hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
多光子型レーザ誘起蛍光を用いたCO_2の高感度計測システムの試作

大気中の二酸化炭素濃度の増加による地球温暖化問題の解決には,燃焼により排出されるCO_2の吸収,固定,処理および貯留に関する要素技術を開発し,その技術の最適化を計ることが重要であるが、特に最も重要な因子であるCO_2の動的挙動について把握するための計測手法,すなわち,高い時空間分解能を有するCO_2光学計測法がないのは,CO_2分子が前述のレーザ発振波長に吸収帯がない分子に属しているために生じている.本研究はレーザ光の多光子吸収法を適用することによりCO_2誘起蛍光を用いた高感度・非接触計測システムを試作することを目的として研究を行った。この方法は,通常のレーザ発振波長域より極短波長紫外側にある分子の吸収帯で多光子吸収を生じさせ,これにより生じる誘起蛍光のスペクトルならびに強度を計測することにより,レーザ光非吸収化学種の検出を行うものである.具体的には、二酸化炭素(CO_2)と窒素の混合ガスに,YAGレーザの発振波長をCO_2の極短波長紫外領域にある吸収帯に対して多光子吸収するように同調させて入射させた.レーザ光を多光子吸収して得られる誘起蛍光スペクトルの分光計測を分光器とイメージインテンシファイアを装着したCCDカメラを組合わせたシステムにより行った.その結果,CO_2の濃度に依存した蛍光のスペクトルを検出することに成功した.また,蛍光スペクトルに及ぼすCO_2濃度の影響,レーザ光パルスエネルギーの影響,ガス圧力の影響について明らかにした.大気中の二酸化炭素濃度の増加による地球温暖化問題の解決には,燃焼により排出されるCO_2の吸収,固定,処理および貯留に関する要素技術を開発し,その技術の最適化を計ることが重要であるが、特に最も重要な因子であるCO_2の動的挙動について把握するための計測手法,すなわち,高い時空間分解能を有するCO_2光学計測法がないのは,CO_2分子が前述のレーザ発振波長に吸収帯がない分子に属しているために生じている.本研究はレーザ光の多光子吸収法を適用することによりCO_2誘起蛍光を用いた高感度・非接触計測システムを試作することを目的として研究を行った。この方法は,通常のレーザ発振波長域より極短波長紫外側にある分子の吸収帯で多光子吸収を生じさせ,これにより生じる誘起蛍光のスペクトルならびに強度を計測することにより,レーザ光非吸収化学種の検出を行うものである.具体的には、二酸化炭素(CO_2)と窒素の混合ガスに,YAGレーザの発振波長をCO_2の極短波長紫外領域にある吸収帯に対して多光子吸収するように同調させて入射させた.レーザ光を多光子吸収して得られる誘起蛍光スペクトルの分光計測を分光器とイメージインテンシファイアを装着したCCDカメラを組合わせたシステムにより行った.その結果,CO_2の濃度に依存した蛍光のスペクトルを検出することに成功した.また,蛍光スペクトルに及ぼすCO_2濃度の影響,レーザ光パルスエネルギーの影響,ガス圧力の影響について明らかにした.大気中の二酸化炭素濃度の増加による地球温暖化問題の解決には,燃焼により排出されるCO_2の吸収,固定,処理および貯留に関する要素技術を開発し,その技術の最適化を計ることが重要であるが,特に最も重要な因子であるCO_2の動的挙動について把握するための計測手法,すなわち,高い時空間分解能を有するCO_2の光学計測法がないのは,CO_2分子が前述のレーザ発振波長に吸収帯がない分子に属しているために生じている.本研究はレーザ光の多光子吸収法を適用することによりCO_2の誘起蛍光を用いた高感度・非接触計測システムを試作することを目的として研究を行った。この方法は,通常のレーザ発振波長域より極短波長紫外側にある分子の吸収帯で多光子吸収を生じさせ,これにより生じる誘起蛍光のスペクトルならびに強度を計測することにより,レーザ光非吸収化学種の検出を行うものである.具体的には、二酸化炭素(CO_2)と窒素の混合ガスに,YAGレーザの発振波長をCO_2の極短波長紫外領域にある吸収帯に対して多光子吸収するように同調させて入射させた.レーザ光を多光子吸収して得られる誘起蛍光スペクトルの分光計測を分光器とイメージインテンシファイアを装着したCCDカメラを組合わせたシステムにより行った.特に,CO_2の極短波長紫外領域(170mm以下)にある吸収帯は,吸収波長域により蛍光放射機構が異なるため,蛍光強度のCO_2濃度依存性が強い吸収帯ならびに蛍光放射スペクトルの波長域を確定した.大気中の二酸化炭素濃度の増加による地球温暖化問題の解決には,燃焼により搬出されるCO_2の吸収,固定,処理および貯留に関する要素技術を開発し,その技術の最適化を計ることが重要であるが,特に最も重要な因子であるCO_2の動的挙動について把握するための計算手法,すなわち,高い時空間分解能を有するCO_2の光学計測法がないのは,CO_2分子が前述のレーザ発振波長に吸収帯がない分子に属しているために生じている.本研究はレーザ光の多光子吸収法を適用することによりCO_2の誘起蛍光を用いた高感度・非接触計測システムを試作することを目的として研究を行った。この方法は,通常のレーザ発振波長域より極短波長紫外側にある分子の吸収帯で多光子吸収を生じさせ,これにより生じる誘起蛍光のスペクトルならびに強度を計測することにより,レーザ光非吸収化学種の検出を行うものである.

具体的には,二酸化炭素(CO_2)と窒素の混合ガスに,YAGレーザの発振波長をCO_2の極短波長紫外領域にある吸収帯に対して多光子吸収するように同調させて入射させた.レーザ光を多光子吸収して得られる誘起蛍光スペクトルの分光計測を分光器とイメージインテンシファイアを装着したCCDカメラを組合わせたシステムにより行った.その結果,CO_2の濃度に依存した蛍光のスペクトルを検出することに成功した.また,蛍光スペクトルに及ぼすCO_2濃度の影響,レーザ光パルスエネルギーの影響,ガス圧力の影響について明らかにした.
線形量子ネットワークのフィードバック制御理論

