hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
精神看護における治療的関係のマネジメント力を育むシミュレーション教育モデルの構築

精神医療の大きな課題であるクライエントの早期の地域生活への移行を支援するため、看護師には高度な実践技術が要求されている。同時に、精神看護を学ぶ学生にも専門的で実践的な精神看護技術の獲得につながるような学習の工夫が求められている。このような背景をうけ、精神看護領域における教育の中でも、専門性のある治療的看護師ー患者関係の構築にむけた内容が欠かせないと考えられ、この関係構築において必要とされるさまざまな構成要素と共にそれらの構成要素をマネジメントする力が重要であるとされている。本研究ではまず精神看護のExpertレベルにある看護師の備える治療的看護師ー患者間の専門性の高いマネジメント力について明らかにすることと、看護教育におけるシミュレーションの活用を考え、教育の評価を試みている。本研究により実施を予定していることの1つ目は、精神科CNSを含めたExpertレベルにある看護実践者の治療的看護師ー患者関係のマネジメントの構成要素について質的分析により解明することである。関係を構築する要素としての思いやり、尊重、誠実、共感、自己開示、ユーモアなどを、involvement/overinvolvementの概念を軸にしてどのようにコントロールされているのか、そのマネジメント力を特定し記述することが必要で、これに関しては、現在は面接を修了しデータの分析中である。また分析後にさらに対象者を増やして、面接を実施する予定である。2つ目は、精神看護教育におけるシミュレーション教育を検討し提案することである。これまで実施してきたシミュレーション教育の評価からシミュレーション教育による学生の視点の広がりが確認され、現在はいくつかの視点を予め設定することによる学生の学びの変化について分析中である。ファシリテータとしての、臨地実習指導者に対するインタビューも終え、結果を分析中である。平成30年度は、実習前の精神看護学演習においてシミュレーションを取り入れた演習を受けた学生の観察の視点を分析し、結果公表を予定している。また、精神科領域においてエキスパートレベルにある看護師の患者との関係調整に関する意識についてインタビューを用いて質的に分析を試み、現在分析中である。本来であれば平成30年度に実施した学生を対象にして実施したシミュレーション教育の学びについても、視点を加えた結果の比較迄得られる予定であった。しかしながら、平成29年度の結果の分析方法としてテキストマイニングを使用した分析を加え計量的にも分析することを加えより丁寧な分析を試みたため、やや遅れている。エキスパートレベルにある看護師に対する患者との関係構築及び関係の維持の方法に関するインタビュー調査を実施しており、4名の対象者のインタビューを実施した結果に関しては、引き続き分析中である。平成31年度は、平成30年度に引き続き、シミュレーションを取り入れた演習を受けた学生の学びの結果を踏まえ、そこに、学生が患者ー看護師の関係性を捉えることができるように視点を加えたシミュレーション教育から、その学びを分析することを継続する。精神科領域においてエキスパートレベルにある看護師の患者との関係調整に関する意識について引き続き分析しながら、対象者を増やし面接を行う予定である。CNSによるスーパーヴァイズの視点を加え学生のシミュレーション教育の実施を予定している。スーパーヴァイズを看護師より得られることの学生の学習の効果を明らかにするとともに、スーパーヴァイズを行う看護師が得られた内容に関しても分析を行い、より専門的で実践的な効果の得られるシミュレーション教育の構成を検討する。分析結果は随時公表する予定である。精神医療の大きな課題であるクライエントの早期の地域生活への移行を支援するため看護師の高度な実践技術が要求され、また精神看護を学ぶ学生も専門的で実践的な精神看護技術の学習が求められている。このような背景をうけ、精神看護領域における教育の中でも、専門性のある治療的看護師ー患者関係の構築にむけた内容が欠かせない。そのために、この関係構築において必要とされるさまざまな構成要素と共にそれらの構成要素をマネジメントする力が重要であるとされている。しかし、このマネジメント力については未だ不明瞭であり、本研究ではまず精神看護のExpertレベルにある看護師の備える治療的看護師ー患者間の専門性の高いマネジメント力について明らかにする。さらに、その成果を看護教育のシミュレーション教育に適用し、その教育の評価を得ることを目的としている。関係を構築する要素としての思いやり、尊重、誠実、共感、自己開示、ユーモアなどを、involvement/over-involvementの概念を軸にしてどのようにコントロールされているのか、そのマネジメント力を特定し記述することが必要で、これに関しては、現在一部の対象者の面接を修了したところであり、分析中である。2つ目は、シミュレーション教育の新たな方法を検討することである。これまで実施してきたシミュレーション教育に、看護師ー患者関係におけるマネジメント力において学習可能である部分について現在分析している。平成29年度は、実習前の精神看護学演習においてシミュレーションを取り入れた演習を受けた学生の観察の視点を分析することと、精神科領域においてエキスパートレベルにある看護師の患者との関係調整に関する意識についてインタビューを用いて質的に分析し、明らかにすることを行った。倫理審査書類の作成に時間を要した。学生の視点の分析に関しては、現在、分析中であるが、学生が観察していることとして、「コミュニケーションスキルに関すること」、「看護師の指導方法に関すること」、「患者との関係の持ち方に関すること」にして着目していることがみえてきている。特に、「関係の持ち方」に関しては、患者の思いと看護師の伝えることの会話の量のバランスや、伝え方のバランスに着目していることについて読み取れている。

エキスパートレベルにある看護師に対する患者との関係構築及び関係の維持の方法に関するインタビュー調査を実施しており、4名の対象者のインタビューを実施しており、引き続き分析と面接を行う予定である。精神医療の大きな課題であるクライエントの早期の地域生活への移行を支援するため、看護師には高度な実践技術が要求されている。同時に、精神看護を学ぶ学生にも専門的で実践的な精神看護技術の獲得につながるような学習の工夫が求められている。このような背景をうけ、精神看護領域における教育の中でも、専門性のある治療的看護師ー患者関係の構築にむけた内容が欠かせないと考えられ、この関係構築において必要とされるさまざまな構成要素と共にそれらの構成要素をマネジメントする力が重要であるとされている。本研究ではまず精神看護のExpertレベルにある看護師の備える治療的看護師ー患者間の専門性の高いマネジメント力について明らかにすることと、看護教育におけるシミュレーションの活用を考え、教育の評価を試みている。本研究により実施を予定していることの1つ目は、精神科CNSを含めたExpertレベルにある看護実践者の治療的看護師ー患者関係のマネジメントの構成要素について質的分析により解明することである。関係を構築する要素としての思いやり、尊重、誠実、共感、自己開示、ユーモアなどを、involvement/overinvolvementの概念を軸にしてどのようにコントロールされているのか、そのマネジメント力を特定し記述することが必要で、これに関しては、現在は面接を修了しデータの分析中である。また分析後にさらに対象者を増やして、面接を実施する予定である。2つ目は、精神看護教育におけるシミュレーション教育を検討し提案することである。これまで実施してきたシミュレーション教育の評価からシミュレーション教育による学生の視点の広がりが確認され、現在はいくつかの視点を予め設定することによる学生の学びの変化について分析中である。ファシリテータとしての、臨地実習指導者に対するインタビューも終え、結果を分析中である。平成30年度は、実習前の精神看護学演習においてシミュレーションを取り入れた演習を受けた学生の観察の視点を分析し、結果公表を予定している。また、精神科領域においてエキスパートレベルにある看護師の患者との関係調整に関する意識についてインタビューを用いて質的に分析を試み、現在分析中である。本来であれば平成30年度に実施した学生を対象にして実施したシミュレーション教育の学びについても、視点を加えた結果の比較迄得られる予定であった。
ドラフト管付き噴流層を用いた単核コーティング粒子の連続調製

