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ソフトクリスタル：高秩序で柔軟な応答系の学理と光機能

本領域では、結晶の持つ高秩序構造を維持しながら、外部刺激によって構造が劇的に変化して光機能などの特異な性質を示す物質群「ソフトクリスタル」の生成機構と転移現象の学理解明学と新機能開拓をめざしている。本研究計画では、総括班として領域の実施計画に関する情報を各研究班に提供し、研究計画・進捗状況・成果に関わる情報を集約することで、国際活動を含む領域全体の計画が適切に実施できるよう支援しつつ、領域研究の推進に貢献することを目的とする。平成30年度は、公募班31件が加わり、大所帯になった領域全体の研究活動をますます効果的に推進できるように注力した。全体会議としては、領域会議2回および公開シンポジウム2回を行った。また、領域会議に合わせて、「物性解明研究グループ会議」を開催し、様々な観点からソフトクリスタルを深掘りできる機会を設けた。さらに、領域内の共同研究を推進するための意見交換の場として、「共同研究促進会」を9月、10月、11月と計3回行った。これらにより領域内の情報交換が大いに促進し、1:1の共同研究のみならず、多点的共同研究ネットワークの形成を促進することに成功した。また、7月には、第1回ソフトクリスタル国際会議開催し、諸外国の研究者にも領域周知活動を行うとともに研究内容についての議論を深めることができた。一方で、ソフトクリスタルのコンセプトを世界に発信するために、Chemistry A European Journalにコンセプト論文を発表した。その他のアウトリーチ活動としては、ニュースレターを3回発行し、領域研究者間のコミュニケーションをはかるとともに、WEBにて広く公開した。また、領域の情報も各段に増大したことから、領域のホームページもよりわかりやすくなるように改訂した。本年度は計画班に加えて公募班31件が加わり、活発な共同研究が始まった。特に、総括班主導でエキストラで行った3回の領域会議「共同研究促進会」は大変効果が挙がり、領域内の情報交換が促進するとともに、1:1の共同研究のみならず、多点的共同研究ネットワークの形成を促進することに成功した。また、構造化学や種々の分光学において最先端の手法を駆使する研究者が一同に会して議論する「物性解明研究グループ会議」が班間をまたいで行われ、研究を深掘りするために大いに効果的であった。これらの活動を通じて、「ソフトクリスタル」領域研究の目標が一層明確化し、班員の意識が高まることにより相乗的な効果が出てきている。また、共同研究による成果もいくつか発表できた。平成30年度までの活動で効果が出てきた共同研究をさらに推進する。今後は、その証となる具体的な成果がより多く出てくることが求められる。そのために、物質開拓、物性解明、および理論化学の研究者の間の連携がより緊密化するように積極的な支援を行う。また、成果の発表と討論の場である領域会議、国際シンポジウムを行う。具体的に2019年度には、公開シンポジウム(2回)、国際会議(1回)、総括班会議(2回)、関連の国際シンポジウムの共催・支援、若手研究者セミナーへの支援等を計画している。そのほか、得られた研究成果は、各種アウトリーチ活動(ホームページ、リーフレット、プレスリリース等)により、国内外一般社会へ積極的に発表し、情報公開を行う。また、産業的に有用な技術が開発された場合は、特許出願を行う。結晶の持つ高秩序構造を維持しながら、外部刺激によって構造が劇的に変化して光機能などの特異な性質を示す物質群「ソフトクリスタル」が世界的に注目を集めている。しかしながら、この研究の鍵となるソフトクリスタルの生成機構と転移現象の学理は未解明であり、分子科学技術におけるもっとも挑戦的な課題の一つとみなされる。これを解明できれば、ソフトクリスタルの準安定状態や周期構造を、目的に合わせて制御できるようになり、これまで到達できなかった高秩序で柔軟な機能性材料を自由に創造できる。そこで、本新学術領域では、複数の既存の分野にまたがる研究者集団を結集し、学理解明と新機能開拓をめざす。平成29年度は、領域研究開始の一年目として、以下の領域会議および公開シンポジウムを2回開催した。また、領域のホームページを立ち上げ、研究紹介および研究成果の公開と積極的に行った。ニュースレターを定期的に発行し、領域研究者間のコミュニケーションをはかるとともに、WEBにて広く公開した。さらに、領域研究者間の共同研究を促進するために、研究者の得意とする測定技術や利用可能な装置などを掲載した研究者名簿を作成し、領域研究者間で共有できるようにした。本年度は計画班のみでの活動であったが、総括班主導で共同研究の推進を積極的に促した。その結果、多くの共同研究が始まった。今後の相乗的な成果が期待できる。

平成30年度は、公募班31件が加わり、大所帯になった領域全体の研究活動をますます効果的に推進できるように注力した。全体会議としては、領域会議2回および公開シンポジウム2回を行った。また、領域会議に合わせて、「物性解明研究グループ会議」を開催し、様々な観点からソフトクリスタルを深掘りできる機会を設けた。さらに、領域内の共同研究を推進するための意見交換の場として、「共同研究促進会」を9月、10月、11月と計3回行った。これらにより領域内の情報交換が大いに促進し、1:1の共同研究のみならず、多点的共同研究ネットワークの形成を促進することに成功した。また、7月には、第1回ソフトクリスタル国際会議開催し、諸外国の研究者にも領域周知活動を行うとともに研究内容についての議論を深めることができた。一方で、ソフトクリスタルのコンセプトを世界に発信するために、Chemistry A European Journalにコンセプト論文を発表した。その他のアウトリーチ活動としては、ニュースレターを3回発行し、領域研究者間のコミュニケーションをはかるとともに、WEBにて広く公開した。また、領域の情報も各段に増大したことから、領域のホームページもよりわかりやすくなるように改訂した。本年度は計画班に加えて公募班31件が加わり、活発な共同研究が始まった。特に、総括班主導でエキストラで行った3回の領域会議「共同研究促進会」は大変効果が挙がり、領域内の情報交換が促進するとともに、1:1の共同研究のみならず、多点的共同研究ネットワークの形成を促進することに成功した。また、構造化学や種々の分光学において最先端の手法を駆使する研究者が一同に会して議論する「物性解明研究グループ会議」が班間をまたいで行われ、研究を深掘りするために大いに効果的であった。これらの活動を通じて、「ソフトクリスタル」領域研究の目標が一層明確化し、班員の意識が高まることにより相乗的な効果が出てきている。また、共同研究による成果もいくつか発表できた。本領域の研究目的である「ソフトクリスタルの学理を解明し、その機能を開拓する」ことを実現するために、1物質創製、2物性測定・解析、3複合化、4融合研究が推進されるように、総括班として戦略的な取り組みを行う。それぞれの専門分野の研究者を効果的に配置した班を構成しているが、公募研究者も加わる次年度以降は、より緊密に班内および班間の連携が進むように積極的な方向性を提示する。特に、物性、研究者は班を越えて情報共有を図る会議を行い、効果的に研究が進むように促す。合同班会議では、研究紹介および自由討論の時間を多く設けることで、さらに互いの研究に関する理解を深めることにより、1:1の共同研究のみならず、多点的共同研究ネットワークの形成を促進する。平成30年度の具体的な実施計画は以下の通りである。30年5月:第2回公開シンポジウム、領域会議を開催し、成果発表とともに討論を行う。総括班会議で運営方針を検討する。30年7月:第1回国際会議開催し、諸外国の研究者にも領域周知活動を行うとともに研究内容についての議論を深める。31年1月:第3回公開シンポジウム、領域会議を行い、研究成果を発表するとともに議論を行う。総括班会議において更なる展開を議論する。
19世紀後半の異文化交渉と日本美術の相関 － 画師河鍋暁斎を中心に

