hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
多様な英語の産出と知覚における音声的な分かりやすさの境界点とその音響的な定量化

本研究の目的は、それぞれ異なる母語を持つ人々によって話されている様々な種類の英語の相互的な「分かりやすさ」について解き明かすことであり、特に、そうしたそれぞれ違った英語の産出・知覚における相関関係や、多様な英語を産出・知覚する際の音声的な「分かりやすさ」を決定付けるパラメーターは一体何なのかということ、さらには、「分かりやすさ」に直接関わる韻律的要素は一体どのような意味や効果を持つのだろうかということに主な焦点を置き、違う母語を持つ話者による英語の産出・知覚実験等を行い、得られたデータを定量化すると共に、結果を分析し考察した上で、最終的に「分かりやすさ」について定義することを目指した。結果として、いかにして日本語の母語話者による英語が相手により分かりやすくなるのかということなどに関して、知見を広められた。本研究の目的は、それぞれ異なる母語を持つ人々によって話されている様々な種類の英語の相互的な「分かりやすさ」について解き明かすことである。特に、そうしたそれぞれ違った英語の産出・知覚における相関関係や、多様な英語を産出・知覚する際の音声的な「分かりやすさ」を決定付けるパラメーターは一体何なのかということ、さらには、「分かりやすさ」に直接関わる韻律的要素は一体どのような意味や効果を持つのだろうかということに主な焦点を当て、違う母語を持つ話者による英語の産出・知覚実験を行い、得られたデータを定量化すると共に、結果を分析し考慮した上で、最終的に「分かりやすさ」について定義することを目指している。なお、平成21年度には、日本語の母語話者が話す英語の特徴に関するものを中心に文献調査等を行い、産出実験を行った。実際、平成22年度に行うデータ処理によって詳細は明らかになるが、日本語の母語話者による英語発音には多少なりとも似通った傾向が見られ、「分かりやすさ」を調査する上で注目すべき点がある。母語である日本語からの影響を克服することや、文献調査等によって明らかになったようなプロソディーの各要素を「分かりやすさ」と関連付けてみることが、相互的な「分かりやすさ」を目指す上で重要であろうことなど、知見を広められたことはとても意義深いと考える。今後の計画として、データ処理や知覚実験、結果の分析等を行う予定である。なお、平成22年度には、日本語の母語話者が話す英語の特徴に関するものを含めて文献調査等を行うと共に、産出・知覚実験等の各種実験や、データ処理並びに分析等を行った。実際、日本の企業等における英語の社内公用語化の動きがより活発になってきている現代においては、英語の非母語話者である日本語の母語話者同士が、英語という言語を媒体として、お互いのコミュニケーションを図らなければならないという状況がさらに増えるということが予想される。そうした中、いかにして日本語の母語話者による英語が相手により分かりやすくなるのかということに関して、知見を広められたことはとても意義深いと考える。また、「分かりやすさ」に影響するとされる韻律的要素の音響的な定量化に関するデータ等は、今後の英語教育における音声指導において、特に発音の指導や評価等をする際においても活用できるのではないかと考える。
変異型ヘルペスウイルス単一ベクターシステムによる複合的遺伝子治療

(1)HSVの複製開始配列oriと、パッケージングシグナルを含むpBR322起源のプラスミドを用いて、CMVプロモーター下流にTIMP2、INFγを組込んだアンプリコンプラスミドを構築後HSV-G207をヘルパーウイルスとして各遺伝子を発現するdefective HSV vectorを作製した。(2)in vitro局所投与の解析では、親ウイルスHSV-G207と各々のdefective vectorのウイルス産生能に大きな差は認められず、plaque forming法による細胞傷害活性の解析でも、ヘルパーウイルスを同濃度で感染させる限りは両者に差は認めなかった。これらの結果は新たに作製したベクターにおいてもヘルパーウイルスによる細胞傷害活性が維持されていることを示す。In vivoの解析では、G207のみ、G207+IFNγ、G207+TIMP2、G207+IFN+TIMP2の順に効果の増大が認められた。(3)膀胱癌を用いたIn vivo解析: Intravesical therapy,静注による血管内投与とともに著明な腫瘍抑制効果が認められ、他臓器への副作用は認められなかった。HSV-G207をヘルパーウイルスとして機能遺伝子を同時発現するHSV Vectorを開発し、TIMP2とIFNγを付加することで治療効果が増強することが判明した。毒性減弱型G207は、膀胱内投与や静脈投与が副作用無く可能であることが示唆された。今後、進行癌を含めて応用範囲を広げられるか詳細な検討をしたいと考えている。
散在性反復配列(SINE)を指標とした哺乳類の目内,目間レベルでの系統関係の解析

本年度においては、ゾウ、ジュゴン、ハイラックス、キンモグラ、テンレツク、ツチブタ、ハネジネズミのゲノムに特異的に分布するSINE配列の単離に成功した。これらのグループは独立した6個の目を含んでおり、形態学的研究からはそれらの単系統性を示唆する様なデータは得られていない.しかし近年の分子系統学的解析からは、これらのグループが単系統群を形成する可能性も示唆されており、おそらく今から8000万年ほど前にゴンドワナ大陸から分離・孤立したアフリカ大陸において、1つの共通祖先から独立に進化を遂げた哺乳類群なのではないかと予想されていた。この新規SINEの発見はハイラックスゲノムの網羅的探索によってなされたものであり、その後にこのSINE配列を指標にしてPCRプライマーを設計し、他の哺乳類中におけるこのSINEの分布を確認した所、これらのグループに特異的に分布することかわかった。本研究は哺乳類の伝統的分類体系における大きな矛盾点を明らかにしたと共に、大陸移動と哺乳類の進化が密接に関与していることを示した重要なものであると考えている。この結果は現在Molecular Biology and Evolution誌において印刷中である。また本研究に附随してアフリカを起源とする哺乳類のミトコンドリア全長配列を用いた包括的系統解析をおこない、それらの単系統性に加えて、その内部系統に関しても詳細に解析した。その結果はGenes and Genetic System誌およびMdecular Phylogenetics and Evolution誌において現在印刷中である。
HBe抗原陰性慢性肝炎の病態と発症予測

