hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
急性心筋梗塞患者が必要とする周手術期医療情報と情報提供への看護介入

PCI患者またはCABG患者の2群に分け、Mann-WhitneyのU検定を行った。CABG患者は退院支援の中の注意が必要な症状と疾患に関連して起こる他の症状の情報をPCI患者より有意に高く必要としていた。情報獲得のための看護介入の内容については、有意差は認められなかった。1.急性心筋梗塞患者の周手術期医療に携わる看護師が必要と考える医療情報と情報提供への看護介入の面接調査結果の分析と質問紙の作成面接調査結果を逐語録におこし、看護師が提供が必要だと考える医療情報の内容、必要な看護介入内容、情報提供方法および情報提供時の課題を表現している部分を抽出し内容分析を行った。対象者は、女性18名、男性2名計20名で、年齢は28歳41歳平均年齢33.40歳(SD=3.81)であった。看護師経験年数10.25年(SD=3.14)、そのうち周手術期看護経験年数は7.20年(SD=3.11)であった。必要な情報提供内容のカテゴリーは、狭心症または心筋梗塞の病気、心筋梗塞の病態生理、心筋梗塞の症状、狭心症または心筋梗塞への対処、リスクファクターとリスク軽減方法、心筋梗塞の治療、合併症への対処、ステント留置後の生活、CABG後の生活、リハビリ、退院後の生活、食生活等であった。看護介入内容は、説明の時期を調整する、患者の状態にあった説明をする、患者の理解度に合わせて説明をする、医師の説明後に補助的な説明を加える、自身をもてるようにかかわる、患者の疑問を引き出す、家族も一緒に指導する等であった。必要な情報提供方法は、パンフレットを用いる、イラストを加え説明する、モデルを用い説明する、映像を用い説明する、栄養士に説明してもらう等であった。情報提供時の課題は、他職種と協働する、患者のペースにあわせた説明方法、患者の個別性にあつた情報を提供する、患者の理解度を確認する等であった。これらのカテゴリーおよびサブカテゴリーの結果に基づき、質問紙を作成した。2.急性心筋梗塞患者が必要とする周手術期医療情報と看護内容および課題の質問紙調査調査協力者の勤務する病院で、質問紙を200部配布し調査協力依頼を行った。しかし現在までデータは21名しか回収できず、分析できない状況である。調査協力施設で面接調査に協力の得られる冠動脈バイパス術を受けた対象者が予定していたより少なく、他施設の調査も検討したが患者に直接面接するため協力が得られなかった。面接調査結果が分析できないと患者対象の質問紙調査に移れないため、23年度計画を変更し看護師対象の面接調査を行った。25年度が最終年度であるため、記入しない。1.急性心筋梗塞患者の周手術期医療に携わる看護師が必要と考える医療情報と情報提供への看護介入の面接調査結果の分析と質問紙の作成については、質問紙が完成し順調に進行している。2.急性心筋梗塞患者が必要とする周手術期医療情報と看護内容および課題の質問紙調査については、患者の負担感に配慮し配布した質問紙の返送期限を2週間程度で書き終わったらと説明したためか返送が遅く、回収率も低く、まだ統計的分析を行えない状況にある。急性心筋梗塞患者の周手術期医療に携わる看護師が必要と考える医療情報と情報提供への看護介入について、面接調査結果に基づき質問紙を作成し平成25年度に実施する予定であった看護師対象の質問紙調査を平成24年度に実施する。
分子軌道法による氷結晶における気体の拡散に関する研究

氷結晶中の気体の拡散係数の推定を行うため,非経験的分子軌道法を用いて,移動の障壁エネルギーの計算を行った。氷の格子間拡散の経路としては,結晶のc軸に沿った経路であるTuサイト→Tuサイトの拡散がより支配的であると考えられ,その取り扱いのために水分子18個からなるクラスターを作成し,移動の障壁エネルギーの計算を行った。非経験的分子軌道法の基底関数として6-311G(d,p)を用いて計算を行うと,Heのc軸に平行な方向の拡散の実験データと非常に良い一致を示した。さらに,原子の移動に伴う全エネルギーの変化から見積もったattempt frequencyの値から,古典的な遷移状態理論に基づく理論式を用いて拡散係数の前指数因子を計算したところ,実験データと良い一致を示した。また,Neに関しても同様であるが,計算値が実験値よりも5%大きくなったが,これは,構造緩和の効果を無視したためであると考えられる。酸素や窒素の分子に関しては,障壁エネルギーの計算を行ったところ,酸素分子の方が約0.3eV低い値となった。さらに,構造緩和の効果を調べるため,水分子378個からなる大規模クラスターを作成し,半経験的分子軌道法による計算を行った。その結果,両者の差は約0.1eVとなったが,分子径は酸素分子の方0.1Å小さいが,その差は,分子径の差からは説明できない。そこで,分子軌道を調べたところ,酸素の場合は,分子の移動の過程で氷の格子と結合を生成するため,障壁エネルギーが低下することがわかった。メタンについて同様の計算を行った結果,メタンの障壁エネルギーは約0.8eVと求められた。このことは,メタン分子では氷結晶中の格子間拡散は起こりえないことを示している。また,二酸化炭素については,直線的な形状・大きさの効果を考慮する必要があり,引き続き検討中である。氷結晶中の気体の拡散係数の推定を行うため,非経験的分子軌道法を用いた,移動の障壁エネルギーの計算を行った。氷の格子間拡散の中で,結晶のc軸に沿った経路であるTuサイト→Tuサイト, c軸に垂直な経路であるTuサイト→Tcサイトの拡散を取り扱うため,それぞれ水分子18個と14個からなるクラスターを作成し,移動の障壁エネルギーの計算を行った。まず,実験データのあるHeおよびNeに関して,構造の緩和を行わない計算を行い,実験データとの比較をして,非経験的分子軌道法で用いる基底関数のレベルの決定を行った。Heでは,基底関数として6・311G(d,p)を用いると,c軸に平行な方向の拡散の実験データをよく再現できることがわかった。さらに,原子の移動に伴う全エネルギーの変化から,attempt frequencyを見積もり,古典的な遷移状態理論に基づく理論式を用いて,拡散係数の前指数因子を計算したところ,実験データと良い一致を示した。以上のことから,HeやNeのように氷の格子との相互作用の小さい気体に関しては,構造の緩和を考慮しなくても,障壁エネルギーや拡散係数の推定が行えることがわかった。しかしながら,本研究の目的である,メタンや二酸化炭素の拡散をこの方法で扱うためには,分子の移動に伴う氷の格子の構造緩和を考える必要がある。また,より厳密な理論に従って拡散係数を推定するためには,格子振動の振動数の変化を計算する必要がある。これらの目的のために,より大きな系に対する計算を行うとともに,今後,新たに分子動力学法による計算を予定している。
英語科教育における事前教材評価に対する階層分析法（ＡＨＰ）の応用に向けた実践研究

