hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
体細胞核移植による効率的なクローンミニブタ作出システムの確立

我々はこれまでに、超音波の照射による新しい卵子活性化法を開発し、同法を体細胞核移植に応用してクローンミニブタを作出することに成功した。しかし、得られたミニブタは生後41日で死亡したので、その正常性には疑問が残った。そこで本年度は、再度クローンミニブタの作出を試みるとともに、作出効率に影響を及ぼすと予想されるレシピエント卵子の除核法を最適化した。新たに3匹のクラウン系ミニブタ胎子から線維芽細胞を採取し、除核卵子に移植してクローン胚を作製した。これらを超音波活性化後に3頭のクラウン系ミニブタ仮親に移植した結果、1頭の産子が得られた。マイクロサテライトDNAマーカーを用いて解析した結果、この産子が核移植に用いた細胞の1つと同一の遺伝子型を持つクローン動物であることが確認された。現在このクローンミニブタは生後5ヶ月であるが、順調に生育しており、正常性に問題はないと考えられる。無処理のブタ卵子核を顕微鏡下で観察することは困難であるので、除核においてはその位置を把握する方法の開発が重要となる。従来は、核を染色した後に紫外線を照射してその位置を確認する方法が広く用いられてきたが、最近になって、卵子をディメコルシンおよびスクロースで処理すると核を含む細胞質の小さな突出が形成され、それを除去することによって容易に除核し得ることが報告された。そこで、ブタ卵子の核突出に及ぼすこれらの成分の影響について検討した結果、0.2μg/mlのディメコルシンで30分間処理することにより、効率的に核突出を誘起し得ることが示された。また、スクロースはブタ卵子の核突出に影響を及ぼさないことが明らかになった。鹿児島大学において樹立・維持されているクラウン系ミニブタにおける効率的な体細胞クローン動物作出システムの確立を目的として種々の実験を行い、以下の知見を得た。1、レシピエント卵における卵丘細胞の除去から作製したクローン胚の活性化までにかかる時間は、クローン胚の体外発生に影響しないことが示された。また、レシピエント卵の除核からドナー細胞の融合までの時間も、クローン胚の体外発生に影響しないことが示された。2、腎臓あるいは皮膚に由来する培養細胞をドナーとしてクローン胚を作製した結果、いずれの細胞を使用した場合にも高率(23.5-24.8%)に胚盤胞にまで体外発生することが示された。腎臓由来細胞をドナーとして作製された624個のクローン胚を4頭の仮親に移植した結果、胎子は得られなかった。一方、皮膚由来細胞をドナーとして作製された868個のクローン胚を5頭の仮親に移植した結果、1頭の妊娠が115日目まで継続し、帝王切開によって妊娠末期の胎子が1頭得られた。この胎子は帝王切開時に死亡していたが、形態学的な異常は見られなかった。3、従来、ブタ体細胞クローン胚の活性化には直流電気パルスを印加する電気活性化法が用いられてきたが、超音波を照射することによっても同様の活性化を誘起し得ることを明らかにした。超音波照射によって活性化したクローン胚の胚盤胞形成率は電気活性化法による値と差がなかったが、得られた胚盤胞の細胞数は有意に増加した。この結果から、超音波照射法により活性化されたクローン胚の質は電気活性化法を用いた場合よりも高いことが示唆され、これらの胚を仮親に移植することにより、クローン動物の作出率を改善し得ると考えられた。そこで、皮膚由来細胞をドナーとして作製された349個のクローン胚を超音波照射法により活性化した後に2頭の仮親に移植した結果、2頭とも妊娠が成立したので、現在経過を観察中である。体細胞クローン動物の作出率に影響を及ぼす要因の一つとして、活性化処理の方法があげられる。これまでブタにおいては直流パルスを印加する電気活性化法が主流であったが、我々は前年度の研究において超音波の照射による新しい方法を開発した。本年度は、ミニブタ体細胞核移植における超音波活性化法を最適化するために、超音波のduty比が活性化後の体外発生に及ぼす影響について検討した。さらに、最適化された方法を用いて活性化されたミニブタ体細胞クローン胚を仮親に移植して産子への発生能について調べた。ブタ体外成熟卵子の活性化においては、duty比20-30%の超音波が適していた。一方、クラウン系ミニブタ体細胞クローン胚の活性化においては、duty比10%の超音波が適していた。クローン胚にduty比10%の超音波を照射あるいは直流パルスを印加した結果、体外発生状況に差はみられなかった。duty比10%の超音波により活性化したクローン胚を2頭の仮親に移植した結果、そのうち1頭から2頭の産子が得られた。マイクロサテライトDNAマーカーを用いて解析した結果、これらの産子が核移植に用いた体細胞と同一の遺伝子型を持つクローン動物であることが確認された。以上の結果から、卵子およびクローン胚のいずれにおいても、超音波のduty比は活性化後の発生にとって重要な要因であることが示された。また卵子とクローン胚では活性化に最適なduty比が異なることが示唆された。さらに、超音波により活性化されたミニブタ体細胞クローン胚は、産子にまで発生し得ることが証明された。

しかし、得られたミニブタは生後41日で死亡したので、その正常性には疑問が残った。そこで本年度は、再度クローンミニブタの作出を試みるとともに、作出効率に影響を及ぼすと予想されるレシピエント卵子の除核法を最適化した。新たに3匹のクラウン系ミニブタ胎子から線維芽細胞を採取し、除核卵子に移植してクローン胚を作製した。これらを超音波活性化後に3頭のクラウン系ミニブタ仮親に移植した結果、1頭の産子が得られた。マイクロサテライトDNAマーカーを用いて解析した結果、この産子が核移植に用いた細胞の1つと同一の遺伝子型を持つクローン動物であることが確認された。現在このクローンミニブタは生後5ヶ月であるが、順調に生育しており、正常性に問題はないと考えられる。無処理のブタ卵子核を顕微鏡下で観察することは困難であるので、除核においてはその位置を把握する方法の開発が重要となる。従来は、核を染色した後に紫外線を照射してその位置を確認する方法が広く用いられてきたが、最近になって、卵子をディメコルシンおよびスクロースで処理すると核を含む細胞質の小さな突出が形成され、それを除去することによって容易に除核し得ることが報告された。そこで、ブタ卵子の核突出に及ぼすこれらの成分の影響について検討した結果、0.2μg/mlのディメコルシンで30分間処理することにより、効率的に核突出を誘起し得ることが示された。また、スクロースはブタ卵子の核突出に影響を及ぼさないことが明らかになった。
トーリックFano多様体上のEinstein-Kahler計量

