hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
声帯粘膜波状運動の定量化に関する実験的研究

声帯振動の本質は、声帯下面から上面外側に向かって移動する粘膜隆起を波頭とする粘膜波状運動である。この粘膜波状運動を定量的に解析するために波状運動の伝播速度(Traveling wave velocity、以下TWVと略す)の測定が試みられてきた。昨年度、我々はレーザードップラー振動計(以下LDVと略す)を用いて声帯の直角方向の振動速度(以下、V vtと略す)と振幅をTWVと同時に記録することによって、TWVとV vtとの関係を検討した。その結果、TWVとV vtの間には相関係数0.900.98と非常に高い有意な相関が見られることを見いだした。従って、VvtはTWVと同様に粘膜波状運動を定量化する指標として有用であると考えられた。今年度はLDVから得られる垂直方向の振幅と光グロットグラフィーから得られる水平方向の振幅を組み合わせて振動中の声帯の動きをリサージュ波形で描画し、吹鳴条件による声帯振動の変化を解析した。声帯振動の軌跡は長軸を上外方に傾けた楕円形であり振幅は気流量の増加に伴って水平、垂直両方向にほぼ同じ割合で大きくなった。また、内筋刺激時にはイヌ喉頭では声門開大期初期には垂直方向に、声門開大期の後期には水平方向に大きくなる2段階の変化を示した。一方、ヒト喉頭では垂直方向に大きくなり水平方向では逆に小さくなった。従って、軌跡は垂直方向に引き延ばされた形に変化し、イヌ喉頭とは異なった変化を示した。ヒト声帯粘膜では振動しやすい疎な固有層が薄く、肉筋が厚い。従って、内筋収縮によって振動範囲がおもに上下方向に拡大するため軌跡が垂直方向に大きくなったものと考えられた。我々はレーザードップラー振動計(以下LDVと略す)を用いて声帯の垂直方向の振動速度(以下、Vvtと略す)と振幅をTWVと同時に記録することによって、TWVとVvtとの関係を検討した。声帯表面の2ヶ所に標識を付けこの2点間の距離と2点間を粘膜波状運動の波頭が移動する時間を測定してTWVを計算した。測定には3個のイヌ摘出喉頭を用いた。喉頭を吹鳴用の木箱に固定し加湿した空気を送気して声帯を振動させた。気流量や声帯緊張を調節することで広い周波数域で声帯振動を惹起させた。声帯を緊張させる前後でそれぞれ気流量を8141/分の間で1l毎に変化させた。3個の喉頭ともTWVとVvtとの関係は同様であった。TWVはVvtよりも大きく、両者はともに流量増加に伴って直線的に増加した。声帯緊張を増加した場合も同様であった。TWVとVvtの間には相関係数0.900.98と非常に高い有意な相関がみられた。TWVの測定には声帯粘膜になんらかの標識を置く必要があり、in vivoでは測定が困難である。一方、Vvtはレーザー光を用いるので比較的容易に測定でき、同時に垂直方向の振幅も得られるという利点がある。従って、次年度の研究ではVvtを粘膜波状運動の定量的指標として用いる。さらに光グロットグラフイーから得られる水平方向の振幅と組み合わせてリサージュ波形を描画し、吹鳴条件による声帯振動の変化を解析する。

この粘膜波状運動を定量的に解析するために波状運動の伝播速度(Traveling wave velocity、以下TWVと略す)の測定が試みられてきた。我々はレーザードップラー振動計(以下LDVと略す)を用いて声帯の垂直方向の振動速度(以下、Vvtと略す)と振幅をTWVと同時に記録することによって、TWVとVvtとの関係を検討した。その結果、TWVとVvtの間には相関係数0.900.98と非常に高い有意な相関がみられることを見いだした。今年度はLDVから得られる垂直方向の振幅と光グロットグラフィーから得られる水平方向の振幅を組み合わせて振動中の声帯の動きをリサージュ波形で描画し、吹鳴条件による声帯振動の変化を解析した。声帯振動の軌跡は長軸を上外方に傾けた楕円形であり振幅は気流量の増加に伴って水平、垂直両方向にほぼ同じ割合で大きくなった。また、内筋刺激時にはイヌ咽頭では声門開大期初期には垂直方向に、声門開大期の後期には水平方向に大きくなる2段階の変化を示した。一方、ヒト咽頭では垂直方向に大きくなり水平方向では逆に小さくなった。従って、軌跡は垂直方向に引き延ばされた形に変化し、イヌ咽頭とは異なった変化を示した。ヒト声帯粘膜では振動しやすい疎な固有層が薄く、内筋収縮によって振動範囲がおもに上下方向に拡大するため軌跡が垂直方向に大きくなったものと考えられた。
実験室及び宇宙プラズマにおける非線形現象の理論及びシミュレーションによる研究

今年度はモスクワ物理工科大学から1名(Bobrova)が富山大学を1ヵ月間訪問し、又、富山大学から3名(坂井、川田、升方)がモスクワ物理工科大学を1週間訪問して以下の共同研究を行った。1)宇宙プラズマでの磁気再結合:宇宙プラズマの多くは無衝突プラズマであり、そのような状況で磁気再結合を引き起こす機構は現在でも解明されていない。我々は、Force-freeの磁場を持つプラズマ考え、2次元の粒子コードシミュレーション及び理論解析により磁気再結合の機構を調べた。その結果、磁場のエネルギーの50%がプラズマの熱エネルギーに変換されることも明らかになり、太陽フレアへの応用も視野にいれている。2)レーザプラズマ相互作用:レーザと固体の相互作用でつくられる相対論的電子ビームの非線形力学過程を2次元及び3次元粒子コードで調べた。最初に空間的に一様にある電子ビームは、対向不安定により多くのフィラメント状のビームに分かれ、その後フィラメント状のビームが合体しより大きなビームに成長する、この過程で電子ビームのつくる磁場が散逸して、ビームが減衰することが明らかになった。我々はフィラメント状のビームが合体する過程に2つの合体過程、すなわちほぼ同じ大きさのフィラメントの合体と大きさの異なるフィラメントの合体があり、これらの合体過程で陽子が高エネルギーに加速されることを明らかにした。3)太陽コロナ加熱機構:最近NASAのTRACE科学衛星でコロナループの根元にコロナ加熱の熱源が集中して存在する事が明らかになった。我々はこの観測事実を説明する新しいコロナ加熱機構のモデルを提案した。今年度は富山大学から3名(坂井、川田、升方)が1週間モスクワ物理工科大学を、モスクワ物理工科大学から3名(Bulanov,Bobrova,Esirkepov)が富山大学を1ヶ月間相互訪問し以下の研究をおこなった。1)電子陽電子プラズマでの磁気再結合の理論とシミュレーション:無衝突電子陽電子プラズマでの磁気再結合の物理過程を明らかにするため、Force-free型の磁場構造での無衝突Tearing不安定の理論を構築して、粒子コードによるシミュレーションと比較して良い結果の一致を得た。次に非線形発展過程で磁場のエネルギーの約70%がプラズマの加熱、高エネルギー粒子加速に変換されることを明らかにし、無衝突磁気再結合の機構がこれまで提唱されていた機構と異なる新しい機構によることを発見した。これは、2次元的に発生する静電気的波動により電流を運ぶ電子が捕捉されるため、突然電流が遮断され、磁場エネルギーがプラズマの加熱に変換される。この結果は2000年3月1日にMagnetic Reconnection 2000国際会議(於東京大学)で発表された。2)レーザプラズマ相互作用時の磁場形成の理論及びシミュレーション:レーザを固体に照射したときにプラズマが発生し、強い磁場が発生することが知られている。この機構を明らかにするため、レーザで加速された電子とその電子電流を打ち消す電子流を考えるとWeibel型の不安定が発生することが理論及び2次元の粒子シミュレーションで明らかになっていた。我々は3次元粒子シミュレーションにより磁場の発生過程を調べ、これまで2次元で得られた結果よりも早く生成磁場が散逸することを明らかにした。この理由は、電流方向にできる棒状の電流がつくる磁場の再結合が生じ磁場の散逸が促進される。今年度はモスクワ物理工科大学から3名(Bulanov,Bobrova,Naumova)が富山大学を2ヵ月間訪問して以下の共同研究を行った。我々は、Force-freeの磁場を持つプラズマ考え、2次元の粒子コードシミュレーションにより磁気再結合の機構を調べた。その結果、これまで見落とされていた新しい磁気再結合をひきおこす物理過程を発見した。それは、Buneman不安定により生じる

