hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
心臓足首血管指数の測定を導入した看護的治療「フットケア」の評価に関する実証的研究

血圧の影響を受けない動脈硬化指標である心臓足首血管指数(CAVI:cardio ankle vascular index)を測定できる『血圧脈波検査装置VaSera(バセラ)』を導入し、看護的治療「フットケア」を定量的に評価することを目的に研究を開始した。フットケアを実践した後の経過を追うと、CAVIについては、3名中2名は維持または改善しており、3名中1名は、悪化していた。患者の足病変は、患者自身が自己処理できない胼胝や爪肥厚であり、足病変の有無によりCAVIが異なっていたため、フットケア以外の下肢血流へ影響を及ぼす要因についても検討する必要がある。心臓足首血管指数を測定できる『血圧脈波検査装置VaSera(バセラ)』を導入し、看護的治療「フットケア」を定量的に評価することで、日常的に実施されている「フットケア」について、科学的根拠の礎を築くことを目的に研究を開始した。血圧脈波検査装置VaSera(バセラ)で測定される「CAVI(キャビィ:Cardio Ankle Vascular Index)」は、大動脈を含む心臓から足首までの動脈硬化度を反映する指標であり、測定時の血圧の影響を受けることなく血管固有の硬さを評価できる動脈硬化指標として開発されたもので、短時間で簡便に測定可能な為、導入に至った。研究所初年度と比べ、実際の測定場所は確保できたが、簡易式のベッドを広げ、検査装置を設置すると研究者が移動するスペースがなく、検査開始から終了までの時間が予想以上にかかってしまう状況があった。また、継続して経過観察できる対象者の選定には難渋しており、外来看護師と連携を図りながら、対象者を確保していくことが重要である。対象者が少なかった昨年と比較すると、継続して外来通院している対象者がおり、数ヶ月経過した現在、CAVI値が若干であるが改善していた。爪切りや足の手入れを自宅でも継続しており、その効果について今後も評価していく予定である。動脈硬化の成り立ちから考えると、すぐに良好な結果が出るものではない為、長期的な視点を持って関わって行く必要があり、引き続き調査を進める。心臓足首血管指数を測定できる『血圧脈波検査装置VaSera(バセラ)』を導入し、看護的治療「フットケア」を定量的に評価することで、日常的に実施されているフットケアについて、科学的根拠の礎を築くことを目的に研究を開始した。血圧脈波検査装置VaSera(バセラ)で測定される値「CAVI(キャビィ:Cardio Ankle Vascular Index)」は、大動脈を含む心臓から足首までの動脈硬化度を反映する指標であり、測定時の血圧の影響を受けることなく血管固有の硬さを評価できる動脈効果指標として開発されたものである。今回は、外来診療の間の短時間で簡便に測定可能であると判断し、導入に至った。被験者のCAVI値は、正常境界域であったが、下肢動脈野っ狭窄や閉塞を評価する指標であるABI(Ankle Brachial Index)値は、標準範囲内であった。日常の保健行動については、下肢の正しい爪切り方法は統一されておらず、丸くカットしている足肢や凹凸が見られ靴下着脱の際、引っかかりそうな状況も見られた。足の手入れは、指と指の間も石鹸使用し洗浄しているとのことで、乾燥以外の足病変は認められなかった。今後、足の観察や洗浄方法、下肢の爪切りについて実践も交えながらフットケアを実施していくことで、下肢内部環境の評価をしていく。平成24年度は、研究場所の確保と患者選定に難渋し、現時点で2名の被験者確保に留まっており、計画通りに進めることができていない。平成25年度は、調査場所の確保が出来たため、症例数を増やして引き続き調査を進める。心臓足首血管指数を測定できる『血圧脈波検査装置VaSera(バセラ)』を導入し、看護的治療「フットケア」を定量的に評価することで、日常的に実施されている「フットケア」について、化学的根拠の礎を築くことを目的に研究を開始した。平成20年4月から糖尿病合併症管理料として糖尿病の重症化予防のためのフットケアについて診療報酬が認められるようになり、今回の調査でフットケアを評価することはとても意義のあることとなる。しかし、研究開始後、データ収集場所の確保や継続して経過観察できる対象者の選定に難渋し、さらに研究者自身の都合(妊娠・出産)により、研究が滞っている状況である。今年度は、研究を再開し、医師や看護師と連携を図りながら対象者を選定し、データ収集・分析を進め、看護的治療である「フットケア」を評価する。フットケアは、現在25名の患者さんに実践できている。足病変が、主に胼胝や爪肥厚が多く、フレーザーで削る処置に多くの時間を要している。足の爪切りはスクウェアカットが基本である旨その都度患者さんに伝えているが、糖尿病の合併症である視力障害も進行しており、実際に実行できているのは数名に留まっている。足に関心を持ち、足をよく診ることについては、指導の成果があり、次回の受診時に足の変化を伝えられるようになる患者が増えてきている。

しかし、胼胝処置など自宅では処置できないものもあり、実際のケアについては自宅でもできるケアの指導を検討する必要がある。研究場所である病院の特徴から、糖尿病の急性期治療がある程度落ち着くと、地域診療に移行する患者も多く、外来で継続してフットケアを実践できる患者はさらに少なくなり、フットケアによる効果判定のためのABI、TBI、CAVIのデータ的な統計学上の比較には、まだ至っていない状況である。しかし、データが悪化している訳ではない。さらに、すでに神経障害がある患者さんが多く、フットケアだけでは著名な内部血流状況の改善までには至っていない。バランス機能についても、ほとんどが高齢者であり、1分間の閉眼立位が継続できない患者も多く存在することが分かった。フットケアによりバランス機能が改善し転倒予防にも好影響をもたらすことを想定していたが、糖尿病患者に対しては、患者に無理のない範囲でケアを実践し、長期間に亘る地道なデータ収集が必要と考えている。予定していた研究期間は終了してしまうが、今後も継続してフットケアを実践する患者さんの経過をたどりながら、無理なくデータ収集を継続し、フットケアの評価を継続していく予定である。血圧の影響を受けない動脈硬化指標である心臓足首血管指数(CAVI:cardio ankle vascular index)を測定できる『血圧脈波検査装置VaSera(バセラ)』を導入し、看護的治療「フットケア」を定量的に評価することを目的に研究を開始した。フットケアを実践した後の経過を追うと、CAVIについては、3名中2名は維持または改善しており、3名中1名は、悪化していた。患者の足病変は、患者自身が自己処理できない胼胝や爪肥厚であり、足病変の有無によりCAVIが異なっていたため、フットケア以外の下肢血流へ影響を及ぼす要因についても検討する必要がある。研究者自身の都合(妊娠・出産)により、研究データの収集自体が滞ってしまった。慢性期看護産休明けて仕事復帰したため、滞っていたデータ収集を早急に進める予定である。データ収集する際、医師や看護師の協力を得て、対象者の選定とデータ収集場所の確保に努める。昨年度に比べ、調査スペースの確保はできたが、継続して評価できる対象者の確保に難渋している。大学病院では、体調等により地元の病院へ通院する患者も多く、新規で調査協力してくださる患者はいても、継続評価という点においては、厳しい状況である。そのような中でも、外来看護師と連携を図り、少人数でも良いので継続評価可能な対象者を選定し、研究協力を仰いでいく必要がある。病院再編成工事に伴い、調査場所の確保が困難な状況が続いている。また、患者選択にも難渋し調査が進んでいない状況である。しかし、平成25年度に入り調査場所の確保ができたため、数名ではあるが調査を開始している。研究者自身の都合(妊娠・出産)により、研究自体が滞ってしまった。研究協力者を確保するため、外来看護師との連携を図る。外来診療の間の待ち時間を有効活用し、患者選定・被験者確保に努める。データ収集を再開し、データの集計・分析を行い看護的治療「フットケア」を評価する。フットケアの実践に必要な器材やデータ保存・集計・分析の為の電子機器等の購入に使用する予定。2013年度も継続してデータを収集し分析する予定であったが、予定数のデータを収集することができなかった。
「価値観に働きかける研修」のあり方を問う基礎的研究

