hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
アッサムモンキーの社会と生態：オス間の寛容性の進化を探る

ネパールの主にShivapuri Nagarjun国立公園でアッサムモンキー(Macaca assamensis)を観察した.同地域のアッサムモンキーは,他のマカカ属の種と同様に母系の複雄複雌群を形成し,オスはマウンティングや抱き合い行動を行って,その際相手のペニスを触る事があった.また,オスは群れのコドモを抱く事もあった.しかし,タイに生息するアッサムモンキーやアッサムモンキーと近縁なチベットモンキー(M. thibetana)とは異なり,相手のペニスを舐める行動やブリッジング行動(2頭のオトナが一緒にコドモを持ち上げる行動)は,ネパールのアッサムモンキーでは観察されなかった.平成25年度は,ネパールのShivapuri Nagarjun国立公園内に生息するニシアッサムモンキー(Macaca assamensis pelops)の観察を,2013年12月25日(出国)から2014年1月4日(帰国)までと,2014年3月16日(出国)から2014年3月31日(帰国は翌年度である2014年4月5日)まで行った.カトマンドゥー近郊にあるShivapuri Nagarjun国立公園は,Nagarjun地域とShivapuri地域の2地域からなり,両地域内にニシアッサムモンキーが生息している.このうちNagarjun地域(27&#61616;44'N, 85&#61616;17''E,高度1300m)は,一般の観光客も多く訪れるために,道沿いのサル達はある程度人慣れしていた.特にその中の1群は,国立公園内にある軍隊の施設から出る残飯によって餌付けされていたために,近距離から長時間観察する事が可能だった.そこで初年度の平成25年度は,以下の1及び2の調査を,Tribhuvan大学のChalise氏及び同大学の大学院生と共に,国立公園のレンジャー達の協力を得て行った.1Nagarjun地域の特にPhulubari Gateから山頂の寺Jamachoへ向かう道沿いでセンサスを行い,アッサムモンキー及びアカゲザル(M. mulatta)の発見場所と発見時間及び群れの性年齢構成を記録した.2餌付け群を追跡し,観察できた社会行動を記録して社会行動の目録の作成を開始し,同時に個体追跡法やスキャニング法による観察がどの程度可能かどうかを試した.平成26年度は,ネパールにおいて現地調査を2014年4月1日(出国は前年度の3月16日)から4月5日(帰国)まで,7月25日(出国)から9月15日(帰国)まで,12月20日(出国)から2015年1月7日(帰国)まで,3月15日(出国)から3月31日(帰国は翌年度の4月5日)まで,Tribhuvan大学のChalise氏ら及び国立公園のレンジャー達の協力を得て行った.カトマンドゥー近郊にあるShivapuri-Nagarjun国立公園はNagarjun地域とShivapuri地域の2地域からなり,両地域内にはニシアッサムモンキー(Macaca assamensis pelops)が生息している.このうちNagarjun地域の道沿いのサル達はある程度人に慣れており,その中の1群は公園内にある軍隊の施設から出される残飯によって餌付けされている.そこで,この群れのすべてのオトナを個体識別し,Koirala氏と共に個体追跡法によってオトナメス8個体とオトナオス8個体を出産季にあたる89月と交尾季にあたる121月にそれぞれ各10時間観察した.この地域のアッサムモンキーはオス間で頻繁に社会交渉を行うものの,タイに生息するヒガシアッサムモンキー(Macaca assamensis assamensis)とは異なり,2個体が同時に1頭のコドモを持ち上げるブリッジング行動は行わない事が明らかになった.観察記録の詳細は現在分析中である.またNagarjun地域で植生調査を行った.高度100mごとに10m四方の方形区を北及び南斜面にそれぞれ設け,方形区内の胸高直径10cm以上のすべての樹木について胸高直径と樹高を記録した.最終年度である平成27年度は,以下の現地調査を行い,これまで行った調査結果をまとめた.現地調査は,ネパールのカトマンドゥー近郊にあるShivapuri-Nagarjun国立公園のNagarjun地域において,2015年4月1日(出国は前年度の3月15日)から4月5日(帰国)までと2015年12月23日(出国)から2016年1月8日(帰国)まで,Tribhuvan大学のChalise氏ら及び国立公園のレンジャー達の協力を得て行った.同地域には軍隊に餌付けされて観察が容易なアッサムモンキー(Macaca assamensis)の群れが1群いる.前年度に引き続き,この群れの性年齢構成の変化を記録し,すべてのオトナを個体識別し,Koirala氏と共に,個体追跡法によって社会行動の観察を行った.また,前年度に実施した植生調査地を再訪して植物の同定を行い,センサスでアッサムモンキーとアカゲザル(M. nulatta)の群れの位置をGPSで記録し,各群れの性年齢構成やサル達の活動及び採食品目等を記録した.さらに,センサーカメラ(カメラトラップ)を設置して,サルの捕食者の生息の有無を確認した.

