hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
越境するイスラーム紛争・チベット問題に関する実証研究：「宗教NGO」の視点から

イスラーム紛争に関して、以下の地域にてイスラームコミュニティ、礼拝参加者、女性信徒の生活、雲南系ムスリムの有無を調査した。(1)8月シェムリアップ(カンボジア)ニャックマーモスクにて、中国雲南系ムスリムの越境状況、(2)12月ハノイ(ベトナム)アルノーモスク、ホーチミン(ベトナム)アルラヒームモスクとチョロンモスクにて、社会主義国のイスラーム政策、(3)3月北京市(中国)の東四モスクでは、イスラームと「宗教の中国化」政策の実態を調査した。チベット問題に関して、以下の地点で現地調査を行った。(1)8月中国四川省白玉県のヤチェン修行地にて、大規模宗教コミュニティにおける宗教ツーリズムの実態。(2)8月四川省甘孜県の朱徳総司令格達活仏記念館にて1940年チベット仏教高僧と中国共産党の協力関係。(3)8月四川省丹巴県の頂果山寺にて、1940年代頂果山寺と中国共産党の協力関係。(4)北京にてチベット仏教内部流通本の調査。今年度ラルン五明仏学院(色達県)での現地調査を予定していたが、外国人の立ち入りが禁止状態にあるため、調査の実施を断念した。コロンビア大学(ニューヨーク)の研究者YasminChoとラルンガル及びヤチェン修行地に関する情報確認を実施した。アウトリーチ活動への準備を2点行った。(1)チベット問題に関する市民講座の実施準備、2019年4月に開催予定。(2)チベット問題に関する一般書の執筆、2019年5月に刊行予定。(2)については、ラルン五明仏学院を舞台とした中国共産党の統一戦線活動への宗教者の対応、日本おけるラルンガル関連記事の調査、チベット亡命政府から見たラルンガル、漢人信徒の動向、宗教政策への対応、2016年以降のラルンガル改造計画、2017年NHK放映番組「天空の宗教都市」の記録等を執筆した。主にチベット問題に関する漢語資料の入手に成果があった。ケンポ・ソダジ、ケンポ・ツルティム・ロドゥの漢語版著作、ヤチェン修行地のアソン・リンポチェに関する図版資料を入手することができたため、次年度の研究活動に進展が期待できる。『天空の聖域ラルンガル』の執筆を完了することができたことは大きな収穫である。イスラーム紛争、チベット問題に関する海外現地調査の実施も順調であった。アウトリーチ活動の準備も進み、来年度の実施へ向けて支障はない。次年度は研究期間(4年間)の最終年にあたるため、研究成果の公表に力を注ぎたい。成果の柱はラルン五明仏学院(中国四川省)に関する単著の刊行である。同時に、中国共産党の宗教政策と漢人のチベット仏教信仰に関する共著の準備を行う予定である。中国四川省甘孜州の政治動向が安定している時期に、ラルン五明仏学院での調査を行う予定である。イスラーム紛争に関しては、平成28年8月に中国陝西省とウイグル自治区にて中国共産党の宗教政策とイスラーム政策をテーマとする現地調査を行った。調査地点は西安(清真大寺、清真古寺、清真西寺)、カシュガル(アパクホージャ・モスク、エイティガール・モスク、プラベカシ・モスク)、トルファン(エミン・モスク)、ウルムチ(ジッドリッキ・モスク)のモスクである。同時にウルムチのプロテスタント教会で活動状況を観察した。チベット問題に関しては、平成28年8月に中国陝西省西安の広仁寺(チベット仏教ゲルク派)にて、中国共産党のチベット政策及び「宗教と和諧」政策の動向を調査した。平成29年2月、ラルン五明仏学院(中国四川省甘孜チベット族自治州色達県)のツティン・ロドゥ副学院長が来日した際、京都大学及び京都大谷ホールで行われた講演を聴講し、中国共産党の統一戦線活動の展開とチベット仏教の関係を調査した。7月に大阪大学にて「漢人宗教意識の新潮流」という報告を行い、中国経済学や文化人類学の分野からレクチャーを受けた。中国共産党の宗教政策に関して、7月に天理台湾学会にて「台湾と中国の宗教交流を中国の統一戦線工作から考察する」と題する報告を聴き、台湾の動向を確認した。アウトリーチの一環として、単著『天空の仏学院ーラルンガルへの誘惑』(仮題)の執筆を進めた。平成29年度刊行予定である。平成29年3月にNHK-BSプレミアムが放映した「天空の宗教都市」の制作・取材への協力を行った。新疆ウイグル自治区での現地調査は大きな成果が得られた。単著『天空の仏学院ーラルンガルへの誘惑』の執筆が進んだことも重要な成果である。これまで実施してきたラルン五明仏学院の調査結果が、NHK番組「天空の宗教都市」の放映に結びついた。一方で、中国四川省甘孜チベット族自治州を中心に政治情勢が悪化したため、外国人の立入制限が発生した。そのため、当初予定していたラルン五明仏学院での調査を中止せざるを得なかった。イスラーム紛争に関しては、以下の地点で現地調査を実施した。(1)8月中国青海省玉樹市の玉樹モスク、(2)9月中国四川省成都市の皇城モスク、(3)10月中国北京市の東四モスクと南豆芽モスク、(4)12月タイのチェンライモスク、メーサイモスク、ミャンマーのタチレクモスク、(5)2月タイのプーケットモスク、(6)中国雲南省麗江市の麗江モスク、大理市の西門モスク、南門モスク、昆明市の順城モスク、上海市の小桃園モスク、福佑路モスク。

