関係(井上、坂下)0歳から15歳まで393人について咬耗の調査を行ない、保育園児には筋活動量、食品の摂食状況との関係を調べ、有意な相関のあることが判った。歯科学、人類学、工学の3分野の研究者13人による咬耗、咀嚼機能、口腔形態の解析を総合的に研究を行う研究が二年目に入り、以下のような成果を得た。(1)咬合力、すベりセンサの開発(江刺)マイクロマシーニング技術により、義歯に咀嚼力、咀嚼時の歯の動きを測定するセンサを開発して取り付け、いろいろな食物を食べたときの咀嚼力と歯の動きを測定した。(2)パターン投影法による顎運動の精密測定(吉澤)昨年開発した測定機を用いて、大学生および小学生、幼児の咀嚼時の顎の動きを3/100秒ごとに三次元的に測定することができた。(3)歯のマイクロ磨耗の測定方法の開発(本多、毛利)義歯にチタン被膜をスパッタリングし、EPMA法により咀嚼をくりかえしたときの特定点の摩耗の進行の測定を行った。また圧電素子を使い圧力をかけた状態で歯を少し移動させる磨耗試験機を造り、歯の形状変化から歯の磨耗の測定が可能であることを示した。(4)実験用義歯の試作(桑原、佐田)咬耗測定のための義歯を試作し、咬耗の測定を行った。(5)歯のエナメル質分布の測定(諏訪)昨年開発した歯のエナメル質の三次元分布の測定方法をさらに発展させ、歯冠部の表面積、投影面積、特定領域の体積の計測を可能とし、この方法を使って現代人の大臼歯のエナメル質の三次元分布の再構築を行った。(6)咬耗、頭蓋3次元構造間の関係解析(溝口)頭蓋の3次元構造と咬耗、脊椎の形態との関係を多変量解析により調査した。(7)類人猿とヒトの咬耗の比較(内田)現生および中新世化石ヒト上科の下顎臼歯形態の変異を分析した。(8)咬耗評価による咀嚼機能の臨床診断法の開発(伊藤、黒江)江刺の開発した咬合力、歯の動き測定センサを用いて、被検者の咀嚼時の咬合力、歯の動きを測定し、従来の顎口腔機能検査装置のデータとの比較により、より高い精度で測定できることをあきらかにした。(9)乳幼児の咀嚼器官の発育評価と食生活との関係(井上、坂下)幼児の口腔模型を採取し、咬耗に関する情報と咀嚼機能検査、食生活調査との関連を検討した。歯科学、人類学、工学の3分野の研究者13人による咬耗、咀嚼機能、口腔形態の解析、実験を総合的に行う研究が三年目に入り、以下のような成果を得た。(1)咬合力、すべりセンサの開発を引き続き行い、そのセンサを鹿児島大学、大垣女子短期大学の歯科学の研究者に貸与し、咀嚼力と歯の動きの測定による歯科学の研究の発展に貢献した。(江刺、黒江、井上、桑原)(2)歯のマイクロ磨耗の測定方法の開発については、義歯にチタン被膜をスパッタリングし、EPMA法により咀嚼を繰り返したときの磨耗の進行が10オングストロームの程度で可能であることを立証した。(本多、毛利、桑原)
ソフトインターフェースの分子科学

本研究では、細胞サイズの液滴や小胞を取り上げ、マイクロメータ・スケールでのソフト界面の物理化学的特質を明らかにするとともに、微小空間でのタンパク質やDNAの機能制御手法を発展させることを目的としてきた。リン脂質を含む油層中に細胞サイズ液滴を形成させ、それをバルクの水層に移行させることにより、細胞サイズのリン脂質小胞を得るという実験手法が、有用であることが、本研究を通してますます明らかになってきた。理論的解析の結果から、液滴のサイズが大きいほど油相から界面への移行は容易であるが、界面にはピン止めされる傾向をしめすことが予想された。逆に、小さい液滴ほど、油相から界面への移行は起こり難いが、界面へピン止めされることなく水相に移行するようになることがわかる。これは、実際の実験で観測されている事実と対応している。また、重要な結果として、液滴のサイズに関わらず、液滴はその大半が水相に移行した時点で、その上部が界面にピン止めされる傾向を示すことが、この理論モデルからわかる。また、単分子膜部分と二分子膜部分の相対的な安定性が移行の速度過程に決定的な影響を与えることが予想できる。例えば、荷電脂質を用いることで、二重膜小胞の生成効率が増大することも理論的に予測できる。以上のように、界面透過法は、今後多様な生体高分子や基質を生体濃度で封入して、細胞サイズのリン脂質膜小胞を構築する汎用的な方法論へと発展してゆくものと期待される。24年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は以下の2つの課題に関して研究を進め、それぞれ、公表論文という形で成果を得る事が出来たので、順に紹介していきたい。