hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
湿熱処理高アミロース米を用いた糖尿病者向けの食後血糖値が上がりにくい災害食の開発

高アミロース米品種に、澱粉糊化条件より低水分で加熱する湿熱処理を行い、澱粉消化速度を低下させ食後血糖値上昇が穏やかで、難消化性澱粉増加させ便秘改善効果を有する米の開発を目的とした。「越のかおり」「こしのめんじまん」「夢十色」の高アミロース米三品種に湿熱処理をして比較した結果、消化速度低下や難消化性澱粉増加の点から「越のかおり」を使用することにした。湿熱処理によりin vitroでの澱粉分解速度は低下したが、動物実験では消化速度の低下による血糖値上昇の抑制や短期的な脂質代謝の影響は認められなかった。湿熱処理「越のかおり」玄米は、未処理玄米に比べて滞腸時間や糞重量の有意な増加を示した。夢十色、新潟79号、北陸207号の高アミロース米3品種の中から、アミロース含量、炊飯時の糊化度、糊化後の老化速度、食物繊維含量、in vitro消化速度試験、炊飯米の食味、物性試験の結果から白米での吸水率が低く、炊飯後の糊化度が低い北陸207号を選定した。昨年度、湿熱処理精白米の生理的機能性は確認できたが、より機能性を高める目的で北陸207号玄米に湿熱処理を行い、処理後精米を行った。玄米の湿熱処理により、米中のフォリンーチオカルト法で測定したポリフェノール含量の増加、抗酸化能の増加など、糊粉層中成分の胚乳部への移行や難消化性デンプンの増加が確認された。5週齢Wistar系雄ラットにAIN-76飼料を1日2時間自由量投与、それ以外の時間は絶食させ、1日に必要な飼料を短時間に摂取するように10日間馴化飼育した後、AIN-76飼料のコーンスターチを各米飼料で置換して5日間(非投与期)、その後、この飼料に止瀉作用のあるロペラミド(体重1kgあたり6mg/日)添加した便秘誘発飼料を5日間投与(投与期)した。各投与期間中は毎日採糞し、最終日にカルミン色素をマーカーとして用いて消化管通過時間を調べた。その結果、玄米状態で湿熱処理をした北陸207号は、対照のコシヒカリ、未処理北陸207号、精米に湿熱処理した北陸207号と比較して、糞重量、糞中デンプン含量、糞個数、消化管通過時間が、ロペラミド非投与期・投与期共に有意差が認められた。これらの結果から高アミロース米北陸207号はコシヒカリに較べて消化管通過時間が短く、玄米状態で湿熱処理するとさらに短縮されることが示唆され、腸内環境改善に有効な加工方法であると考えられる。湿熱処理は、デンプンの糊化に必要な水分より低水分条件下で加熱処理する方法で、デンプンの粒形態は変化しないで、物理・化学的性質や結晶性が変化することを特徴とする。高アミロース米は、米デンプン中のアミロース含量が高い品種で、粘りが少なく食味の点では劣るが、消化速度が遅く、食後血糖値上昇が穏やかな米で、糖尿病予防やメタボリック症候群予防の点で期待されている。今回、この高アミロース米品種「越のかおり(旧名:北陸207号)」の玄米に湿熱処理を行った結果、処理後に精米した白米中の抗酸化活性上昇、ポリフェノール含量の増加、食物繊維含量の増加、消化時間の短縮が確認できた。この湿熱処理玄米を炊飯・乾燥・粉砕し、Wistar系雄ラットに投与して、消化管通過時間、糞便重量等に及ぼす影響を検討した結果、未処理玄米に比較して、消化管通過時間が短縮、糞便重量が増加した。また、この湿熱処理玄米と未処理玄米を精米後、白米部分を炊飯・乾燥・粉砕し、Wistar系雄ラットに投与して、消化管通過時間、糞便重量等に及ぼす影響を検討した結果、玄米と同様に未処米に比較して、消化管通過時間が短縮、糞便重量が増加したが、その強度は玄米に比べて弱かった。以上の結果から玄米への湿熱処理は、白米部分の難消化性が向上し消化管通過時間の短縮した以上に、糠成分に大きく影響したことが考えられ今後の課題で去る。しかし、今回の研究により高アミロース玄米の湿熱処理により、消化管通過時間の著しい短縮が認められ、便秘改善などの機能性が期待できる。

難消化性デンプン含量は、未処理の1.2%から2.8%に増加、食物繊維含量は、未処理の0.6%から1.5%に増加、α-コーンスターチを100としたin vitroの消化速度は、未処理コシヒカリ93、未処理74、湿熱処理64と消化速度の低下が認められた。北陸207号の湿熱処理条件を、保存中の変質に関与するリポキシゲナーゼ活性の消失、糊化度、食味の点から検討し処理条件を確立できた。In vitroの消化速度評価に加え、ラットを用いた糖吸収速度、エネルギー代謝関連指標(アディポネクチン、レプチン、リアルタイムPCR法を用いた肝臓中の関連mRNA転写の網羅的解析)、脂質代謝(血中脂質、糞中脂質)への影響を検討したが、盲腸内脂肪酸の増加や盲腸内容物pHの低下など、盲腸内細菌に対する影響が認められたが、脂質代謝、エネルギー代謝への影響については、傾向は認められたが有意な差が認められなかった。湿熱処理によって高アミロース米中の難消化性デンプン含量は、増加を示したが数%の増加であり、動物実験で生理的機能性の差として検出するには不十分であったことが考えられる。平成23年度はやや遅れ気味であったが、平成24年度の研究の順調な進展により、当初計画の進展に達した。高アミロース米選定とその湿熱処理条件の設定に手間取り、当初計画の保存性の確認試験の開始が遅れてしまい、現在も進行中である。最終年度の平成25年度は、本研究の実用化に向けて展示会などへの情報発信を行うと共に、研究の完成を目指してさらに研究を実施する予定である。高アミロース米選定とその湿熱処理条件の設定に手間取り、当初計画の保存性の確認試験の開始が遅れてしまい、2度の動物実験を計画していたが23年度中に1度しか実施できなかず、23年度直接経費の一部を24年度に繰り越した。24年5月10日より23年度分の動物実験を実施中である。それ以外の研究は計画通り実施する予定である。平成24年度で確認した玄米状態での湿熱処理における、糊粉層からの物質移動の確認のため、分析用試薬・HPLCカラム等消耗品を購入する。また、生理的機能性確認のため動物実験を実施するため、ラットとその飼育資材を購入する。23年度に実施予定だった1回分の動物実験を24年5月10日から実施しているため、23年度研究費の一部(240,000円)を24年度に繰り越した。その他の24年度分の研究費については、申請書通り使用する計画である。
ホメオボックス転写因子CDXsによる大腸癌の癌幹細胞性関連遺伝子の発現抑制機構

