hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
歯科用コーンビームCT検査の最適化のための総合的CT性能評価法の開発

歯科用コーンビームCTは、顔面全体をカバーできる比較的大きな照射野まで撮影可能となり、医科用CTと比較して被曝線量が低いという誤解のもとに若年者に対して過剰な検査が行われている例が見られる。そこで、照射野の大きさと被曝線量および画質を定量的に評価し、歯科用コーンビームCT検査の最適化のための指針を得る為の評価方法を確立した。歯科用コーンビームCTが一般の医科用CTより安価であることはもちろんであるが、解像度が高いこと、被曝線量が格段に小さいことが喧伝されており、一般歯科医院への普及が進み、インプラント術前診査、歯周疾患診査、矯正術前および術後診査などに用いられている。しかしながら、近年販売されている歯科用コーンビームCTは、比較的大きな照射野まで切り替えによりカバーできるものにシフトしつつある。照射野の拡大は被曝線量の増加につながるが、照射野の大きさと被曝線量の関係は定量的に示されていないために、被曝線量が低いという誤解のもとに若年者に対して過剰な歯科用コーンビームCTによる検査が行われている例が見られる。そこで本研究では、照射野の大きさの異なる数種類の歯科用コーンビームCTと医科用CTを用い、照射野の大きさと被曝線量および画質を定量的に評価し、それらの性能を総合的に評価し、歯科用コーンビームCT検査の最適化のための指針を得ることを目的とし、本年度は以下の事を行った。1.本学設置の歯科用コーンビームCTおよび医科用CTを用いた被曝線量の測定本学設置の歯科用コーンビームCTおよび医科用CTを用いた被曝線量の測定を行い、各種撮影条件における各臓器の吸収線量を測定し、各臓器の吸収線量、実効線量を求めた。また、これらの値を過去のデータと比較するため、線量計算プログラムの購入を行い、比較検討を行っている。2.アルミステップファントムを用いた本学設置の歯科用コーンビームCTおよび医科用CTの画質評価ファントムの位置、方向による画素値の変化、距離計測精度の変化を定量的に評価し、総合的CT画質評価法の基礎データを取得し、新たな評価用ファントムを作成した。そこで本研究では、照射野の大きさの異なる数種類の歯科用コーンビームCTと医科用CTを用い、照射野の大きさと被曝線量および画質を定量的に評価し、それらの性能を総合的に評価し、歯科用コーンビームCT検査の最適化のための指針を得ることを目的としている。本年度は以下の事を行った。2.昨年度作成した骨等価ファントムの実験計画昨年度作成した骨等価ファントムを用い、そのファントム上に作成したホールの描出能を画像情報の目安とした評価方法を確立した。しかしながら、近年販売されている歯科用コーンビームCTの傾向は、開発当初のような小照射野ではなく、小照射野から顔面全体をカバーできる比較的大きな照射野まで切り替えによりカバーできるものにシフトしつつある。小照射野の場合、確かに一般の医科用CTに比べ被曝線量が少なくなるが、照射野の拡大は被曝線量の増加につながり、このような照射野の大きさと被曝線量の関係は定量的に示されていないために、被曝線量が低いという誤解のもとに若年者に対して過剰な歯科用コーンビームCTによる検査が行われている例が見られる。そこで本研究では、照射野の大きさの異なる数種類の歯科用コーンビームCTと医科用CTを用い、照射野の大きさと被曝線量および画質を定量的に評価し、それらの性能を総合的に評価し、歯科用コーンビームCT検査の最適化のための指針を得ることを目的とした。試作した性能評価用ファントムを用い、あたらしく開発した評価方法を用いて当施設で医科用CT装置および歯科用コーンビームCT装置の画質評価を行い、画質評価法の確立をおこなった。また、多くの評価者で本評価法を行い、評価法の妥当性を統計学的に評価し、有用性を確立した。画質評価と同時に被曝線量の測定および計算を行い、測定方法および計算による被曝線量の誤差の検討を行った。
戦後沖縄における女性の労働に関する一考察-労働力移動の視点から

本研究では、1945年から「復帰」前の1960年代までの戦後沖縄における女性の労働について、移動の視点から考察することを目的とした。まず、沖縄近現代史における政治・経済研究、女性史研究、また国際労働力移動、ジェンダー研究における先行研究を再検討し、経済構造の変化と女性労働・労働力移動の関係に焦点を当てて、研究史を整理し、ワーキングペーパーを執筆した。次に、移動を伴う女性労働の規模・内容について、より動態的な実態を明らかにするために、公文書・統計・新聞など各種文献資料、個人史・証言などを収集し整理した本研究では、1945年から「復帰」前の1960年代までの戦後沖縄における女性の労働について、移動の視点から考察することを目的とした。次に、移動を伴う女性労働の規模・内容について、より動態的な実態を明らかにするために、公文書・統計・新聞など各種文献資料、個人史・証言などを収集し整理した本研究は、1945年から「復帰」前の1960年代までの戦後沖縄における女性の労働について、移動の視点から考察することが目的である。沖縄は近代以後、有数の「移民県」である。戦前の移動に関して研究成果も多い一方、沖縄戦後については十分ではない。「復興」の中で労働を支えた女性達は、生活のため、また学業や専門技術習得のために「生まれ島(故郷)」を離れ、近隣の琉球諸島の島々との間で、またヤマト(本土)や海外へと海を渡っている。その規模・内容について、公文書・統計・新聞など各種文献資料と個人史・証言の内容を参照することが必要であり、その上でより動態的な実態を明らかにするため、本年度は以下のことを念頭に先行研究を整理し、IICS Monograph seriesにまとめた。1.沖縄戦後史における政治・経済研究、女性史研究、移動に関する研究動向について整理し、資料の所在、内容について再検討した。特に、戦後沖縄における政治・経済構造の変化、女性労働・労働力移動、証言や個人史に焦点を当てて、研究史の整理を行った。2.近年復刻版の刊行された該当時期の新聞資料(『うるま新報』、『琉球新報』『沖縄新民報・自由沖縄』など)から、沖縄の女性史・女性労働・労働力移動に関する記事を調査し、地域ごとに整理した。3.これまでに刊行されてきた資料集、図書館・公文書館に収集されている文献資料から、沖縄の女性史・女性労働に関するものを収集し、整理した。4.離島を含め、沖縄の県市町村史編纂事業における資料、証言・記録集、新聞・雑誌などから、女性労働に関する部分を収集し、整理した。本研究は、1945年から「復帰」前の1960年代までの戦後沖縄における女性の労働について、移動の視点から考察することが目的である。その規模・内容について、公文書・統計・新聞など各種文献資料と個人史・証言の内容を参照することが必要である。また同時代の東アジア、アジア各地域での移動の実態、国際関係史の中で、課題について考察し、位置づけることを念頭に、研究史を整理し、個人史などの資料収集、聞き取り調査を行った。5.近代以降の東アジア国際関係史において、移動について先行研究を整理した。(1)沖縄戦前後の沖縄で発行された新聞資料、沖縄県公文書館において収集が進められてきた米軍政および米国民政府資料、琉球政府の資料・統計、沖縄本島・離島の各市町村史などで記録されてきた証言・個人史などから、女性の労働・移動に関する項目を抽出し地域ごとに整理する作業を進めた。公文書・統計・報道・回想など、資料群ごとの特性に着目しつつ、参照・考察し、この時期の沖縄における女性の労働・労働力移動の研究史の整理を行った。(2)文献資料を補足し、文字化されにくい女性の体験・感想・生活認識を、生活空間の中で記録するために、八重山諸島において聞き取りおよび文献資料の調査を行った。当時の各島々の状況や個人の体験について、労働・移動の実態だけでなく、生活状態、経済状態の認識との対応、労働や生活における相互協力や共同性、沖縄における諸制度の変化、宗教・風俗からの影響、戦前の移民・出稼ぎ、戦争の体験、他の地域との関係など、多方面より検討し、整理した。

