hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
慢性糸球体腎炎の進展過程におけるアルブミン結合脂肪酸の役割

本年度も引き続きネフローゼ症候群患者の尿中脂肪酸を分析定量した。症例数を増やしても結果はほぼ前年度と同様であった。すなわち尿中アルブミンに結合する総脂肪酸量は、血液中のそれと比べ10分の1以下と少なく、そのほとんどが飽和脂肪酸であった。また脂肪酸組成と臨床像(腎機能、蛋白尿・高脂血症の程度)や腎病理学的診断との間に一定の傾向は認められなかった。近位尿細管細胞由来の脂肪酸結合蛋白が存在すると思われる低分子蛋白画分においても同様の結果であった。また脂肪酸は蛋白を含まない画分にも存在することも明らかとなった。以上より、血液中においてアルブミンは脂肪酸を結合し担体として機能しているが、尿中に漏出する過程で希釈される結果もはや脂肪酸結合蛋白としては機能しないと考えられる。したがって尿中アルブミン結合脂肪酸の分析によって腎炎進展における役割を検討することは不可能である。今後、近位尿細管細胞へ脂肪酸負荷の影響を調べるため培養細胞を用いた検討、脂肪酸結合蛋白のネフローゼ症候群患者での動態の検討を行なっていく予定である。[方法]腎生検によって組織型を確認しているネフローゼ症候群18例の新鮮尿を材料とした。細胞成分を除去した尿よりアルブミンを他の蛋白から分離した後、Iwataらの方法により脂肪酸を抽出・蛍光ラベルし、高速液体クロマトグラフィーにて分離・同定した。またより低分子の蛋白画分の脂肪酸組成についても同様に定量した。[結果と考察]全症例で高脂血症を合併しているにもかかわらず血中脂肪酸量は健常人と差がなかった。しかしやはり全症例に低アルブミン血症が存在していることからアルブミン1分子あたりの脂肪酸結合量は増加していることが示唆された。いっぽう尿中アルブミンの脂肪酸結合量は血中の10分の1以下であった。脂肪酸の組成では、尿中アルブミンは血中に比し飽和脂肪酸の含量が圧倒的に大きく特に多価不飽和脂肪酸はほとんどが測定感度以下であった。以上の事実は、より多くの脂肪酸を結合した(したがってより陰性荷電の多い)アルブミンが糸球体より漏出しにくいか、あるいは漏出には差はないがより尿細管に再吸収されやすいことを示唆している。ネフローゼ症候群の病態より前者の可能性は低く、したがって尿細管に負荷される脂訪酸が同症候群の尿細管・間質障害に影響を与えている可能性がある。脂肪酸組成と臨床像・腎生検像の間には現在までのところ一定の傾向は得られていない。またアルブミンよりも低分子の画分にも脂肪酸が認められた。私信であるが蛋白尿患者の尿中には本来細胞質蛋白である脂肪酸結合蛋白が存在することが知られており今後アルブミンと合わせ検討を加える予定である。
超分子アーキテクチャ-を利用した複合機能性分子磁性材料の開発

超分子アーキテクチャーとは分子間力などの弱い結合力を用いた複合分子システム構造体のことである。本研究では三次元的に集積して興味深い磁性を示す超分子構造の開発と、その複合材料への展開を目指した。ホストゲスト型超分子化合物では下記1,2の研究、分子間相互作用を利用した高次元物質開発としては下記3,4の研究、ナノサイズの情報記録材料の探索として下記5,6の研究を展開した。1.クラウンスピンラベル試薬を合成した。反磁性イオンを包接させると磁性に変化が見られた。この材料はスイッチ機能をもつ磁性体や、特定のイオンの検出試薬になりえる。2,多孔質の鉄(II)錯体を用いて、紫外光照射により誘起磁化を生じる現象を詳細に調べた。圧力によって自発磁化の有無をスイッチできたものもあった。3.ラジカルとコバルトイオンから単一次元磁石的性格を強く持ちながらバルクの磁石として振る舞う一次元鎖状材料群を見いだした。最大級の保持力を有する材料を開発した。4..有機ビラジカル物質で、反磁性と三重項常磁性とをいれかえる相転移(有機スピンクロスオーバー)を調べた。完全に単結晶一単結晶相転移するものも見いだした。5.ランタノイドと3d金属イオンを含む多核錯体から単分子磁石[Dy_2M](MニCu,Ni)、[Ln_4Cu](Ln=Tb,Dy)、[Dy_2Cu_2]などを開発した。銅イオンを含むものについて高周波ESRを測定し、提案した磁気カップリング機構を検証した。6.ラジカルキレート化合物では、これまで不安定で単離できなかったラジカルを適用して、大きな磁気的カップリングを得た。また、別の配位子を用いてメソヘリケート構造の錯体を合成した。その配位子合成の過程でカゴメ格子類似の結晶を作成した。本研究では三次元的に集積して興味深い磁性を示す超分子構造の開発、ならびにその複合材料への応用を目指した。ホスト-ゲスト化学のような超分子手法を用いて強磁性的/反強磁性的相互作用をスイッチしたり、光や圧力という外的刺激により磁化を発生あるいは消滅させるといったような、動的に磁性を制御することを、複合材料のもう一つの鍵となる性能と位置づけた。また、「単分子磁石」の合成開発を行った。1.キラルな空間群をもつ弱強磁性対[Fe(pm)_2Cl_2](pmはピリミジン)の磁気構造を偏極中性子線回折などから明らかにした。新規な磁気光学素子に展開できる可能性がある。2.[M(pm)(N_3)_2](M=Mn,Fe,Co,Ni)は、紫外線照射により誘起磁化を生じるものを見いだした。[M(pm){N(CN)_2}_2]はナノサイズ空間を待ち、ゲスト分子の貫入により磁気相転移温度などが変化した。この物質は構造が柔らかく、0.4GPa程度の圧力によって自発磁化の有無をスイッチできた。3.クラウンエーテル状の側鎖をもつニッケル錯体では、Baイオンの有無によって磁気的相互作用を強磁性/反強磁性的にスイッチすることができた。4.クラウンスピンラベル試薬を合成開発した。

