hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
異文化コミュニケーション能力養成のための英語教材の語用論的分析・開発研究

本研究は、近年の異文化語用論の研究を基盤とした英語教材開発に関する示唆的研究である。高等学校英語オーラルコミュニケーションA教科書の語用論的分析を通して、日本の英語教科書の特徴を語用論の所見を援用しながら特定し、今後の教材開発のあるべき方向を示唆することを目的としている。平成12年度は前年度の研究成果を再度、精査し、新たに2つの発話行為を追加して、対象とした全高等学校英語オーラルコミュニケーションA教科書の語用論的分析を完成させた。また、データベース化した教材分析結果から、特定の発話行為別対話例の分析が可能となる形式として成果をまとめることができた。また、在外研究の機会を得て外国の教材の分析も実施し、ひとつの発話行為「依頼する」について海外で出版された第二言語としての英語(ESL)教材との比較研究を行った。その結果、1)日本の教科書は発話行為の種類が少なく、しかも提示されているフェイス侵害行為の種類は非常に限られている、2)日本の教科書に表れた人間関係は、話し手と聞き手との間の社会的地位や力関係が同等の場合がほとんどで、地位や力関係の見知らぬ人物との間の会話モデルとしては不十分である、3)英語圏で出版されたESL教材と日本の英語教材を比較した結果、発話行為の収録範囲は日本の教科書と大きな差はなく、英語母語話者の直観データに基づく教材は必ずしも語用論能力の指導には適したものとは言えない、という3点があきらかになった。これらの結果をもとに、異文化コミュニケーション能力養成のための英語教材開発研究のためのガイドラインを示した。本研究は、日本人英語学習者が外国語でコミュニケーションを行う際に生じる誤解は日本との文化の違いに起因するものと位置づけ、その誘因を教科書に表れた不適切なコミュニケーションの用例にあると仮定し、高等学校英語オーラル・コミュニケーションA教科書の語用論的な分析を通して、日本の英語教科書の特徴を語用論の立場から特定し、今後の教材開発のあるべき方向を示唆することを目的としている。平成11年度は、第1に異文化語用論の文献研究を進め、特に日本人英語学習者の語用能力に関する研究を概観し、第2に高等学英校英語オーラル・コミュニケーションA教科書のうち、10冊に限定して予め設定した10個の発話行為について教科書の対話例をすべて抽出し、分析した。そして、抽出された発話の状況を、話者間の人間関係(社会的地位、社会的距離、発話行為の影響の重さ)における社会文化的適切さの視点から分析した。研究の結果、分析した教科書においては、発話行為を含む対話が年齢、人間関係などにおいて類似した人間関係をもとにして作成されており、逆に緊張関係を伴う対話(「不平を言う」など)は表れないことがわかり、異文化コミュニケーションにおける反対意見の陳述を含めた自己主張を支援する教材の必要性を指摘した。また、この研究実績の中間報告は、平成11年度中、3つの学会・研究会の場で口頭発表された。来年度はさらに残った高等学校英語オーラル・コミュニケーションA教科書の分析を完成するとともに、分析教科書の発話行為別データベース化を図り、発話行為別の特徴に焦点化した研究を深めるとともに、海外の代表的英語スピーキング教材を研究対象に広げ、今年度の研究と併せて日本人英語学習者の異文化コミュニケーション能力養成をめざした英語教材開発のあるべき方句を提言する。本研究は、近年のCross-cultural pragmaticsの研究を基盤とした英語教材開発に関する示唆的研究である。日本人英語学習者が外国語でコミュニケーションを行う際に生じるコミュニケーション上の誤解の原因を、話者間のものの見方、考え方、価値観、コミュニケーション・パタンなどに代表される文化の違いに起因するものと位置づけ、その原因を日本人学習者が中学校・高等学校で使用してきた教科書に表れた不適切なコミュニケーションの用例にあると仮定して、高等学校英語オーラルコミュニケーションA

教科書の語用論的分析を通して、日本の英語教科書の特徴を語用論の立場を援用しながら特定し、今後の教材開発のあるべき方向を示唆することを目的としている。平成11年度は文献研究を基盤に、あらかじめ設定した10種類の発話行為について教科書の対話例を抽出・分類し、英語語用論から見た日本の英語教材の特徴を指摘した。続いて、平成12年度は前年度の研究の際、アプリオリに設定した発話行為の種類がすべての対話例を包含できないことから、さらに2名の研究協力者を加えて分析結果の客観性を向上させ、先年度の研究成果を再度、精査し新たに2つの発話行為を追加して、対象とした全高等学校英語オーラルコミュニケーションA教科書の語用論的分析を完成させた。また、データベース化した教材分析結果から、特定の発話行為別対話例の分析が可能となる形式として成果をまとめることができた。
心筋細胞障害の成因と防御に関する基礎的研究

現代医学の重要課題である「心筋細胞障害の成因と防御」の問題を、62年度より重点領域研究として発展させるべく調査・討議を行った。その結果(1)心筋細胞の興奮・収縮機構,(2)心筋細胞機能の調節・適応と破綻,(3)心筋細胞の損傷・修復過程とその修飾因子、(4)虚血による心筋細胞障害とその防御機構,(5)心筋細胞障害と心作動物質,の5重点研究項目を掲げそれぞれの研究分担並びに担当者を設定することにより研究体制を組織した。本研究課題においては、細胞工学や遺伝子工学などの領域で蓄積されつつある知識と技術を心筋細胞障害の研究にいかに有効に導入するかが問題解決の成否を握ると考えられる。よって病態研究者並びに基礎科学研究者からなるワークショップ小班を総括班内に設置し、各研究項目の有機的整合を企るとともに、新たな研究シーズ発掘に向けて調査・立案することとした。その準備段階として、国内外の基礎生物科学研究者を招請し、公開シンポジウム「心筋細胞機能の制御機構ー分子生物学的アプローテー」(62年1月30日:大阪)を開催して、(1)心筋興奮におけるイオン動態,(2)細胞膜受容体を介する情報伝達,(3)心筋Ca輸送調節の分子機構,(4)心筋収縮蛋白質変換における遺伝子調節,などの研究課題の推進策について討議した。尚、本シンポジウムには約200名の心臓研究者の参加を得、本分野の今後の研究展開に大きなインパクトを与えた。
オーファンG蛋白質共役受容体を標的とした生体リズム中枢調節薬の創成