本研究は、英語を第2言語もしくは外国語として指導する現場を念頭に置いた事前教材評価における「階層分析法(Analytic Hierarchy Process)」の応用・実用可能性を探り、実際の使用のシミュレーション調査を元に、平易な操作で利用できるプログラムを開発することを目的とした。成果として、現職の教員を対象とした調査をもとにプログラムの改善を重ね、アップル社ipad対応のアプリケーションソフトの開発をほぼ終了した。平成27年度中の公開・一般使用を目指す。本研究は、英語を第2言語もしくは外国語として指導する現場を念頭に置いた事前教材評価における「階層分析法(Analytic Hierarchy Process)」の応用・実用可能性を探り、実際の使用のシミュレーション調査を基に、平易な操作で利用できるプログラムを開発し、検証を重ねたうえで教育現場の使用に供する形で公開することを目的として行われた。平成24年度には、新潟大学教育学研究科在籍正数名にマイクロソフトエクセル上で試作されたプログラムを使用して、シミュレーション調査を行い、上記協力者からのフィードバックをもとに、試作版エクセルプログラムの改善、整備を行った。平成25年度には改善後のエクセルプログラムを基に、アップル社ipad対応のアプリケーションプログラムとして開発企業に委託して作成し、平成25年度末の段階でほぼ完成に近い形となっている。さらに当該アプリケーションについて最終整備を行い、平成27年度中の公開・一般使用を目指す。出来上がったアプリケーションとその使用については平成27年度(2014年度)世界応用言語学学会(AILA)ブリスベーン大会での発表が内定している。また階層分析法の英語教育現場における教科書選択に対する利用可能性と、具体的な仕様手順、プログラム作成にいたる経緯については、"Using Analytic Hierarchy Process in Textbook Evaluation,Kato, S.,TESOL Journal, 2013, Doi:10.1002/tesj.125, )"として、インターネット上で刊行された。(http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/tesj.125/pdf)。準備段階として、研究代表者が既にMicrosoft Excelを使用し、評価基準7項目、評価下位基準各7項目(7×7=合計49下位基準項目)、選択肢数7項目まで対応した簡易プログラムを試作済みであった。その試作プログラムを使用した予備調査を既に実施(新潟県公立高等学校教員4名、新潟大学Gコード科目英語担当の英語母語話者教員2名の合計6名を対象に高等学校3年生もしくは大学1年生レベルの読解テキストを選択する課題を設定し、協力者が調査当時に担当していた学習者を念頭に置いてシミュレーション評価を行ってもらった)し、その結果を踏まえ、プログラムの変更、調整を行った。上記の予備調査(シミュレーション評価)から得られたフィードバック・データを基に、プログラムをより利便性の高いソフトとして実用向けに作成する準備段階として、評価プロセス全体の手順を整理する目的で論文形式にまとめ、完成させた。研究代表者が独自にMicrosoft Excelで作成した現段階での階層分析法プログラムを基に、予備調査の段階で得られたフィードバックを考慮しながら実用向けプログラムの作成段階に入る予定であったが、試作プログラムの微調整、さらにプログラム作成依頼先の選定などに遅れがでたため、プログラム作成直前の試作版変更・改訂と評価手順全体の整理の段階でとどまっている状況である。また、平成25年度より科目編成が抜本的に改正される高等学校英語科の新しい科目群に対応する検定教科書が、平成24年度中に入手することが困難であることが判明し、プログラムを使用した、実際の事前評価の依頼が困難となった。今年度(25年度)は、予備調査から得られたフィードバック・データを基に試作のプログラムを実用向けに作成することを目指し、今年度より施行された高等学校外国語(英語科)の新しい科目群に対応する検定教科書を使用した、実際の教材評価を教育現場の教員に依頼する。その際、主として「コミュニケーション英語I」、「コミュニケーション英語II」の2科目に絞り調査を試み、それぞれの協力教員の現場の状況に合わせ、独自の階層構造を設定してもらうなどの柔軟性を持たせ実施するものとする。上記調査の成果については、例えば平成25年度(2013年)もしくは平成26年度(2014年)の関東甲信越英語教育学会もしくは全国英語教育学会等で発表することを目指す。また、本研究で作成されたプログラムは利益を得ることは目的とせず、CD-ROM等で複製したものを無償で教育現場に配布し、使用を勧めるものとする。教育現場の教員対象の調査に使用する目的で、新学習指導要領における新規高等学校検定教科書(主として「コミュニケーション英語I」、「コミュニケーション英語II」の2科目)の購入を予定する(各科目500円×4種類=2,000円、計4,000円)。また、本調査謝礼として最大25,000円(1名あたり5,000円)を予定する。プログラムソフト作成費用として150,000円を予定する。
炭素鎖の分岐した4-チオフラノースを構成糖とするヌクレオシドの合成とその生物活性

3,5-O-(1,1,3,3-テトライソプロピルジシロキサン-1,3-ジイル)-4-チオフラノイドグリカール(1)をN-ヨードコハク酸イミドの存在下、シリル化したチミンと反応させることにより4'-チオチミジン誘導体(2)のβ-アノマーを得た。グリコシル化成績体2はラジカル還元および脱シリル化により、4'-チオチミジン(3)へ変換した。化合物3の一級水酸基のヨウ素化、3'位のアセチル化、DBNによる脱ヨウ化水素酸および保護基の変換により、3'-O-TBDMS-4',5'-不飽和4'-チオチミジン誘導体(4)を合成した。化合物4は、四酢酸鉛によるジアセトキシレーションにより、4'-アセトキシ体(5)へ変換した。鍵中間体5は、ルイス酸の存在下、シリコン試剤との反応により、4'-α-フェニルチオー(6)、4'-α-アジドー(7)、4'-α-メトキシー(8)、4'-α-C-aアリルー(9)、4'-α-C-シアノー(10)および4'-α-C-エチニルー4'-チオチミジン(11)へ変換することができた。3,5-O-(ジートブチルシリレン)-4-チオフラノイドグリカール(12)をm-CPBAで酸化することにより、対応する3オキシド(13)を得た。化合物13をAc20/TMSOAc/BF30Et2と室温下反応させたところ、"additive Pummerer"反応が進行し、1,2-ジ-O-アセチル-3,5-O-(ジートブチルシリレン)-4-チオリボフラノース(14)を選択的に得ることができた。チオ糖供与体14をシリル化したウラシルとTMSOTfの存在下、反応させたところ4'-チオウリジン誘導体(15)のβ-アノマーを高い選択性で得ることができた。この結果は、チオグリコシル化反応においてアセチル基の隣接基関与が有効に働いた最初の例となった。このグリコシル化反応の適用範囲を調べる目的で、シリル化したチミンおよびシトシンとのグリコシル化を行ったところ、4'-チオチミジン(16)および4'-チオシチジン誘導体(17)のβ-アノマーを選択的に得ることができた。また、6-クロロプリンおよび2-アミノー6-クロロプリンとのグリコシル化では、目的とするグリコシル化成績体の位置異性体であるN^7-置換体の副生が認められ、目的1物の単離収率の低下が認められたが、高い立体選択性で対応するβ-アノマー(18)を得ることができた。