微粒子の単核コーティングが実現できれば、微細でハンドリングの困難な有用物質がハンドリングの容易なシード粒子にコーティングされることになり、機能性微粒子として応用範囲が広がる上に、これらを原耕料とする新規な機能性物質にも機能の付与が効率よく行えると考えられる。本実験においては、微細で付着凝集性が強くハンドリング困難な環境浄化物質であるチタニア微粒子をハンドリング容易なガラスピーズやシラス微粒子などの基質にコーティングすることにより、環境浄化機能を備えた機能性微粒子の調製を試みた。結果として、ドラフト管先端に撥水性のあるテフロンチューブを取り付けることにより、チューブ閉塞が抑制され、ガラスビーズ、シラス粒子に300分の連続コーティングを実施することが可能となり、PVAの重合度やシード粒子に関わらずチタニア微粒子を90%以上コーティングすることができた。また、調製粒子は、蛍光灯による紫外線の照射によりメチレンブルーを脱色したことで光触媒としての活性があることが確認された。しかしながら、固定層でメチレンの標準ガスを用いて二酸化チタンの光触媒性能の検討を行ったが、バインダー液がチタニアを被覆しているためか短時間での分解反応は見られず、適切なバインダー液の選択が必要なことが分かった。更に、調製粒子を流動化させ、付着チタニアの剥離の程度を調べた結果、剥離率は30%程度で光触媒としての能力は失われていないと考えられることから、流動層による環境汚染物質の除去が期待できることが分かった。近年、機能性物質や新規材料の開発に伴い、原材料の表面改質や微細化の要求が高まっている。微細粒子の表面改質の有用な手段の一つとして、微粒子コーティングが挙げられる。微粒子コーティングとは、一個のシード粒子の表面に、微小な粒子をコーティングさせることである。微粒子の単核コーティングが実現できれば、微細でハンドリングの困難な有用物質がハンドリングの容易なシード粒子にコーティングされることになり、機能性微粒子として応用範囲が広がる上に、これらを原材料とする新規な機能性物質にも機能の付与が効率よく行えると考えられる。そこで、本研究では、有用物質である超微粒子をシード粒子である微粒子に単核コーティングした機能性微粒子の連続製造を目的とするものである。本実験においては、微細で付着凝集性が強くハンドリング困難な環境浄化物質であるチタニアをハンドリング容易なガラスビーズやシラス微粒子などの基質にコーティングすることにより、環境浄化機能を備えた機能性微粒子の調製を試みる。実験条件として、基質粒子の安定な循環が得られるドラフト管基準の空塔速度範囲を選定する。また、バインダー液濃度、コーティング粒子濃度は、液滴噴霧装置である二流体ノズルの閉塞を避けるように、これまでの蓄積データを基に決定する。これまでの結果として、基質をガラスビーズとした場合、コーティング率は低いが、単粒子率は80%程度のコーティング生成物が得られた。今後、南九州全域に賦存しているシラス微粒子を基質として利用し、安価で取扱容易な環境保全物質としての機能性微粒子の調製を試みる。近年、機能性微粒子や新規材料の開発に伴い、原材料の表面改質や微細化の要求が高まっている。本実験においては、微細で付着凝集性が強くハンドリング困難な環境浄化物質であるチタニア微粒子をハンドリング容易なガラスビーズやシラス微粒子などの基質にコーティングすることにより、環境浄化機能を備えた機能性微粒子の調製を試みる。

実験条件として、基質粒子の安定な循環が得られるドラフト管基準の空塔速度範囲を選定する。また、バインダー液濃度、コーティング粒子濃度は、液滴噴霧装置である二流体ノズルの閉塞を避けるように、これまでの蓄積データを基に決定する。本年度は、南九州全域に大量に賦存しているシラス微粒子を基質として利用し、安価で取扱容易な環境保全物質としての機能性微粒子の調製を試みた。吉田産シラス微粒子は不定形で凝集性が強く、ドラフト管入口での閉塞が頻発し、コーティング不能であったが、平均径の大きい加久藤シラスを基質に選定するとともに、ドラフト管入口に撥水性の強いテフロンチューブを取り付けることにより、連続的に単核コーティングが可能となった。今後、シリコン系のバインダー液によるコーティングやコーティング物の流動層内挙動を検討していく予定である。微粒子の単核コーティングが実現できれば、微細でハンドリングの困難な有用物質がハンドリングの容易なシード粒子にコーティングされることになり、機能性微粒子として応用範囲が広がる上に、これらを原杉料とする新規な機能性物質にも機能の付与が効率よく行えると考えられる。本実験においては、微細で付着凝集性が強くハンドリング困難な環境浄化物質であるチタニア微粒子をハンドリング容易なガラスビーズやシラス微粒子などの基質にコーティングすることにより、環境浄化機能を備えた機能性微粒子の調製を試みた。結果として、ドラフト管先端に撥水性のあるテフロンチューブを取り付けることにより、チューブ閉塞が抑制され、ガラスビーズ、シラス粒子に300分の連続コーティングを実施することが可能となり、PVAの重合度やシード粒子に関わらずチタニア微粒子を90%以上コーティングすることができた。また、調製粒子は、蛍光灯による紫外線の照射によりメチレンブルーを脱色したことで光触媒としての活性があることが確認された。しかしながら、固定層でメチレンの標準ガスを用いて二酸化チタンの光触媒性能の検討を行ったが、バインダー液がチタニアを被覆しているためか短時間での分解反応は見られず、適切なバインダー液の選択が必要なことが分かった。更に、調製粒子を流動化させ、付着チタニアの剥離の程度を調べた結果、剥離率は30%程度で光触媒としての能力は失われていないと考えられることから、流動層による環境汚染物質の除去が期待できることが分かった。
プラスチック可塑剤による水系汚染現状の把握と人体へのリスク評価

