hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
産業化学物質の皮膚毒性とその評価に関する研究

皮膚毒性の評価のために、化学物質の皮膚一次刺激性および皮膚感作性を客観的に評価する方法を確立し、かつ、これに関与する諸要因を明らかにする目的で、この研究を行い、本年度に、下記のような知見を得た。1)試料としてパラフェニレンヂアミンを用い、アジユバンドを使用しない從来のBiihler法と、アジュバンドを使用した我々のBiihlerの変法とを実施して、それぞれ0.5%の初感作、0.1%,0.05%,0.01%,0.005%の誘発刺激における感作率の変効を観察し、モルモットにおいては、アジユバンド(FCA)を用いることによって感作率が高まることを認め得た。同様な傾向は、ヂニトロクロルベンゼンによる実験でもうかがわれ、FCAの投与による増感の有効性は、貼布感作後に高く、とくに反覆貼布の場合は2回目貼布後が最も有効と思われた。2)これまでの動物試験成積に基づく皮膚貼布試験のヒトへの応用として、ダコニールによって誘発される喘息患者に実施し、陽性反応を得たので、農業從事者417名の第一次調査から撰ばれた約100名について皮膚試験、呼吸器能調査を実施し、ダコニールの一次刺激性は確認したが、感作性については明らかに認めることはできなかった。3)皮膚貼布試験における一次刺激反応を客観的に評価するためにレーザードブラー血流計測の応用を試み、モルモットにフィンチャンバーを用いて0.1%乃至10%のラウリル酸ナトリウム(SLS)を貼布し、26時間および48時間後の発株赤を、Draizeの紅班のスコアによる判定と血流計の読み(V)と比較し、紅班の程度をより客観的に記載できることを確めることができた。レーザドブラーは予定より早く今年度試用できたが、産業化学物質の皮膚一次刺激性および皮膚感作性を客観的に評価する上で有効な方法と考えられる。
『チャイルド・ハロルドの巡礼』と読者―協働で変容するテクストとコンテクスト

平成30年度の主な活動は、以下のとおりである。(1)平成29年度までに実施した『チャイルド・ハロルドの巡礼』の編集本の収集後、作品の主題に関する分類をおこなった。(2)(1)の収集資料の分類・分析にあわせて関連する資料の調査(19世紀末期の教育状況や学習教材など)を行った。(3)以上をもとに、段階的な研究報告を複数回行った。(4)投稿論文を執筆し、平成30年9月の「比較文化研究」(日本比較文化学会)に掲載された。特に(2)を進めるうえで、収集本の分類に、編集された年代、地域、対象と想定された読者、注釈挿入の位置などを基準とした。すると、『チャイルド・ハロルドの巡礼』は、1880年から1920年代にかけて多くの編纂がなされていた。また、前年度からの調査であきらかとなった文学叢書の一作品に組み込まれていることもこの年代と符合していることもわかった。これらをもとに(3)の研究報告を行い、今後の研究に有益な助言を受けた。さらに(4)の投稿論文では、特にモリスが編集した『チャイルド・ハロルドの巡礼』を用いて、その特徴や読者層、読者への配慮を考察して、編集者の意図を読み解いた。今後の予定として、18801920年代の教育と文学の取り扱いによって、『チャイルド・ハロルドの巡礼』に対する後発的な意味づけを見いだすことに焦点を当てる。特に後発的な意味づけがどのような経緯を経て与えられたのか、学習者たる読者がどのように作品を受容したかに注目していきたい。本年度は第一に、校務が多忙を極め、予定していた別個の文学叢書の調査までに及ばなかった。これについては、研究期間を延長する申請をおこなっている。第二に、19世紀末期の学習者にとっての既存の知識を調査するには膨大な時間が必要となる。そのため、包括的な知識を意識しながらも、対象範囲をある程度狭めて調査をおこなう予定である。もともと本年度に予定していた、英文学叢書に組み込まれた一作品としての意味付けについても論じるために、そのほかの英文学作品の調査は、次年度に対象を絞って実施する。特に後発的な意味づけがどのような経緯を経て与えられたのか、学習者たる読者がどのように作品を受容したかに注目する。現時点では、2019年9月に台湾にて研究報告を予定している。本研究の目的は、19世紀イギリスロマン派詩人ジョージ・ゴードン・バイロン作『チャイルド・ハロルドの巡礼』の受容史を、各時代の編集本を調査することによって、明らかにすることである。今日にいたるまで、『チャイルド・ハロルドの巡礼』は何度も編集を受けながら、さまざまな形式をもって公開されてきたが、後世の編者や翻訳家は、過去の版や翻訳を振り返りながら、自身の解釈を示すものの、過去から変容をつづけるテクストのコンテクストに意味づけを与えることはなかった。そのため、各テクストを通時的に配置し、時代ごとに応じた意味づけをすることができれば、非常に特色のある研究になると思われる。また本研究を達成することで、これまでの研究上の欠落部分である作品受容史を補完することができる。平成28年度は、(1)各年代に刊行された編集本(国内・国外を含む)の収集、(2)(1)で閲覧したデータ整理および分析(3)研究内容の段階的な発表、以上を実施した。(1)では、大英図書館や国内の図書館から閲覧可能な各時代の編集本を閲覧し、データベースを作成した。その結果、19世紀後半から20世紀前半にかけて、多くの編集者によってそれぞれに編集がなされていることがわかった。(2)では、編集本を年代順や出版地域などに注目して整理したうえで、本文の配列の違いを比較した。(3)では、日本比較文化学会九州支部大会や英米文化学会例会において、19世紀当時に刊行された本作品と19世紀末期に編集を受けて刊行された編集本を比較し、その違いが持つ意味について発表をおこなった。本研究における主眼である各時代の編集本の閲覧および資料整理は着々と進行している。平成28年度末におこなった研究報告では、一部の資料が閲覧できていなかったことが、悔やまれるが、その資料を平成29年度初頭に閲覧する準備はすでに整っている。また、資料分析によって編集者の編集目的・意図の違いも明らかになった部分もある。平成29年度の主な活動は、以下のとおりである。(1)平成28年度で実施した「チャイルド・ハロルドの巡礼」の編集本の収集を引き続き行った。(2)(1)の収集資料の分析にあわせて関連する資料の調査を行った。(4)投稿論文を執筆し、平成30年2月の「比較文化」(日本比較文化学会)に掲載された。特に(2)を進めるうえで、収集本の分類に「英文学叢書」の1冊か単独の作品編集本として刊行されたかを加えた。すると、「チャイルド・ハロルドの巡礼」は、19世紀後半以降に編纂された「英文学叢書」の多くに組み込まれていた。一方で、ほかのイギリス・ロマン派詩人たちの作品は、英文学叢書に組み込まれることが、本作品と比較すると少なかったことがわかった。