研究計画に従って、体内時計の中枢を標的としたG蛋白質共役型受容体シグナルに基づく中枢リズム調整薬の開発に向けた調査スクリーニングを行った。その結果、体内時計の周期長を調節するオーファンG蛋白質共役受容体Gpr176(Doi et al., NatureCommun 7:10583, 2016; Goto & Doi et al., Endocr J 64(6):571-579, 2017)を標的分子とした化合物探索研究においてGpr176の恒常的基礎活性を再現性良く制御する化合物を同定することに成功した。またさらに、昼寝の時刻の体温変動を制御するG蛋白質共役型受容体CALCR*(Goda & Doi et al., Genes Dev 32(2):140-155, 2018)についての詳細な発現マッピング解析を実施し、CALCRが体内時計の最高位中枢器官として機能する視床下部前野の視交叉上核に強く発現するとともに、それ以外の脳内領域にも発現することを明らかにした。これらの成果に加え、本年度は視交叉上核ニューロンに発現する新たなG蛋白質共役型受容体にも着目し、本受容体を特異的に欠損する遺伝子改変マウスを作出したうえで、当該マウスの恒常暗条件下の自発活動リズムおよびその光刺激に対する位相応答性についての表現型を確定することができた。このように、当初の計画どおりの探索研究を実施することができており、中枢時計を標的とした生体リズム調整薬の開発において今後の研究展開の基礎となる重要な所見を得ることができた。*, Calcitonin receptor(カルシトニン受容体).当初の研究計画に従って体内時計の中枢を標的としたG蛋白質共役型受容体シグナルに基づく中枢リズム調整薬の開発に向けた調査スクリーニングを行った結果、研究が順調に進み、予想を上まわる良好な研究成果をあげることができた。すなわち、体内時計の最高位中枢器官である脳内の視交叉上核を標的とした探索研究において、体温の日内変動パターンを規定する新たなG蛋白質共役受容体CALCRを同定することに成功した(Goda & Doi et al., Genes Dev 32(2):140-155, 2018)。これに加え、さらに重要な研究成果として、体内時計の周期長を制御するオーファンG蛋白質共役受容体Gpr176(Doi et al., Nature Commun 7:10583, 2016)を対象とした化合物スクリーニング研究においてGpr176の恒常的基礎活性を再現性良く制御する化合物を同定することに成功した。G蛋白質共役型受容体は薬理学上最も重要かつ効率の良い創薬標的である。オーファンG蛋白質共役型受容体の基礎活性を制御することのできる化合物の同定は、生体リズム調整薬の開発に向けて今後の研究展開の土台となる重要な成果であるといえる。前年度に引き続き、当初の研究計画に従って体内時計の中枢を標的としたG蛋白質共役型受容体シグナルに基づく中枢リズム調整薬の開発に向けた調査スクリーニングを行う。特に、前年度までの研究調査によって良好な結果が得られつつある下記の課題に重点をおいて研究を進める。具体的には、体内時計の最高位中枢器官である視交叉上核を標的とした探索研究において、体温の日内変動パターンを規定する新たなG蛋白質共役受容体CALCRを同定することに成功した(Goda & Doi et al, Genes Dev 32(2):140-155, 2018)。CALCRは視交叉上核以外の脳領域においても発現することが前年度までに行った我々の研究の結果から分かってきたので、今後はこの詳細な所見を土台に、体温の概日性制御の神経回路を明らかにする。また、我々は前年度までに大規模な化合物スクリーニングを行い、Gpr176の活性を再現性良く制御する化合物を同定することに成功した。今後、本化合物の分子作用メカニズムを明らかにする計画である。当初の予定通り、Gpr176下流のGzシグナルおよびRGS16を介したcAMPシグナルの時間的変動に着目し、中枢時計のG蛋白質共役型受容体シグナルの時間変動機構に迫る研究を強化してゆく計画である。この他、我々は視交叉上核に発現する新たなオーファンG蛋白質共役受容体に着目し、本受容体欠損が生体リズム機能に及ぼす影響を同定することができたため、今後、その背後の分子機構に迫る計画である。研究計画に従って、体内時計の中枢を標的としたG蛋白質共役型受容体シグナルに基づく中枢リズム調整薬の開発に向けた調査スクリーニングを行った結果、これまでに研究代表者らが見出していたオーファンG蛋白質共役受容体Gpr176(Doi et al., Nature Commun. 2016)およびその下流のG蛋白質シグナル制御因子RGS16(Doi et al., Nature Commun. 2011)に関連して、今回新たに体温のサーカディアンリズム調節の鍵を握る分子としてカルシトニン受容体Calcrを同定することに成功した(Goda & Doi et al., Genes & Development, 2018; Goto & Doi et al., Endocr J, 2017)。この受容体は、体内時計の最高位中枢器官である脳内の視交叉上核の一部のニューロンに発現し、体温の日内変動パターンを規定する。

同様のカルシトニン受容体ニューロン系はショウジョウバエにも存在し、ショウジョウバエにおいても同様に体温の時間依存的な適応に深く関与することから、本受容体を介した体温の日内変動制御は進化的に保存された原始的な仕組みであることがわかった。これら一連の研究成果は、エネルギー代謝や睡眠覚醒の制御に密接に関与する体温の日内制御において、これまで不明であった鍵となる脳内分子基盤を明らかにするものであり、新聞報道などにおいてもその発見の重要性が広く取り上げられた(朝日新聞2018年2月14日朝刊33面;京都新聞2018年2月14日朝刊1面;読売新聞2018年2月17日夕刊12面)。当初の研究計画に従って体内時計の中枢を標的としたG蛋白質共役型受容体シグナルに基づく中枢リズム調整薬の開発に向けた調査スクリーニングを行った結果、本年度は研究が大変順調に進み、予想を上まわる良好な研究成果をあげることができた。すなわち、脳内のサーカディアンリズム中枢が体温の日内リズムを生み出す神経回路において、体温変動調節の鍵となる新規受容体分子としてカルシトニン受容体を見出すことに成功した(Goda & Doi et al., Genes Dev 2018)。さらに、米シンシナティ病院との国際共同研究を実施し、このカルシトニン受容体ニューロン系を介した体温制御が哺乳類にのみならず昆虫のショウジョウバエにも共通にみられる分子機構であることを示すことができた(朝日新聞2018/2/14朝刊33面;京都新聞2018/2/14朝刊1面;読売新聞2018/2/17夕刊12面)。これらの成果は、生物種を超えた共通の体温制御の分子基盤に迫るものであり、エネルギー代謝や睡眠覚醒制御の創薬標的として新たなG蛋白質共役型受容体シグナルを示す極めて重要な所見であると考えられる。この他にも、中枢時計の周期長を制御するオーファン受容体Gpr176を標的とした創薬スクリーニング課題において、当初計画した以上の数の規模で化合物ライブラリー検索を実施することができた。このように、当該年度において計画した個々の研究課題で進展が得られた。研究計画に従って、体内時計の中枢を標的としたG蛋白質共役型受容体シグナルに基づく中枢リズム調整薬の開発に向けた調査スクリーニングを行った。その結果、体内時計の周期長を調節するオーファンG蛋白質共役受容体Gpr176(Doi et al., NatureCommun 7:10583, 2016; Goto & Doi et al., Endocr J 64(6):571-579, 2017)を標的分子とした化合物探索研究においてGpr176の恒常的基礎活性を再現性良く制御する化合物を同定することに成功した。またさらに、昼寝の時刻の体温変動を制御するG蛋白質共役型受容体CALCR*(Goda & Doi et al., Genes Dev 32(2):140-155, 2018)についての詳細な発現マッピング解析を実施し、CALCRが体内時計の最高位中枢器官として機能する視床下部前野の視交叉上核に強く発現するとともに、それ以外の脳内領域にも発現することを明らかにした。これらの成果に加え、本年度は視交叉上核ニューロンに発現する新たなG蛋白質共役型受容体にも着目し、本受容体を特異的に欠損する遺伝子改変マウスを作出したうえで、当該マウスの恒常暗条件下の自発活動リズムおよびその光刺激に対する位相応答性についての表現型を確定することができた。
自律神経系ペースメーカ機構の拡がり