本研究課題において我々は、ホメオボックス転写因子であるCDX1とCDX2による、大腸癌細胞の癌幹細胞性維持に関わる遺伝子群(癌幹細胞性関連遺伝子)の発現制御機構の解明を進めている。これまでに、ChIP-seq法により、CDX1とCDX2が結合するゲノム領域を網羅的に解析した。その結果、癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節領域や、遺伝子内またはその周辺において、CDX1とCDX2が結合するゲノム領域を多数同定した。これらの結果をもとに、CDX1とCDX2がゲノムに結合することで生じる、ヒストン修飾によるクロマチンの構造変化を検証した。最初に、Flag-CDX1またはFlag-CDX2をTetシステムにより発現誘導した大腸癌細胞株を用いて、遺伝子発現調節に重要となる各々のヒストン修飾を特異的に認識する抗体でクロマチン免疫沈降を行った。そして、ChIP-qPCR法により、CDX1とCDX2の結合ゲノム領域のヒストン修飾の変化を解析した。その結果、CDX1とCDX2が結合するゲノム領域において、H3K27acやH3K4me1などの、開いたクロマチンのマークとして知られているヒストン修飾が増加することを明らかにした。一方、抑制的マークとして知られるH3K4me3のヒストン修飾は減少していた。さらに、MNase-qPCR法により、CDX1とCDX2の発現により誘発されるクロマチン構造の変化を確認したところ、CDX1とCDX2の結合領域ではクロマチン構造が弛緩していることを明らかにした。これらの結果から、CDX1とCDX2は、本研究により同定したゲノム領域を介して、癌幹細胞性関連遺伝子の発現を制御していると考えられた。これまでの解析により、大腸癌細胞の癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節領域において、CDX1とCDX2が結合するゲノム領域を同定した。さらに、CDX1とCDX2がゲノムに結合することで生じる、クロマチンの構造変化を検証した。その結果、CDX1とCDX2の結合ゲノム領域では、クロマチン構造が弛緩していることが分かった。一方、我々はこれまでに、CDX1とCDX2は、大腸癌幹細胞性関連遺伝子の発現量を顕著に低下させることを明らかにしている。したがって、CDX1とCDX2による癌幹細胞性関連遺伝子の発現抑制は、これまでに知られているエピジェネティックな遺伝子発現制御とは異なることを明らかにした。現在、癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節に鍵となる、CDX1とCDX2が結合するゲノム結合領域を決定するために、レシフェラーゼレポーター解析を進めている。また、癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節に関わる、CDX1とCDX2と相互作用する分子を網羅的に解析する実験も、順調に進んでいる。以上の理由により、当初の予定にしたがって、本研究はおおむね順調に進展していると判断した。これまでの研究により、癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節領域における、CDX1とCDX2が結合するゲノム領域を同定した。今後、同定した結合領域を含むゲノム領域をクローニングし、ルシフェラーゼレポーター解析用のベクターpGL4.10Luc2に組み込む。そのレポーターを大腸癌細胞(DLD1またはLS174T)に導入し、癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節において、重要となるCDX1とCDX2の結合ゲノム領域を特定する。さらに、CDX1とCDX2が結合する配列(TATAAAA)を検索し、それらの配列に変異を導入する。その変異型レポーターを用いて、ルシフェラーゼレポーター解析を行い、CDX1とCDX2による癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節において、鍵となるゲノム配列を特定する。CDX1とCDX2は、ホメオボックス転写因子である。転写因子は、複数のコファクターと協調して標的遺伝子の発現を調節する。そこで、CDX1またはCDX2と複合体を形成するタンパク質を、網羅的質量分析法により網羅的に解析する。同定したタンパク質のなかから、遺伝子発現に関係すると考えられるタンパク質を本解析の候補とする。その候補タンパク質と、CDX1またはCDX2とのタンパク質間相互作用は、免疫沈降法により確認する。さらに、CDX1とCDX2による癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節に不可欠な候補タンパク質を選出するために、それぞれの遺伝子に対するshRNAを準備して、CDX1やCDX2の発現誘導細胞にそのshRNAを導入する。このとき、CDX1やCDX2によって生じる癌幹細胞性関連遺伝子の発現抑制をキャンセルするタンパク質について、さらに解析を進める。具体的な実験計画は、候補タンパク質の特徴に合わせて設計する。

その結果、CDX1とCDX2が結合するゲノム領域において、H3K27acやH3K4me1などの、開いたクロマチンのマークとして知られているヒストン修飾が増加することを明らかにした。一方、抑制的マークとして知られるH3K4me3のヒストン修飾は減少していた。さらに、MNase-qPCR法により、CDX1とCDX2の発現により誘発されるクロマチン構造の変化を確認したところ、CDX1とCDX2の結合領域ではクロマチン構造が弛緩していることを明らかにした。これらの結果から、CDX1とCDX2は、本研究により同定したゲノム領域を介して、癌幹細胞性関連遺伝子の発現を制御していると考えられた。これまでの解析により、大腸癌細胞の癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節領域において、CDX1とCDX2が結合するゲノム領域を同定した。さらに、CDX1とCDX2がゲノムに結合することで生じる、クロマチンの構造変化を検証した。その結果、CDX1とCDX2の結合ゲノム領域では、クロマチン構造が弛緩していることが分かった。一方、我々はこれまでに、CDX1とCDX2は、大腸癌幹細胞性関連遺伝子の発現量を顕著に低下させることを明らかにしている。したがって、CDX1とCDX2による癌幹細胞性関連遺伝子の発現抑制は、これまでに知られているエピジェネティックな遺伝子発現制御とは異なることを明らかにした。現在、癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節に鍵となる、CDX1とCDX2が結合するゲノム結合領域を決定するために、レシフェラーゼレポーター解析を進めている。また、癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節に関わる、CDX1とCDX2と相互作用する分子を網羅的に解析する実験も、順調に進んでいる。以上の理由により、当初の予定にしたがって、本研究はおおむね順調に進展していると判断した。これまでの研究により、癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節領域における、CDX1とCDX2が結合するゲノム領域を同定した。今後、同定した結合領域を含むゲノム領域をクローニングし、ルシフェラーゼレポーター解析用のベクターpGL4.10Luc2に組み込む。そのレポーターを大腸癌細胞(DLD1またはLS174T)に導入し、癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節において、重要となるCDX1とCDX2の結合ゲノム領域を特定する。さらに、CDX1とCDX2が結合する配列(TATAAAA)を検索し、それらの配列に変異を導入する。その変異型レポーターを用いて、ルシフェラーゼレポーター解析を行い、CDX1とCDX2による癌幹細胞性関連遺伝子の発現調節において、鍵となるゲノム配列を特定する。CDX1とCDX2は、ホメオボックス転写因子である。転写因子は、複数のコファクターと協調して標的遺伝子の発現を調節する。そこで、CDX1またはCDX2と複合体を形成するタンパク質を、網羅的質量分析法により網羅的に解析する。同定したタンパク質のなかから、遺伝子発現に関係すると考えられるタンパク質を本解析の候補とする。その候補タンパク質と、CDX1またはCDX2とのタンパク質間相互作用は、免疫沈降法により確認する。
東アジア祭祀芸能史論の構築