5.気体吸蔵性能を目指したハニカム格子状多孔質錯体[Cu(4APM)(OCH_3)(NO_3)]を合成した。6.無修飾のβ-シクロデキストリンが塩化銅を担持するという珍しい構造を得た。7.ランタノイドと3d金属イオンを含む多核錯体から単分子由来のヒステリシスを示すナノサイズ磁石{DyCuDy]および「Ln_4Cu](Ln=Tb,Dy)を開発した。超分子アーキテクチャーとは分子間力などの弱い結合力を用いた複合分子システム構造体のことである。本研究では三次元的に集積して興味深い磁性を示す超分子構造の開発、ならびにその複合材料への応用を目指した。ホスト-ゲスト化学のような超分子手法や光や圧力という外的刺激により磁気的相互作用をスイッチするといったように、動的に磁性を制御することを、複合材料のもう一つの鍵となる性能と位置づけた。また、「単分子磁石」の合成開発を行った。1.[Fe(pm)(N_3)_2]が紫外光照射により誘起磁化を生じる現象を詳細に調べた。[Fe(pm){N(CN)_2}_2]は構造が柔らかく、0.4GPa程度の圧力によって自発磁化の有無をスイッチできた。2.ラジカルとコバルトイオンから比較的高温で機能発現する単一次元磁石を開発した。3.ランタノイドと3d金属イオンを含む多核錯体から単分子磁石[Dy_2Cu]および[Ln_4Cu](Ln=Tb,Dy)を開発した。また、3d-4f錯体から、A_2B_2型としては初めてのフェリ磁性鎖を開発した。4.電導性単分子磁石を目指して、4f金属イオンを含む幾つかのイオンラジカル塩を得た。伝導性と磁性を解析した。5.電導性物質の構成分子に、天然の生物発光分子にヒントを得たイミダゾピラジノン骨格を適用した。6.クラウンスピンラベル試薬を合成開発した。反磁性イオンを包接させると磁性に変化が見られた。7.気体吸蔵性能を目指した有機カゴメ格子結晶[H_2pzao(CHCl_3)_<1/3>]を合成した。8.メソヘリケート[Ni_3pzNN_6]、[Ni_3pzIN_6]を合成した。本研究では三次元的に集積して興味深い磁性を示す超分子構造の開発と、その複合材料への展開を目指した。1.クラウンスピンラベル試薬を合成開発した。この材料はスイッチ機能をもつ磁性体や、特定のイオンの検出試薬として用いられる可能性がある。遷移金属イオンをゲストに用いると、強い磁気的カップリングが見られた。2.ラジカル-金属ハイブリッド磁性体に対して、これまで不安定で単離できなかったラジカルを適用して、大きな磁気的カップリングを得た。また、ラジカルを1電子還元した形のアニオン性配位子を用いて類似構造のキレートを得た。二量体、多量体などの構造と磁性を明らかにした。2.ラジカルとコバルトイオンから単一次元磁石的性格を強く持ちながらバルクの磁石として振る舞う一次元鎖状材料群を見いだした。最大級の強い保持力を有する材料を開発した。4.ランタノイドと3d金属イオンを含む多核錯体から単分子磁石[Dy_2M](M=Cu,Ni)、[Ln_4Cu](Ln=Tb,Dy)、[Dy_2Cu_2]などを開発した。
懸濁液を原料とする超高温高周波誘導プラズマによるニオブ-希土類系酸化物の合成

従来より、金属塩水溶液を霧状に噴霧し、5000K以上の温度を有する高周波誘導プラズマに送り込む方法(Spray-ICP法)により、酸化物の超微粒子や薄膜を合成する研究を行ってきた。この方法は一種のCVD法と考えられる。今回申請した研究の目的は、金属塩水溶液に超微粒子を分散させた懸濁液を出発原料として用いることにある。この方法が成功すれば、適当な金属塩が見つからずこれまでこの方法の対象外にあったニオブ-希土類系のような酸化物にまでSpray-ICP法を拡張することができる。しかし懸濁液を使用した研究例はほとんどなく、最初に実験上の諸問題を解決する必要があるので、可溶金属塩を用いた場合の研究例が報告されているチタン-鉛系化合物にこの方法を適用した。実験は硝酸鉛溶液に酸化チタンの超微粒子を分散させた懸濁液を出発原料とした。この結果、実験技術上の問題を解決すると同時に、チタン酸鉛の超微粒子が合成ができた。可溶塩を用いた場合はチタン酸鉛の合成は不可能だったので、懸濁液を出発原料をする方法の有用性が証明された。さらに、チタン-カルシウム、マグネシウム、ストロンチウム、バリウムの各二成分酸化物系にこの方法を応用した。これらの系のうち、塩化チタンと硝酸バリウムの混合水溶液からはいわゆるペロブスカイト型化合物が生成しないことが従来より明らかにされている。チタン-鉛系の場合と同様に懸濁液を出発原料とすると、カルシウム、ストロンチウム及びバリウムの場合はペロブスカイト型の化合物が得られたが、マグネシウムの場合は2MgO・TiO_2が生成した。以上のように、これらの系の化合物生成の様子が明らかになってきた。これらの研究を基礎として、本来のニオブ-希土類系酸化物の研究を行っているが、シ-ライト型構造以外の生成物が得られている。現在、詳細な研究を継続している。
中枢神経系のベーシック・デザインに関する比較研究

平成7,8両年度に得られた成果を要約すると,次のようになる.(1)ザリガニ脳内のノンスパイキング巨大介在ニューロンの応答性と眼柄の補償運動を解析し,脳の動作原理にニューロンの冗長性が大きく係わっていることを確認した(山口).(2)昆虫のキノコ体が,哺乳類の大脳皮質などと類似したモジュール構造をもつことを明らかにした(水波).(3)カイコガの脳内で,フリップ・フロップ回路的な動作を示すニューロン回路で運動パターンが形成され,性フェロモンに対する定位行動を発現することを見い出した(神崎).(4)ウズラの脳における歌発生機能部位が中脳内側部であることを確認し,テストステロンが歌パターンを切り替えることなどを見い出した(青木).(5)ヒザラガイやウミフクロを用いて,発生過程における神経構築やセロトニ作動性ニューロン,ヒスタミン作動性ニューロンなどの神経系構築を明かにした(桑沢).(6)サケ嗅球の僧帽細胞と顆粒細胞間のシナプスで,長期増強現象を見い出した(佐藤),(7)棘胞動物,棘皮動物,環形動物,軟体動物,節足動物,脊椎動物などから約80種類の新規生理活性ペプチドを同定した(宗岡).(8)カエルにおける特徴抽出の神経機構に関連して,視蓋ニューロンのシナプス電位と視神経の電気刺激によるフィールド電位の解析を行い,シナプス電位の時空間受容野,視蓋の細胞構築と深さ方向の情報の流れの関係をなどを明かにした(松本).(9)各種昆虫の脳構造の比較,学習行動などについて解析し,これらが昆虫の生活様式に適応していることを見い出した(藤).(10)ゲンジボタルの脳に投射する6種類の感覚子を精査するとともに,種々の方法でゴキブリのキノコ体を調べ,キノコ体が階層的に機能単位が並列する構造であることを明かにした(富永),(11)ヒドラの神経環の機能を調べ,神経環が摂食反応の発現に必須ではなく,より高次な機能に関係していることなどを明らかにした(小泉).平成7,8両年度に得られた成果を要約すると,次のようになる.(1)ザリガニ脳内のノンスパイキング巨大介在ニューロンの応答性と眼柄の補償運動を解析し,脳の動作原理にニューロンの冗長性が大きく係わっていることを確認した(山口).(2)昆虫のキノコ体が,哺乳類の大脳皮質などと類似したモジュール構造をもつことを明らかにした(水波).(3)カイコガの脳内で,フリップ・フロップ回路的な動作を示すニューロン回路で運動パターンが形成され,性フェロモンに対する定位行動を発現することを見い出した(神崎).(4)ウズラの脳における歌発生機能部位が中脳内側部であることを確認し,テストステロンが歌パターンを切り替えることなどを見い出した(青木).(5)ヒザラガイやウミフクロを用いて,発生過程における神経構築やセロトニ作動性ニューロン,ヒスタミン作動性ニューロンなどの神経系構築を明かにした(桑沢).(6)サケ嗅球の僧帽細胞と顆粒細胞間のシナプスで,長期増強現象を見い出した(佐藤),(7)棘胞動物,棘皮動物,環形動物,軟体動物,節足動物,脊椎動物などから約80種類の新規生理活性ペプチドを同定した(宗岡).(8)カエルにおける特徴抽出の神経機構に関連して,視蓋ニューロンのシナプス電位と視神経の電気刺激によるフィールド電位の解析を行い,シナプス電位の時空間受容野,視蓋の細胞構築と深さ方向の情報の流れの関係をなどを明かにした(松本).(9)各種昆虫の脳構造の比較,学習行動などについて解析し,これらが昆虫の生活様式に適応していることを見い出した(藤).(10)ゲンジボタルの脳に投射する6種類の感覚子を精査するとともに,種々の方法でゴキブリのキノコ体を調べ,キノコ体が階層的に機能単位が並列する構造であることを明かにした(富永),(11)ヒドラの神経環の機能を調べ,神経環が摂食反応の発現に必須ではなく,より高次な機能に関係していることなどを明らかにした(小泉).得られた成果などを列挙すると、次のようになる。(1)腔腸動物(小泉):ヒドラの散在神経網で神経の集中化を示す神経環の構造と機能を調べ、これが原始中枢神経系である可能性を検討した。(2)軟体動物(桑沢):ウミフクロウの発生過程で、発生の初期過程で消滅するセロトニンニューロンを見いだした。(3)甲殻類(山口):ザリガニ脳内ノンスパイキングニューロンの異種感覚の情報処理と空間定位行動との関係を精査するとともに、オオグソクムシの個々の伸展受容器の機能を調べ、他の等脚類のそれらとの相違点から伸展受容器の分化を検討した。(4)昆虫(山口、水波、神崎、冨永、藤):ゴキブリでキノコ体の出力ニューロンを解析し、キノコ体が感覚情報の高次統合や運動の高次制御に関与することが示唆された。また、コオロギの脳や食道下神経節で多数の行動解発ニューロンを同定し、これらのニューロンが3種の運動パターン(歩行、飛翔及、遊泳)の発現や選択に重要であることを見いだした。また、ハンミョウの幼虫で、捕獲行動と逃避行動が運動物体のサイズと距離によって切り替わることを明らかにした。

