hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
胎児心筋細胞移植と心筋転写調節因子の検討

心臓への細胞移植は、解決しなけらばならない多くの問題を抱えている。ドナー細胞数を十分確保するため、ドナー細胞に遺伝子導入を行い細胞を改変することが1つの方法であると考えられる。本研究では、マウス胎仔心筋細胞をドナーとして遺伝子導入法はリポフェクティン、レトロウイルス、アデノウイルスを用い、マーカー遺伝子を導入し、アダルトの同系マウスに細胞移植を行った。遺伝子導入効率、細胞毒性、介在板を形成する能力の保持を指標に比較検討を行った。細胞毒性の現れない最も高いMultiplicity of Infectionでの導入効率は、アデノウイルスが最も良く、レトロウイルス、リポフェクティンの順であった。また介在板の形成は、アデノウイルスでの遺伝子導入の場合でしか認められなかった。アデノウイルスによって導入された遺伝子は3ケ月間安定に発現しており、移植細胞の周囲に炎症反応は認められなかった。またアデノウイルスの他臓器への感染は認められなかった。遺伝子導入のターゲット遺伝子としては、ドナー細胞を十分増殖させる機能を持つもの、もしくは未分化な細胞を心筋細胞へ分化誘導するものが考えられる。本研究では、心筋細胞へ分化するP19EC細胞を用いて、細胞周期関連遺伝子の発現の推移を検討した。その結果、サイクリンD1-3が心筋細胞への分化誘導を、サイクリン依存性キナーゼインヒビターが増殖抑制をもたらす転写調節の役割を果たしている可能性が認められた。心臓への細胞移植が治療手段となるためには、多くの問題を解決しなければならない。1)長期のドナー細胞の生着。2)ドナー細胞とホスト心筋細胞の機能的結合。3)心機能を改善するのに十分なドナー細胞の移植。4)ホスト心臓に著明な炎症をもたらさないこと。5)ドナー細胞が腫瘍原性を獲得しないこと。以上の条件が考えられ、本年度は1)及び2)の条件に関して研究を行った。ドナー細胞にはマウス胎児の心筋細胞を用い、レシピエントには同系のマウスを用いた。1)に関して:ドナー細胞への血液供給が十分であることが重要であると考え、血管新生をもたらすVEGFのような因子をドナー細胞自ら分泌すれば長期の生着を可能に出来るのではないかという仮説のもとに、遺伝子導入ドナー細胞の移植を導入法を変え行った。導入遺伝子には、マーカー遺伝子としてβ-galactosidaseを用いた。結果はアデノウイルスベクターによる遺伝子導入が、細胞障害のない濃度でほぼ100%の導入効率をもたらし、細胞移植の後も著明な炎症反応を励起することなく遺伝子発現は12週間に及んだ。レトロウイルス及びプラスミドとリポフェクティンの混合液による導入効率は、25.5%,7.5%と低く発現遺伝子の効果を生体内で確認するに十分なものではないと判断した。Ex vivo genetransferのベクターとしてはアデノウイルスが最も優れていた。2)に関して:遺伝子導入心筋細胞とホスト心筋細胞の関係を検討するために透過型電子顕微鏡にてその形態を検討した。ドナー細胞は、マーカー遺伝子産物により電子顕微鏡下に黒いデポジットとして認識され、ホストの心筋細胞とギャップ結合を有していた。このことよりドナー細胞はホスト心臓に統合されていることが示され、心機能をアシストする可能性をもっていると考えている。心臓への細胞移植は、解決しなければならない多くの問題を抱えている。本研究では、マウス胎仔心筋細胞をドナーとし遺伝子導入法はリポフェクティン、レトロウイルス、アデノウイルスを用い、マーカー遺伝子を導入し、アダルトの同系マウスに細胞移植を行った。

アデノウイルスによって導入された遺伝子は3ヶ月間安定に発現しており、移植細胞の周囲に炎症反応は認められなかった。またアデノウイルスの他臓器への感染は認められなかった。遺伝子導入のターゲット遺伝子としては、ドナー細胞を十分増殖させる機能を持つもの、もしくは未分化な細胞を心筋細胞へ分化誘導するものが考えられる。本研究では、心筋細胞へ分化するP19EC細胞を用いて、細胞周期関連遺伝子の発現の推移を検討した。その結果、サイクリンD1-3が心筋細胞への分化誘導を、サイクリン依存性キナーゼインヒビターが増殖抑制をもたらす転写調節の役割を果たしている可能性が認められた。
表面光化学反応動力学

星間塵微粒子表面を覆っている水氷の光分解では水素原子、酸素原子、水酸基ラジカルが氷内部と最表面上に生成する。これらの反応ダイナミックスを調べた。また、理論的に分子動力学・量子化学計算を実施した。このような励起分子の生成を数多く示すことで、極低温空間における新しい光化学反応を提案した。さらに、水と空気の界面での化学反応について実験研究を実施して、大気環境化学にとって新しい知見を見出した。人為的な汚染源から比較的離れている南北極域においては、人為汚染物質の長距離輸送に加え雪氷面における不均一反応が、対流圏微量成分の変動に重要な役割を担っていると考えられる。とくに、氷雪の表面における硝酸イオンの光分解が複雑かつ重要である。極域対流圏空気ではオゾン濃度が40ppmにも達する。そこで、真空チャンバーとレーザーイオン化分光法を組み合わせた実験手法により、窒素酸化物やイオンを氷表面に吸着させて、光照射によって脱離生成するO原子やOHラジカルを直接検出した。このような低温でのイオン再結合や、活性種の直接的に生成してくる反応機構は今まで提案されていないので、これを実証したことは従来の酸化反応モデルに影響をあたえた。特にOHラジカルの新しい発生源として。「雲核に吸着した硝酸の光化学反応によるOHラジカルの生成」は、今までに無い新しい観点であり、従来の未解決であった雲中の酸化反応にとって新しい反応機構となる。実大気条件においてのOH生成はCRDS装置を用いても実証を試みたが、反応性が高いのでうまく行かなかった。つぎに、最表面は氷に覆われている星間塵からなる星間分子雲領域には強い真空紫外光が存在する.このため微粒子表面に吸着した氷の光分解を実施した。その際生じた水素原子の再結合反応・引き抜き反応から生成する励起水素分子の振動・回転・並進状態は、その反応ダイナミックスに依存することがわかった。こうして生成する振動励起分子と基底状態分子の反応性は、宇宙空間反応において大きな違いが見られる。そこで光脱離する水そのものの振動・回転温度を計測した。励起分子の生成を実証したことで、極低温空間における今までに無い化学反応系の提案ができた。本研究では、従来から用いられてきた赤外吸収分光法などの静的な計測手段でなく、電子励起した状態と表面との相互作用をダイナミカルにとらえることの出来る高感度レーザーイオン化法をもちいた表面光脱離分光法や、液体-気体界面反応からの生成物であるラジカルなどをその場観測できるキャビティーリングダウン分光法を用いて、いろいろな形態の水界面と吸着(溶解)分子との動的な相互作用を解明してきた。本年度は、光分解により表面から出てきた直後のフラグメントの並進エネルギーやスピン励起状態の観測データに基づいて、冷却した氷表面の水分子真空紫外光分解により宇宙化学研究における酸素原子と酸素分子生成の化学反応機構を水酸基ラジカル化学反応ダイナミクスの立場から実験した結果、このような極低温表面でもホット原子・ホットラジカル反応が起こることを提案した。この結果、新しい観点の表面光化学反応を見いだし、いままで観測されてはいたが反応機構が不明確であった宇宙塵表面を覆っている氷の化学反応を理解することができた。さらに、雪や氷の界面からでも振動励起した分子、反応性の高い原子やラジカルが気相へ向かって飛び出して行き、それらが新しい反応機構を気相で起こすことを高真空装置とレーザー分光手法で直接に実証した。また、水-気体界面においてオゾンとヨウ素イオンが反応して10ラジカルやヨウ素分子が気相へ向かって飛び出して行くことを確認し、これが表面に偏析した有機物イオンにより阻害されることを確認した。この様な結果は、宇宙化学、エアロゾル光化学反応の重要な反応過程における新しい観点を提供できることを実証した。星間塵微粒子表面を覆っている水氷の光分解からホットな水素原子、酸素原子、水酸基ラジカルが氷内部と最表面上に生成する。これらが相互に、または氷と反応した結果、振動励起した水素分子、酸素分子、水分子が、それぞれ再結合反応・引き抜き反応から生成する。とくに励起水素分子の振動・回転・並進状態は、その反応ダイナミックスに依存する。振動量子数高い分子の生成を実験的に確認し生成機構を調べた。具体的には、光脱離するH_2, O_2, OH, H_2Oの振動・回転・併進温度を計測した。さらに、星間塵の表面をカバーしている氷はCO2や含窒素無機物を含んでいるので、これらの実験をこころみた。同時に分担者である藪下助教が、高感度なキャビティーリングダウン分光法で超長光路を有する光吸収分光法を用いた。反応系は水と空気の界面に偏析するハロゲンイオン種とオゾンが実際に界面(表面)で反応するかどうかを検証した。