生体内に、多様にかつ広範に分布する自発性活動・ペースメーカ活動を体系化することは、生理学や生物学の分野のみならず、消化器・泌尿器・循環器・呼吸器における適切な医学的診断・治療を今後進めるうえでも極めて重要である。本企画調査では、この広範な研究を統合して、その意義を深めるとともに、研究代表者を中心とした共同研究とセミナーを行ない、社会からの本研究に対するニーズにも答えうるプロジェクトの編成を意図した。それの具体化として、新規発足研究領域として特定領域研究に応募する為の本準備調査の成果をもとに、平成19年度に新規発足研究領域として特定領域研究に応募した。特定領域研究応募領域名は【ユビキタスペースメーカ系とその調節機構】である。構成員は本企画調査研究のメンバーが主要であるが、さらに多様な研究者の参入を図った。また、平成19年3月に行われる第84回日本生理学会大会における本研究代表者がオーガナイズしたシンポジウム「ユビキタスペースメーカ」のシンポジストとして英国からSusan Wray教授とカナダからJan Huizinga教授を招聘し、ユビキタスペースメーカについての情報交換をすると共に、今後の発展性について活発な議論を進める予定である。さらに、本研究代表者は、平成19年7月5-6日に奈良県橿原市で第49回日本平滑筋学会総会を開催するので、この総会で企画調査の成果の一部をシンポジウムの形式(ユビキタスペースメーカ)で発表する予定になっている。
横紋筋融解を引き起こす危険ドラッグに関する網羅的研究

大麻成分であるカンナビノイド(CB)と構造の類似した化合物が次々に合成され、拡散乱用され、幻覚や異常行動から、危険運転や突然死を惹起し、社会問題化している。初年度はSDラットに合成CB系薬物の1つであるMDMB-CHIMICAを投与し、その生理学的変化(血圧、脈拍、体温)、血液生化学的検査、組織学的検査を観察した。また、危険ドラッグ成分である25B-NBOMeにおいてはゼブラフィッシュにおいて骨格筋の破たんを確認している。これらについて学会発表および論文で報告した。本年度においてはMDMB-CMICAにおいて約5分間は無動(カタレプシー様)となり、小刺激で「のたうち回る」特異な行動をしめすことからその程度を3段階に分け評価した。これも学会発表および論文報告した。次にゼブラフィッシュを用いて薬剤投与後の刺激において特異な行動を示すことを発見し、学会発表および論文投稿準備中である。また、同時にラットにおいても薬剤投与後の光刺激による行動観察の準備を始めている。刺激による行動観察によってそれを分析することが危険ドラッグ等の危険薬剤のスクリーニングシステム構築に大きく関与すると考えられる。危険ドラッグの中でカンナビノイド(CB)と構造が類似した化合物がつき次に合成され、幻覚や異常行動から危険運転や突然死を惹起し社会問題化されている。本研究の前段階として合成CB系薬物の1つであMDMB-CHIMICAをラットに投与し、その生理学的変化(血圧、脈拍、体温)、血液生化学的検査、組織学的検査および行動を観察した。またCB受容体(CB1およびCB2)のアンタゴニストを投与し同様に観察した。その結果、MDMB-CHIMICA投与後、顕著な除脈が認められた。こらはCB1レセプターアンタゴニストがCB2レセプターアンタゴニストより強く抑制した。行動は投与後約5分間はカタレプシー様に無動となり、その後小刺激によって四肢伸展しながら転げまわるなどの異常行動が観察された。これをだいたい四頭筋でモニタリングしたところ、強い活動電位が確認され、これもまた優位にCB1レセプターアンタゴニストが抑えることが確認できた。次に、ゼブラフィッシュにおいて時系列で移動距離、速度および加速度等をしればるとともに組織学検査にて変化を観察する予定である。25B-NBOMeにおいてはゼブラフィッシュにおいて骨格筋の破たんを確認している。これについては論文として報告している。Genri Kawahara, Hideyuki Maeda, Ruri Kikura-Hanajiri, Ken-ichi Yoshida, Yukiko K. Hayashi The psychoactivedrug 25B-NBOMe recapitulates rhabdomyolysis in zebrafish larvae ForensicToxicol (2017). doi:10.1007/s11419-017-0366-9学会発表としては第85回日本法医学会学術関東地方集会および第178回東京医科大学医学会総会で発表している。危険ドラッグの入手困難な状況およびゼブラフィッシュにおける飼育のハンドリング。ただし、後者は完全に克服している。ゼブラフィッシュの繁殖が思うようにいかず必要量が確保できなかったが現在はそれを克服し予定通りに実験が遂行されている。当初の計画通り、危険ドラッグ投与・横紋筋融解の“マーカー"となる遺伝子を見出し、責任5-HT受容体を決定し、横紋筋融解に寄与する経路や機序を解明する。そして、その危険ドラッグをラットに投与し、骨格筋に、Zfと同様の“マーカー"分子の発現および、横紋筋融解に矛盾ない結果を組織及び血液生化学検査によって認めるかを確認し、さらに、危険ドラッグによる横紋筋融解症死亡例の骨格筋の“マーカー"分子発現を検証する。そして、道の危険ドラッグに対してもそのスクリーニングシステム作成のために努める。現在MDMB-CHIMICをゼブラフィッシュに投与してラットと同じような現象が起こるかどうかを確認しているところである。当初の計画通り、危険ドラッグの投与によって、行動異常および横紋筋融解のモデルを確立し、その"マーカー"となる遺伝子を見出しその寄与する経路や機序を解明する。また、未知の危険ドラッグにおいてもその危険性をスクリーニングできるシステム作成のために努める。実体顕微鏡購入選定に時間がかかってしまった。動物の購入及び管理費、薬剤の購入費に使用予定である。当初の計画通り実体顕微鏡を購入し、遅くとも平成29年5月に設置予定である。
交雑帯におけるナラ類の遺伝特性が森林昆虫の群集動態に及ぼす影響

