hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
近世日本における民間宗教者組織の研究-陰陽道組織を中心に-

(2)中近世移行期の奈良における寺社権門の近世本所への移行の実態、という大きく二つのテーマを中心に研究活動を行った。(1)については、「近世陰陽道祭祀の性格-公家社会における陰陽道をめぐって」では、古代・中世の陰陽道史研究と比べて実証的な祭祀実態の研究に欠けていた近世の陰陽道儀礼をとりあげ、願主の階層や地域という背景を考慮して内容を比較した。結果、近世の公家社会における陰陽道は古代の宮廷陰陽道の流れを直接ひくものではなく、近世京都地域での習俗的信仰として理解しうる事を確認した。なお、「林淳著『近世陰陽道の研究』書評」では、東海・関東地方の事例を中心に編まれた著書を批評・検討し、畿内を中心とした自らの研究成果との相違点を明らかにした。(2)については、中世には興福寺を中心とする巫女・神楽男・盲僧ら民間宗教芸能者の組織的編成が行われた奈良地方において、そうした中世の寺社権門による編成がどのように解体し、近世の全国的本所への包摂につながっていったのかを明らかにした。「興福寺大行事職考」では、複雑な興福寺寺内組織のなかでも、とくに春日若宮社拝殿運営と民間宗教者編成とを掌握した大行事職の存在を明らかにし、荘園経済衰退後の南都寺院において、大行事が果たした役割を分析した。そして、大行事職を通じた社辺の民間宗教者支配が興福寺に大きな経済的利益をもたらした可能性を指摘した。同時に、その経済構造が近世に転換するという見通しを示すことで、南都寺院の近世化についても論及した。また、「近世奈良の盲僧組織」では、興福寺支配下にあった地神経盲僧という宗教者集団の史料を分析し、その実態を明らかにした。地神経盲僧組織は、近世中期には集団としての独自性を維持できず消滅していったが、こうした動向を、盲人集団として拡大し、全国本所化した京都当道座と対比する事で、近世本所成立への歴史的経緯に関する新たな事例を提供した。
行動内分泌関連遺伝子の脳領域特異的DNAメチル化制御

本研究は、ホルモン情報伝達系に中心的役割を担う核内受容体を含む行動内分泌関連遺伝子について、[1]げっ歯類脳の発達・分化に伴う各種神経核のDNAメチル化情報解析、[2]遺伝子座位を共有する内在性非翻訳RNAの単離同定と組織学・生化学的解析、[3]非翻訳RNA導入によるDNAメチル化改変と表現系解析、の大別して3点よりなる。[1]について、昨年度までに同定したエストロジェン・アンドロジェン・プロジェステロン・グルココルチコイド受容体の脳領域特異的メチル化可変領域に加え、行動内分泌関連遺伝子として10遺伝子を解析した。そのうち、4つの神経分化に関わる遺伝子Map2、Nef、Tau、Vimentinのプロモーター領域にメチル化可変領域があることを明らかにした。いずれの遺伝子もラット胎生12日では細胞種に関わらず低メチル化状況にあり、生後0日目までに徐々に高メチル化へと移行していた。しかし、エストロジェン・アンドロジェン・プロジェステロン受容体とは異なり、神経核間でのメチル化差は認められなかった。項目[2][3]について、新規に取得したメチル化可変領域にオーバーラップして発現するnoncoding RNA (ncRNA)を発見した。その発現は細胞種ごとに異なっており、Map2にはセンスncRNAが、NefとTauにはアンチセンスncRNAが、VimentinにはセンスncRNAとアンチセンスncRNA両方が発現していた。各ncRNAについて、神経細胞モデルであるPC12細胞あるいは繊維芽細胞株であるNRK細胞から、内在性に発現しない細胞株を選択し、一過性に強制発現させたところ、センスncRNAではDNAメチル化改変が起こらず、アンチセンスncRNAではDNA脱メチル化が配列特異的に引き起こされることが明らかとなった。[1]げっ歯類脳の発達・分化に伴う各種神経核のDNAメチル化情報解析:マウス・ラットエストロジェン・アンドロジェン・グルココルチコイド各受容体のメチル化解析を行った。バイサルファイトシークエンス法により同定した可変領域については、調べた6つの神経核のうち、例えばラットエストロジェン受容体についてはメスの分界条床核のみが高メチル化状況にあった。一方で、マウスエストロジェン受容体については扁桃体以外ではすべて高メチル化状況にあった。同様に、ラットアンドロジェン受容体では、オスの腹内側核以外全て高メチル化状況にあったが、マウスでは、分界条床核が雌雄に拘らず低メチル化状況にあった。したがって、DNAメチル化状況には種差が存在することが明らかとなった。雌雄差については、差の認められる神経核は種に拘らず共通しており、その標的神経核は分界条床核と腹内側核であった。幼少期の早期離乳ストレスが核内受容体のメチル化を改変することもわかり、グルココルチコイド受容体の上流域においてDNA脱メチル化が認められている。[2]遺伝子座位を共有する内在性非翻訳RNAの単離同定と組織学・生化学的解析/in vitro、in vivoの系における非翻訳RNA導入によるDNAメチル化改変と表現系解析:エストロジェン・アンドロジェン・プロジェステロン各受容体のプロモーター領域に発現する非翻訳RNAの全長を取得することに成功した。これら新規RNAはラット・マウスに共通していずれも新生児期から発現していた。ラット・マウス細胞株から、部位特異的メチル化領域のメチル化されているものをバイサルファイトシークエンス法によりスクリーニングした。神経細胞様に分化可能なPC12は分化前後で、エストロジェン受容体の上流域が、高メチル化から低メチル化に誘導できた。また新規エストロジェン受容体非翻訳RNAの強制発現系で特異的に脱メチル化が誘導できることを見出した。
デマンドレスポンス評価を目的とする高時間解像度業務部門エネルギー需要モデルの開発

