hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
嗅覚性大脳誘発反応に関する研究

これは刺激に対する被検者の意識レベルの上昇を示唆していること考えられた。1.本研究の嗅性大脳誘発反応記録のために,以下の仕様を有するニオイ刺激制御装置が試作された.(1)鼻に装置したセンサーで被検者の呼吸を電気信号に変換し,吸気相に同期して臭素を送出する電磁弁を開閉させる.(2)刺激間隔は嗅覚の疲労や慣れを防止するために, 1から9呼吸までの任意の呼吸毎に刺激することが可能.(3)刺激時間は最大2秒まで,また刺激を与えるタイミングは被検者に応じて設定可能.2.嗅覚正常者について嗅性大脳誘発反応を記録し,その結果および知見は以下の如くであった.(1)26名を対象とし,基準電極部位を耳垂,オトガイ部先端,頭部外の平衡型基準電極(BNE),手関節部に設置し,反応の大きさと出現率について検討したところ,基準電極部位をBNEとしたときがやや高率(84.6%)に記録され,また振幅の大きさは頭部外の基準電極としたときのほうが大であった.このことは耳垂にも誘発電位が波及していると推定された.(2)反応波形は, i)頂点潜時が700mにsecに付近に認められるもの, ii)頂点潜時が300msecと700sec前後に陽性波が認められたもiii)300msec前後の陽性波のみが認められたものの3つの型に分類され,最初のタイプが最も高率(77.3%)に記録された. (3)5名について嗅覚性大脳誘発反応の頭皮上電位分布および潜時分布を作成した.中心部や頭頂部で高電位となり,頭皮上の周辺部では電位が低下し,不明瞭となった.頂点潜時は後頭部にいくに従い延長する傾向にあった.これらから大脳誘発反応は中心部付近で最大となるベクトルが想定された.また正中中心部Czの部位が電位が高かったことから,誘発電位による他覚的嗅覚検査として適当な記録部位であると考えられた.62年度はニオイ刺激に対する大脳誘発反応を正常者から記録したが、全例において記録されなかった。このことは他覚的嗅覚検査として臨床応用するにあたってさらに検討が必要である。よって当該年度は、このニオイ刺激に対する誘発反応の背景にある脳波そのものの変動に着目して研究を進めた。嗅覚正常者10名を対象とし、刺激はT&TオルファクトメータのB4(バラの香り)とE5(糞の香り)を用いた。頭皮上16か所より無刺激時(安静閉眼覚醒時)とニオイ刺激時の脳波を50秒間記録し、これら脳波をFFT処理してδ波(2ー3.5Hz)、θ波(4ー7.5Hz)、α_1波(8ー9.5Hz)、α_2波(10ー12.5Hz)、β_1波(13ー17.5Hz)の各周波数帯域別の平均パワーを求めた。頭皮上16か所の値から補間関数を用いて二次元脳電図を作製し、さらに無刺激状態とニオイ刺激状態の脳電図の変化をt-検定によるSPM(significance probability mapping)を用いて検討した。ニオイ刺激中の各帯域別の脳波の空間的変化はSPMによって有意な変化のある部位と変化のない部位が観察された。臭素B4で刺激した時は無刺激時に比較してδ帯域の後頭部、θ帯域の前頭部にパワーの減少、α_2帯域の前頭部・中心部にパワーの増大が観察された。α_1帯域、β_1帯域には変化は認められなかった。E5で刺激した時はα_1帯域の後頭部・頭頂部にパワーの減少、α_2帯域の前頭部にパワーの増大が観察された。δ帯域、θ帯域、β_1帯域には変化は認められなかった。
自己免疫性胃炎:ペプチド抗原認識T細胞クローンによる疾患誘導とトレランスの破綻誘導

1。研究目的マウス自己免疫性胃炎は胃壁細胞H/K-ATPase分子を自己抗原とし発症し、寛容は抑制性T細胞(Ts)によって維持される。本研究はTsの認識する抗原を明らかにする目的で行われた。2。研究成果1)新生児マウス胸腺内に胃壁細胞を注入すると生後3日胸腺摘出による胃炎発症は疾患誘導性T細胞(Te)の排除ないし不活性化によって抑制される(寛容成立)が、Tsは排除されない。2)H/K-ATPase特異的疾患誘導性T細胞株A-IIを生後3日胸腺に移入すると寛容は成立せず生後6日胸腺摘出によって67%のマウスに自己免疫性胃炎が誘導された。ちなみに無処置対照マウスの生後6日胸腺摘出による胃炎発症率は10%以下である。3)Tsは正常個体のリンパ組織に存在し、胃炎発症マウスに存在する疾患誘導性効果T細胞(Te)の活性をTsの細胞数に比例して抑制した。4)以上の結果、Tsは生後6日には末梢化し、Teを認識してその活性化を抑制することが示された。これが臓器特異抗原に対する自己寛容を維持する(少なくとも一つの)機構であると考えられる。1。2。
抗腫瘍活性アセトゲニン類の系統的不斉合成法の開発と高活性物質の探索

