hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
ウイルスが生み出す新しい抗原レパートリー「リポペプチド」の免疫パラダイムの確立

平成24年度は、リポペプチド抗原提示を担う分子機構の解明に向けて、以下の研究を展開した。1.特異的T細胞株の解析より、リポペプチド抗原提示分子は少なくともサル単球上に発現していることが分かっている。そこで、サル単球を免疫原として、マウスあるいはラットへの免疫を行った。脾臓細胞あるいはリンパ節細胞を回収し、ミエローマ細胞と細胞融合することにより、多数のモノクローナル抗体産生ハイブリドーマクローンを作製した。そして、この中から特異的T細胞株の応答を阻害する抗体のスクリーニングを行った。その結果、得られた阻害活性を持つ抗体群は、抗インテグリン抗体および抗MHCクラス1抗体に大別されたことから、リポペプチド抗原提示を担う接着分子および抗原提示分子について重要な知見が得られた。2.リポペプチド抗原(Cl4nef5-mer抗原)のペプチド配列あるいはアシル鎖長に様・々な変異を入れたアナログを合成し、その抗原活性を評価した。次に、抗原活性が見られなかったアナログについて、Cl4nef5-mer抗原との競合実験を行った。その結果、リポペプチド抗原提示には少なくとも以下の2タイプの様式があると考えられた(Morita et al. J.Virol. 2013)。a)ペプチド長は5残基を必要とし、リポペプチドのアシル鎖とN末端から5残基目(C末端)のアミノ酸残基が抗原提示分子へのアンカーとして機能する。そして、N末端から2残基目と4残基目のアミノ酸側鎖はT細胞による認識に重要な役割を果たしている。b)ペプチド長は4残基を必要とし、リポペプチドのアシル鎖が抗原提示分子へのアンカーとして機能する一方、N末端より5残基目のアミノ酸残基は不要である。N末端より4残基目のアミノ酸が、抗原提示分子への結合あるいはT細胞による認識のどちらか、あるいは両方に必須の役割を果たしている。
公害・環境教育の成立史研究-四日市における公害教育の位相の検討をとおして-

本研究は、現在の環境教育の理論や実践のための基礎研究である。まず、公害・環境教育の重要事例のひとつである「四日市の公害教育」を「四日市公害史」および「全国的な公害教育史」から捉え直すため、四日市を含む4大公害裁判地において資料収集やインタビュー調査を実施した。また、四日市市立塩浜小学校において1964年以降実践されてきた健康教育および在日韓国・朝鮮人教育に関して詳細に明らかにした。報告者は、これまで「四日市の公害教育」の戦後数十年間の変遷について、現地調査をもとに調査研究を行ってきた。この研究の視座を広げるため、20年度は特に「四日市公害史」全体から「四日市の公教育」を捉え直すことを研究目的とし、行政面や運動面の資料収集やインタビューを行い、検討した。行政面では、三重県レベルの資料収集と分析を行った。比較的収集しやすい機関から収集し、現在は県庁などにおいて年代の古い順から収集を継続しており、順に分析している。運動面では、裁判の際、被害者支援団体として最も力を発揮した四日市市職員労働組合が所蔵する公害関係資料をすべてコピーし、順に検討したり、関係者にインタビューしたりしている。業績としては、四日市公害全体にかかわる研究として、下記「11.研究発表」に記した共著に中間的な成果を出した。また、一橋大学の先生方との共著で、21年度刊行予定の『地球環境の未来を創造する』(島崎隆編、労働旬報社)への原稿を準備中である。公害激甚地に位置する四日市市立塩浜小学校の教育実践の変遷を、四日市公害史全体から捉え直す論文である。21年度は、三重県に関する研究を継続するとともに、四日市以外の四大公害裁判のあった富山と水俣地域の「公害教育」について調査研究する予定である。このうち、報告者の居住する石川県のとなりの富山では、20年度に「日本環境学会」の大会が開催され、報告者は実行委員として活動した。この過程で、イタイイタイ病研究に係わっている地元富山の研究者たちと知り合いになれ、被害者団体とも交流したり、神岡鉱山の見学に行くなど、21年度の計画を先行的に実施しており、水俣も加えて引き続き研究を深化させたいと考える。報告者は、「四日市の公害教育」の戦後数十年間の変遷について研究を行ってきた経緯がある。この研究の視座を広げる目的で、四日市以外の地域の公害教育を調査研究し、比較検討したいと考えている。21年度は特に水俣と富山の公害教育に関して資料収集やインタビュー調査などを実施した。その結果、戦後から現在までの2つの公害教育の変遷が判明し、現在論文作成中である。富山市では、イタイイタイ病を扱った公害教育実践が非常に少なかったことが判明した。例えば、戦後の社会科の地域学習のための小学校副読本においては、イタイイタイ病の記載が現在に至るまで全くなく、中学校では2000年代からようやく36ページ中、半ページ強のみ記載されるようになった。組合での公害教育研究もほとんどないが、70年前後に公害裁判の傍聴をしたり、勤務先の中学校でイタイイタイ病を熱心に取り入れた教師がたったひとり存在しており、この方にインタビューを実施した。一方の水俣では地域学習のための社会科の副読本そのものはない。しかし、市内の小・中学校では、70年代から一斉に水俣病の授業を毎年実施してきたという。水俣ではこの40年間、公害教育がタブー視されることはなかったものの、教員によって取り組み内容に差があるという。市全体の取り組みの原動力となったのは、70年代前半の結成以来、水俣病を積極的に学校で教えることを推進してきた現地の民間教育団体「芦北・水俣公害教育サークル」の教師たちである。彼らにインタビューを実施したり、サークルが発行している資料などをコピーさせていただいた。21年度の研究業績としては、一橋大学の先生方との共著として、土井妙子「もうひとつの公害教育-四日市市立塩浜小学校における健康教育実践-」(島崎隆編著『地球環境の未来を創造する-レスター・ブラウンとの対話-』旬報社、2010年3月)がある。この続編も紀要などに書く予定である。報告者の長年の研究テーマである「四日市公害と教育」の視座を広げる目的で、H2122年度は、4大公害裁判の提訴された、四日市以外の地域の公害教育に関して調査を実施した。今年度は主に新潟調査を実施し、現在論文作成中である。なお、H21年度から22年度にかけて、四日市市立塩浜小学校における健康教育および在日韓国・朝鮮人教育に関して調査研究を深め、下記の「研究発表11[雑誌論文]」に成果を出すことができた。また、現在投稿中の拙著「四日市市立塩浜小学校における在日韓国・朝鮮人教育に関する一考察」(金沢大学教育実践センター紀要、2011年9月発行)も今後の成果予定としてある。塩浜小校区は、公害被害激甚地であり、市内で最も公害病認定児童が多かった。この公害被害に対応した教育実践を明らかにすることは、四日市研究にとって重要な課題であったが、一旦区切りがついた。同校においてS39年からはじまった健康教育は、大気汚染の一定程度の改善とともに約30年後に後退した。