3,5-O-(1,1,3,3-テトライソプロピルジシロキサン-1,3-ジイル)-4-チオフラノイドグリカール(1)とチミンとのグリコシル化反応により、2'-ヨード-4'-チオチミジン誘導体のβ-アノマー(2)を選択的に合成した。化合物2は、トリブチルチンヒドリドによる2'位のヨウ素置換基のラジカル還元、5'位水酸基のヨウ素化および脱離反応により4',5'-不飽和-4'-チオチミジン誘導体(3)へ変換した。得られた3を四酢酸鉛で処理する事により、本研究の鍵化合物となる4'-アセトキシ-4'-チオチミジン誘導体4を得る事ができた。4'-アセトキシヌクレオシド4に対して、塩化メチレン中、四塩化スズの存在下、フェニルチオトリメチルシランを反応させたところ、目的とする4'-α-フェニルチオチミジン誘導体(5)を良好な収率で得る事ができた。本手法を用いる事により、4'-α-メトキシ体(6)ならびに4'-α-アジド体(7)も合成する事ができた。一方、炭素求核試剤としてアリルトリメチルシランを用い、4との反応を行ったところ、4'-α-アリル体(8)を得る事ができた。一方、シアノトリメチルシランとの反応では、分子内閉環反応が進行しスピロ誘導体が得られた。この副反応を抑えるために、5'位の水酸基をt-ブチルジメチルシリル基で保護した4'-アセトキシ体(9)を5から合成し、シアノトリメチルシランとの反応を行ったところ、目的とする4'-α-シアノ体(10)を得る事ができた。合成した新規ヌクレオシド誘導体の抗HIVを調べたところ、4' -アジド体7に強力な阻害活性が認められた。3,5-O-(ジ-t-ブチルシリレン)-4-チオフラノイドグリカール(1)をm-CPBAで酸化することにより、対応するS-オキシド(2)を得た。化合物2をAc_2O/TMSOAc/BF_3OEt_2と室温下反応させたところ、"additivePummerer"反応が進行し、1,2-ジ-O-アセチル-3,5-O-(ジ-t-ブチルシリレン)-4-チオリポフラノース(3)を選択的に得ることができた。チオ糖供与体3をシリル化したウラシルとTMSOTfの存在下、反応させたところ4'-チオウリジン誘導体(4)のβ-アノマーを高い選択性で得ることができた。この結果は、チオグリコシル化反応においてアセチル基の隣接基関与が有効に働いた最初の例となった。このグリコシル化反応の適用範囲を調べる目的で、シリル化したチミンおよびシトシンとのグリコシル化を行ったところ、4'-チオチミジン(5)および4'-チオシチジン誘導体(6)のβ-アノマーを選択的に得ることができた。また、6-クロロプリンおよび2-アミノ-6-クロロプリンとのグリコシル化では、目的とするグリコシル化成績体の位置異性体であるM^1-置換体の副生が認められ、目的物の単離収率の低下が認められたが、高い立体選択性で対応するβ-アノマー(7)を得ることができた。この合成法は、C-グリコシル化反応にも適用可能であり、チオフェン-(8)およびフラン-C-グリコシド(9)を合成した。化合物3とシアノトリメチルシラン(TMSCN)との反応では、分子内環化が進行したため、3から誘導した2'-O-TBDMS体(10)とTMSCNとの反応を行い、1-C-α-シアノ体(11)を合成した。化合物11をシステインエチルエステルと反応させることにより、チアゾリジンエステルとした後、プロモトリクロロメタンによるエステルのα位での臭素化とDBNによる脱離反応によ.り、4'-チオチアゾブリン(12)の合成を達成した。
スギ花芽分化・形成ならびに開花機構におけるジャスモン酸の役割

草本植物におけるジャスモン酸の処理効果は、根塊の肥大促進をはじめ多くの生理作用が明らかにされつつある。特に注目すべき点は、植物ホルモンのアブシジン酸と多くの生理作用で共通していることである。これまで、筆者らはアブシジン酸がスギの花芽分化・形成ならびに開花に関連のあることを明らかにしてきた。そこで、ジャスモン酸(JA)もスギ(Cryptomeria japonica)の生殖生理現象と関連のあるものと考え、1)JA処理による生理現象発現の有無、2)内生JAの検索および同定、3)花芽分化・形成ならびに開花時期におけるJAの動態を検討した。スギ花芽形成期におけるJA処理でははっきりとした効果はみとめられなかった。しかし、スギ開花期におけるJA処理では、スギの雄花および雌花の開花時期を早める傾向が認められ、スギの開花現象との関連が示唆された。内生JAの検索および同定では、スギ針葉(雄花形成位置、雌花形成位置)、雄花、雌花の各組織より、抽出を行い液液分配後、高速液体クロマトグラフ(ODS-HPLC)により精製後、ジャスモン酸測定ELISAシステムによりイムノアッセイを行いJAおよびジャスモン酸メチル(JA-Me)の存在を確認した。その後、ガスクロマトクラフー質量分析計(GC/MS)および液体クロマトグラフ-質量分析計(LC/MS/MS)を用い、分析に用いたすべてのスギの器官からJAおよびJA-Meを同定した。さらに、スギの花芽分化・形成および開花におけるジャスモンサンの動態では、花芽形成期ではJAおよびJA-Meの変動はみられなかった。しかし、雄花および雌花の開花直前にJA-Meの増加が確認された。これらのことから、ジャスモン酸はスギの開花現象に影響をおよぼしているものと考えられる。また、植物が障害を受けると直ちにジャスモン酸(JA)が発生するために、障害に対する情報伝達機能をもつ物質であることも明らかにされている。JAの生理作用で特に注目すべき点は、植物ホルモンのアブシジン酸と多くの生理作用で共通していることである。これまで、筆者らはアブシジン酸がスギ(Cryptomeriajaponica)の花芽分化・形成ならびに開花に関連のあることを明らかにしてきた。そこで、1)JAもスギの生殖生理現象と関連、2)花芽形成や開花に関するシグナル伝達物質の可能性を予測している。本研究では、1)処理による生理現象発現の有無、2)内生JAの検索および同定、3)花芽分化・形成ならびに開花時期におけるJAの動態を検討し、スギの芽分化・形成ならびに開花現象とJAの関連を明らかにすることが目的である。上記の目的のうち平成10年度においては、まず、JAの分析方法の検討を行った。これまでのJAの分析方法においては、ラジオイムノアッセイ(RIA)により確認を行い、GC/MSによる同定、手定量が一般的であった。しかし、RIAはラジオアイソトープを用いるために取り扱いが困難となる。そこで、本研究ではエンザイムイムノアッセイ(ELISA)用いてJAの確認を行った。まず、(-)-JAにジシクロへキシルカルボジイミドとN-ヒドロキシこはく酸イミドを反応させて(-)-JA活性エステルを調整し、これとウシ血清アルブミンを結合させ免疫原とした。この免疫原をウサギに免疫を行い抗-ジャスモン酸メチル化抗体を得た。この抗体を用いたELISAでは数十pgの(-)-JA-Meが検出できた。また、LC/MSを用いることであまり精製を行わない試料でも、高感度の測定ができることが明らかとなった。
惑星内部における水素の挙動の解明