ネットワークの構成要素がそれぞれ量子系で与えられる「量子ネットワーク」を考察し、ノード間の量子相関を強化するフィードバック制御系の構築法を与えた。とくに、最大の量子相関を生成するシステムの完全な特徴付けを得た。また、スクイズド光を強化する量子制御器の実験的構築に成功した。本研究では、ネットワークの構成要素(ネットワークの端点であるノード、およびそれらを結合するチャンネル)がそれぞれ量子系で与えられる「量子ネットワーク」を考察する。量子ネットワーク上で、古典系では実現できない「量子情報処理」を実行するためには、ノード間に量子的な相関を発生させる必要がある。交付申請書記載の通り、本年度は、次の2つの課題に取り組んだ:(1)フィードバックループの構造は与えられたものとして、ノード間の量子相関を強化するフィードバック制御器の効率的な設計法を与える。(2)量子情報分野へのシステム制御理論適用の様々な可能性を探るとともに、考案された量子制御理論の物理的実現法を、実験も含めて検討する。得られた成果は以下の通りである。(1)注目する線形系に対しては、量子相関は「共分散行列」で一意に指定できる。共分散行列の、制御入力のもとでの時間変化はシステム制御理論において従来より詳細に調べられており、とくに所望の共分散行列を指定する「共分散行列指定制御問題」として定式化され解が得られている。この結果を利用して、線形量子ネットワーク上に所望の量子相関を発生させるためのフィードバック制御機構の設計法を得ることができた。可解性、具体的な応用は次年度において検討する。(2)量子情報実装の際に欠くことのできない道具が、量子誤り訂正である。本年度は、とくに量子情報の保存「量子メモリー」の実装を行う際に起こるであろうエラーを、ダイナミカルに訂正するフィードバック制御機構を理論的に定式化し、その有効性を確認した。量子メモリーは量子相関を利用することでその精度を高めることができるが、その相関の強化も行われていることが確認されている。また、本年度、量子フィードバック制御の有効性を具体的に検証するための光学実験系構築のための準備を整えることができた。次年度は、理論・実験の両面から課題解決を試みる。本研究では、ネットワークの構成要素がそれぞれ量子系で与えられる「量子ネットワーク」を考察する。交付申請書記載の通り、本年度は次の3つの課題に取り組んだ:(1)ノード間にロバストな量子相関を生成するフィードバック(FB)制御器の設計法を与える。(2)系の安定性が量子相関に及ぼす影響を調べ、FBループ構成法の一般的指針を与える。(3)量子情報分野へ適用可能な制御理論の可能性を探るとともに、その物理的実現法を実験も含めて検討する。(1)オーストラリア国立大学・M.R.James教授のグループに所属するポスドク研究員H.I.Nurdin博士とともに、空間的に離れた量子光学ネットワーク間に強い量子相関を生じさせるFB制御則を見出した。これはいわゆるLQG制御器と呼ばれるもので、ある種のロバスト性を有していることが知られている。ロバスト性に関する若干の追加解析を行い、ジャーナル投稿の予定である。(2)連続的測定下にある1粒子の挙動を詳細に調べ、予想していた安定性と不確かさのトレードオフを持たないシステムを一般的に構成できることがわかった。具体的には、量子系に不可避的に起こる測定のバックアクションを、測定していない物理量に押しつけることで、このトレードオフを回避することが常に可能であることが判明した。現在、Physical Review Aに投稿用の原稿を執筆中である。(3)測定機構を含まない「量子コヒーレントFBネットワーク」の、とくに「スクイズド状態」を生成するシステムについて詳細に解析を行い、実際の実験機構を踏まえた設定における制御限界を明らかにした。さらに、東京大学・工学部物理工学科・古澤明教授の研究室にて実際に実験を行い、理論と整合することを確認した。結果は、IEEE Transaction on Automatic Controlに投稿中である。交付申請書記載の通り、本年度は次の3つの課題に取り組んだ:1.ノード間にロバストな量子相関を生成するフィードバック(FB)制御器の設計法を与える。2.系の安定性が量子相関に及ぼす影響を調べ、FBループ構成法の一般的指針を与える。3.量子情報分野へ適用可能な制御理論の可能性を探るとともに、その物理的実現法を実験も含めて検討する。1。とくに光の量子相関を、「量子メモリ」であるイオンやナノ振動子などの固定系へ転送する枠組みにおいて、メモリの量子相関をロバストに生成するためのフィードバック制御機構を考案し、その効果を検証した。結果はPhys.Rev.A(85巻、022303頁)に掲載された。本結果は、その有効性が広く認知されているLQG制御法を量子情報の体系へはじめて適用したものであり、意義深いと考える。2.アプローチを変更し、そもそも、いわゆる「純粋な」つまりもっとも望ましい量子相関を生成するようなシステムがもつべき性質を特徴づけることを出発点とし、実際に、完全な特徴付けを得ることに成功した。

結果はPhys.Rev.A(85巻、022103頁)に掲載された。さらにこの結果を拡張し、いかなるフィードバック制御を行えばこの条件を満たすことが可能であるか、これについても完全な特徴付けが得られた。結果はPhil.Trans.Roy.Soc.Aに掲載決定している。3.測定機構を含まない「量子コヒーレントFBネットワーク」の、とくに「スクイズド状態」を生成するシステムを、東京大学・工学部物理工学科・古澤明教授の研究室にて実験的に構築することに成功した。結果は、IEEE Transactionon Automatic Controlに掲載決定している。他方、光学干渉系の大域的な位相ずれを補正するフィードバック制御機構の理論構築を行い、さらにそのシステムを、申請者の研究室にて実験的に実現した。本結果はさらなる発展が見込め、現在、追加検証中である。餓
有限非可換群上の耐量子問題の探究

補助事業期間全体で、本研究は次の2点を達成することを目標として計画を立てている。(1)有限非可換群上の分解問題の難しさを多角的に検討して耐量子性の状況証拠を積み重ねること(2)かつて本研究代表者が開発した計算量的リフティング技術を分解問題の活用により再構築することここに計算量的リフティングとは、耐量子性が備わっていると見られる問題を比喩的に言えばゴンドラのように利用し、耐量子性のない問題をゴンドラに入れて耐量子性の領域へ引き上げ、量子計算機による攻撃を回避する計算量理論的な手法のことである。
細胞周期関連遺伝子ShugoshinのCKOマウスにおける血管病変の分子機能解析

