hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
マイクロゲルプリンターの研究開発

・打出し装置の改良昨年度に試作した打出し装置の改良を行った。インクジェットノズルの支持部および輸液装置の構造および材質を検討しながら試作を繰返した。その結果,軽量コンパクトでありながら簡単にノズルを交換可能で,4種類の液体を輸液可能なノズル支持部を開発できた。使用する液体の種類によっては頻繁にノズルが詰まることがあるため,ノズルを容易に交換可能なことは実験を行う上で有利である。また輸液ライン内への液体の充填や除去の際に加圧や減圧を行う関係上,輸液ラインの着脱部には十分な密封性能を持たせた。さらに,輸液ラインの材料はテフロンもしくはPEEK樹脂とし,輸液ライン中の液体に影響を与えないようになっている。輸液ラインとノズルの支持部は分離可能で,必要ならば輸液ラインのみを交換可能である。ノズルや輸液ラインなど,液体と直接接触する部分が容易に交換可能であることは,生体材料などの高度に清潔な管理が要求される材料を取り扱う際に必要不可欠となる。・3次元ゲル構造の試作およびその観察PVA(Poly Vinyl Alcohol)を用いて基材の粘度を調整し、その中に3次元ゲル構造を構築する方法は昨年度に確立した。本年度は最適なPVA濃度について検討した。検討は3次元のチューブ構造を試作し,その長さや微細構造の観察により行った。良好な結果が得られたのは1520%のPVA濃度の基材を用いた場合であった。最適なPVA濃度が得られたことにより,より多様な3次元ゲル構造の構築に成功した。特にチューブ状構造に関しては,血管などと類似の層構造を持つものなどを構築できた。また,一辺が10mm程度の多色積層構造などの構築にも成功した。異なる波長の光源により励起される複数の蛍光インクをそれぞれ混入した液体で構造を構築することで,比較的大きな3次元ゲル構造中の多色の微細構造を色ごとに個別に観察することも可能となった。・打出し装置の試作まずインクジェットヘッドに輸液するための機構を試作した。インクジェットヘッドは一個のヘッドに複数のノズルがあり、それぞれのノズルから異なる液体を吐出させるために複数の輸液ラインをヘッドに取付ける必要がある。また、この機構はプリンターに組み込まれ、高速に往復運動して大きな加速度が加わることを考慮すると、できるだけ小型軽量なものにしなければならない.さらに、プリンター専用のインクだけでなくぐアルギン酸ナトリウム水溶液やその他の液体をノズルに供給するためには、独自の輸液機構を試作する必要があった.このような機構を試作するために、工作機械を購入して輸液機構を試作した。いくつかの試作を繰返し、まずは単一液体、次いで2種類の液体を同時に打出す機構を実現した。インクジェットヘッドには静電式およびピエゾ式のものを用いた。これらの駆動電圧はそれぞれ40Vおよび80Vと比較的山高圧であり、打出し信号の周波数や波形の調整や外部トリガ信号による制御などを行う必要から、独自の信号発生器を製作した。また、インクジェトヘッドを3次元的に動かせるプリンターを試作した。・アルギン酸ゲルによる構造の試作インクジェットヘッドからアルギン酸Na水溶液を塩化Ca水溶液中に打出して粒子状アルギン酸ゲルを試作した。.この結果アルギン酸Naは0.8%、塩化Caは2%の水溶液を用いるのが適していると判断した。.次に、塩化Ca水溶液表面に数十μm間隔でアルギン酸ゲルのラインを引くことで、シート状の構造を得ることが出来た。試作中の様子は焦点距離が十cmの単眼鏡を用いて観察し、得られたゲル構造物はデジタルカメラでしたさらに塩化Ca水溶液にポリビニルアルコールを溶かし、粘度を増加させることで、浮遊しているゲル構造物が水溶液表面上を移動することを防止し、積層させることで3次元ゲル構造の構築に成功した。

また,一辺が10mm程度の多色積層構造などの構築にも成功した。異なる波長の光源により励起される複数の蛍光インクをそれぞれ混入した液体で構造を構築することで,比較的大きな3次元ゲル構造中の多色の微細構造を色ごとに個別に観察することも可能となった。
ヒト病刺激伝導系の加齢、各種病態におけるアポトーシスを介した変性機構の検討

当教室において司法、行政解剖を施行した事例の心刺激伝導系につき、TUNEL法を用いてアポトーシスの発現状態について検索すると共に、アポトーシス関連抗原であるFas抗原の発現について検索し、さうに抗PCNA抗体を用いて、間質における間葉系細胞の増殖状態を評価した。その結果、覚醒剤常習者、アルコール常用者、右冠状動脈有意狭窄保持者突然死例の房室結節、His束内において、健常非心臓死例に比し、高いアポトーシスの出現を認め、Fas陽性細胞の出現頻度も高かった。またこれらの事例では、房室結節内にPCNA陽性の間葉系細胞が少数ながら観察されたことから、これらの事例においては、健常者よりも特殊心筋のアポトーシスが亢進し、心筋の変性脱落がより強く起こっており、その結果、間葉系細胞のactivationが起こり、線維化が進展するものと考えられることから、一部の病態において、刺激伝導系内にアポトーシスを介した心筋変性が起こっていることが示唆された。また覚醒剤、アルコール常習者の多くには、作業心筋内同様、房室結節内にリンパ球の出現が観察された、これがアポトーシスを促進するものなのか、アポトーシスを介した心筋変性の結果なのかという点については、今後の検討課題と考えられる。また本研究施行中に、1.右冠状動脈に有意狭窄を有する一部の心臓性突然死において、房室結節周囲の上部心室中隔に小梗塞の形成が認められること、2.交通事故を始めとした法医学的に発生機序の推定が困難な不慮の事故死例の一部に刺激伝導系の形態学的異常が認められ、事故発生と因果関係を有する可能性があること、3.アルコール常習者突然死例の一部に房室伝導系に非常に強い脂肪浸潤が観察されること等を見出し、それぞれ英文紙に投稿中である。本研究の遂行のため、平成12年度から剖検例において、高度腐乱死体、白骨死体を除き、連続的に心刺激伝導系の標本を作製し、現在100例を越えている。各事例の背景等も考慮に入れ、不整脈が死亡原因に関与した可能性が考えられる事例につき、心臓の詳細な検索を行い、特に不整脈が死因、ないし外因死の発生に関与したことが強く疑われるmild Epstein's anomaly、Anomalous origin of coronary artery、hypertrophic cardiomyopathy等の稀少例における心刺激伝導系ないし周囲作業心筋の変化について症例報告を作成、または投稿中である。従来突然死への関与が指摘されている右脚走行異常を伴うHis束の左室心内膜下側への変位例をまとめ、これらの破格は伝導系標本を連続的に作成すると比較的よく認められるものであり、左心系の高度の圧負荷等の異常環境がない場合には直接的に不整脈の原因になるとは考えにくいことが見出されたため現在論文作成中である。覚醒剤使用事例、僧房弁逸脱症例について症例を蓄積し、刺激伝導系を含む上部心室中隔標本を用いて、アポトーシス検出、免疫染色、画像解析を遂行中であり、現在、これらの症例の一部において、上部心室中隔の作業心筋に高度の病的変化が見出されている。有意狭窄を伴う冠状動脈硬化症等の心臓疾患を有さず、外因死であることが明白な事例につき、前期病的変化群の対象コントロールとして、または加齢による刺激伝導系ないし周囲作業心筋のアポトーシス出現状況を明らかにする目的で検索中である。
高次集積反応場効果にもとづく人工酵素の設計

