hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
機能性ペプチドを用いたアトピー治療用 siRNA の皮内送達システム構築と経皮製剤化

本研究では、機能性ペプチドを基盤としたsiRNA皮内送達システムの開発を目的とし、皮内送達性、治療効果の検討を行った。機能性ペプチドとして、細胞透過性ペプチドとタイトジャンクション開口ペプチドを併用することでsiRNAの皮内送達性が向上し、siRNAとして抗NFκB siRNAをアトピー性皮膚炎モデルマウスに投与することで優れた治療効果が示された。さらに、機能性ペプチド/siRNA含有ハイドロゲル製剤とすることで治療効果が増強させることを確認した。本年度は、機能性ペプチドを用いた非侵襲的なsiRNA皮内送達システムの確立に向けた検討として、種々のペプチドとのsiRNA複合体の評価、細胞内取り込み効率、マウス皮膚を用いた蛍光標識siRNAの送達性について評価した。細胞透過性ペプチドであるTATペプチド(TAT)/siRNA複合体は、粒子径約100nm、ゼータ電位10mVを、当研究室にて開発したステアリン酸(STR)、アルギニン(R)、ヒスチジン(H)、システイン(S)からなる多機能性ペプチド(STR-CH2R4H2C)のsiRNAとの複合体は、約200nm、20mVを示した。また、naked siRNAでは、RNA分解酵素混合後5時間でほとんど分解されていたのに対し、TATでは60%以上が、STR-CH2R4H2Cでは80%以上のsiRNAが安定であった。次に、マウス樹状細胞(JAWS II細胞)を用いて、蛍光標識siRNAの細胞内取り込み効率をFACSにより測定した結果、両ペプチドを用いる事でsiRNAの細胞内導入効果は向上し、特にSTR-CH2R4H2Cで非常に高い導入能を有することを明らかとした。また、マウス皮膚を用いて蛍光標識siRNAの皮内送達性を検討した。その結果、TAT、STR-CH2R4H2、タイトジャンクション開口作用のあるAT1002ペプチド(AT1002)はいずれも高いsiRNAの皮内送達性を示し、さらにAT1002にTATあるいはSTRCH2R4H2Cを併用することで、siRNAの皮内送達性を著しく向上させることを明らかとした。以上より、TAT、STR-CH2R4H2CやAT1002はsiRNAの皮内送達システムの有用なツールであることが示された。昨年度の研究より、細胞透過性ペプチドであるTAT、当研究室で開発したSTR-CH2RH2C、タイトジャンクション開口ペブチドであるAT1002などの機能性ペプチドがsiRNAの皮内送達ツールとして有用であることを明らかとしている。本年度は、治療siRNAとしてNF-κBの構成タンパク質であるRe1Aに対するsiRNA(以下siRe1A)、siRe1Aのキャリアペプチドとして機能姓ペプチドを用いて、標的細胞である樹状細胞におけるRe1A mRNAのサイレンシング効果およびハプテンにより耳介にアトピー性皮膚炎症状を発症させたモデルマウスでの治療実験、さらに皮膚塗布型の製剤化を目指し、液晶製剤およびハイドロゲル製剤を調製し検討した。マウス樹状細胞でのサイレンシング効果実験の結果より、naked siRNAに比べ、機能性ペプチドを併用して投与した群でサイレンシング効果は有意に向上し、機能性ペプチドのsiRNA、キャリアペプチドとしての有用性が示された。また、機能性ペプチドを併用してsiRe1Aをモテルマウスの発症部位である耳介へ適用した結果、耳の肥厚および臨床スコアを著しく改善し、本研究で確立した機能性ペプチドによるsiRNA皮内送達システムの有効性を証明することができた、次に、皮膚塗布型siRe1A製剤の開発を目的とし、セラキルアルコールを基剤とした蛍光標識siRNA含有液晶製剤を調製し、マウス皮膚に塗布した結果、角質下の表皮深部までsiRNAの蛍光が観察された。さらに、絹蛋白質の構成成分であるセリシンを基剤としたsiRe1A含有ハイドロゲル製剤を調製し、モデルマウスの耳介に適用した結果、siRe1A溶液に比べ皮膚炎による耳の肥厚、臨床スコアを有意に抑制した。以上、本年度の研究より有効なアトピー性皮膚炎治療製剤開発の足がかりとなる非常に重要な知見が得られた。昨年度までの研究より、機能性ペプチドがsiRNAの皮内送達ツールとして有効であり、NF-κBに対するsiRNAと併用することで高い治療効果を得ることを示し、また、製剤化検討としてsiRNAを含有したハイドロゲルならびに液晶製剤の調製にも成功している。本年度では、機能性ペプチドとsiRNAを含有した皮膚塗布型製剤を調製し、その皮内送達性、治療効果、安全性について検討した。はじめにsiRNAと機能性ペプチドを含有させたハイドロゲルおよび液晶製剤を調製した。ハイドロゲルは、絹たんぱく質の構成成分であるセリシンを基剤として調製した。液晶製剤は、界面活性剤、油、水溶性アルコールを用いて調製し、偏光顕微鏡観察により液晶構造を確認した。機能性ペプチド/蛍光標識siRNA

含有ハイドロゲル塗布後の皮内送達性について角質層を除去したマウス皮膚を用いて行った結果、機能性ペプチド/蛍光標識siRNA溶液塗布群と同様に高い皮内送達性が観察された。液晶製剤塗布後の皮内送達性についてマウス皮膚を用いて検討した結果、角質を除去していないマウス皮膚においても高い皮内送達性が観察された。次に機能性ペプチド/抗NF-κB siRNA含有ハイドロゲル塗布による治療効果についてアトピー性皮膚炎症状を発症させたマウス耳を用いて検討した結果、機能性ペプチドとハイドロゲルを併用することで最も優れた治療効果を発揮した。最後に安全性の検討として、基剤のみで調製した液晶製剤あるいはハイドロゲルをICRマウス皮膚に適用した際の適用部位を観察した結果、皮膚の肥厚や外観変化は観察されなかった。以上、本年度の研究より、機能性ペプチドと共にsiRNAを含有させた液晶製剤やハイドロゲル製剤の調製に成功し、さらにこれら製剤が安全性と治療効果に優れていることが示された。木研究の目的は、(1)非侵襲的なsiRNA皮内送達システムの構築、(2)製剤化である。本研究はこれまでの2年間の研究により、細胞透過性ペプチドやタイトジャンクション開口ペプチドといった機能性ペプチドを併用することで、皮膚に塗布するだけでsiRNAを皮内へ送達できることを明らかとしており、非侵襲的なsiRNA皮内送達システムの構築に関して順調に進展している。また、2年目から製剤化研究にも着手することができ、残り1年間の研究により目的とする製剤の開発発は可能であると思われる。24年度が最終年度であるため、記入しない。今後は、昨年度までの研究で構築できたsiRNA皮内送達システムを搭載した製剤の開発を中心に研究を進めていく。製剤は、昨年度から着手しているハイドロゲル製剤と液晶製剤を用いる。
パラグライダーによる低空撮影を用いた沿岸域環境モニタリングの研究

