hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
内因性低分子が切り拓くオートファジー誘導機構の研究

オートファジーは恒常性維持や疾患抑制に貢献する細胞内分解系である。大部分のオートファジーは、分解対象を選ばないが、一部に選択的オートファジーが知られている。選択性発現の分子メカニズムを解明することは、オートファジーを理解する上で極めて重要である。本研究では、私たちの体で作られる(=内因性)の小分子が、選択的オートファジーに関与するか調べた。細胞内に侵入した細菌の周囲に、内因性8ーニトロcGMPによる修飾が集積することが判明し、この集積とユビキチン化、細菌排除とのあいだに津良い相関が見られた。このことから、細菌排除の選択性を決定する初期の段階でマーカーとして働いていることが示唆される。神経変性疾患におけるタンパク質凝集体や、細胞内に侵入したバクテリアの排除には、オートファジーとよばれる細胞内分解機構が重要な役割を果たしている。二重膜からなるオートファゴソームに分解対象物が包まれ、リソソームと融合したのちに加水分解される。オートファオジー関連タンパク質については数多くの報告があるが、低分子量のオートファジー制御因子は、ほぼ未解明である。本研究では、8ーニトロcGMPが「内因性の」オートファジー誘導分子であることを発見した。8ーニトロcGMPが一酸化窒素(NO)に由来することから、その生理的機能は炎症や感染症と関連すると予想して検討を進めた。初代マクロファージ細胞内に侵入したA群連鎖球菌のオートファジーによる排除の解析を行なった結果、細菌表面のS-グアニル化修飾の程度が、細菌のユビキチン修飾と堅固な相関を示した。また、各種の阻害剤を用いた実験から、Sーグアニル化がユビキチン修飾の引き金になっていることが示唆された。これらの成果を論文として本年度発表した。続いて、オートファジーが関わる疾患に対する医薬品探索を目的に、8ーニトロcGMPの各種誘導体ライブラリーの合成を行なった。ライブラリーのオートファジー誘導能を評価して、誘導能の高い化合物を選抜した。これらについて、ハンチントン病などのモデルとして用いられるポリグルタミンタンパク質を発現する細胞株を用いて評価を開始した。神経変性疾患におけるタンパク質凝集体や、細胞内に侵入したバクテリアの排除にはオートファジーとよばれる分解機構が重要な役割を果たしている。8ーニトロcGMPは、我々によってオートファジー制御分子であることが明らかにされ、前年度に論文発表した。この内因性分子のオートファジー誘導機構について、前年度に引き続き検討をおこなった。研究期間全体では3つの検討項目を掲げている。すなわち、1.8ーニトロcGMPの標的タンパク質の同定とオートファジーとの関連解明;2.選択的オートファジーによる細菌排除の機構解明;3.8ーニトロcGMPに関連する化合物ライブラリーの作成と、細胞内感染細菌や神経変性疾患に対する治療効果評価である。まず、項目1については、8ーニトロcGMP自身、および化学プローブによって修飾される主要な標的タンパク質を精製し、LC-MSを用いて分析した。複数の候補物質が得られたので、これらを順次RNAIでノックダウンし、オートファジー誘導に対する影響を調べた。これらの過程で、S-グアニル化修飾は受けないものの、あるタンパク質が8ーニトロcGMPによるオートファジーに関与することが示唆された。項目3については、ハンチントン病を念頭において作成されたポリグルタミン発現細胞で、合成ライブラリーの評価を継続した。8ーニトロcGMP以上の効果を示す化合物が複数得られており、さらに次年度も検討を継続する予定である。1)8-ニトロcGMPの標的タンパク質を引き続き探索し、数種のタンパク質を電気泳動により分離後、質量分析をおこなった。質量分析計から出力された多くの候補タンパク質を、培養細胞において順次ノックダウンしたが、オートファジー誘導に直接関係するような因子の同定には至っていない。2)オートファジーの開始過程に関連する遺伝子を欠損させたMEF細胞を使って依存性を調査した。その結果、通常のオートファジーと8-ニトロcGMPとは、開始過程に違いが見出された。3)8-ニトロcGMPの合成誘導体を用いて、A群連鎖球菌のオートファジーを促進するものを探索した。合成誘導体のなかにはオートファジーを促進するものが複数見出されたものの、期待に反してA群連鎖球菌の排除を促進するものはなかった。本年度は、これまでの主要成果を取りまとめ、主要国際誌において公表することができた。Sーグアニル化とユビキチン化の相関は斬新で、発見の重要性は大きい。今年度も交付申請書に掲げた計画を順次実施できている。27年度が最終年度であるため、記入しない。ケミカルバイオロジー概ね当初計画通りに進めて行く。8ーニトロcGMPのオートファジー誘導機構解明にむけて引き続き検討を行う。

27年度が最終年度であるため、記入しない。補助金分において一部計画を次年度に繰越実施した。それに関連した基金分の実験を次年度に実施するため。最終年度にあたる27年度において、広汎なRNAi実験を実施するため、必要な研究費をとり置いたものである。次年度に当該実験を行なう為に支出する。27年度の交付申請書にあるように、3つの検討項目に使用する。特に、8ーニトロcGMPの標的同定の項目でおこなうRNAi実験に用いる。
溶接部の透過X線写真にあらわれる影と溶接部の機械的性質

溶接部の透過X線写真には影と呼ばれるまだら模様があらわれる。この原因として、溶接金属中の粗大粒によるX線回折という説が有力であった。筆者はこの通説を否定し、影は単なるラウエはん点ではなく、溶接金属中の内部ひずみによってX線回折能が増大するため発生するという新しい考え方を提唱してきた。昭和60,61年度科学研究費の補助を得て行なわれた研究は、これまでにすでに提唱してきた内部ひずみ説を実証する一方で、影と溶接部の機械的性質の関係を明らかにする目的で行なわれた。まず影の発生機構という点では、X線回折説とともに従来から主張されてきた成分偏析を原因とする説について検討を加え、溶接金属中の一定領域内に数個の隣り合う粗大粒を特定し、これらからの回折X線による以外に影は発生しないことを確認し、もってX線回折説の正しいことを明らかにした。また影の形態という立場からも、溶接中央部にあらわれる特殊な点状の影に注目し、この影もまた溶接中央部に縦に生長した柱状晶からのX線回折によって生ずるものであることをたしかめ、もって筆者の提唱する、内部ひずみを考慮したX線回折説によって充分説明できることを示した。さらに、フェライト量を広範に変えたオーステナイト系ステンレス溶接金属ならびに通常の低炭素鋼溶接部について影と機械的性質の関係を明らかにし、もって溶接部の透過X線写真上にあらわれる影のコントラストをみて、その溶接部の機械的性質を推定するという従来なかった全く新しい形の非破壊検査法を確立した。金属材料の溶接部の透過X線写真には影と呼ばれるまだら模様があらわれる。我々はオーステナイト系ステンレス鋼や軟鋼溶接部にあらわれる影について研究を続けてきた結果、影の明瞭さは溶接部の健全性と関係がある、すなわち影の明瞭な溶接部は不明瞭なものに比べて機械的性質が劣るという知見を得ている。本研究では影の明瞭さと溶接部の機械的性質の関係をより厳密に、より広範な材料について調べ、これによって透過X線写真にあらわれる影から溶接部の健全性を評価するという、全く新しい非破壊検査法を確立するのが目的である。昭和60年度は種々の組織のオーステナイト系ステンレス鋼サブマージドアーク溶接部を用い、影の明瞭さ、組織、結晶の内部歪および種々の機械的性質について調べ、現在までに行なってきたTIG溶接部の場合と比較した。得られた結果は以下の通りである。1.サブマージドアーク溶接部の透過X線写真にあらわれる影は組織中にδフェライトが多く含まれるものほど不明瞭である。この傾向はTIG溶接部の場合と同じである。2.サブマージドアーク溶接部の内部歪はTIG溶接部の場合と同様に組織中にδフェライトが多く含まれるものほど大きくなるが、同じ組織であればTIG溶接部よりもサブマージドアーク溶接部の方が内部歪は大きい傾向にある。3.δフェライトを多く含む溶接部は含まないものに比べて強度が大きく、また曲げ延性も大きい。以上のことから、オーステナイト系ステンレス鋼サブマージドアーク溶接部ではδフェライトを多く含んだ組織の溶接部は含まないものに比べて影は不明瞭であり、内部歪は大きく、機械的性質は優れていることが明らかになった。すなわち、影の不明瞭な溶接部は明瞭なものに比べて、より健全な溶接部であると言える。
ペプチドライゲースオルソログの機能解析

