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星間雲および原始太陽系星雲における氷の凝縮・蒸発機構

星間雲から原始太陽系星雲への深化の過程で,氷の凝縮・蒸発が繰り返しおこっている.この過程で物理的,化学的分別が進み多様な氷が形成される.従来はこの過程の解析に平衡凝縮理論を用いていたが,最近速度論的効果の重要生が理論的に示された.しかし,彗星や外惑星の起源にとって重要な氷についての実験的研究はほとんど行われていない.そこで本年度は,氷の凝縮・蒸発を議論する場合の基礎データとなる蒸気圧の測定と, 2成分系の氷の蒸発実験を行なった.1.実験装置......設備備品費で購入した真空チェンバーに現有のHeガス冷凍機,四重極型質量分析計,電子銃などを取り付けて,氷の凝縮・蒸発実験装置(10300K, 10^<-6>Pa)を製作した.また消耗品費を用いて2成分ガスの混合装置を製作した.2.蒸気圧の測定......低温の基板上に凝縮したH_2OおよびCO_2の温度上昇にともなう蒸気圧の変化をラングミュア法で測定した.いずれの場合も,アモルファス氷の蒸気圧は結晶の蒸気圧より1桁から4桁ほど大きく,さらに凝縮温度や凝縮速度に大きく依存して変化することが明らかになった.これまではアモルファス氷の凝縮・蒸発を結晶の氷の蒸気圧をもとに議論していたが,今回の測定により凝縮・蒸発温度がかなり低下することが明らかになった.また,新彗星からの大きなH_2Oガスの蒸発量も,説明可能となっか3.2成分氷の蒸発過程......10Kで凝縮したH_2O-COおよびH_2O-CO_2氷の温度上昇にともなう蒸発ガスの測定をおこなった. COおよびCO_2はそれぞれの平衡凝縮温度,アモルファスH_2Oの結晶化,六方晶系氷の蒸発の3段階で複雑に蒸発し,平衡凝縮論には従わないことが明らかになった.したがって,彗星からの蒸発ガスの分析から彗星の形成領域を推定するのは困難であることがわかった.星間雲から原始太陽系星雲への深化の過程で,氷の凝縮・蒸発が繰り返しおこっている.この過程で物理的,化学的分別が進み多様な氷が形成される.従来はこの過程の解析に平衡凝縮理論を用いていたが,最近速度論的効果の重要生が理論的に示された.しかし,彗星や外惑星の起源にとって重要な氷についての実験的研究はほとんど行われていない.そこで本年度は,氷の凝縮・蒸発を議論する場合の基礎データとなる蒸気圧の測定と, 2成分系の氷の蒸発実験を行なった.1.実験装置......設備備品費で購入した真空チェンバーに現有のHeガス冷凍機,四重極型質量分析計,電子銃などを取り付けて,氷の凝縮・蒸発実験装置(10300K, 10^<-6>Pa)を製作した.また消耗品費を用いて2成分ガスの混合装置を製作した.2.蒸気圧の測定......低温の基板上に凝縮したH_2OおよびCO_2の温度上昇にともなう蒸気圧の変化をラングミュア法で測定した.いずれの場合も,アモルファス氷の蒸気圧は結晶の蒸気圧より1桁から4桁ほど大きく,さらに凝縮温度や凝縮速度に大きく依存して変化することが明らかになった.これまではアモルファス氷の凝縮・蒸発を結晶の氷の蒸気圧をもとに議論していたが,今回の測定により凝縮・蒸発温度がかなり低下することが明らかになった.また,新彗星からの大きなH_2Oガスの蒸発量も,説明可能となっか3.2成分氷の蒸発過程......10Kで凝縮したH_2O-COおよびH_2O-CO_2氷の温度上昇にともなう蒸発ガスの測定をおこなった. COおよびCO_2はそれぞれの平衡凝縮温度,アモルファスH_2Oの結晶化,六方晶系氷の蒸発の3段階で複雑に蒸発し,平衡凝縮論には従わないことが明らかになった.したがって,彗星からの蒸発ガスの分析から彗星の形成領域を推定するのは困難であることがわかった.
植物微小管におけるガンマチューブリンの存在様式の解析

植物の表層微小管は細胞膜に沿って存在し、新たに合成されるセルロースミクロフィブリルの方向を決定する。セルロースミクロフィブリルの方向は細胞の伸長方向を決定するため、表層微小管の配向は細胞の伸長方向を制御すると考えられる。表層微小管の構築機構を探るためには、表層微小管の重合、脱重合のメカニズムを知る必要があると考えられるが、重合、脱重合に関与するタンパク質の解析はほとんどされていない。γ-チューブリンは微小管のマイナス端に存在し、微小管の重合核になると考えられている。動物細胞ではγ-チューブリンは中心体に局在するが、植物の表層微小管においては明瞭な局在は示されていない。植物の表層微小管におけるγ-チューブリンの局在を明らかにすれば、表層微小管の構築機構の解明につながると考えられる。本研究では1本1本の表層微小管の端にγ-チューブリンが存在するか否かを検討した。タバコγ-チューブリンcDNAの3'側の塩基配列を決定し、得られたγ-チューブリンC末端の推定アミノ酸配列を元に抗ペプチド抗体を作成した。タバコ培養細胞抽出液に対してウエスタンブロッティングを行った結果、作成した抗体は約55kDのタンパク質を認識したので、この抗体はタバコγ-チューブリンを認識すると考えられた。間期の細胞を蛍光抗体法により染色したところ、細胞表面、および細胞内部に細かい粒状の染色が見られた。タバコ培養細胞よりプロトプラストを作成し、プロトプラストゴースト(単離細胞表層)を得た。得られたゴーストを用い、蛍光抗体法で、抗α-チューブリンとの2重染色を行った結果、細胞染色で見られた粒の一部は表層微小管上に存在することがわかった。現在、電子顕微鏡レベルでのγ-チューブリンの局在を検討中である。ガンマチューブリンは微小管のマイナス端に存在し、微小管の重合核になると考えられている。動物細胞ではガンマチューブリンは中心体に局在するが、植物の表層微小管においては明瞭な局在は示されていない。植物の表層微小管におけるガンマチューブリンの局在を明らかにすれば、表層微小管の構築機構の解明につながると考えられる。本研究では1本1本の表層微小管におけるガンマチューブリンの局在を電子顕微鏡レベルで決定する第一段階として、植物由来のガンマチューブリンに対する抗体作成を行った。タバコ培養細胞BY-2からmRNAを調製し、東京大学の長田教授より提供いただいたガンマチューブリンの部分塩基配列を用いて、3'-RACE法によりガンマチューブリンcDNAの3'側断片を増幅した。塩基配列を決定したところ、得られたcDNAは2種類のmRNA由来であることがわかったが、コードするアミノ酸配列は同じであった。C末端側15個のアミノ酸配列を用いて合成ペプチドを合成し、BSAと結合させてウサギに免役した。現在、抗体作成を継続している。
R-PASを用いた減弱精神病症候群（APS）の病態の解明

