hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ケトン食による薬物動態変動に対する分子生物学的影響と薬物速度論的影響の解明

本研究の目的は、難治性てんかんに対し有用性が報告されているケトン食による薬物動態変動の分子生物学的影響および薬物速度論的影響を明らかにし、ケトン食療法時の安全で有効な薬物投与計画の構築である。申請者らは経腸栄養剤により薬物代謝酵素やトランスポータの発現が変動することを見出し、栄養療法や食事療法により薬物動態変動が起こりうる可能性を提起した。さらに、高脂質食による薬物代謝酵素発現変動の報告もある。申請者は臨床業務中、抗てんかん薬の血中濃度が有効域から中毒域まで上昇し、薬物動態変動要因としてケトン食が強く疑われる症例を経験した。本研究では「ケトン食」、「薬物代謝酵素」に着目し、ケトン食モデルラットを用いた基礎研究および臨床研究の両面から検証する。これにより、ケトン食療法による薬物動態変動の予測が可能となり、ケトン食療法時の最適な薬物投与設計や副作用発現回避に寄与することができる。平成30年度は、ケトン食による薬物代謝酵素の発現・活性に与える影響についてモデル動物を作成し検討を行なった。コントロール群(リサーチダイエット社(D10070802)、ケトン食群(リサーチダイエット社(D10070801))の2群を3週間自由摂食させ、薬物代謝酵素の変動を遺伝子発現レベルで検討した。検討した薬物代謝酵素(CYP3A2, 2B1, 2C6, 2C11, UGT2B1)の肝臓における遺伝子発現レベルに有意な変動は確認できなかった。そこで、ラット肝臓ミクロソームを用いて、抗てんかん薬のフェニトインと、ケトン食療法で多く摂取される多価不飽和脂肪酸のリノレン酸をヒト血液中濃度範囲で代謝阻害試験を行ったところ、フェニトインから4'-HPPHへの代謝速度の低下を認めた。これにより、ケトン食による薬物動態変動要因の一つとして、多価不飽和脂肪酸による抗てんかん薬の代謝阻害が示唆された。当初平成30年度分として計画していた「ケトン食」による薬物代謝酵素の発現・活性に与える影響を検討を実施した結果、フェニトインとリノレン酸の代謝阻害試験の結果、ケトン食による薬物動態変動要因の一つとして、多価不飽和脂肪酸による抗てんかん薬の代謝阻害が示唆されたため。多価不飽和脂肪酸によるフェニトインの代謝阻害試験を継続し、リノレン酸以外での多価不飽和脂肪酸によるフェニトインの代謝阻害の影響を明らかにする。多価不飽和脂肪酸とフェニトインをラットに静注および経口投与し、多価不飽和脂肪酸がフェニトインの薬物速度論的パラメータへ与える影響を明らかにする。ヒトに投与されているケトン食を用い、ケトン食がフェニトインの薬物速度論的パラメータに与える影響を明らかにする。
脳腫瘍における模型ケモカインのクローニングと解析

相同分子の多いケモカインファミリーの中で、最近単離されたCX3Cの特異的な構造および膜貫通ドメインを有するフラクタルカインについて以下の研究を行った。1)まず、フラクタルカインの相同分子が存在するのかという重要な問題に解答を出すため、ヒトグリオーマ細胞株よりcDNAライブラリーを作成し、フラクタルカインのcDNAプローブとして、マイルドな条件でスクリーニングを行ったところ、2種類の陽性cDNAクローンが単離された。しかし、塩基配列解析を行った結果、3.非翻訳領域の長さが違うのみで蛋白質コード領域は完全に一致した。従って、これら2種類のクローンは生物学的機能にはなんら違いがないものと推定された。次に手法を替えESTデータベースを用いてコンピューター上で相同性のある分子をスクリーニングしたが、既知のCCケモカインファミリーのメンバーがリストアップされたのみで、膜貫通領域を持つ新たなケモカイン分子は同定できなかった。以上より、フラクタルカインには、相同分子は存在せず、1分子で1サブファミリーを形成する特異的ケモカインであるという結論に達した。2)つぎに、フラクタルカイン分子は、ヒトおよびラットにおいて神経細胞に特異的に発現していることが最近報告されたので、神経由来の脳腫瘍におけるフラクタルカイン発現の意義について免疫組織化学的に検討した。Neurocytomaでは、8例中7例で発現が見られ、その発現は神経特異的エノラーゼとほぼ一致していた。Gangliogliomaでは、約半数(9例中5例)で発現が見られ、ganglion細胞で強陽性であった。一方、medulloblastomaでは11例中3例でのみ発現が見られたのみであった。神経分化への傾向に一致して発現の頻度は高くなったが、発現パターンはこれまでの神経細胞のマーカーとは必ずしも一致しておらず、臨床的な神経細胞の分化度を示すマーカーとしての利用が可能か、今後の検討が必要である。最近クローニングされた膜型のケモカイン(fractalkine)は、細胞外ドメインで切断されて従来の白血球遊走活性をもつケモカインとして作用するのみでなく、同時に接着分子としても働きうろことが示された。また、正常脳に高レベルに発現していることより、浸潤の性格を強く持つ悪性グリオーマにおいて何らかの働きを担っていることが示唆されている。我々は、脳腫瘍において発現される膜型のケモカイン分子をクローニングするために、ヒト悪性グリオーマ細胞株よりmRNAを抽出し、cDNAライブラリーを作成した(ベクター:λgtll)。プラークハイブリダイゼーション法により50万個のクローンをスクリーニングしたところ、4個の陽性クローンが単離された。これを制限酵素で切断しタイピングすると2つのグループに分けられた。そこで、それぞれのクローンについてサブクローンしてシークエンス解析による構造決定を行ったところ、蛋白質コード領域は同じで3非翻訳領域が異なる2種類のクローンであった。蛋白質のコード領域は完全に一致したことより異なるポリA添加シグナルを認識して作られたクローンと考えられた。また、並行してfractalkineの配列をもとにESTデータ・ベースで検索する手法を行った。多くの相同分子が同定されたが、全ては現時点では既知のCCケモカインのであり、未知の膜型ケモカイン分子は今の所同定されてはいない。以上の結果より、fractalkineはCケモカインであるリンフォタクティンが唯一のファミリー分子であるように、唯一のCXXXCケモカインである可能性も疑われるが、現在cDNAライブラリーを換えてスクリーニングを行うべく、計画を続行中である。
半翅系昆虫の高次系統関係と穿孔―吸汁式口器の進化系列の解明