Kahler多様体上にいつEinstei-Kahler計量が存在するかという問題がCalabiにより提出された.この問題は第一Chern類が零又は負の時AubinとYauにより解かれた.一方,第一Chern類が正の複素多様体はFano多様体と呼ばれるが,この時は存在することに対する障害として松島障害と二木不変量の二つが知られていて,存在に対してはTian・Sin・Nadelなどによる部分的な解答しか知られていない.現在のところこの問題を解くには群の作用による対称性を利用する方法が非常に重要となっている.例えば,等質空間のときには必ず存在することが知られている.そこで我々はその次に対称性の高い概等質空間を考えることにする.なかでも次元分の代数的トーラスが作用しているトーリックFano多様体と呼ばれる概等質空間上でこの問題を考えることにする.トーリックFano多様体を考えることの利点は,トーリックFano多様体には凸多面体が一対一に対応していてその凸多面体を調べることによりもとのトーリックFano多様体の幾何学的性質が解るということにある.例えば,松島障害は対応する凸多面体が対称であるかということに対応し,二木不変量は対応する凸多面体の重心に対応している.また,Einstein-Kahler計量の一般化である端的Kahler計量の存在に対する障害としてはCalabiによる正則自己同型群の構造定理があるが,トーリックFano多様体の正則自己同型群も対応する凸多面体により調べることができる.本年度は商特異点を許す多様体である軌道体についてもこれらの計量の存在問題を考えた.その結果,反標準因子が豊富なCartier因子になる二次元トーリック軌道体はCalabaiの構造定理を満すことが解り,三次元ま非特異なトーリックFano多様体もまたCalabiの構造定理を満すことが解った.Kahler多様体上にいつEinstei-Kahler計量が存在するかという問題がCalabiにより提出された.この問題は第一Chern類が零又は負の時AubinとYauにより解かれた.一方,第一Chern類が正の複素多様体はFano多様体と呼ばれるが,この時は存在することに対する障害として松島障害と二木不変量の二つが知られていて,存在に対してはTian・Sin・Nadelなどによる部分的な解答しか知られていない.現在のところこの問題を解くには群の作用による対称性を利用する方法が非常に重要となっている.例えば,等質空間のときには必ず存在することが知られている.そこで我々はその次に対称性の高い概等質空間を考えることにする.なかでも次元分の代数的トーラスが作用しているトーリックFano多様体と呼ばれる概等質空間上でこの問題を考えることにする.トーリックFano多様体を考えることの利点は,トーリックFano多様体には凸多面体が一対一に対応していてその凸多面体を調べることによりもとのトーリックFano多様体の幾何学的性質が解るということにある.例えば,松島障害は対応する凸多面体が対称であるかということに対応し,二木不変量は対応する凸多面体の重心に対応している.また,Einstein-Kahler計量の一般化である端的Kahler計量の存在に対する障害としてはCalabiによる正則自己同型群の構造定理があるが,トーリックFano多様体の正則自己同型群も対応する凸多面体により調べることができる.本年度は商特異点を許す多様体である軌道体についてもこれらの計量の存在問題を考えた.その結果,反標準因子が豊富なCartier因子になる二次元トーリック軌道体はCalabaiの構造定理を満すことが解り,三次元ま非特異なトーリックFano多様体もまたCalabiの構造定理を満すことが解った.
走査電子顕微鏡と原子間力顕微鏡によるコラーゲン細線維の分子解剖学的研究

走査電子顕微鏡と原子間力顕微鏡を用いて,コラーゲン細線維の微細構造解析を行った.材料にはマウスおよびラットの種々の部位の結合組織を用いた.走査電顕でコラーゲン細線維を観察する場合は,導電染色と薄い金属コーティングが欠かせなかった.一方,原子間力顕微鏡による観察では,特別な処理をすることなく乾燥させた標本を,コーティングもせずに直接観察することができた.走査電子顕微鏡で見たコラーゲン細線維は60-65nm周期(D周期)の浅い凹凸をもっていた.この凹凸は原子間力顕微鏡でも容易に観察することができた.とくに,原子間力顕微鏡像では,得られた像をもとに,コンピューター上で溝の高さや幅を正確に測定することができる利点をもっていた.これらの結果によると,どちらの像においても尾腱のコラーゲン細線維の周期は長く,皮下組織などの細線維の周期は短い傾向にあった.また,D周期に伴う線維表面の凹凸の形態も,線維によって異なっているように見えた.尿素・希酢酸でコラーゲン細線維を処理をして走査電子顕微鏡で観察したところ,腱および皮下組織のコラーゲン細線維が部分的にほぐれて,線維内のフィラメント構造がかなりはっきりと観察できるようになった.このフィラメント構造は,細線維内を右巻きにねじれて配列する傾向にあり,そのねじれの程度は,腱よりも皮下のコラーゲン細線維において強かった.以上の結果から,コラーゲン細細胞を構成するコラーゲン分子は,細線維内で右巻きにねじれて配列しており,その配列様式は腱と皮下のものでは微妙に異なり,それに応じてD周期も多少異なることが示唆された.走査電子顕微鏡と原子間力顕微鏡を用いて,コラーゲン細線維の微細構造解析を行った.材料にはマウスおよびラットの種々の部位の結合組織を用いた.走査電顕でコラーゲン細線維を観察する場合は,導電染色と薄い金属コーティングが欠かせなかった.一方,原子間力顕微鏡による観察では,特別な処理をすることなく乾燥させた標本を,コーティングもせずに直接観察することができた.走査電子顕微鏡で見たコラーゲン細線維は60-65nm周期(D周期)の浅い凹凸をもっていた.この凹凸は原子間力顕微鏡でも容易に観察することができた.とくに,原子間力顕微鏡像では,得られた像をもとに,コンピューター上で溝の高さや幅を正確に測定することができる利点をもっていた.これらの結果によると,どちらの像においても尾腱のコラーゲン細線維の周期は長く,皮下組織などの細線維の周期は短い傾向にあった.また,D周期に伴う線維表面の凹凸の形態も,線維によって異なっているように見えた.尿素・希酢酸でコラーゲン細線維を処理をして走査電子顕微鏡で観察したところ,腱および皮下組織のコラーゲン細線維が部分的にほぐれて,線維内のフィラメント構造がかなりはっきりと観察できるようになった.このフィラメント構造は,細線維内を右巻きにねじれて配列する傾向にあり,そのねじれの程度は,腱よりも皮下のコラーゲン細線維において強かった.以上の結果から,コラーゲン細細胞を構成するコラーゲン分子は,細線維内で右巻きにねじれて配列しており,その配列様式は腱と皮下のものでは微妙に異なり,それに応じてD周期も多少異なることが示唆された.
行為の記述・推測・判断における文化的要因:国際比較と国内変動の総合的研究