減弱精神病症候群(Attenuated Psychosis Syndrome; APS)は、統合失調症や双極性障害などの精神病の発症危険性を、より早い段階で発見し、適切な早期支援に結びつけるために提唱された概念である。しかしながら、偽陽性の高さや、他の精神障害との合併率の高さなど非一様な症候群であることから、有効な心理社会的支援技法の確立には至っていない。
メタ規範論を基盤とする法概念論と法価値論の統合的再構成

第一に、法的言明について真理性を発話者・評価者へと二重に相対化する型の意味論的相対主義の適用可能性を検討した。その結果、法実証主義的な規約主義と適合的な外見にもかかわらず、不同意の存在が説明できないという古典的難点が必ずしも克服されないことから、固有の理論的長所が意外に乏しいことが明らかとなった。第二に、法的判断と判断主体の行為者性(agency)の問題を検討した。行為者の単位については、方法論的個人主義の再検討を通じて団体の実在を認めつつ、その構成員と全体の間の義務の相克について明らかにした。また、命令説から制裁説までの法モデルのスペクトラムと法的主体の行為者性の内在的連関を明らかにした。本年度の研究作業は主として相対主義意味論の検討に充てられた。本年度の作業で理解し確認されたことは、次のとおりである。まず、指標主義が不同意問題の解決に於いて難点を抱えることが確認された。意味論的相対主義についても、その相対性が使用感応性(use sensitivity)のそれにとどまる限り、殆ど同様の問題を生じさせる。これに対して、評価感応性(assesment sensitivity)を更なる感応性として導入するならば、不同意の問題の多くが解消されるという点で、MacFarlane型の評価者感応的な意味論的相対主義が優れている。ただし、同時に、規範的談話など評価者感応的な意味論的相対主義が必ずしも不同意の問題を解消しないように思われる種類の談話も存在する。相対主義意味論では二次元主義意味論に於ける一次内包と厳格化された二次内包の関係同様に視点のrigidificationの現象が生ずるが、メタ倫理学に於ける二次元主義的意味論とJackson型のア・プリオリ還元主義が生じさせる(ある種の)道徳的相対主義との類比を検討し、論者達の間で一見不同意的な状況に於ける不同意の不存在を許容できるか否かについての見解が大きく食い違う原因が、不同意が生ずると想定された状況の反事実条件法的性格に求めることができるという見解に達した。規範性の有するphenomenologicalな側面(すなわち動機付け)をそれ自体として重視するか、自らが動機付けられているところの対象の本性を重視するか、という点で「水」の現象的現れと分子的組成のそれとを巡る周知の問題と同型の問題が生じているのであり、対立(とそれゆえ相対主義意味論の可否)はメタ倫理学的内在主義のde dicto解釈とde re解釈のそれに淵源するのである。本年度の研究によって明らかにされたことは概ね以下の通りである。(1)前年度までの研究結果に依拠しつつ、法概念論に於いて不同意問題が関連するその様態を更に正確に同定し、意味論的相対主義を含む諸理論がそれをどのように取り扱いうるかを明らかにした(特に不同意問題に対応して非自然主義的実在論と当為判断の動機付け内在主義を結合しようとする立場についてその原理的難点を明らかにした)。また得られた結果の一部を論文として公刊した。(2)当為判断に関して、それが言及し、或いは対象に対して述定する当為性が、意味論的相対主義がそうするような評価者に対してのみならず、行為者に対してもまた相対化されるべきであるということを明らかにした。具体的には、集合的当為に於ける構成員行為者の貢献を求める当為(集合的当為から派生する個人的当為)と、非集合的な個人的当為が、それぞれ別種の当為についてのものであって衝突し得ないものとして行為者単位に即して相対化されるべきである(またこれによって道徳的ディレンマのある重要なクラスが無効化されることになる)ことを明らかにした。また、得られた結果の一部を公刊した。(3)行為当為と事態当為の区別に依拠しつつ、法の当為性について分類的整理を行い、命令説を始めとする古典的法モデルが、それが個別化された法規範をどのような当為として(或いは非当為として)把握するかに対応して分類されることを明らかにした。これは法の行為指導性とその規範的正当化に関わる今後の作業の基礎となる研究成果であった。これについても、得られた結果の一部を論文として公表した(ただし出版情勢から未公刊であり28年度中の公刊が見込まれている)。平成26年度の本研究課題に関わる新規申請時に、平成27年度以降に行われるべき作業として設定した3項目のうち、不同意問題の解明と、法規範の道徳的正当化の様態とそれによる法の道徳的限界の解明という2項目について、十分な進展が見られたことによる。特に後者については、刑罰と租税の規範論的相違という観点からスペイン後期スコラ学に遡る法思想史的研究成果が得られたことも大きく、順調(以上)に進展しているものと考えている。昨年度までの成果を主に実定法の分析へと応用したことが本年度の重要な成果である。(1)昨年度までに検討したように、集合的当為とその成員の個人的当為とが行為者単位へと相対化されるべきであり衝突しないものとして理解されるべきであるという点について、私法における団体の取扱、とりわけ団体が固有の権利主体性・義務主体性を有しうることを明らかにした。方法論的個人主義の棄却という点に於いていわゆる「社会科学の哲学」の現状と呼応する結果でもある。(2)行為当為と事態

