hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
学習理論における特異性とその代数幾何学的性質およびその応用

学習システムの目的は,たとえば,画像認識,音声認識,遺伝子解析,データマイニンである.このような学習データは,正規分布に従っているような単純なものではなく,非常に複雑な構造をもっている.したがって,このような目的のために用いられる学習モデルは十分複雑なものを考えなくてはならない.現在,そのようなデータを扱える学習モデルとして,階層構造,内部構造を持つものが応用されている.これらのモデルは,パラメータを変えることできわめて多くの確率分布となりえることが証明されている.このようなモデルを特異モデルという.渡邊澄夫教授は,特異モデルに関して,ベイズ推測において重要な役割を果たす確率的複雑さが,特異点解消により構成された方法論と数理的に緊密な関係を持つことを明らかにした.しかし,実はこのような数理の確立にもかかわらず,計算を行うことは非常に困難であった.特異点解消自身の困難性や,特異点の非孤立性,ニュートン図形の退化などが理由である.今年度は,これらの困難性を個別のモデルに対して工夫を行いながら克服し,昨年度よりさらに一般化した3層ニューラルネットワークの場合について,確率的複雑さの厳密な漸近展開を与えた.さらにその方法を混合正規分布にも応用した.方法の概略は昨年度と同様recursive blowing-up及びトーリック多様体による特異点を帰納的に解消する方法である.この方法で上限のみしか得られていなかった学習モデルのゼータ関数の最大の極およびその位数の値を与え,汎化誤差の漸近展開を明らかにした.今後は,スピンモデルについても考察していきたい。階層型ニューラルネットワークのように,入力からも出力からも直接には働きを定められていない隠れた部分を持つ学習モデルは,パラメータが特定不能になり,フィッシャー計量が縮退するという特徴をもつ.このようなモデルを特異モデルと呼ぶ.渡辺澄夫は、この場合に関して、学習モデルのゼータ関数の極が,特異モデルのベイズ推測に関する確率的複雑さの漸近形を与えることを示している.ここで学習モデルのゼータ関数は,カルバック情報量と事前分布より定まる1変数複素関数である.今年度は,縮小ランクモデル,および3層ニューラルネットワークにおいての確率的複雑さの厳密な漸近展開を与えた.recursive blowing-upによりカルバック情報量の特異点を帰納的に解消する方法を提案し,特異点解消が学習理論のゼータ関数の解析に有効であることを示した.また,これを縮小ランクモデル,3層ニューラルネットワークに応用することで,上限のみしか得られていなかった学習モデルのゼータ関数の最大の極およびその位数の値を与え,汎化誤差の漸近展開を明らかにした.いままで,複雑な学習モデルの選択やハイパーパラメータの設計において,周辺尤度の値を理論計算することが出来なかったので,特異点を持つ学習モデルにMCMC法を適用した場合,どの程度正しい値が得られているかを確認することが出来なかった.しかし,縮小ランクモデルなどの周辺尤度の理論値が得られたことにより,今後,MCMC法の精度を解明することや,MCMC法の精度の改良法などを考察することの基盤が作られることになる.また,カルバック情報量より導かれる関数は,ほとんどが,ニュートン図形退化で,さらに特異点が孤立していないという状況である事もわかった.このような特異点は代数幾何の分野においてもまだあまり研究されていないので,今後,代数幾何学的観点からも考察していきたい.階層型ニューラルネットワークや混合正規分布,ボルツマンマシンなどの学習モデルは,パラメータが特定不能になり,フィッシャー計量が縮退するという特徴をもつ.例えば,3層ニューラルネットワークにおいて,パラメータwが,学習モデルよりもより少ない隠れユニット数をもつモデルを表現する時,フィッシャー情報行列I(w)が特異(detI(w)=0)になる.すなわち,小さなモデルを表現するパラメータが大きなモデルを表現するパラメータの解析的集合となる。このようなモデルを特異モデルと呼ぶ.近年,渡辺澄夫教授により,ベイズ推測において重要な役割を果たす確率的複雑さが,カルバック情報量の特異点解消により得られることが明らかになった.しかし,このような数理の確立にもかかわらず,カルバック情報量は,ほとんどがニュートン図形退化で,さらに特異点が孤立していないという状況であるため,確率的複雑さを実際に得るのは困難であった.実際,ゼータ関数の極の値に関しては,数学の分野においても概均質ベクトル空間などの特別な場合にしか研究されていないのが実情である.今年度は,前年度に引き続き,より一般形の縮小ランクモデル,3層ニューラルネットワークにおいての確率的複雑さの厳密な漸近展開を与えた.recursive blowing-up及びトーリック多様体によりカルバック情報量の特異点を帰納的に解消する方法を提案し,この方法で上限のみしか得られていなかった学習モデルのゼータ関数の最大の極およびその位数の値を与え,汎化誤差の漸近展開を明らかにした.今後は,多層ニューラルネットワークについても考察していきたい.学習システムの目的は,たとえば,画像認識,音声認識,遺伝子解析,データマイニンである.このような学習データは,正規分布に従っているような単純なものではなく,非常に複雑な構造をもっている.したがって,このような目的のために用いられる学習モデルは十分複雑なものを考えなくてはならない.現在,そのようなデータを扱える学習モデルとして,階層構造,内部構造を持つものが応用されている.これらのモデルは,パラメータを変えることできわめて多くの確率分布となりえることが証明されている.

このようなモデルを特異モデルという.渡邊澄夫教授は,特異モデルに関して,ベイズ推測において重要な役割を果たす確率的複雑さが,特異点解消により構成された方法論と数理的に緊密な関係を持つことを明らかにした.しかし,実はこのような数理の確立にもかかわらず,計算を行うことは非常に困難であった.特異点解消自身の困難性や,特異点の非孤立性,ニュートン図形の退化などが理由である.今年度は,これらの困難性を個別のモデルに対して工夫を行いながら克服し,昨年度よりさらに一般化した3層ニューラルネットワークの場合について,確率的複雑さの厳密な漸近展開を与えた.さらにその方法を混合正規分布にも応用した.方法の概略は昨年度と同様recursive blowing-up及びトーリック多様体による特異点を帰納的に解消する方法である.この方法で上限のみしか得られていなかった学習モデルのゼータ関数の最大の極およびその位数の値を与え,汎化誤差の漸近展開を明らかにした.今後は,スピンモデルについても考察していきたい。
電子線ホログラフーによる超高感度の電場・電気分極計測

