hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
樹状細胞の抗原提示作用におけるフラクタルカインの機能の検討とその分子機構の解明

本研究は、ユニークな膜結合型ケモカインであるフラクタルカイン(FKN)とその受容体の結合が、FKNを発現する樹状細胞とその受容体を発現する活性化T細胞の相互作用において、単なる細胞遊走や非特異的な細胞接着に働くのみならず、抗原提示を代表とする樹状細胞T細胞間の特異的な相互作用(免疫シナプスの形成)に関わる可能性について調査すること、とりわけ、FKNとその受容体の結合によって、受容体(T細胞)側にGタンパク質を介して情報が伝わるのみならず、膜表面に存在するFKN(樹状細胞)側にもその細胞内領域を使って情報が伝達される可能性について調査することが目的であった。しかし、活性化T細胞は分泌型FKNに対して走化性を示すにもかかわらず、これらにはFKN受容体とされているCX3CR1の発現はRNAレベルですでに認められず、先のFKNとCX3CR1の結合が抗原提示作用において役割を果たすという仮定は根底から崩れてしまった。さらに、FKN、CX3CR1ノックアウトマウス双方ともに、接触皮膚炎などの抗原特異的免疫反応に異常を認めないという報告が出されたことからも、FKNとCX3CR1の結合が抗原提示作用において重要な役割を果たすということは考えにくいこととなった。一方、抗原呈示作用に役割を果たさないとしても、FKNからの情報が樹状細胞の生死や増殖に関与している可能性が考えられたが、マウス骨髄から樹状細胞を誘導する系に、分泌型FKNあるいは抗FKN抗体を添加しても、誘導されてくる樹状細胞の数、形態、表面マーカーに有意な変化は認められなかったことから、FKNから樹状細胞内に情報が入ることを積極的に示唆する知見は得られなかった。
習慣流産をおこすG4四重鎖DNA多型

私たちは以前の研究で、胎盤性抗凝固因子であるアネキシンA5遺伝子のプロモーター領域にある遺伝子多型が習慣流産と関連し、女性が少数アリルを持つと流産のリスクが増加することを示した。このプロモーター領域の多型の位置にはグアニン4重鎖形成のコンセンサス配列がある。本研究では、プロモーター領域の多型がこのコンセンサスを変化させ、グアニン4重鎖の形成しやすさに影響し、その結果、少数アリルからのアネキシンA5の発現量が低下することが胎盤における過凝固をひきおこし、流産のリスクが増加するという仮説を証明した。習慣流産は多因子疾患であるが、胎盤における過凝固も要因のひとつである。近年、プロモーター領域のグアニン4重鎖構造の転写調節作用が注目されている。本研究では、プロモーター領域の多型がこのコンセンサスを変化させ、グアニン4重鎖の形成しやすさに影響し、その結果、少数アリルからのアネキシンA5の発現量が低下することが胎盤における過凝固をひきおこし、流産のリスクが増加するという仮説を証明する。昨年度は、胎盤でのアネキシンA5の発現量をqRT-PCRにて検討したところ、少数アリルからの発現量がすくないことを、胎盤でのqRT-PCRで示し、ルシフェラーゼシステムを用いて、少数アリルのプロモーター活性が低いことを示した。また、円旋光二色性(CD)によりグアニン4重鎖形成能を検討したところ、多数アリルは生理的条件でグアニン4重鎖を形成し、少数アリルは多数アリルよりもグアニン4重鎖形成能が低下していた。本年度は、ルシフェラーゼシステムで、グアニン4重鎖形成を阻害するような変異を導入すると、少数アリルと同程度にルシフェラーゼ活性が低下した。グアニン4重鎖結合剤TMPyP4を加えるとルシフェラーゼ活性が低下し、絨毛細胞株でアネキシンA5の発現量が低下した。以上より、少数アリルはグアニン4重鎖形成能が低下することでプロモーター活性が低下し、アネキシンA5の発現量が低下し、胎盤内で過凝固になり、その結果、流産を起こしやすい状態になっていることが示唆された。本年度は、まず、胎盤でのアネキシンA5の発現量をqRT-PCRにて検討したところ、少数アリルをヘテロで持つ胎盤は、多数アリルのホモの胎盤と比べて、発現量が有意に低かった。また、アリル特異的qRT-PCRの解析系を確立し、ヘテロの胎盤内で比較したところ、少数アリル由来の産物の方が多数アリル由来の産物より発現量が低かった。次に、ルシフェラーゼシステムを用いてプロモーター活性を調べたところ、少数アリルの方が多数アリルよりもプロモーター活性が有意に弱かった。円旋光二色性(CD)によりグアニン4重鎖形成能を検討したところ、多数アリルは生理的条件でグアニン4重鎖を形成し、少数アリルは多数アリルよりもグアニン4重鎖形成能が低下していた。研究の第一段階として、遺伝子多型と遺伝子発現量の関係を証明すること、第二段階として、遺伝子多型とグアニン4重鎖形成能の関係を証明すること、の2つのステップに明確に分け、作業を単純化した研究計画が奏功したと考えられる。次のステップとしては、遺伝子多型が発現量に影響することが、グアニン4重鎖形成能の変化を介していることを証明する、というやや複雑なステップになるが、グアニン4重鎖のコンセンサス配列の人工的な変異体の利用、グアニン4重鎖形成、安定化をさせる化学物質の利用、などを予定している。また、可能なら、グアニン4重鎖形成とメチル化との関連も検討したい。

多型がヘテロのサンプルを用いてバイサルファイト法でアリル特異的メチル化の有無を検討する。前年度の研究計画を一部変更して単純化して行ったため、よい研究成果は得られたが、予想より研究期間を要した。そのため、一部の計画を次年度に移行し、主に物品費を次年度へ繰り越した。次年度は、主に消耗品に使う予定であるが、最終年度であり、研究成果の報告を行う予定であり、学会発表のための国内外の旅費、ならびに、論文作成のための英文校閲、投稿料などに使用することも計画している。
白人政権下の南アフリカで「大英帝国臣民の黒人」　が新たに「想像する共同体」

