hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
シナプス可塑性におけるカルモデュリン依存性キナーゼIIの作用機構

Ca^<2+>/カルモデュリン依存性プロテインキナーゼII(CaMキナーゼII)の286番目のスレオニン(Thr-286)の自己燐酸化反応は酵素をCa^<2+>依存性型からCa^<2+>非依存性型(恒常的活性型)に変換する.このCa^<2+>非依存性活性の上昇がシナプス伝達の促通に関与し,CaMキナーゼIIが記憶の素子として働くという仮説が提唱されている.これまでに海馬の長期増強(LTP)においてCaMキナーゼIIの自己燐酸化反応とCa^<2+>非依存性活性の上昇を確認した.本研究ではThr-286の自己燐酸化反応を特異的に認識する抗体を作製して,免疫組織化学的に自己燐酸化反応の亢進を確認した.LTPの誘発に伴って,CAl錐体細胞の細胞体と樹状突起で有意な免疫染色性の上昇が見られた.さらに,共焦点レーザー顕微鏡で調べると活性型CaMキナーゼIIの局在はNMDA受容体の発現部位とよく一致していた.次に,自己燐酸化反応はプロテインホスファターゼによっても調節されことから,LTP発現に伴うホスファターゼ活性の変化について調べた.LTP発現に伴って,プロテインホスファターゼ2Aの活性が有意に減少していた.このとき,プロテインホスファターゼ2Cの活性には変化は見られなかった.in vitroおよびin vivoの研究からプロテインホスファターゼ2AのB′αサブユニットが直接CaMキナーゼIIによって燐酸化され,プロテインホスファターゼ活性が減少することが明らかとなった.これらの結果はCaMキナーゼIIによるプロテインホスファターゼ2Aの調節がLTPにおけるCaMキナーゼIIの恒常的活性化反応のみならず可塑性発現に関与するシナプス蛋白の燐酸化反応にも関与することを示唆している.Ca^<2+>/カルモデュリン依存性プロテインキナーゼII(CaMキナーゼII)の286番目のスレオニン(Thr-286)の自己燐酸化反応は酵素をCa^<2+>依存性型からCa^<2+>非依存性型(恒常的活性型)に変換する.このCa^<2+>非依存性活性の上昇がシナプス伝達の促通に関与し,CaMキナーゼIIが記憶の素子として働くという仮説が提唱されている.これまでに海馬の長期増強(LTP)においてCaMキナーゼIIの自己燐酸化反応とCa^<2+>非依存性活性の上昇を確認した.本研究ではThr-286の自己燐酸化反応を特異的に認識する抗体を作製して,免疫組織化学的に自己燐酸化反応の亢進を確認した.LTPの誘発に伴って,CAl錐体細胞の細胞体と樹状突起で有意な免疫染色性の上昇が見られた.さらに,共焦点レーザー顕微鏡で調べると活性型CaMキナーゼIIの局在はNMDA受容体の発現部位とよく一致していた.次に,自己燐酸化反応はプロテインホスファターゼによっても調節されことから,LTP発現に伴うホスファターゼ活性の変化について調べた.LTP発現に伴って,プロテインホスファターゼ2Aの活性が有意に減少していた.このとき,プロテインホスファターゼ2Cの活性には変化は見られなかった.in vitroおよびin vivoの研究からプロテインホスファターゼ2AのB′αサブユニットが直接CaMキナーゼIIによって燐酸化され,プロテインホスファターゼ活性が減少することが明らかとなった.これらの結果はCaMキナーゼIIによるプロテインホスファターゼ2Aの調節がLTPにおけるCaMキナーゼIIの恒常的活性化反応のみならず可塑性発現に関与するシナプス蛋白の燐酸化反応にも関与することを示唆している.海馬CA1領域におけるシナプス伝達長期増強(LTP)はヒトの学習・記憶の分子基盤である。私達はこれまでに,海馬CA1のLTPにおいてカルモデュリン依存性キナーゼII(CaMキナーゼII)のCa^<2+>非依存性活性と全活性が上昇することを報告した。本研究ではLTPにおけるCaMキナーゼIIの標的蛋白質について検討した。海馬切片でLTPを誘発した後,1時間後にCA1をパンチアウトして,プロテインホスファターゼ(PP)活性を測定するとPP-1,PP-2B(カルシニューリン),PP-2Cの活性は変化することなしに,PP-2Aの活性が有意に減少していることが解った。あらかじめ,海馬切片を^<32>P_-無機燐酸で標識して,PP-2Aの抗体で免疫沈降して燐酸化反応を調べると,PP-2Aの分子量55kDaの調節サブユニットの燐酸化反応がLTP発現に伴って上昇していた。この燐酸化反応はカルモデュリン阻害剤の前処置で完全に消失した。ラット脳からPP-2Aを精製して,CaMキナーゼIIとATP存在下にインキュベートするとPP-2Aの55kDaの調節サブユニットが燐酸化され,その結果,プロテインホスファターゼ活性が低下した。これらの結果から,PP-2Aが海馬LTPにおけるCaMキナーゼIIの標的分子の一つであり,プロテインホスファターゼの活性低下はCaMキナーゼIIの恒常的な活性化のみならずAMPA型グルタミン酸受容体など,シナプス可塑性に関与する分子の燐酸化反応の持続に関与している。このことは海馬LTPの維持過程に重要であると考えられる。海馬CA1シナプス伝達長期増強(LTP)は入力線維の高頻度刺激によるシナプス後部でのNMDA受容体の活性化,プロテインキナーゼの活性化反応と連続的に進行して,シナプスにおいて最終的に長期の可塑的変化を引き起こす.

