hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
系外惑星の軌道・表層進化とそのリモートセンシングへの応用

本年度の研究実施計画に記載した以下の4つのテーマに関する実績を述べる。1)ケプラー探査機の短周期トランジット惑星に対して、系統的なリング探査を完了した。リングを持つ惑星候補は発見できなかったが、観測データに基づいてその存在確率の上限値を得ることに初めて成功した。2)地球の表層データを用いて、太陽に対する自転傾斜角を変化させた10個程度の大循環シミュレーションを実行し、光度曲線の周波数変動を計算するに成功した。現在そのデータを解析し、将来のミッションによって惑星の自転傾斜角がどの程度の精度で推定可能であるか検証中である。3)星震学を用いて、約20個のトランジット惑星系の中心星の自転傾斜角を推定した。これは現時点で最大のカタログである。特にケプラー408と呼ばれる地球サイズのトランジット惑星を持つ系の自転傾斜角が約40度であることを発見した。これは、自転公転軸がずれている系において、最小サイズの惑星である。さらに、この方法から推定される主星の自転周期を従来の光度関数変動から推定される測光的自転周期と比較することで、測光的手法の信頼性の問題点を指摘し、また、いくつかの系に対して、自転周期と公転周期の共鳴がある可能性を発見した。4)ブラックホール連星の周りを公転する天体の運動を、3体問題の摂動論によって解き、その視線速度曲線から、中心連星系の情報を読み取る方法論を構築した。重力波を放出するブラックホール連星の発見は、より長周期のブラックホール連星が多数実在していることを示唆しており、その探査のための一つの方法論を提案できた。特に星震学の解析において、予想していなかった小さいサイズの惑星を持つ系での習性公転自転角のずれを発見することができ、その起源に大きな制約を課すことができた。また、その過程で、従来広く用いられている主星の自転周期の測光的推定のある割合が、信頼できないことを発見した。これは、恒星の自転周期という基本的なパラメータの理解に密接に関係するもので、現在、その方向の研究をさらに推進中である。予想以上に順調に進んでいるので、基本的にはこの方向を進めていく。ケプラーデータから星の光度曲線の測光的時間変動を系統的に再解析する予定である。大循環モデルシミュレーションについては、その結果の解釈を行うために、人為的な大陸分布を与えて解析し直すなど、物理的な理解を進めている。また、ブラックホール連星探査法については、解析的摂動論が使えないようなより一般的パラメーター空間に対して、数値シミュレーションを用いて検出可能性を検討する。
統合失調症患者のメタ認知を客観的に評価する手法の確立

本研究では、正解確信度の評定を含む表情認知課題を用いて統合失調症のメタ認知を客観的に捉える新たな評価法を確立することを目指している。そのために、「(1)本研究で評価されるメタ認知指標と統合失調症患者の妄想の重症度との関連の検証」「(2)表情認知課題実施中の顔の各領域における注視点数と、メタ認知指標との関連の検証」「(3)統合失調症患者のメタ認知について、本研究のメタ認知指標を用いて健常成人との比較にて検証」という3つの研究目的を設定している。今年度は、統合失調症患者を対象としてデータ収集を行い、表情認知課題を用いて評価されるメタ認知指標と統合失調症患者の症状の重症度、および表情認知課題実施中の視線解析データとの相関を検証した。その結果、メタ認知指標と妄想の重症度との間に有意な相関が確認された。これは、先行研究で示されているメタ認知と妄想との関連を反映した結果であり、表情認知課題を用いてメタ認知を客観的に捉えるという本研究での取り組みの有用性を示唆すると考えている。さらに、メタ認知指標と顔の領域の中の特定の領域への注視点数との間にも有意な相関が確認された。このことから、表情認知課題中の知覚処理がメタ認知的に影響する可能性が考えられる。以上の結果から、引き続き研究を進めることで、臨床場面で活用されていなかった統合失調症のメタ認知についての新たな評価の視点を創造することにつながると考えられる。なお、ここまでのデータ解析の一部については、11th Pan-Pacific Conference on Rehabilitation in Hong Kongにおいて報告している。2018年度は、3つの研究目的のうち、統合失調症患者を対象として実施する「(1)本研究で評価されるメタ認知指標と統合失調症患者の妄想の重症度との関連の検証」、および「(2)表情認知課題実施中の顔の各領域における注視点数と、メタ認知指標との関連の検証」の2つの検証を予定していた。予定症例数の設定は50名であったが、50名分のデータ(視線解析データについては視線の捕捉率が70%未満の者のデータを採用しないため44名分のデータ)を収集済みである。視線解析データも含めて予定症例数を超えるよう統合失調症患者を対象としたデータ収集を継続する予定であるが、おおよその平均年齢・教育年数、および性別の分布が明確になってきている。そのため、3つ目の研究目的である「(3)統合失調症患者のメタ認知について、本研究のメタ認知指標を用いて健常成人との比較にて検証」を進めることができる段階にあるといえる。以上のことから、進捗状況としては「おおむね順調に進展している」と考えている。今後は、視線解析データも含めて予定症例数を超えるよう統合失調症患者を対象としたデータ収集を継続するが、3つ目の研究目的である「(3)統合失調症患者のメタ認知について、本研究のメタ認知指標を用いて健常成人との比較にて検証」を達成するために健常者を対象としたデータ収集を進めていく。同時に、2018年度に収集したデータについて国内外での学会発表を行い、要因間の相互関係の検証を中心とした解析について新たな視点を得ること、および本研究の今後の発展の方向性などを検討する予定である。

視線解析データも含めて予定症例数を超えるよう統合失調症患者を対象としたデータ収集を継続する予定であるが、おおよその平均年齢・教育年数、および性別の分布が明確になってきている。そのため、3つ目の研究目的である「(3)統合失調症患者のメタ認知について、本研究のメタ認知指標を用いて健常成人との比較にて検証」を進めることができる段階にあるといえる。以上のことから、進捗状況としては「おおむね順調に進展している」と考えている。今後は、視線解析データも含めて予定症例数を超えるよう統合失調症患者を対象としたデータ収集を継続するが、3つ目の研究目的である「(3)統合失調症患者のメタ認知について、本研究のメタ認知指標を用いて健常成人との比較にて検証」を達成するために健常者を対象としたデータ収集を進めていく。同時に、2018年度に収集したデータについて国内外での学会発表を行い、要因間の相互関係の検証を中心とした解析について新たな視点を得ること、および本研究の今後の発展の方向性などを検討する予定である。人件費・謝金については、統合失調症患者を対象としてデータ収集をおこなったものの、以前に研究協力施設において本研究と類似の内容でほぼ同じ実施時間で行った予備研究の際に謝金を設定していなかったことから、公平性を考慮して謝金を設定せずデータ収集を実施することとなったため、今年度の使用がなかった。次年度は、健常成人へのデータ収集にあたって研究協力謝金として使用する。旅費については、研究進捗状況を発表する予定であった学会前日に北海道胆振東部地震が発生したため学会会場に赴くことができず、演題取り下げとなったため、当初の予定より支出が少なかった。当該演題、およびその後の研究の進捗を次年度に学会で発表するために、旅費を使用する予定である。その他については、上記と同じ理由での学会参加費の支出の中止があったため、次年度に使用する。さらに、論文の英文校正のために次年度に使用する予定である。
歯の初期発生に関わる遺伝子群および細胞群の同定・機能解析

