hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
IDH変異陽性グリオーマに対するグルタミン代謝を標的とした治療法の開発

ヒトグリオーマ継代培養細胞(U87 MG)にIDH1変異遺伝子を導入した細胞モデルに対してグルタミン代謝に関連する代謝酵素の遺伝子操作や阻害剤を用いて、抗腫瘍効果を検討する予定である。その際、グルタミン飢餓状態がグリオーマ細胞に及ぼす影響についても検討を行っており、他のアミノ酸の変動などに注目して解析を行う予定としている。IDH変異グリオーマの発生やエピゲネティックな変化(メチル化など)に焦点をあてて、2HGやグルタミン代謝が関連する因子について検討する予定である。また、同時に低酸素状態やグルタミン飢餓状態が及ぼす影響についても検討を行っており、他のアミノ酸の変動などに注目して解析を行う予定としている。ヒトグリオーマ継代培養細胞(U87 MG)にIDH1変異遺伝子を導入した安定発現細胞株の作成が困難であり、その後のメタボローム解析や遺伝子操作実験が遅れているため次年度使用額とした。本年度はメタボローム解析費用、遺伝子操作に必要なベクターや試薬、導入確認のための試薬などの計上を行っていく予定である。予定していたメタボローム解析が機械の都合で順次出来ていないことや、発注した薬品や実験器材の納入が遅れたため。
歯周病原細菌ポルフィロモナス・ジンジバリスの血小板凝集因子の同定とその作用機構

すでに構築している本菌のプロテアーゼや線毛の遺伝子の変異株(1)を用いて血小板凝集能の有無について詳細に検討した。その結果、以下のことがわかった。(a)本菌の主要な線毛であるHimA線毛の完全欠損株でも野生株同様の血板凝集能を示したことからHimA線毛は本活性とは無関係である。(b)アルギニン特異的プロテアーゼ(RGP)の完全欠損株(rgpA rgpB)、RGPとリジン特異的プロテアーゼ(KGP)の完全欠損株(rgpA rgpB kgp)および血球凝集素完全欠損株(rgpA kgp hagA)はまったく血小板凝集活性を示さなかった。一方、KGPの完全欠損株(kgp)は野生株同様の活性を示した。(c)RGPの阻害剤であるleupeptinは野生株の血小板凝集活性を部分的に抑制したがTLCKは阻害しないことがわかった。また、トロンビンの特異的阻害剤であるhirudinでも抑制されないことがわかった。これらの結果はRGPプロテアーゼ活性の本菌の血小板凝集活性への関与を示唆したが血小板凝集活性のすべてがRGPプロテアーゼ活性で説明がつくかどうかについては疑問の余地が残った。上述の遺伝子群はプロテアーゼドメイン以外に付着因子ドメイン(アドヘジン)をコードしていることから、アドヘジンドメインタンパクの血小板凝集活性への関与もRGPとともに重要な働きをしている可能性が示唆された。(d)予めプロスタグランジンE1で処理した血小板では本菌による凝集は生じないことから血小板内でのシグナル伝達による血小板の活性化が必要な現象であることが示された。
内部自由度を持った分子のボース・アインシュタイン凝縮体

スヒン内部自由度をもつボース・アインシュタイン凝縮体(BEC)における双極子-双極子相互作用の効果について研究を行った。近年、異核二原子分子のBECが精力的に研究されており、強電場中で分極を起こすことにより双極子相互作用が支配的な凝縮体が実現できると期待されている。一方、原子気体BECの場合も、原子のもっ磁気双極子モーメントのために双極子相互作用が働く。しかし、この磁気双極子相互作用は非常に弱くこれまで無視されてきた。我々は、本研究でスピン自由度がある場合には原子気体BECの微弱なダイポール相互作用が多大な影響を及ぼすことを明らかにした。まず、双極子相互作用を考慮してBECの基底状態を調べ、強磁性相互作用する原子ではスピンテクスチャが現れることを示した。スピンテクスチャの構造はテクスチャに伴う運動エネルギーと双極子相互作用の競合によってきまり、^<87>Rb原子のBECでは、BECのサイズを変えることで3種類のテクスチャが出現する。さらに注目すべき点は、BECがスピン-ゲージ対称性を持つために、スピンテクスチャに伴って超流動流が出現するという点である。つまり、双極子相互作用のために、静止した状態よりも自発的に回転した状態の方が安定になることがわかった。また、磁場中でゼーマンエネルギーが支配的な場合においても双極子相互作用の効果が観測可能であることを示した。トラップされた有限系のBECでは、BEC自身のつくる双極子場が非一様であるために、原子のラーモア歳差運動も非一様となり、自発的にスピンテクスチャを形成する。スピンテクスチャを観測する実験技術はすでに確立しており、我々の予言によりスピノルダイポール効果の初の観測が期待される。
消化管用デジタル・ラジオグラフィの装置および通信処理ソフトの臨床的開発

1.消化管に適した画像処理法として、早期胃癌のような微細病変の描出には周波数151p/cmを中心に3.0倍前後の強調、補正係数は最もノイズを減らすものが有用であり、階調特性曲線は病変の種類によって数種類を使い分けるのがよいと考えられた。2.装置については、管球焦点と管球容量をどのように設定していくかが問題と考えられた。散乱線除去グリッドは、低グリッド比で撮影線量を増やしてS/N比を向上させるか、高グリッド比で散乱線を除去しコントラストを向上させるかが今後の検討課題と考えられた。3. IM-DRはノイズが多く、空間分解能も劣っているために画像収集のアルゴリズムや画像処理方法を改良してもCFSS画像に比べて微細所見の描出は劣っているが、4M-DRはノイズが少なく、CFSS画像よりも鮮鋭な画像が得られた。4. DR用の消化管スクリーニング検査法は、上部食道では秒間6枚以上、中下部では秒間3枚の連続撮影が有効であった。胃や大腸では大口径イメージ・インテンシファイアで全体像を撮影し、その画像を観察して病変を探すことで無駄な患者への被曝は減少し、また細部については57インチの視野で撮影すると高解像度の画像が得られ、また撮影条件も安定することがわかった。5.心拍動との同期については、心拍動のモニターを開発したが、心拍動のサンプリングが今後の課題と考えられた。6. DRで撮影した消化管の微細病変のX線像と病理組織像との対比。(1)DRでは胃小区がCFSSよりも明瞭に描出され画像解析によって胃炎像のパターン化が可能と考えられる。(2)早期胃癌の表面像の描出ではCFSS画像に比べてDR画像は微細所見(0.3mm以下の陰影)の描出性が劣っており、IM-DRでは表面平坦型(IIb型)の診断は難しい。(3)早期食道癌の表面性状描出ではDRはCFSSに劣っていたが、辺縁像についてはDRのほうが明瞭であった。(4)表面型大腸腫瘍は表面や輪郭の性状からX線で過形成性ポリープと腫瘍(腺腫および早期癌)が可能と考えられ、DRはそれらを現すのに有用であった。7. 4M-DR装置を開発し、臨床的な検討を開始した。1)臨床画像(直接X線およびDR)と切除標本の肉眼像とを対比によって、消化管に適した画像処理法として、早期胃癌のような微細病変の描出には周波数15lp/cmを中心に3.0倍前後の強調が適していることがわかった。また、補正係数としては、最もノイズを減らすものが有用であり、階調特性曲線については、病変の種類によって適するものが異なるので、数種類を使い分けるのがよいと考えられた。2)装置については、撮影線量を増やしてS/N比を向上させるために大きなX線管球焦点を用いると、濃度分解能は向上したが、空間分解能の低下をきたした。今後、管球焦点と管球容量をどのように設定していくかが問題と考えられた。