ピーク電力需要が観測される夏期・冬期において電力需要を削減させる、あるいは、太陽光発電出力に合わせて電力需要を増減させるデマンドレスポンスが注目されており、本研究が対象とする業務施設ストックは大きな電力需要調整能力を有すると期待されている。本研究は電力需要調整能力を推計・評価することができる業務部門エネルギー需要モデルの開発を目的としている。平成29年度は下記の開発課題5点に取り組んだ。1)全国業務施設ストックに関するデータモデリング昨年度、事務所、宿泊、医療、商業施設についてストックの把握を行った。今年度は空気調和・衛生工学会、建築設備士協会等が発行する竣工設備データに基づいて建築設備採用状況を模擬する回帰モデルを開発し、日本全国の空気調和設備別のストックの推計を終了した。2)業務施設の稼働状況のモデル化パーソントリップ調査を用いて、業務施設利用者エージェントを生成して滞在時間を模擬し、現実的な設備稼働状況の想定を可能とした。3)エネルギー需要モデルの開発昨年度までに、エネルギー需要を推計するソフトウェアとハードウェアの準備を終えた。今年度は、エネルギー需要推計に用いる入力条件として、日本全国の業務施設ストックを代表する多数の建物モデルを開発した。これにより、日本全国の事務所、宿泊、医療、商業、飲食、文教ストックのエネルギー需要推計を行うことができるようになった。4)エネルギー需要モデルの精度検証3)で開発したモデルをDECCおよびSIIにより公開されている実態データと比較して、精度検証を行った。5)デマンドレスポンスの評価デマンドレスポンスの有力な技術として、電気駆動給湯機の蓄熱を用いた電力需要調整がある。これを考慮するため、給湯需要および給湯用エネルギー消費を推計するモジュールを開発した。1)全国業務施設ストックに関するデータモデリングとサンプリング手法の確立については、昨年度までに全国業務施設ストックのデータの整備が終了している。建築設備に関する竣工設備データに基づく回帰モデル開発の方法論を確立し、日本全国の業務施設を対象として空気調和設備ストックの推計が完了した。この内容でEnergy and Buildings誌に論文が採択された。2)業務施設の稼働状況のモデル化については、昨年度は事務所ビルのみを対象としていたが、今年度は考慮した全用途における設備稼働状況を模擬できるようになった。3)で開発している都市圏単位のエネルギー需要モデル開発では、専門家へのヒアリングを行い、日本の業務建築ストックを代表する建築、設備の仕様を反映した建物モデルを開発することができた。4)の精度検証については、現在進行中であり、若干精度が低い建物群があることを確認し、対応策を検討している。5)として実施した内容は今年度から実施したものであるが、事務所、宿泊、医療についてはモデル化が終了した。以上のようにおおむね順調に進展していると考えられる。平成30年度以降は実施内容1)5)を継続する。1)全国業務施設ストックに関するデータモデリングでは、空調用途以外についても設備採用状況を体系的に調査し、基準年(2013年を想定)におけるエネルギー需要のベースラインの推計、2030年を時間断面とする将来推計において、適切な技術水準を設定できるようにする。2)業務施設の稼働状況のモデル化では、滞在状況と設備稼働状況に関する関係性について情報収集し、時系列のエネルギー需要の挙動の再現精度を向上させる。また、3)エネルギー需要モデルの開発では、対象ストックにおける全エネルギー用途を対象としてエネルギー需要を推計できるようにする。昨年度までに空調、照明・コンセントについてはエネルギー需要を推計することができるようになったが、給湯、調理・厨房、その他用途については不十分なものがある。実態データ調査や文献調査を行い、エネルギー需要推計モデルを完成させる。加えて、計算対象とする都市圏や国土に立地する業務施設を数万件程度に縮約して建物モデルを生成するサンプリング手法を確立する。昨年度までにストックを代表する建物モデルは完成したが、建物モデルの数が少ない場合、エネルギー需要の動的挙動が不自然になる危険がある。これを避けるため、地域スケールの推計であっても代表モデルを複数生成し、異なる居住者滞在条件での推計結果を重ね合わせて地域全体のエネルギー需要とする必要がある。この方法論を確立する。4)エネルギー需要モデルの精度検証では、引き続きDECC、SIIの実態データを用いて評価を行い、精度検証を完成させる。5)デマンドレスポンスの評価では、業務部門が有する調整可能な電力需要を定量化し、電力需要の調整による電力システムの経済性や安定性への貢献を評価する。平成28年度は上記の開発課題3点に取り組んだ。1)全国業務施設ストックに関するデータモデリング総務省統計局が整備する法人土地・建物基本調査、市販のGISデータに基づいて事務所、宿泊、医療、商業施設についてストックの把握を行った。加えて、空気調和・衛生工学会、建築設備士協会等が発行する竣工設備データに基づいて建築設備採用状況を模擬する回帰モデルを開発し、日本全国の空気調和設備別のストックを推計した。2)業務施設の稼働状況のモデル化パーソントリップ調査を用いて、居住地区や年齢、性別、ライフステージ、職業、勤務地などを持つ数十万から数百万程度のエージェントを生成し、その滞在場所、利用施設を時系列で推計した。これにより現実的な設備稼働状況の把握が可能となった。また、稼動スケジュールが事務所ビルのエネルギー需要に及ぼす影響を評価した。

3)エネルギー需要モデルの開発本研究ではアメリカDOEが開発したEnergyPlusを用いてエネルギー需要を推計するモデルを開発した。モデルに必要となるソフトウェア開発、サーバ調達などを行い、日本全国の業務施設を対象とした推計ができる環境が整備された。開発したソフトウェアを用いて事務所、宿泊、医療、飲食ストックのエネルギー需要推計を行った。1)全国業務施設ストックに関するデータモデリングとサンプリング手法の確立については全国業務施設ストックのデータが利用可能であり、主用途についてデータを得ることができた。また、竣工設備データに基づく回帰モデルにより、日本全国の業務施設を対象として空気調和設備ストックの推計を行うことができた。この内容で国内会議での発表1件があり、雑誌論文への投稿を終えている。2)業務施設の稼働状況のモデル化についても国際会議論文1件を発表済みである。現在、3)で開発している都市圏単位のエネルギー需要モデルへの統合化を行っている。3)についてはサーバの調達、ソフトウェア開発について遅れがあったが、年度内にエネルギー需要の推計を行うことができるまでに至った。ピーク電力需要が観測される夏期・冬期において電力需要を削減させる、あるいは、太陽光発電出力に合わせて電力需要を増減させるデマンドレスポンスが注目されており、本研究が対象とする業務施設ストックは大きな電力需要調整能力を有すると期待されている。本研究は電力需要調整能力を推計・評価することができる業務部門エネルギー需要モデルの開発を目的としている。平成29年度は下記の開発課題5点に取り組んだ。1)全国業務施設ストックに関するデータモデリング昨年度、事務所、宿泊、医療、商業施設についてストックの把握を行った。今年度は空気調和・衛生工学会、建築設備士協会等が発行する竣工設備データに基づいて建築設備採用状況を模擬する回帰モデルを開発し、日本全国の空気調和設備別のストックの推計を終了した。2)業務施設の稼働状況のモデル化パーソントリップ調査を用いて、業務施設利用者エージェントを生成して滞在時間を模擬し、現実的な設備稼働状況の想定を可能とした。3)エネルギー需要モデルの開発昨年度までに、エネルギー需要を推計するソフトウェアとハードウェアの準備を終えた。今年度は、エネルギー需要推計に用いる入力条件として、日本全国の業務施設ストックを代表する多数の建物モデルを開発した。これにより、日本全国の事務所、宿泊、医療、商業、飲食、文教ストックのエネルギー需要推計を行うことができるようになった。4)エネルギー需要モデルの精度検証
Ｔ細胞の核酸認識機構の解明