これまでにLTPにおいてカルモデュリン依存性キナーゼII(CaMキナーゼII)が恒常的に活性化されること,シナプス前部,後部におけるCaMキナーゼIIの標的分子のいくつかを同定した.本研究ではCaMキナーゼIIの活性化型である自己燐酸化酵素を特異的に認識する抗体を用いて海馬LTPにおけるCaMキナーゼIIの活性化状態を免疫組織化学的に検討した.海馬CA1への入力線維を高頻度刺激し,15,60分後に海馬切片を固定し,免疫染色を行い活性化部位について調べた.いずれの時間においても,CA1錐体細胞の細胞体と樹状突起において有意な免疫染色性の上昇が見られた.NMDA受容体の2Bサブユニットに対する抗体と二重染色すると,活性型CaMキナーゼIIの存在部位はNMDA受容体の発現部位と一致していた.これに対して,CA3および歯状回の神経細胞では活性型CaMキナーゼIIの有意な変化はみられなかった.また,共焦点レーザー顕微鏡を用いることによってスパインでの変化も調べることができた.これらの結果は以前,報告したLTP発現に伴うCaMキナーゼIIの活性の変化と一致していた.今回,作製した活性型CaMキナーゼIIを認識する抗体を用いることによってシナプスの可塑的変化を可視化することが可能となった.現在,恐怖条件付けを行ったラットにおける海馬,扁桃核でのCaMキナーゼIIの動態についても検討を進めている.
Siベース発光デバイス用材料:β-FeSi2単結晶の作製とホモエピタキシャル成長

微細化によるSi超々大規模集積回路(ULSI)の高密度化は金属配線の電気信号伝達遅延が大きな問題となるまでに達し、より高速化を進める上で早急に解決すべき障壁となっている。その解決手段の一つとして、電気配線に代わる光接続が提唱されており、β-FeSi_2はSiベースの発光受光デバイス用材料の最有力候補として精力的に研究されている。本研究では、高品質なβ-FeSi_2単結晶の作製および、それを基板としたホモエピタキシャル成長を通じて、β-FeSi_2の物性とデバイス性能の可能性を抽出することを目指す。今年度はロッド状共晶組織の「α相+ε相→β相」包析変態反応を利用したバルクβ-FeSi_2結晶の作製と、薄膜成長技術の確立を目指してSi基板上へのヘテロエピタキシャル成長を試み、下記の知見を得た。1.FeSi_2組成の溶湯を一方向凝固することにより、α相マトリックス中にεロッドが配列した試料を得ることができた。α相とε相はそれぞれ単結晶であり、試料内では同一方位を有していた。2.α相とε相はそれぞれ単結晶であり、α相の凝固方向に垂直な結晶面(横断面)は(100)面であった。一方、ε相では(100)面や(001)面と様々な結晶面が現れたが、試料内では同一方位を有していた。3.このロッド状共晶試料を熱処理することにより得られるβ相は、横断面においては様々な方位を持っており、異方性はなかった。一方、凝固方向に平行な結晶面(縦断面)では、粒界を持たず長く伸びたβ相が確認された。4.熱反応堆積法によりSi(001)基板上へFeを約50nm蒸着したところ、基板温度800°Cで高配向性を有するβ-FeSi_2薄膜の成長が確認された。5.その薄膜を熱処理することにより、残留ε相が完全に消失しβ-FeSi_2の配向性が更に向上した。その解決手段の一つとして、電気配線に代わる光接続が提唱されており、β-FeSi_2は発光受光デバイス用材料の最有力候補として精力的に研究されている。本研究では、高品質なβ-FeSi_2単結晶の作製および、それを基板としたホモエピタキシャル成長を通じて、β-FeSi_2の真の物性とデバイス性能可能性を抽出することを目指す。今年度はロッド状共晶組織の「α相+ε相→β相」包析変態反応を利用したバルクβ-FeSi_2結晶の作製と方位制御について検討し、下記の知見を得た。(1)FeSi_2組成の溶湯を一方向凝固することにより、α相マトリックス中にεロッドが配列した試料を得ることができた。このε相は多少湾曲することがあっても、試料の途中で途切れたり、枝分かれすることがなかった。(2)α相とε相はそれぞれ単結晶であり、α相の凝固方向に垂直な結晶面(横断面)は(100)面であった。(3)このロッド状共晶試料を熱処理することにより得られるβ相は、横断面においては様々な方位を持っており、異方性はなかった。(4)ロッド状共晶試料の熱処理方法を最適化することにより、ε相がファセット化することを見出した。

4.熱反応堆積法によりSi(001)基板上へFeを約50nm蒸着したところ、基板温度800°Cで高配向性を有するβ-FeSi_2薄膜の成長が確認された。5.その薄膜を熱処理することにより、残留ε相が完全に消失しβ-FeSi_2の配向性が更に向上した。
ジャンプ過程とマイクロストラクチャー・ノイズを考慮した金融高頻度データの計量分析

殆どの資産価格評価についての先行研究において、計量モデルのパラメーターが識別できると仮定されていますが、実際のデータではこれらの仮定を満たさないことも沢山あります。したがって、パラメーターの完全な識別性を保証できない場合(すなわちWeak IdentificationあるいはPartial Identificationの場合)でも使われる計量手法を開発するのは一つの課題です。またミクロ計量経済学の分野でもWeak Identificationに関係する「Many Instruments/Many Weak Instruments」のような問題があります。モデルの識別性が弱い場合、従来の漸近理論による統計手法はうまく行かないとよく指摘されております。これらの一連の問題の解決策を模索するために、今年度はBootstrapのような小標本理論による統計手法の研究に集中しました。具体的に、カナダのモントリオール大学に滞在した間に(6月27日-9月14日)、BootstrapとWeak Identificationの専門家であるRussell Davidson教授とJean Marie Dufour教授のところに自分の論文を持って行き、また彼らのコメントを自分の研究に反映し、まとめました。帰国後、論文「Bootstrapping Anderson-Rubin and J Statistics with Many Instruments」を京都大学経済研究所計量経済学セミナと関西計量経済学研究会に発表し、今はもらったコメントを基に、論文を書く直し、年内に投稿する予定です。また、モントリオール大学に所属しているPhD学生Maximilien Kaffoとの共同研究「Bootstrapping Anderson-Rubin and J Statistics with Many Weak Instruments」は5月に開催される計量経済学理論の学会「CIREQ Econometrics Conference: High Dimensional Problems in Econometrics」に発表される予定です。本研究は金融市場のマイクロストラクチャ・ノイズに頑健なリスク測度Multipower Variation (MPV)を開発することを目指しています。平成22年度はまず、ノイズに頑健なMPVに関する漸近理論の開発に着手するため、研究計画に挙げた参考文献を含む計量ファイナンスの関連論文について分野を俯瞰できるようサーベイを行いました。また実証分析として、日経NEEDS高頻度データから計算されたノイズに頑健なMPVを用いて、異なる確率的ボラティリティ変動モデルを推定し、またモデルの当てはまりのパフォーマンス比較を行いました。今はこれらの研究結果を論文にまとめる作業を行っています。また、私は2010年9月から2011年4月まで京都大学に派遣留学生としてカナダのCREPUQ大学連合モントリオール大学へ派遣されました。派遣期間中は、本研究に関する専門知識を深めるために、モントリオール大学とマギル大学でAdvanced Econometrics, Time Series Analysis, Selected Topics in Econometrics, Empirical Research in Financeなど博士課程授業を履修し、よい成績で単位を取りました。また、積極的に計量経済学理論と計量ファイナンスの研究会や学会に参加し、これらの分野の第一線の研究者の最新論文や研究成果をオブサーブすることができました。それと同時に、授業とセミナで発表を行うことで自分の研究結果に対するカナダの計量経済学者たちの意見とアドバイスをもらいました。
第三象牙質形成におけるRunx2の役割に関する組織細胞学的研究