散乱線除去グリッドについても、低グリッド比のものを使い撮影線量を増やしてS/N比を向上させるか、高グリッド比のもので散乱線を十分に除去しコントラストを向上させるかが今後の検討課題と考えられた。3)DR用の消化管スクリーニング検査法については、上部食道では秒間6枚以上、中下部では秒間3枚の連続撮影が有効であった。とくに、従来の直接X線撮影に比べて撮影の失敗がほとんどなくなり、また拍動や食道の蠕動によるブレについてもほぼ解消した。胃や大腸では、大口径イメージ・インテンシファイアで全体像を撮影し、その画像を観察し病変を探すことによって、無駄な患者への被爆は減少し、また細部については57インチの視野で撮影すると高解像度の画像が得られ、また撮影条件も安定することがわかった。4)心拍動との同期についは、心電図装置による心拍動のモニターを開発し、臨床で使用できるか検討中である。1.DR装置および画像処理方法の開発:臨床画像の検討から消化管の微細所見を描出するには処理条件として周波数15lp/cmを中心に3.0倍前後の空間周波数強調が適していることが分かった。またその補正係数として最もノイズを減らすものが有用であった。階調特性曲線についても適するもの分かってきたので、これらのデータに基づいて次年度に導入予定の2K×2KのDR試作機の開発に応用する。2.DR装置を用いた検査方法の検討:DRには従来のX線直接撮影とは多くの相違点があるため、これまでの検査法ではその特徴を十分に生かし切れないので、DR装置用の検査方法を検討した。DRの利点であるレアルタイムの画像表示機能を生かして、検査中にDR画像を5-6枚撮影し、撮影直後にその画像を観察し、微細病変の発見につとめた。この結果、初心者でも径1cm以下の小病変の発見が増加し、さらにその病変を狙って撮影することによって質的診断能も向上した。検査方法としては、DRの欠点であるダイナミックレインジの狭さを補い、さらに空間分解能の向上をはかるため、全体像のみ912インチの視野で撮影し、それ以外は57インチの視野で撮影するようなマニュアルを検討中である。また、DRでは曝写のタイミングが制御でき、心拍や体動と同期することによってタイミングがよくブレのない画像が撮影できるので、心電計をモニタリングし曝写をゲイトする装置を開発し臨床試験中である。3.コンピュータによる診断支援(CAD)ソフトの開発:食道の早期癌の拾い上げや深達度診断、慢性胃炎と平坦型早期胃癌(IIb)との鑑別、大腸の早期癌と腺腫や過形成性ポリ-プとの鑑別についてDR画像を解析処理してCADを行う。その解析方法としては、フラクタル解析を用いることとし、現在データのサンプリングの方法の検討やソフトの開発に着手した。1)画像処理;IM-DRではノイズが多く、空間分解能も劣っているために画像処理方法を改良しても、直接X線画像に比べて非常に微細な所見の描出ではまだ差がみられたが、新たに導入された4M-DRでは直接X線画像よりも鮮鋭な画像が得られた。2) DR装置の改良;空間分解能を向上させるために考案したDRのX線拡大撮影法をさらに有効に活用できるような機構の改良を検討したが4M-DRによってその必要性はなくなった。3) DRで撮影した消化管の微細病変のX線像と病理紹織像との対比.(1) DRでは胃小区が直接X線よりも明瞭に描出され、画像解析によって胃炎像をパターン化することが可能と考えられる。(2)早期胃痛の表面像の描出では直接X線画像に比べてDR画像は微細所見(0.3mm以下の陰影)の描出性が劣っており、現段階(IM-DR)では表面平坦型(IIb型)の早期胃癌の診断は難しいと考えられた。(3)早期食道癌の表面性状描出はDRは直接X線に劣っていたが、辺縁像についてはDRのほうが明瞭であった。
古代組紐の知恵を活かした先端複合材料の作製に関する研究

本研究では道具が考案される前に手だけで作られていた多様な組物の組構造を決定し、機械化するための手順を研究した。組物の経路図と繊維束数の決定の公式を導き、さらに組物を作製するための経路図の設計方法を検討した。組物を作製するための組機のホーンギアの設計・配置について検討を行い、組物の作製技術を機械化した。実際に設計された組機を、現有の組機を改良することで試作した。また組紐の構造と複合材料の物性の関係を解明するために、繊維束形状を考慮した繊維束配向モデル、組物変形モデルを構築した。具体的に得られた成果は以下のとおりである。1.経路図の機械化設計古代組物の経路図の設計方法を考察し、任意の組構造を有する組物を機械化する手法を提案した。2.組物作製機械の設計・組機の改造1.において設計された経路図をもとに、組物を作製する為の組機のホーンギアの設計・配置について検討した。3.CAE手法を用いた組物内部構造の構築・繊維配向状態の予測組物の内部観察を行ない、繊維配向状態を観察した。画像処理による組物の三次元構築を行ない、繊維配向状態のモデル化を行った。また、組物に荷重を負荷した際の繊維配向状態を観察し、内部構造の変形モデルを構築した。4.組物複合材料設計手法の提案一連の結果より、機械設計から材料設計、構造設計まで統一された組物複合材料の設計手法を提案した。本設計手法を用いて、組物作製機構解析をおこない、組物作製条件の決定、複合材料中の組物の幾何学的形状予測を行った。1.角組系組物の構造と製造パラメータの決定中実な3次元構造を有する組物(古代組物)の作製を機械化するために、角組系組物(2×2角組・2×4角組・4×4角組・4×6角組・4×8角組)の組構造を決定し、その経路図および経路数の決定方法を明らかにした。また、角組系組物の安定組糸数を決定する敷きを、畝数(組物の外周に位置する組糸数)をパラメータとして導いた。さらに角組系組物の経路図、特にねじれない角組系組物の経路図を描く方法を示し、経路図と組糸の関係を明らかにした。また角組系組物の機械化のために組機の羽車の設計・配置について検討を行い、機構のユニット化により多様な組物が製作可能であることを示した。2.コンピュータによる組物内部の構築、繊維配向の予測日本とアンデス地方の伝統的な組み方とその組み合わせの中から組構造の異なる3種類を用いて、その組構造および組糸の配向状態を知るための断面観察を行い、組糸の動きをコンピューターにより3次元に構築した。また、経路図(組糸の移動図)から組物の構造を推測し、その3次元構造図を作製する方法を提案した。得られた断面観察による3次元構築と、経路図から推測した組構造との比較を行い、断面観察を行うことなく、組糸の配向状態を予測する方法を確立した。

