hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
新たな網膜循環調節因子と網膜症治療法の確立

我々は、脂肪から産生されるアディポサイトカインの一つであるアディポネクチンが内皮依存性に網膜血管を拡張させることを示し、さらに2型の早期の糖尿病網膜症患者において、血中アディポネクチン濃度と網膜血流量が正の相関を示すことも明らかとした。以前の臨床研究で我々は、2型の早期の糖尿病網膜症の患者において、網膜血流量が低下しているという結果を得ていることから、血中の低下したアディポネクチンが網膜血流量を低下させ、網膜症の進展につながっているかもしれない。したがって、アディポネクチンの活動性を強めることが新しい治療法につながるかもしれない。平成24年度の研究により、以下の成果を得た。1)脂肪細胞から分泌されるサイトカインであるアディポネクチンの血中濃度の低下と糖尿病網膜症の重症度と関連があるとういう報告があるが、アディポネクチンの網膜血管の直接作用について、詳しく検討されていなく我々は、ブタの網膜摘出血管を用いたin vitro実験により、アディポネクチンが濃度依存性に血管拡張作用させ、さらにこの血管拡張は、内皮から産生された一酸化窒素(NO)が関与していることが考えられた。2)アディポネクチンは、アディポネクチン受容体を介し、さまざまな生理作用を有する事から、アディポネクチンだけでなくアディポネクチン受容体も網膜症の病態に関与しているものと考えられる。しかし、網膜血管においてアディポネクチン受容体の存在が確認されていなく、今回、免疫染色にてブタ網膜血管の内皮にアディポネクチン受容体が存在することを確認した。上記1)2)の結果について平成25年に論文を発表した。(Omae T et al., Invest Ophthalmol Vis Sci. 2013 Jul;54(7):4586-94.)平成25年度の研究により、以下の結果を得た網膜症患者では、血中のアディポネクチン濃度と重症度が関連しているとの報告があり、また網膜症早期に網膜血流が低下しているという報告(Nagaoka T et al., Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010 Dec;51(12):6729-34.)からアディポネクチンが網膜症の発症・進展に関与している可能性がある。そこで2型糖尿病患者における網膜循環と血中のアディポネクチン濃度の関連を検討し、網膜血流量と血中アディポネクチン濃度が有意に正の相関を示した。この内容は、今後学会報告予定。また、硝子体のアディポネクチン濃度は、濃度が低すぎるのか検出できず。1)脂肪細胞から分泌されるサイトカインであるアディポネクチンの血中濃度の低下と糖尿病網膜症の重症度と関連があるとういう報告があるが、アディポネクチンの網膜血管の直接作用について、詳しく検討されていなかった。そこで今回われわれは、ブタの網膜摘出血管を用いたin vitro実験により、アディポネクチンが濃度依存性に血管拡張作用させることを確認できた。さらにこの血管拡張は、一酸化窒素(NO)合成阻害薬や血管内皮剥離により有意に同程度抑制されたことから、この血管拡張は、内皮から産生されたNOが関与していることが考えられた。以上の結果と網膜症早期に網膜血流が低下しているという報告(Nagaoka T et al., Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010 Dec;51(12):6729-34.)から、網膜症早期において、アディポネクチン濃度を上昇させる薬剤などによる適切な介入により、糖尿病網膜症の発症・進展を予防できる可能性が示唆された、平成25年度の研究により、新しい糖尿病網膜症治療法の開発につなげたいと考えている。平成24年度は、主に、基礎研究をすすめた。結果の内容にかかわらず、多くの基礎研究を平成24年度内に行えたと考えている。基礎研究で得られた結果をもとに、臨床研究を行う予定。アディポネクチンの血中濃度と網膜血流の研究を、健常者をはじめ糖尿病患者で検討する。また、アディポネクチンの血中濃度を上昇させる薬剤などが、網膜血流にどのような影響を与えるかも検討する。薬品購入費、論文校正料、論文掲載料、学会発表
ＧＨ遺伝子組み換えアマゴを用いた発現遺伝子や代謝産物からの食品としての安全性評価

GH遺伝子組換えアマゴの肝臓や筋肉、脳下垂体で発現する遺伝子やタンパク、そして代謝産物を通して生理状態を調べた。その結果、肝臓では代謝異常や炎症反応、そして過剰なエネルギー消費による飢餓反応が見られ、組織の脂肪蓄積も抑制された。肝臓では飢餓応答遺伝子であるGRP78遺伝子の発現増加とMid1ip1遺伝子の発現が低下した。さらにMid1ip1はde novo脂肪酸合成に関与するためGH transgenicの肝臓ではSFAやMUFAの脂肪酸合成経路の抑制が示された。一方、筋肉では肝臓程の脂肪抑制は見られなかった。尚、この報告書では肝臓における発現遺伝子と代謝産物解析を中心に報告する。大規模シークエンスで得られた遺伝子の相同性解析イルミナ解析で得られていたデーターを基に相同性解析を行ってきたが、既知の遺伝子データーバンクを用いた相同性解析で得られる遺伝子数は少なく、大部分はunknownの遺伝子であった。また、このunknownの遺伝子(タグ配列を除いた遺伝子は22塩基)を用いて相同性解析をしても困難であるため、再度400塩基から700塩基に渡る大規模シークエンスにかけることにした。現在解析中である。メチオニンとヒストンのメチル化量解析今回、遺伝子組換えアマゴとそのコントロールからヒストンタンパクの抽出を行い、ヒストンタンパクのメチル化量をエライザーにより計測したが、良好な結果を得られなかった。しかし、並行して行ったLC-MS/MS解析の結果、どの部位がどれだけメチル化、またはアセチル化されているのかを調べることが出来た。マイクロアレイとiTRAQ法による比較定量トランスクリプトームとプロテオーム解析GHは脳下垂体前葉から合成・分泌され、成長を司るホルモンである。そのため、このGH遺伝子組み換えアマゴの脳下垂体でどのようなことが起きているのかを知ることは重要な研究課題であった。脳下垂体ペプチドをiTRAQタグで標識し、分画したものをMS/MS測定したところ、45,305のスペクトルが測定され、2,345種類のタンパク質が同定された。そのうちの約10%にあたる188種類のタンパク質がHomo,Hetero,Non-Tg+GHの実験群いずれか(もしくはすべて)で発現変動がみられた。発現変動があったタンパク質同士の相互作用をネットワーク解析で調べた結果、iTRAQ解析で発現が変動していたタンパク質の約7割が変動タンパク質同士で相互作用を持つことが明らかになった。これらの結果は今年Joumal Proteomicsに発表することが出来た。アメリカでは短期間で成長するGH遺伝子組み換えサーモンがFDAの認証が得られ、いよいよ我々日本人の口に入る可能性が出てきた。特にTPPへの参加が表明されたことで、このことが現実化してきた。我々は養殖研究所で同じサケ科魚類であるアマゴを用いて、巨大成長を示すGH遺伝子組換えアマゴを作り出してきている。しかし、この遺伝子組換え魚は外面的な形態のみならず、臓器の形態などにも異常を示すことが判っている。以前の実験結果から、実験に供した全ての検体(N=10)で肝臓や心臓などに著しい形態異常が起きることを示している。更に、魚の脂質代謝系や糖代謝が大きく変化していることも明らかになってきた。しかし、実際に人間にとっての魚の安全性の評価の視点からは魚の可食部位での解析が最も重要となる。そのため、今までの解析結果から、特に大きな問題があると思われる代謝物質や遺伝子発現などの食品の安全性に注目して、主な可食部位である筋肉に焦点を絞り解析を行った。そのため、GH遺伝子組換えアマゴ(ヘテロ)とサイズコントロール(各3匹)の2群の筋肉を取り出し、成分分析(水分、タンパク質、脂質、炭水化物、灰分)とエネルギーの分析、脂肪酸の不飽和度、コレステロール含量、トランス脂肪酸含量の測定を行った。その他にもマイクロアレー解析、2D-DIGE解析やメタボローム解析も行い、GH遺伝子組換えアマゴとコントロールとの差異を調べた。更にCE-TOFMSを用いて肝臓や筋肉の代謝産物解析を行った。その結果、ばらつきが大きいがGH遺伝子を組換えたアマゴとそのコントロールの肉質では特定の差異があることが明らかになった。肝臓からのアゼチジン-2カルボン酸の分離精製と構造解析MSによるメタボローム解析の結果からアゼチジン2-カルボン酸が体内で合成されていることがTOFMSで示されている。更に、NMRでの構造解析を試みるために、大量精製を試みたが肝臓に大量に含まれていないため、TLCやカラムでの大量精製は困難であった。また、以前からの懸案であった、餌の中のアゼチジン2-カルボン酸の有無に関して、LC-MS/MSによる解析を行った結果、アマゴ飼育に使われている試料の中にはアゼチジン2-カルボン酸は検出できなかった。そのため、餌にはアゼチジン2-カルボン酸はほとんど含まれていないと考えられる。

