hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ｍＲＮＡ代謝制御因子群が担う植物形態形成の制御機構

シロイヌナズナSF3b複合体構成因子7つの内、6つが複数の遺伝子がコードしていることが判明した。これらの遺伝子機能を解析する逆遺伝学的アプローチを進めた結果、SAP130AとBに加え、新たにSAP14bAとBも花粉形成に不可欠であることを見出した。またSAP49AとBが胚発生において不可欠であることを明らかにして、SF3bのサブユニットごとに、標的遺伝子の選択性に関わる貢献度が異なることを示した。さらにSAP130と結合するCSN1に注目し、csn1部分相補植物が、花粉形成過程に異常を示すことを発見した。CSN1とSAP130とが協調的に調節する花粉形態形成過程があると考えている。本研究では、植物のmRNA代謝制御機構に着目し、植物形態形成における遺伝子発現制御メカニズムの理解を目指す。まず、pre-mRNAのスプライシングに必須であるSF3b複合体の全構成因子を植物で同定し、研究基盤を整備する。酵母やヒトのSF3b構成因子を参考に、シロイヌナズナにおける相同因子群を同定した結果、7つのうち6つのサブユニットは複数の遺伝子がコードしていることが判明した。そこで、これらの遺伝子機能を順次解析する逆遺伝学的アプローチと、SF3bタンパク質複合体構成因子の同定する生化学的アプローチを進めている。これまでの成果は、国内外の学会、招待講演、国際雑誌論文などに発表した。以下その成果の一部を列記する。1)SF3b構成因子候補のSAP130が花粉形成に不可欠であることを報告したが、同SAP14bもまた、花粉形成に不可欠であることが判明したので、発生学的解析を進めている。2)また、SF3b構成因子候補のSAP49は胚発生において不可欠であることが判明し、解剖学的な解析を進めている。3)生化学的アプローチを目指して、SAP130とSAP49にタグをつけたコンストラクトを作製し、大腸菌、シロイヌナズナで発現する系を確立した。現在、これにより、植物粗抽出物を用いたpull down、植物生体からのpull downと免疫沈降条件の最適化を行なっている。つぎに、csn1変異体にCSN1遺伝子を発現する部分相補植物が、花粉形成過程に異常を示すことから、その解析を進めた。その結果、花粉形態形成異常が現れる時期や表現型がSAP130 RNAi植物のそれとよく似ていることを見出した。現在、標的遺伝子群の解析を進めている。まず、スプライシングに必須であるSF3b複合体の全構成因子を植物で研究するために、酵母とヒトのSF3b構成因子を参照し、シロイヌナズナにおける相同因子群を同定した。その結果、7つのうち6つのサブユニットは複数の遺伝子がコードしていることが判明した。つぎに、これらの遺伝子機能を順次解析する逆遺伝学的アプローチと、SF3bタンパク質複合体構成因子の同定する生化学的アプローチを進めた。得られた成果は、国内外の学会、招待講演、国際雑誌論文などに発表した。以下に成果の一部を列記する。1)SF3b構成因子候補のAtSAP130AとAtSAP130Bとが花粉形成に不可欠であることを報告したが、同SAP14bが、花粉形成に不可欠であることが判明した。発生学的解析の結果、特定の時期からその発生に異常がみられることを確認した。2)SAP49は胚発生において不可欠であることが判明したので、解剖学的な解析を進めた結果、球状型胚以降の発生に異常を来すことを見出した。4)さらにSAP130と結合するCSN1に注目し、csn1変異体にCSN1遺伝子を発現する部分相補植物が、花粉形成過程に異常を示すことから、その解析を進めた。本研究では、植物のmRNA代謝に着目して、植物形態形成における遺伝子発現制御メカニズムの理解を目指した。具体的には、スプライシングに必須であるSF3b複合体の全構成因子を植物で研究するために、酵母とヒトの構成因子を参照し、シロイヌナズナにおける相同因子群を同定した。この成果は、国内外の学会、招待講演、国際雑誌論文などに発表した。以下成果の一部を列記する。1)植物SF3b構成因子のAtSAP130AとAtSAP130Bとが花粉形成に不可欠であることを報告したが、新たにSAP14bが花粉形成に不可欠であることを見出した。機能欠損植物の発生学的解析の結果、特定の時期から形態異常がみられることを確認した。2)AtSAP49は胚発生において不可欠であり、機能欠損植物が球状型胚以降の発生に異常を示すことを明らかにした。

前記結果と合わせて考えると、SF3bのサブユニットごとに、標的遺伝子の選択性に関わる貢献度が異なると考えられ、このプレファレンスの制御機構を解析している。3)植物粗抽出物を用いた生化学的解析を進め、植物SF3b構成因子の同定と動態を解析している。4)さらにSAP130と結合するCSN1に注目し、csn1変異体にCSN1遺伝子を発現する部分相補植物が、花粉形成過程に異常を示すことを発見した。解析の結果、花粉形態形成異常が現れる時期や表現型がSAP130 RNAi植物のそれとよく似ていることから、CSN1とSAP130十が協調的に調節する花粉形態形成過程があることを検討している。シロイヌナズナSF3b複合体構成因子7つの内、6つが複数の遺伝子がコードしていることが判明した。これらの遺伝子機能を解析する逆遺伝学的アプローチを進めた結果、SAP130AとBに加え、新たにSAP14bAとBも花粉形成に不可欠であることを見出した。またSAP49AとBが胚発生において不可欠であることを明らかにして、SF3bのサブユニットごとに、標的遺伝子の選択性に関わる貢献度が異なることを示した。さらにSAP130と結合するCSN1に注目し、csn1部分相補植物が、花粉形成過程に異常を示すことを発見した。CSN1とSAP130とが協調的に調節する花粉形態形成過程があると考えている。現在までに計画通り研究が進展し、確実に成果を上げている。逆遺伝学的手法による、シロイヌナズナSF3b構成因子の機能解析は、順調に変異体を得て解析を進めている。複数コピーによってコードされるサブユニットは多重変異体を作製するとともに、サブユニット間の多重変異体作製も開始した。その正解の一部としては、SAP49をコードする遺伝子の1つは偽遺伝子である可能性が示唆され、解析を進めている。また、特に転写が確認できるSAP49については、その転写産物と翻訳タンパク質がともに、主に核にあることを見出した。逆遺伝学的解析によって特定の形態形成過程への関与が示唆された遺伝子については、発現誘導植物、遺伝子マーカーの導入、などを進めている。生化学的手法においては、in vitroおよびin vivo系を用いたpull downと免疫沈降条件の最適化を行ないシロイヌナズナSF3b構成因子の同定を進めている。さらにCSN結合タンパク質であるPrp43、CPSF6の機能解析を進め、ともに機能欠失変異植物を得たので解剖学的解析を進め、関連遺伝子群との多重変異体を作製している。これまで、SF3bの構成因子機能の解析をモデルに、普遍性が高い制御を行なうmRNA代謝制御因子群が、どのように特定の遺伝子転写を制御するのか、その分子機構を解明してきた。今後さらに、SF3bの解体に重要なPrp43 RNAヘリカーゼやCPSFの機能解析を行ない、植物におけるmRNA代謝制御機構の理解を目指す。一方、SAP130、SF3b、Prp43、CPSF6が各々、タンパク質分解を制御するCSNと結合するので、mRNA代謝へのCSN機能の関与を解明したい。これまでに、当初予想していなかった研究材料を獲得して、今後さらに効率的で相補的な研究の進展が期待できる。
女性ホルモン様物質の河川〜海域での分布と集積