B型肝炎の診療において、HBe抗原陰性慢性肝炎は間欠的に激しい肝炎を起こす傾向があり、肝硬変や肝癌へ進行しやすいことが報告されている。今回、この病態を検討し以下のことを明らかにした。HBe抗原セロコンバージョン後2年以降のALT上昇はHBe抗原陰性慢性肝炎と評価され、この発症予測にはALT値, HBV DNA量、HBcrAg量が有用であった。HBVのPre-core変異とウイルス量はセロコンバージョン前後で逆の関連がみられた。WFA+-M2BPはB肝炎の肝線維化および肝発癌の予測に有用であった。これらの成績は、HBe抗原陰性慢性肝炎例の予後改善に役立つことが期待される。HBe抗原陰性慢性肝炎は間欠的に激しい肝炎を起こす傾向があり、肝硬変や肝癌へ進行しやすいことが報告されている。しかし、HBe抗原のセロコンバージョン(SC)直後にHBe抗原陰性慢性肝炎となる症例を予測することは困難である。平成25年度は、SC後のALT値の推移からHBe抗原陰性慢性肝炎を定義し、この発症例と非発症例を比較検討することによりHBe抗原陰性慢性肝炎発症と関連する因子を検討した。HBe抗原SC前3年から後3年以上経過観察可能であったB型慢性肝炎の36例を対象とした。SC前後に、1年間以上ALT値が正常化した最初の時点をSCに伴う肝炎終息と定義すると、SC後2年目までは肝炎の終息する症例が多く、それ以降は少なくなった。このため、SC後2年目以降の肝炎をHBe抗原陰性慢性肝炎として評価した。SC後2年目以降のALT値の平均AUCの分布をみると30 IU/Lを境に2峰性の分布を示した。このため、平均AUCが30 IU/L以上をHBe抗原陰性慢性肝炎と定義し、30 IU/L未満の症例との間で、ALT値、HBV DNA量、HBs抗原量、HBcr抗原量、HBe抗原非産生変異などのSC前後での推移を比較検討した。HBe抗原陰性慢性肝炎発症を予測する因子としては、SC後2年目のALT値の異常が多変量解析で有意な因子であった。次に、SC後2年目のALT値が正常の症例に限って検討すると、この時点でのHBcr抗原量とHBV DNA量の高値が有意の因子であった。以上の結果より、SC後2年以内に肝炎が沈静化する症例ではHBe抗原陰性慢性肝炎の発症は少ない。しかし、このような症例においてもHBcrAg量(> 3.9 U/ml)またはHBV DNA量(> 4.5 log copy/ml)が高値の症例では発症の危険性が高く注意が必要であることが明らかになった。この発症には、ウイルスのHBe抗原非産生変異が関与しており、特にpre-core(Pre-C)変異とbasal core promoter(BCP)は重要とされている。今回、HBe抗原セロコンバージョン(SC)前後でのこれら変異の推移とHBe抗原陰性慢性肝炎発症との関連を検討した。HBe抗原持続陽性群18例、SC群25例、HBe抗体持続陽性群43例を対象とし、観察前後でPre-C/BCP変異、HBV DNA量、HBs抗原量、HBcr抗原量を測定した。遺伝子型は全例Cであった。観察期間の中央値はそれぞれ6.3年、10.8年、8.5年であった。Pre-C変異は、HBe抗原陽性時には陽性率は低く、SC前後で陽性率が高くなる傾向がみられた。HBe抗体陽性時には約60%がPre-C変異陽性であり、その後の変化は少なかった。これに対しBCP変異は、HBe抗原陽性時から陽性率が高く、SCとは関連なしに60-80%の陽性率を示した。HBV DNA量、HBs抗原量、HBcr抗原量は全て、HBe抗体陽性になるとHBe抗原陽性時に比較して有意に低値となった。HBe抗原陽性時には、Pre-C/BCP変異陽性例は陰性例に比較してHBV DNA量、HBs抗原量、HBcr抗原量は全て低値となる傾向がみられた。これに対しHBe抗体陽性時には、Pre-C変異陽性例は陰性例に比較してHBV DNA量とHBs抗原量は高値になる傾向がみられた。以上の結果より、Pre-C変異はSCと直接的に関連すること、および、HBe抗体陽性例において高ウイルス量と関連することが明らかになった。すなわち、Pre-C変異の出現はHBe抗原陰性慢性肝炎の発症と強い関連があることが示唆された。しかし、現状では、HBe抗原のセロコンバージョン後にHBe抗原陰性慢性肝炎となる症例を特定することは困難であり、臨床的な問題点となっている。これまでの研究で、HBe抗原のセロコンバージョン後にHBe抗原陰性慢性肝炎を発症した症例の特徴を、ウイルス抗原産生能、全遺伝子の変異、RNAウイルス粒子産生の観点から解析を行った。本年度は肝線維化と発癌に注目し、肝の線維化マーカーとして新規に報告されたWFA+-M2BP(Wisteria floribunda agglutinin-positive Mac-2 binding protein)の意義を、B型肝炎例を対象に解析した。

肝生検を施行した無治療のB型慢性肝炎・肝硬変患者112例を対象にWFA+-M2BPを測定した結果、肝線維化と有意な相関がみられた(r=0.3725, p=0.001)。特に、肝線維化がF2以上の症例の予測に優れており(AUC = 0.713)、既知の非観血的線維化予測マーカーと同等の予測能であった。さらに、肝発癌予測因子の多変量解析では、男性、WFA+-M2BP 0.71以上, ALT 80 IU/L以上、血小板数14.5万/μL未満が有意の因子であり、WFA+-M2BPが発癌予測因子としても有用であることが示された。今回の研究では、WFA+-M2BPが肝線維化および肝発癌を予測する新しい因子であることが明らかになった。今後、HBe抗原陰性慢性肝炎例に対象を絞った解析が必要と考えられた。B型肝炎の診療において、HBe抗原陰性慢性肝炎は間欠的に激しい肝炎を起こす傾向があり、肝硬変や肝癌へ進行しやすいことが報告されている。今回、この病態を検討し以下のことを明らかにした。HBe抗原セロコンバージョン後2年以降のALT上昇はHBe抗原陰性慢性肝炎と評価され、この発症予測にはALT値, HBV DNA量、HBcrAg量が有用であった。HBVのPre-core変異とウイルス量はセロコンバージョン前後で逆の関連がみられた。WFA+-M2BPはB肝炎の肝線維化および肝発癌の予測に有用であった。これらの成績は、HBe抗原陰性慢性肝炎例の予後改善に役立つことが期待される。H26年度は、長期経過観察可能であったHBe抗原持続陽性例、SC例、HBe抗体持続陽性群例を対象とし、観察前後でPre-C/BCP変異、HBV DNA量、HBs抗原量、HBcr抗原量を測定した。対象の選定、血清検体の整理、測定、データ解析は順調に進行し、最終的に論文化することができた。以上のことから、H26年度の計画は予定通り実行したと判断する。ウイルス肝炎の病態と治療H25年度、H26年度とも計画通り研究は進行したので、最終年度であるH27年度は視点を変え、肝線維化および発癌マーカーとHBe抗原陰性慢性肝炎の予後との関連を検討する。具体的には、肝生検を施行したB型慢性肝炎例を広く対象とし、新規マーカーであるM2BPGiを加えた各種線維化マーカーを測定し、HBe抗原陰性慢性肝炎と肝線維化や肝発癌との関連を検討する。本研究の対象となる、長期経過観察が行われHBe抗原のセロコンバージョンを伴うB型慢性肝炎症例のピックアップを行い、背景因子の入力が終了した。さらに、血清検体をシリーズで整理し、HBs抗原量やHBcr抗原量の測定を行った。ALT値やHBV DNA量の推移もデータ収集が終わり、初年度に基本的な解析が可能となった。以上のことから、初年度の計画をほぼ予定通り実行したと判断する。今後は、HBe抗原の持続陽性例、セロコンバージョン例、持続陰性例を対象に、HBe抗原非産生変異の測定を行う。まず、HBV遺伝子のプレコア、コアプロモーター領域にあるメジャーなHBe抗原非産生変異をキットを用いて測定する。続いて、セロコンバージョン前後で全塩基配列の決定を行い、マイナーなHBe抗原非産生変異の存在を確認する。これらの測定結果を元に、HBe抗原非産生変異とセロコンバージョンとの関連、さらには、病態との関連を検討する。
食品アレルゲンと抗体との相互作用の解析