本研究は、物質が示す電磁場を局所的に解析できる電子線ホログラフィーの高度化を目的としている。これまでの研究により、電子線ホログラフィーの空間分解能は十分に向上し、原子分解能での電磁場観察も可能な段階に至っている。しかし微弱な電磁場を検出するための測定感度は、なお一層の改善が要求される。この研究目的を達成するために、2018年度に以下の研究を実施した。(1)電子線ホログラムに記録される位相情報の分離技術の確立:電子線ホログラフィーでは、物質を透過した電子の位相変化の解析を通して、電場・磁場の分布を明らかにする。この際、物質が示す電場・磁場の情報を与える位相変化に、結晶内での電子回折に由来する付加的な位相変化が重なる場合が多い。本研究では、不要な回折由来の位相情報を低減するために、ホログラムの取得条件と解析プロセスの最適化を図った。特に、同一視野に対して、励起されるブラッグ反射の相対強度を変えながら系統的なデータ収集を行うことで、回折由来の位相情報を制御、或いは必要とする電磁場情報と分離することが可能であることを示した。(2)大容量・大規模な電子線ホログラム画像データの処理技術の整備:ホログラフィー電子顕微鏡の制御ソフト、ならびにホログラムからの位相再生処理ソフトの改良を図り、大規模な画像データを効率的に収集・解析するための技術基盤を整備した。特に位相再生の精度向上に有効な複数画像の積算平均化プロセスを高度化するため、画像データ間の位置調整やアーティファクトの除去に関わる技術を強化した。下記の理由から、本研究は「おおむね順調に進展している」と判断される。2018年度の研究計画として、(1)電子線ホログラムに記録される位相情報の分離技術の確立と、(2)大容量・大規模な電子線ホログラム画像データの処理技術の整備の二課題を設定した。このうち(1)の課題については、暗視野電子線ホログラフィーとう技術を活用しながら、電子回折の励起条件を調整することで、不要な回折由来の位相変化を効果的に抑制できることを実証した。研究成果はMater. Trans.誌に投稿し、採択されている。(2)の課題については、機械学習を用いた電子顕微鏡画像の認識技術の開発を進めている共同研究者の支援も受けながら、コントラストに乏しい位相再生像の識別や、複数画像のドリフト(位置ズレ)を電子線ホログラムの状態で補正するための技術を整備し、本研究の推進に資する技術基盤を得ることができた。いずれも当初計画に則った研究が、適切に実施されたものと判断する。2018年度の成果・実績を踏まえて、次年度は以下の課題を設定し、研究を進める。(1)機械学習を用いた画像データの処理:前年度の研究課題(2)を発展させる形で、機械学習を用いた画像データ処理の技術を強化する。具体的には、大量に取得した電子線ホログラムとその位相再生像から、データの積算平均化に利用できる画像(或いはその一部)を抽出するための技術を整備・高度化する。(2)触媒系微粒子への展開:上述した機械学習による画像認識の手法を、ロジウム系など実際の触媒ナノ粒子の解析に応用する。具体的には、大量に取得したナノ粒子の画像データをもとに形状分散性の統計的解析を実施するほか、ナノ粒子の表面に修飾された有機物を弱位相物体に見立てて、位相再生像の解析を通した精緻な形態解析を試みる。(3)研究の総括:2018年度、ならびに2019年度の研究を総括し、電子線ホログラフィーによる電場・磁場の高感度化に関して収められた成果を取り纏め、発表を行う。2018年度の研究計画として、(1)電子線ホログラムに記録される位相情報の分離技術の確立と、

(2)大容量・大規模な電子線ホログラム画像データの処理技術の整備の二課題を設定した。このうち(1)の課題については、暗視野電子線ホログラフィーとう技術を活用しながら、電子回折の励起条件を調整することで、不要な回折由来の位相変化を効果的に抑制できることを実証した。研究成果はMater. Trans.誌に投稿し、採択されている。(2)の課題については、機械学習を用いた電子顕微鏡画像の認識技術の開発を進めている共同研究者の支援も受けながら、コントラストに乏しい位相再生像の識別や、複数画像のドリフト(位置ズレ)を電子線ホログラムの状態で補正するための技術を整備し、本研究の推進に資する技術基盤を得ることができた。いずれも当初計画に則った研究が、適切に実施されたものと判断する。2018年度の成果・実績を踏まえて、次年度は以下の課題を設定し、研究を進める。(1)機械学習を用いた画像データの処理:前年度の研究課題(2)を発展させる形で、機械学習を用いた画像データ処理の技術を強化する。具体的には、大量に取得した電子線ホログラムとその位相再生像から、データの積算平均化に利用できる画像(或いはその一部)を抽出するための技術を整備・高度化する。(2)触媒系微粒子への展開:上述した機械学習による画像認識の手法を、ロジウム系など実際の触媒ナノ粒子の解析に応用する。具体的には、大量に取得したナノ粒子の画像データをもとに形状分散性の統計的解析を実施するほか、ナノ粒子の表面に修飾された有機物を弱位相物体に見立てて、位相再生像の解析を通した精緻な形態解析を試みる。(3)研究の総括:2018年度、ならびに2019年度の研究を総括し、電子線ホログラフィーによる電場・磁場の高感度化に関して収められた成果を取り纏め、発表を行う。
プロフェッショナルケアによるクラウンの二次う蝕予防プログラム作成