国内各地およびマレーシアにおいて,研究に用いる半翅系昆虫のサンプリングを行った.これらのフィールドワークにより,分子系統解析に必要なサンプルの収集はほぼ完了した.チャタテムシ目の頭部の形態学的研究を行い,頭盾および小顎において相同性の解釈の誤りを見いだした・これらの形質は,穿孔-吸汁式口器の進化のキーとなる形質であり,今後この研究結果に基づき,半翅目および総翅目の頭部の形態学的再検討を行う予定である.特に,小顎は半翅目+総翅目の単系統性を支持する形質でもあるため,発生過程も含めた綿密な調査を行う.分子系統解析に用いるDNAマーカーの探索を行った.ミトコンドリアの12S,16SrDNAと,核の18SrDNA, Histone3,Winglessが,進化速度が遅く,かつ幅広い分類群において比較的容易に増幅できる事から,高次系統関係の探索に有効なDNAマーカーの候補として挙げられた.これらの領域を増幅するためのPCRプライマーの設計は完了し,半翅系昆虫の幅広いサンプリングに基づく予備実験では,良好な結果が得られている.また,ミトコンドリア領域の塩基配列情報に基づき,チャタテムシ目及びシラミ目の分子系統解析を行った.この結果,チャタテムシ目が側系統群である事が明らかとなるとともに,シラミ目のミトコンドリアゲノムに,他の昆虫には見られない特異な進化傾向が見られる事も明らかとなった.現在この結果をテストするために,18S rDNAを用いたチャタテムシ目+シラミ目の広範な系統解析を行っている最中である.国内各地およびマレーシアにおいて,研究に用いる半翅系昆虫のサンプリングを行った.これらのフィールドワークにより,分子系統解析に必要なサンプルの収集はほぼ完了した.チャタテムシ目の頭部の形態学的研究を行い,頭盾および小顎において相同性の解釈の誤りを見いだした・これらの形質は,穿孔-吸汁式口器の進化のキーとなる形質であり,今後この研究結果に基づき,半翅目および総翅目の頭部の形態学的再検討を行う予定である.特に,小顎は半翅目+総翅目の単系統性を支持する形質でもあるため,発生過程も含めた綿密な調査を行う.分子系統解析に用いるDNAマーカーの探索を行った.ミトコンドリアの12S,16SrDNAと,核の18SrDNA, Histone3,Winglessが,進化速度が遅く,かつ幅広い分類群において比較的容易に増幅できる事から,高次系統関係の探索に有効なDNAマーカーの候補として挙げられた.これらの領域を増幅するためのPCRプライマーの設計は完了し,半翅系昆虫の幅広いサンプリングに基づく予備実験では,良好な結果が得られている.また,ミトコンドリア領域の塩基配列情報に基づき,チャタテムシ目及びシラミ目の分子系統解析を行った.この結果,チャタテムシ目が側系統群である事が明らかとなるとともに,シラミ目のミトコンドリアゲノムに,他の昆虫には見られない特異な進化傾向が見られる事も明らかとなった.現在この結果をテストするために,18S rDNAを用いたチャタテムシ目+シラミ目の広範な系統解析を行っている最中である.
新しい機能をもつキメラ型のミオシンの検索

ディクチオ型細胞性粘菌から新しい機能をもつキメラ型のミオシンの検索を試みた。はじめに、キメラ型のミオシンIII、IX、Xに近縁のミオシンを、これらのファミリー間で相同性が高く他のファミリー間では相同性が低い3個所の短い共通な配列をプライマーとしてゲノムDNAからPCR行い、検索を試みたが、新しいミオシンは発見できなかった。次に、モータードメイン内の共通配列である、Pループ、およびスイッチ2と呼ばれる領域について、キメラ型のミオシンIII、IX、Xの塩基配列をもとにプライマーを作成し、ゲノムDNAを鋳型としてPCRを行ったところ、既知のミオシン2のほかにこれまで報告の無い配列を含むミオシンに類似した配列が1つ確認できた。その配列には、キメラ型のミオシンIII、IX、Xと同様に、保存性の低いループ領域でのアミノ酸の挿入が多数見られ、またPループからスイッチ2までの配列を他のミオシンと比較すると、これまで知られているどのミオシンファミリーとも相同性が低いことがわかった。また、増殖期の細胞性粘菌から作成したcDNAを鋳型として、同様にPCRを行ったところ、この遺伝子の産物と思われるバンドが確認されたので、偽遺伝子ではないことがわかった。この新しいミオシンが、キメラ型である可能性は高いと思われ、遺伝子の全長の決定と、ノックアウト作成による機能の確認の実験が進行中である。さらに、特定のミオシンの、モータードメイン内の共通配列をもとにしたPCRによる検索が、新しいミオシンの検索に有効であることが確認できたので、プライマーのデザインを変えることにより、他の新しいミオシンの発見が期待される。
動物実験の人道的エンドポイント構築のためのテレメトリー法によるエビデンス集積

