hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
知的財産権を用いた農業の保護と活性化に関する農業政策

農業技術は広く公開すべきという考えから、排他的権利の設定には積極的ではなく、権利としての知的財産権の意識が希薄であった。本研究では、過去30年間の各都道府県における農業分野の知的財産権の出願動向、農業統計、農業政策、ブランド化戦略等を調査し、知的財産権の活用による農業活性化政策を検討することを最終目的とする。[方法]商標調査については、データベースとしてPATOLIS-IVを、種苗調査については農林水産省品種登録情報を活用した。日本国内における農業関連技術分野の特許・実用新案を、国際特許分類(IPC)に基づいた調査を行った。更に、PATOLIS-IVにおける県コード及びキーワードを用いて、検索論理式を作成し、出願件数の機械検索を行った。尚、出願日を基準として各種のデータを算出した。[結果]商標については、企業による出願の割合が高かったが、個人出願の割合が全体の2割以上ある比較的高い地域もみられた。種苗については、個人による出願の割合が比較的高く、なかには50%以上が個人で行っている地域もあった。全国的には農機具メーカーをはじめ大都市圏の電機メーカーや化学メーカーが特許及び実用新案を多く出願していたが、都道府県毎で集計した場合、個人出願の件数が多い地域もあった。一般的に、知的財産権を個人で管理することは困難である。今後、地域の実情に合わせた農業分野(一次産業)の知的財産戦略を早急に策定し、農業関係者を含めた知的財産権取得に向けた支援体制を構築することは、地域農業の活性化と地域の農産物関連のブランド化を図る上で重要になってくると考えられる。また、農業関係者が無形の価値を知的財産と認識し、適切に扱うようになることが必要であり、知的財産に詳しい人材を育成していくことが重要である。
植物ホルモン・ストリゴラクトン情報伝達機構の構造基盤解明と新規制御剤の創製

植物ホルモン「ストリゴラクトン(SL)」は、植物の「枝分かれ」という農業バイオマスに寄与する極めて有用な形質を制御している。本研究では、SLの情報伝達系に関わる因子の生化学/構造生物学的解析を押し進め、SL形質に基づく技術開発を目的とした。得られた成果は、植物本来が持っている生長のための潜在能力を顕在化・活性化させるための知見・技術として利用できる。今年度は、まだまだ未解明な点の多いSL情報伝達機構について、その全容解明を目指し、受容体D14を起点に構造生物学的/生化学的アプローチを仕掛け、以下のような成果が得られた。未だに報告されていないSL結合状態のD14を捉えるべく、D14の保存された触媒残基に変異導入を行った。単一/多重変異体の調製に成功し、SL分解活性が消失したことを確認できた。またSL存在下における結晶化スクリーニングではいくつかの条件で結晶が得られ、X線回折測定からデータセットを回収し現在解析を進めている。SL情報伝達抑制因子D53について、全長および各ドメインに分けた複数の発現系を構築した。またそれらの大量発現を行い、単離精製系を確立することにも成功した。調製したD14変異体およびD53は、in vitro相互作用実験に用い、シグナル伝達におけるSL加水分解の重要性を検討できた。さらに、SL-D14-D53三者複合体の結晶構造解析に向けて結晶化スクリーニングを行い、幾つかの候補を見出すことができた。以上の成果は、本研究の目的達成に向けた一連の実験の中で、特にその礎ともいえるものであり、非常に有意義な結果であるといえる。翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。
犬の腫瘍におけるペプチドワクチンを用いた免疫療法の開発

犬の自然発生腫瘍に対する免疫療法の開発としてWT1蛋白を標的としたペプチドワクチンによる免疫療法の可能性を探索した。ペプチドワクチン作成にあたり、犬WT1遺伝子を単離し、その塩基配列を決定した。2つのcDNAクローンが得られたが、いずれも人で報告のあるアイソフォームと同等の構造を有し、うち1つは腫瘍において高発現しているアイソフォームであったことから、このクローンの予測されるアミノ酸配列に基づきペプチドを作成した。一方、犬の正常組織および自然発生腫瘍組織におけるWT1蛋白の発現について免疫組織化学を用いて検討したところ、正常組織では腎臓、脾臓、肺、卵巣といった限られた組織においてわずかに発現が認められるのみであったのに対し、腫瘍組織においては様々な組織で強い発現が認められた。腫瘍治療は主に外科的摘出や放射線治療による局所治療と化学療法に全身療法が柱となる。しかし、これらの治療法では取り除くことのできない微小残存病変が再発を引き起こすため、免疫療法などの補助治療が必要である。これまでに腫瘍免疫を高める様々な方法が試みられているが、実用化に至り大きな効果をあげている治療法が未だ存在しない。有効な免疫療法を確立するためには、腫瘍に特異的に発現する抗原を同定し、その抗原を認識し活性化する免疫担当細胞を誘導する必要がある。そこで多くの腫瘍に発現し、in vitroで強力な腫瘍免疫を誘導しうるWT1を腫瘍抗原としたワクチン療法と細胞障害性T細胞の抑制蛋白であるCTLA4を抑制するペプチド療法の併用による、より効果的な免疫療法の確立を目的とした研究を計画した。H22年度はまず初めに、抗ヒトWT1ポリクローナル抗体の犬WT1との交差性をWestern blottingにより確認したところ、数種の抗体のうち一種のクローン(C-19)において、ヒトおよびマウスのWT1蛋白とほぼ同じ分子量の蛋白バンドが犬の蛋白においても確認され、WT1ペプチドにより得られたバンドの消失が確認された。これにより抗ヒトWT1抗体の犬との交差性が確認できた。次に、犬の正常組織におけるWT1蛋白の発現について免疫組織化学により確認したところ、一部の正常組織(腎臓、気管支、脾臓、乳腺)においても発現が確認され、その発現パターンはこれまでに報告のあるヒトやマウスと同様であった。続いて、犬自然発生腫瘍組織におけるWT1蛋白の発現について免疫組織化学により解析を行っている。平成23年度には、犬WT1遺伝子のクローニングを行い、犬においても人で報告のあるアイソフォームが存在することを確認した。またさらに、犬の正常組織では、腎臓、脾臓、肺、乳腺といった限られた組織にのみ、弱い発現が認められるのみであったのに対し、自然発生腫瘍組織において犬WT1は広範に強く発現していることを明らかにした。これらのことより、犬の自然発生腫瘍においてWT1蛋白を標的とした免疫療法の有効性が示唆された。続いて、得られた犬WT1遺伝子の塩基配列より予測されるアミノ酸配列を基に、5種の犬WT1ペプチドを作成した。正常犬より分離した犬末梢血中単核球の培養液中に作成した犬WT1ペプチドを添加して、培養上清中のIFN-γをELISAにより測定したところ、溶媒のみ添加群と比較して有意な上昇は認められなかった。
ブートストラップ法・非線形最適化法等による複雑なデータからの情報抽出の研究