当為の区別に依拠しつつ、法の当為性について分類的整理を行い、命令説を始めとする古典的法モデルが、それが個別化された法規範をどのような当為として把握するかに対応して分類されることを明らかにした。これは法の行為指導性とその規範的正当化に関わる今後の作業の基礎となる研究成果であった。これについても、得られた結果の一部を論文として公表した。(3)またこれに関連して、法規範をその意味と因果的機能からそれぞれ分節化するモデルによる実定法の分析を行った。この過程で、前者については法的推論の基本的分析に伴って、憲法の「最高法規性」の批判的分析を、後者については刑法についての新派刑法学的理解の再構成という試みがそれぞれ行われた。(4)また、本年度は移民や国境管理の問題など普通には規範倫理学・規範的正義論に分類されるような主題について、そうした主題についての典型的な議論が前提とする方法論的想定や形而上学的コミットメントについての反省を加えることによって、規範理論の批判的検討を行うという方法を複数の論考に於いて採用し、その可能性を示そうと試みた。本年度は研究計画全体の後半を開始するものであった。基礎理論的側面について、メタ倫理学についての研究成果を報告・公刊しつつ、特に民法、刑法、憲法といった実定法分野への応用の基本的作業が公刊されたため、この点は26年度の本研究課題の申請時に設定された研究計画通りに進められたと言える。また、本年度の研究は社会科学の哲学や分析形而上学などの近年の進展の、法的・道徳的問題への応用を示し、本研究課題に後続すべき研究課題を示すものともなった。昨年度までの成果をふまえ、実定法の分析への応用を更に進めたことかが本年度の重要な成果である。特にこの作業に関して昨年度来研究協力を行ってきた研究者との共著書が刊行されたことは最終年度の特筆すべき成果として挙げられよう。なお、具体的な研究内容の進展については、(1)昨年度までに検討したように、方法論的個人主義の棄却に関しては、そこで示唆されたように更に進んで「社会科学の哲学」との関係に於いて研究を進めた。(2)既に昨年度までに行為当為と事態当為の区別に依拠しつつ、法の当為性について分類的整理を行い、命令説を始めとする古典的法モデルを分類する作業が進められたが、本年度はさらなる実定法への応用として、租税法(的)規範と刑法(的)規範の概念的関係についての解明が行われた。その成果の一部が論文として公表されている。(3)昨年度に明らかになった研究課題としてのフィクション論の取り組みが進展した。具体的には、法的言明の中でも事実認定を取り扱う言明が、記述的でありながら認知的反駁を受けないという特殊な性格を持ちながら、にもかかわらず国家権力の発動の正統性の基盤として用いられることによって、現実に「錨をおろす」ために、フィクション一般と同視し得ないことを明らかにした。これまでの作業が、メタ倫理学・メタ規範理論の法概念論への素直な応用という性格をある程度有していたのに対し、本年度の進展によって法概念論固有の問題が立ち現れるに至ったといってよい。本年度はこれまでの移民や国境管理の問題なに加えて、性的倫理など普通には規範倫理学・規範的正義論に分類されるような主題について、そうした主題についての典型的な議論が前提とする方法論的想定や形而上学的コミットメントについての反省を加えることによって、、その可能性を示そうと試みた。第一に、法的言明について真理性を発話者・評価者へと二重に相対化する型の意味論的相対主義の適用可能性を検討した。
表面張力を利用した水上微小磯械の研究

これまでに得た水槽実験のデータをまとめて、以下の結論を得た。1)水面に浮上する微小物体に働く上下方向の流体力は、浮力と表面張力そのものによる力の他に、水面の変形によって生ずる静圧による力がある。このため主に浮力のみによる、完全に水没した物体(没水体)に比較して、はるかに有利である。2)1)の流体力は、角柱のように角のある物体が、円柱のように角のない物体より、流体力の大きさも上下の安定条件も優れている。3)水面に浮上する微小物体に働く水平方向の流体力は、相対速度があると水面が物体の前後で非対称形になるため、表面張力や静圧に起因した、それぞれの抗力成分が発生する。しかし、発生する全抗力は全ての成分を考慮しても、完全に水没した物体と比較すると、定量的にやや少ない。従って微小機械の前進力として、水面に浮上する微小物体に働く水平方向の流体力を使用することは、没水体に働く水平方向の流体力を使用するより有利ではない。4)アメンボの形状や機構は、上記の結論からみると、表面張力機械として非常に優れている。すなわち、没水体に比べてはるかに大きい上下方向の力を利用して、胴体を空中に維持して、前後方向の抵抗を没水体の約1000分の1に減らし、必ずしも大きくない推進力でも高速かつ省エネルギで移動できる。そして脚部を、駆動時には水面上で戻し時には空中で運動させ、高効率の推進を可能にしているさらに以上の結論に基づき、表面張力を利用した機構の一例として、回転型の微小機械を提案し試作した。本年度は、まず、CFDによる数値解析と水槽実験を合わせて行い、表面張力を受ける2次元物体の断面形状および運動を調べた。CFDによる数値解析はFluent社の市販コードを用いて、水面の形状変化を考慮して行った。この結果、計算は初期水面形状や格子形状の与え方に強く影響されることが判明し、計算の信頼性を高めるための初期水面形状や格子形状などが明らかになった。一方、水槽は回流式のものを自作した。その大きさは70cmX50cmで流速は020cm/秒であり、実験目的のために格子を用いて、表面波を極力抑える工夫をした。この水槽を用いて定常流中で2次元物体が形作る水面形状と物体に働く流体力を同時計測した。水面形状はCCDカメラにより光学的に計測し、流体力はロードセルを用いて計測した。以上の結果、準静的な場合には円柱よりも角柱の方が、表念張力を利用した水面歩行ロボットの安定性を高められること、物体の非定常運動の効果が大きいこと等を定量的に明らかにした。続いて、表面張力を用いて水面歩行運動を行なう生物の代表として、アメンボの運動を回流水槽で観察した。その結果、脚を非定常に(加速度を持って)動かすことにより効率的に推進している可能性があること、およびアメンボの成虫と幼虫では、体のサイズが違うために運動方法が異なることがわかった。また、アメンボの足の断面形状を測定し、その形状は流体力学的特性よりもむしろ構造力学的な特性を主に満足するように出来ていることを見いだした。昨年度の研究の結果、数値解析と水槽実験の差が大きいことが判明した。この差を検討したところ水槽実験に使用した回流水槽の大きさが不足して、水槽壁の影響および流速の不均一性が存在した可能性を見出した。本年度は大型の回流水槽(5.5mX1.6m)を用いて実験系を再構築し、新たにデータを取得した。その結果、昨年のデータはおおよそ2割ほど流体力を過大評価していたことを確認した。また過重の大きさには水の表面形状が大きく関係することが理論的解析より予想されるので、荷重測定と同時に水の表面形状を光学的に計測した。また物体の断面形状を変化させて定常流中で流体力を計測し、どのような断面形状が定常流中で大きな流体力を生み出すか検討した。その結果、角柱の方が円柱よりも大きな流体力を発生することがわかった。さらにアメンボの泳ぎでは、アメンボに発生する推進力をテザード状態で定量的に測定することに成功した。アメンボは定常状態の角柱や円柱より、はるかに大きな推進力を発生していることがわかった。以上の実験的研究に加えてCFDによる数値解析を昨年に引き続き行った。Fluent社の市販のCFDコードを用いて、実験結果を合理的に説明できる解を求めたが、流体力と表面の変形が連成する解は予想以上に難しく、定性的に水の表面形状が流体力に大きく影響するという結論を得ることができただけであった。