本研究は20世紀初頭の南アフリカで、Sol Plaatjeを始めとするアフリカ人知識人たちが、様々なアパルトヘイト法施行によってアフリカ人の諸権利が剥奪されるなか、自分たちが帰属しうる「想像の共同体」(国民国家)を再構築しようとしたその軌跡を明らかにした。かつてのように選挙権を持つ帝国臣民として大英帝国を国民国家に近いものとして「想像」することが困難になった彼らは、大西洋を越えたアフリカ系ディアスポラの「氾アフリカ主義」の影響を受けつつ、自らの歴史、伝統を近代国家の文脈のなかで再構築し、アパルトヘイト国家に代わる共同体を新たに想像しようとしたのである。2010年前半は、前年度から個人的に行なっていた研究で、Sol Plaatjeの研究に関連あるいはその基礎となる研究の発表が続いた。『20世紀英文学研究IX:現代イギリス文学と場所の移動』に執筆した論文やそれを発展させた論文Journal of Commonwealth Literature掲載)においては、アフリカ系ディアスポラに関する基本的な理論(Plaatje研究には必須)を理解し、「「南アフリカの小さなヴィクトリア女王」が"New Woman"を目指すとき:Olive SchreinerのFrom Man to Man」(1926)における性と人種を巡るポリティックス(イギリス女性史研究会での口頭発表)においては、19世紀末から20世紀初頭にかけて南アに存在した白人女性参政権運動とアフリカ人男性参政権(Plaatjeも保持)剥奪の過程について議論した。こういった研究を踏まえた上で、夏から本格的なPlaatje研究に入った。ボーア戦争後にアパルトヘイト体制が確立されるなか、彼が英国や米国で南アのアフリカ人の窮状を訴え、Marcus GarveyやW.E.B.Du Boisと交流するなかで、彼が意識する「想像の共同体」が「大英帝国」から「氾アフリカ主義的な共同体」にどのような形で変化した(あるいは変化しなかった)かというテーマで研究を行なった。主にMarcus Garveyとの関連でGlobalizing the Empire, Nation and Native : Marcus Garvey's Information Networkfroma South African Perspectiveという題目でOxfordの学会にて口頭発表している。同様のテーマで別の視点から「「世界の中心」から兄弟愛を叫ぶ:大英帝国と黒い大西洋の交差路で生まれ続けるソル・プラーキの「想像の共同体」」という論文を執筆し、共著の形で2011年度に刊行予定である。この2つの研究で明らかになったのは、自分が「想像する」共同体から疎外されつつもそれを代表/表象し続ける植民地主体としての彼のidentityの複雑さであった。2011年前半は、Sol Plaatje研究を俯瞰する研究の関連で2011年7月刊行の『オルタナティヴ・ヴォイスを聴く』にてアフリカ英語文学、特に南アフリカ文学を、環境、移動、土地への帰属というテーマで執筆した。また、6月に英国のリバプールで開催されたAfromodernism 2という学会に、Plaatjeの小説Mhudiに現れる植民地的近代がどのようにモダニズム的要素を示しているかを論じた論考Modernism and Colonial Modernity in Sol Plaatje's Mhudiの要旨を送り受理された。夏には英国および南アフリカにてPlaatje関連の資料収集を行った。特に、彼が行ったツワナ語(彼の母語)の諺の翻訳および編纂や、シェイクスピア劇のツワナ語への翻訳の意味、そして彼の作品群の評価の1980年代以降の移り変わりについて資料を収集し、アフリカ人が「植民地近代」を生きぬく際に、「近代」の何を受容し、そしてどの「伝統」が生き延びるべきとPlaatjeが考えたのか、その世界観を探った、また、2012年3月刊行の『<終わり>への遡行-ポストコロニアリズムの歴史と使命』を共同編集し、そこに「「世界の中心」から「兄弟愛」を叫ぶ-大英帝国と黒い大西洋の交差路で生み出されるソル・プラーキの「想像の共同体」」という論文を発表した。ここではボーア戦争後にアパルトヘイト体制が確立されるなか、彼が英国や米国で南アのアフリカ人の窮状を訴え、Marcus GarveyやW.E.B.Du Boisと交流するなかで、彼が意識する「想像の共同体」が「大英帝国」から「氾アフリカ主義的な共同体」にどのような形で変化した(あるいは変化しなかった)かを論じたものである。自分が「想像する」共同体から疎外されつつもそれを代表/表象し続ける植民地主体としての彼のidentityの複雑さを考察した。前年度の課題であったSol Plaatjeの小説Mhudi研究、およびPlaatjeの「想像の共同体」と「彼の多言語性とその翻訳/通訳作業」の関係に関する研究については引き続き研究を進めてきた。Mhudi研究については、特にそのcolonial modernityとmodernismとの関連について研究を進め、2012年9月6-9日に英国Leedsにて開催された学会2012ASAUK

biennial conferenceにて9日に、"Rethinking Nationalism: Re-imagining Community in Sol Plaatje's Mhudi"という題目で発表を行い、同領域研究者からfeedbackを得る。現在関連論文を執筆中である。さらに、「彼の多言語性とその翻訳/通訳作業」においては、まず南アフリカ社会の英語や多言語性について下調査を行い、その結果は、南アフリカ社会の多言語性を歴史的・言語的観点から論じた考察として、10月14日に津田塾大学言語文化研究所研究会での発表「District 9 (2009)におけるポストアパルトヘイト時代の喪失、共存、雑種化の行方」に含められた。同様の考察が共著『世界の英語を映画で学ぶ』(松柏社)(2013年4月刊行予定)に収められる。Plaatjeの翻訳/通訳作業の関連に関する研究では、『黒人研究の会会報』において「プラーキ研究、『ジュリアス・シーザー』観劇、ASAUK学会参加報告」の中にPlaatjeによるShakespeare作品のツワナ語翻訳の政治性についての考察を載せた。なお、Shakespeare作品のPlaatjeによるツワナ語翻訳については、ツワナ語から英語への翻訳を依頼予定であったが、Rhodes大学で同様のプロジェクトが進行中であることが判明し、現在連絡中である。体調を崩したため、研究に遅延が生じた。特に計画通りにMhudiに研究を進めるため、手始めとしての英国での学会発表を予定していたが出席が叶わず、Mhudi研究を深めることができなかった。「想像の共同体」と「多言語と翻訳/通訳」についての資料収集は行えたが、翻訳(ツワナ語から英語への)作業を委託するところまで至らず、まだ成果の発表という段階ではない。ただし、Plaatjeについての包括的な論文は執筆済みなので基礎的な研究は行えている。25年度が最終年度であるため、記入しない。研究実施計画にあった英国LeedsにおけるASAUKでの学会発表申請は、受理され計画通り発表を行い、その後それをもとにした論文を執筆しているがまだ完成していない。これは想定外の健康上の理由による(その健康上の問題は現在解決済)。また、PlaatjeのShakespeare作品のツワナ語翻訳を英語へと翻訳する作業を委託し謝金を払う計画も実施が遅れている。それは、Leeds大学での学会で海外研究者の情報により南アフリカのRhodes大学にて進んでいる同様のプロジェクトを知り、連絡を取ることが必須であると助言をうけ、何度かプロジェクト担当者(直接だけなく、関係者を通じても)に連絡を試みているが、全く返事が来ないことによる。24年度の課題に安易に移行せず、前年度の課題であった「Mhudi研究」、および「想像の共同体」と「多言語と翻訳/通訳」研究について引き続き研究を進める。「Mhudi研究」については現在、海外の学会発表に申請中である。
偽アルドステロン症発症リスクの個体差に関する研究と予知のための検査キットの開発