本研究では、河川水に含まれる女性ホルモンレセプター結合性物質を蛍光偏光原理を応用したBeacon【○!R】で測定し、魚類への影響を雄血中ビテロジェニン濃度によって明らかにした。その結果、1)木曽三川では、下流部に多く、女性ホルモンレセプター結合性物質が検出できた。淀川下流においても同程度であることから、全国の河川においても同様の状況と推察できる。2)汚染源は、都市生活排水等が処理放流される支流であることが明瞭になった3)川に棲む雄コイの女性化や、川の水で飼育した雄メダカの女性化は傾向としてあるものの、有意ではなかった。4)河口沿岸に生息する雄ハゼでは全く女性化が認められなかった。さらに、具体的な化学物質についても調査し、以下の点を明らかにできた。5)汚染の一因となるビスフェノールAは長良川下流部で高い値が記録された。6)沿岸河川に生息する食用の魚介類のダイオキシン類は、12種に若干量認められる程度で、他地域の調査に比較し小さな値であった。以上から、ホルモン様物質による河川海域の汚染は、人間生活の副産物によるものであり、下流ほど強くなるが、海域では希釈されている(ダイオキシンは一部魚類に濃縮)。これが、現在の木曽三川と伊勢湾沿岸の歴史的状況である。逆に、今後の監視を弛めるわけにはいかない状況とも言い換えることができる。さらに、こうしたホルモン様物質の人体や野生動物への影響を明瞭にしてゆく必要がある。河川水をSepPacで濃縮し、エストロジェンレセプターαと蛍光色素をラベルした17βエストラジオール(ES-1)の結合物を含んだ溶液に添加し、両者の結合阻害を蛍光偏光度の変化で測定し、河川水に含まれる、女性ホルモレン様化学物質の総体を定量した。木曽川、長良川、損斐川の源流では、そわぞれ0.024、0.15、1.3μM(ES-1相当)であるのに対し、河口部ではそれぞれ289、61、2,123μMといずれも河口部へ向かうほど濃度が高かった。しかし、長良川のみは、河口よ34km地点濃度が13,500μMと最も高く、ここから河口部に向かって減少傾向を示した。これは、この地点へ都市排水が注がれるからと考えられた。女性ホルモン様作用を有する化学物質の1つとして、免疫法によって測定できるビスフェノールAいついても定量した。長良川の15km地点で最も濃度が高く、54.0ng/mlを記録した。上流の郡上郡でも17.5ng/mlを記録していることから、生活排水には多くのビスフェノールAが含まれると考えられる。この物質が上記の反応の一部に関与しているものと考えらねた。長良川の38km地点で川漁師が捕獲したコイと、上流の郡上郡で長良川支流の吉田川の流水を使って養殖されたコイのオス血清中のビテロジェニンの定量を免疫法によって行った。下流の同値は157.0±20.3ng/ml、上流の同値は122.5±7.0ng/mlで、有意に(p<0.005)下流の雄コイの同値が高かった。従って、長良川下流の野生動物は、女性ホルモン様化学物質の影響を受けている可能姓が示唆された。木曽三川、特に長良川とその支流において内分泌攪乱化学物質による汚染状況を(1)河川水中のestrogen recepterαに結合能のある物質の量をBeacon^【○!R】2000による蛍光偏光の差から、(2)魚の血中ビテロジェニン(Vg)濃度をenzyme-linked immunosorbent assayで測定し、以下の結論を得た。1)Beacon^【○!R】2000による測定値であるmp値は女性ホルモン様物質が多いほど低くなるが、各地点におけるmp値は(河口より)6km地点;127.5、15km地点;121.7、30km

地点;95.2、34km地点;54.5となり(10000倍に濃縮したサンプル)、木曽川・揖斐川の各地点と比較しても長良川34km地点で特に高値を示した。次に、34km地点に注ぐ支流を調査したところ多くの地点でかなり低いmp値をとり、女性ホルモン換算値が0.0005M以上存在することになる。これより、34km地点での長良川の汚染は、生活排水を含む支流よりの流入であると結論づけられた。2)長良川上流に生息する雄コイの血中Vg濃度は、平均122.5ng/mL(n=8)、下流のそれは157ng/mL(n=10)で、有意な差は認められなかったものの下流で高値を示した。コイは、特定場所での生息が保証されないため、河川水でメダカを飼育しVg濃度を測定した。長良川上流・下流の河川水中で10日間程飼育したところVg濃度はそれぞれ10.6ng/mL,17.8ng/mLとなりコイと同様の傾向を得た。これらの結果から、木曽三川下流部では容易に女性ホルモン様物質を見いだせるが、魚類のメス化を結論づけるほどの汚染状況にはないと考えられた。3)ハゼの血中Vg濃度が検出限界以下であったことから、海域への蓄積はないものと考えた。
紅斑症の発生機序に関する免疫学的・生化学的並びに電顕的研究

