hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
光センシング用半導体素子の適用波長域を拡大させる新規材料と転位制御の研究

レーザガスセンシングに適用するための中赤外波長域のレーザ、LED、受光素子の実現を目指し、有機金属気相成長法(MOVPE)を用いた様々な材料、ヘテロ構造の作製、評価を行っている。今年度は伝導帯と価電子帯のバンド端がそれぞれもぐりこんだ形のヘテロ構造となるType-II型のInAs/GaSb超格子のMOVPE法による作製時の組成制御について実験的な検討を行った。中赤外波長域の利得、吸収波長をもつ超格子を作製するには、InAs層、GaSb層を1nm以下から10nm以上まで、様々な膜厚を制御し結晶成長する必要がある。その際に結晶成長炉内の残留ガスによる混晶化が問題になると考えた。具体的にはInAs層にV族のSbが混入し、InAsSbになることや、GaSb層にV族のAsが混入し、GaAsSbになることを想定した。InAsとGaSbの膜厚を1InAsのみを変化させたとき、2GaSbのみを変化させたとき、3InAsとGaSbの膜厚比を一定にして周期厚を変化させたとき、の3グループにわけて超格子を作製し、XRDを用いて周期厚と平均格子定数差を測定した。これに対して、成長炉内の残留ガスが時間に対して指数関数的に減少し、残留分が次の層の成長時に取り込まれると仮定したモデルを作成しこの時定数などをフィッティングパラメータとして実験結果にフィッティングして時定数と取り込まれる組成を算出した。これらの最適化により35ミクロン帯のフォトルミネッセンス発光強度が高い組み合わせを調べ、室温においても発光する構造を見出した。これは室温で動作する発光、受光デバイス実現に有望である。今後も計画通り、中赤外波長域をカバーする光源、受光素子を可能にする結晶成長技術の開発、デバイス作製による評価を推進する。
胚細胞変異体を用いたDNAミスマッチ修復蛋白hMLHIの機能解析

DNAミスマッチ修復(MMR)遺伝子、hMLH1の胚細胞変異は、遺伝性非腺腫症性大腸癌(HNPCC)の主要な原因である。また、その異常の約30%がミスセンス変異であるという特徴をもつ。そのため、これらのミスセンス変異が本当に病気の原因であるのか、それとも単なる多型なのかを評価することが重要である。本研究で、われわれは、これらの点を明らかにする簡便で効率の良いアッセイ法を開発することに成功した。まず、ICG-HNPCCのデ-タベ-ス(http://www.nfdht.nl)を検索し123種のhMLH1ミスセンス変異を選択した。次に、hPMS2あるいは、hEXO1をbaitとして、two-hybrid assayをおこなった結果、78%(18/23)で野生型に比べ、β-ガラクトシダーゼ活性の著しい低下を検出した。また、β-ガラクトシダーゼ活性の低下が見られなかった5つのミスセンス変異のうち、2つは多型であることが判明した。一方、すでに報告のある9種のアミノ酸の変化を伴う多型については、野生型とほぼ同じβ-ガラクトシダーゼ活性を示すことが明らかとなった。さらに、hPMS2との相互作用領域の一部あるいは、大部分を含む11種のフレームシフト変異、3種のナンセンス変異、1種のin-frame deletionについても解析をおこない、同様に、著しく低いβ-ガラクトシダーゼ活性を示すことを見出した。これらをまとめると、87%(33/38)のhMLH1胚細胞変異がtwo-hybrid assayによって評価できることになる。さらなる解析の結果、これらの異常は、hMLH1蛋白のN末およびC末での構造異常によるものであることが明らかになった。したがって、この方法はhMLH1胚細胞変異、特に、評価の難しいミスセンス変異の簡便で正確な診断を可能にする。われわれは、これらの胚細胞変異蛋白を用いて、hMLH1の細胞内における機能を明らかにすることを目的とした。hMLH1蛋白は、細胞内で別のMMR蛋白hPMS2をはじめ、メチルCPG結合蛋白MBD4、エクソヌクレアーゼEX01、ブルーム症候群原因蛋白BLMと相互作用することが知られている。本年度は、まず、これらの蛋白とhMLH1との相互作用部位を酵母の2ハイブリッドの系を用いて解析した。その結果、すべての蛋白がhMLH1のC末領域(390756番目のアミノ酸残基)で相互作用するごとを見い出した。次に、site-directed mutagenesisにより、40種のhMLH1胚細胞変異(25種のミスセンス変異を含む)と2種のアミノ酸の変化を伴う多型をcDNAに導入し、それぞれのhMLH1変異体および多型とhPMS2との相互作用を酵母の2ハイブリッドの系を用いて解析した。2種の多型では、2ハイブリッドアッセイの指標であるβガラクトシダーゼ活性は、元の正常なhMLH1 cDNAと同じ値を示した。一方、ナンセンス変異および、フレームシフト変異はすべてβガラクトシダーゼ活性の著しい低下を引き起こした。また、ミスセンス変異に関しては、全体の約2/3を占めるN末側とC末側の変異でβガラクトシダーゼ活性の著しい低下が見られた。in vitroのGST pull-downassayおよぴゲル移動度シフト法の解析から、hMLH1胚細胞変異蛋白によるβガラクトシダーゼ活性の低下は、単なるhPMS2との相互作用の異常だけでなく、N末側での構造変化がその主要な原因であることが明らかとなった。

さらなる解析の結果、これらの異常は、hMLH1蛋白のN末およびC末での構造異常によるものであることが明らかになった。したがって、この方法はhMLH1胚細胞変異、特に、評価の難しいミスセンス変異の簡便で正確な診断を可能にする。DNAミスマッチ修復(MMR)遺伝子、hMLH1の胚細胞変異は、遺伝性非腺腫症性大腸癌(HNPCC)の主要な原因である。また、その異常の約30%がミスセンス変異であるという特徴をもつ。前年度、39種のhMLH1胚細胞変異蛋白について詳細な解析をおこない、大部分の胚細胞変異は、hMLH1蛋白のN末、または、C末領域での構造異常を引き起こすことを明らかにした。本年度は、これらの結果を踏まえ、hMLH1の胚細胞変異、特に、アミノ酸の変異を伴うミスセンス変異が真に病気に関連する変異であるのか、それとも単なる多系なのかを正しく評価する方法として酵母の2ハイブリッドの系の有用性を検討した。MMR蛋白であるhPMS2、hEXO1をhMLH1の相互作用パートナーとして、2ハイブリッドアッセイをおこなった結果、23種のミスセンス変異のうち、18種(78%)でβ-ガラクトシダーゼ活性の著しい低下を見出した。また、β-ガラクトシダーゼ活性の低下が見られなかった5つの変異のうち、2つは多系であることが判明した。一方、すでに報告のある9種のアミノ酸の変化を伴うhMLH1の多系については、野生型とほぼ同じβ-ガラクトシダーゼ活性を示すことが明らかとなった。したがって、この方法はhMLH1変異の簡便で正確な診断を可能にする。また、hMLH1胚細胞変異の効果をヒト細胞で解析する系を確立するため、hMLH1のヒト欠損細胞株HCT116のゲノム上に単一コピーのlox部位を導入し、Cre-lox部位特異的組換えにより、外来プラスミドを染色体の同じ位置に、単一コピーで挿入する系を作製した。野生型のhMLH1 cDNAを含むプラスミドをこの系で挿入すると、MMR欠損の細胞株が修復可能な細胞株へと変化する。したがって、この系を用い、ヒト細胞でのhMLH1胚細胞変異の効果を解析することが可能となった。
農薬のトキシコキネティクスとその法医中毒学的応用

