hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
企業労働者の心身症状に影響するワークスタイル及びライフスタイル因子の縦断的研究

そこで、上記ウェブサイトでの募集と平行して、株式会社日経リサーチが行政庁等の委託を受けて実施する、ウェブを通じたアンケート調査を利用し、同調査のモニター登録の中に成人双生児に該当する者がどの程度いるか、予備調査的に把握を試みた。その結果、約1600名ほどの成人双生児またはその家族がモニター登録者に含まれていることが判明した。この手法で本研究の協力者を本格的に募集しようとしたものの、23年度途中に研究代表者が所属先を異動したことに伴い、日経リサーチ社への委託の交渉のための研究費の調達時期の遅延が生じたため、同社との交渉が暗礁に乗り上げた。一方、研究代表者が現所属先に異動することで、幸いにも所属先が運営する成人双生児レジストリー(登録簿)の管理実務を連携研究者の一人(早川)とともに担当することとなった。同レジストリーにはこれまでいかなる研究の対象にもなったことのない60歳未満の成人双生児が含まれていることが判明した。そこで、本研究費に係る研究を上記の60歳未満の成人双生児を対象に実施することとした。これは本研究の目的の範囲内での計画修正であるとともに、達成のための合理的方法であると考えられる。24年3月までに、これらの成人双生児に対して研究参加を呼びかけるための準備を概ね完了した、本研究は、労働者の働き方や生活習慣と心身症状発症との関連やそのメカニズムを、成人双生児を用いた縦断的研究によって解明することにより、職場における実効ある保健指導対策の確立に資することを目的とする。双生児研究法は、遺伝的に同一かつ幼少期(母胎内を含む)の環境を共有する一卵性双生児を対象とすることにより、曝露要因の影響を鋭敏に比較検討できる有力な研究方法である。本年度においては、本研究への参加の呼びかけに応じた60歳未満の成人双生児を対象に、本事業の研究協力機関である大阪大学大学院医学系研究科附属ツインリサーチセンター(以下、「同センター」)の協力の下で、本年度申請書にあるとおりの質問紙調査を実施すべく、準備を整えていた。その後、同センターの担当者を含むアジア・欧州などの双生児研究者らによる国際会議が開催された。その席上、成人双生児を用いた国際的な共同調査研究を実施する案が出されて了承され、同センターも足並みを揃えて調査を実施する必要に迫られた。この調査は本事業において実施することとなっている主要な調査項目(職業性ストレス、慢性疲労など)を含むものであるため、本事業のみ先走って調査を実施することが叶わなくなった。得られるデータ次第では本事業の研究方式の見直しが必要とされる事態も想定された。こうしたことから、本事業においては同センターの調査の準備状況と同一歩調を取り、関係各国間の継続的な交渉・調整を図ることとするため、調査実施時期を次年度以降に延期することとした。本研究は、労働者の働き方や生活習慣と心身症状発症との関連やそのメカニズムを、成人双生児を用いた縦断的研究によって解明することにより、職場における実効ある保健指導対策の確立に資することを目的とする。本年度79月にかけて、本研究への参加の呼びかけに応じた成人双生児約2000名に対し、郵送自記式質問紙調査を実施した。
カルボキシル基を有する天然化合物による活性型グレリン産生抑制効果の検討

本研究では、摂食亢進作用を有する活性型グレリンの産生を抑制する物質の探索を行った。その結果、カルボキシル基を有するトリテルペン類(アシアチン酸、グリチルレチン酸、オレアノール酸)およびエピガロカテキン没食子酸(EGCG)がグレリン産生細胞AGS-GHRL8の活性型グレリン産生を抑制することが明らかとなった。また、オレアノール酸およびEGCGはマウス血漿中活性型グレリン濃度を低下させることも明らかとなった。本研究で見出したトリテルペン類およびEGCGは、活性型グレリン産生抑制を機序とする肥満の予防・改善薬の開発に有用であると思われる。グレリンは摂食亢進作用を有するペプチドホルモンであり、3位セリン残基にオクタン酸が結合したオクタノイルグレリン(活性型グレリン)が主にその作用を示すことが知られている。我々は肥満の予防および改善を目的として、遺伝子組み換え細胞を用いた活性型グレリン産生抑制物質のin vitro探索実験系を構築し、活性型グレリン産生抑制物質の探索を行ってきた。これまでの探索の結果、活性型グレリン産生抑制効果を示した物質は全てカルボキシル基を有していた。このことから、活性型グレリン産生抑制作用にはカルボキシル基が関与していると考えられたため、本研究ではカルボキシル基を有する天然化合物を中心に活性型グレリンの産生抑制効果を検討した。平成27度は、14物質のスクリーニングを行い、7物質(オレアノール酸、アシアチン酸、グリチルレチン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、エピガロカテキン没食子酸およびクルクミン)の活性型グレリン産生抑制効果を見出した。エピガロカテキン没食子酸およびクルクミンはカルボキシル基を有しておらず、活性型グレリン産生抑制作用にはカルボキシル基の存在は必須の条件ではないことが示された。またカフェイン酸、クロロゲン酸および没食子酸はカルボキシル基を有しているが、活性型グレリン産生抑制作用を示さないことも明らかとなった。さらに現在、in vitroにおいて活性型グレリン産生抑制作用を示したウルソール酸が、マウスの血漿中活性型グレリン濃度に及ぼす影響を明らかにするため、種々の条件で検討を行っている。平成27年度は、新規活性型グレリン産生抑制物質の探索ならびにin vitroにおける活性型グレリン産生抑制効果が明らかとなっているウルソール酸およびコロソリン酸のマウス血漿中活性型グレリン濃度への影響の検討を予定していた。このうち、活性型グレリン産生抑制物質の探索については順調に実施することができ、新たに7種の活性型グレリン産生抑制物質を見出した。ウルソール酸およびコロソリン酸がマウス血漿中活性型グレリン濃度へ及ぼす影響については現在、ウルソール酸の濃度、投与方法および投与時間などの条件を変更して検討を進めている段階にあり、コロソリン酸の影響はいまだ検討するに至っていない。以上のことから進捗状況を「やや遅れている」と判断した。グレリンは、主に胃で産生されるペプチドホルモンであり、3位セリン残基にオクタノイル基が結合したオクタノイルグレリン(活性型グレリン)が摂食亢進作用を示すことが知られている。活性型グレリンの生成には、Ghrelin-O-acyltransferase(GOAT)およびfurin、PC2、PC1/3などのプロホルモン転換酵素が必要である。我々は肥満の予防および改善を目的として、活性型グレリン産生抑制物質のin vitro探索実験系を構築し、その探索を行ってきた。前年度はカルボキシル基を有する物質を中心に探索を行い、オレアノール酸などの5種類のカルボキシル基を有するトリテルペンおよび緑茶成分エピガロカテキン没食子酸(EGCG)の活性型グレリン産生抑制作用を明らかにした。今年度は、オレアノール酸およびEGCGをマウスへ投与し、両物質がマウス血漿中活性型グレリン濃度を低下させることを明らかにした。さらにEGCGを投与したマウスから採取した胃のグレリン、GOAT、furin、PC2およびPC1/3のmRNA発現量をリアルタイムPCRにて測定し、グレリンおよびPC1/3のmRNA発現量が低下していることを見出した。EGCGの加水分解産物である没食子酸およびエピガロカテキンは、in vitroにおける活性型グレリンの産生抑制作用を示さなかったことから、EGCGが活性の本体であることが示唆された。本研究により、カルボキシル基を有するトリテルペン類およびEGCGの活性型グレリン産生抑制作用が明らかとなり、これらの物質を用いた抗肥満薬およびサプリメント開発への可能性が示された。前年度は7種の新規活性型グレリン産生抑制物質を見出した。今年度はそれらの物質の、1マウス血漿中活性型グレリン濃度に及ぼす影響、2活性型グレリン産生抑制の機序、の2点を検討する予定である。

