hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
脳血管攣縮の成因および治療に関する研究

当該研究は脳動脈瘤破裂によるくも膜下出血(SAH)後の脳血管攣縮に対し、アラキドン酸(A.A.)リポキシゲナ-ゼ系代謝産物ロイコトリエン(LT)の関与、更にA.A.代謝・脂質代謝の関与を検討し、従来から指摘されている脳血管攣縮惹起物質との間での位置づけ・役割をみたものである。そこで先づ実験的SAH犬の髄腔内へのLTC_4,D_4の注入にて、頭蓋内主要動脈の拡張・収縮・弛緩という3相性変化を認めた。次にLTB_4注入で髄膜への著明な好中球浸潤をみた。更にこれられ髄液中変化をHPLCにて分析すると、LTC_4,D_4が比較的短時間で代謝されたがLTB_4はかなり安定で、一部に20ーCOOH LTB_4と思われるpeakをみた。このうち、脳血管攣縮の成因という観点から、頭蓋内主要動脈の3相性変化を最重要視した。即ちLTの血管平滑筋に対する作用に着目し、培養血管平滑筋を用いて細胞内Ca^<2+>濃度の変化を検討した。その結果、オキシヘモグロビン≧エンドセリン>プロスタグランジンF_2α>LTC_4,D_4の順で細胞内Ca^2濃度の上昇作用を認めた。これは、従来、LTC_4,D_4がslow reactive substance for Aと言われ、同じ平滑筋収縮物質ではあるものの、刺激と同時に出現する急速な細胞内Ca^<2+>の上昇そして収縮を引き起こすオキシヘモグロビン等とはかなり異なる収縮メカニズムが考えられ、興味あるところと思われた。又、更にSAH髄液がこの細胞内Ca^<2+>の上昇を引き起こすかについて検討すると、新たにCa^<2+>のreーelevationという現象を把えた。一方、脂質代謝の一つとしてヒトSAH時の髄液中変化を検討し、リゾリン脂質の上昇を認め、同様にイノシト-ルリン脂質特異的ホスホリパ-ゼC(PLC)活性の上昇も確認した。更にこれが細胞膜上でジグリセリドの放出を促し細胞内ホスホキナ-ゼC活性を上昇させ、脳血管攣縮のtriggerに一役を担っている可能性を示唆した。今後、このSAH時の血管平滑筋細胞での刺激・応答について詳細な検討が必要と思われる。当該研究は脳動脈瘤破裂によるくも膜下出血(SAH)後の脳血管攣縮に対し、アラキドン酸(A.A.)リポキシゲナ-ゼ系代謝産物ロイコトリエン(LT)の関与を検討し、更にA.A.代謝或いは脂質代謝の関与を検討するものである。そこで本年度は、先づ実験的SAH犬の髄腔内へのLT注入による検討を行った。その結果、生理学的変化として、LTC_4、D_4の髄腔内注入にてくも膜下腔に面した頭蓋内主要動脈は、容量依存的に拡張、収縮、弛緩の3相性変化を呈した。一方、LTB_4注入では、それらの変化はなかった。

しかし光顕レベルに於ける組織学的検討では、LTB_4で髄膜への著明な好中球浸潤をみたのに対し、LTC_4、D_4では何れの変化もみられなかった。又、髄液中LT及びその代謝物を分析すると、LTC_4、D_4が比較的短時間で代謝されたが、LTB_4はかなり安定で一部に於いて20-COOHLTB_4と思われるpeakを得た。尚、LTの推骨動脈内注射ではその支配領域の血管収縮と同時に、呼吸停止、痙攣発作が見られた。以上の中で、LTC_4、D_4髄腔内注入による頭蓋内主要動脈の拡張、収縮、弛緩という3相性変化は、脳血管痙攣の成因という観点から極めて重要と推測された。そこで、LTの血管平滑筋に対する作用に注目し、培養血管平滑筋を用いて細胞内Ca^<2+>濃度の変化を検討した。その結果、LTC_4、D_4による細胞内Ca^<2+>濃度の急激な上昇を認めたが、これはより強力なOxy Hbによるsustained high Ca^<2+>levelとは異なっており、今後更に詳細な検討を加えることとした。一方、SAH時の髄腔内或いは脳内A.A.代謝を検討する為、先づ、髄液中脂質代謝、特にリン脂質代謝を検討した。その結果、重症SAH患者では、リン脂質、特にリゾリン脂質の髄液中濃度の上昇が伺われた。今後、このリゾリン脂質の血管系への作用や、SAH時のA.A.代謝(Phospholipase活性を含む)での位置付けも検討課題と推測された。当該研究は脳動脈瘤破裂によるくも膜下出血(SAH)後の脳血管攣縮に対し、アラキドン酸(A.A.)リポキシゲナ-ゼ系代謝産物ロイコトリエン(LT)の関与を検討し、更にA.A.代謝或いは脂質代謝の関与を検討するものである。そこで昨年は、実験的SAH犬の髄腔内へのLTC_4,D_4の注入にてくも膜下腔に面した頭蓋内主要動脈の拡張、収縮、弛緩のという3相性変化を認めた。一方、LTB_4注入では、組織学的検討で髄膜への著明な好中球浸潤をみた。又、これらの髄液中変化をHPLCにて分析すると、LTC_4,D_4が比較的短時間で代謝されたが、LTB_4はかなり安定で一部に於いて20ーCOOH LTB_4と思われるpeakを得た。このうち、頭蓋内主要動脈の3相性変化は、脳血管攣縮の成因という観点から極めて重要と推測された。そこで本年は、LTの血管平滑筋に対する作用に着目し、培養血管平滑筋を用いて細胞内Ca_2農度の変化を検討した。その結果、オキシヘモグロビン≧エンドセリン>セロトニン>ノルアドレナリン>プロスタグランジンF_2α>LTC_4,D_4の順で細胞内Ca^2濃度の上昇作用を認めた。これは従来からLTC_4,D_4がslow reactive substance for Aと言われ、同じ平滑筋収縮物質ではあるものの刺激と同時に出現する急速な細胞内Ca^2の上昇、そして収縮を起こすオキシヘモグロビン等とかなり異なる収縮メカニズムが考えられ、興味あるところである。例えばその一つにGTP結合蛋白質の関与が考えられ、虚血脳での検討では、GTP結合蛋白質が虚血直後より活性化状態に至り細胞内Ca^2の動員を促している可能性があり、今後、SAH時のCa^2,GTP結合蛋白質、平滑筋収縮物質の関連をLT代謝と共に検討する予定である。一方A.A.代謝の一つとして昨年はヒトSAH時の髄液中リゾリン脂質の上昇を認めたが、本年はこの髄液中でイノシト-ルリン脂質特異的ホスホリパ-ゼC(PLC)活性が上昇していることを確認した。今後更にこれらの詳細な検討も予定している。当該研究は脳動脈瘤破裂によるくも膜下出血(SAH)後の脳血管攣縮に対し、アラキドン酸(A.A.)リポキシゲナ-ゼ系代謝産物ロイコトリエン(LT)の関与、更にA.A.代謝或いは脂質代謝の関与を検討し、従来から指摘されている脳血管攣縮惹起物質との相互関係の中での位置づけ・役割を検討するものである。
生殖細胞における染色体テロメアの機能構造の解析