植物の交雑帯では,植食性昆虫の形質や捕食者の利用資源など,群集の機能構造が多様化すると考えられる。ゴールの形質は,形成者と寄主植物の形質の相互作用によって決定される。植物の交雑帯では,種間交雑により寄主植物の形質が多様化することから,同一種のゴールの形質も多様化することが予想される。本年度は,この仮説を検証することを目的とし,以下の研究を実施した。ミズナラとカシワの同所的に生育する調査地として5地域を,交雑の生じない調査地(純林)としてミズナラ純林1地域,カシワ純林1地域を選定した。各調査地にトランセクトを設置し,トランセクト内に生育するナラ類個体の葉形態の定量化により,各調査地におけるミズナラとカシワの交雑頻度を推定した。各調査地の林縁で優占的なタマバチの一種のゴールを採集し,その形質の調査地間変異を解析した。ミズナラとカシワの交雑頻度は,調査地間で異なっていた。葉あたりゴール形成数の頻度分布は,ミズナラ純林と他の地域の間で異なっていたが,交雑帯とカシワ純林の間では,明確な違いは検出されなかった。ゴールの集中度およびサイズには,地域間の有意な差は認められなかった。一方,ゴールの各形質について変動係数を算出し,地域間で比較したところ,葉あたりゴール形成数について有意差が認められた。しかしながら,そのばらつきの大きさと各調査地の交雑頻度の間には,相関はみられなかった。以上のように,「植物の交雑帯ではタマバチ種の形質も多様化する」という仮説は棄却された。このことは,寄主植物の形質の種間差以外に,ゴールの形質に影響を及ぼす要因が存在することを示唆している。また,ゴールの形質は,タマバチ類を寄主する寄生蜂複合体の構造に影響を及ぼすことが知られているが,本年度の結果から,ゴールの形質の多様化という観点からは,ナラ類の交雑が寄生蜂複合体に及ぼす影響は弱いものと推察される。北海道各地の沿岸部にはカシワとミズナラの交雑帯が形成されている。一方,ナラ類は多種から構成されるタマバチ群集の寄主植物である。本年度の研究では,交雑由来のナラ類の遺伝変異が,タマバチ群集の構造に及ぼす影響を明らかにした。まず,北海道沿岸部において,ミズナラとカシワが同所的に生育する地域を選定し,8地点の調査地を設定した。また,対照地域として,ミズナラまたはカシワのみが生育する調査地を各1地点設定した。各調査地において,海岸線に近い部分,内陸に近い部分,およびその中間にベルトトランセクトを設定した。次に,ミズナラとカシワの種間雑種の存在を確認するため,トランセクト内に生育するナラ個体について,カシワ,ミズナラ,雑種個体を葉の形質にもとづいて判別した。その結果,ミズナラとカシワが同所的に生育している地域においては,両種の中間的な葉の形態を持ったナラ個体,すなわち雑種と推定される個体が確認された。したがって,これらの地域はミズナラとカシワの交雑帯であると考えられる。また,ミズナラ雑種カシワの遺伝的勾配に対するタマバチ類の反応を明らかにするため,トランセクト内のナラ個体から枝葉を採集し,出現したタマバチ種を記録した。そして,判別された樹種グループ(ミズナラ,カシワ,推定雑種)間で,タマバチ群集の種数,種構成,各種のアバンダンスを比較し,そのパターンの地域間の共通性を検討した。その結果,タマバチの種数の多い樹種グループは地域間で一貫していないこと,および,タマバチの種構成には樹種グループ間で明瞭な違いのないことが明らかとなった。しかしながら,一部のタマバチ種は,特定の樹種グループに多く出現した。したがって,タマバチ群集の構造に対するミズナラとカシワの種間交雑の影響は強いものではなく,一部のタマバチ種に対する感受性を通じて,部分的に作用するものであると推察される。交雑帯において,植食者に対する親種・雑種間の化学的防御レベルの変異は,生物群集の構成に影響を及ぼしているものと予想される。そこで本年度の研究では,この影響を検討するために,ミズナラ・カシワ交雑帯とゴール形成タマバチ群集に注目し,(i)親種・雑種におけるタンニン濃度を定量化して,(ii)これとタマバチ類の群集構造との関係を検討した。北海道沿岸部において,ミズナラとカシワが同所的に生育する5地域を調査地として設定した。また,ミズナラまたはカシワのみが生育する調査地各1地域を設定した。そして,各調査地につきナラ類2030個体から試料を採集し,タンニンによるタンパク質沈殿能をタンニン酸当量として定量化した。また,試料中に出現したタマバチの種と密度を記録した。葉中のタンニン濃度は地域間,樹木個体間で異なっていたが,樹種カテゴリ(ミズナラ,カシワ,推定雑種)間の差は有意ではなかった。このことから,ミズナラとカシワの種間交雑は,タンニンによる化学的防御レベルに関与していないものと考えられた。タマバチ類の種数,種構成ともに,同一地域における樹種カテゴリ間の違いは明確ではなかった。