英文学叢書とは、ある意味では、英文学史上で、主要とされる読むべきとされる作品の集合体である。すなわち、「チャイルド・ハロルドの巡礼」は19世紀末から20世紀初頭にかけて、英文学を学習するうえで、重要な作品のひとつであったことが、編集本から読み解くことができた。また、関連して編集本に挿入されているほかの作品についても、調査を行った。そのなかで、英文学の潮流を紐解くうえで、主要と考えられる作家や作品が浮かび上がった。これらをもとに(3)の研究報告を行い、今後の研究に有益な助言を受けた。さらに(4)の投稿論文では、特にロルフが編集した「チャイルド・ハロルドの巡礼」を用いて、その特徴や読者層、読者への配慮を考察して、編集の意図を読み解いた。本研究における主眼である各時代の編集本の閲覧および資料整理は、昨年度に引き続き、着々と進行している。平成29年度には、平成28年度に不足していた資料の補填もできた。調査の中で、『チャイルド・ハロルドの巡礼』と帝国主義的な教育方針に関連性を見出したことで、研究の方向性も新たに見つかった。そこで、平成29年度は複数回の研究発表をおこない、1本の論文を執筆し、投稿する機会の得られた。平成30年度の主な活動は、以下のとおりである。(1)平成29年度までに実施した『チャイルド・ハロルドの巡礼』の編集本の収集後、作品の主題に関する分類をおこなった。(2)(1)の収集資料の分類・分析にあわせて関連する資料の調査(19世紀末期の教育状況や学習教材など)を行った。(3)以上をもとに、段階的な研究報告を複数回行った。(4)投稿論文を執筆し、平成30年9月の「比較文化研究」(日本比較文化学会)に掲載された。特に(2)を進めるうえで、収集本の分類に、編集された年代、地域、対象と想定された読者、注釈挿入の位置などを基準とした。すると、『チャイルド・ハロルドの巡礼』は、1880年から1920年代にかけて多くの編纂がなされていた。また、前年度からの調査であきらかとなった文学叢書の一作品に組み込まれていることもこの年代と符合していることもわかった。さらに(4)の投稿論文では、特にモリスが編集した『チャイルド・ハロルドの巡礼』を用いて、その特徴や読者層、読者への配慮を考察して、編集者の意図を読み解いた。今後の予定として、18801920年代の教育と文学の取り扱いによって、『チャイルド・ハロルドの巡礼』に対する後発的な意味づけを見いだすことに焦点を当てる。特に後発的な意味づけがどのような経緯を経て与えられたのか、学習者たる読者がどのように作品を受容したかに注目していきたい。本年度は第一に、校務が多忙を極め、予定していた別個の文学叢書の調査までに及ばなかった。これについては、研究期間を延長する申請をおこなっている。第二に、19世紀末期の学習者にとっての既存の知識を調査するには膨大な時間が必要となる。そのため、包括的な知識を意識しながらも、対象範囲をある程度狭めて調査をおこなう予定である。現在までの進捗状況で言及したとおり、資料収集は順調に進行している。また、資料分析も徐々におこなわれているので、これらを継続しながら、研究成果を研究報告や研究雑誌掲載にむけた論文執筆をおこなう予定である。具体的には、平成29年度は、日本比較文化学会全国大会への登壇が予定されている。
2核ルテニウムヒドリド錯体を前駆体に用いた異種遷移金属を含むクラスター錯体の合成

本年度は異種遷移金属を含む配位不飽和な三核錯体の合成研究に先立って、ルテニウムの三核トリヒドリド錯体の反応性について詳細に検討し、以下に列挙する成果を得た。(1)三核トリヒドリド錯体(Cp′RuH)_3とプロトン酸(HX)の反応で三核のモノカチオン錯体(Cp′RuH_2)_3Xが生成することを明らかにし、X線回折法を用いてその分子構造を解明した。(2)三核トリヒドリド錯体(Cp′RuH)_3とアルキンの反応は形状選択的に進行し、μ_3-η^2-(⊥)-アルキン錯体が生成することを明らかにした。非対称アルキンの置換基の配向は一義的に決まり、より大きな置換基が選択的に3つのルテニウムで形成されるコアの真ん中に位置する。(3)三核トリヒドリド錯体(Cp′RuH)_3と環状ジエンとの反応においては顕著なサイズ選択的基質取り込みが観察された。シクロオクタジエン、シクロヘプタジエンとは室温下およびTHF還流条件下でも全く反応せず錯体が回収されるのに対し、環サイズの小さなシクロヘキサジエン、シクロペンタジエンとは室温下で速やかに反応する。1,3-および1,4-シクロヘキサジエンとの反応ではμ_3-η^2:η^2:η^2-ベンゼン錯体が定量的な収率で得られた。一方、シクロペンタジエンとの反応ではC-C結合の切断が起こり新規な三核のメタラサイクル錯体が生成した。これまで遷移金属錯体によるシクロペンタジエンのC-C結合切断の報告は全くなく、本研究において初めて顕著な多核効果が観察されたものと考えられる。
次世代シークエンサーを用いた家族性心房細動の原因遺伝子検索

家族性心房細動症例に対し、書面にて説明し同意を得た上で、遺伝子解析目的の末梢血採取を行った。これまでに収集したサンプルは11家系、内訳は家族性7例、若年性4例であった。これらの家系に対しPCR、DNAシークエンスにて塩基配列を解析した。候補遺伝子アプローチにより、KCNQ1, KCNH2, SCN5A, KCNE1, KCNE2, KCNJ2, CACNA1C遺伝子の解析を行なったが、これまでに家族性心房細動において報告のある遺伝子において変異は同定されなかった。そこで次世代シークエンサーを用いて、原因遺伝子の検索を行なった。対象疾患は他に原因遺伝子の同定が比較的容易と考えられる他の心臓イオンチャネル病(ブルガダ症候群、QT延長症候群)も含めた。各症例より抽出したゲノムDNAを超音波破砕により断片化し、液相ハイブリダイゼーションにて標的エクソン配列を濃縮した。標的エクソンは循環器疾患に関連する原因遺伝子を網羅するものとした。得られた混合試料をIllumina社シークエンサーにより、標的エクソン配列の解析を行った。今後報告済みのSNPを除去したのち、家族内の罹患患者と非罹患患者の標的エクソン解析結果を比較検討することにより、原因遺伝子の候補を絞り込む予定である。また、新規原因遺伝子の同定が期待された場合は、疾患特異的iPS細胞による機能解析を行う予定である。我々の研究目的は従来の候補遺伝子アプローチにより原因遺伝子が同定されない若年性・家族性心房細動症例に対し、最近利用可能となった次世代シークエンサーを用いて新規の変異遺伝子を同定しその機能解析を行うことである。「研究の目的」心房細動は日常診療で最もよく遭遇する不整脈である。この心房細動の患者群の中には明らかな基礎心疾患を有さず発症する孤立性心房細動が存在し、それらの一部に若年発症、家族発症をきたす例が少なからず存在する。このような家族性心房細動において近年心臓のイオンチャネルに変異を有する例がいくつか報告されている。「研究実施計画」1.1)研究デザイン:心房細動の大家系例においては連鎖解析により原因遺伝子の遺伝子座を特定する。孤発例や小家系例においては候補遺伝子アプローチにより、心房細動の発生に関与することが期待されるいくつかの遺伝子の変異スクリーングを行う。変異が同定された時点で、哺乳類動物細胞を用いたチャネル蛋白発現系にて心臓イオンチャネルの機能解析を行う。

