hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
光による電力供給を利用した生体計測用光ファイバセンサに関する研究

本研究では光ファイバを介して光電変換によりエネルギーを供給するシステムを試作した。システムの構成は,光源,光電変換素子,信号変換回路,データ伝送回路よりなる。本研究の特色はシリコーン太陽電池を光電変換素子として用いたことにあり,太陽電池が800nm以上で高い変換効率をもつことから,高出力の半導体レーザーを光源として用いた。波長813nmの半導体レーザ光を光ファイバを介して太陽電池に照射して太陽電池の開放電圧,短絡電流を測定し,供給電力を求めた。センサ駆動回路の供給電圧を太陽電池8個で4.5Vとすると短絡電流は7mAで,6個で供給電圧を3.3Vとすると短絡電流は25mAであった。太陽電池に個数が増すに比例して開放電圧は増大するが,短絡電流は個数が増大するにつれて指数関数的に減少した。センサ駆動回路で得られた信号は,電圧一周波数変換して,LEDを発光させ,光ファイバを介して伝送した。太陽電池8個を用いて光電変換して得られた電力で温度測定回路を駆動させた。IC温度センサの出力を,周波数変換して,データ伝送した。使用した光ファイバの距離は2mとした。消費電力は10mW以下であった。測定値は温度範囲0100°Cであり,データ伝送時の誤差はなかった。供給電力を増大させるためには,太陽電池の照射密度を大きくすることがあげられる。エネルギー伝送に用いた光ファイバは多成分ガラスファイバで開口数が0.2であっため,太陽電池8個を用いた場合,全てに均一に光が照射されなかった。効率をあげるためには,光ファイバ先端の形状を開口数を大きくするように作製し,また太陽電池の配列も工夫する必要がある。本年度は,光による電力供給のための光源ならびに光電変換素子の選択・構造に関する研究を行った。1.光によるエネルギ-供給のための光源として1W高出力半導体レ-ザ(波長813nm)を用いた。光ファイバ(グレ-デッド・インデックスファイバE167,日立電機,コア径230μm,開口数0.3,長さ2m)によりレ-ザ光を光電変換素子部に導光した。光ファイバ先端での光出力は最大800mwであった。光ファイバと半導体レ-ザとの接続は,市販のFCコネクタを使用した。2.光電変換素子として,シリコン単結晶の太陽電池(S4V United Detector Technology,大きさ4×2mm)を8個直列に接続し,アクリルパイプ内に光ファイバ先端をとりまくように配置した。最大供給電力は38mWであった。しかし,光出力を最大にすると熱の影響が大きく,太陽電池の効率が時間とともに減少するため,熱の影響を受けず安定した供給電力が得られる光出力を選択した結果,解放電圧4.3V,ショ-ト電流6.7mAが得られた。この値は,われわれが当初予測した値より少ないが簡単な回路を動作させるのには十分であると思われる。3.今後の課題(1)太陽電池の配列構造を再検討する。すなわち今回使用した光ファイバの開口数は0.3と小さいので光が広く拡散しないため,8個すべての太陽電池表面を均一に照射することができず,小電流しか得られなかった。すべての太陽電池を均一に照射できる構造に改めたい。(2)(1)と平行して現状の供給電力を用いて信号処理部の設計を行いたい。(3)光電変換素子部の形状に最適な光ファイバコネクタを設計する。平成3年度は,光電変換素子の変換効率の改良ならびにセンサ,センサ駆動回路,計測デ-タ伝送系に関する研究を行った。1.使用した光ファイバの開口数は0.2とファイバからの光の拡がりが狭いため光電変換素子の配列を光軸にほぼ平行に8個設置した。

位置を微調整することによって,解放電圧4.5V,ショ-ト電流7mAを得た。光電変換素子として太陽電池を用いたが,太陽電池の変換効率を高めるためには単位面積当りに照射する光密度が高いことが必要である。しかし,センサを駆動するためには最小4.5Vの電圧が供給されなければならない。そのため少なくとも8個の太陽電池を直列に配置しなければならなかった。8個の素子にほぼ光が均一に照射されなければ最低供給電圧を維持できないがこれは効率を高める条件に矛盾する。そのため太陽電池への変換効率は必ずしも満足するものが得られず今後も検討を重ねていくつもりである。2.駆動するセンサとして温度測定センサを選択した。IC温度センサ(AD590L)を利用しその出力を増幅した後,電圧ー周波数変換することによって温度に対応した周波数を得た。周波数変換したデジタル信号でLEDを駆動し,別の光ファイバ(ステップインデックスファイバ)で計測デ-タを伝送した。センサ駆動に必要な電力は10mW以下であった。3.伝送された信号はホトダイオ-ドを介して処理し,得られた精度は0から100°Cの範囲で±2°Cであった。前年度までに開発した光電交換素子および駆動回路の改良を行った。それを用いて実験にセンサを使用した計測を試みた。センサ回路の駆動電圧を3Vとし、太陽電池の配列を工夫した結果、開放電圧3.3V、短絡電流25mAが得られた。供給電力を開放電圧と短絡電流の積の80%とすると、66mWとなり、低電圧駆動の集積回路素子から構成されるセンサ回路では十分な電力を与えることができる。さらに効率を高めるためには、光ファイバ先端の形状を工夫し、開口数を大きくし、太陽電池に均等に照射されるようにしなければならない。温度測定を試み、前年度試作した回路のコネクター部の改良を行った。データ伝送の光出力は増大したが、測定結果は、前年度と同様であり、0100°Cの測定で±2°Cであった。V-F変換は、精度良く行われた。温度の精度を高めるためには、センサ部(IC温度センサ)の回路の改良を行わなければならない。データ伝送でプラスチック光ファイバを用いたが伝送線路が短かったため伝送誤差は生じなかった。生体の温度測定の試みとして経皮エネルギー伝送を行った。光源としてハロゲン光(150W)を用いた実験では、皮下2mmで開放電圧3.3V短絡電流3mA程度の電流が得られることが示された。減衰は大きかったが植え込み装置の駆動電源として使用できる可能性が示唆された。
高ポリフェノール食品の伝承に由来する新たな機能の科学的検証

