hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
網膜視蓋投射形成に機能するプロテインチロシンホスファターゼの機能解析

細胞内情報伝達において重要な役割を果たしているタンパク質のチロシンリン酸化は、プロテインチロシンキナーゼ(PTK)とプロテインチロシンポスファターゼ(PTP)の活性のバランスによって決定される。中でも、受容体型のPTKとPTPは、細胞外環境の情報を読み取り細胞内に情報を伝達する上で、重要な役割を担っていると考えられている。しかしながら、受容体型PTPが生体内においてどのような情報伝達系に機能しているかについてはよく分かっていない。これは、PTPの基質分子がほとんど同定されていないことに起因している。受容体型PTKであるEphはephrinをリガンドとして、軸索ガイダンス、細胞移動、脳内の領域特異化、シナプス形成やシナプスの可塑性等、神経系の発生や機能維持において重要な役割を果たしている。網膜神経節細胞に発現するEphは、網膜から視蓋へのtopographicな投射形成において重要な役割を果たすことが知られている。本研究において、Ephを基質とするPTPを探索したところ、受容体型PTPの一つであるPtproがEphのA, B両タイプを共に基質とし、それらの活性を負に制御することを見出した。さらに、生化学的な解析を進めたところ、PtproはEphの活性に重要な役割を果たしている膜貫通ドメイン近傍に存在するリン酸化チロシン残基を脱リン酸化することが判明した。網膜視蓋投射の形成においてはEph受容体が重要な役割を果たしているが、網膜におけるPtproの発現を人為的に修飾することにより、視神経軸索のephrinに対する反応性と、網膜から視蓋への投射を自在に変化させることができた。本研究においては、神経回路網形成におけるPTPの役割を、基質であるEphの機能制御という観点から分子レベルで解明した。これが本研究の独創的な点といえる。細胞内情報伝達において重要な役割を果たしているタンパク質のチロシンリン酸化は、プロテインチロシンキナーゼ(PTK)とプロテインチロシンホスファターゼ(PTP)の活性のバランスによって決定される。現在、網膜視蓋投射形成におけるPtproの機能について明らかにするために、網膜の器官培養系やニワトリ胚を用いた個体レベルの解析を進めている。

受容体型PTKであるEphはephrinをリガンドとして、軸索ガイダンス、細胞移動、脳内の領域特異化、シナプス形成やシナプスの可塑性等、神経系の発生や機能維持において重要な役割を果たしている。網膜神経節細胞に発現するEphは、網膜から視蓋へのtopographicな投射形成において重要な役割を果たすことが知られている。本研究において、Ephを基質とするPTPを探索したところ、受容体型PTPの一つであるPtproがEphのA、B両タイプを共に基質とし、それらの活性を負に制御することを見出した。さらに、生化学的な解析を進めたところ、PtproはEphの活性に重要な役割を果たしている膜貫通ドメイン近傍に存在するリン酸化チロシン残基を脱リン酸化することが判明した。網膜視蓋投射の形成においてはEph受容体が重要な役割を果たしているが、網膜におけるPtproの発現を人為的に修飾することにより、視神経軸索のephrinに対する反応性と、網膜から視蓋への投射を自在に変化させることができた。以上の結果より、網膜視蓋投射形成において重要な役割を果たしていることを見出した。
感染性心内膜炎の原因となる口腔レンサ球菌と宿主細胞との相互作用の解明

Streptococcus gordoniiは、歯垢を形成する細菌の一つで、感染性心内膜炎の原因菌としても注目されている。感染性心内膜炎の発症には、局所で菌体と血球系の細胞が結合し、疣贅といわれる大きな固まりを作ることが重要だと考えられている。そこで、これらの宿主細胞とS. gordoniiの付着様式や各宿主細胞のレセプターの同定を試みた。その結果、赤血球では主にGlycophorin Aとband3、単球とマクロファージではCD11bとCD43、好中球ではCD11b、CD43とCD50がレセプターであることが明らかとなった。本研究では、口腔レンサ球菌の一種で感染性心内膜炎の原因菌のひとつであるStreptococcus gordonii DL1株に発現するシアル酸結合性アドヘジン(Hsa)についての解析を行った。この菌のもつ赤血球凝集活性や血小板凝集能、白血球への付着能が感染性心内膜炎の発症に強く関与していると考えられている。そこで、S. gordoniiのHsa蛋白と宿主細胞との付着メカニズムを明らかにする為に、Hsa蛋白のシアル酸結合領域と考えられているNR2をGST融合蛋白(GST-HsaNR2)として大腸菌の系で作製し、そのリコンビナント蛋白を用いて赤血球レセプターの同定を行った。最初に、GST-HsaNR2がDL1株と同様な赤血球凝集活性を持つ事を確認した。この活性が、α2-3結合シアリルラクトースにより阻害される事から、Hsaの赤血球レセプターはα2-3シアロ糖蛋白である事が示唆された。赤血球膜に多く存在するシアロ糖蛋白には、glycophorin Aやband 3が知られている。そこで、これらの精製蛋白をdot blotし、GST-HsaNR2をオーバーレイさせ確認した。さらに、赤血球膜を可溶化し、GST-HsaNR2と混合後、Glutathion Sepharoseにてpull-downした。このサンプルをSDS-PAGEで展開後、ニトロセルロース膜に転写し、抗glycophorin A抗体または抗band 3抗体にて検出した。その結果より、これら二種のシアロ糖蛋白は、GST-HsaNR2によりpull-downされる事を確認した。以上より、Hsaの主な赤血球レセプターは、glycophorin Aとband 3である事が示唆された。本研究では、口腔レンサ球菌の一種で感染性心内膜炎の原因菌のひとつであるSteptococcus gordonii DL1株に発現するシアル酸結合性アドヘジン(Hsa)についての解析を行った。この菌めもつ赤血球凝集活性や血小板凝集能、好中球をはじめ、単球、マクロファージへの付着能が感染性心内膜炎の発症に強く関与していると考えられている。そこで、S. gordoniiのHsa蛋白と宿主細胞との付着メカニズムを明らかにするために、Hsa蛋白のシアル酸結合領域と考えられているNR2をGST融合蛋白(GST-HsaNR2)として大腸菌の系で作製し、そのリコンビナント蛋白を用いてレセプターの同定を行った。現在までに、血小板のレセプターがGPIbαとGPIIb、赤血球のレセプターがglycophorinAとband 3であることを明らかにしてきた。今年度の研究では、単球、好中球、マクロファージに対するレセプターを明らかにするために、培養細胞であるHL-60細胞を用いて、それぞれ分化させて行った。これらの細胞にS. gordoniiが付着すること、その付着はS. gordoniiに発現するHsaが関与していることが明らかとなった。そこで、Bacterial overlay法や免疫沈降紙GST pull-downaSsayを行った結果、単球とマクロファージではCD11bとCD43が、好中球ではCD11bとCD43、CD50がHsaに対するレセプターであることが明らかとなった。
五経正義の発展的研究

