hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
乳癌臨床検体を用いたドセタキセル耐性遺伝子の同定と機能解析

乳癌臨床検体を用いたレーザーマイクロビームマイクロダイセクション法によるcDNAマイクロアレイ解析により正常乳管細胞に比べて乳癌細胞において、高頻度に高発現している遺伝子群の同定をおこなった。また、ドセタキセルに対する感受性情報と遺伝子発現プロファイルを用いてRandomPermutationテストを行い、感受性の強い症例群と感受性の弱い症例群の間で統計学的に有意に発現量の異なる遺伝子群278遺伝子を同定した。更に両群からそれぞれ1例ずつランダムにサンプルを抜き出し、異なる12の感受性群vs非感受性群の組み合わせを用いて、同様の解析を行ったところ、4回以上の解析で共通して選び出され、p値が0.0001以下であった51遺伝子を同定した。この51遺伝子のうち、20遺伝子がドセタキセル非感受性群において感受性群よりも相対的に高発現していることが判明した。また、感受性群8例と非感受性群12例を用いてLeave-one-out cross validation testにより、遺伝子発現量に基づき各サンプルに点数化を行ったところ、有意差上位9遺伝子を用いることで感受性群8例は全てプラスのスコアを、非感受性群12例は全てマイナスのスコアを示した。更に、この9遺伝子を選別する際に用いなかった9症例に対し、同9遺伝子によるスコア化を行ったところ、2例の感受性症例と7例の非感受性症例を正確に予測することが可能であった。現在、非感受性症例群において高発現している遺伝子群について、機能解析を行っている。cDNAマイクロアレイサンプルの調整方法については、クリオモルド2号にO.C.Tコンパウンドに充填済みの生検にて採取された乳癌組織を8umの厚さで切片化し、ヘマトキシリン-エオジン染色を施しレーザーマイクロビームマイクロダイセクション法(LMM法)により乳癌組織から乳癌細胞だけを選択的に採取するという作業を27乳癌組織について行った。また、癌細胞の遺伝子発現に対するコントロールとして、付随して摘出される乳腺組織の正常部分より選択的に乳管細胞をLMM法にて採取した。RNA抽出については、市販のキットを用いてTotal RNAを抽出した後、アレイ解析に必要な量にまで増幅する必要があるため、T7-based RNA増幅法を2回行い約50μg-200μgの増幅RNA(aRNA-2)を得た。マイクロアレイスライド上でのハイブリダイゼーション実験については、当研究室にてすでに作成されている、約37,000遺伝子がスポットされたcDNAマイクロアレイ解析システムを使用した。乳癌サンプルに対するコントロールとして選択的に採取されたヒト正常乳管細胞を用い、全サンプルに対するユニバーサルコントロールとして使用した。正常乳管細胞由来のmRNAを乳癌サンプルと同様に増幅した後に逆転写しながらCy3ラベルし、また乳癌細胞由来の増幅RNAを逆転写しながらCy5ラベルし、マイクロアレイ解析のプローブとした。Automated Slide Processorを用いて、両者をマイクロアレイのスライド上で競合的にハイブリダイゼーションし、共焦点レーザースキャナーによりスポットされた遺伝子のハイブリダイゼーションシグナルを検出したうえでソフトウエアにより数値化を行った。数値化されたデータをアレイ上にスポットされているハウスキーピング遺伝子によりサンプルとコントロールの正規化を行い、現在数理解析を行っている。
歯科心身症の診断・治療のための実践型方略の構築

1.疾患分類の試み前年度に引き続き、疾患名の整理と英文表記について日本歯科心身医学会においてアンケート調査を行い、まとめの作業を行った。しかし、施設間格差が大きく、また一つ一つの病名に歴史的背景が存在し、難航している。2.治療アルゴリズム構築の試み第45回日本心身医学会総会にて「歯科心身症の入院治療とその遠隔成績について」口演発表、その内容の要旨を日本歯科心身医学会雑誌に論文投稿し受理され、現在印刷中である。本症の数年から十数年にわたる長期予後を検討し、当科で入院治療を行った患者の73%で比較的良好な経過が得られていたことを報告した。一方で不完全寛解や再発など治療上の問題点を論じ、本症の病態仮説を再考した。第14回口腔粘膜学会シンポジウムにて「ドライマウスと歯科心身症-鑑別診断と治療について-」発表。ドライマウスという切り口と歯科心身症概念との整合性や問題点、さらに薬物治療に伴うドライマウスの問題などについて論じた。また新規向精神薬と従来の三環系抗うつ薬との併用療法が奏効した舌痛症の1例報告を行い、日本歯科心身医学会雑誌に論文投稿し、現在印刷中である。薬物療法に関しては基本的にはなるべく単純な処方が望ましいが、単剤では十分な効果が得られない症例もしばしば経験される。症状の緩和と副作用との兼ね合いについて、各薬剤の特性を考慮した併用療法が重要であることを論じた。(1)歯科心身症疾患概念規定の検討まず歯科心身医学、心身医学、精神医学および脳科学領域の文献的考察を行った。さらに実際に経験した症例を診療録をもとに治療の経過や転機、患者の反応などを分析し、また再発・再燃や患者の社会適応状態など長期予後も調査した。これらの結果から歯科心身症は、(1)思春期は少なく中高年患者が多い、(2)心理療法のみならず薬物療法が必要であること、(3)歯科治療の制限とその解除が治療のポイントになること、(4)長期予後は比較的良好であるが、再発・再燃の面から引き続き歯科治療には注意が必要であること、などが特徴と考えられた。この結果を、第8回日本心療内科学会パネルディスカッションにて「歯科口腔外科領域における心身医学的アプローチの特異性について」という演題で発表した。また、他領域とのオーバーラップについて考察し、第43回日本心身医学会九州地方会にて「線維筋痛症を伴った咬合の異常感(顎関節症)の1治験例」を発表し、日本歯科心身医学会雑誌に論文投稿し受理された。これらの結果から、歯科口腔外科領域の心身症では心理社会的因子モデルが適応しにくいことが多く治療に難渋することが多いのは、口腔領域の解剖・生理学的特異性のみならず歯科治療による侵襲や口腔内環境の不可逆的変容という病態の特殊性に基づいていることが示唆された。現在引き続き、症候と経過・予後まで含めて「歯科心身症の疾患概念」を再検討している。(2)歯科心身症疾患分類の試みまずは用語・病名整理のため、日本歯科心身医学会学術委員会において歯科心身医学関連の疾患名の整理・検討に参加し、その結果を日本歯科心身医学会雑誌18巻に「用字用語例」として掲載できた。「歯科心身症の疾患概念」の再検討とあわせて、さらに詳細な疾患分類を検討しているところである。
ヒト配偶子形成過程の分子遺伝学的解析(生殖補助技術におけるゲノム刷り込みの影響)

