hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
補体活性を抑制した急性ショック・炎症フリー魚の作出

現在C5aR欠損系統作製のための標的配列を検討中であり、これを用いてC5aR欠損魚の作製に取り掛かる予定である。当初の予定通り組換えzfC5aの作製および抗zfC5a抗体の作製を完了させており、今年度からそれらを用いて生体内でのC5a活性に関する実験を行う予定である。またC5aR欠損魚の作製についても予備試験により作製手順を確認しており、速やかに取りかかる準備が出来ており、今年度中にそれらの欠損系統を確立できる見込みのため、概ね予定通りに進んでいると考えられる。H30年度は作製した研究ツールのin vitroでの活性評価とゲノム編集による欠損系統の確立を中心に研究を進めた。H29年度に作製した抗ゼブラフィッシュC5a抗体(anti-zfC5a Ab)がzfC5aの活性を抑制できるか検証するため、ゼブラフィッシュ腎臓由来白血球を用いた遊走試験を行ったところ、ザイモサン活性化血清に対し遊走する白血球数がanti-zfC5a Ab投与によって顕著に減少したことから、anti-zfC5a AbのzfC5a活性阻害能が示され、またzfC5aがゼブラフィッシュ血漿中における主要な遊走因子であることが示唆された。一方で溶血活性を指標とした活性化前のzfC5に対する活性化阻害試験では、わずかに阻害がみられたものの遊走活性に比べ抑制率が低く、anti-zfC5a Abは活性化前のzfC5よりも活性化により産生されたzfC5aに対し優先的に阻害活性を発揮することが示された。CRISPR/Cas9法による欠損系統作製では、ターゲット遺伝子であるzfC5a受容体(zfC5aR)またzfC5aR様遺伝子(zfC5aR-like)に対するガイドRNAを作製し、これを顕微注入したゼブラフィッシュ胚への変異導入をHMA法により確認したところ、変異遺伝子を有したモザイク欠損魚が得られたため、現在これらを継代しホモ欠損系統の確立と各種試験に必要な数の欠損魚の確保を目指している。さらにAeromonas hydrophilaを用いた感染試験の条件検討も並行して行っており、anti-zfC5a Abを投与した抑制魚及びzfC5aR欠損魚に対しそれらの感染試験を行い、zfC5aの生体防御、炎症への寄与を検証する予定である。現在までに組換えzfC5a、anti-zfC5a Abの作製を予定通り完了させ、またzfC5aR及びzfC5aR-likeの欠損系統魚の作製も順調に進めている。H31年度にこれらの系統魚由来のzfC5aR欠損白血球を用いたzfC5aに対する遊走能の測定、zfC5a刺激時の遺伝子発現応答、活性酸素産生能を評価し、またこの欠損系統魚、抗体投与によるzfC5a抑制魚を用いた感染試験を行うことで、当初の目的であるzfC5aの魚類生体防御に対する寄与を評価し、zfC5a活性抑制時の炎症反応にどう影響するかを明らかにできると期待される。現在までの研究結果からzfC5aはゼブラフィッシュ生体内で感染局所に白血球を動員する主要な誘引因子として機能していると示唆されており、本研究で作製したzfC5a抑制魚、zfC5aR欠損魚は特に好中球を中心とした自然免疫研究のモデルとして広く活用できると期待される。当初の予定通り、前年度に作製した組換えzfC5aの活性を更にin vitroの白血球遊走試験、活性化試験で検証し、生体への投与試験へと移る。作製したGST融合zfC5aは白血球の誘引活性を有していたが予想される活性よりもやや低かったため、今後精製方法を検討し、また当初作製した6xHisタグ融合zfC5aについてもリフォールディングを試みより高いアナフィラトキシン活性を有する組換え体の作製に務める。
基本的転写共役複合体メディエーターによる新しい造血支持機構

基本的転写因子複合体メディエーターのサブユニットMED1を欠損したマウス胎児線維芽細胞(MEF)のFGF7の発現は低下した。骨髄細胞と骨髄間質細胞を抗FGF7抗体存在下で共培養したところ、骨髄細胞数とLTC-IC数が減少した。ニッチ細胞依存性の骨髄芽球性白血病細胞MB-1は骨髄間質細胞との共培養で維持・増殖する。この系に抗FGF7抗体を添加するとMB-1の敷石構造形成が低下し、細胞増殖が抑制された。以上の結果および遺伝子発現や細胞内情報伝達の検討より、FGF7は骨髄間質細胞の発現するFGFR2IIIbを介して間接的に正常造血幹細胞および骨髄芽球性白血病の支持・増殖を担うことが強く示唆された。私達は、私が発見したRNAポリメラーゼIIホロ酵素複合体の構成成分である基本的転写共役複合体メディエーターが造血のニッチ細胞内で発現を誘導する分子(オステオポンチン等)により、造血幹・前駆細胞が支持されることを発見し発表した。本研究は、造血器等におけるメディエーターの生理的役割を解明してきた私達の成果を基盤に、造血ニッチでメディエーター(特にそのMED1/TRAP220サブユニット)が細胞外環境を構成するシグナルの発現をどう制御して造血幹・前駆細胞を支持するのかを明らかにし、血液内科の臨床に寄与することを目的とする。本研究は基本的転写因子がニッチ機能を担う仕組を始めて解明する学際的研究である。MED1欠損MEFは野生型MEFと比べて造血細胞の増殖能と造血幹細胞支持能の著明な低下を示す。その機序をシステマティックに見出すためにこれらのMEFの遺伝子発現をマイクロアレイで網羅的に調べたところ、オステオポンチン以外には既知の造血幹細胞支持分子が検出されなかったが、著明に発現が低下した9個の遺伝子を含むニッチ分子候補をみつけ、その中に増殖因子FGF7が含まれていた。FGFファミリーはニッチ分子として注目されており、24年度にFGF1とFGF2が造血幹細胞支持能を発揮することが報告された。またFGF7が肝前駆細胞の支持分子であることも24年度に報告された。したがって、FGF7が造血ニッチ機能を持つことが予想される。そこで、MEFを用いた造血ニッチモデルを用いて、野生型MEFに抗FGF7抗体を添加して検討したところ、共培養の骨髄細胞の増殖が抑制され、造血幹細胞支持能の低下も認めた。逆に、MED1欠損MEFにリコンビナントFGF7を添加すると、共培養の骨髄細胞の増殖が促進し、造血幹細胞支持能が増加した。以上から、FGF7が新しい造血ニッチ分子であることが強く示唆された。私は先にRNAポリメラーゼIIホロ酵素複合体を構成する複合体メディエーターを発見し、同複合体が前イニシエーション複合体の生成に必須の基本的な転写コファクターであることを見出した。基本的である一方、メディエーターは特異的役割を併せ持ち、そのサブユニットMED1は核内受容体等の特異的コアクチベーターであることをこれまでに示している。造血を支えるニッチである骨髄間質細胞で、MED1が造血支持能に重要な役割を果たすこと、その機序として、MED1が発現に関与するオステオポンチンやFGF7がニッチ機能を担うことを前年度までに見出した。今年度は、まずFGF7による造血支持能の機序を明らかにした。FGF7受容体であるFGFR2IIIbは血液細胞に発現せず間質細胞に発現していた。また間質細胞はFGF7に反応して細胞内シグナル伝達が活性化した。以上のことから、間質細胞が発現するFGF7は自らをオートクリン機構によって活性化し、その結果として間接的に造血幹細胞を支持するものと考えられた。次に、同様の機序が白血病幹細胞にも存在するのかを、ニッチ依存性骨髄芽球性白血病細胞MB-1を用いて検討した。抗FGF7抗体によりFGF7をブロックすると、ニッチ細胞によるMB-1細胞の支持能は著明に低下し、幹細胞の性質である敷石構造の減少を認めた。以上より、FGF7による造血支持能は、正常細胞のみならず、腫瘍性造血細胞にも重要な役割を果たすことが強く示唆された。私達は、私が発見したRNAポリメラーゼIIホロ酵素複合体の構成成分である基本的転写共役複合体メディエーターが造血のニッチ細胞内で発現を誘導する分子(オステオポンチン:OPN等)により、造血幹・前駆細胞が支持されることを発見し、最近発表した。