報告者は『春秋正義』全60巻の訳注を企図し、その第一歩・二歩としてすでに巻17を発表している。本研究はその第三歩として位置づけられるもので、その概要は、(1)『春秋正義』巻8・9・10・11の校定本・校勘記・訳注を作成すること、(2)『五経正義』をめぐる諸問題を考察することである。その成果として、(1)は冊子体にして公刊した。(2)は論文として11編を発表した報告者は『春秋正義』全60巻の訳注を企図し、その第一歩・二歩としてすでに巻17を発表している。(2)は論文として11編を発表した報告者は『春秋正義』全60巻の訳注を企図し、その第一歩としてすでに巻14を発表し、次いで昨年度末に、巻57を発表したのであるが、本研究はその第三歩以降として位置づけられるものである。すなわち本研究は主として以下の4点から成る。(1)『春秋正義』全60巻の校勘記完全版を作成すること、(2)『春秋正義』巻8・9・10の校定本を作成すること、(3)『春秋正義』巻8・9・10の訳注を作成すること、(4)『五経正義』をめぐる諸問題を考察すること、上記は3年間を通じ並行して実行するが、強いて年度別の計画を立てると以下の通り)平成20年度(1)(2)巻8(3)巻8(4)平成21年度(1)(2)巻9(3)巻9(4)平成22年度(1)(2)巻10(3)巻10(4)そして本年度は予定通り、(2)『春秋正義』巻8の校定本を作成した。(3)『春秋正義』巻8の訳注を作成した。(4)次頁11「研究発表」の項目の通り、3件の論文を発表した。報告者は『春秋正義』全60巻の訳注を企図し、その第一歩としてすでに巻14を発表し、次いで一昨年度末に、卷57を発表したのであるが、本研究はその第三歩以降として位置づけられるものである。(1)『春秋正義』全60巻の校勘記完全版を作成すること、(2)『春秋正義』巻8・9・10の校定本を作成すること、(3)『春秋正義』巻8・9・10の訳注を作成すること、(4)『五経正義』をめぐる諸問題を考察すること、上記は3年間を通じ並行して実行するが、強いて年度別の計画を立てると以下の通り。平成21年度(1) (2)巻8 (3)巻8(4)平成22年度(1) (2)巻9 (3)巻9(4)平成23年度(1) (2)巻10(3)巻10 (4)そして本年度は予定通り、(1)(2)『春秋正義』巻9の校定本を作成した。(3)『春秋正義』巻9の訳注を作成した。(4)次頁11「研究発表」の項目の通り、3件の論文・翻訳を発表した。「五經正義讀解通論(六)」では五經正義の「複語」「常訓」の問題を論じた。「五經正義讀解通論(七)」では五經正義の「語辭」「語助」の問題を論じた。「周易正義訓讀-乾卦-」は周易正義の翻訳としては、本邦初訳である。報告者は『春秋正義』全60巻の訳注を企図し、その第一歩・二歩としてすでに巻17を発表しているのであるが、本研究はその第三歩として位置づけられるものである。(1)『春秋正義』全60巻の校勘記完全版を作成すること、(2)『春秋正義』巻8・9・10の校定本を作成すること、(3)『春秋正義』巻8・9・10の訳注を継続すること、(4)『五経正義』をめぐる諸問題を考察すること、上記は3年間を通じ並行して実行するが、強いて年度別の計画を立てると以下の通り)平成21年度(1)(2)巻8(3)巻8(4)平成22年度(1)(2)巻9(3)巻9(4)平成23年度(1)(2)巻10(3)巻10(4)そして本年度は予定より一歩進め、(2)『春秋正義』巻10・11の校定本を作成した。(3)『春秋正義』巻10・11の訳注を作成した。(4)次頁13「研究発表」の項目の通り、5件の論文を発表した。
魚類病原菌の遺伝子構造の解明と簡易迅速同定法の開発

魚類病原菌より特定遺伝子をクローン化し、それをプローブとしたハイブリダイゼーション法による魚類病原菌Pasteurella piscicidaおよびVibrie anguillarumの簡易迅速同定法の開発を目的とした。1.P.piscicidaよりクローン化したDNA断片の長さは692bPで、そのGC含量は、39.2%であった。このクローン断片は他の魚病細菌あるいは近縁種と考えられているP.multocida、P.haemolyticus等と相同性をまったく示さず、P.piscicidaのみ有する特定遺伝子であることが明らかとなった。2.V.anguillarumより得られたDNA断片は562bPで、GC含量は38.8%であった。この断片は他のVibrio種、V.alginolyticus、V.parahaemolyticus等の16種および他の魚類病原菌とはハイブリッドを形成せず、V.anguillarum特定の遺伝子であることが明らかとなった。3.P.piscicidaよりクローン化した692bP断片をPhotobiotinで標識し、ハイブリダイゼーションを行ったところ、P.piscicidaとのみハイブリッドの形成が確認できた。DNA3.9ng量までハイブリッドの形成が認められ、^<32>Pで標識したプローブのハイブリッドの検出限界値と変わらなかった。4.細菌性類結節症に罹病したハマチの腎臓あるいは脾臓の血液をニトロセルロースフィルターに直接塗沫し、P.piscicidaの特定遺伝子プローブとハイブリダイゼーションを行ったところフィルター上でハイブリッドの形成が認められた。以上、P.piscicidaおよびV.anguillarumより特定遺伝子をクローン化し、それを^<32>Pのみならずphotobiotinで標識しプローブとして用いたところ、それ自身の菌とのみハイブリッドを形成した。さらに、分離培地を用いなくても臓器より直接ニトロセルロースフィルターに塗沫し、プローブハイブリダイゼーションを行うことにより原因菌の検出が可能となった。各魚類病原菌より特定遺伝子を見付け,それをプローブとしたハイブリダイゼーション法による魚類病原菌の迅速同定法の開発を目的とする.昨年度は魚類病原菌Pasteurella piscicidaおよびVidrio anguillarumより特定遺伝子を見付け、これをプローブとしたハイブリダイゼーション法による同定法を開発した。本年度はより実用化を目的として非放射線によるプローブの標識および病魚の臓器の血液を直接ニトロセルロースフィルターに塗沫し、プローブハイブリダイゼーション法で病原体の検出が可能かどうか試みた。1.P.piscicidaよりクローン化した特定遺伝子692bPDNA断片をPhotobiotinあるいは^<32>Pで標識し、dot blotハイブリダイゼーションを行ったところ、両標識プローブはP.piscicidaの染色体DNAとのみハイブリッドを形成し、相同性を示した。一方、他の魚類病原菌とは相同性を示さなかった。Photobiotinで標識したプローブは希釈したDNA溶液の3.9ng/blotの段階までハイブリットの形成が認められ、^<32>Pで標識したプローブとハイブリットの検出限界値と変わらなかった。2.ハマチの腎臓および脾臓の血液をニトロセルロールフィルターに直接塗沫し、^<32>Pで標識した692bPプローブDNAとハイブリダイゼーションを行ったところ、細菌性類結節症にかかった魚ではニトロセルロースフィルター上でハイブリッドの形成が認められた。対照として健康魚の臓器を塗沫したニトロセルロールフィルター上ではハイブリットの形成が認められなかった。