ヒトがん細胞に強力な選択毒性を示すアセトゲニン類の基本骨格合成法の確立と高活性物質の探索を目的に研究を遂行し,その結果,mono-およびbis-THFアセトゲニンの代表例としてmurisolinとlongimicin Dの初めての不斉全合成研究を達成するとともに,独自に開発したpoly-THF環部の系統的合成法の利点を生かしてmurisolin類縁体を合成し,その生物活性評価を行った.1)Murisolin及び類縁体の合成と活性評価既に確立したpoly-THF環部の系統的合成法とともに,アセトゲニン合成に必要な工程であるγ-ラクトン部との連結部導入法を確立することにより,mono-THFアセトゲニン,murisolinの初めての不斉全合成に成功した.また,2種類の16,19-cis-murisolinを合成し,先に合成したmurisolinとともに,ヒトがん細胞パネル評価とCOMPARE分析を依頼し,39種のヒトがん細胞に対してフィンガープリントの収集,並びに,類縁体間や既存薬とのCOMPARE分析により作用機作の比較を行った.膵がん細胞に対して強い細胞毒性を示すlongimicin Dの不斉全合成を行った.不斉点の集中するbis-THF環部を系統的合成法により,高い光学純度で合成することができた.THF環部とγ-ラクトン環の連結部として適するものを検討した結果,(3R)-10-benzyloxy-3-(methoxymethoxy)dec-1-yneが最適であることを明らかにし,不斉アルキニル化とアルキル化によって3つのセグメントを連結することで,longimicin Dの初めての不斉全合成に成功した.ヒトがん細胞に強力な選択毒性を示すアセトゲニン類の基本骨格合成法の確立と高活性物質の探索を目的に研究を遂行し,その結果,mono-およびbis-THFアセトゲニンの代表例としてmurisolinとlongimicin Dの初めての不斉全合成研究を達成するとともに,独自に開発したpoly-THF環部の系統的合成法の利点を生かしてmurisolin類縁体を合成し,その生物活性評価を行った.1)Murisolin及び類縁体の合成と活性評価既に確立したpoly-THF環部の系統的合成法とともに,アセトゲニン合成に必要な工程であるγ-ラクトン部との連結部導入法を確立することにより,mono-THFアセトゲニン,murisolinの初めての不斉全合成に成功した.また,2種類の16,19-cis-murisolinを合成し,先に合成したmurisolinとともに,ヒトがん細胞パネル評価とCOMPARE分析を依頼し,39種のヒトがん細胞に対してフィンガープリントの収集,並びに,類縁体間や既存薬とのCOMPARE分析により作用機作の比較を行った.膵がん細胞に対して強い細胞毒性を示すlongimicin Dの不斉全合成を行った.不斉点の集中するbis-THF環部を系統的合成法により,高い光学純度で合成することができた.THF環部とγ-ラクトン環の連結部として適するものを検討した結果,(3R)-10-benzyloxy-3-(methoxymethoxy)dec-1-yneが最適であることを明らかにし,不斉アルキニル化とアルキル化によって3つのセグメントを連結することで,longimicin Dの初めての不斉全合成に成功した.アセトゲニン類はバンレイシ科植物から産出される天然物群であり,ヒトがん細胞に対して強力な選択毒性を示すことから新規抗がん剤のリード化合物として注目されている.我々は代表的なアセトゲニン類の基本骨格合成法を確立し,作用機構の解明,新規高活性誘導体の探索,構造決定などに貢献したいと考え,研究を展開してきた.今年度は,THF環セグメントの合成サイクルを完了するためのtermination stepを確立するとともに,1990年にCortesらによりannona muricataの種子より単離され,ヒトの肺がん,大腸腺がん,腎臓がん細胞にアドリアマイシンの10^6倍という強力な活性を有するmurisolinの最初の全合成を達成することができた.以下にその成果をまとめる.既に確立した手法により立体選択的に合成したα-テトラヒドロフラニックアルデヒドに対する不斉アルキニル化の検討を行った.アルキンとしては将来薗頭反応によりγ-ラクトン部と結合することを念頭において,アルキン部を炭素鎖の両端に持ち,入手容易な1,6-ヘプタジインを用いた.工程数削減のため,片方のアルキンを保護することなく不斉アルキニル化を行うという先例のない方法で行ったところ,高収率・高立体選択的に反応が進行することを見出した.2)mono-THFアセトゲニン,Murisolin及びその類縁体の不斉全合成薗頭反応のためのヨードオレフィン部をもつγ-ラクトンセグメントは,α-スルフェニル-α,β-不飽和γ-ラクトンとα-オキシトリフラートのカップリングにより合成することができた.これを計画どおり薗頭反応でTHF環セグメントと連結し,murisolinの不斉全合成に成功した.以上のようにmono-THFアセトゲニン類縁体合成の方法論を確立することができた.昨年度確立できたmono-THFアセトゲニン,murisolinの不斉合成法を応用して,我々の系統的合成法の利点を生かし,その類縁体の合成と生物活性評価を行った.また,bis-THFアセトゲニンの代表例として,longimicin Dの不斉全合成研究を実施した.1)Murisolin類縁体の合成Murisolinの合成法に準じて,16,19-cis-murisolinの合成を行った.THF環部は,独自に開発したTHF環部の系統的合成法により,高い光学純度で合成することができた.

これを,1,6-ヘプタジインをリンカーとしてγ-ラクトン部と連結させることにより,2種類の16,19-cis-murisolinを高い光学純度で合成することができた.これらのmurisolin類縁体と先に合成したmurisolinについて,ヒトがん細胞パネル評価とCOMPARE分析を依頼し,39種のヒトがん細胞に対してフィンガープリントの収集,並びに,類縁体間や既存薬とのCOMPARE分析により作用機作の比較を行った.膵がん細胞に対して強い細胞毒性を示すlongimicin Dの不斉全合成を行った.不斉点の集中するbis-THF環部を系統的合成法により,高い光学純度で合成することができた.3)Longimicin Dのγ-ラクトンセグメントの合成と両セグメントの連結THF環部とγ-ラクトン環を結ぶリンカーとして適するものを検討した結果,(3R)-10-(benzyloxy)-3-(methoxymethoxy)dec-1-yneが最適であることを明らかにし,不斉アルキニル化とアルキル化によって3つのセグメントを連結することで,longimicin Dの初めての不斉全合成に成功した.
炎症性皮膚疾患における皮膚浸潤T細胞のMDR1発現とステロイド抵抗性

尋常性乾癬やアトピー性皮膚炎といった炎症性皮膚疾患の病変部皮膚より得られた皮膚浸潤T細胞を培養し、それらのT細胞のMDR1発現やその機能をフローサイトメトリーなどで調べる。MDR1陽性細胞の病態に関わるサイトカイン産生などの機能をin vitroで解析し、ステロイド抵抗性との関連性につき調べる。
低線量率放射線照射下の生体応答における非相同末端結合の役割の解明