本研究で、ハスの葉茶の摂取はヒトの身体温に対して温熱作用を示すことが確認できた。さらに、温熱作用が現れた部位や程度は、室温の違いにより差が認められた。すなわち、被験者が寒冷ストレスを受けている状況では、指先、手首、足首といった抹消に温熱効果が認められ、寒冷ストレスのない状況では上半身を温めるということが示された。また、ハスの葉茶特有の苦みの影響を考慮した凍結乾燥粉末入りカプセル(カプセル)を用いた同様の実験では、ハスの葉茶とカプセルで、温熱作用を示す部位、効果の認められる時間が異なるという結果を得た。この点については、今後の検討課題である。一方、われわれは、このハスの葉茶の温熱効果にはポリフェノールが関与しているのではないかと推測した。そこでハスの葉茶(ハスの葉茶の熱水抽出物)の構成ポリフェノールを明らかにするために、まず、植物に含まれている既知ポリフェノール24種について、フォトダイオード検出器を用いたHPLC分析を行い、クロマトグラム上の溶出時間、吸収スペクトルなどの情報を整理した。次に、ハスの葉茶の熱水抽出物について同様のHPLC分析を行い、作成したデータベースと比較した。HPLCクロマトグラム上では2つのピークが顕著に認められ、この2成分が主たる成分であることが明らかとなった。標準ポリフェノールのデータと比較したところ、一つはgallic acid、もう一つはluteolinと類似した吸収スペクトルを示していたが、同定するには至らなかった。今後、この成分を明らかにすることによって、成分レベルでの温熱効果を明らかにできるのではないかと考える。【柿渋、あるいは柿渋タンニンの温冷効果と自律神経系への影響】柿の摂取は末梢の体表温をゆっくりと低下させる。この柿の冷作用の本体を明らかにするため、柿渋、あるいは柿渋タンニンの温冷効果と自律神経系への影響を検討した。被験者は1822歳の健康な女子学生10名とした。実験は、温度・湿度のコントロールされた環境下で行い、試験食(柿渋、渋柿搾汁液)あるいは対照食を摂取後、額、首、足首の体表温、鼓膜温、手首の血流を連続的に測定した。柿は特に末梢の体表温を有意に低下させるが、渋柿搾汁液は末梢の体表温を低下させなかった。また、柿渋も末梢の足首の体表温を低下させることはなく、むしろ手首の体表温を上昇させる傾向を示した。柿の体表温低下作用は柿渋タンニンによるものではないと推察された。【柿、柿渋の酔い醒まし効果の検証】ヒトを対象として、柿、柿渋を摂取してから飲酒した後、呼気から血中アルコール濃度を携帯型アルコールチェッカーにより測定した。その結果、柿を食べた時と対照(梨)を食べた時、柿渋を飲んだ時と対照(水)を飲んだ時、また柿渋粉末を摂取した時と対照を摂取した時も、飲酒後の血中アルコール濃度にほとんど差が見られなかった。したがって、今回の実験では、柿や柿渋の酔い醒まし効果を明らかにすることはできなかった。【新たな高ポリフェノール食資源の探索】身近に自生している可食野草(26種)のポリフェノール含量を測定した。野菜(10種)のポリフェノール量と比較してみたところ、野菜よりもポリフェノール含量の高いものが多く存在した。中でも、古くから食用としているフキ、ヨモギ、イタドリが高ポリフェノール含有植物であることを確認した。【「ハスの葉茶」の温冷効果の検証】健康茶として一般に飲用されている「ハスの葉茶」が高ポリフェノール含有食品であることを確認した。そこで、ヒトを対象に「ハスの葉茶」の温冷効果の有無を明らかにするための検証実験を行った。被験者が恒温室内で試験食(ハスの葉茶)あるいは対照食(水)を摂取後、被験者の額、首、足首、手首、指先の体表温、手首の血流量、鼓膜温、さらに心拍変動を連続的に測定した。その結果、「ハスの葉茶」の摂取によるヒトの身体温への温熱作用を確認することができた。しかし、恒温室の温度の違い(24°Cと22°C)により、その温熱作用が現れる部位や程度に差がみられ、寒冷ストレスの影響が示唆される結果となった。一方、「ハスの葉茶」摂取が自律神経活動に及ぼす影響について確認することはできなかった。【ココアの温熱効果の検証】ココアはカカオポリフェノールを含んだ高ポリフェノール食品であり、経験的に身体を温める飲物として好まれている。そこで、ヒトを対象にココアの温熱効果の有無を明らかにするための検証実験を行った。上述と同じ方法で行った体表温の測定結果から、ココア摂取は手の指先および手首を温めており、末梢部位への温熱作用が認められた。さらに、一過性ではない持続的な効果である可能性が示唆された。しかし、血流量および自律神経への影響については、明確な結果を得ることができなかった。今後更なる実験が必要であると考える。【高ポリフェノール食品に含まれるポリフェノールの特定】高含有ポリフェノール食品の構成ポリフェノールを明らかにするために、一部既知ポリフェノールのHPLCクロマトグラムフィーを行った。

すなわち、被験者が寒冷ストレスを受けている状況では、指先、手首、足首といった抹消に温熱効果が認められ、寒冷ストレスのない状況では上半身を温めるということが示された。また、ハスの葉茶特有の苦みの影響を考慮した凍結乾燥粉末入りカプセル(カプセル)を用いた同様の実験では、ハスの葉茶とカプセルで、温熱作用を示す部位、効果の認められる時間が異なるという結果を得た。この点については、今後の検討課題である。一方、われわれは、このハスの葉茶の温熱効果にはポリフェノールが関与しているのではないかと推測した。そこでハスの葉茶(ハスの葉茶の熱水抽出物)の構成ポリフェノールを明らかにするために、まず、植物に含まれている既知ポリフェノール24種について、フォトダイオード検出器を用いたHPLC分析を行い、クロマトグラム上の溶出時間、吸収スペクトルなどの情報を整理した。次に、ハスの葉茶の熱水抽出物について同様のHPLC分析を行い、作成したデータベースと比較した。HPLCクロマトグラム上では2つのピークが顕著に認められ、この2成分が主たる成分であることが明らかとなった。標準ポリフェノールのデータと比較したところ、一つはgallic acid、もう一つはluteolinと類似した吸収スペクトルを示していたが、同定するには至らなかった。今後、この成分を明らかにすることによって、成分レベルでの温熱効果を明らかにできるのではないかと考える。
ゲノム情報に基づく新規遊離脂肪酸受容体群のリガンド同定と機能解析