本研究は,出席者が活動に主体的に参加するプロセスを通じて学ぶという「ワークショップ的手法」を取り入れた研修・授業を実際に実施し,その研修・授業の出席者・実施者にインタビューを行うことにより,この種の研修・授業の中で起こっている各人の心理的プロセスを明らかにするとともに,この種の研修・授業にどのような意義があり得るか,また同種の研修・授業を設計・実施していくに当たり,運営者にはどのような配慮が求められるか,などについて知見を得ていくことを目的としている。前年度(2017年度)には「フォーラム・シアター(FT)」と呼ばれる手法に基づく演劇ワークショップを実施し,複数の参加者及びファシリテーターに対するインタビューを行った。本年度(2018年度)は,FTにおいて強い葛藤を感じていた一部の参加者に対し,ワークショップを終えてさらに時間をおいてからの振り返りインタビューを追加実施し,その葛藤について自分の中で折り合いをつけていくプロセスを分析した。同時に,前年度収集した複数の参加者・ファシリテーターに対するインタビューの結果に対し,研究分担者が個別に分析を加えた。さらに,それぞれの分析に対し統合的に解釈を加えることにより,以下の知見を得た:1FTには,「他人ごと」でなく「自分ごと」として状況を引き受ける(「三人称的アプローチ」からの脱却)ことを可能にし,かつ「ネガティブ・ケイパビリティ」(性急に証明や理由を求めずに,不確実さや不思議さ,懐疑の中にいることができる能力)を涵養し得る力がある,2ただしその際,「自分の価値観」だけに基づいて状況を見る(一人称的アプローチ)のでなく,「眼の前にいる人の価値観への共感」をもって状況を見る(二人称的アプローチ)ことが大切であり,運営者には参加者にそうしたアプローチを促すような配慮が求められる。近年,講師から一方的に,あらかじめ指定された情報を吸収するだけでなく,出席者が活動に主体的に参加するプロセスを通じて学ぶという,ワークショップ的手法を取り入れた研修・授業の手法が試みられるようになってきている。しかしながら学習者の中には,こうした活動への参加にある種の抵抗感を示すものも少なくない。こうした活動から「学び」を得たと実感できるためには,何をもって「学び」と見なすかという学習観自体の変容が必要となる可能性がある。本研究では,実際に各種のワークショップ型研修や授業を実施し,その参加者に対し継続的インタビューを実施することにより,1)ワークショップ型研修・授業への抵抗感の分析,2)活動に参加することによる学習観・学習態度変容の有無の確認,3)変容のきっかけとなった要因(変容しなかった理由)の特定,等を行うとともに,学習観変容のプロセスをモデル化する試みを行う。2016年度は,(ア)各種の日本語教育の現場における問題について再考するための演劇ワークショップ,(イ)言語教育分野における「評価」のあり方を問い直すための,ディスカッションを主体とする大学院授業,を調査の場とし,参加者の一部に対する継続的インタビューを実施した。その際,活動の中で感じたことを率直に語ってもらうため,ワークショップ・授業の担当者とは異なる研究者がインタビューを担当することとした。インタビューの分析の結果,ワークショップ型研修に対する抵抗感は,「これまでのワークショップ参加の経験」,「自分の言語能力が不足していることの自覚」,などに端を発していたが,こうした理由に基づく抵抗感はまた,実際の活動に参加することによって軽減され得ることが示された。一方で,「教師に教えてもらいたい・まとめてもらいたい」という学習観に基づく抵抗感の軽減は困難であるようであった。演劇ワークショップは,学会の有料研修として実施したため(研究代表者が企画を担当),調査結果を公表することについての許諾を得ることが困難であった。このため,参加者へのインタビューは実施でき一定の知見は得られたものの,試行的調査,という位置づけにとどめざるを得なかった。もう一つの大学院授業におけるインタビュー調査は順調に進んだが,年度内に成果を公表するにはいたらなかった(2017年度中に発表の予定)。本研究は,出席者が活動に主体的に参加するプロセスを通じて学ぶという「ワークショップ的手法」を取り入れた研修・授業を実際に実施し,その研修・授業の出席者・実施者にインタビューを行うことにより,1)ワークショップ型研修・授業に対し抵抗感があるとすればそれはどういうものか,どのようにしてその抵抗感が生まれてくるのか,2)活動に参加することによって学習観・学習態度は変容しうるのか,3)変容するとしたらそれはどのようなきっかけによるものなのか,などの分析を行おうとするものである。同時に,学習観変容のプロセスをモデル化し,今後同種の研修・授業を設計・実施していくに当たっての有効な知見を得ていくことも目的としている。2017年度は,前年度に実施したワークショップ型授業参加者(この種の授業に対して何らかの抵抗感を示した者)に対するインタビューの結果を質的に分析し,学会で発表するとともにその成果を論文としてまとめた。複数名のインタビュー結果からは,【教師への期待】(「教師に介入してほしい」「教えてほしい」という期待)が共通して見られ,その期待が満たされないことが授業への抵抗感等につながっていることが示された。一方,「日本語母語話者でない」「日本語教師経験がない」という【ハンディキャップ感】を持ち,当初は活動にあまり積極的に参加していなかった出席者の1人が,話し合いのプロセスの中で【これまでの自分の問い直し】を経て【どうしても伝えたいこと】を見つけることで,「教師に介入してほしい」という意識を乗り越えていたことも確認できた。また本年度は,日本語教育関係者を対象に,「フォーラムシアター」と呼ばれる手法に基づく演劇ワークショップを実施し,出席者・ファシリテーターに対するインタビューデータを収集することができた。