本研究は、骨芽細胞分化に必須の転写因子であるRunx2の歯牙における第三象牙質形成との関連を明らかにすることを目的とし、ヒト抜去歯における第三象牙質、および実験的にマウス臼歯に形成させた修復象牙質を対象にして、第三象牙質におけるRunx2の発現と基質の性状を組織化学的に解析した。その結果、ヒト第三象牙質およびマウス修復象牙質の形成細胞はRunx2を発現しており、また、それらの細胞と基質には骨組織に主に発現するosteopontinやosteocalcin等が強く発現していた。すなわち、第三象牙質の形成にはRunx2が関与し、その基質は骨組織の性状と類似していることが明らかになった。我々は、象牙芽細胞特異的にRunx2を発現させたトランスジェニック(Tg)(Col1a1-Runx2)マウスを用いて象牙芽細胞分化過程におけるRunx2の機能を解析し、Runx2は象牙芽細胞を骨芽細胞様の細胞に形質転換することを明らかにした。そして、Tgマウスの象牙質が、う蝕・咬耗・磨耗・窩洞形成等の刺激により形成される第三象牙質の特徴と多くの共通点を有することから、本研究はRunx2の第三象牙質形成における役割を組織細胞学的に解明することを目的とした。本年度は、主にヒトの歯における第三象牙質をTeマウス象牙質と組織学・組織化学的に比較することに重点を置いて研究を行った。ヒトの健常歯、および、う蝕、歯周病による抜去歯を通常のヘマトキシリン・エオジン染色により観察して第三象牙質形成歯をサンプリングし、Arana-Chavez and Massa(2004)等の文献を参考に象牙細管や埋入細胞の有無などによりタイプ分けした。そして、それらにおけるRunx2の発現と、象牙芽細胞マーカーおよび各種硬組織基質タンパク質の発現を免疫組織化学により解析した結果、第三象牙質において、その形成細胞におけるRunx2の微弱な発現と骨基質に主に発現するオステオポンチンやオステオカルシンの強い発現を認め、Teマウス象牙質の性質と非常に類似することが明らかになり、Runx2の第三象牙質形成への関与が示唆された。現在、マウスの加齢歯や窩洞形成により得られた反応性の象牙質について同様の解析を行っている。我々は、骨芽細胞の分化に必須の転写因子であるRunx2が歯牙において象牙質を形成する象牙芽細胞に発現すると、それを骨芽細胞様の細胞に形質転換して骨様象牙質を形成することをトランスジェニック(Tg)(Colla1-Runx2)マウスを用いた研究から明らかにした。Tgマウスの象牙質は、う蝕・咬耗・磨耗等の刺激により形成される第三象牙質の特徴を有することから、本研究は第三象牙質形成におけるRunx2の関連性を解明することを目的としており、組織細胞学的に解析を行っている。ヒトの歯については、矯正治療による抜去歯を健常な歯の対照として用い、齲蝕や破折、および歯周炎により抜歯した歯について解析するために、これまでに第3大臼歯を中心に、臼歯、犬歯、切歯合わせて182本の抜去歯をサンプリングし、組織標本を作製した。そして、形成されている第二,第三象牙質を象牙細管の有無、走行の乱れ、基質に埋入する細胞の有無等により分類してRunx2、象牙芽細胞マーカー(Nestin,DSPP)および各種硬組織基質タンパク質(osteopontin,osteocalcin,DMP1)の免疫組織化学により比較検討した。マウスについても、加齢とともに形成される第二象牙質と実験的に歯牙表面を摩耗させた臼歯の象牙質を同様に比較解析した。その結果、第二象牙質の象牙芽細胞と基質の性状は原生象牙質に類似していたが、骨様の第三象牙質の多くはRunx2-Tgマウスと同様な性状を示し、すなわち、第三象牙質形成におけるRunx2の重要性が示唆された。我々は、骨芽細胞分化に必須の転写因子であるRunx2が象牙質を形成する象牙芽細胞に発現すると、象牙芽細胞は骨芽細胞様の細胞に形質転換して骨様象牙質を形成することをトランスジェニック(Tg)マウスを用いた研究で明らかにした。そして、そのTgマウスの象牙質は、う蝕・咬耗・磨耗等の外的刺激により形成されると考えられている第三象牙質の特徴に類似していた。そこで、本研究は第三象牙質形成におけるRunx2の機能を解明することを目的として組織細胞学的な解析を行った。ヒトの歯を用いたRunx2、象牙芽細胞マーカー(Nestin, DSPP)および各種硬組織

基質タンパク質(osteopontin, osteocalcin, DMP1)の免疫組織化学により、第三象牙質に相当する構造の表面に配列する象牙芽細胞の中にはRunx2やosteocalcinの発現を示すものがあり、さらにその基質には骨基質に主に発現するosteopontinやDMP1が強く発現しており、Tgマウスの骨様象牙質の性質と類似していた。本年度は特に、マウスの下顎臼歯咬頭部を実験的にダイアモンドポイントで摩耗させて象牙質を露出させ、付加的に形成される修復象牙質の性状について実験を行った結果、修復時の象牙芽細胞におけるRunx2の発現と、修復象牙質におけるosteopontinの強発現、およびDMP1の弱発現を確認した。また、Runx2発現細胞において、象牙芽細胞のマーカータンパクであるNestinの発現が低下していることが示唆された。この結果は、ヒト第三象牙質やTgマウスの骨様象牙質の性状と非常に類似していることから、修復的に形成される象牙質の形成にはRunx2の発現が関与し、修復象牙質の性状は骨基質に類似していることが示唆された。
中枢アシンニューロンの相互調節機構