水溶液の表面に大きなサイズのイオンが現れ、バルク濃度より高くなり表面反応が促進されることを気相生成物の濃度変化から判定した。これは、大気環境化学にとって新しい反応経路を提案できた。また、環境に関する学校教育への貢献として小・中学校の教員とともに学校現場での活動を積極的におこなった。
希少悪性脳腫瘍に対する免疫監視機構を標的とした新規治療法開発のための基礎的研究

頭蓋内孤発線維性腫瘍/血管周皮腫(SFT/HPC)は全摘出を行っても多くの症例で再発や頭蓋外転移を来す。また胚細胞腫瘍は化学放射線治療での治癒が期待されるものの、再発後の治療法は確立されていない。一方、免疫チェックポイント関連分子に対する抗体が様々な癌種に対する新規治療薬として注目されており、私たちは、頭蓋内SFT/HPC及び頭蓋内胚細胞性腫瘍では全例でPD-L1が発現しており、また臨床経過と腫瘍免疫回避機構とに相関がある可能性を見出している。本研究では、患者より採取した腫瘍検体を用いて、PD-L1遺伝子の構造異常解析、遺伝子発現プロファイル解析による関連分子経路検索などから、これらの2腫瘍型におけるPD-L1の発現メカニズムを解明することを主目的とする。胚細胞性腫瘍に関しては、laser capture microdissectionによる腫瘍細胞のみからのDNA抽出が可能である。本研究の成果として、SFT/HPCのPD-L1発現と予後とに相関を認めた。この内容に関して論文を投稿、Journal of Neurooncologyにacceptされた。さらに胚細胞腫瘍の一つである胚腫についても、予後不良群においてPD-L1の発現上昇があり、またPD-1の発現もCD8陽性リンパ球の中の割合を考慮すると上昇していることを見出した。本研究についても論文を作成し、現在投稿中である。今後は頭蓋内孤発線維性腫瘍/血管周皮腫(SFT/HPC)に対する免疫チョックポイント阻害薬を使用した治験に向けてさらなる研究を進めている。PD-1/PD-L1を始めとする、免疫チェックポイント関連分子の研究は幅広く様々な癌種で行われている。しかし、本研究が対象とする2腫瘍に関しての研究報告はほとんどなく、胚腫ではPD-L1の発現の有無に関する報告に留まり、頭蓋内SFT/HPCに関する報告はない。そのため、本研究の意義は大きいと考えて本研究が開始された。頭蓋内SFT/HPC及び頭蓋内胚細胞性腫瘍では全例でPD-L1が発現しており、また臨床経過と腫瘍免疫回避機構との関連が示唆されている。腫瘍におけるPD-L1発現メカニズムを解析し、発現そのものをブロックすることにより、腫瘍免疫が増強される可能性がある。PD-L1発現メカニズムは腫瘍により異なるが、免疫染色でのPD-L1高発現例、低発現例をマイクロアレイによる遺伝子発現プロファイル解析を行う。PD-L1発現と相関する分子シグナル経路の候補を選定、RT-PCRにより確認する予定である。胚細胞腫瘍の進行速度と腫瘍免疫との関連が示唆されており、従って、免疫チェックポイント分子阻害などの免疫治療が有効な可能性があると考えている。一方、胚細胞腫瘍は前頁図のように多数のリンパ球の混在があるため、しばしば腫瘍の遺伝子検索が困難である。当院ではlaser capture microdissection(LCM)を用いて、ホルマリン固定パラフィン包埋標本(FFPE)から細胞単位でDNAを回収することが可能であり、本手技を用いてDNA解析を進める方針となっている。PD-L1発現に関わる分子経路を見出すことができた場合、培養細胞を用いて、その阻害剤やsiRNAなどで処理をすることにより、PD-L1の発現の変化を、FACSを用いて評価し、その関連を確認する。頭蓋内SFT/HPCに関して、免疫チェックポイント阻害薬を用いた治験を予定しており、治験に向けて上記の研究をさらに進めている。

