hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
氷成長抑制ポリペプチドと温度応答性物質を用いた水・氷・霜の付着しない機能面の研究

1.不凍ポリペプチドをコーティングしたガラス面を作製し、水滴の凍結実験を行った。とくに、水滴の接触面を同一にした場合、一定の表面温度を数通りに変えた場合、別の結合剤を用いた場合について、温度と氷付着応力の測定を行った。また、耐久性および透明度を調べた。その結果、同一接触面の場合には過冷却温度はコーティングにあまり依存しないこと、ガラス面と異なり表面温度が低いほど付着応力が減少すること、結合剤として3-グリシドキシプロピルトリメトキシシランを用いた場合には付着応力がより低下すること、約100回まで繰り返し氷除去できる耐久性があるとみなせること、透明性はコーティングによって損なわれないことを明らかにした。2.格子状微細溝を設けたガラス面に結合剤をコーティングした機能表面上の衝突水滴の凍結に関する測定を行い、以下のことを明らかにした。表面に霜が存在しない場合には、氷殻が形成されたのち氷層が形成され凍結が完了した。他方霜が存在する場合には、氷殻は形成されず氷層が形成された。なお、霜が存在して衝突水滴が過冷却の場合には、衝突直後に氷殻を形成した。さらに、過冷却水滴の凍結時間が長くなった。3.フェーズフィールド法を用いた液滴の凍結に関する数値シミュレーションを行い、新たな式を用いて凍結による体積増加を定量的に予測することに成功した。4.分担者の主な実績として、微細加工された銅板による着霜の測定を行い、表面を撥水処理したことにより霜層が薄くなること、冷却面投影面積を10%以下にすることにより過冷却解消と霜結晶の生成・成長を遅らせることが出来ること、微細加工形状を施して溝の幅を広くした場合にドライエリアが発生することを明らかにした(大久保教授)。また、分子動力学シミュレーションを行い、不凍ポリペプチドが螺旋構造を有すること、その端面が開いて氷結晶面に吸着することを得た(灘研究員)。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。本研究は、空気流中の水滴、雪、氷粒子、水流中の氷、さらには蒸気流が冷やされてできる霜が付着しないように、ナノスケールの表面の凹凸が温度に応じて変わることができる新規な透明機能面の確立することを目的とする。初年度である平成28年度は、以下の結果を得た。1.冬ガレイ由来の不凍タンパク質のアミノ酸配列をもとにしたポリペプチドの水溶液の一方向凝固実験を行った。その結果、水溶液を短時間予熱することにより、同濃度の不凍タンパク質水溶液と比べて界面速度と界面温度がより低下することが明らかになった。2.水平試験板上に水滴を滴下して冷却すると、水滴の表面に氷膜が生成し、その後水滴内部の液体部が冷却面から上方向に向かって氷成長することが分かった。試験板としてポリスチレン板とガラス板を採用した。プラズマ処理法を用いて、ポリペプチドを固定したポリスチレン板上の水滴は、未処理のポリスチレン板上の水滴よりも凝固点が低下することを得た。また、シランカップリング剤を介してポリペプチドを固定したガラス板上の水滴は、未処理のガラス板上の水滴と比較して、凝固点および結晶化温度が低下することを得た。3.フェーズフィールド法と埋め込み境界法を用いて、冷却面上の液滴の凍結に関する数値シミュレーションを行った。その結果、上記2で述べた気液界面に沿って氷殻が形成される現象に近い現象を再現できることが明らかになった。さらに、このシミュレーションを発展させて、冷却面に衝突した直後の低温液滴に関する数値シミュレーションを行った。その結果より、衝突時の気液界面の揺動及び液滴内の流動によって、冷却面に静置させた場合より潜熱の移動が促進されることを確認した。平成27年4月に提出した交付申請書の研究実施計画では、まず冬ガレイ由来不凍タンパク質をもとに数種類のポリペプチドを合成することになっていた。これに関しては、2種類のポリペプチドを合成し実験に用いたので、おおむね順調に進展していると言える。つぎに、ポリペプチド水溶液を予熱して会合体を形成し、これを表面処理したプラスチック板に固定する計画があった。これについては、予熱した水溶液の特性を調べるために行った一方向凝固実験結果を英語論文に纏めるために、会合体の詳細な計測を行った。これと並行してプラスチック板の表面処理を行い、予熱した水溶液を用いて会合体の固定を試みた。原子間力顕微鏡による表面のデモ測定を依頼したところ、予想以上に不均一であった。そこで、予熱していない水溶液を用いてポリペプチドを固定した機能面を作製した。予定より早く、この機能面上に純水の水滴を置いて冷却し、凝固点と氷成長の測定を行った。また、予定より早く金属の機能面を作製して、凝固点の測定を行った。したがって、おおむね順調に進展していると言える。さらに、作成した面の接触角を計画通り測定した。最後に、分子動力学法とフェーズフィールド法を用いて、水平面上の水滴の形状と付着を予測するシミュレーション法を開発する計画があった。これに関しては、分子動力学法による液滴の付着の予測は不十分であるが、フェーズフィールド法による液滴形状と凝固過程の予測は順調に進み、衝突直後の液滴の凝固、衝突しつつある液滴の凝固の予測もできることがわかり、2編の国際会議論文に結果を発表予定である。したがって、おおむね順調に進展しているといえる。