生殖細胞のような不死化細胞において、このような通常のDNA合成機構のみでは染色体DNA末端が短小化することに拮抗する機構として、現在多くの支持を集めているのがテトラヒメナにおいて初めて同定されたテロメレースである。テロメレースはテロメアDNAを構成する単純繰り返し配列をその末端に新規に合成付加する作用を持ち、内在するRNAを鋳型とする一種の逆転写酵素と考えられている。しかし、現在、生殖細胞特異的にテロメレースが発現している分子機構はもちろんのこと、生殖細胞系列がmitosisとmeiosisを繰り返して維持されているどの段階の細胞において活性があるのかすら不明なままであるのが現状である。そこで、本研究においては、ヒトテロメレースの検出系の開発と酵素の精製を試み、以下の様な結果を得た。ヒトテロメレースは、きわめて微量にしか存在しないために、その生化学的な研究のためには高感度かつ定量性に富むテロメレースの検出系の開発が不可欠であった。我々は、テロメレースの産物であるテロメア繰り返し配列をPCRを用いて高感度に検出することで、高感度かつ定量性よくテロメレース活性を測定する系(Stretch PCR assay)の開発に成功した。この系を用いて、これまで純化精製の報告のないヒトテロメレースの精製を試み、テロメレースの蛋白質成分と思われる数種類の蛋白質を同定した。現在、この蛋白質の構造解析を行っている。今後、この蛋白質をコードしている遺伝子をクローニングすることにより、テロメレースが生殖細胞では、活性が強く、体細胞では低い分子機構の解明を進めたい。
インド-西部太平洋におけるクロサギ科魚類の分類学的再検討

初年度は、最も標本入手の難しいインドの2つの種群であるThe G.Subfasciatus complexとThe G limbatus complexの標本の確保に全力を注いだ。現在解析中である。また平行してデータ取りのほぼ終わった他の種群の3種を含むThe Gerres oyena complexをreviewsし、最近受理された。また、タイ国からの1種の新種を含む3種のThe G.setifer complexも今年2月にIchthyol.Res.に出版された。更にThe G.setifer complexに含まれるマレー半島からG.phayaの新種をCopeiaに投稿した。The G. erythrourus complexはG.erythrourusを有効と認める論文を1998年に公表した。The G.filamentosusでは、タイ湾からG.infasciatusの新種を1998年に公表した。The G.longirostris complextとThe G.oblongus complexは現在解析および執筆中である。データ取りと論文作成に重点をおき、結論が得られたグループから積極的に公表していく。
ポートフォリオ評価法を用いた総合的な学習の時間と教科学習の関係の研究

本研究の目的は,ポートフォリオ評価法を用いて総合的な学習の時間と教科学習(主に外国語科)の関係を明らかにすることであった。本年度は次の研究を実施した。1.外国語科や総合的な学習の時間に関する情報の収集を行い,授業実践を行った。書籍や文献等から総合的な学習の時間における成果と課題を分析し,それらを踏まえながら,生徒の興味・関心や実態に応じて,信州大学教育学部附属松本中学校で,一年間担任として授業実践を積み重ねてきた。2.総合的な学習の時間における紙ベースのポートフォリオ作成を指導し,分析を行った。生徒の興味・関心をとらえながら活動内容を決めだし,主体的な追究を支援してきた。活動計画と方法,実施内容,反省と次の活動の実施という「一連の追究」を一年間通して行ってくることで,生徒の思考力・判断力・表現力が高まってきていることが分かった。3.外国語科における紙ベースのポートフォリオ作成を指導し,分析を行った。毎時間の学習の振り返りカードをファイルにとじ,学期の終わりに総合自己評価をすることで,生徒が自己分析できるようにした。ポートフォリオ評価法を用いることで,総合的な学習の時間で継続して取り組んだ「一連の追究」で身につけた思考力・判断力・表現力の高まりが教科でも発揮され,自己分析が深まっているということをとらえることができた。4.今後の教育課程のあり方について検討を行った。総合的な学習の時間が教科学習に与える影響については,ポートフォリオ評価法により相関関係を見ることができた。総合的な学習の時間で養われた思考力・判断力・表現力は,教科でも養われていく必要があると考える。教科学習においても,生徒の意欲的で主体的な追究ができるようにしていくことで,思考力・判断力・表現力を高められると考える。
ヒト冠動脈平滑筋のアセチルコリン受容体機能特性に関する研究

