hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
解析写像の値分布理論・ディオファントス近似と解析的サイクルの交点理論の研究

平田は、多重対数のある値の一次独立性をディオファントス近似を用いて証明した。またディオファントス近似の手法による整数格子の決定問題およびその応用を考察した。引き続き、今年度交付申請書に書いた三つの研究項目(1)、(2)、(3)の研究を遂行した。岡の余零問題を解決し以前より共同で研究してきた3名による共著論文として発表した。またリーマン領域に対するレビ問題についの岡潔の定理の証明を簡略化する新しい証明を得、論文を発表した。これらの成果を取り入れつつこの分野の基礎を与える入門的専門書を刊行した。海外共同研究者であるJ. Winkelmann (Bochum, Germany)と共著でコンパクト複素多様体Mへの正則写像の位数について研究し、Mがケーラーか非ケーラーかで著しい差のあることを発見しこれを論文として発表した。これまでの成果を取り入れた多変数値分布とディオファントス近似についての著書を発刊準備した。計画していた国際的小研究集会を国際シンポジウムである多変数複素解析葉山シンポジウムのサテライトとして海外よりの参加者56名を得て20人規模の実質討議を主体とする研究集会を開催し、これまでの成果のチェックとこれからの課題について研究討議を行った。連携研究者(以下同)山ノ井は、アルバネーゼ次元最大かつ一般型な複素射影代数多様体内の正則曲線に対して、Nevanlinna理論による統一的な研究を行った。濱野は、あるりーマン面のスパンから誘導される計量が完備で負曲率性、対数的多重劣調和性を持つことを示した。足助は横断的に複素解析的な葉層構造について研究した.平田は、多重対数関数の値の数論的性質を研究した.大沢は、レビ平坦面の研究を続行しブルネラの結果を拡張した。辻は、K-E計量の射影族の半正値性を示した。これまでの研究成果を集成する著書を海外研究協力者であるJ. Winkelmannと共同で世界的に権威あるSpringer社Grundlehrenシリーズより出版した。その中で、値分布と有理点分布に関する2002年のNoguchi-Winkelmannの定理の証明の不備が正され、より改良された。これをA. Levinは、代数曲線状の有理点分布の研究に応用し結果が出つつある。当該分野の基礎理論である岡理論についての著書の英語化の作業も行われた。その中で、基本定理の証明の見直しや、新証明の発掘に努めた。例えば、最も基本的な岡の第1連接定理の証明が改良された。また、岡の定理の証明中で使われるL. Schwartzの有限性定理の簡単な別証明の発見もなされ、この分野への基礎理論が改良された。このような、研究成果の総括の中から次の興味深く重要な課題が明確に出てきた。連携研究者(以下同)の山ノ井は値分布理論について、BlochーOchiaiの定理を精密化するアーベル多様体の一般型の部分多様体の擬小林双曲性を研究した。同大沢は、Hopf曲面内の実解析的レビ平坦面を全て決定し、複素多様体上で新しいハルトークス型拡張定理を得た。リーマン面の正則族と擬凸問題について、同濵野は、OADクラスに属するプラナーリーマン面の変形族が2次元擬凸ならば、同時一意化可能であることを証明した。Diophantus近似について同平田・河野は、多重対数関数の値の数論的性質の研究を進めた。
B細胞欠損マウスを用いた狂犬病ウイルスN蛋白の感染抵抗性賦与に関する研究

昨年度の実験により、N蛋白を免疫したB細胞欠損マウス(B-/-マウス)とC57BL/6マウス(B+/+マウス)を用い、狂犬病ウイルス野生株で攻撃すると、抗体産生能のないB-/-マウスは感染防御できなかった。したがって、中和活性のない抗N抗体が感染防御に重要な役割を果たしていることが考えられた。そこで、本年度は、抗N抗体の関与のみで感染防御が得られるのか否かを調べるため、1)それぞれの免疫マウスにおいて、細胞性免疫応答が誘導されているかをCTLアッセイとIFN-_γの分泌にて測定し、2)B-/-マウス抗N抗体を受動免疫し、狂犬病ウイルスで攻撃後発症、死亡の確認を行った。免疫マウスの脾細胞を用いたCTLの誘導、IFN-_γの分泌能に大きな差異は見られなかった。それに対して、リンパ筋細胞はB-/-マウスで十分量の細胞数が得られなかった。これは、B細胞と他の免疫細胞が相互に関与していると思われる細胞性免疫系の誘導や機能が低下している可能性が考えられた。B-/-マウスに抗N抗体を受動免疫し攻撃した結果、免疫マウスは発症および死亡までの日数が遅延し、抗N抗体の感染防御への関与が示唆された。B-/-マウスはB細胞が欠損し、抗体が産生されないマウスであるが、一部の細胞性免疫も機能低下が見られるという結果が得られた。したがって、N蛋白を免疫して得られる感染防御能は、完全に抗N抗体のみの関与であるとはいえないが、受動免疫の結果より、抗N抗体が感染防御に深く関与していると考えられる。本年度はN蛋白の免疫スケジュールについて実験を行った。以前我々(Takita-Sonoda等1993)がBALB/cマウスで報告した投与方法(N蛋白を発現する組換えワクシニアウイルスを腹腔内投与)でC57BL/6マウスに免疫し、狂犬病ウイルス野生株の攻撃を試みたがBALB/cマウスで得られた防御効果はC57BL/6マウスでは見られなかった。これはC57BL/6とBALB/cの系統差によって狂犬病ウイルスに対する感受性に違いがあると思われるため、さらに強力な免疫誘導方法を試みた。その結果、N蛋白を発現する組換えワクシニアウイルスとN蛋白を発現する組み換えバキュロウイルス感染昆虫細胞破砕液を組み合わせて免疫することで、狂犬病ウイルス攻撃後約80-90%の生存率を得た。この免疫スケジュールでB細胞欠損マウス(μMTマウス)と免疫正常マウスC57BL/6マウスにN蛋白を免疫後、狂犬病ウイルス野生株を攻撃し感染抵抗性を調べた。その結果、生存率は、欠損マウス:0%、正常マウス:87%であり、明らかに抗体を産生できないμMTマウスは感染防御できなかった。免疫血清の抗N抗体価は、現在のところCVS感染神経芽腫細胞を用いた間接蛍光抗体法で確認しており、欠損マウス:10倍以下、C57BL/6マウス:約400-800倍の抗体価を得た。この免疫によってマウスに細胞性免疫が働いているかの確認については、現在検討中であり、リンパ球増殖試験、サイト力イン測定の条件について実験を進めている。
変形性関節症軟骨におけるエストロゲン受容体を介した病的血管新生の制御機構の解明

