hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
英国テイト・ギャラリーの教育普及活動における学校連携の方法と成果

3年計画の2年目に当たる研究計画の中心は,美術館と学校が連携して行なう実践的な教育プログラみを調べることを目的としていう。具体的にはバーバル・アイズというプロジェクトの詳細を現地のロンドンにで,アーティストなど関係者から取材し,その目的と運営方法と成果をまとめることてある。この計画に沿った学会発表を実施できたことで,おおむね順調と評価できる。また,印刷中めため,下記雑誌論文欄に記載できないが,女子美術大学の美術教育関連領域の紀要に,「テイト・ブリテンの学校プログラム参加アーティストの視点かち」という論題の論文を連名で投稿済みであり,これを含めて(2)の評価としている。24年度が最終年度であるため、記入しない。本年度前半は,平成22年度に実施した学芸員(プロジェクト企画者)・教師のインタビューと平成23年度に実施したアーティストへのインタビューの記録を精読し,"Tate Handbook"など,テイト・ギャラリーの教育普及活動の全体像を論述した文献とつきあわせることで,バーバル・アイズの先駆的な位置づけについて明確にする予定である。本年度後半には,アーティストとの連携を強化することで,創作活動のライブ感を学校に導き入れる方法を模索し,美術館と学校との連携について検討している学芸員・教師とともに,教材の開発と組織的な教育計画の立案について検討する。これまでの成果の報告を兼ね,上記の教材開発および教育計画の立案の見通しをつけるため,研究代表者・研究分担者・研究協力者とともに適切な研究者などを加えたシンポジウム形式の研究会を二回開催する予定である。なお,この方向は申請時の計画と変わっていない。
遺伝性小頭症責任遺伝子ASPMは神経発生過程において細胞周期と細胞死を制御するか

(1)Fucci発現脳特異的Aspm欠損マウス(Fucci-NesCre;Aspmflox/flox)の作製:当該マウスを作製するにあたり交配の組み合わせを検討し、Fucci-Aspmflox/floxホモ親とNesCre;Aspmflox/+ヘテロ親の組み合わせが、効率的にFucci-NesCre;Aspmflox/flox (Aspm cKO)を作製できることが分かった。(2)脳スライスの作製方法の検討:まず、Aspm cKOでアポトーシスが多く発生したE12.5, E14.5における冠状断スライスの効率的な作成方法を検討した。E12.5は大脳壁構造が未発達であり、正確に観察面をとらえることが困難であったが、E14.5は大脳壁が発達しており実体顕微鏡下で取り扱いが可能であった。さらに、ビブラトームと比べ、顕微鏡下で自作の極小メスにより短冊状にスライスすることで、操作工程の簡略化できダメージも少なくFucciの発現が明瞭に確認できた。このことから、E14.5を対象とすることが妥当であると考えた。(3)Fucci発現細胞のタイムラプス観察:つぎに、脳スライスをコラーゲンで包埋し、顕微鏡に設置したインキュベータ内で培養しながら、5分間隔で16時間連続観察した。既報どおり、Fucciが細胞周期のS/G2/Mを緑色、G1/G0期を赤色の蛍光タンパク質で細胞核を可視化するように、当該マウスにおいても、脳室帯に緑色、中間帯および皮質板に赤色の核を有する細胞を明瞭に認めた。しかし、Fucci蛍光は経時的な変化をするものの、細胞周期に連動するエレベータ運動については下降する緑色の細胞のみ観察され、G1期の上昇する赤色の細胞の挙動をとらえることができなかった。脳スライスでの検証が困難であると考え、現在分散培養系によるタイムラプス観察条件を検討している。Fucci-NesCre;Aspmfloxマウスを用いた脳スライスによるタイムラプス観察において、当初計画していた動態観察が困難であることが分かった。現在、当該マウス由来の神経幹細胞を用いた方法に変更し、解析を進める予定である。(1)タイムラプスによる細胞周期解析:まず、G1期の核が赤色の蛍光、S/G2/M期の核が緑色の蛍光を発するFucciを発現する遺伝子改変マウス由来の野生型神経幹細胞(NSC)を用いて、観察条件を確立する。この方法を用いて、Fucci-NesCre;Aspmflox/flox(Aspm KO)胎仔由来のNSCの挙動と比較する。さらに、観察終了時点でのNSCサブタイプを蛍光細胞染色などで解析し、増殖・分化および、対称・非対称分裂情報を取得し、単一細胞レベルでのWTとAspm KOの違いを調べる。(2)遺伝子発現解析:胎齢14.5日目のAspm KOおよび野生型の胎仔脳の側脳室周囲増殖細胞層を回収し、Aspm依存的に変動するDNA損傷修復関連分子、アポトーシスに関連する遺伝子群を判別する。(1)タイムラプスによる細胞周期解析:まず、G1期の核が赤色の蛍光、S/G2

/M期の核が緑色の蛍光を発するFucciを発現する遺伝子改変マウス由来の野生型神経幹細胞(NSC)を用いて、観察条件を確立する。この方法を用いて、Fucci-NesCre;Aspmflox/flox(Aspm KO)胎仔由来のNSCの挙動と比較する。さらに、観察終了時点でのNSCサブタイプを蛍光細胞染色などで解析し、増殖・分化および、対称・非対称分裂情報を取得し、単一細胞レベルでのWTとAspm KOの違いを調べる。(2)遺伝子発現解析:胎齢14.5日目のAspm KOおよび野生型の胎仔脳の側脳室周囲増殖細胞層を回収し、Aspm依存的に変動するDNA損傷修復関連分子、アポトーシスに関連する遺伝子群を判別する。初年度の計画に変更が生じ、解析方法の追加に伴い前倒し請求を実施した。これは、解析用の当該マウスの作製、輸送費および細胞培養関連費への充当を予定していた。しかし、想定よりもマウス作製の効率が高くなり、作製回数が抑えられ輸送費に余剰が出た。次年度は、野生型と変異型間の遺伝子発現解析を行う。さらに培養細胞を用いたタイムラプス解析により、蛍光色および細胞形態から増殖・分化、対称・非対称分裂情報の取得および細胞死の有無を検証する。これらにより、神経幹細胞の細胞周期制御とアポトーシス発生におけるAspmの役割を推察する。
超高頻度突然変異発現を示すヒト細胞の解析