また、戦前戦後を通して、沖縄の女性の労働を取り巻く環境、移動を生じさせる要因、生活認識、価値観などについても考察した。体験者の体調により、聞き取り調査が困難な場合もあったため、個人史・回想記録など、個人資料の収集を行い、整理した。(3)(1)(2)の作業を通して、戦後沖縄における女性を取り巻く政治・経済研究、女性史研究の再検討を行った。現在、戦前戦後を通して、沖縄における経済構造の変化、女性労働・労働力移動の特徴について、特に八重山諸島の実態に焦点を当て、論文を執筆中である。出版や公開事情などにより、一部、入手できていない資料、聞き取りのできていない課題もあるが、おおむねの調査は計画通り順調に進展している。24年度が最終年度であるため、記入しない。出版や資料保存の事情で、入手不可能な資料については、現時点では今後の課題とし、これまでに収集できた資料について、早急にまとめ、課題についての考察を深める。
自然免疫応答における新規転写因子制御機構の解明

自然免疫系は病原体に対する生体防御応答に重要である一方、その制御機構の破綻は自己免疫疾患などの病態発症を引き起こす。本研究では自然免疫応答に重要な転写因子IRF5の活性化機構と抑制機構を解析した。その結果、IRF5はユビキチン化された後にリン酸化されて活性化型となり、IRF5と結合するタンパク質Lynがこれらの翻訳後修飾を抑制することで、IRF5が過剰に活性化しないように調節していることを明らかにした。これらの制御機構を応用することで、全身性エリテマトーデスなどのIRF5が関与する疾患の治療法開発につながることが期待される。自然免疫細胞である樹状細胞やマクロファージの分化に重要な転写因子interferon regulatoryfactor 8 (IRF8)の自然免疫応答における役割を明らかにするため、既に作製済みの、IRF8の発現をコントロールできる細胞(Tet-ONシステムを使用)を用い解析を行った。その結果、IRF8タンパク質の発現により別のIRFファミリータンパク質であるIRF5の発現が認められた。逆に、IRF8の発現を消失させた場合、IRF5の発現も同様に消失した。以上の結果からIRF8はIRF5の発現誘導に重要な役割を担っていることが示された。IRF5は全ゲノム関連解析(GWAS)により自己免疫疾患である全身性エリテマトーデス(SLE)と関連していることが多数報告されている。一方で、IRF5の活性化機構の詳細は不明であり、本研究でIRF5に焦点を絞り解析を進めた。当研究室ではIRF5結合タンパク質としてSRCファミリーキナーゼLYNを同定した。LYN欠損マウスはSLE病態を発症することから、IRF5との関連を解析した。SLE病態発症に重要である樹状細胞において、LYN欠損細胞では自然免疫応答が亢進しており、これがLYNとIRF5の二重欠損によって顕著に抑制された。また、LYNはIRF5と結合することによって、リン酸化などの翻訳後修飾を抑制した。さらに、LYNとIRF5の二重欠損マウスを作製し解析したところ、LYN欠損によって生じるSLE病態が顕著に抑制された。以上からLYNはIRF5による自然免疫応答を抑制しており、LYNが欠損すると過剰な免疫応答によりSLE病態発症につながると考えられた。IRF8によって誘導されるIRF5の活性化を制御することで、SLEをはじめとする自己免疫疾患の治療法開発につながることが期待できる。本研究の目的は自然免疫応答における新規の転写因子制御機構を解明することである。これまでの研究により、転写因子interferon regulatoryfactor 8 (IRF8)によって発現誘導される別の転写因子IRF5が、SrcファミリーキナーゼであるLynによって抑制されるということが判明した。IRF5は自然免疫応答に重要な役割を担っている一方で、その遺伝子多型は自己免疫疾患である全身性エリテマトーデス(SLE)と関連することが多数報告されている。したがって、IRF5の制御機構を解明することはSLEをはじめとする自己免疫疾患の治療法開発につながることが期待できる。そこで当該年度では、研究実施計画の「免疫応答時における転写因子制御機構の解析」に重点を置き、LynによるIRF5の抑制機構の詳細を解析した。まず、LynはIRF5による転写活性化を選択的に抑制するが、この抑制にLynのキナーゼ活性は必要ではないことが判明した。次に、LynはIRF5と自然免疫刺激依存的に会合することが分かり、このLyn-IRF5相互作用にはLynとIRF5それぞれ2つのドメインが重要であることが示された。そこで、IRF5と会合できないLynを解析した結果、LynによるIRF5の抑制は顕著に減弱した。これまでの結果と合わせ、LynはIRF5と結合することにより、リン酸化などの翻訳後修飾によるIRF5の活性化を抑制し、その結果IRF5による転写活性化を抑制していることが考えられる。LynによるIRF5抑制機構を更に解明することで、IRF5の活性化が増悪に働く疾患の治療法開発に繋がることが期待できる。以上の結果とこれまでの研究結果をまとめ、第43回日本免疫学会学術集会で口頭およびポスター発表を行った。本研究の目的は、自然免疫応答における新規の転写因子制御機構を解明することである。平成26年度までの研究では、転写因子interferon regulatoryfactor 8 (IRF8)によって発現誘導される別の転写因子IRF5の活性が、SrcファミリーキナーゼであるLynによって抑制されることを発見し、その制御機構と生体における意義について検討した。IRF5は自然免疫応答に重要な役割を担う一方で、その遺伝子多型は自己免疫疾患である全身性エリテマトーデス(SLE)と関連することが多数報告されており、IRF5の過剰な活性化がSLEの病態発症に繋がると考えられている。さらに、LynもSLEと関連することが報告されており、Lyn欠損マウスはSLE様病態を発症する。したがって、LynによるIRF5抑制機構の解明は、SLEをはじめとする自己免疫疾患の治療法開発に繋がると期待できる。平成27年度の研究実施計画における「免疫応答に特異的な制御機構の調節法」に関しては、すでにLyn欠損マウスのSLE様病態がIRF5の欠損によって改善することを示しているため、「免疫応答時における転写因子制御機構の解析」に重点を置き、特にIRF5の活性化に着目して研究を行った。具体的には、IRF5の翻訳後修飾による活性化は、ユビキチン化がリン酸化の上流にあることを示した。