しかし、本研究が対象とする2腫瘍に関しての研究報告はほとんどなく、胚腫ではPD-L1の発現の有無に関する報告に留まり、頭蓋内SFT/HPCに関する報告はない。そのため、本研究の意義は大きいと考えて本研究が開始された。本研究の成果として、SFT/HPCのPD-L1発現と予後とに相関を認めた。この内容に関して論文を投稿、Journal of Neurooncologyにacceptされた。さらに胚細胞腫瘍の一つである胚腫についても、予後不良群においてPD-L1の発現上昇があり、またPD-1の発現もCD8陽性リンパ球の中の割合を考慮すると上昇していることを見出した。本研究についても論文を作成し、現在投稿中である。頭蓋内SFT/HPC及び頭蓋内胚細胞性腫瘍では全例でPD-L1が発現しており、また臨床経過と腫瘍免疫回避機構との関連が示唆されている。腫瘍におけるPD-L1発現メカニズムを解析し、発現そのものをブロックすることにより、腫瘍免疫が増強される可能性がある。PD-L1発現メカニズムは腫瘍により異なるが、免疫染色でのPD-L1高発現例、低発現例をマイクロアレイによる遺伝子発現プロファイル解析を行う。PD-L1発現と相関する分子シグナル経路の候補を選定、RT-PCRにより確認する予定である。胚細胞腫瘍の進行速度と腫瘍免疫との関連が示唆されており、従って、免疫チェックポイント分子阻害などの免疫治療が有効な可能性があると考えている。一方、胚細胞腫瘍は前頁図のように多数のリンパ球の混在があるため、しばしば腫瘍の遺伝子検索が困難である。当院ではlaser capture microdissection(LCM)を用いて、ホルマリン固定パラフィン包埋標本(FFPE)から細胞単位でDNAを回収することが可能であり、本手技を用いてDNA解析を進める方針となっている。PD-L1発現に関わる分子経路を見出すことができた場合、培養細胞を用いて、その阻害剤やsiRNAなどで処理をすることにより、PD-L1の発現の変化を、FACSを用いて評価し、その関連を確認する。頭蓋内SFT/HPCに関して、免疫チェックポイント阻害薬を用いた治験を予定しており、治験に向けて上記の研究をさらに進めている。予定していたメチル化アレイ解析を翌年度に行うこととしたため
複数人ユーザ対応の会話エージェント対話管理機構の研究

CGで表現される擬人化会話エージェントシステムは,一般的ユーザ向けの新しいインタフェースとして期待される.展示会などで複数の来訪者と会話可能なエージェントが望ましいが,会話状態が複雑になり,ユーザ状態の検知とエージェントの行動制御が格段に困難になる.本研究は,まずインタラクションコーパスの収集実験を行い,ユーザの言語・非言語行動を考察し,分析結果に基づいたユーザ発話の受話者推定手法とエージェントの会話管理機構,そしてそれらを利用した完全自律の案内エージェントを開発した.開発したエージェントは被験者実験によって有効性を検証した.エージェントの自律化にあたり,今年度は主に,エージェントの会話管理機構,言語理解部,ジェネレーション部,音声認識部を中心に開発を行った.会話管理機構は,時間,システムの現在・以前の状態,ユーザの人数,言語理解結果,発話者,受話者,エージェントの発話といった情報の管理を行う.言語理解結果と受話者を入力とし,状態遷移モデルによって会話の制御を行う.認識されたユーザ発話の意味表現に応じて状態が遷移し,遷移した状態に基づきエージェント発話が決定され,出力すべき発話の文字列がアニメーション生成部に送信される.状態遷移モデルは,黄が開発を行なっている汎用的会話エージェント開発枠組みGECAのシナリオ記述言語GSMLを拡張した.新規の言語理解部,ジェネレーション部に合わせて,ユーザ入力・エージェント出力の対応ペアを,実行時に動的に値を関係付けられるようにした.これによって膨大な可能性がある言語理解部の入力とジェネレーション部の出力を簡潔に記述できるようになった.今年度は,複数人対話を行う際に積極的にサービスを提供するエージェントの適切な割り込むタイミングの推定にも取り組んだ.会話の停滞,直近のエージェントの発話に対しての更なる支援が必要,ユーザへの回想支援が必要,質問内容を議論していると4つのタイミングを自動的に推定する手法を考案した.受話者推定の精度が100%でない以上,誤った推定結果が起きうる.実験で恣意的にエラーを起こし,ユーザの反応を集めた.笑い,びっくり,戸惑いの表情をよく観察したため,まず,こういった表情の認識に取り組んだ.今のところ,90%を超える精度で,この3種類の表情を無表情の状況から区別できた.しかし,表情だけでは,誤りの発生を断定できないため,今後,音声情報などを含めて,誤りの発生を判別できる手法を考案したい.今年度は主に,前年度に引き続き,エージェントの会話管理機構,言語理解部,ジェネレーション部,音声認識部を中心に,完全自律型の複数人ユーザ対応のエージェントシステムを開発していた.開発終了後に,京都の観光案内を題材として,評価実験を行なった.WOZ法によるコーパス収集実験で集めたユーザ発話の韻律情報と顔向き情報に機械学習を適用することで得られたモデルを用いる提案システムに対し,評価対象となる比較システムは,発話間の注視対象(顔向き)の継続長のみで受話者を判定する.その結果,提案システムにおける対エージェント発話の判定はF値0.8であり,十分な精度が得られた.対パートナー発話については,F値が0.56であり,今後精度向上の必要があるが,顔向きの継続長のみに基づく従来の実装手法[Bohus 10]に比べて精度はよく,また,誤ってユーザ同士の会話に割り込む危険性も低いことが確認された.また,複数人対話を行う際に積極的にサービスを提供するエージェントの適切な割り込むタイミングの推定についても引き続き取り組んでいる.会話の停滞,直近のエージェントの発話に対しての更なる支援が必要,ユーザへの回想支援が必要,質問内容を議論していると4つのタイミングを自動的に推定する手法を考案したが,タイミングの定義は主観によるもので,現在,より多くの評定者によるタイミングのラベル付,そして評定者の性格と話しかけるタイミングのラベル付の関係性を調査する実験を実施中である.受話者推定の精度が100%でない以上,誤った推定結果が起きうる.ユーザの顔表情の変化と発話による誤りの発生を判別できる手法を引き続き検討している.CGで表現される擬人化会話エージェントシステムは,一般的ユーザ向けの新しいインタフェースとして期待される.展示会などで複数の来訪者と会話可能なエージェントが望ましいが,会話状態が複雑になり,ユーザ状態の検知とエージェントの行動制御が格段に困難になる.本研究は,まずインタラクションコーパスの収集実験を行い,ユーザの言語・非言語行動を考察し,分析結果に基づいたユーザ発話の受話者推定手法とエージェントの会話管理機構,そしてそれらを利用した完全自律の案内エージェントを開発した.開発したエージェントは被験者実験によって有効性を検証した.今年度はH22年度に始まった成蹊大学中野准教授との共同研究の引き続きとして,コーパス収集実験に基づいて構築している受話者推定モデルをオンラインシステムとして構築した.当コーパスは人間同士の会話ではなく,人間が操作するエージェントと複数人ユーザとの会話WOZ実験を行い,収集した物であった.実験のタスクは,典型的な会話エージェントのアプリケーションである情報提供サービスとし,複数人のユーザがエージェントから情報を提供してもらいながら,グループ内での議論を経て,単位履修と旅行先の意思決定を行う形をとった.エージェントの役割(操作役の実験参加者)は,単にユーザの情報リクエストに答えるだけではなく,ユーザの議論に積極的に介入し,新しい情報を提供したり議論のまとまりを促進したりする.ユーザ役の実験参加者には顔認識ソフトを用いて,マイクロホンも付けてもらい,頭部運動と音声を映像データと共にコーパスとして収録した.コーパスデータで集めた被験者の非言語行動パターン(視線方向の近似として頭部の動きとパワー,基本周波数と話速の音声特徴量を用いる)を機械学習で分類可能な形にして受話者推定モデルを構築した.