東アジアのうち、東シナ海を中心にした祭祀と芸能について、40余りのウエブサイトを公開した(後掲一覧参照)。そして、その具体的な資料に基づいて、野村伸一編著『東アジアの祭祀伝承と女性救済』(風響社、2007年)を刊行し、さらに野村伸一著『東シナ海祭祀芸能史論序説』(2009年、7月刊行予定)をまとめた。これらにより、中国、朝鮮半島、日本につづく基層文化のいくつかの基軸を明確に示すことができた。そうした基軸の提示は従来の縦割りの研究組織からはなされていない。このことが最も大きな成果といえる。研究の方法は基本的には、歴史的研究と共時的研究の併用です。歴史的研究では、次の2項目を特記しておきます。1.東アジアの特異な祭祀芸能「目連戯」の総括をおこない、この報告書を2006年度に刊行します(野村伸一編著『東アジアの目連戯-目連救母伝承と芸能』、風響社、2006年秋刊行予定)。また論文「観音の姿態変容と東アジアの演戯文化」発表(裏面参照)。2.2006年2月24日、25日に韓国高麗大学民族文化研究院民俗学研究所主催の国際学術討論会、『18世紀東アジア公演文化』に参加して、発表をしました(発表原稿は野村伸一「目連戯からみた近世東アジアの芸能空間」高麗大学校民族文化研究院民俗学研究所編『18世紀東亜細亜〓公演文化』、2006年、275-289頁、ソウル)。一方、共時的研究では、中国福建省と沖縄県波照間島の2箇所で新たな記録を取りました。その概要は次のとおりです。1.中国福建省政和県楊原村の四平戯四平戯は明代の四平腔という曲調を伝承したものと考えられています。今日の福建ではまだあまり研究が盛んでなく、行政からの支援もほとんどない状態です。これは楊源の村民による1年二度の祭祀儀礼の一環としておこなわれる貴重な祭祀芸能です。これについては「四平戯の世界」としてホームページ上で公開済みです(http://web.hc.keio.ac.jp/shnomura/shiheizu.html)。また2006年度の『日吉紀要言語・文化・コミュニケーション』No.36に同題で発表します。2.波照間島のムシャーマムシャーマは旧7月の盆行事のなかに、旧6月の豊年祭の一部がはいったもので、独特な祭祀芸能がみられます。これを東アジアの霊魂供養芸能のひとつとして観察し、記録しました。この記録もホームページ上で公開しておきました(http://www.flet.keio.ac.jp/shnomura/mushama.html)。1.歴史的研究1.東アジアの祭祀芸能「目連戯」研究の総括。報告書刊行(野村伸一編著『東アジアの祭祀伝承と女性救済--目連救母と芸能の諸相』、風響社、2007年7月刊行予定)。出版社事情により2006年刊行予定であったが、一年間遅延。2.論文「四平戯-福建省政和県の張姓宗族と祭祀芸能」(誌名は裏面参照)。「四平戯(2)-福建省政和県禾洋村の祭祀芸能」(誌名は裏面参照)3.中国での研究発表2006年10月16日から18日まで福建省屏南(ピンナン)県における「中国四平腔学術研討会」に参加して、発表(発表原稿は野村伸一「中国の民間祭祀芸能小感-福建省の祭祀儀礼や芸能を通して」http://www.flet.keio.ac.jp/shnomura/yantaohui.htmlにて公開中)。II.共時的研究1.中国福建省政和県楊原村の四平戯の調査・記録・資料公開福建の四平戯は明代の四平腔という曲調を伝承したものと考えられます。2005年度につづいて2006年度も8月と10月に現地調査を継続。これについては「四平戯の世界」「四平戯の世界2」として論文およびネット上で公開済みです(http://web.hc.keio.ac.jp/shnomura/shiheizu.html)。2.沖縄県与那国島豊年祭の調査・記録2006年7月19-22日に現地で調査、記録。写真資料公開準備中。3.韓国全羅南道の西南島嶼部の祭祀状況調査韓国全南の新安郡は東シナ海の祭祀文化を考える上で重要な地域。2006年8月27日から9月8日まで現地で調査、記録。写真資料公開準備中。4.韓国ソウルにおける死者霊祭儀の調査、研究

2007年2月18日から22日まで現地で死霊祭の調査、記録。前年度に引き続き、歴史的な研究と共時的な研究を併用しました。I.歴史的研究数年来の研究の成果として、野村伸一編著『東アジアの祭祀伝承と女性救済-目連救母と芸能の諸相-』(風響社、2007年、全524頁)を刊行。本書は二部構成。そのうち第一部の概説篇論考・日誌・図録(35-316頁)は編者野村によるもの。本書では東アジアの祭祀芸能のなかで特異な位置を占める目連戯という芸能を中国演劇史だけでなく、朝鮮と日本の宗教文化史の上に位置づけて論じた。II.共時的研究1.沖縄本島北部のシヌグ、ウンジャミ調査シヌグとウンジャミを一連の祭祀とみて、これを東アジアの原初の農耕感謝儀礼の系譜上に位置づけることを考えている。2.台湾鹿港の祭祀現況調査鹿港は媽祖信仰だけでなく旧来の祭祀伝統が今なお濃厚な地域である。その一端を現地調査し、これを図録としてウェブ上で公開した。「台湾民俗誌(図説)-鹿港から」。(http://web.hc.keio.ac.jp/shnomura/taiwanl.html)。3.中国浙江省舟山島定海および普陀山の祭祀と芸能調査この海域は古来、越族の生活したところであり、その海洋文化は日本や朝鮮に大きな影響を及ぼしている。また海天仏国といわれ、とくに観音信仰が顕著である。調査の一部は「今日の普陀山(図録)」にて公開した(http://www.flet.keio.ac.jp/shnomura/Putuoshan/putuoshan.html)。4.中国広東省汕尾市城区の旧正月における奉納芸能の現地研究汕尾では節日や神の誕生費に海陸豊劇の名でよばれる演劇が盛んに奉納される。これを三週間余りにわたって現地調査した。その概要は「東シナ海文化の現場-2008年汕尾、海陸豊劇による旧正月」にて公開した(http:www.flet.keio.ac.jp/shnomura/Hailufeng/Heilufeng.html)。前年度に引き続き、歴史的な研究と共時的な研究を併用した。I.歴史的研究数年来の研究の成果を、野村伸一著『東シナ海祭祀芸能史論序説』(風響社、2009年、6月刊行予定)としてまとめた。本書は六章構成。対象地域を東シナ海周辺に限定しつつ、弟一章は〓祭に由来する収穫祭祀、弟二章は南方の灘、弟三章から弟五章は巫覡の祭祀(狭義の巫の儀礼、女神、海神、龍蛇の信仰を含む)、第六章は仏教・道教とかかわる祭祀を主題とし、それらと芸能の関係を歴史的に論じた。同時に各章の末尾には現在伝承の所在地を記した。また、それらをより詳細に知るためのウェブサイトをも提示した。「東シナ海祭祀芸能史論のすすめ(補遺;図録、映像)」II.共時的研究1.福建省〓田における南戯の現地研究調査旧暦3月23目の媽祖生誕行事と〓仙戯(南戯)を現地調査し、記録した。2.鹿児島県奄美大島の豊年予祝祭祀調査龍郷町秋名のショチョガマ、平瀬マンカイの行事を東シナ海の豊年予祝祭の視点で実地調査。その概要を図録としてウェブ上で公開した。「庵美大島秋名のアラセツーショチョガマと平瀬マンカイ」(http://www.flet.keio.ac.jp/shnomura/amami/amami.html)。3.台湾の王爺祭祀調査台湾南部では3年ごとに各地で王爺を迎え、送る祭祀がおこなわれる。2009年3月、台南県安定郷蘇〓の真護宮において、そのひとつの事例を調査記録した。
分子生物学的手法を用いた大腸腫瘍内視鏡的切開剥離術の安全性の検討

