hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
グラフにおける歩道の存在不可能性の証明手法の開発とその応用

完全グラフのオイラー回路の、探索問題への応用を主目的としてボードゲームであるペンタゴの完全解析結果を対象にした大規模データ処理に関する研究を平成27年度から継続している。15点からなる完全グラフのオイラー回路で11以下の長さの部分閉路をもたないものは存在しないと予想している。15点からなる完全グラフについて、192GB主記憶、12コアのワークステーションを使ったランダムな探索をかなりの規模で実施したが、そのようなオイラー回路を見付けることはできなかった。ただし、平成28年度末の時点で膨大な探索空間を手に負える範囲の規模に縮小するための理論が完成していないため予想の検証の目処は立っていない。上記の探索実験において探索時間の短縮の手段としてGPGPUの活用を考えているが十分に活用できていない。15以上の任意の奇数nについてn - 4以下の長さの部分閉路をもたないものが存在しないことを予想しているが、その理論的解明の糸口すら得られていない。平成29年10月に開催された平成29年度電気・情報関連学会中国支部連合大会において「完全解析結果に基づいた畳み込みニューラルネットワークによるペンタゴの学習」という標題で講演した。さらに平成30年2月に開催された京都大学数理解析研究所共同研究(公開型)「代数系、論理、言語とその周辺領域」において"Learning finitefunctions by neural networks"という標題で講演し、さらに平成30年3月に開催された第13回組合せゲーム・パズル研究集会において「正確な訓練データを使ったニューラルネットワークによるゲーム局面の学習」という標題で講演した。これらの研究の過程でGPUを使った高並列計算技術を習得し、ボードゲームであるペンタゴの局面のニューラルネットワークによる学習についての実験結果が得られた。特に、最後に挙げた「正確な訓練データを使ったニューラルネットワークによるゲーム局面の学習」という標題の講演の研究では、様々な難易度の局面を含む訓練データによる学習から得られたニューラルネットワークよりも、その一部分である難解な局面だけを集めた小さい訓練データによる学習から得られたニューラルネットワークの方が学習量が少ないにも拘わらず僅かであるが性能が良くなるという結果が得られた。ニューラルネットワークは、一般的な探索問題についても有用であると期待される。例えば、現在15点からなる完全グラフのオイラー回路で11以下の長さの部分閉路をもたないものが存在しないことを予想しているが、その反例を効率的に見付けようとすればニューラルネットの活用し探索範囲を見込みの有りそうなものに制限することが有力な手段になり得る。さらに、ニューラルネットによる学習のための高並列計算技術、特にGPUの活用技術を今後完全グラフのオイラー回帰長の探索に応用することを計画している。現時点でも、15以上の任意の奇数nについてn - 4以下の長さの部分閉路をもたないものが存在しないことを予想しているが、その理論的解明の糸口すら得られていない。そのため、15点からなる完全グラフのオイラー回路で11以下の長さの部分閉路をもたないものが存在しないこと、すなわち15点からなる完全グラフのオイラー回帰長が11であることを計算機実験により究明することを目指しているが、平成30年度当初から利用可能な九州大学のスーパーコンピュータシステムITOを使っても、従来の単純な探索アルゴリズムを並列化しただけでは平成30年度内に実験が終了しないことが確実である。
日中比較による農村の貧困状況からの脱却方策に関する共同調査研究

(1)研究実績報告書今年度(最終年度)は、前年度の日本における島根県、青森県、および北海道における日中合同調査の結果を踏まえ、中国内陸部における貧困状況とそこからいかに脱却を図ろうとしているかについて実態調査を実施した。広大な中国大陸におけるごく一部に限定せざるをえなかったが、中国農業科学院および中国社会科学院によるこれまでの資料分析作業を踏まえて、四川省重慶市、湖北省宣昌市、武漢市、江蘇省丹陽市、無錫市、および山西省大寨地域など、典型的対象地を選定することができた。いずれも市街から数十キロ離れた農村、農山村であったが、現地の関係機関の支援・協力によって関係機関および農家において聞き取り調査を実施することができた。中国内陸部といっても種々の農村社会構造が、その自然条件、経済的立地によって異なっているが、したがって貧困からの脱却方策もそれら農村社会構造などによって異なっていることが明らかとなった。とくに、「老、少、辺」といわれる老革命根拠地、少数民族地域、および辺境地域においては貧困状況は最も厳しく、共通的には自然条件あるいは交通条件における劣悪性が大きな要因とみられた。本プロジェクトは本年度で終了するが、このような貧困からの脱却方策に関する調査研究は、「老、少、辺」に焦点を合わせて、今後も継続していく予定である。(2)研究成果概要本調査研究は、平成4年度に日中双方がそれぞれ統計資料によって全国的に生活水準等の解析を行い、その上で、日本における島根県および青森県の農村・農家実態調査を実施し、かつての貧困からの脱却をいかに達成してきたか、そこにおける対象地域および日本における特異的条件のあり方等について、日中合同して議論を重ねてきた。それらを踏まえて、平成5年度には、中国内陸部における農村・農家実態調査を実施してきたものである。日本における調査結果からは、日本の農家も小農生産でありながらも、農業協同組合に結集して農産物市場対応を行ってきたこと、それら系統組織による各種の事業展開、とくに農民資本による地域的営農振興が図られてきたこと、日本の農業は基本的には私有性に基づく営農展開でありながらも、一方で公共牧野などの公的な農家・農業支援がなされてきたこと、農業経営も法人経営や各種生産組織のように、さまざまな経営形態が複線的に模索されてきていること、などに日本の農山村における農業展開の特徴があることを指摘した。また、このような日本の農家・農業の展開において、日本全体に共通する特質として、農業者の教育水準、知識水準、および相互扶助精神など、人的要素の高い資質であることが、日中双方において共通して認識されたが、したがって劣悪な条件による貧困からの脱却方策のあり方についても、物的条件の整備と同時に、ある意味ではそれら整備の前提条件として、農業者教育制度など人的育成に関する条件を、長期的な観点から、整えることが最も重要な方策であるという認識がえられた。それらを踏まえて中国内陸部における農村実態をみると、貧困の背景としての共通項は、歴史的条件をとりあえず等閑視すれば、なによりも自然条件といえる。このことは万国共通の条件といえるが、中国に即してみれば、広大な中国大陸においては自然条件は一様ではなく種々さまざまな様相を呈しており、とくに劣悪な自然条件によって、交通網の絶対的不足が、物流のみではなく各種情報や教育の機会あるいは医療サービスにおける低位性をもたらしているといえよう。このような自然的条件は、同時に、農業生産力の発現における相対的な低位性と、頻繁に発生する自然災害をもたらしている。とくに内陸部における干ばつの発生頻度は著しく、さらに集中豪雨による重層的災害が生じていることが自然的条件の中でも顕著な特徴といえる。このような自然的条件による貧困は、社会的基盤整備化の遅延・脆弱性によって増幅してきたといえるが、以上のような実態にあるために、近年まで食糧を確保するための自給自足的形態によって農業が営まれてきており、商品経済的農業生産は省みられないままにあったことにも、その要因とみられる。そこでは食用作物を単作的に作付することから、頻繁に発生する災害によるリスクはそれだけ大きく、しばしば自給自足体制自体も脅かされることが多かった。このような状況からの脱却方策は、それぞれの農村社会がおかれた社会的・経済的・自然的条件によって異なるものであった。例えば、四川省では有機的な多角複合の立体農業の確立によるものであり、江蘇省では、農業そのものではなく、むしろ郷鎮企業の発展によって農業を支援するという方策であった。山西省大寨では文革以後全国的な批判に晒されながらも、さらに農業における振興のあり方を模索してきたが、最近になって郷鎮企業も積極的に導入し始めたばかりであった。共通することは、農業振興であっても郷鎮企業化であっても、情報収集活動が鍵になっていること、そのためには人材の確保、基本的には人材の育成が最も重要であるという認識が、現地においてももたれ始めていることである。中国内陸部は、このように農村振興へのさまざまな試みをとおして、かつての貧困からの脱却を図っている真っ最中といえるが、1人当たり純収益でみた地域間格差は相変わらず存在し、むしろ更に格差拡大の傾向が読み取れる。したがって、このような中国内陸部における貧困層の存在問題は依然として残されている課題といえよう。