1、ヨーロッパの河鍋暁斎作品コレクションの調査平成24年度前半は、ゴールドマン・コレクションの他に、イギリス、アイルランド、フランス、ドイツで、計13箇所の美術館、博物館、図書館で調査をした。掛幅や巻物、額装の大きな肉筆作品64点、小さな肉筆作品を156点、画帖1点、屏風作品2点、多数の下絵類、さらに71種の版本作品、82種の版画作品、多数の小さなサイズの校正摺などを実見し、写真データや書誌データを蓄積することができた。2、イスラエル・ゴールドマン・コレクション(英国、ロンドン)の調査前年度後半に引き続き調査をしたゴールドマン・コレクションは、掛幅や巻物などの大きい肉筆作品が198点、小さな肉筆作品が98点、下絵類が49点、合計で肉筆59点を含む3冊の画帖、屏風作品1点、そして版本作品が32種、版画作品が197種を数える。これらのデータをExcelの表にまとめ、写真データとリンクさせたものを作成した。2012年9月に英国ノリッチで開かれたBritish Association for Japanese Studies(BAJS)の学会で、「吉祥画」というテーマでコレクションの一部を紹介する口頭発表を行った。3、版本作品『暁斎画談』[明治20年・1887]の調査と研究平成24年度も『暁斎画談』の書誌調査は継続して行った。端本も含めて、欧州では7セット、日本国内では10セットを新たに調査した。昨年度発表した内容を元に『画談』研究の成果を論文2本にまとめた。4、1945年以前に国内で出版された河鍋暁斎関連文献の調査と研究平成24年度後半に行った作業のひとつに、1945年以前に国内で出版された暁斎関連の文献め収集、整理がある。これらの暁斎関連文献は、出版年代別に表にまとめている。暁斎にまつわる言説が、国内外でどのように展開し、暁斎の評価にいかなる影響を与えたかを考える材料となる。年度末に米国サンディエゴで開かれたAssociation for Asian Studies(AAS)の学会で、明治三年の暁斎の筆禍事件に関する言説を取り上げ、文献調査の成果を反映させた口頭発表を行った.1、『暁斎画談』[明治20年・1887]の調査と研究平成23年度前半は、河鍋暁斎の版本作品『暁斎画談』に焦点を絞って研究を進めた。これまで『画談』の詳細な書誌調査は行われておらず、初版の特定もされていなかったため、多くの版本にあたり書誌データを集めて整理することが必要であった。現時点までで国内外合せて計26セットを調査し、その結果これまでに見た中では、ゴールドマン氏所蔵の『画談』を最も初版に近いものと判断した。どの版本を定本として研究すべきかが判明したことは『画談』研究において重要である。異版本の出版時期は特定できていないが、大きく三段階に分けて版の違いを考えることができると分かった。書誌調査と同時に、出版事情についても調査を進めている。2、イスラエル・ゴールドマン・コレクション(英国、ロンドン)の調査平成23年度後半は、英国ロンドンに滞在して、大英博物館に寄託されているイスラエル・ゴールドマン氏の暁斎コレクションを調査している。現在行なっている作業は、すでに大英博物館で作成された簡単な目録をさらに充実させることと、作品の写真記録をとることである。追加する情報には落款データも含まれ、数多い暁斎の印の記録、整理も進めている。現時点では、164点の軸作品が調査済みである。当コレクションには未発表の作品が数多く含まれており、新しい材料に富んでいる。このコレクションがなければまったく理解が違っていたであろう分野として、暁斎の春画が挙げられる。コレクションに含まれる26点の春画作品(肉筆、版画)を材料として、大英博物館の春画展プロジェクトチームと「河鍋暁斎と明治の春画」という勉強会を開いた。3、同時代作品との比較調査100点を超える明治の版本を所蔵しているスペイン国立装飾美術館(マドリッド)で、渡辺省亭、幸野楳嶺、小林永濯など、暁斎の同時代画師による絵本の書誌調査を行った.1、ヨーロッパの河鍋暁斎作品コレクションの調査平成24年度前半は、ゴールドマン・コレクションの他に、イギリス、アイルランド、フランス、ドイツで、計13箇所の美術館、博物館、図書館で調査をした。3、版本作品『暁斎画談』[明治20年・1887]の調査と研究

平成24年度も『暁斎画談』の書誌調査は継続して行った。端本も含めて、欧州では7セット、日本国内では10セットを新たに調査した。昨年度発表した内容を元に『画談』研究の成果を論文2本にまとめた。4、1945年以前に国内で出版された河鍋暁斎関連文献の調査と研究平成24年度後半に行った作業のひとつに、1945年以前に国内で出版された暁斎関連の文献め収集、整理がある。これらの暁斎関連文献は、出版年代別に表にまとめている。暁斎にまつわる言説が、国内外でどのように展開し、暁斎の評価にいかなる影響を与えたかを考える材料となる。年度末に米国サンディエゴで開かれたAssociation for Asian Studies(AAS)の学会で、明治三年の暁斎の筆禍事件に関する言説を取り上げ、文献調査の成果を反映させた口頭発表を行った.河鍋暁斎の版本作品の書誌データ蓄積や海外コレクションの調査など、予定通り調査を進めている。ゴールドマン・コレクションの調査により、新たな材料の発見もあった。ただ、成果の発表に関しては、口頭発表は行なっているが、執筆中の論文がまだ完成せず投稿が遅れている。平成24年度前半は計画通りヨーロッパの河鍋暁斎コレクションの調査を進めていく。これまではゴールドマン・コレクション、大英博物館所蔵品を中心に見ていたが、ヨーロッパの他の国にある暁斎作品の調査にも力を入れる。ゴールドマン・コレクション調査の成果は、9月にBritish Association for Japanese Studies Conferenceで口頭発表を行う。執筆中の論文「(仮)明治の画譜『暁斎画談』-近世絵本文化からの連続と、新しい時代を迎えての展開」の完成と、他の準備中の論文執筆も進め、完成させる。また、平成24年度後半は『暁斎画談』の版元や発売元となった書璋など、『画談』の出版事情に関する調査を進め、より大きな文脈の中で作品の成立を理解することを目指す。帰国後は国内所蔵の版本の調査を行い、海外で見られた版本作品との比較を行う。
共同による科学的問題解決過程の研究-自己説明説と共同構築説の検討-