この後退期前のS59年から、在日韓国・朝鮮人教育が開始され、在日児童が在籍しなくなったH16年頃まで市内で最もさかんに実践された。ともすると論争的な教育実践が当然のことのように導入され、発展したのは、S39年から継続してきた健康教育が、児童の生命や健康を守るという原初的な人権教育であり、出自を隠して生きる在日たちのアイデンティティ・クライシスに対応した在日のための人権教育と目的に連続性があったためである。また、当地には同和教育の地道な実践の歴史があったこと、このため塩浜小の教員たちはあらゆる差別に対峙する「同和教育」として実践していたことも資料から明らかになった。なお、三重県内の在日韓国・朝鮮人教育に関する学術論文は管見の限り拙稿のみであり、この分野の知見も前進させることができたといえる。
多階層医工学的解析に基づくメカニカルストレスを利用した心機能維持の分子基盤の解明

心不全に至る原因や過程は一様ではないが、唯一、高血圧などの血行動態負荷は共通の引き金である。しかしながら、心筋細胞の機械刺激受容機構は未だ解明されておらず、その生理的役割や心肥大・心不全発症メカニズムが明らかにされていない。本研究では、心筋細胞のメカノセンサー分子を核として、『メカニカルストレスを利用した心機能維持の分子基盤』を明らかにし、新しい心不全治療戦略を提案することを目的としている。我々は、これまでに、成体マウスの心臓において、このメカノセンサー分子を発現抑制したコンディショナルノックアウトマウスは、重篤な心不全を呈することを明らかにし、この分子が心機能や構造の維持に必須であることを明らかにしてきた。昨年度は、メカノセンサー分子をノックアウトした心臓を用いてマイクロアレイ解析を行い、心筋細胞でのどのような遺伝子の発現変化が心不全へと移行する引き金となるかを調べた。本年度は、マウス新生児培養心筋細胞の研究から、メカノセンサー分子は、同調拍動する心筋細胞へと分化する過程において必須であることを、分子レベルで明らかにした。さらに、幼若期からメカノセンサー分子を欠損させたマウスの心機能や心筋細胞機能解析を行い、心筋細胞や心臓の分化におけるメカノセンサーの役割を明らかにした。マウス新生児培養心筋細胞の研究から、メカノセンサー分子は、同調拍動する心筋細胞へと分化する過程において必須であることを、生理学・分子生物学・形態学的観点より多方面から解析した。さらに、幼若期からメカノセンサー分子を欠損させたマウスの心機能や心筋細胞機能解析を行い、心筋細胞や心臓の分化におけるメカノセンサーの役割を明らかにしたため。今後は、心筋細胞同士の接触や、収縮によって隣接した細胞から入力するメカニカルストレスによって、メカノセンサー機能がどのような影響をうけるかについて検討したい。本年度は、メカノセンサー分子をノックアウトした心臓を用いてマイクロアレイ解析を行い、心筋細胞でのどのような遺伝子の発現変化が心不全へと移行する引き金となるかを調べた。この結果、メカノセンサー分子の欠損は、興奮収縮連関に関わるCa2+輸送体の発現低下を引き起こすことが明らかとなった。また、培養心筋細胞を用いて、心筋細胞の成熟過程を観察したところ、メカノセンサー分子の欠損は、興奮収縮連関を獲得することができずに、周囲の細胞と同調拍動を示さない未成熟な細胞となった。この結果から、メカノセンサー分子は、心筋細胞の興奮収縮連関に伴うCa2+ハンドリングを維持するために欠かせない分子であることが明らかとなってきたところである。筋成熟や維持におけるメカノセンサーの生理的役割が明らかになってきており、これらをまとめ出版の準備中であることから、当初の計画通りにおおむね順調に進展していると判断した。今後も引き続き、当初の計画に従って、データを蓄積していう予定である。また、国内外の共同研究者と協力して、メカノセンサー分子の心臓以外での役割も明らかになりつつあり、さらなる発展が期待できる。
東アジアにおける円通貨圏形成に関する実証研究

平成13年度は2つの研究論文の執筆に専念した。その過程で、研究補助を雇って実証研究のためのデータ収集とその入力。整理も行った。また、平成12年度に作成した論文の学術誌への投稿も引き続き行った。平成12年度は、研究補助を雇って実証分析のためのデータ収集・整理を行うと同時に、その研究成果を学会で報告し、さらにレフリー制の学術雑誌への投稿を行った。2)平成12年度中に、1)に加えて次の二つの論文作成に取り掛かっている。整理も行った。
養殖ウシエビの体色発現機構に関する研究

養殖ウシエビの体色改善法を確立することを目的として、ウシエビ外骨格および筋肉上皮中のカロテノイド、カロテノプロテインの分析を行い、ウシエビの体色発現機構の解明を試みた。まず、様々な体色を呈するウシエビ外骨格中のカロテノイドの含量および組成を分析した。含量は2.333.1mg/100gと体色の濃いエビ程高い傾向が見られた。主なカロテノイドはアスタキサンチンで、ジエステル型、モノエステル型、遊離型の3形態が存在した。次いで、ウシエビ外骨格中のカロテノプロテインの単離・精製を行い、分子量約120kDaの遊離型アスタキサンチンを含む濃青色カロテノプロテインを得た。それに対し筋肉上皮からは、コラゲナーゼ処理により分子量21.4kDaの遊離型アスタキサンチンを含む濃青色カロテノプロテインを抽出した。最後に暗灰色および青色のウシエビの筋肉上皮につき、コラゲナーゼ処理により抽出されるカロテノプロテインと、残存するカロテノイドの含量・組成を比較した。カロテノプロテイン画分は遊離型アスタキサンチンを含み、その含量は暗灰色および青色の試験群間で大差なく、いずれも濃い青色を呈した。一方、青色カロテノプロテインを除いた後の筋肉上皮は、従来の着色部位が赤色を呈し、暗灰色試験群でその色調が濃厚であった。対応して、残留カロテノイドの主成分であるアスタキサンチンエステルは、暗灰色群で青色群の約6倍多く含まれていた。以上のことから養殖ウシエビの多様な体色は、共通の青色カロテノプロテイン画分および赤色のアスタキサンチンエステル画分の存在比の相違によって生じることを明らかにすることができた。東南アジア諸国で養殖された様々な体色を示すウシエビについて外骨格中のカロテノイド含量および組成を分析した。カロテノイド含量は外骨格100g当たり2.3mg33.1mgと幅があり、体色が濃いエビで高く、"blue"と呼ばれる体色の青いエビでは低い傾向が見られた。体色の濃い個体ではモノエステル型の割合が高く、アスタキサンチン以外のカロテノイドとしてβ-カロテンと4-ケトゼアキサンチンも存在した。体色の青いエビではアスタキサンチン以外のカロテノイドは検出されず、遊離型のアスタキサンチンが主成分であった。したがって青い個体の体色発現には、遊離型のアスタキサンチンの寄与が大きいものと考えられた。甲殻類の外骨格に存在する遊離型のアスタキサンチンの一部は、カロテノプロテインとして存在することが知られている。そこでウシエビの外骨格に存在するカロテノプロテインの諸性状を明らかにすることを試みた。外骨格からリン酸緩衝液により、カロテノプロテインを抽出し、イオン交換クロマトグラフィー、高速ゲルろ過により単離精製を行った。このカロテノプロテインはリン酸緩衝液中で615nmに最大吸収を持ち、濃い青色を呈した。ゲルろ過およびPAGEにより求められた分子量は約120kDaであり、SDS-PAGEにより22.4kDaおよび21.4kDaの2種のサブユニット3つずつから成ることが分かった。また、発色団として1分子中2分子の遊離型アスタキサンチンを含んでいた。養殖ウシエビの体色の発現には外骨格中の色素とともに、筋肉上皮の色素が大きく寄与することが観察された。そこで、筋肉上皮中に存在するカロテノプロテインをコラゲナーゼ処理により抽出し、その諸性状を検討した。このカロテノプロテインは濃青色を呈し、分子量はゲルろ過により21.4kDaと算定された。