ヒト培養細胞RSaは紫外線による突然変異発現の誘発頻度が異常に高い(10^2生存細胞あたり1変異率)。この原因は、プラスミノゲンアクチベーター様プロテアーゼ活性の代謝異常であることを以下の実験結果から明らかにした。1.RSaの紫外線致死抵抗株UV^r-1は紫外線による突然変異誘発頻度も低下していた。このUV^r-1細胞はDNA修復複製レベルがRSa細胞のそれと同程度であることから、他の第二のDNA修復機構、おそらく誤りなし(エラーフリー)修復機構を獲得していると予測された。UV^r-1では紫外線照射直後プラスミノゲンアクチベーター様プロテアーゼの活性値が急上昇した。しかし、RSaではそのような上昇は見い出されなかった。したがって、プロテアーゼ活性を有する何らかのタンパク質が突然変異誘発調節因子であることが示唆された。2.RSa細胞もインターフェロン処理し紫外線照射を受けると突然変異の誘発頻度は著減した。ところが、照射直後サイクロヘキシイミド処理すると再び誘発頻度は上昇した。インターフェロン処理RSaでは紫外線照射直後上記プロテアーゼの活性レベルは上昇し、サイクロヘキシイミド処理は本上昇を消失させた。3.高頻度突然変異形質のXeroderma,Pigmentosum患者由来繊維芽細胞でも上述のインターフェロンとサイクロヘキシイミド効果は認められた。したがって、インターフェロンのようなサイトカインを利用することによりヒト細胞の突然変異発現調節機構の解明か容易になったと言え、しかも、プラスミノゲンアクチベーター様プロテアーゼはエラーフリー機構の誘導に関与することが強く示唆された。ヒト細胞RSaにおいて突然変異発現の紫外線による誘発頻度が異常に高い理由を以下のように解明した。2.RSaの紫外線致死抵抗変異株【UV^r】-1は、誘発頻度低へと変化した株であった。しかも、この【UV^r】-1では紫外線照射直後プラスミノゲンアクチベーターの活性値が急上昇した。しかし、RSaではそのような活性上昇は見い出されなかった。したがって、プラスミノゲンアクチベータ活性を有する何らかのタンパクが突然変異誘発調節因子であることが示唆された。3.一方、RSaでも、紫外線照射前にヒトインターフェロンαを処理しておくと誘発頻度が著減した。さらに、インターフェロン処理RSaでは、DNA修復複製レベルが上昇したことから、この修復がエラーフリー型でありその結果変異誘発頻度が低下されることが示唆された。4.【UV^r】-1は、DNA修復複製レベルが同程度であることから、他の第二のエラーフリー型DNA修復機構を獲得していると予測された。以上の結果から、次年度は次の3点について研究を続行する。1.プラスミノゲンアクチベーター様タンパクとエラーフリー型DNA修復機構との関連性を究明する。2.トランスフェクション法により、【UV^r】-1由来DNAをRSa細胞へ移入し、抗突然変異作用遺伝子の同定を試みる。3.ヒトインターフェロンが上記タンパクと遺伝子の作用をどのような分子機構により調節しているか究明する。ヒト細胞RSaにおいて突然変異発現の紫外線による誘発頻度が異常に高い理由をプロテアーゼタンパクと抗突然変異遺伝子の究明という2点から検討した.1.RSaでは,紫外線照射前にヒトインターフェロンαを処理しておくと突然変異の誘発頻度が著減しDNA修復製レベルが増大するが,高発癌・高頻度突然変異形質のXeroderma pigmentosum(XP)患者由来線維芽細胞でも同様のインターフェロン効果が見られた.さらに,高発癌性患者由来細胞ではどうか現在検討中である.一方,紫外線高感受性Cockayne syndrome(CS)患者由来線維芽細胞でも上記インターフェロン効果は認められた.

したがって,インターフェロンを利用することにより,ヒト細胞のDNA修復機構の解明加容易になったと言えよう.実際, RSa, XP, CSとの細胞でも,上述インターフェロン効果に連動して活性上昇するプラスミノゲンアクチベーター様プロテアーゼ活性を認めた.本活性は,大腸菌recAプロテーアーゼと類似している可能性があり,今後詳細に検討したい.2.RSaの紫外線致死抵抗株UVr-1は突然変異誘発頻度も低下した変異株である.このUVr-1由来のDNAを制限酵素で断片化し,レーザー光を用いRSa細胞へ移入したところ,極めて高頻度に紫外線抵抗性株加得特異的な遺伝子加移入され安定化したと考えられる.したがって, UVr-1由来DNA断片をクローン化することにより,ヒト細胞の抗突然変異遺伝子を同定しうると予測される.ヒト細胞RSaは紫外線作用に高感受性を示す培養株である。紫外線作用の中でも突然変異誘発頻度が本細胞では著しく高い。この高頻度の原因と関係あるタンパク質を本研究で明らかにした。紫外線照射前インターフェロン処理したRSaでは突然変異の誘発頻度は低下するが、紫外線照射直後サイクロヘキシイミド処理すると再び上昇した。サイクロヘキシイミドはタンパク合成阻害剤であるから、何らかのタンパク質が高頻度変異に関与すると予測された。一方、RSaより樹立した株UVr-1は突然変異発現頻度が低いが、紫外線照射直後プラスミノゲンアクチベーター様プロテアーゼの活性レベルが上昇した。このUVr-1細胞より得た粗抽出プロテアーゼサンプルを用い、試験管内で本活性を阻害する因子をいくつか見い出した。その中の一つアンチパインを紫外線照射直後投与すると、UVr-1の突然変異誘発頻度は上昇した。UVr-1細胞より抽出したDNA断片をレーザートランスフェクション法によりRSa細胞に抽入して得られた形質転換株は、突然変異誘発頻度が低下し、同時に、本プロテアーゼ活性の誘発レベルが上昇していた。なお、インターフェロン処理したRSa細胞では紫外線照射直後プラスミノゲンアクチベーター様プロテアーゼの活性レベルは上昇し、サイクロヘキシイミド処理は本上昇を消失させた。以上のことから、プラスミノゲンアクチベーター様プロテアーゼはエラーフリー(誤りなし)機構の誘導に関与することが強く示唆された。このプロテアーゼ関与エラーフリー誘導機構は、Xeroderma Pigmentosum(XP)患者由来細胞でも欠損していることが明らかとなった。
移民女性の言語問題―ハンディ克服のための言語習得戦力と言語支援とのかかわり