臓器の形態形成と病気に関連する遺伝子の発現量解析1ControlとGH transgenic肝臓の形態観察を行った結果、Control肝臓の腹側面、背側面は共に滑らかで楕円形の単葉構造だった一方、GH transgenic肝臓の腹側面には凹凸が多く見られ、多角形または分裂葉のような形態だった。また肝臓の背側面については、表面に不自然な亀裂が走っていた。そして、GH遺伝子組換えの全サンプル中にControlのような形態をした肝臓は見られなかった。このことから肝臓の形態変化には細胞接着分子や細胞骨格の遺伝子発現に変化があることが予測された。イルミナ解析のデーターからはCadherinやIntegrinなど細胞接着分子関連遺伝子の発現に大きな変化は見られなかった。しかし、ある重要な遺伝子が抑制されているため、この遺伝子により肝臓全体の歪みにつながったと考えられる。223年度に行われたイルミナやハイセックによる遺伝子解析が終了した。これらの遺伝子を全てblast解析にかけ、GH組換え体のホモ、ヘテロの中でコントロールに較べて100倍以上発現しているものを上位100個選抜し、再解析を行った。26年度が最終年度であるため、記入しない。分子生理学26年度が最終年度であるため、記入しない。大規模シークエンスはやり直しをしているが、方法などを大幅に変更しているため順調に動いている。そのため、今までより良い結果を得られるはずである。また、ヒストンタンパクに関しては既に解析が終了し、予想以上のデーターを得ることが出来た。また、この研究と並行して行っていた脳下垂体のトランスクリプトームとプロテオーム解析の結果を論文として発表できたため、大きく研究が進展したと考える。研究を展開しているうちに全く新しい発見がなされることは良くあることである。今回、我々もGH遺伝子組換えアマゴの研究を行っている中で、ある条件下で作製された遺伝子組換え魚はその他のGH遺伝子組換え魚と代謝系が大きく異なることが明かになった。この事は今回の研究の中で明らかになったため、同時に展開していた可食部位に関する研究の一部では代謝系が大きく異なる組換え魚もGH遺伝子組換え魚として一緒に解析してしまったことを意味する。そのため、より正確なデーターを得るためには再度実験を立ち上げる必要があると思われる。1成長ホルモン(GH)遺伝子組換えアマゴの肝臓での発現遺伝子解析の結果から、遺伝子組換えアマゴのホモ、ヘテロ、そしてコントロールの肝臓で発現している遺伝子をイルミナやハイセックにより解析し、遺伝子組換えにより全遺伝子の発現を知ることが出来た。これらは全遺伝子の発現量、そして、均一化ライブラリーを作り、それらのデーターを重ね合わせることにより、遺伝子の全長解析も行うことが出来た。これにより、ほぼ全ての遺伝子の全長ライブラリーとそれらの発現量の比較が出来た。2代謝解析では、メタボローム解析などにより成長ホルモン遺伝子組換えアマゴのホモ、ヘテロ、そしてコントロールの肝臓での代謝全体が明らかになった。
揮発性麻酔薬の虚血心筋保護作用におけるユビキチン・プロテアソーム系の役割の解明