また、SDS-PAGEでは22.9kDaの単一のバンドのみが見られた。構成カロテノイドとしては遊離型アスタキサンチンのみを含んでいた。次に体色が暗灰色および青色を呈するエビの筋肉上皮につき、コラゲナーゼ処理により抽出されるカロテノプロテインと残存するカロテノイドの含量・組成を比較した。カロテノプロテイン画分は主として遊離型アスタキサンチンを含み、その含量は暗灰色および青色の試験群間で大差なく、いずれも濃い青色を呈した。一方、青色カロテノプロテインを除いた後の筋肉上皮は、両試験群ともコラゲナーゼ処理前に着色の認められた部分が赤色を呈したが、当初、暗灰色であった試験群でその色調が濃厚であった。対応して、残留カロテノイドの主成分と同定されたアスタキサンチンエステルは、暗灰色群で青色群の約6倍多く含まれていた。このことから養殖ウシエビの暗灰色の体色は、カロテノプロテインの青色とアスタキサンチンエステルの赤色の重ね合わせにより発現することが示唆され、養殖ウシエビに見られる体色の多様性はは、異なる色素によるものではなく、共通の青色カロテノプロテイン画分および赤色カロテノイド画分の存在比の相違によって生ずることが明らかになった。
代謝型グルタミン酸受容体ノックアウトマウスを用いた小脳長期抑圧の研究

mGluR1トランスジェニックマウスをmGluR1(-/-)マウスとかけ合わせ、mGluR1がプルキンエ細胞で特異的に発現し、失調歩行が殆ど見られなくなったマウス(L7-mGluR1)を作成した。L7-mGluR1マウスではmGluR1α抗体を用いた免疫染色によりプルキンエ細胞特異的にmGluR1αを発現していることを確認し、mGluR1(-/-)マウスで見られる失調歩行がプルキンエ細胞でmGluR1が欠失したことによることが明らかとなった。L7-mGluR1マウスの協調運動能をrotorodを用いて検討したところ、L7-mGluR1マウスではmGluR1(-/-)マウスに比べ明らかな改善が見られたが、野性型と比較するとローラーの上に留まっている時間が短く、プルキンエ細胞以外のmGluR1の機能がこの協調運動には必要である可能性がある。登上線維の多重支配はL7-mGluR1マウスではmGluR1(-/-)マウスと同程度に残っていた。したがって、登上線維の多重支配が失調歩行の原因になっていることはないことがわかった。また、活性型突然変異を導入したGタンパク質Gα11をプルキンエ細胞特異的に発現するトランスジェニックマウス(L7G)では小脳の発達に異常があり、calbindin抗体による免疫組織によりプルキンエ細胞が、21生日(P21)では脱落していることが明らかになった。また、プルキンエ細胞が比較的残存しているP14での電顕によるプルキンエ細胞-平行線維シナプスの解析では既にプルキンエ細胞-平行線維シナプスの数が大幅に減少していることが明らかとなった。
オートファジー選択的基質p62を標的とした新しい大腸癌治療法の開発