実験動物として犬を用い、中毒事例が多い農薬のうち化学的性質の異なる3種類の農薬(パラコ-ト、マラソン、メソミル)の薬動力学的パラメ-タ-を算出する実験を行い、各薬動力学的パラメ-タ-の法医中毒学的応用について検討した。静脈内投与後の血清中パラコ-ト濃度曲線を非線形最小二乗法により指数関数へあてはめを行ったところ、3-指数関数で示され、パラコ-トの体内での分布排泄は二つの末梢コンパ-トメントを持つ3-コンパ-トメントモデルで解析することができた。また、臨床的に重要な消失相におけるパラコ-トの半減期は約10時間内外であった。一方、マラソンとメソミルの血清中濃度曲線はパラコ-トの場合と異なり、1あるいは2-指数関数で示され、また、消失相における半減期はパラコ-トより早く、23時間であった。経口投与後の各農薬の生物学的利用率(bioavailability)は大きな個体差を認められたがパラコ-トでは約5%、マラソンとメソミルでは2%から20%と低く、これらの農薬の物理化学的性質あるいは吸収率の低さが関係していると思われた。特にマラソンとメソミルについては胃腸管内での分解が大きく寄与していると思われた。半減期は静脈弦与の場合と同様の値を示した。一方、中毒時を想定した大量経口投与の場合、パラコ-トではある程度の投与量依存性の変化が認められた。しかし、マラソンとメソミルの場合は投与量との間に明確な関連は認められなかった。今回の実験で得られたそれぞれのパラメ-タ-は法医学的な服毒量の推定や中毒患者の治療などの基礎資料となるものであるが、今後さらに組織中の薬物あるいは代謝物濃度などを調べさらに検討する必要がある。本年度は実際の中毒事例が多い農薬のうち化学的性質の異なる3種類の農薬を選び、薬動力学的パラメーターを算出する実験を行った。実験方法:実験動物として犬を用い、ネンプタール麻酔下で3種類の農薬(パラコート,マラソン,メソミル)を静脈内投与し、経時的に採血、採尿を行い、各農薬の血清中濃度曲線を求めた。なお、パラコートはSEP-PAK C18で精製後、高速液体クロマトグラフィーで、また、マラソンはケイ藻土カラムExtreluteで精製後、今回購入した炎光光度計検出器付きガスクロマトグラフで定量した。次に各血清中濃度曲線を既設のマイクロコンピュータで解析を行い薬動力学的パラメーターを算出した。なお、メソミルについては当初予定していた定量方法に問題があったため現在検討中である。血清中パラコート濃度曲線を非線形最小二乗法により指数関数へのあてはめを行ったところ、3-指数関数で示され、パラコートの体内での分布排泄は二つの末梢コンパートメントを持つ3-コンパートメントモデルで解析することができた。また、臨床的に重要な消失相におけるパラコートの半減期は約10時間内外であった。一方、マラソンの血清中濃度曲線はパラコートの場合と異なり、1あるいは2-指数関数で示され、また、消失相における半減期はパラコートより早く、23時間であった。体内で殆ど代謝されず主として腎臓から排泄されるパラコートと、加水分解などの代謝により体内から除去されるマラソンとの体内挙動の相違が2つの農薬の薬動力学的パラメーターの違いとして現れていた。一方、これらのパラメーターは投与量や生体の状態によっても変動し、その変動の割合は毒物の種類で異なっていることが予想される。現在、中毒時という特異な状況におけるこれらパラメーターの変化について検討中である。

前年度の静脈内投与実験に引き続いて経口投与実験を行い、薬動力学的パラメ-タ-を算出すると共に、実際の農薬中毒を想定した大量投与実験を行い、各薬動力学的パラメ-タ-の法医中毒学的応用について検討した。実験動物として犬を用い、実際の中毒事例が多い農薬のうち化学的に性質の異なる3種類の農薬(パラコ-ト、マラソン、メソミル)を投与量を変えて経口投与して経時的に採血、採尿を行い、各農薬を定量した。なお、パラコ-トはSEP-PAK C18で精製後、高速液体クロマトグラフィ-で、マラソンはケイ藻土カラムExtreluteで精製後、炎光光度計検出器付きガスクロマトグラフで定量した。また、メソミルはSEP-PAK C18で精製後、同様にガスクロマトグラフで定量した。次に各血清中および尿中農薬濃度を既設のマイクロコンピュ-タ-で解析を行い薬動力学的パラメ-タ-を算出した。中等量を経口投与後の各農薬の生物学的利用率(bioavailability)は大きな個体差が認められたがパラコ-トでは約5%、マラソンとメソミルでは2%から20%と低く、これらの農薬の物理化学的性質あるいは吸収率の低さが関係していると思われた。特にマラソンとメソミルについては胃腸管内での分解が大きく寄与していると思われた。半減期は静脈内投与の場合と同様の値を示した。一方、大量経口投与の場合の生物学的利用率は中等量投与の場合と同様に個体差が著しく、投与量との間に明確な関連は認められなかった。また、そのほかの薬動力学的パラメ-タ-についても投与量依存性の変化は認められなかった。しかし今回の実験で得られたそれぞれのパラメ-タ-は法医学的な服毒量の推定や中毒患者の治療などに応用できるものである。
生体安全化処理を施したチタン合金の審美性歯科補綴物への応用