動脈硬化進展度別にヒト冠動脈のアセチルコリン(ACh)適用時の収縮・弛緩反応を観察することによりACh受容体機能の変化を検討した.〔方法〕15例の剖検人屍より左右冠動脈起始部を採取し,幅2.5mmの柵状標本を作製し, AChおよびニトログリセリン(NTG)を累積適用し,等尺性張力変化を記録した.動脈硬化の進展度は内腹と中腹の面積化(I/M)をもって表わした.内皮の形態変化は走査定電顕にて観察した.〔結果〕(i)AChの用量一反応関係:I/M比0.71.5の軽度動脈硬化例の場合,内皮非剥離下では10^<-6>M以下の濃度で弛緩反応を呈したが10^<-5>M以上では収縮に転じた.内皮剥離下では10^<-8>Mより収縮反応が認められた. I/M比1.5以上での高度動脈硬化例では剥離,非剥離にかかわらず弛緩反応は認められなかった. (ii)プロスタグラシェンF_<2α>(3×10^<-6>M)の適用によりI/M比の程度の如何にかかわらなく周期的収縮が観察された. (iii)周期的収縮に及ぼすAChの影響を検討した結果,内皮非剥離例では弛緩相は10^<-7>Mで84%まで弛緩し,収縮相は8%弛緩した.内皮剥離例では3×10^<-6>M以上の濃度で弛緩相はむしろ上昇し,振幅は極めて小となった. (iv)周期的収縮に対するNTGの影響を検討した結果, I/M比の程度の如何にかわらず,内皮剥離,非剥離下ともに周期的収縮を消失せしめることなく,主として弛緩相を抑制した.〔考察〕動脈硬化の程度の如何にかかわらず周期的収縮が誘発され,直接平滑筋に作用するNTGの適用に際しても動脈硬化進展度および内皮の存否によってその反応は左右されなかった.さらにAChは高度動脈硬化例においては弛緩反応を生ぜしめなかったことより,動脈硬化という病態時には,比較的選択的に内皮細胞のムスカリニックレセプターの機能に障害が生じているが内皮細胞の内皮由来血管弛緩因子(FDRF)産生能と平滑筋のEDRF応答応は残存していると考えられる.動脈硬化進展度別にヒト冠動脈のアセチルコリン(ACh)適用時の収縮・弛緩反応を観察することによりACh受容体機能の変化を検討した.〔方法〕15例の剖検人屍より左右冠動脈起始部を採取し,幅2.5mmの柵状標本を作製し, AChおよびニトログリセリン(NTG)を累積適用し,等尺性張力変化を記録した.動脈硬化の進展度は内腹と中腹の面積化(I/M)をもって表わした.内皮の形態変化は走査定電顕にて観察した.〔結果〕(i)AChの用量一反応関係:I/M比0.71.5の軽度動脈硬化例の場合,内皮非剥離下では10^<-6>M以下の濃度で弛緩反応を呈したが10^<-5>M以上では収縮に転じた.内皮剥離下では10^<-8>Mより収縮反応が認められた. I/M比1.5以上での高度動脈硬化例では剥離,非剥離にかかわらず弛緩反応は認められなかった. (ii)プロスタグラシェンF_<2α>(3×10^<-6>M)の適用によりI/M比の程度の如何にかかわらなく周期的収縮が観察された. (iii)周期的収縮に及ぼすAChの影響を検討した結果,内皮非剥離例では弛緩相は10^<-7>Mで84%まで弛緩し,収縮相は8%弛緩した.内皮剥離例では3×10^<-6>M以上の濃度で弛緩相はむしろ上昇し,振幅は極めて小となった. (iv)周期的収縮に対するNTGの影響を検討した結果, I/M比の程度の如何にかわらず,内皮剥離,非剥離下ともに周期的収縮を消失せしめることなく,主として弛緩相を抑制した.〔考察〕動脈硬化の程度の如何にかかわらず周期的収縮が誘発され,直接平滑筋に作用するNTGの適用に際しても動脈硬化進展度および内皮の存否によってその反応は左右されなかった.さらにAChは高度動脈硬化例においては弛緩反応を生ぜしめなかったことより,動脈硬化という病態時には,比較的選択的に内皮細胞のムスカリニックレセプターの機能に障害が生じているが内皮細胞の内皮由来血管弛緩因子(FDRF)産生能と平滑筋のEDRF応答応は残存していると考えられる.
がん遺伝子を持たないレトロウイルスの腫瘍原性に関する研究

がんを引き起こすレトロウイルスの中には、ウイルス遺伝子中に、がん遺伝子を持つウイルスと持たないウイルスがある。がん遺伝子を持たないウイルスが、腫瘍を誘導するメカニズムのひとつとして、ウイルス遺伝子が宿主ゲノムのがん原遺伝子の近傍に組み込まれることにより、がん原遺伝子の発現に影響を与える、いわゆる挿入変異が知られている。当研究室で分離されたフレンドマウス白血病ウイルスA8は、がん遺伝子を持たないウイルスであるが、このウイルスを新生仔ラットに接種すると、78週間後に100%のラットに胸腺腫瘍が起こる。本研究は、A8ウイルスによって誘導される胸腺腫瘍に、ウイルス遺伝子の挿入変異によるがん原遺伝子の活性化が関与するか否かを明らかにすることを目的とするものである。A8ウイルスと腫瘍原性の弱い57ウイルスの組換えウイルスを用いた実験から、A8ウイルスの腫瘍原性に関わるウイルス遺伝子の配列は、LTRのエンハンサー内のFVa,LVb/C4,CORE部位を含む38bpの繰り返し配列であることが、明らかになった。胸腺腫瘍におけるウイルス遺伝子の組み込み位置をサザンブロットにより調べた結果、宿主ゲノム上の特定の位置に組み込まれたウイルス遺伝子が検出された。一方、腫瘍を誘導しないウイルスが感染したラットの胸腺では、ウイルス遺伝子は検出されたが、その組み込み位置はランダムであった。これら結果から、A8ウイルス感染による胸腺の腫瘍化とウイルス遺伝子の宿主ゲノム上の特定の位置への組み込みとの関連性が示唆された。また、胸腺腫瘍におけるc-myc遺伝子の相対発現量をリアルタイムPCRにより測定した。その結果、正常胸腺と比較して、胸腺腫瘍ではc-myc遺伝子の発現量の増加が認められた。以上の結果より、A8ウイルス感染による胸腺腫瘍には、がん原遺伝子c-mycの活性化が関与する可能性が示唆された。マウス白血病ウイルスA8感染によって誘導されたラットの胸腺腫瘍において、ウイルス遺伝子が宿主染色体の特定の位置に挿入されているのか、ランダムな位置に挿入されているかをサザンブロッティングによって解析した。その結果、ほとんどの胸腺腫瘍において、特定の組み込み位置が存在することが示された。この結果は、A8ウイルスによって誘導される胸腺腫瘍は、ウイルス遺伝子の宿主染色体への挿入によるがん原遺伝子の活性化や修飾によるものである可能性を示唆していると考えられる。これまでの研究で、A8ウイルスの腫瘍原性を決めるウイルス遺伝子は、LTR内のエンハンサー領域であることが、明らかになっている。A8ウイルスのLTRのエンハンサー領域の構造は、FVa-FVa-FVa-FVb2/NF1-FVcであるが、エンハンサー変異株を作成して、腫瘍原性に関連した遺伝子配列を検索した結果、FVaを含む38bpのくり返し配列が腫瘍原性を増強することが明かとなった。さらに、この腫瘍原性増強のメカニズムは、宿主染色体へのプロウイルスの挿入量の増加よりもむしろ、標的組織におけるがん原遺伝子の直接的な活性化の増大によるものであることが示唆された。宿主がん原遺伝子の近傍にウイルス遺伝子が挿入されていることが強く示唆されたので、今後、以下の点について検討する予定である。1.近傍のがん原遺伝子の同定。2.ウイルス遺伝子挿入部位の遺伝子配列に共通性があるか。3.A8ウイルスのLTRは、同定されたがん原遺伝子を実際に活性化または修飾しているか。4.胸腺由来リンパ球において、A8-LTR内のエンハンサー領域と相互作用する宿主蛋白の検索。当研究室で分離されたフレンドマウス白血病ウイルス