以上の進捗状況より、総合的に「おおむね順調に進展している」とした。本研究は、空気流中の水滴、雪、氷粒子、水流中の氷が付着しないように、表面の凹凸が温度に応じて変わることができる新規な透明機能面の確立することを目的とする。二年目である平成28年度は、以下の結果を得た。1.不凍タンパク質に着想を得たポリペプチドの水溶液の一方向凍結に関する測定と観察を行った。その結果、氷/水溶液界面は櫛歯状になり、界面温度が低下した。このポリペプチドの働きを変えるために、水溶液を数時間予熱して冷ました後、凍結したところ、界面温度がいっそう低下した。ほかの測定や観察を行った結果、短時間予熱により生じたポリペプチドの会合体の氷表面への吸着が原因であることを明らかにした。この結果を踏まえ、不凍タンパク質水溶液を短時間予熱して、同様の測定を行った。その結果、予熱時間が短いとき、顕著な氷成長抑制が得られた。2.水平冷却面に衝突する水滴の気液界面の振動について、フェーズフィールド法を用いた二次元数値シミュレーションと測定を行った。界面振動の周波数の測定値は、他者の経験式の値とよく一致した。シミュレーション結果は、定性的に実験結果と一致したが、定量的には実験結果と異なった。この原因は、計算条件と実験条件の差のみならず、二次元計算によって生じる界面振動のモード数の違いと冷却面に沿う氷の成長率の違いにあると考えられる。なお、潜熱移動のみならず、液滴衝突で引き起こされた循環流の上向き成分によって、温度場が擾乱されることを明らかにした。3.シランカップリング剤を用いて1で検討したポリペプチドを固定した機能面を創製し、その上に静置した液滴の凍結を観察した。その結果、創製した機能面は氷核生成温度を下げ、凍結を抑制することが明らかになった。その原因として、ポリペプチド会合体が表面に固定されていることが、原子間力顕微鏡の観察により明らかになった。平成28年4月に提出した交付申請書の研究実施計画と比較した結果をいかに示す。1.備品として購入した原子間力顕微鏡によるポリペプチド固定表面の観察に関しては、温度応答性高分子の選定に手間取ったため、温度依存性のない状態での観察にとどまった。しかしながら、当初予定の透明プラスチックのみならず、ガラス、アルミニウムのポリペプチド固定表面の観察を行い、その特性の違いを把握できた。2.プラズマ処理によるポリペプチドの表面への固定は耐久性がやや劣ることが明らかになったので、別の方法を検討し、耐久性を高め水滴の凍結を遅らせる効果的な方法を得た。計画通り、この方法により作成した面の接触角を測定した。3.予熱したポリペプチド水溶液を用いた場合には、原子間力顕微鏡による表面観察の結果、会合体が固定されていることを確認したが、その分布は不均一であった。そこで、計画にはなかったが、会合体を固定する面積を減らして疎水部を増やす目的で、計画にはなかったが、ピラー構造を持つ機能面を新たに試作した。4.フェーズフィールド法を用いた、衝突液滴の凍結に関する数値シミュレーション結果の考察を行い、2次元計算と3次元測定の違いが計算結果に影響していることに気付いたので、計画よりも早めに、3次元計算法の検討を始めた。また、次年度の実施計画にある気流を伴う液滴の冷却面への衝突と凍結に関して、予定より早く実験装置の一部を完成させ、測定を行った。
デジタルPCR法を応用した非侵襲的小児がん診断法の開発

神経芽腫23例で、MYCN増幅は血漿や骨髄DNAでデジタルPCR法による検出は可能で、原発巣摘出後転移巣のある6例を除き検出されなかった。ALK変異のある神経芽腫2例、βーカテニン変異のある肝芽腫3例は診断時に検出されたが、術後5日以降は検出されなかった。小円形細胞腫瘍の12種のキメラ遺伝子のライブラリーを作成し、ユーイング肉腫1例、横紋筋肉腫2例は、診断時に検出したが、術後は検出されなかった。血漿中エクソソームを濃縮し、次世代シークエンサーとデジタルPCRを用いてmicroRNA発現量を4例で検討した。上記から、小児がん患者の血液を用いたデジタルPCR診断法は有用と考えられた。1990年から同意を得て保存しえた神経芽腫、肝芽腫、横紋筋肉腫、ユーイング肉腫の外科的切除腫瘍および術前と術後の血清(血漿)一部、骨髄、腹水、胸水が保存されている症例97例を対象に以下の検討を行った。1. MYCN遺伝子増幅:神経芽腫症例の腫瘍由来DNAと血清(血漿)由来DNAを用いて、デジタルPCR法にてMYCN増幅を検討したところ、増幅例全例で血清由来DNAでMYCN増幅が見出され、コピー数も相関した。2.遺伝子異常検索:ALK変異のある神経芽腫、βーカテニンのエクソン3の変異、欠失のある肝芽腫症例について、血清由来DNAを用いて次世代シークエンサにて検出しえた。、デジタルPCRでその変異検出率を検討している。3.キメラ遺伝子検索:横紋筋肉腫、ユーイング肉腫症例で、腫瘍からキメラ遺伝子が検出されている症例において、腫瘍でみられたキメラ遺伝子の部位から、特異的なPCRプライマーとプローブを設計し、血清、胸水などの体液由来DNAを次世代シークエンサにて検出し、さらにデジタルPCRを用いての検出法を提唱し、その検出限界、精度を検証している。4. microRNA検索:腫瘍特異性が示唆されているmicroRNAの検出を次世代シークエンサーまたはデジタルPCRを用いて試みた。上記の結果から、血液特に血清由来DNAを用いたデジタルPCR法による神経芽腫のMYCN増幅診断法、ALK変異の検出法、肝芽腫におけるβ-カテニン変異の検出法、胞巣型横紋筋肉腫、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍などのキメラ遺伝子の検出での次世代シークエンスとデジタルPCRの有用性を見出し、非侵襲的に高感度な血清診断法を提示した。さらに、小児がんに特異的とされるmicroRNAとしてLet7のデジタルPCR法による検出感度、特異度について20例で検討した結果、その有用性も示唆された。術後経過中に保存された血漿検体、骨髄を用いたデジタルPCRにて、遺伝子増幅や変異、キメラ遺伝子の検索について検討し、治療効果判定あるいは再発マーカーとしての有用性を検討した。1. MYCN遺伝子増幅: MYCN増幅神経芽腫23症例の術後の血漿と骨髄検体中の遊離DNAを用いて、デジタルPCR法によるMYCN増幅検出を行うと、原発巣が摘出後14日には転移巣が残存している6例を除き増幅が検出されなかった。2.遺伝子異常検索: ALK変異のある神経芽腫2例、βーカテニン変異のある肝芽腫3例の術後の血漿DNAを用いた検出は変異ごとに個別にプローブ設計が必要であったが、診断時に検出された変異が術後5日以降は検出されなかった。3.小円形細胞腫瘍のキメラ遺伝子検索:腫瘍及び血液由来DNAを用いて次世代シークエンサーにて、12種のキメラ遺伝子のライブラリーを作成し、ユーイング肉腫1例、横紋筋肉腫2例の術後検体用いて検証したところ、診断時に検出されたキメラ遺伝子はいずれも検出されなかった。4. microRNA検索:腫瘍特異性が示唆されているmicroRNAについて、血液中のエクソソームを濃縮し、これらから、次世代シークエンサーおよびデジタルPCRを用いてmicroRNA発現量を4例で検討を行ったところ、前者では診断時からの検出はできず、後者のみで検出され、術後は検出不能となった。上記の結果から、小児がんとくにMYCN増幅神経芽腫、ALK変異神経芽腫、βカテニン異常肝芽腫、胞巣型横紋筋肉腫、ユーイング肉腫などの血清DNA診断、さらに特異的microRNAを用いた小児がんのデジタルPCR法による非侵襲的診断法は有用と考えられ、さらに、治療中や治療後の骨髄や体液中のMRD判定法、治療効果判定法、再発の早期診断法への有効性が示唆された。上記の結果から、小児がんとくにMYCN増幅神経芽腫、ALK変異神経芽腫、βカテニン異常肝芽腫、胞巣型横紋筋肉腫、ユーイング肉腫などの血清DNA診断、さらに特異microRNAを用いた小児がんのデジタルPCR法による非侵襲的診断法の確立が可能と考えられた。