この結果は同時に病魚あるいは健康魚より増菌培地に検出した結果と一致した。以上、上述の魚類病原菌の特定遺伝子をPhotobiotinで標識を行い、プローブハイブリダイゼーションにより原因菌の検出が可能になったことより放射性同位元素と使用しなくても済み、今後この方法により菌の同定が広く行なわれるようになるだろう。さらに、病原より直接ニトロセルロースフィルターに塗沫し、病原菌の検出が可能になったことより、菌を培地で分離培養しなくても原因菌の検出が可能となった。
標数p法によるgeneralized Cohen-Macauley環の構造の研究

体上の多項式環の単項式イデアルでその剰余環がgeneralized Cohen-Macaulayになるものを構成する問題について、後藤四郎、奥平崇貴との共同研究によって、generalized complete intersectionと呼ばれるStanley-Reisnerイデアルのクラスを発見した。これは冪イデアルが全てgeneralized Cohen-Macaulay環を与えるようなStanley-Reisnerイデアルのクラスで、その極小自由分解が線形になるようなサブ・クラスも含めて、完全な組合せ論的特長付けを与えることに'成功した(第一、第二論文)。また、この研究から派生して、Taylor自由分解が極小自由分解になるような単項式イデアルのクラスを発見した。すなわち、安定イデアルと呼ばれる特殊なクラスについてTaylor自由分解が極小になるための必要十分条件を与え、さらにそのような安定イデアルの生成元の形を完全に決定した(第三論文)。また、J. Herzogらとの共同研究の結果、上記必要十分条件はより広いcomponentwise linearないでアルの範囲まで拡張できることがわかった(第四論文)。密着閉包理論との関連では、正標数の体上の有限生成次数付き多元環で、孤立非F-有理特異点になっているものの局所コホモロジーの消滅・非消滅次数についていくつかの新しい結果を得た。すなわち、P. Schenzel,後藤四郎らによって与えられたgeneralized Cohen-Macaulay環のUSD-列の理論とC. Huneke, K. E. Smithらの小平消滅定理に関する結果などを組合せて、孤立非F-有理特異点の局所コホモロジーの密着閉包と極限閉包による簡明な表示を与えた。その表示の応用として、コホモロジーの消滅・次数についてのいくつかの特徴づけを行った。さらに、特に孤立特異点の場合について、最高次の局所コホモロジーにおけるゼロの密着閉包が、低次の局所コホモロジーの消滅・非消滅次数にどのように関係しているかという問題に対して、ひとつの答を得た。本年度は主に2.パラメータ・イデアルの密着閉包理論の検討を行った。1.については、平方自由な単項式イデアルの場合に知られていた局所コホモロジーのHochsterの公式を一般の場合に拡張し、それを使って(1)generalized Cohen-Macaulay単項式イデアルの局所コホモロジーの消滅次数の下限定理を証明し、(2)generalized Cohen-Macaulay単項式イデアルの組合せ論的特徴づけを与えた。さらに、後藤四郎氏との共同研究により、平方自由な単項式イデアルで、その冪が全てgeneralized Cohen-Macaulay単項式イデアルになるようなものを完全に決定し、generalizedCohen-Macaulay単項式イデアルのひとつのクラスを与えることに成功した。2.については、特に次数付き孤立非F-有理特異点に絞って、Huneke-Smithの切片環の方法による小平消滅定理との関連性、および、後藤-中村による密着閉包の重複度理論との関連について、詳細に検討を行った。次数付き孤立非F-有理特異点の局所コホモロジーの消滅次数の評価については、第2Wittベクトルへの持ち上げが存在する場合、標数が十分大きければ小平型消滅定理が成立することが、Deligne-Illusieの1987年の結果によって知られているが、それ以外の場合については散発的な結果が得られているだけのようであり、解明すべき問題は多いと思われる。

それ以外の実績としては、日大文理学部のおける特異点セミナー、および、平成17年9月の特異点理論国際シンポジウムの参加を通して、複素高次元代数多様体における各種特異点理論への乗数イデアル、密着閉包理論の応用、Blow-up環の極小自由分解の標準射影におけるふるまい等についての最新の研究動向を調査した。平成18年度は以下の2系統の研究を行った:(1)多項式環の単項式イデアルの構造の研究、(2)標数pの次数孤立非F-有理型特異点の局所コホモロジーの構造の研究。単項式イデアルにはテイラー型自由分解が与えられるが、これがどのような場合に極小になるかは完全には分かっていない。そこで(1)に関する奥平との共同研究の一環として、Eliahou-Kervaire型極小自由分解が知られている線形商付イデアル(ideal with linear quotients)について、テーラー型自由分解が極小になるための必要十分条件を与え、特に安定イデアルに関しては、その生成元の形を完全に決定した。さらに、後藤との共同研究によって完全な分類が与えられた一般化された完交環(generalized complete intersection)、すなわち任意のべきI^n(n>0)がgeneralized Cohen-MacaulayになるようなStanley-Reisner型単項式イデアルについて、さらにI^nが全て線形極小自由分解を持つ場合を、奥平との共同研究により完全に決定した。いっぽう(2)の研究として、(標数0の体上の)次数付き孤立非有理特異点から素数pによる十分一般な還元、すなわちgeneric mod p reductionで得られる孤立非F-有理型特異点が、最高次局所コホモロジーにおけるゼロの密着閉包によって制御されることに着目し、孤立非有理特異点からの還元とは限らない一般の場合を考察した。すなわち、一般の場合最高次数局所コホモロジーにおけるゼロの密着閉包の非消滅次数が、ある条件のもとでは次数が1つ低い局所コホモロジーの非消滅次数を制御することを示した。
トマトの異常茎発生における組織学的特徴

