hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
高尿酸血症モデルマウスにおけるアルツハイマー病予防機構の解明

行動学的解析としては、2931週齢の雄マウスを用いてY迷路試験を行った。過去の報告では6ヶ月齢のアルツハイマー病モデルマウスにおいて有意な自発的交替行動率の低下が見られていたが、我々の実験条件では野生型マウスに比べて交替行動率の低下傾向はあるものの個体差が大きく、今回は尿酸値の変動がアルツハイマー病モデルマウスの認知機能の低下に影響するかどうか明らかにすることができなかった。今後は、尿酸代謝系をよりヒトに近づけたモデルマウスを用いて認知機能の評価を行うとともに、アミロイド斑蓄積以降のイベントに対する尿酸の影響についても検討していく予定である。マウスの系統樹立を効率的に進める。また、脳内アミロイド蓄積以外の検討項目の予備実験を行い、複合変異マウスの完成後速やかにAPPノックインマウスとAPPノックイン/Uoxノックアウト複合モデルマウスを比較できる体制を整えていく。アミロイドβの沈着が始まる初期、中期、後期において高尿酸-アルツハイマー複合マウス、低尿酸-アルツハイマー複合マウスの脳切片を作製し、アミロイドβ、アストロサイトおよびミクログリアの集積を比較しすることで血中尿酸値による病理学的影響を明らかにする。脳内尿酸濃度の解析にあたっては、側脳室からの採取方法が確立でき次第、尿酸トランスポーターノックアウトマウスを用いて脳内尿酸輸送機構における尿酸トランスポーターの寄与を検討する。平成28年度の研究期間中に産休・育休を取得し、研究を一時中断したため使用予定金額に至らなかった。次年度使用額がわずかに生じたが、今年度複合変異マウスを用いた免疫組織学的解析に必要な各種消耗品の購入にあてる。複合変異マウスの評価実験に必要な各種消耗品の購入にあてる。
民族の記憶としてのモスクワ公国揺盤期研究(ロシア諸年代記の文献学的考察)

繰り返すが、本研究は、交付決定金額が予定より下回ったため、文献の精読によるテーマの考察に絞られることになった。昨年度同様、研究業績は資料の収集、読解、分析の分野で行われた。本年度も昨年度に引き続き、スラヴ民族固有の土着的伝統とキリスト教文明が独自の融合をとげたロシア・文化の精神体質を考察することになったが、本年度は西欧的スラヴ圏(ポーランド、チェコなど)に視野を広げ、その文化的特質とロシアのそれを比較することを通じて、当該テーマの考察を深めることを試み、一定の成果をあげた。申請時には、1文献の精読、2文献精読の補助手段としてのデータ・ベース化を本研究課題の二つの柱として申告したが、決定額が申請額より下回ったため課題2を切り捨てざるを得なかった。従って、研究実績は資料の収集、読解、分析の分野に限られる。申請書にも記した通り14・15世紀ロシアは東スラヴ民族としての伝統とキリスト教的伝統が独自の仕方で隔合を遂げ、西ヨーロッパとも、やがてイスラムを受容する中央アジアとも異なる一つの文化的統合体として成立する。この文化的統合体の生理こそがロシアが世界帝国として発展をとげる際の核になると筆者は考え、14・15世紀ロシアにおけるモスクワ国家、正教会、民衆の共生関係を年代記の比較研究によって明らかにすることを課題とした。上記課題のため資料を収集、分析し、それに伴う研究指導をロシア人専門研究者に仰いだ。
ウマヘルペスウイルス1型レセプターのクローニング

ウマヘルペスウイルス1型(EHV-1)はアルファヘルペスウイルス亜科に属し、馬に鼻肺炎、流産、脳脊髄炎を惹き起こす。ヒト単純ヘルペスウイルス(HSV)など他のアルファヘルペスウイルスではウイルス侵入に関わるウイルス側および細胞側因子が明らかとなってきている。一方、EHV-1ではエンベロープ蛋白であるgDが細胞への侵入に必要であることが報告されているものの、細胞側因子に関しては不明である。本研究ではEHV-1の細胞内侵入に関与する細胞側因子の解明、特にウイルスレセプターの同定を目的とする。EHV-1脳脊髄炎においてウイルス感染の標的となる馬脳微小血管内皮細胞(EBMECs)の初代培養系を確立し、EHV-1のEBMECs細胞内侵入様式を検索したところ、カベオラ介在性エンドサイトーシスの関与が示唆された。カベオラ介在性エンドサイトーシスはレセプター誘導性であることから、EBMECsにはEHV-1レセプター分子が発現していることが推測された。現在報告されているアルファヘルペスウイルスレセプターのうち、Nectin-1は動物種間でよく保存され、アミノ酸レベルで90%以上の相同性を示す。実際にヒト、マウスのNectin-1はHSV、仮性狂犬病ウイルス、ウシヘルペスウイルス1型の細胞への侵入を促進する。そこで、EBMECs cDNAからウマNectin-1ホモログをPCRクローニングし、EHV-1レセプターとしての機能を評価した。EHV-1侵入を許容しないNIH3T3細胞にウマNectin-1を発現させ、EHV-1を感染させたところ、細胞へのウイルス侵入は促進されなかった。従って、EHV-1は他のアルファヘルペスウイルスとは異なる分子をレセプターとして利用している可能性が考えられた。今後はEBMECsのcDNAライブラリーを用いた発現クローニングによりEHV-1レセプターの同定を試みる。ヒト単純ヘルペスウイルスなど他のアルファヘルペスウイルスではウイルス侵入に関わるウイルス側および細胞側因子が明らかとなってきている。超微形態学的解析により、EHV-1は初代培養馬脳微小血管内皮細胞(EBMEC)、ウサギ腎由来細胞(RK13)、馬真皮由来細胞(E.Derm)にエンドサイトーシスを介して侵入することが明らかとなった。さらに、エンドサイトーシス阻害剤を用いた感染実験、ウイルス抗原とエンドサイトーシス関連蛋白の局在により、EBMECとRK13ではカベオラ介在性エンドサイトーシス、E.Dermではマクロピノサイトーシスおよびクラスリン介在性エンドサイトーシスがEHV-1感染に重要な役割を果たしていることが示唆された。脳血管内皮細胞は馬のEHV-1脳脊髄炎でウイルス感染の標的になること、カベオラ介在性エンドサイトーシスはレセプター誘導性であることから、今後はEBMECのcDNAライブラリーから発現クローニングによりEHV-1レセプター遺伝子を同定し、同分子発現とin vivoにおけるウイルスの組織向性との関与を検討していく。
筋弾性蛋白質コネクチンの構造と機能