1)細胞サイズ微小空間特異性の実験的検証:特に液滴系の活用本申請者らは、任意の濃度の蛋白質・基質やDNA,RNAなどを取り込んだ、細胞サイズリポソームの構築手法の確立に向けての研究を進めてきている。特に、その中でも、リン脂質を含む油層中に細胞サイズ水滴を形成させ、それをバルクの水層に移行させることにより、細胞サイズのリン脂質小胞を得るといった、実験手法が極めて有用であることを報告している(A.Yamada et al.,Langmuir,2006)。本年度は、このような細胞内の環境の特徴の一つである、反応空間の体積に着目して研究を行い、微小空間であるほどタンパク質合成反応が亢進する事を明らかにした。2)細胞サイズのリン脂質小胞が示す特異な物性の解明細胞膜は単成分では無く、多成分であり、その様な場合に相分離現象が起こる事が知られている。本年度は、構成成分の中に高分子の様な体積力(エントロピー的な理由による斥力相互作用)をもつ分子が存在する場合に、相分離がどのようなるかという視点で研究を行った。その結果、ある割合を境にして急峻な転移を起こし、単一ドメインが分かたれて非常に多数の小ドメインになる事が明らかになった。これはラフトのモデルとしても興味深い結果である。申請当初の見込みより多くの論文が出版されており、研究内容的にも期待以上に進捗している。順調であるので、これを維持し研究を推進する。
ゴーシェ病原因糖脂質を認識するレクチン受容体の発見とその病態への関与の解明

生体は、病原体のみならず、損傷を受けた自己細胞を免疫受容体で認識し、適切な免疫応答を誘導することでこれらに対処し、恒常性を維持している。死細胞を認識する受容体として、ミエロイド細胞活性化に寄与するMincle(Macrophage-inducible C-type lectin)と呼ばれるC型レクチン受容体が知られている。近年、Mincleは病原体に特有な糖脂質を認識することが明らかになったが、死細胞由来の糖脂質リガンドは不明であった。死細胞培養上清中より脂質成分を抽出し、分画を作成して活性を調べた結果、Mincle結合能を示すピークを得た。この分画を精製し、質量分析、および核磁気共鳴法により構造解析を行ったところ、β-glucosylceramide(β-GlcCer)が同定された。実際、β-GlcCerはマウス樹状細胞を活性化し、その効果はMincle欠損マウスで失われた。β-GlcCerは、セラミド代謝産物として知られるスフィンゴ糖脂質であり、通常、小胞体やゴルジ体に局在する。β-GlcCerの分解酵素であるGBA1(β-glucosylceramidase)の機能欠失型変異は、β-GlcCer蓄積を引き起こし、神経障害や肝脾腫を特徴とする、全身性の炎症を伴うゴーシェ病の原因となるが、β-GlcCerと炎症の因果関係は不明であった。GBA1欠損マウスでは、細胞死に伴う炎症や獲得免疫応答が増強したが、その効果はGBA1×Mincle二重欠損マウスで失われることが明らかとなった。以上より、通常は細胞内代謝物として働くβ-GlcCerは、細胞の損傷に伴って放出され、Mincleを介して免疫活性化能を発揮する、内因性アジュバントとして機能することが強く示唆された。28年度が最終年度であるため、記入しない。CLRの1つであるMincle(Macrophage inducible C-type lectin)は、マラセチア真菌や結核菌由来脂質成分を認識することが明らかとなっている。また、Mincleは死細胞を認識することから、損傷に伴って生成される内因性脂質成分を認識する可能性も考えられるが、Mincleの内因性脂質リガンドは見つかっていなかった。申請者は、内因性脂質成分中にMincleのリガンドが含まれる事を発見した。加えてMincleは、効率良く獲得免疫を誘導するアジュバントレセプターであることから、『損傷細胞より放出される脂質成分が内因性アジュバントとして機能する』という新たなモデルを着想するに至った。ここから、内因性Mincleリガンドの同定、その生理的機能の解析を行うことを目的とした。一方、脂質分解酵素機能欠失型ミスセンス変異は、内因性脂質の過剰な蓄積を引き起こし脂質代謝異常症の原因となることが知られている。肝脾腫、神経障害等の症状が主に確認されているが、発症に至る分子機構は未だ不明である。申請者は、ミエロイド系細胞上で脂質成分を認識するMincleが、蓄積した脂質成分を認識して過剰な炎症を惹起する原因受容体として機能している可能性を考え、その病理的機能の解析を行うことを目的とした。1、新たな内因性Mincleリガンドを同定した。2、ミエロイド系細胞を内因性Mincleリガンドで刺激すると、Mincle依存的に活性化され、炎症性サイトカインの産生が確認された。