2次元的電場が電流電子を補足して電気抵抗を起こし、磁気再結合を促進することが明らかになった。また、磁場のエネルギーの90%がプラズマの熱エネルギーに変換されることも明らかになり、太陽フレアへの応用も視野にいれている。2)レーザプラズマ相互作用:レーザと固体の相互作用でつくられる相対論的電子ビームの非線形力学過程を2次元及び3次元粒子コードで調べた。最初に空間的に一様にある電子ビームは、対向不安定により多くのフィラメント状のビームに分かれ、その後フィラメント状のビームが合体しより大きなビームに成長する。この過程で電子ビームのつくる磁場が散逸して、ビームが減衰することが明らかになった。3次元効果の特徴は、磁場の散逸が3次元的磁気再結合を伴い、極めて速い時間で電子ビームが減衰することが明らかになった。3)レーザと電子陽電子プラズマの相互作用:レーザと電子陽電子プラズマの相互作用が粒子コードシミュレーションで調べられ、レーザビームの自己収縮およびそれに伴うプラズマ粒子の加速が明らかになった。今年度はモスクワ物理工科大学から1名(Bobrova)が富山大学を1ヵ月間訪問し、又、富山大学から3名(坂井、川田、升方)がモスクワ物理工科大学を1週間訪問して以下の共同研究を行った。1)宇宙プラズマでの磁気再結合:宇宙プラズマの多くは無衝突プラズマであり、そのような状況で磁気再結合を引き起こす機構は現在でも解明されていない。我々は、Force-freeの磁場を持つプラズマ考え、2次元の粒子コードシミュレーション及び理論解析により磁気再結合の機構を調べた。その結果磁場のエネルギーの50%がプラズマの熱エネルギーに変換されることも明らかになり、太陽フレアヘの応用も視野にいれている。我々はフィラメント状のビームが合体する過程に2つの合体過程、すなわちほぼ同じ大きさのフィラメントの合体と大きさの異なるフィラメントの合体があり、これらの合体過程で陽子が高エネルギーに加速されることを明らかにした。3)太陽コロナ加熱機構:最近NASAのTRACE科学衛星でコロナループの根元にコロナ加熱の熱源が集中して存在する事が明らかになった。我々はこの観測事実を説明する新しいコロナ加熱機構のモデルを提案した。
消化管粘膜における免疫応答からみた低出生体重児に対するプロバイオティクスの有用性

まずL.reuteri、L. brevis、B.breveの菌数の調整を行い、増殖培養を行った。続いて、Caco-2細胞の培養条件を検討し、単層細胞培養を膜の抵抗値を測定することにより確認した。次に新生仔マウスを母乳群と生後3日より人工哺育する群とに分け、免疫担当細胞の数や細胞組成の変化について解析したところ、人工乳群において自然免疫細胞やCD8+T細胞が母乳群に比較して腸管のみならず全身性に活性化された。さらに生後1日からの低出生体重児へのB.breve(M-16V)投与により1か月と1歳のサンプルからM-16Vと考えられる細菌が検出され、生後早期に投与したB.breveの定着が確認された。まず使用する3種のプロバイオティクスであるLactobacillusreuteri、Lactobacillus brevis、Bifidobacterium breveの菌数の調整を行った。L.reuteri、L.brevis(KB290)、B.breve(M-16V)をそれぞれの状態から統一液体保存菌株を作製し、-80°Cで冷凍保存した。次にL.reuteriおよびL.brevisは好気的に、B.breveは嫌気的にMRS培地に培養条件を確認後増殖培養を行った。今後これらの3種のプロバイオティクスを使用し、細胞培養実験ならびに動物実験を行っていく。プロバイオティクスの消化管粘膜における免疫応答を検討するにあたり、マウスの消化管免疫応答の発達過程を知ることを目的に、母乳飼育群と人工飼育群に分け、生後早期の消化管粘膜における免疫細胞の変化を観察した。母乳飼育群(n=5)と人工飼育群(n=7)間で体重や胸腺重量に差を認めず、人工飼育群では、CD45+免疫細胞、γσT細胞、NK T細胞、樹状細胞、マクロファージ、CD8+T細胞、CD4+T細胞などが母乳飼育群に比して増加していた。この結果より、人工乳飼育では、消化管粘膜の自然免疫応答はより活性化されており、T細胞の分化にもより強く影響を及ぼしている可能性が示唆された。低出生体重児へのプロバイオティクス投与の有用性につき検討するにあたり、生後早期のB.breve投与のその後の腸内細菌叢への影響を調査した。日齢0からのB.breve(M-16V)投与により、9例中5例の極低出生体重児でNICU退院一年後もM-16Vの排泄を認め、投与したプロバイオティクスの定着が確認された。本結果はこれまでに報告のない新しい知見と考えられた。今回研究で使用する3種のプロバイオティクスであるLactobacillusreuteri、Lactobacillus brevis、Bifidobacterium breveの菌数の調整を行い、次にL.reuteriおよびL.brevisは好気的に、B.breveは嫌気的にMRS培地に培養条件を確認後増殖培養を行った。続いて、Caco-2細胞の培養条件を検討し、ストック保存と安定増殖培養を確認した。さらにCaco-2単層細胞培養を膜の抵抗値を測定することにより確認した。新生仔マウスを母乳群(Dam群)と日齢2より人工哺育する群(AR-2群)に分けた。両群マウスとも日齢14に解剖し、胸腺、脾臓、小腸における免疫担当細胞の数や細胞組成の変化についてフローサイトメトリーを用いて解析し、比較を行った。自然免疫細胞についてはAR-2群においてγσT細胞、iNK細胞、NK細胞、樹状細胞、マクロファージ、顆粒球が脾臓、腸管でいずれも増加を示した。獲得免疫細胞については、脾臓、腸管、供せ念でCD8+T細胞がAR-2群において増加した。人工乳群において自然免疫細胞やCD8+T細胞が母乳群に比較して腸管のみならず全身性に活性化されていた。日齢0からのB.breve(M-16V)投与により1か月と1歳のサンプルからM-16Vと思われる産物が検出されたが、一部のサンプルから菌株を分離したところ、1か月糞便サンプルからのみM-16Vと思われる株が確認された。また、特異的プライマーの再設計により、現行プライマーの特異性には問題が在ることが示されたため、新規プライマーにより再検討を行った結果、1か月のサンプルからのみM-16Vと思われるPCR産物が検出された。3種類のプロバイオティクスを企業から入手するのに時間がかかったため、L.reuteri、L.brevis、およびB.breveを実験に使用するための培養および調整が遅れた。さらにCaco-2細胞の単層細胞培養ならびに抵抗値の測定に時間がかかったため、続いて行う予定であった細胞培養ならびに動物実験の開始に遅れが出たため当初の計画より進行が遅れることとなった。他方、その間当初の計画にはなかったが、本研究の遂行には重要と考えられるマウスの人工飼育実験が行えたこと、ならびに投与B.breve同定のための新生児特異プライマーの作成が行われたことは意義のあることと思われた。