未変性のウシβ-ラクトグロブリン(β-LG)をマウスに免疫した。このマウスから得た脾臓細胞と、ミエローマ細胞とを融合することによって、モノクローナル抗体(McAb)を5種類調製した。これらは、互いに異なるイデイオタイプであった。これらの抗体と、還元カルボルキシメチル化することによって高次構造が破壊されたと考えられるβ-LG(RCMβ-LG)との結合性を酵素免疫測定法(ELISA)によって調べた。McAb61B4及び62A6は、未変性β-LGのみに結合した。McAb61C1は、未変性β-LGとともにRCMβ-LGにも弱いながら結合性を示し、さらにMcAb21B3及び31A4は、未変性β-LGよりもRCMβ-LGに対して、より強い結合性を示した。次にβ-LGをトリプシン、キモトリプシン及び臭化シアンによって分離し、逆相系カラムを用いた高速液体クロマトグラフィーによって、ペプチドを分離、精製した。このペプチドと各McAbとの結合性をELISAによって調べた。その結果、McAb21B3、31A4及び61B4の結合部位は、^<25>Ala-^<40>Arg、^8Lys-^<19>Trp、^<125>Thr-^<135>Lysの中にそれぞれ含まれていることが明らかになった。これをβ-LGの高次構造にあてはめてみると、変性抗原に強い結合性を示すMcAb21B3及び31A4は、ランダムコイルの部分に結合し、未変性抗原に強く結合するMcAb61B4は、α-ヘリックスの部分に結合する可能性が示唆された。これらモノクローナル抗体と未変性及び加熱時間を変化させたβ-LGとの結合性を調べ、ランダムコイルに結合するMcAb21B3、31A4、α-ヘリックスに結合するMcAb61B4とでは、結合定数の変化する温度の異なることを明らかにし、これらMcAbがβ-LGの局所的構造変化を調べるよいプローブとなることを示した。また^8Lys-^<19>Trpの合成ペプチドを作成し、そのNMRスペクトル上のシグナルを解析した。
ネットワーク理論の基盤整備と伸張

ネットワーク理論において横の広がりとなる基礎理論の構築と縦の広がりを作る実社会に適応したモデルの伸張を行い,基礎問題と拡張問題の両方に対して,アルゴリズム開発を行った.具体的には,修正可能性を考慮したネットワーク上の配置問題に対するアルゴリズム提案,通信ネットワークにおける耐故障性の指標開発,社会ネットワークにおけるコミュニティ抽出のハイパーグラフ上への拡張,グラフの向き付けに関する基本的性質やアルゴリズム開発などを行った.ネットワーク理論において横の広がりとなる基礎理論の構築と縦の広がりを作る実社会に適応したモデルの伸張を行い,基礎問題と拡張問題の両方に対して,アルゴリズム開発を行った.具体的には,修正可能性を考慮したネットワーク上の配置問題に対するアルゴリズム提案,通信ネットワークにおける耐故障性の指標開発,社会ネットワークにおけるコミュニティ抽出のハイパーグラフ上への拡張,グラフの向き付けに関する基本的性質やアルゴリズム開発などを行った.ネットワーク理論において横の広がりとなる基盤整備と縦の広がりを作る実社会に適応したモデルの伸張を柱に,ネットワーク理論の基礎理論の構築と伸張モデルの確立,そしてアルゴリズム開発をおこなった.ネットワークの基礎理論としては要求されるグラフの特性を満たすようなグラフの枝の方向付けに関していくつかの性質を示し,効率のよいアルゴリズムを開発した.実社会に適応したモデルとしては,サービスサイエンスなどで重要視される不確実な入力のもとにいくつかの基準に基づいて意思決定を行うモデルであるロバスト性を取り入れ,入力確定後に解の修正ができる新たなロバスト最適化モデルを提案した.そしてネットワーク上の問題にこのモデルを適用したときに効率よく解ける問題を見極め,その一つである木構造上の配置問題に対しアルゴリズムを構築した.一方で,ロバスト性を取り入れたモデルに限らず,複雑な実社会の制約を加味するとネットワーク上の単純な問題でも効率よく解けなくなることが多い.このような問題に対しては,最適解でなくても,精度保証のできる解を効率よく求める近似アルゴリズムの開発が重要となる.本研究では単純な予算制約を加えた最短路問題に対する完全多項式近似アルゴリズムを構築した.構築したアルゴリズムの枠組みがより広い組合せ最適化問題に適用できることを検証し,より一般的な枠組みとしてスケジューリング問題に対するアルゴリズムとして提案した.ネットワーク理論において横の広がりとなる基盤整備と縦の広がりを作る実社会に適応したモデルの伸張を柱に,ネットワーク理論の基礎理論の構築と伸張モデルの確立,そしてアルゴリズム開発をおこなった.ネットワークの基礎理論としては,通信ネットワークにおける基本的な通信プロセスモデルにおける故障耐性に関する指標左提示した.ゴシップと呼ばれる通信プロセスが働くための最小通信数の指標と,ブロードキャストと呼ばれる通信プロセスに対する単純なアルゴリズムが働くためめ新たな指標を示した.特に,ブローキャストアルゴリズムに対する指標では,ネットワークの連結度に関する概念である最大隣接順序から導かれる指標が既存のものよりも優れていることを示した.これにより,グラフ連結度に関する概念やグラフ連結度増大アルゴリズムの適用可能性が期待される.また,組合せ論と絡めてグラフの向き付けに関する基礎的な結果を導いた.実社会に即したモデルの伸張としては,webネットワークや社会ネットワーク上のコミュニティ抽出について,ネットワークをさらに一般化したセットシステム(ハイパーグラフ)上でのコミュ二ティ抽出を議論することの重要性を示した.そして,密な部分グラフの概念を一般化した密な部分集合を求める問題に対して,効率的なアルゴリズムを提案した.提案するアルゴリズムは最大平均カット問題などの他のパラメトリックなネットワーク問題に対しても有効であることも示した.ネットワーク理論において横の広がりとなる基盤整備と縦の広がりを作る実社会に適応したモデルの伸張を柱に,ネットワーク理論の基礎理論の構築と伸張モデルの確立,そしてアルゴリズム開発をおこなった.ネットワーク基礎理論としては,通信ネットワークにおける基本的な通信プロセスであるブロードキャストにおける耐故障性の指標に関して,既存の指標の計算量を示し,提案する指標と差が大きくなる具体例を提示することで,提案する指標の優位性を裏付けた.また,従業員スケジューリングなで重要となる従属関係のあるマッチング問題に対し,既存のモデルを拡張し,複数の従属関係がある場合に,そのうち一つを満たせばよいというモデルにおいて,多項式時間で解けるケースとNP-困難となるケースを示した.この結果は,制約付きのネットワーク最適化問題への拡張が期待される.さらに,劣モジュラ関数最小化や確率グラフに関するアルゴリズムについての新たな見解を与えた.実社会に即したモデルの伸張としては,社会ネットワーク上のコミュニティ抽出について,ネットワーク理論を利用したコミュニティ抽出の概念をハイパーグラフ上に拡張し,幾つかのコミュニティ指標を提案した.昨年度に引き続き,最大密度部分集合によるコミュニティ抽出について,共著者関係からなるハイパーグラフ上での妥当性の検証実験をおこなった.また,隣接数に着目したコミユニティ指標をハイパーグラフ上に拡張し,共著者関係からなるハイパーグラフ上での各指標によるコミュニティを比較し,その妥当性についても検討した.
ACC合成酵素のリン酸化による制御機構の解明

