hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
イネ科植物の鉄欠乏応答遺伝子発現制御に関する研究

イネ科植物の鉄欠乏に応答して遺伝子の発現を引き起こすシスエレメントIDE1とIDE2に結合する転写因子の検索とそれらの解析を行った。IDEF1とIDEF2、二つの転写因子を単離・同定することに成功した。また、鉄獲得に重要な転写因子IRO2も単離した。これらの転写因子を用いて鉄欠乏耐性の組換え植物を作成した。DEF1、IDEF2、OsIRO2が鉄欠乏応答に関与する多段階の遺伝子制御ネットワークを担うによって鉄欠乏応答性と耐性を制御することを明らかにした。イネ科植物の鉄欠乏応答性のシスエレメントIDE1、IDE2に結合する転写因子の検索を行った。IDE1はこれまでに知られている転写因子の中でも植物特有の転写因子ファミリーABI3/VP1の未だ解析されていないサブグループに属し、IDE1内のCATGC配列に特異的に結合することが分かった。IDEF1を恒常的にタバコで高発現させると鉄欠乏の根でのみIDE1を介した発現が活性化された。さらに鉄欠乏応答性IDS2プロモーターの制御下でIDEF1を発現させた形質転換イネは、鉄欠乏水耕液での鉄欠乏クロロシスの進行が遅く、石灰質アルカリ土壌で良好な初期生育を見せた。この形質転換イネは鉄欠乏条件下での二価鉄トランスポーター遺伝子OsIRT1と鉄欠乏誘導性の転写因子OsIRO2の発現を促進させた。IDEF1は鉄欠乏応答に関与する多段階の遺伝子制御ネットワークの初期段階を担うことによって鉄欠乏耐性と耐性を制御することがわかった。イネの鉄欠乏誘導性bHLH型転写因子OsIRO2はムギネ酸類の生合成経路に関わる酵素遺伝子、鉄トランスポーター遺伝子の発現制御に必須である。このOsIRO2の過剰発現イネは非組換えイネに比べてムギネ酸類生合成経路の遺伝子の発現が高く、ムギネ酸類の分泌量も多かった。以上から、イネ科植物においては、鉄欠乏というシグナルが何らかの形で伝えられ、それを受け取って、まず、IDEF1の機能が活性化され、OsIRO2のような上流にIDE1を持つ遺伝子の発現が誘導させる。そして、OsIRO2によってムギネ酸類生合成に関わる遺伝子およびさらに下流の転写因子、鉄欠乏誘導性遺伝子の発現へとつながっていく遺伝子発現ネットワークが新たに明らかとなった。酵母を用いたone-hybridスクリーニングによりIDE2に結合する転写因子の検索を行った。鉄欠乏処理をしたイネの根から作成したcDNAライブラリーを用いた。スクリーニングにより新規な転写因子IDEF2を単離した。またその相同遺伝子をオオムギからも単離した。IDEF2はNAC転写因子ファミリーに属し、これまでは明らかにされていないグループに存在する。ゲルシフト電気泳動解析およびcyclic amplification andselection of targets実験によってIDEF2はIDE2に存在するCA(A/C)G(T/C)(T/C/A)(T/C/A)を結合認識配列とすることが分かった。IDEF2遺伝子の発現はイネの根と地上部では恒常的であった。RNAiおよびCRES-TによりIDEF2の機能を欠損させた組換えイネでは,鉄の恒常性に異常が起こった。通常のイネで鉄欠乏で発現の誘導される二価鉄ニコチアナミンのトランスポーターであるOsYSL2がIDEF2機能欠損イネでは発現誘導されなくなった。また、このIDEF2機能欠損イネでの発現が抑制された遺伝子のプロモーター領域の多くでIDE2様配列が見出された。これまでの結果ともあわせてIDEF1、IDEF2、OsIRO2が鉄欠乏応答に関与する多段階の遺伝子制御ネットワークの初期段階を担うによって鉄欠乏応答性と耐性を制御することが明らかになった。
鉛の土壌中金属酸化物への選択的濃縮現象：メカニズムの解明と先駆的浄化技術への活用

鉛による土壌汚染は我が国における重要な環境問題である。本研究では、土壌に含まれるアナターゼなどの金属酸化物への鉛の濃縮現象の重要性を評価し、この自然現象を生かした磁力選別による土壌浄化処理技術の開発を目指した。本研究で対象とした土壌の場合、30%以上が土壌中のアナターゼに収着していることが分かった。これは、酸化鉄に収着している鉛よりも高い割合であった。また、アナターゼが有する磁性を利用した磁力選別による土壌洗浄技術の検討を行った結果、アナターゼの表面を鉄が一部コーティングしており、この鉄により粒子全体の磁性が高まっていることが示唆された。鉛による土壌汚染は我が国における深刻な環境問題となっている。そのため、既存技術より高効率で安価な鉛汚染土壌処理技術の開発が望まれているが、新技術の開発には土壌中における鉛の収着形態に関する理解を深めることが不可欠である。本研究の最終目的は、土壌中に含まれる金属酸化物が鉛を含む重金属類の土壌中挙動に及ぼす影響を明らかにし、その自然現象を活用した新しい土壌浄化技術を開発することである。本年度は、各種の金属酸化物およびカオリナイトを収着剤として用いて、鉛などの有害物質が金属酸化物に収着するメカニズムの解明を試みた。具体的には、1)バッチ実験による収着性の評価、2)XANESによる収着形態の解析、3)TEM-EDSによるビジュアル的観察、その結果、下記のことが明らかとなった。まず、土壌中に含まれる金属酸化物は鉛などの有害物質をカオリナイトより高効率に収着することが分かった。また、XANESおよびTEM-EDSによる解析により、本実験条件下における固形として析出している鉛の割合を定量的に評価することができた。また、QCM(水晶振動子マイクロバランス)を用いた実験からは有意義な結果が得られなかったが、バッチ実験により速度論的考察を行った結果、今回検討した金属酸化物は鉛の収着は比較的早く、10分以内に平衡に達することが分かった。本年度の大きな目標として計画していた「鉛の析出物の化学形態を同定し、さらにそのメカニズムを解明すること」については、ほぼ完了したため。【検討項目1】デキシークレーを用いて作製した人工汚染土壌において、鉛が二酸化チタンに析出している割合の明確化を行った。具体的には、鉛が二酸化チタンに析出している割合を明らかにすることで、磁力選別で得られる最大の除去率を把握した。【検討項目2】デキシークレーを用いて作製した人工汚染土壌に対して、有機物質の含有量が鉛・砒素の除去率に与える影響を評価した。【検討項目1に対する実験結果】デキシークレーには、鉛(II)イオンと高い親和性を示すことが知られている酸化鉄が1.7wt.%含まれている。このことを踏まえ、本研究では5ステップで鉛の分画を行った。その結果、本研究で検討した人工汚染土壌の場合、アナターゼに収着している鉛が全体の32%以上を占めており、酸化鉄に吸着している鉛と合計すると50%以上の鉛が金属酸化物に収着していることが分かった。この結果は、磁力選別により酸化鉄およびアナターゼを除去できれば、50%以上の鉛を除去できる可能性を示している。【検討項目2に対する実験結果】日本エリーズマグネチックス株式会社のフェラストラップ(表面磁力1.5T)を用いて、固液比1:20 (100 g : 20L )の一定条件下で反応時間が重金属の除去率に及ぼす影響を検討した。なお、土壌の汚染濃度は736mg-Pb/kg-soilおよび490mg-As/kg-soilである。その結果、重金属の除去率は時間と共に増加するが、24時間以降の更なる除去は得られず、最大27%(鉛)および42%(ヒ素(V))の除去率にとどまった。また、有機物含有汚染土壌では20%以下の低い低下率であった。本年度は、鉛がデキシークレー中の二酸化チタンに選択的に収着している割合を実験的に(定量的に)求める手法の開発など、有意義な結果が得られた。しかしその一方で、フェラストラップによる重金属の除去率は特に有機物含有土壌では低かったため、来年度に更なる改善が必要であることも分かった。これらのことを踏まえると、これまでは研究はおおむね順調に進展していると言える。今年度は磁力選別による土壌浄化処理技術の開発を目指し、日本エリーズマグネチックス株式会社のフェラストラップ(表面磁力1.5T)を用いて、固液比1:20 (100 g : 2L)の一定条件下で、反応時間が重金属の除去率に及ぼす影響などを検討した。なお、汚染土壌に含まれる鉛およびヒ素(V)の濃度はそれぞれ736mg-Pb/kg-soilと490mg-As/kg-soilである。その結果、重金属の除去率は時間と共に増加するが、24時間以降の更なる除去は得られず、鉛は15%-76%(平均22%)、そしてヒ素(V)は22%-85%(平均30%)の除去率が得られた。これらの値は同じ実験を10回繰り返して得られた除去率の範囲であるが、ばらつきが大きい理由は現時点では不明である。しかし、有機物含有汚染土壌では20%以下の低い除去率であった。