本研究は、造血器等におけるメディエーターの生理的役割を解明してきた私達の成果を基盤に、造血ニッチでメディエーター(特にそのMED1/TRAP220サブユニット)が細胞外環境を構成するシグナルの発現をどう制御して造血幹・前駆細胞を支持するのかを明らかにし、血液内科の臨床に寄与することを目的とする。本研究は基本的転写因子がニッチ機能を担う仕組を始めて解明する学際的研究である。先にマウス造血ニッチモデルにおいて、トロンビン切断型OPNと異なり全長のOPNが骨髄細胞の増殖ストレスを発揮しかつ造血幹・前駆細胞支持能を持つことを示したが、その造血細胞側の受容体はこれまで不明であった。私達はこの度、特異的抗体を用いることにより、受容体がインテグリン系の受容体ではなくCD44であることを示唆する結果を得た。従って、OPNからCD44を介する細胞増殖ストレスのシグナルが造血細胞に入ることが強く示唆される。一方、MED1欠損MEFで特異的に発現が低下している分子を網羅的遺伝子発現プロファイルで検討したところ、OPN以外には既知の造血幹細胞支持分子が検出されなかったが、著明に発現が低下したの9個の遺伝子を含むニッチ分子候補をみつけ、その中に増殖因子が含まれていた。造血ニッチを構成する新しい分子候補FGF7を見出したことより、造血を支持する細胞外環境の新しい仕組みを提唱できる可能性がある。当初の研究計画に示したことのうち、造血前駆細胞の増殖ストレスと維持を司る新規細胞外シグナル分子の検索、全長OPNの機能の確認とその機序、マウスモデルの作製は順調に進んでおり、次年度の研究につなげることが十分可能である。当初の計画に従い、新規細胞外シグナル分子であるFGF7の発現の解析やそのレセプターシステム仕組みを解明し、FGF7による造血ニッチ機能のメカニズムを解明したい。また可能な限り個体レベルでの解析を推進したい。一方、メディエーターとの関連からオステオポンチン遺伝子のプロモーター解析について詰めてみたい。当初の計画に従い、新規細胞外シグナル分子の発現のメカニズムの解析や個体レベルでの解析を推進したい。また、余裕があれば、メディエーターとの関連からOPNのプロモーター解析について詰めていくつもりである。昨年度には10,431円という端数の予算の残余があった。以前なら細かい物品を発注して消化するところであったが、本研究費が基金化されたことから、次年度に繰り越して真に有効な利用を図ることにした。この金額は当初の予算のうち消耗品(試薬)に充てる予定である。その他は計画通りの研究費の使用計画を持っている。昨年度には829円という端数の予算の残余があった。以前なら細かい物品を発注して消化するところであったが、本研究費が基金化されたことから端数を消化する必要がないことを知り、少額とはいえ、次年度に繰り越して真に有効な利用を図ることにした。一方、所属する研究科の同僚の転勤に伴い、研究科内にある備品で足りないものが生じている。その中で、転写研究に必須な、クロマチン免疫沈降アッセイのため、出力制御が可能な専用の超音波破砕機を購入予定である(約100万円の備品)。
セリウム-パラジウム-アルミニウム化合物における重い電子状態の研究

我々のこれまでの研究において、六方晶PrNi_2Al_3型結晶構造をもつCePd_2Al_3は反強磁性磁気秩序と近藤効果が競合する典型物質であり、基底状態が大きな試料依存性を示すことを報告してきた。そこで、本研究では、種々の物性実験によりCePd_2Al_3の基底状態を決めている要因や磁気秩序と近藤状態との競合問題を総合的に明らかにする事を目的とした。その結果、以下の成果を得た。1,モザイク度の少ない良質の単結晶を得るための結晶成長の条件を、ほぼつかむことが出来た。2,多結晶試料(T_N=28K)と単結晶試料(T_N<0.9K)のAlのNQRスペクトルを見る限りでは、前者の方が線幅は広く、Alのサイトが不均一になっていることがわかった(京大との共同研究)。3,Ceサイトを非磁性Laイオンで置換したCe_<1-X>La_XPd_2Al_3系(多結晶)において観測された、高濃度近藤系に特有な電気抵抗の温度変化、及びT_Nに対するX依存性は、典型的な磁気秩序を持った近藤物質に特有のふるまいであることがわかった。4,Pdサイトを原子半径の小さなNiに置換したCePd_<2-X>Ni_XAl_3系(多結晶)において(金材技研との共同研究)、Xの増加とともに、T_Nや磁気エントロピー、gamma値が減少していくことを観測した。これは単位胞体積の減少による伝導電子とf電子間の交換相互作用の増大したせいで、近藤効果がRKKY相互作用より優勢になったことを示唆する。5,多結晶CePd_2Al_3における圧力下の比熱測定(金材技研との共同研究)が6kbarまでなされた。T_Nは、圧力の増加とともゆるやかに増加するが、5kbarを境に減少に転じることがわかった。これは、Doniachによる相図に定性的には対応している。
細胞間接着分子ネクチン-アファディン系と細胞極性因子による細胞極性の形成機構