エチレンはガス状の植物ホルモンであり、高等植物の一生を通じて様々な成長段階で重要な働きをしている。エチレン生合成経路においてACC合成酵素(ACS)は律速段階を触媒する酵素であり、エチレン生合成の中で、最も重要な酵素である。我々はACSがリン酸化されることを初めて示し、そのリン酸化部位を明らかにした。このリン酸化による制御機構は、細胞内のACSの量を調節するものであり、その分子機構を明らかにするが本研究課題の目的である。そこでリン酸化による翻訳後制御機構を解明するために、トマトACS,LE-ACS2,をリン酸化するprotein kinaseの同定を試みた結果、CDPKがクローニングされLeCDPK2と名付けた。LeCDPK2はLE-ACS2以外のACSアイソザイムもリン酸化することができた。シロイヌナズナにはゲノム中に34個のCDPKが存在しているので、トマトにおいてもそれ以上のアイソザイムの存在が予想できる。既にLeCDPK1とLeCPK1のクローニングが報告されているので、これらもクローニングしてそれぞれを大腸菌で発現させ、生化学的特徴を調べた。その結果、3つのCDPKとも生化学的に大きな違いはなかった。このことはどのCDPKが真のACS-kinaseか一義的に特定することが困難であることを意味している。一方、ACSに結合しその半減期を制御している新奇タンパク質EOLのホモログの同定も試みた。その結果、4種類のLeEOLを同定し、その中、3つについては完全長cDNAのクローニングに成功した。いずれもN末端領域にBTB/POZドメインを、C末端領域に3から5つのTPRドメインを持っており、タンパク質複合体の形成に関与することが示唆された。今後はEOLとACSの結合およびリン酸化による影響を調べる必要がある。エチレンはガス状の植物ホルモンであり、高等植物の一生を通じて様々な成長段階で重要な働きをしているが、とりわけ果実の成熟や野菜・花卉の老化など、園芸作物に与える影響は極めて大きく、エチレンの作用を人為的に制御することは、園芸分野において重要な課題である。エチレン生合成経路においてACC合成酵素は律速段階を触媒する酵素であり、エチレン生合成の中で、最も重要な酵素である、この酵素の調節は主に転写段階で制御されていると考えられてきたが、我々はACC合成酵素がリン酸化されることを初めて示し、そのリン酸化部位を明らかにした。このリン酸化による制御機構は、細胞内のACC合成酵素の量を調節するものであると推測しており、その分子機構を明らかにする。そこでリン酸化による翻訳後制御機構を解明するために、ACC合成酵素LE-ACS2をリン酸化するprotein kinaseの同定を試みた。まず傷害処理をしたトマト果実からcDNAライブラリーをZAP IIファージベクターで作製した。次にLE-ACS2が発現するように形質転換した大腸菌BL21に、このファージーライブラリーを感染させた。IPTGでcDNAとLE-ACS2を共発現させ、LE-ACS2のSer460リン酸化部位を認識する特異抗体を用いて、LE-ACS2をリン酸化するprotein kinaseをスクリーニングした。その結果、あるCDPKがクローニングされた。このCDPKはエリシターやosmotic stressにより発現が誘導されるタバコのNtCDPK2とよく類似しており、LE-ACS2以外のACC合成酵素アイソザイムもリン酸化することができることが明らかになった。

そこでリン酸化による翻訳後制御機構を解明するために、トマトACS, LE-ACS2,をリン酸化するprotein kinaseの同定を試みた結果、CDPKがクローニングされLeCDPK2と名付けた。LeCDPK2はLE-ACS2以外のACSアイソザイムもリン酸化することができた。シロイヌナズナにはゲノム中に34個のCDPKが存在しているので、トマトにおいてもそれ以上のアイソザイムの存在が予想できる。既にLeCDPK1とLeCPK1のクローニングが報告されているので、これらもクローニングしてそれぞれを大腸菌で発現させ、生化学的特徴を調べた。その結果、3つのCDPKとも生化学的に大きな違いはなかった。このことはどのCDPKが真のACS-kinaseか一義的に特定することが困難であることを意味している。一方、ACSに結合しその半減期を制御している新奇タンパク質EOLのホモログの同定も試みた。その結果、4種類のLeEOLを同定し、その中、3つについては完全長cDNAのクローニングに成功した。いずれもN末端領域にBTB/POZドメインを、C末端領域に3から5つのTPRドメインを持っており、タンパク質複合体の形成に関与することが示唆された。
口腔癌周辺にみられる異常上皮の悪性潜在能に関する細胞化学的研究

