hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
MAP様キナーゼNLKの機能解析

MAPキチーゼ様のセリン/スレオニンキナーゼであるNLKは、MAPKKKであるTAK1の下流でWntシグナル伝達経路の転写因子であるTCF/LEFをリン酸化する事により、β-catenin/TCF複合体のDNA結合能を抑え、Wntシグナル伝達経路を負に制御する事が知られている。しかし、ツメガエル胚における解析からNLKが初期発生においてWntシグナル伝達経路にも関与する事が示唆されており、生体内におけるNLKの機能には依然不明な点が多い。本研究では酵母Two-hybrid法を用いて単離されたNLK結合因子であるSTAT3の機能解析を行い、NLKとSTAT3の新たな機能を解明した。STAT3はJAK/STAT3シグナル伝達経路を構成する転写因子であり、JAKキナーゼによってチロシン残基がリン酸化されると核へ移行して標的遺伝子の発現を誘導する。一方、STAT3のC末端側領域に存在するセリン残基の生理的な意義は不明であった。今年度我々は以下の事を明らかにした。NLKが培養細胞またはXenopus胚においてSTAT3と結合し、このセリン残基をリン酸化する事を示した。培養細胞においてTGF-βファミリーリガンドによってNLKが活性化する事、STAT3、NLKに加え、NLKの上流のキナーゼであるTAK1もXenopus胚においてTGF-βファミリーリガンドが制御する中胚葉誘導に関与する事、この中胚葉誘導にはNLKによるSTAT3のセリン残基のリン酸化が重要な役割を担っている事も証明した。これらの結果は生体内においてTGF-βファミリーリガンドの下流でTAK1-NLK-STAT3というシグナル伝達経路が機能して中胚葉誘導を担っている事を示唆している。NLKはMAPK様のセリン/スレオニンキナーゼで、TAK1の下流で転写因子であるTCF/LEFをリン酸化する事によりWnt/β-cateninシグナル伝達経路を負に制御する事が知られている。しかし、生体内におけるNLKの機能は依然不明な点が多く、Wntシグナル伝達経路以外のシグナル伝達経路にも関与する事が示唆されていた。本年度は酵母Two-hybrid法を用いて単離されたNLK結合因子であるSTAT3の機能解析を行う事により、TGF-βシグナル伝達経路におけるNLKの新たな機能を解明した。STAT3はJAK/STATシグナル伝達経路を構成する転写因子であり、JAKキナーゼによってチロシン残基がリン酸化されると核へ移行して標的遺伝子の発現を誘導する。一方、STAT3のC末端側領域に存在するセリン残基はそれ自身の転写活性能を制御しているという知見はあったものの、その生理的な意義は不明であった。今回我々は培養細胞においてNLKがTAK1の下流でSTAT3のセリン残基を直接リン酸化する事を示した。また、Xenopus胚において、TAK1、NLK、STAT3がTGF-βファミリーリガンドが制御する中胚葉誘導に関与している事、その際NLKによるSTAT3のセリン残基が必要である事も証明した。さらに、NLKがTGF-βファミリーリガンドであるactivinによって活性化される事もわかった。これらの結果より、生体内においてTGF-βファミリーシグナル因子の下流でTAK1-NLK-STAT3というシグナル伝達経路が機能して中胚葉誘導を行っているという、TGF-βシグナル伝達経路におけるNLKの新たな機能を明らかにした。
哲学の再定義としてのドゥルーズ哲学:その批判的継承のための基礎的研究

本研究の目的は、三つの基本問題((1)哲学と自然・社会諸科学との関係の問題、(2)哲学の社会的役割の問題、(3)哲学の今後の可能性の問題)を、ドゥルーズ哲学を参照項としつつ解明することである。それは同時に、来たるべき「哲学という名に値する新たな思考形態」の模索の試みでもある。昨年度より、ドゥルーズの前期主著『差異と反復』、その中でも特にドゥルーズ哲学の要を為す「強度」概念につき、その具体的内実をドゥルーズが参照を指示する諸科学の言説群へ遡行して解明しようと試みてきた。今年度完成した論文「強度概念再考-その内在的理解の深化に向けて」では、主に心理学者J・パリアール、M・プラディーヌの言説を綿密に解読し、ドゥルーズ自身の主張と突き合わせることで、彼が提出する「強度」概念の含意が従来の研究レベルを超える深い次元で解明された。それを踏まえ目下、ドゥルーズが参照を指示する発達心理学者J・ピアジェの言説の解読を進めており、投稿予定論文「行動と強度-ピアジェから見たドゥルーズの<強度>」においては、更に「行動」という視点から「強度」概念の内実理解を深める予定である。以上のようにドゥルーズ哲学の内在的理解の深化を進めつつ、本年度は他方で雑誌媒体によるアウトリーチ活動を行った。昨年度の共著書『環境-安全という価値は・・』(松永澄夫編・東信堂)所収論文「監視社会化の何が問題か」に関して、東洋経済新聞社より雑誌『週刊東洋経済』(06年5月20日号)への記事掲載の為の取材を受け、現在の日本社会が向かいつつある「監視社会化」について上記論文をベースに解説を加えた。ドゥルーズが萌芽的形態で有していた「監視社会化」というテーマを現代日本社会に適用し執筆した論文をベースに、その内容を咀嚼しつつ一般社会向けに提言を行ったという意味で、この作業はアカデミックな哲学研究の「アウトリーチ活動」だと称されよう。本研究の日的は、三つの基本的問題((1)哲学と自然・社会諸科学との関係の問題、(2)哲学の社会的役割の問題、(3)哲学の今後の可能性の問題)を、ドゥルーズ哲学を参照項としつつ解明することであり、それは同時に来たるべき「哲学という名に値する新たな思考形態」の模索の試みでもある。本年度の個別目標「ドゥルーズ哲学の内在的理解」の推進については、「強度」・「アフェクト」というドゥルーズ哲学の中心的諸概念の再検討を、ドゥルーズ自身の言説と彼が利用した哲学・自然科学・社会科学の文献を参照しつつ遂行した。研究発表「ドゥルーズ哲学におけるアフェクト概念の内実と意義について」(05年4月・哲学会「カント・アーベント」)では、スピノザに由来する「アフェクト=触発」概念のドゥルーズ的展開について、「生成の度合い」という独自の視点や「スタイル」概念との繋がりに着目しつつ検討し、各人が通暁する実践における「スタイル」の構築が「新たなアフェクトの創造・贈与」を齎すことを解明した。また、「強度」概念については、『差異と反復』第5章で参照される諸論者(パリアール・プラディーヌ・ピアジェら)の言説の緻密な再検討を通じ実証科学との繋がりを解明しつつある。(この成果は論文「強度概念再考-内在的理解と現代的展開」として06年発行予定の『ドゥルーズ&ガタリ論集』〔人文書院〕に発表する。)加えて、『環境-安全を確保すること』(松永澄夫編)所収論文「監視社会化の何が問題か」においては、ドゥルーズが晩年に警鐘を鳴らした「監視社会」に関する理解を深め、更新した。監視カメラ・バイオメトリクス等の技術の社会への導入によりいかに我々の生にとり根本的な「自由。平等・時間・空間」が変容しつつあるかを考察した本論文は、「ドゥルーズ哲学の理解の深化」と並立する、もう一つの本研究の目的「哲学という名に値する新たな思考形態」創造の試みでもある。昨年度の共著書『環境-安全という価値は・・』