プラスチック添加剤による水系汚染現状の把握のため、京都盆地の桂川とその周辺の浅層地下水を対象として調査を行った。プラスチック添加剤の地下水への流入システムを推測する基礎資料を得るために、プラスチック添加剤濃度の季節変動を河川・地下水について調査した。また、地下水中に移行するプラスチック添加剤の源は、人為的影響の大きい地点に多く存在すると考え、プラスチック添加剤の環境中での存在量と、その分布に対する人為的影響について検討した。さらに、プラスチック添加剤の地下水中での濃度変化の原因について検討するため、地下水中の微生物によるプラスチック添加剤の分解に関する実験を行った。そして、次の結論を得た.1)プラスチック添加剤の季節変動は不規則で、一年を通じて高い濃度で含まれている可能性を示した。さらに、これらの物質の地下水中濃度に対し、降雨量もある程度の関係を持っていると考えられることを示した。また、地下水中のプラスチック添加剤については、河川からの浸透と地表からの浸透の両方から入ってきている可能性があることも示した。2)土壌表面などから高い濃度のDOP、DBPが地下水に負荷されている可能性を示した。また、都市中心部からの距離とDOP、DBPの抽出濃度の関係から、DOP、DBPはやはり、人為的影響の大きい都市部の環境中において大量に存在すると考えられるが、人為的影響の少ない地域でも広く環境中に分布していることを示した。3)地下水中の微生物による分解実験を行い。半減期がDBPについては3.3日、DOPについては5.3日程度であることを示した。半減期が比較的短いことと、常に地下水中にDOPなどが存在することから、DOPなどは常に地表から地下水への浸透があるか、原液が地中に浸透し、それが地下水へ溶出している可能性が考えられる。
センシング技術を活用した高齢障害者の日常身体活動に関する実態調査

本研究課題は、身体に障がいがある人たちの加齢に伴う運動と健康との関係性の変化を明らかにするために、質問紙および体組成評価による実態調査、および運動機能について調べた。対象者を壮年者群、中年者群、高齢者群に分け比較した結果、身体活動量は中年者群が最も高く、壮年者群は仕事関連活動は高いものの、余暇時間における活動は高齢者群とほとんど変わらなかった。また、高齢者群は自宅での活動量が多かった。これと関連するように、運動に対する意欲は壮年者群が低いこと、そして運動機能は中年者群が高く、普段、運動習慣のある人たちはその中でもQOLおよび運動機能面が高いレベルで維持されていることが分かった。28年度はセンシング技術を活用した身体活動計測システムのプロトタイプの作成を目標に、先ずは健常成人を対象に身体活動を非拘束かつ簡易に計測できるウェアラブルセンサを用いて、スポーツ活動や日常での身体活動中の生体反応を調べた。成人男女10名にシャツ型のウェアラブルセンサを着てもらい、スポーツ活動中(野球の試合中)の心拍ならびに加速度の変動を計測した結果、激しい運動時にも心拍が検出可能なこと、また、個人によって最大心拍数や心拍変動は異なる一方で、得点が入るなど状況に応じて個人間で共通の心拍変動が見られることが確認された。しかしながら、シャツ型のウェアラブルセンサは腹部側面での加速度計測しかできず、本研究の当初の目的である身体の部位別の活動量を評価できなかったため、シャツ型センサに加えてワイヤレス小型加速度センサを併用して日常生活活動中の心拍、加速度の変動の計測も行った。成人男性3名を対象に日常生活中の心拍変動ならびに体幹部、上肢(利き手側)の加速度を計測し、身体活動量と心拍変動との関連を調べた。計測は3日間行い、被験者には通常の日常生活を送ってもらった。激しい運動の有無による活動量の違いはあったものの、心拍の日間変動はあまり見られず、その変動は体幹部の加速度と関連があった。上肢の加速度の変化は個人差が見られはあったものの、心拍変動との関連はなく、日常での活動量に及ぼす影響は少ないことが示された。以上の結果から、ウェアラブルセンサを活用して、スポーツ活動中や日常生活活動中の心拍変動は個人間で異なるものの、体幹部の加速度を評価することで身体活動量を評価できる可能性が示唆された。当初の計画では、28年度に高齢障害者の運動と健康状態に関するアンケートおよび肥満度計測による実態調査を開始する予定だったが、調査を実施する予定だった障害者施設との測定実施および研究協力についての調整が思ったように進まず、28年度での調査実施を断念した。現在は新たに別の施設に調査協力を依頼し調整を行っている段階である。また、実施する測定および聞き取り調査については精査を進めており、調査の実施が決定したときにすぐに実行できるように準備を進めている。また、28年度はセンシングシステムのプロトタイプの作成およびその検証のために、ウェアラブルセンサを用いた身体活動量の計測について健常者を対象に測定を行ったが、本研究の研究課題のひとつである普段、車椅子を利用している高齢障害者の日常身体活動の実態調査を実施するための車椅子利用時の測定検証を実施することができなかった。また、動作解析システムとの比較検証も実施できなかったことから、作成したプロトタイプで計測した各数値の妥当性の検証や問題点の抽出がまだ十分でないため、29年度に実施する必要がある。H30年度は、昨年度実施できなかった高齢障がい者の日常身体活動および健康状態に関する実態調査を行った。調査は協力を承諾してくれた障がい者スポーツおよび福祉施設で実施し、質問紙によるアンケート、そして体組成計測として体重、周囲径、皮脂厚計測を行った。アンケートは障がい、既往歴、痛み、環境要因といった基本情報に加え、日常身体活動評価としてPhysical Activity Scale for Individuals with Physical Disabilities(PASIPD)、そして運動に対する意欲の評価としてBehavioral Regulation in Exercise Questionnaire(BREQ-2)それぞれの日本語版を作成し使用した。また、上肢運動機能評価も併せて行い、車椅子駆動力(20 m直線走)、把持動作による力調節課題、ペグボードを実施した。その結果、高齢になってもスポーツに取り組んでいる障がい者は日常身体活動量および運動への意欲が普段、習慣的に運動を行っていない障がい者の人たちよりも高かったが、肥満度については加齢やスポーツ活動の有無よりは、自立歩行が出来ず、普段、車椅子による移動を行っている人たちの方が高く、一方で、生活習慣病などの既往歴や現在抱えている疾患には被験者間で差はなかった。上肢運動機能については、車椅子使用者の方が立位障がい者よりも高く、その中でも力調節課題時の変動係数は、脊髄損傷者が最も低かった。日常身体活動量を定量化するための上肢、体幹部の加速度計測については車椅子利用者4名に対し、車椅子駆動時の計測を行ったが、体幹部の加速度は駆動速度や個人間での差が見られなかったため、日常身体活動計測を行うプロトタイプの作成については、今後、筋活動の評価など別の手段で活動量を評価する必要性が認められた。