本研究では、新規アミド結合形成酵素(ペプチドライゲース, PGM1)の相同遺伝子について解析を行った。Micromonospora属放線菌の相同遺伝子(KtmD)が、新規シュードペプチドとして単離したケトメミシンの生合成中のアミド結合に関わることを明らかにした。ケトメミシンのメチレンケトン部の生合成について、アルドラーゼ(KtmA)、脱水酵素(KtmC)、PLP依存-オキソアミン合成酵素(KtmB)、還元酵素(KtmF)の関与で生合成されることを明らかにした。その他の相同遺伝子についても周辺の遺伝子クラスターと共に異種宿主発現し、特異的に生産された代謝産物をいくつか確認した。(1)メチレンケトン型擬似ペプチド生合成中のペプチドライゲースの機能解析Micromonospora属放線菌のメチレンケトン型新規擬似ペプチド(ケトメミシンと命名した)の生合成遺伝子クラスターにコードされたペプチドライゲースについて、有機合成的手法で擬似ジペプチド基質を用意し、酵素反応の進行をin vitorで検証した。また、これを利用して最終産物であるケトメミシンの絶対立体配置を決定した。また、ペプチドライゲースのN末基質にアミジノ基を導入するアミジノ基転移酵素についてin vitroで酵素反応の解析を行った。(2)メチレンケトン型擬似ペプチドの生合成解析これまで報告がないメチレンケトン部の生合成について、遺伝子クラスター中にコードされた4つの酵素が関与している仮説を検証するため、大腸菌で発現した組換え酵素を用いて酵素反応の検討を行った。その結果、フェニルピルビン酸とマロニルCoAを出発物質とすること、アルドラーゼ(KtmA)、脱水酵素(KtmC)、オキソアミン合成酵素(KtmB)、還元酵素(KtmF)の順で酵素が反応を触媒しメチレンケトン型擬似ペプチドが生合成されることを明らかにした。(3)ペプチドライゲースオルソログの機能解析ペプチドライゲースのオルソログを含む遺伝子クラスターの中でクラスターに含まれる遺伝子がユニークであった遺伝子クラスターを10菌株選択し、それぞれ遺伝子を異種宿主に導入し、得られた生成物をHPLCで分析した。その内のいくつかについては宿主に存在しない代謝産物のピークが見いだされた。計画したケトメミシン生合成中のペプチドライゲースの機能解析について終了した。また、メチレンケトン型疑似ジペプチド構造の生合成に関与する4つの酵素についてもすべてin vitroで反応の解析に成功しており、おおむね順調に進展している。本研究では、最近当研究室で見出した新規アミド結合形成酵素、ペプチドライゲースの相同遺伝子について解析を行った。前年度(1)Micromonospora属放線菌に見出した相同遺伝子(KtmD)が、新規シュードペプチドとして単離したケトメミシンの生合成に関わるアミド結合形成酵素であることをin vitroで検証した。また、有機合成で用意した基質を用いて、本酵素の基質認識について調べ、本酵素がジペプチドライゲースであることを明らかとした。(2)ケトメミシンの部分構造であるメチレンケトン部については生合成が未解明であったため、大腸菌で発現した組換え酵素を用いて酵素反応の検討を行った。その結果、フェニルピルビン酸とマロニルCoAを出発物質とすること、アルドラーゼ(KtmA)、脱水酵素(KtmC)、PLP依存-オキソアミン合成酵素(KtmB)、還元酵素(KtmF)の順で酵素が反応を触媒し、メチレンケトン型擬似ペプチドが生合成されることを明らかにした。さらに、ペプチドライゲースのN末基質にアミジノ基を導入するアミジノ基転移酵素についてもin vitroで反応を実証した。また、これらを総合し、ケトメミシンの形式的酵素合成を達成した。今年度、その他の放線菌に見出したペプチドライゲース相同遺伝子についても機能解析を行った。それぞれ遺伝子を周辺の遺伝子クラスターと共にクローニングし、近縁異種宿主のStreptomyces lividansに導入し、特異的に生産された代謝産物をHPLCとLC-MSで解析した。この結果、いくつかの代謝産物が確認できた。おおむね順調に推移しており、当初の計画に沿って研究を進める。特にペプチドライゲースオルソログの機能解析については、特異的な代謝産物の生産条件の検討と得られた化合物の構造解析を進めており、実験を継続する。天然物化学
βアミロイド沈着と脳老化の比較生物学的研究