1.2)サンプル収集:当大学付属病院を訪れる大多数の心房細動患者のうち、若年発症(40歳未満)、および家族内集積を示す症例に対し、書面にて説明をし同意を得る。同意が得られた患者より末梢血20mlを採取し、リンパ球よりゲノムDNAを抽出する。1.3)候補遺伝子アプローチによるDNAシークエンシング:これまでに報告のある主な家族性心房細動に関与する候補遺伝子のエクソンコード領域を特異的に増幅するプライマーを設計しPCR、DNAシークエンスにて塩基配列を解析する。平成23年度の研究実績は上記の部分まで完了した。「研究実施計画」に記載した下記の部分の達成が未完了であるため。1.4)次世代シークエンサーによるDNAシークエンシング:候補遺伝子アプローチで変異の同定されなかった家系に対し、次世代シークエンサーにて塩基配列を決定する。1.5) Mutagenesis:イオンチャネルの遺伝子変異をsite-directed mutagenes法にて作成し、哺乳類動物細胞に変異チャネル蛋白を発現させる目的でpcDNA3.1 (Invitrogen社)にサブクローニングする。1.6)哺乳類動物細胞への遺伝子発現:発現にはHEK293、COS-7、tsa201細胞などから適切な細胞を選択し、35 mm細胞培養用ディッシュにて飼育する。細胞をリポフェクション法にて遺伝子導入を行う。遺伝子導入から24-72時間以内に機能解析を行う。遺伝子導入の成功の有無の判断は、GFP発現ベクターの共導入にて行う。また、標的チャネルに応じてαサブユニット以外にもβサブユニットも発現させる。細胞培養液は10%FBS添加DMEM液にペニシリン100 U/ml、ストレプトマイシン100g/mlを加えたものを用いる。H24年度中に、次世代シークエンサーによる解析を行う。共同研究者との情報交換により積極的にデータを蓄積する。主に次世代シークエンサーによるDNAシークエンシングおよびそのデータ解析、また変異同定後のmutagenesis、哺乳類動物細胞への遺伝子発現による機能解析に用いる。また、同手法による変異解析手段が確立していないため、国内、海外での研究協力者との情報交換目的を兼ねた学会参加費用として使用する。また、H23年度の未使用額の発生は、効率的な消耗品調達を行なった結果であり、H24年度の消耗品の購入に充てる予定である。
毒素原性大腸菌の耐熱性下痢毒素の受容体活性化

毒素原性大腸菌が産生する耐熱性下痢毒素(ST)は腸管膜グアニル酸シクラーゼを活性化しサイクリックGMP濃度を上昇させて下痢を起こす。本研究では下痢のメディエーターであるサイクリックGMPの生成に関与する膜結合型グアニル酸シクラーゼにいかして活性化のシグナルが伝わるかを分子生物学的手法で解明することを目的とした。すでにST受容体であるグアニル酸シクラーゼのc末端側にある63残基のアミノ酸を遺伝子操作して欠如させた受容体ではSTがこの受容体に結合しても活性化のシグナルは伝達されない。そこで5種類の変異受容体を作製して毒素結合に対応してグアニル酸シクラーゼ活性が活性化されるかいないかを検討した。その結果プロテインキナーゼCでリン酸化を受けることが推定された配列を変異させたものでは影響の無いこと、39残基のアミノ酸をc末端から削った受容体では毒素による活性化が起きないこと、さらに22残基のアミノ酸を削ったものでは著明な活性化が認められたことなどからc末端の23残基から40残基にいたるアミノ酸部位に何らかの機能が存在する可能性が考えられている。
劣性遺伝疾患原因遺伝子検索システムの構築

ナンセンス変異の存在を前提として、DNAマイクロアレイによる網羅的遺伝子発現解析を利用した劣性遺伝疾患原因遺伝子探索の新しい方法論を構築すると共に、原因遺伝子が既知の患者由来細胞を用いて構築したシステムの有効性を検証することが本研究の目的である。劣性遺伝疾患ではナンセンス変異が一定の頻度で観察されるが、このタイプの変異をもつ遺伝子のmRNAはナンセンス変異異存mRNA分解機構(Nonsense-mediated mRNA decay、NMDと略される、別名RNA-サーベイランスとも呼ばれる)により正常なmRNAとは分別されて選択的に分解される。そのために、変異遺伝子の発現はmRNAレベルでほぼ消失しており、変異配列から予想されるトランケート型のタンパク質も生成せず、いわゆる"null"の状態にある。そこで、DNAマイクロアレイを利用した網羅的遺伝子発現解析系を利用して発現の消失した遺伝子を同定できれば、遺伝疾患や発がん等の原因遺伝子を速やかに決定できる。ただし、実際のDNAマイクロアレイの測定結果は多数の遺伝子発現を定量化できる一方で、測定自体のノイズおよび個体、実験間のばらつきが大きく単一発現欠損遺伝子の同定は困難である。このため、複数の手法を組み合わせて共通にNMDの標的となりうる遺伝子の候補を選別し、ノイズを軽減することによって再現性をもたせて実際的な候補数まで絞り込む必要がある。そのために、ナンセンス変異による遺伝子発現欠損と併せて、親子関係やNMDの阻害、NMD関連因子のノックダウンにより絞りこむことを試みた。その有用性を検討するために変異既知の患者由来細胞を利用して試験してみると、変異による欠損と阻害剤で発現が上昇する遺伝子の組み合わせが有効であることが明らかとなった。原因遺伝子未知の疾患への応用に向けて症例の収集も併せて行った。
塩橋の成立条件のファージディスプレイを利用した統計的解析

従来、ファージライブラリーのスクリーニングはイオン強度約0.2の緩衝液を用いて行われていたが、我々は塩橋を強調するためにイオン強度約0.01の緩衝液を用いた。牛膵臓RNase Aに結合するペプチドを7残基の直鎖状ランダムペプチドを提示するライブラリーから5ラウンドのbiopanningによってスクリーニングした。その結果、従来の緩衝液では得ることができなかった、RNase Aに親和性を持つファージクローンが得られた。ファージの提示するアミノ酸配列はLDNLWMV、SPWDARL、SADKWHT、EISMHYR、STASYTR、ISFDYLI、DSHTPQR、GRPAWDAなどで、このうちLDNLWMV、SPWDARLを合成し、蛍光偏光解消法でRNase Aに対する親和定数を求めたところそれぞれ3×10^3及び5×10^3M^<-1>であった。また、少なくともLDNLWMVはRNase A(13.7k,pl=9.6)と同程度の分子量の塩基性蛋白質であるegg white lysozyme(14.3k,pl=11)には結合せず、非特異的な塩橋による結合ではないことが確認できた。得られたアミノ酸配列には、何れも荷電アミノ酸が含まれており、その両端には疎水性アミノ酸が存在する傾向が見られた。今後、得られたペプチドの特異性、イオン強度依存性を解析すると共に、更に条件を変えてスクリーニングし、統計的解析を行う。
植物細菌病をモデルに植物の罹病化・発病の分子機構を解明する。