2018年度には得られたデータの分析を進め,総合的な考察を行っていく予定である。前年度中に実施したインタビューデータを分析し,成果として発表することができた。また,前年度中に実施することができなかった演劇ワークショップを実施し,参加者に対するインタビューデータを収集した。ワークショップ受講者からだけでなく,コーディネーターからもインタビューデータを得ることができたため,ワークショップで何が起きていたかを多面的な視点から分析していくことが可能となっている。本研究は,出席者が活動に主体的に参加するプロセスを通じて学ぶという「ワークショップ的手法」を取り入れた研修・授業を実際に実施し,その研修・授業の出席者・実施者にインタビューを行うことにより,この種の研修・授業の中で起こっている各人の心理的プロセスを明らかにするとともに,この種の研修・授業にどのような意義があり得るか,また同種の研修・授業を設計・実施していくに当たり,運営者にはどのような配慮が求められるか,などについて知見を得ていくことを目的としている。前年度(2017年度)には「フォーラム・シアター(FT)」と呼ばれる手法に基づく演劇ワークショップを実施し,複数の参加者及びファシリテーターに対するインタビューを行った。本年度(2018年度)は,FTにおいて強い葛藤を感じていた一部の参加者に対し,ワークショップを終えてさらに時間をおいてからの振り返りインタビューを追加実施し,その葛藤について自分の中で折り合いをつけていくプロセスを分析した。同時に,前年度収集した複数の参加者・ファシリテーターに対するインタビューの結果に対し,研究分担者が個別に分析を加えた。さらに,それぞれの分析に対し統合的に解釈を加えることにより,以下の知見を得た:1FTには,「他人ごと」でなく「自分ごと」として状況を引き受ける(「三人称的アプローチ」からの脱却)ことを可能にし,かつ「ネガティブ・ケイパビリティ」(性急に証明や理由を求めずに,不確実さや不思議さ,懐疑の中にいることができる能力)を涵養し得る力がある,2ただしその際,「自分の価値観」だけに基づいて状況を見る(一人称的アプローチ)のでなく,「眼の前にいる人の価値観への共感」をもって状況を見る(二人称的アプローチ)ことが大切であり,運営者には参加者にそうしたアプローチを促すような配慮が求められる。演劇ワークショップについては,参加者には申込時に調査研究への参加協力を要請し,許諾を得ておくことによって,成果公表についても問題が起こらないような形で企画・実施する。その他,本研究のメンバー(研究代表者・分担者・連携協力者)がそれぞれ企画実施するワークショップ・研修等に他のメンバーがそれぞれ参加し,インタビュー調査にも相互に協力し合うことにより,多様な目的・形態の研修・授業を舞台としたデータを収集・分析していく予定である。これまでに得られたデータを多角的に分析することにより,態度変容のプロセスにどのようなものがありうるかを洗い出し,態度変容のモデルを作成することを試みる。
多重化されたネットワークにおける動的な最適経路選択法の研究

本研究では多重化された通信路からなる通信ネットワークを対象とし、環境の変化に対して動的に適応可能な最適通信経路の選択法に関する考察をおこなっている。本年度はオンラインアルゴリズムとしての側面から、いくつかの具体的な成果をあげている。特にある制約された資源を有効に利用するという観点からこの問題を一種のビンパッキング問題ととらえこれまでに知られている結果を改良するアルゴリズムの提案をおこなった。また、複数のキャリアを効率的に運用する問題を新たに定式化し、その問題に対するいくつかの理論的結果を得ている。他にも通信の形態をマルチキャストに限定することで、いくつかの新しい知見を得ることができた。本研究では、多重化された通信路からなる通信ネットワークを対象とし、環境の変化に対して動的に適応可能な最適経路選択法に関する考察をおこなっている。今年度はネットワーク資源に対する動的割当て問題とその具体的応用としてのマルチプロセッサスケジューリング問題を中心として検討をおこなってきた。具体的には通信路選択問題の一種の双対問題である節点へのラベル付け問題について考察し、グリーディアルゴリズムの性能の理論的解析をおこなった。また通信路での遅延が無視できないネットワーク上でのスケジューリング問題に注目し、遅延による効果をスケジュール長の下界によって示す方法を新たに示した。次年度はこれらの結果をさらに発展させ、具体的な通信アルゴリズムの開発につなげていく予定である。
P-糖蛋白質の機能の調節機構(P-糖蛋白質の関与しない多剤耐性変異細胞の解析