広大な中国大陸におけるごく一部に限定せざるをえなかったが、中国農業科学院および中国社会科学院によるこれまでの資料分析作業を踏まえて、四川省重慶市、湖北省宣昌市、武漢市、江蘇省丹陽市、無錫市、および山西省大寨地域など、典型的対象地を選定することができた。いずれも市街から数十キロ離れた農村、農山村であったが、現地の関係機関の支援・協力によって関係機関および農家において聞き取り調査を実施することができた。中国内陸部といっても種々の農村社会構造が、その自然条件、経済的立地によって異なっているが、したがって貧困からの脱却方策もそれら農村社会構造などによって異なっていることが明らかとなった。とくに、「老、少、辺」といわれる老革命根拠地、少数民族地域、および辺境地域においては貧困状況は最も厳しく、共通的には自然条件あるいは交通条件における劣悪性が大きな要因とみられた。本プロジェクトは本年度で終了するが、このような貧困からの脱却方策に関する調査研究は、「老、少、辺」に焦点を合わせて、今後も継続していく予定である。(2)研究成果概要本調査研究は、平成4年度に日中双方がそれぞれ統計資料によって全国的に生活水準等の解析を行い、その上で、日本における島根県および青森県の農村・農家実態調査を実施し、かつての貧困からの脱却をいかに達成してきたか、そこにおける対象地域および日本における特異的条件のあり方等について、日中合同して議論を重ねてきた。それらを踏まえて、平成5年度には、中国内陸部における農村・農家実態調査を実施してきたものである。日本における調査結果からは、日本の農家も小農生産でありながらも、農業協同組合に結集して農産物市場対応を行ってきたこと、それら系統組織による各種の事業展開、とくに農民資本による地域的営農振興が図られてきたこと、日本の農業は基本的には私有性に基づく営農展開でありながらも、一方で公共牧野などの公的な農家・農業支援がなされてきたこと、農業経営も法人経営や各種生産組織のように、さまざまな経営形態が複線的に模索されてきていること、などに日本の農山村における農業展開の特徴があることを指摘した。また、このような日本の農家・農業の展開において、日本全体に共通する特質として、農業者の教育水準、知識水準、および相互扶助精神など、人的要素の高い資質であることが、日中双方において共通して認識されたが、したがって劣悪な条件による貧困からの脱却方策のあり方についても、物的条件の整備と同時に、ある意味ではそれら整備の前提条件として、農業者教育制度など人的育成に関する条件を、長期的な観点から、整えることが最も重要な方策であるという認識がえられた。それらを踏まえて中国内陸部における農村実態をみると、貧困の背景としての共通項は、歴史的条件をとりあえず等閑視すれば、なによりも自然条件といえる。このことは万国共通の条件といえるが、中国に即してみれば、広大な中国大陸においては自然条件は一様ではなく種々さまざまな様相を呈しており、とくに劣悪な自然条件によって、交通網の絶対的不足が、物流のみではなく各種情報や教育の機会あるいは医療サービスにおける低位性をもたらしているといえよう。このような自然的条件は、同時に、農業生産力の発現における相対的な低位性と、頻繁に発生する自然災害をもたらしている。
琵琶師伝集『胡琴教録』の総合的研究