本研究は、大学生の被験者が二人で協同して科学的な発見課題を解く際に、彼らが実験を行ってその結果を解釈していく過程を分析し、科学的説明の共同構築過程を調べることを目的としていた。課題は、Dunbar(1993)の分子生物学課題(コンピュータ上で要因を操作し実験しながら、分子生物学上のメカニズムを発見することができる課題)を用いた。被験者は友人同士の理系の男子大学生のペア11組(22人)であった。被験者は、個別に学習課題を行った後、協同で発見課題に取り組んだ。彼らは、話し合いながら実験を行い、共通の解答にたどり着くように求められた。問題解決過程のビデオ記録を基に、被験者が行った実験の内容と問題解決場面でのディスカッションの内容を主たるデータとして分析した。さらに、実験後のインタビュー記録も分析の参考にした。分析に際しては、各ケースのデータに大まかに目を通した結果、いくつかのケースで科学的説明の共同構築が活発に起こっていたので、そのうち3つのケースを取り上げ、それらのデータを詳細に分析し、共同構築過程を記述することにした。3例のケース分析から、各被験者が持っている表象(representation)や「ものの見方」が、説明の共同構築過程において重要な役割を持っていることが示唆された。また、表象が変化する際に、一方の被験者からの説明の要求(request for explanation)がきっかけとなっていることも明らかになった。
マウス軌跡情報の記録・検索・分析を通した学習者評価システム開発に関する研究

e-Learningシステムを用いた学習では、学習者が解答に至るプロセスを履歴情報として残すことが容易であることに着目し、本研究課題において、解答中にマウスが頻繁に移動する英単語並べ替え問題を取り上げ、マウス軌跡ならびにその他の履歴データを取得・分析することによって、学習者の解答時における「迷い」を判別するWebアプリケーションの開発に取り組んできた。以前は、解答の自信度とマウス軌跡のパラメータ値との関係から迷いを推定していたが、本研究課題では「教師あり機械学習」を利用し、マウス奇跡のパラメータ(「移動時間」「移動距離」「移動速度」「静止時間」「Uターン回数(X軸方向、Y軸方向)」「D&D回数」「D&D時間」「D&D間時間」(一つのD&D操作から次のD&D操作を行うまでの時間))を機械の学習データとして、迷いの判定システム(分類器)を構築した。「迷い」判定の正解データを得るために、27名の実験協力者に解答時における「迷いあり/なし」について自己申告させ、分類器が判別した「迷いあり/迷いなし」の精度を分析した。その結果、「再現率」「適合率」「それらの調和平均」のいずれも、約80%の確率で正しく迷いを判定できた。また、迷いの判別に貢献した上位のパラメータは「D&D間時間」「解答時間」「移動速度」「Y軸方向Uターン回数」であることも判明した。また、学習者が解答中に、どのように「単語のグループ化機能」を利用したかについても分析したところ、問題が難しくなるほど平均グループ化回数が増えていることが分かり、グループ化された語句の移動は、単語一時退避欄(レジスタ)から解答欄に戻すときに多く使用されること、さらに、グループ化の見られるマウス動作の約71.3%は、熟語生成に能動的に使用されていることが示唆された。これらの研究結果は、口頭発表・論文の形で発表し一定の評価を得た。本研究の目的は、英単語並べ替え問題の解答時のマウスの軌跡情報を分析することによって、学習者が答えを導き出す過程にアプローチし、従来のe-learningシステムにおける学習時間、解答率や正解率といった学習結果の評価より正確に、学習者の理解度を把握する学習評価システムを構築することである。そのために先ず、マウスの動きの軌跡データから、学習者が問題を解く過程における「迷い」の発生を把握することによって、理解度の判定に繋げることが可能であるという仮説のもとで、「迷い」の判別は、履歴データを迷いあり/迷いなしの2つのラベルに分類する分類問題と捉え、機械学習における教師あり学習の手法を用いて26名の学生を対象として実験を行った。実験に備えて、学習者本人に申告させる迷いと軌跡データとの関連性を検出できるように、学習モジュールのインタフェースを改良した。具体的には、迷いありと申告した場合には、問題中のどの単語の並べ替え(単語を文中に置く位置)が難しく感じられたかも回答しないと次の段階に進めないような設定とした。マウスの軌跡データから得られる各種パラメータ(「移動時間」「移動距離」「移動速度」「静止時間」「Uターン回数(X軸方向、Y軸方向)」「D&D回数」「D&D前時間」など)の値を特徴量として、迷いのあり/なしを分類する分類器を構築して、実験で得られたデータを判定した。その結果、全体的に見て分類に貢献した上位のパラメータは「解答時間」「移動距離」「移動速度」であることが判明したが、同時に、学習者により迷いの判定に効果的な特徴量が異なることも分かった。これらの一連の実験・分析・考察は、国内の学会・学会誌において発表し、一定の評価を得た。平成28年度の主な研究計画は、1.理解度の指標を目指したマウス軌跡データの分析、2.部分点方式による採点方法の改良と実装、の2つである。1については、解答の正誤に加え、解答過程における迷いのある/なしから、学習者の理解度を導き出すために、マウスの軌跡データから迷いを判別する「分類器」を構築し、実験データを分析した。その結果、学習者全体のデータのうちいくつかの軌跡パラメータが迷い(=理解の不足)と深く関連しており、学習者グループ全体にとっての迷いの指標に繋がりうることが分かった。一方で、個々の学習者の迷いを判定するには、分類器を構築するにはデータ不足であること、また個々の学習者のマウス軌跡の個性や特徴を判定データに加味することが、課題として残った。2については、正解文に含まれる重要な熟語や構文を構成する単語の並びが正しい場合と、正解文でなくても文意がある程度通る語句を形成している場合には、部分点が与えられるように学習システムを改良することで、解答の正誤だけの採点よりも精密な採点ができるようになった。しかしながら、学習者が作り出す多様な解答すべてにシステム上で対応するには至っておらず、学習ソフトによる採点後に人の手で点検し直す必要があったので、さらなる改良の余地が残っている。H28年度の研究に引き続き、英単語並べ替え問題の解答時のマウスの軌跡情報の分析を進め、学習者が答えを導き出す過程にアプローチして、従来のe-learningシステムにおける学習時間、解答率や正解率といった学習結果の評価より正確に、学習者の理解度を把握する学習評価システムの開発を試みた。マウス動作の軌跡データから、学習者が問題を解く過程における「迷い」を見つけることができれば、理解度の判定に繋げることが可能であるという仮説を立て、「迷い」を判別するシステム(分類器)を構築した。

