hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
筋収縮によるアセチルカルニチン排出機序の解明と生理作用の検討

カルニチンは脂肪燃焼の他に、過剰に細胞内に蓄積した糖・脂質と結合してアセチルカルニチンに変換することでそれを緩衝する役割を担う。本研究は骨格筋収縮時のアセチル化動態を捉えることを目的とした。電気刺激によって筋収縮させると遅筋線維優位に骨格筋内へのカルニチンの取り込み、細胞内でのアセチル化が亢進することが明らかとなった。さらにマイオカインの分泌調節の検証を可能とする培養細胞の筋収縮システムを完成させ、アセチルカルニチンの分泌機序の解析を開始した。カルニチンの新たな生理学的意義を解明することは、健康医科学の分野の発展に貢献できると期待される。カルニチンは脂肪酸をミトコンドリアに運ぶ役割を担う一方で、筋細胞内の悪性脂質であるアセチルCoAと結合してアセチルカルニチンと呼ばれる物質を生成することによって、それを無毒化している。これまで申請者は、骨格筋収縮はアセチルカルニチンの生成を増大させることを見出しているが、筋収縮時のカルニチン動態、特にカルニチンの排出機構については明らかにされていない。アセチルカルニチンは骨格筋以外の臓器に作用し、様々な健康効果を生み出すことから、骨格筋は筋収縮時にはアセチルカルニチンを作って悪性脂質を減らすに留まらず、善玉であるアセチルカルニチンを血液を介して他の臓器に送っている可能性が考えられる。平成27年度は、培養骨格筋細胞C2C12を電気的に収縮させて筋収縮をトリガーとしたアセチルカルニチンの排出調節の明らかにすることを試みた。まずは筋収縮調節性マイオカインとして知られるIL-6を指標に、筋収縮によって分泌が調節される実験条件を検討した。電気刺激のパルス幅と電流値、培養液の種類をあらゆる条件で検証した結果、IL-6が一時間の収縮で分泌促進される条件を見出した。一方、in vivoにおける骨格筋カルニチン動態を明らかにするために、質量分析イメージングによってマウス骨格筋組織の内因性アセチルカルニチンの分布を同定した。坐骨神経を電気刺激してin situ収縮させたところ、筋収縮でアセチルカルニチンが増加していること、またその部位はPAS染色によって同定したグリコーゲンの減少部位と一致することが示された。さらに、安定同位体で標識したカルニチン(d3-carnitine)を静脈から投与し、その生体内分布を明らかにした。当初の計画では、平成27年度内に骨格筋組織および培養細胞を用いた実験系で筋収縮によるアセチルカルニチンの分泌調節を検証する予定であった。しかし、筋収縮によって分泌促進されると言われるIL-6が我々の培養収縮モデルでは分泌調節されなかったため、予定を変更してまずはその実験条件の確立を行った。現在はこの実験条件でアセチルカルニチンの排出量の変化を検証している。一方、次年度に行う予定であった質量分析イメージングのin vivo実験を、先に繰り上げて実施することができた。平成27年度は、培養骨格筋細胞C2C12を電気的に収縮させてマイオカインの調節性分泌を検証できる条件を確立した。平成28年度はマウス骨格筋の初代培養細胞から速筋および遅筋タイプの筋管細胞を作製することに成功した。カルニチントランスポーターOCTN2はC2C12では欠損していたが、初代細胞では確かに発現していたため、この実験系はカルニチン動態を解析する上で極めて有用なツールとなることが分かった。一方、マウスin vivoにおける骨格筋カルニチン動態を明らかにするために、安定同位体で標識したカルニチン(d3-carnitine)を静脈から投与し、質量分析イメージングによって骨格筋組織におけるカルニチン局在を可視化した。連続切片で筋線維タイプを同定したところ、標識カルニチンは遅筋線維で多く取り込まれることが明らかとなった。また、in situ収縮によって片脚を筋収縮させたところカルニチンの取り込みは促進し、さらにグリコーゲンの利用依存的にカルニチンのアセチル化が亢進していることが示された。平成28年度では、これまで確立した培養細胞の筋収縮条件によってアセチルカルニチンの分泌調節を検証する。ただし、我々の予備実験によって骨格筋培養細胞

株C2C12ではカルニチントランスポーター(OCTN2)の発現量が骨格筋組織に比べて著しく少ないことが明らかとなった。C2C12でカルニチン輸送が検出できない場合は、マウス骨格筋から初代培養細胞を得ることを計画している。初代細胞は細胞株に比べて生体組織の性質を維持していると考えられ、実際に初代細胞由来の筋管細胞はOCTN2の発現がC2C12よりも高かった。我々は初代細胞での筋収縮モデルを確立することにも成功している。骨格筋におけるアセチルカルニチンの排出機構を明らかにするため、阻害剤を用いた薬理実験やトランスポーターの機能をコントロールした遺伝子工学的な実験を行う。運動生化学
ストレス応答性TMEM16E安定化と局在化による迅速な膜修復機構の解明