1については各物質の混餌による投与およびゾンデを用いた投与の影響を検討する。2については、活性型グレリン産生に不可欠な酵素であるGhrelin O-acyltransferaseおよびFurinのmRNA発現量への影響をリアルタイムPCRにて検討する。さらに活性型グレリン産生抑制物質がグレリンの3位セリン残基に結合するオクタン酸の細胞内濃度の低下をもたらした可能性を考え、細胞内オクタン酸濃度への影響をガスクロマトグラフィーにより、評価する予定である。28年度が最終年度であるため、記入しない。医療薬学28年度が最終年度であるため、記入しない。
追加学習を行なう神経回路モデルによる事例ベース推論システムの構築

近年,過去の事例を基に新しい問題を解く事例ベース推論が注目されている.この推論システムの核となる事例データベースを神経回路に置き換えることができれば,人力層に問題を提示して少数の細胞の活性値を計算するだけで,出力層に問題に適応した解が得られるため,推論効率が高まるものと期待できる.昨年までの研究では,事例データベースとしての神経回路が新しい事例を追加的に学習できるように,効率の良い追加学習法の開発を行って来た.本年度は,まず,昨年度までの研究成果を具体的な推論システムに実装した.構築したシステムは,女性の化粧を支援するためのカラーコーディネイトシステムで,ユーザーはテーマカラーと自分の顔の肌の色をシステムのコンソールを使って入力する.すると中に組み込まれた神経回路がこのテーマカラーと肌の色を入力として目の淵,眉毛の下,および瞼に塗るアイカラー3色を出力して表示する.しかしユーザーがその3色を気に入らなかった場合にはユーザがコンソールからその3色を修正し,追加学習ボタンをクリックする.するとシステムは次回からはユーザの修正を反映した出力を出すようになる.このシステムは既に当該研究者のホームページで公開され,インターネットを通して誰でも利用できる.しかし,神経回路が新しい事例を提示される度に確実に学習するようにした場合,その都度場当たり的に細胞を割り付ける必要があり,結果として冗長な中間細胞が増えてしまう.本年度はこれを解決するため,慎重に小数の細胞を割り付けながらゆっくり学習するS-Netと,S-Netのエラーを高速に補填するように多くの細胞を割り付けて学習を行うF-Netとを組み合わせた神経回路を構築した.この神経回路では,学習を続けるにしたがってS-Netのエラーは減少し,F-Netはゼロを出力するようになっていく.するとF-Netは自分の中間細胞のうち,ゼロ出力にのみ貢献する中間細胞を不要とみなして削除する.またこの神経回路の出力はF-Net+S-Netであり,学習の初期段階から全体(F-Net+S-Net)のエラーは小さく,朱だS-Netのエラーが大きい状態であっても推論が可能である.つまり推論システムの運用を行いながら,総細胞数を徐々に少なくしていける.だがS-Netの適応速度が遅いため,次々と領域の異なる新規パターンが提示され続けると,結局F-Netの細胞が増え続ける場合がある.これを解決するには定期的に新規パターンの学習をストップする以外に無い.そのため学習期間を昼と夜に分けて,昼は推論を行いつつ従来通りの学習をし,夜は新規パターンの学習をストップしてS-Netが(F-Net+S-Net)の出力を学習し,F-Netの冗長な細胞を削除するようにした.この昼と夜の学習を交互に繰り返すことでシステムは,常に総細胞数を少なく抑えながら推論を実行できるようになる.この夜の間の学習が生物における睡眠に対応する可能性がある.近年,過去の事例を基に新しい問題を解く事例ベース推論が注目されている.この手法では,過去の事例を事例データベースに蓄積し,新しい問題が提示された際には,それに最も良く似た事例を検索し,それを問題にあうように適応させた上で解を出力する.もしこの解が間違っていれば専門家が修正し,その問題と正しい解とを新しい事例として事例データベースに追加する.この事例データベースを神経回路に置き換えることができれば,入力に問題を提示して少数の細胞の活性値を計算するだけで,汎化能力によって出力層に問題に適応した解が得られる.そのため推論効率が高まるものと期待できる.本研究では,これを実現するために,新しい事例を効率良く追加学習する神経回路を構築し,事例データベースとして使用する.この神経回路はGeneralized Radial Basis Function (GRBF)に適応的に中間細胞を追加する神経回路Resource Allocating Network (RAN)を使用し,新しい事例を学習する際には,その学習によって干渉を受けると予想される過去の事例を想起して共に学習する.この追加学習システムの性能をいくつかのベンチマーク用データセットを用いて「追加学習した事例の個数」に対する「全事例に対する二乗誤差の総和」で評価した.その結果、一般的に広く使われているk-Nearest Neighbor(k-NN)よりも速く二乗誤差が減少し,且つk-NNよりも十分に少ない素子数(中間細胞数)でこれを実現できたことを確認した.そしてこのシステムを,カラーコーディネートシステムに実装した.だが,ここで使用している追加学習システムでは,提示された新規事例を確実に記憶するために,新しい細胞を多く割り付ける傾向がある.これは,場合によっては冗長な中間細胞を多く発生させ,いたずらに計算量を増加させることもあり,必ずしも望ましいことではない.そこで,速い適応能力を保持しつつ中間細胞数を削減する手法も検討した.この手法では,慎重に細胞を割り付けて遅く学習するネットワークに,その誤差を補填するように中間細胞を多く割り付けて高速学習するネットワークが付加されている.最終出力はこの二つのネットワークの出力の和である.遅く学習するネットワークの誤差がゼロに近付くと高速学習ネットワークは常にゼロを出力するようになり,その中間細胞も不要と見なされて削除されていく.これによりシステムは,学習の初期段階から高い精度で関数近似する能力を持つため,学習と認識との同時実行が可能である.そして運用途中に総細胞数が徐々に減少して実行効率が向上していくのである.今後このシステムに,上述した追加学習法を適用し,事例ベース推論に応用していきたい.近年,過去の事例を基に新しい問題を解く事例ベース推論が注目されている.

