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生活文化産業の創出による中山間地域経済の再構築に関する研究

日本の中山間地域は長く過疎化に悩まされてきたが,高度経済成長期を経て、公共事業による建設業や分工場型の製造業を中心とした、外部依存性の高い周辺型経済を形成した。しかし,今日,急速に進むグローバル化,構造改革の波は,そうした経済にも根本的な転換を迫っている。このような認識に立って、本研究では現代日本の知識社会への移行を前提として、中山間地域経済の今後の再構築の方向を生活文化産業の観点から理論実証両面から展望しようとした。主な研究成果は下記の通りである。1)従来の研究では、地域の存続に関わる中山間地域経済の再構築について知識社会を見据えた形での展望はなされていない。その際重要なのは、新産業のあり方を,農業,林業,工業といった従来の産業区分を乗り越えて,産業融合的な観点から模索することである。「生活文化産業」はこうした要請に応えるものとして提起したい。生活文化産業とは,都市生活者のニーズに対応した質の高い生活文化領域の財・サービス供給を、地域に根ざした形で産業融合的に行うものである。2)東広島市の福富町竹仁地区を対象に研究を進めた。この地区のツーリズムは,初期には地区外からの転入者による知識創造に依存していたが,徐々に地元住民も加わるようになった。多くの地元住民の参入を可能としたのは行政による「福富物産しゃくなげ館」の開設であり,この組織を核とした集団学習や事業へのサポートによるところが大きい。来訪者の大半は都市部の中高年層である。そこで追求されるものは,自然や田園景観,食事,農産物、健康と癒し,工芸,そして,それらによる消費のストーリー性である。このような特徴は,ポスト生産主義における「農村を消費するまなざし」に対応するものと言えよう。現代の農村ツーリズムが「農村へのまなざし」に依拠しているとするならば,供給サイドにはこの「まなざし」に応えうる学習と知識創造が求められる。平成17年度は、農村型ツーリズムについて全国のいくつかの先進事例地域の調査を行うとともに、広島県の中山間地域において生活文化産業の展開と来訪者の実態調査を行った。1)全国の農村型ツーリズム先進事例の調査北海道の十勝地方・新得町と大分県の豊後高田市における農村型ツーリズムについて調査を行った。北海道新得町では農家民宿が展開しているが、酪農や牧羊といった農業、さらに乳製品や羊毛製品などの加工品の製造などが複合する形で生活文化産業が展開しつつあることが判明した。豊後高田市では、中世の地割りを残し農村景観保全への取り組みが進んでいる田染荘を対象としたが、農家民宿が生まれつつあるものの、生活文化産業への取り組みが弱いことが判明した。今後、相互の比較検討を進める予定である。2)広島県福富町における農村型ツーリズムの調査ここでは、生活文化産業がある程度地域的に集積しているケースに焦点をあて、集積のプロセスと意義を検討した。対象地域は東広島市福富町の上竹仁地区である。ここでは行政に頼るのではなく民間主導で自然に事業所が集積し、それらの相互交流から「こだわりの郷」を作り上げ、多くの来訪者を集めてきた。今年は、来訪者のアンケート調査を行い、その需要の特性と来訪者の分類を行った。生活文化産業としては食事の提供などより複合的な形態が求められている。以上をふまえ、来年度は事例地域の比較検討作業を進めるとともに、東広島市福富町の事例について成果をまとめたい。

平成18年度は、農村型ツーリズムについて広島県の中山間地域における事例研究を学会で発表するとともに、生活文化産業を軸とした中山間地域経済の振興について理論的検討を行い、学会誌に論文として発表した。1.広島県福富町竹仁地区における農村型ツーリズムの研究生活文化産業が地域的に集積しているケースに焦点をあて、その地域振興に果たす意義について考察した。本事例からは、知識経済化時代の中山間地域の地域振興に求められるいくつかの要素が見出せる。行政への依存度の少なさと住民の自主性、ネットワーク型の組織、地域ブランド、新旧住民双方の関与と交流、来訪者とのコミュニケーション重視の販売形態、健康に代表される生活文化領域での提案、自然環境や景観の重視などである。これらの体系的検討は今後の課題であるが、それら一群のものの背後に「知の創造」があることを指摘できる。2.生活文化産業を軸とした中山間地域経済の振興について理論的考察中山間地域の経済は厳しい状況にあるが、地域社会維持に資する産業の再構築について検討を行った。グローバル化はローカルフードへの関心の増大など、中山間地域にとってプラスに作用する面もあり、こうした動きを受けて、農業を核として、農産物の販売、農産物加工、ツーリズムなどを産業融合的に展開させ、地域の活性化に成功している事例がある.こうした産業をここでは「総合生活文化産業」と呼び、また、この種の産業を核とした新たな経済の展開を「都市農村交流型農村複合化」として捉え、今後の中山間地域における農業振興、地域振興の方向性を明らかにした。最終年度である来年度は、今年度の理論的検討をふまえ、事例地域の比較検討作業をさらに進めるとともに、生活文化産業の創出による中山間地域経済の再構築の方向性をまとめたい。平成19年度は最終年度であり、知識経済化にともなう中山間地域の変動に関する理論的な考察を深め、その成果を下記のような内容で地理科学学会の知識経済化に関するシンプジウムで発表した。また、補足的に博物館を軸とした中山間地域経済の振興事例についての調査も行った。1.知識経済化時代における中山間地域経済の展開についての理論的考察新たな産業部門として、農林業、ツーリズム、そして自然環境・文化などの地域資源が密接に関わり合った「総合生活文化産業」を提起し、このような産業振興に共通してみられるのが、「ネットワーク」、「ブランド」、「コミュニケーション」、「生活文化」、「ローカル」などの新たな要素であることを明らかにした。それゆえ、この種の産業を立ち上げ担う主体には、知の創造や学習が強く求められることを指摘した。また、このような産業振興は地域の自然・文化・景観と密接に関わっているため、環境保全や景観保全などへの取り組みも欠かせず、これらの領域には、環境保全に資する政府の政策や、ボランタリーな都市住民との連携が大きな意義をもつことを述べた。「総合生活文化産業」の振興は、自発的な要素が強く、従来の行政主導型の開発になじまない面を多分にもつ。知識経済化時代の中山間地域振興において、行政と地域住民がどのように関わり、また域外の都市住民とどのように連携するのかが課題となると結論した。2.博物館を用いた生活文化産業の振興博物館は、本来生活文化産業の振興に関わる面があると考えられる。そこで、大分県の1地方博物館の事例を調査した。
B型肝炎の病態における宿主遺伝子多型の関与についての検討