DNA2重鎖切断(DSB)は、放射線被ばくによって生じる生物影響の主な原因であり、DNA Ligase IV(Lig4)は、その主な修復機構である非相同末端結合(NHEJ)における重要なタンパク質の一つである。Lig4に点突然変異を持つマウスを用い、低線量率照射下で生じる影響を解析した結果、Lig4変異マウスは、1 Gyを高線量率照射した場合と比べ、1 mGy/hの低線量率で照射した場合のほうが早期に死亡することを見出した。その原因として、幹細胞にDNA損傷の蓄積やターンオーバーの加速による早期枯渇が生じることを解明し、低線量率照射下での生体防御機構としてのNHEJの重要性を明らかにした。1.低線量率放射線照射下におけるDNA損傷蓄積性の解明(1)DNA2重鎖切断(DSB)の修復機構の1つである非相同末端結合(NHEJ)において、最終的に切断されたDNA末端の再結合を行うDNA Ligase IV遺伝子に変異を持つ、Lig4^<Y288C>マウスの譲渡に関する契約を結び、マウスが寄託されているバイオリソース(英国MRC HARWELL)における個体化作業を開始した。1回目の作業では目的とする個体が得られなかったため、2回目の作業を実施中である。当所におけるマウスの繁殖はH25年度に納入次第開始する。(2)今後Lig4^<Y288C>マウスが納入され、繁殖が進んだ後に速やかに低線量率連続照射実験を開始できるようにするため、同じ系統の野生型マウスを用い、大腿骨からの骨髄の抽出法と造血幹細胞(LSK細胞;Lin^-,Sca-1^+,c-kit^+)の単離方法を確立した。また、今後実施予定のセルソーティングを用いて造血幹細胞に生じたDSBを解析するための蛍光抗体染色方法の検討を行った。(3)今後の低線量率連続照射実験のための予備的検討として、DNA Ligase IV遺伝子を欠損した培養細胞を用い、低線量率連続照射に対する細胞応答を検討した。^<137>Cs-γ線を10mGy/hの線量率で、最長56時間連続照射した結果、野生型細胞と比較して増殖遅延や細胞生存率の低下、平均細胞サイズの増加等が生じることを確認した。今後の実験では、すでに検討済みの1mGy/hと、今回予備的検討を行った10mGy/hの2点で線量率による生体応答の違いを検討することとした。DNA Ligase IV(以下、lig4)は、DNA2重鎖切断(DSB)の主な修復機構のひとつである非相同末端結合(NHEJ)において切断したDNA末端を最終的に再結合するタンパク質である。Lig4遺伝子に点突然変異を持つlig4tinyマウスを、英国MRC HARWELLから入手し、飼育・繁殖して以下の実験を行った。1. NHEJ欠損マウスを用いた低線量率放射線照射条件の検討一般状態を観察するため、非照射条件下においてlig4tinyマウスを27週齢まで飼育した。Lig4ノックアウトマウスが胎生致死であるのに対し、lig4tinyマウスは順調に成育したが、野生型およびヘテロマウスと比較して体が小さく平均体重も著しく減っていた。137Csγ線を連続照射しながら(線量率1.6 mGy/h)lig4tinyマウスを飼育した結果、5週目から体重の減少が認められ、6週目で骨髄死を生じた。このときの積算線量は1.7 Gyであった。当初の予想よりも低線量放射線照射下において感受性が高かったため、次年度からはより低い線量率でも実験を行い、結果を比較することにした。2.低線量率放射線照射下における造血幹細胞への影響の解析低線量率γ線照射したlig4tinyマウスを用いて解析した結果、特に白血球や骨髄細胞が著しく損なわれていた。この結果から、リンパ球や骨髄細胞に生じたDSBが修復されずに蓄積したため、ターンオーバーが加速されて造血幹細胞が早期に枯渇した可能性が推測された。対比のため非照射で27週齢まで飼育したlig4tinyマウスを解析した結果、ほぼ同週齢の非照射の野生型マウスと比較して骨髄細胞は半減しており、造血幹細胞(Lin-, Sca-1+, c-kit+)も著しく減少していた。今後は、造血幹細胞の分布を詳細に解析するとともに、造血幹細胞におけるDSBの蓄積も解析する予定である。DNA2重鎖切断(DSB)は、放射線被ばくによって生じる生物影響の主な原因である。DNA Ligase IV(Lig4)は、DSBの修復機構のひとつである非相同末端結合において、切断したDNA末端を最終的に再結合する最も重要なタンパク質のひとつである。このLig4に点突然変異を持つマウスを用い、以下の結果を得た。1.低線量率放射線照射下におけるDNA損傷蓄積性の解明(1) Lig4変異マウスから、胎児線維芽細胞(MEF細胞)を樹立した。この細胞に100 mGy/hのγ線を連続照射した結果、野生型細胞では生存率の低下が著しく抑制されたが、変異型細胞では線量に応じて直線的に生存率が減少した。また、野生型細胞では照射中の細胞周期進行に顕著な変化は認められなかったが、変異型細胞では進行が抑制された。これらの結果は、Lig4変異細胞では、γ線連続照射下でDNA損傷が修復されずに蓄積することを示唆する。

(2) Lig4変異マウスと野生型マウスを、1 mGy/hと0.3 mGy/hの低線量率連続照射下において飼育し、脾臓細胞や造血幹細胞への影響を解析した。野生型マウスでは照射による影響は認められなかったが、Lig4変異マウスでは成熟したB細胞や造血幹細胞が顕著に減少した。Lig4変異マウスでは、非照射でも造血幹細胞から増殖細胞への分化が抑制されるが、低線量率照射下ではその傾向が加速されることを明らかにした。(3) (2)で照射したマウスから十二指腸を切除し、クリプト底部の幹細胞を観察し、アポトーシスの誘導を確認した。2.低線量率放射線照射下における染色体不安定性の解明p53依存性のアポトーシスを抑制して、Lig4変異細胞を長期培養することにより、染色体不安定性を解析する。今年度はp53ノックアウトマウスとLig4変異マウスとの交配を開始したが、MEF細胞の樹立が若干遅れている。1)低線量率放射線照射下におけるDNA損傷蓄積性の解明:Lig4Y288Cマウスの生存率は、高線量率(0.5 Gy/分)X線を1 Gy照射した場合と比較して、1 mGy/hで連続照射した方が早期に低下した。一方、さらに低線量率の0.3 mGy/hで連続照射した場合、コントロールと比較して生存率の低下に有意な違いは認められなかったが、加齢に伴う造血前駆細胞の減少が連続照射によってさらに促進し、造血幹細胞のターンオーバーが加速することを確認した。Lig4Y288Cマウス胎児由来線維芽(MEF)細胞を用い、100 mGy/hの連続照射を行った結果、野生型MEF細胞よりも細胞致死効果は高いが、高線量率(0.9 Gy/分)X線を照射した場合と比較して細胞生存率が回復する線量率効果を示すことを明らかにした。その原因として、連続照射中にDNA損傷が蓄積し、細胞周期の進行が抑制されることを見出した。2)低線量率放射線照射下における染色体不安定性の解明:DNA損傷を蓄積した細胞が、p53依存性アポトーシスによって排除されずに生存した場合に、染色体不安定が蓄積されることを明らかにするため、p53ノックアウトマウスとLig4Y288Cマウスを交配し、2重変異MEF細胞の樹立を試みたが、妊娠確率が低いため2重変異を持つ胎児が得られなかった。引き続き細胞の樹立を試みる。低線量率連続照射を行う施設の不具合により、約半年に及ぶマウスの連続照射を予定通りに実施できず、結果として研究の進捗がやや遅れている。現在修理が完了し、連続照射を再開したことから、残りの実験については計画通りに進捗できる予定である。また、p53ノックアウトマウスとLig4Y288Cマウスを交配した2重変異MEF細胞の樹立に手間取っていたが、2016年度早々に細胞を樹立できたため、今後連続照射実験を実施する。1.低線量率放射線照射下におけるDNA損傷蓄積性の解明:ヒトLig4遺伝子を導入したLig4Y288Cマウス胎児由来線維芽(MEF)細胞の生存率を解析した結果、いずれの線量率においても、野生型細胞と同レベルまで感受性が回復することを確認し、Lig4Y288CMEF細胞の高感受性の原因が、Lig4の変異にあることを確実にした。小腸の凍結切片を作成してDSBの蓄積性を観察した結果、1 mGy/hで連続照射したLig4Y288C
脱髄性疾患におけるClaudinファミリー蛋白に対する自己免疫応答の解析