また、LynはIRF5のユビキチン化とリン酸化の両方を抑制することが判明した。さらに、SLE病態を発症しているLyn欠損マウスでは、免疫細胞である樹状細胞においてIRF5が活性化(リン酸化)していることが明らかになった。今後はLynによるIRF5翻訳後修飾抑制機構の詳細を解明することで、IRF5の活性化が増悪に働く疾患の治療法開発に繋がり、またリン酸化をモニターすることでIRF5の活性化を簡便に判定できるようになると考えられる。自然免疫系は病原体に対する生体防御応答に重要である一方、その制御機構の破綻は自己免疫疾患などの病態発症を引き起こす。本研究では自然免疫応答に重要な転写因子IRF5の活性化機構と抑制機構を解析した。その結果、IRF5はユビキチン化された後にリン酸化されて活性化型となり、IRF5と結合するタンパク質Lynがこれらの翻訳後修飾を抑制することで、IRF5が過剰に活性化しないように調節していることを明らかにした。これらの制御機構を応用することで、全身性エリテマトーデスなどのIRF5が関与する疾患の治療法開発につながることが期待される。平成26年度の研究実施計画では、IRF8の「標的遺伝子の複合的解析」と、「免疫細胞の分化と免疫応答時における転写因子制御機構の解析」を計画していた。前者においては、IRF8によって発現誘導されるIRF5について、質量分析によるIRF5の活性化に必要なリン酸化部位の同定や、マイクロアレイ解析によるIRF5依存的に誘導される遺伝子の解析を行った。また、後者に関しては、IRF5の抑制因子として同定されたLynについて、ノックアウトマウスの解析はこれまでに行っているので、その抑制機構の詳細を解析した。「研究実績の概要」に記載した内容に加え、この解析にも質量分析とマイクロアレイ解析を用い、Lynによって抑制されるIRF5のリン酸化部位の同定と、Lynによって抑制されるIRF5依存的な遺伝子誘導の解析をそれぞれ行った。以上のように平成26年度の研究実施計画をおおむね遂行できており、本研究を遂行する上での具体的な工夫として挙げた質量分析とマイクロアレイ解析を行うこともできた。一方で、研究計画で考えていたバイオインフォマティクス解析による転写因子ネットワークの解析は行えず、IRF8の標的遺伝子の網羅的な解析ではなく、IRF5という一つの標的遺伝子に絞った解析になってしまった。その分、LynによるIRF5の抑制機構について詳細な解析を行うことができたため、おおむね順調に進展していると自己評価した。免疫学研究実績で述べたLynによるIRF5の抑制機構と、これまでノックアウトマウスを用いて解析を行った全身性エリテマトーデスの病態発症におけるIRF5とLynの関連については、第43回日本免疫学会学術集会で口頭およびポスター発表を行った。また、現在論文を準備中であり、平成27年度中に出版まで進め、また研究成果を学会で発表する予定である。平成27年度の実施計画では、「免疫応答に特異的な制御機構の調節法の開発」が主体となっている。
父性発現の脳内機構:雄マウスの攻撃から養育への行動変化に関与する脳部位の同定

本研究において、仔を攻撃する交尾未経験の雄マウスでは、仔が発するフェロモンによって鋤鼻神経回路が活性化され、攻撃行動が誘発されているのに対し、仔を養育する父マウスでは、フェロモンを感知する入り口の鋤鼻器で既にその情報伝達が抑制されていることがわかった。さらに、交尾未経験の雄マウスの鋤鼻器を切除して仔のフェロモン情報の感知を遮断すると、仔への攻撃行動が抑制されるとともに、父性行動が発現することが明らかとなった。以上の結果から、雄マウスの攻撃から養育への行動変化には、鋤鼻器における仔のフェロモン情報の伝達抑制が重要であることが示唆された。交尾未経験雄マウスは仔に接すると直ちに攻撃するが、父になると養育するようになる。仔からの知覚刺激は同じなのに雄がどのようにして行動を変化させているかという脳内メカニズムについてはほとんど研究が行われていなかった。これまでの当研究において、神経活動依存的に発現することが知られている最初期遺伝子、c-Fosの発現解析から、仔を提示した際、交尾未経験の雄マウスでは、一部の鋤鼻感覚ニューロンを起点とする特定の鋤鼻神経回路(副嗅球、扁桃体内側核、分界条床核)が活性化され、最終的に、攻撃行動に関与する視床下部の領域(視床下部前野、視床下部腹内側核腹外側部)が活性化されているのに対し、父マウスでは、フェロモンを感知する鋤鼻感覚ニューロンにおいて既にその活性化は見られないことがわかった。さらに、交尾未経験の雄マウスの鋤鼻器を外科的に切除して、仔のフェロモン情報を感知できないようにすると、仔への攻撃行動が抑制されるとともに、父性行動の発現が観察されたことから、雄マウスにおける、仔に対する攻撃から養育への行動変化には、仔のフェロモンに対する鋤鼻神経細胞の活性化の抑制が重要であることが示唆された。平成24年度は、以上の研究成果をまとめ論文として発表した(*)。また、仔への攻撃行動を誘発するフェロモンを受容する、『仔フェロモン受容体』の検索を開始した。これまでの当研究において、神経活動依存的に発現することが知られている最初期遺伝子、c-Fosの発現解析から、仔を提示した際、交尾未経験雄では鋤鼻神経回路(副嗅球、扁桃体後内側核、分界条床核)が強く活性化され、父ではこの経路が副嗅球の段階ですでに抑制されていることが示唆された。しかしフェロモンの受容器官ある鋤鼻器については不明であった。そこで我々はまず、1)仔を提示した際の鋤鼻器の活性化をc-Fosを用いて検討した。その結果、交尾未経験雄ではある特定の鋤鼻神経細胞が活性化されていたのに対し、父ではその活性化はほとんど見られなかった。つまり父では、鋤鼻器の段階ですでに仔のフェロモン情報の伝達が抑制されていることが示唆された。しかし、この鋤鼻器を介した仔のフェロモン情報が仔への攻撃行動を直接誘発するのかについては不明であった。そこで次に、2)鋤鼻器を外科的に切除し、鋤鼻器からのシグナルを遮断する事により、仔への攻撃行動が抑制されるかを検討した。その結果、鋤鼻器切除を行った交尾未経験雄では仔への攻撃行動は完全に抑制され、同時に養育行動の開始が観察された。一方、父では鋤鼻器切除は養育行動に影響を与えなかった。以上の結果から、交尾未経験雄マウスにおいて、仔からのフェロモン情報は鋤鼻器を介して鋤鼻神経回路を活性化し、仔への攻撃行動を誘発している事、さらに鋤鼻器切除による仔のフェロモン伝達の遮断が、父性行動の発現に十分であることが示唆された。つまり、雄マウスにおける仔に対する攻撃から養育への行動変化には、仔のフェロモンに対する鋤鼻神経細胞の活性化の抑制が重要であることが示唆された。23年度の実験計画である鋤鼻器の切除実験が終了し、交尾未経験雄において鋤鼻器を介した仔のフェロモン情報が攻撃行動を誘発していること、さらに鋤鼻器切除による仔のフェロモン伝達の遮断が、父性発現に十分であることを示した。さらに、24年度の実験計画である、V1r欠損マウスにおける交尾未経験雄マウスの攻撃行動の変化の有無について既に検討を開始している。23年度の研究結果から、交尾未経験雄において仔のフェロモンはある特定の鋤鼻神経細胞を活性化することがわかった。