異常茎発生の初期兆候は、花房の大きさが約12cmのころに花房が着生している節の直下の茎中央に現れ、縦方向に5mm10mmほどの長さで内側にへこんだ条溝が生じる。条溝の発生した部分では、皮層細胞が小さいこと、小さな木質部が連続して条溝内側に連なっていること、木質部の道管径が小さいこと、木質部のリグニン化が強いことなどが認められた。さらに、症状が進行し窓開きの兆候が現れた茎では、深い条溝を境にして2分された双方の茎の伸長速度の差が現れ、一方の茎が他方の茎を引き吊るような格好で伸長し、窓開き症状が進行した。窓開き症状は花房と最終葉(当該花房が分化する直前の葉)の間隔がきわめて短く、ほぼ向かい合うように着生した場合に生じやすいことがわかった。ただし、条溝の発生は花房間の葉においても認められた。しかし、いずれの場合も葉あるいは花房の着生基部を中心にして条溝が現れ、節間部分だけに深い条溝が発生する事はなかった。条溝あるいは窓開き症状が進行する株では、全体に茎径が太い、葉柄及び仮軸径も太い、葉柄がねじれるなどの傾向が認められた。葉柄のねじれも、茎の伸長速度のギャップによる窓開き症状も類似した現象と思われる。以上の結果から、組織形態学的には、条溝および窓開き症状の発生とその発達は、葉柄及び花柄の発達にともなうこれら器官の着生部における茎軸の肥大及び伸長生長のアンバランスによって引き起こされるものと考えられる。なお、本年の研究においては、仮軸生長と異常茎発生との関連を組織形態学的な観察結果から明らかにする事はできなかった。今後は、茎軸における維管束走行(太さ、数)と条溝発生部位との関連、並びに栄養過多条件下での茎軸形成と維管束発達との関連を調査する予定である。
代数多様体の数論的性質について

代表者は研究分野の異なる分担者との討論を通して他の研究分野における成果や方法等を吸収しつつ以下のような成果および今後の研究への展望を得た。代数体上で定義されている代数多様体、特に楕円曲線、のハッセのゼ-タ関数について多くの興味ある問題と未解決の予想があり、これらに対してどのようにアプロ-チするかが課題であった。まずハッセのゼ-タ関数が他の数学的対象と関係をもつ場合について。楕円曲線にはその群の構造から定まる形式群があり、その変換子のある展開はゼ-タ関数と同じ係数をもつことが知られているがこれを見つける方法が知られていないため形式群からゼ-タ関数の性質を導くことは困難である。問題は変換子を展開する局所パラメ-タをどうやって見つけるかであるが、現在素粒子論いとの関連で研究されている無限次元のモジュライ空間が代数曲線の局所パラメ-タの情報を含んでいることに注目しこの空間およびこの空間に作用している無限次元リ-環を詳しく研究することによってゼ-タ関数と関係する局所パラメ-タを解明できる可能性がある。一方、近年整数論でl進フ-リエ変換の理論が発展し、これまで標数pの場合には知られていた、ゼ-タ関数の関数等式にでてくる定数が局所定数の積に分解すること、の理由などが分かってきた。この理論が混合標数の場合にも拡張できればゼ-タ関数を他の解析関数、モジュラ-関数、の性質に帰着させることができる。又、このフ-リエ変換は作用素環の言葉では接合積に対応するのでこういう代数的な形で整数論へ拡張できることが期待される。
西夏語漢語対訳語彙集「番漢合時掌中珠」のコンピュータ処理のための基礎的研究

『番漢合時掌中珠』という西夏語-漢語対訳語彙集に現われる漢語の語彙を検索キーとして,『掌中珠』に記述された西夏語の基礎語彙をコンピュータ上で検索するシステムを作成し,ムニャ語をはじめとする関係諸語との対応を容易に調べられるようにするのが本研究の目的であった。漢語索引については,日本漢字(JIS)版,中国簡体字(GB)版,港台繁体字(Big5)版を作成し,西夏文字の画像データにアクセスして,字形および文献上での出現位置や前後関係,中期中国語の音韻地位,復元音などの必要な情報にアクセスできるようにデータベースの基本構造を設計した。漢語索引部分は当初の計画どおりにほぼ完成した(JIS漢字部分は1997年度じんもんこん研究成果報告CDに収録)が画像データと諸情報の入力に手間取り,現在も作業を継続中である。近く一応の形が整った段階で,本研究の成果をWeb上に公開できるよう準備を進めている。いっぽう,『掌中珠』以外の諸文献にあらわれる西夏語をデータとして扱うとなると,西夏文字を画像ではなくデジタル文字化してテキスト処理がおこなえるようにする必要があり,日本・中国・台湾・ロシア・アメリカで異なる言語環境からの共同利用と研究が可能なシステムを考え出さなくてはいけない。そこで本研究の成果を基礎として次のような研究課題に着手しており,今後も継続して西夏文字のデジタル化に向けてより発展的な研究段階へ進む見通しである。(1)約6000字の標準西夏文字トゥルータイプフォントの作成。(2)特定のOSに依存せずに各国から利用できる仕様の考案。(3)入力プログラムのユーザー辞書を利用して,意味の対応で西夏文字を呼び出せる辞書テキストファイルの作成。
＾＜99＞TC＾m−sestamibiを用いた脳血流測定による抗癌剤の耐性遺伝子発現予測

[目的]1)MIBI SPECTで脳腫瘍患者における化学療法の効果が、治療前に予測可能であるか、2)脳腫瘍患者におけるTI SPECTとMIBI SPECTの半定量的解析を行って、MIBI SPECTが腫瘍の悪性度と相関関係にあるか否かを検討する。[結果・結論]mdrl,Pgpの発現は、RT-PCRでは全例に、mdrl mRNAの発現を認めたが、Northern blottingではいずれも発現が見られなかった。免疫染色では、glioma細胞にPgpの発現はなかったが、正常脳と組織学的悪性度の低い部位の血管壁(endotherial cell)に発現を認めた。GBのendothelial proliferationには発現が見られなかった。すなわち悪性度が上がるに従ってこれらは減少するため、悪性脳腫瘍の薬剤耐性の主因とは考えづらく、化学療法の効果をMIBI-SPECTで予測するのは困難であった。MIBIはpassive transportによって集積しPgpによって排出される事がin vitroの実験で言われているが、今回の結果はそれを支持するものであった。また、悪性度の予測という観点から見れば、Tl-SPECTではRIが、LGAS:0,AA:4.10±0.84,GB:5.71±3.47,meta:7.52±1.52、MIBI-SPECTではearly UIが、LGAS:0,AA:0.82±0.07,GB:1.12±0.40,meta:0.90±0.19で相関が見られ、良い指標になると思われた。
高付加価値放射線治療を実現する金ナノ粒子増感剤の開発

