hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
脳発達期の自然免疫活性化によって惹起される精神発達障害の発現機序の解明

1陽性細胞が認められなかった。以上の結果から、新生仔期のpolyI:C処置に伴いアストロサイトから分泌されたFstl1が、前頭皮質の神経発達を障害していることが示唆された。Polyriboinosinic-polyribocytidilic acid (PolyI:C)は擬似的にウイルス感染惹起する化合物であり、生体内では強力に自然免疫反応を誘導することが知られている。我々は新生仔期のPolyI:Cが成熟期まで続く高次脳機能障害を惹起することを報告している。本研究課題では、アストロサイトからのFstl1の分泌増加が前頭皮質の神経発達を障害すること明らかにした。また、PolyI:Cによる神経発達障害の対処方法としてFstl1を分泌抑制が有効であることを示した。本年度に計画していたpolyI:C処置に伴いアストロサイトから分泌されたFstl1の神経発達及ぼす影響について解析することができ、目標はほぼ達成できたと考えられる。神経精神薬理学Fstl1の高次脳機能への影響として新生仔期PolyI:C投与時にFstl1の発現が変化する脳部位を特定するとともに、Fstl1の高次脳機能への影響をin vivoで検討する。本年度に計画していたFstl1の分泌に関与するPolyI:Cの標的細胞の同定、Fstl1結合タンパクの探索およびIfitm3とFstl1の関連解析は完了しており、目標はほぼ達成できたと考えられる。今後はFstl1による神経発達障害の機序の解明として初代培養神経細胞にリコンビナントFstl1を添加して培養を行い、樹状突起マーカー分子Microtubule-associated protein 2 (MAP2)および軸索マーカー分子Tau1の免疫染色によって神経突起伸展が抑制されるのかを調べる。また、神経伝達に重要なスパイン形成については、EGFPを遺伝子導入してスパインを可視化し、スパインの形状および密度を計測する。
薬剤溶出型生体吸収性マグネシウムステント植え込み後の血管反応の解明

冠動脈病変に対するカテーテル治療はこれまでバルーン拡張術→金属ステント→薬剤溶出性金属ステントと大きな進歩を遂げてきた。一方、薬剤溶出性金属ステントにも未だ多くの問題が残されており、その問題点を解決する目的で、薬剤溶出型生体吸収性マグネシウムステントが開発された。本研究では、動脈硬化モデル動物を用いた基礎研究およびヒト生体内における臨床研究の双方からのアプローチにより、これまでの様々な問題点を全て解決する可能性を秘めた薬剤溶出型生体吸収性マグネシウムステント留置後の吸収過程における血管応答を明らかにする。
赤血球膜蛋白P4.2の正常と病態における遺伝子発現制御と病態機序の研究

遺伝性溶血性貧血200例の赤血球膜蛋白について解析した結果、P4.2異常症は量的異常と質的異常に分けられ、さらに前者は部分欠損型と完全欠損型に分類された。推定される病因遺伝子P4.2とband3(B3)について遺伝子解析を行い以下の成績が得られた。2) P4.2蛋白および遺伝子発現3) B3とP4.2の遺伝子発現調節Promoter領域のCpG siteにおけるmethylation:正常対照とP4.2欠損症例について検討し、以下の成績が得られた。正常では両遺伝子ともCpG siteはほぼ完全にメチル化されていることが判明した。P4.2欠損症例では特徴的にB3の3個所のCpG siteが非メチル化であることが判明した。この成績はB3の遺伝子発現調節異常がP4.2発現に間接的に影響を与えている可能性を示唆すると考えられた。平成9年度の研究により分画4.2(p4.2)について以下の諸点が明らかにされた。1.赤血球膜蛋白p4.2異常症および欠損症の発見について:(1)約90症例の先天性溶血性貧血患者のスクリーニングを行い、p4.2完全欠損症を2家系発見した。さらに、p4.2部分欠損が日本人においては特徴的に遺伝性球状赤血球症(hereditary spherocytosis:HS)に多く見られることが判明した。(2)HSにおけるp4.2部分欠損に関して:HS37家系、92例(うち患者54症例);autosomaldominant(AD)型HS、14家系、患者31症例、Non-AD型HS、23家系、患者23症例、について赤血球膜蛋白遺伝子解析、膜蛋白解析、臨床血液学的検討を行った結果以下のことが明らかとなった。p4.2単独部分欠損は特徴的にNon-AD型のHSに多く、その頻度は約70%であった。また、AD型のHSでは分画3(B3)+P4.2複合型欠損が主体であった。これらの所見は日本人のHSに特徴的であると考えられた。2.赤血球膜蛋白p4.2異常症および欠損症の遺伝子解析結果について:(2)B3+P4.2複合欠損を伴うHS症例に発見されたB3遺伝子異常について:3.ヒト赤芽球におけるP4.2遺伝子と蛋白発現について:P4.2のmRNAはeary erythroblastにおいて発現を認めるが、その蛋白はorthochromatic erythroblast(late eryghroblast)で初めて発現が認められ、他の主要赤血球膜蛋白の中で最も発現の遅い蛋白の一つであることが判明した。さらに、今回の研究でP4.2mRNAのisoformが新たに一種発見され、全体としてisformは6種存在することが判明し、それらは血液細胞のうち赤芽球に特異的であることがsouthernblot法で判明した。本年度は遺伝性溶血性貧血90例の赤血球膜蛋白について解析した結果、P4.2異常症は量的異常と質的異常に分けられ、さらに前者は部分欠損型と完全欠損型に分類された。2) P4.2蛋白および遺伝子発現ヒト赤芽球においてP4.2は他の主要膜蛋白に比べ最も発現が遅く、orthochromatic erythoblast(Ebl)の段階で初めて蛋白として発現することが、Westernblot法、flow cytometry法、蛍光抗体法によって判明した。本年度はさらにmRNAの発現の発現について解析した。成績としてP4.2mRNAはearly Eblから検出され、成熟するに従い7種のisoformが発現することがSouthern blot法によって判明した。各isoformはP4.2のexon1,3,5のsplicingによって生ずることが判明した。3) B3とP4.2の遺伝子発現調節本年度はpromotertA域のCpG siteにおけるmethylationについて解析した.:正常対照とP4.2欠損症例について検討し、以下の成績が得られた。
材料プロセス用の高圧力マイクロ波プラズマの生成と制御