この研究期間の研究目的は、過去数年間にわたり蓄積した「近い過去における努力の記録」「10年後の或日の自分の生活についての予想記述」「人物の物語作成における事項の重要性の判断」「母親および幼稚園教師による読み聞かせおよび応答のスタイル」についての日本、米国、中国の資料の補完と総合的分析であった。この目的のため次のような諸研究活動をおこなった。1.米国における補充調査の実施。米国の資料は約10年前の古いものをふくむため、ワシントンDCのジョージタウン大学とオハイオ州ケニヨンカレッジの協力を得て、最近の日本及び中国での方法に従って補足資料を収集し、比較可能なかたちにした。2.中国及び米国の研究者を交えてワークショップを開催し、データの分析や解釈に研究者の文化による偏りが生じないようにした。特に2006年7月にはメルボルンでの国際行動発達学会において本研究についてのポスターシンポジウムを開催、米国、中国の研究者を討論者に招いて検討した。3.以上を通じて、人生記述のスクリプトには文化圏による差異があること、及びその差異は集団主義対個人主義と言うようなステレオタイプ化には必ずしも従わない事、を認めた。理論的及び方法論的検討。文化圏間の差異を文化要素の分布状態の差異によるものとして、文化ステレオタイプを想定しない文化圏間行動比較を意味付け、さらに2文化圏間よりも3文化圏問の比較が生産的である事を確認した。又、物語りデータの質的分析の可能性と実用性を検討した。研究経過本研究では主に国内変動の調査チームと国際比較の調査チームに分かれて,進めることとなった.国内変動調査チームは「母子のやりとり」を手がかりに調査をすすめ,これまでの研究成果を2004年6月にオスロで行なわれた国際心理学会で発表した.国際比較の調査チームは,「公正分配」「10年後の記述」「努力したことの記述」「人物の記述」の4課題を手がかりに,日中米比較研究を目的とした.まず,先行して行なってきた日中比較については,調査データの分析を行い,2006年2月に中国側の研究協力者を交えて,分析の方法と結果の解釈についての討論を行なった.以上のことを踏まえて,2006年3月に行なわれた発達心理学会においてシンポジウム「行為・出来事の記述における文化的バイアスの形成」を開催し,結果の中間発表と議論を行なった.また,3カ国比較を行なうため,アメリカにおいて日中と同じ調査を行なう必要があったため,2005年10月にアメリカを訪問し,調査についての協力依頼をとりつけ打ち合わせを行なった.その後12月から1月にかけてアメリカの大学生を対象とし,質問紙調査を実施した.現在調査の結果の分析を行なっている.研究経過この研究期間の研究目的は、過去数年間にわたり蓄積した「近い過去における努力の記録」「10年後の或日の自分の生活についての予想記述」「人物の物語作成における事項の重要性の判断」「母親および幼稚園教師による読み聞かせおよび応答のスタイル」についての日本、米国、中国の資料の補完と総合的分析であった。文化圏問の差異を文化要素の分布状態の差異によるものとして、文化ステレオタイプを想定しない文化圏問行動比較を意味付け、さらに2文化圏間よりも3文化圏間の比較が生産的である事を確認した。
人為撹乱影響下におけるアフリカ大型類人猿の生態学的研究

チンパンジーが生息しているウガンダ国カリンズ森林で、森林を構成する主要な樹種について、植物の機能形質である材密度、葉面積葉重比、葉の硬さ、窒素含有量を計測した。またチンパンジーが採食する植物の葉については、新葉と旧葉を採取して、葉面積葉重比、葉の硬さ、窒素含有量を比較した。その結果、チンパンジーが好んで食べる樹種の葉は、葉の硬さが柔らかく、窒素含有量を多い傾向があり、それは材密度が小さく、葉面積/葉重比が大きい、すなわち光環境の好適な場所で成長量が大きいという生態学的な性質と関連が大きいことがわかった。このことは、チンパンジーなどの類人猿は原生林の成熟した林分よりも、むしろ人為などで撹乱を受けた二次林などで採食する時間が長いという観察と一致した。より樹上生活に適応していると考えられるオランウータンについても、マレーシア・サバ州のキナバタンガンの森林でも、同様の植物サンプリングをおこなった。まだ窒素含有量などの計測は完結していないが、葉の硬さが柔らかい、材密度が小さい、葉面積/葉重比が大きいなど、アフリカのデータと類似する傾向があることがわかった。オランウータンの場合には、明るい環境である川辺林で採食が多くみられる一方、成熟林分内では不定期に展開する新葉をもとめて、森林内をかなり広い範囲で移動している可能性がある。今後は、キナバタンガンの森林をサンプルを国内に輸入し、さらに高度は化学分析をおこなって、厳密な比較による議論をおこなう予定である。マレーシア・サバ州で生物多様性条約に関連して、植物標本の輸出に関する手続きが変化したことにより、予定どおりにサバ州から輸出し、日本に輸入することができなかった。現在、マレーシア・サバ州で生物多様性条約に関連して、新しい手続きにしたがって植物標本の輸出許可を再申請しており、7月までには輸出許可が得られる見込みである。輸入したサンプルは速やかに機能形質を計測し、アフリカのチンパンジーの生息する森林と比較可能なデータセットとしてまとめ、解析する予定である。ガボン共和国のニシゴリラ、コンゴ民主共和国のボノボおよびウガンダ共和国のチンパンジーで、遊動域と食物選択について観察を行った。ニシゴリラでは対象集団は2016年10月から11月のあいだに核オスが消失した。しかし、これまで他地域のニシゴリラで報告されてきたような集団の崩壊は起きず、数頭のブラックバックが集団から離脱しヒトリゴリラになった以外は、集団の凝集性を維持し、最年長のブラックバックが核オスのように振る舞うことが確認された。シルバーバックを欠く集団構造は3月時点で比較的安定していた。今後もこの状態が続けば、ニシゴリラでは初めて、集団で生まれたオスによる集団の継承の事例となる。その間2頭のメスが未成熟のコドモとともに隣接集団に移籍した。移籍したメス2頭はいずれも離乳前のアカンボウを連れていたが、移籍後アカンボウは確認されていない。移籍の前後に子殺しにあった可能性が考えられる。また、メス2頭のうち1頭は3月にはいずれの集団でも確認できなかった。再移籍をした可能性がある。いっぽうで、コンゴ民主共和国のボノボのE1集団で継続していた順位変動について観察した。これまでの観察例から、オスの順位変動とメス間のグルーピングが密接に関係しつつ変化することがわかった。ボノボに特異的な諸特徴が、チンパンジーと分かれた後どのように進化したかということについての総合的研究を行った結果、ボノボがコンゴ川左岸に入って種分化した時期に起こった遺伝子浮動によるメスの発情のメカニズムに関す進化が、メスの社会的優位性、メス同士の集合性、オス間の交尾および繁殖をめぐる競合に影響をおよぼしていったという新たな仮説を提唱した。ガボン共和国のニシゴリラ、コンゴ民主共和国のボノボおよびウガンダ共和国のチンパンジーの3つのサイトで順調に調査が行われており、大型類人猿の行動観察と植生がともに集まりつつある。3カ国の政治情勢、カウンターパートとの関係もきわめて良好である。とくに観察しているニシゴリラでは、群れを率いていたシルバーバックが消失し(おそらく死亡、しかし死体の確認はできず)、今後大きな社会変動が予想される。そのための観察シフトも組んで、変化のプロセス(群れの構成、遊動域、食物選択など)をつぶさに追跡することが可能であると考えている。

