hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
おたく文化系コンベンションのカルチュラル・スタディーズ的研究

本研究の目的は、おたく文化系コンベンションの実態を明らかにすることである。本年度は最終年として、研究の取りまとめを行なうとともに、研究成果報告書を作成した。本研究で主に取材・調査対象としたのは、同人誌即売会の「コミックマーケット」と造形物即売会の「ワンダーフェスティバル」である。この二つのコンベンションを中心に、(1)日本におけるおたく文化系コンベンションの歴史と展開をあとづけ、(2)現在のコンベンションの実態を明らかにし、そして、(3)おたく文化系コンベンションの社会的意味について考察した。研究成果報告書の目次を以下に掲げる。第1章おたく文化系コンベンションについて1.「おたく文化系コンベンション」と「おたく文化」2.おたく文化系コンベンションの展開(1)同人誌即売会3.おたく文化系コンベンションの展開(2)造形物関係4.大衆文化生産社会と「おたく文化系コンベンション」第2章おたく文化系コンベンション調査1.「ワンフェス」実地調査2.「コミックマーケット」一般参加者調査2.1.調査の実施と回収2.2.調査結果(1)回答者の基本属性2.3.調査結果(2)同人誌即売会参加状況2.4.調査結果(3)同人誌購入状況2.5.調査結果(4)コミックマーケットの魅力など2.6.結びに換えて第3章そして"解放"とは本研究の当初予定した方法論はカルチュラル・スタディーズ的エスノグラフィー作成であったが、調査対象(コミックマーケット)からの好意的な協力によって、数量的な社会調査の実施が可能となり、調査方法を変更した。これまでこの種の調査の対象となって来なかったおたく文化系コンベンションの実態を数量的データの形で明らかにすることができた。おたく文化系コンベンションは、現代の若者文化を論じる場合、看過できないものとなっている。最大規模のものの一つ、コミック同人誌即売会「コミックマーケット」では、3日間でのべ40万人以上の参加者が動員され、また、フィギャーなどの造形物の即売会「ワンフェス」(ワンダーフェスティバル)では、例年1日3万人弱の参加者がある。本年度は、この二つの即売会において参与観察を行なった。「コミックマーケット65」は、東京国際展示場(東京ビッグサイト)全館を使用して、2003年12月28日(日)30日(火)に行なわれた。主催者発表によると、参加サークル数3万5千(申込サークル数5万2千)、入場者数28日(日)15万人、29日(月)13万人、30日(火)14万人ということであった。本年度は、研究協力者の大学院生2名と共に、イベント参加者の観察調査とイベント出品物に関する資料収集・調査を行なった。「ワンダーフェスティバル2004 Winter」は、東京国際展示場(東京ビッグサイト)西1・2ホールとアトリウムを使用して、2004年2月22日(日)に行なわれた。主催者発表によると参加ディーラー(販売者)数約1,250ディーラー(プロモーション企業出展含む)とのことであり、入場者数は「目標3万人」とされていた。入場のための行列が、例年より長かったので、目標は達成されたのではないかと思われる。業者も参加ディーラーに含めた形で運営されるこのイベントでは、企業活動とアマチュア活動の中間領域ともいうべき社会活動について興味深い実態が観察された。コミック同人誌即売会では女性参加者が多く、造形物即売会では男性参加者が多いといった違いがあるが、両者とも取り上げられる題材に共通したものがあり、一つの連続した文化の異なった現われとして理解することが可能であると考えられる。本研究は参加者の社会的特性について焦点をあてるものであり、本年度はコミックマーケット主催者と協議を行ない、共同主催の質問紙調査プロジェクトを開始した。本研究の目的は、おたく文化系コンベンションの、文化社会学的立場およびカルチュラル・スタディーズ的立場からの分析である。本年度は、わが国最大級で、最も歴史のある「コミックマーケット66」の一番参加者を対象に質問紙調査を実施した。調査票は、イベント主催者の協力を得て、コミックマーケットの会場/プログラム案内書である『コミックマーケットカタログ』の1ページに印刷し、また、回収もイベント主催者の協力を得て、会場各所に配置したアンケート回収箱によって行った。参加者数は主催者発表で、8月13日(金)16万人、14日(土)17万人、15日(日)18万人で、調査票回収数は、1,482票であった。なお、主催者の話によると、コミックマーケットカタログの販売部数は、参加者数とほぼ同数ということなので、質問表はほぼ全員に配付されたと見なすことができる。得られたサンプルの男女構成比は女性56.9%、男性42.9%となった。この数値は過去の調査結果(社会的通年とは異なり、同人誌即売会への参加者は女性の方が多い)から見て妥当なものと考えられる。本年はこの調査票について第一次分析を行った。いくつかの調査結果を記しておく。

・同人誌頒布物購入額は、「30,00049,999円」というカテゴリーを回答した者が最も多く、23.6%・一般参加者でもサークル参加した経験を持つものは多く、女性で3分の1(33.0%)、男性で4分の1(24.4%)に上る・コミックマーケットの魅力に関する質問では、「コミケでしか入手できない同人誌・CD・DVD・グッズがあること」を回答した者が最も多く29.6%、次いで「お祭りのような雰囲気があること」を回答した者が26.3%、以下、「日本最大の即売会であること」17.6%、「多種多様な表現が許容されていること」15.7%、など本研究の目的は、おたく文化系コンベンションの実態を明らかにすることである。本年度は最終年として、研究の取りまとめを行なうとともに、研究成果報告書を作成した。本研究で主に取材・調査対象としたのは、同人誌即売会の「コミックマーケット」と造形物即売会の「ワンダーフェスティバル」である。この二つのコンベンションを中心に、(1)日本におけるおたく文化系コンベンションの歴史と展開をあとづけ、(2)現在のコンベンションの実態を明らかにし、そして、(3)おたく文化系コンベンションの社会的意味について考察した。研究成果報告書の目次を以下に掲げる。第1章おたく文化系コンベンションについて1.「おたく文化系コンベンション」と「おたく文化」2.おたく文化系コンベンションの展開(1)同人誌即売会3.おたく文化系コンベンションの展開(2)造形物関係4.大衆文化生産社会と「おたく文化系コンベンション」第2章おたく文化系コンベンション調査1.「ワンフェス」実地調査2.「コミックマーケット」一般参加者調査2.1.調査の実施と回収2.2.調査結果(1)回答者の基本属性2.3.調査結果(2)同人誌即売会参加状況2.4.調査結果(3)同人誌購入状況2.5.調査結果(4)コミックマーケットの魅力など2.6.結びに換えて第3章そして"解放"とは本研究の当初予定した方法論はカルチュラル・スタディーズ的エスノグラフィー作成であったが、調査対象(コミックマーケット)からの好意的な協力によって、数量的な社会調査の実施が可能となり、調査方法を変更した。これまでこの種の調査の対象となって来なかったおたく文化系コンベンションの実態を数量的データの形で明らかにすることができた。
タッチパネル式運転者教育システムと歩行者認知能力の向上