分類器の構築においては、マウス奇跡のパラメータ(「移動時間」「移動距離」「移動速度」「静止時間」「Uターン回数(X軸方向、Y軸方向)」「D&D回数」「D&D時間」などと、解答の迷いあり/なしとの関連性を、機械学習における教師あり学習の手法を用いた。分類器の精度を評価するため、26名の学生を対象として実験を行った。学習ソフトのインタフェースを改良し、学習者の迷いと軌跡データとの関連性を検出できるようにした。具体的には、解答過程において英単語の並べ替え(単語を文中に置く位置)が難しく感じられた単語数に応じた迷いのレベルを3段階準備し、学習者は迷いのレベルを選択しなければ、次のステップに進めないように設定した。実験で得られたデータから、学習者の迷いを分類器で判定したところ、判定の正しさを検証する「再現率」「適合率」「それらの調和平均」のいずれも、80%を超える確率で正しく迷いを検出できたことを示した。また、迷いの判別に貢献した上位のパラメータは「次に移動する単語を探す時間」「解答時間」「移動速度」「Y軸方向Uターン回数」であることも判明した。一方で、学習者により迷いの判定に効果的なパラメータが異なることも分かった。これらの一連の実験・分析・考察結果は、国内の学会・学会誌において発表し、一定の評価を得た。平成29年度の研究では主に、1.学習者の解答過程における迷いの有無の判定、2.問題の文法項目別管理と学習者の弱点克服支援システムの開発、3.より使いやすいインタフェースの構築、の3つに取り組んだ。1については、教師あり機械学習の手法を用いることでかなりの確度で迷いの有無の判定が可能であることを実証し、迷いの判定に寄与する特徴量(マウス軌跡のパラメータ)を特定したが、判定確度の向上と特徴量の絞り込みに向けてさらなる実験を行う必要がる。2については、実験に使った30問を、問題中で最も多く含まれている5つの文法項目(否定、前置詞句・副詞句、to不定詞、動名詞、関係詞)に分け、解答の正誤および迷いあり/なしと、マウス軌跡のパラメータとの相関関係を調べた。その結果、解答の正誤および迷いのあり/なしのいずれもパラメータとの間に相関関係があることが判明した。しかしながら、誤解答および迷いが示された文法項目(弱点)に焦点を当てた学習を自動的に促すシステム構築には至っておらず、弱点項目の学習は学習者の自主性または教師自身の指導にゆだねられているのが現状であるため、弱点項目を含む問題群へのリンクの準備に継続的に取り組まなければならない。3については、学習者自身が迷いの有無を申告する際の負担を軽減することがポイントである。迷いの申告は、分類器による判定が正しいかどうかを検証する上で必須のデータなので省くことはできないが、学習者にとっては問題への集中を妨げる負担でもある。その負担を最小限にするために、迷った単語を記述するのではなくクリック選択で申告できるように設計し、さらに迷として選択した単語数に基づいて迷いのレベルをシステムが判断するようにインタフェースを改良した。e-Learningシステムを用いた学習では、学習者が解答に至るプロセスを履歴情報として残すことが容易であることに着目し、本研究課題において、解答中にマウスが頻繁に移動する英単語並べ替え問題を取り上げ、マウス軌跡ならびにその他の履歴データを取得・分析することによって、学習者の解答時における「迷い」を判別するWebアプリケーションの開発に取り組んできた。
ウィルスの関与に着目した胸腺上皮性腫瘍発症メカニズムに関する探索的研究

扁平上皮癌は口腔内・咽頭・喉頭・食道・肺・子宮頚部など体外との境界に近接した部位に多く発生することが知られており、病因としてウィルス感染など後天的・外的因子が誘因となっていると理解されている。胸腺癌の多くは扁平上皮癌であるが、胸腺は前縦隔に位置する臓器であり外界への直接の暴露は無く、他部位に発生する扁平上皮癌と比べて、解剖学的局在という観点からは例外的存在である。胸腺癌や胸腺腫などの胸腺上皮性腫瘍は、その発生頻度は年齢とともに増加することが知られているため、後天的誘因の存在を疑わせるが、病因の詳細は不明である。本研究は胸腺上皮性腫瘍の発症にウィルス既感染が関与している可能性を探り、発症機構を解明することを目標としている。2017年度は胸腺上皮性腫瘍のうち、胸腺扁平上皮癌例に絞り、Nanostring社のn Counter Analysis Systemを用いた網羅的遺伝子解析を行った。胸腺癌では既知のKIT遺伝子のほか、頭頸部扁平上皮癌での発現・予後因子として知られるPRAME遺伝子の発現増強が認められる事が明らかとなった。2018年度はPRAMEの胸腺癌での免疫染色での発現を確認した。また重症筋無力症非合併胸腺腫での網羅的遺伝子解析を行い、胸腺癌と胸腺腫では遺伝子発現プロフィールが異なることを観察した。今後重症筋無力症合併胸腺腫での網羅的遺伝子解析を追加し、全体の解析を進めていく予定である。重症筋無力症の発症で発現増強が疑われているtoll like receptor 7/9シグナルやantiviral interferon type Iなどについても検討を加えていく。また重症筋無力症非合併胸腺腫での網羅的遺伝子解析を行い、胸腺癌と胸腺腫では遺伝子発言プロフィールが異なることを観察した。おおむね順調に解析が進んでいると考える。今後重症筋無力症合併胸腺腫での網羅的遺伝子解析を追加し、胸腺上皮性腫瘍の発生にどのような因子が関与している可能性があるのか、全体の解析を進めていく予定である。コントロールとして胸腺嚢胞切除例の胸腺組織を使用した。PRAME遺伝子に関しては現在免疫組織学的な検討の準備中であり、発現部位や胸腺癌予後因子となり得るかを検討していく予定である。また得られたデータのすべての解析は中途であり、今後重症筋無力症の発症で発現増強が疑われているtoll like receptor 7/9シグナルやantiviral interferon type Iなどについても検討を加えていく。胸腺癌組織での網羅的遺伝子解析の結果、PRAME遺伝子など、発現が増強している遺伝子を同定したが、本来的なウィルスとの発症関連性の可能性については未だ明らかになっていない。

