hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
蛇紋岩の高温高圧変形実験に基づくスロー地震発生メカニズムの解明

このことは、変形メカニズムがsemibrittleでも海洋地殻が沈み込み、累進変成作用を受けている間は弱面(プレートからはがれやすい面)をつくり、摩擦すべりをおこすのに対して、海洋地殻がプレートからはがれて大陸側に付加し、上昇する過程(安定条件下)では変形が集中せず塊状として振る舞う可能性があることが分かった。また、塩基性片岩中にできた弱面は安定滑りを示すので地震を引き起こすことはできないが、他の場所(例えば蛇紋岩中)で発生した破壊すべりを減速し、スロー地震発生領域を広げている可能性がある。本研究の目的は、高温高間隙水圧条件下で蛇紋岩の変形実験を行い、沈み込み帯で起こっているスロー地震発生機構を物質科学的側面から解明することであったが、今年度のみで研究の目的をほぼ達成することができた。蛇紋石の剪断変形に伴う脱水によって実験室でスロー地震を再現していると考えられるスロースティックスリップが起こること、そしてスロースティックスリップのスケーリング則が実際のスロー地震のスケーリングと一致したことを発見したことでスロー地震発生機構をおおむね理解できた。今後は研究課題であるスロー地震の発生メカニズム解明のために、蛇紋岩や沈み込み帯に存在すると考えられる他の岩石、特に付加帯物質である泥岩と海洋地殻の玄武岩の変形実験をスロー地震発生域に近いより高圧な条件で行うこと計画としている。今後取得予定であるよりスロー地震発生域に近い条件で行われた実験結果からスロー地震発生メカニズム解明へつながるさらなる基礎データを得られると期待される。(抄録なし)
C型慢性肝炎に対するアンチセンスHCV・DNAによる遺伝子治療

研究業績の概要1)HCV由来リコンビナントRNAポリメラーゼを用いたin vitroRNA合成系の樹立C型肝炎(HCV)ウイルス遺伝子マップ上のNS5領域に相当する遺伝子領域を抽出、クローニングし、大腸菌および酵母を用いてリコンビナント蛋白として発現を試みたが、RNAポリメラーゼ活性は認められなかった。そこで,この実験系を修正したうえで、同時にT7プライマーとT7RNAポリメラーゼを用いたin vitro HCV RNA合成系樹立も試みたが、結局HCV RNAの発現をみなかった。2)HCVアンチセンス遺伝子による蛋白合成の抑制活性の検討HCV遺伝子の5'非翻訳領域、コアおよびエンベロープの一部を挿入したプラスミドを用いて、in vitroトランスレーション法でHCV蛋白(コアーエンベロープに相当)の発現をみた。この系にHCV・アンチセンスオリゴヌクレオチド(HCV遺伝子の5'非翻訳領域-開始コドン近傍をターゲッットとした)を加えて、蛋白合成の抑制効果を検討した。その結果、濃度依存的に高い蛋白合成抑制効果が確認されたが、コントロールでもある程度の蛋白合成抑制効果がみられたことから、アンチセンスオリゴヌクレオチドが非特異的に作用していることが示唆された。この原因、対策について現在検討中であり、in vitroトランスレーション法、アンチセンスオリゴヌクレオチドの修飾法などに修正を加える必要があるかと考えている。(1)HCV由来リコンビナントRNAポリメラーゼの発現C型肝炎ウイルスの遺伝子マップ上のNS5領域(RNAポリメラーゼ)に相当する遺伝子領域を抽出し,クローニングを行った。大腸菌および酵母を用い,リコンビナント蛋白として発現を試みたが,RNAポリメラーゼ活性は認められなかった。この原因については現在解明中であり,判明次第,実験系の修正を行い,平成8年度にRNAポリメラーゼを用いたインビトロRNA合成系を樹立する予定である。(2)HCV遺伝子を用いたインビトロトランスレーション法による蛋白合成系の樹立HCV遺伝子の5'非翻訳領域,コアおよびエンベロープの一部を含む領域に相当する遺伝子を用い,インビトロトランスレーション法による蛋白発現を試みた。その結果,目的とするコアおよびエンベロープの一部と考えられているサイズの蛋白発現が得られた。現在,発現された蛋白の同定確認を行っている。本結果を基に平成8年度にHCV・DNAアンチセンスを用いたインビトロにおける蛋白合成の抑制系を樹立する予定である。1)HCV由来リコンビナントRNAポリメラーゼを用いたin vitroRNA合成系の樹立C型肝炎(HCV)ウイルス遺伝子マップ上のNS5領域に相当する遺伝子領域を抽出、クローニングし、大腸菌および酵母を用いてリコンビナント蛋白として発現を試みたが、RNAポリメラーゼ活性は認められなかった。そこで、この実験系を修正したうえで、同時にT7プライマーとT7RNAポリメラーゼを用いたin vitro HCV RNA合成系樹立を試みたが、結局HCV RNAの発現をみなかった。
エルゴディク磁場形成に伴うRFPプラズマのエネルギー損失機構の研究

1)磁気島の重畳現象について蟻酸レーザー干渉計を用いてプラズマ中心と外側6cm(磁場逆転面近く)の所でプラズマの密度揺動を測定した。結果は6cm外側での揺動レベルが高く、周波数も中心のものに比較して約2倍高い事が分かった。これはエルゴデイク磁場形成に伴う密度揺動が磁場逆転面で増幅されている事を示している。高速度カメラによる測定でも、両者の違いは確認された。逆転面近くではプラズマの発光が頻繁に観測される。この結果は、磁気島の重畳に伴う揺動が、m(ポロイダルモード数)=0だけではない事を示している。2)磁気島の重畳と他の揺動の関係磁気島の重畳とトロイダル磁束の変化との関係が確認された。他のRFP装置では、磁気島の重畳は、トロイダル磁束の増加と同期しているが、我々の場合は、トロイダル磁束の減少と同期している事が分かった。但し、前駆現象としてトロイダル磁束の増加を伴っている。イオンの加速は磁気島の重畳によるプラズマの発光と同期している。エネルギー分析器を用いた測定結果では、イオンのエネルギーは単色的で約3keVと高い。粒子束も極めて大きく、スパッタリングにより真空容器から金属の不純物をプラズマ中にたたき出すことも観測された。電流遮断前に磁気島の重畳が頻繁となり、同時に鉄等の不純物の発光強度も増大する。3)磁気島の重畳に伴うプラズマのエネルギー損失について磁気島の重畳に伴うプラズマのエネルギーの周辺部への流出を測定する為のシニスター半導体を用いた測定系は製作され現在較正を行っている。更に、プラズマ周辺部の粒子の外部への流れの性質を測定する静電探針及び磁気探針群を製作し、装置に設置したところである。これから詳しく調べる予定である。RFPにおいて,高磁気シェアー配位のためプラズマ中心部に隣接して存在する共鳴面に発生する磁気島のオーバーラッピングにより磁気面が破壊されエルゴディックな磁場配位となり,その際に中心部から周辺部にプラズマエネルギーが流出することを発見した。さらに,これらの機構解明に関して,RFP装置,STP-3M(名古屋大学プラズマ科学センター)を用いて実験を行った。高磁気レイノルズ数領域におけるRFPプラズマ中に静電探針(既設・新規製作),磁気探針群およびサーミスタボロメータ群(新規製作)を設置し,このプラズマエネルギー束を直接測定すると共に,周辺(リミタ陰)プラズマ中の静電揺動(密度・電位揺動)と磁場揺動(トロイダル磁束揺動等)を測定し,データ処理系(増設・整備)を経由しての計算機を用いたこれらの諸量の相互相関や輸送スペクトルを求めて,その損失機構と性質を解明した。周辺プラズマ中での静電プローブ等を用いた静電揺動及び磁場揺動の相互相関解析結果とポート内での揺動解析(イオンの特徴的)結果との比較から,周辺部のイオン・電子の振舞いが解明された。モードカップリングの結果生じたトロイダル磁束の増加に伴いイオン及び電子による静電揺動の増加が顕著に観測され,この静電揺動は高エネルギーのイオン及び電子により発生したことが判明し,エルゴディック磁場配位が形成された際に中心部から周辺部に放出されるエネルギーはプラズマ及び高エネルギーのイオン・電子によるものであることが示された。このエネルギー損失機構について,エネルギー束を直接測定するためにファラデーカップ及びサーミスタボロメータを用いた計測を行い,ファラデーカップの測定からは静電揺動と同期して放出されるイオン・電子のエネルギーが高いことが予測され,ボロメータによるエネルギー束の測定では静電揺動とエネルギー束の相関が強いようであることが解明できた。