生体安全性および機能性の高い審美性補綴物に応用するため、Ti-6Al-7Nb合金およびTi-15Mo-5Zr-3Al合金に電解処理を施し、その力学的信頼性ならびに耐食性の評価を実施した。その結果、両合金ともに高強度純チタンよりも有意に大きい曲げ強さを示し、Ti-15Mo-5Zr-3Al合金では有意に小さい曲げ弾性係数が得られた。また、チタン合金の耐食性は、電解処理による向上が認められた。Ti-6Al-7Nb合金、Ti-15Mo-5Zr-3Al合金およびコントロールの純チタンについて、歯科鋳造および機械加工の両面から試料の作製条件を検討した。その結果、Ti-15Mo-5Zr-3Al合金の鋳込み率が他の2種と比較して有意に低くなることが判明し、前装材との接合性評価において鋳造性の相違が影響してしまう可能性があるため、合金試料の作製条件は機械加工とした。また、チタン合金の表面処理として実施する電解処理の条件について検討した結果、電解液は水57.2%+グリセリン35.7%+乳酸7.1%、対極は純チタン、作用極-対極間距離35mm、電解電圧50Vの条件を設定し、電解処理装置を作製した。Ti-6Al-7Nb合金、Ti-15Mo-5Zr-3Al合金および第4種純チタンの試料形状は、4.0mm×1.2mm×25mmの直方体とし、ワイヤー加工およびパフ研磨により未処理試料を作製した。未処理および電解処理チタン合金と前装材の接合性評価法は、ISO 6872「歯科用セラミックス材料」の曲げ試験によって実施するため、試験装置用治具を設計し、作製した。しかし、曲げ試験試料支持部および荷重部の治具形状についての国際規格が変更されたため、新規格(ISO 6872:2008)に合わせた治具を再度設計した。また、チタン合金と前装用陶材あるいは歯冠補綴用硬質レジンとの接合処理条件、使用プライマーを決定した。チタン合金、ならびにチタン合金-前装材複合体の耐食姓評価はアノード分極試験によって実施することとし、予備実験により試験条件を設定した。実験計画に従い、Ti-6Al-7Nb合金、Ti-15Mo-5Zr-3Al合金およびコントロールの純チタンについて、4.0mm×1.2mm×25mmの直方体形状の未処理合金試料を、ワイヤー加工およびバフ研磨により作製した。また、前年度に決定した試料表面処理条件、すなわち電解液は水57.2%+グリセリン35.7%+乳酸7.1%、対極は純チタン、電解電圧50Vの条件で、未処理合金試料の電解処理を実施した。チタン合金と前装材の接合性評価法として曲げ試験を実施するため、新規格(ISO 6872:2008)に合わせた治具を作製し、Ti-6Al-7Nb合金、Ti-15Mo-5zr-3Al合金および第4種純チタンの未処理合金試料について試験を実施した。その結果、Ti-6Al-7Nb合金では2093MPa、Ti-15Mo-5Zr-3Al合金では1926 MPa、第4種純チタンでは1488MPaの曲げ強さを示し、曲げ弾性係数はそれぞれ、72.8GPa、66.3GPa、66.9GPaであった。この値は、引張試験等による既報のデータとの差異が認められるため、データ解析方法についての検討を進めている。未処理および電解処理したTi-6Al-7Nb合金試料についてアノード分極試験を実施した結果、電解処理試料では腐食電位が上昇し、不動態保持電流密度が著しく減少しており、耐食性の向上が示された。また、前装材の硬化収縮を補償するための専用治具を作製し、チタン合金と前装材の複合化試料を試作した。Ti-6Al-7Nb合金、Ti-15Mo-5Zr-3A1合金および第4種純チタンについて、4.0mm×12mm×25mmの直方体形状の試料を、機械加工によって追加作製した。また、電解液を水57.2%+グリセリン35.7%+乳酸7.1%とし、対極は純チタン、電解電圧50Vの条件で、未処理合金試料の電解処理を実施した。前年度にチタン合金と前装材の接合性評価法として曲げ試験を実施したが、試験システムの不調によるデータの誤差が認められたため、再試験を実施した。すなわち、ISO 6872に合わせた治具を再調整し、Ti-6Al-7Nb合金、Ti-15Mo-5Zr3A1合金および第4種純チタンについて試験を実施した。その結果、曲げ強さは大きい方から順にTi-6Al-7Nb合金、Ti-15Mo-5Zr3Al合金、チタンであり、すべて有意差が認められた。

また、曲げ弾性係数は、第4種純チタンで94.6GPa、Ti-6Al-7Nb合金では88.3GPa、Ti-15Mo-5Zr-3Al合金では76.8GPaを示し、純チタンとTi-6Al-7Nb合金との間には有意差が認められなかったが、Ti-15Mo-5Zr-3Al合金では有意に小さくなった。電解処理を施したチタン合金試料についてアノード分極試験を実施した結果、腐食電位の上昇および不動態保持電流密度の低下が認められ、耐食性を向上する効果が確認された。さらに、チタン合金と前装材の複合化試料を作製し、接合性ならびに耐食性についてのデータを集積している。
癌のリンパ節転移に関する研究(生細胞を用いたリンパ路の検索について)

癌のリンパ節郭清を過不足なく行うために、従来の方法とは異なった標識リンパ球を用いて胃および直腸周囲のリンパ流の検討を行った。1.胃周囲リンパ流:注入部位によりリンパ流の方向性が認められた。全ての領域において小彎注入では小彎側と左胃動脈系のリンパ節へのリンパ流が、大彎注入では大彎側リンパ節と脾動脈系もしくは、上腸間膜静脈系のリンパ節へのリンパ流が主体となり、前壁あるいは後壁注入では小・大彎側注入の場合にみられる両方向の流れが認められた。リンパ節郭清に際し、リンパ流からみて特に重点的郭清を行う必要のあるリンパ節をあげると、第1群リンパ節は全て郭清を要するが、第2群リンパ節では左胃動脈幹リンパ節、総肝動脈幹前上部リンパ節、腹腔動脈周囲リンパ節であり、第3群リンパ節では総肝動脈幹後部リンパ節、肝十二指腸間膜内リンパ節であった。胃の区域により郭清が必要な第2群および第3群リンパ節は異なる。すなわち胃上部では脾門、脾動脈幹、左胃動脈、腹腔動脈周囲、総肝動脈前上部の各リンパ節および総肝動脈後部、肝十二指腸間膜内の各リンパ節である。胃下部では左胃動脈幹、総肝動脈前上部、腹腔動脈周囲、右噴門の各リンパ節および肝・十二指腸間膜内、膵頭後部、腸間膜根部、脾動脈幹の各リンパ節である。胃中部では左胃動脈幹、総肝動脈前上部、腹腔動脈周囲、脾動脈幹の各リンパ節および総肝動脈後部、肝・十二指腸間膜内、膵頭後部、腸間膜根部の各リンパ節である。また、左腎静脈上下の大動脈周囲リンパ節も進行胃癌においては積極的に郭清すべきリンパ節であることが判明した。2.直腸周囲リンパ流:直腸ではいずれの部位でも上方リンパ流が最重要なリンパ流であった。また、側方リンパ流は腹膜翻転部以下の癌においては上方リンパ流に劣らず重要なリンパ流であり、この領域のリンパ節は郭清を要するものと考える。1、Brdu標識リンパ球は、研究計画調書の方法に従って作製した。2、Brdu標識リンパ球と墨汁を胃粘膜下層内に注入し、リンパ節中への移行状態を検索した結果、前者は墨汁より広範に分散していた。3、胃周囲リンパ路遮断後Brdu標識リンパ球及び墨汁の胃壁内注入実験成大の胃周囲リンパ路を遮断、墨汁と標識リンパ球を胃中部小湾・漿膜下に注入し、リンパ節への流入状態を検討した。リンパ路遮断は、A群(胃周囲全ブロック)、B群(小湾ブロック)、C群(小湾・左胃動脈根部ブロック)とし、注入後、胃周囲と大動脈周囲リンパ節を摘出検索した。結果:A群には墨汁、標識リンパ球はみられない。B群では墨汁は小湾リンパ節には陰性、総肝動脈前上部、腹腔動脈周囲、大動脈周囲リンパ節に陽性。標識リンパ球は小湾リンパ節にもみられ、さらに墨汁注入時の上記リンパの他、幽門下、肝十二指腸間膜内、脾動脈幹の各リンパ節にもみられた。C群では、墨汁は検索リンパ節にはみられなかった。