テレメトリー法を活用して、マウスやラットにおける各種生理指標(血圧や心電図、体温、自発活動量)の取得を行い、動物実験における人道的エンドポイント設定のためのエビデンス集積に努めた。送信器装着自体による生体への負担、麻酔法の比較や環境要因による動物への影響等について検討した。動物実験計画書に反映させるために、取得データからの知見に加えて国内外の関係論文や文献を収集し、苦痛度分類コード表の作製・改善を図った。本研究の目的は人道的エンドポイントの構築・確立をめざし,マウスやラットの各種実験処置に関わる苦痛の客観的評価根拠を集積することである。研究初年度につき,生理指標測定のためのテレメトリーシステムを活用する上で,マウスでの体内埋込み送信器の合理的装着手技や長期間にわたる安定したデータ取得技術の向上に努めた。ICRおよびC57BL/6J系マウスについて無麻酔・無拘束状態での体温や心電図,血圧を5分ごとに数目から数週間にわたり継続記録して測定実験系全体の安定性や信頼性について確認し,測定項目ごとの明暗リズムを解析した。マウスの血圧測定には新規購入のテレメトリー送信器(DSI,TA11PA-C10;重量1,4g,容積1.1cc)を使用した。血圧測定用のカテーテル先端(外径0.6mm)を顕微鏡下にて左総頸動脈に挿入し装着し,頸部背側皮下に送信器本体を埋設した。テレメトリー法を用いて麻酔や外科的実験処置後における体温や心拍数,血圧について評価した。28°C以上の高温曝露や18°C以下の低温環境下での影響,給水装置異常を想定したケージ内漏水実験等も実施した。これらの結果から,C57BL/6J系は環境温の影響が受けやすく,麻酔時の体温低下が顕著であることが明らかとなった。このような傾向は,ラットと比較してマウス特にC57BL/6J系の小型のものは相対的体表面積が大きく熱容量も小さいという特徴によるものと考えられた。ケージ交換による生理指標への影響についても観察した。ケージ交換直後のマウスやラットはいずれにおいても自発活動量が増加し,同時に体温も約1°C程度上昇した。各種体内埋め込み送信器自体のマウスへの負担についても体重変化の面から検討した。以上から研究初年度として次年度を見据えた合理的かつ迅速な研究遂行環境を整備しえた。本研究の目的は人道的エンドポイントの構築・確立をめざし、マウスやラットの各種実験処置に係わる苦痛の客観的評価根拠であるエビデンスを集積することである。研究初年度において生理指標測定のためのテレメトリーシステム活用に必要なマウスでの体内埋込み送信器の合理的装着手技および長期間のデータ取得技術手技を確立したことから、研究第2年度である本年度では血圧用送信器、心電図用送信器、体温用送信器の再生を行い、同一条件によるデータ取得個体数の確保に努めた。初年度に実施したマウスやラットでのケージ交換による体温上昇は、本年度において取得した血圧や心拍数、自発活動量の同時測定結果から交感神経活動の亢進による現象であることが知り得た。受動的回避学習や能動的回避学習といった古典的課題に加え近年、記憶に関連した脳研究等においてモリス型水迷路や放射状迷路が多用されている。これらの迷路はラット用として開発されたものであり、マウスにおける水迷路実験の苦痛度の評価のエビデンスが明確でない。そこで、C57BL/6J系マウスでの水温による体温低下について検討した。その結果、28°Cの水温ではラットの場合とは異なり水浸後ただちにマウスの体温は低下した。32°C程度では体温低下は顕著でなく、20°Cの水温では生命維持が危ぶまれる状況も観察された。このような結果から、マウス特にC57BL/6J系にとって水迷路実験の苦痛度は高く設定すべきこと、水温設定や実験後の保温にも配慮すべきことが示唆された。さらに、テレメトリー送信器を体内に埋込んだオスマウスをメスと同居させた場合、相手のメスは通常の場合と同様に妊娠・出産が可能であり産仔にも臨床所見上の以上は認められなかった。また、これまでに報告されている国内外の関係論文や文献の収集にも努め、人道的エンドポイントのエビデンスの類別化を進めている。本研究の目的は人道的エンドボイントの構築・確立をさし、マウスラットの各種実験処置に係わる苦痛の客観的評価根拠であるエビデンスを集積することである。初年度では生理指標測定のためのテレメトリーシステム活用に必要なマウスでの体内埋込み送信器の合理的装着手技や長期間のデータ取得手技を確立し、次年度以降、血圧用送信器や心電図用送信器、体温用送信器の再生を行い、同一条件下のデータ取得個体数を増やした。マウスやラットでのケージ交換による体温上昇は、血圧や心拍数、自発活動量の同時測定結果から交感神経活動の亢進によることを明確にした。

記憶に関連した脳研究領域でモリス型水迷路が多用されているが、これらの迷路は、本来ラット用のものであり、マウスにおける水迷路実験の苦痛度の評価のエビデンスが明確でないことから、マウスでの水温による体温低下について検討した結果、28°Cの水温ではラットの場合とは異なり、水浸後ただちにマウスの体温は低下した。32°C程度では体温低下は顕著でなく、20°Cの水温では数分後に低体温状態となり生命維持が危ぶまれる状況も観察された。特にC57BL/6J系では低体温になりやすい結果を得た。研究最終年度にはC57BL/6J系の例数を追加した実験を進め、併せて麻酔時や実験処置後の心拍数や体温の経過観察から生体への負担程度についても類推した。これらの結果から、マウス特にC57BL/6J系にとって水迷路実験の苦痛度は高く設定すべきこと、水温設定や実験後の保温にも配慮すべきことが示唆された。さらに、テレメトリー送信器を体内に埋込んだオスマウスをメスと同居させた場合、相手のメスは通常の場合と同様に妊娠・出産が可能であり産仔にも臨床所見上の以上は認められなかった。テレメトリー送信器を体内に埋込んだメスマウスにオスを同居させた場合、4例中1例に出産時死亡があったものの他の3例では通常の出産および授乳行動が観察された。また、これまでに報告されている国内外の関係論文や文献を収集し、人道的エンドポイント関連のエビテンスの類別化を進めた。これらの成果を研究者が所属する大学での動物実験計画書に反映させ、適切な動物実験の実施への活用を図っている。
有限群のモジュラー表現論

計算機に抽象代数学を計算させるコンピュータソフトとしてオーストラリアで開発されたMAGMA及ドイツで開発されたGAPさらにアメリカ製のMathematicaを使用して今まで知られていなかった有限群の表現論の分野の事実を算出することに成功した。今回行われた計算は無限系列を持つ有限体上のSymmplectic群のモジューラ表現における分解定数をMAGMA及GAPを利用して具体的な場合に計算し,その結果を基にしてMathematicaを使ってこの結果がある条件をみたす無限系列上で常に正しいことを証明した。また置換群Gと素体Fが与えられたときのFG-加群の1次と2次のコホモロジーの計算アルゴリズムを9月に京都大学で行われた短期共同研究「有限群のコホモロジーの計算」で題名「計算機を使ったコホモロジーの計算」で紹介し抽象代数学における計算機の利用の啓蒙を行った。以上の発表については報告集が出される予定である。特にル-マニアで行われた研究発表の内容はレフリー付の報告集である。
システムバイオロジーによる癌放射線治療モデル