多くの血管病変は、加齢とともにその罹患率が増加し、年齢そのものが重要な危険因子となっている。細胞周期関連遺伝子であり有糸分裂時に染色体の適切な分配を制御する因子であるSgol1(Shugoshin-like 1)が血管内皮細胞、血管平滑筋細胞の老化において果たす役割をコンディショナルノックアウトマウス(以下CKOマウス)を用いて解析することを目的とした。20頭以上のマウスでtypingを行ったが、胎生致死のためか血管内皮特異的もしくは血管平滑筋特異的shugosin CKOマウスを得ることができなかった。ヘテロマウスで大動脈の表現系を検討したが有意な所見は認めなかった。Cre-loxPシステムを用いて、血管内皮特異的shugoshinノックアウトマウスと血管平滑筋特異的shugoshinノックアウトマウスの作成を試みた。血管内皮/平滑筋特異的ホモノックアウトマウスは胎生致死の可能性があり誕生していない。現時点では血管内皮/平滑筋特異的ヘテロノックアウトマウスは少数ながら誕生した。血管内皮膚特異的、血管平滑筋特異的ホモノックアウトマウスは胎生致死の可能性があり誕生困難であった。現時点では血管内皮特異的、血管平滑筋特異的ヘテロノックアウトマウスは誕生した。ヘテロノックアウトマウスの大動脈で血管の表現型を確認したが差は認めなかった。血管内皮膚特異的、血管平滑筋特異的ホモノックアウトマウスの作成を試みたが、胎生致死の可能性があり誕生困難であった。現時点では血管内皮特異的、血管平滑筋特異的ヘテロノックアウトマウスは少数ながら誕生しており、同マウスで血管の表現型の確認までは施行できた。本研究は細胞周期関連遺伝子であり有糸分裂時に染色体の適切な分配を制御する因子であるSgol1(Shugoshin-like 1)が血管内皮細胞、血管平滑筋細胞の老化において果たす役割をコンディショナルノックアウトマウス(以下CKOマウス)を用いて解析することで、血管の老化予防や動脈硬化による血管イベントの発生の抑制に関する研究を強力に推進することを目的とした。Cre-loxPシステムを用いて、血管内皮特異的shugoshinノックアウトマウスと血管平滑筋特異的ノックアウトマウスの作製を試みた。血管内皮特異的・血管平滑筋特異的ノックアウトマウスは胎生致死の可能性があり誕生しなかった。血管内皮特異的ヘテロノックアウトマウス、血管平滑筋特異的ヘテロノックアウトマウスにて大動脈の表現型を組織で確認したが特異的な所見は見出せなかった。上記結果を英文雑誌に投稿中である。血管内皮/平滑筋特異的ヘテロノックアウトマウスは少数ながら誕生しているものの、血管内皮/平滑筋特異的ホモノックアウトマウスは胎生致死の可能性があるためか、現時点では誕生していない。血管内皮特異的、血管平滑筋特異的ヘテロノックアウトマウスの量産を行う。1)血管内皮特異的、血管平滑筋特異的sgol1ホモノックアウトマウス胎生致死のメカニズムを解析、2)ヘテロノックアウトマウスにおいて頸動脈結紮やアンジオテンシン刺激による頸動脈や大動脈の病理学的評価、3)マウス血管内皮、平滑筋を分離し、shugoshin発現低下を確認していく。血管外科学血管内皮/平滑筋特異的ホモノックアウトマウスは胎生致死の可能性があり、現時点では誕生していない。血管内皮/平滑筋特異的ヘテロノックアウトマウスは少数ながら誕生している。今後、下記の方針である。1)血管内皮/平滑筋特異的sgol1ホモノックアウトマウスの胎生致死のメカニズムを解析。2)交配を重ね、sgol1特異的ヘテロノックアウトマウスを量産。3)ワイヤー傷害および頸動脈結紮により内膜肥厚モデルを作製し、Sgol1の寄与を検討する。4)大動脈内皮細胞,大動脈平滑筋細胞を分離し,細胞増殖能,遊走能等を比較する。5)eNOS等の血管の老化に関連する遺伝子のmRNA量,蛋白量,翻訳後修飾等を比較検討する。6)術時に採取したヒトの大動脈標本及び剖検時の大動脈標本を用い、ヒトにおいてもマウスと同様の分子生物学的システムが働いているか解析する。その解析結果の如何によっては、ヒトSgol1遺伝子搭載アデノウイルスを作製しSgol1蛋白を高発現させ安全域を確認し、治療に応用する。
ヘリコバクターピロリ病原因子ＣａｇＡの病原生物活性に関わる分子構造基盤の解明

ピロリ菌CagAタンパク質は宿主細胞内に注入され、C末端領域に存在するEPIYA領域を介して増殖シグナル伝達分子SHP-2及び細胞極性制御分子PAR1と相互作用し、その活性を脱制御する。CagA組換えタンパク質を用いた構造解析を進め、CagAが二つのドメインで構成され、CagA生物活性に重要なC末端領域においては高次構造が存在する一方で、自由度の高い不規則構造も併せて存在していることを示した。一方、CagAのN末端フラグメントを用いた結晶化スクリーニングを行い、タンパク質結晶を得ることに成功しX線構造解析を進めCagA分子立体構造を解明した。申請者はこれまでに、ヘリコバクターピロリCagA組換えタンパク質を用いた構造解析を進め、CagAが二つのドメインで構成され、CagA生物活性に重要なC末端領域においては高次構造が存在する一方で、自由度の高い不規則構造も併せて存在していることを明らかにした。また、全長CagAが示す細胞形態変化誘導活性を指標に組換えC末端フラグメントの生物活性を検討し、不規則構造から構成されているC末端フラグメントは細胞形態変化活性を示したことから、CagAは主要な生物活性に重要なEPIYA領域周辺を不定形構造として持つ内因性不規則構造タンパク質であることが強く示唆されていた。1.NMR法によるC末端フラグメントとCagAの標的分子であるPAR1分子間相互作用の解析を進め、PAR1によるNMR分子滴定の結果からCagA C末端フラグメントは標的分子と相互作用することで一定の構造を維持する内因性不規則構造タンパク質であることが明らかとなった。さらにN15/C13ラベルCagA分子を用いたNMR滴定解析を進め、PAR1との相互作用に関わるアミノ酸残基の同定を行った。2.CagA N末端フラグメントの結晶構造解析を行い約3.5Aの解析像を得たが、分子構造の詳細を明らかにするには至らなかった。そこで、N末端フラグメントのさらなるドメイン構造解析を進め、ドメイン構造情報に基づいた複数の欠失変異体を作成し結晶化に成功した。個々の欠失変異体フラグメントのX線構造解析結果に加え、アミノ酸置換を導入した変異型N末端フラグメントの構造解析を進め、N末端フラグメント構造の概要を明らかにするに至った。申請者は、ヘリコバクターピロリCagAタンパク質を用いた構造解析を進めてきた。プロテアーゼ限定分解等の解析により、CagAが二つのドメインで構成され、生物活性に重要なCagA C末端領域には高次構造が存在する一方で、自由度の高い不規則構造も併せて存在していることが明らかとなった。また、CagAのN末端フラグメントを用いた結晶化スクリーニングを行い、CagAタンパク質結晶を得ることに成功しX線構造解析を進めた。当初得られた結晶では、部分的な解析像を得ることに成功したが、詳細な構造情報を得られなかった。解像度の向上を図るため、X線構造解析に影響を及ぼしていると予想されたアミノ酸残基を置換し、一連の変異型CagA N末端フラグメントを作出、解析し、主目的の一つであるCagA分子構造の解明に成功した(Hayashi T. et al. Cell Host Microbe, 2012)。そこで、これまでのCagA分子構造解析で得られた技術・情報を利用し、細菌性病原因子の分子構造情報を基盤とした、細菌感染症の予防法開発を試みた。炭疽菌病原因子の一つProtective antigen (PA)の分子立体構造情報を基にin silico解析を進め、新規抗炭疽ワクチンを目的とした抗原性、分子安定性の検討ならびに分子モデリングを行った。その結果、PA多量体上で隣接したPA分子で表現される、タンパク質四次構造を再現する新規人工タンパク質を作出した。得られた人工分子を用いたマウス免疫実験を行った結果、作出した人工分子により炭疽病原因子に対する抗体価の上昇が確認され、また、培養細胞を用いた毒性試験では、免疫マウス血清によって病原因子の毒性が軽減されることが確認された。申請者らは、これまでヘリコバクターピロリCagA組換えタンパク質を用いた構造解析を進め、CagAが二つのドメインで構成され、CagA生物活性に重要なC末端領域においては高次構造が存在する一方で、自由度の高い不規則構造も併せて存在していることを示してきた。一方、CagAのN末端フラグメントを用いた結晶化スクリーニングを行い、タンパク質結晶を得ることに成功しX線構造解析を進めてきた。CagA分子N末端領域のタンパク質結晶を用いたX線構造解析より得られた分子構造情報を基に、構造解析に有用と予想されたアミノ酸置換を導入した変異型N末端フラグメントならびに欠失変異体を作製した。