アミンニューロンが′′状態依存性活動′′をほぼ一斉に行っている機構の中に,アミン-アミン性回路の依在が指摘される。このアミン性回路に関して,青斑核ノルアドレナリンニューロンを用い,成熟脳のみならず発達段階の脳について検討した。1)ドーパミン性入力は視床下部A13ニューロン群に由来する。2)ノルアドレナリン性入力は延髄A1,2ニューロン群に由来する。3)アドレナリン性入力は延髄C1ニューロンに由来する。4)セロトニン性入力は中脳,橋から由来する。5)アドレナリン終末はノルアドレナリンニューロンと大型の非対称シナプスを作る。6)ドーパミン終末はノルアドレナリンニューロンと非対称シナプスを,非アミンニューロンと対称シナプスを作る。以上の結果を総合すると,青斑核ノルアドレナリンニューロンの活動は,自律神経性の活動情報が上位よりはドーパミン性入力を経て,下位よりはアドレナリン性入力を経てもたらされることによって,強い調節を受けていると考えられる。これらアミン性回路は青斑核に特異的であり,その他の部位に存在するアミンニューロンに対する回路とは異なることが示唆された。一方,発達段階脳についてはセロトニン終末の一過性集積を中心に検討した。その結果,幼弱セロトニンニューロンには,発達中の知覚領野皮質に知覚入力と連動して濃密な一過性終末を作り,知覚受容皮質細胞の分化が終ると投射をやめるものがある事が分かった。それは幼弱期皮質投射セロトニンニューロンの約40%を占めるがニューロンは決して消失しない。これら特殊な幼弱アミンニューロンへのアミン性入力についる目下検討している。ラット青斑核のノルアドレナリン(NA)ニュ-ロンに対するアミン性入力を調べるため、1)青斑核における各種アミン性終末とその標的構造の大きさおよびシナプスの形態について半定量的に検討し、ついで2)アミン性入力の起源について二重標識法を用いて検討した。検討した終末はド-パミン(DA)、アドレナリン(AD)、セロトニン(5ーHT)である。DA、5ーHTに対する抗体とAD合成酵素フェニ-ルエタノ-ルアミンーNーメチル転位酵素(PNMT)に対する抗体を用いた。逆行性標識はWGAapoHRPーAuで行った。AD(PNMT免疫陽性)線維終末は大型(60%が直径1μm以上)でその80%が青斑核NAニュ-ロンと典型的非対称シナプスを作り、延髄下端のC1,2,3に位置する細胞体から由来する。5ーHT線維終末は小型で(95%が直径1μm以下)青斑核中の非アミンニュ-ロンと非対称シナプスを作り背側縫線核から由来する。DA線維終末は小型(50%が直径1μm以下)から大型(50%が値径1μm以上)にわたり,NAニュ-ロンと非アミンニュ-ロンの両者に終末する。約70%が非対称シナプスを作り、間脳A11,13に位置する細胞体から由来する。以上の事が明らかになり、青斑核NAニュ-ロンの活動はアミンニュ-ロンによる調節を強く受けており、そのうちADによるものが最も直接的で、ついでDAの影響が大きく、5ーHTは非アミンニュ-ロンを介した間接的な調節と思われる。さらにADが延髄腹側部、DAが視床下部から主として由来することを考えると、臓性入力の影響下にAD,DA両ニュ-ロンが働き、NAニュ-ロンの状態特異的活動に対する調節を行っていることが示唆される。アミンニューロンが“状態依存性活動"をほぼ一斉に行っている機構の中に、アミン-アミン性回路の存在が指摘される。このアミン性回路に関して、青斑核ノルアドレナリンニューロンを用い、成熟脳のみならず発達段階の脳について検討した。

1)ドーパミン性入力は視床入力は視床下部A13ニューロン群に由来する。2)ノルアドレナリン性入力は延髄A1、2ニューロン群に由来する。3)アドレナリン性入力は延髄C1ニューロンに由来する。4)セロトニン性入力は中脳、橋から由来する。5)アドレナレン終末はノルアドレナリンニューロンと大型の非対称シナプスを作る。6)ドーパミン終末はノルアドレナリンニューロンと非対称シナプスを、非アミンニューロンと対称シナプスを作る。以上の結果を総合すると、青斑核ノルアドレナリンニューロンの活動は、自律神経性の活動情報が上位よりはドーパミン性入力を経て、下位よりはアドレナリン性入力を経てもたらされることによって、強い調節を受けていること考えられる。これらアミン性回路は青斑核に特異的であり、その他の部位に存在するアミンニューロンに対する回路とは異なることが示唆された。一方、発達段階脳についてはセロトニン終末の一過性集積を中心に検討した。その結果、幼弱セロトニンニューロンには、発達中の知覚領野皮質に知覚入力と連動して濃密な一過性終末を作り、知覚受容皮質細胞の分化が終ると投射をやめるものがある事が分かった。それは幼弱期皮質投射セロトニンニューロンの約40%を占めるがニューロンは決して消失しない。これら特殊な幼弱アミンニューロンへのアミン性入力について目下検討している。
質量分析法によるホスファチジルイノシトール類の脂肪酸側鎖の分析

ホスファチジルイノシトール(PI)3-キナーゼは、生体内でPI4,5-2リン酸の3位をリン酸化して、細胞増殖・分化、アポトーシス等を制御するセカンドメッセンジャーとして機能すると考えられるPI3,4,5-3リン酸を生成する重要な酵素である。この酵素は天然のPIを基質とすることができるが、ジアシルグリセロール部分の2位に天然のアラキドン酸とは異なる炭素数18,20の飽和脂肪酸が結合したPIでは反応が進行しない。そこでPI3-キナーゼの基質特異性を調べるために、ジアシルグリセロール部分の1位に天然と同じステアリン酸、2位に炭素数218の飽和脂肪酸が結合したPIを合成した。合成PIをATPまたは^<32>PラベルATP存在下PI3-キナーゼ反応をおこない、3位リン酸化を行った。生成物のPI3-リン酸は、高速原子衝撃質量分析法(負イオンFAB MS)およびオートラジオグラフィーで検出した。FAB MS分析を行うに際しては、反応生成物を効率よく検出するためにマトリックスの最適化をおこない、トリエタノールアミン-グリセロール(3:1)がPI3-リン酸の[M-H]イオンを感度よく生成することを見いだした。更にNa塩は遊離型にする、高速スキャンをおこなうなど分析条件も検討した。これらの分析の他に、酵素反応液中に含まれるPI、PI3-リン酸、キャリアーとして加えたホスファチジルセリンの混合物から、固相抽出用カートリッジSep-PacC_<18>を用いてPI3-リン酸を単離する方法の検討もおこなった。本研究の結果、PIのジアシルグリセロール部分の2位に不飽和のアラキドン酸が結合していなくても、炭素数210の飽和脂肪酸が結合していればPI3-キナーゼの基質となることが明らかとなった。この結果は、今後のPI3-キナーゼの基質の分子設計、酵素阻害剤の設計などに新たな可能性が開けたことを示すものである。ホスファチジルイノシトール(PI)のリン酸化、加水分解を経て生成するイノシトール3リン酸(IP3)およびジアシルグリセロールは、細胞内情報伝達にかかわるセカンドメッセンジャーとして知られている。PIの3,4,5位がリン酸化されたPI-3,4,5-P_3(PIP3)も重要なセカンドメッセンジャーと考えられているが、細胞内で生成する量が微量なため機能解明には至っていない。動物のPI類はグリセロール部の1位にステアリン酸を主とする飽和脂肪酸が、2位にアラキドン酸を主とする不飽和の脂肪酸が結合している。我々はPIP3の生体内での機能の解明を行うために1位、2位に飽和のステアリン酸側鎖を持つPI、PI3を合成し、酸素反応を行った。しかし天然品と異なりPIはPI3キナーゼの基質にならず、PIP3は加水分解酵素5-ホスファターゼの基質にならなかった。グリセロールの2位の脂肪酸がどのような時にこられの酵素の基質となるかを検討するために、2位に鎖長の異なる脂肪酸を結合させたPIおよびPIP3を合成した。2位の脂肪酸側鎖の鎖長がC_2,C_4,C_8,C_<12>,C_<16>,C_<18>のPIを用いた実験では、C_2-C_<12>がPI3キナーゼの基質となることが判明した。