しかし、発生する全抗力は全ての成分を考慮しても、完全に水没した物体と比較すると、定量的にやや少ない。従って微小機械の前進力として、水面に浮上する微小物体に働く水平方向の流体力を使用することは、没水体に働く水平方向の流体力を使用するより有利ではない。4)アメンボの形状や機構は、上記の結論からみると、表面張力機械として非常に優れている。すなわち、没水体に比べてはるかに大きい上下方向の力を利用して、胴体を空中に維持して、前後方向の抵抗を没水体の約1000分の1に減らし、必ずしも大きくない推進力でも高速かつ省エネルギで移動できる。そして脚部を、駆動時には水面上で戻し時には空中で運動させ、高効率の推進を可能にしているさらに以上の結論に基づき、表面張力を利用した機構の一例として、回転型の微小機械を提案し試作した。
NDRG2 欠損マウスは全身性 AKTリン酸化によりがんを含む各種成人病を引き起こす

成人T細胞白血球・リンパ腫(ATLL)の病態解析からNDRG2(N-myc downstream-regulated gene 2)をPI3K/AKT情報伝達系を制御するがん抑制遺伝子候補として同定した。NDRG2欠損マウスは全身で恒常的にAKTリン酸化が亢進し、さまざまな臓器で腫瘍形成を示した。さらに、脳神経疾患、心肥大および脂肪肝等の循環器疾患に関与していることを明らかにした。NDRG2の機能解析並びに欠損マウスの病態解析ががんを含む各種成人病に対する病態解明と新規診断治療法の開発につながる可能性を示唆した。NDRG2(N-myc downstream regulating gene 2)は多くの固形がんにおいて特異的発現低下が見られ、がん抑制遺伝子として知られる。我々は成人T細胞白血病や口腔がんの解析からNDRG2がPI3K/AKT情報伝達系の活性抑制に働くことを発見し、さらなる解析を進めるためにNDRG2欠損マウスを作製した。組織からのタンパク質を使ったウエスタンブロットで、特に脳、心臓、肝臓でNDRG2の発現が高く、ホモ欠損マウスでは完全に発現が消失している一方で、AKTリン酸化が増加していた。長期間(6-24ヶ月)飼育すると、NDRG2欠損マウスでは生存率が低下した。死後解剖してみると肝臓、肺などの臓器に腫瘍が見られ、リンパ腫と思われる腫瘍も認められた。またNDRG2欠損マウスでは脂肪肝や心肥大を起こしていた。NDRG2はがん抑制遺伝子として働いている一方で、心疾患や循環器疾患の発症にも関与している可能性を示唆した。NDRG2欠損マウスでは加齢に伴い耐糖能が変化し、絶食後グルコース値が増加しており、また、病理学的所見から肝臓に脂質の蓄積が認められた。心臓においても重量の増加、心筋の肥大が認められ、NDRG2欠損による循環器疾患の発症が明らかとなった。発がん物質投与により、NDRG2欠損マウスでは肝臓等に腫瘍が誘発されていた。腫瘍形成および循環器疾患の発症のメカニズムとして、NDRG2はPTEN/AKT/GSK3betaのリン酸化を減少させ、またIKK/IkBa/NFkappaB系を制御していることが明らかとなった。NDRG2はPTENと直接結合することによりPTEN活性を調節し、下流シグナルを制御している可能性を示唆した。NDRG2の発現低下がこれらのシグナル伝達系の異常な活性を惹起し、ひいてはさまざまな成人病を引き起こす可能性を示唆した。ヘテロ同士を掛け合わせた結果、メンデルの法則に従い、野生型:ヘテロ:ホモが1:2:1で生まれた。NDRG2欠損マウスは短期間(6ヶ月)では野生型に比べて明らかな外見的差異はみられなかった。さらに、長期間(6-24ヶ月)飼育すると、NDRG2欠損マウスでは生存率が低下した。NDRG2はアルツハイマー病において高発現し、抗うつ薬イミプラミンにより脳内のNDRG2発現が低下することから、脳神経疾患に関与している可能性がある。そこでNDRG2欠損マウスおよびイミプラミン投与マウスを解析することでNDRG2の作用を検討した。情緒の状態を調べるために尾懸垂試験およびホールボードを用いた行動実験を行い、NDRG2欠損マウスで明らかに、情動行動の改善が認められた。さらに、野生型マウスにイミプラミンを投与すると脳内のNDRG2発現が低下し、AKT活性が亢進し、情動行動も改善した。このことから、NDRG2が情動行動を制御している可能性を示唆した。NDRG2は、N-mycにより発現低下する遺伝子NDRG1ファミリーとして同定された遺伝子である。数多くの固形がんでプロモーターメチル化により発現低下し、各種がん細胞系でNDRG2過剰発現によりAKTリン酸化が抑制され、細胞増殖を押さえられた。構造的にはHydrolase様ドメイン構造を持つものの酵素学的活性は見つかっていない。正常組織では脳、心臓、肝臓などで高発現しており、特に脳ではアルツハイマー病に多く発現しており病態との関連性が示唆されている。さらに抗うつ薬イミプラミンが脳組織におけるNDRG2の発現を抑制し抗うつ効果を発揮することが知られている。

虚血・再潅流傷害の動物実験でNDRG2の発現が低下し、またNDRG2のサブファミリーであるNDRG4の発現低下が心電図上でQT延長による心停止突然死の原因であると疑われており、心疾患に対する関連が示唆されている。このことから、NDRG2はがん抑制遺伝子として作用するだけでなく、脳/神経疾患や心血管病に対しても関連が示唆されている。また、低酸素、ストレスなどで発現が誘導されるストレス応答遺伝子である事も幾つか報告されている。我々は成人性T細胞白血病リンパ腫(adult T-cell leukemia-lymphoma; ATLL)、口腔がん等固形腫瘍の統合的ゲノム解析を行ない、NDRG2発現が、網羅的遺伝子発現解析によりATLLで有意に減少していた。そこでNDRG2欠損マウスを作成したところ、NDRG2の発現低下に伴い、各臓器でAKTリン酸化が亢進していた。NDRG2欠損マウスの解析を行うと情動行動の改善、心血管疾患、さらにはがんを発症していた。NDRG2はがん抑制遺伝子として働いている一方で、情動行動や心血管疾患に対しても関与していることが明らかとした。NDRG2欠損マウスを長期間にわたって経過観察した結果、ホモおよびヘテロ欠損マウスで野生型マウスに比べて早期に死亡し、安楽死後臓器を確認したところ各種臓器で腫瘍形成および心肥大、脂肪肝が認められた。NDRG2欠損によるAKT活性上昇がメタボリックシンドロームおよび糖尿病、さらには心疾患を引き起こすかどうか検討を行う。N-エチル-N-ニトロソ尿素(N-ethyl-N-nitrosourea:ENU)を単回腹腔内投与により、NDRG2欠損マウスと同じように情報伝達系PI3K/AKT経路の活性が増加するrasH2マウスにおいて肺、肝臓および胃で腫瘍が誘発されることが知られている。そこでNDRG2欠損マウスにも同様の処理を行い、発がん機構を検討する。NDRG2はPI3K/AKT情報伝達系を調節するがん抑制遺伝子であることが示唆されるが、詳しい分子機構については不明な点が多い。AKT上流(PTEN,PI3K)、下流(FOXOs,GSK3beta,mTOR等)のシグナルやクロストークして作用するシグナル(IKK,MAPK等)についてさらに詳しく研究する。Mouse embryonic fibroblast (MEF)を作製し、また癌細胞株にNDRG2を過剰発現させることにより、NDRG2の機能の解析を目指す。動物実験を行うため、マウスの維持管理に費用を必要とする。さらに、マウス実験および細胞実験から得られた試料を解析するために、免疫染色、RT-PCR、ウエスタンブロット等に使用する抗体や酵素の購入のために費用が必要となる。
日本におけるクリティカルケア看護師のモラルディストレス尺度の開発