B型肝炎に対するペグインターフェロンα2a投与症例61例において、著効(治療終了24週後のHBV DNA<3.3logIU/mL、HBe抗原陰性、ALT正常化)を達成したのは、HBe抗原陽性例では8%(3/39)、HBe抗原陰性例では36.4%(8/22)、HBe抗原セロコンバージョンを達成したのは22.2%(8/36)であった。IL28B遺伝子多型は、major alleleが11例、minor alleleが1例であり、IL28B遺伝子多型と治療効果に関連を認めなかった。治療終了24週後に著効を達成しなかった症例においても、投与中のHBs抗原量は低下傾向を認め、また、投与終了後の新規発癌症例は認めなかった。一方、核酸アナログ治療(ラミブジン、エンテカビル、テノホビル)によりHBV DNA増殖が長期間抑制されている512例について長期予後の解析を行うと、治療開始後5年以内と5年以降の初発肝癌を比較すると、それぞれ年率2.32%、年率1.78%と、5年以降の発癌率は低下していなかった(p=0.383)。続いてエンテカビル症例において、HBs抗原量と肝発癌の関連についての検討では、55歳以上の症例において、5年時点のHBs抗原量1000IU/mL未満の症例では1000IU/mL以上の症例に比して有意に発癌が低率であった(p=0.025)。また、HBコア関連抗原については、5年時点で3.0logIU/mLの症例からは5年以降の新規発癌を認めなかった。核酸アナログ治療により長期間HBV DNA増殖抑制効果が得られている症例においても、HBs抗原低下が重要である可能性が示唆された。しかし、その作用機序からは核酸アナログによるHBs抗原低下効果は乏しいため、今後、予後改善を目指した治療戦略として、HBs抗原低下効果を期待できるペグインターフェロン併用治療の可能性が考えられた。B型肝炎に対する抗ウイルス治療としてインターフェロンと核酸アナログが用いられるが、治療の治療目標であるHBs抗原消失は困難な状況であり、発癌抑制効果など予後改善効果は不十分である。本研究では、病態や治療効果における宿主遺伝子の関与について明らかにすることにより、予後改善を目指したオーダーメイド治療の確立を目的とする。「NA投与症例におけるHBV関連マーカーと発癌率の関連」の検討においては、核酸アナログ投与例のうち、開始以降ウイルス制御が持続して得られている474例の肝発癌について検討を行った。68.5ヶ月の観察期間において、65例に発癌を認め、5年発癌率は非肝硬変例で5.5%、肝硬変例で32%であり、ウイルス制御が得られても発癌抑制は十分ではなかった。「ペグインターフェロンの治療効果」の検討においては、当院ならびに関連施設において53例の登録があり、現在臨床経過を追跡している。HBe抗原陽性例では、HBV DNA4logC/mL達成率は治療終了24週後で22%、48週後で17%、2年後で21%であり、HBe抗原セロコンバージョン率は24週後で23%、48週後で22%、2年後で33%であった。HBe抗原セロコンバージョンに寄与する因子について検討したところ、単変量解析で肝線維化進展と開始時のHBe抗原量が寄与する可能性があった。HBe抗原陰性例では、治療開始後すみやかにHBV DNAは低下するが、HBV DNA4logC/mL達成率は治療終了24週後で50%、48週後で25%、2年後で60%であり、5例は核酸アナログの追加投与を行った。「NA投与症例におけるペグインターフェロンの有用性」の検討においては、5例の登録があり、drug-freeの状態で経過観察を行っている。ペグインターフェロンの治療効果についての臨床経過の追跡が継続できており、治療終了2年後のHBV DNA4logC/mL達成率は、HBe抗原陽性例では33%、HBe抗原陰性例では60%という結果が得られている。B型肝炎に対する抗ウイルス治療として、インターフェロンと核酸アナログ(NA)が用いられる。治療の目標であるHBs抗原消失は、いずれの治療によっても困難であるが、どのような症例において治療効果が得られるかは明らかではない。本研究では、治療効果とそれらと宿主遺伝子の関与について明らかにすることにより、予後改善を目指した治療戦略の確立を目的とする。「NA投与症例におけるHBV関連マーカーと発癌率の関連」の検討においては、核酸アナログ治療によりウイルス制御が得られている512例を対象に検討を行った。5年以内の発癌率は年率2.32%に対して、5年以降の発癌率は年率1.78%であり、核酸アナログ開始後5年以内と5年以降の発癌率に有意差を認めなかった。観察期間における肝発癌に関与する因子として、高齢とγGTP高値がリスク因子であることが示されたが、これらのリスク因子は5年以降の肝発癌においてもリスク因子として存在していた。「ペグインターフェロンの治療効果」の検討においては、ペグインターフェロン単独治療を行った55例を対象に検討を行った。HBs抗原消失例は1例のみであったため、治療終了後の経過観察において、直近のHBs抗原1000IU/mL未満に関与する因子について単変量解析を行ったところ、HBe抗原陽性例では、組織学的activityが高いこと、IFN治療歴があること、HBe抗原セロコンバージョン達成が有意であった。核酸アナログ症例については長期間の追跡が可能となっている。

B型肝炎に対するペグインターフェロンα2a投与症例61例において、著効(治療終了24週後のHBV DNA<3.3logIU/mL、HBe抗原陰性、ALT正常化)を達成したのは、HBe抗原陽性例では8%(3/39)、HBe抗原陰性例では36.4%(8/22)、HBe抗原セロコンバージョンを達成したのは22.2%(8/36)であった。IL28B遺伝子多型は、major alleleが11例、minor alleleが1例であり、IL28B遺伝子多型と治療効果に関連を認めなかった。治療終了24週後に著効を達成しなかった症例においても、投与中のHBs抗原量は低下傾向を認め、また、投与終了後の新規発癌症例は認めなかった。一方、核酸アナログ治療(ラミブジン、エンテカビル、テノホビル)によりHBV DNA増殖が長期間抑制されている512例について長期予後の解析を行うと、治療開始後5年以内と5年以降の初発肝癌を比較すると、それぞれ年率2.32%、年率1.78%と、5年以降の発癌率は低下していなかった(p=0.383)。続いてエンテカビル症例において、HBs抗原量と肝発癌の関連についての検討では、55歳以上の症例において、5年時点のHBs抗原量1000IU/mL未満の症例では1000IU/mL以上の症例に比して有意に発癌が低率であった(p=0.025)。また、HBコア関連抗原については、5年時点で3.0logIU/mLの症例からは5年以降の新規発癌を認めなかった。核酸アナログ治療により長期間HBV DNA増殖抑制効果が得られている症例においても、HBs抗原低下が重要である可能性が示唆された。しかし、その作用機序からは核酸アナログによるHBs抗原低下効果は乏しいため、今後、予後改善を目指した治療戦略として、HBs抗原低下効果を期待できるペグインターフェロン併用治療の可能性が考えられた。核酸アナログ投与症例ならびにインターフェロン投与症例において、宿主遺伝子多型の研究への登録症例を増やし、解析を行う。すでに登録している症例については、抽出したDNAを用いて測定を順次行っていく。核酸アナログ投与症例ならびにペグインターフェロン投与症例について、症例登録を継続し、また、蓄積症例について追跡調査を行う。
歯周病原細菌線毛の歯周組織破壊における役割の解析