(松永澄夫編・東信堂)所収論文「監視社会化の何が問題か」に関して、東洋経済新聞社より雑誌『週刊東洋経済』(06年5月20日号)への記事掲載の為の取材を受け、現在の日本社会が向かいつつある「監視社会化」について上記論文をベースに解説を加えた。ドゥルーズが萌芽的形態で有していた「監視社会化」というテーマを現代日本社会に適用し執筆した論文をベースに、その内容を咀嚼しつつ一般社会向けに提言を行ったという意味で、この作業はアカデミックな哲学研究の「アウトリーチ活動」だと称されよう。
台湾・中国・香港・韓国における戦前・戦後の不良・犯罪少年の教育権の保障

第一に、戦後台湾では日本統治期の少年司法、少年刑務所などの制度を生かし、各国の少年司法を研究したうえで台湾の不良・犯罪少年への教育権が保障されるような制度を作った。1960年代までの感化院、少年輔育院の歴史、現在の台湾の少年福祉について研究をした。第二に香港では日本占領期が短期であったこともあり、イギリス型の少年司法下で教育権の保障がなされた。本年は、台湾では、台湾省政府档案センターで戦後の少年輔育院の歴史に関する公文書を調査し、戦後の不良・犯罪少年に関わる矯正教育の流れを研究することができた。以前少年刑務所であった明陽中学で収容少年の教育について、また桃園輔育院(少年院)でも同様に少年の教育県の保障について職員の方に話を聞いた。高雄では、一般の中学も訪問し、心理学の専門家がいるセンターが中学何校かで1校あり、そこで少年の心の問題について、また輔導(ガイダンス)専門の先生数人からその状況を説明してもらった。高雄警察署では、警察官から台湾の少年犯罪の状況について高雄少年法院では裁判官から、台湾の少年司法の特徴と犯罪少年を教育で矯正するという強い言葉をもらった。香港では、犯罪・不良少年や家庭背景がよくない少年が宿舎で生活しながら勉強する特別支援学校の一つ、群育学校を3校(1校は通学生)訪問した。校長先生や教員と、生徒の問題点、指導上の苦労、さらに群育学校の意義について議論することができた。1990年代、学習動機に欠けた生徒が通った実用中学であった香港航海学校の先生にも、実用中学であった90年代と一般中学となった現在との違い、生徒指導の状況について話を聞くことができた。また、一般の中学を訪問し、薬物防止の授業の見学もすることができた。また、香港教育局学校行政及支援部訓育及輔導組で半日、香港、日本の生徒指導、ガイダンスに関する議論をした。その後、小学校を見学した。これらのことから、日本とは異なり、台湾、香港では、学校で問題行動を起こす不良少年、犯罪少年に対する支援が制度的に保障され、香港では、問題行動がある少年の教育を群育学校がになっている状況が分かった。しかし、それ以上に、予防教育や輔導活動も盛んで、少年の生活、学習に対する社会・教育支援はある程度機能していることが理解できた。今年度は、昨年度の資料収集、調査を踏まえ、学会の研究例会で「台湾の少年法院と明陽中学」を共同発表した。また、現在の香港、台湾の犯罪少年・不良少年への教育的支援について、学校、関係機関(香港善導会、台北の不登校の生徒、問題を抱えた少年を支援する機関など)で調査をした。香港では、宗教団体、公教育が教育支援を行い、台湾では、公教育の中で支援をしていた。香港は、貧しい児童生徒に放課後計画で学校で放課後の活動を提供したり、犯罪少年・不良少年向けの特別支援学校がある。台湾では、一部の学校に家庭環境が良くない生徒が通う慈輝班、不登校の生徒が通う中途班が作られていた。香港・台湾の学校の訓育(生徒指導)、輔導は学校全体で生徒中心の方法で行っており、香港ではスクール・ソーシャルワーカーと支援団体のソーシャルワーカーの連携があった。2012年3月出版の『公教育と子供の生活をつなぐ香港・台湾の教育改革』(風媒社)で、その支援の具体的な状況を書いた。また、戦前戦後の犯罪少年・不良少年の教育権の保障については、イギリスやアメリカ国立公文書館で資料収集ができた。これによって、香港、台湾の犯罪少年・不良少年への教育支援の現状や、戦前戦後の香港、韓国の教育支援の状況が分かってきた。現在、台湾、韓国は、アメリカから少年への教育支援の方法を学んでいるが、戦前の日本植民地時代からアメリカ的な教育支援への変化を論じることは、日本にとってもどのような犯罪少年・不良少年への教育支援が必要なのか考える上で重要である。平成25年度は、これまであまり研究を進めていなかった戦後すぐの中国の少年犯罪の状況に関して、中国広東省の省立図書館、中山大学図書館、香港大学図書館などで資料を調査した。1940年代後半、1950年代初期の中国の新聞雑誌、警察関連の雑誌から当時の少年犯罪に関わる記事があるのかを確認した。また、現在の中国の少年犯罪に関する書籍も購入した。しかし中国の関連資料は膨大であり、まだ時間的にも十分に調査ができなかったことから、今後、これらの資料に加え、さらに資料を収集し、1950年代までの中国の少年犯罪について論文等を執筆できるようにしたい。戦後台湾の少年犯罪に関しては、日本統治時代との連続性を研究するため、終戦後の日本統治時期の少年刑務所の接収、犯罪少年に関わる公文書を収集するため、国家档案管理局(公文書館)に出向いた。しかし終戦直後の公文書は修復作業中のものも多いため、申請はしたが、今年度は公開されている公文書をカメラで撮影した。本年度は、台湾でこれまで収集した明陽中学(少年刑務所)所有の公文書等を用いて、戦後台湾の少年輔育院(少年院)に関する2論文を公表した。