Ubiquitin-proteasome system (UPS)はシグナル伝達などの生命現象に関わっている。我々は揮発性麻酔薬による虚血心筋保護作用を報告して来た。この作用におけるUPSの役割を検討した。揮発性麻酔薬投与群では虚血再灌流後の心機能回復が良好であり、心筋組織の免疫組織化学染色ではミオグロビン陰性細胞が少なく、Ubiquitin染色強度が有意に高かった。電子顕微鏡ではオートファゴゾームが多く見られ、特にコントロール群では麻酔薬投与群よりオートリソソームが多く消化段階での遅延が示唆された。この結果はUPSがオートファジーと密接に関連して虚血心筋細胞保護に働いていると考えられた。Ubiquitin proteasomesystem (UPS)はリソゾームを介さない細胞内の異常タンパク質を処理する経路である。オートファジーがミトコンドリアなどの大きな細胞内器官をリソゾームを介して貪食するのに対して、小さいタンパク質はUPSにより修飾を受け分解される。近年、ユビキチン修飾がエンドサイトーシス・DNA修飾・翻訳調節・シグナル伝達などさまざまな生命現象に関わっていることが判明している。本研究の目的は、臨床で用いられる揮発性麻酔薬の心筋保護作用におけるUPSの役割を明らかにし、全身麻酔時における周術期心筋保護に最も有効な麻酔方法の確立を分子生物学的手法を用いて解明することである。今年度は以前よりのテーマである揮発性麻酔薬の虚血心筋保護作用におけるオートファジーの役割と心筋保護にアデノシンを介して関与するdipyridamoleに関しての研究を継続して行った。Ubiquitin proteasomesystemはオートファジーと密接な関係があり、まずオートファジーの役割を詳細に解明する必要があった。その結果、セボフルランはオートファジーを増強することにより細胞の生死に大きく関与するmitochondrial permeability transition pore (MPTP)の開口を阻止することが判明した。また、dipyridamoleの心筋保護効果は投与中止後も3日間は持続し、この効果にはAktおよびendothelial nitric oxide synthaseのリン酸化増強が関与することが判明した。今年度は研究代表者である宮前の所属機関変更に伴い、研究設備の設置、実験体制作りに時間を要したため十分な研究実績を出すことが難しかった。次年度は鋭意努力し実績を作る予定である。共同研究者である竹村との研究はある程度成果が出ている。小さな蛋白質を処理するユビキチン・プロテアゾーム系と大きな細胞内器官をリソゾームを介して貪食するオートファジーは密接な関係にある。そこで、心筋のオートファジー反応が糖尿病1型と2型で異なることを報告した。Streptozotocinで誘導した1型及びdb/db 2型糖尿病マウスを用い、心機能(拡張能)とオートファジーの指標であるLC II/I比、cathepsin D、AMP-activated protein kinase (AMPK) activityおよび心筋組織を電子顕微鏡にて検討した。オートファジー阻害剤であるchloroquineを投与すると1型糖尿病では心筋拡張能が悪化した。2型糖尿病では1型に比べautophagic vacuolesがたくさん見られるにもかかわらず、LC II/I比、cathepsin D、AMPK activityは低下し、リソゾームはほとんどみられなかった。これらは2型糖尿病ではオートファジー反応が消化の最終段階で抑制されていることを意味する。一方、オートファジーの増強剤であるresveratrolの投与では心筋拡張能は改善し、1型糖尿病ではオートファジー反応は増強されていたが、2型糖尿病では抑制されていた。これらの所見は糖尿病性心筋症の生態病理の解明と新薬の開発につながるものである。研究代表者である宮前の所属機関変更に伴い、研究設備の設置、実験体制作りに時間を要したため十分な研究実績を出すことが難しかった。[目的]Ubiquitin proteasomesystem (UPS)はリソゾームを介さない細胞内の異常タンパク質を処理する経路である。本研究の目的は、臨床で用いられる揮発性麻酔薬(sevoflurane)の心筋保護作用におけるUPSの役割を明らかにし、全身麻酔時における周術期心筋保護に最も有効な麻酔方法の確立を分子生物学的手法により解明することである。[方法]モルモット灌流心で30分間の虚血後120分間再灌流(IR)を行った群(CTL, n=8)、CLTにSevo(2%)を虚血前10分間投与した群(SEVO, n=8)の2群を作製した。これらの群で再灌流後の左心室機能、梗塞サイズ(IS)を比較した。また、虚血再灌流後に心筋を採取し、ubiquitinとUPSと密接な関係があるオートファジー関連蛋白質(LC3、p62)を免疫組織染色法にて検討した。[結果]ISはSEVO群でCTL群に比べて有意に縮小した。免疫組織染色ではSEVO群ではCTL群に比べてミオグロビン陰性細胞が有意に少なく、ubiquitin, LC3の染色強度が有意に強かった。また、p62は両群で染色強度は強かった。[考察]

心筋虚血再灌流前にsevofluraneを投与することによりオートファジーとともにUPSも増強され、これが虚血心筋保護に関与していると考えられる。CTL群ではオートファジー消化段階での遅延が考えられる。研究代表者である宮前の所属機関変更に伴い計画は遅延している。このため研究期間の延長を申し出た。オートファジーが虚血心筋に対して保護的に働くのか傷害的かについては未だ意見の一致を見ていない。我々の今年度得られたデータからは明らかに保護的であることが判明した。同様にUPSについても詳細には判明していない。今回の免疫組織染色法によるubiquitin染色強度増強からはsevofluraneによりUPSの亢進が考えられ、目的の一部は達成できたと考えている。[目的]Ubiquitin proteasomesystem (UPS)はリソゾームを介さない細胞内の異常タンパク質を処理する経路である。オートファジーがミトコンドリアなどの大きな細胞内器官貪食するのに対して、小さいタンパク質はUPSにより修飾を受け分解される。近年、ユビキチン修飾がシグナル伝達などさまざまな生命現象に関わっていることが判明している。本研究の目的は、揮発性麻酔薬(sevoflurane)の心筋保護作用におけるUPSの役割を明らかにし、周術期心筋保護に最も有効な麻酔方法の確立を分子生物学的手法により解明することである。[方法]モルモット灌流心で30分間の虚血後120分間再灌流を行った群(CTL, n=8)、CLTにSevo(2%)を虚血前10分間投与した群(SEVO, n=8)の2群を作製した。これらの群で再灌流後の左心室機能、梗塞サイズ(IS)を比較した。また、虚血再灌流後に心筋を採取し、今年は電子顕微鏡を用いたオートファゴソームの出現頻度をubiquitinの染色強度、蛋白aggregationについて各群で比較検討した。[結果]ISはSEVO群でCTL群に比べて有意に縮小した。電顕によるオートファゴソームの検討ではCTL群で有意に多く観察され、SEVO群では少なかった。免疫組織染色ではSEVO群ではCTL群に比べて有意にubiquitin染色強度が高かった。また、蛋白aggregationは各群で差は見られなかった。[考察]心筋虚血再灌流前にsevofluraneを投与することによりオートファジーとともにUPSも増強され、これが虚血心筋保護に関与していると考えられる。昨年度の結果(CTLでのp62の染色強度増強)を考慮すると、CTL群ではオートファジー消化段階での遅延が考えられ、SEVO群ではこの改善にUPSが関与している可能性が考えられる。Ubiquitin-proteasome system (UPS)はシグナル伝達などの生命現象に関わっている。我々は揮発性麻酔薬による虚血心筋保護作用を報告して来た。この作用におけるUPSの役割を検討した。揮発性麻酔薬投与群では虚血再灌流後の心機能回復が良好であり、心筋組織の免疫組織
各種尿蛋白分析法による腎組織障害部位並びに悪化・治癒判定基準の確立