(1)SiO_2高圧相の含水量測定の研究SiO_2の高圧相であるStishovite(St)は、Al_2O_3を含むことで0.3wt%程度まで水を含むことができることから、沈み込むプレート中のSiO_2が地球深部まで水を運ぶ可能性が考えられている。地球深部条件ではSiO_2はStからCaCl_2型やα-PbO_2型の高圧相に相転移するが、これらの高圧相が水をどれ程含めるのかはわかっていない。そこで地球深部条件でのAl_2O_3を含むSiO_2の相平衡と含水量を明らかにする。合成した3.0wt%Al_2O_3-0.3wt%H_2O-Stを約40万気圧まで加圧し、CaCl_2型に相転移させた後、常圧まで脱圧して、フーリエ変換型顕微赤外分光光度計(FT-IR)にて含水量を測定した。このようにCaCl_2型の含水量を測定したのは初めてである。それによると、相転移前後でのStとCaCl_2型の含水量に大きな違いは見られなかった。これによって、表層の水が沈み込むプレートによって地球内部に運ばれ、SiO_2を介して地球深部まで輸送される可能性が非常に高いことが考えられる。(2)高圧下での鉄-水素系(FeHx)の融点の研究地球核は鉄と軽元素(水素など)で構成され、液体の外核と固体の内族の層構造をしていることから、鉄-軽元素系の融点測定は核の温度構造を明らかにする上で非常に重要である。そこで地球核の温度構造を明らかにすべく、放射光施設SPring-8にて高温高圧下でのX線その場回折実験(BL10XU)を行い、高圧下でのFeHxの融点を測定した。高圧発生にダイヤモンドアンビルセルを用い、40万気圧までの圧力条件にてFeH_<0.3>組成の融点を決定した。これによると、水素量が少ないFeH_<0.3>組成と水素に飽和しているFeH組成の融点はほぼ違いが無いことが分かった。つまり水素はたとえ少量だとしても融点を大きく変化させ、他の軽元素と比べても核の温度構造に及ぼす影響が非常には大きいことが明らかになった。これまで報告がなかったSiO_2の高圧相であるCaCl_2型の含水量測定を行うことが出来た。これは地球深部の水を理解する上で非常に重要なことであり、本研究の目標の1つである。しかしながら、本研究の最終目標である地球深部の水の挙動をより深く議論していくためには、より高圧相であるα-PbO_2型の含水量測定が不可欠である。今後は、本研究で培った高圧相の含水量測定技術を生かして、α-PbO_2型の含水量測定も行っていく必要がある。今回行うことが出来たCaCl_2型の含水量測定技術を基本として、より高圧で相転移するα-PbO_2型の含水量測定を行っていく。そのためにはより高圧力を発生する必要が出てくるが、それに伴い試料の大きさもより小さくなり、含水量測定が難しくなる。そこで、FT-IRよりも微小領域の測定が可能なSIMSを用いて含水量の測定を試みる。また、現在は常温での含水量測定であるが、地球内部は高温状態であるので、レーザーやヒーターを用いて高温を発生させ、高温を経験した試料の含水量測定も行っていく。それによって、より精密に地球内部の水の挙動を解明していく。(1)高圧下での鉄-ニッケル-水素合金の融点研究地球内部の温度構造は未だ正確に決定されておらず、解明すべき最優先事項の一つである。そこで、地球内部の温度構造を明らかにすべく、SPring-8にて川井型マルチアンビル高温高圧発生装置を用いて高温高圧その場観察実験を行い、地球核を構成しうる鉄10at%ニッケル-水素系の融点を、13.5GPaまでの圧力条件で明らかにした。これによると、鉄の融点と比べて約400K融点が低くなり、鉄-水素系の融点と比べて約100K融点が高い結果が得られた。これは、鉄中にニッケルが10at%入ることで純鉄とは異なる融点になることを示しており、実際の核条件(135GPa以上)ではさらに融点の差が大きくなると予想されることから、温度構造を知る上で非常に重要な結果である。今後、より高圧力を発生することが可能なダイヤモンドアンビルセルを用いて、地球核の圧力条件(135GPa以上)における鉄10at%ニッケル-水素系の融点を明らかにしていく。これによって地球内部の温度構造に大きな制限を与えることが期待される。(2)高圧下での鉄-硫黄-水素合金の融点研究木星の衛星であるガニメデの核は、人工衛星の観測や隕石観察などから、主に鉄-硫黄-水素系の合金である可能性が考えられる。そこでガニメデ核の構造を解明すべく、西播磨のSPring-8に設置されている川井型マルチアンビル高温高圧発生装置を用いて高温高圧その場観察実験を行い、16.5GPaまでの鉄-硫黄-水素系の融点を明らかにした。これによると、高圧下では硫化鉄中に水素が約15at%固溶し、融点が約150-250K低下することが明らかになった。

