hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
大腸癌微小環境を介した肝転移機構の解析と新規分子標的治療の開発

大腸癌の死亡率低下に向け、肝転移の制御は重要な課題である。近年がんの転移過程における、腫瘍周囲間質細胞を中心とした腫瘍微小環境の関与が報告されている。本研究は、腫瘍周囲間質内におけるmicroRNAおよびその標的遺伝子の発現を測定し、大腸癌肝転移過程への関与を解析することを目的とする。浜松医科大学第二外科において過去12年間に切除された、化学療法歴のない大腸癌20症例(無肝転移再発10例、同時性肝転移5例、術後異時性肝転移再発5例)の原発巣切除検体のFFPE sampleからlaser capture microdissection (LCM)法にて腫瘍間質組織を採取し、total RNAを抽出。RNAのquality checkを行い、解析可能と判断された16例(無肝転移再発8例、同時性肝転移4例、術後異時性肝転移再発4例)のRNAをMegaplex PreAmp Primersでプリアンプリフィケーションを行った後に、TaqMan microRNA Arrayを用いてmiRNA発現を計測し、原発巣の腫瘍周囲間質細胞におけるmiRNA発現と同時性、異時性肝転移の有無との関係を解析した。クラスタリング解析では、無肝転移再発8例+異時性肝転移再発4例と同時性肝転移4例の2群に分かれた。無肝転移再発8例と比較して同時性肝転移4例において、miR-302bなど複数のmiRNA発現が低下していた。以上の結果より、大腸癌原発組織内の腫瘍間質細胞におけるmiRNA発現変動を介して、ある(分泌)タンパクの発現が上昇し、原発巣における癌細胞の教育あるいは肝における転移癌細胞の発育を促進している可能性が示唆された。
成人の歯周疾患予防管理におけるCPITNの応用

1.当科初診来院者の特徴を把握するために、初診時の問診結果および診査結果をまとめた。1)問診結果:「当科の認知由来」「当科の来診由来」「歯と歯肉の自覚症状」「歯磨き情報」「歯ブラシ以外の使用器具」「歯磨剤使用情報」「フッ化物配合歯磨剤の使用情報」の問診項目のうち、以下の3項目が特徴的であった。(1)当科の認知について:「他の診療科で予防歯科を知った」とする回答が56.3%と高かった。(2)当科の来診由来:「紹介で来診した」との回答が56.8%と高かった。(3)歯と歯肉の自覚症状について:「歯間にものがつまる」との回答が多かった。2)診査結果:(1)DMFT-index:年代別の分布の内訳を平成5年度歯科疾患実態調査のものと比較すると、10代、20代を除いた各年齢層で低い値を示した。(2)CPITNによる各コードの割合:年代別では40代以降、深いポケットのコード4の割合が増加した。部位別では各部位を通じて、最高で歯石沈着のコード2の割合が高い値を示した。(3)PCR:分布をみると、20%台が20.3%と最も高く、それ以降は減少傾向にあった。(4)BOP:分布をみると、10%未満が27.6%と最も高く、それ以降は減少傾向にあった。2.初診時から2年間継続して管理を受けた者の評価について、初診時との比較において有意に減少した。(1)CPITN:初診時の平均コード2.7から2.3と減少した。(2)PCR:初診時の平均30%から15%と半減した。(3)BOP:初診時の平均36%から12%と3分の1に減少した。(4)なお、DMFT-indexの増加は1.2で、予想より多かった。3.まとめ今回、成人の歯周疾患予防管理において、疫学的評価システムとしてCPITNを使用し、以下の結果を得た。初診時から2年間継続して管理を受けた者については、歯周疾患の改善と重症化の防止ならびに健全な歯周組織の維持が可能であることが示唆された。ただし、管理の成果の確認に必要な症例数が不足しているため、今後対象者数をそろえた検討が必要と考察した。
Naイオン恒常性と浸透圧維持の多階層調節システム

ヒトを含む哺乳動物は、脳の感覚性脳室周囲器官において体液のNa+レベルや浸透圧を監視し、水分/塩分の経口摂取量の制御と腎臓における排泄/再吸収の制御を統合的に行っている。私は、このシステムの全体像の解明を目指して分子レベルから個体レベルの各階層の研究を進めてきた。しかし、階層間の関係性をつなぐ知見が不足しているために、全体像をシステムとして捉えるには至っていない。本研究では、逆行性標識薬や電気生理学的手法を用いて階層間をつなぐ情報伝達経路の構造を明らかにし、伝達される情報を定量的に解明してモデル化した。さらに、光感受性タンパク質を特定の細胞に発現し生体の一部を任意に操作することにより、水分/塩分摂取行動を制御し、モデルの信頼性を検証した。26年度が最終年度であるため、記入しない。我々は、このシステムの全体像の解明を目指して分子レベルから個体レベルの各階層の研究を進めてきた。分子レベルでは、感覚性脳室周囲器官のNaxチャンネルが体液Na+レベルセンサーであることを明らかにしてきたが、本年度、Naxチャンネルの活性化閾値が制御される仕組みを明らかにした。Naxが真に脳のNa+濃度センサーであるとすれば生理的範囲のNa+濃度変化を感知できるはずであるが、Naxは体外(in vitro)ではNa+濃度が約150 mMを超えて初めて活性化するという特性を示していた。本研究において、Naxの活性化閾値は、体内では血圧調節ホルモンの1つエンドセリン-3 (ET-3)によって調節されており、生理的範囲のNa+濃度の上昇に応答できることが判った。Naxは、体液Na+レベル上昇を感知して、塩分摂取を回避する行動の制御に関わっていることがわかっているが、逆に、塩分欠乏時に塩分摂取を促進する行動が制御される仕組みについては、詳細は不明なままである。これまでに、アンジオテンシンIIを脳室内に投与すると塩分及び水分の摂取行動が促進されることが知られている。我々はアンジオテンシンII受容体を発現する細胞の同定に成功した。また、Naxが体液Na+レベルの検出を行い、塩分摂取行動を制御するための中枢として機能していることがわかっている脳弓下器官のアンジオテンシンII発現細胞が投射する神経核の同定に成功した。分子レベル、回路レベルの、各階層の解明は、当初の計画どおり順調に進んでいる。しかし、それらの成果に基づくモデル化が遅れ気味であるため、次年度に集中的に取り組む。1、塩分摂取行動の制御におけるアンジオテンシンIIの役割に関する解析:SFOにおいてアンジオテンシンII受容体AT1aを発現する神経細胞がグルタミン酸作動性であることや、その中である神経核に投射する細胞が塩分摂取行動を担っていることが明らかになった。そこで、その神経核に投射するグルタミン酸作動性神経細胞に特異的に光活性化型チャンネル(ChR2)やポンプ(ArcT)を発現したマウスを作成し、光刺激による塩分摂取行動の制御を試みる。そのために、グルタミン酸受容体にCreリコンビナーゼを発現するvglut2-creマウスの分界上床核にChR2やArcT遺伝子をloxP配列で挟んだものを組み込んだ逆行性遺伝子輸送発現ウィルスベクターを導入し、光刺激時の塩分摂取行動を測定する。2、マウス脳組織における神経活動制御の定量解析と新しい定量的生体システムモデルの構築:Naxを発現するグリア細胞とGABAニューロンの共培養系を構築する。この系を用いてNa+イメージングと細胞外乳酸濃度測定、電気生理学的解析手法を組み合わせ、Nax活性化と乳酸放出の関係、乳酸濃度と神経活動の関係を定量的に解析する。さらに、この測定値と文献値を入れた定量的生体システムモデルの構築を試みる。
ボトルネック構造を持つ空間上の熱核と幾何学的不等式の研究