タンニン濃度とタマバチの種数の関係についてみると,地域レベル,樹木個体レベルいずれにおいても両者間に相関は認められなかった。一方,タマバチ類の種構成の類似度とタンニン濃度の間には,地域レベルでは明瞭な関係は認められなかったものの,樹木個体レベルでは,一部の地域において,両者間に相関が認められた。また,各地域における優占種の密度とタンニン濃度との間には,明瞭な関係はみられなかった。以上のような,種間交雑-タンニン-タマバチ群集間の関係の弱さは,タマバチ類の群集構造に対してより大きく影響する,他の因子の存在を示唆している。植物の交雑帯では,植食性昆虫の形質や捕食者の利用資源など,群集の機能構造が多様化すると考えられる。ゴールの形質は,形成者と寄主植物の形質の相互作用によって決定される。植物の交雑帯では,種間交雑により寄主植物の形質が多様化することから,同一種のゴールの形質も多様化することが予想される。本年度は,この仮説を検証することを目的とし,以下の研究を実施した。ミズナラとカシワの同所的に生育する調査地として5地域を,交雑の生じない調査地(純林)としてミズナラ純林1地域,カシワ純林1地域を選定した。各調査地にトランセクトを設置し,トランセクト内に生育するナラ類個体の葉形態の定量化により,各調査地におけるミズナラとカシワの交雑頻度を推定した。各調査地の林縁で優占的なタマバチの一種のゴールを採集し,その形質の調査地間変異を解析した。ミズナラとカシワの交雑頻度は,調査地間で異なっていた。葉あたりゴール形成数の頻度分布は,ミズナラ純林と他の地域の間で異なっていたが,交雑帯とカシワ純林の間では,明確な違いは検出されなかった。ゴールの集中度およびサイズには,地域間の有意な差は認められなかった。一方,ゴールの各形質について変動係数を算出し,地域間で比較したところ,葉あたりゴール形成数について有意差が認められた。しかしながら,そのばらつきの大きさと各調査地の交雑頻度の間には,相関はみられなかった。以上のように,「植物の交雑帯ではタマバチ種の形質も多様化する」という仮説は棄却された。このことは,寄主植物の形質の種間差以外に,ゴールの形質に影響を及ぼす要因が存在することを示唆している。また,ゴールの形質は,タマバチ類を寄主する寄生蜂複合体の構造に影響を及ぼすことが知られているが,本年度の結果から,ゴールの形質の多様化という観点からは,ナラ類の交雑が寄生蜂複合体に及ぼす影響は弱いものと推察される。
筋電気刺激と血流制限を組み合わせた新たなトレーニング方法の開発

本申請課題では新たに考案した筋電気刺激と血流制限を組み合わせたトレーニング方法の筋肥大を効果的に導く至適な条件について明らかにすることを目的とした。これ迄に我々は、筋電気刺激と血流制限を併用することで、筋肥大に重要である筋疲労(発揮筋力の低下)とパンプアップが5分という短時間で生じることを確認している(未発表)。従って、5分間のトレーニング(5分×1セット)はこれまで実施していた20分間(5分×4セット)のトレーニングと同程度のトレーニング効果を獲得できるかもしれない。従って、3年目には1年目と2年目の研究から得られた筋疲労とパンプアップを効果的に導く筋電気刺激と血流制限の条件を用いて筋肥大を導くトレーニング時間について検証した。運動習慣のない成人男性5名を対象とした。片脚をそれぞれ5分間のトレーニングを実施する条件と20分間のトレーニングを実施する条件に無作為に振り分け、筋電気刺激と血流制限を併用したトレーニングを1日/2回の頻度で4週間おこなった。筋電気刺激(刺激周波数, 20Hz;パルス幅, 500μs)は電極パッドを大腿部前面に貼付して実施した。また、血流制限は大腿基部にタニケットを装着して、阻血にいたる血流制限圧の50%の圧を加えた。トレーニング期間の前後に、筋肥大の指標として大腿部前面の筋厚を超音波Bモードによって評価した。また、膝伸展時の最大筋力を筋機能測定装置によって評価した。その結果、大腿部前面の筋厚と膝伸展時の最大筋力はいずれの条件でもトレーニング後に増加した。しかしながら、20分間のトレーニングを実施した条件は5分間のトレーニングを実施した条件よりも有意に改善が認められた。以上のことから本申請課題で作成したトレーニングプロトコルで筋肥大を効果的に導く為には20分のトレーニングが効果的であることが示唆された。本研究の目的は、筋肥大を引き起こすために重要である筋のパンプアップ現象と筋電気刺激後の筋疲労を最も引き起こす筋電気刺激の刺激条件を検討することであった。運動習慣のない成人男性6名を対象とした。筋電気刺激は、1スタンダード条件(Std)、2中周波数条件(MF)、3高周波数条件(HF)の刺激条件を無作為に実施した。次の筋電気刺激の刺激条件を実施するまでには1週間の期間を空けた。筋電気刺激の刺激条件の違いがパンプアップ現象に与える影響を評価するために、筋電気刺激を実施する前後に超音波診断装置を使用して大腿部前面の筋厚を計測した。また、筋電気刺激の刺激条件の違いが筋疲労に与える影響を評価するために、筋電気刺激を実施する前後に筋機能測定装置を使用して膝伸展筋力を計測した。筋電気刺激後に生じた大腿部前面の筋厚の変化率は、Std条件が最も高値を示した(Std; 7%, MF; 3%, HF; 4%)。また、筋電気刺激後の発揮筋力の低下もStd条件が最も高値を示した(Std; 10%, MF; 5%, HF; 6%)。Std条件による筋電気刺激は、筋パンプアップ現象と筋疲労を他の刺激条件よりも効果的に導くことができる。昨年度の研究目的は、筋電気刺激の刺激条件の違いがパンプアップ現象と筋疲労に及ぼす影響を明らかにすることであった。研究の結果、筋肥大に重要とされるパンプアップと筋疲労を効果的に導く筋電気刺激の刺激条件を明らかにすることができた。本研究の目的は、筋肥大を引き起こすために重要である筋のパンプアップ現象と筋疲労を最も引き起こす血流制限圧を検討することであった。対象者の大腿基部にカフを装着し,内科後方にある後頸骨動脈上に脈波計を貼付した状態で筋電気刺激を大腿部前面に実施した。血流制限は、阻血に至る血流制限圧を100%とした際に、血流が30%、40%、50%、60%制限される条件を無作為に実施した。次の血流制限条件を実施するまでには1週間の期間を空けた。血流制限圧の違いがパンプアップ現象に与える影響を評価するために、血流制限を実施する前後に超音波診断装置を使用して大腿部前面の筋厚を計測した。また、血流制限圧の違いが筋疲労に与える影響を評価するために、血流制限を実施する前後に筋機能測定装置を使用して膝伸展筋力を計測した。さらに血流制限による痛みや主観的運動強度の指標としてCR10およびRPEを血流制限後に記録した。血流制限後に生じた大腿部前面の筋厚の変化は、40%および50%の制限圧で他の条件と比較して高値を示した。血流制限後の膝伸展筋力は、50%および60%の制限圧で他の条件と比較して高値を示した。RPEおよびCR10は、血流制限圧が低くなればなるほど低値を示した。以上のことから、50%の血流制限圧は筋電気刺激と組み合わせた際に他の条件と比較して筋のパンプアップ現象と筋疲労を同時に導くことが明らかになった。昨年度の研究目的は、血流制限圧の違いがパンプアップ現象と筋疲労に及ぼす影響を明らかにすることであった。研究の結果、筋肥大に重要とされるパンプアップと筋疲労を効果的に導く血流制限の条件を明らかにすることができた。