我々は核酸が抗菌ペプチドあるいはヒストンと複合体を形成することにより、T細胞内に取り込まれ、共刺激を誘導し、T細胞の活性化を増強することを明らかにした。さらに死細胞から放出される核酸が寄生虫の排除やアレルギー応答に重要なTh2細胞への分化を誘導することを明らかにした。また、核酸によるTh2細胞への分化の分子機構を調べた結果、Th1細胞への分化を誘導すると同時にTh2関連遺伝子(GATA-3、IL-4、IL-5、IL-13)の発現を抑制する転写因子T-betの発現が核酸刺激により強く抑制され、それに伴って、Th2関連遺伝子の発現上昇が誘導されることを明らかにした。T細胞が核酸を認識し、T細胞の活性化を増強することを示してきたが、その生理的意義に関しては不明なままであった。そこで本研究ではその生理的意義に関して検討した。ナイーブCD4陽性細胞は活性化すると体内に侵入した病原体や抗原の種類に応じて適切なヘルパーT細胞に機能分化することが知られている。そこで核酸刺激がヘルパーT細胞の分化に及ぼす影響を調べたところ、核酸刺激によりTh2細胞への分化が誘導されることが明らかになった。生体内において核酸の供給源は死細胞であると考えられているため、ナイーブT細胞を死細胞存在下で活性化したところ、Th2細胞への分化が促進することが認められた。DNA分解酵素の添加により死細胞によるTh2細胞への分化が抑制されることから死細胞由来のDNAがTh2細胞の分化を誘導していることが示唆された。これまでTh2細胞への分化にはIL-4が重要な役割を果たしていることが知られているが、核酸によるTh2細胞への分化もIL-4受容体欠損マウス由来のT細胞ではほとんど認められなかったことから、核酸によるTh2細胞への分化もIL-4依存的であることが分かった。実際、TCR刺激による初期のIL-4産生が核酸刺激により増強し、逆にTh1サイトカインのIFN-gの産生が減少することを見出した。次に核酸刺激による初期のIL-4産生の分子機構を調べた結果、IL-4の発現が上昇する前にTh2関連遺伝子の発現を抑制する転写因子T-betの発現が著明に減少し、その後にIL-4やGATA-3などのTh2関連遺伝子の発現が誘導されることが明らかになった。以上のことから核酸に刺激されたT細胞はT-betの発現抑制を介して、IL-4の産生を誘導し、自己分泌したIL-4によりGATA-3とTh2サイトカインの発現がさらに増強し、Th2細胞への分化が確立することが明らかになった。T細胞における核酸認識機構が自然免疫系とは異なることを明らかにしてきたが、その受容体と下流のシグナル伝達機構に関しては不明な点が多い。そこで本研究では強い共刺激活性を示すGpC DNAに特異的に結合するタンパクをプロテオーム解析により同定した。しかしながら、それらの遺伝子の発現をshRNA法によりノックダウンしても、核酸共刺激によるT細胞の活性化に変化は認められなかった。我々はLL37とゲノムDNAの複合体がT細胞内に取り込まれ共刺激を誘導できることを明らかにしてきたが、LL37以外にも核酸を凝集させる因子があることが予想されるため、プロテオーム解析によりその同定を試みた。その結果、いくつかのヒストンファミリー分子が同定された。そこでヒストンとゲノムDNAの複合体でT細胞を刺激したところ、リンカーヒストンのH1では共刺激を誘導できなかったが、コアヒストンのH2A、H2B、H3、H4では共刺激の誘導が認められた。これと相関するようにコアヒストンとゲノムDNAの複合体はT細胞への強い取り込みが認められたが、ヒストンH1ではほとんど取り込みが認められなかった。コアヒストンとゲノムDNAの複合体がエンドソームとリソソームに蓄積するのを共焦点顕微鏡で観察した。さらにヒストンH2AとH3はTLRリガンド+IFN-g刺激により、樹状細胞から分泌されることも明らかにした。さらにナイーブCD4+細胞を核酸存在下で活性化するとTh2サイトカインの産生は増加するが、逆にTh1サイトカインのIFN-g産生は著明に減少することを見出した。当初の目的の核酸受容体の同定には至らなかったが、ゲノムDNAと結合し、T細胞への取り込みを促進し、共刺激を誘導する因子としてコアヒストンを同定することができた。コアヒストンは炎症刺激に伴い、樹状細胞から分泌されるため、炎症時に死細胞から放出されたDNAと複合体を形成することにより、T細胞の活性化を増強することが示唆された。また、核酸刺激の新規の機能としてTh2サイトカインの発現を誘導することを発見したことは、T細胞の核酸認識の生理的意義を理解する上で興味深い知見を得ることができた。

核酸で刺激されたT細胞はTh2型のサイトカインを優勢的に産生することから、核酸刺激がTh2細胞への分化を促進することが予想される。そこで核酸刺激がTh2細胞分化に及ぼす影響を検討するとともに、その分化誘導の分子機構を調べる。核酸受容体の同定に関してはデータベース解析により決定した核酸受容体候補分子の遺伝子欠損マウスの表現型解析を行う。該当なし
現代ロシアの文化外交と美術館―「記憶の政治」のメディア分析―

本研究は現代ロシアの美術館が文化外交の中で、いかにロシアの歴史的イメージの創出に寄与しているかを明らかにして、「記憶の政治」研究の深化を図る。そのために、エルミタージュ美術館を主たる分析対象として、1現代ロシアの美術館と愛国、2現代ロシアの美術館とヨーロッパ、3現代ロシアの美術館と日本の三項目から分析と考察を進める。事業期間中、サンクトペテルブルク、モスクワ、アムステルダムなどで現地調査を実施しつつ、学会報告による中間発表、査読誌への論文投稿による成果公開につなげる。その成果を集約し、事業期間終了後に単著として刊行することが最終目標である。
硫化水素による神経細胞保護の可能性-初代神経細胞での検討-