う蝕ハイリスク者の術後管理プログラム(検査の時期,リコール間隔,ケアの方法など)を作成することを目的に,ハイリスクと診断された患者の口腔内環境をプロフェッショナルケア処置群と観察群に分け,比較した.リスクの判定には唾液検査(Dentocult[○!R]シリーズ)とカリオスタット^<TM>(三金工業)を用いた.カリエスリスクがハイリスクと診断され,上顎中切歯にレジン前装鋳造冠,下顎第一大臼歯に全部鋳造冠を装着した被検者を選択し,ランダムにPMTCを行う処置群と観察群に分けた.処置群には,クラウン装着後1ヵ月毎に1年間,唾液検査によるカリエスリスクの判定と装着したクラウン辺縁部のプラークpH値を測定し続けた.同時にPMTCを行った.観察群には,クラウン装着後2ヵ月毎に1年間,唾液検査によるカリエスリスクの判定と装着したクラウン辺縁部のプラークpH値の測定のみを行った.それぞれの群間でどの時期にカリエスリスクの変化やpH値の差が認められるかを解析した.その結果を以下にまとめた.1.PMTC処置群と観察群間の刺激唾液量に関して,両群に差はなく,経時的な変化も認められなかった.2.PMTC処置群と観察群間の唾液緩衝能に関して,両群に差はなく,経時的な変化も認められなかった.3.PMTC処置群と観察群間では,mutans streptococci菌数が経時的に変化せず,ハイリスクのまま差が認められなかった.4.PMTC処置群と観察群間では,lactobacilli菌数の経時変化が異なった.群ごとに変化を観察すると,PMTC処置群では,2ヵ月後から有意に減少し,観察群では4ヵ月以降から減少した.5.PMTC処置群と観察群間のCandida菌数に関して,両群に差はなく,経時的な変化も認められなかった.6.PMTC処置群と観察群間のレジン前装鋳造冠辺縁部に付着したプラークpH値を経時的に比較した結果,両群に差は認められなかった7.PMTC処置群と観察群間の全部鋳造冠辺縁部に付着したプラークpH値を経時的に比較した結果,両群に差は認められなかった.8.全部鋳造冠辺縁部のプラークpH値は両群とも,経時的な変化は認められなかった.しかし,PMTC観察群では12ヵ月後低下する傾向が多かった.9.レジン前装鋳造冠,全部鋳造冠すべての症例において,pH値が上昇したものはなかった.補綴装置が装着されているう蝕のハイリスクな患者に,定期的にプロフェッショナルケアを行い,う蝕に関する口腔内環境因子と歯質に付着するプラークpH値を経時的に比較検討する.本年度は,本学附属病院に通院し,クラウンによる修復処置を行う成人患者8名を選択した.彼らには本研究に協力してもらうにあたり,十分なインフォームドコンセントを行い納得した上で,大阪歯科大学医の倫理委員会の承認を得た同意書に署名してもらった.被検者は,上顎中切歯にレジン前装鋳造冠または下顎第一大臼歯に金銀パラジウム合金による全部鋳造冠を装着した患者である.なお,彼らは事前にOrion社製デントカルトシリーズを用い唾液検査を行った.刺激唾液量,緩衝能,齲蝕原性細菌数mutans streptococciおよびLactobacilliを測定し,モデルチャートを用いて判定した結果,う蝕のリスクレベルが,ハイリスクと診断された患者である.ハイリスクと診断された患者をランダムにプロフェッショナルケアを行う処置群と観察群に4名ずつ分けた.処置群には,クラウン装着後1ヵ月毎に1年間,唾液検査によるカリエスリスクの判定と装着したクラウン辺縁部のプラークpH値を測定し続けている.同時に術後管理としてプロフェッショナルケア(PMTC)を行っている.観察群には,クラウン装着後2ヵ月毎に1年間,唾液検査によるカリエスリスクの判定と装着したクラウン辺縁部のプラークpH値の測定のみを行っている.現時点では約半年を経過した症例が半数である.カリエスリスクレベルは全ての症例でハイリスクのままである.クラウン辺縁のプラークpH値も値は一定であり,差は認められない.今後引き続いて実験を行う.補綴装置が装着されているう蝕のハイリスクな患者に,定期的にプロフェッショナルケアを行い,う蝕に関する口腔内環境因子と歯質に付着するプラークpH値を経時的に比較検討する.本年度は,本学附属病院に通院し,上顎中切歯にレジン前装鋳造冠または下顎第一大臼歯に金銀パラジウム合金による全部鋳造冠を装着した成人患者6名を選択した.被検者は事前にOrion社製デントカルトシリーズを用い唾液検査を行った.刺激唾液量,緩衝能,う蝕原性糸田菌数mutansstreptococci

およびLactobacilliを測定し,モデルチャートを用いて判定した結果,う蝕のリスクレベルが,ハイリスクと診断された患者である.ハイリスクと診断された患者をランダムにプロフェッショナルケアを行う処置群と観察群に3名ずつ分けた.処置群には,クラウン装着後1ヵ月毎に1年間,唾液検査によるカリエスリスクの判定と装着したクラウン辺縁部のプラークpH値を測定し続けている.同時に術後管理としてのプロフェッショナルケア(PMTC)を行っている.観察群には,クラウン装着後2ヵ月毎に1年間,唾液検査によるカリエスリスクの判定と装着したクラウン辺縁部のプラークpH値の測定のみを行っている.昨年度から継続した症例による結果では,PMTC処置群,観察群の両群において過半数の被検者が,カリエスリスクレベルは,ハイリスクのままである.特にmutans streptococci細菌数はハイリスクである.また,クラウン辺縁のプラークpH値では処置群では値が変化しない傾向があり,観察群では1年後低下した傾向が多い.すべての症例において,pH値が上昇したものは認められない.次年度も引き続いて実験を行う予定である.う蝕ハイリスク者の術後管理プログラム(検査の時期,リコール間隔,ケアの方法など)を作成することを目的に,ハイリスクと診断された患者の口腔内環境をプロフェッショナルケア処置群と観察群に分け,比較した.リスクの判定には唾液検査(Dentocult[○!R]シリーズ)とカリオスタット^<TM>(三金工業)を用いた.カリエスリスクがハイリスクと診断され,上顎中切歯にレジン前装鋳造冠,下顎第一大臼歯に全部鋳造冠を装着した被検者を選択し,ランダムにPMTCを行う処置群と観察群に分けた.処置群には,クラウン装着後1ヵ月毎に1年間,唾液検査によるカリエスリスクの判定と装着したクラウン辺縁部のプラークpH値を測定し続けた.同時にPMTCを行った.観察群には,クラウン装着後2ヵ月毎に1年間,唾液検査によるカリエスリスクの判定と装着したクラウン辺縁部のプラークpH値の測定のみを行った.それぞれの群間でどの時期にカリエスリスクの変化やpH値の差が認められるかを解析した.その結果を以下にまとめた.1.PMTC処置群と観察群間の刺激唾液量に関して,両群に差はなく,経時的な変化も認められなかった.2.PMTC処置群と観察群間の唾液緩衝能に関して,両群に差はなく,経時的な変化も認められなかった.3.PMTC処置群と観察群間では,mutans streptococci菌数が経時的に変化せず,ハイリスクのまま差が認められなかった.4.PMTC処置群と観察群間では,lactobacilli菌数の経時変化が異なった.群ごとに変化を観察すると,PMTC処置群では,2ヵ月後から有意に減少し,観察群では4ヵ月以降から減少した.5.PMTC処置群と観察群間のCandida菌数に関して,両群に差はなく,経時的な変化も認められなかった.6.PMTC処置群と観察群間のレジン前装鋳造冠辺縁部に付着したプラークpH値を経時的に比較した結果,両群に差は認められなかった7.PMTC処置群と観察群間の全部鋳造冠辺縁部に付着したプラークpH値を経時的に比較した結果,両群に差は認められなかった.8.全部鋳造冠辺縁部のプラークpH値は両群とも,経時的な変化は認められなかった.しかし,PMTC観察群では12ヵ月後低下する傾向が多かった.9.レジン前装鋳造冠,全部鋳造冠すべての症例において,pH値が上昇したものはなかった.
非破壊法によるヤング係数容積密度数等材質に関する形質の精英樹クローン間変異