本研究は、グローバル化に伴う人々の移動を「女性」と「言語問題」に焦点を絞り、移民女性の言語問題を社会言語学の観点から、当事者の戦略とホスト社会の支援との関係を明らかにしようとするものである。移民の受け入れの歴史が長い多文化社会である欧米の場合、非熟練労働者や難民などの移民に対して、その社会の構成員として「福祉」や「権利」の理念のもとで言語支援が行われている状況が確認できる。しかし移民の受け入れに消極的な日本の場合、在日コリアンや中国帰国者の例からいえるように、移民女性は、複雑な社会的要因により、社会的排除の対象となってきた事実がある。一方、近来結婚移住女性が増えている韓国の場合、移住女性に対して韓国人の「妻」や「母」という認識が社会に定着しており、「多文化家庭」をささえる女性の役割としての言語的圧迫が強いことが明らかになった。本研究は、グローバル化に伴う人々の移動を「女性」と「言語問題」に焦点を絞り、移民女性を取り巻く困難な社会状況を社会言語学的観点から捉えようとすることを目的とする。さらに、移民女性の言語問題を当事者の戦略とホスト社会の支援との関係を明らかにしようとするものである。研究代表者の金は、国内では東京都新宿区のコリアンコミュニティの経済活動及び他のアジア系外国人コミュニティのホスト社会との交流について調査をした。また、日本の市民団体の日本の異民族及び外国人に対する支援活動を観察した。国外調査では、韓国の移住女性の言語問題を知るため、行政の委託団体を訪問し、実際に行っている言語支援活動の見学、言語支援を受けている移住女性のインタビュー調査ができた。また、移住者の言語で情報を出している放送局を訪問し、メディアを道具とした言語支援の状況を知ることができた。一方、アメリカではCommunity Adult Schoolを訪問し、市民を対象に行われている言語(英語)支援プログラムを利用している移民女性の言語習得状況を調査した。その他コリアン系移民とメキシコ系移民の子供への母語継承に対する意識の予備調査ができた。研究分担者の庄司は日本国内では、中国帰国者、特に女性の日本語習得度や日本における社会参加の実情に関し、大阪周辺の帰国者を対象とする聞き取り調査を行い、夜間中学、中国帰国者支援交流センターなどでの日本語支援制度の実態を調査した。国外ではフィンランドにおいて非識字定住者を対象とするフィンランド語講座で教授方法、教材使用などの参与観察のほか、参加者や教師に対して聞き取り調査を実施した。日本では、中国帰国者においては公費、私費帰国者のあいだ、また識字、非識字者のあいだでは定住後の日本語学習度や社会参加に差が生じやすいことがうかがえる。フィンランドでは移民の資格にかかわらず非識字者へのフィンランド語支援が積極的に実施されていることが明らかになった。本研究は、グローバル化に伴う人々の移動を「女性」と「言語問題」に焦点を絞り、移民女性を取り巻く困難な社会状況を社会言語学的観点から捉えようとするものである。当年度には以下のような研究調査を行った。研究代表者の金は、国内では去年に引き続きアジア系外国人コミュニティのホスト社会との交流について、日本の市民団体による外国人への日本語支援活動が、外国人にどのように活用されているのかを調査した。国外調査では、イギリスではロンドンを訪問し、イギリスの移民に対する公的な言語(英語)支援状況に対する資料を集めたほか、移民コミュニティの言語活動状況を移民の集住地域から観察することができた。一方、韓国の移住女性への言語問題を知るため、行政の委託団体を訪問し、言語支援を受けている移住女性のインタビュー調査ができた。いずれの調査からも、移民(外国人)に対する公的支援とそれがいかに外国人に生かされ、ホスト社会への適応につながるかを知るための貴重な情報を得ることができた。研究分担者の庄司は、国外ではフィンランドにおいて昨年に引き続き、非識字定住者を対象とするフィンランド語講座で教授方法、教材使用などの参与観察のほか、参加者や教師に対して聞き取り調査を実施した。また、スウェーデン、フィンランドにて、これらの国に移住後、現地の言語を習得することで、職をえた女性移民(ベトナム人、フィンランド人、パレスチナ人、ハンガリー人)のほか、エスニックビジネスに従事する移民り起業に関するライフストーリーをインタビューした。日本では、私費による中国帰国者に関し、引き続き調査したが、公費による帰国者にくらべ、初期の日本語教育、日本適応教育が欠損したこととともに、その後の行政による支援にも大きな影響がみられる。特に40代に来日した二世世代は、今日こどもが独立し家庭を離れる中、日本語能力の不自由さから社会との断絶しつつある現状がみられる。

本研究は、グローバル化に伴う人々の移動を「女性」と「言語問題」に焦点を絞り、社会言語学的観点から捉えようとするものである。当年度には以下のような研究調査を行った。研究代表者の金は、まず、韓国外国人労働支援センター(ソウル市)とアンサン移住者センター(アンサン市)を訪問し、移住者への言語支援状況についての情報を得た。次に、全羅南道、ムアン郡庁を訪問し、移住女性に対する生活支援についてインタビュー調査をした。また郡庁委託のハングル教室を訪問し、アジアからの移住女性の授業参加状況を観察し、彼女らの言語問題(言語習得、韓国語でのコミュニケーションなど)について聞き取り調査を行った。調査の際にはインタビュー内容を録音し、談話資料を確保することもできた。今回の調査では韓国の移住者に対する公的支援がいかに当事者に活用されているのか、またどのような問題点を残しているのかを知り、さらに移民女性の韓国語習得の過程を分析できる資料が得られた。分担者の庄司は、フィンランドにおいて、移民関連行政を全体として管理、調整する部門で、移民女性の統計や生活状況に関し責任者および職員に対しインタビューを実施した。移民の識字問題はおもに雇用の機会の提供、および雇用現場での不自由の軽減のため該当者を対象に教育をおこなってきた。アフリカ、中東出身の家庭女性、高齢の女性などに社会参加をうながし、啓蒙をすすめる観点から識字教育が始まったのは近年で、民間NGOおよびそれを支援する形で行政が参与する。参与観察をおこなった施設は、保育所との併設、女性の文化活動を提供するものなど使用の便宜性をたかめるほか、教育メソッドにおいても従前とは根本的にことなる方法が実施されている。また非識字者全体の把握のため、若年者層にもみられる潜在的非識字者の発見方法が試行されていることなどが明らかになった。非識字者の調査対象件数はやや少ないが、その分は、支援者や公的機関からの情報でおおむね補えるみこみであり、全体としては、ほぼ当初の計画にそって進捗している。24年度が最終年度であるため、記入しない。研究体表者の金は本年度、移民女性の言語問題について、北朝鮮からの移住(脱北者)女性に焦点を当て調査を行う予定である。特に韓国の脱北女性が直面している言語問題について、意思疎通とは異なる移住女性の言語に対するホスト社会の態度や規範意識について調査をする。研究分担者の庄司は本年度も研究計画を大筋変更せず、あらたな対象者にインタビューを継続するが、できれば行政、支援団体などを通じ、非識字者への支援についての情報でインタビューの情報を補充する予定である。
ミトコンドリア遺伝子異常に伴う難聴の発症機序に関する研究

