hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
慢性腎炎進行因子としてのレニン-アンギオテンシン系遺伝子の関与

目的)近年アンギオテンシン変換酵素遺伝子(以下ACE)多型が腎疾患の進行に関与するとされているが、今回我々はACE多型と腎疾患の発症形式の関連について検討した。方法)当科腎臓外来受診の各種腎疾患症例を対象として、臨床経過とACE多型との関連を検討した。臨床経過に関しては発見年齢、発見動機、薬物療法、最終観察時の尿所見・腎機能などを検討した。ACE多型については全血5mlから白血球を分離し、DNAを抽出したのちにRigatらの方法でPCRを行ないACEイントロン16を増幅した。約300bpのAlu配列を有するalleleをI、Alu配列の欠失したalleleをDとした。各症例ごとにその遺伝子型(II、ID,DD)を決定した。結果)検索し得た症例は63例で、血尿22例、IgA腎症18例、紫斑病性腎炎6例、その他の増殖性腎炎5例、ネフローゼ症候群4例などであった。そのうち血尿例ではII11例、ID10例、DDl例であったのに対してIgA腎症ではII9例、ID4例、DD5例で、IgA腎症ではDDを有する例が多かった。また、これらの症例の発見動機とACE多型を比較すると血尿で発症した例ではII20例、ID16例、DD2例であったの対して、蛋白尿を伴った症例ではII8例、ID10例、DD6例であり、DDを有する例が多かった。さらにIgA腎症のみに限っても蛋白尿を伴った群でDDを有する例が多かった。まとめ)従来の小児科領域からの報告と異なり、IgA腎症症例でDDが多かった。これは腎生検の適応、経過観察期間が施設により異なることによると考えられた。発症時尿所見で蛋白尿を有する群でDDが多かったことは、蛋白尿を有する腎炎群は予後不良の例が多いという、従来の臨床的観察と一致した。今年度の研究において対象とした症例は、当科腎臓外来受診者の中でIgA腎症10症例、無症候性血尿10症例、微量アルブミンを伴った小児糖尿病(IDDM)2症例であった。患者血液より白血球を分離しゲノムDNAを抽出した後、これを材料としてアンギオテンシン変換酵素遺伝子のイントロン16の挿入/欠失の多型性についてPCR法を用いて検討した。また、アンギオテンシノーゲン遺伝子の変異についてもPCR法、SSCP法を用いて検討した。その結果、アンギオテンシン変換酵素遺伝子の多型性についてはD/D、D/I、I/Iの症例数は、IgA腎症において4例、4例、2例、無症候性血尿において4例、5例、1例と疾患による相違は認められなかった。なお、糖尿病症例ではD/D、D/Iが各1例であった。一方、アンギオテンシノーゲン遺伝子の変異については、M235、M235T、T235の症例数は、IgA腎症と無症候性血尿のいずれにおいても各々4例、4例、2例であった。以上の如く、今回検討を行った2種類の遺伝子多型については、現在までの症例においては疾患毎の頻度の差は認められず、過去に報告されている正常者例との差も認められなかった。次年度以降は検討症例数を増やすと共に、これらの遺伝子多型の他にアンギオテンシン受容体遺伝子の変異についても検討を加える。また、これらの遺伝子多型と臨床経過との比較検討も行う。

さらに無症候性血尿症例については経過観察を行い、特定の遺伝子多型が腎炎発症の予知因子となりうるのか否かを検討する。本年度は腎疾患症例の臨床経過、病理所見について検討を行った.特に紫斑病性腎炎については発症時臨床所見、病理所見、長期予後について検討した。当院で経過観察している紫斑病性腎炎の中でネフローゼ症候群で発症した8例につき臨床経過を検討したところ、210年の経過で5例では尿蛋白が消失したものの、3例では尿蛋白が持続していた.いずれの症例も、約6カ月でネフローゼ症候群からは脱していた.ステロイドの投与期間以外の治療法に両群の間で差はなかった.ステロイド投与期間は尿蛋白持続群でより長期であったが、これはこの群より重症であることを反映していると思われる.尿蛋白が消失した5例ではISKDCの組織分類でIIまたはIIIaであり巣状変化が主体であるのに対して、尿蛋白持続群ではいずれもがびまん性変化を認めるIIIbであった.このことから組織変化の広範な症例ほど蛋白尿が持続する傾向がみられた.今後これらの症例に関してレニン-アンギオテンシン系遺伝子の関与について検討する.また小児糖尿病10症例から検体を得たのでこれらの臨床経過とレニン-アンギオテンシン系遺伝子の関係について検討する.無症候性血尿において、レニン-アンギオテンシン系遺伝子が顕性蛋白尿の出現に影響を与えるか否かに関しては、症例数が少ないため結論は得られていない.目的)ACE多型と腎疾患の発症形式の関連について検討した。方法)当科腎臓外来受診の各種腎疾患症例を対象として、臨床経過とACE多型との関連を検討した。臨床経過に関しては発見年齢、発見動機、薬物療法、最終観察時の尿所見・腎機能などを検討した。ACE多型については全血5mlから白血球を分離し、DNAを抽出したのちにRigatらの方法でPCRを行ないACEイントロン16を増幅した。約300bpのAlu配列を有するalleleをI、Alu配列の欠失したalleleをDとした。各症例ごとにその遺伝子型(II、ID、DD)を決定した。結果)検索し得た症例は63例で、血尿22例、IgA腎症18例、紫斑病性腎炎6例、その他の増殖性腎炎5例、ネフローゼ症候群4例などであった。そのうち血尿例ではII 11例、ID 10例、DD 1例であったのに対してIgA腎症ではII 9例、ID 4例、DD 5例で、IgA腎症ではDDを有する例が多かった。また、これらの症例の発見動機とACE多型を比較すると血尿で発症した例ではII 20例、ID 16例、DD 2例であったの対して、蛋白尿を伴った症例ではII 8例、ID 10例、DD 6例であり、DDを有する例が多かった。さらにIgA腎症のみに限っても蛋白尿を伴った群でDDを有する例が多かった。まとめ)従来の小児科領域からの報告と異なり、IgA腎症症例でDDが多かった。これは腎生検の適応、経過観察期間が施設により異なることによると考えられた。発症時尿所見で蛋白尿を有する群でDDが多かったことは、蛋白尿を有する腎炎群は予後不良の例が多いという、従来の臨床的観察と一致した。
農村女性の「個」の確立と地域農業ネットワークの形成

