hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
政策情報公開の包括化・国際化・ユニバーサル化

学術的には,6月の日本公共政策学会(福島)で,国会審議映像検索システムを利用した研究報告による「議会・立法に関するICTの活用」と題するセッションを開いた.また,社団法人政府資料等普及調査会が収集してきた府省庁の報告書等の政策関連資料の保管と政府資料データベースの維持を引き継ぎ,電子化の方策を検討した.3.比較立法情報・英文データ化:外国議会や国際機関の提供するデータベース,その運用方法についての調査を継続し,政治指導者の国際的データベース開発を目指す欧州政治研究学会のSEDEPEに日本担当として参画した.4.情報公開のユニバーサル化:本研究課題のウェブサイトを拡張した.とくに,国会審議映像検索システムは,検索対象に参議院の審議動画も大幅に追加した.さらに英語版の開発を進めたことで,それまでは日本語のみであった検索語の入力が英文でも可能となった.本研究課題では,政策情報供給の効果を検証するとともに,立法府の政策情報公開を促進し,政府に関する情報公開の包括化を図っていく.また,立法府の政策情報を英文でも公開・発信し,わが国の立法に関する国際的な理解・研究の基盤を提供するとともに,政策的知識やIT・言語能力に制約されない電子化情報の公開方法を試行し,政策情報公開のユニバーサル化を目指す.平成24年度においては以下を実施した.1.情報公開の効果検証本研究課題では,情報公開制度の集計的な利用状況ではなく,開示請求の目的と請求された情報内容の関連性を解明していく.自治体を対象とした情報公開開示請求データベースを構築し,開示請求案件の入出力をインターネット上で行うプログラムを改善した.また,日本公共政策学会研究大会にて論文を報告し,情報公開制度を通じた行政情報を自治体間で共有し,広く一般市民も活用できるようにする本研究の取り組みを紹介した.2.立法情報のデータベース化国会審議映像検索システムについては2012年3月に運用を開始し, 5月の日本選挙学会では国会審議映像の検索・再生実演を行った.2012年11月から一般公開を開始した.3.比較立法情報・英文データ化フィンランド議会,スペイン議会における立法情報の公開状況について調査し,国際図書館連盟年次大会,国際政治学会に参加した.また,国際的データベース開発プロジェクトの一環として,日本の閣僚に関するデータを整備し,分析結果をまとめた論考をプロジェクトの論文集に寄稿した.4.情報公開のユニバーサル化初年度に開設した本研究課題のウェブサイトを拡張し,立法情報の統合ポータルサイトとして運用を開始した.
アジアの宗教・文化圏における国民統合の比較史的研究

本研究の成果として、第一に、学術的に相互交流が活発化している現状を利用して、日本に訪問中のアジア諸地域の研究者を招き、連続して公開研究会を開催して、情報の収集と研究視角の再検討を行った。アジア諸地域の研究者の問題意識に広く触れることができたことにより、大きな成果が得られた。第二に、研究対象地域における現実のさまざまな民族対立、宗教的粉争、地域的な分離主義の動きなどに刺激されつつ、それぞれの宗教・文化圏における問題の在り方を比較、対照することができた。各地域に即していえば、東アジア(儒教文化圏)では、中国について、国民統合と歴史的な統一帝国の観念の関係、中央政府と地方の独自性の関係などについて検討し、台湾について、新たなアイデンティティの形成過程を検討した。中央アジア・中東(イスラム文化圏)では、社会主義的中央政府と民族宗教地域の関係、宗教的小数派に由来する政治的社会的問題などについて検討した。南アジア(ヒンドゥ-文化圏)については、ヒンドゥ-、イスラムの二大宗教の対立と融和の実態を、域内諸国の分離独立過程に即して検討した。第三に、上述の各地域に共通して取り上げられるべき問題として、近代的な国民国家の体制が、民族的な集団や宗教的集団との間に生じている予盾や軋轢について検討した。また同一のエスニシティに属することが国家の側からは強調されるような地域における政治的特殊性や経済的格差の拡大によるアイデンティティの分裂の問題を明らかにした。この問題は、ナショナリズムとエスニシティの相互連関をどのようにとらえるかという問題と関連して、今後の研究の進展に展望を与えるものである。課題の大きさに比べると、本研究の二年間の成果は必ずしも充分なものではないが、今後の研究への一定の寄与を期して「研究成果報告書」を作成した。本研究はアジアにおける国民統合が、儒教圏、イスラム圏、ヒンドゥ-圏、仏教圏において、どのように異なるか、異ならないかを問題とし、アジア各地の民族紛争、宗教的対立の問題を、現状への関心を中核として、歴史的、社会的、文化的、宗教的背景にさかのぼって糾明し、かつそれぞれの宗教・文化圏における問題の発言の在り方を比較、対照することを目的としている。上記の目的に沿って、本年度は、(1)それぞれの宗教・文化圏における国民統合・少数民族関係の基礎史料・関連文献の蒐集を行ない、(2)上記史料およびその他の関連史料の整理とデ-タベ-ス化に着手し、(3)アジア各地から日本を訪問している研究者、留学生を招いて連続してセミナ-を開催し、文献史料以外の情報の収集と記録を行なった。こうした基礎的作業を踏まえて、東アジア(儒教文化圏)、とくに中国については、国民統合と伝統的な「一統」観念の関係を再検討し、中央政府と地方の民族社会、地域社会の結合の実体を明らかにすべく研究を進めた。中央アジア・中東(イスラム文化圏)については、有力な宗教的少数派、異端派集団に由来する政治的、社会的問題に着目するとともに、社会主義を掲げる中央政府と民族宗教地域との関係について研究を進めた。南アジア(ヒンドゥ-圏)についても、ヒンドゥ-イズム、イスラミズムの二大宗教の対立と融和の実態について、諸国家の分離独立の過程にそくして研究を進めた。

第二に、研究対象地域における現実のさまざまな民族対立、宗教的粉争、地域的な分離主義の動きなどに刺激されつつ、それぞれの宗教・文化圏における問題の在り方を比較、対照することができた。各地域に即していえば、東アジア(儒教文化圏)では、中国について、国民統合と歴史的な統一帝国の観念の関係、中央政府と地方の独自性の関係などについて検討し、台湾について、新たなアイデンティティの形成過程を検討した。中央アジア・中東(イスラム文化圏)では、社会主義的中央政府と民族宗教地域の関係、宗教的小数派に由来する政治的社会的問題などについて検討した。南アジア(ヒンドゥ-文化圏)については、ヒンドゥ-、イスラムの二大宗教の対立と融和の実態を、域内諸国の分離独立過程に即して検討した。第三に、上述の各地域に共通して取り上げられるべき問題として、近代的な国民国家の体制が、民族的な集団や宗教的集団との間に生じている矛盾や軋轢について検討した。また同一のエスニシティに属することが国家の側からは強調されるような地域における政治的特殊性や経済的格差の拡大によるアイデンティティの分裂の問題を明らかにした。この問題は、ナショナリズムとエスニシティの相互連関をどのようにとらえるかという問題と関連して、今後の研究の進展に展望を与えるものである。課題の大きさに比べると、本研究の二年間の成果は必ずしも充分なものではないが、今後の研究への一定の寄与を期して「研究成果報告書」を作成した。
グルタミン酸誘導体アクロメリン酸の受容体のクローニングとその痛覚誘発機構の解明