また、骨の発生に必須の転写因子であるRunx2/Cbfa1のノックアウトマウスでは歯の形成障害が起こることから、Runx2/Cbfa1のisoformの違いによる歯胚の発生・分化との関連があるのではないかと考え、器官培養法とアンチセンス法(S-ODN法>を組み合わせて検索を行い、タイプII/III Runx2/Cbfa1が歯胚の発生・発育やエナメル上皮、象牙芽細胞の分化に関与している事、またタイプII/III Runx2/Cbfa1がdentinmatrix protein 1,dentin sialophosphoprotein, amelogenin and ameloblastinの発現を制御している事を明らかにした。平成13年度はマウス胎生10.5日(E10.5)と12.0日(E12)の下顎からmRNA採取し、cDNAに変換した後、cDNAサブトラクションを行い、歯胚の初期発生に関わる可能性が高い遺伝子群を見い出した。その内訳は、E10.5に強く発現するものとして核内蛋白2つ、シグナル伝達に関連するもの2つ、熱ショック蛋白4つ、細胞外蛋白1つ、未知の遺伝子6つが、一方E12に強く発現するものとしてアミノ酸翻訳に関するもの1つ、細胞内輸送に関するもの1つ、アクチン集重合に関するもの1つ、膜関連蛋白1つ、そして未知の遺伝子3つであった(Int. J. Dev. Biol.,45:675-680,2001)。半定量的RT-PCR法により発現の差異が確認された遺伝子の中で、E10.5の下顎に差異的に発現しているSet-α, heat shock protein (Hsp86,Hsc73,Hsj2)について、マウス胎仔の下顎におけるその発現様式をin situ hybridization法を用いて検索した。その結果、Set-α、Hsp86,Hsc73,Hsj2の発現分布は歯胚の発育過程のすべての段階で歯原性上皮および歯乳頭内の間葉系細胞にほぼ一致しており、特にE18における鐘状期歯胚では内エナメル上皮と象牙芽細胞に限局した発現を認めた。興味あることにこれらの遺伝子はこれまで歯胚発生との関連において報告されていないものであった。Set-αについてはすでにThe Histochemical Journalに投稿し、現在印刷中である。Hsp86,Hsc73,Hsj2の発現分布については、投稿準備中である。また我々はすでに歯胚の発育段階でアポトーシスが歯牙の形態形成に密接に関連していることを示した(Histochem. J. 31:367-377,1999)。さらに、細胞死実行の主要因子である活性化型Caspase-3に対する特異的抗体を用いてアポトーシスとの関連を詳細に検討し、TUNEL陽性細胞の分布にほぼ一致して活性化型Caspase-3が発現しており、歯胚形成過程におけるカスパーゼ3経由のアポトーシスの存在を明かにした(Histochem. J. 33:253-258,2001)。さらに硬組織の形成と関連性がある事が示されているcore binding factor 1(cbfa1)についてin situ hybridization法による発現様式と、アンチセンス法による機能解析を器官培養法を用いて行った。その結果、cbfa1が帽状期以降の歯胚の発育に関与している事が明かとなった。この結果についても現在論文投稿準備中である。平成14年度はマウス胎生10.5日(E10.5)と12.0日(E12)の下顎からmRNA採取し、cDNAに変換した後cDNAサブトラクションを行い、E10.5に強く発現するSet-α、heat shock protein(Hsp86,Hsc73,Hsj2)、nucleolin、Pgk1、E12.0に強く発現するL21、ATPase6、Tβ4、Ifrg15)についてマウス胎仔の下顎におけるその発現様式をin situ hybirdization法を用いて検索し、これらの遺伝子がいずれも歯胚の発生過程に発現している事を確認した。これらの遺伝子は歯胚発生過程では、過去に報告がないものであり、歯牙発生の分子メカニズムに新たな知見を加えるものであった。これらのうち、heat shock protein(Hsp86,Hsc73,Hsj2)については論文発表を行った。(Histochem. J. 34、3-4:105-109 2002)。その結果、cbfa1が帽状期以降の歯胚の発育、およびエナメル芽細胞や象牙芽細胞の発育と分化に関与している事が明かとなった。また、Hoechist33342

蛍光色素を用いた細胞分離法にて、歯胚形成開始期のマウス胎齢11日(E11)の下顎より歯胚幹細胞を含むと予想される未熟な細胞を回収し、低密度培養にによる分離細胞のクローニングを行っている。この段階でコロニーを形成した細胞群の中に歯原性幹細胞が含まれている可能性があり、クローニング終了後は、象牙芽細胞あるいはエナメル芽細胞への分化誘導因子・成長因子を添加し、reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR)により分化マーカーを検索し歯胚形成に関わるクローニング細胞を選定する。さらに、選定した細胞を3次元培養にて歯胚再構築能を有しているか検討し歯胚幹細胞を同定する。平成15年度は骨の発生と分化に必須の転写因子であり、歯の発生との関連も指摘されているRunx2/Cbfa1について、isoformの違いによる歯胚の発生・分化との関連を、器官培養法とアンチセンス法(S-ODN法)を組み合わせて検索を行った。その結果、タイプII Runx2/Cbfa1の発現抑制により歯胚の発育の抑制およびエナメル芽細胞と象牙芽細胞への分化が保母敢然に抑制された。Runx2/Cbfa1の下流に位置するDMP1,DDSP, AMGN, AMBNの各遺伝子の発現も抑制された。タイプI Runx2/Cbfa1では歯胚の発育抑制や下流に位置する各遺伝子の発現の抑制は観察されなかった。この事から歯胚の発生・発育・分化にタイプII Runx2/Cbfa1が深く関与している事が明らかになった。現在この結果について論文を投稿準備中である。また、Hoechist33342蛍光色素を用いた細胞分離法にて、歯胚形成開始期のマウス胎齢11日の下顎より歯胚幹細胞を含むと予想される未熟な細胞を回収し、低密度培養による分離細胞の培養を行い、形態の異なる種々のコロニーの形成を認めた。現在これらのコロニーについてクローニングを続行中であり、ES細胞やEC細胞に特異的に反応する抗体を用いて細胞の性格を検索中である。cDNAサブトラクションにより検出した歯胚の発生初期に発現する遺伝子のうち、その蛋白構造のモチーフから細胞膜表面の受容体と予想される因子について、現在抗体の作成やyeast two hybrid法による細胞内パートナー蛋白の検索、等を行っており、これらの結果を用いて歯胚の基となる細胞(歯原性幹細胞)の単離・同定が可能となり、歯胚再生への新たな段階へ研究をすすめる事ができる。平成16年度はRunx2/Cbfalについて、isoformの違いによる歯胚の発生・分化との関連を、器官培養法とアンチセンス法(S-ODN法)を組み合わせて検索を行い、タイプII/III Runx2/Cbfalが歯胚の発生・発育・分化に関与している事を明らかにし、Boneに投稿である。又、我々がcDNAサブトラクション法により検出した歯胚形成に関連した遺伝子のうち、thymosin beta 4(Tb4)、PGK-1についてin situ hybridization法による歯胚における発現状況を検索し、これらが歯胚の発生と分化に関連している事を明らかにした。特にTb4については、matrix metaloproteinase-
抗酸化系遺伝子改変動物を用いた母体糖尿病による胎児異常発生抑止効果に関する研究