顎関節円板細胞の細胞性格を特定し、顎関節症の一因とされる女性ホルモンに対する反応を検討した。雌性マウス顎関節円板細胞にテロメラーゼ遺伝子を導入し、不死化顎関節円板クローン細胞株を作製し、細胞性格を評価した。また、エストロゲン、リラキシン、プロゲステロンを添加した条件下での女性ホルモン受容体とMMP9/13の発現量を生化学的に評価した。不死化顎関節円板クローン細胞は、細胞形態、増殖率、生化学的性質から、軟骨細胞様あるいは線維芽細胞様のいずれかの性質をもつものの2種類に分類され、2種類のクローン細胞はエストロゲンとリラキシンに対して各々異なった反応を示しMMP9/13を産生することが明らかとなった。[目的]顎関節円板は、顎関節疾患の病態を解明する上で、重要な標的組織であるのに関わらず、組織を構成する細胞の種類や細胞性格について特定されていない。また女性ホルモンに対する顎関節円板細胞の反応機構は不明である。顎関節円板細胞の細胞性格を特定し、それらの女性ホルモンに対する反応機構について明らかにすることを目的とした。[方法]不死化顎関節円板クローン細胞は雌性マウス顎関節円板細胞にテロメラーゼ遺伝子を導入して作製した。TRAP法から顎関節円板クローン細胞の不死化を確認し、各クローン細胞を、細胞増殖、形態、基質産生能の観点から細胞生化学的に評価した。女性ホルモンに対する応答に関して、エストロゲン、リラキシン、プロゲステロンを添加した条件で、クローン細胞を培養し、エストロゲン受容体ESR1/2、リラキシン受容体Rxfp1/2、プロゲステロン受容体PGRおよびPGRMC1、基質分解酵素MMP9/13の発現量についてmRNAレベルおよびタンパク質レベルを解析した。[結果]不死化顎関節円板クローン細胞は、細胞形態、増殖および生化学的性質から、軟骨細胞様あるいは線維芽細胞様のいずれかの性質をもつものの2種類に分類されることがわかった。軟骨細胞様細胞は、エストロゲン処理に伴い、ESR1/2とMMP9/13のmRNAの発現を増加させ、タンパク質レベルも同様に変化した。線維芽細胞様細胞は、リラキシン処理に伴い、Rxfp1/2とMMP9/13のmRNAおよびタンパク質の発現増加を示した。さらに2種類の細胞は、プロゲステロン処理に伴い、MMP9/13の産生を減少させた。[考察および結論]顎関節円板を構成する2種類の関節円板細胞はエストロゲンおよびリラキシンに対して各々異なった反応を示しMMP9/13を産生し、関節円板の破壊に関与することが示唆された。日本人男性の9.9%、女性の17.3%が顎関節症状の経験をもつ。顎関節症の罹患率、症状の性差から、疾患の発症、増悪に対する女性ホルモンの関与が考えられる。エストロゲン、リラキシンが関節の可動性を高め、関節の機能障害に関わるとされる。顎関節疾患の解明において機能的構成要素である顎関節円板への視点は重要であるが、顎関節円板を構成する細胞のサブタイプ、性質が同定されていず、サイトカインやホルモンに対する細胞応答は明らかにされていない。本研究では、顎関節円板の構成細胞のサブタイプ、性格を明らかにすることを第一の目的とした。各サブタイプのエストロゲン、リラキシンへの細胞応答を比較することを第二の目的とした。本課題において、雌性マウスから顎関節円板細胞を採取、ヒト・テロメラーゼ遺伝子を強制発現させ、36クローンの不老化顎関節円板細胞の単離を行い、2種類のサブタイプに円板細胞が分類された。細胞形態、細胞増殖カーブ、また軟骨マーカーであるX型コラーゲン、線維芽細胞で多く産生される線維芽細胞特異マーカーのmRNAレベル、タンパク質レベルでの発現量から、顎関節円板細胞を軟骨細胞様の性質を備えた細胞と線維芽細胞様の性質を備えた細胞に分類した。マイクロマス培養にて、I型およびII型コラーゲンの発現量とそれらの比率について、軟骨細胞様細胞は優位にII型コラーゲンを産生した。エストロゲン処理下で、軟骨細胞様細胞は線維芽細胞様細胞に対しエストロゲン受容体ESR1、2と基質分解酵素MMP9、13の発現増加を有意に示した。一方、リラキシン処理下では、線維芽細胞様細胞が軟骨様細胞に対しリラキシン受容体Rxfp1、2とMMP9、13の発現増加を示した。顎関節円板の構成細胞は、軟骨細胞様細胞と線維芽細胞様細胞の2タイプに分類され、エストロゲン、リラキシンに対して各サブタイプが異なった細胞反応を示すことがわかった。

本研究ではヒト・テロメラーゼ遺伝子を強制発現させた36の安定発現クローンの不老化顎関節円板細胞の単離を行い、2種類のサブタイプに顎関節円板細胞が分類されることを国内外ではじめて明らかにした。細胞形態、細胞増殖カーブ、軟骨マーカーであるX型コラーゲンとCartilage Oligomeric Matrix Protein、線維芽細胞で多く産生される線維芽細胞特異マーカーとバイメンチンの発現解析から、軟骨細胞様の性質をもつ細胞と線維芽細胞様の性質をもつ細胞に分類した。マイクロマス培養下で、I型およびII型コラーゲンの発現量とその比率から、軟骨細胞様細胞は優位にII型コラーゲンを産生することが明らかとなった。顎関節円板は女性ホルモンであるエストロゲン、リラキシンの標的組織であるが、エストロゲン処理下では、軟骨細胞様細胞は線維芽細胞様細胞に対しエストロゲン受容体ESR1、ESR2と基質分解酵素MMP9、MMP13の発現増加を有意に示した。一方、リラキシン処理下では、線維芽細胞様細胞が軟骨様細胞に対しリラキシン受容体Rxfp1、Rxfp2とMMP9、MMP13の発現増加を示した。したがって、顎関節円板の構成細胞は、エストロゲン、リラキシンに対して各サブタイプが異なった反応を示し、顎関節炎症の機序を担うことが示唆された。変形性関節症、関節リウマチなどの関節炎症では、関節腔内の酸素濃度が大幅に低下し関節内に炎症因子の発現が誘導される。初年度の結果を踏まえ、以下のことを行う。1.顎関節円板における低酸素による炎症の惹起を担う細胞の特定。2.低酸素下における各サブタイプのエストロゲン、リラキシンへの反応性の検討3.低酸素下での軟骨基質の産生能の検討4.間歇的低酸素および継続的低酸素条件の違いによる炎症反応の変化実験動物、試薬の購入、論文投稿費用に使用する。
育児休業を取得した看護職のキャリアパス支援モデルの構築