連結和は熱核がLi-Yau型評価を持たないことが古くから知られていた。2009年、Grigor'yan, Saloff-Costeは各エンドがnon-parabolicであるときに熱核のシャープな評価を得た。本研究では全てのエンドがparabolicである場合の熱核の評価の研究を行い、そのシャープな評価を得た。まず中心部分のon-diagonalな値は増大度が最も大きいエンドにより決定されることを明らにした。これは増大度が最も小さいエンドにより決定されるnon-parabolicなエンドの場合と本質的に異なる挙動を持つことを示した新しい現象である。本年度はまず、研究目的の研究1「ボトルネック構造を持つ空間上の熱核の長時間挙動」実現のため、Grigoryan教授との共同研究でブラウン運動が再帰的(parabolic)な多様体の連結和上の熱核の挙動の研究を行った。Grigoryan, Saloff-Costeは2009年の論文でブラウン運動が非再帰的な(non-parabolicな)非コンパクトリーマン多様体の連結和上の熱核の長時間挙動をhitting probabilityの詳しい挙動を調べることにより明らかにしている。しかし多様体がparabolicな場合はhitting probabilityの挙動が良い評価を持たないので新たなアプローチが必要であった。我々はグリーン関数の挙動を調べることによりparabolicな多様体上の連結和上の熱核の良い評価を得た。これにより非コンパクトリーマン多様体をコンパクトな連結部分で連結和をとった多様体上の熱核の挙動は適切な条件のもとでは全て明らかになったことになる。この結果は現在投論文稿準備中である。また、研究目的の研究3「ボトルネック構造の距離空間・グラフ上への拡張」実現のため、非コンパクトリーマン多様体の離散的類似である無限グラフ上のランダム・ウォークの長時間挙動について、研究協力者の小谷教授および河備准教授と研究を行った。グラフ上のランダム・ウォークは様々な条件のもとで多くの研究者により研究されているが、abel群が作用しているグラフ(結晶格子)上の対称ランダム・ウォークの長時間挙動は近年小谷、白井、砂田らにより詳しい挙動が明らかとなっている。本研究ではボトルネック構造把握の第一歩として結晶格子上で非対称ランダム・ウォークを考え、まず、三角格子の漸近挙動に非対称性がどう関わっているのかについて明らかにした。この結果を動機として、一般の結晶格子において、その長時間の挙動である中心極限定理、さらにプロセスレベルでの弱収束について明らかにした。この結果は現在論文投稿準備中である。本年度は研究目的の研究1「ボトルネック構造を持つ空間上の熱核の長時間挙動」に則り、研究協力者のGrigoryan教授およびCornell大学のSaloff-Coste教授と共同で複数のエンドのある非コンパクトリーマン多様体上の熱核の長時間挙動の研究を行い、各エンドがパラボリック(ブラウン運動が再帰的)である場合に、中心部分でのon-diagonalな熱核はエンドの中で最も増大度が大きいところに支配されるという結果を得た。これを用いて空間全体での熱核のシャープな評価を得ることができた。各エンドが非パラボリックである場合はGrigoryan, Saloff-Costeの先行研究により明らかとなっていたが、パラボリックの場合を証明したことにより、ほぼ全ての状況で熱核の詳細な挙動を明らかにすることができ、大変意義のある成果である。例えばこの結果から平面とチューブをつなげたような空間の熱核のシャープな挙動が初めて明らかとなった。また、この結果から、各エンドがパラボリックで、さらにsubcriticalという条件を持つならば、異なるエンドにある2点間の熱核を見ても熱核の値は小さくならない、つまりボトルネック効果がないことがわかった。この結果は現在投稿準備中である。また、本研究課題に関連する研究として、結晶格子上の非対称ランダム・ウォークの長時間漸近挙動について東北大学の小谷教授、岡山大学の河備教授と研究を行い、非対称ランダム・ウォークの場合、通常の中心極限定理型の弱収束と推移確率のそれを対称化する推移確率の族に関する弱収束という2通りの標準的な弱収束が存在することがわかり、そのそれぞれでDonskerの不偏原理を示すことができた。これは非対称ランダム・ウォークの長時間挙動の特徴付けとして意義のある結果である。研究目的の研究1.「ボトルネック構造を持つ空間上の熱核の長時間挙動」の研究成果として、放物型多様体、即ちブラウン運動が再帰的な多様体の連結和上の熱核の長時間挙動について研究を行い、1センター部分の熱核の対角値は、体積増大が最大であるエンドの熱核の挙動と同値であること、2エンドがcritical (R^2状の体積増大度を持つ場合)であるものが1つ以下であるならば、熱核にボトルネックの影響がないこと、を明らかにした。これらは「確率論と幾何学」(東京工業大学、2015年11月)、「Geometric Analysis seminar」(Bielefeld大学、2015年11月)、「確率論シンポジウム」(岡山大学、2015年12月)、「Analysis seminar」(Cornell大学、2016年3月)にて発表を行い、また、論文としてまとめ、現在投稿準備中である。この結果をもとにして、研究2.「ボトルネック構造を特徴付ける幾何学的不等式の開発」に関する研究として、現在連結和上においてポアンカレ不等式等の幾何学的不等式についての研究を継続して行っている。研究目的の研究