本研究課題は,ドライバーが前方の歩行者を発見する能力を高める運転者教育システムを開発し,交通事故の低減に寄与することを目的とする。提案システムはタッチパネル式ディスプレイに車載カメラ映像を提示し,出現する歩行者の位置を訓練者にタッチさせるシミュレータであり,歩行者を認知するまでの注視行動を計測・分析し,訓練者の認知特性を高めるものである。平成27年度は車載カメラ映像の収集と提案システムの改善を図り,改善後の訓練効果の基礎的な検証をした。その結果,視線計測の導入により被験者の反応時間を認知時間とタッチ動作時間に分離でき,歩行者に対する認知時間,タッチ動作時間のいずれも有意に短縮することを明らかにした。平成28年度は被験者への提示映像サイズが訓練効果に及ぼす影響について検討した。その結果,12inchから21.5inchモニタに提示映像サイズを変更しても同等の訓練効果が得られることを明らかにした。また,被験者の注視行動の分析に基づき注視行動レベルを定量化する手法を提案し,その妥当性を明らかにした。平成29年度は訓練前後の注視行動の変化を比較するために,被験者が何を見ていてかを自動的に判別するための方法として,視線計測技術と画像認識技術を組み合わせ,歩行者・車両・信号機・標識などの注視対象となり得る物体を判定する仕組みを構築した。平成30年度は実走行に対する訓練効果を検証するために,訓練前後に市街地を走行した際の注視行動を比較した。その結果,歩行者や自動車に対する注視の割合が訓練により高まることを明らかにした。また,視線情報と物体認識により注視対象物を自動的に判定する手法を改良し。実走行映像を対象とした認識実験を行った。その結果,ドライバー間・コース間の注視対象物の傾向の違いを明らかにした。さらに,ドライバーの注視行動レベルの判定手法における評価指標を見直し,その有効性を示した。本研究は,ドライバーが前方の歩行者等の対象物の認知能力を高める運転者教育システムを開発し,交通事故の低減に寄与することを目的とする。提案システムはタッチパネル式ディスプレイに車載カメラ映像を提示し,映像中の対象物の位置を被験者にタッチさせ,対象物に対するドライバー認知行動を計測する。平成27年度は対象物を歩行者に限定し,車載カメラ映像の収集と提案システムの改善を図った。また改善システムによる訓練効果の基礎的な検証をした。映像収集にはドライブレコーダを用い,秋田県由利本荘市を中心に撮影した。並行して撮影映像を提案システムで利用するための映像追加編集ツールの開発を試みた。開発ツールにより,収集映像からの必要なシーンの抽出,提案システムへの映像追加を容易にした。また映像の属性情報として,時間帯,天候,対象物の位置,対象物までの距離などの記録も可能とした。さらに映像フレーム毎の歩行者の位置座標を取得する方法について検討し,線形補完により半自動で位置情報を取得する機能を実装した。この機能によりこれまで画像認識で行っていたタッチ位置が歩行者かどうかの判定処理を高速化できた。提案システムの改善においては,映像中の歩行者位置を自動抽出する際に必要となる認識処理として,移動物体検出手法を提案し,実験により有効性を検討した。また歩行者までの距離・車両速度の推定方法を検討し,モーションステレオ法より投影法が適していることを示した。さらに視線計測器の導入を図り,映像提示中の被験者の視線座標を記録することを可能にした。上記改善後の運転者教育システムを用い,訓練効果の検証実験を行った。その結果,視線を同時に計測することで,被験者の反応時間を認知時間とタッチ動作時間に分離できることを示した。また,歩行者に対する認知時間,タッチ動作時間のいずれも優位に短縮することを明らかにした。提案する運転者教育システムにより様々な実験を行うためには,条件の異なる車載カメラ映像を多数用意することが望ましい。しかし撮影した映像を提案システムで利用するためには,必要なシーンの抽出だけでなく,映像中の歩行者等の対象物の位置情報が必要となる。そのため,映像を撮影する一方で,当初予定していなかった映像追加編集ツールを開発し,映像の編集と歩行者位置情報の取得を容易にする環境を整備した。現状で半自動的に歩行者位置情報を取得でき,約30本の実験用映像の準備ができている。また,時間帯や歩行者位置など映像の属性情報の記録を可能としたため,映像追加編集ツールの利用により,今後さらに実験用の映像を増加し,様々な条件に対する認知傾向の分析や訓練効果の違いについて検証するなど,幅広く研究を遂行するための準備が整いつつある。また,平成28年度以降に予定していた視線計測機能の実装に,前倒しで着手した。視線計測機能の導入は,被験者への実験結果のフィードバックとして注視位置を軌跡で示し訓練効果への影響を明らかにすることと,映像再生中の被験者の注視行動が,運転習熟度や年齢などによりどのような傾向となるかを明らかにすることに重要である。現状では基礎的な導入に留まっているが,映像中に歩行者が出現してから被験者が歩行者位置にタッチするまでの反応時間を,歩行者の認知時間とタッチ動作にかかる時間に分離することにも有用であることを示すことができた。また歩行者の認知時間とタッチ動作時間のいずれも,提案システムを用いた訓練により優位に短縮できることを明らかにできた。一方で,提案システムを用いた歩行者認知能力向上のための訓練が,実際の運転における歩行者の認知時間短にも効果があるのか,学会等でも指摘を受けており,今後検証する必要のある新たな課題も抽出されている。