C_2,C_4,C_8およびC_<18>のPIP3を用いた実験では、C_2,C_4が5-フォスファターゼの基質となることがわかった。2位に長鎖の脂肪酸側鎖をもつものは基質となり得ないことから、これらの結果は酵素が基質を認識する上で、2位の脂肪酸構造が重要であることを示すものである。実験に用いた合成品および合成中間体の構造認識は、主に質量分析(負イオンのFABMS)で行った。さらに、リン酸化されたPI類の分析を行うために、最も適したFABMS条件を、市販の4位リン酸化PI(PI4P)を用いて検討した。この結果、負イオンFABMS用マトリックスとして広く用いられているトリエタノールアミン(TEA)のみを用いた時より、TEAとグルセロールの3:1混合物を用いた方が、擬分子イオン[M-H]^-を感度良く検出できることを見いだした。ホスファチジルイノシトール(PI)3-キナーゼは、生体内でP14,5-2リン酸の3位をリン酸化して、細胞増殖・分化、アポトーシス等を制御するセカンドメッセンジャーとして機能すると考えられるPI3,4,5-3リン酸を生成する重要な酵素である。この酵素は天然のPIを基質とすることができるが、ジアシルグリセロール部分の2位に天然のアラキドン酸とは異なる炭素数18,20の飽和脂肪酸が結合したPIでは反応が進行しない。そこでPI3-キナーゼの基質特異性を調べるために、ジアシルグリセロール部分の1位に天然と同じステアリン酸、2位に炭素数218の飽和脂肪酸が結合したPIを合成した。合成PIをATPまたは^<32>PラベルATP存在下PI3-キナーゼ反応をおこない、3位リン酸化を行った。生成物のPI3-リン酸は、高速原子衝撃質量分析法(負イオンFAB MS)およびオートラジオグラフィーで検出した。分析の結果から、PIのジアシルグリセロール部分の2位に不飽和のアラキドン酸が結合していなくても、炭素数210の飽和脂肪酸が結合していればPI3-キナーゼの基質となることが明らかとなった。負イオンFABMS分析を行うに際しては、反応生成物を効率よく検出するためにマトリックスの最適化をおこない、トリエタノールアミン-グリセロール(3:1)がPI3-リン酸の[M-H]イオンを感度よく生成することを見いだした。負イオンFAB MS分析は酵素反応液の粗抽出物を用いたが、酵素反応液中に含まれるPI、P13-リン酸、キャリアーとして加えたホスファチジルセリンの混合物から、固相抽出用カートリッジSep-pac C_<18>を用いてPI3-リン酸を単離する方法の検討をおこなった。C_<18>TLCプレートを用いて予備実験をおこない、Sep-PacからCH_3OH-CHCI_3(1:3)でPS、PIを溶出し、Sep-Pakを反転後CHCl_3-CH_3OH-0.5M NH_4OH(9:7:2)でPI3-Pを溶出できることが明らかになった。実際の分離、および分離できる試料量などについて、更に検討したい。
ルイス酸を活用した新規合成反応による生理活性化合物の合成

これまで続けてきたルイス酸を活用する新規合成反応の開拓研究を基礎に,2,2-ジアルコキシシクロプロパンカルボン酸エステルとカルボニル化合物の反応を検討した。アルデヒドとの反応においては,ルイス酸として四臭化スズあるいは四臭化チタンを用いて反応を行うと,極めて高い選択性でシス-3,4-置換-γ-ラクトンが高収率で得られることを明らかにした。また,対称ケトンと3-一置換シクロプロパンの反応においてはルイス酸として四塩化チタンを用いるとシス-2,3-置換-γ-ラクトンが高選択的かつ高収率で得られることを見出した。さらに,γ-ラクトンの三中心連続立体制御を試みた。その結果,四塩化ジルコニウムを活性化剤として用いれば,2,3-シス,3,4-トランス-三置換-γ-ラクトンが高選択的に得られることを見出した。この反応を利用して,苔より抽出され植物成長抑制作用を有する天然物,ジヒドロペルツサル酸の合成を行い、その簡便な合成法を確立した。しかし、天然由来のラクトンは,従来の構造の帰属に誤りがあることが明かとなった。すなわち,天然物の構造は2,3-トランス,3,4-シスの立体配置で,申請者らの反応では主生成物としては得られないものであったため,天然物そのものの合成は出来なかった。また,ジヒドロペルツサル酸の簡便な合成法,および,ラセミ体の光学分割法は確立できたが,この非天然型のラクトン及び合成中間体も抗菌活性などの調査を行った結果,期待していたほどの生理活性を示さなかった。さらに,ルイス酸を用いる新規合成反応の開発の一貫として,二価のゲルマニウム化合物を用いて種々の反応を検討した結果,ヨウ化ゲルマニウム(II)とハロゲン化アリルからin situでアリルゲルマニウム(IV)試薬を調製し,カルボニル化合物と反応させると対応するホモアリルアルコールが得られるBarbier型の反応を見出した。これまで続けてきたルイス酸を活用する新規合成反応の開拓研究を基礎に、2,2-ジアルコキシシクロプロパンカルボン酸エステルとアルデヒドとの反応の最適条件を検討した。その結果、ルイス酸として四臭化スズあるいは四臭化チタンを用いてジクロロメタン中-78°Cで反応を行なうのが最適であり、極めて高い選択性でシス-3,4-置換-γ-ラクトンが高収率で得られることを明らかにした。さらに、この反応を拡張し、非対称ケトンを求電子剤として用いたところ、これも極めて高い立体選択性で、嵩高いケトンアルキル基あるいはアルケニル基とアルコキシカルボニル基がシスに配置したγ-ラクトンが高収率で得られることを見出した。一方、2,2-ジアルコキシシクロプロパンカルボン酸エステルと対称ケトンとの反応についても詳細に調べ、この場合には、ルイス酸として四塩化チタンを用い、ジクロロメタン中-78°Cあるいはアセトニトリル中-45°Cで反応を行なうのが最適であることが分かった。この反応条件により、シス2,3-置換-γ-ラクトンが高選択的且つ高収率で得られることを明らかにした。これら詳細な検討によって、本反応においては、2,2-ジアルコキシシクロプロパンカルボン酸エステルにルイス酸が作用してE-体のカチオンエノラ-トが中間体として生成し、これがアルデヒドあるいはケトンとの6員環遷移状態を経由して反応が進行すると考えることによって立体選択性を説明できることが分かった。この知見は、本研究の今後の展開に重要な役割を果すものと期待される。