育児休業を取得した看護職のキャリアパス支援モデルの構築を目指している。平成30年度は前年度に実施したフォーカス・グループ・インタビュー内容の分析作業を行った。妊娠・出産後にキャリア継続の後押しとなった要因や育児休業から復帰後または再就職後の状況などについての体験について明らかとなった。フォーカス・グループ・インタビュー内容の詳細については,日本看護教育学会(京都)での発表が決まっている。併せてキャリアパス支援モデル案を作成中である。育児休業を取得した看護職のキャリアについては、育児休業取得後に継続しているケースや育児休業取得後しばらくして離職し再就職するケースなど複雑である。そのため、キャリアパス支援モデルに当てはまりにくいケースに対する支援の検討も必要となっており、さまざまな視点から支援モデルのあり方についても検討を行っている状況がある。データ分析に時間を要したため。2019年度は,これまでに行った調査結果を踏まえ、前年度までに協力頂いた研究対象者と共にキャリアパス支援モデルを完成させる。それと併せ,平成29年度調査で明らかとなった妊娠・出産後にキャリア継続している看護職の体験について学会発表・論文作成を行う計画である。産前産後の休暇又は育児休業による中断中のため、実施していない。産前産後の休暇又は育児休業の取得に伴い,平成26年8月1日平成28年3月31日まで研究を中断し,本申請課題の研究実施期間を必要な手続きを経て平成28年度から平成30年度までに延長した。研究再開は平成28年4月からとなったため,研究の成果はなし.平成28年4月1日から計画的に研究を再開している.子育て期の看護職のキャリア継続は重要課題の一つである。本研究は育児休業を取得した看護職のキャリアパス支援モデルの構築を目的としている。平成28年度は文献検討に基づき200床以上の医療機関に所属する育児休業を取得し同医療機関に復帰した看護職1675名を対象に全国的な実態調査を実施した。その結果,1025名から回答を得た(回収率61.2%)。育児休業を取得した看護職のほとんどが,育児休業中には組織からの継続したサポートは受けていなかったが,職場復帰後は家族の理解と協力を確保し,職場では上司・同僚からのサポートを得て仕事と育児をしていることが分かった。また,職業継続意思は高いが,経済的な理由で働いているものが多いことや活用可能な育児支援制度は制度としてはあっても,実際は利用のしづらさを感じていることなど看護職としてのキャリアアップと仕事と家庭との両立は容易ではないことが明らかとなった。結果の詳細については,今後発表予定である。研究実施施設,研究対象者からも調査の協力が得られた。当初の計画どおりに進んでいる。平成29年度は、前年度の全国調査(対象:育児休業を取得し、職業継続している看護職)を学会にて発表し、論文とした。また、育児休業を取得後、職業継続している看護職7名を対象にフォーカス・グループ・インタビューを実施した。職業継続の後押しとなった要因や育児休業から復帰後の状況などについてのインタビュー内容については現在分析中である。研究対象者からのインタビューの協力が得られたが、分析に時間を要する状況である。研究中断中の届け出を提出しているため。今年度の研究計画は,育児休業から職場復帰した看護職の実態についてアンケート調査を実施する予定で準備を進めている.本研究の結果を踏まえ,育児休業から復帰した看護職を対象にフォーカス・グループ・インタビューを実施し,休業中に求めるサポートや職場復帰後の継続につながった要因等を明らかにし,キャリア形成を継続するためのキャリアパス支援モデルの構築を目指す。。妊娠・出産を経験し子育てをしながら働く看護職のキャリアのパターンとして,妊娠・出産後に育児休業を取得し同組織に復帰し職業継続するパターンと妊娠・出産を期に離職し子育てに専念しある時期をみて別の組織で再就職するパターンがあるため,対象者について検討し調査することで,より幅広く柔軟に対応できるキャリアパス支援案の構築に繋がると考える。今年度までの結果を踏まえ、キャリアパス支援モデル案を作成し、平成29年度の対象者と共にキャリアパス支援モデルの構築を目指す。育児休業が終了した後、平成28年度4月1日に研究再開予定である。

申請者本人の産前産後の休暇又は育児休業取得に伴う研究の中断により,予算を繰り越したため.物品調達の際の見積もり額,データ入力等にかかった人件費が当初予算より安価となったこと,年度内での結果発表ができなかったため。物品費・人件費が予算より安価となったこと、キャリアパス支援モデルの構築に関する研修会等への参加が出来なかったため、プログラム構築に向けた準備に使用する計画である。研究遂行の遅れが、資金的な執行計画とのずれを招いている主な原因となっている。特にH29年度に実施したフォーカス・グループ・インタビュー結果の分析に時間を要し、H30年度内での結果発表が出来なかった。そのため、結果発表等に当てた予算が未使用となっている。次年度は調査結果を学会発表に関わる旅費や論文投稿に用いる予定である。またキャリア支援パス支援プログラム構築に伴う検討会議に関わる費用などに用いる計画である。産前産後の休暇又は育児休業による中断中のため計画書に準じて進めていく予定.当初の計画に加え、複数の学会での発表や情報収集,キャリア支援パス支援プログラム構築に関連した研修会等の参加費用等に使用する計画である。初年度に計画した通り
非天然型人工塩基に導入したアルデヒド基の反応性と酵素認識に関する研究