当初計画した以下の研究項目を実施した。(1)遊離脂肪酸受容体ファミリーのクローニングゲノム情報よりオーファンG蛋白質共役型受容体GPR120を抽出、クローニングし、更にその天然リガンドが遊離脂肪酸であることを発見した。本研究では、GPR120を含む近年見出された遊離脂肪酸を天然リガンドとする一群の受容体群(GPR40,GPR41,GPR43)について、ゲノムデータベース(ヒト、マウス、ラット)を最大限活用しIn Silicoクローニングを行った。それぞれの受容体に特異的な抗体の作成に成功した。また、各受容体の詳細な組織発現解析情報を収集した。更に、高効率の細胞内情報伝達解析プラットフォームを用いて各種化合物をスクリーニングし、一部の受容体に特異的な天然物を見出した。更に、各受容体のマウスゲノムをクローニングし、その構造を決定するとともに、遺伝子改変動物(特にノックアウトマウス)作出を試み、一部の受容体でその作出に成功した。(3)GPR120機能解析GPR120に関しては天然発現細胞株STC-1細胞を用いてin vitro機能解析を行い、その受容体機構がインスリン分泌調節の重要な因子であるインクレチンホルモンGLP-1分泌機構に極めて重要な機能を有する事を明らかにした。また、その細胞内情報伝達機構にはカルシウムシグナル伝達機構とERKリン酸化カスケードが関与し、特に腸管内分泌細胞においてはこのGPR120受容体情報伝達が細胞死阻害機構に働いていることを明かとした。まとめ全ての遊離脂肪酸受容体に関して、更なる生理機能解析研究のための各種リソース(抗体、特異的化合物プローブ、遺伝子改変動物等)の整備が完了した。今後はその基盤に基づく更なるこれら遊離脂肪酸受容体群の生理、病態における役割の解明と創薬への展開が期待できる。遊離脂肪酸を共通リガンドとする受容体群(Free Fatty Acid Receptor : FFAR)に関し、各種生物ゲノム情報やマイクロアレイ遺伝子発現等の各種国際公共データベースを用い、遺伝子系統樹解析、ESTアセンブリによる遺伝子クローニング、ゲノム構造情報、更に組織分布、病態に於ける発現変動等のゲノム機能情報をバイオインフォマティクスにより収集するとともに、この情報に基づきヒト、マウス、ラット遺伝子をクローニング、安定発現細胞の作製、更に安定発現細胞を用いた高感度リガンド検出システムによる天然リガンドの探索、同定、更に、天然発現細胞株や遺伝子改変動物作出による機能解析を行いFFAR群の生理、病態に於ける役割を明らかとすることを目的としている。今年の研究実績としては1.FFARの中でもGPR40,GPR41,GPR43,GPR120をクローニングし、特にGPR120はラット、マウス、ヒトでそれぞれクローニングを進めるとともに、その天然リガンドの薬理特性を決めた。また、組織分布情報を各受容体に関して収集した。2.GPR120の生体機能として、培養腸管内分泌細胞を用いた機能解析よりGLP-1分泌のセンサーとして働くことを明らかとした。3.遺伝子改変動物(ノックアウトマウス)作出のためのゲノムクローニング、ベクター構築を終了し、組み換えES細胞を取得した。4.今後の詳細な機能解析のため、各受容体の抗体作成を行い、一部の受容体で特異的抗体の作成に成功した。申請者らはゲノム情報よりオーファンG蛋白質共役型受容体GPR120を抽出、クローニングし、更にその天然リガンドが遊離脂肪酸であることを近年発見した。本研究では、GPR120を含む近年見出された遊離脂肪酸を天然リガンドとする一群の受容体群(GPR40,GPR41,GPR43)について、生理機能の包括的理解を目的として、ゲノムデータベース(ヒト、マウス、ラット)を最大限活用しIn Silicoクローニングを行い、特異的抗体作成、RT-PCRにより詳細な組織発現解析情報を収集した。

また、高効率の細胞内情報伝達解析プラットフォームを用いて各種化合物をスクリーニングし、一部の受容体に特異的な天然物を見出した。更に、各受容体のマウスゲノムをクローニングし、その構造を決定するとともに、遺伝子改変動物(特にノックアウトマウス)作出を試み、一部の受容体でその作出に成功した。これら2年間の一連の研究成果として、GPR120に関しては天然発現細胞株STC-1細胞を用いてin vitro機能解析を行い、その受容体機構がインスリン分泌調節の重要な因子であるインクレチンホルモンGLP-1分泌機構に極めて重要な機能を有する事を明らかにした。また、その細胞内情報伝達機構にはカルシウムシグナル伝達機構とERKリン酸化カスケードが関与し、特に腸管内分泌細胞においてはこのGPR120受容体情報伝達が細胞死阻害機構に働いていることを明かとした。また、他の遊離脂肪酸受容体に関しても、更なる研究のための各種リソース(抗体、特異的化合物プローブ、遺伝子改変動物等)の整備が完了した。今後はその基盤に基づく更なるこれら遊離脂肪酸受容体群の生理、病態における役割とまた創薬への展開が期待できる。
高圧技術を利用した有機強誘電性薄膜の異常光電性の高能率化

1.異常光起電力効果現象における短絡電流・開放端電圧の温度特性強誘電性高分子(VDF/TrFE)共重合体(VDF分率54および65mo1%;50μm厚)を対象に,光起電力電流・電圧の温度特性を温度可変型測定セルを用い真空中で調べた.約1mW/cm^2の光を薄膜試料に照射すると,直後の焦電効果による電流ピークの他に照射期間中一定の定常電流が観測された.その電流値の温度特性は,本共重合体試料の強誘電相から常誘電相への転移温度(Curie点;約65°C)近傍で急激に減少する特徴を示した.更に,光起電力電流値が顕著な時間依存性を示すこと,開放端電圧は57VとBand Gap値を大きく超える値が観測された.以上の結果から,ポーリング処理した(VDF/TrFE)共重合体の光照射時の電流・電圧は異常光起電力効果に由来するものと結論される.2.(VDF/TrFE)共重合体の強誘電的構造に対する圧力効果VDF分率の異なる(VDF/TrFE)共重合体(54/46, 65/35, 73/27)を用い, X線回折および誘電率測定を400MPaまでの高圧下で行ない,高圧誘起結晶構造変化特に強誘電相での結晶構造の完全性の向上が確認され,光電変換の高効率化の一手法になりうることが示唆された.以上のように,強誘電性高分子(VDF/TrFE)共重合体において,試料内部に存在する内部電界に起因した光起電力(異常光起電力効果)が発生すること, 57VとBand Gap値を大きく超える開放端電圧値を初めて観測した.これら光起電力電流・電圧値は顕著な時間依存性を示し,イオン性のキャリアの寄与を示唆する.更に,圧力の印加により本共重合体の強誘電相での結晶構造はより完全になり,また高分子物質の光吸収スペクトルはRed Shiftし, Band Gap値も低下する事も分かり,高圧技術の応用による光電効率の向上が期待される.1.異常光起電力効果現象における短絡電流・開放端電圧の温度特性強誘電性高分子(VDF/TrFE)共重合体(VDF分率54および65mo1%;50μm厚)を対象に,光起電力電流・電圧の温度特性を温度可変型測定セルを用い真空中で調べた.約1mW/cm^2の光を薄膜試料に照射すると,直後の焦電効果による電流ピークの他に照射期間中一定の定常電流が観測された.その電流値の温度特性は,本共重合体試料の強誘電相から常誘電相への転移温度(Curie点;約65°C)近傍で急激に減少する特徴を示した.更に,光起電力電流値が顕著な時間依存性を示すこと,開放端電圧は57VとBand Gap値を大きく超える値が観測された.以上の結果から,ポーリング処理した(VDF/TrFE)共重合体の光照射時の電流・電圧は異常光起電力効果に由来するものと結論される.2.(VDF/TrFE)共重合体の強誘電的構造に対する圧力効果VDF分率の異なる(VDF/TrFE)共重合体(54/46, 65/35, 73/27)を用い, X線回折および誘電率測定を400MPaまでの高圧下で行ない,高圧誘起結晶構造変化特に強誘電相での結晶構造の完全性の向上が確認され,光電変換の高効率化の一手法になりうることが示唆された.以上のように,強誘電性高分子(VDF/TrFE)共重合体において,試料内部に存在する内部電界に起因した光起電力(異常光起電力効果)が発生すること, 57VとBand Gap値を大きく超える開放端電圧値を初めて観測した.これら光起電力電流・電圧値は顕著な時間依存性を示し,イオン性のキャリアの寄与を示唆する.更に,圧力の印加により本共重合体の強誘電相での結晶構造はより完全になり,また高分子物質の光吸収スペクトルはRed Shiftし, Band Gap値も低下する事も分かり,高圧技術の応用による光電効率の向上が期待される.
四重極モーメントに基づくメタ磁性転移の研究