国内の大腸癌患者はこの30年間で約6倍に急増し、死亡者数は男性では肺癌、胃癌についで第三位、女性では第一位であり、有効な治療法の開発が切望されている。癌細胞においてオートファジー(以下Atp)を阻害すると細胞増殖が抑制されることから、抗癌剤とAtp阻害剤を併用して効率的に癌細胞を死滅させる治療法が考案されている。しかし、Atpの阻害によりApoが誘導される機序の詳細は不明である。申請者らはこれまで、大腸癌細胞を標的にAtP選択的基質であるp62/sequestosome1 (以下p62)をノックダウンするとcaspase8依存性Apoが強く抑制されることを見出した。そこで本研究では、AtPの阻害によるp62の蓄積がCaspase8を活性化し、抗癌剤によるApoを増強する機序をin vitro、vivoで明らかにし、新たなAtPとApoのクロストークの分子生物学的機序を解明することを今回の目的とした。本年度は樹立したp62ノックアウト大腸癌細胞株及びWT細胞を、それぞれマウスの大腸に移植した。マウスに殺細胞性抗癌剤(5-FU,CPT-11)を投与後、in vivo imagingで観察を行った結果、WT細胞では腫瘍の著明な縮小効果を認めたが、p62ノックアウト大腸癌細胞株はわずかに縮小した程度であった。腫瘍の縮小効果が得られたWT大腸癌細胞株、p62ノックアウト大腸癌細胞株をそれぞれマウスから摘出し、Atp、Apoに関わる因子(p62,LC3,C3,C8,C9)をTaqman PCR、免疫染色法(IHC)にて発現を確認したところWT大腸癌細胞株はp62ノックアウト大腸癌細胞株と比較してLC3、C3、C8の強い発現を認めた。このin vivoの結果よりp62がAtpとApoのクロストークを担う重要な因子であることが明らかとなった。本研究では、オートファジー(AtP)の阻害によるp62の蓄積がCaspase8を活性化し、抗癌剤によるApoを増強する機序をin vitro、vivoで明らかにし、新たなAtPとアポトーシス(Apo)のクロストークの分子生物学的機序を解明する。また、新規AtP阻害剤を使用し、AtP選択的基質p62を標的とした新しい大腸癌治療法を開発するための基盤を構築することに取り組んでいる。大腸癌細胞株(HCT116,DLD1)を用い、新規抗癌剤ABT263、殺細胞性抗癌剤(Oxaliplatin,CPT11,5FU)とAtP阻害剤(クロロキン(CQ))を併用しMTT assayを施行したところ、全ての薬剤においてCQ非併用群と比較し細胞増殖が抑制された。またWB法にてAtP、Apoのsignal伝達に関わる蛋白の発現(p62、LC3、Caspase3、8、9)を検討したところ、p62の過剰発現を認め、用量依存性にApoを誘導した。また、大腸癌細胞株のp62をノックダウンするとcaspase8依存性にApoが強く抑制された。さらに免疫沈降法、培養細胞の蛍光二重染色にてp62とCaspase8の共在化を確認した。1大腸癌細胞株における種々の抗癌剤とオートファジー(AtP)阻害剤との併用によるCell viabilityの評価2レンチウイルスによるp62のノックダウンによるアポトーシス(Apo)の評価3免疫沈降法、蛍光二重染色法のよるp62とCaspase8の共在化の検討は、当初の予定どおり施行できている。しかし、p62過剰発現大腸癌細胞での検討やCaspase8のポリユビキチン化に関する検討はまだ施行できていない。初年度は1大腸癌細胞株における種々の抗癌剤とAtP阻害剤との併用によるCell viabilityの評価2レンチウイルスによるp62のノックダウンによるApoの評価3免疫沈降法、蛍光二重染色法のよるp62とCaspase8の共在化の検討を施行した。平成29年度は、新しいゲノム編集技術であるCRISPR Casにて大腸癌細胞株のsingle p62ノックアウト細胞株を樹立した。まず、使用する培養細胞は内因性p62の発現量の小さい大腸癌細胞株を選定し、ノックアウトする際レポーター蛋白として蛍光蛋白もしくはルシフェラーゼを発現するようにベクターを構築し、ノックアウト細胞のselection及びin vivo imagingの際に利用した。Cell selectionはcell sorter付のFACSを利用した。また、同時にWT(Wild type)大腸癌細胞株も樹立し、樹立細胞からTotalRNAを抽出し、Real time PCRによる遺伝子発現解析によって、そのノックアウト効率の確認を行った。p62ノックアウト細胞株を樹立後、in vivoでの実験の前にin vitroでこれまで得られた結果と同様の結果が得られるかを確認した。1新しいゲノム編集技術であるCRISPR Casにて大腸癌細胞株のsingle p62ノックアウト細胞株の樹立2WT(Wild type)大腸癌細胞株を樹立し、ノックアウト効率の確認3p62ノックアウト細胞株を用いたin vitroでこれまで得られた結果と同様の結果が得られるかの確認は予定どおり施行できている。

国内の大腸癌患者はこの30年間で約6倍に急増し、死亡者数は男性では肺癌、胃癌についで第三位、女性では第一位であり、有効な治療法の開発が切望されている。癌細胞においてオートファジー(以下Atp)を阻害すると細胞増殖が抑制されることから、抗癌剤とAtp阻害剤を併用して効率的に癌細胞を死滅させる治療法が考案されている。しかし、Atpの阻害によりApoが誘導される機序の詳細は不明である。申請者らはこれまで、大腸癌細胞を標的にAtP選択的基質であるp62/sequestosome1 (以下p62)をノックダウンするとcaspase8依存性Apoが強く抑制されることを見出した。そこで本研究では、AtPの阻害によるp62の蓄積がCaspase8を活性化し、抗癌剤によるApoを増強する機序をin vitro、vivoで明らかにし、新たなAtPとApoのクロストークの分子生物学的機序を解明することを今回の目的とした。本年度は樹立したp62ノックアウト大腸癌細胞株及びWT細胞を、それぞれマウスの大腸に移植した。マウスに殺細胞性抗癌剤(5-FU,CPT-11)を投与後、in vivo imagingで観察を行った結果、WT細胞では腫瘍の著明な縮小効果を認めたが、p62ノックアウト大腸癌細胞株はわずかに縮小した程度であった。腫瘍の縮小効果が得られたWT大腸癌細胞株、p62ノックアウト大腸癌細胞株をそれぞれマウスから摘出し、Atp、Apoに関わる因子(p62,LC3,C3,C8,C9)をTaqman PCR、免疫染色法(IHC)にて発現を確認したところWT大腸癌細胞株はp62ノックアウト大腸癌細胞株と比較してLC3、C3、C8の強い発現を認めた。このin vivoの結果よりp62がAtpとApoのクロストークを担う重要な因子であることが明らかとなった。まず、p62過剰発現大腸癌細胞での検討やCaspase8のポリユビキチン化に関する検討を施行後、CRSPR-Casシステムによるp62ノックアウト大腸癌細胞株の樹立、ヌードマウスを用いたin vivoにおける検討を行っていく予定である。まず、樹立したp62ノックアウト大腸癌細胞株及びWT細胞を、それぞれマウスの大腸に移植する。移植する細胞数は1×107個で、移植直後から毎日in vivo imaging観察を行う。平成28年度に得られたin vitroの実験結果から、より相乗効果をもってApoを誘導し、p62とcaspase8の共在化が確認できた抗癌剤とAtP阻害剤の併用薬剤を選択し、マウス尾静脈より投与する。WT大腸癌細胞株で十分な縮小腫瘍効果が得られた後、マウスから癌細胞を摘出し、AtP、Apoに関わる因子(p62,LC3,C3,C8,C9)をTaqman PCR、WB、免疫染色法(IHC)等にて発現が増強、減弱されているかを確認し、p62のAtPとApoのクロストークに関わる役割を検討していく予定である。p62過剰発現大腸癌細胞での検討やCaspase8のポリユビキチン化に関する検討などが次年度に繰り越しとなり、さらにCRSPR-Casシステムによるp62ノックアウト大腸癌細胞株の樹立、ヌードマウスを用いたin vivoにおける検討を行っていく予定のため。
出血性大腸菌O-157が産生するベロ毒素による内皮細胞の血栓制御系の破綻機序