両群マウスとも日齢14に解剖し、胸腺、脾臓、小腸における免疫担当細胞の数や細胞組成の変化についてフローサイトメトリーを用いて解析し、比較を行った。自然免疫細胞についてはAR-2群においてγσT細胞、iNK細胞、NK細胞、樹状細胞、マクロファージ、顆粒球が脾臓、腸管でいずれも増加を示した。獲得免疫細胞については、脾臓、腸管、供せ念でCD8+T細胞がAR-2群において増加した。人工乳群において自然免疫細胞やCD8+T細胞が母乳群に比較して腸管のみならず全身性に活性化されていた。低出生体重児へのプロバイオティクス投与の有用性につき検討するにあたり、生後早期のB.breve投与のその後の腸内細菌叢への影響を調査した。日齢0からのB.breve(M-16V)投与により1か月と1歳のサンプルからM-16Vと思われる産物が検出されたが、一部のサンプルから菌株を分離したところ、1か月糞便サンプルからのみM-16Vと思われる株が確認された。また、特異的プライマーの再設計により、現行プライマーの特異性には問題が在ることが示されたため、新規プライマーにより再検討を行った結果、1か月のサンプルからのみM-16Vと思われるPCR産物が検出された。まずプロバイオティクスの入手が遅れたため、L.reuteri、L.brevis、およびB.breveを実験に使用するための培養および調整が遅れた。さらにCaco-2細胞の単層細胞培養ならびに抵抗値の測定に時間がかかり、細胞培養ならびに動物実験の開始に遅れが出たため当初の計画より進行が遅れることとなった。新生仔マウスを母乳群(Dam群)と日齢2より人工哺育する群(AR-2群)に分けた。まずL.reuteri、L. brevis、B.breveの菌数の調整を行い、増殖培養を行った。続いて、Caco-2細胞の培養条件を検討し、単層細胞培養を膜の抵抗値を測定することにより確認した。次に新生仔マウスを母乳群と生後3日より人工哺育する群とに分け、免疫担当細胞の数や細胞組成の変化について解析したところ、人工乳群において自然免疫細胞やCD8+T細胞が母乳群に比較して腸管のみならず全身性に活性化された。
複数企業を対象としたサプライチェーンの在庫管理手法の開発

本研究は,サプライチェーン計画問題に対する最適化手法の方法論と種々の変動に対する複数企業間のサプライチェーンにおける在庫管理手法に関する研究であり,研究実績および得られた知見は以下に示すとおりである.1.複数企業を対象とした不確実需要に対するサプライチェーンの在庫管理手法を開発した.期が進行するとともに需要量が次第に確実になるという需要の不確実性を想定したサプライチェーン計画問題をモデル化し,需要の平均値と分散のみの惰報を用いて,次期の原料調達量と製品在庫量を決定する在庫管理方法を開発した.開発した手法により,複数企業間の生産計画問題を対象として,総利益と鞭効果の影響について検討した.その結果,鞭効果減少のための在庫管理方策は必ずしも,総利益の最大化に一致しないことを数値実験により明らかにした.2.複数企業を対象としたサプライチェーン計画問題に対する分散型最適化手法を開発した.開発した手法は全ての企業間でコスト情報等を共有することなく,局所情報のみを利用して全体の準最適解が得られることを示した.3.複数最適化モデルの同時最適化手法として,ラグランジュ緩和とカット生成を併用する分解法にもとづく最適化アルゴリズムを提案した.提案したアルゴリズムを生産スケジューリングと複数台搬送車の同時スケジューリング問題に適用し,その有効性を確認した.原料ヤードにおけるベルトコンベア搬送システムの計画問題に対しては,拡張ラグランジュ法を用いた分解法のアルゴリズムを提案し,需要変動に対する最適在庫量と搬送経路計画の同時最適化の有効性を確認した.本研究では,複数企業間のサプライチェーン計画問題に対する在庫管理手法の開発を目的として,以下に示す研究を行った.1)単一工程生産システムを対象とした不確実需要に対するサプライチェーンの在庫管理手法を開発した.期が進行するとともに需要量が次第に確実になるという需要の不確実性を想定したサプライチェーン計画問題をモデル化し,需要の平均値と分散のみの情報を用いて,次期の原料調達量と製品在庫量を決定する在庫管理方法を開発した.開発した手法により,生産計画問題を対象として,機会損失コストと在庫コストのトレードオフ関係を最適に調整することができること,および原料調達量と目標安全在庫量の決定パラメータの近似最適値は,正規分布を仮定した需要に対して,在庫理論における不確定需要に対する静態的決定法によって導出できることを示した.また,アーラン分布に従う受注による納期間隔を想定した生産計画・スケジューリング問題に対して,在庫コストと納期遅れのフィードバックによって,需要変動に対して柔軟に対応できることを示した.2)生産計画調整問題を混合整数計画問題としてモデル化し,拡張ラグランジュ分解調整法の原理を利用した分散型最適化手法を開発した.開発した手法をアルミ工場における生産計画とスケジューリング問題,石油コンビナートにおける複数企業間の取引計画問題,および複数企業間の中期計画問題へ応用し,提案手法により最適性に優れた解が得られることを確認した.今後は在庫管理手法が複数企業問における在庫変動や解の最適性に与える影響について検討する予定である.本研究は,サプライチェーン計画問題に対する最適化手法の方法論と種々の変動に対する複数企業間のサプライチェーンにおける在庫管理手法に関する研究であり,研究実績および得られた知見は以下に示すとおりである.1.複数企業を対象とした不確実需要に対するサプライチェーンの在庫管理手法を開発した.期が進行するとともに需要量が次第に確実になるという需要の不確実性を想定したサプライチェーン計画問題をモデル化し,需要の平均値と分散のみの惰報を用いて,次期の原料調達量と製品在庫量を決定する在庫管理方法を開発した.開発した手法により,複数企業間の生産計画問題を対象として,総利益と鞭効果の影響について検討した.その結果,鞭効果減少のための在庫管理方策は必ずしも,総利益の最大化に一致しないことを数値実験により明らかにした.2.複数企業を対象としたサプライチェーン計画問題に対する分散型最適化手法を開発した.開発した手法は全ての企業間でコスト情報等を共有することなく,局所情報のみを利用して全体の準最適解が得られることを示した.3.複数最適化モデルの同時最適化手法として,ラグランジュ緩和とカット生成を併用する分解法にもとづく最適化アルゴリズムを提案した.提案したアルゴリズムを生産スケジューリングと複数台搬送車の同時スケジューリング問題に適用し,その有効性を確認した.原料ヤードにおけるベルトコンベア搬送システムの計画問題に対しては,拡張ラグランジュ法を用いた分解法のアルゴリズムを提案し,需要変動に対する最適在庫量と搬送経路計画の同時最適化の有効性を確認した.
生体膜脂肪酸鎖の細胞生物学的機能