一連の組み換えCagA N末端フラグメントの結晶化及びX線構造解析を進め、CagA分子構造の詳細を明らかにした(Hayashi T et al. Cell Host Microbe 12(1), 20-33, 2012)。CagA N末端領域は3つのドメインから構成されており、CagA N末端領域はその一次構造と同様に既知の分子構造と相同性を示さない立体構造を示すことが明らかとなった。また申請者は、CagA生物活性の発現に重要なC-末端領域がN末端領域との間で分子内相互作用を示し、その相互作用によりCagA生物活性が影響を受けること示してきたが、N末端領域の立体構造情報が明らかとなり、分子内相互作用がCagA生物活性発現に及ぼす分子機構を明らかにするに至った。申請時において得られていたCagA分子構造情報に加え、新たに作出した変異型分子の構造情報からCagA N末端フラグメント構造の概要を明らかにすることに成功した。このことは、本申請課題の目的であるCagA分子構造の解明、さらには分子構造情報に基づいた抗CagA活性物質の開発を達成するにあたり、非常に大きな進捗と考えられる。25年度が最終年度であるため、記入しない。これまでのCagA構造解析の結果から、限定された分子領域内に存在する塩基性アミノ酸残基がX線回折に影響を与えていることが示唆されていた。そこで、遺伝子的にアミノ酸置換を導入した変異型CagA分子の結晶を作成し構造解析に用いた。新たに作出した変異型分子の構造情報より、本申請課題の主目的の一つであるCagA分子構造の解明に成功し論文上に公表した。このことは、本申請課題の最終目的である抗CagA活性物質の開発を達成するにあたり非常に大きな進捗であり、抗CagA活性物質の開発に着手できる状況に至った。得られたCagA分子の表面分形状に関する構造情報に基づき、CagAと他の分子との相互作用をin silicoでシュミレーションを行う準備に着手した。現在解析中の変異型CagA分子の構造情報を明らかにし、これまでに得られた立体構造情報と併せた分子構造モデリングを遂行する。また、得られたCagA分子構造情報を基盤とした、抗CagA活性物質の探索に着手していく。・立体構造情報を利用したドラッグモデリングと評価を進める。CagAの構造解析結果及びCagAの分子間・分子内相互作用に関する情報を基に、特許申請を視野に入れなからCagA生物活性に対し抑制作用を示す低分子物質のin silicoスクリーニングを進める。得られた化合物に関して、CagA/SHP-2相互作用により誘導される細胞形態変化ならびにCagA/PAR1相互作用に依存する細胞極性形成異常を指標とした評価をはじめ、これまでに確認されているCagA生物活性依存的な生物学的現象を利用し評価を進める。・既知または新規の細菌性病原因子において、CagA分子と構造及ひ機能面で類似性を示す分子を探索する。今回明らかとなったCagA分子の立体構造情報を利用し、他の細菌性感染症における感染成立及び発症に関わる分子機構の解明および治療・予防法の開発を試みる。
ナノスケールアパタイト生体結合膜による人工関節軟骨への高度組織親和性付与