沿岸域の自然環境度を評価するために、モーターパラグライダーにより低空からの航空写真を撮影する技術を開発し、そのモニタリングデータからセミマクロGIS(地理情報)データを作成することにより、自然環境の保全度を評価することを目的とした研究を行い下記の成果を得た。(1)環境モニタリング手法の確立狭範囲から広範囲にわたる沿岸域環境を効率よくモニタリングするために、DGPSとモーターパラグライダーを用いた環境モニタリング手法を開発した。環境モニタリング手法は、モニタリングの目的と対象物、範囲に応じて撮影に用いるカメラを選択し、撮影範囲から撮影高度を算出するので、目的に応じた解像度の空中写真を取得できた。(2)モニタリングデータ地図作成環境モニタリング手法を用いて撮影された空中写真からモニタリングデータ地図を作成した。地図は、ArcView Image Analysisを用いて幾何補正し、そのまま地図化したため、写真に写っている1つ1つの対象物が位置情報を持っており、モニタリングデータ地図から位置を把握できる。(3)モニタリングデータ管理システムモニタリングデータ地図は、そのままでは、見比べることしかできない。そこで、詳細な変化を見逃さずに観測するために、GISによるオーバーレイで、モニタリングデータの比較を行うモニタリングデータ管理システムを構築した。(4)植生モニタリング石川県加賀市片野・塩屋海岸の海浜植物群を事例として、海浜植物群の植生被覆を管理し、季節に伴う変化量の算出した。そして、海浜植物を抽出して管理・解析することで、植生被覆の変化した面積を算出した。加えて、踏査した海浜植物の分布データを用いることで、変化した海浜植物群の種類を明らかにした。沿岸域の自然環境度を評価するために、モーターパラグライダーにより低空からの航空写真を撮影し、セミマクロGIS(地理情報)データを作成することを目的とした研究を行った。さらにそのデータを基に、自然環境の保全度に加え、水産業や海洋レクリエーションなどの人間活動による利用価値と生態系の価値も含めて指標化し、沿岸域環境の価値を評価することを目的とした。石川県の加賀海岸において、1999年7月から11月にわたって海岸線をモーターパラグライダーで飛行し、高度50mの低空からGPSと連動したデジタルカメラおよび一眼レフカメラで航空写真を撮影し、地上の対象物の位置と形状、面積などを推定する試験を繰り返し行った。特にその際地上に標的を置き、撮影場所と地上データが一致できるように今回の研究では工夫した。また同時に生態学的データ(沿岸環境・動植物分布)と沿岸域利用データ(漁業活動・護岸やテトラポッドなどの人工構造物の位置データ・観光レクリエーション活動、放置ごみなど)をフィールドサーベイデータから取得し、GISを用いて結合する試みを行った。その中で、特に海岸植生に注目し、植生のフロントライン(先端)と植物分布を明らかにした。さらに、この植生データをメッシュデータとしてGISソフトウエアを用いてデータベース化した。その結果、海岸の植物分布の面積の算出や植生分布図作成が可能にできた。メッシュごとの沿岸域ポテンシャル評価を行い、海岸の自然環境保全度を評価する手法を研究中である。

そこで、詳細な変化を見逃さずに観測するために、GISによるオーバーレイで、モニタリングデータの比較を行うモニタリングデータ管理システムを構築した。(4)植生モニタリング石川県加賀市片野・塩屋海岸の海浜植物群を事例として、海浜植物群の植生被覆を管理し、季節に伴う変化量の算出した。そして、海浜植物を抽出して管理・解析することで、植生被覆の変化した面積を算出した。加えて、踏査した海浜植物の分布データを用いることで、変化した海浜植物群の種類を明らかにした。
歩行改善を促す身体認知変容の神経基盤の解明

運動の学習を通して自己の身体に対する認識(身体認知)が変容し、姿勢や身体の垂直認知に偏倚が生じることがある。先行研究では、慢性期の脳卒中患者を対象に、左右のベルトが異なる速さで動く“左右分離型トレッドミル"を用いて歩行練習を行うことで、歩行後に非対称的な歩容が改善したと報告されている。この即時的な効果の要因としては、運動機能の改善よりも脳内での身体認知の変容が関与していると考えられるが、このメカニズムついては明らかにされていない。そこで我々は、左右分離型トレッドミルを用いた歩行の運動学習と学習の結果生じるであろう身体認知変容との関連を明らかにすることを目的に現在研究を進めている。平成30年度(初年度)は、脳機能イメージング技術を用いて左右分離型トレッドミル歩行中の脳活動を計測する予定であったが、測定・解析方法の検討や実験用機器の購入に時間を要したため、当初の計画通りに実験を開始することができなかった。そのため、今年度の後半からは予定を変更し、次年度の研究計画内容であった左右分離型トレッドミル歩行が身体認知に与える影響を解明するための実験をスタートさせた。現時点では予備実験が終了し、歩行条件や歩行パターンの変化の計測方法、身体認知変容の評価方法など、具体的な実験条件や計測・評価方法に関する検討を終えた段階である。今年度は研究計画1として左右分離型トレッドミル歩行中の脳活動を計測する予定であった。しかしながら、実験環境の整備とテクニカルな問題の解決に時間を要したため、計画を変更し、先に研究計画2として考えていた左右分離型トレッドミル歩行後の身体認知の変容に関する実験を開始した。本研究では、トレッドミル歩行後の身体認知の変容を評価する方法の一つとして、自己の身体の垂直認知の変化を評価している。この評価を正確かつ簡便に行うために、今年度は垂直軸傾斜評価システムの作成を業者に依頼した。評価システム作成の過程では、評価内容に関する打ち合わせや、購入後の不具合の修正などを繰り返し行う必要があり、実験で使用できるようになるまでにかなりの時間を要した。現時点では、予備実験の結果を踏まえ、実験条件やプロトコル等の見直し・修正を行い、本実験に入る準備まで完了した状況である。平成30年度内に評価システムの問題点を修正し、予備実験まで終えることができた。令和元年度の前半は、左右分離型トレッドミル歩行後の身体認知の変容に関する研究を推し進め、実験データの集積と解析までを行う予定である。後半には、得られたデータに関する学会発表の準備と論文執筆を行うとともに、脳活動の計測実験をスタートできればと考えている。脳機能イメージング技術を用いた研究の実施が困難となった場合は、研究計画3の内容である経頭蓋直流電気刺激を用いた実験を令和元年度中に開始する予定である。