この理由としては、本研究で対象としたデキシー産カオリナイトに含まれるアナターゼ粒子が小さいために磁力が作用しにくいこと、そして土壌粒子との凝集性が高いことが要因と考えられた。そこで、未汚染のデキシー産カオリナイトに収着実験後のアナターゼ(大きさは約50 nm程度でデキシー産カオリナイトに含まれるアナターゼより大きい)を添加して同様の実験を行った。しかし、鉛・ヒ素(V)共に除去率の大幅な向上は得られなかった。このことから、デキシー産カオリナイトではアナターゼの表面を鉄が一部コーティングしており、この鉄により粒子全体の磁性が高まっていることが示唆された。鉛による土壌汚染は我が国における重要な環境問題である。本研究では、土壌に含まれるアナターゼなどの金属酸化物への鉛の濃縮現象の重要性を評価し、この自然現象を生かした磁力選別による土壌浄化処理技術の開発を目指した。本研究で対象とした土壌の場合、30%以上が土壌中のアナターゼに収着していることが分かった。これは、酸化鉄に収着している鉛よりも高い割合であった。また、アナターゼが有する磁性を利用した磁力選別による土壌洗浄技術の検討を行った結果、アナターゼの表面を鉄が一部コーティングしており、この鉄により粒子全体の磁性が高まっていることが示唆された。当初の計画通り、1)金属酸化物表面への析出現象の重要性評価2)先駆的な土壌浄化技術の提案を行う。2016年度で得た研究結果から、磁力選別により酸化鉄およびアナターゼを除去できれば、50%以上の鉛を除去できる可能性が示された。しかし、磁力選別実験によって得られた除去率は最大27%(鉛)および42%(ヒ素(V))であり、さらに有機物の存在により磁力選別の効果は大きく低下した。これらの研究結果を踏まえ、2017年度は、鉛がアナターゼに選択的に収着する現象をさらに追求すると同時に、2016年度に用いたデキシークレー以外の土壌(ジョージアカオリナイトを予定)を用いた実験を行う。さらに、通常の土壌に含まれる金属酸化物の大きさを考慮した上で、2016年度に行った磁力選別と同様の実験を継続して行っていく予定である。繰り返しになるが、我が国の汚染土壌は環境基準を大幅に超過する場合は少ない。そのため、50%の除去率が得られれば十分実用化の見通しがあると考えられる。29年度が最終年度であるため、記入しない。環境工学29年度が最終年度であるため、記入しない。
迷走神経活動電位の低侵襲的計測法の開発