この推論システムの核となる事例データベースを神経回路に置き換えることができれば,人力層に問題を提示して少数の細胞の活性値を計算するだけで,出力層に問題に適応した解が得られるため,推論効率が高まるものと期待できる.昨年までの研究では,事例データベースとしての神経回路が新しい事例を追加的に学習できるように,効率の良い追加学習法の開発を行って来た.本年度は,まず,昨年度までの研究成果を具体的な推論システムに実装した.構築したシステムは,女性の化粧を支援するためのカラーコーディネイトシステムで,ユーザーはテーマカラーと自分の顔の肌の色をシステムのコンソールを使って入力する.すると中に組み込まれた神経回路がこのテーマカラーと肌の色を入力として目の淵,眉毛の下,および瞼に塗るアイカラー3色を出力して表示する.しかしユーザーがその3色を気に入らなかった場合にはユーザがコンソールからその3色を修正し,追加学習ボタンをクリックする.するとシステムは次回からはユーザの修正を反映した出力を出すようになる.このシステムは既に当該研究者のホームページで公開され,インターネットを通して誰でも利用できる.しかし,神経回路が新しい事例を提示される度に確実に学習するようにした場合,その都度場当たり的に細胞を割り付ける必要があり,結果として冗長な中間細胞が増えてしまう.本年度はこれを解決するため,慎重に小数の細胞を割り付けながらゆっくり学習するS-Netと,S-Netのエラーを高速に補填するように多くの細胞を割り付けて学習を行うF-Netとを組み合わせた神経回路を構築した.この神経回路では,学習を続けるにしたがってS-Netのエラーは減少し,F-Netはゼロを出力するようになっていく.するとF-Netは自分の中間細胞のうち,ゼロ出力にのみ貢献する中間細胞を不要とみなして削除する.またこの神経回路の出力はF-Net+S-Netであり,学習の初期段階から全体(F-Net+S-Net)のエラーは小さく,朱だS-Netのエラーが大きい状態であっても推論が可能である.つまり推論システムの運用を行いながら,総細胞数を徐々に少なくしていける.だがS-Netの適応速度が遅いため,次々と領域の異なる新規パターンが提示され続けると,結局F-Netの細胞が増え続ける場合がある.これを解決するには定期的に新規パターンの学習をストップする以外に無い.そのため学習期間を昼と夜に分けて,昼は推論を行いつつ従来通りの学習をし,夜は新規パターンの学習をストップしてS-Netが(F-Net+S-Net)の出力を学習し,F-Netの冗長な細胞を削除するようにした.この昼と夜の学習を交互に繰り返すことでシステムは,常に総細胞数を少なく抑えながら推論を実行できるようになる.この夜の間の学習が生物における睡眠に対応する可能性がある.
相対論的重イオン衝突反応におけるクォークグルーオンプラズマの非平衡過程

本研究は、複雑で多様な過程を含む相対論的重イオン衝突反応のうち、生成された極限状態の物質「クォークグルーオンプラズマ(QGP)」の非平衡現象に注目し、衝突反応ダイナミクスを記述するためのモデルの構築、及び、QGPの輸送的性質を調べることを目的としている。研究成果は大別して、(1)衝突直後の物質の揺らぎがダイナミクスに与える影響、(2)QGPの粘性流体力学、(3)QGPがハドロン化した後の散逸の影響の3つに分類される。本研究は、全く新しい極限状態の物質「クォーク・グルーオン・プラザマ(QGP)」の性質を、非平衡過程を通して理解することを目的としている。本年度は、相対論的粘性流体力学についての情報収集を主に行った。また、重イオン衝突反応の時間発展を念頭に、散逸項を含んだ相対論的流体方程式を熱力学量が衝突軸方向のローレンツ変換不変性を持つような簡単な系(Bjorkenのスケーリング解)に適用し、解の振る舞いを調べた。最終的に得られるエントロピー生成量は、系の初期条件に敏感に依存することが分かり、今まで以上に、重イオン衝突反応の初期状態を詳細に調べる必要があることが分かった。現在は、この解析結果を衝突軸方向に熱力学量がローレンツ不変性を持たないより現実的な系に適用することを試みている。また、粘性の効果を有効的に取り入れることができるBoltzmann方程式を、ハドロン多体系の時空発展に適用し、一方、クォークとグルーオンの多体系には依然として、完全流体を仮定した模型を構築した。この模型を用いて、相対論的重イオン衝突実験のうち、系の流体力学的な様相と密接に関連のあるデータを系統的に解析し、ハドロン多体系の粘性の効果を詳細に調べた。粘性は、ハドロン間の相互作用の強さに応じて、測定される粒子毎に異なる影響を与える。特に、他のハドロンと相互作用をあまり起こさないと考えられているφ中間子に注目し、粒子の質量順に整列化する楕円的な運動量異方性が、φ中間子の場合、この順序が破れることを予言した。更に、この破れから、クォーク・グルーオン・プラズマ中における流体力学的な性質を直接引き出すことができる可能性を指摘した。本研究は、全く新しい極限状態の物質「クォークグルーオンプラズマ(QGP)」の性質を、非平衡過程を通して理解することを目的としている。本年度は、非平衡過程の一つの例として、量子色力学のスケール不変性の破流と密接に関連がある体粘性に着目し、相対論的重イオン衝突反応における観測量に与える影響を調べた。QGPの時空発展に相対論的流体力学を適用した場合、流体方程式の解を如何に観測量に結びつけるかが常に問題となる。ずれ粘性の場合は、これまでに多くの解析がなされていたが、体粘性は、その取り扱いの複雑さと体粘性係数の小ささから、あまり注目されてこなかつた。本研究では、粒子分布関数における体粘性に起因する歪みを系統的に解析し、実験と比較しうるハドロンのスペクトルとその方位角異方性のパラメータに与える影響を定量的に評価した。その結果、体粘性の影響が小さいという従来の予測に反し、非自明なメカニズムによって観測量に大きな影響を及ぼすことが判明した。更に、重イオン衝突反応の統合的な記述の一環として、ハドロン相に粘性の影響を取り入れたQGP流体-ハドロンカスケード統合モデルに、従来無視されてきた重イオン衝突直後のQGPの空間的な揺らぎを考慮した。完全に球対称な安定核同士を衝突させても、原子核(重イオン)内核子の位置の揺らぎから、衝突直後の生成物質の空間分布は、衝突ごとに異なる。この効果を取り入れることにより、ハドロンのスペクトルの方位角異方性の実験結果をより良く再現することができた。このモデルは、今後実験結果からQGPの粘性を定量的に引き出す上で重要となる。本研究は、我々の初期宇宙を満たしていた原始物質「クォークグルーオンプラズマ(QGP)」の物理的な性質を相対論的重イオン衝突における非平衡過程を通して理解することを目的としている。本年度は、研究の最終的な目標である相対論的粘性流体方程式の数値的解法に向けて、多成分系、かつ、多保存流が存在する場合の粘性の影響も含んだ相対論的流体方程式の導出を試みた。非平衡過程である粘性の影響は、素朴な相対論的拡張をすると因果律を破る、不安定性を引き起こすことが知られている。そのため、粘性量に対する緩和過程を取り入れる必要がある。そのため、数値解法を目指す前に相対論的粘性流体力学の定式化自身を行う必要があった。そこで、具体的にはGradのモーメント法を拡張し、Onsagerの相反定理を満たすような非常に一般的な構成方程式を導いた。また、体粘性が横運動量スペクトルや楕円型フロー係数といった観測量に及ぼす影響の定量的評価も行った。