また組紐の構造と複合材料の物性の関係を解明するために、繊維束形状を考慮した繊維束配向モデル、組物変形モデルを構築した。具体的に得られた成果は以下のとおりである。(1)組紐の構造とその複合材料の物性の関係の解明様々な構造を有する組紐を強化形態とする複合材料の物性試験を行ない、製組方法、繊維配向状態、力学的特性の関係を明らかにした。(2)CAE手法を用いた組物内部の構築・繊維配向状態の予測組物の内部観察を行ない、繊維配向状態を観察した。画像処理による組物の三次元構築を行ない、繊維配向状態のモデル化を行った。(3)経路図の機械化設計古代組物の経路図の設計方法を考察し、任意の組構造を有する組物を機械化する。(4)組物作製機械の設計・組機の改造(3)において設計された経路図をもとに、組物を作製する為の組機のホーンギアの設計・配置について検討した。実際に設計された組機を、現有の組機を改良することで試作した。本研究では道具が考案される前に手だけで作られていた多様な組物の組構造を決定し、機械化するための手順を研究した。組物の経路図と繊維束数の決定の公式を導き、さらに組物を作製するための経路図の設計方法を検討した。組物を作製するための組機のホーンギアの設計・配置について検討を行い、組物の作製技術を機械化した。1.組物作製機械の設計、試作昨年度に引き続き設計された経路図を元に、組物を作製するための組機のホーンギアの設計・配置について検討し、組物作製機械を試作した。2.組物複合材料の試作、成形1.において試作した組機を使用して、組物を作製した。得られた組物を用いて複合材料の成形行った。3.組物複合材料の力学的特性評価2.において作製した組物複合材料の物性試験を行い、内部構造と力学的特性の関係を明らかにした。さらに上記結果に基づき、組物複合材料の機械設計・材料設計・機械設計に関する指針を得た。
酸化ストレス応答シグナルの網羅的解析による肝発癌機構の解析

酸化ストレスは重要な肝発癌機構であるが、本研究で以下の2点を明らかにした。(1)酸化ストレスによって細胞内情報伝達が影響を受け、糖代謝や細胞死機構が影響を受ける。(2)酸化ストレスの主役は活性酸素種(ROS)であるが、ROSの主な産生部位であるミトコンドリアの品質管理障害は肝発癌に関係し、細胞内の鉄が減少するとミトコンドリアの品質管理障害が回復する。以上の結果は肝発癌における酸化ストレスの意義を説明する。HCVはミトコンドリアの品質管理であるマイトファジーを抑制することで、酸化ストレスを増幅かつ持続させることを明らかにしてきた(Am J Pathol 2014)。活性酸素種(ROS)に起因する酸化ストレスの分子機構は、不対電子をもつフリーラジカルによる細胞内高分子の傷害とH2O2に代表され表される非ラジカルoxidantによる細胞内シグナルの障害やレドックス制御機構の破綻に大別される。しかし、非ラジカルoxidantによる細胞内シグナルの障害やレドックス制御機構の破綻がどのように肝発癌と関連しているかは殆ど明らかにされていない。そこで今年度はHCV-JFH1株感染細胞ならびにヒト肝細胞キメラマウスを用いて、Type 2(脱分極誘導型)マイトファジー抑制下での細胞内蛋白質のリン酸化状態を、液体クロマトグラフ質量分析計(LC/MS)を利用したiTRAQリン酸化部位同定・相対的定量解析を行った。ROS産生が亢進しているHCV感染細胞では488種類の蛋白に質量変化を認め、そのうち80.3%がリン酸化による質量増加であった。リン酸化を受けたアミノ酸の97%がserine、3%がthreonineであり、ストレス応答性kinaseであるserine/threonine kinaseの活性亢進が示唆された。一方、キメラマウスの肝組織ではROS産生の亢進を伴わず86種類の蛋白に質量変化を認め、リン酸化による変化が46.5%、脱リン酸化による変化が53.5%であった。以上の結果から、HCVによるマイトファジーの抑制は酸化ストレスを亢進させ、ROSの産生亢進がストレス応答性kinaseを活性化させ、細胞内のリン酸化シグナルを亢進させるのではないかと推測された。しかし、in vitroとin vivoでの細胞内のリン酸化シグナル活性化には差が認められ、更なる検討が必要と考えられる。平成26年度はHCV-JFH1株感染細胞ならびにヒト肝細胞キメラマウスの肝臓の細胞内蛋白質のリン酸化状態を網羅的に解析し、serine/threonine kinaseの活性亢進とともに細胞内蛋白質のリン酸化亢進を明らかにした。そこで平成27年度はこれらリン酸化の亢進したタンパク質のうち糖代謝に関連するpyruvate kinase muscle isozyme (PKM)と細胞骨格タンパクであるalpha-adducin (ADD1)のリン酸化についてHCV-JFH1株感染細胞を用いて検討した。PKMはリン酸化されるとその活性が低下することが知られているが、HCV-JFH1株感染細胞ではPKMの活性は低下し、抗酸化剤であるN-acetyl cysteine (NAC)の添加によりPMKの活性は回復した。HCV非感染Huh7細胞にH2O2を加えるとPKMの活性は低下した。また、HCV-JFH1株感染細胞ではリン酸化ADD1の発現量は亢進していたが、NACの添加によりリン酸化ADD1の発現量は低下した。PKMは解糖経路の最終段階の律速酵素であり、ADD1のリン酸化がcaspase 3によるADD1のcleavageに関与することが報告されている。以上の成績は、細胞内の酸化ストレスにより種々のタンパク質のリン酸化が亢進し、様々な細胞内シグナルを変化させることを示していると考えられた。In vitroの解析はほぼ予定通り進行しているが、肝発癌モデルを用いたin vivoモデルでの細胞内リン酸化シグナルの解析がやや遅れている。肝発癌モデルでの腫瘍作成が当初の予定より時間がかかっている点とミトコンドリア品質管理の実験を先行させていたことが主な理由である。平成28年度は酸化ストレス応答機構の一つとして、ミトコンドリア品質管理機構について研究を行った。ミトコンドリアは細胞内の最大の活性酸素種(ROS)産生器官であり、細胞のアポトーシス制御器官でもある。それ故、ミトコンドリアの品質管理は細胞の恒常性維持に重要である。障害ミトコンドリアはミトコンドリア特異的オートファジー(マイトファジー)により排除されるが、最近細胞内の鉄欠乏がマイトファジーを誘導することが報告された。そこで細胞内の鉄欠乏がマイトファジーを引き起こす分子機序について解析した。鉄キレート剤、Deferiprone (DFP)を細胞に投与するとミトコンドリア内に2価鉄が減少した。ミトコンドリアの鉄代謝関連分子の発現を調べたところ、鉄減少に伴いミトコンドリアフェリチン(FtMt)の発現上昇(mRNAと蛋白)が確認された。FtMtの転写を制御する転写因子はいくつか知られているが、その中で鉄減少に伴いSP1の発現上昇、核移行とともにFtMt転写活性化領域への結合活性が上昇した。一方、FtMtはオートファジーのcargo receptorであるNuclear Receptor Co-activator 4 (NCOA4)と結合し、FtMtのミトコンドリア誘導配列により、FtMtとNCOA4はミトコンドリアに局在するのが確認された。