DNAやRNA中に部位特異的に酵素反応により相補的に導入可能な人工塩基対(Ds-Pa)を利用し、Pa内のアルデヒド基を利用したDNAやRNAの複製・転写後修飾の可能性とアルデヒド基の向きが及ぼす核酸合成酵素の認識能を調べた結果、ヌクレオシドPa内のアルデヒド基は、その化学的反応性は低いが、そのコンフォメーションが酵素認識に影響することがわかり、さらなる機能性人工塩基開発に関する重要な知見を得ることができた。研究代表者の所属研究室で開発された人工塩基対(Ds-Pa)は、人工塩基DsおよびPaをDNAやRNA中に部位特異的に酵素反応により相補的に導入することができる。人工塩基Paには、天然型核酸塩基にはないアルデヒド基が結合されているため、アルデヒド基をDNAやRNAの部位特異的な化学修飾サイトとして利用できる。このPaアルデヒド基は、天然型ピリミジン塩基の2位ケト基の酸素原子と同様に複製や転写における核酸合成酵素との相互作用を容易にするために結合しているが、自由回転可能なアルデヒド基のコンフォメーションによっては、酸素原子の位置は異なってくる。人工塩基Paのアルデヒド基の配向を詳しく調べ、基質と酵素認識能の関係を明らかにすることは、新たな人工塩基のデザインだけでなく、酵素と基質問の相互作用に関する新たな情報を提供できる。そこでPaに結合したアルデヒド基の化学的反応性の検討と、アルデヒド基のコンフォメーションの違いと酵素認識能の関係をPaと比較して調べるための2-ピロールアルデヒドの3位で糖と結合したC-ヌクレオシド合成を行った。Paのアルデヒド基のシッフ塩基形成についてヌクレオシドレベルでHPLCとNMRにより調べた結果、10倍等量のヒドラジンを用いた場合、リボヌクレオシドPaと反応してシップ塩基を形成し、酸性加熱条件で可逆的にPaに戻ることがわかった。このことから、ヒドラジン様アミンによる化学修飾が可能であることが予備的に分かった。また、C-ヌクレオシド合成では、2-スチリル-3-ヨードピロールとシリル化フラノイドグリカールとのPd触媒クロスカップリング反応、スチリル基の酸化切断によるアルデヒド基への変換を経て、5段階トータル収率17%で目的のC-ヌクレオシドが合成できることが分かった。現在更にアルデヒド基の反応性とコンフォメーションに関して検討を行っている。研究代表者の所属研究室で開発された人工塩基対(Ds-Pa)は、人工塩基Ds、およびPaをDNAやRNA中に部位特異的に酵素反応により相補的に導入することができる。本研究課題は、人工塩基Pa内のアルデヒド基をDNAやRNAの部位特異的な化学修飾サイトとして利用可能であると考え、アルデヒド基の反応性に基づくDNAやRNAの複製・転写後修飾の可能性とPa内のアルデヒド基の向きが及ぼす核酸合成酵素の認識能を調べることを目的とした。アルデヒド基の反応性に関する知見の一つとして、シクロヘキシルアミンとN-メチルピロール-2-アルデヒドとのすでに報告されている反応条件を用いて比較した場合、ヌクレオシドPa内のテルデヒド基の反応進行は遅いことが分かった。一方、アルデヒド基の配向と核酸合成酵素により取り込まれる基質の酵素認識能を調べるために合成したデオキシヌクレオシドPa(dPa)の構造異性体(2-ピロールアルデヒドの3位で糖と結合したC-ヌクレオシド:dB3)の基質の核酸合成酵素反応の効率は低く、dPaとのアルデヒド基の向きの違いを、NMRを用いた糖H1'とアルデヒド基間のNOE強度に着目して調べた。その結果、糖H1'とCHO基間のNOE強度増加は、dPaが4%であることに対して、dB3では12%であった。さらに75°C加熱条件下では、dB3ヌクレオシドが12%から6%に減少したことに対し、dPaヌクレオシドは、4%から3%とほとんど変化しなかった。これは、dB3ヌクレオシドに結合したアルデヒド基の酸素原子の向きが、核酸合成酵素との相互作用に適した配置を取りにくい構造をしており、自由回転可能なアルデヒド基の酸素原子を核酸合成酵素に対する認識原子として利用した人工塩基設計に対する有用な知見を得ることができた。
サルコイドーシスぶどう膜炎における感染概念からの病態解明

(1)Propionibacterium acnes (P. acnes)が眼サルコイドーシスに関与するかどうか検討するため、網膜生検を実施しP. acnesに特異的なPAB抗体による免疫組織化学での検討を行い、サルコイドーシスの症例は82%の症例において網膜内にPAB陽性の円形体を認めた。一方コントロール群では1例も検出さず、P. acnesの眼サルコイドーシスへの関与を強く示唆する結果が得られた。本研究の論文投稿において、コントロールの追加の必要性を指摘されたため、サルコイドーシス以外のぶどう膜炎症例において追加実験を行った。その結果でもコントロール群では全例でP. acnesは検出されず、サルコイドーシスぶどう膜炎にP. acnesが関与することがより強調される結果となった。(2)サルコイドーシスぶどう膜炎では硝子体中のHP proteinなどのタンパク質がupregulateしていることがわかった。(3)サルコイドーシスぶどう膜炎に対する硝子体手術の長期成績を検討し、視力及び中心網膜厚は術前に比較し術後有意に改善し、術後3年まで維持されており、サルコイドーシスぶどう膜炎に対する硝子体手術は長期的に有効であることがわかった。硝子体の除去がP. acnesに関与する炎症のコントロールに寄与している可能性も考えられる。(4)臨床的に評価項目として種々の項目を行ってきたが、特に前眼部OCTでは新たな知見としてぶどう膜炎のうちVogt-小柳-原田病や急性前部ぶどう膜炎では毛様体剥離の頻度が高く、その剥離の高さが高いことがわかった。一方でサルコイドーシスでは高さは低く頻度は低いものの毛様体剥離が見られる症例も認められることがわかり、今後さらなる他の臨床像や眼内液との解析を組み合わせることで、病態解明や治療につながる可能性が考えられる。この結果から、サルコイドーシスに対する新規治療法として抗菌薬治療が考えられ、その効果を検討する。(2)サルコイドーシスに特異的抗原候補タンパク質の解析については少数例での網羅的解析において9種類のup-regulateされた候補タンパク質と6種類のdown-regulateされた候補タンパク質を検出しているが、さらに多くのサンプルでこれらを解析するため、サンプル採取を行っている。(3)臨床的に評価項目として種々の項目を行ってきたが、特に前眼部OCTでは新たな知見としてぶどう膜炎のうちVogt-小柳-原田病や急性前部ぶどう膜炎では毛様体剥離の頻度が高く、その剥離の高さが高いことがわかった。(1)本研究においてP. acnesがサルコイドーシスぶどう膜炎に関与することが大前提であり、この点につき追加実験を行い、論文掲載に至った。この結果から、次に計画する新規治療法として抗菌薬治療への根拠が整った。(2)サルコイドーシス特異的抗原タンパク質の解析は、より多くのサンプルで解析することが望ましいと考えられたため、サンプル採取の追加を行っている。(3)眼内液のサイトカイン解析については、サルコイドーシス以外の疾患のサンプル収集がやや遅れている。症例ごとにサンプル採取の同意を得る必要があり、同意が得られない場合もあることが要因であるが、今後継続していく。(4)副次的な項目として前眼部OCTで有用な所見が得られた。以上のように一部は論文掲載されたが、さらなる解析にうつれるようサンプルの収集を含めてもう少し継続が必要であることから概ね順調と判断した。

(3)サルコイドーシスぶどう膜炎に対する硝子体手術の長期成績を検討し、視力及び中心網膜厚は術前に比較し術後有意に改善し、術後3年まで維持されており、サルコイドーシスぶどう膜炎に対する硝子体手術は長期的に有効であることがわかった。硝子体の除去がP. acnesに関与する炎症のコントロールに寄与している可能性も考えられる。(4)臨床的に評価項目として種々の項目を行ってきたが、特に前眼部OCTでは新たな知見としてぶどう膜炎のうちVogt-小柳-原田病や急性前部ぶどう膜炎では毛様体剥離の頻度が高く、その剥離の高さが高いことがわかった。一方でサルコイドーシスでは高さは低く頻度は低いものの毛様体剥離が見られる症例も認められることがわかり、今後さらなる他の臨床像や眼内液との解析を組み合わせることで、病態解明や治療につながる可能性が考えられる。(1)抗菌薬治療の検討についてはレトロスペクティブな解析とともに、前向き研究を行っていく。(2)サルコイドーシスに特異的抗原候補タンパク質の解析については、サンプル数を増やして、これまでに検出されている抗原候補タンパク質について、ウェスタンブロットによる解析を行う。(3)眼内液のサイトカイン解析についてはサルコイドーシス以外のサンプルを増やして解析する。(4)副次的に得られた前眼部OCT所見について論文化する。サンプル数を増やすこととしたため、解析が2年目になった項目があるため。次年度に解析を行い、残額を使用予定である。
Kチャンネル開口薬と過分極とにより調節される膜酵素活性の研究