血清抗claudindomaincontaining1(CLDND1)抗体は健常群に比べ抗アクアポリン4抗体陽性多発性硬化症(MS)群での陽性率が有意に高い。また、CLDND1の発現は中枢神経系の脳梁や内包、白質などの髄鞘の多い場所やニューロンや脳毛細血管周囲にも発現が認められる。また実験的自己免疫性脳脊髄炎やMSの病変ではCLDND1は脱落していた。これらの結果は、CLDND1が髄鞘におけるタイトジャンクション形成や血液脳関門の形成にも関わるユニークな蛋白質である事を示唆し、さらにCLDND1に対する自己免疫応答の存在は、血液脳関門の破綻と同時に脱髄を引き起こし、広範な病巣形成に関わることを示唆している。本研究では、中枢神経系での発現を主体とするclaudindomain containing 1(CLDND1)蛋白に対する自己免疫応答の多発性硬化(MS)症病態への関与を解明することを目的としている。本年度は、抗CLDND1抗体を用いて、マウス、ラット、ヒトの中枢神経組織でのCLDND1蛋白の発現を検討し、更にMSの動物モデルである実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)やMS組織でも検討を行った。正常マウス、ラットの組織の免疫染色では、中枢神経系の脳梁や内包、白質に発現が認められ、末梢神経での発現は認められなかった。髄鞘での染色パターンは、claudin-11と同様に髄鞘に沿って間欠的に染色された。また、中枢神経系における脳毛細血管周囲、網膜毛細血管周囲にも発現が認められた。血管内皮細胞との二重染色によりCD34と一部重なることから、内皮細胞側での発現が示唆された。他の臓器では、肺、腎臓、肝臓、骨格筋では発現は認められなかったが、心筋で淡い染色が認められた。一方で、SJL/JマウスにPLPペプチドを免疫することでEAEを誘導し、急性期と慢性期の脊髄脱髄病変にて検討を行った結果、CLDND1は脱髄病変において脱落していた。また、MS患者における急性大脳病変や慢性期病変でも、同様にCLDND1は脱落していた。Claudin蛋白は様々な臓器に発現し、主にtight junction(TG)の形成に関わる。脳血管内皮細胞に発現するclaudin-1,-3,-5,-12,occludinは、血液脳関門(BBB)の形成に関わり、一方でclaudin-11はミエリン形成に関わることが知られている。本研究の結果より、CLDND1は髄鞘におけるTG形成やBBBの形成にも関わるユニークな蛋白質であると考えられた。我々がこれまでに示してきたMS患者におけるCLDND1に対する自己免疫応答は、BBBの破壊と脱髄の両方を共に惹起しうると考えられ、今後もさらなる検討が必要と考えられた。本研究では、中枢神経系での発現を主体とするclaudindomain containing 1 (CLDND1)蛋白に対する自己免疫応答の多発性硬化(MS)症病態への関与を解明することを目的としている。これまでの検討で、CLDND1蛋白は中枢神経系の脳梁や内包、白質に発現が認められ、髄鞘での染色パターンは、claudin-11と同様に髄鞘に沿って間欠的に染色されるパターンであった。更に中枢神経系における脳毛細血管周囲、網膜毛細血管周囲にも発現が認められ、内皮細胞側での発現が示唆されている。一方で末梢神経系での発現は認められない。MSの動物モデルである実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)では、急性期と慢性期病変では共にCLDND1蛋白は脱落しており、MS患者においても同様である。これらの結果は、CLDND1蛋白が髄鞘におけるタイトジャンクション形成や血液脳関門の形成にも関わるユニークな蛋白質である事を示唆している。我々がこれまでに示してきたMS患者におけるCLDND1蛋白に対する自己免疫応答の存在は、血液脳関門の破壊と脱髄の両方を共に惹起する可能性があり、その動物モデルを作成し病態を解明することはきわめて重要である。今後CLDND1蛋白のオーバーラッピングペプチドを作成し、感受性のある実験動物に接種することで動物モデルの作成を行う。更に抗CLDND1抗体のEAEへの影響や内皮細胞への直接的な影響についても検討を行っていく。血清抗CLDND1抗体は、健常者では3.2%に認められる一方で、抗AQP4抗体陽性MSでは41.2%と陽性率が有意に高い。

また、CLDND1蛋白の発現は中枢神経系の脳梁や内包、白質などの髄鞘の多い場所に認められ、髄鞘においてはclaudin-11と同様に髄鞘に沿って間欠的に染色されるパターンであった。更に中枢神経系における脳毛細血管周囲、網膜毛細血管周囲にも発現が認められ、内皮細胞側での発現が示唆された。一方で末梢神経系での発現は認められなかった。MSの動物モデルである実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)では、急性期と慢性期病変では共にCLDND1蛋白は脱落しており、MS患者においても同様であった。これらの結果は、CLDND1蛋白が髄鞘におけるタイトジャンクション形成や血液脳関門の形成にも関わるユニークな蛋白質である事を示唆している。さらに、抗AQP4抗体陽性MS患者でのCLDND1に対する免疫応答が高いことは、血液脳関門の破綻と同時に脱髄を引き起こす可能性を示唆している。本研究においては、MSに対するCLDNDの1蛋白への免疫応答の証明、並びにCLDND1蛋白発現を正常組織、MS病巣で検討しえた点で大変意義があると思われる。
バイオリージョンマップづくりにおける市民参加の取り組みに関する日欧比較研究