観察記録の詳細は現在分析中であるが,同地域のアッサムモンキーは,(2個体が同時に1頭のコドモを持ち上げるブリッジング行動は行わないものの)オス間で頻繁に親和的社会交渉を行い,オスは1度のマウントで射精に至るために低順位のオスも交尾機会が多く,そのため複数のオスが群れ内に共存出来ているのではないかと考えられた.なお,ネパール各地域における霊長類の分布調査も当初計画に入れていたが,その調査は研究代表者の所属大学の個人研究費を用いて2016年3月に行った.ネパールの主にShivapuri Nagarjun国立公園でアッサムモンキー(Macaca assamensis)を観察した.同地域のアッサムモンキーは,他のマカカ属の種と同様に母系の複雄複雌群を形成し,オスはマウンティングや抱き合い行動を行って,その際相手のペニスを触る事があった.また,オスは群れのコドモを抱く事もあった.しかし,タイに生息するアッサムモンキーやアッサムモンキーと近縁なチベットモンキー(M. thibetana)とは異なり,相手のペニスを舐める行動やブリッジング行動(2頭のオトナが一緒にコドモを持ち上げる行動)は,ネパールのアッサムモンキーでは観察されなかった.2年目にあたる平成26年度は,ネパールのカトマンドゥー近郊にあるShivapuri-Nagarjun国立公園内のNagarjun地域を4度訪れて,ニシアッサムモンキーの観察を行った.Nagarjun地域では,観察する上では幸いなことに地域内の1群が餌付けされており,それらのサルを近距離から長時間観察する事が可能だった.そのため,この群れのすべてのオトナを個体識別して,社会行動を詳細に観察する事ができた.彼らの社会関係を分析する準備が整った.一方,他の群れについては,群れを発見した時にはその発見場所と群れの性年齢構成を記録したものの,それらの群れを追跡していく事は困難であった.そのため,それら野生群の行動域や生息地利用についての資料はあまり収集できなかった.また,植生調査を実施したが,植物の同定はまだ終わっていない.生物学最終年度である平成27年度は,以下の14の調査を行い,その結果をまとめる予定である.ネパールのカトマンドゥー近郊にあるShivapuri-Nagarjun国立公園内ので,1.餌付けされている群れの性年齢構成の変化を記録し,社会行動の観察を引き続き行う.2.センサスを行ってアッサムモンキーおよびアカゲザル(Macaca nulatta)の群れの位置をGPSで記録し,同時にその群れの性年齢構成やサル達の活動およびと採食品目などを記録する.3.センサーカメラ(カメラトラップ)を設置して,サルの捕食者の生息の有無と密度や,サルの夜間の行動について調べる.また,ネパール内の各地域において,4.アッサムモンキー及びアカゲザルの分布と生息地を調査する.初年度の平成25年度は,ニシアッサムモンキーが生息するNagarjun地域(ネパールのカトマンドゥー近郊にあるShivapuri Nagarjun国立公園内)を2度訪れて,現地のサルの生息状況を調べ,観察や調査がどの程度可能であるかを探った.Nagarjun地域では,観察上としては幸いなことに地域内の1群が餌付けされており,それらのサルを近距離から長時間観察する事が可能だった.そのため,この群れのオトナ全頭を個体識別する事ができて,社会行動を詳細に観察する準備が整った.一方,他の群れについては,Nagarjun地域でセンサスを行って,発見場所と群れの性年齢構成を記録した.しかしながら,それらの群れを追跡していく事は困難であり,行動域や生息地利用についての資料はあまり収集できなかった.平成26年度は,平成25年度に引き続き,以下の13の調査を行う予定である.1
左半側空間無視患者における読字障害の発現メカニズムの解明

【研究目的】本研究の目的は、左半側空間無視患者における読字障害の発現に関わる要因を明らかにすること、読字の際の視線の方向・停止位置と誤り方の関係を明らかにすることである。【研究計画】研究期間内に以下の研究13を実施する計画である。2018年度は健常者を対象とした実験を実施し、課題を完成させる計画とした。研究1:横書き文章を音読する際に、無視側にある行頭が語頭か/語中かによる眼球運動の差を明らかにする。研究2:行頭の語および視線の停止位置が読み誤りの種類(省略/置換)に関わるか否かを検討する。研究3:文字刺激に対する視線移動の速さ・正確さとプライミング効果との関係を明らかにする。【実施内容】研究1:健常者20名を対象に文章の音読課題を実施し、アイトラッカー(Tobii X3-120)を用いて視線の位置を計測した。行頭が語頭か/語中かによって、改行時の視線の停止位置(左方への移動距離)に有意な差がみられた。以上は、文章の行頭の統制が、視線移動の差をもたらすことを示唆する。2019年度は本課題を左半側空間無視患者に実施する。研究2:語彙の調査および音読課題の作成を行った。当初の計画よりも課題の作成に時間を要したため、実験の実施時期を2019年度に変更した。研究3:健常者21名を対象に、左右空間のプライム刺激が後続の単語完成の成績に与える影響を検討した。プライム刺激を左空間に提示した条件では、右空間に提示した条件に比べ、視線の停止位置が右側に大きくずれていた。両条件の差は視空間性注意の左右差を反映していた可能性が考えられた。一方、2つの条件におけるプライム刺激に対する視線移動の速さ、プライミング効果に有意な差はなかった。本研究は、左半側空間無視患者が文章を読み誤るメカニズムを、アイトラッカー(Tobii X3-120)を用いた3種類の実験(研究13)を通して明らかにする計画である。2018年度は、健常者を対象にデータ収集・分析を行い以下の成果を得た。研究1:健常者20名を対象とした実験を行い、行頭が語頭か/語中かによって、改行時の視線の停止位置(左方への移動距離)に有意な差が生じることを明らかにした。2018年度の目標は概ね達成することができたと考える。2019年度に、左半側空間無視患者を対象とした検討を行うことができる。当初の計画では2018年度中に課題を完成させ、健常者を対象とした実験を開始する予定であったが、語彙の調査に時間を要したため23ヶ月の遅れが生じている。2019年度に、健常者と患者を対象とした検討を並行して行うことで遅れを取り戻す計画である。対応策として、大学と研究協力病院の両方に実験環境を整え、効率的にデータ収集を行えるようにする。研究3:健常者21名を対象とした実験を行い、左右空間のプライム刺激が後続の単語完成課題の成績に与える影響を比較した。その結果、プライム刺激を左空間に提示した条件では、右空間に提示した条件よりも、視線の停止位置が右側に大きくずれることが明らかになった。この知見は、日本心理学会に発表予定であり、一定の成果を挙げることができたと考える。2019年度は、左半側空間無視患者を対象とした検討を行う。最終年度となる2019年度は、左半側空間無視患者を対象とした検討を行う予定である。また、脳損傷の既往がない健常者を対象とした実験も並行して行う。研究1:左半側空間無視患者を対象に文章の音読課題を実施し、アイトラッカー(Tobii X3-120)を用いて視線の位置を計測する。独立変数は、行頭が語頭か/語中かである。従属変数は、行頭の文字の省略数および改行時の視線の左方への移動距離である。仮説は、行頭が語中の条件では語頭の条件に比べて、1行頭の文字の省略数が少ない、2改行時により視線が左方へ移動するである。2019年度は、患者を対象とした実験によって仮説の検証を行う。研究2:研究1と同様の装置を用いて、文章音読時の視線の停止位置による、読み誤りの種類(省略/置換)の差を検討する。文章の行頭の語に、2語を組み合わせた複合語を用い、2語の組み合わせを統制する(付加的な語か否か、親密度が高い語か否か)。2019年度は、健常者と左半側空間患者を対象とした実験を並行して行い、どのような複合語の場合に省略が生じやすく、またどのような複合語の場合に置換が生じやすいのかを明らかにする。研究3:左半側空間無視患者を対象に、プライム刺激が後続の単語完成課題の成績を促進する条件を明らかにする。仮説は以下の通りである。1プライム刺激の提示位置周辺に視線が向けられた場合に、刺激の存在を報告することができる。2プライム刺激の提示位置周辺に視線が向けられた場合に、それを言語化できるか否かに関わらず単語完成課題の成績が促進される。