甘草の副作用、偽アルドステロン症の原因物質として、申請者はMrp2機能不全時に血中に出現する3ーモノグルクロニルグリチルレチン酸(3MGA)が原因物質であると推定している。本研究では、抗3MGA抗体を用いてその血中、尿中濃度を測定する方法を開発し、その副作用の発症を予防するためのキットの開発を目的とした。しかし、Mrp2欠損ラットに甘草由来成分であるGAを経口投与した時の血中、尿中から、その抗体と交差反応する新規GA代謝物が検出され、単離、構造を解析したところ、新規物質であるcompound 1と決定した。本化合物が3MGAに代わる偽アルドステロン症原因物質である可能性が推定された。漢方薬による副作用のうち最も頻度の高いものは、甘草含有処方による偽アルドステロン症である。その発症の原因物質は、甘草に含まれるグリチルリチン酸(GL)を経口摂取した後に肝機能不全時に血液中に表れるその代謝物である3モノグルクロニルグリチルレチン酸(3MGA)であることが強く示唆されている。本研究では、血中または尿中濃度をELISAを原理として定量する方法を開発し、血中また尿中3MGAと副作用発症との関連を実証するとともに、その発症予防のための3MGA簡易測定検査キットを開発を目的としている。まずはじめに、偽アルドステロン症の発症の原因と考えられる3MGAを特異的に認識するモノクローナル抗体を開発し、それにより3MGAの濃度を測定するためのELISA系を開発した。その測定系は、GLや血液中の主代謝産物であるグリチルレチン酸(GA)とは交差反応しなかった。次に、3MGAを血中に蓄積するMrp2欠損ラット(EHBRs)にGAを経口投与し、経時的に血液と尿を採取、得られた血液および尿を、従来通りのLC/MS/MSとこの抗体を利用したELISA法とで同時に3MGA濃度を定量した。その結果、血液、尿、どちらの場合でも、ELISA法による実測値は、LC/MS/MSでの実測値と比較して10倍程度の値を示し、ELISAでは3MGAとは別の何らかの代謝産物と交差反応している可能性が推測された。そこで、GAを投与したEHBRsの尿を逆相薄層クロマトグラフィーで展開し、抗3MGA抗体を用いたイースタンブロッティング法で検出を試みたところ、3MGAよりも極性の高い位置に抗3MGA抗体と反応する複数のスポットを認め、それらのほうが3MGAよりもスポットが大きかった。このことから、肝機能不全時に血液中に表れるGLの代謝物は3MGAが主ではなく、別の代謝物である可能性が示唆された。漢方薬が引き起こす副作用のうち頻度の高く重篤なものとして、甘草含有処方による偽アルドステロン症が知られている。その発症の原因物質は、甘草に含まれるグリチルリチン酸(GL)を経口摂取した後に肝機能不全時に血液中に表れるその代謝物である3モノグルクロニルグリチルレチン酸(3MGA)が強く示唆されている。本研究では、血中または尿中濃度を酵素抗体法を原理として定量する方法を開発し、血中また尿中3MGAと副作用発症との関連を実証するとともに、その発症リスク予知のための3MGA簡易測定検査キットを開発を目的としている。その測定系は、GLや血液中の主代謝産物であるグリチルレチン酸(GA)とは交差反応しないことを確認した。ところが、Mrp2欠損ラット(EHBRs)にGAを投与した時に血液および尿中にあらわれる未知の代謝産物と交差反応している可能性が推測された。そこで、GAを投与したEHBRsの尿を逆相薄層クロマトグラフィーで展開し、抗3MGA抗体を用いたイースタンブロッティング法で検出を試みたところ、3MGAよりも極性の高い位置に抗3MGA抗体と反応する複数のスポットを認め、それらのほうが3MGAよりもスポットが大きかったことから、その単離を目指すこととした。逆相オープンクロマトグラフィーで対象となるスポットを単離し、構造を決定したところ、イソフラボンであるダイゼインであった。これはエサ由来であることが推定された。ダイゼイン標品と3MGAモノクローナル抗体とは反応しなかった。このことから、目的の化合物は逆相クロマトグラフィーではダイゼインとピークが重なってしまい、この方法では単離出来ないことが推測された。本研究では、血中または尿中濃度をELISAを原理として定量する方法を開発し、血中また尿中3MGAと副作用発症との関連を実証するとともに、その発症予防のための3MGA簡易測定検査キットを開発を目的とした。次に、3MGAを血中に蓄積するMrp

2欠損ラット(EHBRs)にGAを経口投与し、血液と尿を採取、従来通りのLC/MS/MSとこの抗体を利用したELISA法とで同時に3MGA濃度を定量した。その結果、血液、尿、どちらの場合でも、ELISA法による実測値は、LC/MS/MSでの実測値と比較して10倍程度の値を示した。そこで、GAを投与したEHBRsの尿を薄層クロマトグラフィーで展開し、抗3MGA抗体を用いたイースタンブロッティング法で検出を試みたところ、3MGAではない未知の化合物による陽性スポットを検出した。このスポットを指標にして、EHBRの尿から新規化合物であるcompound 1を単離、同定した。今後、このcompound 1の11βヒドロキシステロイド阻害酵素(11β-HSD)II阻害活性と、その血中濃度の測定を行い、本化合物の偽アルドステロン症発症への関与について検討する予定である。甘草の副作用、偽アルドステロン症の原因物質として、申請者はMrp2機能不全時に血中に出現する3ーモノグルクロニルグリチルレチン酸(3MGA)が原因物質であると推定している。本研究では、抗3MGA抗体を用いてその血中、尿中濃度を測定する方法を開発し、その副作用の発症を予防するためのキットの開発を目的とした。しかし、Mrp2欠損ラットに甘草由来成分であるGAを経口投与した時の血中、尿中から、その抗体と交差反応する新規GA代謝物が検出され、単離、構造を解析したところ、新規物質であるcompound 1と決定した。本化合物が3MGAに代わる偽アルドステロン症原因物質である可能性が推定された。予想外の交差反応代謝物がヒト血清、尿中に存在することが推測されたために、モノクローナル抗体を用いた3MGA特異的なELISA法の開発は困難となっている。しかし、その交差反応代謝物は、3MGAと類似した骨格をもつ分子であることが容易に予想されるため、その分子も偽アルドステロン症の原因である11βヒドロキシステロイド脱水素酵素2(11βHSD2)を阻害する作用をもつ可能性が大いに期待される。本モノクローナル抗体は複数の11βHSD2阻害物質を同時に検出できる可能性があることから、その交差反応代謝物の化学構造を同定し、それらの11βHSD2阻害活性を評価し、最終的に偽アルドステロン症の発症の予防のための検査キットの開発を目指す。生薬学今後は、EHBRsで検出された抗3MGAモノクローナル抗体と交差反応を示した未知のGL代謝物を逆相クロマトグラフィーの前に順相シリカゲルで低極性物質を吸着除去した後に行い、単離、同定をめざす。その11βHSD2阻害活性をラット腎ホモジネートおよびスライスを用いて評価するほか、腎尿細管上皮細胞に発現するトランスポーターとの親和性を明らかにし、実際にそれらの化合物がヒト腎尿細管において11βHSD2阻害活性を示すかどうかを検討する。その結果、甘草による偽アルドステロン症発症における新規原因成分と発症メカニズムが解明される。本研究で開発した抗3MGAモノクローナル抗体に交差反応する未知代謝物が予想外にヒト血清、尿中に存在することが推測されたために、モノクローナル抗体を用いた3MGA特異的なELISA法の開発は困難となっている。
ファーネスアトマイゼーションにおけるナノ化学反応機構