コネクチンは本研究者が1977年に発見した骨格筋の弾性タンパク質で分子量300万、長さ1μmにおよぶ。未変性で單離されているのは、分解物(分子量210万)のβ-コネリチンで、母分子α-コネクチンは、塩に溶けず單離されていない。本研究で、ごく少量のα-コネクチンを分離できたが、たえずβ-コネクチンに分解し、研究の対象にならなかった。β-コネクチンから人工的につくったファイバーは、X線回折からβシートを含んでいることが判明した。これは、溶液状態で、円偏光二色性からえたβ-シート70%,ランダムコイル30%の結果と一致する。コネクチンファイバーは、もとの長さの30%までは可逆的に伸長し、張力を発生した。温度依存性からエントロピー弾性とは認めがたく、βシート構造を介しての弾性とみなされる。より詳細な構造解析は、これからの問題である。βアクチニン存在下でアクチンフィラメントを音波処理すると、短かいアクチンフィラメントが得られる。これにβ-コネクチンを加えると、白湯した。電子顕微鏡下で見ると、短かいアクチンフィラメントは網目構造を形成していた。この両者の結合はKCl濃度に依存する。80mMKClで結合するが、120mMになるとほとんど解離する。さらに、80mMKCl下で、ミオシン頭部S1をアクチンフィラメントに加えて矢じり構造をつくらせると、コネクチンは結合できなくなる。コネクチン・アクチンの網目構造にミオシンS1を加えると、矢じり構造ができてほぐれてくる。これらのことから、コネクチンはミオシンとアクチンの反応-滑りの原動力-を何ら抗げないものと思われる。サルコメア内で、コネクチンはアクチンフィラメントと弱く結合して、いわばガイドラインの役割をするものと思われる。他〓はミオシンフィラメントに結合している。このように、サルコメアの新しいモデルが提出されるはこびとなってきた。
グローバル化時代における海外コリアンのホスト社会への適応と葛藤

本研究の目的は、グローバル化時代にあって世界諸地域に居住する海外コリアンの比較研究をするための基礎的な資料の収集と、その基礎的なデータベースの作成にある。そして、それらの資料を用いて、海外コリアンの問題をより一般的な移住、移動、多民族共生などの現代的諸問題に対してアプローチすることができるような理論的フレームを検討することを目指している。各研究分担者・協力者は、それぞれの担当地域の調査研究を推進したが、相互に調査地域を知ることの重要性を考慮し、各年度に以下のような共同調査を実施した。平成15年度は、合衆国への韓国人移民100周年にあたり、最初の移住地であるハワイで調査を行ない、韓国において在外同胞財団をはじめ韓国人研究者との意見交換を行った。平成16年度は、オーストラリアのシドニー郊外に形成されているコリアンタウンを調査した。平成17年度は、グローバル化の中で流動性が高まり、転換点を迎えつつある中国社会に着目し、中国朝鮮族と新在中韓国人(韓人)との相互関係に注目した。また、福岡の在日韓国・朝鮮人の集住地区を調査した。平成18年度は、韓国において韓国人研究者との意見交換と研究成果のとりまとめを行った。これらの調査研究を基に、各研究分担者および研究協力者は学会・公的研究会などで発表するとともに、その成果を『国立民族学博物館調査報告』69などに公表した。また、『民博通信』119に特集を組んで公表する予定である。基礎的データベースに関しては、世界各地域における海外コリアンに関する主要文献のリスト化を行い、海外コリアン研究の全体像を{府鰍した。近年、海外コリアン関連の資料・文献が急増し、その内容も多岐にわたっている現状を鑑み、各研究分担者・協力者がそれぞれの研究成果をふまえた視点からの文献紹介を作成・編集したが、今後も継続してデータベースを充実させていく予定である。また、韓国の研究者や在外同胞財団とも連絡をとりあい、彼らと相互補完的に、現地の研究者や関係者とのネットワークを構築し、今後の海外コリアン研究を展開するために体制を整えた。本研究の第一の目的は、多様な海外コリアンのあり方を視野に収め、世界諸地域に居住する海外コリアンを比較研究するための基礎的資料の収集にある。そのため研究メンバーは世界各地の海外コリアンについて、それぞれ分担して研究を行っているが、本年度は、本研究の初年度にあたり、またハワイヘの移民100周年にあたるため、次ぎの2点に関し、共同調査を行った。1つは、2003年8月下旬に、移民100周年を迎えたハワイにおいて、その記念事業に関わった「ハワイ大学韓国学研究所」のエドワード・シュルツ教授「駐ホノルル大韓民国総領事館」の丁完聲副総領事へのインタビューを行った。また、ホノルル市内における韓国人経営の店、1980年代以降に移民してきた韓国人商人を対象にして調査を行った。2つは、2004年2月に、韓国において海外コリアンヘの研究・支援を行っている「在外同胞財団」において、資料の収集を行うとともに、同財団の李光奎理事長との意見交換を行い、今後の研究協力関係を結んだ。また(沿海州のコリアンを支援するNGO団体である「東北亜平和連帯」を訪れ、その活動状況について調査した。このほか、本研究テーマに関連する文献リストの作成に着手した。本研究の第一の目的は、多様な海外コリアンのあり方を視野におさめ、世界諸地域に居住する海外コリアンを比較研究するための基礎的資料の収集にある。