エラー!ヒトの神経系関連遺伝子マイクロアレイを用いて犬の脳における遺伝子発現を網羅的に調べた。老齢犬で発現量が増加した遺伝子にGFAP、CNPase、p35などが、発現減少または無変化であったものにはAPP、Tauがあった。イヌとネコの脳についてNeprilysin(Nep)の発現と活性、β-Amyloid(Aβ)沈着を検索した。イヌ・ネコともに、Nepは大脳皮質では弱い発現が、線条体・黒質では強い発現が認められた。Nep活性値はイヌ、ネコとも『線体>大脳皮質>大脳白質・海馬』の順で高かった。イヌの線条体で加齢によるNep活性の滅少傾向がみられたが、他の部位では発現・活性ともに年齢差はなかった。Aβ沈着の程度と頻度はイヌ、ネコともに加齢にともなって増加した。イヌとネコではAβの沈着時期および形態は、これまで考えられていたより類似していた。両種の寿命がほぼ同じであることから、脳の老化速度もほぼ同一である可能性が考えられた。パーキンソン病の動物モデルであるMPTP投与マウスで、病態発現の系統差をしらべた。黒質-線条体におけるチロシンハイドロキシラーゼ(HT)の発現量はC57BLマウスでHT発現が重度に低下したが、BALB/cマウスでは低下しなかった。非近交系の1CRマウスでは一部の個体がHT低下を示した。MPTP投与パーキンソン病モデルマウスでは病態の発現に単一の遺伝子が関与している可能性が示された。マウスおよびウシのGFP癒合βアミロイド(GFP-Abeta)を大量に作製した。これらのGFP-Abetaを離乳前後のマウスとウシにそれぞれ経口投与した。いずれの動物種でもGFP-betaは胃で分解されることなく空回腸に達し、絨毛の吸収上皮から取り込まれること、また、この取り込みは授乳期に顕著であることが明らかになった。本実験系はプリオン侵入経路研究のよいモデルになる。本年度はまず、ヒトの神経系関連遺伝子マイクロアレイフィルター(東洋紡製)を用いて犬の脳における遺伝子発現を網羅的に調べた。このフィルターに用いられている遺伝子群はヒトに由来するが、それらの塩基配列は動物種によらず比較的よく保存されている部分が用いられており、イヌの組織に対しても十分使用できた。老化やアルツハイマー病との関連が報告されている遺伝子のうち老齢犬で発現量が増加した遺伝子としてGFAP、CNPase、p35などが、発現減少または変化しなかったものにはAPP、Tauがあった。全遺伝子を変動係数、すなわちばらつきに注目して調べたところ、脳老化の過程でばらつきが増加(SOD-1)、あるいは減少する(β-catenin)遺伝子が認められた。次に各種年齢の犬と猫の脳におけるβアミロイド分解酵素であるネプリライシンの活性をしらべた。犬と猫の両方でネプリライシン活性は白質より皮質で高かった。皮質の活性は加齢とともに減少したが、白質の活性は変化しなかった。犬と猫とでネプリライシン活性を比較したところ、皮質の活性は、若齢の動物では猫は犬に比べて著しく高かったが、老齢になるとその差は小さくなった。白質では若齢、老齢とも猫より犬が高かったが、その差は小さかった。ネプリライシンは神経細胞で産生され、プレシナプスに存在すると考えられている。したがって今回、皮質の活性が白質より高かったことは妥当な結果と思われた。

また、加齢による大脳皮質のネプリライシン活性の低下によりβアミロイドの沈着が説明できた。イヌとネコの脳についてNeprilysin(Nep)の発現と活性、β-Amyloid(Aβ)沈着を検索した。イヌ25例(114歳)、ネコ14例(020歳)の大脳についてNepおよびAβの発現を免疫染色を用いて調べた。また、膜タンパク分画を抽出、生体外基質を用いた方法でNep活性を測定した。イヌ・ネコともに、Nepは大脳皮質では弱い発現が、線条体・黒質では強い発現が認められた。Nep活性値はイヌでは『線条体>大脳皮質>大脳白質・海馬』、ネコでは『線条体>大脳皮質>海馬>大脳白質』の順で高かった。イヌの線条体で加齢によるNep活性の減少傾向がみられたが、他の部位では発現・活性ともに年齢による差はなかった。Aβは、イヌでは7歳、ネコでは10歳から沈着が認められ、加齢にともない沈着の程度、頻度ともに増加した。沈着部位は、いずれも大脳皮質、海馬であった。両動物種間でAβの沈着形態に明確な差は認められなかった。イヌとネコではAβの沈着時期および形態は、これまで考えられていたより類似していた。両種の寿命がほぼ同じであることから、脳の老化速度もほぼ同一である可能性がある。イヌおよびネコの線条体・黒質では全年齢を通じてNepの活性が高く、そのためAβの沈着がおきない可能性が示された。大脳皮質、海馬はNepの活性・発現が線条体より低いため、Aβが十分に分解されず沈着した可能性がある。今回の研究によりイヌとネコでNepの発現分布・活性およびAβの沈着分布は非常に良く似ていることが分かった。これに加えて、パーキンソン病の実験モデル系であるMPTP投与C57BL/6マウスでは、黒質-線状体系細胞のみならず脳室周囲の神経幹細胞にもアポトーシスが生じることを明らかにした。イヌとネコの大脳におけるネプリライシンの活性と発現をしらべ,投稿し,公表された。パーキンソン病の動物モデルであるMPTP投与マウスで,病態発現の系統差をしらべた。黒質一線条体におけるチロシンハイドロキシラーゼ(HT)の発現量を病態評価の基準とした。近交系のC57BLマウスでHT発現が重度に低下したが,BALB/cマウスでは低下しなかった。非近交系のICRマウスでは一部の個体がHT低下を示した。MPTP投与パーキンソン病モデルマウスでは病態の発現に単一の遺伝子が関与している可能性が示された。マウスおよびウシのGFP癒合βアミロイド(GFP-Abeta)を大量に作製した。これらのGFP-Abetaを離乳前後のマウスとウシにそれぞれ経口投与した。いずれの動物種でもGFP-betaは空腸から回腸のパイエル板上皮細胞だけではなく,絨毛の吸収上皮細胞からも取り込まれ,絨毛間質に分布した。この取り込みは離乳後に低下した。絨毛上皮に取り込まれなかったAbetaは陰窩深部に達していたが,この部位はプリオンタンパク(PrPc)が分布する腸管壁の末梢神経に近かった。以上の結果から,(1)経口的に取り込まれたアミロイドタンパクは胃で分解されることなく空回腸に達し,絨毛の吸収上皮から取り込まれること,
神仙思想の成立に関する研究