本年度は、初期発生において生殖補助技術(Assisted Reproductive Technology : ART)が後天性遺伝子修飾機序に及ぼす影響を解明するため、本期間のターゲットとして、母体血漿中胎児成分の供給源を明らかにし、胎盤特異的遺伝子発現と後生的遺伝子修飾機序(エピジェネティクス)を指標とした母体血漿中胎児DNAおよびRNAの臨床応用の可能性について検討を加えた。2.胎盤特異的に発現する遺伝子として、hCG-βmRNAおよびhPL mRNAに着目した。real-time RT-PCR法を用いて母体血漿中の両遺伝子レベルを定量したところ、母体血漿中のhCG-βmRNAレベルは妊娠経過とともに減少し、一方でhPL mRNAレベルは増加していた。本法の臨床応用として、膀胱浸潤を認める前置胎盤例における穿通胎盤の状態をモニターすることが可能であった。したがって、母体血漿中hCG-βmRNAレベルおよびhPL mRNAレベルの定量は、妊娠中の胎盤機能をモニターし得る分子遺伝学的マーカーとしての可能性が示された。この成果を英文論文として報告し、アクセプトされた(Masuzaki et al. Clinical Chemistry. In press)。上記より、母体血漿中の胎児/胎盤由来DNAおよびRNAをもちいて、初期発生においてARTが後天性遺伝子修飾機序に及ぼす影響を解明する手がかりを得た。本年度は、皮様嚢胞腫の卵子形成過程における発生時期分類と腫瘍でのゲノム刷り込み遺伝子の発現解析を行った。1.発生時期分類組織学的に皮様嚢胞腫と診断し、正常染色体核型であることを確認した79例を対象に、計20種類のマイクロサテライトマーカーを用いて、オートシークエンサーで遺伝子型を決定した。患者血液と腫瘍の遺伝子型を比較して、腫瘍の発生時期を同定した。すなわち、染色体着糸点近傍のinformativeマーカー(患者血液の遺伝子型がヘテロ接合)で、腫瘍の遺伝子型がホモ接合のものをIと分類し、ヘテロ接合のものをIIと分類した。つぎに、腫瘍の遺伝子型を、腕中間部から遠位部のinformativeマーカー間で比較し、腫瘍の遺伝子型が異なるもの(ホモ接合からヘテロ接合への変化あるいはその逆)を組み換えと判定した。そして、組み換えを複数の染色体かつ複数の遺伝子座で認めたものをIbもしくはIIb、同じく組み換えを認めなかったものをIaもしくはIIaとした。79例の皮様嚢胞腫のうち、Iaに分類されたものは22例,IIaは18例,Ibは27例,IIbは3例,そして分類不能例は9例であった。母性発現するH19の腫瘍における発現レベルは、0.93±0.15から1.89±0.08の範囲であった。卵子形成過程における腫瘍の発生時期と比較すると、時期が成熟するにつれて高発現していた。一方、父性発現するSNRPNおよびMEST-1の腫瘍における発現レベルは、それぞれ1.17±0.05から0.21±0.04および0.96±0.03から0.11±0.04の範囲であった。時期が成熟するにつれて、体細胞レベルから次第に低発現へと変化していた。よって、ゲノム・インプリケンティング遺伝子の発現レベルは、卵子形成過程における腫瘍の発生時期が成熟するにつれて次第に成熟卵の発現パターンを示すことが示唆された。これは、腫瘍の発生時期が成熟するにつれて、腫瘍におけるH19のメチル化レベルは次第に低メチル化し、SNRPNのそれは高メチル化していたメチル化解析の結果と一致していた。一方、脳細胞特異的に母性発現するUBE3Aの腫瘍における発現レベルは、0.91±0.14から1.12±0.13の範囲であった。発生時期に関係なく血液細胞と同じ発現レベルを呈していた。これは、本遺伝子が組織特異的インプリントを受けることに由来しているものと思われた。以上より、皮様嚢胞腫は、卵子形成過程の各時期より発生していた。本腫瘍におけるゲノム・インプリンティング遺伝子の発現レベルは、発生時期が成熟するにつれ、次第に成熟卵の発現パターンを示すものと示唆された。

本年度は、初期発生において生殖補助技術(Assisted Reproductive Technology : ART)が後天性遺伝子修飾機序に及ぼす影響を解明するため、本期間のターゲットとして、母体血漿中胎児成分の供給源を明らかにし、胎盤特異的遺伝子発現と後生的遺伝子修飾機序(エピジェネティクス)を指標とした母体血漿中胎児DNAおよびRNAの臨床応用の可能性について検討を加えた。2.胎盤特異的に発現する遺伝子として、hCG-βmRNAおよびhPL mRNAに着目した。real-time RT-PCR法を用いて母体血漿中の両遺伝子レベルを定量したところ、母体血漿中のhCG-βmRNAレベルは妊娠経過とともに減少し、一方でhPL mRNAレベルは増加していた。本法の臨床応用として、膀胱浸潤を認める前置胎盤例における穿通胎盤の状態をモニターすることが可能であった。したがって、母体血漿中hCG-βmRNAレベルおよびhPL mRNAレベルの定量は、妊娠中の胎盤機能をモニターし得る分子遺伝学的マーカーとしての可能性が示された。この成果を英文論文として報告し、アクセプトされた(Masuzaki et al. Clinical Chemistry. In press).上記より、母体血漿中の胎児/胎盤由来DNAおよびRNAをもちいて、初期発生においてARTが後天性遺伝子修飾機序に及ぼす影響を解明する手がかりを得た。
首振り指示に基づくヒューマンロボットインタフェース