各地の調査を総合し、中国政府の宗教事務管理の実態比較を行った。チベット問題に関しては、以下の地点で現地調査を実施した。(1)8月中国四川省徳格県の佐欽寺、石渠県の江瑪寺、玉樹市のタンカ寺、結古寺、(2)9月中国四川省成都市の昭覚寺、(3)中国北京市の雍和宮、(4)1月ケンポ・ツルティム・ロドゥの来日講演(京都市)。主に漢人信徒の中国仏教への接近状況を読み解く作業を行った。中国共産党の宗教政策に関して、(1)10月北京市にて中国共産党第19回全国大会開催時期、(2)3月中国雲南省と上海市にて全国人民代表大会開催時期における政府の宗教事務管理の状況を調査した。研究資料の入手面で成果が得られた。主にチベット仏教に関する漢語教材『慧燈之光』等(内部流通本)。アウトリーチ活動への準備を2点行った。(1)チベット問題に関する市民講座の実施準備、平成30年度に開催予定。(2)チベット問題に関する一般書の執筆、平成30年度に刊行予定。主にチベット問題に関する漢語資料の入手に成果があった。「漢人信徒とチベット仏教の関係」「中国宗教組織の震災支援活動」に関する内部流通資料の入手は次年度の研究活動の展開に進展をもたらすであろう。海外現地調査の実施も順調であった。特に「タイとミャンマー」「タイとラオス」「中国とミャンマー」国境周辺地域での調査を行った意義は大きい。アウトリーチ活動の準備も進み、来年度の実施へ向けて支障はない。イスラーム紛争に関して、以下の地域にてイスラームコミュニティ、礼拝参加者、女性信徒の生活、雲南系ムスリムの有無を調査した。(1)8月シェムリアップ(カンボジア)ニャックマーモスクにて、中国雲南系ムスリムの越境状況、(2)12月ハノイ(ベトナム)アルノーモスク、ホーチミン(ベトナム)アルラヒームモスクとチョロンモスクにて、社会主義国のイスラーム政策、(3)3月北京市(中国)の東四モスクでは、イスラームと「宗教の中国化」政策の実態を調査した。チベット問題に関して、以下の地点で現地調査を行った。(1)8月中国四川省白玉県のヤチェン修行地にて、大規模宗教コミュニティにおける宗教ツーリズムの実態。(2)8月四川省甘孜県の朱徳総司令格達活仏記念館にて1940年チベット仏教高僧と中国共産党の協力関係。(3)8月四川省丹巴県の頂果山寺にて、1940年代頂果山寺と中国共産党の協力関係。(4)北京にてチベット仏教内部流通本の調査。今年度ラルン五明仏学院(色達県)での現地調査を予定していたが、外国人の立ち入りが禁止状態にあるため、調査の実施を断念した。コロンビア大学(ニューヨーク)の研究者YasminChoとラルンガル及びヤチェン修行地に関する情報確認を実施した。(1)チベット問題に関する市民講座の実施準備、2019年4月に開催予定。(2)チベット問題に関する一般書の執筆、2019年5月に刊行予定。(2)については、ラルン五明仏学院を舞台とした中国共産党の統一戦線活動への宗教者の対応、日本おけるラルンガル
省察に特化した表現力育成プログラムの開発：科学コミュニケーションゲームを活用して

生徒同士の深い省察に重点を置いた、科学コミュニケーションゲームによる表現力を効果的に育成するための学習プログラムを開発する。具体的には、生徒の発達段階に応じたゲームの構築、実施プログラム作成を行う。このプログラムに基づいて授業実践を行い、その結果を踏まえ授業を実施するための学習用テキストと教師用指導書を作成しする。最後に研究の成果を学会等で発表し普及を図る。
外性器形成過程の発生遺伝学的解析

哺乳類は脊椎動物の中でも、良く発達した外性器を有している。これは哺乳類が効率的な精子の伝達手段を外性器発達によって獲得したことを意味しており、おそらくは水生生活から陸上生活への変化に対する受精方法の適応とも考えられる。高等哺乳類の外性器形成過程は、これまで分子発生工学的に全く解明されておらず、そもそも如何なるメカニズムで胎生期に外性器原基(一種の突起構造)が伸長するのか、更に如何にそれが分化して外性器を作っていくのか殆ど理解されていない。我々は本研究によって、まずマウス外性器の形成過程を分子発生工学的に解析する世界的に極めてユニークなプロジェクトを展開した。まず我々は、生殖結節の形成における諸分子群の機能を調べるため、マウス生殖結節の器官培養系を樹立した。また、このような系を用いてFgf遺伝子を発現している尿道上皮先端領域が、生殖結節間葉遺伝子の発現を制御し得ること、また尿道板上皮に発現するShhも外性器形成に必須であることを見いだした。以上の知見は、四肢と生殖結節の形成過程の類似性を進化発生学的に示唆する大変興味深い結果であり、外性器形成過程においても器官形成のシグナリングセンターが存在する可能性をも示している。以上のように世界的にユニークな研究成果を発表することができた。
11p15転座型白血病のNUP98遺伝子の相手遺伝子の単離とその機能解析

研究プロジェクトの3年間の最終年度である。11p15転座型白血病/MDSにおいて、我々はこれまでNUP98遺伝子に融合する3つの新規相手遺伝子(HOX遺伝子)を単離・同定した。本研究の目的は、未知の相手遺伝子の単離を行い、機能を明らかにすること、および11p15転座型白血病/MDSに関連するがん遺伝子あるいはがん抑制遺伝子を同定することにより、11p15転座に共通した白血病発症のメカニズムが明らかになり、将来の治療法の発展に貢献することである。今年度の研究成果は以下の通りである。1)NUP98-HOX融合遺伝子を有する白血病が有する他の遺伝子異常の同定:NUP98-HOX融合遺伝子は骨髄系造血幹細胞の分化を抑制するが、細胞の増殖に対する十分ではないことが予測された。そこで、我々は細胞の増殖に関与する遺伝子変異の有無を検討した。昨年度、HOX遺伝子の機能を制御しているMLL遺伝子の転座を有する白血病において、MLL遺伝子再構成を有する乳児白血病において、細胞の増殖に関与するFLT3遺伝子変異が高頻度に認められ、FLT3の下流に存在するSTAT5がFLT3 ligandの刺激なしにリン酸化されることが証明された。このことから、NUP98-HOX融合遺伝子を有する白血病についても、同様にFLT3遺伝子の関与があるかどうか検討したところ、FLT3遺伝子変異が高頻度に認められた。現在、他の細胞増殖に関与する遺伝子異常について検討している。研究プロジェクトの3年間の初年度である。11p15転座型白血病/MDSにおいて、我々はこれまで3つの新規相手遺伝子を単離・同定した。本研究の目的は、未知の相手遺伝子の単離を行い、機能を明らかにすることにより、11p15転座に共通した白血病発症のメカニズムを明らかにし、将来の治療法の発展に貢献することである。1)NUP98-HOXD11融合遺伝子を有するAMLの微小残存病変(MRD)の評価:以前我々が同定したNUP98-HOXD11融合遺伝子を有するAMLの患者において、治療後の骨髄の細胞を用いてRT-PCR法でMRDの検討を行った。治療後2か月後より治療終了後までMRDは消失していた。血液検査および骨髄検査でも再発していないことから、NUP98-HOXD11融合遺伝子のMRDは、臨床経過を観察する上で有用であると思われる。2)NUP98-HOX融合遺伝子を有する白血病が有する他の遺伝子異常の同定:NUP98-HOX融合遺伝子だけでは白血病化には十分ではないことが予測された。そのため、他の遺伝子変異(second hit)の存在を検討した。まず、造血の分化に関与するAML1遺伝子変異の有無を検討したが、NUP98-HOX融合遺伝子を有する白血病ではこの変異は認められなかった。NUP98-HOX融合遺伝子は造血の分化を制御する報告がみられるので、次のステップとして、細胞の増殖に関与する遺伝子変異の有無を検討した。HOX遺伝子の機能を制御しているMLL遺伝子の転座を有する白血病において、Genechipを用いて遺伝子発現プロファイリングを行ったところ、いくつかの細胞の増殖に関与する遺伝子の発現に差が認められた。NUP98-HOX融合遺伝子を有する白血病についても今後研究を極めてゆきたい。研究プロジェクトの3年間の2年度である。1)NUP98-HOX融合遺伝子を有する白血病が有する他の遺伝子異常の同定:NUP98-HOX融合遺伝子だけでは白血病化には十分ではないことが予測された。NUP98-HOX融合遺伝子は造血の分化を制御する報告がみられるので、細胞の増殖に関与する遺伝子変異の有無を検討した。HOX遺伝子の機能を制御しているMLL遺伝子の転座を有する白血病において、Genechipを用いて遺伝子発現プロファイリングを行ったところ、いくつかの細胞の増殖に関与する遺伝子の発現に差が認められたことを昨年報告した。今年度は、そのMLL遺伝子再構成を有する乳児白血病において、細胞の増殖に関与するFLT3遺伝子変異が高頻度に認められ、FLT3の下流に存在するSTAT5がFLT3 ligandの刺激なしにリン酸化されることが証明された。このことから、NUP98-HOX融合遺伝子を有する白血病についても、同様にFLT3遺伝子の関与があるかどうか現在検討中である。