標識リンパ球は小湾、幽門下、総肝動脈前・上部、腹腔動脈周囲、肝十二指腸間膜内、大動脈周囲の各リンパ節にみられた。標識リンパ球の分布は墨汁より広範囲である。これは生細胞の自走能の結果と考えられ、生リンパ球の本研究への応用は色素検索よりも癌細胞の移転機序に近いものと考えられる。臨床的には、標識リンパ球の注入部位とその到達リンパ節より、胃の部位別のリンパ流の方向性を求めた。胃上・中・下各部位とも小湾注入群では小湾リンパ節と左胃部系のリンパ節、大湾注入群では大湾リンパ節と脾動脈系もしくは上腸間膜静脈系へのリンパ流が主体となっていた。なお、大動脈周囲リンパ節への転移が重視されている現在、この部へのリンパ流の検索が、今後の課題として重要と考える。1.胃周囲リンパ流胃の部位によりリンパ流に方向性が認められた。各部位ともに小弯側では小弯側リンパ節と左胃動脈系のリンパ節へのリンパ流が、大弯注入では大弯側リンパ節と脾動脈系もしくは上腸間膜静脈系のリンパ節へのリンパ流が主体となり、前壁、後壁では両方向への流れが認められた。リンパ流が多いと考えられる第2群リンパ節は左胃動脈幹リンパ節、総肝動脈幹前上部リンパ節、腹腔動脈周囲リンパ節であり、第3群リンパ節では、総肝動脈幹後部リンパ節、肝十二指腸間膜内リンパ節であった。また左腎静脈上下を中心とする大動脈周囲リンパ節への豊富なリンパ流が証明された。現在胃癌手術時、積極的に大動脈周囲リンパ節の郭清を施行し、症例を集積中であるが、従来予測されていた以上に大動脈周囲リンパ節にリンパ節転移が証明され治療効果を上げている。2.直腸周囲リンパ流直腸の部位によりリンパ流の方向性が認められた。直腸S状部では上方向リンパ流が重要なリンパ流である。腹膜反転部近傍の上部直腸では、上方向リンパ流が主要なリンパ流であるが、側方向リンパ流も少なからず認められた。下部直腸、肛門管となると、上方向リンパ流、側方向リンパ流がともに重要なリンパ流となっている。この結果は、直腸癌のリンバ節転移の検討からも裏づけられた。また、リンパ節転移を起こしやすい直腸癌の特徴も把握できつつある。胃癌における腹部大動脈周囲リンパ節への転移およびリンパ流(1)臨床病理左腎静脈周囲の大動脈周囲リンパ節郭清を施行した胃癌77例を検索対象として、胃癌における腹部大動脈周囲リンパ節への癌転移状況を検討した。左腎静脈周囲リンパ節郭清77例中の転移率は23.4%であった。その転移部位は大動脈外側(腎静脈頭側)が20.8%、大動脈大静脈間(腎静脈頭側)に6.5%、大動脈前面(腎静脈尾側)が14.3%、大動脈外側(腎静脈尾側)に5.2%、大動脈大静脈間(腎静脈尾側)に5.2%であり、予想以上に高率のリンパ節転移が認められた。胃癌占居部位別の検討では、胃上部癌では大動脈外側(腎静脈頭側)に、胃下部癌では大動脈前面(腎静脈尾側)に高率に転移が認められた。リンパ節郭清施行後期間が短く、その効果を評価するには充分な期間ではないが、他に非治癒因子がない場合、郭清例では50%生存月数は16ケ月であり、対照とした腹部大動脈周囲リンパ節のpick up郭清例の7カ月より生存の延長が認められている。大動脈周囲リンパ節郭清の適応を次のごとく定めた。すなわち(1)術中第2群リンパ節に転移ありと判定した場合、(2)胃上部癌では大動脈周囲リンパ節は第2群リンパ節と同等と考えて郭清する。(2)胃周囲リンパ流胃上部では噴門周囲、小彎、脾動脈幹の各リンパ節に高い集積性が認められ、大動脈周囲リンパ節と関連が深いことが示された。胃下部では幽門上下、大彎、肝十二指腸間膜内リンパ節に高い集積性が認められるとともに、左胃動脈幹、総肝動脈に沿う各リンパ節の重要性が示唆された。
がん細胞分泌ナノベシクルのプロテオミクスと画期的診断法開発の試み

本研究は、がん細胞分泌ナノベシクル(Exosome)上の新規バイオマーカーを探索・同定することにより、がんの早期診断・悪性度診断・治療薬決定診断を可能とする革新的診断法の開発に挑戦するものである。本申請研究では、細胞から分泌・放出されることが近年明らかになってきた約百ナノメートル径の小胞である"Exosome"に着目し、Exosomeに含まれるがんマーカータンパク質にフォーカスした新規プロテオミクス解析を試みた。超遠心法により、培養がん細胞からexosomeを回収し、電子顕微鏡観察、動的光散乱法による粒子径測定、マーカーとされるテトラスパンニン分子の発現解析を行った。その結果、確かにexosomeが高純度で回収できていることが確認できた。さらに、exosomeからたんぱく質を回収し、質量分析法により発現たんぱく質を解析した。その結果、複数のがん関連膜タンパク質が同定できた。以上の検討から、がん細胞分泌exosome上には、がん関連膜たんぱく質などが含まれることが判明した。今後は、がん組織から分泌されるexosomeを血液中から効率よく回収し、そのマーカーたんぱく質解析できるかどうかを調べ、診断法への応用の可能性を検証する予定である。これまで、プロテオミクス等によるがん血液診断のためのバイオマーカータンパク質の探索が世界規模で取り組まれてきたものの、血液中に存在するがん関連タンパク質は量的ダイナミックレンジが大きすぎることなどから、有用な分子は見出されていない。そこで本申請研究は、細胞から分泌・放出されることが近年明らかになってきた約百ナノメートル径の小胞である"Exosome"に着目し、Exosomeに含まれるがんマーカータンパク質にフォーカスした新規プロテオミクスでブレークスルーを図る。本年度、がん細胞由来Exosomeをターゲットとした革新的診断法の開発を念頭に、Exosomeの高純度・効率的回収法、及びその膜タンパク質の高感度解析法の確立・最適化、さらに、各種がん細胞株由来Exosome上のマーカータンパク質同定を試みた。まず、Exosomeの高純度・効率的な回収法を探るべく、超遠心法に着目し、培養がん細胞からexosomeを回収した。電子顕微鏡観察、動的光散乱法による粒子径測定、マーカーとされるテトラスパンニン分子の発現解析の結果、確かにexosomeが高純度で回収できていることが確認できた。
土壌水分量と傾斜変位に着目した豪雨時の低コストで簡便な斜面監視システムの実用化