蟻酸レーザー干渉計を用いてプラズマ中心と外側6cm(磁場逆転面近く)の所でプラズマの密度揺動を測定した。結果は6cm外側での揺動レベルが高く、周波数も中心のものに比較して約2倍高い事が分かった。これはエルゴデイク磁場形成に伴う密度揺動が磁場逆転面で増幅されている事を示している。高速度カメラによる測定でも、両者の違いは確認された。逆転面近くではプラズマの発光が頻繁に観測される。この結果は、磁気島の重畳に伴う揺動が、m(ポロイダルモード数)=0だけではない事を示している。又、磁気島の重畳とトロイダル磁束の変化との関係が確認された。これ迄は、磁気島の重畳は、トロイダル磁束の増加と同期している事を予想していたが、測定結果は、トロイダル磁束の減少と同期している事が分かった。但し、前駆現象としてトロイダル磁束の増加を伴っている。イオンの加速は磁気島の重畳によるプラズマの発光と同期している。我々のRetarding Potential Analyzerを用いた測定結果では、イオンのエネルギーは単色的で約3keVと高い。粒子束も極めて大きく、スパッタリングにより真空容器から金属の不純物をプラズマ中にたたき出すことも観測された。電流遮断前に磁気島の重畳が頻繁となり、同時に鉄等の不純物の発光強度も増大する。これらの測定結果は、keV程度のイオンの存在を裏づけるものであり、他のRFP装置での観測結果と違うので、新たな加速機構を考える必要がある。又、周辺部のプラズマの輸送現象について、いくつかの報告があるが、磁気島の重畳が支配的であるという報告はない。これは全く奇妙な事なので、これから詳しく調べる予定である。
リング交換・フラストレーションをもつ磁場中量子スピン系におけるカイラリティ秩序

昨年度に引き続き、リング交換・フラストレーションをもつ磁場中量子スピン系における、新奇量子相の探求を行った。まず、リング交換を含んだ磁場中二本鎖梯子ハイゼンベルグ量子スピン系の解析を行い、この系の磁気相図を決定した。その結果、この系では、2つのマグノンが作るマグノン束縛対がBose凝縮したスピンネマティック状態や、ベクトルカイラリティが支配的な朝永・ラッティンジャー流体などの新奇量子相が実現されることを発見し、それら新奇量子相の出現条件と、その特性を明らかにした。また、リング交換を含んだジグザグ梯子ハイゼンベルグ量子スピン系に関する研究を行い、これまでに知られていなかった部分強磁性相や新奇非磁性相を含んだ、基底状態相図を決定した。さらに、実在の量子細線の電子密度や閉じ込めポテンシャル強度と、スピンモデルの相互作用パラメータを関連付けることで、今回発見した新奇量子相が、実際の量子細線において実現可能と期待されるパラメータ領域に存在することを示した。さらに、最近接強磁性相互作用と次近接反強磁性相互作用が競合した、磁場中ジグザグ梯子ハイゼンベルグ量子スピン系の研究も行い、この系の磁気相図を決定した。その結果、この系では、低磁場領域でベクトルカイラリティ長距離秩序を伴うベクトルカイラリティ相が、また、高磁場領域で複数のマグノンが束縛状態を形成するマグノン束縛相が実現されることを明らかにした。この結果は、LiCuVO_4など、実在の擬一次元磁性体の性質を理解する上で重要な結果である。また、ダイヤモンド型量子スピン鎖におけるリング交換相互作用の効果についても調べ、リング交換相互作用による新奇な非磁性状態の出現を予言する結果を得た。リング交換・フラストレーションをもつ磁場中量子スピン系における、新奇量子相の探求を行った。まず、リング交換を含んだ磁場中二本鎖梯子ハイゼンベルグ量子スピン系に対する考察を行い、この系において、これまでに知られていたスピン=カイラリティ相対変換に加えて、もう一つの新しい厳密な双対変換が成り立つことを発見した。これら2つの双対変換により、この系のパラメータ空間の双対構造が明らかになり、相転移線の位置など、系の相図が満たすべき様々な性質を厳密に導出することが可能になった。さらに、厳密対角化法及び密度行列繰り込み群法を用いた数値計算を行い、この系においては、リング交換相互作用と磁場の相乗効果により、ベクトルカイラリティが支配的な朝永・ラッティンジャー流体や、two-magnon bound pairの安定化など、新奇な量子状態・現象が実現されることを示した。これらの結果は、リング交換相互作用がもたらす物理に関する新たな知見を与えるものとして、意義のある結果である。また、リング交換を含んだジグザグ梯子ハイゼンベルグ量子スピン系についての研究も行った。この系は、He3固体で実現される三角格子リング交換模型の一次元版としてだけでなく、低電子密度量子細線中で実現される電子状態のスピン自由度を記述するものとして注目されている模型である。我々は、厳密対角化法を用いた数値解析により、この系の基底状態相図を作成し、リング交換相互作用が大きいパラメータ領域で、部分強磁性相や新奇非磁性相など、通常のジグザグスピン鎖では実現されない新しい量子相が出現することを示した。今回得られた基底状態相図は、この系の今後の研究の出発点となるものとして、大きな意義のある結果であると言える。
ACTHによる生体防御機構の解明