昨年度、HOX遺伝子の機能を制御しているMLL遺伝子の転座を有する白血病において、MLL遺伝子再構成を有する乳児白血病において、細胞の増殖に関与するFLT3遺伝子変異が高頻度に認められ、FLT3の下流に存在するSTAT5がFLT3 ligandの刺激なしにリン酸化されることが証明された。このことから、NUP98-HOX融合遺伝子を有する白血病についても、同様にFLT3遺伝子の関与があるかどうか検討したところ、FLT3遺伝子変異が高頻度に認められた。現在、他の細胞増殖に関与する遺伝子異常について検討している。
葉層構造並びに力学系の研究

我々の今回の研究の目標は、多様体上の葉層構造の定性的性質を調べること、および、力学系の非遊走点集合の安定性のための条件をみいだすことであった。前者についての我々の実績は、次のとおりである。離散群上の単位円周【S^1】への作用についての、Ghysの結果をうけて、ふたつの、そのような作用が、いつ半共役になるか、そのための、数量的不変量を与えることに、我々は成功した。さらに、我々は、そのような作用に対し、実EUler類と呼ばれる不変量を定義し、その消滅のための条件をみいだした。応用は次のとおりである。松元-森田により、すでに、PSR(2,TR)および【Homeo^+】(【S^1】)の有界(2次元)コホモロジーが計算されており、いづれも実数体と同型であった。このコホモロジーの少ないことと、上記の今回結果を結びあわせると、次のようなものが決定される。(1)PSL(2,IR)の自己準同型((2)【Homeo^+】(【S^1】)の自己準同型。(3)PSL(2,IR)から、【Homeo^+】(【S^1】)への準同型。たゞし、いづれも、離散群とみなしてのものである。次なる応用として、我々は、種数2以上の有向閉曲面上の、有向【S^1】束でそのEnler数が、曲面のEuler数と一致するものについて、その上の、行き止まり成分のない葉層構造(【C^2】以上)について、それが、つねに、Fuchs群から得られる標準的なものと位相的に同型になることを示した。後者に掲げた目標について、我々の結果は、目標そのものからはずれてしまったが、次のとおりである。区間[0,1]から自身への【C^2】埋め込みで、像が、交わらないものを二つ考える。そのとき、それらは、標準的な方法で、カントール集合を定義するが、そのレベーク測度が0であることを示すことに、我々は成功した。これは、広汎な一般化の可能性があり、今後の研究にまたれる。
インドにおける社会的弱者層の若者の共同的関係性の構築過程に関する研究

本科研は、ストリートチルドレン支援を行うNGOの被支援者であった若者の就職や結婚における選択・決定の場面に着目し、社会的弱者層の若者の共同的関係性の構築過程を明らかにすることを目的とした。NGO出身者の事例からは、インドの若者が一般的に家族や親族を頼って行う選択・決定に関して、NGO出身者はNGOとの共同的関係性を選択・決定の基盤として、選択・決定の準拠集団となる共同的関係性を複数構築していることが明らかとなった。また、これらの若者は故郷の家族や親族との間にも共同的関係性を再構築しており、複数の準拠集団が相互補完的に若者の選択・決定において影響しているという仮説が生成された。本研究は、18歳までにストリートチルドレンに支援を行うNGOで教育をうけた経験を有するインドの若者の就職や結婚における選択・決定の場面に着目しつつ、若者の共同的関係性の構築過程を明らかにすることを目的とした。これらの若者の多くが貧困家庭出身者であり、10歳前後で家出し、家族との別離を経験している。子どもの頃に家族という共同体を離れ、NGOという共同体に接触した若者の共同的関係性構築のプロセスについて、個人の経験と意識に焦点を当ててインタビューを行うことで、社会的弱者層の子ども・若者にとっての共同体的存在の条件をも検討を行うことを目的とした。初年度である平成24年度には、計2回の現地調査を行った。2012年12月には、研究者がこれまで調査を行ってきたNGO出身者のうち2人が進学のために移住したチェンナイにおいて、2人の大学生活と進学後の社会関係についてインタビューと大学生活の観察を行った。2012年12月と3月にはNGO出身の若者と大学生の社会関係をを比較するために、2人が通う工学系の私立大学に通う大学生を対象として大学進学時と大学卒業後の進路選択に関してインタビューを行った。その結果、明らかになったことは以下の二点である。1中等教育修了時の進路選択をNGO出身者と大学生とで比較すると、その選択・決定に関してNGO出身者が自分で決定している部分が大きく、意識的であること。2大学卒業後の進路に関しては、急速な高等教育拡大、商業主義的な大学経営、リーマンショック後の不況という状況のなか、大学生は進路決定に困難を抱えながらも、大学生活を通じて進路選択に資するような社会関係を構築できず、家族や親族にも情報やコネクションの提供を期待できないこと。本研究の主目的である社会的弱者層の若者の共同的関係性の構築過程を明らかにすることは次年度の課題として残った。1990年代からインド政府はNGOと連携して、すべての子どもに対する福祉と教育の保障に取り組んでいる。その結果、労働や路上生活の経験のある社会的弱者層の子どもの多くは、NGOなどの組織により、何らかの支援を受けた経験をも有している。本研究の目的は、18歳までにストリートチルドレン支援を行うNGOに支援をうけた経験を有する若者の就職や結婚における選択・決定の場面に着目しつつ、若者の共同的関係性の構築過程を明らかにすることである。最終年度である平成25年度には計2回、NGO出身者の多くが居住するデリーにおいて、NGOの施設から自立した若者の就労と結婚の選択・決定についてインタビューと観察を行った。本研究を通じて、路上生活経験のある社会的弱者層の若者の共同的関係性の構築過程に関連して明らかになったことは以下2点である。1NGO出身者はキャリアに関する選択・決定をNGOの助言や支援を受けながら行っているが、大学生の進路選択と比較して、意識的に自分で選択・決定を行っていること、2NGO出身者の多くが家族・親族の意向に基づき結婚を行うインドの一般的な若者と比較して、結婚に関する選択・決定(時期、結婚相手、婚姻儀礼等)をNGOを通じた社会関係に基づき自分で行っている部分が大きいこと。すでに数年来の調査協力者であるNGO出身者と彼らを通じて知り合った大学生を対象に調査を行ったことで、比較的スムーズにインタビュー調査を行うことができた。NGO出身の若者に対する進路選択のインタビューでは、大学生活を送るなかで、彼らが同じ大学に通う学生や大学の教員との関係性を有していることが明らかとなったが、卒業後の進路に関しては、大学関係者者や友人からは十分な情報を得ることできていないことが明らかとなった。NGO出身者との比較のためにインタビューを行ったチェンナイの私立大学生については、大学進学時の進路選択に関しては工学系という専門の選択については、成績や親のアドバイスをから自然と決定したという意識をもっている事例が多かった。