さらに、カイコガで、匂い定位行動発現に関与するフリップフロップ回路と、ゲンジボタルで、行動の発現と制御に関与する感覚受容器の同定と中枢投射明らかにした。(5)魚類(佐藤):コイ嗅球の僧帽細胞と顆粒細胞間のシナプスで長期増強を発見した。(6)両生類(松本):カエル網膜神経節細胞のON-OFF繊維が視蓋弟6層の細胞体近くに局在し、単シナプス性に結合していることを明らかにした。(7)鳥類(青木):ウズラの地鳴きの発声中枢は中脳内側部であることを、神経行動学的手法で明らかにした。(8)ペプチド(宗岡):ヒドラ、プラナリア、ハマグリ、ヨーロッパマイマイ、コオロギ、ミツバチ、ポリプテルス(古代型魚)、イモリ、ウズラの神経系から100種類以上の新型ペプチドを同定、合成し、それらの活性を調べた。(9)以上の結果に基づいて、班会議などで、中枢神経系の多様性と多様性のなかに存在する普遍性が検討された。各分担者によって得られた成果を要約すると,次のようになる.(1)ザリガニ脳内のノンスパイキング巨大介在ニューロンの応答性と眼柄の補償運動を解析し,脳の動作原理にニューロンの冗長性が大きく係わっていることを確認した(山口).(2)昆虫のキノコ体が,哺乳類の大脳皮質などと類似したモジュール構造をもつことを明らかにした(水波).(3)カイコガの脳内で,フリップ・フロップ回路的な動作を示すニューロン回路で運動パターンが形成され,性フェロモンに対する定位行動を発現することを見い出した(神崎).(4)ウズラの脳における歌発生機能部位が中脳内側部であることを確認し,歌発生に対するテストステロンが歌パターンを切り替えることなどを見い出した(青木).(5)ウミフクロを用いて,セロトニ作動性ニューロン,ヒスタミン作動性ニューロンなどの神経系築を明かにした(桑沢).(6)魚類嗅球の僧帽細胞と顆粒細胞間のシナプスで,長期増強現象を見い出した(佐藤).(7)棘胞動物,棘皮動物,環形動物,軟体動物,節足動物,脊椎動物などから約80種類の新規生理活性ペプチドを同定した(宗岡).(8)カエル視蓋ニューロンのシナプス電位と視神経の電気刺激によるフィールドの電位の解析を行い,シナプス電位の時空間受容野,視蓋の細胞構築と深さ方向の情報の流れの関係をなどを明かにした(松本).(9)各種昆虫の脳構造の比較,学習行動などについて解析し,これらが昆虫の生活様式に適応していることを見い出した(藤).(10)ゲンジボタルの脳に投射する6種類の感覚子を精査するとともに,種々の方法でワモンゴキブリのキノコ体を調べ,キノコ体が階層的に機能単位が並列する構造であることを明かにした(冨永).(11)ヒドラの神経環の機能を調べ,神経環が摂食反応の発現に必須ではなく,より高次な機能に関係していることなどを明らかにした(小泉).
中世イタリア中部の財産管理文書に関する史料論研究