そのため研究メンバーは世界各地の海外コリアンについて、アメリカ、中国、日本などの諸地域において、それぞれ分担して調査研究を継続し、また当該地域の文献資料(行政資料、統計、新聞など)の収集を行った。具体的には、中国朝鮮族担当の岡田は中国・黒龍江省、在日コリアン担当の島村は福岡市と北九州市、林は華僑の移動ルートに沿って流動化、拡散する新しいコリアン移民について、神戸市およびフィジーにおける現地調査を行った。フィジーには、木材輸入業、水産業、および投資のための韓国からの移民が、約1,000人居住している。林は、首都のスパと国際空港のあるナンディにおいて調査し、韓人録などの資料を収集し、コリアン移民についての新しい知見と資料をもたらすような大きな成果をあげた。また、文献資料の収集のため、林と島村は韓国に、岡田は東京に出張し、大学図書館、国会図書館(日本、韓国)における資料調査をおこなった。なお、前年度研究分担者の韓景旭は在外研究のため、本年度は不参加である。また中央アジアの高麗人研究をしている李愛俐娥(同志社大学研究員)とハワイのコリアン研究をしている洪賢秀(科学技術文明研究所研究員)に、研究協力者として、本研究の遂行上必要な専門知識を提供し、あわせて調査研究に加わっていただいた。研究分担者による個別の調査研究に加え、本年度は、近年になってコリアンの移民が急増しているオセアニア・太平洋地域に着目し、オーストラリアを共同調査した。オーストラリアには、研究代表者の朝倉と研究分担者の岡田とともに、李愛俐娥と洪賢秀が同行し、それぞれの分担地域と比較する視点で調査した。オーストラリアのシドニーには、30年前からコリアンが移住し始めたが、近年その数が急増し、郊外にはコリアンタウンが形成されている。このコリアンタウンを踏査するとともに韓人会、教会、韓国系新聞社などで聞き取り調査を行った。また、年度末に、共同研究会を研究代表者が所属する国立民族学博物館にて開催した。この研究会では、今年度の成果の検討、来年度の研究計画の打ち合わせに加えて、昨年度、今年度収集した基礎資料を整理、分析するための、予備作業として収集文献のリスト化、それぞれの資料や文献に関する解説、解題などのデータベースのひな形作成をおこなった。本研究の第一の目的は、多様な海外コリアンのあり方を視野におさめ、世界諸地域に居住する海外コリアンを比較研究するための基礎的資料の収集にある。そのため研究メンバーは世界各地の海外コリアンについて、それぞれ分担して研究を行っている。本年度は、グローバル化の中で流動性が高まり、転換点を迎えつつある中国社会に着目し、中国東北部黒龍江省牡丹江市、ハルビン、藩陽、北京、天津、青島において、中国朝鮮族の村落および都市集住地に関する共同調査をおこなった。中国東北部、北京、天津の中国朝鮮族に関しては、研究代表者の朝倉と研究分担者の岡田、韓とともに、ハワイのコリアン研究をしている洪賢秀が同行し、それぞれの分担地域と比較する視点で調査した。また中国朝鮮族出身で現地の事情に通暁している神戸大学院生の安成浩君が調査を補助した。
口腔インプラントは在宅・介護現場における要介護高齢者の口腔ケアの妨げになる?

口腔インプラント治療を受けた高齢者が全身状態の変化,特に痴呆,循環器系疾患によってリコールに応じることができなくなる実態が明らかになった.また,インプラント義歯を装着した健康な高齢者もメインテナンスの方法に対する疑問,インプラント体の予後への不安を抱いており,口腔インプラント治療を施術した我々歯科医師側の情報提示不足,さらに患者の高齢化を見据えた長期のケアプランの再考が求められていることがわかった口腔インプラント治療を受けた高齢者が全身状態の変化,特に痴呆,循環器系疾患によってリコールに応じることができなくなる実態が明らかになった.また,インプラント義歯を装着した健康な高齢者もメインテナンスの方法に対する疑問,インプラント体の予後への不安を抱いており,口腔インプラント治療を施術した我々歯科医師側の情報提示不足,さらに患者の高齢化を見据えた長期のケアプランの再考が求められていることがわかった口腔インプラント治療を受けた高齢者に起こる問題点を抽出するため,65歳以上のインプラントリコール患者を対象とした診療録ベースの後ろ向きコホート研究を行った.そして,高齢者の追跡不能患者の詳細を検討するために,現在年齢65歳以上のインプラント患者に診療ベースのリコール横断調査を行った.<方法>・過去17年間に当科で口腔インプラント治療を受けたインプラント埋入時年齢65歳以上の全患者61名(男/女:30/31名,平均機能期間:3.3±3.6年)を対象とした.・これらの患者群に性別,欠損部位,機能期間をマッチングさせた65歳未満のインプラント患者122名を当科の全インプラント患者から抽出した.・インプラント体の生存はLog-rank testを用いたITT解析で評価した.・なお,本研究は岡山大学大学院倫理委員会の承認を得て行った(#213).・過去17年間に当科でインプラント最終上部構造を装着した現在年齢65歳以上の患者80名(平均年齢72.7歳)に連絡をとり,リコールを行った.<結果>・65歳以上の高齢者と65歳未満の患者の15年累積生存率に有意差を認めた(p<0.05),しかし,追跡不能患者が65歳以上に多かったことが本結果に影響を与えている可能性が強く示唆された.・現在年齢65歳以上の患者80名のうち70%の患者はリコール継続中であったのに対し,27.5%の患者は現在追跡できていなかった.・現在追跡ができない高齢インプラント患者22名のうち,4割の患者が何らかの全身状態の変化が原因で追跡できないということがわかった.高齢者では,認知症や悪性腫瘍,脳血管障害といった全身状態の変化によりリコールに応じられなくなり,その後予後を追跡できなくなる患者が少なくないことが明らかとなった,今後は,加齢に伴い全身疾患を患った患者や要介護の状態になった高齢者の在宅,施設訪問による予後調査を行い,高齢インプラント患者の問題点をさらに明確にし,その対応策に関しても模索していく予定である.前年度の単変量解析を用いた生存分析では,年齢以外の交絡因子を加味できていなかったため,本年度ではまず,加齢が本当にインプラント体生存に影響を与えるかを明らかにするため,リコール患者を対象に多変量解析を用いた全数調査を行った.さらに,口腔インプラント治療を受けた介護高齢者の問題点を抽出する前提として,健康な高齢者がインプラント義歯を含めた欠損補綴治療に対し,どのような疑問を持っていて,どのような困りごとを抱えているかアンケート調査を行った<方法>・過去17年間の全リコール患者393名を対象に,年齢を含めたインプラント体生存に影響を及ぼすと思われる要因を予測因子とした多変量解析(一般化推定方程式:Generalized Estimating Equation)を行った.・岡山県老人クラブ連合会主催の女性リーダー研修会と健康づくり介護予防リーダー養成講習会の参加者48名(非患者群;平均年齢:74.3歳,男/女/未記載:9/37/2名)ならびに岡山大学病院に受診中の患者77名(患者群;平均年齢61.8歳,男/女/未記載:14/61/2名)を対象に,QOLアンケートならびに欠損補綴治療に関する記述式アンケート調査を行った.<結果>・「喫煙」と「可撤式インプラント義歯」がインプラント体生存のリスク因子として同定されが,年齢はリスク因子ではなかった.・非患者群の欠損歯数(平均欠損歯数:11.6本)の方が患者群(平均欠損歯数:9.1本)に比べ多かった.・非患者群の口腔関連QOL得点(平均得点:47.5点)は,患者群(平均得点:44.5点)に比べ高かった.・岡山大学病院における患者群のほうが非患者群に比べ「補綴治療に関する疑問」,「口腔内の困り事」を間う記述式質問に多く回答していた.・非患者群で口腔インプラント治療を受けている高齢者は6名(12.5%)であった.今後は,要介護高齢者に対し,在宅,施設訪問によるアンケート調査を行い,高齢インプラント患者の問題点を明確にし,その対応策に関しても模索していく予定である.まず,高齢者の追跡不能患者の詳細を検討するために,当科で口腔インプラント治療を受けた全患者を対象に,診療録ベースの追跡調査を行った.そして,協力を得ることができた老人保健施設に入所している介護高齢者を対象に,口腔内にインプラントが存在するか診療検査ベースの横断調査を行った.さらに比較対照として,インプラント義歯を装着している健康な高齢者がどれくらい存在するかアンケートにより調査した.〈方法〉