大腸ESD後の発熱の頻度と菌血症の関与を検討した。発熱は全体で46.5%に認めた。多変量解析では病変の大きさと年齢が発熱の有意な危険因子であった。血液培養およびPCR法による検討では細菌は検出されなかった。牽引法の有用性をランダム化比較試験を行い検討した。S-O clipを用いた27例は用いなかった23例に比べ切除時間が有意に短かった。ESD後の潰瘍を内視鏡クリップを用い縫縮し1、4週後の縫縮効果と治癒過程を検討した。1週後には7人中5人でクリップの残存を認め潰瘍面積は78.8%縮小していた。4週後には7人中2人に残存を認めたが1または2個の付着のみで潰瘍面積は99.8%縮小していた。本研究は一括切除困難とされていた20mmを越える大腸腫瘍にESD(内視鏡的切開剥離術)を行うにあたり、術中、術後の合併症をいかに予防することを目的とした。tractionsystemである"S-O Clip"および術後潰瘍を容易に縫縮させる"Loop Clip"を開発し、実臨床で用いることにより、"S-O Clip"は術中操作性の向上に、"Loop Clip"は術後合併症の減少および術後潰瘍の修復にどれだけ貢献するか、症例をランダム化し両デバイスを用い、その有用性および安全性を科学的に検証した。大腸腫瘍の内視鏡切開剥離術(ESD)後の発熱は約40%の症例に認めたが、血液培養および細菌のDNA検索を行うも明らかな菌血症を示す菌種は同定できず、ESD後の潰瘍面からの腸内細菌を含めた逆行性感染が発熱の原因とは考えにくいことが明らかとなり、現在論文作成中である。大腸腫瘍の内視鏡切開剥離術におけるトラクション法(S-Oクリップ)の有用性を解明するためランダム化比較試験を行った。S-Oクリップを用いることにより、高い一括切除率を得ると同時に、有意に切除時間が短縮できることが明らかとなり現在論文投稿中である。大腸ESD後に生じる粘膜損傷の修復に完全縫縮を行うことにより合併症予防および損傷修復に及ぼす影響について、術後1週間、4週間に創部を観察することにより検討中である。本研究もランダム化比較試験を行い検討中である。大腸腫瘍の内視鏡切開剥離術(ESD)は食道や胃と比べ、内視鏡操作が困難、腸管壁が菲薄、汚物や腸内細菌の存在などにより難易度が高く、合併症の多い手技とされている。これらの問題を解決すべく術中合併症の予防および剥離操作を容易にさせるためにtraction deviceである"S-O Clip"および術後潰瘍を容易に縫縮させる"Loop Clip"を開発し実臨床で用いた。"S-O Clip"は術中操作性の向上に、"Loop Clip"は術後合併症の減少および術後潰瘍の修復にどれだけ貢献するか有用性を評価し大腸ESDを安全かつ容易に施行できるか検討した。また大腸ESD後に生じる発熱と菌血症に関する検討も行った。大腸ESD後の発熱は約40%の症例に認めたが、血液培養および細菌のDNA検索を行うも明らかな菌血症を示す菌種は同定できず、ESD後の潰瘍面からの腸内細菌を含めた逆行性感染が発熱の原因とは考えにくいことが明らかとなった。大腸腫瘍の内視鏡切開剥離術におけるS-O Clipの有用性を解明するためランダム化比較試験を行った。S-O Clipを用いることにより、高い一括切除率を得ると同時に、有意に切除時間が短縮できることが明らかとなった。大腸ESD後に生じる粘膜損傷を内視鏡クリップを用い完全縫縮すると術後1週間では内視鏡クリップは創部に残存しており、50mm以下の症例では4週間でほぼ完全に修復することが明らかとなった。消化器内視鏡治療の進歩はめざましく、これまで一括切除困難とされていた20mmを越える大腸腫瘍までESD(内視鏡的切開剥離術)の技術により一括切除が可能になってきた。しかし大腸腫瘍のESDは内視鏡操作が困難、腸管壁が菲薄、汚物や腸内細菌の存在などにより難易度が高く、合併症の多い手技とされている。我々はこの問題を解決すべくtraction systemである"S-O Clip"および術後潰瘍を容易に縫縮させる"Loop Clip"を開発した。この両デバイスを用いて大腸ESDの有用性と安全性を科学的に検証することを目的としている。"S-O Clip"は術中操作性の向上に、"Loop Clip"は術後合併症の減少および術後潰瘍の修復にどれだけ貢献するか、症例をランダム化し前向きの臨床試験を以下の通り同時に3つ行っている。

1、大腸腫瘍の内視鏡的切除後における分子生物学的手法を用いた菌血症の解析2、大腸粘膜下層剥離術における牽引法の有用性に関する研究3、大腸腫瘍性病変に対する内視鏡的切除後の広域な粘膜欠損部に対する縫縮の有用性に関する研究。1では分子生物学的解析を導入することにより術後感染の原因と腸内細菌との関係を解明することができ、適切な抗菌薬の使用により耐性菌の増加を予防することが可能となる。2では"S-O Clip"が術中の操作性の向上、3では術後潰瘍の縫縮により術後合併症の軽減の有無が明らかとなる。以上の3研究を完遂することは今後の大腸内視鏡治療の領域において非常に価値のある研究であると考えられる。症例の蓄積は十分であり、ほぼ順調である。大腸ESD症例もコンスタントに集まっており患者さんの同意も得られており3試験ともに予定通り進行している。大腸ESD後に生じる粘膜損傷の修復に完全縫縮を行うことにより合併症予防および損傷修復に及ぼす影響について、術後1週間、4週間に創部を観察することにより検討中である。本研究もランダム化比較試験を行い検討中である。症例の蓄積を今後も行っていく。このまま症例を集積し逐次解析を行っていく。本研究で得られた結果を学会発表、論文作成を行っていく。また、現在進行中の研究に対しては引き続き症例を重ね、クリップ作成、得られた結果を科学的に評価していく。研究を行うにあたり必要な備品、旅費、解析機器などをそろえ使用する予定である。
イベントポロジーを認識するBelleレベル1.5トリガーシステムの開発