頚部において迷走神経本幹は総頚動脈と内頚静脈が作る鞘内を走行する。そこで、迷走神経本幹に微小電極を刺入と頚部神経血管鞘内に双極電極留置し、迷走神経の電気活動を導出できるか検討した。微小電極ではハムの混入で明らかな迷走神経の活動電位は見られなかった。双極電極では周期的な2相性の波形が観察された。双極電極で観察された2相性の波形は、迷走神経の活動に関係しているかは今後の課題である。実験の目的迷走神経活動電位の観察は、臨床の場において非常に有用であると期待されているが、低侵襲的な手法は開発されていない。本研究は、低侵襲的迷走神経活動電位記録法の導出条件の基礎的検討を行った。本実験は、熊本大学動物実験等に関する規則第11条第2項の規定に基づき、承認された。目的:実験犬で頚部迷走神経と大腿部交感神経の自発放電を導出すること対象:実験犬であるメスビーグル3匹方法麻酔麻酔導入:メスビーグルに静脈路確保後、チアミラール250mgにて麻酔導入し、気管挿管した。麻酔の維持:イソフルラン1.5%と酸素1.5Lと笑気1.5Lを用いた。筋電図の混入を避けるため、臭化ベクロニウムを1.0μg/kg/minで投与した。迷走神経と交感神経の同定右鼠径部を切開し、大腿動脈と大腿神経が包まれる血管神経梢を露出させた。頚部を切開し、総頚動脈と迷走神経が包まれる血管神経梢を露出させる。micro-neurogram用タングステン電極を、直視下に迷走神経と大腿神経に含まれる交感神経へ穿刺する。それぞれの自発放電の導出条件を日本光電製Neuropack S1を用いて検討した。結果現在のところ、自発放電の記録波計に多数のハムが混入しているため、アースの工夫や、環境ノイズの混入を避けるためシールドドレープを用いてイヌを被覆するなど、様々なハム対策を立てたが、はっきりとした迷走神経や交感神経の自発放電は観察できていない。現在、実験室の環境整備を行っている。シールドルームを作製し、そこでの実験を考慮にいれている段階である。前年度に引き続き、迷走神経活動電位の導出条件の基礎的研究を行った。前年度は自発放電の記緑波計に多数のハムが混入していたため、本年度はシールドルームでの実験を計画したが、予備実験でやはりハムの混入は避けられなかったので昨年と同様の実験室で、よりハム対策を行って実験した。<目的>実験犬で頚部迷走神経の自発放電を導出すること<対象>実験犬であるメスビーグル<方法>メスビーグルに静脈路確保後、チアミラール250mgにて麻酔導入し、気管挿管した。麻酔の維持はイソフルレン1.5%と酸素1.5L/分、笑気1.5L/分を用いた。筋電図も混入を避けるため、臭化ベクロニウムを投与した。頚部を切開し、総頚動脈に伴走する迷走神経を露出させた。micro-neurogram用タングステン釘電極を迷走神経に直視下に刺入する。タングステン電極抜去後、引き続き硬膜外カテーテル電極を総頸動脈と迷走神経の間に置き、日本光電製NeuropackS1を用いて自発放電を観察した<結果>micro-neurogram用針電極ではやはりハムの混入で明らかな迷走神経の活動電位は見られなかった。硬膜外カテーテル電極では周期的な約4秒/分の2相性の波形が観察された。それは人工呼吸を中止しても観察された。<考察>針電極での記録波計には迷走神経の活動電位が記録されていると考えるのでデータ波計の分析を進めたい。また硬膜外カテーテル電極で観察された2相性の波形は、迷走神経の活動に関係しているかは今後の課題である。
Machado-Joseph病遺伝子ゲノムの全塩基配列の決定

Machado-Joseph病(MJD)は進行性の神経変性疾患で、小脳性運動失調および種々の随伴症状を呈する。本症は遺伝性脊髄小脳失調症のうち最も頻度の多い疾患で、常染色体性優性遺伝形式をとる。原因遺伝子MJDは14q32.1に位置し、翻訳領域内のCAGリピートの異常伸長によって発症する。MJD遺伝子の生理的機能、ゲノム構造、発現については十分に明らかにされていなかった。大規模シークエンシングなどにより、MJD遺伝子のゲノム構造、プロモーター領域、発現を明らかにすることを目的として本研究を行なった。27箇のcDNAクローン、13箇のコスミッドと8箇のBACクローンを得た。FISH法によりMJD遺伝子を含む約300kbのゲノム・コンティグを作成した。コスミッドのマッピングから14q21-q22に偽遺伝子または同族遺伝子の存在が推測された。コンティグのうち175kbの全塩基配列を決定した。MJD遺伝子は11箇のエクソンからなる約48.2kbの遺伝子で、3'端の2箇のエクソンは選択的スプライシングにより使い分けられている。また複数のポリA付加部位が存在し、少なくとも約1.4、1.9、2.0、4.4、7.0kbの転写産物が予測された。ノーザンブロットにて発現は遍在性であり、これらにほぼ対応する転写産物が確認された。独立した複数のcDNAクローン及びCAPクローンより転写開始点は翻訳開始点より58塩基上流と推定された。プロモーター領域にTATAボックスCCAATは存在しない。4箇所のGCボックス、Sp1、USF、SRY結合配列が認められる。翻訳領域内にアミノ酸置換を伴う一塩基置換多型(SNP)を2箇所、伴わないSNPを1箇所同定した。これらの多型について日本人一般集団及びMJD患者について検討したところ2種のハプロタイプが同定され、CAGリピート長並びに罹患染色体各々と間に強い連鎖不平衡が認められた。Machado-Joseph病(MJD)は進行性の神経変性疾患で、小脳性運動失調症及び錐体路障害、錐体外路障害、眼球運動障害、筋萎縮などの様々な随伴症候を呈する。本症は常染色体性優性遺伝形式を取り、遺伝子は14q32.1に位置するMJD1である。翻訳領域に位置し、ポリグルタミンに翻訳されるCAGリピートの異常伸長が病因となる突然変異である。異常伸長したポリグルタミンが本症の病態に深く関わっていることが明らかにされてきているが、MJD1遺伝子の生理的機能、ゲノム構造、発現調節などについては明らかにされていない。本研究は大規模シークエンシング法などによりMJD1遺伝子のエクソン・イントロン構造、プロモーター構造を明らかにしようとするものである。我々はMJD1遺伝子の7個のcDNAクローンと13個のコスミド・ゲノム・クローンを得ている。cDNAの大きさは1.02.0kbで、alternative splicingにより3'側の異なる2グループが存在する。コスミド・クローンについてFISHによりマッピングを行い、5クローンが14q32.lに位置し、約100150kbのコンティグをなしていた。他のコスミドは14q21-q22などに位置し、偽遺伝子又は同族遺伝子の存在が推測される。Nested deletion(ND)法を用いてコスミド・コンティグのシークエンシングを進め、現在までに約70%のシークエンシングを終えた。cDNAとゲノム・シークエンスの比較から、MJD1遺伝子は少なくとも8個のエクソンからなることが明らかとなった。