母体糖尿病による胎児異常の発症機序として、従来、遺伝的素因、高血糖や高ケトン体血症などの代謝性変化、子宮胎盤血流量の減少など、さまざまな要因が考えられているが、その一つに活性酸素等の発生による酸化ストレスの関与が示唆されている。今回の研究では、母体糖尿病による胎児異常発生における酸化ストレスの意義を検討するために、主要な抗酸化系の1つであるチオレドキシンレドックスサイクルに着目し、チオレドキシンを過剰発現するトランスジェニックマウスを作成して、胎児異常発生の抑止効果について検討する。全身的チオレドキシン発現マウス(雄)を、遺伝子を改変していない正常マウス、1型糖尿病モデルマウス、2型糖尿病モデルマウス、あるいはストレプトゾトシン投与により作成した実験的糖尿病マウス(雌)と交配させる。母親の代謝状態ならびに胎仔の発育・代謝状態を観察するとともに、後の解析のために、母獸の血液、胎仔の血液、各種臓器、全身骨格標本を保存する。保存した母獸および胎仔の検体を用いて、血糖値などの代謝状態を評価するとともに、胎仔におけるチオレドキシンの発現レベルを調べる。その発現レベルと各種胎仔異常発生、すなわち流産率、胎仔発育、先天奇形発症率などとの関連を検討する。また、胎仔発育に関連するとされる各種成長因子、インスリン、IGFなどを測定する。また先天奇形については、保存した全身骨格標本を観察することにより、特に骨格系の異常の頻度を調べる。以上の結果をまとめて論文発表する予定であり、現在一つ一つのステップは進んでいるが、結果を得るところまでは至っていない。我が国における糖尿病患者数は急速に増大しつつあり、糖尿病合併妊娠の問題も大きくなってきている。糖尿病合併妊娠が胎児、新生児に及ぼす異常には、先天奇形、巨大児などが知られる。母体糖尿病における胎児異常の発症機序として、酸化ストレスの関与が示唆されている。本研究では主要な抗酸化系の1つであるチオレドキシンレドックスサイクルに着目し、チオレドキシンを過剰発現するトランスジェニックマウスを作製し、胎児異常の発生の抑止効果を検討する。これまでに、チオレドキシンcDNAをインスリンプロモーターを用いて発現するトランスジーンを受精卵にマイクロインジェクションし、生まれたマウスをスクリーニングしたところ、2系統のトランスジェニックマウスが得られている。また、このトランスジェニックマウスでチオレドキシンを膵島特異的に過剰発現していることをwestern blotにより確認している。これらマウスは、繁殖を続けており、今後、ストレプトゾトシン投与により、実験的に糖尿病にしたトランスジェニック雌マウスを妊娠させ、その子宮における胎仔の発育、インスリン分泌能をチオレドキシンを発現する胎仔としていない胎仔との間で比較する。また一方で、全身的にチオレドキシンを発現するトランスジェニックマウスをベータアクチンプロモーターを用いて作製している。1匹のfounder mouseが得られており、今後これを繁殖し、上述のように、母体糖尿病における胎仔の異常への抵抗性を検討する。

これらマウスは、繁殖を続けており、今後、ストレプトゾトシン投与により、実験的に糖尿病にしたトランスジェニック雌マウスを妊娠させ、その子宮における胎仔の発育、インスリン分泌能をチオレドキシンを発現する胎仔としていない胎仔との間で比較する。また一方で、全身的にチオレドキシンを発現するトランスジェニックマウスをベータアクチンプロモーターを用いて作製している。1匹のfoundermouseが得られており、今後これを繁殖し、上述のように、母体糖尿病における胎仔の異常への抵抗性を引き続き検討する予定である。母体糖尿病による胎児異常の発症機序として、従来、遺伝的素因、高血糖や高ケトン体血症などの代謝性変化、子宮胎盤血流量の減少など、さまざまな要因が考えられているが、その一つに活性酸素等の発生による酸化ストレスの関与が示唆されている。今回の研究では、母体糖尿病による胎児異常発生における酸化ストレスの意義を検討するために、主要な抗酸化系の1つであるチオレドキシンレドックスサイクルに着目し、チオレドキシンを過剰発現するトランスジェニックマウスを作成して、胎児異常発生の抑止効果について検討する。全身的チオレドキシン発現マウス(雄)を、遺伝子を改変していない正常マウス、1型糖尿病モデルマウス、2型糖尿病モデルマウス、あるいはストレプトゾトシン投与により作成した実験的糖尿病マウス(雌)と交配させる。母親の代謝状態ならびに胎仔の発育・代謝状態を観察するとともに、後の解析のために、母獸の血液、胎仔の血液、各種臓器、全身骨格標本を保存する。保存した母獸および胎仔の検体を用いて、血糖値などの代謝状態を評価するとともに、胎仔におけるチオレドキシンの発現レベルを調べる。その発現レベルと各種胎仔異常発生、すなわち流産率、胎仔発育、先天奇形発症率などとの関連を検討する。また、胎仔発育に関連するとされる各種成長因子、インスリン、IGFなどを測定する。また先天奇形については、保存した全身骨格標本を観察することにより、特に骨格系の異常の頻度を調べる。以上の結果をまとめて論文発表する予定であり、現在一つ一つのステップは進んでいるが、結果を得るところまでは至っていない。
森林土壌におけるグロマリン現存量とその集積に関与する鉄化合物の解明