マイクロ波放電の高圧力化の課題については、初年度、スロットアンテナ形状の最適化とスロットと石英板の間に設けた空気層の厚さの最適化を行った。その結果、空気層の厚さが3cmくらいのときに共鳴が起きて放電が容易となり、また、傾斜スロットよりも平行スロットの方がパワーが入りやすいことを見出し、放電圧力を30Torr程度まで高めることができた。本年度は独自の放電イグナイターを考案して、大気圧(760Torr)でプラズマを生成することに成功した。次に、コーティング膜の疎水性の向上の課題については、アルゴンにCF_4やC_4F_8を混合してマイクロ波放電を行った。得られたフロロカーボン膜の元素組成を調べてF原子成分が多いほど疎水性が増すこと、CF_4よりもC_4F_8がはるかに高い疎水性の膜が得られること等の知見が得られた。現在までに、接触角125°の疎水性が得られている。これまでに得られた結果はThin Solid Filmsに近く掲載される。また、韓国で行われた国際会議(AEPSE)や名古屋で開催されたプラズマ科学国際COEフォーラムで発表している。
神経跳躍伝導を磁気刺激による電磁界変化で検出する食道がん術中反回神経探索法の開発

神経上で刺激パルスを印可した際の伝達特性を解析した結果、神経周囲に10mmから20mmの距離で減衰しながら伝達しており、跳躍伝導は神経上を約50mm毎に発生していることが判った。また、跳躍伝導の絶対不応期は1.2ms以下、相対不応期は3ms以下という値を得た。跳躍伝導の磁気センシングは、現状の磁気インピーダンス方式のセンサーではセンサー感度が不足しており、120pTの磁束密度を検出するには至らなかった。神経の磁気刺激を誘発にするには0.4T以上の磁束密度が必要であり、磁気応答特性として、10ms以下の応答速度が必要であることが示唆された。本年度はまず、神経刺激による電気特性を測定するため、電気刺激装置、電極、及び、応答特性測定のための検出装置の準備から始めた。刺激及び神経からの信号を検出する電極を手作りした。神経の信号を検出するには細胞膜電位レベルの検出が必要なことから、今後の応用利用も可能なように、容易に改造可能な基板ベースの装置を購入して、測定を行った。測定にはラットの坐骨神経を使って行ったが、坐骨神経の状態が個体により違っており、坐骨神経分岐の有無や神経に電極の取り付ける際、神経周囲の膜の剥離により、特性が変わり、安定した測定結果が得られるまで様々な工夫を強いられた。さらに、ラットの坐骨神経は最長でも30mm程度しかとれず、跳躍伝導を誘発するための電気刺激を中枢側の脊椎近くで実施しても、電気刺激による神経のランビエ絞輪における脱分極が神経上の複数のランビエ絞輪で生じており、神経上の伝導速度が2040m/sであることから、1回の跳躍伝導の様子が測定できるかどうかというところである。実験の結果、電気刺激による影響で、神経上の跳躍伝導が観測されるのは刺激した電極位置から20mmから30mm離れたところであることが判った。また、刺激電極から神経上で最初に観測される跳躍伝導波形までの間では、跳躍伝導が逆行性(求心路)にも進行し、電気緊張性伝搬と相殺しあうことも判った。さらに、試行錯誤の末、ラットのしっぽを使って、伝搬特性を測定することを見出した。一般的に、坐骨神経が最も太く、長い神経であるが、ラット特有の特徴である長いしっぽの尾骨神経を使うことで、約150mmの距離での特性測定に成功した。その結果、伝送速度は約25m/sの数値を得た。従って、神経探索を行う場合、神経の跳躍伝導を誘発位置から約30mm離れないと探索できないことが判った。来年度は磁気センサーを使った非接触センシングに挑戦していく予定である。本年度の研究計画は以下の3項目になっているので、各項目毎に進捗を記載する。(1)神経を電気刺激することにより、特定神経が支配する筋肉等の応答特性を測定。これについては、神経に関する電気特性を測定するにあたり、神経刺激により生ずる跳躍伝導等の特性を測定するための測定環境の構築を行った。また、測定に用いる動物として、ラットを選定して、取扱いの講習を受け、東北大学における倫理教育を受講してから実験に取り組んだ。ラットは小型動物であるため、迷走神経は非常に細く、特性測定には不向きであるため、最も太く、測定し易い坐骨神経を用いて、神経の電気刺激に対する特性を測定した。しかし、特性が判ってくるに従い、ラットの坐骨神経は長くても40mm程度であるため、跳躍伝導の特性を測定するには短すぎることが判ってきた。これは、跳躍伝導が電気刺激位置から30mm離れたところから、検出されることが判ってきたためである。また、詳細に測定したところ、この位置から跳躍伝導が双方向(中枢側と末梢側)に伝導し、電気刺激位置とこの位置から30mm離れたところでは相互に影響し合い、跳躍伝導は刺激位置に近いほど、跳躍伝導レベルが小さくなっていることが判った。(2)磁気センサーを用い、神経からの距離と電磁界強度、神経の太さと伝導速度等を測定。これについては、神経から電磁界は非常に微弱であり、地磁気が45μT(テスラ)に対して、数百nT程度と予想し、センサーを選定した。また、伝導特性がどのようになっているかを刺激位置からの距離、伝導速度等の特性を測定した。(3)磁気センサーを2次元配置したセンサーモジュールを試作し、神経の探索可否を検証。これについては、磁気センサーを2つ用意して、1つは神経からの磁束変化、もうひとつは地磁気の影響を測定するセンサーとして、モジュールを試作して、磁束変化が検出できることを確認した。本年度、ラットのしっぽを使った神経の伝導速度の測定を行った。昨年神経伝導速度を25m/Sと報告したが、刺激レベルを様々に変えて、実験したところ、跳躍伝導の一回目と二回目の波形が重なり、伝導波形を見誤っていたことが判り、正確には50m/sであったことが判った。跳躍伝導の発火は50mm離れたところで、生じており、100mm離れると2回発火することが判った。このことから、跳躍伝導の検出は神経上のどこでもできるということではなく、ランビエ絞輪25個分ほど飛んだところで、跳躍伝導の発火が発生しており、ランビエ絞輪毎に跳躍伝導が発生しているのでは無いことが判った。従って、神経上の跳躍伝導を直接、磁気検出するには50mm毎の発火ポイントで行う必要があることが判った。このことが跳躍伝導の検出を難しくしている。磁気検出には磁気インピーダンス効果を利用したセンサーを活用した。