今後、この新たに発見されたMincleリガンドのアジュバント活性の検討や、代謝異常症モデルマウスの樹立を通し、さらにMincleの機能解析を進めていく予定である。C型レクチンの1つであるMincle(Macrophage inducible C-type lectin)は、マラセチア真菌や結核菌由来糖脂質を認識することが明らかとなっている。また、Mincleは死細胞を認識することから、損傷に伴って生成される内因性糖脂質を認識する可能性も考えられるが、Mincleの内因性糖脂質リガンドは見つかっていなかった。我々は、内因性糖脂質成分中にMincleのリガンドが含まれる事を発見した。加えてMincleは、効率良く獲得免疫を誘導するアジュバントレセプターであることから、『損傷細胞より放出される糖脂質が内因性アジュバントとして機能する』という新たなモデルを着想するに至った。一方、Mincleによって認識される内因性糖脂質の分解酵素機能欠失型ミスセンス変異は、ゴーシェ病の原因となることが知られている。全身性の炎症を伴う肝脾腫、神経障害等の症状が主に確認されているが、発症に至る分子機構は未だ不明である。以上より我々は、Mincleはこの内因性糖脂質に対し、アジュバントレセプターとして作用する一方、異常蓄積した際には過剰な炎症を惹起する原因受容体として機能している可能性を考え、その生理的、病理的機能の解析を行うことを目的とした。本年度は主に、同定した内因性糖脂質がアジュバント活性を有するかを明らかにするための実験を精力的に行った。その結果、当該糖脂質を用いた系において、in vitro、in vivoの両方で、当該糖脂質がMincleに認識されることでアジュバント活性を発揮し、獲得免疫誘導に働くことを明らかとなった。今後は、代謝異常症モデルマウスの樹立を通し、Mincleの病理的機能解析を進めていく予定である。本研究の目的は、Mincleと内因性糖脂質リガンドの生理的機能(内因性アジュバントとしての機能)、病理的機能(ゴーシェ病病態との関連)の解析である。

当初の予定通り、本年度は、当該糖脂質を用いた系において、in vitro、in vivoの両方で、当該糖脂質が受容体であるMincleに認識されることでアジュバント活性を発揮し、獲得免疫誘導に働くことを明らかとした。In vitro解析は、樹状細胞とT細胞の共培養の系を用いた。抗原刺激に加えて、当該糖脂質で樹状細胞を活性化すると、効率的にT細胞応答を誘導することが明らかとなった。In vivo解析では、DTHの系を用い、当該糖脂質が、Mincleの強力なリガンドとして知られるTrehalose 6,6'-dimycolate (TDM)と同程度の応答を示すことを明らかとした。また、当該糖脂質が蓄積する(マウス由来細胞で血球系を再構築した)マウスでは、外からアジュバントを加えること無く抗原のみで抗体産生が誘導されたことから、この糖脂質が内因性アジュバントとして働いている可能性を強く示唆した。よって、予定していた当該糖脂質のアジュバント活性を、in vitro、in vivoの両方から解析できた為、本年度の研究計画は概ね達成できたと考える。生体は、病原体のみならず、損傷を受けた自己細胞を免疫受容体で認識し、適切な免疫応答を誘導することでこれらに対処し、恒常性を維持している。死細胞を認識する受容体として、ミエロイド細胞活性化に寄与するMincle(Macrophage-inducible C-type lectin)と呼ばれるC型レクチン受容体が知られている。近年、Mincleは病原体に特有な糖脂質を認識することが明らかになったが、死細胞由来の糖脂質リガンドは不明であった。死細胞培養上清中より脂質成分を抽出し、分画を作成して活性を調べた結果、Mincle結合能を示すピークを得た。この分画を精製し、質量分析、および核磁気共鳴法により構造解析を行ったところ、β-glucosylceramide(β-GlcCer)が同定された。実際、β-GlcCerはマウス樹状細胞を活性化し、その効果はMincle欠損マウスで失われた。β-GlcCerは、セラミド代謝産物として知られるスフィンゴ糖脂質であり、通常、小胞体やゴルジ体に局在する。β-GlcCerの分解酵素であるGBA1(β-glucosylceramidase)の機能欠失型変異は、β-GlcCer蓄積を引き起こし、神経障害や肝脾腫を特徴とする、全身性の炎症を伴うゴーシェ病の原因となるが、β-GlcCerと炎症の因果関係は不明であった。GBA1欠損マウスでは、細胞死に伴う炎症や獲得免疫応答が増強したが、その効果はGBA1×Mincle二重欠損マウスで失われることが明らかとなった。以上より、通常は細胞内代謝物として働くβ-GlcCerは、細胞の損傷に伴って放出され、Mincleを介して免疫活性化能を発揮する、内因性アジュバントとして機能することが強く示唆された。当初の予定通り、新たに発見した内因性糖脂質リガンドに対する、ミエロイド細胞活性化におけるMincleの機能解析は、in vitroについては概ね終了した。また、すでに代謝異常症モデルマウス樹立の為の、ターゲティングベクター作製も開始済みである。