1993年4月トドマツ採種園の間伐にさきだって、試験木の樹高、胸高直径、非破壊法による曲げヤング係数の測定を行った。採種園は植栽後22年の同樹木からなり、保育過程、環境条件等は同一である。試験木は1クローン当たり5箇46クローン合計226本で、胸高部位より厚さ約5cmの円板を採取、-30度に貯蔵した。実験に際し、円板を心・辺材に分け、常法により試料を作製して、生材水分、容積密度数、年輪幅を測定、さらに温水、アルカリ、アルコール・ベンゼン各抽出物と灰分を定量した。これらの結果から、分散分析によってクローン間変異を調べ、各測定値の相関と反復率を計算して、考察をおこなった。1.試験木の平均樹高は6.9m、平均胸高直径は13.3cmであった。2.心・辺材を含む容積密度数は平均342kg/m^3、平均年年齢幅は3.9mm、心材含水率は平均141.2%、樹幹曲げヤング係数は平均86.0t/cm^2であった。3.心材含水率はきわめて高く、いわゆるトドマツ水喰い材であった。4.ヤング係数86t/cm^2は農林規格E90(80-100t/cm^2)に属し、かなり高い値である。5.心材温水抽出物はそれぞれ平均4.1%,16.3%、および4.1%で、心材灰分は平均1.2%であった。6.分散分析により各性質はクローン間でほとんど有意の差があり、クローンによって差があることがわかった。7.各材質の遺伝率(反復率)は高い方で容積密度数の0.46、辺材アルコール・ベンゼン抽出物の0.45であり、その他はいずれも低かった。このことは各性質が環境の影響を受け易いことを意味する。8.心材含水率と心材容積密度数および灰分の間に有意な相関が認められた。以上の結果から、たとえ精英樹のクローン同志によって得られた優秀な種子から育成された樹木であっても、造林に際しては、適地を選んで、適切な管理を行うことが必要である。研究実施計画にしたがって行われた実験結果をまとめると、次の通りである。1993年4月トドマツ精英樹採種園の間伐にさきだって、間伐予定木の樹高、胸高直径、非破壊法による樹幹曲げヤング係数の測定を行った。試料は1クローン当たり5個、467クローンで,合計226本について、胸高部位より厚さ約5cmの円板を採取、直ちにビニール袋に入れて、-30度に貯蔵した。試験木は植栽22年の同齢で、保育過程、環境条件等は同一である。1.植栽22年のつぎ木トドマツクローンの平均樹高6.9m,平均胸高直径13.3cmであった。2.心.・辺材を含む容積密度数は342kg/m^3,平均年輪幅3.9mm,心材含水率141.2%,樹幹曲げヤング係数86.0t/cm^2であった。3.平均心材含水率141.2%は極めて高く、1クローンを除いて、いずれも100%をこえる、いわゆる水食い材であった。

4.樹幹曲げヤング係数平均86t/cm^2は農林規格E90(80100t/cm^2)に属し、6等級区分中の中間で道南のスギに比べて、かなり高い値である。5.分散分析により材質はいずれもクローン間で有意であった。このことは各形質がクローンによって差があることを意味する。6.各材質の遺伝率(反復率)はヤング係数で0.13,容積密度数で0.46であって、いずれも低かった。このことは材質の各形質が環境の影響をうけやすいことを意味する。7.心材含水率と心材容積密度数、同含水率と同年輪幅の間に有意な相関が認められた。8.樹幹曲げヤング係数と容積密度数、同ヤング係数と年輪幅の間には、有意な相関が認められなかった。これは今までの結果と異なるのは、今回のヤング係数測定の応力レベルが10kg/cm^2と小さかったことによる。9.以上各形質を調べた結果から、たとえ精英樹のクローン同志によって得られた優秀な種子から育成された樹木であっても、造林に際しては適地を選んで、適切な管理を行うことが必要である。試料は1993年に北大演習林林木育種試験場トドマツ採種園間伐木より採取した円板である。昨年の物理的性質の調査にひきつづき、今年は主として化学的性質について調査した。材料は46クローン、225個体である。実験方法は常法により温水抽出物,アルカリ抽出物,アルコール・ベンゼン抽出物,灰分を測定した。結果と考察:試料重量に対し,心材温水抽出物は平均4.1%,心材アルカリ抽出物は平均16.3%,心材アルコール・ベンゼン抽出物は4.1%,心材灰分は1.2%であった。総合的に見て心材4つの抽出物の多いクローン5つ,同少ないクローン5つ,その他2つ合計12クローン58個体の辺材より同様な抽出を行った。辺材温水抽出物は3.1%,同アルカリ抽出物は18.1%,同アルコール・ベンゼン抽出物は2.0%,同灰分0.7%であり,アルカリ抽出物を除き,辺材は心材の約2/3であった。クローン間の分散分析では辺材温水,辺材アルコール・ベンゼンに0.1%,辺材灰分に5%,心材アルコール・ベンゼン,心材灰分に1%水準で有意差があった。心材と辺材には有意な相関はなかった。
各種動物の回腸縦走筋標本の高K^+収縮に対するリチウムイオンの抑制作用