その検出特性を測定したところ、0.1uT1uTまでほぼ線形な感度特性を有しており、跳躍伝導の磁気検出可能な感度(0.12nT)には不足していることが判った。しかし、現状、磁気センサーとしては最高感度であるため、計画に沿って、ロックインアンプを使って感度アップを図った。神経の跳躍伝導の反応が可能な周期信号を使い、このパターン信号のみを検出するようにフィルターリングを施した。これにより、地磁気の影響などの周囲磁界の影響を含めたノイズ成分を除去した検出が可能になるため、磁気センサーの感度アップになるはずである。実験の結果、跳躍伝導そのものを検出するには至らなかった。やはり、磁気センサーそのものの感度が神経の跳躍伝導を検出するには不足していると考えられる。神経刺激については、0.4Tの磁束密度を発生可能な刺激用コイルを試作して、実験を行ったが、コイルの磁気応答特性が悪く、神経を発火させるには至らなかった。神経上で刺激パルスを印可した際の伝達特性を解析した結果、神経周囲に10mmから20mmの距離で減衰しながら伝達しており、跳躍伝導は神経上を約50mm毎に発生していることが判った。また、跳躍伝導の絶対不応期は1.2ms以下、相対不応期は3ms以下という値を得た。跳躍伝導の磁気センシングは、現状の磁気インピーダンス方式のセンサーではセンサー感度が不足しており、120pTの磁束密度を検出するには至らなかった。神経の磁気刺激を誘発にするには0.4T以上の磁束密度が必要であり、磁気応答特性として、10ms以下の応答速度が必要であることが示唆された。本研究の次年度の研究計画では、神経の探索可否の検証することと、神経励起条件に合わせ、神経励起用コイルを試作し、電気刺激と同様、刺激条件を検証することの2つである。神経探索方法には2つあり、刺激コイルを使って探索する方法と磁気センサーを使って探索する方法の2種類が考えられる。本研究では後者の磁気センサーを使って探索可能かどうかを検証する予定である。磁気センサーとして、磁気インピーダンス変化方式のMIセンサーを利用して、検証を進める予定である。この際、ポイントとなるのは、脂肪の下などに隠れた神経からの磁束変化を検出可能かどうか、また、どの程度神経が入り組んだ状況でも検出可能かという点にある。従って、本検証ではまず、神経単独での検出特性を明確にした後、2本の神経が並行している場合の特性を検証していく予定である。次に磁気刺激については、励起用コイルの試作からスタートし、目標とする励起磁束は0.1T程度を想定している。現状、脳の刺激等に利用される磁気刺激装置における励起磁束は1T程度であることから、神経直下ではもっと小さな磁束密度でも、神経の励起が可能ではないかと考えている。しかし、磁気による神経の跳躍伝導の直接励起が可能かどうかということについては文献が存在していない。従って、磁気による神経の直接励起について、機序を明確にすることも重要であるため、来年度、励起用コイルの試作およびパルス磁界発生用電源などの環境整備をどのように行うかがカギとなる。あまり高額な設備は無理なので、磁気パルスを印加時に細胞膜の脱分極閾値以下の電圧を加え、脱分極し易くし、弱い磁気パルスでも脱分極可能なようにして、神経への直接励起で脱分極可能かどうかを検証する。
Subrenal Capsule Assay(SRCA)による感受性の研究

SRACは現時点では最も効率の良い感受性テストであり、臨床効果に関する予言性も効率であるがその正確度をより高めるための研究が実施された。第1にマウスの宿主反応がこの方法の精度に関係した事に関しては、食道癌、頭頸癌などの一部の扁平上皮癌では免疫抑制剤の前処置を行わなくても宿主反応が軽度であったが、サイクロフォスファミドの前投与により更に良い結果が得られた。胃腸癌、乳癌などの腺癌は宿主反応が高度であり、サイクロスポリンA又はブレジニンを用いての前処置が必要と結論された。第2に免疫抑制剤と抗癌剤双方の併用による至適条件が研究された。サイクロフォスファミド、5FUで治療した時は宿主反応は殆どなく、よって免疫抑制剤は不要と結論された。一方マイトマイシン、シスプラチン、アドリアマイシン、メソトレキセートなどは併用が必要であり、併用時の至適投与量が決定された。第3に、新抗癌剤のスクリーニングシステムとしての有用性が研究された。カンプトテシンの誘導体のCPT-11、新しいアンソラサイクリンSM-5887では、現在進行中の第2相研究の成績とSRCAでの成績が良く一致した。第4に臨床相関に関しては、真陽性率が70%以上そして真陰性率は80%程度と高い相関が得られた。
セメントの水和解析に基づくコンクリート構造物の養生計画立案手法の開発

本研究は,セメントの水和率が所要レベルに達するように合理的に養生計画を立案する手法を開発することを目的とする。養生条件がセメントの水和反応に及ぼす影響を解析的に予測する手法を開発するために,養生条件の影響に関する基礎データの取得および各種養生工法の養生効果を評価する実験を実施した。得られた結果を用いて,解析プログラムによる水和解析の検討を行い,養生条件がセメントの水和に及ぼす影響の評価手法を確立した。これらの結果の取りまとめを行い,「セメントの水和解析に基づくコンクリート構造物の養生計画の立案手法」の提案を行った。コンクリート構造物の性能を確保する上で養生は重要な作業工程であり、養生計画を適切に立案することが重要である。本研究では、養生で達成されるセメントの水和の程度を解析的に予測して養生計画を立案する手法を開発することを目的とする。本年度は、以下に示す検討を行った。(1)養生条件の影響に関する基礎データの取得:研究代表者らは、湿潤養生条件がセメントの水和に及ぼす影響を把握するために、各種セメントを用いたコンクリートの各種養生条件下における圧縮強度発現特性を把握し、養生条件がコンクリートの強度発現に及ぼす影響評価手法を提案した。本研究では、評価手法の汎用性を高めるために、種々の温度条件および配合条件において、湿潤養生条件がセメントの水和に及ぼす影響に関するデータの取得を行った。すなわち、3水準の水結合材比(55、40、30%)および温度条件下(10、20、30°C)において、養生条件(水中、封緘、水中+気中、型枠存置+気中、等)が圧縮強度発現に及ぼす影響を把握した。その結果、コンクリートの圧縮強度に及ぼす養生条件の影響への養生温度・配合条件の依存性を定量化し、提案している評価手法へ組込みを行った。(2)供試体レベルの水和解析手法の検討:既存データおよび本年度取得データを用いて、供試体レベルの水和解析を行い、解析パラメータの同定、解析条件の設定方法等の検討を行った。使用する解析プログラムは、コンクリート材料性能解析プログラムDuCOM-SDであり、任意の使用材料,配合および養生条件におけるセメント鉱物の水和解析が可能である。その結果、使用した解析プログラムによって,供試体レベルの水和解析に基づく養生効果の評価がおおよそ可能であることを明らかとした。コンクリート構造物の性能を確保する上で養生は重要な作業工程であり,養生計画を適切に立案することが重要である。本研究では,養生で達成されるセメントの水和の程度を解析的に予測して養生計画を立案する手法を開発することを目的とする。昨年度は,供試体レベルで養生効果の評価試験および解析を実施した。本年度は,以下に示す部材レベルの実験および解析を行い,セメントの水和解析に基づく養生計画立案手法の開発を進める。(1)各種養生方法の効果に関する基礎データの取得各種養生方法による効果の評価には,養生中の内部の水分量を把握する必要がある。本研究では,水分センサーを埋め込んだ小型供試体の一面を種々の方法で養生し,深さ方向の水分量の分布および経時変化を把握することで養生効果を評価した。検討する養生方法は,既存方法として養生マットおよび型枠存置による養生を,近年開発の方法として気泡シートによる給水養生を選定した。実験の結果,水分センサーにより内部の水分量の測定が可能であり,各種養生方法の効果を評価することができた。さらに,透気係数の測定結果との比較により,水分分布測定による養生効果の評価の妥当性を確認できた。(2)部材レベルの水分移動および水和解析手法の検討(1)で得られた実験データを用いて性能解析プログラムによる部材レベルの水分移動および水和解析を行い,解析パラメータの同定,解析条件の設定方法等を検討した。その結果,用いた性能解析プログラムにより,深さ方向の水分量分布,経時変化の予測および水和解析が可能であり,各種養生工法の養生効果の評価が可能であることを明らかとした。(1)各種養生方法の効果に関する基礎データの取得については,水分センサーを埋め込んだ小型供試体の一面を種々の方法(養生マット,給水養生,型枠存置)で養生し,深さ方向の水分量の分布および経時変化を把握することで養生効果を評価した。深さ方向の水分保持効果は,給水養生>養生マット>型枠存置に順で大きく,その効果は,透気係数の測定結果とも相関が高く,水分分布測定による養生効果の評価の妥当性を確認できた。(2)部材レベルの水和解析手法の検討については,コンクリート材料性能解析プログラムにより,(1)で取得したデータを用いて,部材レベルの水分移動および水和解析を行い,解析パラメータの同定,解析条件の設定方法等の検討を行った。その結果,使用したプログラムにより,部材レベルの水和解析に基づく各種養生方法の養生効果の評価が可能であることを明らかとした。コンクリート構造物の性能を確保する上で養生は重要な作業工程であり、養生計画を適切に立案する必要がある。本研究では,養生で達成されるセメントの水和率を解析的に予測し,目標の水和率が得られるように合理的に養生計画を立案する手法を開発することを目的とする。初年度および2年度では,(1)養生条件の影響に関する基礎データの取得,および(2)各種養生方法の効果に関する基礎データを部材レベルの実験による取得,を行い,得られたデータを用いて(3)コンクリート材料性能解析プログラムDucom-SDによる水和解析を行い,解析パラメータの同定・解析条件の設定方法等の検討を行った。