1.背部に紅斑を自然発症するSLEモデルマウスであるMRL/lマウスの皮膚を生検し、ヒスタミン分解酵素であるhistamineーNーmethyltransteruse(HMT)とdiamineoxidase(DAO)活性を測定したところ、本マウスのHMT活性は、1カ月令ではコントロールであるMRL/nマウスや他の自己免疫マウスとほぼ同様の値を示したが、以後次第に低下し、紅斑を発生する5カ月令では、これらコントロールマウスに比して有意に低下してした。また、コルチコステロイドを全身的に投与しておくと、このようなHMTの低下は認められなかったが、紅斑の形成や蛋白尿は軽度改善されるにすぎなかった。なお、DAO活性は、いずれのマウスの皮膚にもほとんど検出されなかった。2.HMT活性に抑制作用のあるセロトニン代謝を、紅斑のモデルであるモルモットのアルサス反応を用いて検討した、セロトニン分解酵素には、monoamine oxidase(MAO)と、serotonin-N-acetultransferase(NAT)があるが、前者の活性は後者の活性に比して約10倍大きく、アルサス反応2時間後まで増加し、以後は漸次低下した。この変化は、セロトニンの経時変化と鏡像をなすものであり、両者の密接な関係がうかがわれた。まおNATの変化は、4時間まで経時的に漸減し、以後、その状態を維持した。3.HMTには上記のようにセロトニンが抑制作用をもつことが分ったが、その他の薬剤についても検討したところ、疎水基近傍にエチルアミンの構造をもつ生理活性アミンは、種類に関係なく、HMT活性を拮抗的に阻害することが分った。4.多形滲出性紅斑の発症に免疫複合体が関与することは、すでに報告したが、本症患者血清は多核白血球を刺激し、各種活性酵素を産生することが分った。また、本症の治療剤であるヨードカリやダプリンはinvitroの実験において活性酸素の産生を抑制したり、産生された活性酵素を除去することが分った。1.多形滲出性紅斑の病巣辺縁部,中央褪色部,周辺健常部を生検し,我々の作成した抗ランゲルハンス顆粒特異抗体(Lag), OKT6, OKT8, Leu3a, HLAーDRなどの各種モノクロナール抗体で染色した.その結果,真皮では,病変の活発な病巣辺縁部でhelper/inducer T細胞が著明に浸潤し,中央褪色部では, suppressor/cytotoxic T細胞が増加すること,また表皮では,病巣辺縁部で,ランゲルハンス細胞が増加し,中央褪色部では,表皮細胞表面にIaの抗原が誘導されることが分った.2.MRL/lマウスの紅斑部を経時的に生検し, Thyー1.2,Lytー1,Lytー2,抗Ia,ATPase等で染色した.その結果,加令とともに,真皮浸潤細胞中のT細胞の割合が多くなり,特にhelper T細胞が優勢となることが分った.また,表皮内ランゲルハンス細胞は病変の初期と思われる病巣辺縁部で増加し,病巣中央部では,かえって減少することが分った.3.Xanthine oxidaseとhypoxanthineを混合して活性酸素を産生せしめ,これをモルモットに注射することによって紅斑を惹起し得た.この際,皮膚SOD活性をモルモットの年令との関連において測定してみると,紅斑惹起前にはほとんど差異がないのに対して,紅斑惹起後には,老化マスウ程,それが低下していることが分った.4.ヒト紅斑症のモデルとしてアルサス反応を選び, invitroにおいてヒスタミン分解酵素であるhistamineーNーmethyltransferase(HMT)活性に対し,阻害効果を示すセロトニン,ドーパミン,トリプタミン,チラミンの皮膚内定量を行った.その結果,セロトニンのみが,実際に増加していること,その増加とHMTの減少とが経時的に対応すること,また,セロトニンの主要分解酵素であるMAO活性を測定することによって,セロトニンの増加が,主として血小板に由来することが分った. 5.紅斑症の電顕,免疫電顕的研究は主として,昭和63年度に行う予定である.1.背部に紅斑を自然発症するSLEモデルマウスであるMRL/lマウスの皮膚を生検し、ヒスタミン分解酵素であるhistamineーNーmethyltransteruse(HMT)とdiamineoxidase(DAO)活性を測定したところ、本マウスのHMT活性は、1カ月令ではコントロールであるMRL/nマウスや他の自己免疫マウスとほぼ同様の値を示したが、以後次第に低下し、紅斑を発生する5カ月令では、これらコントロールマウスに比して有意に低下してした。

まおNATの変化は、4時間まで経時的に漸減し、以後、その状態を維持した。3.HMTには上記のようにセロトニンが抑制作用をもつことが分ったが、その他の薬剤についても検討したところ、疎水基近傍にエチルアミンの構造をもつ生理活性アミンは、種類に関係なく、HMT活性を拮抗的に阻害することが分った。4.多形滲出性紅斑の発症に免疫複合体が関与することは、すでに報告したが、本症患者血清は多核白血球を刺激し、各種活性酵素を産生することが分った。また、本症の治療剤であるヨードカリやダプリンはinvitroの実験において活性酸素の産生を抑制したり、産生された活性酵素を除去することが分った。
コロニアル都市・青島の形成と文化多重性に関する総合研究

ドイツの「模範植民地」として形成された青島は、第一次大戦後は日本に占領され、中、独、日の重層的な帝国支配という複雑な政治環境に置かれた。ロシア、満州および朝鮮半島との往来交易、フィリピン駐留のアメリカ軍との交易など、その国際関係はきわめて多彩であった。本研究は1,コロニアル都市・青島は接触空間としてどのような機能を持っていたのか。2,青島において展開された政治、経済、文化の特質はどのようなものであったか。3,青島の存在は半島空間および内陸部にどのような影響を与えたか。という問題意識に基づき、具体的事例から中国近代史における青島の位相を考察した。例えば、ドイツは駐留軍隊の衛生的な食糧確保のために東洋一の規模と設備を誇る食肉加工場を建設し、そこで生産された牛肉はロシア、日本、フィリピンの米軍にまで輸出された。しかしながら、牛を農耕の役牛として考える中国側とは摩擦が生じ、しばしばその輸出量を制限された。食文化の異質性がかかる摩擦を引き起こしたともいえる。また、山東の土産である落花生も国際商品となり、欧米や日本、中国南方に輸出されたが、その買い付けにカがあったのは伝統的な広東商人であった。広東商人は山東開港期から買弁として働き、青島市政にも参加したのであり、青島の形成にあたって広東商人の果たした役割の大きさが確認された。ドイツの軍事拠点としての青島経営は、流入する中国商人と中国人労働者の働きと下支えの上に成り立ったのであり、植民都市とは移民都市の実態を併せ持つものであった。青島は中国東北部への労働力移動の中継点ともなったのである。2004年度は青島に関する基本的な歴史資料の収集に努めることとして、まず、日本国内に散在する史資料の網羅的な文献目録の作成に着手した。また、9月4日11日まで、森紀子、佐々木衛、奥村弘、緒形康は史資料および史跡調査のため青島市を訪問した。青島市公文書館においてドイツ占領期および日本占領期の新聞資料、文献資料を調査収集するとともに青島関係出版物の入手に務めた。ドイツ人居留区である旧青島市街の景観、ドイツ時代の建築物について基礎的な俯瞰を行うとともに、中国人居住地であった台東鎮、台西鎮の位置を確認し、清朝支配下の行政都市即墨県の調査と総合することにより、植民都市青島形成にかかる歴史空間の初歩的知見が得られた。また、大津留厚は7月8月の問、オーストリアのウィーンに滞在し、第1次世界大戦の日独戦において、日本の捕虜となったオーストリア=ハンガリー帝国海軍の巡洋艦「エリーザベト」に関する調査を徹底的に行った。「エリーザベト」をめぐる日本-オーストリアの外交関係については、オーストリア外交史料館(Haus-. Hof- und Staatsarchiv)で史料を収集した。「エリーザベト」の航跡については国家文書館の軍事史関係文書で調査し、日本で捕虜になった兵士の帰還に関しては国家文書館のオーストリア共和国関係文書で調査した。捕虜として日本に収容されていた期間の状況を調査するためジュネーブの国際赤十字中央文書館で史料を収集した。また巡洋艦「エリーザベト」と捕虜兵に関してオーストリア研究者と情報を交換した。2005年2月には日本の外交文書館を訪れ、日本側の巡洋艦「エリーザベト」に関する外交文書を調査した。2005年度は、引き続き青島に関する基本的な歴史資料の収集に努めた。日本国内では一橋大学、金沢大学に散在する青島守備軍等の史資料を収集し、『青島官報』のデジタル化をはかった。8月、森紀子、佐々木衛は史資料および史跡調査のため青島市を訪問した。青島屠獣場、監獄、広東会館、三江会館、山東会館、青島取引場等、旧青島市街の史跡を訪ねるとともに、森は青島市公文書館において海関資料の閲覧、収集を行い、佐々木は新旧住宅区域の変遷を調査した。