当研究プロジェクトでは、中世イタリアにおける所領経営に関わる文書実践を知る上で不可欠な史料の1つである財産管理文書(地代リスト)を対象として、トスカーナの文書館で史料調査を実施するとともに、文書作成のプロセスやリストの利用方法を明らかにすべく、リストの物的体裁や文書形式の検討など、史料論的考察を行った。そこから、財産管理記録が毎年作成されるべき会計文書と、たえず加筆・修正の手を加えることを前提とする地代目録という、二種類の文書カテゴリーに分類されることを明らかにした。平成21年度に実施した研究の主たる内容は以下の三点である。第一に、シエナ国立文書館とフィレンツェ国立文書館にて史料調査を実施した。その結果、新たにパッシニャーノ修道院をはじめとするトスカーナ地方の教会・修道院に、11・12世紀に遡る財産管理記録が約20点伝来することが明らかとなった。第二に、シエナ聖堂参事会伝来の11・12世紀の地代リスト3点について、現物の観察によりつつ、リストの物的体裁や作成の様式、テクストの改変など、史料論的考察を加えた。この作業を通して、聖堂参事会による貨幣徴収記録の作成・利用の諸段階を再構成した。第三に、シエナ聖堂参事会による地代リストの作成と利用を、参事会による財産管理ないし所領経営に関わる文書実践全体のなかに位置づける試みを行った。そこから、地代リストの出現が、新たなタイプの文書(売買契約と借地契約の一体化した文書)の出現や文書保管・管理への関心の高まりに対応する現象であること、そして発展しつつあった貨幣経済へ所領経営をいかに適応させるかという課題に応えるかたちで、参事会がリストを活用するようになったとする点を明らかにした。本研究の意義は、都市的環境における財産管理記録の出現と普及を説明するための一つの道筋を提供した点にある。イタリア中部に伝来する財産管理記録の多くが農村を拠点とする教会組織のものであることをふまえるならば、シエナ聖堂参事会の事例が今後の比較研究の参照枠となることが期待される。また、今後さらなる事例研究を蓄積していくことにより、中世盛期の財産管理記録一般に関する史料論を構築することが可能となる。平成22年度に実施した研究の主たる内容は以下の三点である。第一に、シエナ国立文書館、ピサ大司教座聖堂付属文書館、およびルッカ大司教座聖堂付属文書館にて史料調査を実施し、11・12世紀の財産管理記録13点の写真版を入手するとともに、その一部についてテクストの読解作業を行った。第二に、現地の研究者と意見交換を行った。とりわけ、中世トスカーナ領主制を専門とするピサ大学コッラヴィーニ研究員からは、財産管理文書に関する新たな情報を提供していただくとともに、当該史料を用いた研究の方法について有益な助言を賜った。第三に、昨年に引きつづきシエナ聖堂参事会の地代リストについて史料論的考察を行うとともに、俗人による地代リストの作成と利用のあり方について検討した。このうちシエナ聖堂参事会については、とくに参事会による文書の作成・保管、そしてアーカイヴや記憶の組織化といった問題との関連の中で論じた。本研究の意義は、財産管理記録の出現や利用、そして支持素材の物的体裁や内容に関する比較研究が可能となる点にある。今日まで伝来する財産管理記録の多くが農村の教会組織のものであることをふまえるならば、都市の教会組織や俗人の手になる記録は、研究を進める上で、都市と農村、および聖職者と俗人といった比較の参照枠を提供してくれる。今後さらなる事例研究を蓄積し、比較検討作業を進めていくことにより、中世盛期の財産管理記録一般に関する史料論構築への道筋が見えてくるであろう。本研究の最終年度である平成23年度に実施した研究の主たる内容は以下の4点である。1、史料調査。平成23年11月、フィレンツェ国立古文書館ならびにシエナ国立古文書館にて所領経営に関わる文書調査を実施し、地代負担者の名前や地代の種類、量を列挙した財産管理記録数点をはじめとする史料の写真版を入手した。2、過去3年間に収集した11・12世紀トスカーナ地方の財産管理文書約20点を対象に、史料論研究の基盤となる類型論的整理を行った。そこから、財産管理記録が毎年作成されるべき会計文書と、たえず加筆・修正の手を加えることを前提とする地代目録という二種類の文書カテゴリーに分類されることを明らかにした。3、以上の類型的整理をふまえて、地代リストの形式と内容を分析した。具体的には、シエナ司教座聖堂参事会に伝来する会計文書型の地代リストと、パッシニャーノの修道士たちの手による地代目録型のリストを比較検討した。4、現地の研究者と意見交換を行った。とくに古文書学者アントネッラ・ギニョーリ(ローマ大学ラ・サピエンツァ校)からは、羊皮紙に書かれたオリジナル文書の読み方について有益な助言を受けた。

本研究の意義は、財産管理記録の作成様式や利用方法、記載内容について文書の類型的整理をはじめとする史料論的考察を加えることにより、'中世初期的な所領明細帳から中世盛期の地代帳へ、そして中世後期の会計記録への進化という、所領経営に関わる財産管理記録について従来想定されてきた単線的な発展モデルに再検討を迫る点にある。したがって当研究の意義は、究極的には財産管理記録の発展に適合的な見解、すなわち古典荘園からバン領主支配への発展を想定する中世イタリア領主制の通説を見直すための起爆剤となりうる点にある。
地域協働における非営利組織の現実-インフラストラクチャ-組織と自治体の視角から-

本研究では、日英の非営利組織が公共サービスの供給主体としての役割を高めるにしたがい、その評価やアカウンタビリティが、ローカル・ガバナンスのあり方を決定づけることを明らかにした。また、非営利組織の中間支援組織が、地域のネットワーク形成において重要な役割を果たしていること、さらに、いわゆる労働統合型社会的企業では、一般労働市場で事業を継続していること自体が、社会的価値として評価されうることを提示することができた。研究開始年度に当たる今年度は、次の研究活動を行った。第1に、英国労働党政権時代から現在の保守・自民連立政権に至る非営利セクター政策に関する政策文書及び主要な研究者の文献等をレビューし、政策がどのように変遷していったかを考察した。第2に、英国内閣府市民社会局及び自治体担当者に、政府・自治体の協働政策についてインタビューした。第3に、障害者の就労支援事業を展開する社会的企業であるソーシャル・ファームズUKのスタッフにインタビューするとともに、関連文献をレビューした。第4に、非営利セクターの全国型インフラストラクチャー組織事務局長に、非営利セクターが直面している現状についてインタビューした。以上の調査研究から、次の知見を得られた。第一に、現連立政権の非営利セクター政策は、個々の施策レベルでは労働党政権時代のそれと似通っているにも関わらず、施策の重点化によってそのコンセプトは全く異なるものになっていることである。端的な現象としては、社会起業家やコミュニティ支援の予算化はなされる一方で、セクターの集合利益は軽視され、協働関連施策は軒並み廃止されている。第二に、障害者のような就労困難者を包摂する社会的企業については、その収入の多くを公的資金に依存せざるを得ないが、政府の大規模な歳出削減が続く中、公的資金を得られる正当性をいかに主張できるかが問われていることである。前政権の時代は、インフラストラクチャー組織がセクターとしての集合利益を代表し、政府と交渉・協議する基盤も用意されていたが、今後は、組織単体の社会的価値が問われていることになると思われる。政府は、その手法として社会的投資収益(SROI)の活用を検討している。非営利組織がいかなる説明責任を果たせば社会的価値を発揮したといえるのかということについては、次年度の課題とし、理論的枠組みについて考察していきたい。2011年度は、主に以下の点に関する調査研究を行った。第一に、ローカル・ガバナンスにおける非営利セクターの位相について考察した。近年のいわゆる「新しい公共」において、サード・セクター(NPO)に対する期待が高まっているが、公共空間に多様な主体が参画する状況では、各主体のリンケージのあり方が問題になる。この点について、アカウンタビリティ(評価)の視点から検討し、他律的統制手段による評価の限界性について確認した。第二に、地域のサード・セクターを下支えするインフラストラクチャー組織の社会的機能に関する調査研究を行った。まず、労働統合型社会的企業(WISE)の国際比較研究を行う研究グループであるEMESの分析枠組みに依拠しつつ、国内のWISEの実態を把握するため、労働者協同組合連合会及び(財)協同総合研究所の協力を得て、全国のワーカーズ・コープの事業所を対象に、事業実態(事業活動の概要、組織ガバナンス、ネットワーク、財源構成等)と就労困難者の受け入れ実態に関するアンケート調査(計2種類)及び代表的な系譜ごとのインタビュー調査を実施した。この調査結果を踏まえ、次年度では、社会的企業、とりわけWISEの社会的価値とはどのようなもので、それがどのような条件によって促進あるいは制約されうるのかを考察していきたい。次に、英国におけるインフラストラクチャー組織に対する評価の実態を確認するために、英国の実践家及び研究者に対するインタビュー調査を行った。この調査から、インフラストラクチャー組織の社会的価値をいかに測定可能なものにするかが大きな争点になっており、その評価をめぐってさまざまな議論が展開されている実態が明らかとなった。評価のあり方それ自体を評価される側自らが提起し、議論の俎上にのせることの重要性を再認識した。2012年度においては、これまでの2ヶ年度の成果のとりまとめを中心に主に以下の点に関する調査研究を行った。第一に、公共サービスが多元化する中で、アカウンタビリティや評価のあり方がローカル・ガバナンスにおける重要な争点になっていることを英国の非営利セクターの実態調査を通じて明らかにした。非営利組織は、アカウンタビリティを果たすべき多様なステークホルダーが組織内外に存在するが公共サービス供給の担い手としての存在感を高めるほど、市場において支払能力がない人々や公的支援のスキームから排除されている人々への応答は確保されにくくなる。英国では、こうした組織のミッションに関わる評価のあり方が、「社会的価値」として認識されつつあることがわかった。第二に、地域のサード・セクターを下支えするインフラストラクチャー組織は、直接サービスを提供しているわけではないため、英国連立政権下では公的資金が大幅に削減され、その存在意義が問われている。しかし、傘下単位組織に対する能力開発サポートという点だけでなく、公共サービスの準市場化や競争的契約の比率が高まる中で、ともすれば分断されがちな非営利組織の横断的な連携を図り、地域のサポート・ネットワーク形成を促す役割を果たしており、いわば「民主主義のコスト」として捉えられるべき存在であることが確認できた。