平均サイズ5nmと26nmの金ナノ粒子を合成し、腫瘍細胞内に取り込ませた後に、陽子線およびX線照射して電子を発生させ、媒質中の酸素を励起して活性酸素を発生させる放射線増感剤の開発を行った。生理環境下での凝集を防ぎ、標的指向性を持たせるため、リポソームに抗EGFR抗体を接合したキャリアに金ナノ粒子を内包させた金ナノ粒子複合体を調整した。これをHeLa(ヒト子宮頸がん)およびNB1RGB(ヒト繊維芽細胞)に投与し、細胞集積性を確認した。その後、放射線照射して細胞生存率を測定するとともに、金ナノ粒子存在下での細胞膜損傷と核損傷を示す脂質過酸化とAPサイト数を評価した。その結果、26nm金ナノ粒子複合体から、対照群の数倍の活性酸素発生を認めた。また、エンドソーム内の金ナノ粒子が細胞質内に拡散し、核近傍と一部核内に移行することを確認した。10MVの治療用X線照射下で、細胞膜に過酸化脂質を生成するとともに、DNAに多くのAPsiteを形成したことから、放射線増感が示唆された。In vitroでの増感効果と細胞取り込みが確認できたことをうけて、動物モデルでAuNPの腫瘍集積を増強するin vivo用金ナノ粒子を設計し、B16メラノーマ担がんマウスおよびEGFR過剰発現のA431ヒト類表皮がん担がんマウスに、濃度36mg/mLおよび15mg/mLの5nmおよび26nm金ナノ粒子増感剤を尾静脈投与した。48時間後に腫瘍集積を確認した時点で40MeV、0.6Gy/min.の陽子線を2025Gyまで照射し、照射後30日間腫瘍サイズを測定したところ、5nm投与群でより顕著に抗腫瘍効果が確認された。また、局所投与した群では、投与量の約70%が臓器蓄積し、肝臓と腫瘍で高い集積が見られたことから、金ナノ粒子の腫瘍蓄積が増感に寄与したと推察される。リン脂質とコレステロールを用いて、直径150-180nmのリポソームをベンガム法で合成した。抗EGFR抗体のヒンジ部のSS結合還元でSH基を露出させ、NHSエステルとマレイミド基をもつヘテロ架橋剤でリン脂質のアミノ基と還元抗体のSH基を接合した。この抗体リポソームを孔径200nmのエクストルーダで処理し、8000g、10分の遠心で凝集体を除去し、粒径を整えた。なお、IgG共通のSS結合開裂による還元法を使うため、抗EpCAM、抗MUC1抗体等のリポソーム接合も可能である。次に、塩化金水溶液を撹拌沸騰させ、クエン酸還元剤を添加して、直径20-30nmの金ナノ粒子を合成した。この金コロイドをリポソーム被覆フラスコに添加して、リポソーム内に金ナノ粒子を封入した。SEM/TEM観察で、リポソーム1個あたり2-3個の金ナノ粒子が含有されていることを確認した。金ナノ粒子、リポソームの粒子径およびゼータ電位をDLS測定し、平均粒径が各々26nmと182nm、ゼータ電位が-44mVと-3.5mVであることを確認した。細胞内小器官への集積を強化するため、TATペプチドを付加した金ナノ粒子を合成した。TATはエンドソームとリン脂質膜の融合により、エンドソーム脱出を促進すると考えられる。金ナノ粒子にPEG鎖とアジド基を接合し、FITC標識したアルキン鎖ペプチドを結合させた。ペプチドをNLS、MTSに変更することも可能で、最適な標的指向性を選択できる。リポソームにローダミンB、金ナノ粒子にFITCを標識し、培養時間を18時間、金コロイド濃度を1.03.0mg/mlで変化させ、EGFR発現するHeLa細胞およびNB1RGB正常繊維芽細胞に投与して、細胞内取り込みを蛍光顕微鏡で観察した。HeLa細胞への集積が高く、細胞内小胞にリポソームの集積、細胞質内への金ナノ粒子拡散が確認できた。H28年度は、1)ペプチド結合金ナノ粒子合成、2)抗体リポソーム合成、3)ナノ粒子特性評価、4)腫瘍細胞への送達評価を計画し、ほぼ全ての項目を達成することができた。今回ペプチドとしてTATを使用し合成方法を確認した。塩基数の多いNLS、MTS配列についても適用可能な技術となる。抗体リポソームもIgG共通の部位を結合に利用したので、他の抗体にも適用可能である。物理化学特性として、DLSによる粒子サイズ分布、ゼータ電位のほか、質量濃度と金ナノ粒子特有の表面プラズモン吸光度を評価した。また、還元抗体の抗原親和性は、水晶マイクロバランスで評価した。細胞内のリポソームおよび金ナノ粒子は、レーザー共焦点顕微鏡で局在を確認した。これらの分析や合成は、外部の大学の専門家の助言を得て実施することができた。陽子線照射で放射化される金ナノ粒子からのガンマ線に対し、Ge検出器の検出効率を求めたところ、1.33MeVから0.276MeVの範囲で、1.7%から9.3%であった。金1mgを含む金コロイド溶液に200MeV、10Gyの陽子線を照射した結果、198Au等の生成同位体ピークは検出限界以下であり、放射能は約1時間でBackgroundレベルに低下することを確認した。X線リニアック装置のスペクトルをEGS5コードで計算した結果、1MeV以下の低エネルギーフォトンと電子成分が大きいことが分かった。