本研究では,パルスレーザーアブレーション法によってハイドロキシアパタイト(HA)を人工関節軟骨とビーズ型人工歯根に超薄膜被覆し,それらに高度な生体親和性を与える方法を開発した.1.HA被覆した人工関節軟骨ポリビニルアルコールハイドロゲル(PVA)の生体親和性評価PVAは含水性エラストマーであり,表面親水性が大きい.そのため細胞接着性(生体親和性)は極めて悪く,人工関節軟骨として利用するとき,その母床である軟骨下骨との組織結合は全く期待できない.そこでPVAの比較的大きな変形にも追随できるHA被覆,すなわち超薄膜化HAを被覆する方法を提案しその効果を検討した.厚さ300nmのHAを被覆したPVA/HAは,PVAの含水率が小さいほど生体親和性が高かった.特に含水率33%のPVA/HAは,良好な生体親和性を示した.他の実験条件の結果も含めて検討し,HA超薄膜被覆は元来生体親和性を持たないPVAに良好な生体親和性を付与できると結論した.2.HA被覆したビーズインプラントのバイオメカニクス的評価レーザーアブレーション法によってHAを約10μmの厚さでビーズ型人工歯根の表面に被覆した.そしてビーズが形成する連通孔断面におけるCaとPの元素分析を行い,本方法を用いると従来手法では不可能であった連通孔深部にまでHAを被覆できることを確認した.一方,HA被膜ビーズ型人工歯根をイヌ下顎骨に埋入し,術後312週での骨成長状態をμCT画像によって評価した.その結果,HA被膜インプラントの連通孔深部への骨成長速度は,HA被覆しない場合に比べて2倍程度速いことがわかった.しかし,術後3週での骨からの引抜強さについて,HA被覆の効果は明確でなく,術後より早期においてHA被覆の効果が期待できることが示唆された.本研究では,パルスレーザーアブレーション法によってハイドロキシアパタイト(HA)を人工関節軟骨とビーズ型人工歯根に超薄膜被覆し,それらに高度な生体親和性を与える方法を開発した.1.HA被覆した人工関節軟骨ポリビニルアルコールハイドロゲル(PVA)の生体親和性評価PVAは含水性エラストマーであり,表面親水性が大きい.そのため細胞接着性(生体親和性)は極めて悪く,人工関節軟骨として利用するとき,その母床である軟骨下骨との組織結合は全く期待できない.そこでPVAの比較的大きな変形にも追随できるHA被覆,すなわち超薄膜化HAを被覆する方法を提案しその効果を検討した.厚さ300nmのHAを被覆したPVA/HAは,PVAの含水率が小さいほど生体親和性が高かった.特に含水率33%のPVA/HAは,良好な生体親和性を示した.他の実験条件の結果も含めて検討し,HA超薄膜被覆は元来生体親和性を持たないPVAに良好な生体親和性を付与できると結論した.2.HA被覆したビーズインプラントのバイオメカニクス的評価レーザーアブレーション法によってHAを約10μmの厚さでビーズ型人工歯根の表面に被覆した.そしてビーズが形成する連通孔断面におけるCaとPの元素分析を行い,本方法を用いると従来手法では不可能であった連通孔深部にまでHAを被覆できることを確認した.一方,HA被膜ビーズ型人工歯根をイヌ下顎骨に埋入し,術後312週での骨成長状態をμCT画像によって評価した.その結果,HA被膜インプラントの連通孔深部への骨成長速度は,HA被覆しない場合に比べて2倍程度速いことがわかった.しかし,術後3週での骨からの引抜強さについて,HA被覆の効果は明確でなく,術後より早期においてHA被覆の効果が期待できることが示唆された.1.アパタイト(HA)被覆したインプラントのバイオメカニクス的評価約10000nmの厚さでレーザアブレーション被覆したビーズ型人口歯根の表面およびビーズが形成する連通孔断面におけるCa元素分析を行った。そして,HAが連通孔深部にまで到達していることを確認した.一方,厚さ約3000nmのHA被膜インプラントをイヌ下顎骨に埋入し,術後5および9週での骨成長をμCT画像によって評価した,その結果,HA被膜インプラントの連通孔深部への骨成長速度は,HA被覆しない場合に比べて2倍程度速いことがわかった,また,術後8週における引抜強さは,HAの影響は認められず500N程度であった,しかし,術後12週における引抜強さは400Nに低下しており,連通孔深部での応力遮断が原因と思われる進入骨先端部における骨萎縮の発生が疑われた.2.HA被覆した人工関節軟骨ポリビニルアルコールハイドロゲル(PVA)の生体親和性評価3種類の含水率,2種類の重合度をもつ計6種類のPVAを作製した.PVAの亀裂進展抵抗は未だ確定値を得ることはできていないが,最も弱かったPVAでも高級構造プラスチック材料とされるABS樹脂に比べて1.3倍程度大きいことが示唆された.また,HA被覆とその処理過程がPVAの引張強さに与える影響はほとんどなかった.亀裂進展抵抗にもその影響は少ないことが示唆された.一般的な方法によって,HA被覆したPVA表面でのマウス骨芽細胞および線維芽細胞の増殖実験を行った.HA被覆したPVAでは,細胞は伸展して偽足をのばしている様子が確認できた.

HA被覆しなかったPVAでも一部に細胞進展は見られたが,細胞接着性は被覆した場合に比べて半分程度であった.また,PVAの含水率によって細胞接着性と倍加速度が変化し,その変化特性から細胞増殖に最適なPVAの含水率が存在することが示唆された.本研究では,骨の主成分であるハイドロキシアパタイト(HA)を基材に超薄膜被覆できるパルスレーザーアブレーション法(PLD)を利用して,基材である人工関節軟骨とビーズ型人工歯根にHAを被覆しそれらに高度な生体親和性を与える方法を開発した.特に人工関節軟骨として利用するPoly(vinyl)alcohol hydrogel (PVA)は,含水性エラストマーであり,表面親水性が大きい.そのため細胞接着性は極めて悪く人工関節軟骨として利用するとき,その母床である軟骨下骨との組織結合は全く期待できない.一方,人工関節軟骨の関節面は,その潤滑性を保つために生体不活性である必要があり,PVAは好適である.そのため人工関節軟骨の所要の面に選択的に生体親和性を与える技術が必要となる.このためにテンプレートマスクを用いる技術を開発し,PVAの所要箇所に所要の膜厚でHAを被覆できるようにした.低,中,高の3グレードの含水率,2種類の重合度をもつ計6種類のPVAを作製した.前年度の研究で亀裂進展抵抗が大きかったPVAを用いて,マウス線維芽細胞L929を用いた一般的な細胞増殖実験によってPVAの生体親和性を評価した.HA被覆をしないPVAは人工関節軟骨として使用したとき,骨との接着は不可能であることを確認した.厚さ300nmのHAを被覆したPVA/HAは,PVAの含水率が少ないほど生体親和性が高かった.含水率33%のPVA/HAは,対照群(標準培地を用いたL929が良好に増殖する条件)と有意差が認められない程度の良好な生体親和性を示した.これに他の条件の実験結果も含めて検討し,HA超薄膜被覆は元来生体親和性を持たないPVAに良好な生体親和性をそれが必要な面に選択的に付与できると結論した.すなわち,PVAの所要の面にPLDによるHA被覆を施すことで,人工関節軟骨に骨固定性を与えることができることを示した.
これまで見逃されていた好塩基球の存在意義と病態形成における役割