また、高齢者群は自宅での活動量が多かった。これと関連するように、運動に対する意欲は壮年者群が低いこと、そして運動機能は中年者群が高く、普段、運動習慣のある人たちはその中でもQOLおよび運動機能面が高いレベルで維持されていることが分かった。29年度は先ず、アンケートおよび肥満度計測による実態調査を優先的に進め、調査協力をしてもらえる障害者施設が決定次第、速やかに調査を開始する。また、調査を進めるのと同時に本研究では年齢層別、および障害の程度別の実態を明らかにすることを目標としているため、複数施設に調査協力を依頼して可能な限り調査の実施を承認してもらえるよう進めていく。プロトタイプの作成については妥当性の検証を進め、車椅子利用者の身体活動量が評価できるようにし、高齢障害者の日常身体活動の実態を明らかにする。これらを実施して得られたデータはまとめ次第、国内外に発表できるように進める。29年度が最終年度であるため、記入しない。障がい者スポーツ29年度が最終年度であるため、記入しない。
胆道閉鎖症術後と乳幼児の肝機能障害におけるヘリコバクター・ヘパティカスの役割解明

ヘリコバクター属はピロリ菌に代表されるが、ヘパティカス、ビリスなど様々な菌種が報告されている。ヒトにおける病原性は十分には明らかでない。小児の肝障害や胆道閉鎖症術後の肝障害とヘパティカス菌の関連を検討するため、抗体測定を行った。さらに、精度の高い血清診断法の開発を目的として、ヘパティカス菌(標準菌株)の全蛋白質を二次元電気泳動を行い、前記の研究で用いた血清を反応し、最も強く反応する蛋白質を同定した。ヘパティカス菌抗体保有率は肝障害なし015歳の小児33名で30.3%、肝障害あり9名では44.4%であった。イムノブロットでは小児血清が最も強く反応した蛋白はフラジェリンAであった。Helicobacter hepaticus(H. hepaticus)はマウスにおいて慢性肝炎や肝腫瘍、大腸炎の原因となる。しかし、ヒトにおける病原性については充分解明されていない。特に小児における感染状況や疾患との関連、感染後に産生されるH. hepaticus抗体群は報告がない。本研究では小児血清におけるH. hepaticus抗体測定による疫学研究と肝胆道疾患、特に胆道閉鎖症や葛西手術後の肝機能障害との関連を検討する。さらに、血清H. hepaticus抗体群の解析とH. hepaticus抗体測定において最適な抗原蛋白を選出し、抗体測定法を確立することである。小児のH. hepaticus抗体測定として、肝機能障害あり・なしの小児の血清の収集と解析を開始した。抗体測定系としてHelicobacter hepaticusAntigen、Helicobacter hepaticus ELISA MicroplateとPCR陽性コントロールを使用する。同時にHelicobacter hepaticusATCC51449株を購入し、抗原として使用するための大量培養法の確立を行った。すなわち、微好気培養、水素添加微好気および水素添加嫌気培養の比較を行った。H. hepaticusATCC51449株は寒天平板上にはコロニーを作成しないものの、2相培地による培養で少量ずつは継代増殖可能であることがわかった。培養条件のうち最も多い菌量が回収されるのは水素添加の微好気培養であった。現在この方法で、少量ずつではあるが抗原を集めている。また、別の寒天平板上に発育可能なH. hepaticusの入手も予定している。研究の目的:抗体測定系の確立当初の研究計画で予定していたHelicobacter hepaticus抗体測定系が抗原蛋白の供給が不足し、測定ができなくなったので、精度の高い測定系の確立を研究の目的の一つとした。1.市販のH. hepaticus蛋白を用いた小児血清との反応:ELISA法で行った。希釈倍率を変更して、至適条件を設定し、小児血清のELISA法を行った。高反応、低反応群に分けた。2.精度の良い、H. hepaticus抗体測定系の確立に向けて:H. hepaticus菌(ATCC51449)を入手し、継代培養に成功した。菌株から全蛋白質を抽出処理を行ったのちに二次元電気泳動した。1であらかじめH. hepaticusとの反応を検査している小児6血清でイムノブロット解析を行った。また、ゲルの高感度CBB染色を行った。イムノブロット陽性スポットを染色ゲルから切り出して質量分析に供した。33スポットの質量分析を行い、H. hepaticus抗原蛋白を用いたELISA法で高反応であった血清が最も強く反応した蛋白を選定した。1つの蛋白はH. hepaticus高反応群で強く反応したが、低反応群でも弱い反応を認め、さらに詳細なエピトープの解析が必要であると考えられた。小児におけるH. hepaticus(ヘパティカス菌)抗体保有率の測定を実施した。対象と方法:小児科外来で採取され、保存されていた血清である。血清は連結不可能匿名化し、血清の使用に関して、兵庫医科大学倫理審査委員会の承認を得た。対象は015歳の小児から採取された血清、59検体である。(肝障害なし49検体、あり10検体)抗体測定はHRII-51antigen capture ELISA (Fukuda Y etal. Helicobacter 14: 66-71, 2009)を用いた。結果:抗体保有率は肝障害なしでは49名中12名(24.5%)、肝障害ありでは10名中2名(20%)であり、差はなかった。平成26年度にH. hepaticus標準株(ATCC51449)から蛋白抽出を行い、2次元電気泳動を行った。ゲル染色を行い、染色部位の蛋白解析(LC-MS/MS analysis)を行った。また、イムノブロットではPVDF膜に転写し、希釈した小児血清を反応させ、反応蛋白を特定した。小児血清が最も強く反応したのはflagelin Aであることを見出した。flagelinは様々な細菌の鞭毛蛋白であり、非特異的な反応があるため、H. hepaticus flagelin Aに特異的でかつ小児の血清が最も反応するエピトープを検索するため、ペプチドを作成し、96 hole ELISA Plateに固層し、ELISA法で小児血清の反応を試みた。しかし、ペプチドの固層が困難なためか、一定した結果は得られず、次回研究課題とした。