アーバスキュラー菌根菌と共生するソヨゴ林と共生しないコナラ林の土壌間において,「特定試薬に反応するたんぱく質量(BRSPと表記する。これがグロマリン量にほぼ相当する)」,および炭素、窒素含有率、CN比、細根量、ピロリン酸抽出鉄含有率を比較した。これらの値は全て、ソヨゴ林土壌がコナラ林土壌より高く、ソヨゴ林土壌のBRSP、炭素、窒素の各含有率はコナラ林土壌のそれの約2倍に相当した。またBRSP含有率は、他のパラメータと正相関をもっており、ソヨゴ林のほうがピロリン酸抽出鉄の増加率に対するBRSPの増加率は大きかった。従って、ピロリン酸抽出鉄が多く含まれる土壌ではグロマリン含量(グロマリンと同調する炭素含量も)が増えるが,その増え方はアーバスキュラー菌と共生するソヨゴの林の方がより顕著であることが明らかになった。これらの結果から、グロマリンが土壌有機物の蓄積を底上げしていることが示唆された。アーバスキュラー菌根菌由来の糖たんぱく「グロマリン」は、土壌のもつ炭素貯留機能を高めている可能性があるが、グロマリンの集積実態はまだ良く分かっていない。そこでグロマリンの集積に関与すると考えられている鉄が、実際にグロマリン量と関係があるのかを把握することを本研究の目的としている。山城試験地のソヨゴ林とコナラ林の土壌問において、「特定試薬に反応するたんぱく質量(BRSPと表記する。これがグロマリン量にほぼ相当する)」、および炭素と鉄の量を比較した。前者の植生はアーバスキュラー菌根菌と共生するため、その土壌ではグロマリンが多く、後者の植生はアーバスキュラー菌根菌と共生しないため、その土壌ではグロマリンが少ないと考えられる。その結果、ソヨゴ林とコナラ林の土壌で、BRSP含量が高ければ炭素含量も高く、また、ピロリン酸可溶鉄含量が高ければBRSP含量も炭素含量も高いという関係が見られた。ただしBRSPと炭素の関係はソヨゴ林とコナラ林間で統計的な差はなかったが、ピロリン酸可溶鉄とBRSPの関係は林間で統計的な差が見られ、ソヨゴ林のほうがピロリン酸可溶鉄の増加率に対するBRSPの増加率は大きかった。従って、ピロリン酸可溶鉄が多く含まれる土壌ではグロマリン含量(グロマリンと同調する炭素含量も)が増えるが、その増え方はアーバスキュラー菌と共生するソヨゴの林の方がより顕著であることが明らかになった。この結果は、グロマリンが土壌の炭素集積能をより高めていることを示唆している。日本には、グロマリンをつくるアーバスキュラー菌根菌と共生する造林樹種が広く分布するため、日本の森林ではグロマリン蓄積が炭素貯留能を底上げしている可能性がある。しかしグロマリンの存在量やそれを左右する環境条件についての知見は皆無に等しい。グロマリンの土壌中で金属成分と結びついてそれ自身の難分解性をより強固なものにしていると信じられているため、鉄をはじめどのような金属と関係が深いかを調査した。調査は、京都府木津川市山城試験地のソヨゴ林とコナラ林で行った。前者はアーバスキュラー菌根菌と共生する樹種であるため、土壌のグロマリン含量が高く、後者は基共生樹種ではないため、土壌のグロマリン含量が低いと推察され、実際、グロマリン量に相当するといわれる「特定試薬に反応するたんぱく質含量(BRSP含量)」はソヨゴ林土壌のほうがコナラ林土壌より高かった。このBRSP含量と、ピロリン酸抽出鉄と有意な相関が認められたが、アルミニウム、マンガン、シリカとは有意な相関がなかった。この結果は、「アルミニウム腐植複合体」に代表されるように、腐植物質との親和性はアルミニウムのほうが鉄より強いと考えられるが、グロマリンに関しては鉄によって保持されていることを示している。山城試験地(京都府木津川市)のソヨゴ林とコナラ林の土壌間において,BRSP含有率、炭素含有率、窒素含有率、CN比、細根量を比較し、さらにBRSP量とその他のパラメータ間の相関係数を求めた。最表層(0-10cm)は、BRSP含有率に含まれる腐植の量が他の層に比べて非常に大きいことが危惧されるため、これを除いて検定した結果、CN比以外のパラメータでソヨゴ林土壌はコナラ林土壌よりも有意に高かった。

具体的には、BRSP含有率、炭素含有率、窒素含有率はソヨゴ林ではコナラ林の約2倍、細根量はソヨゴ林土壌はコナラ林土壌の約1.2倍であった。また両林分土壌で、BRSP含有率は炭素含有率、窒素含有率と強い正相関が認められた。細根量、CN比もBRSPとの間に正相関が認められた。これらの結果は、1)BRSPが必ずしもアーバスキュラー菌根菌のみが作り出すグロマリンを反映しているわけではなく腐植が少なからずあること、あるいは2)近年になって裸地から森林が発達した若い林であっても、裸地化以前の植生がアーバスキュラー菌根菌との共生樹種であった場合、その植生の時代に形成されたグロマリンが、難分解性であるために残存している、という2つの可能性を示すものと考えられる。BRSP含有率と炭素含有率や窒素含有率との強い相関は、BRSPが腐植の影響を受けているとともに、たんぱく質を示す指標であることとも関係していると推察される。林齢がほぼ同じであるのにBRSP、炭素、窒素の各含有率がソヨゴ林土壌でコナラ林土壌の2倍あった結果は、グロマリンが±壌有機物の蓄積を底上げしているものと推察される。
都市部若年非正規労働者による労働組合実践のビジュアルエスノグラフィー

本研究の目的は、都市部若年非正規労働者による労働組合実践がはらむ力学を、ビジュアルエスノグラフィーの手法を用いて明らかにすることである。本研究では、労働組合の実践過程を、法や知やモノの複合からなる社会空間の生成としてとらえ、問題に直面した当事者が「労働者」へと変容していく過程を記述・分析する。この過程では、当事者の体験が労使関係をめぐる制度言語へと翻訳されることによって、権利主体として確立されていく一方で、制度言語へと「標準化」されざるものはそこから排除されていく。しかし、その制度言語とその「外部」との緊張をはらんだ力動的な関係と過程こそが労働組合実践における生命線であることを明らかにする。
音楽によって生じる感情反応と自律神経系の応答に関する研究