1.慢性閉塞性肺疾患(COPD)マウスモデルを使って肺気腫の発症過程を解析し、肺に浸潤してくる好塩基球が重要な働きをしていることを明らかにした。すなわち、好塩基球の産生するIL-4が肺に浸潤した単球に作用して間質マクロファージへと分化させること、間質マクロファージが分泌するタンパク分解酵素MMP-12が肺胞壁を傷害し、肺気腫が形成されることが判明した。肺気腫の新たな治療標的の同定につながる重要な発見である。2.1度マダニ感染を経験すると2度目以降の感染では宿主動物がマダニ吸血に対して抵抗性(獲得耐性)を示す。本研究において耐性獲得のメカニズムを明らかにすることができた。すなわち、2度目の感染部位に集積した好塩基球が分泌するヒスタミンが皮膚表皮細胞に作用して増殖を促進すること、その結果表皮が肥厚しマダニによる吸血が阻害されることが判明した。マダニ感染に対するワクチン開発につながる重要な発見である。3.好塩基球が必須の役割を果たしているIgE依存性慢性アレルギー炎症(IgE-CAI)では、アレルゲンにおけるキャリアタンパク質の違いによってIgE-CAIの炎症強度が著しく異なり、大きな凝集体を作るキャリアタンパク質を用いた場合に重篤なIgE-CAIが誘導されることが判明した。アレルゲンとなりうるタンパク質の性状を示した重要な発見である。4.好塩基球によるIL-4産生にはCa2+の流入が必要である。本研究においてIL-4産生刺激の種類の違いによって異なるCa2+センサーが作動することが判明した。すなわち、IgE受容体を介する刺激ではSTIM1が、IL-3受容体を介する刺激ではSTIM2が主要な役割を担う。これまでCa2+流入におけるSTIM2の重要性は低いと考えられていたが、IL-3刺激による好塩基球のIL-4産生においてSTIM2が必須の役割を果たしていることが明らかとなった。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。好塩基球は末梢血白血球のわずか0.5%程度を占めるに過ぎない極少血球細胞であるが、私たちはアトピー性皮膚炎のマウスモデルであるIgE依存性皮膚慢性アレルギー炎症(IgE-CAI)の解析から好塩基球がアレルギー炎症に必須の役割を果たしていることを明らかにしてきた。しかし、好塩基球がどのようなメカニズムでアレルギー炎症を惹起するのかはよく分かっていなかった。本年度の研究では、好塩基球の分泌顆粒に貯蔵され、細胞の活性化にともなう脱顆粒によって細胞外に放出されるプロテアーゼに注目し解析をすすめた。mMCP-11は、当初マスト細胞の発現するトリプターゼのひとつとして報告されたが、私たちの解析から好塩基球に選択的に発現するトリプターゼであることが判明した。そこでmMCP-11ノックアウトマウスを樹立して耳介皮膚においてIgE-CAIを誘導したところ、皮膚の腫脹が正常マウスの約半分にまで減弱した。詳細な解析から、mMCP-11ノックアウトマウスでは当該皮膚における血管透過性亢進ならびに細胞浸潤が半減するなど、アレルギー炎症反応が抑制されていることが明らかとなり、mMCP-11がアレルギー治療の標的になる可能性が示された。mMCP-8も好塩基球の特異的に発現するセリンプロテアーゼであり、好塩基球固有の機能に関与していることが強く示唆されたので、本年度ノックアウトマウスを作製し、その表現型の解析を開始した。予定通り、mMCP-11ノックアウトマウスの機能解析が進み、mMCP-8ノックアウトマウスの樹立にも成功した。これまでの研究で、好塩基球がIgE依存性皮膚慢性アレルギー炎症(IgE-CAI)の発症に必須の役割を果たしていることを明らかにしてきた。好塩基球に選択的に発現するプロテアーゼmMCP-11を欠損したマウスではIgE-CAIの皮膚病変部への白血球浸潤が半減することから、mMCP-11が白血球遊走に関与する可能性が強く示唆された。リコンビナントmMCP-11とトランスウェルを用いた解析から、mMCP-11が血中・組織中の蛋白質に作用して、その分解産物がG蛋白質共役受容体を介して好塩基球、好酸球や単球・マクロファージの遊走をひきおこすことが判明した。好塩基球特異的に発現するもうひとつプロテアーゼmMCP-8に関してもリコンビナント蛋白を作製して皮内注射したところ、好中球を主とした白血球浸潤が観察された。この場合、mMCP-11とは異なり、皮膚常在の細胞に作用してケモカイン産生を誘導することで、白血球遊走をひきおこすことが示唆された。好塩基球がMHCクラスII分子(MHC-II)を発現して抗原提示細胞として機能するかどうかに関しては相反する実験結果が報告されたため、未解決のままであった。そこで本研究では好塩基球におけるMHC-II発現を詳細に検討した。その結果、好塩基球自体はMHC-II蛋白質を産生することはできないが、トロゴサイトーシス機構により樹状細胞から抗原ペプチド・MHC-II複合体を獲得して、T細胞に抗原提示することが出来るという新事実が明らかとなった。すなわち、好塩基球はこのトロゴサイトーシスを介した抗原ペプチド・MHC-II複合体獲得とともにIL-4を産生することで、ナイーブCD4 T細胞をTh2細胞へと分化させる能力を有することが判明した。

予定通りmMCP-11ならびにmMCP-8のアレルギー炎症惹起の分子メカニズムの解析が進んだ。また、これまで結論が出ていなかった「好塩基球のMHC-IIの発現ならびに抗原提示能」に関して、トロゴサイトーシスを介するMHC-II獲得という予想外のメカニズムが存在することを見いだした。これまでの研究で、好塩基球がアレルギー病態形成に関与する一方、寄生虫感染(マダニなどの外部寄生虫ならびに消化管寄生虫などの内部寄生虫)に対する生体防御に重要な役割を果たしていることを明らかにしてきた。マダニは吸血性の節足動物で、吸血の際にヒトを含む宿主動物に病原微生物を伝搬し、ライム病や重症熱性血小板減少症候群などの重篤な感染症を引き起こすことから、医学的・社会的に大きな問題となっている。1度マダニ感染を経験すると、2度目以降のマダニ感染では宿主動物がマダニによる吸血に対して抵抗性(獲得耐性)を示す。これまで私たちは、2度目のマダニ感染部位に好塩基球が集積していること、この好塩基球を除去すると獲得耐性が失われることを示し、マダニ感染に対する耐性獲得に好塩基球が必須の役割を果たしていることを見いだしたが、どのようなメカニズムで好塩基球が2度目のマダニ感染部位に遊走してくるのかは不明であった。本年度の研究において、皮膚に存在するCD4陽性記憶T細胞の産生するサイトカインIL-3が2度目のマダニ感染部位への好塩基球の遊走・集積に重要であることを明らかにした。すなわち、1度目の感染で生成されたダニ抗原特異的CD4 T細胞が全身の皮膚に移行して皮膚常在性の記憶T細胞となり、2度目のマダニ感染の際にマダニ抗原によって活性化されると、IL-3を分泌して好塩基球を感染部位に引き寄せることが判明した。このメカニズムを応用することにより、マダニに対する効果的なワクチンの開発が可能になるものと期待される2度目のマダニ感染部位への好塩基球の遊走・集積のメカニズムを細胞レベルならびに分子レベルで明らかにすることができた。2度目のマダニ感染が1度目の感染部位とは異なっていてもマダニ吸血に対する抵抗性が発揮されることから、全身性の免疫反応の関与が示唆されていたが、本研究により、その本態が1度目の感染で生成された皮膚常在性のダニ抗原特異的記憶T細胞であることが判明した。これは当初の予想を越える大きな成果である。1.慢性閉塞性肺疾患(COPD)マウスモデルを使って肺気腫の発症過程を解析し、肺に浸潤してくる好塩基球が重要な働きをしていることを明らかにした。すなわち、好塩基球の産生するIL-4が肺に浸潤した単球に作用して間質マクロファージへと分化させること、間質マクロファージが分泌するタンパク分解酵素MMP-12が肺胞壁を傷害し、肺気腫が形成されることが判明した。肺気腫の新たな治療標的の同定につながる重要な発見である。2.1度マダニ感染を経験すると2度目以降の感染では宿主動物がマダニ吸血に対して抵抗性(獲得耐性)を示す。本研究において耐性獲得のメカニズムを明らかにすることができた。すなわち、2度目の感染部位に集積した好塩基球が分泌するヒスタミンが皮膚表皮細胞に作用して増殖を促進すること、その結果表皮が肥厚しマダニによる吸血が阻害されることが判明した。マダニ感染に対するワクチン開発につながる重要な発見である。3.好塩基球が必須の役割を果たしているIgE依存性慢性アレルギー
言語理論と日本語教育の相互活性化

