hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
消化管における新規ポンプおよびチャネルの構造と機能

1.胃プロトンポンプαおよびβサブユニットを、極性細胞(LLC-PK1細胞)に安定発現させることに成功した。この細胞を使い、胃プロトンポンプはフリッパーゼとして機能することを証明した。2.胃プロトンポンプの発現系(HEK293細胞)を用いた研究で、(1)αサブユニットM6セグメントの機能発現に必須なアミノ酸残基は、αヘリツクス構造の片方の側に局在していることを明らかにした。(2)βサブユニットの細胞外側部分の3つのジスルフィド結合は、いずれもα-βの会合、プロトンポンプの活性維持、αおよびβサブユニットの安定化、αサブユニットの細胞膜表面への移送に必要不可欠であることを明らかにした。3.胃酸分泌細胞により近いプロトンポンプ発現細胞の構築を指向して、SV40大型T抗原遺伝子導入トランスジェニックマウスより、胃上皮細胞株の樹立を行った。そして胃プロトンポンプ遺伝子を発現する細胞の構築に成功した。4.ウサギ胃酸分泌細胞の基底側膜に存在するHousekeeping塩素イオンチャネルは、IL-1β→IL-1リセプター→百日咳毒素非感受性G蛋白質(G12/G13)→Rho/Rho kinase→O_2^-産生→Cl^-チャネルという一連の経路により抑制されることを明らかにした。5.Housekeeping塩素イオンチャネルの分子実体は、CLCA1ではないことを証明した。また、CLC-5塩素イオンチャネルが胃酸分泌細胞に発現していることを発見し、CLC-5は胃プロトンポンプと会合していることを明らかにした。6.ラット大腸粘膜において、NO産生を介する塩素イオンチャネルの新規活性化機構を明らかにした。NOによりトロンボキサンA_2産生が促進され、トロンボキサンA_2が大腸クリプト細胞に作用して、Cl^-チャネルを活性化するものと考えられた。我々のグループは胃・腸を中心に消化管の生理機能解明、とりわけ、胃酸分泌を担う胃プロトンポンプや腸における慢性下痢疾患や薬物による下痢疾患に関わる塩素イオンチャネルについて研究を展開してきた。我々は胃酸分泌細胞から得られた胃ベシクルの2分子膜の外層(細胞質側)より内層(細胞外側)に、ATP依存的にPC, PS, PEといった広範囲なリン脂質を輸送するフリッパーゼを発見した。本年度は胃フリッパーゼについて以下のような究を行った。SCH28080のアフィニティラベル物質を有機合成し、この特異的阻害剤が結合したタンパクを精製する実験を行ってきた。胃フリッパーゼが胃プロトンポンプと共存し、胃プロトンポンプの阻害剤により、胃フリッパーゼの機能も阻害されることから、両者は同一の分子の多機能である可能性が強い。また、分子がプロトンポンプ機能を行う際に、膜脂質を鰹削り器のように、削って、移動させるというコンピュターモデルを構築した。他方、胃酸分泌細胞膜の基底側膜に細胞防御に直接関わる塩素イオンチャネルが存在することを我々は発見した。このHousekeeping塩素イオンチャネルについて、このチャネルがこれまでに知られている塩素イオンチャネルfamilyのCLC-2, CLC-3, CLC-5である可能性について、チャネル蛋白質の抗体を作製して免疫組織染色により検討している。これまで、CLC-2は胃酸分泌細胞の分泌側膜に存在して、塩素イオン分泌に関与するという他研究者のこれまでの発表は間違っていることを発見した。

これらの研究の中から、我々自身が世界で初めてその存在を発見し、その後、他の世界中のグループが未だ研究を行ってきていないものが2つある。胃フリッパーゼとHousekeeping塩素イオンチャネルである。これらについて、今年度は以下の研究を行った。胃プロトンポンプを特異的に阻害する可逆的阻害剤SCH28080や非可逆的阻害剤ラベプラゾール、オメプラゾールが同時にフリッパーゼを阻害することを見いだした。しかし、SCH28080の誘導体で新規に合成したものの中に、プロトンポンプを阻害するがフリッパーゼを阻害しないものが見つかった。したがって、胃フリッパーゼはポンプ分子の機能そのものではないが、ポンプ分子の部分機能である可能性が考えられた。胃酸分泌細胞の側基底膜側細胞膜に存在する塩素イオンチャネルは膜電位を規定し、ハウスキーピングな役割をしている。このチャネルは活性酸素やインターロイキン1βにより制御されることを見いだした。その他の胃酸分泌機能に関連する塩素イオンチャネル(CLC2,CLC3,CLC5)についても、それらの機能を調べた。我々のグループは胃・腸を中心に消化管の生理機能解明、とりわけ、胃酸分泌を担う胃プロトンポンプや腸における慢性下痢疾患や薬物による下痢疾患に関わる塩素イオンチャネルについて研究を展開してきた。胃プロトンポンプ分子機能の一部としてフリッパーゼ機能があることを、極性のある細胞株にポンプ遺伝子を安定発現させて証明できた。分泌されたリン脂質が細胞膜表面を覆うことで、細胞表面が疎水性バリアとなり、酸分泌細胞が分泌する高濃度の酸から細胞を防衛していると考えられる。胃酸分泌細胞の側基底膜側細胞膜に存在するHousekeeping塩素イオンチャネルは膜電位を規定し、ハウスキーピングな役割をしている。他方、我々はヒト大腸がん細胞では、正常細胞に比べて、Na^+,K^+-ATPase α1サブユニットの発現が減少するが、その補償としてα3サブユニットの発現が増大していることを発見した。この機構は、大腸がん細胞の極性(高分化腺がん)を維持するために重要であると考えられた。
イカ類が表出する体表パターンの言語的意味に関する数理的探求