左半側空間無視患者は、病巣の反対側にある刺激を意識的に処理することができない。横書きの文の読みにおいて左側の読み落としや読み誤りを示す。本研究の目的は、左半側空間無視患者における読字障害の発現に関わる要因を明らかにすること、読字の際の視線の方向・停止位置と誤り方の関係を明らかにすることである。平成29年度の計画は、1無視性失読の特徴を明らかにするための実験プログラム(音読課題)の作成、2眼球運動測定システムの開発であった。1)実験プログラム(音読課題)の作成左半側空間無視患者は横書きの文章の改行時に、次の行頭(左端)の文字を探索することができずに、省略することが多い。一方で、患者は、行末の文字(例:学)を手掛かりに、次の行頭の文字(例:校)に視線を向けずに、補完的な反応をする(例:学→学校)ことも少なくない。このようは補完的な反応は、無視性失読の分析を難しくする。そこで、H29年度は音読課題を試作し、大学生28名(男性2、女性26)(平均21.0±1.0歳)を対象に予備調査を行った。その結果、補完的な反応でも平均31.4±29.1%と非常に高い正反応が得られることが明らかになった。H30年度は、これらをふまえ音読課題を修正して実験を進める計画である。2)眼球運動測定システムの整備H29年度は眼球運動測定システムの整備を行った。文字刺激をプライム刺激とした単語完成課題を行っている際の視線解析を行うプログラムを作成し、健常若年者と高齢者を対象とした検討を行った。健常若年者を対象とした実験からは、プライム刺激に視線が向けられていれば、それを同定・報告が困難な場合でもターゲット刺激に対する反応が促進されることが明らかになった。その成果は日本心理学会第82回大会(2018年9月)で発表予定である。本研究は、左半側空間無視患者が文章を読み誤るメカニズムを、眼球運動測定システムを用いて解明することを目指すものである。1)実験プログラム(音読課題)の作成音読課題を試作し、大学生28名を対象に予備調査を行うことができた。しかし、補完的な反応が可能な条件下での正反応率が平均31.4±29.1%と、予想以上の高い値であった。行頭の文字に対する注意の有無が音読の正誤に及ぼす影響を検討するためには、補完的な反応の影響をより小さく抑えなくてはならず、課題の修正が必要となった。当初の計画ではH29年度中に課題を完成させる予定であったが、23ヶ月の遅れが生じている。2)眼球運動測定システムの整備H29年度はアイトラッカーを使用した実験を行える環境の整備とプログラムの開発を目標とした。当初の予定に追加して、文字刺激をプライム刺激とした単語完成課題時の視線解析を行うプログラムを作成した。健常若年者を対象としたプライミング実験からは、プライム刺激に視線が向けられていれば、それを同定・報告が困難な場合でもターゲット刺激に対する反応が促進されることが明らかになった。以上より、眼球運動測定システムの整備については、一定の成果を挙げることができたと考える。【研究目的】本研究の目的は、左半側空間無視患者における読字障害の発現に関わる要因を明らかにすること、読字の際の視線の方向・停止位置と誤り方の関係を明らかにすることである。【研究計画】研究期間内に以下の研究13を実施する計画である。
藍藻Anabaena spiroides類似群の形態学および分子分類学的研究

Anabaena spiroides類似群を日本各地およびドイツから採集し、株として確立した。2.形態観察確立した株について、維持培養を行い、アキネートの観察を試みた。アキネートを形成した株について栄養細胞およびアキネートの形態の測定及び写真撮影を行った。その結果の大部分について、論文として発表した。3.新種記載形態観察を重ねた結果阿寒湖から採集し株として確立したAnabaena akankoensisが新分類群と判明したので新種記載した。4.16SrDNAによる分析アナベナの16S rDNA解析に用いることが出来るプライマーについて様々な検討を行った結果、Gugger et al.(2002)が開発した異質細胞を持つ藍藻類に特異的なリバースプライマー(1480)とユニバーサルフォワードプライマー(27f)の組合せでPCR、シーケンス共に安定した結果を得た。Gugger et al.(2002)などの報告では、同一分類群が多くの分岐に出現し、形態分類と16SrDNAシークエンス結果が一致せず混乱が見られるが、本研究ではそのようなことはなかった。むしろ、従来重視されてきた形態と16SrDNAシークエンス結果は対応する場合が多いといえる。本研究の初年度である平成12年度には、浮遊性Anabaena属の種に関して記録がほとんどない西日本を中心にサンプリングを行った。滋賀県山東郡の三島池、鳥取県鳥取市湖山池、水尻池でAnabaena spiroidesに最も近いと思われる藻が採集された。天然の材料でアキネート、異質細胞、栄養細胞などの形と大きさを詳しく調べることができたので、Anabaena spiroidesの形態学的特長が明らかになる。これらの藻は分離・培養を行って分子解析に備えてある。沖縄本島では琉球大学名誉教授の香村眞徳博士の案内で首里のダム、千原池、辺野喜ダム、安波ダム、倉敷ダム、福地ダムなどでサンプリングを行ったが、辺野喜ダムでMicrocystisの発生が見られたのみでその他の浮遊性藍藻の種は見られなかった。現地で明らかになったことであるが、沖縄のダムを管理する事務所でダムのプランクトンを調査・記録していて、いくつかのダムではAnabaenaが発生することがわかった。香村博士を通じてこれらの資料を取り寄せ、ダム湖とサンプリングの時期を考慮して調査を行なう。本研究の第2年度である平成13年度には、Anabaena spiroides類似群の試料を各地から採集し、また採集を依頼して集めた。それら試料から分離培養を行った。以下にこれまでに収集した同類似群培養株の形態分類による仮同定の結果と産地を示す。Anabaenacrassa:琵琶湖赤の井港、浜大津港、彦根港、神奈川県城山湖、兵庫県にご池これにより既に培養している同類似群の15株に、今回未同定の培養株を含めて都合27株を新たに追加した。一昨年・昨年に引き続きAnabaena spiroides類似群の収集のため、北海道(阿寒湖・釧路湿原湖沼群・網走湖など)・本州(諏訪・琵琶湖・大阪ため池群など)、四国(香川ため池群など)など全国各地から水試料を採取し、形態観察と分離培養を行った。これにより、本年度62株の培養株を新規に確立し、計89株が現在維持培養されている。2.形態観察と新分類群の記載フィールドからの試料の形態観察および培養株の形態観察・計測により、Anabaena circinalisとされてきた分類群が3分類群に分けられることが明らかになった(Niiyama & Watanabe, Algae 2002で口頭発表)。阿寒湖からの分類群については、本年度の採集により、精密な形態観察の実施および株の確立が出来たため、新種記載を行った(Watanabe 2003)。3.16SrDNAの分析のための予備実験今回、目的とする分子解析のためには多数の株を分析する必要があるが、AnabaenaはMicrocystisに比べて非常に収量が少なく、また無菌化も困難である。そのため、PCRにあたって京都大学の宮下英明氏の開発した藍藻類を特異的に増殖する混合リバースプライマーとPLG1.1を用いた所、良好な結果が得られた。また、収量が極めて少ない株からもPCRを行うことが出来た。