以上のことからガニメデの核は現在、全溶融しているかもしくは液体成分と水素化硫化鉄(FeSH0.2)で構成された固体成分を持ちうることが明らかになった。より実際のガニメデの核組成に近い系で実験を行ったことで、既存のガニメデの核モデルにより強い制限を加える結果となり、核の状態を解明する上で非常に重要な結果である。(1)高圧下での鉄水素化物(FeH)の弾性波速度の研究地球核は鉄と軽元素(水素など)で構成されていると考えられている。しかしながら、これらの軽元素の量や種類は未だにわかっていない。そこで地球核中の水素量を明らかにすべく、放射光施設SPring-8にてX線非弾性散乱実験(BL35XU)とX線回折実験(BL10XU)を行い、FeHの弾性波速度と密度を明らかにした。高圧発生にダイヤモンドアンビルセルを用い、70GPaという地球深部条件にて測定することができた。得られたFeHの弾性波速度と密度の結果から、地球核中には約0.30wt%の水素が含まれている可能性があることが明らかになった。今後、さらに精密に核を構成している物質について制約を与えるために、鉄-ニッケル-水素系や鉄-水素-軽元素系といったより地球核に近い系の弾性波速度や密度を測定する。(2)SiO_2高圧相の含水量測定の研究SiO_2の高圧相であるstishovite(St)は、Al_2O_3を含むことで0.3wt%程度まで水を含むことができることから、沈み込むプレート中のSiO_2が地球深部まで水を運ぶ可能性が考えられている。地球深部条件ではSiO_2はStからCaCl_2型やα-PbO_2型の高圧相に相転移するが、これらの高圧相が水をどれ程含めるのかはわかっていない。そこで地球深部条件でのAl203を含むSiO_2の相平衡と含水量を明らかにする。SPring-8.8L10XUにてX線回折実験を行い、合成した3.0wt%Al_2O_3-0.3wt%H2O-Stの相同定を行った結果、約15GPaでCaCl_2型に相転移することがわかった。pure-Stは約50GPaでCaCl_2型に相転移することから、Al_2O_3と水が相転移圧力に大きく影響を与えることが確認できた。今後、CaCl_2型およびα-PbO_2型への相転移を経験したSiO_2を回収し、フーリエ変換型顕微赤外分光光度計(FT-IR)にて含水量を測定していく。それによって、表層の水が沈み込むプレートによって地球内部に運ばれ、SiO_2を介して最終的に核にまで輸送されうるのかを明らかにしていく。(1)SiO_2高圧相の含水量測定の研究SiO_2の高圧相であるStishovite(St)は、Al_2O_3を含むことで0.3wt%程度まで水を含むことができることから、沈み込むプレート中のSiO_2が地球深部まで水を運ぶ可能性が考えられている。そこで地球深部条件でのAl_2O_3を含むSiO_2の相平衡と含水量を明らかにする。合成した3.0wt%Al_2O_3-0.3wt%H_2O-Stを約40万気圧まで加圧し、CaCl_2型に相転移させた後、常圧まで脱圧して、フーリエ変換型顕微赤外分光光度計(FT-IR)にて含水量を測定した。このようにCaCl_2型の含水量を測定したのは初めてである。それによると、相転移前後でのStとCaCl_2型の含水量に大きな違いは見られなかった。これによって、表層の水が沈み込むプレートによって地球内部に運ばれ、SiO_2を介して地球深部まで輸送される可能性が非常に高いことが考えられる。(2)高圧下での鉄-水素系(FeHx)の融点の研究
胃癌におけるProx1ホメオボックス転写因子とCOUP-TFII核内受容体の役割

胃癌におけるProx1とCOUP-TFIIの機能解析のため、OCUM-2MD3、OCUM-2MLN、MKN7、28、45細胞を用いて両者の発現を調べ、MKN28-COUP-TFIIノックダウン株を樹立し、細胞運動能および足場非依存的増殖が亢進することを示した。しかしこの細胞株をヌードマウスに移植しても腫瘍増殖に有意な差は生じなかった。このCOUP-TFIIの機能の違いが実験系によるものなのか、それとも別の原因によるものなのかを考察し、COUP-TFIIはデータベース上にsplicing variantが報告されており、full lengthをCOUP-TFIIとすると、variantについては未解明であることがわかった。そこでvariantの機能とその作用機序を検討した。まずvariantが各種細胞で発現し、構造上DNA結合を欠いているため、DNA結合能がないことを明らかにした。またCOUP-TFIIはホモダイマーを形成することが知られているが、variantはCOUP・TFIIとヘテロダイマーを形成しCOUP-TFIIのDNA結合を抑制することを示した。さらにCOUP・TFIIおよびvariantの欠損変異体を作製することで、両者の結合部位を明らかにし、内因性の結合も示した。COUP-TFIIはHepG2細胞においてCyp7a1遺伝子の転写を活性化すること報告されているが、variantはこのCOUP-TFIIによるCyp7a1の転写活性化を抑制することを示した。また、variantはCOUP-TFI-がCyp7a1プロモーターに結合することを阻害し、variantの発現により細胞内での内因性のCyp7a1遺伝子の発現も低下することを示した。以上の結果から、variantはCOUP-TFIIとの結合を介してCOUP-TFIIの作用に抑制的に機能している可能性が示唆された。胃癌におけるProx1とCOUP-TFIIの機能解析のため、スキルス胃癌原発巣から樹立したOCUM-2MD3、OCUM-2MLNおよび管状腺癌MKN7、28、45を用いて両者の発現を調べ、発現の低い細胞にはそれぞれのレンチウィルスを発現させた恒常発現株、発現の高い細胞ではmicroRNAレンチウィルスベクターを発現させたノックダウン株を樹立した。これらの細胞株を用いて細胞増殖能、細胞運動能、および足場非依存的増殖能を検討したところ、MKN28-COUP-TFIIノックダウン株では細胞増殖は変化しないが細胞運動能および足場非依存的増殖が亢進した。しかしこの細胞株をヌードマウスに皮下移植したところ、コントロール細胞株に比べ腫瘍増殖に有意な差は生じなかった。一方で乳癌細胞や膵癌細胞を移植してCOUP-TFIIを時期特異的にノックアウトすると、腫瘍内の血管新生が低下し、腫瘍の増殖が抑えられるという複数の報告が別の研究グループからなされ、COUP-TFIIが腫瘍の悪性化に寄与している可能性が示唆された。これらのCOUP-TFIIの機能の違いが実験系によるものなのか、それとも別の原因によるものなのかを考察し、COUP-TFIIにはマウスではデータベース上にsplicing variantが2つ報告されており、以前から多くの研究がなされてきたものをCOUP-TFIIとすると、variantについては全く未解明であることがわかった。そこで特に血管内皮細胞におけるvariantの機能の検討を進めることにした。現在までにvariantが血管内皮細胞をはじめとする各種細胞で発現し、variantはDNA結合を欠いた構造であるがCOUP-TFIIと結合することでCOUP-TFIIのDNA結合を抑制することを示した。今後血管内皮細胞における両者の内因性の結合や生物学的検討を進める予定である。
走査トンネル顕微鏡によるCu-O面の直接観察と局所対破壊効果から見た高温超伝導