中国の近代の美学理論における日本の哲学美学思想の影響

報告者の研究課題は「中国の近代の美学理論における日本の哲学美学思想の影響」である。主な研究対象は、中国美学の核心的な概念「境界」である。「境界」は元々王国維(18771927)が1908年に執筆した詩論『人間詞話』における詩の判断基準としての概念である。先行研究において「境界」はドイツの哲学者ショーペンハウアーの美学理論の応用だと結論づけられたが、報告者の研究によって「境界」は、中国の儒学思想及び芸術思想に根付いている概念だと明らかにした。また、その概念が形成される過程には、日本の明治期の中国思想研究の影響を受けていることも明らかにした。具体的に、『人間詞話』において「境界」が明瞭に定義されなかったが、「有我の境」と「無我の境」という二つの概念によって説明されている。「有我の境」は「我(われ)を持って物(もの)を観(み)、物は我の色に染まる」で、「無我の境」は「物を持って物を觀,何者が我か,何者が物かを知らない」である。「有我の境」と「無我の境」は、「境界」の意味を探る重要な鍵である。報告者は、まず「有我の境」の分析を行い、「有我の境」の思想的な背景に影響を与えた日本の学者及びその理論に辿り着いた。明治期の心理学・倫理学者元良勇次郎(18581912)と彼の心理学の「心物相関論」(1890『心理学』)である。さらに、「無我の境」の分析を行い、元良勇次郎の儒学の「性」の理論に基づく「自我」の概念の影響を受けたことを明らかにした。「有我の境」は詩人の感情的な自我の創造であるのに対して、「無我の境」は詩人の人格的な自我の創造である。前者は儒学の心理学的な自我であるが、後者は儒学の倫理学的な自我である。従って、「境界」は詩人の真実な自我の創造である。その自我の真実においては、瞬間的な真実と永久的な真実の違いがある。29年度が最終年度であるため、記入しない。平成27年度の研究では、先行研究では論じられていなかった三つの重要なことを明らかにした。1、美学は本来中国になかった学問で、近代で中国に伝わったものである。近代の中国において西洋の「美学」は、理論の面において、どのように中国に伝わり、そして学問として根付いたのか?2、近代の中国での「美学の誕生」において、日本という国は如何なる役割を果たしたのか?3、西洋の学問である「美学」は、アジアに伝わった時、日本と中国という二つの国にそれぞれいかに受容され、いかなる理論的な変貌を遂げたのか。具体的に説明すると、中国の近代の最初の美学理論「境界論」をめぐって、まずその理論の誕生において、大いに日本の明治期の哲学及び心理学の理論研究の影響を受けたという事実を判明した。「境界論」というのは、王国維が詩論『人間詞話』(1908)において「境界」という概念を中心に構築された理論である。報告者の研究によれば、王国維は、日本の明治時代の哲学研究と心理学研究における「認識」に関する理論に没頭していたため、「境界」という概念には、哲学的な意味と心理学的な意味が混在されているようになっている。具体的に言えば、哲学者の桑木厳翼の解釈したカントの「認識論」と心理学者の元良勇次郎の解釈したヴントの「心の統覚作用」である。だが、王国維の理論の拠り所は必ずしも西洋の美学ではなく、中国の伝統的な哲学思想、主に荀子の「天官論」(感覚器官と心の関係)であったことを明らかにした。従って、「境界論」は西洋の哲学、心理学の概念(日本の学者が解釈したもの)によって整理された、中国の伝統的な哲学思想の「天官論」(主に「心」)が芸術創作における、哲学的、心理学的な働きに関する理論である。平成27年度の研究によって、先行研究では論じられなかった二つのことを明らかにした。1、先行研究では、「境界論」を巡って、その理論の本質は中国的なものなのか、それとも西洋的なものなのかという論争を繰り返してきた。しかし、報告者は今までなかった観点から「境界論」を見直した。具体的に言うと、中国の美学の最初の「赤ん坊」とされている「境界論」は、「哲学」と「心理学」の血が交じり合う「混血児」であったことを判明した。それは、中国の近代の美学の萌芽と形成は、終始日本の西洋哲学、心理学、美学研究の状況に影響されたからである。具体的に言うと、明治時代に日本に流行したカントの観念論哲学、ヴントの心理学、その後、大正時代に風靡したリップスの心理学的美学の影響を大いに受けていたという、事実を明らかにした。2、先行研究では、「境界論」と「移情論」は二つの異なる理論だとされてきたが、心理学的美学である点において、「移情論」は「境界論」の延長線にあるものだと判明した。この二つの理論の関連性を明らかにしたことによって、中国の近代における美学の誕生するプロセスを明らかにした。