これまでの調査結果を整理し、既発表論文や学会報告の成果もふまえて、以下のように研究成果をまとめた。→機械化と減反政策にともなう総兼業化よって、農家の女性の地位や役割構造は大きく変容した。◎変化した側面1.農外就労の賃金は、後継者の妻の労働評価を高めた。2.農業労働についても家事労働についても分担している作業については責任が任されており、意思決定から乖離した「ただの働き手」といった問題状況は見られない。3.農業経営費から生活費が分離し、家長による一元的管理は見られず、生活費の管理については、主婦に任されている。後継者世代の女性への主婦権の委譲もスムーズに行われている。→今日的形態におけるイエは「家父長的」性格を払拭している。◎変化していない側面1.今日でもなお、直系家族の家族構成を活かした複数世代の男女による性別分業や世代間分業が、農業労働と農外労働と家事労働について行われている。2.多就業状況のもとで収入源が多様化し、別勘定が個人や夫婦世代ごとに分化しても、なお複数の世代間を束ねる主家計が存在している。→今日でもなお、日本農業は、家族労働力を駆使した小農(≒イエ)に担われているのであり、今日の農家をイエと規定することができる。平成10年度は、山形県庄内地方と愛媛県南予地方の村落を対象地として予備調査をおこない、それぞれの地域の地域農業の概況や集落の概況および個別農家の経営状況や農村女性の生活や労働の現況を把握することを目指した。その結果、東日本の水稲地帯でも、西日本の果樹地帯でも、減反政策や農産物の輸入自由化、農産物価格の低迷といった農業危機の進行のなかで、農業離れや兼業化が顕著であった。さらにこのような事態は、農村女性の就労形態や家族内での地位と役割をも大きく変容させ、過重労働になりがちではあるが農業労働や農業経営への女性の関与を増大させ、家族内での生活や労働にかんする女性の発言権を高めていることが明らかになった。つまり農業危機は、女性の自立化という観点から見ると、逆説的ながら、その傾向を促進していることが明らかにされたのである。本年度は、さらにこの点についてより立ち入った考察をおこなうため、庄内地方の専業的農家における若い世代の農業専従の女性を対象に、「いえ」や「むら」のなかでの地位と役割、生活と意識について詳細な聞き取り調査を実施した。現在、農村女性の「個」の確立と「いえ」と「むら」の変容という観点から、以下の問題について分析を進めつつある。1.農業労働と家事労働における家族内役割分担の実態を把握し、基幹的な労働の担い手であることと管理的な仕事(経営の意志決定)とのあいだに乖離がないか。2.労働報酬や自由に使えるお金、農地の所有名義と養子縁組、老後の経済的保障について農村女性のおかれた状況を把握し、女性が現に果たしている役割が家族や村落、社会のなかで見合った評価をうけているか、さらにそのような生活実態と法的・制度的保障とのあいだにギャップがないか。平成11年度は、これまでの調査の経過をふまえて、山形県庄内地方の専業的農家の女性33名を対象とした自由回答形式の聞き取り調査の結果を分析して、以下のようなことを明らかにし、次頁に記した2本の論文にまとめた。1.農業経営の責任者は、ほとんど男性であり、女性に関しては経営と労働が完全に一致しているとは言えないが、経営責任が、親世代の男性から対象者世代の男性に移行している場合には、女性は、夫との日常的な意思疎通をとおして経営の意思決定過程に積極的に参画している。2.主婦権と言われる生活費の管理や自由に使える金銭を見る限り、女性の労働は家族内で評価されており、嫁の家族内地位が低いとは言えない。今日の農家の家族内役割分担は、家族内地位に応じて固定されたものではないし、異なる役割の間に上下関係をともなう位階秩序や権威の不均等な配置による権力構造は見られなかった。

3.農地の所有と農業経営(耕作)の最小単位は、労働力商品の所有者としての個人ではなく、家族成員の生活を保障する機能を果たす「いえ」であり、「いえ」の財産としての農地と「いえ」の職業としての農業は、世代を越えて継承され、家族成員に共同で利用されていく。→今日の「いえ」においては、農業労働についても家事労働についても、実際の作業の担当者と意思決定の責任者を一致させようとする努力と傾向が見られた。自らの行動を自らの意思で決定し、その行動の結果に責任を負うことを「個」の自立と規定するならば、「いえ」における家族成員の「個」の自立化傾向を指摘できる。「いえ」のなかでの女性の自立化は、多くの問題を孕みながらも、「家父長的」とか「封建的」と形容されたかつての「いえ」に比して、かなり前進していることが明らかにされた。このように、今日の「いえ」は大きく変化し、かつての「いえ」と断絶している。だが、「いえ」の本質的な機能は維持されているのである。平成12年度は、これまでの庄内地方の農業専従の女性の調査結果をふまえて、研究課題のさらなる解明に向けて、以下の観点から補充調査を進めてきた。1.女性の地位と役割から見たイエの変化:調査事例のなかから、家族内役割分担の典型的な事例農家を析出し、今日のイエにおける性別分業と世代間分業の特質と問題点を明らかにすると同時に、現代のイエの性格と機能について考察を進めている。2.地域農業ネットワークの形成を探るための山形県庄内地方の集落調査:経営責任者を対象とした集落の全戸調査をおこない、女性を対象とした調査からは見えにくかった集落の現状を把握して、地域社会における重層的な社会関係の実態にアプローチしつつある。3.山形県庄内地方と比較した愛媛県南予地方の農業と農家と農村の共通点と相違点:南予地方の蜜柑農家を専兼別・家族構成別にばらつきのないよう選出し、農業経営、家族員の就労状況、家族内役割分担、生活史、家計といった項目についての聞き取り調査を実施している。本年度は、最終年度にあたるため、これまでの調査結果を整理して、研究成果を以下のようにまとめた。本研究では、農業専従の女性に焦点をしぼり、女性が農業経営や地域の意思決定にどの程度関与しているかを把握する調査を計画した。→その結果、夫婦二人で農業に専従する稲作に施設園芸や野菜作や果樹作や畜産を組み合わせた複合経営農家が浮かび上がってきた。1.世代間分業:このような専業的農家においては、親世代の女性が家事労働を引き受け、体力のある若い世代の夫婦二人で農業を担当するという農業労働と家事労働の世代間分業が行われている。このような分業において、家長である親世代の父親が死ぬまで家の財布を握っているというかつてのような子世代の無権利状態は見られず、現世代の男性の農業者年金の受給に伴い、経営委譲がスムーズにいっている実態が明らかになった。2.夫婦間分業:夫婦間の農業労働の分担においても、農業経営の経営責任者は夫である、女性が意思決定から排除されているわけではなく、日常のコミュニケーションをとおして女性の意思がかなり反映されている実態が明らかにされた。→今日では、親世代の男性である家長による労働の統制や家計の一元的管理が見られず、それゆえ、今日の農家を「家父長的」性格において捉えることはできない。
筋原線維形成のシグナル伝達機構の包括的解明とその破綻による筋疾患・心筋症