記憶・学習に優れ、発達した視覚系を持つイカ類の体表パターンの変化は、カモフラージュや同種個体間コミュニケーションに利用されていると考えられてきた。しかし、イカ類の飼育・実験の困難さから、その詳細は明らかではない。そこで、本研究は行動学と数学の協同により、イカ類がコミュニケーション時に体表に表出させる動的で多彩な体表パターンの言語的意味について数理的な解読・理解をし論理を確立することが目的である。これまでの行動実験では、主に次の2つの方法を行なった。(i)トラフコウイカ成体にいくつかの動画を見せ、体表パターン変化を記録(ii)2個体のトラフコウイカ亜成体の初対面での体表パターンおよび動作要素変化を記録捕食者の動画を見た際や対面実験において、状況の時間変化とともに、急激な体表パターン変化と特定パターンの出現が見られた。また、数学的アプローチとして、複雑なトラフコウイカの体表パターンが幾つかの典型的な体表パターンの線形和として実現され得るかイカ類の体表構造や神経系をもとに検討した。最終年度は、トラフコウイカの入手が困難であったため、代替案としてコブシメを使用し主に上記(i)(ii)の行動実験を行なった。体色が変化するコウイカのアニメーションを見たコブシメの体色は変化せず、体の向きを変えるコウイカのアニメーションを見たコブシメは体表の色彩や質感を変化させた。初対面の他個体を見たコブシメは、時間経過とともに個体間の距離や動作要素を変えるとともに、主に6種類の体表パターンを出現させた。それらの動作や体表パターンの出現頻度や順番にある程度の秩序が見られた。今後は、イカ類が視力に頼ってコミュニケーションを行なっていることを踏まえ、人間の判断では分類できないすべての体表パターンを機械学習によって分類し、そのパターンの出現秩序についてさらに解析を進め体表パターンの言語的意味について解読する。本研究は、コミュニケーション時にイカ類が表出する動的で多彩な体表パターンに注目し、その表出パターンに言語的規則を当てはめ、数理的な解読・理解を目的とする。イカ類は下等動物に位置付けられる軟体動物門の一群であるが、小型哺乳類並みに発達した巨大脳と、精巧なレンズ眼という視覚系をもち、これらにより迅速で多彩な体色変化を可能とする。また、記憶・学習に優れた知的側面ももつ。このようなことから、イカ類の体表パターンは、防衛を企図したカモフラージュ(擬態)と同種個体間のコミュニケーションという、複雑な行動に利用されていると考えられているが、その詳細は明らかではない。本研究は行動学と数学の協同により、イカ類の動的で多彩な体表パターンがどのような規則により発現され、維持されるのか、その規則に言語的意味をあてはめて解読し、明らかにすることを目標とする。本年度は、トラフコウイカにおける体表パターンに焦点を当て、アニメーションを提示することで、以下のような2つの場面における行動実験を行い、体表パターンの観察と記載した。1)トラフコウイカ成体にコンピュターディスプレイに映じたエビの絵の動画を見せて、その際のボディーパターンを記録する。2)集団飼育しているトラフコウイカの行動を撮影し、行動文脈に対応させてボディーパターンを解析する。防衛場面においては、捕食者による発見から捕食までの過程において、パターンが次々に変化していき、それぞれの体表パターンに被験者であるトラフコウイカの心情が表現されている様子が観察された。またその体表パターンの発現順序についても一定の秩序が見られた。今年度は期間が半年で実験データ数が少ないため、来年度引き続き実験データを収集し、それらをもとに統計処理を行い数理モデルのプロトタイプを構築する予定である。イカの寿命は1年で、かつ飼育が困難であるため、季節によって実験を行える個体数に大きな差が出てしまう。今年度は期間が半年しかなく個体数が減っていた時期であったため、実験データ数が少なくなってしまった。進捗状況は半年分、遅れている。本研究は、イカ類がコミュニケーション時に体表に表出させる動的で多彩な体表パターンに注目し、その表出パターンに言語的規則を当てはめ、その意味について数理的な解読・理解をすることを目的とする。本年度は、トラフコウイカにおける体表パターンに焦点を当て、1週間以上遭遇しなかった他個体と対面するという社会的場面でトラフコウイカがどのようなボディーパターンを表出するのかを調べたところ、対面直後にパターンの変化が顕著に見られた。ここではいくつかの特定のパターンが表出されていたことから、これらは、初対面というコミュニケーション場面において意味を持つパターンであることが示唆される。今後は、この社会場面におけるパターンの意味について統計的な解析によりさらに詳細に調べる予定である。統計解析を行えるデータ数が揃うまで当初予定より時間がかかったため、数理的な考察について遅れている。

またアニメーションを用いた社会場面の設定についての観察実験についても、実験回数が不足している状況である。記憶・学習に優れ、発達した視覚系を持つイカ類の体表パターンの変化は、カモフラージュや同種個体間コミュニケーションに利用されていると考えられてきた。しかし、イカ類の飼育・実験の困難さから、その詳細は明らかではない。そこで、本研究は行動学と数学の協同により、イカ類がコミュニケーション時に体表に表出させる動的で多彩な体表パターンの言語的意味について数理的な解読・理解をし論理を確立することが目的である。これまでの行動実験では、主に次の2つの方法を行なった。(i)トラフコウイカ成体にいくつかの動画を見せ、体表パターン変化を記録(ii)2個体のトラフコウイカ亜成体の初対面での体表パターンおよび動作要素変化を記録捕食者の動画を見た際や対面実験において、状況の時間変化とともに、急激な体表パターン変化と特定パターンの出現が見られた。また、数学的アプローチとして、複雑なトラフコウイカの体表パターンが幾つかの典型的な体表パターンの線形和として実現され得るかイカ類の体表構造や神経系をもとに検討した。最終年度は、トラフコウイカの入手が困難であったため、代替案としてコブシメを使用し主に上記(i)(ii)の行動実験を行なった。体色が変化するコウイカのアニメーションを見たコブシメの体色は変化せず、体の向きを変えるコウイカのアニメーションを見たコブシメは体表の色彩や質感を変化させた。初対面の他個体を見たコブシメは、時間経過とともに個体間の距離や動作要素を変えるとともに、主に6種類の体表パターンを出現させた。それらの動作や体表パターンの出現頻度や順番にある程度の秩序が見られた。今後は、イカ類が視力に頼ってコミュニケーションを行なっていることを踏まえ、人間の判断では分類できないすべての体表パターンを機械学習によって分類し、そのパターンの出現秩序についてさらに解析を進め体表パターンの言語的意味について解読する。進捗状況はイカの飼育の影響で半年分遅れているが、実験データの数は徐々に増えてきており、課題推進上大きな問題はない。有効な母体数のデータが収集でき次第、統計解析など数理的な手法を用いるとともに、並行して実験データを増やしていく予定である。現時点でのデータをもとに数理的考察を行う。アニメーションを用いた攻撃、防御などの社会的場面について観察実験を行う。今年度は期間が半年であったが、イカの寿命は1年で、かつ飼育が困難であるため、季節によって実験を行える個体数に大きな差が出ることや加熱冷却装置の故障のため個体数が減ってしまい当初予定の実験が行えておらず次年度への繰越分が発生している。飼育用水槽で使用する水温制御用の加熱冷却装置が故障したため、今年度に予定外の支出があった。進捗状況は半年分遅れている状況ではあるが、飼育環境の劣化による個体数の減少によるものである。現在は環境を整備し実験を行うための飼育が行えているので、繰越分は次年度分と合わせて主に実験で使用する予定である。
新規がん抑制遺伝子REIC/DKK-3の機能解析と前立腺癌治療への応用

