hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
細胞性粘菌ミトコンドリア遺伝子の発生・分化への影響

しかし、DNAのレベルでは、牛と植物の順が大きく逆転した。このことの意味は現在調査中である。3.また、サガン法によって、この遺伝子と交雑する配列が核の方には存在しないことがわかった。今後、これらの遺伝子と発生・分化との関係を調べる予定である。また、有性生殖過程におけるミトコンドリアDNAの伝達様式を、細胞性粘菌Palysphondylium pallidumを用いてRFLPで調べたところ、結果は、子孫の交配型とは関係なく全て、uniparentalな伝達をした。しかし、どちらのミトコンドリアが伝達するかは、交配させた株間で差が見られた。以上1.昨年に引き続き、細胞性粘菌Dictyostelium discoideumのミトコンドリア(mt)DNAのPvuI断片3.6Kbとそれに接する0.8Kbを完全に配列決定した。昨年度の研究から、この断片の中にはATPase subunit 9(ATP9)とNADH dehydrogenase subunit 1(ND1)が存在することが分かっていたが、今年度さらに(1)5つのtRNA(2つのMet,Lys,Arg,Pro)の遺伝子、それにsmall rRNAの一部がコ-ドされていることが分かった。(2)tRNAについては、全てがDル-プ、Tル-プを有し、細胞質のtRNAと同様なクロ-バ-葉構造を形成すると考えられる。(3)サザン法の結果、ATP9とND1とともに遺伝子はmtDNAにのみ存在し、核の方にはなかった。(4)細胞性粘菌のND1はアミノ酸レベルでショウジョウバエと48.5%のホモロジ-があった。(5)2つの遺伝子のアミノ酸配列を他の生物のそれと比較し、細胞性粘菌のmtDNAは普遍暗号を使用していると予想され、また(6)特徴として、コドンの3文字目の塩基比率がA+Tが90.4%と非常に高く、特にAで終わるコドンは63.9%に達していた。2.発生分化期に入ると、largeとsmallのrRNA,ND1,ATP9の発現がどのように変化するかを、ノ-ザン法で調べたところ、ATP9が発生期に入ってそのmRNAの量が顕著に減少することが分かった。3.有性生殖過程におけるmtDNAの伝達様式をRFLPを用いて、さらに詳しく調べたところ(1)両交配型(matl, mat2)の細胞当りのmtの数や、mtDNAの長さ、それにメチル化の程度などに差がなかったので、細胞レベルでのmtDNAの選択はないと考えられ、(2)mtDNAは全てuniparentalに遺伝されたが、同じ系統株間の交配の場合、mat2細胞のある遺伝子がmat1細胞のある遺伝子よりも優性であり、異なる系統株間の交配ではその核遺伝子が相互優性(codominant)であると考えられた。
セラミック圧電アクチュエータの線形駆動法に関する研究

圧電素子が汎用的な機能性材料となり得るには位置及び力の再現性すなわちヒステリシス,温度の影響,周波数特性並びに動特性に関する改善が不可欠である。その改善策としては,再現性と温度特性の優れた高感度の単一材料の開発を目指すだけでは限界がある。本研究は,圧電素子の非線形特性を明らかにし,さらに素子の特性による入力電圧の非線形化数学公式を求め,得られた結果に基づき入力電圧の非線形変換器を試作し素子の高速・高精度駆動を実現するものである。初めに,圧電素子の駆動用線形パワーアンプを製作し,種々の圧電素子の印加電圧と変位特性及び周波数特性を計測し,素子の変位曲線の履歴を把握した。次に,計測した素子の変位曲線の履歴に対して素子の入出力に対する数学モデルをたて,変位履歴を除去する非線形入出力の関係を3次元で近似できることが分かった。さらにパソコンを用い,上記の計算公式に基づき入力電圧を非線形化する制御プログラムを製作し実験システムを組み立てた。実験では線形入力電圧をA/Dボードを経てパソコンに入力し制御プログラムによって入力電圧を非線形した後にD/Aボードを経て線形駆動パワーアンプで増幅し圧電素子に印加いることによって,素子の発生変位と入力電圧との関係から入力電圧非線形パラメータを求めた。最後に,以上得られた結果を総合し入力電圧非線形変換器(プリアンプ)を試作し,上記の実験で求められた素子の固有非線形パラメータを非線形変換器にセットし実験を行った。結果より,本非線形駆動法および入力電圧非線形変換器の有効性が確認された。今後、可能な限り実用化して向けて改良を加え,本入力電圧非線形変換器を小型化し,製品化する。
C型肝炎陽性者における肝癌予測因子としての血中MAGE癌退縮抗原の測定

血清中のMAGE-4タンパク質陽性率(健常人での平均値+2SDをcut-off値とした)は、HCC-Cの患者の46.7%(n=45)およびLC-C患者の32.7%(n=55)であったが、B型肝炎ウイルス関連肝癌では0%(n=3)、B型肝炎ウイルス関連肝硬変で6.1%(n=49)、アルコール性肝疾患の8.5%(n-47)、および健常人で2%(n=49)であった。また、MAGE-4抗原はHCG RNAとは相関しなかった。これらの事より、肝再生や線維化、あるいはHCV感染によりMAGE-4抗原が出現した可能性は少なく、HCVによる肝炎や肝硬変の一部で、すでに微少癌が発生している可能性が示唆された。以上のことより、HCV感染者で、血清中MAGE-4抗原量の推移を見ることは、肝癌への移行を予測する上で重要であると考えられ、今後、MAGE-4の発現例が治療後によりどのような経過をたどるのか、また予後との相関があるのか否かを解析する(Cohort study)必要があると思われる。