さらに、オートファジー隔離膜の伸長蛋白であるLC3-IIとも結合していることも確認された。以上の成績は、ミトコンドリア内鉄の減少に伴いFtMt発現が増強し、NCOA4と結合することでマイトファジーを誘導することを示すものであるが、FtMtをノックダウンするとマイトファジーの誘導は抑制された。当初は、酸化ストレス応答シグナルの網羅的解析から肝発癌機構を解析することを目的としていた。実際に平成27年度まではHCVによる肝発癌機能を念頭にHCV感染細胞の酸化ストレス応答シグナルについて解析を行った。酸化ストレス応答の網羅的解析のひとつとして、細胞内リン酸化酵素の活性亢進とそれに伴う細胞内シグナルの変化について解析を行った。この間Direct Acting Antiviral (DAA)の登場により、100%近いHCVの排除が可能になってきた。そこでHCVに起因する酸化ストレス応答から少し方向性を変えて、非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)等も含んだより広範な肝細胞内酸化ストレス応答としてのミトコンドリア品質管理機構に焦点を当てて研究を進めている。ミトコンドリアの品質管理機構はミトコンドリア特異的オートファジー(マイトファジー)によって制御される。これまでマイトファジーはユビキチン結合酵素であるParkinがリン酸化されてミトコンドリアに局在し、ミトコンドリア外膜がユビキチン化されることでオートファジーが進行する分子機序が明らかにされていた。一方、Parkinには依存しない鉄欠乏によるマイトファジー誘導が報告され、鉄代謝からみたあらたなマイトファジー誘導機構が注目された。そこでわれわれは鉄キレート剤によるマイトファジー誘導機構を明らかにすることで、酸化ストレス応答機構からみた肝発癌抑制戦略を検討している。酸化ストレス応答による肝発癌抑制機構の解析として、ミトコンドリア品質管理を制御するミトコンドリア特異的オートファジー(マイトファジー)の分子機構について検討した。前年度までに鉄キレート剤(Deferiprone)によりマイトファジーが誘導され、そのkey moleculeとしてミトコンドリアフェリチン(FtMt)がオートファジー基質であるNuclear Receptor Co-activator 4 (NCOA4)と結合することを報告した。今年度はさらにFtMtはそのミトコンドリア移行シグナルでミトコンドリアに移行するものの、障害を受けミトコンドリア膜電位の低下したミトコンドリアに対してのみミトコンドリア外膜に係留する形で存在することを明らかにした。ミトコンドリア外膜に係留したFtMtは細胞質に存在するNCOA4と結合することで、隔離膜が形成され、マイトファジーが誘導されることを証明した。これまでマイトファジーの誘導機構としてはParkin/PINK1シグナルが報告されていたが、本研究で明らかにしたFtMtを介するマイトファジー経路はParkin/PINK1経路とは独立したマイトファジー誘導機構であった。細胞内の鉄がミトコンドリアの品質管理を制御する新たな分子機構を明らかにするとともに、鉄キレート剤によるマイトファジーの誘導は肝発癌を抑制することを示した。酸化ストレスは重要な肝発癌機構であるが、本研究で以下の2点を明らかにした。
摩擦性材料から粘着性材料まで適用可能な構成式に関する研究

粒状体のような摩擦性材料から金属のようなボンドの強固な粘着性材料まで、広範囲の工学材料を対象として、統一的な破壊規準および構成式を構築した。すでに提案している空間滑動面(SMP)に基づいた摩擦性材料のための破壊規準と構成式を、粘着成分を有する材料に対しても拡張するため、3次元応力下の3個のモールの応力円に垂直応力軸上の負の1点(この絶対値をボンド応力σ_0と名付ける。σ_0=c・cotφ(c:粘着力、φ:内部摩擦角))から接する3本の直線を想定した。このとき得られる粘着成分のある場合の空間滑動面を拡張された空間滑動面(Extended SMP)と名付ける。この拡張SMPの方向余弦が、σ_0=0の場合には粒状材料に対して成功している従来のSMPの方向余弦に一致し、σ_0→∞の場合には金属材料に対して成功している正八面体面(0ct面)の方向余弦に一致することに着目して、粒状体から金属まで適用可能な破壊規準と構成式をボンド応力σ_0をパラメーターとして定式化することを試みた。なお、粘着成分を有する摩擦性材料の代表的な試料として、ここでは主に貧配合のセメント混合砂および不飽和粘土を用いた。研究成果の要点:1)ボンド応力σ_0なるパラメーターを導入することによって、空間滑動面(SMP)に基づいた摩擦性材料のための破壊規準(松岡・中井規準)と構成式(σ_0=0の場合)と正八面体面(0ct面)に基づいた粘着性材料のための破壊規準(ミーゼス規準)と構成式(σ_0→∞の場合)を両端として包含する摩擦・粘着性材料のための破壊規準と構成式(σ_0を含む)を提案した。2)摩撮・粘着性材料の代表的な試料として、セメント混合砂や不飽和土を選んで、現有の三軸試験機を用いて三軸圧縮試験(σ_1>σ_2=σ_3)と三軸伸張試験(σ_1=σ_2>σ_3)を行った。また、不飽和土のための剛板載荷型三主応力制御試験機(σ_1≧σ_2≧σ_3)を試作し、平均主応力一定の三主応力制御試験を行った。これらの実験データに基づいて、上記の破壊規準と構成式を検討した。
現物モデリングによる実験・計測融合マルチレベルトライボロジーシミュレータの開発