微量のアクロメリン酸をマウスに髄腔内投与するとアロディニアを誘発したが、過剰量を投与して1週間後、プロスタグランジン(PG)F_<2α>で誘発したアロディニアが特異的に消失した。下部脊髄ではニューロンの変性・壊死やアポトーシスは起こらず、グリオーシスを認めるのみであった。アクロメリン酸受容体を同定するために、アンチセンスオリゴでアロディニアを抑制する実験系が必須であったので、マウスの髄腔内に細いチューブを挿入してPGF_<2α>受容体(FP)mRNAに対するアンチセンスオリゴを投与したところ、脊髄のFPmRNA量が低下し、PGF_<2α>のアロディニアが特異的に消失した。脊髄スライスにPGF_<2α>をかけると後角深層で著明な[Ca^<2+>]iの増加が見られたが、FPのアンチセンスオリゴを投与した脊髄では、PGF_<2α>に応答する細胞数が減少するとともに[Ca^<2+>]iのピークも下がった。すなわちFPを発現する細胞が後角深層に多い事を明らかとする事ができ、またアクロメリン酸の作用とアロディニアに関係する分子の評価が可能となった。一方、アクロメリン酸のアジド化誘導体を化学合成して光親和性リガンドとする事を試みた。この誘導体は、アクロメリン酸と同様にアロディニアを誘発したが、特異的に結合するタンパク質は同定する事ができなかった。そこで、cDNAのクローン化のため、アクロメリン酸と生理的食塩水を投与したマウスの脊髄を用いたサブトラクションライブラリーからcDNAを単離したところ、脊髄で特異的に発現するものが得られたので、完全長cDNAを単離し構造を決定した。それぞれのアンチセンスオリゴを作製してマウスに髄腔内投与すると、PGF_<2α>で誘発したアロディニアが特異的に消失するものを発見した(投稿準備中)。このうち一部はFP等の受容体と相互作用したので、アクロメリン酸の受容体とも密接に関与する事が示唆された。アクロメリン酸をごく微量、マウスに髄腔内投与するとアロディニアを誘発する。プロスタグランジン(PG)F_<2α>を投与してもアロディニアを誘発するが、過剰量のアクロメリン酸を投与すると、1週間後にPGF_<2α>で誘発したアロディニアが特異的に消失した。ラットとは違い、下部脊髄のニューロン選択的な変性・壊死やアポトーシスは起こらず、グリオーシスを認めるのみであった(論文投稿中)。アクロメリン酸の受容体を同定するためには、アロディニアをアンチセンスオリゴで抑制する実験系が必須である。そこでマウスの髄腔内にチュービングを入れて、PGF_<2α>受容体(FP)のmRNAに対するアンチセンスオリゴを投与したところ、脊髄のFP mRNA量が低下し、PGF_<2α>のアロディニアが消失した。一方、生理的食塩水やPGE_2ではアロディニアに影響を与えなかった。マウスの脊髄スライスにPGF_<2α>をかけると後角の深層で著明な[Ca^<2+>]iの増加が見られたが、FPに対するアンチセンスオリゴを投与した脊髄では、PGF_<2α>に応答する細胞数が減少するとともに[Ca^<2+>]iのピークも下がった。即ちFPが後角の深層に多い事を明らかにした。

この方法によりアロディニアに関係する分子の機能的および定量的評価が可能となり、アクロメリン酸の受容体の同定に一歩近づいた。アクロメリン酸受容体のクローン化のため、アクロメリン酸を投与したマウス脊髄を用いたサブトラクションライブラリーからcDNAを単離したところ、脊髄で特異的に発現するものが得られたので、完全長cDNAを単離し構造を決定した。アンチセンスオリゴを作製してマウスに髄腔内投与すると、PGF_<2α>のアロディニアが特異的に消失する複数のcDNAを発見した(論文準備中)。一部については抗体を作製して脊髄の免疫染色を行なっており、化学合成したアクロメリン酸と結合するかも検討している。微量のアクロメリン酸をマウスに髄腔内投与するとアロディニアを誘発したが、過剰量を投与して1週間後、プロスタグランジン(PG)F_<2α>で誘発したアロディニアが特異的に消失した。下部脊髄ではニューロンの変性・壊死やアポトーシスは起こらず、グリオーシスを認めるのみであった。アクロメリン酸受容体を同定するために、アンチセンスオリゴでアロディニアを抑制する実験系が必須であったので、マウスの髄腔内に細いチューブを挿入してPGF_<2α>受容体(FP) mRNAに対するアンチセンスオリゴを投与したところ、脊髄のFP mRNA量が低下し、PGF_<2α>のアロディニアが特異的に消失した。脊髄スライスにPGF_<2α>をかけると後角深層で著明な[Ca^<2+>]iの増加が見られたが、FPのアンチセンスオリゴを投与した脊髄では、PGF_<2α>、に応答する細胞数が減少するとともに[Ca^<2+>]iのピークも下がった。すなわちFPを発現する細胞が後角深層に多い事を明らかとする事ができ、またアクロメリン酸の作用とアロディニアに関係する分子の評価が可能となった。一方、アクロメリン酸のアジド化誘導体を化学合成して光親和性リガンドとする事を試みた。この誘導体は、アクロメリン酸と同様にアロディニアを誘発したが、特異的に結合するタンパク質は同定する事ができなかった。そこで、cDNAのクローン化のため、アクロメリン酸と生理的食塩水を投与したマウスの脊髄を用いたサブトラクションライブラリーからcDNAを単離したところ、脊髄で特異的に発現するものが得られたので、完全長cDNAを単離し構造を決定した。それぞれのアンチセンスオリゴを作製してマウスに髄腔内投与すると、PGF_<2α>で誘発したアロディニアが特異的に消失するものを発見した(投稿準備中)。このうち一部はFP等の受容体と相互作用したので、アクロメリン酸の受容体とも密接に関与する事が示唆された。
可溶性受容体ＬＲ１１による褐色脂肪細胞トランスディファレンシエーションの分子解明