人と同じ環境で日常的な支援を行うロボットの実現のための基礎的アプローチとして,発話や上肢に障がいを持つ人でも指示を出すことのできる,首の運動(顔の向きの変化)を全方向移動ロボットへ与える運動命令とするヒューマンロボットインタフェースを提案した.操作者のロボットへの運動指示をより明確にするために,頭頂部からロボットの動作環境上にレーザー光線を照射し,首の運動により変化する光点の移動にロボットが追従するシステムを構成した.また,運動指示に対するロボットへの追従運動がより操作者にとって好ましいものとなるように,人間心理に受け入れられる感性コントローラを導入し,その効果について確認した.手先や音声により同じ部屋等の身近なロボットに指示を与えることが出来ない人間にとっては,首振り指示のみによりロボットを思い通りに操作できれば理想的である.操作者がロボットをある場所に止めておきたい場合は停止モードとしてその場にロボットを停止させ,逆にロボットを動作させたい場合は追従モードとしてロボットを操作する,といったモード切り替えを導入し,首振り指示により操作・停止を容易に行えるシステムを構築した.それは,ロボットの前方床面とロボット本体のパネルを用いて,その部位にレーザ光点を照射し,照射時間を測定することにより切り替えを行うものである.ロボット本体のパネルは,発行ダイオードにより領域を示し,環境に設置したカメラにより画像処理を通じてその領域内にレーザ光点が入っているかどうかを認識し,一定時間入っている場合は操作者が停止に意志を持つものと判断して,停止モードへの移行を行う.ロボットを停止させた状態から再びロボットを動作させる場合はロボット前方床面の長方形のエリア内に操作者がレーザーの光点が入るように首振り指示を行う.そしてレーザーの光点がこの長方形のエリア内に照射されたことをシステムが認識したとき,停止モードから追従モードへ切り替わる.以降はロボットがレーザーの光点に追従して動作する.また,ロボット本体にステレオカメラを2台装着し,環境のカメラでは死角になる位置や障害物が存在する場合でも追従が行われるようにシステムの改良を行った.これにより,環境のカメラで死角になった場合の追従に成功するだけではなく,デッドレコニング(オドメトリシステム)により生じた誤差を,搭載したカメラを用いて補正することに成功した.これにより,操作者が意図した位置からのずれをシステムが補正することが出来た.平成23年度は,レーザポインタを用いた首振り指示によるロボット操作システムを実現するために,オムニホイールを用いた全方向移動ロボットの製作,ステレオカメラによる床面上のレーザ指示光点の位置計測システムの構築,指示光点に追従運動するロボットの運動軌道の生成に成功した.移動ロボットとして,操作者に対する心理的影響を考慮し,足回りに低振動型オムニホイールを利用した全方向移動型を製作し,完成した.操作者の首振りにより投影された指示光点の計測を,環境上に2台のカメラを設置し,ステレオ法を用いることにより高精度に実現した.そして,ステレオカメラにより得られた光点の指示運動に追従するロボットの制御系を構成した.平成24年度は,ロボットが人間の指示運動に追従する場合,やわらかさ,滑らかさを付加することが心理的に望ましいため,それを実現する2次遅れ系の感性コントローラを指示運動と目標運動の間に挿入し,人間の操作に対するロボットの追従軌道を,より滑らかなものとすることが可能なインタフェースを構築した.また,操作者がロボットをある場所に止めておきたい場合は停止モードとしてその場にロボットを停止させ,逆にロボットを動作させたい場合は追従モードとしてロボットを操作する,といったモード切り替えを導入し,首振り指示により操作・停止を容易に行えるシステムを構築した.平成25年度は,構成したシステムを用い,実際に首振りにより移動ロボットの操作を行ってもらい,評価実験を実施した.その際の指示光点に対するロボットの追従特性,操作感,ロボット運動の印象を評価した.その結果,感性コントローラを用いることにより,ロボットの追従特性は人間心理に好ましいものであることを心理学的に明らかにし,感性コントローラの望ましいパラメータには個人差があるため,それらを調整可能なインタフェースに対して高い評価を得た.人と同じ環境で日常的な支援を行うロボットの実現のための基礎的アプローチとして,発話や上肢に障がいを持つ人でも指示を出すことのできる,首の運動(顔の向きの変化)を全方向移動ロボットへ与える運動命令とするヒューマンロボットインタフェースを提案した.操作者のロボットへの運動指示をより明確にするために,頭頂部からロボットの動作環境上にレーザー光線を照射し,首の運動により変化する光点の移動にロボットが追従するシステムを構成した.また,運動指示に対するロボットへの追従運動がより操作者にとって好ましいものとなるように,人間心理に受け入れられる感性コントローラを導入し,その効果について確認した.レーザポインタを用いた首振り指示によるロボット操作システムを実現するために,オムニホイールを用いた全方向移動ロボットの製作,ステレオカメラによる床面上のレーザ指示光点の位置計測システムの構築,指示光点に追従運動するロボットの運動軌道の生成を行った.以下,それぞれについて具体的に示す.移動ロボットとして,操作者に対する心理的影響を考慮し,足回りに低振動型オムニホイールを利用した全方向移動型を製作し,完成した.ステレオカメラによる光点の位置計測を実現するため,環境の高い位置に特性の等しい2台のカメラを平行に固定し,床面上の光点を撮影した.その映像は高速画像処理ボード2枚により取得され,それらの画像処理(閾値処理,特徴点抽出等)を行った.得られた左右の画像平面内の特徴点の対応付けをエピポーラライン上の探索により行い,三角測量の原理により光点の3次元座標を得た.

ステレオカメラにより得られた光点の指示運動に追従するロボットの制御系を構成した.光点の座標はether-net接続により画像処理用コンピュータから移動ロボットに搭載されているロボット制御用コンピュータにリアルタイムに送信され,ロボット制御用コンピュータはその座標を目標点とし,リアルタイムでロボットが追従するようオムニホイールを制御する.ただし,ロボットが人間の指示運動に追従する場合,やわらかさ,滑らかさを付加するほうが心理的に望ましいため,それを実現する2次遅れ系の感性コントローラを指示運動と目標運動の間に挿入した.そして,実際に人間によりロボットの操作を行い,感性コントローラを挿入することによる効果について心理学的評価手法を用いて明らかにした.平成23年度は,オムニホイールを用いた全方向移動ロボットの製作は,低振動型オムニホイールを足回りにモータ,モータドライバ,コンピュータをロボットに搭載し,それらの制御システム構成に成功した.また,環境にカメラを配置して,そのカメラを用いて操作者のレーザー光点を認識するための画像処理システムの構築に成功している.また,操作により運動するロボットが心理的に好ましいものとなるための感性伝達関数をソフトウエア的に実現し,その効果を確認している.これらは当初の計画通りである.平成24年度は,操作者がロボットをある場所に止めておきたい場合は停止モードとしてその場にロボットを停止させ,逆にロボットを動作させたい場合は追従モードとしてロボットを操作する,といったモード切り替えを導入すること,およびロボットに複数のカメラを搭載して,それによりレーザ光点の認識を寄り安定化させることを目標としていたが,いずれも目標を達成し,その効果を確認している.
酸化亜鉛バリスタの課電劣化機構