MC2R KOマウスをモデル系として、グルココルチコイドの糖代謝への影響の検討し、MC2R KOマウスが、高齢で痩せを呈する事、高脂肪食誘導性肥満、インスリン抵抗性に対して抵抗性を示すことを見出した。MC2R KOマウスの脂肪細胞の大きさは、野生型マウスと違いがなく、細胞数が減っていると考えられた。一方、骨量増加が起こっており、グルココルチコイドが間葉系幹細胞における脂肪系譜と骨細胞系譜への分化スイッチを制御している可能性が示唆された。生体の恒常性を脅かすようなストレスは、自律神経とHPA axisを介して、ストレス反応を引き起こし、生体の恒常性を維持するように働く。ストレスによって誘導された炎症性サイトカインは、視床下部のCRH(corticosterone releasing hormone)の分泌を促進し、下垂体からのACTH(Adrenocorticotropic Hormone)の分泌を介して副腎皮質からグルココルチコイドの分泌を誘導する。このHPA axisの活性化は、自律神経系と並んで、生体の恒常性の維持に重要な役割を担っている。副腎、脳下垂体腫瘍に起因する全身性グルココルチコイド作用過剰は、内臓脂肪型肥満、インスリン抵抗性、糖尿病、高脂血症、高血圧症などを特徴とするクッシングシンドロームを引き起こす。この病態は、メタボリックシンドロームと良く似ていることから、以前より、グルココルチコイド過剰がメタボリックシンドローム発症に重要な役割を果たす可能性が示唆されてきた。また、肥満に伴うインスリン抵抗性は、副腎除去によって改善されることから、糖尿病の発症に高レベルのグルココルチコイドが悪玉として働き、グルココルチコイドレベルの調節機構の破綻が糖尿病発症の原因の一つである可能性が示唆されている。申請者は、ACTH受容体(MC2R)遺伝子改変マウスを作成、解析してきた(Chida et al. PNAS 2007)。ACTH受容体は、副腎皮質以外では、脂肪細胞に発現していることが明らかになっており、ACTHは、in vitroで脂肪分解を引き起こすことが知られている。このことから、ACTHが脂肪細胞の肥大化、蓄積に重要な役割を果たしている事が推測される。しかし、その生体内における重要性、病態発症における役割に関しては、適切なモデル系、評価系が無かったために、明らかでない。本研究では、ACTHおよびグルココルチコイドの脂肪細胞に対する影響について、ACTH受容体遺伝子改変マウスを用いて、解析を行い、ACTH受容体を標的とした肥満、糖尿病に対する新規治療戦略を打ち立てることを目的として、研究を行った。本年度は、MC2R KOマウスにおける高脂肪食誘導肥満に対する影響を解析したところ、MC2R KOマウスは、高脂肪食誘導肥満に対して抵抗性であることが明らかになった。通常食下、高脂肪食下においても、ステロイド投与によって、野生型と同様に脂肪量の増加を伴って、体重の増加が起こるが、野生型のレベルにまでは、回復しなかった。血清の解析により、ステロイド投与によって、野生型と同様なレベルにまで血中ACTHレベルが低下したことから、ステロイド含有水を飲ませることで、生理的なレベルのコルチコステロンレベルになったと考えられた。しかし、カテコールアミンレベルは、回復していないことを見いだしていた。今後、さらなる解析が必要である。生体の恒常性を脅かすようなストレスは、視床下部のCRH(corticosterone releasing hormone)の分泌を促進し、下垂体からのACTH(Adrenocorticotropic Hormone)の分泌を介して副腎皮質からグルココルチコイドの分泌を誘導する。この病態は、メタボリックシンドロームと良く似ていることから、グルココルチコイド過剰がメタボリックシンドローム発症に重要な役割を果たす可能性が示唆されてきた。ACTH受容体は、副腎皮質以外に脂肪細胞に発現していることが明らかになっており、ACTHは、in vitroで脂肪分解を引き起こすことが知られている。本研究では、ACTHおよびグルココルチコイドの脂肪細胞に対する影響について解析を進め、ACTH受容体を標的とした肥満、糖尿病に対する新規治療戦略を打ち立てることを目的として研究を行った。昨年度までに、MC2R KOマウスにおける高脂肪食誘導肥満に対する影響を解析したところ、MC2R KOマウスは、高脂肪食誘導肥満に対して抵抗性であった。

通常食下、高脂肪会下において、ステロイド投与によって、野生型と同様に脂肪量の増加を伴って、体重の増加が起こるが、野生型のレベルにまでは、回復しなかった。本年度は、ステロイド投与によって引き起こされた体重増加がコルチコステロンの脂肪細胞に対する効果か、あるいは、ACTHの直接作用である明らかにするため、野生型マウスとMC2R KOマウスにおいて、副腎除去(ADX)を行った場合に差がなくなるかどうか、検討した。副腎除去した野生型マウスと副腎除去したMC2R KOマウスでは、有意な違いは認められなかった。このことから、高脂肪食誘導肥満に対する抵抗性は、主に、副腎由来のコルチコステロンの脂肪細胞に対する効果であると結論された。生体の恒常性を脅かすようなストレスは、視床下部のCRH(corticosterone releasing hormone)の分泌を促進し、下垂体からのACTH(Adrenocorticotropic Hormone)の分泌を介して副腎皮質からグルココルチコイドの分泌を誘導する。このHPA axisの活性化は、自律神経系と並んで、生体の恒常性の維持に重要な役割を担っている。副腎、脳下垂体腫瘍に起因する全身性グルココルチコイド作用過剰は、内臓脂肪型肥満、インスリン抵抗性、糖尿病、高脂血症、高血圧症などを特徴とするクッシングシンドロームを引き起こす。この病態は、メタボリックシンドロームと良く似ていることから、グルココルチコイド過剰がメタボリックシンドローム発症に重要な役割を果たす可能性が示唆されてきた。申請者は、ACTH受容体(MC2R)遺伝子改変マウスを作成、解析してきた(Chida et al. PNAS 2007)。ACTH受容体は、副腎皮質以外に脂肪細胞に発現していることが明らかになっており、ACTHは、in vitroで脂肪分解を引き起こすことが知られている。このことから、ACTHが脂肪細胞の肥大化、蓄積に重要な役割を果たしている事が推測される。本研究では、ACTHおよびグルココルチコイドの脂肪細胞に対する影響について解析を進め、ACTH受容体を標的とした肥満、糖尿病に対する新規治療戦略を打ち立てることを目的として研究を行った。MC2R KOマウスにおける高脂肪食誘導肥満に対する影響を解析したところ、MC2R KOマウスは、高脂肪食誘導肥満に対して抵抗性であった。通常食下、高脂肪食下において、ステロイド投与によって、野生型と同様に脂肪量の増加を伴って、体重の増加が起こるが、野生型のレベルにまでは、回復しなかった。ステロイド投与によって引き起こされた体重増加がコルチコステロンの脂肪細胞に対する効果か、あるいは,ACTHの直接作用である明らかにするため、野生型マウスとMC2R KOマウスにおいて、副腎除去(ADX)を行った場合に差がなくなるがどうか、検討した。
認知症の診断直後からの家族介護者に対する支援体制の構築