本研究は、LR11欠損にともなう脂肪細胞トランスディファレンシエーションの病態生理と脂肪細胞の分子機序を、LR11を過剰発現する白血病細胞やLR11が枯渇してアルツハイマー病を発症する神経組織解析とあわせて、解明することを目的とした。トランスディファレンシエーションの分子基盤を提示し、細胞フェノタイプ変換を調節する可溶性LR11産生に重要なシェディング機構を明らかにした。本研究成果から、可溶性LR11が白色脂肪細胞の褐色化やベージュ化のネガティブレギュレーターであることが明らかになり、その放出を修飾することが新たな肥満や糖尿病治療の創薬標的になる可能性がある。本研究は、LR11^<-1->マウスにおける脂肪細胞トランスディファレンシエーション(白色脂肪の褐色脂肪への転換)の病態生理を同定しその分子機序を、それを過剰発現する白血病がん細胞やLR11が枯渇するアルツハイマー病神経細胞の機能とあわせて、解明し、これを修飾する創薬を探索することを目的とする。1)脂肪細胞トランスディファレンシエーションモデル解析。A.エネルギー代謝の生理学的解析:高脂肪食摂取での体重変動、糖脂質代謝をLR11^<-1->マウスと野生型で比較解析した。高脂肪食負荷後、LR11^<-1->マウスは野生型に比べ有意に体重が少なく、内臓脂肪および皮下脂肪ともに減少していた。インスリン抵抗性が減弱していた。LR11^<-1->マウスの皮下脂肪に褐色脂肪が存在し野生型ではみられなかった。B.培養脂肪細胞の分化解析:マウス白色および褐色脂肪に由来前駆細胞の分化誘導反応遺伝子発現解析を行った。LR11^<-1->マウス由来白色脂肪細胞は褐色脂肪の分化に関わる遺伝子群の発現が誘導されていた。C.脂肪細胞遺伝子と機能の包括的解析:LR11^<-1->マウスの皮下脂肪からmRNAを抽出しアレイ解析を実施中である。2)骨髄移植後の血球分化解析。A.LR11^<-1->所および野生型マウスに白血病細胞株U937を移植し生存率を解析している。B.血球分化誘導因子によるLR11放出作用の解明:GCSF処理し骨髄および末梢血の単核球分化誘導の変動を解析した。GCSFは細胞からLR11^<-1->放出を誘導し、両者は協調的に血球細胞の内皮細胞におけるトランスマイグレーションを亢進させた。以上より、LR11は脂肪細胞のトランスディファレンシエーションを抑制しこの破綻が褐色脂肪細胞への分化を誘導すること、血球細胞のGCSFに反応して末梢血に動員される過程で骨髄から末梢血へと血球が放出されるトランスマイグレーションに重要であることが明らかになった。来年度以降継続する分子解明は、脂肪細胞の褐色脂肪化を介した代謝疾患治療、血球細胞の動態調節を介した白血病治療に新たな治療法を提示することが期待される。われわれは病的細胞へのフェノタイプ変換研究から同定したキーレギュレータLR11をノックアウトすることで白色脂肪が褐色脂肪へ転換することに遭遇した。本研究は、このモデルの病態生理とその脂肪細胞の分子機序を、LR11を過剰発現する白血病がん細胞やLR11が枯渇するアルツハイマー病神経細胞の機能とあわせて解明し、脂肪細胞トランスディファレンシエーションの分子基盤を提示する。1)LR11ノックアウトマウスモデルの生理学的、細胞生物学的解析マウスエネルギー調節能を測定したところLR11ノックアウトマウスで慣例刺激による熱エネルギー産生が有意に亢進していた。LR11ノックアウトマウス由来培養脂肪細胞の生化学的ならびに分子生物学的解析を行い、分化の制御機構に関わるキーレギュレータBMP群を同定した。トランスディファレンシエーションモデルにおける異所性褐色脂肪細胞の包括的遺伝子変動をマイクロアレイ解析を行い褐色脂肪に至る包括的遺伝子変動が起きたことを証明した。樹立およびヒト由来脂肪細胞を用いキーレギュレータ分子の病的変動が細胞レベルで引き起こされることを同定した。2)LR11ノックアウトマウスの造血能解析LR11ノックアウトマウスにおける骨髄幹細胞の機能変化と前駆細胞や機能分化細胞への成熟過程を解析し、LR11産生に基づく細胞外への放出が未熟細胞の分化と成熟に重要であることを同定した。3)可溶性LR11とアミロイド前駆体蛋白輸送の関連ヒトLR11発現レベル、可溶性LR11放出量とアミロイドおよびタウ蓄積量の定量解析を行うための検体の収集を終え、解析のための免疫染色学的条件検討に着手した。本研究目的は、先端画像により成人で同定された褐色脂肪の存在メカニズムの基礎となる脂肪細胞トランスディファレンシエーション(白色脂肪の褐色脂肪への転換)を、平滑筋細胞フェノタイプ変換に重要な遺伝子LR11に着目することで、それを過剰発現する白血病

がん細胞や枯渇するアルツハイマー病神経細胞の病態とあわせて細胞生物学的に解明し、細胞トランスディファレンシエーションの分子基盤を提示し、これを修飾する創薬を探索することである。LR11欠損マウスのフェノタイプ解析から、高脂肪食負荷により皮下脂肪に著しい褐色脂肪が出現しエネルギー産生が亢進していることが明らかになった。その結果、インスリン抵抗性、脂質異常、肝脂肪蓄積を認めない。細胞生物学的ならびに包括的遺伝子発現プロファイル解析から、可溶性LR11はBMP受容体と複合体を形成し、BMP7の受容体下流シグナルを減弱させた。このように、可溶性LR11はマウス褐色および皮下脂肪の前駆細胞から成熟脂肪に分化するプロセスでBMP7作用を弱める褐色化ネガティブレギュレーターであることが明らかになった。臨床的解析から、血中可溶性LR11濃度は、肥満で増加し減量とともに低下した。さらに、可溶性LR11は白血病細胞で増加しその増殖遊走能に関わり、アルツハイマー病細胞内で発現が低下していた。このように、LR11の細胞内機能障害が病態形成に結びついていた。以上の結果から、LR11は、脂肪細胞、血液細胞、神経細胞の病態形成に関わる細胞フェノタイプ変化を制御する遺伝子であり、その発現異常が密接に病態と関わることが明らかになった。とりわけ、生理学的な白色脂肪から褐色脂肪への変換に重要な遺伝子であることから、この標的創薬が新規糖尿病治療へと結びつく可能性がある。26年度が最終年度であるため、記入しない。代謝学26年度が最終年度であるため、記入しない。モデル解析から予想された病態変化とその起因となる遺伝子変化を検出したことから、計画通り包括的遺伝子解析へと移行することができた。また、初代培養をもちいたアッセイ系の樹立にも成功し、来年度これを用いた解析が予定に沿って行われる予定である。モデル解析から予想された病態変化とその起因となる遺伝子変化を生理学的および細胞生物学的解析により同定でき、計画通り包括的遺伝子解析へと移行するとともに想定した結果を得ることができた。初代培養をもちいたアッセイ系のスクリーニングを終了した。来年度これを用いてモデルマウスの解析に関わる論文作成のための最終実験とともに、血液疾患、神経疾患における意義解明を継続して行う予定である。初年度の計画通りに、脂肪細胞のトランスディファレンシエーションおよび血球細胞動員モデルの樹立と細胞生物学的解析に着手したことから、次年度はこれらを用いた包括的な遺伝子発現解析とそれによる原因解明に着手する予定である。今年度の計画通りに、脂肪細胞のトランスディファレンシエーションに関わる細胞生物学的解析を終了したことから、次年度はこれらを基礎基盤として論文公表化へ詳細な実験と統計学的解析に着手する。また、血液病、神経病での意義解析は検討の終わった設定条件をもとにすべての検体の生化学的ならびに病理組織学的解析を行い結果をまとめて報告する。
ｐ６２を介した癌細胞の悪性形質獲得の解明及び新規治療の開発