出血性大腸菌O-157に感染し,溶血性尿毒症(HUS)を併発して,死にいたることがある.私はHUS併発の機序解朋のなかで,昨年度,出血性大腸菌O-157の産生するベロ毒素が内皮細胞で血栓形成を抑制するトロンボモジュリン(TM)の産生を遺伝子転写レベルで低下されると同時に,血栓形成を促進する組織因子(TF)の産生を誘導することを見出し,HUS発症の大きな一因となることを明らかにした.本年度はTFの遺伝子転写がベロ毒素によって,どのようにかく乱されているのかに的を絞り,合わせて,そのかく乱を取り除く予防および治療薬となる薬物を検索した.I.ベロ毒素による培養内皮細胞のTF遺伝子の転写促進機序1.ベロ毒素によるTF発現誘導は,内皮細胞のベロ毒素刺激によって,P65/P50のへテロダイマーが形成されて転写因子NFκBを,c-Jun/Jun-Dのヘテロダイマーが形成されて転写因子AP-1を活性化し,活性化された両転写因子がTF遺伝子のプロモーター領域に結合して,転写を促進する機構によることを明らかにした.II.ベロ毒素によるTF遺伝子の転写促進を制御できる薬物の検索1.レチノイン酸やcAMPはベロ毒素によるTFの発現促進を抑制することはなかった.2.ベロ毒素によるTF遺伝子の転写促進は活性酸素除去剤で抑制出来なかったが,カレー粉の主成分であるクルクミンによって抑制されることを明らかにした.出血性大腸菌O-157の感染後にしばしば認められる容血性尿毒症症候群(HUS)は腎糸球体内皮細胞の機能的および機械的障害が引き金となって,糸球体に血栓を多発させることが主要な原因と言われている.内皮細胞における血栓形成の調節はトロンボモジュリン(TM)と組織因子(TF)の発現調節に依存することが多い.TMは健常な血管内皮細胞の膜表面に発現する血栓形成抑制因子であり,組織因子(TF)は健常な内皮細胞には発現していないが種々刺激を受けたとき発現が誘導されてくる血栓形成促進因子である.本研究はO-157などの産生するベロ毒素が培養血管内皮細胞のTMよびTFの発現をどのように乱し,HUS発症の引き金を引くのかを解析することを目的とする.I.ベロ毒素による培養ヒト血管内皮細胞のTM発現低下とTF発現誘導の解析I.ベロ毒素は10^<-10>g/mlから濃度および時間に依存してTMの発現量を低下させ,逆にTFの発現を誘導することが明らかになった.2.ベロ毒素の上記作用はエンドトキシンと相乗的に作用することが明らかになった.3.ベロ毒素による内皮細胞TMの発現量低下は遺伝子転写レベルでの低下と細胞傷害の両作用によること.TFの発現誘導は転写レベルの活性化によることが明らかになった.4.ベロ毒素によるTFの発現誘導は転写因子NFκBおよびAP-1を介していることが明らかになった.出血性大腸菌O-157に感染し,溶血性尿毒症(HUS)を併発して,死にいたることがある.私はHUS併発の機序解朋のなかで,昨年度,出血性大腸菌O-157の産生するベロ毒素が内皮細胞で血栓形成を抑制するトロンボモジュリン(TM)の産生を遺伝子転写レベルで低下されると同時に,血栓形成を促進する組織因子(TF)の産生を誘導することを見出し,HUS発症の大きな一因となることを明らかにした.本年度はTFの遺伝子転写がベロ毒素によって,どのようにかく乱されているのかに的を絞り,合わせて,そのかく乱を取り除く予防および治療薬となる薬物を検索した.I.ベロ毒素による培養内皮細胞のTF遺伝子の転写促進機序1.ベロ毒素によるTF発現誘導は,内皮細胞のベロ毒素刺激によって,P65/P50のへテロダイマーが形成されて転写因子NFκBを,c-Jun/Jun-Dのヘテロダイマーが形成されて転写因子AP-1を活性化し,活性化された両転写因子がTF遺伝子のプロモーター領域に結合して,転写を促進する機構によることを明らかにした.II.ベロ毒素によるTF遺伝子の転写促進を制御できる薬物の検索1.レチノイン酸やcAMPはベロ毒素によるTFの発現促進を抑制することはなかった.2.ベロ毒素によるTF遺伝子の転写促進は活性酸素除去剤で抑制出来なかったが,カレー粉の主成分であるクルクミンによって抑制されることを明らかにした.
アトピー性皮膚炎における皮膚真菌叢の変化と特異的IgE抗体獲得機序の解明

アトピー性皮膚炎(AD)は汗が増悪因子として知られ、真菌であるMalassezia Globosaの分泌蛋白(MGL_1304)が汗アレルギーの一因である。健常人と比較し、AD患者はMalassezia属に対するIgE抗体を持つ割合が高いことが知られているが、その機序は不明である。今回、皮膚真菌叢および皮膚に侵入する病原体を察知し、T細胞への抗原提示等を介してIgE産生を含んだ獲得免疫に関与する皮膚ランゲルハンス細胞と樹状細胞に注目し、Mallasezia属に対する皮膚免疫を解析する。またAD患者が高率に特異的IgE抗体を持つ機序と、アレルギーの発症機序を解明することを目的とする。
小胞体ストレスと脂肪肝に関連する新規小胞体局在膜タンパク質ILDR2の機能解析

我々がQTL解析により同定したIldr2は、小胞体に局在する膜タンパク質をコードしている新規糖尿病感受性遺伝子であり、マウス肝臓におけるILDR2ノックダウンは脂肪肝を誘導する。しかし、ILDR2どのように脂肪肝発症に関与しているのかは明らかになっていない。申請者らは、ILDR2と結合するタンパク質を探索するために、免疫沈降法・MALDI-TOF/MSを用いて、複数のILDR2結合タンパク質を同定し、報告した。今後、同定したILDR2結合タンパク質の機能解明により、ILDR2とILDR2結合タンパク質がどのように脂肪肝発症に関与するのかを明らかにする。我々の先行研究において、QTL解析により同定した新規糖尿病感受性遺伝子Ildr2は、小胞体に局在する膜タンパク質をコードしており、Ildr2の発現低下が脂肪肝発症に関与することを示した。近年、小胞体ストレスが、肥満(脂肪肝)や糖尿病など、メタボリックシンドロームの病態と深く関与していることが注目されている。ILDR2は、小胞体局在膜タンパク質であることから、小胞体ストレスによってその機能が制御される可能性が考えられた。そこで、本研究では、Ildr2の発現低下と脂肪肝の関連を明らかにすること目的として、Ildr2の発現調節機構の解明を試みた。まず、小胞体ストレスがIldr2発現に影響を与えるかどうかを検討するために、小胞体ストレス誘導剤、ツニカマイシンを肝細胞株処理し、その発現量をreal-time PCRにより検討した。Ildr2の発現量は、ツニカマイシン濃度依存的に有意に低下した。次に、Ildr2のプロモーター領域には小胞体ストレス応答配列(ERSE)に類似する配列が存在していることから、ERSEに結合する転写因子がIldr2の転写を制御している可能性が考えられた。そこで、Ildr2プロモーターを用いたレポーターアッセイを行った結果、小胞体ストレストランスデューサーであるATF6a、XBP1がIldr2の転写を抑制することが明らかとなった。Ildr2発現は、小胞体ストレスにより抑制されることから、ILDR2が小胞体ストレスと脂肪肝発症とを関連付ける新たな仲介因子であることが示された。本研究課題が予定通り実施されているため。しかし、ILDR2がどのように脂肪肝発症に関与しているのかは明らかになっていない。ILDR2は、小胞体局在膜タンパク質であることから、小胞体ストレスによって、その機能が制御される可能性が考えられた。しかし、ILDR2が小胞体膜でどのような機能をしているのかは明らかでない。本研究では、脂肪肝発症におけるILDR2の役割・意義を分子レベルで解明するために、まず、ILDR2と結合するタンパク質を同定し、ILDR2の機能を明らかにすることを目的とした。申請者らは、ILDR2と結合するタンパク質を探索するために、免疫沈降法及びMALDI-TOF/MSを用いて、ILDR2結合タンパク質の同定を試みた。その結果、脂質代謝関連タンパク質を含む、複数のタンパク質をILDR2結合タンパク質の候補として同定した。今後、同定した既知のILDR2結合タンパク質とILDR2の関連を解明することにより、ILDR2がどのように脂肪肝発症に関与するかを明らかにする。さらに、ILDR2と小胞体ストレスとの関連についても明らかにしたい。Ildr2floxマウスはすでにコロンビア大学との連携によりマウスを搬入し、現在、C57BL/6マウスとの戻し交配を実施し系統を樹立している。今後、肝臓特異的ILDR2ノックアウトマウスを作製し、肝臓におけるILDR2の役割を解明する。分子生物学
障害の「美学」における創造的な場の生成と文化的背景に関する研究