脳機能イメージング技術を用いた研究の実施が困難となった場合は、研究計画3の内容である経頭蓋直流電気刺激を用いた実験を令和元年度中に開始する予定である。(理由)前倒し支払い請求をして開発・購入を進めていた本研究用の機械振動刺激装置がまだ完成していないため、次年度使用額が生じている。(使用計画)機械振動刺激装置が完成し次第、購入のために助成金を使用する計画である。また、助成金は、研究成果をまとめた論文の英文校正代や、学会発表をするための旅費として使用する予定である。
腸上皮化生からの分化型胃癌の発癌のメカニズムの解明

胃粘膜に発生する腸上皮化生は分化型胃癌の前癌病変と考えられてきた。この腸上皮化生は主としてH.pyloriの感染によって起こるが、H.pyloriの除菌によって胃癌の発症率が減少するか否かを検討するためには、H.pyloriの関与がない状態においても腸上皮化生粘膜から分化型胃癌が発生するか否かを検討することが肝要である。しかしヒトにおいても動物実験モデルにおいてもH.pyloriの関与がない状態で腸上皮化生から実際に胃癌が発生するか否かはこれまで明確には示されていない。そこで、今回われわれは腸上皮化生を引き起こすトランスジェニックマウスを作成し、H.pyloriの関与なしに腸上皮化生粘膜から分化型胃癌が発生するか否かを検討した。ヒトの腸上皮化生粘膜に発現している転写因子Cdx2を胃粘膜に特異的に発現するトランスジェニックマウスを作成した。このトランスジェニックマウスの胃粘膜は完全に腸上皮化生粘膜に置き換わり、吸収上皮細胞、杯細胞、腸管内分泌細胞から構成されていた。この腸上皮化生粘膜をH.pyloriの感染や発癌剤を用いることなく通常の食事にて経過を観察した。生後2年目には観察したトランスジェニックマウスの全例に胃粘膜に肉眼的に認められるポリープが形成された。このポリープは粘膜筋板を破り粘膜下層に達し、固有筋層を破る進行癌であった。この分化型胃癌はp53の核内蓄積やβカテニンの核内移行がみられ、実際p53やAPCの変異がシークエンスにより確かめられた。組織学的には高齢者にみられる腸上皮化生粘膜を背景としたヒトの高分化型腺癌にきわめて類似していた。この内容はCancer Researchに発表した。この分化型胃癌の発生は腸上皮化生粘膜自体が分化型胃癌の前癌病変であり、腸上皮化生が進展した胃粘膜を有するヒトにおいては除菌が成功した場合でも高度に進展した腸上皮化生粘膜の改善は一般にはむずかしく、臨床的に分化型胃癌の発生母地として慎重な経過観察が必要であることを示している。さらにこのCdx2トランスジェニックマウスにより転写因子Cdx2による腸粘膜の分化を検討することができた。腸粘膜上皮細胞の分化には転写因子Math1が関与していることが報告されているがCdx2がこのMath1を誘導することを明らかにした。さらにCdx2は間質も胃型から腸型に変化させることがこのCdx2トランスジェニックマウスの解析により明らかになった。この腸上皮化生は主としてH.pyloriの感染によって起こるが、H.pyloriの除菌によって胃癌の発症率が減少するか否かを検討するためには、H.pyloriの関与がない状態においても腸上皮化生

粘膜から分化型胃癌が発生するか否かを検討することが肝要である。しかしヒトにおいても動物実験モデルにおいてもH.pyloriの関与がない状態で腸上皮化生から実際に胃癌が発生するか否かはこれまで明確には示されていない。そこで、今回われわれは腸上皮化生を引き起こすトランスジェニックマウスを作成し、H.pyloriの関与なしに腸上皮化生粘膜から分化型胃癌が発生するか否かを検討した。ヒトの腸上皮化生粘膜に発現している転写因子Cdx2を胃粘膜に特異的に発現するトランスジェニックマウスを作成した。このトランスジェニックマウスの胃粘膜は完全に腸上皮化生粘膜に置き換わり、吸収上皮細胞、杯細胞、腸管内分泌細胞から構成されていた。この腸上皮化生粘膜をH.pyloriの感染や発癌剤を用いることなく通常の食事にて経過を観察した。生後2年目には観察したトランスジェニックマウスの全例に胃粘膜に肉眼的に認められるポリープが形成された。このポリープは粘膜筋板を破り粘膜下層に達し、固有筋層を破る進行癌であった。この分化型胃癌はp53の核内蓄積やβカテニンの核内移行がみられ、実際p53やAPCの変異がシークエンスにより確かめられた。組織学的には高齢者にみられる腸上皮化生粘膜を背景としたヒトの高分化型腺癌にきわめて類似していた。この内容はCancer Researchに発表した。この分化型胃癌の発生は腸上皮化生粘膜自体が分化型胃癌の前癌病変であり、腸上皮化生が進展した胃粘膜を有するヒトにおいては除菌が成功した場合でも高度に進展した腸上皮化生粘膜の改善は一般にはむずかしく、臨床的に分化型胃癌の発生母地として慎重な経過観察が必要であることを示している。胃粘膜に発生する腸上皮化生は分化型胃癌の前癌病変と考えられてきた。この腸上皮化生は主としてH.pyloriの感染によって起こるが、H.pyloriの除菌によって胃癌の発症率が減少するか否かを検討するためには、H.pyloriの関与がない状態においても腸上皮化生粘膜から分化型胃癌が発生するか否かを検討することが肝要である。この腸上皮化生粘膜をH.pyloriがの感染や発癌剤を用いることなく通常の食事にて経過を観察した。この分化型胃癌の発生は腸上皮化生
知的信号処理による匂いの識別・合成・通信手法の構築