本申請課題では新たに考案した筋電気刺激と血流制限を組み合わせたトレーニング方法の筋肥大を効果的に導く至適な条件について明らかにすることを目的とした。これ迄に我々は、筋電気刺激と血流制限を併用することで、筋肥大に重要である筋疲労(発揮筋力の低下)とパンプアップが5分という短時間で生じることを確認している(未発表)。従って、5分間のトレーニング(5分×1セット)はこれまで実施していた20分間(5分×4セット)のトレーニングと同程度のトレーニング効果を獲得できるかもしれない。従って、3年目には1年目と2年目の研究から得られた筋疲労とパンプアップを効果的に導く筋電気刺激と血流制限の条件を用いて筋肥大を導くトレーニング時間について検証した。運動習慣のない成人男性5名を対象とした。片脚をそれぞれ5分間のトレーニングを実施する条件と20分間のトレーニングを実施する条件に無作為に振り分け、筋電気刺激と血流制限を併用したトレーニングを1日/2回の頻度で4週間おこなった。筋電気刺激(刺激周波数, 20Hz;パルス幅, 500μs)は電極パッドを大腿部前面に貼付して実施した。また、血流制限は大腿基部にタニケットを装着して、阻血にいたる血流制限圧の50%の圧を加えた。トレーニング期間の前後に、筋肥大の指標として大腿部前面の筋厚を超音波Bモードによって評価した。また、膝伸展時の最大筋力を筋機能測定装置によって評価した。その結果、大腿部前面の筋厚と膝伸展時の最大筋力はいずれの条件でもトレーニング後に増加した。しかしながら、20分間のトレーニングを実施した条件は5分間のトレーニングを実施した条件よりも有意に改善が認められた。以上のことから本申請課題で作成したトレーニングプロトコルで筋肥大を効果的に導く為には20分のトレーニングが効果的であることが示唆された。昨年度の研究ではパンプアップと筋疲労を導く筋電気刺激の刺激条件について検討した。引き続き本年度は、パンプアップと筋疲労を導く血流制限の制限条件について検討して行く予定である。これまで申請者らは、筋電気刺激と血流制限を併用することで、発揮筋力が5分ほどの短時間で著しく低下し、筋疲労が生じていることを観察している(未発表データ)。従って、5分間のトレーニングで、これまで実施していた20分間(5分×4セット)のトレーニングと同程度のトレーニング効果を得ることができるかもしれない。従って、1年目と2年目の研究から得られたエビデンスに基づき、最も至適と思われる筋電気刺激と血流制限の条件を組み合わせたトレーニングをおこない、効率がよいトレーニング時間を明らかにする。
実測調査に基づいたデルフォイのアテナ・プロナイア神域の研究

1)遺構現状図面の作成デルフォイのアテナ・プロナイア神域の「トロス(円形建物)」の調査は、平成7年に引き続き、平成8年の夏に行われた。(科学研究費国際学術研究による)本研究では、この現地調査をもとにトロスについて縮尺1/30の平面図、断面図、および解体された大理石部材の縮尺1/5の図面を作成した。平面図については、7年に空中撮影した写真をもとに日本で図化した図面を、現地でさらに手を入れて完成した。2)設計法および施工法の分析トロスは地盤の緩みで変形し、本来の直径が不明確であった。分析の結果、基壇の直径は13.4870mと計算され、古代尺の45尺と考えられる。各部は他のギリシア建築と同様に、比例をもとに設計されているが、アテネのパルテノン神殿と似た4:9の比例が見られ、材料がアッティカのペンテリ産の大理石であることと合わせて、興味深い事実を示している。3)本研究の評価本研究のまず第一の価値は、研究の一級資料として遺構のドキュメントを作成したことである。なぜなら、今回得られた詳しい遺構の図面と寸法データは、何にも代え難いものであり、世界中の研究者に共有されるものとなるからである。第二の価値は、これらの結果をもとに建築の設計および施工の点から分析をし、トロスの建築的な研究の面から新しい知見を得たことである。その結果については、日本建築学会九州支部の研究報告に発表した。この研究はまだ途上にあるが、今後さらに研究を進めるつもりである。1)遺構現状図面の作成デルフォイのアテナ・プロナイア神域の「ドリス式宝庫」と「円形建物(トロス)」の調査は、平成7年の夏に行なわれた。(科学研究費国際学術研究による。)本研究では、この現地調査のデータをもとに、「ドリス式宝庫」について縮尺1/20の平面図、立面図、および解体された大理石部材の縮尺1/5の図面を作成した。また「円形建物」については、空中撮影による写真実測の結果から、立面図および大理石部材2個の図面を作成した。作成図面の総数は45枚である。2)設計法および施工法の分析ドリス式宝庫は、遺構の残存状況が悪く、実測結果からまず主要部の寸法を復元することが重要であった。調査データの分析から、基礎の寸法が側面10.452m正面7.321mスタイロベート(基壇)の寸法が側面9.772m、正面6.650mと考えられる。円形建物は地盤の緩み等で変形し、基壇の直径に最大12.7センチの誤差が生じ、本来の直径が不明確であった。設計は7尺をモデュールとして各部が設計されたと考えられる。3)本研究の評価および報告書1)遺構現状図面の作成デルフォイのアテナ・プロナイア神域の「トロス(円形建物)」の調査は、平成7年に引き続き、平成8年の夏に行われた。2)設計法および施工法の分析トロスは地盤の緩みで変化し、本来の直径が不明確であった。

各部は他のギリシア建築と同様に、比例をもとに設計されているが、アテネのパルテノン神殿と似た4:9の比例が見られ、材料がアッティカのペンテリ産の大理石であることと合わせて、興味深い事実を示している。3)本研究の評価本研究のまず第一の価値は、研究の一級資料として遺構のドキュメントを作成したことである。なぜなら、今回得られた詳しい遺構の図面と寸法データは、何にも代え難いものであり、世界中の研究者に共有されるものとなるからである。第二の価値は、これらの結果をもとに建築の設計および施工の点から分析をし、トロスの建築的な研究の面から新しい知見を得たことである。その結果については、日本建築学会九州支部の研究報告に発表した。この研究はまだ途上にあるが、今後さらに研究を進めるつもりである。
肝臓における糖脂質代謝関連遺伝子の新規な発現制御経路の同定とその解析