我々は主としてP-糖蛋白質の機能の調節機構の解明を行なう予定であったが、P-糖蛋白質の関与しない多剤耐性株の解析の研究が世界的に進んだためこの研究を優先的に行ない以下の結果を得た。1)P-糖蛋白質が担う多剤耐性に対する耐性克服薬剤であるセファランチンと突然変異誘導剤メゼレインの存在下にヒト口腔内類表皮癌KB細胞を培養し、坑癌剤アドリアマイシンを培地中に添加した。漸次、坑癌剤アドリアマイシン濃度を上昇させたところP-糖蛋白質を発現しないアドリアマイシン耐性細胞株C-A40及びC-A120がえられた。2)そしてこのP-糖蛋白質を発現しないアドリアマイシン耐性細胞株がクイーンズ大学のコールらによって発表されたMultidrug Resistance-associated Protein (MRP)を発現していることをMRPに対する抗体を用いたウエスタンブロットによって確認した。3)このP-糖蛋白質を発現しないアドリアマイシン耐性細胞株のアドリアマイシンにたいする耐性度とMRPの発現量はある程度まで相関するがそれ以上になると耐性度に比較しMRPの発現量の上昇が減少する。この場合トポイソメラーゼ2の発現減少が耐性をになうことが確認された。4)クイーンズ大学のコールらによって供与されたMRPのプローブを用いて大腸癌、胃癌、肺癌におけるMRPの発現を検討し、ヒト口腔内類表皮癌KB細胞及びP-糖蛋白質を発現しないアドリアマイシン耐性細胞株C-A40及びC-A120でのMRPの発現と比較した。i)C-A40及びC-A120のMRPのmRNAの発現はKB細胞の約17倍、126倍と過剰発現していた。P-糖蛋白質が担う多剤耐性細胞であるKB-8-5及びKB-C2のMRPmRNAの発現はKB細胞とほぼ同じであった。ii)逆にC-A40及びC-A120ではMDR1mRNAの発現は過剰発現していなかった。iii)genomicDNAのスロットブロットを行った結果、C-A40及びC-A120ではMRP geneが増幅していた。iv)ヒトの癌組織におけるMRPmRNAの発現を調べたところ、胃癌20例中12例(60%)大腸癌26例中11例(42%)、肺癌25例中14例(56%)でKB細胞より高く発現していた。v)肺癌の中では、腺癌11例中3例(27%)で過剰発現がみられるのに対し、扁平上皮癌では9例中8例(89%)と非常に高い割合で過剰発現がみられた。また、扁平上皮癌細胞株L13、L20はMRP geneの増幅はみられなかったもののMRPmRNAの発現はKB細胞より高かった。vi)正常組織でのMRPmRNAの発現をKB細胞と比較したところ、胃で17検体中13検体(76%)、肺で23検体中18検体(78%)、大腸で20検体中3検体(15%)でKB細胞より高く発現していた。vii)癌組織と正常組織でのMRPmRNAの発現を比較すると大腸癌では有意に正常組織より発現が高かったが、胃癌、肺癌では、正常組織での発現と有意の差がみられなかった。viii)MRPのペプチド抗体を用いて胃癌、肺癌での免疫組織学化学的検討を行った。MRPの発現は細胞質と細胞膜の両方にみられた。これらの結果は肺扁平上皮癌の抗癌剤耐性にMRPが関与している可能性を示している。5)MRPはグルタチオン抱合体の輸送の輸送を担っているという報告がライエルらによってなされているため、我々の細胞株についてもロイコトリエンC4の輸送と各種薬剤による輸送の阻害について検討し、併せてシスプラチン耐性細胞とも比較した。すべての変異細胞の親株であるKB細胞とMRP高発現細胞C-A120、シスプラチン耐性細胞KCP-4、P-糖蛋白質の高発現細胞KB-C2のmemmbrane vesicleを用い、ロイコトリエンC4の輸送と輸送系の阻害について検討中である。

4)クイーンズ大学のコールらによって供与されたMRPのプローブを用いて大腸癌、胃癌、肺癌におけるMRPの発現を検討し、ヒト口腔内類表皮癌KB細胞及びP-糖蛋白質を発現しないアドリアマイシン耐性細胞株C-A40及びC-A120でのMRPの発現と比較した。i)C-A40及びC-A120のMRPのmRNAの発現はKB細胞の約17倍、126倍と過剰発現していた。P-糖蛋白質が担う多剤耐性細胞であるKB-8-5及びKB-C2のMRPmRNAの発現はKB細胞とほぼ同じであった。ii)逆にC-A40及びC-A120ではMDR1mRNAの発現は過剰発現していなかった。iii)genomicDNAのスロットブロットを行った結果、C-A40及びC-A120ではMRP geneが増幅していた。iv)ヒトの癌組織におけるMRPmRNAの発現を調べたところ、胃癌20例中12例(60%)大腸癌26例中11例(42%)、肺癌25例中14例(56%)でKB細胞より高く発現していた。v)肺癌の中では、腺癌11例中3例(27%)で過剰発現がみられるのに対し、扁平上皮癌では9例中8例(89%)と非常に高い割合で過剰発現がみられた。また、扁平上皮癌細胞株L13、L20はMRP geneの増幅はみられなかったもののMRPmRNAの発現はKB細胞より高かった。vi)正常組織でのMRPmRNAの発現をKB細胞と比較したところ、胃で17検体中13検体(76%)、肺で23検体中18検体(78%)、大腸で20検体中3検体(15%)でKB細胞より高く発現していた。vii)癌組織と正常組織でのMRPmRNAの発現を比較すると大腸癌では有意に正常組織より発現が高かったが、胃癌、肺癌では、正常組織での発現と有意の差がみられなかった。viii)MRPのペプチド抗体を用いて胃癌、肺癌での免疫組織学化学的検討を行った。MRPの発現は細胞質と細胞膜の両方にみられた。これらの結果は肺扁平上皮癌の抗癌剤耐性にMRPが関与している可能性を示している。5)MRPはグルタチオン抱合体の輸送の輸送を担っているという報告がライエルらによってなされているため、我々の細胞株についてもロイコトリエンC4の輸送と各種薬剤による輸送の阻害について検討し、併せてシスプラチン耐性細胞とも比較した。すべての変異細胞の親株であるKB細胞とMRP高発現細胞C-A120、シスプラチン耐性細胞KCP-4、P-糖蛋白質の高発現細胞KB-C2のmemmbrane vesicleを用い、ロイコトリエンC4の輸送と輸送系の阻害について検討中である。我々は主としてP-糖蛋白質の機能の調節機構の解明を行なう予定であったが、P-糖蛋白質の関与しない多剤耐性株の解析の研究が世界的に進んだためこの研究を優先的に行ない以下の結果を得た。1)P-糖蛋白質が担う多剤耐性に対する耐性克服薬剤であるセファランチンと突然変異誘導剤メゼレインの存在下にヒト口腔内類表皮癌KB細胞を培養し、抗癌剤アドリアマイシンを培地中に添加した。漸次、抗癌剤アドリアマイシン濃度を上昇させたところP-糖蛋白質を発現しないアドリアマイシン耐性細胞株がえられた。この結果はSomatic Cell and Molecular Geneticsに投稿し現在in Pressである。2)そしてこのP-糖蛋白質を発現しないアドリアマイシン耐性細胞株がクイーンズ大学のコールらによって発表されたMultidrug Resistance-associated Protein(MRP)を発現していることをMRPに対する抗体を用いたウエスタンブロットによって確認した。
肝虚血再灌流障害に対する一酸化窒素の影響

【目的】NOが虚血再潅流後に果たす役割をフリーラジカル産生、肝障害、肝組織血流量の点から検討した。【方法】SD系雄性ラットをコントロール(無処置)群とN-nitro-L-Arginine(LNNA:NO合成酵素阻害剤、7.5mg/kg)投与群の2群に分けた。ネンブタール麻酔下に開腹し、スピントラップ剤である4-POBNを投与した後に肝正中葉と左葉に流入する門脈、肝動脈、胆管を一括遮断し、70%部分肝虚血を行った。60分の虚血後再潅流0分、10分の時点で、肝左葉を摘出し、肝内に産生されたフリーラジカル(POBN adduct)の量を電子スピン共鳴装置(ESR)にて測定した。同時に肝上部下大静脈より採血し、血清GOT,GPT,LDH値を測定した。また、レーザードップラー血流計を用いて経時的に肝組織血流量を測定した。【結論】NOの合成を阻害したことによって虚血前から肝組織血流量は有意に低下しており、再潅流後の肝組織血流回復も有意に遅延した。従ってNOは強い血管拡張作用を持っていることが明らかとなった。また、フリーラジカルの産生低下は血管収縮による酸素供給量の低下によって起こったと考えられた。
遺伝子レスキューマウスの解析によるNASHを制御する組織・細胞Nrf2の役割解明