バイオアッセイに供するサンプルはカルボン酸であることが好ましいと考え、3位のエステルの加水分解法を確立した。この方法により、立体の異性化を伴うことなくカルボン酸を得ることができた。本研究は,これまでに申請者らが開発した種々のLewis酸を用いる立体選択的な新規合成法を基盤として,さらにこれらを発展させる形での不斉合成反応,特に触媒量の不斉源で高い光学収率をあたえる反応の開発を目的として行なったものである。さらに,これらの方法論を生理活性天然物やその誘導体の合成に応用し,また,生成物のバイオアッセイやコンピューターシミュレーションを通じて,新しい骨格を有する生理活性化合物の合成および評価を行ない,新規医薬・農薬などの実用的合成法を開発することを最終目標とする。これまでに申請者らは,シクロプロパン誘導体を用いる2,3-シス-二置換-および3,4-シス-二置換-γ-ラクトンの立体選択的な合成法を開発してきた。これらの手法を組み合わせれば2,3,4-三置換-γ-ラクトンの立体選択的合成法へ展開が可能と考え,γ-ラクトンの三中心連続立体制御を試みた。その結果,予期に反し,期待していた2,3-シス,3,4-シス-三置換-γ-ラクトンは主生成物ではないことが明かとなった。しかしながら,さらに検討を重ねたところ,四塩化ジルコニウムを活性化剤として用いれば,2,3-シス,3,4-トランス-三置換-γ-ラクトンが高選択的に得られることを見出した。この反応を利用して,苔より抽出され植物成長抑制作用を有する天然物,ジヒドロペルツサル酸の合成を行い、その簡便な合成法を確立した。しかし、天然由来のラクトンは,従来の構造の帰属に誤りがあることが明かとなった。すなわち,天然物の構造は2,3-トランス,3,4-シスの立体配置で申請者らの反応では主生成物としては得られないものであったため,天然物そのものの合成は出来なかった。また,ジヒドロペルツサル酸の簡便な合成法,および,ラセミ体の光学分割法は確立できたが,この非天然型のラクトン及びその合成中間体も抗菌活性などの調査を行った結果,期待していたほどの生理活性を示さなかった。申請者らはこれまでに、シクロプロパン化合物のLewis酸による開環反応を基盤とするラクトンの立体選択的合成反応の開発と天然物合成への応用,生成物の生理活性の調査を行ってきた。本年度は,さらにLewis酸を活用する新しい合成反応の開発を検討した。ホウ素やアルミニウム,スズなどの化合物はLewis酸として広く利用されている。これに対して,第4周期元素のガリウムやゲルマニウムの化合物はほとんど合成反応に使用されておらず,興味深い反応性を示すことが期素のガリウムやゲルマニウムの化合物はほとんど合成反応に使用されておらず、興味深い反応性を示すことが期待される。これらの元素の特徴は,還元力の強く極めて活性ではあるが,単離可能な低原子価状態の分子種が存在することである。そこで、二価のゲルマニウム化合物を用いて種々の反応を検討した結果,ヨウ化ゲルマニウム(II)とハロゲン化アリルからin situでアリルゲルマニウム(IV)試薬を調製し,カルボニル化合物と反応させると対応するホモアリルアルコールが得られるBarbier型の反応を見出した。すなわち,ジメチルホルムアミド中,室温でベンズアルデヒドとヨウ化アリルの混合物にヨウ化ゲルマニウム(II)を作用させたところ,ホモアリルアルコールが86%の収率で得られた。
近世の敵討ち実録の享受・伝来と、当時の敵討ち観に関する研究