病原性、非病原性のPseudomonas属細菌を接種したレタ、ナス、タバコでは、病徴の発現時、防御応答時の何れにもアポトーシス様PCDが誘遺される。過敏感細胸死(HR)と病徴発現時の細胞死に共通して関与するMAP kinaseに関しては遺伝子の部分配列を向定一し、細胞死に関わるタバゴのNtf6と高い相同性を示すことが明らかとなった(LsNtf6)。LsNtf6の発現は過敏感細胞死の誘導時にも発現するととから、植物の感染応答PCDに普遍的に関わる遺伝子で有ると推察された。さらに、Nicotiana benthamianaのNtf6遺伝子をノックダウンした植物ではHRのみならず、野火病の病徴発現も抑制されることが判った。また、病原性菌であるP.cichorii接種時に特異的に発現するレタス由来め遺伝子のPLATZ型Zn-finer転写因子を見出し、感受性の誘導に関わる転写制御に役割を持つことを示した。また、Ralstonia solanacearum感染時に誘導される遺伝子として、低分子熱ショックタンパク質を見出し、本遺伝子ノックダウン個体では、タバコ立枯病の発病が顕著に促進することを見いだした。機能未知ながら遺伝子のノックダウン実験から、タバコ野火病やタバコ立枯病の発病が顕著に遅延する遺伝子を見いだした。即ち、これらの細菌病の発病過程には宿主の遺伝子発現が関与していることを示している。現在、発病時に特異的に発現する遺伝子のプロモーターの単離を進めており、プロモーター活性を指標にした抵抗性/発病過程に関わる植物細胞内情報伝達系の解析を進めている。病原性、非病原性のPseudomonas属細菌を接種したレタス、ナス、タバコでは、病徴の発現時、防御応答時の何れにもアポトーシス様PCDが誘導される。過敏感細胞死と病徴発現時の細胞死に共通して関与するMAP kinase,カスパーゼIIIおよびV様プロテアーゼやDNase、さらに、発病時に特異的に作用するセリンプロテアーゼやDNaseを見出している。このうち、MAP kinaseに関しては遺伝子の部分配列を同定し、細胞死に関わるタバコのNtf6と高い相同性を示すことが明らかとなった。また、発病時に特異的に発現する遺伝子をレタスより2種、タバコより1種単離することに成功した。レタス由来の遺伝子の1つはZn-finer型転写因子と相同性を示し、病原細菌の感染による宿主遺伝子発現の制御が考えられた。また、発病時に特異的に発現する、タバコ遺伝子は既知の遺伝子との相同性は低く、コードしているタンパク質の機能について詳細は不明である。しかしながら、ウイルスベクターを用いたノックダウン実験から、本遺伝子ノックダウン個体では、タバコ野火病やタバコ立枯病の発病が顕著に遅延することを見いだした。即ち、これらの細菌病の発病過程には宿主の遺伝子発現が関与していることを見いだした。現在、発病時に特異的に発現する遺伝子のプロモーターの単離を進めており、プロモーター活性を指標にした発病過程に関わる植物細胞内情報伝達系の解析を進めている病原性、非病原性のPseudomonas属細菌を接種したレタ、ナス、タバコでは、病徴の発現時、防御応答時の何れにもアポトーシス様PCDが誘遺される。
バイオイメージングを目的とした新規一酸化窒素検出法の開発と生態系への応用

本研究は、生体中から生理活性物質をバイオイメージングとして促える機能性蛍光プローブの開発を目的として行われたもので、具体的には1998年度のノーベル医学生理学賞の受賞対象となった一酸化窒素(NO)の蛍光プローブの開発を目指したものである。開発に際しては、NOの反応性に着目して、これを促えるプローブを種々分子設計し、それらを合成および評価した。その結果、プローブ分子内にジアミノ基を有するDAF化合物が上記の目的に適うことが明らかになった。DAFはNOと水溶液(中性)中、室温で容易に反応し、蛍光を有するトリアゾール環を生成する。実用的感度を有していることから、更にDAFを改良し、最終的に、感度、特異性、光に対する安定性、pH依存性等いずれの点においても、実用上満足できるDAF-FMDAの創製に成功した。これを用いて、実際に培養細胞あるいは生体組織中から生成するNOをバイオイメージングすることを試みた結果、内皮培養細胞からNMDA刺激に対応して生成するNOをバイオイメージングすることができた。また大脳切片を用いて、虚血状態でのNO産生をCA1領域など部位特異的に促えることに成功した。この蛍光プローブの開発に成功したことは非常に意義あることであり、この分野の多くの研究者から共同研究の申し込みが相次いでいる。今後、この生細胞プローブは21世紀の科学といわれる脳研究において強力な武器となるであろう。仮に,生体の組織あるいは培養細胞から酵素,受容体,セカンドメッセンジャーなどの機能性物質の作用発現を時々刻々の変化に対応して視覚的に捉えることができれば,生理機能解析の観点から非常に有意義であることは疑いない.本研究は,生体物質をバイオイメージングとして捉える機能性蛍光プローブの開発を目的として行われたもので,具体的には1998年度のノーベル賞(医学生理学)の授賞対象となった生理活性種である一酸化窒素(NO)の蛍光プローブの開発に成功したものである.開発に際しては,NOの反応性に着目してこれを捉えるプローブを種々分子設計し,それらを一合成および評価した.今回開発に成功したプローブはジアミノフルオレセイン骨格を有するDAF化合物群であるが,DAF化合物の中でも更に感度の向上とpHと光に対する安定性を増したプローブの創製を目指し,その結果新規のNO蛍光プローブであるDAF-7M2を創出したものである.DAF-7M2は従来のプローブに比べ,感度で1.5倍,pH4.0の酸性領域まで蛍光強度が変化しない等の優れた特性を有している.NOは循環器系,免疫系,神経系など多様な領域において情報伝達物質として機能していることが報告されつつある.特に神経系においては記憶や学習などの高次の生理作用を担っているが示唆されその機能が注目されている.このNOを生体組織からリアルタイムで捉えることができる蛍光プローブの開発に成功した事は非常に意義あることであり,特に21世紀の科学といわれる脳研究において強力な武器となるであろう.本研究は、生体中から生理活性物質をバイオイメージングとして促える機能性蛍光プローブの開発を目的として行われたもので、具体的には1998年度のノーベル医学生理学賞の受賞対象となった一酸化窒素(NO)の蛍光プローブの開発を目指したものである。その結果、昨年度までにプローブ分子内にジアミノ基を有するDAF化合物を創製した。DAFはNOと水溶液(中性)中、室温で容易に反応し、蛍光を有するトリアゾール環を生成した。実用的感度を有していることから今年度はこのDAFを改良し、実際に培養細胞あるいは生体組織中から生成するNOをバイオイメージングすることを試みた。改良の主な点はPHに対する安定性および光に対する安定性を向上させることである。検討の結果、これら二点に対し実用上、十分に満足できる改良型DAFの創製に成功した。これを用いて、内皮培養細胞からNMDA刺激に対応して生成するNOをバイオイメージングすることができた。