量子論のような原子・分子レベル理論を基礎に自動車用エンジンのような実用部品・機器を解析する方法論を確立するために、本研究では、(1)実験トライボロジーで現れる実構造・本物構造のコンピュータモデリング手法、(2)実構造・本物構造モデルからのトライボロジー物性の理論予測手法、(3)原子レベルからの積上げによるトライボ計測・トライボ試験結果予測手法、(4)原子レベルからの積上げによるトライボ部品・トライボ機器摩擦・摩耗挙動予測手法、(5)実験研究者との共同を加速するためのヒューマンインターフェイスを開発した。さらに、実験研究者との共同により開発シミュレータの有効性を多くの課題について実証した。量子論に基づいてミクロとメソ、マクロを繋ぐ「マルチレベルトライボロジーシミュレータ」を世界に先駆けて開発してきたが、最近はトライボロジー分野の機器分析、計測試験方法が飛躍的に進歩している。しかしながら、実験の進歩が計算には十分には反映されず、また、理論・計算の進歩が十分には実験には反映されないなど、十分な協奏・シナジーが発揮されて来なかった。そこで、本研究では、これまで別々に進められてきた実験的手法と理論的・計算化学的な手法を融合した実験融合マルチレベル計算化学手法を、これも世界に先駆けて、トライボロジー分野において実現し、次世代自動車、医療機器など社会の期待が大きい技術に応用して、その有効性を実証する。さらに、実験・計測そのものをマルチレベルでリアルにシミュレーションするシームレスシミュレータの開発と合わせて、トライボロジーに係る研究開発手法を飛躍的に革新する。1.実験トライボロジーで現れる実構造・本物構造のコンピュータモデリング手法の開発:リアルな原子レベルでのモデリングを実現するために、平成25年度は、ラマン分光シミュレータに加え、X線回折、中性子線回折、赤外線分光、XPS、AFMの各シミュレータを開発した。2.実構造・本物構造モデルからのトライボロジー物性の理論予測手法の開発:平成25年度は、弾性係数、ポアソン比、熱伝導度、電気伝導度の各局所物性値を超高速化量子分子動力学法に基づき予測する手法について、トライボ解析で必要となる高圧、高せん断状態への適用性、計算精度を高める開発を行った。3.原子レベルからの積上げによるトライボ計測・トライボ試験結果予測手法の開発:平成25年度は、往復摺動試験装置シミュレータの開発を行った。その際に必要となる局所構造、局所物性について、上記1、2のシミュレータを活用することにより、原子レベルからの積上げによるマルチスケール化を実現した。量子論に基づいてミクロとメソ、マクロをつなぐ「マルチレベルトライボロジーシミュレータ」を世界に先駆けて開発してきたが、最近はトライボロジー分野の機器分析、計測試験方法が飛躍的に進歩している。しかしながら実験の進捗が計算へ十分には反映されず、また一方で理論・計算の進捗も実験へは十分に反映されないなど、協奏・シナジー効果が十分に発揮されてこなかった。そこで本研究では、これまで個別に進められてきた実験的手法と理論的・計算化学的な手法とを融合した実験融合マルチレベル計算化学手法を、トライボロジー分野において世界に先駆けて実現し、次世代自動車・医療機器など社会の期待が大きい分野に応用することで、その有効性を実証する。さらに実験・計測そのものをマルチレベルでリアルにシミュレーションするシームレスコンピュータの開発と合わせて、トライボロジーに係る研究開発手法を飛躍的に革新する。1.実験トライボロジーで現れる実構造・本物構造のコンピュータモデリング手法の開発:リアルな原子レベルでのモデリングを実現するために、平成26年度はSTM、AFM、SEM、SFG(和周波発生)分光、発行スペクトル、トライボエミッションの各シミュレータを開発した。2.実構造・本物構造モデルからのトライボロジー物性の理論的予測手法の開発:摩擦環境下での特に高圧粘性の計算手法を確立するため、平成26年度は実験的に用いられている落球粘度(Falling-ball)方を原子レベルで液体の粘性係数予測に活用した手法をもとに、複雑多成分系での粘性係数の予測手法を開発した。3.原子レベルからの積み上げによるトライボ計測・トライボ試験結果予測手法の開発:実際のトライボロジー挙動を的確にシミュレートするため、平成26年度はピンオンディスク、リングオンディスク、転がり摩擦試験、およびボール通し試験シミュレータを開発した。1.実験トライボロジーで現れる実構造・本物構造のコンピュータモデリング手法の開発:STM、AFM、SEM、SFG(和周波発生)分光、発光スペクトル、トライボエミッションの各シミュレータの開発と応用を進めた。2.実構造・本物構造モデルからのトライボロジー物性の理論予測手法の開発:実機のトライボロジー挙動解析において重要な物性である、摩擦係数、粘弾性特性、破壊強度、電気伝導度の理論予測手法の開発を進めた。

3.原子レベルからの積み上げによるトライボ計測・トライボ試験結果予測手法の開発:ピンオンディスク、リングオンディスク、転がり摩擦試験、ボール通し試験の各トライボ計測・トライボ試験装置シミュレータの開発と応用を進めた。4.原子レベルからの積み上げによるトライボ部品・トライボ機器摩擦・摩耗挙動予測手法の開発:自動車用エンジンのピストンリング、空調機器におけるシュー、化学機械研磨装置の摩擦・摩耗挙動を予測する手法を開発した。年度当初に計画していた実施項目をすべて達成できたのみならず、各種製造業企業との共同研究への応用を通じてより高性能なシミュレーション手法に発展できたため。量子論に基づいてミクロとメソ、マクロを繋ぐ「マルチレベルトライボロジーシミュレータ」を世界に先駆けて開発してきたが、最近はトライボロジー分野の機器分析、計測試験方法が飛躍的に進歩しており、実験の進歩と理論・計算の進歩がなかなか相互に反映されず、十分な協奏・シナジーが発揮されて来なかった。そこで本研究では、これまで別々に進められてきた実験的手法と理論的・計算化学的な手法を融合した「実験融合マルチレベル計算化学手法」を、これも世界に先駆けてトライボロジー分野において実現し、次世代自動車、医療機器などの社会の期待が大きい技術に応用して、その有用性を実証する。さらに実験・計測そのものをマルチレベルでリアルにシミュレーションするシームレスシミュレータの開発と合わせて、トライボロジーにかかわる研究開発手法を飛躍的に革新する。1.実験的な構造解析で使用される各種トライボロジー計測手法と、超高速化量子分子動力学法に基づくマルチスケール・マルチフィジックス手法を併用することで、実構造・本物構造のモデリング手法を実現するとともに、各種トライボロジー物性の理論予測手法を開発し、多様な例で活用を進めた。2.原子レベルからの積み上げによるトライボ計測・トライボ試験結果予測手法を開発して多くの共同研究で活用するとともに、マルチスケール・マルチフィジックス計算化学手法を用いて各種シミュレータとのリンクを進めた。3.実験研究者との共同を加速するためのヒューマンインターフェイスの開発を進め、シミュレーション結果をもっと実験研究者に理解しやすくなるように工夫した。4.企業を含む国内外の多くの実験研究者との連携を進め、開発シミュレータの有効性の検証と課題抽出を行った。さらに幅広い実験研究者との連携、共同研究を進めており、新たにスノースポーツ分野、原子力分野の企業・大学等との共同も生まれた。年度当初に計画していた実施項目をすべて達成できたのみならず、各種製造業企業と共同研究への応用を通じてより高性能なシミュレーション手法に発展できたため。量子論に基づいてミクロとメソ、マクロスケールを繋ぐ「マルチスケールトライボロジーシミュレータ」を世界に先駆けて開発してきたが、最近はトライボロジー分野の機器分析、計測試験方法が飛躍的に進歩してきており、実験と理論・計算で進捗が相互に反映されづらく、十分な協奏・シナジー効果を発揮できていなかった。
糖鎖付加を伴う無細胞タンパク質合成系の機能化