また、交尾未経験の雄マウスに仔を提示し、攻撃行動を示した際に、副嗅球の吻側部でc-Fosの強い発現が見られた。つまり、仔への攻撃を誘発するフェロモンは、副嗅球の吻側部に投射するV1rを介して受容されている事が予想された。そこで、本年度は、V1r欠損マウスにおける交尾未経験雄マウスの仔に対する攻撃行動の検討を行う。もしこのマウスで仔に対する攻撃行動が抑制されていれば、将来的には鋤鼻器においてc-Fosの免疫染色と、このマウスで欠損している16個のV1rフェロモンレセプターのin situハイブリダイゼーションとの共染色により、仔への攻撃行動を誘発するフェロモンのレセプターの同定を試みる。H23年度は、北米神経科学学会への参加を見合わせたため、189,839円が未使用額として残った。H24年度は、6月にスウェーデンで開催されるISOT(the international symposium on olfaction and taste)に参加予定であり、H23年度未使用の189,839円はその学会参加の旅費に使用する予定である。また、H24年度の研究費は主に、マウス行動実験、免疫組織学用試薬、国内学会参加の費用に使用する予定である。
チベットにおける占いの総合的研究～古文書研究とフィールド調査を通して～

研究最終年度である本年度は、研究成果の統合と成果発表に重点をおいて研究を進めた。具体的には、古チベット語骰子(さいころ)占卜文書の成立背景に関して、ウランバートルで開催された第13回国際チベット学会において発表した。これにより、古チベット語骰子占卜文書の全体像とその問題点がはじめて明らかにされたといえる。また、研究2年度目に国際学会にて口頭発表をおこなった、古チベット語鴉鳴(=烏の声)占卜文書に関する研究成果を論文にまとめた。そこでは、古チベット語鴉鳴占卜文書の成立背景や占卜法の由来を検証した上で、鴉鳴占卜が現代社会へと継承される過程についても考察を試みており、チベットにおける鴉鳴占卜の総括的研究となったといえる。論文は、神戸市外国語大学研究年報シリーズの第51号に収録され、2014年3月に刊行されている。また、2013年8月には12日間の日程で中国青海省を訪れ、古チベット語碑文の調査を行った。この成果は、古代チベット帝国時代の東チベットの様相解明に寄与すると期待できる。さらに、同年10月には、ブータンにおいて、骰子占卜及びそれと深い関わりを持つ各地の土地神に関する現地調査を行った。特に、中央ブータンに位置するブムタン地方に固有の土地神、ケープ・ルンツェンとゾ・ラ・ラ・ケーについては、その祭りや法要に関する聞き取り調査も行った。ここから得られた成果と、西チベット(インド・ラダック地方)で行った調査結果とを綜合的に検証したところ、現代チベット文化圏で実施されている骰子占卜には、その実施状況や継承のプロセスに地域的な差異がみられることがわかった。詳細については、現在論文を準備中である。(抄録なし)研究初年度である本年度は、古チベット語占卜文書の解読と分析およびそれらと同時代に書された他言語占卜文書との比較研究という2点に重点をおいて研究を進めた。具体的には、これまでに実見調査を行った古チベット語占卜文書の全てについて、テキストデータベースを作成し、詳細な分類と分析に取り組んだ。その結果、(A)骰子(22点)、(B)銅銭(6点)、(C)鴉鳴(からすの声)(6点)、(D)日・星(11点)、(E)夢(2点)、(F)その他(2点)、の6種の占いに関する49文書の記述内容を確認できた。これらに出土地や所蔵機関等の詳細な情報を加えてまとめたことにより、古チベット語占卜文書の包括的研究を進めるための基盤を構築できたと言える。また、(C)については全6文書の記述内容を照査することを通して文書間にみえる相違や共通項を検証した上で、同時代文献である漢文鴉鳴占卜文書やチベット大藏経に収録されている鴉鳴観察kakajaritiとの比較研究も行い、古チベット語鴉鳴占卜文書の全貌解明に取り組んだ。2012年2月には、11日間の日程で大英図書館、フランス国立図書館において古チベット語占卜文書を実見し、上記の情報を補填することができた。現在、これらの研究成果を博士論文としでまとめており、草稿が2011年11月に予備審査を通過した。さらに、2011年8月には、古チベット語文書の出土地である敦煌石窟(中国・甘粛省)やミーラーン遺跡(中国・新彊ウイグル自治区)の調査プロジェクトに同行し、古文書の出土環境について実地調査を行うことができた。その際、新彊ウイグル自治区考古学研究所では、未発表の古チベット語文書9点を実見する機会を得た。いずれも1973年にミーラーン遺跡から発掘された断片文書である。これらの調査結果については、2012年3月31日に開催された第44回中央アジア学フォーラム(於大阪大学)にて合同発表を行った。研究2年目である本年度は、これまでの研究成果を集成して、学位論文「古チベット占い文書の研究」を完成させた。拙論は、敦煌石窟(中国・甘粛省)およびシルクロードの諸遺跡から発掘された銅銭占い、鴉鳴(からすの声)占い、骰子(さいころ)占いに関する古チベット語文書を対象に研究を進めたものである。占いの種別に網羅的に記述内容を照査した結果、課題とした3種類の占卜書は、古チベット語で書かれた占卜書であるという共通性を持つにもかかわらず、個別の成立背景を有していることが明らかとなった。たとえば、鴉鳴占卜文書に記述された予兆卦辞からは、占卜書の由縁がインドにあることが読み取れた。インド由来の鴉鳴予兆がチベットに伝播し、利便性に長けた一覧表の形式に改編されたのである。ここには、契約、手紙、法律といったジャンルごとに厳密に書式を制定する古代チベットの特徴がいかされていると言える。また、漢語占卜文書の分析からは、チベットの鴉鳴予兆一覧表が漢語文書に消化される様子が観取できた。インドに起源をもつ民間信仰が、チベットで実用的な書式に編纂されて漢人社会へと伝播していく様子が、文献研究によって明らかになったのである。この成果については、2012年9月に神戸で開催された「第3回若手チベット学研究者国際会議」にて発表を行った。さらに、2013年2月3月にかけて、インド北西部(西チベット)・ラダック地方のチベット仏教寺院にて、現存する骰子占卜文書の収集を行った。