TMEM16E遺伝子の1アミノ酸変異は骨系統組織に遅発性の硬化性病変を伴う顎骨骨幹異形成症GDDに連鎖する。また、ノックアウト変異は上下肢帯部の遅発性筋ジストロフィーLGMD2Lに連鎖する。本研究ではDysferlin機能が欠損したマウス由来培養筋管でTMEM16EとCaveolin3が同一の細胞内顆粒構造物に局在することを発見した。さらに、Dysferlin欠損培養筋管ではこのTMEM16E/Caveolin3局在顆粒が形質膜近傍への顕著な集積を見せたことから、TMEM16Eの筋組織における機能はCaveolin3と協調しており、これにDysferlin機能は必要ないことを示した。研究対象のTMEM16E遺伝子は遺伝性疾患の原因遺伝子である。ミスセンス変異は顎骨骨幹異形成症(GDD),ナンセンス変異は肢帯型筋ジストロフィーLGMD2Lにそれぞれ連鎖する。罹患者における各変異アリル形質よりTMEM16Eの生理的機能は筋の恒常性維持にある一方、ミスセンス変異型TMEM16Eは骨系統組織における異所的な機能を獲得していると推測される。しかし、Dysferlin欠損マウス由来筋細胞を用いた私たちの検討では筋細胞におけるTMEM16E発現レベルに報告されたような異常はなかった。私たちの検討では、予想外にTMEM16E局在細胞内顆粒がDysferlin欠損筋細胞では筋細胞膜直下に集積することが明らかになった。このことはDysferlin欠損により未完結状態となった筋膜修復においてTMEM16E局在細胞内顆粒の筋細胞膜への融合が阻害され蓄積されている可能性を示唆した。研究対象とするTMEM16E遺伝子は遺伝性疾患の原因遺伝子であり、ミスセンス変異(機能獲得)は優勢遺伝形質として顎骨骨幹異形成症(GDD)に連鎖する一方、ナンセンス変異(機能喪失)は劣性形質として肢帯型筋ジストロフィー(LGMD2)に連鎖する。LGMD2罹患者の病態よりTMEM16Eの生理的機能は筋の恒常性維持にあることが明らかであるが、ミスセンス変異が生理的機能部位以外の骨組織に異形成症を発症させる現象はTMEM16Eの機能の複雑性を示唆している。本研究では、TMEM16Eおよびミスセンス変異型TMEM16Eの獲得機能を検討することを独創的な点として研究を展開している。これまでに本研究計画により私たちは純系マウス遺伝背景にて系統樹立維持してきたKOマウスに期待されたLGMD2L症状が通常飼育環境下では現れないことをライフスパンにわたって確認してきたが、本年度、独立した他研究機関が私たちよりも先行して学術誌上に本遺伝子欠損モデルマウスの報告を相次いで掲載した。これらの興味深い報告より予想外の機能としての精子運動能のへの本遺伝子機能の関与は当該器官細胞での本遺伝子産物発現の確認、組織学的な局在分布、ファミリー分子機能に基づき分子機能として予測否定されてきた特徴的な機能は関与するのか否か等の新しい課題を設定することを余儀なくされた。GDD変異ノックインマウスはヘテロ、ホモ体ともに個体サイズが大きく、明らかな健康長寿を多くの個体で観察中である。中でも生殖器官においてのみの特徴的な脂肪の蓄積を認めるとともに器官に特徴的な異常所見を示唆したため詳細な解析を進行している。独立した3研究施設のグループより本研究と同一遺伝子改変モデル解析の結果が別個に学術誌に掲載された。KOマウスに予測されたLGMD2症状がないことは本研究の結果と共通であったが、1つの研究グループはLGMD2症状が再現されたとしている。また予想外に雄性生殖能に本遺伝子機能が関与することが1グループより報告され、本研究でも追認できた。以上のようにKO解析では他グループより遅れを認める。研究対象としたTMEM16E遺伝子は遺伝性疾患の原因遺伝子であり、ミスセンス変異(機能獲得)は優勢遺伝形質として顎骨骨幹異形成症(GDD)に連鎖する一方、ナンセンス変異(機能喪失)は劣性形質として肢帯型筋ジストロフィー(LGMD2)に連鎖する。LGMD2罹患者の病態よりTMEM16Eの生理的機能は筋の恒常性維持にあることが明らかである一方で、ミスセンス変異が生理的機能部位以外の骨組織に異形成症を発症させる現象はTMEM16Eの機能の複雑性を示唆している。研究期間中にノックアウトマウスは通常飼育下ではヒトLGMD2の疾患モデルとならないことを組織学的所見より見出していたが、他研究機関より本遺伝子欠損マウスの報告が相次いで先行したが、この所見は1報告を除き他機関においても確認された。しかし、ノックアウトマウスでは不顕性であったが、筋組織でのTMEM16E機能を見出すためには、さらなる解析が必要である。また、1報告により新規に判明したTMEM16E欠損によるマウス男性生殖能の低下は研究期間中に追認できたが完全不妊ではなかった。一方GDDミスセンス変異型TMEM16Eノックインマウスは個体サイズが大きくなるが早期に男性不妊の傾向が認められ系統維持が困難となったため、系統維持に努めている。最終年度に開発したモノクローナル抗体は陽性ハイブリドーマを40クローン樹立することができたためTMEM16Eの解析において有効なツールを得ることができた。

本研究ではDysferlin機能が欠損したマウス由来培養筋管でTMEM16EとCaveolin3が同一の細胞内顆粒構造物に局在することを発見した。さらに、Dysferlin欠損培養筋管ではこのTMEM16E/Caveolin3局在顆粒が形質膜近傍への顕著な集積を見せたことから、TMEM16Eの筋組織における機能はCaveolin3と協調しており、これにDysferlin機能は必要ないことを示した。先行グループの解析の結果を得て、共通する問題は組織学的解析、生化学的な解析によい抗体がないことである。このためモノクローナル抗体を一刻も早く開発し問題を打開したい。分子生物学GDD,LGMD2Lを再現したマウス2系統を均一な遺伝バックグラウンドで飼育維持するとともに、胚を凍結保存し解析に備える。現在までに個体レベルでのLGMD2L,GDDモデルマウスはヒトにおける疾患を反映していない。しかしGDDモデルマウスは内分泌系の異常を示すデータが蓄積しており、LGMD2Lモデルマウスには神経症状が認められるため、個体数および遺伝背景を変えた場合での再現性の確認とともにヒト病態との関連を検索する。特異性の高い多用途モノクローナル抗体開発が必要となりDNA免疫法を外部業者と共に開始した。作業工程に発生するコストが年度をまたぐため、くり越し執行を必要とした。予期せぬ内分泌系器官の所見を確定するためマウス個体維持によるサンプル確保が優先されたため、当初予定していた胚凍結保存による系統バックアップ実施を次年度以降に先送りした。このため胚凍結にかかわる予算の執行も先送りとなった。繰越が生じた工程は5月-6月に終了する。胚凍結保存にかかる経費
妊娠期ホルモン環境を模倣した乳癌予防プロトコールの確立とその分子基盤の解明

ヒトでは若年で初回満期妊娠を経験した経産婦は、未産婦に比して乳癌の発生は112である。経産による乳癌の抑制はラットにおいても認められ、妊娠を模倣する短期(3週間;ラットの妊娠期間に相当)のエストロゲンとプロゲステロン(E/P)投与においても乳癌の抑制をみる。しかし、エストロゲンは乳腺あるいは乳癌細胞の増殖促進因子であり、長期E/P暴露では乳癌の危険因子となりうる可能性がある。よって、N-methyl-N-nitrosouea(MNU)誘発:Lewisラット乳癌に対して、≧1cm乳癌ならびに微小乳癌も含めた全乳癌の発生を指標として、長期(23週間)ならびに短期(3週間)E/P暴露群とE/P非処置群とを、MNU投与後25週間にわたり観察して比較した。その結果、E/P非処置群に比して、長期ならびに短期E/P暴露群では、ともに≧1cm乳癌の抑制をみたが、E/P投与群ではMNU投与後23-25週頃より<1cm乳癌の発生が急峻に増加し、全乳癌について比較すると、依然短期E/P暴露群では抑制をみたが、ラット当たりの乳癌発生個数は長期E/P暴露群ではE/P非処置群と差はみなかった。これら<1cmの微小乳癌がラテント癌として微小のままで留まるのか、進展して≧1cmの顕在性乳癌になるのかの同定は重要である。しかし、既報によると、20週間のE/P連続暴露では乳癌の抑制はみるものの、顕在性乳癌の出現を20週目にみとめたり、別の報告では33週間の長期E/P暴露では顕在性乳癌の有意な増加をみることは、今回みとめた微小乳癌は、顕在性乳癌に進展する可能性が高い。よって、E/Pの短期暴露で得られた乳癌抑制能が今回の長期E/P暴露群で消失したことにより、E/Pよる乳癌抑制能は短期暴露においてのみ達成可能で、>20週E/P暴露ではE/P非処置群に比して乳癌増悪はみないものの、乳癌抑制効果が消失することが判明した。ヒトでは若年で初回満期妊娠を経験した経産婦では未産婦に比して乳癌の発生は1/2である。しかし、エストロゲンは乳腺あるいは乳癌細胞の増殖因子であり、長期E/P暴露では乳癌の危険因子となる可能性がある。よって、N-methyl-N-nitrosouea(MNU)誘発Lewisラット乳癌に対して、≧1cm乳癌ならびに全乳癌の発生を指標として、短期(3週間)E/P暴露群ならびにE/P非処置群とをMNU投与後25週間にわたり観察して比較した。その結果、E/P非処置群に比して、長期ならびに短期E/P暴露群では、ともに≧1cm乳癌の抑制をみたが、E/P投与群ではMNU投与後23-25週頃より<1cm乳癌の発生が急峻に増加し、全乳癌を比較すると、依然短期E/P暴露群では抑制をみたが、乳癌発生率は長期E/P暴露群ではE/P非処置群と差はみなかった。これら<1cmの微小乳癌がラテント癌として微小のままで留まるのか、進展して≧