本研究は3つの分掌に分かれ調査研究を継続している。すなわち、【A.諸本研究】、【B.人物・史実】、【C.奏法・楽理】である。各分掌における研究実績は以下のとおり。【A.諸本研究(担当:磯水絵、櫻井利佳、神田邦彦)】昨年に引き続き『胡琴教録』の諸本を中心に研究を進めた。『胡琴教録』の諸本には真名本(下巻のみ)と仮名本(上下巻)とがあるが、神田邦彦は両者を比較検討して、『胡琴教録』の原態は真名本であり、仮名本は真名本を仮名書きに直そうとしたものであることを定例研究会において発表した。『胡琴教録』の本文校訂、注釈、内容理解を進める上で意義ある発表になったと考える。今後論文化の予定である。なお、年度末近く、京都市立芸術大学日本伝統音楽研究センター准教授、武内由美子氏の好意により、イギリスに渡っている以下の『胡琴教録』の写真を入手できた。大英博物館蔵平松家旧蔵本(1上下巻の仮名本2-9/10、2上下巻の仮名本2-17/18、3下巻の真名本2-19)、4英国ケンブリッジ大学図書館蔵菊亭旧蔵『胡琴教録』上巻の仮名本(143)。【B.人物・史実(担当:櫻井利佳、磯水絵、神田邦彦)】昨年度行った『胡琴教録』の各登場人物についての先行研究調査、索引作成を元に、更に研究を進めた。諸楽書(『群書類従』『続群書類従』両管絃部、『図書寮叢刊』伏見宮旧蔵楽書集成第一三巻)の人物索引作成を、学生・大学院生のアルバイトの協力を得て、作業工程全体の約半分を終えた。【C.奏法・楽理(担当:ネルソン、根本千聡)】『三五要録』などの琵琶譜の分析を通して、本文の解釈に関わって具体的な成果が着実に挙がってきているが、いまだ論文発表する段階に至っていない。なお、ネルソンは、楽琵琶奏者の中村かほる氏の協力のもと、琵琶秘曲について国内学会で報告・実演を行った。研究の核となる『胡琴教録』の輪読作業には、予想したよりも時間がかかっている。主たる原因は、諸本の現存状況にある。上記の通り、上巻は原態を留めないと思われる仮名本の本文しか伝わっておらず、本文に難解なところが多いため、解釈作業を容易に進めることができない。現時点では上巻の校訂本文作成は7割ほど済んでいる。なお、上記の通り、各分掌における個別の調査研究は順調に進んでいるため、研究計画の大勢に重大な支障は生じないものと考える。停滞している上巻の輪読作業を続ける。また引き続き、A、B、Cの作業を遂行する。並行して、解題、翻刻、注釈、現代語訳、年表、人物略伝、楽譜資料、解説などの執筆作業を続ける。【A.諸本研究】引き続き、諸本調査を行う。順次、未確認資料の実見調査を行っていく。また、真名本系統の精読を行う。神田(2006)を基に、猪熊信男旧蔵本、岩瀬文庫蔵本、新しく入手できた平松家旧蔵本など、真名本系統の諸本を精読し、輪読の成果もふまえて『胡琴教録』下巻の校訂本文を作成する。【B.人物・史実】琵琶の流派についての検証を続ける。『胡琴教録』の琵琶伝承について、琵琶の二大流派である桂流、西流とどのような関係にあるのか、検討していく。また、『胡琴教録』中の記事と史実との整合性の確認を行う。主要な出来事については年表にまとめ、一覧できるようにする。【C.奏法・楽理】琵琶の実演による検証実験を行う。検証の際には琵琶の演奏に精通した専門家に協力を依頼する。これらの成果を踏まえ、2019年12月、説話文学会・仏教文学会合同例会のシンポジウムで、「音楽と文学ー『胡琴教録』の作者は鴨長明かー」(仮)の題で次の諸問題を取り上げ、プロジェクト構成メンバー全員に2名程を加え、発表する予定である。1『胡琴教録』の諸本と作者の問題、2その成立した背景にある、琵琶の二大流は(桂流と西流)、3『源氏物語』に描かれた音楽場面を端緒として『胡琴教録』に見られる曲種、調絃法や秘曲、それにまつわる説話、また流派による奏法の違い、以上の3点である。本研究は次記A、B、Cの各分掌に分かれ調査研究を継続している。【A.諸本研究(担当:磯水絵、櫻井利佳、神田邦彦)】関西方面における未確認の『胡琴教録』伝本および『教訓抄』、『続教訓鈔』等の関連諸資料の調査を行なった。2018年2月1920日、3月2728日の2度に渡り、相愛大学・龍谷大学・立命館大学の各附属図書館、京都大学附属図書館・同文学研究科図書館を調査。

『胡琴教録』は(神田2006)にまとめたものを含めての再調査・確認が主となったが、2006年調査時点での見落とし等、書誌情報にいくつかの訂正をすることができた。なお、京都大学の所蔵資料に関しては、さらなる調査の必要性が認識された。【B.人物・史実(担当:櫻井利佳、磯水絵、神田邦彦)】『胡琴教録』に載る人物すべてについて、既存の調査(森下1995)と照合しつつ訂正の有無を確認した上で、各人物についての先行研究調査を行なった。この調査は終了したため、次年度からは、この結果をふまえた人物調査と執筆作業に取りかかる。【C.奏法・楽理(担当:ネルソン、本塚亘、根本千聡)】研究課題26370112「琵琶古楽譜の独奏曲ー失われた演奏伝承の「再生」に向けてー」の延長が認められたことにより、『胡琴教録』とほぼ同時期に成立した琵琶譜『三五中録』の解読を中心として、琵琶独奏曲のリズム・テンポ・奏法の解明に関わる研究を続けた。楽琵琶奏者、中村かほる氏協力のもと、国際会議(上海音楽学院)での報告・実演、および琵琶独奏曲のスタジオ録音を行ない、後の発信に備えた。詳細は当該研究課題の実績報告を参照されたい。本研究の核となる『胡琴教録』の輪読作業が停滞している。この原因はひとえに研究代表者の個人的事情によるものである。2017年3月に左足指を骨折したため、特に上半期、物理的に作業の遂行が困難な状況が続いた。下半期は前項に述べたとおり、中国における学会発表と、古楽譜の解読作業および録音による記録を行ない、分掌Cの遂行に注力した。ただし、これも前項に述べたとおり、各分掌における個別の調査は順調に進んでいるため、研究計画の大勢に重大な支障は生じないものと考える。本研究は3つの分掌に分かれ調査研究を継続している。すなわち、【A.諸本研究】、【B.人物・史実】、【C.奏法・楽理】である。各分掌における研究実績は以下のとおり。【A.諸本研究(担当:磯水絵、櫻井利佳、神田邦彦)】昨年に引き続き『胡琴教録』の諸本を中心に研究を進めた。『胡琴教録』の諸本には真名本(下巻のみ)と仮名本(上下巻)とがあるが、神田邦彦は両者を比較検討して、『胡琴教録』の原態は真名本であり、仮名本は真名本を仮名書きに直そうとしたものであることを定例研究会において発表した。『胡琴教録』の本文校訂、注釈、内容理解を進める上で意義ある発表になったと考える。今後論文化の予定である。なお、年度末近く、京都市立芸術大学日本伝統音楽研究センター准教授、武内由美子氏の好意により、イギリスに渡っている以下の『胡琴教録』の写真を入手できた。大英博物館蔵平松家旧蔵本(1上下巻の仮名本2-9/10、2上下巻の仮名本2-17/18、3下巻の真名本2-19)、4英国ケンブリッジ大学図書館蔵菊亭旧蔵『胡琴教録』上巻の仮名本(143)。【B.人物・史実(担当:櫻井利佳、磯水絵、神田邦彦)】昨年度行った『胡琴教録』の各登場人物についての先行研究調査、索引作成を元に、更に研究を進めた。諸楽書(『群書類従』『続群書類従』両管絃部、『図書寮叢刊』伏見宮旧蔵楽書集成第一三巻)の人物索引作成を、学生・大学院生のアルバイトの協力を得て、作業工程全体の約半分を終えた。【C.奏法・楽理(担当:ネルソン、根本千聡)】『三五要録』などの琵琶譜の分析を通して、本文の解釈に関わって具体的な成果が着実に挙がってきているが、いまだ論文発表する段階に至っていない。なお、ネルソンは、楽琵琶奏者の中村かほる氏の協力のもと、琵琶秘曲について国内学会で報告・実演を行った。研究の核となる『胡琴教録』の輪読作業には、予想したよりも時間がかかっている。主たる原因は、諸本の現存状況にある。上記の通り、上巻は原態を留めないと思われる仮名本の本文しか伝わっておらず、本文に難解なところが多いため、解釈作業を容易に進めることができない。
免疫細胞ネットワークのデジタル解析