しかしながらPLG1.1では、ITS領域の大半を読むことが出来ないため、27fを用いる事が出来ないかどうか現在検討中である。その検討が済み次第、培養株のシーケンスを来年度行いたい。一昨年・昨年に引き続きAnabaena spiroides類似群の収集のため、過去2年間に調査をしていない九州・沖縄地域を中心に水試料を採取し、Anabaena spiroides類似群を探したが、これらの地域から採集する事は出来なかった。2.形態観察昨年度までに分離した株について、維持培養を行い、アキネートの観察を試みた。観察が出来た株につき、栄養細胞およびアキネートの形態の観察を行い、写真撮影した。3.16SrDNAによる分析昨年度試みた、プライマーではAnabaenaの株をうまく増幅できず、また、変異が多いと考えられている先端部分を、読みとる事が出来なかった。そのため、フォワードプライマーとして27fを用いると共に、リバースプライマーを改良し、私たちが実験した全てのアナベナを増幅できるプライマーを見いだし、解析に成功した。解析の結果、以下の事が分かった。i.Anabaenaspiroides類似群は、単系統ではなく、属レベルを超える遺伝的多様性を内包している。また、螺旋以外の形態が類似している直線上群体を形成する種との遺伝的距離が小さい。ii.形態観察から、細胞径や螺旋径が大きく異なると考えられる分類群が、遺伝的にまったく同一である事例が見つかった。そのことから、分類形質として細胞径や螺旋径に頼りすぎる事の危険性が明らかになった。DNA分析の結果は、従来の形態分類を完全に否定するものではなかったが、上記3-iiの様に見直しが必要な部分も見つかった。DNA分析の結果を基に、形態分類を見直す事が、今後の課題として残っている。
味噌中におけるアルカリプロテアーゼインヒビターの生理活性に関する研究

味噌は日本人に古くからら愛用されてきた調味料の1つであり,特有の風味と調味機能を有している.従って,味噌に関する研究は,種々の見地から幅広く行われてきた.味噌汁を飲む人は罹がん率が低いという疫学的調査に基づき,近年,味噌中に含まれる生理活性物質の検索が行われ,抗変異原性物質としてリノール酸メチルが報告されている.本研究においても,同様の観点から,味噌中におけるアルカリプロテアーゼインヒビター(APIと略記)に着目し,これを精製し,諸性状を調べるとともに,抗微生物試験及び卵割阻害試験を行って生理活性を検討した.まず,火入れをしていない江戸味噌及び西京味噌につきAPI活性を調べた結果,粗抽出液を80°Cで20分間加熱することによりAPI活性が現われることが判明した.次に,味噌の原料となる米麹,加熱大豆及び加熱米についてもAPI活性を調べ,味噌中のAPI活性は米麹由来のものであることが明らかとなった.米麹中のAPIはパパインの酵素活性をも阻害した.米麹中のAPIは, SephadexG-50ゲルろ過およびDEAE-トヨパール650Sにより更に精製を行った.精製したAPIは分子量約20,000,pI=5.6であった.また, 70°C, 30分の加熱では活性はほとんど変化せず, 100°C, 20分の加熱でも約76%の活性が残存しており,熱安定性が高いことが認められた.至適pHは9付近であり, pH711の範囲では比較的安定であった.Bacillus subtilus,E.coli,Penicillium chrysogenum等8種類の微生物を用いて抗微生物試験を行ったが,活性は認められなかった.しかし,イトマキヒトデの授精卵に対し, 32-64分割期の卵割が阻害されることが明らかとなった.以上より, APIはDNA合成阻害作用を有しており,味噌汁中にAPI活性が残存していることを考え合わせると, APIの体内における生理機能が注目されるところである.味噌は日本人に古くからら愛用されてきた調味料の1つであり,特有の風味と調味機能を有している.従って,味噌に関する研究は,種々の見地から幅広く行われてきた.味噌汁を飲む人は罹がん率が低いという疫学的調査に基づき,近年,味噌中に含まれる生理活性物質の検索が行われ,抗変異原性物質としてリノール酸メチルが報告されている.本研究においても,同様の観点から,味噌中におけるアルカリプロテアーゼインヒビター(APIと略記)に着目し,これを精製し,諸性状を調べるとともに,抗微生物試験及び卵割阻害試験を行って生理活性を検討した.まず,火入れをしていない江戸味噌及び西京味噌につきAPI活性を調べた結果,粗抽出液を80°Cで20分間加熱することによりAPI活性が現われることが判明した.次に,味噌の原料となる米麹,加熱大豆及び加熱米についてもAPI活性を調べ,味噌中のAPI活性は米麹由来のものであることが明らかとなった.米麹中のAPIはパパインの酵素活性をも阻害した.米麹中のAPIは, SephadexG-50ゲルろ過およびDEAE-トヨパール650Sにより更に精製を行った.精製したAPIは分子量約20,000,pI=5.6であった.また, 70°C, 30分の加熱では活性はほとんど変化せず, 100°C, 20分の加熱でも約76%の活性が残存しており,熱安定性が高いことが認められた.至適pHは9付近であり, pH711の範囲では比較的安定であった.Bacillus subtilus,E.coli,Penicillium chrysogenum等8種類の微生物を用いて抗微生物試験を行ったが,活性は認められなかった.しかし,イトマキヒトデの授精卵に対し, 32-64分割期の卵割が阻害されることが明らかとなった.以上より, APIはDNA合成阻害作用を有しており,味噌汁中にAPI活性が残存していることを考え合わせると, APIの体内における生理機能が注目されるところである.試料として(株)あぶまた味噌の江度味噌および西京みそを用いた。また、アルカリプロテアーゼインヒビター(APIと略記)の来源を調べるために、種麹菌として(株)桶口松之助商店より「ヒグチモヤシBF1号菌」を入手し、米麹を調製した。2種の味噌および米麹に3倍量の蒸留水を加え、氷冷下3分間ホモジナイズした後、60分間撹拌抽出した。冷却遠心機を用い、5,000r.p.m.で20分間遠心分離し上清を得た。次に、この上清を80°Cの温浴中に20分間浸漬した後濾過し、濾液に硫安を加えて0.8飽和とした。生成した沈澱を遠心分離(8,000rpm×20min)により得た。このものにつき、Kunitzのカゼイン消化法等に準拠してAPI活性を調べたところ、米麹に最も強い活性が認められ、江度みそおよび西京みそでは、米麹の約1/4であった。そこで、以下の精製は米麹についてのみ行った。硫安分画で得た沈澱を0.05Mホウ酸緩衝液(pH9.0)に溶解後、同緩衝液で平衡化したSephadexG-50(Syperfime)を用いるゲル濾過に付し、活性画分を得た。活性画分は0.05M