AE技術に着目したゴム支承の新しい損傷度評価手法の構築

近年,ゴム支承の経年劣化の顕在化や大地震によるゴム支承の破断が報告されている.しかし,現在までにゴム支承の損傷度を評価できる手法は明確にされていない.研究者らは,非破壊試験法の一つであるAE法を用いて,損傷したゴム支承の損傷評価に取り組んできた.その既往の研究成果から,せん断載荷を受けたゴム支承に対してAE計測を行い,特徴的なAE現象が確認された.しかし,せん断試験前にAE計測を実施しておらず,それらのAE現象がせん断載荷に伴う損傷によるものか確認していなかった.せん断試験前後で繰返し圧縮載荷試験を行いAEモニタリングを実施した.その結果,せん断試験前と後で異なるAE特性が確認された.本年度は,せん断試験を実施する前のゴム支承とせん断試験後のゴム支承のそれぞれについて,室内で載荷実験および計測を行った.せん断試験実施前には,活発的なAE現象は確認できなかったが,せん断試験後には多くのAE現象が検出された.これは,せん断試験で損傷した影響を検出していると考えられる.このことから,ゴム支承の損傷評価にAE技術が適用できると考えられる.また,本実験ではHDR(高減衰ゴム支承),RB(天然積層ゴム支承),LRB(鉛プラグ入りゴム支承)の3種類の積層ゴム支承を用いており,ゴム支承の種類が異なることで,損傷評価にどのような差異が表れるかも検討した.以上より,せん断試験前後の載荷試験および計測により,各ゴム支承におけるAE現象の特徴と損傷評価の可能性について確認ができた.また,現地計測においては,過去計測を行った2箇所について再計測を実施した.これらのゴム支承は,設置されて数年のものと設置されて十年以上経過しているものである.後者は,水平ひび割れが発生しており,表層部の損傷が目視でも確認できるゴム支承である.前回の計測が3年前であったが,設置されて数年のゴム支承では,少しAE現象の検出が増加しており,設置されて十年以上のゴム支承では,AE現象の数はあまり変化がなかった.つまり,前者は少しだけ損傷あるいは劣化しており,後者は損傷あるいは劣化の状況はあまり変化していないと推測された.これは,今後のさらなる詳細な損傷評価への足がかりになると考えられる.平成28年度では,せん断試験前後のゴム支承の室内載荷実験で差異が表れるか検討すること,現地計測を行うことを主な目的としていたが,室内実験および現地計測ともに実施して様々なデータが検出できたため,おおむね順調に進展していると考えられる.種々のせん断試験を受けている積層ゴム支承供試体を用意して,室内で載荷実験を実施した.具体的なケースとしては,1せん断ひずみ変形(±175%,±250%,±300%),2低温環境(-20°C,-30°C),3積層ゴム支承の種類(RB(天然ゴム系積層ゴム),HDR(高減衰積層ゴム),LRB(鉛プラグ入り積層ゴム))である.載荷方法は,既存橋梁でゴム支承が受ける交通振動を想定して,鉛直方向の繰返し圧縮載荷試験を実施した.いずれのケースにおいても,せん断試験前(新品)では,AE現象が非常に少なかったが,せん断試験後にはAE現象が急激に増加した.また,せん断試験後の繰返し圧縮載荷試験では,最初に検出されたAE現象のエネルギーは,繰返し圧縮載荷中もほぼ変化せずに検出されていた.このことから,繰返し圧縮載荷試験前からせん断変形に伴う損傷がゴム支承内部に蓄積されていたことが推測できる.また,損傷位置標定精度の確認実験では,ゴム内部に加硫接着させた鋼棒先端を引抜くことで発生するAE現象を同定できるか検証した.ゴム内部に挿入する鋼棒は,ゴム表面から10,20,30,40,60,80,100mm離れた箇所とした.また,ゴム供試体内部の鋼板なし,上部側に鋼板有り,下部側に鋼板有り,上下部に鋼板有りの4ケースを用意した.AE現象の同定精度については,供試体ケース間でバラつきはあったものの,ほとんどのケースで50%以上のAE現象が鋼棒先端に同定されることがわかった.すなわち,ゴム内部を伝搬する弾性波速度は遅く同定精度が低くなると考えられたが,ゴム内部で発生したAE現象を高精度で同定できることが示された.近年,ゴム支承の経年劣化の顕在化や大地震によるゴム支承の破断が報告されている.しかし,現在までにゴム支承の損傷度を評価できる手法は明確にされていない.研究者らは,非破壊試験法の一つであるAE法を用いて,損傷したゴム支承の損傷評価に取り組んできた.その既往の研究成果から,せん断載荷を受けたゴム支承に対してAE計測を行い,特徴的なAE現象が確認された.しかし,せん断試験前にAE計測を実施しておらず,それらのAE現象がせん断載荷に伴う損傷によるものか確認していなかった.せん断試験前後で繰返し圧縮載荷試験を行いAEモニタリングを実施した.その結果,せん断試験前と後で異なるAE特性が確認された.現在までの研究では,せん断変形を最大に考慮したせん断試験を行っている.