斜面崩壊事例の大部分を占める小規模な表層崩壊に対象を絞り、安価で簡便な無線モニタリング装置を開発し、斜面災害の前兆を監視して警報を発する実用的なシステムを構築した。これまでに開発してきた、土壌水分量と斜面地表面および内部の傾斜変位に基づく斜面の無線センサーネットワーク機器の機能、信頼性を向上し、国内および中国四川省の地すべり、崖崩れ、堀削工事の斜面に適用し、実証を行った。実測データの分析から、傾斜変位に基づく警報基準を検討した。また、斜面の土壌水分量の増加や、不安定化を検知するための指標として、弾性波速度の低下を利用する手法について基礎実験を行った。また、室内実験に基づき、斜面の降雨と土壌水分量の推移を関係づける水理特性のモデル化、土壌水分量と変位・崩壊危険度を関係づける変形特性のモデル化を行った。1.斜面の無線センサーネットワーク機器の機能、信頼性の向上屋外の実斜面で長期間の試験モニタリングを行い、高温、低温、風雨の中での長期耐久性、計測の信頼性を検証した。試験サイトとしては、中央開発(株)、(独)土木研究所、中国科学院の協力を得て、六甲の砂防工事斜面、中国四川省の三峡ダムの斜面での設置・計測試験を行ったほか、来年度に計画している中国四川省都江堰市塔子坪の大規模地すべり地域での計測に向けて、現地の予備調査を行った。センサー回路の改良によるデータのふらつきの低減、省電力化、各センサーユニットへのマイクロSDメモリ搭載によるデータ消失防止などの改良を行った。また、太陽電池から効率的に2次電池に充電する電圧コンバーター基板、および、ひずみゲージ式の各種のセンサーを接続できるようにするためのひずみアンプ基板を開発した。中国など海外での利用を可能とするために、各国の電波法規に適合する無線モジュールの選定と技術的検討を行った。2.土壌水分量の常時モニタリングによる斜面の水理特性のモデル化本研究で開発した機器を用いて、降雨時に、その前後における土壌水分量の増減を測定し、斜面の集水性、水はけの良さなどの水理特性を定量的に評価してモデル化する方法を開発した。特に、排水時の水はけの良さについて、簡便なモデル化ができた。通常の比較的弱い雨が降ったときの土壌水分の推移から、斜面のモデル化を行い、豪雨時に、リアルタイムの土壌水分量データと組み合わせて、土壌水分のその後の推移を予測する方法を提案した。この成果は、降雨終了後の防災警報の解除の判断や、斜面災害リスクの高い斜面の抽出への適用が期待できる。試験サイトとしては、中央開発(株)、(独)土木研究所、中国科学院の協力を得て、六甲の砂防工事斜面、愛媛の道路法面、高知の砂防工事における掘削斜面、中国四川省都江堰市塔子坪の大規模地すべり地域での試験計測を行い、その機能を検証した。中国など海外での利用を可能とするために、各国の電波法規に適合する無線モジュールの選定と技術的検討を行い、機器を改造した。また、短距離用の安価な無線モジュールを用いたセンサーユニットを新たに開発し、これまで作ってきたセンサーネットワークに接続することで、斜面内の重点箇所に多数のセンサーを設置して監視する仕組みを試作した。2.斜面変位と土壌水分量の組み合わせモニタリングによる豪雨時の斜面崩壊の危険度評価法の提案本研究で開発した機器を用いて、降雨時に、斜面の変位と土壌水分量を測定し、両者のデータを組み合わせることで、リアルタイムで斜面崩壊の危険度を評価する手法について検討した。斜面上のすべり層を模擬した模型実験で、降雨と排水が繰り返される場合の斜面変位の生じ方を観察し、両者の関係を考察した。土壌水分量と変位の間には、降雨の履歴にかかわらず、地盤材料の力学試験における応力とひずみの関係によく似たユニークな法則が見いだされた。この考え方に基づいて、斜面の土壌水分量(または降水量)と斜面の変位のモニタリングデータを組み合わせることで、斜面の状態をより的確に把握し、危険度を評価しうることを示した。1.斜面の無線センサーネットワーク機器の機能、信頼性の向上22年度に続いて、国内の複数の斜面崩壊現場、掘削工事現場などで、監視機器を設置運用し、高温、低温、風雨の中での長期耐久性、計測の信頼性を検証した。2.斜面変位と土壌水分量の組み合わせモニタリングによる豪雨時の斜面崩壊の危険度評価法の提案

日本国内、及び中国で斜面にセンサーを設置した実現場のうち、豪雨や掘削による変状や斜面崩壊が見られた場所で、センサーから得られたデータを分析し、どのような挙動が見られたときに、斜面が危険な状態にあると判断すべきか、早期警報の基準を検討した。斜面が豪雨などにより短時間で崩壊に至る場合と、地すべりや掘削工事などで長期間かけて変状を起こす場合とに分けて、それぞれ異常時に、斜面表層に立てたロッドの傾斜角が示す傾斜角速度の範囲を、経験的に特定することができた。また6月に、四川省の自然斜面で、人工降雨による崩壊実験を行って、斜面崩壊前に測定されるデータと、それに基づく早期警報基準の決め方について考察した。ここでも、実現場での結果と同じく、斜面崩壊前には同じ範囲の傾斜速度が観察された。また、この実験では、斜面の変位と斜面内部の土壌水分量の推移の間に、22年度に検討したような、地盤材料の力学試験における応力とひずみの関係によく似たユニークな法則が見いだされた。さらに、実験室内で、不飽和山砂の単純せん断試験を行い、一定の圧縮、せん断応力下で、時間あたり一定量の水を注入したときの、せん断変形の進み方を詳しく分析した。雨水の浸透が一定速度で起こっても、それに伴うせん断ひずみの進行は一定速度ではなく、条件によって一度減速してから崩壊に至る場合もあることが分かった。これは、斜面の変位や傾斜角を監視しているときに、その辺加速度が緩んだからといって、必ずしも安全な状態になったわけではないことを示している。
超ナノ磁気微粒子の新規薬剤輸送・排出システムの開発