トリス塩酸緩衝液(pH7.4)で平衡化したDEAE-セルローズ(トヨパール,650S)に付し、塩濃度を0から0.3Mまで直線的に変化させ精製を行った。このようにして得たAPI画分をSDS-ポリアクリルアミド電気泳動に付したところ、分子量24,000および19,000の2本のバンドが認められた。ポリアクリルアシドを用いる等電点電気泳動の結果、等電点は5.6であると推定された。また、37°CにおけるpHの変化に伴う安定性を調べ、pH9が最も安定であり、60分間放置してもほとんど活性が変化しなかった。pH7および11では30分後に活性が約70%に減少し、pH3および5では約30%に減少した。従って、このAPIは、分子量約20,000,等電点5.6で、アルカリ側で安定なタンパク質であると考えられる。
理数科・情報教育の国際協力ストラテジーに関する研究

教育プロジェクトを効果あるものにするためには、様々な要因への行政的働きかけを考慮しなければならない。教育の質的向上を目的とする典型的なプロジェクトは教員養成・訓練に対する協力である。教員の指導力向上が児童・生徒の学力向上に寄与するであろうことは予期されるとしても、児童・生徒の学力向上にはその他、校長の指導力、教材・教具の利用可能性、親の期待と協力、家庭内学習時間など多くの要因が絡む。教員の指導力向上だけではなく、これらのな要因に対する働きかけも同時に行う、複合的なプロジェクトが必要である。教材・教具の充実をめざしたプロジェクトの例でも、単に学校の設備を充実させ、教科書を配布したからといって、教員の授業に対する創意工夫や生徒の勉強に対する熱意が高まり、児童・生徒の成績や進級・進学があがるわけではない。補助金を有効に活用する施策が重要である。教科書も効率的に活用する土壌が備わってこそ、教員の授業計画に活かすことができ、児童・生徒の学力向上に寄与する。このように、国際教育協力の内容としては、学校設備の整備などハードの面の援助と共に、カリキュラム開発、教科書・教材開発、教員の養成と質的向上、教育行政の強化など、ソフト面での協力・援助がますます重要になっている。また、プロジェクトは普段の見直しが重要である。継続した援助が行われた教育・人材養成に対する評価案件を分析した結果では、各種の事後協力の実施理由は次のように5つに分けることができる。1.協力を継続することにより、業務遂行の遅れや不備を補完し、より高い効果を得る2.著しい技術革新に対応するべく、新たに専門家や機材を投入する3.資機材の損耗が激しいが、財源が乏しく自弁できないために、日本側から新たに資機材を供与する4.とりあえずは5年計画で実施し、その後計画変更を行い、更に継続する5.長期的な協力によりカウンターパートの資質改善や体制強化を図るこれらはいずれも中間評価結果をフィードバックすることによって、プロジェクトをより完成したものに導く事の重要性を示唆している。国際教育協力援助の内容としては、学校設備の整備などハードの面の援助と共に、カリキュラム開発、教科書・教材開発、講師の養成と質的向上、教育行政の強化など、ソフト面での協力・援助がますます重要になってきている。本研究は、国際教育協力の評価を通じて、どのような援助の方法が効果的、効率的であるかを、これまでの我が国及び他の援助諸機関の評価結果に基づき明らかにすると共に、被援助国の社会・経済条件に沿った今後の援助のあり方を提言することを目的としている。本年度は以下の研究活動を行った。1.ソフト面の教育援助の代表的な方法であるカスケード方式とクラスター方式で行われた、我が国を始め、世界各援助機関の援助について、多くの基本設計調査報告書、中間報告書、最終評価報告書、など、関連資料を収集し分析した。2.インドネシア、フィリピン、ベトナム、アメリカ合衆国、メキシコにおいて現地調査および関係者との情報交換を行い、表記の研究に関する多くのデータと知見を得た。3.単に事例を積み重ねるだけではなく、一般化が可能な評価手法を合わせて開発する。例えば、記述された文章を複数の評価者で判断し、信頼性を高めた内容分析とメタ・アナリシスの手法を併用することによって、客観的で総合的な評価を可能にする方法論の研究を行った。理数科・情報教育を含めた教育・人材育成政策は長期的な観点に立って計画することが必要である。

その為、この分野の国際協力・援助の場合は、長期的計画に立った上で、それを短期間に区切り、区切りごとに評価を行って必要な計画の見直しをして次の段階へ進むことが、柔軟で且つ効果的な協力となる。これまでの継続した援助が行われた教育・人材養成に対する評価案件を分析した結果では、これら各種の事後協力の実施理由は次のように大きく5つに分けることができる。1.協力を継続することにより、業務遂行の遅れや不備を補完し、より高い効果を得る2.著しい技術革新に対応するべく、新たに専門家や機材を投入する3.資機材の損耗が激しいが、財源が乏しく自弁できないために、日本側から新たに資機材を供与する4.協力当初から長期的な協力期間を前提としているが、とりあえずは5年計画で実施し、その後計画変更を行い、更に継続する5.長期的な協力によりカウンターパートの資質改善や体制強化を図るこれらはいずれも中間レベルの評価結果をフィードバックすることによって、プロジェクトをより完成したものに導く事の重要性を示唆している事を示している。理数科・情報教育を含めた教育・人材育成プロジェクトを効果あるものにするためには、様々な要因への働きかけを考慮しなければならない。教育の質的向上を目的とした典型的なプロジェクトは教員養成・訓練に対する協力である。教員の指導力向上が児童・生徒の学力向上に寄与するであろうことは予期されるとしても、児童・生徒の学力向上にはその他、校長の指導力、教材・教具の利用可能性、親の期待と協力、家庭内学習時間など多くの要因が絡む。他の要因に対する働きかけをせずに、短期研修による教員の指導カ向上だけで幅広い地域の児童・生徒の学力をどれほど向上させることができるかは正直極めて心許ない。率直に言って、現行のほとんどのプロジェクトは児童・生徒の学力向上を保証するのに最適なプロジェクトになっていない。児童・生徒の学力向上を単なる耳当たりの良い飾り言葉ではなく、本気で最終目標とするのであれば、現行のプロジェクトの仕組みを大幅に変更する必要がある。基本的には教員の指導力向上だけではなく、他の重要な要因に対する働きかけも行うような幅の広い複合的なプロジェクトに変更する必要がある。教材・教具の充実をめざしたプロジェクトも同様である。単に学校の設備を充実させ、教科書を配布したからといって、教員の授業に対する創意工夫や生徒の勉強に対する熱意が高まり、児童・生徒の成績や進級・進学があがるわけではない。インドネシアのプロジェクトの分析からも、補助金を有効に活用する施策や教科書をよりよく利用するための施策によって、学校の設備が効率的に充足され、また教科書も効率的に活用する土壌が備わってこそ、教員の授業計画に活かすことができ、児童・生徒の学力向上に寄与するのである。
金属・非金属境界に位置する金混合原子価錯体の電子状態の研究とその超伝導相の探索