歯周病原細菌の1つであるP.gingivalisが持つ線毛は、歯周組織破壊に重要な役割を担っていると考えられている。P.gingivalisは、FimAとMfa1の2種類の線毛を発現しているが、FimA線毛に関する研究は進んでいるものの、Mfa1線毛に関する研究はあまり進んでおらず、その免疫応答を中心とした生体組織への影響に関しては不明な点が多い。歯周組織破壊特に歯槽骨吸収におけるMfa1線毛の役割を明らかにすることを目的とし、引き続き線毛の破骨細胞分化・活性化誘導能に関する検討を行った。Mfa1線毛のみを発現しているP. gingivalis fimA欠損株(JI-1株)、JI-1株を親株としてmfa5をテトラサイクリン耐性遺伝子に置換したmfa5欠損株(FMFA5株)、FMFA5株にインタクトなmfa5をプラスミドDNAに繋いで導入した相補株(FMFA5C)およびFimA線毛のみを発現しているP. gingivalis mfa1欠損株より抽出した各種精製線毛を実験に使用した。RANKLにて24h前処理したRAW264.7細胞に、各種線毛を加え、5日間培養した後、TRAP染色にて多核の破骨細胞数を測定したところ、どの精製線毛も有意に破骨細胞形成を促進した。その中でFMFA5株由来精製線毛が、他と特にFimA精製線毛と比較して、破骨細胞形成能が高い傾向を示した。上記傾向は、リン酸カルシウムでコーティングされた培養プレート上に出来る吸収窩を測定することで検討する破骨細胞活性化能に関しても同様であった。次年度は、上記各種菌株を用いて、マウスに実験的歯周炎を惹起し、歯周組織の組織学的(H-E染色およびTRAP染色)および形態学的解析(マイクロCT撮像)等を行うことと、歯槽骨およひ歯肉組織を回収してPCRアレイにより各種遺伝子発現変化を網羅的に解析する予定である。各種線毛発現の異なった菌株を使用して、マウスに実験的歯周炎を惹起し、歯周組織の組織学的および形態学的解析を行うこととしていたが、実験的歯周炎の安定して惹起に苦慮しているため、実験の進捗がやや遅れている。条件設定が進んできているため、今後は動物モデルでの解析を進め、線毛の詳細な役割を検討していく予定である。動物モデルでの解析と細胞レベルでの解析を平行して、継続することで、多方面から線毛の役割を検討する。また、表面化してきた線毛の役割に関与する免疫調節因子を詳細に検討することで、線毛の新たな免疫調節能を明らかにしたい。それぞれの研究分担者が免疫、細菌、骨代謝等を専門にしているため、得意分野を生かして、解析を進めていく。P.gingivalisは、FimAとMfa1の2種類の線毛を発現しているが、Mfa1線毛に関する研究は歴史が浅く、その生体組織への影響に関しては不明な点が多い。今回、歯周組織破壊におけるMfa1線毛の役割を明らかにすることを目的とし、in vitro研究として線毛の破骨細胞分化誘導能に関する検討を行った。Mfa1線毛のみを発現しているP. gingivalis fimA欠損株(JI-1株)、JI-1株を親株としてmfa5をテトラサイクリン耐性遺伝子に置換したmfa5欠損株(FMFA5株)、およびFimA線毛のみを発現しているP. gingivalis mfa1欠損株より各種線毛を精製し、実験に使用した。RANKLで24h前処理したRAW264.7細胞に、各種精製線毛を加え、5日間培養した後、TRAP染色にて多核の破骨細胞数を測定したところ、FMFA5株由来精製線毛が、JI-1株由来精製線毛と比較して、破骨細胞形成能が有意に高かった。両者共に、FimA精製線毛と比較し、高い破骨細胞形成能を示した。上記傾向は、リン酸カルシウムでコーティングされた培養プレート上に出来る吸収窩を測定する破骨細胞活性化能に関しても同様であった。次年度は、上記各種菌株を用いて、in vivo研究としてマウスに実験的歯周炎を惹起し、歯周組織の組織学的(H-E染色およびTRAP染色)および形態学的解析(マイクロCT撮像)等を行うことと、歯槽骨および歯肉組織を回収してPCRアレイにより各種遺伝子発現変化を網羅的に解析する予定である。破骨細胞分化・活性化に対するMfa1線毛の役割に関して、詳細な解析が進んでいる。Mfa1線毛のみを発現しているP. gingivalis fimA欠損株(JI-1株)、JI-1株を親株としてmfa5をテトラサイクリン耐性遺伝子に置換したmfa5欠損株(FMFA5株)、FMFA

5株にインタクトなmfa5をプラスミドDNAに繋いで導入した相補株(FMFA5C)およびFimA線毛のみを発現しているP. gingivalis mfa1欠損株より抽出した各種精製線毛を実験に使用した。RANKLにて24h前処理したRAW264.7細胞に、各種線毛を加え、5日間培養した後、TRAP染色にて多核の破骨細胞数を測定したところ、どの精製線毛も有意に破骨細胞形成を促進した。その中でFMFA5株由来精製線毛が、他と特にFimA精製線毛と比較して、破骨細胞形成能が高い傾向を示した。上記傾向は、リン酸カルシウムでコーティングされた培養プレート上に出来る吸収窩を測定することで検討する破骨細胞活性化能に関しても同様であった。次年度は、上記各種菌株を用いて、マウスに実験的歯周炎を惹起し、歯周組織の組織学的(H-E染色およびTRAP染色)および形態学的解析(マイクロCT撮像)等を行うことと、歯槽骨およひ歯肉組織を回収してPCRアレイにより各種遺伝子発現変化を網羅的に解析する予定である。各種線毛発現の異なった菌株を使用して、マウスに実験的歯周炎を惹起し、歯周組織の組織学的および形態学的解析を行うこととしていたが、実験的歯周炎の安定して惹起に苦慮しているため、実験の進捗がやや遅れている。条件設定が進んできているため、今後は動物モデルでの解析を進め、線毛の詳細な役割を検討していく予定である。マウス実験的歯周炎モデルを用いて、線毛発現の異なるP.gingivalisの歯周組織破壊に対する影響を、詳細に解析することで、Mfa1線毛の役割を明らかにする予定である。動物モデルでの解析と細胞レベルでの解析を平行して、継続することで、多方面から線毛の役割を検討する。また、表面化してきた線毛の役割に関与する免疫調節因子を詳細に検討することで、線毛の新たな免疫調節能を明らかにしたい。それぞれの研究分担者が免疫、細菌、骨代謝等を専門にしているため、得意分野を生かして、解析を進めていく。細胞培養実験を中心に行い、既に持ち合わせていた試薬を主に使用したため、次年度使用額が生じた。次年度は動物実験を中心に行う予定であることと細胞培養実験に関しても新たな試薬を必要とするため、次年度使用額を使用する。動物実験の進捗が遅延したことに伴い、細胞培養実験に関しては既存の試薬を主に使用したため、次年度使用額が生じた。
周期の理論と双有理幾何学の融合，ミラー対称性研究の新時代