REIC/Dkk-3によるアポトーシス誘導起因としてのER-stressの特性解析がんのAd-REICに対する耐性獲得機構とその原因因子の探索このように、REIC/Dkk-3はがんと正常とを見分ける抗腫瘍因子として位置づけられ科学的・技術的にも大きな価値を有していることが明らかとなった。平成19年度の我々の研究により、REIC/Dkk-3の強制発現によるJNK活性化の上流メカニズムとして、BipやChopを介する小胞体ストレスのメカニズムが重要であること、また、HSP70やHSP90などのタンパク質のJNKの機能制御への介入が明らかとなっている。また、最近の研究成果として、REIC/Dkk-3発現によるアポトーシス誘導の耐性化と良く相関する分子の一つとして、Bcl-2が見つかった。さらに、REIC/Dkk-3遺伝子のアポトーシス誘導ドメインを同定するために、様々な長さの遺伝子フラグメントを作製し細胞死誘導実験を行ったところ、REIC/Dkk-3遺伝子フラグメント-2が機能ドメインであることが明らかとなった。このフラグメント-2には78個のアミノ酸がコードされており、どのようにアポトーシス誘導に関与するのかを検討中である。実際に、このフラグメント-2を用いた遺伝子治療実験をマウス前立腺癌皮下モデルを用いて行ったところ、同癌の腫瘍増殖抑制効果が認められた。これらの結果より、REIC/Dkk-3発現によるアポトーシス誘導機序には、小胞体ストレス関連分子群やアポトーシス制御分子であるBcl-2の発現が密接に関わっていると考えられる。本研究により、REIC/Dkk-3強制発現により癌細胞特異的におこるアポトーシス誘導の分子機序が明らかとなりつつあり、REIC/Dkk-3遺伝子を用いた前立腺癌治療の基盤となる知見が集積してきている。
高活性長期持続性経口抗糖尿病治療薬としてのバナジウムおよび亜鉛錯体の開発研究

生活習慣や食生活の変化により糖尿病の発症率が増大し続けている。現在、1型糖尿病の治療にはインスリンの皮下注射が唯一の方法であり、一方2型糖尿病の治療には合成薬剤が用いられているが、それぞれ肉体的・精神的苦痛および副作用発現などの問題をかかえ、新しい概念を有する治療薬の開発が世界的に望まれている。我々のグループでは、1型糖尿病には、経口的に与えたバナジル錯体が、そして2型糖尿病には経口投与可能なバナジルおよび亜鉛錯体が有効であることを見出し、研究を続けている。本研究では、これまでに見出して来た錯体をリード化合物と用い、構造活性相関にもとづいて新しい錯体の開発を目指す一方、これまで検討して来なかった新しい構造をもつ錯体を検索することとする。これらの新錯体の開発・研究と並行して、錯体の血中動態や金属の体内分布を解析しながら、新錯体開発への方向づけを補強すると共に、将来への臨床応用への可能性を探ることとした。血糖降下作用のインビトロ評価系に関して、これまでの放射性標識グルコースを用いる方法に代わり、新たに酵素あるいは電子スピンを用いる簡便な方法を確立した。したがって、我々のグループでは、これらの2方法に加えて、これまでの脂肪酸放出を指標する方法の3方法を用いて、総合的なインスリン様作用の評価および作用機構の解析ができるようになった。錯体として新たにハロゲン化ピコリン酸誘導体やアルキル化マルトール誘導体のバナジルおよび亜鉛錯体を合成し、それらの構造を解析し、ラット脂肪細胞を用いてインビトロインスリン様作用を評価し、いくつかの有望な錯体を見出しつつある。これまでの研究成果にもとづいて、本年度はインスリン様作用を示す錯体をまず合成した。バナジル錯体の合成には、ピリドン、ピリジン-N-オキシド、ピコリン酸およびイミダゾール誘導体を配位子に用いた。一方、亜鉛錯体の合成には、カルニチンベタイン、乳酸、キニン酸およびアスコルビン酸を配位子に用いた。これらの錯体は、ラット脂肪細胞を用いるインビトロインスリン様活性評価ではいずれも高活性を示した。錯体の実験糖尿病動物への投与法と体内への吸収性を予測するために、錯体のスペシエーション(化学種形態別分析)を検討し、血中において錯体は血清中の低分子化合物とternary complexを作ることが分かった。一方、血清タンパク質の大部分を占めるアルブミンとバナジルイオンとの結合を円二色性スペクトル(CD)法を用いて基礎的に研究し、バナジルイオンはアルブミン中のシステイン-34に結合していることを明らかにした。本CD法は、錯体とアルブミンなどのタンパク質との結合性を研究するには極めて有効な機器であることが分かったため、現在、種々の錯体とアルブミンなどの血清タンパク質の結合様式に関して研究を展開している。放射性V-48を用いて4価および5価バナジウムイオン溶液を健常ラットに投与すると、非放射性キャリアーを加えない場合と加えた場合では、V-48の体内分布が大きく変化する新しい事実を見出すことができた。キャリアフリーではV-48の大部分は肝臓に集積するのに対し、キャリアーを加えると骨や腎臓に集積しやすくなることが分かった。この結果は、キャリアフリーでは、V-48はトランスフェリンに結合し肝臓に集まり、一方キャリアーが存在するとアルブミンにも結合し全身に分布することを示唆した。
ドイツ精神科学における「自由」と政治 -戦間期・ナチズム・戦後-

本研究は、1920年代から1930年代にかけてドイツ・アカデミズムの一角を担うようになった精神諸科学の思想と行動を解明することを目的とするものである。精神諸科学は、シュライエルマッハーに端を発し、ディルタイを経て広まった研究方法であり、《歴史》ないし《文化》を対象とし、方法として《追体験》による《解釈》を提唱した。その影響は、教育学研究分野において最も顕著に顕れた。1930年代には、大学における教育学のポストを占めるようになる。しかし、方法論的特質のゆえに、内的世界ないし主観的世界の記述に傾斜し、現実世界(政治)との接合が困難であった。こうした仮説の下に、本研究においては、ワイマール時代から戦後にかけての精神科学的教育学、とくにナチズム期における精神科学的教育学の基礎構造を解明するため、二つの宗教的人間形成論との比較検討を行った。一つは、ナチズムに対する態度決定において精神科学的教育学とは対極の立場を取った告白教会左派、すなわち弁証法神学における人間形成論との比較である。E・シュプランガーの人間形成論が、所与の《文化》ないし《歴史》に実定性を持たせたのに対し、D・ボンヘッファー、K・バルトらの弁証法神学に見られる人間形成論は、《神の言葉》に集中し、そこから《文化》や《歴史》を相対化し、その上に人間形成論の可能性を示唆している。もう一つは、同時代の宗教教育学との比較である。ゲッチンゲン大学においてE・ヴェーニガーと同僚であった宗教教育学者H・キッテルは、ヴェーニガーと同様、《軍隊的教育学》を構築した。なお、戦後における精神科学的教育学の動向、とりわけナチズム期に対する反省については、十分解明することができなかったので、今後の課題としたい。本年度の研究においては、主に1930年代の精神諸科学的諸科学の位相を明らかにするために、精神諸科学と国家社会主義的諸科学および反ナチ抵抗運動に見られるさまざま思想との比較研究を行った。精神諸科学は近代ドイツ思想の本質である人間の内面性、すなわち精神的自由の記述においては優れているものの、観念論の枠組みの中にとどまる。そして、現実政治との関わりにおいては無原則の態度決定を繰り返す。たとえば、シュプランガーやノールはナチ支配に対して迎合し、一方フリットナーは沈黙を守る。これに対して、ナチ・ドイツの政治思想を前提とし、人間のトータルな掌握を目指す国家杜会主義的諸学は、精神科学的諸科学とは正反対の議論を展開する。たとえば、クリークは精神諸科学を否定、《純粋教育科学》あるいは《現象学的教育科学》を標榜し、国家社会主義という場の論理から《政治的》人間論を展開した。また、反ナチ抵抗運動に見られる《人間再建》の思想は、ナチ的諸学と同様、人間をトータルに捉え直す試みである。しかしそれは、ナチ的諸学と異なり、その根底において宗教性を把持していた。たとえば、神学者であったボンヘッファーはナチの本質を正統的キリスト教に代替する疑似宗教と見なし、《キリストに従う》ことから人間の覚醒と国家秩序の再建を目指した。以上のことから、1930年代における精神諸科学の特徴は以下のように理解するととができる。1.国家杜会主義的諸学と抵抗運動と比較して非政治的(社会科学的認識の欠如)である。2.宗教性に関しては、疑似宗教としてのナチ、また正統的キリスト教を内包する抵抗運動と比較して希薄(宗教性の欠如)である。本研究は、1920年代から1960年代にかけてドイツ・アカデミズムの一角をになった精神諸科学の思想と行動を解明することを目的とするものである。