本研究によって私共は、細胞極性因子Par-3は上皮細胞のアドヘレスジャンクション(AJ)とタイトジャンクション(TJ)の形成に必須の役割を果たすが、接着分子ネクチンによって形成される初期の細胞接着には必須でないことを見出した。Par-3はネクチンとその裏打ち分子アファディンとの結合を促進するが、一方、アファディンはPar-3とネクチンの結合には関わらない。アファディンとネクチンとの結合だけではAJとTJの形成には十分ではなく、Par-3とアファディンが協調的に働いて、AJとTJの形成を制御している。タイトジャンクション(TJ)の形成には多くの細胞極性因子が関与している。aPKCとPar-6、Lg1の3つの細胞極性因子は三者複合体を形成しているが、Cdc42がPar-6と結合すると、aPKCが活性化されてLglをリン酸化する。リン酸化されたLglは三者複合体から解離して、その代わりにaPKCとPar-6の二者複合体に細胞極性因子Par-3が結合して新たな三者複合体を形成し、これがJAMに結合する。これらのいずれの過程を阻害しても、TJは形成されなくなるので、これらの細胞極性因子はTJの形成には必須であるとされていた。最近、私の研究室では、細胞間接着形成初期にアドヘレンスジャンクション(AJ)分子であるネクチンがPar-3と直接結合していることを明らかにした。そこで私は、Par-3複合体はネクチンとアファディンとともに、TJの形成だけでなくAJの形成にも関与しているのでないかと考え、RNA干渉法を用いて細胞極性因子をノックダウンし、細胞間接着形成初期の細胞極性因子の影響を詳細に検討した。興味深いことにPar-3、Par-6、aPKCのいずれをノックダウンしても、ネクチン依存性の細胞間接着は形成されるものの、アファディンが細胞間接着部位から消失し、E-カドヘリン依存性のAJやTJは形成されなかった。また、Par-3をノックダウンした条件下でアファディンを強制発現させたところ、アファディンは細胞間接着部位に濃縮するが、AJやTJの再形成は認められなかった。したがって、これらの細胞極性因子は、AJの形成においてはアファディンの上流の調節因子として、またTJの形成においてはアファディンと協調して機能していると考えられた。このように、ネクチン-アファディン系はこれらの細胞極性因子と密接に関係しながら、細胞間接着だけでなく極性形成も制御していると考えられた。上皮細胞においてタイトジャンクション(TJ)はアドヘレンスジャンクション(AJ)のアピカル側に形成され、極性形成に重要な役割を担っている。TJでは主要な接着分子としてクロウディン、オクルーディン、JAMが機能している。AJではカドヘリンとネクチンが主要な接着分子である。まず、ネクチンが細胞-細胞接着を形成し、その部位にカドヘリンをリクルートしてAJを形成する。またネクチンはJAM、続いてクロウディン、オクルーディンをAJのアピカル側にリクルートし、TJの形成にも関わっている。AJとTJの存在しない線維芽細胞にJAMとクロウディンを共発現させると、それぞれ別の膜ドメインを形成し、共局在しなかった。一方、ネクチンとカドヘリンを共発現させると、それらは同一の膜ドメインを形成した。しかし、ネクチンを発現させるとJAMとクロウディンは共局在した。したがって、ネクチンはJAMとクロウディンによるTJの膜ドメインの形成に重要な役割を果たし、細胞極性の形成に関わっていると考えられる。また私は、ネクチンの細胞内ドメインに結合するアファディンがPDGF受容体によってSrcを介してチロシンリン酸化されることを見出している。リン酸化されたアファディンは、SHP-2と結合してその脱リン酸化活性を促進して、PDGF受容体を脱リン酸化し、Ras-ERKのシグナルを抑制した。このように、ネクチン-アファディン系は細胞内シグナル系と密接に関連しながら、細胞間接着を介して極性形成を制御していると考えられる。
パルサ-サ-ベイ干渉計用バックエンドディジタルシステムの製作およびソフトウェア開発

本研究では、早稲田大学パルサーサーベイ電波干渉計におけるバックエンドディジタルシステムの検証および制御ソフトウェアの開発を目的としている。現在の開発状況は以下の通りである:●FFTプロセッサについてパルサーサーベイ用の16×16×256ポイント2+1次元FFTプロセッサの単体での検証はすでに終了し、細かなパラメータの調整を行っている段階である。また、制御ソフトウェアとしても、基本制御ライブラリとしてのC++のクラスライブラリが完成しており、さらに将来のリモートコントロールに備えて分散オブジェクト技術を利用したコンポーネントも作成することができた。このコンポーネントを利用することによって、クライアントプログラムによるプロセッサの制御をネットワーク透過にすることができると共に、スクリプト言語(VBScript)からのアクセスが可能になるので一般ユーザによる制御プログラムの開発が容易になる。このスクリプト言語は将来の観測プログラムにおけるプロセッサのパラメータ設定のための記述言語として採用する予定である。このことにより、単にプロセッサのパラメータを記述したものに比べて、制御構文を備えたアクティブなパラメータ設定を行うことが可能になる。●光伝送システムについて現干渉計のIF伝送系を同軸ケーブルから光ファイバに変更する作業は、テストデータの伝送チェックが全て終わり、これからフリンジデータを取ることによってシステムのチェックを行う段階にある。今のところ、まだ電圧レベルやタイミングの調整が必要な状況である。●フロントエンドについて西那須野パルサー観測所に建設済みの直径20mの球面鏡の主鏡5基のうち、1基には天頂部分を観測可能な副鏡と簡単な受信装置を取りつけ、銀河面の試験観測を行っている。残る4基にも天頂から±5°を観測可能な副鏡の取り付けが終了しており、これから二素子のフリンジデータを取るところである。新規に開発した16×16×256ポイント2+1次元FFTプロセッサは単体での検証の最終段階に入っており、不具合などもほぼなくなってきている。簡単なパラメータ設定プログラムもすでにできている。しかし、現状でできるのはプロセッサの単体チェックに限られており、自動化なども考慮されておらず他のアプリケーションからの利用もできないので、これから制御ソフトウェア・ライブラリを充実させると共に、実際に現在の早稲田大学8×8電波干渉計システムに組み込んで検証することになる。実際にシステムに組み込むためには、現干渉計のIF伝送系を同軸ケーブルから光ファイバへ変更することと、FFTプロセッサからの出力をPCに取りこむためのインターフェイスが必要である。光ファイバ装置に関しては、ディジタル光ファイバの敷設工事は終わり、O/E装置およびA/D装置はすでに開発済みなので、O/E,E/0モジュールを付ければすぐに使用可能な状態である。また、8組に関してはすでに接続した状態でデータ転送のチェックを行っており、順調に動くことが確かめられた。PCとのインターフェイスに関しては、ボードの設計・開発はすでに終わっており、これからPLD,FPGAプログラムの検証に入る段階である。なお、フロントエンドに関しては、西那須野に直径20mの球面鏡の主鏡5基がすでに建設済みであり、これから簡単な受信装置を製作して実際に電波を受けてみる予定である。また、その際に早稲田からリモート制御できるようなソフトウェアの開発を行う。
固体表面における協同触媒作用概念に基づく不活性結合と不活性分子の活性化