1cmの顕在性乳癌になるのかの同定は重要である。しかし、既報によると、20週間のE/P連続暴露では乳癌の抑制はみるものの、顕在性乳癌の出現を20週目にみとめたり、別の報告では33週間の長期E/P暴露では顕在性乳癌の有意な増加をみることは、今回みとめた微小乳癌は顕在性乳癌に進展する可能性が高い。よって、E/Pの短期暴露で得られた乳癌抑制能が今回の長期E/P暴露群で消失したことにより、E/Pよる乳癌抑制能は短期暴露においてのみ達成可能で、>20週E/P暴露ではE/P非処置群に比して乳癌増悪はみないものの、乳癌抑制効果が消失することが判明した。ヒトでは若年で初回満期妊娠を経験した経産婦は、未産婦に比して乳癌の発生は1/2である。経産による乳癌の抑制はマウス・ラットにおいても認められ、妊娠を模倣する短期(3週間;マウス・ラットの妊娠期間に相当)のエストロゲンとプロゲステロン(E/P)投与においても乳癌の抑制をみる。しかし、エストロゲンは乳腺あるいは乳癌細胞の増殖促進因子であり、長期E/P暴露では乳癌の危険因子となりうる可能性がある。よって、N-methyl-N-nitrosouea(mm)誘発Lewisラット乳癌に対して、≧1cm乳癌ならびに微小乳癌も含めた全乳癌の発生を指標として、長期(23週間)ならびに短期(3週間)E/P暴露群とE/P非処置群とを、mm投与後25週間にわたり観察して比較した。その結果、E/P非処置群に比して、長期ならびに短期E/P暴露群では、ともに≧1cm乳癌の抑制をみたが、E/P投与群ではMNU投与後23-25週頃よりく1cm乳癌の発生が急峻に増加し、全乳癌について比較すると、依然短期E/P暴露群では抑制をみたが、ラット当たりの乳癌発生個数は長期E/P暴露群ではE/P非処置群と差はみなかった。これら<1cmの微小乳癌がラテント癌として微小のままで留まるのか、進展して≧1cmの顕在性乳癌になるのかの同定は重要である。しかし、既報を総合すると、今回みとめた微小乳癌は、顕在性乳癌に進展する可能性が高い。マウス乳腺発癌には多段階発癌をみることより、マウスを実験系に組み込み、前癌病変とホルモンの関係を明らかにしたい。
二重ベータ崩壊実験にかかわる低エネルギー電子のふるまいに関する研究

(1)ニュートリノ質量探査を目的とする二重ベータ崩壊実験(NEMO3)の国際共同研究に参加のもとで本研究テーマを実行した。^<100>MO核に対してニュートリノ質量を探索するモードとは別に標準模型で予想される二重ベータ崩壊モードの膨大なデータが蓄積されつつある。また同時に多くの核種(^<82>Se,^<116>Cd,^<150>Nd,^<96>Zr,^<48>Ca)の測定が同時に進行中である。(2)実験の進行の過程において測定器内の微小残留ラドンガス濃度が、探査限界に影響を及ぼすことが判明し、高感度ラドン測定器、ラドンフリーガスシステムの供給装置の開発に中心的な役割を果たした。(3)^<100>Mo核測定から得られた標準の二重ベータ崩壊モードのデータの統計量はすでに、10^6eventsの領域に達しており、普通に行われている典型的な(シングル)ベータ崩壊研究「ベータ線エネルギースペクトルの精密研究から標準模型とのずれを探る研究」等に匹敵する典型的な研究可能等軽量に達している。同様の研究をエネルギー和のスペクトル、二つのベータ線のエネルギー相関、角度相関を用いることにより二重ベータ崩壊でも進めることが可能であるが、そのためには、低エネルギー電子のメラー散乱、制動輻射などの振る舞いに関する精度のよい定量的な理解とシミュレーションプログラムの信頼性の限界を確かめる必要があり、そのようなことを目的とした研究を行った。(4)^<100>Mo核以外に同時に多くの核種(^<82>Se,^<116>Cd,^<150>Nd,^<96>Zr^<48>Ca)の測定が同時に進行中であるが、特に^<48>Caの解析に携わり、主要バックグランド源となっている90^<Sr>の(比較的低エネルギーである)電子のメラー散乱のふるまいについて理解し、その結果、このバックグランドをきれいに分離するためのデータ解析法を開発した。(1)ニュートリノ質量探索を目的とする二重ベータ崩壊実験(NEMO3)の国際共同研究に参加のもとで本研究テーマを実行している。^<100>Mo核に対してニュートリノ質量を探索するモードとは別に標準模型で予想される二重ベータ崩壊モードの膨大なデータが蓄積されつつある。(2)^<100>Mo核測定から得られた標準の二重ベータ崩壊モードのデータの統計量はすでに10^6eventsの領域に達しており、普通に行われている典型的な(シングル)ベータ崩壊研究「ベータ線エネルギースペクトルの精密研究から標準模型とのずれを探る研究」等に匹敵する典型的か研究可能統計量に達している。同様の研究をエネルギー和のスペクトル、二つのベータ線のエネルギー相関、角度相関を用いることにより二重ベータ崩壊でも進めることが可能であるが、そのためには、低エネルギー電子のメラー散乱、制動幅射などの振る舞いに関する精度のよい定量的な理解とシミュレーションプログラムの信頼性の限界を確かめる必要があり、そのようなことを目的として研究が進行中である。^<100>

Mo核に対してニュートリノ質量を探索するモードとは別に標準模型で予想される二重ベータ崩壊モードの膨大なデータが蓄積されつつある。また同時に多くの核種(^<82>Se,^<116>Cd,^<150>Nd,^<96>Zr,^<48>Ca)の測定が同時に進行中である。(2)^<100>Mo核測定から得られた標準の二重ベータ崩壊モードのデータの統計最はすでに10^6eventsの領域に達しており、普通に行われている典型的な(シングル)ベータ崩壊研究「ベータ線エネルギースペクトルの精密研究から標準模型とのずれを探る研究」等に匹敵する典型的な研究可能統計量に達している。同様の研究をエネルギー和のスペクトル、二つのベータ線のエネルギー相関、角度相関を用いることにより二重ベータ崩壊でも進めることが可能であるが、そのためには、低エネルギー電子のメラー散乱、制動輻射などの振る舞いに関する精度のよい定最的な理解とシミュレーションプログラムの信頼性の限界を確かめる必要があり、そのようなことを目的とした研究を行った。
遺伝子探索を効率化するデジタル遺伝子発現QTL解析法の確立

