hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
シアノバクテリアにおける脱水・乾燥応答機構

昨年度、ラン藻Synechocystissp.PCC6803のグルコシルグリセロールの合成とショ糖合成に関わる2つの遺伝子破壊株(Δsll1566Δsll0045)が乾燥・脱水に感受性を示すことが明らかになった。そこで、今年度は、それぞれの合成関連遺伝子の破壊株、Δsll1566株およびΔsll0045株の乾燥ストレスの影響を調べた。その結果、両株とも野生株に比べて、乾燥後の光合成活性と生存率が共に低下していた。sll0045は液体培養中でも発現していたが、Δsll1566株に乾燥ストレスを与えると、その転写量が増加した。また、Δsll0045株ではsll1566の転写量の増加が認められた。このことからショ糖とグルコシルグリセロールは共に乾燥耐性に重要な働きをしていることと、それぞれの合成系は影響しあっている可能性のあることが明らかとなった。さらに、Δslr0280変異株を作製したところ、通常の培養液では生育できるのに対し、500mMソルビトール下で生育できないことが明らかとなった。また、slr0280と相互作用をもつ可能性のあるslr1558についても遺伝子破壊を行なったが、高浸透圧下での生育で増殖開始が遅れるものの、増殖速度に変化は見られなかった。一方、この研究の過程で、ろ紙上で乾燥した細胞の中に、生存するものが見出された。その株の乾燥ストレス耐性を調べたところ、乾燥処理後の生存率が高まっていることが明らかとなった。現在、その原因となる遺伝子を探索中である。全ゲノムの塩基配列が明らかになっているラン藻Synechocystis sp. PCC6803を用いて、ラン藻における脱水・乾燥ストレスに対する分子機構を解明することを目的として、本研究を開始した。本年度は脱水・乾燥ストレス条件と生存率との関係を調べ、ついでその条件で転写が増加あるいは減少する遺伝子を調べた。細胞をセルロース膜上にのせ、34°Cで湿度85%に置いたところ、2時間で細胞の相対重量の85%にあたる水分が失われたが、生存率は維持されていた。その生存率は、3時間後に50%、4時間後に20%に低下した。この条件で、脱水・乾燥1時間後の転写産物をDNA microarrayを用いて調べたところ、処理前に比べて2倍以上に増加したORFが52個見いだされ、逆に半分以下に減少したORFは87個確認された。このことは全ORFの約5%が転写の影響を受けたことを意味している。そこで、変動したORFについて発現の時間変動を調べたところ、DnaK(sll0170)、HspA(sll1514)、ClpB(slr1641)、ClpC(sll0020)、ssl0438などが30分以内で発現増加し、GgpS(sll1566)、QueA(sll0467)は1時間後に増加が認められた。また、RbcR(slr1594)、PsaA(slr1834)、RpoE(slr1545)、ApqZ(sll2057)は徐々に減少した。なお、セルロース膜上に細胞をのせた時に、DnaKやClpCは発現していた。RbcRやPsaAはルビスコ及び光化学系lの遺伝子であることから、ラン藻が脱水・乾燥条件にさらされると、光合成関連タンパク質の発現が低下し、乾燥ストレス応答を示すことが推測された。ラン藻Synechocystissp. PCC6803における脱水・乾燥ストレス応答を調べるため、昨年度に引き続いてNorthern hybridizationを用いて、ストレス応答遺伝子の解析を行った。その結果、昨年報告した遺伝子のほかに、slr1739やslr1128も脱水・乾燥ストレスで発現量が増大することが明らかになった。また、乾燥ストレスで発現量の増加する遺伝子のほとんどすべてが、塩ストレスあるいは浸透圧ストレスのいずれかまたは両方で発現誘導された.このことから、脱水・乾燥ストレスは、塩ストレスと浸透圧ストレスの複合として現われると考えられる.しかし、RpoD1 (slr0653)など浸透圧ストレスで発現誘導が見られるものの、脱水・乾燥ストレスで変化が見られないものもあった。次に、水分子輸送タンパク質遺伝子とされるslr2057の遺伝子破壊株(以下変異株Aと略す)、およびグルコシルグリセロール合成酵素遺伝子sll1566とスクロース合成酵素遺伝子sll0045の両遺伝子破壊株(以下変異株Bと略す)を作製した.これらの変異株をセルロース膜上で脱水・乾燥させたところ、変異株Aは野生株と比べて乾燥速度があまり変わらなかったが、コロニー形成率で求めた細胞の生存率は野生株より早く低下した。一方、変異株Bは、野生株や変異株Aに比べて乾燥速度が速く、生存率は変異株Aと同程度に急速に低下した。以上の結果から、適合溶質の合成、及び水輸送タンパク質の機能は、脱水・乾燥ストレス耐性に重要な役割を担っていることが判明した。

その結果、両株とも野生株に比べて、乾燥後の光合成活性と生存率が共に低下していた。sll0045は液体培養中でも発現していたが、Δsll1566株に乾燥ストレスを与えると、その転写量が増加した。また、Δsll0045株ではsll1566の転写量の増加が認められた。このことからショ糖とグルコシルグリセロールは共に乾燥耐性に重要な働きをしていることと、それぞれの合成系は影響しあっている可能性のあることが明らかとなった。さらに、Δslr0280変異株を作製したところ、通常の培養液では生育できるのに対し、500mMソルビトール下で生育できないことが明らかとなった。また、slr0280と相互作用をもつ可能性のあるslr1558についても遺伝子破壊を行なったが、高浸透圧下での生育で増殖開始が遅れるものの、増殖速度に変化は見られなかった。一方、この研究の過程で、ろ紙上で乾燥した細胞の中に、生存するものが見出された。その株の乾燥ストレス耐性を調べたところ、乾燥処理後の生存率が高まっていることが明らかとなった。現在、その原因となる遺伝子を探索中である。
脳回路のセルフリライト性の探求