戦後香港の少年犯罪については、香港の政府档案処で1950年代から現在までの少年犯罪に関する公文書の大多数をコピーし郵送してもらった。これらの公文書は今後徐々に読んでいき、論文等で確実に公表したいと考えている。また、日本統治期の朝鮮半島の少年犯罪を考察するため、戦前の朝鮮半島の少年福祉を専門とする先生に、韓国国家記録院で日本統治時期の少年刑務所の公文書をコピー、送付をしてもらった。今年度は資料収集に多くの時間を割いたが、今後の研究に必要な資料が多く得られた。戦前・戦後の台湾、香港、韓国の不良・犯罪少年について次の研究を行った。第一に、台湾の明陽中学(少年刑務所)档案館で戦後の公文書を収集した。これにより戦後の少年刑務所行政、刑務所運営がわかった。また高雄市内の中学で、社会福祉士に生徒支援の状況などの話を聞いた。第二に、拙著『日本植民地・占領下の少年犯罪』(成文堂、2013年3月出版)の校正の過程で、最近の先行研究を調べた結果を掲載することができた。第三に、韓国調査で同行した日本人研究者2人と事前に十分な韓国の不良・犯罪少年に関する情報交換をした。そののち、韓国の少年院、代案学校などを訪問した。その成果は同行した一人の研究者が平成25年度に国内の学会研究例会で発表予定である。また戦前の朝鮮総督府の公文書の収集も行った。これらの成果は25年度にもう一人の同行者も含めて国内の学会などで公表予定である。これまでの研究成果を次の形で還元した。第一に7月香港で開催された第一屆兩岸四地学輔導国際学芸研討会で台湾、香港、日本の現在問題を抱えた生徒支援の比較について発表した。会場で香港、台湾、マカオ、シンガポールの研究者、実務家と交流をした。第二に、11月に香港教育局訓導及輔導組督導の李少峰先生に第七回アジア教育学会大会、名古屋市立大学人間文化研究所マンデーサロンで香港の生徒支援に関する講演をお願いした。また香港の最新の情報について教えていただいた。第三に、2013年3月、上述の『日本植民地・占領下の少年犯罪』(成文堂)を出版した。第四に、1950-60年代の台湾の感化院(少年輔育院)に関する論文を執筆した(1960年代の少年輔育院研究は25年度公表予定)。教育学戦後の少年犯罪に関して、特に現在の香港、台湾の犯罪少年への教育的支援については、2012年3月出版の『公教育と子供の生活をつなぐ香港・台湾の教育改革』(風媒社)でその一部を発表した。また、台湾の戦後すぐの少年輔育院の資料収集を終え、2012年度に論文として執筆する予定である。今年度は、日本植民地後の韓国における少年司法についてもアメリカ公文書館などで資料収集ができた。25年度が最終年度であるため、記入しない。現在までに単著2冊のなかで本研究に関連する研究成果に言及しているため、研究は順調に進んでいると言える。特に戦前・戦後の台湾、香港における不良少年に関する研究は十分に進展した。また最終年度の一年間でもさらに資料を収集し、十分研究成果を上げることができると考えている。一方で韓国調査については日本人の韓国教育研究者2人に同行してもらい韓国の少年院、代案学校、Weeプロジェクトを行う学校などを訪問した。その成果は同行した研究者が2013年度国内の学会研究例会で発表予定である。
リボヌクレアーゼPによる基質認識と転移RNA高次構造安定性に関する研究

本研究の目的はリボヌクレアーゼP(RNaseP)をRNAの高次構造を探るプローブとして利用した、tRNA高次構造安定化戦略の解明である。本期間内に明らかにしたことは以下の14である。1試験管内におて、tRNAアンチコドンループ内のイントロンの存在がヒトチロシンtRNAの高次構造変化(クローバーリーフ型二次構造からダブルヘアピン型二次構造への変化)を促すことを明らかにした。2ヒトリジンtRNAと線虫リジンtRNAは塩基配列から考えるとクローバーリーフ型二次構造とダブルヘアピン型二次構造の両方をとることが出来ると推定できる。しかし試験管内において、これらのtRNAは高次構造がクローバーリーフ型二次構造で安定していることを明らかにした。これら後生動物の二つのtRNAに類似した塩基配列をもつ真正細菌AchleplasmalaidlawiiリジンtRNAは試験管内において高次構造変化することを明らかにした。これらの塩基配列を比較した結果、tRNAアミノアシルステムの塩基対の形成が、tRNAの高次構造安定化に重要であることが示唆された。3 tRNA前駆体の5'リーダー配列に相補的に設計した一本鎖DNA(ガイドDNA)は、大腸菌RNasePの賦活剤としてはたらくが、さらに解析を進め、ガイドDNAが賦活剤とより効果を発揮するには、20以上の塩基対を形成するようガイドDNAを設計する必要があることを明らかにした。4本研究で調査したポルフィリンの数種類が、大腸菌RNasePによるtRNA成熟化反応をこれまで報告されているどの阻害剤よりも強力に阻害することを明らかにした。これらの研究成果はtRNA高次構造の起源の解明のみならず、ポストゲノム時代のにおけるRNasePの切断反応を応用した遺伝子発現制御技術、RNA高次構造予測技術に大いに貢献すると考えられる。
歯周病原菌Porph、romonas gingivalisの組織破壊酵素の研究

P.gingivalisのリジン特異的プロテアーゼ(K-プロテアーゼ)を培養上清より分離精製した.分子量は48KDaで反応の至適pHは7.5であった.tos-GPK-pNA,VLK-pNAに対するKm値はそれぞれ0.25mM,0.33mMであった.活性は還元剤で上昇するのでチオール酵素であり,TLCKで完全に阻害され,金属キレーター(EDTA,EGTA)で活性化され,また血清アルブミン,IgA,IgGなどの蛋白質を加水分解する.菌体より調製したエンベロープにはヘモグロビンとの結合能があり,1mgのエンベロープは最大58μgのヘモグロビンと結合し,その解離定数は0.17nMと低い,結合は酸性条件でよく起こり,アルカリ下では解離する.この特性を利用してエンベロープの可溶化画分から分子量19KDaのヘモグロビン結合蛋白(HbBP)を分離,精製した.HbBPはシデロフォアシステムを持たない本菌の鉄源の獲得において,重要な役割をしている可能性が考えられる.P.gingivalisのリジン特異的プロテアーゼ(K-プロテアーゼ)を培養上清より分離精製した.分子量は48KDaで反応の至適pHは7.5であった.tos-GPK-pNA,VLK-pNAに対するKm値はそれぞれ0.25mM,0.33mMであった.活性は還元剤で上昇するのでチオール酵素であり,TLCKで完全に阻害され,金属キレーター(EDTA,EGTA)で活性化され,また血清アルブミン,IgA,IgGなどの蛋白質を加水分解する.菌体より調製したエンベロープにはヘモグロビンとの結合能があり,1mgのエンベロープは最大58μgのヘモグロビンと結合し,その解離定数は0.17nMと低い,結合は酸性条件でよく起こり,アルカリ下では解離する.この特性を利用してエンベロープの可溶化画分から分子量19KDaのヘモグロビン結合蛋白(HbBP)を分離,精製した.HbBPはシデロフォアシステムを持たない本菌の鉄源の獲得において,重要な役割をしている可能性が考えられる.porphyromonas gingivalis ATCC33277株がリジン特異的プロテアーゼ(K-プロテアーゼ)を産生することが認められた。K-プロテアーゼ活性は細胞にも菌体外にも存在するが、今回は菌体外の(培養上清中)のものについて分離精製を試みた。酵素基質としてトシルグリシルプロリルリジン-パラニトロアニリド(tos-GPK-pNA)を用いた。培養上清の硫安塩析、イオン交換クロマトグラフィー(DEAE)、ゲル濾過、アフィニティクロマトグラフィー(リジンセファロース)によってK-プロテアーゼを精製した。精製標品はSDS-PAGEで単一バンドを示し、比活性は1331倍上昇した。分子量はSDS-PAGEで48kDaで、反応の至適pHは7.5であった。tos-GPK-pNAおよびバリルロイシルリジン-パラニトロアリニド(VLK-pNA)に対するミカエリスーメンテン定数はそれぞれ0.25mM、0.33mMであった。またtos-GPK-pNAに対する活性を100%とすると、VLK-pNAには64%、ベンゾイルリシル-パラニトロアニリドには12%の活性を示した。しかしリジンアミノペプチダーゼ活性は検出されなかった。P.gingivalisにはアルギニンに特異的なプロテアーゼ(トリプシン様酵素)があるが、精製されたK-プロテアーゼにはその活性が全く認められず、両者は異なる酵素である。K-プロテアーゼの蛋白質に対する加水分解能を調べたところ、血清アルブミン、IgA、およびIgGを切断することが分かった。酵素阻害剤および金属キレーターのK-プロテアーゼへの影響を比較したところ、トシルリジンクロロメチルケトンで完全に阻害されたフェニルメチルスルファニルフルオライド、ジイソプロピルフルオロフォスフェイト、ε-アミノカプロン酸、アプロチニン、ロイペプチン、E-64の影響を受けず、EDTAとEGTAで活性化されることが判明した。P. gingivalisのエンベロープは調べたヘム蛋白のうちではヘモグリビンと最もよく結合し,チトクロームとの結合が最も少なかった.1mgのエンベロープは58μgのヘモグロビンで飽和し,飽和ヘモグロビンは最早他のヘム蛋白とは結合できないので,ヘム蛋白の結合サイトは共通でと考えられる.ヘモグロビンに対するKdは0.17nMであった.また予め70°Cで熱処理したエンベロープでは結合能が失われる.結合の至適pH4.55.0で中性以上では結合はおこりにくい.エンベロープに結合サイトあると仮定し,そこにヘモグロビン結合蛋白(HbBP)が存在することの証明とHbBPを分離する試みを行った.ドットプロット法を応用するとエンベロープにHbBPが存在することが確認された.さらにエンベロープ可溶化画分にもHbBPが認められた.本画分をアフィニティクロマトグラフィーと等電点電気泳動で単一のHbBPを得ることができた.その分子量は19Kdで等電点は4.3であった.
中世北東アジア考古遺蹟データベースの作成を基盤とする考古学・歴史学の融合