・過去19年間の全リコール患者634名を65歳以上,未満に分類し,リコール率を算出した.加えて,65歳以上の高齢者において,リコールに応じるとこができなかった患者の詳細を記述的に調査した.・当科の協力施設に全入所者の全身状態把握,口腔内診査を依頼し,インプラント体の有無を確認した.・岡山県老人クラブ連合会主催の女性リーダー研修会と健康づくり介護予防リーダー養成講習会の参加者を対象に,欠損補綴治療に関する記述式アンケート調査を行った.〈結果〉・全リコール患者634名のうち,65歳以上の高齢者は149名(平均年齢:71.7歳,男/女:68/81)で,リコール率は65.8%であった.一方,485名の65歳未満リコール患者のリコール率は70.5%と65歳以上と差はなかった.・65歳以上のリコールに応じていなかった患者49名のうち26名は追跡不能であったが,23名は転居などを理由に転医していた.・当科協力老人保健施設の全入所者95名(平均年齢:83.4歳,男/名:18/77名,要介護状態区分1/2/3/4/5:8/13/20/25/19名)にインプラント義歯を装着している高齢者はいなかった.・女性リーダー研修会および介護予防リーダー養成講習会の参加者は48名(平均年齢:74.3歳,男/女/未記載:9/37/2名)で,インプラント義歯を装着している高齢者は6名(12.5%)であった.
筋炎特異自己抗体の病因的・臨床的意義と病態形成機序の解明

多発性筋炎/皮膚筋炎(polymyositis /dermatomyositis : PM/DM)は,筋力低下を主徴とする慢性炎症性疾患で,その臨床像は多彩である。本疾患においても,種々の細胞成分に対する自己抗体が検出される。特に,PM/DMに特異的に見出される自己抗体(myositis-specific autoantibodies ; MSAs)は,診断,病型の分類,予後の推定,治療法の決定など臨床的に有用である。さらに,かかる自己抗体が標的とする自己抗原が細胞内の重要な生物学的機能を持つ酵素や調節因子であることが同定され,自己抗体産生機序を考える上で重要な知見となっている。本研究では,PM/DMにおける自己抗体(とくに,抗アミノアシルtRNA合成酵素抗体や抗SRP抗体)とその臨床・免疫遺伝学的特徴および病理組織学的特徴の検討,抗SRP抗体の新たな測定法の開発,新たなMSAの同定,を行った。【方法】1)慶應義塾大学病院および関連施設の膠原病患者のうち,抗SRP抗体が検出された23例を対象とした。2)自己抗体の検索:HeLa全細胞抽出物を抗原とした免疫沈降法により,患者血清中の自己抗体が認識する核酸成分,蛋白成分を分析した。3)抗SRP抗体陽性23例の従来,未検討であった筋炎の発症様式,臨床特徴(臨床症状,臨床経過,治療反応性,予後など)を,詳細に解析した。4)抗SRP抗体陽性筋炎例の筋病理組織学的特徴を検討した。【結果】1)抗SRP抗体陽性23例中21例(91%)血清が筋炎を持ち,Bohan分類でI型:14例,II型:3例,III型:2例,IV型:2例であった。2)筋力低下は,20例中!2例(60%)が徒手筋力検査で3以下であった。ステロイド減量中に,19例中12例(63%)が再燃し,21例中8例(38%)で免疫抑制薬が併用された。3)抗アミノアシルtRNA合成酵素(ARS)抗体と関連する,間質性肺炎は5例(22%),関節炎は4例(17%),レイノー現象は1例(4%)と低頻度であった。4)悪性腫瘍は2例(上咽頭癌,肺癌),重症筋炎と関連する嚥下障害は3例(14%)に併発した。5)筋炎の発症時期(季節)における有意差はなかった。6)抗SRP抗体陽性筋炎11例の筋病理所見を検討すると,全例に壊死または再生像を認めたが,11例中10例で炎症細胞浸潤を認めず,type I fiberpredominanceを11例中6例(55%)に認めた。【結語】抗SRP抗体は重症,再燃性筋炎と関連することが明らかとなった。また,抗ARS抗体と異なる臨床病態を形成し,同抗体の産生機序の追究はPMの病態を解明する上で重要と考えられた。抗SRP抗体陽性筋炎例の筋病理組織像は炎症所見の明らかでない「壊死性筋症」が特徴的であるが,“type I fiberpredominance"が注目された。同組織学特徴と同抗体の反応様式,臨床病態との関連機序の解明が今後の課題である。本年度は,平成20度の成績に基づき,(A)新たな筋炎と関連する自己抗体の追究,(B)新たな抗SRP抗体測定法の開発を行った.【目的】炎症性筋疾患における自己免疫異常を検討するために,(A)新たな筋炎と関連する自己抗体の追究,(B)新たな抗SRP抗体測定法を開発,を目的とした.【方法】対象:膠原病患者16,000例,(抗SRP抗体測定法の開発では,とくにRNA免疫沈降法で7SL-RNAと反応した抗SRP抗体陽性18例)を対象とした.(A)自己抗体:HeLa細胞抽出物を用いた,核酸成分とタンパク成分の免疫沈降法により,同定した.(B)1)リコンビナントSRP-54kDa蛋白を抗原とした酵素免疫測定法(SRP-Elia),免疫ブロット法により,抗SRP抗体を測定した.2)SRP-Eliaによる抗SRP抗体陽性例の臨床特徴,HLAクラスII遺伝子を検討した.