種々の病態での血管平滑筋・心筋・神経細胞の静止膜電位のレベルがイオンチャンネルの開閉ばかりでなく他の効果を持ち得るのかと言うことが関心を読んでいる。細胞膜を過分極させる作用を持つKチャンネル開口薬(KCO)は一般にagonist収縮を比較的よく抑制することが知られている。そこでこの研究では、Fura-2を細胞内に取り込ませたイヌおよびブタの左冠動脈リング標本を用いて、細胞内Ca濃度([Ca^<2+>]_i)を張力と同時に測定して、thromboxan A_2 analogueであるU46619のagonist収縮作用を検討し、この収縮作用に関与する膜酵素活性であるホスホリパーゼC活性の産物、イノシトール3燐酸をラジオイムノアッセイ法にて検討した。また細胞膜過分極とKCOのagonist作用を抑制する作用機序を検討した。KCO(levcromakalim,KRN2391)は細胞膜を過分極させた。ホスホリパーゼC活性を高めるagonist作用のすべて、すなわち、イノシトール3燐酸含量の増加作用、筋小胞体(SR)からのCa遊離作用そして一過性収縮作用を、KCO(cromakalim,Ki4032)は抑制した。Cromakalimの抑制作用は、KチャンネルブロッカーのTBAで拮抗され、[K^+]。を20mMとすると打ち消された。CromakalimはcaffeineによるCa遊離作用に影響しなかった。さらに、U46619とcaffeineとを続けて作用させると、それに応じてCa遊離が見られた。Cromakalim存在下ではU46619によるCa遊離は抑制されるものの、caffeineによるものは抑制されずむしろ増強された。KCOは過分極作用によって間接的にCaチャンネルを抑制するばかりでなく、agonistによって活性化される膜酵素のフォスフォリパーゼC活性をも抑制する。さらに膜電位のレベルは膜酵素活性をも調節していることが明かとなった。
複合極限非平衡環境下での低次元有機導体における不均化秩序の研究

本研究の目的は種々の特殊環境下における有機導体の本質的不均一と出現物性の相関を明らかにすることである.本年度は,制御された不純物の人為的な添加制御による超伝導状態の抑制から超伝導対称性に関する知見を得ることを目的とした.そのために有機超伝導体k-(BEDT-TTF)_2Cu(NCS)_2に種々の非磁性不純物を導入し,その超伝導抑制効果を調査した.不純物としてd-BEDT-TTF分子およびBMDT-TTF分子によるBEDT-TTF分子部分置換,エックス線照射による分子欠陥を施した試料を用意した.不純物散乱を観測する手段として極低温協磁場中でドハースファンアルフェン効果を測定し,量子振動の解析から直接的に散乱時間を得た.BMDT-TTF分子置換量の増加,エックス線照射欠陥の導入のどちらの場合でも,散乱時間は減少し,同時に超伝導転移温度も低下する.散乱時間の低下と超伝導転移温度の低下の相関関係を,アブリコソフ-ゴルコフ関係式と比較検討すると,置換量が少ない場合は,ほぼアブリコソフ-ゴルコフの式に従う振る舞いを見せるが,置換量が増えると関係式からはずれ,より散乱時間が短くなる(散乱が大きくなる)ように見えた.これはdHvA効果の測定で得られる散乱時間が,不純物散乱による寄与に加えて,不均一の寄与を大きく反映することによっていると考えられる.これらの結果は,非磁性BMDT-TTF分子部分置換やエックス線照射欠陥により超伝導転移温度がアブリコソフ-ゴルコフの関係式に従って抑制されていることを示しており,この有機超伝導体が異方的超伝導体であることを支持する結果である.本研究では,低次元有機導体に発現する電子相転移のごく近傍において、1次性の強い場合に発現が期待される本質的な不均一電子状態を,複合した極限環境の下でコントロールすることにより、その応答を制御することを目的としている.本年度は電場勾配(電流注入)を印加した非平衡環境下で発現する方向性秩序を有するマクロ相分離の形成とその走査型局所赤外反射スペクトル測定による実空間分布測定を中心に行った.モット絶縁体であるK-TCNQは,395K以下でスピンパイエルス的構造転移を起こしTCNQ分子の2量体を形成する.この状態では顕著な非線形伝導を示すが,Kumaiらによって電場印加方向に垂直な方向にストライプパターン(垂直ストライプ)が形成されることが示された.本研究では、走査型局所赤外反射スペクトル測定によりこのストライプパターンの性質、発現機構を明らかにするために,まずストライプパターンの形成を試みた.その結果、電場印加方向に対するストライプの方向が試料セッティングにより変わることを見出した.垂直、水平ストライプの各相を同定するために、SPring-8放射光赤外光を利用した走査型局所赤外反射スペクトル測定を行った.測定の空間分解能(15μm)は、各ストライプの幅よりも若干広いため各ストライプを分離した測定には至らなかった.しかしストライプが出現している領域では、平行、垂直ストライプのどちらの場合でも明瞭にダイマー構造が弱くなっていることが観測され、ストライプが均一相とダイマー相の相分離であることがわかった.垂直ストライプの形成は,電流印加により試料が伸張する事による局所歪の緩和が起源であり,平行ストライプは,電流印加による分子内電荷分布の平均化によるダイマー構造の平均化が局所的に発現し、空間的に電流方向に増殖しながら相分離構造を形成すると考えられる.本研究の目的は種々の特殊環境下における有機導体の本質的不均一と出現物性の相関を明らかにすることである.本年度は,制御された不純物の人為的な添加制御による超伝導状態の抑制から超伝導対称性に関する知見を得ることを目的とした.そのために有機超伝導体k-(BEDT-TTF)_2Cu(NCS)_2に種々の非磁性不純物を導入し,その超伝導抑制効果を調査した.不純物としてd-BEDT-TTF分子およびBMDT-TTF分子によるBEDT-TTF分子部分置換,エックス線照射による分子欠陥を施した試料を用意した.不純物散乱を観測する手段として極低温協磁場中でドハースファンアルフェン効果を測定し,量子振動の解析から直接的に散乱時間を得た.BMDT-TTF分子置換量の増加,エックス線照射欠陥の導入のどちらの場合でも,散乱時間は減少し,同時に超伝導転移温度も低下する.散乱時間の低下と超伝導転移温度の低下の相関関係を,アブリコソフ-ゴルコフ関係式と比較検討すると,置換量が少ない場合は,ほぼアブリコソフ-ゴルコフの式に従う振る舞いを見せるが,置換量が増えると関係式からはずれ,より散乱時間が短くなる(散乱が大きくなる)ように見えた.これはdHvA効果の測定で得られる散乱時間が,不純物散乱による寄与に加えて,不均一の寄与を大きく反映することによっていると考えられる.これらの結果は,非磁性BMDT-TTF分子部分置換やエックス線照射欠陥により超伝導転移温度がアブリコソフ-ゴルコフの関係式に従って抑制されていることを示しており,この有機超伝導体が異方的超伝導体であることを支持する結果である.
自己貪食異常を示す筋疾患の病態解明と治療法開発に関する研究