具体的に言うと、桑木厳翼のカント認識論及び元良勇次郎のヴントの心理学(心の統覚作用)の影響を受けた、王国維の「境界論」(1908)に引き続き、呂澂は阿部次郎のリップスの心理美学理論に立脚する「感情移入論」を借りて、「心」をめぐる中国の伝統的な芸術創作思想を理論化した。1908年の「境界論」は理論の枠組みがその内実を圧倒しているのに対して、1923年の「感情移入論」は、「境界論」にすでに現れた心理学的美学を大きく展開して、中国近代における、初めての体系的な美学理論を形成した。それは哲学的な美学ではなく、心理学的な美学であった。報告者の研究課題は「中国の近代の美学理論における日本の哲学美学思想の影響」である。平成28年の研究を振り返ってみれば、研究課題を決めた当初の「二つの目的」を達成することができたと言える。目的の一つは、中国国内の美学研究の空白を埋めるものであった。具体的に言うと、中国国内の美学研究において、今まで中国の近代に誕生した美学芸術学の諸理論は西洋の哲学美学思想の影響を受けていたと思われてきた。だが、報告者の研究によれば、中国近代の重要な美学者、芸術家は西洋ではなく、西洋の思想と中国思想を統合した明治期日本の思想(哲学、心理学、倫理学、芸術理論)に対して大いに共鳴し、自ら作り上げた理論に応用していたことを明らかにした。その研究結果は中国で開かれた中華美学学会(2016年10月21日)で発表し、また中国国内の学術誌(『杭州師範大学学報』2017年第1期)に掲載され、多くの中国の研究者たちに知ってもらうことができた。もう一つの目的は、日本の美学研究の空白を埋めるものである。日本国内の美学研究は西洋美学が中心となっている中、中国美学に関する研究はほとんど見当たらない。報告者の研究によれば、日本と中国は、同じ「美学」という漢字の二文字で名付けられている学問を持ちながらも、根本的違いがあったことを明らかにした。その違いは一言で言えば、中国の美学研究は、日本のように西洋美学に対する徹底的な理解と新たな解釈ではなく、西洋美学とは異なる「中国独自な美学」を作り上げることである。その研究成果は国際美学会(2016年7月29日、ソウル大学)日本国内で開かれた日本美学会(2016年10月8日)、中国学会(2016年10月9日)及びで発表し、日本の美学研究者及び中国学の研究者たちに知ってもらうことができた。『人間詞話』は1908年に王国維の作り上げた、中国の詩の一ジャンルの詞に関する理論である。報告者は『人間詞話』の中心的な概念「境界」の分析を通じて、その概念が形成された思想的な背景には、王国維が独学した日本の心理学者・元良勇次郎の「心」の理論があったことを判明した。それによって今までの研究にはなかった第三の角度から「境界」に新たな光を当たったことができた。王国維の求める詞における「境界」の創造とは、詩人の「心」の表現であって、その「心」を通じて詩人の唯一無二の「自己」の表現である。詩における「境界」の創造は、「自己」の創造である。中国の儒学思想を源泉とする、詩の概念「境界」は、中国独自な美学の概念だと言える。画論「図画修得法」は1905年に東京美術学校の西洋画科に進学する前の李叔同が東京で執筆したものである。李叔同は中国近代の重要な芸術家であって美術教育家である。報告者の研究によれば、まずは「図画修得法」は1903年に出版された小学校の美術教授法の教材『普通教育における圖畫教授法』(柿山蕃雄、松田茂著、東京三省堂)を編訳するものであることを明らかにした。油絵を志している李叔同は、あえて毛筆画の教授法を選んだ理由は、彼が『普通教育における圖畫教授法』の主な著作者柿山蕃雄の美術に関する理念に賛同したからである。それは創作法の最初に挙げられた「精神法」である。精神法は物体の「心」の表現に関わるものであって、技巧より表現する対象の精神性を重視している。
AR技術を用いたワイヤレス給電システムの可視化に関する研究