過去ノ5年間にわたり、種々の腎疾患患児の尿蛋白分析、ならびに沈渣赤血球形態についての分析を行ってきた。また腎生検と施行した症例については蛋白尿の分析結果と併せて腎組織像との対比についても検討を行ってきた。これらの分析結果より、蛋白尿の多寡に拘らず腎組織像の推定がほぼ可能であるという結論に達した。しかし、小児期の蛋白尿には、いわゆる体位性蛋白尿が高頻度(15%-30%)に存在するため、これらを除外する採尿条件を考慮する必要があり(例えば、患児を安静後30分60分後の検体と用いることなど)これらを検討した上での判定が極めて大切であるとの結論に達した。今後、蛋白尿の分析結果と併せて、血尿の形態の分析(非糸球体性、糸球体性)や、尿検体を用いた非侵襲的方法にて腎組織像の悪化進展や治療への反応性、治癒判定の推定が可能かどうか、さらに検討を行う予定である。本年度は、まず、昭和52年度以来今日まで行ってきた各種腎疾患患児の新鮮尿について、セルロ-ズアセテ-ト膜電気泳動法により尿蛋白分析を行い、図1のごとき分類を行った。(図1)まず、尿蛋白分析パタ-ンより検討を加えた。1;視察的評価ーまず、図1のごとく4群に分類し、さらに各群ともa,b群の亞型に分類した。2;次に尿蛋白分析値より腎組織所見の推定が可能かどうかについて検討した。ii)小児の場合、蛋白尿単独例の症例中には、体位性蛋白尿症例が極めて多く存在し、かつ腎炎径過中の患児尿の分析にて、体位性蛋白尿パタ-ンと極めて類似するパタ-ンを示すことが知られており、この両者について尿蛋白分析像での差異について検討を行う予定である。iii)IIIa、IIIbのいわゆるNephritic patternについては、次年度に組織所見との相関について検討予定である。iv)IVa、のTubular patternについては、既に我々が初めて報告した“特発性遺伝性尿細管性蛋白尿"に特有な蛋白泳動像として認めており、現在まで全国より60数例に及ぶ症例を集績し、現在検討中である。次年度は、本法を用い、腎疾患治療期の尿と腎疾患の既往のない体位性蛋白症例の尿蛋白分析にて両者の鑑別が可能かどうか、また、組織学的治癒判定が可能かどうか検討を行う予定である。過去15年間にわたり、種々の腎疾患患児の尿蛋白分析、ならびに沈渣赤血球形態についての分析を行ってきた。しかし、小児期の蛋白尿には、いわゆる体位性蛋白尿が高頻度(15%-30%)に存在すめため、これらを除外する採尿条件を考慮する必要があり(例えぱ、患児を安静後30分60分後の検体と用いることなど)これらを検討した上での判定が極めて大切であるとの結論に達した。
スマート超音波システムを用いた癌患部の自動ＨＩＦＵ治療

現在のHIFU治療で用いられる超音波プローブは焦点距離が固定されており,焦点をあわせるには機械的な操作を行う。焦点位置を電子制御することが出来るデバイスがあれば、患者や医師の負担が小さくなる。提案したフレネルゾーンプレート方式による超音波音場の制御では単一の電気信号さえあれば,焦点位置を自由に制御することが可能である。フレネルゾーンプレートの配列パターンを変化させることによって、焦点の位置を深さ方向および角度方向に変化させることができることをコンピュータシミュレーションで確認した.3次元超音波撮像の高速描画について大きな成果を得た。これまで、市販のものでは描画速度は0.5[vol/s]であった3次元超音波画像の描画速度を、本研究では4[vol/s]まで引き上げた。演算をC言語記述からHDLに変換してFPGAに実装した。シミュレーションと実測の結果、GPGPU以上の速度が期待できることを確認した。Impulse C/CoDeveloperを用いて設計した。シミュレーションではボリュームレートが約4.098[vol/s]となり、本研究で行ってきた従来の描画方法であるCPUのみのシステムでのボリュームレート約0.134[vol/s]に対し約30倍、OpenMPを用いて並列化を行ったシステムのボリュームレート約1.403 [vol/s]に対し約3倍、GPGPUを用いたシステムのボリュームレート約0.426[vol/s]に対し約10倍の高速化が見込めることを明らかにした。Impulse C/CoDeveloperを使用してHDLコードを生成したが、今回はハードウェア化で一般的に行われる固定小数点化等の効率化を行っていない。このため、現在FPGA上に実装してある相互相関プロセスよりさらに高速に動作する回路が作成可能であると考えられる。フレネルゾーンプレートの配列パターンを変化させることによって、焦点の位置を深さ方向および角度方向に変化させることができることをコンピュータシミュレーションで確認した.リニアアレイトランスデューサにフレネルパターンを適用し、超音波を任意の位置に集束できるのかを実験的に検証した。集束点の位置をコントロールすることには成功したものの、焦点における超音波強度が足りず細胞を死滅させるために十分な温度上昇を得られなかった。十分な温度上昇を得るために超音波素子を増加させることを考え、2Dアレイトランスデューサを用いた。このアレイを用いた音場形成シミュレーションを行った結果、焦点でのエネルギーは上昇し、細胞死滅に十分なエネルギーが得られることが分かった。生体模倣材料の作成を行った。寒天とグラファイトを混入することにより音響特性のコントロールを試みた。音速の変化は非常に小さく、グラファイト粉末の重量濃度には、ほとんど影響を受けないことがわかった。減衰定数は、寒天にグラファイトを混入させることで高くなることがわかった。また、人体の減衰定数の範囲は0.52(dB/cm)と言われており、測定結果と比較すると非常に近い値が実現できていた。これらにより、減数定数は人体に近い値にコントロールすることが可能であることがわかった。また、凹面トランスデューサを用いて集束超音波を生成し、寒天製ファントムにおいて局所加熱と温度検証の計測を行うことができたため、今後の加熱実験に生体模倣材料として使用することができ、実際の人体での効果を正確に予測できる。二次元超音波アレイを用いた音場制御と3Dイメージングの組み合わせによる、超音波の診断治療応用の研究を行った。音場制御によるHIFU応用技術についてはアレイ長が10cmの1MHzの超音波プローブを使った場合、プローブの機械的な操作を行わずに各プローブのONOFF制御だけを行って、超音波エネルギーをの焦点を上下左右に3cm移動させることに成功した。この時、焦点のエネルギーは細胞を死滅させるには不十分で、少なくとも2倍のエネルギーが必要であることが分かっており、HIFU応用を行うにはさらに改善が必要と言える。しかしながら、焦点の移動を容易に行えることが分かったことは大きな成果で今後のHIFU治療への応用の可能性を示したといえる。また、診断の研究は主に画像再構成の高速化の研究を行っており、並列計算の効率化や専用ハードウェアの設計などを行った。現在のイメージングシステムは送信素子64個、受信素子64個で構成されており、このアレイ条件ではスループットがおよそ0.1vol/s程度であったが、マルチコアCPUを用いた並列計算やGPGPUを用いた並列計算、さらには専用ハードウェアとしてFPGAを用いることによって、スループットを最大で4vol/sまで上昇させることができることが確認できた。これまで、本手法はエコー情報取得のサンプリングレート5000vol/s以上と非常に優れていたが、診断中実際にディスプレイに表示される速度は非常に遅かった。今回の研究によって、1秒間に4回の更新ができることが分かり、現場で利用するものとして現実性が出てきた。本研究ではこれらを組み合わせることを考えていたが、個別にブラッシュアップするところまでが成果となった。超音波工学本研究は超音波撮像とHIFUの二つのデバイスの制御を行う必要がある。超音波撮像に関しては描画速度の遅さとダイナミックレンジ、HIFUデバイスに関してはエネルギー不足の三点が改善すべき事象として挙げられている。このうちのエネルギー不足の問題に関して1年目に対応を開始し、デバイスの仕様を決定した。