骨格筋筋原線維のアクチン線維形成は,IGF-1シグナリングにより,nebulin (Neb)のC末端のSH3ドメインにN-WASPが結合し,両者の間でアクチン重合核が形成され,さらにNebに沿ってZ帯からアクチンが重合することにより起こることをこれまでに明らかにした.NEB遺伝子の突然変異は先天性筋疾患ネマリンミオパチーの原因となる.一方,心筋においては,Nebの代わりに存在するnebulette (Nebl)のSH3ドメインにN-WASPが結合して,N-WASPはZ帯に局在化し,アクチン線維形成に働いていた.NEBL遺伝子の突然変異は拡張型心筋症の原因となる.そこで骨格筋と心筋におけるN-WASPを介したアクチン線維形成の破綻が,これらの筋疾患や心筋症につながることを実証するために,骨格筋や心筋特異的な誘導性N-WASPコンディショナルノックアウト(cKO)マウスの作製を行った.N-WASPゲノムDNAをloxP配列で挟んだターゲティングベクターを用いてキメラマウスを作製し,さらにfloxedヘテロ接合マウスを得た.これらのfloxedヘテロ接合マウスと心筋特異的Myh6プロモーターにつないだCre-ERT2 Tgマウスを交配させて,誘導的に心筋でN-WASPの発現を欠損するマウスを作製した.これらのマウスに4-hydroxytamoxifenを投与すると,心筋でのみN-WASPの発現が消失した.これにより,作製したマウスは誘導性の心筋特異的N-WASP cKOマウスであることが確認できた.成体マウスにおいて持続的にN-WASPの発現を消失させて,拡張型心筋症の表現型が現れるかどうかを解析している.一方,floxedヘテロ接合マウスと骨格筋特異的Acta1プロモーターにつないだCre-ERT2 Tgマウスを交配させて,誘導性の骨格筋特異的N-WASP cKOマウスの作製を進めている.26年度が最終年度であるため、記入しない。26年度が最終年度であるため、記入しない。骨格筋筋原線維のアクチン線維形成は,次のようにして起こることをこれまでに明らかにした.IGF-1シグナリングにより,nebulin (Neb)のC末端のSH3ドメイン(Z帯に局在する)にN-WASPが結合し,両者の間でアクチン重合核が形成される.さらにNebに沿ってZ帯からアクチンが重合する.Neb遺伝子の突然変異は先天性筋疾患ネマリンミオパチー(NM)の原因となる.これらの突然変異の中では,特にSH3ドメインを含むC末端側の欠損につながるものが多い.そこでNeb C末端のSH3ドメインの機能的な役割を明らかにするために,SH3ドメインを欠損させたNebΔSH3ノックイン(KI)マウスの解析を行った.これらのマウスでは,一見したところアクチン線維や筋原線維および骨格筋の異常はみられなかった.またN-WASPもZ帯に局在していた.しかしKIマウスの骨格筋では,伸張性収縮を反復して行った後の等尺性張力が低下していた.すなわち伸張性収縮による筋損傷を受けやすくなっていた.この筋損傷がNMにつながる可能性が考えられる.さらにこれらのKIマウスの骨格筋に大きな負荷を長期間にわたってかけた場合には,典型的なNM様の表現型が現れる可能性が考えられる.一方,心筋においては,Nebの代わりに存在するnebulette (Nebt)のSH3ドメインにN-WASPが結合して,N-WASPはZ帯に局在化し,アクチン線維形成に働いていた.骨格筋と心筋におけるN-WASPを介したアクチン線維形成の破綻が,筋疾患や心筋症につながることを実証するために,骨格筋や心筋特異的な誘導性N-WASPコンディショナルノックアウト(cKO)マウスの作製を進めている.これまでに,N-WASPゲノムとターゲティングベクターが相同組換えを起こしたES細胞を樹立し,これらのES細胞を用いてキメラマウスを作製した.骨格筋筋原線維のアクチン線維形成は,IGF-1シグナリングにより,nebulin (Neb)のC末端のSH3ドメインにN-WASPが結合し,両者の間でアクチン重合核が形成され,さらにNebに沿ってZ帯からアクチンが重合することにより起こることをこれまでに明らかにした.NEB遺伝子の突然変異は先天性筋疾患ネマリンミオパチーの原因となる.一方,心筋においては,Nebの代わりに存在するnebulette (Nebl)のSH3ドメインにN-WASPが結合して,N-WASPはZ帯に局在化し,アクチン線維形成に働いていた.NEBL遺伝子の突然変異は拡張型心筋症の原因となる.そこで骨格筋と心筋におけるN-WASPを介したアクチン線維形成の破綻が,これらの筋疾患や心筋症につながることを実証するために,骨格筋や心筋特異的な誘導性N-WASPコンディショナルノックアウト(cKO)マウスの作製を行った.N-WASPゲノムDNAをloxP配列で挟んだターゲティングベクターを用いてキメラマウスを作製し,さらにfloxedヘテロ接合マウスを得た.これらのfloxedヘテロ接合マウスと心筋特異的Myh6プロモーターにつないだCre-ERT2 Tgマウスを交配させて,誘導的に心筋でN-WASPの発現を欠損するマウスを作製した.これらのマウスに4-hydroxytamoxifenを投与すると,心筋でのみN-WASPの発現が消失した.

これにより,作製したマウスは誘導性の心筋特異的N-WASP cKOマウスであることが確認できた.成体マウスにおいて持続的にN-WASPの発現を消失させて,拡張型心筋症の表現型が現れるかどうかを解析している.一方,floxedヘテロ接合マウスと骨格筋特異的Acta1プロモーターにつないだCre-ERT2 Tgマウスを交配させて,誘導性の骨格筋特異的N-WASP cKOマウスの作製を進めている.26年度が最終年度であるため、記入しない。26年度が最終年度であるため、記入しない。研究計画にある,N-WASPとLmod2のリン酸化部位の同定を行った.これらのリン酸化とプロテアソームによる分解との関係を明らかにすることが今後の課題である.またマウス心筋にAAVベクターを用いてEGFP-アクチンを発現させ,アクチン線維の動態を解析した.AAVベクターでLmod2 siRNAを発現させてノックダウンし,先端の伸長が阻害されるかどうかを明らかにすることが今後の課題である.一方,骨格筋や心筋特異的な誘導性N-WASP cKOマウスの作製については,キメラマウスが得られており,順調に進行している.さらに当初の計画以上に,NebΔSH3 KIマウスの解析を行い,その骨格筋では伸張性収縮による筋損傷を受けやすくなっていることを明らかにした.これがNeb SH3ドメインの欠損によるNMの発症につながると考えられる.したがって全体としてみると,おおむね順調に進展していると言えよう.NebΔSH3 KIマウスの骨格筋に大きな負荷を長期間にわたってかけた場合には,NM様の表現型が現れるかどうかを解析する.さらにSH3ドメインを欠損しているにもかかわらず,N-WASPがZ帯に局在する機構を明らかにする.心筋ではNebは存在せず,代わりにNebtが心筋特異的に発現している.Nebt KOマウスを解析して,心筋筋原線維やアクチン線維の形成が異常になっているかどうかを明らかにする.またNebtの突然変異により拡張型心筋症(DCM)が発症することが報告されているので,Nebt KOマウスにおいてDCMの表現型が現れるかどうかを解析する.骨格筋や心筋特異的な誘導性N-WASP cKOマウスを作製し,骨格筋におけるNeb-N-WASP複合体形成を介したアクチン線維形成の破綻により,NMの表現型が現れるかどうかを明らかにする.また心筋におけるNebt-N-WASP複合体形成を介したアクチン線維形成の破綻により,DCMの表現型が現れるかどうかを明らかにする.
歯周病病原菌バクテロイデス・ジンジバリスの血清型分類用試薬の開発