葉酸修飾微粒子による細胞特異的デリバリー葉酸修飾微粒子はガン細胞に特異的に導入できた。細胞選択性機能性超ナノ磁気微粒子の開発ができた。これをさらに発展させて微粒子取り込み時の細胞培養条件を検討した。その結果、微粒子を導入する培養液はUptake Bufferと呼ばれる細胞分裂に必要な栄養分を抜いたものを使用すると微粒子の取り込みを向上することができた。微粒子表面への様々な官能基の導入既に得られたアミノ化微粒子同様、当該微粒子に、シラン化にチオール基の導入を行い目的の修飾物質に併せた表面を検討した。IR分析によりチオール基の修飾を確認できた。この微粒子はアミノ酸を微粒子に修飾するのに用いた。薬剤のイメージング質量分析薬剤を修飾した微粒子をマウスなどの体内に導入し、任意の臓器へのデリバリーを目的とした。その確認方法としてはイメージング質量分析を用いた^<1)>。その前段階として、薬剤(Methotrexate:MTX)のみをマウスに静脈注射し2時間後、その腎臓を摘出し薬剤が検出されるかを確認した。結果、MTXのプロトン付加体であるm/z455.5のシグナルを得ることができた。機能性超ナノ磁気微粒子の調製と特性評価(本研究で「超」とは直径が1桁オーダーのナノ微粒子を指している)FeCl_2溶液とNa2SiO_3溶液を材料とし、二つの水溶液を混合し、沈殿物を得た。ついで、約350Kに保持した恒温槽で乾燥後、電気炉にて、873Kの温度範囲で7時間焼成してγ-Fe_2O_3超ナノ微粒子を得た。X線回折によりコア成分γ-Fe_20_3の周囲をアモルファスSiO_2が一層被覆されている構造をとり粒径は約3.0mmである。これはTEM観察の結果と一致した。磁化測定により本微粒子は常磁性体であった。シラン化により微粒子表面にアミノ基を導入した、IR測定により、超ナノ磁気微粒子表面にアミノ基をシラン化により修飾することが確認できた。機能性超ナノ磁気微粒子の調製ができた。細胞内への導入PtK2細胞培養シャーレに、機能性磁気超ナノ微粒子または、コントロールとして蛍光ビーズ(平均粒子径200nm)をそれぞれ培養液に導入した。24時間後のTEM観察では本ナノ微粒子を導入した細胞内から本微粒子が観察された。蛍光ビーズを導入した物は、観察されなかった。また、本ナノ微粒子を導入した細胞をそのまま培養し5日間後に観察した結果、細胞は消滅することなく増殖した。本ナノ微粒子には細胞毒性がないことが示される。磁気による局所的機能性磁気超ナノ微粒子濃度増大効果磁気により生体内への本超ナノ微粒子の導入及び、微粒子を組織の1点に集中させた。マウスの外耳部分に本ナノ磁気微粒子を塗布した。塗布した面の反対に円形磁石をテープにより固定した。24時間後にマウス耳殻組織切片から本ナノ磁気微粒子の存在を確認できた。磁力を用いることで局所的にその濃度を向上させることができた。葉酸修微粒子による細胞特異的デリバリー葉酸修飾微粒子はガン細胞に特異的に導入できた。
植物オルガネラにおけるヌクレオシド2-リン酸類縁体の代謝

本研究から、植物におけるNudix hydrolase(AtNUDX)は多様な生理的役割を果たしていることが明らかになった.すなわち、シロイヌナズナ細胞質局在型のAtNUDX1は酸化ヌクレオチド浄化、AtNUDX2はADP-リボースのリサイクル、AtNUDX7はNADH代謝を介したPAR反応制御により酸化ストレス防御に機能していることを明らかにした.また、推定オルガネラ局在型のAtNUDX15、14、19、および23の細胞内局在性および特異的基質も明らかにした.本研究から、植物におけるNudix hydrolase(AtNUDX)は多様な生理的役割を果たしていることが明らかになった.すなわち、シロイヌナズナ細胞質局在型のAtNUDX1は酸化ヌクレオチド浄化、AtNUDX2はADP-リボースのリサイクル、AtNUDX7はNADH代謝を介したPAR反応制御により酸化ストレス防御に機能していることを明らかにした.また、推定オルガネラ局在型のAtNUDX15、14、19、および23の細胞内局在性および特異的基質も明らかにした.Nudix (Nucleoside Diphosphate linked some moiety X)hydrolaseは、酸化ヌクレオチド、ADP-ribose、NAD(P)H、FAD、CoAなどを含むヌクレオシド2-リン酸類縁体に対する加水分解活性を有する酵素ファミリーである。本研究では、植物の各オルガネラにおけるNudix hydrolaseによる種々のヌクレオシド2-リン酸類縁体(特に、酸化ヌクレオチド,ADP-ribose,NAD(P)H,FAD,CoAなど)の代謝制御の全容、およびそれらがオルガネラ間の相互作用に及ぼす影響を明らかにすること試みている。大腸菌相補試験および遺伝子破壊植物体を用いた解析の結果、細胞質局在型AtNUDX1は[8-oxo-(d)GTP pyrophosphatase]は細胞質のヌクレオチドプールを浄化することで、酸化ヌクレオチドの核、ミトコンドリアおよび葉緑体ゲノムへの取り込みを防いでいることが示された。また、細胞質局在型AtNUDX2について、過剰発現および発現抑制株を用いて解析を行った結果、本酵素はポリ(ADP-リボシル)化サイクルから生成する遊離ADP-リボースのリサイクルにより、細胞内エネルギー状態を維持することで酸化ストレス耐性に寄与していることが示された。シロイヌナズナのミトコンドリア型(AtNUDX1218)、葉緑体型(AtNUDX1924、26、27)Nudix hydrolaseの分子特性の解析の結果、AtNUDX14はADP-ribose(K_m:13.0μM)、AtNUDX15はCoA(K_m:118.7μM)、AtNUDX19はNADPH(K_m:36.9μM)、AtNUDX23はFAD(K_m:9.1μM)を特異的基質とすることが明らかになった。Nudix(Nucleoside Diphosphate linked some moiety X)hydrolaseは、ヌクレオシド2-リン酸類縁体に対する加水分解活性を有する酵素ファミリーである。高等植物シロイヌナズナには細胞質(12種)、ミトコンドリア(7種)、葉緑体(8種)などに計27種類ものNudix hydrolaseが局在していると推測されることから、各オルガネラでの種々のヌクレオシド2-リン酸類縁体の代謝が酸化ストレス応答や代謝調節などの多様な細胞応答に大きな影響を与えていることが示唆される。本研究では、リコンビナントタンパク質を用いて、推定オルガネラ局在型AtNUDXの基質特異性および細胞内局在性を解析した。その結果、AtMIDX15はミトコンドリアに局在し、CoAおよび種々のCoA誘導体を特異的基質とすること、AtNUDX14、AtNUDX19、およびAtNUDX23は葉緑体に局在し、それぞれADP-ribose、NADPH、およびFADを基質とすることが分かった。また、遺伝子破壊株を用いた生理機能解析から、細胞質局在型のAtNUDX1が唯一の酸化ヌクレオチド加水分解酵素として酸化ヌクレオチドの核、ミトコンドリアおよび葉緑体ゲノムへの取り込みを防いでいることを示した。さらに、AtNUDX2はポリ(ADP-リボシル)化サイクルから生成する遊離ADP-リボースのリサイクルにより、細胞内エネルギー状態を維持することで酸化ストレス耐性に寄与していること、AtNUDX7は生体内でAtNUDX2とは異なりADP-riboseだけでなく、NADH代謝を介したPAR反応制御にも関与することで酸化ストレス防御に機能していることを明らかにした。
レーザー誘起核発生を用いたフォトクロミック結晶の多形成長制御