本研究では、ファーネスアトマイゼーションの領域において黒鉛炉原子吸光法における原子化装置の中の電熱黒鉛炉の表面と分析元素の相互作用に関する基礎的成果を得た。更に、新規の分析法を提案した。(1)基礎的研究:溶液中において炭素材料に金属イオンを吸着させた場合、ある種の元素において炭素材料中の細孔に単原子状態で分散していることが分かった。この炭素材料の加熱によりイオンは原子に還元され、つづいて原子が脱離して原子蒸気の発生する。その発生する原子蒸気に関するデータから計算によって原子化の活性化パラメーターを求めることが可能となった。炭素材料の細孔の原子サイズレベルの表面の凹凸状態を示す指標の表面フラクタル次元とその原子化の活性化パラメーターに強い相関性があることが分かった。(2)新規の分析方法:本方法を用いて、炭素材料中の細孔の内壁表面の幾何学的構造を示す表面フラクタル次元を測定する新規な方法が見いだされた。表面フラクタル次元は、細孔の比表面積と関係式で結ばれ、本方法でこの表面フラクタル次元を求めることでサブナノメートルレベルの径をもつ微細孔の比表面積も求める方法が示唆された。(3)システム化:炉内での原子蒸気の発生およびそのときの温度の計測とデータ処理を最新のPCシステムを用い測定装置がシステム化された。自動分析も可能なシステムが完成した。(4)応用分析:表面のナノサイズでの制御は、分析元素の分散、共存物質の化学干渉、原子化装置表面への浸透および還元反応などを制御することで分析が困難であった環境有害微量元素のカドミウム、鉛およびヒ素の高感度分析を可能にした。(5)最近の動向:黒鉛炉原子吸光分析法における本体装置開発、関連装置開発、最新の分析方法、ナノテクノロジーおよびナノサイエンスの導入についての動向が明らかにされた。ナノ化学はナノ科学の領域を含み表面科学および微細孔における化学へと発展している。ピコグラム量の超微量元素を黒鉛表面に分散後原子蒸気を発生させる黒鉛炉原子吸光法は、表面科学と関連深い。本年度は、黒鉛炉原子吸光システムを活用し、ナノからピコグラムの超微量元素の原子化機構および分析技術の発展を目的に研究を行った。超微量元素は、黒鉛表面において単原子分散状態で分布する。しかし、金、銀および銅などある特別な元素において、黒鉛表面で2次元状態の平面クラスターから3次元状態の立体的なクラスターを形成する場合がある。原子化中間体の存在状態と原子化の活性化エネルギーは、原子吸光シグナルに基づいた等速昇温過程の速度論的解析から求められた。黒鉛表面との原子レベルの相互作用の強さは、原子の熱脱離のエンタルピー変化に反映され、これは原子の熱脱離(原子化)の活性化エネルギーに等しい。金の原子化の活性化エネルギーと金原子の単原子分散の担体となる炭素材料表面の特性との相関性を明らかにした。金原子は、ファンデルワールス力で炭素表面に吸着する。その吸着面の立体的な凹凸状態によって吸着力の作用する有効表面積が変化する。黒鉛炉内でアスコルピン酸から生成した活性炭の表面構造をその熱処理温度によって制御できる。表面状態を制御された活性炭上に分散した金原子の活性化エネルギーと比較したところ、表面の原子サイズの凹凸状態を示す表面フラクタル次元との間で直線関係が存在することを解明し、これを利用して炭素材料の表面の幾何学的変化を計測することが3分以内で可能となることを示唆する知見が得られた。