音楽は人間の生理的、心理的、精神的側面に複合的に影響を与える.音楽による不安や疼痛の緩和,ストレスの緩和やリラクセーションといった鎮静効果,あるいは気分の高揚,覚醒度の向上などの賦活効果等を目的とした音楽療法が代替・相補治療として行われている.音楽により治療効果を得るためには,音楽に対する個々人の反応の相違をもたらす特性,音楽感受性などの変数を特定し,その影響を明らかにしていくことが必要である.本研究は,音楽鑑賞による反応の個人差を音楽感受性という観点から調査し,音楽によって生じる感情反応と自律神経系の応答について明らかにした.1.寒冷刺激下における痛み耐性への聴取楽曲の違いによる影響:1/fゆらぎ曲よりも好み曲聴取により気分が高揚し不快感が軽減されることや,好み曲は意識を傾けやすく痛みから注意をそらす効果があることから,痛みに耐えるための有効な心理状態に導きやすいという可能性が示された.2.不安気分時における聴取音楽の違いによる気分変化の違い:気分と一致していない音楽は不安,倦怠のネガティブ感情を喚起することが明らかになった.3.音楽とマッサージによって生じる感情反応と自律神経系の応答に関する研究:減算負荷によりストレス反応を示した場合は,音楽マッサージにより副交感神経系活性は高まるが,交感神経活性には変化を及ぼしていないことが明らかになった.また,感情状態変化と自律神経系の反応には関連は見出せなかった.4.環境音楽による事業所職員の精神的ストレス緩和効果に関する検討:自覚症調べの結果からは環境音楽聴取が作業中の精神的ストレスの緩和に効果があることが示された.しかし,CgAでは環境音楽聴取による差は認められなかった.音楽は人間の生理的、心理的、精神的側面に複合的に影響を与える.音楽による不安や疼痛の緩和,ストレスの緩和やリラクセーションといった鎮静効果,あるいは気分の高揚,覚醒度の向上などの賦活効果等を目的とした音楽療法が代替・相補治療として行われている.音楽により治療効果を得るためには,音楽に対する個々人の反応の相違をもたらす特性,音楽感受性などの変数を特定し,その影響を明らかにしていくことが必要である.本研究は,音楽鑑賞による反応の個人差を音楽感受性という観点から調査し,音楽によって生じる感情反応と自律神経系の応答について明らかにした.1.寒冷刺激下における痛み耐性への聴取楽曲の違いによる影響:1/fゆらぎ曲よりも好み曲聴取により気分が高揚し不快感が軽減されることや,好み曲は意識を傾けやすく痛みから注意をそらす効果があることから,痛みに耐えるための有効な心理状態に導きやすいという可能性が示された.2.不安気分時における聴取音楽の違いによる気分変化の違い:気分と一致していない音楽は不安,倦怠のネガティブ感情を喚起することが明らかになった.3.音楽とマッサージによって生じる感情反応と自律神経系の応答に関する研究:減算負荷によりストレス反応を示した場合は,音楽マッサージにより副交感神経系活性は高まるが,交感神経活性には変化を及ぼしていないことが明らかになった.また,感情状態変化と自律神経系の反応には関連は見出せなかった.4.環境音楽による事業所職員の精神的ストレス緩和効果に関する検討:自覚症調べの結果からは環境音楽聴取が作業中の精神的ストレスの緩和に効果があることが示された.しかし,CgAでは環境音楽聴取による差は認められなかった.音楽による不安や疼痛の緩和、ストレスの緩和やリラクセーションといった鎮静効果、あるいは気分の高揚、覚醒度の向上などの賦活効果等を目的とした音楽療法が、代替的あるいは相補的治療とし寸行われている。音楽を用いた働きかけにより治療的効果を得るためには、音楽療法の効果についての実証的研究が必要である。つまり、音楽に対する個々人の反応の相違をもたらす人格特性、性格、年齢、音楽経験、音楽感受性などの変数を特定し、その影響を科学的に明らかにしていくことが必要である。本研究の目的は、音楽鑑賞による反応の個人差を音楽感受性という観点から調査し、音楽によって生じる感情反応と自律神経系の応答について明らかにすることである。音楽+マッサージ群,音楽群,マッサージ群,対象群に3名ずつ無作為割付した.5分間安静臥床後,30分間,計算問題によるストレス負荷を行った.メディカルチェアーi-1(ファミリー株式会社製)を使用し,音楽は管弦組曲第3番よりアリア(バッハ)を用いた.自律神経活動として心拍R-R間隔のフラクレット解析による副交感神経活性化,および唾液中chromograninAを定生した.気分・感情(多面的感情状態尺度・短縮版),聴取音楽への親近,関心および音楽への日常的な関心,最近1週間の精神的健康度(GHQ-28)を合わせ調査した.音楽+マッサージ群,音楽群は対照群に比べて副交感神経系の活性化,および唾液中chromograninAの低下僚向があり,音楽によるストレス緩和効果がみられた.日常的に音楽に親しんでいる人のほうが,そうでない人に比べて音楽によるストレス緩和効果が大きかった.また,音楽聴取により非活動的な心地良さの感情(のんびりとした,のどかな,など)が喚起された人は,スートレス緩和効果が大きかった.音楽による不安や疼痛の緩和、ストレスの緩和やリラクセーションといった鎮静効果、あるいは気分の高揚、覚醒度の向上などの賦活効果等を目的とした音楽療法が、代替的あるいは相補的治療として行われている.本研究の目的は、音楽鑑賞による反応の個人差を音楽感受性という観点から調査し、音楽によって生じる感情反応と自律神経系の応容について明らかにすることである。