バイオリージョンづくりを社会に浸透させるため研究者だけでなく、産学官民と様々な立場の人々の参画により成立し、それらの人々の意見の反映された地域づくりのモデルを構築することに特徴である。近年、欧州は、特にオランダ、ドイツや北欧諸国をはじめ、バイオリージョンづくりまたはバイオリージョンマップづくりが積極的に進められている。バイオリージョンづくり(bioregion、エコロジカルな地域づくり)とは、「生命地域」と訳されており、気候、地形、流域、土壌、野生生物など、独特の自然の特徴によって決まってくる地域の生命圏のことであり、それらの自然環境に順応し、調和した形で営まれている生活様式や都市の機能までも含めた概念である。本研究では、研究調査対象地域としてオランダ、ドイツ、デンマークの3カ国における市民参加によるバイオリージョンマップづくりの現況調査を行う。さらに、豊かな里山里地が残っている北九州市若松区を比較対象地域として、市民参加によるバイオリージョンマップづくりを実施し、都市及び近隣農村地域での特徴を明確し、地域全体の生物多様性マップを作成することを目的である。平成21年度は、オランダのランドスタッドメトロポリス地域(アムステルダム・デンハーグ・ロッテルダム・ユトレヒト)及びデンマークのコペンハーゲン市にてバイオリージョンづくりの現地調査及び資料収集を行った。両調査地域を中心としてバイオリージョンづくりの政策及び広域バイオリージョン計画を作成している。コペンハーゲン市及びランドスタッドメトロポリス地域の「Groenblauwe slinger」という広域生命地域を中心に着々と実行していることが確認できた。バイオリージョンマップづくり、地域イノベーション及びその活用方法に関しては地域の産業・行政・大学・市民に広く情報を公開し、意見を求めることが問題解決の基本であり、それぞれの立場、理解度、表現力は多様であり単純な方法では対応できない。基本的に1)必要な情報に自由にアクセスできること、2)意見交換する場、学ぶ場があること、3)専門家の意見を聞く機会があること、4)政策や未来モデル構築に参加あるいは提言できることが必要である。平成22年度は、ドイツの主要都市・地域(ハンブルグ市、フライブルク市、スツッツガルト市)にてバイオリージョンづくりの現地調査及び資料収集を行った。調査地域を中心としてバイオリージョンづくりの政策及び広域バイオリージョン計画を作成している。特にフライブルク市を中心に着々とバイオリージョンマップづくりを実行していることが確認できた。欧州諸国及び日本では、都市の拡大によって、自然の減少が続く。多くの貴重な生息空間がまだ多く点在し広域的に豊かな自然環境地域を長期にわたり守っていくため、自然を保護するだけではなく、ネットワーク化することが重要である。また生態系の持続性や変化対応力として生物多様性の保全は必須の条件になっている。生物多様性の喪失原因の多くは、物質的な豊かさを追求してきた人間の経済・社会活動にある。現在、豊かな地域づくりにおいて、市民参加が多いに期待されているが、どう市民を上手く巻き込むのはまだ多くの難点が残っているのも現状である。本研究では、オランダ・ドイツ・デンマークの3カ国における市民参加によるバイオリージョンマップづくりの現況調査を行い、都市及び近隣農村地域での特徴を明確し、地域全体の生物多様性マップづくりの在り方を調査おこなった。対象地域の特徴及び歴史的な変化を明確にし、対象地域の生態系保全など地域の課題を俯瞰し、立場の異なる産官学民が意見を交わし、社会的合意形成を可能にする統合評価モデルを構築した。昨年度の研究成果に踏まえ、文献(洋書・和書)調査及びヒーリング、現地調査を主たる方法として作業を進行した。豊かな里山里地が残っている北九州市若松区を比較対象地域として、市民参加によるバイオリージョンマップづくりを実施し、都市及び近隣農村地域での特徴を明確し、地域全体の生物多様性マップを作成することを目的であってバイオリージョンマップづくり、地域イノベーション及びその活用方法に関しては地域の産業・行政・大学・市民に広く情報を公開し、意見を求めることが問題解決の基本であり、それぞれの立場、理解度、表現力は多様であり単純な方法では対応できない。
放射線感受性決定におけるプロテインキナーゼの関与

DNA依存性プロテインキナーゼ(DNA-PK)が放射線感受性の決定に関与しているか否かを検討する目的で、放射線高感受性で、照射後速やかに死に至るヒトリンパ性白血病由来MOLT-4細胞からDNA-PKの精製を試みた。低張液処理によって細胞を破壊し、単離した核を塩抽出した後、DNA依存的なα-カゼインのリン酸化を指標として、3段階のカラムクロマトグラフィー(イオン交換2回、DNAアフィニティー1回)により精製を行った。精製画分にはSDS-PAGEによる見かけの分子量350kDa,85kDa,および70kDaの3本のポリペプチド(p350,p85,p70)が含まれていた。このうち後2者は抗Ku血清に反応した。精製画分をさらにグリセロール濃度勾配遠心によりp350とp85/p70とに分離した。DNA-PKに特異的な基質を用いてp350とp85/p70のリン酸化能を検討したところ、リン酸化活性はp350で顕著で、p85/p70のみでは無視しうる程度であったが、p350とp85/p70が共存する場合にリン酸化能が大きく増強された。以上のことより、DNA-PKのリン酸化活性は、p350が担っており、p85/p70はその活性を増強する役割を果たしているものと推察された。一方、DNA-PKの細胞内での機能を探る一環として、DNA-PKの阻害剤が照射後の細胞死の発現に及ぼす影響について検討をおこなった。予備的な結果ではあるが、照射前に阻害剤を添加しておくことによって、色素排除能を指標とした死細胞の出現が早められる傾向が認められた。また、精製したDNA-PK各サブユニットに対する抗体の作製を試みた。抗体を得るには至らなかったが、今後も抗体作製を進め、得られた抗体を用いて、各サブユニットの量、存在様式等の細胞による違いを解析し、放射線感受性との関係につき検討を加える予定である。
インドネシアのコミュニティ・ポリシングについての地域社会学的研究

本研究企画から、近隣住民組織のまとまりの構造と、その応用としての、まちづくりと観光振興、多文化の共同へとつながるコミュニティ・ポリシングの様相を明らかにし得た。ここから導き出された議論のひとつに、コミュニティ・ポリシングがコミュニティによるポリシングであることの先に、排他的な分離主義ではなく、多様性から持続可能性へと至る水路として、ポリシングから他分野への融合可能性を担保することの重要性がある。平成20年度の研究目的は、(1)リスク社会論・監視社会論をはじめとした地域セキュリティの基本的な視角についての文献レビュー、(2)インドネシア語・オランダ語歴史資料の収集、(3)インドネシアへの支援についての国内研究、(4)警察民主化重点地域の活動についての資料収集であった。(1)文献レビューについては、近刊の共著(平成21年度公刊予定)として、リスク社会論と監視社会論についての議論をまとめた論考を書き上げた。実際の地域セキュリティ活動を東南アジアの文脈に即して理論的に整理したものはこれまでなく、新たな試みとして提示できる。(2)インドネシア語・オランダ語歴史資料については、京都大学東南アジアセンター(平成20年10月の研究会時)、国立ウダヤナ大学(平成20年12月バリ調査)、国立ライデン大学(平成20年8月オランダ調査・別経費使用)にて資料収集を行った。資料の読解・分析・整理といった作業は平成21年度に引き続き行う。(3)インドネシアへの地域セキュリティ支援についての国内研究に関しては、国際移住機関をはじめ、現在、調査対象者・資料の選定と把握・調整を行っており実際の調査は平成21年度に繰り越されることになる。(4)バリ島では平成20年12月調査時に、デンパサール市の広域地方警察にて調査対象・資料選定を行った。この調査の内容をシンガポールのフォーラムにて発表し、高い評価をうけ、Asian Journal of Social Scienceへの掲載依頼をうけた。さらに、平成21年3月にジャカルタに滞在し、ジャカルタ日本人会を起点として調査対象・資料の選定を行った。ジャカルタでの調査活動は平成21年度に調査対象を限定したかたちで実施される。州の観光警察プロジェクトと、デンパサール市の地域治安助成プロジェクト(BANKAMDES)ならびにその類型についての研究を行うため、対象地域として、a)デンパサール市の北部インナーシティに位置し、最も早くコミュニティ・ポリシングが取り入れられ成功を収めたI地区、b)西部インナーシティに位置し、ジャワ島からの多くのイスラム系移民を受け入れるU地区、c)爆弾テロの現場となり、自警活動がいっそう活況を呈しているK地区を設定した。そのうえで、それぞれの地域を、コミュニティ・ポリシングが、a)一般犯罪対策、b)多文化統治、c)爆弾テロとツーリズム資本といったテーマにおける地域セキュリティの典型例と位置づけた。このなかで、b)をより適切かつ端的な事例として析出するため、テーマはそのままに、対象地域を国際空港に近く、いっそうの他文化状況をみせるT地区へと変更した。調査は平成21年6月、12月から平成22年1月の二回を実施し、市・郡警察、市民警察パートナーシップ・センターを中心に、コミュニティ・ポリシング担当官、BANKAMDES成員への聞き取りと、パートナーシップ・フォーラムの議事録、それぞれの特定問題事項解決の事例についての一次資料を収集した。州レベルのプロジェクトとしては、州警察において「安心なまちづくりプロジェクト」を推進している、JICAの現地警察改革支援プログラム専門員から資料提供を受けた。あわせて、調査結果を二回の国際学会(シンポジウム)にて報告する機会を得た。こうした研究活動のなかで、今後、治安の動的な技術たるコミュニティ・ポリシングと比較し、静的な技術たるゲーテッドコミュニティについて研究を敷衍する手がかりを得ることができた。バリ島の町村レベルの自警団についての研究を進める中で、一連の締めくくりとして、国際学会と国際シンポジウムでの報告を行った。本研究企画の中心的な対象地区となったS地区からは、近隣住民組織のまとまりの構造と、その応用としての、まちづくりと観光振興へとつながるコミュニティ・ポリシングの様相を明らかにし得た。このことを仮説命題として、より多文化的な要素をもつT地区のコミュニティ・ポリシングについての研究に歩を進めた。T地区は国際空港を囲むように存在する地区であり、世界的に有名な観光地区の背景を成す。すなわち、T地区は、観光地区における労働力・労働手段・生産物といったものがストックされ、同時に、空港の騒音や観光地区の下水を一身に受ける場所である。この地区の改良にむけたまとまりをつくる手法のひとつがコミュニティ・ポリシングであった。今後、移民労働者についてのより詳細な研究が必要とされるものの、現段階において、先の仮説について一定の検証が可能となり、コミュニティ・ポリシングについての地域社会学的可能性を提示し得た。3年間の研究の成果として、当初、現地に於いて国際シンポジウムを企図していたが、中心スタッフの異動が重なり実行不可能となったため、代替として、国際学会での報告、国際シンポジウムでの招待講演での報告を行った。