代表者高橋は協力者荒牧と,鎖型可逆多項式に付随する極大次数付き行列因子化の圏に対してLefschetz型完全例外列を構成した.約40年進展がなかった古典的重要問題への貢献となる成果である.分担者藤野は高次元代数多様体の特異点の研究を行い,擬対数的標準対はDu Bois特異点しか持たないという決定的な結果を得た.また,高次元安定多様体のモジュライ空間の射影性に関する決定的な結果が,Ann. of Math.という最も権威ある雑誌の一つに掲載された.分担者入谷はトロピカル幾何を使って代数多様体の周期の漸近挙動を調べ,ゼータ函数の特殊値とガンマ予想に関する研究を行った.分担者小西はDuality groupsと呼ばれるクラスに対して,自然な齋藤構造とヘシアン写像から定まるものとの関係を調べ,すべてのCoxeter群と一部のShephard群で一致を示した.分担者安田はFabio Toniniと有限群に対する形式トーサーのモジュライ空間の研究を行い,従来より一般的な群に対しモジュライ空間を構成した.この成果は野性マッカイ対応を通して正標数や混合標数の特異点研究への応用が期待される.分担者大川は安定点つき曲線のモジュライスタックの非可換変形や非可換Hirzebruch曲面についての研究を行った.分担者岩木は,種数1のスペクトル曲線に対して位相的漸化式による量子化を行い,応用として位相的漸化式の分配関数の離散Fourier変換としてPainleve方程式のタウ函数が構成できることを示した.分担者神田は,海外共同研究者と楕円代数の族に関する研究を行い,特定の条件を満たす楕円代数の組に対する次数付き加群の圏同値を示した.これらの研究成果の多くはすでに論文としてまとめられ,現在雑誌に投稿中である.また,ミラー対称性・双有理幾何学に関する国際研究集会・国内研究集会等を開催し,最新の研究成果についての講演をもとに,参加者たちと活発な研究交流を行った.研究代表者・分担者のいずれも順調に個別・共同研究を進めることができており,研究成果を論文としてまとめ発表することができている.また,雇用した特任教員についても同様である.開催した国際研究集会や勉強会・セミナー等も非常に充実した内容であり,活発な研究交流がなされ,当該分野の進展に大きく貢献するものとなっている.研究計画が順調に進捗しているので,現在の体制・方法を継続する.代表者高橋は自己同値函手のエントロピーの研究と軌道体Jacobi環の研究に主として取り組み,エントロピーについてのGromov-Yomdin型予想に関する基礎研究や,軌道体Jacobi環の存在と一意性の証明を行った.分担者藤野は東京電機大学の藤澤太郎氏と共同でホッジ束の半正値性定理の研究を行い,ある種の直線束が非常に良い性質を持つ特異計量を持つことを示した.分担者入谷はCoates・Corti・Tseng氏らとの共同研究においてトーリック軌道体に対するミラー対称性の研究を進め,同変大量子コホモロジーに対するホッジ理論的ミラー対称性を一般的な設定で証明し,ポアンカレ双線形形式と高次留数双線形形式の一致や収束性に関する結果を得た.分担者小西は計量なし齋藤構造の慨双対性と複素鏡映群の軌道空間上の自然な計量なし齋藤構造について研究し,既約複素鏡映群について計量なし齋藤構造を完全に決定した.分担者安田は野性マッカイ対応の研究を行い,モチーフ版野性マッカイ対応の定式化に必要なモジュライ空間の構成において,代数的スタックに関する技術的な困難の多くを解決した.分担者大川は導来同値な代数多様体の不変量について研究した.導来同値なCalabi-Yau多様体の組であってL同値であるものの例を複数見つけた.分担者岩木は完全WKB解析による位相的漸化式を研究し,モノドロミー保存変形と相関関数の関係などを明らかにした.分担者神田はアーベル圏に付随する幾何学的空間の研究を行い,特定のクラスの代数多様体に対し,準連接層のなすアーベル圏における無限直積の完全性を幾何学的に特徴付けた.これらの研究成果の多くはすでに論文としてまとめられ,現在雑誌に投稿中である.また,ミラー対称性・周期の理論・双有理幾何学に関連する国際研究集会を開催し,最新の研究成果についての講演をもとに,参加者たちと活発な研究交流を行った.研究代表者・分担者のいずれも順調に個別・共同研究を進めることができており,研究成果を論文としてまとめることができている.また,新規に開催した国際研究集会も非常に充実した内容であり,活発な研究交流がなされ,当該分野の進展に大きく貢献するものとなった.次年度以降の継続開催やこれを基礎とした研究活動の活性化に向けて,良いスタートを切ることができた.代表者高橋は軌道体Jacobi環の研究に主として取り組み,可逆多項式に対して,それと群同変行列因子化の圏に対するHochschildコホモロジー環の同型を証明した.分担者藤野は高次元代数多様体と複素多様体の研究を行った.とくに,乗数イデアル層についてのベルティニ型定理を確立した.分担者入谷はトーリック軌道体の標準類を保たない双有理変換の下での量子コホモロジーD-加群の変化を研究した.また海外共同研究者と局所射影平面の高種数グロモフ・ウィッテンポテンシャルの保型性を調べた.分担者小西はフロベニウス構造の概双対性の研究を行った.とくに,概双対性を計量なし齋藤構造へ一般化し,既約複素鏡映群の軌道空間上の齋藤構造の構成に応用した.分担者安田は野性マッカイ対応の基礎付けや応用の研究を行った.