本研究は、障害者の芸術表現における「美学」が生起する創造的な場について、実証的かつ理論的に調査研究を行うことを目的としている。3年目であり最終年度にあたる平成30年度は、主に分析・解明作業を進め、アウトプットとして研究成果をまとめることを研究計画としていた。分析・解明作業については、クレアムの芸術実践にみられる創造的な場の仕組みの解明に努め、ベルギーの文化的背景と結びつけながら創造現場の分析を行う作業に着手した。しかしながら、本研究課題をまとめる作業については、その過程において当初予定していた専門家や当該分野の研究者との意見交換を実施できていない状況である。今年度の成果は、主にインドネシアにおける障害者アートの実践との対比という観点において新たな知見が得られたことにある。障害者の芸術表現における「美学」が生起する場においては、表現する者とそれを感受する者との関係性が不可欠であるが、インドネシアにおける実践では、障害の「美学」を体現する者は、必ずしも障害のある者に限定されない。障害者の芸術表現は、主に欧米を中心として、美術史や障害学の潮流のなかに位置づけられてきたが、他の文化的社会的ないし学術的背景をもつ地域と比較してみるならば、表現する者とそれを感受する者との関係性のあり方も、障害の「美学」の生成過程も異なっている。現時点では、そうした実証的な解明作業を続けながら、それを理論的に裏付けていく作業を試みている。なお、本年度は進捗が大幅に遅れたことから本研究課題を一年間延長するに至っており、研究成果をまとめていく作業が目下の課題となっている。本年度の勤務先業務による。留学生別科長および志願者獲得委員会委員を任命されたことから、新しい業務内容および年間スケジュールの把握と対応に時間がかかったことが主な理由である。なお、長期実地調査が実現し難い状況であることは、前年度からの課題となっていたが、他の研究調査と併せて短期間で実施するなどで改善を図った。しかしながら、本研究課題にエフォートを割くことがほぼ叶わなかったため、研究期間延長を申請し、承認が得られている状況である。速やかに研究成果のまとめに取りかかる予定である。研究を遂行する上での課題は、1)実地調査での検証が難しい、2)エフォート率を確保することが困難である、の2点である。1)は、これまでの実地調査のデータに基づき、文献および理論研究を中心に検証作業を実施することで対応する。2)は、昨年度は新しい業務が一時的に増えたことにより予期していない事態となったが、本年度は予めエフォート配分を適切に行うことで対処していく。本研究は、障害者の芸術表現における「美学」が生起する創造的な場について、実証的かつ理論的に調査研究を行うことを目的とするものである。初年度となる平成28年度は、主として障害者アートおよび障害者の芸術表現についての基礎資料を整理するとともに、障害のあるアーティストを取り巻いている社会的、文化的、政治的状況について把握するために、ヨーロッパ全体における障害者アートの潮流の分析に努めた。障害者アートの潮流は、主に4つに分類される。1アール・ブリュットおよびアウトサイダー・アートをはじめとする美術史における潮流。ここでは作品評価を重視することによる芸術的価値の追求と、作家と創作方法の特殊性の強調がみられる。2アート・セラピーを中心とする医療やケアの分野における潮流。ここでは、芸術は治療的効果をもたらすものであり、作品よりも作家自身に関心が向けられ、作品は作家の内面世界や症状の投影と捉えられる。3コンタクト・インプロヴィゼーションなどの身体表現に代表されるコミュニティ・アートの潮流。日常的な余暇活動や芸術活動の領域にしばしばみられるものであり、障害の有無にかかわらず誰もが参加できるものとして芸術が実践され、共同体的価値の追求や実現がみられる。4障害のある当事者自身が主体となる芸術運動や実践としてのディスアビリティ・アートの潮流。障害の経験を反映していることを核とする芸術活動や作品を提示することにより、既存の障害観や文化的価値観を問い直す試みとして位置づけられる。こうした4つの潮流をふまえ、ヨーロッパにおける美術界のひとつの潮流として生まれたベルギーの知的障害者によるクレアムの実践が、絵画、音楽、演劇、サーカスなどへと発展していくなかでどのように障害の「美学」が生起し、またそれを感受する文化的土壌が育まれたのかを探った。本研究の遅延の最大の理由は、研究実施計画に記載した実地調査の延期によるものである。これは、他業務と重なり日程調整が予定通りに運ばなかったことによる。本年度の目的は、1979年に生まれたアール・ディフェランシエが、ヨーロッパを中心にどのように独自にネットワークを築いてきたのかを探るところにあった。この点については、文献資料や過去の調査データから補うことで分析作業を進めた。また、調査先団体の状況については、メールマガジン等を通して情報収集に努めた。以上により、本年度の目的はほぼ達成しつつあるものの、アール・ディフェランシエの国際的展開を追跡するにはデータが不十分である。障害者アートを取り巻く状況は、国内外において目まぐるしく変化している。本研究が解明を目指している創造的な場の生成も、1970年代以後の社会的、文化的、政治的状況についての情報収集のみでは捉えきれず、実践者たちの生の声をできる限り聞き取りたいと考えている。本年度の大きな成果としては、12月に行われたシンポジウムでの発表(於駿河台大学)において、コメンテーターの方々から貴重な助言を得られたことが挙げられる。