また2年目には描画速度を改善し、高速で画像を確認できる方法を提案することができた。また、この成果をもとに超音波素子の個数を増加させることによってダイナミックレンジの向上も期待できる。最終年度にシステムの統合をするための条件がそろってきている。リニア(線上)アレイによる実測では超音波の集束点をコントロールできることを確認できたものの、そのパワー不足が露呈した。この点を解決することが必要である。このことを解決するための方法として、本申請書にも明記した逆位相出力による素子数の増加および、2Dアレイへの拡張により対処ができることがシミュレーションによって明らかになっている。本年度の目標の焦点コントロールおよび、エネルギーの算定について予定通り研究が遂行されていると判断できる。実験によって明らかになったHIFUデバイスの仕様を満たす素子開発を行い、コンピュータシミュレーションによって明らかにした高速超音波撮像システムのハードウェア設計を行い、二つのシステムを統合する。特に超音波撮像システムのハードウェア設計はそのテーマだけでも十分学術的に価値が高く優先的に行いたい。24年度の計画が申請書通りに実行されているため、25年度も申請所通りに計画を遂行する予定である。具体的には超音波パワー不足の解消ためのハードウェア開発と、焦点コントロール用制御用プログラムの開発となる。ハードウェア開発に関しては仕様がシミュレーションによって、決定されているため、外注可能かどうかを各超音波素子メーカに打診する。場合によっては研究室で作成することも考える。また、制御用ブログラムは超音波素子を直接コントロールする前に素子数分のスイッチをコントロールすることができるものを作成し、その後に超音波素子と連動するように実装する。25年度ではデータ受信用ADCの受信CHを当初の予定よりも少なくして、システムが稼働するかどうかを確認するにとどめたため、予算を繰り越すことになった。25年度に用意したベースのADCに、26年度には予定通りのCH数にするためにモジュールを増設するために予算を使用する。超音波素子の製作やその制御用スイッチに研究費の大部分を使用することになると考えられる。同時にこれまでの成果発表を国際学会を始め国内の学会等で発表していくため、それら参加費、旅費等に予算を使用する。
付着歯肉に特異的に発現 する遺伝子.蛋白の同定 とその機能解析

付着歯肉特異的遺伝子の同定を目的に,ラットの付着歯肉および可動粘膜から間葉細胞を採取し,機能解析を行った.その結果,可動粘膜由来間葉細胞の方が,付着歯肉由来のものと比較し,細胞接着,増殖,遊走能は有意に高かった.次に,PFA固定にて固定されたこれらの線維芽細胞上にヒト上皮細胞株を播種し,上皮細胞の角化に与える影響を検討した.その結果,付着歯肉由来間葉細胞上で培養した方が有意に上皮細胞の角化は促進された.以上の結果より,間葉細胞の接着因子が上皮の角化を制御していることが明らかとなった.現在,cDNA microarrayのデータと照らし合わせ,網羅的に解析している.付着歯肉特異的遺伝子の同定を目的に,ラットの付着歯肉および可動粘膜から間葉細胞を採取し,機能解析を行った.その結果,可動粘膜由来間葉細胞の方が,付着歯肉由来のものと比較し,細胞接着,増殖,遊走能は有意に高かった.次に,PFA固定にて固定されたこれらの線維芽細胞上にヒト上皮細胞株を播種し,上皮細胞の角化に与える影響を検討した.その結果,付着歯肉由来間葉細胞上で培養した方が有意に上皮細胞の角化は促進された.以上の結果より,間葉細胞の接着因子が上皮の角化を制御していることが明らかとなった.現在,cDNA microarrayのデータと照らし合わせ,網羅的に解析している.補綴物が長期にわたって安定して機能するためには,歯周組織の健康が欠かせない.なかでも,歯や補綴物の周囲に十分な付着歯肉が存在することは,過剰なメカニカルストレスから歯周組織を守るため,付着歯肉が不足している場合には,口蓋部などから遊離歯肉弁移植術などにより付着歯肉を補う手術が行われる.一方,遊離歯肉弁移植術において,付着歯肉を移動,縫合した際に再度付着歯肉が得られる事実を考え合わせると,移植組織自体に付着歯肉の形質を維持する能力が備わっているのか,あるいは,移植した付着歯肉から移植床に向かって何らかの因子が放出されていることが推測される.すなわち,術野に存在する細胞群が付着歯肉に分化成熟するメカニズムが明らかになれば,その因子を外因性に補ってやることで,可動粘膜を直接,付着歯肉に誘導することが可能かもしれない.そこで本研究では,付着歯肉特異的遺伝子の同定を目的に,以下の実験を実施した.初めに,Wistar系6週齢のメスのラットから実体顕微鏡下にて付着歯肉および可動粘膜の組織を採取し,それぞれの組織特異的に発現しているkeratin4,keratin10,keratin15,keratin17,MMP12(上皮系マーカー)およびElastin(間葉系マーカー)の遺伝子発現レベルを定量性RT-PCR法にて定量した.その結果,これまでの報告通り,採取した付着歯肉は可動粘膜と比較し,keratin10,keratin17,MMP12,Elastinの遺伝子発現量は高く,keratin4,keratin15の遺伝子発現量は,低かった.つまり,付着歯肉および可動粘膜を分離し採取できていることがわかった.現在, out growth法にて付着歯肉,可動粘膜の間葉組織から線維芽細胞の採取を行なっており,今後,付着歯肉および可動粘膜由来線維芽細胞の性質の違いを明らかにしていく予定である.歯や補綴物の周囲に十分な付着歯肉が存在することは,過剰なメカニカルストレスから歯周組織を守るため,付着歯肉が不足している場合には,口蓋部などから遊離歯肉弁移植術などにより付着歯肉を補う手術が行われている.一方,付着歯肉と可動粘膜は連続した組織であるが,全く違った性質を有しており,その発生メカニズムや付着歯肉への分化誘導遺伝子は未だ明らかではない.そこで平成25年度は付着歯肉特異的遺伝子の同定を目的に,Wistar系6週齢のメスのラットから実体顕微鏡下にて付着歯肉および可動粘膜の組織を採取し,それぞれの組織特異的に発現しているkeratin1,keratin4,keratin10,keratin13(上皮系マーカー)およびElastin(間葉系マーカー)の遺伝子発現レベルを定量性RT-PCR法にて定量した.その結果,これまでの報告通り,採取した付着歯肉は可動粘膜と比較し,keratin1,keratin10の遺伝子発現量は高かった.つまり,付着歯肉および可動粘膜を分離し採取できていることがわかった.そこで今年度は, out growth法にて付着歯肉,可動粘膜の間葉組織から線維芽細胞の採取を行ない,細胞のフェノタイプを確認した.その結果,可動粘膜由来歯肉線維芽細胞の方が,付着歯肉由来のものと比較し,細胞接着,増殖,遊走能は有意に高かった.次に,PFAにて固定されたこれらの線維芽細胞上にヒト上皮細胞株を播種し,上皮細胞の角化に与える影響を検討した.その結果,付着歯肉由来線維芽細胞上で培養した方が有意に線維芽細胞の角化は促進された.以上の結果より,間葉細胞の接着因子が上皮の角化を制御していることが明らかとなった.現在,cDNA micro arrayにて付着歯肉由来線維芽細胞および可能粘膜由来歯肉線芽細胞の違いを網羅的に解析している.26年度が最終年度であるため、記入しない。歯科補綴学26年度が最終年度であるため、記入しない。