イネを材料として網羅的な遺伝子発現解析データを基にして量的な形質を支配する遺伝子(QTL遺伝子)の同定を目指す技術開発の研究を行った。本研究では、品種間の交雑後代のような多数の試料について数千以上の遺伝子発現を定量的なデジタルデータとして解析する方法と、同じく多数の品種や個体間のゲノムDNA配列の違い(多型)を多数(数百千箇所)検出できる方法を確立した。これらの結果、遺伝子発現の変化を支配する遺伝子座(遺伝子を含む領域)の位置を見出すための技術基盤を整備することができた。遣伝子発現QTL解析のベースとなる多検体のデジタル遺伝子発現解析法(ハイスループットSuper SAGE法)を確立し(Matsumura et al.,Plos ONE)、イネ品種「蒙古稲」(日本型)と「C8005」(インド型)を両親としたRILs(Reeombinant Imbred Lines)の幼苗の発現解析試料調整法の確立を行った。96ウェルプレートもしくは8連PCRチューブ内で酵素反応等を行い、DNA精製は磁気ビーズを用いるプロトコールを確立している。またこれら多系統のRILsの遺伝子型タイピングについてゲノムDM断片からタグを調整して大規模シークエンス解析から多型を網羅的に解析する方法(ゲノムタグ解析法)を試みた。親品種を含む96試料のDNAからタグを抽出し、96種類の試料識別配列を持つアダプターに結合させて同時にシークエンス解析(イルミナ社ゲノムアナライザー)を行った。その結果、全ての試料について50万タグ以上のデータを得ることができ、RILs各系統での数千箇所の多型の遺伝子型をタイピングできた。これらのRILsにおけるSuper SAGEによる発現解析データと網羅的なジェノタイピングデータを組み合わせて遺伝子発現QTL領域の同定を試みる。これらの技術により96試料でもインデックス配列を利用することで同時にシークエンス解析が可能であることを示しており、試料当たりの解析単価、解析効率を大幅に改善する方法である。タグの抽出、インデックス配列によるデータの仕分けは市販のゲノム配列解析ソフトウェアを利用して行うことが可能である。低温発芽性RILsを用いた遺伝子発現QTL解析を目標として、まず材料となる系統の大規模なDNA配列多型解析を行った。低温発芽性に優れるイネ品種「Arroz da terra」と低温発芽性の劣る品種「いわてっこ」のゲノムDNAを供試し、制限酵素PacIを用いたゲノムタグ解析(RAD-tag解析)を行った。「Arroz da terra」については8,462,936タグ、「いわてっこ」については7,309,743タグが得られた。このタグ数からPacIで切断したほぼ全ての断片の末端配列が得られていると推測できる。両品種の各タグ配列のタグ数(出現頻度)を比較し、どちらかの品種でのみ出現しかつ50タグ以上であるタグを品種特異的タグとして選別した結果、いわてっこ特異的タグとして2,684種類、Arroz da Terra特異的タグとして3,057種類が見出された。いわてっこ特異的タグについてはリファレンスゲノム(品種「日本晴」)にマッピングを試みたところ、各染色体上に分布することが示された。つづいて両品種の交雑後代であるRILsの96系統の各々からゲノムDNAを抽出し、同様に制限酵素PacIを用いたゲノムタグ解析(RAD-tag解析)を行った。抽出したタグDNA断片はイルミナ社Hiseq2000シークエンサーで解析し、平均1,317,151タグ/系統のタグを解析した。これら96系統のRILsにおける上記のいわてっこ及びArroz da Terra特異的タグの出現の有無によって遺伝子型タイピングを行うことができた。いわてっこ及びArroz da Terra特異的タグのうち両者で1ないし2塩基違いのタグを同一遺伝子座由来の対立遺伝子を表す共優性マーカーとして捉え、RIL,s各系統での各タグの有無からいわてっこ型、Arroz型、ヘテロ型のタイピングを行ってグラフィカルジェノタイプを作成した。次世代シークエンサーを用いた多検体の網羅的なデジタル遺伝子発現解析技術(ハイスループットSuperSAGE法)と前年度までに確立、実施した大規模なDNA多型解析技術(RAD-seq解析法)を組み合わせて低温発芽性に関わる発現遺伝子及びイネRILsを用いた連鎖解析によるそれらを支配する領域の同定を目指した。また、イネの多様な品種を材料として同様なゲノム多型、遺伝子発現情報を組み合わせた連関解析適用の試みも目的とした。前者は「いわてっこ」と「Arroz da terra」について28°Cと15°Cにおける好気条件および嫌気条件下で播種後3-7日目の発芽種子をサンプリングしてRNA抽出を行いハイスループットSuperSAGE解析を行った。各試料から30-50万タグが得られ、現在はまだデータ解析を進行中であるが、各条件で発現が有意に増減する遺伝子を複数見出す事が可能なデータが得られた。

また同2品種間のRILs96系統について15°Cにおける発芽試験を行い、シュートおよび根の伸長を測定した。現在この測定値と取得済みのRAD-seq解析による各RILのジェノタイプデータから低温時のシュート、根の伸長に作用する領域の絞り込みを行っている。さらにこの領域において発芽時の低温に応答する遺伝子を見出すことで低温発芽性関連遺伝子を絞り込める。多様な品種の解析には、イネコアコレクションを材料とし、本年度は日本型イネのコレクション(約60品種)全てについてRAD-seq解析を行って1万箇所以上の品種間多型を見出した。このデータをもとに品種間の近縁関係を推定すると、現代の育成品種間よりも多様性が高い集団である事が明らかとなった。このデータは各品種の特性(形質)データと組み合わせてアソシエーション解析による遺伝子マッピングに利用可能である。RILsについての遺伝子発現解析についてもH23年度中に実施を完了すべきであった。これらの解析はH24年度において実施する計画である。24年度が最終年度であるため、記入しない。a)低温発芽性RILsを用いた遺伝子発現QTL解析「いわてっこ」と「Arroz da terra」を親として作出したRILsについてゲノム全体を網羅した遺伝子型タイピングを先に実施したため、低温(15□)発芽時の遺伝子発現解析(SuperSAGE解析)を行い、遺伝子型情報と組み合わせて遺伝子発現制御領域を見出す。同時に低温発芽時の生長測定も行い、可視的な表現型を支配する領域との比較も行う。b)品種間におけるゲノム多型および遺伝子発現量の評価イネコアコレクション(日本および世界)の全て(120品種)についてゲノムタグ解析により網羅的なゲノム多型情報を収集する。これにより連鎖不平衡の評価を行う。また同時にそれらの発芽時あるいは幼植物体の遺伝子発現解析も行い、ゲノム多型との連関が見られるような遺伝子発現を見出す。別途、以前の研究で見出されている花粉等で特異的な発現遺伝子のコアコレクションにおける多型を評価し、その特異性を明らかにする。
浪曲の「節」の生成原理に関する研究