脳回路の自己書き換え性を追求する上で、ニューロン同士のつくるシナプスに着目をしながら実験を進めて行ったところ、偶然にもアストロサイトが神経細胞の活動性に大きな影響をあたえることを見出した。アストロサイトはグリア細胞の一種であり、近年の研究では、脳の情報処理に多様な影響をもたらしうる動的な細胞であることはすでに報告されてはいる。しかし、多数のアストロサイトからなるアストロサイト・ネットワークがどのような挙動を示すかということについては未だ不明な点が多い。そこで、本研究では、急性海馬スライス標本における、アストロサイト・ネットワークの自発的な時空間活動パターンを、大規模カルシウムイメージング法によって記録した。その結果、隣接したアストロサイトどうしは、同期したカルシウム活動を示しやすく、ネットワーク全体として、局所的かつ動的な同期細胞集団を形成していることが見出された(本研究では、この活動を「アストロサイト・アイランド」と命名する)。薬理学的検討の結果、このネットワーク活動には、代謝型グルタミン酸受容体の活性化が関与し、神経活動とは独立に生じうることが明らかになった。また、ケージド・カルシウム化合物を用いて数個のアストロサイトを光刺激すると、周辺のニューロンにおいて、数mVの静止膜電位の脱分極と、自発的なシナプス入力頻度の増加が観察された。本結果は、アストロサイト・ネットワークの活動パターンを、従来にないほど大規模かつ詳細に記述するものであり、アストロサイト-ニューロンコミュニケーションを考察する上で重要な知見であると考えている。
骨格筋および心筋におけるジストロフィン遺伝子の発現調節に関する分子生物学的研究

本年度は以下の2つの可能性について検討した。(1)ジストロフィン遺伝子の5'端のalternative transcriptionにより心筋特異的なジストロフィンのアイソフォームが存在する可能性についてジストロフィンのN端にはエクソン2を共通に有する3つのアイソフォームが知られており、それぞれ異なるプロモーターにより転写調節を受けている。心筋特異的なアイソフォームの存在を確認するため正常心筋より精製したmRNAから5'-RACE法を用いてエクソン2の5'側のcDNA断片をクローニングし、その塩基配列を決定した。その結果、エクソン2の5'端には骨格筋型のエクソン1の配列が確認され、ジストロフィンの心筋特異的なアイソフォームは否定的と考えられた。(2)ジストロフィンのイントロン1内に転写制御部位が存在する可能性について今回はイントロン1の5'端寄りに存在するMEF2(Myocyte-specific Enhancer 2)結合モチーフに注目して検討した。MEF2はMyoDファミリーにより誘導され、筋管細胞以降に発現する組織特異的な転写因子である。骨格筋型ジストロフィンのプロモーター部分の機能を見るために部分的に切り取ったdeletion mutantsを作成し、おのおのの下流にレポーター遺伝子としてCAT遺伝子をつなぎ、筋芽細胞に導入してその活性を測定した。次にMEF2結合モチーフをつないだコンストラクトを作成し、同様に筋芽細胞に導入してCAT活性を測定した。その結果、TATAボックスやCrAGボックスを含む-100+68のコンストラクトが最も高いCAT活性を示した。このコンストラクトにMEF2結合モチーフをつないだところさらに数倍のCAT活性の上昇を認めた。培養系の血清濃度を変えて検討したところMEF2結合モチーフをつないだコンストラクトでは血清濃度が減少するにつれてCAT活性の上昇が見られた。以上より骨格筋においてはMEF2結合モチーフがジストロフィン遺伝子の転写活性化に関与していることが推察された。今後は心筋細胞への遺伝子導入実験よりMEF2結合モチーフの意義をさらに検討する予定である。
発育期の運動牲成長促進における血中成長因子結合蛋白の動態とその生理的貢献

運動も、発育期では持久的トレーニング(TR)やアナボリックTRともに、質的・量的な違いはあるものの、骨・筋の成長促進を惹起するが、これに対する全身性因子としての血中GH-IGF-I系の関与の仕方や程度は不明のままである。私どもは、上記のTRの後、安静時の血中IGF-I水準は変化しないが血中GH分泌量が増加すること。また、一過性の運動負荷直後では血中IGF-I濃度が有意に減少し、また、それがTR強度に依存して大きいことを報告した。これは、血中のIGF-Iの絶対量が増加せずとも、組織に積極的に取り込まれ作用する可能性を示唆している。最近、IGF-Iは血中では遊離状態と、特異的な結合蛋白(BP)との複合体という2様式で存在し、さらに後者のBPは大分子(150-KD)から低分子(25-KD)まで6種類に分類されることが報告されている。本研究は、運動TRによる骨・筋組織の肥大において、血中のIGF-I-BPの増加の可能性を検証することを目的とした。生後3週齢の雄ラットについて、動物用トレッドミルを用い、30m/min(30T)および10m/min(10T)の速度で30分間/日、5日/週で3ヶ月間の走行トレーニング(TR)を負荷した。対照群としては、何も運動負荷を与えないものとした。TR終了後、速度漸増法的走行テストを行わせ、予め留置した右心房カテーテルから、安静時、ならびに運動前・中・後に採血を行い、血中乳酸濃度を測定した。残りの血液は血漿分離の後、-80°Cで凍結保存し血中IGF-IならびにIGF-I-BP定量に供した。IGF-I-BPは低分子のIGF-I-BP-1(血糖依存型),2(絶食やGH欠乏症で増加),4(老人性骨粗鬆症で増加)および高分子のIGF-I-BP-3(IGF-Iの貯蔵庫として働く)の4種類についてwestern ligad blotting法(肥塚ら、1992)を用いて検討した。その結果、運動TRによる下腿筋(ヒラメ筋、足底筋)の有意な肥大が認められ、また、速度漸増的走行テストにおける血中乳酸濃度も有意な低下を示し運動適応が再確認された。また、血中IGF-I濃度は不変であった。血中のIGF-I-BPは、IGF-I-BP-1,2,3,4のいずれにおいても有意な増加は認められなかった。このことは、発育期の運動適応において血中IGF-I、ならびに、血中IGF-I-BPの直接的貢献は少ないことを示唆している。現在、この追試をするとともに、今度は筋組織中のIGF-I-BPの変化についても併せて検討している。

このことは、発育期の運動適応において血中IGF-I、ならびに、血中IGF-I-BPの直接的貢献は少ないことを示唆している。現在、この追試をするとともに、今度は筋組織中のIGF-I-BPの変化についても併せて検討している。
核アメリカにおける先史モンゴロイドの動植物利用