形式的トーサーのモジュライ空間の構成や野性的商特異点が良い性質を持つための特徴付けなどの成果を得た.分担者大川は中心上有限な非可換代数多様体の分類に向けてb-因子に対する極小モデル理論を整理した.導来同値と代数多様体のGrothendieck環との関係についてhyperケーラー多様体からなる例を挙げた.分担者岩木は完全WKB解析と位相的漸化式に関する研究を行い,射影空間の量子微分方程式とスペクトル曲線の量子化の一致を示し,そのStokes構造と壁越え現象に関する結果を得た.分担者神田は海外共同研究者とArtin-Schelter正則代数およびCalabi-Yau代数に関する研究を行い,与えられたCalabi-Yau代数の中心拡大が射影空間上の平坦族をなすことを証明した.これらの研究成果の多くはすでに論文としてまとめられ,現在雑誌に投稿中である.また,ミラー対称性・双有理幾何学に関する国際研究集会・国内研究集会等を開催し,最新の研究成果についての講演をもとに,参加者たちと活発な研究交流を行った.研究代表者・分担者のいずれも順調に個別・共同研究を進めることができており,研究成果を論文としてまとめ発表することができている.また,雇用している特任教員についても同様である.開催した国際研究集会や勉強会・セミナー等も非常に充実した内容であり,活発な研究交流がなされ,当該分野の進展に大きく貢献するものとなっている.代表者高橋は協力者荒牧と,鎖型可逆多項式に付随する極大次数付き行列因子化の圏に対してLefschetz型完全例外列を構成した.約40年進展がなかった古典的重要問題への貢献となる成果である.分担者藤野は高次元代数多様体の特異点の研究を行い,擬対数的標準対はDu Bois特異点しか持たないという決定的な結果を得た.また,高次元安定多様体のモジュライ空間の射影性に関する決定的な結果が,Ann. of Math.という最も権威ある雑誌の一つに掲載された.分担者入谷はトロピカル幾何を使って代数多様体の周期の漸近挙動を調べ,ゼータ函数の特殊値とガンマ予想に関する研究を行った.分担者小西はDuality groupsと呼ばれるクラスに対して,自然な齋藤構造とヘシアン写像から定まるものとの関係を調べ,すべてのCoxeter群と一部のShephard群で一致を示した.分担者安田はFabio Toniniと有限群に対する形式トーサーのモジュライ空間の研究を行い,従来より一般的な群に対しモジュライ空間を構成した.この成果は野性マッカイ対応を通して正標数や混合標数の特異点研究への応用が期待される.分担者大川は安定点つき曲線のモジュライスタックの非可換変形や非可換Hirzebruch曲面についての研究を行った.分担者岩木は,種数1のスペクトル曲線に対して位相的漸化式による量子化を行い,応用として位相的漸化式の分配関数の離散Fourier変換としてPainleve方程式のタウ函数が構成できることを示した.分担者神田は,海外共同研究者と楕円代数の族に関する研究を行い,特定の条件を満たす楕円代数の組に対する次数付き加群の圏同値を示した.これらの研究成果の多くはすでに論文としてまとめられ,現在雑誌に投稿中である.また,ミラー対称性・双有理幾何学に関する国際研究集会・国内研究集会等を開催し,最新の研究成果についての講演をもとに,参加者たちと活発な研究交流を行った.研究代表者・分担者のいずれも順調に個別・共同研究を進めることができており,研究成果を論文としてまとめ発表することができている.
2元線形ブロック符号のトップダウン型再帰的最尤及び準最尤復号法に関する研究

2元線形ブロック符号のトップダウン(適応)型再帰的最尤および準最尤復号法を考案し、アルゴリズムの有効性を計算機シミュレーションにより示した。従来、最尤復号法の効率的なアルゴリズムとしてはトレリスダイアグラムを用いるヴィタビ復号法が広く知られていたが、実行に際して必要な加算、比較といった演算の回数と記憶容量の問題から、構造がよく知られた2元線形ブロック符号においても符号長64程度までしか計算機シミュレーションによる誤り特性の解析ができなかった。本研究では符号の持つ再起構造に着目し、従来法には無い、次に示す改善を具現化可能なアルゴリズムを考案した。第一に加算に関して、再利用される可能性のある加算結果をメモリに格納し、必要に応じて計算済み結果を再利用し、加算に関する重複計算を完全に除去した。この改善点の実現に伴い、メモリ使用量は増加するが、適応型アルゴリズムとして実現しているため、従来法に比較しても総合的には大きな問題にはなっていない。第二に比較演算に関して、従来法では同じ比較演算が複数の箇所に散在していることが多く、演算の種類が加算の結果の種類の概ね2乗に達するため、比較演算が同一かどうかの判定が簡単ではない。そめため、重複した比較演算が従来法には多数含まれていたが、提案アルゴリズムでは、符号の構造に関する情報を利用することにより、比較演算の重複箇所そのものを理論的に特定し、可能な限り共有することにより、従来法で大きな問題となっていた比較演算の数を劇的に削減することに成功した。第三に、従来法では最適化問題の解法をまじめな総当り的手法によって実現しているため、加算、比較といった演算の回数は、入力系列に無関係に固定的な数値となっていた。提案アルゴリズムでは、枝刈りの手法を最大限活用することにより、入力系列に加えられている雑音の大きさに応じて計算量が変化するようにしている。つまり、雑音が小さな入力系列に対する復号は早く停止するため、平均計算量の低減が可能となっている。以上のような改善に関するコンセプトを実現した最尤復号法および最小重み探索を用いる準最尤復号法のアルゴリズムとして考案し、ソフトウエア実装した。最尤復号法に関しては、よく知られたいくつかの符号として、(128,64,16)RM符号、(128,64,22)拡大BCH符号に関して数値演算シミュレーションにより、精度の高い誤り制御特性を初めて得るとともに、平均的計算量に関して、ヴィタビ復号法などの従来法と比較して劇的な低減が実現されることを示した。また準最尤復号法に関しては、いくつかの符号長256および512のRM符号に関して、優れた誤り制御特性と小さな平均計算量を実現する優れた復号法であることを示した。2元線形ブロック符号の新しい復号法を考案し、計算機シミュレーションにより有効性を示した。まず、リード・マラー符号(RM符号)の構造的特長を利用して、最小重み符号語だけに関するトップダウン型再帰的最尤探索アルゴリズムを繰り返し用いる形式の準最尤逐復号法を考案し、従来困難とされていた符号長256のRM符号に関する計算機シミュレーションを可能とし、その結果、既存の復号法に比べて少ない計算複雑さにて低い誤り率が実現されることを示した。また、当該復号法の改良に関する研究を進め、誤り率をほとんど劣化させることなく計算複雑さを減少させる拡張方法を考案し、符号長512のRM符号に関して既存の他の復号法に比べて低い誤り率を実現できることを示した。計算複雑さに関しては、既存手法のデータが明確でないため直接比較ができていない。この一連の研究により、トップダウン型復号手法の明確な有効性を確認できた。続いて符号の構造をあまり利用しない形式の最尤復号法として、順序統計量を利用したトップダウン型再帰的最尤復号法を考案し、従来は簡単でないまたは困難とされていた符号長128かつ符号化率1/2の良く知られた3種類の符号(RM符号、拡大BCH符号、拡大QR符号)に関する計算機シミュレーションを可能とし、その結果、RM符号に関しては従来に比べて高精度の、他の符号に関しては初めて最尤復号法の誤り率を示した。この研究により、同一パラメタ(符号長128、情報ビット数64)の符号に関する最尤復号法の誤り率が明確になり、直接比較が可能となった。これにより、従来から言われていた、「同一パラメタの符号においては最小距離が大きいほど最尤復号法の誤り率が小さくなる」という説が、当該の3つの符号に関しても成立することが確認され、当該パラメタに関しては「拡大BCH符号よりも拡大QR符号の方が最尤復号法の誤り率が小さくなる」という説をシミュレーション結果から否定することができた。現在、符号の構造を利用した再帰的最尤復号法のアルゴリズムの考案を終わり、計算機シミュレーションの実装を行っている。