精神諸科学は、シュライエルマッハーに端を発し、ディルタイを経て広まった研究方法であり、《歴史》ないし《文化》を対象とし、方法として《追体験》を提唱した。その影響は、教育学研究分野において最も顕著に顕れ、1930年代には大学における教育学のポストを席巻する。しかし、方法論的特質のゆえに、内的世界ないし主観的世界の記述に傾斜し、現実世界との接合が困難であった。こうした仮説の下に、今年度の研究においては、ワイマール時代から戦後にかけての精神学的教育学、とくにナチズム期における精神科学的教育学の基礎構造を解明するため、二つの宗教的人間形成論との比較検討を行った。一つは、ナチズムに対する態度決定において精神科学的教育学とは対極の立場にあった告白教会左派、弁証法神学における人間形成論との比較である。シュプランガーの人間形成論が所与の《文化》ないし《歴史》を基礎として構築されるのに対し、ディートリヒ・ボンヘッファー、カール・バルトの弁証法神学に見られる人間形成論は、《神の言葉》に集中し、そこから《文化》や《歴史》を相対化、その上に人間形成論の可能性を示唆している。もう一つは、同時代の宗教教育学との比較である。ゲッチンゲン大学において精神科学的教育学者であり、ナチズム期に《軍隊教育学》を提唱したエーリヒ・ヴェーニガーと同僚であった宗教教育学者ヘルムート・キッテルは、ヴェーニガーと同様、《軍隊的教育学》を構築した。なお、戦後における精神科学的教育学の動向、とりわけナチズム期に対する反省については、十分解明することができなかったので、今後の課題としたい。
PPARγ-ligandによるhTERTを標的とした新たな膵癌治療法の開発

PPARγ-ligandのヒト膵臓癌細胞に対する傷害性を確認するため、MIAPaCa-2細胞を各種濃度の15-Deoxy-Δ^<12,14>-prostaglandin J_2 (15d-PGJ_2)で処理し、72時間目の細胞生存率を検討した。その結果、15d-PGJ_2濃度に依存して細胞生存率は低下し、15d-PGJ_220μM処理時には、未処理時の約20%に達した。次に、15d-PGJ_2処理がhTERT mRNAと蛋白の発現に及ぼす影響を調べたところ、いずれも著明に抑制された。hTERT遺伝子の発現は、転写因子であるSp1、c-Mycおよびestrogen receptor(ER)によって担われている。そこで、15d-PGJ_2処理でこれら転写因子のhTERTプロモーター領域への結合が抑制されるか否か、EMSA法で検討した。その結果、ERの結合量のみが明らかに減少した。この機序を明らかにするため、15d-PGJ_2がERの発現に及ぼす影響を検討した。MIAPaCa-2細胞で発現がみられたのはERβのみであったが、15d-PGJ_2で処理してもその蛋白量に変化はなかった。ERβのDNA結合能は、ERα同様セリンのリン酸化によって高まる可能性がある。そこで、セリンがリン酸化されたERβ量を調べたところ、15d-PGJ_2処理で明らかに減少した。さらに、ERβのリン酸化に重要な役割を果たすと推測されるMAP kinaseの活性を、リン酸化ERKの発現量で解析した。その結果、15d-PGJ_2処理でリン酸化ERK量も著明に減少していた。すなわち、15d-PGJ_2はERβのリン酸化阻害を介してhTERTの発現を阻害し、膵癌細胞の増殖を抑制することが明らかになった。本研究により、PPARγ-ligandが新たな膵癌治療薬となる可能性が示唆された。PPARγ-ligandのヒト膵臓癌細胞に対する傷害性を確認するために、MIAPaCa-2細胞を各種濃度のprostaglandin J2(PGJ2)で処理し、72時間後の細胞生存率をMTTアッセイで検討した。その結果、PGJ2濃度に依存して細胞生存率は低下し、PGJ2 30μM処理時には、未処理時の約20%に達した。hTERT遺伝子の発現は、転写因子であるspecificity protein 1(Sp1)、c-Mycおよびestrogen receptor(ER)によって促進されている。そこで、PGJ2処理により、これら転写因子のhTERTプロモーター領域への結合が抑制されるか否かをEMSA法で検討した。その結果、Sp1結合量には変化がみられなかったが、c-MycおよびER結合量は明らかに減少した。この原因を解析するため、PGJ2が両転写因子の発現量に及ぼす影響をWestern blotting法で検討したところ、c-Mycの発現が抑制されることが明らかになった。一方、ERについては、MIAPaCa-2細胞がαとβの2種類のうちβのみを発現しており、その発現量はPGJ2処理をしても低下しないことが確認された。ERβのDNA結合能は、ERα同様セリンのリン酸化によって高まることが推測されている。現在、PGJ2がセリンのリン酸化に及ぼす影響について解析中である。PPARγ-ligandのヒト