本研究は平成元年度および2年度の公幕研究「南アメリカにおける適応戦略としてのイモ型有用植物の裁培化」「裁培植物からみるアメリカ大陸先住民の拡散と適応戦略」を、対象地域を核アメリカにしぼり、扱うテ-マを動物にまで拡大したものである。核アメリカ地域に焦点をあてた理由は、そこでは特異的なほどに数多くの植物が裁培化されたこと、さらにこの地域だけで動物の家畜化がおこなわれたことなどによる。このテ-マの拡大にともない、研究組織も拡大し、動物利用(稲村)およびエスノヒストリ-(熊井)の研究者もくわえ、本研究は動植物の利用から先史モンゴロイドの適応戦略の特質を究明する目的をもって実施した。研究の方法は、基本的に研究代表者および分担者がすでに蓄積している調査資料のうちから当該テ-マに関連するものを選定し、分折、統合するものである。具体的には、代表者の山本は先スペイン期の土器に描かれたり象どられた裁培植物の写真および資料をコンピュ-タ-に入力し、その同定、分析を試みた。稲村は、動物利用の専門家の立場から自身のアンデスでの調査調査にもとづき、植民地時代の資料をも利用して先スペイン期における核アメリカ地域での動物利用の具体相の究明に努めた。エスノヒストリ-の専門家の熊井は、国立民族学博物においてコンピュ-タ-に入力されている植民地時代の史期から動植物の利用および適応に関係する史料を抽出、分析中である。以上のように、研究代表者および分担者はそれぞれに満足するべき成果をあげることができたが、初期の目的である3名の研究成果を統合するという点では充分ではなかった。これまでの研究で、動物利用と植物利用は密接な関係があることやエスノヒストリ-の有効性も明らかになっているので、分野の異なった3名の研究成果を統合し、報告書の刊行に備えるために平成4年度の公幕研究にも申請中である。
「手動PCR」をもとにしたデザイン可能な学生実験プロトコールの開発

理学部化学系の生物化学実験は分子生物学の操作が中心であり、実験を履修している学生の9割が高校で生物化学を勉強してこない。そのため生物化学の基本的な知識が備わっておらず、実験を理解せずに終了していた学生が多かった。これを解決するため、基本的な生物化学の知識や操作の習得のみならず、その実験原理を理解できる課題を提供する必要があった。しかしながら、生化学分野の学生実験では溶液などあらかじめキット化されている場合が多く、条件や操作の意味を理解できずに実験を終了してしまい、基礎理論や原理を実感できるように工夫された実験課題は無かった。本研究で開発実験として選んだポリメラーゼ連鎖反応(PCR)によるDNAの増幅は、酵素によるDNAの重合反応が基礎となっている。これは化学系学生にとても親しみやすい内容である。また、さまざまな分野で応用されるため、その理解はたいへんに重要である。しかしながら、研究室レベルでは自動化された機器(サーマルサイクラー)を使用しておこなうことが日常的であり、学部学生向けの適当なプロトコールは存在しなかった。今回開発した実験は、同じ実験操作(PCR)を2度行うことになっており、2回目の実験は自らが考えた条件(繰り返し回数、金属イオンの追加、操作温度の変更等)で実験を実施し、操作や薬品の意味を実感できる課題とした。さらに当初の計画通り、実験の安全性の向上、実験開始時の初期コストを抑える、操作、準備の軽減なども図ることができた。この実験はテキスト化後、今年度の京都大学理学部の化学実験として提供することができた。
ジュニア競技者のための時空間解析によるサイバネティックス系体力評価システムの開発

本研究は動作分析データによって得られる変量について、サイバネティックス系体力評価変量の検討を目的とした。慣性センサは3軸のジャイロ、加速度、磁気の各センサで構成され、カーリング競技のデリバリーにおける各相対座標系の3次元加速度および角速度を測定した。ストーンの速度を運動パラメータから推定するためにニューラルネットワークを適用した結果、実測値に対する推定値は10%未満の誤差であった。デリバリー動作の運動パラメータのみからストーンの速度を推定できるということは、パフォーマンスの向上に直結する具体的な動きの修正点を客観的に抽出できることを意味し、効果的なフィードバックを可能にすると考えられる。本研究は、ジュニア競技者のタレント発掘に資するサイバネティックス系体力評価システムを開発するために、既存の体力テストの解析(高次および階層的因子分析)による一般因子(適性因子)を抽出し、基準関連妥当性を検証するとともに、競技横断的な適性因子の存在の有無を明らかにすることを目的とする。今年度はカーリングジュニア競技選手のパフォーマンステストのデータより探索的因子分析を行い、高次および階層的因子分析によって一般因子を抽出する。さらに、カーリング日本代表クラス選手においても同様な解析を行い、構造方程式モデルの適用から多母集団同時分析を行い、ジュニア選手と高レベルアスリートの一般因子間の関与の程度を明らかにすることを主に計画した。体力テストによって得られるパフォーマンスにおけるサイバネティックス系の情報を取り出すため、その外的基準変量となる動作解析より規定される評価変量を得るため、カメラ撮影による映像解析とセンシングデータとのマッチングを行った。これにより得られたデータから評価において有効なパフォーマンス変量を次年度に検討する。さらに、サイバネティックス系とエネルギー系の関連の程度を検討する。サイバネティックス系の評価の関連変量として、カーリングフォームの評価項目を作成した。次年度以降にビデオ映像に基づく評価を行い、得られたデータに対して項目反応理論を適用し、カーリングフォームの評価における数量化を行う。これに先立ち、同時に測定したFMSの各項目について、評価を行った。カーリングフォームの評価の前段階として、このデータについても項目反応理論を行った。カーリングフォームのサイバネティックス系評価変量の基礎変量とすべく、項目反応理論より得られた困難度を算出した。この困難度はカーリングフォームの評価変量とあわせて、合成変量を作成し、エネルギー系フィットネスデータとの関連を検討する。パフォーマンス測定において予定していた被験者よりも人数が少なく、解析を行った結果、データの適合が十分得られなかった。また、主要な機器であるフォーム解析用のセンサー予算が減額交付となり、初年度に準備することができず、次年度に持ち越すことになった。関連して解析プログラムの構築も予定よりも遅れている。サイバネティックス系の評価変量として、カーリングのフォーム分析結果とそのフォームの質的評価の両面からアプローチする。フォーム分析の検討がセンサーが準備できていない状況によって遅延していることを踏まえ、フォームの質的評価を進めた。フォームの質的評価は項目反応理論による量的変量への適用を行うため、フォームの基礎的評価となるファンクショナルムーブメントシステム(FMS)の評価について項目反応分析を適用し、解析を行った。この結果は日本体育測定評価学会において発表した。これによりフォーム分析における質的評価の量的変量への変換作業に見通しがついた。フォームの質的評価は、現在および過去の日本代表選手が評価の観点および評価項目の作成を行った。評価の観点は大きくデリベリーとスゥイープに分類し、さらにデリバリーは6段階、スライドの形、フリップとリリースの観点、スゥイープはフォーム、フットワーク、ストロークの観点に細分化した。これについては次年度以降に様々な競技レベル、特にジュニア選手のフォームに対して評価を行う予定である。また、センサーによる測定を予定していたフォーム分析は、カメラ撮影映像によるフォーム分析を行った。カーリングのフォーム測定は氷上で行うため、実験室で行う赤外線カメラによる測定が困難である。従って、一般のカメラ撮影を行い、マーカーから関節角度、角速度等の変量を解析する。現在、フォームの質的評価に関する観点とマッチングさせた評価変量の解析を進めた。本研究はジュニア競技者のタレント発掘に資するサイバネティックス系体力評価システムを開発するために,既存の体力テストの解析(高次および階層的因子分析)による一般因子(適正因子)を抽出し,基準関連妥当性を検証するとともに,競技横断的な適性因子の有無を明らかにすることを目的とする。一昨年および昨年度はカーリングジュニア競技選手のパフォーマンステストのデータより探索的因子分析を行い,高次および階層的因子分析によって一般因子の抽出を試みた。さらに,カーリング日本代表クラス選手においても同様な解析を行い,構造方程式モデルの適用から多母集団同時分析を行い,ジュニア選手と高レベルアスリートの一般因子間の関与の程度を明らかにすることを主に計画した。体力テストによって得られるパフォーマンスにおけるサイバネティックス系の情報を取り出すため,その外的基準変量となる動作解析より規定される評価変量を得るため,カメラ撮影による映像解析とセンシングデータとのマッチングを行った。これにより得られたデータから評価において有効なパフォーマンス変量を検討する。さらに,サイバネティックス系とエネルギー系の関連の程度を検討する。サイバネティックス系の評価の関連変量として,カーリングフォームの評価項目を作成した。ジュニアサッカー選手には既存の評価項目を適用する。動作に際する主観的な評価を評価項目に基づいて行い,得られたデータに対して項目反応理論を適用し,カーリングフォームおよびサッカーの技能の評価における数量化を行う。カーリングフォームおよびサッカーのサイバネティックス系評価変量の基礎変量とすべく,項目反応理論より得られた困難度を算出した。