しかし、大学選択については情報がないなか、広告やインターネットの情報を頼りに行っていた。また、卒業後の進路選択に関しては、家族は精神的な支えとしながらも、具体的なアドバイスや支援をえることができているわけではないことが明らかとなった。25年度が最終年度であるため、記入しない。次年度においては、初年度の調査で得られたデータを整理し、若者のキャリア形成と結婚における選択・決定に関して関係性があることが語られた個人・集団についてさらに詳しい現地調査を2回行う。若者が共同的な関係性を構築している相手との関係性についてさらに深い話をきくために、可能な相手とはチャットやスカイプ通話を行い、若者が共同的な関係性を有している相手へのインタビュー調査の許可を求める。3月の現地調査は、3回の調査を経て必要となった補足調査を行う。具体的には以下の点について、調査、考察を行う。1)若者のキャリア形成と結婚に関係する個人・集団の把握2)若者が共同的な関係性を有する個人・集団との関係性の構築過程の把握3)社会的弱者層の若者が共同的な関係性を構築しうる個人・集団の条件25年度が最終年度であるため、記入しない。
ナフタセンキノン構造を有する新規分子集合フォトクロミックシステムの構築

本研究では,アリールオキシナフタセンキノンに代表される芳香族キノンのフォトクロミズムに着目し,これらを利用した新しい分子集合フォトクロミックシステムの構築を目指した.まず,さまざまなビスアリールオキシナフタセンキノンを合成し,その基礎的なフォトクロミック特性を明らかにした.特に,フェノキシ基の代わりにビフェニルオキシ基を有するナフタセンキノンは,フェノキシ体と同様,紫外光照射でpara体からana体に,可視光照射でana体からpara体に可逆的に光異性化するが,ana体からpara体には比較的効率良く戻ること,室温付近では熱による戻り反応は起こさないことを確認した.一方,フェノキシ基の代わりにピリジルオキシ基やペンタフルオロフェノキシ基を有する化合物,フェノキシ基の4位がカルボキシレートアニオンである化合物はフォトクロミズムを示さないことも明らかにした.また,末端に3本のアルキルオキシ基を有するデンドリマー型のビスアリールオキシナフタセンキノンを合成し,そのフォトクロミック特性と分子集合特性を検討した結果,これらの化合物は,室温でガラス固体を形成すること,デカン,1-ブタノール,1-オクタノール,DMFなどの複数の有機溶媒をゲル化することも分かった.また,溶液中だけでなく,ガラス固体状態とゲル状態でも紫外光照射でpara体からana体へ,可視光照射でana体からpara体へのフォトクロミズムを示すことを明らかにした.さらに,ナフタセンキノン部位を有する高分子架橋剤を合成し,これを用いたフォトクロミック化学ゲルを作製することにも成功した.本研究では,アリールオキシナフタセンキノンに代表される芳香族キノンのフォトクロミズムに看目し,これらを利用した新しい分子集合フォトクロミックシステムの構築を目指している.平成21年度は主に,構造変換によって分子集合系に適した化合物を合成し,そのフォトクロミック特性を明らかにすること,物理ゲル化剤・液晶といった自己組織性分子集合材料の構築のためのパーツ分子の合成を目的として研究を行った.その結果,分子集合系に適した構造として対称性の良い二官能性のジフェノキシナラタセンキノン,ジフェノキシアントラキノンを合成し,それらがフォトクロミズムを示すことを確認した。また,末端置換基としてカルボキシル基やヒドロキシ基を有する化合物も合成し,同様にフォトクロミズムを示すことを確認した.自己組織性分子集合材料への展開に向けては,トリアルコキシベンジル基を分子末端に複数有するデンドロン型のパーツ分子の合成を行った.平成22年度にはこれらを組み合わせて,フォトクロミック液晶および物理ゲル化剤を合成する予定である.さらに,構造変換の一環として,これまでには報告例のない非棒状の分子形状を有する液晶性ジベンゾイルオキシアントラキノン化合物の合成に成功した.それらの液晶挙動を偏光顕微鏡観察,示差走査熱量測定,エックス線回折測定などで調べ,主にスメクチック相を形成することが分かった.平成22年度には,ベンゾイル基の転移によるフォトクロミズムについても検討する予定である。本研究では,アリールオキシナフタセンキノンに代表される芳香族キノンのフォトクロミズムに着目し,これらを利用した新しい分子集合フォトクロミックシステムの構築を目指した.まず,さまざまなビスアリールオキシナフタセンキノンを合成し,その基礎的なフォトクロミック特性を明らかにした.特に,フェノキシ基の代わりにビフェニルオキシ基を有するナフタセンキノンは,フェノキシ体と同様,紫外光照射でpara体からana体に,可視光照射でana体からpara体に可逆的に光異性化するが,ana体からpara体には比較的効率良く戻ること,室温付近では熱による戻り反応は起こさないことを確認した.一方,フェノキシ基の代わりにピリジルオキシ基やペンタフルオロフェノキシ基を有する化合物,フェノキシ基の4位がカルボキシレートアニオンである化合物はフォトクロミズムを示さないことも明らかにした.また,末端に3本のアルキルオキシ基を有するデンドリマー型のビスアリールオキシナフタセンキノンを合成し,そのフォトクロミック特性と分子集合特性を検討した結果,これらの化合物は,室温でガラス固体を形成すること,デカン,1-ブタノール,1-オクタノール,DMFなどの複数の有機溶媒をゲル化することも分かった.また,溶液中だけでなく,ガラス固体状態とゲル状態でも紫外光照射でpara体からana体へ,可視光照射でana体からpara体へのフォトクロミズムを示すことを明らかにした.さらに,ナフタセンキノン部位を有する高分子架橋剤を合成し,これを用いたフォトクロミック化学ゲルを作製することにも成功した.
PD-1遺伝子破壊EGFRvIII特異的CAR-T細胞による膠芽腫治療法の開発

平成30年度は、Cas9を搭載したsingle-guide RNA(sgRNA)発現ベクターにPD-1遺伝子に対するCRISPR配列を設計・構築した。培養細胞系(HEK293T細胞)に構築した遺伝子ベクターを導入しPD-1の標的遺伝子領域を破壊できたことをPCR法とresolvase反応で確認した。平成31年度(令和1年度)は、PD-1-KO-EvCAR-Tの誘導とその特性解析(EvCAR、PD-1、その他の細胞表面レセプターの発現、膠芽腫細胞に対する増殖抑制試験)を行う予定である。誘導したPD-1-KO-CAR-TについてPD-1遺伝子の破壊領域のDNA配列解析も実施する予定である。HEK293T細胞に構築した遺伝子ベクターを導入し、PD-1の標的遺伝子領域が破壊できたことをPCR法ならびにresolvase反応を用いて確認した。当初の計画通りに、PD-1遺伝子破壊EGFRvIII特異的CAR-T細胞の誘導とその特性解析を実施する予定である。平成30年度の研究進行状況から60,074円の次年度使用額が残った。平成31年度(令和1年度)に必要な物品の購入に使用する予定である。
バナツハ空間上の関数微分方程式の解の定性的研究