本研究では、予め記譜された旋律を再現するわけではない浪曲実演における「節」の生成原理を、〔骨格式〕に基づく分析により明らかにした。〔骨格式〕は、詞章文言「なにがなにしてなんとやら」の単位に充てられた旋律断片を、開始音、保続音、終結音の枠組として簡潔化した図式である。〔骨格式〕に基づき、同一演者による複数演題および異なる演者による同一演題の「節」を比較分析した結果、1浪曲の「節」は、演者ごとに異なる〔骨格式〕に還元される旋律断片を「使い回し」ながら半即興的に生成されていること、2同じ「家」に属す演者は、同一あるいは類似した〔骨格式〕に還元されるような旋律断片を用いていることが明らかになった。研究方法の二本柱のうち、録音物の分析については、平成26年度は桃中軒雲右衛門、二代吉田奈良丸、初代東家浦太郎による浪曲を対象にした分析を行い、以下の結果を得た。1.浪曲の「節」を、文言のほぼ7モーラ+5モーラ(なにがなにして/なんとやら)のひとまとまりごとに分節すると、複数の、類似性をもった旋律型を抽出することができる。2.類似性をもった旋律型は、「キッカケ」(自由リズムの「節」)、「キザミ」(「関西節」の様式での基本となる、等価の拍に乗る「節」)、「関東節」、「早節」など、「節」の種別ごとに異なっているだけでなく、演者によっても異なっている。3.類似性をもった旋律型は、一席の中での当該の「節」の位置づけや、文言のイントネーションとも関係しつつ、変形を施されながら使用されていると考えられる。これらの分析結果から、浪曲の「節」は、文言のほぼ7モーラ+5モーラのひとまとまり(浪界にはこのまとまりを示す用語がないため、[句]という用語をあてることとして考察をすすめた)に対応する複数の規範的旋律型が、当該の[句]が一席中に占める位置取りや文言のイントネーションも勘案されつつ、継時的に選択され、運用される過程として生成されている面をもつのではないか、との仮説を立て、仮説を実証する研究段階に進んだ。実証作業の途中成果として、初代浦太郎の持ちネタである〈野狐三次〉を対象にした分析を文章化し、そのうち「前編」を論文として公表した。また、作業の副産物として、桃中軒一門の浪曲師・蛟龍斎青雲による浪曲〈天草四郎と由井正雪〉が、宮崎滔天による浪花節台本に基づくものであることが明らかになり、これについても論文として公表した。いまひとつの研究方法である、「家」の「節」に関するフィールドワークについては、春日井家と澤家の「節」について、インタビューとフィールドノーツ作成をおこなった。明治期に誕生した浪曲の「節」(旋律)は、現在まで口頭伝承により受け継がれてきており、その実演は、あらかじめ青写真として設定された「節」の忠実な再現という性格をもたない。本研究の目的は、そうした特徴を有する浪曲の「節」が個々の浪曲師によってどのように実演現場で生成されるのか、という問題を、「家」すなわち流派の比較をふまえて明らかにすることにある。平成27年度は、異なる浪曲師による「節」を客観的・相対的に比較するための分析方法の案出に焦点化して研究を進めた。平成26年度までの筆者自身の研究から、浪曲では、詞章文言のほぼ7モーラ+5モーラのひとまとまりに対応するような旋律断片を軸に、より長い「節」が紡がれていると考えられることを背景に、当該の単位をなす旋律断片を、開始音、持続音、到達音、終結音に基づく骨組みとして把捉する[骨格式]を着想するにいたった。この着想は、聴取者がもちうる「節が似ている」とか「節が全然ちがう」という漠然とした感覚を、客観的な基準のもとに解明し、実証を可能にするようにとのねらいをもつものである。1.一方で、天中軒家の浪曲の稽古の場に立ち会っての、「節」の伝承をめぐるフィールドワーク、他方で、素人の浪曲愛好会での、師から弟子への伝授を介さない実演のフィールドワークを行い、プロと素人がそれぞれ「節」をどのように生成させているかについて参与観察を重ねた。2.過去の音源および浪曲文献(雑誌記事)の一部を電子データ化し、作業を行いやすくした上で、上記1の結果もふまえ、[骨格式]に基づく「節」の分析方法を案出した。桃中軒雲右衛門および二代吉田奈良丸による「節」の分析を行った論稿(北川2015)ならびに、初代東家浦太郎による《野狐三次》の「節」の分析を行った論稿(北川2016)の執筆段階では、やや漠然としたアイディアであったものを精錬させ、詞章文言のほぼ7モーラ+5モーラのひとまとまりに対応する旋律断片を、開始音、持続音、到達音、終結音から成る「骨組み」として把捉する方法を案出し、判断基準を明確化した。ねらいは、二つ以上の「節」の類似性を判断する論拠として使用できる分析方法の設計にあった。3. [骨格式]に基づく方法を用いて、初代春日井梅鶯の「節」の分析を行った。分析の結果、梅鶯師の場合には、[骨格式]の出現順序に明確な規則性と循環性があること、また、循環回数の調節によって、全体としての長さに適合させるよう「節」が生成されていることが導出された。