モルモット回腸縦走筋における高濃度K^+および各種収縮薬に対するリチウムイオン(Li^+)の抑制作用について検討を行い、その機序に対していくつかの可能性があることを報告した。一方、カルシウム蛍光指示薬のFura-2を用いた実権で、Li^+は高濃度K^+収縮を抑制するが、細胞内Ca^<2+>レベルを変化させなかった。これは、Li^+の抑制作用が細胞内Li^+の蓄積と高い相関があること、および細胞内Ca^<2+>の有意な減少を伴わなかったことからLi^+が収縮蛋白系に対して影響していることが考えられた。そこでTriton X-100でスキンドファイバ-を作成して収縮蛋白系に対する作用を検討し、さらに尿素ゲル電気泳動法を用いたミオシンのリン酸化、あるいはMg^<2+>-ATPase、ホスホジエステラ-ゼ、ホスファタ-ゼ、Ca^<2+>、Mg^<2+>-ATPaseの酵素活性に対する影響を検討した。スキンドファイバ-の実験では、Ca^<2+>収縮の用量反応曲線はLi^+の処置により右方に移動してCa^<2+>拮抗性が認められ、その抑制効果は30mMのLi^+で最も大きかった。このことから、Li^+の高濃度K^+収縮に対する抑制作用が収縮蛋白系を抑制する可能性が示唆された。またスキンドファイバ-におけるCa^<2+>非依存性の収縮(ATPrS)に対してはLi^+は無影響であった。つぎにニワトリ筋胃からミオシンBを抽出してミオシン軽鎖のリン酸化に対する影響をみたが、Li^+はこれには無影響であった。またカルモジュリン活性を調べる目的でウサギ赤血球膜のCa^<2+>、Mg^<2+>-ATPase活性をみたが、Li^+は有意な変化を示さなかった。現在、ホスホジエステラ-ゼならびにホスファタ-ゼ活性に対するLi^+の影響を実験し若干の成績を得ているが、報告する程の成果は得ていない。これらの若干一致しない成績より他の動物より得た酵素標本でなく、モルモット回腸縦走筋より得たミオシン軽鎖およびCa^<2+>、Mg^<2+>-ATPase標本で実験を行うべきであると考えている。サル,ウサギ,モルモットおよびラットの回腸縦走筋における高K+収縮に対するLi^+置換液の影響について比較検討した.栄養液中のNa+の一部を等モルのLi^+に置換することによって,いずれの動物の回腸縦走筋における高K+収縮は時間の経過に従って抑制され,その抑制硬化は置換したLi+の濃度に依存して増加した.また,この時の細胞内Li^+量も置換したLi+の濃度および時間の経過に従って増加した.さらにいずれの動物種においてもLi+による高K+収縮の抑制率と細胞内Li^+量との間に高い相関が得られた.サルおよびラットの回腸縦走筋における高K+収縮はモルモットおよびウサギのそれに比して,より少ない細胞内Li^+量で抑制されることから,細胞内Li+量による高K^+収縮の抑制効果に動物種差が存在することが示唆された.各種動物の回腸縦走筋において,細胞内Na^+量による高K^+収縮の抑制硬化に同様な動物種差が認められ, Li^+による抑制に対して感受性の高い動物種においてはNa^+による抑制に対しても高い感受性を示し,両者間には高い相関関係(δ=0.963)が得られた.以上のことから,細胞内Li^+量による高K+収縮の抑制効果は,細胞内Na^+量によるそれと類似した作用機序による可能性が示唆された.モルモット回腸縦走筋を用いて各種収縮薬に対するリチウムイオンの抑制効果ならびに各種弛緩物質の影響を観察し、リチウムイオンの抑制作用の機序について検討した。各種収縮薬(高濃度カリウム、カルバコール、ヒスタミンおよびA23187)による収縮はリチウムイオンの適用によりいずれも抑制され、その抑制効果はリチウムの濃度に依存して増大した。また、これらの収縮薬に対するリチウムイオンの抑制効果に差はなかった。さらにリチウムイオンによる抑制効果はいずれも外液カルシウム濃度の増加によって拮抗されたが、いずれも非競合拮抗型を示した。一方、カルシウム蛍光指示薬であるFura2を用いて細胞内カルシウム濃度と張力の変化の同時測定を試み、高濃度カリウム収縮に対する各種弛緩物質の影響をみた。EGTAおよびニフェジピンの適用により高濃度カリウム収縮は時間の経過とともに抑制され、高濃度カリウムにより増大した細胞内カルシウム濃度の減少が認められた。しかしながら呼吸抑制剤のモネンシン、ウワバインおよびリチウムイオンの適用により高濃度カリウム収縮は抑制されたが、細胞内カルシウムレベルは有意に抑制されなかった。リチウムイオンによる張力と細胞内カルシウム濃度変化の間の相関がみられないことから、スキンドファイバーを用いて収縮蛋白系に対するリチウムイオンの影響を試みた。その結果リチウムイオンが収縮蛋白系を抑制する可能性が示唆された。

そこでTriton X-100でスキンドファイバ-を作成して収縮蛋白系に対する作用を検討し、さらに尿素ゲル電気泳動法を用いたミオシンのリン酸化、あるいはMg^<2+>-ATPase、ホスホジエステラ-ゼ、ホスファタ-ゼ、Ca^<2+>、Mg^<2+>-ATPaseの酵素活性に対する影響を検討した。スキンドファイバ-の実験では、Ca^<2+>収縮の用量反応曲線はLi^+の処置により右方に移動してCa^<2+>拮抗性が認められ、その抑制効果は30mMのLi^+で最も大きかった。このことから、Li^+の高濃度K^+収縮に対する抑制作用が収縮蛋白系を抑制する可能性が示唆された。またスキンドファイバ-におけるCa^<2+>非依存性の収縮(ATPrS)に対してはLi^+は無影響であった。つぎにニワトリ筋胃からミオシンBを抽出してミオシン軽鎖のリン酸化に対する影響をみたが、Li^+はこれには無影響であった。またカルモジュリン活性を調べる目的でウサギ赤血球膜のCa^<2+>、Mg^<2+>-ATPase活性をみたが、Li^+は有意な変化を示さなかった。現在、ホスホジエステラ-ゼならびにホスファタ-ゼ活性に対するLi^+の影響を実験し若干の成績を得ているが、報告する程の成果は得ていない。これらの若干一致しない成績より他の動物より得た酵素標本でなく、モルモット回腸縦走筋より得たミオシン軽鎖およびCa^<2+>、Mg^<2+>-ATPase標本で実験を行うべきであると考えている。
ジストロフィン結合蛋白機能異常の導入による筋ジストロフィーマウスの作製と解析