まだ窒素含有量などの計測は完結していないが、葉の硬さが柔らかい、材密度が小さい、葉面積/葉重比が大きいなど、アフリカのデータと類似する傾向があることがわかった。オランウータンの場合には、明るい環境である川辺林で採食が多くみられる一方、成熟林分内では不定期に展開する新葉をもとめて、森林内をかなり広い範囲で移動している可能性がある。今後は、キナバタンガンの森林をサンプルを国内に輸入し、さらに高度は化学分析をおこなって、厳密な比較による議論をおこなう予定である。マレーシア・サバ州で生物多様性条約に関連して、植物標本の輸出に関する手続きが変化したことにより、予定どおりにサバ州から輸出し、日本に輸入することができなかった。現在の調査に加えて、植生の過去の変化をたどるために、入手できるできるだけ古い、しかも十分な解像度のある衛星写真を入手して、解析を進めたい。同時にとくに長期のデータのあるコンゴ民主共和国ワンバのボノボ、ウガンダ共和国カリンズのチンパンジーの過去の遊動域、食性、さらに社会構造の変化との関連づけを試みたい。現在、マレーシア・サバ州で生物多様性条約に関連して、新しい手続きにしたがって植物標本の輸出許可を再申請しており、7月までには輸出許可が得られる見込みである。輸入したサンプルは速やかに機能形質を計測し、アフリカのチンパンジーの生息する森林と比較可能なデータセットとしてまとめ、解析する予定である。
実体的利益制御と会計的利益制御の関係に関する実証的研究

本研究の目的は,実体的利益マネジメントと会計的利益マネジメントの関係を実証的に分析することである。本研究では,会計制度や法規制が2つの利益マネジメント行動に与えた影響についての実証研究を行っている。その結果,経営者は報酬契約や負債契約を動機とした目標利益達成のために,実体的利益マネジメントを利用しているということが発見された。また財務報告が持つべき特性を明らかにするために,アメリカ会計学会の財務報告委員会が作成した概念フレームワークの翻訳を行った。本研究は,経営者が結んだ会計数値に基づく報酬契約によって引き起こされる利益マネジメント行動に焦点を当て,取引自体を操作することで利益を調整する実体的利益マネジメントと,会計報告上の裁量を用いて利益を調整する会計的利益マネジメントが代替的な関係にあり,かつ実体的利益マネジメントが企業価値を減少させるものであるため,利益マネジメントのインセンティブが強い企業経営者であるほど,会計的利益マネジメントよりも実体的利益マネジメントを主に利用することで目標利益を達成する行動に出る,という分析を行うことを目的としている。日経NEEDS Financial Questより収集したデータを用いて経験的分析を行い,上記の仮説を検証した結果,報酬契約により誘発された目標利益達成のインセンティブが強い企業経営者ほど,利益調整手段として,企業価値を損ねる実体的利益マネジメントを主に用いていることが分かった。この証拠は,資本市場からの圧力ではなく,報酬契約が利益マネジメントを誘発する状況においても,利益マネジメントを削減するために会計基準による規制を強化することで,会計低利益マネジメントを抑制することが,実体的利益マネジメントの増加を生み出し,企業価値を損ねる可能性があることを示している。2010年度における本研究の目的は,実体的利益制御と会計的利益制御の関係を実証的に分析することである。本研究では,主に法規制が2つの利益制御行動に与えた影響と,コーポレートガバナンスが利益制御行動に与えた影響についての実証研究を行っている。契約理論の枠組みにおいて,会計不正を抑制するために導入された金融商品取引法が2つの利益制御行動にどのような影響を与えたのかを分析し,その結果,経営者は報酬契約や負債契約を動機とした目標利益達成のために,実体的利益制御を利用しているということが発見された。さらにその行動に対してコーポレートガバナンスが与える影響を実証的に明らかにするという課題が残されている。企業の機関設計が利益制御行動に与えた影響を分析するためのデータが十分にそろわなかったため,コーポレートガバナンスの利益制御行動に対して与えた影響についての実証研究は,現在継続中である。本フレームワークでは,事実に基づく費用収益アプローチが望ましいという主張を行っており,契約理論の枠組みにおいて望まれる財務会計情報の特性と整合的なものである。これらの研究から,信頼性のある会計情報を作り出す会計システムを構築し,エージェンシー費用を削減するためにある会計的利益制御を行う裁量を経営者に与えることが望ましい,ということを示している。
促音の音韻対立実現に寄与する発声・調音の協調運動の機序

ハイスピードカメラやMRI、EMAを用いて促音の生成に関する発声、調音の特徴を解析した。その結果,東京方言話者の子音における舌の拳上のタイミングは、促音が非促音より遅れることが明らかになった。南琉球宮古島方言では有声促音生成時に咽頭が拡大すること、有声摩擦音の促音は破擦音として生成される傾向があることが示された。また標準語のoral flowのパタンは促音では有声、無声子音で類似していた。これが有声促音の無声化をもたらす調音的背景となっていると考えられる。H26年度は夏にドイツ,ミュンヘン大学の音声研究所にてEMAによる調音運動測定のための準備と打合せを行った後,12月にドイツ語話者4名のEMAデータ採取を行った。現在データの分析を行っており,日本語方言話者のデータとの比較を行う予定である。日本語本土方言に関しては,促音が非促音に比べ舌の拳上のタイミングが遅れる傾向があり,調音的差異があることが示された。南琉球の宮古島の池間方言では,有声の促音において子音区間中の声帯振動が持続しており,東京方言とは異なる特徴があること,またそれを可能にするために咽頭を拡大するという特徴的な調音を行っていることが確認できた。さらに九州の熊本,柳川方言の音声を収録し,分析を行っている。これらを比較することで促音の調音に関する方言的特徴や差異の有無の検討が期待できる。経鼻ファイバースコープを用いた喉頭のハイスピード撮影実験を予定していたが,被験者の候補がみつからなかったため今年度は行えなかった。それに代えて,MRIを用いた最新の手法であるリアルタイムMRIによる南琉球方言の撮像と分析を行った。これにより従来のMRI同期撮像法では困難であった高齢の話者の調音データを採取することができた。分析も進めており,一部はすでに国内外の学会で発表した。H26-28年度の調音運動の測定では、ミュンヘン大学(ドイツ)においてドイツ語話者4名のEMMAを用いたデータと、脳活動イメージングセンター(京都府)において南琉球の宮古島方言話者2名と熊本方言話者2名のリアルタイムMRI(rtMRI)のデータを採取した。それらの分析結果と、H23-25年度に収録したWAVEやAirflowデータの再分析の結果を基に、国外(GlasgowでのICPhSとGemCon2015、HawaiiでのASA/ASJ joint meeting)や国内(音声学会、音響学会)で発表を行った。これらの分析から、日本語標準語の話者では促音は非促音より舌の挙上が遅れる傾向があり、促音に先行する母音は非促音に先行する母音に比べ持続時間が長くなる傾向が示された。これは先行研究の結果を支持するものである。また南琉球宮古島方言にみられる有声促音では、閉鎖区間中の声帯振動を継続する調音上の方策として、咽頭を拡大していることが明らかになった。宮古島方言話者の喉頭画像の撮影は実験協力者がえられなかったが,それに代わりMRI動画の撮像を行えた。画像も鮮明であり貴重なデータが得られた。またフランスの研究機関におけるePGGによる声門図採取は,実験実施時期の調整が難しく進めるられなかったが,それに代わり,ドイツの研究所においてEMAを用いた調音運動測定が行えた。いずれも促音,あるいは重子音発音時の舌の運動を動的に記録できており,日本語本土方言と琉球方言,日本語とドイツ語の調音運動の比較を行えるデータが得られた。促音の調音に関する特徴が明らかになりつつあることを踏まえ,日本語本土方言については被験者数を増やし定量的な検討を進める。有声促音や語頭促音など,琉球方言や九州方言の一部に特徴的な促音については,その調音特徴の定性的な検討を進める。音声生成H26年度に得られたデータをもとに,琉球方言と日本語本土方言の促音の比較,日本語の促音とドイツ語重子音の調音の比較を行う。フランス,パリ大学でのePGGを用いた声門図採取実験は,機材の調整と日程調整がおりあわず実施できなかった。またその資料の分析のために補助者に支払う謝金の使用もなかった。琉球方言話者の実験協力者が得られないため,ハイスピードカメラによる喉頭画像撮像が行えず,被験者謝金,実験者謝金の支出がなかった。フランス,パリ大学のePGG実験の計画が立てにくいため,代わりにアメリカ,カリフォルニア大学のバークレー校にて呼気圧と流量測定実験を行うべく計画している。MRI撮像の実験と分析費用に用いる。
二次草地の保全に向けた施策立案のための学際的・保全生態学的研究