近年の、資源・エネルギー問題を受けて、よりシンプルな合成経路によるファインケミカル・機能性化学品の合成が強く望まれており、それを可能とする新しい触媒作用、具体的には不活性結合あるいは不活性小分子を活性化し、目的生成物への変換を可能とする触媒・触媒反応の開発が切望されていた。本研究では、これまでの研究によって蓄積された固体表面において発現する協同触媒作用を利用することで、不活性結合・不活性分子の活性化を実現することを目的とした。具体的には、C-H結合・C-O結合の活性化を経由する反応や、二酸化炭素を目的化合物へと効率よく変換する触媒の開発に取り組んだ。平成27年度の研究では、不活性分子としての二酸化炭素の変換反応を試みた。具体的には、二酸化炭素とヒドロシランからのシリルホルメート合成にフッ化物塩が活性を示すことを見出した。この反応は、従来、金属錯体触媒が必須とされてきたため、安価なフッ化物塩で代替できる点は極めて画期的であるといえる。フッ化物塩を用いる反応は、アミンの存在下でも進行し、ワンポットでのホルムアミド合成を達成することができた。さらに、ヒドロシランに代えてジシランを還元剤とする反応にもフッ化物塩が活性を示すことがわかった。ジシランはシリコーン工業における副生成物として回収できる可能性があり、産業排ガスとしての二酸化炭素と廃棄物のみから有用有機物合成の可能性を示すことができた。さらに、触媒活性点の固体表面での共存に関する研究では、Pd錯体と有機塩基を用いる系において、Pdジホスフィン錯体の利用へと展開することに成功し、種々の分光学的手法を用いて触媒構造を解明することができた。二酸化炭素の変換反応において、フッ化物塩を触媒とする反応系を新たに見出し、ワンポットでのホルムアミド合成や、ヒドロシランに加えてジシランを還元剤とすることにも成功した。さらに、固体表面への活性点の共存では、ホスフィン錯体の利用へと展開することができた。不活性分子の活性化には、対象とする分子の特性に合わせた触媒活性点の設計が必要不可欠である。平成28年度の研究では、前年度までの研究で得られた二酸化炭素の活性化のためのフッ化物触媒の機能をさらに追及し、二酸化炭素変換において使用可能な還元剤の種類の拡張に成功するとともに、触媒反応を実際に進行させている活性種に関する知見を得ることができた。例えば、ケイ素-ケイ素結合の還元剤としての働きに着目することで、金属ケイ素を還元剤とする二酸化炭素の変換反応を促進することに成功した。固体表面に強力な活性点を固定することによって、複数の活性種が関与する反応場の設計も可能となる。前年度の研究によってほぼ構造解析が終了した触媒である、C-H結合からのプロトン引き抜きが可能な強力な有機塩基DABCOとPd錯体が共存するシリカを用いて、種々の基質分子のアリル化反応を試みた。この触媒は、アリル化反応における従来の系と比較して、最も高い触媒回転数を示すことが分かった。前年度までの研究で見出した、二酸化炭素活性化のためのフッ化物触媒の機能をより引き出すことに成功し、併せて反応機構を解明することで、新たな触媒設計のための指針を立てることが可能になった。加えて、Pd錯体を用いる系では、C-H結合活性化のためのDABCOが共存した固定化触媒の開発に成功し、これを用いる高効率アリル化反応を達成した。以上の成果から、研究はおおむね順調に進展していると考えられる。本年度の研究では、不活性結合としてアリルアルコールの炭素ー酸素結合を活性化し、アリル化反応を促進させるための触媒開発に着手した。アリル化反応に用いられるアリル化剤は、ハロゲン化アリル、酢酸アリル、アリルメチルカーボネート等が一般的で反応性も高いが、それらの合成が煩雑であるとともに、アリル化反応後に大量の副生成物が生成するため、水のみを副生成物とするアリルアルコールを用いる反応系の開発が切望されている。本研究では、シリカ表面に存在するシラノール基が、Pd錯体とアリルアルコールからのπーアリルパラジウム形成を促進することを見出した。メソポーラスシリカに固定化したPd錯体を反応に用いると、90回程度の触媒回転数で反応が進行したのに対し、固定化していないPd錯体では活性が9分の1程度まで低下した。加えて、シリカ表面に存在するシラノール基の量を低下させるにしたがって、触媒活性が低下することが分かった。これらの結果から、シラノール基とアリルアルコールとの間で水素結合を形成することによるアリルアルコールの活性化を経由する反応機構を提案した。これらの検討を通じて、シリカ表面のシラノール基の特異な性質を見出し、ここへRh等の金属錯体を固定化した触媒を設計開発し、種々の有機合成反応へ展開可能であることも見出した。加えて、不活性分子である二酸化炭素の反応において、特にフッ化物塩が二酸化炭素とジシランあるいは金属ケイ素との反応に活性を示すことを見出した。速度論的解析・中間体測定・同位体実験の結果から、フッ化物触媒はケイ素ーケイ素結合を切断し、系内で還元力を有するヒドロシランを生成ステップにおいて効果的に機能していることが分かった。

本研究では、これまでの研究によって蓄積された固体表面において発現する協同触媒作用を利用することで、不活性結合・不活性分子の活性化を実現することを目的とした。具体的には、C-H結合・C-O結合の活性化を経由する反応や、二酸化炭素を目的化合物へと効率よく変換する触媒の開発に取り組んだ。二酸化炭素の変換反応では、特にジシランを用いる系において、反応機構および活性種構造を明らかにする必要がある。加えて、金属ケイ素を用いる反応へと展開したい。固定化触媒では、従来の均一系を凌駕する高活性の発現が望まれる。前年度までの研究成果を受けて、二酸化炭素変換や有機合成反応における不活性化合物活性化のための指針をより明確にすることで、更なる高活性触媒の開発に挑む。加えて、固定化触媒を用いる協奏効果の発現に関する研究においては、いまだ明らかとなっていない触媒担体の構造特性が触媒活性・協奏効果に与える影響を調査する。29年度が最終年度であるため、記入しない。触媒化学29年度が最終年度であるため、記入しない。
栄養環境によるエピジェネティクス制御と生活習慣病抑制機構の解明