今後は,せん断試験の強度も変化させながら,より詳細に損傷評価ができるように実験を行っていく.また,実橋梁から取り出したゴム支承の実験や現地計測の数も増やして,データの蓄積を進めていく.おおむね計画通りに進展しており,上記額は来年度に使用することとした.2016年度は実験でデータを抽出することを目的とした.様々なデータが得られたため,これらを使用して論文や発表などに積極的に使用する予定である.
世界文化遺産厳島神社における災害と防災及び維持活動に関する史的研究

災害に関連する未刊行の文書の発見・確認により、海と共存する社殿の維持には、突発的な災害対策活動以外にも日常の活動が重要であることが明らかとなった。また、本殿内の玉殿安置形式は事前防災の観点から生じたともいえる。その形式は安芸国に広く分布し、厳島神社を祖型とすることが判明した。さらに、その他類例調査の分析により、施設の維持には災害の許容などの特徴が見出され、厳島神社の伝統的な災害回避と保護機能が明らかとなった。文化財の多くを占める木造建造物に対する防災と維持活動に関する保護機能と災害回避機能について検証を進めた。第一に、文献史料調査に関しては、史料調査〔厳島神社・大願寺・広島大学〕を実施した。具体的には営繕書類・大願寺文書など現場記録などの文献史料を対象とする調査を行い、未刊行の文書を新たに確認し、撮影した。第二に、類例資料実地調査に関しては、瀬戸内海の沿岸地〔住吉神社などの社寺〕、中部地方の山間地〔諏訪大社などの社寺〕、東北地方の山岳地〔羽黒山などの社寺〕、琵琶湖周辺山沿い〔御上神社などの社寺〕の類例調査を行い、社寺などの災害と防災及び維持活動に関する文化財建造物資料の収集作業を行った。第三に、収集した資料の整理及び分析を実施した。まず、調査した文献史料より、現在の厳島神社の社殿が海上に建ち自然との調和に成功した一方、海と共存するための社殿の防災・維持活動が度々必要であったことが窺える。明治以降に書かれた営繕書類からは、県知事などに宛てた修繕願や修繕の図を多数確認した。また数百年に一度の割で襲った暴風や土石流などの災害については、材木注文や再建棟札などによりその被害の多くを確認した。一方、神社で一番重要な建造物である本殿内に安置された玉殿は、実際に厳島神社の社殿の中で最も高く配置されており、本殿内の形式に玉殿安置形式を採ったのも一種の防災であるといえ、本殿の内部の機能や神体の奉安形態である玉殿などと神社における防災や維持活動について関係が認められた。次に、類例資料実地調査においては、一例を挙げると、若松寺において複数部材を一木で造り出す一木造出を有していることを確認し、その有無の差異については、建築物内部の大梁等の構造の違いが反映されていることが明らかとなった。文化財の多くを占める木造建造物に対する防災と維持活動に関する保護機能と災害回避機能および災害認識について検証を進めた。第一に、文献史料調査に関しては、昨年度に引き続き、厳島神社・広島大学などにおいて史料を対象とした収集作業を実施した。具体的には造営書類などの未刊行の文書を確認した。第二に、類例資料実地調査に関しては、瀬戸内海の国宝・世界遺産の類例調査〔姫路城〕、琵琶湖周辺の湖岸地域の類例調査〔都久夫須麻神社など〕、広島県地方の類例調査〔広島東照宮など〕の類例調査を行い、社寺などの災害と防災及び維持活動に関する文化財建造物資料の収集作業を行った。また、当時の災害認識に関する史料調査〔国立天文台〕や、建築物の維持活動に関して、広島県内の中世からの港町である鞆町の小規模町家について、隣接密集する場合の戸境の処理方法などを調査し、当時の建築技法上の特徴を確認した。まず、調査した文献史料より、厳島神社においては突発的な災害以外にも維持活動が必要であったことが確認された。明治以降に書かれた営繕書類には修繕願や修繕の図などが多く確認され、造営当初から日常の維持活動は、海に建つ厳島神社にとって重要であったことが明らかとなった。また、厳島神社に採用された本殿内の玉殿安置形式は、安芸国に広く分布しているものであり、それらに関する調査・分析も行った。玉殿と防災や維持活動の関係についての一例として、玉殿には複数部材を一木で造り出す一木造出技法を有しているものが多いことを確認した。これについては、小規模建築である玉殿を精巧に作り上げると同時に、非常時の玉殿の移動をも考慮した可能性が指摘でき、安芸国における玉殿の建築的特徴として重要な点であるといえる。厳島神社を中心に、文化財の多くを占める木造建造物に対する防災と維持活動に関する災害回避と保護機能について検証を進め、分析を行った。第一に、文献史料調査に関しては引き続き、厳島神社・広島大学などにおいて史料を対象とした収集作業を実施した。具体的には社務日誌などの未刊行の文書を確認した。第二に、類例資料実地調査に関しては、出雲大社や神魂神社などの山陰地方の海岸地及び山沿いの社寺、御調八幡宮などの広島県地方の社寺について類例調査を行い、社寺などの災害と防災及び維持活動に関する文化財建造物資料の収集作業を行った。