【結果】(A)既知の抗アミノアシルtRNA合成酵素抗体と異なるtRNA成分と48kDaタンパクを免疫沈降する自己抗体が多発性筋炎と全身性エリテマトーデス患者血清中に見出された.(B)1)7SL-RNAを沈降した全18血清が,SRP-Elia法で高力価陽性を示し,免疫ブロット法でも確認された.2)16例中14例(89%)が筋炎を持ち,14例中9例(64%)がステロイド療法抵抗性筋炎であった.3)免疫遺伝学的背景の検討では、DR8(DRB1*0802/*0803)が健常人に比し,高頻度であった.【結語】(A)新たなtRNA関連自己抗体が見出された.今後,その免疫学的性状と臨床的特徴の検討が課題である.(B)新たなSRP-Eliaは,簡便なスクリーニング検査に適していると考えられた.さらに,ステロイド療法抵抗性の壊死性筋炎サブセットを形成する症例を同定し,その臨床的有用性が示された.本年度は,これまでの成績に基づき,(I)抗グリシルtRNA合成酵素(EJ)抗体と関連する臨床像の追究,(II)筋炎特異自己抗体と関連する筋病理組織像の検討,を行った。【目的】(I)抗アミノアシルtRNA合成酵素(ARS)抗体の一つである,抗EJ抗体陽性例の臨床的特徴を追究すること,(II)筋炎特異自己抗体陽性例の筋病理組織学的特徴を検討すること,を目的とした。【対象と方法】(I)教室で自己抗体を検索した膠原病患者6,000例を対象とし,免疫沈降法により抗EJ抗体陽性例を同定し,同抗体陽性例の臨床的特徴を検討した。(II)1)当院,共同研究施設を受診し,自己抗体の分析とともに詳細に筋組織所見を検討し得た多発性筋炎/皮膚筋炎45例を対象とし,H&E, ALP, ATPase, Gomoriトリクローム染色などで筋組織像を検討した。【結果】(I)(1)抗EJ抗体陽性例15例(DM:7例,特発性間質性肺炎(IIP):6例,PM:1例,関節リウマチ:1例)を見出した。(2)間質性肺炎(IP)を全例に認めたが,経過は慢性型であった。多関節炎を13例(87%)、発熱を11例(73%),RF陽性を9例(60%),筋炎を8例(53%),DM皮疹を7例(47%)に認めた。(II)1)抗Jo-1抗体4例,抗SRP抗体8例,抗RNP抗体5例が検出された。2)抗Jo-1抗体;筋壊死・再生所見が25%,抗SRP抗体;炎症性細胞浸潤なく,typel fiber優位が50%,抗RNP抗体;全例に筋壊死,炎症性細胞浸潤,が認められ,特徴的であった。【結語】)(I)抗EJ抗体はIP,関節炎,筋炎と密接に関係し,筋炎においてはDMが特徴的であった。(II)筋炎特異自己抗体と筋病理組織所見との関連が示唆された。
MHC結合性に偏りを示すCB6F1マウス由来紫外線誘導腫瘍の抗原解析

1.紫外線誘発腫瘍よりcDNAライブラリーの作成UV♂-ldよりグアニジウム法、Oligo(dT)-LatexによってmRNAを抽出精製した。cDNAは合成キットを用い一方向性に発現ベクターpcDNA3のクローニングサイトに組み込んだ。2.腫瘍拒絶抗原認識CTLを用いた抗原のcDNAスクリーニングUV♂-ldをCTLと混合培養し培養上清中に遊離されたサイトカインをELISA、バイオアッセイ等を用い解析した。スクリーニングの指標となるサイトカインとしてはGMCSF、TNF-α,IFN-γなどが考えられたが、UV♂-ldの腫瘍拒絶抗原認識CTLの中で最も感度が高かった10T7ではGMCSF、IFN-γの産生が高くTNF-αの産生は低かった。精度に関してはトランスフェクション標的細胞数種類を検討しCOS細胞Kdを有するマウス線維芽細胞を用いてUV♂-ld細胞と混合培養しバックグラウンドシグナルの程度を検討した。pcDNA3-β-Galによる発現効率の解析結果は表1の如くで発現効率は本システムに関する限りCOS7細胞が最良の結果を示した。同時に検討したCMS8、BALB/3T3などのマウス線維芽細胞ではトランスフェクション効率は非常に低かった。バックグラウンドの高低に関してはトランスフェクション標的細胞よりはCTLの状態が大きく影響することが明らかとなった。即ちCTLをIL2とIL7で維持した場合には腫瘍拒絶抗原を有するUV♂-ld細胞が0%でも強いシグナルを認めるのに対し、同系マウス脾細胞をフィーダーとして加えた場合はを0.78%まで検出できるがそれ以下では非特異的シグナルは消失し特異性の高いアッセイとなることが判明した。現在これらの課題を改善し効率よく抗原のcDNAスクリーニングを進めている。
発振波長が温度に依存しないレーザ用希釈ビスマスIII-V族半導体超格子に関する研究

GaAsBiはその禁制帯幅が温度無依存化するので、発振波長が温度に依存しないレーザ用材料として有望である。透過電子顕微鏡観察、ホトルミネセンス、トラップ密度の測定結果をもとに、適切な条件で成長することで、デバイスに応用しうる高品質のGaAsBiを得られることを実証した。また、GaAsBiから世界で初めてレーザ発振を得た。さらに、AlGaAs/GaAsBi多重量子井戸構造を製作し、Biの偏析のない急峻なAlGaAs/GaAsBi界面が実現できることを示した。このヘテロ界面の欠陥準位を解析し、その低減法を明らかにした。半金属半導体混晶GaAsBiの禁制帯幅の温度依存性は大幅に低減できる。この特性を活用して最終的には発振波長が温度無依存である半導体レーザを得ることを目指している。Biの偏析により、GaAsBi/GaAs超格子は、従来、製作が困難とされてきた。本研究では、GaAsBi/GaAs超格子の製作法を確立し、その物性を明確にするとともに、発光の高輝度化を図る。その結果をもとに、レーザ基本構造(GaAsBi/GaAs超格子を活性層とするダブルヘテロ構造)の製作を目的としている。BiはGaAsと混じりにくく、MBE成長などでサーファクタントとして働くことが良く知られており、Biの偏析が懸念されていた。成長中のAs圧のわずかな変化が、特にBi原子の取り込みに影響するため、同じ組成の混晶を再現性良く得ることが容易ではなかった。GaAsBiのMBE成長の条件を最適化し、GaAsBiの高品質化を進め、世界で初めて光励起によるGaAsBiのレーザ発振に成功した。また、GaAsBi/GaAs超格子に関しては、透過電子顕微鏡(TEM)像観察と高分解能X線回折測定(XRD)により、顕著な偏析のない、原子レベルで平坦な界面をもつ超格子が製作できることを実証した。レーザ素子への応用を考えたとき、GaAsBi/GaAs接合では、価電子帯側のバンド不連続が大きく、伝導帯側のバンド不連続がほとんど無いと予想される。このためにAlGaAsをクラッド層とすることで、伝導帯側のバンド不連続を大きくする必要がある。本年度は、AlGaAs/GaAsBi超格子を製作し、TEM、XRDや二次イオン質量分析(SIMS)測定により、Biの偏析のない急峻なAlGaAs/GaAsBi界面が実現できることを示した。超格子の重要な物性値であるバンドオフセットを求めるために、p-GaAsBi/p-GaAsヘテロ構造へのショットキー接触を製作し、その容量電圧特性を測定した。GaAsに比べてGaAsBiには表面準位が多く存在することが明確となり、その影響によりバンドオフセットが求められなかった。次年度に、得られた知見を元に新たに考案した試料構造を製作し、表面準位の影響を抑制してバンドオフセットの解明を進める。また、本ショットキー接触を用いて、Deep Level Transient Spectroscopy (DLTS)によるトラップの検出を行った。GaAsBiの禁制帯の中で価電子帯側のトラップ密度は、たかだか2×10^<15>cm^<-3>であった。GaAsBiにBi原子がAsサイトではなくGaサイト(アンチサイト)に取り込まれトラップを形成する懸念が指摘されてきたが、少なくとも、禁制帯の価電子帯側のトラップ密度は大きくない。今後、伝導帯側のトラップ密度を求め、Biアンチサイトの有無を明確にする。また、AlGaAs/GaAsBiダブルヘテロ構造を製作した。ヘテロ界面の平坦性は、AlGaAs/GaAsBi超格子の透過電子顕微鏡観察と二次イオン質量分析により確かめている。Alを供給する分子線セル周辺からの汚染が、AlGaAs/GaAsBiダブルヘテロ構造の光学特性を大きく劣化させていることが判明した。次年度に、Al原料の分子線セル周辺を改造し、ダブルヘテロ構造の光学特性の改善をはかる。