小児の肝障害や胆道閉鎖症術後の肝障害とヘパティカス菌の関連を検討するため、抗体測定を行った。さらに、精度の高い血清診断法の開発を目的として、ヘパティカス菌(標準菌株)の全蛋白質を二次元電気泳動を行い、前記の研究で用いた血清を反応し、最も強く反応する蛋白質を同定した。ヘパティカス菌抗体保有率は肝障害なし015歳の小児33名で30.3%、肝障害あり9名では44.4%であった。イムノブロットでは小児血清が最も強く反応した蛋白はフラジェリンAであった。当初予定していた抗体測定系が使用できなくなったことがあり、平成26年度は新たにHelicobacter hepaticus抗体測定系の確立を目的とした。エピトープとなる蛋白を同定し、その中からさらに精度の良い抗原を決定する段階にきており、実験は順調に進んでいる。感染症学小児科学精度の良いH. hepaticus抗体測定系を作成し、小児の肝胆道疾患、特に胆道閉鎖症についてH. hepaticusに対する反応性と疾患との関連を検討する。(1)まず、小児の血清が最もよく反応する蛋白が選定されたことから、さらに詳細なエピトープについて解析を進める。最終的に選ばれた蛋白あるいはペプチドを用いてELISA法による抗体検出を確立する。(2)抗体測定法が確立された後に、各種疾患で疫学調査を行い、疾患との関連の解析を進めていく。当初予定していた、血清Helicobacter hepaticus抗体測定系は抗原蛋白の充分な供給を得る事ができず、H. hepaticus抗原蛋白を購入して測定準備が整っている。しかし、抗原蛋白は高価であるため培養を行ない抗原を得る事とした。Helicobacter hepaticus ATCC51449株を購入し培養を試みたが当初は十分な菌を得る事ができず、培養条件の調整に時間を費やしたが、ようやく、少しずつ抗原を得られるようになった。抗体測定の方法や対象とする検体に変更があったため、再度倫理審査の申請を行なうなど時間を要した。予定していた抗体測定方法が使用できなかったため、一時、実験が滞った。新たなH. hepaticus抗体測定方法の考案と下準備のため、実験には取りかかれず、次年度使用額が生じた。小児のH. hepaticus抗体保有率の疫学調査をHelicobacter pylori(H. pylori)抗体保有との関連で調査を開始している。肝機能障害の有無と肝・胆道疾患、特に胆道閉鎖症と術後の肝障害とH. hepaticus抗体保有の関連を検討する。研究分担者が保有していたH. hepaticus測定用の抗原蛋白の供給が充分でなく、精度の良い抗体測定系の確立を行なう事を新たに追加した。Helicobacter hepaticus ATCC51449株からの培養を試み、抗原蛋白を量産し、House ELISAの作成を行なうこととした。また、抗原を二次元展開し、血清抗体を反応させ、プロテオーム解析による血清H. hepaticus抗体群の解析による小児の血清が反応するHelicobacter hepaticus抗原蛋白の解析を行なう。
ミトコンドリアによる細胞死調節機構を応用した脳保護法の開発

脳障害にはapoptosisが関連している。apoptosisはその関連タンパクが徐々に切断されるが、このカスケードの発生をとらえることが脳障害の発生機序を解明するために重要なツールとなる。初代神経培養細胞においてapotosisの発生をとらえるためにFRET(蛍光共鳴エネルギー移動)を応用し、apotosis関連タンパクの切断の画像化を試みた。その結果、初代培養細胞においてFRETの変化をとらえることに成功し、その定量的な解析方法を考案した。本研究ではFRET解析という手法を用い、Bidの分解を可視化することを目標とした。Bidは、アポトーシスが発現する際にカスパーゼにより切断されるタンパクである。このタンパクの両端にCFPおよびYFPを付けたものがFRET現象(蛍光共鳴エネルギー移動、Fluorescence resonance energy transfer)を起こす。このCFPおよびYFPという二つの異なる励起光を発生させるprobeをplasmidを用いて細胞内に発現させ、このタンパクが分解されると励起光に変化が出るのでBid分解を光の変化で捉えることができる。初代ラット海馬培養細胞を35mmディッシュに調整し、30分のOGD(無酸素無糖培養)にてapoptosisを起こし、120分のOGDにてnecrosisを起こしたものを観察対象とした。これまでの検討では、FRETの変化は細胞間差があり、あるいは細胞内のミトコンドリア間においても時間経過がまちまちであることがわかってきた。しかし、これまでFRET解析により得られた画像は、両者を正確に重ね合わせ、さらに定量分析することができなかったため詳細な検討ができなかったが、今回導入したソフトであるmetamorphにより画像解析が格段に向上し、時間的空間的分解能が向上した。今後、アポトーシスの時間経過におけるBid切断の過程を明らかにすることの道筋が見えてきた。また、このBid切断過程におけるミトコンドリア膜電位も検討の対象であるが、電位依存性色素TMREにて蛍光強度の変化により定量化した画像も同時に取得可能であり、これらの画像処理技術を用いることにより、ミトコンドリア膜電位とBidの切断の関係を明らかにし、虚血に伴うアポトーシスの過程を明らかにしつつある。発達期の脳神経細胞における麻酔薬の為害作用は、麻酔臨床上の大きな解決すべき課題である。麻酔薬によるアポトーシス誘導を検討するため、薬剤投与後の神経細胞のカスパーゼ活性を測定した。カスパーゼ活性の測定にはFRETを用いた。FRETプローブであるプラスミドDNAのpFRET-Bidを神経細胞に導入した。カスパーゼ活性によりBidが切断されFRET現象が消失すると、YFP励起光の蛍光強度が減少しCFPの蛍光強度が増大する。この原理を用いてカスパーゼ活性をin-situで可視化することを試みた。新生仔ラットから大脳皮質を取り出し、0.25%トリプシン/EDTAで処理し、ポリエチレンイミンコーティングした35mmシャーレの血清培地上で培養した。培養5日後にFRETプローブのプラスミドDNAをLipofectamine 2000を用いて神経細胞に導入し、24-48時間後に共焦点レーザー顕微鏡下にて観察・測定した。しかし、pFRET-Bidの導入により測定された蛍光強度は小さく、薬剤投与後の蛍光強度変化をとらえるのが難しいことから、新たにSCAT3.1/pcDNA4-HisMaxBを理化学研究所から譲り受け、実験に用いることにした。SCAT3.1はYFPの部位により蛍光強度の強いVenusを発現させるプラスミドDNAで、この遺伝子導入により蛍光強度が増大しFRET現象が観察された。カスパーゼ活性を誘導する薬剤として選択したプロテインキナーゼ阻害剤のStaurosporineおよびプロポフォールの2,6-Diisopropylphenolの投与は、カスパーゼ分析キットのSulforhodamine FLICA (Fluorochrome Inhibitor of Caspase)を用いて培養神経細胞にカスパーゼ活性を誘導することが確認された。現在、Staurosporineの投与によるCFPとVevusの蛍光強度変化を経時的に測定している。今後は、より安定した神経細胞の培養条件と細胞障害性の小さい遺伝子導入方法を検討し、麻酔薬によるカスパーゼ活性およびアポトーシス変化の誘導を経時的に観察する手法を確立する。本年度はこれまでのFRET解析の方法論をまとめて、論文として発表した。Nakazawa H, Nishimura A, Suga K, Mishima T, Yorozu T, Iijima T. FRET-based evaluation of Bid cleavage ina single primarycultured neuron. Neurosci Lett. 2012Dec 20.さらに研究を進め、caspase8の切断酵素が活性化するとFRETが消失するプローブを導入したtgマウス(系統名:C57BL/6J-Tg(CAG-SCAT3)18Miur理研リソースNo:RBRC03114)胚から孵化させ、vectorの導入では十分に観察できなかったcaspase8活性を可視化する蛍光をすでに遺伝子上に発現しているマウスを実験に利用できるようになった。