この困難度はフォームおよび動作の評価変量とあわせて,合成変量を作成し,エネルギー系フィットネスデータとの関連を検討する。今年度は昨年度機器購入時期の遅延で停滞していた慣性センサによる動作測定を中心に行った。慣性センサから得られる身体運動計測情報は加速度や角速度であり,角速度の積分演算や重力加速度の変換からデータを得ることができる。また時間軸に沿って変化する現象は動的時系列解析によって分析される。急激な変化が生じたり,非線形性を示すデータ等身体運動における神経系サイバネティックス系の体力を評価する場合は,時間の要素を含む時空間解析の適用が望ましい。そこで非周期的な運動について時間情報を含めた分析を慣性センサから得られる情報の解析を試みた。この結果,並進加速度,ドリフトによる誤差を補正した結果を推定することができた。慣性センサによる時空間解析によって,測定誤差が少なく且つ環境を選ばない身体運動計測が可能であり,新たなスポーツ現場における測定精度の高い測定方法が提案できると考えられた。この結果は日本体育測定評価学会において発表した。これによりフォーム分析における質的評価の量的変量への変換作業に見通しがついた。フォームの質的評価は,現在および過去の日本代表選手が評価の観点および評価項目の作成を行った。評価の観点は大きくデリバリーとスイープに分類し,さらにデリバリーは6種類,スライドの形,フリップとリリースの観点,スイープはフォーム,フットワーク,ストロークの観点に細分化しており,今年度実施する。また,センサーによる測定を予定していたフォーム分析は,人数の確保を踏まえ,カーリングに加え,サッカージュニア選手に対しても同様のアプローチで測定を行っている。現在,フォームの質的評価に関する項目について項目反応理論を適用する準備を行っている。慣性センサによる身体運動のキネマティクス測定は簡便かつ測定範囲の制限を受けない計測が可能である。慣性センサから得られる身体運動計測情報は、加速度や角速度であり、角速度の積分演算や重力加速度の変換からデータを得ることができる。また、急激な変化が生じたり、非線形性を示すデータ等身体運動における神経系サイバネティックス系を評価する場合は、時間の要素を含む解析の適用が望ましい。慣性センサから得られる情報について、カルマンフィルタによる状態空間モデルを適用し、競技におけるフォームの測定評価を行った。また、フォーム分析によって得られた変量データとフォームの質的評価データとの比較を行った。
自己切断機能をもったDNAに関する研究

自己切断機能をもったDNAに関する研究を行った。詳しくは、一本鎖でありながら高次構造に基づくグアニンの8位のプロトン間に核オーバーハウザー効果(NOE)の観察される4量体(HTTG、GATG)についての核磁気共鳴による水容液高次構造の解析と昇温下の自己分解反応についての速度論的な検討を行った。上記の4量体オリゴヌクレオチドを一次元ならびに二次元NMR(COSY,NOESY,ROESY)によって測定し、全プロトンの帰属に成功した。GTTGではグアニンの8位のプロトン間ならびにチミンの6位のプロトン間に強いNOE間が観測されこれらの塩基同士が強い相互作用を行っていることが示唆されたが、この相互作用は40゚C以上の昇温によっても消失しない極めて安定な相互作用であることを確認した。一方GATGでは0゚C近傍の低温ではグアニンのプロトン間に弱いNOEが見られたが、これは昇温によって消失したこの相互作用が弱いことが分った。また他の塩基配列の4量体についても同様の測定を行ったが、塩基間の相互作用は観測されなかった。すなわち、GTTGは4量体という小分子でありながら水溶液中で堅い構造をもつことを発見した。なお、このような安定な高次構造をもった小オリゴヌクレオチドを見出した過去の報告はない。一方上記の4量体オリゴヌクレオチドを昇温したときの自己分解についても速度論的に解析した。その結果、5'ならびに3'端にグアニンをもつオリゴヌクレオチドでは塩基の脱プリン反応が容易におき、これに引き続きおきるβ脱離によって5'端ならびに3'端のヌクレオチド単位が消失しやすいことを明らかにした。現在、高次構造と分解反応の程度と相関を検討しており、さらには脱プリン反応以外にも、インターヌクレオチドリン酸結合の加水分解反応についても検討を行っている。
抗原虫活性物質の結合タンパク質同定と新規創薬ターゲットの開拓