現在,遊離歯肉および可動粘膜の分離を正確に行うことができている.また,これらの組織から線維芽細胞の単離に成功しており,概ね実験は順調に進んでいるといえる.来年度は,単離に成功している遊離歯肉および可動粘膜由来線維芽細胞の特性を細胞生物学の観点から明らかにする.また,現在,間葉組織が上皮組織に角化,非角化に関与していると考えているため,これら間葉組織由来線維芽細胞と上皮細胞を共培養し,上皮細胞の角化与える影響を詳細に検討する.これらの実験がうまく言った場合は,これらの間葉組織由来線維芽細胞の違いをcDNA micro arrayにて明らかにし,どの遺伝子が上皮の角化に関与しているかを明らかにしていく予定である.
乾燥破壊パターンの動的スケーリングとその応用

粉体-水混合ペーストなどを乾燥させてできる乾燥破壊パターンは、乾燥のさせ方の履歴に依存して時間発展し、その統計的性質である平均破片サイズや破片サイズ分布などは時間に依存して変化する。特に、時間変化する破片サイズ分布は、平均サイズでスケールする事で時間に依らない分布形へ収束していく事(動的スケーリング則)が知られている。我々は乾燥破壊パターンの時間発展を連続体モデルや確率モデルを使って調べ、破片サイズ分布の時間発展の性質を調べた。本年度はこれらの成果を纏めた論文を2報投稿しそれぞれ受理された。そしてさらなる研究として、確率モデルの詳しい解析と実際に乾燥破壊実験を行なって、理論と実験のそれぞれの破片サイズ分布を比較し、理論の妥当性を議論した。我々はGibratの確率モデルを拡張した確率モデルを考案し、そこに連続体モデルから計算される破片の寿命を取り入れ、乾燥破壊パターンの破片サイズ分布の時間発展を表現するモデルを構築した。そして、その確率モデルのマスター方程式を詳しく解析し、モデルパラメーターと破片サイズ分布関数形の定量的な関係付けを行なった。そのパラメーターと分布形の関係が実際の乾燥破壊実験での亀裂パターンでもあわられるかどうかを検証する為、炭酸水酸化マグネシウム粉体と純水の混合ペーストを用いた乾燥破壊実験を行なった。結果として、実験で得られた破片サイズ分布の関数形は理論が予測する関係を部分的に満たし、乾燥履歴は破片サイズ分布の関数形に残される事が分かった。我々の現段階までの結果は、実測においてパターンの時間発展を追う事が出来なくても、動的スケーリング則と合わせて考える事で、破片サイズ分布の関数形から乾燥履歴を読み取る事ができる事を示唆している。この成果は論文に投稿する予定である。26年度が最終年度であるため、記入しない。我々は乾燥破壊パターンの統計的ダイナミクスに関する研究を行っている。これまでに実験において終状態のパターンの報告がほとんどであったが、実際はその統計的性質は乾燥の進行と共に変化する。乾燥破壊の時間発展の統計的性質を調べる事は破壊の予測・制御の面で重要な知見となる。我々は連続体シミュレーションにより、乾燥破壊パターンの破片分布の時間発展を調べ、その時々刻々と変化する破片分布は平均面積の時間発展のみでスケールできる事を示した。これを我々は破片分布の動的スケーリング則とよんでいる。これは破片分布の時間発展の性質は平均面積の時間発展の性質にすべて集約されている事を意味する。本年度で、我々はこのスケーリングの理由の確率モデルの解析による模索と、実際の乾燥破壊において破片分布の動的スケーリング則が観測されるかどうかの実験を日本大学で行った。前者では、マルコフ化した確率モデルのマスター方程式を導出し、スケーリング解析から、収縮により内部で増加する応力が時間のべキ関数であれば動的スケーリング則がペーストの物性パラメータによらず普遍的に成り立つ事が分かった。後者では、炭酸カルシウムの粉末と純水の混合ペーストを使って、粉の体積分率を系統的に変化させて乾燥破壊させて実験を行った。炭酸カルシウム粉末ペーストは乾燥前に揺すった方向を記憶するという性質を持つ事が知られている。揺すった後に乾燥させると、最初に揺すった方向に垂直に層状な亀裂が生じ、その後あみだ状に亀裂が生ずる。揺すらないで行った実験では、初期の亀裂イベントで亀裂が終状態となってしまい、破片の分割過程を観測する事が困難である事が分かった。揺すった実験での層状亀裂後に発生するあみだ状亀裂では亀裂発生イベントが比較的遅く、破片分割過程を観測できる事があった。この時は破片分布の動的スケーリング則は成立している事を確認した。