A8は、がん遺伝子を持たないウイルスであるが、このウイルスを新生仔ラットに接種すると、78週間後に100%のラットに胸腺腫瘍が起こる。昨年度までの研究から、A8ウイルスの腫瘍原性に関わるウイルス遺伝子の配列は、LTR内のFVa, LVb/C4, CORE領域を含む38bpの繰り返し配列からなるエンハンサー領域であることが、明らかになっている。本研究は、A8ウイルスによって誘導される胸腺腫瘍に、ウイルス遺伝子の挿入変異によるがん原遺伝子の活性化が関与するか否かを明らかにすることを目的とするものである。宿主ゲノムにおけるウイルス遺伝子の組み込み位置を調べるためにA8ウイルス感染ラットの胸腺腫瘍からDNAを抽出し、env遺伝子をプローブにサザンハイブリダイゼーションを行った。その結果、宿主ゲノム上の特定の位置に組み込まれたウイルス遺伝子が検出された。一方、腫瘍を誘導しないウイルスが感染したラットの胸腺では、ウイルス遺伝子は検出されたが、その組み込み位置はランダムであった。この結果から、A8ウイルス感染による胸腺の腫瘍化とウイルス遺伝子の宿主ゲノム上の特定の位置への組み込みとの関連性が示唆された。また、がん原遺伝子の活性化について調べるために、胸腺腫瘍からRNAを抽出し、c-myc遺伝子の相対発現量をリアルタイムPCRにより測定した。その結果、正常胸腺と比較して、胸腺腫瘍ではc-myc遺伝子の発現量の増加が認められた。以上の結果より、A8ウイルス感染による胸腺腫瘍には、がん原遺伝子c-mycの活性化が関与する可能性が示唆された。
患者安全指標を用いた周術期ケアの質評価に関する研究

医療の質と安全の確保は先進各国において重要な政策課題である。米国AHRQ(Agency for Healthcare and Quality)は、医療安全領域の指標群をPSI(Patient Safety Indicators)として整理している。本研究では、1公益社団法人全日本病院協会による医療の質評価事業(Medi-Target事業)のDPCデータを用いたPSIの算出、2周術期ケアに関連するPSIと、手術件数、患者重症度、手術難易度、その他の病院属性との関連の分析、3国内外における周術期ケアの質評価の現況と課題を明らかにし、今後の方向性を検討した。1990年代後半以降、医療の質と安全の確保は先進各国において重要な政策課題となっている。医療の質に関する状況を客観的に把握、評価するために臨床指標を設定し、退院患者情報等から臨床指標値を求め、得られた指標値の公開や多施設間ベンチマーク等を通じて、医療の透明化と質の向上を図ろうとする試みが各国においてなされている。平成25年度研究では、米国AHRQ等により開発された医療安全指標のレビューに基づき、全日病Medi-Target事業のDPC/PDPSデータを用いてPSIsを算出し、周術期ケアに関連するPSIについて、手術件数等との関連性を明らかにした。各国では、医療の質を客観的に把握、評価する臨床指標の開発がすすめるとともに、退院患者情報等から臨床指標値を求め、得られた指標値の公開や多施設間ベンチマーク等を通じて、医療の透明化と質の向上を図ろうとする試みも行われている。米国AHRQ(Agency for Healthcare and Quality)は、1990年代前半から医療の質に関する臨床指標の開発とデータ収集事業を開始し、AHRQ Quality Indicators(QIs)として臨床指標を体系化している。そのうち医療安全領域の指標群は、PSI(Patient Safety Indicators)として整理されている。PSIは、主に潜在的に予防可能な合併症に着目し、入院後に発症した病態に関する情報等をもとに指標値が算出される。研究代表者は、我が国のDPC/PDPSデータに含まれる退院患者情報のうち、患者属性や入院後発症病態等に関する情報を用いることで、PSIが算出できることを先行研究で明らかにしている。本研究では、1米国AHRQ等により開発された医療安全指標のレビューに基づき、公益社団法人全日本病院協会(全日病)による医療の質評価事業(Medi-Target事業)のDPC/PDPSデータを用いたPSIの算出、2周術期ケアに関連するPSIと、手術件数、患者重症度、手術難易度、その他の病院属性との関連の分析、3国内外における周術期ケアの質評価の現況と課題を明らかにし、今後の方向性を検討する。各国では、医療の質を客観的に把握、評価する臨床指標の開発をすすめるとともに、退院患者情報等から臨床指標値を求め、得られた指標値の公開や多施設間ベンチマーク等を通じて、医療の透明化と質の向上を図ろうとする試みも行われている。PSIの算出には2009年1月から2011年12月に退院した患者の連結不可能匿名化されたDPC/PDPSデータを用いた。周術期ケアに関連するPSIとして、PSI#4(術後の治療可能な重症合併症による死亡率)、PSI#9(術後の出血、血腫発生率)、PSI#13(術後の敗血症発生率)を取り上げた。分析対象は191施設、1,955,100名であった。2013年度研究では、月当たり手術件数とPSIとの関係を明らかにした。PSI#4は月当たり手術件数と有意な負の相関がみられた。一方、PSI#9とPSI#13では、月当たり手術件数と有意な正の相関がそれぞれみられた。2014年度研究では、医療安全に関連する病院属性とPSIとの関係を分析した。医療安全対策加算の算定状況に基づいて病院を2群に分け、群間で各PSI指標値を比較した結果、PSI#4とPSI#13では、各年とも統計学的有意差はなかった。PSI#9は、2009年は医療安全対策加算を算定している群で有意に低値であったが、2010年は医療安全対策加算を算定している群で有意に高値であるなど、一定の傾向は認められなかった。