LaCu_2を除くRCu_2が示すCeCu_2型の斜方晶のac面内に容易軸がある物質は、斜方晶の結晶場効果によりa軸とc軸がそれぞれ磁化の容易軸と困難軸に分かれている。この結晶構造と磁気異方性を持ったDyCu_2で、強磁場中でメタ磁性を伴った磁化困難軸と容易軸の入れ替わりが起こる。本研究ではまず、単結晶DyCu_2を育成し、強磁場磁化の温度変化の実験を行なったところ、反強磁性転移温度以上ではPrCu_2と同様にメタ磁性を起こす磁場が直線的に上昇し170Kで25Tを示すことを明らかにした。反強磁性状態ではメタ磁性転移磁場は高くなる。この結果、DyCu_2のメタ磁性はPrCu_2と同種のメタ磁性であると考えられるので、PrCu_2と同様に四重極子間の相互作用を入れた解析を行ない、磁場誘起の四重極子の回転でこのメタ磁性が説明できる事を明らかにした。これらの結果を1996年夏、スイスのチューリッヒで行われたの強相関電子系の国際シンポジウムで発表した。また、同じような振る舞いが同様な磁気異方性を持ったRCu_2でも観測されるであろうとの予想をたて、TbCu_2およびCeCu_2の単結晶育成と強磁場磁化測定をおこなった。期待したとおり、磁気異方性の転換をともなった同種のメタ磁性をこれらの物質で初めて発見した。TbCu_2ではDyCu_2同様の磁気相図が得られている。このメタ磁性に必要なエネルギーを磁化のヒステリシスループより求めると、常磁性領域では不思議なことに希土類イオンや温度によらずイオン一個当たりほぼ10Kと同じ値になる。この事は、希土類イオンより結晶構造がこのメタ磁性に大きく寄与している事を強く示唆している。
前5世紀におけるギリシア・ペルシア関係

本研究では、ペルシア戦争後のギリシア世界とペルシア世界との関係を再検討することを試みた。とりわけ、50年以上もペルシアの支配下にあった小アジア沿岸部のポリスが、対ペルシア抗戦同盟たるデロス同盟といかに向き合ったかについて考察し、小アジア沿岸部においては、デロス同盟加盟に消極的な態度が顕著であり、加盟にいたるまでにかなりの時間を要したことを明らかにした。具体的には、「ギリシア世界の展開と東方世界」『古代地中海世界の統一と変容』において、ギリシア世界がペルシア戦争前後を問わず、アケメネス朝ペルシアと深い関係を持ち政治的社会的文化的に強い影響を受けていたことを論じ、ついで'Athenian Empire and Persia:Attitudes of the Greeks in Asia Minor to Athens and Persia in the First Years of the Delian League'(口頭報告)において、デロス同盟加盟をめぐる小アジア沿岸部のポリスの動向を具体的に探った。ペルシアとの経済関係が加盟について消極的にさせたという見解を示すとともに、盟主国アテナイがこうした小アジア沿岸部のポリスの態度に嫌気がさし、組織的にも精神的にもアテナイ中心の同盟へと同盟の性格を変質させていったことを指摘した。論文公表するには、キモンの同盟政策についての分析、とりわけデロス同盟とテセウスとの関係についての分析がもう少し必要である。「テミストクレスの亡命」においては、彼のペルシア亡命の過程を追い、ギリシア人エリートとペルシアとの間に直接的間接的に緊密な人間関係が存在していたことを示した。最後に、本研究をとおして、トゥキュディデス『戦史』においても史家の「アテナイ中心的な見方」による事実歪曲のあることが確認された。これについては、新たなテーマで取り組むべきであろう。アケメネス朝ペルシアとギリシア世界とはとかく対比的に、また敵対する関係として考えられてきた.しかしながら、両者を対比的にとらえるギリシア人の政治的プロパガンダとは裏腹に、両者は政治的関係においても社会・文化面においても豊かな関係を結んでいた。ペルシア戦争においてペルシアに抗戦し、戦後は対ペルシア同盟たるデロス同盟の盟主となったアテナイにおいて、まさに戦勝者の威厳とギリシア世界のリーダーとしての威厳を演出するために「ペルシア風」が流行したことは、その端的なあらわれである。アケメネス朝の支配領域と接する小アジア沿岸部のギリシア世界においては、両者の関係はさらに個別のレベルにまで及んでいた。この地域のギリシア人に貢租の支払いを求めていたアテナイとアケメネス朝の権力の狭間にあって、当該地域のギリシア人の対応は複雑である。当該地域のポリスの政治エリートらは、政治主導権をめぐる争いにしばしば両大国の介入を許し、互いに「親アテナイ派」「親ペルシア派」というレッテルを用いてライバルを中傷し、国内に内乱をもたらした。内乱の収拾如何によって当該ポリスはデロス同盟に所属(復帰)し、あるいは、デロス同盟から離脱したのである。このような状況は、従来、デロス同盟におけるアテナイの支配に対する反感から生じたものと解釈されてきた。しかし、ギリシア世界とアケメネス朝との関係を考慮に入れるならば、それはもともとあった状況としてとらえるべきである。このように考えることで、デロス同盟結成後、最初の20年間に起こった反乱や内乱について、いたずらに特殊事情としてアテナイの同盟支配についての考察の対象から外したり、エリュトライ決議(ML40)のように450年代末に年代を置き換えたりする必要がなくなる。なお、このエリュトライ決議の決議年代に関する論文についてはまもなく投稿する予定である。本年度は、デロス同盟初期のギリシア・ペルシア関係に焦点をあてた。とくに長らくアケメネス朝の支配下におかれていた小アジア沿岸部のギリシア諸市が、ペルシア軍のギリシア本土からの撤退とデロス同盟の結成によって、対ペルシア抗戦同盟たるデロス同盟とアケメネス朝に対してどのような態度をとったかについての考察に重点を置いた。その結果、以下の点を指摘した。

1.小アジア沿岸部において、島嶼部と本土において態度に大きな差が見られること、2.本土においては、一般にデロス同盟の加盟に積極的な態度が見られないこと、3.その背景にアケメネス朝との長期にわたる政治的・社会的・経済的諸関係が成立していたこと。さらに、こうした小アジア本土沿岸部の諸市の状況に対して、盟主国アテナイが同志として、またイオニア人の祖として加盟をすすめるよりも、むしろ彼らと距離をおくことで同盟を発展させてきたことを指摘した。最後の点に関しては、もう少しアテナイ人、とくに当時指導的立場にあったキモンの持っていたイオニア人についてのイメージについて考察を深める必要がある。また、この時代のギリシア世界とアケメネス朝との人的関係の実態を探るべく、テミストクレスのペルシア亡命の背景を考察した。ここから、両社会の支配者層の間に密な関係が存在していたこと、とくに地理的に接する小アジア本土においてそれが顕著に見られることを指摘した。このような人的関係がデロス同盟への関わり方にどのような影響を与えたかについては、今後の課題でもある。
日本人の強直性脊椎炎と慢性関節リウマチ患者血清中の抗細菌抗体