小児期発症で重症の筋ジストロフィーであるDuchenne筋ジストロフィーの原因蛋白であるdystrophinは骨格筋細胞において複数の糖蛋白と結合し複合体を形成している。本研究では骨格筋におけるdystrophin糖蛋白複合体の構成要素の分子構築を生化学的、細胞生物学的に検討するとともに、これら蛋白の異常を分子生物学的手法で導入しその効果を解析した。細胞接着因子としてdystrophin糖蛋白複合体の中で最も重要な要素はα-dystroglycanを膜貫通蛋白であるβ-dystroglycanが細胞膜につなぐ構造をとるdystroglycan複合体であった。dystroglycan複合体はその糖鎖を介して筋細胞基底膜外のlaminin-2、agrinとカルシウム依存性に結合していた。その発現は組織の分化と関連していた。一方、dystrophin糖蛋白複合体の中で信号伝達系に関与する要素としてcaveolin-3に注目、その遺伝子変異を持つトランスジェニックマウスを作製した。また筋細胞膜でcaveolin-3が消失していたもののdystrophin糖蛋白複合体の他の構成要素は保たれていた。さらに筋細胞膜でのnNOS活性が異常に亢進していたことより、信号伝達異常が筋細胞変性に寄与しているものと考えた。以上の結果はdystrophin糖蛋白複合体が細胞接着因子であるとともに信号伝達因子であることを示唆している。本研究の目的は25kDaのジストロフィン結合蛋白(25DAP)遺伝子をクローニングし、その遺伝子のターゲティングにより25DAP欠損マウスを作製、解析することにより蛋白の機能を解明することである。これまで25DAPについてはどのような蛋白か同定されていなかったので、初年度の研究計画としては、ウサギ骨格筋を出発材料としてジストロフィン糖蛋白複合体を精製し、25DAPのN末端アミノ酸シークエンスを決定する予定であったが、1996-97年にかけてともに25kDaの分子量をもつcaveolin-3とsarcospanがジストロフィン糖蛋白複合体の構成成分であることが報告された。このうちcaveolin-3は骨格筋特異的に発現するcaveolin分子であり、シグナル伝達への関与が示唆されている。また、最近筋ジストロフィーの発症機序にはシグナル伝達の異常が関与すると推定されている。そこで、われわれは、caveolin-3遺伝子のノックアウトマウスを作製し、筋ジストロフィー発症機構にcaveolin-3がどのような役割を担っているのかを検討することにした。まず、ラットcaveolin-3のcDNA塩基配列に基づいてPCRプライマーを作製し,RT-PCRによりマウスのcaveolin-3 cDNAをクローニングした。次にマウスをcaveolin-3のcDNAプローブを用いてマウスゲノムDNAのP1 plasmidライブラリーをスクリーニングして、4個のcaveolin-3遺伝子のクローンを得ることができた。得られたゲノムDNA断片の制限酵素解析によりcaveolin-3遺伝子のexon-intron構造を解析した。これまでに得られた遺伝子情報に基づいてcaveolin-3遺伝子の第一exonに、null mutationを導入するターゲティングベクターを設計し、現在それを作製している段階である。本研究の目的はジストロフィン結合蛋白の一つであるカベオリン3が欠損したマウスを作製、解析して筋ジストロフィー発症におけるカベオリンの役割を解明することである。初年度である平成9年の段階ではマウスカベオリン遺伝子のターゲティングによりカベオリン欠損マウスを作出する計画で、ターゲティングベクターの作製を行っていたが、平成10年にヒトのカべオリン遺伝子変異により常染色体優性肢帯型筋ジストロフィーを発症することが明らかにされた。従ってカベオリン遺伝子変異はdominant negative効果を示すことが示唆されたため、ヒトで同定された遺伝子変異をマウスカベオリン遺伝子に導入してトランスジェニックマウスを作製することとした。in vitro mutagenesisにより2種類の遺伝子変異(Pro105Leu,deletion Phe65)をマウスカベオリン遺伝子に導入し、マウス筋クレアチニンキナーゼ発現調節エレメントの下流に接続してトランスジェニックベクターを作製した。次にこれをC3Hマウス受精卵にmicroinjectし、ICRマウスの卵管に移植した。

9母体から57匹の生存産子が得られた。今後、これらのマウスの遺伝子解析を行いトランスジェニックマウスを同定するとともに、その表現型について詳細な解析を行う予定である。ヒトcaveolin-3遺伝子変異を導入したトランスジェニックマウスを作製し、その表現型を解析した.すなわち1アミノ酸欠失ΔPhe65の遺伝子変異をマウスcaveolin-3cDNAに導入した。上流にマウスmuscle creatine kinase(MCK)の発現調節エレメントを接続し、下流にSV40 polyadenylation配列を接続したtransgenic constructを作製した。これをC3Hマウス受精卵にmicroinjectionし、ICRマウスの卵管に移植した。トランスジーンの組込みはマウス尾よりゲノムDNAを採取し、PCRによりスクリーニングした。トランスジェニックマウスの骨格筋を採取し、HE染色による筋病理組織所見を観察するとともにノーザンブロット解析、RT-PCR法、免疫組織化学、ウエスタンブロット解析により骨格筋におけるcaveolin-3発現を解析した。PCR解析により50匹の産子中4匹のトランスジーン導入が確認された。トランスジェニックマウスは体重増加が不良で骨格筋の萎縮がみられた。後肢の麻痺も観察された。筋線維は大小不同が顕著であり、中心核線維が増加していた。間質は軽度増加していた。壊死再生像は見られなかった。トランスジェニックマウスでは変異caveolin-3mRNAの過剰発現が確認された。内因性の正常caveolin-3mRNAの発現も確認された。免疫組織染色では、筋形質膜に局在するcaveolin-3がほとんどの線維で欠損していたた。これはウエスタンブロットでも確認された.現在dystrophin結合蛋白群の発現を解析中である。
単一伝送路を適用したＲＦＩＤによる低コスト・スマートシェルフの実現