今回我々は、p62タンパク質が膀胱癌の悪性形質にどのように関与しているかを検討した。浸潤性膀胱癌の組織標本を用いて、免疫組織化学的染色を行い、p62の発現レベルを評価した。結果、p62は正常組織に比し癌組織で高発現しており、さらにp62が高発現している浸潤性膀胱は低発現のそれと比べ、予後不良である可能性が示された。また、恒常的にp62が抑制された膀胱癌細胞株はdual PI3K-mTOR kinase inhibitorで治療することにより、対照株に比し有意に細胞増殖が抑制されたことから、p62はPI3K-mTOR pathwayに関与し、癌生存に寄与している可能性が示唆された。【方法】浸潤性膀胱癌の組織標本を用いて、免疫組織化学的染色を行い、膀胱癌におけるp62の発現レベルを評価し、正常組織のそれと比較検討した。また、再発や予後との相関の評価もおこなった。ヒト膀胱癌細胞株であるKoTCC1を用い、ストレス環境下でのp62の発現レベルをWestern blottingを用いて評価し、siRNAを用いてp62の発現を抑制し、細胞増殖に与える影響をWST assayを用いて検討した。また、恒常的にp62を抑制すべくp62を標的としたshRNAを含むプラスミド(p62/shRNA)導入細胞株を樹立した。【結果】浸潤性膀胱癌73例の組織標本を用いた免疫組織化学的染色による検討では、p62は癌組織で59例(80.8%)に高発現しているのに対し、正常組織では11例(15.1%)のみであり、p62発現レベルは膀胱正常組織に比し、癌での有意な発現亢進を認めていた。しかしながら、膀胱癌細胞におけるp62発現の程度は、再発や予後のリスクとは有意な相関を認めなかった。ヒト膀胱癌細胞(KoTCC1, UMUC3)に抗癌剤であるDocetaxel、Cisplatin及びGemcitabinを添加することにより、p62の発現亢進が誘導され、また、siRNAを用いてKoTCC1のp62の発現を抑制することにより、対照群に比し有意に細胞増殖が抑制された。【結論】p62は膀胱癌で高発現しており、それを発現抑制することで、有効な制癌効果が得られる可能性が示唆された。今後、p62/shRNA導入細胞株を用いて、経時的な細胞増殖能、運動能及び浸潤能を対照群と比較検討し、in vivoに発展させたいと考えている。p62タンパク質が膀胱癌の悪性形質にどのように関与しているかを検討するために、浸潤性膀胱癌73例の組織標本を用いて、免疫組織化学的染色を行い、膀胱癌におけるp62の発現レベルを評価し、正常組織のそれと比較検討し、再発や予後との相関の評価もおこなった。結果、p62は癌組織で59例(80.8%)に高発現しているのに対し、正常組織では11例(15.1%)のみであり、p62発現レベルは膀胱正常組織に比し、癌での有意な発現亢進を認めていた。さらに、浸潤性膀胱癌のうち、p62が高発現している群は低発現の群に比し、有意差(P=0.046)をもって予後不良であることが示され、うち膀胱全摘除術を施行した36例については、p62高発現群の予後が不良である傾向が示された。以上より膀胱癌において、p62発現レベルは予後や再発に有意に相関している可能性があり、予後予測因子の一つとなり得る可能性が示唆された。次にヒト膀胱癌細胞株であるKoTCC1を用い、恒常的にp62が抑制されたp62を標的としたshRNAを含むプラスミド(p62/shRNA)導入細胞株を樹立した。p62/shRNA導入細胞株はコントロールベクター導入細胞株(con/shRNA)と非ストレス環境での細胞増殖能は同等であったが、dual PI3K-mTOR kinase inhibitorであるNVP-BEZ235存在下ではcon/shRNA導入細胞株に比しp62/shRNA導入細胞株で有意に細胞増殖が抑制された。現在までにそのメカニズムとして、pNf-κβの抑制やCleaved caspase3の亢進が関与していることがわかっており、p62が癌細胞生存に作用し、Nf-κβのリン酸化亢進やアポトーシス抑制に関与している可能性が示唆された。現在、in vivo実験を施行中であり、さらなるメカニズムの解明を検討中である。泌尿器悪性腫瘍免疫組織化学染色の検体収集及び評価に時間を要し、また恒常的p62発現抑制株の樹立に時間がかかっているため。

今後、恒常的にp62蛋白発現が抑制されたp62/shRNA導入細胞株を用いて、経時的な細胞増殖能、運動能及び浸潤能を対照群と比較検討し、有益な所見が得られればin vivoに発展させたいと考えている。また、p62/shRNA導入細胞株とコントロール株とのストレス環境下でのシグナル伝達活性の差異を比較検討する予定である。膀胱癌細胞株にて有益な結果が得られた後、前立腺癌細胞株においても同様の実験を行う予定にしている。基礎実験として、免疫染色や安定細胞株樹立のためのin vitroの実験系が大半を占めており、試薬等の使用量が少なかったため。次年度は細胞浸潤能や遊走能等を評価するためのアッセイキットを購入予定としており、またin vivoの実験系のため、マウス購入費や試薬使用量の増加が予想される。このためにさらなる研究費が必要と考える。また、有益な結果が得られれば、成果を発表するために旅費として研究費を使用する予定である。
ナノ粒子が環境生物および細胞間コミュニケーションに及ぼす影響の解析とその利用