本研究は、10世紀から14世紀の北東アジア地域に関する考古・歴史・地理研究情報データベースの構築を通して、考古・歴史・地理等の学融合を目指し、今後の研究の基盤を形成することを目的としている。平成16年度は、現地調査によるデータ収集を目的に、モンゴル国での遺跡調査を実施し、モンゴル時代の重要な軍事拠点であるチンカイ屯田・チンカイ城の地と思われるハルザン・シレグ遺跡の発見など、大きな成果を上げた。17年度は文献データなどの収集に力を入れ、これまでの蓄積に加えて、モンゴル科学アカデミー考古学研究所のツォクトバータル副所長の協力により、多くの文献情報を得た。それらを基に、東北アジア・モンゴル地域の都市遺跡に関わる発掘報告書、研究文献などを網羅した目録型データベースを構築した。東北アジア・モンゴル地域都市関係研究文献について、WEBを介して検索可能にした。本データベースに登録されている書誌データは多言語にわたるため、全てのデータはユニコードで登録されている。また、2年間の研究成果をまとめた報告書も作成した。報告書にはまず、平成16年度のモンゴル国における調査の詳細な行動記録を載せ、ついで、村岡倫は、ハルザン・シレグ遺跡調査の総説を述べ、その歴史的意義についても改めて言及した。研究協力者・白石典之によるハルザン・シレグ遺跡実測図面も掲載する。松田孝一は、チンカイ城に関して歴史文献から詳細に研究したものを載せた。徐は中国人民大学歴史学院の魏堅氏の協力のもと、クビライ即位前の根拠地、金蓮川草原にある元の上都(中国内蒙古自治区)の調査を行なった。上都については多くの研究蓄積がこれまでにもあるが、最新の調査の成果を載せる。松川節も、モンゴル国発見の新出史料、『勅賜興元閣碑』碑片の解読を試みたものを掲載。『勅賜興元閣碑』とは、1346年、カラコルムに建てられた漢モ対訳の碑文である。中世北東アジア考古遺蹟のデータベース作成に当たって、最も課題となるのは、これまでモンゴル高原で発見されたモンゴル帝国時代の遺蹟のほとんどが、高原中央部から東部地域のもので、西部では全く発見されていないということであった。そのような状況の中で、かつて、我々は、独自にモンゴル西部に赴いて調査を行ない、ゴビアルタイ県シャルガ郡でモンゴル帝国時代の軍事拠点チンカイ屯田の遺蹟を発見した。しかし、その後は再調査する機会を得られなかった。そこで、16年度の最大の目標は、チンカイ屯田の遺蹟の再調査ということに置いた。16年の8月から9月にかけて、モンゴル国国立歴史民族博物館館長のオチル氏の協力を得て現地調査を行ない、その結果、チンカイ城(称海城)と思われる土城、多くの土器片や磁器片(特に13世紀初頭のものと思われる金代鈞窯の磁器の発見は重要)を発見した。また、新たに文献と現地の状況が一致する点も確認され、シャルガ郡内のこの遺蹟がチンカイ屯田であることを改めて確信した。従来手薄であったモンゴル西部の遺蹟情報が得られたことによって、中央部・東部との比較も可能となり、今後作成するデータベースのさらなる充実化をはかることができる。我々の16年度の成果については、同じ特定領域の「北東アジア中世遺跡の考古学的研究」班(代表:札幌学院大学・臼杵勲)の『平成15・16年度研究成果報告書』に、村岡が調査報告を載せ、松田が、文献資料精査の成果として、「クビライ政権時代のチンカイ地区(箚記)チンカイ・バルガスン(称海城)屯田年表」を掲載している。本年度には我々独自の研究成果報告書も刊行し、16年度のさらに詳しい調査内容を公開する予定である。また、徐を通して、徐とは古くから研究協力が構築されている藩陽東亜研究中心から『中国考古集成東北巻』(全20冊)を購入した。これは、当該地区の考古情報を得るのに重要な書であり、今後も我々の研究に益するところは大きい。

徐は中国人民大学歴史学院の魏堅氏の協力のもと、クビライ即位前の根拠地、金蓮川草原にある元の上都(中国内蒙古自治区)の調査を行なった。上都については多くの研究蓄積がこれまでにもあるが、最新の調査の成果を載せる。松川節も、モンゴル国発見の新出史料、『勅賜興元閣碑』碑片の解読を試みたものを掲載。『勅賜興元閣碑』とは、1346年、カラコルムに建てられた漢モ対訳の碑文である。
胎児遺伝子治療の方法論確立のための基礎的研究