今後の研究の展開として、先に挙げた移民労働についての研究と共に、国際学会報告からは居住における地域セキュリティのシステムとしてゲーテッド・コミュニティ、国際シンポジウムからは日本における町内会の活動との比較研究が示唆された。
電気化学的なプロトン注入とH+ダイナミクスの解明及びガラスの新機能発現（国際共同研究強化）

高いイオン伝導性と化学的耐久性を両立する一つの手法としてイオン伝導相とマトリックスの分相が指摘され、市販の高分子形燃料電池の電解質や超イオン伝導性ガラスも分相することが知られている。音響解析より得られるヤング率や内部摩擦に着目して、スピノーダル分相組成のリン酸塩およびホウ酸塩ガラスの分相過程を調べた。ホウ酸塩ガラスのヤング率は加熱に伴いはじめ上昇して、ガラス転移温度より200°C近く低い260°C辺りに内部摩擦の極大値を観測した。この温度で示差走査熱量分析(DCS)および熱膨張(TMA)測定においても極めてわずかながらベースラインの傾き変化を確認した。Tg以上の温度域において温度一定で数100時間保持したところ、弾性率は数時間程度で一定に達した。3配位/4配位ホウ素の比は分相に伴い変化することが知られている。ラマン分光測定よりホウ素配位数の変化を調べたところ、弾性率の変化と同程度の時定数で3配位/4配位の変化することを確認した。処理時間と供に分相組織は粗大化すると考えられるが、弾性率や内部摩擦からそのような傾向は認められなかった。他方、温度一定で長時間保持すると弾性率と内部摩擦はいずれも上下におよそ一定周期でゆらぐことが認められ、この周期や振幅は温度上昇に伴いわずからながら短く、また大きくなった。高いイオン伝導性のためには加熱が必要で、特にガラス転移温度前後における長期間の力学挙動と分相構造の変化、またイオン導電率を明らかにすることは重要であり、ガラス転移温度以下で保持した場合などの詳細について引き続き調べている。内定年度:2015プロトン(H+)が材料中に導入されると、金属・無機・有機材料のいずれも力学特性などが大きく変化することが知られている。材料へのH+注入は高温水素雰囲気での熱処理やイオン加速器によるH+照射が一般的であり、これらの方法ではH+注入とともに力学特性などがどのように時間変化するか定量的にその場計測することは難しい。本研究では独自の装置開発を通じて電界を利用したガラスへのH+注入ダイナミクスを評価している。ガラスのプロトン(-OH基)濃度は赤外分光法により、またH+注入に伴う力学物性変化は圧子圧入法より調べている。いずれの評価も水素ガス中でガラスに通電することでH+を注入して、そのときのH+濃度と力学応答をその場解析可能である。これまでにH+濃度の時間変化の解析から、H+注入が一次反応であることを明らかにした。またH+注入にはわずかでも水分(相対湿度換算で0.1%以下)が不可欠であった。レンヌ第一大学(フランス)と共同で特にH+注入時のガラスの機械的な応答を定量解析することに着目している。従来の時間依存型の粘弾性構成方程式にH+の拡散を加味することで、H+注入によるガラスの構造変化を理論検証する。これまでにH+注入条件下でクリープ変位(荷重一定条件における圧入深さの変化)の測定より、非注入時と比較してクリープ変位が著しく大きくなることを確認した。粘弾性構成方程式より単一成分の緩和を仮定して変位の時間変化を解析したところ、H+注入条件であるか否かに関わらず加湿によって前項因子が変化し、他方、プロトン注入条件では緩和の時定数τが増大することを明らかにした。従来から知られる「水の吸着」によるガラスの構造変化とプロトン注入によるものとを区別して議論できると考えられる。水素脆化やガラスの応力腐食メカニズムの解明や新たなH+伝導性電解質の創成など波及効果の高い成果になると期待される。H+注入ダイナミクス解析に必要な反応速度定数やクリープ緩和時定数などの実験データ取得が当初計画通りに進んでおり、またH+注入に伴うクリープ変位の増大などこれまで報告例の無い結果も得られている。今後は粘弾性構成方程式にH+拡散の効果を加味して、H+がガラスにどのように拡散して、その結果生じる構造緩和を時間の関数として理論に基づき解析する。また国内共同研究者と海外共同研究者との共同研究推進を促す目的で、2017年8月にH+注入活性に関する小規模シンポジウムを開催する。本研究(国際共同研究強化)の主旨を十分理解し、申請者自身が国内共同研究者と海外機関とのハブとして連携強化を図ることで、将来のH+導入技術の幅広い応用展開に繋げる。他方では本国際共同研究加速の目的より、ガラス(酸化物)の機械的特性の評価から派生して、機械的衝撃による酸化物の構造変化をエルランゲン・ニュルンベルク大学(FAU,ドイツ)と調べる機会を得た。酸素欠陥生成の時間発展を理論的に導き、一例としてZnOに対して表面欠陥を利用したアニオン(S)ドープを示した。研究者ネットワークが広がっており、計画が順調に推移していると判断した。一般に酸化物ガラス内のプロトン(-OH基)濃度は極めて低いものの、水素雰囲気中で白金など水素解離活性を有する電極を用いて通電すると、リン酸ガラス内部のOH基濃度が時間とともに増加し、またプロトンに随伴して注入される水分子(H3O+)が-OH基濃度上昇に不可欠であることを昨年までに明らかにした。同様のH+注入は水素濃淡電池や燃料電池評価時にも見られ、電極間の電気化学ポテンシャルがH+注入の駆動力となる。他方、プロトン注入によってガラスの粘弾性特性が大きく変化することを独自の電気化学圧子圧入試験機を用いて明らかにした。