研究目的:文法の各部門の有機的関連性を基に文法モジュ-ルを設定し、これにたいして機能モジュ-ルが働きかけるシステム「総合機能文法」と日本語教育の相互活性化を目指して、各モジュ-ル間の接点の問題を堀り下げ、次の知見を得た。1.理論的研究:(1)使役、受動、可能、能挌、中間態の各構造にわたるヴォイス現象は、従来前三者を統語論、後二者を語彙論の問題としてきたが、これらは語彙情報である項構造とtheta枠、及びそれらの変更を基礎にした派生過程として小数の共通原理に基づいており、語彙情報を統語構造(Dー構造)に投射する投射原理、語彙的派生と統語的派生の区別、各構造の独立性など、従来の文法理論の基本的仮説に修正が必要であることが明らかになった。(2)ヴォイス構造の認知的基盤を探り、認知過程が文法化される際の機能的原理の作用についての研究の端緒を得た。(3)統語構造と意味構造の接点の問題として、時制によって決定される構造および意味解釈に関し、中間態、条件文、音形を持たない総称的な代名詞の分布を時制を基に分析した。(4)談話構造と統語構造の接点において、情報伝達という機能面と文構造との関わりについて新しい知見を得た。(i)条件文の論理構造と談話の接続の研究(ii)情報伝達機能から見たYesーNo疑問文、その応答詞「そうです」の談話機能(iii)「です」「ます」の談話機能2.応用研究:(1)日本語教育の基礎語彙の意味分布についてデ-タの集計終了(2)日系二世の談話資料の分析により第二言語としての日本語使用者の談話の特徴を抽出(3)ヴォイスの理論的研究を基に日本語学習者の誤用例を調査し、その特徴として能挌文を中心に、動作主性の低い構文に誤りが集中するという結果を得た。3.「言語理論と日本語教育の相互活性化」をテ-マに、平成2年、3年にシンポジュウムを開催し予稿集を用意して、日本語学、日本語教育専門家を招き、活発な討議を行った。1.資料整備:(1)1985ー1990の特別推進研究で収集・入力した日本語誤用デ-タをパソコン用に変換する方法を試験中(2)上記デ-タの一部をデ-タベ-スプログラムに試作、2.基礎研究:(1)統語論一語彙論:(i)日本語の可能文と能格文および中間態文との対応関係を研究(井上)(ii)「非対格の仮説」が日本語の理論的分析だけではなく日本語教育の実践において有効であることを実証(影山)(iii)日本語の文法関係変更のプロセスを明らかにし、間接受動文を中心にした他言語との比較(鷲尾)(2)意味構造:(i)数量詞のスコ-プと名詞句格下げ(村木)(ii)日本語の条件文の論理構造(阿部)(3)談話文法:(i)談話文法研究の文献調査、日本語母語話者による談話例を対象に、談話文法で提案されている概念を検証(日比谷)(ii)応答辞「そうです」の談話機能、否定疑問文の談話機能とその分類(奥津)(4)モジュ-

ル的文法システムの開発:統語、意味、語用、機能モジュ-ルの相関関係を日本語の主題構文によって検討、主題構文のこの種の文法での重要性を確認。アイヌ語の抱合現象の、語彙と統語との関連の研究(柴谷)(5)統語構造と機能:伝達の発話行為と日本語の文末形式:話者・聴者間での情報の分布状態を分類し、これに統語的階層性の情報を加味した、日本語のモ-ダリティと終助詞の分布に関する研究(金水)3.応用研究:(1)日本語教育基礎2000語について:教えるべき意味の決定のために(i)「新聞kwic」(書き言葉)「言語生活kwic」(話ことば)による意味ことの使用例と使用数の調査(ii)教科書で使うべき助詞決定のために主な動詞に関する「言語生活kwic」の用例調査(野元)(2)談話展開の重要要素である条件表現を取り上げ、これを含む日本文の英訳を資料として、日英語を比較(水谷信子)(3)「助言」行動が談話中に現れる形を調査。映画のシナリオ等に現れた「助言」と思われる箇所の談話を収集、整理分類。(水谷修)理論的研究:総合機能文法開発のために、文法関係を軸とする文法機能の研究と、認知作用を含む語用論的機能文法を総合するために、主としてヴオイスの現象を多角的に研究し次の成果を得た。(1)語彙的派生と統語的派生がごく少数の共通の原理に従っていることを、使役、受動、可能、能格、中間の各構造を中心に多言語からの資料により実証。時に項構造とtheta枠およびその変更が統語的派生を貫く原理とどのように連係するかを明らかにすることにより、文法理論の中の機能文法を組み入れる新しい方向を見い出した。(井上,影山,山田,鷲尾)(2)多くの言語のヴオイスの構造分析と認知作用による文法性のゆれの関わりを追求し、構文の認知的基盤を明らかにした。認知過程の文法化の可能性と、複雑な外界状況を文法的に把握する過程の研究に手掛りを得た(柴谷,金水)(3)文構造と意味解釈の接点の問題として条件文の文法的、意味的特性と調べた(阿部,水谷信)(4)条件文,中間構文、総称的解釈を受ける代名詞に関し、時制による文法構造と意味論との有機的な関連づけを明らかにした(阿部)応用研究:(1)情報伝達手段としての「YesーNo疑問文」を分析し、「受信情報の疑問文」「3^ ́確定情報の疑問文」の二種に分類し、これに対する「そうです」の応答句の妥当性について日本語教育における問題点の検討(奥津)(2)録音による口語資料による「です」「ます」の機能について研究。これを中心に言語行動の日本語における特徴的な類型を、談話の進行過程に注目し整理、検討。(水谷修)(3)談話資料について、談話の展開に関する日・英語の比較(水谷信)(4)日系カナダ人二世の自然談話資料における受動文の役割の研究(日比谷)(5)日本語教育のための基礎語彙の意味の分布について、「新聞KWIC」と「言語生活KWIC」による集計の完了(野元)(6)「言語理論と日本語教育の相互活性化」と題するシンポジウムを本年度も開催し、本研究による知見を公表した。
分子標的治療薬TGFbeta阻害剤の樹状細胞による胃癌ワクチン療法への応用