本研究課題では、3種類の研究を行ったので、以下に項目別にその成果の概要を述べる。第1に、(A)ブートストラップ同等性検定については、対になった2組の縦断的データの平均曲線間に全体として差があるか否かを調べるための種々のブートストラップ検定法を提案し、数値実験により、各種の検定法の性質について詳細に検討した。その結果、提案した統計量の中では、面積差統計量の場合の検出力が最も高く、次が差の2乗和統計量の場合であり、いずれも従来からの統計量(例えばHall & Hartの統計量)よりも良いことが分かった。また、数値的検討によれば、提案した混合ブロック・リサンプリング法は、データ間の相関が弱く、標本数がかなり小さな場合でも、検定のパワーがかなり高くなることも判明した。第2に、(B)ブートストラップ推論・複雑な実際データの解析については、論理的思考力、推論・分析力、読解・表現力等の総合的な能力・資質の測定を目的として開発された、教科・科目フリー型の総合試験で測定している能力についての検討を行った。以前に行ったアンケート調査のデータに因子分析を適用して6因子を抽出し、各因子に対応する尺度得点と試験得点との相関を調べた。その結果、今回の総合試験が目標に合った能力や資質を測定していることが示唆された。第3に、(C)パラメータ推定の非線形最適化問題とその安定性については、まず、重回帰分析の場合について、2次および1次の制約条件の下での相関係数最適化解を、幾何学的考察も交えて厳密に求めた。次に、2組の2次制約条件が付いている正準相関分析の場合についての検討を行った。その結果、重回帰分析の場合と同種のアルゴリズムを反復して適用することにより、正準相関分析の場合においても有限回の反復で最適解が得られることが解析的に示せた。また、データの変動が極めて微小であっても、相関係数最適化解の値が大きく変化する可能性のあることも判明した。本年度は、主として複雑なデータに対するブートストラップ推論についての研究を行った。具体的には、対になった2組の縦断的データを取り上げ、それらの平均曲線間に全体として差があるか否かを調べるための種々のブートストラップ検定法を提案した。また数値実験を行い、各種の検定法の性質について詳細に検討した。対象とした検定統計量は、2曲線間の面積、2曲線の差の絶対値の和・2乗和である。また比較のためにHall&Hartの統計量も対象とした。リサンプリングは、中心化した残差に対してムービング・ブロック・ブートストラップ(MBB)法を適用する方法により行ったが、比較のためにナイーブなブートストラップ(NB)法も適用した。シミュレーションでは、人工衛星と地上の流星レーダーによって測定された高度8090kmでの風速データを想定し、残差に1次の相関をもつ人工データに対して計算を行った。各種の検定法(4種類の検定統計量と2種類のリサンプリング法のすべての組合せ)に対して、種々のシミュレーション条件(2種類の検定のサイズ,10種類のブロック長,3種類の相関)の下で、検定のサイズと検出力を計算した。その結果、次のような知見を得ることができた。(1)MBB法において最適な検定のサイズを与えるブロック長は、Hall等の統計量の場合にはかなり長いが、提案した統計量の場合には23と短い。(2)提案した統計量に対しては、検定のサイズは名目上の値と近いが、Hall等の統計量の場合には名目上の値を下回る場合が多い。

(3)ほぼすべての場合について、提案した統計量による検定の検出力は、Hall等の統計量による検定の検出力よりもかなり高い。(4)提案した統計量の中では、面積統計量の場合の検出力が最も高く、次に2乗和統計量の場合であった。(5)Hall等の統計量については、相関が小さい場合にはMBB法の検出力が高く、相関が大きい場合にはNB法の検出力が高い。本年度は、ブートストラップ同等性検定、およびパラメータ推定の非線形最適化問題とその安定性についての研究を行った。まずブートストラップ同等性検定については、2組の縦断的データのそれぞれに対する平均値を時系列的につないだ2本の曲線間に、全体として差があるか否かを調べるための種々のブートストラップ検定法のサイズおよびパワーについて検討した。対象とした検定統計量は、2曲線間の面積、2曲線の差の絶対値の和・2乗和であり、比較のためにHall & Hartの統計量も検討対象とした。リサンプリングは中心化した残差に対して行い、通常のムービング・ブロック・ブートストラップに加えて、2つの標本をプールしたものからブロックのリサンプリングを行うパーミュテーション検定も考えた。詳細な数値実験の結果によれば、次のような知見が得られた。まず検定のサイズに関しては、(1)名目上の被覆確率を達成するためには、本研究で提案した統計量の場合には、ブロック長を長めにとる必要のあること、(2)パーミュテーション検定については、復元抽出と非復元抽出の場合の差は小さいこと、等が判明した。また検定のパワーに関しては、(3)残差項の分散よりは2組の標本数に強く影響されること、(4)多くの場合、面積統計量の場合にパワーが最大となること、等が判明した。次にパラメータ推定の非線形最適化問題については、2種類のパラメータのそれぞれに2次の制約条件が付いている場合の正準相関分析についての検討を行った。前年度に得た最も簡単な場合の最適解を求める方法を拡張し、各ステップにおける最適解を交互反復的に改良する方法を提案した。この反復法はほとんどの場合には収束することが解析的に示せるが、収束についての厳密な検討、および数値的検討は次年度の課題とする。今年度は本研究課題の最終年度であり、次の3種類の研究を行った。すなわち、(A)ブートストラップ同等性検定についての研究、(B)ブートストラップ推論・複雑な実際データの解析についての研究、および(C)パラメータ推定の非線形最適化問題とその安定性についての研究、である。まず(A)については、前年度までに提案した各種の統計量・検定方法等を踏まえて、2組の縦断的データの平均曲線間に全体として差があるか否かを調べる新たな検定方法を提案した。具体的には、ブロック・リサンプリングによりリサンプルを構成し、近似的に並べ替え検定を行う方法である。数値的検討によれば、提案した混合ブロック・リサンプリング法は、データ間の相関が弱く、標本数がかなり小さな場合でも、検定のパワーがかなり高くなる等の知見が得られた。また(B)については、論理的思考力、推論・分析力、読解・表現力等の総合的な能力・資質の測定を目的として開発された、教科・科目フリー型の総合試験で測定している能力について、因子分析等を用いた情報抽出の研究を行った。
海馬の場所細胞を生成する神経演算原理の解明