次に,このモデルを取り入れてリアルタイムで受話者推定可能な会話エージェントシステム用のコンポーネントを開発した.更に,8月に立命館大学でコーパス収集実験と同条件で20名10ペアのリアルタイム推定コンポーネントの精度評価実験を行った.機械学習の教師信号に用いたコーパスデータと同等の80%前後の推定精度を得ている.その成果を国内会議(HAIシンポジウム2011)と国際会議(IVA2011,ICMI2011)で発表している.当初の予定では,H24年度に,以下の3つの目標の達成を目指すことにした:(1)会話状態の入力とエージェント自身の行動を制御する会話管理機構を設計,実装する.(2)平面に表示されるエージェントキャラクターが,視線や発話などのアテンションの対象を,違和感なく,ユーザに提示し,認知させる手法を開発する.(3)非接触型ユーザ行動検知技術の開発.リアルタイムで動作する実用システムの実現に向かって,モーションキャプチャーなどの接触型センサで得られたモデルを正解データとし,コンピュータービジョン,空間内の音源定位など,ユーザの身に何らかの計測装置を付ける必要のない非接触型の計測技術でそれに近似する手法を開発する.このうち,研究成果の節で挙げたように,今年度はユーザの会話状態,受話者推定結果を用いて,エージェントの会話管理機構の実装ができた.また,(3)については,マイクロソフト社のKinect深度センサに内蔵されたマイクロホンアレイとビデオ会議用の高指向性のマイクを用いて,これまでのシステムでユーザに装着してもらう必要のあったヘッドセットは必要でなくなった.(2)に関しては,情報提供エージェントという設定から,個々のユーザに提示を行う必要性がそれほど高くないと判断した.研究の方向性を,実用システムに向けてより重要性の高い,割り込みタイミングの推定と受話者推定誤りの検知にシフトした.研究協力者と想定していた学生の人数を確保できず,実装などの作業を大半代表者自身で行なっているためやや遅れている.H24年度は本プロジェクトに関わる学生を確保できたので,人員不足の問題を解決できると思われる.現在,受話者推定エラーの検出と会話修復手法の開発をまず取り組んでいきたいと考えている.2012年7月に立命館大学で追加の22組の被験者WOZ実験を行い,これまでの顔の動き,声の韻律情報の他,Kinectセンサから得られる深度情報から推定した体勢の変化も記録した.実験段階で操作者に適切でない発話行動を意図的に起こさせ,ユーザの困惑,会話の齟齬,確認発話の場面を観察・分析している.現段階では,誤りの発生の判断につながるユーザ表情の認識はできたが,誤りがなくても,それらの表情は有りうる.そのため,音声情報や文脈情報を更に加えて,確率的にエラーの発生とエージェントの対応手法を考案したい.また,割り込みタイミングの推定に関しては,より検知精度を高めるために,表情の認識,音声情報(ピッチ,パワー,話速)の変化等の更なる非言語情報の利用が考えられる.また,非言語のみで分類可能な4種類だけでなく,定義を行った言語情報も含めて分類可能だと判断した8種類について自動検知を可能にし,その後,割り込みタイミングを自動検知する会話エージェントを実装する予定である.
封入体筋炎における動的糖鎖付加の研究

人の骨格筋組織において、O-linked-β-N-acetylglucosamine(O-GlcNAc)修飾蛋白は、主に細胞膜と核に存在していることを初めて示した。様々な筋疾患の再生筋線維や萎縮筋線維の細胞質、封入体筋炎とDMRVで空胞を持つ筋線維の細胞質はO-GlcNAc陽性であった。これらの細胞質での亢進は細胞ストレス反応と推定された。また、封入体筋炎とDMRVの縁どり空胞壁にO-GlcNAc修飾蛋白強陽性反応がみられ、これについては核膜蛋白由来と推定された。今後O-GlcNAc修飾蛋白の解析・同定が必要である。疾患筋組織でO-GlcNAc転移酵素(OGT)の分布を免疫組織化学的により検討した。封入体筋炎と遠位型ミオパチー(DMRV)の筋組織の空胞化線維にOGT陽性封入体を認めた。封入体筋炎ではリン酸化蛋白質の凝集や核転写因子・Elk-1のリン酸化型(pElk-1)の異常凝集がみられる。免疫蛍光法により、OGT・リン酸化蛋白質・DNAの3重染色を行い、リン酸化蛋白質の凝集体とOGTの位置関係を比較したところ、これらのリン酸化蛋白質の異常凝集体とOGT陽性封入体は共存していた。一方、対照例では、OGT陽性封入体を認めなかった。次いで、OGTの産物であるO-GlcNAc修飾蛋白質について、特異抗体を用いて組織化学的に検討したところ、細胞膜と核膜にO-GlcNAcの強い反応が見られた。種々の病的筋の萎縮筋線維では、細胞膜上の陽性反応が低下または消失していた。また、封入体筋炎とDMRVの空胞の一部は辺縁が陽性であった。筋ホモゲネートのO-GlcNAcの免疫ブロットでは、10本程度の陽性バンドがみとめられ、疾患によりパターンに差を認めた。核孔蛋白質nucleoporin p62に対する抗体あるいは上記のElk-1に対する特異抗体を用いた筋ホモゲネートの免疫沈降により、筋組織ではNuc62、Elk-1はO-GlcNAc修飾されていることが分かった。蛋白質のO-GlcNAc修飾はリン酸化と同じアミノ酸残基にされることが多く、リン酸化と共役または拮抗して細胞内シグナル伝達や核細胞質間輸送を制御する。封入体筋炎とDMRVのOGT陽性封入体、O-GlcNAc修飾異常の原因についてさらに追及することにより病的機序の解明を目指したい。当該年度は生化学的方法、特に筋ホモゲネートの電気泳動、免疫沈降により、O-GlcNAc修飾蛋白を分析した。筋組織における筋ホモゲネートのO-GlcNAcの免疫プロットでは、10本程度の陽性バンドがみとめられ、疾患によりパターンに差を認めた。核孔蛋白質nucleoporinp62に対する抗体あるいはシグナル蛋白Elk-1に対する特異抗体を用いた筋ホモゲネートの免疫沈降により、筋組織ではNuc62、Elk-1はリン酸化を受けていること、およびO-GlcNAc修飾されていることが分かった。また、筋ホモゲネートを細胞質と核分画に分けると核分画中の75kDの蛋白質が、筋炎組織で強く発現していることをみいだした。核膜成分やシグナル分子のうち、この分子量をとるものをいくつか検討したが、それらの分子に対する特異抗体で生検筋のホモゲネートを免疫沈降した後に、抗O-GlcNAc抗体を用いて免疫プロットを行ってもバンドは陽性反応を示さず、その候補分子が確かに目的のO-GlcNAc修飾蛋白質であるという裏づけが今のところ得られていない。今後は免疫沈降と質量分析の手法を用いてこの分子の同定をすすめる。蛋白質のO-GlcNAc修飾は、リン酸化と同じアミノ酸残基に行なわれることが多く、リン酸化と共役または拮抗して細胞内シグナル伝達や核細胞質間輸送を制御する。今回の検討ではnucleoporin p62、Elk-1が筋組織で確かにリン酸化/O-GlcNAc修飾を受けていることを確認した。また核には未知の、75kDの優位なO-GlcNAc修飾蛋白が存在すること、疾患によりその発現に差があることが示唆された。O-linked-_-N-acetylglucosamine(O-GlcNAc)はリン酸化同様、動的に蛋白を修飾し、その機能を調節する。当該年度は、O-GlcNAc修飾蛋白の骨格筋における正常分布と神経筋疾患におけるその変化を検討した。診断目的で得られた40症例の生検筋の連続切片を作成し、O-GlcNAcに対する抗体を用いて免疫組織化学法にて評価した。正常対照筋線維ではO-GlcNAc修飾蛋白は細胞膜と核に認められた。