それによれば、ラダック地方の骰子占卜書は、中国西藏自治区内で用いられている占卜書と同一、あるいは同系統に属するものであることが分かった。しかし、当該の骰子占卜書がシャーマンによって病因の同定やその治療のために活用されている点で、地域的独自性がみられた。現代チベット文化圏における骰子占卜書の実用例は、古文書の使用状況を考える上で、重要な指針となるものである。今年度は、中国西藏自治区、ラダック、ブータン王国に現存する骰子占卜書のテキストデータベースを作成した、研究最終年度である本年度は、研究成果の統合と成果発表に重点をおいて研究を進めた。具体的には、古チベット語骰子(さいころ)占卜文書の成立背景に関して、ウランバートルで開催された第13回国際チベット学会において発表した。これにより、古チベット語骰子占卜文書の全体像とその問題点がはじめて明らかにされたといえる。また、研究2年度目に国際学会にて口頭発表をおこなった、古チベット語鴉鳴(=烏の声)占卜文書に関する研究成果を論文にまとめた。そこでは、古チベット語鴉鳴占卜文書の成立背景や占卜法の由来を検証した上で、鴉鳴占卜が現代社会へと継承される過程についても考察を試みており、チベットにおける鴉鳴占卜の総括的研究となったといえる。論文は、神戸市外国語大学研究年報シリーズの第51号に収録され、2014年3月に刊行されている。また、2013年8月には12日間の日程で中国青海省を訪れ、古チベット語碑文の調査を行った。この成果は、古代チベット帝国時代の東チベットの様相解明に寄与すると期待できる。さらに、同年10月には、ブータンにおいて、骰子占卜及びそれと深い関わりを持つ各地の土地神に関する現地調査を行った。特に、中央ブータンに位置するブムタン地方に固有の土地神、ケープ・ルンツェンとゾ・ラ・ラ・ケーについては、その祭りや法要に関する聞き取り調査も行った。ここから得られた成果と、西チベット(インド・ラダック地方)で行った調査結果とを綜合的に検証したところ、現代チベット文化圏で実施されている骰子占卜には、その実施状況や継承のプロセスに地域的な差異がみられることがわかった。詳細については、現在論文を準備中である。本年度は、烏鳴占卜に関わる文献について、比較対象となる全ての文献に対する横断的な研究を行えた。また、2月にロンドン、パリで行った古チベット語文書の原典調査により、調査可能な文献については全てを実見したことになる。つまり、2年度目以降の研究の素地を構築できたと言える。本年度は、これまでに解読と分析をすすめた古チベット語占い文書の研究成果を集成することができた。その際、同時代の他言語占卜文書との比較も行い、古代シルクロード社会における文化交流について新たな知見を得ることに成功した。また、現代チベット文化圏に現存する骰子(さいころ)占卜書についてもデータベースを作成することができ、内容を横断的に検証することが可能となった。本年度に引き続き、古チベット語占卜文書の解読と分析および同時代に属する他言語占卜文書との比較研究を進める。また、現代チベット文化圏において占卜文書の蒐集と、占いの実施状況に関する現地調査を行う。具体的には、中国西藏自治区(2012年)およびブータン王国(2013年)を調査地としてフィールド調査を実施する予定である。2012年度は、5月に博士論文を提出し、7月に口頭試問をうける。その後、9月には神戸市外国語大学で開催される第三回若手チベット学研究者国際会議において発表することが決定しているので、2月3月にフィールドワークを行うことにする。
標的遺伝子組換えによる突然変異体の作成とその生体機能の研究