Nilotinibの標的タンパク質を同定するためにマラリア原虫の大量培養を行い原虫ライゼート(細胞質フラクション、核フラクション)の調整を継続して行っている。リガンド結合ビーズの作製も継続して行っていたが、リガンド結合量とSDS-PAGEで確認されるバンドから推測されるタンパク質量に再現性が見られなくなっていたため受託により結合ビーズを作製した。その結果、リガンドの実質結合量が調整量の1/2となっていたため、リガンド結合量の条件をこれまでの2倍として作製された結合ビーズを用いてtarget protein fishingを行った。細胞質フラクションを用いた検討ではSDSーPAGE上で3 -5本程度の結合タンパク質が確認された。これまで数回の検討を実施したなかで、再現性の高いバンド2本(37kDa, 30kDa付近)をゲルから切り出した。解析は前回検討したMALDI-TOFF-massによるPMF法ではなく、より感度の高いLC/MS解析を実施中である。リーシュマニア原虫を用いたtarget protein fishingの最適化に向けて内臓リーシュマニア原虫のamastigote型(細胞内感染型)からライゼートを得るために大量取得および培養の検討を継続している。マクロファージ等の宿主細胞に対して十分な感染力を維持したリーシュマニア原虫を得るために定期的なマウスpassegeによって標的臓器である脾臓からamastigoteを分離しin vitro培養を行った。本法によってホストマクロファージ細胞に感染力のあるamastigoteが得られているものの、得られるamastigoteの量、in vitro培養での維持、細胞増殖度が一定しないためtarget protein fishingに使用する原虫ライゼートを調整するまでの原虫量確保には達していない。前年度の問題であったリガンド結合ビーズに関しては解決したものの、マラリア原虫の培養に滞りがあったこと、同じくリーシュマニア原虫の取得、培養が順調とは言えない。Nilotinibの結合タンパク質取得においては核タンパク質フラクションを用いた検討を進める。細胞質および核タンパク質フラクションの標的タンパク質候補のバリデーションに進む。Nilotonibの作用機序を解明する上で、結合タンパク質以外の部分でも検討を進める。Nilotinib結合タンパク質の同定において、target protein fishing後に得られたタンパクをSDSーPAGEから切り出しPMF解析を行ったが、標的候補は得られていない。切り出したSDS-PAGE上のバンドに含まれる標的タンパク質の絶対量が不足していると考えられ、バンドを十分に得るためには量上げを行う必要がある。これに向けてマラリア原虫ライゼート調整および結合ビーズの作製を継続している。抗マラリア活性物質として標的探索候補としているNP-023について同調培養したマラリア原虫を用いてマラリア原虫生育ステージ感受性を検討し、trophozoiteからschizontにかけて阻害作用が見られることを確認した。リーシュマニア原虫を用いたtarget protein fishingの最適化に向けて原虫ライゼートを得るために大量培養の検討を開始した。リーシュマニア原虫は内臓リーシュマニア原虫と皮膚リーシュマニア原虫を同時に検討した。いずれもマクロファージ等の宿主細胞に対して十分な感染力を維持したリーシュマニア原虫を得るため、マウスpassageを定期的に行い原虫を分離、in vitroでの培養とマウス腹腔マクロファージ(PEM)に対する感染を継続的に繰り返す中でPEM細胞内感染型amastigotesのライゼートを得るために、最適条件を検討している。無細胞系amastigoteの大量培養を行うため、凍結原虫から培養した内臓リーシュマニア原虫をRag2KOマウスにi.v.感染させ約2ヶ月後に脾臓を摘出、ホモジネートを調整し遠心分離によりamastigoteを分離し現在培養中である。Amastigoteからpromastigoteに分化させた内臓リーシュマニア原虫はPEMに感染することを確認した。NIlotinb結タンパク質の同定において、target protein fishingで得られるSDS-PAGE上のバンドの再現が取れないことが続いた。Nilotinib結合ビーズ調整の再現性が悪いことが考えられたため、結合ビーズ作成時における反応試薬を新しくすること、反応のモニタリングをすることで改善されてきている。

本法によってホストマクロファージ細胞に感染力のあるamastigoteが得られているものの、得られるamastigoteの量、in vitro培養での維持、細胞増殖度が一定しないためtarget protein fishingに使用する原虫ライゼートを調整するまでの原虫量確保には達していない。前年度の問題であったリガンド結合ビーズに関しては解決したものの、マラリア原虫の培養に滞りがあったこと、同じくリーシュマニア原虫の取得、培養が順調とは言えない。29および30年度の計画に沿って研究を継続する。各種標的原虫の培養とライゼート調整は継続的に行いライゼートストックを確保する。Nilotinibの標的タンパク質同定を継続して進めると共に、他の作用メカニズムについても合わせて検討することで包括的に作用メカニズムを明らかとする。他、FGビーズと結合させる抗原虫活性物質は連携研究者が新たに取得したより活性が強く、かつin vivoで効果を示すような化合物、あるいは元の抗原虫活性物質をさらに最適化した高活性な誘導体などに適時変更し、最終目的である新規創薬ターゲットの開発に繋げる。Nilotinibの結合タンパク質取得においては核タンパク質フラクションを用いた検討を進める。細胞質および核タンパク質フラクションの標的タンパク質候補のバリデーションに進む。Nilotonibの作用機序を解明する上で、結合タンパク質以外の部分でも検討を進める。
骨転移におけるα4β1インテグリンの関与に関する研究

2細胞の生物学的解析:インテグリンα4β1のトランスフェクタント(α4-CHO)について、そのリガンドであるVCAM-1およびフィブロネクチンCS-1タン白に対する接着実験を行なった。その結果、発現したインテグリンα4β1はそれらリガンドに接着し、十分な機能があることを確認した。3転移実験:α4-CHOあるいは母細胞(CHO)をヌードマウスに投与し実験転移を検討した。その結果、CHOは肺にのみ転移がおこったのに対して、α4-CHOは骨にも高率に転移を認めた。組織学的には主として骨髄領域に腫瘍細胞が存在し、一部では骨破壊性に周囲に浸潤していた。また、骨髄のみに微少な転移巣が見られることもあり、転移の形成が骨髄から起こると考えられた。マウスの中には脊髄に転移し、周囲の神経根を圧迫して、下肢の麻痺を来す例が見られ、これは臨床上でも脊髄転移の時にしばしば見られる現象で興味深かった。インテグリンα4鎖およびリガンドであるVCAM-1の中和抗体を併用することにより、α4CHOによる骨転移は80-90%阻害された。骨髄中にはVCAM-1を恒常的に発現している細胞(stroma cell)が存在するので、α4-CHOの細胞表面にあるインテグリンα4β1とVCAM-1との接着により、α4-CHOが骨髄中にとどまり、増殖したと考えられた。臨床的にインテグリンα4β1を発現している腫瘍細胞は骨に転移を形成することが予想され、そのメカニズムを阻害することにより転移の抑制が期待される。1細胞への遺伝子導入:培養細胞の中でChinese Hamster ovary(CHO)cellを用いることにより、効率よく遺伝子導入が行われた。すなわち、インテグリンα_4あるいはβ_1両方のサブユニットの遺伝子導入が順調に行われ、十分な発現のあることがフローサイトメトリー法および免疫沈降法により確認された。また、CHO細胞はインテグリンの中でα5β1しか発現しておらず、解析がしやすい系であることが認められた。2細胞の生物学的解析:遺伝子導入された細胞のうちインテグリンα_4鎖のトランスフェクタントについて、リガンドであるVCAM-1およびフィブロネクチンCS-1タン白に対する接着実験を行なった。その結果、発現したインテグリンα_4β_1はそれらリガンドに接着し、十分な機能があることを確認した。3転移実験:インテグリンα_4のトランフフェクタントについてヌードマウスを使用し詳細な解析を行なった。その結果、transfectionしていない母細胞のCHO細胞では肺転移のみしか見られなかったのに大して、transfectantは高率に骨に天使を認めた。その他の臓器としては、リンパ節、副腎に転移を認めることがあり、その評価は検討中である。骨転移は組織学的に骨破壊性に周囲に浸潤しているもののほか、骨髄のみに少数のmicroscopicな転移が見られることから、骨髄から起こると考えられた。また、マウスの中には脊椎に転移し、周囲の神経根を圧迫して、下肢の麻痺を来す例がかなり見られた。臓器特異的な転移を単一の分子で説明した研究は今まで見られず、初めてのものとして注目される。また、骨転移のモデルはあまり見られず、この系を使って病態の解析、治療への応用が期待される。その結果発現したインテグリンα4β1はそれらリガンドに接着し、十分な機能があることを確認した。