本研究の目的は、Banach空間上無限遅れを持つ関数微分方程式の基礎定理及び安定理論・非線形振動論の確立の基礎を見いだすことであった。そのためにまず、相空間をuniform fading memory spaceとfading memory spaceの場合に分けて考えることにする。解の存在定理、一意性そして延長性はすでに1994年Henriquezによって証明されている。そこで解の初期値に関する連続性が成り立つかどうかを調べることにした。これは、アルハ-measureの導入でfading memory space上で成り立つことが判った(現在準備中)。また、解の安定性と周期解・概周期解の存在定理についてはある意味で媒介的性質を持つロ-安定の導入でuniform fading memory spaceでもfading memory spaceでも全安定及び一様漸近安定のもとで存在が確かめられた(現在投稿中)。ただし、有限次元では周期解の存在に関しては解の一意性を必要としない点、まだまだ改良の余地が残されている。これらの考え方とか途中結果についてはギリシャで行われた国際会議WCNA96において講演した。分担者稲葉・久我は位相幾何学的立場から、特にこれらの方程式の解のつくる力学的構造について、さらに一般化への方向性を探ることに多大な協力を惜しまなかった。分担者石村・岡田・筒井は多くの具体的モデルの提供によってこの研究が微分方程式の広い分野に応用できることを確信させてくれた。
センサータンパク質の信号伝達における共通立体構造の役割

センサータンパク質は、外部刺激センサーとなる補欠分子族だけでなく、それを取り囲むタンパク質の立体構造が共通であるものが多く存在する。本研究では、タンパク質の共通立体構造が、生理機能に果たす役割に注目し、外部刺激により引き起こされるタンパク質ダイナミクスを、時間分解紫外共鳴ラマン分光法をもちいて実時間観測し、機能発現機構の解明を目的とする。本年度は、共通立体構造を持ちながら、センサーだけでなく異なる機能を示す典型的な光受容タンパク質である古細菌型ロドプシンについて、タンパク質ダイナミクスを追跡し、機能に重要と考えられる構造変化を調べた。古細菌型ロドプシンは、レチナール発色団の光励起により起こる異性化反応に応答した光サイクル反応を行う。プロトンポンプタンパク質であるバクテリオロドプシン、および光センサータンパク質であるセンサリーロドプシンIIについて、初期に現れる反応中間体(J,K,KL)のタンパク質構造を調べた。これらの中間体において、古細菌型ロドプシン共通の発色団周辺に存在するトリプトファンおよびチロシン残基の構造が変化する過程を観測することに成功した。それぞれのタンパク質における初期ダイナミクスでは、特にJ中間体において、構造変化の過程に違いがみられることがわかった。このことから、反応の初期段階で機能を決定付ける構造変化があることが示唆された。本研究から、紫外共鳴ラマン分光法による初期ダイナミクス観測は、タンパク質機能の発現機構解明の一役を担うことが期待され、さらに詳細な実験研究が必要であることが示された。センサータンパク質には、外部刺激センサーとなる補欠分子族だけではなく、それを取り囲むセンサードメインの立体構造が共通であるものが多く存在する。本研究は、PASドメインとよばれるセンサードメインの共通立体構造が、タンパク質の生理機能に果たす役割に注目し、外部刺激により引き起こされるタンパク質ダイナミクスを、時間分解紫外共鳴ラマン分光法をもちいて実時間観測し、機能発現機構の解明を目的とする。本年度は、PASドメインを有する最も基本的な光センサータンパク質であるイエロープロテインにおいて、光センサーであるp-クマル酸が励起状態にある場合におけるタンパク質構造変化を詳細に追跡した。イエロープロテインの紫外共鳴ラマンスペクトルには、タンパク質骨格中に含まれるチロシンおよびトリプトファン残基の振動バンドが選択的に観測される。p-クマル酸の光励起により、チロシンおよびトリプトファン残基の振動バンドには、それぞれ、水素結合および疎水性の変化があることを示すスペクトル変化が観測された。イエローケロテイン分子中にトリプトファン残基は1個存在するのみであるため、トリプトファン残基のスペクトル変化は、Trp119残基の構造変化に由来すると帰属した。チロシン残基は分子中に5個あるため、変異体測定により帰属を行った。Tyr42残基はp-クマル酸と直接水素結合しているため、その構造変化がスペクトル変化に寄与する可能性がもっとも高いと考えられる。とのため、Tyr42→Phe変異体の時間分解紫外共鳴ラマン測定を行った。その結果、野生型で見られたスペクトル変化は観測されなかった。このことから、p-クマル酸が励起状態にある場合のチロシン残基のスペクトル変化は、唯一Tyr42残基に由来すると帰属した。
神経特異的DNAチップの作製と神経発生の遺伝子発現ネットワークの網羅的解析

神経発生に関わる遺伝子ネットワークを大規模に解析することを目指し、神経芽腫に発現する遺伝子の大量クローニングおよびそのDNAチップの作製を進めている。本年度は以下を行った。1)<オリゴキャップcDNAライブラリーからのDNAチップに用いる遺伝子の収集>___-予後良好群および予後不良群cDNAライブラリーからの合計約5000クローンに加え、本年度は予後良好群の一つであるstage4Sのサンプルからさらに5000クローンの単離を終了し、両端塩基配列の決定を進行中である。最終的に合計約1万クローンからなるcDNAソースを作製した。2)<テストチップの作製>___-予後良好群ライブラリーからの約2000クローンをドットしたテストチップを用いて神経芽腫細胞株へのレチノイン酸を用いた分化誘導により6つの遺伝子の発現量の変化(2倍以上)を同定した。次にヒト胎児および成人脳の間で発現に差のある遺伝子を検索した。胎児期に特異的に発現が上昇するP311等の既知遺伝子が2.5倍以上の差で確認された他、新規遺伝子の中にも胎児期に発現が高いものが同定され、これらについて各種組織における発現解析を行ったところ、神経系特異的な発現を示すことが判明した。3)<予後良好群および不良群の間で発現に差のある遺伝子の同定>___-昨年度に引き続き、両群で発現量が有意に異なる遺伝子を各群16症例ずつを用いた半定量RT-PCRにより検索した。合計1842種類の遺伝子について検討したところ、305遺伝子において両群における発現量が異なっていた。予後良好群で高い発現を示す既知の遺伝子群には、シナプス小胞関連分子、接着分子、ホメオティック転写因子等のファミリーが多くみられ、これらは神経分化マーカーの新たな候補となると考えられた。サブセット間の遺伝的な背景の違いは主にNGF受容体TRKAや癌遺伝子MYCNに制御されていると予想されるので、これらの神経細胞死/増殖シグナル伝達システムの一員として働く分子が含まれていると期待される。194個の差が見られた新規遺伝子の機能についても同様な機能が予想される。
職場に1人で勤務する産業保健師の資質能力自己評価チェックリストの開発