現在、麻酔薬の幼弱脳における障害作用を検討するためにプロポフォールをこれらの細胞に負荷することによるcasapase8活性の変化をFRET解析により観察している。プロポフォールによるアポトーシスの誘導を実験的に示すには、その濃度および潜時を特定しなければならない。そのため、基礎実験としてマウス培養細胞のプロポフォールを負荷した際のcaspase8活性をwestern blottingにて定量解析し、実験モデルの構築を行っている。この結果によりプロポフォールによるcaspase8活性をFRETにて確実に観察するモデルを構築することを目標としている。今後さらに検討を進め、tgマウスを用いて生体内でアポトーシスの誘導を観察できるモデルを開発していきたい。このモデルが実現すれば麻酔薬による脳障害の機能解明に貢献することができると考える。研究代表者の所属が変わり、実験室の引っ越しなど実験系の移設に時間を必要とした。24年度が最終年度であるため、記入しない。現在、研究は進行中であり、今後1年以内に成果が得られると考えられる。
梁の部材長を考慮した確率論的安全性評価

本研究では,曲げを受ける梁の部材長が変化する時,曲げ耐力がどの様に変化するのかについて,実験値と理論値との比較を行い,理論値を導く為に用いた既存の安全性評価手法の妥当性を検証した.既存の安全性評価手法では,部材長を便宜上ある長さの各要素に分割し,各要素の耐力は完全に独立であると仮定して導いている.実験は,支点間50cmの建設用断熱材の梁を用い二点載荷を行った。そして,この純曲げ区間長を,以後“部材長"とみなし,2,5,10,15,20cmと変化させ,各100本ずつの曲げ破壊実験より,それぞれの部材長の曲げ耐力分布を導いた.すべての部材長において,曲げモーメントの増加速度は同一とし,この影響を確認する上で,部材長2cmに対しては,異なる増加速度においても100本の実験を行った。その結果,本研究で行った実験の範囲内において,以下のような結論が得られた.1.部材長の増加にともない,曲げ耐力の分布は,平均値は直線的に減少するが,標準偏差はほぼ一定値となる.2.曲げ耐力の分布は,極値I型最小値分布のあてはめが有効であり,また,この分布を仮定した場合,各部材長において,既存の安全性評価手法により導かれた理論値と実験値が,ほぼ一致した.この時,便宜上必要となる,互いに耐力が独立と考える各要素の長さは,約2cmとなった.曲げモーメントの増加速度の影響は大きく,部材長の変化による曲げ耐力分布の変化を実験より求める際には、共通の増加速度を用いる必要がある.今後の展開としては,より剛性の高い供試体を用い,今年度の実験より長い部材長に対しても,理論上必要な,耐力が独立と考える便宜上の要素長の存在を導き出し,既往の安全性評価手法が成立することを確認したい.本研究では,曲げを受ける梁の部材長が変化する時,曲げ耐力がどの様に変化するのかについて,実験値と理論値との比較を行い,理論値を導く為に用いた既存の安全性評価手法の妥当性を検証した.既存の安全性評価手法では,部材長を便宜上ある長さの各要素に分割し,各要素の耐力は完全に独立であると仮定して導いている.実験は,支点間50cmの建設用断熱材の梁を用い二点載荷を行った。その結果,本研究で行った実験の範囲内において,以下のような結論が得られた.1.部材長の増加にともない,曲げ耐力の分布は,平均値は直線的に減少するが,標準偏差はほぼ一定値となる.2.曲げ耐力の分布は,極値I型最小値分布のあてはめが有効であり,また,この分布を仮定した場合,各部材長において,既存の安全性評価手法により導かれた理論値と実験値が,ほぼ一致した.この時,便宜上必要となる,互いに耐力が独立と考える各要素の長さは,約2cmとなった.曲げモーメントの増加速度の影響は大きく,部材長の変化による曲げ耐力分布の変化を実験より求める際には、共通の増加速度を用いる必要がある.今後の展開としては,より剛性の高い供試体を用い,今年度の実験より長い部材長に対しても,理論上必要な,耐力が独立と考える便宜上の要素長の存在を導き出し,既往の安全性評価手法が成立することを確認したい.
書字作業における巧緻運動の特性とその指標に関する研究

本研究では、書字運動を特徴づける三次元運動解析パラメータを探索し、右利きの軽症の右片麻痺者6例と右利き健常者10例を対象に、左右の手による書字運動特性を解析するとともに、麻痺による書字運動の変化を検討した。左右の手で1.2,6,15cm角の3種類の大きさの平仮名「ふ」を、初めに各人の自由な書体で、次に楷書体手本をなぞらせた。評点をペン先、示指MP関節位、橈骨遠位端の3ヶ所において三次元座標からオフラインにて、書字時間、書字軌跡長、各点の運動半径、そしてその運動半径比を計算した。運動半径比とはペン先の運動半径を1とした時の他の2つの評点における運動半径比で、手や腕を固定してペン先の動きだけで書字がなされれば0に近くなり、反対にペン先と手全体が一塊となった動きでは1に近い値を示す指標である。健常者の自由書字では字体が大きくなるほどペン先は速くなり、書字時間を一定にする傾向を認めた。利き手書字の習熟性の反映と解釈できた。加速度や躍度あるいは文字軌跡長/文字半径といった書字運動や文字を構成する線のスムースさを反映するパラメータの一部で、感覚障害のある麻痺手による書字の稚拙さを示すことができた。健常者の書字運動半径比の結果で、字が大きくなるほど評点は一塊となって動くが、その一塊性は右手より左手で顕著となった。一方、右不全片麻痺者において、感覚が正常であれば健常者の右書字と同じ運動半径比の特性を認めたが、感覚障害があると小さな字でも一塊の動きになることが示された。つまり、麻痺があっても、感覚障害がなければ、書字速度は遅くなるにもかかわらず運動半径に示される利き手の習熟書字の運動特性は保たれることがわかった。巧緻運動の特徴の1つとして、身体各部の運動の独立性をあげることができるが、本研究の示す運動半径比はまさに、そういった独立性・分離性を示すパラメータといえる。平成15年度は当該2年計画研究開始の初年度で、書字運動解析のシステムを構築し、健常者を対象に実験を行った。システムは身体各部の三次元位置センサー、関節角度を示す多軸ゴニオメータ、表面筋電計で、各センサー情報をメモリー上に記録するものであり、初年度は各センサーの動作確認を行った上で、書字動作の三次元位置解析に焦点をあてた。健常成人10名を対象に左右の手で、1.2,3.5,9.5cm角の3種類の大きさの平仮名「ふ」を、初めに各人の自由な書体(普段書いている書体)で、次に手本書体をなぞらせて、各々10字、合計1200字を記録し、自由書字となぞり書字の特性の違いを主題として検討した。評点はペン先、示指MP関節、橈骨遠位端の3ヶ所で計120Hzのサンプリングを行った。オフラインにて、汎用数値解析ソフトウェアMatlab(Cybernet社製)を用いて、書字時間、各点の軌跡長、運動半径の3つのパラメータを計算した。なお、各パラメータともペン先が紙面に触れている期間のデータを対象にし、字の粗さを補うためにスプライン補間し、各サイズとも同じ数の等間隔の点の集合として扱った。