p62およびNrf2遺伝子の二重欠損マウス(DKO)マウスは,通常食飼育下で過食肥満とともにNASHを発症する.そこで,本マウスのNASH発症機序を腸管とKupffer細胞に主眼をおき解析した.腸内細菌叢の解析より,DKOでグラム陰性菌が増加しており,糞便及び血清中LPS濃度も増加していた.また,腸管透過性はNrf2-KO,DKOで亢進していた.DKOのKupffer細胞は炎症性サイトカインの発現レベルは増大していた.DKOのNASH発症には,p62欠損に起因する腸内グラム陰性菌の増加と,Nrf2欠損に起因する腸管上皮バリア機能の脆弱化により,LPSの肝への流入量が増加することが重要である.平成26年度は、組織特異的p62, Nrf2遺伝子ノックインマウスの作製を行った。以下に行った作成方法を記す。まず、p62遺伝子の第2イントロンあるいはNrf2遺伝子の第2イントロンに、LoxP配列で挟まれた転写終結シグナルおよびpolyA付加シグナルを挿入した組換え遺伝子を持つ、ES細胞(C56BL/6由来)を相同組換えにより得た。これを胚盤胞(BALB/c由来)にインジェクションし、偽妊娠ICRメスマウスの卵管に移植してキメラマウスを作製する(現在この段階を遂行中である)。このうち、キメラ率の高い雄を野生型C57BL/6雌と交配しF1ヘテロマウスを得る。遺伝子型の判定は、尾端組織DNAを用いたPCR産物のパターンを解析して行う。ここで得られる遺伝子改変マウス(p62KI/KIおよびNrf2KI/KI)は、第2イントロンで転写がストップするため、全身でp62あるいはNrf2の発現が欠損する。これらのマウスを、既に作製済のp62-/-、Nrf2-/-、あるいは互いに交配して、p62KI/KI:Nrf2-/-、p62-/-:Nrf2KI/KI、p62KI/KI:Nrf2KI/KIマウスを得る。これらのマウスは、全身でp62およびNrf2遺伝子二重欠損となり、NASHを発症する。平成27年度も引き続きノックインマウスの作製を行う。本年度は,昨年度に引き続き組織特異的p62, Nrf2遺伝子ノックインマウスの作製を行った.昨年度作製したキメラマウスのうち,キメラ率の高い雄を野生型C57BL/6雌と交配しF1ヘテロマウスを得た.遺伝子型の判定は,尾端組織DNAを用いたPCR産物のパターンを解析して行った.ここで得られる遺伝子改変マウス(p62KI/KIおよびNrf2KI/KI)は,第2イントロンで転写がストップするため,全身でp62あるいはNrf2の発現が欠損する.これらのマウスを,既に作製済のp62-/-、Nrf2-/-、あるいは互いに交配して,p62KI/KI:Nrf2-/-,p62-/-:Nrf2KI/KI,p62KI/KI:Nrf2KI/KIマウスを得た(現在この段階を遂行中である).これらのマウスは,全身でp62およびNrf2遺伝子二重欠損となり,NASHを発症する.平成28年度は,p62,Nrf2の全身二重欠損下において,組織特異的にp62,Nrf2の発現をレスキューするために,上記マウスを組織特異的にCreリコンビナーゼを発現するマウスと交配する.これにより生まれる仔は,Creが発現する組織でのみLoxPで挟まれた転写終結シグナルおよびpolyA付加シグナルが除去され,p62あるいはNrf2の発現がレスキューされる組織特異的ノックインマウスとなる.本研究では,腸管上皮,肝細胞,骨髄系細胞(クッパー細胞),脂肪細胞特異的ノックインマウスを作製するために,それぞれLyz2-Cre,Albumin-Cre,CK19-Cre,aP2-Creマウスを用いる.本学動物資源センターにおいて,Nrf2遺伝子レスキューマウスは順調に作製されている.ただし,マウスの繁殖に時間を要する問題がある.その対処法として,繁殖ケージを増やして繁殖を行なっている.現在,匹数は増えてきており,遺伝子レスキューが出来ているマウスから実験を行う予定である.研究成果の一部は,国際学会にて成果報告を行った.近年,顕著な増加を示している慢性肝疾患は非アルコール性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis; NASH)である.NASHは肝硬変,肝癌に至る慢性肝疾患であることより,予防や治療に関する医療対応が重要である.しかしながら,その詳細な発症機構は未だ明らかになっていない.当研究室の作製したp62およびNrf2遺伝子の二重欠損(double knockout ; DKO)マウスは,通常食飼育下において加齢とともにNASH病態が進展した.そこで,本マウスのNASH発症機序を腸管とKupffer細胞に主眼をおき,in vivo,in vitroの両面から検討した.次世代シーケンスによる腸内細菌叢を解析したところ,DKOマウスでグラム陰性菌の割合が増加しており,糞便中及び血清中LPS濃度も増加していた.また,FITCデキストランの腸管透過性はNrf2-KO,DKOマウスにおいて有意に亢進していた.そこでNrf2欠損Caco-2細胞を作成し解析したところ,タイトジャンクションタンパク質の発現が低下しており,バリア機能の低下が見られた.DKO