生体膜を構成するリン脂質には多様な構造を持つ脂肪酸鎖が結合し、生体膜の疎水的環境を形成しているが、その細胞生物学的意義はほとんど解明されていなかった。我々は生体膜リン脂質の脂肪酸鎖を規定する分子群を基軸に研究をおこなった結果、エンドサイトーシス、細胞接着、ミトコンドリア融合などの細胞機能に特定のリン脂質分子種が重要であることが明らかとなった。また特定のリン脂質脂肪酸鎖により活性や安定性、局在が変化するタンパク質群を同定した。さらに生体膜脂肪酸鎖のバランスを維持する分子機構を解明し、生体膜脂肪鎖鎖の異常が過剰な炎症応答や脂肪肝を引き起こすことを明らかにした。申請者は、高度不飽和脂肪酸(PUFA)が欠乏した線虫(脂肪酸不飽和化酵素が欠損)では、エンドサイトーシス異常、上皮系細胞の接着異常等、様々な異常を来すことを見出している。また、脂肪酸合成系の遺伝子の多重変異体を用いることにより、培地に加えた脂肪酸がそれ以上代謝されないPUFA欠乏線虫も確立している。そこで、これらのPUFA欠乏による異常がどのPUFAで回復できるか(言い換えれば、どのPUFAを必要とするのか)確立したPUFA欠乏線虫で調べたところ、エンドサイトーシス異常は様々なPUFA(18:3n-3、20:3n-6、20:4n-3、20:4n-6、20:5n-3)で回復がみられたが、上皮系細胞の接着異常は、20:4n-6と20:5n-3でのみ回復がみられた。興味深いことに、上皮系細胞の異常は20:4n-3では全く回復せず、脂肪酸鎖長や不飽和度のみならず、不飽和結合の位置が重要であることが示唆された。すなわち、カルボキシ末端から5番目の位置(Δ5)に二重結合があることが、上皮系細胞の異常の回復に重要であると考えられた。また、PUFA欠乏線虫でみられる表現型がどのリン脂質に含まれるPUFAの欠乏により引き起こされているか、ホスファチジルコリン(PC)に選択的にPUFAを導入するLPCAT3(mboa-6)、ホスファチジルイノシトール(PI)に特異的にPUFAを導入するLPIAT(mboa-7)の欠損変異体を用いて調べた。その結果、エンドサイトーシス異常はPC中のPUFA欠乏により、上皮系細胞の接着異常はPI中のPUFA欠乏により引き起こされていることが明らかとなった。これらの結果は、リン脂質種特異的な脂肪酸鎖の生物学的意義を初めて示したものである。線虫において網羅的RNAiを行い、PUFAを欠乏する変異体においてのみフェノタイプが現れる遺伝子(PUFA感受性遺伝子)を数十遺伝子同定している。このうち、PURE-1と名付けた膜タンパク質が、正常状態では小胞体膜に局在するが、PUFA欠乏状態では酸性オルガネラ内に局在変化することを見出している。さらに、近年、酵母におけるPURE-1の相同分子が6分子からなる複合体を形成していることが報告され、「PUFA感受性遺伝子」として同定した別の分子PURE-2がこの複合体の構成分子であることも分かった。そこで、この複合体を構成する分子群について、生理機能ならびに細胞内局在に着目して解析を行った。まず、これらの分子群の欠損変異体を樹立し、表現型を観察したところ、いずれも卵母細胞の形成に異常が生じ、完全に不妊となった。また、PURE-1の変異体においては、coelomocyteと呼ばれるスカベンジャー細胞において、Fluid-phaseエンドサイトーシスに異常が生じることを見出していたが、その他の分子の変異体においても同様の異常が観察された。次に、これらの分子の細胞内局在を解析したところ、正常状態ではいずれも小胞体膜に局在していたが、PUFA欠乏状態においてはリソソーム内腔へと局在変化した。オートファジーの抑制によってこの局在変化が部分的に回復したことから、PUFA欠乏時のこれらの分子の局在変化にオートファジー経路が関与していることが示唆された。膜リン脂質の脂肪酸組成は食餌由来の脂肪酸などにより絶えず影響を受けているが、生体はそれに応答して、細胞内の脂肪酸代謝系を調節し、脂肪酸組成の恒常性を維持していると考えられる。しかし、現在まで、このような膜脂肪酸環境変化に対する生体応答については分子レベルでほとんど明らかになっていない。申請者は、線虫のPUFA合成変異体におけるマイクロアレイを行い、膜リン脂質中のPUFAが減少すると発現上昇する遺伝子群を同定している。その中の2つ(UPD1,UPD2と命名)の遺伝子のプロモーター領域とGFPを融合させたコンストラクトを持つ線虫は、PUFAが減少するとGFP蛍光を発する。すなわち、膜リン脂質中のPUFAが欠乏すると何らかのシグナルが流れUPD遺伝子を発現上昇させている。この系を利用し、GFP蛍光の消失を指標に網羅的RNAiスクリーニングを行った結果、膜中のPUFAが欠乏すると、「新規MAPキナーゼ経路」、および「小胞体ストレス応答経路」が活性化されていることを見出している。MAPキナーゼ経路については、MAPキナーゼの恒常活性体を発現させたトランスジェニック線虫を確立し、それを利用したMAPキナーゼの上流因子の探索を行った。その結果、約30の上流遺伝子を同定した。さらにMAPキナーゼ経路が熱ストレスによっても活性化することを見いだし、熱ストレス耐性に関与することを見いだした。小胞体ストレス応答経路に関しては、異常タンパク質の蓄積で起こる小胞体ストレス応答とはことなり、転写因子XBP1を介さないIRE1依存的な遺伝子発現誘導がPUFA欠乏下では顕著にみられることを見いだした。