3.「ボトルネック構造の距離空間・グラフ上への拡張」に関連した成果として、グラフ上のランラム・ウォークの長時間挙動の研究を行い、結晶格子(可換群が作用しているグラフ)上の非対称ランダム・ウォークに関する中心極限定理および漸近展開を証明した。本研究成果は「幾何学シンポジウム」(東京理科大学、2015年8月)、「スペクトル・散乱理論とその周辺」(数理解析研究所、2016年1月)において研究発表を行った。本研究課題で一番重要な部分であった連結和上の熱核が解決したためParabolicな多様体の連結和上の熱核の長時間挙動を, Bielefeld大学のAlexander Grigor'yan教授, Cornell大学のLaurent Saloff-Coste教授と共同で研究し、以下の結果を得た。熱核のLaplace変換を最大値の原理を中心部分と各エンドで用いるという新しい方法により、中心部分のon-diagonalな挙動は、増大度が最も大きいエンドに支配されることがわかった。これは増大度が最も小さいエンドにより支配されるエンドがnon-parabolicな連結和上の熱核の挙動と本質的に異なることを示す新しい現象である。この中心部分の熱核の挙動と、Grigor'yan、Saloff-Costeのhitting probability, Dirichlet熱核の評価の結果を合わせることで全ての2点間のoff-diaginalな熱核の挙動も求めることができた。これにより、criticalなエンドが1つ以下の連結和ではnon-parabolicな連結和で観察されていたようなボトルネック現象が起きないことがわかった。これは論文として投稿して受理された。東北大学の小谷元子教授、岡山大学の河備浩司教授とともに、結晶格子上の非対称ランダムウォークの長時間漸近挙動を明らかにした。砂田により得られていた推移確率の局所中心極限定理の拡張として推移確率の漸近展開を求めた。また、弱収束として2通りの推移作用素の収束およびプロセスレベルでの収束であるinvarianceprincipleを証明した。これらは論文として投稿して受理された。連結和は熱核がLi-Yau型評価を持たないことが古くから知られていた。2009年、Grigor'yan, Saloff-Costeは各エンドがnon-parabolicであるときに熱核のシャープな評価を得た。本研究では全てのエンドがparabolicである場合の熱核の評価の研究を行い、そのシャープな評価を得た。まず中心部分のon-diagonalな値は増大度が最も大きいエンドにより決定されることを明らにした。これは増大度が最も小さいエンドにより決定されるnon-parabolicなエンドの場合と本質的に異なる挙動を持つことを示した新しい現象である。本年度の研究により、研究目的の中で最も重要な研究1については概ね達成することができた。研究2ボトルネック構造を特徴付ける幾何学的不等式の開発および研究3.ボトルネック構造の距離空間・グラフ上への拡張については研究1の成果をもとに展開していきたい。
日本のリステリア症原因食品の分子疫学的探査と危害防除および発症機構に関する研究

日本の水産物に分布が確認されているリステリア菌について、そのリスクを調査し、制御法を確立することを目的に研究を行なった。リステリア菌は、免疫不全者等に対し高い致死性を示すため、食品業界を中心に注意が払われている。日本においては、加工度の高いネギトロやイクラといった水産加工品に分布が確認されているものの、それらの病原性や水産物における増殖性について、知見がほとんど存在しなかった。本研究では、日本の臨床株と水産物等から分離された菌株との遺伝的差異をゲノム解析で確認し、両菌株間には遺伝的な差異はほとんどないことを明らかにした。また、増殖抑制法についても研究を進め、フェルラ酸による制御法を確立した。本研究では日本の一部水産加工品において汚染が確認されたリステリア菌について、その病原性の解析と疫学的解析に用いる手法の開発、および食品中での制御法に関し研究を進める。24年度の研究においてはこのうち、日本の臨床株、海外の臨床株、食品分離株の菌株間の際を解析する際に必須となるDNAタイピング法として、複数の病原遺伝子を用いたMLST解析、ならびに全血清型対応の近縁菌株解析用tandemrepeat解析法を確立し、論文発表を行った。現在、本法を用いて臨床株、食品分離株の解析を行っており、近日中に日本における臨床株のタイピングデーターから日本のリステリア症の実態が明らかになると考えられる。また、米ぬか抽出成分であるフェルラー酸を利用し、食品中のリステリア増殖を制御する試みも行った。過去に、申請者らは、既存添加物の抗酸化剤であるフェルラー酸がリステリアを含めて数種の食中毒菌の増殖制御左用があるという学術的に興味深い現象を見出した。更に、フェルラー酸によるリステリアの増殖に対する最小増殖抑制濃度を明らかにし、また、ネギトロなど一部の水産食品での効果を確認できている。本年度はこの薬剤を用い、スモークサーモン、チーズ、ネギトロ用マグロなどの食品にリステリア菌を人工的に接種し、フェルラー酸の添加効果により増殖が抑制可能か検討を行った。引き続き薬剤等の組み合わせにより、さらに効果の高い増殖抑制法の開発を検討している。さらに、腸内へ本菌が定着、感染を引き起こす際にどのような遺伝子群が関与しているのか解析するリアルタイムPCR法についても検討を行い、接着因子であるinlAの発現解析法を確立した。本研究では日本の水産物に分布が確認されている食中毒菌、リステリアモノサイトゲネスについて、1)水産分離株と日本での病床分離株の分子疫学解析、2)増殖制御法の開発3)リステリアの腸内環境定着や病原性発現性と食品成分の関係解明、の3テーマについて研究を行っている。25年度は、リステリアの病原因子の一つであるinlAの欠失が本病原体の他の病原遺伝子にどのような影響を及ぼしているのかを調査し、inlAの欠失は他の病原遺伝子の欠失に影響を及ぼさないことを明らかにした。また、inlAが腸管内に定着する際。どのタイミングで発現、作用しているのか培養細胞を用いて検討を行い、その発現タイミングの解析も進めている。さらに、一般的なDNAタイピングで近縁株であると判断される2株間はゲノムレベルでどの程度近縁であるか、次世代シークエンサーを用いて詳細に調査し、株間での変異についての知見を収集した。このようなデータに基づき、リステリアをゲノムタイピング法により種や菌株レベルで識別する方法の開発も進め、MLVA法やHRM法の開発を行った。また、テーマ2)に関連し、フェルラ酸を用いた本菌の制御法を検討し、最適な添加濃度と他薬剤との組み合わせを明らかにし、モデル食品においてその有効性を評価した。本研究では、日本の水産物に分布が確認されている食中毒菌であるリステリア菌について、その潜在的リスクを調査し、その制御法を確立する目的で研究を行った。リステリア菌は、海外においては生ハム、チーズ、サラダなどの非加熱喫食食品において分布が確認されており、免疫不全者等において致死率が高い傾向があるため、食品業界としてもその動態が注視されている。本研究ではこれらの実態を解明するため、日本の臨床分離株と過去に水産物等から分離された菌株との遺伝的差異をゲノム解析やDNAタイピングで確認し、海外において分離されている菌株と遺伝的な差異はほとんどなく、水産物等に分布している菌株により将来的に食中毒が発生する可能性か無いとは言い切れれないと結論付けた。水産食品中での増殖性に関しても、分布が確認されている水産物においては、リステリア菌の増殖を阻害する要因は含まれておらず、冷蔵流通中に増殖が起こることが確認されたため、その増殖抑制法についても研究を進めた。