金属・非金属境界領域に位置する金混合原子価錯体M_2Au_2X_6(M=Rb,Cs;X=Cl,Br,I)について、高圧下X線回折実験、単結晶偏光反射スペクトル、^<197>Auおよび^<129>Iメスバウアー分光実験を行い、次に示す成果を得た。(1)Rb_2Au_2I_6およびCs_2Au_2I_6の単結晶偏光反射スペクトルの測定により観測された三種類のAu^I-Au^<III>間電荷移動吸収帯を群論を用いて帰属し、またスペクトルの偏光特性の解析よりAu^I-Au^<III>間電荷移動が二次元的であることを明らかにした。(2)高温高圧下X線構造解析により、Cs_2Au_2X_6(X=Cl,Br,I)およびRb_2Au_2X_6(X=Br,I)の詳細なP-T相図を完成させた。Cs_2Au_2X_6では、2種類の正方晶および1種類の立方晶が共通して存在する。金属領域で起こる圧力誘起正方晶(I)-正方晶(II)転移はAu^<II>状態(d^9電子配置)の出現に伴うヤーン・テラー変態に起因するものと考えられる。正方晶(II)では、Cs_2Au_2I_6のAuI_6が伸びた八面体であるのに対し、Cs_2Au_2X_6(X=Cl,Br)のAuX_6は縮んだ八面体である。ヤーン・テラー変態による縮んだ八面体の存在は極めて稀である。また正方晶(II)においては、Cs_2Au_2I_6のHOMOがd_x2_<-y>2であるのに対しCs_2Au_2X_6(X=Cl,Br)のHOMOはd_z2であることから、それぞれ二次元伝導体および一次元伝導体として振舞うものと推定される。(3)単結晶^<197>Auメスバウアー分光における核四極子分裂の解析により、Au^IとAu^<III>の核の周りの電場勾配の符号を明らかにし、Au^I,Au^<III>の化学結合に寄与する混成軌道について詳細な知見を得ることができた。また^<129>Iメスバウアー分光においては、Cs_2Au_2I_6における架橋ハロゲンの電荷及びAu-I間の化学結合について極めて定量的な情報を得ることができ、Cs_2Au_2I_6の-Au^I-X-Au^<III>-鎖の電子状態について詳細な知見が得られた。

Cs_2Au_2X_6(X=Cl,Br,I)は、金属・非金属の境界領域に位置するペロブスカイト型混合原子価錯体であり、高圧下で負Uセンター(バイポーラロン)状態、金属状態、バイポーラロンによる超伝導状態の競合が予想され、重要にして未開択の物性現象が期待できる物質群である。平成5年度の研究成果を下記に記す。(1)Cs_2Au_2I_6の単結晶偏光反射スペクトルの測定を行い、この系のAu^I-Au^<III>間電荷移動遷移を詳細に調べた。その結果、この系は構造的には三次元的であるが、Au^I-Au^<III>間電荷移動相互作用は二次元的であることを明らかにした。また、この系ではAu^I-Au^<III>間電荷移動吸収帯が可視域に複数現れるが、群論に基づく解析により、その帰属を明らかにした。(2)放射光を用いた高温高圧下X線構造解析により、Cs_2Au_2X_6(X=Cl,Br,I)の詳細なP-T相図を完成させた。この系には、立方晶および2種類の正方晶が共通して存在することが明らかになった。高圧下伝導物性との相関より、高圧下で出現する正方晶(II)および立方晶におけるAuの原子価状態は極めて稀なAu^<II>状態と推定される。(3)Auの原子価状態を調べるには超高圧下Auメスバウアー分光が最適であるが、線源の寿命が18時間であることから線源作製のための原子炉が必要不可欠であり、日本では実績が全く無かった。このため今年度、世界で唯一実績のあるマールブルク大学(独)との共同研究を行い、高圧下で出現するCs_2Au_2I_6の正方晶(II)のAu原子価状態はAu^<II>状態であること、Au原子価状態と結晶構造との間に密接な相関があり、5.5GPaで起こる正方晶-正方晶転移がAu^<I,III>→Au^<II>原子価転移に誘起されたものであることを初めて証明することができた。金属・非金属境界領域に位置する金混合原子価錯体M_2Au_2X_6(M=Rb,Cs;X=Cl,Br,I)について、高圧下X線回折実験、単結晶偏光反射スペクトル、^<197>Auおよび^<129>Iメスバウアー分光実験を行い、次に示す成果を得た。(1)Rb_2Au_2I_6およびCs_2Au_2I_6の単結晶偏光反射スペクトルの測定により観測された三種類のAu^1-Au^<III>間電荷移動吸収帯を群論を用いて帰属し、またスペクトルの偏光特性の解析よりAu^1-Au^<III>間電荷移動が二次元的であることを明らかにした。(2)高温高圧下X線構造解析により、Cs_2Au_2X_6(X=Cl,Br,I)およびRb_2Au_2X_6(X=Br,I)の詳細なP-T相図を完成させた。Cs_2Au_2X_6では、2種類の正方晶および1種類の立方晶が共通して存在する。金属領域で起こる圧力誘起正方晶(I)-正方晶(II)転移はAu^<II>状態(d^9電子配置)の出現に伴うヤーン・テラー変態に起因するものと考えられる。正方晶(II)では、Cs_2Au_2I_6のAuI_6が伸びた八面体であるのに対し、Cs_2Au_2X_6(X=Cl,Br)のAuX_6は縮んだ八面体である。ヤーン・テラー変態による縮んだ八面体の存在は極めて稀である。また正方晶(II)においては、Cs_2Au_2I_6のHOMOがd_x2_<-y>2であるのに対しCs_2Au_2X_6(X=Cl,Br)のHOMOはd_z2であることから、それぞれ二次元伝導体および一次元伝導体として振舞うものと推定される。(3)単結晶^<197>Auメスバウアー分光における核四極子分裂の解析により、Au^1とAu^<III>の核の周りの電場勾配の符号を明らかにし、Au^1,Au^<III>の化学結合に寄与する混成軌道について詳細な知見を得ることができた。また^<129>Iメスバウアー分光においては、Cs_2Au_2I_6における架橋ハロゲンの電荷およびAu-I間の化学結合について極めて定量的な情報を得ることができ、Cs_2Au_2I_6の-Au^1-X-Au^<III>-鎖の電子状態について詳細な知見が得られた。
食品タンパク質の経皮感作に影響を及ぼす要因の解明