また、骨髄のみに微少な転移巣が見られることもあり、転移の形成が骨髄から起こると考えられた。マウスの中には脊椎に転移し、周囲の神経根を圧迫して、下肢の麻痺を来す例が見られ、これは臨床上でも脊椎転移の時にしばしば見られる現象で興味深かった。インテグリンα4鎖およびリガンドであるVCAM-1の中和抗体を併用することにより、α4-CHOによる骨転移は80-90%阻害された。骨髄中にはVCAM-1を恒常的に発現している細胞(stroma cell)が存在するので、α4-CHOの細胞表面にあるインテグリンα4β1とVCAM-1との接着により、α4-CHOが骨髄中にとどまり、増殖したと考えられた。臨床的にインテグリンα4β1を発現している腫瘍細胞は骨に転移を形成することが予想され、そのメカニズムを阻害することにより転移の抑制が期待される。
受粉生態からみた温暖化条件におけるイネの理想型

4Lのポットに栽培した開花期のイネ(品種:IR72)をイネ群落(品種:全両優681)の中に設置した種々の高さの台に置き,葉郡内の穂の深さ,穂周囲の環境と受粉・稔実との関係を調べた.稔実から見て最適な穂の深さが認められ,稔実には最適な風速があると考えられた.穂の周辺の風速が毎秒0.5メートル以下になると不安定になることが認められたが,強風条件下では受粉が安定しており,受粉の安定性から強風条件下での稔実の低下を説明することはできなかった.品種と施肥により形成されるイネの草型・群落構造と受粉の安定性との関係を群落内の風を通じて量的に理解し,特に温暖化条件において収量からみた理想的なイネの形を理論的に示す目的で,中国のイネコアコレクションから,まざまな草型のイネ12品種を選抜,栽培し,群落構造,群落内の風環境と受粉・稔実の安定性との関係を検討した.8月上中旬に最高気温36°Cに達し,不稔率は,開花中の全品種の平均値で32%,最も高い品種で64%に達した.日々の不稔の発生率の変化は,開花期間の最高気温でよく表されたが,受粉動態との関連は認められなかった.一方,不稔発生率の品種間差異は,柱頭上で発芽した花粉が5粒未満の穎花の割合でよく説明された.これらの結果から,圃場における高温不稔の発生は,従来の制御環境下で指摘されてきたような受粉や花粉の発芽の不具合によるものではなく,花粉発芽の後のプロセスに現れる不具合によるものであると考えられた.しかし,安定した受粉や花粉発芽が高温不稔耐性に貢献することは確認された.柱頭上での発芽花粉が5粒未満の穎花の割合の日々の変化は,開花時の風速でよく説明でき,気温との関係は明らかでなかった.発芽花粉が5粒未満の穎花の割合の品種間差異は群落内の穂の深さと葯基部の裂開により説明できた(寄与率72%).さらに,期間中に出穂した穂の不稔率は,穂の深さ,葯基部の裂開,開花期間3日間の最高気温の平均値でよく説明できた(寄与率55%).これらの結果から,深い穂や,葯基部の大きな裂開は,受粉・柱頭上の花粉発芽の安定を通じて高温条件下での稔実に貢献していると結論した.一方,これまでにオーストラリアで得られたデータを解析し,風が穂温を通じて受粉の安定性に関与することを示した.さらに,葯の裂開に関与する遺伝座を特定する目的で,裂開後の葯の形態に関するQTL解析を実施し関与するQTLを明らかにした.穂の高さと葉群との位置関係が高温不稔の発生や受粉の安定性におよぼす影響,穂の高さにおける風の強さと受粉の安定性との関係を明らかにする目的で,高温不稔が発生しやすい中国長江大学において,水田を用いたモデル実験を行った.4Lのポットに栽培した開花期のイネ(品種IR72)を群落の中に設置した種々の高さの台に置くことで葉群内の穂の高さを違えた.開花時に受粉の状態と穂の周囲の環境を,成熟期に稔実率を計測し,葉群内の穂の深さ・穂周囲の環境と受粉・稔実との関係を調べた.特に,穂周辺の風速については,熱戦風速計を用いて性格に測定した.実験を3回繰り返した.稔実率は,花の位置が深いほど低くなり,草冠からの深さが6cmの位置でもっとも高くなった.それ以上浅い場合には,かえって稔実率が低くなる傾向が認められた.柱頭上での発芽花粉数が不十分な花の割合は,穂が深くなるほど低下する稔実の傾向とよく一致した.柱頭上での花粉の発芽が十分でない花の割合は,開花後柱頭に付着していた花粉の数が不十分な花の割合とよく一致した.受粉不良の花の割合は,開花時刻の群落内の穂の高さの風速の2次曲線でよく近似され,風速0.40.8ms-1程度で最も小さくなった.以上の結果から,稔実から見て,葉群に対する穂の深さには最適な値があり,穂の深さと稔実との関係には風速が関与していると考えられた.ただし,風速のデータについては,さらにデータの収集が必要と考えられた.昨年度に引き続き,穂の高さと葉群の位置関係が高温不稔に発生や受粉の安定性に及ぼす影響,穂の高さにおける風の強さと受粉の安定性との関係を明らかにする目的で,高温不稔が発生しやすい中国長江大学において,水田を用いたモデル実験を行った.4Lのポットに栽培した開花期のイネ(品種:IR72)をイネ群落(品種:全両優681)の中に設置した種々の高さの台に置くことで葉群内の穂の高さを違えた.開花時に受粉の状態と穂の周囲の環境を成熟期に稔実率を計測し,葉郡内の穂の深さ,穂周囲の環境と受粉・稔実との関係を調べた.本年度は風の強い日が多く,昨年度のデータを補完することができた.