なお、森は11月に京都大学人文科学研究所近代史研究班において「コロニアル都市・青島の社会情報」と題して口頭発表を行った。また、大津留厚、奥村弘は青野ヶ原収容所におけるドイツ人捕虜の文化活動の復元作業を小野市との協力の下に行った。2006年2月9日には、「コロニアル都市・青島の形成とその歴史的位相」と題して国際シンポジウムを開催した。クラウス・ミュールハーン(フィンランド、トゥルク大学)楊來青(青島公文書館)、孫立新(青島海洋大学)、浅田進史(千葉大学)をゲスト講演者として招聘し、論文の口頭発表を委嘱した。本学からは森、大津留がそれぞれ「屠獣場と牛肉輸出から見る青島の位相」「青島のエリーザベト号」と題して口頭発表を行った。緒形康はシンポジウムの総括討論を司会し、模範植民都市といわれた青島の歴史的実態に鑑み、植民都市を移民都市という呼称をもって変えることが可能かという問題提起をした。2006年度は前年度に引き続き国内及び海外における青島関係の史資料収集を行うとともに、これまでの成果を論文としてまとめ、国際シンポジウムの場で発表していくことにも留意した。すなわち、森紀子は8月25日28日、中国社会科学院近代史研究所が北京で開催した『1910年代的中国』の国際学術討論会に出席し「食肉市場から見た1910年代のコロニアル空間・青島」と題する口頭発表を行った。また、大津留厚と奥村弘は8月中、ドイツ・ミュンヘンのバイエルン国立図書館およびオーストリア・ウィーンの国家文書館で青島の日独戦で捕虜になったドイツ・オーストリア兵に関する史料の収集を行った。森、佐々木、緒形、奥村は11月2930日にかけて国立台湾大学で開催された『東アジア文化交流:空間・境界・移動国際学術シンポジウム』に参加し、森紀子が「コロニアル空間・青島における文化摩擦と時代相」と題して口頭発表を行った。緒形康は12月9日、孫文記念会主催の『孫文生誕140周年国際シンポジウム』において「孫文・熊楠の"アジア主義"」と題する口頭発表を行い、コロニアリズムを巡る時代思潮の分析を行った。2007年2月7日、青島市から張樹楓(青島市社会科学院研究員)楊来青(青島市档案局副局長)両氏を招聘し、神戸大学において『国際学術シンポジウム・東アジア海港都市の人文学』を開催、それぞれ「清末膠州湾の駐兵防備の研究」「ドイツの青島における自由貿易政策実施の研究」と題する口頭発表を行った。また、2月中、森紀子はドイツ・フランクフルト市公文書館およびフランクフルト大学図書館において青島関係文献史料の収集を行った。なお、大津留厚が監修者として翻訳を進めていたヴォルフガング・バウアー著『植民都市・青島19141931-日・独・中政治経済の結節点』は訳了して出版された。平成19年度は最終年度であるため、研究成果の発表と報告書の作成に努めた。すなわち、12月5日7日、中山大学が広州で開催した『国際シンポジウム・東アジア海港都市の文化発展』において森紀子は「山東開港と広東人」、大津留厚は「トリエステ、神戸、海港都市学」、緒形康は「厳復と籌安会問題再考」、奥村弘は「開港場神戸からみた「清国人」認識」と題してそれぞれ口頭発表を行った。これらは、青島をはじめとする諸海港都市を比較研究する中で、広く海港都市学というアプローチが可能であるのか、その方法論を追求しようとしたものである。
頻発する大規模森林火災の実態解明とホットスポットを使った火災挙動把握手法の開発

頻発する大規模森林火災の実態解明のための現地調査を、米国アラスカ州、ロシア・サハ共和国、モンゴル、インドネシア・カリマンタン島で行うと共に、火災、衛星データ(ホットスポット)、気象データを分析した。この結果、(1)ホットスポットを使った火災挙動把握手法を2004年に米国アラスカ州フェアバンクス近郊で発生した、Boundary Fireに適応した結果、火災挙動や焼損面積の把握が十分に行える事がわかった。ホットスポットを使う火災挙動の把握は簡便で便利で、航空機主体の肉眼による現地調査よりは場合によっては正確であることが分かった。(2)北方林での過去半世紀の火災気象を分析した結果、アラスカでは6月の気温が、サハ共和国では6月の雨量が重要な因子であることを示した。これは、アラスカでは雷による着火が重要であるため雷の活動を左右する気温が重要で、一方、サハでは森林の乾燥度合いが火災の拡大には重要であるためである。(3)ロシア・タイガの南端を有するモンゴルの森林火災は、夏場の雨量に強く左右され、夏の日照りが発生した時に9,10月に発生することがわかった。また、春先の火災は主にステップ火災で冬季間の雨量が極端に少ないので、春先の雪解け時期の頃から火災が始まることがわかった。(4)インドネシア・カリマンタン島での泥炭火災を検討した結果、エルニーニョ現象に伴い発生する日照り重要な因子であることがわかった。海水温の異常が僅かでもプラス側になると日照りが発生するので、公式なエルニーニョ発生宣言に拘わらず、海水温の監視が必要であることがわかった。なお、アラスカではアラスカ大学・アラスカ森林火災局と、ヤクーツクでは永久凍土研究所、生物研究所と、モンゴルではモンゴル国立大学、モンゴル国立リモートセンシング・センターと、カリマンタンではパランカラヤ大学との国際情報交換による研究を行った。本研究の目的1としての"頻発する大規模森林火災の実態解明"を行った。この結果、北方林では、近年の気候変動により、夏季の降水量低下で、森林火災が発生しやすい状態となっていることを明らかにした。サハ共和国と米国アラスカ州で大火災を過去半世紀の気象と火災データを詳細に調べ、実態を解明した。この結果、1990年以降の気候変動による森林火災への影響は顕著であった。米国アラスカ州では、1956-1989年と1990年以降の1990-2005年を比べると、火災件数は120件程度増加、焼損面積は2.3倍になっている事がわかった。サハ共和国では、1955-1989年と1990年以降の1990-2005年を比べると、火災件数は92件程度増加、焼損面積は1.9倍になっている事がわかった。この結果、近年の急激な気候変動下で両地域の北方林(タイガ)が危機的な状況であることを明らとした。また、サハ共和国とアラスカ州では主に気温が、サハ共和国では主に降雨量が、森林火災の挙動を支配していることも明らかとした。本研究の目的2としての"ホットスポットを使った火災挙動把握手法の開発"の方は、既にアラスカの大規模火災で基本的な開発は済んでいる。このため、アラスカやシベリアなど広大な森林地帯で発生する森林火災挙動の把握は、航空機や現地観測による手法と比べ精度や信頼性は悪いものの、衛星で検知されたホットスポットを使う手法の方が、火災挙動の大まかな把握には簡便で便利である事は明白で、平成19年度に本手法を、サハ共和国とアラスカ州の北方林ばかりでなく、インドネシアなどの熱帯林の特に、泥炭火災へ適用し、その有効性を実証する予定でいる。