また大脳切片を用いて、虚血状態でのNO産生をCA1領域など部位特異的に促えることに成功した。この蛍光プローブの開発に成功したことは非常に意義あることであり、特に21世紀の科学といわれる脳研究において強力な武器となるであろう。
村張り定置網の機能分析と漁村振興のための適用モデル構築に関する研究

日本の村張り定置網の機能を途上国の漁村振興に役立てるための適用モデル構築を目指して日本国内での実態調査として津波被害を受けた三陸地方並びに富山県氷見市の定置網について視察並びに情報収集を行い,特に地域振興に向けた漁業協同組合と市役所の役割や機能,そして協業化による復興可能性について調査した。途上国での調査としては2003年にタイ国ラヨンに技術移転された日本式定置網についての調査を実施し,漁期を通じた漁獲傾向の変化,漁獲物販売流通経路と魚価設定の方式を明らかにしてきた。これらの成果をもとに,氷見市,そしてタイ国とインドネシアの定置網技術移転の事例を比較して地域振興の駆動力となる因子を解析した。日本の定置網漁業は400年の歴史を持ち,地域の雇用や経済を支える村張り定置網として発展してきた経緯があり,現在では漁業権で規定された沿岸域での商業的漁業として世界的にも特異な存在となっている。この村張り定置網の機能を途上国の漁村振興に役立てるために,適用モデル構築を目指す研究となっている。日本国内での実態調査として,東日本大震災で被害を受けた宮城県の定置網について視察を行い,特に復興の過程で3ケ統共同操業を行っている東松島の定置網の事例について聞き取りを行った。また,村張り定置網の機能について富山県定置網の事例について情報収集を行った。国外調査としては, 2003年にタイ国ラヨンに技術移転された日本式定置網についての調査を継続し,漁獲販売記録をもとに漁期を通じた漁獲傾向の変化,そして燃油消費量からみた収支バランスについて日本の定置網についての既往の傾向と比較を行った。このなかで,漁獲物の販売や流通経路と魚価設定の方式を調査してきた。また,風向風速計,流向流速計,水深計を漁場に設置し,環境条件と漁獲変動に関する解析を進めてきた。また,周辺沿岸漁業漁業者からの聞き取り調査と操業野帳・GPSロガーの資料,そしてインターバルビデオレコーダーによって小型漁船の漁場利用形態を明らかにして,定置網漁具との漁場競合の問題について解析した。定置網の環境インパクトの問題については,漁獲物組成の急激な変動の兆しとして漁獲物平均栄養段階の数値が指標として使えるかどうかを検討するため,主要漁獲物の筋肉片と消化管内容物の安定同位体解析を行い,主要魚種の栄養段階の推定に向けて解析を進めてきた。これらをもとに,最終年度において,定置網技術導入が沿岸域の資源,そして小規模漁業者にどのように影響するかを検証するものとする。東南アジアを始めとする発展途上国へ日本式定置網の技術移転を行う上で,日本の村張り定置網が漁村振興のためにどのような機能を果たしていたかを改めて検証する。そのために,日本各地の代表的な定置網を選んで歴史的背景と操業実態についての調査を行い,特に三陸地方の津波被害復興に際して村張り定置網がどのように漁村振興に機能するかを調査してきた。具体的には,石川県,富山県,そして宮城県の定置網について実地調査並びに資料を収集し,村張り定置網としての実態や,三陸地方での協同操業による早期復興・操業開始について確認を進めてきた。同時に東南アジアで現在進行している技術移転の現場での操業実態や問題点・可能性について調査を行い,特にタイ国ラヨンに日本から技術移転して10年が経過したことから,改めて操業方式と収支バランスを検討し,個々の漁業者が定置網と沿岸小規模漁具を兼業する場合の所得状況について,これまでの資料をもとにシミュレーションを行った。また,タイ国の定置網の水揚げ資料をもとに漁獲物の平均栄養段階の数値をもって資源と環境へのインパクト指標となるものかを検証するため,主要漁獲物の定期サンプリングを実施し,消化管内容物と安定同位体分析による栄養段階推定のための試料を収集し,次年度の解析に向けて準備を進めてきた。これらの情報をもとに,操業形態や漁具構造による環境インパクトの比較や長期データからの急激な変動の兆しが現れる可能性を探り,定置網技術導入が沿岸域の資源にどのように影響するかを検証するとともに,日本の村張り定置網のシステムを途上国の漁村振興に適用するためのモデル構築のための検討を実施した。日本の定置網漁業は400年の歴史を持ち,地域の雇用や経済を支える村張り定置網として発展してきた経緯があり,現在は漁業権で規定された沿岸域での商業的漁業として世界的にも特異な経営実態となっている。この村張り定置網の機能を途上国の漁村振興に役立てるための適用モデル構築を目指す研究を実施した。日本国内での実態調査として富山県氷見市の大型,小型定置網について視察並びに情報収集を行い,特に地域振興に向けた漁業協同組合と市役所行政の役割や機能について検討してきた。

途上国での調査としては,2003年にタイ国ラヨンに技術移転された日本式定置網についての調査を継続し,漁獲販売記録をもとに漁期を通じた漁獲傾向の変化,そして漁獲物販売や流通経路と魚価設定の方式を明らかにしてきた。また風向風速計,流向流速計,網深さ計を漁場に設置し,環境条件と漁獲変動に関する解析を継続してきた。この過程で周辺漁場の小型沿岸漁業の操業形態を環境条件との関係から検討し,定置網漁業を行うことの有利性や収入変化をもとに,漁場競合の問題や漁業者の意識調査を実施した。これらの成果をもとに,定置網操業の機能に視点をおいて環境と資源と人の関連性について,氷見市,そしてタイ国とインドネシアの定置網技術移転の事例を比較して地域振興の駆動力となる因子を解析してきた。定置網漁業の環境インパクトの問題については,主要漁獲物の筋肉片と消化管内容物の安定同位体分析をもとに魚種別に栄養段階の推定を試み,12年間の漁獲物組成の傾向をもとに漁獲物平均栄養段階を指標とした漁獲傾向の安定性を確認した。この結果を周辺沿岸域での漁場別,漁業種別の指標と比較し,定置網による漁獲がバランスのとれた沿岸域からの資源利用につながることを確認した。海洋生物資源学国内・国外調査ともに順調に推移してきており,特にタイ国での調査については風況,流況等の漁場環境要因と操業条件・漁獲傾向との関係を検討するための準備が整えられた。また,定置網漁獲物の安定同位体解析については総合地球環境学研究所のプロジェクトと連携して行っており,定置網の環境インパクトを考えるために十分な解析結果を蓄積することができた。なお,研究成果については,ICES-FAO漁業技術・魚群行動部会や日本学術振興会主催の国際学会で6件,日本水産学会等の国内学会で8件の口頭発表・ポスター発表を行うとともに,日本水産学会の2件のミニシンポジゥムで講演を行ってきた。国内各地の大型,小型定置網について村張り機能を調査し,途上国へ技術移転する際のモデル構築に向けて研究を進めてきた。このなかで,これまでのタイ国,そしてインドネシアへの技術移転の経緯と問題点を第6回世界水産学会議で講演発表するとともに,国内でも日本水産学会においてタイ国定置網漁業者と他の沿岸漁業者との所得比較を専業と兼業で比較するシミュレーション結果を報告した。また,三陸津波復興に関連して漁業懇話会で定置網の協同操業の在り方について話題提供を行った。タイ国の定置網に関連した資料入手は総合地球環境学研究所のプロジェクトと連携して行っており,次年度以後の研究展開のために十分な試料を蓄積することができた。最終年度として,国内外での現地調査と資料入手を継続するとともに,村張り定置網の機能分析を行い,漁村振興モデルの構築に進める。特に,タイ国定置網について,流況による漁具形状の変化と漁獲への影響,そして周辺沿岸漁業の定置網周辺での操業状況把握をもとに,途上国沿岸域での漁場利用の在り方を考え,漁村振興モデルとして定置網技術の導入がどのように機能するかを考察する。このなかで,定置網漁獲物の集荷流通販路の調査も継続し,日本の魚市場制度との比較検証を行う。また,定置網主要漁獲物の安定同位体解析の結果をもとに,漁獲物平均栄養段階の長期的な推移を明らかにして,周辺での小規模漁業,そして沖合漁業との関係を含めて,定置網の環境インパクトを考察する。
関節リウマチにおける自己抗体産生誘導Ｔ細胞の解析