システムバイオロジーの観点から放射線による癌化および癌細胞死滅のメカニズムを検討し、力学アナロジーに基づくモデルで放射線治療効果のシミュレーション手法を開発した。臨床データから得られるパラメータをシステム工学的な解析を行うことによって、臨床に則したシミュレーションが可能となった。これにより、放射線治療パラメータ(放射線量、照射時間、照射速度、照射密度、等)と縮小過程の特性との対応関係が検討可能なことを示した。臨床データとしてのX線CT画像から得られた腫瘍の三次元形状データから内部要素を組み込んだ腫瘍のソリッドモデルを作成した。腫瘍領域のCT値分布により、モデル内の平均質量、密度、質量分布を算出した。ソリッドモデルから腫瘍の三次元有限要素モデルを作成した。これには医療画像解析ソフト(Analyze)と有限要素法ソフト(ANSYS、所有)のインターフェースを作成した。有限要素解析の境界条件等を整理し、有限要素モデルの各要素の支配方程式として、放射線照射ー細胞死滅率関係式を定式化する。またそれらの関係から細胞死滅率と腫瘍領域体積減少率の関係を導いた。○放射線量と等価な外力を負荷させた場合の変形縮小解析を行った。LQモデルの修正と係数の放射線医学的意味を整理した。○上記の照射前有限要素モデルを計算し、照射後の三次元形状モデルと一致させるための力学条件と要素パラメータを同定するための方法を検討した。○治療による放射線パラメータ(放射線量、照射時間、照射間隔、照射速度、照射密度、発症領域、周囲状況、等)を縮小に関係する因子として整理する。また、力学パラメータおよび要素パラメータと放射線パラメータの関連を整理した。バイオインフォマティクス解析に基づく分子細胞情報と放射線治療効果シミュレーションのパラメータおよび治療パラメータについて相互の関連性を解析した。システムバイオロジーの観点から放射線による癌化および癌細胞死滅のメカニズムを仮定し、力学アナロジーに基づくモデルで実際の放射線治療効果シミュレーションを行った。各パラメータの相互関係をシステムバイオロジーとしてとらえ、それらの関連性を整理した。これらの結果から、システムバイオロジー適用の是非を考察し、今後の課題等が明らかとなった。○臨床データとしてのX線CT画像から得られた腫瘍の三次元形状データから内部要素を組み込んだ腫瘍のソリッドモデルを作成した。○ソリッドモデルから腫瘍の三次元有限要素モデルを作成した。○有限要素解析の境界条件等を整理し、有限要素モデルの各要素の支配方程式として、放射線照射ー細胞死滅率関係式を定式化する。○バイオインフォマティクス解析に基づく分子細胞情報と放射線治療効果シミュレーションのパラメータおよび治療パラメータについて相互の関連性を解析した。○本研究ではシステムバイオロジーの観点から放射線による癌化および癌細胞死滅のメカニズムを解明し、力学アナロジーに基づくモデルで実際の放射線治療効果シミュレーションを行った。交付申請書記載の計画項目は、ほぼ計画通り実施している。交付申請書通りに実施予定である。○固体変形の力学関係式とのアナロジーにより放射線治療効果の定式化を行う。○先に作成した三次元形状モデルに腫瘍の放射線に対する感受性,および癌細胞の死滅と腫瘍形状変化の関係を表すパラメータを設定する。○汎用の有限要素解析ソフトウェアを用いて放射線治療効果のシミュレーションを行う。○バイオインフォマティクス解析に基づく分子細胞情報と放射線治療効果シミュレーションのパラメータおよび治療パラメータについて相互の関連性を解析する。○本研究ではシステムバイオロジーの観点から放射線による癌化および癌細胞死滅のメカニズムを解明し、力学アナロジーに基づくモデルで実際の放射線治療効果シミュレーションを行う。両者の結果と臨床データのパラメータ解析を組み合わせることにより、臨床に則したシミュレーションが高精度に可能となる本研究は、計算機利用したシミュレーションとモデル開発が主体のため、予想外にそれらにかかる経費が少なく済んだ。そのため次年度に\770,600が繰り越しとなった。次年度当初予算\900,000とあわせて、次年度は\1,670,600が研究費として支出可能となった。その内訳は以下の通りである。物品費\450,000、旅費\600,000、人件費・謝金\400,000、その他\220,600
中性子過剰核におけるクラスター構造の出現機構の解明

本研究の最大の研究目的は中性子過剰核におけるクラスター構造の出現機構の解明である。まず、これを達成するためには中性子過剰核に特有な構造変化を見つける必要がある。これを見つけるために申請者は中性子過剰なC同位体である^<16>Cの構造を研究した。これは以前に申請者が行い2つの特徴的な構造(非軸対称変形構造、リニアチェイン構造)を見つけた^<14>Cよりさらに中性子過剰な原子核であり、より余剰中性子の効果が現れ得る系である。実際の計算結果としては^<16>Cにおいても2つの興味深い構造(α+α+^8Heのガス的構造、リニアチェイン構造)が現れることが分かった。特にリニアチェイン構造は^<12>Be+α構造を持っていたが、この^<12>Beにとても興味深い特徴が見て取れた。普通、クラスター構造が現れる場合、それぞれのクラスターが基底状態になったものがもっとも低い状態として現れるが、このリニアチェイン構造中の^<12>Beは励起状態になっていた。これは安定核では見られなかった構造であり、このような構造が現れるメカニズムを解き明かすことは今後の中性子過剰核の研究を進める上で大きな知見を与える可能性が高い。また、近年重要だと認識されてきた「クラスター構造とシェルモデル構造の競合」を簡単に記述できる手法、AQCM (Antisymmetrized Quasi-Cluster Model)の改良に成功した。AQCMは基本的にクラスター模型にパラメータを一つ導入することによって、クラスターの崩れを取り込めるように拡張した模型である。申請者の改良する前のAQCMは模型の拡張の仕方が不十分であり、シェルモデル構造の取り込みが不完全であったが、この問題を解決した。AQCMは中性子過剰核にも十分適用可能であり、「クラスター構造とシェルモデル構造の競合」の観点から中性子過剰核の研究を行なう新たな道を開いた重要な発展と言える。中性子過剰核の構造そのものの理解としては^<16>Cの研究を行ない、余剰中性子が存在する故に現れる2つの特徴的な構造が存在しうることが分かってきた、という発展があった。また、近年重要だと認識されてきた「クラスター構造とシェルモデル構造の競合」を簡単に記述できる手法を開発した。この手法は安定核のみならず中性子過剰核の記述もうまく行える手法であり、競合の観点から中性子過剰核を理解する新たな道を開いたといえ、これらは計画以上の進展であった。しかしながら予定していた4体以上のクラスター構造を取り込む、という目標は達成できておらず、これに関してはやや遅れている。これらを合わせて、おおむね順調に進展している、と評価できる。まず^<16>Cで見つけた、中性子が存在する故に現れる2つの構造(α+α+^8Heのガス的構造、リニアチェイン構造)が発現するメカニズムを追求する。これらの特殊な構造を仮定した模型を用いて、様々なモードに対する安定性や余剰中性子の運動を詳細に調べることにより達成する。また、以前申請者が行った研究や他の研究者による成果も合わせると、余剰中性子が存在すると、C同位体においてはかなりグローバルにリニアチェイン構造が存在する可能性が示唆されるが、これを確認したい。これにはより中性子過剰なC同位体の研究を行う必要があるが、そのためには中性子の配位をかなり広く取り扱えるような模型を使わなくてはならない。そのために、現在用いている模型の余剰中性子部分の波動関数の記述を改良する。さらに相互作用も現在用いている現象論的なものからより現実的なものに取り替える必要がある。