治療用X線および陽子線照射下(ともに10Gy)で、金ナノ粒子の活性酸素発生を調べた結果、X線のほうが陽子線に比べて大きいことがわかった。また、APF、HPF試薬の特異性から、放射線照射ではヒドロキシラジカル、スーパーオキシドの発生が多く、一重項酸素の発生は少ない。X線照射前後で、細胞内の酸化ストレス、スーパーオキシド、NO発生を活性酸素蛍光試薬で測定したところ、細胞質内で酸化ストレス上昇及びNO産生が認められた。また、核近傍でのスーパーオキシド生成も認められた。金ナノ粒子をリポソームで包含することで、培養液中の分散性や安定性が向上し、細胞取り込みに寄与ことがわかった。また、リポソームに包含された金ナノ粒子の活性酸素発生が低い理由として、溶媒との接触が制限されること、脂質による活性酸素トラップなどが考えられる。蛍光標識した金ナノ粒子リポソームをHeLa細胞に投与し、レーザー顕微鏡で観察した結果、細胞質内に金ナノ粒子が拡散し、NLSペプチド付加した金ナノ粒子が核近傍に集積していた。また、その一部は核内に移行していると推察される。ICP-MS質量分析で金の質量を定量した結果から、数千個オーダーの金ナノ粒子が取り込まれたと推察できる。H29年度は、1)X線、陽子線ビーム特性の解析、2)細胞内外の活性酸素計測を計画し、これらを遂行することができた。使用予定のリニアック装置不具合のため、別の装置を手配して実験を行い、ビーム特性をシミュレーションで評価した。陽子線照射に先立ち、施設スタッフの協力を得て、検出器校正とスペクトル測定を実施し、安全性を確認できた。ペプチド設計、リポソーム合成、抗体接合、表面修飾等について、参加機関以外の外部専門家から助言を得て実施することができた。平均サイズ5nmと26nmの金ナノ粒子を合成し、腫瘍細胞内に取り込ませた後に、陽子線およびX線照射して電子を発生させ、媒質中の酸素を励起して活性酸素を発生させる放射線増感剤の開発を行った。生理環境下での凝集を防ぎ、標的指向性を持たせるため、リポソームに抗EGFR抗体を接合したキャリアに金ナノ粒子を内包させた金ナノ粒子複合体を調整した。これをHeLa(ヒト子宮頸がん)およびNB1RGB(ヒト繊維芽細胞)に投与し、細胞集積性を確認した。その後、放射線照射して細胞生存率を測定するとともに、金ナノ粒子存在下での細胞膜損傷と核損傷を示す脂質過酸化とAPサイト数を評価した。その結果、26nm金ナノ粒子複合体から、対照群の数倍の活性酸素発生を認めた。また、エンドソーム内の金ナノ粒子が細胞質内に拡散し、核近傍と一部核内に移行することを確認した。10MVの治療用X線照射下で、細胞膜に過酸化脂質を生成するとともに、DNAに多くのAPsiteを形成したことから、放射線増感が示唆された。In vitroでの増感効果と細胞取り込みが確認できたことをうけて、動物モデルでAuNPの腫瘍集積を増強するin vivo用金ナノ粒子を設計し、B16メラノーマ担がんマウスおよびEGFR過剰発現のA431ヒト類表皮がん担がんマウスに、濃度36mg/mLおよび15mg/mLの5nmおよび26nm金ナノ粒子増感剤を尾静脈投与した。48時間後に腫瘍集積を確認した時点で40MeV、0.6Gy/min.の陽子線を2025Gyまで照射し、照射後30日間腫瘍サイズを測定したところ、5nm投与群でより顕著に抗腫瘍効果が確認された。また、局所投与した群では、投与量の約70%が臓器蓄積し、肝臓と腫瘍で高い集積が見られたことから、金ナノ粒子の腫瘍蓄積が増感に寄与したと推察される。
強光子場による有機分子のイオン化・クーロン爆発

有機分子の高強度フェムト秒レーザー励起の実験は1995年DeWittらのイオン化に始まった.レーザーの照射強度が10^<13-14>Wcm^<-2>付近では分解しないでそのまま分子イオンを生成する現象が有力になった.それでも激しいフラグメント化を起こす分子もあった.以前に当グループは非共鳴多光子イオン化において,「レーザー波長がカチオンの吸収と非共鳴の場合に分子イオンの生成が有力になる.」ことを明らかにした.フラグメント化を起こす原因のパラメーターは上述の1.励起波長のほか,2.電子の再衝突(偏光),3.パルス幅,等が考えられる.これらを変化させ,有機分子のフラグメント化を左右する原因を詳しく調べてきた.今年度は電子の再衝突の影響,つまり,励起レーザーの偏光特性について特に詳しく調べた.分子イオン生成は微量分析装置に発展できる.クーロン爆発についてはC_6F_6の結果をまとめ[10],イオン化の実験の際に見られる爆発の結果を解析した.1.電子再衝突の影響ナフタレンの1.4μm励起では分子イオンが主に生成する.したがってフラグメントイオンの少ない条件で偏光の影響を調べることができた.2価のイオンの生成は電子再衝突によると思われる増大を示した.フラグメントイオンについては再衝突の影響は見られなかった.2.アントラセン,0.8μm励起では円偏光励起でフラグメントイオンが増大した.励起光,0.8μm,はアントラセンカチオンと共鳴できる波長である.遷移モーメントとの関係で,円偏光の方がカチオンとのマッチングがよいため,として偏光依存性を説明した.3.パルス幅依存性サブテンフェムト秒パルス励起ではカチオンと共鳴波長であっても,分子イオンを生成できる可能性がある.パルス幅依存性については2,3-ジメチル-1,3-ブタジエン,シクロヘキサンで1000-15fsの範囲で調べた.短パルス励起の方が,フラグメントイオン生成を抑えられた.強光子場による有機分子のイオン化では親イオン/フラグメント化を光電子スペクトルから判別できることを実験で示し、イオン化機構議論した。高強度フェムト秒レーザーで有機分子をイオン化させると、親イオンが観測されることがある。当グループでは親イオンが観測される条件の一つとして、「励起波長に親イオンが吸収が重ならない」ことを報告した。しかし例外の分子が見つかり、この議論を深めるため、有機化合物で量も単純な構造を持つ分子の一つであるメタン、ハロゲン化メタンについて調べた。光電子スペクトルから、イオンの基底状態からレーザーの波長800nmの1光子分のエネルギー1.55eV足したところにイオンの励起準位が存在するならば親イオンは解離するパスが生じると考えられ、また、イオンの基底状態が解離ポテンシャル型であれば、フラグメント化すると予想される。測定した全てのメタン、ハロゲン化メタンで上記のように解釈できることを示すことができた。次に100%イオン化が起こるとされるレーザー強度であるI_<sat>をそれぞれの分子で見積もった。有機化合物のI_<sat>は貴ガスのそれの延長で説明できることが示された。ヘキサフルオロベンゼンのクーロン爆発を実験、および、分子ダイナミクスシミュレーションで調べた。クーロン爆発では、フッ素イオンはレーザー偏光と水平方向に放出され、炭素イオンはレーザー偏光と角度を持って放出された。これを5および、4置換フルオロベンゼンと比較すると、フッ素の置換基の数が減ると、炭素の偏光依存性が少なくなることを見出した。次に、モレキュラーダイナミクスシミュレーションを行った。計算結果では、イオンの運動エネルギーの偏光依存性が実験を定性的に再現できた。また、爆発のダイナミクスにおいて、フッ素は重いため、炭素の動きを阻害し、その結果炭素は角度をもって放出されることが分かった。分子のクーロン爆発において、重い元素が、軽い元素の動きを阻害するという、新しい解釈を示した。有機分子の高強度フェムト秒レーザー励起のイオン化において親イオン/フラグメント化を調べ,クーロン爆発ではC_6F_6の結果を解析した。赤外多光子イオン化法を利用したポンプ-プローブ法を共同研究で始めた。これらの研究は反応機構の研究、微量分析に発展できる。1.高強度フェムト秒レーザーを用いた非共鳴多光子イオン化において,「レーザー波長がカチオンの吸収と非共鳴の場合に親イオンの生成が有力になる。」ことを明らかにした。これを一般化するため、波長可変赤外レーザー励起の実験を開始した。2,3-ジメチル-1,3-ブタジエンでは800nm励起ではフラグメントイオンが観測された。しかし、1400nm励起では親イオンのみが観測された。この分子のカチオンは800nmに吸収を持ち,1400nmに吸収を持たないからである。この考え方をジベンゾ-P-ダイオキシン,その関連分子に応用する詳細な実験を進めた。2.100%イオン化が起こるとされるレーザー強度I_<sat>を求める実験を進めた。メタン系化合物のI_<sat>は希ガスのそれの延長で説明でき、ベンゼン系を含むπ電子を持つ化合物はこれらよりも大きい値を示した。3.赤外多光子イオン化法を利用したポンプ-プローブ法をW.Fussらは開発した。共同研究で二重蛍光を出すことで有名なN, N'-ジメチルアミノベンゾニトリル、その関連分子のポテンシャルを調べた。