その結果、水和解析により養生効果が圧縮強度発現に及ぼす影響の評価が可能であること,深さ方向の水分量分布,経時変化の予測および水和解析が可能であり,各種養生工法の養生効果の評価が可能であることを明らかとした。最終年度は,実構造物で養生効果を評価する実験を計画していたが,気象条件の変動による測定誤差(水分センサー)が懸念されたため,室内の一定の環境下で配合条件が養生効果に及ぼす影響に関する部材レベルの実験を実施した。実験で得られたデータを用いて,水分移動および水和解析手法を行い,各種養生方法に応じた境界条件の設定,各種パラメータの設定等の妥当性を検討することとした。これらの結果の取りまとめを行い,「セメントの水和解析に基づくコンクリート構造物の養生計画の立案手法」を提案するとともに,提案した養生計画手法に基づきケーススタディーを行い,適用性を検証した。さらに,提案した手法の社会実装を進めるために,解析を行うことなく条件に応じた必要な養生期間を簡単に把握することのできるノモグラムを作成した。今後,さらにケーススタディーを進め各種条件におけるノモグラムを提供することで,提案する手法の社会実装を推進する。本研究は,セメントの水和率が所要レベルに達するように合理的に養生計画を立案する手法を開発することを目的とする。養生条件がセメントの水和反応に及ぼす影響を解析的に予測する手法を開発するために,養生条件の影響に関する基礎データの取得および各種養生工法の養生効果を評価する実験を実施した。得られた結果を用いて,解析プログラムによる水和解析の検討を行い,養生条件がセメントの水和に及ぼす影響の評価手法を確立した。これらの結果の取りまとめを行い,「セメントの水和解析に基づくコンクリート構造物の養生計画の立案手法」の提案を行った。(1)養生条件の影響に関する基礎データの取得については、当初計画どおりの温度条件3水準および配合条件3水準の条件において、養生条件(水中、封緘、水中+気中、型枠存置+気中、等)が圧縮強度発現に及ぼす影響を把握した。その結果、コンクリートの圧縮強度に及ぼす養生条件の影響への養生温度・配合条件の依存性を定量化し、提案している評価手法へ組込みを行った。(2)供試体レベルの水和解析手法の検討については、コンクリート材料性能解析プログラムDuCOM-SDにより、既存データおよび取得データを用いて、供試体レベルの水和解析を行い、解析パラメータの同定、解析条件の設定方法等の検討を行った。その結果、使用したプログラムにより、供試体レベルの水和解析に基づく養生条件の影響評価が可能であることを明らかとした。最終年度は,実構造物における各種養生方法の効果の評価および解析を行うことで,実構造物への適用性を検証する。すなわち,各種養生方法で養生した実構造物の表面からの深さ方向の水分量測定を行い,各種養生方法が構造物中の水分状態に及ぼす影響を把握する。次に,実験で得られたデータを用いて,水分移動および水和解析手法を行い,各種養生方法に応じた境界条件の設定,各種パラメータの設定等の妥当性を検討する。これらの結果の取りまとめを行い,「セメントの水和解析に基づくコンクリート構造物の養生計画の立案手法」の提案を行う。
運動学習の誤差信号に背景が与える影響の解明