本年度は,音楽聴取により生じる感情状態と生理学的指標について関連をより詳細に検討した.1)健康成人6名を対象に,10分間安静臥床後,30分間,計算問題によるストレス負荷を実施した.その後,各被験者に対して音楽あり条件と音楽なし条件の順序を無作為に変えて実施した.2)メディカルチェアーi-1(ファミリー株式会社製)を使用し,音楽は管弦組曲第3番よりアリア(バッハ)を使用した.3)以下の項目により評価した.自律神経活動心拍R-R間隔解析,唾液中chromograninA定量気分・感情(多面的感情状態尺度・短縮版)聴取音楽への親近,関心および音楽への日常的な関心最近1週間の精神的健康度(GHQ-28)4)音楽聴取により副交感神経活動の活性化,唾液中chromograninA量の低下が認められ,音楽による生理的なリラクセーション反応が認められた.音楽を日常的にリラクセーションのために使用している被験者はそうでない被験者に比べて,反応が顕著であった.音楽聴取後,活動的な心地よさを感じた被験者ほど副交感神経活動活性が高くなる傾向が認められた.5)音楽感受性の相違により音楽聴取時の反応に差異があることが示唆された.音楽による不安や疼痛の緩和、ストレスの緩和やリラクセーションといった鎮静効果、あるいは気分の高揚、覚醒度の向上などの賦活効果等を目的とした音楽療法が、代替的あるいは相補的治療として行われている.本研究の目的は、音楽鑑賞による反応の個人差を音楽感受性という観点から調査し、音楽によって生じる感情反応と自律神経系の応答について明らかにすることである。本年度は,健康成人12名を対象に,音楽療法の基本原則の一つである同質の原理を用い,楽曲を選定し,音楽と情動反応の関連をより詳細に検討した.音楽の性質が対象者の気分とテンポにあったものが受け入れられやすいという「同質の原理」の考えに基づくと、不安気分時には不安と同質の音楽が受け入れられやすいことになる。しかし、一般に不安気分時に聴きたい個人の嗜好音楽は、不安同質音楽であるとは限らない。そのため、不安気分誘導を行い不安上昇群3名と不変群9名に分け、不安同質音楽と高揚感情価高値音楽を聴取した場合と嗜好音楽を聴取した場合の不安気分の変化と感情の変化、聴取音楽と音楽要素への同質感の検討を行った。不安上昇群では高揚感情価高値音楽と嗜好音楽、不変音楽では嗜好音楽への同質感が高く、親しみや非活動的快の上昇が見られ、不安上昇群では不安低下傾向があった。嗜好音楽では不安低下効果は見られなかった。不安上昇群では、不安同質音楽への同質感が低く、気分と一致していない音楽は不安、倦怠のネガティブ感情を喚起することが分かった。音楽鑑賞による反応の個人差を音楽感受性という観点から調査し、音楽によって生じる感情反応と自律神経系の応答について明らかにした。健康成人女性6名を対象に,音楽とマッサージの身体への影響を感情反応と自律神経系反応をもとに検討した.被験者に対して以下の4種類の実験刺激を行った.すなわち、音楽と音楽に同調したマッサージ、音楽聴取のみ、音楽は聴取せず音楽と同調したマッサージのみ、仰臥位(コントロール)である。
ファイバー構造と接触・シンプレクティック多様体の研究

本研究では、接触・シンプレクティック多様体が許容するファイバー構造の解明と、この構造を用いたそれらの多様体の幾何学的性質解明を目的としている。本年度はLefschetz-Bottファイバー空間というファイバー構造の研究を行った。接触多様体のシンプレクティック充填の研究にはこれまでLefschetzファイバー空間というファイバー構造が用いられてきた。この場合、対応するシンプレクティック充填のクラスはStein充填というクラスであり、充填全体の中では狭いクラスであることが知られている。より広いクラスを扱うべく、報告者はLefschetz-Bottファイバー空間をシンプレクティック充填の研究に導入した。まず、Lefschetz-Bottファイバー空間の全空間は、境界の接触多様体の強い意味でのシンプレクティック充填になることを示した。これにより、このファイバー空間の有用性が明らかとなった。また、これまでLefschetz-Bottファイバー空間を許容するシンプレクティック多様体の具体例はほとんど知られていなかった。本研究で、閉シンプレクティック多様体上の前量子化直線束がLefschetz-Bottファイバー空間の構造を許容することを示した。この結果と、強シンプレクティック充填との対応関係を用い、高次元のA型特異点のリンクと呼ばれる接触多様体について、その強シンプレクティック充填を複数個構成した。これは低次元の場合と異なる結果であり興味深い。本結果は論文にまとめてあり、プレプリントとしてオンライン上(arXiv)で公開している。研究協力者のM. Kwon氏(ドイツ・Giessen大学)に2ヶ月半ほど日本に滞在してもらい、Lefschetz-Bottファイバー空間などについて集中的に議論を行った。議論からこのファイバー構造の更なる応用例を考案することができた。当初計画していたLefschetz-Bottファイバー空間のハンドル分解の解明には至らなかったものの、Lefschetz-Bottファイバー空間を許容するシンプレクティック多様体の具体例を与えこのファイバー構造に関する理解を深めた。さらにこのファイバー構造の強シンプレクティック充填への応用を明らかにしたことでその有用性を示すことができた。「平成31年度科学研究費助成事業(科学研究費補助金)交付申請書」に記載した計画に沿い、本研究課題に関する研究活動を続ける。特に平成30年度に完成できなかった、Lefschetz-Bottファイバー空間のハンドル分解に関しては、最も単純と考えられる余次元が大きい場合に限定して研究を進め完成を目指す。研究協力者と集中的に議論ができる機会をもつ。そのため、M.Kwon氏の元へは2ヶ月間ほど滞在する。さらに、国内外から研究者を京都大学に招へいし、ワークショップを開催しお互いの研究の深化を図る。
腫瘍組織への自走侵入可能なpH感応性べん毛駆動型リポソームの創成