さらに、ハドロン相の粘性を運動学的に取り入れた流体-カスケード複合模型を用いて、衝突初期の系の形の揺らぎが物理量に与える影響を調べた。また、流体から直接放出される熱光子の解析を行った。光子はハドロンと異なり、強い相互作用をせずに、一旦放出されれば検出器によって直接測定されるためクリーンなプローブとされている。本件急では特に楕円型フローの横運動量依存性が、ハドロンでは得られない系の内部の情報を担っていることを見出した。
フランスにおける都市集合住宅に内包される伝統的生活サポートシステムに関する研究

1.研究目的日本は未曾有の高齢化社会に入ってきている。この研究では、高齢期の住生活に焦点を合わせ、高齢社会での住生活に焦点を合わせ、高齢社会での住生活のサポートシステムについて検討を進めた。高齢社会といえば、北欧やヨーロッパが先進国であるが、その典型的先行経験をフランスにて検討した。2006年の研究目的は、次の2点であった。(1)、フランスにおける伝統的な住生活のサポートシステムを確認する。(2)、フランスにおける現代の住生活管理システムを検討する。2007年の研究無目的は、昨年の目的をさらに深め、(3)、一般化して、フィールドにてフランス都市部における集住と、その管理の実態について、アンケートちょうさを実施した。2.研究方法上記(1).(2)の日的では、関連図書の翻訳をした。また、この延長線上で、翻訳図書の出版をした。(3)の目的実現のために、フランス(パリ)の、日本人居住者を対象に、集住と住生活管理の実態について調査を実施した。調査票の配布は、2007年9月、パリ日本人会にて、来訪者に直接行った。回収は郵送である。配布数311票、回収数219票(有効数218票)であった。3.研究結果(1)(2)では、昨年、日本住宅総合研究財団からの追加的出版助成金を得たが、それを併用して、翻訳図書の出版を行った。翻訳図書は、ジャン=ルイ・ドクール著「初期の管理人小屋-19世紀のパリとパリのコンシェルジュー」300ページ(研究成果参照)である。(3)では、日本人会での調査結果を2008年日本建築学会中国大会などにて報告し、関連論文報告等を行った。回収は郵送である。この研究では、高齢期の住生活に焦点を合わせ、高齢社会での住生活のサポートシステムにっいて検討を進めた。2006年度の研究内容は、次の2点である。(1).フランスにおける伝統的な住生活のサポートシステムを確認する。(2).フランスにおける現代の住生活管理システムを検討する。2.研究方法上記(1).については、関連図書の翻訳をした。同(2).については、現在のパリで、集住に関する実態を、居住者および管理人(ガルディアン)の側面より、ヒヤリング調査をした。(2007年度には、より一般化して留め置きアンケート調査に入る予定であるので、そのためのプレ調査の意味もあった。)3.研究結果2006年度の研究結果は、まだ進行途中のため、報告は、中間報告的なものになる。まず(1).の、図書の翻訳は、近日中出版する段取りにしている。(研究成果参照。)(2).については、調査受け入れ先の調整をしていたが、その目途がたった段階である。以上1.研究目的日本は未曾有の高齢化社会に入ってきている。この研究では、高齢期の住生活に焦点を合わせ、高齢社会での住生活のサポートシステムについて検討を進めた。2007年の研究目的は、(1)、(2)をさらに深め、(3)、一般化して、フィールドにてフラシス都市部における集住と、その管理の実態について、アンケート調査を実施した。2.研究方法

上記(1)、(2)の目的では、関連図書の翻訳をした。また、この延長線上で、翻訳図書の出版をした。(3)の目的実現のために、フランス(パリ)の、日本人居往者を対象に、集住と住生活管理の実態について調査を実施した。調査票の配布は、2007年9月、パリ日本人会にて、来訪者に直接配布した。回収は郵送である。配布数311票、回収数219票(有効回収数218票)であった。3.研究結果(1)(2)では、日本住宅総合研究財団からの追加的出版助成金を併用して、翻訳図書の出版を行った。翻訳図書は、ジャン=ルイ・ドクール著「初期の管理人小屋-19世紀のパリと、パリのコンシェルジュー」300ページ(研究成果参照)である。(3)では、その結果を2008年日本建築学会中国大会などにて報告し、関運論文報告等を行った。
日本人悪性黒色腫における融合遺伝子と臨床病理組織学的因子との関連に関する研究

本研究の目的は、日本人悪性黒色腫における遺伝子情報の特徴を明らかにし、本邦患者に対し分子標的治療のターゲットとなりうる新規遺伝子を探索することである。本研究では特に日本人悪性黒色腫における融合遺伝子に焦点を当て解析し、我々のこれまでの研究で得られた体細胞変異データや臨床病理学的因子との関連について検討する。
エフェクター前駆細胞へのHIV抑制因子の遺伝子導入による新たな治療法の開発

HIVそのものを改良したレンチウイルスベクターはヒトTリンパ球へ遺伝子導入効率が優れている。このベクターを用いてHIVの増殖を抑制する遺伝子治療法を確立することを目的とした。今年度の成果はHIVのコレセプター分子であるCXCR4のmRNA発現を切断する小分子RNAであるsmall interfering RNA(siRNA)を発現するウイルスベクターを開発し、このベクターの導入により、HIVの感染を抑制できるようになったことである。さらに、ラムダファージインテグレースを利用した部位特異的組換え反応が可能なレンチウイルスベクター系を開発し、これを利用して効率よくcDNAライブラリを発現するレンチウィルスベクター実験系を確立した。そして、HIV感染よる細胞障害性を抑制する遺伝子の同定を試み、ヒト白血球cDNAライブラリよりCD14がその細胞障害性を強力に抑制することがわかった。今回のsiRNA発現レンチウイルスベクター、ならびに、cDNAライブラリ発現レンチウイルスベクターはいずれも新規のベクター系であり、さらに強力なHIVへの抑制活性を示す遺伝子導入系への改良が期待できる。また、レンチウイルスベクターは血液幹細胞を含んだ種々の細胞に遺伝子導入が可能であり、新規遺伝子治療法として期待されている。さらに、他の分子のsiRNAならびにCD14以外のHIV増殖性ならびに細胞障害性の長期的に抑制する遺伝子分離同定をめざしている。
強磁場印加による円偏光コヒーレント軟X線の発生