各種保存料や日持ち向上剤等を検討したところ、酸化防止剤として広く使用されているフェルラ酸にリステリア菌の抑制効果があることが今回新たに判明し、その添加方法、他薬剤との相乗効果、耐性の獲得性についても知見を得た。さらに、腸管内において定着、侵入にinlAがかかわっており、腸管上皮細胞へ到達したリステリア菌においてその発現が変化することも見出した。また、海藻より抽出した成分にリステリア菌の腸管付着性を阻害する能力があることも見出した。これらの研究により、水産物に分布しているリステリア菌の遺伝的特性とそのリスクが明らかとなり、新たな増殖制御法を確立することができた。26年度が最終年度であるため、記入しない。食品微生物26年度が最終年度であるため、記入しない。研究計画書の通りに研究が遂行し、3つのテーマのうち2件については、国際誌への論文発表を行うことができた。リステリア菌のゲノム解析データの収集により、MLVA, HRMなど食品製造現場でも比較的簡便に本菌を識別可能なタイピングの開発へとつなげることができたため。また、増殖制御方の開発に関しても、保存料ではない製剤の組み合わせで確実に増殖を抑制できる方法を確立し、食品への添加実験においてもその有効性を示せているため。初年度においてはおおむね研究計画書の通りに研究が遂行し、次年度においても順調な遂行が予想される。当初計画通り、研究を遂行予定である。
カーボンナノチューブの配向制御成長技術の開発とナノサイズ電子源への応用

本研究はフラットパネルディスプレイなどの冷陰極電子源の開発を目的として、電子ビームリソグラフィー装置を用い、基板上に空間制御されたカーボンナノチューブ(CNT)を成長させ、その電界放出特性を評価した。CNTを成長させる際に用いるNH_3/C_2H_2混合ガスの比と成長したCNTの形状と電界放出特性の関係を調査した。作製したサンプルを電界放射型顕微鏡(FE-SEM)や透過型電子顕微鏡(TEM)により観察した結果、C_2H_2比を10%から30%へと増加させるにつれ、その構造がチューブ状(15%以下)からコーン状(20%以上)へと変化する傾向が確認された。またCNTの長さは減少する傾向が確認された。これらの電界放出特性を比較すると、25%で成長したCNTでは、電子放出の生じる閾値電圧は240Vであるのに対し、15%で成長したCNTはで140Vとなり特性の向上を確認した。また、CNTの電界放出特性はその先端構造に強く依存するため、そのCNTの形状との関係を調べるため、マイクロ波励起表面波プラズマ装置を用いてO_2プラズマをCNT電子源表面へ照射した。入射パワーを400Wとし、最大5分間のプラズマ照射を行った。電界放出特性を比較すると、2分照射したCNTでは閾値電圧は110V(0.88V/μm)、5分照射したCNTでは260V(2.1V/μm)となった。また、これらをTEMにより構造解析を行った結果、先端触媒が除去されており、その部分で局所的な電界集中効果が高まったことが電界放出特性の向上につながったと考えられる。このようにして、研究目的で掲げた1.0V/μm以下を達成できた。本研究はフラットパネルディスプレイなどの冷陰極電子源の開発を目的として、基板上に空間制御された垂直配向技術の構築及び電界放出特性の高効率化を目指し、電子ビームリソグラフィー装置を用い、最:小で100nmの触媒ドットアレイを作製し、プラズマCVD法により空間制御されたカーボンナノチューブを成長させ、その電界放出特性を評価した。このように作製したサンプルを電界放射型電子顕微鏡(FE-SEM)やTEMにより形状を観察した結果、直径100nm、長さが約5μmのカーボンナノチューブが触媒ドット上に均一に成長しているのを確認した。電界放出特性については、高密度に垂直配向成長したカーボンナノチューブ膜では、電子放出が生じるための閾値電圧は約300V(2.4V/μm)であるのに対し、100nmのドット配列カーボンナノチュープアレイにおいては閾値電圧が220V(1.7V/um)となり、特性の向上を確認した。さらに、エミッタの形状を高いアスペクト比を有する構造の場合では、閾値電圧は140V(1.1V/μm)となり、研究計画で掲げた2V/μm以下を達成した。また、高密度にカーボンナノチューブが配置されると、電界放出において電界の遮蔽効果が生じてしまうため、カーボンナノチューブの配置を最適化する必要があるため、ドット間隔を変化させて電界電子放出特性との関係を調査した。この実験においては、ドットサイズが400nmとしドット間隔を0.3μmから10μmと変化させた基板を作製し、長さ3μmのカーボンナノチューブを成長させた。これらの電界放出特性を比較すると、間隔が6μmのサンプルにおいて最も低い閾値電圧140V(1.1V/μm)となることを確認した。このようにドット間隔を制御することによって、電界放出特性における最適化条件(長さ:間隔=1:2)を実験的に明らかにした。
デセン酸エステル誘導体の脊髄損傷修復作用とその医学的応用に関する研究