本研究は標的遺伝子組換え(ジーンターゲッティング)を用いて、中枢神経系、免疫系、形態形成等に関与する遺伝子を計画的に破壊し、それぞれの遺伝子の生体での機能を解析することを目的としている。計画班員は、きわめて緊密に連携し、独立を保ちながら、多種の遺伝子の突然変異体の作成に成功した。本年度までに本研究班によって作成された突然変異マウスを列挙すれば120種を越えるに至った。グルタミン酸受容体、ドーパミン受容体、セロトニン受容体、リアノジン受容体、IP3受容体、H-ras、N-ras、K-ras、rac1、rac2、basigin、prion、SAPなどである。それぞれの遺伝子破壊によって認められる生体の特徴は、細胞レベルや分子レベルの成果から容易に予測されものは少なく、それぞれの遺伝子産物が多彩な生体機能に関わっていることが示された。行動異常や記憶・学習の実験により高次機能の解析を行った。その結果、ras群遺伝子産物は細胞の増殖と分化だけでなく、脳の高次機能にも関与していることが明らかとなった。ジーンターゲッティングマウスが次々に作成され、その解析の結果が今後報告される。本研究は標的遺伝子組換え法(ジーンターゲッティング法)を用いて,個体レベルでの解析が必須であると考えられる中枢神経系,免疫系,形態形成等に関与する遺伝子を計画的に破壊し,それぞれの遺伝子の生体での機能を解析することを目的としている。計画班員はきわめて緊密に連携し,マウスの遺伝子を制限酵素で分解した後,二次元展開して,新しい遺伝子を見出した林崎班員の成果は即刻勝木のもとでジーンターゲッティングがなされるなど領域設定が大いに意義あるものとなっている。本年度において破壊された遺伝子を列挙すれば次の如くである。グルタミン酸受容体(NMDAタイプ5種およびメタボトロピック6種):ホモ型突然変異体のうちNMDA受容体1(NR1)破壊マウスは生後1日目にミルクが飲めずに死亡する。セロトニン受容体:現在キメラマウス。p53遺伝子をbeta-ガラクトシダーゼ遺伝子で置換したマウス:p53の発現を受精から成体まで染色によって解析でき,その特徴的な発現パターンを研究中である。GFAP,XPAC,Fyn,CSK,テネシンなどの遺伝子が破壊された。それぞれの遺伝子破壊によって認められる生体の特徴は細胞レベルやタンパク質化学レベルの既存の成果から容易に予測されるものは少なく,それぞれの遺伝子産物が多くの生体機能に関っていることが示された。本年度は本領域の初年度であるに拘らず,多くの大きな成果が得られたと評価できる。本研究は標的遺伝子組換え法(ジーンターゲッティング法)を用いて、固体レベルでの解析が必須であると考えられる中枢神経系、免疫系、形態形成等に関与する遺伝子を計画的に破壊し、それぞれの遺伝子の生体での機能を解析することを目的としている。例えば林崎班員が単離したマウスのreeler遺伝子は、さっそく勝木班員に送られ、すぐにターゲッティングにとりかかるといった状況は、重点領域研究の計画研究として初めて出来ることである。本年度においてホモ型にまで進んで突然変異マウスを列挙すれば次の如くである。グルタミン酸受容体(NMDARタイプ5種、およびmGluR4種):ホモ型突然変異体受容体6(mGR6)破壊マウスは光のON刺激に対して反応しないことが確かめられた。ドーパミン受容体:ホモ型変異体は、不稔であるが、他の性状はみかけ上正常である。今後薬理学的行動実験を行う。H-ras遺伝子:ホモ型突然変異体は正常に生まれ、驚くべきことに正常と変わらない。その他、N-ras、K-ras、ジストロフィン、Otx2、Brn2、HGF、リアノジン受容体などの遺伝子が破壊された。それぞれの遺伝子破壊によって認められる生体の特徴は、細胞レベルやタンパク質化学レベルの既存の成果から容易に予測されものは少なく、それぞれの遺伝子産物が多くの生体機能に関わっていることが示された。本年度は以上の他にも、各班員それぞれに1個以上の遺伝子破壊に成功し多くの大きな成果が得られたと評価できる。本研究は標的遺伝子組換え法(ジーンターゲッティング法)を用いて、中枢神経系、免疫系、形態形成等に関与する遺伝子を計画的に破壊し、それぞれの遺伝子の生体での機能を解析することを目的としている。本年度までに本研究班によって作成された突然変異マウスを列挙すれば90種を越えるに至った。グルタミン酸受容体(NMDAタイプ5種、およびmGluR4種)、ドーパミン受容体、セロトニン受容体、リアノジン受容体、IP3受容体、H-ras、N-ras、K-ras、rac1、rac2、などである。詳細は、進捗状況報告および研究成果報告書にまとめてある。また、行動異常や記憶や学習の実験などにより高次機能の遺伝子発現との関係が検討された。本年度はジーンターゲッティングマウスが次々に作成され、来年度にかけてその解析の結果が続々と報告されるものと期待される。

本研究は標的遺伝子組換え(ジーンターゲッティング)を用いて、中枢神経系、免疫系、形態形成等に関与する遺伝子を計画的に破壊し、それぞれの遺伝子の生体での機能を解析することを目的としている。計画班員は、きわめて緊密に連携し、独立を保ちながら、多種の遺伝子の突然変異体の作成に成功した。本年度までに本研究班によって作成された突然変異マウスを列挙すれば120種を越えるに至った。グルタミン酸受容体、ドーパミン受容体、セロトニン受容体、リアノジン受容体、IP3受容体、H-ras、N-ras、K-ras、rac1、rac2、basigin、prion、SAPなどである。それぞれの遺伝子破壊によって認められる生体の特徴は、細胞レベルや分子レベルの成果から容易に予測されものは少なく、それぞれの遺伝子産物が多彩な生体機能に関わっていることが示された。行動異常や記憶・学習の実験により高次機能の解析を行った。その結果、ras群遺伝子産物は細胞の増殖と分化だけでなく、脳の高次機能にも関与していることが明らかとなった。ジーンターゲッティングマウスが次々に作成され、その解析の結果が今後報告される。
都市生活における「公共性」の比較社会学的研究

本研究は日本の公-私関係を街路に設置された「看板」の言説から読み取っていた。それは英国のパブリックープライヴィト関係に象徴される欧米の関係とは大きく異なるものである。日本と欧米の公共性のあり方の相違は、市街地の景観にも表れている。その最たるものが、日本中の都市に隈なく張りめぐらされた塀の存在である。日本における塀の存在は、物理的安全にかかわる問題だけではない。塀の役割は拡大する強力な公から「私」を守るためである。明治以降は、以前にはなかった町屋にまで塀が作られるようになる。人びとも聖なる目的がつけば、公的性格をおび「世間」の名の下に、私に迫ってくる。世間は公として「私」民を脅かす。このため日本ではどこにでも、他人の目をさえぎるために塀がつくられる。安全を掲げている公共施設どころか、公園までもが、他者を排除する塀で囲まれることすら珍しくない。公園はしばしば管理の優先する官園となっている。とくに住宅地における塀の存在は、日本の都市を狭隘なばかりでなく、見通しの悪く窮屈なものとしている。この点、住宅の周辺がオープン・スペースとなっている欧米の景観と対照的である。日本において公と私は、相補概念ではなく、対立概念となっている。しかし最近は、各種のボランティアやNPOなど新たな「公共性」の可能性を担う組織が族生している。これにともなって、官-民関係や公私関係も大きく変わろうとしている。今年は新潟市、大阪市、名古屋市、佐世保市を訪れ資料を収集するとともに、自治体の公共意識の一端を探るため、自治体が設置した都市計画と街路の関係、住居表示の仕方、交通標識、スローガン、さらに各種の看板を写真に収めた。夏季にはイギリスとドイツで公共性の行政資料を収集するとともに、自治体の公共意識の一端を探るために日本での調査と同様に、自治体が設置した都市計画と街路の関係、住居表示の仕方、交通標識、スローガン、さらに各種の看板を写真に収めた。現在それらの資料を分析中である。オックスフォード大学ボードリアン図書館、ケンブリッジ大学図書館では多くの資料を収集するとともに、研究者との数回の会合をもった。とくに2週間滞在したケンブリッジ大学のセルウィン・カレッジでは、バウリン教授の協力で多くの成果をあげることができた。さらにダーラムでは、現地の帝京大学の協力を得て住民のヒアリングを行うことができた。また、平成14年5月19日に東京大学で開催された地域社会学会大会のシンポジウムでは研究活動委員長として、シンポジウムのテーマ「地域における『公共性』の転換」について、企画の趣旨説明を行った。また、平成14月6月21日に京都リーガロ・ホテルで開催された京都フォーラムの第37回公共哲学研究会で「街角で感じる公と私-新しい公共性をもとめて」と題する報告を行った。本年度の研究実績は2003年5月12日には、松山大学で開催された地域社会学会大会において「自治体の公共観」を発表した。そこでは、自治体が設置した各種の看板を分析することで、自治体の民衆観の一端を報告した。さらに、日本社会学史学会大会が、2003年6月28日に東北公益大学で開催され、そこで自由報告として「CivicsからUrban SociologyをへてUrban Studiesへ」を発表した。都市社会学(Civics)は「公共性」の問題と深くかかわりながら、イギリスのエディンバラで誕生した。しかし、その後のシカゴ学派の都市社会学(Urban Sociology)において、公共性への問いかけは科学的研究への強い志向性のなかで忘れ去られてしまった。ところが、最近の都市社会学(Urban Studies)研究では、「公共性」の問題が再び脚光を浴びるようになっている、というのが報告の趣旨である。日本都市学会は2003年に、創立50周年を迎えた。記念大会は大阪市の主催で「都市の活性化とNPO-新しい主体の登場による公共性の転換-」を掲げて開催された。