フォトクロミック結晶や有機非線形光学結晶の多形成長制御技術の確立を目標として研究を進めてきた。多形制御を実現する候補技術として、レーザー誘起核発生や溶媒の種類変更、過飽和度の変更等があるが、本年度は、育成時に使用する溶媒を変更することにより、結晶形状の変更に成功した。また、結晶育成に溶液撹拌を導入することにより、不要な核生成の起きにくい均一な溶液状態の実現、結晶の高品質化に成功した。1.溶媒の種類の変更によるフォトクロミック結晶、有機非線形光学結晶の形状制御有機非線形光学結晶DAST、フォトクロミック結晶ジアリールエテンの育成用溶媒に混合させるアセトニトリルの比率を増加させることにより、結晶がバルク化する傾向にあることを明らかにした。また、DAST結晶の場合、バルク化した結晶は、厚みに応じて素子特性(電気光学素子特性、テラヘルツ波発生特性)の向上が見られ、溶媒の変更は結晶の品質を維持したまま、形状のみ変化させることを示唆していた。2.溶液撹拌の導入による均一な結晶育成環境の実現、不要な核生成の抑制、結晶品質の向上有機結晶育成は静置溶液内で実施するのが一般的であったが、溶液温度、濃度の分布といった溶液状態の不均一性が核析出や結晶品質に与える影響を懸念して、本研究では、育成過程を通じての溶液撹拌を導入した。その結果、溶液撹拌により実現された均一な溶液状態は、不要な核生成を抑制することが明らかとなった。また、レーザー損傷耐性も向上する等、結晶の高品質化にも効果的であった。溶液撹拌により実現される均一な溶液状態は、均一な結晶成長速度の実現も期待できることから、将来的にはレーザー誘起核発生との組み合わせにより、少量の核をレーザー照射箇所に限定して析出させ、均一な速度で成長させることにより、多形成長制御にも有効と考えている。レーザー誘起核発生現象のメカニズムの解明を目的として、従来から取り組んでいる有機非線形光学結晶DASTの過飽和溶液にフェムト秒レーザーを照射して結晶成長を行った。レーザー光が核発生に影響を与える際、溶液内のクラスター状態に大きく左右されると考え、本年度はある過飽和溶液状態に達してからレーザーを照射するまでの静置時間の効果を調べた。フェムト秒Ti:sapphireレーザーを、静置後1時間の溶液に30秒照射した場合の析出確率は25%と、未照射の析出確率17%を僅かに上回る程度であった。一方、静置開始1日経てから同一過飽和溶液にレーザーを照射した場合は、残り4日の間に析出確率が60%に上昇することが明らかになった。このことから、レーザー誘起核発生の効果が顕著に現れるには、溶液のクラスター化がある程度進んだ状態であることが好ましいことが分かる。また、本研究から核発生効果が見られるのは、照射後2日間くらいの間であることも分かった。しかしながら、静置後2日経てから照射した場合は、逆に核発生確率が8%程度と低くなることも分かった。それゆえ、ある程度大きなサイズのクラスターに対しては、レーザー電場による引力に対して効果が出せなくなるという解釈ができる。これらの研究に基づき、レーザー照射部分に電場の勾配が生成し、適度な大きさのクラスターが引き寄せられて核発生が高まるというモデルが考えられる。フォトクロミック結晶としては、1,2-bis(2-ethyl-5-phenyl-3-thienyl)perfluorocyclopentene(2Et5Ph)の溶媒蒸発法による結晶育成を行った。様々な溶媒を検討した結果、ヘキサンとアセトニトリルの層分離した混合溶媒系において、通常の平板状結晶(ヘキサン溶媒)と異なるバルク状の単結晶が得られることを確認した。結晶析出の状況をさらに検証した後、レーザー核発生に取り組む予定である。

溶液撹拌により実現される均一な溶液状態は、均一な結晶成長速度の実現も期待できることから、将来的にはレーザー誘起核発生との組み合わせにより、少量の核をレーザー照射箇所に限定して析出させ、均一な速度で成長させることにより、多形成長制御にも有効と考えている。
イギリス新教育の「メディア-ポリティクス」と学び・試験に関する教育思想史的研究

本研究では、新教育運動を牽引した新教育連盟の機関誌『新時代』とその国際会議報告書を第一次史料とし、教育運動の磁場「メディア-ポリティクス」において、学びの促進が「教育の自由」に対立する「試験」や「知能テスト」を取り込んだこと、この逆説的状況が、創始者エンソアの批判や警告にもかかわらず、それらを肯定した教育学者のサドラーとナン、「知能テスト」の科学性と優勢思想を展開した心理学者のバートらの「教育の自由」の帰結であったことを解明した。その結果、以下の点が明らかになった。1.イギリス新教育運動家らは19世紀末以来、教育における自由を標榜し、「生の理想」を個性の伸展として掲げていたが、授業論についてはその枠組みとして「遊び」論の意義を展開し、具体的な教育評価論についてはバート(Cyril Burt)の研究成果への着目の意義を指摘するに留まっていることが解明できた。3.以上のことから、イギリス新教育運動期の自由の標榜は子どもの全体性の発達やそのための人格の統合性を強調し、手工芸、遊びなど3R'sの偏重を克服する学習内容の導入につながったが、逆説的にも、個性や人格など、数値化し難いものに重きをおく指導内容に対する信頼性の拠り所をIQという指標に求めたのではないか、という問いが出てきた。4.また、IQテストの普及に『新世界(The New Era)』がメディアとしての役割を果たしたこと、また同時にナンの教育学者としての功績もポリティクスの観点から捉え直す意義があることが再確認できた。本研究の仮説は、イギリス新教育思想そのものに両義的な意味内容や自由と試験の双方を充足させる意味が内包されていたのではないか、というものであり、このことは「教育の新理想」や新教育連盟に属していたナン(P.Nunn)やバート(Cyril Burt)の能力論や試験論への意味付与の内実解明によって明らかになる、と考えられる。この解釈枠組みは、研究2年目に相当する平成23年度全期にわたる作業課題の一つ、すなわち研究協力者のRoy Lowe著のThe Death of Progressive Education(2006)の翻訳作業の伸展によって裏付けられた。また、本研究の月別作業課題では、8月から9月にかけて、ロンドン大学10E図書館及びケンブリッジ大学図書館のアーカイヴに所蔵されている書誌を第一次史料とし、(1)イギリス新教育運動における「試験」・「知能テスト」をめぐる論争とジレンマ、(2)イギリス新教育運動の組織的拡大と思想的混迷に焦点化して研究をすすめた。まず、イギリス新教育運動第III期に登場した「試験」や「知能テスト」をめぐる約10年間の論争を俎上に載せ、「自由」概念の多義性あるいは両義性やその文脈の実態の解明を視野に入れつつ、そこでの議論がどのような状況下で展開されたかを解明した。そして、ナン、新教育連盟の創設を主導したエンソア,新教育連盟を支援したサドラー、新学校・ビデールズ校を創設したバドレーらの見解にある多義性とそれが優性思想に回路を敷いたことを明らかにした。次に、1929年から1934年までに新教育連盟の会合や誌上で展開された「試験制度改革」や「知能テスト」に関して、公教育改革に貢献したサドラー、ナン、バートと教育院報告書の見解や特徴を明らかにし、新教育運動が一枚岩に成り得ず混迷の様相を呈していった諸相を描出した。以上の理由により、本研究はおおむね順調に伸展していると、自己評価した。24年度が最終年度であるため、記入しない。本研究の最終年に当たる平成24年度は、本研究の第一次史料を掲載した新教育連盟の季刊誌TheNewEraと新教育連盟の各『国際会議報告書(International Conference of New Education Fellowship)』(1923, 1925, 1927, 1929, 1932, 1936)には、どのようなポリティクスが内在しているかを明らかにする。その際の留意点は、季刊誌への投稿者の背景とコマーシャルをていねいに読み解くことである。これを推進するため、8月から9月にかけて渡英する。
オブジェクト指向に基づく時相属性文法処理系の作成