O-GlcNAcは筋ジストロフィー・筋炎・横紋筋融解症における再生筋、筋炎における萎縮筋の一部、封入体筋炎・縁取り空胞を伴う遠位型ミオパチー(DMRV)の空胞を持つ筋線維において細胞質にび漫性に染色された。神経原性筋萎縮のtarget formationはO-GlcNAc陽性であった。封入体筋炎とDMRVでは、空胞壁に強い線状のO-GlcNAc陽性反応がみられ、蛍光染色においてこのO-GlcNAcと核膜蛋白emerinとの重なりを確認した。以上、人の骨格筋組織において、O-GlcNAc修飾蛋白は、主に細胞膜と核に存在していることを初めて示した。O-GlcNAc修飾蛋白の本態は、現在までの生化学的研究によれば、細胞膜ではインスリン受容体のような細胞内シグナル伝達のカスケードの開始に関わる蛋白、核では核内転写因子や核孔蛋白である可能性がある。様々な筋疾患の再生筋線維や萎縮筋線維、封入体筋炎とDMRVでは空胞を持つ筋線維の細胞質、target formationが抗O-GlcNAc抗体で陽性であった。これらの筋線維の細胞質では同時に検討したHSP70の反応性も亢進していた。HSP70はそれ自身O-GlcNAc修飾を受ける蛋白で、ストレス下でO-GlcNAcのレクチンとして働く蛋白である。筋線維に対するストレスがO-GlcNAc修飾を誘導している可能性がある。封入体筋炎とDMRVの縁どり空胞には核の崩壊産物が認められることより、空胞は核の変性産物であると推定されている。核膜マーカーのemerinと重なってみえたO-GlcNAc修飾蛋白については核膜蛋白由来と推定される。今後神経筋疾患におけるO-GlcNAc修飾蛋白を解析・同定することにより、疾患筋の変性過程におけるストレス反応や、封入体筋炎とDMRVの核変性機序についての新しい知見が得られるものと考える。
医療ソーシャルワークの専門性確立のための研究 ―Grounded Theory の方法を用いて―

MSWの専門性を確立するために、MSWの専門性を表すと考えられる職務の特徴について、他の医療職種との比較という側面から捉えようとした。方法としては、Grounded Theoryの方法を用いて、12人の対象者を理論的サンプリングした。その12人に対して、半構成的でセミオープン形式のインタビューを行った。インタビュー結果から逐語記録を作成し、コーディングを行った。最終的にMSWの職務の専門的特徴を示すと考えられる以下のようなコアカテゴリーを導き出した。1)「即応対促進しながらの待機」2)「密着対専門的距離感覚」3)身体の再構築対人生の再構築」4)「分化・独立対共生・連帯」5)パズルの1片対接着剤」6)「限局された社会関係への関与対トータルな社会関係への関与」7)「深化・単一対多角・総合」8)「タテの専門性対ヨコの専門性」の8つであった。これらをMSW自身がしっかりと自覚し、他職種による承認を得ていくことで、一刻も早くMSWの専門性を確立していかなければならない。医療ソーシャルワーカーの専門性を明らかにするという研究目的を達成するために、本年度の研究目標と研究実施計画に従って次のような研究を行った。(1)調査のための理論的枠組みの一層の明確化社会福祉の領域だけでなく、専門職としての専門性について論議の行われている領域での職種に関する専門性研究の状況を把握するため、国家図書館等での資料収集を行うと共に、関係領域の研究者への聞き取りを行った。また、国内、海外のGrounded Theory関連の文献を調査し、調査の理論的枠組み、方法のより一層の明確化を計った。(2)調査実施のための準備(2)調査員として、本調査に当たる担当者と数回の会合を持ち調査実施に向けての打ち合わせを行った。(3)次年度の面接調査実施の為に関西の医療機関に働く医療ソーシャルワーカーの中から、研究に協力を得られる複数の被調査者を確定した。(3)予備調査の実施次年度の本調査にむけ、調査項目の妥当性を探るため、予備調査を3名の医療ソーシャルワーカーを対象に実施した。また、医療ソーシャルワーカーの専門性についての意見を聴取するなどを行い本調査への準備をすすめた。具体的には、12名の保健医療領域に働く医療ソーシャルワーカーに対して、聞き取り調査を行った。その結果をGrounded Theoryの方法によって逐語記録化し、センテンスごとに区切り、コーディング並びにカテゴリー化の作業を行った。そこから分析を行うことによって、他の医療専門職との対比という観点から、医療ソーシャルワーカーの独自の視点が、かなり明確なものとなってきた。それらをまとめたものを、次年度では、学会などで報告したい。インタビュー結果から遂語記録を作成し、コーディングを行った。最終的に、MSWの職務の専門的特徴を示すと考えられる以下のようなコアカテゴリーを導き出した。(1)即応対促進のながらの待機(2)密着対専門的距離感覚(3)身体の再構築対人生の再構築(4)分化・独立対共生・連帯(5)パズルの一片対接着剤(6)現局された社会関係への関与対トータルな社会関係への関与(7)深化・単一対多角・総合(8)タテの専門性対ヨコの専門性の8つであった。これらをMSW自身がしっかりと自覚し、他職種による承認を得ていくことで、一刻も早くMSWの専門性を確立していくことが望まれる。これらの研究成果については、第18回日本医療社会事業学会ならびに第9回日本医療社会福祉学会において報告を行った。
ヒト唾液腺腫瘍におけるＲＨＡＭＭ遺伝子の発現及び機能解析