看護師のモラルディストレスは、職務満足や離職に影響をすることが問題となっている。モラルディストレスとは、倫理的に適切な行動が必要であると分かっていても妥協しなくてはならず、その行動ができない時に起こる苦痛な気持ちや心理的不安定さである。申請者は、クリティカルケア看護師の臨床状況に特有の困難感や無力感は、倫理的な苦悩の体験を伴っていることを浮き彫りにした。しかし、現時点の日本においてクリティカルケア看護師に特化したモラルディストレスを測定する尺度は無い。本研究では、日本におけるクリティカルケア看護師に特化したモラルディストレスを測定できる尺度の開発および、測定尺度の信頼性、妥当性を検証する。
薬物トランスポーター機能をヒトinvivoで評価可能なプローブ薬の開発

トランスポーターの機能をヒトin vivoで評価できるプローブ基質・阻害剤となる薬物のin vitro試験による探索、ならびにヒト臨床研究による検証を複数実施した。その結果として、腎取り込みトランスポーターOAT1, OAT3, OCT2、腎排出トランスポーターMATEs、肝取り込みとランポーターOATPs、胆汁排泄トランスポーターMRP2などに対するヒトに適用しうるプローブ基質、阻害剤が見出された。本研究では、医薬品の体内動態に影響を与える因子の-つとしての薬物トランスポーターの機能をヒトin vivoにおいて定量的に推定するためのプローブ基質・阻害剤の探索、並びにそれらを用いることでヒト生体におけるトランスポーターの役割を予測する方法論の開発を目指したものである。これらの目的を達成するために、in vitro実験によるプローブ薬物の基質認識・阻害特性の検証、動物実験を介したプローブ薬物によるトランスポーター機能検証に関する検討、さらには、ヒト臨床試験を行い、プローブ薬物を用いたヒトin vivoにおけるトランスポーター機能の推定法の確立までを行うものである。本研究では、肝臓・腎臓・小腸に発現する各種薬物トランスポーターに対するヒト臨床で適用可能なプローブ基質および阻害薬の探索を進めると共に、臨床研究を行い、適切な機能評価のための投与法および評価方法を構築することで、実際の利用法を提案することを目的としている。本年度は、腎臓におけるOAT1,OAT3の機能を評価しうるプローブ薬物の探索のため、遺伝子発現細胞およびヒト腎スライスを用いたin vitro実験、ならびにOAT1,OAT3ノックアウトマウスを用いたin vivo実験を行い、OAT1,OAT3それぞれのプローブ薬としてadefovir,benzylpenicillin(PCG)を候補薬物とし、p-aminohippurate(PAH)をOAT1選択的阻害剤として、またprobenecidがOAT1,0AT3両方の阻害剤として用いうることを見出した。次に、ヒト臨床研究を実施し、adefovir,PCGに対するprobenecid,PAHの阻害効果を阻害剤の投与量を変化させる4期クロスオーバー試験を行ったところ、adefovirについては、PAH,probenecidともに腎クリアランスの阻害効果が見られ、OAT1のプローブ薬として用いうる可能性が考えられた。一方、PCGについては、probenecidの併用により腎クリアランスの低下が見られたが、PAHとの併用では予想に反して、腎クリアランスの上昇が観察された。これはおそらくPCGの再吸収がPAHにより阻害されたものと推定しており、検討を進めている。さらに、腎臓の排出トランスポーターであるMATEに対する臨床で用いうる阻害剤を発見しており、他のトランスポーターに対する阻害定数から考えても非常に漁TE選択的に阻害をかけることが示唆され、今後臨床研究を行い、この阻害剤のin vivoにおける阻害効果を観察することを考えている。本年度は、昨年度に引き続き、ヒトにおけるMRP2の機能を診断できるプローブ薬として、MRI造影剤Gd-EOB-DTPAに着目したin vitro研究を実施した。Gd-EOB-DTPAの肝取り込み機構について調べたところ、OATP1B3により主に肝取り込みされることが示唆される結果となった。また、胆汁排泄トランスポーターとしてMRP2の良好な基質となることが明らかとなった。従って、肝臓内における本薬剤の集積をイメージングにより定量することで、OATP1B3,MRP2の機能をヒトin vivoで見積もることができる可能性が示唆された。また、小腸の上皮細胞から血管側への排出に関わるトランスポーターとしてMrp3が挙げられるが、これまで消化管吸収における役割は不明であったが、マウスを用いた検討により、各種グルクロン酸抱合体や葉酸の消化管吸収を促進する方向で機能していることが明らかとなった。さらに、MRP3,MRP4は肝臓の血管側にも発現しているが、これらの機能をin vitro実験系として模倣するために、肝取り込み・胆汁排泄に関わるトランスポーターを両方発現する細胞にさらにMRP3,MRP4を発現させたトリプルトランスフェクタントを構築したところ、計細胞輸送の低下が見られる化合物が複数見つかり、それら化合物は、MRP3,MRP4ノックアウトマウスにおいても胆汁排泄の低下がみられたことから、MRP3,MRP4の胆汁排泄における寄与を知るための有用な実験系を構築することができた。本研究では、医薬品の体内動態に影響を与える因子の一つとしての薬物トランスポーターの機能をヒトin vivoにおいて定量的に推定するためのプローブ基質・阻害剤の探索、並びにそれらを用いることでヒト生体におけるトランスポーターの役割を予測する方法論の開発を目指したものである。本年度は、トランスポーターと代謝酵素両方が薬物のクリアランスに関係しているatorvastatinにおいて、どちらが肝クリアランスに対して大きく寄与しているかを定量的に決定するための臨床研究を実施した。Atorvastatinの肝取り込みトランスポーターOATPsのプローブ基質であるpravastatin, CYP3A4の選択的基質であるmidazolamをatorvastatinと被験者に同時投与し、各薬物の血中濃度を測定した。