本研究は関節リウマチに関連した自己抗体産生における、抗体産生誘導T細胞やこれらが産生するIL-21の機能を検討した。IL-21受容体欠損マウスを用いた研究から、IL-21は抗体産生誘導T細胞自体の分化には必要ないが、それによる自己抗体産生の誘導には必須であり、そのためこれらのマウスは関節炎誘導に抵抗性であることが判明した。ヒト患者検体の解析では、末梢血中の抗体産生誘導T細胞と疾患活動性や自己抗体価に明らかな相関は認めなかったが、関節内には典型的な抗体産生誘導T細胞とは異なる表現型のIL-21産生細胞を多く認め、局所での抗体産生や異所性リンパ濾胞形成への関与が考えられた。昨年度中に観察された、IL-21受容体欠損マウスにおけるコラーゲン誘導性関節炎の疾患抵抗性の機序について解析を行なった。IL-21欠損マウスでは抗II型コラーゲン(CII)特異的IgG抗体産生が著明に低下していたが、CII特異的CD4T細胞のIL-17やIFN-γなどの炎症性サイトカイン産生能は維持されていたことから、関節炎抵抗性の主因は自己抗体産生の障害と考えられた。上記の知見と一致してIgG産生濾胞B細胞の数も著減していたが、これらを誘導する濾胞ヘルパーT細胞の数は低下していないことが分かり、B細胞自体のIL-21シグナルの重要性が示唆された。これを証明する為にIL-21受容体欠損B細胞の移入実験などを施行している。ヒト関節リウマチ患者検体の解析からは、IL-21産生細胞は末梢血中にはほとんど認めないが、関節内には比較的豊富に存在していることが確認された。しかし、興味深いことにこれらの細胞は、いわゆる濾胞ヘルパーT細胞とは異なる表現型を示していることが分かってきたため、どのような機能を持ち、なぜ関節内に多く存在するのかなど、さらに詳細な検討を行なう。本年度は、まず動物実験においては、IL-21受容体欠損マウスと野生型マウスにII型コラーゲンを免疫することで関節炎を誘導し、発症率、重症度を比較した。その結果、IL-21受容体欠損マウスは関節炎誘導に高い抵抗性を示すことが明らかになった。繁殖交配をつづけ、マウス数を増やして実験し、再現性を確認した。関節炎経過中に血清を採取し、抗II型コラーゲン抗体価を測定した所、IL-21受容体欠損マウスでもIgMクラスの抗体は野生型マウスと同レベルで産生されていたが、IgG抗体価が著明に低下していることが判明し、これが関節炎抵抗性の原因の一つと考えられた。現在、IL-21受容体欠損マウスで抗体産生が低下するメカニズムについて、詳細に解析をおこなっているところである。ヒト検体を用いた解析については、本年度はまず九州大学臨床研究倫理審査委員会によって、本研究遂行に関する研究計画の審査を受け、その実施の許可を得た。その後、主に末梢血を用いたフローサイトメーター解析を開始した。現在までに解析を行なったのは、まだ少数サンプルに限られるが、濾胞ヘルパーT細胞の頻度はかなり少ないこともあり、解析にやや苦労している。この細胞についての研究は盛んで、日々新たな知見が報告されてきているので、これらを参考に、各種実験プロトコールには適宜変更を加えてゆく予定である。最終年度において行った研究のうち、マウスコラーゲン関節炎モデルの解析では、野生型およびIL-21受容体欠損マウスからB細胞とT細胞を分取し、これらを種々の組み合わせで、T,B細胞同時欠損マウスに移入することで、どのリンパ球サブセットのIL-21シグナルが関節炎発症およびその際の抗体産生誘導に最重要なのかを検討した。その結果、B細胞のIL-21シグナルが障害されたときのみに自己抗体産生、および関節炎発症の抑制が観察された。すなわち、ここまでのIL-21受容体欠損マウスを用いたマウス関節炎モデルの解析から、主に濾胞ヘルパーT細胞が産生するIL-21は、炎症性エフェクターT細胞の誘導ではなく、B細胞の自己抗体産生誘導を介して、関節炎発症に重要な役割を果たしていることが明らかになった。よってIL-21は関節炎のみならず、自己抗体がその病態、発症に重要な役割を果たす種々の炎症性疾患について、有力な治療標的となることが示唆された。ヒト検体の解析においては、最終年度では主に滑液、滑膜より採取したリンパ球の解析を、サンプル数を増やして行った。その結果やはり関節中には細胞内染色フローサイトメータ法にてIL-21陽性CD4T細胞が末梢血に比べて高頻度に存在することが確認された。表面分子の発現パターン等の表現系が末梢血中の濾胞ヘルパー

T細胞様細胞とは異なることも確認できたが、IL-21陽性細胞に特異的に発現する分子を同定するまでには至ることが出来なかった。このようなIL-21産生細胞が、関節内に多数存在することが明らかになったことから、それらの局所自己抗体産生への関与が推測された。なお、滑膜組織での自己抗体産生を解析する過程で、滑膜組織片の中期培養法の確立に成功した。今後はこれを利用して、自己抗体産生のみならず、滑膜炎病態の解析もすすめたいと考えている。臨床免疫学研究遂行の妨げになるような大きなトラブルはなかったが、遺伝子欠損マウスの交配状況、臨床検体の入手状況などにより若干の遅れが生じている。動物実験研究については、順調に研究成果が得られているが、臨床検体を用いた研究については、解析にやや難渋している。ただし、各種プロトコール改良により十分に回復可能な範囲と考えている。基本的に当初計画に沿って研究を遂行する。しかし、本申請課題に密接に関連する論文発表が相次いでいることから、それを考慮した計画への修正は随時必要となると思われる。当初の研究計画に沿って研究を遂行する。特に大きな変更はない。該当なし
特定の細胞内キナーゼ活性を定量的に制御する光技術の開発