哺乳類のナビゲーション行動には、海馬体に存在する場所細胞が重要な役割を果たすと考えられている。場所細胞の活動パターンはこれまで詳細に調べられてきたが、なぜ場所選択的な活動が生じるのか、その神経回路メカニズムは不透明なままである。そこで本研究は、ナビゲーション行動中の海馬体における大規模細胞外計測とシナプス結合の網羅的検出とを組み合わせることで、場所細胞の活動を生成するシナプス入力を同定することを目的とした。さらに、海馬体で生成された場所情報が、下流の複数の脳領域へとどのように分配されて伝達されるかについても検証した。1) 256点からなる多点電極をもちいた大規模計測により、ラット1個体あたり100個程度の神経細胞の発火活動を同時計測し、さらに、計測している細胞同士をむすぶ約10,000通りのシナプス結合を網羅的に同定する手法を実装した。その結果、海馬CA1野から海馬台へといたる領域間シナプス結合や、海馬台内部の再帰性シナプス結合を同定することが可能となった。これにより、場所細胞やその他の神経細胞のあいだのシナプスを介した情報伝達を捉えることが可能となった。一方で、本手法で同定されるシナプス数は、解剖学的に推定されるシナプス数より少ない傾向にあり、手法のさらなる改善により、情報伝達をさらに網羅的に把握できる可能性が考えられた。2)大規模計測と光遺伝学とを組み合わせて、計測している細胞の投射先を同定する手法を構築した。この手法を用いて、海馬体の投射細胞が持つ場所などの情報を定量するとともに、海馬体で観察される各種の局所電位に対する発火パターンを精査した。その結果、海馬体の投射細胞は、投射先の脳領域によって異なるパターンで活動し、異なる種類の情報を伝達することを示唆する予備的データを得た。こうした結果は、海馬体は投射先選択的な情報伝達をおこなうことを示唆するものである。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、行動中のラットにおいて100個程度の神経細胞の活動を一斉に計測する大規模計測法を確立した。具体的には、脳への多点電極の埋め込みをおこなう手術設備(脳定位固定装置、手術用実体顕微鏡、気化麻酔装置、ウイルス注入装置)、および多点同時記録システム(最大512チャネルの多点記録電気生理装置、動物の行動を記録するビデオシステム、電気生理・行動データの同期取込用ワークステーション、シリコンプローブ電極、3Dプリンタで作成した電極保持用マイクロドライブ、各種の行動課題装置)を構築した。これらの機器を用いて、最大256点の多点電極を脳に留置することで、空間ナビゲーション課題をおこなうラットの海馬体から100個程度の神経細胞を同時に計測しつつ、動物の行動をカメラで撮影し、動物の位置と神経活動の関連を調べることが可能になった。本年度はさらに、活動を計測している神経細胞同士をつなぐシナプス結合を網羅的に検出する計算手法を実装した。2個の神経細胞がシナプス結合をもつ場合、シナプス前細胞の1発の活動がシナプス後細胞の活動を惹起するスパイク伝達と呼ばれる現象がしばしば生じる。シナプス結合の存在をしめすこの現象を、2細胞の活動タイミングの相互相関を算出することで検出した。さらに、この相互相関を、活動を計測しているすべての細胞ペアについて行うことで、約10,000通りの細胞間のシナプス結合の有無について網羅的に調べることが可能になった。これらの成果により、ラットが空間ナビゲーションをおこなう最中に、個々の神経細胞が他のどの細胞から入力を受け、それに応じてどんなパターンの出力を発するかという神経演算の様態をつぶさに捉えることが可能となった。当初の計画通り多細胞同時記録法を大規模化することができた。また、本研究の特色であるシナプス同定をおこなうための手法も実装した。こうした成果により、空間ナビゲーション中の動物の海馬体において、神経細胞への入力と出力の両方を大規模に計測することが可能になった。以上の理由から、おおむね順調に進捗していると判断した。

この手法を用いて、海馬体の投射細胞が持つ場所などの情報を定量するとともに、海馬体で観察される各種の局所電位に対する発火パターンを精査した。その結果、海馬体の投射細胞は、投射先の脳領域によって異なるパターンで活動し、異なる種類の情報を伝達することを示唆する予備的データを得た。こうした結果は、海馬体は投射先選択的な情報伝達をおこなうことを示唆するものである。H29年度にセットアップした実験系をもちいて、海馬体の神経細胞がしめす空間選択的な活動パターンを生み出している神経演算原理の解明に取り組む。まず、空間ナビゲーション中の活動データを数百個千個程度の神経細胞について収集し、これらの細胞の動物の位置に対する活動頻度を算出する。さらに、これらの細胞間のシナプス結合を検出することで、細胞間の情報のながれを明らかにし、どのような活動パターンの細胞からシナプス入力を受けることで、空間選択的な活動パターンが生成されるかを明らかにする。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
植物の側根形成開始における細胞極性および非対称分裂の制御機構の解析