本研究は、腫瘍内pH変化を感知し自走するDDSキャリアー開発を目指した。初年度は、バクテリアゴースト調製に試薬濃度等の詳細な検討が必要なこと、また大腸菌からのべん毛単離に成功した。2年度目は、バクテリアゴーストの調製に成功した。また、ゴースト画分にべん毛フィラメント構成タンパク質FliCが存在することを確認した。これらから、初年度に困難であったバクテリアゴースト調製法を確立できた。また、腫瘍組織浸透機能性素子AT1002とポリエチレングリコールを表面修飾したナノ粒子を構築し、がん細胞スフェロイド内へのナノ粒子の浸透に成功した。当初計画を完遂できなかったが、その足掛かりとなる材料が揃った。本研究の目的は、腫瘍内pH変化を感知し、低pH領域(腫瘍微小環境)に向かって自走するDDSキャリアーの開発である。バクテリアは、内外のプロトン勾配に基づいて細胞装置(べん毛等)を回転させることで自走する。我々は、これまでの実績に基づき、バクテリアべん毛を組み込むことで、腫瘍微小環境を指向し腫瘍内部に侵入可能な自走型の新しいDDSキャリアーの開発を試みている。まず今年度は、過去の報告を基に大腸菌JM109株を用いてバクテリアゴーストの調製を行った。その結果、過去の論文中の条件では細菌が完全に溶菌してしまっていることが示唆された。参考にした方法の原理としては、膜に孔を空けるための4種類の試薬(CaCO3, NaOH, SDSおよびH2O2)をMIC前後の濃度で処理し、遠心にて細菌の中身を外に排出させ、ゴーストを作成することになっているが、実際に4種類の試薬を処理すると、処理前に認められた細菌ペレットが認められなくなり、ペレット画分中に核酸濃度およびタンパク質濃度を分光学的に測定したが、ピークは認められなかった。一方、処理途中で上清中にゲノムDNAと思われる不溶性物質が認められたため、上清の核酸濃度を測定した結果、ピークが認められた。これらのことから、細菌成分が上清に含まれていることが示唆された。また、ペレット画分をINT(塩化3-(p-ヨードフェニル)-2-(p-ニトロフェニル)-5-フェニルテトラゾリウム)で染色後、光学顕微鏡で観察したが、細菌構造体は認められなかった。以上の結果から、この処理では細菌細胞膜が完全に分解されていると考えており、ゴーストの調製には試薬濃度等のより詳細な検討が必要である。他方、今年度の進捗として、大腸菌からのべん毛単離を検討した結果、精製後のべん毛をSDS-PAGEに供したところ、一部構成因子の欠損が認められたものの、べん毛の単離に成功している。過去の論文に基づいて検討を行ったが、報告されている結果とならず、大腸菌のバクテリアゴースト調製が行えておらず、今後より詳細な条件の検討が必要なためである。また、べん毛単離に関しても、過去の報告通りに実施したが、条件検討に思いのほか時間がかかってしまった。初年度は、過去の報告を基に大腸菌JM109株を用いてバクテリアゴーストの調製を行った。その結果、ゴーストの調製には試薬濃度等のより詳細な検討が必要であることを見出した。他方、初年度は、大腸菌からのべん毛単離を検討し、精製後のべん毛をSDS-PAGE解析を行うことで、一部構成因子を欠損しているものの、べん毛を単離することに成功していた。今年度は、バクテリオファージΦX174由来Lysis protein Eを大腸菌DH5α株に発現させ、菌体内容物を漏出させることで、バクテリアゴーストの調製を検討した。得られたペレット画分中のタンパク質量およびDNA量を定量し、ゴーストができていることを確認した。また、調製したゴースト画分にべん毛フィラメント構成タンパク質FliCが存在することをウエスタンブロッティングによって確認した。これらのことから、初年度に困難であったバクテリアゴーストの調製法を確立することができた。また、細胞間隙を開裂して腫瘍組織中に浸透させるための機能性素子であるAT1002を表面修飾したナノ粒子を構築し、がん細胞スフェロイドを用いた系において、AT1002だけでなくポリエチレングリコール(PEG)を同時修飾することで、スフェロイド内に効率よくナノ粒子を浸透させることに成功した。当初計画を完遂できなかったが、その足掛かりとなる材料を揃えることができた。

また、腫瘍組織浸透機能性素子AT1002とポリエチレングリコールを表面修飾したナノ粒子を構築し、がん細胞スフェロイド内へのナノ粒子の浸透に成功した。当初計画を完遂できなかったが、その足掛かりとなる材料が揃った。バクテリアゴーストの調製条件の詳細な検討を行うことで、べん毛を残したキャリアー粒子の構築を目指す。また別途、単離べん毛をリポソームに組み込み、べん毛キャリアー粒子の構築を試みるつもりである。構築できたキャリアー粒子の運動性を検証し、自走キャリアーの完成を目指す。薬物送達学、生物物理化学
分子構造・機能性からみたリグナン化合物のアテローム性動脈硬化予防の検討

リグナン化合物ならびにそれらを含有する食品の脂質代謝改善作用について検討した。リグナン化合物としてゴマに含まれるセサミン化合物(セサミンとそのジアステレオマ-であるエピセサミンの混合物)を、リグナン化合物含有食品として杜仲を使用した。同時に、現在脂質代謝改善剤として欧米で使用されているgemfibrozilについて検討を行いその作用を比較した。実験動物は高脂肪・高コレステロール食(HFC食)飼育により食餌性高脂血症(高コレステロール血症)を誘導した脳卒中易発症性高血圧自然発症ラット(SHRSP)を用いた。その結果、1)セサミン混合物をHFC食に0.5%添加して投与すると、明確な血清コレステロール上昇抑制作用を発現した。この作用は、コレステロールに富むatherogenicβ-VLDL上昇抑制に基づいていた。同時にapoA-Iを含むHDL亜分画の減少抑制も観察された。肝臓ではコレステロール蓄積が抑制された。次にこのセサミン混合物をHPLCにてセサミンとエピセサミンに分離・精製し、それぞれについて同様に食餌性高脂血症における脂質代謝改善作用について検討を進めたところセサミン混合物の脂質代謝改善作用はエピセサミンの有効作用が強く影響していると考えられた。またエピセサミンの脂質代謝改善作用はgemfibrozilの作用に類似した機構が考えられた。2)杜仲の場合、杜仲葉粉末ならびに杜仲葉エキス共にatherogenic β-VLDL上昇抑制に基づく血清コレステロール上昇抑制作用が認められた。更に肝臓コレステロール含量上昇抑制作用が認められ、肝臓病理組織切片において脂肪肝の抑制が観察された。杜仲にはセサミンと構造類似のリグナン化合物が多く含まれていることから、この有効作用にはリグナン化合物が関与している可能性が高い。そこで次にヒト肝臓癌由来培養細胞株HepG2系を用い、単離・精製したリグナン化合物をはじめとする食品由来化合物がコレステロール生合成律速酵素(HMG-CoA reductase)活性に及ぼす影響を検討した。その結果、リグナン化合物のHMG-CoA reductase活性阻害作用はさほど強いものではなく、他の脂質代謝改善作用機構があるものと考えられた。一方、ケルセチン配糖体やgeniposidic acidがHMG-CoA reductase活性阻害作用を有することが明らかになると共に、阻害活性と構造との関連性に関する知見を得ることができた。実験動物は高脂肪・高コレステロール食(HFC食)飼育により食事性高脂血症を誘導した脳卒中易発症性高血圧自然発症ラット(SHRSP)を用いた。