当初、本研究では、(1)実用システム開発のための予備調査、(2)理論的研究、(3)オブジェクト指向の適用、を計画していた。結果として、本年度は(1)の研究が最も進展し、その副産物として(2)、(3)についてもさらに新たな知見を得ることができた。(1)実用システム開発のための予備調査本研究ではこれまでMacintoshの上に低次グラフィックス・ルーチンを使って、時相属性文法処理系を試作してきたが、本年度はより実用的な処理系を目指し、ワークステーションで最も一般的であるXtoolkitを時相属性文法から利用することを試みた。結果、Xtoolkitのwidgetは時相属性文法ときわめて親和性がよく、自然なプログラミングが可能であることが分かった。たとえば、電卓を時相属性文法だけで記述できることが分かった。また実用性を目指す立場からは、これまでの時相属性文法の時間解釈および木構造の変化機構は一部非効率であることが判明し、見直しを行った。理論的研究(1)の最後に述べた以外に、時相属性文法による計算方法が実はインクルメンタルな(増分的な)処理を自然に実現するものであることを新たに認識し、計算モデルの改良を行った。(3)オブジェクト指向の適用(1)の研究により、Xtoolkitからさらに本格的なオブジェクト指向ツールであるOSF/Motifへの適用の拡大が可能であること、およびその際の問題点が明らかになった。以上の成果の一部は既に発表済みであり、総括論文は投稿中である。
中国地方の裁判所の保管にかかる第二次大戦前の裁判記録の調査

1中国地方の裁判所の保存にかかる明治期の裁判記録の調査を行った。2調査を行った裁判所は、以下のとおりである。広島地方裁判所、同竹原支部、同三次支部、岡山地方裁判所、同簡易裁判所、鳥取地方裁判所、岡山地方裁判所津山支部、山口地方裁判所萩支部、岡山地方裁判所倉敷支部、及び広島県加計町井上家。3明治初年より昭和18年までの下級審民事判決原本は、既に広島大学法学部において一時保管に付されている。それ以外の裁判記録の所在調査は、主として「民事事件受付簿」のそれが中心となった。「民事事件受付簿」は裁判所により、また時期により名称が「訴訟明細録」、「訴状受(請)取録」などに変わっている。それらは判決原本と同様、史料として「永久保存」とされていたため、現在まで残されたものである。その他、「勧解事件簿」や「勧解事件調査」、「執行事件受付簿」などを保存している裁判所があった。その他「訴訟表」や「土地・家屋の図面」なども若干保存されている。前者は、事件処理の統計表であり、後者は土地や家屋をめぐる訴訟事件において作成された図面である。それらはいずれも、たまたま、破棄されなかったために、現在まで保存されてきたものである。若干の裁判所では「未確定事件記録」も少数の冊数が保存されている。4本件調査は、それらの簿冊のリストを作成することを目的としている。本調査を通して、特に、「民事事件簿」は判決原本の索引の役割を果たすものであり、判決原本とともに利用することによって、格段の史・資料価値を発揮するものであることを確認することができた。広島高裁及び広島地裁,山口地裁,松江地裁ならびにその管内支部の協力を得て「民事々件簿」「受付簿」など,明治時代の判決原本意外に各裁判所の保管する裁判記録の調査を行った.その他,判決原本の保存方法やDB化の準備などのため,東京へ出向いた。'97.7,広島地裁'97.8,山口地裁岩国支部'97.9.1.92松江地裁'97.10.31上'97.11.411.5.山口地裁及び全下関支部'97.12.22鳥取地域米子支部'98.1.16.広島地裁'98.2.26.広島地裁尾道支部'98.3.6.国際日本文化研究センター'98.3.17.江津市立図書館'98.3.18.松江県立図書館明治初期,殊に10年頃までは,中国地方の裁判所の制度がきわめて流動的であること,民事事件簿が判決原本(既に国立大学に移管済み)とつき合せることによって,当時の民事事件の統計的な観察ができること.事件の概要を知ることができるものもあること.社会事情の変化などを窺うことができることが分った.勧解事件簿や全調書なども僅かながら在り,資料価値が高いことが分った.1前年度に続き、中国地方の裁判所の保存にかかる明治期の裁判記録の調査を行った。それ以外の裁判記録の所在調査は、主として「民事事件(受付)簿」のそれが中心となった。「民事事件(受付)簿」は裁判所により、また時期により名称が「訴訟明細録」、「訴状受(請)取録」などに変わっている。その他、「勧解事件簿」や「勧解事件調書」、「執行事件受付簿」などを保存している裁判所があった。

その他「訴訟表」や「土地・家屋の図面」なども若干保存されている。前者は、事件処理の統計表であり、後者は土地や家屋をめぐる訴訟事件において作成された図面である。それらはいずれも、たまたま、廃棄されなかったために、現在まで保存されてきたものである。若干の裁判所では「未確定事件記録」も少数の冊数が保存されている。4本件調査は、それらの簿冊のリストを作成することを目的としている。本調査を通して、特に、「民事事件簿」は判決原本の索引の役割を果たすものであり、判決原本とともに利用することによって、格段の史・資料価値を発揮するものであることを確認することができた。資料価値の高いリストの一部は整理して、公刊すべく準備中である。