2017年度は胸腺上皮性腫瘍のうち、胸腺扁平上皮癌例に絞り、Nanostring社のn Counter Analysis Systemを用いた網羅的遺伝子解析を行った。胸腺癌では既知のKIT遺伝子のほか、頭頸部扁平上皮癌での発現・予後因子として知られるPRAME遺伝子の発現増強が認められる事が明らかとなった。2018年度はPRAMEの胸腺癌での免疫染色での発現を確認した。また重症筋無力症非合併胸腺腫での網羅的遺伝子解析を行い、胸腺癌と胸腺腫では遺伝子発現プロフィールが異なることを観察した。今後重症筋無力症合併胸腺腫での網羅的遺伝子解析を追加し、全体の解析を進めていく予定である。重症筋無力症の発症で発現増強が疑われているtoll like receptor 7/9シグナルやantiviral interferon type Iなどについても検討を加えていく。また重症筋無力症非合併胸腺腫での網羅的遺伝子解析を行い、胸腺癌と胸腺腫では遺伝子発言プロフィールが異なることを観察した。おおむね順調に解析が進んでいると考える。2017年度の研究で発現増加が明らかとなったPRAME遺伝子については、免疫組織学的な検討を今後加える。また頭頸部扁平上皮癌のような予後因子となり得るかについても今後検討を加える。網羅的遺伝子解析については、胸腺癌の他の組織形や、胸腺腫などでも行いウィルスとの関連性について検索をおこなっていく。今後重症筋無力症合併胸腺腫での網羅的遺伝子解析を追加し、胸腺上皮性腫瘍の発生にどのような因子が関与している可能性があるのか、全体の解析を進めていく予定である。本研究は主にnCounter systemを用いた網羅的遺伝子解析により成り立っているが、解析パネルが高価なために、解析が無駄にならないように検索にかけるパラフィン泡埋切片からのRNA抽出や適切な対象検体の抽出に時間をかけた。そのため実際の解析開始まで時間を要し、2017年度はやや研究費の余剰が生じた。方法を確立したため、2018年度以降は、いろいろな胸腺上皮性腫瘍を解析にかける事が可能と思われ、当初の研究計画に沿った研究が可能と考えている。研究分担者の未使用分が次年度使用予定となった。次年度分と合わせて使用する計画である。
肺内薬物放出性評価システムに基づく発現持続型遺伝子ドライパウダー吸入製剤の開発

本研究は近赤外蛍光イメージング技術を応用した肺内薬物放出性評価システムを構築するとともに、そのシステムに基づき最適化された肺内徐放性キャリアを用いて、発現持続型遺伝子吸入ドライパウダーの開発を目指すものである。平成21年度は肺内薬物放出性評価システムの構築、速効性遺伝子ドライパウダーの遺伝子発現パターンの解析、肺内徐放性キャリアの探索を行った。肺内薬物放出性評価システムの構築を目的として、近赤外蛍光指示薬であるインドシアニングリーン(ICG)を含む速放性マンニトールドライパウダーを噴霧急速凍結乾燥法により調製し、in vivoイメージングシステムを用いてマウス肺内投与後のICGの体内動態を評価し、溶液の場合と比較検討を行った。溶液では、投与後速やかにICGが肺から吸収され、30分後には肝臓に、また3時間後には腸に分布することが明らかとなった。マンニトールドライパウダーついてもほぼ同様の傾向が認められたことから、ICGの体内動態に基づく肺内薬物放出性評価システムの有用性が明らかとなった。次にマンニトールドライパウダー中にプラスミドDNAを含む速効性遺伝子ドライパウダーを調製し、マウス肺内投与後の遺伝子発現パターンを解析したところ、投与6-9時間後に肺内で最大の遺伝子発現効果が認められ、24時間後にはその効果が消失することが示された。肺内徐放性キャリアの探索として、種々の賦形剤を用いてICG含有ドライパウダー化を試みたところ、イヌリンおよびデキストランについて多孔性に富み優れた吸入特性が期待できる微粒子を調製することができた。これらドライパウダーのマウス肺内投与後のICGの体内動態について、マンニトールドライパウダーと比較し若干の肝・腸移行時間遅延傾向が認められたが、十分な肺内徐放性を示すには至らなかった。今後、同システムを用いてより優れた肺内徐放性キャリアの開発を目指す。
走行トレーニングのγ運動ニューロン活動に及ぼす影響についての研究

一般に多数の骨格筋収縮の精密な空間的・時間的制御を必要とする複雑な身体運動パーフォーマンスの熟達は、その構成動作パターンを反復する'トレ-ニング'によって達成されることが経験的に知られているが、この身体運動トレーニングによって生ずる種々の適応的変化のうち特に神経系についての研究は極めて乏しい。かかる高い巧緻性が要求される複雑な身体運動パーフォーマンスの実現には、骨格筋収縮のフィードバック調整系としてのγ運動ニューロンの寄与が不可欠と考えられる。本研究は、γ運動ニューロンが身体運動トレーニングによって影響を受けるか否か、また若し受けるならば如何なるものであるかを調べるため、トレッドミルによる走行トレーニングを一定期間負荷(8-10週)いたWistar系雄ラットのヒラメ筋筋紡錘第一種および第二種終末の筋伸張に対する求心性応答を記録・解析した。ウレタンによる全身麻酔下に椎弓切除術を行い、後根を細分することによりヒラメ筋筋紡錘から単一GiaまたはGII求心性線維を分離・同定、それらの神経インパルス活動を増幅・観察し、一定速度・距離の筋伸張を反復加え、その求心性応答を連続的に記録した。一回毎に筋伸張応答は、筋伸張終了時点のPeax frequency (P)、0.5秒後のStatic frequency (S)およびこれらPとSの差のDynamic Index(DI)の発射頻度を瞬時頻度検出器により検出・計測した。走行トレーニングラット群のGia線維の反応ではPおよびDIが、GII線維の応答ではP、SおよびDIが、非トレーニングのコントロールラット群に比べて有意に増大した。Gia線維のPおよびDI増加はdynamicγ運動ニューロンの賦活が明らかであるが、GII線維のP、SおよびDIの増大はstaticγ運動ニューロンの賦活を示すものの、Gia線維におけるSの増大に伴うPの減少が一例も見られなかった点は、staticγ運動ニューロン賦活を全面的に肯定することが難しいと考えられた。これらの実験結果は、トレッドミル走行トレーニングによって生じたdynamicγ運動ニューロンの賦活を示唆するものと考えられた。本平成9年度基盤研究(C)(2)-科学研究費補助金交付決定通知を受けると同時に、研究の開始に必須となる各種基本的実験装置を発注したが、その内特に実験開始の遅延を起因したのは筋紡錘求心性インパルス観察・解析(dynamic γかstatic γ)に必要な一連のNeurolog計測器類(英国、Digitimer社)の納期(平成9年12月)であり、今年度内の目的とする走行トレーニングラットの筋紡錘求心性インパルスのデータを何ら得ること無しに終わった。しかしかかる状況下においても、広い意味での本研究の開始には着手した。本研究の骨子となるラットの走行トレーニング負荷による運動機能系の適応的変化を補足する一連の実験を予備試験的に行い、本研究の最終目標とする身体トレーニングによる適応的変化を、ヒラメ筋および長指伸筋γ運動ニューロン活動という機能的変化として補足できる可能性を強力に支持する結果を得た。その予備試験的実験は、中等度速度(30m/分)・一定時間(9分/日)の走行トレーニングをラットに一定期間(6週間)負荷し、そのヒラメ筋および長指伸筋の神経筋接合部の伝達機能にいかなる変化が観察され得るか否かを、刺激後増強Post-tetanic potentiation(PTP)について調べ、コントロール群のそれと比較・検討した。その結果、今回用いた条件の走行負荷(いわゆる持久性トレーニング)されたラットのPTPの持続時間が有意に延長(約2倍)することがヒラメ筋のみに認められた。