対麻痺は胸部大動脈手術の重要な術後合併症であるが、その病態は解明されていない。今回、初代海馬神経細胞を用いて虚血再灌流後の硫化水素による神経保護作用のメカニズムに関する研究を行った。硫化ナトリウムおよびGYY4137を硫化水素ドナーとして使用した。しかしながら、治療濃度においても培養神経細胞に対する保護作用は弱かった。硫化水素で誘導されるタンパク質同定をDNAマイクロアレイにより網羅的に行った。しかし、アレイの結果では系統だって遺伝子の変化がおこっている事が確認できなかった。対麻痺は胸部大動脈手術の重要な術後合併症であるが、術後対麻痺の病態は解明されていない。マウス脊髄神経細胞傷害モデルを用いた研究(Stroke 2011)で、虚血再灌流後に低濃度の硫化水素吸入を行うと神経細胞保護効果が得られた。しかし、硫化水素の神経保護作用についてメカニズムは不明である。今回、初代海馬神経細胞を用いて虚血再灌流後の硫化水素による神経保護作用のメカニズム解明と硫化水素による治療の可能性に関する研究を行った。硫化ナトリウムは低濃度(10μmol/L)の場合、神経細胞死はほとんど生じないが、高濃度(100μmol/L)の場合には薬剤の添加により神経細胞死を来すことが判明した。実験結果から硫化ナトリウム添加濃度を10μmol/Lとして硫化水素による低酸素環境下における細胞保護効果についての検討を行った結果、硫化ナトリウムを添加すると低酸素環境下による神経細胞死を減少させることが示唆された。一方で、硫化ナトリウムが高濃度では、細胞死が誘発された。これは、従来の報告とは異なるものである。本検討ではin vivoにおける組織学的検討と比較すると神経保護作用が弱く、低濃度長時間の硫化水素暴露というin vivoモデルと異なった。そのためin vivoモデルに近づけるため、新たなドナーとしてGYY4137を使用した。GYY4137では高濃度硫化水素を添加しても硫化水素による細胞死は誘発されず、細胞保護効果が示唆された。さらに硫化水素により誘導されるタンパク質の同定をおこなうためDNAマイクロアレイにより網羅的に遺伝子発現を定量化した。アレイの結果では系統だって遺伝子の変化がおこっている事が確認できなかった。遅発性対麻痺発症マウスモデルに対して低濃度硫化水素吸入がどのような効果を発揮しているのか、低酸素暴露初代培養神経細胞に対するGYY4137添加では確認する事ができなかった。雌性C57/BL6系マウス胎生18日の胎仔から海馬を同定し、海馬のみを摘出、海馬初代神経細胞培養を行い研究を行った。海馬初代神経細胞に対する低酸素暴露による細胞死について検討を行ったところ、酸素濃度1%という低酸素環境においてはその暴露時間により、細胞死が誘発されることが判明した。それぞれの細胞に対して硫化水素のドナーである硫化ナトリウム(Sodium Sulfide;Na2S)を添加する実験を行った。添加濃度は0, 10, 100, 1000 μmol/Lとした。まず、酸素濃度が21%の環境下で添加する硫化ナトリウムの神経細胞に対する細胞毒性を評価した。硫化ナトリウムは低濃度の場合は神経細胞死はほとんど生じないが、高濃度の場合(具体的には100μmol/L)には薬剤の添加により神経細胞死を来すことが判明した。そのため硫化ナトリウムの添加濃度は10μmol/Lが適切であると考えられた。そのため、硫化ナトリウム添加濃度を10μmol/Lとして硫化水素による低酸素環境下における細胞保護効果についての検討を行った。その結果、硫化ナトリウムを10μmol/L添加すると低酸素環境下による神経細胞死を減少させることが示唆された。一方で、硫化ナトリウムが100μmol/L以上の高濃度では、低酸素と高濃度硫化ナトリウムそれぞれの生存細胞数がより少なくなり、神経細胞毒性という点において相加的に有害作用が存在する可能性も示唆された。今年度の実験結果からは硫化ナトリウムの添加濃度は10μmol/Lが適切であると考えられた。その結果、硫化ナトリウムを10μmol/L添加すると低酸素環境下による神経細胞死を減少させることが示唆され、計画通りの結果を得た。治療濃度と有害濃度について近接しているため、濃度についてより詳細な検討が必要であると考えられた。そのため、現在、硫化ナトリウム濃度10μmol/Lから100μmol/Lの間の濃度の検討を行っている。結果自体は計画通り神経細胞保護効果が示唆されたが、より有効な濃度が存在する可能性があるため、次の段階であるTdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling染色を行い、アポトーシスの検出と硫化水素によるアポトーシス抑制に対する効果を確認する検討がまだ開始できていない。

次年度直ちに開始する計画である。直ちに開始できる環境にあるため、達成度はやや遅れているとした。最適な硫化ナトリウム濃度の検索を行うのと同時にTUNEL染色を行い、アポトーシスの検出と硫化水素によるアポトーシス抑制に対する効果を確認する計画である。さらに硫化水素により誘発される遺伝子の同定をおこなう計画である。具体的には低酸素暴露後の初代海馬神経細胞より、mRNAを抽出しDNAマイクロアレイにより網羅的に遺伝子発現を定量化し、硫化水素によって変化する遺伝子を同定する計画である。また、DNAマイクロアレイにより確認できた遺伝子について、解析結果からRT-PCRを行い遺伝子の発現を確認する。また、westren blottigによってタンパク質の発現も確認する計画である。westrenblottigによって確認できた場合、ノックアウトマウスを用いた検討を行い、低酸素における硫化水素の働きに関して明らかにする計画である。マウス購入費、試薬購入費として使用する計画である。また、当施設ではDNAマイクロアレイは行っていないため、委託検査を行い、結果を得る計画である。それ以外の実験に関してはすべて現有の機材にて行うことが可能であり、新たに機器を購入する計画はない。また、実験結果の公開のため、学会発表を国内学会と国際学会をそれぞれ1回計画している。さらに、論文作成時の英文校正も行う計画である。
疾患モデル動物を用いたグリア・ニューロン相互作用の解析