口腔粘膜扁平上皮癌新鮮例のうち、癌周辺上皮に何らかの組織学的な異常が確認された症例を対象とし以下の検索を行なった。1.臨床的検索:性、年齢、部位、癌の臨床進展度、周辺粘膜の肉眼所見、癌との位置関係について検討した。その結果、口腔粘膜癌全体と比較して、性、年齢構成に有意差は認められなかった。部位では舌が約50%と多く、臨床進展度ではT2までの小さい症例が約80%を占めていた。肉眼所見では白斑が約65%と最も多く、位置関係では異常上皮内に癌が認められたもの(I型)が約50%、両者が互いに接するもの(II型)が約30%、非連続した部位に認められるもの(III型)が約5%、II+IIIが約15%であった。2.組織学的検索:実験材料にH-E染色を行い顕鏡した。その結果、癌の分化異型度は高分化で低異型のものが約80%を占めていた。周辺上皮の組織所見では異形成を欠くものが約10%、軽度異形成が約50%、中等度が約20%、高度が約20%であった。3.核DNA量の検索:パラフィン包埋したブロックより単離細胞塗抹標本を作成、Feulgen染色を施した。この標本を顕微分光測光法を用い、Feulgen DNAの光学濃度を測光し、パソコンにてデーター解析を行い核DNA量ヒストグラムを作成した。また、この他に分散値と4C以上の細胞頻度を求めた。その結果、原発巣のDNA ploidy patternはdiploidy patternが約30%、aneuploidy patternが約70%でった。周辺異常上皮ではdiploidyが約55%、aneuploidyが約45%であった。周辺異常上皮の分散と4C以上の細胞頻度は、全般的に癌と健常上皮の中間的な値を示していたが、約15%の症例では癌の最低値を越えていた。異形成の有無とDNA ploidy patternとは明らかな関連性は認められなかった。また、異形成を有する上皮は無いものに比べ、分散、4C以上の細胞頻度が高い傾向であった。
ジャン・パオロ・パニーニの風景画に描かれた古代建築と古代彫刻のデータベース構築

ジャン・パオロ・パニーニの風景画に描かれた古代の彫刻と建築物を調査し、それらの彫刻と建築物を主要素とするデータベースを構築した。同定できた彫刻は55作品、建築物は36点である。データベースを利用して、描かれた彫刻・建築に関する美術史的な考察に必要なさまざまなデータを得ることができるほか、描かれた頻度など、純粋に統計的なデータをいろいろな観点で取得することができた。また、アップル社のiBooks Author(電子書籍化ツール)を用いて、データをデジタルコンテンツ化した。題材はパニーニの代表作《古代ローマ》(ルーブル美術館蔵)である。今年度実行したことは、データ処理環境の拡充、データ取得、データベース化、現地調査である。まず、環境の拡充として、タブレットを購入した。目的は、Apple社製のiBooks Authorのテストである。iBooks Authorは電子書籍制作アプリで、簡単に電子書籍を作ることができる。プレゼンテーションアプリkeynoteを組み込んだり、インタラクティブな画像ギャラリーを埋め込むことができるので、インタラクティブな手法でさまざまな情報を効果的に伝えることができる。テスト版として、パニーニの代表作《古代ローマ》の絵画を題材とした簡易な電子書籍を制作し、データベースの書籍化の手段として有効であることを確認した。具体的には、《古代ローマ》には画中に数多くの古代彫刻や遺跡の風景画が描き込まれているが、たとえばそのうちのある彫刻をタッチすることにより、その描かれた彫刻の実際の大理石作品の画像を表示することができた。データベース化作業は、パニーニのカタログレゾネのデータをさらに入力し、データベースを拡充した。現地調査は、予定していた科研調査のためだけの集中的な海外渡航は行わず(26年度に科研のための出張を予定)、業務で海外出張した際に、科研調査を合わせて行った。具体的には、前年度に引き続きルーブル美術館での調査、および、イタリアのデルータ美術館でパニーニ作品を2点調査した。また、ローマでパニーニが描いた古代遺跡、たとえばフォロ・ローマーノ、コロッセオなどの撮影を行った。今年度実行したことは、環境整備、データ取得、データベース化、現地調査、学術的データ解析、論文作成である。まず、環境整備として、必要な書籍、機材、ソフトウェアを購入した。書籍は研究対象の画家パニーニのカタログレゾネ、機材はコンピュータと周辺機器、ソフトはデータベース関連である。次に、データベース構築のための作業に取りかかった。第一に、カタログレゾネのスキャン作業、第二に、カタログレゾネの基本情報(作品名、所蔵先など)のファイルメーカー入力である。カタログはテキストと画像から構成されているので、両者を別々にデータ化した。すなわち、対象データに応じたファイル形式(TIFF, JPEG, PDFなど)で管理をはかった。次に、データを共有化するために、ネットワーク環境を整えた。つまり、ウェブサーバを構築し、ドメインを取得してネットワーク上のデータ共有を実現した。同時に、ファイルサーバを併置し、大量の情報を共有化するための環境を整えた。上記の作業をすすめつつ、現地調査をおこなった。調査対象は、イタリア、フランス、ドイツである。美術館などの所蔵機関で作品を実見し、写真撮影、分析をおこなった。また、現地研究者と会見し、情報を交換した。以上のデータ収集、現地調査を基にして、学術的見地により、データを分析した。つまり、描かれた古代モチーフの内容を解析し、データベース化をはかりつつ、学術的検討を加えた。そして、その結果を論文としてまとめ、発表した(飯塚隆「ジャン・パオロ・パニーニの風景画に描かれた古代彫刻の同定」『国立西洋美術館研究紀要』17(2013)、17-32頁)。最終年度実施内容は、パニーニ作品調査、現地調査、データベース化、iBooks Author(Apple社製電子書籍)化である。まず作品調査では、パニーニの絵画中の建築モチーフの同定をした。現地調査は、ローマにてパニーニに頻繁に描かれるモニュメントの写真撮影、およびルーブル美術館でパニーニの『古代ローマ』を中心とする写真撮影である。そして調査した同定モチーフ、撮影した写真をデータベース化した。そして、それらのデータを閲覧・検索するシステムとしてiBooks Authorを採用し、データを入力し、閲覧・検索方法の拡充・最適化を図った。パニーニの建築モチーフは実物に即したものと想像上のものに大別される。したがって同定が困難な建築物は相対的に少ないが、多数の作品を対象とした結果、同種モチーフの区別ができたり、あるいは現地調査により細部のモチーフが判明したものもあった。ローマでは、頻繁に現れる建築物を絵画と類似したアングルで撮影した。ルーブルでは『古代ローマ』中の約100点のモチーフを網羅的に撮影した。データベース化の成果のひとつは、建築モチーフの統計的な分析ができることにある。たとえば、パニーニの絵画は当時の観光客の旅の記念品でもあったため、モニュメントの人気の指標を提示できる。