細胞におけるタンパク質へのN型糖鎖の付加は小胞体、ゴルジ体、小胞輸送、膜との融合等の細胞内諸器官を経由し、多様性に富む様々な種類の糖転移酵素による酵素反応の集積プロセスとして行われている。このような小胞輸送経路に翻訳産物が移行するには細胞内移行シグナルが重要な役割を果たしている。本技術シーズではin vivo系と同様にin vitro系においても分泌シグナルが機能し、試験管内であるにもかかわらず小胞輸送経路が再構築されているものと考えられる。このプロセスを移行する過程で糖鎖のトリミングを受け、糖タンパク質が合成されている。窒素ガスを利用した加圧型細胞破砕装置で調製した昆虫細胞抽出液を用いて合成した翻訳産物VP1には糖鎖が付加されたgVP1であった。PNGaseF処理の結果、gVP1はメディアルゴルジで修飾される糖鎖と同様な糖鎖が付加されていること、プロテアーゼ抵抗性を示したことから翻訳産物gVP1はオルガネラ内腔に存在し、そのオルガネラはゴルジ体内に存在することが明らかになった。したがって、本研究開発事業の技術シーズである昆虫細胞抽出液の中には糖鎖付加を司るオルガネラが安定に存在し、細胞内移行シグナルに依存した小胞輸送により糖鎖修飾が行われることが明らかになった。さらに、合成された翻訳産物は小胞輸送経路を経てゴルジ体へ移行していることが示唆された。一方、部分精製を行ったgVP1タンパク質のレクチンとの結合性の検討結果から、付加された糖鎖を構成する糖としてマンノース及びフコースが確実に存在することが明らかになった。しかし、糖鎖を構成する糖とレクチンとの親和力の強弱がレクチン結合性の判定に大きく影響を与える。現在、モデル系としてSf21細胞で発現した糖鎖が付加したVP1をLC-MSによる糖鎖構造の解析に着手している。得られたin vivoレベルでの糖鎖構造をベースに、in vitro系で合成されたVP1に付加された糖鎖構造を早急に決定したい。(I)無細胞糖タンパク質合成用細胞抽出液調製法の最適化不活性ガスとして窒素ガスを利用し、ミニボンベ細胞破砕器を用いて昆虫培養細胞Sf21から無細胞糖タンパク質合成用抽出液を調製した。ガス圧8atm、処理時間30分間が好適で高い糖鎖修飾活性を有した。哺乳類、両生類、魚類起源の培養細胞から調製した抽出液では糖タンパク質を合成できなかった。(II)糖鎖付加を伴う無細胞タンパク質合成系の効率化効率的翻訳鋳型活性を有するmRNAのデザイン:バキュロウイルス上にコードされるポリヘドリン遺伝子の5'-非翻訳領域が翻訳能に大きく影響を及ぼした。3'-非翻訳領域はそれほど翻訳能に影響を及ぽさなかった。リボゾームの効率リサイクル化:翻訳終結反応がタンパク質合成の律速段階となっていることが多く、またペプチド鎖伸張段階でヌクレアーゼによるmRNA切断に起因する翻訳停止現象が明らかになった。そのため、リボソームの効率的リサイクル化を目指し、終結因子と翻訳停止修飾に関与する因子の究明を実施している。(III)糖鎖構造の解析N型糖鎖付加シグナルを2箇所有するVP1遺伝子のN末端にニワトリリゾチーム由来細胞内移行シグナルを導入し、無細胞糖タンパク質合成用抽出液を用いて糖鎖が付加されたVP1の合成に成功した。硫安塩析、透析により糖鎖が付加されたVP1を部分精製し、SDS-PAGE後のゲルから切り出し、LC-MASSに供する精製・糖鎖解析システムを確立した。現在、LC-MASSにて糖さ構造解析中である。
LC/MSによる副腎腫瘍組織内ステロイドホルモン分析の研究

1.pregnenolone、170H pregnenolone、DHEAのauthentic sampleを用いて至適条件の検討を行ったが、これらのステロイドのmass spectraは脱水ピークがbase peakとして認められ、vaporization heater250°C、desolvation heater 390°C、drift voltage 700Vが至適条件であると考えられた。2.先ず、腎癌患者に対する根治的腎摘除術により得られた癌浸潤の無い正常副腎4例をコントロールとして用い、上記ステロイドの組織内含有量を測定した。定量分析ではpregnenolone、DHEAは微量ながらも測定可能で、それぞれの平均値は1439.1ng/g tissue、564.7ng/g tissueであり、同時に行ったRIAによる測定結果と近似していた。170H pregnenoloneに関してはmass chromatogram上retention timeの近似する未知の物質の大きなピークが認められたため分離困難であった。今後、カラムを含めた測定条件を再度検討するとともに、未知物質の同定も行う予定である。1.pregnenolone、170H pregnenolone、DHEAのauthentic sampleを用いて至適条件の検討を行ったが、これらのステロイドのmass spectraは脱水ピークがbase peakとして認められ、vaporization heater 250°C、desolvation heater 390°C、drift voltage 700Vが至適条件であると考えられた。
蛋白質結晶構造解析に必要なデータセットを1秒以内に完全測定するシステムの開発