生体内での安定性を高める目的で2-デセン酸エステルのエステル部分をアミド結合に変換した新規2-デセン酸アミド化合物を合成し、重篤なモデルである脊髄全切断モデルラットに経口投与すると、2週間後から運動機能が改善し、3週間後には後肢で体重を支えて歩行するまでに回復した。対照群は2点程度であり後肢の関節は全く動かないままであった。本研究の目標である経口投与による脊髄損傷のモデル動物の治療がおおむね達成された。1.効力の強い、経口投与に適した2-デセン酸誘導体の合成:2-デセン酸エチルエステル(DAEE)のエステルは生体内ではエステラーゼによって容易に分解されるので、1)これを防ぐための化学修飾を付与した化合物、2)活性の増強を目的とする新規デセン酸化合物を合成した。3)培養神経細胞に対するERK1/2シグナリングの増強効果を指標として評価し、特許出願した(特願2010-246503)。2.脊髄半切断モデルに対する損傷修復効果:本研究は脊髄全切断モデル動物に対するDAEEの効果を見出したことに端を発しており、このモデル動物を中心に検討する。しかし全切断モデル動物は極端な損傷であり疾患としてはまれであること、作製に習熟が要求され、再現性も十分とはいえないなどの問題も存在する。そこで脊髄の左右半分を切断するモデル動物を作製し、DAEEの運動機能に及ぼす効果を検証した。半切断モデルは切断側の後肢の運動機能が失われるが、時間の経過とともにある程度自然に回復する。そこで、損傷直後から1日1回、DAEEを腹腔内に投与すると2週間後より有意に運動機能の上昇が認められ、損傷サイズは有意に小さくなった。DAEE投与群の損傷部位では、ERK1/2のリン酸化レベルが有意に高い値を示した。一方、bcl2と脳由来神経栄養因子(BDNF)の発現上昇を伴っていた。このように、半切断モデルにおいても腹腔内投与されたDAEEによって損傷部位のERK1/2シグナル経路が活性化され、運動機能の改善につながるような生化学的変化が起こることが明らかとなった。1.新規デセン酸誘導体のin vitro活性評価:2-デセン酸誘導体(DA)を多数合成し培養大脳皮質ニューロンのErk1/2リン酸化の増強効果に基づく構造活性相関により、3種類のDAを選んだ(知財保護によりA、B、Cと呼称)。以下の治療成績を含め特許出願(国際出願番号:PCT/JP2011/75228)。2.経口投与による運動機能回復:脊髄(T10)の左半分切断ラットにA、B又はCを1日1回、30日間経口投与するとAは500μg/kgで、Bは500、2,500μg/kgで、Cは2,500μg/kgで運動機能の上昇が認められた。次に脊髄を全切断した後、1日1回、6週間にわたり化合物Cを腹腔内投与すると、投与10日あたりから運動機能改善が認められ、28日以降は、後肢で体重を支えて歩くまでに回復した,,化合物AとBについて経口投与で運動機能回復効果を検討中である。3.DAの細胞内作用機構の解析;DAは培養ニューロンに作用してErk1/2のリン酸化を増強する。この活性はチロシンキナーゼ型受容体をもつ神経栄養因子の作用と類似すると同時に脊髄損傷治療の要因であると考えられる。そこで分子メカニズムについて検討し、DAが細胞内で特定タンパク質(Xとする)と結合しXを活性化することによって特定の受容体型チロシンキナーゼファミリーをリン酸化することが明らかになった。この結果は、DAが、神経栄養因子と同等の活性を示すことを示唆している。1. ERK1/2のシグナル伝達増強作用と運動機能回復効果本研究の目的の一つは、当該2-デセン酸誘導体の運動機能回復効果の相関性を確認し、作用メカニズムを明確にすることであった。2-デセン酸エステル誘導体の中でERK1/2リン酸化活性がほとんど認められない化合物Aと、強い作用を示す化合物Bについて、脊髄の半切断モデル後肢の運動機能回復効果を比較した。化合物Bは、運動機能の回復時期が早まり、最終的な回復レベルも高まった。しかし化合物Aは、回復開始時期がやや早まったものの、最終的な回復レベルには改善は認められなかった。また、損傷部位におけるBDNF mRNAの発現を増強する作用やNO合成酵素(iNOS) mRNAの損傷誘導性の発現を抑制する作用を示すのに対し、化合物Aにはそのような作用は認められなかった。以上より、脊髄損傷後の運動機能回復効果とニューロンのERK1/2リン酸化増強作用とはある程度相関し、作用メカニズムの本質であると考えられた。2.経口投与による運動機能回復生体内での安定性を高める目的で新規に開発したデセン酸アミド化合物(化合物B、正式名称は割愛)について、重篤な脊髄損傷である全切断モデルに経口投与することによって治療を試みた。脊髄損傷後毎日1回経口投与し、適宜、後肢の運動機能を評価した。損傷/投与開始

2週間後から運動機能の改善が認められ、3週間でBBBスコアは10点に達した(健常21点、損傷直後0点)。対照群は全く関節が動かないが、後肢で体重を支えて関節が3つとも動くなど、歩行が可能なレベルにまで回復した。経口投与による脊髄損傷治療は本研究の最終目標であり、ひとつの目標は達成された。本研究の目的は、1)経口投与で脊髄損傷を治療できるデセン酸化合物の創製である。さらにその、2)細胞内作用機構の解明、3)軸索再生の実証を行うことにある。これまでに、1)は当初の目的をほぼ達成し、安定性、薬効ともに高い候補化合物を見出した。2)細胞内作用機構は、Erk1/2のリン酸化までについては、ほぼ解明することができた。3)免疫組織化学、軸索トレーサー実験はまだ行っていないが次年度に計画している。24年度が最終年度であるため、記入しない。最終年度に行う事柄は以下の通りである。1)軸索をトレーサーで染色することにより、真に軸索再生に基づく運動機能の回復かどうかを組織学的に検証する、2)脊髄の全切断モデル動物に対して経口投与したデセン酸化合物A、Bの運動機能の回復効果を確認する、3)運動機能の回復した動物について、損傷部位を中心に免疫組織化学的に解析する。
入居者―職員の会話特性の分析に基づく高齢者施設のケアおよび居住環境評価