本研究は、通常は無偏光であるプラズマ軟X線レーザーを円偏光化することを目的としている。高波長分解能分光器及び、専用に開発した強磁場発生装置を従来の軟X線レーザーと組み合わせることにより円偏光化を試みた。結果として、世界で初めてニッケル様イオンを用いたX線レーザーの線幅測定、及び外部磁場によるスペクトル線の波長分離の観測に成功した。また、波長分離量が、外部磁場から予想される量と比較して非常に大きい事から、レーザー媒質中での磁場圧縮機構の存在が予想される。本研究は、日本原子力研究開発機構で開発されたX線レーザーを円偏光化することを目的としている。円偏光X線レーザーは、物質の構造解析用の光源として望まれている。具体的には、X線レーザー媒質に強磁場を特定方向に印加した場合、レーザー線の円偏光成分と直線偏光成分が波長的に分離する(通常はランダムに混在しているため、ほぼ無偏光)ことを利用して、円偏光成分を選択的に取り出すことを試みている。平成19年度は、X線レーザーの線幅の精密測定及び、パルス強磁場発生装置の開発を行った。X線レーザーの線幅の精密測定は、円偏光化に必要な磁場強度を見積もるために必要であるが、X線レーザーの線幅は極めて狭く、その測定は世界でも2例目である(超短パルスレーザー励起によるX線レーザーでは世界初)。X線レーザーの線幅は、媒質の電子温度、電子温度に敏感であるため、原子過程のシミュレーションコード開発の指標としても有用である。高波長分解能分光器により計測された線幅は波長18.9nmにおいて0.002nmであり、円偏光化に必要な磁場は約44テスラであることが判明した。パルス強磁場発生装置は磁場生成用のコイルをX線レーザー用に小型化(内径5mm、長さ5mm)することにより、電源部を含めた装置全体の小型化が可能である。現在までに真空中における磁場発生試験を行い、約25テスラの磁場の発生に成功している。平成20年度には、磁場生成用コイルの材質及び、形状の最適化を行うことで磁場強度の増強を行い、X線レーザーの円偏光化実験を行う。円偏光X線レーザーは、物質の構造解析用の光源として有望である。通常のX線レーザーは高温高密度のレーザープラズマを媒質とする為、ほぼ無偏光である。ニッケル様イオン(プラズマ)を用いたX線レーザー媒質が特定方向の強磁場下に置かれた場合、レーザー遷移線がゼーマン効果により分離する事が予測される。分離したレーザー線は、それぞれ右回りと左回りの円偏光を有するため、高分解能分光器を用いる事で、円偏光のX線レーザーを選択的に抽出する事が可能である。平成20年度は、平成19年度に開発したパルス強磁場発生装置を用いて、X線レーザーの円偏光化を試みた。X線レーザー媒質(ニッケル様モリブデン:発振波長18.9nm)をパルス強磁場発生装置により発生した強磁場下(15テスラ)に設置する事により、世界で初めて発振線の波長分離の観測に成功した。これにより、非常に輝度の高い円偏光のコヒーレントX線(1e+10光子以上/1ショット)が物質の構造解析用の光源として利用が可能となると期待される。また、観測された発振線の分離量が、磁場強度から予想される値と比較して非常に大きい(約10倍)ことから、X線レーザー媒質中において磁場が圧縮されている事が予想される。レーザープラズマ中における磁場の圧縮は今までに直接観測の例が無く、本研究により得られた結果は、磁場圧縮機構が重要視される天体プラズマの分野への応用も期待できる。
アマチュア菌類学のための支援情報基盤と遺伝情報つき地域エキシカータ作成の試み

アマチュアの活動がきわめて重要な菌類学において自然史系博物館を教育基盤として活用するために1.学習用情報源として本郷次雄菌類図譜を様々な教育活用に供することや研究資源としての活用を図り、全資料のデータベース化を終えた。テングタケ科やイグチ科などの資料については研究活用もすすめることができた。2.博物館を拠点とした学びの場を作り出し、多くの博物館の菌類展で展示支援をすることができた。3.菌類資料に対するDNAバーコーディング法を評価し、古い標本からの遺伝情報取得を試み、部分的ながら成果を得ることができた。これらからアマチュアと博物館の連携に関するデータベースや学芸員の役割の重要性を再評価した。日本の菌類生物多様性の解明において、アマチュア研究者の担う役割は大きい。アマチュア菌類学のために有益な参考資料の提供拠点として博物館を活用するのが本研究である。1.本郷コレクションの現状調査と公開準備日本のきのこ相解明の上で、故本郷次雄氏は重要な役割をはたし、彼の作成した図鑑や論文が、職業研究者、アマチュアともに現代の日本菌類学の基礎となっている。そこで、本郷氏が収集した菌類標本約6500点、水彩画1100点、ノート60冊について、デジタル化を進めている。年度内に標本の1/3、水彩画の1/2、ノートの9割程がデジタル化を完了している。一部の画像についてはそれぞれの分野の研究者に預け、現在の知見に基づいた再評価を行いつつある標本番号や種名をキーとして、検索公開可能なシステムを準備中である。2.本郷標本の分割寄贈先の探索と、状況の確認本郷標本はタイプ標本が国立科学博物館に移管されている他、ニュージーランド、小笠原などの調査行の関連標本が国立科学博物館にあることが分かった。このほか、共同研究者であった長澤栄史氏の所属する鳥取県立菌蕈研究所にも標本と海外参考標本が移管されていた。これらの標本も自宅標本と同様に虫害を受けていた。日本菌類相解明史の証拠標本確認作業として重要である3.菌類バーコーディングに関する予備的な調査ITS2領域のバーコーディングに関し、生サンプル、乾燥標本、凍結乾燥標本、また本郷標本なと古い標本でDNA検出ができるのか検討を行った。4.標本の価値に関する検討と普及教育標本の価値についてアマチュアの理解を得るためのテキスト執筆と公開研究会などを試みた。また震災を契機として自然史標本全体への認識向上を論じた。5.エキシカータの準備学習用標本の作製、配布に向けて、利用者へのヒアリングを試み、単純な凍結乾燥標本よりも顕微鏡観察に特化した資料の希望が強かった。同時に過去の模型など学習資料について研究した。1)本郷次雄氏の研究資料のデジタルアーカイブ化による公開、という目標に対しては、今年度はDVDーROMを用いて2013年度茅野市八ヶ岳博物館及び大阪市立自然史博物館での展示を行った。その他研究用資料として北海道大学、北海道教育大学、信州大学、筑波大学、京都大学、鳥取大学、関西菌類談話会、菌類懇話会などの研究者に試作版を提供し、研究に活用していただいた。データベースは昨年度の図・標本・ノートについて記された産地情報などの入力を進め、論文や地図情報とのリンクを取りやすくした。この成果を解析し生態学会に発表した。また、タイプローカリティについての情報整理も進めており、2014年6月の菌学会にて発表の予定である。2)各地域で得た資料のDNAシーケンスを取得し、交換用凍結乾燥標本作成しエキシカータを作成。エキシカータは八ヶ岳博物館で展示の後資料として収蔵していただいた。この他京都府立植物園、西宮市北山緑化植物園、大阪市立自然史博物館などで展示、地域のアマチュアによって活用された。DNAバーコーディングの適用についても検証を進め、新鮮な標本からは比較的高確率で遺伝情報を取り出せるようになった。現在これらの成果をアマチュア向けに執筆を進めている。本郷標本からのDNA取得は限定的な条件でのみ可能である。手法及び活用について2013年6月の日本菌学会で発表した他、2014年にも続報を発表予定である。3)標本を活用するため、菌類研究のためのマニュアル作成を進めている。DNAバーコーディングなどを含めた菌学講座を開催、120名近い参加者を得ることができた。アマチュア菌類研究者へDNA利用の機会を拓き、理解を促進するため、現在試験的に実習を行っている。このほか、アマチュアの自然史資料活用やアマチュアとともに行なう市民向けの教育活動など幅広い取り組みの中で本研究の要素を導入している。