レベル1.5を構成する高速処理エレクトロニクスの開発を続けてきた。まず、アナログ情報を処理するためにはフラッシュADC(FADC)により高速で信号のディジタル化を行い、その情報を後述するディジタル信号処理系に送る必要がある。そのためのモジュールを開発した。このモジュールは初段にAD8041というビデオアンプを採用し、様々な入力信号レベルに対応できるように工夫されている。FADCにはAD9057を採用し40Mサンプル/秒の変換速度を実現している。これらの出力はディジタル信号処理系に直接送り込まれる。モジュールはVMEモジュールとして実装されたディジタル信号処理系のメザニンカードとして搭載される。現在モジュールのデバッグが進行している。ディジタル信号処理系はSPARTANというシリーズのFPGAを採用し、VMEから構成データの書き込みが可能である。また、FPGAの一部の入出力ブロックを直接VMEバスから制御できる。このシリーズのFPGAは廉価版であり速度の上では格段に優れたものではないが、様々なロジックに対してほぼ30MHzでの動作が確認されている。これはレベル1.5トリガーシステムを動作させる基本システムクロックである32MHzには少し及ばないが、プロトタイプとして種々の評価を行うには十分である。このモジュールは汎用性を意識して設計されており、実際のトリガーシステムの一部として組み込めるものになっている。これらの結果をもとに、実際にレベル1.5トリガーシステムに採用されるべきアナログ/ディジタルモジュールの仕様と実装について検討を行っているところである。
有機スズ化合物およびヒ素化合物の環境化学的毒性化学的比較および制御手法の研究

有機スズについては,使用削滅に伴って,その環境中濃度が変化する様子を知るために,時系列的な分析を行った。トリフェニルスズ化合物の東京湾あさり中の濃度は,既に1981年には汚染が存在したことが明らかになると共に,海水中の濃度は,1991年には減少してきていることが明らかとなった。トリブチルスズ化合物は,1990年より使用削減が進んでいるが,海水中濃度は依然して高水準に推移しており,汚染状況に目だった改善が見られないことが明らかとなった。有機スズに代替しつつある,汚汚塗料有効成分について,その動向を明らかとした。代替物質は,亜酸化銅と農薬を配合したものが多く,必ずしも安全であることが言えない。毒性等のリスクを相互比較するためのスコアリングについて検討し,各物質の評点を行った。代替物質以外に,電気分解法や表面張力の巻を利用した防染技術についても情報を集めた。有機ヒ素化合物については,海産生物中に出現する天然の有機ヒ素化合物について研究を行った。海産生物をメタノ-ルで抽出した後,高速液体クロマトグラフ/ICP質量分析法にかけて,存在する各種ヒ素化合物の定性・定量を行った。海産動物中に多く含まれる物質は,アルセノベタイン,テトラメチルアルソニウムであり,海藻中に多く含まれる物質はジメチルヒ素基を含むリボ-ス及びその誘導体であることが明らかとなった。イソギンチャクの中から,未知のヒ素化合物が検出され,その構造を決定するための単離を行った。推定される構造はアルセノコリン硫酸エステル又はスルホン酸誘導体であった。
禁煙がメタボリック・シンドロームの構成因子に及ぼす長期的影響に関する検討

大阪府立健康科学センターで連続5年間健診を受診した男性2254名を非喫煙者652名、喫煙者867名、新規禁煙者(初年度から翌年の間に禁煙)121名、過去禁煙者614名の4群に分類し、禁煙後の体重増加に伴う検査値の長期影響について2要因分散分析を用いて比較検討した。新規禁煙者では、体重やBMIが1年後有意に増加しその後横ばい、Tchは12年後に増加しその後減少、TGは1年後増加し4年後には初年度と同程度に減少、白血球は経年的に有意に減少、赤血球やHbが1年後に有意に減少、尿酸が12年後に増加した。HDLは全群で経年的に有意な増加がみられたが、新規禁煙者では1年後の増加が大きかった。血糖やHbAlcは全群で経年的に有意な増加がみられた。過去喫煙者では体重やTch、HDLに有意な改善が見られたが、非喫煙者や喫煙者には大きな変化は見られなかった。次に、禁煙を希望するメタボリック・シンドロームまたは予備群の男性6名を対象とし、禁煙後の検査値の変化を前向きに検討するためのパイロット研究を実施した。介入として12週間の禁煙治療を実施し、禁煙前、禁煙3ヵ月後、6ヵ月後の時点で身体計測、血液検査、腹部CT検査、食事調査、身体活動量等の測定を行った。禁煙6ヵ月後時点で対象者6名中5名が3ヵ月以上の禁煙を達成し、1名は途中再喫煙したが6ヵ月後には禁煙していた。6ヵ月後時点で内臓脂肪面積が増加した群4名(729%増)、低下した群2名(2325%減)となった。増加群ではアディポネクチンは減少傾向、インスリンやHOMAは増加傾向、低下群はアディポネクチンに変化はみられなかったが、インスリンやHOMAは改善または維持する傾向にあった。以上より、禁煙に伴う体重ならびに検査値の変化は一時的であり、その後の禁煙の経過とともに改善することが示された。介入研究については今後対象者を増やして検討したい。禁煙に伴う体重や検査所見の長期変化を調べることを目的として、20012006年に大阪府立健康科学センターの健診を5年間継続的に受診し、喫煙状況の質問に答えた男性2033名を対象に、喫煙状況と体重、BMI、血液検査結果の関係を2要因分散分析を用いて検討した。対象者を非喫煙者596名、喫煙者793名、初年度は喫煙、翌年から禁煙した禁煙者79名、過去に禁煙し継続している過去禁煙者565名の4群に分類した。その結果、非喫煙者に比較し禁煙者は、体重やBMIが12年目にかけて有意に増加しその後横ばいで推移、Tchは13年目にかけて有意に増加しその後有意に減少、白血球数は有意に経年的に減少、Hbが12年目にかけて有意に減少、尿酸が12年目にかけて有意に増加した。HDLは全群が経年的に有意に増加したが、特に禁煙者の12年目の増加が大きかった。血糖やHbAlcは、全群が経年的に有意に増加していた。対象をメタボリックシンドローム(MS)の基準を満たすものに限定すると(非喫煙者113名、喫煙者124名、禁煙者10名、過去禁煙者118名)、禁煙者は体重やBMIが12年目にかけて減少、全群のTchやLDLが経年的に減少し、HDLが経年的に増加、血糖は禁煙者が、HbAlcは全群が経年的に増加、尿酸は禁煙者で3年目以降減少していた。以上の結果より、禁煙後の体重の変化と他の検査結果の動きは同調しており、禁煙と同時に体重をコントロールすることが検査結果の安定や改善につながると考えられた。しかし、糖代謝は全群で経年的に増加しており、今後検討する必要がある。2008年2月より禁煙後の検査結果の変化を介入研究により予備的に検討することを目的に、禁煙希望のMS男性を対象として禁煙治療、身体計測、血液検査、腹部CT、運動や栄養調査を実施している。現在までに予定登録者15名のうち8名を登録した。

介入として12週間の禁煙治療を実施し、禁煙前、禁煙3ヵ月後、6ヵ月後の時点で身体計測、血液検査、腹部CT検査、食事調査、身体活動量等の測定を行った。禁煙6ヵ月後時点で対象者6名中5名が3ヵ月以上の禁煙を達成し、1名は途中再喫煙したが6ヵ月後には禁煙していた。6ヵ月後時点で内臓脂肪面積が増加した群4名(729%増)、低下した群2名(2325%減)となった。増加群ではアディポネクチンは減少傾向、インスリンやHOMAは増加傾向、低下群はアディポネクチンに変化はみられなかったが、インスリンやHOMAは改善または維持する傾向にあった。以上より、禁煙に伴う体重ならびに検査値の変化は一時的であり、その後の禁煙の経過とともに改善することが示された。介入研究については今後対象者を増やして検討したい。
難治性あるいは希少肺癌克服のための肺癌基礎研究臨床応用システムの構築