本研究は、種々の栄養環境と生活習慣病の発症制御機構をエピジェネティクス制御の視点から探求し、生活習慣病発症リスクを最小限に抑制できる栄養学的な方策の分子レベルでの解明を試みることを目的に実施した。肥満抑制効果が報告されている食品因子を飼料に添加し実験を行ったところ、エネルギー代謝関連遺伝子と脱メチル化酵素遺伝子の発現変動が認められ、この変化が生活習慣病発症抑制の一因を担う可能性が示唆された。生活習慣病の発症には遺伝因子と環境因子が関与すると考えられているが、近年、“栄養環境"が関与するという“生活習慣病胎児期起源仮説"が注目されている。これは、胎生期の不適切な栄養環境が、遺伝子発現の制御系にエピジェネティックな変化を起こして生活習慣病の素因を作り、さらに、生後の成長過程で不適切な環境因子に暴露されると疾患発症が加速されるという仮説である。本研究では、生後のみならず、胎生期を含めた、生涯に渡る適切な栄養環境の制御が、生活習慣病の発症をいかに制御するかについて検討を行った。まず、栄養環境の違いが成長後の生活習慣病の易感受性にどのように影響するかについて、正常動物を用いて検討した。正常動物を普通食、高脂肪食で飼育し、次世代をさらに各々の栄養環境で飼育し、生活習慣病の病態マーカーがどのように変化するかを比較検討した。その結果、普通食に比べ、高脂肪食で飼育した動物の方が血糖値、血清脂質レベル等の高値を示し、糖尿病や脂質異常症といった生活習慣病の病態へより進行していることを確認した。また、仔の成長に各段階において、糖代謝や脂質代謝などに関連する、既知の生活習慣病関連遺伝子発現の変化を検討した。その結果、高脂肪食で飼育した動物において、発現量に差がみらる遺伝子があり、成長の各段階におけるその差の変化を確認した。本年度に得られた結果を今後の実験指標として活用し、研究を進めていく予定である。今年度は遺伝的背景を持つ生活習慣病モデル動物が種々の栄養環境におかれた場合に、生活習慣病の易感受性にどのような影響を受けるかについて検討した。生活習慣病モデル動物は、遺伝的に高血糖や脂質異常症等の生活習慣病になりやすい背景を持ったモデル動物である。生活習慣病モデル動物を普通食、高脂肪食で飼育し、さらに次世代を得て、生活習慣病の病態マーカーがどのように変化するかを比較検討した。その結果、正常動物に比べ、生活習慣病モデル動物の方が生活習慣病関連マーカーは高値を示しており、糖代謝や脂質代謝などに関連する、既知の生活習慣病関連遺伝子発現に変化がみられた。また、正常動物と生活習慣病モデル動物において発現量に差がみらた遺伝子は、仔の成長の各段階においてもその差の変化を確認することができた。これまでに得られた結果を今後の実験指標として活用し、研究を進めていく予定である。生活習慣病の発症には遺伝因子と環境因子が関与すると考えられているが、近年、"栄養環境"が関与するという"生活習慣病胎児起源仮説"が注目されている。これは胎生期の不適切な栄養環境が、遺伝子発現の制御系にエピジェネティックな変化を起こして生活習慣病の素因を作り、さらに、生後の成長過程で不適切な環境因子に暴露されると疾患発症が加速されるという仮説である。本研究では生涯にわたる適切な栄養環境の制御が生活習慣病の発症をいかに制御するかについて検討を行った。遺伝的背景を持つ生活習慣病モデル動物と、持たない正常動物を用いて、生活習慣病の病態マーカーの変化を比較検討を行った。その結果、正常動物に比べ、生活習慣病モデル動物の方が生活習慣病関連マーカーは高値を示しており、糖代謝や脂質代謝などに関連する既知の生活習慣病関連遺伝子発現に変化がみられた。また栄養条件の異なる飼料を摂取させ、その影響を検討したところ、遺伝子発現量の変動を示すものが認められた。変動を示した遺伝子の脱メチル化に関連する酵素の遺伝子発現量を検討したところ、正常動物では発現量が上昇するのに対し、生活習慣病モデル動物において発現量が低下していた。この変化が代謝関連遺伝子の発現量を変化させ、生活習慣病の発症に関与している可能性が示唆された。栄養学研究実施計画に基づき、研究を遂行している。研究実施計画に基づき、研究を遂行している。今後は、これまでの成果に引き続き、研究実施計画に基づき研究を遂行していく。

これまでの研究の中で明らかとなった、遺伝子発現等の栄養環境による違いと、遺伝的背景を持つことによる違いがどのような機序で起きているかを明確にするためにさらに詳細に解析を行っていく予定である。3年間の研究となっており、初年度は他の年度と比べると、直接経費の配分割合が大きかったため、次年度へ繰り越した金額が出てしまったが、次年度も今年度と同様に解析を進めていくため、繰り越し分も研究に必要な金額として執行する見込みであ。昨年度の実験の遂行状況により、次年度使用額が生じた。今年度は昨年度の残りも含めて執行予定である。
再生腸上皮幹細胞ニッチの誘導・再構築による炎症腸管粘膜再生治療の確立

本研究の遂行により、1)正常腸上皮及び大腸炎の腸上皮におけるNotchリガンドDll1及びDll4発現細胞の同定と機能的意義の解明、2)炎症粘膜において「再生腸上皮」を構成するNotch及びTNF-α経路が活性化した腸上皮細胞で発現が誘導される候補遺伝子群の同定、3)大腸炎からの回復期に見られる再生腸上皮を構成する特殊な幹細胞分画の同定、という3つの領域に於いて新規知見を得た。1腸管上皮陰窩-絨毛軸におけるDll1及びDll4陽性細胞同定法の開発:1)NotchリガンドであるDll1及びDll4を発現する細胞を正確かつ簡便に同定する検出法を新たに開発した。同方法により、両分子を発現する腸管上皮細胞を組織内に於いて単一細胞レベルで正確に同定可能となった。同法により、正常腸管内陰窩における両分子発現細胞がATOH1陽性の分泌型細胞で構成される異なる細胞分画であり、いずれもHes1陽性細胞と隣接して存在していた。2)デキストラン硫酸(DSS)大腸炎モデルの病変部に於いてDll1陽性大腸上皮細胞が著しく減少する一方、Dll4陽性大腸上皮細胞が著しく増加するだけでなく、これらDll4陽性大腸上皮細胞の増加に伴い、隣接するHes1陽性細胞の増加も明らかとなった。これら結果より、Dll1及びDll4は大腸幹細胞ニッチ構成細胞に発現し、かつ大腸炎粘膜においてはDll4陽性細胞がより重要な役割を担っている可能性を明らかとした。2腸管上皮幹細胞ニッチにおけるDll1及びDll4陽性細胞の機能的意義の解析:1) LGR5-EGFP-CreERT2マウス及びATOH1-CrePGRマウスを用い、幹細胞又は分泌型細胞特異的にDll1及びDll4の欠損を誘導可能なマウスを作成し、その表現型を解析した。その結果、両リガンドの欠損により分泌型上皮が著しく増加する一方、増殖マーカー陽性の細胞が著しく減少する事が明らかとなった。2)上記に加え、幹細胞に隣接するニッチ構成細胞で両リガンドが欠損すると、LGR5の発現が減弱する事が明らかとなった。これらの結果から、腸管上皮幹細胞ニッチにおいて、Dll1及びDll4が重要な機能的意義を有していることが明らかとなった。本年度は腸管上皮幹細胞ニッチにおけるDll1及びDll4陽性細胞の機能的意義の解析について引き続き解析を進めた。1.LGR5-EGFP-CreERT2マウス及びATOH1-CrePGRマウスを用い、幹細胞又は分泌型細胞特異的にDll1及びDll4の欠損を誘導可能なマウスを作成し、その表現型について前年度に引き続き解析した。その結果、LGR5-EGFP-CreERT2マウスにおいて両リガンドの欠損を誘導することにより杯細胞・内分泌細胞が著しく増加することに加え、Notchシグナルの標的遺伝子であるHes1を発現する細胞が著減することが明らかとなった。また、幹細胞ニッチ領域に於いてLysozyme陽性細胞が著増し、正常な幹細胞ニッチ構造の維持が困難となる可能性が明らかとなった。2.一方、LGR5-EGFP-CreERT2マウスを用い、幹細胞特異的にRBPJの欠損を誘導可能なマウスを作成し、Notchシグナルのcanonical経路を遮断し、その表現型についても解析を行った。その結果、上記のDll1及びDll4欠損と比較し、その表現型である分泌型細胞(杯細胞・内分泌細胞・タフト細胞・パネート細胞)の増加はわずかに留まり、かつ幹細胞ニッチ領域における構成細胞の変化もごく軽度であった。3.上記にて作成した幹細胞特異的にRBPJの欠損を誘導したマウスの腸管上皮陰窩を単離し、オルガノイドを作成した。その結果、幹細胞におけるRBPJ欠損誘導下に於いても、オルガノイドの構成は可能であり、継代による持続的なオルガノイドの再構成能も保持していた。これらの結果から、腸管上皮幹細胞ニッチにおいてDll1及びDll4リガンドにより活性化されるNon-canonicalなNotchシグナル経路が適正な構成細胞の保持に重要な役割を有している可能性、が明らかとなった。本年度の研究により、以下の成果が得られた1)「再生腸上皮」構成細胞で発現が誘導される候補遺伝子群の同定:上記の如く、炎症粘膜で誘導される再生上皮とこれを構成する細胞内の遺伝子発現について、網羅的に探索を行った。この結果、両シグナルの活性化により32倍以上の発現増加が誘導される遺伝子群として31遺伝子が同定された。さらにこのうちNotch活性化またはTNF-α添加のいずれか一方のみ条件と比較し1.5倍以上の発現増加を認めた遺伝子群として21遺伝子を同定した。この遺伝子群の中には幹細胞特異的遺伝子OLFM4が含まれ、同遺伝子は炎症粘膜の再生上皮で広範な発現が誘導される事が確認済みであることから、これを除く20遺伝子(PLA2G2A,LAMA3,PTGES等)についても「再生腸上皮」を構成する上皮細胞で広範かつ特異的に発現が誘導される可能性があるものと考えられた。2)「再生腸上皮」における特殊な幹細胞分画の同定:再生腸上皮において構成される幹細胞ニッチはAtoh1陽性(かつDll1陽性またはDll4陽性)細胞が主たる役割を担っているものと考えられたことから、同細胞の動態を追跡可能なAtoh1陽性細胞系譜追跡(Lineage tracing)