頻発する大規模森林火災の実態解明のための現地調査を、米国アラスカ州、ロシア・サハ共和国、モンゴル、インドネシア・カリマンタン島で行うと共に、火災、衛星データ(ホットスポット)、気象データを分析した。この結果、(1)ホットスポットを使った火災挙動把握手法を2004年に米国アラスカ州フェアバンクス近郊で発生した、Boundary Fireに適応した結果、火災挙動や焼損面積の把握が十分に行える事がわかった。ホットスポットを使う火災挙動の把握は簡便で便利で、航空機主体の肉眼による現地調査よりは場合によっては正確であることが分かった。(2)北方林での過去半世紀の火災気象を分析した結果、アラスカでは6月の気温が、サハ共和国では6月の雨量が重要な因子であることを示した。これは、アラスカでは雷による着火が重要であるため雷の活動を左右する気温が重要で、一方、サハでは森林の乾燥度合いが火災の拡大には重要であるためである。(3)ロシア・タイガの南端を有するモンゴルの森林、火災は、夏場の雨量に強く左右され、夏の日照りが発生した時に9,10月に発生することがわかった。また、春先の火災は主にステップ火災で冬季間の雨量が極端に少ないので、春先の雪解け時期の頃から火災が始まることがわかった。(4)インドネシア・カリマンタン島での泥炭火災を検討した結果、エルニーニョ現象に伴い発生する日照り重要な因子であることがわかった。海水温の異常が僅かでもプラス側になると日照りが発生するので、公式なエルニーニョ発生宣言に拘わらず、海水温の監視が必要であることがわかった。なお、アラスカではアラスカ大学・アラスカ森林火災局と、ヤクーツクでは永久凍土研究所、生物研究所と、モンゴルではモンゴル国立大学、モンゴル国立リモートセンシング・センターと、カリマンタンではパランカラヤ大学との国際情報交換による研究を行った。
アメリカン・ルネサンス文学における情動と身体ーアフェクト理論とその応用

アフェクト理論を応用することで、文学テクストにおける身体の働きや情動の諸相を読み取り、アメリカン・ルネサンス期における精神と身体の独特な関係を解明した。研究成果としては17本の研究論文、43件の研究発表・シンポジウム、9件の図書刊行を数える。また、毎年、ゲスト講師を迎えてサマーセミナーを開催した。本研究の集大成として平成28年3月に『身体と情動ーアフェクトで読むアメリカン・ルネサンス』を刊行した。本研究は、アメリカン・ルネサンスの作家たちが、身体を中心とした関係性にどう向き合ったのかを、所謂「アフェクト理論」を発展・応用することで調査するものである。アメリカン・ルネサンスの作家、即ち、エマソン、ソロー、ホーソーン、メルヴィル、ホイットマン、ポーらの作品には、精神と身体の謎めいた関係や、主体と外界の一体化、モノに宿る生命の痕跡などが頻繁に描かれる。これらの問題は従来、ピューリタニズムやロマン主義的なミスティシズム、疑似科学の文脈で理解されることが多かった。本研究は、その発想を大きく転換し、彼らの文学を新たな観点から読み解くものである。平成25年度は、まず、アフェクト理論を再構築し、その射程を近代全体に広げる。そのうえで、19世紀中葉のアメリカを、視覚文化や劇場文化が、印刷技術によってもたらされたリニアな表現構造を崩壊させた時代として定義する。また、博物学や身体医学、解剖技術などの科学分野の発展、そこから発想された人体実験的見せ物や蝋人形、催眠術などの大衆文化の隆盛、音楽文化の浸透、交通網の発展とそれによってもたらされた異人種の身体との出会いなどを重要な文脈として調査する。具体的にはジェーン・スレイルキルやシャン・ガイの著作を参考に、研究会を開き、調査結果を基に研究発表を行った。それによってアフェクト理論をより汎用性の高い概念として作家研究、作品研究に生かせることとなった。平成26年8月に夏季セミナーを開催し、国内のトップ級アメリカ文学研究者諸氏を招いて、アフェクト理論に関する研究会を実施した。その中でアフェクト理論を文学研究に応用する方策を議論し、メルヴィル、ホーソーン、ジェイムズ、ポー、エマソンらアメリカン・ルネサンス作家の作品やその背景となる思想を身体や情動の観点から再検討することができた。その中で、平成27年度に発行する図書の構想を明確化し、各自の論点を深めることとした。この間、ニューヨーク市立大学のデイヴィッド・レノルズ氏とはメールで連絡を取り合い、アフェクト理論とアメリカン・ルネサンス研究の関連性についての意見交換を行った。また、同じく、ニューヨーク市立大学のエリック・ロト氏とは現地で直接面談し、アメリカン・ルネサンス作家と19世紀アメリカの音楽文化の関りについて意見を聴取した。さらに、スタンフォード大学のシャン・ンガイ氏とはメールで連絡をとり、上述の図書の中で、ンガイ氏のUgly Feelingsからメルヴィルの『信用詐欺師』に関する論考を訳出して掲載することの同意を得た。本年度も8月中旬にサマーセミナーを開催し関東、関西、九州より第一線で活躍されるアメリカ文学研究者を招いて研究報告や講演会を行った。その中でアフェクト理論の最新の知見について理解を深めるとともに、研究分担者だけではまかないきれなかったヘンリー・ジェイムズやハリエット・ビーチャー・ストウの情動表現や、トラウマ理論とアフェクト理論の接点等について討論を行って。さらに、3月には日本ナサニエル・ホーソーン協会九州支部と共催によるシンポジウムを開催し、ホーソーンの語りにおける情動の働きや、アメリカ文学研究者が見落としがちなD・H・ロレンスの『アメリカ古典文学』におけるホーソーン解釈とそこにおける原始的な情動の位置付けについて、多くの研究者と議論を行った。本研究の集大成として3月に『身体と情動ーアフェクトで読むアメリカン・ルネサンス』を刊行した。本書は三部構成となっており、第一部は「解き放たれる身体」と題して、物体としての身体が突き付ける謎めいた力に、精神至上主義の十九世紀アメリカがいかにして向き合ったのかを探っている。第二部は「知覚とリスズム」と題した。言語の使い手である作家たちが身体を通して知覚される音と律動の刺激を、言語表現との関係において、いかなる形で導き出したのかを論じている。第三部は「情動の政治学」と題し、怒り、悲しみ、疑念、信頼、不安など、様々な情動が、文学作品においてどのように変奏され、いかなるパターンを形成し、テクストがその中にどのような政治意識を織り込んでいるのかを考えた。さらに、本書には「特別寄稿」として、スタンフォード大学教授のシアン・ンガイ教授に特段のご理解をいただき、アフェクト理論の文学への応用として先駆的研究である彼女の『醜い感情』から「トーン」の章を訳出して掲載している。まず、本研究は、アフェクト理論を再構築し、その射程を近代全体に広げる。