化学的性状や物性が異なるナノ微粒子(フラーレン、カーボンナノチューブ、酸化チタン)を用い、ナノ微粒子が「種々の環境生物細胞の生理活性に及ぼす影響」および「環境生物細胞間のコミュニケーションに及ぼす影響」について解析を行った。各種ナノ微粒子と花粉(スギ、ヒノキ、ツバキ、サザンカ)の付着特性を花粉の自家蛍光特性に基づき定量的に解析すると伴に、ナノ微粒子が花粉の生存活性(Viability)や発芽能に及ぼす影響を解析した。その結果、ナノ微粒子の種類や花粉の種類の違いにより付着特性が大きく異なった。また、ある種のフラーレンが付着した花粉で発芽率が大きく低下した。UV-A照射条件下では、アナターゼ型の酸化チタンが付着した花粉で発芽率が低下した。また、花粉の種類によっては、UV-A照射によりナノ微粒子の影響を受けやすくなる事が示唆された。ナノ微粒子がフィジカルコミュニケーションに与える影響について、レクチンと糖鎖を介した微生物の直接接着の系を対象に、レクチン修飾ビーズConA-agaroseと、ConAに吸着する糖鎖を細胞表層に持つCandida viswanathiiの接着の系を選択し、そこにナノ微粒子が介在した場合の影響を解析した。その結果、ナノ微粒子は、(A)微生物細胞表層やレクチンに非特異的に接着するもの、(B)レクチンと糖鎖を介した接着に影響を与えないもの、(C)レクチンと糖鎖を介した接着を阻害するもの、の3種類に分類できる事が示唆された。現在、物性によりナノ微粒子は分類されているが、新たに環境生物に及ぼす影響を加えて再分類し、環境生物に影響の少ないナノ微粒子を選択して使用する事の重要性が示唆された。各種ナノ微粒子を花粉(スギ、ヒノキ、ツバキ、サザンカ)に作用させ、蛍光顕微鏡で観察した結果、ナノ微粒子を作用させる事により、花粉種特有の自家蛍光の特性が大きく変化した。また、花粉の種類とナノ微粒子の種類により付着特性が大きく異なることが観察された。そこで、花粉へのナノ微粒子の付着率を画像解析により計測する方法を独自に開発した。開発した手法を用いる事により、各種ナノ微粒子と花粉との付着特性を定量的に評価する事がはじめて可能となった。ナノ微粒子が環境生物細胞間のコミュニケーションに及ぼす影響を解析する事を目指し、Autoinducer(AI)を媒介にしたクオラムセンシングの系を対象に、ナノ微粒子がケミカルコミニュケーションに与える影響について解析を行った。クオラムセンシングにより制御されているVibrio carohariae(VC)の発光および毒素生産の系をモデルに、ナノ微粒子が及ぼす影響について解析を行った。その結果、ナノ微粒子の種類により菌体への付着特性が異なると伴に、発光や毒素の生産に変化が見られた。種々検討した結果、AIや毒素を吸着するナノ微粒子が存在することが明らかとなった。また、AI生産を阻害するナノ微粒子が存在することが示唆された。
ジルコニアセラミックスの二相分離

ZrO_2-CeO_2系およびZrO_2-R_2O_3系(R:稀土類元素)について立方晶-正方晶(c-t)二相分離に関する研究を行い、以下のような成果を得た。(1)定比組成に近いZrO_2-CeO_2系のc-t相転移は、2次相転移と見なしうるものであることを示した。また、この理解をもとに微細組織形成を説明した。(2)ZrO_2-CeO_2系では、Ce^<4+>イオンの一部がCe^<3+>イオンとなることによって不定比性を生じ、酸素イオン空孔が生じる。酸素イオン空孔の導入により、不定比(Zr,Ce)O_2-xには、理想的な蛍石構造からの酸素イオンの規則正しい〈111〉変位が生じること、これによって特有の禁則反射が現れることを初めて明らかにした。(3)不定比(Zr,Ce)O_2-xのc-t相転移は、1次相転移の性格を有していることを示した。(4)ZrO_2-R_2O_3系のc-t二相領域の幅はR^<3+>イオンのイオン半径によって変化することを実験的に見出した。またこの結果を、c-t相転移が2次相平衡であるとして熱力学的に説明できることを示した。通常の方法では固溶体の生成が困難なZrO_2-ZrN系について、メカニカルアロイングにより固溶体を作成できることを見出した。平成7年度の研究実績は以下のように要約される。(1)ZrO_2-CeO_2系のc-t相転移特性は立方晶相(c-ZrO_2)の構造に影響される。定比組成に近い(Zr,Ce)O_2および酸素イオン空孔濃度の低い不定比(Zr,Ce)O_2-xでは、c-ZrO_2は蛍石構造をとる。このc-ZrO_2からt-ZrO_2への相転移は、2次相転移とみなすことが出来る。一方、酸素イオン空孔濃度の高い(Zr,Ce)O_2-xではc-ZrO_2中の酸素イオンは理想的な蛍石構造中のサイトから〈111〉方向に規則正しく変位している。この酸素イオン変位を有するc-ZrO_2からt-ZrO_2への相転位は1次相転移である。(2)希土類R^<3+>イオンを含むZrO_2-R_2O_3系のc-t二相分離は、いずれも溶解度ギャップとみなしうるものである。しかし、二相領域の幅はR^<3+>イオンのイオン半径に依存し、半径の大きいものほど二相領域の幅は広がる。これは、イオン半径効果によりc-ZrO_2の安定性が変化すると考えることにより熱力学的に解釈できる。15EA04:(3)通常の方法では固溶体を形成しないZrO_2-ZrN系において、メカニカルアロイングをすることによってN^<4->イオンをZrO_2格子中に固溶させることが出来る。この固溶は、酸素イオンの生成を伴うものであり、このためN^<4->イオンの固溶はt-Zro_2(およびc-ZrO_2)を安定化させる作用をもつ。本研究において得られた実績は以下のように要約される。(1)ほぼ定比組成を有するZrO_2-CeO_2の立方晶-正方晶(c-t)相転移挙動を調べた結果、この相転移が2次相転移と見なしうるものであると結論した。CeO_2添加による立方晶安定化作用は、Ce^<4+>イオンのイオン半径効果によるものである。これは2価あるいは3価の陽イオンを添加した場合の酸素イオン空孔の作用とは異なっている。

(2)メカニカルアロイング法によって、ZrO_2中にZrNを固溶させることができる。ZrNの固溶によって立方晶(あるいは正方晶)が安定化されるが、これは電気的中性条件を維持するために導入される酸素イオン空孔の作用であるとして説明できる。ZrO_2-ZrN固溶体は不安定であり、およそ700°C以上の温度で大気中で加熱するとNは固溶体中より除去される。(3)ZrO_2-R_2O_3(R:Y,Gd,Sm,Nd)系のc-t二相領域の幅が系によって異なることを見出した。これは、R^<3+>イオンとZr^<4+>イオンのイオン半径差に起因して立方晶中に生じるひずみエネルギーを考慮することによって熱力学的に説明できることを示した。また、ZrO_2-R_2O_3系の相平衡が、我々が最初に提案したようにc-t相転移を2次相転移を仮定して説明できることを再確認した。
超音波反応場を用いた有機廃棄物の循環利用