本研究ではこれまで、障害者の芸術表現における「美学」が生起する創造的な場を、「即興的身体」と名づけて分析を進めていたが、この「即興的身体」には、身体の能動性と受動性のみならず、意識と無意識との関係性および、私の身体と他人の身体との交錯といった観点も含まれている。今後、さらに研究を発展させていくうえでは、「即興的身体」についての理論的な位置づけも不可欠であるとの見解に至っており、速やかに研究を遂行していきたい。本研究は、障害者の芸術表現における「美学」が生起する創造的な場について、実証的かつ理論的に調査研究を行うことを目的とするものである。2年目となる平成29年度は、昨年度実施できなかったベルギーの知的障害者によるクレアムの芸術実践について実地調査を行った。また、障害者アートの潮流のひとつでもあり、クレアムの芸術実践にも大きな影響を与えたと考えられるアール・ブリュットについても現地に赴いて調査を行い、クレアムとの関連を探った。今年度の大きな成果は、実地調査により現在の知的障害者の芸術実践をめぐる動向について直截的に把握できたことがある。とりわけ、クレアムにおいては、絵画、音楽、演劇、サーカスなど多様な表現形態を実践しているため、その全体像および個々の実践についてはクレアム内部においても捉えがたい現状がある。関係者からの聞き取り調査や参与観察により、現在のクレアムでは、知的障害のあるアーティストに加えて、精神障害のあるアーティストの参加が増えてきていることや、表現の「美学」が生起する際のアプローチについても洞察が得られた。現在は、昨年度実施した文献研究の成果および今年度の実地調査から得られたデータをもとに分析作業を行い、ベルギーにおけるアール・ディフェランシエの活動展開を、美術史の文脈と障害学の文脈のもとに位置づける試みを行っている。なお、本研究の実績として、昨年度末に口頭発表した内容が刊行された。実地調査を9月に実施したことにより、年度中での論文執筆作業が遅れたことが理由である。またイギリスを予定していた調査については、本務校での業務により日程調整ができなかったことから取りやめている(なお当初の計画で予定していたインドネシアについては他研究費により3月に実施した)。現在は、研究成果を論文として執筆する作業が残っており、最終年度となる次年度中には一定の成果としてまとめる予定である。本研究は、障害者の芸術表現における「美学」が生起する創造的な場について、実証的かつ理論的に調査研究を行うことを目的としている。3年目であり最終年度にあたる平成30年度は、主に分析・解明作業を進め、アウトプットとして研究成果をまとめることを研究計画としていた。分析・解明作業については、クレアムの芸術実践にみられる創造的な場の仕組みの解明に努め、ベルギーの文化的背景と結びつけながら創造現場の分析を行う作業に着手した。しかしながら、本研究課題をまとめる作業については、その過程において当初予定していた専門家や当該分野の研究者との意見交換を実施できていない状況である。今年度の成果は、主にインドネシアにおける障害者アートの実践との対比という観点において新たな知見が得られたことにある。
神経膠腫の生物学的特性に関与するエピジェネティクス制御機構の解明

脳腫瘍のうち最も分化度の低いglioblastomaは、治療に難渋する浸潤性悪性腫瘍である。エピジェネティクスとは、DNAの塩基配列によらない遺伝子発現制御に関わる後成的修飾である。癌治療の観点では、エピジェネティクな異常は可逆的な反応であることから、その変化の修復は効果的な治療法になり得ると期待されている。本研究では、革新的なDNA解析装置として注目されている飛行時間型質量分光計MassARRAYを用いて、神経膠腫細胞株において、数々の遺伝子群のメチル化を網羅的にプロファイル解析した。この結果、A172、U87MG、U251MG、T98G、YH13、AM38、およびU138MGの7つの神経膠腫細胞株において、zygote arrest 1(ZAR1)のメチル化が高頻度で検出された。ZAR1は卵巣に特異的に発現し、卵細胞の形成に関与するといわれているが、癌の発生に関わるとの報告はなされていない。このメチル化はプロモーター領域以外のCpGアイランドに認められ、遺伝子発現上昇に関与していることが明らかとなった。正常脳では、メチル化は検出されなかった。脳腫瘍手術検体86例にて検討したところ、diffuse astrocytoma 7例全例(100%)、anaplastic astrocytoma 17例中16例(94%)、glioblastoma 29例中26例(90%)、oligodendroglioma 3例全例(100%)、anaplastic oligodendroglioma 3例全例(100%)、pituitary adenoma10例中9例(90%)にZAR1のメチル化が認められた。ZAR1のメチル化はgliomaとpituitary adenomaに高頻度に検出された。特にgliomaではgrade 1以外のいずれのgradeでも極めて高頻度に認められており、その腫瘍形成に必須のエピジェネティクス変異と考えられる。さらに神経膠腫細胞株において、RT-PCRにてmRNAの発現解析を行ったが、ZAR1発現を認めることができなかった。ZAR1のメチル化は他の遺伝子変異や腫瘍形成過程における二次的な変化を反映したものと推察される。脳腫瘍のうち最も分化度の低い膠芽腫は、治療に難渋する浸潤性悪性腫瘍である。2005年、多施設共同第III相臨床試験にてtemozolomide(TMZ)の有効性が証明されたことにより、膠芽腫の治療方法は大きな転換期を迎えたといえる。しかしながら、TMZがエビデンスを持つとはいえ、延命効果は3ヶ月に満たず、その恩恵はわずかといわざるをえない。膠芽腫のエピジェネティクスに関わる最大のトピックスは、O^6-methylguanine-DNA methyltransferase(MGMT)遺伝子の高メチル化である。MGMTはTMZなどのアルキル化剤耐性の主因であるDNA修復酵素であり、高メチル化によるMGMTの不活性化はTMZ感受性を高めることが証明されている。

TMZの耐性・感受性には、MGMT以外の遺伝子のエピジェネティクな異常が関与していると推察されるが、その分子機構についてはほとんど解明されていない。本研究では、革新的なDNA解析装置として注目されているMassARRAYを用いて、神経膠腫細胞株において、TMZ感受性と関連する遺伝子群のメチル化を網羅的にプロファイル解析した。MassARRAYでは、200-600bpのターゲット領域内の複数のCpGサイトを一度に同定・定量することが可能であり、ターゲット領域数やサンプル数を自由に組み合わせることが出来ることから、メチル化プロファイルの作成に適しているといえる。この結果、A172、U87MG、U251MG、T98G、YH13、AM38、およびU138MGの7つの神経膠腫細胞株において、zygote arrest 1(ZAR1)のメチル化が高頻度で検出された。ZAR1は卵巣に特異的に発現し、卵細胞の形成に関与するといわれている。手術検体での検討では、grade 1以外のいずれの神経膠腫でも極めて高頻度に認められており、その腫瘍形成に必須のエピジェネティクス変異と考えられる。脳腫瘍のうち最も分化度の低いglioblastomaは、治療に難渋する浸潤性悪性腫瘍である。2005年、多施設共同第III相臨床試験にてtemozolomide (TMZ)の有効性が証明されたことにより、glioblastomaの治療方法は大きな転換期を迎えたといえる。しかしながら、TMZがエビデンスを持つとはいえ、延命効果は3ヶ月に満たず、その恩恵はわずかといわざるをえない。エピジェネティクスとは、DNAの塩基配列によらない遺伝子発現制御に関わる後成的修飾である。癌治療の観点では、エピジェネティクな異常は可逆的な反応であることから、その変化の修復は効果的な治療法になり得ると期待されている。本研究では、革新的なDNA解析装置として注目されている飛行時間型質量分光計MassARRAYを用いて、神経膠腫細胞株において、TMZ感受性と関連する遺伝子群のメチル化を網羅的にプロファイル解析した。この結果、A172、U87MG、U251MG、T98G、YH13、AM38、およびU138MGの7つの神経膠腫細胞株において、zygote arrest 1 (ZAR1)のメチル化が高頻度で検出された。ZAR1は卵巣に特異的に発現し、卵細胞の形成に関与するといわれているが、癌の発生に関わるとの報告はなされていない。このメチル化はプロモーター領域以外のCpGアイランドに認められ、遺伝子発現上昇に関与していることが明らかとなった。正常脳では、メチル化は検出されなかった。
π結合共役高分子を利用する新規光化学反応システムの開発