活動期の強直性脊椎炎(以下AS)患者は抗Klebsiella抗体を、慢性関節リウマチ(以下RA)の患者は抗Proteus抗体を持っていることが欧米で報告されている。本研究では日本人ASおよびRA患者血清を対象として3種の細菌(K. pneumoniae, P. mirabilis, E. coli)に対するIgG, IgA, IgMクラス抗体と3種の合成ペプチド(HLA-B27, pullulanase-D, scrambled)に対する抗体を調べた。活動期AS患者は抗Klebsiella IgA抗体が有意に高値を示した。IgG, IgM抗体の上昇はなかった。非活動期AS患者にはこの現象は見られなかった。活動期RA患者ではIgGクラスの抗Proteus抗体が有意に高値であった。AS患者、RA患者、健常人対照群ともにE. coliに対する抗体は上昇していなかった。AS患者は活動期に関係なくHLA-B27合成ペプチドに対する自己抗体を持っていた。また活動期AS患者はHLA-B27と交差反応をもつpullulanase-D合成ペプチドに対する自己抗体を持っていた。以上の結果は日本人AS患者、RA患者も欧米と同じくそれぞれK. pneumoniaeおよびP. mirabilisに対する抗体を持つことを示した。このことはこれら細菌がASおよびRAの病因に関連する可能性を示すものと考えられる。本研究では日本人ASおよびRA患者血清を対象として3種の細菌(K.pneumoniae,P.mirabilis,E.coli)に対するIgG,IgA,IgMクラス抗体と3種の合成ペプチド(HLA-B27,pullulanase-D,scrambled)に対する抗体を調べた。IgG,IgM抗体の上昇はなかった。活動期RA患者でもIgGクラスの抗Proteus抗体が有意に高値であった。AS患者、RA患者、健常人対照群ともにE.coliに対する抗体は上昇していなかった。以上の結果は日本人AS患者、RA患者も欧米と同じくそれぞれK.pneumoniaeおよびP.mirabilisに対する抗体を持つことを示した。
抗認知症活性が期待されるカンキツ由来ポリメトキシフラボンの分布と生合成

申請者の研究室では文部科学省の遺伝資源保存事業によりミカン科22属、約300種類の野生種及び栽培種を保有し国内最大規模である。そこで、抗認知症活性が期待されるカンキツ由来ポリメトキシフラボンの分布や蓄積、生合成経路の解明を目指す。現在認知症の効果的な治療法・治療薬はないため製薬企業が開発に多額の資金を投資しているが、ポリメトキシフラボン(PMF)の活性が注目されている。PMFの蓄積は一部の植物に限られており、それがカンキツ類である。申請者側の豊富なミカン亜科植物を対象としてPMFの分布や生合成を明らかにすれば、将来的に世界中の人たちの健康増進に大いに寄与することができる。
ヒト神経系におけるガングリオシド分布様式

ウシ脳ガングリオシド,各種合成ガングリオシド,Campylobacter jejuniリポオリゴ糖感作によるモノクローナル抗ガングリオシド抗体作成を試みた.アジュバンドを加え調整したウシ脳ガングリオシドや各種合成ガングリオシド,Guillain-Barre症候群患者から分離されたC.jejuniリポオリゴ糖を,1週間毎にGD3合成酵素ノックアウトマウスあるいは,GM2/GD2合成酵素ノックアウトマウスに繰り返し感作した.経時的に採血し,ELISAを用いて抗ガングリオシド抗体を測定し,抗体の上昇が極期に達した時点で,マウスの脾臓を摘出した.ポリエチレングリコール法を用いて脾細胞とミエローマ細胞との融合細胞を作成し,細胞を培養した.IgG抗GM1抗体を始めとするIgG抗GQ1b抗体,IgG抗GD1b抗体など,38種類の各種モノクローナル抗ガングリオシド抗体産生クローンを樹立した.得られたクローンを培養し十分量のモノクローナル抗体を得た.得られた免疫グロブリン可変部領域のアミノ酸配列をジデオキシ法でシークエンシングし,抗体特性を検討した.神経組織における各種ガングリオシドの発現パターンを検討し,組織,細胞レベルでの局在を明らかにするために,免疫組織化学的に一連のモノクローナル抗ガングリオシド抗体を反応させた.ラットの小脳脊髄神経,末梢神経を摘出し,固定後神経組織の薄層切片を作成し,モノクローナル抗GD1b抗体を用いてラット後根神経節にGD1bが局在することを確認し,固有感覚に関与するパルブアルブミンと共に局在することを明らかにした.その成果について、平成16年9月の国際神経免疫学会で口演した.さらに,筆頭著者としてJournal of Neuroimmunology投稿へ向けて準備中であり,ほぼ完成した.ウシ脳ガングリオシド,各種合成ガングリオシド,Campylobacter jejuniリポ多糖感作によるモノクローナル抗ガングリオシド抗体作成を試みた.アジュバンドを加え調整したウシ脳ガングリオシドや各種合成ガングリオシド,Guillain-Barre症候群患者から分離されたC.jejuniリポ多糖を,1週間毎にGD3合成酵素ノックアウトマウスあるいは,GM2/GD2合成酵素ノックアウトマウスに繰り返し感作した.経時的に採血し,enzyme-linked immunosorbent assayを用いて抗ガングリオシド抗体を測定し,抗体の上昇が極期に達した時点で,マウスの脾臓を摘出した.ポリエチレングリコール法を用いて脾細胞とミエローマ細胞との融合細胞を作成し,細胞を培養した.IgG抗GM1抗体を始めとするIgG抗GQ1b抗体,IgG抗GD1b抗体など,38種類の各種モノクローナル抗ガングリオシド抗体産生クローンを樹立した.得られたクローンを培養し十分量のモノクローナル抗体を得た.神経組織における各種ガングリオシドの発現パターンを検討し,組織,細胞レベルでの局在を明らかにするために,免疫組織化学的に一連のモノクローナル抗ガングリオシド抗体を反応させた.ラットの小脳,脊髄神経,末梢神経を掃出し,固定後神経組織の薄層切片を作成し,モノクローナル抗GD1bも抗体を用いてラット後根神経節にGD1bが局在することを確認し,固有感覚に関与するパルプアルブミンと共に局在することを明らかにした.ウシ脳ガングリオシド,各種合成ガングリオシド,Campylobacter jejuniリポオリゴ糖感作によるモノクローナル抗ガングリオシド抗体作成を試みた.アジュバンドを加え調整したウシ脳ガングリオシドや各種合成ガングリオシド,Guillain-Barre症候群患者から分離されたC.jejuniリポオリゴ糖を,1週間毎にGD3合成酵素ノックアウトマウスあるいは,GM2/GD2合成酵素ノックアウトマウスに繰り返し感作した.経時的に採血し,ELISAを用いて抗ガングリオシド抗体を測定し,抗体の上昇が極期に達した時点で,マウスの脾臓を摘出した.ポリエチレングリコール法を用いて脾細胞とミエローマ細胞との融合細胞を作成し,細胞を培養した.IgG抗GM1抗体を始めとするIgG抗GQ1b抗体,IgG抗GD1b抗体など,38種類の各種モノクローナル抗ガングリオシド抗体産生クローンを樹立した.得られたクローンを培養し十分量のモノクローナル抗体を得た.得られた免疫グロブリン可変部領域のアミノ酸配列をジデオキシ法でシークエンシングし,抗体特性を検討した.神経組織における各種ガングリオシドの発現パターンを検討し,組織,細胞レベルでの局在を明らかにするために,免疫組織化学的に一連のモノクローナル抗ガングリオシド抗体を反応させた.ラットの小脳脊髄神経,末梢神経を摘出し,固定後神経組織の薄層切片を作成し,モノクローナル抗GD1b抗体を用いてラット後根神経節にGD1bが局在することを確認し,固有感覚に関与するパルブアルブミンと共に局在することを明らかにした.その成果について、平成16年9月の国際神経免疫学会で口演した.さらに,筆頭著者としてJournal of Neuroimmunology投稿へ向けて準備中であり,ほぼ完成した.
エポキシ樹脂の不均一硬化による巨視的機能の発現