理論解析は十分に行えたが、実験はサンプル数が少なく十分な解析が行えなかった。しかし系統的に炭酸カルシウムの乾燥破壊の性質を調べる事ができたので、この評価とする。今後は当該年度で行いきれなかった実験を行う。炭酸カルシウムだけでなく、コーンスターチ等でも動的スケーリング則が成り立つかを確認する。理論計算においては、破片形状の扁平を考慮した確率モデルの計算を行い、より定量的な実験との比較を可能にしていく。
開かれたカリキュラム評価の理論と方法の開発

研究の内容は大きく二つに分けられる。ひとつは、日本における諸外国のカリキュラム評価研究(厳密な効果か教師個人の即興的な意思決定かといった摂取の仕方)を批判し、再創造することである。もうひとつは、、学校や学年やコースといった中間レベルにおけるカリキュラム評価に資する、具体的な方法の開発である。とりわけ、学校や学年やコースといった集団内における、目標と評価基準に言及する言語が生成し定着する過程の解明である。
文学作品における「熟考・評価」の力を高める評価テストの開発

本研究の目的は、国語科教育において、小学校の読書活動での読む力のうち、「熟考・評価」の力について分析し、その力を高めるための評価テストを開発することである。1研究の内容(1)感想の調査と分析子どもの読みの反応についての先行研究を基に、小学校3年生と6年生を対象とし、『泣いた赤おに』(浜田廣介作)を結末が対照的な『お手紙』(アーノルド・ローベル作)と比べ読みさせ、類似点・相違点と好きなテクストの理由の書き方、『泣いた赤おに』の登場人物、人物関係に対する感想の変容について分析した。(2)比べ読みの実践小学校3年生を対象とし、教科書教材『サーカスのライオン』と『やさしいライオン』(やなせたかし作)とを比べ読みさせ、「熟考・評価」の力を高めるための評価基準を作成し、評価の改善を図った。(3)「熟考・評価」の力を高める評価テストの開発『おにたのぼうし』(あまんきみこ作)について、作品の結末に対する評価、自分や他の本との比較、自分の在り方等について考えることを評価するテストを作成し、実施した。2研究の意義(1)3年生と6年生の比べ読みによる感想の分析結果により、評価基準作成の重要な手がかりをつかみ、今後の比べ読みの指導と評価の可能性を示すことができる。(2)比べ読みの実践を通して改善した評価基準は、文学作品を読むレベル、自分や他の本と関連付けるレベル、自分の生活や他の場面で応用するレベルを質的に評価することができるものである。これにより、従来区別されてきた国語科教科書の授業の「読解」と「読書」を統合し、読書で読解の指導と評価が可能となる。(3)調査、実践を基に開発したテストは、情報の取り出しを中心とする市販のテストでは評価されない「熟考・評価」の力を評価することができるものであり、児童の読む力を多角的に評価できるという点で重要である。
ミラーニューロンシステムからみた睡眠不足時の危険認知機能への影響と個体差の検討

本研究では,睡眠不足時の社会認知機能への影響について,機能的核磁気共鳴画像法(fMRI)を用いて検討を行った.社会認知機能の1つであるミラーニューロンシステム(MNS)と共感が関連する,脳の機能領域に着目し,痛みを伴う行動認知や表情認知刺激を用いた実験を実施した.その結果,睡眠不足時には情動に重要な役割を持つ島皮質において,痛みや恐怖の表情といったネガティブな刺激に対して強く賦活する事が明らかとなった.本研究では,睡眠不足時の社会認知機能への影響について,機能的核磁気共鳴画像法(fMRI)を用いて検討を行った.社会認知機能の1つであるミラーニューロンシステム(MNS)と共感が関連する,脳の機能領域に着目し,痛みを伴う行動認知や表情認知刺激を用いた実験を実施した.その結果,睡眠不足時には情動に重要な役割を持つ島皮質において,痛みや恐怖の表情といったネガティブな刺激に対して強く賦活する事が明らかとなった.本研究では,現代社会が直面している睡眠不足に対するヒトの不適応(ヒューマンエラーの増加)の問題に焦点を当てる.具体的には,睡眠不足時に低下すると思われる危険認知機能について,ミラーニューロンシステム(MNS)を用いて明らかにする事を目的とした.実験は,全断眠後の危険認知機能について,機能的核磁気共鳴画像法(fMRI)を用いて計測した.突発的な疼痛や危険を伴う行動場面を提示した際に活性化するMNSが,どのように修飾・阻害されているかを,個体差も含めて明らかにした.また,不安,うつ傾向,パーソナリティに関する主観的評価を行い,睡眠不足と個体差の関連を評価するために用いた.痛みを伴う危険な行動場面を観測した際に,充足睡眠時では,断眠時と比較して前帯状皮質や中側頭回が有意に賦活した.一方,断眠時では,充足睡眠時と比較して中心後回,中前頭回,島が有意に賦活した.さらに,断眠時には状態不安の傾向が高いほど,痛みを伴う行動場面に対して島が強く賦活する相関がみられた.本研究結果から睡眠不足によって,危険を伴う行動認知に対して,脳機能上に変化がみられる事が明らかとなった.また,その変化は心理的な指標と強く関連をもつ知見も得られた.今後は,内分泌系のコルチゾールやメラトニンとの関連や,時計遺伝子型との関連など,これまで睡眠不足との関連が示唆されている指標を個体差として総合的に評価した研究が必要であると考えられる.
食道・胃機能へのTRPV1, TRPA1の関与ー分子から欠損マウスの解析までー