ポリパラフェニレン粉末を光触媒とするカルボニル化合物の可視光(>400nm)還元反応を,メタノールを溶媒としトリエチルアミンを電子供与体とする系で検討した.E^<red>_<1/2>=-2.0Vvs.Ag/AgNO_3より貴なケトン類が光還元され, 2電子還元体のアルコールを収率よく与えた.2電子目の還元電位が高くカップリング反応における立体障害の少ないアルデヒト類からは1電子還元体であるピナコール体が主生成物となった.この結果をふまえオレフィン類の可視光還元へ発展させた.還元電位E^<red>_<1/2>=-1.80Vvs.Ag/AgNO_3のフマル酸ジメチルで反応が効率よく進行し,オリゴマーと共にコハク酸ジメチルが24%収率で生成した.還元電位E^<red>_<1/2>=-2.00Vvs.Ag/AgNO_3と極めて卑なシス及びトランスーP-シアノシンナムニトリルの光還元反応では,光照射直後から早い速度でシスもしくはトランス体からのトランスもしくはシス体への光異性化が起こり,還元体であるジヒドロ体をそれぞれ70%と85%の好収率で生成した.還元電位が大きく卑なオレフィンの光還元機構を解明するためにメタノールーd_1を溶媒としてトランスーP-シアノ桂皮酸メチルの光触媒反応を行った.基質が半減するまで反応を行い,回収した桂皮酸メチルと還元生成物の重水素化割合をマススペクトルにより検討し,その光還元反応が1電子還元生成ラジカルの不均化反応によって進行するものと結論した.重合反応やシス・トランス異性化反応も1電子還元生成ラジカルを経由するとして矛盾なく説明できる.用いたポリパラフェニレンのバンドギャップ(2.90eV)とイオン化ポテンシャル(5.53eV)を測定し,伝導帯と価電子帯のポテンシャルをそれぞれ-2.21Vと0.69Vvs.Ag/AgNO_3と決定し,光触媒反応を矛盾なく説明しうるエネルギー構造が明らかとなった.他の研究計画は今後展開する予定である.ポリパラフェニレン粉末を光触媒とするカルボニル化合物の可視光(>400nm)還元反応を,メタノールを溶媒としトリエチルアミンを電子供与体とする系で検討した.E^<red>_<1/2>=-2.0Vvs.Ag/AgNO_3より貴なケトン類が光還元され, 2電子還元体のアルコールを収率よく与えた.2電子目の還元電位が高くカップリング反応における立体障害の少ないアルデヒト類からは1電子還元体であるピナコール体が主生成物となった.この結果をふまえオレフィン類の可視光還元へ発展させた.還元電位E^<red>_<1/2>=-1.80Vvs.Ag/AgNO_3のフマル酸ジメチルで反応が効率よく進行し,オリゴマーと共にコハク酸ジメチルが24%収率で生成した.還元電位E^<red>_<1/2>=-2.00Vvs.Ag/AgNO_3と極めて卑なシス及びトランスーP-シアノシンナムニトリルの光還元反応では,光照射直後から早い速度でシスもしくはトランス体からのトランスもしくはシス体への光異性化が起こり,還元体であるジヒドロ体をそれぞれ70%と85%の好収率で生成した.還元電位が大きく卑なオレフィンの光還元機構を解明するためにメタノールーd_1を溶媒としてトランスーP-シアノ桂皮酸メチルの光触媒反応を行った.基質が半減するまで反応を行い,回収した桂皮酸メチルと還元生成物の重水素化割合をマススペクトルにより検討し,その光還元反応が1電子還元生成ラジカルの不均化反応によって進行するものと結論した.重合反応やシス・トランス異性化反応も1電子還元生成ラジカルを経由するとして矛盾なく説明できる.用いたポリパラフェニレンのバンドギャップ(2.90eV)とイオン化ポテンシャル(5.53eV)を測定し,伝導帯と価電子帯のポテンシャルをそれぞれ-2.21Vと0.69Vvs.Ag/AgNO_3と決定し,光触媒反応を矛盾なく説明しうるエネルギー構造が明らかとなった.他の研究計画は今後展開する予定である.
現代日本教育財政における中央地方関係の制度と政策実施過程

今年度の研究は主として後述する2論文としてまとめられた。第1に、公立学校施設整備事業に関する補助負担金についての研究である。これまでは文部省所管の補助金・負担金(以下、補助負担金と略す)を市町村が運用する場合には厳しい制約があり、市町村の政策を十分に反映しない実態であると指摘されてきた。これに対して本研究では、全国市町村に対する質問紙調査により、補助負担金事業の工事費データ等を収集することを通じて、補助負担金の実施分析を行った。これにより、市町村が文部省の補助負担金の交付を受けて実施する公立学校施設整備事業においては、その自主的運用が制度上可能であること、さらに実際にも自主的に運用していることを明らかにした。第2に、公立学校施設整備事業を分析対象として、補助負担金のナショナルミニマムの達成維持機能を分析した。従来の研究では補助負担金の経年分析を行うことは少なかったため、補助効果の分析としては不十分な状況であった。これに対して、本研究は補助負担金とそれに関連する施設整備指標を用いて経年分析を行った。この結果、公立学校施設整備事業においては補助負担金を通じてナショナルミニマムが一定程度達成・維持されていることが明らかとなった。具体的には校舎等の非木造化指標についてはナショナルミニマムが達成・維持されていることが示されたが、危険校舎については依然として整備の必要性があることが示された。以上の分析を通じて、公立学校施設整備事業における補助負担金の機能やその実際の運用状況が明らかとなった。