遺伝学的にDanon病と診断が確定した13家系38名の患者の臨床病理学的特徴について検討した。男性患者では、全例で心筋症とミオパチーが認められたが、精神遅滞は70%の頻度であった。血清CK値は男性患者では全例で上昇が見られたが、女性患者では63%に上昇が見られるのみであった。死亡年齢は男性が19±6歳、女性が40±7歳で何れも死因は心不全であった。女性患者では臨床症状は比較的軽度ではあるものの、致死的心筋症が必発であった。Danon病と類似するもの遺伝学的に異なる、成人発症の多臓器障害型の自己貪食空胞性ミオパチー(AVM)と、先天性ミオパチーに類似した臨床症状を呈しX連鎖性AVMを新たに見出した。後者の先天型に関しては、Xq28に遺伝子座がある可能性が高いことを明らかにした。また、lysosomeと融合後速やかに分解されるべきautophagosome形成必須分子LC3が、lysosomeとの融合後も分解されていないことが示され、自己貪食物質分解のプロセスに何からの異常があることが明らかとなった。縁取り空胞を伴う遠位型ミオパチー(DMRV)の原因遺伝子が、遺伝性封入体ミオパチー(HIBM)の原因遺伝子と同様に、UDP-GlcNAc 2-epimerase/ManNAc kinase(GNE/MNK)をコードする遺伝子(GNE)であることを明らかにした。患者で認められた変異を有する組換え蛋白質を作製しGNEおよびMNKの活性を測定したところ、GNEドメインの変異ではGNE活性が、MNKドメインの変異ではMNK活性が低下していた。患者培養細胞では、シアリル化が低下していたが、GNE/MNK経路の代謝産物であるManNAcやNeuAc添加によりシアリル化が回復することを初めて示した。このことは、同様の手法により治療法を開発出来る可能性を示している。代表的な自己貪食空胞性ミオパチーであるDanon病はまれであることに加え、遺伝学的に異なる乳児例が同じ病名で報告されるなど、疾患概念の混乱が見られる。そこで、Danon病の臨床像を確定するために、遺伝学的にDanon病と診断が確定した13家系38名の患者の臨床病理学的特徴について検討した。女性患者では、心筋症は全例に認められたが、ミオパチーは33%、精神遅滞は6%であった。また、血清CK値は男性患者では全例で上昇が見られたが、女性患者では63%に上昇が見られるのみであった。女性患者では臨床症状は比較的軽度ではあるものの、致死的心筋症が必発であることが明らかとなった。一方、これまでにDanon病と同じ「酸性マルターゼが正常なライソゾーム性糖原病」の病名で、2例の乳児例が報告されている。これら乳児例につき検討したところ、何れの例でもLAMP-2は欠損しておらず、Danon病とは別の疾患であることが明らかになった。従って、これらの例は、乳児型自己貪食空胞性ミオパチーと呼ばれるべきである。また、自己貪食異常を伴い遠位筋が主に侵される縁取り空胞を伴う遠位型ミオパチー(DMRV)の原因遺伝子は長らく不明であった。遺伝性封入体

ミオパチー(HIBM)の原因遺伝子、UDP-N-acetylglucosamine 2-epimeraseとN-acetylmannosamine kinaseの2つのシアル酸代謝酵素をコードする遺伝子(GNE)を調べたところ、互いの血縁関係のない18例のDMRV例において、ホモ接合型または複合ヘテロ接合型の変異を認めた。従って、DMRVは、HIBMとallelicであることが明らかになった。代表的な自己貧食空胞性ミオパチーであるDanon病はまれであることに加え、遺伝学的に異なる乳児例が同じ病名で報告されるなど、疾患概念の混乱が見られる。そこで、Danon病の臨床像を確定するために、遺伝学的にDanon病と診断が確定した13家系38名の患者の臨床病理学的特徴について検討した。男性患者では、全例で心筋症とミオパチーが認められたが、精神遅滞は70%の頻度であった。女性患者では、心筋症は全例に認められたが、ミオパチーは33%、精神遅滞は6%であった。また、血清CK値は男性患者では全例で上昇が見られたが、女性患者では63%に上昇が見られるのみであった。死亡年齢は男性が19±6歳、女性が40±7歳で何れも死因は心不全であった。女性患者では臨床症状は比較的軽度ではあるものの、致死的心筋症が必発であることが明らかとなった。また、Danon病患者においても、germline mosaicismにより発症することがあることを見出した。また、自己貧食異常を伴い遠位筋が主に侵される縁取り空胞を伴う遠位型ミオパチー(DMRV)の原因遺伝子は長らく不明であった。最近、遺伝性封入体ミオパチー(HIBM)の原因遺伝子が、UDP-GlcNAc 2-epimeraseとManNAc kinaseの2つのシアル酸代謝酵素をコードする遺伝子(GNE)であることが報告された。DMRV患者DNAを用い、GNE遺伝子解析を行ったところ、互いに血縁関係のない27例のDMRV患者において、ホモ接合型または複合ヘテロ接合型の変異を認めた。従って、DMRVは、HIBMと同一アレル病であることが明らかとなった。また、患者白血球中のUDP-GlcNAc 2-epimerase活性を測定したところ、著明な活性の低下を認め、GNE遺伝子の機能喪失型変異がDMRVの原因であることが明らかとなった。偶然、GNE遺伝子ホモ接合型変異を有していながら全く健康な例を1例見出した。このことは、GNE変異のみが疾患発症の決定因子ではなく、何らかの方法によって、表現型を変え得ることを示しており、治療法開発への手掛かりとなる可能性がある。自己貪食空胞性ミオパチーの新たな病型を見出した。成人発症で多数の臓器が障害される病型と、先天性ミオパチーに類似した臨床症状を呈しX連鎖性と考えられる病型である。ともに、筋線維内に多数の自己貪食空胞を認めた。Danon病と同様に、その空胞膜は筋鞘膜の性質を有していた。加えて、基底膜が多層化し膜間にexocytosis物質が認められた。後者の先天型に関しては、連鎖解析にて、Xq28に遺伝子座がある可能性が高いことが示された。また、lysosomeと融合後速やかに分解されるべきautophagosome形成必須分子LC3が、lysosomeとの融合後も分解されていないことが示され、自己貪食物質分解のプロセスに何からの異常があることが明らかとなった。
2つの伝播様式の共存が材線虫病の発生形態に及ぼす影響