中性子過剰核の構造そのものの理解としては^<16>Cの研究を行ない、余剰中性子が存在する故に現れる2つの特徴的な構造が存在しうることが分かってきた、という発展があった。また、近年重要だと認識されてきた「クラスター構造とシェルモデル構造の競合」を簡単に記述できる手法を開発した。この手法は安定核のみならず中性子過剰核の記述もうまく行える手法であり、競合の観点から中性子過剰核を理解する新たな道を開いたといえ、これらは計画以上の進展であった。しかしながら予定していた4体以上のクラスター構造を取り込む、という目標は達成できておらず、これに関してはやや遅れている。これらを合わせて、おおむね順調に進展している、と評価できる。まず^<16>Cで見つけた、中性子が存在する故に現れる2つの構造(α+α+^8Heのガス的構造、リニアチェイン構造)が発現するメカニズムを追求する。これらの特殊な構造を仮定した模型を用いて、様々なモードに対する安定性や余剰中性子の運動を詳細に調べることにより達成する。また、以前申請者が行った研究や他の研究者による成果も合わせると、余剰中性子が存在すると、C同位体においてはかなりグローバルにリニアチェイン構造が存在する可能性が示唆されるが、これを確認したい。これにはより中性子過剰なC同位体の研究を行う必要があるが、そのためには中性子の配位をかなり広く取り扱えるような模型を使わなくてはならない。そのために、現在用いている模型の余剰中性子部分の波動関数の記述を改良する。さらに相互作用も現在用いている現象論的なものからより現実的なものに取り替える必要がある。
水俣病被害者支援運動のコミュニティに関する人類学的研究

本研究では、熊本県水俣市の水俣病被害者支援NGOを対象として、計10ヵ月にわたる、人類学的アプローチを用いた現地調査を実施し、データを収集した。その結果、このNGOは、水俣病被害者を支援する社会運動を通じて新しい知識を蓄積していること、その知識を広めることを通じて社会を変容させようとしていること、またそれらの過程を通じて、国家や社会との関係をつねに変化させていることなどが明らかになった。本年度は、相思社および水俣市周辺において、約2ヵ月間にわたる現地調査を実施し、水俣病被害者支援NPO「水俣病センター相思社」(以下、相思社)の現在の活動内容、組織形態、メンバーの社会的属性、メンバーどうしの関係、所有する運動の資源等についてデータを収集した。その結果、2005年に実施した調査結果と比べて2つの大きな変化が生じていることが明らかになった。ひとつは、世代交代の進行である。90年代以降、相思社の活動をリードしてきた60歳代のメンバーに代わり、30歳前後の新しいメンバーが活動の中心になっており、それにともなって活動の方向性や運営方法等に変化が顕れ、ときにはそれがさまざまな困難を生じさせていることが明らかになった。このことは、相思社という個別の団体に限られた問題ではなく、水俣で被害者を支援している多くの市民団体において観察されることであることもわかった。もうひとつは、市民団体と行政との関係の変化である。研究者は現地調査において、相思社のメンバーとともに、水俣市および熊本市でおこなわれた国際水銀条約会議、水俣市立水俣病資料館の展示リニューアル検討会議に準備段階から参加した。これらの活動を通じて、これまで敵対的な態度をとることが多かった水俣病被害者を支援する市民団体と熊本県や水俣市とのあいだで、少しずつではあるが信頼関係が醸成され、ときに協働するようにさえなっていることが観察された。このことは、市民団体の活動の方向性を理解するうえできわめて重要な要件であり、今後も注視していくことが必要である。平成26年度は、水俣病被害者を支援するNPO相思社および水俣市周辺において、約2ヵ月にわたる現地調査を実施し、特に、民間知識や儀礼的知識、社会的記憶など、相思社に蓄積された知や実践の様式等を中心にデータを収集することができた。その結果、平成25年度の調査で明らかになった、相思社内部における世代交代と、相思社と行政との関係の変化について、さらに詳細に具体的内容を明らかにすることができた。相思社内部における世代交代については、60歳代のメンバーと30歳前後のメンバーとのあいだで活動の方向性や運動方法をめぐってさらに対立が深刻なものとなっていることがわかった。60歳代のメンバーは、改革志向的で、相互に主体性を競うような、1960年代後半の学生運動に通じる運動のスタイルを維持しようとしていたのにたいし、30歳前後のメンバーは、現状維持的で、より協調性を重視し、いわばNPO志向と呼べるような活動のスタイルを好む傾向があった。こうした方向性や運動方法をめぐる差異は、財政が厳しさを増している現在の相思社の活動において、さまざまな局面で深刻な意見の対立を引き起こしていた。相思社と行政との関係の変化については、相互の信頼関係がいっそう醸成され、いくつかのプロジェクトが協働でおこなわれるようになっていた。とりわけ熊本県主催の水俣病啓蒙普及活動や、水俣市による水俣病資料館の展示リニューアル、相思社が運営するJICA研修「水銀に関する水俣条約批准に向けた能力強化」等において、協働の成果が明確に現れていた。なお、並行して、平成25年度末に組織した国際シンポジウム「東アジアにおける社会運動の人類学的研究」の成果について、英文の論文集として刊行するための編集作業を予定通り進めることができた。平成25年度および26年度は、それぞれ約2ヶ月間の現地調査を実施し、水俣病被害者支援NPO「水俣病センター相思社」(以下、相思社)の現在の活動内容、組織形態、社会関係等についてデータを収集した。その結果、前回、長期現地調査を実施した平成17年度以降に、メンバーの世代交代と、行政との協働の推進という二つの大きな変化が相思社に生じていることが明らかになった。平成27年度は、約6ヶ月間の現地調査を実施し、これらの変化の前提となっている相思社の歴史を明らかにするために補足調査をおこなった。具体的には、水俣市周辺に居住する水俣病被害者支援運動経験者、特に相思社の元メンバーから、運動の歴史について聞き取り調査を実施し、データを収集した。また、相思社資料室、水俣市立水俣病資料館等において調査を実施し、水俣病被害者支援運動の歴史についての文献資料を収集した。これらの調査を通じて以下のことが明らかになった。第一に、現在の相思社が伝えている知識は、長年にわたる運動のなかで蓄積されたものであり、学校教育や行政、マスコミ等を通じて伝えられる知識とはその内容や形態において異なる独自のものになっている。第二に、1990年以降、行政が相思社を統治しようとする過程と、相思社が行政を利用して自らの利害を追求しようとする過程の両方が同時進行している。第三に、相思社の活動の変化は、市民運動から住民運動、NPO活動へという日本の社会運動または市民社会の歴史のなかに位置づけることが可能である。本研究は、社会運動を知や実践の様式が蓄積されるコミュニティととらえる、社会運動への新しいアプローチの有効性を示すことができた点で意義がある。