黒鉛表面の幾何学的変化が、分析試料溶液の分散挙動に重要な影響を及ぼし高精度な大容量導入分析が理論的に正しく行われていることを解明、環境水中カドミウムの分析に応用しppt分析が可能となった。ファーネスアトマイゼーションにおいて黒鉛炉表面の構造の影響の研究と分析への応用について本年度、次のような研究実績が得られた。黒鉛炉表面をタングステン、チタン、ハフニウムおよびジルコニウムなどの耐熱炭化物生成元素によって表面処理を行った場合、試料導入室の内部表面を顕微ラマン散乱分光法によって2次元マッピングを行ったところ表面処理による黒鉛の構造の劣化および処理面の均一性について処理元素によって特異的に変化することが判った。この表面処理によって試料室の親水性が変化して、溶液の大容量導入を可能にするなどのメリットを生み出した。活性炭のサブミクロ孔の孔壁の表面における原子サイズレベルにおける表面の凹凸の程度を表す指標となる表面フラクタル次元が金の原子化の活性化エネルギーを測定することによって計測できることが判った。その速度論的および熱力学的パラメーターを求める物理化学的な解析方法も確立できた。これによって、原子サイズレベルつまりサブナノサイズでの構造特性を評価できる新しい手法を開発できた。ナノスペースのキャラクタリゼーションの新手法としての応用研究が今後期待できる。分析化学分野の研究であることから、分析技術の高度化への研究も行った。黒鉛炉に替わる、耐熱セラミックを利用した原子化装置を試験的に試作した。その表面材は、黒鉛と同じ構造をしているが化学反応性がきわめて低い。水銀、カドミウム、鉛などの欧州環境規制元素に対して高感度化することが判った。海水中のカドミウムの環境モニタリングのために充分な高感度直接分析が可能となった。ナノ微粒子の構造および黒鉛炉原子吸光法への利用ができることに関する知見が得られた。また、X線を利用するとナノサイズの超微粒子の組成が解明できるまでになっている。触媒、分析および表面科学分野での利用が期待できる。ピコグラム量の超微量元素を黒鉛表面に分散後に原子蒸気を発生させる黒鉛炉原子吸光法は、表面の化学現象を反映する。昨年度までは加熱黒鉛炉内部においてアスコルビン酸および糖類の加熱分解によって精製した炭素材料に単原子分散した金原子の原子化機構の研究を基盤として、原子化の活性化エネルギーと表面フラクタル次元の関連性について研究を行ってきた。実際の試料の分析においては、分析対象物が固体試料であることからスラリー導入法を検討する必要があった。固体試料を破砕、粉砕または微細な繊維へと分散させることで実際の炭素材料試料を効率よく黒鉛炉内に導入することができた。金原子の吸着には、ビーカー内での吸着および黒鉛炉内での吸着の双方とも有効であることがわかったが、吸着時間が0.5分程度必要であることも重要である。活性炭、活性炭素繊維および炭などの種類に対応した吸着および脱離挙動が計測できるようになった。計測装置のシステムかとデータ処理の高速化をPCネットワークによって確立して、自動分析も可能なシステムを構築するなど、実用に向けての基礎的な研究が実施された。金原子以外の金属原子をプローブとして炭素材料中の細孔に吸着させて原子化過程を研究した。このとき、ある種の金属原子においてはサブミクロ孔以外の細孔の表面状態が反映することが示唆される実験結果を得ることができた。
全エクソーム解析を用いた脳奇形疾患における体細胞変異の同定

我々は体細胞変異に起因する疾患について遺伝子変異の検索を施行した。その結果、Sturge-Weber症候群におけるGNAQ遺伝子および限局性皮質異形成症におけるMTOR遺伝子の体細胞変異の同定に成功した。MTOR遺伝子はmTOR経路に関与するたんぱく質をコードする遺伝子であり、本遺伝子変異がmTOR経路の活性化を惹起することを明らかにした。このMTOR遺伝子変異によるmTOR経路の活性化は免疫抑制剤の一つであるラパマイシンによって抑制されることが示されており、ラパマイシンをMTOR遺伝子変異に起因する難治性てんかんの治療薬として応用できる可能性が期待されており、現在臨床試験が進められている。限局性皮質異形成(Focal cortical dysplasia, FCD)IIb患者9名のエクソーム解析を施行し、その結果MTOR遺伝子の体細胞変異を同定した。MTOR遺伝子がコードするmTOR蛋白は、脳皮質の発生において重要な役割を果たすPI3K-AKT3-mTOR経路の制御因子として知られており、これまでの研究により、FCDIIb組織においてはmTOR経路が活性化されることが報告されている。そこで、Targeted amplicon sequencing法にてMTOR遺伝子の全コーディング領域のdeep sequencingを行ったところ、FCDIIb患者13例中6例においてMTOR遺伝子の体細胞変異を同定した。次に、MTOR変異を有する患者の脳組織検体におけるmTOR経路の活性化を評価したところ、MTOR変異陽性のFCDIIb症例においては、他の疾患の脳組織に比較してmTOR経路の著しい活性化が認められた。また、同定された各変異がmTOR経路に及ぼす影響をヒト培養細胞株を用いて検討したところ、MTOR変異体を発現するプラスミドをトランスフェクションした細胞株はMTOR正常体を発現するプラスミドをトランスフェクションした細胞株に比べて、mTOR経路の活性が著明に上昇していた。このことから、これらの変異はすべてPI3K-AKT3-mTOR経路を賦活化する活性型変異であることが示唆された。mTOR蛋白は免疫抑制剤の一つであるラパマイシン(Rapamycin)の標的蛋白であり、ラパマイシンおよびそのラパログをFCDに起因する難治性てんかんの治療薬として応用できる可能性が期待される。FCDの新規原因遺伝子MTORの同定に成功しており、さらに変異が疾患病態形成に寄与する機序の一部を解明することに成功している。また、ラパマイシンの投与がMTOR遺伝子変異によるmTOR経路の活性化を抑制することが示されていることから、現在難治性てんかんを示すFCD患者に対するラパマイシン投与の治験が進められている。以上の事から想定以上の進捗が得られていと考えられる。次に、MTOR変異を有する患者の脳組織検体におけるmTOR経路の活性化を評価したところ、MTOR変異陽性のFCDIIb症例において、他疾患の脳組織に比較してmTOR経路の著しい活性化が認められた。また、同定された各変異がmTOR経路に及ぼす影響を人培養細胞株を用いて検討したところ、MTOR変異体を発言するプラスミドをトランスフェクションした細胞株はMTOR正常体を発現するプラスミドを発現するトランスフェクションした細胞株に比べて、mTOR経路の活性が著名に上昇していた。このことから、これら変異体はすべてPI3K-AKT3-mTOR経路を賦活化する活性型変異であることが示唆された。mTOR蛋白は免疫抑制剤の一つであるラマパイシン(Rapamycin)の標的蛋白であり、ラパマイシンおよびそのパラログによってmTOR活性が抑制されることが知られている。MTOR変異に起因するFCD症例では、mTORの異常活性化が疾患病態に関与している可能性が考えられ、ラパマイシン製剤がFCD患者の難治性てんかん治療薬としての応用できる可能性が期待されている。現累計34症例の皮質形成異常症患者の脳組織および血液検体の解析が終了しており、そのうち9症例において疾患原因と考えられる体細胞変異の同定に成功している。おの多くはPi3K-AKT-MTOR経路に関連する遺伝子変異であり、これらの変異がmTOR経路の過剰な活性化を引き起こすことを解明している。さらに、ラパマイシン製剤のてんかん治療への応用が進められている。本研究では体細胞変異に起因すると強く疑われている複数の疾患について病変組織と正常組織のペア検体を入手し、全エクソーム解析を用いて未知の体細胞変異を同定することを目的とし解析を行った。我々は数%の低頻度体細胞変異を同定するために、複数の体細胞変異解析ツールを用いることで感度・特異度を改善し、1%という超低頻度の体細胞変異の同定に成功している。また、非常に高感度な変異解析機器であるdroplet digital PCRを併用することで、1%未満の超低頻度モザイク変異の検出も可能となっており、これら多様な解析手法や機器を用いることで高い変異同定率を得ることに成功した。Sturge-Weber症候群(SWS)では、解析を行った15症例のうち12症例(80%)においてGNAQ遺伝子のc.548G>A (p.R183Q)モザイク変異を同定した。本変異は現在SWSの診断基準の一つとなっており、SWSが疑われる患者の診断に大きく貢献することが期待される。mTOR蛋白は免疫抑制剤の一つであるラパマイシンの投与がMTOR遺伝子変異によるmTOR経路の活性化を抑制することが示されており、ラパマイシンおよびそのラパログをFCDに起因する難治性てんかんの治療薬として応用できる可能性が期待される。