2015年度研究では、手術件数と各指標値の20092011年における動向との関連を分析した。手術件数は月当たり手術件数の33パーセンタイル値と66パーセンタイル値により区分し、手術件数の多い群から順にHigh-Volume群、Middle-Volume群、Low-Volume群とした。また、各指標値の動向は、各年の指標値から求めた回帰直線の傾きの正負に基づいて上昇と低下に区分した。PSI#4とPSI#9では手術件数と指標値の動向に有意な関連がみられ、Low-Volume群では、PSI#4が上昇している割合が他群に比して多く、PSI#9が低下している割合が他群に比して多かった。医療の質と安全の確保は先進各国において重要な政策課題であり、各国で医療の質を客観的に把握、評価する臨床指標が開発されている。米国AHRQ(Agency for Healthcare and Quality)は、1990年代前半から医療の質に関する臨床指標の開発とデータ収集事業を開始し、医療安全領域の指標群をPSI(Patient Safety Indicators)として整理している。PSIは、主に潜在的に予防可能な合併症に着目し、入院後に発症した病態に関する情報等をもとに指標値が算出される。本研究では、1公益社団法人全日本病院協会による医療の質評価事業(Medi-Target事業)のDPCデータを用いて周術期ケアに関連するPSIを算出し、2PSIと手術件数、患者重症度、その他の病院属性との関連の分析、3国内外における周術期ケアの質評価の現況と課題を明らかにし、今後の方向性を検討した。PSIの算出には2009年1月から2011年12月に退院した患者の連結不可能匿名化されたDPCデータを用いた。周術期ケアに関連するPSIとして、PSI#4(術後の治療可能な重症合併症による死亡率)、PSI#9(術後の出血、血腫発生率)、PSI#13(術後の敗血症発生率)を取り上げた。分析対象は191施設、1,955,100名であった。月当たり手術件数とPSIとの関係を解析した結果、PSI#4は月当たり手術件数と有意な負の相関がみられた。一方、PSI#9とPSI#13では、月当たり手術件数と有意な正の相関がそれぞれみられた。また、医療安全に関連する病院属性とPSIとの関係に関する解析では、医療安全対策加算の算定状況に基づいて病院を2群に分け、群間で各PSI指標値を比較した。その結果、PSI#4とPSI#13では、各年とも統計学的有意差はなかった。PSI#9は、2009年は医療安全対策加算を算定している群で有意に低値であったが、2010年は医療安全対策加算を算定している群で有意に高値であるなど、一定の傾向は認められなかった。医療の質と安全の確保は先進各国において重要な政策課題である。米国AHRQ(Agency for Healthcare and Quality)は、医療安全領域の指標群をPSI(Patient Safety Indicators)として整理している。
刑事司法と精神医療-刑罰・医療・保安処分

1(1)前年度に引き続き、本研究では、精神医療におけるいわゆる「処遇困難者問題」、および犯罪行為を行った精神障害者(触法精神障害者)に関する問題を法的観点を踏まえて検討した。その際処遇困難者問題と触法精神障害者問題とは問題の次元を異にするという前提は、さらに強調されねばならない。そして、研究は、そのいずれをも含めた精神医療全体の改善を最終的な目標とするものでなければならない。(2)以上のような立場を前提としつつ、今年度は特に、いわゆる心神喪失者等医療観察法案の立法作業を注視しながら研究を行った。個別的に特に問題だったのは、処分の要件である行為者の将来の危険性であった。本研究においても、その判断の可能性、あるいはこの要件の正当性に関してたびたび検討が必要であると考えた。2(1)以上の目的を実現するために、前年度同様に、本研究では次のようなことを行った。(2)まず、触法精神障害者問題、処遇困難者問題に関する国内外の文献の収集を行い、それを分析した。(3)また、これらの問題に携わる人々の意見を聴取した。本年度は、刑法学者、鑑定に携わる精神科医、裁判官、検察官および矯正に携わる人々(法務省)、厚生労働省などの意見を伺う機会を設けた。(4)一方、これらの問題に対する比較法的調査も試みた。この海外調査は、諸外国の触法精神障害者処遇施設や、法制度の面を検討した。具体的には調査団をフランスに派遣したことをはじめとして、研究者の海外派遣(大韓民国・オランダ)を行った。(5)最後に、本件の研究分担者・研究協力者同士の研究会で意見交換を行った。この研究会は法学者、精神医学者、臨床家、法律実務家、官僚、報道関係者といったメンバーを含むものであった。1(1)本研究の目的は、精神医療における患者の人権保護のあり方をふまえ、いわゆる「処遇困難者問題」、そして犯罪を行った精神障害者(触法精神障害者)に関する問題について解決に向けた適切な処方箋を示すことにある。ところが、処遇困難者問題と触法精神障害者問題は従来混同されてきた。本研究では、この二者は異なる概念であることを認識しつつ、それぞれの解決に向けてどのような法的枠組みを作り、どのような処遇をなすべきかの提言をすることを試みた。(2)ところで平成13年の池田小事件を契機として、現行の触法精神障害者処遇への不満が広まり、今や立法化の段階にある。本研究もこの問題に対応することとし、本年度は特に触法精神障害者問題に重点を置いた。2(1)以上の目的を実現するために、本研究では次のようなことを行った。本年度は、鑑定に携わる精神科医、報道関係者、警察、検察(法務省)、厚生労働省などの意見を伺う機会を設けた。具体的には調査団をフランスに派遣したことをはじめとして、研究者の海外派遣(アメリカ・カナダ)を行った。(5)最後に、本研究の研究分担者・研究協力者同士の研究会で意見交換を行った。

その際処遇困難者問題と触法精神障害者問題とは問題の次元を異にするという前提は、さらに強調されねばならない。そして、研究は、そのいずれをも含めた精神医療全体の改善を最終的な目標とするものでなければならない。(2)以上のような立場を前提としつつ、今年度は特に、いわゆる心神喪失者等医療観察法案の立法作業を注視しながら研究を行った。個別的に特に問題だったのは、処分の要件である行為者の将来の危険性であった。本研究においても、その判断の可能性、あるいはこの要件の正当性に関してたびたび検討が必要であると考えた。2(1)以上の目的を実現するために、前年度同様に、本研究では次のようなことを行った。(2)まず、触法精神障害者問題、処遇困難者問題に関する国内外の文献の収集を行い、それを分析した。(3)また、これらの問題に携わる人々の意見を聴取した。本年度は、刑法学者、鑑定に携わる精神科医、裁判官、検察官および矯正に携わる人々(法務省)、厚生労働省などの意見を伺う機会を設けた。(4)一方、これらの問題に対する比較法的調査も試みた。この海外調査は、諸外国の触法精神障害者処遇施設や、法制度の面を検討した。具体的には調査団をフランスに派遣したことをはじめとして、研究者の海外派遣(大韓民国・オランダ)を行った。(5)最後に、本研究の研究分担者・研究協力者同士の研究会で意見交換を行った。この研究会は法学者、精神医学者、臨床家、法律実務家、官僚、報道関係者といったメンバーを含むものであった。
租税回避対抗策の国際的な進展と納税者の権利保護に関する研究