本研究は、事業場に常勤の医療スタッフが1人という環境で勤務している産業看護職が自らの資質能力を客観的に自己評価できる尺度を開発することを目的とした。対象者は事業場に1人で勤務している産業看護職60名である。自由記述の調査から尺度原案を作成し、対象者に郵送にて配布・回収した。得られたデータを分析した結果、一定の信頼性妥当性が備わった計16項目からなる尺度を作成することができた。平成28年度は、文献レビューと職場に1人で勤務する産業看護職の資質能力自己評価チェックリスト(暫定版)の作成を行った。文献レビューでは、産業看護職の資質能力について概念的検討が中心で客観的分析までは行われていなかった。また先行研究の分析から産業看護職の資質能力は、「専門職としての役割を発揮する能力」、「自己研鑽」、「コーディネート力」、「専門職としての役割の創造する力」、「情報収集・分析し、様々な方法を用いて問題解決につなげる能力」の5つの構成要素から主に成り立っていた。職場に1人で勤務する産業看護職の資質能力自己評価チェックリスト(暫定版)の作成は、3つのプロセスで進めた。1職場に1人で勤務する産業看護職に必要な資質能力の項目を抽出:産業看護職354名に対して自記式質問調査を行った。得られた項目を整理・分析した結果、128項目を抽出することができた。2128項目のグループ分け:自記式質問調査で得られた128項目について、先行研究で得られた5つの構成要素をもとにグループ分けを行った。5つの構成要素に該当しない項目は「その他」として扱った。3内容的妥当性の検討:得られた128項目が、内容的に資質能力の項目として適当であるかどうか、研究代表者も含めた産業保健関係の研究者と現職の産業看護職の合計6名によって検討を行った。具体的には、内容的妥当性の観点から前述の評定者が一致して「職場に1人で勤務する産業看護職に必要な資質能力」と判断した項目を原則として採用することにした。平成28年度に計画をしていた内容をすべて達成することはできなかった。しかし、次のプロセスに進むための準備を同時に進めてきたため、次年度は準備が整い次第、作成した暫定版チェックリストの信頼性と妥当性の検証を行うことができる。社会経済の変化に伴う労働衛生への取り組みが重要課題となっている今、産業看護職の資質能力をさらに強化するとともに多様な資質能力をもつ人材を柔軟に配置し活動を展開していく事が求められている。そのためには産業看護職の資質能力の可視化が不可欠となる。必要な資質能力を定義した上で、それらの能力をどのレベルで身についているかを明確にしてはじめて産業看護職の能力開発への取り組みが有効に機能していくと考えられる。産業看護職は、事業場に医療従事者が1人という環境で勤務する場合も多く専門職としての資質能力の開発は自己研鑽に委ねられている。1人きりの職場の場合、自己の資質能力は他者から評価されにくく自己評価に頼るしかないが、これらを的確に評価できる尺度は今のところ存在しない。本研究の目的は、事業場に1人で勤務する産業看護職が自らの資質能力を自己評価できる尺度を開発する事である。2017年度は前年に作成した尺度案の信頼性・妥当性の検証を行った。調査対象者に尺度案と無記名自記式質問紙を郵送にて配布回収しデータを分析した。データは、平均値などの基本統計量に加え、I-T相関や項目間相関分析、G-P分析による項目分析を行った。項目分析で削除する項目はなかった。探索的因子分析の結果、3つの下位尺度、計16項目からなる尺度が開発された。尺度全体と各因子のCronbachのα係数を算出した結果、内的整合性が確認できた。基準関連妥当性の検討では、Sense of Coherence(S0C-13)の下位項目である「把握可能感」との相関をみたが、統計学的に有意な相関があることが確認できた(p<0.001)。しかし、検証的因子分析でモデルを作成し共分散構造分析による適合度を確認した結果、十分な値が得られなかったため今後、尺度項目の更なる検証が必要であることが明らかとなった。暫定版チェックリストの信頼性と妥当性の検証を行うための質問紙を作成した後、研究協力者に発送し調査を行う。またデータ収集とデータ入力を同時に進行させ、研究が滞ることがないよう調整する。平成28年度は、質問紙の印刷準備と発送準備に時間を要したため、平成29年度は関係者との調整を早期から開始する。29年度が最終年度であるため、記入しない。産業看護学29年度が最終年度であるため、記入しない。
ヒト生殖領域におけるケモカイン・ケモカイン受容体システムの機能解析とその臨床応用

NK細胞を中心とした免疫制御機構の妊孕現象に対する関与について解明され、NK細胞に対する遊走活性可能を有するケモカイン・ケモカイン受容体の妊孕現象に対する影響に関心がもたれている。本研究ではNK細胞に対して強力な遊走活性をもつフラクタルカイン(FRK)に注目した。ヒト卵管組織におけるFRKの発現を解析したところ卵管各部位において恒常的にFRK蛋白およびmRNAの発現を認め卵管上皮にFRK蛋白の発現を確認した。一方、卵管にFRK受容体を有する細胞の浸潤を認め、卵管における免疫維持機構にFRKが機能していることが確認された。さらに、精子の尾部にFRK受容体の存在が確認でき、精子・卵管の相互機構にFRK蛋白が関与している可能性が示された。次に、女性の腹腔内環境におけるケモカイン・ケモカイン受容体の関与について解析するために腹水について解析を進め、子宮内膜症病変の有無と腹水中のFRK濃度と相関し、その産生源は腹膜上皮細胞であり、さらに腹水中のFRKによって受容体陽性の細胞が腹水中に遊走されていた。腹水中のFRKが子宮内膜症の病態形成に関与していることが明らかとなった。ついで子宮内膜および子宮頚管におけるケモカイン・ケモカイン受容体システムについて解析するためにFRK・FRK受容体について検討した。子宮内膜にFRK蛋白が発現しており、その蛋白発現は分泌期後期から妊娠脱落膜において強発現しており、内膜組織にFRK mRNAの発現を認め、FRK受容体陽性細胞が子宮内膜に存在した。また、子宮頚管組織にもFRK・FRK受容体システムが存在し、子宮頚管粘液中にもFRK蛋白が分泌されていた。これらの結果から子宮内膜・子宮頚管におけるFRK・FRK受容体系は精子の卵管への遊走作用および着床期における内膜環境の維持さらに妊娠初期の免疫応答機構維持に作用していることが明らかとなった。ヒト生殖領域におけるケモカイン・ケモカイン受容体システムの機能解析を行う目的でケモカインの一つであるFractalkine (FRK)に注目し、その機能解析を行った。まず卵管組織におけるFRK-FRK受容体(CX3CR1)系について解析し、卵管組織におけるFRK蛋白およびmRNAの発現をWestern blot、免疫組織学的解析、RT-PCRにて示し、卵管上皮細胞がFRKの産生源であった。さらに卵管組織におけるFRK受容体陽性細胞の存在を免疫組織学的解析およびRT-PCRにて明らかとした。また精子にFRK受容体mRNAが存在することをRT-PCRにて示し、さらにその局在が精子の尾部であることを免疫組織学的検討によって明らかとした。これらの知見はHuman Reproduction (vol.19,No.2,409-414,2004)にて報告した。更に子宮内膜、脱落膜におけるFRK-FRK受容体(CX3CR1)系の解析を行い、子宮内膜および脱落膜においてもFRK-FRK受容体(CX3CR1)系が機能していることを報告し、性周期などの影響について現在解析中である。また腹腔内におけるFRK-FRK受容体(CX3CR1)系の解析を行うためにまず腹水中のFRK濃度をWestern blot解析およびELISAを用いて測定し、子宮内膜症との関連を見出し、詳細な検討を進行中である。また精子機能におけるケモカイン-リンパ球系細胞の関与を解析するために酸化ストレスの指標としてErythropoietin(EPO)に注目し、精漿中のEPO蛋白の存在をWestern blot解析にて示し、ELISAにてEPO濃度を測定し、精液所見との関連を解析した。