本研究計画は肝臓の糖脂質代謝関連遺伝子の新規な発現制御経路を同定し、その調節メカニズムを明らかにすることにより、糖尿病や高脂血症などの代謝異常症の病態の理解と治療法の開発に繋げようというものである。今年度は肝臓において糖産生の抑制と脂肪酸合成の抑制に重要な機能を果たす転写因子STAT3の活性制御メカニズムについて検討した。肝臓においてSTAT3はインスリン作用により活性化するが、中枢神経特異的インスリン受容体欠損マウスではこの作用が減弱しており、また脳室内にインスリンを注入すると肝臓のSTAT3の活性化が観察された。これはインスリンが中枢神経における作用を介して肝臓のSTAT3のリン酸化を促すことを示す知見である。また肝臓特異的STAT3欠損マウスでは脳室内インスリン注入による肝臓糖産生抑制能が低下しいることを見出し、STAT3は中枢性インスリン作用に発現に重要な機能を果たす因子であることを明らかとした。また、肝臓の遺伝子転写制御におけるインスリンの作用とグルコースの作用の重要性の解析も行った。肝臓特異的PDK1欠損マウスはインスリン作用の発現に中心的な機能を果たすPDK1を欠損することにより、肝臓のインスリン作用が遮断されるとともに、グルコキナーゼの発現が低下するために二次的にグルコース作用も低下したモデルマウスである。肝臓特異的PDK1欠損マウスにグルコキナーゼを再発現させることにより、インスリンシグナルは遮断されるがグルコースシグナルはほぼ正常化したモデルマウスを作成し得た。このマウスの解析により、SREBP1cやグルコース6リン酸脱リン酸化酵素などの遺伝子発現にはインスリン作用が、ピルビン酸キナーゼや脂肪酸合成酵素、PEPCKなどの遺伝子発現意はグルコース作用がより優勢な機能を果たすことを明らかとした。転写因子KLF15は腎臓においてClチャネル遺伝子の発現に関わることが明らかとなっているが、主要臓器の中では肝臓に最も発現が高い。KLF15の遺伝子発現がマウス肝臓において絶食により増加し、摂食において減少することを見出した。また高インスリン正常血糖クランプを行っても、肝臓のKLF15の発現は抑制されることから、KLF15の発現制御にはインスリンが重要な機能を果たすことが明らかとなった。また、肥満インスリン抵抗性モデルマウスであるdb/dbマウスの肝臓ではKLF15の発現は亢進していた。初代培養肝細胞ではKLF15の発現はグルココルチコイドやcAMPによって誘導され、インスリンによって抑制された。このような発現変動は糖新生系酵素であるPEPCKの遺伝子の発現変動と平行していた。培養肝細胞にKLF15を強制発現するとPEPCK遺伝子の発現が誘導やプロモーター活性の増強を認めた。以上のような知見から、KLF15はPEPCK遺伝子の発現に関わることが示唆された。転写因子Stra13の遺伝子発現はマウス肝臓において絶食により低下し、摂食において増加した。また肝臓特異的にPI3キナーゼの優位抑制型変異体を強制発現したマウスでは肝臓のStra13の発現は抑制されていた。初代培養肝細胞ではStra13の発現はインスリンによって誘導され、このインスリンの作用はPI3-キナーゼの薬理学的阻害剤により抑制された。このことからStra13は個体レベルにおいても細胞レベルにおいても、インスリンによりPI3-キナーゼ依存性に誘導されることが明らかとなった。db/dbマウスやインスリン欠乏性のSTZ糖尿病マウスの肝臓にStra13を強制発現すると、血糖値が著しく低下した。すなわち、Stra13はインスリンによって制御され、インスリンの血糖降下作用において重要な機能を果たす転写因子であることが示唆された。今年度は肝臓において糖産生の抑制と脂肪酸合成の抑制に重要な機能を果たす転写因子

STAT3の活性制御メカニズムについて検討した。肝臓においてSTAT3はインスリン作用により活性化するが、中枢神経特異的インスリン受容体欠損マウスではこの作用が減弱しており、また脳室内にインスリンを注入すると肝臓のSTAT3の活性化が観察された。これはインスリンが中枢神経における作用を介して肝臓のSTAT3のリン酸化を促すことを示す知見である。また肝臓特異的STAT3欠損マウスでは脳室内インスリン注入による肝臓糖産生抑制能が低下しいることを見出し、STAT3は中枢性インスリン作用に発現に重要な機能を果たす因子であることを明らかとした。また、肝臓の遺伝子転写制御におけるインスリンの作用とグルコースの作用の重要性の解析も行った。肝臓特異的PDK1欠損マウスはインスリン作用の発現に中心的な機能を果たすPDK1を欠損することにより、肝臓のインスリン作用が遮断されるとともに、グルコキナーゼの発現が低下するために二次的にグルコース作用も低下したモデルマウスである。肝臓特異的PDK1欠損マウスにグルコキナーゼを再発現させることにより、インスリンシグナルは遮断されるがグルコースシグナルはほぼ正常化したモデルマウスを作成し得た。このマウスの解析により、SREBP1cやグルコース6リン酸脱リン酸化酵素などの遺伝子発現にはインスリン作用が、ピルビン酸キナーゼや脂肪酸合成酵素、PEPCKなどの遺伝子発現意はグルコース作用がより優勢な機能を果たすことを明らかとした。
エミシとは誰だったのか-学際的研究で探る東北古代人の人類学的・考古学的実像-