本研究は、背景を中心とした座標系によって運動学習の誤差信号が表現されているという仮説を検証することを目的としている。前年度の研究において、機能的磁気共鳴画像反復抑制法を用いて右楔前部及び、右中後頭回が背景座標系での視覚刺激の位置を表現していることを明らかにした。本年度は、脳機能画像撮影中の視線位置の計算し、個視点から外れた試行を除外し解析した。さらに前処理を工夫することで画像の空間解像度を上昇させることに成功した。その結果、背景座標系の神経基盤が指の運動や単純な視覚刺激によって反応する部位とは異なる部位であることなどを明らかになった。背景座標系の神経基盤である楔前部は運動中に標的が動くような条件で活動が上昇することが知られている(Diedrichsenら2005)。この結果は標的の移動によって生じる運動誤差が楔前部において表現されていることを意味しており、運動学習の誤差情報が背景座標系で表現されているという本研究の仮説を支持するものである。26年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、「運動学習の誤差信号が背景との相対的な位置で表現されている」という仮説を検証することを目的としている。本年度は、背景座標系での標的の位置が脳内のどの領域で表現されているか、機能的磁気共鳴画像法を用いて検証した。昨年度中に12名の被験者に対して実験を行っていたが、本年度は6名の新規被験者を追加した。実験ではスクリーンに枠と標的を表示し、枠の位置2か所×標的の位置3か所の6種類の視覚刺激の中から1つが1回の試行で提示した。背景となる枠と標的の相対的な位置が同じ場所に繰り返し提示された場合、背景座標系を表象する部位では脳血流が低下すると予測される。結果は両側内側後頭頂葉、右背側運動前野、右頭頂間溝、右中側頭回で背景座標系に対して有意な反復抑制効果を示した。また、背景座標系を形成するにはある程度の大きさが必要であることを示すために、18人の新規被験者に小さな枠を用いて同様の実験を行ったところ、反復抑制効果を示す部位は存在しなかった。さらに、背景をなくした時に、網膜座標系と頭部座標系のどちらで標的の位置を表象しているか18人の被験者で検証したところ、両側視床網様核が網膜座標系で標的の位置に対して反復抑制効果を示した。これらの結果から、様々な大脳連合野がネットワークを形成して、背景座標系での標的の位置を表現していることが明らかになった。特に、内側後頭頂葉と背側運動前野は到達運動において重要であることが知られており、背景を中心とした運動学習の誤差信号は、これらの部位で表現されているのでないかと推測される。以上の結果をまとめて、第7回モーターコントロール研究会、平成25年度包括脳ネットワーク夏のワークショップ、第91回日本生理学会大会などで発表した。第7回モーターコントロール研究会では若手研究奨励賞を受賞した。本年度は背景座標系で標的の位置を表現している脳部位を、機能的磁気共鳴画像法を用いて明らかにすることに成功しており、順調に進展していると考えられる。平成25年度は背景座標系で標的の位置を表現している脳部位を、機能的磁気共鳴画像法を用いて、明らかにすることに成功した。平成26年度は、背景座標系で表現されている運動学習の誤差情報が脳内でどのように表現されているか解明することを目指す。
精神医学の社会的基盤：対話的アプローチの精神医学への影響と意義に関する学際的研究

2018年度はオープンダイアローグを中心として、精神科医療における対話的アプローチの意義に関する研究を進めたほか、認知症研究におけるナラティブ研究の可能性などについても考察を行った。研究代表者・研究分担者がそれぞれの研究テーマに即して論文執筆や学会発表などを進めるとともに、「精神医学の社会的基盤」研究会を3回開催した。第9回研究会では、カリフォルニア大学のDavid Cohen教授に精神医療における診断の役割に関する講演を依頼し、DSM-5前後における精神医学的診断の意義について研究討論を行った。第10回研究会では、研究分担者の鈴木、浦野、河野がそれぞれの研究テーマに関する発表を行い、第11回研究会では、プロジェクトメンバーの黒木、斎藤、村井、石原が「精神医学の哲学と多元主義」をテーマとして発表と研究討論を行った。また2019年2月には、Open Dialogue Tokyo/Kyoto International Research Meetingを東京及び京都で開催し、オープンダイアローグの研究と実践を国際的にけん引するMary Olson氏(米国),Mark Steven Hopfenbeck氏(ノルウェイ)、Douglas Ziedonis(米国)氏、Shi-Jiuan Wu氏(台湾)に講演を依頼した。本会合にはプロジェクトメンバーおよびオープンダイアローグの研究者などが参加し、オープンダイアローグをめぐる研究状況に関する意見交換と研究討論を行った。2018年度はまた書籍『精神障害を哲学する:分類から対話へ』を出版したほか、オープンダイアローグの哲学とシステムについての総合的に考察する『オープンダイアローグの哲学』(仮題、全2巻を予定)などの執筆と編集作業を進めた。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は精神医学における対話的アプローチ(フィンランドのオープンダイアローグとイタリアのトリエステモデル、英国のリカバリーカレッジ)が精神医学や関連領域に与える影響を評価し、精神医学の社会的基盤を問い直すことを目的としている。2016年度は各研究メンバーが担当テーマに関する基礎的な研究をそれぞれ進めるとともに、「精神医学の社会的基盤」研究会を開催した。研究会では研究メンバーによるクローズドの会のほか、外部の専門家を招いたオープンな研究会も開催し、オープンダイアローグの思想的基盤、イタリアの司法精神医療制度、多文化精神医学、妄想の間主観性などをテーマとして討論を行った。また、オープンダイアローグの開発が行われたフィンランド・ケロプダス病院の視察研修を行うとともに、関連するアプローチとして、ACT(Assertive Community Treatment:包括型地域生活支援)の視察を行った。雑誌論文・学会発表・書籍による成果発表では、トリエステモデルとオープンダイアローグの比較、双極性障害の概念史、精神医学と当事者の関係の明確化、当事者研究の意義などに関する考察の結果が成果として発表された。また、リカバリーカレッジの研究を進めている研究グループと連携し、リカバリーカレッジに関するワークショップの開催の準備を進めたほか、国際学会におけるオープンダイアローグと当事者研究に関するシンポジウムの企画を進め、シンポジウムの提案を行った。2016年度の調査研究によりオープンダイアローグの検討については一定の進展が見られたほか、トリエステモデルの分析に関しても一定の進展がみられた。オープンダイアローグ、リカバリーカレッジに関するワークショップや国際学会におけるシンポジウムの準備も進められた。2016年度は1年目であり、雑誌論文の件数はまだ多くないが、学会発表は活発に行われている。次年度以降の研究計画も進められており、おおむね順調に進展していると考えられる。今年度はオープンダイアローグアプローチの実践や思想的背景に関する研究や、他のアプローチや当事者研究との比較を中心に研究を進め、論文や国際学会などにおいてその成果を発表した。他のアプローチとの比較という点では、地域精神医療の重要なアプローチであるACT(包括型地域生活支援プログラム)に関するインタビュー調査に着手するとともに、下記のように、リカバリーカレッジやイタリアの精神科医療改革に関する専門家・研究者と共同で研究会およびワークショップを開催した。また、精神疾患の概念や診断に関する基礎的な研究を行ったほか、精神疾患と地域とのかかわりや精神疾患に対する当事者の視点などに関する研究も進めてきた。本科研費プロジェクトの研究会である「精神医学の社会的基盤」研究会は3回開催し、家族療法、マディソンモデル(地域精神医療の包括的なモデル)、WHO国際疾病分類ICD-11(ドラフト)と精神障害の診断・分類、イタリアの精神科医療改革をテーマとし、外部の研究者も招へいして、各テーマに関するディスカッションを行った。研究会以外では、リカバリーカレッジに関わる研究者と共同でワークショップを開催したほか、オープンダイアローグ発祥の地であるフィンランド・ケロプダス病院のスタッフと当事者(経験専門家)による講演会を開催した。さらに、研究代表者は、ロンドンで開催されたオープンダイアローグに関する国際会議に参加し、国際的な研究動向の調査と国際研究ネットワークの構築に努めた。オープンダイアローグを中心とした対話的アプローチに関する研究の進展があり、論文発表や学会発表も順調に行われた。国内外の研究者との連携も進んでいる。おおむね順調に進展していると考えている。