本研究では、ZnOセラミックバリスタを単純化したモデル系(ZnO-【Bi_2】【O_3】薄膜バリスタ)を作成し、その導電機構および課電劣化機構を明らかにするとともに、実用セラミックバリスタの導電特性および劣化機構について検討した。以下、本研究で得られた主な成果を列記する。1.実用ZnOバリスタの電流-電圧特性を調べ、非直線的な電流急増の挙動を実験的に明らかにした。また、直流課電による劣化現象には極性効果が存在することを示した。2.直流高電界を印加したZnOバリスタが330°C付近に粒間層中の空間電荷に起因するTSCピークを示すことを明らかにした。また、この空間電荷が課電劣化と密接に関連していることを指摘た。3.RFスパッタ法により、ZnO-【Bi_2】【O_3】二層薄膜バリスタ(ZnOバリスタの単純化モデル系)を作成するための条件と電気特性との関係を明らかにした。4.この薄膜バリスタの電流-電圧特性も著るしい非直線性を示し、特に逆方向では非直線性を示すα値(α=△LnJ/△LnV)は6090の値を示し、ZnOセラミックバリスタと同等以上の特性を有することを明らかにした。5.薄膜バリスタの課電劣化を調べ、その原因が界面での空間電荷の蓄積によることを示した。6.薄膜バリスタの電流は顕著な湿度依存性を示し、湿度センサとしても有望であることを明らかにした。本研究により、ZnOバリスタの課電劣化の機構が明らかにされたので、今後はこれに対する対策を検討する必要がある。
歯周組織再生過程での骨シアロタンパク質と骨芽細胞内転写因子の発現変化

骨シアロタンパク質(Bone Sialoprotein;BSP)はリン酸化および硫酸化を受けた糖タンパク質で,石灰化初期の骨芽細胞により分泌され,アパタイト結晶形成能を有し石灰化組織特異的に発現することなどから,初期の石灰化において重要な役割を果たすと考えられている。本研究では,BSPの遺伝子発現機構を検索する目的で,骨芽細胞様細胞(UMR106細胞)を用い,Prostaglandin E_2(PGE_2)およびメカニカルストレス(静磁場)のBSPの転写に対する影響を検索した。Real-time PCRの結果,3μg/mlのPGE_2刺激(12時間)および300,800ガウスの静磁場(24時間)にてBSPmRNA量は増加した。ルシフェラーゼアッセイの結果,UMR106細胞に導入したpLUC3(-116+60塩基対)コンストラクトで,PGE_2(□μM,12時間)および静磁場(300,800ガウス,24時間)刺激により転写活性は上昇した。PGE_2の効果は,転写開始点から約70塩基対上流のcAMP応答配列(CRE)および90塩基対上流のFGF2応答配列(FRE)を,静磁場の効果はFREおよび110塩基対上流に存在する下垂体特異的転写因子結合配列(Pit-1)を介すると考えられた。PGE_2の作用は,Aキナーゼ,チロシンキナーゼ,MAPキナーゼ系を介し,静磁場の効果はチロシンキナーゼ系を介すると考えられた。ゲルシフトアッセイの結果,PGE_2刺激によりCREおよびFRE結合核内タンパク質が増加し,CREに結合する転写因子はリン酸化CREBであった。さらに,静磁場刺激によりFRE結合タンパク質が増加し,Pit-1結合タンパク質が減少することが明らかになった。以上の結果,PGE_2および静磁場に応答するラットBSP遺伝子プロモーター中の応答配列および転写調節機構が明らかになった。骨芽細胞培養系(ROS17/2.8骨芽細胞様細包)に骨代謝を調節すると考えられる成長因子である腫瘍壊死因子(TNF-α;10ng/ml)またはフラボノイド(Gcnistein;50μM)を添伽後,全RNAを抽出しノーザンブロットを行った結果,TNF-αは添切口24時間後にmRNAの発現抑制し、Genisteinは12時間後に促進した。しかし,TNF-αは添加6時間後にはmRNAの発現を促進した。現在刺激時間によるTNF-αの効果の違いについて検討を進めている。ルシフェラーゼベクターに種々の長さに調節したBSPプロモーター遺伝子を挿入し,ROS17/2.8細胞にリポフェクタミンを用いて導入し,TNF-αまたはGenisteinで刺激したところ,BSPのプロモーター約116塩基上流域を含むコンストラクトでTNF-αはルシフェラーゼ活性を抑制し,Genisteinは活性を上昇させた。BSPプロモーター約116塩基上流には,逆方向のCCAAT配列,cAMP応答配列(CRE),FGF2応答配列(FRE)および下垂体特異的転写化因子結合配列(pit-1)が存在する。CRE配列に変異を挿入したコンストラクトでは,TNF-αの効果が消失し,CCAAT配列に変異を挿入したコンストラクトでは,Genistein刺激後にルシフェラーゼ活性の上昇が認められなかった。以上の結果より,BSPプロモーター中のCRE配列およびCCAT配列を介してTNF-αおよびフラボノイドによる転写の調節が行われていると考えられた。

BSPプロモーター中のCREおよびCCAAT配列をアイソトープで標識し,ゲルシフトアッセイにて核内タンパク質との結合性の検索を行った結果,CRE配列とROS17/2.8核内タンパク質との複合体はTNF-アルファ刺激により減少し,CCaAT配列に結合する核内タンパク質はGenistein刺激後変化は求められなかった。骨シアロタンパク質(Bone Sialoprotein ; BSP)はリン酸化および硫酸化を受けた糖タンパク質で,石灰化初期の骨芽細胞により分泌され,アパタイト結晶形成能を有し石灰化組織特異的に発現することなどから,初期の石灰化において重要な役割を果たすと考えられている。本研究では,BSPの遺伝子発現機構を検索する目的で,骨芽細胞様細胞(UMR106細胞)を用い,リポポリサッカライド(LPS)およびProstaglandin E_2(PGE_2)のBSPの転写に対する影響を検索した。ノーザンブロットの結果,1μg/mlのLPS刺激(12時間)後にBSPmRNA量が減少した。UMR106細胞をPGE_2(3μM,12時間)にて刺激するとBSPmRNA量は増加した。ルシフェラーゼアッセイの結果,UMR106細胞に導入したpLUC3(-116+60塩基対)コンストラクトにおいて,LPS(1μg/ml)により転写活性が抑制された。PGE_2(3μM,12時間)刺激により,pLUC3の転写活性は上昇し,その効果は転写開始点から70塩基対上流に存在するcAMP応答配列(CRE)および90塩基対上流のFGF2応答配列(FRE)を介すると考えられた。PGE_2の作用はEP2およびEP4受容体を介し,細胞内情報伝達系は,Aキナーゼ,チロシンリン酸化,MAPキナーゼ系を介すると考えられた。ゲルシフトアッセイの結果,FRE結合タンパク質が,LPS刺激12時間後に減少した。以上の結果より,FRE配列を介してLPSによる転写調節が行われていると考えられた。PGE_2刺激によりCREおよびFRE結合核内タンパク質が増加し,CREに結合する転写因子はリン酸化CREBであることが明らかになった。以上のことから,LPSおよびPGE2に応答するラットBSP遺伝子プロモーター中の応答配列および転写調節機構が明らかになった。
昆虫の運動検出と距離測定の視覚神経機構