神仙思想の仙人の起源は、秦・漢時代の死生観の変化に由来すると思われる.仙人は、たんに長生きした人ではなく、むしろ、本来は死者であり、死者の魂の永世という観念が屈折して、肉体も不死であるという仙人が生み出されてきたのであろう。この内容に即して、以下のような考察をおこなった。一、僊の文字と魂・死についての文字学的考察-魂と骨の観点から-・厚葬と薄葬-神仙思想の観点から-・「仙」と「僊」-神仙思想の形成と文字の変化-二、列仙図と列仙傳:・祀られる仙人-列仙図をめぐって-・『列仙傳』の仙人-黄帝・関尹子・涓子-三、蓬莱山と博山炉・博山炉と香-蓬莱山との関わりから-四、崑崙山と渾沌・『荘子』にみえる北と南と中央五房中術の精気・房中術の精気と鍼灸の精気これらは、いずれも、神仙思想の生み出される基盤を形成していたと考えられる。14年度はおもに画像石にみえる神仙思想に関して研究をすすめ、芝草関係の資料を蒐集整理し、また道教や神仙思想関係の書籍、史書、本草・植物関係の書籍から記事を探し考察した。さらに中国美術・画像石・銅鏡関連の図書から画像を探し、分類整理を行っている。それらにもとづき、「芝草について」という論考をまとめつつある。もう少し整理した上で「古代学研究(古代学研究会)」に投稿予定である。また博山炉と香と蓬莱山に関して「博山炉と香-蓬莱山との関わりから-(『宮澤先生古稀記念論集』所収予定、原稿提出済み)」という題で考察した。博山炉は香炉であるが、形は仙山を模し、蓬莱山に由来する。これは明器としても使われ、その形は墓室内にも芝草などとともに描かれた。この場合は魂の昇僊と結びつけらたのだろう。僊人や僊者という語は蓬莱山との関わりで使用されたが、蓬莱山をかたどった明器を墓室内におくことは馬王堆の昇僊図などと同様に死者の魂を昇僊させる目的をもっていたのだろう。山腹に孔が穿たれた蓬莱山の形状は瓢箪や壷などのイメージと重ねあわされ、壷中天のように中に仙界がひろがるイメージを生み出した。中で魂が暮らすという発想である。しかし香が天界から神を降ろし、またその煙に乗って天界の神のところにいくということを考えたとき、博山炉には仙界と墓室を直接、結びつけるイメージがある。博山炉という香炉に死者の魂が入りこめば、そこは実際の蓬莱山であり、また香の煙とともに上昇して天界へも昇ることができると考えられたのかもしれない。またさらに「死についての文字学的考察-魂と骨の観点から-(人文学論集第21集、印刷中)」を著した。これは「死」という文字が骨によりつく魂の意味であるということを論証したものだが、それはまた頭部の魂を運ぶ意味の「僊」という文字とも関連していることを考察している。15年度は前年度に引き続き、画像石や文献にみえる神仙思想に関して研究をすすめた。また芝草関係の資料を蒐集整理し、画像石にみえる芝草と西方のパルメット文様の関係について考察を進めた。パルメットは本来、パームで椰子をさすが、文様では椰子の葉の形にひらいたエジプトなどの蓮をさすことも多い。蓮は太陽が昇れば開き、沈めば閉じるなど思想とも関連づけられそうな特徴をもつ。植物学の角度からさらに考察を進めたい。これは「古代学研究(古代学研究会)」に投稿予定で、すでに原稿は四百字詰百二十枚ぐらいになっているが、未解決の問題があるため、もう少し考察したい。本年は他に『列仙傳』の仙人のうち、呂尚、黄帝、涓子について考察を加え、『人文学論集』に発表した。また『人間文化学研究論集』に「仙」と「僊」と題する論考を発表した。この論考は発行年は2003年3月だが、実際の刊行、本年の1月であり、原稿も8月に書いたものである。ここでは「僊」と「仙」の文字について考察した。

「僊」と「仙」は現在、ほぼ同様の意味で使用されているが、両者の関係は明確には説明されておらず、「僊」の方が古い字体であるという感覚はあるものの確固とした使い分けはみえない。「僊」は「〓」・「遷」から分化してきた文字で、本来、「魂」と深く関連する。「僊」が使用されるまでは「遷」の文字が「僊」の意味で使われていたかもしれない。房中術関連の書籍である『十間』にみえる「遷」は、論者によっては「仙」と解釈されている。拙論ではその説はしりぞけ、この「遷」は精神や魂が「うつる」意味だと考察したが、それはのちの僊人の意味へとつながっていく。『説文解字』では「遷」は「登る」という意味とされ、「僊」の文字にも、のぼりうつるの意味がのこされている。「遷」と「僊」はほぼ同様の意味をもつ語とされていたようにみえる。これは魂が昇天して天界にのぼりうつるということと関連しているようだ。仙人が空を飛ぶという感覚は一般に方術にもとつく特殊能力と考えられがちだが、本来は魂の昇天と関連するのだろう。一方、「仙」には「のぼる」・「うつる」といった動詞的な用例がなく、名詞として使用されている。「仙」は「山(せん)」にもとつく文字で、発音が同一であることから、「遷」や「僊」の通仮字として使用されたようだ。また「仙」・「山」は画数が少なく、細かい文字の鋳造に便利なため、「僊」の意味として、後漢時代に鏡の銘文に多用されたようだ。『史記』には「僊」と「仙」が混在している。けれども『史記』の中で「僊」と「仙」に使い分けがあるようにはみえない。あるいは後世、文字が乱れて「僊」と「仙」になっているのかもしれない。いずれにしても大きな流れとして「僊」から「仙」へと変化していくことは確実であり、それにともなって魂の昇僊にもとづく「僊」から、山に住み不老不死の人である「仙」へと質的な変化をともなっていくように思われるのである。また昨年度、原稿を提出していた博山炉と香と蓬莱山に関して「博山炉と香-蓬莱山との関わりから-(『宮澤先生古稀記念論集』)」が刊行された。さらに「死についての文字学的考察-魂と骨の観点から-(人文学論集第21集)」も印刷された。なおこれらの内容に関しては昨年度の実績報告書においてすでにふれているので省略する。16年度はおもに「祀られる仙人-列仙図をめぐって-」と題する考察を行った。「祠」は本来、死者をまつるという動詞であり、その後、死者をまつる場所ということから、墓前の建物をさすようになったようだ。祠や廟には「図画形象」と遺像が掲げられることがあったが、それは死者の肉体および魂を具現化したものであろう。漢の武帝の祭祀に、「(太始四年)又祠神人於交門宮、若有郷坐拜」とある。応劭は「神人、蓬莱仙人之屬也」と、この神人を仙人と理解している。顔師古の「如有神人景象嚮祠坐而拜也。事具在武紀。郷讀與嚮同。漢注云神並見、且白且黒、且大且小、郷坐三拜。郷讀曰嚮」を参考にすれば、「又た神人を交門宮に祠る、有るがごとく郷(むか)い、坐して拝す」と解釈できる。『論語』の「祭如在、祭神如神在」とを意識しての表現であろうが、師古のいう「神人の景象」という語は興味深い。「景象」は姿形ということだが、「景」は影でそれは同時に「魂」を示しており、魂と姿をもった神がそこにいるかのように拝むということだろう。漢注は、実際に白や黒、また大小の神々があらわれたと述べ、引用する師古もそれを支持しているようである。ここでは神の図像があったとはされないが、『太平経』には懸象還神法がみえる。これは体内神の魂神をすみやかに還す方法として、その図を描いて掲げるようだ。現代の道教祭祀でも神々の図を掲げるが、神の似姿をえがくことによって、神がそれを自分の肉体とみなして降臨するという発想であろう。世傳明帝夢見金人、長大、頂有光明、以問群臣。
教育従事者の多様化に対応する教育学部カリキュラム構築に関する基礎的研究