計画においては、倫理委員会に申請した後に認知症の診断を受けた直後(1ヶ月以内)の家族に対してインタビューを実施し、家族の抱える身体的・心理的・社会的困難について明らかする。更にインタビュー結果を基に、もの忘れ外来に求められる支援についてアンケート用紙を作成し、「認知症の人と家族の会」に実施する予定であった。しかし、2018年は、計画が進まず実施した内容は以下14となった。1認知症の家族介護者が抱える身体的・心理的・社会的な家族介護者の困難に対する文献検索を実施し、先行研究よりもの忘れ外来に求められる支援内容について検討した。更に、認知症の家族の支援を実施している「家族の会」、「地域包括支援センター」等の社会資源について情報収集を実施し連携について検討した。2もの忘れ外来を受診し、認知症の診断を受けた直後(1ヶ月以内)の家族に対するインタビューの実施について久留米大学倫理委員会への申請を行った。3もの忘れ外来を受診した家族介護者のインタビューに向けて、認知症の診断を受けるまでの診療の流れと再来までの日程、インタビューするための部屋の確保について検討した。4認知症の診断を受けた1ヶ月以内の家族介護者に対するインタビューの実施に向けて医師・外来看護師、社会福祉士等の研究者間の連携に向けて検討した。外来において家族のインタビューを実施することは、認知症高齢者の方の支援が必要となるため、今後の人材の確保について検討した。時間的制約の中で、もの忘れ外来にて認知症の診断を受けるまでの診療の流れと再来までの日程の把握などの理解に時間を要した。また、本研究は、認知症を介護する家族に対するインタビューであるため、インタビューの間に認知症高齢者への支援が必要である。そのための研究者の人材の確保が困難であった。更に外来は煩雑であり、インタビューするための部屋の確保や時間の確保が困難であった。認知症高齢者の家族介護者に対するインタビュー中は、研究者同士が連携し認知症高齢者の支援ができるように研究者間の日程を調整する。更に外来看護師、医師と調整し、インタビューの時間、部屋を確保する。2018年度は、インタビュー調査が遅れたたため、全国調査を実施することができなかった。2019年度は、全国の認知症の家族の会にむけて全国調査を実施する予定としており、旅費等に使用する予定である。
歯周病原性細菌の保有するアポトーシス様細胞死誘導因子の単離・同定

[1]歯周病原細菌Actinobacillusactinomycetemcomtans(A. a.)血青型aの殺細胞因子を部分精製し、当該活性画分でマウスを免役して特異性の高い抗A. a.殺細胞因子モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ1クローンを得た。このハイブリドーマの産生する抗体は、ウエスタンプロット法において分子量約30kDのA. a.菌由来蛋白質を認識し、かつ液相中でA. a.の殺細胞活性と免疫沈殿反応を起こした。一方、当該殺細胞活性はヒト上皮様がん細胞の細胞周期をG2で抑圧し、細胞形態の著しい伸展を起こすことから、A. a.-bで報告されているCytolethal distending toxin(CDT)のホモログと推定された。A. a.-aでCDTの存在を示したのは本研究が最初である。[2]歯周病原細菌Bacteroides forthysus(B. f.)の殺細胞因子の同定を目的とし、当該因子を精製した。当該因子は、(a)SDS-PAGEにおいて単量体の分子量約28. 5kD、または複合体として分子量約55、57kDを示し、(b)核酸に親和性を有すること、(c)ヒト口腔がん由来上皮様癌細胞株に投与したとき、サイクリンB1の分解抑制を伴って細胞周期をS期後期G2期に停止する活性を持つ。これら特徴により、当該殺細胞因子はCDTファミリーの一員と推定される。[3]B. f.の殺細胞活性に対するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ7クローンを樹立した。これらハイブリドーマの産生する抗体は、(a)液相中のB. f.殺細胞因子と免疫沈殿反応を起こした。(b)ウエスタンブロツト法において、上記[1]で精製した殺細胞因子(分子量約28. 5、55、及び57キロダルトン)と反応した。1.細胞死誘導因子をコードする遺伝子のクローニング2.口腔癌細胞株に対する当該因子の作用扁平上皮癌由来の樹立化細胞であるKB,ZA,HOC313細胞にA.a.血清型a,B.forsythusの超音波破砕物を48時間作用させWST-1アッセイを行ったところ、濃度依存的に細胞死が誘導され、血球系、上皮系の細胞の他に扁平上皮癌においても細胞死の誘導が認められた。従って、本因子はヒトに共通なレセプターを介するか、非特異的に細胞を障害すると考えられる。3.細胞死誘導因子の精製A.a.血清型aの超音波破砕物をDEAE Sepahroseカラムを用い精製し、各画分を濃縮、稀釈系列を作製後、HCT116細胞とKB細胞に48時間作用させ、WST-1アッセイにより細胞死誘導活性を検定した。その結果、400mMNaCl画分に細胞死誘導活性が認められた。さらに、本分画をPhenyl sepharoseカラムにより分画したところ、1.9-1.05M硫酸アンモニウム濃度の画分に活性が認められた。4.予備的実験としてNFkBのA.a.血清型a,c,B.forsythusによる転写誘導活性を超音波破砕物を用いて調べたところ、A.a.血清型a,cには検出されたが、B.forsythusには検出されなかった。
開放端におけるエンドプレートメッシュバイアスの最適化

本課題では筑波大学プラズマ研究センターのタンデムミラー装置ガンマ10において、メッシュバイアスによる端損失電子束の軽減を試みた。ガンマ10で電位形成用ECRHを印加すると、大量の端損失電子が装置端のステンレス板(エンドプレート)に流入する。エンドプレートは電気的に浮遊しているので、エンドプレートから放出された冷たい2次電子が装置中央部に向かって逆流する。エンドプレート前面に張ったメッシュに負の電圧をかけ、二次電子を抑制する実験がメッシュバイアスである。これまでに得た成果は、(1)メッシュバイアスにより、エンドプレート電位が下がり端損失電子束と熱流が減少した。(2)しかし、端損失電子束の減少率は当初の期待より小さく、エンドプレートの電流バランスに疑問が生じた。(3)そこで、エンドプレート裏のプラズマを介した電流I3を考慮すると、電流バランスの勘定が合うことが分かった。また、この電流のためにメッシュバイアスの効果が制限されていることも明らかにした。現在エンドプレートの表面と裏面を絶縁し、エンドプレート表面ではI3なしで電流バランスを成立させる準備をしている。ガンマ10の実験スケジュールとの関係で、平成8年度中には実験出来ないが、次年度の早期に結果を出すべく努力中である。また、メッシュの一部に高透過率の物を用いると、バイアス電圧がよくかかるようになったので、他のメッシュも高透過率化することを検討中である。これはメッシュ自身から放出される2次電子を軽減する意味でも重要である。本研究で、開放磁場部の電位形成とプラズマの輸送機構に関して多くの知見を得た。エンド部の電流バランスは主プラズマの径方向拡散とも密接に関わっている。今後はこのことも視野に入れた研究を進めて行く必要がある。
超遺伝子族のデータベースの試作