独自に開発している光可逆的蛋白質ラベル化技術と二官能性酵素阻害剤を融合させて、光照射を利用して特定の細胞内リン酸化酵素活性を可逆的かつ定量的に制御するシステムを開発する。標的酵素としてはがんなどの疾患に関与する酵素を選択し、それらの酵素活性レベルと細胞応答を顕微鏡イメージング技術によって可視化解析を行う。これにより、キナーゼ活性レベルが細胞内シグナル伝達を始めとする動的分子ネットワークに及ぼす役割を調べる。
プリオン感染培養細胞系によるプリオン複製の分子機構解明

これまでプリオン複製の実験モデルが動物個体以外に存在せず、感染実体の生化学的解析が困難であった。プリオン感染培養細胞モデルもこれまで感染複製効率の低さが致命的な欠陥であったが、最近我々は培養神経細胞に遺伝子導入によりPrPを過発現することにより高効率でプリオン感染とその複製が起こることを示した。このプリオン感染培養細胞系は感染因子の生化学的解析を可能ならしめる初の試験管内プリオン複製モデルといえる。今回は、マウスモデルを用いてその存在が明らかにされてきたプリオン株の特性を本培養細胞モデルで検討することにより、プリオン複製モデルとしての妥当性をさらに確立することを目的とした。マウス脳で継代された生物学的個性(発症までの潜伏期、症状、病理変化)の異なる3プリオン株(Fukuoka-1,22L, Chandler)を2種の培養細胞株(1C11,GT1-7)に感染・増殖させ、培養細胞中でも株の個性が維持されるか否かを、ddyマウス脳に感染細胞抽出液を接種することにより検討した。その結果、潜伏期、症状、病理変化の全ての指標で株の個性は培養細胞中でも維持され、株の個性は宿主因子ではなく病原体に規定されることが明らかとなった。一方、電気泳動上の移動度や糖鎖付加パターンを指標とした蓄積PrPScの立体構造は宿主因子に大きく影響されることが示唆された。われわれの培養細胞感染モデルは株の特性を維持することから、モデルとしての有用性がさらに明確となった。
現代民主主義社会の市民を育成する歴史カリキュラムの開発研究

本研究において明らかにしたのは次の四点である。第一は、年代史、通史というこれまでの歴史教育や歴史カリキュラムの原理を越えたことである。常識や通念としての歴史カリキュラムは、歴史を古代から現代への時間的経過、また、出来事や事件を中心に構成することを前提にしていた。本研究では、このような常識や通念自体を疑い、それを越えた歴史教育や歴史カリキュラムの原理を見つけた。第二は、新しい歴史教育の基盤として、歴史のディスコース論を提示したことである。本研究では、歴史が存在としてあるのではなく、構成されたディスコースとして見ることによって、歴史教育の教室実態と合致させることができる。これまでの歴史教育では、歴史そのものの存在を教えるという不可能なことを行おうとしていた。これを批判・反省し、歴史はわれわれが構成したディスコースであるという教室実態に即した考えに転換した。第三は、現代民主主義社会における社会原理である社会形成を社会科教育とともに、歴史教育の基本原理にしていることである。社会科教育と歴史教育を同一の原理の下に置き、社会科という-教科の中に位置づけることができることを明らかにした。第四は、歴史教育によって民主主義社会の形成を担う市民を育成する方法原理を示したことである。民主主義社会を形成する原理である批判を社会科、そして歴史教育の方法原理にすることによって、社会形成力を育成する社会科、歴史教育を構築することができるようになる。従来の歴史教育は、無批判的か批判的がのちがいがあるにしても、単に社会(やその歴史)を受容してきた。本研究では、社会(やその歴史)を批判し新たに構築・形成することが、社会科(歴史)教室の役割であることを明確に示した。現代民主主義社会の市民を育成するという目的をもった歴史カリキュラムを開発するために、本年度はアメリカ、イギリス、ドイツの歴史教育や社会科教育のカリキュラムと教科書を収集した。また、我が国で先進的に行われている歴史教育実践を収集・収録した。外国の社会科カリキュラムの一部は分析を行い、現代民主主義社会の形成の原理であるとともに、市民形成の原理でもある「議論による批判」という育成原理を明確に析出し、それを社会科教育学会で発表し、また、論文にまとめた。この「議論による批判」という原理からみて、現在我が国の中等学校で行われている歴史授業を見ると、この原理とはほど遠いものであることが、理解される。しかし、今年度収集・収録した授業の中には、この原理を一部取り入れているものもあり、授業記録としてまとめるとともに、分析を行った。その結果は、公表していないが、来年度も収集・収録する授業とともに、類型化して、新しい歴史教育の可能性を開示したい。現代民主主義社会の市民を育成するという目的をもった歴史カリキュラムを開発するために、本年度は次の4つを中心に、研究した。第一は、1998(平成10)年から1999(平成11)年にかけて発表された学習指導要領の内容を分析し、その構造と問題点を解明したことである。小学校、中学校、高等学校の学習指導要領の構造、歴史教育に関わる内容を分析し、その編成構造を検討した。第二は、昨年度に引き続き、アメリカ、イギリス、ドイツの歴史教育や社会科教育に関連するカリキュラムと教科書を収集し、分析を行ったことである。イギリスの多文化教育論にもとづいた歴史カリキュラム、ドイツの中等用総合社会科教科書を検討し、これらのシリーズや教科書が、現代民主主義社会の形成をカリキュラム編成原理としていることを明らかにした。第三は、昨年度に引き続き、我が国で先進的に行われている歴史教育実践を収集・収録するとともに、分析し、授業構造、カリキュラム原理を抽出した。外国研究から得た現代民主主義社会形成という原理からみると、現在我が国の中等学校で行われている歴史授業は、この原理とはほど遠いものであり、新たにカリキュラムや単元を作成する必要があることを認識した。

第四は、現代民主主義社会形成を原理とした歴史単元を開発したことである。この原理にもとづいた歴史授業を社会問題史学習として位置づけ、「男女平等」の問題に焦点をあてた歴史単元を開発し、論文として発表した。現代民主主義社会の市民を育成するという目的をもった歴史カリキュラムを開発するために、最終年の本年度は次の4つを中心に、研究した。第一は、昨年度に引き続き、アメリカ、イギリス、ドイツの歴史教育や社会科教育に関連するカリキュラムと教科書を収集し、分析を行ったことである。イギリスの多文化教育論にもとづいた歴史カリキュラム、ドイツの中等用総合社会科教科書を検討し、これらのシリーズや教科書が、現代民主主義社会の形成をカリキュラム編成原理としていることを明らかにした。第二は、昨年度に引き続き、我が国で先進的に行われている歴史教育実践を収集・収録するとともに、分析し、授業構造、カリキュラム原理を抽出した。外国研究から得た現代民主主義社会形成という原理からみると、現在我が国の中等学校で行われている歴史授業は、この原理とはほど遠いものであり、新たにカリキュラムや単元を作成する必要があることを認識した。第三は、現代民主主義社会形成を原理とした歴史・地理単元を開発したことである。この原理にもとづいた歴史・地理授業を社会問題(史)学習として位置づけ、ジェンダーの問題に焦点をあてた日本史単元、革命問題に焦点をあてた世界史単元、環境問題に焦点をあてた地理単元を開発した。第四は、歴史カリキュラムを民主主義社会の形成から類型化し、カリキュラム編成の組織化について考察し、現在のわが国における歴史カリキュラムや歴史授業をこの類型化に位置づけ、その評価を試みた。
各種記憶障害事例における病巣と障害像との関係に関する実験心理学的研究