本研究では、1)走査トンネル顕微鏡(STM)によるCu-O面の原子像からBi2212のアンダードープ領域とオーバードープ領域でのdホールの局在性の違いを明らかにすること、2)超伝導に対する不純物効果からCuサイトの3dスピンが作る磁気的ネットワークと高温超伝導との関わりを調べることを行ってきた。その結果、前者に関しては、Bi2212系のオーバードープ領域ではCu-3dおよびO-2p軌道が強く混成するためSTMパターンが格子縞状になることを確認した。一方、アンダードープ領域では輸送現象や磁気的性質の特徴からCu-3d軌道とO-2p軌道との混成が弱まってdホールの局在性が強くなっていることが予想される。その場合にはCu-O面のSTM原子像がアンダードープ領域で球状配列へ変化すると期待されるが、本研究では良質なアンダードープの単結晶が得られず、このようなSTM原子像の変化を確認することはできなかった。一方、後者の研究に関しては、dスピンを持つNiと違ってdスピンを持たないZnは周りのCu-3dスピンの磁気的ネットワークを大きく乱し、その領域では超伝導が本質的に起きなくなることを再確認した。このようなZnによる局所的対破壊効果は最近のバークレイグループによるSTMの結果とも一致する。ところで、Bi2212等の銅酸化物高温超伝導体では、平均場の特性温度T^*(2Δo/4.3k_B)付近から成長し始める擬ギャップが高温超伝導の発現と深く係わっていると考えられ、現在大きな注目を集めている。本研究でも擬ギャップに対する研究を進め、これまであまり報告のなかったLa214系でもT^*(>Tc)付近から擬ギャップが成長することを見出した。さらに、この擬ギャップ現象に対する不純物効果から、やはり擬ギャップが超伝導の前駆的現象である可能性が非常に高いことが分かった。今後、擬ギャップが高温超伝導の発現に果たす具体的役割を明らかにしていきたい。ここ23年、La214やBi2212等の銅酸化物高温超伝導体の常伝導相(T>Tc)では、異なる2つの温度T_m、T_*でクロスオーバーが存在し、これらが超伝導と深く関わっていることが明らかとなってきた。我々は、La214系のキャリアー(ホール)濃度が最適値付近からオーバードープ領域に入ると、Cuのdホールが徐々に遍歴性を強めることを明らかにした。そして、これに連動するようにクロスオーバー温度T_m、T^*が共に低下し、超伝導ギャップ2Δ_0も減少することがら、Cuのdホールの局在性が超伝導を支配する重要因子であることを指摘してきた。(1)そこで、本研究の目的の1つとして、走査トンネル顕微鏡(STM)によるCuO_2面のSTM像から、dホールの局在性(d_<x2-y2>とp_0との混成度)のホール濃度依存性を調べることとした。この研究では何処にクリーンな僻開面の試料を用意するかがその成否を決めるため、本年度は超高真空中における試料僻開が可能な極低温STM装置の組み上げを行い、現在、その極低温領域での調整を行っている。(2)また、Cuの局在dスピンが作る磁気的ネットワークに着目し、(dスピンを持たない)Zn添加によってこのネットワークを乱した場合に生じる超伝導への影響も調べている。現在までに、Zn添加によってこのネットワークを乱した場合、その領域で超伝導が完全に抑制されることが明らがとなった。

そして、この超伝導の抑制は単なる超伝導電子対の対破壊によるものでなく、局在dスピンの磁気的ネットワークに少しでも乱れが生じるとそこでは本質的に超伝導が起きなくなるためであることが結論できた。この結論は「超伝導の発現に局在dスピンが作る磁気的ネットワークが重要な役割を担っている」ことを示す大変興味深いものであり、結果の公表も行った。我々は銅酸化物高温超伝導体における不純物の対破壊効果を、Cuの3dスピンが作る磁気的ネットワークに着目して調べてきた。具体的には、不純物として3dスピンをもつNiともたないZnを選び、それらが磁気的ネットワークと超伝導に与える影響との比較を行った。その結果、3dスピンを持たないZnは磁気的ネットワークを大きく乱し、その乱れた領域では本質的に超伝導が起きなくなることを結論してきた。この結論は、植村によるミューオンを用いた不純物効果の研究や最近行われたカリフォルニア大学のSTMによる研究結果とも一致する。ところで、銅酸化物超伝導体の多くでは、常伝導相の2つの温度T_<max>、T^*付近から成長する擬ギャップが高温超伝導の発現と深く関わっていると指摘されているが、本研究ではこれらの擬ギャップに対する不純物効果の研究も進めてきた。これまでに、低温側(T<T^*)の擬ギャップに対する不純物の影響は超伝導の抑制と密接に関連しており、この擬ギャップが超伝導発現の前駆的現象という考え方を支持する結果が得られた。一方、高温側の擬ギャップに関する不純物効果からは高温側の擬ギャップの起源に関係すると思われる特徴的な結果が得られつつある。また、本研究では不純物による対破壊効果を調べるために超高真空タイプの極低温STM装置の立ち上げを行っているが、現在、ヘリウム温度で試料表面が観察できるまでに装置の調整が進んでいる。今後、微視的観点からNiとZnによる超伝導の対破壊効果や擬ギャップに対する不純物効果を調べていく予定である。本研究では1)Cu-O面の走査トンネル顕微鏡(STM)像からアンダードープ領域とオーバードープ領域でのdホールの局在性の違いを明らかにすること、2)Cuサイトのdスピンが作る磁気的ネットワークに対する不純物効果を通してこの磁気的ネットワークが超伝導の発現に果たす役割を調べてきた。その結果、前者に関しては、Bi2212系のオーバードープ領域ではd、pホールの軌道(d_<x2-y2>およびp_σ)が強く混成するためSTMパターンが格子状になることを確認した。これに対してdホールの局在性が強いアンダードープ領域では、d軌道とp軌道との混成が弱まってSTMパターンが球状配列へ変化すると期待されるが、アンダードープ領域では良質な単結晶が得られず、明瞭なSTM像は観測できなかった。一方、超伝導に対する不純物効果に関しては、3dスピンを持たないZnは(3dスピンを持つNiと違って)dスピンの磁気的ネットワークを大きく乱し、その乱れた領域では本質的に超伝導が起きなくなることを再確認した。ところで、Bi2212等の銅酸化物高温超伝導体では、常伝導相のT^*(2Δo/4.3k_B)付近からクロスオーバー的に成長する擬ギャップが超伝導の発現に深く関わっている可能性が高く、現在、世界的レベルで精力的な研究が続けられている。本研究でも擬ギャップに対する研究を進め、これまでほとんど報告のなかったLa214系でもやはりT^*付近から擬ギャップが成長することを見出した。
グリア細胞カリウムチャネルKir4.1/K_<AB>-2の分子機能解析