平成14年度は、ユニットケアに取り組む特別養護老人ホームの介護職員の視線から見た具体的な介護場面を記録・分析し、施設のケア方針、サービス種別、空間条件がどのように具体的にその質に影響するのか明らかにし、入居高齢者の視線からみた高齢者施設の居住環境評価を行うため、CCDカメラと小型マイクを介護職員に装着し、入居者-職員間のコミュニケーションを分析した。その結果、1)記録された会話にはCCD調査自体に関する会話がやや目立つというデータが示された。これは調査がある意味非日常的な介護状況を作ったという調査手法上の限界も指摘されるが、言い換えればCCD調査のような、介護職員あるいは利用者にとっていつもとは異なる要素が外部から入ってくる、つまり日常にちょっとした変化が起きると、そのことをきっかけとして自然な形で会話が盛り上がることを示しており、利用者と豊かなコミュニケーションを図るためには、施設生活に非日常的要素が入ることで実現することを示唆している。2)CCD調査に関する会話を除けば・天気やテレビの話など、やや変化に乏しいものが目立ったが、3)中には利用者あるいは介護職員自身の身に付けている衣服・装飾品などを話題にする場面も見られ、衣服や装飾品に限らず、利用者あるいは介護職員の日々の生活背景が垣間見えるような話題づくりは、お互いの信頼を高めていく上で有効なことが示唆された。以上の研究から、介護職員に求められているのは、礼儀や言葉遣いなどの介護の基本的な姿勢はもちろんであるが、もうひとつのステップとして、さらに介護職員自身の個性が必要なこと、一方、画一的なケア教育を貫くあまり、介護職員が皆一様に没個性的なパーソナリティに陥ることは、ともすれば利用者との豊かなコミュニケーション、信頼しあえる関係づくりの弊害になりかねないなど、入居者-職員間のコミュニケーション特性について考察を行った。これまでの高齢者施設のケアに関する研究の多くは、新しく導入した具体的なサービスの効果を検証する研究が中心であり、職員の入居者に対する「気配りによる声かけ」のように、心理的対応とも言える介助行為は、ケアの質を高める重要な部分でありながら、具体的な介助の形態をとらないため、これまでほとんど研究が蓄積されていない。あるいは、職員のパーソナリティの問題として片づけられた。このため、ケアの質や入居者の生活の質を測る方法の多くは、実態調査ではなく職員等へのアンケート調査に頼らざるを得なかった。そこで、今年度は、ユニットケアを取り入れた痴呆性高齢者専門の老人保健施設を対象として、入居者のADLや痴呆度が異なるユニットにおいて、入居者と職員の会話について、その記録方法と内容の分類方法を検討したうえで、入居者職員の会話特性の違いについて、一般会話、ケア会話、生活行為誘導会話の3種類に分類した上で、調査・分析を行った。その結果、ADL,痴呆度ともに軽度の入居者については1)職員間に一般会話、ケアに関連する会話がともに多いが、既往研究(鈴木ほか、2001)で指摘されているような生活行為誘導会話は必ずし多くないこと、2)入居者同士の会話も活発であること、が示された。一方、痴呆度が高く、ADLの低い入居者については、3)職員との一般会話は少なく、ケアに関連する会話が相対的に多いこと、4)必ずしも行為誘導会話が多くないこと、5)入居者間の会話が少なくなった分を、職員とのコミュニケーションで補われる、という関係が示された。特に5)の結果は、痴呆度が高くADLの低くなれば、職員とのコミュニケーションの重要性が相対的に増すことを示している点で重要と考える。また、1)4)の結果を既往研究と比較すると、痴呆性高齢者のケア方針により入居者-職員間のコミュニケーション内容が異なることが示唆される為、この点の研究が今後の課題とされる。鈴木健二他、「痴呆性高齢者グループホームにおける入居者の生活の再編過程痴呆性高齢者のケア環境のあり方に関する研究(1)」日本建築学会計画系論文集NO.546 P.1212001年8月平成14年度は、ユニットケアに取り組む特別養護老人ホームの介護職員の視線から見た具体的な介護場面を記録・分析し、施設のケア方針、サービス種別、空間条件がどのように具体的にその質に影響するのか明らかにし、入居高齢者の視線からみた高齢者施設の居住環境評価を行うため、CCDカメラと小型マイクを介護職員に装着し、入居者-職員間のコミュニケーションを分析した。以上の研究から、介護職員に求められているのは、礼儀や言葉遣いなどの介護の基本的な姿勢はもちろんであるが、もうひとつのステップとして、さらに介護職員自身の個性が必要なこと、一方、画一的なケア教育を貫く

あまり、介護職員が皆一様に没個性的なパーソナリティに陥ることは、ともすれば利用者との豊かなコミュニケーション、信頼しあえる関係づくりの弊害になりかねないなど、入居者-職員間のコミュニケーション特性について考察を行った。
階層的な規則構造を有するポリシルセスキオキサンの合成と機能化

キラル基含有オルガノトリアルコキシシランとアミノ基含有オルガノトリアルコキシシランの混合物の共重合(ゾル-ゲル反応)を行ったところ、ラダー構造やヘキサゴナル積層構造を形成することに加えて、キラルなコンフォメーションを有するポリシルセスキオキサンが得られることを見出した。また、この材料はアキラルなイオン性ポルフィリンのキラル会合体形成のためのテンプレートとしても働くことを見出した。ポリシルセスキオキサンは、Si-O結合由来の熱的・力学的・化学的安定性に加えて、有機置換基の働きにより分散性に優れるものも知られており、最近注目されている材料の1つである。しかし、三官能性モノマーであるオルガノトリアルコキシシランの重縮合によって合成されるポリシルセスキオキサンの構造を精密に制御することは難しい。本応募者はこれまでに、これら材料の合成における新しい構造制御法として、アミノ基含有オルガノトリアルコキシシランの酸触媒による重縮合(ゾル-ゲル反応)により、規則的な高次構造を有するロッド状ラダーポリシルセスキオキサンが得られることを報告してきた。本研究課題では、前述のポリシルセスキオキサンのコンフォメーションを制御することを目的に、この反応系に対してキラル成分の導入を検討した。具体的には、キラル基含有オルガノトリアルコキシシランを前述の反応系に加えて共重合を行った。その結果、得られた材料がラダー構造やヘキサゴナル積層構造を形成することに加えて、振動円二色性スペクトル測定よりキラルなコンフォメーションを有することを見出し、本材料の構造が階層的に制御されていることを明らかにした。また、この材料はアキラルなイオン性ポルフィリンの会合体形成のためのテンプレートとしても働き、合成したポリシルセスキオキサンとイオン性ポルフィリンの混合水溶液のUV-Visおよび円二色性スペクトルからは、ポルフィリン会合体の形成とこの会合体へのキラリティーの誘起が確認された。本応募者はこれまでに、これら材料の合成における新しい構造制御法として、アミノ基含有オルガノトリアルコキシシランの酸触媒による重縮合(ゾルーゲル反応)により、規則的な高次構造を有するロッド状ラダーポリシルセスキオキサンが得られることを報告してきた。また、この材料はアキラルなイオン性ポルフィリンの会合体形成のためのテンプレートとしても働き、合成したポリシルセスキオキサンとイオン性ポルフィリンの混合水溶液のuv-Visおよび円二色性スペクトルからは、ポルフィリン会合体の形成とこの会合体へのキラリティーの誘起が確認された。
リンパ球腫瘍化に関わるインターフェロン系転写因子IRF-4を標的とした創薬研究