身体トレーニングによって生ずる適応的変化の観察が骨格筋の形態的変化にとどまる多くの従来の研究報告と異なり、これらの結果は神経系を含む機能的適応変化の実証を意味すると同時に、本研究の目的とするトレーニング効果による適応的変化として、γ運動ニューロン等の中枢神経系内においても機能的変化が生じ得ることを強く示唆する意義をもつと考えられる。一般に多数の骨格筋収縮の精密な空間的・時間的制御を必要とする複雑な身体運動パフォーマンスの熟達は、その運動動作パターンを反復する`トレーニング'により達成されることが経験的に知られているが、このトレーニングによって生じる適応的変化特に神経性要素についての研究は乏しい。本研究は、骨格筋収縮のフィードバック調節系としてはたらくγ運動ニューロン活動が身体運動トレーニングによる適応的変化を受けるか否かを明らかにするため、走行運動トレーニングを行ったラットのγ運動ニューロン活動を調べた。Wistar系雄ラットに、トレッドミルによる、今回は先ずいわゆる持久性トレーニング(走行速度12.5m/分、30分間×2の1日当りの走行を5日間/週)を8週間行ったトレーニング・ラット群のγ運動ニューロン活動の賦活・抑制を、筋伸張による筋紡錘第1種終末からの単一求心性神経線維GIaのインパルス応答により解析し、コントロールラット群のそれと比較した。今回はヒラメ筋Soleusの筋紡錘第1種終末の筋伸張に対する求心性応答を調べるために、ラットのウレタン腹腔内投与による全身麻酔下に、椎弓切除術(L1-S2)を行い、後根末梢端神経束を細分してヒラメ筋伸張に応ずる単一求心性神経線維を選び出し、神経伝導速度(25m/s以上)・単攣縮中および筋伸張の特長的インパルス発射パターンからGIa線維を同定した。筋伸張は、一定の速度(10mm/s)・距離(3mm)・期間(3-5秒間)のramp-and hold-stretchを反復して(30秒毎)加え、一回毎の筋紡錘求心性インパルス応答は、筋伸張終了時点のPeak frequency(P)、0.5秒後のstatic frequency(S)およびこれらの差のDynamic index(DI)を瞬時頻度検出器により計測・記録した。その結果は、トレッドミル走行トレーニングラット群のP、S、DIはいずれも、非走行ラット群のそれらに比べ高い値を示した。かかるP値の増大に伴うDI値の、S値の増大を伴わない増大、dynamic γ運動ニューロンの賦活を示すものと考えられた。これは、今回加えた比較的長期(8週間)の持久制タイプの走行運動トレーニング負荷によってγ運動ニューロン活動に適応的変化が起こることを示しており、更にそれはdynamic γ運動ニューロンの賦活を示唆するものであることが考えられるが、この点については更にヒラメ筋筋紡錘第2種終末の筋伸張による求心性応答の解析が今後の課題として残った。
無線通信環境と有線ネットワークのシームレスな接続に関する研究

本年度、無線通信環境と有線ネットワークのシームレスな接続に関する研究を行ったのは、次の点である。無線通信環境から有線ネットワークへ接続する際に問題となる点の一つとして、限られた無線資源をいかに効率よく各端末に割り当てるかという問題がある。これに対し、本年度はマルチメディアトラヒックを想定したアクセス制御手法と低軌道衛星通信におけるチャネル割り当て手法について検討を行った。マルチメディアトラヒックでは、データのようなパケットの発生に時間的に相関のないトラヒックだけでなく、音声や動画像のようにパケットの発生に時間的な相関があるトラヒックも扱われる。このようなトラヒックの統計的性質に着目すると、未来における同時送信パケット数の瞬時値を推定できる可能性がある。そこで適応アルゴリズムの原理を用いることで、過去に発生したパケット数から未来の同時送信パケット数を推定し、この値に基づく効果的なアクセス制御方式を提案した。また、低軌道衛星通信は低い高度をとる非静止衛星であり、軌道上を非常に高速に直線的に移動している。本研究ではこの特徴を利用して、ハンドオーバが生じてもユーザはハンドオーバ以前と同一のチャネルを使い続けることによりドロッピングを防ぐ方式を提案した。さらに、1つの衛星におけるサービスエリアの集中管理が可能という特徴に着目し、サービスエリア内の全セル内におけるユーザ分布およびチャネル分布から求まる目的関数を用いた動的チャネル割り当て方式を提案した。これらの結果を電子情報通信学会論文誌に2件、IEEEの国際会議において2件、電子情報通信学会の国内会議において2件発表済みである。本年度,無線通信環境と有線ネットワークのシームレスな接続に関する研究を行ったのは,次の点である.無線ネットワークからインターネットヘ接続する場合に,頻繁に利用されるTCPの特性についての解析モデルを提案した.提案した解析モデルでは,無線ネットワーク特有のセグメント損失の発生に注目することで,今まで同時に考慮されてこなかったスロースタート,ファーストリトランスミット,ファーストリカバリ,タイマ期間の指数増加を考慮した.また,無線ネットワークでのTCPの特性についてTCP Tahoe,TCP Reno,TCP New Renoについて,TCPの再送機構の発生確率,スループット特性を解析的に示した.また,解析値の妥当性を検討するために,既存の研究で多数利用されているネットワークシミュレータnsを利用することで,提案した解析モデルが極めてシミュレーション値と近い値を示すことも明らかにした.また,無線ネットワークでのTCPのスループットは,セグメント損失率の上昇に対して,急激に劣化することがわかったため,無線リンクにおいて誤り訂正機構を適用することを考えた.その際,本研究では,一般に多く利用される誤り訂正機構として,FECとしてReed Solomon符号,ARQとしてGo-Back-N方式を適用し,これらの機構によるTCPの特性改善を解析的に検討した.この結果,無線リンクの伝送誤りの発生の種類に合わせた誤り訂正機構を適用しなければ,TCPの特性改善は望めないことを示した.これらの検討により,既存の研究では主にシミュレーションなどから議論されてきたTCPの特性を,既存の解析手法に比べ,小さい誤差で解析的に検討することが可能となった.また,今まで独立なものとして検討が行われてきた,TCPと無線リンクの特性を,関連するものとして総合的かつ解析的に検討することが可能となった.これらの結果をIEEEの国際会議において1件,電子情報通信学会において2件,情報処理学会において1件発表済みである.本年度、無線通信環境と有線ネットワークのシームレスな接続に関する研究を行ったのは、次の点である。
C-H結合活性化を活用した一次元多環芳香族炭化水素類の合成