さらに次世代シークエンサーを用いた血清遊離DNAによる変異の診断の可能な症例が見出され、ほぼ順調に経過していると考えられた。小児外科学前年度の研究を継続し、前年度に対象とした検体に加えて、術後経過とともに保存している検体、骨髄、胸水、腹水を用いたデジタルPCRにて、遺伝子増幅や変異、キメラ遺伝子の検索などについて検討し、治療効果判定あるいは再発指標としての有用性を検討する。1. MYCN遺伝子増幅: MYCN増幅神経芽腫症例の術後に継時的に保存された血清(血漿)由来、あるいは骨髄DNAにて、デジタルPCR法によるMYCN増幅検出による骨髄転移の評価、術後の治療効果、化学療法の有効性、さらに再発例におけるの再発予測の指標と有効性を検証する。2.遺伝子異常検索: ALK変異のある神経芽腫、βーカテニン異常(エクソン3の欠失または変異)のある肝芽腫の血清DNAを用いて、これらが検出された症例の術後検体の検討から、術後の治療効果、化学療法の有効性、さらに再発例においての再発予測の指標としての有効性を検証する。3.小円形細胞腫瘍のキメラ遺伝子検索:腫瘍及び血液由来DNAを用いて次世代シークエンサーにて、キメラ遺伝子が認められる遺伝子を中心に選択したライブラリーを作成し、キメラ遺伝子の存在部位を確定する。確定できたキメラ遺伝子について、個々にプライマーとプローブを設定し、術後検体でデジタルPCRを用いて検証し、診断とともに、治療中の治療効果、化学療法の有効性、さらに再発例においての再発予測の有効性を検証する。4. microRNA検索:腫瘍特異性が示唆されているmicroRNAについて、体液特に血液中のエクソソームを濃縮し、デジタルPCRを用いてmicroRNA発現量を検出し、術前診断と術後経過について検討を加える。上記の結果から、デジタルPCR法や次世代シークエンスを利用した骨髄や体液中のMRD判定法、治療効果判定法、再発の早期診断法も提言し、小児がんの治療成績向上に寄与する。
ニューカマー第二世代の義務教育卒業後のライフコースと次世代形成に関わる総合的調査

本研究は、ベトナム・カンボジア・フィリピン・中国・ブラジル・ペルーにルーツを持つニューカマー第二世代へのインタビュー調査から得られたデータに基づき、かれらの日本社会への適応のあり方を明らかにしたものである。その際かれらがいかなる資源を調達し、蓄積を図っているのかという点に留意した。本研究においてはニューカマー第二世代の様々な側面(職業選択、ジェンダーと教育達成、進路選択と大学進学、帰国経験等)に着目し分析を行った。共通して指摘できるのは、第二世代が出身国や親世代またはエスニックコミュニティとの文化的葛藤を経て経験していることである。かれらの日本における社会的達成は決して簡単なものではない。本研究は、これまでのニューカマー研究の蓄積に基づいて、ニューカマー第二世代に焦点を当て、かれらの義務教育後のライフコースを描き出すとともに、ニューカマー第二世代がいかなる資源を蓄積しまたそれらをいかに活用しているのかを明らかにするものである。特に本年度はカンボジア・ベトナム・南米(スペイン語圏)にルーツを持つ20代30代を中心とする成人男性約20名を対象にインタビュー調査を実施し、そこから得られたデータを比較検討することで各グループの特徴について仮説的な説明を試みた。1親子関係と結婚については、カンボジアグループは子供が成長した後も濃密な親子関係が見られる一方で、ベトナムグループと南米グループでは比較的独立した家族関係が見られた。こうした親子関係の違いは配偶者選択にも影響が及んでおり、カンボジア及びベトナムグループでは母国からの呼び寄せによる結婚が多く見られた。一方南米グループではこうした結婚は見受けられず、配偶者は主として本人の判断によって選択されていた。2義務教育経験の良し悪しに関してみれば、カンボジアグループが比較的「良い」経験を持つのに対して、ベトナム及び南米グループでは「良/悪」が二分された。ベトナムグループでは学校経験が良かったものの方がその後転職傾向が少なく安定しているように見受けられた。学校経験が良いことは、言語に不安を抱えつつも参入した社会がうまくいけ入れてくれたことを意味し、それがその後にである社会への障壁を軽減するよう影響しているという仮説を示した。3ルーツの表出について、ベトナム・カンボジアグループでは全員が、南米グループにおいても帰化した者を除いては表出されていた。ただし表出の仕方には積極的/消極的の違いが見られた。こうした違いは彼らが育った地域や通った学校において外国人性がいかに捉えられるかに大きく影響されると思われる。本研究はニューカマー第二世代の社会適応に焦点を当て、かれらの義務教育後のライフコースを描き出し、ニューカマー第二世代がいかなる資源を蓄積し、またそれらをどのように活用しているのかを明らかにするものである。本年度はフィリピン、ベトナム、ペルーにルーツを持つ10代後半から30代前半の女性25名に対してインタビュー調査を実施した。特に女性の場合、男性よりも家族役割などにおいて期待されるものが大きいと考えられることから、1親世代との関係、2親世代からの文化継承、3親世代の人的資本と編入様式が第二世代女性の文化継承と地位達成に与える影響、の3点について考察した。1に関してフィリピン系は「母娘」関係がもっとも強く、母親に対する「敬意と思いやり」がみられ、娘は母親をロールモデルとしていた。ペルー系では「親の権威の維持」をベースとした母娘関係がみられ、家事役割もそれらに基づいて引き受けられていた。ベトナム系では第二世代の方が日本社会への適応が早く、役割逆転が観察された。2について文化継承が最も弱かったのは役割逆転がみられたベトナム系であった。ペルー系では親世代との意志疎通ができる程度の言語継承がみられたが、家族役割の引き受け方については親世代の婚姻関係のあり方が影響を与えていた。フィリピン系は最も強く文化継承がみられたがその継承あり方には継承拒否・選択的継承・包括的継承の3パターンを見出した。3についてフィリピン系では文化継承のパターンにより学業達成に違いがみられた。ペルー系では親世代の人的資本と第二世代本人の社会関係資本のあり方で学業達成が異なっていた。さらに本研究グループでは上記調査に追加して特にフィリピン系ニューカマー第二世代を対象とした調査も実施した。本年度はフィリピン系ニューカマー第二世代のエスニックな自己呈示のあり方とその変容についてライフコースの視点から解明を試みた。年度当初の研究実施計画では研究調査を1義務教育段階対象者追跡調査と2ニューカマー第二世代の家族編成に関する実態調査の2層で進めつつ、ベトナム系ニューカマーを対象とした調査においてはイギリス・オーストラリアにおける現地調査を予定していた。このうち1および2については、東京都内、神奈川県大和市及び川崎市在住者を中心に約30名のインタビュー調査を実施した。また、特にフィリピン系ニューカマーについてはより多くの調査協力者と接触できる機会を得たため、かれらのエスニシティに関わる自己呈示に関する調査研究を進めた。それらの成果については日本教育社会学会第67回大会において研究発表を行ったものである。当初予定していたイギリスおよびオーストラリアにおける第二世代の調査については実施することはできなかった。海外現地調査の実施については今後実施の可能性も含めて再検討する必要があると認識している。一方で、日本教育社会学会における研究発表終了後、関西地域におけるニューカマー第二世代についても研究調査を実施する必要があるとの認識を得、神戸市の外国人支援団体の協力も得られたことから、関西地域におけるニューカマー第二世代インタビュー調査を開始した。これについては来年度以降も引き続き実施し、データの蓄積を図りたいと考えている。以上のことから、達成度については「(2)おおむね順調に進展している」と評価した。