側根はすでに存在している根から分岐するように形成され,植物体の支持,水分や栄養分の効率的な吸収を行うための根系を構築する.シロイヌナズナの側根は,特定の内鞘細胞が非対称分裂することで形成を開始する.その後,規則的な細胞分裂によってドーム状の側根原基が作られ,分裂組織を構築して,元の根の外へと成長する.本研究課題では,側根形成の開始を制御する分子機構,および側根原基の形成機構を理解するために,以下の解析を行った.側根形成開始を制御する転写因子LBD16の下流因子として,機能未知なタンパク質をコードするTOLS1と側根原基形状を制御するAP2/EREBPタイプの転写因子PUCHIの解析を行った.いずれもLBD16によって発現制御され,側根形成開始時に発現上昇した.TOLS1は細胞膜と細胞質・核に局在して側根形成を促進した.一方,PUCHIは側根形成を抑制したことから,LBD16は側根形成を促進するだけでなく,PUCHIを介して側根形成の頻度を制御することが示唆された.また,側根原基の発生過程を理解するために,共焦点レーザー顕微鏡をもちいたタイムラプスイメージングによって,側根原基発生における細胞分裂および細胞分化パターンの解析を行った.変異体をもちいた解析から,側根原基の特定の細胞層における並層分裂が転写因子SCARECROW(SCR)によって制御されることが示唆された.また,側根原基形成過程における細胞分裂の方向を3次元的に解析した.26年度が最終年度であるため、記入しない。26年度が最終年度であるため、記入しない。側根は後胚発生的に形成され、水分や栄養分を効率的に吸収するとともに、環境の変化に対応した根系を構築する上でも重要である。シロイヌナズナの側根形成開始においては、SLR/IAA14-ARF7-ARF19を介したオーキシン情報伝達,およびその下流で発現制御されるLBD (Lateral Organ Boundaries-domain)/ASL (Asymmetric Leaves2-1ike)ファミリーに属するLBD16/ASL18が重要な働きを担っている。この分子機構および側根原基の形成機構を理解するために、本年度は以下の解析を行った.(1)Auxin Response Factor 7 (ARF7)とARF19によるオーキシン情報伝達の解析ARF7およびARF19をそれぞれarf7 art19二重変異体背景で過剰発現させたところ、異なる表現型がみられたことから、ARF7, ARF19のタンパク質の機能に違いがあることが示唆された。また、ARF7機能誘導型植物をもちいたマイクロアレイデータから、ARF7の下流で発現制御される新たな候補を探索し,機能欠損変異体の表現型の解析を行ったところ、オーキシンに関連すると考えられる表現型をもつ変異体が得られた。(2)タイムラプスイメージングによる側根原基発生の解析側根原基の発生過程を理解するために,共焦点レーザー顕微鏡をもちいたタイムラプスイメージングによって,側根原基発生における細胞分裂および細胞分化パターンの解析を行った.静止中心などの細胞特異的マーカーとともに細胞膜を可視化し,側根メリステムが構築される過程を観察した.また, 3次元での細胞分裂のパターンを解析し,側根原基において,細胞分裂は高度に同調していることが示唆された.側根は後胚発生的に形成され、水分や栄養分を効率的に吸収するとともに、環境の変化に対応した根系を構築する上でも重要である。シロイヌナズナの側根形成開始においては、SLR/IAA14-ARF7-ARF19を介したオーキシン情報伝達,およびその下流で発現制御されるLBD (Lateral Organ Boundaries-domain)/ASL (Asymmetric Leaves2-like)ファミリーに属するLBD16/ASL18が重要な働きを担っている。この分子機構および側根原基の形成機構を理解するために、本年度は以下の解析を行った.(1) Auxin Response Factor 7 (ARF7)とARF19によるオーキシン情報伝達の解析ARF7およびARFl9をそれぞれarf7 arf9二重変異体背景で過剰発現させたところ、異なる表現型がみられたことから、ARF7, ARF19のタンパク質の機能に違いがあることが示唆された。(2)タイムラプスイメージングによる側根原基発生の解析側根原基の発生過程を理解するために,共焦点レーザー顕微鏡をもちいたタイムラプスイメージングによって,側根原基発生における細胞分裂および細胞分化パターンの解析を行った.静止中心などの細胞特異的マーカーとともに細胞膜を可視化し,側根メリステムが構築される過程を観察した.また, 3次元での細胞分裂のパターンを解析し,側根原基において,細胞分裂は高度に同調していることが示唆された.側根はすでに存在している根から分岐するように形成され,植物体の支持,水分や栄養分の効率的な吸収を行うための根系を構築する.シロイヌナズナの側根は,特定の内鞘細胞が非対称分裂することで形成を開始する.

その後,規則的な細胞分裂によってドーム状の側根原基が作られ,分裂組織を構築して,元の根の外へと成長する.本研究課題では,側根形成の開始を制御する分子機構,および側根原基の形成機構を理解するために,以下の解析を行った.側根形成開始を制御する転写因子LBD16の下流因子として,機能未知なタンパク質をコードするTOLS1と側根原基形状を制御するAP2/EREBPタイプの転写因子PUCHIの解析を行った.いずれもLBD16によって発現制御され,側根形成開始時に発現上昇した.TOLS1は細胞膜と細胞質・核に局在して側根形成を促進した.一方,PUCHIは側根形成を抑制したことから,LBD16は側根形成を促進するだけでなく,PUCHIを介して側根形成の頻度を制御することが示唆された.また,側根原基の発生過程を理解するために,共焦点レーザー顕微鏡をもちいたタイムラプスイメージングによって,側根原基発生における細胞分裂および細胞分化パターンの解析を行った.変異体をもちいた解析から,側根原基の特定の細胞層における並層分裂が転写因子SCARECROW(SCR)によって制御されることが示唆された.また,側根原基形成過程における細胞分裂の方向を3次元的に解析した.26年度が最終年度であるため、記入しない。26年度が最終年度であるため、記入しない。側根原基発生のタイムラプスイメージングが可能になり,さまざまな細胞特異的マーカーの発現を通して,側根メリステムが構築されていく過程を可視化した.また,変異体背景において,マーカーラインを観察する準備がほぼ整いつつある.側根原基発生のタイムラプスイメージングが可能になり,さまざまな細胞特異的マーカーの発現を通して,側根メリステムが構築されていく過程を可視化した.また,変異体背景において,マーカーラインを観察する準備がほぼ整いつつある.側根原基のメリステム構築過程を明らかにするために,今後は変異体をもちいた解析を進め,分子機構を明らかにしていく.また,原基内部だけでなく,周囲の細胞との関係についても解析を進める.また、ARF7とARF19に関しては,側根だけでなく,オーキシンが関与する他の表現型についての解析を進め, ARF7とARF19が連続的に活性化する生物学的な意義を明らかにしていく。側根原基のメリステム構築過程を明らかにするために,今後は変異体をもちいた解析を進め,分子機構を明らかにしていく,また,原基内部だけでなく,周囲の細胞との関係についても解析を進める.また、ARF7とARF19に関しては,側根だけでなく,オーキシンが関与する他の表現型についての解析を進め, ARF7とARF19が連続的に活性化する生物学的な意義を明らかにしていく。
高所登山活動のヘルスプロモーションへの効果を検証する実践的研究