芳香環が密集した構造を迅速に構築し、重合に適用可能な反応の探索・検討を行った。まず、ロジウム錯体を触媒として、ジインと2等量のビフェニルボロン酸が、C-H結合切断を伴いながら効率的に分子間環化反応を起こし、1,4-ビス(10-アリールフェナントレン-9-イル)ベンゼンが得られる条件を見出した。この化合物に対して分子内環化反応を行うことにより非平面構造を有する発光性の多環芳香族炭化水素が得られた。また、ルテニウム錯体を触媒としたC-H結合切断を伴う1-ナフチルシランとアルキンの分子間環化反応により、含ケイ素多環芳香族炭化水素であるシラフェナレンを得る手法を開発した。多環芳香族炭化水素やナノグラフェンは有機半導体として優れた性質を有するものが多く、エッジや次元に依存したユニークな物性を示すため、それらを効率良く、かつ精密に合成する手法が求められている。本年度は、一次元に拡がった多環芳香族炭化水素やラダー型共役系高分子の合成を目的として、重合に適用可能である高効率な分子間環化反応の探索を行った。特に効率の良さという点に関して、C-H結合の切断を伴うこと、反応により芳香環が拡大すること、複数の反応点で環化が起こること、の3点を満たす反応について検討した。2',5"-ジヨード-p-ターフェニル誘導体とジフェニルアセチレン類を酢酸パラジウムとホスフィノビフェニル型配位子の存在下で反応させた。主生成物はジベンゾアントラセン誘導体であり、分子間の環化が2ヶ所で効率よく進行した。また、1,4-ビス(フェニルエチニル)ベンゼン類と2-ビフェニルボロン酸誘導体をロジウム触媒と銀塩の存在下で反応を行った。結果として両方のアルキン部位で環化が起こり、1,4-ビス(9-フェナントリル)ベンゼン類が収率良く得られた。この反応では1,4-ビス(フェニルエチニル)ベンゼンの末端ベンゼン環にアルキル基やアルコキシ基を有する場合においても反応が問題なく進行した。これらの反応系では複数ヶ所の環化が起こるため、ジヨードモノマーあるいはジボリルモノマーとジインモノマーの重合に適用できる可能性を有するものと考えられる。本年度も前年度に引き続き芳香環が密集した構造を迅速に構築し、重合に適用可能な反応の探索・検討を行った。まず、ロジウム触媒によるボロン酸と内部アルキンの分子間環化反応に関する先行研究を参考にして、ジインと2等量のビフェニルボロン酸が、C-H切断を伴いながら効率的に分子間環化反応を起こし、1,4-ビス(10-アリールフェナントレン-9-イル)ベンゼン(1)が得られる条件を見出した。この反応の基質をジインとジボロン酸へと変更することによりポリマーが得られると考えたが、現在のところポリマーが得られていない。しかしながら、化合物1に対して酸化剤を用いた脱水素型分子内環化反応を行うことにより多環芳香族炭化水素(PAH、2)が得られた。この化合物2は予備的な単結晶X線構造解析により,大きな立体反発の影響で大きくねじれた非平面構造であることが明らかとなった。平面性の高いPAHと比較して、化合物2は非平面構造のためクロロホルムやTHFといった有機溶媒への溶解性が高く、強い発光性を有していた。次に、多環式芳香族化合物を効率的に構築することを目的として1-ナフチルシランをアルキンの新規分子間環化反応により含ケイ素6員環を有するシラフェナレンの合成について検討をおこなった。その結果カルボニルとトリアリールホスフィンの両方を配位子として有するルテニウム錯体が、C-H切断を伴う分子間環化反応を触媒することが明らかとなった。1-ナフチルシランのケイ素上の置換基について検討を行った結果、(1-ナフチル)ジフェニルシランが種々の内部アルキンと定量的に反応し、シラフェナレンが得られることを見出した。現在のところ,アルキンが水素アクセプターとして消費されてしまうことが分かっている。今後、重合反応へ展開するためには、酸化剤や水素アクセプター等を添加し、アルキンの消費を抑制する必要があると考えられる。26年度が最終年度であるため、記入しない。有機化学26年度が最終年度であるため、記入しない。複数の反応点で環化が同時に起こり、多環芳香族炭化水素の前駆体となり得る骨格を効率よく構築する条件を見出せたため。分子間環化反応を重合反応に適用する。また、従来のクロスカップリングと直截的アリール化を組み合わせたポリマー合成等についても検討を行う。
適切な意志力を制御するノルアドレナリンの役割

これまでの動物モデルを用いた研究により前頭前野のノルアドレナリン過不足がある状態では恐怖の抑制が適切に行われないことを示されている。そこで本研究ではこのようなモデルを人工的に作成し、恐怖抑制タスクを行う過程での前頭前野の神経活動を観察する。これによりノルアドレナリンの過不足状態においてどのような異常が神経活動レベルで起こっているのかを明らかにする。
Epstein-Barrウイルス感染におけるヒト白血球でのインフラマソーム応答