また、伝統技法に関連し木造資料調査を行い、維持活動に関しては、広島県内の中世からの港町である靹町の港湾施設や町家について分析し、当時の建築技法上の特徴を確認し補完した。第三に、収集した資料の検証及び分析を実施した。まず、文献史料にある日常・災害時の修理の有無から、厳島神社の社殿を海上に維持するにあたり、玉殿を安置し外側に巨大な本殿とする形式が有効であったことを確認した。また、本殿内の玉殿安置形式に関する分析も行った。その結果、玉殿は安芸国に広く分布しており、厳島神社を祖型として広まったものであることが判明した。さらに、靹町の港湾施設の分析により、沿岸に建つ伝統的建造物の維持の共通点が見出された。波止においては、一定規模以上の高波について、あえて波が越えて港湾内に入ることを許容することで、建造物の維持継続を図っている。この点は厳島神社でも同様であり、海という条件を考慮した場合、ある程度の被害を許容することによって、総合的には最大限の有益性を引き出していると言える。
教師・学習者の発展的な思考・態度を習慣化する授業実践モデルの開発

発展的な思考・態度を促す要素を特定する質問紙調査を実施した。質問紙は、JSPS科研費15K04390研究で整理した発展的に考えることの3つの状況をもとに開発した。全国の教員養成大学・学部や教員研修機関を対象に行い、「発展的思考・態度に必要な要素については、文部省・中島の「統合を観点にした発展的な考察」に関わる要素が多く、発見的発展に関わる要素や簡潔・明瞭・的確、一般化の要素がやや少ないこと」「養成、研修ともに発展的思考・態度に必要な要素の全てを重視していること」「発展的思考・態度に必要な要素の獲得時期は、養成、研修ともに教職5年程度に集中していること」「発展的思考・態度に必要な要素は研修よりも養成が早めに獲得されると捉えていること」を捉え、発展的思考・態度を支える要素も意識化することの示唆を得た。次に、発展的思考・態度を育成する授業を展開できる教師Sへの算数授業に対する意識変容に関する聞き取り調査を行った。分析の結果、授業改善は、「直線的に進むものではなく、内容的発展、思考的発展の作用が認められること」「内容的発展、思考的発展の順で進むこと」を明らかにし、思考的発展と内容的発展の2軸からなる段階的授業モデルに示した。そして、学習者の認知的活動とメタ認知的活動を捉えるべく、鉛筆が止まるといった解決者の思考停滞を分析し、「数学的な認知的内容とメタ認知的支援を複合した数学的なメタ認知的支援フレーズが有効であること」「消極的支援、半積極的支援、積極的支援の3段階で支援すること」を明らかにした。さらに、15K04390研究で開発したモデルプレートを援用して発展的思考・態度を促す授業モデルの開発を行い、河合・黒田実践の再構成することができた。また、授業改善に向けた授業評価モデルの開発、教科書分析変容にも着手した。上記研究の成果は、学会発表するとともに、ホームページにおいて公開した。申請時の計画では、「視点1.発展的な思考・態度を促す要素の特定」「視点2.発展的な思考・態度の内面化と学習者の学力変容の解明」「視点3.発展的思考の関連図を活用した授業実践モデルの開発とその検証」の3視点から解明することにしており、1年次は、視点1に取り組むことにしていた。1年次は、視点1の解明に加え、視点2について思考停滞の分析からの検討、視点3について発展的思考・態度を促す授業モデルの開発に取り組んでおり、当初の計画以上に進展している。また、授業改善に向けた授業評価モデルの開発にも着手していることも理由として挙げられる。2年次は、視点2、視点3に取り組む。開発した発展的思考・態度を促す授業モデルを授業実践による検証を行う。あわせて、発展的な思考・態度の内面化、学習者の学力変容を捉える評価モデルを開発して解明する。既に着手している授業評価モデルも、授業実践により検証する。これらの研究成果は、学会発表を行うとともに、ホームページに公開する予定である。さらに、3年次には、国際学会での発表を検討しており、その準備も進める。

また、授業改善に向けた授業評価モデルの開発にも着手していることも理由として挙げられる。2年次は、視点2、視点3に取り組む。開発した発展的思考・態度を促す授業モデルを授業実践による検証を行う。あわせて、発展的な思考・態度の内面化、学習者の学力変容を捉える評価モデルを開発して解明する。既に着手している授業評価モデルも、授業実践により検証する。これらの研究成果は、学会発表を行うとともに、ホームページに公開する予定である。さらに、3年次には、国際学会での発表を検討しており、その準備も進める。次年度使用額が生じた最大の理由は、旅費の節約である。7件の研究発表を行ったが、そのうち3件は東北数学教育学会であり、支出を抑えることができた。また、質問紙調査をウェブページを使用して実施したことから、質問紙の印刷費、郵送費も節約することができた。授業実践のプロトコルデータの作成や質問紙調査のデータ解析も、研究代表者らが行ったことから節約することができた。
骨格筋の遅筋特性獲得機序解明とその予測モデルの構築