アストロサイト,ミクログリアなどグリア細胞は最近の研究から従前考えられていたような神経細胞の単なる栄養細胞,支持細胞でなく,神経細胞と積極的な物質的相互作用を行うことで神経情報伝達の処理,神経細胞の機能発現に深く関わっていることが明らかになってきている。また,アストロサイト,ミクログリアは外的刺激により反応性にその形態と機能が変化することが知られており,この反応性の解明が神経細胞死や神経変性疾患など脳の病態形成機序を考える上で極めて重要であると考えられている。昨年度よりマウス脳由来培養アストロサイトを用いて,薬剤刺激によるアストロサイトの反応性に特異的に関わるG蛋白質共役型受容体(GPCR)の一つとしてVPAC2を同定してきたが今年度はVPAC2の薬剤による誘導がグリア型グルタミン酸トランスポーターの発現増加を引き起こすことを見出した。他方,ミクログリアについては,炎症性物質と考えられていたブラジキニンにミクログリアからの炎症性サイトカインの遊離を抑制する作用があることを予想外な結果として見出した。またブラジキニンはミクログリアに発現するGPCRの一つであるプラジキニン受容体に作用しミクログリアの遊走を誘導することを発見した,さらに,この遊走能はNa^+/Ca^<2+>交換体の逆向き作用によるCa<2+>流入に依存することが判明した。以上の成果は,グリア細胞の機能にGPCRが深く関わっていることを示唆する。その他,アストロサイト優位に発現するGPCRとしてNtsr2を同定し一昨年度来解析してきたがその成果を論文として報告した。グリア・ニューロンの相互作用を分子レベルで明らかにするために自家開発したI93M変異型ubiquitin C-terminal hydrolase L1 (UCH-L1)発現マウスを利用して神経細胞側の病態に応じたグリア側因子の変動を中脳領域で発病前、発病初期、発病後期に分けてジーンチップで解析した。I93M変異型UCH-L1発現マウスは加齢依存的に黒質ドーパミン産生細胞の脱落と線条体ドーパミン含量の低下を呈する新規パーキンソン病モデルマウスである。その結果、病理学的変化が細胞レベルで生じる以前からグルタミン合成酵素などグリアに発現する遺伝子が多数変動していることを見出した。この結果は、神経疾患の発症前において既に神経細胞側の遺伝子・蛋白質レベルでの変化がグリア細胞側に伝えられている可能性を示唆する。このグリア・ニューロンのダイナミックなクロストークの存在は神経細胞だけに特化せずグリアを含むグリアーニューロン相互作用を標的にした治療戦術の展開の必要性を示唆する。また、同定された因子の中には結晶構造の情報が利用できるものがありグリア細胞を標的にする薬剤開発も実現するためにin silico drug screening系を構築した。上記の成果に加え、新規のオリゴデンドロサイト特異的因子としてAIGP3を同定した。AIGP3はミエリンラフトに存在する可能性が高く、細胞生物学的解析からAIGP3は発生初期のオリゴデンドロサイトから成熟オリゴデンドロサイトまで発現していることが明らかとなった。AIGP3はオリゴデンドロサイトの特異的機能に密接に関連した因子の可能性が示唆されるとともに、AIGP3がオリゴデンドロサイトの良きマーカー合子になる可能性が示された。今年度はカイニン酸誘発てんかんラットを用いNa^+依存性高親和性グルタミン酸トランスポーターの機能形態学的解析を行った。Na^+依存性高親和性グルタミン酸トランスポーターは神経細胞及びアストロサイトに存在し、細胞外の過剰なグルタミン酸を細胞内に取り込む事により興奮毒性から神経細胞を保護する役割を担うと考えられている。大脳では、皮質アストロサイトにGLT-1とGLASTが発現しているが、ヒト病理組織及び疾患モデル動物を用いたこれまでの研究から発生期やてんかん脳、脳虚血、腫瘍化に伴い、その発現が多様に変化していることを発表してきた。これらの病態のうち、ヒトてんかん脳において観察されたGLT-1の細胞内局在変化に着目し、今年度はカイニン酸誘発てんかんラットを作製した。カイニン酸腹腔内投与後約2時間で観察されるけいれん重積時、GLT-1は、蛋白量は変化せず、免疫電顕でアストロサイトの細胞体や血管周囲の突起に染色性がみられたが、神経周囲に存在する腫脹したアストロサイトの突起には発現が認められなかった。すなわちGLT-1は細胞障害性浮腫の初期に内在化しグルタミン酸取り込みが低下する可能性が示唆された。グルタミン酸トランスポーターはin vitroにおいてプロテインキナーゼや成長因子存在下でサブタイプ毎に細胞内局在の調節が異なると報告されている。Membrane traffickingによるグルタミン酸取り込み調節が脳病巣でどのように制御されているか疾患モデル動物を使って次年度は検証したい。今年度はアストロサイトにおけるG蛋白質共役型受容体の機能解明をめざして細胞生物学的・発生工学的解析を行った。G蛋白質共役型受容体(GPCR)はゲノム上最大のファミリーを形成する。医療用薬剤の約60%はGPCRを標的にすると考えられており、創薬の重要な標的分子でもある。他方、アストロサイトに代表されるグリア細胞は、これまでの研究から、神経細胞の単なる支持細胞でなく神経細胞と積極的な物質的相互作用を行い、神経情報伝達の処理に深く関わっている細胞であることが明らかになっている。さらにアストロサイトには多様性・領域特異性が存在し、高度なグリア・ニューロン回路網を形成する要素となっていることも示されつつある。

そこで、マウス海馬由来培養アストロサイト、大脳皮質由来培養アストロサイト、扁桃体由来培養アストロサイトに発現するGPCR同定するために包括的定量的PCR法を適用した。その結果、およそ20種以上のGPCRが各アストロサイトでその発現が高まっていることが判明した。その発現パターンは各アストロサイトで異なり、GPCRの発現においてもアストロサイトの多様性が検出される結果となった。現在同定されたGPCRの機能解析を進めているが、そのなかの一つであるニューロテンシン2型受容体(Ntsr2)は、神経細胞での発現が低くアストロサイトに特異性が極めて高かった。扁桃体由来培養アストロサイトにおいてもその高度な発現が確認されたことから、Ntsr2遺伝子欠損マウスについて扁桃体機能を反映すると考えられるfear conditioningtestなどの行動学的解析を行ったところ、野生型対照に比べ恐怖記憶の形成が障害されていることが判明した。この結果はアストロサイトに特異的に発現するGPCRが扁桃体機能の制御に関わっていることを示す一例と考えられる。昨年度に引き続きアストロサイトにおけるG蛋白質共役型受容体の機能解明をめざして細胞生物学的・発生工学的解析を行った。G蛋白質共役型受容体(GPCR)はゲノム上最大のファミリーを形成する。医療用薬剤の約60%はGPCRを標的にすると考えられており、創薬の重要な標的分子でもある。他方、アストロサイトに代表されるグリア細胞は、これまでの研究から、神経細胞の単なる支持細胞でなく神経細胞と積極的な物質的相互作用を行い、神経情報伝達の処理に深く関わっている細胞であることが明らかになっている。さらにアストロサイトには多様性・領域特異性が存在し、高度なグリア・ニューロン回路網を形成する要素となっていることも示されつつある。そこで、昨年マウス海馬由来培養アストロサイト、大脳皮質由来培養アストロサイト、扁桃体由来培養アストロサイトに発現するGPCR同定するために包括的定量的PCR法を適用した。その結果、各アストロサイトで発現が高まっているGPCRが同定され、そのなかの一つであるニューロテンシン2型受容体(Ntsr2)はアストロサイトに特異性が高く、Ntsr2遺伝子欠損マウスでは扁桃体機能を反映すると考えられるfear conditioningtestにおいて野生型対照に比べ恐怖記憶の形成が障害されていることを見出した。今年度は、神経系前駆細胞で高発現するGPCRとしてPAC1を同定し、その活性化が引き起こす細胞作用の一つとして栄養因子存在下の神経系前駆細胞増殖をさらに増強させる活性があることを見出した。また、PAC1に近縁のVPAC2の発現が反応性刺激によりアストロサイトで上昇することを見出した。これらの結果はアストロサイトや神経系前駆細胞に高発現するGPCRがアストロサイトの増生に関わる可能性を示唆する。アストロサイト,ミクログリアなどグリア細胞は最近の研究から従前考えられていたような神経細胞の単なる栄養細胞,支持細胞でなく,神経細胞と積極的な物質的相互作用を行うことで神経情報伝達の処理,神経細胞の機能発現に深く関わっていることが明らかになってきている。
家系図をキーインデックスとしたデータベースの手法の開発と検証