尚、インタビュー調査の実施と平行して、インタビュー調査の実施報告を中心とした研究会を原則隔月で開催し、調査データの共有を図りつつ検討を重ねた。さらに理論枠組みを構築するための基礎理論に関する研究会もおおむね3ヶ月に1回程度開催した。前者の研究会については来年度以降も継続して実施する予定である。本研究はニューカマー第二世代の日本社会における社会適応に焦点を当て、かれらの義務教育後のライフコースを描き出し、ニューカマー第二世代がいかなる資源を蓄積し、またそれらをどのように活用しているのかについて、エスニシティごとの違いに着目しながら明らかにしようとするものである。本年度も昨年度に引き続きニューカマー第二世代のインタビュー調査を継続的に実施するとともに、一昨年度から実施しているインタビュー調査によって得られたデータの蓄積も加味し、検討分析を行い、日本教育社会学会第68回大会および第89回日本社会学会大会において研究発表を行った。まず、ニューカマー第二世代のトランスナショナル実践についてベトナム・中国・フィリピンの各エスニシティ間に見られる違いを比較することによってエスニック集団間の社会移動の比較考察を行った。日本社会において特に上昇移動を果たすうえで重要と思われるのは、親の人的資本、家族の編入様式、選択的文化変容を可能とする地域資源の3つの要素であった。また、日本における義務教育経験のあるニューカマー第二世代の進路形成のあり方とその規定因についてブラジル系ニューカマーに着目しつつ解明を試みた。ブラジル系ニューカマーは「欠落/喪失」の経験を有しておりそれらの経験にいかなる語り直しを付与するかによって将来の進路形成に影響を与えていると考えられる。さらに、ニューカマー第二世代のエスニック・アイデンティティの有り様について、ベトナム、カンボジア、中国、ブラジル、ペルー、フィリピンの各エスニシティの比較を視野に入れつつ、1第一世代の日本への移動の様相、2第二世代のエスニック・アイデンティティの様相、3エスニックアイデンティティの分岐要因の3点を中心に分析・考察を行った。平成26年度から引き続き、1義務教育段階対象者追跡調査と2ニューカマー第二世代の家族編成に関する実態調査の二層で調査研究を実施した。これまでインタビューを実施した各エスニシティごとの延べ数はベトナム系約20件、カンボジア系約20件、フィリピン系約30件、ブラジル系約15件、ペルー系約15件、中国系約40件である。特に本年度はこれまで手薄だった中国系ニューカマー第二世代に対するインタビュー調査・分析を進展させることができた。また、昨年度より関西地域におけるニューカマー第二世代についても、比較考察の観点から調査を行うべきであるとの認識を得、今年度も神戸市の外国人支援団体の協力を得ながらインタビュー調査を実施した。これについては来年度も引き続き実施することでさらなるデータの蓄積を図りたいと考えている。
(試験管内)ヒト毛包再生法の確立