本研究の目的は、匂い情報処理の新たな試みとして、匂いの計測、匂い表現、匂い識別、匂い合成を行い、匂い情報処理の新展開を行うことである。本年度はータ処理による匂い構成要素の抽出とそれを用いた匂い識別に関する研究として、以下の3点について考察した。(1) SOMによる匂いの基本要素の抽出:前年までに得られた独立成分で類似したものをまとめて縮約するために、競合型ニューラルネットワークであるSOMを適用した。SOMで得られた匂いの特徴量の類似性分布を表現している出力層に分離境界線を設定し、クラスタリングを行い、各クラスタリングの重心を匂いの基本要素として抽出した。(2) LVQによる匂い識別:匂い計測データを匂いの基本要素に分解し、その要素の大きさ(分解係数)を競合型ニューラルネットワークの入力として用い、競合型ニューラルネットワークの出力が、計測標本の匂いと識別されるようにLVQによる学習を行った。このネットワークは競合層の出力が様々な匂い標本を同時に識別可能になるような構造に設計した。また、匂い標本セットに対して、食品、香料、悪臭などの大分類、コーヒー、紅茶、ココアなどの中分類、キリマンジャロ、モカなどの小分類が可能となる階層構造を有する競合型ニューラルネットワークを構築し、学習速度を向上させた。本研究の目的は、匂い情報処理の新たな試みとして、匂いの計測、匂い表現、匂い識別、匂い合成を行い、匂い情報処理の新展開を3年間で行うことである。平成19年度は匂い情報処理に必要な匂い情報計測システムの構築を行った。とくに、匂い計測は流量、温度、湿度、圧力、濃度などに影響され易いために、これらの変数を制御して、一定の状態を作ることが必要であり、これらの条件が制御可能な匂い計測装置を設計・試作した。1)水晶振動子による匂い計測装置の設計と試作:本研究では、水晶振動子法を併用した匂い計測装置を設計・試作し、匂い計測精度の向上を図った。とくに、サンプリングボックスの設計を専門家に依頼して計測条件を一定にして、20個のセンサを天井付近に配置した。また、サンプリングボックス内の流量、温度、湿度、圧力、濃度を予め定められた条件に保っために、流量調節、温度調節、乾燥空気による湿度調節、圧力・濃度調節が可能な制御装置を装備した計測装置を設計・試作した。2)半導体ガスセンサによる匂い計測装置の設計と試作:半導体センサ法は匂いの有無を検出可能であるが、匂いの種類を特定する根拠を見出すことが困難であるため、サンプリングボックスの天井部分に水晶振動子による匂いセンサを半導体センサと同じ場所に設置し、実験ごとに両センサを交換可能にした。本年度は、昨年試作した匂い計測装置を用いて、匂いに関する種々のデータを収集した。まず、匂い構成要素の検出が容易であると思われるコーヒーを20種類選択し、そのデータを蓄積した。つぎに、紅茶やココアに関して同様な考察をするために、これらの匂いデータを計測した。1標本当り、20個の半導体センサのサンプリング時間を100msとして20秒間計測し、その200個の時系列データを各センサから計測し、1セットとした。さらに、ICAによる匂い計測データの独立成分の抽出を行った。まず、20個のセンサによって計測されたデータをICAによってセンサと同数の独立成分に分解し、ノイズと匂い信号成分を分離した。このような独立成分を様々な匂い標本に対して抽出し、それらを独立成分データベースに格納した。最後に、これらの独立成分で類似したものをまとめて縮約するために、競合型ニューラルネットワークであるSOMを適用する。
国際比較からの新理論の構築によるダイバシティマネジメントの類型化と人事政策の立案

私たちは本共同研究において、2013年度、網羅的に研究論文・文献を収集すると同時に、著名な外国人研究者を招いて共同研究会を開催し、研究対象領域設定・研究理論の検討をおこないました。そして2014年度には、私たちは、日本、アメリカ、アジア、欧州において、研究代表者、研究分担者と研究協力者によって、国際的な定性的な研究調査・資料収集をおこないました。そして2015年度には、それぞれの研究成果をとりまとめ、本共同研究の最終研究報告を研究書として編集し、ミネルヴァ書房より『活躍する女性会社役員の国際比較』と題して、2016年6月に刊行することを予定しています。本研究テーマ「ダイバシティマネジメントの新理論の構築とそれにも基づく新人事制度の構築」に関して、共同研究会をおこないました。その共同研究プロセスにおいて、マレーシアのハナピィ教授を招き、同志社大学においても、共同研究会をおこないました。その結果、「ジェンダーダイバシティの新理論の構築と新人事制度の構築」といったジェンダーダイバシティマネジメント、それも、女性管理職・役員の登用等に絞り、共同研究をおこなうことに同意し、2015年に、ミネルヴァ書房より、『活躍する女性管理職ー女性役員の国際比較を中心としてー』を出版することとし、ミネルヴァ書房と交渉し、出版することに同意を得ることができた。研究成果出版計画としては、日本は、もとより、韓国、中国、台湾、シンガポール、アメリカ、タイ、インドネシア、ベトナム、EUなどの諸国のジェンダーダイバシティマネジメントの国際比較研究をおこなうことを計画し、その研究協力者も得ることができた。まず、研究実績としては、諸国の文献・資料も網羅的に収集し、かつ国内外の学会に出席し、各国のダイバシティマネジメントの状況を概括的に把握につとめた。また、日本に関しては、代表者・研究分担者全員で、積極的に、質的な調査をおこなうことができた。質的な調査では、日本を代表する多国籍大企業や日本において積極的経営展開をおこなう外資系多国籍大企業について、半構造化調査法にもとづくヒアリング調査をおこなうことができた。また、日本の中小企業におけるダイバシティマネジメントに関しては、森田園子が担当し、系統的に、質的調査を、日本全国をベースとして、調査をおこなうことができた。海外調査に関しては、アメリカについては、中村艶子が担当し積極的に資料収集・調査等をおこなうことができた。そして、中村は、関西圏団体連合会や市・県主催のジェンダーダイバーシティ(女性活躍推進)にかかかわる講演会・討論会等において、それらの研究成果の社会的還元をおこなうことができた。このような資料収集・調査のプロセスにおいて、この科学研究費基盤Cの研究成果を、論文として、研究代表者である守屋貴司は、「タレントマネジメント論に関する一考察」として、『立命館経営学』第53号第2・3号に研究発表をすることができた。また、研究成果発表としては、2014年12月に、労務理論学会関西部会において、研究代表者である守屋貴司と研究協力者である石錚によって「女性の労働と管理の日中国際比較」と題として、学会報告をおこなうことができた。このように、研究成果について、社会的・学術的に還元をおこなうことができた意義は大きいと考えられる。本共同研究では、ダイバシティマネジメントの中でも、「ジェンダーダイバシティマネジメント」に特に、テーマを絞り込み、最終研究成果を、出版することを企画し、ミネルヴァ書房と出版交渉をおこない、出版企画をたて、共同研究者・研究協力者に、執筆を依頼することにした。ミネルヴァ書房とは、出版交渉の末、出版を引き受けて頂くことができた。そして、2014年度には、研究代表者・研究分担者・研究協力者によって、精力的に、日本、アジア、アメリカ、欧州において、調査・資料収集をおこなうことができた。そして、最終年の2015年度(平成27年度)では、研究計画・出版計画に基づき研究分担者・研究協協力者より前年度の調査研究の研究成果を盛り込んだ研究成果を収集し、研究代表である守屋と研究分担者である渡辺が、編集をおこなった。その編集をおこなう際、当該共同研究のとりまとめにあたって必要な文献を、国内・海外にわたって系統的に収集し、それを研究代表者である守屋と研究分担者である渡辺峻とが読み込む作業をおこなった。そのうえで、研究代表者の守屋と研究分担者である渡辺峻が、前述した編集作業を1年がかりでおこない、その共同研究成果を、ミネルヴァ書房より2016年5月に、『活躍する女性会社役員の国際比較』と題して、出版を予定することができた点は、学術的・社会的に大きな意義があると認識している。また、2013年4月から2016年3月にかけて、わたしたちは、それぞれの研究成果をそれぞれの所属する大学の紀要等で日本語・英語で発表すると同時に、労務理論学会の関西部会および社会政策学会の秋期全国大会の共通論題においても、積極的・精力的に研究成果報告をおこなうことができた点も大きな学術的貢献といえよう。