100fs以内で電荷移動状態は生成し、分子がねじれていること(48cm^<-1>)平面を示唆する振動(71cm^<-1>)の両方が観測された。4.C_<60>、C_6H_6に続いてC_6F_6のクーロン爆発を昨年度までに実験的に調べた。フッ素イオンはレーザー偏光と水平方向、炭素イオンはレーザー偏光と角度を持って放出された。重原子効果をモレキュラーダイナミックスでシミレーションし,まとめた。高強度フェムト秒レーザーによる,有機分子のイオン化では分子イオンの生成が有力になるが,それでも激しいフラグメント化起こす分子もある.本研究では非共鳴多光子イオン化において,「レーザー波長がカチオンの吸収と非共鳴の場合に分子イオンの生成が有力になる.」ことを明らかにした.フラグメント化を起こす原因は上述の1.励起波長のほか,2.パルス幅,3.電子の再衝突(偏光),が考えられる.これら三つのパラメーターを変化させ,有機分子のフラグメント化を左右する原因を詳しく調べた.また,分子の多価の親イオンが明瞭に観察された.多価イオン生成と分子の諸物性との相関を議論した.分子イオン生成は微量分析装置に発展できる.ダイオキシン類をフェムト秒パルスでイオン化させ,分析への応用の可能性を示した.クーロン爆発ではC_6F_6の結果を解析した.1.分子イオン/フラグメントイオン1.1励起波長アントラセンの場合,1.4μm励起では分子イオンイオンが見え,0.8μm励起ではフラグメントが多く見えた.アントアセンカチオンとの非共鳴のため(1.4μm励起)として説明できた.1.2パルス幅依存性2,3-ジメチル-1,3-ブタジエン,1ps,300fs,35fsとパルス幅を変えて調べた.パルス幅が短い方が分子イオンの生成が大きくなった.1.3.電子の再衝突(直線vs.円偏光)再衝突機構は多価イオン生成に大きな寄与はなく,フラグメント化については分子イオンとレーザー光との共鳴による分解機構に比べ,小さい寄与であった.2.質量分析への応用の可能性ダイオキシンのフェムト秒イオン化の実験を行い,微量分析に応用の可能性を示した.有機分子の高強度フェムト秒レーザー励起の実験は1995年DeWittらのイオン化に始まった.レーザーの照射強度が10^<13-14>Wcm^<-2>付近では分解しないでそのまま分子イオンを生成する現象が有力になった.それでも激しいフラグメント化を起こす分子もあった.以前に当グループは非共鳴多光子イオン化において,「レーザー波長がカチオンの吸収と非共鳴の場合に分子イオンの生成が有力になる.」ことを明らかにした.フラグメント化を起こす原因のパラメーターは上述の1.励起波長のほか,2.電子の再衝突(偏光),3.パルス幅,等が考えられる.これらを変化させ,有機分子のフラグメント化を左右する原因を詳しく調べてきた.今年度は電子の再衝突の影響,つまり,励起レーザーの偏光特性について特に詳しく調べた.分子イオン生成は微量分析装置に発展できる.クーロン爆発についてはC_6F_6の結果をまとめ[10],イオン化の実験の際に見られる爆発の結果を解析した.1.電子再衝突の影響ナフタレンの1.4μm励起では分子イオンが主に生成する.
ヒト膵癌におけるCD200発現の臨床病理学的意義解明と新規標的治療の開発

膵癌におけるCD200発現の臨床的意義を検討した.膵切除後標本を用いて免疫組織染色を行い, CD200発現と臨床病理学的因子との関連を検討した.その結果,癌部におけるCD200発現は術前非治療例と比し,術前化学放射線治療(NACRT)例において有意に高率であり, NACRT例では独立予後不良因子であった.術後補助肝動注療法完遂例においてCD200陽性例は陰性例と比し,肝再発割合が高かく,有意に予後不良であった.腫瘍周囲浸潤リンパ球との関連を検討した結果, CD200陽性例ではCD4, CD8, CD45RO陽性リンパ球が有意に低値であった.以上の結果から,膵癌集学的治療においてCD200発現は治療抵抗性や宿主免疫回避に関与し,重要な臨床的意義を有する可能性が示唆された.CD200はT細胞抑制経路に関連する免疫抑制性膜蛋白であるが,最近癌幹細胞との関連も報告されている.悪性疾患において,いくつかの血液悪性疾患の予後因子と報告されている他,乳癌,メラノーマ等の固形癌の組織や細胞株での発現が確認されている.しかし,膵癌における発現および癌進行への関与については未だ知られていない.術前治療施行後に切除した膵癌臨床検体を用いて,免疫染色にてCD200発現と臨床病理学的因子との関連を検討した.癌部でのCD200発現を認め,陽性例は有意に予後不良で,予後因子多変量解析でも独立予後因子であった.また, CD200陽性例はCD44陽性例と相関しており,癌幹細胞性質と関連することが示唆された.術後補助肝動注療法との関連の検討では, CD200陽性例は肝動注完遂後においても有意に予後不良で,陰性例と比し肝転移の割合が高かった.腫瘍免疫学的検討として,腫瘍周囲浸潤リンパ球との関連を検討した結果, CD200陽性例ではCD4, CD8, CD45RO陽性腫瘍浸潤リンパ球数が有意に低値であった.さらに切除標本の凍結検体を用いてreal-time PCRにて局所免疫活性を検討した結果, CD200陽性例でIL-2が有意に低値であった.膵癌集学的治療においてCD200発現は,治療抵抗性や宿主免疫回避に関与し,重要な臨床的意義を有する可能性が示唆された.CD200を標的とした治療が,膵癌における新規治療戦略となりうるものと思われた.全ての課題を検討するに至らなかったが,臨床検体を用いた検討により膵癌集学的治療におけるCD200発現の重要な臨床的意義の可能性を見出した.膵癌におけるCD200発現の臨床的意義を検討した.膵切除後標本を用いて免疫組織染色を行い, CD200発現と臨床病理学的因子との関連を検討した.その結果,癌部におけるCD200発現は術前非治療例と比し,術前化学放射線治療(NACRT)例において有意に高率であり, NACRT例では独立予後不良因子であった.術後補助肝動注療法完遂例においてCD200陽性例は陰性例と比し,肝再発割合が高かく,有意に予後不良であった.腫瘍周囲浸潤リンパ球との関連を検討した結果, CD200陽性例ではCD4, CD8, CD45RO陽性リンパ球が有意に低値であった.以上の結果から,膵癌集学的治療においてCD200発現は治療抵抗性や宿主免疫回避に関与し,重要な臨床的意義を有する可能性が示唆された.CD200と治療抵抗性の関連についてさらに検討を進める.膵癌細胞株を用いて,薬剤抵抗性phenotyeにおけるCD200発現の検討, CD200ノックダウンや強制発現下で薬剤投与の検討, CD200発現とヌクレオチド輸送蛋白の関連等の検討から,薬剤抵抗性におけるCD200の役割を解明する.さらに,幹細胞性質との関連についても検討する.臨床検体においてCD200とEMT関連因子との関係を検討し, CD200発現の機序を解明する.実験計画に沿って概ね順調に進捗しているが、一部物品を次年度購入予定としたため、使用額が生じた。次年度交付分と合わせて薬品や細胞等を購入し、実験計画に沿って使用する予定である。
12誘導心電図伝送システムが急性心筋梗塞診療に及ぼす影響に関する研究