既に我々は、男性型脱毛部(AGA)と正常部からの毛乳頭細胞(DPC)間での遺伝子発現の差を検討し、AGA部では毛包細胞の増殖を促進させるephrinA3の発現が抑制されていることを見出したが、その後、生直後マウス皮膚でephrinA群の発現をPCR法と免疫組織化学法で調べ、ephrinA1A3が生長期に一致して発現が亢進するが、休止期直前には発現しなくなり、次の生長期に再び急激に亢進する事を見出した。そして、誕生直後のマウス皮下にephrinA3蛋白を注入すると毛包数が増加する事も見出した。そしてエフリン群の作用機序も解明し発表した(詳しくは研究成果参照)。その後、Zheng Yらの方法を用いて、毛包形成とephrinA群-Wnt系シグナルの関係をみたところ、密な関係を見出した(投稿準備中)一方、アデノシンがDPCに働き、FGF7の産生を促進する事、毛乳頭細胞そのものの増殖も促す事を見出し報告した。これらの結果を基に、トランスレーショナル研究の一環として、アデノシン含有育毛剤を開発し市場に提供した。そしてその製品が男性型脱毛のみならず、女性の脱毛症にも効果がある事を確かめ報告した(研究成果参照)また、コルネオデスモシン遺伝子をノックアウトし、コルネオデスモシンの皮膚や毛包形成に及ぼす影響を調べ、その役割についても推測した(研究成果参照)既に我々は、男性型脱毛部(AGA)と正常部からの毛乳頭細胞(DPC)間での遺伝子発現の差を検討し、AGA部では毛包細胞の増殖を促進させるephrinA3の発現が抑制されていることを見出したが、その後、生直後マウス皮膚でephrinA群の発現をPCR法と免疫組織化学法で調べ、ephrinA1A3が生長期に一致して発現が亢進するが、休止期直前には発現しなくなり、次の生長期に再び急激に亢進する事を見出した。そしてその製品が男性型脱毛のみならず、女性の脱毛症にも効果がある事を確かめ報告した(研究成果参照)また、コルネオデスモシン遺伝子をノックアウトし、コルネオデスモシンの皮膚や毛包形成に及ぼす影響を調べ、その役割についても推測した(研究成果参照)同一人の男性型脱毛症部(AGA)と正常部からの毛乳頭細胞(DPC)での遺伝子発現をDNA microarrayで検討し、AGA部DPCでは毛包細胞の増殖を促進させるBMP2とephrin A3の発現が顕著に抑制されているを見出し発表した[J Dematol Sci 36:25-32、2004]。その後の検討で、男性ホルモン依存性に発現が上昇する退行期移行シグナルであるneurotropin 4(NT4)が上昇していることもはっきりした(投稿準備中)表皮-真皮相互作用に及ぼすephrin A3の作用を検討するため、in vitroでのskin equivalent法でephrin A3をマイクロビーズに濃度濃く付着させ真皮内に埋め込んだ上に、表皮細胞をまき、両者の相互作用を見ているが、ビーズ上部の表皮細胞に大きな変化は見られなかった男性型脱毛部(AGA)と正常部からの毛乳頭細胞(DPC)間での遺伝子発現の差を検討し、AGA部では毛包細胞の増殖を促進させるephrin A3の発現が抑制されているを見出した。その後、生直後マウス皮膚でephrin A群の発現をPCR法と免疫組織化学法で調べ、ephrin A1A3が生長期に一致して発現が亢進し、休止期直前には発現(-)となり、次生長期に再び急激に亢進する事を見出した。そして、誕生直後のマウス皮下にephrin A3蛋白を注入すると、毛包の数が増加する事を見出した。そのわけは、(1)毛包(原基)数は胎児期に決定されるが、一部の毛包原基は毛包へと成長しない、(2)ephrin A3は毛包原基から毛包への分化を促進させ、毛包数を増加させることを見出した[Yamada Y.他].その後の検討で、ephrin A群と、Wnt-βcatenin系のシグナル伝達の関係を認め、Zheng Yらの方法[organogenesis from dissociated cells.J Invest.Dermato1.124,867-876,2005]で、毛包形成とephrin A群、Wnt系シグナルの関係をみている。すなわち、培養表皮細胞とDPC細胞の混合を鼠の皮下に注入すると、皮下で毛包が形成されるが、ephrin蛋白の直接注入や、Wnt阻害剤等を同時に使用する事で、いかなる影響が出るかをみており、Wnt阻害剤の使用で、毛包が形成されない事を確かめた(投稿準備中)。アデノシンが毛乳頭細胞に作用し、FGF7の産生を促進する事よりアデノシン含有育毛剤を開発し市場に出した。そしてその製品が男性型脱毛のみならず、女性の脱毛症にも効果がある事を確かめた[Oura H.他]
タウオパチーの超早期診断のためのＧＳＫー３β標的核医学イメージングプローブの開発

本研究では、タウオパチーの早期診断に資するGSK-3β標的核医学イメージングプローブの開発を目的として、GSK-3β阻害剤の一つであるマレイミド誘導体に着目し、125Iを導入したマレイミド誘導体である化合物7を設計・合成した。化合物7は、正常マウスにおける体内放射能分布実験より、脳移行性を示すことが明らかとなった。また、GSK-3βへのインビトロ結合性評価実験において、既存のGSK-3β阻害剤に比べ、高い結合性親和性を有することが示唆された。今後、プローブの構造最適化を行うことによって、GSK-3βを標的とした核医学イメージングプローブの開発の可能性が示唆された。本研究では、タウオパチー脳内に過剰出現するGSK-3βに特異的・選択的に結合する分子イメージングプローブを設計・開発し、それを用いてGSK-3βを体外から非侵襲的に定量する分子イメージング法を構築する。本研究では、GSK-3βへの高い結合性が報告されているGSK-3β阻害剤であるマレイミドを母核とした化合物7を設計・合成し、GSK-3βプローブとしての基礎的評価を行った。化合物7の合成は、5-ブロモインドールと3-ベンゾフラノンを出発原料とする7段階の反応を経て目的物を得た。化合物7のI-125標識は、スズーヨウ素交換反応により行い、放射化学的収率30%、放射化学的純度99%以上で得た。本標識体を用いて、正常マウスにおける体内放射能分布実験を行ったところ、125-I標識化合物7は投与早期に放射能が脳に移行し、その後経時的なクリアランスを示した。さらに、GSK-3βを用いたインビトロ結合実験を行ったところ、化合物7のGSK-3βへの結合性は、既存のGSK-3βと同等以上の結合性を示すことが明らかとなった。今後、GSK-3βを過剰発現するモデル動物を用いたインビボイメージングに関する評価実験が必要であるが、本検討結果は、GSK-3βイメージングプローブの開発の可能性を示唆するものであり、リン酸化タウタンパク質の蓄積をイメージングバイオマーカーとする診断に比べ、早期段階におけるタウオパチーの診断が可能になると期待できる。本研究の目的は、アルツハイマー病をはじめとするタウオパチーにおいて、タウ凝集体の沈着よりも前段階にあり疾患根幹的過程であるタウタンパク質のリン酸化を制御する酵素、グリコーゲンシンテースキナーゼ3β(GSK-3β)が増加することに着目して、GSK-3βを標的とするタウオパチーの超早期・予防診断のための新規PET/SPECT用核医学分子プローブを開発することにある。このようなタウオパチーの超早期過程の鍵となる分子を標的とする分子プローブは、現在開発が進んでいる、沈着したタウやアミロイド凝集体に結合する核医学分子プローブよりも根幹的、早期の段階を標的とする、従来にない全く新しいカテゴリーのものであり、アルツハイマー病などのタウオパチー発症前の超早期診断を可能にすることが期待される。さらに、開発された分子プローブはタウオパチーの発症過程の病態解明や治療薬開発研究のバイオマーカーとして利用できることから、本研究の成果は意義深いものとなる。今年度は、GSK-3βへの高い結合性が報告されている、GSK-3β阻害剤であるマレイミドを母核とした化合物1を設計・合成し、GSK-3βプローブとしての基礎的評価を行った。化合物1の合成は、5-ブロモインドールと3-ベンゾフラノンを出発原料とする7段階の反応を経て目的物を得た。化合物1のI-125標識は、スズーヨウ素交換反応により行い、放射化学的収率30%、放射化学的収率99%以上で得た。正常マウスを用いた体内放射能分布実験を行ったところ、[125I]化合物1は、投与10分後に1.68%ID/gの放射能が脳に移行し、その後経時的なクリアランスを示した。現在、化合物1のGSK-3βへの結合性を評価するためのアッセイ系の構築を行っているところである。本研究では、タウオパチー脳内に過剰出現するGSK-3βに特異的・選択的に結合する核医学イメージングプローブを設計・開発し、それを用いてGSK-3βを体外から非侵襲的に定量する核医学イメージング法を構築する。