(1)細胞接着に関与する3つの遺伝子族、シグナル伝達系に関与する6つの遺伝子族、rasをはじめとするGTP結合タンパク質遺伝子族及びタンパク質キナーゼ遺伝子族を含む6つの遺伝子族に対して、アミノ酸配列のアラインメント、コンセンサス配列、荷重モチーフ、メンバーの分子系統樹を計算し、データベース化した。(2)新しい遺伝子族メンバーをデータベース中に探査したり、データベースから全てのメンバーの抽出を容易にするために、新しいホモロジーサーチ法(局所探査法)を開発した。この方法は、先ず、強く配列の保存した断片(モチーフ)を複数選び、各座位に出現するアミノ酸頻度に基づいて作成された荷重モチーフを決定する。この荷重モチーフに類似の配列をデータベース中に探査し、統計的に有意な類似度を持つ配列を選び出す方法である。(3)上で述べた局所探査法を細胞接着に関与する3つの遺伝子族に応用し、レセプタータイプのチロシンキナーゼのうち、イ)神経成長因子レセプターtrkの細胞外ドメインに免疫グロブリン様配列を、ロ)retがんタンパクの細胞外ドメインにカドヘリン様配列を、ハ)及び複数のレセプターの細胞外ドメインにフィブロネクチンタイプIII様配列を見つけることに成功した。(4)(3)の結果から、レセプタータイプのチロシンキナーゼは細胞外ドメインの構造から、少なくとも、4つの型に分類出来ることを示した。この分類は細胞内ドメインのチロシンキナーゼドメインの比較から推定された系統樹に基づく分類とほぼ一致した。1)超遺伝子族デ-タベ-スの試作に先立ち、将来外部とのデ-タ通信に備え、これまで我々が汎用コンピュ-タ用に開発してきたプログラムをワ-クステ-ションに移植し、ネットワ-クを完成させた。2)超遺伝子族に於ける基本的解析技術は相同性探査、複数の配列の並列(マルチプルアラインメント)及び分子系統樹推定法の3つである。その第一として、同一遺伝子族に属する既知のメンバ-を集め、複数の保存領域の各座位に出現するアミノ酸の頻度(頻度マトリックス)を求め、それを基に類似の配列を探査する新しい『局所探査法』を開発した。この方法を免疫グロブリン、フィブリノネクチンタイプ3(FN3)、カドヘリン超遺伝子族に応用し、レセプタ-型チロシンキナ-ゼ遺伝子族のメンバ-にそれぞれに類似の配列を検出した。これらの結果を基に、この遺伝子族を分類することを試みた。上記の成果の一部は既に論文として報告し、一部は準備中である。3)第二に、新しい簡便なマルチプルアラインメント法を開発した。この方法の特徴はアニ-リングによりベストに近いアラインメントを実現する点にある。この方法はワ-クステ-ションによく適合し、百本程の配列を数分程度でアラインメントを行うことが出来る。4)推定した系統樹の信頼性を量的に示すブ-トストラップ確率を樹上に示すコンピュ-タプログラムを開発し、作業の向上を計った。現在新しい分子系統樹推定法を開発中である。5)上記の方法を応用し、各超遺伝子族毎に、メンバ-のアラインメント、保存部位のモチ-フと頻度マトリックス、分子系統樹を計算し、超遺伝子族のデ-タベ-スを作成中である。現在迄に13の遺伝子族について完成、あるいは完成に近い状態にある。(1)昨年度開発した荷重モチーフによる相同性探査法を利用して、遺伝子族メンバーを新たにデータベース中に探査し、更新を計った。最終的に細胞接着に関与する3つの遺伝子族、シグナル伝達系に関与する6つの遺伝子族、rasをはじめとするGTP結合タンパク質遺伝子族、及びタンパク質キナーゼ遺伝子族を含む6つの遺伝子族、計16の異なる遺伝子族に対して、アミノ酸配列のアラインメント、コンセンサス配列、荷重モチーフ、メンバーの分子系統樹を計算し、データベース化した。このデータベースは配列のアクセッションナンバーを付記して、一般に公表する予定である。また今回データベースに収録した遺伝子族数は数において少なく、決して十分とは言い難い。今後、配列の更新と共に、遺伝子族の数の増加を計っていく。

(2)昨年度開発した局所探査法を細胞接着に関与するカドヘリン遺伝子族に応用し、レセプタータイプのチロシンキナーゼの一種retがんタンパクの細胞外ドメインにカドヘリン様配列を見つけることに成功した。このホモロジーの検出結果は同時に、この探査法がホモロジーが弱く、且つ十分長い領域に亙るホモロジーが存在しない場合でも有効な方法であることを実例で示したことになる。(3)(2)の結果、及び昨年度のホモロジー探査の結果から、レセプタータイプのチロシンキナーゼは、細胞外ドメインの構造から、少なくとも4つの型に分類出来ることを示した。この分類は細胞内ドメインのチロシンキナーゼドメインの比較から推定された系統樹に基づく分類とほぼ一致した。
高温固体に入射する水溶性高分子ポリマー水溶液液滴の固液界面現象と被膜形成の素過程