報告者はパネルディスカッションにおいて「都市学の新世紀」と題する基調報告を行った。夏期にはイギリスにおいて、ケンブリッジ大学、オックスフォード大学、ダーラム大学を訪ね研究者と「公共性」の概念をめぐって議論した。過去2年間の成果は『都市と文明の比較社会学-環境・リスク・公共性-』(東京大学出版会2003年11月全312頁)にほぼ集約されています。
新エネルギー資源としてのクラスレートハイドレートの相安定性検討

1)複数のゲストが占有したガスハイドレートの熱力学安定性:クラスレートハイドレートの相図を分子レベルで正確に予測できるモデルを開発した。このモデルはゲスト分子のホスト格子への影響を考慮し、計算に用いる熱力学ポテンシャルの温度と圧力の適用範囲を広げ、van der WaalsとPlatteeuの理論を大きく改良した。メタン、キセノンハイドレートに関するガス-ガスハイドレート-氷Ihの相平衡の理論研究を行い、得られた結果は実験データとよく一致していた。2)ガスハイドレートの自己保存効果:分子動力学および格子力学に基づく理論モデルにより水とハイドレートの界面の存在と氷の相中のメタンハイドレートの熱力学的に安定なナノクラスターの可能性を示した。シミュレーションによりガスハイドレートの異常な保存効果を作り出す氷の役割を調べた。メタンハイドレートを取り込んだ氷の相は常圧でメタンハイドレートが解離する温度よりも高い温度で安定に存在することが示された。氷の相に取り込まれたメタンハイドレートクラスターの圧力は氷の相の圧力よりも大変高く、250Kにおけるハイドレート相の余分な圧力はガスハイドレートを相図中の熱力学的安定性の領域に入れるのに十分なものであることが示された。3)ガスハイドレート核形成メカニズム:メタンハイドレートの場合、第一原理計算により次の核形成メカニズムが明らかになった。メタンハイドレート形成の最初のステップで、メタンは大きなケージよりも小さなケージをより安定にするために、メタンが入った小さなキャビティが形成される。その後、小さなキャビティは周囲の水分子と水素結合を形成し始め、少数の水分子で水素結合ネットワークが安定化される。さらに、小さなケージ間のメタン分子がキャビティの接着を防ぐために必要である。平成17年度は以下の4点の研究成果を得た。1)1つのケージに複数個の有機分子が占有したガスハイドレートの熱力学安定性について研究を進めた。この物質は水素貯蔵の観点から注目を集めている。本研究では独自にプログラム開発を行い、格子力学を用いた手法により熱力学的安定性を、第一原理計算を用いた手法により正確なゲスト-ホスト間の相互作用を解析した。水素ハイドレートの動力学および熱力学的安定性を広い温度・圧力領域において調べ、様々な条件下での最安定ケージ占有状態を見いだした。特に、CS-Iの構造が最大の水素吸蔵能力を持つことを明らかにした。実験ではTHF分子の添加によりガスハイドレートが安定化することが知られている。この結果をもとにH2-CH4-H2O系のCH4添加量による安定性へ寄与を解析した。2)ガスハイドレートの自己保存効果について多くの研究が実験・理論計算の両面から行われているが、その起源などの基礎的な物性でさえも統一的な理解は得られていない。本研究では自己保存効果についての分子レベルのモデルを提案し、その有効性を検討した。このモデルは氷中にメタンを入れたものであり、メタンハイドレートが分離。融解する温度・圧力下でも安定であることを明らかにした。3)既知の分子間相互作用のポテンシャルからこれらの化合物の熱力学的関数を求める手法を確立した。これはゲスト分子によるホスト格子およびゲスト-ゲスト間の相互作用への影響を解析できるものである。4)第一原理計算を用いてカゴ型構造をもつ水分子について系統的計算を行い、メタンハイドレートの核形成メカニズムを明らかにした。
DNAマイクロアレイ技術を用いた神経細胞移動を制御する分子の探索

発生過程において、最終分裂を終えた神経細胞は機能部位まで移動する。本研究は、大脳皮質の錐体細胞を対象に、神経細胞の移動・停止過程に関与する細胞間相互作用を明らかにするため、移動錐体細胞と停止錐体細胞の比較に焦点を置き、これらの細胞間で発現量が異なる膜蛋白質・分泌性蛋白質を網羅的に探索・同定することを目的として実験を行った。移動錐体細胞は、マウス胎生15日の脳室帯にgfp-plasmidを子宮内電気穿孔法用いて導入し、4日後(生後0日)の皮質板組織から調製した。これと対になる停止錐体細胞は、同手順を経て5日後(生後1日)の辺縁帯を含む組織から調製した。組織片は、酵素処理によって単一細胞に分散後、propidium iodide(PI)処理を行い、GFP陽性/PI陰性細胞となる生細胞のみをセルソータで回収した。細胞より回収したRNAはバイオアナライザーで品質の評価を行った。一連の実験により、約5x10^4個のGFP陽性細胞から品質の良いRNAを回収する条件が確立し、最終的に移動錐体細胞と停止錐体細胞に関して、各3サンプルのRNAを調製した。得られたRNAをもとにプローブを作成し、Affymetrix社のMouse Expression Array 430Aを使い、DNAマイクロアレイ法で発現を解析した。各サンプル中の発現遺伝子は、シグナル強度を基に同定した。更に移動細胞および停止細胞に含まれる各発現遺伝子を、シグナル強度をもとにGenespring解析ソフトウエアを用いて統計的に処理し、両者に数倍以上差のあるものを抽出した。今後は、抽出遺伝子のうち膜蛋白質、分泌性蛋白質をコードすると予想される遺伝子を選択して発現の確認をin situ hybridization法を用いて行うとともに、これら遺伝子が神経細胞移動において果たす役割を解明する実験へと発展させる予定である。
タンパク質の生産・品質管理の場としての小胞体の網状構造の意義