本研究ではハンミョウ(Cicindela chinensis)の幼虫を材料として運動検出と距離測定の視覚神経機構を調べた。ハンミョウの幼虫は地面の巣穴でエサとなる昆虫等を待伏せる。適当な大きさの昆虫等が近づくと跳び出しこれを捕獲するが、大きな物体を近づけると巣穴の奥に逃避する。この捕獲行動と逃避行動の切換えを調べることで、視覚機構を調べた。幼虫は6対の単眼をもつが、そのうち大きな2対の単眼で頭上を見ている。ダミ-標的に対する行動から、幼虫は自身が跳び上がれる高さ以下の標的にのみ捕獲行動をし、視角が同じでもそれより高い標的には逃避行動を示した。このことは、幼虫の行動が標的の高さで切換わることを示した。2対(4個)の単眼の視野測定から、複数の単眼の刺激の時間パターンがこの切替に関わることが示唆された。隣接単眼の視野は頭の近くでは重複せず、高いところでは大きく重複していた。このことから、隣接単眼が僅かな遅延でほぼ同時に刺激されれば逃避行動、順番に刺激されれば捕獲行動を引起こすとするモデルを提唱した。現在このモデルの鍵となる高さに応じて応答特性を変化させるニューロンを脳内で生理学的に検索している。視覚刺激要因のうち標的の運動速度は行動の切替には直接関与しないが、静止した標的は何れの行動も引起こさない。従って、視覚行動には標的の動きが必須である。電気生理学的に標的の動きに特異的に応答するニューロンを検索し、視葉内に数種の運動感受性ニューロンを同定し、その形態を明らかにした。現在、運動特異的ニューロンの形成回路を検索中である。
大規模地震における斜面災害モニタリング基づく斜面災害予測に関する研究

大規模地震により発生した斜面災害の現地調査(モニタリング調査)を実施して、なぜその場所で斜面災害が発生したのか考察し、地震動特性、地形・地質特性、地盤工学的特性等と斜面災害特性との関連を検討した。国の内外において、大規模地震による斜面災害が頻発し多くの人命と財産が失われている。大規模地震は大きく分けて、海溝型地震と内陸直下型の2つのタイプがある。これまでの経験では、内陸直下型地震の方が多くの斜面災害が発生しているようであるが、その原因や理由は明らかにはなっていない。また同じような地形・地質の場所であっても、斜面災害が発生する場所は異なることが多い。このように大規模地震による斜面災害の予測手法は確立されておらず、理論的な予測手法が求められている。しかし、さまざまな振動特性を持つ大規模地震と斜面災害の関係を理論的に求めることは困難であるので、本研究では、大規模地震により発生した斜面災害の現地調査(モニタリング調査)を実施して、なぜその場所で斜面災害が発生したのか考察することにより、大規模地震と斜面災害のメカニズムを見出すことが目的である。さらに明らかにされたメカニズムにより、大規模地震による斜面災害の予測手法を提案し、山梨県における大規模地震による斜面災害の予測を行う予定である。内外で発生した最近の大規模地震における斜面災害のモニタリング研究により、以下の項目に注目して斜面災害の法則性を見出すための検討を行った。・地震動特性(地震のタイプ、地震動の大きさ、波動特性、震源からの距離、その他)・斜面災害の特徴(規模、発生回数、走向・傾斜、勾配、基岩の性質)・地形・地質的特徴・土質力学的特徴・岩盤力学的特徴・その他の特徴さらに、平成23年3月11日に発生した東北地方太平洋沖地震による斜面災害についても現地調査等を行い、地形・地質的特徴,地震動タイプや規模などの類型化を行い、大規模地震による斜面災害の発生場所(または地域)の予測手法を見出すことを目的に研究を継続する予定である。しかし、さまざまな振動特性を持つ大規模地震と斜面災害の関係を理論的に求あることは困難であるので、本研究では、大規模地震により発生した斜面災害の現地調査(モニダリング調査)を実施して、なぜその場所で斜面災害が発生したのか考察することにより、大規模地震と斜面災害のメカニズムを見出すことが目的である。内外で発生した最近の大規模地震における斜面災害のモニタリング研究により、以下の項同に注目して斜面災害の法則性を見出すための検討を行った。・地震動特性(地震のタイプ、地震動の大きさ、波動特性、震源からの距離、その他)・斜面災害ゐ特徴(規模、発生回数、走向・傾斜、勾配、基岩の性質)・地形・地質的特徴・土質力学的特徴・岩盤力学的特徴・その他の特徴さらに、平成23年3月11日に発生した東北地方太平洋沖地震による斜面災害についても現地調査等を行い、地形・地質的特徴,地震動タイプや規模などの類型化を行い、大規模地震による斜面災害の発生場所(または地域)の予測手法を見出すことを目的に研究を実施している。大規模地震による斜面災害の予測手法は確立されておらず、理論的な予測手法が求められている。本研究では、大規模地震により発生した斜面災害の現地調査(モニタリング調査)を実施して、なぜその場所で斜面災害が発生したのか考察し、大規模地震と斜面災害のメカニズムを検討した。1.地震動特性(地震のタイプ、地震動の大きさ、震源からの距離、その他)2.斜面災害の特徴(規模、走向・傾斜、勾配、基岩の性質、その他)3.地形・地質的特徴・土質力学的特徴・岩盤力学的特徴・その他の特徴大規模地震による斜面災害の発生場所(または地域)の予測手法を見出すことを目的に研究を行った。成果論文として発表はしていないが、平成24年度は成果を公表する予定である。24年度が最終年度であるため、記入しない。日本の内外で大規模地震が頻発しているので、どのような大規模斜面崩壊が発生する可能性があるのか、具体的にある地域で想定する必要がある。
肝再生における塩基性線維芽細胞成長因子の生理機能の解明と肝臓外科における臨床応用