第三に、労働統合型社会的企業(WISE)の国際比較研究を行う研究グループであるEMESの分析枠組みに依拠しつつ、国内のWISEの実態を把握するため、労働者協同組合連合会(労協)の実態調査を行い、その結果を取りまとめた。この調査を通じて、組織ミッションの没意味化を防ぐには、民主的な参加型ガバナンス構造が有効であり、それ自体が「社会的価値」として評価対象になり得ること、また、その際、インフラストラクチャー組織が先導的役割を果たしていることを確認できた。本調査研究は、社会的排除問題に取り組む非営利セクターが、地域の政策形成やサービス供給において一定の影響力を行使できるようになるための基盤条件を考察することを目的としている。そこで、今年度においては、協働政策の先進国である英国の実態を継続的に調査すると共に、非営利セクターが公共領域において一定の存在感を発揮するための評価のあり方について考察した。また、その際、非営利セクターがその活動を適切に評価されるには、非営利組織(NPO)の社会的価値を明示的に提起することが必要であることから、研究蓄積の乏しい国内社会的企業の実態調査も行った。24年度が最終年度であるため、記入しない。本調査研究は、次年度で終了するため、今年度までの調査研究で得た成果や知見についてのとりまとめを行いたい。ただし、本研究の主たる目的である非営利セクター(特にインフラストラクチャー組織)に対する評価のあり方については、英国の動向についての継続的な調査が必要である。幸い、英国の研究者や実践家から、多くの助言を得られるようになったので、次年度においても、英国調査については引き続き精力的に行っていきたい。
ステロイド性骨粗鬆症の克服のための臨床的、基礎的研究

臨床研究)神戸大学附属病院でステロイド大量療法を行った患者の脆弱性骨折の発生率を後ろ向きに検討した。脆弱性骨折は高頻度に骨折を起こしていることを明らかにし、リスク因子を明らかにしたた。この研究の要旨は2014年欧州リウマチ学会、米国骨代謝学会、2015年米国リウマチ学会で発表を行った。現在この研究を踏まえて前向き研究を行っている基礎的研究)ステロイドならびに各種内因性物質の破骨細胞分化におよぼす影響をIn vitroでおこなった。現在幾つかの物質が影響をおよぼすことを見出し追加実験を行っているステロイド性骨粗鬆症の臨床研究について後ろ向き解析を行なった。まず神戸大学附属病院膠原病リウマチ内科において1988年4月から2012年3月の間にPSL>0.8mg/kg以上で加療を行われた患者の後ろ向き解析をおこなった。ステロイド開始時の骨折リスクは診療録よりFRAXを算出した。特にBis内服していても5年以内に骨折を来した患者と、BisやVitD製剤の有無にかかわらず骨折をおこさなかった患者の比較に注目して解析を行った。解析にの結果、229人の患者(SLE 76,血管炎58,筋炎51,スティル病12, MCTD 7,他25)が対象となり、平均観察期間は1819日であった. 57人(52臨床的椎体骨折, 3大腿骨頚部骨折, 1上腕骨骨折, 1橈骨遠位端骨折)が脆弱性骨折を起こした。28人がBis内服にもかかわらず5年以内に脆弱性骨折を起こし、94人はBisやVitD内服にかかわらず5年以上骨折がなかった。Bis内服で5年以内の骨折を予防できなかった患者のFRAX主要骨折確率は平均15.5%で5年以上骨折を来さなかった患者は平均1.1%であった。ROC解析によるBisで骨折予防ができない患者の至適カットオフ値はFRAX主要骨折確率5.8%であった(感度89.3%,特異度74.5%, AUC 0.885).生存時間解析ではFRAXが5.8以上の時に骨折のリスクは有意に上昇し、Bis内服によっても骨折の発生率は低下しなかった。以上の研究成果は2014年6月にパリで行われるヨーロッパリウマチ学会議で採択され、発表予定である。基礎的研究については単球からRANKL、GMーCSFを投与し破骨細胞を作成。In vitroで作成した破骨細胞にデキサメサゾンを投与。その両者の代謝産物の網羅的解析を行っているステロイド大量療法を行った患者の後ろ向き研究について、当院でステロイド大量療法(PSL>0.8mg/kg/日)を受けた患者を解析し、ステロイド大量療法の重要な副作用である脆弱性骨折と、ビスフォスフォネート製剤の骨折予防効果を検証した。観察期間の中央値は約5年間で131人に閉経後女性と40歳以上の男性131人を対象に解析を行った。結果は51人(38.9%)の脆弱性骨折が発生していることがわかった。さらに、ビスフォスフォネート製剤を内服していているにもかかわらず、骨折した患者が32人も存在すること、さらにステロイド投与開始時のFRAXの値が9.3%を超えるとビスフォスフォネート製剤を内服していても骨折するリスクが高くなることがわかった。この研究内容については、2014年6月フランス・パリで行われたヨロッパリウマチ会議、および2014年9月アメリカヒューストンで行われたアメリカ骨代謝学会で発表を行った。またその概要は日本骨粗鬆症学会雑誌Osteoporosis Japanに掲載された。後ろむき研究を踏まえての、前向き研究は現在進行中である。当院でステロイド大量療法を受けた患者対象にして、Bis剤やPTH製剤、RANKL抗体制裁の骨折予防効果を検証する目的で現在まで30人の患者がエントリーされている。骨芽細胞を用いた基礎的研究については、単球から骨芽細胞を誘導し、ステロイドおよび種々のインフラまゾームが骨芽細胞に及ぼす影響を解析中であるステロイド大量療法を行った膠原病患者の骨折発生における調査を継続して行った。前年度から更に解析を進め、男性や閉経前助成についても解析を加えた。ステロイド大量療法が従来の報告よりも高頻度に膠原病患者に脆弱性骨折を起こしていることを示し、ビスフォスフォネートを中心とした現在の標準的治療では脆弱性骨折の予防は不十分である事がわかった。本研究内容は英文誌に投稿し現在revise中である。また、要旨は2015年11月にサンフランシスコで行われた米国リウマチ学会で発表を行った。PTH製剤、RANKL抗体などの新規骨粗鬆薬のステロイド大量療法を受けた膠原病患者の骨折予防効果を検証する前向き調査も同時におこなっているが、観察研究のアウトカムが骨折であるため長期の観察が必要であり、現在のところ有意な結果は得られていない。破骨細胞の分化、活性に及ぼす基礎研究についてもすすめている。グルココルチコイド以外にも様々な内因性物質を対象にして解析を行っている。これらの物質が末梢血由来CD14陽性単球からTRAP陽性多核細胞への分化、さらにカテプシンK、炭酸脱水酵素の発現に及ぼす影響を現在解析中である。ある内因性物質で破骨細胞の分化、骨吸収能を抑制する可能性を見出し現在追加実験を行っている臨床研究)神戸大学附属病院でステロイド大量療法を行った患者の脆弱性骨折の発生率を後ろ向きに検討した。