次にこのセサミン混合物をHPLCにてセサミンとエピセサミンに分離・精製し、それぞれについて同様に食事性高脂血症における脂質代謝改善作用について検討を進めた。現在詳細に検討中であるが、これまでのところセサミン混合物の脂質代謝改善作用はエピセサミンの有効作用が強く影響していると考えられる。今後脂質代謝関連酵素活性への影響をも含めて検討を行う予定でいる。2)杜仲の作用については、杜仲葉粉末ならびに杜仲葉エキス共にコレステロールに富むatherogenicβ-VLDL上昇抑制に基づく血清コレステロール上昇抑制作用が認められた。更に肝臓コレステロール含量上昇抑制作用が認められ、肝臓病理組織切片において脂肪肝の抑制が観察された。杜仲にはセサミンと構造類似のリグナン化合物が多く含まれており、この有効作用にはリグナン化合物が密接に関連していると考えられる。現在リグナン化合物を分離・精製し、それらの分子構造・機能性との関連について更に検討を進めている。リグナン化合物ならびにそれらを含有する食品の脂質代謝改善作用について検討した。リグナン化合物としてゴマに含まれるセサミン化合物(セサミンとそのジアステレオマ-であるエピセサミンの混合物)を、リグナン化合物含有食品として杜仲を使用した。同時に、現在脂肪代謝改善剤として欧米で使用されているgemfibrozilについて検討を行いその作用を比較した。実験動物は高脂肪・高コレステロール食(HFC食)飼育により食餌性高脂血症(高コレステロール血症)を誘導した脳卒中昜発症性高血圧自然発症ラット(SHRSP)を用いた。その結果、1)セサミン混合物をHFC食に0.5%添加して投与すると、明確な血清コレステロール上昇抑制作用を発現した。この作用は、コレステロールに富むatherogenicβ-VLDL上昇抑制に基づいていた。同時にapoA-Iを含むHDL亜分画の減少抑制も観察された。肝臓ではコレステロール蓄積が抑制された。次にこのセサミン混合物をHPLCにてセサミンとエピサセミンに分離・精製し、それぞれについて同様に食餌性高脂血症における脂質代謝改善作用について検討を進めたところセサミン混合物の脂肪代謝改善作用はエピサセミンの有効作用が強く影響していると考えられた。またエピセサミンの脂質代謝改善作用はgemfibrozilの作用に類似した機構が考えられた。2)杜仲の場合、杜仲葉粉末ならびに杜仲葉エキス共にatherogenic β-VLDL上昇抑制に基づく血清コレステロール上昇抑制作用が認められた。杜仲にはセサミンと構造類似のリグナン化合物が多く含まれていることから、この有効作用にはリグナン化合物が関与している可能性が高い。そこで次にヒト肝臓癌由来培養細胞株HepG2系を用い、単離・精製したリグナン化合物をはじめとする食品
組織免疫細胞の機能不全による新規心疾患発症機序の解明と治療法の開発

心不全、心臓突然死の疾患研究は心筋細胞を中心に行われてきたが、我々は心臓マクロファージが心臓に対して保護的に働いていることを明らかにした。本研究では、さらに心臓マクロファージを含みミエロイド系細胞が心臓病発症にどのようにかかわっているかを、1細胞遺伝子発現解析、1細胞エピゲノム解析等を用いて解析し、新しい治療標的を同定する。具体的には、心臓を保護する新規細胞の同定、その細胞が分泌するタンパクの同定、さらに疾患研究として、その新保護的細胞がどのように機能低下に陥るかについて検討する。
野生動物における病原性Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ属菌の生態解明に関する研究

わが国の野生鹿の57.8% (26/45)は少なくとも2種のBartonella属菌を保有しており,その水平伝播にはシラミバエが関与していることが示された。ニホンアナグマおよびテンの各1頭から分離された株は,それぞれB. clarridgeiaeおよびB. washoensisと近縁であったが,遺伝子系統解析では,各動物に固有のBartonella属菌であると考えられた。沖縄県のマングースの15.9%(10/63),千葉県のハクビシンの3.8%(1/26)から初めてBartonella henselaeが分離されたことから,両動物種は猫ひっかき病の新たな感染源となる可能性が示唆された。北米の野生イヌ亜目(アライグマ、ハイイロギツネ、コヨーテ)は、高率に人の心内膜炎や不明熱の原因となるBartonella属菌を保有していることが報告されている。しかしながら、アジアの野生イヌ亜目におけるBartonella属菌の保有状況については全く不明の状態である。そこで、本研究では、日本に棲息する野生イヌ亜目1,205頭(アライグマ1,008頭、タヌキ171頭、ニホンアナグマ15頭、テン8頭、ニホンイタチ2頭、チョウセンイタチ1頭)の血液から5%ウサギ血液加Heart Infusion Agarを用いてBartonella属菌の分離を試みるとともに,分離株の遺伝子性状を解析し,人への感染リスクについて評価した。。ニホンアナグマおよびテンのそれぞれ1頭がBartonella属菌を保有していることが初めて明らかとなった。各分離株のハウスキーピング遺伝子(16S rRNA, ftsZ, gltA, groEL, ribC, rpoB)とITS領域の塩基配列から系統解析を行った結果、アナグマおよびテン分離株はそれぞれB. clarridgeiaeおよびB. washoensisと近縁であったが、それぞれ独立したクレードを形成したことから、これらの動物は固有のBartonella属菌を保有していると考えられた。アライグマとタヌキからはBartonella属菌は分離されなかったものの、病原種に近縁なDNAが検出された。米国のアライグマは、人に対して病原性を示すB. rochalimaeを高率に保有していることから、今後、わが国のアライグマ、タヌキならびに他の野生イヌ亜目についても継続してBartonella属菌の分布を調査していく必要があると考えられた。沖縄県のマングース63頭,イリオモテヤマネコ18頭,長崎県のツシマヤマネコ15頭,千葉県および神奈川県のハクビシン50頭(千葉県;26頭,神奈川県;24頭)からBartonella属菌の分離を試みた。沖縄県のマングースの15.9%(10/63)および千葉県のハクビシンの3.8%(1/26)からBartonella属菌が分離され,その血中菌数はそれぞれ3.0&#61620;1018.9&#61620;103CFU/ml,7.0&#61620;103CFU/mlであった。一方,2種のヤマネコからBartonella属菌は分離されなかった。マングース・ハクビシン分離株の遺伝子解析の結果,遺伝子解析の結果,各陽性個体から分離した11株全てがCSDの病原菌であるB. henselaeと同定された(相同性99.6100%)。MST解析では,マングース・ハクビシン分離株と今回解析した日本のネコ由来株は8つに型別され,全ての株が日本のCSD患者由来株と同じ系統であった。マングース分離株の2株は沖縄のネコ由来の2株と,他の2株はCSD患者由来の8株と同じMST型であったことから,マングースーネコ間におけるB. henselaeの伝播が起きているとともに,マングースとハクビシンはCSDの新たな感染源となる可能性が示唆された。捕獲した15頭の野生のニホンザルの4頭(26.7%)から塹壕熱の病原体であるBartonella quintanaが分離された。各個体の血中菌数は5012,000CFU/ml(平均525CFU/ml)と,高い菌血症状態であったにもかかわらず,無症状であったことから,ニホンザルは本菌の自然病原巣の一つである可能性が示唆された。また,分離株の遺伝子解析の結果,ヒトおよびサルの種類ごとに独自の遺伝子性状を有するB. quintanaが分布することやニホンザルには固有のB. quintanaが存在することが明らかとなった。本研究は,日本における病原性Bartonellaの生態を,野生動物とその外部寄生虫(マダニ・シラミバエ等)を研究対象として,細菌学的・分子生物学的手法を用いて解明することを目的としている。