これまで、共同研究会の開催をおこない、外国人教授を招へいし、アメリカ等の「先進的モデルへの収斂」理論とは異なる新しいダイバシティマネジメントの理論・理論的フレームワーク・モデルリングを仮説的に構築し、まず論文にまとめることができた。また、共同研究会の開催を通して、ジェンダーダイバシティ(それも女性管理職・上場企業女性役員)の焦点を定めて、アメリカと韓国・ベトナム・インドネシア・タイといった国際比較をおこなう調査計画を立案し、論文にまとめると同時に、ミネルバ書房と交渉をおこない、同共同研究の研究成果を、出版することを企画・了承を得ることができた。そして、諸国の文献・資料も網羅的に収集し、各国のダイバシティマネジメントの状況を概括的に把握することができた。それと、同時に、日本、アメリカ、中国、韓国などの諸国において、資料集と質的調査をおこなうことができた。これらの共同研究の進捗状況から「おおむね順調に進呈している」と判断した。経営学これまでの2年間のダイバシティマネジメントの新しい仮説的な理論構築・研究調査のまとめをおこなうと同時に、一定の提言を含んだ論文・学術書を日本語で作成することを、今後の研究の推進方策としている。特に、学術書としては、ミネルヴァ書房より仮題『活躍する女性管理職の国際比較』と題して学術書の出版を、共同研究の研究成果として出版することを予定している。それと同時に、この共同研究の研究成果をベースに、個々の共同研究者で、英字論文の翻訳をおこない各種の大学紀要・国際学術雑誌への投稿をそれぞれがおこなうことを計画している。ジェンダーダイバシティマネジメントに限定し、制度論の視点から新理論の構築を、文化・制度・組織の構造的関係について分析をおこない、その理論的仮説を構築することができた。また、その理論的仮説に基づき、日本は、もとより、韓国、中国、台湾、シンガポール、アメリカ、タイ、インドネシア、ベトナム、EUなどの諸国の調査計画を立案し、その成果を、2015年に出版することを、ミネルヴァ書房より賛同を得ることができた点も大きい。そのプロセスにおいて、マレーシアの有力な研究協力者となるハナピィ教授を、招聘し、共同研究会を開催し、マレーシアのダイバシティマネジメントの現状について知ることができたことも有意義であった。当初、研究代表者および共同研究者によるインドネシア・ベトナム・中国等の海外企業の質的調査を企画していたが、ヒアリング調査の受け入れ企業等との調整がつかず、インドネシア、ベトナム等の海外の大学の研究者および外国人留学生(博士課程後期課程の院生)を研究協力者としてすることによって、それらの諸研究調査を依頼・分担することにに計画を変更したことによる点が大きい。2014年は、今後の研究推進計画としては、共同研究者、研究協力者と共に、制度論に基づく理論的仮説をもとに、本は、もとより、韓国、中国、台湾、シンガポール、アメリカ、タイ、インドネシア、ベトナム、EUなどの諸国の調査をおこなうことにある。予算的な制約もあり、これだけの世界にまたがる調査を実施することは、限界もあるが、その予算的制約をできるだけクリアしながら、できるだけ可能性を追求し、その研究成果をあげることにしたい。
ニュージーランド文学におけるポストコロニアル・アイデンティティの形成