膵臓癌細胞に対する傷害性を確認するために、MIAPaCa-2細胞を各種濃度の15-Deoxy-Δ^<12,14>-prostaglandin J_2(15d-PGJ_2)で処理し、72時間目の細胞生存率を検討した。その結果、15d-PGJ_2濃度に依存して細胞生存率は低下し、15d-PGJ_2 30μM処理時には、未処理時の約30%に達した。次に、15d-PGJ_2処理がhTERT mRNAと蛋白の発現に及ぼす影響を調べたところ、いずれも著明に抑制された。hTERT遺伝子の発現は、転写因子であるSp1、c-Mycおよびestrogen receptor(ER)によって担われている。そこで、15d-PGJ_2処理でこれら転写因子のhTERTプロモーター領域への結合が抑制されるか否か、EMSA法で検討した。その結果、ERの結合量のみが明らかに減少した。この機序を明らかにするため、15d-PGJ_2がERの発現に及ぼす影響を検討した。MIAPaCa-2で発現がみられたのはERβのみであったが、15d-PGJ_2で処理してもその蛋白量に変化はなかった。ERβのDNA結合能は、ERα同様セリンのリン酸化によって高まる。そこで、セリンがリン酸化されたERβ量を調べたところ、15d-PGJ_2処理で明らかに減少した。さらに、ERβのリン酸化に重要な役割を果たすMAP kinaseの活性を、リン酸化ERKの発現量で解析した。その結果、15d-PGJ_2処理でリン酸化ERK量も著明に減少していた。すなわち、15d-PGJ_2はERβのリン酸化阻害を介してhTERTの発現を阻害し、膵癌細胞の増殖を抑制することが明らかになった。本研究により、PPARγ-ligandが新たな膵癌治療薬となる可能性が示唆された。
水晶振動子を用いた空気中非接触原子間力顕微鏡の高速高分解能化

大気中においても高いQ値を示す水晶振動子を力センサーとして用いることで高感度・高分解能の原子観力顕微鏡(AFM)による測定が実現され、生体試料を初めとする分子試料、溶液中での触媒反応など、真空中では観察が困難な分野にも応用が広がると期待される。本研究ではこの水晶振動子を用いた大気中動作の非接触AFMの開発を行った。1.広帯域高感度I/V(電流-電圧変換器)の開発水晶振動子の振動を高いS/Nで検出するために初段のアンプであるI/Vの高ゲイン化を行った。回路方式の変更と超高速のオペアンプを用いることで、帯域3MHzで、トランスインピーダンスゲイン320kΩと10倍以上に高めることに成功した。2.高感度FM復調器の開発通常AFMに比べ約3桁近く周波数シフト量が水晶振動子からの信号を検出するためアナログクワドラチャ方式を採用し、多段水晶振動子移送器を用いることで、超高感度(最小検出10mHz)と高帯域(135Hz(1ms))を得、励振回路、I/Vを含む総合特性で、通常のAFMより約2桁感度を高めた。3.Q値を高める正帰還励振方式の開発空気中を初め、溶液中でも高いQ値を持ち安定した励振を可能.とするため、発振器と自動ゲイン調整回路および移相器を組み合わせた回路方式を考案した。単純な励振に比べQ値を10倍以上に向上させ、感度の向上を図ることができた。4.大気中でのSi(111)単原子ステップの観察本装置の分解能を評価するためSi(111)単原子ステップの観察を行った。空気中での最適振動振幅は1216Åであった周波数シフト量と周波数ノイズとから最適値を求めた。観察は平均周波数シフトは-70mHz、1画面9分で画像化に成功した。約5倍の高速化と垂直分解能0. 8Å、水平分解能44Åが得られた。原子間力顕微鏡(AFM)は、これまで真空中では試料と非接触(NonContact)の状態で試料表面を原子分解能観察できるところまで進歩してきたが、空気中では原子分解能を持った非接触での観察は行えなかった。我々は先端にAFM探針を取り付けた幅100μm・長さ3mm程度の細長い針状の水晶振動子を力センサー(共振周波数1MHz)として、その長手方向振動の共振変化により、探針試料間の距離制御を行っている。水晶振動子を用いることで、通常のAFMカンチレバーとは異なり、空気中においても共振が鋭い(Qが高い)ため、共振変化、すなわち距離変化を高感度に測定できる。測定のS/Nを高めるため、次のような改良を行った。まず、水晶振動子の励振のための励振回路の最適化を行い、高安定な自励発振回路を開発した。次に、励振信号の検出のため水晶振動子に流れる電流を検出するI/V変換器に新たな回路方式を導入して、2MHzの帯域を保ったまま、ゲインを10倍に高め、S/Nを向上させた。これらの改良により、水晶振動子が試料からの微少な引力を受けたときのわずかな周波数変化を直接検出する「周波数変調法」を新たに導入することにした。このため、微少な共振変化を広帯域に高感度に検出できる周波数検出回路が非常に重要となった。そこで、従来からあるアナログ方式周波数検出回路の改良を行い、1msの応答速度で、最小10mHzの微少な周波数変化を検出可能とした。AFM装置としての性能評価のためにSi(111)自然酸化膜表面の観察を行い、従来位相検出法を使ったものに比べ約5倍の高速な走査ができることを確認した。

観察は平均周波数シフトは-70mHz、1画面9分で画像化に成功した。約5倍の高速化と垂直分解能0. 8Å、水平分解能44Åが得られた。
骨髄性プロトポルフィリン症患者の遺伝子解析、DNA診断と患者変異遺伝子の発現

単離されたヒトフェロケラターゼcDNAおよびゲノムDNAを用いて、致命的な重症肝不全を合併した日本人骨髄性プロトポルフィリン症(EPP)患者とその家族の遺伝子解析およびDNA診断を試み、この患者のフェロケラターゼ遺伝子に全く新しいタイプの点変異があることを明らかにした。(1)患者から得られたリンパ球をEBVでトランスフォームし、これらの細胞からcDNAを調整した。PCR法によりフェロケラターゼをコードした部分を増幅、単離し、電気泳動法によりフェロケラターゼcDNA長を検索したところ、正常なサイズのものとこれよりやや小さなサイズの2つのフェロケラターゼcDNAが確認された。異常な長さのcDNAクローンの塩基配列を決定したところ、フェロケラターゼ遺伝子のエクソン9が欠落していた。さらに患者のゲノムDNAの解析により、対立遺伝子の異常とイントロン9のdonor siteの最初の位置にG→Aの点突然変異が明らかにされた。この点突然変異はこれまでに報告のない新しいタイプのものであった。(2)患者における以上のデータに基づいて、患者家族のフェロケラターゼ遺伝子を解析し、さらにDNA診断を試みた。対立遺伝子に特異的なオリゴヌクレオチドを用いたハイブリダイゼイション(Allele-specific oligonucleotide hybridization)法により患者家族のフェロケラターゼ遺伝子を調査したところ、患者の父と患者第1子及び長兄の第1,2子に患者と全く同一の遺伝子異常(点突然変異)が発見された。さらに患者の長兄(EPPにより死亡)と次兄は変異遺伝子のキャリアーであると推測された。これらの結果により、この家族におけるEPPは常染色体優性の遺伝様式であると結論づけた。本研究により骨髄性プロトポルフィリン症のDNA診断が可能になった。
反語彙主義モデルに基づく形態-統語関係の実証的研究