高いイオン伝導性と化学的耐久性を両立する一つの手法として伝導相とマトリックスの分相が指摘され、市販の高分子形燃料電池の電解質や超イオン伝導性ガラスも分相することが知られている。本研究で取り扱っているリン酸塩ガラスのうち、伝導性の高いガラスはスピノーダル分相を示す傾向があるが、プロトン注入と分相構造との関係はわかっていない。ガラスの力学特性評価で充実した設備環境を有するレンヌ第1大学において分相進展と力学特性変化、またそれらのイオン伝導性との関係を主に音波に着目して調べたところ、分相過程、およびスピノーダルとバイノーダル成長によって音速の減衰速度や共鳴周波数に特徴的な変化を観測した。同様にガラスのアニール(応力緩和)とイオン伝導性との関連性について、交流電場下での高温ヤング率の時間変化より調べる装置を起ち上げた。先行した電気化学圧子圧入試験機を用いたインピーダンス測定より、応力下でのイオン導電率の関係についてデータが得られている。ガラスの応力緩和・分相進展とイオン伝導性との関係を引き続きレンヌ第1大学で調べており、分相構造を制御できればプロトン導電率の上昇に繋がると考えられる。プロトン注入速度の解析と並行して、ガラス緩和や分相とイオン伝導性との相関などの解析、またプロトン注入速度とクリープとの関係に関する数値解析等も予定通り着実に進めている。国内共同研究者と海外共同研究者との連携強化の目的で、2017年8月に予定通りH+注入活性に関するシンポジウムを開催し、face to faceで有意義な議論ができた。今後も本研究(国際共同研究強化)の主旨を十分理解し、国内研究者と海外機関とのハブとして連携強化を図っていく。他方では、国際共同研究加速の目的より、ガラスへの応力付加と機械的特性評価から派生して、エルランゲン・ニュルンベルク大学(FAU,独)との連携も続いており、成果を論文としてまとめた。研究者ネットワークが継続して広がっており、計画が順調に推移していると判断した。高いイオン伝導性と化学的耐久性を両立する一つの手法としてイオン伝導相とマトリックスの分相が指摘され、市販の高分子形燃料電池の電解質や超イオン伝導性ガラスも分相することが知られている。音響解析より得られるヤング率や内部摩擦に着目して、スピノーダル分相組成のリン酸塩およびホウ酸塩ガラスの分相過程を調べた。ホウ酸塩ガラスのヤング率は加熱に伴いはじめ上昇して、ガラス転移温度より200°C近く低い260°C辺りに内部摩擦の極大値を観測した。この温度で示差走査熱量分析(DCS)および熱膨張(TMA)測定においても極めてわずかながらベースラインの傾き変化を確認した。Tg以上の温度域において温度一定で数100時間保持したところ、弾性率は数時間程度で一定に達した。3配位/4配位ホウ素の比は分相に伴い変化することが知られている。ラマン分光測定よりホウ素配位数の変化を調べたところ、弾性率の変化と同程度の時定数で3配位/4配位の変化することを確認した。処理時間と供に分相組織は粗大化すると考えられるが、弾性率や内部摩擦からそのような傾向は認められなかった。他方、温度一定で長時間保持すると弾性率と内部摩擦はいずれも上下におよそ一定周期でゆらぐことが認められ、この周期や振幅は温度上昇に伴いわずからながら短く、また大きくなった。
軟骨内骨化制御因子cGK2の分子シグナルの解明と骨軟骨再生医療に向けての機能解析

cGKllは、ヒトにおいてもマウスにおいても骨成長に重要であることが知られているCNP/cGMPシグナルの下流に位置するキナーゼであり、そのキナーゼ活性を喪失した自然発症型変異ラットKMlは軟骨細胞の肥大分化障害によって四肢短縮を呈する。cGKllの標的遺伝子の同定する研究では、軟骨肥大化関連分子の中からcGKllのリン酸化標的をスクリーニングしたところ、古典的Wntシグナル関連分子であるglycogen synthase kinase-3β(GSK3β)が強力にリン酸化されその活性が抑制された。軟骨細胞株ATDC5にcGKllを過剰発現した場合も、GSK3β活性阻害剤であるLiClを添加した場合もCOL10の発現は強力に誘導されたが、cGKllによってリン酸化を受けない恒常活性変異型GSK3β(GSK3βS9A)を共発現させるとcGKllによる肥大分化は抑制された。また、cGKll過剰発現はβ-cateninの分解を抑制して核内への移行を誘導し、同時にTCF promoter活性を上昇させたが、これらはすべてGSK3βS9Aの共発現によって回復した。続いてcGKll欠損マウス(cGKll-/-)の骨軟骨を解析すると、軟骨細胞肥大化の障害による成長板の増高と四肢の短縮が見られた。一方、GSK3β-/-マウスは胎生致死であったがGSK3β+/-マウスは正常に成長した。そこでcGKll-/-にGSK3β+/-マウスを交配してダブルノックアウトマウス(cGKll-/-;GSK3β+/-)を作出したところ、cGKll-/-の成長板増高と成長障害が有意に改善された。cGKllはGSK3βをリン酸化・不活化することによって古典的Wntシグナルを活性化し、生体内での成長板軟骨細胞の肥大化による骨成長を制御していることが示された。軟骨分化におけるCNPシグナルとWntシグナル間の分子ネットワークの存在が明らかとなった。本研究は国内外の学会で発表し、高い評価を受けた(日本骨代謝学会優秀演題賞、米国骨代謝学会Young Investigator Award、豪州ニュージーランド骨代謝学会Outstanding Abstract AwardおよびYoung Investigator Award)。軟骨特異的cGKllコンデイショナルノックアウトマウスおよび軟骨特異的cGKllトランスジェニックマウスの作出については、ターゲテイングベクターはすでに構築済みであり、現在cGKll floxマウスおよびcGKllトランスジェニックマウスを作出中である。cGKII遺伝子欠損マウスは軟骨内骨化障害をきたす。我々はcGKIIが軟骨の肥大分化への分子スイッチとして軟骨内骨化に重要な役割を果たすことを解明した。今年度はcGKIIの軟骨肥大分化をさらに詳細に検討するために以下の研究を行った。cGKIIアデノウイルスの作成については、作成はすでに終了し、使用できる状態である。軟骨特異的cGKIIコンデイショナルノックアウトマウスの作出については、ターゲテイングベクターはすでに構築済みであり、現在cGKII floxマウスを作出中である。軟骨特異的cGKIIトランスジェニックマウスの作出についても、II型コラーゲンのプロモーターの制御下に構成活性型cGKII遺伝子を挿入したトランスジーンの構築は終了しており、現在cGKIIトランスジェニックマウスを作出中である。