【結果】(1)カニクイサル胎仔(妊娠期間163日)を用い、細胞の胎仔への移植手技や胎仔解析手技、サル細胞への遺伝子導入手法を検討する基礎実験を施行した。(2)ヒト臍帯血CD34^+細胞3.5x10^6個を妊娠43日のサル胎仔腹腔内に移植した。出生仔のFACSおよびPCRによる解析でヒト由来細胞は同定されなかった。(3)ヒトALL患者有核血球4.2x10^7個を妊娠43日の胎仔へ腹腔内移植した。妊娠114日の胎仔血と生後の新生仔血の解析を施行したが、ヒト細胞は同定されなかった。(4)ヒト臍帯血CD34^+細胞にGFP遺伝子を導入し、1.6x10^6個を妊娠45日の胎仔腹腔内へ移植、妊娠126日に胎仔血を解析し、ヒト細胞は同定できなかった。本胎仔はその後子宮内死亡した。(5)妊娠114日のサル胎仔血を採取しリンパ球にGFP遺伝子を導入、2.7x10^7個を妊娠123日の同サル臍帯血管内に移植した。出生仔からGFPは検出されなかった。(6)妊娠131日のサル胎仔血を採取しリンパ球にGFP遺伝子を導入、1.0x10^5個を妊娠143日の同サル臍帯血中に移植した。(7)ヒト骨髄CD34^+細胞5x10^6個を妊娠125日、胎仔の臍帯血管に移植、同ヒト骨髄由来リンパ球にBCL-X遺伝子を導入後、これを同胎仔に妊娠135日に3x10^7個、妊娠145日に4x10^6個追加移植した。生後ヒト細胞は同定できなかった。(8)胎仔の父サル骨髄から有核血球4x10^7個を回収し、妊娠156日のメス胎仔に移植、新生仔では父サル由来SRY遺伝子は検出されなかった。【考察】本研究の結果、移植細胞の定着は得られず、また治療遺伝子導入についても不成功であった。レシピエント骨髄中に移植細胞の居場所(niche)が確保されなかったことが一因と考察され、母獣または胎仔に何らかの前処置が必要と考えた。本研究では国立感染症研究所、筑波医学実験用霊長類センターで飼育されているカニクイサルを用いた。本サルの平均妊娠期間は163日である。第1にサル胎仔の大きさの測定を超音波断層装置により施行した。胎仔心拍は妊娠30日頃に同定可能となり、妊娠40日頃には頭殿長20mmと、ベクターや細胞の腹腔内投与可能なサイズに発育した。胎仔血管内(心腔内)への投与が技術的に可能と思われるのは妊娠100日頃であった。第2にサル胎仔への細胞注入を試みた。全身麻酔を施したサルを仰臥位に固定し、リアルタイム断層映像下に注入操作をおこなった。(a)胎仔腹腔内投与:妊娠43日(n=2)、妊娠45日(n=1)のサル胎仔を用い、超音波ガイド下に細胞を腹腔内注入した。技術的に腹腔内注入は可能であり、被移植胎仔3匹すべてが生存し、正期産に至った。(b)胎仔臍帯静脈内投与:胎仔臍帯径は妊娠138日には4mm、妊娠158日には5mmであった。妊娠サル6匹(妊娠136日、141日、144日、146日、152日、157日)の胎仔臍帯静脈内に細胞を注入した。本手技により胎仔死亡に至った症例はなかった。第3に胎仔採血を試みた。胎仔期での解析目的に、胎仔より採血する手法であるが、安全に施行できる時期や採取量は不明である。その確認のため、妊娠各時期において様々な量の胎仔採血を試みた。その結果、妊娠125日での5ml、131日での7ml、妊娠144日での8mlの胎仔採血が可能であり、各例満期正常分娩となった。一方妊娠126日に10mlの胎仔採血を行ったサルは、その後胎仔が子宮内死亡に至ったことから、適正な採取量はせいぜい8ml程度までと推察した。この時期には胎仔採血不成功例はなかった。本研究により得られた基礎データに基づき、今後遺伝子導入細胞を用いた研究を遂行していく予定である。

(4)ヒト臍帯血CD34^+細胞にGFP遺伝子を導入し、1.6x10^6個を妊娠45日の胎仔腹腔内へ移植、妊娠126日に胎仔血を解析し、ヒト細胞は同定できなかった。本胎仔はその後子宮内死亡した。(5)妊娠114日のサル胎仔血を採取しリンパ球にGFP遺伝子を導入、2.7x10^7個を妊娠123日の同サル臍帯血管内に移植した。出生仔からGFPは検出されなかった。(6)妊娠131日のサル胎仔血を採取しリンパ球にGFP遺伝子を導入、1.0x10^5個を妊娠143日の同サル臍帯血中に移植した。(7)ヒト骨髄CD34^+細胞5x10^6個を妊娠125日、胎仔の臍帯血管に移植、同ヒト骨髄由来リンパ球にBCL-X遺伝子を導入後、これを同胎仔に妊娠135日に3x10^7個、妊娠145日に4x10^6個追加移植した。生後ヒト細胞は同定できなかった。(8)胎仔の父サル骨髄から有核血球4x10^7個を回収し、妊娠156日のメス胎仔に移植、新生仔では父サル由来SRY遺伝子は検出されなかった。【考察】本研究の結果、移植細胞の定着は得られず、また治療遺伝子導入についても不成功であった。レシピエント骨髄中に移植細胞の居場所(niche)が確保されなかったことが一因と考察され、母獣または胎仔に何らかの前処置が必要と考えた。
中国黄土高原地帯における砂漠化の防止に関する予備調査研究「(予備調査研究)」