脆弱性骨折は高頻度に骨折を起こしていることを明らかにし、リスク因子を明らかにしたた。この研究の要旨は2014年欧州リウマチ学会、米国骨代謝学会、2015年米国リウマチ学会で発表を行った。現在この研究を踏まえて前向き研究を行っている基礎的研究)ステロイドならびに各種内因性物質の破骨細胞分化におよぼす影響をIn vitroでおこなった。現在幾つかの物質が影響をおよぼすことを見出し追加実験を行っている基礎研究については予定よるも遅れているが、臨床研究については予定以上に進んでいる膠原病基礎研究がやや遅れているため、大学院生とも連携して研究を行っていく臨床研究については引き続き、患者のエントリーを行っていくほぼ計画書通りの進行である基礎研究が予定より進まず、試薬などの購入が行われなかった臨床的研究については、神戸大学膠原病リウマチ内科入院中の患者を対象にステロイド大量療法の骨折に及ぼす影響の前向き超研究を行っている。骨粗鬆症薬の選択については、現在主治医の判断で選択されているが、将来的には無作為割付を行って各種薬剤のステロイド大量療法中の効果を調査したいと考えている次年度の基礎的研究に必要な試薬などの購入に充当する当該年度は学会出張がなく、旅費に計上していた予算が余剰となった2015年6月にパリで開催されるヨーロッパリウマチ学会に本研究に関連する演題が採択されたので、その際の旅費に使う予定である
ヘビPLA2遺伝子の加速深化-I型PLA2遺伝子による検証-

ヘビ毒および哺乳類の膵液に含まれるいわゆる外分泌性ホスホリパーゼA2(PLA2)は、その一次構造が明らかになったものが多くある。両酵素間には一次構造におけるホモロジーがあるほか、X線結晶構造解析により明らかになった立体構造においても類似性がある。外分泌性PLA2は7個のジスルフィド結合の位置の違いにより2群(I型、II型)に分類される。I型PLA2はコブラ科、ウミヘビ科に属するヘビの毒や膵液に含まれるもので、Cys11とCys77間のジスルフィド結合が存在するのがその特徴である。さらにI型は、哺乳類膵臓由来のPLA2に存在する"pancreatic loop"の有る(IB)、無い(IA)により2つのサブグループに分類される。II型はマムシ科、クサリヘビ科に属するヘビの毒や炎症部由来の非膵臓型PLA2がこれに含まれる。一般に、ヘビ毒中のPLA2は神経・筋接合部の神経側に作用してアセチルコリンの放出を阻害することで毒性を発現する。コブラ科のヘビ毒中に存在するI型PLA2は、PLA2活性の強いもの、弱いもの、毒性の全くないもの、強いものまでいろいろで、なかにはtipoxinγやOphiophagus hannnahの毒由来PLA2のように、"pancreatic loop"を持つものも知られている。沖縄産エラブウミヘビの毒液中にはI型PLA2が存在することが既に明らかになっている。本研究では、エラブウミヘビ毒腺並びに膵臓で発現しているIA及びIB型PLA2遺伝子(cDNA、genome DNA)の構造を明らかにした膵臓由来I型(IB)PLA2と毒腺由来I型(IA)PLA2の遺伝子を比較したところ、イントロンは互いに良く保存されていたが、膵臓由来I型に存在する"pancreatic loop"および第4エクソンの後半部分が毒腺由来I型では欠損していた。毒腺が唾液腺から変化した器官であることを考慮すると、毒腺由来I型PLA2は膵臓由来I型のprototypeを祖先遺伝子として進化してきたと考えられるヘビ毒および哺乳類の膵液に含まれるいわゆる外分泌性ホスホリパーゼA2(PLA2)は、その一次構造が明らかになったものが多くある。毒腺が唾液腺から変化した器官であることを考慮すると、毒腺由来I型PLA2は膵臓由来I型のprototypeを祖先遺伝子として進化してきたと考えられる本研究ではまずエラブウミヘビ膵臓由来IB型PLA_2 cDNAの単離を目的とした。エラブウミヘビ膵臓由来mRNAを鋳型としRT-PCRを行った。この際既に報告されているエラブウミヘビ毒腺由来PLA_2 cDNAのprimerを用いた。その結果膵臓由来mRNAからIA型IB型両方のPLA_2 cDNAの部分配列が増幅された。また哺乳類でPLA_2遺伝子の発現が報告されている肺についても同様の実験を行ったところ、肺からはIA型PLA_2の部分配列が増幅され、IB型の増幅も示唆された。膵臓由来IB型PLA_2の部分的な塩基配列を決定したところ、第二エクソン相当領域は毒腺由来PLA_2に高い相同性を示し、第三エクソン相当領域は哺乳類膵臓由来PLA_2に高い相同性を示した。爬虫類の毒腺以外の組織におけるPLA_2遺伝子の発現に関する報告例はこれまでになく、IB型PLA_2単離の報告もない。また膵臓でのIA、IB両型の同時発現の報告においては爬虫類に限らずいまだ報告はない。IA型、IB型PLA_2が同一組織に発現しているという結果は本研究の目的である加速進化のIB型PLA_2からの検証のみならず、PLA_2遺伝子の進化機構の全容や、組織特異的な発現調節機構を考察する上でも非常に有用かつ貴重な結果であると考えられる。