免疫細胞ネットワークにおいては、B細胞の1個の細胞はそれぞれ1種類のモノクローナル抗体を生産しており、それが全体として10の8乗もの多様性を生み出し、巨大な生体防御機構を形成している。これを分子レベルで理解するためには、各細胞がどのような抗体を作っているのか調べることが必要である。本研究においては、研究者らが開発したSICREX法(1細胞RT-PCRと無細胞蛋白質合成系を組み合わせ、B細胞1個由来の蛋白質(ここでは抗体)を合成させる手法)を用いて、生体中の各B細胞がどのような抗体を作っているのか、さらにそれぞれの抗体が何を認識しているのかを網羅的に調べることができるシステムの開発を行うことを目的としている。昨年度の検討により、本システムの基本技術を完成させることが出来た。本年度はこのシステムをヒトに応用できるかどうかを調べた。モデルとして、B型肝炎ワクチンを接種された健常人より末梢血を採取し、ウィルスの表面抗原蛋白質を固定した磁気ビーズにより細胞を選択し、SICREX法により解析した。その結果約20%の効率で、抗B型肝炎ウイルス抗体が得られた。さらにそれらのDNA塩基配列を解析し、データベースと照合し、それらが確かにヒト抗体であることを確認した。以上の結果より、B細胞1個が保持する抗体の合成と配列決定システムを確立できたといえる。このことは免疫ネットワークの網羅的デジタル解析を可能にするものである。本年度は本システムの基盤技術を確立するため、まず一細胞-RT-PCRの最適化を行った。まずRT反応のキットを選定し直し、またその温度を最適化した。次にヒト肝炎ウイルスの表面抗原をGSTとの融合蛋白質として調製し、免役したマウスの脾臓細胞よりB細胞を回収し、SICREX法により効率よくモノクローナル抗体を取得することに成功した。現在得られた抗体の親和性を測定中である。以上のことより、本手法の基本技術をほぼ完成することができた。
インテリジェント塑性加工制御システムに関する研究

金属板材の引張試験と曲げ試験を行い、その結果を用いて、材料変形特性データベースと曲げデータベースを構築し、データベースを基とする曲げ加工AI制御システムの開発を行った。具体的に下記に示す。1)曲げ加工データベースの構築材質の異なる板材を用いて引張試験を行い、個々の材料の変形特性を調べた。また、曲げ実験を行い、板厚や材料特性のばらつきが成形精度に与える影響を調べた。板厚や材料特性、さらに曲げ実験でのモニタリングしたパンチ荷重-ストローク曲線を用いて、データベースの構築を行った。2)データベースを基とする制御システムの開発基礎実験データベースを基とする曲げ加工のオンライン制御システムを構築した。具体的には、加工中にパンチ荷重-ストローク曲線を測定し、データベース内の曲線との比較を行う。曲線同士のズレに対してファジィモデルを用いて評価し、最終加工条件の決定を行う。また、加工前に得られる情報(例えば、公称材質、公称板厚など)から、データベースの検索(オフライン検索)を行い、ある程度データを絞り込み、別のファイルに保存することによってより小さいデータベースを構成する。オンラインでは小さいデータベースの検索(オンライン検索)により、検索時間を短縮し、加工制御のリアルタイム性を可能にした。加工制御シミュレーションの結果から、かなり高精度な加工が実現し、特に、加工前に得られる情報が多い(例えば、製造メーカーまで分かる)場合、加工精度が±0.2%以内という大変高いものである。また、本研究では、FEMシミュレーションを用いて材料変形特性の各要素(例えば、ヤング率、降伏応力、加工硬化指数など)の曲げ角度に及ぼす影響の度合を解析した。加工中に得られるパンチ荷重一ストローク曲線から材料特性を同定し、データベースとの比較から材料特性のズレを算出し、シミュレーションで得られた影響度を用いて最終加工条件に対する補正量を決定することによって、どんな材料に対しても安定した加工精度が得られることが分かった。具体的に下記に示す。
シリコン量子ドット構造の自己組織化形成法の研究

モノシラン(SiH_4)を用いた減圧CVD法によって、成長温度525650°Cの範囲で、シリコン熱酸化膜(SiO_2)上にナノメートルサイズのSiドットを形成し、そのサイズ分布と面密度を原子間力顕微鏡(AFM)及び透過電子顕微鏡(TEM)により評価した。その結果、基板面内方向(ドット直径)及び垂直方向(ドット高さ)の成長には、それぞれSi結晶核上でのSiH_4の熱分解反応及び化学吸着した前躯体の凝集作用が律速過程である事を明らかにした。また、Si核発生には、SiO_2表面における化学結合の熱解離が極めて重要である事を見出した。さらに、希HF処理によってOH終端したSiO_2表面では、核発生密度が、顕著に増大することを明らかにすると共に、結晶核密度の増大によって、平均ドットサイズが小さい、狭いサイズ分布が得られることを示した。Siドット(高さ約3nm)を厚さ1nmのSiO_2膜で挟んだ二重障壁構造を作成し、導電性AFMプローブを用いて、孤立したSi電子ドットを介した電流-電圧特性を調べた結果、共鳴トンネル伝導に起因すると考えられる負性コンダクタンス特性が、室温で明瞭に観測された。さらに、表面を薄い熱酸化膜で覆ったSiドットにおいて、可視域(発光ピークエネルギー1.5eV)に室温で高効率なフォトルミネッセンスを確認した。励起エネルギー2.54eVおよび3.81eVのそれぞれにおいて、発光スペクトルのピーク位置とスペクトル形状に大きな変化は認められないことから、この試料では主として光学バンドギャップ2.54eV以下のSiドットが、この発光に寄与していることが示唆された。モノシランガス(SiH_4)の減圧CVD(LPCVD)法により、SiO_2膜表面にSi量子ドットを自己組織化形成した。反応温度550-600°C、SiH_4分圧0.2Torr、堆積時間12-60secの条件下で、半球状の独立したSiドット(高さ<10nm,密度約1.0x10^<11>cm^<-2>)を再現性よく形成できることが判った。SiH_4ガス分圧一定(0.2Torr)で堆積温度をパラメータとして、Siドットの平均サイズと密度の時間変化を評価すると、ドットの高さ成長は時間にほぼ比例し、ドット密度は550°Cにおいて急激に増大し約2x10^<11>cm^<-2>で飽和する傾向が観測された。また、SiO_2表面を希釈HF溶液処理することにより、ドット密度の増加およびサイズの減少が可能となる。これは、HF処理によってSiO_2表面にO-H結合のような反応活性なサイトが増大し、前駆体の表面拡散が抑制されることを示している。SiO_2/Si量子ドット/SiO_2二重障壁構造におけるトンネル電流を定量的に評価するための前段階としてナノメーターSiO_2膜MOSダイオードのトンネル伝導を評価した。電流電圧測定は、導電性探針を用いた原子間力顕微鏡(AFM)に高性能電流計電圧源を付加して行った。この手法を用いて、厚さ3nm以下のSiO_2膜のトンネル伝導を定量評価できることを明らかにした。この結果に基づいて、SiO_2/Si量子ドット/SiO_2=1nm/2.52.7nm/1nmの二重障壁構造を作成し、電流-電圧特性を評価した。室温で共鳴トンネル伝導に起因すると考えられる電流増加と負性抵抗が観測できた。この時、共鳴トンネル電流のピークとバレイの比は最大で約10であった。今後は、Si量子ドットの位置制御およびサイズの均一化を行う必要がある。また、Si量子ドットサイズをパラメータとして量子化準位の変化を定量的に評価する。モノシランガス減圧化学気相成長(LPCVD)の初期成長過程を精密制御することで、シリコン酸化膜上にナノメートル寸法のSi量子ドットを自己組織的に形成した。