第10回研究会では、研究分担者の鈴木、浦野、河野がそれぞれの研究テーマに関する発表を行い、第11回研究会では、プロジェクトメンバーの黒木、斎藤、村井、石原が「精神医学の哲学と多元主義」をテーマとして発表と研究討論を行った。また2019年2月には、Open Dialogue Tokyo/Kyoto International Research Meetingを東京及び京都で開催し、オープンダイアローグの研究と実践を国際的にけん引するMary Olson氏(米国),Mark Steven Hopfenbeck氏(ノルウェイ)、Douglas Ziedonis(米国)氏、Shi-Jiuan Wu氏(台湾)に講演を依頼した。本会合にはプロジェクトメンバーおよびオープンダイアローグの研究者などが参加し、オープンダイアローグをめぐる研究状況に関する意見交換と研究討論を行った。2018年度はまた書籍『精神障害を哲学する:分類から対話へ』を出版したほか、オープンダイアローグの哲学とシステムについての総合的に考察する『オープンダイアローグの哲学』(仮題、全2巻を予定)などの執筆と編集作業を進めた。2017年度以降はリカバリーカレッジとイタリアの精神科医療に関する調査研究を進めるとともに、オープンダイアローグに関する検討も深める。また、精神医学・精神科医療、福祉分野における他のアプローチとの比較検討も進めながら、精神医学・精神科医療全般の現状と将来像に関する検討も進めていく。2018年度が研究期間の最終年度にあたるため、これまで通り、個々の研究テーマをさらに深めていくとともに、研究成果のとりまとめを行う。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
中脳ドーパミンニューロンへの入力の完成時期を経シナプス性逆行性標識により解明する

ラット新生仔線条体においてドーパミン入力線維が形成する「アイランド」領域は、成体でミューオピオイド受容体免疫活性を示す「パッチ」領域に対応すると考えられてきたが、生後4日前後では「アイランド」が「パッチ」よりも一回り大きいことを見出し、線条体の区画形成に新しい洞察を与えた。また、ウイルスベクターを用いて単一の線条体投射ニューロンの形態を調べ、大脳基底核神経回路の生後発達過程を明らかにしつつある。中脳ドーパミン作動性ニューロンのバースト発火活動が報酬予測誤差をコードしており、動物の意志決定や習慣形成へきわめて強い影響を及ぼすことが、W.Schultzらの仕事を始めとする一連の精力的な研究によって認知されるようになったが、いったい幼い動物の脳の回路発達過程においていつ頃からこのドーパミンを介した報酬予測神経回路が機能しているのであろうか。本研究は、改変型仮性狂犬病ウイルスPRV Ba2001を用いて、中脳ドーパミンニューロンへの入力の完成時期を明らかにすることを具体的な目的とする。平成19年度は、入手したTH-IRES-Creノックインマウスについて、免疫組織化学的にCreタンパク質の発現部位を検討し、中脳のドーパミンニューロン群について高い特異性でのCre発現を確認した。これにより、このマウス系統を用いて、Cre-loxPシステムを応用したドーパミンニューロン特異的な経シナプス性逆行性標識を実行するための必要条件のひとつを確認したこととなる。また、標準的な仮性狂犬病ウイルスについて成体ラット脳への注入感染実験を行い、仮性狂犬病ウイルスの振る舞いを調べた。また齧歯類新生仔の線条体への神経トレーサーの注入方法をほぼ確立することができたので、この手法を用いた研究成果について学会発表を行った。さらにin vitroで改変型仮性狂犬病ウイルスPRV Ba2001の性能試験を行い、期待通りの結果を得ている。以上のように平成20年度に向けて整えておくべき準備がほぼ完了したといえる。中脳ドーパミン作動性ニューロンのバースト発火活動が報酬予測誤差をコードしており、動物の意志決定や習慣形成へきわめて強い影響を及ぼし得ると広く認知されるようになったが、いったい幼い動物の脳の回路発達過程において、いつ頃からこのドーパミンを介した報酬予測神経回路が機能しているのであろうか。本研究は、改変型仮性狂犬病ウイルスPRV Ba2001を用いて、中脳ドーパミンニューロンへの入力の完成時期を明らかにすることを具体的な目的としている。平成20年度は、まず齧歯類新生仔線条体への神経トレーサーの注入方法が確立できた。TH-IRES-Creノックインマウス成体の線条体への改変型仮性狂犬病ウイルスPRV Ba2001の注入では、有効なウイルス感染が得られなかったため、同ウイルスをEmx1Creノックインマウス大脳新皮質に注入したところ、少数の皮質および視床ニューロンへの感染が得られた。実験に使用したウイルスの力価に問題があるものとみて、現在ウイルス調整法の再検討を行っている。また上記の研究と並行して、生後1週までのラット線条体において、チロシン水酸化酵素免疫活性を強く示す「ドーパミンアイランド」が、小胞性グルタミン酸輸送体免疫活性を強く示す「グルタミン酸アイランド」とほぼ境界線を一にして共に「入力アイランド」を形成する一方、μオイピオイド受容体免疫活性強陽性の「パッチ」領域は、「入力アイランド」よりも一回り小さいことを見出し、責任著者かつ筆頭著者として論文に報告した。さらに現在、齧歯類新生仔線条体への神経トレーサーの注入方法が確立できたことから、GFPを発現する改変型シンドビスウイルスを順向性トレーサーとして用いて、線条体マトリックス領域の投射ニューロンの軸索の成熟過程を単一ニューロン単位で解析することを推進中であり、この内容について学会発表を行った。
ラットリング超伝導体βパイロクロア酸化物の電子状態研究