また、社会運動の主要な争点が文化的なものに移行していることから、社会運動研究における人類学的なアプローチの有効性を確認できたという点で重要である。本研究では、熊本県水俣市の水俣病被害者支援NGOを対象として、計10ヵ月にわたる、人類学的アプローチを用いた現地調査を実施し、データを収集した。その結果、このNGOは、水俣病被害者を支援する社会運動を通じて新しい知識を蓄積していること、その知識を広めることを通じて社会を変容させようとしていること、またそれらの過程を通じて、国家や社会との関係をつねに変化させていることなどが明らかになった。平成26年度は、予定していたより少し短い期間の現地調査を実施したが、それでも主たる調査対象である相思社の活動のなかにみられる知識や実践、記憶などの実態についてほぼ想定していた内容のデータを収集することができた。特に、平成25年度はあまりデータを収集することができなかった、30歳前後の相思社の若手メンバーから、インタビュー等を通じて、ライフヒストリーを含む密度の高い内容のデータを収集することができたことは大きな成果であった。また、2016年5月にリニューアル・オープンを予定している水俣市立水俣病資料館の展示リニューアル専門家会議に定期的に出席し、展示リニューアルの構想過程に参加するなかから、行政の水俣病対策、行政の被害者支援運動についての対応、行政と相思社との関係などについて、詳細なデータを収集することができた。さらに、相思社が運営するJICA研修「水銀に関する水俣条約批准に向けた能力強化」に協力することを通じて、相思社と他の被害者支援団体、水俣病原因企業、マスメディア、地域社会との関係を観察することができた。これはまた平成27年度に実施する調査の準備を進めることにもなった。なお、平成25年度末に組織した国際シンポジウム「東アジアの社会運動の人類学的研究」の成果について、参加者とさらに議論を進め、Senri Ethnological Seriesの一冊として刊行するための準備を十分に進めることができた。現在、編集の最終段階にあり、平成27年6月に出版される予定である。社会人類学平成27年度は、本研究の最終年度であり、平成26年度にできなかった分、長期間現地に滞在し、創設時から現在までの相思社のコミュニティの歴史的変容過程を明らかにするための補足的な調査研究をおこなう。そのなかでも中心となるのは、過去40年間に相思社に在籍した元メンバーのうち、水俣に在住している人を中心に、運動の歴史についての聞き取り調査を実施し、データを収集することである。この際、被調査者の選定にあたっては、これまでの調査で知り合った人を中心にしていくが、研究協力者である相思社の遠藤邦夫氏から助言をもらうとともに、可能な範囲で仲介もしてもらう予定である。また、相思社資料室、水俣市立水俣病資料館、国立水俣病総合研究センター、熊本学園大学水俣現地研究センター等において資料調査を実施し、水俣病被害者支援運動の歴史および相思社の歴史についての分析に取り組む。さらに、これまでの調査で集めたデータの分析に基づいて成果のとりまとめをおこない、平成25年度に組織した国際シンポジウムの成果刊行、平成26年度に参加した研究会の成果刊行への寄稿、その他、国立民族学博物館の内外で開催される研究会での成果発表などを予定している。
前立腺癌患者における循環血中癌細胞の特性解析と癌転移動態の分析

末梢循環細胞癌(CTC)クラスターにおけるandrogen receptor splice variant 7 (AR-V7)が、アビラテロンまたはエンザルタミドで治療された骨転移性去勢抵抗性前立腺癌患者98症例のPSA progression-freesurvival (PSA-PFS), radiological progression-freesurvival (rPSF), overall survival (OS)の予測因子であった。CTC clustersでのAR-V7は、アビラテロンまたはエンザルタミド治療での疾患の転帰を予測できることが示唆された。末梢循環癌細胞(circulating tumor cell:CTC)のandrogen-receptor splice variant (ARV)7はアビラテロンまたはエンザルタミドの治療効果を予測かを検討した。CRPCと診断されてドセタキセル治療前の患者60例(アビラテロン:38例、エンザルタミド22例)を対象にセルソーターシステムによりCTCを抽出しPCR法にてAR-V7発現を検討した。1.アビラテロン治療前ではCTCーARV7は12/38(31.7%)陽性でPSA奏功率(PSA50%以上低下)はCTCーARV7陽性で16.7%(2/12)で陰性で94.1%(16/17)であった。エンザルタミド治療前ではCTCーARV7は36.4%(8/22)陽性でPSA奏功率はCTCーARV7陽性で12.5%(1/8)で陰性で90.9%(10/11)であった。PSA再発を予測する因子は多変量解析でCTCーARV7(p<0.001)とAFP(p=0.023)であった。2.アビラテロン治療群で治療3ヶ月後、陽性が持続した症例は10例でPSA奏功は認めなかった。CTCーARV7陽性から陰性になった2例でPSA奏功を認めた。CTCーARV7陰性から陽性になった9例でPSA奏功率22.2%(2/9)であった。CTCーARV7陰性が継続した症例は12例でPSA奏功率100%であった。3.エンザルタミド治療群で治療3ヶ月後、陽性が持続した症例は7例でPSA奏功は認めなかった。CTCーARV7陽性から陰性になった症例は1例でPSA奏功を認めた。CTCーARV7陰性から陽性になった症例は3例でPSA奏功率33.3% (1/3)であった。CTCーARV7陰性が継続した症例は11例でPSA奏功率100%であった。患者登録が予定よりやや遅れている。特に化学療法後の患者登録が遅れている。B.アビラテロンおよびエンザルタミド投与前のCRPCにおいてCTC-clusterを抽出しPCR法にてandrogen receptor splice variant 7 (AR-V7)発現を検討した。1.アビラテロン治療前ではAR-V7は20/64(31.3%)陽性でPSA奏功率(PSA50%以上低下)はAR-V7陽性で0%(0/20)で陰性で79.5%(35/44)であった。エンザルタミド治療前ではAR-V7は18.8%(6/32)陽性でPSA奏功率はAR-V7陽性で16.7%(1/6)で陰性で76.9%(20/26)であった。PSA再発を予測する因子は多変量解析でCTC-cluster-AR-V7 (p<0.001)とAFP (p=0.023)であった。2.アビラテロン治療群で治療3ヶ月後、陽性が持続した症例は18例でPSA奏功は認めなかった。AR-V7陽性から陰性になった2例でPSA奏功を認めた。AR-V7陰性から陽性になった9例でPSA奏功率22.2%(2/9)であった。AR-V7陰性が継続した症例は35例でPSA奏功率100%であった。3.エンザルタミド治療群で治療3ヶ月後、陽性が持続した症例は5例でPSA奏功は認めなかった。AR-V7陽性から陰性になった症例は1例でPSA奏功を認めた。AR-V7陰性から陽性になった症例は3例でPSA奏功率33.3% (1/3)であった。AR-V7陰性が継続した症例は23例でPSA奏功率100%であった。CRPC治療におけるCTC-clusterにおけるAR-V7の検出になる治療効果判定に有用であることが示唆された。化学療法前の患者さんの登録は進展しているが、化学療法後の追跡調査不能な患者さんにより予定より約10名少ない状態(エンザルタミド治療)となり検査ができなくなった。解析に必要な患者さん登録を推進中である。アビラテロンの治療を受けた64症例のCRPCでは、PSA奏効率が54.7%(35/64)であった。このうちCTCクラスターが検出されなかった症例のPSA奏効率が87.5%(35/40)だったのに対し、CTCクラスターAR-V7を有する症例では0%(0/20)であった。