このことにより、[骨格式]に基づく「節」の分析の有効性を、ある程度確かめることができた。4.上記のように、平成27年度中に、「節」の比較分析を可能にする方法を案出し、個別の浪曲師の「節」に対してそれを適用するところまで研究を進展させたことにより、平成28年度には、当該方法を用いた、「家」の「節」の比較作業に焦点を定めて研究を展開させることができる。最終年度は、過去2年の研究で、浪曲の「節」の分析に使いうると考え、案出した[骨格式](おおむね、文言「なにがなにしてなんとやら」の単位に充てられる旋律断片について、それぞれの開始音、持続音、終結音から見た道筋を簡素化した枠組み)に基づき、複数の浪曲師による録音を分析・比較する作業とその総合を通して、1分析方法の有効性の検証、2「節」の生成原理に関する理論構築を行った。分析と総合の結果、第一に、それぞれの浪曲師が独自の「骨格式」に還元できるような旋律断片を使って「節」を生成していると考えられること、第二に、同じ「家」(流派)に属する浪曲師群は、[骨格式]から見た時に同一性もしくは類似性を有する旋律断片を用いて「節」を生成している傾向が顕著である一方、「家」が異なれば使われる旋律断片の特徴が異なること、第三に、個々の浪曲師が複数の演題を実演するにあたっては、各演者特有の、同一性あるいは類似性を有する「骨格式」に基づく旋律断片を、いわば使い回しつつ、文言のイントネーションやモーラ数に適応させながら「節」を生成していると考えられること、が明らかになった。3年間の研究を総合して、1浪曲の「節」は実演ごとに全く同じではないものの、文言「なにがなにしてなんとやら」の単位に対応し、かつ、特定の[骨格式]に還元できるような「モデル旋律断片」とでも言うべきものが浪曲師ごとに存在し、それが、文言のイントネーションや文言のモーラ数に応じて変形されながら半即興的に連結されて「節」が紡がれると考えられること、2浪曲の「節」については従来、個人ごとに異なる面が強調されてきたが、「家」(流派)に収れんされる部分もあること、3譜面なしに誦される浪曲は、〈骨格式〉の連結という観点から見た場合、大なり小なりの定型性を有し、浪曲師によっては「節」の個人様式が明確な構造をなす場合もあることが明らかになった。本研究では、予め記譜された旋律を再現するわけではない浪曲実演における「節」の生成原理を、〔骨格式〕に基づく分析により明らかにした。〔骨格式〕は、詞章文言「なにがなにしてなんとやら」の単位に充てられた旋律断片を、開始音、保続音、終結音の枠組として簡潔化した図式である。〔骨格式〕に基づき、同一演者による複数演題および異なる演者による同一演題の「節」を比較分析した結果、1浪曲の「節」は、演者ごとに異なる〔骨格式〕に還元される旋律断片を「使い回し」ながら半即興的に生成されていること、2同じ「家」に属す演者は、同一あるいは類似した〔骨格式〕に還元されるような旋律断片を用いていることが明らかになった。録音物の分析に関しては、複数の演者の「個人様式」と、当該様式の「節」を部分的にではあるが構成する雛形的小旋律型(規範的旋律型)の抽出と整理を行い、研究の途中成果の公表も行ったことから、当初の計画以上に進展している。一方で、もう一本の研究の柱であるフィールドワークについては、年度の後半は、本務校での業務が増加したことから、フィールドワークの時間をあまり確保できなかった。とはいえ、春日井家については年度前半に集中してフィールドワークを行い、その作業結果を理論構築に反映させることができたとともに、澤家についてのフィールドワークについても一部着手しており、全体として大きな遅れが生じたというような状況ではなくおおむね順調に進展している。なお、26年度後半に確保できなかったフィールドワークについては、27年度にまわす形で実施する。平成28年度は、「家」(流派)による「節」の特性の考察を充実させる。
視覚障害者の静的および動的平衡機能に関する研究

本研究では、視覚障害者の静的および動的平衡機能について明らかとするために、晴眼者と比較検討し、また視覚障害の程度や、障害が生じた時期との関連、さらに今までの運動経験等との関連についても検討した。対象は、筑波技術短期大学視覚部に在籍する視覚障害学生、および、対照の晴眼者として筑波大学学生とし、静的平衡機能検査(ロンベルクテスト、マンテスト、片足立ちテスト)および動的平衡機能検査(回転後片足立ちテスト、100回足踏みテスト、5m継ぎ足テスト)を実施した。判定には日本神経科学会の標準を用いた。結果は以下の通りである。1.静的な平衡機能検査の結果、閉眼片足立ちテストにおいて、男子視覚障害者のほうが、男子晴眼者に比べて陰性である者が有意に多かった。2.動的な平衡機能検査の結果、5m継ぎ足テストの移行距離は、男女ともに視覚障害者のほうが晴眼者よりも有意に移行距離が少なかった。回転後片足立ちテストの結果および100回足踏みテストにおける移行距離は、視覚障害者と晴眼者では有意の差はみられなかった。3.先天性の視覚障害者では、障害の程度が重いほど、5m継ぎ足テストの移行距離が少ない傾向にあり、また体力診断テストの結果からみた体力レベルが高く、今までの運動経験が豊富な者のほうが、動的平衡機能が優れている傾向が見られた。障害が重度であるほど、また日常での活動が活発な者ほど、視覚以外の、三半器官や筋、腱などの固有受容器等によって身体のバランスをとる能力が優れていることが示唆された。一方後天性の視覚障害者では、平衡機能検査の結果は晴眼者とほぼ同様であり、視覚障害になってからの期間が短い者ほど、平衡機能が劣っている傾向にあった。視覚障害者が安全に日常を送るためにも、身体活動等を通したバランスのトレーニングが重要であると考えられた。
エチレン前駆体ACCを分解する酵素反応の解析〜立体構造からのアプローチ〜

炭素-炭素結合を協奏的に形成する反応を触媒する酵素(macrophomate synthase)の立体構造解析に成功した。得られた立体構造から、このステップはDiels-Alder反応の可能性が極めて高くなった。Diels-Alder反応は、シクロヘキセンを合成する有機化学上極めて重要な反応である。この反応を触媒する酵素の立体構造は世界初のものであり、Nature誌で発表した。活性部位は巧妙に設計されており、より効率的にDiels-Alder反応を進行させるための戦略を見ることができる。基質を導入した活性部位の構造及び、変異実験や反応中間体の絶対配置に関する情報を組み合わせ、1)より活性化した基質を用いること、2)水素結合によって反応性を大きく上昇させること、3)生成物阻害を回避する構造変化を伴うこと、4)柔軟性に富んだループ領域をもっていることなどを具体的に明らかにした。この活性部位は、新たな化合物を作るための、抗体触媒を設計する上で非常に重要な情報となるものである。三員環アミノ酸ACC(1-aminocyclopropane-1-carboxylate)を分解できる特殊な酵素ACC deaminase(yACCD;酵母Hansenula saturunus由来)の結晶構造を、分解能2.0Åで精密化した。立体構造および構造情報から予測した反応機構を、J.Biol.Chem.誌上に発表した。この反応機構を検証するために変異体を9種類作製した。活性消失が確認された変異体のうち、K51T, Y295FとACCを結合させた複合体の結晶化に成功し、反応中間体構造を得た。反応中でビタミンB6は基質と結合し、回転することで反応に最適な立体環境を提供する。活性残基Lys51はACCのメチレン側鎖からプロトンを引き抜くモデルを提唱することができた。これはビタミンB6酵素では初のものであり、進化の多様性を表すモデルと言える。論文投稿中である。また、超高度好熱古細菌P.horikoshiiにおいてACCDとアサインされた遺伝子(PH0054)がコードする蛋白質の、ACC存在下での構造解析にも成功し、大きなドメイン変化が観察できた。ACCD活性の発現は当初の予想以上に厳密な環境制御を要している。論文投稿準備中である。論文投稿中である。
極薄・極小中空球を用いた超軽量金属材料の新製造法