ドットサイズの堆積温度依存性からドット成長の活性化エネルギーを評価した結果、半球状のSiドットの高さ方向と横方向の成長は、Si原子の凝集とモノシランガスの熱分解過程にそれぞれ支配されていることが示唆された。また、原子レベルで平坦なSiO_2/Si(111)表面を用いて、Siドットの形成位置とSiO_2表面の原子レベルの微細な凹凸の相関を評価したが、有意な差は認められず、結晶核はランダムに発生していることが明らかになった。更に、個々のSiドットにおける高分解能透過型電子顕微鏡観察で、基板に対して約60度傾いたSi(111)面格子縞が明瞭に確認されたことより、(100)面が基板面と平行に成長することが分かった。これは、Siドットの成長が、表面自由エネルギーが最小となる<111>面で優先的に進行するためと考えられる。表面を薄い熱酸化膜で覆ったSiドットにおいて、可視域(発光ピークエネルギー1.5eV)に室温で高率的なフォトルミネッセンスを確認した。励起エネルギー2.54eVおよび3.8eVのそれぞれにおいて、発光スペクトルのピーク位置とスペクトル形状に大きな変化は認められないことから、この試料では主として光学バンドギャップ2.54eV以下のSiドットが、この発光に寄与していることが示唆された。酸化膜上のSiドットのX線光電子分光測定により得られたSi2p光電子スペクトルにおいて、ピーク位置はバルクSiの場合に比べ約0.5eV高結合エネルギー側に観測された。これは、X線照射下でSiドットが帯電したことに起因すると考えられる。さらに、Si2p光電子スペクトルの半値幅は水素化アモルファスSiの場合にくらべて約2倍大きいことから、ドットサイズにばらつきがあるため、ドットのチャージングエネルギーに分布が生じていることが示唆される。
諸外国における動物実験の法規制に関する調査研究

動物実験に係る倫理観は,国によって少しずつ異なっているが,法規制の方向は,近年,次第にひとつに収斂しつつある。動物実験を必要不可欠と考える研究者と動物実験に批判的な人々とが到達したひとつの調和点は,動物実験のオールタナティヴ(使用数の削減,動物の代替,苦痛の軽減,つまり,いわゆる3R)で,多くの国の法規制は、このオールタナティヴの実現を指向している。私たちは,これまでにイギリス,フランス,スイス,ベルギー,スウェーデン,フィンランド,オーストラリア,中国,アメリカ,カナダ,アルゼンチン,その他の国々,さらには,欧州会議,世界保健機構,国際医学会議等の国際的組織から各種の法律,規則,指針を入手し,原文または訳文により比較検討を試みた。また,数十篇にわたる文献(各国法規等の解説)に目を通した。その結果は「研究成果報告書」に詳述する予定であるが,法規等の表面に現われた文言だけでは,わが国の法規等によっても諸外国の法規制と同等のことが実施可能と思われるけれども,実験動物あるいは動物実験の規制に関して,法規等制定の趣旨や法規制の実態にはわが国と諸外国の間に大きな格差があるといわざるを得ない。つまり,わが国の法規制には実験者,動物施設および実験計画のライセンス制度はないが,もしわが国の関連法規等を厳格に遵守すれば,わが国においても動物実験のオールタナティヴは実現可能である。しかし現実には,欧米流のオールタナティヴの実現は,わが国では困難であろう。その詳細な論考は,「研究成果報告書」において行なう。私たちの研究目的は、いわゆる欧米先連諸国において施行されている動物実験に関係する法律、規則、指針、その他(以下法規等)を系統だって収集、分析し、わが国の法規等との関連において比較検討を加え、わが国と欧米諸国との動物実験に関わる法規制の格差是正に資することである。予備的な調査によれば、現在、すくなくともわが国を加えた34か国に動物の保護を目的とした法規等が制定されており、整備しつつある国も10か国を越えている。なお、この種の法律をもつ国は、いわゆる欧米先進諸国だけでない。平成元年2月末日現在、英国より3点、カナダおよび米国より2点、オーストラリア、スイス、デンマーク、オランダ、あるいはWHO、CIOMS、ICLAより各1点の法規等を入手し、近々、イタリア、ECその他4か国(組織)よりも送付されてくる予定である。また、フランスその他17か国に対して資料請求を行っている。さらに、これら欧米諸国の法規等に関する13篇の解説資料を入手している。収集資料の分析は緒についたばかりで断定は避けるが、個人ライセンスと研究機関(課題)ライセンスの2つの認可によって動物実験の厳しい規制に向っているヨーロッパ諸国、個人ライセンス制度を採らず、ヨーロッパに較べると比較的規制が緩やかな米国、規制が大巾に緩やかなアジア、アフリカ諸国の3群に分けることができそうである。第2年度は、未収集の諸国の法規等あるいは解説資料を入手し、外国法に詳しい法律専門家の協力を仰ぎ、資料の分析を行う予定である。第3年度には、動物実験に関するわが国の法規制について、国際的視点からの提言を行う。いわゆる欧米先進国で施行されている動物実験に関わる法規、指針等を系統だって収集、分析し、わが国のそれらと比較、検討を試み、動物実験の法規制に関する国内外の格差是正に資することを意図し、第2年度研究として所期の目的を十分に果たすことができた。第1年度においては、欧米諸国ならびにWHO、EC等の国際関係組織の諸法規の収集に努めたが、第2年度である本年度では、主要な未収集国であるアメリカ、フランス、スウェ-デン等の法律、あるいは、これらの国々の各大学、研究所の動物実験指針、その他の資料を収集し、また、動物実験指針の運用の実態について調査した。現段階では、これ以上の資料を集める必要を認めない。