1.人工酵素の触媒活性を制御するための人工レセプターとして,誘導適合型の包接機能をもつ「タコ」形シクロファン,「鍵と鍵穴」機構により分子を識別できる「かご」型シクロファン,これらの中間的性質をもつステロイドシクロファン,エンテロバクチンモデルとしてのヘキサパスシクロファン,DNAの認識が可能な機能性インターカレータ等を種々分子設計士,それらの合成に成功した。これらの人工レセプターは,水中において,個々の分子の構造的特徴を反映して細胞質レセプターとしての優れた機能を発現した。さらに合成ペプチド脂質が形成する二分子膜中に埋め込むことによって,人工細胞膜レセプターとしても有効に機能した。特に,光学活性な「かご」型シクロファンを二分子膜に組み込むことによって,人工酵素の基質である疏水性アミノ酸類に対する不斉認識能の発現が認められた。合成ペプチド脂質が形成する二分子膜ベシクルに,疏水性ビタミンB_6誘導体と金属イオンを組み込んで構成した二分子膜型人工酵素は,トランスアミナーゼ,トリプトファンシンターゼ,およびアルドラーゼとしての機能を発現し,温和な条件下の水中において,立体選択的かつ触媒的なアミノ酸変換反応が可能になった。疏水性ビタミンB_<12>誘導体を組み込んだ二分子膜型人工酵素は,メチルマロニルCoAムターゼ,グルタミン酸ムターゼ,およびα-メチレングルタル酸ムターゼとしての機能を発現した。さらに,基質活性化の助触媒を組み合わせることによって,炭素骨格の組み替えをともなう異性化反応を触媒的に進行させることが可能になった。トランスアミナーゼ活性を有する二分子膜型ビタミンB_6人工酵素と,グルタミン酸ムターゼ活性を有する二分子膜型ビタミンB_<12>人工酵素間で連係機能の発現が可能であることを明らかにした。1.“inducedーfit"型の包接機能を有する「タコ」型シクロファン3種類、および“lockーandーkey"型の包接機能を発現する「かご」型シクロファン1種類を新たに合成した。「タコ」型シクロファンは水中において疎水性効果と静電効果により有機ゲスト分子を識別することを見出した。また、金属配位部位をもつ「タコ」型シクロファンは疎水性相互作用と配位相互作用により有機分子を強力に包接することが明らかになった。さらに、「かご」型シクロファンはD体のフェニルアラニンおよびL体のトリプトファンを選択的に包接し、アミノ酸の不斉認識を行う機能をもつことを見出した。2.ビタミンB_6およびビタミンB_<12>活性を示す人工二分子膜脂質を合成した。すなわち、天然のビタミンB_6のピリジン環窒素を4級化し、2本の炭化水素鎖を導入した疎水性ビタミンB_6を合成した。また、疎水性ビタミンB_<12>にアスパラギン酸残基を有する合成脂質を共有結合的に導入した化合物を合成し、これが水中でアラニン残基をもつ合成脂質と混合二分子膜を形成することを明らかにした。3.水中でアラニン残基を有する合成脂質が形成する合成二分子膜ベシクルと疎水性ビタミンB_<12>の非共有結合的組み合せにより人工酵素を構成し、炭素骨格の組み替えを伴う異性化反応を触媒的に進行させることに成功した。また、このビタミンB_<12>人工酵素系で反応生成物を与える最終段階の水素源を明らかにした。4.水中でヒスチジン残基を有する合成脂質が形成する合成二分子膜ベシクルと疎水性ビタミンB_6の組み合せにより人工酵素を構成した。この触媒系によりセリンとインド-ルからトリプトファンを合成することに成功した。このビタミンB_6人工酵素は天然酵素と異なる立体選択性を発現し、D体のトリプトファンが優先的に生成することを見出した。

1.「inducedーfit」型包接機能をもつ「タコ」形シクロファン2種類「lockーandーkey」型包接機能をもつ「かご」型シクロファン2種類を新たに合成することに成功した。さらに、DNAに対する人工レセプタ-として、ビオロ-ゲンをリンカ-部にもつビスインタ-カレ-タを新たに合成した。2.「かご」型シクロファンはゲスト分子の形状および特性にもとづいた分子認識能を発現することを見出した。この分子認識挙動を、分子設計支援・分子構造解析システムを用いたコンピュ-タ計算(分子力場計算,分子動力学計算)により検討し、形状認識効果および静電的効果の重要性を明らかにした。さらに、リンカ-部として可逆的な電子受容体であるビオロ-ゲンとインタ-カレ-ション部として、2つのアクリジン残基をもつ人工レセプタ-がDNAに対して顕著な認識能を示すことを明らかにした。3.「タコ」形シクロファンは合成ペプチド脂質と二分子膜型ハイブリッド分子集合体を形成し、有効な人工レセプタ-として機能することを見出した。4.合成ペプチド脂質、疎水性ピリドキサ-ル誘導体、金属イオンから構成されるビタミンB_6人工酵素を用いて、アミノ酸のβー置換反応を基質選択的・立体選択的に進行させることが可能になった。また、アルドラ-ゼ反応によるβーヒドロキシアミノ酸の合成反応にも本触媒系が有効であることを見出した。5.合成二分子膜に非共有結合的に疎水性ビタミンB_<12>を固定化した人工酵素を用い、アミノ酸の骨格変換を司どるグルタミン酸ムタ-ゼのモデル化に成功した。さらに、この反応機構について検討し、酵素と類似の機構で反応が進行することを明らかにした。1.シクロファンに骨格に複数の剛直なステロイド部位を導入した人工レセプターならびに分子内に3次元的な不斉空洞を有する「かご」型シクロファンを合成二分子膜中に埋め込んでハイブリッド系を構成し、その特異な分子認識能を見出した。この分子認識特性をコンピュータ計算(分子力場計算,分子動力学計算)により検討し、形状認識および静電効果の重要性が明らかになった。2.水中のpHに応答して分子認識能を顕著に変化させることができるシクロファン型の新規人工レセプターの開発に成功した。3.DNAを認識するオリゴヌクレオチドを酸化還元活性基で修飾し、3本鎖DNAの形成反応を熱化学的測定により明らかにした。4.疎水性ビタミンB_6と合成脂質が形成する分子集合体を用い、グリシンと種々のアルデヒド類から種々のβーヒドロキシアミノ酸を立体選択的に合成する人工アルドラーゼの開発に成功した。5.軸不斉性のビナフチル基を有する合成脂質を用いた二分子膜型ビタミンB_6人工酵素により立体選択的βー置換反応(インドールとDL-セリンからL-トリプトファンの合成)が進行することを見出した。6.ストラップ型疎水性ビタミンB_<12>を用いた不斉アルキル化反応を行い、高いエナンチオ選択性を見出した。2-ブロモメチル-2-メチルプロピオン酸エステル類を基質とした反応では、最高75%eeの光学収率が得られた。アルキル化反応速度の測定から、エナンチオ選択性は動力学的に決定されていることを明らかにした。
高分子"マクロ結晶"研究に最適な高分子ミクロスフェアの創製とその凝集系の相転移