堆積物試料の花粉分析,炭化片分析,植物珪酸体分析により,以下のことが判明した.1)石鎚山地瓶ヶ森周辺と剣山地天狗塚では,過去1,000yrsの間はササ草原が優勢だった.2)石鎚山地神鳴池周辺のササ草原の成立時期は約1,400yrs BPに遡る.3)剣山地夫婦池付近では,約700yrs BP以降,ブナ-ツガ林の一部が二次林や草原に移行した.600yrs BP頃のソバの栽培も確認された.4)剣山地落合峠では,約600yrs BP以降,ブナ-ツガ林が草原化した可能性がある.5)火災撹乱は鬼界-アカホヤテフラ降灰期以前に太平洋沿岸で頻発し,山間地に向かって進行した.現在も管理が継続されている塩塚高原では191種の草原生植物種が確認された.そのうち27種が徳島県の,25種が愛媛県の絶滅危惧種に指定されていた.植生構造は春季には多様な群落が点在するが,秋季にかけてススキ群落へと置き換わる.春季の多様な群落型の成立には,火入れ管理の不均一性や秋の刈り取り管理が影響していた.塩塚高原と他の放棄草地2地域の植物相を比較したところ,草原生植物種の割合が放棄草地で小さいことが判明した.また,休眠型組成において,放棄草地では1年生草本,2年生草本の割合が塩塚高原に比べて小さく,遷移の進行によって植物相が変化していた.管理が放棄された落合峠では樹林化が顕著であり,2030年には15ha程度にまで草地面積が減少すると予測された.希少種の生育適地評価地図は,地形指数,南風の風当たり指数,北風の風当たり指数から作成可能であった.マツムシソウを指標種として検討を行った結果,崩壊地周辺,踏圧の影響を受ける散策路周辺等,光環境の阻害要因となるミヤマクマザサの繁茂が抑制される地点で生育可能であることが確認された.ワークショップ等をとおして,これら結果を住民に提示し,草地復元の可能性を協議した.堆積物試料の花粉分析,炭化片分析,植物珪酸体分析により,以下のことが判明した.1)石鎚山地瓶ヶ森周辺と剣山地天狗塚では,過去1,000yrsの間はササ草原が優勢だった.2)石鎚山地神鳴池周辺のササ草原の成立時期は約1,400yrs BPに遡る.3)剣山地夫婦池付近では,約700yrs BP以降,ブナ-ツガ林の一部が二次林や草原に移行した.600yrs BP頃のソバの栽培も確認された.4)剣山地落合峠では,約600yrs BP以降,ブナ-ツガ林が草原化した可能性がある.5)火災撹乱は鬼界-アカホヤテフラ降灰期以前に太平洋沿岸で頻発し,山間地に向かって進行した.現在も管理が継続されている塩塚高原では191種の草原生植物種が確認された.そのうち27種が徳島県の,25種が愛媛県の絶滅危惧種に指定されていた.植生構造は春季には多様な群落が点在するが,秋季にかけてススキ群落へと置き換わる.春季の多様な群落型の成立には,火入れ管理の不均一性や秋の刈り取り管理が影響していた.塩塚高原と他の放棄草地2地域の植物相を比較したところ,草原生植物種の割合が放棄草地で小さいことが判明した.また,休眠型組成において,放棄草地では1年生草本,2年生草本の割合が塩塚高原に比べて小さく,遷移の進行によって植物相が変化していた.管理が放棄された落合峠では樹林化が顕著であり,2030年には15ha程度にまで草地面積が減少すると予測された.希少種の生育適地評価地図は,地形指数,南風の風当たり指数,北風の風当たり指数から作成可能であった.マツムシソウを指標種として検討を行った結果,崩壊地周辺,踏圧の影響を受ける散策路周辺等,光環境の阻害要因となるミヤマクマザサの繁茂が抑制される地点で生育可能であることが確認された.ワークショップ等をとおして,これら結果を住民に提示し,草地復元の可能性を協議した.1)1954年から2000年の間に撮影された塔丸と落合峠周辺の空中写真判読から,草地の樹林化が顕著であり,両地域とも1954年には100haほど分布していた草地が,現在では30haほどにまで激減していることがわかった.毎木調査をもとに、分布拡大が顕著であるウラジロモミの生育適地について検討したところ,傾斜10度未満の凹地形以外のところは生育可能であり,また,そのような地形領域は限られていることから,今後もウラジロモミの侵入は続き,2030年には15ha程度にまで草地面積が減少すると推測された.2)火入れが行われている塩塚高原の草原域163ヶ所で植生調査を行った結果,春季にモザイク状に分布する多様な群落が,夏季から秋季にはススキ群落に置き替わることがわかった。草原域で確認された246種の植物のうち13種が高知県または徳島県のRDB掲載種であり,塩塚高原にのみ残存している種も多かった。