βパイロクロア酸化物超伝導体AOs2O6(A=K, Rb, Csに対しTc=9.6, 6.3, 3.3 K)においては、OsO6の作るかごの中のアルカリ原子のラットリングが超伝導クーパー対を作る引力の起源となっていることが、物性研廣井らのこれまでの系統的な研究から明らかになっている。殊に、KOs2O6では、電子比熱係数から見積もられる多体効果による質量増強因子λが約6と極めて大きく、超伝導転移に伴う比熱の大きな飛びなどから極めて強結合の超伝導が実現していることが明らかになっており、その電子状態は大変興味深い。我々は、昨年度KOs2O6のdHvA振動の測定に成功し、フェルミ面を完全に決定し、また多体効果による質量増強がλ=5--8であり、電子格子相互作用によるものとしては異常に大きいことを示した。A=Rb, Csにおいても高圧下においてはTcがA=K並みに増大することが知られており、その電子状態の変化を調べることはたいへん興味深い。そこで、今年度はA=Csについて26.4 kbarの高圧までdHvA振動測定を行った。CsOs2O6のフェルミ面は以前の我々のdHvA測定で完全に決まっている。圧力印加によりTcは従来の報告と同程度の増大を示した。dHvAデータの詳細な解析はまだ行っていないが、有効質量も若干増大しているようである。上部臨界磁場の解析おもあわせて行い、結合係数λの圧力変化を考えたい。24年度が最終年度であるため、記入しない。βパイロクロア酸化物超伝導体AOs206(A=K,Rb,Csに対しTc=9.6,6.3,3.3K)においては、OsO6の作るかごの中のアルカリ原子のラットリングが超伝導クーパー対を作る引力の起源と,なっていることが、物性研廣井らのこれまでの系統的な研究から明らかになっている。殊に、KOs206では、電子比熱係数から見積もられる多体効果による質量増強因子λが約6と極めて大きく、超伝導転移に伴う比熱の大きな飛びなどから極めて強結合の超伝導が実現していることが明らかになっており、その電子状態は大変興味深い。我々は、最近KOs206のdHvA振動の測定に成功した。測定には水冷銅磁石と希釈冷凍機を使用し、最高磁場35T最低温度30mKまでトルク法で測定した。観測されたフェルミ面とバンド計算との一致は良く、フェルミ面は完全に決定された。多体効果による質量増強はλ=5--8であり、電子格子相互作用によるものとしては異常に大きい。最大で自由電子質量の26倍の重い有効質量が観測されており、これは、f電子系以外ではまれに見る重い電子である。さらに、LuNi2B2CやMgB2など比較的高いTcを持つ電子格子相互作用起源の超伝導体の場合、特定のフォノンと特定の電子状態との間にだけ特に強い相互作用があって高いTcが実現しているが、それらと比較した場合に、KOs206では質量増強の強さがフェルミ面の各部位や方位によらずほぼ一様であるという顕著な特徴があることが明らかになった。これはこの系における電子ラットリング相互作用の特性を示すものと思われる。当初計画では、常圧下でのフェルミ面の決定と、圧力変化の測定の2本立てであるが、予定期間の半分を終わって、上述のようにKOs206のフェルミ面が完全に決定されているので、概ね順調に進展していると言える。今後は、dHvA振動が未測定のRbOs206に注力し、常圧でのフェルミ面の完全決定と、圧力変化の測定を実施したい。
畜産に関わる温室効果ガスの制御と利用に関する研究

世界でも有数の畜産地帯であるオーストラリア・クィーンズランド州の中心大学であるクィーンズランド大学とわが国の主要な畜産地帯である東北海道に位置する帯広畜産大学の多方面の専門分野が協力して家畜由来メタンの制御・利用技術を開発して体系化することを目的として日豪政府間ブロジェクト(95AGF05)を締結した。文部省科研費による支援を受け、1999年からクイーンズランド大学との間で「畜産に関わる温室効果ガスの制御と利用」共同ブロジェクトを開始した。研究期間は1999年度から2001年度の3カ年である。本科研費では1999年にオーストラリア・クイーンズランド大学において日豪の研究者によるワークショッブを開催し、家畜由来メタンの制御・利用技術の体系化について討議した。すなわち、安全な天然資材による家畜のルーメン内メタン発酵の栄養学的制御技術に関する共同研究を基軸にして、さらに家畜糞尿のメタン発酵に対しても環境工学・生化学的制御技術の導入について両大学の研究者で検討した。ワークショッブでは糞尿処理の適正化技術及びその資源化についてバイオガスプラント技術についても活発に討議し、それらの議事録を製本し、出版した。また2000年にはメタンエネルギーの高度化変換バイオシステムの構築を目指して、専門分野を拡大し、「畜産に関わる温室効果ガス-メタン-の制御と利用」国際セミナーをクイーンズランド大学で開催した。これらの共同研究の成果を纏め、出版した。さらに科研費最終年度の2001年には参加国を拡大し、帯広において11月7日11日に国際会議「畜産における温室効果ガスの制御と利用」を開催し、これらの共同ブロジェクトの成果を公開した。本国際会議にはこれらの分野について21カ国以上から220名の参加者を得、100題の講演論文が投稿され、本会議の開催主旨について世界的に高い関心を集めた。(1)本年度は帯広畜産大字とクイーンズランド大学の両大字で行われてきた安全な天然資材による家畜のルーメン内メタン発酵の栄養学的制御技術に関する共同研究を基軸にして、さらに家畜糞尿のメタン発酵に対しても環境工学・生化学的制御技術の導入について両大学の研究者で検討した。反芻家畜のルーメン内メタン発酵に対して、種々の天然マニピュレータが供試され、含硫アミノ酸であるL-システインあるいは植物性抽出物ユッカにメタン生成抑制効果か認められた。しかし、飼料条件による効果の変動の解明が今後の課題である。(2)クイーンズランド州における家畜糞尿処理の実状を把握し、バイオマスエネルギとしての利用の可能性を検討するために、クーンズランド州DPI及びCSIRO両研究機関の協力の下で帯広畜産大学とクイーンズランド大学の研究者が共同で調査し、クイーンズランド大学においてワークショップを開催し、問題点について討議した。クイーンズランド州では水資源に乏しいことから、各畜産農家ではラグーン等を利用して、水のリサイクルを行っている。しかし、これらは地下水源、河川を汚染し、近接する住環境に悪影響を及ぼしている。またラグーンから放出されるメタンは相当量に上ると推定されるが、これに対してもまだ有効な処置は講じられていない。ワークショップでは糞尿処理の適正化技術及びその資源化についてバイオガスプラント技術についても活発に討議し、それらの議事録を製本し、出版した。(3)クイーンズランド大学ブルース・ヤング教授を招聘し、帯広畜産大学において畜産と地球温暖化に関する学術ゼミナールを開催した。ゼミナールには帯広畜産大学学部学生・院生、教職員及び道立農業試験場等の他機関研究者約200名の参加があり、活発な質疑応答があった。1.平成11年度に引き続き、帯広畜産大学とクイーンズランド大学との表記課題に関する共同調査・研究をオーストラリア連邦研究機関CSIRO及びクイーンズランド州研究機関QDPIの協力の下に実施し、ワークショップを開催した。