昨年度はSBS(スチレン-ブタジエン-スチレン)トリブロック共重合体を出発試料として、ポリブタジエン(PB)球状ミクロ相分離構造を作製し、さらにそのPB鎖を化学架橋してPBミクロスフェア構造を作製した。今年度はこれを用いて、高分子"マクロ結晶"の相転移現象の研究を行った。1.架橋PBミクロスフェア構造の温度に対する安定性本実験系が純粋に"マクロ結晶"の熱力学的挙動が研究できるようなモデル系であるためには、"マクロ結晶"の基本的構成要素である架橋PBミクロスフェア構造(おもにサイズ)が温度によって変化しないことが望まれる。このことを確認する実験を温度可変の小角X線散乱(SAXS)測定によって行なった。また、圧力による変化も調べた。今後は圧力印加状態下でSAXS測定によって構造解析を行う。2.相転移現象("マクロ結晶"の融解あるいは近距離秩序の無秩序化過程、一次相転移性)"マクロ結晶"の温度変化にともなう融解過程を温度可変のSAXS測定により追跡した。SAXSデータをパラクリスタル理論に基づき解析することによって、"マクロ結晶"格子の乱れ因子を決定し、その温度変化が"マクロ結晶"の融解(無秩序化)温度で不連続に変化するかどうかを検討する予定であったが、初期試料で望み通りの高秩序が達成されなかった。そこで、4000気圧までの高圧を印加した。その結果、すでにある程度秩序化している試料はさらに秩序化したが、最初からあまり秩序化していない試料ではさらに秩序化度が良くなることはなかった。今後は圧力印加後の時間依存性を詳細に検討する。本研究では、ブロック共重合体が形成する球状ミクロ相分離構造を基本的構成要素とした、"マクロ結晶"の熱力学的挙動について検討し、高分子材料に代表されるソフトマテリアルが形成する"マクロ結晶"の特徴を明らかにすることを目的とした。今年度は、ブロック共重合体の形成するミクロスフェア構造を化学的に架橋して固定化することで、"マクロ結晶"の基本的構成要素の構造変化を最小限に抑制し、純粋に"マクロ結晶"の熱力学的挙動が研究できるようなモデル系を創製する。来年度はこれを用いて、"マクロ結晶"の近距離秩序(充填格子)、長距離秩序(グレインの大きさ、グレイン間の相関)、相転移現象("マクロ結晶"の融解あるいは近距離秩序の無秩序化過程、一次相転移性)を研究する予定である。今年度の実験では、SBS(スチレン-ブタジエン-スチレン)トリブロック共重合体を出発試料としてPS(ポリスチレン〉と相溶性のあるホモポリマー(PSあるいはポリフェニレンエーテル)をブレンドさせて系全体の平均組成をPS一rich(PS組成85wt%以上)とすることで、SBSトリブロック共重合体にポリブタジエン(PB)ミクロスフェア構造を形成させ、PBコア粒子内部でのPB鎖の化学架橋による固定化を行なった。小角X線散乱(SAXS)測定を行い、サイズのそろった球状ミクロドメインが形成されているかどうかの判定を行った。その結果、低分子量PSホモポリマーをブレンドした試料では、比較的サイズの一様な球状ミクロドメインが形成されたが、その後、トルエンに再溶解させて分別し、架橋PBミクロスフェアを単離する操作で、完全に溶解せずにゲル化した。原困は、共連続構造が混在したためであり、出発物質として用いたSBSトリブロック共重合体のPB分率が小さすぎたと考えられる。現在、PB分率がもっと大きなSBSトリブロック共重合体を用いた試科で継続検討中である。とりあえず、上述の検討試料でトルエンに再溶解した成分を単離して、3次元"マクロ結晶"を自発的に形成させた。SAXS法、原子間力顕微鏡タッピング・モード観察、透過型電子顕微鏡観察を行い、近距離ならびに長距離秩序性を検討した。
放射能市民測定運動におけるフェミニスト・スタンドポイント研究