一方,1967年の空中写真と比較した結果,樹林化が進行して草地面積が約4分の1に減少しており,また,過去に生育が確認されていたオキナグサ,カキランなどは確認できなかった。これは,火入れ管理の中断期があったことや草地面積の減少によると思われた。3)石鎚山地の瓶ヶ森と神鳴池,剣山地の落合峠で採取された窪地堆積物の花粉,植物珪酸体および微小炭化片から,次のことが分かった.瓶ヶ森と神鳴池では,少なくとも約6,000年前以降,ブナ,落葉ナラ類が優勢な冷温帯林が発達していた.約2,3001,100年前には,持続的な火災撹乱が生じ,森林の一部が破壊され,その跡地に陽生の樹木や草本類が侵入した.調査地のササ草原の成立もこの火災を契機とする可能性がある.落合峠では,少なくとも約600年前以前に,モミ属,ツガ,ブナが優勢な森林が存在した.4)ワークショップを行うため,住民や行政とのネットワークづくりを開始した.1)徳島県東祖谷山村の落合峠における草地の復元計画策定のために,希少種の生育適地に関する環境評価マップを作成した.植生調査から,草本植物の出現パターンは,ミヤマクマザサの生育状況を反映する4グループに類型化された.一方,GISを用いた検討から,ミヤマクマザサの生育状況は,湿性状況を適切に示すことが知られる地形指数と,落合峠において夏季に卓越する南風の風当たりの程度,および冬季に卓越する北風の風当たりの程度の3つのパラメータで推定できることがわかった.これらから,希少植物の潜在的生育適地図を作成した.[鎌田]2)現在火入れによって維持されている塩塚高原(愛媛・徳島県境,海抜1043m)において,ススキ型の半自然草地植生の多様性とその季節変化を明らかにすることを目的として,植物相の調査を行うとともに,優占種の異なる32の群落において毎月一回の植生調査を行った.その結果,火入れの行われているスタンドと比較して,刈り取りのみのスタンドで一年を通して種数,多様度指数共に高い値を示し,刈り取りは火入れよりも植物の種多様性を維持するためには効果的であることが示唆された.[石川]3)窪地堆積物の花粉,植物珪酸体および炭化片から,剣山地落合峠周辺の植生と植物燃焼の変遷を調べた.約800年前以前には,ブナ,コナラ亜属などの落葉広葉樹林に,ツガとモミ属が混生していた.約800-300年前には,特にヅガやモミ属が減少し,森林の一部は草原に移行した.草原の形成は約800年以降に増加した火災に起因する可能性がある.ススキ属珪酸体量が極めて少ないため,草原の植生型はススキ型ではなかったと考えられる.約300年前以降には,南側斜面のスギの植林を示すスギ属花粉の急増が認められた.[三宅]4)上記結果を東祖谷山村の地域住民,NPO,行政等に報告し,今後の活動方針についての意見交換の場として「四国草原保全研究フォーラム」を立ち上げ,第1回フォーラムを12月に東祖谷山村で開催した.[山中・鎌田](1)剣山地天狗塚と夫婦池,太平洋沿岸の中村市具同と室戸市奥郷で採取した堆積物試料の花粉分析と炭化片分析を行い,当地域における完新世の植生と火災撹乱の変遷について調べた.主な成果は次に示す通りである.1)剣山地天狗塚では,少なくとも過去1,000yrsBPの間はササ草原が優勢であった.2)剣山地夫婦池付近では,約700yrsBP以降,ブナ-ツガ林の一部が二次林や草原に移行した.周辺域における600yrsBP頃のソバの栽培も確認された.3)火災撹乱は少なくとも鬼界-アカホヤテフラ降灰期以前に太平洋沿岸で頻発し,山間地に向かって進行したことが示唆された.(2)塩塚高原に生育する草原生絶滅危倶植物モリアザミ,ヒメヒゴタイ,ヤナギタンポポ,カセンソウ,オオバギボウシ,ヒメユリ,および草原において広域分布するハバヤマボクチ,シコクアザミの種子発芽・休眠特性および成長特性を実験で明らかにした。これら8種の発芽可能時期や発芽特性は比較的類似していたが,実生の成長特性は少しずつ異なり,それが草原における生育地の違いを反映していると考えられた。
精子形成細胞の分化研究を明らかにする免疫電顕クロマトイドミクス解析

精子形成と配偶子細胞のRNA干渉に働くアルゴノート2タンパク質(Ago2)のラット精巣内の局在を、細胞生物学的に明らかにした。Ago2は、ラットの精巣で精母細胞が精子細胞へ分化するあいだ、生殖細胞特有小器官のヌアージュに局在した。その後、精子細胞の発生後期に現れるクロマトイドボディー(CB)近傍の小胞に含まれ、リソソーム膜タンパク質LAMP2と共存した。以上の結果から、Ago2は、ヌアージュ全域でRNAの転写を調節する一方、後期CBでは、リソソームにおいて、細胞成分の分解にも働く可能性が新たに示唆された。哺乳動物の精子を成熟させる精巣の細胞内構造物ヌアージュに種々のタンパク質が見出されている。Argonaute2(Ago2)タンパク質は、配偶子細胞の精原細胞で、標的mRNAのガイドとして働くsiRNAやmiRNAと結合して、異常なmRNAを切断し遺伝子の保護に役立つRNA誘導型サイレンシング複合体(RISC)の主要成分である。精子細胞の発生に伴いAgo2の局在変化を明らかにし、精子発生に伴う遺伝子の保護の関係を明確にするため、免疫電子顕微鏡的手法を用いる観察を行った。精子の発生と細胞構造物の形態が観察しやすいラットを用いた研究を行うため、抗ラットAgo2に由来する14アミノ酸残基のペプチドを抗原にウサギに免疫し、ポリクローナル抗体を作製した。同抗体は、ラット精巣から超遠心分離で得たミトコンドリアと細胞質分画に存在するAgo2(分子量約100 kDa)を検出することが確認出来た。本抗体とラット精巣組織切片、蛍光顕微鏡および透過型電子顕微鏡を用いてAgo2の局在を観察し、細胞内のヌアージュ構造に存在し、精母細胞および精子細胞への成熟する期間に、細胞内の特徴的な構造に局在が移行していくことをはじめて明らかにできた。正常な遺伝子を保護し異常なmRNAを切断する、RNA型サイレンシング複合体の主要成分、Argonaute-2(Ago2)タンパク質の精子細胞分化過程での発現を観察した。抗ラットAgo2ポリクローナル抗体を用いて精巣の超微形態観察を行うと、Ago2は精母細胞のステージVIIIでヌアージュ構造であるLoose aggregate Structureに発現を認めた。分化が進行したステージXでは、Intermitochondrial cementにAgo2の発現が移行することが判明した。精子細胞に分化後は、Ago2はステップ1から6でクロマトイドボディーに局在し、それ以上の分化段階で、Ago2が消失していくことを明らかにできた。Ago2は、精子の発生段階の後期に出現し、CB近傍の小胞に分布することが免疫電子顕微鏡の観察から判明し、これはヌアージュを構成した他のタンパク質と異なる特徴的な局在と言えた。CB近傍の小胞には、リソソーム膜タンパク質LAMP2、リソソーム由来プロテアーゼのカテプシンD・Hが含まれ、Ago2とLAMP2との共局在が観察された。一方、ISPG, IMC, SBの構造では観察されなかったことから、Ago2は、ヌアージュ全域でRNAの転写を調節する一方、後期CBではリソソーム分解経路にも関与している可能性が新たに示唆された。抗Ago2抗血清の作製に成功し、ラット精巣内の精母細胞・精子細胞でのAgo2の発現時期を見出すことが出来た。糖鎖生物学配偶子細胞で健常なmRNAを維持するしくみを明らかにするため、Ago2に加えて、他のRNA型サイレンシング複合体の成分解明に取り組む。抗Ago2抗体を利用し、RNA型サイレンシング複合体分子を共精製する条件の検討を行う。複合体を構成する分子が精製できたら、その分子の同定を行い、抗体を作製し、電顕による発現の観察に役立てる。ラット精巣のAgo2を特異的に検出できるポリクローナル抗体の作製に成功し、Ago2が雄性配偶子細胞のヌアージュ構造に存在して発生に伴い特異的な局在が認められ、結果を組織学および細胞生物学の学術雑誌に投稿した。計画は順調に進展している。電顕用の包埋試薬の輸入による入荷の遅れから、前年度内に購入することが困難であったため。精巣の発生成熟に伴うAgo2タンパク質と他のヌアージュタンパク質との局在の異同を、免疫電子顕微鏡・蛍光光学顕微鏡を用いて観察する。遺伝子抑制タンパク質であるAgo2が機能を発揮するため、RISCと結合して細胞内に存在していることが報告されている。Ago2と特異的に結合する分子をアフィニティー精製法で単離し、プロテオームの手法を用いてこれら分子の特定を行う。同様にAgo2複合体と結合するRNAを単離し、その配列を同定する。電顕用の包埋樹脂の条件検討を行いながら、ラット精巣内のAgo2とその関連分子の発現を観察する。