4年にわたる本研究プロジェクトにおいて、多くの調査や、学会発表、論文作成を行った。調査としては、実際の登山者からのデータ収集として、2015年の白馬三山縦走登山調査、2016年の富士山山頂の3日間滞在による調査、2017年はアメリカロッキー山脈における長期調査と、高度や期間を延長ながら発展的調査を実施した。多様な場所での、多様な対象者への調査結果より、高所(3000メートル前後)への登山体験の、呼吸器系・循環器系のヘルスプロモーション効果のエビデンスが得られ、また個人特性との関連の強さも明らかになった。高山病との関連についても個人差が大きく、今後も検証が必要である。また、心理的要因との関連も大きいことも明らかとなり、多くの教育的示唆が得られた。今後の調査の方向性として、高所における実践的調査の必要性と、よりコントロールされた状況下における実験的研究の必要性が示唆された。出版物として、査読付き原著論文1編、研究報告英文論文1編、査読付きの国際学会発表抄録2編出版することができたが、現在も分析中のデータも数多くあり、今後も分析や執筆をつづけ、さらなる成果物の出版に努める予定である。初年度の2015年度には、新たな調査内容の確定のための文献検索、学会参加による情報収集・関係者との打ち合わせ、新たな手法を試すための実地調査を数多く行った。新たに購入したスパイロメータによる調査が主となったが、以下が主な結果である。12泊3日の北アルプス白馬三山縦走登山において、7名の被験者の呼吸機能を測定した結果、登山前から後にかけて、呼吸効率の向上が明らかとなった。2スパイロメーターを用い、登山中の呼吸とSPO2を測定した。2名について、3か所5回の測定を行った。呼吸と動脈血酸素飽和度の連動がみられ、メーカーの協力を得て、細部のデータを測定器から抽出し、より詳細な分析を今後行う。3以前の調査との共通調査項目(尿・動脈血酸素飽和度・主観的尺度・非侵襲性ヘモグロビン濃度)については、比較検討を行い、今後の調査への改善点が明らかになった。2015年度の調査結果から、さらに呼吸機能の調査を行うことの意義、多様な指標の関連を明らかにすることの意義が明らかとなり、2016年度の調査に向けての課題が得られた。2015年度の調査結果については、2016年6月の登山医学学会での発表、11月にはアメリカでのAssocaition for Outdoor Recreation and Education内のResearch Symposiumにて発表を予定している。また、スパイロメーターについては、メーカー側と測定値の扱いについて、協議を行っており、さらに継続し、本研究へより活用することを検討している。新たな検討課題であった呼吸機能の測定が実施でき、それなりの結果が得られた。高所での極所測定についての課題は今後さらに厳密に取り組んで行かなければならない。2年目であった2016年度は、多様な調査からの分析、2015年度に行った調査の結果発表を行った。具体的には、北アルプス鳳凰三山における調査(対象者9名)と、富士山における調査(対象者8名)、登山医学学会や海外学会での発表である。北アルプスでの調査では、これまでに行ってきた調査同様の形式での調査実施を行い、富士山では、より標高の高い場所、また1泊長い日程での調査を行うことにより、比較材料とすることを目的とした。これまでに行ってきた高所と動脈血酸素飽和度の関係、呼吸機能改善、ヘモグロビン濃度の改善などへのエビデンスを多く集めることができた。これらを今後これまでのデータと共に分析を行っていく。結果を2017年3月に一つすでに報告済みであり、また2017年度の登山医学学会国際大会にて発表予定である。発表としては、2015年度の結果を登山医学学会で分担者と共に2題発表し、多様な意見を受けることができた。内、1題は原著論文として掲載された。また、アメリカの学会においても発表することから、多様な意見を受け、今後の参考とする。3年目をメインの調査を目的としてきた。おおむね進行は予定通りであり、29年度にメインの調査を実施予定である。平成29年度は本研究計画の3年目の年であり、これまでの結果の公開とさらなる調査発展を図った。公開としては、6月に長野にて開催された登山医学会の学術集会が、本年度はアジア・太平洋国際会議との合同開催となり、英語での口頭発表を行った。内容は、過去数年蓄積してきた登山者の心拍数と動脈血酸素飽和度の関連性を、標高や、登山開始からの時間、距離、荷物の重さなどの要因からの分析や、富士山での3日間継続的な測定を行った比較であり、「Monitoring SpO2 during Mountain Trekking Activities ーAnalyses of Various Factors at Different Altitudesfrom 10 Mountain Trips 」というタイトルにて、2017年の登山医学(学術雑誌)に掲載された。また、実践面では、アメリカロッキー山脈へのエクスペディションにおいて、3泊4日の山行にて調査を実施した。これまでのデータの蓄積としての生理的データ(心拍数・動脈血酸素飽和度・主観的評価・高山病調査)に加え、教育目的でのエクスペディションであったことからも、集団形成に焦点を当てた「expedition behavior」と言われる遠征における集団行動心得とも言える「自己・他者・グループとの関係」への意識向上を図る概念を用いた調査を行った。