ミトコンドリア遺伝子異常モデル動物としてモルモットに0.5%ゲルマニウム食を摂取させ、その内耳、骨格筋、心臓、肝臓、腎臓における影響の検討を継続した。聴力評価はABRを用い、組織学的検査は光顕および透過電顕により組織観察を行い、さらに免疫組織および生化学的にミトコンドリアの機能を検討した。組織学的検討では蝸牛血管条障害はほぼ全例に、蝸牛支持細胞障害は過半数にみられたが、蝸牛有毛細胞、らせん神経節、前庭、半規管、蝸牛・前庭神経にほとんど異常はみられなかった。また骨格筋障害、腎臓障害は全例に、心筋障害は8割強にみられ、一方肝臓障害はほとんどなかった。免疫組織学的検討、および生化学的検討では骨格筋のCOX活性低下が認められた。このデータをまとめ論文作成中である。臨床ではミトコンドリア遺伝子T7511C点変異の症例の臨床像を国際学会で報告し、またA1555G点変異症例の臨床像、ミトコンドリア遺伝子フルシークエンス結果、骨格筋の病理所見について論文にまとめ、掲載された。1)ミトコンドリア遺伝子異常のモデル動物としてモルモットにゲルマニウムを与え(0.05%,と0.2%)、1カ月毎に体重測定、聴力測定(ABR)、骨格筋採取(CCO活性)、心臓、肝臓、腎臓採取(電顕)、内耳採取(電顕)を行った。0.05%ゲルマニウム投与動物は6カ月を過ぎて骨格筋CCO活性が落ち、8カ月頃から難聴と蝸牛の変性が出てきている。0.2%ゲルマニウム投与動物はやや早目に障害が出る傾向にあるがまだ検討中である2)二次実験として音響曝露の影響を調べるため強大音を出せる設備(防音箱,NF回路設計ブロックなど)を準備した.現在音圧レベルによる難聴の程度蝸牛障害の程度についてpreliminaryな実験を行っている。3)ヒト側頭骨からミトコンドリアDNAを採取する方法を確立し3243位変異の側頭骨病理について報告した。また、種々のミトコンドリアDNA変異によるphenotypeについても報告した。1555位変異による難聴の特徴,筋病理については投稿中であるがミトコンドリアDNAの他の変異がないこと,ストマイ投与がなくても難聴は起こりうること,症状はないが筋病理で異常があることを初めて示した。本年度はゲルマニウム食をモルモットに与え、内耳、筋肉、腎臓、心臓の病理変化やミトコンドリアの変化を調べる実験を継続して行なった。これまでの経過ではゲルマニウム0.05%食を与えても、1年まで病理学的に明らかな異常は見られず難聴も生じなかった。このためゲルマニウム食を0.2%に増量(ラットやマウスでは著明な変化の出る濃度)したが、若干の体重減少などはみられたが著明な筋萎縮や難聴は出現しなかった。病理学的検討でも明らかな筋肉の変性やミトコンドリアの増加・膨化・封入体の出現などの異常はほとんどみられなかった。このため今回1%のゲルマニウム食を与えたところ、1ヶ月までに急性腎毒性により死亡した。現在0.5%ゲルマニウム食を投与してその経過を検討しているが、2ヶ月までに著明な体重減少があり、筋萎縮や難聴が出現している。今後病理学的に筋肉・内耳組織・心臓・腎臓など精査を行なう予定である。ヒトミトコンドリア遺伝子3243位の異常では糖尿病の重症度および難聴の発症年齢と相関がある事が判明した。また1555位点変異の検索を行ない、アミノ配糖体の投与がない症例でも難聴を生じる事、また神経筋症状がなくとも、筋病理で変性や封入体の発現が見られる事を示した。ゲルマニウム食をモルモットに与え、内耳、筋肉、腎臓、心臓の病理変化やミトコンドリアの変化を調べる実験を継続して行なった。この結果ゲルマニウム0.05%食、0.15%食では6ヶ月まで病理学的に明らかな異常は見られず難聴も生じず、1%のゲルマニウム食を与えたところ、急性腎毒性により2週間頃にすべての動物が死亡した。一方0.5%ゲルマニウム食を投与したところ、体重は全く増加せず、2ヶ月までに著明な筋萎縮と約40dBの難聴が出現することが判明した。

この系では2-3ヶ月後にほとんどの動物が死亡するため、2ヶ月のデータを解析した。この結果、内耳では血管条のミトコンドリアにゲルマニウムが沈着し、ミトコンドリアの変性および血管条全体の萎縮・空胞変性が見られた。一方支持細胞はゲルマニウム沈着・変性があるものの有毛細胞はほぼ保たれていた。前庭もほぼ正常であった。骨格筋・腎臓でもゲルマニウムの沈着、ミトコンドリア変性が顕著であったが、心臓・肝臓はほぼ正常であった。この結果は人のミトコンドリア脳筋症に類似しており、ミトコンドリア病の良い動物モデルであること、このモデルの難聴は主に血管条変性によることが判明した。人の難聴症例でも引き続きミトコンドリア遺伝子を解析しており、これまで1家系しか見られていないT7511C点変異を発見し、現在家系の解析中である。ミトコンドリア遺伝子異常モデル動物としてモルモットに0.5%ゲルマニウム食を摂取させ、その内耳、骨格筋、心臓、肝臓、腎臓における影響の検討を継続した。聴力評価はABRを用い、組織学的検査は光顕および透過電顕により組織観察を行い、さらに免疫組織および生化学的にミトコンドリアの機能を検討した。組織学的検討では蝸牛血管条障害はほぼ全例に、蝸牛支持細胞障害は過半数にみられたが、蝸牛有毛細胞、らせん神経節、前庭、半規管、蝸牛・前庭神経にほとんど異常はみられなかった。また骨格筋障害、腎臓障害は全例に、心筋障害は8割強にみられ、一方肝臓障害はほとんどなかった。免疫組織学的検討、および生化学的検討では骨格筋のCOX活性低下が認められた。このデータをまとめ論文作成中である。臨床ではミトコンドリア遺伝子T7511C点変異の症例の臨床像を国際学会で報告し、またA1555G点変異症例の臨床像、ミトコンドリア遺伝子フルシークエンス結果、骨格筋の病理所見について論文にまとめ、掲載された。
大動脈弁石灰化における骨芽細胞分化マスターレギュレーターの同定と機能阻害剤の開発

これまで我々は、網羅的遺伝子発現解析により石灰化大動脈弁由来の間質細胞に、特異的に高発現する遺伝子群を同定している。これらの遺伝子群は、弁間葉系幹細胞を骨芽細胞に分化させた際にも発現上昇することから、骨芽細胞への分化に必須である可能性が高い。本研究では、これらの遺伝子群を対象に、in vivoおよびin vitroでの機能解析を実施する。また、その分子機能阻害剤を探索することにより、新規大動脈弁狭窄症治療薬としてのリード化合物の導出を目指す。
検索結果の知的提示手法に関する研究