そして、博物学や身体医学、解剖技術などの科学分野の発展、そこから発想されたバーナムら興行主による人体実験的見せ物や蝋人形、催眠術などの大衆文化の隆盛、音楽文化の浸透、交通網の発展とそれによってもたらされた異人種の身体との出会いなどを重要な文脈として調査する。上記の目的の達成を踏まえたうえで、アメリカン・ルネサンス作品から、アフェクト的身体運動や情動の描写を抽出し、それと時代の文脈との関連を探る。これらの目的は研究代表者と分担者それぞれの研究活動、並びに、上述した平成26年8月の夏季セミナーにおいて達成された。加えて、平成27年度発行の図書において、国内のトップ研究者に加え、アメリカン・ルネサンス研究においてアフェクト理論をいち早く取り入れたシャン・ンガイ氏の論考を掲載できることになったことは、本研究プロジェクトにおいて特筆すべきことである。27年度が最終年度であるため、記入しない。アメリカ文学平成27年度は上記の活動を踏まえて、アメリカン・ルネサンスとアフェクト理論の関連を総合的に論じた図書を発行する。執筆者は既に決定しており、本研究のメンバーに加え、中村善雄、舌津智之、大串尚代、大和田俊之、新田啓子の各氏に寄稿をいただく。それに、シャン・ンガイのUgly Feelingsの第1章toneの翻訳が加わる。また、この図書の発行に先立ち、平成27年度も夏季セミナーを開催し、メンバー各自の構想をさらに明確化すると共に、それを批判的、建設的に高め、発行する図書の質の向上を目指す。研究会や夏季合宿、学会発表などを通じてアフェクト理論への理解を深め、アメリカン・ルネサンス研究に生かすことができた。これは当初の年度別計画にそったものである。また、現代最高のアメリカン・ルネサンス研究者と言えるデイヴィッド・レノルズと連絡を取り、本研究の内容について意見交換を行い、拙論についても一定の評価をいただいた。現在は平成27年度の日本への招聘に向けて交渉を行っている。ニューヨーク市立大学のエリック・ロト教授を招聘するための資金を確保していたが、本人の事情により来日できなくなった。平成26年度は、アメリカン・ルネサンス作品から、アフェクト的身体運動や情動の描写を抽出し、それと時代の文脈との関連を探る。それぞれの着眼点は以下のような形で展開していく。基本的な枠組みとしては、ロマンティシズムやピューリタニズムの伝統により自ら精神主義的な方向性で文学探究をしていた作家たちが、図らずも身体や情動の力に向き合わざるを得なかった事情に注目する。『緋文字』のパールは「A」の文字にこだわり、その意味も分からずに身につけることで成長した。ディムズデイルは、その説教の言葉が聴衆に通じない状況でありながら、その声色の豊かさが人を感動させる。一方で彼は罪の意識を深め、肉体に「A」の文字が浮かび上がったとされる。ここには、明らかに、思考や言語の意味とは別次元で働く、モノや肉体や音の影響力が抽出されている。メルヴィルは、片足のエイハブ船長に、激情や情動で理屈を越えたコミュニケーションを展開させ、それによってピークォッド号のクルーが一丸となる過程を描いている。
血液細胞に発現する新規SH2蛋白質HSH2によるJAK2/STAT5の活性化機構

JAK/STAT経路は細胞増殖に中心的な役割を持つシグナル伝達機構のひとつであり、その制御の異常が細胞の癌化と密接に関連している。HSH2 (Hematopoietic SH2 protein)は、我々が同定した新規SH2蛋白質で、血液細胞で強く発現している。本研究で、HSH2とJAK2との相互作用について調べてみた。その結果、HSH2のN末端は構成的に、C末端はキナーゼ活性依存的にJAK2と結合することが分かった。更に、HSH2のC末端領域がJAK2の活性を増強することが明らかになった。JAK2の活性を増強するタンパク質はこれまでほとんど知られていない。HSH2によるJAK2の活性化のメカニズムの解明は、JAK/STAT経路を制御する分子機構の全体像を明らかにしていく上で重要であると考えられる。次にHSH2と血液疾患発症との関連について検討した。ESTデータベースでHSH2 cDNAクローンの異常を検索したところ、あるalternative splicing formは野性型HSH2 cDNAと比べて4塩基欠失しており、野性型HSH2の翻訳ができないことが分かった。興味深いことに、データベース上の野性型HSH2 cDNAが正常血液細胞、白血病由来細胞(10クローン)のどちらからも検出されたのに対して、上記のalternative splicing form cDNAはすべて白血病細胞(5クローン)から検出された。HSH2の異常が、JAK/STAT経路の制御を乱し、血液疾患発症に関与しているか更に検討していく必要がある。
脳障害者の認知機能評価に関するサイコメトリックスの再考