1.本郷コレクションの現状調査と公開準備:日本のきのこ相解明の上で、故本郷次雄氏は重要な役割をはたし、彼の作成した図鑑や論文が、職業研究者、アマチュアともに現代の日本菌類学の基礎となっている。本郷氏が描いたタイプ標本を含む菌類の水彩画1100点、標本記録ノート60冊について、デジタル化をほぼ完了した。収集した菌類標本約6500点については保存処理を行いつつ現状記録を進め、ほぼ6割を完了している。展示や研究での活用もすすめつつある。標本番号や種名をキーとして、検索公開可能なシステムを試作し、権利処理を進めている。また、本郷標本の分割寄贈先の探索と、状況の確認を進め、国立科学博物館、菌蕈研究所、京都大学での状況確認を行った。2.菌類バーコーディングに関する予備的な調査:ITS2領域のバーコーディングに関し、生サンプル、乾燥標本、凍結乾燥標本からは良好に抽出できる体制を確認した。本郷標本など古い標本でDNA検出について検討を行い、保存条件によるDNAの断片化とAspergirusのコンタミを確認、これらを回避する手法としてプライマーの工夫を検討している。3.標本の価値に関する検討と普及教育:引き続き標本の価値についてアマチュアの理解を得るためのテキスト執筆と公開研究会などを日本菌学会などと連携して試みた。また震災を契機として自然史標本全体への認識向上を分類学会連合や文化庁などと協力し、論じた。4.エキシカータの準備:学習用標本の作製、配布に向けて、利用者の要望の高い顕微鏡観察に特化した保存用プレパラート資料の作成手法について検討した。同時に過去標本や図譜、模型などがアマチュア研究にどう寄与したのか大上宇市を例に研究した。本郷次雄菌類図譜は日本の菌類研究上極めて重要な資料である。この資料を整理、公開し、また分子的手法を用いたDNAバーコーディングなどの情報提供などを行なうことでアマチュア菌学の活性化を図るのが本研究の要点である。34冊の標本ノート1500点の画像、6000点の標本の確認データベース化及び論文引用状況のデータベース化を終えた。これらの情報を元に学会発表などで順次公開し、一部の情報はweb公開を試みている。標本はタイプ確認をすすめており、非常に多くのisotypeおよび、小数のHolotypeが含まれていることを確認した。同時に標本の採集地確認を進め、非常に多くの標本が滋賀大学および本郷家の周辺で採集されていることを確認し、同コレクションが特に関西地方の菌類研究に重要であることを確認した。本郷標本はパラホルムアルデヒドによる燻蒸が繰り返されDNAの断片化が進んでいるが、これを1)短鎖DNAの分析で利用することを試みた。属特異的なプライマーで50ベースから150ベースという短いシーケンスを得ることで既知のシーケンスとの一致を検討させることができるか検討を進めたところ、Cortinarius属、Boletus属で成果を得ることができた。これらは一部学会発表を終えており、原罪論分化を進めている。2)本郷標本の顕微鏡などによる組織確認による種の概念確認のための利用を部分的に進めており、Endo et.al (2014)、遠藤(2015)など成果も上がっている。
ニュージーランド社会保障・社会福祉制度におけるコーディネーション機能の分析

2000年以降の地域福祉の「政策化」の展開を背景に日本の社会福祉・社会保障分野では多様な「コーディネーター」及び「コーディネーション」役割の制度化が進んでいる。一方でコーディネーションに関する研究蓄積は浅く、現場のコーディネーターはその役割を推進するにあたり課題に直面している。本研究は社会福祉分野における「コーディネーター」及び「コーディネーション」の機能に関する理論化の第一歩として、日本の既存制度に基づく「コーディネーター」の役割の実態等の分析と、官民協働による生活困窮者等の自立支援及び福祉サービスの提供を実現しているニュージーランドの社会保障制度におけるコーディネーション機能の分析を行う。
都市水循環系におけるマイクロプラスチックの発生源分析と環境運命予測

5 mm以下のプラスチックによる水環境汚染が問題となっている。ところが、マイクロプラスチックがどこで発生し、どのような大きさで、どこに存在しているのかは明らかになっていない。問題点は各試料別の迅速な分析方法が確立されていないことにある。本研究では、これまで測定が困難であった110 μmのMPsの採取、計測、成分同定手法を開発し、都市水循環系におけるMPsの分布および動態を把握し、発生源を特定することを主目的とする。これにより、流域内での発生量を発生源別に定量化する。そして、紫外線照射による耐候性試験、加熱劣化試験と得られた赤外スペクトルとの関係からMPsの劣化度を把握し、環境運命を予測する。マイクロプラスチック(以下MPs)による水環境汚染が問題となっているが、MPsの発生源、組成、動態は明らかになっていない。軸となる測定技術(迅速分析法)の確立からスタートして、それを活かした取り組みとなっており、アプローチの仕方がわかりやすくスマートである。この研究での成果がMPsの動態解明に大きく貢献し、新しい学術分野の開拓に展開できると期待される。
活性化HDLの産生を基盤とした動脈硬化症の分子治療法の開発