本研究の主要な成果は、親族オントロジーの研究およびアプリケーションAlliance3.3の開発である。前者としては、人類学調査における個人情報に関する不詳データをグラフィクスとしてどのように取り扱うかの基本的なロジックの研究である。具体的には、どのような条件をデフォルトとすればコンピュータ・グラフィクスとして表現可能であるかについての研究である。後者としては、今期の開発の焦点は、親族オントロジーの研究をふまえて、直感的な入力方法を開発することであった。開発されたアプリケーションは、下記のウェブサイトからダウンロードが可能である。また、親族データベースや親族研究に関して、国際連携研究を行い、国内外において成果報告を行った。本研究は、(1)文化人類学における「親族研究」の再構築のための教育ツールキットとしての「親族データベースおよび家系図作成アプリケーション」の開発および親族関係のオントロジーの構築をおこなう。(2)先住民のおかれている現代的課題、権利回復と文化的多様性の維持のために、「親族知識」のデータベース化を通して寄与する。以上2点を目的として掲げた。平成22年度、まず、(1)の目的遂行のために、親族データベースの継続開発をおこなった。オントロジーおよびデータベース構造の開発にあたっては、分担研究者の遠藤とともにWikiを構築するとともに、8回の研究会を重ねた。その結果、今年度は、先の開発からデータベース構造を含め一新するために、移行プログラムの開発をおこなう必要を見出し、そのための開発に集中することとした。また、親族研究の教育ツールキット開発の一環として、東京外国語大学アジア・アフリカ言語文化研究所(22年10月16日、第6回Fieldnetワークショップとして)、および、まるはち文化人類学研究会(名古屋大学、23年2月19日、特別例会として)において、ワークショップをおこなった。(2)では、オーストラリアを中心とした研究者との情報交換の他に、「第21回歴史科学会議」(アムステルダム)において、分担研究者の川口とともに、"Sharing Genealogical Spaces : A New World with the Alliance Database System"と題して発表をおこない、とりわけ、データベース構造についても各社会文化の状況を反映したものでなくてはならず、文化的多様性を意識した開発を意識的に実践しなければならないことを主張した。以上をふまえ、次年度以降の新たな展開に期したい。平成23年度は、開発業者(本研究が開発を行っている親族データベース「アライアンス」のソフトウェア開発を依頼)、および、分担者の遠藤とともに、合計12回の会合を持ち、本年度の開発の主たる目的として掲げた親族データベースのためのグラフィカルなインプットメソッド開発にあたった。この開発は、今期において最終的な到達目標として掲げるWebサービスとしての「アライアンス」の開発の基礎要件となる部分である。また、遠藤とは、「kinship ontology」(家系図のグラフィカルな表示のための基礎要件)に関する議論をかさね、その一部については、今回のインプットメソッドに実装することができた。新たなインプットメソッドの公開には至ってはいないが、平成24年度前半期において、バグフィックス等をおこなって、公開の予定である(専用サイトからの無償ダウンロード)。平成24年度の最大の成果は、親族データベース「Alliance3.3」の開発を完了、3月11日に発表、即日公開を行なったことにある。開発の要点は、親族オントロジーをふまえた新たなインプットメソッドの公開版への実装である。なお、あわせてセキュリティの確保のため公開サーバを更改した。本研究が掲げた人類学の「親族研究」教育ツールキットとしてのオントロジーの開発は、残念ながら未完のまま終えることとなった。今後を期したい。予定していたグラフィカルなインプットメソッドのプロトタイプを作成し、また、「kinship ontology」の開発についても、順調に推移している。また、国際学会で発表を行った。24年度が最終年度であるため、記入しない。平成24年度においては、「アライアンス」ソストウェアの公開版の開発を目標とすると同時に、「kinship ontology」の公開を通じて、人類学における親族研究および人類学教育に資することを目指す。なお、9月に京都で行われる研究成果の国際学会において、アライアンスプロジェクトの成果を発表するとともに、公開版リリースのアナウンスを予定している。
規則性周期構造を有するポリエステル共重合の高効率合成法の開発と高性能化技術の確立

前年度の成果によって得られたモノマーの分子構造およびオリゴマーの連鎖長の異なる8シリーズ、56種類のポリエステルアミド周期共重合体試料の物性評価を行うとともに、結晶構造・固体構造の解析を行った。周期性共重合体の中には、熱処理により複数の融解挙動を示すものが存在することを見出した。周期性共重合体の融解挙動における熱処理効果を詳細に調べた結果、熱処理後に見られる融解温度の急激な増加は、ラメラ結晶の厚化と、それに伴う結晶領域中へのアミドユニットの取り込みに起因することが明らかとなった。すなわち、結晶の大きさをコントロールすることで、周期性共重合体の熱的性質を制御できることを見出した。また、周期性共重合体の力学的性質を評価したところ、周期連鎖の長さに依存して、やわらかい性質から硬い性質まで幅広い物性を示すことが明らかとなった。アジピン酸および炭素数が6のジオールとジアミンから合成した周期性共重合体の単結晶および配向結晶性フィルムを調製し、その結晶構造を解析に取り組んだ。電子線及びX線回折測定の結果、周期性共重合体の結晶は、単位格子中に4本のセグメントを有しており、そのセグメントは周期連鎖中の1ユニットに相当することが明らかとなった。さらに、コンピュータプログラムによる結晶構造及びパッキング解析シミュレーションを行ったところ、周期性共重合体の結晶が、エステルユニットに起因した単位格子を有すると同時に、その格子中でアミドユニットに起因した分子鎖折りたたみシート構造を形成していることが明らかとなった。また、同じユニットから構成されたポリエステル、ポリアミド、周期性共重合体結晶の分子モデルの比較から、熱安定性に優れた分子鎖設計に向けた基礎的知見を得ることに成功した。生物資源であるジカルボン酸(コハク酸やアジピン酸)とジオール(1,4-ブタンジオールなど)との縮合反応により調製したオリゴマーを、クロマト分離によって単一分散エステルオリゴマーとして分別回収し、この単一分散エステルオリゴマーとジアミン(1,4-ジアミノブタンなど)を縮合させるという手法により、目的とする周期性ポリエステルアミド共重合体の合成を行った。二段階目の縮合反応(エステルオリゴマーとジアミンとの縮合反応)において、平衡を鎖長伸長側に移動させることを目的として、エステルオリゴマーの反応性分子末端をフェニルエステル化処理を施した。フェニルエステル化したエステルオリゴマーを用いることにより、生成物の分子量が格段に上がり(数平均分子量2万以上)、フィルム成型可能な高分子量物を生成することに成功した。ジオール成分およびジアミン成分の炭素鎖数をそれぞれ36の間で変化させ、それぞれの組み合わせにより、合計8種類の周期性ポリエステルアミド共重合体を調製し、その熱的性質と結晶構造解析を行った。ポリエステルアミドの融解温度は、ジオール・ジアミンの炭素鎖数の組み合わせおよびエステル・アミドの連鎖長により大きく変化した(45258°C)。しかしながら、いずれの共重合体もエステルユニットのみから成る高重合物の融解温度よりも高温で融解することを明らかにした。これは、周期的に導入したアミドユニットがエステルユニットとともに結晶中に取り込まれ、分子鎖間水素結合を形成したためであると結論できる。特に炭素数4のジオール・ジアミンを用いた場合に、極めて高温領域(200°C以上)で融解がおこることがわかった。これは、炭素数4のジオール・ジアミンの組み合わせが、ポリエステルアミド結晶中の分子鎖間水素結合を最も効率的に形成できるためであることがわかった。
新生児低酸素性虚血性脳症に対する低体温と水素吸入ガス併用療法の効果に関する研究