頭頚部癌においてRHAMMの発現は癌細胞の増殖能と関連していた。また、CD44高発現を示す唾液腺癌細胞および口腔扁平上皮癌細胞から間葉系細胞の性質を示し、高い遊走能をもつ細胞集団(CD44high/ESAlow)と上皮様形態を示し、高い増殖能をもつ細胞集団(CD44high/ESAhigh)の二つのphenotypeを分離した。この二つの細胞集団はともに癌幹細胞形質を有し、CD44high/ESAhigh細胞のholoclone形成にはRHAMMが必要であることが明らかとなった。このことから、RHAMMが頭頚部癌幹細胞の自己複製に重要な役割を担うことが明らかとなった。興味深いことに,GSK3betaのリン酸化にはCD44やRHAMMが関与しており,CD44が単なる癌幹細胞のマーカーではなく,CD44/RHAMM-ERK-GSK3betaのシグナル経路を制御することにより,癌幹細胞の自己複製を調整する可能性が示唆された.さらに、CD44high/ESAlow phenotypeからsingle cell cloneを培養し、性状を解析した結果、このクローンは自己複製能が高く、抗癌剤抵抗性が高いことが明らかとなった.また、GSK3beta knock down後には、CD44high/ESAlow phenotypeはCD44high/ESAhigh phenotypeに変化することが明らかとなり、GSK3betaのknock downによりMETが誘導されることが示唆された.以上より,GSK3beta及びRHAMMは口腔癌幹細胞において、自己複製と分化を調節するという重要な機能を担う可能性が示された.口腔癌細胞株における癌幹細胞の同定とその機能解析を行った。以上より、GSK3β及びRHAMMは口腔癌幹細胞において、自己複製と分化の調節に重要な役割を担うことが示された。今回、口腔癌細胞株および唾液腺癌細胞株を用いて癌幹細胞の同定と機能解析を行った.FACS解析より、癌幹細胞にはEMTに関与する癌幹細胞(CD44high/ESAlow phenotype)と上皮性癌幹細胞(CD44high/ESAhigh phenotype)の二つのphenotypeが存在し、その自己複製には活性化型GSK3betaが関与することが明らかとなった.またCD44high/ESAhigh細胞はRHAMMが過剰発現しており,特に増殖能が高いことが明らかとなった.興味深いことに,GSK3betaのリン酸化にはCD44が関与しており,CD44が単なる癌幹細胞のマーカーではなく,CD44/RHAMM- ERK-GSK3betaのシグナル経路を制御することにより,癌幹細胞の自己複製と分化を調整することが明らかとなった.以上より,RHAMMは癌幹細胞において重要な機能を担う可能性が示唆された.さらに癌幹細胞の抗癌剤抵抗性についても検討した結果,活性化型GSK3betaを持つCD44high/ESAlow/low細胞は5-FUに対して最も高いアポトーシス抵抗性を示した.このEMT phenotypeからsingle cell cloneを培養し、性状を解析した結果、このクローンは自己複製能が非常に高いがMETを起こすことがなかった.またRHAMMの発現が高いCD44high/ESAhigh細胞は,epiregulin産生能が高いことより,以前の研究結果と照らし合わせると,epiregulinの自己産生により抗癌剤抵抗性の獲得に関与する可能性が示唆された.本年度の研究より,RHAMM及びGSK3betaが口腔癌および唾液腺癌幹細胞の自己複製と分化の調節において、重要な役割を担っていることが明らかとなった.さらには,GSK3betaのリン酸化にはCD44とRHAMMが関与しており,CD44/RHAMM-ERK-GSK3betaのシグナル経路を介することにより,GSK3betaが癌幹細胞の自己複製と分化を調整することが明らかとなった.さらには,抗癌剤抵抗性についても検討した結果,CD44high/ESAlow細胞はCD44high/ESAhigh細胞やCD44low細胞と比較して5-FUに対して最も高いアポトーシス抵抗性を示した.これらの結果から,口腔癌幹細胞の幹細胞性維持の概要が明らかとなり,研究は順調に進んでいると考えられる.本年度の研究より,RHAMM及びCD44が口腔癌および唾液腺癌幹細胞の自己複製において、重要な役割を担っていることが明らかとなった.さらには,GSK3betaのリン酸化にはCD44とRHAMMが関与しており,RHAMMが単なる癌幹細胞のマーカーではなく,CD44/RHAMM-ERK-GSK3betaのシグナル経路を制御することにより,癌幹細胞の自己複製と分化を調整することが明らかとなった.さらには,癌幹細胞の抗癌剤抵抗性についても検討した結果,CD44high/ESAlow細胞は5-FUに対して最も高いアポトーシス抵抗性を示した.

これらの結果から,唾液腺癌細胞におけるRHAMMの重要な機能や,抗癌剤抵抗性の獲得機構の概要が明らかとなり,研究は順調に進んでいると考えられる.広島大学病院口腔顎顔面再建外科にて切除し,患者による同意が得られた口腔扁平上皮癌例および唾液腺悪性腫瘍症例の新鮮凍結材料を用いて,タンパク質を抽出し,western blot法により,リン酸化GSK3betaの発現解析を行う.また口腔扁平上皮癌例および唾液腺悪性腫瘍症例のパラフィン包埋切片を用いて,免疫組織学的にリン酸化GSK3betaの発現検索を行い、病理組織学的な腫瘍の浸潤度や患者の予後との関連を検討する.唾液腺癌細胞を用いて,RHAMMを過剰発現させた際の抗癌剤(5-FU,CDDP,Docetaxel)に対する抵抗性について検討する.さらに,転写因子として機能するNR4A2がRHAMMの転写促進に関与し, RHAMMがアポトーシス抵抗性に関与するか検討する.さらには,広島大学病院口腔顎顔面再建外科にて切除し,患者による同意が得られた唾液腺悪性腫瘍症例の新鮮凍結材料を用いて,RNAを抽出し,Real time RT-PCR法により,RHAMM mRNAの発現解析を行う.また唾液腺腫瘍症例のパラフィン包埋切片を用いて,免疫組織学的にRHAMMの発現検索を行う.また,腫瘍の増殖活性を明らかにする目的で,免疫組織学的にPCNAおよびKi-67の発現を検索し, RHAMMの発現との相関性についても検討する.唾液腺腫瘍症例の新鮮凍結材料を用いて,DNA抽出を行いRHAMM cDNA probeを作成しRHAMMの遺伝子増幅の有無を検索する.本研究においては分子生物学、細胞生物学、生化学、免疫組織化学などの実験手技を用いて検索する.生化学的検討には、各種遺伝子産物の抗体、抗リン酸化蛋白抗体、蛋白質実験関連試薬、ウエスタンブロッティング用試薬、蛍光抗体などが必要である.また分子生物学的実験のためには、大腸菌培地、寒天培地、抗生剤、プラスミドベクター、大腸菌からのプラスミド回収キット、制限酵素、アガロースゲル、電気泳動試薬、PCRプライマーの合成、ピペット、チップ、各種プラスチックチューブ等の消耗品などが必要であり、以上の物品購入に研究費を使用する予定である.また、学会発表のための出張費にも研究費を使用する予定である.本研究においては分子生物学、細胞生物学、生化学、免疫組織化学などの実験手技を用いて検索する.生化学的検討には、各種遺伝子産物の抗体、抗リン酸化蛋白抗体、蛋白質実験関連試薬、ウエスタンブロッティング用試薬、蛍光抗体などが必要である.また分子生物学的実験のためには、大腸菌培地、寒天培地、抗生剤、プラスミドベクター、大腸菌からのプラスミド回収キット、制限酵素、アガロースゲル、電気泳動試薬、PCRプライマーの合成、ピペット、チップ、各種プラスチックチューブ等の消耗品などが必要であり、以上の物品購入に研究費を使用する予定である.また、学会発表のための出張費にも研究費を使用する予定である.
日本語のかき混ぜ構文おける項とヘッドの依存関係の成立