敵討ちを題材にした実録(実録体小説)に注目し、三年間の活動を通じて、これまでに紹介されていない実録の発掘につとめ、それらを調査し、敵討ち実録の解題作成のためのデータ収集を第一の作業として行った。そのうえで、収集した実録の内容の吟味を行い、敵討ち実録のストーリー構築の方法を考察した。また、他ジャンル文芸との影響関係の有無を考え、演劇や黄表紙などの素材となっているケースをあらたに指摘した。今年度は研究計画に基づき、調査資料の収集と整理を中心に行った。調査先は、鳥取県立博物館中島家文書、関西大学図書館中村幸彦文庫、弘前市立図書館岩見文庫、天理大学図書館、大阪大谷大学図書館であり、ほかに個人の所蔵しているものについても調査する機会を得た。調査点数は100点であり、可能な物についてはデジタル撮影し(全体で約7000コマ)、サンプルの充実をはかった。調査撮影した敵討ち実録は、大半がこれまでに知られていないものである。今後敵討ち実録の特徴を明らかにしたり、他ジャンル文芸における素材の探求をしたりするためにも、非常に貴重なサンプルを収集することができた。調査した敵討ち実録については、冊子形態の解題集の刊行を企図しており、梗概をまとめている。このほか、データベース化を見据え、書誌的事項だけでなく、「敵討ちのもととなった事件の起きた年月」や「敵討ちの行われた年月」、「登場人物とその役割」、「物語中にみられる趣向」等をデータとしてパソコン入力している。また、『鎌倉街道女敵討』(弘前市立図書館蔵)の原文解読を行って、さらにこの一群の実録について諸本調査も実施した。ほかに、敵討ち実録における武者修行の趣向について分析を試み、事件の舞台となる時代が十七世紀半ば以降になると、武者修行の趣向があまりみられなくなってくることを明らかにした。本年度は前年度に引き続き、敵討ち物実録の調査を継続して行なった。それにより、これまで存在が知られていなかったり内容の不明であったりした敵討ち物実録が新たに発見され、書誌的事項や梗概、内容的特徴をパソコン入力することで、解題作成のためのデータをより充実させることができ、実録研究を一歩前進させることができた。将来的には、他ジャンル文芸の研究者にも冊子、あるいはデータベースの形で解題を公開し、それぞれの研究者の専門とするジャンルと実録との関連が把握できるようにし、近世文学研究における実録の重要性を広く認識させるつもりである。また、これまでのデータの蓄積に基づき、十七世紀における実録のあり方や実録の十七世紀の描き方について検討し、近世文化における実録のかかわり方を考えていく手がかりとした。この他、調査済みの敵討ち物実録のうち、「お春の敵討ち」と呼ばれる事件を扱った実録に注目し、重点的に諸本の比較検討や内容の吟味を行ない、この敵討ちが「実録」として流布していたにもかかわらず、実際に起きた事件ではない可能性が強いことを明らかにし、いかにして真実味を出したかということについて言及した。この敵討ち物実録の一本である『鎌倉道婦女敵討』の翻刻も行なっている。さらに、本年度は敵討ち物実録と他ジャンル文芸との交流についても研究を進め、「お春の敵討ち」を扱った実録が、浄瑠璃や草双紙の素材として取り入れられていることを具体的に解明し、近世文学における実録の重要性を裏付ける一助とした。本年度は前年度に引き続き、敵討ち物実録の調査を継続して行い、これまでに存在が知られていなかったり内容が不明であったりした敵討ち物実録を新たに見いだすことができた。それらの書誌的事項や梗概、内容的特徴をパソコン入力することで、解題作成のためのデータをさらに充実させることができ、敵討ち物実録のみならず、これまで研究が遅れていた実録研究そのものも一歩前進した。三年間の研究の最終年度ということもあり、これまでの調査結果を踏まえ、解題作成を行った。執筆した作品の点数や考察部分についてなど、まだ公開するだけのレベルには至っていないが、将来的には、他ジャンル文芸の研究者にも冊子あるいはデータベースの形で解題を公開し、それぞれの研究者の専門とするジャンルとの関連および、近世文学研究における実録の重要性を広く認識させていくつもりである。このほか、調査の過程で、他ジャンル文芸の素材となった敵討ち物実録や、実録ではないものの新出の敵討ち物版本小説などを見付けることができ、それらは発表を予定している。また、収集した実録の梗概をまとめていくにあたって、敵討ち物実録の内容的なあり方について考え、研究会において発表し、私見を提示した。合わせて、敵討ち物以外の実録の内容分析の必要も感じ、「大岡政談」、「久留米騒動」などの実録の内容を吟味し、それぞれの実録の執筆意図を明らかにした。そして、これらとの比較を通じて、敵討ち物実録の内容的特徴の検討を行った。
微分方程式に対する精度保証付き計算の総合ライブラリの構築

本研究では以下の成果を得た。(1)偏微分方程式に関する微分作用素の逆作用素をノルム評価するための精度保証法(2)常微分方程式の解析のためのLyapunov関数を陽に構築する精度保証法(3)多倍長精度保証演算ライブラリLILIBの開発・実装これに関する成果発表状況は、(1)については学術雑誌論文1件(査読付き)(2)については学術雑誌論文2件(査読付き)(3)についてはWeb上での実装ライブラリの公開、および以上に関する口頭発表多数(成果内容報告では主たるもの4件のみを挙げている)がある。(1)偏微分方程式の精度保証付き数値計算に関しては、佐世保高専校長の中尾充宏教授らの研究グループと打ち合わせを頻繁に行い、現在の研究状況の把握に努めた。(2)力学系の精度保証法に関しては、山本の指導のもとにある大学院生および統計数理研究所の松江要研究員と共同研究を行い、数回の国内/国際研究集会で発表した。大学院生(修士)との共同研究では、リャプノフトレーシングと呼ばれる新手法の開発に従事し、その適用範囲を見極める研究を行った。同時に、松江氏の協力のもとで、ふたつの異なる不動点を結ぶ解軌道であるヘテロクリニック軌道の精度保証法の研究を進め、実際にその存在を証明する精度保証例を構築した。大学院(博士)との共同研究では、閉軌道の存在証明を行うための精度保証法(前年度までに開発した樋脇・山本の方法)の改良を進め、非常に簡潔な形で記述・実装を行うことができるようになった。この研究では東京大学・松尾教授らの助言を受けている。得られた成果は、年度末に早稲田大学で行われた国際研究集会で発表した。また、同じ簡素化の手法によって、漸近安定な閉軌道の吸引集合を同定するための精度保証法の開発・改良に務め、実用に耐える方法が実装できるようになった。これらに関しては、現在論文執筆中である。なお、前年度に研究に着手した区間演算と位相幾何学をつなげる理論開発については、やや進展が遅れた状態となっている。(3)多倍長ライブラリに関しては、大学院生(博士)とともに進めている。実装を行った後に、実際の使用を通して検証した。その過程で、多倍長数の10進表記の問題などが明らかになり、これを改善した。特に、常微分方程式の代表的は精度保証法であるLohner法について、その多倍長プログラムを自動生成できるようになったことは大きな成果である。(1)偏微分方程式の精度保証法に関して、佐世保高専・京都大学・早稲田大学の研究者らと共同研究を行った。特に線形作用素のノルム評価を利用する方法をベースとし、常微分方程式の周期解の精度保証法である樋脇・山本の方法を応用して、偏微分方程式の周期解の精度保証法の構成に着手した。(2)力学系の精度保証法については、東北大学の研究者との共同研究を進め、特に不動点の吸引域の同定方法、および前述の樋脇・山本の方法に関しては学術雑誌に論文を投稿し、掲載された。また、リャプノフトレーシングと呼ぶ新しい解軌道の追跡方法を考案し、これに関する数値実験および理論的な考察を進めた。この方法は、不動点周りのリャプノフ関数を精度保証の手法を用いて構成する方法(前述の不動点の吸引域の同定法に関係する)にヒントを得て、さらにこれを簡略化するかたちで不動点から離れた軌道の近傍に等位面を持つリャプノフ関数を構成し、これを連続的につなげていくというものである。初期値として区間値を持つ力学系の軌道追跡の計算では、本手法を使う事でかなりの精度改善が見込まれる。(3)さらに、サドル型不動点に関するホモクリニック軌道の精度保証による検証のために、区間演算と位相幾何学をつなげるための理論の構築に着手した。具体的には、区間単体定理と呼ぶ定理を導出し、これによって解集合の位相的な特徴を区間演算に基づく精度保証法によって捉える事が可能となった。(4)多倍長精度保証ライブラリに関しては、基本的な部分の実装がほぼ終了した。特に、平方根の実装に関して新しい工夫を取り入れている。(1)偏微分方程式の精度保証付き数値計算に関しては、佐世保高専校長・中尾教授、九州大学・渡部准教授等と連絡を取り合って研究を進めた。その結果、2階の楕円型作用素の逆作用素の存在を照明するための精度保証法および逆作用素のノルム評価に関して3つの異なる手法を開発し、これらの有効性を数値例を通じて確認した。これについては論文を執筆して投稿し、年度内に出版することが出来た。(2)力学系の精度保証法の研究については、統計数理研究所・松江要氏、一橋大学・小林健太氏および東京女子大学・荻田武史氏をはじめとする早稲田大学・大石進一氏のグループとの連携研究を進めた。松江氏、小林氏とは週一回の会合を持ち、連続力学系のうち非双曲型不動点をもつものに対する精度保証法の開発の準備を行った。具体的にはn体問題の周辺を調べ、精度保証の適用可能性を検証した。