金属材料を強化する焼き入れ冷却では,水溶性ポリマー水溶液が冷媒として用いられることがある.この冷媒によるスプレー冷却特性の素過程を解明するため,加熱固体面に衝突する単一液滴の衝突挙動,液滴と固体間の熱移動,および液滴衝突途中に固体面に形成されるポリマー被膜を可視化実験により研究した.その結果,ポリマー被膜はその熱分解温度以上に加熱された固体面でも一時的に形成されることがあること,また被膜形成から消失までの時間は固体面温度や固体の熱物性の影響を受けることが明らかになった.さらに,ポリマー被膜は液滴と固体間の熱移動を妨げる熱抵抗層として作用し,焼入冷却時の製品不良を軽減することを確認した.鋼材の焼き入れ冷却では、冷媒として水や油が適用されるが、水溶性高分子ポリマーを水で希釈した水溶液(水溶性焼き入れ剤)も使用される。この冷媒は、水と油の中間の冷却速度が実現でき、ポリマーの種類や希釈濃度を変更することで冷却速度の調整が可能である。また、冷却途中に鋼材表面にポリマー被膜を形成し、その効果で焼き割れと呼ばれる材料の局所破壊を抑制するとされている。しかし、ポリマー被膜の形成メカニズムや条件は不明であり、焼き割れ防止機構も明らかではない。これらの知見が得られれば、より高精度な焼き入れ冷却制御が実現でき、製品の品質向上が期待できる。焼き入れ冷却では、浸漬冷却法やスプレー冷却法が使用される。本研究ではスプレー冷却法を研究対象とし、その素過程である単一液滴と加熱固体面との衝突現象とポリマー被膜の形成過程を可視化実験によって研究した。分子量が約20,000の高分子ポリマー(ポリオキシエチレン・ポリプレングリコール)を水で希釈した常温の水溶液を供試液体とし、透明なサファイアおよび石英プリズムを加熱固体とした。固体面温度は200°C600°Cである。鋼に近い熱伝導率を有するサファイアに液滴を衝突させた場合、固体面温度が600°Cではポリマー被膜は形成されなかった。500°Cではポリマー被膜が一時的に形成され、その後、熱分解により消失した。一時的な被膜の存在時間は固体面温度の低下により長くなり、供試ポリマーの熱分解開始温度である300°C以下になると、被膜の消失は起こらなくなった。熱伝導率が小さい石英ガラスでは、固体面温度が600°Cでも、一時的な被膜形成が確認された。これは、液滴衝突途中の過渡的な固液界面温度が被膜形成の重要な支配因子であることを示唆していると考えられる。初年度は可視化実験手法の確立とポリマー被膜形成機構の解明を主たる目的としており、これらについては達成できたと考えている。また、液滴衝突時の固体面の過渡的な温度測定から熱伝達量の調査を計画していたが、温度計測上の問題点が幾つか発生した。これらの問題はほぼ解決でき、本格的なデータ収集の目途はついている。以上のことから、研究の進捗はおおむね順調である。本年度の研究成果は(1)観察実験手法の精度向上,(2)液滴衝突の慣性が変形挙動とポリマー被膜形成プロセスに及ぼす影響の解明の2点である.(1)観察実験手法の精度向上(2)液滴衝突の慣性が変形挙動とポリマー被膜形成プロセスに及ぼす影響の解明液滴衝突時の慣性の影響を調査するため,液滴の慣性と表面張力の比で定義されるウェーバー数を約50および100の場合について実験を行った.供試ポリマーは分子量20,000のポリオキシエチレン・ポリプロピレングリコールで,10wt%の常温の水溶液を供試液滴とした.供試固体は200600°Cに加熱した平滑なサファイアである.供試ポリマー水溶液や固体面温度は実操業における鋼材の熱処理の条件に沿って決定した.実験の結果,液滴の慣性は変形挙動に大きな影響を及ぼすものの,ポリマー被膜の形成や消失に対して重要な影響因子とはならないことが分かった.この研究成果の一部は日本鉄鋼協会秋季講演大会で発表済みであり,全容について論文執筆している段階である.本研究で必要な実験手法はおおむね開発できた.液滴衝突時の固体面温度変化の実験に多少の遅れがあるが,大きな問題とはなっていない.ポリマー水溶液液滴(ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレン,分子量約20,000)をその熱分解温度(350-400°C)以上に加熱した固体面(サファイア)に衝突させると,一時的なポリマー被膜が形成される温度域(400-580°C)が存在する.本年度は,水溶液濃度および固体の熱物性値が被膜形成に及ぼす影響を研究した.ポリマー被膜量は濃度,すなわち水溶液中のポリマー量に応じて増加することと,低熱伝導材料はポリマー被膜が形成されやすいことを明らかにした.また,ポリマー水溶液液滴および水液滴を加熱金属(ステンレス鋼)箔に衝突させ,その際の金属箔の温度変化履歴を計測した.ポリマー被膜が恒常的に形成される温度域でかつ水が強い核沸騰もしくは遷移沸騰を呈する条件では,ポリマー水溶液による温度降下量は水のそれよりも明らかに小さくなった.また,温度降下量はポリマー濃度が5wt%より10wt%の場合の方が大きくなった.これらのことから,固体面上のポリマー被膜が熱抵抗層として作用していると考えられる.本研究期間全体を通じて明らかになったことは,(1)加熱固体面がポリマーの熱分解

温度以上であっても一時的にポリマー被膜が形成される,(2)固体面上に形成されるポリマー被膜により液滴と固体との冷却特性が影響を受ける,(3)ポリマー被膜形成は固体温度,固体の熱物性,ポリマー濃度の影響を受ける,などである.これらの知見は水溶性ポリマーによる金属材料の焼き入れ冷却の冷却条件決定に有用であり,また,学術的にも有意義である.本研究の所期の目的は達成されたと考えている.金属材料を強化する焼き入れ冷却では,水溶性ポリマー水溶液が冷媒として用いられることがある.この冷媒によるスプレー冷却特性の素過程を解明するため,加熱固体面に衝突する単一液滴の衝突挙動,液滴と固体間の熱移動,および液滴衝突途中に固体面に形成されるポリマー被膜を可視化実験により研究した.その結果,ポリマー被膜はその熱分解温度以上に加熱された固体面でも一時的に形成されることがあること,また被膜形成から消失までの時間は固体面温度や固体の熱物性の影響を受けることが明らかになった.さらに,ポリマー被膜は液滴と固体間の熱移動を妨げる熱抵抗層として作用し,焼入冷却時の製品不良を軽減することを確認した.実験手法はおおむね確立できているため、今後は被膜形成について諸因子の影響の調査を進める。所期の研究計画のとおり、固体面温度および液滴衝突速度が被膜形成に及ぼす効果を重点的に研究する。また、液滴と固体面との熱伝達の計測についても実験を進める。研究はおおむね順調に進んでいる.当初の計画では最終年度はポリマー分子量,濃度,ウェーバー数等の諸因子が被膜形成に及ぼす影響を研究することとしていた.しかし,実操業上の重要な関心事は,ポリマー被膜形成の有無による固体面の過渡的な温度変化であることが判明したため,これを重点的に研究する予定である.熱流体工学
スフィンゴ脂質が骨代謝に及ぼすメカニズムに関する研究