【背景と目的】肝細胞の増殖には、主に肝細胞増殖因子(HGF)が関与し、塩基性線維芽細胞成長因子(bFGF)はほとんど無効であるという培養系での報告が多い.しかし、肝癌組織及び再生肝に多量のbFGFが含まれていることがイムノブロットを用いて報告されている(Prestaら1989年、Brigstockら1991年)ことから、bFGFが肝再生あるいは肝細胞増殖に重要な働きを持つ可能性が高いと考えられる。そこで、bFGFの再生肝における作用を明らかにするために検討を加えた。【方法】肝細胞の分裂・増殖が活発な再生肝のモデルを用い、以下の如く検討した。1) bFGFの変化:肝切除後の時間経過に沿って、免疫組織化学及び核分画のイムノブロット、ELISAを用いて調べる。2) bFGF受容体の変化:各時期のbFGF受容体の変化を125I-bFGFを用いたオートラジオグラフィー、受容体結合実験及びbFGF受容体のmRNAに対するin situ hybridizationにより調べる。3)周術期におけるbFGFの関与:ヒト各種肝切除の術中および術後早期における血中bFGF濃度をELISAを用いて測定し、臨床検討する。【結果】bFGF特に、高分子量型bFGFが肝細胞の分裂、増殖期に発現が認められ、基礎的にはbFGFの機能、特に核内における働きを示唆する新たな形態的結果が得られ投稿した。臨床的には、肝切除術における新しいパラメーターとしての可能性を探る目的で周術期における蛋白レベルでの変化を検討したが、肝切除術に伴う明らかな特異的変動は認められなかった。【背景と目的】肝細胞の増殖には、主に肝細胞増殖因子(HGF)が関与し、塩基性線維芽胞成長因子(bFGF)はほとんど無効であるという培養系での報告が多い。しかし、肝癌組織及び再生肝に多量のbFGFが含まれていることがイムノプロットを用いて報告されている(Prestaら1989年、Brigstockら1991年)ことから、bFGFが肝再生であるいは肝細胞増殖に重要な働きを持つ可能性が高いと考えられる。1)bFGFの変化:肝切除後の時間経過に沿って、免疫組織化学及び核分画のイムノブロット、ELISAを用いて調べる。2)bFGF受容体の変化:各時期のbFGF受容体の変化を125I-bFGFを用いたオートラジオグラフィー、受容体結合実験及びbFGF受容体のmRNAに対するin situ hybridizationにより調べる。3)再生肝に対する生体内でのbFGFの作用:肝切除bFGF及びその拮抗剤を門脈持続注入し、bFGFの生体内での効果を検討する。4)周術期におけるbFGFの関与:ヒト各種肝切除の術中および術後早期における血中のbFGF濃度をELISAを用いて測定し、臨床検討する。臨床的には、肝切除術における新しいパラメーターとしての可能性を探る目的で周術期における蛋白レベルでの変化を現在検討中である。【背景と目的】肝細胞の増殖には、主に肝細胞増殖因子(HGF)が関与し、塩基性線維芽細胞成長因子(bFGF)はほとんど無効であるという培養系での報告が多い。しかし、肝癌組織及び再生肝に多量のbFGFが含まれていることがイムノブロットを用いて報告されている(Prestaら1989年、Brigstokら1991年)

ことから、bFGFが肝再生あるいは肝細胞増殖に重要な働きを持つ可能性が高いと考えられる。そこで、bFGFの再生肝における作用を明らかにするために検討を加えた。【方法】肝細胞の分裂・増殖が活発な再生肝のモデルを用い、以下の如く検討した。1)bFGFの変化:肝切除後の時間経過に沿って、免疫組織化学及び核分画のイムノブロット、ELISAを用いて調べる。2)bFGF受容体の変化:各時期のbFGF受容体の変化を125I-bFGFを用いたオートラジオグラフィー、受容体結合実験及びbFGF受容体のmRNAに対するin situ hybridizationにより調べる。3)周術期におけるbFGFの関与:ヒト各種肝切除の術中および術後早期における血中bFGF濃度をELISAを用いて測定し、臨床検討する。【結果】bFGF特に、高分子量型bFGFが肝細胞の分裂、増殖期に発現が認められ、基礎的にはbFGFの機能、特に核内における働きを示唆する新たな形態的結果が得られ投稿した。臨床的には、肝切除術における新しいパラメーターとしての可能性を探る目的で周術期における蛋白レベルでの変化を検討したが、肝切除術に伴う明らかな特異的変動は認められなかった。
生物希少資源が不要な酵素増幅型エンドトキシン検出法の開発