このようにして得られたcDNA部分配列をプローブとして、現在cDNAライブラリー及びゲノムライブラリーからIB型PLA_2遺伝子の単離を試みている。ヘビ毒および哺乳類の膵液に含まれるいわゆる外分泌性ホスホリパーゼA2(PLA2)は、その一次構造が明らかになったものが多くある。両酵素間には一次構造におけるホモロジーがあるほか、X線結晶構造解析により明らかになった立体構造においても類似性がある。外分泌性PLA2は7個のジスルフィド結合の位置の違いにより2群(I型、II型)に分類される。I型PLA2はコブラ科、ウミヘビ科に属するヘビの毒や膵液に含まれるもので、Cys11とCys77間のジスルフィド結合が存在するのがその特徴である。さらにI型は、哺乳類膵臓由来のPLA2に存在する"pancreatic loop"の有る(IB)、無い(IA)により2つのサブグループに分類される。II型はマムシ科、クサリヘビ科に属するヘビの毒や炎症部由来の非膵臓型PLA2がこれに含まれる。一般に、ヘビ毒中のPLA2は神経・筋接合部の神経側に作用してアセチルコリンの放出を阻害することで毒性を発現する。コブラ科のヘビ毒中に存在するI型PLA2は、PLA2活性の強いもの、弱いもの、毒性の全くないもの、強いものまでいろいろで、なかにはtipoxin γやOphiophagus hannahの毒由来PLA2のように、"pancreatic loop"を持つものも知られている。沖縄産エラブウミヘビの毒液中にはI型PLA2が存在することが既に明らかになっている。本研究では、エラブウミヘビ毒腺並びに膵臓で発現しているIA及びIB型PLA2遺伝子(cDNA,genome DNA)の構造を明らかにした。膵臓由来I型(IB)PLA2と毒腺由来I型(IA)PLA2の遺伝子を比較したところ、イントロンは互いに良く保存されていたが、膵臓由来I型に存在する"pancreatic loop"および第4エクソンの後半部分が毒腺由来I型では欠損していた。毒腺が唾液腺から変化した器官であることを考慮すると、毒腺由来I型PLA2は膵臓由来I型のprotorypeを祖先遺伝子として進化してきたと考えられる
都市部におけるGNSS測位精度および信頼性の向上に関する研究

本研究では,特に衛星測位にとって厳しい環境下,すなわち都市部や山間部を走行する自動車等の移動体において,建造物や地形の影響により測位衛星からの信号が途切れがちな状況においても精度良く測位を継続する手法について考察した.具体的には,車載カメラ画像と衛星測位,慣性航法等を融合したナビゲーションシステムの開発を行い,GNSS測位の信頼性を向上させる為に必要な一連のアルゴリズムが開発され,今後のさらなる発展に向けた指針が示された.衛星測位の重要性,利用範囲は近年ますます拡大しているが,都市部や山間部を走行する自動車等においては建造物や地形の影響を受け,高精度な測位を安定的に継続することが困難である.本研究では,このような衛星測位にとって厳しい環境下でも測位精度を保持し,衛星測位システムの信頼性を向上させる基盤技術を確立することを目的としている.このような目的達成のため,平成26年度は,精密単独測位(PPP)アルゴリズムを核として,(a)QZSSやGlonassを併用した測位,(b)高度や高度変化の情報として,気圧センサや地図データを有効に利用する手法,(c)異常観測データの検出および除去に関する研究を行い,その成果は,上記PPPアルゴリズムに組み込む形でソフトウェア化した.その結果,QZSSやGlonassを併用することで,使用可能な衛星数を増加させることができるとともに,QZSSが送信する高精度な補正情報を活用することで測位精度を飛躍的に改善できることが確認できた.また,気圧センサを応用することにより,使用可能な衛星数が極端に減少する(4基未満)ような状況においても,精度を保持した測位が可能であることが示された.異常観測データの検出,除去に関しては,測位演算におけるカルマンフィルタのイノベーション過程に対する検定,および観測量に対する検定手法を考案し,移動体の測位で活用されるドップラ観測量の異常値検出が効果的に行われることを確認した.また,車載カメラによる走行状態(直進,旋回,速度,加速度)に関する情報を画像データから得るための処理アルゴリズムについて基礎的な調査・研究を行った.以上の成果を基礎として,平成27年度の研究を実施する予定である.自動車などの自動運転技術は近年大変注目されている分野である.その実現には高精度な自車位置や車両状態の検出,判断,制御等の課題がある.特に,車両位置,状態の検出には様々なセンサが組み合わされている.その中でも,本研究はGPSに代表される衛星測位システム(GNSS)による自車位置検出の精度および信頼性向上に関する研究を行うものである.例えば,都市部や山間部を走行する車両では,建造物や地形の影響を受けるため,安定的に高精度な測位を継続して行うことが困難である.そのため,衛星測位にとって厳しい環境下でも測位精度を保ち,信頼性を向上させる基盤技術を確立することを目的としている.このような目的達成のため,平成27年度は,(a)精密単独測位(PPP)の精度向上を目指した局所的電離圏遅延補正モデルの作成,(b)複数アンテナを用いた高精度PPPアルゴリズムの開発,(c)ドップラ観測量の異常値検出アルゴリズム開発,(d)INS(慣性航法装置)/GPS-PPP複合航法における非線形フィルタの精度検証,(e)ドライブレコーダ画像による移動方向の予測アルゴリズムの開発,に関する研究・開発を行った.(a),(b)および(c)の研究成果により,PPP技術を核とした高精度な衛星測位の可能性が示された.さらに,(d)の研究成果により,上記のPPP技術と加速度センサ,ジャイロセンサとの複合のためのモデリング,非線形問題への対処法が明らかとなった.また(e)の研究では,簡単な(市販の)ドライブレコーダ画像(動画)から車両進行方向等の走行状態を推定する方式が考案され,効果的に進行方向予測が可能であることが確認された.平成28年度は,上記の研究成果に基づいて,PPPとINSおよび画像情報を融合した自車位置および車両状態の検出アルゴリズム,およびそのソフトウェアを開発する予定である.当該年度の研究成果は,平成26年度の研究実施計画(当初計画)をほぼ網羅しており,おおむね順調に進展していると評価した.現在,日本製のGPSである準天頂衛星システム(QZSS)の本格的運用を控え,衛星測位の重要性,利用範囲の拡大はますます拡大している.そのような背景の下,高精度な測位を安定して継続することや,測位の品質を保証する基盤技術の確立が求められている.本研究は,特に衛星測位にとって厳しい環境下,すなわち都市部や山間部を走行する自動車等の移動体において,建造物や地形の影響により測位衛星からの信号が途切れがちな状況においても精度良く測位を継続する手法を考案してきた.平成26年度,27年度においては,精密単独測位(PPP)を核とし,マルチGNSSの活用,気圧センサ,地図情報の有効活用,異常観測データの排除等のアルゴリズム,INS(慣性航法システム)と衛星測位の複合等のアルゴリズム開発を行い,これらのアルゴリズムが,ユーザ側の測位手法として信頼性の向上に寄与することを示した.