日本語のかき混ぜ文における項とヘッドの依存関係の成立過程で、かき混ぜ詞となる項の種類が処理に必要なワーキングメモリ容量や文処理にどのように関わっているのか、また、かき混ぜ詞の(再)活性化の度合いが文処理中にどのように変化するのかを調査した。関係節付加曖昧構文において関係節を含む複雑な名詞句が目的語でありかき混ぜ語順と基本語順になる文について、質問紙法による実験、オンラインの容認性判断実験などを行った。その結果、処理に必要なWM容量が変化し、空範疇と先行詞の依存関係成立に影響することが示唆された。先行研究では、かき混ぜ語順は基本語順に比べてより多くの処理資源が必要であると考えられてきたが、本研究ではかき混ぜ詞の種類やサイズによっては、かき混ぜ文の方が文全体の処理に必要な処理資源の量が基本語順より小さくなる可能性が示唆された。第二言語では習熟度も影響することが示唆された。間接目的語がかき混ぜ詞で短距離移動をしている文を用いながら、擬似と真正の痕跡位置、動詞の直後で再活性化が起こるかどうか、もし、誤って再活性化された場合はどうなるのかについて交互様相語彙性判断課題を使う調査も行った。その結果、かき混ぜ詞は、文が処理されている間はある程度活性化され続けているが、動詞の位置で動詞との間に依存関係を成立させるときには活性化のレベルがより高くなった。しかし擬似痕跡位置で活性化され、その後動詞とのあいだに依存関係が成立しないことが明らかになり再解釈が起こると逆に活性化のレベルが低くなるが、真正の痕跡位置で再び活性化されることが示唆された。また、WM容量の個人差の影響も見られた。必要とされているWM容量と個人の持っているWM容量との差や文構造に従って、項であるかき混ぜ詞が活性化されたりその活性化がある程度抑制されたりしながら、ヘッド(動詞)との間に依存関係を成立させることが分かった。本年度は、実験設備の設置や整備、予備的実験を行い、空範疇と先行詞の依存関係成立へのワーキングメモリや語順などの影響について、行動指標を用いた実験を行った。予備的実験では、リーディング・スパン・テストとリスニング・スパン・テストを作成した。本実験では、関係節の主語または目的語がヘッドになっている関係節付加曖昧名詞句が主文の直接目的語である文を用いた。ヘッドになる項の種類や、関係節付加曖昧名詞句の主文での語順を変えることで、文処理に必要なWM容量を変化させ、先行詞選択への影響について調べた。かき混ぜ語順の方が基本語順よりも多く高位名詞句を先行詞に選択する傾向が見られた。この結果から、語順の違いによって実験文の処理に必要なWM容量が変化し、空範疇と先行詞との依存関係成立に影響することが示唆された。実験材料を処理するのに必要なWM容量の影響を調査したので、被験者間のWM容量の違いが、空範疇と先行詞の関係成立に影響するかどうかについても調査した。リーディング・スパン・テストの得点と先行詞の選択傾向を比較した結果、高スパン群の方が低スパン群よりも、多く高位名詞句を選択する傾向が見られた。かき混ぜ構文の処理はコストがかかることが報告されているが、かき混ぜ詞の種類やサイズによっては、基本語順の文と比べて文全体の処理コストは必ずしも大きくならない可能性が示唆された。日本語の関係節付加曖昧名詞句では、空範疇の後に先行詞が現れる。

実験結果から、そのような場合にもWM容量が依存関係の成立に影響することが推測された。この研究成果の一部は、平成18年8月の広島大学のセミナー、12月の高知大学の研究会で報告された。また、平成19年7月に行われる国際学会(The Japanese Society for Language Sciences 2007)で発表する予定である。現在国内の学会に投稿中のものある。日本語のかき混ぜ構文における項とヘッドの依存関係の成立について、オンライン・オフラインの実験を行い、2つの方向から先行研究の結果と比較検討した。1.昨年に引き続いて、関係節付加曖昧構文において関係節内の空範疇と関係節のヘッドとの依存関係成立に、基本語順とかき混ぜ語順やワーキングメモリ(WM)容量の個人差は関係節内の空範疇と関係節のヘッドの依存関係成立にどのように影響するのか、を調べた。高スパン群では基本語順よりかき混ぜ語順の方がより多く高位接続名詞句を選択する傾向が観察されたが、低スパン群ではそのような変化が見られなかった。日本語では高位接続が好まれるという先行研究の結果を支持しているが、WM容量の個人差が、どの先行詞との間に空範疇との依存関係が成立するのかに影響することが示唆された。また、先行研究では、かき混ぜ語順は基本語順よりも多くWM資源を必要であるとされているが、本研究のような構文ではかき混ぜ語順の方が基本語順よりも少ないWM資源を必要とすることが示唆された。2.間接目的語をかき混ぜ詞とする構文で、動詞の持っている項構造情報がかき混ぜ詞の再活性化の度合いにどのような影響を及ぼすのかについて、共同実験研究を行った。日本語では、構文の最初の部分を処理しているときには、後にどのような動詞が現れるのかわからない。本研究では、予測を立てながら処理を進めること、予測と実際が異なる場合には活性化された情報が非活性化されることを示唆する結果が得られた。今後、更に実験結果の分析を進め、詳細について検討する必要がある。1つ目の課題について、第二言語としての日本語を対象に調査を行った。被験者は中国語を母語とする中級の上または上級レベルの日本語学習者だった。日本語に堪能な学習者でも、日本語母語話者と同じ傾向を示すとは限らないことが示唆された。更に研究を進めれば、外国語教育に還元できる可能性がある。
日本語の格と語順の関係とその史的変化