従来、高価なリムルス試薬を必要とするエンドトキシン(ET)の計測を、ET認識分子を修飾したナノカーボン電極と、第二のET認識基と電気化学活性基からなるET認識メディエータの応答を増幅する測定技術を利用することで、安価にかつ高感度にETを電気化学検出する簡便な方法の開発を行った。上述の目的を達成するため、ETの認識・濃縮が可能なET認識ポリマー修飾ナノカーボン電極の作製と、ET認識メディエータとして、ET認識分子であるポリミキシンB (PMB)に、(1)酵素、ならびにフェロセンを標識したPMBの二種類を開発した。以上、得られた修飾ナノカーボン電極・PMB標識メディエータの組合せから成る測定系において、ET検出感度(2ng/mL)を達成した。さらには本測定系を微小流路化することに成功した。従来、高価なリムルス試薬を必要とするエンドトキシン(ET)の計測を、ET認識分子を修飾したナノカーボン電極と、第二のET認識基と電気化学活性基からなるET認識メディエーターの応答を増幅する測定技術を利用することで、安価にかつ高感度にETを電気化学検出する方法の実現を目的とする。このために、下記の研究課題を実施した。1.電気化学ET測定系の構築(H23-24):ETの認識・濃縮を行う反応場をナノカーボン電極上に構築するため、1牛血清アルブミンと認識分子を混合架橋した膜を電極上に成膜する物理的固定、および2ナノカーボン表面と認識分子を直接架橋可能な二官能性リンカーによる化学的固定を検討した。また、ET認識メディエーターとして、ET認識分子であるポリミキシンB(PMB)に、1酵素ALPを標識したALP-PMB、2フェロセン(Fc)を標識したFcPMBの二種類を開発した。以上、得られた修飾ナノカーボン電極・PMB標識メディエーターの組合せから成る測定系において、メディエーターのFc、並びにALPの酵素反応生成物であるPAPの酸化電流が電極表面に吸着したET濃度に比例すること、かつ還元剤(鉄(II)イオン)を添加すると酸化されたFc、PAPが還元され、得られた信号がリサイクリング効果によって増幅することを確認した。その結果、ET検出感度(2ng/mL)を達成した。2.測定系のフローシステム化(H24):マイクロ流路と電気化学測定を組合せたマイクロフローシステムを開発した。シリコン基板上にパタンスパッタしたナノカーボン電極とポリジメチルシロキサンからなる流路を貼合せることで、マイクロ流路を形成した。十分な送液と電気化学測定が可能となる流路デザインを検討した結果、流路幅1.2mm、高さ40μmのマイクロ流路において、ET測定で用いる上記PAPを感度良く測定できることを見出した。従来、高価なリムルス試薬を必要とするエンドトキシンの計測を、エンドトキシンを認識する分子と、酵素反応によって電気化学的に活性な分子(メディエーター)の応答を増幅する測定技術を利用することで、安価にかつ高感度にエンドトキシンを電気化学検出する簡便な方法の実現を目的とする。このような新規計測法の定量性向上を図るために、具体的に、以下の点を明らかにする。1.リムルス試薬を用いずにエンドトキシンを認識・濃縮し、シグナルをさらに増幅して定量が可能な電気化学エンドトキシン測定系を新たに構築する。2.上述の増幅型エンドトキシン検出において、メディエーターを安定かつ高感度に検出・定量が可能なスパッタナノカーボン電極を導入する。また、検出感度・検出限界をより向上させるためのナノカーボン薄膜電極表面の最適化、ならびに電極のフロー化・微小化を図る。平成23年度は、酵素増幅による電気化学エンドトキシン測定系の構築するため、下記の内容を実施した。エンドトキシンの認識・濃縮を行う反応場を電極上に構築するため、エンドトキシン認識分子(ポリアミノ酸など)を電極表面へ安定に固定化する方法を探索した。具体的には、牛血清アルブミン(BSA)と認識分子を架橋剤と混在することで、化学的に架橋した膜を構築した。また、フェロセン、ならびに酵素で標識した第二のエンドトキシン認識分子(ポリミキシンB:PMB)を合成した。候補酵素として、西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)とアルカリフォスファターゼ(ALP)を標識することを検討した。以上、得られた修飾電極・標識PMBの組合せから成る測定システムにおいて、メディエーターの酸化電流がエンドトキシンの存在下で、酵素反応のリサイクリング効果によって増幅されることを確認した。その結果、本年度は従来の報告よりも一桁低い検出感度(2ng/mL)を達成した。

認識分子固定化と、当初平成24年度に検討を予定していた表面が原子レベルで平坦で極めてノイズ電流の小さいスパッタナノカーボン薄膜電極の導入を検討し、定量性の向上を図った。以上2点の検討により、本提案の測定システムがエンドトキシンの信号を電気化学的に増幅していることを確認できた。以上の観点においては、当初の予定に沿っておおむね成功した。しかしながら、認識分子の固定化の安定性に課題を残した。平成24年度はエンドトキシンをより高感度・かつ定量的に検出するべく、下記の2項目を実施する。1.スパッタナノカーボン薄膜電表面に酸素原子を導入することで、より高感度な応答が得られるカーボン膜表面の最適化を図る。また、導入された酸素官能基(COOHなど)に反応可能な低分子リンカーを合成し、認識分子のより安定な固定化法を模索する。2.電極の高感度化を図るために、ナノカーボン電極のフローシステム化を検討する。一般に電極上の薄層セル構造をμmレベルで制御し、検出感度の向上を目指す。今年度はエンドトキシン検出システムを構築するための各種試薬、特注セル等、ならびに表面構造作製・解析に必要な各種機器の使用代金等で使用を予定している。また、次年度使用額においては、昨年度請求予定であった生体試薬(エンドトキシン認識分子)の受注生産が間に合わず、今年度に移行した。
増殖と分化のスイッチング:細胞周期制御因子の非分裂細胞における新たな役割の解明

細胞分裂において中心体は微小管ネットワークの再編のかなめとして機能し、紡錘体形成に重要な役割を果たしている。なかでもAurora-A、Plk1などのmitotickinaseは微小管ネットワークの再編の制御因子として機能している。一方で、分化終末細胞である神経細胞は細胞分裂に向かうことはないがmitotickinaseは多く発現しておりその機能は不明であった。我々は後根神経節細胞を用いた実験からAurora-Aが神経細胞の神経突起伸展の際の微小管ネットワーク再編に必須であることを証明した。さらに、Aurora-Aの標的タンパク質であるNDEL1が協調して機能することを明らかにした。また、我々はAurora-Aが神経突起の進展だけでなく、発生期における神経細胞の遊走にも関与することを明らかにした。小脳顆粒神経細胞を用いた遊走実験から、遊走開始と同時にAurora-Aのリン酸化が亢進し、微小管の中心体からの進展が促進されることが分かった。逆に、Aurora-Aのノックダウン、阻害剤で抑制した時には有意に神経細胞の遊走が阻害されることが分かった。これらのことはmitotickinaseは細胞分裂だけでなく分化終末細胞においても積極的な機能があることが分かった。さらに、CDK5はAurora-Aの上位のリン酸化酵素として機能し、CDK5rap2を介してAurora-Aの中心体への集積を制御し、両者はNdel1を介して微小管のダイナミックスを制御し、神経細胞の遊走をコントロールしていることを証明した。神経細胞におけるmitotic kinaseの役割を解明し、Aurora-Aが神経細胞において神経突起の伸展、神経細胞の遊走に関与することの解明に成功した。神経細胞における中心体の役割を更に掘り下げ、プロテオーム解析による構成因子の変化、構成因子の破綻と疾患との関連に研究を発展させたい。なかでもAurora-A、Plk1などのmitotic kinaseは微小管ネットワークの再編の制御因子として機能している。一方で、分化終末細胞である神経細胞は細胞分裂に向かうことはないがmitotic kinaseは多く発現しておりその機能は不明であった。逆に、Aurora-Aをノックダウンしたり、阻害剤で抑制した時には有意に神経細胞の遊走が阻害されることが分かった。これらのことはmitotic kinaseは細胞分裂だけでなく分化終末細胞においても積極的な機能があることが分かった。
認知症高齢者グループホームの終末期ケアにおける看護連携システムの開発