高比重リポ蛋白(HDL)の動脈硬化防御作用は多数の疫学調査から明かであり、その機序としてHDLが血管壁細胞からコレステロールをくみ出して肝臓へ運んで処理するコレステロール逆転送系が存在する。私共はHDLのコレステロールエステルを他のリポ蛋白へ転送するコレステロールエステル転送蛋白(CETP)の欠損に起因する著明な高HDL血症患者より分離した大粒子HDLは、マクロファージからのコレステロール引き抜き能が欠損しており、患者血漿に精製CETPと肝性リパーゼ(HTGL)を添加するとHDLは縮小してリン脂質と蛋白に富む超高比重リポ蛋白(VHDL)粒子となり、マクロファージからのコレステロール引き抜き能の極めて強い粒子となることを見出した。私共はCETP欠損症の遺伝子異常が他地域の30倍もの高頻度に存在する地域を発見し、それらの欠損症例で動脈硬化が発症しやすいことを確認し、HDLの質的異常が動脈硬化発症に直接関与するという概念を確立した。コレステロール蓄積の場である血管壁において、CETPやHTGLの働きにより生成された小粒子HDLが動脈硬化進展防御に重要な役割を果たす可能性が推察される。本研究ではCETPとHTGLの作用により産生させた活性化HDLを静注するか、精製CETPとHTGLの静注またはCETP遺伝子及びHTGL遺伝子のin vivoでの過剰発現により活性化HDLを生成させ、動脈硬化進展防御・退縮を目的とした新たな治療法を開発することを目的とした。活性化HDLの精製のために用いるCETPはヒト血漿より、またHTGLはヘパリン静注後のヒト血漿より精製した。ヒト血清にVLDLまたはイントラリピッドを添加し、精製CETPおよびHTGLを添加して、LCAT阻害剤の存在下に37°Cで孵置した後、HDL粒子を精製し、これを用いて培養マクロファージにおけるアセチルLDLによる細胞内コレステロール蓄積が著明に抑制されることを確認した。しかし、この方法ではin vitroで生成される活性化HDLの量がin vivo実験に使用できるほど十分ではなかったため、活性化HDLをin vivoで生成させる目的でrecombinant CETPおよHTGLの作製を行った。recombinant CETPの作製には成功したが、HTGLに関しては現在検討中である。今後、別のアプローチとしてヒトCETPおよびHTGL cDNAを組み込んだプラスミドを、HVJ-liposome法を用いて大動脈硬化を有するWHHLウサギに導入し、in vivoでの活性化HDLの産生効果と抗動脈作用について検討し、動脈硬化症に対する活性化HDLを介した分子治療法の基礎を確立したいと考えている。
ペロブスカイト型ブロック層を有する鉄系超伝導体の単結晶作製と異方性

本研究では、以下の4点について明らかにすることを目的としている。2. Sr_2VFeAsO_<3-δ>単結晶における磁性と超伝導の関係3.鉄系超伝導体における結晶構造と異方性の関係4.常伝導状態における異方性Sr_2VFeAsO_<3-δ>単結晶において、磁場中での抵抗率測定および磁化測定を行い、酸素欠損が増大するのに伴い、T_cが低下してδ=0.75で超伝導が消失することを明らかにした。またキュリー温度は酸素欠損に伴い、上昇していくことが分かり、電子相図を決定した。磁場中抵抗率の角度依存性から異方性を見積もることにより、Ca_5(Mg, Ti)_4Fe_2As_2O_<11>[n=4]単結晶は異方性パラメータΓ160となり、これまで観測されている鉄系超伝導体の中で最大の値を持つことが明らかにした。また同様に、Sr_2VFeA_sO_3ではΓ20となり、Ca_5(Mg, Ti)_4Fe_2As_2O_<11>の値よりは小さいが、BaFe_2As_2系やNdFeAsO系より大きいことが明らかになった。そこで、この異方性パラメータと結晶構造との関係を議論することにより、異方性パラメータはブロック層の厚さで見積もり可能であることを見出し、また厚さ一層の類似性を利用して、ブロック層の枚数のみで異方性パラメータの予測が可能であるという新たな一般則を提案した。さらには、大型な単結晶を育成することができたSr_2VFeAsO_3において、四端子法を用いることでc軸方向の抵抗率を測定することにも成功し、常伝導状態における異方性を抵抗率の比から見積もると、T_c直上において、超伝導状態の異方性と一致することが明らかになった。ペロブスカイト型のブロック層をもつ種々の鉄系超伝導体を単結晶化する手法を確立したことにより、結晶構造と異方性の相関を定量的に明らかにしており、おおむね順調に進展している。平成25年度の研究成果を踏まえ、提案した結晶構造と異方性の関係が妥当であるかを検証するために、(Fe_2As_2)(Ca_<n+1>(Mg,Ti)_nO_<3n-1>)[n=3]などのブロック層の厚さの異なる鉄系超伝導体の単結晶を育成することを目指す。また、収束イオンビーム装置を用いてメサ構造を作製することにより、微結晶しか育成できていない組成においてもc軸抵抗率を測定することを目指す。Sr_2VFeAsO_<3-δ>における強磁性の原因を明らかにするために、共同研究先へ単結晶を提供しており、角度分解光電子分光やX線磁気円二色性の実験が現在進行中である。

また、収束イオンビーム装置を用いてメサ構造を作製することにより、微結晶しか育成できていない組成においてもc軸抵抗率を測定することを目指す。Sr_2VFeAsO_<3-δ>における強磁性の原因を明らかにするために、共同研究先へ単結晶を提供しており、角度分解光電子分光やX線磁気円二色性の実験が現在進行中である。
フグ毒の蓄積機構に関する研究