新生児低酸素性虚血性脳症の動物モデルとして、新生仔豚を対象に負荷時の脳血液量を指標とした低酸素負荷を行い、低体温療法、ラジカルスカベンジャー(エダラボン)と低体温併用療法の効果、および水素ガス吸入療法の安全性の検討を行った。その結果、無治療の蘇生後24時間での脳血液量増加と低振幅脳波持続時間は正の相関を示したが、低体温療法では負の相関を示した。また低体温療法と併用療法は無治療と比較し、大脳皮質および白質障害は少なかったが、低体温療法のみと併用療法は中枢組織障害の差異は認めなかった。さらに水素ガス吸入は、体・脳循環、脳波及び血液ガスへの影響がなく、その使用上の安全性が確認された。新生仔豚低酸素性虚血性脳症(HIE)モデル22頭を、無治療群13頭と低体温(HT)群9頭の2群に群分けし、低酸素虚血負荷を行った。低振幅脳波(LAEEG)になるまでFiO2を下げ、LAEEGになった後20分は平均血圧が負荷前の60%以上、その後さらに510分は50%以上になるようFiO2を下げ、蘇生した。HT群は蘇生直後よりHT(直腸温で33.034.0°C)を施行した。負荷中から蘇生後6時間までの、脳血液量(CBV)、脳波(aEEG)を解析した。その結果、HT群では全例CBVは蘇生後減少した。新生仔豚HIEモデルの、無治療群の蘇生後の脳血液量増加(ΔCBV)とLAEEG持続時間は正の相関を示すが(r=0.69, p=0.01)、HT施行中のΔCBVとLAEEG持続時間は負の相関を示した(r=-0.76, p=0.02)。両群の回帰直線を比較すると、LAEEG持続時間が長いほど蘇生後ΔCBVが大きい(無治療では増加、HTでは低下)。このことは、LAEEG持続時間が長い症例ほど脳循環の自動調節能の障害が大きくHTによる脳循環への影響を受けやすい可能性を示唆している。今後は、この両群の相関関係を病理も含めて解析し、CBV値や変動値のHTに対する適応基準や、効果判定への有用性を検討する予定である。また低体温療法とラジカットの併用療法の研究も進んでいるため、この効果判定や他の併用療法との効果判定を行う予定である。新生児低酸素性虚血性脳症(HIE)の新生仔豚モデルを用いて、無治療群13頭、低体温療法群(HT)群9頭、低体温療法及び活性酸素消去薬のエダラボン(ラジカット)使用群8頭(HT+R)での群分けを行った。低酸素虚血負荷は脳波が低振幅脳波(LAEEG)になるまで吸入酸素濃度を低下させ、LAEEGを認めた後20分間は平均血圧が負荷前の60%以上、その後5-10分間は50%以上になるように吸入酸素濃度を調節し、蘇生を行った。また低酸素虚血負荷が同一となるように、近赤外光分光装置での脳血液量の低下を指標とした。HT群は蘇生直後から低体温(直腸温33.0-34.0度)を施行し、HT+R群は低体温に加えエダラボンを1日2回、3日間投与した。結果、HT群では全例脳血液量は低下し、無治療群の蘇生後24時間での脳血液量増加(ΔCBV)とLAEEG持続時間は正の相関を示すが、HT群では負の相関を示した。両群での回帰直線を比較すると、LAEEG持続時間が長いほど蘇生後のΔCBV)が大きく無治療群は増加、HT群では低下)、このことはLAEEG持続時間が長い脳障害が重篤な症例ほど、脳循環の自動調節能が低く、HTによる脳循環への影響が出やすいと考えられた。現在は、それぞれの中枢神経系や多臓器の組織学的な検索を進めている。また、水素吸入の準備を開始しており、HIEモデルでの有用性の検討を行う予定である。特に平成26年度は地域での豚感染症が流行し、継続した研究が不可能であった。本研究課題を通じて、新生児低酸素性虚血性脳症(HIE)の新生仔豚モデルを用いて、無治療群13頭、低体温療法群(HT)群10頭、低体温療法及びエダラボン(ラジカット)使用群8頭(HT+R)での群分けを行った。また低酸素虚血負荷が同一となるように、脳血液量の低下を指標とした。その後蘇生5日目に屠殺を行い、現在は、中枢神経系や多臓器の障害を組織的に評価している。無治療群10頭、低体温療法群(HT)群10頭での解析を行った結果、HT群では蘇生後に全例脳血液量は低下した。無治療群の蘇生後24時間での脳血液量増加(ΔCBV)とLAEEG持続時間は正の相関を示したが、HT群では負の相関を示した。