さらに、臨床投与量でOATPsを阻害できるrifampicin、CYP3A4を阻害できるitraconazoleの併用投与を実施し、各薬剤の薬物動態の変動を観察した。その結果、pravastatinは、rifampicinによって血中濃度の上昇が見られ、midazolamは、itraconazoleによってのみ血中濃度が上昇した。これは、プローブ薬物が予想通り機能していることが実証されたこととなる。この条件下でatorvastatinの血中濃度変動を観察したところ、rifampicinでは大きく血中濃度の上昇が見られたが、itraconazoleによっては、血中濃度は変動しなかった。一方で、atorvastatinの主代謝物(1-OH体)の量は低下していることから、CYP3A4による代謝は阻害されていた。すなわち、これらの結果から、atorvastatinの肝クリアランスの律速段階は、OATPsによる肝取り込み過程にあることが示唆された。本研究では、ヒトin vivoでトランスポーター機能を定量的に評価しうるプローブ薬探索と、それを用いた定量的な薬物動態予測法の開発を目的とした研究を進めてきた。本年度は、プローブ阻害剤のin vivoにおける効果を予測することを目指して、薬物間相互作用の簡便な予測法について検討した。既知のOATPトランスポーターを介した相互作用と考えられる臨床報告の情報を収集し、それを阻害剤の最大血中非結合型濃度一定とみなして計算した阻害率から、血中濃度上昇を予測することを試み、あわせてその折の仮説の妥当性について検証した。その結果、false-negativeを避けた予測を行うには、消化管アベイラビリティの阻害による上昇の考慮、肝臓入口の最大非結合型阻害剤濃度の利用、取り込み+排泄/代謝の両過程の最大の阻害率の乗算の実施が有効であることを示した。また、一方、取り込み阻害だけを考慮した場合では、若干false-negativeな予測は増えるが、予測精度としては、むしろ高く、このことから、OATP基質が絡む薬物間相互作用は、主に取り込み過程の阻害を考えることが重要であることが示唆できた。さらに、プローブ薬のin vitro薬物動態評価法として、ヒト肝細胞・ヒト腎スライスを用いることで、ヒトにおけるトランスポーター基質薬物の肝・腎クリアランスを良好に予測可能であることを示した。
変動次数擬微分作用素で生成されるマルコフ過程の性質の研究とその非線形解析への応用

退化するLevymeasuerを持つ積分作用素を生成元とする純飛躍型のマルコフ過程が適当な条件の下では存在する事は知られている。この純飛躍型のマルコフ過程が遷移密度関数を持つための条件を調べる事が最終の目標である。最近、この種の研究には九大の国田教授がマリアバン・カリキュラスを用いて結果を出している。しかし、我々は擬微分作用素の理論を用いて、この目標へのアプローチを試みた。そして、我々の研究をR^d上のLevy measuerが各x毎に互いに独立なベクトルθ_j(x)(j=1,2,...,d)方向にのみに台をもつケースに限定した。その結果、次のような生成作用素Lによって生成されるMarkov過程は遷移密度関数を持つ事がわかった。生成作用素Lは但し、θ_j(x)(j=1,2,...,d)はR^d上のR^d-値関数で、滑らかで、かつその全ての導関数が有界であり、|θ_j(x)|=1を満たすものとする。さらに、Θ(x)=(θ_1(x),θ_2(x),...,θ_d(x))としたとき、Θ(x)^*Θ(x)の固有値は一様に下からある正数で押さえられていることも仮定しておく。また、n_j(x,y)(j=1,...,d)も滑らかな関数で、通常の条件を満たしているものとする。また、αは1<α<2を満たす定数とする。研究課題の一つである非線形微分作用素と確率過程との関係についての成果は得られなかった。しかし、その情報収集中の成果として菊地が次のような成果が得た。双曲型方程式u_<t,t>-u_<x,x>=0を自由境界条件u<x/2>=u<t/2>=Q^2on(0,∞)×(0,∞)∩∂{u>0}のもとで考察した。この問題はAlt-Caffarelliが楕円型方程式に対して考察したものであるが、これを双曲型方程式に適用したものである。適当な条件の下で、局所古典解の存在と一意性を証明した。また、ある種の4階非線形放物型方程式の近似解をRotheの方法と直接変分法を組み合わせた方法で構成し、極限値の存在を示すのに幾何学的測度論の手法を用いている。今、興味のある問題は退化を許すLevy mesureを持つ作用素を生成作用素とする純飛躍型のMarkov過程が存在し、かつその過程が遷移確立密度関数を持つための十分条件を求めることである。現時点で得られている結果は次のようなことである。は基本解p(l,x,y)が存在することを示さねばならない。この問題の難点は作用素Lの表象a(x,ξ)=Σ^d_<j=1>aj(x_1Oj(x)・ξ)但し、はS^n_<0.1>となることである。このことは従来の擬微分作用素の理論を直接適用することができない。

しかし、我々は次のようなcut off functionを導入することによって基本解を得ることに成功した。そのcut off functionとはX_j(x,ξ)=ψ(|θ_j(x)・ξ|1<p>^p)と定義する。但し、このLに対するMartingal問題の解とこの基本解とを合わせて考えることにより我々の主張が得られる。(今年度、1998年度、北海道大学の特別講演、及び熊本大学で開かれたシポジュムとで発表)退化するLevymeasuerを持つ積分作用素を生成元とする純飛躍型のマルコフ過程が適当な条件の下では存在する事は知られている。この純飛躍型のマルコフ過程が遷移密度関数を持つための条件を調べる事が最終の目標である。最近、この種の研究には九大の国田教授がマリアバン・カリキュラスを用いて結果を出している。しかし、我々は擬微分作用素の理論を用いて、この目標へのアプローチを試みた。そして、我々の研究をR^d上のLevy measuerが各χ毎に互いに独立なベクトルθ_j(χ)(j=1,2...,d)方向にのみに台をもつケースに限定した。その結果、次のような生成作用素Lによって生成されるMarkov過程は遷移密度関数を持つ事がわかった。生成作用素Lは但し、θ_j(x)(j=1,2,...,d)はR^d上のR^d-値関数で、滑らかで、かつその全ての導関数が有界であり、|θ_j(x)|=1を満たすものとする。さらに、Θ(x)=(θ_1(x),θ_2(x),...,θ_d(x))としたとき、Θ(x)^*Θ(x)の固有値は一様に下からある正数で押さえられていることも仮定しておく。また、n_j(x,y)(j=1,...,d)も滑らかな関数で、通常の条件を満たしているものとする。また、αは1<α<2を満たす定数とする。研究課題の一つである非線形微分作用素と確率過程との関係についての成果は得られなかった。しかし、その情報収集中の成果として、菊地が次のような成果が得た。双曲型方程式u_<t,t>-u_<x,x>=0を自由境界条件u^2_x=u^2_t=Q^2on(0,∞)×(0,∞)∩∂{u>0}のもとで考察した。この問題はAlt-Caffarelliが楕円型方程式に対して考察したものであるが、これを双曲型方程式に適用したものである。適当な条件の下で、局所古典解の存在と一意性を証明した。また、ある種の4階非線形放物型方程式の近似解をRotheの方法と直接変分法を組み合わせた方法で構成し、極限値の存在を示すのに幾何学的測度論の手法を用いている。
トレーニングによる心肥大と不整脈に心血管系遺伝子がおよぼす影響について