本研究は、女性の生活という立場から科学技術の有り様を議論するフェミニスト・スタンドポイント(FSP)アプローチを用いてチェルノブイリ原子力発電所以降に日本で行われてきた放射能市民測定運動を分析し、女性らの測定実践が果たしている社会的役割と、日本社会における放射線をめぐる「科学」の在り方を検討することを目的としている。当事者へのインタビュー、測定記録や日誌、会議録等の資料、ニューズレター、パンフレット、書籍等の発刊物の分析を通して体系的な調査を行う。初年度は、福島第一原子力発電所事故以前から放射能測定活動に携わってきた第一波活動家らが、放射能市民測定運動の中で行ってきた測定実践および、それらを通して形成されてきた理念の調査を探索的に行った。すでにつながりのある活動家が体調不良のためインタビューの実施ができなかったが、一方で、別の経路から長期活動を行っている活動家との連携が形成されつつある。本年度明らかになったことは、震災以前の市民放射能測定には、想像以上に「専門家」の関わりがあるということである。核科学に限らず、環境測定や化学分析の領域で専門的トレーニングを受けた専門家らが、その技能を活かし、市民の立場から放射能測定に関与してきている。また逆に、非専門家という立場からは、福島原発事故以前に実施されていた、放射能以外の化学物質に関する(女性を中心とした)市民運動に関わった活動家らが、福島原発事故後に放射能測定に関わった事例についても調査を行った。同時に本年度は、フェミニズム理論、特にFSPアプローチによる研究群の探索的調査を行った。この過程で、新マテリアル・フェミニズムと呼称される新たな動きが、本研究の分析枠組みとして援用できるのではという感触を得た。今後は、FSPアプローチと新マテリアル・フェミニズムとの関連を含めた理論枠組みの検討を行う。東京都内でつながりのある活動家が病気療養のためインタビューが実施できなかったことが大きい。チェルノブイリ原発事故後から活動を続けている方は高齢になってきていることもあり、なるべく早い時期にインタビューを行う必要がある。幸い、別の経路から震災前より活動をされている活動家の方とつながりができたので、次年度以降は複数のルートでインタビュー対象者のリクルートを行う予定である。チェルノブイリ原発事故の後、全国で市民測定所が設立され、福島原発事故の時点でも放射能測定を行っていた。また福島原発事故の後には、母親らを中心とした放射能測定の動きが全国的に活発化した。こうした市民による測定運動には、多くの女性が関わっているが、なぜ「非研究者」で「女性」という層が放射能測定を行うのか、また市民科学としての測定運動は社会の中でどのような意義があるのかを体系的に描くことを目標として研究を行っている。次年度は、当事者インタビューのうち、第一波の活動家の範囲を拡げたリクルートを行い、聞き取りを実施する。初年度に形成できたネットワークにより、当初、計画していた人数・内容のインタビューが実施できる予定である。また、「専門家」による市民放射能測定運動への関与事例として、高木仁三郎の定義による「市民科学者」という視点から、低線量被曝の身体的影響の疫学的研究を行い、後に欧州放射線リスク委員会(ECRR)の初代議長となったアリス・スチュワート(Alice Mary Stewart)、核実験放射性降下物による海洋汚染の研究を行った猿橋勝子の研究・活動を参照点として調査する。こちらは文献調査が中心となる予定である。同時に、福島原子力発電所事故後に新たに参入した活動家らの調査も開始する。こちらも聞き取り調査および文献調査を中心に実施する予定である。フェミニズム理論に関しては、引き続き、FSPアプローチおよび新マテリアル・フェミニズムに関する理論枠組みの検討を行う。

チェルノブイリ原発事故後から活動を続けている方は高齢になってきていることもあり、なるべく早い時期にインタビューを行う必要がある。幸い、別の経路から震災前より活動をされている活動家の方とつながりができたので、次年度以降は複数のルートでインタビュー対象者のリクルートを行う予定である。チェルノブイリ原発事故の後、全国で市民測定所が設立され、福島原発事故の時点でも放射能測定を行っていた。また福島原発事故の後には、母親らを中心とした放射能測定の動きが全国的に活発化した。こうした市民による測定運動には、多くの女性が関わっているが、なぜ「非研究者」で「女性」という層が放射能測定を行うのか、また市民科学としての測定運動は社会の中でどのような意義があるのかを体系的に描くことを目標として研究を行っている。次年度は、当事者インタビューのうち、第一波の活動家の範囲を拡げたリクルートを行い、聞き取りを実施する。初年度に形成できたネットワークにより、当初、計画していた人数・内容のインタビューが実施できる予定である。また、「専門家」による市民放射能測定運動への関与事例として、高木仁三郎の定義による「市民科学者」という視点から、低線量被曝の身体的影響の疫学的研究を行い、後に欧州放射線リスク委員会(ECRR)の初代議長となったアリス・スチュワート(Alice Mary Stewart)、核実験放射性降下物による海洋汚染の研究を行った猿橋勝子の研究・活動を参照点として調査する。こちらは文献調査が中心となる予定である。同時に、福島原子力発電所事故後に新たに参入した活動家らの調査も開始する。こちらも聞き取り調査および文献調査を中心に実施する予定である。フェミニズム理論に関しては、引き続き、FSPアプローチおよび新マテリアル・フェミニズムに関する理論枠組みの検討を行う。東京都内でつながりのある活動家が病気療養のためインタビューが実施できなかったため。別の経路から震災前より活動をされている活動家の方とつながりができたので、次年度以降は複数のルートでインタビュー対象者のリクルートを行い、初年度計画数も含めたインタビュー実施を行う予定である。
新しい外リンパ瘻診断マーカーCTPの時空間的発現の検討

CTP(cochlin tomoprotein)は外リンパに豊富に存在する一方、内耳以外の組織から検出されないことから、外リンパ瘻の診断マーカーとして臨床応用が期待されている注目のタンパク質である。しかしその機能についてはほとんど解明されていない。我々はCTPの機能解明を目的として、ラット内耳発達過程における外リンパ中のCTPの発現パターンを時空間的に解析を行なった。その結果、CTPは特徴的な発現パターンを示すタンパク質であることが解明された。我々が発見した、cochlinのアイソフォームの一つCTP(cochlin-tomoprotein)は、外リンパに特異的に発現しており、陽性コントロール(アブミ骨手術におけるアブミ骨底板開窓時の外リンパ)の感度、特異度は、共に100%近い値を示すことから、外リンパ瘻の診断マーカーとして臨床応用が期待されている注目の蛋白である。しかしながら、CTPの基礎的研究はほとんど行なわれておらず、CTPが実際どのように存在し、どのような機能を持った蛋白など、詳細は不明である。研究は内耳の未熟な時期から、成熟する過程におけるCTPの発現パターンを解析する予定である。これをCTPの発現パターンが良く知られているヒトで行うことは、胎生期の外リンパをサンプルとしなければならなくなるため困難である。このため、実験動物として我々が普段から用いているラットを使用して検討を進めていくにあたり、ヒト外リンパに含まれているCTPがラットにおいて同様の発現パターンを示すかを確認する目的で平成21年度の研究を計画した。平成21年度は、ヒトとラットのCTPの発現パターンの差異を調査する目的で、ヒトと成獣ラットの外リンパをそれぞれ用いてウェスタンブロットを行い、発現パターンの差異の解析を行なった。すると、ラット成獣外リンパにおいて、ヒト外リンパ同じく16k Da付近にシグナルを認めることが明らかとなった。以上の結果より、ラット外リンパはヒトと同じくCTPと思われるバンドを持つことが明らかとなった。このため、予定通りラットを用いて次の研究段階を進める予定である昨今、cochlinのアイソフォーム(p40,p44,p63,CTP)の一つであるCTP(cochlin tomo-protein)は、内耳に特異的に発現していることから、外リンパ瘻の診断マーカーとして有用視されている。しかし機能を含めたその詳細についてはほとんど分かっていない。われわれは、内耳の未熟な時期から、成熟する過程における外リンパにおけるCTPの発現パターンを解析する予定で研究を行った。CTPの発現パターンが良く知られているのはヒトであるが、胎生期の外リンパをサンプルとしなければならなくなるため困難である。このため実験動物として我々が普段から用いているラットを使用した。平成22年度は、生後ラット内耳発達過程におけるCTPの発現パターンの推移を確認する目的で、ウェスタンブロットの手法を用いた解析を行なった。その結果、外リンパにおけるCTPの発現パターンはラットの生後初期に最も多く発現を認め、内耳の成熟につれて減少することが明らかになった。この結果は従来分かっていたcochlinの他のアイソフォーム(主にp40)の発現パターンと全く異なっていることから極めて興味深い結果であった。但し今までcochlinの発現の確認に使用したサンプルが内耳組織であったものに対し、本研究ではCTPの確認に外リンパを使用していることから、内耳組織におけるCTPの発現や逆に外リンパにおけるp40を始めとした他のccchlinアイソフォームの発現パターンの解析が必要と考えられるので、これを23年度以降の検討課題としたい。近年、cochlinのアイソフォーム(p40,p44,p63,CTP)の一つであるCTP(cochlin tomo-protein)は、内耳に特異的に発現していることから、外リンパ瘻の診断マーカーとして有用視されている。内耳の未熟な時期から、成熟する過程における外リンパにおけるCTPの発現パターンを解析する予定で研究を行った。さらにこの結果は、cochlinアイソフォームの形成メカニズムに関して重要な示唆を与えるものと考えられた。また外リンパをサンプルとして生後発達過程の特定タンパクの発現パターンを調べた研究は今までになく、今後、今まであまり研究されていない外リンパ中の各種タンパクに関する研究を行なうことにより、内耳研究のさらなる発展が望めるものと考えられた。
慢性腎臓病患者に対する運動指導を主体とした疾患管理の長期効果