近年注目を集めている、食物アレルギーの新規な感作経路である「経皮感作」に関して、マウスモデル系を用いて、経皮感作に影響を及ぼす要因を明らかにする。1経皮感作されやすい食品タンパク質の特性の解析2個体の栄養条件が経皮感作能に及ぼす影響の解析、3食品中に共存する食品成分が経皮感作能に及ぼす影響を明らかにする。これらの研究によって、食物アレルギーの一因である食品タンパク質の経皮感作が、どのような要因によって影響を受けるのかという点が、食品側及び個体側の両面から明らかになり、経皮感作の抑制という観点から、ヒトにおける食物アレルギー発症の抑制戦略に対して有益な情報を与えることを目的とする。
文章の理解、記憶、生成に関する認知心理学的研究

本研究では、文章に対する"理解"、"記憶"、"生成"の過程をすべて含むと考えられる「文章の要約生成過程」に注目し、その過程の心理学的な解明とモデル化を試みることを目的とした。具体的には、文章読解時に心内に構築される意味の心的表象はどのようなものであるのか、そしてそれはどのような処理を経て構築されるのか、また、構築された意味の心的表象はその後どのように変化するのか、あるいはまた、要約生成時にはどのように利用され操作されるのか、などの問題を心理学的に解明し、文章の理解、記憶、要約に伴う認知過程全体のモデル化を目指そうとするものであった。この2年度の間に得られた成果は概略以下の通りである。1.文章の意味表象構造のモデル化:阿部が従来から提案してきている"物語文章に対する意味の表現体系"を心理学的により妥当でかつ表現体系としてもより精緻なものになるように修正した。2.文脈処理過程のモデル化:表層的言語表現からどのようにして"意味"の心的表象が構築されていくのか、そのアルゴリズムを明らかにするための考察を行なった。すなわち、読み手が言語表現を手がかりとして、文章全体の意味表象をどのように形成していくのか、その過程をモデル化するための理論的考察を行なった。3.文章の要旨決定過程のモデル化:物語文章中のどのような部分あるいは意味内容が"要点"となるのか、その要旨決定の法則性を上記の1、2の成果を利用しながら整理した。4.要約文章の生成過程のモデル化:原文章に対してある字数制約内で要約を生成することを求められた際の認知過程(要約文章生成過程)を、上記の1、2、3の成果を利用しながら性格づけした。本研究では、文章に対する"理解""記憶""生成"の過程をすべて含むと考えられる「文章の要約生成過程」に注目し、その過程の心理学的解明とモデル化を試みることを目的とした。具体的には、文章読解時に心内に構築される意味の心的表象はどのようなものであるのか、そしてそれはどのような処理を経て構築されるのか、また、構築された意味の心的表象はその後どのように変化するのか、あるいはまた、要約生成時にはどのように利用され操作されるのか、など問題を心理学的に明らかにし、文章の理解、記憶、要約に伴う認知過程全体のモデル化を目指そうとするものであった。その成果および来年度へ向けての現在進行中の研究内容は以下のとおりである。1.文章の意味表象構造のモデル化:阿部が従来から提案してきている"物語文章に対する意味の表現体系"を、心理学的により妥当で、かつ表現体系としてもより精緻なものになるよう、修正を施した。2.文脈処理過程のモデル化:表層的言語表現からどのようにして意味の心的表象が構築されていくのか、そのアルゴリズムを明らかにするための予備的考察を行なった。すなわち、読み手が言語表現を手がかりとして、文章全体の意味の心的表象をどのように形成していくのか、その過程をモデル化するための理論的考察を行なった。3.文章の要約アルゴリズムの定式化:物語文章を要約する際にどのような部分・性格の情報が削除されたり抽象化されたりするのか、その法則性を1.の意味表象のモデルを利用しつつ整理した。4.心理学的検証実験:3.で定式化された法則性の妥当性・一般性に関する検証実験を行ない、その法則性の洗練化をはかった。本研究では、文章に対する“理解"、“記憶"、“生成"の過程をすべて含むと考えられる「文章の要約生成過程」に注目し、その過程の心理学的な解明とモデル化を試みることを目的とした。

具体的には、文章読解時に心内に構築される意味の心的表象はどのようなものであるのか、そしてそれはどのような処理を経て構築されるのか、また、構築された意味の心的表象はその後どのように変化するのか、あるいはまた、要約生成時にはどのように利用され操作されるのか、などの問題を心理学的に解明し、文章の理解、記憶、要約に伴う認知過程全体のモデル化を目指そうとするものであった。本年度は昨年度の成果をふまえ、下記の作業を行った。1.文章の要旨決定過程のモデル化:物語文章中のどのような部分あるいは意味内容が“要点"となるのか、その要旨決定の法則性を、従来の成果である“意味表象構造のモデル"を利用しながら整理した。なお、その作業のための基礎作業として、物語文章に対する“記憶再生"実験や“重要性評定"実験を行った。2.要約文章の生成過程のモデル化:原文章に対してある字数制約内で要約を生成することを求められた際の認知過程(要約文章生成過程)を、従来の成果を利用しつつ性格づけした。具体的には、物語文章の要約を求められた際に、人は、原文章の表現をどのような部分でどの程度、残したり、削除したり、抽象化したりするのか、その一般的法則性の定式化を実験デ-タをもとに試みた。
複合的宇宙リスク管理のための生物影響モニタリングシステムの構築