東北、関東の5遺跡から出土した合計22個体の古墳人骨からDNAを抽出した。得られたDNA溶液中のミトコンドリアDNAのハプログループを決定し、その種類と頻度を東北地方縄文時代人および現代人と比較検討した。その結果、東日本古墳時代人の遺伝的特徴は東北地方縄文時代人とは大きく異なる一方、現代人には非常に近かった。この結果は、古墳時代には既に、渡来型弥生人の遺伝的影響が東日本においても集団の主体をなすほど大きくなっていた可能性を示していると考えられた。八幡神社遺跡試料を初め、解析対象の古墳人骨の保存状態が予想より悪かったこと、また、縄文時代人に比べて観察されるミトコンドリアDNAの遺伝子型の多様性が高かったことから、東アジア人集団にみられるミトコンドリアDNA多型を網羅的に検出でき、かつ従来の方法より検出感度の高い新しい一塩基置換解析システムを、Amplified Product-Length Polymorphism (APLP)法を用いて構築し、報告した。このシステムを、本土日本より遙かに平均気温の高い台湾の少数民族である平埔族の古人骨DNA解析に適用したところ、良好な成績が得られ、本法の有用性が確認された。また、青森県尻労安部洞窟出土の2本の遊離歯について、形態人類学的解析、年代測定および食性分析、DNA解析を組み合わせた理化学的な個人識別をおこない、この2本の遊離歯が極めて高い確率で同一人物由来のものであることを明らかにした。年代測定の結果、これらの試料は約4000年前の縄文中期のものであることが明らかとなり、本研究は法医学領域で個人識別に用いられているShort Tandem Repeat (STR)解析を古人骨に適応した本邦最古の事例となった。この研究の結果、尻労安部洞窟出土試料中のDNAの保存状態が古人骨のそれとしては例外的に良好であることが明らかとなった。現在、この試料について次世代シークエンサーを用いた核ゲノムの網羅的解析が進行中であり、その成果は日本列島の基層集団の遺伝子型を明らかにする上で多大な貢献があるものと考えられる。昨年度までの研究で、古墳時代人骨中のDNAが想像以上に劣化していることが明らかとなった。このため、こうした超高度変性試料においても集団遺伝学的解析を可能にするための解析システムの樹立に取り組んだ。こうした試料の解析においては我々が継続的に開発を続けているAmplified Product-Length Polymorphisms (APLP)法が有効である。そこで、従来のミトコンドリアDNAのみならず、核DNAについても本法を用いた個人識別システムを設計し、論文として発表した。また、従来のAPLP法では、競合する2つのプライマーのいずれかの5'末端に非相補的な塩基配列を追加することにより増幅産物の長さの違いを生み出し、これを電気泳動で検出することで1塩基置換の有無を検出していた。しかし、この方法では、テンプレートとなるDNAの塩基配列によっては、電気泳動時のPCRバンドの分離が不明瞭になる欠点があった。そこで、競合プライマーの5'末端に、従来の塩基ではなくイノシンをフラップとして追加することで、この欠点を克服する方法を開発し、論文として発表した。さらに、上記のイノシンフラップによる新しいAPLP法をミトコンドリアDNAのハプログループ解析に応用し、合計84個の1塩基多型および欠失/挿入多型を検出するシステムを開発し、論文として投稿中である。加えて、この新しいAPLP法を用いた性別判定用プライマーセットも開発しており、これを用いた縄文時代人骨の性別判定にも成功している。この成果については、既に論文として投稿し、受理されている。本年度の研究で、従来の方法では遺伝的情報を得ることが困難だった試料からも、ミトコンドリアDNAのみならず、核DNAについても解析することが可能となった。これによって、従来の方法では解析できなかった試料についても解析成功の目処が立った。さらに、2016年3月に入り、縄文時代人骨と形態的特徴が類似する個体が含まれていることで知られる、宮城県石巻市五松山洞窟遺跡出土人骨の解析について、石巻市教育委員会から正式な解析の許可を得ることができた。さらに、東北地方唯一の状態の良い弥生人骨である岩手県花巻市アバクチ洞窟遺跡出土の小児人骨について、既にDNAの抽出が成功しており、予察的な解析も終了している。28年度はこれらの人骨の詳細な解析をおこなうことで、典型的な古墳人骨である横穴式古墳人骨とは異なる、東北地方の弥生時代以前の人々の遺伝的特徴を明らかにできることが期待される。東北、関東地方の5遺跡から出土した、合計22個体の古墳時代人骨からDNAを抽出した。得られたDNA溶液中のミトコンドリアDNA(mtDNA)のハプログループを、Kakuda et al.(2016)のMultiplex Amplified-Product Length polymorphisms法を用いて決定した。これら東日本の古墳時代人骨にみられたハプログループの種類および頻度を、東北地方縄文時代人および現代人のそれと比較することで、東日本古墳時代人の遺伝的特徴について検討した。22個体のうち、ハプログループの決定が可能だった試料は13個体であり、観察されたハプログループは10種類であった。その種類及び頻度を東北地方縄文時代人および東北地方現代人と比較検討したところ、東日本古墳時代人には以下のような特徴があることが明らかとなった。1)東北地方縄文時代人との共通性が少ない。今回観察されたハプログループのうち、共通しているのはN9b1のみであり、その頻度も低い。

2)現代日本人で多くみられるハプログループD4(現代日本人に観察されないD4h2を除く)の頻度が高い。3)東北地方縄文時代人に観察されないハプログループが8種類(M7a1, D4a, D4j, F1b, G1a, D5b2, N9a, M9a)もある。これらの特徴を総合すると、東日本古墳時代人のmtDNAの遺伝子型は、東北地方縄文時代人より現代人に明らかに近いことが明らかとなった。即ち、古墳時代には既に東日本縄文時代人の遺伝的影響が相当減少していた可能性がある。言い換えれば、稲作農耕文化を日本列島にもたらした渡来系弥生人集団の遺伝的影響は、古墳時代には既に、関東・東北地方においても集団の主体をなすほどに大きくなっていた可能性があることが示された。東北、関東の5遺跡から出土した合計22個体の古墳人骨からDNAを抽出した。得られたDNA溶液中のミトコンドリアDNAのハプログループを決定し、その種類と頻度を東北地方縄文時代人および現代人と比較検討した。その結果、東日本古墳時代人の遺伝的特徴は東北地方縄文時代人とは大きく異なる一方、現代人には非常に近かった。この結果は、古墳時代には既に、渡来型弥生人の遺伝的影響が東日本においても集団の主体をなすほど大きくなっていた可能性を示していると考えられた。研究実績の概要で述べたごとく、東アジア人集団にみられるミトコンドリアDNA多型を網羅的に検出でき、かつ、従来の方法より検出感度の高い新しい一塩基置換解析システムの構築が昨年度で完了しており。このシステムを用いれば状態の不良な試料についてもかなりの正確性を持って試料の遺伝子型を決定できる。また、現在国立科学博物館人類研究部に収蔵されている、宮城県石巻市五松山洞窟遺跡出土人骨について解析の許可を得る目処が立った。この人骨は縄文時代人骨との形態的類似性が指摘されており、また、その保存状態は極めて良好であることから、この試料の解析結果は東北地方の古墳時代人に縄文時代人の遺伝的要素がどれだけ残存しているのかを推定する上で極めて重要である。上記のごとく、東北地方の人類史を解明する上で極めて貴重な試料である宮城県石巻市五松山洞窟遺跡および岩手県花巻市アバクチ洞窟遺跡出土人骨の解析を進める。アバクチ洞窟遺跡人骨については既に予察的な解析が終了しており、DNAの状態が良好であることを確認済みである。また、五松山洞窟遺跡人骨についても保存状態は良好であり、DNA解析が成功する可能性が高いものと考えられる。生物学昨年度で、状態の良好な試料については次世代シークエンサーを用いた核ゲノムの網羅的解析をおこなう体制が整った。この解析で得られる情報量は莫大であり、その成果は日本列島の人類集団の時代的変遷を明らかにする上で重要な貢献となることが期待される。消耗品購入時に極力安価なものを選んだ結果、使用額に余裕が生じたため。消耗品の購入時に極力安価なものを選んだ結果、使用額に余裕が生じたため。次年度の消耗品購入に充てる予定。次年度の消耗品購入に当てる予定。