本研究は,エポキシ樹脂の不均一硬化が発現する巨視的機能を明らかにすることを目的としている.平成16年度は,比熱容量と誘電率に着目し,不均一硬化が与える影響を明らかにすることを目的として,単一モノマー試料(均一)と,二種類のモノマーを配合した混合モノマー試料(不均一)を作製し,モノマーの分子量およびその分布の影響について調べた.示差走査熱量計により熱量測定を行い,各試料の比熱容量の温度特性を調べた.単一モノマー試料については,硬化前のモノマーの分子量が小さいほど,高いガラス転移温度を示した.混合モノマー試料については,試料全体の平均分子量には依存せず,配合した各モノマーの特性が独立に現れた.変成器ブリッジ法により静電容量・コンダクタンス測定を行い,各試料の複素誘電率の温度・周波数特性を調べた.単一モノマー試料については,硬化前のモノマーの分子量が小さいほど,低周波数あるいは高温においてガラス転移した.混合モノマー試料については,比熱容量と同様,試料全体の平均分子量には依存せず,配合した各モノマーの特性が独立に現れた.さらに,複素誘電率の周波数依存性にHavriliak-Negamiモデルを適したところ,単一モノマー試料は単一緩和モデル,混合モノマー試料は二重緩和モデルで表されることが明らかになった.混合モノマー試料における二つの緩和時間は,配合した単一モノマーの緩和時間にほぼ等しく,各分布は広くなった.一方,混合モノマー試料の緩和強度は,平均分子量に影響を受けた.このような二重緩和は,モノマーの分子量・その分布だけでなく,硬化後の網目鎖の分布に大きく起因していると考えられる.以上より,エポキシ樹脂の比熱容量および複素誘電率は,モノマーの平均分子量だけでなく,モノマーの分子量およびその分布,さらに網目鎖分布による不均一硬化に大きな影響を受けることがわかった.本研究は,エポキシ樹脂の不均一硬化が発現する巨視的機能を明らかにすることを目的としている.平成16年度は,比熱容量と誘電率に着目し,不均一硬化が与える影響を明らかにすることを目的として,単一モノマー試料(均一)と,二種類のモノマーを配合した混合モノマー試料(不均一)を作製し,モノマーの分子量およびその分布の影響について調べた.示差走査熱量計により熱量測定を行い,各試料の比熱容量の温度特性を調べた.単一モノマー試料については,硬化前のモノマーの分子量が小さいほど,高いガラス転移温度を示した.混合モノマー試料については,試料全体の平均分子量には依存せず,配合した各モノマーの特性が独立に現れた.変成器ブリッジ法により静電容量・コンダクタンス測定を行い,各試料の複素誘電率の温度・周波数特性を調べた.単一モノマー試料については,硬化前のモノマーの分子量が小さいほど,低周波数あるいは高温においてガラス転移した.混合モノマー試料については,比熱容量と同様,試料全体の平均分子量には依存せず,配合した各モノマーの特性が独立に現れた.さらに,複素誘電率の周波数依存性にHavriliak-Negamiモデルを適したところ,単一モノマー試料は単一緩和モデル,混合モノマー試料は二重緩和モデルで表されることが明らかになった.混合モノマー試料における二つの緩和時間は,配合した単一モノマーの緩和時間にほぼ等しく,各分布は広くなった.一方,混合モノマー試料の緩和強度は,平均分子量に影響を受けた.このような二重緩和は,モノマーの分子量・その分布だけでなく,硬化後の網目鎖の分布に大きく起因していると考えられる.以上より,エポキシ樹脂の比熱容量および複素誘電率は,モノマーの平均分子量だけでなく,モノマーの分子量およびその分布,さらに網目鎖分布による不均一硬化に大きな影響を受けることがわかった.
成熟産業、成熟市場における企業の再活性化と競争優位の再構築に関する研究