砂漠化の問題は今や全地球的規模で取り組むべきものと認識されている.国内に砂漠が存在しないわが国での砂漠研究は専ら海外調査を通じて,比較的限定された技術段階の研究にとどまり,学術的な立場からする「砂漠化」への全体的対応に資するものは殆どないのが実情である.従って,わが国の研究者が全地球的な砂漠化現象の防止に今後積極的に寄与するには,早急に現地の人々と協力体制を築き,基礎的かつ総合的にこの問題の調査研究に取り組む必要がある.本研究は中国科学院研究者の協力のもとに中国・黄土高原において深刻化しつつある「砂漠化」過程の把握と植生の回復を中心的課題に取り上げ,当地の砂漠化防止を最終目標として研究するものである.〔本調査候補地の選定〕黄土高原東部の大行山脈,西部の固原県,西北部の銀川市を現地視察した. 3地域と比較した結果,黄土高原として最も典型的であり,かつ中国科学院西北水土保持研究所の現地試験地があって,調査研究に協力をえやすい固原県を昭和63年度の本調査の候補地として選定した.〔固原県の概況〕県は北緯34度に位置し,総面積3780km^2,黄土が厚く堆積した丘陵からなり,河川(降雨期のみ流水あり)による開析が進んで,複雑な地形を呈している.標高13003000m年平均気温47°Cと低い,年降水量は350500mmと少ないが,その60%が79月に集中豪雨的に降るため,年土壌流亡量は20007300t/km^2に達する.植物の生育期間は49月の半年間であり,無霜期間は130日前後と短い,農用地は総面積の90%を占め,内訳は草地42%,耕地37%,林地21%であるが,草地・林地とも植生は貧弱で,耕地は傾斜地の割合が高い.この地域は歴史上,古い時代には緑に覆われた遊牧地であったが,明代中葉以降,とくに清末から人口増と開墾が進み,自然植生の破壊が急速に激化して現在に至っている.〔調査研究の方向〕短期間の予備調査の結果ではあるが,凡そ次の方向が考えられる.1)地理学,気象学,土壌学的見地から,土壌侵食の起る機構を明らかにし,対応策を検討する.2)耕地化による草地の縮小と,過放牧の連続で草地は草種数,草量ともに極めて貧弱で,土壌侵食を受け易い.外来草種の導入,適正放牧頭数の厳守による植生の回復を検討する.3)傾斜地等の不適地の耕地化により,穀物収量は500kg/haと著しく低く,耕地の土壌侵食も激しい.不適地を草地に戻し,耕地は平坦な水利条件のよい所に縮小し,品種・栽培法・輪作体系・土壌肥沃度増進等,収量,増加の可能性を検討する.砂漠化の問題は今や全地球的規模で取り組むべきものと認識されている.国内に砂漠が存在しないわが国での砂漠研究は専ら海外調査を通じて,比較的限定された技術段階の研究にとどまり,学術的な立場からする「砂漠化」への全体的対応に資するものは殆どないのが実情である.従って,わが国の研究者が全地球的な砂漠化現象の防止に今後積極的に寄与するには,早急に現地の人々と協力体制を築き,基礎的かつ総合的にこの問題の調査研究に取り組む必要がある.本研究は中国科学院研究者の協力のもとに中国・黄土高原において深刻化しつつある「砂漠化」過程の把握と植生の回復を中心的課題に取り上げ,当地の砂漠化防止を最終目標として研究するものである.〔本調査候補地の選定〕黄土高原東部の大行山脈,西部の固原県,西北部の銀川市を現地視察した. 3地域と比較した結果,黄土高原として最も典型的であり,かつ中国科学院西北水土保持研究所の現地試験地があって,調査研究に協力をえやすい固原県を昭和63年度の本調査の候補地として選定した.〔固原県の概況〕県は北緯34度に位置し,総面積3780km^2,黄土が厚く堆積した丘陵からなり,河川(降雨期のみ流水あり)による開析が進んで,複雑な地形を呈している.標高13003000m年平均気温47°Cと低い,年降水量は350500mmと少ないが,その60%が79月に集中豪雨的に降るため,年土壌流亡量は20007300t/km^2に達する.植物の生育期間は49月の半年間であり,無霜期間は130日前後と短い,農用地は総面積の90%を占め,内訳は草地42%,耕地37%,林地21%であるが,草地・林地とも植生は貧弱で,耕地は傾斜地の割合が高い.この地域は歴史上,古い時代には緑に覆われた遊牧地であったが,明代中葉以降,とくに清末から人口増と開墾が進み,自然植生の破壊が急速に激化して現在に至っている.〔調査研究の方向〕短期間の予備調査の結果ではあるが,凡そ次の方向が考えられる.1)地理学,気象学,土壌学的見地から,土壌侵食の起る機構を明らかにし,対応策を検討する.

2)耕地化による草地の縮小と,過放牧の連続で草地は草種数,草量ともに極めて貧弱で,土壌侵食を受け易い.外来草種の導入,適正放牧頭数の厳守による植生の回復を検討する.3)傾斜地等の不適地の耕地化により,穀物収量は500kg/haと著しく低く,耕地の土壌侵食も激しい.不適地を草地に戻し,耕地は平坦な水利条件のよい所に縮小し,品種・栽培法・輪作体系・土壌肥沃度増進等,収量,増加の可能性を検討する.
新奇の色素体分裂機構の解明

胚乳における澱粉粒の大きさは、澱粉の精製効率や利用用途を規定する重要形質である。澱粉粒の大きさは植物種によって異なるが、その決定機構に関与する分子群は分かっていない。本研究では、澱粉粒が巨大化するイネssg4 (substandard starch grain 4)突然変異体の解析を進めており、マップベースクローニング法ならびに様々な解析を行ない、澱粉粒の大きさを制御する新規因子であるSSG4遺伝子の同定に成功した。ssg4ならびにssg6変異体は、胚乳のアミロプラストが野生型よりも著しく巨大化するイネの突然変異体であり、研究代表者が独自の方法で単離した新奇の突然変異体である。これまでに、SSG4遺伝子の同定とSSG6遺伝子の大まかな遺伝子座乗位置の確認に成功している。SSG4遺伝子は、機能未知のタンパク質をコードしており、他の植物種のホモログにおいても機能解析が例がない、全く新奇の遺伝子だった。当該年度では、1SSG4遺伝子の組織別発現解析2SSG4タンパク質の細胞内局在性解析3胚乳以外の組織におけるアミロプラストの形状の観察4マイクロアレイ解析によるssg4変異体で発現が変化している遺伝子の同定を進めた。5ssg6遺伝子のマッピングを進め、候補遺伝子を29個に限定できた。1に関しては、登熟初期の種子(3日目から7日目)、葉(第3葉と止め葉)、葯(花粉)、雌しべ、幼穂などからtotal RNAを抽出し、リアルタイムPCR法によりSSG4遺伝子の発現組織を同定することに成功した。特に登熟種子で高い発現を確認できた。2ではSSG4遺伝子の完全長cDNAの単離に成功し、GFP融合タンパク質を用いて細胞内の局在性を調べた。その結果、SSG4タンパク質はアミロプラストに局在することが分かった。3では、花粉や根冠に存在するアミロプラストの形状も、ssg4変異体では変化していることが分かった。4マイクロアレイ解析に関しては今年から開始した状態であり、条件検討や解析ソフトの立ち上げが完了した。ssg4変異体の解析に関しては学会発表を数回行っており、日本育種学会より優秀発表賞を授与された。本研究では、澱粉粒が巨大化するイネ突然変異体の解析を進めている。本年度は、澱粉粒の大きさを制御する新規因子であるSSG4遺伝子の同定と解析を行なった。澱粉粒が巨大化するssg4変異体を用いて、マップベーストクローニングを行なった結果、ssg4変異を第一染色体短腕62kbの領域に限定した。ssg4変異体でこの領域を調べたところ、Os01g0179400遺伝子に塩基置換を発見することができた。相補性テストの結果もOs01g0179400遺伝子がSSG4遺伝子であることを支持した。SSG4遺伝子はC末端にDUF(Domain of unknown function) 490を持つ機能未知のタンパク質をコードしていた。DUF490配列は細菌から植物まで保存されており、ssg4変異はDUF490内で保存されている部位にアミノ酸置換を引き起こす変異であった。発現解析の結果、SSG4遺伝子は多くの組織で発現していたが、受粉後5-7日目の登熟種子において強く発現することが分かった。また、GFP融合タンパク質の解析から、SSG4タンパク質は澱粉粒を合成、蓄積するオルガネラであるアミロプラストに局在することが分かった。また、GC-MS解析の結果では、ssg4変異体の胚乳ではsucroseとglucoseが増加していることを発見した。今後、食味試験や工業的な視点から澱粉粒の特性評価を行ない、ssg4変異体の応用可能性について検討していく予定である。色素体は、約20億年前のシアノバクテリアの共生に由来する植物オルガネラであり、組織や器官に応じて様々なタイプに分化して独自の役割を担う。宿主である植物細胞が色素体の大きさと数を制御することは、共生関係を成立させるために必須であり、光合成を担う色素体である葉緑体を中心に分裂制御機構に関して多くの研究が進められている。アミロプラストは色素体の分化型の1つで、貯蔵器官において澱粉を集積する役割を担う。アミロプラストの分裂制御機構は、他の色素体(葉緑体)のものとは異なることが予想されているが、その詳細は不明である。本研究ではこれまで全く未知であった「アミロプラストの分裂制御機構」の解明を目指している。本年度は、研究代表者が独自に単離したアミロプラストが巨大化するイネ