転写共役因子PGC-1αは、ミトコンドリア生合成に関わる遺伝子を系統的に発現制御する。PGC-1αを骨格筋特異的に過剰発現させたマウスでは、筋線維タイプの遅筋化、ミトコンドリア量増加、毛細血管新生など持久運動トレーニング効果を模する表現型を示し、運動持久力が向上することを見出した。本研究では、このマウスの骨格筋で分岐鎖アミノ酸代謝の促進、TCAサイクルで利用される基質の供給量増加を認めた。最近、運動トレーニングが転写共役因子PGC-1α依存的にn-3系多価不飽和脂肪酸(特に22:6)含有リン脂質を増加させることを明らかにし、骨格筋リン脂質多様化メカニズムの一端を捉えることに成功した。骨格筋において筋細胞膜リン脂質中の脂肪酸組成がインスリン感受性に影響を及ぼすことが報告されており、骨格筋細胞膜のリン脂質分子種と骨格筋機能維持には何らかの関連性があると考えられる。一方、骨格筋は遅筋と速筋に大別され、このうち持久的運動トレーニングは骨格筋の遅筋化を促進する。この適応反応にリン脂質分子が貢献していると想定されるが、どのような機序で変化が生じるのかは不明である。研究実施者らはこれまでに、転写共役因子PGC-1αを骨格筋特異的に過剰発現させた「筋PGC-1αマウス」を作製し、骨格筋の遅筋化と持久力の向上を認めている。本研究課題では、このようなモデルマウスを手がかりに骨格筋機能向上の分子レベルでの科学的エビデンスを獲得するとともにマーカーを特定することを主目的の一つとしており、モデルマウス骨格筋に含まれるリン脂質分子種を明らかにし、どのリン脂質分子種が骨格筋機能向上のマーカーとなるかを探索する必要がある。そこで今年度は、骨格筋の脂質組成を赤筋と白筋別に網羅的に解析する測定系を確立し、予備的に筋PGC-1αマウスにおける脂質分子種の変化について検討した。その結果、クラスタ分析により、白筋と赤筋で含まれる分子種が大きく異なること、PGC-1αの過剰発現は骨格筋脂質組成を変化させるが、白筋を赤筋と同じような脂質組成までには変化させないことが判明した。また、主成分分析の結果、成分1の変化から白筋と赤筋ではトリアシルグリセロール含有量が大きくことなること、成分2の変化からPGC-1αは骨格筋の脂質分子種、特にグリセロリン脂質の分子種に変化を引き起こすことが示唆された。【背景・目的】運動トレーニングは骨格筋中のリン脂質分子種の脂肪酸組成を変化させるが、そのメカニズムは明らかになっていない。転写共役因子であるPGC-1αは、運動トレーニングによる骨格筋の適応反応に重要な役割を果たすため、PGC-1αが運動トレーニングによるリン脂質分子種変化の一端を担っている可能性がある。そこで、リン脂質分子種変化へのPGC-1αの寄与を明らかにすることを試みた。【方法】骨格筋特異的にPGC-1αを過剰発現させたPGC-1α-Tgマウスより骨格筋を採取し、含まれる脂質成分を一斉分析した。得られたデータについて多変量解析を行った後、骨格筋の性状変化に寄与する分子を同定した。次に、骨格筋特異的にPGC-1αをノックアウトしたPGC-1α-KOマウスに対して、運動トレーニングを5週間施し、骨格筋中の脂質成分を分析した。【結果】PGC-1αは骨格筋中の脂質構成を大きく変化させた。また、運動トレーニングは、構成する脂肪酸が異なる7種のphosphatidylcholine (PC)と2種のphosphatidylethanolamine (PE)を増加させた。そのうち、PC(18:0/22:6)とPE(18:0/22:6)の増加にはPGC-1αの発現が大きく寄与していることが示唆された。【考察】リン脂質は細胞膜を構成する主要成分であるので、運動トレーニングによるリン脂質分子種の変化は、膜の形態や柔軟性に影響を及ぼすことで、骨格筋の適応反応に貢献している可能性がある。【結論】本研究により、運動トレーニングによって特定の脂肪酸組成を有するリン脂質がPGC-1α依存的に変化することが明らかになった。研究は「研究の目的」に沿って順調に進捗している。研究成果を英文専門誌に発表した。さらに、国内外の学会や研究会において研究成果を発表した。【背景・目的】生体内のリン脂質は、極性基や脂肪酸の組み合わせから多様性に富む。骨格筋では、筋萎縮時にリン脂質組成が変化することや、摂取する脂肪酸の違いが骨格筋量や筋機能に影響を及ぼすことが報告されているが、その機序は明らかにされていない。転写制御因子FOXO1は、不活動やエネルギー欠乏により骨格筋で発現が増加し、タンパク質分解に関与する遺伝子発現を亢進させ、筋萎縮を誘発する。本研究では、絶食モデルマウスと骨格筋特異的にFOXO1を過剰発現させたマウス(FOXO1-Tgマウス)を用いて、骨格筋中リン脂質分子種の網羅的解析を実施し、筋萎縮時のリン脂質組成変化の機序を明らかにすることを試みた。