本研究では、GaAsBi/GaAs超格子の製作法を確立し、その物性を明確にするとともに、発光の高輝度化を図る。前年度に容量電圧法によるGaAsBi/GaAsヘテロ接合のバンドオフセットの測定を試みたが、表面あるいは界面に存在する準位の影響により、求められなかった。本年度は、アドミタンス分光法、DLTS法およびICTS法を組み合わせて測定することで、p-GaAsBi/p-GaAsヘテロ界面に8×10^<11>cm^<-2>eV^<-1>程度の準位が存在することを明らかにした。この界面準位がGaAsBi/GaAs超格子の発光強度を低下させている原因と考えられる。また、バンドオフセットを測定するためには界面密度を1×10^<11>cm^<-2>eV^<-1>程度に低減する必要がある。GaAsBi表面とGaAs表面の超構造の違いを考慮して、GaAsBi/GaAs界面でGaAsBi組成を緩やかに変化することで、界面密度を低減できることを見出した。また、従来、GaAsBiではBi混入によりバンドギャップの価電子帯側に浅い局在準位が形成されるとされてきた。さらに、p-GaAsBiの正孔移動度はこの局在準位の影響で、大きく劣化するとされてきた。ドープ量の異なる一連のp形GaAsBiのホトルミネセンス測定から、この局在準位密度は2×10^<17>cm^<-2>程度と見積もった。局在準位の形成に寄与しているBi原子はGaAsBi中のBi原子の10^<-4>程度である。また、これに対応して、本研究のp-GaAsBiではBi組成が4%以下であれば、正孔移動度はGaAsとほぼ同じであることを見出した。本研究では、局在準位密度の少ない良質なGaAsBiが製作できていることを明らかにした。
アルパイン型カンラン岩のカンラン石中のレリック流体包有物の研究

マントル起源の固体貫入カンラン岩体中のカンラン石に含まれるレリック流体包有物(RFI)の起源を明らかにすべく岩石学的研究を行なった。まずRFIの普遍性をチェックするために日本の11のアルパイン型岩体、典型的なオフィオライト岩体とされるパブア、トルードス、オマーンのカンラン岩、および海洋底より得られたカンラン岩中のカンラン石を通常の偏光顕徴鏡で詳細に観察した。その結果、すべての岩石においてカンラン石中にRFIを見出し、固体貫入カンラン岩体におけるRFIの存在の普遍性を確認した。また、流体包有物の形成にはいくつかのステージがある事が確認された。すなわち、RFIのうち、個々の包有物が大型で不規則形をなすものは、蛇紋石(リザルダイトークリソタイルよりなる貫入後低温で形成された)の脈に移行する。一方、蛇紋石脈に切られているRFI列の個々の包有物は、四角形または多角形で、カンラン石の結晶構造に支配されている様に見える。分析電顕によるRFIの観察と分析を行うため、岩内岳,幌満,東赤石,大西洋底および比較のために一の目潟産の捕穫岩のカンラン岩のカンラン石をイオン研磨した。電顕下でRFIは母相カンラン石に完全に囲まれ、a軸方向に伸長した四角形から偽六角形の形態を持つ。一方、RFIの構成鉱物は産地ごとに異なる。既ち、岩内岳では蛇紋石+ブルース石、幌満は蛇紋石+ブルース石+マグネサイト、東赤石では蛇紋石+マグネサイト+タルクである。これらの鉱物組み合わせより、各カンラン岩に供給された流体組成の【CO_2】/【H_2】O比が推定された。東赤石の場合、三波川変成作用時に再結晶したカンラン石にはRFIは全く含まれず、ポーフィロクラストにのみ認められる。この事実は、流体の供給が三波川変成作用以前、おそらくは上部マントルにおいてなされた事を強く示唆する。
肝臓における7α,12α脱水素酵素活性の測定とその臨床的意義

肝におけるコレステロールから胆汁酸への異化について検討する目的で、胆汁酸合成の律速酵素である7α水酸化酵素活性測定法を確立し、内因性コレステロール合成亢進による胆石形成の成因について検討した。すなわち、1)7α水酸化酵素活性測定法の確立高速液体クロマトグラフィによる内因性コレステロールを基質に用いた7α水酸化酵素活性測定法についてラットおよびハムスターの肝で検討した。7αハイドロキシ4コレステン3オンという代謝産物を測定することにより、7α水酸化酵素活性が測定可能であることが判明した。12α水酸化酵素活性の測定については、その酵素の基質を合成する必要があるため、検討中である。2)内因性コレステロール負荷による7α水酸化酵素活性への影響高グルコース食にて雄性ハムスターを飼育した結果、第2-4週で80%以上にコレステロール胆石の発現を認めた。この間、第1週では7α水酸化酵素活性は同時に測定したHMG-CoA還元酵素活性と同様に上昇を認めたが、第2週以降前値に復し、HMG-CoA還元酵素活性のみ亢進を持続した。この結果、胆汁へのコレステロール排泄量が胆汁酸を上回ったため、胆石が発現したと考えられた。3)外因性コレステロール負荷による7α水酸化酵素活性への影響0.1%コレステロール含有食にて飼育した雄性ハムスターにおける7α水酸化酵素活性の変化については現在検討中である。
脂肪細胞分化過程における脂質修飾プロテオームの時空間解析