その結果、心理的・生理的な負荷があるからこそ、自己や他者の深い気づきにつながり、気づきへ向き合いながら集団としての目標達成に向けた個々人の意識や行動変容が明らかになった。異文化ならではの刺激の多い体験や、wildernessといわれる原生的な自然環境での活動なども多様な気づきへとつながっていた。現在結果を分析し、考察をおこなっているところであり、2018年の登山医学会の学術集会にて発表予定である。データ収集、学会発表は順調に行っているが、集計・分析・執筆活動が遅れている。発表や投稿学会の選択について共同研究者と議論を行っており、より方向性の適した公開先を探索しながら、公開方法の検討を行っている。4年にわたる本研究プロジェクトにおいて、多くの調査や、学会発表、論文作成を行った。調査としては、実際の登山者からのデータ収集として、2015年の白馬三山縦走登山調査、2016年の富士山山頂の3日間滞在による調査、2017年はアメリカロッキー山脈における長期調査と、高度や期間を延長ながら発展的調査を実施した。多様な場所での、多様な対象者への調査結果より、高所(3000メートル前後)への登山体験の、呼吸器系・循環器系のヘルスプロモーション効果のエビデンスが得られ、また個人特性との関連の強さも明らかになった。高山病との関連についても個人差が大きく、今後も検証が必要である。また、心理的要因との関連も大きいことも明らかとなり、多くの教育的示唆が得られた。今後の調査の方向性として、高所における実践的調査の必要性と、よりコントロールされた状況下における実験的研究の必要性が示唆された。出版物として、査読付き原著論文1編、研究報告英文論文1編、査読付きの国際学会発表抄録2編出版することができたが、現在も分析中のデータも数多くあり、今後も分析や執筆をつづけ、さらなる成果物の出版に努める予定である。2015年度呼吸機能の改善が示唆されたことが最も大きな結果であり、その結果について、より他の指標との関連性など明らかにしていく。また、測定器を増やし、測定方法の精度もあげていく。2015,2016年度の調査結果を合わせるとそれなりな結果が得られることを期待している。4年という期間の3年目として、メインの調査(海外登山での調査実施)を行う予定としている。これまでの結果から、調査内容を精査し、実施に向けた準備を行う。また、蓄積してきたデータを分析の上、論文として執筆を行う。これまで長期的に蓄積してきたデータに関しては、同様に調査をすすめ、データを蓄積する。さらに、これまでの結果を反映させ、調査についての修正が必要であると考えられ、新たな研究計画の立案と、実施を開始するとともに、執筆を進め、論文投稿に尽力したい。物品に関して、メーカーとの確認事項があり、検討が必要であった。現在協議中であり、内容によって、新たに測定機器を増やすことを検討している。残高が少額であり、物品購入に不十分であったため、来年度へ繰り越し、来年度の測定用消耗品へあてることとした。海外への出向費用を出す予定であったが、他の大学での仕事との兼ね合いで、大学の経費で旅費を出すこととなった。また、謝礼を出すはずの業務が進行しておらず、支払いが次年度に持ち越されたため。
医療事故調査制度の再発防止策の提言のクローズドクレームを用いた検証研究

本研究の目的は、日本医療安全調査機構が医療事故調査制度により収集した医療事故事例の分析に基づいて公表している医療事故の再発防止策の提言の有用性を、損保ジャパン日本興亜社の保有するクローズドクレーム(法的に決着のついたクレーム)を用いて検討することである。さらに、提言とクローズドクレームの統合的な分析によって、新たな知見の獲得も目指す。具体的な方法は、提言と同種の医療事故のクローズドクレームを抽出し、提言に記載されたリスク因子や推奨手技等の様々な観点から、後方視的に当該事故の防止の可能性を検討する。
咀嚼筋の副交感神経性血流増加反応における性差と咀嚼筋血流障害との関連性

本研究は、咀嚼筋の自律神経性血流調節における性差の有無について検討した。その結果、雌ラットの咬筋の副交感神経を介する血流増加反応は雄ラットよりもムスカリン受容体の遮断薬であるアトロピン(ムスカリン受容体の遮断薬)の投与によって顕著に抑制されることが明らかになり、アセチルコリンを伝達物質とするコリン作動性血管拡張線維は男性よりも女性の咀嚼筋の血流調節に密接に関わっていることが示唆される。本研究は咀嚼筋の副交感神経性血流増加反応における性差と咀嚼筋血流障害の発症機序及び病態との関連性を明らかにすることを目的とし、本年度(平成20年度)は顎・顔面領域(とくに咀嚼筋)の副交感神経性血流増加反応の応答特性における性差の有無を検討した。実験には、Wistar系雄性及び雌性ラット(10-20週齢)を用いた。ラットはウレタンを用いて麻酔して筋弛緩剤で非動化した後、人工呼吸器を用いて管理した。体幹血圧は大腿動脈から観血的に記録し、諸種の薬物は大腿静脈に挿入したカテーテルから投与した。咀嚼筋(咬筋)及び下唇の血流量はレーザードップラー血流計を用い、総頸動脈の血流量は超音波レーザー血流計を用いて継時的に測定・記録した。副交感神経性血流増加反応は三叉神経の求心性刺激により、脳幹の諸核を介して反射性に副交感神経線維を活性化させる方法を用いて誘発した。なお、本法は従来の直接的な神経刺激法では困難であった副交感神経の単独作用を生理的条件下で観察することを可能とする本研究室において独自に開発・確立された方法である。その結果、1)安静時の咬筋、口唇及び総頸動脈の血流レベルには性差がない、2)三叉神経(舌神経)の求心性刺激により誘発される副交感神経性血流増加反応は刺激強度及び頻度に依存して増加したが、それらの依存度に性差は認められなかったことから、安静時の咀囑筋を含む顎・顔面領域の血流レベル、三叉神経中の感覚神経線維(求心路)及び顎・顔面領域に分布する副交感神経性血管拡張線維(遠心路)の応答性には性差がないことが明らかになった。したがって、咀嚼筋機能障害の病因及び発症率における性差の発現には、末梢神経の応答特性ではなく、これら血管反応に関わる神経伝達物質とそれらの受容体の特性(種類、アゴニストに対する親和性及び発現量)における性別によって異なるメカニズムが重要であることが示唆された。本研究は咀嚼筋の副交感神経性血流増加反応における性差と咀嚼筋血流障害の発症機序及び病態との関連性を明らかにすることを最終的な目的としている。前年度(平成20年度)は咀嚼筋の副交感神経性血流増加反応の応答特性における性差の有無を検討した。その結果、反射性副交感神経性血流増加反応の応答特性には明確な性差が認められず、咀嚼筋機能障害の病因及び発症率における性差の発現にはこれら血流反応における神経伝達物質とそれらの受容体の特性に関する性差が重要であることが示唆された。そこで、本年度は副交感神経性血流増加反応に関わる神経伝達物質とそれらの受容体における性差の有無について検討した。実験には、Wistar系雄性及び雌性ラットを用いた。咀嚼筋(咬筋)及び下唇の血流量はレーザードップラー血流計を用い、総頸動脈の血流量は超音波レーザー血流計を用いて測定・記録した。その結果、1)咬筋の反射性副交感神経性血流増加反応はムスカリン受容体遮断薬(アトロピン)によって雄ラットよりも雌ラットの方が顕著に抑制される、及び2)このアトロピン感受性における性差は下唇及び総頸動脈の血流反応においても認められることが明らかになり、コリン作動性副交感神経性血管拡張線維は男性よりも女性の顎・顔面・口腔領域の血流調節に密接に関わることが示唆された。コリン作動性線維の活性は性周期或いは加齢に伴う女性ホルモンの血中濃度の変化に影響されることが多数報告されていることから、性ホルモンとコリン作動性副交感神経性血管拡張線維のはたらきは密接に関連しており、これらが咀嚼障害の発症率に認められる著しい性差を生じさせる要因の一つである可能性が示唆される。
慢性関節リウマチにおける腱断裂機序の解明と治療法の確立