救急隊が急性心筋梗塞(AMI)患者のもとに到着した際に12誘導心電図を施行し医療機関に伝送する「プレホスピタル12誘導心電図」によって、来院から再灌流までの時間(Door to balloon time;D2BT)が短縮することが報告されており、宮城県においても2015年6月1日より大崎・仙南地域で導入されたが、本邦においてその効果を詳細に検討した研究はこれまでに認めないことから、本研究では宮城県内で発症した急性心筋梗塞のほぼ全例を35年以上前向き登録している「宮城県心筋梗塞対策協議会」のデータベースを用いて、プレホスピタル12誘導心電図の導入がAMI救急医療に及ぼす影響について検討した。2015年2017年のデータを用いて解析を行った結果、システム導入開始から経年的に伝送使用率の上昇を認めていた(2015年:23.1%、2016年:39.3%、2017年:52.1%)。プレホスピタル12誘導心電図施行患者は未施行例と比較して、ST上昇型心筋梗塞(STEMI)の割合が有意に多く(76.9% vs. 65.7%, P=0.03)、急性期再灌流療法であるPrimary PCI施行率が高い傾向であった(93.8% vs. 87.4%, P=0.06)が、院内死亡率には有意な差を認めなかった(7.7% vs. 8.0%, P=0.36)。また、年齢、性別、冠危険因子の罹患率に差は認めなかった。プレホスピタル12誘導心電図施行例は未施行例と比較して救急隊現場到着から病院搬送までの時間は延長させずに(34分vs. 35分, P=0.51)、D2BT短縮を認めていたが(101分vs. 118分, P=0.005)、STEMIと非STEMI症例に分けるとSTEMI症例でのみD2BTを認めた(STEMI:98分vs 115分、非STEMI:125分vs 126分)救急隊が急性心筋梗塞患者のもとに到着した際に12誘導心電図を施行し医療機関に伝送する「プレホスピタル12誘導心電図」を行うことで、来院から再灌流までの時間を短縮させることが報告されており、宮城県においても2015年6月1日より大崎・仙南消防エリアで導入されており、本研究では12誘導心電図伝送システムの導入がAMI救急医療に及ぼす影響についての検討を行うことが目的である。2015年6月2016年5月までに259件の12誘導心電図伝送が施行されており、そのなかで急性心筋梗塞と診断された13症例(伝送あり群)を、同観察期間内で心電図伝送システムを使用しないで救急搬送された18例(伝送なし群)と比較検討を行った。伝送あり群はなし群と比較して、年齢(伝送あり群: 69.2±10.7歳vs.伝送なし群: 67.0±13.4歳、P=0.64)、性別(男性:100% vs. 88.9%、P=0.21)に差は認めなかったが、STEMI症例が有意に多く(92.3% vs. 55.6%、P=0.03)、Killip2度以上の心不全合併率も高い傾向であった46.2% vs. 22.3%、P=0.07)。また、伝送あり群は、伝送なし群と比較してDoor to balloonが有意に短く(中央値(四分位):78(51-87)分vs. 117(73-165)分、P=0.03)、来院から冠動脈造影までに要した時間も短い傾向を認めた(44(34-55)分vs. 85(38-151)分、P=0.09)。このことから心電図伝送システムはより重症心な急性筋梗塞症例で用いられ、迅速な急性心筋梗塞診療に寄与している可能性が示唆された。2015年6月2016年5月までの検討を行った結果、12誘導心電図伝送が迅速な急性心筋梗塞診療に寄与していることが示唆され、12誘導心電図伝送に関する研究会で報告を行った。さらに症例登録を重ねることで詳細な解析を行ることが可能と考えられるため進捗状況はおおむね順調と考えられる。救急隊が急性心筋梗塞患者のもとに到着した際に12誘導心電図を施行し医療機関に伝送する「プレホスピタル12誘導心電図」を行うことで、来院から再灌流までの時間を短縮させることが報告されており、宮城県においても2015年6月1日より大崎・仙南消防エリアで導入されている。しかし、本邦においてその効果について詳細に検討した研究はこれまでに認めないことから、本研究では宮城県内で発症した急性心筋梗塞のほぼ全例を35年以上にわたって前向き登録している「宮城県心筋梗塞対策協議会」のデータベースを用いて、12誘導心電図伝送システムの導入がAMI救急医療に及ぼす影響についての検討を行い、AMI救急医療の現状と問題点を把握し、今後の課題を明らかにすることを目的として以下の検討を行う。1.プレホスピタル12誘導心電図を施行されたAMI患者数の推移をみるとともにプレホスピタル12誘導心電図を施行された患者の特徴を年齢、性別、既往症・危険因子の有無、発症時間、梗塞部位、ST上昇の有無といった項目を用いて検討を行う。2.12誘導心電図伝送システム