RFIDタグは、開発当初、様々な分野への応用が検討された。物の追跡、棚卸、在庫管理、また自動決済などが応用分野として検討された。しかし、タグの価格やサイズの問題で、初期に利用分野として想定されていた分野のすべてにおいて有効に活用できるわけでは無いということが明らかになってきている。その中で、図書館等での書籍の管理や、企業における重要書類管理は、RFIDの特性が生かせる分野である。上記の分野では、書籍や書類は持ち出されるが、その後また返却される。従って初期投資が有効に長期間活用できる。本課題では単一伝送路を利用し、本に貼り付けられたタグを読み取る本管理システムを提案した。本年度は,単一伝送路を用いた書籍読み取り実験を実施した.まず,システム全体について実施例を作成した,これまでの特性評価により,すべての段の書籍を一本の伝送路を折り曲げて棚全体に敷設する場合,すべての書籍を読み取るのに必要な電力が供給できない状況が確認された.そこで,それぞれの段に個別に伝送路を敷設し,これに読み取り装置を順次接続することにより読み取る方法を提案し,この提案に基づきシステムを構築した.伝送線路の長さと整合特性に関する解析を実施した.また,金属製の本棚を模擬して,本棚一段の解析モデルを作成し,電磁界解析環境を構築した.また読み取り特性を電磁界解析により解析した.まず,1本のタグの読み取り特性や線路からの距離特性などを把握した.金属棚の背面板の影響は大きいことが明らかになった.背面板が存在する方が,単一伝送路からの読み取り距離は長くなることを明らかにした.その後,複数タグ同時読み取り時の各タグの受信電力特性を明らかにした.単一伝送路の特徴は先端を解放していることである.このため電流が先端で反射し,単一伝送路上に電流の定在波が発生する.これによりデッドスポットの発生が危惧された.しかし,電力解析の結果,電界の低い場所においても,受信電力が十分に確保できることを明らかにした.最後に電波暗室内で,各タグへの供給電力に関する実験を行った,厚さ1cm程度のファイルを複数用いて実験を行った.その結果,良好に読み取れることを確認した.前年度までに行った単一伝送路による書籍読み取り特性評価のために準備として、RFIDタグが書籍に埋め込まれた場合のアンテナ指向性変化について研究を行った。前年度までに、書籍の背表紙に埋め込まれRFIDタグの読み取りにおいて、背表紙方向(正面方向と定義する)のアンテナ利得が半波長ダイポールアンテナ利得に対して約5dB低下することが確認された。さらに、アンテナ指向性が半波長ダイポールアンテナの指向性に対して大きく変化することが明らかになり、さらに書籍が大きな損失媒体であることが予想された。そこで本年度は、書籍を構成する紙の複素誘電率を精密に測定し、電磁界解析の一つであるFDTD法による解析を行った。またその結果を検証するために、書籍に測定用の標準ダイポールアンテナを埋め込んで指向性を測定した。その結果、紙の複素誘電率として、εrが3.142、tanδが0.123と共に大きいことが明らかになった。特にtanδが大きく、これが損失要因となり、アンテナ利得の低下を引き起こしていることが明らかになった。また、FDTD解析と実験結果から得られた指向性はよく一致していることが確認できた。さらに、実験結果との比較により、FDTD解析が十分な解析精度を有することが確認できた。従って、FDTD解析により、さらに詳細な書籍埋め込み時の指向性解析を行った。RFIDタグを用いた書籍管理において想定されるRFIDタグ埋め込み位置や冊数の変化に対してどのように指向性が変化するかを明らかにした。さらに、指向性形成原理を明らかにするために、電磁界解析の一つであるレイトレース法を利用して、指向性解析を行った。媒質定数としては、先に述べた実測に基づく複素誘電率を設定した。その結果、書籍境界面での反射や透過を考慮することで、指向性形成のメカニズムが理解できることを明らかにし、冊数変化時のRFIDタグの読み取り特性を予測できることを明らかにした。この研究では,書籍管理を目的としたスマートシェルフの実現に向けてこれまでに研究を進めて来た単一伝送路技術を適用することを目的としている.非常に簡易な伝送路を書棚に設置することにより複数RFIDタグの同時読み取りを実現することが特徴である.終了年度までに,単一伝送路の設計指針を確立することを目標としている.これまでに行ってきた研究では,主に木製の棚を想定して,単一伝送路単体の特性解析を進めてきた.しかし,書籍の重量の関係で,特に海外では金属製の書棚が多いとの指摘があり,これに対する適用可否について検証を進める必要があった.そこで平成23年度は,おもに金属製の棚に対して単一伝送路を適用するための技術の確立を目指した.

電磁界解析の結果,6段の書棚全体に単一伝送路を敷設し,書棚全体を読み取ることは困難であることがわかり,1段から2段程度に分けて読み取る構成とした.この構成では,単一伝送路のみを棚にあらかじめ敷設しておき,整合回路を伴ったリーダをこの単一伝送路に順次接続することを想定した.金属製棚と単一伝送路の間隔は2cmとしており,書籍を棚の背板にあたるように挿入した場合に読み取れるように設置している.この結果,自遊空間に単一伝送路が存在している場合に比較して,VSWRは劣化するものの,1.5以下の値が得られている,整合特性に問題がないことを確認した.またRFIDタグの受信電力を解析した結果,8cm間隔で配列した複数タグの受信電力がすべて閾値を上回ることを確認した,今年度はこの一連の研究により,単一伝送路技術が金属製棚に適用できることを確認できた.また,書棚を一括して読み取る構成と比較して,1から2段程度の段ごとによる読み取りは書籍の位置特定にも応用できるため,より適切な構成であると考えている.初年度は,書籍がRFIDタグの読み取りに与える影響について明らかにした.複数タグの同時読み取りを行う場合,読み取り距離が自由空間に対して半分程度まで低下することを明らかにし,またこれは,アンテナ利得が書籍中では5dB程度低下することに起因することを示した.またこのアンテナ利得の低下は,本の損失と指向性のゆがみが原因であることを明らかにした,これにより,本がアンテナに与える影響を明確にした.これはスマートシェルフを実現する上での基本特性となる.一方,本年度は,単一伝送路の特性を明らかにした,設計方法や,金属製の棚の影響を明らかにし,実施例も含め提案した.また単一伝送路を用いて書籍の同時読み取りが可能であることを電波暗室内での実験から明らかにした.以上,理由により,順調に研究が実施されていると判断した.単一伝送路を使用したRFIDタグによるスマートシェルフを実現する上で,最も懸念されたことは,本技術が金属製の書棚に適用可能であるかどうかという点であった.一般にグランドプレインとなる金属製書棚に単一伝送路を敷設する場合,電界が伝送路とグランドプレインとの間には強く存在するが,RFIDタグが存在する上部の電界が弱くなると考えられた.しかし,背板のある金属製書棚を想定し,さらにグランドプレインから2cm程度の間隔をあけることにより,グランドプレインと垂直な電界成分が発生し,RFIDタグの読み取りが可能となった.
褐色脂肪細胞特異的転写制御におけるクロマチン構造変化とエピゲノム制御の役割