両群での回帰直線を比較すると、LAEEG持続時間が長いほど蘇生後のΔCBV)が大きく(無治療群は増加、HT群では低下)、このことはLAEEG持続時間が長い脳障害が重篤な症例ほど、脳循環の自動調節能が悪く、HTでは脳循環低下が起こり易く、脳障害が更に進行する可能性が示されている。現在は、各々の群における中枢神経系障害評価として、HE染色やアポトーシス評価を行いながら比較障害部位の特定や行っている。また、肝障害、腎障害に関する組織学的な検索も同時に進めている。特にHIEにおける肝障害での脂肪蓄積や、エダラボンでの腎障害は、重要項目として詳細な検討を進めている。また、水素吸入の準備を開始しており、HIEモデルでの有用性の検討を行う予定である。特に平成26年度は地域での豚感染症が流行し研究が不可能であったため、研究課題の研究期間延長を行い、現在も継続研究中である。すでに新生児低酸素性虚血性脳症(HIE)の新生仔豚モデルを用いて、無治療群13頭、低体温療法群(HT)群10頭、低体温療法及びエダラボン(ラジカット)使用群8頭(HT+R)での、負荷後5日間の飼育を行い、組織評価を行っている。昨年度(H27)は主に、今後の治療効果判定に重要な、組織評価に重点を置いて検討を行った。組織評価に関しては、中枢神経の評価部位の決定に時間を要しているが、HE染色による障害重度評価やアポトーシス評価を行っている。また肝障害、腎障害に関する組織学的な検索も同時に進めている。特にHIEにおける肝障害での門脈領域(静脈領域と比較して)での脂肪蓄積や、エダラボンでの腎障害は、重要項目として詳細な検討を進めている。水素吸入療法はフリーラジカル除去及び酸化ストレス軽減作用を有することから、成人での心停止蘇生後の脳障害軽減効果が報告されている。水素吸入は、新生児低酸素虚血性脳症における生後の虚血再灌流による臓器障害の軽減が期待されるが、その生体に与える影響に関し新生児領域での検討が必要である。新生仔豚を対象に、水素ガス吸入の生体への影響について調べ、その安全性の検証を行った。生後24時間以内の新生仔豚(1.6-2.4kg)6頭(非吸入群:3頭、水素吸入群:3頭)を対象とした。人工呼吸管理・鎮静下で、非吸入群及び水素吸入群では、約30%酸素にて人工呼吸器管理を行い、水素ガス吸入は約2.7%水素ガスを6時間施行した。吸入前1時間から吸入後6時間まで、観血的に心拍数と共に動脈圧測定を行い、amplitude-integrated EEG(aEEG)にて脳波測定を、time-resolved spectroscopy (TRS)にて脳血液量(CBV)、脳内Hb酸素飽和度(ScO2)を連続測定した。血液ガスは1時間毎に測定・記録した。その結果、水素吸入群および対照群では、心拍数、平均血圧、体温、血液ガスでは明らかな差を認めなかった。また脳波振幅値に差を認めず、TRS測定によるCBV、ScO2についても差は認めなかった。この研究結果により、新生仔豚を対象とした水素ガス吸入は、体・脳循環、脳波及び血液ガスへの影響がなくその使用上の安全性が確認された。新生児低酸素性虚血性脳症の動物モデルとして、新生仔豚を対象に負荷時の脳血液量を指標とした低酸素負荷を行い、低体温療法、ラジカルスカベンジャー(エダラボン)と低体温併用療法の効果、および水素ガス吸入療法の安全性の検討を行った。その結果、無治療の蘇生後24時間での脳血液量増加と低振幅脳波持続時間は正の相関を示したが、低体温療法では負の相関を示した。また低体温療法と併用療法は無治療と比較し、大脳皮質および白質障害は少なかったが、低体温療法のみと併用療法は中枢組織障害の差異は認めなかった。さらに水素ガス吸入は、体・脳循環、脳波及び血液ガスへの影響がなく、その使用上の安全性が確認された。
各種温度馴化,運動鍛錬が老化促進モデルマウス(SAM)の寿命に及ぼす影響

老化促進モデルマウス(SAM)において、我々は短命系のP2(寿命10ケ月)と長命系のR1(寿命14ケ月)を用い、このP2とR1から得られたF1雑種、F2、更にはF1♂×R1♀から得られた戻し交配群を求め各群の生理学特性を比較してみた。その結果、P2の代謝は食餌性を中心とする食物および水分摂取量,身体全体の代謝を示す酸素消費量(VO_2)がR1より著しく高いことを見い出した。体温からみた熱貫流率では、P2の熱効率が悪くまた毛皮の発達およびその重量はR1>P2(P<0.01)となり、VO_2の上昇は断熱性の減少が原因していると考えられた。生理学的特性はR1の体重、食物、水分摂取、VO_2などがF1と全く変らないことが示された。この結果は明らかにR形質がP形質より優性であることを示唆する。またこの生理学的特性の遺伝性を検討するために求められた戻し交配群では、まだ実験個体数が少ないためはっきりしたものではないがおよそPとRの形質は1:1に分かれそうである。この生理学特性と共に寿命の遺伝については、F1の寿命平均はR2よりやや長い位の値が得られ、P1の短命系寿命は全く抑制された。これらの結果からSAMの生理学特性および寿命は遺伝的に決定されていると考えられる。代謝から寿命を検討するため低温および高温馴化マウスを恒温馴化マウスと比較した。その結果現在のところ高温馴化マウスで寿命の延長が認められている。また運動鍛錬マウスでは命のところ差は認められていない。代謝の変化を日内リズムで検討するとP2では明期(午前8時午後8時)でも食物水分摂取、運動などが行われるのに対し、R1ではほとんどこれらの期間には代謝亢進は認められない。すなわち、日内リズムに両系統に大きな差が認められている。次にショウジョウバエから求められた77KDの蛋白投与によりR1群の老令マウスには著しい延命が認められた。老化促進モデルマウス(SAM)のP/2系は短命系(寿命約8.8ケ月)で,正常老化モデルマウスといわれるR/1系でも寿命は約12.4ケ月である。これらの寿命はdd系マウス(日本産)の寿命約24ケ月と比較して著しく短命である。我々はまずこのマウスの代謝を中心とする生理学的特性を検索した。その結果、動物の代謝の指標を示す酸素消費量(VO_2)がdd系の1.5倍以上を示すこと,また短命のP/2はR/1のVO_2値より有意に高いことを見い出した。そしてこのVO_2の増加は特に低温環境下で大きいことから、動物の熱貫流率(TC=(VO_2)/(Tco-Ta))値,(但しTcoは結腸温,Taは外気温)を調べてみるとP/2>R/1(P<0.01)となった。この結果はP/2の熱効率が悪いことを示す。そこで両群の熱断熱性の指標となる毛皮重量を比較するとR/1>P/2(P<0.01)となり、VO_2の上昇も断熱性の減少が第一の原因であると考えられた。また体重の成長率はR/1>P/2(P<0.01)を示し、短命系のP/2の小型化が認められた。