大学の陸上部に所属している男子長距離選手21名を対象として、スポーツ心臓と心血管系遺伝子多型について検討し、以下の結果を得た。それぞれの値はmeam±S.D.にて示す。1.アンギオテンシン変換酵素(angiotensin converting enzyme、ACE)遺伝子の遺伝子多型についてはDD型2名(9.5%)、DI型9名(42.9%)、II型10名(47.6%)であった。またアンギオテンシノーゲン(angiotensinogen、AGT)遺伝子の遺伝子多型についてはTT型11名(52.4%)、MT型10名(47.6%)であった。2.心電図では、トレーニングによる明らかな徐脈(HR494±7.7/min)と左室高電位(RV5+SV14.26±1.12mV)が認められた。心エコーでは、LV mass(263.3±47.3g)にトレーニングによる増大傾向がみられた。しかしながら、ACE遺伝子多型およびAGT遺伝子多型について有意な変化は見られず、いずれも心肥大とは関連していなかった。3.加速度脈波については、ACE遺伝子多型のDD型+DI型に総合的な血管機能指数(APG-AI)の低下が認められた。4.不整脈については、ホルター心電図にて2秒以上のpauseが17名中11名(64.7%)に高率にみられた。また最低心拍数がAGT遺伝子多型のTT型において、MT型より低値であった。大学の陸上部に所属している長距離選手13名を対象としてスポーツ心臓の変化について検討した。それぞれの結果についてはmean±S.D.にて示す。1.心電図では心拍数50±2.0/min,左室電位差4.41±1.26mVがみられ,トレーニングによって明らかに徐脈と左室高電位差が認められた。またST上昇が12名(92.3%)にみられ,従来の報告よりも高頻度であった。3.運動代謝能力については最大摂取酸素量71.9±4.Oml/kg/min,無酸素作業閾値55.0m±4.7ml/kg/minであり,トレーニング効果がみられ,代謝能力は高値であった。5.DD型,DI型,II型に対して心電図,心エコー,運動代謝能力の各項目から検討したが,各群間において有意な変化を認めなかった。しかしながらD群(DD+DI)について運動代謝能力が低い傾向がみられた。また指尖の加速度脈波の解析結果からD群の方が血管伸展性が低下している傾向がみられた。大学の陸上部に所属している男子長距離選手21名を対象として,スポーツ心臓と心血管系遺伝子多型について検討し,以下の結果を得た。それぞれの値はmean±S.D.にて示す。1.心電図では,安静時心拍数494±7.7/min,左室電位差4.26±1.12mVであり,トレーニングにより明らかに徐脈と左室高電位差が認められた。またホルター心電図では,2秒以上のpauseが17名中11名(65%)と高率にみられた。3.運動代謝能力については,最大摂取酸素量68.1±5.4ml/kg/min,無酸素作業閾値48.7±7.0ml/kg/minであり,トレーニング効果がみられ,代謝能力は高値であった。4.angiotensin converting enzyme (ACE)遺伝子の遺伝子多型について検討したところ,DD型2名(10%),DI型9名(43%),II型10名(48%)であった。D群(DD+DI)とI群(II)について心電図,心エコー,運動代謝能力の各項目から検討したが,有意な変化を認めなかった。しかし指尖の加速度脈波の解析結果から,D群の方に有意に血管伸展性の低下が認められた。

5.Angiotensinogen(AGT)遺伝子の遺伝子多型について検討したところ,TT型11名(55%),MT型9名(45%)であった。T群(TT)とM群(MT)間の比較を行ったところ,ホルター心電図の最低心拍数がT群において有意に低かった。他の検査では有意差は認められなかった。
ミリ波・サブミリ波による星・惑星系形成領域の観測的研究

野辺山ミリ波干渉計を用いた原始星L1551 NEのCS分子輝線観測の成果を、米国の「The Astrophysical Journal」誌に報告した。研究のポイントは以下である:従来は低質量星形成領域では孤立した系で形成が進むと考えられてきたのに対して、おうし座分子雲でも近傍の原始星が他の原始星形成に大きな影響を与えうる、具体的には原始星アウトフローが近接星の形成を誘発している現場を観測的に示した。低質量星形成のシナリオは、これまでほとんどが孤立系で進行すると考えられてきたが、その考えに一石を投じる結果である。更に原始星L1551 IRS5,HLTauのエンベロープ内で原始惑星系円盤が形成されつつある様子を観測的に明らかにし、現在論文を投稿中(一部執筆中)である。また、大型ミリ波サブミリ波干渉計(ALMA)のための受信機システムを構築するために、カートリッジ型の冷却システムを設計・評価して、その結果を「Publication of the Astronomical Society of Japan」と「Cryogenics」誌に報告した。カートリッジ型の受信機システムは、ALMAが想定する80台のアンテナ、各7バンドの受信機を搭載する大型システムでも、各々の受信機開発グループが独立して開発を進めることが可能になる点が重要である。ネジを使わない、かつ高い熱伝導度を持った熱リンクシステムを導入することで、低機械振動(振動の振幅が2ミクロン)、低温度振動(2mK)を達成した。開発した冷却システムは既にサブミリ波受信機を搭載し、南米のチリの標高4800mのサイトで345GHz,500GHz,800GHz帯において既に科学観測をはじめている。野辺山ミリ波干渉計を用いた原始惑星系円盤のサーベイ観測の成果を、米国の「The Astrophysical Journal」誌に報告した。研究成果の最重要ポイントは、低質量YSOであるTタウリ型星を取り巻くダスト円盤(原始惑星系円盤;固体微粒子からなる惑星系形成母体となる円盤状構造)の進化および多様性を観測的に明らかにした点である。13天体を観測した結果、中心星のHα輝線の弱化(質量降着率の減少)につれて、ダスト円盤半径が膨張する傾向を捉えることに成功した。この結果は、低質重星周囲の円盤内での粘性理論モデルに強い制約を与えることが出来る。また同時に、円盤面密度の半径依存性がこれまでに考えられてきた以上にフラットであること、ダスト粒子のサイズはミクロンサイズであること、質量降着率の減少に伴う円盤の温度低下などが明らかになった。一方、将来の大型ミリ波サブミリ波干渉計の受信機システムを構築するために、カートリッジ型の冷却システムを設計・評価した。その結果は日本天文学会欧文論文誌「Publication of the Astronomical Society of Japan」に報告済みである。カートリッジ型の受信機システムを開発することで、数10台のアンテナ、数100個の受信機を搭載するような大型干渉計でも、各々の受信機グループが独立して開発を進めることが可能になる。ネジを使わない、かつ高い熱伝導度を持つ熱リンクシステムを導入することで、低機械振動(2ミクロン)、低温度振幅(2mK)を達成した。開発した冷却システムには、既に試験サブミリ波受信機が搭載されており、2002年度10月11月にかけて南米チリ(標高4800m)のサブミリ波観測に適したサイトで、試験観測および評価を終えており、2003年度夏季(チリの冬季)に科学観測を開始する予定である。
ストレス評価用DNAチップを用いたメンタルジェネテイクスの展開