強風時には穂が葉群の深い位置にあるほうが稔実率は高く,弱風時に浅い位置にあるほど高かった.2014度の実験では,風は中庸な条件で,稔実から見て最適な穂の深さが認められたことから,稔実には最適な風速があると考えられた.受粉については,2年間の実験を通じて,穂の周辺の風速が0.5ms-1以下になると不安定になることが認められたが,強風条件下では受粉が安定しており,受粉の安定性から強風条件下での稔実の低下を説明することはできなかった.草型の異なるイネを群落状態で栽培した場合には,穂の位置が葉群内の高い位置にある品種や草丈自身が高い品種で受粉が不安定になる傾向が認められ,モデル実験の結果と一致しない.一般に穂の位置が高い品種では,出穂・開花時より穂が傾く傾向がある.そこで,岐阜大学の研究圃場において,ポット栽培したイネを開花時に傾け,穂の傾斜と受粉の安定性との関係を調べたところ,穂が30°以上傾くと,受粉が不安定となることが確認された.以上の結果から,穂の受粉の安定性は,穂の位置だけではなく穂の傾きの影響を強く受け,これが草丈の高い品種や葉群内の穂の位置が浅い品種の受粉が不安定となることの要因の一つであると考えられた.4Lのポットに栽培した開花期のイネ(品種:IR72)をイネ群落(品種:全両優681)の中に設置した種々の高さの台に置き,葉郡内の穂の深さ,穂周囲の環境と受粉・稔実との関係を調べた.稔実から見て最適な穂の深さが認められ,稔実には最適な風速があると考えられた.穂の周辺の風速が毎秒0.5メートル以下になると不安定になることが認められたが,強風条件下では受粉が安定しており,受粉の安定性から強風条件下での稔実の低下を説明することはできなかった.穂の群落中の高さと稔実,受粉との間に一定の関係があることが,再現性を持って示された.また,熱線風速計の導入により,穂周辺の風速と受粉,稔実の3要素の量的な関係が,かなり明らかにされた.以上のことから,おおむね順調に進展していると判断した.作物学引き続き,高温条件下において,群落内の穂の位置と稔実との関係を明らかにするための圃場実験を行い,データを収集する.さらに,稔実に影響を及ぼす穂の深さ以外の群落構造に係る要因についても検討を加える.中国において圃場実験を実施し,概ね予定のデータを得ることができた.天候不順のためにサンプリングした葯数が予定より少なくなり,計測や輸入に用いる消耗品の必要量が少なくなり,次年度購入使用することにした.引き続き中国において圃場実験を実施するとともに,圃場実験を補うためのポットを用いた基礎的な実験を中国と日本において実施する.前年にサンプリングできなかった分も含めてサンプリングを計画し,必要な消耗品を購入する.当初,学生1名を中国へ同伴する予定であったが,希望する学生がいなかったために,同行することができなかった.本年度は学生を同伴し,昨年カバーできなかった実験・調査を行う予定である.
フランス近世・近代文学における歴史的断絶の表現(シャトーブリアンを中心に)

フランス近世・近代文学における歴史的断絶の表象をめぐる本研究は,当初,フランス革命を貴族として経験した大作家シャトーブリアンの文学的実践を中心に組織される予定であったが,18世紀文学の豊かな土壌を予備的に踏査する過程で,わたしは歴史的断絶の文学的表象という歴史と文学の両方にまたがる主題を十分に把握するためには,シャトーブリアン以前に論じるべき重要な作家と作品が少なからず存在することに驚愕した.それゆえ,本研究は,シャトーブリアンの文学世界それ自体を論じるにいたることなく終了したが,研究の成果は,ヴォルテールの重要な小説『カンディード』(1759)の新たな読解と,モーツァルトのオペラ《フィガロの結婚》(1786)およびそのもとになったボーマルシェの戯曲作品『フィガロの結婚』(1784)の独自の解釈というかたちで結実したことを強調しておきたい.『カンディード』も《フィガロの結婚Le Nozze di Figaro》・『フィガロの結婚Le Mariage de Figaro』も,実は,模範的な方法によって,近代世界の創出をうながした巨大な歴史的転換としての「啓蒙」を表象した作品なのである.この事実を,わたしは,今回の文学的テクストと音楽的テクストによりそった分析によって,明らかにすることができたと自負している,フランス近世・近代文学における歴史的断絶の表象をめぐる本研究は,当初,フランス革命を貴族として経験した大作家シャトーブリアンの文学的実践を中心に組織される予定であったが,18世紀文学の豊かな土壌を予備的に踏査する過程で,わたしは歴史的断絶の文学的表象という歴史と文学の両方にまたがる主題を十分に把握するためには,シャトーブリアン以前に論じるべき重要な作家と作品が少なからず存在することに驚愕した.それゆえ,本研究は,シャトーブリアンの文学世界それ自体を論じるにいたることなく終了したが,研究の成果は,ヴォルテールの重要な小説『カンディード』(1759)の新たな読解と,モーツァルトのオペラ《フィガロの結婚》(1786)およびそのもとになったボーマルシェの戯曲作品『フィガロの結婚』(1784)の独自の解釈というかたちで結実したことを強調しておきたい.『カンディード』も《フィガロの結婚Le Nozze di Figaro》・『フィガロの結婚Le Mariage de Figaro』も,実は,模範的な方法によって,近代世界の創出をうながした巨大な歴史的転換としての「啓蒙」を表象した作品なのである.この事実を,わたしは,今回の文学的テクストと音楽的テクストによりそった分析によって,明らかにすることができたと自負している,本年度の当初の予定は、一方で詳細な分析の対象となる作品を設定するために、17世紀から19世紀にかけてのいくつかの作品を読み解く予定であったが、残念ながら多くの作品に目を向けることはできなかった。手始めに考察し始めたヴォルテールの『カンディード』が、予想を大きく裏切って、汲み尽くしえない内容を持った書物であるように思われたからである。何とかなしえたことは、ヴォルテールの『カンディード』をとにかく精密に読み込むことを通じて、この作品が本研究計画の「歴史的転換の文学的表現」というモチーフに見事に答えるものであることを確認することであった。より具体的に言えば、本年度の収穫は、『カンディード』第3章の「戦争」にかんするテクストと第1章の全体、ならびに最終章の微視的なテクスト分析をとおして、ひとりの未熟な青年の成長を語るこの物語が一風変わった教養小説であると同時に、神の時代の決定的な後退を画する作品になっていることを明らかにできるのではないかという見通しがついたことである。この作品に関しては、来年度中には、小さな書物のかたちにまとめたいと考えている。『カンディード』の読解に大きな労力を傾けたために、今年度におこなうことを考えていたもうひとつの作業、すなわちマルク・フュマロリの大著Chateaubriand, poesie et terreurと、ピエール・バルベリスの一連の研究Chateaubriand, une reaction au mondemoderne, Rene de Chateaubriand, un nouveau roman, A larecherche dune ecriture, Chateaubriandには、まったく目をとおす余裕がなかった。来年度以降の課題としたい。昨年度の報告書で,わたしは,シャトーブリアンを本格的に読み進める前に,その前の世代にあたる啓蒙時代の作家たちを検討するにあたって,ヴォルテールの『カンディード』を取り上げたところ,そこには以外に大きな鉱脈が存在することを発見したことを述べた.歴史的転換の文学的表現というテーマにそって,ヴォルテールの『カンディード』のテクストを詳細に検討する作業を行ったのである.具体的には,第三章における「戦争」の表象,第一章における中世的な秩序の崩壊と近代的な秩序の生成の問題をとりあげたわけだが,その分析結果が予測を裏切るほど豊かな内容をもつものに思われたので,わたしは,それを小さな書物にまとめることを決意し,そのことを昨年の報告書で予告した.本年度は,まずその作業にとりかかったが,本をつくるという作業は非常に多くの労力を要し,著書『『カンディード』<戦争>を前にした青年』の執筆が終わり,首尾良くみすず書房より刊行されたのは7月のことであった.