またこのIRE1依存的/XBP1非依存的経路が飽和脂肪酸代謝を制御し、PUFA欠乏時の線虫の生存に必要であるを明らかにした。これまでの解析からUPRセンサータンパク質IRE1は、膜リン脂質脂肪酸鎖の恒常性に関わることが明らかとなってきた。本年度では、IRE1の下流で起こるXBP1非依存的なシグナル経路の解析を行った。申請者はまず線虫を用いたマイクロアレイ解析を行い、ツニカマイシン処理によりIRE1依存的に発現上昇する遺伝子の90%はXBP1依存的だが、PUFA合成変異体ではIRE1依存的に発現上昇する遺伝子の30%はXBP1非依存的であることを見出した。これらの遺伝子について定量PCRで検証したところ、31個の遺伝子を同定した。これらのうち、発現抑制によりPUFA合成変異体の表現型を増強する遺伝子も見出しており、恒常性維持におけるXBP1非依存的なシグナル経路の重要性が示唆された。一方、哺乳動物では飽和脂肪酸添加によりIRE1が活性化することが知られている。哺乳動物細胞ではIRE1の発現抑制により飽和脂肪酸毒性が増強した一方、XBP1の発現抑制では増強しなかった。そこでマイクロアレイ解析を行い、飽和脂肪酸によってIRE1依存的、XBP1非依存的に発現上昇する遺伝子としてある種のキナーゼ複合体のサブユニットを同定した。また飽和脂肪酸によってIRE1依存的にこのキナーゼ複合体が活性化することを見出した。詳細な解析の結果、IRE1はキナーゼ複合体を介して、飽和脂肪酸の不飽和化を促進し、細胞内脂質の恒常性を維持していることが示唆された。膜リン脂質脂肪酸鎖の恒常性に関わるシグナル経路とその生物学的重要性を明らかにすることができた。この結果から、膜リン脂質脂肪酸鎖の恒常性維持機構の解明がさらに進むことが期待され、本研究はおおむね順調に進展していると判断した。ホスファチジルイノシトール(PI)にアラキドン酸を導入するLPIAT1の欠損マウスは脂肪肝を示す。肝臓系の培養細胞においてLPIAT1の発現抑制をしたところ、欠損マウスと同様に中性脂質の蓄積がみられた。詳細に調べたところ、中性脂質の合成やリポタンパク質分泌には異常はなく、中性脂質(脂肪滴)の分解が遅延することがわかった。これらの結果から、PI中のアラキドン酸が肝臓における脂肪滴の分解に重要であり、PI脂肪酸鎖の異常は、脂肪肝を引き起こすことが示唆された。培養細胞に高度不飽和脂肪酸(PUFA)を負荷すると、PUFAがリン脂質に取り込まれるとともに、飽和脂肪酸のみを持つリン脂質(DPPC)が産生されることを見出している。脂質代謝関連遺伝子をRNAiスクリーニングした結果、LPCAT1がPUFA負荷時のDPPC産生に関わることを見出した。またLPCAT1の発現抑制によりDPPC産生を抑えると、PUFA負荷時に小胞体ストレス応答誘導性の細胞死が起こることがわかった。さらにマウスの網膜においてもPUFA含有リン脂質の増加とともにDPPCが増加していることがわかり、LPCAT1欠損マウスの網膜ではDPPC産生が顕著に抑制され、視細胞の脱落がみられた。
複雑な3次元曲面形状のパターン分類・観察のための画像生成に関する研究