エンザルタミドで治療された32症例のCRPCにおいても同様な傾向であり、CTCクラスターが検出されなかった症例のPSA奏効率が73.0%(17/21)だったのに対し、CTCクラスターAR-V7を有する症例では16.7%(1/6)であった。PSA無増悪生存をCTCクラスターの有無により解析した結果、CTCクラスターが検出されなかった症例は検出された症例に比べ、有意に良好であった。AR-V7の発現による解析でもAR-V7を発現していない症例は、発現している症例に比べ有意に良好だった。またベースラインの予後因子について多変量解析でPSA無増悪生存との相関を解析した結果、有意な関連因子は、CTCクラスターの有無(p<0.001)とCTC-クラスターのARV7発現の有無(p<0.001)、ALP値(p=0.023)であった。CTCクラスターにおけるAR-V7の検出が、アビラテロン及びエンザルタミドの治療効果の予測に有用である可能性が明らかになった。今後は、血液中のがん分子・遺伝子診断を実現の技術・システムの研究を開発していく予定である。末梢循環細胞癌(CTC)クラスターにおけるandrogen receptor splice variant 7 (AR-V7)が、アビラテロンまたはエンザルタミドで治療された骨転移性去勢抵抗性前立腺癌患者98症例のPSA progression-freesurvival (PSA-PFS), radiological progression-freesurvival (rPSF), overall survival (OS)の予測因子であった。CTC clustersでのAR-V7は、アビラテロンまたはエンザルタミド治療での疾患の転帰を予測できることが示唆された。CRPCと診断されてドセタキセル治療後の患者を対象にセルソーターシステムによりCTCを抽出しPCR法にてAR-V7発現を検討する。治療開始前、治療後3ー6ヶ月ごとおよび治療変更時にCTCのAR-V7発現(CTCーARV7)を検討する。ドセタキセル治療後のCRPC治療におけるCTCーARV7の検出は治療効果判定に有用であるかを検討する。現在、より多くの症例で検討する予定である。患者登録には当院関連施設より登録をし、予定の患者数(30例以上)での解析を行う。1.化学療法前で登録できた症例において定期的なCTC-clusterを抽出しPCR法にてAR-V7発現を検討する。泌尿器腫瘍当研究のための患者登録数が予想を下回ったため検体処理等にかかる費用が少なくなった。化学療法前で登録できた患者さんのうち10名が化学療法中及び後の追跡調査不能になった。この登録分におけるCTC, CTC-Cluster, CTC-ClusterのAR-V7検査の費用が未使用となった。本年度はより多くの患者登録ができるよう関連施設からの登録を行うこととした。次年度使用額は、5施設から登録を行うため検体の郵送費に使用する。また検体登録が増えることが見込まれるため検体処理費に使用する。1.予定より10名少ないため登録を行う。治療前と治療後の定期的なCTC、CTC-clusterを抽出しPCR法にてAR-V7発現を検討する。既存のAdana testとの比較を行い検討するための費用として使用する。
広域分布する蘚苔類における地域集団間分化の解明