本研究の目的は、英語の種々の名詞化表現を規則的に生成するメカニズムを明らかにすることによって、形態的機構の仕組み及び統語的機構との相互関係を解明することにある。日英語の名詞派生語及び複合語に関する広範な事実観察に基づき、両言語の共通点・相違点を分類した上で、名詞化システムの妥当なモデルを提案する。1「適正に分配された語形成」のモデルー各タイプの意味的・形態的・統語的情報は各々の関連した文法モジュールに最適に分配される、2「動的語形成理論」ー統語的・談話的環境で複雑語を生産的に作る創造的語形成は、形態統語的操作の制限を緩和し形態論的可能性を拡大させる。本研究は、子供による言語の獲得、とりわけ語彙の獲得の説明ー子供が短期間に大量の語を獲得できるのはなぜかーを最終目標として、日英語の名詞化現象に焦点を当てて、そのメカニズムを明らかにするものである。子供が限られたデータを基にして短期間に言語を獲得するという事実を説明するためには、語彙部門を制限するとともに形態-統語の相関関係を制約することによって、子供が覚えるべき語彙項目・語彙情報を最小限にする必要がある。本研究では、「分散形態論」(Distributed Morphology)の文法モデルを基盤として、形態統語的現象の中心である名詞化(nominalization)のプロセスを対象として上記の作業を着実に推進している。即ち、名詞化表現構築の中核的特質を統語構造から引き出すことにより、形態と統語間の余剰性を取り除くとともに、語を組織的に生成・加工することによって語彙部門を制限する分析を提案している。具体的には、下記1-3の調査によって名詞化の創造的・普遍的側面を浮き彫りにすることを試みてきた。1.大規模コーパスに見出される日英語の名詞形hapax legomenonーある資料で1度のみ用いられる語ーを調査することによって、名詞化表現の創造的な側面を明らかにする。2.収集された日英語の名詞化の語形を精査することにより、語形決定の規則性を明らかにする。3.名詞化に関する日英語の句の包摂、及び語の内部要素と外部要素の結合の事例を収集・分析することによって、名詞化の主要なプロセスが談話的文脈に依存して統語機構で行われることを示す。上記の研究成果を公表するために、The 3rd Florida Yearly Linguistic Meetingにて、“A Syntactic-Morphological Analysis of Nominal Compounds"という題目で研究発表を行った(2016年3月10日、Florida International University)。本発表では、最適に分散された語形成のモデルを提案し、(i)複合語が節的対応物と平行的な基底構造を持つ故に両者の主題的・意味的特性が統語部門で統一的に扱われること、及び(ii)統語出力が形態論に送られた後、一連の形態的操作と条件に従って語形に変えられることを明らかにした。おおむね順調に進展しているその理由:本研究では、形態的機構の仕組み及び統語的機構との相互関係の解明を目的として、日英語の種々の名詞化表現を規則的に生成するメカニズムを明らかにする。そのために、「派生名詞及び複合語名詞はレキシコンに貯蔵されるものとされないものとに区分される」を含む計7つの作業仮説を設置し、計画通りに、以下の各ステップを踏んで仮説の検証を行った。第一のステップとして、「事象名詞」「動作主名詞」及び「状態名詞」のリストを作成した。『逆引き広辞苑』を利用して、(i)接尾辞-化で終わる過程名詞、(ii)接尾辞-者、-人、-手、-家、-役、-主で終わる動作主名詞、及び(iii)接尾辞-性、-さ、-み、-け、-ぶりで終わる状態名詞をすべて列挙した。さらに先行文献や筆者が収集した実例に基づいて、漢語タイプ(e.g.森林破壊)と和語タイプ(e.g.車選び)の事象名詞を列挙した。合わせて、動作主名詞及び状態名詞も列挙した。第二に、hapax legomenonのリストを作成する。ステップ1で作成したリストの各語彙項目を『現代日本語書き言葉均衡コーパス(BCCWJ)』で検索し、hapaxの名詞表現を選別した。

第三にコーパスの検索を行う。ステップ2で作成したリストの各語彙項目をBCCWJで順次検索し、上記の作業仮説に照らし合わせて必要な形態・統語的情報を、丹念に記録していった。最後にデータ解析を行い、作業仮説を検証する。その際に、複数のインフォーマントによる文法性のチェックによって、コーパスに基づく検証を適宜補った。上記の研究成果を公表するために、論文「Postsyntactic Compoundの分析」を出版した(『現代の形態論と音声学・音韻論の視点と論点』pp. 42-60、2015年11月、開拓社)。本論文では、データから得られるPostsyntactic Compoundの語彙的・統語的二面性および混成性の詳細を提示し、文法拡張の観点からその根源を論証した。本研究の目的は、英語の種々の名詞化表現を規則的に生成するメカニズムを明らかにすることによって、形態的機構の仕組み及び統語的機構との相互関係を解明することにある。平成28年度は、過去2年間の研究の総括を行った。即ち、日英語の名詞化に関する広範な事実観察の結果、とりわけ両言語の共通点・相違点を整理・分類した上で、名詞化システムにまつわる妥当な原理を提案した。具体的には、次の研究活動を行った。1.主として大規模コーパスの検索に基づく日英語の名詞化に関する広範な事実観察の結果を、整理・分類した。2.先行研究を再読した後で、1の事実観察に照らし合わせて、先行研究の問題点を指摘した。3.作業仮説の検証に基づき、日英語の複雑語形成メカニズムに関する経験的・理論的に妥当な原理(言語事実に合致し、しかも一般性の高い原理)を提案した。日英語の名詞派生語及び複合語に関する広範な事実観察に基づき、両言語の共通点・相違点を分類した上で、名詞化システムの妥当なモデルを提案する。1「適正に分配された語形成」のモデルー各タイプの意味的・形態的・統語的情報は各々の関連した文法モジュールに最適に分配される、2「動的語形成理論」ー統語的・談話的環境で複雑語を生産的に作る創造的語形成は、形態統語的操作の制限を緩和し形態論的可能性を拡大させる。本研究では、形態的機構の仕組み及び統語的機構との相互関係の解明を目的として、日英語の種々の名詞化表現を規則的に生成するメカニズムを明らかにする。そのために、「派生名詞及び複合語名詞はレキシコンに貯蔵されるものとされないものとに区分される」を含む計7つの作業仮説を設置し、計画通りに、以下の各ステップを踏んで仮説の検証を行った。第一のステップとして、「事象名詞」「動作主名詞」及び「状態名詞」のリストを作成した。Lehnertの逆引き辞典を利用して、(i)接尾辞-(a)(t)ion、-ment、-al、-ance、-age、-ureで終わる過程名詞、(ii)接尾辞-er、-antで終わる動作主名詞、及び(iii)接尾辞-ness、
非言語情報に基づく他者意図理解が語意推測に果たす役割