具体的な成果としては、連続力学系のほか離散力学系に対してもLyapunov関数を精度保証法によって構築する方法を開発した。これによって連続力学系の周期解の近傍における安定・不安定多様体を補足することが可能となり、この方面での研究発展の基礎を築くことができたと自負している。なお、これは松江氏との共同研究である。(3)多倍長ライブラリに関しては、大学院生とともに研究を進めた。特に、バグの洗い出しおよびライブラリの整備に努め、これまでの成果をまとめた論文の執筆に入っている。以上に関しては、国内外の学会・研究集会で発表するとともに、山本が主催者となって精度保証の研究者を集めて発表・討論を行う研究集会を催した(第1回山梨精度保証研究会)。数値解析、精度保証付き数理計算力学系の研究について、基礎的な部分はおおむね順調に進んでいるが,位相幾何学との連携に関しては共同研究者の異動もあって研究態勢が十全でなく、あまり進めることができなかった。多倍長精度保証のプログラム開発は概ね完了し、まとめの論文執筆にはいっている。偏微分方程式の研究に関しては、先行している中尾グループとの研究連絡は密にしているものの、こちら側からの具体的な貢献をなすことができないでいる。力学系の精度保証法については,論文2編を上梓し、また新しい理論的な発展も予想以上の速度で行われている。偏微分方程式の精度保証に関しては、共同研究者側の事情もあって、少し遅れがあるように感じる。多倍長精度保証ライブラリについては、おおむね目標に達している。これらを総合して、おおむね順調とした。最終年度であるので、得られた成果については論文のかたちでまとめていくことが優先される。遅れている部分である位相幾何学との連携に関して、共同研究態勢の立て直しを行い、出来る限りの成果を出して行く。偏微分方程式の研究については、中尾グループと定期的な研究打ち合わせを行うだけでなく、常微分方程式の精度保証法で得られている手法を適用し、共同であたる事ができる研究目標を捕らえ直す。具体的には、周期性をもつ偏微分方程式の解の精度保証を考えている。申請書の研究実施計画にあるように、(1)偏微分方程式の精度保証の共同研究をさらに進め、特に周期解の精度保証を目指す。(2)偏微分方程式の精度保証用コンピュータプログラムの自動生成ソフトの開発に着手する。(3)力学系の精度保証については、現状をさらに発展させ、進行波解の精度保証につながる結果を得たい。(4)多倍長精度保証については、一般公開を目指してライブラリを整えて行きたい。計算機環境整備を計画していたが、大学運営業務(学科長および専攻長)が予想以上に多忙となったため、計算機の新型への置換作業が遅れた。2013年度に行う事ができなかった計算機環境の整備を急ぎ、同時に国際学会への参加費として使用する。特に大学院生の帯同をともなうので、その費用にも充てる。該当なし
液中微小液滴の静電搬送を利用したPCRの研究

DNA増幅法としてPCRだけでなく、栄研化学社のLAMP法をはじめとした定温増幅法が開発されている。本研究の最終目標はPCRを微小液滴内で実現することであるが、一番の課題は温度コントロールであり、定温増幅法はPCRに先駆けて容易に実現できるであろうと考えている。そこで、微小液滴を液中(シリコンオイル)で定温に保つことによって微小液滴内でDNAを増幅させることを試みた。サーマルサイクラーを用いてシリコンオイル内で0.5μ1の液滴を65°Cで30分加熱して、静電搬送を行う電極上へと滴下し、蛍光顕微鏡で観察を行った。結果、増幅している液滴と増幅されていない液滴をはっきり区別できる程度に蛍光を発しており、顕微鏡を通して確認することができた。この結果を踏まえて、次に静電搬送を行う電極フィルムに熱電対センサーとマイクロセラミックヒーターを取り付けて、65°Cに液相(シリコンオイル)を加熱保温し、そこへ0.5μ1の微小LAMP液滴を導入して30分ほど観察した。途中、熱対流によって液滴が動かされてしまい、顕微鏡下で見失うことが度々あった。そこで、静電搬送を行う際の搬送可能印加電圧パターン周波数より高めの周波数を液滴に印加したところ、熱対流により動かされることを防ぐことができた。しかしながら、30分経過後液滴の発光は観察できなかった。原因は熱電対センサーの不具合と考えられ、現在センサーの修正を行っている状態である。また、液適温度を計測するために、ローダミンを液滴内に入れてその蛍光強度変化から温度測定を試みたが、定常状態でも蛍光強度が変化する、測定によりばらつきがあるなどの問題がありまだ確定していない。
フィンランドすべての住民に開かれた生涯学習機関の研究

現在、我が国では、技術の高度化、社会の高齢化、学籍社会から資格社会へのシフトにより生涯学習の必要性が認識され始めているが、成人の生涯学習参加率は僅か25%に留まっている。その数字には、社会システムや国民性だけでなく、各教育機関のサービス提供内容・方法も大いに関わっている。生涯学習において配慮すべきは、年齢、価値観、文化的背景の異なる様々な人たちに学習の場を提供するという点であり、日本の生涯学習においても今後このような視点がより一層重要になってくると考えられる。本研究では、生涯学習参加率66%を誇るフィンランドの生涯学習機関(成人教育センター)に焦点を当て、その高い学習参加率の要因を探る。