タンパク質分子は酵素反応において様々な化学反応を触媒し、多くの場合、ミリ秒から秒オーダーの時間領域に特有の反応時定数を持っている。このようなタンパク質の酵素反応過程を原子レベル分解能の動画として観測することは生物科学研究者の究極の夢である。本研究課題は、放射光から得られる高輝度単色X線と高速試料回転ゴニオメータを組み合わせることにより、秒オーダーで進行する反応を触媒する酵素タンパク質を対象として、1回の測定で1秒以内に1個の結晶から独立な領域の高精度X線回折データを測定する装置の開発し、新規データ解析ソフトウエアを開発と合わせて、酵素反応中間体の構造解析をこれまでの方法では実現不可能であった高精度で行うためのシステム開発することを目的とした。本研究では、目標値である1秒以内のデータ測定の実現までには最終的に至らなかったものの、その基盤的な検討のために高速回転ゴニオメータを組み込んだX線回折装置の開発を進め、装置上は原理的に1秒以内のデータ測定が実現可能であることを確認した。また一方で、タンパク質結晶試料を低温条件下に冷却しながらパルスレーザー照射を行うことにより、ミリ秒から秒オーダーで進行する反応を分オーダーまで減速し、高精度にX線回折データ測定するシステムの開発を平行して行った。この測定方法を一酸化炭素結合型ミオグロビン結晶に適用し、ミオグロビン分子の小分子輸送ダイナミクスに関する新たな知見を得ることに成功した。
ゲル状態変化を用いた含水保存処理法の新規開発

発掘された木製の遺物(以下、出土木製品とする)は、埋蔵中に木材成分が減少し、大量の水を含んだ状態で出土する。水の蒸発に伴い収縮・ねじれ・割れ等の変形が生じ、そのままでは展示や研究資料等に利用できない。そのため、出土木製品から水を除く保存処理と補強のため常温で固まる薬品を浸透させる保存処理が行われる。しかし、従来の保存処理には、劣化の進んだ出土木製品の処理で変形が生じるなど解決されていない問題も多い。特に出土木製品の変形は、水の40%以上が薬品に置き換わった時に発生しやすい。そこで、水を薬品に置き換えるのでなく、水を取り込んだままの新たな出土木製品の保存処理方法構築を検討した。低分子ゲル化剤をキログラム単位で準備し、3cm辺の立方体に作成したアカガシの試験片(平均含水率400%)を使用し、保存処理実験を行った。ゲル化限界濃度である2%濃度(w/w)で取り上げ後変形が生じたため、30%濃度(w/w)の低分子ゲル化剤を用いて実験を行った。ゲル化後直ちに試験片をゲルから取り出すと変形したが、(1)ゲル化後真空凍結乾燥を実施すること、または(2)取り出しをゲルが安定する1か月後に行うことで、変形が起こりにくくなることが分かった。実用化に向けてゲル化安定後の試験片取り出し法や水を含むことに起因する真菌類等影響に対して改良すべき課題はあるが、含水保存処理という保存処理に対する新たな可能性を見出すことはできた。水を取り込んだままの保存処理を行うための低分子ゲル化を合成し、3cm辺の立方体に作成したアカガシの試験片を使用し、実験を行った。アカガシは平均含水率300%の出土自然木を使用した。2%の低分子ゲル化剤を用いることで試験片が浸透した水溶液をゲル化させることに成功した。ゲル化実験により、試験片の存在でゲル化速度が低下することを明らかとした。試験片へのゲル化剤の浸透が少ないため、水分の蒸発とともに試験片の変形・収縮が発生することを確認した。また、ゲル化剤の開発者より保存処理に適するゲル化剤の助言を得て、2種類のゲル化剤について物性を検討した。低分子ゲル化剤の使用濃度を上げるため、合成委託業者と合成経路の検討を行い、低分子ゲル化剤の大量合成準備を行った。
介護者のためのエンハンスメント・プログラムの評価

本研究の目的は、介護者のエンハンスメント・プログラムの評価を行うことである。今回は、これまでの介護領域である「心配事の解消」「食事の介護」「暮らしのリズムを整える」に加えて、「最期の意思を支える」を開発した。全てのプログラムにおいて、看護職を対象としたファシリテーター養成プログラムを開発し実施した。さらに、受講後のプログラム評価のアンケートを開発および洗練化するとともに、プログラム参加前後、参加2週間後、参加4週間後、参加8週間後にGSES(一般性セルフエフィカシー尺度)、Zarit介護負担尺度日本語版の短縮版(J-ZBI_8)の調査を実施した。本研究の目的は、高齢者の家族介護者の介護能力を高める「介護者のためのエンハンスメント・プログラム」の長期的な効果を明らかにすることである。本研究者は、高齢者の家族介護者が介護の知識と技術を高めることに着目し、Bandura(1977)の社会学習理論を基盤とした「介護者のためのエンハンスメント・プログラム」を開発した(藤田,2010)。また、近年、高齢者の終末期医療の選択の意思決定についても注目され、高齢者の病状安定期における終末期医療の選択・意思決定の意識調査や啓蒙活動に関する取り組みが始められている(佐藤,2008、鶴若,2009)。その後、2012年6月には日本老年医学会より「高齢者ケアの意思決定プロセスに関するガイドラインー人工的水分・栄養補給の導入を中心としてー」が発出されている。しかし、現状では高齢者の最期に意思が反映されているとはいいがたい。そこで、今年度は、エンハンスメント・プログラムの新たな介護領域として、症状安定期から考える「最期の意思を支える」の開発準備を行った。総合病院で働く看護師及び看護師長、在宅で認知症高齢者を介護する家族介護者に、高齢者の最期の意思を支えるためにプログラムに反映すべき項目、高齢者の最期に意思を反映させるような臨床の取り組みの有無について、面接し情報収集を行った。また、訪問看護師に対して在宅介護する介護者が認知症高齢者に抱く心情についても情報収集を行った。その結果、高齢者の意思を反映した最期の選択を支援する取り組みが十分に行われているわけではないこと、症状が安定しているときから家族内で最期の方針を話し合っておくこと、高齢者の意向を繰り返し家族内で認識し共有すること、高齢者に対する愛着からケアワーカー等に嫉妬も生じうるということがわかった。本研究の目的は、高齢者の家族介護者の会の能力を高める「介護者のエンハンスメント・プログラム」の長期的な効果を明らかにすることである。すでに開発した3つの介護領域である「心配事の解消」「食事の介護」「暮らしのリズムを整える」に加え「最期の意思を支える」を開発中である。「最期の意思を支える」の介護領域では、エンハンスメントプログラムの構造である、1.介護者としての自己を認め高めていくスキル、2.介護力を高め健康を維持促進するスキル、3.家族・社会と関係する能力を高めるスキル、4.介護方法を状況に合わせ適用していくスキルに応じて、到達目標と教育内容および教育方法を検討しているところである。また、高齢化が加速する中で、90歳代の超高齢者の介護者や老老介護、認知症高齢者の増加、地域包括ケアの促進および医療施設における地域包括ケア病棟の開床、新オレンジプランの策定により、「最期の意思を支える」の介護領域の開発においては、より幅広い介護状況を想定することが必要となり、当初計画していた内容を再吟味することとした。今年度は、プログラムを実施する看護職がもつ能力の情報収集、急性期病院のおよび老人保健施設での高齢者の入院入所状況の情報収集、急性期病院で対応困難な家族介護者のケアを行っている老人看護専門看護師の実践経験についてインタビューを行った。その結果、90歳代の超高齢者の中には、老衰で亡くなる場合、認知症でなくなる場合、がんで亡くなる場合、呼吸器疾患で亡くなる場合について、それぞれ、高齢者自身および家族の直面する体験の特徴が明らかとなりつつある。また、対応困難な介護者においては、介護者自身が直面している状況に理解を示す姿勢や介護者自身が高齢者を亡くした後の人生をどのように生きていくか考えていけるといったことも、必要な教育内容であることが明らかとなった。これまで開発した3つの介護領域である「心配事の解消」「食事の介護」「暮らしのリズムを整える」に加えて、病状安定期から考える「最期の意思を支える」を開発中である。また、今年度は、急性期病院、介護老人保健施設、訪問看護ステーションの看護管理者にプログラムの実施について説明し協力を依頼するとともに、関西地区で開催される老人看護専門看護師事例検討会においても、プログラム実施の協力依頼を行った。その結果、介護老人保健施設および訪問看護ステーションの看護師に3つのプログラムの説明会を開催できることとなった。そして、介護老人保健施設および訪問看護ステーションの看護師を対象に「心配事の解消」のファシリテーター養成プログラムを実施した。さらに、プログラムの到達目標に対する終了時アンケートを分析し第35回日本看護科学学会学術集会において「高齢者をケアする家族介護者のエンハンスメント・プログラムの評価」の演題名でポスター発表した。その中で、「心配事の解消」は他のプログラムに比べ、難しい介護領域であることが推察された。「食事の介護」「暮らしのリズムと整える」ではアンケート結果から到達目標が達成されていた。