そしてデータベース化された情報をiBooks Authorに移行し、インタラクティブな操作が可能な電子書籍を制作した。まず、『古代ローマ』の細部を構成する約100点のモチーフをすべて拡大表示できるようにした。同定できたモチーフは、実物の画像、および関連するパニーニの他の作品とリンクさせた。描かれた代表的なローマのモニュメントは、地図と関連させた。そして、モニュメントの索引を作成し、検索の利便性を高めた。美術史、考古学新たに電子書籍の利用可能性が確認できたことは収穫だった。これは、データベースをウェブ以外で活用する1つの手段だと思われる。現地調査は、海外出張の予定を変更したため、限定的になった。26年度で挽回したい。学術的解析は、初年度ほどではないが、モチーフの同定など、ある程度の進展があった。まず、コンピュータ等による作業環境はほぼ整った。カタログレゾネの基本的なスキャン作業は終了したので、テキストと画像の分割などの作業をこれから進める。カタログの基本情報(作品名、所在地など)のデータベース化(ファイルメーカー)は完了した。さらに、文献情報などをこれから加えていく。現地で実験した作品の数は、予定よりも少ない。おもな理由としては、個人コレクションが多くアクセスが困難であること、および、美術館などの所蔵機関でも、公開していない場合が多いことがあげられる。これからは、周到な事前準備によって、より多くの作品を見ることができるように努める。作品の学術的解析は、1年目としては順調に進んだと言える。実際、研究調査の一定の所産があったため、その成果の一部を、論文として発表することができた。現地での作品調査、および、欧州での文献調査を集中的に行う。調査研究の公開方法として、データベースとともに電子書籍も平行して行う。そのための前提として、学術解析を充実させる。対象作品の学術的分析により多くの時間をかける。そのためにも、現地でより多くの作品を実見する。データ解析を容易にするため、データベース構造を改善する。つまり、検索・閲覧方法などの効率化を図る。収集データ、調査研究結果の一般公開の方法を検討する。具体的には、従来のようにウェブアプリケーション化するか、それとも、最近注目されている電子書籍の形態を採用するかを検討する。当該年度は、予定していた科研のためだけの海外出張を行わなかったことが、次年度使用額が生じた主な理由である。次年度使用額は、翌年度の科研のための海外出張に主に使用する。現地調査のための費用。より多くの作品を実見するために、調査範囲を広げたい。データベース化作業の費用。より効率的・生産的なデータベース構造を目指し、データ収集を拡充する。調査結果
住民による地域自然環境の管理手法に関する研究

地方都市近郊に位置し人口が維持されている山梨県都留市と、中山間地に位置し人口が減少している山梨県早川町において、周囲の自然環境の利用の変化や将来の森林管理を考える上の問題点にどのような差があるか調査し比較検討を行った。都留市上大幡地区では、森林所有とその利用に対する意識が問題点となりうるとの考えから、自然資源利用と土地所有との関連ならびに住民の共有意識について調査を行った。上大幡地区では集落周囲は私有林に囲まれており、薪などの自然資源利用が頻繁に行われていた時期から、自所有地だけでなく他者所有の森林も用いていた。現在でもこうした私有林の利用は、頻度は少なくなっているものの、地縁的関係から利用が認められている。しかし、遠くの所有林より、近くの他者所有の森林が利用されるなど、集落から離れた森林の管理はほとんど行われなくなっている。また、集落から近い私有林に関しても、利用はするものの管理は所有者に委ねられ、「共有」としての住民の森林管理意識は低かった。一方、早川町五箇地区では多くが私有林であり、戦後は耕作地としても利用された傾斜地は植林され、現在は集落に近接する森林のみが自然資源利用の場として用いられていた。そこで、森林の管理意識・環境認識に関するアンケート調査を行った結果、森林所有者の半数以上は5年以上森林に行っておらず、行っていると答えた3割の所有者も軽作業が中心の管理であった。森林の状態について、「やや」もしくは「荒れている」と半数が回答した。森林の管理主体は所有者にあると6割が回答したが、その他の多くが国や県、町を管理主体とした方がいいと答え、個人による管理の限界が意識された。都留市では首都圏からや市内中心部からの市民参加を求め、遊休農地を開放し周囲の自然環境を活かした有機農業や林業体験などが今後の森林管理のひとつとして考えられる。早川町では都市から離れているため、町民の理解を高めた上で行政主導で森林ボランティアなどを募る方策が必要であると考えられた。地方都市近郊に位置し人口が維持されている山梨県都留市と、中山間地に位置し人口が減少している山梨県早川町において、周囲の自然環境の利用の変化や将来の森林管理を考える上の問題点にどのような差があるか調査し比較検討を行う。今年度は早川町五箇地区で調査を行った。聞き取り調査は38世帯の年長者を対象に行った。生業では、1950年頃には計34世帯が第1次産業から収入を得ていたが現在は半減し、13世帯が事務・建設業、9世帯が収入は年金のみであった。若い世代が同居するのは6世帯のみと労働人口が流出していた。耕作地は戦後直後は集落から山上まで広く畑だったが、現在は集落近くのみが耕作される。自然資源利用では、木炭生産は利用されなくなったが、薪採取,採草,山菜・キノコ採集は、利用する世帯は減少しているが、趣味や楽しみとして利用が変化して続けられている。観察や聞き取りから、集落を囲む森林の機能低下がみられることから、森林の管理意識・環境認識について、20歳以上の常住者にアンケート調査を行った(無記名,直接配布/回収,配布数156,回収率88.5%)。対象者の65%が森林を所有し、そのうち約3割の人が年1回以上行っていたが、半数近くは5年以上行かず、軽作業中心に行われていた。森林の状態について「やや」または「かなり荒れている」と回答者の半数以上が答えた。労働力の流出を考慮すると現在森林の管理が困難となり、その結果森林が荒れていると認識をもつ。今後の管理主体については、所有者管理の原則は強く認識されているが、個人による管理の限界が意識されていた。森林ボランティアへの理解は乏しかった。都市から離れているこの地域では、都市居住の関心の高い人々を取り込む活動での森林管理は持続的には望めないことから、地域の人々の関心を高めた上で、行政主導でボランティアを募る等の方策が必要と考えられる。

森林の管理主体は所有者にあると6割が回答したが、その他の多くが国や県、町を管理主体とした方がいいと答え、個人による管理の限界が意識された。都留市では首都圏からや市内中心部からの市民参加を求め、遊休農地を開放し周囲の自然環境を活かした有機農業や林業体験などが今後の森林管理のひとつとして考えられる。早川町では都市から離れているため、町民の理解を高めた上で行政主導で森林ボランティアなどを募る方策が必要であると考えられた。
「遊びの質」を高める園文化に関するエスノメソドロジー研究