この書物は小さいながらも今回の科学研究補助金によって生み出すことができた成果の一部であると自負している.加うるに,わたしのこの試みが,他の研究者とみすず書房を刺激し,この研究を支える発想にもとづいたひとつの叢書(「理想の教室」)を生み出すことになったことを特記しておきたい.『『カンディード』<戦争>を前にした青年』をわたしはふたりの作家を意識しながら執筆した.ひとりは,言うまでもなくシャトーブリアンであり,もうひとりは戯曲『フィガロの結婚』を著したボーマルシェである.なぜこの二人なのかといえば,カンディードに見られる青年主人公がシャトーブリアンの『ルネ』の「ルネ」やボーマルシェの「フィガロ」にどのように受け継がれていったのかが重要な意味を持つからである.年代的には,ボーマルシェの方が一世代若いので,本年度は,『『カンディード』<戦争>を前にした青年』の出版後は,もっぱらボーマルシェの『フィガロの結婚』における青年像を中心に研究を進めることになった.シャトーブリアンを研究の中心にすえる計画は大幅な軌道修正を余儀なくされたといわなければならない.2006年はモーツァルト生誕250年にあたる年であることからも,来年度は「フィガロの結婚」が重要な位置をしめるであろう.18年度申請書類に記したとおり,今年度の研究は,モーツァルトのオペラ作品《フィガロの結婚》とその土台となったボーマルシェの戯曲作品『フィガロの結婚』における歴史的断絶の表象の問題を解明すべく,あらゆる努力が傾けられた.目的は,あくまでも,当初の予定どおり,《フィガロの結婚》と『フィガロの結婚』という芸術作品を,歴史的な断絶を表現するものとして読み解くことである.それは,まず何よりも,モーツァルトのオペラを啓蒙のテクストとして読むという困難をともなう作業であった.モーツァルトを啓蒙の表現者としてとらえかえすうえで,わたしに大きな示唆を与えてくれたのは,昨年春にフランス国立図書館で催された「啓蒙!明日への遺産」と題された,大がかりな展示会の内容である.わたしはパリまで出かけてその展示会を実際に見たわけではないが,展示会のカタログを読み,展示会にあわせて企画され,フランス・キュルチュールで放送された,いくつかの「討論会」を聞くことができた.この展示会の総責任者はブルガリア出身で,かつては文学の形式主義的・構造主義的アプローチで名前を馳せたツヴェタン・トドロフだが,彼の主張する,啓蒙という思想的運動のなかに息づく,受け継ぐべき遺産としてのユマニスムの伝統に深く共鳴したわたしは,モーツァルトの《フィガロの結婚》をつねにボーマルシェの『フィガロの結婚』と対比しながら,自律的個人の創出へと向かう「啓蒙」を,音楽的テクストと文学テクスト(リブレット)とのコラボレーションによる意味生産過程のなかに読み取るように努めた.重要なのは,音楽テクストと文学テクストを同時につかまえ,その協同性のなかに,啓蒙の刻印を見いだすことであった.《フィガロの結婚》と『フィガロの結婚』をめぐるわたしの研究は,幸いにして,ひとつの大きな書物としてまとめることができた.その結論部分だけをここに引用しておきたい.「モーツァルトのオペラ,とりわけ《フィガロ》における人間集団の表象が言語を絶するほど素晴らしいのは,ルソーにおける男の<共和国>が,言葉と,そして何よりも音楽の偉大な力によって超克され、真に普遍的な<共和国>の到来が予告されているように感じられるからである.
星画像のパターン認認による気球搭載観測器の方向制御システムの開発

星や太陽の画像を取り込んで画像パターンを認識することで、気球搭載観測器の方向制御系にフィードバックをかけて姿勢制御を行なうシステムを開発中である。気球搭載観測器としてBETS検出器(Balloon-borne Electron Telescope with Scintillating fibers)によって一次電子観測を行なっており、将来このシンチレーション・ファイバーの技術を利用したガンマ線検出器を開発して気球による観測を行なうことも考えられている。ガンマ線観測は南極周回気球を用いて行なう可能性もあり、この場合太陽の画像パターンによる姿勢制御が有力になる。気球の位置を測定するために購入したGPS受信機は非常に小型であり、方向制御のフィードバック信号を作り出すモジュール上に組み込むように設計中である。気球観測では回路は小型・省電力化する必要があるので、パターン認識ソフトウエアなどを書き込むROM(Read Only Memory)やPLD(Programable Logic Device)を駆使して回路を設計している。このROM、PLDにソフトウエアやヒューズパターンなどのデータを書き込むプログラマとそのデータを消去するためのイレーサを購入した。CCDカメラで取り込んだ画像中には数個の星が存在し、一つの星は数画素分になる。その数画素を一つの塊と認識し、パターンとして認識するソフトウエアを作成した。その画像パターンと星の実際のパターンから仰角、方位角のずれを計算するプログラムと方向制御のフィードバック信号を作り出すモジュールは、現在作成・設計中である。