本研究は,ドライバーが前方の歩行者等の対象物の認知能力を高める運転者教育システムを開発し,交通事故の低減に寄与することを目的とする。提案システムはタッチパネル式ディスプレイに車載カメラ映像を提示し,映像中の対象物の位置を被験者にタッチさせ,対象物に対するドライバー認知行動を計測する。平成28年度は提案システムの問題点の改善,被験者への提示映像サイズが訓練効果に及ぼす影響,視線計測機能の活用による注視行動レベルの定量化について主に検討した。提案システムの改善では,被験者が歩行者を認知したと判定する基準を変更した。従来は提示映像中の走路を目安に,左・中・右と領域を分割し,領域の境界付近歩行者が位置する場合に注視とみなされない可能性があった。そこで,歩行者を中心とした一定領域内に視線が停留した場合は認知とみなすよう処理を改善し,認知時間とタッチ動作時間をより正確に分離することを可能とした。前年度の実験データを再度分析した結果,従来と同等の訓練効果が得られることが確認できた。また物体認識モジュールの改善と歩行者教育への応用についても取り組み,被験者の注視領域における歩行者と車両の認識手法について検討した。提示映像サイズの影響については,従来と異なるサイズのモニタを用いて被験者の認知時間の訓練効果について分析した。これまで12inchモニタのタブレットPCを実験に用いていたが,被験者の視野内に映像すべてが含まれ正確な認知時間が得られていない可能性もあった。そこで21.5inchのタッチパネルモニタで従来と同一の計測実験を実施した結果,提示映像サイズを変更しても同等の訓練効果が得られることを明らかにした。注視行動レベルの定量化では,静止画と動画を提示した際の被験者の注視行動を定量的に分析し,注視行動レベルの判定手法について検討した。実験により提案手法の妥当性を明らかにした。H28年度までの研究により,映像追加編集ツールを開発,視線計測器の導入による提案する運転者教育システムの改善,注視行動の計測,提示映像サイズの影響についての検討を主に行った。映像追加編集ツールの開発により,映像の編集と歩行者位置情報の取得を容易にし,時間帯や歩行者位置など映像の属性情報の記録を可能とした。今後さらに実験用の映像を増加し,様々な条件に対する認知傾向の分析や訓練効果の違いについて検証するなど,幅広く研究を遂行する準備が整いつつある。また,提案システムへの視線計測器の導入により,被験者の視線情報の取得を可能とし,映像中に歩行者が出現してから被験者が歩行者位置にタッチするまでの反応時間を,歩行者の認知時間とタッチ動作時間により正確に分離することが可能となった。さらに,静止画と動画に対する被験者の注視行動を計測し,運転映像に対する注視行動を定量的に分析し,被験者の注視行動レベルの判定手法を提案した。実験により,効率的に歩行者を探索する被験者のスコアは高くなるなど,一定の成果を確認できた。一方で習熟度が低い被験者の注視行動レベルが高くなるケースも存在し,スコア化の基準変更が課題として挙げられる。
ケイ素やゲルマニウムを含む芳香族化合物の安定化実現と高反応性制御の理論的研究

典型的な芳香族化合物であるベンゼンの炭素を同族のケイ素で置換すると芳香族性(安定性)及び反応性がどのように変化するかを理論的に明らかにした。その結果、ケイ素で交互に三置換したトリシラベンゼンは、ベンゼンよりも大きい芳香族性があることを見出した。ケイ素で完全に置換したヘキサミラベンゼンは、有機ケイ素化学において夢の化合物とされ、ベンゼンと同様のDbh対称をもつ平面の正六角形骨格構造をとると予想されてきた。しかし、電子相関を取り込んだ精度ある分子軌道計算を実行すると、ヘキサシラベンゼンは平面構造ではなく、幾分ねじれたイス型の非平面の【D_3】d構造をとることが明らかになった。ヘキサシラベンゼンの芳香族性はベンゼンの約半分であるが、確かに存在する芳香族化合物であり、ベンゼンとは著るしく異なる性質がある。ヘキサミラベンゼンのケイ素骨格にはラジカル性があり、その芳香族性は6Π系の電子の環状非局在化によるよりも、反強磁性的に局在化した電子のスピン結合によることを提案した。この電子の局在化傾向がヘキサミラベンゼンの非平面構造及び高反応性の原因になっている。今後、ベンゼンの炭素をゲルマニウム置換した場合の構造、安定性及び反応性を支配する基礎的因子を解明し、新規な芳香族化合物の分子設計の理論的指針を与えることを目的としたい。
高速鉄道車両の乗り心地向上と安全性向上のためのリンク機構に関する研究

本研究の目的は,車輪-レール式車両の速度向上の観点から,特に曲線部での超過遠心力による固有の動揺現象を解析し,動力学的な見地から速度向上に有効な車両制御のための機構を提案し,その効果を理論と実験により明らかにすることである.本年度は昨年度の結果を踏まえ,以下の検討を行った.(1)提案する制御性能を検討するためのリンク機構における力学的釣り合い式の導出(2)制御目標の決定(定常特性)(3)計算機シミュレーションによる統合アルゴリズムの制御効果の検討(4)模型実験による統合アルゴリズムの制御効果の検証(1)昨年度構築した、固有振動数を解析モデルより、超過遠心加速度と、輪重変動を出力する方程式を作成し、目的を実現するため線形解析モデルを構築した。(2)(1)で作成した出力方程式より、目標を実現する線形系の厳密唯一解と、非線形系の解析解とで、性能が一致することを確認した。(3)作成した線形モデルにより、目標を実現するリンクを可変とするための駆動方式を導出し、緩和曲線を通過後の、左右加速度、輪重変動の応答を確認した。(4)模型実験のより制御効果の検証をし、有効性を明らかにした。最後にこの2年間の研究成果を報告書にまとめると共に,学会発表などにより,今後積極的に研究成果を公表する。本研究の目的は,車輪-レール式車両の速度向上の観点から,特に曲線部での超過遠心力による固有の動揺現象を解析し,動力学的な見地から速度向上に有効な車両制御のための機構を提案し,その効果を理論と実験により明らかにすることである.本年度は以下の検討を行った.(1)リンク機構によるサスペンションの設計・試作(2)試作品の実験解析と性能評価(3)リンク形状と加速度及び輪重変動の解析・評価(4)曲線軌道上の外乱を受けた際の自由振動応答を再現するモデル化(1)では、目的を実現するための機構を持ち合わせた装置を試作した。また、アクチュエータにより駆動させるための制御システムの開発を行った。(2)では、設計した制御システムにおけるアクチュエータの性能を確認した。(3)では、円曲線部走行時の定常状態と直線から円線部へと走行する過渡状態での傾斜角、左右加速度、輪重変動の応答を確認した。(4)では、制御を行う前段階の、基本特性を再現する解析モデルを構築し、固有振動数が一致することを確認した。
トロピカル幾何の位相代数幾何への応用