本研究は、慢性腎臓病患者(CKD)患者のうち、透析治療が導入されていないCKD患者(保存期CKD患者)の身体機能(運動機能、身体活動量ならびに日常生活活動(ADL)を含む))を詳細に評価するとともに、これらの低下の有無と腎機能(CKDステージ)との関連を分析し、一般外来における身体機能評価に基づく運動指導(疾病管理)の効果を検討したものである。身体機能評価に基づく運動指導(疾病管理)内容、特に身体機能等の低下を判断するための有力な評価指標とその基準(カットオフ値)については、血液透析治療が導入されたCKD患者(血液透析患者)に対する疾病管理の成果を検証しながら決定し分析を進めた。このため、本研究の成果は大きく分けて、1)CKD患者の身体機能の特性と生命予後、および疾病管理システムの有用性と、2)保存期CKD患者の身体機能(身体活動量との特性と運動指導の効果の2つに分けて示すことにする。1)延べ1,054名の血液透析患者を対象に、評価項目のカットオフ値を膝伸展筋力の体重比40%、最大歩行速度:男:89 m/min、女:85 m/min、および歩数4,000歩とした際のその後の死亡率、心血管疾患罹患率は大きく乖離することが認められた。2)112名の保存期CKD患者(平均73歳)を対象とした。測定内容は腎機能、貧血、脂質代謝に関する血液データ、合併症スコア、運動機能として筋力、歩行速度、パフォーマンステスト(SPPBなど)、精神機能(抑うつ症状等)およびCKDステージとした。身体機能が低下(上記1)のカットオフ値参照)していた群はそれ以外と比べてCKDステージが悪化した患者の割合が多かった。ただし、その後の1年半の追跡調査の結果、CKDステージの悪化と歩行速度との関連は認められたものの、他の機能との関連は見いだせず、運動指導の著明な効果はさらに長期的な調査が必要と考えられた。慢性腎臓病(CKD )患者に対する定期的な運動療法が、その後の運動機能、身体活動量、血液透析導入率と導入時期およひ生命予後に与える影響を検討する目的で、平成26年度においては、内科的な疾患管理を定期的に受けているCKD患者のうち、本研究の参加に同意が得られ、身体活動量ならびに運動機能の詳細が把握できた症例を登録する計画を実施した(ベースライン登録者の決定)。対象は、CKD重症度分類(CKD診療ガイド2012、日本腎臓学会編)G2からG4のステージにあり、定期的に内科管理が実施されている連続症例とした。初回登録時の除外基準は、認知症を有する者、運動機能の測定が困難な整形外科疾患ならびに脳血管疾患を有する者とした。協力いただける診療所(血液透析クリニック)は2施設(東京都、神奈川県)であり、患者登録における診療的背景(診断名、治療状況、合併症、併存症等を把握するためのデータベースの作成について、数回にわたり、会議(情報交換)を実施した。また、運動機能の測定については、その測定機器の調達、機器の整備等を実施した。協力いただく2施設のうち1施設はすでに、数年前より、運動機能に関する測定を実施している施設であり、特に準備や測定方法に関する整備は必要なかったが、他1施設では、未だ調整段階である。現状では、登録患者は20名程度であるが、今後、増えていくものと思われる。なお、本研究の準備に当たって、第59回日本透析医学会(神戸)、米国腎臓病学会(ASN, KIDNEY WEEK 2014,フィラデルフィア)、および第5回透析運動療法研究会に参加し、本研究で測定する項目の妥当性について、これまでの血液透析患者を対象とした研究成果を発表するなかで、討議ならびに情報交換を行った。平成27年度は、本研究計画の5年間のうちの2年目の年度であり、内科管理状況および身体活動状況を含む運動機能の詳細が把握でき、且つ、対象の取り込み基準(適応基準)に合致した慢性腎臓病(CKD)患者のうち、本研究に同意が得られた患者のデータの登録を進めた。特に昨年度は、神奈川県相模原市の透析クリニック、ならびに東京都足立区綾瀬にある透析クリニックにおいて、血液透析導入前のCKD患者に対する基本データ項目(病態、治療状況、個人の背景因子等)の整備および選定に時間を要したが、本年度(平成27年度)ではデータ採取が可能となった。現状では、50名程度のデータ登録が完了しているが、さらに、平成28年度には100名程度の登録を見込んでいる。なお、上記のデータ登録と分析に先立ち、平成27年4月30日から5月4日にかけてシンガポールで開催された「世界理学療法連盟学会(World Confederation of Physical Therapy (WCPT) Congress 2015」、平成27年10月17日および18日に甲南女子大学(神戸)で開催された「第33回日本私立医科大学理学療法研究会学術集会」、平成27年11月1日および2日にミャンマー(ヤンゴン)で開催された2nd International Myanmar Nephro-Urology Conference(シンポジウム、講演)、さらには平成28年3月26日および27日に岡山コンベンションセンター(岡山)で開催された「第6回日本腎臓リハビリテーション学会・学術集会」において、血液透析治療が導入されているCKD患者の身体機能(筋力、バランス、歩行速度)、身体活動量および骨密度の経年的変化を調査し、その変化がその後の日常生活活動、心血管イベントおよび生命予後(全死亡)に及ぼす影響を報告した。これらの報告は、本研究課題における血液透析治療が導入されていないCKD患者の身体機能等の調査項目の選定、ならびに結果の予測に大きく役立っている。