インターネット上に存在するテキスト情報の量が急速に増加するとともに,我々は検索エンジンの結果から望む情報を見つけるのがますます大変になってきている.このため,検索結果を効果的に再構成する研究が活発になっている.これまで進められてきた大部分の研究は,トピックに従って検索結果をクラスタリングするものである.しかし,最近注目に値する動向の1つとして,増加するインターネット上の情報の中で,ユーザが直接作成したコンテンツの占める割合が急増しているということがある.これらには,特定製品や映画などに対する主観的な評価,または政策に対する賛否の情報が含まれている.このようなコンテンツは,ユーザのブログに掲示されたり,掲示板での活発な議論や,オンラインショッピングモールなどでの使用者評価コメントなどとして現われたりする.したがって,トピックによる検索結果の再構成技術とは別に,ユーザの観点による検索結果の再構成,すなわちユーザの主観的な見解を認識し,肯定/否定の観点によってクラスタリングする技術の開発が必要とされている.本研究では,検索結果から主観的な見解を記述した文章を抽出する方法を提案する.これは大きく,主観/客観分類器を構築する既存の方法を改善することで,初期主観/客観分類器を構築することと,初期主観/客観分類器を特定の領域に適合させるため,教師なし学習を用いることに分けられる.初期主観/客観分類器の構築は,既存の単語に基づく分類器に単語の稀少さの概念をを追加,拡張することで,既存の方法を改善する方法を用いた.単語の稀少さは,文書集合内で極めて限定的に出現する語彙集合を表現する概念であり,人間が主観的な文章を記述する時は,稀少な単語を好むという観察から考案されたものである.このようにして構築された主観/客観分類器は,既存の分類器よりも性能が良いが,まだ性能は十分でない.本研究では,その理由が主観/客観分類に使われる語彙が実際にはトピックによって非常に変化するからであることを示す.この観察に基づき,本研究では初期分類器を,トピックに依存した文書集合を使って,トピックごとに適応化した主観/客観分類器を生成する手法を提案する.本研究の検証のため,現在公開されている主観/客観分類評価コレクションであるMPQA2.0を用いて実験を行なった.実験により,単語の稀少さの概念が,単語に基づく分類器の性能を向上することを確認した.また,特定トピックに適応した主観/客観分類器が,トピックに適応させない分類器に比べ性能が良いことを確認した.ベクトル空間モデル,確率モデルといった,多くのランキングアルゴリズムが1960年代から開発されてきている.その他に,検索結果を組織化するクラスタリング手法に関する研究が行われてきている.今年度ではまず,伝統的なテキストクラスタリング技術の調査を行った.次に,その調査結果に基づき,検索結果の文書集合を効果的にクラスタリングする手法の設計を行った.検索結果のクラスタリングでは,時間効率もまた重要な考慮点である.なぜなら,たとえクラスタリング結果が見易く,ユーザ親和的であろうとも,待たされるのであればユーザは不満を感じるであろう.そのため,我々は,検索結果を効率的に組織化する,単純なランキングに基づくクラスタリングアルゴリズムを設計した.次に,このアルゴリズムを元に,組織化された結果を提示するプロトタイプシステムを実装した.さらに,そのシステムを用いた実験を行った.100のTRECのクエリと適合文書集合を用い,適合文書集合全体あるいはその部分から元のクエリを自動的に生成できるかを調査した.適合文書集合の最適なクラスタラベルとして,各クエリを生成できるかどうかを評価していることを意味している.クラスタのキーワードを選択するアルゴリズムとして,OLF^*OGFとRSVの2つのアルゴリズムを比較した.伝統的なRSV手法が最近提案されたOLF^★OGF手法よりもかなり良い結果を残した.インターネット上に存在するテキスト情報の量が急速に増加するとともに,我々は検索エンジンの結果から望む情報を見つけるのがますます大変になってきている.このため,検索結果を効果的に再構成する研究が活発になっている.これまで進められてきた大部分の研究は,トピックに従って検索結果をクラスタリングするものである.しかし,最近注目に値する動向の1つとして,増加するインターネット上の情報の中で,ユーザが直接作成したコンテンツの占める割合が急増しているということがある.これらには,特定製品や映画などに対する主観的な評価,または政策に対する賛否の情報が含まれている.このようなコンテンツは,ユーザのブログに掲示されたり,掲示板での活発な議論や,オンラインショッピングモールなどでの使用者評価コメントなどとして現われたりする.したがって,トピックによる検索結果の再構成技術とは別に,ユーザの観点による検索結果の再構成,すなわちユーザの主観的な見解を認識し,肯定/否定の観点によってクラスタリングする技術の開発が必要とされている.本研究では,検索結果から主観的な見解を記述した文章を抽出する方法を提案する.これは大きく,主観/客観分類器を構築する既存の方法を改善することで,初期主観/客観分類器を構築することと,初期主観/客観分類器を特定の領域に適合させるため,教師なし学習を用いることに分けられる.初期主観/客観分類器の構築は,既存の単語に基づく分類器に単語の稀少さの概念をを追加,拡張することで,既存の方法を改善する方法を用いた.単語の稀少さは,文書集合内で極めて限定的に出現する語彙集合を表現する概念であり,人間が主観的な文章を記述する時は,稀少な単語を好むという観察から考案されたものである.このようにして構築された主観/客観分類器は,既存の分類器よりも性能が良いが,まだ性能は十分でない.本研究では,その理由が主観/客観分類に使われる語彙が実際にはトピックによって非常に変化するからであることを示す.

この観察に基づき,本研究では初期分類器を,トピックに依存した文書集合を使って,トピックごとに適応化した主観/客観分類器を生成する手法を提案する.本研究の検証のため,現在公開されている主観/客観分類評価コレクションであるMPQA2.0を用いて実験を行なった.実験により,単語の稀少さの概念が,単語に基づく分類器の性能を向上することを確認した.また,特定トピックに適応した主観/客観分類器が,トピックに適応させない分類器に比べ性能が良いことを確認した.
局所ECRに伴うプラズマ電位形成機構

これまでの詳細な実験により、局所ECRによる不均一磁場配位中のプラズマ電位形成は、局所ECRによる選択的な電子の磁力線方向加速及び減速に対し、プラズマ準中性条件の要請によって自己無憧着にイオンを加速及び減速するような電位が形成されるという、極めて簡潔な機構で説明できることが判明した。1.まず、局所ECRによる電位形成の安定性とECR点における磁場曲率の良悪との関係を解明すべく実験を行った。すなわち、ステップ状収束型ミラー磁場中にパルスプラズマを流入し、磁力線方向電位分布の時間発展と低周波不安定波動の測定を行った結果、ECR点が悪い磁場曲率領域に存在する場合にはドリフト及びフルート型の不安定性が増強されるため、ECR点近傍に過渡的に形成されたプラズマ流障壁電位(局所電位くぼみと後続する電位上昇)が定常状態では崩壊するが、ECR点が良い磁場曲率領域に存在する場合にはそれらの不安定性が増強されずにプラズマ流障壁電位は定常状態においても維持されることが明らかになった。この成果は、井戸型ミラー磁場配位において最小磁場点がECR点に一致する場合には過渡的にしかプラズマ流障壁電位形成が観測されない、という実験結果を矛盾なく説明することができた。2.次に、井戸型磁場配位において平均磁場強度を変えてECR点が二つ存在する場合の電位分布を測定した結果、2点間に電子温度の10倍以上相当の電位くぼみとそれに後続した第二共鳴点近傍のイオンフローエネルギー相当の電位上昇(イオンプラグ電位)が観測された。この大きな電位くぼみは、これまでのECR効果(磁力線方向のμ∇B電子減速)とはむしろ反対に第一共鳴点における磁力線方向のμ∇B電子加速に起因することが、より単純な発散型磁場中のECR共鳴実験によって明らかにされた。この場合には、大きな沿磁力線イオン加速を伴うことも実証された。長さ500cmの直線型装置の中央付近に、ミラー長100cmの局所磁気井戸または磁場勾配特性長50cmのステップ状収束型ミラー配位を実現し、購入設備備品のターボ分子ポンプによりそれらの局所変化磁場領域の真空度を著しく改善した。1.装置の一方の端で、Qマシーン方式により完全電離無衝突プラズマ流を発生し局所不均一磁場領域へ導入するともに、装置他端からクライストロンによりマイクロ波(6GHz、10W以下)を磁力線に平行に入射し、シングルプローブ法によりプラズマ電位の空間分布を測定した。2.その結果、井戸型ミラーの最小磁場点がECR点に一致する場合には、プラズマ流障壁電位(電子流を遮る局所的電位くぼみ及びこれに後続してイオンを補足・反射すべく電位上昇)が定常状態では観測されなかった。3.しかし、ステップ状収束型ミラーの途中点がECR点に一致する場合には、局所ECR点が磁場曲線の良い領域に存在する場合のみ、定常的なプラズマ流障壁電位の形成が観測された。4.一方、プラズマ流をパルス的に導入することにより電位形成の時間発展を測定した。その結果、プラズマ流が局所ECR点に到達した直後には、前者の磁場配位においてもまた後者の磁場配位における悪い磁場曲率の場合にもプラズマ流障壁電位が過渡的に形成されることが明らかになった。5.そこで、収束型ミラーの磁場強度・分布を変え、局所ECR点を磁場曲率の良い領域から悪い領域へ徐々に移動させ、プラズマ中に発生している不安定波動の振舞いを購入備品のスペクトルアナライザーを用いて調べている。