本研究では、このマウスの骨格筋で分岐鎖アミノ酸代謝の促進、TCAサイクルで利用される基質の供給量増加を認めた。最近、運動トレーニングが転写共役因子PGC-1α依存的にn-3系多価不飽和脂肪酸(特に22:6)含有リン脂質を増加させることを明らかにし、骨格筋リン脂質多様化メカニズムの一端を捉えることに成功した。骨格筋は遅筋と速筋に大別され、持久的運動トレーニングは骨格筋の遅筋化を促進する。最近、骨格筋の特性変化に伴い、骨格筋中の脂質分子種の変化が生じることが明らかにされつつあるが、その機序や生理的意義については不明である。本研究では、EDLとsoleusで含まれる分子種が大きく異なること、PGC-1αの過剰発現は骨格筋脂質組成を変化させるが、EDLをsoleusと同じような脂質組成までには変化させないこと、また、主成分分析の結果、成分1の変化からEDLとsoleusではトリアシルグリセロール含有量が大きくことなること、成分2の変化からPGC-1αは骨格筋の脂質分子種、特にグリセロリン脂質の分子種に変化を引き起こすことを初めて明らかにした。筋線維変化のエピジェネティクス制御に関する研究は、実験手技の開発に遅れが生じている。【検討項目1】筋萎縮に伴うリン脂質分子種変化へのFOXO1の寄与筋萎縮を引き起こす転写因子であるFOXO1の過剰発現及び人工的筋萎縮モデルにおけるリン脂質分子種変化、萎縮に伴うリン脂質分子種変化へのFOXO1の寄与を明らかにする。すなわち1骨格筋特異的FOXO1過剰発現マウス(FOXO1-Tg)マウスの骨格筋中のリン脂質分子種組成、2ギプス固定、座骨神経切除、絶食などの人工的な筋萎縮モデルマウスならびに3同様の処置を施した骨格筋特異的FOXO1ノックアウト(FOXO1-KO)マウスの骨格筋中のリン脂質分子種組成を解析する。【検討項目2】転写調節因子依存的な骨格筋リン脂質多様化の機序解明リン脂質の生合成経路は、グリセロール3リン酸を出発点としてacyltransferase (AT)により脂肪酸を取り込むde novo経路と、phospholipase A1 (PLA1)またはA2 (PLA2)による脂肪酸の切り出しとATによる再取り込みからなるリモデリング経路の2つが存在する。取り込まれる脂肪酸はacyl-CoA synthetase (ASCL)によって脂肪酸CoAの形に変換される。ATとACSLには数種類のアイソフォームが存在し、各々が各種脂肪酸に対する基質特異性を有する。そのため、これらアイソフォームの発現制御がリン脂質の多様性に貢献している可能性がある。申請者らは、ACSLアイソフォームのうちの1つがPGC-1αTgマウス骨格筋において発現増加することを確認した。そこで、PGC-1αおよびFOXO1が、AT、PLA1、PLA2、ACSLの発現制御を介してリン脂質への脂肪酸の取り込みを変化させるか否かを、モデルマウス摘出筋、遺伝子改変培養細胞などを用いて検証する。28年度が最終年度であるため、記入しない。栄養化学得られた結果をもとに、筋線維変化に伴って変化する脂質分子種を同定し、様々な生理条件での変化を検討する。
インフラを使用せずに位置に依存した情報を保持するエージェントシステムの開発

特定のインフラに依存せずに局所的に情報を保持する手法として,Nomadic Agent(NA)システムを開発した.NAは歩行者などが保持する携帯端末によって構成されたアドホックネットワーク上でそこを通過する端末間を自律的に移動することにより,情報を特定の場所に保持し続ける.本研究では,特にこのエージェントの移動時間を短縮することに主眼を置いて開発を行った特定のインフラに依存せずに局所的に情報を保持する手法として,Nomadic Agent(NA)システムを開発した.NAは歩行者などが保持する携帯端末によって構成されたアドホックネットワーク上でそこを通過する端末間を自律的に移動することにより,情報を特定の場所に保持し続ける.本研究では,特にこのエージェントの移動時間を短縮することに主眼を置いて開発を行った申請者は局所的に分布するさまざまな情報を,特定のインフラに依存せずに局所的に保持する手法として,エージェントを利用した手法を開発し,より場所に密着した情報サービスの提供が可能になると考えている.そのために利用するエージェントをNomadic Agent(NA)と命名した.NAは歩行者などが保持する携帯端末によって構成されたアドホックネットワーク上で,端末間を移動することによってその物理的な位置を変えないエージェントであり,ミドルウェアとして動作する.このNAについて,携帯端末上に実装を行い,これを用いた有用なアプリケーションの開発を行うこと及びその有用性を示すことが本研究の目的である.本年度は携帯端末上で実際にエージェントを動かした場合の問題点の洗い出しを行うために,携帯端末(PDA)上で動作するNAを開発し,端末間の移動時の特性を評価した.これによってシミュレーションに用いるための基礎的なデータが収集でき,今後,実アプリケーションで利用するための問題点を明確化することが出来た.また,本エージェントの有用なアプリケーションとして,自動車上で動作するNAを用いて交差点において情報を保持するシステムについて検討を行い,コンピュータシミュレーションによって実現性を評価した.現時点では無線通信システムとして用いるデバイスによる影響は大きいが,車で動作するNAについての基本的な評価は行えたと考えている.申請者は局所的に分布するさまざまな情報を,特定のインフラに依存せずに局所的に保持する手法として,エージェントを利用した手法を開発し,より場所に密着した情報サービスの提供が可能になると考えている.