ノーザン・ブロットによるMJD1転写産物の大きさは約7kbである。cDNA、ゲノム、ESTのシークエンスよりこれまでに計約4kbの転写領域を同定した。現在、MJD1遺伝子の構造を完全に決定するために、シークエンシングを継続すると共に、BACクローン分離及び新たなcDNAのスクリーニングを行っている。Machado-Joseph病(MJD)は進行性の神経変性疾患で、小脳性運動失調および錐体路、錐体外路障害、眼球運動障害、末梢神経障害などの随伴症候を呈する。本症は常染色体性優性遺伝形式をとる遺伝性疾患で、原因遺伝子MJDは14q32.1に位置し、翻訳領域内のCAGリピートの異常伸長によって発症することが明らかにされている。CAGリピートに対応するポリグルタミンの異常伸長が本症の病態に密接に関与していることが明らかにされてきているが、MJD遺伝子の生理的機能、ゲノム構造、発現などについては十分には明らかにされていない。本研究は大規模シークエンシングなどによりMJD遺伝子のゲノム構造、プロモーター領域、発現を明らかにしようとするものである。これまでに27箇のcDNAクローン、ゲノムクローンとして13箇のコスミッド、8箇のBACクローンを得、解析を行った。CDNAクローンの解析から、少なくとも2種の選択的スプライシングと3箇所の選択的ポリA付加部位が存在することが判明した。ゲノムクローンのうち5箇のコスミッドと8箇のBACクローンによりMJD遺伝子を含む約300kbのコンティーグをFISH法により作成した。このうち175kbの全塩基配列を決定した。ゲノム配列とcDNA、ESTデータベースとの比較から、MJD遺伝子は48.2kbの大きさで、11箇のエクソンよりなることが判明した。3'端の2箇のエクソンは選択的スプライシングにより使い分けられている。選択的スプライシングと選択的ポリA付加により転写産物として少なくとも約1.4、1.9、2.0、4.4、7.0kbのサイズのものが予測される。ノーザンブロット解析ではMJD遺伝子は偏在的に発現しており、約1.4、1.8、4.5、7.5kbの転写産物が確認され、上記とよく一致している(論文準備中)。転写開始点の同定、発現調節領域の解析を進めている。Machado-Joseph病(MJD)は進行性の神経変性疾患で、小脳性運動失調および種々の随伴症状を呈する。本症は常染色体性優性遺伝形式をとる遺伝性疾患で、原因遺伝子MJDは14q32.1に位置し、翻訳領域内のCAGリピートの異常伸長によって発症する。CAGリピートに対応するポリグルタミンの異常伸長が発病機序に密接に関与していることが明らかにされているが、MJD遺伝子の生理的機能、ゲノム構造、発現については十分に明らかにされていなかった。本研究は大規模シークエンシングなどにより、MJD遺伝子のゲノム構造、プロモーター領域,発現を明らかにすることを目的とした。27箇のcDNAクローン、13箇のコスミッドと8箇のBACクローンを得、解析を行った。FISH法によりMJD遺伝子を含む約300kbのゲノム・コンティグを作成した。
バルカン-トルコ語における統語法についての総合的研究

本研究では次の点に留意しながら研究を遂行した。1.現地調査と文献調査を踏まえた先行研究の補完2.バルカン-トルコ語(ラズグラット方言が中心)の口語録音資料に基づくテクストデータベースの作成3.バルカン-トルコ語とガガウズ語の統語法における相互影響についての考察4.研究成果の迅速な公開と社会還元本研究の独創性は記述的な貢献と理論的な貢献の二点に大きく分けることができる。記述的な点からは変容しつつある統語法を記述することにより文法理論や言語接触による相互影響を考える上での基礎資料を提供した。このような資料は今後の研究において必要不可欠なものである。理論的な点からは語順を支配する原理がどのように言語接触を通して変容していくかという問題を明らかにした。一例を挙げると、現代トルコ語はSOVの語順をとるといわれるが実際には口語においてSVOも頻繁に認めることができる。バルカン-トルコ語ではさらに自由な語順を許し、ガガウズ語ではトルコ語では認められないような、さらに自由な語順も認められる。一般的にガガウズ語の語順についてはスラブ諸語の影響が指摘されているが、この見方ではブルガリア語と常時接触してきたバルカン-トルコ語がガガウズ語ほど自由語順を許さない点を説明することができない。この問題の解明のためにバルカン半島で使用されているバルカン-トルコ語を含めたブルガリアのガガウズ語やモルドバのガガウズ語を検討し総合的な観点からの考察をおこなった。研究概要平成12年度夏期に行った現地調査(ブルガリア;デリオルマン地区およびバルナ近郊)により入手したバルカン-トルコ語およびガガウズ語の音声・映像資料の整理とテキスト化を行った。その一部に対して音声と映像を利用したマルチメディア化を行い言語分析だけでなく、イスラム教徒のバルカン-トルコ語話者人およびキリスト教徒のガガウズ語話者の言語と文化を一般の人にも提示できるような工夫をした。言語学的な分析の概要としては、バルカン-トルコ語とガガウズ語は音韻的な側面や形態的な側面で細部には異同があるものの決定的な違いは統語法に於いてより顕著に認められる。たとえば不定詞句の後置やブルガリア語からの機能語の借用や二重与格構文の発達などがあげられる。つまりブルガリア語の影響を統語法上で顕著に受けている様子が見て取れるが、これは言語地域社会においてバルカン-トルコ語の話者とガガウズ語の話者の間で質的な相違がみられることにあるようである。インターネットでの公開バルカン-トルコ語のフィールドワークの様子およびブルガリアのトルコ系の言語と文化についての情報を公開している。現地調査で得られた資料の一部を電子化して公開している。学会および研究会でのバルカン-トルコ語に関する口頭発表「バルカン-トルコ語の統語法をめぐる諸問題」於神戸大学2000年12月「ブルガリアのトルコ語とガガウズ語の調査報告」於東京大学2001年2月社会活動岡山市主催のさんかくカレッジにおいて「言語と地域社会」という演題でブルガリアのバルカン-トルコ語話者とガガウズ語話者の言語と文化についての一般向けの講義を行った。2001年1月研究概要バルカン-トルコ語と周辺諸言語であるガガウズ語やカラマン-トルコ語との対照研究を行った。今年度夏に調査収集を行ったトルコ在住のガガウズ語の話者によるガガウズ語の資料や同じ南西グループに属するアゼルバイジャン語との対照を行った。またカラマン-トルコ語についてはトルコにおける専門家であるエルジエス大学ハルン・ギュンギョル教授との討論を行った。以上の結果次のような結果が得られた。・ブルガリアのガガウズ語とモルドバのガガウズ語に関しては統語法上の差異がみられる。例えば関係節形成時に用いられるaniはブルガリアのガガウズ語ではそれほど多用されない。・イスラム教徒のトルコ語とブルガリア-ガガウズ語を比較すると、後者のほうがより自由な語順を許す。このことはスラブ語との言語接触のあり方の違いに原因を求められるようである。・ガガウズ語やバルカン-トルコ語にみられる統語的変容は同じくスラブ語との言語接触が認められるアゼルバイジャン語にも同様に認められた。