部品の製品検査,医学における人体3次元情報の認識など,3次元の濃淡・形状情報から対象の良・不良を判断するための基盤技術に関する研究が盛んにおこなわれている.通常3次元の濃淡・形状情報は直接見ることが出来ず,投影や等値面構成などの手段を経て可視化され,さらにこれらの情報を効率よく見る(診る)必要がある.このような可視化プロセスを適切におこなうための"可視化情報処理"は益々重要な技術となる.そこで本研究では,主に3次元濃淡画像の構造解析と効率的な可視化について検討した.曲面のミクロ的な構造特徴だけでなく曲面の表面凹凸パターンをマクロ的に評価するための手法を開発し,さらにそれを可視化する最適な方法を検討した.3次元濃淡画像における形状分類3次元濃淡画像における形状分類として,腹部X線CT画像からの胃壁面の形状をマクロ的に測る特徴量の解析を進めた.胃がんに特有な線状陰影の集中パターンの定量化を進め,その結果を解説としてまとめた.また,肝臓精密診断用の腹部X線CT画像からの肝細胞がん検出に,時系列画像の濃度変化特徴と濃度曲面の固有値解析を取り入れ,病変に特有の形状を評価することにより検出精度の向上を図った.その他自然現象や人体の動作シミュレーションのための可視化方法の検討を進めた.仮想化内視鏡診断は,医用画像の多様化・適用範囲の増加にともない,今後益々柔軟な可視化方法が要求されてくる.本研究の成果をうけて,認識に基づく仮想化内視鏡診断方法の拡張が更に期待される.部品の製品検査,医学における人体3次元情報の認識など,3次元の濃淡・形状情報から対象の良・不良を判断するための基盤技術に関する研究が盛んにおこなわれている.通常3次元の濃淡・形状情報は直接見ることが出来ず,投影や等値面構成などの手段を経て可視化され,さらにこれらの情報を効率よく見る(診る)必要がある.このような可視化プロセスを適切におこなうための"可視化情報処理"は益々重要な技術となる.そこで本研究では,主に3次元濃淡画像の構造解析と効率的な可視化について検討した.曲面のミクロ的な構造特徴だけでなく曲面の表面凹凸パターンをマクロ的に評価するための手法を開発し,さらにそれを可視化する最適な方法を検討した.3次元濃淡画像における形状分類3次元濃淡画像における形状分類として,腹部X線CT画像からの胃壁面の形状をマクロ的に測る特徴量の解析を進めた.胃がんに特有な線状陰影の集中パターンの定量化を進め,その結果を解説としてまとめた.また,肝臓精密診断用の腹部X線CT画像からの肝細胞がん検出に,時系列画像の濃度変化特徴と濃度曲面の固有値解析を取り入れ,病変に特有の形状を評価することにより検出精度の向上を図った.その他自然現象や人体の動作シミュレーションのための可視化方法の検討を進めた.仮想化内視鏡診断は,医用画像の多様化・適用範囲の増加にともない,今後益々柔軟な可視化方法が要求されてくる.本研究の成果をうけて,認識に基づく仮想化内視鏡診断方法の拡張が更に期待される.本研究は、3次元濃淡画像のから得られる情報を人や計算機が認識しやすくするための画像生成に関する技術開発を行っている。人は通常3次元の濃淡・形状情報は直接見ることが出来ず、投影や等値面構成など、情報をなるべく保ったまま次元縮退をする手段を経て可視化され、さらにこれらの情報を効率よく見る(診る)必要がある。このような可視化プロセスを適切におこなうための"可視化情報処理"は重要な基盤技術である。本年度は、3次元曲面上に存在する線状パターンがある点に集中しているか否かを判定するための特徴量の性質解明と実装上の改良を行った。さらに、3次元濃淡情報を可視化したときに問題となる、図形認識のためのランドマークに関する検討を行った。具体的には、胃内部を仮想化内視鏡で観察する際に、胃内壁の情報とともにストマップと呼ばれる画像診断のための解剖学的区分を表示することにより、観察者が3次元位置を把握するための補助になりうることを示した。さらに、このストマップの情報を基にした、仮想化内視鏡ナビゲーション診断支援に関するいくつかの可視化技術を開発した。また、表示システムとして考えるモーションCAVEを扱うためにその操作ノウハウを蓄積した。具体的には、モーションベースをクライアントとして外部から操作可能なインタフェースを構築した。また、人間の動作を解析することを目的として、骨格と筋肉の相互作用を考慮に入れた人体物理モデルに改良を加えた。これにより、体の内部状態が、動作に伴って変形し、かつ物理的な整合性を維持できることを確認した。本研究は、3次元濃淡画像から得られる情報を人や計算機が認識しやすくするための画像生成に関する技術開発を行っている。本年度は、3次元の筒状形状を内部から見る際のユーザガイドに関する検討を行った.具体的には,腹部X線CT像をもとに計算機による胃壁面の自動区分を行う手法および,区分情報のナビゲーション診断への応用について検討した.

仮想化内視鏡システム(Virtualized Endoscope System : VES)による診断では,複雑な臓器を効率よく観察することが,観察者の負担を軽減する上で重要である.そこで,胃内壁の解剖学的部位の定義として用いられる胃の区分(ストマップ)を用いて,3次元腹部X線CT像から抽出した胃壁面領域を区分し,その情報を用いたナビゲーション診断支援として,(1)VESでの観察時の胃の部位情報の提示,(2)VESでの観察経路の自動生成,(3)VESでの観察経路を評価する手法を開発した.CT画像から抽出した胃内壁面に対してストマップに基づく区分を実現し,10症例に適用した.区分結果は部分的には問題があるものの,ナビゲーション診断支援には利用可能という評価を医師より得た.得られた区分情報を利用し,情報の増強と効率的な提示という観点でナビゲーション診断支援を試み,診断中の部位名称を表示する機能に関しては,ナビゲーション診断中の解剖学的な位置情報や観察した領域の空間的な把握が容易になったとの評価を得ることができ,その有効性を確認することができた.また,CADシステムの結果をあわせて観察するための経路生成を検討した.通常3次元の濃淡・形状情報は直接見ることが出来ず,投影や等値面構成などの手段を経て可視化され,さらにこれらの情報を効率よく見る(診る)必要がある.このような可視化プロセスを適切におこなうための"可視化情報処理"は益々重要な技術となる.そこで本研究では,主に3次元濃淡画像の構造解析と効率的な可視化について検討した.・3次元濃淡画像における形状分類3次元濃淡画像における形状分類として,腹部X線CT画像からの胃壁面の形状をマクロ的に測る特徴量の解析を進めた.胃がんに特有な線状陰影の集中パターンの定量化を進め,その結果を解説としてまとめた.また,肝臓精密診断用の腹部X線CT画像からの肝細胞がん検出に,時系列画像の濃度変化特徴と濃度曲面の固有値解析を取り入れ,病変に特有の形状を評価することにより検出精度の向上を図った.・可視化ナビゲーション胃内壁面のように,筒状の形状である程度の大きさがある臓器を効率よく観察することは,診断の効率化につながる.仮想的に切断・展開して新しい画像を提供する方法や,診断すべき領域への自動ナビゲーションなどの報告がある.本研究では胃部X線CT像を対象に,仮想化内視鏡診断中の医師のために,現在見えている領域の解剖学的な情報を提示する方法を開発した.胃内壁領域の解剖学的な区分としては,胃X線二重造影像診断のガイドラインとして提案されている"ストマップ"を用い,それに従い胃内壁の領域の区分けをおこなった.医師により良好な評価を得ることができた.また,この区分けを利用することにより,ナビゲーション診断により診られた領域の定最的な評価ができること,さらに,自動ナビゲーションの経路生成に有効であることが示された.
ハンセン病療養所に関する実証的研究