昨年度に引き続きBacteroides gingivalisの4つの血清型(IIV)の菌株に対して、特異的に反応するモノクロ-ナル抗体(MAb)を作製した。その結果、I型については8種類、II型では22種類、III型3種類、IV型8種類の合計41種類のMAbが得られた。これらを用いて、標準株と分離株の反応を調べたところ、381に対して作製したMAb A'3E9、U3D6、T5F12、U1C12、T1A9の5つが血清型Iのhara1、2TH3ー8のどちらか、あるいは両方と反応した。また、他の血清型菌には反応を示さなかった。血清型IIではMAb W3C12、X2H3、X2F11の3つ、V2H12の1つは同じ血清型菌と反応したが、これらは交又反応を示さず、それぞれ同じ血清型の異なった菌株と反応を示した。血清型IVでは、MAb P2E6が同じ血清型菌と反応した。しかし、血清型IIIに対して作製したMAbは標準株W50、W83株に対して反応を示さず、また分離株もないことより、その反応性をみることができなかった。抗原を熱処理し、Immunodot法で反応性を調べた。381に対するMAbはT5F12をのぞき抗原を熱処理すると、反応性の低下を認めた。JH4に対するMAbでは、X2H3が少し低下し、他の2類のMAbは、熱処理により全く反応を示さなくなった。22KN6ー12のMAbは熱処理により全て反応を示さなくなった反面、16NH2ー1のMAbでは熱の影響を受けなかった。さらにWestern blot法でみてみると、易熱性のものは、反応するバンドが検出できなくなることが多いが、熱耐性のものは血清型IIのMAb X2H3が50KDa、血清型IVのMAb P2E6が100KDaのバンドとのみ反応を示した。これらのバンドはSDSーPAGEで4つの血清型菌に共通にみられるバンドであるが他の型の菌に対して反応しないことから特異抗原あるいはその一部であることが示唆された。<Bacteroides gingivalis>___ーの4血清型菌(IIV型)を培養し、菌体表層物質を高張の塩溶液を用いて抽出した。その粗抽出物を硫安分画、HPLCによるゲル濾過・イオン交換クロマトグラフィ-により、既存の呼吸血清との反応をみることにより特異抗原の存在する画分を得た。これらのうち、I型菌の画分の小量とアジュバントをエマルジョン化して、BALB/cマウスの腹腔内に注射し、数回追加免疫を行った。約2ヶ月後の試血では、血中抗体価の上昇が認められたため、X63ミエロ-マ細胞とマウスから摘出した脾臓細胞と細胞融合を行った。マウス1匹から約10^8個の脾細胞が得られ、その1/5のミエロ-マ細胞と42.5%PEG,15%DMSO溶液中で2分間混和した後、10%FCSを含むDME20mlを徐々に加え、上清を遠心除去したものに24ml HAT培地に再懸濁させ、4枚の96穴マイクロタイタ-プレ-トに60μlずつまきこみ、培養を行った。

約3週間培養したところ、ハイブリド-マのコロニ-が確認でき、さらに1週間培養して、ウエルの50%をしめるようになったところで、その上清を回収した。抗原をI型菌の全菌体としてELISA法を用いて、細胞培養上清中の抗体価を測定したところ、対象と比較して、高い値を得た。また、IIIV型の他の型の菌体との反応性を調べたところ、これらに対しては、対象とほぼ変わらない値だったので、I型菌に対する特異抗体ができている可能性は高いと思われる。現在、このハイブリド-マのクロ-ニング及び抗体の再度の確認を行っているところであり、また、他の菌の特異抗体の作製に着手しているところである。歯周病は齲蝕とともに歯科の2大疾患であり、近年の細菌学的研究により、その病型との関係が明らかにされてきた。結果的に歯の喪失をきたす成人性歯周炎は、グラム陰性偏性嫌気性桿菌のBacteroides gingivalisが病原菌とされ、種々の性質が調べられている。その中で著者らは、血清学的性状について調べ、同菌に4つの血清型が存在し、それらの間に生物活性の差があることを報告している。今回、単クロ-ン抗体(MAb)作製の技術を用い、血清型判定の試薬の開発を試みた。血清型代表菌株(381:血清型I、JH4:血清型II、22KN6-12:血清型III、16NH2-1:血清型IV)に対して、それぞれにのみ反応するMAbは、血清型I、8種類、血清型II、22種類、血清型III、3種類、血清型IV、8種類の合計41種類が得られたが、そのうち標準株と分離株を用いて反応性を調べてみると、血清型I、5種類、血清型II、4種類、血清型III、血清型IV、1種類のMAbは、他の血清型菌株と交叉反応することなく、同じ血清型菌株と反応した。また、抗原の熱による影響を調べてみると易熱性のものと耐熱性のものの存在が明らかになり、血清型を示している特異抗原は複雑であり、さらに研究を要することが必要である。SDS-PAGEにより菌体抽出物を分析すると4つの血清型菌のパタ-ンはよく似ていたが、Western blot法で熱耐性抗原に対してMAbを反応させると血清型IIでは50KDa、血清型IVでは100KDaの同じ血清型菌とのみ反応した。このことは、これらのバンドが血清型を担っている可能性がある。今回得られたMAbを用い、菌株を増やし反応性の検討を行うとともに、各血清型菌はサブタイプに分類できる可能性もあり、B.gingivalisの血清学的研究を今後さらに発展させていき、歯周病の病状とのかかわり合いを調べる予定である。
血管内皮前駆細胞誘導を目的とした自己血で作製した小口径人工血管(3mm)の開発