自閉症児を支援するプログラムを構築するための基盤的情報を得ることを目的とし、定型発達児と自閉症児について非言語コミュニケーション情報の理解を調べた。研究の結果、1)定型発達児では異なるタイプの指さしに対して意味の違いを見いだす能力が幼児期に発達すること、2)指さしと視線の統合的利用によって指示者の意図を的確に判断することがわかった。一方、3)自閉症児では、視線の情報を適切に指示詞の理解につなげることが難しいこと、また4)視線と指さしの情報を統合的に理解することが難しいことがわかった。以上の知見と定型発達児の養育者の指示行動の分析や自閉症児・養育者の支援活動から得た知見も加えることにより、自閉症児の支援プログラム作成のための具体的な情報を得た。共同注意時に語用論的解釈が可能なタイミングの検討を,健常の2歳,4歳,大人を被験者とする実験により行った.新規な事物を2つ提示し,子どもが選択したそのうちの1つについて名称を与えるタイミングを,子どもが事物に注意をし始めてから発話直後と10秒後の2つの条件で比較した.結果,10秒後では相手の視線を確かめることなく正しく相手が注意している方の事物を選択できる傾向があり,それは発達とともに高まることがわかった.下位カテゴリー名称の理解について,事物カードを示しパペットが2歳児,4歳児,大人に名称を教えるという実験を行った.一定の言語形式が話し手の意図すなわちサバはサカナの下位カテゴリー名称であることをよりわかりやすくする可能性と,他にも下位カテゴリーの事物が存在するという環境の要因が関与する可能性を検討し,いずれも影響を与えることを確かめた.指示詞コ・ソ・アの表出と理解の面から,自閉症児の語用論的能力の具体的な特徴を把握し,その特徴に関連する要因を検討した.結果,自閉症児のなかには,指示詞の発話や理解において独自の特徴が見いだされた.この特徴は,自閉症児の対人志向性の乏しさや,話者の視線や指さしといった非言語情報から他者の意図を読み取ることの困難さなどとの関連が示唆された.自閉症児と親への支援と情報収集に関する活動では,医大へ通う自閉症をもつ子どもたちへのグループ指導の実施及びその保護者からの各種相談に応じた.他者の事物に対する動作から他者意図を,子どもたちがどのように推測しているかという観点から,グループ活動場面や自由遊び場面での,子どもたちの様子を観察し記録した.指さしの指示対象を幼児と成人はどのように理解するかについて,指示部分に対し人差し指で円を描くように動かす「円運動指さし(pointing with circular motion)」と,指示部分に対し繰り返し指を振る「タッピング指さし(pointing with tapping)の効果を調べた.定型発達の2歳児ではすでに本研究で示されている単純な接触指さしの理解が難しかったこととは異なり,円運動指さしによる理解は容易であり,タッピング指さしもある程度理解できることがわかった.共同注意時における指示対象の理解について,定型発達の1歳,2歳,3歳児と成人を被験者とし個別実験により比較し,さらに視線の動きをビデオ分析により調べた.2歳から3歳にかけて会話の流れの中で指示対象を推測する語用論的解釈を行うように変化することがわかった.3歳児の解釈パターンは成人のパターンと近似しており,3歳児ですでに大人に近い解釈を行う能力があることがわかった.自閉症をもつ子どもたちへのグループ指導の実施及びその保護者からの各種相談に応じた.このことにより,これらの子どもたちおよび保護者が各種実験に協力してくれるような環境づくりを行うとともに,他者の意図理解における問題点の抽出を行った.他者の事物に対する動作から他者意図を,子どもたちがどのように推測しているかという観点から,グループ活動場面や自由遊び場面での,子どもたちの様子を観察し,記録した.具体的には,話し手の言語による指示と非言語による指示(視線による指示や指さしによる指示)が異なった場合,かれらが,話し手の指示対象をどのように特定するかということを調べた.その結果,非言語よりも言語を手がかりとして,指示対象を特定する傾向が強いことが示唆された.このことは,定型発達者が非言語を主な手がかりとすることと対照的であった.自閉症を含む広汎性発達障害を持つ幼児・児童に対し,非言語情報の理解に関する指導プログラムを策定し,その養育者を含めグループ指導を行った.その結果,発達障害を持つ子どもとその養育者に関し非言語的情報に対する理解に大きなギャップがあることがわかった.その相違点を明らかにするため,支援場面での観察および視線方向・指さし方向・言語情報を統制し実験により調べた.1)視線方向と指さしの統合的利用に関する実験.

定型発達児は視線方向を考慮に入れ大人が指示した事物を推測するが,自閉症児は視線方向を考慮に入れずに大人が指示した事物を誤って推測していた.自閉症児は言語と指さしの情報のみで指示を推測することがわかった.2)共同注意時における発話タイミング.定型発達児に対し発話時間を0秒,10秒とコントロールし実験を行った.定型発達児でも10秒と遅い発話タイミングでは語意を誤解して推測する傾向があることがわかった.よって,発話タイミングという情報も指導プログラムを作る上で重要な知見であることが示唆された.3)グループ活動中における自閉症児の行動観察.他者の事物に対する動作や表情から他者意図を,子どもたちがどのように推測しているかということを検討した結果,表情や視線,指さしといった非言語情報から他者意図をくみ取ることが乏しいということが示唆された.そこで他者意図への気づきや自己の感情への気づきを促すための各種ゲームを考案・実施した.これらの知見を発達障害支援活動の養育者ミーティングにおいて報告すると共に国際会議等の学会発表や著書において公表を行った.
核内環境を忠実に模倣したクロマチン再構成ビーズによる転写制御因子同定法の確立