トロピカル幾何は,さまざまな研究分野と関係する,新しくて魅力的な研究対象である.代数幾何,とくにトーリック幾何・トポロジー,可積分系,力学系,計算理論等と深く関わっている.本研究課題では, 2つの位相代数幾何における問題「与えられた次数を持つ実代数ノーダル曲線のトロピカル幾何による数え上げと構成」「与えられた次数を持つ実代数射影結び目のトロピカル幾何による数え上げと構成」に関し,平成19年度に得られた情報・知見を基に,平成20年度もMikhalkin氏等との研究打ち合わせを行った.前年度の研究で明らかになった,トロピカル幾何と超離散可積分系との関連研究をさらに深めた.こうして,トロピカル幾何を通して,実代数幾何・位相幾何における問題に組み合わせ論や超離散幾何やオートマトン理論が係る,領域を超えた新しい研究を行った.また,関連する研究者たちとの研究打ち合わせ・情報交換を行い,トロピカル極限に近い実代数多様体のトポロジーの理論を構築する手がかりを見いだし,「トロピカル化」を幾何学的に深く理解することが可能となった.研究成果の一部は発表済みである.さらに,一方では,トロピカル幾何に本質的に現れる離散Legendre変換とMonge-Alnpere幾何の関係を新たに発見し,アメーバ理論との関連においてダイマー模型にMonge-Ampere方程式が現れる要因について考察することが可能となり,このことから,本研究課題の成果として,新しく発展的な研究分野を見いだすことができた.19年度はMikhalkin氏との研究打ち合わせを行った。Mikhalkin氏は,日本学術振興会の外国人招聘研究者として2ヶ月間採用され、平成19年9月から10月まで北海道大学大学院理学研究院数学部門に滞在し,それを利用して、綿密な研究打ち合わせを行った.さらに平成19年9月10日から9月12日にかけて,Mikhalkin氏を中心に,本研究課題の解決のために,トロピカル幾何学の国際研究会「Tropical Geometry and Related Topics」を北海道大学において開催し、国内・国外に散らばっている関連する研究者たちとの研究打ち合わせ・情報交換を行った。「トロピカル幾何」というキーワードで,関連する研究者の網(ネット)をつなげる役割を果たし,研究打ち合わせ,情報収集,問題の検討を十分に行った.以上の活動により、代数的平面曲線のトポロジーの問題と代数的結び目のトポロジーの問題という2つの問題を突き詰めて,問題解決の間際まで追いつめていくことができた.具体的に、与えられた次数を持つ実代数ノーダル曲線の数え上げと構成問題、および、与えられた次数を持つ実代数射影結び目の数え上げと構成問題について、部分的な結果を得て、次年度につなげることができた。さらに,以上のような企画を通して,トロピカル特異点の基礎付けと,トロピカル幾何が応用される種々の問題の再検討,応用可能な分野の調査・検討という仕事を行った。結果として、トロピカル特異点論を整備することができた。これらの成果については、平成20年度に予定しているシンポジウムにおいて成果発表予定である。トロピカル幾何は,さまざまな研究分野と関係する,新しくて魅力的な研究対象である.代数幾何,とくにトーリック幾何・トポロジー,可積分系,力学系,計算理論等と深く関わっている.本研究課題では, 2つの位相代数幾何における問題「与えられた次数を持つ実代数ノーダル曲線のトロピカル幾何による数え上げと構成」「与えられた次数を持つ実代数射影結び目のトロピカル幾何による数え上げと構成」に関し,平成19年度に得られた情報・知見を基に,平成20年度もMikhalkin氏等との研究打ち合わせを行った.前年度の研究で明らかになった,トロピカル幾何と超離散可積分系との関連研究をさらに深めた.こうして,トロピカル幾何を通して,実代数幾何・位相幾何における問題に組み合わせ論や超離散幾何やオートマトン理論が係る,領域を超えた新しい研究を行った.また,関連する研究者たちとの研究打ち合わせ・情報交換を行い,トロピカル極限に近い実代数多様体のトポロジーの理論を構築する手がかりを見いだし,「トロピカル化」を幾何学的に深く理解することが可能となった.研究成果の一部は発表済みである.さらに,一方では,トロピカル幾何に本質的に現れる離散Legendre変換とMonge-Alnpere幾何の関係を新たに発見し,アメーバ理論との関連においてダイマー模型にMonge-Ampere方程式が現れる要因について考察することが可能となり,このことから,本研究課題の成果として,新しく発展的な研究分野を見いだすことができた.
燃料電池多孔質電極内における凝縮を伴う水分の高時間分解能3次元計測と能動制御

高出力密度,低温作動等の特徴を有する固体高分子形燃料電池(PEFC)は,次世代の自動車用動力源や家庭用分散電源として開発が期待されている.しかしながら,高性能化に向けて解決すべき課題は多く,その中に,カソード側での水分管理がある.特に,カソード側においては,生成水がガス拡散層(Gas Diffusion Layer, GDL)内で凝縮し,酸素の供給を阻害するというフラッディング現象が著しくなり,その結果,PEFCセルの出力低下を引き起こす.そこで本研究では,高精細デジタル光学顕微鏡を用いることにより,発電モードでのPEFCセルカソード側ガス拡散層内部における水分の存在状態およびミクロ挙動の直接可視化計測を行った.その結果,拡散層内部での水分の凝縮は,ガス流路の下流側で生じやすく,凝縮水の水分量も下流側の方が多くなることが明らかになった.さらに,カソード側におけるフラッディング現象を回避するため,水分排出機能を有する新規電極構造を提案し,その効果について実験的に検証した.本研究課題では,水分誘導経路としてのスリット構造を有するガス拡散層を製作し,スリット付拡散層を採用したPEFCセルのカソード内水分計測および性能評価試験を行った.その結果,水分凝縮の著しいカソード流路の下流側にスリットを設けることにより,拡散層内部で凝縮した水分が迅速にスリット側へ排水されることが可視化観察により示された.また,PEFCセル起動運転時において,スリットを有さない拡散層を用いた場合は,負荷を加えた後,セル電圧は著しく低下するが,スリットを有する拡散層を用いた場合は,セル電圧はほとんど低下せず,安定して発電が継続されることが明らかとなった.これは,拡散層内部の凝縮水の排出が迅速化され,フラッディング現象が抑制されていることによると考えられる.固体高分子形燃料電池(PEFC)は,次世代自動車用動力源や定置型分散電源として普及が期待されているが,高性能化に向けて解決すべき課題は多く,その一つにカソード側で生成した水分がガス拡散層(Gas Diffusion Layer, GDL)内部で凝縮し,反応に必要な酸素の供給を阻害する問題(フラッディング現象)がある.従来までの研究において,PEFCカソード側流路における生成水の可視化観察はこれまでにも行われているが,GDL内部における水分状態については十分検討されておらず,フラッディング現象を解決し,PEFCの性能改善を図るには,カソード側GDLにおける水分の存在状態およびその挙動を把握することが必要不可欠となる.そこで本研究では,3次元デジタル光学顕微鏡システムを用いることにより,PEFCカソード側GDLにおける凝縮を伴う水分をミクロレベルで可視化観察できるようにし,ガス流路構造やGDLの厚みによって,GDL内部の水分の存在状態がどのように異なるかを実験的に検証した.その結果,蛇行流路型(サーペンタイン流路型)PEFCセルにおいて,GDL内部での水分の凝縮は,流路の下流側で生じやすく,凝縮水の水分量も下流側の方が多くなることが示された.また,190μm,360μmの厚みの異なる2種類のGDLを用いて,GDL上に排出された水分の可視化観察および電流-電圧特性の計測を行った結果,GDL厚さ190μmの場合に比べて,360μmの場合のほうが水分の排出量は少なく,セル電圧については,特に高電流密度域において大きく低下することがわかった.次に,カソード側GDL内部における水分挙動に関する基礎的な知見を得るため,溝を設けたGDLを製作し,溝部における凝縮水の可視化観察を行った.その結果,多孔質状GDL内部には多数の水分経路があり,凝縮した水分が厚み方向に移動する際に,他の経路から移動してきた水分と結びつき,その結果,大きな水滴に成長してGDL表面に排出されていることが明らかになった.高出力密度,低温作動等の特徴を有する固体高分子形燃料電池(PEFC)は,次世代の自動車用動力源や家庭用分散電源として開発が期待されている.しかしながら,高性能化に向けて解決すべき課題は多く,その中に,カソード側での水分管理がある.特に,カソード側においては,生成水がガス拡散層(Gas Diffusion Layer, GDL)内で凝縮し,酸素の供給を阻害するというフラッディング現象が著しくなり,その結果,PEFCセルの出力低下を引き起こす.そこで本研究では,高精細デジタル光学顕微鏡を用いることにより,発電モードでのPEFCセルカソード側ガス拡散層内部における水分の存在状態およびミクロ挙動の直接可視化計測を行った.その結果,拡散層内部での水分の凝縮は,ガス流路の下流側で生じやすく,凝縮水の水分量も下流側の方が多くなることが明らかになった.さらに,カソード側におけるフラッディング現象を回避するため,水分排出機能を有する新規電極構造を提案し,その効果について実験的に検証した.本研究課題では,水分誘導経路としてのスリット構造を有するガス拡散層を製作し,スリット付拡散層を採用したPEFCセルのカソード内水分計測および性能評価試験を行った.その結果,水分凝縮の著しいカソード流路の下流側にスリットを設けることにより,拡散層内部で凝縮した水分が迅速にスリット側へ排水されることが可視化観察により示された.また,PEFCセル起動運転時において,スリットを有さない拡散層を用いた場合は,負荷を加えた後,セル電圧は著しく低下するが,スリットを有する拡散層を用いた場合は,セル電圧はほとんど低下せず,安定して発電が継続されることが明らかとなった.これは,拡散層内部の凝縮水の排出が迅速化され,フラッディング現象が抑制されていることによると考えられる.
身体化による自己意識とその障害としての精神病理の関係-統合失調症を中心に-