マウスのKupffer細胞は,野生型と比べM1陽性率,炎症性サイトカインの発現レベルは増大していた.また,二重欠損Raw264.7に低容量LPS添加したところ,野生型に比べNF-κBの活性化およびTNF-α,IL-1βのmRNAレベルの増悪がみられた. DKOマウスのNASH発症には,p62欠損に起因する腸内グラム陰性菌の増加と,Nrf2欠損に起因する腸管上皮バリア機能の脆弱化により,LPSの肝への流入量が増加することが重要な因子の一つであると考えられた.食事療法と運動療法以外に有効な治療法が確立されていないNASHに対し,本DKOマウスを用いることで,画期的な治療薬の開発に繋がる可能性がある.p62およびNrf2遺伝子の二重欠損マウス(DKO)マウスは,通常食飼育下で過食肥満とともにNASHを発症する.そこで,本マウスのNASH発症機序を腸管とKupffer細胞に主眼をおき解析した.腸内細菌叢の解析より,DKOでグラム陰性菌が増加しており,糞便及び血清中LPS濃度も増加していた.また,腸管透過性はNrf2-KO,DKOで亢進していた.DKOのKupffer細胞は炎症性サイトカインの発現レベルは増大していた.DKOのNASH発症には,p62欠損に起因する腸内グラム陰性菌の増加と,Nrf2欠損に起因する腸管上皮バリア機能の脆弱化により,LPSの肝への流入量が増加することが重要である.本学動物資源センターにおいて,Nrf2遺伝子レスキューマウスは順調に作製されている.NASH発症機序に重要な組織を追求するために,DKOマウスの任意の組織・細胞において各遺伝子をレスキューしたマウスを作製し,DKOマウスと形質を比較し,その組織・細胞とNASH発症との関係を明らかにする.一連の研究結果を踏まえて,分子学的機構を解明することにより,どの臓器でどの遺伝子がNASH発症に深く関わっているかを明確にすることができる.28年度が最終年度であるため、記入しない。肝臓病学今後は、p62、Nrf2の全身二重欠損下において、組織特異的にp62、Nrf2の発現をレスキューするために、上記マウスを組織特異的にCreリコンビナーゼを発現するマウスと交配する。これにより生まれる仔は、Creが発現する組織でのみLoxPで挟まれた転写終結シグナルおよびpolyA付加シグナルが除去され、p62あるいはNrf2の発現がレスキューされる組織特異的ノックインマウスとなる。本研究では、腸管上皮、肝細胞、骨髄系細胞(クッパー細胞)、脂肪細胞特異的ノックインマウスを作製するために、それぞれLyz2-Cre、Albumin-Cre、CK19-Cre、aP2-Creマウスを用いる。28年度が最終年度であるため、記入しない。
ハイドロダイナミック力を用いた肝ミトコンドリアへの遺伝子導入システムの開発

ミトコンドリア(Mit)特異的な遺伝子治療の実現に向け、Mit特異的なプロモーターと終止配列、ならびにMit特異的なコドン使用に特化した遺伝子からなるプラスミドと、その送達システムの開発を行った。単純なハイドロダイナミック導入法(HD)では明らかなMitでの遺伝子発現が確認できなかったため、Mit移行シグナルとそれに結合するタンパクの併用を試みた。移行シグナルと結合タンパクをクローニングした後、HDの物理的なインパクトによる結合の解離を防止するため、溶液の粘弾性を利用し注入溶液量と速度をともに半減させたHDシステムを新規に開発した。現在、これらを用いてMit特異的な遺伝子導入を検証中。平成25年度は、Mitochondria localization signal(MLS)とMitochondrial transcriptional factor A(TFAM)の融合タンパクを発現するプラスミドのクローニングと、融合タンパクとリポーター遺伝子搭載ミトコンドリア特異的発現ベクターとの複合体形成を損なわずに細胞内へと送達させるための、より物理的ストレスの少ないハイドロダイナミック導入法(HD)の開発を進めました。MLSとして染色体17番にコードされているsuperoxide dismutase 2(SOD2)を採用し、pE-SUMO3ベクターにSOD2と、その下流にTFAMを現在クローニング中です。TFAMは反復配列を含みPCRでの増幅が困難なため、SOD2とTFAM全体の配列を人工的に合成し、クローニングします。また今後は、融合タンパクと平成24年度にクローニングしたミトコンドリアに特異的な発現を示すpMitGFP、pMitGFP2、あるいはpMitDsRedE2との複合体をHDで細胞内に導入し、MLSの活性でミトコンドリアへの転移を試みる予定ですが、HDの急速な注入による複合体の解離が危惧されます。このため、より低速の注入要件で細胞内送達を担保する新規のHD(neoHD)の開発が必要となり、すでに申請者らは、neoHDの条件をほぼ確立しました。平成24年度は、ミトコンドリア(Mit)に特異的なプロモーター、リポーター遺伝子、終止配列から構成されるプラスミドの新規クローニングを行いました。pAcGFP1-C1(Clontech)とpDsRedE2はそれぞれGFPとDsRedをリポーター遺伝子として有するプラスミドで、今回はプロモーターとしてD-loopを、終止配列としてTER配列、あるいはMitの複製起点(Ori)を用いました。D-loop-GFP-TERをpMit-GFP、D-loop-GFP-OriをpMitGFP2、D-loop-DsRed-OriをpMitDsRedE2としてクローニングし、核とMitでのコドン使用の差異によるMit特異性を担保するために、GFPのG174A、G719A、ならびにDsRedのG429A、G678A変異を導入しました。各プラスミドを生理食塩水に溶解し、体重の10%容量を8週齢マウスの尾状脈より10秒間で静注することで、肝細胞への遺伝子導入を行いました。遺伝子導入法自体の陽性コントロールとしてCMVプロモーター制御下に核由来のGFPを発現するpCMV-GFPを用い、蛍光顕微鏡による評価とリアルタイムRT-PCRによるメッセージの定量を行いました。結果として、GFPシグナルは自家蛍光と交絡するため微弱な陽性シグナルの検出に最適な方法ではないこと、ならびにpCMV-GFP導入マウスではGFPのメッセージが確認される一方で、他のプラスミドが導入された肝臓に核由来リポーター遺伝子発現の認められないことが確認されました。また、26年度に使用予定の遺伝子導入機の開発を進め、ラットを対象として導入効率と安全性の検証を行いました。平成26年度は、Mitochondria localization signal(MLS)であるsuperoxide dismutase 2(SOD2)とTFAMのクローニング、ならびにレオロジー解析に基づく新たな高効率HDの開発を試みました。申請者らはマウスに対してコンピューター断層撮影を実施することで、腹腔内臓器を露出させるなどの外科的操作の加わらない状態におけるHD時の詳細な血流動態を世界で初めて検討しました。その結果、HDによる膨張率が240%とされてきたこれまでの報告と異なり、肝臓の腫大は注入速度非依存性で、HDでも170%前後であることが示されました。このことからHDが遺伝子を細胞内へと誘導する上で脈管方向の進展力に加え脈管に直行するベクトルが重要であると考え、高弾性溶液を用いた導入を試みた結果、HDに用いられる注入溶液量と速度を半減させても、生理食塩水を用いた場合に比較し1,000倍から10,000倍と、HDに匹敵する導入効率の得られることを発見しました。