小口径人工血管には優れた抗血栓性と良好な組織親和性が求められるが、我々はこれまでに独自の技術によって血漿中フィブリンのみで被覆したフィブリンコート人工血管がこれらの条件を満たすことを確認した。今回我々は前年度に引き続き、自己血を用いて作製した自己フィブリンコート人工血管の有用性に関して検討した。<方法>自己(ウサギ、Aグラフト)と異種(ヒト、Xグラフト)の血液を用いて2種類のフィブリンコート人工血管(内径2mm)を作製し、家兎50羽に対して両側頚動脈バイパスモデルを作製した。移植後1,3,7,10,14,30,60,180日にグラフトを摘出し、グラフト開存率、血清中抗グラフト抗体、グラフト血小板付着数、組織像を比較検討した。また血清中IgG、IgM、tPA、PAI-1を経時的に測定して比較検討を行なった。<結果>最長180日までの観察期間中、術後10日に摘出したXグラフト1本のみ血栓閉塞していたが、他はすべて狭窄なく開存した。AグラフトではXグラフトより早期(移植後60日)に内皮様細胞がグラフト内腔を被覆した。血清中抗グラフト抗体は移植後1日に高値を示したが、グラフトがXグラフトより有意に少なかった(0.17±0.02vs.0.46±0.06O.D._<490nm>, p<0,0001)。またグラフト血小板付着数は術後10日に最も増加したが、AグラフトがXグラフトより有意に少なかった(10.3±1.6×10^6vs.17.4±1.4×10^6/mm^2, P<0.0001)心血清中IgG, IgM, tPA, PAI-1はいずれもAグラフトがXグラフトより有意に少なかった(p<0.01)。<結論>自己フィブリンコート人工血管は、免疫反応が少なく、優れた抗血栓性および組織親和性を有し、長期開存が期待できる小口径人工血管となり得ることが示唆された。羊冠動脈バイパス実験では、実験コントロールとなる異種血(ヒトフィブリノーゲン使用)で作製した3mm人工血管を移植したところ、移植3週間前後で閉塞する傾向がみられた。そこで異種血、自己血で作製した小口径人工血管の特性を再評価するために兎頚動脈バイパス実験を行なうことにした。<方法>異種血および自己血で作製したフィブリンコート人工血管(内径2mm,長さ2cm)を家兎30羽の両側頚動脈にそれぞれ置換移植し、移植後1、3、7、14、30、60日に人工血管を摘出して以下の項目について検討した。(1)開存性、(2)抗血栓性(血小板シンチレーションにて人工血管付着血小板数を測定)、(3)病理組織学的観察。<結果>観察期間中、自己血群(n=30)すべて開存していたが、異種血群(n=30)は移植後3日に2本、移植後14日に1本閉塞していた。人工血管付着血小板数は移植後1日、3日ではいずれの群も極めて低値であったが、移植後10日から14日にかけて急激に増加した。しかし総じて自己血群が異種血群より有意に低値であった。

組織学的にはコートフィブリンは移植後10日から14日にかけて完全に分解吸収され、フィブリン膜に置き換わった。<考察>フィブリンコート人工血管の抗血栓性は移植後初期では極めて優れていたが、コートフィブリンの吸収・置換時期に悪化しており、これが羊冠動脈バイパス実験での人工血管閉塞の原因となったものと推測された。また自己血で作製した人工血管のほうが開存性、抗血栓性ともに異種血より優れていた。以上の結果を踏まえて、今後はコートフィブリンの吸収・置換時期の抗血栓性を改善した上で、再度羊冠動脈バイパス実験に戻り、異種血人工血管に加え、自己血使用、さらにCD34抗体添加群について検討してゆく予定である。小口径人工血管には優れた抗血栓性と良好な組織親和性が求められるが、我々はこれまでに独自の技術によって血漿中フィブリンのみで被覆したフィブリンコート人工血管がこれらの条件を満たすことを確認した。今回我々は前年度に引き続き、自己血を用いて作製した自己フィブリンコート人工血管の有用性に関して検討した。<方法>自己(ウサギ、Aグラフト)と異種(ヒト、Xグラフト)の血液を用いて2種類のフィブリンコート人工血管(内径2mm)を作製し、家兎50羽に対して両側頚動脈バイパスモデルを作製した。移植後1,3,7,10,14,30,60,180日にグラフトを摘出し、グラフト開存率、血清中抗グラフト抗体、グラフト血小板付着数、組織像を比較検討した。また血清中IgG、IgM、tPA、PAI-1を経時的に測定して比較検討を行なった。<結果>最長180日までの観察期間中、術後10日に摘出したXグラフト1本のみ血栓閉塞していたが、他はすべて狭窄なく開存した。AグラフトではXグラフトより早期(移植後60日)に内皮様細胞がグラフト内腔を被覆した。血清中抗グラフト抗体は移植後1日に高値を示したが、AグラフトがXグラフトより有意に少なかった(0.17±0.02 vs. 0.46±0.06 O.D._<490nm>,p<0.0001)。またグラフト血小板付着数は術後10日に最も増加したが、AグラフトがXグラフトより有意に少なかった(10.3±1.6×10^6 vs. 17.4±1.4×10^6 /mm^2,p<0.0001)。血清中IgG, IgM,tPA,PAI-1はいずれもAグラフトがXグラフトより有意に少なかった(p<0.01)。<結論>自己フィブリンコート人工血管は、免疫反応が少なく、優れた抗血栓性および組織親和性を有し、長期開存が期待できる小口径人工血管となり得ることが示唆された。
近代移行期における親族関係分析システムの構築