本研究は、聞き取り調査を通じて成熟市場における企業の再活性化と競争優位の再構築に必要な戦略とマネジメントについて解明した。研究の結果、戦略やマネジメントのポイントとして、業界の常識に囚われない発想、グローバルな視点、コンテクスト思考、自社の強みの棚卸し、成長視点の危険性、地域基盤の有効活用、小さな失敗や実験からの学習、部門の壁を越えた交流、成熟市場の本質を読む経営トップの洞察力、気づきから実行に至るリーダーシップの重要性が抽出された。本年度は、昨年度の引き続き、成熟産業、成熟市場と企業の競争力、再活性化等に関連する既存の文献ならびに各種資料を渉猟し、調査研究のための分析枠組みを構築すると同時に、それら分析枠組みを精緻なものにするための補完的な実態調査を一層充実させることを目的に研究を進めた。分析枠組みについては、研究分担者との間で数回の会合を持ち、数回の検討会を開催して、研究全体の分析フレームの精緻化、先行研究との関連性等に関する議論を引き続き行った。実態調査としては平成24年6月18日にSWEET(プラモデル)(事前調査として平成24年5月19日に第51回静岡ホビーショーへ参加)、平成24年7月4日に森下仁丹(食品、シームレス・カプセル)、平成24年7月26日にあさ開(清酒)、平成24年8月10日に福源酒造(清酒)、平成24年8月22日にトンボ鉛筆(文房具)、平成24年9月3日に若竹屋酒造場(清酒)、平成25年2月21日に富士フイルム(高機能素材、化粧品)といった聞き取り調査を実施した。これら調査の結果から、成熟市場での戦略のポイントとして、(1)成熟市場の本質を読む観察力と洞察力、(2)業界の常識や慣行にとらわれない発想の転換、(3)小さな失敗や実験からの組織的学習、(4)気づきから組織的実行に至る経営トップのリーダーシップ、(5)成長戦略が逆に脱成熟を阻害すること(売上重視が真の顧客の存在を忘れさせる)、(6)モノでなくコンテクスト(モノの提供方法、モノの使用から得られる価値)で考えること、(7)地域の基盤(原材料、人材、知識、ノウハウ等)の有効活用、(8)自社の強みの洗い出し(その際に顧客に近い技術ではなく、遠い技術に遡って検討すること)といった事項が共通に抽出された。さらに、次年度に実施予定のアンケート調査(仮説検証作業)の準備作業としてスケジュールの確認、対象企業の選定に関する議論も行った。本年度は成熟産業、成熟市場における企業の競争優位の再構築とそれを支えるマネジメントのあり方に関する最終的な知見を導くことを目的として研究を行った。これまでの研究から抽出された知見をさらに補完するべく、聞き取り調査を実施した。具体的には平成25年6月3日にファインモールド(プラモデル)、平成25年9月9日から10日にえちぜん鉄道(地方鉄道)、平成25年10月17日にグンゼ(繊維)、平成25年10月26日に新田ゼラチン(ゼラチン)(国際ビジネス研究学会での講演)、平成25年11月29日にタミヤ(プラモデル)への聞き取り調査を実施した。前年度までの知見に加え、脱成熟化に向けた戦略、マネジメントのポイントとして(1)グローバルな視点を持つこと(グローバルオペレーションの経験、経営資源のグローバルな活用、グローバルな市場開拓)、(2)成熟市場におけるニーズの深い探索(真の顧客ニーズの把握)、(3)主要事業と非主要事業との連携(人事ローテーション等を含む)、(4)業界慣行とかけ離れた経営トップの経歴や経験といった点が抽出された。これら実態調査の結果を踏まえ、最終的な研究のまとめを行うため、研究分担者との間で数回の会合と検討会を開催した。最終的に研究全体から得られた知見は以下の通りである。(1)成熟市場の本質を読む観察力と洞察力、(2)業界の常識や慣行にとらわれない発想の転換(経営トップの経歴や経験)、(3)小さな失敗や実験からの組織的学習、(4)気づきから組織的実行に至る経営トップのリーダーシップ、(5)売上重視が真の顧客の存在を忘れさせること(成長重視の危険性)、(6)モノでなくコンテクストで考えること、(7)地域の基盤(原材料、人材、知識、ノウハウ等)の有効活用、(8)自社の強みの洗い出し、(9)グローバルな視点を持つこと、(10)社内の主要事業と非主要事業との連携の必要性。本年度は主に成熟産業、成熟市場と企業の競争力、再活性化等に関連する既存の文献ならびに各種資料を渉猟し、調査研究のための分析枠組みを演繹的に導出すること、さらにそれら分析枠組みを精緻なものにするための補完的な実態調査を行うことを目的に研究を進めた。分析枠組みの構築については、研究分担者との間で分担を決め、数回の会合の中で、既存文献の読み合わせおよび資料の解釈等の報告、検討会を開催し、研究全体の分析フレーム構築に関する議論を行った。また、合わせて実態調査対象企業の選定を行い、聞き取り調査の内容および調査項目の検討も行った。

実態調査ではa)貴社の事業概要と直面する問題等、b)成熟産業、成熟市場における貴社の経営戦略の特徴、c)そのような経営戦略を実現する組織運営の工夫やマネジメントの特質等を共通して質問することで合意が得られた。それらの議論を受け、平成23年10月には静岡県の模型企業であるハセガワへの聞き取り調査を実施した。調査結果から、ハセガワは顧客の高齢化と少子化という市場縮小要因に対し、1点特化の「飛行機のハセガワ」からキャラクター、ロボット、ゲーム、コンテンツまでを扱う「総合模型メーカー」への転換を図っていること。商品展開も「点」ではなく「線」で考えることができないと不十分であり、そのためには組織横断的な交流、健全な議論ができる風通しの良い組織体質への変革が必要であること等が明らかになった。さらに平成24年3月には宮城県の清酒企業である一ノ蔵への聞き取り調査を実施した。調査結果から、減少し続ける清酒市場で一ノ蔵は米加工業の原点である農業に回帰し(農商工連携)、徹底的に品質にこだわった清酒造りをしていくこと、新たな市場開拓として低アルコール酒の開発を進めていくこと、これら実現するために組織横断的なプロジェクトチームでの開発、女性の視点を重視し経営を行っていることが分かった。本研究の達成度を、(2)おおむね順調に進んでいると判断した理由として、第一に、昨年度に東日本大震災の影響もあって不十分であった実態調査(聞き取り調査)への取り組みが改善されたことが挙げられる。昨年度は清酒、プラモデル製造各1社ずつの聞き取り調査に止まっていたが、本年度は清酒3社、プラモデル製造1社、文房具1社、食品・カプセル製造1社、フイルム・化粧品製造1社の7社に聞き取り調査を実施することができた。ただし、昨年度の調査も含めて、清酒企業への聞き取り調査のウエイトが大きく、農業、造船、繊維、地方鉄道といった産業に属する企業への聞き取り調査が行われていないという意味で、研究対象とする産業の偏りがみられており、この点は今後の課題である。二つ目の理由として、多角的な視点をもつ先行研究の整理、批判的検討、本研究の分析枠組みづくりにおける議論をおおむね収束させることができた点が挙げられる。議論の中から、(1)成熟産業・市場と衰退産業・市場では性質、特質が異なっているため、同様の分析枠組みを用いることは困難であること、(2)成熟産業・衰退産業の戦略に関する既存の研究ではポジショニング・アプローチが主としてとられてきたが、資源・能力ベース並びに時間(経過)の視点を組み入れる必要があること、(3)技術やマーケティングの発想転換により脱成熟が実行される際に組織プロセスの視点が重要であること、(4)従来の枠組みに地域の能力といった視点を加えることの重要性等の諸点が分析枠組みに組み入れる項目として浮かび上がってきた。おおむね順調に進んでいると判断した第三の理由は、平成25年度に実施予定のアンケート調査に対する準備作業がやや遅れがちではあるが、議論・検討できたからである。アンケート調査票案の作成までには至らなかったが、おおまかな調査のスケジュール、対象企業の選定等における議論を進めることができた。本研究の達成度において、やや遅れているとする理由として、第一に、東日本大震災の影響もあり、実態調査(聞き取り調査)が不十分だった点が挙げられる。
脂肪酸合成を標的とした口腔癌の増殖・進展メカニズムの解析