本研究は、教育従事者の多様化、多職種協働が進行する社会的状況をふまえ、教育学部教育の新たな可能性の探究をねらいとしたものである。3年の期間を通して、メンバーによる定期的な研究会実施に加え、各地の教育学部改革動向調査(北海道・東北、関東・東京、関西)や教育学部卒業生への聞き取り調査(教育学部教育のレリバンスの把握)、日本教師教育学会会員を対象としたアンケート調査、その結果の考察と学会発表などを行った。この発表では、国の教員養成政策をめぐる「研究者教員」ー「実務家教員」間の意識の異同を明らかにしている。なお、各調査の成果は最終的に研究成果報告書(別途印刷・製本、総150頁)にまとめている。今年度においては、以下の研究活動、およびその進展のための条件整備を行った。◯理論的検討:「教育学マインド」を中核とした新しい教育学部の理念を検討すべく、関連する先行研究リストを作成し、収集・整理・検討を行った。◯教育学部改革調査:当初、北海道地区と東京地区を想定していたが、調査受け入れの問題があり、東京地区と別地域の先進的事例2大学を対象に理念、カリキュラム、体制、課題等について聞き取り調査を行った。第一のケースは、東京に立地する私立大学の教員養成に注力する教育学部を対象にしたもの、また第二のケースは、地方国立大学の一般学部(教育学部を改組)における教員養成のあり方についてみた。◯教育学教育のレリバンス調査:1卒業生調査では数人の卒業生にたいする聞き取り調査を行ったが、来年度にも引き続き行う予定である。また2来期メインとなる企業調査では、企業をピックアップするととともに幾つかの企業にアクセスをした。◯カリキュラム調査:基礎作業として、帝京大学教育学部のカリキュラムの現状と課題について整理するとともに、特色ある教員養成・教育学教育を行っている大学について、インタネットを通じてカリキュラム構造の情報を収集・整理した。◯研究の体制づくり:6つのプロジェクトをもつ本研究では、中央に資料整理や個人情報等収集したデータの管理を行う部屋を設けることになっている。大型複合機の導入は機種の選定を行い(2016年度納入)、管理体制を整えた。理論的研究の面では、先行研究の収集・整理のほか、メンバーによるミーティング、合評会等の実施により、研究代表者ー分担者間での情報の共有が進んでいる。教育学部改革動向調査については当初、北海道地区と東京地区を想定していたが、調査受け入れ先の都合等により、東北地区(と東京地区)へと変更することとなった。調査校の変更はあったものの、予定の調査件数は確保した。また、結果的に好対照をなす事例を視察・聞き取りできたことで、実践的研究への具体的ヒントを得、考察のための論点を整理することができた。レリバンス調査や実践的研究と関わっては、まず教育学部の学生の学びをめぐる実態から調査研究を開始し、問題枠組の構築を行っており、次年度以降、本格的に計画されているレリバンス研究に向けた基礎的考察を蓄積している。今年度は、各研究メンバーによる個人研究の蓄積に加え、次の共同調査を実施した。一つは教育学部改革動向調査(第二次)である。国立大学一校(北海道)、私立大学二校(首都圏、関西圏)に聞き取り調査を行った。国立大学では「教育学部」への回帰動向をかかわって、その学科再編動向の詳細について聞き取りを行った。また同時に、教育委員会への聞き取り調査も実施した。今後の教員養成改革において実施される予定の「教員育成協議会」について、大学との連携を含む試行の現状について担当者から報告を聞いた。私立大学二校では、いずれもすぐれた教員採用実績をもつ教職課程の条件整備について視察・聞き取りを行った。さらにうち一校については授業見学も行っている。これらの各視察の記録については文字起こしを行い、報告書を作成した。もう一つは、教育学部卒業生への調査である。大学卒業生や学外協力者からなる若手5人を選出し、座談会形式で「教育学部での学び」や卒業後の経験について聞き取りを行った。インタビュイーの内訳は、学校教員のほか、学校事務職、大学研究者、一般企業勤務などであり、多様な進路を選択したそれぞれの立場から「大学・教育学部での学び」の意味についてふりかえってもらった。また、本調査と関わっては、別途帝京大学が主催する帝京教育会の秋期研究交流学習会でも「大学生の育ちと学び」というかたちで分科会を設け、同様の議論を行った。これにより、「教育学教育のレリバンス」について、さらに教育学部卒業後の、(教員にとどまらない)各職業分野での成長に影響を与える「教育学マインド」という仮説について、卒業生や在学生との意見交換を通して考察した。教育学部再編動向調査や卒業生調査など、当初計画していた研究調査を、予定通りに実施した。さらに、研究の遂行過程で教育学部教育改革に関する有識者調査を新たに企画する必要が出て、最終年度(5月)に実施することを決定した。この調査についても関連の学会との連携や委託業者での実施体制が確定するなど、研究の変更事項ではあるが順調に進捗していると考えられる。最終年度である今年度は、有識者を対象とする「学校及び教育学部改革に関する有識者調査」を実施した(2017年5月)。その課題意識は、以下の通りである。1大学教員、特に教育学部教員が昨今の教員養成・教師教育改革等をどのように受け止め評価しているかを知る必要があること。2教員政策、教員養成/教師教育改革は矢継ぎ早に打ち出され展開しており、その内容を理解している国民はまだ少ない状況にあるとみられること。

これらの事情から、調査方法としては日本教師教育学会の全会員を対象とするアンケート調査が最適であると判断した。そこで同学会事務局並びに事務局を通して同学会理事会と連絡協議し、調査項目について了解を得たうえで、2017年5月に郵送方式でアンケート調査を実施した。また、本件アンケート調査の結果については、9月に奈良教育大学において開催された日本教師教育学会第27回大会において、浦野東洋一、福島健介、佐藤高樹「『学校及び教育学部改革に関する有識者調査』の結果についてーデータの報告と考察ー」と題して研究発表を行った。本調査は、「国の改革政策などをめぐる有識者間ー「実務家教員」と「研究者教員」ーの意識の異同」の把握を一つのねらいとしていたが、集計結果はその双方を明らかにしたといえる。例えば、「『大学における教員養成』原則の確認」「『子どもの権利条約』等国際教育規範の参照」などをめぐっては大きなズレは見られなかったが、一方で、教員以外の専門スタッフへの評価や教員養成のスタンスをめぐっては見解のズレが確認された。これまで「研究者教員」「実務家教員」に対する認識をめぐって「そう思われていた/見なされていた」側面を、大規模な調査(回収率48.6%)を通して、改めて可視化した点は大きいといえる。2018年3月には、これらを含め、この3年間の研究成果を「研究成果報告書」(冊子)にまとめて発行した。本研究は、教育従事者の多様化、多職種協働が進行する社会的状況をふまえ、教育学部教育の新たな可能性の探究をねらいとしたものである。3年の期間を通して、メンバーによる定期的な研究会実施に加え、各地の教育学部改革動向調査(北海道・東北、関東・東京、関西)や教育学部卒業生への聞き取り調査(教育学部教育のレリバンスの把握)、日本教師教育学会会員を対象としたアンケート調査、その結果の考察と学会発表などを行った。この発表では、国の教員養成政策をめぐる「研究者教員」ー「実務家教員」間の意識の異同を明らかにしている。なお、各調査の成果は最終的に研究成果報告書(別途印刷・製本、総150頁)にまとめている。研究代表を中心として研究会・ミーティング等の機会を増やし、各研究分担者の進捗状況についての報告と情報共有、考察の質のさらなる向上を目指すこととする。また、資料整理・データ管理のための環境づくりを進めることで、研究関連業務の効率化をはかる。今年度はレリバンス調査が研究活動のメインとなるため、担当者を中心にこれまでに蓄積している教育学部生活実態調査等、先行調査の分析を進めるとともに、卒業生調査=教育学教育のレリバンスの枠組みについて検討を進めていく。また、教育学部改革動向調査では、初年時に実施できなかった北海道地区および関西地区の視察を引き続き実施する。これに先立ち、全国の国公私立大学教育学部における改革動向の傾向の把握を進め、その特質と現状の課題を浮き彫りにする。最終年度となる今年度は、日本教師教育学会の協力を得て「学校及び教育学部改革に関する有識者調査」を行う予定である。その成果を、学会発表というかたちで還元する予定である。
生体関連金属錯体における多重相互作用と機能発現の研究