(1)ルーメンメタン生成の制御:反芻家畜のルーメン内メタン発酵の制御に関して、メタン生成菌のDNA解析、バイオエンジニヤイリングの可能性が示唆された。またユッカ等の天然資材による抗生物質代替マニピュレータの実用化が提案された。(2)家畜糞尿処理:わが国において家畜糞尿に起因する河川の硝酸態窒素、クリプトスポリジウム等の病原性原虫による水質汚染が大きな環境問題となっているが、クイーンズランド州においても畜産農家のラグーンからの地下水源、河川汚染が進行し、近接する住環境に悪影響を及ぼしていることが判明した。また家畜糞尿を含む有機性廃棄物リサイクルのためのコンポスト処理技術がオーストラリア側から提案された。さらにスラリーのインジェクション法施用試験結果及びアルファルファ栽培に対する肥効試験の結果が報告され、インジェクション方はスラリー散布に比べ、耕地施用時の悪臭・アンモニア揮散抑制に有意な方法であることが明らかになった。(3)バイオガスシステム:糞尿処理の適正化技術及びその資源化についてバイオガスプラント技術の導入と技術面での問題点が討議された。また家畜糞尿からのメタンエネルギーの利用について燃料電池の開発が検討された。2.クイーンズランド大農業機械化センター長Tullberg博士を招聘し、帯広畜産大学においてバイオマスエネルギーの利用に関する共同ゼミナールを開催した。ゼミナールには帯広畜産大学学部学生・院生、教職員及び道立農業試験場等の他機関研究者約100名の参加があり、活発な質疑応答があった。3、ワークショップの成果を纏め、オーストラリアにおいて出版した。世界でも有数の畜産地帯であるオーストラリア・クイーンズランド州の中心大学であるクイーンズランド大学とわが国の主要な畜産地帯である東北海道に位置する帯広畜産大学の多方面の専門分野が協力して家畜由来メタンの制御・利用技術を開発して体系化することを目的として日豪政府間プロジェクト(95AGF05)を締結した。文部省科研費による支援を受け、1999年からクイーンズランド大学との間で「畜産に関わる温室効果ガスの制御と利用」共同プロジェクトを開始した。研究期間は1999年度から2001年度の3カ年である。本科研費では1999年にオーストラリア・クイーンズランド大学において日豪の研究者によるワークショップを開催し、家畜由来メタンの制御・利用技術の体系化について討議した。すなわち、安全な天然資材による家畜のルーメン内メタン発酵の栄養学的制御技術に関する共同研究を基軸にして、さらに家畜糞尿のメタン発酵に対しても環境工学・生化学的制御技術の導入について両大学の研究者で検討した。ワークショップでは糞尿処理の適正化技術及びその資源化についてバイオガスプラント技術についても活発に討議し、それらの議事録を製本し、出版した。また2000年にはメタンエネルギーの高度化変換バイオシステムの構築を目指して、専門分野を拡大し、「畜産に関わる温室効果ガス-メタン-の制御と利用」国際セミナーをクイーンズランド大学で開催した。これらの共同研究の成果を纏め、出版した。
コラーゲン受容体GPla/lla細胞内ドメインを介した血小板活性化の機序

GPIa/IIaに結合すると思われる蛇毒rhodocytinの特異性を確認するために、GPIa/IIaのレコンビナントを組み込んだリポソームを作成し、rhodocytinとの結合を確認した。また、rhodocytinを用いたアフィニティカラムを作成し、血小板膜糖蛋白との結合を見ることにより、GPIa/IIaとの結合を確認した。このようにrhodocytinがGPIa/IIaと反応することを確認した上で、GPIa/IIaによる血小板信号伝達系路の研究を始めた。これまでに、GPIa細胞内ドメインにチロシンキナーゼであるSrcが結合しており、コラーゲンとGPIa/IIaの結合によりSrcの活性化が起きること、またSrcの活性化のためにはGPIa/IIaがクラスタリングを起こす必要があること、SrcとCasとよばれるアダプター蛋白が結合し、CasがSrcのチロシンキナーゼ活性により燐酸化されることを見いだした。GPIaからCasに至る信号伝達系路は、細胞内cAMPの増加によっても抑制されなかった。一方、これらの現象の下流に位置するSykのチロシンリン酸化、またそのまた下流の細胞内カルシウム動員を起こすphospholipase C-γ2の活性化は、細胞内cAMPの増加により著明に抑制された。GPIa/IIaはこのようにコラーゲン惹起血小板活性化の特徴をよく示しており、コラーゲン受容体の代表的なものの一つであることが確認された。さらにrhodocytinでなく、抗GPIa抗体のF(ab')2部分を精製し、これをシャーレにコーティングしたものに血小板を張り付け、その活性化を判定することも行った。これによりGPIa/IIaがFAKを含むfocal adhesion complexの形成に至る信号を惹起することを確認した。GPla/llaに結合すると思われる蛇毒rhodocytinの特異性を確認するために、GPla/llaのレコンビナントを組み込んだリポソームを作成し、rhodocytinとの結合を確認した。また、rhodocytinを用いたアフィニティカラムを作成し、血小板膜糖蛋白との結合を見ることにより、GPla/llaとの結合を確認した。このようにrhodocytinがGPla/llaと反応することを確認した上で、GPla/llaによる血小板信号伝達系路の研究を始めた。これまでに、GPla細胞内ドメインにチロシンキナーゼであるSrcが結合しており、コラーゲンとGPla/llaの結合によりSrcの活性化が起きること、またSrcの活性化のためにはGPla/llaがクラスタリングを起こす必要があること、SrcとCasとよばれるアダプター蛋白が結合し、CasがSrcのチロシンキナーゼ活性により燐酸化されることを見いだした。GPlaからCasに至る信号伝達系路は、細胞内cAMPの増加によっても抑制されなかった。GPla/llaはこのようにコラーゲン惹起血小板活性化の特徴をよく示しており、コラーゲン受容体の代表的なものの一つであることが確認された。さらにrhodocytinでなく、抗GPla抗体のF(ab')2部分を精製し、これをシャーレにコーティングしたものに血小板を張り付け、その活性化を判定することも行った。これによりGPla/llaがFAKを含むfocal adhesion complexの形成に至る信号を惹起することを確認した。

GPIa/IIaに結合すると思われる蛇毒rhodocytinの特異性を確認するために、GPIa/IIaのレコンビナントを組み込んだリポソームを作成し、rhodocytinとの結合を確認した。また、rhodocytinを用いたアフィニティカラムを作成し、血小板膜糖蛋白との結合を見ることにより、GPIa/IIaとの結合を確認した。このようにrhodocytinがGPIa/IIaと反応することを確認した上で、GPIa/IIaによる血小板信号伝達系路の研究を始めた。これまでに、GPIa細胞内ドメインにチロシンキナーゼであるSrcが結合しており、コラーゲンとGPIa/IIaの結合によりSrcの活性化が起きること、またSrcの活性化のためにはGPIa/IIaがクラスタリングを起こす必要があること、SrcとCasとよばれるアダプター蛋白が結合し、CasがSrcのチロシンキナーゼ活性により燐酸化されることを見いだした。GPIaからCasに至る信号伝達系路は、細胞内cAMPの増加によっても抑制されなかった。一方、これらの現象の下流に位置するSykのチロシンリン酸化、またそのまた下流の細胞内カルシウム動員を起こすphospholipase C-γ2の活性化は、細胞内cAMPの増加により著明に抑制された。GPIa/IIaはこのようにコラーゲン惹起血小板活性化の特徴をよく示しており、コラーゲン受容体の代表的なものの一つであることが確認された。さらにrhodocytinでなく、抗GPIa抗体のF(ab′)2部分を精製し、これをシャーレにコーティングしたものに血小板を張り付け、その活性化を判定することも行った。これによりGPIa/IIaがFAKを含むfocal adhesion complexの形成に至る信号を惹起することを確認した。