マツノザイセンチュウとニセマツノザイセンチュウは日本ではマツノマダラカミキリとカラフトヒゲナガカミキリの成虫によって伝播される。伝播はカミキリの摂食箇所の傷と産卵箇所の傷を通して行われる。二つの伝播様式を組み込んだ材線虫病類の伝播モデルを作成し,実際のマツ林におけるセンチュウの伝播率を推定したところ,病原力のないニセマツノザイセンチュウは0.11(1993-1994年の結果)で,病原力がほぼ1.0のマツノザイセンチュウの0.0062より大きかった(1980-1983年の結果)。カラフトヒゲナガカミキリの配偶行動をと通して,ニセマツノザイセンチュウがカミキリ成虫間を移動できる事が実験的に示された。ニセマツノザイセンチュウの場合,カラフトヒゲナガカミキリ成虫の雄から雌への移動に比べて,雌から雄への移動は起こりにくいことが示された。さらに,カラフトヒゲナガカミキリ雄成虫から雌成虫に移動したニセマツノザイセンチュウが産卵箇所を通してマツに伝播される事が示された。カラフトヒゲナガカミキリ雌成虫から産卵箇所を通して伝播されたニセマツノザイセンチュウは,産卵箇所を中心とした半径0.75cmの樹皮内に少なくとも24時間留まる事が示された。ニセマツノザイセンチュウについて,カラフトヒゲナガカミキリ雌成虫の摂食箇所からの伝播数と産卵箇所からの伝播数を実験的に調べた。その結果,媒介昆虫の保持線虫数のうち平均17%が産卵箇所を通して,6%が摂食箇所を通して伝播されることが示された。同様な実験をマツノザイセンチュウとマツノマダラカミキリの系で行ったところ,マツノザイセンチュウは媒介昆虫の産卵箇所からアカマツ丸太に伝播されることが実験室で確認された。次に,媒介昆虫の保持線虫数のうち平均3%が産卵箇所を通して,12%が摂食箇所を通して伝播されることが示された。カラフトヒゲナガカミキリ雌成虫の摂食箇所からのニセマツノザイセンチュウ伝播数と産卵箇所からのニセマツノザイセンチュウ伝播数を実験的に調べた。カラフトヒゲナガカミキリの配偶行動を通して,ニセマツノザイセンチュウがカミキリ成虫間を移動できる事が実験的に示された。マツノザイセンチュウは,マツノマダラカミキリの産卵箇所からアカマツ丸太に伝播される事が実験室で確認された。二つの伝播様式を組み込んだ材線虫病類の伝播モデルを作成したここで,Y(t):t年の感染木密度,X(t):t年の健全木密度,α:材線虫類による死亡率(病原力),b:材線虫類によらない死亡率,β_1:健全木への伝播率,β_<11>:材線虫類によらない枯死木への伝播率とする。

このモデルを用いて,マツ林におけるセンチュウの伝播率を推定したところ,病原力のないニセマツノザイセンチュウは0.11(1993-1994年の結果)で,病原力がほぼ1.0のマツノザイセンチュウの0.0062より大きかった(1980-1983の結果)。マツノザイセンチュウとニセマツノザイセンチュウは日本ではマツノマダラカミキリとカラフトヒゲナガカミキリの成虫によって伝播される。伝播はカミキリの摂食箇所の傷と産卵箇所の傷を通して行われる。二つの伝播様式を組み込んだ材線虫病類の伝播モデルを作成し,実際のマツ林におけるセンチュウの伝播率を推定したところ,病原力のないニセマツノザイセンチュウは0.11(1993-1994年の結果)で,病原力がほぼ1.0のマツノザイセンチュウの0.0062より大きかった(1980-1983年の結果)。カラフトヒゲナガカミキリの配偶行動を通して,ニセマツノザイセンチュウがカミキリ成虫間を移動できる事が実験的に示された。ニセマツノザイセンチュウの場合,カラフトヒゲナガカミキリ成虫の雄から雌への移動に比べて,雌から雄への移動は起こりにくいことが示された。さらに,カラフトヒゲナガカミキリ雄成虫から雌成虫に移動したニセマツノザイセンチュウが産卵箇所を通してマツに伝播される事が示された。カラフトヒゲナガカミキリ雌成虫から産卵箇所を通して伝播されたニセマツノザイセンチュウは,産卵箇所を中心とした半径0.75cmの樹皮内に少なくとも24時間留まる事が示された。ニセマツノザイセンチュウについて,カラフトヒゲナガカミキリ雌成虫の摂食箇所からの伝播数と産卵箇所からの伝播数を実験的に調べた。その結果,媒介昆虫の保持線虫数のうち平均17%が産卵箇所を通して,6%が摂食箇所を通して伝播されることが示された。同様な実験をマツノザイセンチュウとマツノマダラカミキリの系で行ったところ,マツノザイセンチュウは媒介昆虫の産卵箇所からアカマツ丸太に伝播されることが実験室で確認された。次に,媒介昆虫の保持線虫数のうち平均3%が産卵箇所を通して,12%が摂食箇所を通して伝播されることが示された。
ノックアウトマウスを用いたムスカリン性アセチルコリン受容体の機能解析