1.視床前部梗塞10例(左病変6例、右1例、両側病変3例、全例右利き)を検討した研究では、急性期に医術障害、慢性期に自発性低下が認められたが、前例に記憶障害があり、いずれも前向性健忘を主体とし、左病変では言語性、右病変では視覚性の記憶障害が優位であった。2.左視床前内側部・傍正中部限局病変を10例を検討した研究では、コルサコフ症候群1例以外では逆向性健忘・作話は認められず、純粋健忘症候群2例では、言語性前向健忘が選択的に認められた。6例には、言語性以外に視覚性前向性健忘もみられたが、自発性、知能性、言語成績も低下しており、前頭葉の機能低下を随伴していることが示唆された。前内側部損傷例と傍正中部損傷例とで記憶障害の内容に質的差異はなかったが、これは、乳頭体視床路と内髄板とが同様に損傷されていたためと考えられた。障害陽性例では前頭葉を中心とする皮膚の血流低下が認められ、陰性例1例ではそれが認められなかったことから、視床-前頭葉間の神経路の損傷による前頭葉の血流低下が記憶障害と関連していることが示唆された。3.脳弓に限局した両側性の損傷を持つ患者では、エピソード記憶に関する前向健忘症が言語性、視覚性のいずれにも認められたが、逆向性健忘は認められず、意味記憶、手続き記憶も正常であった。4.脳梁膨大後域にほぼ同様の棒変を持つ左損傷例と右損傷例を比較した研究では、左病変によって記憶障害が生じ、右病変では道順障害が起こることが明らかにされたが、これは僅かな病巣部位の違いによると考えられた。5.ウイルス性脳炎の1例では、前向性健忘を伴わない純粋逆向性健忘が確認され、「記憶の形成」と「記憶の想起」とが異なる脳内機構であることが示唆された。脳弓前部両側性損傷例と左海馬損傷例とは、共に逆行性健忘のない純粋な前行性健忘であることが種々の検査で確認された。記憶障害の質の点では両者の間に特に際だった差異はないが、脳弓損傷例の方が一過性でより顕著な回復を示した。前脳基底部損傷3例は、Damasioらの有名な症例Boswellとは異なって病巣が海馬には及んでおらず、むしろ前頭葉の内側面を含み、逆行性健忘を主とする臨床像を呈していたが、前頭葉機能障害も顕著であった。右膨大後部皮質損傷例は、地誌的記憶の特異的な障害を示したが、これとほぼ対称的な部位に損傷を持つ左膨大後部皮質損傷例は、言語性を主とした一般的な記憶障害を示していた。この左右差が、半球機能側性化によるものなのか、あるいは細胞構築学的にも複雑な膨大後部皮質の微妙な病巣部位の違いによるものなのかは、目下検討中である。視床前部梗塞例では、検討した10例(左病変6例、右病変1例、両側病変3例)全例に、前行性健忘を主とした記憶障害が認められた。いずれも言語性記憶、視覚性記憶がともに障害されていたが、左病変では言語性、右病変では視覚性の障害が優位であった。逆行性健忘は、左病変2例と右病変2例に認められ、作話は左病変1例と両側病変3例に観察された。

画像診断の結果は、どの症例も視床前部梗塞病変に加えて主として同側の前頭葉から側頭葉にかけての病変が認められ、急性期の意識障害、慢性期の自発性低下など、それに対応する機能障害が捉えられている。前脳基底部損傷例は、Damasioの有名な症例Boswellとは異なって、病巣が海馬に及んでおらず、むしろ前頭葉の内側面を含み、逆行性健忘を主とする臨床像を呈していたが、前頭葉機能障害も顕著であった。前脳基底部損傷例で、記憶障害を呈する症例と呈さない症例とで、作話の内容の違いを検討したが、明確な差異を確認するまでには至らなかった。膨大後部皮質損傷では、右損症例が地誌的記憶の特異的な障害を示すのに対して、左損症例は言語性を主とした一般的な記憶障害を示すことが、平成5年度までに明らかにされたが、この点がさらに新しい症例によって確認された。視覚記憶に障害を持つ連合型相貌失認患者に,既知顔貌と未知顔貌とを刺激対として,「どちらか好きな方」を選ぶ課題と「既知感を感じる方」を選ぶ課題とを課したところ、既知顔貌を選ぶ確率が前者ではチャンスレベルより有意に高いのに対して、後者ではチャンスレベルにとどまっていることが明かとなり、嗜好判断に限って潜在的認知が見られることが示された。また顔と名前の対連合学習では、正しい対の方が誤った対より正答率た有意に高く、ここでも潜在的認知が示された。1.視床前部梗塞10例(左病変6例、右1例、両側病変3例、全例右利き)を検討した研究では、急性期に意識障害、慢性期に自発性低下が認められたが、全例に記憶障害があり、いずれも前向性健忘を主体とし、左病変では言語性、右病変では視覚性の記憶障害が優位であった。2.左視床前内側部・傍正中部限局病変を10例を検討した研究では、コルサコフ症候群1例以外では逆向性健忘・作話は認められず、純粋健忘症候群2例では、言語性前向性健忘が選択的に認められた。6例には、言語性以外に視覚性前向性健忘もみられたが、自発性、知能、言語成績も低下しており、前頭葉の機能低下を随伴していることが示唆された。前内側部損傷例と傍正中部損傷例とで記憶障害の内容に質的差異はなかったが、これは、乳頭体視床路と内髄板とが同様に損傷されていたためと考えられた。記憶障害陽性例では前頭葉を中心とする皮質の血流低下が認められ、陰性例1例ではそれが認められなかったことから、視床-前頭葉間の神経路の損傷による前頭葉の血流低下が記憶障害と関連していることが示唆された。3、脳弓に限局した両側性の損傷を持つ患者では、エピソード記憶に関する前向健忘が言語性、視覚性のいずれにも認められたが、逆向性健忘は認められず、意味記憶、手続き記憶も正常であった。4.脳梁膨大後域にほぼ同様の病変を持つ左損傷例と右損傷例を比較した研究では、左病変によって記憶障害が生じ、右病変では道順障害が起こることが明らかにされたが、これは僅かな病巣部位の違いによると考えられた。5.ウイルス性脳炎の1例では、前向性健忘を伴わない純粋逆向性健忘が確認され、「記憶の形成」と「記憶の想起」とが異なる脳内機構であることが示唆された。