今年度の研究目的は、療養所入所者の意味世界をさらに追究することにあった。また、同時にその方法論的検討も必要としていた。これらの目的にそって、国立療養所菊池恵楓園および国立療養所宮古南静園にて、入所者にインタビューを重ねた。後者におけるインタビューでは、沖縄独特の、ハンセン病に対する比較的寛容な態度と米軍基地の存在が入所者の人生に関係していることがわかり、本土の他の療養所と異なることを確認した。どちらもハンセン病者にとって、比較的プラスに働いていたようである。ただし、戦時下における「祖国浄化」をねらったハンセン病政策は本土と変わらぬ様相を呈しており、強制収容された古老の回想は憤怒に満ちていた。また、過去(昭和4050年代)の自治会機関誌の内容分析を、菊池恵楓園の『菊池野』を対象におこなった。この時期、療養所自治会は、予防法闘争も落ち着き、実質的な福祉の向上をめざして活動していた。入所者の心情は、文芸(短歌)にあらわれており、数年間のスパンでながめると、それぞれの作者のライフヒストリーが短歌にあらわれてくることが明らかとなった。さらに、方法論的検討は、昨年度から検討していたアーサー・クラインマン等の「病いの経験」研究を土台にしておこない、第71回日本ハンセン病学会(宮古南静園)にて「ハンセン病という『病いの経験』」と題して口頭発表した。ハンセン病者の人生とその語りを治療者および聴き手に引き付けて解釈する場合には、病者をとりまく文化・社会的経験と個人的経験との相互関係を考慮に入れながら、病者に関するミニ・エスノグラフィを再構築し、検討することが必要であることを指摘した。それは同時に病者自身をエンパワーする過程でもあった。最後に、この3年間の成果にもとづいて報告書を作成した。今年度の本研究の目的は、ハンセン病療養所に暮らす入所者個人のライフヒストリーを収集しその分析をすること、さらにその分析から彼らにとって「家族」がどのような意味を持つのかを明らかにすることにあった。まず、入所者個人のライフヒストリーの収集に関しては、おもに国立療養所菊池恵楓園における聞き取り調査によって、ある程度達成できた。発表論文に明らかなように、そのなかのひとりの男性のライフヒストリーは従来のハンセン病療養所入所者のイメージ-強制収容され、断種され、「家族」と引き裂かれる等々-とは一線を画する一種のサクセスストーリーを描き出していたが、その人生の軌跡は、療養所外の生活におけるハンセン病歴を隠す印象操作の実践、病いの苦しみや療養所に暮らすことの意味についての述懐等の深い告白によって、まぎれもなくハンセン病を病んだ人間のありようを提示していた。また、それからハンセン病療養所入所者の類型分けに寄与する諸特性が明らかになった。次に、聞き取り調査の結果にハンセン病療養所入所者の「語り」(ラジオ・TV番組や療養所機関誌のインタビュー記事)、手記等の資料を加えて、療養所入所者にとって「家族」とはなにかという問題を考察した。その結果、彼らの多くは療養所入所という事実によって「在郷家族」から引き裂かれ、同時に療養所内における優生手術の実施によって生殖家族をもつことはできず、二重の意味で家族を剥奪されていることがわかった。彼らにとっての「家族」とは、イエとしての在郷家族であり、家郷世界であった。今年度の研究目的の第一であった、入所者のライフヒストリーや「家族」意識をさらに深化するためのデータ収集は、国立療養所菊池恵楓園において行うことができた。とくに、戦前期を生き抜いた女性のライフヒストリー収集は、発症率において性比が顕著であった(男性:女性=23:

1)時代を生きた「女性」の証言であり、かつ、戦時下の療養所生活を日常生活のレベルでとらえたものである点で、貴重なものである。また、組織上かつ歴史的な検討は、下記の発表論文「アサイラムにおける『結婚』と『家族的世帯』の形成」において一部おこなっている。この結果、療養所という組織を考察する上で欠かせないものとして、かつて存在した「患者看護制度」の詳細な検討があげられることが明らかとなった。かつての療養所が「強制収容」施設としてどのように機能していたのかは、この点において明らかになると考えられる。現行の看護・介護体制とともに、今後ともさらに検討を進めて行かねばならない事項である。医療社会学的な視点の導入は、入所者たちのライフヒストリーを「病いの経験」として読み直すことによって可能であることがわかった。たとえば、A.クラインマンやJ.ハーマンらの精神医学的知見の援用で、診療所入所者のあらたな側面が明らかになると思われる。研究目的の第四としてあげていた、菊池恵楓園と多磨全生園以外の他園の訪問については、香川県にある大島青松園を訪問することができた。菊池・多磨という比較的市街地に近い療養所との違いを、離島に位置する青松園にみることができた。今年度の研究目的は、療養所入所者の意味世界をさらに追究することにあった。また、同時にその方法論的検討も必要としていた。これらの目的にそって、国立療養所菊池恵楓園および国立療養所宮古南静園にて、入所者にインタビューを重ねた。後者におけるインタビューでは、沖縄独特の、ハンセン病に対する比較的寛容な態度と米軍基地の存在が入所者の人生に関係していることがわかり、本土の他の療養所と異なることを確認した。どちらもハンセン病者にとって、比較的プラスに働いていたようである。ただし、戦時下における「祖国浄化」をねらったハンセン病政策は本土と変わらぬ様相を呈しており、強制収容された古老の回想は憤怒に満ちていた。また、過去(昭和4050年代)の自治会機関誌の内容分析を、菊池恵楓園の『菊池野』を対象におこなった。この時期、療養所自治会は、予防法闘争も落ち着きき実質的な福祉の向上をめざして活動していた。入所者の心情は、文芸(短歌)にあらわれており、数年間のスパンでながめると、それぞれの作者のライフヒストリーが短歌にあらわれてくることが明らかとなった。さらに、方法論的検討は、昨年度から検討していたアーサー・クラインマン等の「病いの経験」研究を土台にしておこない、第71回日本ハンセン病学会(宮古南静園)にて「ハンセン病という『病いの経験』」と題して口頭発表した。ハンセン病者の人生とその語りを治療者および聴き手に引き付けて解釈する場合には、病者をとりまく文化・社会的経験と個人的経験との相互関係を考慮に入れながら、病者に関するミニ・エスノグラフィを再構築し、検討することが必要であることを指摘した。それは同時に病者自身をエンパワーする過程でもあった。最後に、この3年間の成果にもとづいて報告書を作成した。
サマリウム複合還元素の開発と制御

本研究では、0価の金属サマリウムと2価のヨウ化サマリウムとの組み合せにより誘発する複合効果の解明と、この複合効果を活用する新合成プロセスの開発を目的に、希土類複合還元系の合成化学的利用について詳細に検討し、以下に示す研究結果を得た。(1)アルキルヨ-ジドおよびブロミドの還元において、Sm/SmIS_2複合系はこれらの単独系に比べて、より高い還元能力を示すことが明らかとなった。(2)アルキルヨ-ジドおよびブロミドの還元は、金属サマリウムと触媒量のSmI_2とを組み合せた反応系においても効率良く進行することが明らかとなった。(3)アルキルヨ-ジドの還元は、金属サマリウム単独でも進行することを見出すとともに、これが反応の初期段階においてアルキルヨ-ジドと金属サマリウムから触媒量のSmI_2が生成し、Sm.cat.SmI_2複合系を形成するためであることを明らかにした。(4)以上の結果を踏まえて、ケトンとアルキルブロミドおよびヨ-ジドとのBarbier反応をSm/SmI_2複合系を用いて検討したところ、室温、短時間で収率良く3級アルコールが合成できることが明らかとなった。(5)金属サマリウムはBarbier反応の試薬としてあまり利用されることはなったが、アルキルヨ-ジドを用いるBarbier反応については有効であることが示された。
ダウン症候群に伴う骨髄形成異常の電顕細胞化学的特性