本研究は、ニュージーランドにおいて、多文化・多民族の共生を希求し、可能にするポストコロニアル(植民地主義後)アイデンティティが形成されていく過程を、ニュージーランドの先住民族マオリの文学に焦点を当て、解読することを通じて明らかにした。特にウィティ・イヒマエラの神話的手法に注目し、マオリの神話・伝統を現代というコンテクストの中に置き直し、再解釈することを通して、差別を再生産する家父長制に陥らない共生のアイデンティティの構築の仕方を示した。ニュージーランド文学におけるポストコロニアル・アイデンティティの形成を、先住民族マオリの視点から明らかにしていくことを目的として、昨年度に収集した資料・文献をていねいに読み解き、分析することを主に行った。マオリ文学の第一人者であるウィティ・イヒマエラの小説群、エルスドン・ベスト、アン・サーモンド、マイケル・キングなどの著名な学者によるマオリ文化、宗教、哲学、歴史に関する文献を広く読むことを通して、ヨーロッパ系白人による植民地支配という負の遺産を乗り越えて、ニュージーランドにおける多文化共生社会構築を実現するための様々な思想や取り組みを研究した。その過程において得られた知見を、「マオリの文化的資源」と題して、2012年6月23日に、東北公益文科大学で行われた「東北公益文科大学ニュージーランド研究所創立10周年記念シンポジウム:小さな大国ニュージーランドの教えるものー日本はニュージーランドに何を学ぶか」において、パネリストとして単独発表した。また、2013年3月には、2週間(3月15日3月29日)にわたりニュージーランドに赴き、オークランド大学、オークランド工科大学、およびオークランド市立図書館を利用して、資料の収集と研究を行った。期間中は、オークランド工科大学マオリ・デベラップメント・デパートメント学部長であるパレ・ケイハ教授から、当研究についての貴重な批評と指導をいただくことができた。研究の最終年度は、初年度にニュージーランドで収集した資料、データを利用した研究を国内で行った。植民地主義の差別と抑圧を体験してきたマオリ作家が、キリスト教西洋の価値観とマオリの価値観を弁証法的に発展させることによってつむぎだしてきた、新たな共生の思想を、3年にわたる研究の帰結として提示した。ウイティ・イヒマエラによって代表されるマオリ作家たちは、自分の生まれついたエスニシティを、思索のための一つの貴重な資源として捉え返す。前近代的であるとして軽んじられ、否定され、周縁に追いやられてきたマオリ文化を、西洋文化の前で拒絶してしまうのではなく、脱植民地化という自己と民族の解放運動の中で、差別を再生産することのないより洗練されたものとして取り戻そうとする。彼らは過去の最文脈化、再解釈という手法によって、神話・伝統に新たな意味を与え、そこからより高次の調和を導き出そうと試みる。新たな調和の上に民族としての真の主体性を確立したときに、マオリ文化は白人文化に抗するアンチテーゼとしての主体の位置を獲得し、二項対立の構造を二文化共生に作り変えていくことが可能になる。最終年度に実施した研究の成果は以下のとおりである。・研究発表:「ニュージーランド文学におけるポストコロニアル・アイデンティティの形成」日本ニュージーランド学会第68回研究会、東京外国語大学、2014年3月1日・論文:「ニュージーランド文学におけるポストコロニアル・アイデンティティの形成:より高次の調和を求めてのIhimaeraによる脱植民地化の過程」日本ニュージーランド学会誌第21号に掲載予定(査読審査済み)、2014年本研究は、ニュージーランドにおいて、多文化・多民族の共生を希求し、可能にするポストコロニアル(植民地主義後)アイデンティティが形成されていく過程を、ニュージーランドの先住民族マオリの文学に焦点を当て、解読することを通じて明らかにした。本研究は、ニュージーランドにおいて、多文化・多民族の共生を希求し、可能にするポストコロニアル(植民地主義後)アイデンティティが形成されていく過程を、ニュージーランドの先住民族マオリの文学に焦点をあて、解読することを通じて究明することを目的とする。当該年度は主に以下の活動を行った。1.「日本ニュージーランド学会第18回研究大会」に参加し、研究者間での情報の交換をするとともに、早稲田大学において資料の収集を行った。(H23.6.17H23.6.19)2.ウエリントンのヴィクトリア大学において開催された「NZSSJシンポジウム2011」に参加し、当該年度の研究対象であるマオリ作家ケリ・ヒュームについての研究発表を`Decoding Keri Hulme's Hooks and Feelers'と題して行った。ニュージーランド人研究者と情報交換を行うとともに、同大学図書館において研究及び資料の収集をした。(H23.8.5H23.8.29)3.オークランド大学、およびオークランド工科大学において研究及び資料の収集を行った。オークランド大学では、マオリ文学の第一人者であるウイティ・イヒマエラ氏にインタビューを行い、彼の主な作品に関しての貴重な情報を得、オークランド工科大学では、パレ・ケイハ教授より、主にマオリの宗教および哲学的概念について助言をいただいた。(H.24.3.14H24.3.

23)研究にとって必要な資料、文献もおおむねそろい、それらの分析を通して得られた知見を学会で発表でき、論文執筆作業もほぼ計画通りに進行しているため。当初の計画通り、ニュージーランドでの研究及び資料の収集を実施することができた。また、マオリ人作家ウイティ・イヒマエラ氏に対してのインタビューも行うことができた。今後は、主に今までの分析に基づいた論文の執筆に力を入れる。今後は初年度に収集した資料、データを利用した研究を、主に国内で行う。平成24年度は、田舎に息づく無垢のマオリ社会を描いたといわれるイヒマエラ第一期(19721975)の著作、及び10年間の執筆停止後に、政治色を強めて蘇った第二期(19862004)の著作を主たるテキストとして研究を行う。次年度の研究費200,000円は、最新の情報を入手するために必要な文献の購入と、最後の現地調査にあてる予定である。次年度の研究費30万円は、主に物品の購入に充てる。
白金担持グラフェンの原子構造・電子状態解析による高活性な低白金触媒材料の開発

白金(Pt)担持グラフェンは燃料電池の電極触媒材料として知られている。しかしPtは凝集して触媒効率が劣化するという問題があり、特に高機能化・高活性化が期待されている1 nm以下の原子やクラスターに関する実験報告例は極端に少ない。本研究では金属/グラフェンの構造を原子レベルで制御し少量で高活性な触媒材料とすることを目的として、透過型電子顕微鏡(TEM)を用いて金属/グラフェンの構造・挙動及び電子状態の原子分解能観察を行った。昨年度末に申請者は走査型透過電子顕微鏡法(STEM)により、数個数十個の原子からなるCuクラスターがグラフェン上で2次元平面状に規則的に並んでいく様子を捉えた。更に、電子エネルギー損失分光(EELS)によりこの2次元結晶は酸素を含むことが分かった。ロシアの理論研究グループと共同でこの特異な2次元結晶構造の安定性や特性に関して解析し、学術誌(Nanoscale)に論文を投稿・受理された。また、2015年度の成果である「Cu単原子によるグラフェンの再構成」について更なる実験・解析を行い、Pt原子との違いを比較した。加熱環境下において電子線を照射すると、Cu原子はグラフェンを修復し、Pt原子はエッチングするという正反対の変形過程が見られた。この結果について学術誌(Applied Physics Express)に論文を投稿・受理された。以上、TEM/STEMによる実験結果の解析及び理論研究グループとの共同研究により、学術誌2誌での論文発表を行うと共に、博士学位論文を執筆した。更に、カナダの研究グループとの共同研究により、海外での研究活動も行った。28年度が最終年度であるため、記入しない。白金担持グラフェンは燃料電池の電極触媒材料として知られている。しかし白金は凝集して触媒効率が劣化するという問題があり、特に高機能化・高活性化が期待されている1 nm以下の原子やクラスターに関する実験報告例は極端に少ない。本年度は研究実施計画の通り、(1)窒素ドープグラフェンと(2)銅担持グラフェンについて研究を進めた。(1)はグラフェンへの異種原子のドープにより触媒金属の凝集を抑制し、その位置及び構造を制御する手段として有効だと考え実施した。グラフェン中の窒素置換サイトは、電荷密度が著しく変化し、吸着原子が滞在しやすくなることが報告されている。そこで、ナノテクノロジープラットフォームにて窒素ドープグラフェンの合成を依頼し、TEMによる構造解析を行った。その結果、固体原料を使用した化学気相成長(CVD)法により、グレインサイズが大きく欠陥の少ない窒素ドープグラフェンを作製できることが分かった。(2)は高価な白金の代替触媒として、安価で特異な触媒作用を示す可能性のある銅(Cu)に着目した。Cu/グラフェンの加熱その場TEM観察を行ったところ、他の元素では見られない特異な構造変形過程の観察に成功した。Cu原子はグラフェンの欠陥部分に安定して存在し、そこに高密度な電子線を照射するとCuと隣接した炭素原子の変形が促進され、元とは方位の異なる小さなグレインが多数形成された。理論シミュレーションにより、Cu原子近方ではグラフェン中の炭素原子の回転変形エネルギーが著しく減少することが分かった。これは孤立Cu原子にもグラフェンの構造を編み直す作用があることを示唆した重要な結果である。研究実績の概要に記した通り、グラフェン上におけるCuの特異な構造、挙動をTEMによって詳細に解析した。更に、高角度散乱暗視野(HAADF)-走査型透過電子顕微鏡法(STEM)と電子エネルギー損失分光(EELS)とを組み合わせることで、グラフェン上のCu原子一つ一つの電子状態の解析にも成功した。構造特定と電子状態解析に関してはそれぞれ動力学的像シミュレーションと第一原理計算によるEELSシミュレーションを行っており、計算に必要な知識・技術を習得した。窒素ドープ量が想定より少なかったこと、白金単原子のEELS測定は非常に困難なことから、当初の予定とは少々異なるものの、Cu原子に関して予想を上回る興味深い結果を得ているため、双方を加味して「(2)おおむね順調に進展している」と評価した。