自由/なぞり書字に関わらず書字速度は字体が大きいほど速いが、サイズによる速度変化は利き手の自由書字で大きく、利き手の通常サイズ(小さな字)での自由書字における習熟性を示す結果と解釈できた。運動半径については、利き/非利き手に関係なく、大きなサイズでは各評点は一塊となって動いているが、利き手の小さなサイズの自由書字では遠位部の独立した運動で書いていることがわかった。つまり、利き手の習熟した書字運動は時間的に効率がもっともよい動きであり、それは遠位部の独立した運動で成り立っているといえる。なお、以上の結果は第41回日本リハビリテーション医学会(平成16年6月3-5日、東京)での口演発表が受理されている。平成16年度は当該2年計画研究開始の最終年度にあたり、構築した書字運動解析のシステムを用いて、右利き健常者および右利きの軽症の右片麻痺者を対象に書字運動を解析し、書字運動が麻痺によって、どう変化するかを検討した。対象は高次脳機能障害のない軽症(SIAS stage3-5/5,握力比0.6±0.2)の右片麻痺者11名で、年齢を一致させた右利き健常者12名を対照とした。左右の手で、1.2,3.5,9.5cm角の3種類の大きさの平仮名「ふ」を、初めに各人の自由な書体(普段書いている書体)で、次に手本書体をなぞらせて、各々10字、合計1200字を記録した。評点はペン先、示指MP関節、橈骨遠位端の3ヶ所で計120Hzのサンプリングを行った。オフラインにて、汎用数値解析ソフトウェアMatlab(Cybernet社)を用いて、書字時間、各点の軌跡長、各点の運動半径、運動半径比を計算し、SPSS(日本SPSS社)によって統計解析した。なお、運動半径比とはペン先の運動半径を1とした時の他の2つの評点の運動半径比で、利き手書字では近位を固定し遠位の動きでなされことを反映して0に近い値を示す。同一サイズの書字を比べると麻痺によって書字速度は遅くなるのは当然の帰結であるが、運動半径比については麻痺の重症度でなく、関節位置覚障害の有無によって異なることがわかった。位置覚正常群では対照群とほぼ同様、すなわち利き手の小さい字の自由書字において運動半径比は0に近く、利き手書字、すなわち学習された巧緻運動特性が保たれていることが示された。位置覚障害群では利き手、非利き手に関係なく、自由・なぞり書きの全てで書字中の運動半径比が1に近い値となり、利き手の特性が失われることがわかった。
界面近傍の乱れと熱輸送機構に関する基礎的研究

本年度は,工学上現れる様々な界面の中で,平均剪断の無い液面(液側の挙動に注目),及び固体壁上に流れ方向の縦溝(リブレット)を形成した場合について,界面近傍での乱れの統計量や大きなスケ-ルの乱流渦構造に注目して基礎的な実験を行ない,またモデル化の検討を行なった.以下に主な結果を示す.(1)自由液面に隣接する等方性乱流場での速度場の基礎デ-タの収集:水槽中に作られる一様等方性乱流における乱れの各次モ-メント,相関係数などの統計量及び乱流構造が,剪断の無い条件下で隣接する液面の近傍でどのような挙動を呈するか,3次元画像処理流速計を応用して基礎的デ-タを計測すると共に,剪断の無い壁乱流の直接シミュレ-ションを行なってデ-タベ-スを構築した.(2)特殊界面に隣接する剪断乱流場での速度場の基礎デ-タの収集:二次元チャネル回流水槽内の発達した乱流が,乱流摩擦抵抗が減少するといわれるリブレットを有する壁面近傍で示す統計的性質と乱流構造を調べるため,前項と同様の実験を行なった.(3)モデル化の検討:前項の実験と並行して,界面近傍の速度温度乱れの挙動に関し,理論的なアプロ-チを試み,応力,スカラ-フラックス方程式乱流モデルの構築を試みた.本年度は、工学上現れる様々な界面の中で、固体壁面及び液面(液側の挙動に注目)を取り上げ、特に平均剪断の無い場合両界面近傍の乱れの統計量にどのような差異を生ずるかについて、基礎的な理解を得ることを試みた。以下に主な結果を示す、(1)界面に隣接する一様等方性乱流の基礎デ-タの収集:静止水槽中で垂直に振動する格子によって作られる一様等方性に近い乱流が、その上方部の液面あるいは固体壁面近傍でどのような性質を示すかについて実験的に調べた。三次元画像処理流速計を応用した計測から、乱れの各次モ-メント、相関係数などの統計量を求めた。これらのデ-タから、各々の界面近傍で特有な乱れの界面漸近挙動が現れることが明らかになった。(2)剪断の無い壁乱流の直接数値シミュレ-ション:一定速度で相対運動する平行平板間の発達した乱流の数値シミュレ-ションを行なって、平気剪断を伴わない壁乱流のデ-カベ-スを構築した。レイノルズ応力のバランスに関わる生成、散逸などの各項の評価を行なった。(3)壁面に隣接する剪断乱流場での速度の基礎デ-タの収集:二次元チャンネル回流水槽内の発達した乱流での壁極く近傍での乱れの統計量を(1)と同様に画像処理流速計によって測定し、前項の結果と比較検討した。本年度は,工学上現れる様々な界面の中で,平均剪断の無い固体面と液面(液側の挙動に注目),及び固体壁状に流れ方向の縦溝(リブレット)を形成した場合について,界面近傍の大きなスケ-ルの渦構造の挙動や,乱れの統計量に注目して基礎的な実験的検討を行なった.以下に主な結果を示す.(1)平均剪断を伴わない固体面及び液面に隣接する一様等方性乱流場:静止水槽中で垂直に振動する格子によって作られる一様等方性に近い乱流が,その上方部の液面あるいは固体壁面近傍でどのような性質を示すかについて実験的に調べた.水素気泡法による流れ場の水平,垂直断面の可視化を行ない,大きなスケ-ルの渦構造を調べた.自由液面下では,固体壁近傍に特有な乱れスケ-ルの急激な減少は発生せず,水平面内で2次元的な乱れ構造が生じることがわかった.又,三次元画像処理流速計を応用した計測から,乱れの各次モ-メント,相関係数などの統計量を求め,各々の界面近傍での界面漸近挙動をさらに調べた.(2)リブレット面に沿う剪断乱流場:二次元チャネル回流水槽内の発達した乱流で,一方の壁面にリブレットを形成し,流れの可視化を行なって壁面近傍での大きなスケ-ルの渦構造の挙動を調べた.リブレットによってストリ-ク構造のスパン方向の揺動が抑制されることが,主たる特微であることがわかった.乱れの統計量を画像処理流速計によって詳細に測定するために,極めて精度の高いリブレット面を有するテストプレ-トを製作し,来年度の測定に備えた.本年度は,工学上現れる様々な界面の中で,平均剪断の無い液面(液側の挙動に注目),及び固体壁上に流れ方向の縦溝(リブレット)を形成した場合について,界面近傍での乱れの統計量や大きなスケ-ルの乱流渦構造に注目して基礎的な実験を行ない,またモデル化の検討を行なった.以下に主な結果を示す.(1)自由液面に隣接する等方性乱流場での速度場の基礎デ-タの収集:水槽中に作られる一様等方性乱流における乱れの各次モ-メント,相関係数などの統計量及び乱流構造が,剪断の無い条件下で隣接する液面の近傍でどのような挙動を呈するか,3次元画像処理流速計を応用して基礎的デ-タを計測すると共に,剪断の無い壁乱流の直接シミュレ-ションを行なってデ-タベ-スを構築した.(2)特殊界面に隣接する剪断乱流場での速度場の基礎デ-タの収集:

二次元チャネル回流水槽内の発達した乱流が,乱流摩擦抵抗が減少するといわれるリブレットを有する壁面近傍で示す統計的性質と乱流構造を調べるため,前項と同様の実験を行なった.(3)モデル化の検討:前項の実験と並行して,界面近傍の速度温度乱れの挙動に関し,理論的なアプロ-チを試み,応力,スカラ-フラックス方程式乱流モデルの構築を試みた.
マイクロバイオセンサ-の開発

生体のもつ分子識別機能に着目して作製されたバイオセンサ-は医療分析、工業プロセス計測、環境計測などにきわめて有力な分析システムである。近年、研究代表者らのグル-プは半導体加工技術などを用いて、バイオセンサ-の微小化及び大量生産化に成功しており、各種バイオセンサ-の実用化を強力に推進することができる見通しを得ている。本研究課題では免疫センサ-、医療用酵素センサ-、環境計測用バイオセンサ-の研究の盛んなフランス・ドイツのグル-プと共同研究を遂行し、各種マイクロバイオセンサ-の開発及びそれらの実用化を図る。具体的には以下の示すように研究調査及び共同研究を遂行した。民谷助教授(東大先端研)は、ブライシュ工科大学、ペルピニアン大学を訪問、滞在し、共同研究を実施した。特にブライシュ工科大学では、シュミット教授らが新規に合成した人工脂質を水晶振動子上にLB膜法によって固定化し、これを用いて安定なにおいセンサ-を作製するための基礎特性を検討した。ペルピニアン大学では、農薬センサ-開発のために研究討論を実施した。博士課程の学生を軽部研に派遣し、具体的に共同研究を実施することとなった。横山博士(東大先端研)は、ポ-ルサバチエ大学・モ-リスコンタ教授の研究室に滞在した。コンタ教授は、電気化学的手法によるNAD_+の再生産に関する研究を行っている。すなわちNADH酸化酵素であるジアホラ-ゼ、メディエイタ-であるフェリシアン化カリウムを用いNAD^+を電気化学的にリサイクルするものである。最近では、これと乳酸デヒドロゲナ-ゼとを組み合わせた乳酸センサ-に関する研究も行っている。また分光電気化学測定により、酵素反応と電気化学反応を同時にモニタリングしている。これにより乳酸センサ-作製の最適条件を見しだしている。一方、横山は、微小バイオセンサ-の専門家であり、滞在中に、直径30μmの微小白金極上に乳酸デヒドロゲナ-ゼ、ジアホラ-ゼを固定化した微小乳酸センサ-を作製し、その特性を調べることにより、微量分析法の開発を実施した。鈴木博士(東大先端研)は、ブライシュバイク工科大学、リヨン大学、コンピエ-ヌ工科大学を訪問し、研究討議を行い、共同研究の可能性について話し合った。ブラウンシュバイク工科大学では印刷技術を利用した集積型マイクロバイオセンサ-の研究を行っているが、このような集積型バイオセンサ-では所定の箇所のみ何種類かの酵素を固定化する必要がある。この目的のため鈴木らが行っている光架橋性ポリマ-を利用した酵素固定化法は適しており、共同研究の可能性を議論した。リヨン大学では酵素溶液に浸すだけで共同結合できる膜を利用している。この方法はきわめて簡単に酵素を均一に固定化できる。この材料をマイクロサンセ-に適用する方法について検討した。コンピエ-ヌ大学では酵素固定化技術全般の日仏両国の研究の現状について情報を交換し、共同研究性を議論した。久保助教授(創価大)は、コンピエ-ヌ工科大学、ペルピニアン大学、を訪問した。コンピエ-ヌ工科大学のト-マス教授の研究室では、バイオセンサ-やバイオリアクタ-などの研究を中心に行っている。組み換え菌を利用したバイオリアクタ-については、かなり精力的に研究が進められており、制御技術としてバイオセンサ-の利用がきわめて重要と考えられた。また、ペルビニアン大学のマ-ティ教授の研究室では、農薬計測用バイオセンサ-の開発が行われている。とくにマ-ティ教授は農薬測定用の酵素とCO_2センサ-を必要としており、日本側からは、これらを供給できるため、今後この方面で共同研究をすすめていくことを話し合った。関博士(創価大)はリヨン大学のク-レ教授の研究室で共同研究を実施した。リヨン大学のク-レ教授の研究室ではホスト・ゲストケミストリ-、バイオセンサ-、LangmuirーBlodgett膜、に関する研究が行われている。特に、リン酸計測用バイオセンサ-、アセチルコリン計測用バイオセンサ、及び光ファイバ-を用いたH_2O_2、ATPおよびNAD(P)計測用バイセンサ-については精力的に研究が進められている。また、LangmuirーBlodgett(LB)膜を用いる酵素固定化法をバイセンサ-に応用するため、LB膜を作製するための基礎的研究が進められている。そこで関は日本からISFETを持参し、ク-レ教授の研究室でISFET上にベヘン酸(CH_3(CH_2) ^<20>COOH)のLB膜を垂直浸漬を用いて形成する実験を行い、特性を検討した。今後、LB膜を作製する技術に関する情報交換を行うことは、マイクロバイオセンサ-の開発において有効と考えられた。研究協力者として佐藤助教授(神奈川工大)、梶原助教授(西東京科学大)はそれぞれコンピエ-ヌ大学、ポ-ルサバチエ大学及びペルピニアン大学に訪問滞在し、熱計測型バイオセンサ-に関する共同研究のための調査を実施した。軽部(東大先端研)は、コンピエ-ヌ工科大、ブライシュ工科大を訪問し、ト-マス教授、シュミット教授と研究討論を行い、本プロジェクトを遂行するための問題点の整理を行うと共に、今後も本共同研究プロジェクトを継続すべきであるとの研究総括を行った。