ダウン症候群に合併したtransient myeloproliferative disorder(transient abnormal myelopoiesis TAM)につき電顕および電顕細胞化学的研究を行った。芽球を形態計測すると、急性リンパ白血病より急性骨髄性白血病に近い形態的特徴を有していた。血小板ペルオキシダーゼ(PPO)はほとんどの症例で陽性度が高く、血小板関連単クローン抗体陽性であった。12例のTAMをダウン症候群に合併した巨核球性白血病13例と比較し、その細胞化学的特性をみた。PPOは両者共48%の陽性率であり、差はみられなかった。しかし、TAMの芽球は、α顆粒、分離膜など巨核球への分化を意味するもの、ミエロペルオキシダーゼ(MPO)陽性顆粒など顆粒球への分化を示すもの、膜様構造物あるいはフェリチン粒子を含む顆粒など赤芽球への分化を思わせるもの、好塩基球様顆粒をもつものなど、多方面への分化を示唆する所見が得られた。これに反し、巨核球性白血病の芽球は未熟で、α顆粒、分離膜を欠き、また顆粒球への分化を示す所見もなく、わずかに膜様構造物を含む顆粒とごく少数の好塩基球様顆粒をみるにすぎなかった。TAMの芽球はまたGolgi-endoplasmic reticulum-lysosome(GERL)の発達が著明で、金コロイド法でみるとRNAの分布が豊富であった。これ等は、細胞が蛋白合成、顆粒形成などにactiveに活動している時にみられる所見であり、TAMの芽球が分化成熟にむけてactiveに活動していることを推測するものであった。TAMの培養細胞ではin vivoの所見と同様に多方面への分化を示す所見がありすでに報告したが(Blood 69:508、1987)電顕的にみても好塩基球、好酸球への分化が著明であった。大豆レクチンなどは好酸球顆粒に特異的に反応することが分りJ.Histochem Cytochiemに印刷中であるが、TAMでは、この方法でみると両者のhybrid cellが多かった。ダウン症候群に合併したmyelporoliferative disorder(Transient abnormal myelopoiesis,TAM)の15例につき電顕および細胞化学的観察をおこなった.芽球を形態計測すると,急性リンパ性白血病(ALL)より急性骨髄性白血病(AML)に近い形態的特徴を有していた.即ち,胞体面積はAML細胞に似て広く,ミトコンドリア数もAML細胞とほぼ同じ値を示した.それぞれの芽球の胞体内には,巨核球系細胞に特徴的なα顆粒,赤芽球系にみられるフェリチン含有顆粒, θ顆粒,好塩基顆粒,好中球顆粒などがみられた.このことより, TAMの芽球は多方面への分化傾向をもつ芽球であることが推測された.細胞化学的にみると,血小板ペルオキシダーゼは症例により差があり, 1%92%の芽球に陽性反応を示した.骨髄ペルオキシダーゼは陽性反応を示す芽球は少なかった.

酸性フォスタファターゼおよび過ヨウ素酸反応性糖化合物の反応をみると,胞体に集積した嚢状の陽性反応を示す部分があり, GERL(Golgi associated endoplasmic ret culum)と形態的に一致したGERLは顆粒形成などが著明なactiveな細胞によく発達する. TAMの芽球は分化,成熟にむけてactiveに活動していると思われる.胞体内のRNAは豊富だった.酸性ムコ多糖類の反応をみると,本反応陽性の好塩基球顆粒を思わせる顆粒をもつ細胞がみられた.大豆レクチン結合部位を金コロイド法にてみると,本反応陽性を示す好酸球顆粒をもつ芽球は少なかった.免疫細胞化学的方法を用いて巨核球形質の出現を見ると, IIa-iiiB陽性の芽球がかなりみられた.血小板ペルオキシダーゼ陽性の芽球の多いことも加えて,巨核球性白血病との関連もあり,比較検討した.以上得られた結果は昭和62年日本臨床血液学会,日本小児血液学などに発表した.昭和63年日本小児科学会,国際血液学会(ミラノ)でも発表予定で演題提出した.1.TAMの芽球をダウン症候群に合併した巨核球性白血病(MKL)の芽球と比較し、自然治癒するTAMと抗腫瘍剤による治療を必要とするMKLの芽球の細胞学的差異を検討。12例のTAMと13例のMKLを用いた。未熟な芽球はTAMとMKLの両者間に電顕形態的に差はなかったが、TAMではこのほかに、成熟傾向を示すものがあり、巨核球、顆粒球、赤芽球などへ分化傾向を示すものがあった。MKLではこのような分化傾向はみられず、わずか赤芽球幼若細胞の特徴を示すものや、好塩基球への分化を示すものが若干みられるにすぎなかった。血小板ペルオキシダーゼは両者共48%の陽性率を示し、また単クローン抗体でも著明な差は見出せなかった。2.芽球の培養による変化、成熟などに対する電顕的観察。我々はTAMの芽球が培養により、好塩基球、好酸球、好中球、マクロファージ、赤芽球などに分化することを光顕的に観察し報告した(Blood 69;508,1987)。特に、TAMでは好酸球、好塩基球などの割合が多い。培養の好塩基球はin vivoの好塩基球と電顕的に形態が異なる(Eur.J.Haematol 42:81,1989)のを我々は報告したが、TAMでは、このような好塩基球に好酸球顆粒に類似の顆粒を混じてもつ細胞がみとめられた。好酸球の顆粒を同定するため、好酸球に特異的に反応するレクチンを電顕的に検討した(J.Histochem.Cytochem in press)。この方法により、TAMの培養細胞では、好塩期球顆粒と好酸球顆粒を合せわてもつhybrid cellが多いことがわかった。
神経ベーチェット病に特異的に増多するrδT細胞のシグナル伝達機構における機序の解析

I.KTH-1抗原刺激に対するγδT細胞の反応性の検討神経BD患者末梢血リンパ球をKTH-1 10μg/ml存在下で9日間培養し、分裂増殖したT細胞をFACScanにて表面マーカーを解析した。CD3+γδ+T細胞は抗原刺激前5.0%から21.2%と増殖した。さらに増殖したγδ陽性T細胞の約48%はCD8陽性細胞であった。II.細胞内シグナル伝達機構の検討BD患者末梢血リンパ球を分離し、KTH-1 10μg/ml存在下で9日間培養し、分裂増殖した細胞をPHA、抗CD3抗体、KTH-1、PPDで0、3、5分に刺激してチロシンリン酸化タンパクの解析を行った。45KDaおよび40KDa付近に健常人、患者共通のチロシンリン酸化タンパクのバンドを認めた。しかし、PHAによる刺激では34KDa付近にバンドを認めたが、抗原刺激ではみられなかった。また抗原刺激では健常人で52KDa付近にチロシンリン酸化タンパクのバンドを認めたが、BD患者では抗原刺激でもそのタンパクは認められなかった。これらの結果より、抗原刺激に対して健常人と患者との間にT細胞内への情報伝達機構が異なることが示唆された。今後さらに細胞内のCaオシレーション、IL-2 gene転写タンパク等の細胞内シグナルを調べ、併せて病因との関連について検討していく予定である。