しかし、全介護領域において参加直後には全体的な介護への自信は十分でなく、学んだ提案を新しい介護の方法として取り入れることについて慎重であることが明らかとなった。また、後期高齢者の増加により介護する高齢者が認知症を持つことが多いことを想定して、認知症ケアをサブスペシャリティとする老人看護専門看護師と認知症高齢者が入院する病棟師長経験を持つ老人看護専門看護師に、病棟における困難なケアへのかかわりについてインタビューを行った。介護者のエンハンスメントプログラムのファシリテーター養成を始めることはできたが、対象者を集めることが難しい状態が続いている。また、実母の認知症と心不全が悪化し介護のため、研究活動が進まない状況が続いた。本研究の目的は、高齢者の家族介護者の能力を高める「介護者のエンハンスメント・プログラム」の長期的な効果を明らかにすることである。これまでに開発した3つの介護領域である「心配事の解消」「食事の介護」「暮らしのリズムを整える」に加えて「最期の意思を支える」を開発した。それとともに、プログラム終了時の「最期の意思を支える」受講後のアンケート、「最期の意思を支える」の介護領域を開催する看護師向けのファシリテーター養成プログラムを開発し、参加者用テキストとファシリテーター用テキストを冊子体にした。さらに、プログラム受講前と受講後に家族介護者が自身の介護疲れや自己の状態をみるために、Zarit介護負担尺度日本語版の短縮版(J-ZBI_8)、GSES(一般性セルフエフィカシー尺度)を記載した調査用紙を作成した。看護職を対象としたファシリテーター養成研修および家族介護者への介護領域の実施について、研究協力を15施設に依頼し、ファシリテーター養成プログラムの実施についての研究協力は2施設、家族介護者への介護領域の実施についての研究協力は1施設のみだった。その結果、8名の看護職を対象として4つの介護領域のファシリテーター養成プログラムを、高知県、東京都の合計2病院において実施した。また、研究者が兵庫県内の老人保健施設で「食事の介護」「暮らしのリズムを整える」の介護領域を家族介護者4名に対して実施し、介護領域受講後の内容に関するアンケート、Zarit介護負担尺度日本語版の短縮版(J-ZBI_8)、GSES(一般性セルフエフィカシー尺度)の調査を実施した。さらに、家族介護者が高齢者を看取った経験について、老人看護専門看護師の体験をまとめ「家族の終生期に対峙して」のリレーエッセーを企画し日本看護協会出版会発刊雑誌のコミュニティケアに12回連載した。本研究の目的は、介護者のエンハンスメント・プログラムの評価を行うことである。今回は、これまでの介護領域である「心配事の解消」「食事の介護」「暮らしのリズムを整える」に加えて、「最期の意思を支える」を開発した。全てのプログラムにおいて、看護職を対象としたファシリテーター養成プログラムを開発し実施した。さらに、受講後のプログラム評価のアンケートを開発および洗練化するとともに、プログラム参加前後、参加2週間後、参加4週間後、参加8週間後にGSES(一般性セルフエフィカシー尺度)、Zarit介護負担尺度日本語版の短縮版(J-ZBI_8)の調査を実施した。
有害ストレスによる細胞周期ブロックの分子機序の研究

酸化ストレス、紫外線、放射線、発癌剤、抗ガン剤、等の種々の有害ストレスに対して、細胞はDNA修復酵素の動員と活性化、生じた活性酸素の除去、細胞周期の一時的ブロックあるいはアポトーシス、等の細胞内反応により対処している。有害ストレスに対するこれらの一連の複雑な細胞内反応は互いに相互作用して精密で効果的なストレス応答を行っていると考えられるがその詳細は明らかではない。我々は、細胞周期ブロックやアポートシスに最も重要な役割を果していると考えられているp53遺伝子の抗ガン剤による活性化機構の研究の過程で、抗ガン剤によるNF-kB転写因子の活性化と、そのp53遺伝子活性化への関与を示唆する結果が得られた。さらにp53遺伝子のプロモタ-上でNF-kBと隣接して結合し、p53遺伝子の発現制御に必須の新しい転写因子を同定した(MCB.投稿中)。NF-kBは、種々の有害ストレスによって活性化されて、c-myc遺伝子を含む多様な細胞遺伝子の関わっており、最近ではアポトーシスへの関与も示唆されている。我々はさらに、cyclin-dependent kiase(CDK)がNF-kB活性化の重要な制御因子であるp105(NF-kBのp50サブユニットの前駆体)の細胞内での主要な燐酸化酵素であること、p105のprocessingすなわちNF-kBの活性化にCDKによる燐酸化が重要な役割を果しており、この過程がUVなどの有害ストレスによって活性化されることを明らかにした(MCB.投稿中)。以上、細胞周期制御へのNF-kB転写因子の関与を明らかにした。