その結果、Sturge-Weber症候群におけるGNAQ遺伝子および限局性皮質異形成症におけるMTOR遺伝子の体細胞変異の同定に成功した。MTOR遺伝子はmTOR経路に関与するたんぱく質をコードする遺伝子であり、本遺伝子変異がmTOR経路の活性化を惹起することを明らかにした。このMTOR遺伝子変異によるmTOR経路の活性化は免疫抑制剤の一つであるラパマイシンによって抑制されることが示されており、ラパマイシンをMTOR遺伝子変異に起因する難治性てんかんの治療薬として応用できる可能性が期待されており、現在臨床試験が進められている。現在までに累計30例の皮質形成異常症患者の脳組織および血液検体の集積が修了しており、引き続き新規原因遺伝子の検索を行っていく。また、すでに同定された遺伝子に関しては、遺伝子変異が疾患病態に与える影響を検討する。現在までに38症例の皮質形成異常症患者の脳組織・血液検体の集積が終了しており、引き続き全エクソーム解析を用いた変異検索を施行する予定である。分子遺伝学平成28年度に使用予定である研究資料の費用として27年度分の研究費の一部を繰り越したため。検体収集の遅れにより、ゲノム解析に使用予定であった物品費を平成28年度中に執行できなかったため。平成28年度に年間契約にて使用するHGMDデータベースの契約料(オンラインネームドユーザー使用料190,000円およびダウンロード研究用ラボライセンス料570,000円)の支払いや海外出張費等に使用する予定である。平成29年度に施行するゲノム解析および分子生物実験試薬の支払い等に使用する予定である。
RNAヘリカーゼを付加したリボザイムの高機能化

本研究は、リボザイム等の機能性RNAを利用した遺伝子特異的な発現抑制の手法開発を通し、遺伝子の機能を探索することを目的としている。mRNAを標的とした機能性RNAは、塩基対形成を通じて標的と結合するため、非常に特異的な分子認識能を有しており、機能未知遺伝子の機能解析や、癌やウイルス等の疾患原因遺伝子を標的とした遺伝子治療への応用が期待されている。近年、遺伝子発現を特異的に抑制することができる機能性RNAとして、siRNAが報告されている。siRNAとは、20塩基対程度の短鎖二本鎖RNAであり、このsiRNAを細胞内に導入することによって遺伝子発現を特異的に抑制することが可能である。申請者は、siRNAを細胞内で発現し、継続的に遺伝子発現の抑制効果が得られるようなsiRNA発現系を新たに構築した。この新規siRNA発現システムには、4個の自己切断型リボザイムが含まれており、4箇所で切断を起こすことによって、siRNAを生じさせるシステムである。このシステムのメリットは、siRNAを様々なプロモーター系で利用できる点、任意の配列をsiRNAとして生じさせることができる点であり、非常にフレキシブルな分子設計が可能となる。一方、このような機能性RNA発現システムを細胞内に導入する際に問題となるのは、導入すべきベクターとしてのDNAの形状である。通常プラスミドが利用されているが、このベクター系としては、より小さく、安定なものが求められる。この条件に該当するものとして閉環末端線状DNA(ダンベル型DNA)が挙げられるが、従来、構築するのが困難だったために汎用性が低かった。そこで、申請者は、新規ダンベル型DNAの作成法を考案し、簡便かつ効率的に、細胞内で安定な、siRNA発現ベクターシステムを構築することに成功した。本研究ではRNAヘリカーゼを利用し、高機能化したリボザイムを技術基盤として、新規遺伝子のスクリーニングを目指している。リボザイムの基質認識領域にランダムな配列を持つライブラリーを培養細胞内に導入した後、表現型の異なる細胞を単離してリボザイム発現プラスミドを回収し、どのような配列を持つたリボザイムが表現型に影響を及ぼしたかを調べる。リボザイムの配列をもとに標的となったmRNAを割り出すことで、表現型を変化させる遺伝子を、新規に同定することが可能である。我々の研究室ではこのシステムを用いて、これまでの遺伝子探索法では得られないような、新規機能遺伝子の探索を行っている。私は共同研究を通して、細胞の分化を例に新たな遺伝子を探索すべく研究を進めている。本年度は、遺伝子スクリーニングのために必要となる細胞の選別システムを設計した。ある細胞特異的に誘導される転写因子のプロモーター配列の下流に、自殺遺伝子を組み込んだレポーター遺伝子を構築した。このレポーター遺伝子を構成的に発現する細胞株に、ある細胞特異的な誘導シグナルをかけた場合、細胞は死滅する。しかしシグナルを担う遺伝子が、ライブラリー中のいくつかのリボザイムによって抑制されると、細胞が生き残る。この生細胞からプラスミドを回収すれば、ある細胞特異的に機能している遺伝子を発見することができる、と目論んでいる。また、本システムの有用性が評価され、生物学的手法論のレビュー誌である「Methods in Molecular Biology」誌に、「Functional gene discovery using hybrid ribozyme libraries(ハイブリッド型リボザイム・ライブラリーを利用した機能遺伝子探索)」という題名で、筆頭著者として執筆した。
看護センス育成モデル構築に向けた看護センスの概念の解明と尺度開発