rbcL, trnL-F, rps4, ITS1&2ならびにrpl16の塩基配列情報に基づき解析を行った結果,以下のことが判明した.(1)ウニゴケSymphyodonperrottetii(蘚類,ウニゴケ科)は国内に少なくとも3つの系統が独自の形態的特徴と分布域をもって存在していることが判明した.(2)オオタマコモチイトゴケ属2種(蘚類,コモチイトゴケ科)では地域間の遺伝的分化が大きく,さらに中米・南米に分布するAptychella属と同属であることが判明した.(3)ヤクシマコモチイトゴケ属(蘚類,コモチイトゴケ科)では地理的に離れた集団でも遺伝的な差異はほとんど見出されなかった.本研究は,従来広域分布するとされている蘚苔類について,広域に一面に分布する種群,隔離分布する種群,繁殖様式の異なる複数の種群について,その地理的分布域内における集団間分化の様相を明らかにすることで,陸上植物の中でも分散力に富む蘚苔類における分布様式と種分化の様相について解明することを目的とするものである.さらに,様々な要素が関与して成立したと考えられる日本西南部の蘚苔類相についても,種多様性が東アジア・東南アジアの蘚苔類相とどのような関わりをもつかを明らかにする.この観点から,各地に隔離的に分布する稀少種であるシダレウニゴケならびにコモチイトゴケ亜科(蘚類)を対象として研究を行い,以下のような成果を上げている.(1)シダレウニゴケ:国内8集団についてサンプルを収集し,形態的特徴の観察ならびに遺伝子の塩基配列(葉緑体DNAからrbcL, rps4, trnL-Fの各遺伝子座,ミトコンドリアDNAからnad5)について解析をおこなった.比較のため同属他種についても12集団ずつ同様の解析をおこなった.その結果,日本の集団は単一にはまとまらないこと,北限となる秩父地方石灰岩で見つかった集団は単一のクレードをつくり,種内分類群レベルで識別可能なことが判明した.また形態から類縁性が指摘されていた中米だけに分布するSymphyodoon imbricatifoliusとは特に近い関係にはないことがわかり,形態の類似は偶発的なものであることが示唆された.(2)コモチイトゴケ群については,特にタマコモチイトゴケ,ナガスジコモチイトゴケさらにヤクシマコモチイトゴケの3種について重点的なサンプリングを行い,これらについては葉緑体DNA(rbcL, rps4, trnL-F),ミトコンドリアDNA(nad5),さらに核DNA(ITS)について解析を行っている.Clastobryopsis属は中米に分布するAptychella属の異名になることが強く示唆され,これについては現在報告を作成中である.rbcL, trnL-F, rps4, ITS1&2ならびにrpl16の塩基配列情報に基づき解析を行った結果,以下のことが判明した.(1)ウニゴケSymphyodonperrottetii(蘚類,ウニゴケ科)は国内に少なくとも3つの系統が独自の形態的特徴と分布域をもって存在していることが判明した.(2)オオタマコモチイトゴケ属2種(蘚類,コモチイトゴケ科)では地域間の遺伝的分化が大きく,さらに中米・南米に分布するAptychella属と同属であることが判明した.(3)ヤクシマコモチイトゴケ属(蘚類,コモチイトゴケ科)では地理的に離れた集団でも遺伝的な差異はほとんど見出されなかった.1.野外集団のサンプリング:八丈島ならびに屋久島において,蘚類ウニゴケ科シダレウニゴケSymphyodon perrottettii,ならびに蘚類コモチイトゴケ科オオタマコモチイトゴケ属の2種,オオタマコモチイトゴケClastobryopsis robusta,ナガスジコモチイトゴケClastobryopsis brevinervis,そして蘚類コモチイトゴケ科ヤクシマコモチイトゴケ属ヤクシマコモチイトゴケYakushimabryum longissimumについてサンプリングを行った.八丈島については,国立公園特別保護地区に当たるため,採集許可を得てからサンプリングを行っている.またこれら隔離的に分布する稀少蘚類の他,広域に普通に分布する地上生のものとして,蘚類ハリガネゴケ科カサゴケ属オオカサゴケRhodobryumgiganteumならびにカサゴケモドキR. ontariense,カサゴケR.roseumについても主として乾燥標本を材料として解析を開始している.2.DNAの抽出ならびにPCR:対象となる分類群について最も適切なDNA抽出手段を検討し,CTAB法によって十分な量のDNAが得られることがわかった.解析する配列を検討し,rbcL,rps4,ならびにtrnL-Fを今後の対象とすることを確定することができた.すでにDNA抽出ならびにPCRを終えているサンプルに関しては,次年度予算で精製と配列解析委託を行う予定である.3.次年度以降サンプリングを行う場所を設定し,情報収集ならびに諸許可の取得等の準備を行った.4.DNA解析を行うための環境整備(試薬等の購入,調整,保管用薬品庫の購入),データ解析用のパソコンの購入等を行った.1.ウニゴケ属Symphyodon(蘚類,ウニゴケ科)の分布と分化従来日本に1種Symphyodon perrottetiiのみが分布するとされていたが,

rbcL, trnL-F, rps4, ITS 1&2, rpl16塩基配列情報を詳細に検討すると,国内に少なくとも3つの系統が独自の分布域をもって存在していることが判明した.学名等については現在検討中である.(1)北琉球(徳之島)九州西岸四国南岸本州太平洋岸(八丈島まで)に分布するタイプ:基物から垂れ下がる軟弱な植物体を持つ.その他の形態形質(葉形,葉の細胞の形状,中肋の長さ)から,ウニゴケ属の別種S. erraticusに相当する.ベトナムで採集した本種ともよく一致する.(2)宮崎県・三重県の内陸部に隔離的に分布するタイプ:植物体は軟弱ではなく,枝が良く張り出す.東南アジアに分布するS. perrottetiiに酷似するが,分子系統からは別のクラスターを形成する.(3)ウニゴケ属の中でもっとも高緯度に分布するタイプ:東京・埼玉の石灰岩に分布が限定される.分子系統の結果ならびに形態形質から,分布の北限で特殊な生育環境で分化を遂げた別種であることが判明.2.オオタマコモチイトゴケ属(蘚類,コモチイトゴケ科)の分類と地理的分化隔離的に分布する稀少種であるオオタマコモチイトゴケAptychellarobustaならびにナガスジコモチイトゴケA. brevinervis,ならびに国外に分布する他種について,rbcL, trnL-F, rps4, nad5塩基配列情報と形態情報を用い,種間・集団間の系統関係を再構築した.その結果,これまで1種とされていた大山コモチイトゴケは少なくとも3種から,ナガスジコモチイトゴケは4種からなりたつことが判明した.記載については,準備中である.植物分類学予定していた野外調査ならびに遺伝子の解析は,順調に進んでいる.現地に赴いても対象となる植物を発見できずに終わることもあり,そのため当初の予定よりは解析できた集団は少なくなっており,この点を改善することが必要である.解析の材料の入手のための野外調査が,十分に行えなかったことが最も大きな原因である.この遅れについては,この4月以降順調に取り戻しており,2013年度に十分に回復できる見込みである.シダレウニゴケの解析において,国内に予想を超える変異が確認された.母系遺伝する遺伝子だけでは解析が足りないため,今後は核DNAのITSも対象として解析を進める.また国外の集団も複数解析対象としたい.現在確実にサンプルの採れる場所についての情報を集めている.コモチイトゴケ亜科についても同様に,解析する集団の数を増やす.この群では既知のプライマーではITS領域がうまく増えないことが判明したため,あらたに設計したプライマーによる解析を行う.2年目にあたる2013年度は,野外サンプリングならびに解析を重点的に実施する予定である.サンプリングの場所としては,国内(宮崎県南部,高知県石灰岩地帯,神奈川県箱根,埼玉県秩父地域),国外(インドネシアジャワ島)を予定し,現在必要な許可等の申請を行っている.シダレウニゴケについては,今年度内に解析を終えて,結果を論文にまとめる予定にしている.研究開始初年度に予算を使う時間的余裕がなく,次年度(今年)にずれこんでしまった.今年は順調に計画を実行できたが,それでも完全に遅れを取り戻すにはいたらなかった.次年度は,国内・国外の野外調査を計画しており,すでに集めたサンプルならびに次年度予定しているサンプルの解析を行う予定である.また解析の対象とする遺伝子座を増やすため,これらによって予定している予算を使い切ることになる.