本研究は生体系金属イオン周辺での種々の相互作用の様式を生体系およびモデル系について検討し、銅酵素の活性中心構造、金属酵素ー基質相互作用、DNAー金属錯体相互作用に関する情報を集積して、これらが機能発現に果たす役割を明らかにすることを目的とした。1.モデル錯体の構造と多重相互作用酵素ー基質相互作用などの特異性発現のための、中心金属イオン近傍でのアミノ酸側鎖官能基、核酸塩基などが関与する分子内および分子間の相互作用の様式とエネルギ-を明らかにした。植物ホルモンであるエチレンの受容体として、種々の銅(I)錯体の有効性を各種エチレン錯体の合成と構造解析ならびに錯体の安定度から明らかにした。これらの知見から、生体系においても銅タンパク質が最有力候補であると結論した。2.金属酵素・タンパク質活性中心構造と反応メカニズム銅タンパク質について、亜硝酸還元酵素におけるタイプI,II銅の役割を結論づけ、マルチ銅酵素ラッカ-ゼとシトクロムcとの電子移動反応の際の相互作用様式を推定した。ブル-銅タンパク質シュ-ドアズリンについては、タンパク質の結晶化を行ない、X線結晶構造解析を進めている。3.DNAー金属錯体相互作用分子認識の観点から,DNA塩基配列を認識して特異的に結合する転写因子Splの亜鉛フィンガ-を含むドメインを、クロ-ニングにより大腸菌中で産生させて亜鉛結合部位の性質を明らかにし、DNA結合能を調べた。一方、DNAの切断、変性を引き起こす白金ブル-錯体を合成し、ヌクレオチドとの反応性、反応生成物を明らかにした。
新規遺伝子改変マウスによるのＣＣＬ１の呼吸器細菌感染症における機能解析

炎症性ケモカインであるChemokine (C-C motif) ligand 1(CCL1) (NCBI: rs2282691)を肺組織特異的に高発現させる遺伝子改変マウスを作成し、Bacille de Calmette et Guérin (BCG)の気管内投与を行ったところ、遺伝子改変マウス群で肺組織内での肉芽形成が促進されているという結果が得られた。RNAを抽出しマイクロアレイを行ったところ、遺伝子改変マウスにおいて、小胞体ストレスや肉芽腫の形成に関与すると考えられているErn1という遺伝子の発現が対照群と比較して亢進していることが示された。肺特異的CCL1発現マウスの作成のため、マウス胚細胞へSP-CプロモーターCCL1プラスミドベクターをマイクロインジェクションにより導入し、キメラマウスを作製し、遺伝子改変マウスを選抜することに成功した。遺伝子改変マウスの表現型を感染などの負荷をかけない状態で検討したところ、遺伝子改変マウスの外観や肺組織所見は、野生型マウスと比較して有意な差を認めなかった。血清及び気管支肺胞洗浄液を採取して検討を行ったところ、遺伝子改変マウスにおいては気管支肺胞洗浄液中のCCL1濃度が野生型マウスと比較して有意に高値であることが示された。また気管支肺胞洗浄液中の肺胞マクロファージ表面抗原を解析したところ、F4/80陽性細胞は、遺伝子改変マウスで少なかった。これらの結果から、生体内において肺組織におけるCCL1過剰状態は、肺胞マクロファージの表面抗原の発現に影響を与えている可能性が示唆された。遺伝子改変マウスの感染症に対する免疫反応を検討するため、Tリンパ球などの細胞性免疫が関与していると考えられているBCG(Bacille de Calmette et Guérin)をマウスの気管内に投与し肺内での免疫反応を観察した。BCG気管内投与により肺組織に肉芽が形成されるが、遺伝子改変マウスでは肉芽の形成が有意に増加していた。以前の我々の知見では慢性閉塞性肺疾患(COPD)における急性増悪の予後にCCL1の遺伝子変異が関与していることを疫学的に示している。COPDの急性増悪の原因として気道感染は重要であり、本研究により肺組織におけるCCL1の役割が明らかにされ、COPDにおける気道感染のメカニズムが解明に近づくことが期待される。結果コントロール群と比較して、遺伝子改変マウス群では肺組織内での肉芽形成が促進され、肺間質における炎症は抑制されているという結果を得た。更に同様の実験モデルからRNAを抽出しマイクロアレイにより遺伝子発現の差異を検討したところ、遺伝子改変マウス群では炎症性サイトカインであるTumor necrosis factor (TNF) -α、Interleukin (IL)-1が抑制されており、M2免疫系因子であるCD163の発現が亢進しているという結果が得られた。これらの知見からCCL1は肺組織の感染症での細胞性免疫反応において重要な役割を演じていることが示唆された。肺特異的CCL1発現マウスの作成のため、マウス胚細胞へSP-CプロモーターCCL1プラスミドベクターをマイクロインジェクションにより導入した。その後雌マウス卵管へ戻してやることによって、キメラマウスを作製した。野生株のマウスと交配して得られた子孫からGenotypingにより遺伝子改変マウスを選抜することに成功した。まず作成された遺伝子改変マウスの表現型を感染などの負荷をかけない状態で検討した。遺伝子改変マウスの外観や肺組織所見は、野生型マウスと比較して有意な差を認めなかった。