以下の詳細な実験により、局所ECRによる不均一磁場配位中のプラズマ電位形成は、局所ECRによる選択的な電子の磁力線方向加速及び減速に対して、プラズマ準中性条件の要請によって自己無憧着にイオンを加速及び減速するような電位が形成されるという、極めて簡潔な機構で説明できることが判明した。1.まず、局所ECRによる電位形成の安定性とECR点における磁場曲率の良悪との関係を解明すべく実験を行った。すなわち、ステップ状収束型ミラー磁場中にパルスプラズマを流入し、磁力線方向電位分布の時間発展と低周波不安定波動の測定を行った結果、ECR点が悪い磁場曲率領域に存在する場合にはドリフト及びフルート型の不安定性が増強されるため、ECR点近傍に過渡的に形成されたプラズマ流障壁電位(局所電位くぼみと後続する電位上昇)が定常状態では崩壊するが、ECR点が良い磁場曲率領域に存在する場合にはそれらの不安定性が増強されずにプラズマ流障壁電位は定常状態においても維持されることが明らかになった。この成果は、井戸型ミラー磁場配位において最小磁場点がECR点に一致する場合には定常的なプラズマ流障壁電位形成が観測さなかった、という前年度の結果を矛盾なく説明することができた。2.次に、井戸型磁場配位において平均磁場強度を変えてECR点が二つ存在する場合の電位分布を測定した結果、2点間に電子温度の10倍以上相当の電位くぼみとそれに後続した第二共鳴点近傍のイオンフローエネルギー相当の電位上昇(イオンプラグ電位)が観測された。この大きな電位くぼみは、これまでのECR効果(磁力線方向のμ▽B電子減速)とはむしろ反対に第一共鳴点における磁力線方向のμ▽B電子加速に起因することが、より単純な発散型磁場中のECR共鳴実験によって明らかにされた。この場合には、大きな沿磁力線イオン加速を伴うことも実証された。
新しい水疱性類天疱瘡抗原の分子構造

水疱性類天疱瘡は、表皮基底膜成分に対する自己抗体が血清中に出現する水疱性疾患であるが、近年そのうちの二種の抗原の構造があきらかにされた。いっぽう我々は水疱性類天疱瘡のある患者血清中には、これらとは異なる450kD抗原を認識する抗体が存在することを発見したが(J.Dermatol.1992)、その分子の構造は明らかでない。今回我々は分子生物学的手法を用いてこの抗原決定基の分子構造を解明したので、報告する。まず450kD抗原を認識する患者血清を用いて、ヒト表皮細胞由来のcDNAライブラリー約200万個をスクリーニングし、この抗原をコードするクローンを1個単離した。この単離クローンが実際この抗原をコードすることは以下の3通りの証拠、即ち(1)単離クローンを大腸菌Y1089に感染させて発現させた融合蛋白質に患者血清がイムのブロットで反応したこと、(2)融合蛋白質に吸着される患者血清成分が450kD抗原と反応したこと。(3)融合蛋白質を家兎に免疫して作製したポリクローナル抗体が450kD抗原と反応したことで確認した。単離クローンの挿入部位を^<32>Pで標識し、この抗原を発現するHO-1-u-1(ヒト口腔底発生扁平上皮癌由来)細胞のmRNAを用いてノーザンハイブリダイゼイションを実施したところ、約12-14KbpのmRNAとハイブリダイズした。挿入部位は276bpのopen reading frameを有し、推定のアミノ酸配列からは現在まで報告のある物質とのホモロジーは認められず新物質と同定された。
細胞融合をもちいた分裂期染色体のサイズを決定する因子の解析

研究目的:染色体は細胞が分裂する際、複製されたゲノムDNAを2つの娘細胞に正確に分配するための重要な構造である。地球上の生物は様々なゲノムサイズをもち、ゲノムが束ねられた染色体のサイズも様々である。では、生物の染色体サイズは何によって決定されているのか?そこで異なるサイズの染色体を持つ細胞を「融合」させる。その結果作られる染色体のサイズを詳細に解析することによってこの問題を解明することにした。本研究のために、巨大な染色体をもつインドホエジカのDM細胞を用いる。このシカは、進化上で染色体が融合して巨大染色体を獲得したことが知られている。近縁の中国シカが46本の染色体を持つのに対し、インドホエジカは合計7本の巨大な染色体を持っている。この染色体の直径、長さは典型的なヒトの染色体の3倍以上に匹敵する。研究方法:(1)ヒトHeLa細胞と、シカDM細胞にCFP-H2B(ヒストン青色蛍光蛋白質)とmRFP-H2B(ヒストン赤色蛍光蛋白質)の遺伝子をそれぞれ導入し、安定発現細胞を単離した。(2)Thymidineで細胞周期のG1/S期にそれぞれ同調し、S期同調した細胞をPEG(ポリエチレングリコール)で融合させ、融合細胞(ヘテロカリオン)を作製した。(3)作製したヘテロカリオンを培養し、細胞分裂期に導入させた。次にノコダゾールで分裂期に停止させ、細胞を固定した。このサンプルを蛍光顕微鏡で3次元的に撮影し、画像解析によって3次元再構築を行った。そして、画像解析用ソフトを使用し、ヘテロカリオンが構築した染色体の太さの測定を行った。研究成果:本来のDM細胞の染色体の太さは約0.97μm、HeLa細胞の染色体は約0.70μmである。これに対して分裂期のヘテロカリオンが構築した染色体の太さはDM由来、HeLa由来の染色体ともに、約0.65μmであった。このことから、ヘテロカリオンが分裂期に入る際、DM由来の染色体はHeLa由来の染色体に合わせるように細くなることが明らかになった。よって、染色体のサイズは、ゲノム配列情報には依存せず、染色体構築に関連する蛋白質因子が関わっていることが考えられる。さらに、ヘテロカリオンの染色体サイズがHeLa細胞の染色体に近いことから、HeLa由来の蛋白質因子は、DM由来のものより「優生」であることが予想される。
葉緑体を中心とする電子伝達反応の制御機構