第一に加算に関して、再利用される可能性のある加算結果をメモリに格納し、必要に応じて計算済み結果を再利用し、加算に関する重複計算を完全に除去した。この改善点の実現に伴い、メモリ使用量は増加するが、適応型アルゴリズムとして実現しているため、従来法に比較しても総合的には大きな問題にはなっていない。第二に比較演算に関して、従来法では同じ比較演算が複数の箇所に散在していることが多く、演算の種類が加算の結果の種類の概ね2乗に達するため、比較演算が同一かどうかの判定が簡単ではない。そめため、重複した比較演算が従来法には多数含まれていたが、提案アルゴリズムでは、符号の構造に関する情報を利用することにより、比較演算の重複箇所そのものを理論的に特定し、可能な限り共有することにより、従来法で大きな問題となっていた比較演算の数を劇的に削減することに成功した。第三に、従来法では最適化問題の解法をまじめな総当り的手法によって実現しているため、加算、比較といった演算の回数は、入力系列に無関係に固定的な数値となっていた。提案アルゴリズムでは、枝刈りの手法を最大限活用することにより、入力系列に加えられている雑音の大きさに応じて計算量が変化するようにしている。つまり、雑音が小さな入力系列に対する復号は早く停止するため、平均計算量の低減が可能となっている。以上のような改善に関するコンセプトを実現した最尤復号法および最小重み探索を用いる準最尤復号法のアルゴリズムとして考案し、ソフトウエア実装した。最尤復号法に関しては、よく知られたいくつかの符号として、(128,64,16)RM符号、(128,64,22)拡大BCH符号に関して数値演算シミュレーションにより、精度の高い誤り制御特性を初めて得るとともに、平均的計算量に関して、ヴィタビ復号法などの従来法と比較して劇的な低減が実現されることを示した。また準最尤復号法に関しては、いくつかの符号長256および512のRM符号に関して、優れた誤り制御特性と小さな平均計算量を実現する優れた復号法であることを示した。
家族性および孤発性IgA腎症の疾患感受性遺伝子の同定と診療への応用

最も多い原発性糸球体腎炎で末期腎不全の主要な原疾患でもあるIgA腎症は、疾患感受性遺伝子の存在が想定され、欧米の多施設共同研究により複数の連鎖領域が報告されているが、責任遺伝子の特定には至っていない。本研究の目的は、第一に家族性IgA腎症の疾患感受性遺伝子を同定し、それが孤発性IgA腎症患者においても疾患感受性および進行に関与する遺伝子として作用しているかどうかを検証することである。第二に同定された疾患感受性遺伝子を利用して腎臓病診療に応用することである。約1年間で、腎生険で診断されたIgA腎症患者が複数確認される家系など、家族性IgA腎症が強く疑われる27家系(罹患者58、非罹患者49名)のゲノムDNAを収集した。これらの家系図から、本症は低浸透率の常染色体優性遺伝性疾患であることが明らかである。一方、HAAレクチンを利用したELISA系を確立し、IgA1ヒンジ部の糖鎖不全を評価した。健常コントロール(尿所見正常)に比して、家族性IgA腎症家系のメンバーは明らかに糖鎖不全IgAの増加をみとめた。しかし、罹患者と家系内の非罹患者に差はなかった。したがって、糖鎖不全は少なくとも部分的に遺伝的に規定されているが、発症には他の要素が必要である可能性が示唆される。本年度、集積された家系を用いてGeneChipを用いたゲノムワイド関連解析、連鎖解析を行い、少なくとも3ヶ所の疾患感受性遺伝子領域を認めた。今後、家系のさらなる集積とGeneChipを用いたゲノムワイド関連解析、連鎖解析を行う。
原子核乾板のNETSCAN法によるニュートリノの研究