マウス食道上皮でのTRPV4の発現を抗TRPV4抗体を用いた免疫組織学的解析およびRT-PCR法によって明らかにした。TRPV4様シグナルは、食道上皮最上層で強く観察された。マウス食道上皮細胞の培養系を確立し、野生型マウスから調整した培養食道上皮細胞において、TRPV4刺激剤GSK化合物による細胞内Ca^<2+>濃度上昇を観察した。また、パッチクランプ法を用いた解析によって、外向き整流性、陽イオン非選択性といったTRPV4に特徴的な性質を示す形質膜電流の活性化を観察した。この細胞内Ca^<2+>濃度上昇および膜電流の活性化はTRPV4欠損マウスから調整した食道上皮細胞では観察されなかった。シリコン膜上に培養した野生型マウス食道上皮細胞に伸展刺激装置によって機械伸展刺激を加えることによって細胞内Ca^<2+>濃度上昇とATP放出が観察されたが、TRPV4欠損マウス食道上皮細胞では機械伸展刺激を加えても、細胞内Ca^<2+>濃度上昇、ATP放出とも起こらなかった。小胞ATPトランスポーターVNUTを特異的抗体を用いて染色したところ、野生型マウス食道上皮細胞でTRPV4欠損マウス食道上皮細胞に比して強いシグナルが検出された。以上のことから、食道上皮細胞において機械刺激によってTRPV4が開口し、Ca^<2+>が流入してexocytosisを介してATP放出がもたらされているものと推定された。食道・胃機能へのTRPV1,TRPA1の関与を明らかにする目的で、食道でのTRPV1,TRPA1の発現を検討して、RT-PCR法でmRNAの発現を確認した。食道上皮細胞の培養系を確立して、TRPチャネル刺激物質への応答をCa^<2+>-imagingで検討したところ、予想されたように神経にその発現が限定されるTRPV1,TRPA1刺激物質への応答は観察されなかったが、4α-PDDの投与に対して細胞内Ca^<2+>濃度の増大が観察され、食道上皮細胞でのTRPV4の機能的な発現が観察された。TRPV4欠損マウスを研究室で保有していることから、マウスを使った個体レベルでの食道機能へのTRPV4の関与の検討を行う予定である。TRPA1の発現細胞はTRPV1発現細胞の真部分集合であると報告されていることから、TRPA1,TRPV1の機能連関が推測される。そこで、TRPV1とTRPA1の両方を発現させたHEK293細胞とTRPA1だけを発現させたHEK293細胞でTRPA1刺激物質AITCの応答をパッチクランプ法を用いて観察したところ、TRPV1を共発現した細胞でAITCによるTRPA1電流が有意に大きかった。このAITC依存性の違いは後根神経節細胞でも観察され、TRPV1欠損後根神経節細胞では、AITC感受性が有意に減弱していた。これに応じるように、TRPV1欠損マウスでは、野生型マウスに比べて、AITCの足底投与による痛み関連行動が有意に少なかった。2つの受容体が共発現する細胞では、機能増強が起こっているものと考えられた。
日本における現代的な財政調整制度の形成過程分析

本年度の前半は前年度に引き続き、1936年に制度化された日本における初めての一般補助金とされる臨時町村財政補給金について、当初2000万から始まったものの、1937年には1億円に増額されたが、この増額に関してはこれまで先行研究では、馬場税制改革の未実現に対する応急措置であったと指摘するのみであるので、そもそもこのような大きな増額が可能であった背景はなんであるかを明らかにするための研究をしてきた。しかし、1930年代においてもなお、農村部の最大の財政負担は依然、小学校教育費であった。つまり、これまでの先行研究では地方の教育費の負担が常に重かったとされてきたが、実態としてどのようにその教育費負担に対応してきたのかを検討する必要があった。そのために本年度の後半は研究対象を広げ、義務教育費の国庫負担要求のきっかけとなった、1908年からはじまった義務教育年限の延長の地方財政に与えた影響の再評価と、さらに同時期にそれまで各小学校区ごとに教育費を負担していた横浜市が、学区を廃止したことの歴史的意義の検討を進めた。以上のように、これまでより研究対象を広げたため、研究そのものは進んでいるものの、学会報告・論文投稿などの研究成果についてはその進捗が予定より遅れた。さらに資料収集については、本年度は国立国会図書館のみならず、より農村部に実態把握のために農政関係の資料が豊富な農文協図書館にも資料収集にいった。さらに横浜貿易新報など横浜関係の資料の収集のために、横浜開港資料館にも資料収集にいった。27年度が最終年度であるため、記入しない。平成26年度においては主に大きく2つの作業を行った。第1に1920年代の地方財政運営、とりわけ農村部である町村財政が、当時の中央政府との関係のなかでどのように運営されていたのかについての研究を行い、学会報告をした。第2に、新たな研究で使用する1次資料の収集と精読を行った。まず学会報告について整理する。これまでの財政史研究では戦前期の地方自治は概ね「官治的」な自治、が行われていたと指摘されてきたが、研究代表者は大正デモクラシー下において多様な地方の自治・財政運営が行われていたとの観点から、1920年代の町村における自治と政府間財政関係について検討した。当時の町村は第1次大戦以降の地方財政の膨張に対応せざるをえなかったため、国庫補助金が増額される一方で、戸数割の重課を強め、さらに足りない財源に対しては地方債発行を行っていた。このように地方の財源は地方でまかなうといった「古典的」自治の要素の強い町村財政運営が行われていた事実がある一方で、従来なされてきたような「古典的」あるいは「官治的」な自治のどちらが行われていたのか、といった議論ではとらえきれない地方自治の態様を研究し、日本地方財政学会において報告した。学会報告を通して得られたコメントなどをふまえて内容に修正を加え、学術雑誌に投稿するべく論文を作成をすすめた。次に、国立国会図書館や各大学図書館などにおいて資料収集を行った。昭和財政史資料、農政研究、帝国農会報などの膨大な資料を今年度、来年度において活用するべく調査、収集することができた。研究成果を学会で報告し、新たな論文作成のための資料収集を行うことができたことなど、研究計画と大きな相違のない進展があった。来年度は1930年代、つまり昭和恐慌期から高橋財政期・準戦時期をへて、1940年の地方分与税成立いたる時期を検討することになる。これにより戦前期の地方自治と政府間財政関係の関連を当該研究の観点から明らかにすることができると考えている。また、必要に応じてさらなる資料収集などを行う。
腸管マクロファージの分化・形質制御機構の解明

腸管に常在する組織マクロファージは、異なる機能を有する複数のサブセットにより構成されている。最近の報告で我々は、この腸管の組織マクロファージの中に、CD169分子を発現するサブセットが存在することを明らかにした。このサブセットは、腸上皮の傷害が起こると、腸上皮死細胞や侵入した腸内細菌をいち早く感知し、CCL8ケモカインを産生することによって、炎症を惹起する。CD169マクロファージは、特徴的な局在や機能を示すことから、固有の転写因子によりその性質が決定づけられていると推察されるが、その詳細は明らかになっていない。本研究では、腸管CD169マクロファージサブセットの分化や機能を制御する転写因子を明らかにする。