マウスを作製し、腸上皮におけるAtoh1陽性細胞の分布と動態の解析を実施した。その結果、正常腸上皮においては分泌型細胞に一致してAtoh1陽性細胞がレポーター蛍光タンパクにより標識される一方、短期の解析に於いては幹細胞の形質を有する細胞には標識されず、通常、幹細胞ではAtoh1の発現は誘導されないものと考えられた。しかしながら長期の解析や大腸炎モデルにおける再生腸上皮の解析に於いては、一部のAtoh1陽性細胞が分泌型上皮以外の形質を獲得し、特殊な幹細胞分画を構成することにより腸上皮の再生に貢献している可能性を示す結果が得られている。本研究の遂行により、1)正常腸上皮及び大腸炎の腸上皮におけるNotchリガンドDll1及びDll4発現細胞の同定と機能的意義の解明、2)炎症粘膜において「再生腸上皮」を構成するNotch及びTNF-α経路が活性化した腸上皮細胞で発現が誘導される候補遺伝子群の同定、3)大腸炎からの回復期に見られる再生腸上皮を構成する特殊な幹細胞分画の同定、という3つの領域に於いて新規知見を得た。本年度の研究推進により、Dll1及びDll4リガンドが正常腸管における幹細胞ニッチ構造の維持に重要な役割を果たしていること、についてより詳細な検討が進められただけでなく、RBPJ欠損マウスと比較することにより、重要な細胞内経路についても解析が進展した。当初予想に反し、腸上皮幹細胞におけるRBPJ欠損により誘導される表現型は、Dll1及びDll4リガンドの欠損により誘導される表現型と比較し、著しく軽度の変化に止まり、幹細胞ニッチ構造の明確な破綻も観察されていない。この結果は、canonical経路と称されるNotchシグナル経路について、これを容易に代償し得る未知の分子機構が腸上皮幹細胞に内在することを示した重要な知見であると考えている。一方、Dll1及びDll4リガンドの欠損により幹細胞ニッチ構造の維持が困難となったことから、同構造の維持にはリガンド-受容体相互作用を介したnon-canonical経路が重要な役割を担っているという、新たな分子機構が存在する可能性が示された。今回明らかとなったリガンド-受容体相互作用を介したnon-canonical経路により幹細胞ニッチ構造が制御される可能性については、炎症粘膜の再生過程においては主にDll4リガンドにより担われていることが想定され、本研究が課題として取り組んでいる再生腸上皮幹細胞ニッチを制御する分子機構について、in vitro培養系も用いる事により新たな知見の獲得に成功している。従って本研究はおおむね順調に進展していると考えている。27年度が最終年度であるため、記入しない。消化器内科今後は確立済みの体外培養技術を用いる事により、「再生腸上皮幹細胞ニッチ」の体外再構築を効率良く実施可能な手法の開発を引き続き実施したい。候補化合物の探索に際しては腸上皮細胞が受容体を発現する生体内生理活性物質及びその誘導体を対象に加え、これら候補化合物を添加した際のin vitroにおける増殖・分化等の応答について、解析を進めたい。併せて化合物スクリーニングを効率良く進める事を可能とする新規評価系の構築・改善も推進する予定としたい。効率化上記研究の推進により、適切な「再生腸上皮幹細胞ニッチ」の体外再構築が効率良く誘導可能となった際にはDSS腸炎を初めとする動物モデルを用いた解析を進める計画である。
最適禁制帯幅を有する太陽電池用カルコパイライト型多結晶薄膜の作製に関する研究