本研究は、水中における超音波反応場を用いた有機物質の抽出・低分子化、酵素による加水分解促進及び微生物活性など効率的な物質循環システムの構築に必要とされる、超音波作用の解明および最適化などを目的として実験を行った。本年度は、酵母などの微生物の増殖活性をフローサイトメトリー法や微生物熱量測定法を用いて測定し、超音波照射による微生物活性(増殖遅滞時間、増殖速度、核酸生成)の変化や細胞膜損傷などを解析することによって、超音波の物理的および化学的作用がどの程度反応に寄与するか明らかにした。低周波数域における効果は、放射線照射による作用と類似していた。また、ラジカル捕捉剤を用いた実験における膜損傷と核酸生成速度を解析し、生物的なアプローチからの超音波化学の基礎的な解明(超音波反応場におけるラジカル生成や衝撃波に対する周波数や強度依存性)と、超音波が微生物に与える影響について明らかにした。さらに、超音波定在波における微生物の凝集を防ぎ、さらにスケールアップするために様々な照射装置を用いて実験を行った。周波数(20kHz1.5MHz)の変化や超音波装置によって、超音波が微生物の増殖活性におよぼす作用が異なることがわかった。また、発酵過程において、グルコースからエタノールをより効率よく生産することを目的とし、酵母に超音波を照射した。増殖誘導期の酵母に対する低強度超音波照射によって、核酸の生成が促進され、増殖遅滞時間が短縮したことから、増殖が活性化されていることが示唆された。また、超音波を用いたバイオディーゼル生成については主体となる研究者からの指導をうけ、廃油からの生成・抽出を行った。本研究は超音波反応場を用いた有機物質の抽出・低分子化、酵素による加水分解促進及び微生物活性化など効率的な物質循環システムの構築に必要とされる、超音波作用の解明および最適化を目的としている。本年度は、超音波と類似した作用をもつ放射線との比較や、微生物代謝活動の測定法を駆使することにより、超音波が有する複雑な作用(活性ラジカルによる化学的作用と、衝撃波による物理的作用)の周波数特性などついて検討した。酵母・大腸菌および病原性原虫であるクリプトスポリジムへの超音波照射・放射線照射・塩素処理を行い・微生物代謝熱量測定法とフローサイトメトリー法によって評価した。代謝熱測定により得られた増殖速度と遅滞時間を比較した結果、それぞれの処理に大きな違いが見られ、超音波照射によって殺菌作用に起因した変化(数的変化)が、塩素処理によって静菌作用に起因した変化(質的変化)が、さらに放射線照射によっては両作用による変化が見られることがわかった。つまり超音波照射によって微生物はダメージを受け死滅するが、生残した微生物の増殖速度はほとんど変化しないことから、不活性化を目的とする場合には静菌作用を及ぼす他の技術との併用が効果的であることが示唆された。しかし反対に、活性化を目的とする場合に懸念される細胞への増殖能力への悪影響は少ないことがわかった。次にフローサイトメトリーにより核酸量の経時変化を測定した。通常酵母は細胞壁が硬く細胞内の核酸は染色されないが、衝撃波に起因すると思われる細胞壁透過性の増加に伴う核酸の染色が見られた。これら一連の実験によって、超音波の化学的作用と物理的作用が明確に区別できる可能性が高まり、さらに超音波によって水循環システムにおける有害性微生物による汚染の防除が可能であることが示された。また殺菌効果について得られた超音波照射の最適条件は、有機物の低分子化などの条件決定にも適応できうる。本研究は、有機廃棄物の循環利用(資源化・再利用)を目的として、超音波反応場における有機物質の抽出・低分子化また酵素による加水分解促進のための微生物活性などの物質循環システムの開発を行っている。超音波化学(ソノケミストリー)が比較的新しい分野であり、その反応場について解明することが最適化には非常に重要であると思われる。したがって超音波の物理的および化学的作用がどの程度反応に寄与するかも明らかにすることが必須である。そこで、微生物に対する作用を解析、また放射線と比較するなどして、これまで物理的作用と化学的作用の周波数特性などについて明らかにした。一般的に化学的作用と物理的作用を区別するためにラジカル捕捉剤を用いることが多いが、それに加えて細胞膜の透過性の変化などを測定、解析した。この結果を用いて微生物がどの程度の作用を受けるか予測でき、活性化または不活性化を上手くコントロールできるシステムを検討中である。微生物の活性化については新たに核酸量の変化などを測定するなどして数%の増殖活性を得られているが、まだ十分ではなく発表には至っていないため、本年度さらに進める予定である。

さらに、超音波定在波における微生物の凝集を防ぎ、さらにスケールアップするために様々な照射装置を用いて実験を行った。周波数(20kHz1.5MHz)の変化や超音波装置によって、超音波が微生物の増殖活性におよぼす作用が異なることがわかった。また、発酵過程において、グルコースからエタノールをより効率よく生産することを目的とし、酵母に超音波を照射した。増殖誘導期の酵母に対する低強度超音波照射によって、核酸の生成が促進され、増殖遅滞時間が短縮したことから、増殖が活性化されていることが示唆された。また、超音波を用いたバイオディーゼル生成については主体となる研究者からの指導をうけ、廃油からの生成・抽出を行った。
光活性化型チャンネルを用いたグリア-ニューロン間情報伝達の生理的役割の解明

Na_xチャンネルは脳弓下器官において、脱水に伴う細胞外液中のNa^+レベルの上昇を感知するNa^+レベルセンサーとして機能し、脱水時の塩分摂取回避行動の制御に関与している。申請者らは以前の研究において、グリア細胞に発現するNa_xがC末端領域を介してNa^+/K^+-ATPaseと結合していること、Na_xの開口によってNa^+が流入するとNa^+/K^+-ATPaseを活性化し、それに伴って解糖系が活性化すること、その結果グリア細胞からの乳酸放出が亢進し、この乳酸がGABAニューロンの神経活動レベルを上昇させることを明らかにした。本研究では、まず培養細胞に光活性化型チャンネル(ChR2)にNa_xのC末端領域を結合した融合タンパク質を発現させ、光照射によってChR2を開口させることによって、Na^+/K^+-ATPaseを活性化することを試みた。その結果、予想通り光によって解糖系の活性化が起きることが明らかとなった。Na_xのC末端領域を結合していないChR2ではこの解糖系の活性化は起きず、この機構が働くには、Na_xのC末端領域を介したChR2とNa^+/K^+-ATPaseの結合が重要であることが確認された。次に、この融合タンパク質をマウスの脳弓下器官のグリア細胞に発現させ、急性脳スライスにおける電気生理学的解析を行ったところ、光照射によってGABAニューロンの神経活動レベルが上昇することが確認された。このように、光制御によってChR2を開口することによって人為的にグリア細胞の糖代謝を活性化し、これによってin vivoと同様に特定の神経細胞活動を制御できることが明らかとなった。従って、本研究の結果は、申請者らが開発した光照射装置を用いて自由行動中の動物の脳内局所領域に光を照射すれば、脱水時の塩分摂取回避行動を光により制御できることを示唆している。グリア細胞の個体行動制御における役割の解明につながるものと期待される。
デマンドサイドのニーズに即した教科領域を超えた教材開発と評価方法の研究