血清及び気管支肺胞洗浄液を採取して検討を行ったところ、遺伝子改変マウスにおいては気管支肺胞洗浄液中のCCL1濃度が野生型マウスと比較して有意に高値であることが示された。更に肺組織内において、CCL1過剰状態での気管支肺胞洗浄液中の肺胞マクロファージの動態を検討した。肺胞マクロファージの表面抗原であるF4/80、CD11bの発現を、フローサイトメトリーを用いて解析した。気管支肺胞洗浄液中の肺胞マクロファージ表面抗原解析では、F4/80陽性細胞は、野生型マウスでは43.5%、遺伝子改変マウスでは35.4%と、遺伝子改変マウスで少なかった。これらの結果から、生体内において肺組織におけるCCL1過剰状態は、肺胞マクロファージの表面抗原の発現に影響を与えている可能性が示唆された。以前の我々の知見では慢性閉塞性肺疾患(COPD)における急性増悪の予後にCCL1の遺伝子変異が関与していることを疫学的に示している。COPDの急性増悪の原因として気道感染は重要であり、本研究により肺組織におけるCCL1の役割が明らかにされ、COPDにおける気道感染のメカニズムが解明に近づくことが期待される。当年度においては、遺伝子改変マウスにおける慢性細菌性気道感染後の病態を検討することが計画されていた。現在までの研究で遺伝子改変マウスに対しBCGを投与することで肺内における肉芽の形成を観察し、対照群との比較検討を行ったところ、肉芽の形成に差が認められることが明らかとなっていることから、BCGに対する細胞性免疫がCCL1の肺内での過剰発現により変化していることを示唆する結果となった。当年度においては、遺伝子改変マウスを作成の上確立をし、野生型マウスとの表現型の差異を確認することが計画されていた。現在までの研究で、遺伝子改変マウスは確立され、感染などの刺激がない状態での表現型の確認が行われた。また気管支肺胞洗浄液中のCCL1の発現量の検討や気管支肺胞洗浄液中のマクロファージを解析し、表面抗原の発現を検討した。これらにより、遺伝子改変マウスでは、肺組織内において免疫機能の最も重要な役割を担うマクロファージの動態に変化がみられることが示唆された。今後感染症における検討が必要と考えるが、無刺激の状態で評価がなされたことは、今後のCCL1の機能解析において重要な基礎データがそろったと考える。<CCL1発現マウスにおける肺気腫モデルの作成、及び細菌性気道感染後の病態の検討>当教室では肺気腫動物モデルとして、喫煙負荷によるモデルと、エラスターゼ投与によるモデルを用いている。前者はモデル作成のために数ヶ月を要するが、後者では約3週間での作成が可能となる。両者の併行により、当該年度内に表題の研究計画を遂行することが可能となると予想される。本遺伝子改変マウスとコントロールマウスに対して喫煙負荷装置(MIPS社)を用いて、20本/日×6ヶ月間(週5日間)の長期間にわたり全身暴露喫煙負荷をかける。我々は以前この方法を用いてマウスに肺気腫が形成されることを報告している(Hirama N et al. Respirology 2007)。よって当方法にて確実に肺気腫が形成されることが期待できる。またエラスターゼ気管内投与により肺気腫を作成した上で、細菌性気道感染症を誘発し、以下の項目を検討する。(1)感染後の生存率を比較する。
視覚障害乳幼児の視覚活用の支援に関する研究

視覚障害児の早期支援を行う全国66校の盲学校に対して2回の実態調査を行った。その全てから回答を得た結果を踏まえて、一つは肢体不自由と知的障害のある視覚障害幼児を対象とした視覚活用の促進を目指す課題において、視覚活用実態把握表を作成し、これを生かした指導法を提案したものである。二つ目は視覚障害のある02歳児の視覚活用における支援方法の研究であり、超早期の支援活動を意欲的に行う、2つの盲学校の実践を基に検討し、適切な指導の方策と教材等を示す映像を教師教材としてDVD版にまとめたことである。本研究の目的については、視覚障害乳幼児の視覚活用への支援は早期からの取組が重要であるため、殊に意識的な視覚の使用が不足する他の障害を併せ有する視覚障害児には必要としており、近年増加する重複障害児に重点を置いた早期の視覚活用の支援方法の検討を行うこととしている。具体的には実際の支援に携わる盲学校担当者や小児眼科医の協力を得ながら、さらに医療と支援機関の連携への模索を進めて、重複障害児への対応が十分なされた視覚障害乳幼児全体の視覚活用に関わる支援法の体系化を目指し、視覚障害乳幼児の早期支援の充実を図ることである。平成22年度には肢体不自由・知的障害のある視覚障害幼児の重度重複障害幼児を対象とした千葉盲学校幼稚部における視覚活用を促進する指導法を課題に挙げて千葉盲学校の担当者と筑波大学柿澤敏文准教授と共に研究に取り組んだ。この成果を平成23年1月1314日に開催された第52回日本弱視教育研究大会大阪大会で「肢体不自由・知的障害のある視覚障害幼児の視覚活用への支援-視覚活用実態把握表を活かした取り組み-」を千葉盲学校杉山利恵子、森栄子、宮城教育大学猪平眞理、筑波大学柿澤敏文の共同研究として発表した。また、猪平が主宰する全国視覚障害早期教育研究会千葉大会を平成23年2月56日に開催したので、この研究大会の一環として同校幼稚部の授業実践で公開し成果の発表も行った。本大会は全国の盲学校(視覚特別支援学校等)等から170名の参加を得て視覚障害乳幼児の研究大会としては他に例のない大きな会となった。このテーマが取り組むべき喫緊で重要な課題であることを実感するものとなった。本研究の2ヵ年目は、1ヵ年目の最後に日本弱視教育研究大会で発表した「肢体不自由・知的障害を併せ有している資格障害幼児の視覚活用への支援」の論文の投稿から始まった。これは副題-視覚活用実態把握表(試案)を活用した事例研究から-として検討を加え、日本弱視教育研究会発行の「弱視教育」第49巻1号(H.23年6月発行)に掲載された。本研究の目的にある近年増加する重複障害児の早期視覚活用の支援に役立てる視覚活用実態把握表を試案としても提案できた成果は大きかったといえる。一方、研究計画にある医療との連携を生かす支援を考えるため、猪平が主宰する全国視覚障害早期教育研究会の研修会を平成23年11月に守田好江氏(視能訓練士、ロービジョンセラピスト)による「見えにくさのある子どもの支援」をテーマに開催し、さらに平成24年1月に全国視覚障害早期教育研究会第13回沖縄大会で釣井ひとみ氏(臨床心理士、視能訓練士)による「重複障害児の視る活動を支える環境調整と初期的視覚活用を育てる取り組みについて」の講演を設定した』後者は160名の参加があり、このことを通じて関係者に視覚障害のある乳幼児の早期からの視覚活用支援の重要性に対する認識を高めることができた。加えて今年24年3月には全国の視覚障害乳幼児の支援を行う66校の視覚特別支援学校(以下盲学校)に実態調査を行い、100%の回答を得たが、盲学校の早期の支援を受けた子どもの就学は盲学校小学部だけではなく、特別支援学校や通常の小学校に進む多様化が進んでおり、視覚活用等を含めた早期からの支援にニーズのあることを確認するものとなった。本研究の目的、視覚障害乳幼児の視覚活用の支援の充実を目指し0歳2歳児の超早期に焦点を当てた取り組みを行った。筑波大学教授柿澤敏文氏の協力を得ながら全国視覚障害早期教育研究会の会員有志とともに、千葉県立千葉盲学校、群馬県立盲学校の実践を基にし研究を重ねた。さらに眼科医や視能訓練士等の医療関係者からの資料提供も受けつつ、視覚障害のある乳幼児の超早期の視覚活用の支援の必要性と、適切な指導方法の検討を行った。この成果をまとめると以下のような骨子となる。0歳からの視覚障害児に対する視覚活用の支援には、各々の子どもの見えやすい位置や方向を把握しつつ、見るものを間近でじっくり見せる働きかけを必要としている。その基盤には、子どもの見たい、知りたいという意欲の育みが重要であり、身近な大人の励ましや子どもに見えやすい環境作りが不可欠である。