神奈川県相模原市の透析クリニック、ならびに東京都足立区綾瀬にある透析クリニックにおいて、血液透析導入前のCKD患者に対する基本データ項目(病態、治療状況、個人の背景因子等)の整備および選定に時間を要しため、患者データの採取ならびに登録が約半年程度遅れている。平成28年度は、本研究計画の5年間のうちの3年目であり、内科管理状況、身体機能(運動機能)ならびに日常生活活動を含む身体活動量の詳細が把握できた、すなわち本研究の対象者の取込み基準に合致した症例のデータ登録を進めた。特に、平成27年度での登録が50名程度であったが、80名近くまでの登録が可能となった。研究計画では登録者のデータは初期データであるとともに、並行して、縦断的な変化の把握(測定、評価)も実施しており、身体活動量が保たれている患者群とそれ以外とで、腎機能の変化、さらには身体機能ならびに身体活動量の変化も把握できるようになり、運動療法としての長期効果の検討段階に入っている。平成28年度では、これらの横断的データの解析を実施し、6月に大阪で開催された第61回日本透析医学会(ワークショップ、シンポジスト)と一般演題、同月福岡(産業医科大学)で開催された第99回福岡県理学療法学術集会(特別講演)、7月に広島で開催された開催された第14回日本高齢者腎不全研究会(特別講演)、10月にマレーシア(クアラルンプール)で開催されたアジア理学療法連盟学会(ACPT2016、一般演題)、11月に広島で開催された広島コメディカル透析セミナー(特別講演)、同月、米国のシカゴで開催された米国腎臓病学会(ASN,一般演題)、平成29年2月に開催された第7回透析運動療法研究会(教育講演)、同月につくばで開催された第7回日本腎臓リハビリテーション学会(セミナー講演)において、それぞれ、成果発表を実施した。これらの成果発表は、血液透析治療が導入されていない慢性腎臓病患者(CKD患者)に対する身体機能ならびに身体活動量の管理の重要性を示すうえで、すなわち本研究の意義を示すうえで、大きく貢献できたと思われる。当初予定した患者登録数には未だ達していないが、今後約100名近くの患者の経過観察(2年間近くの縦断調査)が実施できるなど、概ね、研究の目的、すなわち、慢性腎臓病患者に対する疾患管理としての身体機能ならびに身体活動量の把握(運動療法、運動指導)の長期効果が把握できると思われる。本研究は、血液透析治療を受けていない慢性腎臓病(CKD)患者の内科的な疾患管理と併せて日常の身体活動量ならびに運動機能を継続的に管理し、運動管理指導の継続の有無の違いによる3年後の身体活動状況ならびに生命予後を比較検討することを目的としている。平成29年度は、本研究計画の5年間のうちの4年目であり、内科管理状況、身体機能(運動機能)ならびに日常生活活動を含む身体活動量の詳細が把握できた、すなわち本研究の対象者の取込み基準に合致した症例のテータ登録を80名以上に増やしたと同時に、それに並行して縦断的な変化の把握(測定、評価)も実施しており、身体活動量が保たれている患者群とそれ以外とで、腎機能の変化、さらには身体機能ならびに身体活動量の変化も把握できるようになり、運動療法としての長期効果の検討段階に入っている。
ギランバレー症候群を誘発するカンピロバクター・ジェジュニの病原因子の検索

Campylobacter jejuni(C.jejuni)腸炎の合併症としてGillain-Barre症候群(GBS)がおきることが報告されている。日本におけるGBS患者由来のC.jejuni菌株は、散発性腸炎では稀な血清型であるO19型が多いことが知られている。5種類のレクチンを用いたレクチン型別においては、O19型C.ejuni菌株のうち、GBS患者由来菌株と非GBS患者由来株との有意差が報告されていた。今回、O19型のGBS患者由来菌株、非GBS患者由来菌株のレクチン型別を、ELISAプレート法、スライド凝集法の両方で調べた。被検菌株はGBS患者由来株6株を含むO19型菌株12株とO1群9株、O2群9株である。レクチンはWGA,STA,PNA,BPA,WFAを使用した。その結果、O1群、O2群では、同一血清型(O,LIO)の菌株においても、レクチン型にバリエーションが認められた。それに対して、O19型では、12株すべてが同一であった。さらに、O19型菌株については、異なる条件下で検討したが、GBS患者由来菌株、非GBS患者由来菌株には有意差は認められなかった。この結果は、O19菌株のclonalityの高さを示すものと考えられ、これまでの遺伝子解析(flaAtyping,Randum Amplyfied Polymorphic DNA)の結果とも一致するものである。これらの事から、O19型菌株は、GBSを誘発する未知の遺伝子を保持し続けている可能性が高いと考えられ、本血清型菌株の遺伝子配列の決定が、本神経疾患の病因解明に必要不可欠と考えれれた。この結果は、O19菌株のclonalityの高さを示すものと考えられ、これまでの遺伝子解析(fla A typing,Randum Amplyfied Polymorphic DNA)の結果とも一致するものである。
悪性中皮腫におけるVEGF非依存性の新規血管新生因子の探索