●背景統合失調症の特に陽性症状は,行為における予測的な情報処理の障害である可能性が指摘されている(統合失調症は健常者との連続性を仮定できるという観点から,統合失調型パーソナリティの傾向の高い大学生を対象とした実験的課題を行い,両者の関係を検討した。●研究1・まず48名の健常大学生を対象に統合失調型パーソナリティを測定する質問紙であるSPQBや幻聴傾向を測定するAHESなどを用いて統合失調型パーソナリティの傾向を測定した。・続いて,統合失調型パーソナリティの高い人は「自己行為の予測」に異常が見られるかを、マイクとヘッドホンを用いた発話主判別課題によって検討した。実験参加者はディスプレイに呈示された単語を発声し,返ってきた聴覚フィードバックの発話主を判別した。・結果を分析した結果,統合失調型パーソナリティ傾向(特に幻聴傾向)が高い人ほど,変換された聴覚フィードバックの中から無変換の自己声を検出するのが困難で,さらに発話主を自己へと帰属しにくいことがわかった。●研究2・研究1と同じ48名の健常大学生を対象として,統合失調型パーソナリティの高い人は「予測的な発話」に障害が見られるかを検討するためにスピーチトラッキング課題を行った。実験参加者は自己声が聞こえない環境下にて,ヘッドホンを通じて呈示される音声刺激の真似をして発声をし,両者の類似度を計測することによって,予測的な発話の精度を測定した。・結果を分析した結果,統合失調型パーソナリティ傾向(特に幻聴傾向)が高い人ほど,自己声のフィードバックがあってもなくても,ターゲット音声をトラッキングする成績に違いが見られないことが分かった。これは返されるフィードバックを自己へと帰属していないためであると解釈された。・研究1と2の成果を合わせて論文化を行い,現在,国際誌に投稿審査中である。□研究の背景統合失調症あるいはその前駆段階であるとされる統合失調型パーソナリティでは、自己の行為に関わる主体感(自己主体感;sense of agency)に異常が見られる可能性が指摘されている。自己主体感の生起メカニズムは、行為の計算論によってモデル化されており、このモデルに従って研究を行っている。□研究1●統合失調症患者では観察されている行為主判別の異常が、統合失調型パーソナリティ(以下、SP)の傾向が高い健常者でも見られるかを確認した。マウス操作に対する視覚フィードバックを操作し、その行為主を判別させた結果、SP高群では行為主を自己に帰属しにくい傾向が見出された。□研究2●SP高群における行為主判別の異常が何によって引き起こされるのかを検討するために、行為の計算論に基づいて、自己運動の予測の異常を検討した。カーソルの見えないマウスで、ターゲットをクリックする課題によって自己運動の予測精度を比較した結果、SP高群ではターゲットからより離れた場所をクリックしており、自己運動の予測に異常がある可能性を示唆した。□研究3(現在進行中)●同様に自己主体感の異常が原因とされる幻聴様体験に焦点をあて、同様に自己声の帰属に異常が見られるかを検討している。幻聴様体験を高頻度で経験する健常者は、そうでない人に比べて、自己声を他者声と帰属してしまう割合が高いと仮説を立て、実験的に検討している。現在のところ、実験装置、プログラムなどは完成しており、予備実験を進めながら、実験参加者の数を増やしている。□研究の背景身体行為を正常に実行できることが、「自己意識」の成立につながっている可能性かおり、統合失調症はこの「身体化による自己意識」の障害であると解釈できる。特に行為における予測的な情報処理とその大脳半球機能差の障害が疑われている。近年の統合失調症は健常者との連続性を仮定できるという観点から、統合失調型パーソナリティの傾向の高い大学生を対象とした実験的課題により、自己身体行為の予測とそれに関わる半球機能差の違いを検討した。具体的には「視覚到達課題(研究1)」と音声刺激を用いた「言語性検出課題(研究2)」によって検討した。●研究1・まず健常大学生50名を対象にSchizotypal Traits Questionnaire(陽性統合失調型を測定する質問紙;Gregory etal.,2003)を用いて統合失調型パーソナリティの傾向を測定した。続いて,自己運動の予測精度をオリジナルに開発した実験課題(カーソルの見えないマウス装置を用いて,視覚到達課題を行う)により測定した。その結果,統合失調型パーソナリティの傾向が高い健常者は,自己運動の予測精度が落ちるという関係が見られた。この成果をConsciousness and Cognition誌に投稿し,受理された。●研究2・まず健常大学生50名を対象にSchizotypal Traits Questionnaire(陽性統合失調型を測定する質問紙;Gregory etal.,2003)を用いて統合失調型パーソナリティの傾向を測定した。音声言語刺激の検出に非典型的な大脳半球機能差が見られるか(優位手,優位耳の逆転など)を意味判断Go/No Go課題によって測定した。その結果,統合失調型パーソナリティの傾向が高い健常者では,一般的に見られる空間運動制御と意味判断における優位手が確認できず,非典型的な半球機能差を持つことが示された。この成果をBrain and Cognition誌に投稿し,受理された。