以上の結果から、通常のHDでは細胞膜を通過後さらにミトコンドリアの内膜と外膜を通過させて遺伝子を導入することが困難であるのに対し、高弾性溶液を用いることにより細胞膜通過後にもさらにミトコンドリアの膜小孔を通過させられる可能性が示唆されたことから、本研究で構築したミトコンドリア発現ベクターと高弾性溶液を用いたHDによるミトコンドリアへの遺伝子導入を検証することが今後の課題です。さらに、注入溶液量ならびに速度の半減したHDで十分な遺伝子導入が達成される場合、大動物におけるHD環境の局所的な再現のための注入制御と再現性の担保が格段に容易となります。したがって本研究の成果は、単にミトコンドリアへの遺伝子導入研究を促進するのみならず、非ウイルスベクターを用いた通常の遺伝子治療全般に関する基礎的、ならびに臨床的な研究の更なる発展を促進する基盤となることが期待されます。消化器内科学平成25年度の研究目標は、MLSとTFAMの融合タンパクの作製と、neo HDの確立でした。これまでにMLSとして作用するSOD2をPCRで増幅しクローニングしましたが、TFAMは反復配列の存在が問題と考えられ、PCRでの増幅が困難でクローニングには至っていません。この点に関しては、残念ながら当初、平成25年度に予定した目標を達成することはできませんでした。また、複合体形成が達成されなかったため、平成25年度はラットへの導入機を用いたHDを実施しませんでした。一方、neo HDの確立に関しては、特筆すべき結果が得られました。すなわち、HDは大量の生理食塩水を急速静注することで細胞膜に一過性の欠損を生じさせる、極めて物理的なインパクトの強い方法であり、TFAMとpMitGFP、pMitGFP2、あるいはpMitDsRedE2に含まれるD-loop配列間の複合体形成を解離させる可能性があるため、本年度は、注入速度を減じることで物理的なインパクトを低下させながらも、細胞内への送達効率を維持するHDの条件決定を進めました。その結果、通常は20gのマウスの尾状脈より約2mLの生理食塩水を5秒間で急速静注することにより得られるHDの細胞内送達効率を、半量の1mLを5秒間で注入することでも同等の送達効率を達成することに成功しました。本件に関しては現在、特願の申請準備を進めており、知的財産保護の観点から詳細な情報を提示できません。平成24年度の研究目標は、Mitに特異的なプロモーター、リポーター遺伝子、終止配列から構成され、核由来の遺伝子発現を認めない発現ベクターを構築すること、ならびに小動物用のハイドロダイナミック遺伝子導入(HGD)システムを検証することでした。概要に記載の通り、Mitゲノムに内在する配列であるD-loopをプロモーター、TER、あるいはOriを終止配列として配置し、リポーター遺伝子となるGFP、あるいはDsRedの配列に、核で終止コドン、Mitでアミノ酸をコードする変異を導入することで、Mitへの特異性を担保したプラスミドを3種類、クローニングしました。
大学の研究評価に関する研究（経済学の場合）

近年、世界各国は学術的研究力向上に多額の資金を投じており、その効果として研究の生産性を定量的に測定することが重要な課題となっている。学術的研究生産性の代表的な指標として、重要な国際的学術誌への論文掲載数がある。しかし、このような基準は基本的に欧米中心に設定されているので、日本の研究、特に文科系の研究を評価する際には、慎重に適用すべきと主張されることがある。そこで昨年度から、日本の経済・社会科学系の主要5国立大学の経済・社会科学系部局とシンガポール国立大学経済学部(NUS)の研究生産性を国際的学術誌への論文掲載数で計測している。日本の経済・社会科学系主要5国立大学の経済・社会科学系部局として、東京大学社会科学研究所、一橋大学経済研究所、京都大学経済研究所、大阪大学社会経済研究所、神戸大学経済経営研究所を調査対象とした。シンガポール国立大学は、Times Higher Education(THE)の大学ランキングでは、アジアトップ(2018)の大学である。研究評価基準が基本的に欧米中心に設定されているために、日本の大学に不利になる点があるならば、日本以外のアジアの国でも同様と考えられる。そのため、シンガポール国立大学経済学部(NUS)が、同じ評価基準でどのようなperformanceを達成しているかを調査し、日本の経済・社会科学系部局と比較した。AIS(Article Influence Score)をもとに作成した経済学重要学術誌リスト(TOP20、TOP50、TOP100、TO200)と、経済学との隣接分野(経営学、社会学、法学、歴史学、地域研究、統計学など)の学術誌を膨大に含む「拡張リスト」を使い、研究生産性(論文数の総数だけではなく、部局平均や中位値)を計測した。さらに、今年度は被引用数についても同様に調査を実施した。学術的研究生産性の代表的な定量的指標として、被引用数や重要な国際的学術誌への論文掲載数などがある。さらに、学術誌の重要度の指標として、インパクト・ファクターやAIS(Article Influence Score)がある。本研究では、いわゆる旧帝大7大学の経済学研究科と東京大学、一橋大学、京都大学、大阪大学、神戸大学の経済・社会学系附置研究所、合計12部局の研究生産性を、これら指標で計測した。本研究の特徴の一つは、AISをもとに作成した経済学重要学術誌リスト(TOP20、TOP50、TOP100、TO200)に加えて、経済学との隣接分野(経営学、社会学、法学、歴史学、地域研究、統計学など)の学術誌を膨大に含む「拡張リスト」を使い、研究生産性を計測したことである。もう一つの特徴は、論文数や引用数の総数だけではなく、部局平均や中位値を計測したことである。従来の研究生産性の計測は、経済学の少数の学術誌を使い総数だけを比較していたので、経済学以外の研究や部局規模の差を無視していた。本研究の結果、i)東京大学経済研究科以外は、京都大学経済研究所や大阪大学社会経済研究所といった小規模部局の方が研究生産性が高いこと、ii)どの部局でも、中位値が平均値よりも低く、部局内の生産性の偏りが大きいことが判明した。日本では、一部の研究者が国際的に華々しい研究成果を出す一方で、多数の研究者が国際的な研究成果をあまり出していないと言われている。本研究でもそれが裏付けられた。この結果を、Discussion Paperとして公表する予定である。学術的研究生産性の代表的な定量的指標として、重要な国際的学術誌への論文掲載数がある。しかし、研究評価の国際基準は基本的に欧米中心に設定されているので、日本の研究、特に文科系の研究を評価する際には、慎重に適用すべきと主張されることがある。そこで本年度は、日本の経済・社会科学系の主要5国立大学の経済・社会科学系部局とシンガポール国立大学経済学部(NUS)の研究生産性を国際的学術誌への論文掲載数で計測した。シンガポール国立大学は、Times Higher Education(THE)の大学ランキングでは、アジアトップの大学である。研究評価の国際基準は基本的に欧米中心に設定されているために、日本の大学に不利になる点があるならば、日本以外のアジアの国でも同様と考えられる。AISをもとに作成した経済学重要学術誌リスト(TOP20、TOP50、TOP100、TO200)と、経済学との隣接分野(経営学、社会学、法学、歴史学、地域研究、統計学など)の学術誌を膨大に含む「拡張リスト」を使い、研究生産性を計測した。さらに、論文数や引用数の総数だけではなく、部局平均や中位値を計測した。