本研究ではワイヤレス給電の安全面に関する社会の懸念を払拭する観点で,電磁界解析及び測定技術と拡張現実AR(Augmented Reality)技術を組み合わせることで,ワイヤレス給電システムの近傍電磁界の可視化を試み,ワイヤレス給電システム周辺の電磁界分布をリアルタイムで把握することで,無線電力伝送システムの安全性を確認しながら,システム普及の加速とユーザの安心感の向上を図ることを目的とする.H30年度はKHz/MHz帯の固定/移動体無線電力伝送システムの構築を目標に対し,ほぼ完成した.詳細は下記の通りです.1.送電電力の制御及び金属などの異物が周囲にある際にも動作するロバストな受電回路を新たに構築することができ,評価までは至らなかった.2.独自に開発した効率評価プログラムを用い,金属及びフェライトなどの異物がワイヤレス給電システムの効率に及ぼす影響を評価し,効率が低下しにくいワイヤレス給電システムを構築がある程度に成功した.3.多送電多受電を有するシステムに関する最大伝送効率及び最大伝送効率を達成する条件の導出に成功し,論文と特許の出願も果たした.2019年度には送電電力の制御及び金属などの異物が周囲にある際にも動作するロバストな受電回路の確認と評価すると共に,電磁界測定センサの作成を完成する予定である.電界センサは微小ダイポール,磁界センサは電磁誘導を利用する微小コイルとホール効果を利用するセンサを用いる予定である.どのセンサに対しても,高感度・小型が必須条件となる.また磁場の近傍結合を用いられる大電力ワイヤレス給電システムに対して,強い磁場に耐えられる磁場センサの試作も課題を解決していく予定である.送電電力の制御及び金属などの異物が周囲にある際にも動作するロバストな受電回路を新たに構築することができたが,確認及び評価までは至らなかった.理由としては,制御回路が複雑で,バッグとりはまだ完成できなかった.2019年度には送電電力の制御及び金属などの異物が周囲にある際にも動作するロバストな受電回路の確認と評価すると共に,電磁界測定センサの作成を完成する予定である.電界センサは微小ダイポール,磁界センサは電磁誘導を利用する微小コイルとホール効果を利用するセンサを用いる予定である.どのセンサに対しても,高感度・小型が必須条件となる.また磁場の近傍結合を用いられる大電力ワイヤレス給電システムに対して,強い磁場に耐えられる磁場センサの試作も課題を解決していく予定である.本研究ではワイヤレス給電の安全面に関する社会の懸念を払拭する観点で,電磁界解析及び測定技術と拡張現実AR(Augmented Reality)技術を組み合わせることで,ワイヤレス給電システムの近傍電磁界の可視化を試み,ワイヤレス給電システム周辺の電磁界分布をリアルタイムで把握することで,無線電力伝送システムの安全性を確認しながら,システム普及の加速とユーザの安心感の向上を図ることを目的とする.H30年度はKHz/MHz帯の固定/移動体無線電力伝送システムの構築を目標に対し,ほぼ完成した.詳細は下記の通りです.1.送電電力の制御及び金属などの異物が周囲にある際にも動作するロバストな受電回路を新たに構築することができ,評価までは至らなかった.2.独自に開発した効率評価プログラムを用い,金属及びフェライトなどの異物がワイヤレス給電システムの効率に及ぼす影響を評価し,効率が低下しにくいワイヤレス給電システムを構築がある程度に成功した.3.多送電多受電を有するシステムに関する最大伝送効率及び最大伝送効率を達成する条件の導出に成功し,論文と特許の出願も果たした.2019年度には送電電力の制御及び金属などの異物が周囲にある際にも動作するロバストな受電回路の確認と評価すると共に,電磁界測定センサの作成を完成する予定である.電界センサは微小ダイポール,磁界センサは電磁誘導を利用する微小コイルとホール効果を利用するセンサを用いる予定である.どのセンサに対しても,高感度・小型が必須条件となる.また磁場の近傍結合を用いられる大電力ワイヤレス給電システムに対して,強い磁場に耐えられる磁場センサの試作も課題を解決していく予定である.送電電力の制御及び金属などの異物が周囲にある際にも動作するロバストな受電回路を新たに構築することができたが,確認及び評価までは至らなかった.理由としては,制御回路が複雑で,バッグとりはまだ完成できなかった.2019年度には送電電力の制御及び金属などの異物が周囲にある際にも動作するロバストな受電回路の確認と評価すると共に,電磁界測定センサの作成を完成する予定である.電界センサは微小ダイポール,磁界センサは電磁誘導を利用する微小コイルとホール効果を利用するセンサを用いる予定である.どのセンサに対しても,高感度・小型が必須条件となる.また磁場の近傍結合を用いられる大電力ワイヤレス給電システムに対して,強い磁場に耐えられる磁場センサの試作も課題を解決していく予定である.