本研究は、OECD/G20による「税源浸食と利益移転に対抗するプロジェクト」、いわゆる「BEPSプロジェクト」により、各国の税制の統一化、各国税務当局の国際的協調、納税者情報についての各国税務当局間の情報交換等が進んでいる一方で、課税強化にともなう納税者の権利侵害が懸念されていることを踏まえ、租税回避対抗策と納税者の権利保護のバランスに関する主要国における議論を参考としつつ、納税者保護のための、我が国の法制の未来像を探ろうとするものである。また、各国税務当局間の情報交換の違法性と損害賠償請求等の関係につき、「判例研究:二国間租税条約に基づく情報交換要請の取消し請求等が認められなかった事例」筑波ロー・ジャーナル24号133頁(2018)、「欧州裁判所Berlioz事件判決の影響ー租税条約に基づく情報交換と納税者の権利保護」租税研究828号284頁(2018)を発表した。これらの論文は、OECDモデル租税条約及びそのコメンタリーに照らし、また、比較法的検討も行いつつ、どのような場合に情報交換が違法となり、どのような場合に納税者による損害賠償請求訴訟が可能となるかについて論じたものである。基礎的な研究の成果として、各国の法制におけるBEPS報告書の受容状況に関する、Kerrie Sadiq教授らとの共著書を公刊するとともに、情報交換と納税者の権利保護に関する論文等を公表した(いずれも「研究実績の概要」に記載)。今後は、情報交換に加えて、移転価格税制やタックス・ヘイブン対策税制における納税者の権利保護問題についても研究を進めていきたい。税務当局間の情報交換については、各国で裁判例が公表されていることから、これらの裁判例を今後詳細に検討していく。移転価格税制とタックス・ヘイブン対策税制については、課税当局と納税者の間での証明責任の配分問題を、比較法的に検討していきたい。
複雑な構造を持つネットワークの構造・機能安定性に関する研究

平成17年度1.平成16年度に行った研究成果を踏まえ,より現実的な外部からのノード除去(攻撃)の可能性として,波状的ノード除去に関するネットワーク構造の最適化に関して,解析的手法を用いた考察を行い,以下の定量的な結果を得た。(1)ノード除去閾値はランダムなノード除去確率p_rと選択的ノード除去確率p_tの比p_t/p_rのみに依存する(2)二極次数分布を持つネットワーク構造が最も構造安定である。この場合の最適構造は小さい方の次数は1,大きな方の次数は(<k>-1+r)/rで決まる次数である。ここで<k>は各ノードの平均次数,rは大きな次数を持つノード数の全体に対する割合であり,1.7(p_t/p_r)の程度の大きさを持つ。2.次年度(平成18年度)の研究計画を,機能安定性の研究から,外部からのノード除去に関して最も頑強であり構造的に安定である二極次数分布を持つネットワーク構造と,現実世界に広く存在するスケール・フリー・ネットワーク構造の関係を理解することに変更し,ネットワークの構造安定性についてさらに深く調べることとした。平成18年度1.二極分布構造とスケール・フリー・ネットワーク構造を連続的に考察することが可能なネットワーク構造として多極次数分布ネットワーク構造を提案し,解析的手法を用いて考察を行い,以下の定量的な結果を得た。(1)ノード除去閾値はノード総数をN,次数分布のモード数をmとするときNのm-1分の1乗というパラメータの組合せでスケールされる。(2)選択的ノード除去に関する頑強性が完全に失われる臨界モード数m_cは1+(0.62<k>-1)logNと表わされることがわかった。ここで<k>は各ノードの平均次数である。(3)最適化された多極次数分布ネットワークは指数2.53を持つべき乗分布となる。2.研究成果を,非専門家にも理解しやすいように視覚化するソフトウエアの開発に着手した。5月:昨年度2月に受理されていた論文が出版された。(11.研究発表の項目参照のこと)6月:ボストン大学に出張(1週間)。初年度の課題である「離散的リンク数分布を持つネットワークの構造安定性」について,現時点での経過を持ちより,どのように研究を進めて行くかを研究協力者と話し合った。その結果、系が大きくなっていく場合の漸近的振舞の理解がポイントとなることが確認された。また、どのように結果を整理し理解すればよいかも問題となった。加えて、数値計算をさらに進めることとなった。8月:ボストン大学に出張(3週間)。ここで、それまでの計算結果を整理し、いったん論文の前段階としてレポートの形にまとめた。この時点で、mode数に関するスケーリング則を導出し,系の振舞を決めるcontrollingparameterを同定することができた。また,系の大きさが大きくなって行く極限での漸近的振舞を導き出すこともできた。10月:ボストン大学に出張(1週間)。論文発表をするに十分な結果が出そろったと判断し,論文投稿のための原稿を準備し始めた。11月:同時に進めていた数値計算の結果、系がtargeted attackに関するrobustnessを完全に失うときの、系のnode数、リンク数分布のmode数、平均リンク数の間に成立する関係式を数値的に同定することができた。

この結果も論文に組み入れることとし,準備中の論文原稿を修正した。さらに、ボストン大学の研究協力者とメールや国際電話で合議の結果,最終的に論文を投稿した。2月:ボストン大学に出張(1週間)。ここで、前課題の論文投稿を受け、次に取組むべき課題を検討した。また、11月に投稿した論文について受理に向けて希望の持てる査読結果が返ってきた。現在、次の研究課題に取組むための準備と、投稿中の論文を査読者の意見を取り入れて改訂し返送する作業を並行して行っている。前年度(平成17年度)の研究によって,ランダムなノードの機能不全に加えて選択的なノード除去の可能性がある場合には,二極度数分布を持つネットワーク構造が最も安定であることが示されたが,本年度(平成18年度)は,さらにその研究を発展させることができた。その内容は以下のようになっている。1.構造安定なbimodalネットワークと現実世界に広く見られるスケール・フリー・ネットワークとの関係を,多極度数分布を持つネットワーク(multi-modal network)を導入することにより,定量的に明らかにした。その結果,「ハブ」と呼ばれる大きな度数を持つノードの導入により,ネットワークの選択的ノード除去に対する頑健性がどのように失われていくかが初めて明らかになった。また,選択的ノード除去に対する頑健性を保つためには,ネットワークにハブをどの程度まで導入することができるかについての定量的な指針を提示した。(これらの結果はすでに査読つき論文として公表されている。)2.ノード除去に対するネットワークの頑健性に関する理論は,実際のネットワーク設計に大きな影響を与え得る。そのため,今まで行ってきたネットワークの構造安定性に関する理論的考察の結果を,ネットワーク物理についての詳細な知識を持たない非専門家に対して理解しやすい方法で提示することはきわめて重要であると考え,当初の予定である「ネットワークの機能安定性に関する研究」に着手する前に,「ネットワーク構造安定性に関する理論」を視覚化するソフトウェアの開発を急いで行うこととし,年度内にその開発の大部分を行うことができた。現在,さらなる高機能化およびバグフィックスを行っている段階であり,実際に使用可能な段階になれば,研究会などの場で発表し配布するなどして一般に公開するための準備を進めている。3.年度末に,「ネットワークの機能安定性に関する研究」に着手した。
投影法課題の認知処理に関する基礎研究: NIRSによる前頭葉血流動態の解析を通じて