これまでに収集した法規類のうち、すでに、イギリスで1986年に制定された「動物(科学的処置)法」、カナダのトロント州の「動物実験指針」を全訳し、アメリカ、カナダ、イギリス、フィンランドの動物実験に関する法的ないし行政的規制の実態についての解説(綜説)をほん訳した。また参考として、1988年に中国で制定された「実験動物の管理に関する条例」をほん訳した。最終年度である明年度は、これらの諸資料をほん訳し、分析を加え、わが国の動物実験に関する法規制のあり方についての提言を行う予定であるが、現在私たちが得ている感触は、研究者、研究課題、研究機関の3者をすべて法律によって規制する(認可制とする)イギリスを代表とするヨ-ロッパの方向は、わが国の実情に馴染まず、委員会のチェック機能に弾力性をもたせたアメリカ、カナダの行き方が適していると考えている。私たちの研究目的は、諸外国において施行されている動物実験あるいは実験動物に関わる法律,規則,指針,その他(以下法規等)をできるだけ収集,分析し,わが国の法規等との異同について検討し,わが国と諸外国との動物実験ないし実験動物に関わる法規制の格差是正に資することである。私たちは,これまでに諸外国の法規等を多数収集し,一部は原文のまま,一部は和訳して比較検討を続けてきたが,とくに本年度は,アメリカ合衆国「動物福祉法」,ベルギ-玉国「動物保護法」,スウェ-デン王国「動物保護法」,中華人民共和国「上海動物実験施設条例」等を和訳し,また,10篇を超す各国の法規制に関連する解説(綜説等)を検討した。また,本研究とは別のものであるが,平成元年度文部省科学研究費補助金「国際学術研究」(課題番号:01041117)の交付を受けて,北米における動物実験のオ-ルタナティヴの実情について調査し,収集した法規等の紹介を兼ねた報告書を公表した(アニテックス,2(5),220267,1990)。さらに,わが国の法規制の将来について格別の興味を抱く数名の有志と図り,私的な検討会を発足させた。以上の研究を総括すると,法律条文上は,わが国の諸外国の間にそれほど著しい差異は見出せないが,法律等の制定趣旨,その運用の実態に踏込んで考察すると,少なくない問題点が浮かびあがってくる。その詳細については,「研究成果報告書」に記述する。
フィールドノート・アーカイブズの基礎的研究

1.民俗学者桜田勝徳の調査研究資料の目録を作成し、このアーカイブが、柳田国男の薫陶を受け、民俗学を実践し始めた以降の資料が中心であることを明らかにした。2.桜田のフィールドノートの検討から、その記載形式に一貫性(右面に記載し、左面を補助的に利用)とともに変化(日次、立て横書き等)があること、彼のフィールドワークには2つのスタイルがあること、フィールドノートとフィールドワークの変化は、共に1940年代に認められることが分かった。3.GHQ下の社会調査において、桜田がGHQの改革案を指示する立場で働き掛けていた事実を明らかにし、このようなフィールドワークに関わる実践の民俗学的な意義を明らかにした。本研究は、この基礎作業として、民俗学者桜田勝徳の調査研究資料(慶應義塾大学文学部古文書室蔵)を対象に、1詳細な資料目録を作成して公開に供すること、2遺族の聞き取りと、資料の保存・利用形態、資料内容の調査を行い、アーカイブズの全体構造(性格と特徴)を解明すること、3占領期を中心とする代表的フィールドワークの地へ現地調査と関係資料調査、及び、桜田の関係者へ聞き取りを実施し、社会的実践という観点から桜田によるフィールドワークの意義についての検討すること、の3点を全体の目的として掲げている。本年度は、この調査研究資料について、以下3点の調査研究を進めた。(1)調査研究資料の撮影・詳細な目録化作業。慶應義塾大学文学部古文書室にてデジタルカメラを用いて、資料を撮影し、研究分担者、研究協力者との間で、資料を共有し、詳細な目録化を進めた。撮影、目録化に伴う打ち込み等の作業は、補助作業者の協力を得た。目録化作業は、仮総目録と形態別目録として、ノート類を中心に行い、仮総目録を完成し、Web上での公開の準備に区切りをつけた。(2)関係者からの聞き取り調査。遺族の消息を調べ、原住地を確認することができた。また、桜田勝徳著作集の編纂において中心人物であった民俗学者へ連絡を取った。本人が故人となっていることから、聞き取りを実施することはできなかった。(3)代表的フィールドワーク地の現地調査。桜田の代表的フィールドワーク地として、戦前期の福岡県、鹿児島県等において、調査を実施した。調査地の若者と交流し、民俗学者として育成しようとしていた軌跡が浮かび上がり、無所属時代でありながら、柳田国男の影響を強く受けていた調査の特徴をつかむことができた。本年度は、以下3点の調査研究を進めた。(1)調査研究資料の詳細な目録化作業。研究分担者、研究協力者との間で共有した資料の検討を進め、詳細な目録化作業を進めた。目録化に伴う打ち込み等の作業は、補助作業者の協力を得た。目録化作業は、形態別目録として、ノート類、バインダー類を中心に行った。ノート類については、仮目録を完成し、Web上での公開の準備に区切りをつけた。後述する理由により、今年度は行わなかった。資料の保存・利用形態、資料内容の調査については、ノートの特異な用い方が認められた。すなわち、フィールドノートの利用において、ノート自体を切り、他のバイダー等へ張り替える用い方がなされていることが分かり、アーカイブズの全体構造(性格と特徴)の一端を捉えることができた。加えて、本年度は、イタリアの人類学者のアーカイブズにおいて、フィールドノートの調査を行った。フィールドノートを私的な日記類に位置づけるアーカイブズであり、その多様なあり方の一端を確認することができた。桜田の代表的フィールドワーク地として、今年度も無所属時代のフィールドワークの追跡を継続して実施した。また、鹿児島県においては、アチックミューゼアム時代の足跡についても追跡調査を行った。最終年度においては、以下の5点の調査研究を行った。桜田勝徳調査研究資料について、1,詳細な資料目録を作成し、慶応義塾大学文学部古文書室へ目録データとして提供した。2,桜田勝徳の子息を対象に、所蔵されていた調査研究資料、所蔵環境、利用方法、フィールドワークに関わる事項、及び、それらの変遷について調査を実施した。3,桜田勝徳の代表的フィールドワークの地へ現地調査と関係資料調査を実施した。4,研究会を開催し、アーカイブズの全体構造(性格と特徴)の解明とともに、桜田によるフィールドノート、フィールドワークの意義について検討を行った。5,調査研究報告書を作成した。(1)桜田勝徳調査研究資料の総目録と、5種の形態別目録を作成し(pp.1-61)、目録に対する解題を中野泰が「解題ー桜田勝徳調査研究資料アーカイブー」と題して執筆し(pp.63-81)、「桜田勝徳年譜:フィールドワーク・ノート・著作」と題した資料(pp.135-142)を収録し、今後の調査研究の活用の便宜を図った。(2)桜田によるフィールドノート・フィールドワークについて加えた検討に関する以下の5つの論文を収録した(足立泰紀「桜田勝徳の学問形成に関する一考察」(pp.83-89)、渡瀬綾乃「大福帳「甑島紀行」にみる桜田勝徳のフィールドワーク」(pp.91-99)、辻本侑生「フィールドノート・アーカイブズからみる『美濃徳山村民俗誌』の作成過程」(pp.101-108)、中野泰「GHQ時代のフィールドノートとフィールドワークー漁村調査を中心にー」(pp.109-126)、林圭史「「物」を見る眼ー資料収集方法との関わりからー」(pp.127-134))。