その結果、精漿中には恒常的にEPO蛋白が存在することが明らかとなり、これらの知見をFertility Sterility (in press 2004)に報告した。NK細胞を中心とした免疫制御機構の妊孕現象に対する関与について解明され、NK細胞に対する遊走活性可能を有するケモカイン・ケモカイン受容体の妊孕現象に対する影響に関心がもたれている。本研究ではNK細胞に対して強力な遊走活性をもつフラクタルカイン(FRK)に注目した。まず、女性の腹腔内環境におけるケモカイン・ケモカイン受容体の関与について解析するために腹水中のFRK蛋白の有無についてWestern blot解析および腹水中のFRK濃度をELISAにて解析し、mRNAをRT-PCRにて解析し、さらに腹水細胞におけるFRK受容体の有無についても解析した。その結果、子宮内膜症病変の有無と腹水中のFRK濃度と相関し、その産生源は腹膜上皮細胞であり、さらに腹水中のFRKによって受容体陽性の細胞が腹水中に遊走されていた。腹水中のFRKが子宮内膜症の病態形成に関与していることが明らかとなった。ついで子宮内膜および子宮頚管におけるケモカイン・ケモカイン受容体システムについて解析するためにFRK・FRK受容体について検討した。子宮内膜にFRK蛋白が発現しており、その蛋白発現は分泌期後期から妊娠脱落膜において強発現しており、内膜組織にFRK mRNAの発現を認め、FRK受容体陽性細胞が子宮内膜に存在した。また、子宮頚管組織にもFRK・FRK受容体システムが存在し、子宮頚管粘液中にもFRK蛋白が分泌されていた。また精子に存在しているFRK受容体を介してFRK蛋白には精子に対する遊走作用を有していた。これらの結果から子宮内膜・子宮頚管におけるFRK・FRK受容体系は精子の卵管への遊走作用および着床期における内膜環境の維持さらに妊娠初期の免疫応答機構維持に作用していることが明らかとなった。
心房粗動に対する線状焼灼術の不成功因子の解剖学的,電気生理学的検討

心房粗動のある12例(男8例,女4例,59±15歳)を対象に,TA-IVC間をlinear ablationした.1回の線状焼灼術後では、12例中7例(7カ所)にブロックラインの欠損部を認めた.欠損部にアブレーションを追加し,7例中6例で完全な両方向性ブロックラインの作製に成功した.1例は欠損部を同定できたが,完全なブロックラインを作製できなかった.また両方向性ブロックライン作製に成功した2例にブロックライン外側の興奮様式がIVCまたはEVRからTA方向に変化する現象(pseudo-conduction)が観察された.この2例は従来の多電極カテーテルを用いたマッピング方法ではブロックラインが完全であるか否かの鑑別が困難であると考えられた.従来の電極カテーテルを用いたmappingsystemで形成された焼灼ラインを3D-electroanatomical mappingsystem (CARTO)で評価した.15%の症例で焼灼ラインに欠損があり,不完全であった.CARTOによる評価の有用性が示された.CARTOは高価であり,限られた施設にしかない.従来の電極カテーテルを用いたAFL治療法の改良が望まれている.現在,心室壁運動のドプラ信号を解析し,運動様式をカラー表示して評価すれば,容易に壁運動異常を認識しうることから組織ドプラ法が開発され,WPW症候群にある副伝導路の局在の同定に応用されつつある.TA-IVC間の焼灼ライン作製前後で心筋組織ドプラ心エコー図検査を行い,三尖弁輪各所の局所心筋興奮様式の変化をstrain rate(SR)とstrain(ε)の挙動から解析し,同指標で焼灼ラインの評価が可能であるか否かを検討する予定である.従来のカテーテルmappingsystemで作製された焼灼ラインを心筋組織ドプラ心エコー図法で評価し,心房粗動の根治成功率向上策の開発を図りたい.<方法>心房粗動のある12例(男8例,女4例,59±15歳)を対象に,心房粗動中あるいは冠静脈洞遠位部からのペーシング中にCARTOを用いて右心房全体をマッピングした.その後にTA-IVC間をlinear ablationした.心房粗動再発例では前回の線状焼灼の欠損部を同定し同部位に焼灼を追加した.線状焼灼後には,冠静脈洞からのペーシング中にブロックラインの外側(右心房自由壁側)をCARTOでマッピングし欠損部の有無を確認した.<結果>一回の線状焼灼術後では、12例中7例(7カ所)にブロックラインの欠損部を認めた.欠損部にアブレーションを追加し,7例中6例で完全な両方向性ブロックラインの作製に成功した.残りの1例は欠損部を同定できたが,完全なブロックラインを作製できなかった。また両方向性ブロックライン作製に成功した2例にブロックライン外側の興奮様式がIVCまたはEVRからTA方向に変化する現象(pseudo-conduction)が観察された.この2例は従来の多電極カテーテルを用いたマッピング方法ではブロックラインが完全であるか否かの鑑別が困難であると考えられた.<結語>心房粗動に対する線状焼灼術において、CARTOはブロックラインの評価に有用であった.ブロックラインの欠損部を同定できたが,完全なブロックラインを作製できなかった症例を経験した.来年度は線状焼灼術前後に心エコー図検査(組織Doppler法)を用いてブロックラインを評価する.また心、エコー図検査を用いてpseudo-conductionを起こす症例やブロックライン作製に難渋する症例を検討する.心房粗動のある12例(男8例,女4例,59±15歳)を対象に,TA-IVC間をlinear ablationした.1回の線状焼灼術後では、12例中7例(7カ所)にブロックラインの欠損部を認めた.欠損部にアブレーションを追加し,7例中6例で完全な両方向性ブロックラインの作製に成功した.1例は欠損部を同定できたが,完全なブロックラインを作製できなかった.また両方向性ブロックライン作製に成功した2例にブロックライン外側の興奮様式がIVCまたはEVRからTA方向に変化する現象(pseudo-conduction)が観察された.この2例は従来の多電極カテーテルを用いたマッピング方法ではブロックラインが完全であるか否かの鑑別が困難であると考えられた.従来の電極カテーテルを用いたmappingsystemで形成された焼灼ラインを3D-electroanatomical mappingsystem (CARTO)で評価した.15%の症例で焼灼ラインに欠損があり,不完全であった.CARTOによる評価の有用性が示された.CARTOは高価であり,限られた施設にしかない.従来の電極カテーテルを用いたAFL治療法の改良が望まれている.現在,心室壁運動のドプラ信号を解析し,運動様式をカラー表示して評価すれば,容易に壁運動異常を認識しうることから組織ドプラ法が開発され,WPW症候群にある副伝導路の局在の同定に応用されつつある.TA-IVC間の焼灼ライン作製前後で心筋組織ドプラ心エコー図検査を行い,三尖弁輪各所の局所心筋興奮様式の変化をstrain rate(SR)とstrain(ε)の挙動から解析し,同指標で焼灼ラインの評価が可能であるか否かを検討する予定である.従来のカテーテルmappingsystemで作製された焼灼ラインを心筋組織ドプラ心エコー図法で評価し,心房粗動の根治成功率向上策の開発を図りたい.
フィトケミカルの乳癌に対する抗癌作用の解明と化学予防および治療への応用