本研究の目的はグループホームにおける終末期ケアの看護連携システム案を作成し,その効果を評価することである.本研究ではアクションリサーチとSSM方法論を基盤に,(1)看護連携システム案を作成するプロセス(2)作成した看護連携システム案を導入し,評価を行った.その結果に基づき,グループホーム職員が看護職と連携を促進するためのシステムとして,簡素に記録できる連携シートや連携マニュアルを活用する,各時期に沿って事例検討会を実施する,職員のリフレクションをサポートするという内容で看護連携システムを構築した.本研究の目的はグループホームにおける終末期ケアの看護連携システム案を作成し,その効果を評価することである.本研究ではアクションリサーチとSSM方法論を基盤に,(1)看護連携システム案を作成するプロセス(2)作成した看護連携システム案を導入し,評価を行った.その結果に基づき,グループホーム職員が看護職と連携を促進するためのシステムとして,簡素に記録できる連携シートや連携マニュアルを活用する,各時期に沿って事例検討会を実施する,職員のリフレクションをサポートするという内容で看護連携システムを構築した.平成21年度は,『グループホームにおける終末期ケアでの医療・看護ニーズの把握と訪問看護等の連携の実態調査』の準備として下記の項目を実施した.1.文献検索を行い,最新の認知症高齢者の終末期ケアならびに連携システムに関する情報収集を行った.2.国内外の連携を図っているモデル施設(認知症高齢者グループホームならびに訪問看護ステーション)を国内は滋賀県1か所,海外はスウェーデン王国4か所の視察ならびに聞き取り調査を行った.当初は豪州(ビクトリア州メルボルン)を予定していたが,海外の衛生情勢(新型インフルエンザ)により渡航先を変更した.国内外のモデル施設が介護職と看護職と効率的に連携を図るには,職種間の役割の明確化,教育体制の確立ならび行政を含めた連携体制の構築が不可欠であることが明らかになった.3.「認知症高齢者グループホームの終末期ケアに関する看護師・訪問看護との連携」の実態と課題を把握するための予備調査として,大阪府と兵庫県の認知症高齢者グループホームならびに訪問看護ステーション(合計数11施設,合計人数49人)を対象に,8グループを作成し,フォーカスグループ・インタビューを実施し,質問紙を作成した.課題として,(1)介護職と看護職の役割の認識不足,(2)研修会や事例検討会での情報交換の必要性,(3)介護職は臨終期の予測や判断が難しく,恐怖や不安のなかで終末期ケアをしている,(4)死生観の相違,(5)ケア体制が未確立であるということが明らかになった.そして,この結果より全国調査用の質問紙を作成した.[研究の目的]グループホーム(以下,GH)における終末期ケア提供時の連携に関する課題を再検討し,研修会や事例検討会という介入をとおして終末期ケアに関わる実践者が自ら課題に気付き,研究者との協働により,認知症高齢者GH終末期ケアにおけるより効果的・効率的な看護連携システムを開発することを目的とする.[研究実施状況]平成22年度は,以下の内容で研究を遂行した。1.全国調査の実施2.終末期ケア研修会の実施1)介入計画を立案し,介護職と看護職(訪問看護師含む)を対象に10月30日31日に大阪府下で「認知症高齢者のための終末期ケア研修会」を実施した.参加者:合計142人2)調査内容は,終末期ケア知識・態度の変化,連携状況の変化,死生観の変化,ケアマネージメント能力の変化について自記式質問紙を配付し調査した.また,介入予定のグループホームの終末期ケアの連携の現状を把握するために半構成的面接を実施し,質的にデータ収集した.ベースライン・3か月後のデータ収集が終了しており分析中である.3.追加研修会および事例検討会の継続介入追加研修会をグループホーム7施設(訪問看護ステーション含む),継続介入としての事例検討会をグループホーム3施設において実施した.4.看取りを終えた家族に対して,終末期ケアの満足度についてインタビュー(半構成的面接)を実施し,分析中である.今後も,上記データ収集を継続していくとともに,システム案の構築を進めていく予定である.1.研究目的:平成23年度の研究目的は,データの分析行い,看護連携システム案の有効性を検討することである.そして,看護連携システム案を修正し,看護連携システムを開発した.2.研究実施計画に基ずく研究成果:1)対象の属性:対象98人のうち,女性74人(75.5%),男性24人(24.5%)であった」平均年齢は,44.1歳(±11.41歳)であり,経験年数は平均7.7年(±9.35年)であった.有資格(複数:回答)としては,介護士(ヘルパー)が110件,次いで介護福祉±89件,看護師は37件であった.2)知識の向上:知識確認表を用いて,研修会前・研修会直後・3か月後に回答してもらった.各項目の答数の推移をCochranQ検定で比較したところ,すべての項目において有意な上昇を認めた.また,10項目の合計得点の推移はFriedman検定により有意な変化を示していた(P<0.001).研修会直後と研修会3か月後の中央値の差は認めないことから,知識の習得状況は研修会3か月後までは保持されていた.

(3)死に対する「恐怖・不安」の認識の変化:死生観尺度の下位項目の合計得点の平均値の比較では,「恐怖・不安(P=0.02)」と「目的(P=0.03)」に関して,有意に差を認めた(P<0.05).また,集合研修前後の死生観の比較では,「恐怖・不安」において有意に差を認めており,終末期ケア研修会の実施は,グループホーム職員の終末期ケアに対する不安や恐怖を緩和することにつながっていたことが明らかになった.4)終末期ケアにおける家族の満足度:家族は,常時付添えないときなど[記録を確認することを楽しみ]にしており,死を迎えるまでの[苦痛がいつまで続くかわからない状態を見ることが辛い]と感じていた.最期まで入浴介助や食事に工夫をしてもらったことなど職員の配慮に満足し、家族の希望を伝えることができたことや本人や自分も最期までよくやったと[グループホームでの看取りに満足]していた.上記の結果から,看護連携システム案を修正し,研究成果物として報告書を作成した.
相分離による分子液滴クラスター形成とクロマチン相互作用

近年、実験技術の進展によって真核細胞における転写制御の仕組みに光があてられてきたが、その謎はさらに深まるばかりである。転写因子、RNAポリメラーゼは集合して転写ファクトリーをつくるのであろうか?そこでの様々な因子とクロマチンの離合集散には、分子が液滴状のクラスターを形成する相分離機構が働いているのだろうか?本研究では、こうした疑問とアイデアを検証するために、クロマチン運動の計算モデルによりアプローチする。計算機シミュレーション、機械学習によるゲノムデータの統計処理、統計物理学的考察を合わせて批判的に検討し、生化学、生物物理学的実験と連携して、検証への道筋を明らかにすることを目的とする。