平成28年度においては,27年度までの研究成果に基づいて,特に(a)準天頂衛星システムを活用したPPPの精度改善や電離圏遅延補正情報の生成,(b)搬送波位相観測量を用いる際のアンビギュイティの部分推定,(c)ローコストMEMS IMU,GNSS,車両速度を複合した測位アルゴリズム,(d)車載カメラ画像を活用したナビゲーションについて,考案,発展,改良を行い,その成果をソフトウェアにまとめ活用できるように整備すると共に論文として公表した.以上の研究成果により,都市部等の衛星測位に厳しい環境下におけるGNSS測位の信頼性を向上させるために必要な一連のアルゴリズムが開発され,今後のさらなる発展に向けた指針が示された.本研究では,特に衛星測位にとって厳しい環境下,すなわち都市部や山間部を走行する自動車等の移動体において,建造物や地形の影響により測位衛星からの信号が途切れがちな状況においても精度良く測位を継続する手法について考察した.具体的には,車載カメラ画像と衛星測位,慣性航法等を融合したナビゲーションシステムの開発を行い,GNSS測位の信頼性を向上させる為に必要な一連のアルゴリズムが開発され,今後のさらなる発展に向けた指針が示された.当該年度の研究実績は,平成26年度の研究実施計画(当初計画)をほぼ網羅しており,概ね順調に進展していると評価した.平成27年度の成果に基づき,平成28年度の当初計画に沿って研究を実施する.特に研究計画の変更等は考えていない.衛星測位システム平成26年度の成果に基づき,平成27年度の当初計画に沿って研究を実施する.特に研究計画の変更等は考えていない.平成26年,27年度に行った走行実験およびそのデータ整理が予定工数よりも少なかったために次年度使用額が生じた.平成26年度は,車載カメラ画像処理による走行状態検出手法について,文献調査,アルゴリズム検討にとどまり,実際の車載カメラを用いた予備的実験を行うに至らなかったため,次年度使用額が生じた.平成28年度は本研究課題の最終年度にあたり,開発したアルゴリズム等の検証実験を予定している.そのための謝金として執行する予定である.平成27年度の初頭において,車載カメラシステムの導入および実験を行うための謝金として執行予定である.
脳血管攣縮における平滑筋細胞変性時になぜ平滑筋収縮が生じるか

長期にわたる脳血管攣縮を生じる犬2回クモ膜下出血モデルでは脳血管攣縮が始まる4日目にTUNEL陽性の平滑筋細胞が認められると同時に、血管径は約60%に減少する。7日目にはTUNEL陽性細胞数は増加し、10日目頃より平滑筋細胞死が生じる。このモデルにおいてカルシウ厶がミトコンドリアに異常集積すること、4日目にcytochrome cがミトコンドリアから細胞質に漏出すること、およびcytochrome cの漏出に呼応してCaspase-3の有意な活性上昇を認めた。Caspase-3の活性上昇は14日目まで持続した。また、蛋白分解酵素であるカルパイン活性も4日目以降持続して活性型が認められた。そこで、ラットクモ膜下出血モデルを用いてミトコンドリアからcytochrome cの漏出を制御する蛋白質であるBc2fam yの変動を調べた。Bc2、Bax、Badは脳動脈での発現が元来少なく検出は不可能であったが、Bc-xとBc-xsはlmmunobot法で強いバンドが検出された。そして、Bc-xとBc-xs蛋白量ともクモ膜下出血後4日目に有意に減少したが、ミトコンドリアからcytochrome cの漏出を抑制する蛋白であるBc-x減少の方が著しかった。今回の研究で、クモ膜下出血後にはBc-xの相対的な減少が生じ、ミトコンドリアからcytochrome cが細胞質に漏出し、細胞質のCaspase-3が活性化される。活性化されたCaspase-3はカルパインを活性化し、平滑筋細胞質内の収縮関連蛋白を分解する。これにより、平滑筋変性と平滑筋収縮という病態が同時に引き起こされると考えられる。脳底動脈に脳血管攣縮をほとんど生じない1回クモ膜下出血モデル犬と長期にわたる脳血管攣縮を生じる2回クモ膜下出血モデル犬を用いて、脳底動脈壁平滑筋細胞におけるミトコンドリアからのcytochrome Cの細胞質への漏出、Caspase-3活性、平滑筋収縮抑制蛋白を分解するカルパイン活性の変動を検討した。1回クモ膜下出血モデルでは全経過を通じて細胞質にcytochrome Cは染色されなかった。一方、2回出血モデルでは脳血管攣縮が始まるday4に細胞質に染色性を認め、脳血管攣縮を来す動脈ではcytochrome Cが細胞質に漏出することが確かめられた。Caspase-3活性は、1回クモ膜下出血モデル犬では極く僅かに上昇したが有意な活性上昇ではなかった。2回出血モデル犬では、cytochrome Cの漏出に呼応してday4以降有意な活性上昇を認めた。カルパイン活性は1回クモ膜下出血モデルでは、その活性化は一時的なものに終わったが、2回出血モデルではday4以降持続して活性型が認められた。また、cytochrome Cの漏出、Caspase-3とカルパインの活性化すべてがカルシウム拮抗剤の前投与で有意に抑制された。以上より、クモ膜下出血に伴い脳動脈壁平滑筋細胞に多量のカルシウムが流入し、ミトコンドリアがそれを取り込む。カルシウムによるミトコンドリア・ストレスは、ミトコンドリアからcytochrome Cを細胞質に漏出させ、Caspase-3を活性化させる。活性型Caspase-3はカルパインを持続的に活性化し、収縮抑制蛋白を分解し、脳血管攣縮に認められる持続的収縮を引き起こすものと考えられる。長期にわたる脳血管攣縮を生じる犬2回クモ膜下出血モデルでは脳血管攣縮が始まる4日自にTUNEL陽性の平滑筋細胞が認められると同時に、血管径は約60%に減少する。

このモデルにおいてカルシウムがミトコンドリアに異常集積すること、4日目にcytochrome cがミトコンドリアから細胞質に漏出すること、およびcytochrome cの漏出に呼応してCaspase-3の有意な活性上昇を認めた。Caspase-3の活性上昇は14日目まで持続した。また、蛋白分解酵素であるカルパイン活性も4日目以降持続して活性型が認められた。そこで、ラットクモ膜下出血モデルを用いてミトコンドリアからcytochrome cの漏出を制御する蛋白質であるBcl2familyの変動を調べた。Bcl2、Bax、Badは脳動脈での発現が元来少なく検出は不可能であったが、Bcl-xlとBcl-xsはlmmmunoblot法で強いバンドが検出された。そして、Bcl-xlとBcl-xs蛋白量ともクモ膜下出血後4日目に有意に減少したが、ミトコンドリアからcytochrome cの漏出を抑制する蛋白であるBcl-xlの減少の方が著しかった。今回の研究で、クモ膜下出血後にはBcl-xlの相対的な減少が生じ、ミトコンドリアからcytochrome cが細胞質に漏出し、細胞質のCaspase-3が活性化される。活性化されたCaspase-3はカルパインを活性化し、平滑筋細胞質内の収縮関連蛋白を分解する。これにより、平滑筋変性と平滑筋収縮という病態が同時に引き起こされると考えられる。