マレイミド誘導体などのタウ凝集阻害剤を基盤とした理論的プローブ設計を行い、GSK-3βを用いたインビトロ結合実験、病態モデルマウスおよびアルツハイマー病剖検脳組織切片を利用するインビトロスクリーニング、動物での体内分布実験、オートラジオグラフィ、PET/SPECTイメージングなどのインビボスクリーニングを経て、GSK-3βに特異的・選択的に結合するPET/SPECT用分子プローブを見出す予定である。これまでに、マレイミド誘導体の合成と正常マウス体内放射能分布実験を行い、インビトロ結合評価実験の構築の目処が立ったことから、おおむね順調に進展していると考えられる。合成した種々の化合物に関して、GSK-3βを用いたインビトロ結合実験を行い、GSK-3βに対する結合親和性を検討する。解離定数(Kd)を算出し、脳内GSK-3βのイメージングに十分な結合性を有していると考えられるKdが10 nM以下の化合物の選出を行う。Kd値が10 nM以下の化合物に関しては、(2)の脳組織切片を用いたインビトロ結合実験に供する。(2)病態モデルマウスおよびアルツハイマー病患者脳組織切片を用いたインビトロ結合実験(1)の検討において、Kd値が10 nM以下の化合物に関しては、病態モデルマウスおよびアルツハイマー病患者脳組織切片を用いたインビトロ結合実験を行う。病態モデルマウスには、タウタンパク質を過剰発現させたトランスジェニック(Tg)マウスを使用する。また、Tgマウスから作製した脳切片および患者脳組織切片を用いて、18Fあるいは125I標識プローブによるオートラジオグラフィおよび抗GSK-3β抗体による免疫染色実験を行うことにより、プローブのGSK-3βへの結合性を評価する。同時に、野生型マウスおよび健常人脳組織切片を用いて同様の実験を行い、比較検討を行う。該当なし
生体指標解析のための多次元スペクトル相関法に関する研究

本研究は,パラメータの変化に対する各波長のデータ間の相関をとることにより,同一の振る舞いをするスペクトル成分を抽出し,分析を行う事を目的としている。この方法ではあらかじめ予備的な処理が不要であり,また現実の物質の存在に沿った解析が可能である。パラメータが2個以上の場合,人間がスペクトル形状を見てその特徴を判定する事はきわめて困難であるが,本手法を用いれば,多次元空間内の相関のピークを検出するのみで多くのパラメータに従った複雑な系のスペクトル解析も容易に行うことができる。スペクトルを再現性よく検出必要があるため,皮膚測定用のプローブを作成した。血流量の変化による色の変化のないプローブを設計した。光源についても,被測定領域の外側から皮下に進入する成分が大きく色に寄与を考慮した。皮膚のように強散乱物体中の光拡散のシミュレーションを行った。これまで報告されている手法は分光情報を含んでいないので,本研究では新たに分光情報も取り込んだモンテカルロシミュレーションを行い,色についての評価を行うことができた。皮膚に紫外線を照射し,照射後のスペクトルデータを取得し,メラニンとヘモグロビンの変化を測定した。紫外線量を変化させた実験を行い,結果を解析した。お湯につけた後のスペクトルの変化についても同様の実験を行い,この場合,紫外線照射と異なり,メラニン量は変化しないことを確認した。ヒトの皮膚について,ゼラチンモデル,および,実際に採取した皮膚について,皮下に注入する前の色素の色から,注入後の見え方の予測を行う手法を検討し,臨床応用を試みた。刺青のように人工的に皮下に色素を注入した場合,色素自体はある程度分解していく。その際の色の変化を測定し,これまで困難であった,色変化の予測がある程度可能となった。パラメータの変化に対する各波長のデータ間の相関をとることにより、同一の振る舞いをするスペクトル成分があれば、同一の物質に起因するものとすることができる.それによりそれぞれの特徴スペクトルを持つ個々の物質を定量的に測定可能となる.この方法ではあらかじめ予備的な処理が不要であり,また現実の物質の存在に沿った解析が可能である.本研究では,パラメータとして,紫外線量,照射後の時間,あるいは,湯の温度やその時間などを選んだ.これらの処置によって皮下のヘモグロビン(血流)量やメラニン色素量が変化すると予測された.方法は,まず,1次の相関をおこないその特徴抽出を試みた.まずスペクトルを再現性よく検出必要があるため,皮膚測定用のプローブを作成した.これまでいくつかの測定器を使った特定を行ってきたが,皮膚の場合,プローブを押しつけると血流量がかわり色が白くなる。また,光源についても,被測定領域の外側から皮下に進入する成分が大きく色に寄与していることがわかった.それに基づき最適プローブを設計した.皮膚のように強散乱物体中の光の拡散のシミュレーションを行った.これまで報告されている手法は分光情報を含んでいないので,本研究では新たに分光情報も取り込んだモンテカルロシミュレーションを行った.上記の結果と,異なる色を重ねたモデルによる実験と比較し,ソフトウェアの最適化を行った.皮膚に紫外線を照射し,照射後のスペクトルデータを取得し,相関のある波長を抽出しメラニンとヘモグロビンの変化を推定した.パラメータの変化に対する各波長のデータ間の相関をとることにより,同一の振る舞いをするスペクトル成分があれば,同一の物質に起因するものとすることができる.それぞれの特徴スペクトルを持つ個々の物質を定量的に測定可能となる.本研究は,パラメータの変化に対する各波長のデータ間の相関をとることにより,同一の振る舞いをするスペクトル成分を抽出し,分析を行う事を目的としている。