本研究は糖代謝と骨代謝の相互作用にどのようにスフィンゴミエリン合成酵素(SMS)が関与しているかを明らかにし、スフィンゴミエリンをターゲットにした糖尿病患者の歯周病治療応用へと展開するための研究基盤を確立することが目的である。今年度は細胞膜のSMSに焦点をあてて、細胞膜に含まれる脂質の働きについて注目し実験を行った。昨年度までの予備実験ではSMSノックアウトマウスにおいて、骨の変化を確認していたので、in vitro実験で骨芽細胞を用いた実験を行っていた。それらの結果をふまえて、本年度は破骨細胞分化や機能発現に着目し実験をすすめた。実験方法としてRAW264細胞から破骨細胞に分化する過程で細胞膜に含まれるコレステロールをメチルβシクロデキストリン(MbCD)にて細胞膜から取り除き、破骨細胞分化に影響を及ぼすか検討した。MbCD刺激により、コントロールと比べてRAW264細胞の破骨細胞分化が抑制された。さらにRAW264細胞による骨吸収能に影響を及ぼすか検討するために、リン酸カルシウムプレートを用いて吸収窩を確認した。分化の結果と同様に吸収能も抑制された。これらの結果から、破骨細胞の細胞膜の働きは骨吸収に影響がある可能性が示唆された。さらに、今後、SMSが細胞膜を介して、破骨細胞分化を調節するかを明らかにし、骨におけるスフィンゴミエリンの役割を解明することによって、糖尿病の原因究明の一助となり、さらに歯周病と糖尿病の関連の解明につながる可能性も示唆された。骨吸収能を測定する実験が初めてであったために、予備実験が予測していた以上に時間を必要とした。現在は手技も確立したため、順調に進んでいる。破骨細胞の細胞膜からコレステロールを除去することによって破骨細胞の働きに影響を及ぼす結果が得られたため、今後、破骨細胞分化過程において、ストレス応答に及ぼす影響について研究を進めていく予定である。計画している具体的な研究項目として、1、SMSによる骨代謝調節メカニズムの解明、2、膵臓や脂肪組織を介した骨代謝とSMSとの関連、3、SMSによる酸化ストレス調節と骨代謝の関係、4、SMSノックアウトマウスへのスフィンゴミエリン投与による骨密度の改善、の4つである。今年度は骨組織に焦点をあてて、SMSの働きについて注目し実験を行った。昨年度までの予備実験でSMSノックアウトマウスにおいて、骨の変化を確認しているので、in vitroの実験を進めた。実験方法として骨芽細胞からSMSをノックダウンし骨芽細胞分化に影響を及ぼすかを検討した。SMS2をノックダウンした細胞ではコントロールと比べて、骨芽細胞分化や石灰化が抑制されていたことは、以前に報告したが、SMS1をノックダウンした細胞においても石灰化が抑制していた。さらに、小胞体ストレス応答遺伝子であるGRP78/BiP mRNAの発現が上昇していることがわかった。これらの結果から、SMS1は小胞体ストレス応答を介して、骨芽細胞の分化に関与している可能性が示唆された。さらに今後、SMS1がどのような小胞体ストレス応答を介して、骨芽細胞分化を調節するか明らかにし、骨におけるスフィンゴミエリンの役割を解明することによって、糖尿病の原因究明の一助となり、さらに歯周病と糖尿病の関連の解明につながる可能性も示唆された。当初の仮説とやや結果が異なり、新たな結果が得られたため、別の観点から実験を進めているため、計画よりやや遅れることとなった。

SMSが骨芽細胞分化に影響があることは、すでに結果が得られていたが、どのようなメカニズムが関与していることが明確でなかった。今回、骨芽細胞からSMS1をノックダウンするとBiP mRNAの発現が上昇したことにより、SMS1による骨芽細胞分化に小胞体ストレス応答が何らかの影響を及ぼす可能性が示唆された。そこで、小胞体ストレス応答のシグナル伝達経路に着目し、研究を進めていく予定である。破骨細胞の細胞膜からコレステロールを除去することによって破骨細胞の働きに影響を及ぼす結果が得られたため、今後、破骨細胞分化過程において、ストレス応答に及ぼす影響について研究を進めていく予定である。未使用額が少しあったので、次年度に試薬に使用する。新しく行った実験の手法を身につけるのに、本来の予測より時間を要したため、予定していた研究費の使用に至らなかった。
外国語授業支援のためのアプリ・ソフト類のアーカイブ作成および教具・ツール類の開発

本研究プロジェクトでは、語学教育に携わる教員・研究者らが、ICTをどのように教育実践や研究に活用しているかの知見を集約し、その成果を2016年夏にFLExICTカンファレンスを通じて公開した。同カンファレンスは盛況のうちに閉幕し、継続開催を望む声が多かったことからも、語学教育におけるICT利活用が今日的な課題として広範に訴求しうるテーマであることを浮き彫りにすることができた。なお、本研究プロジェクトの分担者の一人である神谷は、自身が研究代表者を務めるプロジェクトとしてカンファレンスの継続開催を課題目標に据えた研究プロジェクトを2017年度科研費プロジェクトに申請し、採択されている。2014年度は、研究グループの体制づくりと、グループが使用するWebツールの整備を行った。具体的には、Googleグループを用いて連絡網を構築し、グループの通称を「FLExICT」とした(Foreign Language Education x ICTの略)。さらに、独自ドメイン(flexict.jp)を取得し、そこにDokuWikiシステムをインストールして、分担者による取り組みを報告する場とした。すでに複数のメンバーが取り組みの実施状況を上記Wikiシステムに投稿しているが、取り組みの状況がまだサマライズできない段階のメンバーは、2015年度内に報告を行う予定である。分担者の中には、本科研プロジェクトの活動の一環として中国語教育学会の研究会のワークショップを行い、タブレット端末(iPad)を利用した様々な中国語教育のノウハウをまとめた。特に、QuizletやShowMeといった無料アプリやサービスを用いて実際に授業に活用している点で、本プロジェクトの趣旨に大変合致していた。また、研究代表者はiPad上で利用できる板書記録アプリ「ShowMe」を用いて英文テキストの解答解説を撮影し、公開した。(まとめについては2015年度前半に執筆予定)言語教育に活用可能なICTツールやサービスは爆発的な勢いで広まっており、その全容を把握することは極めて難しい。教員ひとりひとりが授業内で具体的に活用し、その実践を通して各ツールやサービスの長所や短所を見極め、公開することが重要である。2015年度は、主にアーカイブサイトの作成を行った。アーカイブサイトは、当初、オープンソースのウィキシステムである「DokuWiki」を用いていたが、2015年度からGoogleサイトに移行した。ソフトウェア開発については、語学教育で多用される構文ダイアグラムを作成するソフトウェアで2バイト文字の使用を前提としたものが皆無であるため、その開発のための仕様を策定した。また、2016年に開催予定の当研究プロジェクト主催のカンファレンスについて、開催会場を確保し、また、基調講演者へのアポイントメントも取りつけた。語学教育にICTを活用した事例を集積するアーカイブの場所をGoogleサイトに移行したことで従来のウィキ構文を覚える必要がなくなり、直感的に情報を入力することができるようになった。また、ソフトウェアについては、本研究プロジェクト以前から研究代表者が構想を練っていた構文ダイアグラム作成ソフトについて、汎用性を高める仕様上のアイデアが提案され、開発依頼の段階まで一気に進んだ。カンファレンスについては、会場として2015年に開学した立命館大学おおさかいばらきキャンパスのラーニングシアターを利用できることになり、基調講演者にもアポイントメントが取れたため、具体的なプログラムの内容を決定する段階に入った。FLExICTカンファレンスでは、研究発表の登壇者として英語・中国語・ドイツ語・日本語それぞれの言語の教育に関わる教員や研究者を事前に募集し、本研究プロジェクトの研究分担者を含む16名が自身の先進的な取り組みを発表した。また、教育ICTの分野を代表して飯吉透氏(京都大学高等教育研究開発推進センター教授)、中国語教育の分野を代表して研究分担者でもある清原文代氏(大阪府立大学高等教育推進機構外国語教育センター教授)を招いて基調講演を行ったほか、発表登壇者らによるパネルディスカッション、イブニングセッションを行い、約80名の参加者で賑わった。外国語教育とICTに特化したカンファレンスの開催は国内的にも珍しく、本研究プロジェクトが当初設定した目標を十分に達成できたと考える。カンファレンスの報告を含む本研究プロジェクトの成果は専用webサイト(http://www.flexict.jp/)に集約し、公開している。活動が複数年度にまたがる分担者からの取り組みやアーカイブ化の報告が遅れているが、2015年度内に解消予定である。最終年度である2016年度は、アーカイブサイトの充実と、ソフトウェア開発の継続、そしてカンファレンスの開催に向けて邁進したい。言語情報学2015年度は、従来の取り組みに加えて、グループをツールの開発メンバーとアーカイブメンバーに分け、研究の多角化を本格化させる。2016年度に実施予定のシンポジウムへ向けて、会場の確保をはじめ、基調講演を依頼する登壇者へのコンタクトも行う。カンファレンス開催およびソフトウェア開発の費用が2015年度段階では未定だったため。本プロジェクトの予算から支出して使用する機器やサービスについて、試用期間を通じて検討している分担者が多いため。2016年度前半にカンファレンス開催費用とソフトウェア開発費用の見積を作成する。2015年度中に支出項目を決定し、適切に執行する。
都市環境に侵入するイノシシのリスク分析とリスク回避手法の検討