今年度は、看護教員を対象に看護学実習や演習においてセンスが良いと感じた場面や事象について調査した。“学生のセンスが良いと感じたことがある"は23名(88.5%),“ない"は3名(11.5%)であった。センスが良いと感じた場面を分析した結果、17カテゴリが抽出された。【人間関係構築のための良好なコミュニケーションができる】【他者に関心を持ち、注目できる】【広い視野で観察できる】【状況を察知し、異変を感じることができる】【先を予測した行動ができる】【一連の看護技術を手際よく、実践できる】【対象の個別性に応じた看護実践ができる】【より効果的な看護実践を行うために思考を発展できる】【他者の思いに共感できる】【周囲の状況を踏まえ、対象を配慮した自然な行動がとれる】【目的意識を持ち、主体的に行動できる】【他者の利益のために探究できる】【自分の考えを言語化し、他者へ発信できる】【他者の視点や状況を受け入れ,柔軟に対応できる】【自己を理解し、コントロールできる】【他者と協調できる】【価値を共有し、尊厳を持った行動ができる】であった。看護教員が捉えるセンスは、対象に関心を持ち共感する、創造する、予測する、協調する、自己の考えを発信するであり、様々な要素が組み合わさり複合的に機能しているものであった。そしてセンスは、社会人基礎力や看護の専門的知識・技術をベースに「いかにより良く」という付加価値のある援助であり、対象の尊厳を保ち、喜びを共有するなど相互満足に繋がる看護援助であることが示唆された.この結果は第38回日本看護科学学会学術集会で発表した。さらに研究を進めていくうえで「センス」という用語は日本特有の表現であることがわかり、海外における「センス」に近い概念を抽出するためにAustraliaでインタビューを実施した。この結果については分析中である。臨床看護師、看護管理者、看護教員と3者を対象にインタビューを実施したことにより多くのデータはとれたものの、どこに焦点を当てるべきか目的が定まらなくなってしまった。また、国際的視野からの探索も行ったため、計画していた尺度項目の抽出に時間を要してしまった。現在、質的分析から得た看護センスの特徴をもとに理論的枠組みの構築、質問項目の作成、尺度化について再度吟味している状況であるため、やや遅れていると判断した。看護センスの概念、構成要素は抽出された。現在この研究結果をもとに内容妥当性を担保できる質問項目を作成し、専門者会議を経て尺度化を行っている。パイロットスタディ、予備調査を行い、尺度を完成させていく。本研究の目的は、看護センス育成モデルの構築に向け、看護センスの概念の解明と尺度開発である。研究初年度は、看護センスの概念を明らかにするために文献検討を行った。しかし「看護のセンスがある・ない」と看護場面において頻繁に使用されているものの先行文献は乏しかった。「センス」に関連する用語や「センス」に近い概念も含め、引き続き検索、検討中である。また、臨床において「センス」という用語をどのように使用しているか、その構成要素を明らかにするために、看護管理者を対象に「看護のセンスが良いと感じた場面や人を想起し、看護のセンスを構成する要素とは何か」についてディスカッションを行った。看護センスを構成する要素として、【看護者としての知識や視点を持つ】【患者の状況や反応を情報として的確にキャッチする】【患者の発信している状況から本質を見極める】【患者の状況を統合的に分析し、問題を明確にする】【最悪の状況を見据えて行動する】【自己の考えを発信する】【創意工夫された卓越した技術を提供する】【良好な関係性の構築に結びつくコミュニケーションをとる】【共感や思いやりのある対応をする】【目的意識をもって主体的に行動する】【五感を超えた感性がある】【求められる役割以上の行動をとる】【周囲の状況を把握し、円滑な業務遂行のための行動をとる】の13カテゴリが抽出された。この結果は、第37回日本看護科学学会学術集会で発表した。看護センスにおける先行文献を検索したが、うまく検索できず文献検討に時間を要した。関連する用語やセンスに近い概念も含め、引き続き検討をしていく。また、他分野における「センス」の概念についてヒアリングを予定したが実施できなかったため、平成30年度に実施する予定である。また、臨床看護師が考える看護センスの概念および構成要素の探求については、看護師および看護管理者を対象にフォーカスグループディスカッションを行った。得られたデータを再度吟味し、看護センスの概念および構成要素について質的帰納的に分析し、検討していく。【人間関係構築のための良好なコミュニケーションができる】【他者に関心を持ち、注目できる】【広い視野で観察できる】【状況を察知し、異変を感じることができる】【先を予測した行動ができる】【一連の看護技術を手際よく、実践できる】【対象の個別性に応じた看護実践ができる】【より効果的な看護実践を行うために思考を発展できる】【他者の思いに共感できる】

【周囲の状況を踏まえ、対象を配慮した自然な行動がとれる】【目的意識を持ち、主体的に行動できる】【他者の利益のために探究できる】【自分の考えを言語化し、他者へ発信できる】【他者の視点や状況を受け入れ,柔軟に対応できる】【自己を理解し、コントロールできる】【他者と協調できる】【価値を共有し、尊厳を持った行動ができる】であった。看護教員が捉えるセンスは、対象に関心を持ち共感する、創造する、予測する、協調する、自己の考えを発信するであり、様々な要素が組み合わさり複合的に機能しているものであった。そしてセンスは、社会人基礎力や看護の専門的知識・技術をベースに「いかにより良く」という付加価値のある援助であり、対象の尊厳を保ち、喜びを共有するなど相互満足に繋がる看護援助であることが示唆された.この結果は第38回日本看護科学学会学術集会で発表した。さらに研究を進めていくうえで「センス」という用語は日本特有の表現であることがわかり、海外における「センス」に近い概念を抽出するためにAustraliaでインタビューを実施した。この結果については分析中である。臨床看護師、看護管理者、看護教員と3者を対象にインタビューを実施したことにより多くのデータはとれたものの、どこに焦点を当てるべきか目的が定まらなくなってしまった。また、国際的視野からの探索も行ったため、計画していた尺度項目の抽出に時間を要してしまった。現在、質的分析から得た看護センスの特徴をもとに理論的枠組みの構築、質問項目の作成、尺度化について再度吟味している状況であるため、やや遅れていると判断した。幅広い分野で使用されている「センス」という用語のため、ファッション、スポーツ界など他分野における対象者にヒアリングを行い、各分野におけるセンスの概念を参考にしながら包括的に構成概念を抽出する。また、看護センスは文化的背景も影響していると考え、Australiaの看護師や教育者へヒアリングを行い、国際的視点からも分析し、看護センスの概念および構成要素を抽出する。これらは尺度開発に補完的に用いる。また、臨床看護師から得た質的分析および先行文献から看護センスの評価尺度の理論的枠組みおよび質問項目の尺度化を行う。看護センスの概念、構成要素は抽出された。現在この研究結果をもとに内容妥当性を担保できる質問項目を作成し、専門者会議を経て尺度化を行っている。パイロットスタディ、予備調査を行い、尺度を完成させていく。H29年度は、専門職者のデータ収集ができなかったことやパーソナルコンピュター等の備品購入に至らなかったため、H30年度に実施するヒアリングのための旅費や人件費およびパーソナルコンピュターの購入に企てる予定である。またH30年度は、国際的視点からデータ収集を行うため海外でヒアリングを行う予定である。研究分担者である堀込・佐藤も同様に平成29年度の経費を繰り越し、海外へ渡航する旅費の一部に企てる予定である。尺度開発における質問項目の作成が遅れたため、パイロットスタディおよび予備調査に至らなかった。
フード・ビジネスにおける米飯の提供形態がコメ流通に及ぼす影響に関する研究