1.無毒養殖クサフグおよびトラフグを親魚年人工受精、ふ化、稚魚の飼育なフグを養殖し、定期的に毒性をチェックするとともに常時実験に使用する養殖フグを確保した。2.筆者らが開発したTTX結合活性測定法を使用し、クサフグ血漿を試料にTTX結合タンパク質を精製単離した。クサフグ血漿を20mM phosphate buffer,pH7.2で10倍に希釈し、DEAE-celluloseを加えタンパク質を吸着させた後、250mMNaClを含むP.bufferで活性画分を溶出した。この画分の硫安35-65%飽和沈殿画分を集め、透析後Sephadex G-100ついでSephadexG-200ゲル濾過に付し活性画分を得た。さらにSephacrylS-200およびCellulofine A-500カラムクロマトグラフィーにより精製し、最終的ににはTSK G-3000SLカラムにより活性タンパク質を単離した。このタンパク質の純度は7%ゲルのPAGEおよびSDS-PAGEにより検定し最終標品は電気泳動的に単一と認められた。SDS-PAGEより求めた分子量は116,000であり、TOF mass spectrometerにより求めた分子量は91,000とほぼ似た値が得られた。本タンパク質のアミノ末端シークエンスはプロテインシークエンサーによる分析によりAla-Prp-Ser-Pro-?-?-?-His-?-Leu-Thr-Lys-Pro-Val-と同定された。本タンパク質(1.2mg protein/ml)のTTX結合活性はTTX 2.5 nmol/mlを添加したときは66%であった。この結合活性は酢酸濃度0.05%で失活し、苛性ソーダで中和すると回復した。この結合活性の可逆性はフグ体内においてTTXの輸送および移動において本タンパク質が役割を演じている**を示唆するものである。本タンパク質を抗原として、ウサギに免疫し、抗体の作成を試みたところ感度の非常に高い抗血清が得られた。抗体をprotein-Gカラムで精製し、ELISA法による本タンパク質の定量を試みた。1.無毒養殖クサフグおよびトラフグを親魚として人工受精、孵化、稚魚の飼育などフグを養殖し定期的に毒性をチェックするとともに常時実験に使用する養殖フグを確保した。クサフグ血漿を20mM phosphate buffer,pH7.2で10倍量に希釈し、DEAE-celluloseを加えタンパク質を吸着させた後、250mMNaClを含むP.bufferで活性画分を溶出した。この画分の硫安35-65%飽和沈殿画分を集め、透析後Sephadex G-100次いでSephadex G-200ゲル濾過に付し活性画分を得た。さらにSephacryl S-200およびCellulofine A-500カラムクロマトグラフィーにより精製し、最終的には二連に繋いだT SK G-3000SLカラムによるHPLCにより活性タンパク質を単離した。この間タンパク質の純度は7%ゲルのPAGEおよびSDS-PAGEにより検定し、最終標品は電気泳動的に単一と認められた。

SDS-PAGEより求めた分子量は116,000であり,TOF mass spectrometerにより求めた分子量は91,000とほぼ似た値が得られた。本タンパク質のアミノ末端のシークエンスはプロテインシークエンサーによる分析によりAla-Pro-Ser-Pro-?-?-?-His-?-Leu-Thr-Lys-Pro-Val-と同定された。1.無毒養殖クサフグおよびトラフグを親魚年人工受精、ふ化、稚魚の飼育なフグを養殖し、定期的に毒性をチェックするとともに常時実験に使用する養殖フグを確保した。2.筆者らが開発したTTX結合活性測定法を使用し、クサフグ血漿を試料にTTX結合タンパク質を精製単離した。クサフグ血漿を20mM phosphate buffer,pH7.2で10倍に希釈し、DEAE-celluloseを加えタンパク質を吸着させた後、250mMNaClを含むP.bufferで活性画分を溶出した。この画分の硫安35-65%飽和沈殿画分を集め、透析後Sephadex G-100ついでSephadexG-200ゲル濾過に付し活性画分を得た。さらにSephacrylS-200およびCellulofine A-500カラムクロマトグラフィーにより精製し、最終的にはTSK G-3000SLカラムにより活性タンパク質を単離した。このタンパク質の純度は7%ゲルのPAGEおよびSDS-PAGEにより検定し最終標品は電気泳動的に単一と認められた。SDS-PAGEより求めた分子量は116,000であり、TOF mass spectrometerにより求めた分子量は91,000とほぼ似た値が得られた。本タンパク質のアミノ末端シークエンスはプロテインシークエンサーによる分析によりAla-Prp-Ser-Pro-?-?-?-His-?-Leu-Thr-Lys-Pro-Val-と同定された。本タンパク質(1.2mg protein/ml)のTTX結合活性はTTX2.5nmol/mlを添加したときは66%であった。この結合活性は酢酸濃度0.05%で失活し、苛性ソーダで中和すると回復した。この結合活性の可逆性はフグ体内においてTTXの輸送および移動において本タンパク質が役割を演じていることを示唆するものである。本タンパク質を抗原として、ウサギに免疫し、抗体の作成を試みたところ感度の非常に高い抗血清が得られた。抗体をProtein-Gカラムで精製し、ELISA法による本タンパク質の定量を試みた。
眼振に起因した視力障害を補正する装置の開発に関する研究

本年度は前年度に開発したシステムの改良と健常者を対象とした視力検査による検証を行った。CCDカメラのフレームレートを、前年度の30Hzから58Hzに増加させ、時間応答性を向上させた。このとき眼球が移動してからミラーが移動するまでの遅れ時間は約60msであった。カメラやミラーなどを設置した架台は、被験者に対して最適な位置に調節できるように上下スライドが容易にできるように改良した。装置の効果に関する具体的な検証を次の方法により行った。健常者である被験者が意図的に眼球を不規則に動かすこで眼振を模擬し、その状態にてランドルト環を用いた視力検査を行い、本システムを用いた場合と用いない場合で正答率を比較した。ランドルト環がパソコン画面に短時間表示する視力検査システムを構築し、その瞬間における眼球の回転速度を本システムで計測した。ランドルト環の表示時間は眼球が静止していれば確実にランドルト環を認識できる時間である0.26秒とした。被験者は健常者で、視力約1.0を有する成人男性である。眼球と視覚対象の距離は2000[mm]とし、視力0.3相当での検査を行った。検査の結果、本システムを動作させた際に正答率が向上していることが確認された。特に、眼球の角速度が3rad/secにおいて本システムの稼働時と非稼働時の正答率はそれぞれ約80%および約50%であった。このことから、これにより、本システムによって眼振に起因した視力の低下を抑えられることが示唆された。当該年度は、本システムの設計・製作を行う。頭部およびシステムを配置するための架台を作成し、ガルバノミラー2台、固定ミラー2枚、赤外線投光器1台、眼球角度測定用高解像度カメラを設置した。眼球位置を求めるための画像処理プログラムおよびガルバノミラー制御用プログラムをそれぞれ製作した。瞳孔位置検出にあたっては、虹彩の輪郭を円でフィッティングすることでその中心を求めると共に、赤外線投光器による光が角膜上で反射する点(プルキニエ点)の位置を同時に求め、それらの相対的位置から眼球角度を算出した。プルキニエ点を用いることで、頭部の移動に伴う眼球角度測定誤差を大幅に軽減することが可能となった。得られた眼球角度情報に基づき、ミラー位置情報を算出し、D/A変換ボードを介してガルバノミラー・ドライバーへ送った。これにより、眼球の動きに対して視線を反対方向に動かすようにミラーを制御するシステムが実現した。健常者である被験者に本システムを適用し、眼球を動かしても同一点が注視されることを確認した。