さらに詳細な検討が必要である。・カラマン-トルコ語のアナトリアでみられる資料による限り統語法においてはトルコ語と比較して統語的な変容は認められなかった。口頭発表研究会の開催トルコ・エルジエス大学Harun Gungor博士(研究協力者)演題Gagauzlar(ガガウズ人)(2001年12月4日岡山大学文学部)社会活動岡山市主催さんかくカレッジ講義題目「言語と地域社会」トルコとアゼルバイジャンの言語と文化について2001年11月岡山市高島公民館主催世界歴史紀行講義題目「イスラムの歴史と日常生活」「イスラムの言語と社会」2001年12月研究概要ブルガリアとトルコでの現地調査より得られたバルカン-トルコ語(ガガウズ語を含む)の音声・映像資料の文字化と分析を行なった。資料集公刊に向けての資料の整理と関連文献の補充調査を行なった。資料集は単語集と談話のテクストを中心に編集中である。今年度の当初計画での研究目的である1)一次資料が過去約40年に渡ってなかったブルガリアのガガウズ語の資料を提供すること、2)統語法の比較をしながら研究の過程で明らかになったバルカン-トルコ語のみが有する統語特徴の分析を行うという点について成果を取りまとめ国内・国外での研究発表および公刊(編集中)することにより研究成果の総括をおこなった。口頭発表社会活動岡山市主催さんかくカレッジ講義題目「言語と地域社会」チュルク系少数民族の言語と文化について2002年10月岡山市県高等学校教育会地理歴史公民部会主催平成14年度高教研地理歴史公民部会歴史分科会講演題目「アナトリア周辺地域のトルコ系少数民族の言語と文化-カシュカイ族とガガウズ族-」2002年2月
辺縁系によるレプチン・メラノコルチン系摂食回路の修飾機構を実験形態学的に視る

摂食行動に対する辺縁系の影響を形態学的立場から調べる目的で、視床下部外側野に存在する摂食関連ペプチド産生ニューロン〔オレキシン(ORX)産生ニューロンとメラニン凝集ホルモン(MCH)産生ニューロン〕への扁桃体や辺縁下皮質からの入力様式を解析した。その結果、扁桃体中心核の投射線維および終末の分布領域と、ORXニューロンあるいはMCHニューロンの分布領域の一致を視床下部外側野において認めた。さらに、扁桃体中心核線維の終末ボタンとMCHニューロンあるいはORXニューロンとの間に対称性シナプスを認めた。次に、視床下部外側野において辺縁下皮質からの投射線維と、MCHニューロンあるいはORXニューロンとの間に非対称性シナプスが形成されることを示唆する所見を得た。さらに、視床下部外側野における扁桃体中心核からの投射線維がγ-アミノ酪酸(GABA)の合成酵素であるグルタミン酸脱炭酸酵素陽性であることを証明した。本研究では、摂食行動に対する辺縁系の影響を形態学的立場から調べる目的で、視床下部外側野に存在する摂食関連ペプチド産生ニューロン〔オレキシン(ORX)産生ニューロンとメラニン凝集ホルモン(MCH)産生ニューロン〕やメラノコルチン4受容体(MC4-R)発現ニューロンへの辺縁系からの入力様式を解析している。本年度は、マウスを用い、皮質下辺縁系の主たる構造物の一つである扁桃体の出力核(中心核)からORXニューロンとMCHニューロンへの連絡様式について、それぞれ光顕的ならびに電顕的に解析し、比較検討した。扁桃体中心核に順行性標識物質であるビオチン化デキストランアミン(BDA)を電気泳動的に限局注入し、BDA標識線維および終末を組織学的に検出後、ORXニューロンあるいはMCHニューロンをそれぞれの抗体を用いて免疫組織学的に検出した。その結果、視床下部外側野においてBDA標識線維および終末の分布領域と、ORXニューロンあるいはMCHニューロンの分布領域の一致を光学顕微鏡下で観察した。この一致領域を電子顕微鏡下で観察すると、BDAで標識された終末ボタンとMCHニューロンとの間に多くの非対称性シナプスが形成されていた。終末ボタン内には多数の球形のシナプス小胞が含まれ、シナプス形成は細胞体よりも樹状突起との間に多かった。しかし、BDA標識終末とORXニューロンとのシナプス形成はほとんど見られなかった。本研究では、摂食行動に対する辺縁系の影響を形態学的立場から調べる目的で、視床下部外側野に存在する摂食関連ペプチド産生ニューロン〔オレキシン(ORX)産生ニューロンとメラニン凝集ホルモン(MCH)産生ニューロン〕への扁桃体や辺縁下皮質からの入力様式を解析した。まず、マウスを用い、皮質下辺縁系の主たる構造物の一つである扁桃体の出力核(中心核)からORXニューロンとMCHニューロンへの連絡様式について、それぞれ光顕的ならびに電顕的に解析し、比較検討した。扁桃体中心核に順行性標識物質であるビオチン化デキストランアミン(BDA)を限局注入し、BDA標識線維および終末を組織学的に検出後、ORXニューロンあるいはMCHニューロンをそれぞれの抗体を用いて免疫組織学的に検出した。電子顕微鏡下では、BDAで標識された終末ボタンとMCHニューロンあるいはORXニューロンとの間に対称性シナプスを認めた。次に、上記と同様の方法を用いて辺縁下皮質からORXニューロンとMCHニューロンへの連絡様式について比較検討した。その結果、視床下部外側野において辺縁下皮質からの投射線維と、MCHニューロンあるいはORXニューロンとの間に非対称性シナプスが形成されることを示唆する所見を得た。さらに、順行性標識法と免疫電顕的手法を併用することによって、視床下部外側野における扁桃体中心核からの投射線維がγ-アミノ酪酸(GABA)の合成酵素であるグルタミン酸脱炭酸酵素陽性であることを証明した。
日本近代公文書の自動解読システム開発のための基盤構築の研究