本研究はフード・ビジネスにおける米飯の提供形態の相違がコメ流通に及ぼしている影響を明らかにすることを目的とし、業界団体、関係機関、個別業者、コメ産地のヒアリング調査及び資料収集を行った。その結果、以下のことが明らかになった。消費者世帯のコメ消費は年々減少しているが、フード・ビジネスにおけるコメ需要は増加傾向であり、コメの総需要に占めるシェアは30%以上になっている。フード・ビジネスはいくつかに分類できるが、主たる事業及び米飯の位置づけの相違が米の仕入形態に大きな影響を及ぼしている。フード・ビジネス各社はコメの仕入れにおける価格、数量、品質の安定化を求め、コメ産地はそれに対応する必要に迫られている。大手フード・ビジネスとの取引は産地が生き残っていくための重要な戦略であるが、大手フード・ビジネスが必要とする数量を供給するには一つの産地では不十分であるため、農協の系統組織が重要な役割を果たしている。また、中間流通を担う大手卸売業者との緊密な連携も必要としている。チェーン・オペレーションを展開する大手フード・ビジネスにより、全国で同一規格の米飯商品(弁当、加工米飯等)を供給するという形態が伸びたことで、結果的にコメ産地(-農協)-卸売業者-フード・ビジネスという垂直的な結合が強化され、自由化が進展する中でも安定的な流通経路が個別的に形成されつつある。一方、それ以外のところでは過当競争が展開されており、安定的な結合に加われるコメ産地と、フード・ビジネス対応型集出荷体制が整備できず、結合に加われない産地との格差が生じつつあるということが明らかになった。本研究はフード・ビジネスにおける米飯の提供形態の相違がコメ流通に及ぼしている影響を明らかにすることを目的としているが、本年度はフード・ビジネスの米飯の提供形態や業態の類型を確定することに重点を置き、業界団体、関係機関のヒアリング調査及び資料収集、関連記事の整理を行った。その結果、以下のようなことが明らかになった。フード・ビジネスは大きく分類すれば、フード・サービス業者と(1)加工米飯業者に分類できるが、前者はさらに(2)レストランや食堂など本来の外食業者、(3)持ち帰り弁当などのいわゆる中食業者、(4)コンビニエンス・ストアや量販店などに弁当・惣菜を納品するいわゆるデリカ業者、(5)事業所・病院・学校等の食堂の運営やケータリングを行う集団給食業者、(6)炊飯を専門とする炊飯業者などに分けられる。また、以上のような業態を米の仕入形態および米飯の販売形態で分類すれば、第一に、米流通業者から米を仕入れて、米飯もしくは加工米飯の形態で流通業者を経て消費者に販売するか、もしくは他の業者に原料として販売するもの((1)、(6))、第二に、米の形態で米流通業者から仕入れるか、もしくは米飯・加工米飯の形態で第一の業者から仕入れ、それに調理を施して、流通業者を経て、あるいは直接消費者に販売するもの((2)、(3)、(4)、(5))に分けられる。前者が「炊飯」(米→米飯)という過程を担うことを主たる事業にしているのに対し、後者は「調理」という過程が主たる事業で、「炊飯」はその一部に過ぎないか、もしくは全く「炊飯」を行わない。また、前者にとっては提供商品に占める米飯の位置づけが高く、後者にとっては低い。このような主たる事業及び米飯の位置づけの相違が米の仕入形態に大きな影響を及ぼしていることが明らかになった。本研究はフード・ビジネスにおける米飯の提供形態の相違がコメ流通に及ぼしている影響を明らかにすることを目的としているが、本年度は個別業者レベルの調査に重点を置き、ヒアリング調査等を行った。フード・ビジネス各社は、不況下での消費者の購買行動の変化から低価格路線を進める一方、有機米使用など高品質化路線も進めており、原料米に求めるニーズをより多様化させている。良食味、低価格という点はともに必要とされるが、商品の種類によって、必要とされる品質、値頃感の水準は異なる。

米飯を主とし、原料米の食味等が決定的な意味を持っ商品もあれば、加工を前提とするため、加工に適した特性が原料米に求められる商品もある。さらに、米飯が主体とならないため、原料米の低コスト化が重視される商品など、品質、値頃感の水準は様々である。また、同じ大手実需者とはいえ一定の品揃えが必要な量販店とは異なり、フード・ビジネス各社は全国の店舗で同一の商品を供給するために、一定の品質のコメを大量に仕入れなければならない。そのため、安定的な数量確保という点が重視され、仕入に際しては事前契約を締結する場合が過半数を占める。以上のように、フード・ビジネス各社はコメの仕入れにおける価格、数量、品質の安定化を求めるため、コメ流通業者やコメ産地は事前契約に基づき、価格、品質ともに安定したコメを恒常的に納入しなければならない。そのためには集出荷施設の整備や生産者毎の品質管理等が必要であるが、コメ流通業者はともかく、それに対応できるコメ産地は未だ限定されているということが明らかになった。本研究はフード・ビジネスにおける米飯の提供形態の相違がコメ流通に及ぼしている影響を明らかにすることを目的としているが、本年度はフード・ビジネスとコメ産地との関係の調査に重点を置き、補足調査等を行った。その結果、以下のようなことが明らかになった。フード・ビジネス各社はコメの仕入れにおける価格、数量、品質の安定化を求めるため、コメ流通業者やコメ産地は事前契約に基づき、価格、品質ともに安定したコメを恒常的に納入しなければならない。そのためには集出荷施設の整備や生産者毎の品質管理等が必要であるが、それに対応できるコメ産地は未だ限定されていた。しかし、2004年4月の食糧法改定以降、実需者との安定的な取引を推進する必要に迫られたコメ産地は急速にフード・ビジネス対応型集出荷体制を整えつつある。コメ過剰下での競争的環境の中で、大手フード・ビジネスとの取引は産地が生き残っていくための重要な戦略であるが、大手フード・ビジネスが必要とする数量を供給するには一つの産地では不十分であるため、農協の系統組織が重要な役割を果たしている。また、中間流通を担う大手卸売業者との緊密な連携も必要としている。チェーン・オペレーションを展開する大手フード・ビジネスにより、全国で同一規格の米飯商品(弁当、加工米飯等)を供給するという形態が伸びたことで、結果的にコメ産地(-農協)-卸売業者-フード・ビジネスという垂直的な結合が強化され、自由化が進展する中でも安定的な流通経路が個別的に形成されつつある。一方、それ以外のところでは過当競争が展開されており、安定的な結合に加われるコメ産地と、フード・ビジネス対応型集出荷体制が整備できず、結合に加われない産地との格差が生じつつあるということが明らかになった。