エネルギー問題や地球環境問題を解決するために、クリーンで無尽蔵な太陽エネルギーを利用した太陽光発電が注目されている。この太陽光発電を実用化するためには、低価格で高効率な太陽電池を開発することが重要である。本研究では、理論的に最適なバンドギャップを持つ太陽電池用カルコパイライト型多結晶薄膜Cu(In,Ga)Se_2の結晶粒径の増大化を試みるとともに、結晶粒の成長過程を明らかにすることを目的として実施した。Cu(In,Ga)Se_2化合物を基板加熱を行わないで真空蒸着させたプリカーサを用いて、飽和セレン蒸気圧中で結晶化させることにより薄膜を作製し、その基礎特性を評価した。電子プローブ微小分析やX線回折から、これらの薄膜はシングルフェイズでカルコパイライト構造を有していることがわかった。走査型電子顕微鏡観察により、飽和セレン蒸気圧中で結晶化させたCu(In,Ga)Se_2薄膜の結晶粒の増大化が、セレン蒸気なしで結晶化させた薄膜と比較して、顕著に認められた。その結晶粒の大きさは1μm以上で、膜内に均一に分布していた。電気特性や光学特性の評価から、ホール移動度の増加も認められ、太陽電池で最適な領域のバンドギャップである1.4eVが得られた。さらに、上記プリカーサを結晶化する際の熱処理温度を200°C600°Cまで変化させて、作製し、結晶の成長過程を調べた。400°C以上で結晶化させた薄膜は、シングルフェイズのカルコパイライト構造Cu(In,Ga)Se_2であったが、300°C以下ではCu-Se化合物で構成されていた。Cu(In,Ga)Se_2薄膜の結晶粒の大きさは、熱処理温度の上昇とともに増大した。特に、600°Cで結晶化させた薄膜で23μmの大きな結晶粒が得られた。以上のことから、大粒径で最適なバンドギャップを持つCu(In,Ga)Se_2薄膜を得るための結晶化条件が明らかになった。
Ｉn-situマーカーとしての尿中エキソソームを用いた尿路上皮系細胞機能の解明

二次元電気泳動法をベースにしたプロテオーム解析によって、健常人尿中エキソソームより、細胞膜、細胞外成分、細胞骨格・代謝酵素を含む、腎・尿路系細胞特異的なタンパク質が同定された。また、健常人の尿中エキソソーム数、長径、およびエキソソーム分画の総タンパク濃度に個人間差を認めなかった。尿中エキソソーム分泌量は単位時間当たり、一定であった。本研究結果は、健常人尿におけるエキソソームタンパク組成と分泌量に関する基礎的情報を提供するものである。健常人尿中エキソソームタンパク質プロファイルの確立:腎・尿路系細胞から尿へ分泌されている膜性小胞であるエキソソーム分子を構成するタンパク質を明らかにするため、健常人尿中エキソソームタンパク質プロファイルを確立を目指して研究を実施した。分離能に優れた二次元電気泳動法と、高速液体クロマトグラフィ・質量分析法(LC-MS/MS法)を組み合わせて、健常人尿から分離されたエキソソームタンパク質を同定した。血中からの漏出タンパク質であるアルブミンやIgG、遠位尿細管から分泌される多量なTamm-Horsfall proteinなど、いわゆる尿タンパク質との区別を行うため、エキソソーム分離前の尿検体のタンパク質も同時に同定し、コンタミネーションと成りうるタンパク質を明らかにした。本成果は、今後、尿から分離されたエキソソーム分子のプロテオーム解析において、基礎的なデータとなる。エキソソーム表面抗原検出法のための基礎的条件検討:今後、臨床検体を用いたプロテオーム解析や、尿中エキソソームの細胞間相互作用を解析するために、エキソソームを破壊せず、直接的に検出する必要がある。そのため、エキソソーム表面に普遍的に発現している、Rab-5b、およびCD63を検出する、サンドイッチELISA法を確立した。さらに、フローサイトメトリー法で検出すべく、抗CD63抗体を用いて条件検討を行った。1.免疫電顕法による尿中エクソソーム検出のための基礎的条件検討エクソソームの代表的なマーカーであるCD63を検出するため、固定時間、固定液濃度、および抗体希釈倍率について、最適条件を得た。また、腎尿細管ヘンレ上行脚に発現するNa-K-2Cl cotransporter 2 (NKCC2)についても検出し、腎特異的なエクソソームの確認を行った。2.尿中エクソソームタンパク質の個人間差についての検討健常人6名(男女各3名、平均年齢21.2 ±0.41歳)から提供を受けた尿を用い、エクソソームを分離した。各尿中エクソソームタンパク濃度は平均14.3 ±1.78 mg/mLであった。また、1.で確立した方法を用い、CD63陽性エクソソームを透過型電子顕微鏡法によって検出し、直径を測定した。各対象者のCD63陽性エクソソームの直径は、プール尿で測定した平均値である45.8 ±17.6 nmに近似しており、エクソソーム直径の個人間差は極めて小さいことが明らかになった。本結果は、今後エクソソーム小胞上の腎・尿路系細胞マーカーを検出し、個人間の比較を行う際の必要な情報と成り得る。病態医科学平成25年度の研究実施計画として掲げていた健常人尿中エキソソームタンパク質の同定が終了した。臨床検体を用いたマーカー探索を予定していたが、腎障害患者尿には、血中由来のタンパク質の混入が顕著になることが予想される。そのため、通常の分離法に加え、エキソソーム特異抗原を利用するなどして、追加で精製する必要がある。以上の理由から、臨床検体を用いたエキソソームタンパク質の解析よりも、エキソソーム表面抗原の検出を優先して検討すべく、ELISA法やフローサイトメトリーを用いた検出法の基礎的解析を行った。尿中エキソソーム直接検出法の確立:血清などでは、腫瘍細胞の転移や、ウイルス感染の拡大に、エキソソームが関与しているという報告がある。これらの細胞にはに他の細胞から分泌されたエキソソームに対するレセプターがあり、細胞への取り込み機序が存在することを意味している。腎・尿路系細胞より分泌される尿中エキソソームにおいてこのような細胞間相互作用に関する報告が未だない。糸球体-尿細管上皮細胞間などの細胞間相互作用をエキソソームが担っているとするならば、例えば、糸球体障害が重症化することによって引き起こされる二次的な尿細管障害の疾患メカニズムを理解することができるようになるかもしれない。このメカニズムの解析には、尿中エキソソーム表面タンパク質を直接的に検出し、由来する細胞を明らかにする必要がある。H25年度までは、腎・尿路系の上皮細胞から分泌されたエキソソームの構成タンパク質を網羅的に同定してきた。

H26年度からは、次の段階として、各細胞表面に特異的に発現している抗原タンパク質を検出し、エクソソーム分子分泌細胞を明らかにする。本研究結果は、各細胞から分泌されているエクソソームの機能を明らかにするための、基礎的な情報と成り得る。既に基礎的条件設定を行っているので、複数の細胞特異的なタンパク質抗原を用いて検出を試みる。検出方法としてはELISA法、フローサイトメトリー法、免疫電子顕微鏡法を使用する予定である。13,850円が平成25年度の残金となったが、研究は概ね計画と通りに実施している。試薬や器具類の消耗品の購入に使用する予定である。
光機能性を有する新規液晶高分子材料の開発と光・電気物性