この結果について学術誌(Applied Physics Express)に論文を投稿・受理された。以上、TEM/STEMによる実験結果の解析及び理論研究グループとの共同研究により、学術誌2誌での論文発表を行うと共に、博士学位論文を執筆した。更に、カナダの研究グループとの共同研究により、海外での研究活動も行った。TEM/STEMによって、グラフェン上の数20個程度のCu原子が2次元結晶構造を形成することが分かった。クラスターになることで金属自身の電子構造が変わり、バルクとは異なる劇的な物性変化が現れると考えられる。現在その特異な組成・構造・物性について、国内外の研究機関と連携して解析を進めている。また、本年の夏にはカナダの研究機関において環境制御TEMを用いたグラフェンの研究を予定している。これまで高真空中にて観察をしていたが、より実際の環境に近い条件で構造・特性を評価できると考えている。28年度が最終年度であるため、記入しない。
特殊な分子環境で行われる核酸の分子認識と構造形成の解明

バイオテクノロジーではDNAが様々な状況下で利用されるが、細胞やバイオチップ表面という特殊な環境下でDNAの機能をいかに高めるかがバイオテクノロジーを成功に導く要である。本研究では、周辺環境がDNAとRNAに大きな影響を与え、特殊な環境下では遺伝子発現の制御に関わるDNA構造体が形成されることや、RNAの酵素活性が向上することなどが見出された。この成果は、バイオテクノロジーで利用されるDNAとRNAの設計に役立つことが期待される。本研究は、材料表面や細胞内部で生じる分子クラウディング環境に着目し、定量解析が可能な分子クラウディング実験系を用いてDNAとRNAの分子間相互作用を解明し、特殊な分子環境で行われる核酸の分子認識と構造形成を解明することを目的としている。本年度は、分子クラウディング環境を再現できるin vitro実験系(高濃度のPEGを含む水溶液を使った実験系)を用いて、主にDNAとカチオンの結合に関する検討を行った。まず、ヘアピンDNAの性質を利用してDNA塩基対とカチオンの結合を簡便に調べることができる実験系を構築した。そして、この実験系を用いて細胞内に存在する様々なカチオン(金属イオン、ポリアミン、塩基性ペプチド)とDNAの結合エネルギーを明らかにした(Chem .Commun.,2008,700)。この実験系は、今後DNAとカチオンの結合反応に対する分子クラウディングの影響を調べるために利用できると考えている。また、PEGを含む水溶液中におけるDNA構造の熱力学的安定性を測定することで、DNA二重らせん構造に結合するカチオンの水和状態を明らかにすること成功した(Bull.Chem.Soc.Jpn.,2007,80,1987)。DNA構造形成と解離に対する速度論的な影響に関する報告も行い(Chem.Commun.,2007,2750)、PEGが及ぼす核酸構造の熱力学的・速度論的な知見を得ることができた。さらに、PEGを含む反応溶液中でのリボザイム活性を測定したところ、PEGはリボザイム活性を向上させることが示され、その原因としてRNAとナトリウムイオンの結合がPEGによって変化している可能性が示された。本研究は、材料表面や細胞内部で生じる分子クラウディング環境に着目し、定量解析が可能な分子クラウディング実験系においてDNAとRNAの分子間相互作用を解明し、特殊な分子環境で行われる核酸の分子認識と構造形成を解明することを目的としている。本年度は、前年度に引き続いて分子クラウディング環境における核酸の構造形成に対する定量解析を行い、新たに遺伝子発現制御に関わるDNAの左巻き構造(Z型構造)が安定化されることを見出した(Mol. BioSyst., 2008, 4 (Emerging investigators issue), 579-588)。この研究ではさらに核酸構造についても検討を行い、分子クラウディング環境はヘアピン構造などの塩基対構造には影響を与えないことを明らかにした。一方で、ポリエチレングリコールや多糖類などの様々な共存溶質によってリボザイムの酵素活性が数倍数千倍も向上することが示された(Nucleic Acids Symp. Ser. 2008, 52, 519-520)。このように、細胞では重要な働きを担っているが、通常の水溶液中では形成されにくいDNAやRNAの高次構造が、分子クラウディング環境では安定に存在できることが明らかになった。本研究では、細胞内部のような特殊な分子環境をモニターできる核酸分子を開発するために、ヘアピン構造を使った実験系の構築も目指している。ヘアピン構造ではループ配列や鎖長、あるいは非塩基対部位の導入によって構造体の安定性をコントロールすることが可能である。この特性を利用した新規実験系(Chem. Commun., 2008, 700)によって、細胞のカチオン性分子をトリガーとして構造変化する様々な構造安定性をもつヘアピンDNA分子群を得ることができた。さらに、この構造安定性が厳密にコントロールされたDNA分子群を用いることで、カチオン性分子に応答する濃度領域、つまりシグナル応答のダイナミックレンジが、ループ配列と鎖長を変えることで簡単に調整できることも示された。本年度は、細胞内部に特徴的な分子クラウディング環境、カチオン性分子が共存する環境、アニオン性分子が共存する環境における核酸構造と機能を簡便に検出できる核酸分子の取得を試みた。前年度までの研究で得られたDNA配列設計技術を利用することで、構造安定性が厳密にコントロールされたヘアピンDNA分子群、並びにヘアピンRNA分子群を開発することに成功した。これらの分子群は、金属イオンやカチオン性分子に対して異なる応答領域(ダイナミックレンジ)を示すことが確認され、当初の研究目的を達成したといえる。この構造安定性が厳密にコントロールされた分子群を利用することで、細胞内部環境における塩基対構造の形成能力が評価できると期待される。そこで、このDNA及びRNA分子群を用いて分子クラウディング効果を調べたところ、ヌクレオチドと金属イオンの結合性が大きく変化することが定量的に明らかになった(Nucleie Acids Symp. ser.,53,519(2009))。