●研究1・まず48名の健常大学生を対象に統合失調型パーソナリティを測定する質問紙であるSPQBや幻聴傾向を測定するAHESなどを用いて統合失調型パーソナリティの傾向を測定した。・続いて,統合失調型パーソナリティの高い人は「自己行為の予測」に異常が見られるかを、マイクとヘッドホンを用いた発話主判別課題によって検討した。実験参加者はディスプレイに呈示された単語を発声し,返ってきた聴覚フィードバックの発話主を判別した。・結果を分析した結果,統合失調型パーソナリティ傾向(特に幻聴傾向)が高い人ほど,変換された聴覚フィードバックの中から無変換の自己声を検出するのが困難で,さらに発話主を自己へと帰属しにくいことがわかった。●研究2・研究1と同じ48名の健常大学生を対象として,統合失調型パーソナリティの高い人は「予測的な発話」に障害が見られるかを検討するためにスピーチトラッキング課題を行った。実験参加者は自己声が聞こえない環境下にて,ヘッドホンを通じて呈示される音声刺激の真似をして発声をし,両者の類似度を計測することによって,予測的な発話の精度を測定した。・結果を分析した結果,統合失調型パーソナリティ傾向(特に幻聴傾向)が高い人ほど,自己声のフィードバックがあってもなくても,ターゲット音声をトラッキングする成績に違いが見られないことが分かった。これは返されるフィードバックを自己へと帰属していないためであると解釈された。・研究1と2の成果を合わせて論文化を行い,現在,国際誌に投稿審査中である。
敗血症による肝障害の発生機序の解明-微小循環障害の果たす役割

平成7年度研究成果敗血症のモデルとしてエンドトキシンのラットへの経静脈的持続投与モデルを用い、近赤外分光装置、顕微分光装置により肝類洞微小循環を定量的に測定し、NITRIC OXIDE (NO)とエンドセリンの敗血症に果たす役割を解析し以下の知見を得た。(1)エンドトキシンの投与で、血清中の肝逸脱酵素(AST等)やビリルビン値は上昇し、胆汁分泌は減少、胆汁鬱滞性肝障害が生じた。近赤外分光装置と顕微分光装置で肝微小循環を測定すると、肝小葉内の血流は低下し、酸素飽和度も低下、肝細胞への酸素供給が低下し、肝臓の細胞が低酸素状態に陥っていることが明らかとなった。肝小葉内での差異をみると、この微小循環障害は、特に、中心静脈域で強かった。(2)エンドトキシンの投与に伴い、容量時間依存性にNOが産生されたが、この産生を阻害すると(1)にみられた胆汁鬱滞性肝障害と肝類洞微小循環障害は憎悪した。NOの供給源であるLアルギニンをNO産生阻害剤と共に投与し、NO産生阻害を抑制すると、NO産生阻害により生じた肝類洞微小循環障害と胆汁鬱滞性肝障害の憎悪は消失した。(3)エンドトキシンの投与に伴い、血中エンドセリン1濃度も容量時間依存性に増加したが、この時エンドセリンAレセプターのアンタゴニスト(BQ123又はBQ485)を同時に投与すると、(1)にみられた肝類洞微小循環障害と胆汁鬱滞性肝障害は憎悪した。以上の結果より、エンドキトシンにより肝類洞微小循環障害とこれに伴う胆汁鬱滞性肝障害が生じていることが明らかになるとともに、エンドトキシンにより誘導されるNOやエンドセリン1は、肝類洞微小循環に対しては保護的に働いていることが明らかとなった。
放線菌における二次代謝及び形態分化の制御機構の解明

1.AdpAレギュロンの解明:放線菌Streptomycesgriseusは自身の生産する微生物ホルモンA-ファクターによって転写因子AdpAの発現を促し、二次代謝と形態分化を導く。胞子形成時の隔壁形成に必須な遺伝子ssgAは、AdpA依存的に転写活性化され、AdpAが転写開始点の-235位、-110位、+60位の3カ所に結合していた。結合部位への変異導入解析の結果、ssgAの転写活性化および気中菌糸への隔壁形成には-235位、-110位の2カ所の結合部位がともに必須であった。以上の成果は学術雑誌J.Bacteriol.(2003)に掲載された。また、放線菌属に共通した気中菌糸形成開始の最終決定因子をコードするamfRもAdpAによって転写活性化されることを見出した。AdpA結合領域は転写開始点の-200位および-60位の2カ所であり、これら結合領域に変異を導入するとamfRの転写量は減少し、気中菌糸形成が遅れた。この形質は-60位の変異においてより際立っていた。この成果は現在投稿準備中である。2.AdpAの機能解析:AdpAレギュロンに属する遺伝子adsA、ssgA、amfRの計5カ所のAdpA結合領域についてU置換、T除去、GA除去の3種の干渉フットプリント解析を行い、AdpA結合に必須な塩基を同定し、その結果からAdpAのDNA結合コンセンサス配列CRRRAX_<3-4>GCCA(R: G or A, X : anynucleotide)を明らかにした。さらに大腸菌から精製したAdpAとS.griseusから精製したRNAポリメラーゼホロ酵素を用い、AdpAレギュロンに属する遺伝子群について過マンガン酸カリウムを用いたフットプリント解析を行い、RMポリメラーゼによるプロモーター領域の開鎖複合体形成にAdpAが必須であることを明らかにした。
転がり疲労強度設計によるトラクションドライブ変速機のパワーウェイトレシオ向上