関節リウマチにおける腱断裂は、骨・関節破壊とともに患者の日常生活に重大な障害を来たす。本研究の目的は、関節リウマチにおける腱断裂の機序の解明と治療法の確立である。そのため、昨年度は、関節リウマチ自然発症モデルSKGマウスおよび、関節炎カクテル(免疫生物学研究所、群馬、日本)で誘導した関節リウマチマウスモデルを用い、関節炎を発症した関節周囲の腱の形態学的解析を行った。いずれのマウスも、関節炎発症時には、組織学的に、関節周囲炎、軟骨・軟骨下骨組織の破壊、パンヌスの形成が見られ、アキレス腱周囲にも炎症が及び、腱の菲薄化あるいは断裂が観察された。アキレス腱菲薄化部あるいは断裂部周囲には、多核を有する酒石酸抵抗性酸性ホスファターゼ陽性の破骨細胞様細胞が観察され、それらにはMMP-9、カテプシンKなどの、蛋白分解酵素の局在も見られた。したがって、これらの動物モデルにおける腱断裂には、多核の破骨細胞様細胞が重要な役割を果たすことが示唆された。本年度は、実際に患者から得られた病理標本において、同様の観察を行った。その結果、関節リウマチにより断裂を来たした腱には、組織学的に、多核を有する酒石酸抵抗性酸性ホスファターゼ陽性の破骨細胞様細胞が観察され、それらにはMMP-9、カテプシンKなどの、蛋白分解酵素の局在も観察された。したがって、これらの関節リウマチの腱断裂においても、多核の破骨細胞様細胞が重要な役割を果たすことが明らかとなった。本研究の目的は、関節リウマチ患者の日常生活に大きな障害を来たす腱断裂の機序の解明と治療法の確立である。そのため、本年度は、まず、関節リウマチモデル動物の腱の形態学的解析を行った。関節リウマチモデル動物については、自然発症モデルSKGを使用する予定であったが、それらに加え、関節炎カクテル(免疫生物学研究所、群馬、日本)で誘導した関節リウマチマウスモデルも用いた。このモデルマウスは、生後7週齡Balb/cマウス(20g、n=6)に2mgの抗体混合液を静注し、5日後にさらに、LPS溶液(1ml)を腹腔内投与するもので、LPS投与後7日には足関節および足趾の腫脹が肉眼的にされる。いずれのマウスも、関節炎発症時には、組織学的に、関節周囲炎、軟骨・軟骨下骨組織の破壊、パンヌスの形成が見られ、アキレス腱周囲にも炎症が及び、菲薄化あるいは断裂を来たした。アキレス腱菲薄化部あるいは断裂部周囲には、多核を有する酒石酸抵抗性酸性ホスファターゼ陽性の破骨細胞様細胞が観察され、それらにはMMP-9、カテプシンKなどの、蛋白分解酵素の局在も観察された。今後は、微細学的観察や組織化学的観察、分子生物学的解析を進め、実際に患者から得られる病理標本においても観察を進める予定である。
4者系の共進化:クリシギゾウムシ・寄主植物・寄生蜂・共生細菌系の適応進化を探る

クリシギゾウムシは、ブナ科植物の種子(ドングリ類)に産卵を行う。しかし、ブナ科の植物の多くは、ゾウムシに食害されないために、タンニンという毒物質を高濃度で種子に蓄積するよう進化している。しかし、昆虫は一般に、タンニンを分解する酵素を生成できないと考えられており、なぜクリシギゾウムシがブナ科種子を食害できるのか、明らかになっていない。そこで、クリシギゾウムシ体内に共生する細菌類に着目して、この細菌類がドングリの毒を無害化する上で「助っ人」として働いているのか、検証を行った。タンニン分解酵素(タンナーゼ)の生成は、様々な細菌類で報告されおり、この細菌の潜在的な機能に焦点をあてた。ゾウムシ体内からクローニングした細菌の16S rRNA遺伝子の塩基配列を調べたところ、新奇な共生細菌がクリシギゾウムシと共生していることが明らかになった。この細菌(以下、一次共生細菌)の16S rRNA配列をターゲットとした蛍光in situハイブリダイゼーションの結果、この一次共生細菌がゾウムシ幼虫体内の中腸前部に付着する「菌細胞塊」に詰め込まれていることがわかった。さらに、雌成虫の体内では、卵巣小管への感染が認められ、卵への感染を通じて、ゾウムシの世代を越えてこの一次共生細菌が受け継がれていることが推測された。この一次共生細菌の塩基配列の組成から、ゾウムシとの長い共生関係を経てゾウムシの体内でしか生存できないような進化を遂げていることが示唆され、すでにゾウムシの「体の一部」としてゾウムシの生存や繁殖に有利な機能を提供していることが推測された。日本各地から集め準クリシギゾウムシからDNAを抽出し、真性細菌の16rDNAに特異的なプライマーでクローニングを実施したところ、腸内細菌科の細菌を中心に様々な系統の細菌がゾウムシ体内に存在していることが明らかになった。なかでも、最も高頻度で出現した細菌(以下、一次共生細菌)は、データベース上に近縁な種が存在しない新奇な共生細菌であった。この一次共生細菌は、自由生活を行うほかの細菌に比べてDNAの塩基組成がATに偏っており、昆虫に絶対的に依存して生活する細菌であると予想された。この一次共生細菌の16SrRNAに特異的に結合する蛍光プローブを作成して、蛍光in situハイブリダイゼーション(FISH)を行ったところ、雌成虫の卵巣小管への感染が確認された。この結果より、クリシギゾウムシの一次共生細菌が、雌ゾウムシ体内の卵への感染を通じて、次世代のゾウムシ個体に垂直伝播されることが推察される。また、クリシギゾウムシの終令幼虫から消化管を取り出し、上記のプローブによるFISHを実施したところ、中腸の前半部(胃のやや後ろ)に一次共生細菌がびっしりと詰まった細胞(菌細胞)がみつかった。この菌細胞は、中腸をとりまく形で存在しており、宿主ゾウムシの消化機能に対して一次共生細菌が何らかの関与をしていることを窺わせる。
フラーレン結晶の金属化