骨肉腫に対するリポソーム封入制癌剤によるターゲッティング療法に関する実験的研究

1.これまでの実験によりハムスター骨肉腫において,MDP (muramyldipeptide)の誘導体であるMDP-Lysの単独あるいはリポソーム封入による投与のいずれにおいても肺転移が抑制されることが照明された.またその至適投与量は単独投与で50μg/日以上,リポソーム封入による投与で20μg×2/週以上であった.今回アドリアマイシン(以下ADR)封入温熱感受性リポソームを用いて以下の実験を行った.(1) Dipalmitoylphosphatidylcholine :Distearoylphosphatidylcholine=9 : 1を用いてリポソームを作成し,逆相蒸発法によりADRを封入してADR封入温熱感受性リポソームを作成した.(2)生後3週齢のハムスターの下腿三頭筋内に可移植性骨肉腫を移植し,腫瘍の大きさを移植後1, 2, 3週で計測しこれをコントロール群とした.(3)移植後1週で以下の4方法の治療を行いコントロール群と比較することで抗腫瘍効果を判定した.A群:ADR静注,B群:腫瘍局所の温熱,C群:ADR静注と局所温熱の併用,D群:ADR封入温熱感受性リポソーム静脈内投与と局所温熱の併用の4群である.ADRの投与量はいずれも5μg/gとした.加温は43°C,30分の温浴で行った.2. (1)今回作成したADR封入温熱感受性リポソームのADRの封入率は約20%で,薬剤放出率は41°Cで約85%であった.(2)腫瘍移植後2週での相対的腫瘍増殖倍率(移植後2週の腫瘍体積/移植後1週の腫瘍体積)はコントロール群で13.5±6.7であった.(3)腫瘍移植2週後(治療後1週)の相対的腫瘍増殖倍率はA群では6.8±5.8,B群では7.4±4.3,C群では6.7±5.6,D群では1.8±0.5であった.A, B, C群では腫瘍の増殖抑制の傾向はあるものの,コントロール群と有意差を認めなかった.しかしD群では有意(p<0.05)に抗腫瘍効果が認められた.1.これまでの実験によりハムスター骨肉腫において,MDP (muramyldipeptide)の誘導体であるMDP-Lysの単独あるいはリポソーム封入による投与のいずれにおいても肺転移が抑制されることが照明された.またその至適投与量は単独投与で50μg/日以上,リポソーム封入による投与で20μg×2/週以上であった.今回アドリアマイシン(以下ADR)封入温熱感受性リポソームを用いて以下の実験を行った.(1) Dipalmitoylphosphatidylcholine :Distearoylphosphatidylcholine=9 : 1を用いてリポソームを作成し,逆相蒸発法によりADRを封入してADR封入温熱感受性リポソームを作成した.(2)生後3週齢のハムスターの下腿三頭筋内に可移植性骨肉腫を移植し,腫瘍の大きさを移植後1, 2, 3週で計測しこれをコントロール群とした.(3)移植後1週で以下の4方法の治療を行いコントロール群と比較することで抗腫瘍効果を判定した.A群:ADR静注,B群:腫瘍局所の温熱,C群:ADR静注と局所温熱の併用,D群:ADR封入温熱感受性リポソーム静脈内投与と局所温熱の併用の4群である.ADRの投与量はいずれも5μg/gとした.加温は43°C,30分の温浴で行った.2. (1)今回作成したADR封入温熱感受性リポソームのADRの封入率は約20%で,薬剤放出率は41°Cで約85%であった.(2)腫瘍移植後2週での相対的腫瘍増殖倍率(移植後2週の腫瘍体積/移植後1週の腫瘍体積)はコントロール群で13.5±6.7であった.