トラクションドライブ要素の転がり疲労強度シミュレーションを提案した.実験結果に基づき,ローラ材中の介在物面積と表面硬さにより現される,1千万転がりにおける転がり疲労強度推定式を導出した.材料観察により介在物の密度と寸法分布を決定し,それに基づいて仮想ローラを計算機上に作成してシミュレーションを行った.100枚の仮想ローラによりシミュレーションを行ったところ,転がり疲労強度の平均値800MPaを得た.並行して14点S-N試験法を行い,これまでのところS-N曲線の概形を得た.その結果から転がり疲労強度を推定し,860MPaを得た.現状でのシミュレーションとの誤差8%となり,概ね良い結果を得た.トラクションドライブ変速機のパワーウェイトレシオ向上(小型化と高伝達動力の両立)のための設計法確立を最終目標として,トラクション油膜のせん断力によるローラ内部の応力変化や材料中の欠陥と介在物の存在等の影響因子を考慮した転がり疲労強度推定式を求め,設計段階でシミュレーションによりトラクションドライブの転がり疲労強度を評価することを目的とする.今年度は,転がり疲労強度に影響を及ぼす非金属介在物の寸法分布を,ローラ材であるSCM420H通常鋼と清浄鋼の試験片観察により求めた.この結果をワイブル分布と呼ばれる確率分布関数に当てはめることで,計算機上で実際の鋼材と同じ介在物分布を有する仮想ローラ材を生成できるようにした.また,表面にトラクション力が働くローラの内部応力分布を,市販の境界要素プログラムであるTED/CPAを用いて計算した.本プログラムでは,トラクション力を摩擦係数として与えることができる.実験値である摩擦係数0.12を与え,トラクションドライブでの動力伝達に必要な押付力を変化させてローラの内部応力分布を計算し,疲労強度と比較できるようにした.さらに,転がり疲労強度シミュレーション法の開発を1年前倒しで行い,予備計算の結果,転がり疲労強度の実験値との誤差数%以下という良好な結果を得た.トルク容量不足となっている二円筒転がり疲労試験機の改良については,モータの選定や,従動側ローラ減速用の歯車対の設計を終え,これらを設置するための試験機の構造変更設計を行っている.トラクションドライブ変速機のパワーウェイトレシオ向上(小型化と高伝達動力の両立)のための設計法確立を最終目標として,トラクション油膜のせん断力によるローラ内部の応力変化や材料中の欠陥と介在物の存在等の影響因子を考慮した転がり疲労強度推定式を求め,設計段階でシミュレーションによりトラクションドライブの転がり疲労強度を評価することを目的とする.前倒しで昨年度に作成した転がり疲労強度シミュレーションは,ローラの弾性接触面の中心を通る厚さの無い仮想ローラを計算対象とした予備的なものであった.実際のローラの内部応力は,弾性接触面中心と,その近傍で特に高い.そこで,今年度は,厚さの無い仮想ローラを多層化することで,シミュレーションを簡易的に3次元化した.この改良プログラムを用いて転がり疲労強度シミュレーションを行ったところ,昨年度は実験値との誤差3%であったところ,誤差1%未満となり,計算精度をさらに向上させることができた.容量不足となっていた二円筒転がり疲労試験機の改良については,設計を全て終え,改良部品の製作(外注)も終了している.現在,実験室内への装置の設置と組立て,アライメント調整等の立ち上げ作業を行っているところである.試験用のローラについては,市内鉄鋼メーカーの厚意により鋼材を無償で確保でき,多数個試験に必要な数量をある程度確保(製作は外注)出来ている.トラクションドライブ変速機のパワーウェイトレシオ向上(小型化と高伝達動力の両立)のための設計法確立を最終目標として,トラクション油膜のせん断力によるローラ内部の応力変化や材料中の欠陥と介在物の存在等の影響因子を考慮した転がり疲労強度推定式を求め,設計段階でシミュレーションによりトラクションドライブの転がり疲労強度を評価することを目的とする.最終年度である本年は,昨年度に改造を終えた二円筒転がり疲労試験機による多数個の疲労試験の遂行を中心に行った.一年間の実験によって,試験ローラが5対損傷した.損傷点を目視観察したところ,損傷原因はシミュレーションで仮定している内部起点損傷である可能性が高かった.上記5点の実験データから,S-N曲線傾斜部の概略を得ることができた.ここまでの結果から転がり疲労強度を推定したところ,860MPaとなった.昨年度までに提案したシミュレーションの推定値は800MPaであり,現状での誤差8%という良い結果を得た.今後実験点数が増えるにしたがって,誤差はさらに縮小すると期待している.疲労強度のばらつきについては,実験回数が不足しており,評価できていない.助成期間終了後も実験を継続し,シミュレーションによるばらつきの推定精度も評価したい.トラクションドライブ要素の転がり疲労強度シミュレーションを提案した.実験結果に基づき,ローラ材中の介在物面積と表面硬さにより現される,1千万転がりにおける転がり疲労強度推定式を導出した.材料観察により介在物の密度と寸法分布を決定し,それに基づいて仮想ローラを計算機上に作成してシミュレーションを行った.100枚の仮想ローラによりシミュレーションを行ったところ,転がり疲労強度の平均値800MPaを得た.並行して14点S-N試験法を行い,これまでのところS-N曲線の概形を得た.その結果から転がり疲労強度を推定し,860MPaを得た.現状でのシミュレーションとの誤差8%となり,概ね良い結果を得た.転がり疲労強度シミュレーションについては,今年度のプログラム改良の結果,前述の通り,ほぼ完成と言ってよい状態となっている.

一方,今年度末ごろから多数個の転がり疲労試験に取り掛かる予定であったが,疲労試験機の改良が遅れたため,実施できなかった.ただし,試験機の組立てが終了すれば,すぐに実験に取り掛かれる状態となっている.機械工学、設計工学・機械機能要素・トライボロジー現在のところ,研究の推進に支障をきたす問題は生じていない.転がり疲労強度シミュレーション法の開発は当初の予定以上に進み,ほぼ完成状態にある.今後は転がり疲労強度の多数個試験と強度のばらつきの評価,シミュレーションとの比較に注力する.多数個試験用ローラは,必要数の半分程度を確保できた.来年度は残りの半数をそろえ,転がり疲労強度データ(S-N曲線)の完成を目指す.転がり疲労強度シミュレーションについては,計算の基礎データとなる,材料中の介在物分布,試験ローラの表面硬さ測定結果,ローラ内部応力の計算結果を当初予定よりも早く揃えることができた.転がり疲労強度推定式の導出や転がり疲労強度シミュレーション法の開発については次年度に行う予定であったが,計算の基礎データ収集が上記の通り予定よりも早く終わったため,前倒しで行うことにした.予備計算の段階であり,かつ実験回数も十分ではないが,転がり疲労強度の計算値と実験値を比較したところ,誤差数%という良い結果を得ている.一方,転がり疲労試験を安定して進めるための疲労試験機の改良については,遅れが生じている.予定では年度内に設計を終える手筈であったが,図面の完成が遅れている.構造の概略や,改良部品の諸元設計は既に終えており,残すは図面の作成のみであるので,目的達成への影響は少ない.実験装置の改良については遅れているが,転がり疲労強度シミュレーション法の開発は当初の予定以上に進んでいる.現在のところ,研究の推進に支障をきたす問題は生じていない.今後は装置改良の遅れを取り戻し,当初の予定通りに転がり疲労強度の多数個試験と疲労強度推定式の精度向上に取り掛かる.平成26年度内に転がり疲労強度の平均値の精度を高める.強度のばらつきについては平成27年度も継続して実験を行う予定である.予定以上に進んでいる転がり疲労強度シミュレーションについては,計算手法の高度化により,推定精度のさらなる向上を図る.ローラの内部応力分布を計算するための市販の境界要素プログラムTED/CPAについては,本申請採択前である前年度に,前倒しで別財源から購入した.これが,次年度使用額が生じた主たる理由である.次年度は転がり疲労試験機の改良を行う.また,試験回数を増やせば精度の良い疲労強度分布が得られるため,ローラ試験片の製作数は多い方が良い.本年度余剰金は,これら,特にローラ試験片の製作数増加に充てる.
エソ類ミオシンの加熱ゲル化特性に関するタンパク質工学的研究