そのために利用するエージェントをNomadic Agent(NA)と命名した.NAは歩行者などが保持する携帯端末によって構成されたアドホックネットワーク上で,端末間を移動することによってその物理的な位置を変えないエージェントであり,ミドルウェアとして動作する.このNAについて,携帯端末上に実装を行い,これを用いた有用なアプリケーションの開発を行うこと及びその有用性を示すことが本研究の目的である.本年度は現実の携帯端末上で動作するNAを改良し,端末間の移動時の特性を再評価した.また,携帯電話を想定したOSであるAndroid上で動作するNAの実装も行った.これらによってシミュレーションに用いるためのデータが収集でき,今後,実アプリケーションで利用するための問題点および課題を明確化することが出来た.また,本エージェントの有用なアプリケーションとして,交差点において情報を保持するシステムについて前年度に引き続き検討を行い,コンピュータシミュレーションによって実現性を評価した.またいくつかの想定されるアプリケーションについてその要求条件を明確化する作業を行った.申請者は局所的に分布するさまざまな情報を,特定のインフラに依存せずに局所的に保持する手法として,エージェントを利用した手法を開発し,より場所に密着した情報サービスの提供が可能になると考えている.そのために利用するエージェントをNomadic Agent(NA)と命名した.NAは歩行者などが保持する携帯端末によって構成されたアドホックネットワーク上で,端末間を移動することによってその物理的な位置を変えないエージェントであり,ミドルウェアとして動作する.このNAについて,携帯端末上に実装を行い,これを用いた有用なアプリケーションの開発を行うこと及びその有用性を示すことが本研究の目的である.本年度は現実の携帯端末上で動作するNAを改良し,さらに新しいモデルの端末を用いて,端末間の移動時の特性を再評価した.これらによってシミュレーションに用いるためのデータが収集でき,今後,実アプリケーションで利用するための問題点および課題を明確化することが出来た.また,本エージェントの有用なアプリケーションとして,歩行者ナビゲーションにおける位置情報を補正するためのシステムについて検討を行い,コンピュータシミュレーション等を用いて実現性を評価した.またいくつかの想定されるアプリケーションについてその要求条件を明確化する作業を行った.
極低サイクル疲労の評価を考慮した橋梁鋼構造物の耐震性能評価法の開発

本研究は,橋梁鋼構造物の局部座屈および極低サイクル疲労を統一的に照査できる手法の開発を目的としたものである.平成24年度では,延性き裂の発生・進展・破壊の全過程を模擬できるCDDモデル(Cyclic Ductile Damage Model)の開発と解析手法の確立について検討した.また,鋼部材の極低サイクル疲労実験を実施し,解析モデルと手法の妥当性について検証した.今年度は,まず,昨年度に構築したCyclic Ductile Damage Modelを適用し,パイプ断面を鋼管ブレース材と箱型断面を有する単柱式鋼製橋脚の数値シミュレーションを行った。ブレース材の場合,径厚比と載荷履歴が異なる8ケースについて検討し,座屈とき裂の発生から破断までの全過程を解析的に評価し,それらを実験結果との比較を行った.ほとんどのケースーにおいて,本手法が実験結果を良好に評価できている.一方,鋼製橋脚の場合,厚肉断面部材に限定して検討し,基部のき裂から進展までの挙動を解析的に評価し,本手法は実験現象をおおむね評価できることを示した.溶接の影響および欠陥の影響を調べるため,切欠きを有する溶接鋼部材の単調引張試験を行った.これらの影響をCDDモデルに反映できるように,モデルパラメータの同定を行った.本プログラム終了後にも,外国人特別研究員と受入研究者が継続して共同研究を行い,鋼製橋脚基部,鋼製ラーメン隅角部の溶接部に着目し,その溶接接合部に溶接欠陥が存在するとした場合の地震時破壊挙動(延性き裂、脆性破壊)についてのシミュレーションを行う予定である.未発表の研究成果や検討中の内容を今後速やかにまとめ,国内外の学会で積極的に発表し,ジャーナルにも投稿していく.(抄録なし)本研究は,橋梁鋼構造物の局部座屈および極低サイクル疲労を統一的に照査できる手法の開発を目的としたものである.そのために,極低サイクル疲労に対する照査法は未整備である現状を踏まえ,極低サイクル疲労による延性き裂の発生・進展・破壊のメカニズムの解明を解析および実験の両面から重点的に検討している.平成24年度では,研究計画の通り,延性き裂の発生・進展・破壊の全過程を模擬できるCDDモデル(Cyclic Ductile Damage Model)の開発と解析手法の確立について検討した.また,鋼部材の極低サイクル疲労実験を実施し,解析モデルと手法の妥当性について検証した.まず,き裂の発生を予測する幾つかのDamageモデル(Local Model)の相互比較を行った.特に,メッシュサイズ(0.1,0.5,1および2mm)が予測精度に及ぼす影響を明らかにした.次に,前述の検討結果を踏まえ,メッシュサイズに依存しないNonlocal Modelを構築した.