本研究は、近代の手書き文字による公文書を自動解読するシステムの実現を目指し、そのための基盤構築を目的とする。平成30年度の研究実績は下記のとおりであり、その成果は国際会議発表4件、国内学会発表2件により公表した。1.台湾総督府文書からサンプリングした335ページを翻刻し、62,049個の手書き文字を字形データベースに追加した。また、平成29年度に作成した1,002ページ分の翻刻データ、字形データおよび原画像を基に、行単位の画像データと行単位の翻刻データを作成した。これにより、ページ単位のみでなく、行単位の自動解読実験を実施できる。2.近代公文書は、多数の筆記者による手書き文書であるため、字形や文字サイズが多様であり、個々の文字の領域を見つけることは容易ではない。平成30年度は近代公文書の原画像から個々の文字の外接矩形(バウンディングボックス)を自動検出する新たな手法を開発し、適合率97%、再現率98%の精度で検出できることを実験により確認した。3.自動文字認識の精度を改善する深層学習手法を検討した。深層学習の学習用データとして、本研究で作成した字形データを用いる。近代公文書に出現する文字は、字種ごとに頻度が異なるため、本研究で作成した字形データにおいても、字種ごとのデータ数が不均衡である。そこで、字種ごとのデータ数が均衡となるようにデータを増強し、それを学習することにより、文字認識精度が向上し、90%に達することを実験により確認した。研究開始時の計画では、平成29年度から平成30年度の期間において、翻刻データ1,325ページ分、字形データ55万文字分を作成することを予定した。これに対し、平成30年度末時点では、翻刻データ1,337ページ分、字形データ263,545文字分を作成した。字形データが当初予定より少ないのは、サンプリングしたページの文字数が少なかったことや、翻刻データおよび字形データの検証作業にかかるコストが想定より大きかったことが原因である。近代公文書解読用辞書については、翻刻データから自動で語句を抽出する仕組みが完成できた。従って、継続して翻刻作業を行うことにより、登録語句数を増やすことが可能である。また、基盤技術開発については、文字検出、文字切り出し、文字認識の各要素技術について、それぞれ開発、実験、改良のサイクルを実施できており、自動解読システムに必要な精度を達成できると予想している。1.平成30年度までの実施結果に基づき、翻刻データ1ページ分に対し、採取できる字形データは200字と想定し、平成31年度は、300500ページ分の翻刻データ、610万文字分の字形データを作成する。また、新たに作成した翻刻データからも用語や定型表現に関する語句を採取し、近代公文書解読用辞書のデータを拡充する。2.平成30年度まで検討した文字検出、文字切り出し、文字認識の要素技術を用いて、自動解読システムを試作し、自動解読の精度を計測する。3.古文書専門家は、文書に読みにくい文字が現れても、文脈情報を利用して解読することができる。平成31年度は、このような古文書専門家の読み方を再現し、解読精度を向上させる方法を検討する。これには、近代公文書解読用辞書に収めた語句データの利用を想定する。4.研究成果について,外部の史学専門家による第三者評価を実施する。また、最終目標である近代公文書の自動解読システムの実現に向けた計画をたてる。平成31年度末までの研究成果を国内研究会および国際会議で報告する。本研究は、近代の手書き文字による公文書を、コンピュータが自動的に解読するシステムの実現を目指し、そのための基盤技術の形成を目的とする。平成29年度の研究実績は下記のとおりであり、その成果は研究論文1篇、国内学会発表4件により公表した。1.台湾総督府文書からサンプリングした1,002ページを翻刻し、2,686字種、201,498個の手書き文字の字形データを作成した。また、作成した字形データから特定の字種を検索・閲覧できる字形データベースを開発し、筆記者の違いによる字形の変化の統計的分析を実施した。2.本研究準備期間に開発した字形データ作成支援ツールの改良を行った。このツールは文書画像中の文字の自動検出・自動切り出し機能により、字形データ作成作業を支援する。平成29年度において、文字検出、文字切り出しの新たな手法を開発し、精度を80%から97%に改善できること実験により確認した。3.近代公文書に現れる用語や定型表現に関する語句を収集し、近代公文書解読用辞書を作成した。この辞書には、333ページ分の翻刻データから採取した4,680種類の語句と、研究分担者が開発した「台湾総督府文書の目録データベース」から採取した18,078種類の語句を収録した。4.字形データを学習用データとし、深層学習法に基づく文字認識実験を実施し75%の認識精度が得られることを確認した。また、ワードスポッティング手法を用いて、文字切り出しと文字認識を一括して行う方法についても技術開発を進めた。翻刻データについては、当初予定していた750ページ分を上回り1,002ページ分を作成できた。一方、字形データについては、当初予定の30万文字分に対し、作成したデータ数は約20万であった。これは、字形データの検証作業にかかるコストが想定より大きかったことが原因である。

従って、継続して翻刻作業を行うことにより、登録語句数を増やすことが可能である。また、基盤技術開発については、文字検出技術、文字切り出し技術、文字認識技術の検討・試作・実験を実施できた。これらを発展させることにより、自動解読システムに必要な精度を達成できると予想している。本研究は、近代の手書き文字による公文書を自動解読するシステムの実現を目指し、そのための基盤構築を目的とする。平成30年度の研究実績は下記のとおりであり、その成果は国際会議発表4件、国内学会発表2件により公表した。1.台湾総督府文書からサンプリングした335ページを翻刻し、62,049個の手書き文字を字形データベースに追加した。また、平成29年度に作成した1,002ページ分の翻刻データ、字形データおよび原画像を基に、行単位の画像データと行単位の翻刻データを作成した。これにより、ページ単位のみでなく、行単位の自動解読実験を実施できる。2.近代公文書は、多数の筆記者による手書き文書であるため、字形や文字サイズが多様であり、個々の文字の領域を見つけることは容易ではない。平成30年度は近代公文書の原画像から個々の文字の外接矩形(バウンディングボックス)を自動検出する新たな手法を開発し、適合率97%、再現率98%の精度で検出できることを実験により確認した。3.自動文字認識の精度を改善する深層学習手法を検討した。深層学習の学習用データとして、本研究で作成した字形データを用いる。近代公文書に出現する文字は、字種ごとに頻度が異なるため、本研究で作成した字形データにおいても、字種ごとのデータ数が不均衡である。そこで、字種ごとのデータ数が均衡となるようにデータを増強し、それを学習することにより、文字認識精度が向上し、90%に達することを実験により確認した。研究開始時の計画では、平成29年度から平成30年度の期間において、翻刻データ1,325ページ分、字形データ55万文字分を作成することを予定した。これに対し、平成30年度末時点では、翻刻データ1,337ページ分、字形データ263,545文字分を作成した。字形データが当初予定より少ないのは、サンプリングしたページの文字数が少なかったことや、翻刻データおよび字形データの検証作業にかかるコストが想定より大きかったことが原因である。近代公文書解読用辞書については、翻刻データから自動で語句を抽出する仕組みが完成できた。また、基盤技術開発については、文字検出、文字切り出し、文字認識の各要素技術について、それぞれ開発、実験、改良のサイクルを実施できており、自動解読システムに必要な精度を達成できると予想している。1.平成29年度の実施結果に基づき、翻刻データ1ページ分に対し、採取できる字形データは200字と想定し、平成30年度は、500ページ分の翻刻データ、10万文字分の字形データの作成を行う。また、新たに作成した翻刻データからも用語や定型表現に関する語句を採取し、近代公文書解読用辞書のデータを拡充する。2.本研究で作成している字形データは、字種ごとの字形データ数に偏りがある。一方、文字認識のための学習用の字形サンプルは、どの字種についても十分な量が必要である。
水素透過金属膜における新パラダイムの構築と低温作動型合金膜の最適設計への展開