我々がグリア細胞に発現していることを見い出した内向き整流カリウムチャネルKir4.1について以下にあげる4つの点を明確にすることができた。(1)Kir4.1の網膜グリア細胞での分布、活性を調べ、Kir4.1が水チャネルAQP4と共存して存在しており、神経組織の水輸送に関与している可能性が高いこと、また、この2つのチャネルは基底膜に接している側にみられ、基底膜がない部位ではほとんど見られないという特徴的分布を示した。グリアと血管の間にKir4.1とAQP4を介したK^+と水の交換がおこなわれていることが強く示唆された。(2)Kir4.1が網膜の色素上皮細胞のapical側に発現しており、これまで不明であったrodやconeの部分におけるK^+ホメオスターシスが色素上皮細胞Kir4.1によっておこなわれている可能性が高いことを示した。(3)蝸牛神経細胞をとりまくグリアのサテライト細胞のミエリンにKir4.1が発現しており、蝸牛神経細胞のK^+ホメオスターシスを行っている可能性が高いことを示した。(4)胃の壁細胞のapical側にKir4.1が発現していることを見い出した。Kir4.1が、これまでわかっていなかった胃酸分泌の際に細胞外にK^+を出してK^+のリサイクルをするKチャネルであることを見い出した。以上の研究は一言で言い表すと、Kir4.1の機能として以前より我々が提唱してきた「K^+の輸送」ということがより明確にできたといえる。内向き整流カリウムチャネル(Kirチャネル)は多種類のメンバーが存在するファミリーからなり、カリウムイオン(K^+)を選択的に透過させるチャネルである。一次構造上で、N末端、C末端ともに細胞質内にあって、膜貫通領域を2つ持っており、その間にチャネルポア(穴)を形成する主な領域となっているH5とよばれる互いに相同性の高い領域が存在している。Kirチャネルはこのサブユニットが4つ集まって1つのポアを作る4量体として存在している。その機能として、細胞静止膜電位を深める作用、静止膜電位を安定化させる作用、細胞の興奮を抑制する作用、K^+の輸送、インスリンの分泌など多彩な機能を持っている。このKirチャネルファミリーの1つであるKir4.1lK_<AB>-2について、既に脳や網膜グリア細胞に発現してPDZドメインを持ったSAP97と結合して存在していることを報告したが、免疫電顕の手法を用いて、網膜ではKir4.1/K_<AB>-2が水チャネルのAQP-4と共存していることを見い出した。このことは、以前よりK^+の輸送と水の輸送が協調的におこなわれているのではないかとされてきたが、実際もK^+と水の出入りが協調している可能性が高いことが判明した。さらに、Kir4.1/K_<AB>-2は胃の壁細胞に限局して発現していることをin situhybridization,Northern blot,Western blot,immunohistochemistryで確認し、また、このチャネルの阻害薬であるBa^<2+>が胃酸分泌を抑制すること、他の種類のKチャネルであるカルシウム依存性Kチャネルや電位依存性Kチャネルの阻害薬には酸分泌を抑制する作用がなかった。一方、パッチクランプ法によって胃壁細胞のKチャネルを測定し、壁細胞にはKirチャネルが発現しており、このチャネルの性質はKir4.1/K_<AB>-2にきわめて類似していることを見い出し、Kir4.1/K_<AB>-2が胃壁細胞に発現して、酸の分泌に直接関与していることを明らかとした。

(1)Kir4.1の網膜グリア細胞での分布、活性を調べ、Kir4.1が水チャネルAQP4と共存して存在しており、神経組織の水輸送に関与している可能性が高いこと、また、この2つのチャネルは基底膜に接している側にみられ、基底膜がない部位ではほとんど見られないという特徴的分布を示した。グリアと血管の間にKir4.1とAQP4を介したK^+と水の交換がおこなわれていることが強く示唆された。(2)Kir4.1が網膜の色素上皮細胞のapical側に発現しており、これまで不明であったrodやconeの部分におけるK^+ホメオスターシスが色素上皮細胞Kir4.1によつておこなわれている可能性が高いことを示した。(3)蝸牛神経細胞をとりまくグリアのサテライト細胞のミエリンにKir4.1が発現しており、蝸牛神経細胞のK^+ホメオスターシスをおこなっている可能性が高いことを示した。(4)胃の壁細胞のapical側にKir4.1が発現していることを見い出した。Kir4.1が、これまでわかっていなかった胃酸分泌の際に細胞外にK^+を出してK^+のリサイクルをするKチャネルであることを見い出した。以上の研究は一言で言い表わすと、Kir4.1の機能として以前より我々が提唱してきた「K^+の輸送」ということがより明確にできたといえる。
bFGF/ヘパリン併用による創傷治癒促進効果の研究