痴呆の評価を中心とした高齢者の認知機能評価とは異なり、脳損傷患者の認知機能評価は、損傷の部位、病理、経過のプロセスなどにより様々な認知傷害の様相を呈することは明らかである。このような背景のもとで、脳神経外科、神経内科、精神科、放射線科に入院・通院している脳障害者の認知機能評価の目的で、検査項目の選択にあたり、いくつかの条件を設定し、琉球大学式認知機能評価バッテリーを考案した。検査項目の中で、いいまで検討してきたものは、MMSEを修正したmodified MMSEを中心とし、認知機能の全体的様相の分析である。即ち、3MSの下位項目の検討を通して、損傷部位、病理、術前・術後の経過等でのプロフィールの分析を行ってきた。また、前頭葉検査として位置づけられている、Stroop testとTrail makingtestを健常者および、脳障害者で行い、琉球大学方式の検査方法を検討した。具体的には、この方式による標準化を試みることによって、データの客観性を得ることができ、この標準化データをもとに、脳損傷者の認知機能評価を、病理、術前・術後の経過等を変数として検討してきた。認知機能の評価には、量的評価と質的評価が必要であり、一般には、量的評価のみが優位に利用されがちでありが、量的評価の客観性を高めるためには、質的評価をどのように組み込むかということ視点を検討した分析を試みている。このために、実験心理学的検査の導入を考案中である。脳損傷患者の認知機能評価は、痴呆の評価を中心とした高齢者の認知機能評価とは異なり、損傷の部位、病理、経過のプロセスなどにより様々な認知傷害の様相を呈することは明らかである。平成16年度においても、脳神経外科、神経内科、精神科、放射線科に入院・通院している脳障害者の認知機能評価の目的で、検査項目の選択にあたり、いくつかの条件を設定し、琉球大学式認知機能評価バッテリーの検討を行った。平成15年度に引き続き、平成16年度もMMSEを修正したmodified MMSEを中心にし、認知機能の全体的様相の分析を行ってきた。3MSの下位項目の検討を通して、損傷部位、病理、術前・術後の経過等でのプロフィールの分析を行ってきた。また、前頭葉検査として位置づけられている、Stroop testとTrail makingtestを、健常者および、脳障害者で行い、琉球大学方式の検査方法を検討した。具体的には、この方式による標準化を行った。そのことによって、データの客観性を得ることができ、この標準化テータをもとに、脳損傷者の認知機能評価を、病理、術前・術後の経過等を変数として検討してきた。認知機能の評価には、量的評価と質的評価が必要であり、一般には、量的評価のみが優位に利用されがちでありが、量的評価の客観性を高めるためには、質的評価をどのように組み込むかということの視点を、fMRI等の神経画像との関係で検討を行っている。さらに、実験心理学的検査の導入を考案中である。
学童に対するリスク診断に基づく歯肉炎予防管理プログラムの構築

小学生の歯肉炎予防を目的に、視聴覚教材による保健教育に加え、学級単位で異なる指導様式(全員対象・リスク児対象・指導なし)によりフロスの使い方指導が行われた。リスク児は、歯肉炎の所有と自己管理スキルレベルの低さによって識別された。リスク児指導学級は、歯肉所見・保健行動の改善および正しい知識の獲得において、他の2学級に比べ良好な結果を示した。リスク児に集中した指導が動機付けを促したためと推察した。実施経過・7月,研究対象児童が在学する学校長および教職員に研究内容・実施計画について説明した。・9月,保護者あての同意文書の文案について学校関係者より承認を受けた。・10月,児童の保護者に対し,研究参加に対する同意を書面で得た。(同意者率:96% 81人/84人)・11月,ベースライン調査:対象児童;5年生80名対象歯;上下顎前歯(歯肉)・12月1月データ解析...>リスク児童のスクリーニング指標、Cut off Pointの決定・2月,学習教材(DVD)の視聴、クラス別に3種(1組3組)の管理プログラムの実施学習教材(DVD)制作経過・9月養護教諭(イラスト担当)と打ち合わせ。10月制作業者の選定11月シナリオ、イラスト完成・1月DVD:さわやかスマイルー健康な歯肉をたもつために-完成現在までの結果および考察自己管理スキル(SMS)と保健行動に関する調査結果から、SMSの低い児童で望ましい保健行動の定着が難しいことが示唆された。そこで、歯肉炎High Risk児童のスクリーニング指標(Cut off Point)として、PD≧3mm、PBI≧1、SMSスコア=4を採用した。また、クラス単位で異なる管理プログラムの実施にあたり、クラス別の平均SMSスコアで低い(優)順に「Control」、「ハイリスク児のみ対象」、「クラス全員を対象」とし、ブラッシング指導、フロスの使い方指導を行った。視聴覚教材の教育効果および保健行動の改善については、次年度以降の評価となる。実施経過・4月,予防プログラム実施2ヵ月後調査(対象児童:6年生78名):調査内容はべースライン調査に準ずる。・7月,第86回国際歯科研究学会(トロント・カナダ)にて発表・11月,6年生:10ヵ月後調査(評価終了)、5年生:同意者(率)83人(95%):べースライン調査・12月1月5年生のクラス別平均自己管理スキル・スコアを算定、クラス別管理プログラムの決定、ハイリスク児童(昨年度と同じ指標による)の選定。・2月,指導教材DVDの視聴、クラス別の3種類の管理プログラムの実施。・歯ブラシ・デンタルフロスの月1回の配布(期間:2月11月、フロスは切れた段階で追加配布)現在までの結果および考察視聴覚教材の視聴に加え、クラス別の予防管理プログラム-対照(C)、ハイリスク児のみ対象(HR)、クラス全員を対象(A)-の実施2ヵ月後、10ヵ月後の歯肉所見、知識の習得、保健行動の改善状況について評価した。(1)クラス(プログラム)間の比較:歯肉所見において、PBI≧1以上の平均部位数は、C組を除き改善傾向にあり、10ヵ月後ではクラス間に有意な差が認められた。また、フロスの使用状況は、全クラスで2ヵ月後良好な行動へと改善がみられたが、10ヵ月後も良好な習慣を維持していたのはHR組であった。歯肉炎予防における歯みがきの有効性について理解不足があった児童の割合は、C、HR組の約10%に対しA組では28%と高かった。(2)HR組のHigh-Risk児童とLow-Risk児童での比較:歯肉所見は、管理を受けたHigh-Risk児童でPBI、PDともに有意な改善を示し、Low-Risk児童との間の有意差は認められなくなった。視聴覚教材による教育に加え、実践指導の必要性が示唆され、全員一律に行うよりも、High-Risk児童に集中的に実施した方が、指導効果が高いことが示唆された。実施経過・4月,口腔診査および歯科保健に関する質問紙調査(H21年度6年生80名)・9月,第9回国際予防歯科学会(プーケット・タイ)にて発表・11月,口腔診査および歯科保健に関する質問紙調査(追跡調査終了)・12月3月2学年分(H19,20年度の5年生)の追跡データを統合して解析結果および考察視聴覚教材の視聴に加え、クラス別の保健指導-対照(C)、ハイリスク児のみ対象(HR)、クラス全員を対象(A)一の実施2ヵ月後、10ヵ月後の歯肉所見、知識の習得、保健行動の改善状況について評価した。歯肉所見;PBI≧1の部位数およびPD≧3mmの部位数のクラス別比較では、2ヵ月後は両指標ともにクラス間に有意差を認めなかったが、10ヵ月後ではPBI≧1の部位数にクラス間で有意な差が認められ、HR群で低い値を示した。