本研究では、水素透過金属膜の分野に、『水素の化学ポテンシャルに基づく新しい学術体系』を構築することを目的に、水素溶解特性と水素拡散性に及ぼす諸因子の影響を「水素透過能の統一的表現」に基づいて定量的かつ系統的に整理した。Pd系合金膜で見いだされた低温域での水素透過能の特異な温度依存性の起源を、新たな視点から解明するとともに、水素透過能と耐水素脆性に優れた低温作動型のV系合金を設計するための指針を示した。新たに設計したV-Fe合金は、300°Cの低温でも水素脆化することなく、PdあるいはPd系合金膜の510倍の高い水素透過流束を1000時間以上にわたって安定して維持した。金属膜の水素透過能はこれまで、フィックの法則を出発点とする水素透過係数φに基づいて整理されてきた。しかし、この解析法は水素濃度が非常に希薄な領域でしか理論的には成立せず、水素透過能を正しく解析できない事例が多く指摘されている。本研究では、金属膜の水素透過能を『水素の化学ポテンシャルに基づく水素透過能の新しい表現』に基づいて解析し、水素溶解特性と水素拡散の易動度の各パラメータに及ぼす諸因子の影響を定量的に整理する。これにより、従来の理解とは異なる切り口から、水素透過金属膜の新しい学術体系を構築するとともに、これらの知見を低温作動型合金膜の設計へ展開する。パラジウム系合金膜で見いだされた低温域での水素透過能の特異な温度依存性を新しい視点から理解するとともに、200°C以下の低温で高い水素透過能と優れた耐水素脆性を発揮する低温作動型新規バナジウム系合金膜の最適設計を行うことを目的とする。本年度の研究実績の概要は以下の通りである。1.種々のV-X2元系合金につい300500°CでのPCT測定を系統的に行い、水素溶解エンタルピー変化およびエントロピー変化に及ぼす合金効果を明らかにした。2.Pd-Ag合金のPCT測定および水素透過試験を系統的に行い、水素の化学ポテンシャルに基づいて解析した。水素拡散性は温度と共に単調に減少し、ピーク温度での特異な変化は見られなかった。Pd-Ag合金の特異な温度依存性は、ジーベルツ則からのズレに起因する現象であることを明らかにした。3.第1原理計算により、合金元素近傍の水素占有サイトの安定性について調査した。研究の進捗状況はおおむね順調である。当初の計画通り、水素化特性に及ぼす合金効果を明らかにした。また、第1原理計算も順調に進んでいる。1.昨年に引き続き、種々のV-X2元系合金につい300500°CでのPCT測定を系統的に行い、水素溶解エンタルピー変化およびエントロピー変化に及ぼす合金効果を明らかにした。2.上記の合金について、300400°Cでの水素透過試験を系統的に行い、水素拡散の易動度を求めた。易動度のアレニウスプロットより、振動数項と活性化エネルギーに及ぼす合金効果を明らかにした。3.低温作動型合金を設計する上で重要となる、バナジウム水素化物(β相)の形成温度に及ぼすFeおよびAlの添加効果を明らかにした。Feは水素化物形成温度を上昇させた。一方、Alは形成温度を著しく減少させ、約3.5%の添加により室温でもβ相の形成が抑制できることを明らかにした。4.第1原理計算により、合金元素近傍の水素占有サイトの安定性にに及ぼす合金効果を明らかにした。水素溶解に伴う部分エンタルピー変化および部分エントロピー変化に及ぼす合金効果をデータベース化した。これにより、任意の運転温度・任意の水素分圧のガスにおいて、高い水素透過能と優れた耐水素脆性を発揮する合金組成を合理的に設計できるようになった。また、水素の拡散性に及ぼす合金効果をデータベース化することで、上記の合金膜および運転条件での水素透過流束を見積ることが可能になった。さらに、水素中その場XRD測定および第1原理計算により、水素化物の形成を抑制する合金元素の候補を幾つかリストアップした。

本研究では、金属膜の水素透過能を『水素の化学ポテンシャルに基づく水素透過能の新しい表現』に基づいて解析し、水素溶解特性と水素拡散の易動度の各パラメータに及ぼす諸因子の影響を定量的に整理する。これにより、従来の理解とは異なる切り口から、水素透過金属膜の新しい学術体系を構築するとともに、これらの知見を低温作動型合金膜の設計へ展開する。パラジウム系合金膜で見いだされた低温域での水素透過能の特異な温度依存性を新しい視点から理解するとともに、低温で高い水素透過能と優れた耐水素脆性を発揮する低温作動型新規バナジウム系合金膜の最適設計を行うことを目的とする。本年度の研究実績の概要は以下の通りである。1.種々の合金元素Xを含むV-Fe-X3元系合金につい300500°CでのPCT測定を系統的に行い、水素溶解エンタルピー変化およびエントロピー変化に及ぼす第3添加元素の影響を明らかにした。2.上記の合金について、300400°Cでの水素透過試験を系統的に行い、水素拡散の易動度を求めた。易動度のアレニウスプロットより、振動数項と活性化エネルギーに及ぼす合金効果を明らかにした。3.低温作動型のV-Fe合金を設計した。300°Cでの水素透過試験の結果、設計合金は水素脆化することなく、PdあるいはPd系合金膜の510倍の水素透過流束を1000時間以上にわたって安定して維持した。本研究では、水素透過金属膜の分野に、『水素の化学ポテンシャルに基づく新しい学術体系』を構築することを目的に、水素溶解特性と水素拡散性に及ぼす諸因子の影響を「水素透過能の統一的表現」に基づいて定量的かつ系統的に整理した。Pd系合金膜で見いだされた低温域での水素透過能の特異な温度依存性の起源を、新たな視点から解明するとともに、水素透過能と耐水素脆性に優れた低温作動型のV系合金を設計するための指針を示した。新たに設計したV-Fe合金は、300°Cの低温でも水素脆化することなく、PdあるいはPd系合金膜の510倍の高い水素透過流束を1000時間以上にわたって安定して維持した。引き続き、種々のV-X2元系合金およびV-X-Y3元系について、PCT測定および水素透過試験を実施し、水素化特性と易動度に及ぼす合金効果を明らかにする。また、水素の溶解と拡散に及ぼす合金効果の理論解析を行う。さらに水素脆性の定量評価を行う。引き続き、1.水素溶解特性および水素拡散の易動度に対する合金効果を系統的に調査する。2.水素の占有サイトに注目して全エネルギー計算を行う。さらに、エネルギー密度解析(EDA)により、金属ー水素原子間の相互作用に及ぼす合金効果を、各原子のエネルギー密度の観点から考察する。3. CsCl構造のB2型金属間化合物(TiFe, TiNi, PdCu等)について、PCT測定および水素透過試験より、水素化特性と水素の拡散性を定量的に評価する。29年度が最終年度であるため、記入しない。水素分離金属膜29年度が最終年度であるため、記入しない。
先天異常を引き起こす母体の加齢効果を小型魚類でモデル化する