新奇突然変異体、"ssg4変異体"と"ssg6変異体"を研究対象とし、アミロプラストの分裂制御機構に関して新知見を得た。具体的にはまず、ssg4変異体の原因遺伝子の単離とそのコンプリメンテーション実験に成功した。その結果をふまえて、SSG4遺伝子の機能解析実験(発現解析と細胞内局在解析)を開始した。さらに、ssg4変異体の細胞レベルの詳細な顕微鏡観察ならびに圃場における個体レベルの農業形質(出穂期、稈長、穂長、穂数、一穂粒数、不稔粒数、全穂重、100粒重)の評価を行った。顕微鏡観察に関しては、登熟胚乳におけるアミロプラストの発達過程を明瞭に経時観察することに成功し、ssg4変異の作用時期を明らかにした。農業形質の評価に関しては、ssg4変異体に出穂期と稈長に有意な表現型を見出す事ができた。ssg6変異体に関しては、ラフマッピングにより染色体の座乗位置の特定を行った。SSG4遺伝子は単離当初は、機能も特徴も全く不明な遺伝子であった。本研究の現在までの解析により、SSG4の"時空間的な発現部位の同定"や"細胞内局在性"を明らかにする事ができている。しかしながら、SSG4タンパク質の機能は、新奇の色素体(アミロプラスト)分裂制御機構に関与している可能性が高いが、その詳細は未だ不明である。本研究では現在までに、SSG4が影響を及ぼす遺伝子群を網羅的に同定できるシステム(マイクロアレイ解析)の構築を開始しており、今後の解明が期待できる。ssg4変異体の解析に関する研究成果は、予定通り学会発表を行っており、原著論文も執筆中である。ssg6変異体に関しては、候補遺伝子の同定までに至っていない。この点は、反省すべき点である。当該研究所の圃場におけるイネの育成は一年一作であり、本年度は夏場の天候にも恵まれ、圃場実験に関しては予定した計画を概ね実施することが出来た。また、冬場には保存しておいた乾燥種子の胚乳に関する実験を集中的に行うことにより、効率的に実験計画を進めることが出来た。実験内容に関しては、ssg4変異体の原因遺伝子の同定に成功したことは大きな前進である。SSG4遺伝子の塩基配列特異性やWeb情報の間違いによりSSG4遺伝子のクローニングには大変苦労したが、本年度内に達成する事ができた。SSG4遺伝子はどの植物種においても機能未知のタンパク質をコードしており、新奇の色素体分裂制御機構に関与している可能性が高いと考えている。発現解析ならびに細胞内局在解析のための予備実験は済んでおり、来夏における本実験の効率的な実施の準備は完了している。ssg4変異体の表現型解析に関しては、登熟胚乳の固定条件を検討し、アミロプラストの明瞭観察のための条件の最適化を行った。登熟胚乳のアミロプラストの発達過程を捉えた美しい写真を撮影できたと自負している。また細胞レベルの表現型をもとに単離したssg4変異体に個体レベルの農業形質に表現型が現れる事は予想外であったが、興味深い結果だと考えている。SSG4遺伝子の胚乳以外の組織における機能を考える際に、指針となるからである。ssg6変異体に関しては、ラフマッピングまでしか行えず、ファインマッピングは来年度以降に持ち越しになってしまった。この点は反省すべき点である。
R-Spondin 3による心停止後ドナー肺の虚血再灌流障害の抑制と機序解明

心停止ドナー(DCD)からの肺移植後の虚血再灌流障害(ischemia reperfusion injury:IRI)におけるmolecular mechanismは不明な部分が多く、臨床応用のためにもその解明が必要である。我々の研究成果では、DCDからの肺移植後のIRIは生体・脳死肺移植後のIRIとは異なった病態であることが示唆された。本研究では、DCDからの肺移植後のIRIのメカニズム、主に血管内皮細胞の働きを解明し、さらにDCDからの肺移植後のIRIの抑制・予防することを目的とする。分泌タンパク質R-spondinファミリーはWntシグナル伝達経路を活性化し、発生過程の多くの現象や疾患の発症に関与していることが知られており、多くの新たな発見が報告されている。R-spondinファミリーの一つ、R-spondin3は血管の発生に大きく関与し、R-spondin3は血管内皮細胞間の接着を強固にすることによって、小腸の虚血再還流障害を抑制するという報告があるまた、血管内皮細胞間の接着を強固にすることはin vitroでも証明されている。R-spondin3を投与することによって、血管内皮細胞の破綻を抑制し、IRIの抑制に寄与すると予想される。R-spondin3の効果を、マウス虚血再灌流障害モデルを用い、検証した。Sham群、Control群、術前30分前にR-spondin3を投与したR-spo群の3群を作製した。30分の虚血後、再灌流し、2時間後に摘出肺の評価を行った。Control群では、TNF-α、IL-1βが高発現していたが、R-spo群では抑制されていた。病理組織学的には、Control群と比較して、R-spo群では炎症細胞浸潤の抑制がみられた。Tunnel染色では、Control群と比較して、R-spo群でアポトーシスが抑制されるという結果であったR-spondin3の効果を、マウス虚血再灌流障害モデルを用い、検証した。Tunnel染色では、Control群と比較して、R-spo群でアポトーシスが抑制されるという結果であった。研究はおおむね順調に進展している。グラフト内の炎症性サイトカイン、ケモカイン、MAPKsなどのmoleculeをPCR法、ウェスタンブロッティング法で解析を進める。病理組織学的には、肺障害・血管内皮細胞障害(H&E、免疫染色、蛍光顕微鏡)や細胞死(Tunnel染色)の評価をさらに行っていく。分泌タンパク質R-spondinファミリーはWntシグナル伝達経路を活性化し、発生過程の多くの現象や疾患の発症に関与していることが知られており、近年大変注目され、多くの新たな発見が報告されている。R-spondinファミリーの一つ、R-spondin3は血管の発生に大きく関与する。また、R-spondin3は血管内皮細胞間の接着を強固にすることにより小腸の虚血再還流障害を抑制すると報告された。血管内皮細胞間の接着を強固にすることはin vitroでも証明されており、R-spondin3を投与することにより、血管内皮細胞の破綻を抑制し、IRIの抑制に寄与すると予想される。マウス虚血再灌流障害モデルを用いて、R-spondin3の効果を検証した。肺門部を30分クランプし、再灌流から2時間後に摘出肺の評価を行った。Control群で高発現したTNF-α、IL-1βはR-spo群で抑制されていた。また病理組織学的には、Control群と比較すると、R-spo群では炎症細胞の浸潤が抑制されていた。Tunnel染色でもR-spondin3の投与によってアポトーシスが抑制されるという結果であった。研究は順調に進展している。