パラメータが2個以上の場合,人間がスペクトル形状を見てその特徴を判定する事はきわめて困難であるが,本手法を用いれば,多次元空間内の相関のピークを検出するのみで多くのパラメータに従った複雑な系のスペクトル解析も容易に行うことができる。スペクトルを再現性よく検出必要があるため,皮膚測定用のプローブを作成した。血流量の変化による色の変化のないプローブを設計した。光源についても,被測定領域の外側から皮下に進入する成分が大きく色に寄与を考慮した。皮膚のように強散乱物体中の光拡散のシミュレーションを行った。これまで報告されている手法は分光情報を含んでいないので,本研究では新たに分光情報も取り込んだモンテカルロシミュレーションを行い,色についての評価を行うことができた。皮膚に紫外線を照射し,照射後のスペクトルデータを取得し,メラニンとヘモグロビンの変化を測定した。紫外線量を変化させた実験を行い,結果を解析した。お湯につけた後のスペクトルの変化についても同様の実験を行い,この場合,紫外線照射と異なり,メラニン量は変化しないことを確認した。ヒトの皮膚について,ゼラチンモデル,および,実際に採取した皮膚について,皮下に注入する前の色素の色から,注入後の見え方の予測を行う手法を検討し,臨床応用を試みた。刺青のように人工的に皮下に色素を注入した場合,色素自体はある程度分解していく。その際の色の変化を測定し,これまで困難であった,色変化の予測がある程度可能となった。
音声コミュニケーションにおける感性情報の表出・受容過程の定量的解析とモデル化

本研究は、音声によって表わされる感性情報を、パラ言語情報と非言語情報とに分け、それぞれが話し手の音声の音響的特徴を介して表出されまた聴き手に受容される過程、さらには聴き手の側に新たな感情が生成される過程を、定量的に解析して定式化することにより、音声を介する人間相互のコミュニケーションにおいて感性情報の占める役割を明らかにすることを目的としている。さらに、得られた知見を音声合成および音声認識に導入して、人間と機械の間のコミュニケーションの精緻化にも寄与することを目標とする。本年度は、主としてパラ言語情報に焦点を当てて研究を進め、当初計画をほぼ満たす以下の実績をあげた。(1)対象とする文を選定し、それを各種の意図をもって発音した連続音声を、東京方言の男性話者と、女性話者について収集した。選定とした文は短文であり、種々のアクセント型の組合せの文を用意した。(2)収集した音声資料について、その韻律的特徴、特に、基本周波数パターンを生成過程のモデルを用いて分析した。得られた結果と話し手の意図とを比較することにより、主として、「断定」は動詞句のアクセント指令の大きさ、「疑問,勧誘,反論」は文末モーラの基本周波数の上げによって表出されることを明らかにした。また、指令の大きさなどの具体的な値がアクセント型によって異なることを示した。(3)自然音声を用いた聴取実験によって、表出・受容の関係を同一個人および異なる人の間で調べ、その異同を明らかにした。(4)自然音声の分析結果を基に、基本周波数パターンのパラメータを制御した合成音声を作成して聴取実験を行った。結果からパラメータとパラ言語情報との関係を定量的に明らかにし、簡単な韻律規則としてまとめた。また、アクセント型本来の基本周波数の下げが、知覚上重要であることを示した。
窒化物三元混晶半導体InGaNの組成均質性の定量的評価に関する研究

MOVPE法によってサファイア基板上にAIN低温バッファ層を介して厚膜(>1μm)成長した窒化物三元混晶半導体1n_xGa_<1-x>Nの組成均質性を理論的・定量的に評価した。まず、InGaNの混合不安定性を熱力学的解析および結晶配列の理論解析から検討した結果、InGaN中のGa-NおよびIn-Nボンド長は組成xによらず、お互いほとんどそのまま純粋なGaNおよびInNのボンド長を保つことがわかった。そのため、xの変化に伴う単位格子の歪は極めて小さく、xが増大しても両ボンドの個性が強く主張される結果、結晶が均質にならず、混合不安定性が大きくなることを示唆した。次に、本研究で使用したIn_xGa_<1-x>N試料の巨視的特性を、SEM像およびTED像から評価し、膜厚均一性、単結晶性を示した。また、PLスペクトルからxの増加に伴うブロードニングの増大を示した。最後にIn_xGa_<1-x>Nの組成均質性を、ラマンスペクトルの非対称形状と選択則の緩和を考慮したSpatial Correlationモデルによる相関長と関連付け、定量的に解析した。その結果、In_xGa_<1-x>NのE_2フォノンモードの低エネルギ側へのブロードニングは、Azuhataら[Physica B 219/220(1996)493]のフォノン分散関係を用いて説明できることを示した。そして、xの増加に伴う、フォノンの減衰長に相当する相関長(フォノンの振幅の広がり)の減少を示した。相関長の大きさは10nm程度で、Kawaguchiら[J.Cryst.Growth 189/190(1998)24]によるTEM像の柱状粒子の大きさとほぼ一致することを示した。ただし、組成均質性の影響をより強く反映すると考えられるE_<2low>フォノンについてはほとんど観測できなかった。その理由として、低い状態密度と励起光に近いエネルギのため励起光の裾野に埋もれた可能性が考えられる。本年度は、異なる組成をもつInGaNの試料の作製を行った。InGaNの分光学的評価の詳細は次年度に行う予定である。本年度は特に窒化ガリウム(GaN)に関連した材料について研究を行ったので以下に報告する。GaNとその関連材料は、オプトエレクトロニクスあるいは高温エレクトロニクス分野において、その非凡な潜在能力ゆえ非常に重要視されている。これらの材料評価は理論的、実験的に精力的に行われており、ドーピング元素の種類によりその特性も大きく左右されることがわかってきた。最近、GaMnNが室温で強磁性を示す材料となることが理論的に予測された。この材料は磁性体と半導体の両方の性質を併せ持つ新機能材料としての可能性を示すものとして注目されている。さらに、ドーピング元素としてのマンガン(Mn)はGaN中で浅いアクセプタになり得ると考えられており、p形ドーパントの種類が限られている中、この性質はInGaNのデバイス応用上でも興味深い。以上のような有望性は示されているものの、GaMnNにおける詳細な研究はほとんどなされていない。特に基礎的な物性パラメータの一つである、フォノンに関する研究はごくわずかである。