本研究では、近赤外分光法をもちいてロールシャッハ法課題遂行時の前頭前野の働きを検討した。一般健常者29名を対象に実験をおこない、ロールシャッハ法課題時における前頭前野の賦活を示唆する結果を得た。また、反応数、抑うつ、特性不安、左右半球差の影響を検討し、一部有意な関連を示唆する結果を得た。以上の結果は、ロールシャッハ法課題と作動記憶や実行機能などの前頭前野機能の関連を示すものと考えられた。平成21年においては8回の研究打合せ会議を開催し,下記の研究成果を得た。1.投影法課題遂行時における脳活動,ならびに,近赤外分光法(NIRS)による認知課題遂行時の脳機能計測に関する研究文献を国内外にわたって広範に収集整理し,それらの知見を分析した。その際,資料の収集整理の補助として1名の大学院生を雇用するとともに,研究代表者と研究分担者により分担して日本ロールシャッハ学会を中心に関連諸学会に参加し情報の収集に努めた。以上の成果について,大阪教育大学学校危機メンタルサポートセンターの紀要『学校危機とメンタルケア』において2本の学術論文として公表した。2.NIRSによるロールシャッハ課題遂行時の前頭葉脳血流動態の計測実験をおこなうために予備実験研究を実施した。予備実験は,休息時と課題時の血流動態の比較をおこなう基礎実験シリーズと,発声ならびに視覚刺激を統制した統制実験シリーズの確立を目的とし,適切な刺激提示プログラムの作成,実験機器の設置,実験デザインの構成等について検討するものであった。なお,実験計画と実験実施手続きについては,神戸大学大学院人間発達環境学研究科研究倫理審査委員会に申請をおこない7月21日付にて承認をえている。また,本研究で用いるNIRS計測機器である日立メディコ製『光トポグラフィETG-7100』の操作方法とデータ解析について,適宜同社技術担当者によるサポートを受けた。実験期間中7名の実験協力者による参加を得,基礎実験デザインを確立するとともに必要な実験データの収集を終えた。その後,得られたデータに対し統計手法を用いた解析をおこない,その結果を検討した。次年度は,1.の文献資料研究を継続するとともに,2.のNIRS実験研究の成果を日本心理学会第74回において発表し,その結果を受けて統制実験シリーズを中心とした実験研究を継続する予定である。平成22年においては7回の研究打合せ会議を開催し,下記の研究成果を得た。1.前年度から継続して神経科学,ならびに,投影法と脳機能に関する国内外の文献資料を収集し,それらを読解する作業をおこなった。得られた知見を下記の予備実験研究の成東の分析と本実験研究の実験計画の樹立に必要な基礎的理論として活用した。2.前年度に実施した予備実験研究のデータを統計的手法により解析した。予備実験は,本実験研究にむけて適切な刺激提示プログラムの作成,実験機器の整備,実験デザインの構成等を検討するものであり,ETG-7100により計測された前頭前野のoxy-Hbをロールシャッハ法課題(以下,RIM課題)時と休息時との間で比較するものであった。統計解析の結果、一部でRIM課題時の前頭前野におけるoxy-Hbの増加を示唆する結果を得た。以上の研究成果を日本心理学会第74回大会(於,大阪大学)においる2件のポスター発表として公表した。3.以上の予備実験研究の成果を討議することを通じて,本実験研究の実験計画を策定した。本実験研究では,刺激提示プログラムの改良をおこなうとともに,RIM課題と休息課題を各30秒と延長し実施した。また,定型図形(具象物の絵)に対してその名称の回答を求める比較課題を作成し,RIM課題と同様の実験デザインで別途実施した。また,前頭前野の脳機能と関連する心理特性として抑うつ傾向,不安傾向を取り上げ,それらを測定する心理測定尺度を施行した。以上の実験プログラムと心理測定尺度を含む実験を一般健常者36名に実施した。得られたデータに対し,休息時とRIM課題時のoxy-Hb変化量の比較,RIM課題時におけるoxy-Hb変化量の左右半球差,RIM課題時におけるoxy-Hbと抑うつ傾向,不安傾向の関係,さらには,RIM課題時のoxy-Hb変化量とRIM反応との関連などの多角的な観点から分析をおこなった。以上得られた成果を次年度の関連学会(国際ロールシャッハ学会,日本心理学会,日本心理臨床学会)において公表するための準備をおこなった。平成23年においては,年度当初に研究打ち合わせ会議を開催し,これまでの文献資料研究と実験研究の総合的な成果を順次国内外の関連諸学会での発表し,学術専門誌への投稿を通じて公表するためのスケジュールを確認した。1.初年度から継続してきた神経科学,ならびに,投影法と脳機能に関する文献資料研究の成果をまとめ,特に,前頭前野に関連する脳機能としてのワーキングメモリと実行機能の働き,ならびに,それらとロールシャッハ課題との関連を中心に理論を整備した。得られた知見を下記の実験研究の結果を考察するうえでの基礎理論として活用した。

2.前年度に実施した本実験研究のデータを統計的手法により解析し,主に以下のような結果を得た。つまり,光トポグラフィ装置による脳血流動態の計測を通じて,(1)ロールシャッハ課題中に前頭前野の脳血流量が増加すること,単純な絵を知覚する定型課題と比較してその領域が広く増加量も多いこと,(2)ロールシャッハ反応が多い群の方が少ない群よりも前頭前野左側の頭頂寄りの領域で多くの血流増加を示すこと,(3)前頭前野の左右半球で血流量の変化に差が見られないこと,(4)抑うつ傾向,ならびに,不安傾向が高い群で,Iカード試行時に前頭前野の頭頂寄りの領域を中心に増加量が少ないこと,を示唆する結果が得られた。(1)の成果を国際ロールシャッハ及び投映法学会第20回大会における1件の口頭発表,(2)を日本心理臨床学会第30回大会にける1件のポスター発表,(3)(4)を日本心理学会第75回大会における2件のポスター発表として順次公表した。3.以上の学会発表における発表内容と質疑を踏まえて,今後の学術専門誌における論文発表を計画した。それぞれの成果を査読付の国内外の学術専門誌に投稿することを目指し論文作成に取り掛かった。また,本砺究課題の研究成果報告書を制作するために,研究期間全体の成果の取りまとめをおこなった。
D-Pheを含んだ神経作用性ペプタイドachatin-Iの神経生理・薬理学的研究