(3)以上、このアーカイブが、主として物質や写真以外の文字資料で構成されている特徴と、桜田によるフィールドノートに一貫する性格といくつかの興味深い変化が見られる点を明らかにした。1.民俗学者桜田勝徳の調査研究資料の目録を作成し、このアーカイブが、柳田国男の薫陶を受け、民俗学を実践し始めた以降の資料が中心であることを明らかにした。2.桜田のフィールドノートの検討から、その記載形式に一貫性(右面に記載し、左面を補助的に利用)とともに変化(日次、立て横書き等)があること、彼のフィールドワークには2つのスタイルがあること、フィールドノートとフィールドワークの変化は、共に1940年代に認められることが分かった。3.GHQ下の社会調査において、桜田がGHQの改革案を指示する立場で働き掛けていた事実を明らかにし、このようなフィールドワークに関わる実践の民俗学的な意義を明らかにした。本年度においては、研究代表者が本務校のサバティカル制度に従って在外研究に従事したため、当初の計画を変更して調査研究を実施した。研究目的の1について重点的に進めた。その結果、Web用の仮総目録の完成に加え、形態別目録として、ノート類も完成させることができた。順調に進んでいる。2遺族・関係者の聞き取りについては、本年度においては実施しないこととした。そのため、やや遅れている。3占領期を中心とする代表的フィールドワークの地へ現地調査と関係資料調査、及び、桜田の関係者へ聞き取りを実施することにおいては、無所属時代に加え、アチックミューゼアム時代のフィールドワークの特徴を浮かび上がらせることができた。順調に進んでいる。民俗学最終年度においては、(1)風呂敷類、封筒類の形態別目録の作成を進め、総目録の完成を目指す。(2)遺族、漁業経済史方面の関係者を中心として、アーカイブズに関わる聞き取り調査を、鋭意、進め、アーカイブズの性格と特徴の析出につとめる。(3)代表的フィールドワークの地へ現地調査と関係資料調査を行うことについては、無所属時代、及び、戦前期については補足調査に留めることとする。戦中・戦後期のフィールドワークの特徴をつかむ追跡調査に重点を置く。研究目的の1については、資料撮影を完了し、Web用の仮総目録を詳細作成している。当初の目的以上に達成している。2遺族・関係者の聞き取りについては、具体的に進めることができなかった。当初の計画としては、遅れている。資料の保存・利用形態、資料内容の調査としては、形態別の目録作業を進め、ノート類の調査検討から、アーカイブズの全体構造(性格と特徴)の解明に益する手がかりを積み重ねており、順調に進んでいる。3占領期を中心とする代表的フィールドワークの地へ現地調査と関係資料調査、及び、桜田の関係者へ聞き取りを実施においては、無所属時代のフィールドワークの特徴をつかむことができ、順調に進んでいる。瀬戸内海島嶼部における実地調査に際して、関係者の日程の都合がつかなかっため、調査を実施しなかった。研究目的の1については、Web用の仮総目録の公開を進めていく。また、形態別目録の作成を進めていく。次年度はノート類の完成を目的とする。2遺族・関係者の聞き取りとしては、次年度は、漁業経済史方面の関係者へ焦点を絞って進めていく。
サーカディアンリズムからみたメニエール病病態の解明

治療に難渋するメニエール病症例においては、反復するめまいや耳鳴りによる影響もあり日内リズムの破綻が見られる。慢性的なバゾプレッシン投与に作成されたメニエール病内リンパ水腫モデルマウスにおいて、日内行動量測定において、その振幅の低下がみられたが有意ではなかった。また、聴性脳幹反応の聴力域値は、AVP投与群は生食水投与群に比べて有意に上昇した。バゾプレッシン増加は内耳内リンパ水腫形成に関与し、活動性低下などサーカディアンリズム障害を二次的に誘導し、メニエール病症例の聴力の予後に影響を与える可能性がある。老化促進マウス系統において、R系であるSAMR1マウスではげっ歯類特有の正常なサーカディアンリズムを示すのに対し、P系であるSAMP8マウスでは摂水行動のサーカディアンリズムにおいて明らかな異常を示すと言われている。さらにこの現象は明期における照明強度を強くすることで改善することが知られている。そこで、SAMP8を用いて、内リンパ水腫モデルを作成し、サーカディアンリズムが正常な他系列のSAMと比較することで、サーカディアンリズム変調が内リンパ水腫形成にもたらす影響を検討する。今年度は、自発行動量を日内リズムの指標にして、ロコモセンサーを用いて計測し、SAMR1系の対照マウスと比較した。ヒトにおいては、反復するめまいの改善には日内リズムの是正が有用であることは過去に報告したが、そのメカニズムはいまだ不明である。今回用いたSAMP8マウスにおいて、16-18週齢の比較的若年の段階から、日内リズムの乱れが対照群に比してみられた一方、自発活動の低下は有意ではなかった。こうしたことを基に、SAMP8マウスは日内リズム異常モデルとして有用であることを証明できた。現在、そうしたリズム異常を認めるマウスにおける内耳および中枢神経での低酸素領域を同定する目的で低酸素誘導因子抗体を用いて、両系統マウスで比較検討している。さらに24週齢以上のSAMP8を用いて、内耳形態および低酸素誘導因子の発現を現在解析中である。また、そうしたリズム変調をきたしたマウスを用いて、アルドステロン、バゾプレッシン投与による内リンパ水腫モデルを作成し、その形態学的変化を比較検討している。今回用いた老化促進マウスであるSAMP8マウスにおいて、16-18週齢の比較的若年の段階から、日内リズムの乱れが対照群に比してみられた一方、自発活動の低下は有意ではなかった。また、脱水は、動物にとっては過度なストレスであると同時に抗利尿ホルモンであるバゾプレッシンを増加させる。そこで老化促進マウスにおける水分制限が聴力および蝸牛形態に及ぼす影響について日内リズムと変化とともに検討している。また、メニエール病症例のいて、その発作期における血漿バゾプレッシン濃度がその聴力予後に影響し、とくに1kHz付近の聴力予後と負の相関関係があることを報告した。めまい発作の予後には必ずしも有意な関係はみられなかった。治療に難渋するメニエール病症例においては、反復するめまいの改善には日内リズムの是正が有用であることは過去に報告したが、そのメカニズムはいまだ不明である。今回用いた老化促進マウス(SAMP8)は日内リズム異常モデルとして有用であることを証明できた。また、そうしたリズム変調をきたしたマウスを用いて、ミニポンプによる慢性的なバゾプレッシン投与による内リンパ水腫モデルを作成するとともに、行動解析から日内リズムを計測した。また、正常マウスにおいて、投与前と投与1週間での聴性脳幹反応(ABR)を測定し、マウス内耳の形態学的変化も比較検討した。バゾプレッシン投与群では明らかに行動特性において、日内リズムの乱れならびに行動抑制が観察された。また、内耳内リンパ水腫の形成ならびに蝸牛血管条の萎縮が観察された。ABRにおいて、閾値上昇が観察された。臨床では、メニエール病症例において、その発作期における血漿バゾプレッシン濃度がその聴力予後に影響し、とくに1kHz付近の聴力予後と負の相関関係があることを報告した。