本年度の研究実績はおもにC_<60>結晶を金属化するために必要なC_<60>のポリ-マ化についての成果である。それはC_<60>シェルの研究とC_<60>結晶の光照射硬化の2点に集約される。(1)C_<60>シェルの研究:C_<60>結晶を酸素雰囲気中である温度以上で加熱すると、C_<60>結晶の表面層だけが残りそのほかは蒸発してしまうことがある。その表面層のことをシェルと呼んでいる。シェルの生成条件はいままでのところ不明であったが、われわれの研究の結果、可視光の照射下で大気中で580Cで再昇華させると生成することがわかった。また一度大気中で可視光のもとで照射したあと、動的に300Cで加熱しながら真空焼鈍するとシェルは形成されなかった。このことから、酸素と光がシェルの形成に重要な役割を果たすことがわかった。シェルの構造は透過電子顕微鏡、ラマン分光、などの研究からアモルファス炭素の構造が最も可能性があることがわかった。原子間力顕微鏡(AFM)観察によればこの膜厚は5nmであり、膜は比較的均一な構造をたもっていることが判明した。(2)C_<60>結晶の光照射硬化:C_<60>結晶に光照射するとポリマー化が起こることが知られている。C_<60>結晶が白色光で光照射すると微小硬さが異常に増加し400Kでその増加がなくなることが見いだされている。また、その波長依存性は赤色で最大になり赤色より波長の長い光に対しては影響のないことも見いだされた。ポリマー化の速度は紫外線の領域の方が大きいとされているが、われわれの結果は硬さの光照射硬化はC_<60>のポリマー化と光の浸透深さに依存することを示している。
超高耐圧ロバスト素子を目指した炭化珪素半導体の欠陥制御に関する研究

超高耐圧素子の作製に必要な高純度・厚膜SiCエピタキシャル成長層の形成と欠陥評価について研究を行った。得られた成果は以下のとおりである。(1)独自の化学気相堆積法により、70-90μm/hの高速で70-160μmの厚膜SiCエピタキシャル成長層を形成することに成功した。成長層の表面は原子レベルで平坦であり、残留不純物密度が約1E13/cm3という高純度結晶を得た。また、SiCパワーデバイスの信頼性に悪影響を及ぼす基底面転位(基板から伝播)の密度が、成長速度の上昇と共に減少することを見出した。(2)フォトルミネッセンス(PL)のマッピング測定により、SiC成長層中に存在するin-grown積層欠陥を高速・非破壊に検出できることを示した。SiC成長層中に存在する主要なin-grown積層欠陥には3種類あり、高分解能断面電子顕微鏡(TEM)観察により、各々の欠陥構造を原子レベルで明らかにした。さらに、成長初期プロセスの改良により、積層欠陥密度を大幅に低減することに成功した。(3)n型SiC成長層に存在する点欠陥(深い準位)をショットキー障壁容量の過渡特性解析(DLTS)により評価した。伝導帯底から約0.6eVおよび1.5eVのエネルギー位置に主要な電子トラップが存在すること、およびこれらの点欠陥は1700°Cの高温熱処理を施すことにより、密度を大幅に低減できることを明らかにした。
細胞膜における情報伝達分子筏の形成と機能:一分子観察・操作法の開発と応用

本研究の目的は、『【1】細胞膜上では、情報伝達分子(特に脂質を結合した分子)の多くは、ラフトと呼ばれる直径50nm程度といわれる脂質ドメインに集合していること、【2】細胞膜における情報伝達経路のクロストークには、情報伝達分子「ラフト」が鍵となる働きをしている。』という作業仮説を検討することである。そのために、まず、ラフトを可視化する方法を開発しそれを応用することを目指した。ある種の脂質は、ラフトへ選択的に分配されると言われている。そこで、リン脂質の拡散運動を、一分子で25マイクロ秒の時間分解能で観察する方法を開発した。その結果、細胞膜は脂質分子の拡散に対しても50-250nm程度の大きさにコンパートメント化されており、脂質分子は10-100ms毎にその境界を越えて拡散することがわかった。このようなコンパートメントの境界は、膜骨格にアンカーされている膜貫通型タンパク質が、立体障害と流体力学的な摩擦の効果によって、膜骨格上にピケラインを形成して出来ていることが明らかになった(アンカード膜タンパク質ピケットモデル)。GPIアンカー型タンパク質であるCD59(C8受容体)も同様の運動制限を受ける。それに加えて、小さい会合体を形成すると、頻繁に運動が一時停止することがわかった(平均8秒に一回、約0.9秒程度)。停留点の大きさは110nm程度である。停留の頻度は、コレステロールを減少させると、3分の1程度に減少した。したがって、これらの停留点がラフトである、あるいは、停留したのは一時的にラフトが形成されたためである、という可能性が考えられる。この可能性をさらに検討していきたいと考えている。
アルツハイマー病神経細胞死におけるp25/Cdk5の役割

アルツハイマー型老人性痴呆症は記憶を担う神経細胞が通常の老化より、より早く、より多く、細胞死により欠落するために発症する記憶障害である。現在は、Aβ、プレセニリン、異常リン酸化タウなどがアルツハイマー病の発症や進行に関与していることが示され、それらが研究の中心となっている。しかし、それらと神経細胞死との関連については未だに判っていない。Cdk5はタウキナーゼとしてアルツハイマー病への関与が示唆されてきたが、最近ではCdk5の活性化サブユニットp35のカルパイン依存的な限定分解による異常活性化が神経細胞死との関連で関心を集めている。一方、前頭側頭葉型痴呆症であるFTDP-17はタウの変異が原因であり、異常にリン酸化されたタウが脳内に凝集することが知られている。しかし、変異とリン酸化の関連も判っていない。本研究では、Cdk5によるFTDP-17型変異タウのリン酸化をin vitroとin vivoで検討しするとともに、p25/Cdk5が細胞死を引き起こす仕組みを詳細に解析した。Cdk5/p35、Cdk5/p25、Cdk5/p39の各種Cdk5を精製し、FTDP-17タウをリン酸化したところ、in vitroでは変異タウはリン酸化され難いことが判った。しかし、微小管に結合させると、リン酸化は回復し、野生型以上のリン酸化が見られた.リン酸化部位にはついては変化が見られず、変異による構造変化がリン酸化の度合いに影響を及ぼしているようであった。また、Cdk5の神経細胞については、小胞体ストレスを与えると、p35がp25へと限定分解され、細胞死の促進に関与することが示された。