先行研究や実践活動で実績のある拠点校(5校区)を中心に、教育現場や隣接領域の実践現場のニーズを調査し、それに応じた領域を超えた教材・活動を開発・展開した。開発した教材は、現場との協働において教育実践に活用された。その実践報告を基に公開研究会を開催し、その有効性が検討された。得られた成果は、学会発表(33件)・論文発表(36件)として公開され、関係研究者の評価を得た。PBL教育の実践を通して、様々な教育周辺領域の実践現場と、長期的・継続的な協働関係を築き上げ、それら教育実践現場から求められる教材や活動を開発し、データベース化して社会に発信することを目的としている。本年度は、PBL教育研究を通して連携を深めてきた教育現場と協働し、参与観察、授業実践、活動支援などの実践を継続するとともに、それぞれのデマンドサイドの課題に即した教材開発を行った。具体的には、白川小学校での授業実践や一身田地区における活動、敬和・東橋内地区の合同文化祭、志摩市片田地区での学生開発型授業実践などである。特に、長野県で開催した芸術プログラムにおいては、本学と大学間協定を結ぶ天津師範大学の講師を招聴し、音楽・舞踊・書道などの芸術交流を実施し、言語を超えた活動の開発を行った。また、研究拠点校として6カ所(津市立一身田中学校、津市立敏和小学校、亀山市立白川小学校、志摩市立片田小学校、志摩市立片田中学校、天津師範大学)を設定し、拠点校用のノートパソコンを設置した。これを利用して、学内サーバーにあるmoodleにアクセスし、教材開発のためのネットワークを構築した。一方、3月には天津師範大学の協力により、中国の幼小中高の授業を視察した。これにより、日本における教育と中国における教育の比較を行った。さらに、教材開発に関する国際会議NSTA(全米科学教育連合会)大会に出席し、海外の動向調査を行った。また、教材の有効性に関する評価法の開発にも着手した。本年度も引き続き、拠点校等と協力し、参与観察、授業実践、活動支援などの実践を行い、教材開発を推進した。芸術プログラムでは打楽器カフォンを取り上げ、様々な芸術活動を創出した。楽器製作の技術的な側面だけでなく、固有性を育む美術活動や、楽器の特性を活かした音楽表現の工夫など、学生との協働により材の開発を進め、その成果を本学で開催された『科学の祭典』においても応用した。『科学の祭典』に並行して行われた『サイエンスonステージ』では、「科学の歌」の制作を行い、子ども達を対象に実践を行った。小学校校歌や幼稚園・小学校での飼育動物の歌を制作、活動を展開した。また、伊賀市の小学生を対象に料理教室を用いた食教育の実践を行い、調理技術・知識・食生活についての変容を観察し、津市内の小学校における実態調査の結果との比較研究を行った。現職教諭である大学院生とともに、調理実習を核としたカリキュラム開発・授業案作成も行った。教育方法に関する研究では、外部講師を招いて協同学習に関する公開勉強会を開催した。小中学校理科の生物分野における「動物の体のつくり」で活用できる教具として、動物の透明解剖模型の考案・作製を進めるとともに市販品との比較調査を行い、本学部の授業および三重県教育委員会の教員研修で実践した。幼稚園との連携において、飼育動物に関する歌づくりや書道活動の記録・分析を行った。一方、海外の教育事情に関する調査研究では、本年度はタイに出向き、学生とともに学校現場の視察や授業観察を行った。データベースの活用については、三重県内栄養教諭の情報交換サイトを立ち上げ、ムードルを利用した現場との情報交換を開始した。研究成果の発信に関しては、本プロジェクト研究会において教科専門における教員養成型PBL教育について検討を行い、大阪教育大学のFD研修会での招待講演においてその成果を報告した。また、京都大学で開催される大学教育研究フォーラムにおいて、学生の学びの履歴の重要性に関する研究報告を行った。さらに、学生の研究成果の一部は、本学で開催されたアカデミック・フェアや一身田フォーラムを通して発表され、他の研究プロジェクトとの交流を行った。2010年度は、これまでに推進されてきた教材開発研究の成果を発信するために、定期的に公開研究会を開催した。食教育に関する研究では、従来型の単発的な調理実習を行うカリキュラムを改善し、ローテーションによる2回の調理実習を組み合わせた新しいカリキュラムを提案した。その有効性を検証するために、試験に加え検定や意識調査による評価方法を用いている。また、領域を超えた教材開発では、幼稚園における飼育動物に関する教材を研究した。飼育動物についての歌を大学生が園児と関わりながつくるという実践である。飼育動物の生物学的な視点と歌づにりに関する音楽科の専門性、また園児の表現に関する幼児教育の領域とめコラボレーションである。教育者の体験・経験を越えた多角的な視点が、園児の体験の機会を豊かにし、文化や教養を培う基礎に関わることが明うかとなった。音楽と技術との協働による教材開発では、打楽器"カホン"に焦点を当て、ものづくりと演奏を組み合わせた芸術活動を研究した。

材料特性と音響特性の関係を、機械工学的アプローチから解明し、楽器の特性を評価することで、その特徴を活かした演奏活動を展開することが可能となった。学年や校種を越えた教材の開発に関しては、異学年グループによる物語の創造教材を提案した。提案した教材を学年や校種、地域の異なる学習者に対して実践した結果、教材としての要件や評価方法についても明らかにるこができた。教材評価法に関する研究では、PBL教育の学習動機付けや学習スキルに対する有効性を、講義型授業との比較研究により明かにした。研究で得られた成果は、日本教育大学協会研究集会、教育GPフォーラム等を通して発信し、関係研究者との交流の中で評価を受けた。
琉球・四国・九州諸方言におけるガ行子音の変容に関する研究