末梢白血球は、ストレス応答に関与する因子の受容体をほとんど発現している。代表者は、脳内のイベントを直接捉えることはできないにしても、強い精神的ストレスの結果として生じる生体反応のout putを末梢白血球で効率よく捕捉出来ると仮定し、DNAチップを用いてストレス反応に関連する遺伝子mRNAの発現量を網羅的に解析し、パターン化することでストレスの程度を評価することを試みた。日立製作所の協力を得て、ストレスホルモン、サイトカイン、及び増殖因子とそれぞれの受容体、アミンの合成・代謝酵素とその受容体ならびにトランスポーター、分子シャペロン、細胞周期、増殖及びアポトーシス、などのカテゴリーに属する合計1,500遺伝子を搭載したDNAチップを作製した。(特願2001-53465)。一目でストレスの程度を評価できる表記システムの特許出願(特願2002-22682)も行った。本DNAチップを用いて、健常人と未治療のうつ病患者の解析に加え、うつ病患者の治療前後の遺伝子発現を縦断的に解析し、うつ病の評価に有用な84遺伝子を選定して特許出願を行った(特願2002-380614)。平成15年度にさらに解析を進め、医学情報とのデータマイニングとクラスター解析を行い、うつ病患者のグルーピングに成功し、さらに、より特異性の高い有用遺伝子群の選定に成功した。これらの新たな発見により、うつ病の評価方法に関する特許(特願2004-96068)を出願した。うつ病の病状を精度よく評価できるDNAチップは、集団検診や人間ドックでのハイリスクグループの選別や、うつ病患者の病状、治療効果の判定に有用である。本研究の成果は、こころの健康管理に応用できる新しいバイオ・メディカル技術として、広く実用化されることが期待できる。本研究は、徳島大学のポストゲノム研究を推進する先導的研究として成果が期待されている。代表者と日立製作所が共同開発したストレス評価用DNAチップは、末梢白血球に映し出される"こころのゆがみ"を捉える新しいバイオ・メンタル技術として精神疾患領域で大きな期待が寄せられている。本DNAチップをベースに健常人と精神疾患患者の解析を行い、DNAチップデータの医学的相関解析を通じてうつ病の病状に関連する遺伝子群を見いだし、これらの遺伝子群を搭載したDNAチップを作成する。本研究を通じて集団検診の場でこころの健康管理に使用する簡易型に加え、精神疾患の早期診断、予後判定、治療評価に応用できる安価で高精度のオリゴヌクレオチドチップの開発を目指している。本事業は、文部科学省の科学技術振興調整費の産官学共同研究の効果的推進事業に採択されたが、本萌芽研究では、本プロジェクトを効果的に推進するための調査研究に主眼を置いている。本萌芽研究を通じた本年度の研究成果として、医学的解析を行うためのサーバのプログラムを作成することが出来た。また、解析に関しては、健常人の精神的ストレス(大学院入学試験15例、学位発表15例)、うつ病患者20例並びに慢性疲労症候群9例の解析を含め、400のサンプルを調整し、解析に用いた。うつ病患者のクラスター解析の結果、うつ病の病状と密接に関連する84遺伝子を見いだし、特許出願した(特願2002-380614)。このように、本研究は着実な成果をあげており、実用化を目指した研究へと順調に研究を発展させている。
下顎複合組織体同種他家移植モデルを用いた歯牙萌出を誘導する全身因子の解析

乳歯でも永久歯でも、各々の歯牙が萌出する順位および年齢はほぼ正確に決定されているが、歯牙が年齢に応じて萌出してくるメカニズムは未だ明確ではない。我々は今までに、歯胚を含む幼犬の下顎組織複合体を各種月齢のイヌに移植することによって、レシピエントの月齢がどのように歯牙萌出速度に影響するかを検討しており、以下の結果が得られている。(1)歯牙萌出はレシピエントの月齢とともに遅延する。(2)歯槽骨からの萌出に関してはレシピエントの月齢は影響せず、歯根の完成も正常時期に認められるが、歯肉からの萌出に関してはレシピエントの月齢は影響する。(3)レシピエントの月齢の違いによる歯牙萌出遅延は歯肉の由来に関係なく生じ、局所的な因子よりも全身因子が大きく関与していることが考えられる。そこで今回は、遅延する歯牙萌出のメカニズムを免疫組織学的に検討した。実験にはビーグル犬を用いた。ドナーは未萌出永久歯胚を含めた幼犬の顎骨とし、レシピエントを幼犬または成犬として、下顎複合組織体同種他家移植を行った。術後11.5ヶ月の萌出直前の状態の時期に歯冠上部歯肉を切除し、以下の組織染色を行って比較検討し、レシピエントが幼犬の場合は未萌出永久歯胚の萌出が認められるのに対し、レシピエントが成犬の場合は萌出が阻害されるという現象について、組織学的に検討した。(ア)エラスチカ・ウンギーソン染色:成犬の歯肉ではコラーゲン線維の硝子化が認められた。(イ)抗コラーゲンの免疫染色:コラーゲンtype IおよびIIIのいずれでも幼犬・成犬で染色性に違いは、認められなかった。(ウ)PCNA:幼犬では上皮細胞で増殖が認められたが、成犬では上皮細胞および線維芽細胞の両者で増殖が認められた。(エ)TUNEL法:幼犬・成犬で染色性に違いは認められなかった。以上の結果より歯胚の萌出が阻害される成犬では、歯冠上部歯肉にコラーゲン線維の硝子化が認められ、線維芽細胞の増殖が認められることに幼犬との違いがあることが明らかとなった。またコラーゲンの種類に違いはなく、アポトーシスの認められる割合も違いが明らかではなかった。