本研究では、戸籍をもとに人口分析を行い、家系図を描画する「近代移行期における親族関係分析システム」の構築を目指している。本システムは、「幕末維新期人口史料」データベース、「幕末維新期人口史料」分析プログラム、親族関係分析システムから構成される。本システムには、岩代国会津郡・大沼郡、武蔵国多摩郡の40ヵ村、約8,000人の情報が蓄積されており、26項目の人口学的指標を利用者側PCに表示することができる。また、数世代の家系図を描画するスタンドアローン版の親族関係分析システムを試作した。研究代表者は、わが国の近代移行期における人口転換を再検討するために、古文書史料をデータベースに蓄積して、その記録内容を分析する歴史情報システムの一つである「江戸時代における人口分析システム」を開発中である。本研究では、幕末維新期に作成された単年度の史料をもとに人口分析を行い、家系図を描画する「近代移行期における親族関係分析システム」をインターネット上に構築して、研究者間で史料と分析方法を共有する研究環境の整備を目指している。近代移行期における人口再生産構造や親族関係などを復元することのできる歴史人口学における基的史料として、「宗門改帳」、「過去帳」、および明治初期に作成された「戸籍」がある。人口規模の大きな史料を整理すると、幕末維新期における人口再生産構造や親族関係の地域特性を抽出することができる。研究対象地域である岩代国会津郡・大沼郡を含む若松縣では、明治3(1870)年に「宗門改人別家別帳」から「戸籍」に改正され、「戸籍」の書式は明治3(1870)年から明治5(1872)年にかけて整備された。本年度は、まず、若松縣における戸籍制度への移行過程を検討し、「戸籍」の史料的性格を分析するために、福島県歴史資料館に所蔵されている県庁文書などを調査したのち、幕末期の「宗門改人別家別帳」と維新期の「戸籍」を現地調査によって比較検討した。つぎに、若松縣の村々に保存されている「戸籍」をもとに、ORACLE9.20をDBMS、ORACLE InternetApplication Server 9.02をWeb Serverとして「幕末維新期人口史料」データベースを試作した。研究代表者は、わが国の近代移行期における人口転換を再検討するために、古文書史料をデータベースに蓄積して、その記録内容を分析する「江戸時代における人口分析システム(DANJURO)」を開発中である。本研究では、幕末維新期に作成された史料をもとに人口分析を行い、家系図を描画する「近代移行期における親族関係分析システム」をインターネット上に構築して、研究者間で共有できる歴史情報システムを目指している。つぎに、「幕末維新期人口史料」データベースに岩代国会津郡8カ村の史料を追加登録した。本データベースには、若松縣に所属する岩代国会津郡伊予戸村、魚渕村、寺山村、小松川村、中在家村、中村、入谷地村、岩下村、大沼郡桑原村、落合村、海老山村、小山村、松岸村、上杉原村、仁主村、菅沼村、大岩村、小川窪村の明治4年戸籍と大沼郡上杉原村、海老山村、落合村の明治3年戸籍の延べ21カ村、2,020人、370世帯が登録されている。さらに、既開発の「宗門改帳」古文書画像データベースに登録されている史料を研究分担者の杉藤重信教授が開発している親族関係分析システム「アライアンス」のデータに変換するプログラムを作成した。これにより、スタンドアローン版「アライアンス」を用いて、数世代の家系図を描画することが可能となった。本研究では、幕末維新期に作成された史料をもとに人口分析を行い、家系図を描画する「近代移行期における親族関係分析システム」を開発して、インターネットを通して研究者間で共有できる歴史情報システムの構築を目指している。本システムは、「幕末維新期人口史料」データベース、「幕末維新期人口史料」分析プログラム、および親族関係分析システムから構成する計画である。本年度は、「幕末維新期人口史料」データベースに若松縣に所属する岩代国会津郡、大沼郡9ヵ村と武蔵国多摩郡10ヵ村の史料を追加登録した。現在、本データベースには、延べ40ヵ村、約7,000人、約1,300世帯が登録されている。第二に、以下に示す13項目の人口構造にかかわる指標をシステム利用者側コンピュータにグラフ表示する「幕末維新期人口史料」分析プログラムを構築した。(1)総人口、(2)性別人口と性比、(3)牛馬数、(4)5歳階級別人口、(5)5歳階級別年齢構造係数、(6)年齢階層別人口、(7)年齢階層別・性別人口、(8)年齢階層別性比、

(9)年齢構造係数、(10)配偶関係別人口、(11)配偶関係別人口の構成比、(12)宗教・宗派別人口、(13)宗教・宗派別人口の構成比。第三に、研究分担者の杉藤重信教授が開発している親族関係分析システムを改良して、一夫一婦制を基本とする日本の伝統家族を表現するのに適した家系図を描けるよう改良を加えた。また、既開発の「宗門改帳」古文書画像データベースに蓄積されているデータを親族関係分析システムに変換するプログラムを作成した。開発作業の結果、スタンドアローン版の親族関係分析システムを用いて、近代移行期における数世代の家系図を描画・検索することが可能となった。
センサシステム内蔵型マットレスによる高齢者の尿意推定

本研究は、認知機能が低下し、尿意を感じること、または訴えることが困難であるために尿失禁を生じている高齢者において、尿失禁の症状を軽減することを目標として、1非拘束・無侵襲で尿意を推定するセンサシステムの開発と、2センサシステムで推定した尿意に基づく排尿ケアプログラムの開発、3実証実験を行なう。本年度はこれらのうち1非拘束・無侵襲で尿意を推定するセンサシステムの開発に取り組んだ。本年度の研究成果について特に進展のあったものが2つある。1つ目は、以前から取り組んできた非拘束、無侵襲での計測が可能な、マットレスに内蔵されたセンサシステムによる尿意の推定である。本センサシステムは、マットレスの身体各部位に対応する位置に加わる力の微小な変化、すなわち微小な体動を計測可能である。このセンサシステムを用いて健常人を対象に実施した実験のデータ解析を進め、尿意の増強に伴って、微小な体動を示すパラメータが大きくなることを示した。2つ目は、ウエアラブルセンサシステムによる膀胱容量モニタリング手法の開発である。非拘束、無侵襲な計測を可能とするためにセンサの小型化を目指し、ヒトの身体の電気インピーダンス計測による膀胱容量推定法に着目して研究を進めた。膀胱内への尿の貯留は、下腹部の一部分にある程度の量の液体が貯留する変化であり、下腹部の電気インピーダンスを大きく変化させる。この変化をとらえるウエアラブルセンサの開発を目指し、回路の小型化のためのシステム検討、電極数を減らすためのコンピュータシミュレーションを行ない、用いる電極が少ない簡易なシステムでも尿失禁予防で要求されるレベルの誤差範囲内で尿量を推定しうることを示した。本年度は、マットレスに内蔵されたセンサシステムにより尿意を非拘束・無侵襲で推定できる可能性を示した。また、当初の研究計画に追加して開始したウエアラブルセンサシステムによる膀胱容量モニタリング手法の開発により、本研究の成果をこれまで対象としてきたいわゆる寝たきり状態の高齢者以外にも応用できる可能性がある。今後も継続して、各センサシステム、アルゴリズムの精緻化、それらを統合した尿意推定システムの開発、また開発したシステムにより推定された尿意に基づく排泄ケアプログラムの開発に取り組む。
日本原生キイチゴ属植物の育種並びに栽培利用に関する研究