インターフェロン制御因子-4(IRF-4)はIRFファミリーに属する転写因子であり、免疫担当細胞特異的に発現誘導され、細胞増殖に対して正の方向に働く「がん遺伝子」としての性格をもつ。申請者らはISREの配列(ISRE-SAAB1)において、IRF-1は転写を活性し、IRF-4はその活性を抑制することを見出した。そこからISRE-SAAB1の下流につないだレポーター活性の回復を指標としてのIRF-4阻害物質の探索を(財)微生物化学研究会微生物化学研究センターと連携して開始した。現在までに放線菌由来生理活性物質5616検体のスクリーニングが終了したがIRF-4を効果的に阻害する候補物質を見出せていない。一方、ISRE-SAABlの転写活性を上昇させる43検体を同定した。Lot 1894-19から既知の抗がん剤が同定されたが、その物質の誘導体十数種にもISRE-SAAB1の転写活性能を確認した。それら物質の中で、細胞を刺激後、EMSAにてISRE配列のDNA結合能の上昇を認めるものがあり、また、IRF-1遺伝子欠損マウスの脾臓細胞では殺細胞効果が抑制されるものもあった。さらにIRF-1遺伝子欠損マウスMEFでISRE-SAAB1やIFN-βプロモーター転写活性が野生型に比べ低くなることを確認したことからこれら物質の作用機序にIRF-familyの寄与が示唆され現在さらなる解析をおこなっているところである。また一方、細胞障害が無くISRE-SAAB1の転写活性を生じる検体も得られており、今後これらの解析、同定をも同時に行っていく予定である。インターフェロン制御因子-4(IRF-4)はIRFファミリーに属する転写因子であり、IRF-1が細胞増殖抑制やアポトーシスなど「がん抑制遺伝子」としての側面を有するのに対し、IRF-4は免疫担当細胞特異的に発現誘導され、細胞増殖に対して正の方向に働く「がん遺伝子」としての性格をもつ。申請者らはISREの配列(ISRE-SAAB1)においてはIRF-4とIRF-1は拮抗する関係にあることを見出し,そこからISRE-SAAB1の下流につないだレポーター活性の回復を指標としてのIRF-4阻害物質の探索を(財)微生物化学研究会微生物化学研究センターと連携して開始した。現在までに放線菌由来生理活性物質3024検体のスクリーニングが終了したがIRF-4を効果的に阻害する候補物質を見出すことはできなかった。一方、IRF-1, IRF-4の有無にかかわらずISRE-SAAB1の転写活性を上昇させる27検体を同定した。そのうちのLot 1889-29から、EtOAc抽出、silica gel chromatographyおよび、HPLCを行いISRE-SAAB1の転写活性化を指標に目的物を得た。本物質の分子式は、HRESI-MSによりC17H22N203と決定した。さらに各種NMR解析および特徴的UV吸収(252sh, 265, 341nm)より本物質を、trichostatin Aと同定した。また、Lot 1894-19から、EtOAc抽出およびHPLCを行いISRE-SAAB1の転写活性化を指標にFr.1および混合成分Fr.2を得た。活性成分Fr.1の分子式は、HRESI-MSにより決定し、さらに各種NMR解析および特徴的UV吸収(230, 258, 290, 434nm)より活性成分を同定した結果、既知の抗がん剤であることが判明した(特許出願準備中)。また、Fr.2もFr.1と同様の特徴的UV吸収を示した。
日本人における英語学習困難の評価のための検査バッテリーの開発と支援方法の構築

本研究では、英語の読み書きに困難さを持つ中学生に焦点をあて、その困難さが未学習によるものか、あるいは認知的な背景によるものかを分離するための評価課題を開発するとともに、認知的な背景による困難さであった場合の学習支援方法について検討した。学習支援方法は、ICTを視野に入れた方法についても検討した。本研究により、英語の読み書きの定着度及び学習支援方法を簡便に評価するための、英単語課題「URAWSS-English」が開発された。本年度は、半年間の研究期間であったが、英語の読み書き評価課題作成の基礎となるデータを、公立の中学校に協力していただき収集することができた。中学1年から3年までの生徒378名に協力していただいた。また、参加した生徒の中から、相談の希望のあった1.2年生の生徒14名に対し、英語の学習状況に関する聞き取りを行うことができた。相談を希望した生徒は特に読み書きや発達に関わる診断等は持っておらず全員通常学級に所属する生徒であった。これらの生徒の多くは、英語の学習につまずいており、勉強しても点数が上がらない、スペルが覚えられないといった訴えが多かった。学習方法について問うと、単語を書いて学習するという生徒が多く、たくさん書いてもなかなか覚えられないということであった。こちらからは、個々の相談内容に応じて、パソコンやタブレットを用いて音声化する方法や、電子教科書の存在、スペルを思い出せない時にすぐに調べられる方法などについて見本を見せるとともに、それらの活用について情報の提供を行った。また、追加情報として、小学校の頃から現在までの漢字の学習の様子について各生徒に質問すると、漢字も苦手であるという生徒が非常に多かった。このことから、漢字の苦手さと英語の苦手さの関連についても、次年度以降の調査内容に反映させたいと考えている。また、英語の読み書きに困難さを持つ生徒の個別の認知機能の評価も行った。ただこちらについてはまだ事例数が少ないため、次年度に増やしていきたいと考えている。更に、米国における読み書き障害の児童生徒のみを対象とした教育の方法についても資料収集を行い、次年度の学習支援方法を検討するための下準備を行った。本年度は、半年間であったにも関わらず中学校において評価課題を作成するための基礎となるデータを収集でき、また聞き取りという形で、英語学習に困り感を抱える中学生の生の声を聴くことができた。この情報は、本研究を残り1年かけてまとめていくうえで非常に貴重なデータとなると考えている。また、本研究内容の、学会での発表の準備や、論文の執筆にも取り掛かることができていることから、研究はおおむね順調に進んでいると考えている。本年度は、英語が苦手な生徒に対する学習支援方法の検討及び、昨年度収集したデータを分析し、検査バッテリーの開発に取り組んだ。英語が苦手な中学生4名を対象とし、個別に週1回60分程度の指導を行った。指導は、日常の英語学習の補助と、集中的な音韻指導を並行した。日常の英語学習の補助としては、英語のワークブックやプリントの電子化の方法、音声読み上げ機能の活用方法に関する指導を行い、日々の英語学習が1人で進めていけるよう、環境を整えた。集中的な音韻指導においては、聴覚刺激と視覚刺激を統合した課題を作成し、音韻のルールを指導した。その結果、特に「読み」の部分において、効果が見られた。ただし、「書き」の部分においては、正しい綴りが定着したのはわずかで、綴りの定着の困難さが、改めて明らかになった。本研究では、単語レベルで指導を行い、単語の「読み」においては効果が見られたが、文章となると流暢に読むということはやはり難しく、このような生徒達に対する音声読み上げやタイピングの補助の必要性が改めて示唆された。英語を母国語とする国では、英語のディスレクシアに対するICTの活用が合理的配慮として広く実施されてきている。今後は、彼らに対する学校での英語学習時の合理的配慮についても検討していく必要性が示唆された。検査バッテリーの開発については、英単語課題の分析を詳細に行い、学年ごとの得点率、音声読み上げの効果、綴りの定着度、音韻の定着度を算出し、それぞれの差異により、英語の読み書きを評価するバッテリーを開発した。実際に、分析した結果、音韻として英単語の知識は積み重ねてきているが、それを正しく綴り表出したり、また表記されているものを正しく音声化するという部分でつまずいている生徒が、通常学級にも多く在籍していることが明らかになった。本バッテリーは、近日中に一般に公開予定である。本年度収集したデータをもとに、翌年度は評価課題の作成に取り掛かる。この評価課題が完成した暁には、英語の読み書きの困難さが、未学習である状態なのか、あるいは認知特性により学習しにくい状態が生まれているのかを分離することが可能になり、現在英語学習に困り感を抱えている多くの生徒及び教師を助けるものとなると考えている。本年度は、本研究の完成に向けて追加となるデータを収集し分析していくことと、研究をまとめて発表することを並行して進めていく。28年度が最終年度であるため、記入しない。特別支援教育28年度が最終年度であるため、記入しない。
光-光二重共鳴効果を応用した超狭帯域原子フィルターの特性解析