さらに子どもの身体作りも大切で、発達の全体から捉える視点が必須となる。この研究成果を視覚障害児の支援にあたる関係者の参考とし、広く理解を図るためにDVDによる教師教材として編集した。内容は対象とする子どもの事例を取り上げ、0歳から2歳に至る視覚障害児の成長発達に即した適切な支援を行う中で、視覚の発達が促進されていく経過を追い、解説している。付録の版として見る意欲を促す玩具や用具の作成の配慮と使用の実際も収録した。他方、発達障害研究34-4(日本発達障害学会)において「視覚障害乳幼児の超早期支援ー全国視覚特別支援学校等(盲学校)における02歳児の支援の現状ー」で本研究の成果の一端を報告した。視覚障害乳幼児に対する視覚活用の支援について、1ヵ年は計画以上に進んで成果を上げたが、2ヵ年目の中心はこの成果を生かす土壌作りの方に力を注いだ形になった。24年度が最終年度であるため、記入しない。本研究を進めてきた中で視覚障害乳幼児の視覚活用を図るには。身体運動をはじめ認識力の向上など子どもの全体発達を促すことの重要性を改めて確認することとなった。当初は本研究の報告として視覚障害乳幼児の視覚活用に特化した教師教材のDVDを作成することとしていたが、現在は視覚障害乳幼児の全体的な発達を支援する内容の中に視覚活用の促進への方法を盛り込む方法を検討している。
イヌ血小板のα2-アドレナリン受容体活性に影響を及ぼす因子

本研究では、イヌ血小板凝集に関与するα2-アドレナリン受容体の薬理学的性質とストレスやショック時に放出される生理活性物質が血小板α2-受容体活性に及ぼす影響の一部を解明する目的で実験を行い、以下の成績並びに知見を得た。1.正常犬における16種類のα-受容体作動薬・遮断薬の血小板凝集効果およびADP・コラーゲン凝集促進効果を調べた結果、各薬物単独での血小板凝集能はなかったが、アドレナリン(Adr)、ノルアドレナリン(Nor)、オキシメタゾリン(Oxy)、キシロメタゾリン(Xyl)ではADPおよびコラーゲン凝集促進効果を示すことが判明した。2.α-受容体作動薬のADP凝集促進効果に対する各々α2-、α2・α1-、α1-受容体遮断薬前処理の影響を調べた結果、α2-受容体遮断作用を有する薬物により効果的に拮抗された。このことから、Adr、Nor、Oxy、XylのADP凝集促進効果はα2-受容体を介することが示唆された。3.生理活性物質のβ-エンドルフィン(β-E)、プロスタグランジンE2(PGE_2)、腫瘍壊死因子(TNF_<-α>)、エンドセリン(END)、インターロイキン-1(IL-1_α)単独添加は血小板凝集能を示さなかった。4.これら生理活性物質存在下におけるAdrのADP凝集促進効果を検討した結果、β-E、PGE2、ENDはAdrのADP凝集促進効果を変えなかったが、TNF_<-α>はその効果を助長する傾向が認められ、TNF_<-α>はα2-受容体を介する血小板凝集機序に相互作用を示す可能性が示唆された。5.^3H-ヨヒンビンを用いたRRA法ではβ-E、PGE_2、ENDは血小板α2-受容体数と親和性を有意に変えなかった。今後、TNF-α、その他の生理活性物質について、血小板α2-受容体活性への影響を更に詳細に検討する計画である。
顔の非対称度を規定するものは何か -アイトラッキング法による分析-

顔貌の対称性について主観的評価とアイトラッキング法を用いた視線運動軌跡の分析を行なった。評価資料には、顎変形症患者30名の顎顔面正貌写真を用いた。評価者にはモニター上に提示された写真をみて対称性を評価してもらい、アイトラッキング法を用いて注視点を解析した。その結果、主観的評価とオトガイ部の偏位や口裂の傾斜との間に高い相関関係を認めた。また、評価時の注視点はオトガイ部、鼻部、口唇部の順で集中していた。顎矯正手術は、顎変形症患者に対して顎口腔機能の回復ならびに正常な咬合関係の確立とともに顎顔面形態の美的改善を目的として行われる。とくに近年増加傾向にある顔面非対称症例では、どこを基準に手術計画を立てるべきかが重要な問題である。そこで、本研究では「顔の非対称度を規定するものは何か?」つまり、われわれが顔のどこを基準に非対称性を判断しているのかを明らかにする。顔貌の主観的評価法には、アイトラッキング法を用いた視線移動軌跡分析法を応用し、顔貌評価システムを開発する。本研究に使用する眼球運動測定装置(TalkEye II)は、眼球に微弱な赤外線を照射したときに角膜や水晶の屈折面に生じる反射像(プルキンエ・サンソン像)が眼球運動において瞳孔に対し動きが少ないという特性を利用し、瞳孔と反射像の両者をアイカメラで撮影しその位置関係から眼球運動角を算出するものである。実際には、評価者にモニターに映し出された顔貌写真を見ながら考えていることを口に出してもらい、アイトラッキング法と同時に正貌写真をみた所見をICレコーダに録音して分析するプロトコル法を組み合わせて行う。今年度は、顔貌評価システムのセッティングを行うとともに、顔貌写真を映し出したモニター画面を注視する場合のアイトラッキング法の測定精度について検討を加えてきた。その結果、高い精度で視線移動軌跡データを算出するためには視線のキャリブレーションとともに評価者の頭位の固定が不可欠であることが判った。そこで、頭位の固定装置を本システムに導入して測定精度の検討を再度行うとともに、顎変形症患者の顔貌評価の測定を開始した。顔面非対称を呈する顎変形症症例では、左右的な咬合平面の傾斜やオトガイ部の偏位だけでなく、左右の外耳道や眼窩の位置異常など複雑な変形を呈することが多く、自然頭位での傾斜を認めることもよくある。本研究では、われわれ医療従事者が顔のどの部位を見て対称性を評価しているのかを明らかにするために、客観的評価と主観的評価ならびにアイトラッキング法を用いた分析結果との関連について検討を行なった。評価には、顎変形症と診断された患者のうち資料の揃った30名(男性7名、女性23名)の術前正貌写真を用いた。評価者は口腔外科医7名、歯科矯正医3名、計10名とした。評価者にはモニター上に一人の患者につき20秒間提示された正貌写真をみてもらい、主観的評価として"ほぼ対象"をO、"非対称を認めるが許容範囲内"を1、"明らかな非対称を認め治療が必要"を2に分類してもらった。さらに、アイトラッキング法を用いて評価時の評価者の視線運動軌跡から注視点を解析し、目、鼻、口、オトガイ、頬部の各部位における注視回数と注視時間および顔貌内における初回注視点を算出した。各症例に対する評価者10名の主観的評価の平均値を算出して主観的非対称度とし、正貌写真分析結果と比較したところオトガイの偏位度や口裂の傾斜、顎角部の角度的非対称率、口角部の角度的非対称率および顎角部の距離的非対称率と相関関係を認めた。また、注視点の分析結果では、初回注視点は鼻部が最も多く、次いで口唇部であった。注視回数ならびに注視時間は、ともにオトガイ部、鼻部、口唇部の順で高い値を示し、中顔面から下顔面に注視部位が集中した。以上の結果より、正貌における対称性の主観的評価には、オトガイの偏位度や口裂の傾斜が大きく影響していると考えられた。