我が国の気候や風土に適したキイチゴを育成することを目的に,本邦に自生する野生種28種,外国産野生種24種,栽培品種であるラズベリー12品種,ブラックベリー6品種及び未同定の不明種18種を遺伝資源として収集した.これらの野生種と栽培種の一部について,花芽の分化,開花及び成熟の様相,果実の成長などを生理,生態的に調査した.また,野生種間及びラズベリーまたはブラックベリーの栽培種と我が国の野生種との交雑を行い,種間雑種の育成を試みた.その結果は以下のとおりである.クマイチゴの花芽分化は,8月頃より始まり,年内には頂花雄ずい形成期まで発達した.ブラックベリー'マートン'の開花期と収穫期は結果枝によって異なり,主茎上半部より発生した結果枝では下半部より発生したそれよりも開花期と成熟期が早かった.本邦原産野生種の成熟果の大きさは,栽培種のブラックベリー3品種のそれらに比べ小さかったが,いくつかの野生種は,ブラックベリーとラズベリー品種の果実に比べ糖含量が高く,酸含量が低かった.野生種とブラックベリー栽培種の果実(集合果)の成長は,二重S字型成長曲線を示した.果実中のサイトカイニン様物質の活性は果実成長第I期に,IAA含量は同II期に,GA様物質の活性は同III期にそれぞれ増大した.ABA含量は,開花期に高く,その後低下して果実成長第II期には低かったが,成熟期にはやや増大した.果実からのエチレンとCO_2の排出量は,いずれも完熟期に急激に増大した.また,野生種間並びにブラックベリー及びラズベリーの栽培種と野生種間の種間雑種を多数育成した.これらの雑種は,今後育種素材としての評価を行う予定である.我が国の気候や風土に適したキイチゴを育成することを目的に,本邦に自生する野生種28種,外国産野生種24種,栽培品種であるラズベリー12品種,ブラックベリー6品種及び未同定の不明種18種を遺伝資源として収集した.これらの野生種と栽培種の一部について,花芽の分化,開花及び成熟の様相,果実の成長などを生理,生態的に調査した.また,野生種間及びラズベリーまたはブラックベリーの栽培種と我が国の野生種との交雑を行い,種間雑種の育成を試みた.その結果は以下のとおりである.クマイチゴの花芽分化は,8月頃より始まり,年内には頂花雄ずい形成期まで発達した.ブラックベリー'マートン'の開花期と収穫期は結果枝によって異なり,主茎上半部より発生した結果枝では下半部より発生したそれよりも開花期と成熟期が早かった.本邦原産野生種の成熟果の大きさは,栽培種のブラックベリー3品種のそれらに比べ小さかったが,いくつかの野生種は,ブラックベリーとラズベリー品種の果実に比べ糖含量が高く,酸含量が低かった.野生種とブラックベリー栽培種の果実(集合果)の成長は,二重S字型成長曲線を示した.果実中のサイトカイニン様物質の活性は果実成長第I期に,IAA含量は同II期に,GA様物質の活性は同III期にそれぞれ増大した.ABA含量は,開花期に高く,その後低下して果実成長第II期には低かったが,成熟期にはやや増大した.果実からのエチレンとCO_2の排出量は,いずれも完熟期に急激に増大した.また,野生種間並びにブラックベリー及びラズベリーの栽培種と野生種間の種間雑種を多数育成した.これらの雑種は,今後育種素材としての評価を行う予定である.我が国の気候風土に適したキイチゴ品種の育成を目的として,数種の野生キイチゴを材料に花粉の貯蔵条件を検討すると共に,貯蔵花粉を用いて種間交雑を試みた.さらに,得られた実生を育成し,形態的な特性や花粉稔性を調査すると共に,RAPD法により雑種性を解析した.その結果,キイチゴの花粉発芽調査には,20%ショ糖と1%寒天添加培地で,25°C,暗黒条件下で12時間培養するのが適切と考えられた.これらの条件で5種の野生種の花粉発芽を調査したところ,いずれも7095%と高い稔性を示した.また,-20°C下で花粉を貯蔵すると,9ケ月後でも50%以上の高い発芽率が維持された.貯蔵花粉を用いて相互交配を行ったところ,刺の無いカジイチゴ(カジ)を種子親とした場合に着果率が高く,多数の種子が得られた.なお,発芽した実生はいずれも正常で旺盛な発育を示した.種開雑種の樹勢は両親と比較して強く,葉はいずれも両親の中間的な形態を示した.開花は定植1または2年目で観察され,開花期は両親と同じ45月であった.カジ×クマイチゴ(カジクマ)の花粉稔性は,いずれの系統でも高かったのに対し,他の種間雑種の花粉稔性は極めて低かった.従って,放任受粉で結実したのは,カジクマのみであった.カジクマの果実は,クマイチゴに似た赤色大果であったが,カジ×ヒメバライチゴとカジ×クサイチゴ(カジクサ)のそれらは淡黄色の小果て両親の中間的形態であった.カジクサについて,果実中の糖と有機酸含量を分析した結果,全糖含量は両親の1/2以下で,全有機酸含量は両親の中間的な値を示した.なお,RAPD法により,雑種性を解析したところ,全ての固体が両親の特異的なバンドを持っており,完全な雑種であることが確認された.

キイチゴについて栽培上の基礎資料を得るため、プラックベリー'ボイソン'の果実の成長を調査すると共に、果実中の植物ホルモンを分析することによって、それらの変化と果実の成長との関連を考察した。その結果、集合果の成長は開花から開花後16日まで急激に肥大する果実成長第I期、その後開花後40日まで緩慢な成長を示す果実成長第II期及び成熟時まで再度急激な肥大を示す果実成長第III期に分けられ、典型的な二重S字型成長曲線を示した。一方、個々の小果の成長は第I期に急激に肥大し、その後は成熟期までほぼ一定の割合で肥大する傾向を示した。果実中の植物ホルモンを分析した結果、オーキシン(IAA)含量は、集合果の成長旺盛な第I期と第III期では低い値を示し、成長の緩慢な第II期では極めて高い値を示した。集合果中のジベレリン(GA)様物質の活性については、矮性イネ苗による生物検定の結果、1112画分、1415画分及び1719画分に高いGA活性が認められた。そこで、これらの画分より果実中の総GA様物質の活性をGA_3当量として示したところ、果実成長の第I期と第II期では極めて低い値を示し、再び果実が成長する第III期に急激に増大する傾向を示した。一方、ABA含量については、GA含量とは逆に開花直後に高く、第I期の間に急激に低下し、第II期では低い値を示した。しかしながら、第III期には成熟期に向かって再び増大する傾向を示した。これらの結果から、果実成長第III期にみられる果実の成長にはGAが、果実の成熟にはABAが関与していることが推察された。一方、オーキシンは成長の緩慢な第II期に高いピークを示したことから、種子の硬化に関与していることが示唆された。ブラックベリー'マートン'における結果母枝上の発生位置の異なる結果枝について,開花期,成熟期,果実の大きさなどを比較した.また,果実の成熟と呼吸量及びエチレン発生量との関係について検討した.その結果.開花から成熟までの日数には両結果枝間に差は見られなかったが,結果母枝の上半部発生結果枝では,同下半部発生結果枝に比べ長さが短く,開花期も成熟期も早かった.花数は,上半部発生結果枝に比べ下半部のそれらで有意に多かったが,逆に着果率は有意に低かった.果実の大きさは,下半部発生結果枝に比べ上半部のそれらで有意に高い値を示した.したがって,結果枝当たりの果実収量も上半部発生結果枝で多かった.これらのことが,ブラックベリー'マートン'の開花期間や果実の収穫期間が長い要因であることがわかった.また,果実のCO_2発生量は,集合果当たりでは果実の成長第I期と第II期では大きな変化は見られなかったが,完熟期には急激に増大した.重量当たりで見ると,開花時で最も高く,その後成熟まで低下し,完熟期にやや増大する傾向を示した.一方,エチレン発生量については,開花から開花後40日までは全く検知されなかったが,果実のCO_2発生量と同時期の開花後48日より完熟に向け急激に増大した.さらに,ラズベリーの暖地性園芸品種の育成を目的として,ラズベリーに数種の野生キイチゴとブラックベリーを種間交雑した.その結果,いずれの組合せからも種子が得られ,ブラックベリーの'マートン'を除き,実生を育成することができた.これらの実生の倍数性をフローサイトメーターで解析したところ,野生種を交雑して得られた実生は二倍体,ブラックベリーを交雑して得られた実生は三倍体と推定された.なお,RAPD法よりDNAを解析したところ,いずれも雑種と確認された.
発語困難児・者の音声言語発信装置の開発と応用