二台の温度制御されたGaAs半導体レーザの一方を励起レーザとし、他方を信号光とする二重共鳴レーザ分光装置により、二重共鳴吸収スペクトルと誘起蛍光スペクトルを中心に、信号光の周波数特性、検出強度とガスセルの温度特性を測定した。活性媒質には、長さ5cmのガラスセルにRbを封入したものを用いた。励起レーザにはFM変調を加え、D_2線の4本の超微細構造の一つを選び、電気的帰還法により安定化し、5P_<3/2>の準位を0.3mWのパワーで飽和させ活性領域を作った。ここに、信号光として用いる第2のレーザビームを同方向または逆方向より入射させ、5P_<3/2>から5D_<3/2>および5D_<5/2>準位へ遷移させた。まず、5D←5Pの吸収スペクトルを検出したが、FM変調幅を狭くすると超微細構造の分裂が現れた。しかし、吸収スペクトルでは信号光を弱くするとS/Nが悪化したので、気体セルの横方向に散乱する6P→5S遷移の蛍光(420nm)を光電子倍増管で検出した。この時、散乱する赤色光は、青色フィルタで除いた。セル温度5060°Cで最大強度が得られ、1.3muWの検出感度が得られた。この時のQ値はFM変調幅で決まり、180MHzの変調幅では2×10^6であった。励起レーザの周波数をDELTAomega_Pだけシフトさせると励起される原子の速度成分が変わるので、中心周波数omega_Rは、omega_S^0±DELTAomega_Pとなり、通常の二重共鳴効果の理論式を適用できることが分かった。FM変調幅が200MHz以上あれば、超微細構造によるスペクトルの歪みを無視でき良好なフィルタ特性が得られる。しかし、100MHz以下では5Pと5D準位の分裂を無視できない。この微細構造は逆方向入射では23本、同方向入射では励起レーザを周波数シフトさせると26本と変化し、5P←5Sで観測されるものと大きく異なっているが、これはオフレゾナンスの時に生じるクロスレゾナンスが逆方向入射と同方向入射では互いに位置を変えるためと考えられ、現在この準位の核磁気相互作用の解析を進めている。また、活性領域にガルバノ効果を利用すると迷光の妨害を受けないので、Krの2p_4←1s_3遷移を用いてガルバノ二重共鳴効果の実験も行い、半値半幅75MHzの鋭いスペクトルを83KrとevenKrの同位体種について検出した。
細胞内外環境変化に対する1価イオン細胞膜輸送系の相互共役機構による細胞応答機序

今年度に行なった研究により下記の結果を得た。1、利尿剤感受性共輸送に及ぼす細胞内外イオンの影響:外液K^+をRb^+に置換し、高張溶液中で培養HeLa細胞のbumetanide感受性Rb^+取り込み速度(JRb)とK^+排出速度(JK)の同時測定を行った。(1)内液イオン濃度と、取込み及び排出の両輸送の関係は一致しなかった。(2)外液Rb^+,Na^+及びCl^-濃度の増加に対し、両輸送は共に飽和曲線を示すが、これらの外液イオンを除去してもK^+は細胞外に排出される。従ってJKにはこれら外液イオンに活性化される成分とこれに依存しない成分があることが示された。(3)一方、JKと内液イオン濃度の関係では、外液イオン依存性成分と非依存性成分とは一致せず、外液イオンはJKの内液イオンに対する親和性に影響することが示唆された。以上のことより、利尿剤感受性のこれらの2種の共輸送は細胞内外の1価イオンの影響を受けながら、互いに密接な関係を持つことが推察される。2、細胞膜K^+channel活性に及ぼす変動磁界の影響:等張高K^+培養液でHeLa細胞を培養すると、細胞内Ca^+濃度が上昇すると同時にCa^<2+>依存性K^+channelを介するK^+内向き輸送が活性化される。(1)この高K^+液中の細胞を変動磁界(最大1.6T)内に曝すと、このchannelの活性が阻害された。(2)(1)と同時に行なった細胞内Ca^<2+>濃度測定により、磁界内ではCa^<2+>濃度の増加も阻害された。しかし、このK^+channelは正常細胞のCa^<2+>レベルでも活性化されるため、K^+channelの阻害作用は、変動磁界に伴う誘導電流が引き起こす膜表面電荷の変化によるものと推察される。