名古屋大学F研究室と富士フィルムとの共同で開発した大量生産用原子核乾板OPERAフィルムを用いて、今年度5月31日に気球による宇宙線実験を行った。タウニュートリノ直接検出実験DONUTで私が開発してきたNETSCAN法と高速飛跡読取装置UTSを適用する事で、今までECCを用いた気球実験では調べる事が出来なかった大気cut off近傍の低エネルギー電子のフラックスを測定する事が可能になったためである。この宇宙線研究の分野では、検出器の面積とその検出可能な角度範囲が重要であり、その点で有利なECCが活躍してきた。問題は解析に時間がかかるという点であったが、UTSとNETSCAN法で問題が大幅に改善されてきている。そこで、私は、OPERAフィルムを用いて新型飛跡検出器Micro Segment Chamber(以下MSC)を開発、製作した。MSCは、二つのエマルションチェンバーを重ね、一方を観測中に徐々にシフトさせる事で、記録された宇宙線が何時入射したかわかるような機構をもたせたものである。計画どおり2004年5月31日、三陸大気球観測所においてMSCを気球に搭載し、上空36kmで14時間の宇宙線の記録に成功した。その後、UTSによる飛跡の読み取りを80cm2にわたって行い、NETSCAN法による電子検出をおこなった。その結果、120個の電子(エネルギーは10GeV近傍)を検出する事に成功し、そこで求めた宇宙一次電子のFLUXを12月に宇宙研究所で行われた大気球シンポジウムで報告した。現在、さらに100GeVまでの電子FLUXを調査するために、スキャン面積を増やす作業をすすめている。また電子同定の際、問題になる陽子反応によるBack Ground量を見積もるためにテスト実験を計画中である。また、過去にすでに行われているエマルションを用いた気球実験の中には、今回当てた宇宙線量の百倍以上に相当する量の露出に成功したものがある。これらの原子核乾板にUTSとNETSCAN法を適用する事で、さらに詳細な一次電子FLUXを出す事ができないか検討中である。DONUT実験では、私が開発したNETSCAN法により、全体の80%までのニュートリノ反応をECC中で見つけ出す事に成功しその中から新たに一つのタウニュートリノ反応を見つけ出した。残りの20%の反応候補探索を現在も続けているところである。今年度の4月から原子核乾板の解析手法であるNETSCAN法を改良し、NETSCAN-BACK法を開発した。これはDONUT実験において、一次粒子が一本しか発生していないニュートリノ反応事象を探索可能にする手法であり、原子核乾板に記録された飛跡のより精密な再構成を実現する事によって可能となった。タウニュートリノ反応直接観測実験DONUTにおいてこの手法を適用することで新たに80事象のニュートリノ反応の探索に成功した。これにより800事象のニュートリノ反応が蓄積していると考えられているDONUTの原子核乾板ターゲットの中で、430事象のニュートリノ反応を見つけ出したことになる。現在までに、この反応事象の中から7つのタウニュートリノ反応を確認できている。この結果については2002年9月の物理学会において口頭発表した。その物理学会後からは、タウニュートリノ反応の検出効率を確認するために430事象のニュートリノ反応についてどのようなニュートリノ反応集団の中で探索しているのか理解しようと努めている。注目している点は二点あり、ミューニュートリノと電子ニュートリノがその集団の中で予想しているとおりの比率で見つかっているのかどうか、そして見つけ出したニュートリノのエネルギー分布が予想されるものと比べて均一に見つけ出す事ができているのかである。特に前項を確かめるための電子ニュートリノの同定には、ニュートリノ反応点から発生した粒子の中に電子があるかどうかを判定する事で行う。NETSCAN法による電子同定を実際のニュートリノ実験に系統的に適用するのは初めての試みである。この電子同定手法を確立することで、今後計画されているニュートリノ振動実験OPERAへの適用、および宇宙線分野における気球実験に参加し高エネルギー一次電子線研究にも貢献していきたいと考えている。DONUT実験において反応点探索に成功した417反応全てに対し、電子ニュートリノ反応を同定するためにNETSCAN法による電子同定を行った。その結果、照射したニュートリノビーム中のμニュートリノと電子ニュートリノの存在比率に対し、反応点探索に成功したニュートリノ反応が同比率で見つかっている事を確認した。この事を踏まえて、今後τニュートリノの反応断面積を求め報告したいと考えている。一方、このDONUTでの電子同定の手法開発が成功した事により、NETSCAN法による一次宇宙電子の物理解析の可能性を追求し始めた。まず、1996年に行われた気球実験のECCをNETSCAN法により再解析し、一次宇宙電子の検出を試みた。全自動飛跡読み取り装置UTSを用いて、18cm^2の面積で飛跡の読み取りを行い、カスケードシャワーを捕らえることで10GeV以上の電子を90%以上の検出効率で捕らえることに成功した。今まで、ECCを用いた実験において200GeV以下の電子の検出を大統計で行い、そのFLUXを出す事はできなかったが、UTSおよびNETSCAN法により一次電子線FLUXを大統計で調べられる可能性を示す事ができた。その成果を2003年11月に宇宙研で行われた大気球シンポジウムで私が報告し、その結果2004年の5月に行われる気球実験に採択された。そこでは、OPERA実験で使用する予定のエマルションフイルムをrefresh処理して使用することで、10GeV以上の電子を10000個以上検出し、その電子FLUXを調べる。

その準備を今年度の1月から開始し、気球に搭載する検出器の製作を行っている。名古屋大学F研究室と富士フィルムとの共同で開発した大量生産用原子核乾板OPERAフィルムを用いて、今年度5月31日に気球による宇宙線実験を行った。タウニュートリノ直接検出実験DONUTで私が開発してきたNETSCAN法と高速飛跡読取装置UTSを適用する事で、今までECCを用いた気球実験では調べる事が出来なかった大気cut off近傍の低エネルギー電子のフラックスを測定する事が可能になったためである。この宇宙線研究の分野では、検出器の面積とその検出可能な角度範囲が重要であり、その点で有利なECCが活躍してきた。問題は解析に時間がかかるという点であったが、UTSとNETSCAN法で問題が大幅に改善されてきている。そこで、私は、OPERAフィルムを用いて新型飛跡検出器Micro Segment Chamber(以下MSC)を開発、製作した。MSCは、二つのエマルションチェンバーを重ね、一方を観測中に徐々にシフトさせる事で、記録された宇宙線が何時入射したかわかるような機構をもたせたものである。計画どおり2004年5月31日、三陸大気球観測所においてMSCを気球に搭載し、上空36kmで14時間の宇宙線の記録に成功した。その後、UTSによる飛跡の読み取りを80cm2にわたって行い、NETSCAN法による電子検出をおこなった。その結果、120個の電子(エネルギーは10GeV近傍)を検出する事に成功し、そこで求めた宇宙一次電子のFLUXを12月に宇宙研究所で行われた大気球シンポジウムで報告した。現在、さらに100GeVまでの電子FLUXを調査するために、スキャン面積を増やす作業をすすめている。また電子同定の際、問題になる陽子反応によるBack Ground量を見積もるためにテスト実験を計画中である。また、過去にすでに行われているエマルションを用いた気球実験の中には、今回当てた宇宙線量の百倍以上に相当する量の露出に成功したものがある。これらの原子核乾板にUTSとNETSCAN法を適用する事で、さらに詳細な一次電子FLUXを出す事ができないか検討中である。DONUT実験では、私が開発したNETSCAN法により、全体の80%までのニュートリノ反応をECC中で見つけ出す事に成功しその中から新たに一つのタウニュートリノ反応を見つけ出した。残りの20%の反応候補探索を現在も続けているところである。
「ゲーミングシミュレーションを用いた医療事故生成プロセス制御モデルの構築

我々は、独自の「医療事故生成プロセス防御モデル」を基盤に、心理的に巧妙に構築された「模擬体験」を使い、ゲーミングシミュレーション法による医療事故防御に向けた医療安全教育を着想した。これは失敗の許されない現場ニーズと、参加・体験型の教育ニーズの両立を可能にする教育手法である。また、想定外事態への柔軟な対応力を事故防止の鍵とみる「レジリエンスエンジニアリング」の視点を具現化すると共に、心理教育としての緻密な構成と効果測定、介入実践縦断パラダイムの検証を行う。本研究では、特に情報伝達と自己点検に関するゲーム開発に重点を置き、評価-体験-訓練の多層構造化による医療安全教育体系の構築と普及を目指す。
基本転写因子TFIIEを介するRNAポリメラーゼIIの転写制御の分子機構解析