光合成は、ピコ秒レベルの早い光化学反応から、還元力とATP生成のための電子伝達、またそれらを利用したCO_2,N,S等の無機物の還元同化まで一貫した反応と捉らえる必要がある。さらにこれらの反応は環境から幾多のストレスを受け、適応しながら植物は生育して行く。このように植物の光合成には4つの調節機構がある。1.2つの光化学系レベルでの光エネルギー補集の調節2.循環的電子伝達系の制御3.ATP生成とNADPH生成のバランス4.還元型フェレドキシンの還元力が、NADP還元、無機物の還元同化、および酵活性の調節を行うフェレドキシン-チオレドキシン系にどのように配分されるか本年は国内のエキスパートの外、アリゾナ州立大学(テンピ)のブランケンシップ教授、ネブラスカ大学(リンカーン)のゴルベック教授およびカリフォルニア大学(バークレー)のブキャナン教授を加え、共同研究を組織する。星名は従前からポリエチレン・グルコールと熱処理を利用し、ホウレンソウ葉緑体から調製した光化学系I複合体を更に単純化し、反応中心の2つの大サブユニットの外、センターABを保持するタンパク質および12個のタンパク質から成り、わずかなアンテナ・クロロフィルを有する複合体を用いてP_<700>からセンターXへの、またセンターXからセンターABへの電子伝達を測定し、速度論的解析を行った。大岡は、緑色イオウ細菌の光化学系を調製することに成功し、その構成成分を解析すると共にそれらの電子伝達反応をアリゾナ州立大学(テンピ)のブランケンシップ教授との共同で研究した。電子伝達反応の解析からも構成成分の存在を明らかにすることができ、緑色イオウ細菌の光化学系は典型的なFe-Sタイプの光化学系であることを確認した。この系は、大量に調整することができれば、X線による結晶構造解析の可能性があり、非常に興味深い。佐伯は、細菌におけるフェレドキシンを中心とした電子伝達の競争に遺伝子の改変によりタンパク質に変化を導入したものがどのようなeffectsを及ぼすのかをフィラデルフィアのペンシルベニア大学大西智子氏およびダルダル氏の協力で検討した。さらに光合成細菌のフェレドキシンを大腸菌中で発現させ、N_2固定との間の電子伝達がどのように調節されるのかを検討するものである。同様にゴルベックは光化学系I反応中心複合体を構成する種々のサブユニット・タンパク質遺伝子を改変し、複合体自体のアッセンブリーと遺伝子改変の影響を調べた。多くのものは複合体のアッセンブリー自体を防げるようであるが、数種のものは非常に興味深い結果となっている。非光合成組織のplastidsを利用した電子伝達機構の調節の解析については和田、松原、ブキャナンが協力して研究し、ホウレンソウの根およびモヤシマメの幼植物を用いて、フェレドキシンとフェレドキシン-NADP還元酵素(FNR)を精製し、詳しい性質を調べた。モヤシマメの幼植物の葉緑体には通常非光合成組織でのみ発現しているroot型ののFNRが発現していることが明らかになり、その生理的性質から非光合成的に電子伝達を行い、Nの代謝に関係していることが示唆され、Plant Phyhsiologyに投稿することができた。すなわち、幼植物では暗所でも貯蔵されている糖を利用して、酸化的pentose phosphate pathwayから生成されたNADP-FNRを介してフェレドキシンを還元し、窒素の代謝を行っているようである。これはやがて光合成能力の増大と共に失われ、通常の葉緑体の機能となるらしい。また、トマト果実の熟成に伴う葉緑体からchromoplastへのplastid変換についても、順調に進行している。ブキャナンはフェレドキシン-チオレドキシン系を非光合成組織に拡大し、いろいろの実用的な利用法を検討した。ブランケンシップ氏およびゴルベック氏が同時に日本へ招聘できたことによって、Fe-Sタイプ光化学系反応中心に関する小集会を開催し、全国から約10名の関連研究者が集まり、討論した。電子伝達反応の解析からも構成成分の存在を明らかにすることができ、緑色イオウ細菌の光

化学系は典型的なFe-Sタイプの光化学系であることを確認した。この系は、大量に調整することができれば、X線による結晶構造解析の可能性があり、非常に興味深い。佐伯は、細菌におけるフェレドキシンを中心とした電子伝達の競争に遺伝子の改変によりタンパク質に変化を導入したものがどのようなeffectsを及ぼすのかをフィラデルフィアのペンシルベニア大学大西智子氏およびダルダル氏の協力で検討した。さらに光合成細菌のフェレドキシンを大腸菌中で発現させ、N_2固定との間の電子伝達がどのように調節されるのかを検討するものである。同様にゴルベックは光化学系I反応中心複合体を構成する種々のサブユニット・タンパク質遺伝子を改変し、複合体自体のアッセンブリーと遺伝子改変の影響を調べた。多くのものは複合体のアッセンブリー自体を防げるようであるが、数種のものは非常に興味深い結果となっている。非光合成組織のplastidsを利用した電子伝達機構の調節の解析については和田、松原、ブキャナンが協力して研究し、ホウレンソウの根およびモヤシマメの幼植物を用いて、フェレドキシンとフェレドキシン-NADP還元酵素(FNR)を精製し、詳しい性質を調べた。モヤシマメの幼植物の葉緑体には通常非光合成組織でのみ発現しているroot型ののFNRが発現していることが明らかになり、その生理的性質から非光合成的に電子伝達を行い、Nの代謝に関係していることが示唆され、Plant Phyhsiologyに投稿することができた。すなわち、幼植物では暗所でも貯蔵されている糖を利用して、酸化的pentose phosphate pathwayから生成されたNADP-FNRを介してフェレドキシンを還元し、窒素の代謝を行っているようである。これはやがて光合成能力の増大と共に失われ、通常の葉緑体の機能となるらしい。また、トマト果実の熟成に伴う葉緑体からchromoplastへのplastid変換についても、順調に進行している。ブキャナンはフェレドキシン-チオレドキシン系を非光合成組織に拡大し、いろいろの実用的な利用法を検討した。ブランケンシップ氏およびゴルベック氏が同時に日本へ招聘できたことによって、Fe-Sタイプ光化学系反応中心に関する小集会を開催し、全国から約10名の関連研究者が集まり、討論した。
リフティングを用いた保型表現の分類・構成についての研究

本研究では、宮脇リフトと呼ばれる保型形式を構成し、調べることを目的とする。保型形式とは豊富な対称性を持つ関数であり、一般に保型形式を構成することは難解な問題である。宮脇リフトとは、より高次元に定義される小さい保型形式を制限することによって得られる保型形式である。宮脇リフトの研究は最も低次元の時に池田氏により始められたが、本研究では高次元化を目指す。また、宮脇リフトにおける局所理論の改築も行う。局所理論における最も低次元の場合は申請者によって得られた。本研究では、それを高次元化し、その性質を調べる。
α,β-エポキシエステルの実践的触媒的不斉合成-ジルチアゼム、ポリオールへの展開