小胞体はタンパク質の産生・品質管理の場であり、細胞の根幹をなす細胞内小器官である。その形態は大変に特徴的で、細胞質全体に拡がる網状構造を示す。それらの構造は下等生物から哺乳類まで幅広く見られることから、その複雑な構造はその機能であるタンパク質の産生・品質管理と密接に結びついていると考えられる。そこで本研究では、チューブ状膜が分岐して形成する特徴的な小胞体の網状構造の形成維持機構を明らかにすることを目的とした。昨年度に試験管内で小胞体の網状構造を再構成する系を立ち上げたので、その系を洗練されたものとすると共に安定化した。さらに、その系を用いて、小胞体の網状構造形成に必要な因子群の同定を行った。網状構造形成に細胞質上清が必須であったので、その細胞質上清を生化学的に分画して試験管内再構成系で活性を検討した。ショ糖密度勾配超遠心法で分画した後、MonoQで分画した所、二つの促進因子と一つの阻害因子を含む分画を同定できた。これらの分画はさらにハイドロキシアパタイトやMonoSを用いて精製を進め、質量分析でタンパク質の同定を行った。現在は、得られた因子の解析を進めているところである。このため我々が先ず行ったことは、試験管内で小胞体の網状構造を再構成する系を立ち上げた。小胞体の網状構造は大変に脆弱であり、熱対流でも容易に壊れてしまう。そこで、熱対流を防ぐために二枚のカバーグラス間の細隙で反応を行うことにした。二枚のカバーグラス間の距離を決めるために、半導体製造用のスペーサーを流用している。さらに、小胞体構造を支える微小管の代わりとして、カバーグラス表面をコーティングした。さらに小胞体膜や細胞上清の調製方法についても検討を加えた。その結果、小胞体の形成過程を経時的に観察できるようになり、網状構造の形成ステップが明らかとなった。同時にそれぞれの各ステップを停止する事も可能になり、形成素過程の解析が可能になった。
NFAT2/NFATc1に制御される破骨細胞骨吸収機構およびその調節機構の解析

転写因子NFAT2/NFATc1が破骨細胞分化における鍵因子であることから、NFATc1は骨吸収活性に関連する遺伝子の発現を制御すると考えられた。そこでNFATc1制御下で発現するHB-EGFおよび新規DAP12会合膜タンパク質RADIOに着目した。本研究から1) HB-EGFはMEKを介した経路で転写因子Twist2の発現誘導およびSmad1の核内移行阻害を介して骨芽細胞分化を抑制すること、2) RADIOがDAP12と協調的に働き、破骨細胞におけるアクチン細胞骨格形成および骨吸収活性を制御すること、が示された。転写因子NFATc1/NFAT2が細胞融合以降の分化過程に必須な鍵因子であることから、NFAT2が細胞融合や骨吸収活性に関連する膜タンパク質の発現を制御すると考えられた。そこでNFAT2の制御下で発現する増殖因子HB-EGFおよびI型膜タンパク質RADIOに着目し、機能解析を行った。HB-EGF遺伝子欠損マウスが骨吸収・骨形成ともに低下していることを踏まえ、本年度は骨芽細胞分化におけるHB-EGFの働きを検討した。in vitro骨芽細胞分化誘導系を用いた解析から、HB-EGFが1)骨芽細胞分化を抑制すること、2) MEKを介した経路および転写因子Twist2の発現を介してアルカリフォスファターゼの発現を抑制すること、が明らかとなった。RADIOの破骨細胞骨格制御機構の解明と骨代謝における意義を明らかにすることを目的とし、本年度は3) RADIO細胞外領域とマウスIgG2aFc領域の融合タンパク質(RADIO-Fc)を作成し、これを抗原として抗体を作成した。作成した抗体をもちいてウェスタンブロッティングを行い、破骨細胞分化に伴い内在性RADIOタンパク質発現が上昇すること、シクロスポリンA処理によりその発現誘導が抑制されること、を確認した。また本抗体を用いた免疫染色実験からRADIOタンパク質が単核および多核破骨細胞形質膜上に発現することが示唆された。4) RADIO遺伝子の転写開始点を5'-RACE法により決定し、プロモーター領域を推定するとともに、RADIO遺伝子のエクソン・イントロン構造を決定した。この情報に基づき、RADIO遺伝子欠損マウスの作製を目指してターゲティングベクターを構築した。転写因子NFATc1/NFAT2が細胞融合以降の分化過程に必須な鍵因子であることから、NFAT2が細胞融合や骨吸収活性に関連する膜タンパク質や脂質制御因子の発現を調節すると考えられた。そこでNFAT2の制御下で発現し、DAP12との会合が報告されているタンパク質RADIO(仮称)に着目した。RNA干渉法によりRADIOの発現を抑制するとDAP12遺伝子ノックアウトマウス由来の破骨細胞で観察される破骨細胞と類似した形態異常および骨吸収活性の低下が観察されたことから、RADIOが破骨細胞のアクチン細胞骨格制御および骨吸収活性に必要であることを見出している。本年度は、1)RADIOノックダウン細胞におけるアクチンリング形成異常および骨吸収活性の低下は、サイレンシング変異を導入した野生型RADIOの導入により回復するのに対し、DAP12との会合能を欠質した変異体や細胞外領域の欠質変異体では回復しえないこと、2)単核破骨細胞をビトロネクチンで刺激した際に、DAPI2 ITAM内リン酸化チロシン残基に結合するSykとRADIOの会合が亢進すること、を見出した。DAP12遺伝子欠損マウス由来破骨細胞がアクチン細胞骨格異常を呈することが報告されていることと考え合わせ、以上の結果はRADIOが破骨細胞における重要なDAP12 associated receptorとして機能し、DAP12とともにアクチンリング形成を介して破骨細胞の骨吸収活性獲得に関わることを強く示唆する。さらにRADIO遺伝子の骨代謝における役割を検証するため、3)RADIO遺伝子欠損マウス作成を行い、ヘテロマウス個体の作成に成功した。