悪性中皮腫は胸膜等の中皮細胞から発症する悪性腫瘍であり、腫瘍の進展に必須な血管新生を伴う。血管内皮増殖因子(VEGF)、特にVEGF-Aが腫瘍血管新生において重要な役割を担っており、VEGF-Aの抗体製剤が中皮腫患者の全生存期間の延長を改善することが最近報告された。その一方で、同様のケースでは無増悪生存期間の延長を改善しないことも報告されていることから、悪性中皮腫においてVEGF以外の血管新生因子の存在が示唆されるが、その因子は不明であった。本研究では、悪性中皮腫における新規血管新生因子を探索した結果、グラニュリン遺伝子産物がVEGF非依存性の血管新生因子であることを明らかにした。本研究では平成28年度までに、中皮腫細胞株NCI-H2052(H2052と略称)に対して無血清培養を行い、その培養上清を3次元血管モデルに添加した実験を行った結果、H2052の無血清培養上清によって血管新生が誘導されること、また、その血管新生は抗VEGF抗体による抗中和実験および血管内皮細胞に存在するVEGF受容体に対するRNA干渉を行った実験では抑制されなかったことを見出した。これらの実験結果から、H2052細胞が分泌する血管新生因子はVEGF非依存性であることを明らかにし、さらに、H2052細胞の無血清培養上清に対してLC-MS/MSを用いたショットガン解析を行い、399個のタンパク質を平成28年度までに同定した。平成28年度では、この399個のタンパク質の中から血管新生に直接関与する報告のあるinterleukin-8(IL-8)、growth-regulated α-protein、midkine、IL-18、IL-6、hepatoma-derived growthfactor、clusterinおよびgranulinの8つのタンパク質に焦点を当て、中和抗体およびRNA干渉を用いた実験を行った。その結果、granulinが悪性中皮腫由来のVEGF非依存性の新規血管新生因子であることが判明した。granulinはprogranulinという前駆体の形で分泌されることが知られており、このprogranulinは他の中皮腫細胞株でもH2052細胞以上に発現していた。さらに、H2052細胞ではprogranulinとは異なるgranulin関連タンパク質も悪性中皮腫由来のVEGF非依存性の血管新生に関与することが明らかとなった。悪性中皮腫におけるVEGF非依存性の血管新生因子を特定するまでの研究結果を論文投稿し、平成28年度中に受理された。この受理された論文内容は挑戦的萌芽研究に申請した際の初年度の研究計画を完全に遂行した結果である。平成29年度では、平成28年度中で明らかにした悪性中皮腫における新規血管新生因子であるprogranulinとgranulin様タンパク質の受容体の探索およびgranulin様タンパク質の起源について解析を行った。progranulinの受容体に関しては最近、エフィリン受容体ファミリーの1つであるEphA2がprogranulinの新規受容体として報告された。我々もEphA2がprogranulin及びgranulin様タンパク質の受容体として働いているかをEphA2のリン酸化を認識する抗体で解析するために、血管内皮細胞を中皮腫細胞株の無血清培養上清で刺激したところ、どの時間帯においても血管内皮細胞のEphA2のリン酸化は誘導されなかった。この結果から中皮腫細胞株の無血清培養上清中に存在するprogranulinとgranulin様タンパク質はEphA2とは異なる受容体に結合する可能性が示唆された。また、granulin様タンパク質の起源を調べるため、中皮腫細胞株のゲノムDNAを用いて全エクソーム解析を行ったが、granulin遺伝子の全エキソンには欠失,転座などの欠損変異は見られなかった。中皮腫細胞株の無血清培養上清中にはprogranulinとgranulin様タンパク質が存在することから、この中皮腫細胞株のgranulin遺伝子が存在する染色体はアレル染色体であることが考えられた。このアレル染色体が原因でゲノムDNA中には全長のgranulin遺伝子と、イントロンもしくは非翻訳領域に何らかの変異が入ったために転写時のメッセンジャーRNAのエキソンが短い形で発現するgranulin遺伝子が混同する形で存在するため全エクソーム解析では全長のgranulin遺伝子しか検出されなかったことが考えられる。平成29年度では、granulinに対する抗中和抗体療法の基礎を確立する。血管生物学平成28年度では試薬・消耗品のほとんどが予算使用予定であったが、悪性中皮腫由来の血管新生因子の特定が予定より早くできたため、予算の執行を留めることができた。平成29年度では本研究で悪性中皮腫の血管新生因子として新たに特定されたgranulinの抗中和抗体療法の基礎を構築するためにgranulinの抗原特定を研究目標に予算を使用する。
CD14のエンドトキシンショックにおける意義解析

1.膜非結合型rGD14の分離:nativeおよびcDNAの3'側コードにmutationを加えC末端部が種々の長さで短縮したクローンを作成し、大腸菌および昆虫系で発現させた。2.膜非結合型rCD14のin vitro効果の検討:Mφ細胞株をLBPを含む血清(硝酸銀液を皮内注射したマウスより得られた急性期血清)存在下にLPSで刺激し、TNFの遊離を目下検討中である。3.膜非結合型rGD14のin vivo効果の検討:LPS投与前後のマウスに種々の濃度の変異rCD14蛋白を注射しショックに対する効果を検討中である。4.CD14遺伝子TGマウスの作成:未変異および変異マウスCD14ゲノム遺伝子の5'上流に肝細胞特異的蛋白α_2Uグロビンのプロモーター、3'末端にSV40のポリAシグナルを結合した変異CD14遺伝子を作成し、BDA/2Ncrj/C57BL/6NcrjF1マウスの授精卵に注入し、ICR偽妊娠マウスで発生させた。現在まで膜結合型およびPI結合部を改変し膜非結合型にしたCD14遺伝子トランスジェニック(TG)マウスを各々一匹づつ得ており、現在pairingによりこれらのTGマウスの増殖を行っている。これらはいずれもCD14の常時発現糸であるが、誘導発現系としてメタロチオネイン遺伝子のプロモーターを連結したTGマウスも作成中である。さらに純系TGマウスの作成もC57BL/6Jマウスを用いて試みている。5.CD14遺伝子TGマウスにおけるCD14の発現および副次変化の検素:肝臓およびその他の組織における発現状態についてのノーザン法およびPAP法での解析はまだ使用可能なF2が得られていないため行っていない。一方、C57BL/6Jマウスではこれまで高い頻度で食仔されること、および生存中の一匹の発育が異常に悪いことなどを経験しており、これらがTGと関連した現象か否かを検討中である。6.遺伝子標的法によるCD14遺伝子廃失マウスの作成:いくつかの相同組替えES細胞を分離しており、発生初期胚注入を検討中である。
就学前の幼児に対する視覚機能の管理の充実－デジタル機器の利用から眼を守る－