本研究では先ず、分子側面方向に長鎖アルキル基を有する化合物の液晶性の合成とその熱的性質を検討した。分子側面方向の長鎖は分子の液晶性を低下させる他、結晶性を下げる効果が見られ、低温に於て容易にガラス化現象を示す。ガラス転移温度は分子両端のアルキル鎖の伸長にともない高温側に移行し、側面方向の炭素鎖の伸長にともない、低温側に移行することがわかった。又、興味あることにこれらの炭素鎖の長さが異なる誘導体に於てはネマチック状態に於て2段階ガラス化現象が見られた。この2段階ガラス化は、一般の高分子に見られる複数段階ガラス化と類似の現象とみなすことが出来る。次に、上に示す高分子材料を合成しその液晶性を検討した。化合物1と2は何れも液晶性を有し、特にネマチック相を発現し易い。両端のアルキル鎖が長い場合、メクチック相の発現も見られる。末端がシアノ基の誘導体の場合はネマチック相のみを示すが、その分子配列は電場・磁場等により変化する。すなわち、無電界時ではホモジニアス配列となり、この状態では強い光散乱状態となる。又、電圧の印加により、ホメオトロピック配列となり、光に対し透明状態となる。この二つの状態を用いることにより、この高分子液晶はライトバルブ機能を有することがわかった。尚、分子側面方向に長鎖を有する液晶は一般にスメクチック相を発現しにくいとされているが本研究で取り扱ったモノマー及びポリマー共に分子末端のアルキル鎖が長い同族体ではスメクチック相の発現が見られた。ただし、そのスメクチック相の組織は従来のファン組織とはかなり異なる。分子配列については今後の研究課題となった。化合物3は2つのスメクチック相を示し、顕微鏡による組織観察では、高温側スメクチック相はA相であり、低温側がC相と推定出来た。これらの状態では電場応答性は認められなかった。本研究では右に示す新規高分子液晶材料の合成並びに電気物性の検討を行っている。化合物1については、ライトバルブとしての応用性を検討する目的で、分子配列の電場並びに磁場応答性を検討した。その結果、50V/10μmの直流印加により分子配列は電極面に対しホメオトロピック配列し光学的には透明状態となり無電加時での光散乱状態と合わせて、ライトバルブ機能を有する事を明らかにした。更に磁場によっても同様の光機能性を有することが明らかとなった。又、化合物1のような側鎖型化合物に於いて、ガラス転移に於いて非常に顕著な比熱の変化が見られ、これが側鎖部分の熱運動の凍結による大きな体積変化が原因であることを見いだした。更に化合物2の合成を試みた。化合物2は末端部に高い非線形機能を有するといわれているMNA骨格を含んでおり、フィルム状の非線形材料の開発を目的としている。現在この合成を行っているが成功するには至っていない。すなわち、末端部のMNA部分は合成過程の最後に結合させる計画をもっていたが、ポリマー部分への導入割合が低く、物性測定可能な純品を得ることが出来ていない.今後、合成ルートの再検討が必要である。昨年度に引き続き、右に示す高分子化合物の合成とその物性検討を行ってきた。先ず、化合物2は非線形光学機能を有する化合物1の誘導体としての興味からこの合成を試みた。その結果、液晶としての熱的性質は化合物1のそれに極めて類似しておりネマチック相のみを示す。

又、ネマチック状態に於て電場応答性も見られ、電場効果により分子配列の制御が可能であることがわかった。今後、その光学的性質を検討する予定である。化合物1、2の誘導体として化合物3の合成も試みた。この化合物は液晶核部分が主鎖に対し、傾斜した配向を取ると考えられ、その熱的挙動に興味を持って研究を行った。スペーサー長が6、7、8の同族体について検討した結果、これらはいずれもスメクチックA-スメクチックCの相系列を持ち、その透明点は約150°Cであった。この事から、これらのポリマーの液晶性は主鎖に対する液晶核の配置が支配的であることがわかった。すなわち、液晶核が主鎖に直交する配置の時スメクチック配列を取り易く、平行になるに従って、ネマチック性を帯びることがわかった。又、化合物3のスメクチックA相は典型的なファン組織を示し、電場応答性は全く見られない。又、化合物1、2とは異なり、高い結晶性を示す。
ポピュリスト反「独占」論の歴史的起源と意味

ポピュリスト反「独占」論の歴史的起源は,アメリカ独立革命期以来の「共和主義」,さらには,ヨーロッパ中世末から近代初頭にかけての民衆的「モラル・エコノミー」観念にあるのではないかとの仮説に立ちつつ研究を進めた結果,私は,この仮説の妥当性を確信するに至った.その根拠は,もちろん,私自身の研究の深まりにもよるが,一方では同様の関心を有する研究者が私と同じような結論に到達したことにもある.その好例が,ポピュリスト思想研究の第一人者ノーマン・ポラック(Norman Pollack)によるThe Just Polity(1987年出版)の刊行と,その中に示された結論である.彼は,ポピュリストの経済体制論を「民主的資本主義」論と性格付け,それは,私有財産所有,コミュニティ,全般的福祉の三つを組み合わせたきわめて「アメリカ」的なものであるとした.しかして,彼によれば,ポピュリズムとは小財産所有者の資本主義修正を求める運動と思想ということになる.このことが確定される前に, 19世紀末において最大の問題であるはずの土地の独占(逆の面からみれば,小作問題)が運動の中でどのように扱われたかについて検証することが不可欠である.拙稿「ノーマン・ポラックのポピュリズム思想像」においては,このことを課題として指摘した.そのうえで,私は現在,自らこの課題に取り組むべく,カンザス州中部のマリオン郡における小作農民の実態と,彼らと農民運動(とりわけ,農民同盟やポピュリズム)との関わり方の解明を急いでいる.この成果は近く,「ポピュリズムと小作農民(仮題)」として学術雑誌に発表の予定である.ポピュリスト反「独占」論の歴史的起源は,アメリカ独立革命期以来の「共和主義」,さらには,ヨーロッパ中世末から近代初頭にかけての民衆的「モラル・エコノミー」観念にあるのではないかとの仮説に立ちつつ研究を進めた結果,私は,この仮説の妥当性を確信するに至った.その根拠は,もちろん,私自身の研究の深まりにもよるが,一方では同様の関心を有する研究者が私と同じような結論に到達したことにもある.その好例が,ポピュリスト思想研究の第一人者ノーマン・ポラック(Norman Pollack)によるThe Just Polity(1987年出版)の刊行と,その中に示された結論である.彼は,ポピュリストの経済体制論を「民主的資本主義」論と性格付け,それは,私有財産所有,コミュニティ,全般的福祉の三つを組み合わせたきわめて「アメリカ」的なものであるとした.しかして,彼によれば,ポピュリズムとは小財産所有者の資本主義修正を求める運動と思想ということになる.このことが確定される前に, 19世紀末において最大の問題であるはずの土地の独占(逆の面からみれば,小作問題)が運動の中でどのように扱われたかについて検証することが不可欠である.拙稿「ノーマン・ポラックのポピュリズム思想像」においては,このことを課題として指摘した.そのうえで,私は現在,自らこの課題に取り組むべく,カンザス州中部のマリオン郡における小作農民の実態と,彼らと農民運動(とりわけ,農民同盟やポピュリズム)との関わり方の解明を急いでいる.この成果は近く,「ポピュリズムと小作農民(仮題)」として学術雑誌に発表の予定である.