本研究は、翻訳後修飾・定量プロテオミクス技術を脂肪細胞分化研究に適用し、その分子基盤を、タンパク質修飾およびその動的局在を鍵にして一網打尽に解明しようとする研究である。当初の計画では、脂肪細胞分化過程における分子機構の解明をターゲットにしていたが、白色、褐色、およびベージュ脂肪細胞におけるリン酸化修飾の違いを網羅的に解析したところ、カゼインキナーゼ2(CK2)の上昇が白色脂肪細胞特異的に生じていることを見出した。さらにその下流シグナルを精査したところ、CK2によりクラス1ヒストン脱アセチル化酵素(HDACs)活性が上昇し、熱産生を妨げていることがわかった。そこで、標的分子群をリン酸化及びアセチル化タンパク質に変更し、研究を進めることとした。アセチルリジン抗体を用いたアセチル化ペプチド濃縮法を確立し、LC-MS/MSと組み合わせたアセチル化プロテオミクスを用いてCK2阻害薬および各種HDAC阻害薬の白色脂肪細胞内アセチル化修飾に対する影響をプロテオーム規模で検討した。その結果、両阻害薬はミトコンドリア内におけるアセチル化修飾を有意に上昇させることが分かった。これらの結果は、リン酸化及びアセチル化シグナルが協働して白色脂肪細胞における熱産生を直接制御していることを示している。両阻害薬処理した白色脂肪細胞におけるタンパク質発現量の大規模解析とメタボローム解析を組み合わせて解析したところ、アセチル化修飾に変化のあったタンパク質は、TCA cycleおよびfatty acid metabolismに濃縮されていることがわかった。翻訳後修飾プロテオミクス、グローバルプロテオミクスおよびメタボロミクスなどのマルチオミクス解析を白色脂肪細胞における熱産生機構に適用することにより、キナーゼ活性や代謝恒常性維持に関わるアセチル化修飾の役割の一端を明らかにすることができた。28年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、最先端の翻訳後修飾・定量プロテオミクス技術を脂肪細胞分化研究に適用し、その分子基盤を、タンパク質脂質修飾およびその動的局在を鍵にして一網打尽に解明しようとする研究である。様々な脂質修飾ペプチドに対する選択的濃縮法を開発し、定量的ショットガンプロテオミクスと組み合わせた脂質プロテオーム解析システムを確立するとともに、このシステムを利用して、脂肪細胞分化時においてどのような脂質修飾がいつ、どこで起きているのかを包括的に解析し、その制御機構においてキーとなる修飾分子候補を同定し、さらに脂質修飾部位特異的に変異を入れることにより検証し、脂肪分化関連疾患における創薬標的探索に資することを目標としている。本年度は、白色、褐色及びベージュ脂肪細胞における翻訳後修飾に注目し、b-adrenoceptor刺激によるc-AMP上昇に伴う白色脂肪細胞の脱共役とエネルギー産生の上昇についてリン酸化プロテオーム解析を行い、CK2の上昇が白色脂肪細胞特異的に生じていることを見出した。本現象におけるリン酸化シグナルと脱アシル化シグナルに注目し、アセチル化プロテオーム解析を行ったところ、リン酸化シグナルによる脱アセチル化シグナルの転写レベルにおける制御を示唆する実験データを得た。当初の計画通り、脂肪細胞に注目した翻訳後修飾の大規模解析システムを立ち上げることに成功している。実験材料の入手も順調にいき、予想した結果を得るとともに、新規の生物学的知見もえられつつあり、順調に推移しているといえる。当初の計画では、脂肪細胞分化過程における分子機構の解明をターゲットにしていたが、白色、褐色、およびベージュ脂肪細胞における翻訳後修飾の違いから、代謝リワイヤリングのメカニズム解明をターゲットにして研究を進める予定である。様々な分子の阻害薬を組み合わせながら、翻訳後修飾定量プロテオミクスをすすめる。
がん細胞はなぜ糖を過剰に必要とするのか？の根本疑問にグリオーマ幹細胞研究から挑む

がん細胞の特徴である糖代謝亢進ががん細胞にとってどのような意義があるかについてはいまだ不明な点が多い。我々はこれまでの科研費研究の成果に基づき糖代謝が活性酸素種(ROS)レベルの調節を通じてグリオーマ幹細胞のがん幹細胞状態維持に寄与しているという仮説を提唱した。そこで本課題ではこの仮説検証を行うとともに解糖経路阻害により細胞内ROSレベルが上昇する機序について検討を試みた。その結果、細胞内ROS上昇により幹細胞性喪失がおきることは確認されたが、GLUT1阻害による糖取り込みの抑制が細胞内ROS上昇を引き起こす機序についてはこれまでのところ仮説実証に至っておらず、さらなる検討が必要と考えられる。自己複製能・腫瘍創始能といったがん幹細胞を特徴付ける形質を喪失させる手法の開発はがん根治実現のカギを握ると考えられるが、こういったがん幹細胞に特徴的な形質が如何なる機序で維持されているかはいまだ不明な点が多い。これに対して我々は「がん幹細胞の糖代謝活性が幹細胞形質維持調節に重要な役割を担っている」という新たな仮説を着想した。本課題は、前年度挑戦的萌芽研究課題「がん幹細胞運命決定の糖代謝レオスタット仮説実証を通じて膠芽腫根治モデル創出に挑む」に引き続き、この仮説を膠芽腫をモデルに実証すると同時にがん幹細胞糖代謝標的治療を膠芽腫幹細胞分化誘導法やbulk tumor control(非幹細胞制御)法等と理論的に組み合わせることによって膠芽腫根治の前臨床モデルを創出することを最終的な目標として実施している。これまでに我々は解糖経路阻害がin vitroで膠芽腫がん幹細胞の諸特性を抑制するとともに、in vivoでも膠芽腫がん幹細胞による腫瘍形成を抑制することを明らかにしている。引き続きこのような解糖経路阻害により幹細胞性が失われる機序について検討を行ったところ、解糖経路阻害により細胞内ROSレベルの上昇が誘導され、これが幹細胞性を抑制している可能性を示唆する結果が得られた。そこで細胞内ROSの解糖経路阻害による幹細胞性抑制における役割を検討するとともに、解糖経路阻害により細胞内ROSレベルが上昇する機序について検討を行った。前者については、少なくとも細胞内ROS上昇により幹細胞性喪失がおきることは確認されている。後者については、グルタチオンを介した制御の可能性が示唆されたため、現在グルタチオン代謝に深く関わっているグルタミン代謝も含めて俯瞰的な視点から検討を継続している。本課題の仮説の中心となっている解糖経路阻害による幹細胞性喪失へのROSの関与を示唆するデータが順調に得られているため。これに対して我々は「がん幹細胞の糖代謝活性が幹細胞形質維持調節に重要な役割を担っている」という新たな仮説を着想し、本課題では、このような仮説の検証を目的として開始した平成26年度挑戦的萌芽研究課題「がん幹細胞運命決定の糖代謝レオスタット仮説実証を通じて膠芽腫根治モデル創出に挑む」に引き続き、解糖経路阻害により幹細胞性が失われる機序について検討を行った。その結果、解糖経路阻害により細胞内活性酸素(Reactive Oxygen Species; ROS)レベルの上昇が誘導され、これが原因となって幹細胞性が抑制されている可能性を示唆する結果が得られた。そこで細胞内ROSの解糖経路阻害による幹細胞性抑制における役割を検討するとともに解糖経路阻害により細胞内ROSレベルが上昇する機序について検討を行ったところ、まず細胞内ROS上昇により幹細胞性喪失がおきることが確認された。さらにROS上昇による幹細胞性喪失の機序としてグルタチオンを介した制御の可能性が示唆されたためグルタチオン代謝に深く関わるグルタミン代謝の関与を含めて検討を行った。その結果、種々実験条件の検討を行いつつ実験を実施したものの、当初予想に反して、グルタミン枯渇やグルタミン代謝阻害による細胞内ROSの上昇はこれまでのところ再現性をもって確認するまでに至っていない。このような結果は実験手法改善の必要性を示唆する一方で、仮説再構築の必要性についても考慮が必要であることを示唆している。解糖経路阻害による細胞内ROSレベル上昇の機序に関して示唆的な知見が得られているので、この点をさらに詳細に解析する。また、細胞内ROSレベルは糖代謝単独ではなく、グルタミン代謝と協調することで制御されていることも明らかになりつつある。これらの新規知見についての解析結果を加えることで、本研究課題からより大きな成果を生み出すことが期待される。