光学活性α,β-エポキシエステル類と同様に、光学活性α,β-エポキシアミド類はエポキシ環の位置選択的開環を行うことにより、有機合成化学的に極めて有用性の高いキラル合成素子である、α-ハイドロキシアミド類やβ-ハイドロキシアミド類へと容易に変換が可能である。これらの効率的合成法の確立を目指し、La-BINOL-Ph_3As=O錯体をもとにα,β-不飽和アミドの触媒的不斉エポキシ化反応の条件の検討を行ったところ、Sm-BINOL-Ph_3As=O錯体を用いた場合に極めて良好な収率、及び不斉収率にて目的物が得られることが分かった。5-10mol%の触媒を用いた場合、最高で99%収率、>99%eeにて対応するα,β-エポキシアミドが得られた。基質としてはβ-位にアルキル置換基を有するもの、及びβ-位にアリール置換基を有するもののいずれにおいても、またアミド部分に関しては2級アミド、3級アミドのいずれにおいても適用可能であることが分かった。β-位にアリール置換基を有するα,β-エポキシアミドは、Pd触媒存在下、位置選択的に開環し、様々な天然物生物活性化合物の構造単位であるβ-アリールα-ハイドロキシアミドを与える。β-アリールα-ハイドロキシアミド類の効率的合成法の開発にあたり、近年アトムエコノミー的な観点からも注目を集めているワンポットタンデム反応を用いる戦略を選択した。本プロセスを達成するため必要条件は、二段階目のPd触媒反応が一段階目のエポキシ化の条件下においても機能しうることである。そこでエポキシ化反応に必要な試薬類を添加剤として加えた場合のPd触媒によるα,β-エポキシアミドの開環反応の検討を行ったところ,添加剤無しの条件と比較してSm-BINOL-Ph_3P=O錯体およびその他の試薬を添加剤として用いた場合に副生成物の生成が抑制されることがわかりた。この特徴的な知見をもとに、α,β-不飽和アミドを原料としてエポキシ化、開環反応を連続的に行った結果、最終生成物として光学活性なβ-アリールα-ハイドロキシアミドが高収率にて得られた。さらに、光学的に純粋なα,β-エポキシアミドは、対応するα,β-エポキシエステルへと変換が可能であり、数工程の変換を行うことにより、合成化学的に極めて有用性の高いsyn-及びanti-3,5-ジヒドロキシエステルを光学的に純粋な化合物として得た。本方法を用いることで、1,3-ポリオール/α-ピロン構造を含む数種の天然物の触媒的不斉合成に成功した。
ナチズムとドイツ民俗学

研究成果のまとまった発表には、もう少し時間がかかりますが、大略、次のような知見を得、またそれをいくつかの解説に活用しました。(1)ドイツの民俗学がナチズムとの相乗という過誤のために、第2次大戦後は学問としての存続が危うくなり、それを克服して今日の隆盛を築いたことは一般に指摘されているところですが、これをめぐっても、評価の違いがみられます。(2)特に、ナチズム民俗学の本質をめぐる評価。ひとつは、ナチズムとの合流は、19世紀以来の民俗学の展開の必然的な結果であり、またそれはドイツにとどまらず、イギリスのフレイザーをも含めた汎ヨーロッパ的な世界観のひとつの帰結であるとの見解。もうひとつは、ナチズム民俗学は、体系学なものではなく、未熟な思念の寄せ集めで、異常な歴史的状況なかで、不自然な結合力がはたらいて形成されたという見解。(3)この見方の相違は、第二次大戦後の民俗学の再建における異なった潮流の成立とも重なってゆきます。(4)現代のドイツの民俗学の成立にあたって、ナチズム民俗学への反省が大きな原動力になったこと。特に、ナチ時代のドイツが現実には高度な工業国家であったにもかかわらず、農民存在にドイツ人の原像を見るというイデオロギーが支配的であったという現実と自己理解との乖離への反省から、工業社会、さらに現代の〈豊かな社会〉の解明という現代民俗学が発達し、またこれが現代の主流にもなっています。(5)ドイツの民俗研究が露呈した諸々の問題点は、日本の民俗学とも重なります。しかし日本では、学問史の総点検を迫られるほどの深刻な反省の契機がなかったところから、ドイツにおけるような方向転換がなされず、現代では両国の民俗学は著しく相違しています。研究成果のとりまとめは次年度以降におこないますので、以下では、今年度の研究の進捗について記します。ドイツ語圏の民俗研究にとって、ナチズム民俗学、ならびにそれへと逸脱するに至った専門学としての原理の脆弱性の克服は、戦後の学界の大課題であり、またそれが今日の展開を促したことは、申請にさいして言及しました。ドイツ民俗学界がそれに一応の終止符を打ったのは1970年の大会での宣言でしたが、その20周年を機に幾つかの企画がなされ、またその成果の多くが1991年に発表されました。本研究者は、そうした最近の情勢にも接する機会をもちました。そしてそこからも刺激を得ながら、今回の研究課題を、現代社会の動向をも射程に入れながら考察をおこなっています。たとえば、ドイツにおいて目下問題になっている外国人への敵視の風潮にたいして、民俗学者が関心をしめし、その因由の分析や、また民俗学者のかかわり方について議論がなされているのも、ナチズム民俗学の克服する過程での方法上の検討や、時事問題との取り組みの蓄積を背景にしています。それはまた外国人労働者とその家族、あるいは引き揚げや観光などの大規模な人口移動を民俗学の観点から把握する姿勢にもつながっています。これらについての部分的な紹介は、すでに今年度も、資料の翻訳やそれに付けた解説、あるいは新聞のコラムなどで試みました。特に、レ-オポルト・シュミット『オ-ストリア民俗学の歴史』(1951)は、ナチズムへの接近に陥ったドイツ民俗学の再検討を主たる課題として書かれた学史文献ですが、その翻訳(本文250頁)に、訳注(150頁)と解説(25頁)を付けるというかたちで、本研究から得た知見を活用しました。
サル初代培養神経細胞による変性疾患の研究

1.サル成体脳をとり出し、黒質部分、大脳皮質部分などを摘出し、パパインなどの分解酵素を用いて、細胞をバラバラにした。これらの細胞をポリ-L-リジンでコートしたウエルにまいて、CO_2インキュベーター中で培養した。分解酵素で遊離した細胞の生存率は10%以下、培養開始後3日間で、ほとんどの生細胞は死滅した。サル成体脳を用いて、現在の技術と摘出法で行う限り、ニューロンの培養は非常に困難であることが、確認された。2.次の可能性として、サル胎児脳を用いての実験が考えられたが、一般に日本のみならず、一定の週令のサル胎児脳を定期的に入手することは不可能と考えられていた。しかし、筑波霊長類実験センターで、多数のサルの飼育、繁殖が試みられ、最近、順調な繁殖が恒常化したとの情報を得たので、胎児脳の入手のための共同実験の申請を行った。3.昭和63年12月に、ようやく申請に対する許可が出、胎児脳の週令による、培養ニューロンの生存率の違いの検討と組織凍結法の是非の検討から着手した。4.胎生108日のサル(Czaum Ranup Length11.0cm)胎児から脳をとりだし、黒質部分、大脳皮質(前頭葉・後頭葉・側頭葉)・小脳などに分切し、パパインを用いて、細胞をバラバラにして培養した。細胞をバラバラにした時点で、細胞の生存率が1530%で、5日間の培養後、生きたニューロンはほとんど見られなくなった。5.より若い胎児脳が適当と考えられたので、胎生80日前後のサル胎児の使用と、DMSO液中での液体窒素による凍結法を検討中である。培養が成功すれば、パーキソン病原因物質の判定に使える。