また、10ヵ月後、C群、A群ともに初診に比べPBI≧1、PD≧3mmの部位数ともに有意な増加を認めたのに対し、HR群ではPBI≧1の部位数に有意な改善を認めた。保健行動・知識の習得;フロスの週1回以上の使用習慣は、全クラスで2ヵ月後良好な行動へと改善がみられたが、10ヵ月後も良好な習慣を維持していたのはHR群であった。歯肉炎を識別できると回答した児童は、全クラスで有意に増加した。さらにHR群では歯みがきの有効性を認識している児童の有意な増加が認められた。歯肉所見および保健行動の改善、歯科保健知識の習得において、HR群で他の2群に比べ良好な結果が示された。リスク児を選別して自覚を促したことでモチベーションが高まったのではないかと推察した。また、自己管理スキルの低いA群で行動面での改善が低い傾向にあり、一方、スキルの高いC群ではHR群と回答がほぼ同じ分布であったことから、自己管理スキルに関する評価は、保健指導を行う上でリスク児選別の有用な指標であることが示唆された。
サイトカインを基盤としたアレルギー疾患発症機序の解明に関する研究

本研究では、細胞外マトリックス分子であるperiostinが気管支喘息の線維化における新規の構成成分であることと、イオンチャネルであるpendrinが気管支喘息、慢性閉塞性肺疾患(COPD)に共通した粘液産生におけるメディエーターであることを明らかとした。前者においては、(1)肺線維芽細胞をIL-4あるいはIL-13で刺激すると、periostinが分泌された。(2)気管支喘息患者あるいは気管支喘息モデルマウスの線維化部位においてperiostinが沈着していた。(3)periostinはtenascin-C、fibronectin、collagen Vなど他のマトリックス分子と結合した。以上の結果より、気管支喘息において、IL-4あるいはIL-13刺激により線維芽細胞からperiostinが分泌され、他の細胞外マトリックスタンパク質と結合して線維化の形成に関与していると考えられた。後者においては、(1)初代培養気道上皮細胞をair-interface法にてIL-13存在下で培養して粘液産生細胞に分化すると、イオンチャネルであるpendrin遺伝子が誘導された。(2)気管支喘息あるいはCOPDのモデルマウスの肺組織、あるいは喘息患者の肺組織においてpendrinの発現が増強していた。(3)気道上皮細胞株にpendrinを強制発現すると、粘液産生が亢進した。(4)マウス肺組織にウイルスベクターを用いてpendrinを強制発現させると、好中球浸潤とともに粘液産生が亢進した。以上の結果より、気管支喘息、COPDにおいてpendrinが誘導され粘液産生に関与していることが明らかとなった。線維化、粘液産生はともに気管支喘息、COPDの症状出現、死因として重要な要素であり、本成果は気管支喘息、COPDにおけるこれらの病態形成機序の解明とその病態に対する新規治療法の開発につながると期待される。今年度の本研究では、細胞外マトリックス分子の一つであるペリオスチンが気管支喘息の線維化における新規の構成成分であることを見出した。気管支喘息において線維化は臨床的重症度とよく相関しており、その機序の解明とそれに対する治療法の開発は、気管支喘息のコントロール上非常に重要である。ペリオスチンは元来骨形成に関与する細胞外マトリックス分子として同定されていたが、今までに細胞外マトリックス分子としての性質についての詳細な解析はされておらず、気管支喘息など疾患との関連性については全く知られていなかった。本研究においては、(1)肺線維芽細胞におけるペリオスチンの発現をRT-PCR、ウエスタンブロット法により解析した。(2)抗ペリオスチン抗体を作製して、健常者及び喘息患者の肺組織におけるペリオスチンの発現を免疫染色により解析した。(3)野生型、IL-4欠損、IL-13欠損マウスを用いて慢性喘息モデルマウスを作製し、肺組織像、ペリオスチンの発現を解析した。(4)ペリオスチンのリコンビナント蛋白質を作製して、種々のマトリックスタンパク質との結合を解析した。その結果、次のような知見が得られた。(1)肺線維芽細胞をIL-4あるいはIL-13で刺激すると、ペリオスチンが分泌された。(2)気管支喘息患者あるいは気管支喘息モデルマウスの線維化部位においてペリオスチンが沈着していた。(3)ペリオスチンはテネシンC、フィブロネクチン、コラーゲンVといった他のマトリックス分子と結合した。以上の結果より、気管支喘息において、IL-4あるいはIL-13刺激により線維芽細胞からペリオスチンが分泌され、他の細胞外マトリックスタンパク質と結合して線維化の形成に関与していると考えられた。この成果は気管支喘息線維化の発症機序における新しい局面を切り開くものであるとともに、線維化の改善につながる新しい治療法の開発につながると期待される。イオンチャネルであるpendrinの機能解析に関する研究本研究課題に関する活動の中で標記テーマに関して以下の結果を得た。(1)初代培養気道

上皮細胞をair-interface法にてIL-13存在下で培養すると、粘液産生細胞に分化し、その分化した細胞においてマイクロアレイ法を用いた網羅的遺伝子解析を行った結果、誘導遺伝子の中にイオンチャネルであるpendrin遺伝子が含まれていた。(2)気管支喘息あるいは慢性閉塞性肺疾患(COPD)のモデルマウスの肺組織、あるいは喘息患者の肺組織においてpendrinの発現が増強していた。(3)気道上皮細胞株にpendrinを強制発現すると、粘液産生が亢進した。(4)マウス肺組織にウイルスベクターを用いてpendrinを強制発現させると、好中球浸潤とともに、粘液産生が亢進した。以上の結果より、pendrinは気管支喘息、COPDに共通した粘液産生における重要なメディエーターであることが明らかとなった。今後pendrinの機能解析については、(1)pendrinノックアウトマウスを用いた気管支喘息、COPDのモデルマウスの病態におけるpendrinの役割についての検討、(2)pendrin発現細胞株を用いたpendrinによるムチン遺伝子発現機序についての検討、(3)製薬会社との共同研究によるpendrinに対する阻害剤の探索と、その化合物の気管支喘息、COPDに対する治療薬としての開発を計画している。