ES細胞の多能性を規定する因子として発見された4つの因子が、全て転写因子であったことから、転写因子による遺伝子発現制御の重要性が再認識されている。本研究では転写因子による遺伝子発現制御の解明を目的に、肝細胞分化に必須の転写因子HNF4alphaによって特異的にリクルートされる転写制御因子を、クロマチン化転写調節領域を固定化したマイクロビーズを用いて、同定を試みた。本研究では転写因子による遺伝子発現制御の解明を目的に、さまざまな転写因子によって転写調節領域に特異的にリクルートされる転写コアクチベーターやクロマチン制御因子を、マイクロビーズに固定化したヌクレオソーム付きの転写調節領域を用いて、網羅的に同定する。肝細胞の分化に必須の転写因子HNF4alphaによって特異的にリクルートされる転写制御因子を同定するために、HNF4alpha結合配列を有する転写調節領域DNA、HNF4alphaのリコンビナントタンパク質を作製した。また、肝がん細胞株HepG2細胞の大量培養を行い、その核抽出液を精製した。転写調節領域DNAをヌクレオソームによってクロマチン化した後、マイクロビーズに固定化し、クロマチン化転写調節領域マイクロビーズを作製した。ビーズを作製後に、HNF4alphaリコンビナントタンパク質と核抽出液を用いて、HNF4alphaによって転写調節領域にリクルートされる転写制御因子の精製を行った。これまでに、類似の方法を用いて、転写因子存在下にメディエーター複合体が新規転写複合体を遺伝子上にリクルートすることを明らかにした【Takahashi H, et al. Cell 2011】。今年度は、肝細胞の分化に必須の転写因子HNF4alphaによって特異的にリクルートされる転写制御因子を同定するために、HNF4alpha結合配列を有する転写調節領域DNA、HNF4alphaのリコンビナントタンパク質を作製した。現在、HNF4alpha結合配列を有する転写調節領域DNAをクロマチン化するために、DNAをヌクレオソームに巻く過程の実験を行っている。転写調節領域DNAをヌクレオソームによってクロマチン化した後、マイクロビーズに固定化し、クロマチン化転写調節領域マイクロビーズを作製する。ビーズを作製後に、HNF4alphaリコンビナントタンパク質と核抽出液を用いて、HNF4alphaによって転写調節領域にリクルートされる転写制御因子の精製を行う。HNF4alphaのリコンビナントタンパク質、HNF4alpha結合配列を有する転写調節領域DNA、肝がん細胞株の核抽出液、DNA鋳型のクロマチン化に必要なヌクレオソームの精製など、本法の確立に必要な試料の作製は順調に進んでいる。クロマチン化転写調節領域マイクロビーズを作製後に、リコンビナントタンパク質のHNF4alphaと核抽出液を用いて、HNF4alphaによって転写調節領域にリクルートされる転写制御因子の精製を行う。クロマチン化転写調節領域マイクロビーズを作製し、それをリコンビナントタンパク質のHNF4alpha、肝がん細胞株の核抽出液と混合し、HNF4alphaによって転写調節領域にリクルートされる転写制御因子の精製を行う。精製した転写制御因子を直接トリプシンで消化した後、質量分析計を用いて網羅的に同定する。同定された転写制御因子が核内でタンパク質複合体を形成しているかどうかを、生化学的手法により調べる。また、同定された転写制御因子が実際に肝細胞において、HNF4alphaと共にその標的遺伝子の発現を制御しているかどうかを、ChIP解析を行い明らかにする。さらに、HNF4alphaをノックダウンした場合に、同定された転写制御因子の標的遺伝子領域へのリクルートが減少するかどうかもChIP解析によって明らかにする。また、同定された転写制御因子をノックダウンした場合に、HNF4alphaの標的遺伝子の発現が低下するかどうかも検討する。該当なし
ギリシア悲劇における死の受容についての研究

ギリシア悲劇には人々が死を受容する様々な場面が描かれているが、その中に男女間での色々な差異が認められる.注目に値するのは、自発的な場合でもやむを得ぬ場合でも人物たちは死をよりよきものとして受容れようとするが、女性にはよき死を死ぬ機会が男性よりも閉ざされていると言うことである.それを象徴するのが悲劇『アンティゴネ』である.アンティゴネは「カロンなる死」(美しい死)を得ることができると信じ、それを目指して兄の埋葬を挙行したのだが、結局願いは叶わなかった.このことの背景にあるのは、「カロンなる死」を死ぬことはもともと女性である彼女には許されていない選択であった、という事実である.なぜなら、悲劇の時代までは、戦死以外の死が「カロンなる」と形容されることはなかったからである.「カロンなる死」とは、『イリアス』に語られた「カロンなる死体」を経て、テュルタイオスによって、「前線において戦いながら死ぬこと」と規定された.それ以外には、死が好ましい、望ましい、等と主観的・相対的によきものとされることはあっても、客観的・絶対的によきものとして主張されることは一切なかった.それが5世紀になると、『アンティゴネ』ほかの多くの悲劇が、人は戦死以外に「カロンなる死」を死ぬことができるのではないか、と問題を提起したと言える.しかし予想されるのは、いかなる悲劇もそれに肯定的な答を提供していない、ということであるが、それは今後一つ一つ検証していくべきことである.ギリシア悲劇には人々が死を受容する様々な場面が描かれているが、その中に男女間での色々な差異が認められる.注目に値するのは、自発的な場合でもやむを得ぬ場合でも人物たちは死をよりよきものとして受容れようとするが、女性にはよき死を死ぬ機会が男性よりも閉ざされていると言うことである.それを象徴するのが悲劇『アンティゴネ』である.アンティゴネは「カロンなる死」(美しい死)を得ることができると信じ、それを目指して兄の埋葬を挙行したのだが、結局願いは叶わなかった.このことの背景にあるのは、「カロンなる死」を死ぬことはもともと女性である彼女には許されていない選択であった、という事実である.なぜなら、悲劇の時代までは、戦死以外の死が「カロンなる」と形容されることはなかったからである.「カロンなる死」とは、『イリアス』に語られた「カロンなる死体」を経て、テュルタイオスによって、「前線において戦いながら死ぬこと」と規定された.それ以外には、死が好ましい、望ましい、等と主観的・相対的によきものとされることはあっても、客観的・絶対的によきものとして主張されることは一切なかった.それが5世紀になると、『アンティゴネ』ほかの多くの悲劇が、人は戦死以外に「カロンなる死」を死ぬことができるのではないか、と問題を提起したと言える.しかし予想されるのは、いかなる悲劇もそれに肯定的な答を提供していない、ということであるが、それは今後一つ一つ検証していくべきことである.1.ギリシア人の死の受容について根源的な一側面を究明するのに有益であると考えて、研究期間開始前から行っていた「イリアス」の葬礼競技におけるアキレウスの賞品供与についての研究を区切りのつくところまで続け論文にまとめた。アキレウスの死欲求(生の放棄)は、絶望した者が所有物を物理的に放棄しようとする傾向と繋がっているものであることを示した。2.女性と死の近接性については、情報を4つの側面に整理した。(1)女性が一見わけもなく死を欲することが多いと見做されていたことのほかに、(2)葬礼と婚礼の共通性、deflorationが屡々死に譬えられたこと、嫁取りと誘拐のイメージが並置されたことから概念的に、また、(3)葬礼においては専ら女性が死体に接触することになっていたことから物理的に、また、(4)男性にとっては過多な出血を女性は出産時に経験することから生理学的に、古代ギリシアの女性は死と近しい存在であったということができる。3.首吊りは、男性より女性に、既婚女性より乙女に似つかわしい自殺方法であったというのはある意味では正しい。しかし文学においては男性には僅少というわけでもなかった。またrapeを逃れる乙女が首吊り自殺をするという話は比較的新しいモチーフであり、古典期における「ヒッポリュスト」のパイドラの首吊りがその伝統に基づいたものとする考えは誤りである。これらの判断をもとに現在「アンティゴネ」と「ヒッポリュトス」についての論考を進めている。4.刀による女性の自殺、女性の人身御供の受容についても、上記2の知見をもとにして、N.Lorauxの先行研究を批判・補足しながらもうしばらく女性の問題について研究を続ける必要がある。1.女性と死の近接性、女性の首吊り自殺への似つかわしさについて調査した昨年度の成果をもとに、今年度は劇「アンティゴネ」の分析を行った。命をかけて兄の埋葬を試みて死を受容した主人公は実際にいかなる死を死んだのかということが焦点である。2.この問題を論じた研究はきわめて貧しかったが、一般的にアンティゴネの死は英雄的なものとして肯定的に受け取られてきた。