本研究は国内外の学会で発表し、高い評価を受けた(日本骨代謝学会優秀演題賞、米国骨代謝学会Young Investigator Award、豪州ニュージーランド骨代謝学会Outstanding Abstract AwardおよびYoung Investigator Award)。軟骨特異的cGKllコンデイショナルノックアウトマウスおよび軟骨特異的cGKllトランスジェニックマウスの作出については、ターゲテイングベクターはすでに構築済みであり、現在cGKll floxマウスおよびcGKllトランスジェニックマウスを作出中である。
中国雲南省少数民族の伝統薬物調査とその有効利用に関する研究

本研究は,中国雲南省において現在でも用いられている少数民族薬について,その原植物,利用部位,利用方法,利用目的(病気等),およびその民族薬に関する諸情報の収集と,収集された材料の解析を進めることによるそれら薬物の有効利用を目的としている。15年度は雲南省東南部(金平,文山周辺),16年度は雲南省西部保山市・臨滄地区および思茅地区,17年度は雲南省南西西双版納俸族自治州および思茅地区西部において調査を展開した。調査方法として1.少数民族の多く居住する集落に赴き,そこで開催されるバザール(交易会)や市場において販売されている民族薬について,販売人に直接インタビューしてその来歴や使用方法,使用目的に関する情報を収集した。2.少数民族居住地域の民間医を尋ね,彼らが使用する薬物について直接インタビューしてその使用方法,使用目的に関する情報を収集した。入手可能な薬物に関してはいずれの場合も標本とし,中国科学院昆明植物研究所で起原の同定を行った。3回の調査で得られた伝承薬,民族薬の情報は合計797種で,そのうち520種については植物または動物種の同定が終了した。3回の調査で対象とした民族はタイ族,ラフ族,ハニ族,イ族,ミャオ族,ヤオ族,ペー族,プーラン族,ワ族,チノ族で,それ以外に漢族の民間薬に関しても情報を得ることができた。薬用植物の中には異なる民族間で使用されているものも多く見られ,その使用目的は同一であるとは限らないことがわかった。また,いくつかの民族では複方として利用しているケースがあり,民間医療が継承されている実例として興味深い。また,治療対象となる疾病にはリウマチ,肝炎,眼病,肺結核と多岐にわたっている。今回得られた情報に関しては動画記録として保管しており,また,写真を徳島大学薬学部,さく葉標本および生薬標本を中国科学院昆明植物研究所にて保管している。本年度は雲南省東南部の紅河哈尼(ハニ)族彝(イ)族自治州,ならびに文山壮族苗族自治州における調査を展開した。調査方法ならびに結果の概要は次の通りである。1.少数民族の多く居住する集落に赴き,そこで開催されるバザール(交易会)や市場において販売されている民族薬について,販売人に直接インタビューしてその来歴や使用方法,使用目的に関する情報を収集した。さらに,それらの民族薬を購入し,共同研究者である中国科学院昆明植物研究所の協力のもと,植物学的に同定した。また,採集可能な植物に関してはさく葉標本として,同研究所にて植物種の同定を行った。入手可能な薬物に関しては標本とし,現植物の同定を行った。今回の調査では得られた伝承薬,民族薬の情報は310種に上り,そのうち230種については植物種の同定が終了した。対象とした民族は泰(タイ)族(収集した民間薬8種,以下同じ),拉〓(ラフ)族(12種),哈尼族(32種),彝族(20種),苗族(142種),瑶族(26種)で,それ以外に漢族の民間薬に関しても情報を得ることができた。

また,彝族,瑶族の伝承薬においては複方として利用しているケースが多く,民間医療が継承されている実例として興味深い。また,治療対象となる疾病にはリウマチ,肝炎,眼病,肺結核と多岐にわたっている。今回得られた情報に関しては動画記録(デジタルビデオならびにDVD)として保管しており,また,写真を徳島大学薬学部,さく葉標本および生薬標本を中国科学院昆明植物研究所にて保管している。今回調査の対象とした地域は雲南省西部保山市・臨滄地区(鳳慶県,臨滄県,双江拉〓族布朗族〓族自治県,耿馬〓族〓族自治県,滄源〓族自治県)および思茅地区(鎮〓彝族哈尼族拉〓族自治県,普〓哈尼族彝族自治県,思茅市)で,この地域に居住する主な少数民族はペー(白)族,イ(彝)族,プーラン(布朗)族,ワ(〓)族,タイ(〓)族,ラフ(拉〓)族である。各民族の密集する居住地に行き,以下の方法で情報を収集した。なお,採集した生の薬物はさく葉とし,乾燥品はそのまま標本とした。これらは中国科学院昆明植物研究所および徳島大学薬学部で保管している。1.民族薬市場で売られている薬物を収集し,その売人に採集場所,効能,使用法などをインタビューする。可能であれば,売人にその採集場所を案内してもらう。2.民族薬の知識が豊富な人物を訪ね,使用している薬物,効能,使用法などをインタビューする。収集できた薬物情報は全部で344件で,そのうち178種類の薬物については種または属の同定が終了した。このうち,4種は動物起原,2種は製剤であった。民族別に収集した薬物を見るとワ族,ラフ族,プーラン族からの情報が多く,さらに昨年の東南部における調査とは異なり漢族からの情報も多く得られた。今回調査した雲南省西部は民族衣装を着用した人もほとんどなく,民族色の強い東南部とはかなり状況が異なっていた。市場には省外(四川省など)から漢薬を売りに来ている人も多く見られ,また,市場によっては民族薬をほとんど売っていないところもあった。今回調査の対象とした地域は雲南省南西西双版納〓族自治州および思茅地区西部(瀾滄拉〓族自治県,孟連〓族拉〓族自治県)で,この地域に居住する主な少数民族はチノ(基諾)族,ラフ(拉〓)族,タイ(〓)族などである。収集できた薬物情報は全部で143件で,そのうち112件について種の同定が終了した。今回収集した薬物は全て植物起原であった。民族別に収集した薬物を見るとタイ族からの情報が多く,さらに昨年の西部における調査と同様に漢族からの情報も多く得られた。また,この地域にしか居住しない比較的珍しい民族であるチノ族薬物の情報も収集できた。薬物の使用形態としてはこれまでと同様に多くは配合処方であり,使用目標としては骨折,舒筋といった外傷に対する治療薬が目立った。