我々はフィトケミカルが乳癌発症リスクを低下させるという疫学研究のエビデンスを乳癌発症モデルラットでの検証を行うとともに、乳癌細胞を使用して単独や併用での抗癌作用の分子メカニズムを明らかにしてきた。大豆イソフラボン成分のゲニステイン(GEN)はエクオール(EQ)との併用で強い相乗的な増殖抑制作用を示し、この効果は主にBax/Bcl-xL比の上昇によるアポトーシス誘導作用によることを示した(Nutr. Cancer 69(8):1300-1307, 2017)。また多くのヒト癌細胞で活性化されているSrc癌遺伝子を導入したヒト癌細胞に対しGENは強い増殖抑制能を示したが、EQ、ダイゼイン、グリシチンは殆ど抑制効果が見られず抵抗性を示した。FACS解析ではGENの増殖抑制はアポトーシス誘導ではなく細胞周期をG2/Mに停止させることが主な機序であり、分子レベルではp53とp21の発現を上昇させ、p21のリン酸化を抑制すことによることが判明した(日本癌学会総会2018;欧州癌学会EACR 2018)。このためGENはSrcの活性化が関与している多くの癌の発症に予防的役割を果たしていることが示唆される。ブロッコリースプラウトに豊富なスルフォラファン(SFN)はリコペンやプテロスチルベンと同様に、トリプルネガティブ(TN)乳癌由来の細胞に強い増殖抑制効果を示し、細胞周期をG1期に停止させ、AKT-mTORのシグナルを抑制し、Baxの発現を高めてアポトーシスを誘導した。またSFNの経口投与はTN乳癌細胞を移植した担癌ヌードマウスでの腫瘍増殖を著明に抑制した(栄養食糧学会中国地方会2018)。これらの結果よりSFNは乳癌の中でも予後不良で治療の選択が化学療法に限定されているTN乳癌の発症のみならず治療にも応用できる可能性が示唆された。我々は今まで野菜・果物に含まれるフィトケミカルが乳癌発症リスクを低下させるという疫学研究のエビデンスを乳癌発症モデラットでの検証を行うとともに、乳癌細胞を使用してフィトケミカルの抗癌作用の多彩な分子メカニズムを明らかにしてきた。今年度はリコペンとレスベラトロールのエチルメタンサルフォネート(EMS)誘発乳癌モデルでの発症予防効果、乳癌移植マウスでの乳癌増殖抑制効果について検討し、更には大豆イソフラボンの構成成分であるエコールとゲニステイン併用の増殖抑制効果とその分子機序を培養乳癌細胞を使って検討した。リコペンは乳癌発症は抑制できなかったが、乳癌組織はより分化した嚢胞状腺癌をつくる傾向が見られた。またバイオアベイラビリティーの高いメチルレスベラトロールはリコペンと同様にトリプルネガティブの乳癌に効果を示し、細胞周期をG1期に停止させ、AKT-mTORのシグナルを抑制した。またトリプルネガティブ乳癌胞を移植した担癌ヌードマウスでは腫瘍増殖を抑制する傾向が見られた。エコールはモデルラットでは乳癌発症を抑えられなかったが発症を遅らせる傾向が見られ、臨床応用の可能性が示唆された。またエコールは単独での乳癌細胞の増殖抑制効果は低かったが、ゲニステインとの併用で強い相乗的な増殖抑制作用を示し、この効果は主にBax/Bcl-xL比の上昇によるアポトーシス誘導作用によることを示した(Nutrients, in press)。このことはアジア人でダイゼインを腸管でエコールに転換できる人口割合が多いことを鑑みれば、大豆を食べるアジア人で乳癌発症が少ないという理論的根拠になりうる可能性がある。現在EMS誘発乳癌モデルラットでゲニステインとエコールの併用効果を検討している。リコペン、レスベラトロール、更には大豆イソフラボンの構成成分であるエコールとゲニステインの併用について、EMS誘発乳癌モデルでの予防効果、乳癌移植マウスでの乳癌増殖抑制効果、In Vitroでの乳癌細胞の増殖抑制の分子機序の実験はほぼ順調に進んでお、り、一部は論文を投稿し受理された。予防効果がほとんど見出せなかった動物での発症予防実験や担がんマウスでの増殖抑制実験は、投与する餌中のフィトケミカルの濃度を上げて再度行っているため、結論が出るまでまだ時間がかかる。我々は今まで植物由来生理活性物質(フィトケミカル)が乳癌発症リスクを低下させるという疫学研究のエビデンスを乳癌発症モデルラットでの検証を行うとともに、乳癌細胞を使用してフィトケミカルの抗癌作用の多彩な分子メカニズムを明らかにしてきた。今年度は大豆イソフラボンのエクオールとゲニステイン併用の増殖抑制効果とその分子機序を検討した。エクオールは単独での乳癌細胞の増殖抑制効果は低かったが、ゲニステインとの併用で強い相乗的な増殖抑制作用を示し、この効果は主にBax/Bcl-xL比の上昇によるアポトーシス誘導作用によることを示した。このことはアジア人でダイゼインをエクオールに転換できる人口割合が多いことを鑑みれば、大豆を食べるアジア人で乳癌発症が少ない理論的根拠になりうる可能性がある(Nutri. Cancer, in press)。さらにリコペンとレスベラトロールよりバイオアベイラビリティの高いジメチルレスベラトロールのEMS誘発乳癌モデルラットでの発症予防効果、乳がん移植マウスでの腫瘍増殖抑制効果について検討した。リコペンは乳癌発症は抑制できなかったが、これはリコペンが脂溶性のため普通の餌に添加した場合は吸収が悪く、血中濃度が上がらなかったことが原因であることが分かったので油脂を加えた餌で再検討している。