自動車の低燃費化によるCO2排出量の削減および衝突安全性の向上のため,軽量かつ高剛性,高エネルギー吸収特性をもつ超軽量多孔質金属材料(中空金属球(MHS)成形体)の新しい製造法について検討した.H16年度では,H15年度に続いてパイプからの転造加工と薄板材からの微細プレスによる製造実験を行った.1.パイプからの転造加工3方向の押込み量や3個のロールの回転速度の同期を厳密に取るため,転造加工用の装置を作製し,それを用いて実験を行った.H15年度に引き続いて焼鈍したSUS304において転造加工を行ったが,パイプをつぶすことなく局部的な絞りを促すため,押込み速度に対して回転速度を上げ,成形の逐次性を高めたが,加工性が悪くパイプの曲げ戻しによる破断が防げなかった.成形性の良い銅の0.2mmのパイプを使用して実験を行ったところ,SUS304より加工ができた.完全に球にするには,逐次性形成と材料そのものの成形性が中空球の製造の実現には必要である.2.内面保持材パイプの潰れを抑制するため,パイプの内側に保持材を入れることを試みた.内面保持材を用いた方が局部絞りが容易になるが,材料の加工性の問題で軸方向の割れを抑制することはできなかった.3.転造加工のFEM解析パイプの肉厚変化や割れ現象を検討するため,市販コードを用いてFEM解析を行った.薄肉材になるほど局部的にひずみが集中し,加工が困難である.4.薄板材からの微細プレス加工H15年度では,カプセル状の中空球であったため,引張り時においては半球同士がはがれるため,曲げ試験としては粉末冶金法による一体型のMHSよりも弱い.引張りにはもともと弱いが,多少強度がないと外套材からもれ易く問題である.したがって,一体型の中空球を作るため,鈴形状の中空球を作製した.0.1mmの薄板材であり隙間を少なくするため,ブランク形状,加工工程の検討を行った.自動車の低燃費化によるCO_2排出量の削減および衝突安全性の向上のため、軽量かつ高剛性、高エネルギー吸収特性をもつ超軽量多孔質金属材料(中空金属球(MHS)成形体)の新しい製造法について検討した。まず,H14年度では,薄肉パイプから転造加工によって局部的に絞り,MHS単体を作る方法について検討した。1.2点支持による転造ねじ転造と同様に、パイプに2方向から刃を押込むことによって絞っていく金型を作成し、実験を行った。金型は軸対称で,軸方向断面は半円が並んだ形状をしており,隣合う半円の間が刃となる.金型同士を近づけ,接触すると円形状になり,その間で転造されたパイプは球となる.2点支持では,パイプは中空のため、楕円型につぶれ、全く絞れなかった。2.内面保持材の検討パイプの潰れを抑制するため、パイプの内側に保持材を入れることを試みた。氷、消しゴム、樹脂など試したが、楕円形に潰れる現象は改善されなかった。3.3点支持による転造3方向から刃を押込む方法を検討したところ、パイプが楕円形に潰れる事がなく、多少絞れることが分かった。しかしながら、刃が先鋭だったため、すぐにせん断され、球にはならなかった。刃を鈍くすることも試みたが,今度は三角オニギリ形に潰れてしまうことが分かった。そこで、3方向の金型を同じ形状にするのではなく,一方向の金型の刃を鋭くする方法を試みた.この方法でさらに絞ることができ,中空球ができるようになった.現在外径D=3mm,肉厚t=0.2mm(t/D=0.07)のSUS304パイプを加工できた.自動車の低燃費化によるCO_2排出量の削減および衝突安全性の向上のため、軽量かつ高剛性、高エネルギー吸収特性をもつ超軽量多孔質金属材料(中空金属球(MHS)成形体)の新しい製造法について検討した。H15年度では,パイプからの転造加工と薄板からの微細プレス加工によるMHS製造法について検討を行った.1.転造加工によるMHSの製造(直径5mm,肉厚100μmの極薄パイプからの製造)H14年度にて直径3mm,肉厚200μmのパイプからの球の製造はできたが,自動車への実用化においてはさらに密度が低い方が望ましく,H15年度は直径5mm,肉厚100μmといった更に加工が困難なパイプからの試作を試みた.また,完全にはできていないが,焼鈍したSUS304のパイプを使用することで割れ発生を抑え,3方向からの転造ロールのフィン高さを適当なものに変更することで,かなり局部絞りができるようになり,球への成形が可能になってきている.2.薄板(100μm)の超微細プレス加工によるMHSの製造薄板材から,微細プレス金型を試作した.金型を用いて2個の半球を作り,半球同士を合わせることにより,MHSを製造する.非常に高精度に直径を作りこむことで,カプセル状にあわせることができ,直動プレスにて大量生産し,低コスト化が図れる事が分った.

さらに,それを接着剤によりパイプの中で固めて成形体を作製し,圧縮試験,曲げ試験により,材料特性について調査した.カプセル状MHSのため,単球では圧縮方向で強度特性が異なるが,成形体(パイプ外套材)の圧縮試験では通常のMHSとあまり変化はなかった.曲げ試験では,パイプ外套をしていても,MHSの半球同士が分離するため,MHS同士の接着力が不足し,成形体の製造方法を更に検討する必要がある.自動車の低燃費化によるCO2排出量の削減および衝突安全性の向上のため,軽量かつ高剛性,高エネルギー吸収特性をもつ超軽量多孔質金属材料(中空金属球(MHS)成形体)の新しい製造法について検討した.H16年度では,H15年度に続いてパイプからの転造加工と薄板材からの微細プレスによる製造実験を行った.1.パイプからの転造加工3方向の押込み量や3個のロールの回転速度の同期を厳密に取るため,転造加工用の装置を作製し,それを用いて実験を行った.H15年度に引き続いて焼鈍したSUS304において転造加工を行ったが,パイプをつぶすことなく局部的な絞りを促すため,押込み速度に対して回転速度を上げ,成形の逐次性を高めたが,加工性が悪くパイプの曲げ戻しによる破断が防げなかった.成形性の良い銅の0.2mmのパイプを使用して実験を行ったところ,SUS304より加工ができた.完全に球にするには,逐次性形成と材料そのものの成形性が中空球の製造の実現には必要である.2.内面保持材パイプの潰れを抑制するため,パイプの内側に保持材を入れることを試みた.内面保持材を用いた方が局部絞りが容易になるが,材料の加工性の問題で軸方向の割れを抑制することはできなかった.3.転造加工のFEM解析パイプの肉厚変化や割れ現象を検討するため,市販コードを用いてFEM解析を行った.薄肉材になるほど局部的にひずみが集中し,加工が困難である.4.薄板材からの微細プレス加工H15年度では,カプセル状の中空球であったため,引張り時においては半球同士がはがれるため,曲げ試験としては粉末冶金法による一体型のMHSよりも弱い.引張りにはもともと弱いが,多少強度がないと外套材からもれ易く問題である.したがって,一体型の中空球を作るため,鈴形状の中空球を作製した.0.1mmの薄板材であり隙間を少なくするため,ブランク形状,加工工程の検討を行った.
MR顕微鏡を用いた肺の病理のMR診断に関する基礎的研究