平成29年12月4日の日本経済新聞記事、「組織管理改革に遅れ国立大の研究力低下」(河村小百合)の基になった論文、「成長戦略として国立大学法人制度に求められる抜本的改革の方向性」(河村小百合、JRIレビュー、日本総研)では、本研究の平成28年度の成果(ISER Discussion Paper, No. 998, April 2017)を約2ページにわたって引用している。本研究の成果が日本の研究の将来を議論する上で重要な役割を果たしている証左である。近年、世界各国は学術的研究力向上に多額の資金を投じており、その効果として研究の生産性を定量的に測定することが重要な課題となっている。学術的研究生産性の代表的な指標として、重要な国際的学術誌への論文掲載数がある。しかし、このような基準は基本的に欧米中心に設定されているので、日本の研究、特に文科系の研究を評価する際には、慎重に適用すべきと主張されることがある。そこで昨年度から、日本の経済・社会科学系の主要5国立大学の経済・社会科学系部局とシンガポール国立大学経済学部(NUS)の研究生産性を国際的学術誌への論文掲載数で計測している。日本の経済・社会科学系主要5国立大学の経済・社会科学系部局として、東京大学社会科学研究所、一橋大学経済研究所、京都大学経済研究所、大阪大学社会経済研究所、神戸大学経済経営研究所を調査対象とした。シンガポール国立大学は、Times Higher Education(THE)の大学ランキングでは、アジアトップ(2018)の大学である。研究評価基準が基本的に欧米中心に設定されているために、日本の大学に不利になる点があるならば、日本以外のアジアの国でも同様と考えられる。そのため、シンガポール国立大学経済学部(NUS)が、同じ評価基準でどのようなperformanceを達成しているかを調査し、日本の経済・社会科学系部局と比較した。AIS(Article Influence Score)をもとに作成した経済学重要学術誌リスト(TOP20、TOP50、TOP100、TO200)と、経済学との隣接分野(経営学、社会学、法学、歴史学、地域研究、統計学など)の学術誌を膨大に含む「拡張リスト」を使い、研究生産性(論文数の総数だけではなく、部局平均や中位値)を計測した。さらに、今年度は被引用数についても同様に調査を実施した。平成28年度には、日本を代表する9大学の合計14部局の研究生産性を測定する指標として、国際学術誌への論文掲載数と被引用回数のデータを作成し、比較を行った。日本の大学の研究を国際化させていくためには、このような国内の大学を、海外の有力大学と比較していくことが有用と考える。そのため、海外の有力大学の経済系部局所属研究者の国際学術誌への論文掲載数と被引用回数のデータも作成することを計画している。平成29年度には、国際的な大学ランキングで、アジアトップの位置にあるシンガポール国立大学経済学部の調査を開始する予定である。シンガポール国立大学は、最近になって飛躍的に国際ランキングをあげた大学である。そのような大学を調査することによって、日本の大学の国際化のための有益な情報が得られると見込まれる。
血液凝固IX因子血友病BのEGF様ドメインに発見された新しいオリゴ糖鎖の機能解析

上記の研究課題については、目下、進めつつあるが、まとまった成果が充分に得られていないので、ここでは新しいレクチンの発見とその構造・機能について述べる。カブトガニの血球細胞は、大腸菌などグラム陰性菌の表層に存在するLPS(リポ多糖)にきわめて感受性が高く、LPSの刺激により速やかに脱顆粒を起こすとともに体液のゲル化が起きる。この細胞内には大、小、二種類の顆粒が存在し、大顆粒には主に体液凝固因子、小顆粒には主に抗菌性ポリペプチドが含まれ、カブトガニの生体防御を担っている。先に、我々はこれら分泌顆粒成分の生化学的解析を行い、大顆粒中にA型赤血球を特異的に凝集する分子量27,000のレクチン(L10と命名)を見い出し、その全一時構造を決定した。その結果、L10は236アミノ酸残基からなり、47残基の5回繰り返し配列をもつことが分かった(J. Biol. Chem. 1995年、Dec. issue, in press)。本年度は、L10の糖に対する結合特異性を赤血球の凝集阻害により調べた結果、L10はN-Acetyl基をもついくつかの糖に対して特異性を示し、それらの中では、N-AcetylglucosamineとN-Acetylallolactosamine(Galβ1→6GlcNAc)に対して高い特異性を示すことが分かった。また、糖を加えたときに起きる蛍光変化を用いて親和定数(Ka)を求めたところ、GlcNAcに対してKa=1.95×10^4M^<-4>であった。さらに、グラム陰性菌の表層成分であるリポテイコ酸に対する結合活性と細菌の凝集活性を調べ、L10にはリポテイコ酸と結合し、かつグラム陽性菌の一種のStaphylococcus saprophyticus KDを特異的に凝集する活性のあることが明らかとなった。
抗原提供能と接着分子の発現調節

(目的)ランゲルハンス細胞(LC)による抗原特異的T細胞の活性化にはLC上のCD80/CD86、HSAおよびCD40が重要であることが最近明らかになりつつある。今回我々はこれらの分子の機能的役割の相異と相互関係について検討した。(方法)C3Hマウスの表皮細胞浮遊液よりLCを単離し、この培養系に異系のナイーブT細胞あるいは抗CD40抗体を加え、CD40刺激によるCD80、CD86およびHSAの発現量の変化をフローサイトメトリーにて解析した。またLCを抗原提示細胞として用いたアロ抗原特異的なナイーブT細胞の増殖を測定し、この系にCD40あるいはCD40Lに対する抗体を加えて各分子の機能的役割を比較検討し、さらにCD80、CD86およびHSAに対する抗体を加え、これらの共刺激シグナルとCD40/CD40Lを介したシグナルの相互関係を比較検討した。(結果および考察)培養LC上のCD80、CD86、HSAは異系T細胞との培養系および抗CD40抗体によるCD40刺激によりその発現量に有意な増強を認めた。またLCによるアロ抗原特異的なナイーブT細胞の増殖は、抗CD40L抗体により抑制され、この系に抗CD40抗体を加えることによりこの抑制の回復を認めたことよりT細胞上のCD40LからLC上のCD40へのシグナルがLCの抗原提示能に重要な役割を果たしていると考えられた。抗CD40L抗体によりCD40/CD40Lシグナルを阻害した系におけるLCの抗原提示能はCD80、CD86、HSAに対する抗体の添加によってさらに抑制されたことより、ナイーブT細胞のprimingにおけるこれらの分子の重要性が示唆された。(目的)ランゲルハンス細胞(LC)による抗原特異的T細胞の活性化にはLC上のCD80/CD86、HSAおよびCD40が重要であることが明らかになりつつある。