イノシシの出没地点の特徴を郡部の行動データと六甲山系の被害情報を用いて、林縁からの距離を基準に分析したところ、通常林縁から100m程度しか離れないイノシシが六甲山系の場合は、500m1kmほど離れた地点でも多く出没していた。出没地から500m以内に餌付けポイントがあり餌付けによって出没行動が大きくゆがめられていることが明らかとなった。市街地で捕獲された個体78個体からロタウイルスの検出は1頭のみで、人への感染影響は低いと判断された。住民に対し意識調査を行ったところ、出没要因を「「山に餌がないため」と誤認しており、このような住民によって餌付けが許容されていると考えられた。都市環境におけるイノシシの出没の状況把握と出没リスク予測を行うため、六甲山系および隣接する市街地において、ルート調査地を8ルート設定し、痕跡調査を行った。また、出没行動のパターンを季節や時間別に明らかにするため、定点ビデオカメラを8台設置し夜間の動物の行動を追跡した。ビデオ画像では、6か月間でのべ1667頭の動物が撮影されそのうち、イノシシは1116頭、67%が撮影された。イノシシが集中して利用する地域があり、また10月月から11月に活動が活発化していることも明らかとなった市街地における被害通報情報と捕獲地点について行政的に蓄積されているデータをデジタル化し、これまでの対策の現状と課題について、論文として取りまとめた(辻・横山、2014a)現状では通報件数が増加傾向にあり、通報エリアも拡大傾向にある。また特定の加害個体を捕獲できたときには、被害が沈静化する傾向が見られた。また、餌付け場所から150m以内の被害が8割を超えているため、餌付け行為による誘引が被害を引き起こす現状が明らかとなった。また、加害個体の解剖分析も行い、辻・横山(2014b)にまとめた。分析した7頭中6頭において、人工物が検出され、人為的食物に誘引、執着した個体と推定された捕獲個体については、山側での捕獲個体と合わせて、寄生虫の肉眼的検索も行い、佐藤ほか(2014)にまとめた。線虫22種と条虫1種、吸虫1種が確認された。これらの中には、兵庫県産イノシシで初記録となった4種確認された。豚腸結節虫はまれで、有歯豚胃虫が阪神間に集中していることなどが明らかとなった。ロタウイルスについては、血清サンプルの収集を終えた。現在分析方法の検討を行っており、H26年に分析に供する予定である。2年間で収集した出没ルートや被害情報など収集したデータと六甲山系の航空写真をGISシステムに整備し、時系列的に動画で、出没状況がわかるクラウドGISシステムを構築した。インタネット上で関係者が同時にリアルタイムの情報共有ができる形となり、出没の空間的時系列的関係性を共有するシステムとして新しい取り組みが可能となった。また、都市部における餌付け問題を解決できない背景として、人間側の要因も強い。そこで、住民や観光客などに餌付けに対する考え方や条例に対する認知度を明らかにするためのアンケート調査を行った。餌付けを引き起こす心理として、「六甲山に餌がない」「六甲山では生活できない」といった誤った認識が根深いことが明らかとなった。また、神戸市民の条例に対する認知度は高いものの県外から来る観光客にはほとんど知られておらず、イノシシの被害に無防備な状況であることが明らかとなった。さらに、イノシシが高密度に生息するにも関わらず、これまで捕獲が実施されてこなかった地域において、地域住民や関係機関と連携し、捕獲体制を整え、捕獲を実践した。3か月間同一場所で15頭のイノシシと4頭のニホンジカの捕獲に成功した。捕獲個体の分析から、人獣共通感染症としてリスクが懸念されていたロタウイルスを78個体について分析した。その結果1個体から遺伝子が研修されたが、ロタウイルスについてはリスクが低いことが明らかとなった。以上のようにイノシシが都市に出没する上でリスクとなる4つの項目について分析とモデル的対策を行うことができた。都市に隣接する六甲山系におけるイノシシの出没の要因と抑制手法を検討することを目的として、1イノシシの出没状況を把握するための痕跡指標の開発と出没ルートの特性の把握、2被害情報や出没状況をリアルタイムで収集するクラウドGISのシステム構築、3公衆衛生上のリスクを把握するため、リスクが最も懸念されるロタウイルスのリスク診断と今後のリスク評価、4餌付けを許容する社会状況を把握するための住民意識調査、を実施し、近年急増しているイノシシの都市出没を抑制するための対策を検討した。1出没ルートデータと行動追跡データ、環境要因を用いて、ギャップ分析を行った。六甲山系では、標高の中腹部及び市街地との接点である林縁部で生息適地が多く得られた。しかし、本地域においては餌付け地点から500m以内の被害報告が多く、潜在的なイノシシの生息状況と比較すると大きく行動がゆがめられていた。2出没状況を関係機関においてリアルタイムで共有するためのクラウドGISのネットワークを構築した。さらに登山グループと連携して餌付け者や山間部でのイノシシの出没情報を集積する仕組みを構築した。3市街地で捕獲された個体78個体についてロタウイルスの保有状況を調べた。ロタウイルスが検出されたのはこのうち1頭で、ブタ由来の株と近縁であり、人への感染影響は低いと判断された。4餌付けを許容する要因を探るため個別面接法と集合調査法を合わせて、185名から回答を得た。