これらのことから、バゾプレッシンは内リンパ水腫形成に関与するとともに、聴力予後に影響する可能性が示唆された。また、行動特性の面から、日内リズムの乱れまたは行動量が抑制されたことから、メニエール病症例でしばしば認める抑うつ状態とバゾプレッシン上昇との関連性が示唆された。すでに日内リズムの乱れとともに行動量の抑制が観察されるSAMP8におけるバゾプレッシンの内耳形態ならびに聴力への影響について更に検討している。
眼炎症疾患発症におけるｍｉＲＮＡの関与

BALB/cマウスをブタクサとアラムで全身感作し、10日後ブタクサを点眼することによりアレルギー性結膜炎を誘導した。ブタクサ点眼24時間後、結膜を採取し、RNAを抽出した。全身感作したマウスから、ブタクサを点眼する直前に採取した結膜を対照とした。microarray法により、miRNAの発現を比較した。その結果、結膜炎誘導によりmiRNAの発現倍率が1/2倍未満となった遺伝子は44個、発現倍率が2倍以上となったmiRNAが74個同定された。さらに、統合評価を行い、Lrp2 binding proteinやlactoperoxidaseなどの標的遺伝子を同定した。昨年度はこれまでにマイクロアレイで確認されたmiRNAの発現について、定量的RT-PCR法を用いて再度評価を行ったが発現の有意な増加あるいは減少は認められなかった。以前我々の研究室では、ぶどう膜炎発症マウスの眼球組織から採取したサンプルを用いてマイクロアレイを行い、増減したmiRNAを定量的RT-PCR法にて確認をする研究を行っている(Ishida W, et al. Invest Ophthalmol Vis Sci, 1;52:611-617, 2011)。この時のサンプル採取法は、ぶどう膜炎を発症したマウスの眼球組織から角膜および水晶体を取り除き、ぶどう膜炎による影響を最も受けやすい網膜周辺組織(網膜、ぶどう膜および強膜)のみを採取したサンプルを用いて解析を行った。その結果、マイクロアレイと定量的RT-PCR法で確認出来たmiRNAの増減はほぼ一致した。網膜周辺組織ではマイクロアレイと定量的RT-PCRによる結果がほぼ一致するにもかかわらず、なぜアレルギー性結膜炎を発症したマウスの結膜の解析結果が再現できないのかについては、サンプルの採取する部位によるものと考えられる。眼球のような独立した組織であれば、炎症の見られる網膜周辺組織のみを採取することが可能であるが、アレルギー性結膜炎を発症したマウスの結膜では、組織の境界が不明確なことから結膜固有層のみを採取することは実体顕微鏡下でも困難である。このことが、個体間のmiRNA発現値のばらつきに影響していることが考えられる。改善策としては、個体間でできるだけ同じ条件で同じ範囲を採取することや、サンプル数を増やすことで安定した結果を得ることができると考えられる。今後は、サンプル採取の改善を行い、miRNAが調節すると考えられる遺伝子発現の特定やmiRNAの局所での発現をin situ hybridization法を用いて評価する。マイクロアレイで確認した後、定量的RT-PCR法で発現を評価したが、発現の増加あるいは減少を検出できなかった。保存していたRNAの質の問題と考え、アレルギー性結膜炎を誘導し結膜から再度RNAを抽出する必要がある。また、結膜炎を誘導した結膜から抽出されるmiRNAには個体間で差が大きく、安定した結果を得るためにはサンプルサイズを大きくする必要があるかもしれない。マウスアレルギー性結膜炎の誘導により変動するmiRNAの同定と関連する遺伝子発現の推移まで確認できた.当初は定量的RT-PCR法を用い発現の推移を確認する,さらにはin situ hybridization法によりmiRNA発現が結膜のどの部分にみられるかを確かめることを目標としていた.しかし,網膜の場合と異なり,結膜炎を誘導した結膜から抽出されるmiRNAには個体間で差が大きく,安定した結果を得るために時間を要した.まずは発現レベルの確認には定量的RT-PCR法で確実に差がみられるmiRNAをピックアップする。最後に,in situ hybridization法によりmiRNA発現が結膜のどの部分にみられるかを確認する。数多く得られた遺伝子情報から,結膜炎発症に関係する可能性が高い遺伝子を選択する.次に,発現レベルの確認には定量的RT-PCR法を用いる.最後に,in situ hybridization法によりmiRNA発現が結膜のどの部分にみられるかを確認する.該当なし定量的RT-PCR法を行うためのプライマーや試薬に大半を用いる.in situ hybridization法で用いるプローブにも用いる.残りはマウスやその他試薬に用いる.「平成23年度の計画に基づく経費執行について、4月に支払いすべき経費が残っているため、次年度使用額が存在するように見えるが、実際には、全額を執行予定である。そのため、次年度の研究は、当初の計画通り進める予定である。」