年度末に予定していた抗体作製のための抗原の準備が遅れ、次年度に抗体作製を依頼することになったため。精子形成に関わるAgo2を含むRISC複合体のタンパク質を抗体を用いて精製および検出のため、抗体作製の依頼やRISCタンパク質に対する抗体の購入を行う。同時に複合体タンパク質を精製後、プロテオーム解析を用いてタンパク質とAgo2複合体と結合するRNAの配列の同定の依頼も検討している。
乱れた密度成層流を対象とした流速・密度計測法の開発と乱流構造の解析

箟は流体から発生する散乱光・蛍光の光子計数法を応用した乱流計測手法を開発した.入力信号としてアルゴンレ-ザ-を用い,光子計数から得られるコヒ-レンス時間より流速・温度等流体諸元の時間平均値を求める.本計測手法は境界層流および管路乱流の流速・温度計測に対し応用され,その精度・有効性を確認した.江藤は画像計測のトレ-サ-粒子としてポリスチレン薄膜で水を密封したマイクロカプセルを開発し実用化した.このトレ-サ-は粒径が小さく(径0.2mmのオ-ダ-),温度変動をともなう熱密度流場においても中立粒子として挙動し,追随性も優れている.さらに,3台の超高速ビデオカメラを用いた3次元流速計測と画像解析システムを開発した.以上の研究開発により,密度差をともなうような乱流場における3次元流速計測が可能となった.中辻は,明石川の大阪湾への流出に関する流速・塩分濃度・浮遊土砂量の現地観測を行った.この実証研究によって潮流・沿岸流が河川プル-ムの密度流挙動におよぼす影響と潮目の形成機構を明らかにした.さらに,淀川の大阪湾への洪水流出のランドサット映像を分析し,実水域における乱流密度流の観測手法について考察した.道奥は停滞水域の物質輸送を支配する熱対流場で発生する乱流を対象として流速計測と完結モデルによる数値解析を行い,乱流構造を明らかにした.複合因擾乱が作用する乱流場での流速計測を試み,乱流強度や乱流の非等方性度などを明らかにした.さらに,乱流モデルによる熱塩対流場の乱流構造解析を行い,実験で得られた情報を補足する形で熱対流場における乱流特性を解明した.室田は河川プル-ムおよび成層せん断密度流を対象として,乱流モデルによる数値予測手法の開発を行った.数値解析は三次元密度流として挙動する淀川流出流にも適用され,その有効性が確認された.箟は流体から発生する散乱光・蛍光の光子計数法を応用した乱流計測手法を開発した.入力信号としてアルゴンレ-ザ-を用い,光子計数から得られるコヒ-レンス時間より流速・温度等流体諸元の時間平均値を求める.本計測手法は境界層流および管路乱流の流速・温度計測に対し応用され,その精度・有効性を確認した.江藤は画像計測のトレ-サ-粒子としてポリスチレン薄膜で水を密封したマイクロカプセルを開発し実用化した.このトレ-サ-は粒径が小さく(径0.2mmのオ-ダ-),温度変動をともなう熱密度流場においても中立粒子として挙動し,追随性も優れている.さらに,3台の超高速ビデオカメラを用いた3次元流速計測と画像解析システムを開発した.以上の研究開発により,密度差をともなうような乱流場における3次元流速計測が可能となった.中辻は,明石川の大阪湾への流出に関する流速・塩分濃度・浮遊土砂量の現地観測を行った.この実証研究によって潮流・沿岸流が河川プル-ムの密度流挙動におよぼす影響と潮目の形成機構を明らかにした.さらに,淀川の大阪湾への洪水流出のランドサット映像を分析し,実水域における乱流密度流の観測手法について考察した.道奥は停滞水域の物質輸送を支配する熱対流場で発生する乱流を対象として流速計測と完結モデルによる数値解析を行い,乱流構造を明らかにした.複合因擾乱が作用する乱流場での流速計測を試み,乱流強度や乱流の非等方性度などを明らかにした.さらに,乱流モデルによる熱塩対流場の乱流構造解析を行い,実験で得られた情報を補足する形で熱対流場における乱流特性を解明した.室田は河川プル-ムおよび成層せん断密度流を対象として,乱流モデルによる数値予測手法の開発を行った.数値解析は三次元密度流として挙動する淀川流出流にも適用され,その有効性が確認された.アルゴンレ-ザ-光膜を水路中の一断面に入射し、流体(水道水)中に自然に含まれる微粒子(空気胞粒子?)からの散乱光子数を二次元光子計数管で計数、解析することにより、水路ー断面における流速・水温分布測定の研究を行った。乱流境界層内の平均流速分布、静水中の水温分布計測を終了し、現在乱流境界層中の水温分布計測を研究中である。(箟)淀川洪水流の拡がりを対象に三次元数値実験を実施して、河川流出流の流動に及ぼす密度流効果ならびに地球自転効果について定量的に考察した。さらに、熱赤外線画像を収集して、淀川河口における濁度、温度分布の拡がりと河川流量との関係を分析した。(中辻)粒子の自動追跡による密度差のある乱れの三次元挙動の観測システムを研究した。その内容は(1)トレ-サ-としてのマイクロカプセル(比重1.005)の開発、(2)2値化の自動化のためのプログラムの開発、(3)2値化画像上のトレ-サ-像の自動追跡のためのカルマンフィルタ-、x^2検定を用いたプログラム開発である。(江藤)Kーεモデルと代数的応力モデル(ASM)を用いて二次元表層密度噴流の数値計算を行い、乱流モデルの成層密度流への応用について実験結果との比較から基礎的な検討を行った。水表面補整を施したASMは表層密度噴流の流動特性と非等方性乱流場を良好に予測した。