そこで本年度はGaMnNのラマンスペクトルを測定し、GaN:Mn(母体結晶GaN中の不純物Mnという意味)に起因したモードの解析を行うことにした。また、スペクトルからキャリア密度を推定することも試みた。GaMnNのラマンスペクトルを解析した結果、GaN:Mnに起因した不純物モードを669cm^<-1>付近に見つけることができた。すなわち、そのモードの強度はキャリア密度の増加に伴い、顕著になることが示された。ただし、高キャリア密度の試料で見られる650cm^<-1>付近のブロードなバンドの詳細は現在のところ明らかではない。また、高キャリア密度により生じたプラズモンに関与したブロードなモードからキャリア密度を理論的に解析することを試み、求めた値がERDA法から得られたキャリア密度と極めてよく一致することを示した。MOVPE法によってサファイア基板上にAIN低温バッファ層を介して厚膜(>1μm)成長した窒化物三元混晶半導体In_xGa_<1-x>Nの組成均質性を理論的・定量的に評価した。まず、InGaNの混合不安定性を熱力学的解析および結晶配列の理論解析から検討した結果、InGaN中のGa-NおよびIn-Nボンド長は組成xによらず、お互いほとんどそのまま純粋なGaNおよびInNのボンド長を保つことがわかった。そのため、xの変化に伴う単位格子の歪は極めて小さく、xが増大しても両ボンドの個性が強く主張される結果、結晶が均質にならず、混合不安定性が大きくなることを示唆した。次に、本研究で使用したIn_xGa_<1-x>N試料の巨視的特性を、SEM像およびTED像から評価し、膜厚均一性、単結晶性を示した。また、PLスペクトルからxの増加に伴うブロードニングの増大を示した。またIn_xGa_<1-x>Nの組成均質性を、ラマンスペクトルの非対称形状と選択則の緩和を考慮したSpatial Correlationモデルによる相関長と関連付け、定量的に解析した。その結果、In_xGa_<x-1>NのE_2フォノンモードの低エネルギ側へのブロードニングは、Azuhataら[physica B219/220(1996)493]のフォノン分散関係を用いて説明できることを示した。そして、xの増加に伴う相関長(フォノンの振幅の広がり)の減少を示した。相関長の大きさは10nm程度で、Kawaguchiら[J.Cryst.Growth 189/190 (1998)24]によるTEM像の柱状粒子の大きさとほぼ一致することを示した。ただし、組成均質性の影響をより強く反映すると考えられるE_<2low>フォノンについては精度良く観測できなかった。その理由として、低い状態密度と励起光に近いエネルギのため励起光の裾野に埋もれた可能性が考えられる。
介助者・医療従事者のためのバイオフィルムの分散・剥離を焦点にあてた制御戦略の開発

本研究は、高齢者や要介護者を支える家族や介助者による口腔清掃の労力の軽減をコンセプトとした新しい口腔ケア製品群を開発することを最終目的としていた。現在の口腔ケア製品は、機械的清掃効果を高めるために殺菌剤が配合されている。洗口液のように、機械的清掃効果が及ばない部位への殺菌効果を期待した製品も注目され、年々販売数が伸びている。初年度は、現在、広く用いられている殺菌に頼った化学的コントロールの弊害作用を明らかにし、殺菌ではなくバイオフィルムを付着界面から剥がれやすくする作用機序の異なる化学物質を探求した。殺菌に頼った化学的コントロール法が起こしうる弊害として、1)付着界面へのバイオフィルム構造の残存と2)sub-MICの抗菌成分によるバイオフィルム形成促進が挙げられる。殺菌されてもなお付着界面に残存した構造は、a)バイオフィルム再形成の足場、b)抗原、c)歯石形成の源として生体に不利益を及ぼす。バイオフィルム内部への抗菌成分の浸透は制限されることが知られており、浸透遅延に続く濃度勾配の結果、深層部でsub-MICとなった抗菌成分は、口腔バイオフィルム中の細菌のストレス応答を躍起する。これらの知見から、殺菌ではなくバイオフィルムを分散・剥離しうる製品の開発が必要であることを報告した。その候補物質として、重曹と細胞表層糖脂質に着目している。重曹は、病院、老健施設やケアハウスで口腔清掃に使われている物質で、口腔内残留物やかひが除去しやすいが、独特の苦みが難点となっている。細胞表層糖脂質は、ある種の細菌壁の成分をリード化合物として創製したもので、免疫賦活作用が報告されている。いずれの物質の生体への安全性、有効性、製剤化や使用感など、明らかにすべき課題は多いが、これからの高齢化社会の問題を解決しうる成分として大きな可能性を感じている。
効果的な大腸癌治療を志向した新規抗血管新生医薬品のシーズ化合物の探索

KCTD18とSNX9の結合阻害剤探索のための大規模スクリーニングの系を構築し、パイロットスクリーニングを実施した結果、大規模スクリーニングに耐えうるhigh-throughput性を担保している事が分かった。また、申請書が同定した新規血管新生因子SNX9を発現抑制したヒト血管内皮細胞HUVECを用いて、KCTD18結合能欠失型SNX9を過剰発現させた所、血管新生が回復しない事を明らかにした。この結果は、SNX9とKCTD18との結合が血管新生において機能的である事を示している。更にSNX9の臨床的重要性を評価するために、ヒト大腸癌組織におけるSNX9の発言を組織染色法により解析した。その結果、ステージや腫瘍部位に関わらず、59例のヒト大腸癌組織の全てにおいて、腫瘍血管内皮細胞と腫瘍上皮細胞でSNX9が正常組織に比べ、高発現している事実を見出した。更に、トランスクリプトーム解析による予後解析を実施した結果、SNX9の発現が高い方が大腸癌の予後が悪い事実を明らかにすることに成功した。結合阻害剤スクリーニングのためのドメイン解析やパイロットスクリーニングは順調に進んでいるものの、大規模スクリーニングがまだ完了できていないため。一方で、ヒト大腸癌組織を用いた発現解析から、SNX9が血管内皮細胞だけでなく、大腸癌の腫瘍上皮細胞においても高発現していて、大腸癌細胞においても極めて重要な機能を有している可能性を示す知見を得る事ができた。本研究から得られるSNX9の制御剤は血管新生阻害剤としてだけでなく、大腸癌細胞の増殖や転移を制御できる新しい抗癌剤になる可能性を秘めている。SNX9とKCTD18との結合を阻害する化合物スクリーニングを早急に進める。併せて、KCTD18以外の血管新生に機能的なSNX9の結合タンパク質Xを質量分析を用いて同定する。SNX9/KCTD18及び、SNX9/結合タンパク質Xの2軸を化合物スクリーニングに供する事で、より特異性の高いSNX9/KCTD18結合阻害剤の同定が可能になる。その後、細胞、マウスレベルでの血管新生阻害活性を評価する。また、SNX9は生体膜リン脂質に結合するドメインを有するため、血管新生時における生体膜リン脂質代謝と連動して局在を変化させ、機能している可能性が高い。そこで、血管新生時における血管内皮細胞内の生体膜リン脂質を可視化して、時間依存的な局在変化を調べ、SNX9との共局在性を明らかにする。2018年度において、SNX9が腫瘍血管内皮細胞だけでなく、大腸癌腫瘍上皮細胞でも高発現している事実を見出したので、SNX9の大腸癌細胞における機能を細胞増殖、転移能の観点から解析する。