褐色脂肪の発生のメカニズムを明らかにする目的で、マウス褐色脂肪組織、白色脂肪組織において、in vivoのFAIRE-seqを施行し、褐色脂肪に特異的な転写制御を担う新たな転写因子としてNFIAを見出した。ChIP-seqによるゲノム上の結合領域の解析や培養細胞および欠損マウスの解析を通して、NFIAが白色脂肪のマスターレギュレーター転写因子であるPPARgをエンハンサー上にリクルートすることで、褐色脂肪特異的な転写制御をする機構を明らかにした。In vivo褐色脂肪組織のFAIRE-seq/ChIP-seq:オープンクロマチン(転写制御)領域/ヒストン修飾のエピゲノム解析:マウスの褐色脂肪組織(BAT)、白色脂肪組織(皮下scWAT・生殖器周囲epiWAT)、肝臓(コントロール)に対してin vivoのFAIRE- seqを施行し、全ゲノムレベルでBAT、scWAT、epiWATでそれぞれ30,754、17,204、17124か所のオープンクロマチン領域を同定した。それぞれに特異的なオープンクロマチン領域を同定した。褐色脂肪細胞に特異的な遺伝子近傍では、褐色脂肪細胞に特異的なオープンクロマチン領域を複数個所認めた。褐色細胞特異的エンハンサーのunbiasedな同定の目的で施行したモチーフ解析により、褐色細胞特異的な転写制御作用をもつ候補遺伝子のリストを作成した。更に候補遺伝子の一つにはアイソフォームが存在するが、その一つはマウス臓器や種々の細胞培養株において、褐色脂肪組織や褐色脂肪組織から樹立された培養細胞株において強く発現していることが分かった。更にこの因子のレトロウイルスによる過剰発現やsiRNAによるノックダウンなどの分子生物学的実験の結果から褐色細胞特異的な転写制御を誘導する因子であることを明らかにした。In vivo褐色脂肪組織のFAIRE-seq/ChIP-seq:オープンクロマチン(転写制御)領域/ヒストン修飾のエピゲノム解析においては、マウス褐色脂肪組織、皮下および生殖器周囲白色脂肪組織、肝臓に対してin vivoのFAIRE-seqを施行し、全ゲノムレベルでオープンクロマチン領域を同定した。褐色脂肪組織に特異的なオープンクロマチン領域は、代表的な褐色脂肪遺伝子周囲に多く存在し、ゲノムレベルの解析でも、褐色脂肪に選択的に発現する遺伝子の近傍に多く存在していた。Gene Ontology解析を施行したところ、褐色脂肪分化に関わる遺伝子の周囲に有意に濃縮していた。褐色脂肪細胞に特異的オープンクロマチン領域のDNA配列のモチーフ解析により、制御因子の候補リストを作成した。それらの因子のうちの一つは、細胞レベル・組織レベルで白色脂肪、骨格筋と比較して、褐色脂肪に多く発現しており、レトロウイルスによる過剰発現やsiRNAによるノックダウンなどの実験から褐色脂肪細胞特異的な誘導作用を有していることを明らかにした。この因子のゲノムレベルでの結合領域を同定するために、ChIP-seqを施行し、褐色・白色脂肪のマスターレギュレーターであるPPARgとの機能的な相互関係の解析を進めた。In vivo褐色脂肪組織のFAIRE-seq/ChIP-seq:オープンクロマチン(転写制御)領域/ヒストン修飾のエピゲノム解析:マウスの褐色脂肪組織(BAT)、白色脂肪組織(皮下scWAT・生殖器周囲epiWAT)、肝臓(コントロール)に対してin vivoのFAIRE- seqを施行し、全ゲノムレベルでBAT、scWAT、epiWATでオープンクロマチン領域を同定した。褐色脂肪細胞に特異的な遺伝子近傍では、褐色脂肪細胞に特異的なオープンクロマチン領域を認めた。褐色細胞特異的エンハンサーのunbiasedな同定の目的で施行したモチーフ解析により、褐色細胞特異的な転写制御作用をもつ候補遺伝子の一つにはアイソフォームが存在するが、その一つはマウス臓器や種々の細胞培養株において、褐色脂肪組織や褐色脂肪組織から樹立された培養細胞株において強く発現しており、レトロウイルスによる過剰発現やsiRNAによるノックダウンなどの分子生物学的実験の結果から褐色細胞特異的な転写制御を誘導する因子であることを明らかになった。ChIP-seqによる本因子や脂肪細胞のマスターレギュレーターPPARgのゲノム上の結合部位の解析から褐色細胞特異的な転写制御のメカニズムが明らかとなった。ヒトの褐色脂肪組織においても対照と比較し高発現しており重要な因子であることが示唆された。褐色脂肪組織特異的なオープンクロマチン領域のunbiasedなゲノムワイド解析を施行し、褐色脂肪特異的な遺伝子の近傍に褐色脂肪細胞に特異的なオープンクロマチン領域を同定した。これらの領域のunbiasedな解析により、褐色脂肪特異的な転写制御作用の候補因子を同定した。これらの因子の中で、過剰発現やsiRNAを用いた検討から、褐色脂肪特異的な転写制御作用を有する転写因子を同定した。この転写因子がどのように褐色脂肪特異的な転写制御作用をもつか、またマスターレギュレーターPPARgと関連の解析を進めている。申請時の研究計画に従い、おおむね順調に進展している。27年度が最終年度であるため、記入しない。糖尿病・代謝内科学研究計画に従い、おおむね順調に進展していると考えら得、引き続き、申請時の研究計画に従って研究を遂行する。

(1) In vivo褐色脂肪組織でFAIRE- seqを施行し、オープンクロマチン領域と臓器特異的なオープンクロマチン領域を同定した。褐色脂肪細胞に特異的な遺伝子近傍では、褐色脂肪細胞に特異的なオープンクロマチン領域を複数個所認めた。褐色細胞特異的エンハンサーのunbiasedな同定の目的で施行したモチーフ解析により、褐色細胞特異的な転写制御作用をもつ新規因子を同定した。申請時の研究計画に従い、おおむね順調に進展していると考えられる。27年度が最終年度であるため、記入しない。研究計画に従い、おおむね順調に進展していると考えられるため、引き続き、申請時の研究計画に沿って研究を遂行する。