近年、国の保育の規制緩和により、園の運営体制が変化し、子どもの育ちが損なわれるのではないかと懸念されている。発達心理学の知見では、子どもの育ちには、遊びが重要とされている。そのため本研究は、幼児の発達を促す「遊びの質」を確保できる園条件を明らかにする。現状、幼稚園教育要領には、「遊びの質」を確保するための視点が示されているが、その言葉の解釈は保育者によって大きく異なる。なぜなら保育者が「遊びの質」を判断する際、「園文化」(同僚、事例検討会、研修、保育記録、保護者等)の影響を無意識に受けているからである。「園文化」は、可視化・言語化が難しく「遊びの質」は、今まで十分に研究されてこなかった。本研究は、「園文化」をとらえるのに適したエスノメソドロジー法により、日本の「遊びの質」の規準といえるA園と、最近「遊びの質」を意識し始めたB園の比較から、1「遊びの質」の発達過程、2「遊びの質」を高める同僚関係、研修、教材等を明らかにする。これにより、日本中の園に、「園文化」を自覚し改善する道筋を示すとともに、日本の保育のレベルの維持・向上に寄与したい。本年度、明らかにしたのは以下の点である。(1)エスノメソドロジーの一種、アクションリサーチ法にネットワーク分析を取り入れる新たな研究方法について、論文にまとめた。これは、A園B園の遊びの質の比較や、保育者研修の効果測定の方法の一つとして活用できる。(2)遊びの質を高める過程において、保育者が抱える課題として「外遊びと室内遊びの時間配分」、「行事による異年齢間の模倣の成立」、「日常的な室内遊びにおける学級内の模倣の成立」、「一斉保育と自由な遊びの時間の関連性」等があることが見出された。(3)遊びの質を高める過程において、保育者同士の話し合いの時間の確保、子どもの遊びを継続的に観察可能となるシフト体制、等を実現する必要があることが見出された。(1)研究フィールド(A園、B園)との協力関係を構築できた。A園では2回の観察、観察結果をもとにした保育者研修を2回実施できた。B園では、年に6回の観察および、保育者研修を1回実施できた。同様に、園の保育者へのスーパーバイズを行う研究会を年に4回実施できた。(2)アクションリサーチにネットワーク分析を取り入れる新たな研究方法について、論文にまとめることができた。次年度以降の本格的なデータ収集と分析に役立てていく。(3)保育記録、保育者同士の打ち合わせや振り返りの日常会話の収集を行った。これらのデータを、エスノメソドロジー法の一つである会話分析(CA)と、保育映像のネットワーク分析を組み合わせて「遊びの質」を分析する方法を考案中である。(1)A園の取り組みをエスノグラフィーにまとめる。B園では、一斉保育から遊び中心の保育に切り替える際に様々な課題を乗り越えてきた。この歴史は、数値化できるものではないが、データを分析する際に重要な視点を提供すると考えられる。また、遊び中心の保育を志向する他園にも重要な示唆を与えると考えらえる。(2)A園、B園にて継続的にデータの収集を行う。B園での研修の機会を増やし、B園の保育者同士の子ども観、保育観を言語的に共有するとともに、小川博久による「遊び保育論」をもとに保育者の身体知の変革を目指す。そのための園内の情報共有方法について、アナログ媒体、インターネット媒体等において検討する。これらの過程を記録し、成果も課題もエスノグラフィーにまとめていく。(3)継続的なデータ収集を実施し、A園とB園の遊びの質の比較、および縦時的変化を実証的に分析し、現場に還元、論文にまとめていく。

(2)遊びの質を高める過程において、保育者が抱える課題として「外遊びと室内遊びの時間配分」、「行事による異年齢間の模倣の成立」、「日常的な室内遊びにおける学級内の模倣の成立」、「一斉保育と自由な遊びの時間の関連性」等があることが見出された。(3)遊びの質を高める過程において、保育者同士の話し合いの時間の確保、子どもの遊びを継続的に観察可能となるシフト体制、等を実現する必要があることが見出された。(1)研究フィールド(A園、B園)との協力関係を構築できた。A園では2回の観察、観察結果をもとにした保育者研修を2回実施できた。B園では、年に6回の観察および、保育者研修を1回実施できた。同様に、園の保育者へのスーパーバイズを行う研究会を年に4回実施できた。(2)アクションリサーチにネットワーク分析を取り入れる新たな研究方法について、論文にまとめることができた。これは、A園B園の遊びの質の比較や、保育者研修の効果測定の方法の一つとして活用できる。次年度以降の本格的なデータ収集と分析に役立てていく。(3)保育記録、保育者同士の打ち合わせや振り返りの日常会話の収集を行った。これらのデータを、エスノメソドロジー法の一つである会話分析(CA)と、保育映像のネットワーク分析を組み合わせて「遊びの質」を分析する方法を考案中である。(1)A園の取り組みをエスノグラフィーにまとめる。B園では、一斉保育から遊び中心の保育に切り替える際に様々な課題を乗り越えてきた。この歴史は、数値化できるものではないが、データを分析する際に重要な視点を提供すると考えられる。また、遊び中心の保育を志向する他園にも重要な示唆を与えると考えらえる。(2)A園、B園にて継続的にデータの収集を行う。B園での研修の機会を増やし、B園の保育者同士の子ども観、保育観を言語的に共有するとともに、小川博久による「遊び保育論」をもとに保育者の身体知の変革を目指す。そのための園内の情報共有方法について、アナログ媒体、インターネット媒体等において検討する。これらの過程を記録し、成果も課題もエスノグラフィーにまとめていく。(3)継続的なデータ収集を実施し、A園とB園の遊びの質の比較、および縦時的変化を実証的に分析し、現場に還元、論文にまとめていく。
ナノクリスタルの引っかき硬さと摩耗特性