本研究計画では、宇宙放射線や微小重力など複合的なリスク因子が存在する宇宙空間において、少量の生体サンプルで様々な生物影響バイオマーカーをモニタリングできるマイクロデバイスシステムの開発を行う。これまで以上に簡便なサンプリング、長期的かつ安定的なサンプルの保存、そしてDNA損傷レベルの迅速な解析を可能とするAll-in-one型PDMSチップアッセイデバイスを実装可能なレベルまで完成させることを第一の目的としている。また、宇宙放射線の生物影響として懸念されている循環器疾患リスクを評価する新しいバイオマーカーとしてテロメア損傷に着目している。幅広い宇宙リスクに対する生体影響を評価するシステムを構築することを最終目的として、平成30年度は以下に掲げる研究項目を実施し成果を得た。【血液サンプルからのγ-H2AX検出による線量評価可能なPDMSチップの開発】PDMSチップの微細構造を改良するとともに、チップ滴下前に血液細胞をパラホルムアルデヒドなどの溶液で固定するなどして、血液サンプルからリンパ球の確実な分離・固定を目指した。その結果、安定的かつ高効率で全血からリンパ球分離することが可能となった。またチップ上でのγ-H2AX染色の質向上に成功し、チップ上でγ-H2AXフォーカスの検出が可能となった。なお、本研究計画で開発中のPDMSチップは特許申請に向けて準備中である。【循環器疾患リスクを評価するためのバイオマーカーの検討】宇宙放射線および微量重力など複合的な宇宙リスク因子によって相乗的に加速誘発される循環器疾患のリスクを評価するためのバイオマーカーとして、テロメア損傷検出の有効性の検討を行った。平成30年度は予備的な実験として、ヒトがん細胞HeLa細胞の染色体核板を作成するための指摘条件の検討を行った。平成30年度の研究実施により、微量の末梢血からリンパ球のみを効率よく捕獲固定することのできる微細構造条件を決定することができた。これまでのマイクロ流路デバイスで一般的であった赤血球の分離や血漿成分の分離とは異なり、中間サイズのリンパ球のみを末梢血から効率的に分離し特定の場所に捕獲するというコンセプトのもと開発されたPDMSチップは世界初であり、現在、特許申請準備中である。また、平成30年度はPDMSに滴下する末梢血サンプルについても様々な条件検討を行うとともに、PDMSチップの構造だけでなく、材質の特性等についても検討を行うことで、安定的に効率的にリンパ球を捕獲する条件を見出すことができた。これらの成果は、今後、放射線被ばくの生物影響をγ-H2AXアッセイによって評価するだけでなく、その他のバイオマーカーを用いた生物影響評価にも有益であると考えられる。さらに、平成30年度はヒト末梢血を用いたex vivo放射線照射実験を行い、照射細胞のPDMSチップへの固定およびチップ上でのγ-H2AXに対する免疫染色が成功していることが確認された。特に、γ-H2AXのフォーカス検出にも成功しており、本アッセイにおける最大の強みであるγ-H2AXフォーカス計測によるDNA損傷レベルの定量が可能であることを示す結果である。以上、γ-H2AXアッセイによる放射線線量評価デバイスとしてのPDMSチップ開発が着実に進行していると考え、本研究成果は「宇宙に生きるための複合的なリスク」を評価し、それに適切に対応するための方針を提言するための基礎基盤的知見を確立するために、十分な研究成果を得ていると考える。今後は、放射線被ばく線量評価を含めた総合的な宇宙リスク管理を現場で行うシステム作りにつながると期待されるPDMSチップの実装化が必要となる。より安定的にリンパ球の分離とγ-H2AXアッセイが可能なPDMSチップの製造手法、保管方法などについても検討を行っていく。今回、ヒト末梢血を用いた放射線誘発DNA損傷レベルの検出が開発したPDMSチップで可能であることが示されたが、その線量依存性については確認されていない。そこで、染色の質をさらに向上させることで、γ-H2AXのフォーカス計測を基本としたDNA損傷レベルの定量、線量評価を目指していく。また、PDMSチップでのγ-H2AXアッセイが低線領域(0.1Gy以下)の線量評価に有用であるかはいまだ不明である。そこで、今後はより低線量の放射線照射サンプルや重粒子線照射サンプルを用いたDNA損傷モニタリングについても検討を行う。培養細胞を用いた放射線照射後のテロメア長の変化を検討するための条件検討を行った。これまでの予備的な研究から、放射線照射後(1Gy, 5Gy)のリンパ芽球細胞では、線量依存的なテロメア長短縮が検出されている。今後は、テロメア短縮がより幅広い放射線線量被ばくに対するバイオマーカーとして有効であるかを検討していく。最後に、これらの研究計画を確実に遂行するためには、MEMS分野を含めた様々な分野との横断的な協働体制が必要であること考えることから、研究成果は積極的に学会等で発表するとともに、研究協力者との十分な打ち合わせを行っていく。

【血液サンプルからのγ-H2AX検出による線量評価可能なPDMSチップの開発】PDMSチップの微細構造を改良するとともに、チップ滴下前に血液細胞をパラホルムアルデヒドなどの溶液で固定するなどして、血液サンプルからリンパ球の確実な分離・固定を目指した。その結果、安定的かつ高効率で全血からリンパ球分離することが可能となった。またチップ上でのγ-H2AX染色の質向上に成功し、チップ上でγ-H2AXフォーカスの検出が可能となった。なお、本研究計画で開発中のPDMSチップは特許申請に向けて準備中である。【循環器疾患リスクを評価するためのバイオマーカーの検討】宇宙放射線および微量重力など複合的な宇宙リスク因子によって相乗的に加速誘発される循環器疾患のリスクを評価するためのバイオマーカーとして、テロメア損傷検出の有効性の検討を行った。平成30年度は予備的な実験として、ヒトがん細胞HeLa細胞の染色体核板を作成するための指摘条件の検討を行った。平成30年度の研究実施により、微量の末梢血からリンパ球のみを効率よく捕獲固定することのできる微細構造条件を決定することができた。これまでのマイクロ流路デバイスで一般的であった赤血球の分離や血漿成分の分離とは異なり、中間サイズのリンパ球のみを末梢血から効率的に分離し特定の場所に捕獲するというコンセプトのもと開発されたPDMSチップは世界初であり、現在、特許申請準備中である。また、平成30年度はPDMSに滴下する末梢血サンプルについても様々な条件検討を行うとともに、PDMSチップの構造だけでなく、材質の特性等についても検討を行うことで、安定的に効率的にリンパ球を捕獲する条件を見出すことができた。これらの成果は、今後、放射線被ばくの生物影響をγ-H2AXアッセイによって評価するだけでなく、その他のバイオマーカーを用いた生物影響評価にも有益であると考えられる。さらに、平成30年度はヒト末梢血を用いたex vivo放射線照射実験を行い、照射細胞のPDMSチップへの固定およびチップ上でのγ-H2AXに対する免疫染色が成功していることが確認された。特に、γ-H2AXのフォーカス検出にも成功しており、本アッセイにおける最大の強みであるγ-H2AXフォーカス計測によるDNA損傷レベルの定量が可能であることを示す結果である。以上、γ-H2AXアッセイによる放射線線量評価デバイスとしてのPDMSチップ開発が着実に進行していると考え、本研究成果は「宇宙に生きるための複合的なリスク」を評価し、それに適切に対応するための方針を提言するための基礎基盤的知見を確立するために、十分な研究成果を得ていると考える。今後は、放射線被ばく線量評価を含めた総合的な宇宙リスク管理を現場で行うシステム作りにつながると期待されるPDMSチップの実装化が必要となる。より安定的にリンパ球の分離とγ-H2AXアッセイが可能なPDMSチップの製造手法、保管方法などについても検討を行っていく。