母体の高齢化は繁殖の成功に影響するリスク因子の1つである。この原因は一般に卵母細胞における染色体異常によって説明されるが、母体の高齢化により発症率が変化する先天異常の中には染色体異常を伴わないケースが存在しており、年齢に依存した母個体の性質の変化が子の発生に与える影響は未同定の様式により決定されている可能性がある。本研究は新規モデルの開発を通して母体年齢の変化が子の発生に与える影響を細胞・分子レベルで理解することを目的としており、それを達成するために水棲脊椎動物を用いることとした。ゼブラフィッシュではこれまでに複数の変異体で初期発生の異常の程度が母体年齢に依存して変化することが報告されている。そこで本年度は同様の変異体を連続的に交配・解析し母体年齢の効果を体系的に解析できる基盤を整備することを計画し、研究代表者の所属機関の動物施設において飼育環境の整備を行い、また野生型系統として用いるTL系統の交配と飼育を開始した。次に母体年齢に伴った変化が予想される胚発生の制御機構を探索する目的で、初期発生の確立過程で機能する細胞内構造を解析するための手法の開発を行った。特に昆虫からヒトに至る動物の卵細胞に普遍的に存在し、卵細胞の生存や極性形成に必須である顆粒構造であるバルビアニ小体に着目した検討を行った。その結果、バルビアニ小体が豊富に含むミトコンドリア等の染色法を応用することにより、母体年齢に依存したバルビアニ小体の形態の変化を簡便に可視化することが可能になった。これまでに本研究が着目する脊椎動物の初期発生に対する母体年齢の効果を解析するための基盤を整備できた。今後は野生型系統の連続的な交配を更に進めるとともに、変異体についても同様に収集と交配を進める必要がある。しかし研究代表者が翌年度に他の研究機関に異動することが決定したため、交配プログラムの進行について遅延が生じた。新規の飼育設備を速やかに確立することにより交配プログラムの遅延解消を目指す。また本研究の目的達成には母体年齢に伴った胚発生の制御機構の変化の全体像を捉えることが重要であるため、ゲノムワイド遺伝子発現解析の実施を計画している。また他の水棲脊椎動物において母体年齢の変化が子の発生に影響を与える可能性を加えて検証したい。交配プログラム実施のために計上した消耗品費が当初計画より軽微で済んだこと、実験補助員の採用が間に合わなかったことにより次年度使用額が生じた。今後の研究実施において必要となる飼育設備の整備と試薬類の購入に充てる計画である。
網膜静脈閉塞症に対する治療的血管新生による血行再還流と神経細胞に与える影響の検討

血管新生が効果的に発生するbFGF、HGF投与量を決定するために、12羽の有色家兎に対し、網膜主幹静脈を視神経から約1乳頭径の長さで34本、眼内ジアテルミーにて凝固することにより、BRVOモデル有色家兎を作成した。ジアテルミー凝固1週間後に、硝子体手術を施行した。硝子体切除施行後、液空気置換し、静脈閉塞部髄翼網膜内に32G網膜下カニューラにて、徐放性のゼラチン粒子に内包されたbFGF、HGFを注入した。濃度はそれぞれ3段階に分けた。(n数は各群2羽、計12羽。)術後1、3、7日目、その後1週間毎に眼底検査を施行した。術終了後1週目、4週目、12週目にフルオロセイン蛍光眼底造影検査を行った。今後、側副血行路形成・網脈脈絡膜血管吻合形成・新生血管形成・循環改善などの網膜循環動態を比較検討する。また、術後12週目で、眼球を摘出した。切り出した髄翼網膜内を、HE染色・免疫染色し、組織学的検討を行う。24羽の有色家兎に対し、網膜主幹静脈を視神経から約1乳頭径の長さで34本、眼内ジアテルミーにて凝固することにより、BRVOモデル有色家兎を作成した。硝子体切除施行後、液空気置換し、静脈閉塞部髄翼網膜内に32G網膜下カニューラにて、徐放性のゼラチン粒子に内包されたbFGF、または末梢血単核球(血小板を含む)を注入した。徐放性のゼラチン粒子に内包されたbFGFを注入する群、徐放性のゼラチン粒子に内包されたHGFを投与する群、末梢血単核球(血小板を含む)を注入する群、硝子体切除のみを施行する群、の4群に分けた。(n数は各群6羽、計24羽。また、同じタイムスケジュールで、眼球を摘出した。
消毒処理における病原性細菌の毒力消失・回復機構の解明

供試菌株は耐熱性エンテロトキシンを産生する毒素原性大腸菌(血清型0168)を用いた。供試菌液にクロラミン溶液を注入し,経時的に菌液を採取した。採取した菌液はTSA培地及び0.1%デソキシコール酸ナトリウム添加TSA培地(以下,TSA-D培地と表記)に塗抹し,36°Cで48時間培養後,集落数を計数した。Ct値と生残率の関係はほぼChickの法則に従っていた。TSA培地を用いた場合の不活化速度よりもTSA-D培地を用いた場合の不活化速度のほうがわずかに大きかった。選択培地を用いて消毒プロセスを評価すると,不活化速度を大きく見積る可能性がある。クロラミン濃度が0.06mgCl_2/lの場合,損傷率は当初は減少した。これはクロラミンと接触前からの損傷菌(初期損傷菌)の不活化速度が非常に大きいためと考えられる。すなわち,クロラミンとの接触による損傷菌の生成が,初期損傷菌の減少に追いつかないため,このような現象が生じたものであろう。損傷率は,その後,緩やかに増加した。クロラミン濃度が0.12及び0.19mgCl_2/lの場合は,損傷率は接触開始時は明白な増加を示さず,その後,わずかに増加する傾向を見せた。クロラミン濃度が0.38及び0.54mgCl_2/lの場合は,接触開始時から損傷率は増加し,その後,ほぼ一定の値となった。初期損傷率は017%の範囲であった。実験終了後,TSA培地上のコロニーについてPCRによりST遺伝子保有の有無を確認したところ,何れも陽性であった。従って,損傷菌も毒素の産生能を保有しており,決して見過ごせないことが示された。