本研究ではハンマーヘッドリボザイムを用いた検証も行い、リボザイム活性に対する分子クラウディング効果を、マグネシウムイオンとの結合エネルギーの観点から解明した(J.Am.Chem.Soc.,131,16881(2009))。さらに、共存するアニオン性分子の影響も調べたところ、アニオン性分子によって低下するリボザイム活性が、分子クラウディング環境では回復することを見出した。また、分子クラウディング効果によってDNAの特殊構造体(i-motif構造)のpH応答性を大きく変えられることもわかった(Chem.Commun.,46,1299(2010)。以上のヘアピン構造分子群、ハンマーヘッドリボザイム、そしてi-motif構造は、分子環境をモニターできる機能性核酸として利用でき、細胞内部などの特殊環境で機能する核酸分子の設計と機能解明に役立つと期待される。
メタボローム解析を用いた犬の糖尿病発症メカニズムの解明

犬とヒトでは糖尿病発症メカニズムが大きく異なっていると考えられている。本研究では、犬筋管様細胞を主たる材料に、インスリン抵抗性に続き糖尿病を発症することが報告されている犬の副腎皮質機能亢進症(HAC)と、インスリン抵抗性が生じるものの糖尿病の発症が報告されていない犬の肥満との違いを代謝産物レベルを中心に比較し犬の糖尿病発症の特性を解析することを目的とした。その結果、HACのモデルとしたデキサメサゾンを添加した犬筋管様細胞と、肥満のモデルとしたTNF-αを添加した細胞との代謝産物の比較から、同じインスリン抵抗性であっても異なる代謝産物の増加と減少を見出した。犬では、先天的異常がない場合、糖尿病の発症には何らかの因子がインスリン抵抗性を増大させ膵臓β細胞を疲弊させると考えられている。中でも、肥満とクッシング症候群はインスリン抵抗性の二大要因と考えられている。しかしながら、犬とヒトでは糖尿病発症の状況が少し異なってくる。本研究では、1) 2つの要因が惹起するインスリン抵抗性を分子レベルで解明することで犬特有の糖尿病発症メカニズムを明らかにする、2)肥満した犬での糖尿病の発症を回避する補償作用を明らかにする、3)ヒトで肥満による糖尿病を抑制する候補因子を抽出することを目的とし、平成25年度は、犬の正常組織由来不死化細胞の樹立および肥満犬およびクッシング症候群犬の血液の網羅的分析を目指した。健康な犬からインスリン標的組織を採取し各正常組織由来不死化細胞を樹立を計画したが、採取組織からの細胞分離、および正常細胞への不死化遺伝子の導入効率が予想よりも低く、以降の分析に用いることが可能な細胞株の樹立ができなかった。国外で販売されている犬の初代骨格筋培養細胞を購入した。初代骨格筋培養細胞における糖取り込み能を評価したところ、インスリンにより増強され、グルココルチコイドにより惹起されるという他動物種の骨格筋細胞と同様の傾向を示した。さらに、LC-MS/MSを用いた代謝産物の網羅的分析を行った結果、インスリンの作用によりリン脂質にいくつかの変動を認めた。肥満犬およびクッシング症候群犬の血液の網羅的分析の進捗状況は、以下の通りである。肥満犬およびクッシング症候群犬サンプルについて、本大学動物医療センターや地域の開業医に協力を依頼してから、実際の入手までには時間を必要としたが、その間に正常な犬の血清について、GCMSでの脂肪酸の分析、アミノ酸の分析を進めた。血液生化学データについては、肥満犬およびクッシング症候群犬について分析済みである。犬では、先天的異常がない場合、糖尿病の発症には何らかの因子がインスリン抵抗性を増大させ、膵臓β細胞を疲弊させると考えられている。中でも、肥満とクッシング症候群ではインスリン抵抗性の2大要因と考えられている。しかし、犬において、肥満でインスリン抵抗性が増しても糖尿病を発症することはないが、クッシング症候群(血中のグルココルチコイドの上昇)から糖尿病へ進行することがある。そこで、本研究では、1) 2つの要因が惹起するインスリン抵抗性を分子レベルで解明することで犬特有の糖尿病発症メカニズムを明らかにする。2)肥満した犬での糖尿病の発症を回避する補償作用を明らかにする。3)ヒトで肥満による糖尿病を抑制する候補因子を抽出することを目的としている。25年度、26年度を通して、得られた結果を以下にまとめる。まず、細胞でのグルココルチコイドの影響の評価するため、犬の初代骨格筋培養細胞においてグルココルチコイドの添加の有無で細胞群を分け、それぞれにインスリンとグルコースを添加し、培地中の残存グルコース濃度とアミノ酸の経時的変化をみたところ、グルココルチコイド添加群では細胞内へのグルコース取り込みが抑制される傾向と、細胞内でのアミノ酸の増加が認められた。グルココルチコイドにより、細胞内でタンパクの異化が亢進していることが示唆される。肥満犬、クッシング症候群の犬の血清中のアミノ酸、脂肪酸、生化学を分析し、多変量解析のPLS-DAを行ったところ、2群にグループを分ける14成分が明らかになった。血清については、LC-MS/MSを用いた代謝産物の網羅的分析も実施しており、複合脂質に変動が認められた。ヒトでは肥満が原因となり、相対的にインスリン作用が不足する2型糖尿病が主体であり、犬とヒトとでは糖尿病発症メカニズムが大きく異なっていると考えられている。そこで、本研究ではインスリン抵抗性に続き糖尿病を発症することが報告されている犬の副腎皮質機能亢進症(HAC)と、インスリン抵抗性が生じるものの糖尿病の発症が報告されていない犬の肥満の違いを比較することで犬における糖尿病発症の特性を解析することを目的とした。健常な犬では血清中インスリン増加に伴い血清中分岐鎖アミノ酸(BCAA)が低下したが、これはインスリン依存的にBCAAが細胞に取り込まれたことを示している。デキサメサゾンを添加した犬筋管様細胞では、細胞内のBCAAがコントロール群に対して有意に低値であったことから、インスリン抵抗性が高まっていたと示唆される。さらに、デキサメサゾンを添加した犬筋管様細胞では、糖取り込み能が抑制され、糖の異化作用が減少する傾向にあった。糖異化作用の減少は、健常な犬から単離した末梢血単核球にデキサメサゾンを添加した時の代謝産物の解析結果でも示されていた。一方、TNF-αを添加した犬筋管様細胞では、逆にインスリン感受性を増強するβ-アミノイソ酪酸が有意に高値を示し、生じたインスリン抵抗性を代償する作用が働いたと考えられる。