本研究では上代語資料を中心に格助詞の分布、人称代名詞の分布、他動詞文の項の語順について調査し、上代日本語は類型学的に「活格類型」に共通する形態的、統語的特徴があることを示した。また、日本語史における変化を活格型から対格型への変化と捉え、生成文法理論の枠組みで格システムの変化について理論的仮説を提示した。さらに、上代から近世までの代名詞の資料調査を行い、日本語史における代名詞の通時変化を反文法化(degrammaticalization)と提案し、理論的観点から分析を行った。2007年12月ひつじ書房から「上代語の能格性について」『日本語の主文現象』長谷川信子編、MIT Working Papers in Linguisticsから"Miyagawa's(2008)Exceptions: An Ergative Analysis"を出版し、さらに共同研究者であるコーネル大学教授John Whitman氏と2007年6月筑波大学で、2008年3月コーネル大学にて上代語と能格に関する共同研究を実施し、'Alignment and Word Order in Old Japanese'というタイトルで論文にまとめた。(Journal of East Asian Linguistics現在審査中)内容は万葉集をデータベースとして、上代語の形態的、統語的特徴を広範に調査した。現在まで、日本語は対格言語であると信じられてきたが、本研究の独創性は上代語に能格言語-特に活格類型を持つ言語-特有の形態的、統語的特徴があることを示したことである。現代語の主語標示「が」は主格であることは議論の余地がないが、上代語の「が」は活格として機能していたことを示した。「が」はSilverstein(1976)の名詞句階層に従い、階層の上位、すなわち、代名詞や固有名詞に「が」が使われれ、階層の低い無生物主語には使われない。これは「が」が活格である根拠のひとつである。さらに、「が」は動詞の動作性と関連し、「が」は動作性の強い動詞に表れ、動作性の低い動詞に表れない。この特徴も「が」が活格であることを支持するものである。さらに、本研究では、万葉集に広く見られる、接頭辞「イ」と「サ」が上代語が活格型能格言語であった強い根拠になることを示した。20年度はオーストロネシア語族などの比較をとおして日本語の格と語順の関係とその史的変化を調査し、言語変化の一般化に関する理論的仮説からすでに消滅した原始目本語の格システムや構造的特徴を再建することを目的に研究をすすめた。古代日本語が現代語と類型学的に異なる、いわゆる「活格型言語」であり歴史的変化の過程で「主格型言語」に変化したという「活格仮説」を提案し、この仮説の実証的研究を行っている。オックスフォード大学で、イギリス人文科学研究振興会(Artsand Humanities Research Council, UK(AHRC))の助成金による古代目本語研究のプロジェクト(ビャーケ・フレレスビッグ、オックスフォード大学東洋研究科教授統括)の外部メンバーとして2008年9月から共同研究をすすめている。またコーネル大学John Whitman教授とは、日本語の格と語順の変化による言語変化のメカニズムに関する共同研究を行っている。20年度の研究成果は'Alignment and WordOrderin Old Japanese'(Journal of East Asian Linguistics)から2009年度中に出版される。また、国内では「人称と活格類型一上代目本語の代名詞体系の観点から」『ウチとソトの言語学』(開拓社、印刷中)に研究成果をまとめた。すでに研究の蓄積のあるインド・ヨーロッパ語族でも活格類型から主格類型への変化が多くの学者により提唱されているため、日本語における「活格仮説」が正しいとすると、言語変化を日本語独自の変化としてではなく、一般的変化の中から日本語を捉えることが可能になる。本年度は上代日本語の活格型の格システムから現代日本語の主格型の格システムへの歴史的変化を生成文法理論の枠組みで理論化し、資料的事実と先行研究が豊富なインド・イラン語派の能格型から主格型への歴史的変化と比較を試みた。活格型とは活格が他動詞の主語と動作自動詞(特に非能格自動詞)をマークし、非動作自動詞主語と他動詞の目的語が同じ格表示をつ言語である。生成文法の枠組みでは活格は能格言語の一形態であるとされてきた。能格・活格型言語と主格型言語の違いは単に格表示の違いだけだはなく、統語的にも異なるシステムをもつことが観察される。Harris and Campbell(1995)は活格型から主格型言語への変化は活格が非動作自動詞(特に非対格自動詞)へ拡大することにより格システムが変わると主張している。本研究では活格が非動作動詞に拡大する以前に、目的語が対格として確立し、対格を付与するための構造的変化が活格から主格への変化の誘因(trigger)になることを示した。

活格と能格は格が内在格をvから付与され、主格は構造格をTから付与されるという一般化はLegate(2004)など多くの研究者によって指摘されているが、日本語の活格から主格への変化もインド・イラン語派の能格から主格への変化と同様に格システムの変化は内在格から構造格の変化であり、またこの格変化が「名詞化(nominalization)」が主文へと拡大する歴史変化と対応することを実証的に示した。また本研究後半は活格システムと代名詞に関する研究を行った。活格型また能格型言語の多くは格が分裂し、分裂言語では活格はSilverstein(1976)の名詞階層でもっとも上位の代名詞に現れ、下位の無生主語には現れない。また代名詞には強形代名詞(strong pronoun)と接語代名詞(clitic pronoun)が存在し、接語代名詞に活格が現れるという特徴がある。本研究ではこうした類型的事実が古代日本語に存在することを示し、活格言語における言語現象を理論的枠組みを用いてどのように説明するかという観点から研究を行った。
衣服の拘束性に関する研究

下半身用衣服の機能性と快適性を追求するための基礎資料を得ることを目的に、タイトスカートを例にスカート丈と歩きぶりの関係について調べた。また、ベルトにかかる張力を計測し、胴囲位置での衣服圧を推定するとともに、ウエストにかかる圧迫量と圧迫感覚の対応について検討した。女子学生9名の被験者が、裾周り一定で、膝下20cm15cmまで5cm間隔に作成した丈の異なる8種類のタイトスカートを着用し、足跡とビデオ画像で歩行の状態をとらえ、ストライド幅、ストライド長、歩行速度などを計測した。未着用の場合と比較し、丈が歩行におよぼす影響について考察した。その結果、スカート丈が長いとき、ストライド幅に影響は見られないが、ストライド長は短く、歩行速度は減速しており、歩行に支障を及ぼすことが確認された。歩幅の変化の程度や歩きにくさの感覚には、個人差がみられた。次に、被験者は、3cm幅のインサイドベルトを立位の状態で快適と感じる程度にウエストに巻いた。これを基準に2cmずつ詰めてゆき可能な限り締めた。張力の計測はストレインゲージ(KFG、共和電業KK)を付けたアルミ製バックルをインサイドベルトに連結して行った。バックルはベルトに一つだけ取り付け、位置をずらして締め直しながら立位・自然呼吸で各箇所30秒間づつ張力を計測していった。一方、詰め寸法に対応する曲率半径を、締めなしと最大締めの断面形状の凹凸から推定した。張力と曲率半径よりウエストにおよぶ衣服圧を算出した。衣服圧はベルトの詰めとともに増加し、脇で高い傾向がみられたが、快適と感じる圧迫度に個人差がみられたが、6.525.0gf/cm^2の範囲にあった。