本研究はbFGFとヘパリンの併用による創傷治癒促進効果を明らかにすることを目的とする。まずは、bFGF単独投与群とbFGF/ヘパリン併用群に分けて細胞数を比較したところ、併用群は有意な細胞数の増加を認めた。次に、細胞遊走試験により、併用群は細胞遊走を促進することが確認できた。さらには、細胞増殖や生存に関与するタンパクであるERKやAkt、JNKの活性化の変化であるが、併用群ではそのリン酸化までの時間の短縮を認めた。糖尿病モデルマウスを用いて、両側背部に皮膚欠損を作成した結果、bFGF/ヘパリン併用群、bFGF単独群、bFGF投与無し群の順に創傷面積の縮小を認めた。FGFはヘパリンと結合し複合体を作ることでFGFレセプターを活性化することが、知られている。bFGFとヘパリンの併用による創傷治癒促進効果を明らかにすることが本研究の目的である。1)bFGF/ヘパリン併用による皮膚線維芽細胞の増殖能力の変化を明らかにした。皮膚線維芽細胞を用いて、bFGF単独群はbFGF10ng/ml、bFGF/ヘパリン併用群はbFGF10ng/ml・ヘパリン10μg/mlを添加し、48時間後の細胞数を、吸光度490nmとして表されるホルマザン産物の量を測定することで比較した。結果であるが、bFGF単独群と比較して、bFGF・ヘパリン併用群は有意な細胞数の増加を認めた。2)bFGF/ヘパリン併用による皮膚線維芽細胞の遊走能力の変化を明らかにした。線維芽細胞を培養し、細胞濃度を100%に近い状態にしたところで、ピペットチップで溝(仮想の創傷)を作成した。bFGF単独投与群(bFGF10ng/ml)とbFGF/ヘパリン併用群(bFGF10ng/ml・ヘパリン10μg/ml)で刺激することにより、細胞がどれだけの速度でこの溝に向かって遊走し、そして、溝を埋めるかを検討した。評価は遊走距離/時間(μm/h)で行った。結果であるがbFGF/ヘパリン併用群はbFGF単独群と比較して有意に細胞遊走を促進することが確認できた。bFGFはヘパリンと結合し複合体を作ることでbFGFレセプターを活性化することが、知られている。前年度の結果でbFGF単独群と比較して、bFGF・ヘパリン併用群は有意な細胞数の増加、遊走速度の増大を認めた。したがって、本年度は細胞増殖や細胞遊走に関与するタンパクの活性化の変化をウエスタンブロッティング法で調べた。細胞増殖や生存に関与するタンパクであるERKやAktの活性化の変化であるが、bFGF投与無し群に比べて、bFGF単独投与群(bFGF10ng/ml)では、それぞれのタンパクでリン酸化(活性化)が確認できた。さらに、bFGF/ヘパリン併用群(bFGF10ng/ml・ヘパリン10μg/ml)ではそのリン酸化までの時間の短縮を認めた。さらに、ERK、Aktそれぞれの阻害剤を用いて、これらのタンパクをブロックしてやると、bFGF刺激による細胞増殖が部分的に阻害された。したがって、bFGF刺激による線維芽細胞増殖におけるシグナルにERK、Aktの関与が示唆される結果であった。次に細胞遊走に関与するタンパクであるJNKの活性化の変化を調べた。bFGF投与無し群に比べて、bFGF単独投与群(bFGF10ng/ml)では、それぞれのタンパクでリン酸化(活性化)が確認できた。さらに、JNKの阻害剤を用いて、これらのタンパクをブロックしてやると、bFGF刺激による細胞遊走が部分的に阻害された。したがって、bFGF刺激による線維芽細胞遊走におけるシグナルにJNKの関与が示唆される結果であった。これまでの結果でbFGF単独群と比較して、bFGF・ヘパリン併用群は有意な細胞数の増加、遊走速度の増大を認めた。そして、細胞増殖や生存に関与するタンパクであるERKやAktが、bFGF投与無し群に比べて、bFGF単独投与群では、それぞれのタンパクでリン酸化(活性化)が確認できた。さらに、bFGF/ヘパリン併用群ではそのリン酸化までの時間の短縮を認めた。bFGF刺激による線維芽細胞増殖におけるシグナルにERK、Aktの関与が示唆された。また、細胞遊走に関与するタンパクであるJNKの活性化の変化であるが、bFGF単独投与群と比較して、bFGF/ヘパリン併用群ではそのリン酸化までの時間の短縮を認めた。bFGF刺激による線維芽細胞遊走におけるシグナルにJNKの関与が示唆される結果であった。さらには、11週齢の糖尿病モデルマウスを用いて、両側背部に1個ずつ直径1cm大の皮膚欠損を作成した。これに対してbFGF投与無し群、bFGF

単独群、bFGF/ヘパリン併用群の3群に分けて、0.5ml皮膚欠損部に添加した。結果であるが、bFGF/ヘパリン併用群、bFGF単独群、bFGF投与無し群の順に創傷治癒面積の縮小を認めた。線維芽細胞増殖におけるシグナルにERK、Aktの関与、線維芽細胞遊走におけるシグナルであるJNKの関与が推測された。糖尿病のモデルマウスの免疫組織染色法のサンプル作成において、予想以上にマウス皮膚の剥離が多く、抗体の結合の効率が落ちているため。FGFはヘパリンと結合し複合体を作ることでFGFレセプターを活性化することが、知られている。bFGFとヘパリンの併用による創傷治癒促進効果を明らかにすることが本研究の目的である。これまでの結果でbFGF単独群と比較して、bFGF・ヘパリン併用群は有意な細胞数の増加、遊走速度の増大を認めた。そして、細胞増殖や生存に関与するタンパクであるERKやAktが、bFGF投与無し群に比べて、bFGF単独投与群(bFGF10ng/ml)では、それぞれのタンパクでリン酸化(活性化)が確認できた。さらに、bFGF/ヘパリン併用群(bFGF10ng/ml・ヘパリン10μg/ml)ではそのリン酸化までの時間の短縮を認めた。bFGF刺激による線維芽細胞増殖におけるシグナルにERK、Aktの関与が示唆された。また、細胞遊走に関与するタンパクであるJNKの活性化の変化であるが、bFGF単独投与群(bFGF10ng/ml)と比較して、bFGF/ヘパリン併用群(bFGF10ng/ml・ヘパリン10μg/ml)ではそのリン酸化までの時間の短縮を認めた。bFGF刺激による線維芽細胞遊走におけるシグナルにJNKの関与が示唆される結果であった。さらには、11週齢の糖尿病モデルマウスを用いて、両側背部に1個ずつ直径1cm大の皮膚欠損を作成した。これに対してbFGF投与無し群、bFGF単独群(bFGF10μg/ml)、bFGF/ヘパリン併用群(bFGF10μg/ml・ヘパリン10mg/ml)の3群に分けて、0.5ml皮膚欠損部に添加した。結果であるが、bFGF/ヘパリン併用群(bFGF10μg/ml・ヘパリン10mg/ml)、bFGF単独群(bFGF10μg/ml)、bFGF投与無し群の順に創傷治癒面積の縮小を認めた。これらの組織を回収し、H.E.染色および、線維芽細胞のマーカーである抗vimentin抗体を用いて免疫組織染色を行った。bFGF単独投与群と比較すると、ヘパリン併用群では線維芽細胞の増殖や遊走の促進が認められた。また、H.E.染色では上皮細胞の遊走が促進していることがわかった。本研究はbFGFとヘパリンの併用による創傷治癒促進効果を明らかにすることを目的とする。まずは、bFGF単独投与群とbFGF/ヘパリン併用群に分けて細胞数を比較したところ、併用群は有意な細胞数の増加を認めた。次に、細胞遊走試験により、併用群は細胞遊走を促進することが確認できた。さらには、細胞増殖や生存に関与するタンパクであるERKやAkt、JNKの活性化の変化であるが、併用群ではそのリン酸化までの時間の短縮を認めた。糖尿病モデルマウスを用いて、両側背部に皮膚欠損を作成した結果、bFGF/ヘパリン併用群、bFGF単独群、bFGF投与無し群の順に創傷面積の縮小を認めた。本年度に予定していた、細胞増殖・細胞遊走に関するタンパクの活性化の変化の解析を行うことができた。そして結果としても想定内であった。