ヒト白血球由来細胞株を用いてEpstein-Barrウイルス(EBV)感染時のインフラマソーム応答について検討した。通常EBVはヒトのB細胞に持続感染するが、細胞株を用いた実験では単球やT細胞にも感染することが示された。B細胞、T細胞由来の細胞株はEBV感染時にインフラマソーム応答の産物であるIL-1βの産生はみられなかったが、単球由来の細胞株ではIl-1βの産生がみられた。さらに細胞中の活性化カスパーゼ-1とパターン認識受容体の一つであるAIM2( Absent in Melanoma 2)の発現が増加しており、これら分子がEBV感染時の単球のインフラマソーム応答に関与していると考えられた。(1)ヒト単球由来細胞株THP-1におけるEBV感染ヒト単球由来細胞株であるTHP-1を用いてEBVが感染するかまず検討した。感染するとGFP陽性となるEBVを産生するEBV陽性上皮由来細胞株(AGS-GFP-EBV)の培養上清を濃縮し、ウイルス液として用いた。あらかじめBリンパ球由来の細胞株であるBJABを用いて上記ウイルス液とインキュベートし、48時間後、フローサイトメトリーでGFP陽性細胞(EBV感染細胞)をカウントして感染率を算出し、感染力価( Green BJAB Unit )を設定した。6×10^5 GBUの力価のウイルス上清を用いてTHP-1とインキュベートしたところ、48時間後に1.76%ほど感染を認めることがわかった。(2)THP-1におけるインフラマソーム応答THP-1におけるインフラマソーム活性を調べるため、EBV感染後の培養上清のIL-1βをELISAにて測定した。結果、感染24時間から48時間後にIL-1βの産生が認められた。細胞中のcaspase-1をイムノブロットで確認したところ、感染6時間後から活性化caspase-1の発現上昇をみとめた。インフラマソームを構成するパターン認識受容体(PRR)のうち、NLRP3 (NOD-like receptor 3)、IFI16(Gamma-interferon-inducible protein 16)、AIM2 ( Absent in Melanoma 2)についてイムノブロットで検討した。結果AIM2のみ、発現上昇をみとめた。mRNAの解析では感染6時間後にIL-1βmRNAの発現上昇をみとめた。また、PRRのうち、AIM2のみが、感染6時間後にmRNA発現が上昇していた。以上から、THP-1のEBV感染に対するインフラマソーム応答にはAIM2が関与していると考えられた。ヒト単球細胞株であるTHP-1にEBVが感染するか確かめるために様々な条件で検討した結果、超遠心(4°C、1,6000G、90分)で培養上清を300倍に濃縮したウイルス液を用いるとインキュベート48時間後に感染細胞を確認できた。感染細胞は共焦点顕微鏡で確認し、フローサイトメトリーでGFP陽性細胞をカウントして感染率を算出した。EBVはBリンパ球の細胞表面にあるCD21に結合して侵入することが知られており、THP-1でもCD21が発現しているか、フローサイトメトリーで解析したところ、THP-1はCD21を発現していないことが分かった。CD21非発現細胞では、CD35とHLA-DR共発現下においてEBVが感染することが報告されており、CD35とHLA-DRの発現を調べたところ、それぞれ41.5%、39%発現していた。次に、THP-1のEBV感染によるインフラマソーム応答について検討したところEBV感染24時間後から上清中にIL-1βが放出されることが分かった。さらに、感染6時間後から活性化したcaspas-1の発現が上昇していた。Caspase-1阻害薬を投与下に同様の実験を行ったところ、培養上清中のIL-1βは有意に減少した。以上から、THP-1のEBV感染時におけるIL-1βの産生はcaspase-1依存性であることが分かった。Caspas-1の活性はインフラマソーム複合体により起こっていると考えられ、インフラマソームを構成することが知られているパターン認識受容体のうち、AIM2、NLRP3、IFI16について検討した。するとEBV感染後THP-1細胞ではAIM2のみ発現が上昇していることがイムノブロットで示された。以上から、THP-1におけるEBV感染時のインフラマソーム応答にはAIM2が関与していると考えられた(1)ヒト単球初代培養細胞におけるEBV感染とインフラマソーム応答(2)SiRNAを用いたAIM2ノックダウン細胞におけるインフラマソーム応答これまでの検討から、単球のEBV感染に対するインフラマソーム応答にはAIM2が関与していると考え、エレクトロポレーション法を用いてTHP-1細胞にAIMおよびコントロールのsiRNAを導入し、AIM2ノックダウン細胞を作成し、同様にウイルス上清インキュベート後のインフラマソーム応答について検討した。ウイルス上清とインキュベート後のmRNAおよびイムノブロットの解析でcaspase-1は抑制された。しかし、培養上清中のIL-1βの産生には有意差が見られなかった。

通常EBVはヒトのB細胞に持続感染するが、細胞株を用いた実験では単球やT細胞にも感染することが示された。B細胞、T細胞由来の細胞株はEBV感染時にインフラマソーム応答の産物であるIL-1βの産生はみられなかったが、単球由来の細胞株ではIl-1βの産生がみられた。さらに細胞中の活性化カスパーゼ-1とパターン認識受容体の一つであるAIM2( Absent in Melanoma 2)の発現が増加しており、これら分子がEBV感染時の単球のインフラマソーム応答に関与していると考えられた。これまでの検討で、濃縮培養上清でEBVが感染し、インフラマソーム応答を起こすことが考えられたが、濃縮培養上清には細胞断片なども含まれるために、それらがインフラマソーム応答を起こしている可能性もある。ウイルス粒子を除去した上清とインキュベートしてインフラマソーム応答がみられるかについて検討する。ヒト単球由来細胞株であるTHP-1においてEBV感染とEBV感染時のインフラマソーム応答が確認できたので、初代ヒト単球細胞を用いて同様に検討する。単一ドナー由来のCD14陽性ヒト単球細胞をこれまでと同じ条件下でEBVとインキュベートし、48時間後に共焦点顕微鏡やフローサイトメトリーによるGFP陽性細胞の解析し、感染するか検討する。また、培養上清中のIL-1βの測定をELISAで測定し、イムノブロット及びRTPCRによる細胞中のインフラマソーム関連分子の解析を行う。THP-1の実験から、EBV感染時のインフラマソーム応答にはAIM2が関与していると考えられた。そこで、AIM2をノックダウンしてEBV感染時のインフラマソーム応答について検討する。AIM2のノックダウンにはsiRNA導入法を行う。本法でノックダウンを確認後、EBVウイルス液とインキュベートして経時的なIL-1β産生やインフラマソーム関連分子の発現について解析する。ヒト化マウスを用いてin VivoでのEBV感染時におけるインフラマソーム応答について検討する。免疫不全マウス(NOGマウス)にヒト臍帯血幹細胞を注入し、ヒト血球細胞の生着をフローサイトメトリーで確認できたらEBVをマウスに感染させる。感染数日後、マウスの血液を採取して、IL-βやIL-18をELISA法で測定し、対照マウスとサイトカイン量を比較する。また、マウスにおける、インフラマソーム活性を、PCRやウエスタンブロッティング等により解析する。感染症今年度購入予定していたウェスタンブロット関連の物品が、想定より安く購入でき、数も少なくて済んだため次年度に繰り越すことにした。この予算は次年度、単球以外のヒト白血球の分離およびインフラマソーム応答の実験に使用する予定である。
ディドロの「理想的モデル」論研究

本研究はフランス啓蒙主義の哲学者ドゥニ・ディドロの美学理論である「理想的モデル」論を、その生成と同時代の理論との関係に着目しながら検討する。「理想的モデル」とは『百科全書』の項目「ADMIRATION」から『俳優に関する逆説』までおよそ20年間かけてディドロが様々な文脈において使用しつつ彫琢した概念である。この概念を中心に展開された理論は、深源をプラトン哲学に持ちながらも、観念論と唯物論の弁証法のなかでの「判断」の契機の特異な位置づけを浮き彫りにする点で18世紀の美学理論のなかでも特筆すべきものである。本研究は、この理論の美学的達成と同時にその政治的含意をあきらかにすることを目指す。