1.Achatin-Iの構造的特徴は,それがD-Phenylalanine残基を含むことである.これの立体異性体8種(achatin-Iを含む)のうち,achatin-Iのみが,Achatina巨大神経細胞に顕著な興奮作用を示した.検定された23種のAchatina神経細胞のうち,10種がachatin-Iにより脱分極性興奮を示した.従ってこれら神経細胞に対して,achatin-Iは興奮性伝達物質として働いていると考えられた.さらにachatin-I作用のイオン機構が検討され,これがNa^+の膜透過性上昇によることが証明された(平成2年度).2.Achatin-Iの誘導体の作用を検定することにより,これらの構造・活性相関が観測された.検定された物質のうち,achatin-Iのみが強い興奮作用を示した.すなわちこのペプチドの作用は,立体異性性を持つと同時に,構造特異性を呈する(平成3年度).5-hydroxytryptamine(5-HT)による興奮のある成分が,興奮作用のED_<50>よりもはるかに薄いachatin-Iの存在により,著しく増強されることが観察された.軟体動物から分離されたペプチドのうち,oxytocinとAPGW-amideの作用がachatin-Iの存在により減弱され,FMRFamideの作用が増強された.これはachatin-Iが興奮性神経伝達物質としてばかりでなく,神経修飾物質としても働いていることの証明である(平成4年度).1.Achatin-Iの構造的特徴は,それがD-Phenylalanine残基を含むことである.これの立体異性体8種(achatin-Iを含む)のうち,achatin-Iのみが,Achatina巨大神経細胞に顕著な興奮作用を示した.検定された23種のAchatina神経細胞のうち,10種がachatin-Iにより脱分極性興奮を示した.従ってこれら神経細胞に対して,achatin-Iは興奮性伝達物質として働いていると考えられた.さらにachatin-I作用のイオン機構が検討され,これがNa^+の膜透過性上昇によることが証明された(平成2年度).2.Achatin-Iの誘導体の作用を検定することにより,これらの構造・活性相関が観測された.検定された物質のうち,achatin-Iのみが強い興奮作用を示した.すなわちこのペプチドの作用は,立体異性性を持つと同時に,構造特異性を呈する(平成3年度).5-hydroxytryptamine(5-HT)による興奮のある成分が,興奮作用のED_<50>よりもはるかに薄いachatin-Iの存在により,著しく増強されることが観察された.軟体動物から分離されたペプチドのうち,oxytocinとAPGW-amideの作用がachatin-Iの存在により減弱され,FMRFamideの作用が増強された.これはachatin-Iが興奮性神経伝達物質としてばかりでなく,神経修飾物質としても働いていることの証明である(平成4年度).DーPhenylalanineを含むneuroactive tetrapeptideのアフリカマイマイからの分離はすでになされており,その1次構造(GlyーDーPheーLーAlaーLーAsp)も決定され,この物質は,achatinーIと名付けられていた.平成2年度には,先ずアフリカマイマイ神経節の中で,achatinーIに感受性を有する神経細胞のmappingが行われた.検定された23種の神経細胞のうち,10種が,3x10^<ー4>M achatinーIにより,脱分極性興奮を示した.他の13種は全く応答を示さず,抑制を示す細胞は見られなかった.従ってこの物質は,これら巨大神経細胞のかなり広範なものに対して,興奮性神経伝達物質として働いていると思われる.ついで3種のachatinーI感受性神経細胞を選び,achatinーIとその立体異性体(3x10^<ー4>M)の作用を検定した.合計8種のペプタイドのうち,achatinーIのみが著しい作用を示し,さらにGlyーDーPheーDーAlaーLーAsp([DーAla^3]ーachatinーI)が弱い作用を示した.他のものは全く作用がなく,achatinーIにより活性化されるレセプタ-の立体異性の高さが立証された.次いで膜電位固定法を用いて,有効な2物質の用量作用曲線を測定し,それをprobit法で解析した.巨大神経細胞PON(periodically oscillating neurone)による結果を記せば,achatinーIについては,ED_<50>=0.20x10^<ー5>M(95%confidence limit=0.14ー0.26x10^<ー5>M),Emax=5.46±0.22nA(n=8)[DーAla^3]ーachatinーIについては,ED_<50>=15.46x10^<ー5>M(95%confidence limit=11.09ー21.56x10^<ー5>M),Emax=2.00±0.17nA(n=6)であった.AchatinーIはそのED_<50>値より,神経伝達物質と考えるのに,充分に強い作用持つ.またED_<50>,Emax両方の値より,achatinーIは有意に,[DーAla^3]ーachatinーIよりも作用が強かった.さらにachatinーI作用のイオン機構が検討され,これがNa^+の膜透過性上昇によることが証明された.

アフリカマイマイ神経細胞の興奮性神経伝達物質と考えられるachatinーI(GlyーDーPheーLーAlaーLーAsp)が,検定された神経細胞の約半数に興奮作用を示すこと,そのED_<50>が0.2×10^<-5>M程度であること,その作用には強い立体特異性(stereospecificity)があること,その作用は膜のNa^+に対する透過性の上昇によることなどは,すでに証明されている。平成3年度には,achatinーIとその関連ペプタイドの構造・活性相関を観測した。(1)NーacetylーachatinーIは作用を示さないので,Nー端のamino groupは,作用を示すために必須である。Nー端を延長したり(GlyーGlyーDーPheーAlaーAsp),短くしたり(DーPheーAlaーAsp)すると作用がなくなるので,Nー端のamino groupとCー端の2つのcarboxyl groupとの距離は重要である。(2)DーPhe^2がLー型であるペプタイドは,やはりアフリカマイマイ神経節中に存在し,achatinーIIと名付けられたが,これは作用を示さない,DーPhe^2をaromatic amino acid(DーTyr,DーTrp),aliphatic aminoacid(DーLeu),basic amino acid(DーHis)あるいはGlyで置換したペプタイドは,いずれも作用を持たない。(3)LーAla^3をLーVal,LーSer,Glyで置換すると,作用がなくなる。従ってAla^3のmethyl groupの存在は重要である。LーAla^3をDーAlaで置換すると,作用は非常に弱くなる。(4)AchatinーIーamide,[βーAla^4]ーachatinーIには作用がない。従って,αーcarboxylic acidは作用を現すために必須である。[Asn^4]ーachatinーIには作用がないので,βーcarboxylic acidの存在も必須である。[Glu^4]ーachatinーIには作用がないので,4位のアミノ酸のcarbon chainの長さは重要である。このことは,先に述べたNー端のamino groupとC端の2つのcarboxyl groupとの距離が重要である所見と一致する。以上に記したように,achatinーIの作用は,非常に構造特異性(structure specificity)が高い。先にアフリカマイマイ(Achatina fulica Ferussac)神経節より同定された,tetra-peptideのachatin-I(Gly-D-Phe-L-Ala-L-Asp)は,Achatina巨大神経細胞の興奮性神経伝達物質と考えられる.本年度は,achatin-Iの興奮作用に対する拮抗物質を探し,またこのペプチドが神経伝達物質であると同時に,神経修飾物質でもあることを証明した.2.いま1つの巨大神経細胞TAN(tonically autoactive neurone)を用いて,5-hydroxytryptamine(5-HT)による興奮の早い成分が,直接的な興奮作用のED_<50>よりもはるかに薄いachatin-Iの存在により,著しく増強されることが観察された.5-HTによる興奮の遅い成分は,achatin-Iの存在により影響されなかった.