平成11年度は高知県大豊町において臨地調査を実施した。その結果、ガ行子音は語頭で有声軟口蓋破裂音であり、母音間では渡りの鼻音をともなって発音されることが分かった。また宮古諸島の伊良部島においても臨地調査を実施した。従来の研究では、伊良部島の伊良部・仲地両集落において、ガ行子音が母音間で声門破裂音として現れる例があるということであったが、今回の調査では従来ほとんど報告の無かったカ行子音もかなりの程度声門破裂音化することが分かった。平成12年度は伊良部島の伊良部・仲地地区においてビデオ撮影およびDATによる録音を行った。また、琉球方言でガ行鼻音のある方言として有名な与那国方言について臨地調査を行った。ブラジリア大学で開催された全伯日本語教師研究会において「日本諸方言のガ行音の実態」として成果の一部を発表した。平成13年度は鹿児島県喜界町と枕崎市において臨地調査を実施した。喜界町ではガ行音は鼻音になるということが分かった。枕崎ではガ行音は老年層で閉鎖音になっており、鼻音は観察されなかった。成果の一部をボン大学で開催された第4回沖縄研究国際シンポジウムで「与那国方言の撥音」として発表した。平成14年度は宮古・伊良部島の伊良部・仲地地区の方言音声をCDにして刊行した。3名の調査協力者により、ガ行子音および関連する発音を含む176項目の単語について、20歳台から90歳までの土地生え抜きの話者75名の資料を得ることができた。調査方法は、調査車が話者の自宅を訪問し、調査表に示した単語を読み上げてもらい、その都度音声記号で書き取る方式によった。明瞭な発音の場合は1回の発音を書き取ったが、似ている音環境で異なる発音が観察された場合はもう一度該当する部分を発音してもらった。渡り音が観察されるのは高齢者になるほど顕著であり、若年層になるに従って母音問でも有声軟口蓋破裂音になる傾向が見られた。高知市における高年層話者の自然談話には軟口蓋鼻音が観察されることから、大豊町でも軟口蓋鼻音があると予想していたが、軟口蓋鼻音は今回の調査ではほとんど観察されず、これが単語読み上げ方式によるものなのか大豊町の特色なのか今後明らかにする必要が出てきた。今年度は宮古諸島の伊良部島においても臨地調査を実施した。従来の研究では、伊良部島の伊良部・仲地両集落において、ガ行子音が母音間で声門破裂音として現れる例があるということであった。今回の調査でその様子を詳しく知ることができたほか、従来ほとんど報告の無かったカ行子音もかなりの程度声門破裂音化することが分かった。平成12年度は宮古諸島の伊良部島の伊良部・仲地地区において11年度の調査結果に基づいて選んだ項目および今年度の調査結果を参考にして選んだ項目についてビデオ撮影およびDATによる録音を行った。その結果、従来宮古方言の大きな特色とされてきた唇歯音のうち、有声唇歯音が弱くなっているということがわかった。ただし、それは子音単独で拍を構成する環境に限られており、促音音素と母音音素に挟まれるような環境では従来の唇歯音が保たれているという実態を把握することができた。また、ガ行子音が声門喉頭破裂音に変化しているという従来の報告とは異なり、カ行子音もともに声門破裂音化しているということがわかった。これは、伊良部・仲地方言が、カ行子音もガ行子音も同じような変化を起こすきわめて珍しい方言であるということを意味する。

このようなカ行・ガ行の子音が声門破裂音化するのは両側にア母音(まれにオ母音)がある環境に限られており、他の母音組み合わせに接する場合にはk音、g音がそのまま保持されるということも明らかになった。本年度はさらに与那国島においても臨地調査を実施した。琉球方言で唯一ガ行子音が鼻音である方言として有名であるが、そのガ行鼻音を音韻論的に解釈するためにはその音節構造の性質を明らかにしなければならないことがわかった。長音音素と促音音素が認められないということは従来も言われていることであるが、撥音音素も軟口蓋鼻音の前においてさまざまな長さで現れるため、その存在がきわめてあやふやな状態であると言える。与那国方言は喉頭化子音がある方言としても有名であるが、その成立過程については十分明らかにされていない。今回の調査で喉頭化と撥音化との間に一定の関係があるらしいことがわかった。本年度は鹿児島県喜界町と枕崎市において臨地調査を実施した。喜界町では音韻の特色が集落ごとに異なるが、それぞれの要素ごとに分布が異なることが分かった。ここではどの集落にどの要素が見られるか一々は挙げられないが、主な特色としては次のようなものがある。語中でガ行音が鼻音で発音される、k音がhに変化したり脱落したりする、連母音が融合する、中舌母音がある、p音がある、jiがある、wuがある、共通語や他の琉球方言のワ行音が語頭でgになっているなどである。子音の鼻音要素が鼻母音になっていたり、「麦」がムニのように、軟口蓋鼻音が歯茎鼻音になっている語もある。母音や半母音の前の撥音はおおむね鼻母音であり、口蓋垂鼻音あるいは軟口蓋鼻音になることは観察されなかった。喜界島では4つの集落について老年層を対象に調査を行ったため、若年層の状態を知るにはいたらなかった。枕崎ではガ行音は老年層で閉鎖音になっており、鼻音はほとんど観察されなかった。ただ、個人によって自然談話の中で鼻音と閉鎖音がまじっている状態にある。1990年に行った調査のときには高齢者にガ行鼻音を持つ話者がいたので、方言全体としてはガ行鼻音がほとんど消失しかけている状態であると言える。語中のkとtが有声化する傾向は老年層においてなお盛んである。若年層ではガ行音は閉鎖音あるいは摩擦音になっており、鼻音はまったく観察されない。平成11年度は高知県大豊町において臨地調査を実施した。その結果、ガ行子音は語頭で有声軟口蓋破裂音であり、母音間では渡りの鼻音をともなって発音されることが分かった。この傾向は高齢者になるほど顕著であり、若年層になるに従って母音間でも有声軟口蓋破裂音になる傾向が見られた。また宮古諸島の伊良部島においても臨地調査を実施した。従来の研究では、伊良部島の伊良部・仲地両集落において、ガ行子音が母音間で声門破裂音として現れる例があるということであったが、今回の調査では従来ほとんど報告の無かったカ行子音もかなりの程度声門破裂音化することが分かった。平成12年度は伊良部島の伊良部・仲地地区においてビデオ撮影およびDATによる録音を行った。さらに与那国島においても臨地調査を実施した。琉球方言で唯一ガ行鼻音のある方言として有名であるが、そのガ行鼻音を音韻論的に解釈するためには音節構造の性質を明らかにしなければならないことがわかった。平成13年度は鹿児島県喜界町と枕崎市において臨地調査を実施した。喜界町ではガ行音は鼻音になるということが分かった。枕崎ではガ行音は老年層で閉鎖音になっており、鼻音は観察されなかった。これらの諸地点の調査から日本語のガ行子音は当初鼻音性をともなっていたのが次第にその要素を失いつつある状態にあり、比較的近い将来において鼻音性が無くなってしまうであろうと予測される。平成14年度は宮古・伊良部島の伊良部・仲地地区の方言音声をCDにして刊行した。