音声情報処理システム(TSUKUBAFM)を用いて、女性アナウンサーの調音した日本語100音節を特徴抽出し、編集を加えてコンピュータにとりこんだ。100音節のそれぞれをプログラマブル・デジタルフィルタ(PDFー1024型)によって、オクターブ80dBのフィルタ特性で400Hz以下をcut offし、持続時間が450ms一定となるように切り出し、ラベリングをして格納した。加えて、キーボードの操作によって、音声切り出し編集装置(DANAC7000)で格納した音節を随意に、しかも瞬時にひきだして音声化することを可能にした。平均聴力レベルが103dBであり、日常的には、受発信に手話を、受信に口語を主要な交信メディアとしている成人女性(F.W.)の単音節(日本語直音67音節)及び「高天原(1 ta ka ma ga ha ra 1)」の音声サンプルを得て、それぞれの発語明瞭度を測定した。デュアルチャンネルFFTアナライザー(B&K2032型)によって、「高天原」の韻律的特徴を分析し、その声性的特徴、基本周波数特徴及び時間構造に基いて、それぞれの音節の第1ホルマント以上をcut offし、デジタル化して格納した。このtakamagaharaの各音節における持続時間と空虚時間(closure duration)に、すでに格納されている母性アナウンサーの音節を重畳させ、キーボード入力によって、擬似的言語符号であるtakamagaharaを音声発信させた。F.W.の【〇!1】自然音声(直音67音節)、【〇!2】自然音声(高天原)、【〇!3】擬似的言語符号(67音節)、【〇!4】擬似的言語符号(takamagahara)をキーボード入力→CRT上へのローマ字表示→D/A変換→スピーカによって音声発信させ、その聴きとり評価を行い、分析した。本研究は、発語困難児・者のうち、重度聴覚障害者のみにとどまった。今後は、重度脳性マヒ児等に広げてゆく。本年度においては、Dual Channel FFT Analyzer(B&K 31)プログラマブルディジタルフィルタ(PDF1024),音声波形編集装置(DANAC7000)及びディジタルソナグラフ(KAY7800)を、コンピュータ(HP216)で制御するシステム化を完成させた。これらのシステムを用いて、健聴成人及び聴覚障害者の自然音声を、音節単位と単語及び句のレベルで任意に切りだし、それらの音響的特徴の解析、抽出、格納を行った。聴覚障害者の音声サンプルの特徴に関しては、日本特、教育学会(5編)、日本教育心理学会(1編)で発表を行った。原著論文として著した「聴覚障害者の発語に関する音響音声学的特徴(心身障害学研究)」、「聴覚障害者の発声・発語ついてーVCV音節の持続時間を中心にー(電子通信学会)」では、次のことを明らかにした。(1)重度聴覚障害者の母音調音にみられる平均基本周波数は、健聴者よりも高いことが認められるが、聴力レベルを必ずしも一義的関係を有しない。高度・重度聴覚障害者の基本周波数は、5母音間で異なる。(2)日本語破裂音を母音ではさむVCV音節の発語にみられる時間構造は、【V_1】D,CD,VO【T_1】【V_2】Dのセグメントからなっている。

このVCV音節の発語において、聴力レベルが100dB以上で、聴覚的フィードパックの確立が不十分な重度聴覚障害者にあっては、日本語の音韻規則を獲得し、調音プログラムを持ち得ていても、CDが短く、【V_2】Dが著しく長くなることが認められた。(3)重度聴覚障害者の慣用句の自然発語にみられる持続時間は、健聴者の2倍強も遷延されている。重度聴覚障害者の場合、慣用句に対する発語運動プログラムを持ち得ていても、調音結合の適切さと調音運動の平滑化において、著しい困難性を示していた。音声情報処理システム(TSUKUBAFM)を用いて,母性アナウンサーの調音した日本語100音節を特微抽出し,編集を加えてコンピュータにとりこんだ. 100音節のれぞれをプログラマブル・デジタルフィルタ(PDFー1024型)によって,オクターブ80dBのフィルタ特性で400Hz以下をcut offし,持続時間が450ms一定となるように切り出し,ラベリングをして格納した.加えて,キーボードの操作によって,音声切り出し編集装置(DANAC 7000)で格納した音節を随意に,しかも瞬時にひきだして音声化することを可能にした.平均聴力レベルが103dBであり,日常的には,受発信に手話を,受信に口話を主要な交信メディアとしている成人女性(F.W.)の単音節(日本語直音67音節)及び「高天原(lta ka ma ga ha ral)」の音声サンプルを得て,それぞれの発語明瞭度を測定した.デュアルチャンネルFFTアナライザー(B&K2032型)によって,「高天原」の韻律的特微を分析し,その声性的特微,基本周波数特微及び時間構造に基いて,それぞれの音節の第1ホルマント以上をcut offし,デジタル化して格納した.このta ka ma ga ha raの各音節における持続時間と空虚時間(closure duratiob)に,すでに格納されている母性アナウンサーの音節を重畳させ,キーボード入力によって,擬似的言語符号であるta ka ma ga ha raを音声発信させた.現在, F.W.の(1)自然音声(直音67音節),(2)自然音声(高天原),(3)擬似的言語符号(67音節),(4)擬似的言語符号(ta ka ma ga ha ra)を,キーボード入力→CRT上へのローマ学表示→D/A交換→スピーカによって音声発信させ,その聴きとり評価を行っている.