(3)腫瘍移植2週後(治療後1週)の相対的腫瘍増殖倍率はA群では6.8±5.8,B群では7.4±4.3,C群では6.7±5.6,D群では1.8±0.5であった.A, B, C群では腫瘍の増殖抑制の傾向はあるものの,コントロール群と有意差を認めなかった.しかしD群では有意(p<0.05)に抗腫瘍効果が認められた.1,ハムスター骨肉腫に対し,MDP (muramyl dipeptide)製剤であるMDP-Lysが肺転移抑制能を有することがわれわれの実験で初めて証明された.そこでリポソーム膜内封入MDP-Lysの効果的な投与経路および投与量を決定し,より効果的な肺転移防止療法の確立を目的とし以下の実験を行った.1) MDP-Lys単独投与によるハムスター骨肉腫に対する至適投与量を決定するために50, 5, 0.5μg/毎日皮下注の3群を作成し,腫瘍移植後3週,7週での肺転移率を算出した.2)リポソーム膜内封入MDP-

Lysのハムスター骨肉腫に対する至適投与量を決定するために20, 2, 0.2μg/週2回静注の3群を作成し,腫瘍移植後3週,7週での肺転移率を算出した.2, 1)腫瘍移植後3週,7週ともにMDP-Lys単独投与では50μg/毎日皮下注で肺転移は有意に抑制された.5, 0.5μg/毎日皮下注の2群では肺転移は抑制されなかった.2)腫瘍移植後3週,7週ともにリポソーム膜内封入MDP-Lys投与では20μg/週2回静注で肺転移は有意に抑制された.2, 0.2μg/週2回静注の2群では肺転移は抑制されなかった.3,現在アドリアマイシン単独投与によるハムスター骨肉腫の腫瘍原発巣に対する局所効果を検討し,これをコントロール群とした.DPPC (Dipalmitoyl phosphatidylcholine)を用いて温度感受性リポソームを作成し,アドリアマイシンの封入率を測定している.今後アドリアマイシン封入温度感受性リポソームを用いてハムスター骨肉腫原発巣に対する局所効果を検討する.1.アドリアマイシン(以下ADR)封入温熱感受性リポソームを用いた腫瘍原発巣の制御を目的として以下の実験を行った.(1)Dipalmitoylphosphatidylcholine:Distearoylphosphatidylcholine=9:1を用いてリポソームを作成し,逆相蒸発法によりADRを封入してADR封入温熱感受性リポソームを作成した.(2)生後3週齢のハムスターの下腿三頭筋内に,教室で継代移植中のハムスター可移植性骨肉腫を移植し,腫瘍の大きさを移植後1,2,3週で計測しこれをコントロール群とした.(3)移植後1週で以下の4方法の治療を行いコントロール群と比較することで抗腫瘍効果を判定した.A群:ADR静注,B群:腫瘍局所の温熱,C群:ADR静注と局所温熱の併用,D群:ADR封入温熱感受性リポソーム静脈内投与と局所温熱の併用の4群である.ADRの投与量は単独投与,リポソーム封入による投与のいずれも5μg/gとした.加温は43°C,30分の温浴で行い,腫瘍内に挿入した温熱センサーで腫瘍内温度を確認した.2.(1)今回作成したADR封入温熱感受性リポソームのADRの封入率は約20%で,薬剤放出率は41°Cで約85%であった.(2)腫瘍移植後2週での相対的腫瘍増殖倍率(移植後2週の腫瘍体積/移植後1週の腫瘍体積)はコントロール群で13.5±6.7であった.(3)腫瘍移植2週後(治療後1週)の相対的腫瘍増殖倍率はA群では6.8±5.8,B群では7.4±4.3,C群では6.7±5.6,D群では1.8±0.5であった.A,B,C群では腫瘍の増殖抑制の傾向はあるものの,コントロール群と有意差を認めなかった.しかしD群では有意(P<0.05)に抗腫瘍効果が認められた.