本研究は、エソ・ミオシン分子の重鎖サブユニット(MYH)の一次構造解析を行い、既報のグチのそれと比較するとともに、魚肉練り製品の主原料であるスケトウダラのMYHの一次構造とも比較する。さらに、3魚種のMYHの一次構造を比較して加熱ゲル形成に関与すると想定される一次構造領域につき、遺伝子組み換え体の作製などの遺伝子工学的およびタンパク質工学的手法を用いてその機能を明らかにすることを目的とした。本年度は、ミオシンをマエソ普通筋から調製し諸性状を調べて一次構造の特徴と比較しつつ、マエソ肉の練り製品原料としての特徴を明らかにした。成果は以下の通りである。1)マエソ・ミオシンを動的粘弾性の測定に付したところ、貯蔵弾性率(G')は25°Cまでは減少し続けたが、28-34°Cで上昇し、その後、46°Cまで上昇を続けた。次いで最高測定温度の80°Cまで徐々に減少した。2)マエソ・ミオシンの損失弾性率(G")は、34および49°Cにピークを示した。3)一方、マエソ・ミオシンの示差走査熱量(DSC)の測定では、熱変性の遷移温度(Tm)が33.0および48.6°Cに認められ、動的粘弾性の測定でみられたゲル化の挙動をよく反映した。4)さらに、マエソ・ミオシンの0°CにおけるCa^<2+>-ATPaseの変性速度恒数は2.27x10^<-6>s^<-1>と、既報のシログチ・ミオシンの2.66x10^<-6>s^<-1>とよく似た値を示し、両ミオシンの熱安定性がほぼ等しいことが示された。魚肉の加熱ゲル化は魚種特異性が高く、グチ類やエソ類では加熱ゲル形成能が高いとされる。既にグチ類については魚肉の主要タンパク質成分で加熱ゲル形成に主体的な役割を果たすミオシンの分子レベルの解析が進んでいる。一方、エソ類についてはほとんど知見がない。本研究はこのような背景の下、エソ類ミオシンの重鎖サブユニットをcDNAクローニングし、一次構造解析することを目的とした。エソ類は数種存在することが知られている。そこで本研究では漁獲量が多く、練り製品原料としてよく使われているマエソSauridaundosquamisおよびワニエソS.wanieso活魚を高知県の沿岸で採取し、直ちにRNA laterで固定し、冷却しつつ東京の研究室に持ち帰った。両魚種は小型の場合は魚種の判別が容易でない。そこで固定した筋肉から常法により全DNAを調製し、既報のプライマーを用いてミトコンドリア16S rRNA遺伝子の部分領域を増幅して塩基配列を決定し、データベースに登録されている配列と比較しつつ、採取した試料の魚種を正確に判別した。次に、両魚種の普通筋(速筋)から常法によりfirst strand cDNAを調製した。さらに、既報の魚類普通筋ミオシン重鎖遺伝子の塩基配列を基にプライマーを設計し、前述のようにして得られたfirst strand cDNAを鋳型にPCRによりミオシン重鎖遺伝子のC末端側L-メロミオシンの部分領域を増幅した後、サブクローニングし、DNAシーケンサにより塩基配列を決定した。その結果、マエソから4種類のcDNAクローンが得られ、それらの塩基同一率は9196%、演繹アミノ酸同一率は9698%であった。一方、ワニエソからは5種類のcDNAクローンが得られ、それらの塩基同一率は9199%、演繹アミノ酸同一率は97100%であった。さらに、3魚種のMYHの一次構造を比較して加熱ゲル形成に関与すると想定される一次構造領域につき、遺伝子組み換え体の作製などの遺伝子工学的およびタンパク質工学的手法を用いてその機能を明らかにすることを目的とするものである。昨年度のエソ類の普通筋を対象とした研究成果からマエソから4種類のMYHをコードするcDNAクローンが得られ、それらの塩基同一率は9196%、演繹アミノ酸同一率は9698%であった。一方、ワニエソからは5種類のcDNAが得られ、それらの塩基同一率は9199%、演繹アミノ酸同一率は97100%であった。本年度はマエソにつき、普通筋から常法により全RNAを調製して市販のキットと用いてfirst strand DNAを合成した。さらにこれを鋳型にMYH遺伝子(MYH)をコードするDNA断片をPCRで増幅し、主成分MYH cDNA全長の塩基配列および演繹アミノ酸配列を決定した。その結果、マエソMYHcDNAは全長5,973bpからなり、1.928アミノコードすることが明らかになった。このアミノ酸配列はスケトウダラおよびシログチMYHとそれぞれ90%および92%の同一率を示した。さらに、マエソMYHのATP結合部位のloop1はスケトウダラおよびシログチの相同領域のそれぞれ38%および60%、アクチン結合部位のloop2ではそれぞれ88%および91%、さらにαらせん領域のロッドではそれぞれ91%および93%であった。ワニエソMYH cDNAは約5500bpの領域の塩基配列を決定できたが、約500bpは未決定のまま残された。

本研究は、エソ・ミオシン分子の重鎖サブユニット(MYH)の一次構造解析を行い、既報のグチのそれと比較するとともに、魚肉練り製品の主原料であるスケトウダラのMYHの一次構造とも比較する。さらに、3魚種のMYHの一次構造を比較して加熱ゲル形成に関与すると想定される一次構造領域につき、遺伝子組み換え体の作製などの遺伝子工学的およびタンパク質工学的手法を用いてその機能を明らかにすることを目的とした。本年度は、ミオシンをマエソ普通筋から調製し諸性状を調べて一次構造の特徴と比較しつつ、マエソ肉の練り製品原料としての特徴を明らかにした。成果は以下の通りである。1)マエソ・ミオシンを動的粘弾性の測定に付したところ、貯蔵弾性率(G')は25°Cまでは減少し続けたが、28-34°Cで上昇し、その後、46°Cまで上昇を続けた。次いで最高測定温度の80°Cまで徐々に減少した。2)マエソ・ミオシンの損失弾性率(G")は、34および49°Cにピークを示した。3)一方、マエソ・ミオシンの示差走査熱量(DSC)の測定では、熱変性の遷移温度(Tm)が33.0および48.6°Cに認められ、動的粘弾性の測定でみられたゲル化の挙動をよく反映した。4)さらに、マエソ・ミオシンの0°CにおけるCa^<2+>-ATPaseの変性速度恒数は2.27x10^<-6>s^<-1>と、既報のシログチ・ミオシンの2.66x10^<-6>s^<-1>とよく似た値を示し、両ミオシンの熱安定性がほぼ等しいことが示された。