TFIIEの機能解析TFIIEαのN末側は転写に必要な領域であり、ヒトTFIIEαの1105番目のアミノ酸領域はwinged helix領域であることが明らかになった。この領域はβサブユニットも有している構造モチーフでタンパク質間相互作用、DNA結合に関わる。この領域の点変異体を作成しin vitro転写再構成系で転写活性の測定を行ったところ、25番目のフェニルアラニンと26番目のチロシンはTFIIEβサブユニットとの結合に必要なアミノ酸である可能性が示唆された。またwinged helix因子の中で、TFIIEαサブユニットに特徴的な長いウイングが転写開始から伸長への移行に機能する可能性が示唆された。TFIIEと相互作用する因子の検索タグを付けたTFIIEαサブユニットを発現するHeLa細胞から調製した核抽出液から、タグに対する抗体カラムでTFIIEと相互作用する因子を単離した。TFIIEβサブユニットはαサブユニットと同程度の比率で精製されており、さらにいくつかの因子を含んでいた。これらの因子をMaldi-TOFマススペクトルで同定を試みたが、量的に同定できなかった。TFIIEαは細胞内で厳密に制御されているようで、過剰に発現すると細胞が生存できない。そのためマススペクトルのサンプル量を確保することは難しく、新たにタグを付けたTFIIEβを発現するHeLa細胞株を樹立し、核抽出液を調整している。1,ヒトTFIIEaのZnフィンガー領域の解析Zn^<2+>を配位する4個のシステインをアラニンに置換したC129A、C132A、C154A、C157Aと、グルタミン酸E140、アスパラギン酸D164をアラニン、リジンに置換したE140A, E140K, D164A, D164Kの点変異体を用いて、転写と他の基本転写因子との結合に関して解析した。ZnフィンガーのN末側の2個のシステインとC末側の2個のシステインで、基本転写活性に非対称性が見られ、N末側は転写開始と伸長への移行の2段階に関わり、C末側は転写開始に機能する結果が得られた。他の基本転写因子との相互作用を調べると、C129A、C132AはTFIIFβとの結合が強くなり、一方、C154A、C157Aは、TFIIHのXPBサブユニットとの結合が低下し、このことは転写結果を良く説明する。また、酸性アミノ酸の点変異に関しては、転写がむしろ促進しており、特にD164への変異は転写活性を大きく増加する。この酸性領域には未知の因子が機能している可能性が示唆され、今後これらを検索していく。2,ヒトTFIIEβのwinged helix領域の解析二本鎖DNAとの結合に関与すると考えられる3個のリジンK86、K129、K142と、この領域に特徴的な酸性アミノ酸のグルタミン酸E101、E105に点変異を導入し、転写への影響を調べた。リジンの変異は転写活性が低下し、特にK129への変異が転写に大きく影響を与えた。また、K129がK86、K142より二本鎖DNAとの結合に重要であることが分かった。一方、酸性アミノ酸の点変異に関しては、転写への影響が小さかったが、今回の一つのアミノ酸に変異を導入するだけでは、転写への影響がさほど現れなかった可能性があり、今後、複数の酸性アミノ酸に変異を導入して解析を行っていく。また、今回の解析で変異を導入した部位に関しては、RNAポリメラーゼIIのCTDのリン酸化にほとんど関与していないことが明らかとなった。今後、さらに変異体を用いて、他の基本転写因子との結合実験を行い、この領域の転写での機能を明らかにするため解析を行っていく。TFIIEの機能解析TFIIEαの蛋白限定分解により、コア領域として同定された領域の一つであるC末端酸性領域を、横浜市立大との共同でNMR構造を同定した。また、この領域は、TFIIHのサブユニットであるp62と非常に強く結合し、TFIIEがTFIIHを転写開始複合体にリクルートするのに重要な働きをしていると考えられている。最近、p62の全長548アミノ酸のうち、N末端の1-108アミノ酸の構造が報告され、PHドメインを有することが明らかにされた。このPHドメインは、シグナル伝達、細胞骨格の形成、核移行など様々な過程で働く蛋白質が持つ構造であり、p62のPHドメインも、転写活性化因子やDNA修復因子と結合すると考えられる。そこでTFIIEとp62との結合が、このPHドメインを介したものであるのか調べるため、p62の欠失変異体を作製した。TFIIEと相互作用する因子の検索1,ヒトTFIIEと相互作用する因子を検索するために、二種類のタグを付けたヒトTFIIEαを発現するHeLa細胞株を樹立した。この細胞株を作る際、タグが付いたTFIIEαを過剰に発現する細胞株はほとんどクローニングされず、発現量の低いものがクローニングされた。また、内在性のTFIIEαの発現量がやや低下することから、TFIIEαは生存に必須であり、常に発現しているとされているが、その発現量も細胞内では厳密に制御されていることが考えられる。2,今回作成した細胞から、核抽出液を調製し、タグに対する抗体カラムでTFIIEと相互作用する因子を単離した。ウエスタンブロットの結果から、TFIIHが含まれていることが分かった。

TFIIEαは、TFIIEβを除いた他の基本転写因子、およびPol IIの中で、TFIIHのサブユニットであるp62と非常に強く結合することが、in vitroの実験で報告されており、今回の結果からin vivoでも結合していることが分かった。また、ゲルの染色図から、Pol II, mediator等、転写制御に重要な働きをするとされる因子が含まれていると考えられ、現在、Maldi-TOFマススペクトルを用いて同定を行っている。TFIIEの機能解析TFIIEαのN末側は転写に必要な領域であり、ヒトTFIIEαの1105番目のアミノ酸領域はwinged helix領域であることが明らかになった。この領域はβサブユニットも有している構造モチーフでタンパク質間相互作用、DNA結合に関わる。この領域の点変異体を作成しin vitro転写再構成系で転写活性の測定を行ったところ、25番目のフェニルアラニンと26番目のチロシンはTFIIEβサブユニットとの結合に必要なアミノ酸である可能性が示唆された。またwinged helix因子の中で、TFIIEαサブユニットに特徴的な長いウイングが転写開始から伸長への移行に機能する可能性が示唆された。TFIIEと相互作用する因子の検索タグを付けたTFIIEαサブユニットを発現するHeLa細胞から調製した核抽出液から、タグに対する抗体カラムでTFIIEと相互作用する因子を単離した。TFIIEβサブユニットはαサブユニットと同程度の比率で精製されており、さらにいくつかの因子を含んでいた。これらの因子をMaldi-TOFマススペクトルで同定を試みたが、量的に同定できなかった。TFIIEαは細胞内で厳密に制御されているようで、過剰に発現すると細胞が生存できない。そのためマススペクトルのサンプル量を確保することは難しく、新たにタグを付けたTFIIEβを発現するHeLa細胞株を樹立し、核抽出液を調整している。