心停止ドナー(DCD)からの肺移植後の虚血再灌流障害(ischemia reperfusion injury:IRI)におけるmolecular mechanismは不明な部分が多く、臨床応用のためにもその解明が必要である。我々の研究成果では、DCDからの肺移植後のIRIは生体・脳死肺移植後のIRIとは異なった病態であることが示唆された。本研究では、DCDからの肺移植後のIRIのメカニズム、主に血管内皮細胞の働きを解明し、さらにDCDからの肺移植後のIRIの抑制・予防することを目的とする。分泌タンパク質R-spondinファミリーはWntシグナル伝達経路を活性化し、発生過程の多くの現象や疾患の発症に関与していることが知られており、多くの新たな発見が報告されている。R-spondinファミリーの一つ、R-spondin3は血管の発生に大きく関与し、R-spondin3は血管内皮細胞間の接着を強固にすることによって、小腸の虚血再還流障害を抑制するという報告があるまた、血管内皮細胞間の接着を強固にすることはin vitroでも証明されている。R-spondin3を投与することによって、血管内皮細胞の破綻を抑制し、IRIの抑制に寄与すると予想される。R-spondin3の効果を、マウス虚血再灌流障害モデルを用い、検証した。Sham群、Control群、術前30分前にR-spondin3を投与したR-spo群の3群を作製した。30分の虚血後、再灌流し、2時間後に摘出肺の評価を行った。Control群では、TNF-α、IL-1βが高発現していたが、R-spo群では抑制されていた。病理組織学的には、Control群と比較して、R-spo群では炎症細胞浸潤の抑制がみられた。Tunnel染色では、Control群と比較して、R-spo群でアポトーシスが抑制されるという結果であったR-spondin3の効果を、マウス虚血再灌流障害モデルを用い、検証した。Tunnel染色では、Control群と比較して、R-spo群でアポトーシスが抑制されるという結果であった。研究はおおむね順調に進展している。グラフト内の炎症性サイトカイン、ケモカイン、MAPKsなどのmoleculeをPCR法、ウェスタンブロッティング法で解析する。病理組織学的にも肺障害・血管内皮細胞障害(H&E、免疫染色、蛍光顕微鏡)や細胞死(Tunnel染色)の評価をさらに行っていく。グラフト内の炎症性サイトカイン、ケモカイン、MAPKsなどのmoleculeをPCR法、ウェスタンブロッティング法で解析を進める。病理組織学的には、肺障害・血管内皮細胞障害(H&E、免疫染色、蛍光顕微鏡)や細胞死(Tunnel染色)の評価をさらに行っていく。
サイバースペースにおける刑事手続－通信記録開示手続を中心に－

サイバースペースにおける犯罪の増加に対応するために必要な捜査手法や制度について、経済学・心理学・哲学等の知見を基に、学際的な研究手法を用いて研究し、従来よりも簡易かつ確実に情報を収集し、かつ正確に処理するための手続とそれを可能にする組織・制度を法的に整備することと、このような情報収集および情報処理が、適切かつ有効に行われるよう検証・監督するための組織・制度を法的に整備することの両方が必要不可欠であると結論づけた。本研究の特色は、通信の秘密と安全とを二者択一的に捉えるのではなく、両者を高い次元で共に実現するための実践的な法政策の基礎を、学際的手法に基づく幅広い検討を通じて提供する点にある。本研究では、サイバースペース犯罪に対応するための最適な捜査手法と、それを実施するための最適な制度設計とについて、刑事法の分野において従前十分に活用されてきたとは言い難かった、法と経済学的アプローチを用いて探究してきた。前年度においては、アメリカ合衆国の法と経済学アプローチが、近時心理学や社会学、さらには哲学の成果をも取り込む非常に内容豊かなものとなっていることを明らかにし、これらの成果を制度設計論に取り込む必要があると結論づけた。そこで本年度は前年度に引続き、刑事法分野での法と経済学的アプローチに則った文献の渉猟・精読を行うとともに、さらにその前提となっている文献、とりわけ認知科学、新制度派経済学、行動ゲーム理論、行動心理学、哲学等の文献の渉猟・精読を行うとともに、それらの知見を統合した新たな制度設計論の構築に努めた。その結果、従来から強調されてきたエージェンシーコストの低下のみではなく、制度を構成する主体の認知資産の活用という観点から制度設計を捉え、これを応用することが適切であるという結論に至った。端的にいえば、情報化社会における新たな犯罪に対応するためには、情報の共有・一元化に基づく迅速かつ正確な情報処理を行うための制度・組織と、その活動をフィードバックし、かつ監督・検証するための制度・組織とを同時に法的に整備しなければならないのである。この観点から見た場合、従来の刑事訴訟法学は、後者の問題に特定の方法論(権利アプローチ)で臨むことに固執し、視野狭窄に陥っていたと思われる。この新しい視点からのアプローチは、近時上に言及した学際領域において本格化した新しい潮流に基づくものであり、刑事法分野のみならず、法学分野全体を通しても未だ本格的に紹介されていない、斬新かつ有望なアプローチを発見し、応用するための道筋をつけることが出来た点に、本研究の重要性があると考える。本年度の研究は主として次の三点に集約される。第一に、研究計画に従い、アメリカ合衆国における関係文献の収集・精読を行った。その結果、合衆国においては、刑事手続法・刑事司法制度の存在意義について、その運営・形成に携わる各種官僚組織のエージェントコストの低減に見出す見解が有力化しており、プライバシー法制についてもかかる観点から分析する見解が注目されていることが判明した。法と経済学を刑事手続法解釈や、刑事司法制度の分析に用いる見解は従前から存在することは認知しており、自身の論文でも用いていたところではあるが、その動きが本格化していることが判明したのである。そこで第二に、今回の研究目的が制度の提言であり、その精緻化に当たってこれらの知見が有用であることは広く知られているところであるから、当初の研究計画を一部変更し、ドイツ法ではなく、法と経済学を刑事法に応用するための文献の収集・精読を行った。その結果、現在法と経済学で用いられている人間像に大きな変動が生じており、これらを理解するためには最新の心理学的知見を取り込んだ、法と心理学の業績についても理解する必要があること、及び経済学自体が一種の思想的背景を備えていることが判明した。そのため、第三に法と心理学についての文献を収集・精読し、また現代経済学の思想的源泉となっている18世紀のフランス政治思想の状況について把握するため、関連文献の収集・精読を行った。その結果、古典的経済学・近代刑事法における人間モデルを特徴付ける合理的選択論が、18世紀フランスの自然権思想に淵源を持つ政治思想であることが判明し、心理学的成果との齟齬から修正が迫られていることが判明した。以上の成果は、研究目的を達成する上で非常に重要な意義を持つが、それ以上に従前の刑事法の常識を疑うべき事態が生じていることを発見した点で画期的意義を持つと思われる。当初計画していたのは、比較法的手法によるアメリカ及びドイツの制度の分析とわが国における法制度を提言するための、文献の収集・精読であった。しかし、アメリカの制度を分析する際に収集した文献を精読するうち、我が国の刑事法学においてこれまでほとんど行われていなかった、法と経済学的アプローチを行っている研究が近時増加し、その水準も著しく向上していることが判明した。