本研究は超微細結晶の純銅について四角錐圧子の押込みと引っかきの各試験ならびにピン-円板型の摩擦・摩耗実験を行い,それらの試験結果を粗大結晶粒の銅についての試験結果と比較し,変形の特性について調べることを目的として行ったものである.実験の結果から以下に記す結論を得た.1.押込み仕事量に対する弾性回復エネルギの割合は結晶粒径が細かい方が大きく上記材料の中では単結晶試料が最も大きい.2. UFG0.2とUFG-Aでは押込み負荷時間が長いほど硬さの値は大きく現れるが,他の試料では負荷時間の影響をほとんど受けない.3.引っかき硬さと押込み硬さとの比は試料(1)と(2)では約0.7,試料(3)では1.72.0,また単結晶でほぼ1.0という値である.4. UFG0.2,CGともにすべり速度の増大とともに比摩耗量が減少する傾向を示すが,ある特定のすべり速度のもとで比摩耗量が極端に大きい値を取る.5. UFG0.2,CGでは摩耗過程でシビア摩耗とマイルド摩耗が確認でき,シビア摩耗では摩耗粉の移着,成長,一方マイルド摩耗では酸化物粒子の生成,堆積が起る.本研究は超微細結晶の純銅について四角錐圧子の押込みと引っかきの各試験ならびにピン-円板型の摩擦・摩耗実験を行い,それらの試験結果を粗大結晶粒の銅についての試験結果と比較し,変形の特性について調べることを目的として行ったものである.実験の結果から以下に記す結論を得た.1.押込み仕事量に対する弾性回復エネルギの割合は結晶粒径が細かい方が大きく上記材料の中では単結晶試料が最も大きい.2. UFG0.2とUFG-Aでは押込み負荷時間が長いほど硬さの値は大きく現れるが,他の試料では負荷時間の影響をほとんど受けない.3.引っかき硬さと押込み硬さとの比は試料(1)と(2)では約0.7,試料(3)では1.72.0,また単結晶でほぼ1.0という値である.4. UFG0.2,CGともにすべり速度の増大とともに比摩耗量が減少する傾向を示すが,ある特定のすべり速度のもとで比摩耗量が極端に大きい値を取る.5. UFG0.2,CGでは摩耗過程でシビア摩耗とマイルド摩耗が確認でき,シビア摩耗では摩耗粉の移着,成長,一方マイルド摩耗では酸化物粒子の生成,堆積が起る.本研究は超微細結晶を有する純銅の常温のもとでの押込み硬さおよび引っかき硬さを明らかにすることを目的としている.そのために静的なビッカース硬さ試験と3種類の引っかき速度0.05,0.5および5.0(mm/s)のもとでの引っかき試験を行った.実験に用いた試料は純度99.96%で,Equal-channel angular Pressingという方法で加工を施したものである.これを熱処理を施さない状態(No.1)と200°Cで3分間(No.2),および550°Cで30分間の焼きなましを施した状態(No.3)で試験に供した.それぞれ試験の平均結晶粒径は0.2,0.2,および15(μm)で,200°Cでの熱処理では結晶粒の成長は認められない.また,試料No.1,No.2およびNo.3のビッカース硬さの値はそれぞれ,1260,1290,470である.引っかき試験の結果では,No.3の引っかきこんの幅は明らかにNo.1よりも大きく,その引っかきこんの周縁を電子顕微鏡で観察したところ,材料の「むしれ」の状態が見られ,とくに周縁から内部にかけて波打つような表面の凹凸が観察される.これらの凹凸は引っかき方向に垂直な方向に近い状態で配列されているすべり面でのすべりが集積することによって生じたものである.いずれの試料でも引っかき速度を増大させるにしたがって引っかき硬さが増すという結果を得た.本研究で行った引っかき試験では,材料の内部では引張,圧縮,せん断の各応力を受けており,本実験の結果は一般に材料に引張あるいはねじりを与える場合ひずみ速度を増すほど強度が大きくなる傾向があることに対応している.本研究結果はナノメートルオーダーの超微細な結晶粒をもつ純金属が摩擦というものに対してどのような変形挙動を示すかを明らかにしたものであり,摩耗のメカニズムを結晶粒レベルで解明する上での手掛りとなるものである.これまでの超微細結晶材料に関する研究は,硬さの結晶粒径依存性について調べたものが多く,その摩耗,摩擦特性を対象にした研究はほとんど行われていない.本研究は,超微細結晶の純銅に対して,圧子押込み,引っかき,摩擦を与え,それらの試験結果を粗大結晶粒の銅についての試験結果と比較し,変形の特性について調べることを目的としている.上記(1)から(5)までの試料に対しては,ダイアモンド四角錐圧子による押込み試験と引っかき試験を行い,試料(1)と(4)に対してはピン-円板型の摩擦・摩耗試験も行った.これらの実験の結果から以下に示す結論を得た1.結晶粒径が細かいほど押込み仕事量に対する弾性回復エネルギーの割合が大きい.2.結晶粒径が細かい(1)と(2)では,押込み負荷時間が長いほど硬さの値が大きく現れるが,他の試料の硬さは負荷時間の影響をほとんど受けない.

3.引っかき硬さと押込み硬さの比は,試料(1)と(2)では0.7前後,試料(3)では1.72.0,また単結晶ではほぼ1.0に近い値をとる.5. CGC,UFGCでは摩耗過程でシビア摩耗とマイルド摩耗が確認でき,それらの過程で摩耗粉の移着,成長,さらに酸化物粒子の生成,堆積が起こる.
CDDPの卵胞毒性及びGn-RHagonist併用による毒性軽減の基礎的研究

【実験方法】(1)6週令の雌のWistar系ラットにCDDPのLD50値から投与量を設定し1性周期(5日間)と2性周期、腹腔内に投与する。投与終了後24時間で両側卵巣を摘出し、連続切片を作成、最大割面での遺残卵胞を成熟度別に分類し、顆粒膜細胞層と卵原細胞の組織学的変化を検討する。(2)血清FSH、E2値を測定し組織学的変化との関係を検討する。(3)5週令のラットにヒト常用量(500μg/kg)のGn-RHagonistを皮下に投与し投与後1性周期と2性周期で遺残卵胞を成熟度別に分類し小卵胞優位の環境が形成される至適時期を決定する。血清E2値とFSH値を測定し内分泌学的にも卵巣周期が抑制されることを確認する。(4)(3)で求めた至適時期からGn-RHagonistを先行投与してCDDPを投与した群とCDDP単独投与群で最大割面での遺残卵胞数を比較しGn-Rhagonistによる卵胞破壊の抑制が可能かを検討する。(5)アポトーシスの発現の違いについても検討を行う。【実験結果】(1)中卵胞及び大卵胞では、顆粒膜細胞層の空胞化及び菲薄化を認め、卵原細胞については膨化傾向が見られた。(2)E2値と顆粒膜細胞層の組織学的変化を示す遺残卵胞数との相関を認めた。(3)Gn-RHagonist投与後、1性周期で有意に小卵胞優位の環境が形成された。投与後1性周期と2性周期では小卵胞数、小卵胞の割合には有意差は認められなかった。E2値は有意に低下しFSH値も有意に低下した。(4)CDDP群に比べGn-RHagonist併用群では有意に遺残する小卵胞数が増加した。(5)Gn-RHagonist併用群ではアポトーシス・インデックスが低い傾向が見られた。【結論】ラットではCDDPを投与する際、Gn-RHagonistを併用することで卵胞毒性を受けにくい小卵胞を温存できる可能性が示唆された。【実験方法】(1)性成熟期を過ぎた5週令の雌のWistar系ラットを1週飼育した後、6週令で実験的に求めたCDDPのLD50値から投与量を設定し1性周期(5日間)と2性周期(10日間)連日、腹腔内にOne shotにて投与する。投与終了後24時間で両側卵巣を摘出し一部を10%ホルマリン液で固定し4μmの連続切片を作成、HE染色後、最大滑面での遺残卵胞を予め作成したラットの卵胞の成熟度別分類表に従って小、中、大卵胞に分類し成熟度別に顆粒膜細胞層と卵原細胞の組織学的変化を検討する。(2)卵巣摘出時に採血を行い血清中のFSH、E2値をRIA法にて測定し(1)での組織学的変化との関係を検討する。(3)摘出卵巣の一部から凍結切片を作成し最大滑面でアポタックキットを用いてアポトーシス発現の変化について検討する。【実験結果】