(室田)水温成層場を対象として、機械的、熱的擾乱によって生起される乱流場に実験観測を行った。水温変動について充分な計測を行い、流速計測について準備観測を実施した。(道奥)篦は流体から発生する散乱光・蛍光の光子計数法を応用した乱流計測手法を開発した.入力信号としてアルゴンレ-ザ-を用い,光子計数から得られるコヒ-レンス時間より流速・温度等流体諸元の時間平均値を求める.本計測手法は境界層流および管路乱流の流速・温度計測に対し応用され,その精度・有効性を確認した.江藤は画像計測のトレ-サ-粒子としてポリスチレン薄膜で水を密封したマイクロカプセルを開発し実用化した.このトレ-サ-は粒径が小さく(径0.2mmのオ-ダ-),温度変動をともなう熱密度流場においても中立粒子として挙動し,追随性も優れいてる.さらに,3台の超高速ビデオカメラを用いた3次元流速計測と画像解析システムを開発した.以上の研究開発により,密度差をともなうような乱流場における3次元流速計測が可能となった.中辻は,明石川の大阪湾への流出に関する流速・塩分濃度・浮遊土砂量の現地観測を行った.この実証研究によって潮流・沿岸流が河川プル-ムの密度流挙動におよぼす影響と潮目の形成機構を明らかにした.さらに,淀川の大阪湾への洪水流出のランドサット映像を分析し,実水域における乱流密度流の観測手法について考察した.道奥は停滞水域の物質輸送を支配する熱対流場で発生する乱流を対象として流速計測と完結モデルによる数値解析を行い,乱流構造を明かにした.複合因擾乱が作用する乱流場での流速計測を試み,乱流強度や乱流の非等方性度などを明らかにした.さらに,乱流モデルによる熱塩対流場の乱流構造解析を行い,実験で得られた情報を補足する形で熱対流場における乱流特性を解明した.室田は河川プル-ムおよび成層せん断密度流を対象として,乱流モデルによる数値予測手法の開発を行った.数値解析は三次元密度流として挙動する淀川流出流にも適用され,その有効性が確認された.
準平面型骨格に基づいた機能性有機材料開発

近年、有機エレクトロニクス分野の研究が盛んに行なわれている。その発展には、素子に電気を効率的に流すための高い電荷輸送特性をもつ機能性有機材料の開発が極めて重要である。本研究では、材料開発において分子の「形」に着目し、プロペラ型構造をもつトリアリールアミンの二箇所を酸素原子で架橋することで、平面から少しだけねじれた「準平面型」の骨格を開発した。この準平面型骨格を用いた機能性有機材料の開発を目的としている。今年度の研究では、準平面型骨格をもつ塗布型の材料を開発し、近年注目を集めているペロブスカイト太陽電池の正孔輸送性材料への応用に取り組んだ。塗布型の正孔輸送性材料として、アズレンやビフェニル骨格に長鎖アルコキシ基をもつ準平面型骨格を複数導入したシート型の分子を開発した。これらを用いてペロブスカイト太陽電池を作製し、素子特性を評価した結果、アズレンに四つの準平面型骨格を導入した分子を正孔輸送性材料に用いることで、Spiro-OMeTADと呼ばれる標準材料を用いた場合と比べて最大1.2倍も高い光電変換効率が得られることを見出した。さらに、一連の正孔輸送性材料の基礎特性と太陽電池特性とを比較することで、正孔輸送性材料に必要な高い光電変換効率を得るための特性を明らかにすることにも成功した。本研究により、準平面型構造を用いた塗布型の正孔輸送性材料の有用性を実証するとともに、ペロブスカイト太陽電池の高効率化に対する材料の設計指針を明確に示すことができた。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
脳内成長ホルモン依存性二次ホルモンの受容体の決定と発育過程での変化

脳発育におよぼす成長ホルモン(GH)の二次ホルモンとしてのInsulin-like growthfactor-1(IGF-1)の作用機構について明らかにする目的で、脳発育遅滞を示すGH分泌異常ミュータントマウス(Snell下垂体性小人症マウス;dw、先天性成長ホルモン単独欠損症マウス;lit)、甲状腺ホルモン分泌異常ミュータントマウス(先天性甲状腺機能低下症マウス;hyt、先天性甲状腺腫マウス;cog)、及び、血中GHおよびIGF-1レベルが正常であるにもかかわらず、脳の発育異常と行動異常を示す小人症マウス(pygmyマウス;pg)を用いて、発育過程を追っての脳発育の液性因子の検索、ならびにIGF-1受容体について検索を行い、以下の成果を得た。(1)40日齢マウスのIGF-1を測定した結果、dw、lit、hyt、cogでは血清、肝臓、腎臓でいずれも有意に低下していたが、pgでは差は認められなかった。脳各部位におけるIGF-1値はいずれも正常マウスと差は認められなかった。(2)血清中のIGF結合蛋白(IGFBPs)は、pgでは全く異常は認められなかったが、他の4種のマウスでは、IGFBP-3とIGFBP-4が著しく減少し、また、IGFBP-2に関しては、dwで増加し、その他では減少していた。このことから、肝臓におけるIGFBP-3とIGFBP-2の産生がそれぞれGHと甲状腺ホルモンにより促進されていることが示唆された。(3)pgマウスを用いての発育期を追ってIGF-1を測定した結果、血清のIGF-1値が20日齢で有意に低下していた。これは、IGF-1産生の主臓器である肝臓と腎臓でのIGF-1産生減少によるものと考えられた。また、大脳と脳幹においても、血清IGF-1値の変化と同様な変化の傾向が認められた。この結果と、dwで生後20日齢から血清、肝臓、腎臓のIGF-1値が有意に低下することとを考え合わせると、脳発育に対するIGF-1の臨界期が20日齢であることが示唆された。(4)pgマウスの脳各部位から調整したミクロソーム画分への[^<125>I]IGF-1の特異的結合は、いずれの部位においても正常マウスとの間に差は認められなかった。また、[^<125>I]IGF-1のアフィニティー架橋実験および部分精製したIGF-1受容体のリン酸化実験の結果、いずれも正常マウスとの間に差は認められなかった。これらのことから、pgマウスではIGF-1受容体後の細胞内情報伝達機構に異常のあることが考えられた。40日齢のpgマウス、成長ホルモン分泌異常