TGF beta阻害剤は樹状細胞(DC)DCによるLPS刺激によるインターロイキン12(IL-12)の産生を増加させた。またTGF beta阻害剤はDCのはT細胞増殖能も増強させた。スキルス胃癌細胞株lysateをパルスしたDCによって刺激されたT細胞による細胞傷害活性(CTL)反応の増強が認められた。CTLに加え、NK活性の増強効果も示した。またin vivoでは、腫瘍特異的CTL活性の増強効果が認められた。すなわちTGF beta阻害剤はDCの抗腫瘍サイトカイン産生を増強する効果を有し、癌宿主の免疫寛容を克服しワクチン療法に応用できることが示唆された。分子標的治療薬TGF beta阻害剤(TGFβ阻害剤)の樹状細胞に及ぼす影響【方法】TGFβR阻害剤を様々な濃度にて,マウスBone Marrow由来DC(BM-DC)、およびヒトPBMC由来DC(ヒトDC)培養に添加し,LPS刺激によるIL-12産生能,co-stimulatory moleculeの発現に及ぼす影響などについて検討した。【結果】マウス骨髄由来DC(BM-D)Cおよびヒトmonocyte由来DC(Mo-DC)両者において,リコンビナントTGFβを培養上清中に添加することにより,DCのIL-12産生は制御された。しかしながら,TGFβR阻害剤を添加した場合,IL-12産生は増強され,LPS刺激単独群と比較したところ,IL-12産生はさらに増強された。Co-stiulatory moleclesの検討でも,マウスではCD86,ヒトではCD83の発現hはTGFβ添加により抑制されたが,TGFβR阻害剤の添加することにより,回復した。尚,われわれが用いたTGFβR阻害剤は使用濃度ではDCの毒性には影響を及ぼさず,DC内でのSmad2リン酸化を抑制することを確認した。DCによるT細胞増殖能をallo-MLRにて検討したところ,TGFβR阻害剤処理DCは,LPS処理DCと比較して,強いT細胞増殖作用を認めた。ヒトDCにおいては,TGFBR阻害剤処理DCにより有意にNK活性が増強した。現在,腫瘍モデルにおいて検討中である。【背景】スキルス胃癌は胃癌のなかでも極めて治療に難渋する予後不良な癌腫であり、治癒切除後であっても腹膜播種を高頻度にきたす。したがってスキルス胃癌において腹膜播種に対する治療がもっとであるが、未だ有効な治療法は確立されていない。われわれの教室では、以前よスキルス胃癌細胞株を多数樹立し、TGFβがスキルス胃癌の腹膜播種の進展に関与していることを証明してきた。また、TGFβは、免疫抑制サイトカインとして、樹状細胞(DC)の抗原提示能や細胞傷害性T細胞(CTL)の機能を制することが知られている。つまり、細胞自身が産生するTGFβにより、転移が促進され、また抗腫瘍免疫反応が抑制されることの結果として、癌が進展すると考えられる、【目的】分子標的治療薬TGFβReceptor Type 1(TGFβR)低分子阻害剤によるスキルス胃癌細胞特異的CTL活性およびin vivo腹膜播種モデルにおける癌細胞特異的CTL活性に及ぼす影響について検討した。【方法】ヒト単球由来DC(ヒトMoDC)培養にTGFβR阻害剤を添加し、同一人から抽出した末梢血単核球(PBMC)と培養した後、K562に対する細胞障害活性を検討した。続いて、TGFβR阻害剤処理したMo-DCを当科で樹立したスキルス胃癌細胞株OCUM8(HLA-A^*2402)のlysateをパルスして、CD8T細胞(HLA-A^*2402)と共培養した後、OCUM-8に対する細胞障害活性を検討した。次に、C57Bl/6マウスにcolon-26細胞を腹腔内注入し腹膜播種モデルを作成、TGFβ阻害剤を3日目と7日目に腹腔内投与し、14日目に脾臓を摘出、colon-26に対するCTL活性について検討した。【結果】低分子TGFβ阻害剤処理によりMO-DCはNK活性を増強させ、スキルス胃癌細胞特異的CTL活性の増強を認めた。マウス腹膜播種モデルにおいて低分子TGFβ阻害剤投与により、癌特異的CTL活性が有意に増強された。またこのメカニズムとしては、DCの成熟化をTGFβ-R阻害剤が増強させうることが考えられた。【結語】TGEβ阻害剤は、スキルス胃癌細胞および腹膜播種に対して、DCの成熟化を介し、CTL活性を増強させ得ると考えられた。
認知行動変容の手法による異文化間ソーシャル・スキルの獲得

ソーシャル・スキルは、対人関係を成立・維持・発展させるための認知・行動的な技術であり、文化によって異なる。異文化環境へ移行した者が、対人関係面の適応に困難を覚えるのは、こうした行動様式の違いに基づくものと考えられる。スキルを身につけることにより、速やかに誤解のない良好な対人関係を築くことができ、そこからソーシャル・サポートを獲得することが期待できる。そしてストレス緩衝効果、文化的観察学習のモデルの提供、直接的問題解決などから、異文化適応が促進される。本研究では、上記のような異文化適応のソーシャル・スキル仮説を検証しながら、スキル獲得の方略を発展させ、その具体的な獲得のための学習方法を、異文化間臨床心理学の視点に立って検討することを目的とした。まず対人関係形成の困難がソーシャル・スキル欠損に起因するものであることを、在日留学生のホストとの対人関係形成の困難の原因認知を解析して確認した。日本人批判に偏る他責的な原因帰属をする場合には、サポート・ネットワークの発達が少なく、スキル実施度も低い。スキル実施によって、サポート獲得が促進され、また原因認知が変化し、対人関係が好転することが示唆された。学習の試行のためには、スキル学習のスクリプトを作成し、ビデオを用いてモデリングのための教材を試作した。生活技能訓練、主張性訓練といった他のソーシャル・スキル学習の形態を参考にして、異文化間ソーシャル・スキルを学習するプログラムを試みた。その結果、社会的強化など認知行動変容の手法を用いたグループワーク形態の学習により、ソーシャル・スキルの獲得が認められた。