ムスカリン性アセチルコリン受容体は、中枢神経系および末梢神経系の両者において、アセチルコリンと結合してシグナルを伝える受容体である。その分布は広範でまた薬理学的な解析から多くの重要な働きが示唆されでいる。本受容体は5種類のサブタイプに分かれ、それぞれ違った遺伝子によりコードされる7回膜貫通型蛋白であることが分かっている。本研究では、これら5種類のそれぞれ欠失させたマウスを作出し、各サブタイプの機能を調べることを目的としている。本研究における平成12年度の実績は以下の通りである。まず、サブタイプ1については、ノックアウトマウスを作出することに成功した。サブタイプ2については、C57BL/6J及びDBA/2Jへの戻し交配を5代以上達成した。サブタイプ3については、詳細な解析を行い、以下のことを解明した。1)副交感神経性の唾液分泌にはM3以外の関与はほとんどない。2)膀胱利尿筋の収縮の95%をM3が担っており、オスでは排尿障害が顕著で、膀胱の拡大が見られる。メスでは排尿障害は軽度で、コリン性神経の排尿機構への関与の度合には性差があることが示唆される。3)これまでの解析では、生殖機能、消化管機能の明らかな障害は検出されていない。さらに、サブタイプ2とサブタイプ3のノックアウトマウスを掛けあわせることにより、両者を欠失したダブルノックアウトマウスを作出することに成功した。現在その表現型の解析を進行中である。サブタイプ4については、C57BL/6J及びDBA/2Jへの戻し交配を8代まで進めた。サブタイプ5については、C57BL/6J及びDBA/2Jへの戻し交配を8代まで進め、各種解析を行った結果、コカインの全身投与に対する反応が異なっているという結果を得ており、脳内のドパミン性神経の活動に異常があることが示唆された。その分布は広範でまた薬理学的な解析から多くの重要な働きが示唆されている。遺伝子クローニングにより、ムスカリン性アセチルコリン受容体は5種類のサブタイプに分けることができ、それぞれ違った遺伝子によりコードされる7回膜貫通型蛋白であることが分かっている。本研究では、これら5種類の遺伝子をそれぞれ欠失させたマウスを作出し、各サブタイプの機能を調べることを目的とている。本研究における平成11年度の実績は以下のとおりである。まず、サブタイプ1については相同組換体の杯盤胞へのインジェクションを継続している。サブタイプ2については、ノックアウトマウスの作出を完了し、外見上明らかな異常がないことを確認している。サブタイプ3については、ノックアウトマウスを作出したところ、生まれた直後は正常マウスと外見は同じであるが、生後3週で乳離れをするころから約2週間の間成長が停滞することを見いだした。また、瞳孔、膀胱にも異常が見られており、現在その詳細を解析中である。サブタイプ4については、ノックアウトマウスの作出を完了し、外見上明らかな異常がないことを確認している。サブタイプ5についてもノックアウトマウスの作出を完了し、外見上明らかな異常がないことを確認している。また、ベータガラクトシダーゼ遺伝子をノックインするコンストラクトについても、サブタイプ2、3、4のそれぞれについてすでにミュータントマウスを作成し、ヘテロ接合体で維持している。

その分布は広範でまた薬理学的な解析から多くの重要な働きが示唆されている。本受容体は5種類のサブタイプに分かれ、それぞれ違った遺伝子によりコードされる7回膜貫通型蛋白であることが分かっている。本研究では、これら5種類のそれぞれ欠失させたマウスを作出し、各サブタイプの機能を調べることを目的としている。本研究における平成12年度の実績は以下の通りである。まず、サブタイプ1については、ノックアウトマウスを作出することに成功した。サブタイプ2については、C57BL/6J及びDBA/2Jへの戻し交配を5代以上達成した。サブタイプ3については、詳細な解析を行い、以下のことを解明した。1)副交感神経性の唾液分泌にはM3以外の関与はほとんどない。2)膀胱利尿筋の収縮の95%をM3が担っており、オスでは排尿障害が顕著で、膀胱の拡大が見られる。メスでは排尿障害は軽度で、コリン性神経の排尿機構への関与の度合には性差があることが示唆される。3)これまでの解析では、生殖機能、消化管機能の明らかな障害は検出されていない。さらに、サブタイプ2とサブタイプ3のノックアウトマウスを掛けあわせることにより、両者を欠失したダブルノックアウトマウスを作出することに成功した。現在その表現型の解析を進行中である。サブタイプ4については、C57BL/6J及びDBA/2Jへの戻し交配を8代まで進めた。サブタイプ5については、C57BL/6J及びDBA/2Jへの戻し交配を8代まで進め、各種解析を行った結果、コカインの全身投与に対する反応が異なっているという結果を得ており、脳内のドパミン性神経の活動に異常があることが示唆された。
学童期の血圧に関連する環境要因および遺伝生化学的指標に関する研究

本研究は学童期の血圧レベルを明かとし、それが成人に達するまでにどの様に変化するのか、および、児童とその両親の循環器検診成績の相関と、尿中カリクレイン,Na、Kの比較検討、さらに、食生活を中心とした生活環境調査などにより、高血圧の発症に関連する近年における環境要因の変化および宿主要因とを明らかにすることを目的とした。対象は秋田県内農村地区の井川町中学3年生で、昭和54年より平成元年までの11年間循環器検診を実施した。さらに,その間のうち昭和54年より58年までの5年間の受診者については、その両親の循環器検診成績との比較を行い、また,昭和55年より59年までの受診者については5年後の20歳時の検診成績との推移についての比較も行った。なお、研究費より備品として購入したパ-ソナルコンピュ-タ-(NEC PC-9801VX)は、これらデ-タの整理と統計解析に使用した。その結果、男子の最大血圧平均値は常に女子より高く、また、項目間の相関については、男女とも最大血圧・最小血圧と身長、体重、肥満度と有意の相関が認められた。さらに、両親の血圧との比較では、最大血圧について男女とも母親との間で有意の相関が認められた。一方、中学生時と5年後の血圧レベルを比較した結果では、最大血圧ー最小血圧とも平均値で10mmHg以上の増加がみられたが、5年間をはさんでの相関は統計学的に有意で、いわゆるtracking現象が認められた。しかし、栄養調査による食塩や各種栄養素,あるいは尿中カリクレイン、Na、Kと血圧レベルとの比較では、いずれも有意の相関は見られなかった。これらの結果より、中学生時点の血圧レベルより将来の傾向をある程度は予測でき、また、両親、特に母親の血圧レベルとの相関が認められることが示された。なお、中学生の血圧値と食生活あるいは代謝機能などとの関連については、さらに検討が必要と結論された。本研究は中年期以降に顕著となる高血圧病率の全国と秋田県の較差が,何歳頃の年代から生ずるのかを明らかにすること,および,学童とその両親の循環器検診成績と尿中カリクレイン, Na, Kの比較検討と,食生活を中心とした生活環境調査より,高血圧の発症に関連する近年における環境要因の変化および宿主要因とを明らかにすることを目的とした.本年度は,秋田県内の農村地区にある井川町の中学生と,その5年後にあたる20歳の成人を対象とした循環器検診を実施した.また,中学生とその両親(昭和62年度受診者)の検診時尿を用いて,尿中Na, K,カリクレインの測定をおこなった.一方,中学生の両親についての循環器検診成績は,上記井川町にて昭和38年より,秋田県衛生科学研究所,大阪成人病センター,筑波大学により循環器検診が実施されており,それより中学生の検診年の前後5年以内の記録を用い,解析を行った.昭和62年度における研究としては,主に,中学生とその両親の循環器検診成績(身長,体重,肥満度,最大血圧,最小血圧,血清総コレステロールの6項目)の相関について検討した.その結果,身長,体重,肥満度および血清総コレステロールの4項目において,男子,女子とも父親,母親との間で有意の正相関を認めた.また血圧については,最大血圧のみ男子,女子と母親との間で有意の正相関であった.今後の研究計画としては,中学3年生および20歳成人を対象とした循環器検診と,栄養調査成績により得られた資料の解析をおこない,また中学生と両親の尿中Na, K,カリクレインの相関について検討を加える予定である.