近年、肺癌の分子レベルでの異常を標的とした分子標的治療薬が盛んに開発されている。それにより一部の肺癌患者の予後は改善した。しかし、依然肺癌患者の予後は不良である。現在も盛んに肺癌の基礎研究が行われているが、そこから得られた知見が十分に臨床現場に還元できていない現状がある。本研究の目的は、肺癌の基礎研究から得られる知見を患者毎に臨床応用するシステムを構築することである。具体的には、我々が確立した研究基盤、臨床検体を統合的に使用し、1患者毎に分子標的治療薬に対する耐性機序の解明、2稀な遺伝子変異を有する肺癌に対する最適な治療法の解明を行い患者生存中に得られた知見を臨床現場に還元する。我々はがん研究センター、京都大学との共同研究により、肺癌における稀な遺伝子変異の薬剤感受性データを取得するとともに、in silicoで薬剤感受性を予測することに成功した。本内容は米国科学アカデミー紀要に掲載された。本研究成果は、臨床の現場で見つかる稀な遺伝子変異に対して、抗癌剤の効果をコンピューター上の計算で予測できるという可能性を提案する新たな知見である。既に目標としていた論文での報告を行うことができている。今後、肺癌領域では次世代シーケンサーを用いた癌細胞由来の遺伝子変異解析が一層進むことがさ予想される。その中で稀な遺伝子変異が多く出現することが予想されるため、本研究をさらに進め、より多くの遺伝子変異に対して有効な薬剤を選択するためのシステムの構築を目指す。具体的には、肺癌患者から同定される遺伝子変異情報をもとに、細胞実験に落とし込み、各遺伝子変異の様々な阻害剤に対する薬剤感受性を明らかにするとともに、それら薬剤感受性データを用いてin silico薬剤感受性システムの予測精度を向上させ、臨床応用に向けた検討を開始する。肺癌は癌死因第1位の予後不良の疾患である。肺癌克服のため、今まで多くの研究がなされ分子レベルでの病態が明らかになりつつある。2004年にはEGFR変異が、また2007年にはEML4-ALK融合遺伝子が同定された。これらEGFRやALKに対して分子標的治療薬が開発され肺癌患者の予後の改善に貢献してきた。しかし、肺癌患者の予後は依然として不良であり、さらなる治療法の開発、個別化医療の推進が求められている。現在も癌の基礎研究は盛んに行われているが、そこから得られた知見を“今治療中の肺癌患者"に還元することは困難であることが多い。つまり基礎研究から得られた知見が“十分に臨床現場に還元できていない"現状がある。本研究では、肺癌患者の臨床検体あるいは臨床情報を用いて基礎研究を行い、肺癌患者の治療方針に役立つ知見を還元し患者毎に臨床応用するためのシステムの構築を目指す。具体的には、希少な遺伝子変異を有する肺癌患者、分子標的治療薬に耐性を獲得した肺癌を有する患者に対するtranslational researchの基盤を構築する。希少な遺伝子変異を有する肺癌患者に対しては、LC-SCRUM-Japanとの共同研究によりその頻度及び分布を把握するとともに、各遺伝子変異に対する薬剤感受性を評価して、希少な遺伝子変異を有する肺癌患者にとってどの薬剤が有効でありうるのかに関わるデータの蓄積を行っている。また、薬剤耐性化に関する研究では、分子標的治療薬に対して耐性を獲得した肺癌検体をもとに細胞株の樹立などを行っており、様々な分子機序の解明を進めている。本研究で得られた基礎的知見を臨床に活用するための研究を順調に行っている。LC-SCRUM-Japanとの共同研究では、稀なEGFR遺伝子変異を有する肺癌患者を100例以上で認め、その分布と頻度を明らかにした。今後、本研究内容は論文化する予定である。耐性機序の解明に関しては、薬剤に耐性化を獲得した肺癌検体から複数の肺癌細胞株を樹立しており今後の研究を進めるうえでの重要なツールを取得できた。今後もLC-SCRUM-Japanとの共同研究を積極的に進め、EGFR遺伝子以外の遺伝子にも注目しその頻度と分布および薬剤感受性を明らかにする予定である。耐性機序の解明に関しては作成した肺癌細胞株を用いてin vitroの解析を行い、複数の耐性機序を明らかにする予定である。

その中で稀な遺伝子変異が多く出現することが予想されるため、本研究をさらに進め、より多くの遺伝子変異に対して有効な薬剤を選択するためのシステムの構築を目指す。具体的には、肺癌患者から同定される遺伝子変異情報をもとに、細胞実験に落とし込み、各遺伝子変異の様々な阻害剤に対する薬剤感受性を明らかにするとともに、それら薬剤感受性データを用いてin silico薬剤感受性システムの予測精度を向上させ、臨床応用に向けた検討を開始する。
がん患者遺族の悲嘆に対するミーニング・センタード・サイコセラピーの有効性の検証

がん患者家族は、患者と同様に精神的負担を抱えており、1030%に何らかの精神医学的診断がつくという報告もある。しかし家族、特に患者を亡くした後の遺族への支援は不十分な現状にある。近年、がん患者や緩和ケアで働くスタッフの悲嘆のケアとして、フランクルの実存分析を基に“生きる意味の再構築“を行うMeaning Centered Psychotherapy(以下MCP)の有効性が検証されているが、本邦での実践はほとんど無い。本研究は、遺族を対象に1MCPの日本人に対する有効性を検討する2MCPの有効性を質的に分析する。そのことにより、がんで家族を亡くした遺族への支援のあり方について提案する。
Mechanisms of memory consolidation in sleep

本研究では、睡眠中に恐怖記憶が固定される際に、様々な遺伝子カスケード(MAPK, PKAなど)がどのようなタイムコースで活性化されるのかについて解析した。その結果、文脈的恐怖条件づけ直後の睡眠中に海馬でPKAがリン酸化されていることが明らかになったものの、最初の4時間と次の4時間の間に差はなかった。睡眠中の動物で海馬の背側部のPKAのリン酸化を薬理学的に阻害すると恐怖記憶に障害が起こるのに対し、睡眠剥奪動物でPKAを活性化すると、睡眠剥奪による恐怖記憶の阻害が見られず正常に記憶が固定された。さらに睡眠中のPKA産生に果たすsharp wave ripplesの役割について検討を進めた。29年度が最終年度であるため、記入しない。
育林技術と材質形成,とくにカラマツ造林木の間伐による生長と材質の変動