1)高分解能MR顕微鏡を設計し作成。最大磁場勾配23mT/m下におけるMR顕微鏡用のコイルを作成し、マトリックス256×256で20mm×20mmから10mm×10mmのピクセルサイズの画像を得ることができた。装置は医科学研究所附属病院放射線科が現有する米国GE社製Signa Horizon5.6version(1.5T)であった。2)肺ファントムを作成。高分解能MR顕微鏡の空間分解能を求めるために、肺のファントムを作成した。水と数種の濃度のアルブミン溶液(5,10,20,30g/dl)はヒトの肺の密度に近い0.3g/mlとなるよう海綿に吸収させた。3次元グラディエントエコー法を用いたMR画像上では、アルブミン水溶液に浸したファントム(海綿)ではアルブミン濃度が低いとき(5g/dl,10g/dl)には水との違いを分別することは困難であった。しかし、20、30g/dlのときには水との信号強度に差がみとめられ、ファントムとして用いることができた。3)ラットに生理食塩水と、オレイン酸を注入し、肺浮腫を生じさせた。4)種々の条件下で肺ファントムを用いてMR顕微鏡での最適な撮像方法及びパルスシークエンスを求めた。5)上記最適条件下におけるラットの実験肺浮腫モデル及び実際の剖検肺を用いて撮像を行った。正常肺と線維化、肺浮腫、出血、腫瘍等の病変のある剖検肺にHeizman固定を行い、病変部を撮像し、光学顕微鏡下の所見と比較が行えた。今後はホルマリン固定を行った場合と行わない場合のMR所見の相違の検討及びMR所見と組織肺の水分量との相関関係を検討していく予定である。最大磁場勾配23mT/m、マトリックス256X256で20μmX20μmから10μmX10μmのピクセルサイズの画像を得ることを目標に径約20mmのMR顕微鏡用のコイルを作成した。装置は医科学研究所附属病院放射線科が現有する米国GE社製Signa Horizon5.6version(1.5T)を用いる。海綿はその隔壁構造がsponginという、collagenに似た蛋白でできた線維組織からなっていて、海綿が水を吸うと、水分はまずその線雑に吸収されてから、次に、気胞に入るのでヒトの肺に似ている。3次元グラディエントエコー法を用いた顕微鏡を用いないMR画像上では、アルブミン水溶液に浸したファントム(海綿)ではアルブミン濃度が低いとき(5g/dl,10g/dl)には水との違いを分別することは困難であった。3)ラットに生理食塩水と、oleic acidを注入し、肺浮腫を生じさせた。肺はホルマリン固定を行った。4)これからの研究計画種々の条件下で肺ファントムを用いてMR顕微鏡での最適な撮像方法及びパルスシークエンスを求める。肺ファントムに含まれる水やアルブミンの溶解液の濃度を変化させ、MR画像上での信号強度の変化を測定する。正常肺と繊維化、肺浮腫、出血、腫瘍等の病変のある剖検肺にHeizman固定を行い、病変部を撮像し、光学顕微鏡下の所見と比較を行う。
急性心筋梗塞患者が必要とする周手術期医療情報と情報提供への看護介入

急性心筋梗塞患者が必要とする医療情報と情報提供への看護介入内容を明らかにするため、冠状動脈バイパス術(CABG)後患者と急性心筋梗塞で経皮的冠状動脈形成術(PCI)を受けた患者が必要と考える情報と情報提供に関する看護介入について質的研究を行い、さらに質問紙調査でPCIおよびCABG術後患者に必要な情報と看護介入を統計的に比較した。また、看護師が認識する急性心筋梗塞患者に提供が必要な情報と情報提供への看護介入内容を明らかにするため、PCI及びCABG患者に必要な情報と提供するための看護介入について質的研究を行い、さらに質問紙調査で患者に必要な情報と情報提供の看護介入内容を統計的に比較した。対象は、研究協力者の勤務する急性期病院(りんくう総合医療センター)の外来診療部門に通院する、経皮的冠状動脈形成術(PTCA)を受けた患者で研究参加の承諾が得られた者、15名を対象に、周手術期医療情報と必要な看護内容についてオープンエンドの面接調査を行った。調査内容は、周手術期医療を受ける患者が外来診療部門または病棟で提供が必要だと思う医療情報の内容、期待する情報提供手段、現在受けている情報提供サービスの課題、必要だと思う情報提供への看護内容である。面接調査で得られたデータから周手術期医療情報提供システムについて表現していると考えられる部分を抽出し、コード化し分類し、現在、内容分析を行っている。冠状動脈バイパス術(CABG)患者が少なく、りんくう総合医療センターだけでは15名のデータが得られなかったため、現在、研究に協力してもらえる病院を検討中である。平成23年4月7月に、新たにデータ収集病院を追加し、データ収集を行う予定である。1.急性心筋梗塞患者の周手術期医療に携わる看護師が必要と考える医療情報と情報提供への看護介入の面接調査対象は、研究協力者の勤務する循環器専門病院(東宝塚さとう病院)の外来診療部門および病棟で、冠動脈バイパス術(CABG)・経皮的冠状動脈形成術(PTCA)を受けた患者及びその家族に関わる看護師で研究参加の承諾が得られた者、20名を対象に半構成質問紙を使用した面接調査を行った。調査内容は、急性心筋梗塞患者が必要とする医療情報、急性心筋梗塞患者が必要とする情報提供への看護介入、及び年齢・経験年数・周手術期無看護の経験年数などの個人的背景についてである。面接調査で得られたデータから、急性心筋梗塞患者が必要とする医療情報、急性心筋梗塞患者が必要とする情報提供への看護介入について表現していると考えられる部分を抽出し、コード化し分類し、内容分析を行った。看護師はCABGでは安静度や創痛に関する情報を主に提供し、患者の回復にあわせてその都度情報を提供する様援助していた。PTCAでは薬の情報を主に提供し、安静度を守れるよう援助していた。2.急性心筋梗塞患者が必要とする周手術期医療情報と情報提供への看護介入の面接調査冠状動脈バイパス術(CABG)患者が少なく、りんくう総合医療センターだけでは15名のデータが得られなかったため、5病院に面接調査を依頼したが看護体制・患者数等の問題があり、まだ調査の承諾が得られる病院がみつかっていない。現在、研究に協力してもらえる病院を検討中である。1.急性心筋梗塞患者の周手術期医療に携わる看護師が必要と考える医療情報と情報提供への看護介入狭心症と心筋梗塞の差及び看護師の経験年数による差を明らかにするため、PCI患者の看護に携わる看護師176名に無記名自記式質問紙調査を行った。狭心症と心筋梗塞の2群、経験年数3年未満、3年以上10年未満、10年以上の3群に分け、χ2乗検定と残差分析を行った。心筋梗塞患者に有意に必要性の高い項目は、心筋梗塞後の心臓の状態、生死にかかわる病気、不整脈とは何か、心不全についての項目であった。心筋梗塞患者看護に携わる看護師に有意に、胸痛発作について他職種に依頼する、生活習慣についてクリニカルパスを用いるが効果的とするものが多かった。経験年数3年以上の看護師は有意に口頭説明が効果的であると回答した。CABG患者に必要な情報及び情報提供のための看護介入について、看護師の経験年数による差を明らかにするため、CABG患者の看護に携わる看護師150名を対象に無記名自記式質問紙調査を行った。経験年数3年未満、3年以上10年未満、10年以上の3群に分け、χ2乗検定と残差分析を行った。検査の必要性及び入院から治療までの経過の情報は経験3年未満看護師が有意に必要性の認識が低く、制限が必要な活動は、有意に10年以上の看護師の必要性の認識が高かった。情報提供の看護介入は、有意差は認められなかった。2.急性心筋梗塞患者が必要とする周手術期医療情報と看護内容PCI及びCABGを受けた外来患者194名を対象に、無記名自記式質問紙調査を行った。