1.小児科医、眼科医との連携により、保育園、幼稚園およびこども園の8園での視力検査および他覚的屈折検査を実施した。他覚的屈折検査の結果より弱視のリスクファクターに該当する児に対して眼科受診勧告をした。勧告後の受診結果(診断)を検討した結果、弱視の早期発見・早期治療に結び付いたことがわかった。視覚の感受性期における視覚機能の管理の重要性を明らかにした。2.保育士・幼稚園教諭を対象とした視力検査講習会を2回開催し、園内の視力検査の実施方法を周知した。その結果、視力検査の精度を高めることができた。視力検査講習会の参加園に対して幼児期の視覚機能管理の重要性を訴えた。3.燕市の3歳児健康診査において保健師と連携し、健診プログラムに他覚的屈折検査を導入したことで弱視の検出率を高めることができた。3歳児健康診査における視覚健診の重要性を訴え、2019年度の家庭一次健診の説明書、家庭配布用視覚健診セットの改変(フェイス眼鏡、ランドルト環)さらに問診票を改変した。視覚健診プログラムを改訂したことで弱視の早期発見・早期治療に結び付いた。受健児のデジタル機器使用に関する調査を開始した。4.保育園、幼稚園およびこども園、計8園の視覚健診結果を集計し、前年度との比較検討を行なった。その結果、眼科受診勧告児の医療機関受診率が前年度と比較し向上したことがわかった。デジタル機器の利用に関する子ども向けの講習会を4つの保育園およびこども園で実施した。5.デジタル機器使用時の眼緊張度を明らかにすることを目的として、スマホゲーム実施前後の眼調節負荷前後の眼緊張およびゲーム中の視線解析の予備調査を成人を対象として実施した。幼児眼科健診への参加と他覚的屈折検査の実施に関しては概ね順調に進展している。幼児眼科保健指導の中に組み込むデジタル機器の利用に関する指導の内容には、小児科医、保健師との検討の結果、スマホ使用時の眼緊張についての実験データからエビデンスを得る必要があることが指摘された。そのためゲーム前後の眼緊張およびゲーム中の視線解析の対する実験が必要となったが、現段階では実験を終え、その実験データの解析に留まっている。幼児視覚健診(3歳児健診・保育園健診)での問診票の集計方法については検討中である。こどもの眼の健康ホームページの準備については保育士、保健師、眼科医とのミーティングを重ねて、慎重に内容を討議している。1.新潟県内外の幼児視覚健診を実施した20園の結果から視力と他覚的屈折検査のパラメーター(等価球面度数・乱視度・乱視軸)の相関を求める。2.視覚健診での家庭問診票の回答の集計、デジタル機器の利用時間と視力との関係を検証する。3.幼児のデジタル機器視聴に関する眼科保健指導マニュアルの作成に当たっては、幼児と大人とでスマホゲーム中の眼緊張度に違いがあること、動画視聴中に子ども特有の視線の動きがあることが予想できるが、現在のところ先行文献がない。この部分を明らかにする方策を検討する。4.幼児期の視機能管理の徹底のために、保育士・幼稚園教諭対象とした視力検査講習会を継続して実施する必要がある。新潟県内の保育園および幼稚園での幼児眼科健診の重要性を訴えるために,幼稚園教諭,保育士対象の視力検査実技講習会を実施し,さらに新潟県内の6つの幼稚園および保育園の幼児視覚健診に参加し,そのデータをまとめ検討した。多くの幼児教育・保育関係者との連携が実現した。スマートフォン等のデジタル機器利用,テレビの視聴に関する保健指導について,幼児教育および保育現場との意見交換を重ねた結果,近年の子どもの視的環境の変化への懸念,視機能低下を予防することの重要性の再認識ができた。多職種(幼稚園教諭,保育士,保健師および小児科医)と連携することで,就学前の幼児の視機能管理の徹底の共通認識から,今後の眼科健診プログラムの再構築,デジタル機器使用の問診の細分化の必要性など課題が明確化された。新潟市の子育てサロンの活動からは,3歳未満児においても子どもの視的環境の変化からくる視知覚の弱さ,さらにスマートフォンなどの長時間の使用や依存との関係性について多くの保護者が関心もっていることがわかった。デジタル機器使用の保健指導の充実は保護者のニーズでもある。しかし,従来の保健指導にデジタル機器の利用を加えるには,デジタル機器と視覚機能の関係性を示す客観的データが必要である。今後の研究遂行には,視覚の感受性期にある幼児がスマートフォン等のデジタル機器に触れることによる視覚機能への影響を客観的に評価することが必要であると考えられる。さらに研究内容の充実を図ることで,就学前の幼児の正常な視覚発達を促し,子どもの身体活動や就学後の学習へのつまずきを防止することにつなげる研究へと発展することが期待できる。初年度は,デジタル機器利用と視覚機能との関連について多職種との意見交換を目的とした。1新潟県内の6つの幼稚園・保育園での眼科健診に参加し,そのデータについて,園と共有できた。2幼稚園・保育園の視力検査の精度向上のための研修会を開催し,多くの幼稚園教諭・保育士との連携を図ることができた。さらに,視力検査推進活動としての絵本を作成した。3子どもの眼の異常,デジタル機器利用に関する問診票の作成については,時間をかけて多職種で討議を重ねる必要があることから,次年度以降も引き続き検討することとした。

4眼科健診データ,問診票,視力,眼屈折の結果を集計することにより,弱視の早期発見につながり,さらに多くの保護者が子どものスマートフォンと視覚機能との関係について懸念していることが明らかになった。5健診データについて幼稚園教諭,保育士,保健師,特別支援学校(盲学校)教諭との意見交換会を開催し,今後の研究方針を明確にした。以上の進捗から,初年度の大きな目標であった,子どものデジタル機器利用の問題点を多職種で共有することができた。1.小児科医、眼科医との連携により、保育園、幼稚園およびこども園の8園での視力検査および他覚的屈折検査を実施した。他覚的屈折検査の結果より弱視のリスクファクターに該当する児に対して眼科受診勧告をした。勧告後の受診結果(診断)を検討した結果、弱視の早期発見・早期治療に結び付いたことがわかった。視覚の感受性期における視覚機能の管理の重要性を明らかにした。2.保育士・幼稚園教諭を対象とした視力検査講習会を2回開催し、園内の視力検査の実施方法を周知した。その結果、視力検査の精度を高めることができた。視力検査講習会の参加園に対して幼児期の視覚機能管理の重要性を訴えた。3.燕市の3歳児健康診査において保健師と連携し、健診プログラムに他覚的屈折検査を導入したことで弱視の検出率を高めることができた。3歳児健康診査における視覚健診の重要性を訴え、2019年度の家庭一次健診の説明書、家庭配布用視覚健診セットの改変(フェイス眼鏡、ランドルト環)さらに問診票を改変した。視覚健診プログラムを改訂したことで弱視の早期発見・早期治療に結び付いた。受健児のデジタル機器使用に関する調査を開始した。4.保育園、幼稚園およびこども園、計8園の視覚健診結果を集計し、前年度との比較検討を行なった。その結果、眼科受診勧告児の医療機関受診率が前年度と比較し向上したことがわかった。デジタル機器の利用に関する子ども向けの講習会を4つの保育園およびこども園で実施した。5.デジタル機器使用時の眼緊張度を明らかにすることを目的として、スマホゲーム実施前後の眼調節負荷前後の眼緊張およびゲーム中の視線解析の予備調査を成人を対象として実施した。幼児眼科健診への参加と他覚的屈折検査の実施に関しては概ね順調に進展している。幼児眼科保健指導の中に組み込むデジタル機器の利用に関する指導の内容には、小児科医、保健師との検討の結果、スマホ使用時の眼緊張についての実験データからエビデンスを得る必要があることが指摘された。そのためゲーム前後の眼緊張およびゲーム中の視線解析の対する実験が必要となったが、現段階では実験を終え、その実験データの解析に留まっている。幼児視覚健診(3歳児健診・保育園健診)での問診票の集計方法については検討中である。こどもの眼の健康ホームページの準備については保育士、保健師、眼科医とのミーティングを重ねて、慎重に内容を討議している。初年度の研究から,幼稚園および保育園の従来の保健指導にデジタル機器の利用方法を加えるには,デジタル機器と視覚機能の関係性を示す客観的データが必要であることが示唆された。このことから視力や眼屈折以外の視機能の一面を評価する実験が必要と考え,今後の研究内容に組み込むこととする。本研究の進捗を広く周知するために,子どもの眼の健康ホームページを立ち上げることとする。