育林技術と材質形成は木材質源の育成とその有効利用において、欠くことのできない課題である。信州においては、カラマツ造林木の間伐問題が緊急かつ重要な問題である。そこで、カラマツ本数調節試験林において、生長と材質の変動を調べた。得られた研究成果の概要は次の通りである。1.間伐による生長の効果:間伐によって材木が疎開されると、その環境に応じて技条が張り、林木は肥大する。3試験林において林齢が若く、間伐率が高いものでは、年輪幅の増加が明瞭である。しかし、その間伐率が低くなると、その年輪幅の減少を緩和する程度である。間伐率が低いもの、また林齢が高い林分の間伐においてはその効果が少ない。2.間伐による偏心生長とあて材の発生についての検討:間伐により技条の発達がある方向に片寄ると、偏心生長やあて材が発生する可能性がある。しかし、上記の3試験林の各間伐区とも間伐による直接的な影響が認められなかった。
全身清拭における5つの方法による生体負担についての検討

【研究目的】全身清拭において蒸しタオル清拭もしくは石鹸清拭を行う際に,介助方法(全介助,半介助,自力)の違いにより生じる生体負担の差を,エネルギー代謝量,皮膚温,鼓膜温,血圧,心拍数を用いて明らかにすることを目的に,平成15年度は「半介助の蒸しタオル清拭」,「半介助の石鹸清拭」,「介助なしですべてを被験者が自力で行う蒸しタオル清拭」の3つの方法のデータ収集を行った.【研究方法】健康な女子8名を対象に,各清拭方法とも清拭実施前,清拭終了直後,および終了後から20分経過した時点に各項目を測定した.自力および半介助で行う清拭方法では,対象者自らが行う部分は対象者が好む方法で実施し,終了後にその手順を記述してもらった.一方,介助を行う部分の手技は統一した.分析は,前年度行った全介助での蒸しタオル清拭および石鹸清拭と,今年度行った3つの方法の全5方法について,清拭時間の比較,およびエネルギー代謝量,皮膚温,鼓膜温,血圧,心拍数それぞれを(1)蒸しタオル清拭における3つの介助法(全介助,半介助,自力)(2)石鹸清拭における2つの介助法(全介助,半介助),(3)全介助での石鹸清拭と蒸しタオル清拭(4)半介助での石鹸清拭と蒸しタオル清拭の4つの観点で平均値比較した.【結果】清拭時間の比較では,清拭方法間に有意差が見られ(F(4,35)=193.24,p<0.001),多重比較検定の結果,全介助の石鹸清拭が最も時間が長くかかり,ついで半介助の石鹸清拭,半介助の蒸しタオル清拭,全介助の蒸しタオル清拭,自力の蒸しタオル清拭の順であった.各測定項目の平均値比較では,上記(1)(3)の皮膚温,(2)(4)の代謝量の変化で清拭方法と経過時間の交互作用が認められた.清拭方法の主効果は(1)の鼓膜温,(2)(3)(4)の収縮期血圧,(2)の拡張期血圧で認められ,経過時間の主効果は(1)の鼓膜温,(2)の拡張期血圧,皮膚温,(4)の皮膚温で認められた.【研究目的】蒸しタオル清拭および石鹸清拭における,介助方法(全介助,半介助,自力)の違いにより生じる生体負担の差を,エネルギー代謝量,皮膚温,鼓膜温,血圧,心拍数を用いて明らかにすることを目的に,平成14年度は全介助での蒸しタオル清拭および石鹸清拭について検討した.【研究方法】健康な女子8名を対象に,蒸しタオル清拭および石鹸清拭において,実施前(安静時)から清拭終了直後(直後),および20分経過した時点(20分後)に各項目の測定を行った.清拭方法は手技を統一の上,実施者は1人に固定した.【結果・考察】清拭の施行時間は石鹸清拭のほうが有意に長かった(t(7)=21.72,p<0.001).分散分析の結果,エネルギー代謝量,心拍数,最小血圧,および鼓膜温は清拭方法と時間の経過における主効果および交互作用は認められなかった.最大血圧は清拭方法の主効果のみ認められた(F(1,7)=10.56,p<0.05).このことは安静時データの差に起因すると考えられる.平均皮膚温は,清拭方法と経過時間の交互作用が有意であった(F(1,7)=25.43,p<0.01).多重比較の結果,蒸しタオル清拭時は安静時に比べ20分後,および直後に比べ20分後に,石鹸清拭時は直後に比べ20分後に有意な上昇がみられた(p<0.05).しかし,両清拭方法とも安静時から直後にかけては有意な変化は見られなかった.従って,全介助での蒸しタオル清拭および石鹸清拭においては,環境気温が保たれ,対象が健常者で,手技が未熟でなければ,施行時間の長短に関係なく生体負担に差のないことが示唆された.なお,直後から20分後にかけての平均皮膚温は,石鹸清拭時に比べ蒸しタオル清拭時が上昇していた.このことは,蒸しタオル清拭のほうが清拭実施時間が短く,皮膚表面の露出時間が短いため,身体の保温が保たれた結果生じたと推察される.【研究目的】全身清拭において蒸しタオル清拭もしくは石鹸清拭を行う際に,介助方法(全介助,半介助,自力)の違いにより生じる生体負担の差を,エネルギー代謝量,皮膚温,鼓膜温,血圧,心拍数を用いて明らかにすることを目的に,平成15年度は「半介助の蒸しタオル清拭」,「半介助の石鹸清拭」,「介助なしですべてを被験者が自力で行う蒸しタオル清拭」の3つの方法のデータ収集を行った.【研究方法】健康な女子8名を対象に,各清拭方法とも清拭実施前,清拭終了直後,および終了後から20分経過した時点に各項目を測定した.自力および半介助で行う清拭方法では,対象者自らが行う部分は対象者が好む方法で実施し,終了後にその手順を記述してもらった.一方,介助を行う部分の手技は統一した.分析は,前年度行った全介助での蒸しタオル清拭および石鹸清拭と,今年度行った3つの方法の全5方法について,清拭時間の比較,およびエネルギー代謝量,皮膚温,鼓膜温,血圧,心拍数それぞれを(1)蒸しタオル清拭における3つの介助法(全介助,半介助,自力)

(2)石鹸清拭における2つの介助法(全介助,半介助),(3)全介助での石鹸清拭と蒸しタオル清拭(4)半介助での石鹸清拭と蒸しタオル清拭の4つの観点で平均値比較した.【結果】清拭時間の比較では,清拭方法間に有意差が見られ(F(4,35)=193.24,p<0.001),多重比較検定の結果,全介助の石鹸清拭が最も時間が長くかかり,ついで半介助の石鹸清拭,半介助の蒸しタオル清拭,全介助の蒸しタオル清拭,自力の蒸しタオル清拭の順であった.各測定項目の平均値比較では,上記(1)(3)の皮膚温,(2)(4)の代謝量の変化で清拭方法と経過時間の交互作用が認められた.清拭方法の主効果は(1)の鼓膜温,(2)(3)(4)の収縮期血圧,(2)の拡張期血圧で認められ,経過時間の主効果は(1)の鼓膜温,(2)の拡張期血圧,皮膚温,(4)の皮膚温で認められた.
人間ドックコホートバンクを用いたがん自然史理論の基づく肺がん発症リスクの定量化