1.明海大学病院にて治療を受けた10例の口腔扁平上皮癌患者の生検組織のホルマリン固定パラフィン包埋材料について,まずHE染色標本にて病理診断を行った後,p53抗体,抗FAS抗体および抗SREBP抗体を用いた免疫組織化学的検索を行い,その発現強度および局在を確認した.その結果,6例(60%)の腫瘍細胞の核にp53タンパク質の陽性反応を認めた.また7例(70%)の腫瘍細胞の細胞質にFAS発現を認め,p53陽性症例全例においてFASの陽性所見が認められた.2.5種類のヒト頭頸部扁平上皮癌培養株HSC-2,HSC-3,HSC-4,Ca9-22およびSAS細胞における,FASとSREBPの遺伝子ならびにタンパク質の発現状況をReal time qRT-PCR法およびWestern blot法にて確認した.その結果,各細胞株においてFAS mRNAおよびSREBP mRNAの自発的な発現を確認した.また,Ca9-22細胞において最も強いFAS mRNAおよびSREBP mRNAの発現量を示し,タンパク質についても同様であった.また,このCa9-22細胞をSREBP small interfere (si) RNAを用いてノックダウンした際,FASの発現は抑制され,この際のCa9-22細胞の増殖活性は明らかに抑制され,細胞数の減少が認められた.以上の結果から, p53遺伝子変異株であるCa9-22細胞において,SREBPの過剰発現を引き起こし,その結果,脂肪酸合成酵素であるFASの発現が増強されていることが示唆された.ここでTNF-alphaの刺激によってSREBPの活性が増強されるという報告があることから,Ca9-22細胞をTNF-alpha(10 ng/ml)にて経時的に刺激した際のSREBPタンパク質の細胞質から核への移行動態をProteoExtractキットを用い検索途中である.ProteoExtract,ルシフェラーゼレポーターアッセイのためのパイロットスタディにおいて,思うようなデータが出ないまま時間と労力を費やしてしまったが,ようやく安定したデータが出だしたので,次年度からは当初の計画以上の達成度が得られるものと考えている.1引き続いて,多数の口腔扁平上皮癌の生検組織材料を用いて,免疫組織化学的にp53,FASおよびSREBPの発現強度および局在を確認する.これらの結果と個々の症例の臨床病理学的諸因子との相関関係について解析を行う.2FASおよびSREBPの発現増強が認められたヒト口腔扁平上皮癌由来細胞株Ca9-22を用い,in vitroの系で研究を行う.ここで,TNF-alphaの刺激によってSREBPの活性が増強されるという報告があることから,Ca9-22細胞をTNF-alpha(10 ng/ml)にて経時的に刺激した際のSREBPタンパク質の細胞質から核への移行動態をProteoExtractキットを用い検索すると共に,核DNAと結合したSREBPが活性化して機能しているか否か証明するために,この細胞株を用いてSREBPの活性動態をルシフェラーゼレポーターアッセイにて解析する.SREBPの活性化が証明されたCa9-22細胞にFASの活性阻害剤として知られる抗酸化剤・ポリフェノールの1つで抗腫瘍活性,抗炎症作用,酸化ストレスからの保護といった多くの作用を持つ天然物質Resveratrolを作用させる,あるいはFASのノックダウンを行いSREBPの活性動態を同様にして解析する.ヌードマウスにCa9-22細胞を播種・腫瘍形成した後,Resveratrolを濃度と時間をそれぞれかえて直接作用させた際のSREBPおよびFASの活性動態を同様に解析し,細胞死の検索と副作用の有無を形態的および組織学的に行う.1.明海大学病院にて治療を受けた10例の口腔扁平上皮癌患者の生検組織のホルマリン固定パラフィン包埋材料について,まずHE染色標本にて病理診断を行った後,p53抗体,抗FAS抗体および抗SREBP抗体を用いた免疫組織化学的検索を行い,その発現強度および局在を確認した.その結果,6例(60%)の腫瘍細胞の核にp53タンパク質の陽性反応を認めた.また7例(70%)の腫瘍細胞の細胞質にFAS発現を認め,p53陽性症例全例においてFASの陽性所見が認められた.2.5種類のヒト頭頸部扁平上皮癌培養株HSC-2,HSC-3,HSC-4,Ca9-22およびSAS細胞における,FASとSREBPの遺伝子ならびにタンパク質の発現状況をReal time qRT-PCR法およびWestern blot法にて確認した.その結果,各細胞株においてFAS mRNAおよびSREBP mRNAの自発的な発現を確認した.また,Ca9-22細胞において最も強いFAS mRNAおよびSREBP mRNAの発現量を示し,タンパク質についても同様であった.また,このCa9-22細胞をSREBP small interfere (si) RNAを用いてノックダウンした際,FASの発現は抑制され,この際のCa9-22細胞の増殖活性は明らかに抑制され,細胞数の減少が認められた.以上の結果から, p53遺伝子変異株であるCa9-22細胞において,SREBPの過剰発現を引き起こし,その結果,脂肪酸合成酵素であるFASの発現が増強されていることが示唆された.ここでTNF-alphaの刺激によってSREBPの活性が増強されるという報告があることから,Ca9-22細胞をTNF-alpha(10 ng/ml)にて経時的に刺激した際のSREBPタンパク質の細胞質から核への移行動態をProteoExtractキットを用い検索途中である.

ProteoExtract,ルシフェラーゼレポーターアッセイのためのパイロットスタディにおいて,思うようなデータが出ないまま時間と労力を費やしてしまったが,ようやく安定したデータが出だしたので,次年度からは当初の計画以上の達成度が得られるものと考えている.1引き続いて,多数の口腔扁平上皮癌の生検組織材料を用いて,免疫組織化学的にp53,FASおよびSREBPの発現強度および局在を確認する.これらの結果と個々の症例の臨床病理学的諸因子との相関関係について解析を行う.2FASおよびSREBPの発現増強が認められたヒト口腔扁平上皮癌由来細胞株Ca9-22を用い,in vitroの系で研究を行う.ここで,TNF-alphaの刺激によってSREBPの活性が増強されるという報告があることから,Ca9-22細胞をTNF-alpha(10 ng/ml)にて経時的に刺激した際のSREBPタンパク質の細胞質から核への移行動態をProteoExtractキットを用い検索すると共に,核DNAと結合したSREBPが活性化して機能しているか否か証明するために,この細胞株を用いてSREBPの活性動態をルシフェラーゼレポーターアッセイにて解析する.SREBPの活性化が証明されたCa9-22細胞にFASの活性阻害剤として知られる抗酸化剤・ポリフェノールの1つで抗腫瘍活性,抗炎症作用,酸化ストレスからの保護といった多くの作用を持つ天然物質Resveratrolを作用させる,あるいはFASのノックダウンを行いSREBPの活性動態を同様にして解析する.ヌードマウスにCa9-22細胞を播種・腫瘍形成した後,Resveratrolを濃度と時間をそれぞれかえて直接作用させた際のSREBPおよびFASの活性動態を同様に解析し,細胞死の検索と副作用の有無を形態的および組織学的に行う.タイミングが合わなかった.具体的には,当初から計画していたルシフェラーゼレポーターアッセイを行なっていたが,最初はなかなか良いデータが出なかった.そうこうしているうちに,年度末が近づいてきた.ちょうど良いデータが出だしたので,もう1セット購入しようと考えたが,年度を超えてしまう時期に来ていたので次年度に回した.その結果,22,242円という次年度使用額が発生してしまった.しかし,ようやく安定したデータが出だしたので,次年度からは当初の計画以上の達成度が得られるものと考えている.このため,この次年度使用額はすぐに使い切ることが予想される.