脳神経外科学、脳腫瘍学研究過程において申請時には予見できなかった新知見が得られ、この新知見に関する検討を十分に行うことにより得られると期待される情報に基づいて当初予定の研究を実施するほうが、当初予定の研究を拙速に実施するよりも遥かに研究費の有効活用が可能であり、有意義な知見が得られると考えられたため。と同時に、科研費の効率的かつ有効利用を最大化するため、研究課題で行う予定の実験のうち、研究室に既存のマテリアルを使用することで推進可能なものは極力既存のマテリアルを使用することで実施する努力をしたため。新知見に基づいて今後得られるであろうと期待される新情報を踏まえつつも方法論的には当初計画どおりに研究を進める予定であり、そこで必要とされる一連の実験を実施するために研究費を使用する。
統計的音声合成を利用したインタラクティブオーディオブックと集合知への応用

電子書籍には音声合成機能が搭載され、ユーザは電子書籍を読んで楽しむだけでなく、聞いて楽しむことも出来る。この技術に、様々な声質や発話様式による音声生成が可能な統計的音声合成を組み合わせれば、合成音声の表現をユーザ自身がインタラクティブに制御可能なプラットフォームに変わる。この目的のため、本研究では音響モデリング技術を音声の変換関数を因子化することで高度化させた。話者の変換行列と感情の変換行列を明示的に因子化させ、ある話者から推定された感情の変換行列を、全く別の話者においても利用できる適応アルゴリズムを提案した。また話者の性別や年齢を因子化したシステムも構築した。提案オーディオブックも試作した。統計的音声合成は柔軟性にすぐれ、声を変える、声を混ぜる、さらには、韻律などを発話中にリアルタイム制御することもでき、様々な声質、発話様式、方言による音声出力が実現可能である。この統計的音声合成のメリットを活かすことで、例えば、文章を読み上げる声優、使用する方言、発話様式等を自由に配置可能なオーディオブック等のアプリを作成でき、ユーザは自由にかつインタラクティブにオーディオブックを創作することが可能になると考えられる。そこで本年度は、オーディオブックを自由にかつインタラクティブに創作することが可能なプラットフォームの試作をモバイル端末上で行った。試作したアプリはiOS上で動作し、ePubフォーマットの電子書籍をHMM音声合成にて読み上げるものである。所望の音声合成用ボイスが利用できる様、ユーザがアップロードした音声から音声合成用音響モデルを自動構築するサーバとも連携させ、自由に話者をダウンロード・選択できる様にした。また、ユーザがどの話者をどのコンテンツに利用したか、人気の話者などのメタ情報を逐次記録できる様にした。日本の音声情報処理技術のさらなる高度化を牽引するため、声質変換技術のコンペ(Voice Conversion Challenge 2016, vc-challenge.org)への協力、音声合成等による話者照合システムへの詐称を検出する技術のコンペ(ASVspoof 2015, www.spoofingchallenge.org)への協力、音声合成技術の医療応用(ボイスバンク)の実証実験実施など、様々な分野へ技術的・社会的貢献も基礎研究と並行して行った。電子書籍は読んで楽しむだけでなく、聞いて楽しむことも出来るが、現在利用されている音声合成は、文章をただ読み上げているだけであり魅力に欠けている。音声合成の研究分野において、声を変える、声を混ぜる、韻律などを発話中にリアルタイム制御する技術等も鋭意検討されており、これらを電子書籍と統合すれば、音声を聞くだけでなく、合成音声の表現をユーザ自身がインタラクティブに制御し、魅力的なオーディオブックを自由に創作することが出来るエンターテイメント性の高いプラットフォームに拡張可能になると期待される。そこで本研究では、柔軟な制御が可能である統計的音声合成を利用した電子書籍を試作し、声を変える技術(話者適応技術)、声を混ぜる技術(補間技術)等を利用した斬新なインタラクティブオーディオブックを試作した。また、アプリにおける制御を向上させる基礎技術の検討も行なった。1)制御の際に考慮したい要素のすべての組み合わせ(例:話者数×方言数×複数の発話様式)を全てカバーしたデータベースを収録することはコストが非常にかかり非現実的である。そこで、限られた規模の音声データベースから、これらの要因を明示的に因子化した音声の変換関数を推定する研究を行った。具体的には、統計的音声合成において、他の異なる話者の音声データから得られた感情表現を、全く別の話者へ「移植」するためのアルゴリズムの検討や、トピックモデルにより検出されたトピックと統計的音声合成システムを密結合させる取り組みを行った。さらに、近年大きな進展を見せているディープラーニングを導入することも行なった。まず、ディープラーニングにより得られた音響モデルをオーディオブックアプリで利用できるようライブラリを拡張し、さらに、ディープラーニングにより声を変える、声を混ぜる、韻律などを発話中にリアルタイム制御する方法の検討も行い、実現可能であることを示した。H28年度はこれらのメタデータをユーザ間で共有出来る様にすると同時に、これらのメタデータを教師データとして機械学習に利用することで、与えられたテキストを読み上げるのにふさわしい話者、方言、発話様式の自動予測といった自然言語処理問題に挑戦する予定である。この様な「ゲーミフィケーション」と「集合知」により得られた音声合成の知見や新モジュールは、音声合成だけでなく、例えば、音声対話システムの改善にも今後利用可能であると期待される。音声情報処理