胸部X線検査は肺がんのスクリーニングとして人間ドック、検診において大変重要な検査です。肺がんの進行をおさえ早期発見するには本格的に精度管理を含むケアが重要です。我々は、MedCity21人間ドックにて呼び出しシステムと名付けた本格的に精度管理をした受診勧告を行っています。MedCity21バイオバンクに登録され、かつ、胸部判定で要精密検査となり当院にてCT検査を施行した症例のコホート研究を行います。人間ドック受診ごとにバイオバンクに生体サンプルが蓄積されます。肺がん発症時にそのサンプルからバイオマーカーを測定し経年変化を検討し、環境因子や遺伝素因を考慮した肺がん発症リスクの定量化をめざします。
将来に関するニュースと景気循環の分析

本研究では将来に関する楽観的なニュースや期待の変化が現在の好況を生み出すとするNews-Driven Business Cycle(NDBC)についての理論的・実証的分析を行った。とくに、(1)消費の習慣形成とNDBCの理論的な関係、(2)名目価格の硬直性とNDBCの理論的な関係、および(3)日本のデータでパラメータを推計した中規模確率動学一般均衡モデルにおけるNDBC、の3点を分析した。まず、ニュースによる景気循環関する理論的な分析として、消費の習慣形成について着目した研究を"lnternal and External Habits and News-Driven Business Cycles"と題する論文にまとめ、海外ジャーナルに投稿した。消費の習慣形成には内生的なもの(internal habit)と外生的なもの(external habit)の2種類があるが、既存のモデルではどちらをモデル構築の際に採用するかはモデルの振る舞いにあまり影響がないといわれていた。しかし、近年注目されているニュースに対しては、どちらを採用するかで経済の反応が異なることを理論的に示したのが貢献である。この論文はすでにEconomics Letters誌に採択され、2010年度に掲載予定である。大恐慌時におけるニュースの役割を確率動学一般均衡(DSGE)モデルとベイズ推計の手法を使って分析する研究に関しては、アメリカおよび日本のマクロ経済のデータベースの構築を行った。また、ベイズ推計に用いるためのベースとなるDSGEモデルの構築も行い、適当なパラメータを与えた下での挙動についてのシミュレーション分析を行った。構造VARのニュースのマクロ経済への影響を分析する研究に関しては、これまでと異なるニュースの識別方法を考案した。さらにその手法をアメリカのマクロ経済データに応用した。現在のところ、まだプレリミナリーなものであるが、伝統的な結果とは異なるインプリケーションを持つ結果が得られている。
トリプルネガティブ乳癌での核内PAG1のプロテアソーム非依存的増殖制御機構の解明

トリプルネガティブ乳癌(以下TNBC)は高悪性度乳癌の一つであるが、いまだ詳細な増殖機構は未知の部分が多い。遺伝子発現解析や免疫組織学的解析により、核内にPAG1(プロテアソーム構成分子のひとつ)という分子が高発現するTNBC症例の生命予後が不良であったことより、核内PAG1の機能について探索を行った。核内PAG1に結合しうる分子を解析したところ、PARP1が核内PAG1に結合しうることを見出した。PARP1はDNA複製に関与する分子で、PARP阻害剤は乳癌治療に臨床応用されつつある。従って、PAPR1に対し核内PAG1が結合することで、PARP阻害剤の感受性を変化させる可能性も示唆された。ホルモンレセプター・上皮成長因子受容体2(HER2)の発現を欠くトリプルネガティブ乳癌(TNBC)は、生物学的悪性度が高く、現時点では未だ有効な分子標的がないことから、その発症・増殖機構の解明および新規治療法の確立は急務である。申請者は、これまでにTNBCの網羅的遺伝子発現解析データを基にしたパスウェイ解析を通じて、TNBCにて発現亢進を認める細胞増殖関連パスウェイを同定し、それら全てに共通して発現亢進を認めるプロテアソーム関連因子PAG1に着目した。本研究では、PAG1がプロテアソーム依存的な増殖制御機構に加え、核内でプロテアソーム非依存的な増殖制御を担っている可能性について細胞生物学および生化学実験により徐々に明らかとなってきた。ホルモンレセプターとHER2の発現を欠くトリプルネガティブ乳癌(TNBC)は乳癌の中で高悪性度のサブタイプであり、TNBCの増殖・進展機構の解明は治療を開発する上で重要である。これまで、プロテアソーム構成因子のひとつであるPAG1が核に強く発現するTNBC症例の予後が不良であることに着眼し、核内PAG1の機能について生化学的手法を用いた解析を行ってきた。TNBC培養細胞株と抗PAG1抗体による免疫沈降法とプロテオミクス解析(2DICAL法)により、核PAG1と結合する分子としてPARP1を同定した。PARP1はDNA複製に関与する分子であり、PAPR阻害剤はすでに臨床応用されつつある。従って、このPARP1に対し核PAG1が結合することが、DNA傷害性薬剤の応答に寄与している可能性を考えた。そこで、PAG1を発現抑制させたTNBC細胞株に対しadriamycinを反応させたが、発現抑制群でわずかに感受性が低下するのみで有意な相違はみられなかった。また、PAG1の各種欠損体を用いてPARP1結合部位を同定し、結合アミノ酸配列を用いたドミナントネガティブペプチド添加時の影響を試みたが、ペプチド作成に必要なアミノ酸長まで結合領域を絞り込むことは困難であった。しかし、近年PARP阻害剤は転写制御を含むepigenetics制御の阻害が細胞傷害の作用点であることも示されており、エピゲノムに作用するPARP1に対しPAG1がどのように作用しているのかを追求する意義は十分あると考えられた。一方、PAG1の発現が細胞周期依存的に転写因子E2F1により調整されることをreporter assayとChIP assayで明らかにした。また大規模遺伝子発現データベースを用いて、TNBCに多いBasal type乳癌でPAG1の発現が他のサブタイプよりも亢進していることを明らかにした。現在までにプロテアソーム構成因子PAG1(HA-tag)の安定過剰発現細胞(HEK293細胞)を用いた網羅的プロテオミクス解析(国立がん研究センター尾野雅哉博士のご協力)により、PAG1と核内で相互作用する因子として新規にPARPを同定した。PARP1はDNA修復に関与するポリメラーゼであり、実際に内在性PARPと内在性PAG1が相互作用しうることもTNBC細胞株であるMDA-MB-231を用いた免疫沈降実験でも確認できた。PARPのDNA修復機構に対するPAG1が与える影響について現在生化学的手法を用いて解析中である。がん分子生物学、病理学PARPと相互作用するPAG1の結合領域を数アミノ酸レベルまで同定し、同部位の膜貫通型ドミナントネガティブペプチドを作成する。このペプチドの細胞株への添加によりPARP/PAG1の相互作用が破綻すると考えられ、その結果DNA傷害性薬剤(白金製剤/アントラサイクリン製剤)に対する応答が変化するかどうかをin vitroで確認予定。また、PARPと相互作用しうるPAG1が成熟プロテアソームの一部として機能しているのか、もしくは単独ないし未成熟プロテアソームの構成因子として機能しているのかどうかも、密度勾配遠心および免疫沈降実験により確認予定である。