さらに,極低サイクル疲労実験を実施し,提案したNonlocal Modelの妥当性を検証している.また,き裂の進展・破壊も模擬できるCyclic Ductile Damage Modelを開発している.このモデルでは,大ひずみ時の材料特性の考慮,延性損傷の判定基準の確立,剛性低下と損傷累積の評価および延性破壊箇所の除去法の提案について検討し,鋼製橋脚およびブレース部材を対象とした3次元弾塑性有限要素解析を実施し,極低サイクル疲労による延性き裂の発生と進展を予測できるようになっている.これらの成果を現在まとめており,学術誌などへ投稿する予定である.本研究は,橋梁鋼構造物の局部座屈および極低サイクル疲労を統一的に照査できる手法の開発を目的としたものである.平成24年度では,延性き裂の発生・進展・破壊の全過程を模擬できるCDDモデル(Cyclic Ductile Damage Model)の開発と解析手法の確立について検討した.また,鋼部材の極低サイクル疲労実験を実施し,解析モデルと手法の妥当性について検証した.今年度は,まず,昨年度に構築したCyclic Ductile Damage Modelを適用し,パイプ断面を鋼管ブレース材と箱型断面を有する単柱式鋼製橋脚の数値シミュレーションを行った。ブレース材の場合,径厚比と載荷履歴が異なる8ケースについて検討し,座屈とき裂の発生から破断までの全過程を解析的に評価し,それらを実験結果との比較を行った.ほとんどのケースーにおいて,本手法が実験結果を良好に評価できている.一方,鋼製橋脚の場合,厚肉断面部材に限定して検討し,基部のき裂から進展までの挙動を解析的に評価し,本手法は実験現象をおおむね評価できることを示した.溶接の影響および欠陥の影響を調べるため,切欠きを有する溶接鋼部材の単調引張試験を行った.これらの影響をCDDモデルに反映できるように,モデルパラメータの同定を行った.本プログラム終了後にも,外国人特別研究員と受入研究者が継続して共同研究を行い,鋼製橋脚基部,鋼製ラーメン隅角部の溶接部に着目し,その溶接接合部に溶接欠陥が存在するとした場合の地震時破壊挙動(延性き裂、脆性破壊)についてのシミュレーションを行う予定である.未発表の研究成果や検討中の内容を今後速やかにまとめ,国内外の学会で積極的に発表し,ジャーナルにも投稿していく.予定通り研究を進めており,得られた成果を学会発表や学術誌への投稿にて公開している.予定通り進めていく.(抄録なし)
Ｎｏｘ遺伝子制御が敗血症性脳症の病態に果たす役割と治療標的としての意義

敗血症マウス脳組織において、サイトカイン発現が増加、また脳血管評価では透過性が有意に亢進していた。加えて、Nox構成サブユニット、p47phox、p67phox発現、酸化ストレス指標8-OHdG産生、iNOS発現が増加していたことから、活性酸素産生増加がNOと反応、活性窒素種が生じ、脳血管が破綻していく機序が示唆された。さらに、光学および電子顕微鏡による解析では、敗血症マウス脳に生じる変性神経細胞の出現は、ラジカルスカベンジャーのエダラボンを投与しておくことで軽減されるいことが確認された。以上のことから、Nox遺伝子制御は、敗血症性脳症治療標的となりうるものと考えられた。盲腸穿孔敗血症マウスモデル脳組織のin vivo系、高グルコース処置培養血管内皮細胞およびのin vivo系を用いて、酸化ストレス増加に大きく関与しているNADPHoxidase (Nox)活性およびその分子発現を介して生じる、細胞内シグナル変動や組織傷害の程度について、分子生物学的手法、各種染色法を用いた顕微鏡形態解析などにより検討した。敗血症マウス脳組織においては、HE染色で大脳皮質および海馬の神経細胞において、多数の細胞委縮変形像、濃染色像を認めるとともに、IL-1β、TNF-α、IL-6等のサイトカインのmRNA量・蛋白質量の発現増加、酸化ストレスマーカーである8-OHdG量増加を認めた。さらに、ニトロチロシン抗体を用いた免疫組織染色では、脳血管周囲に陽性像を認め、ニトロ化ストレスも増加していること、脳血管透過性マーカーが増加したこと、さらには電子顕微鏡解析では、実際に脳血管内皮の傷害像も観察された。さらに、Nox構成各サブユニット分子について、敗血症マウス脳組織におけるmRNA量・蛋白質量を検討すると、p47phox、p67phoxの両サブユニットについて、発現増加が生じていたことを明らかにするとともに、ルシゲニンを用いた化学発光測定によるNox酵素活性についても、増加を認めた。加えて、ラジカルスカベンジャー、エダラボンを処置した敗血症マウスにおいては、脳神経の変性細胞が減少するとともに、Nox酵素活性の減少等、酸化ストレスの指標が減ずることを明らかにしました。一方、in vivo実験系の高グルコース処置培養血管内皮細胞においても、Noxサブユニット遺伝子発現増加とNox酵素活性増加、抗酸化サプリメントによるそれらの抑制効果を認めたことから、高血糖時等の代謝異常による組織傷害モデルおいても、Nox活性が大きく関与していることが示唆される結果が得られました。盲腸穿孔敗血症マウスモデル脳組織、および高グルコース処置培養血管内皮細胞において、酸化ストレス増加に伴う細胞内シグナル変動、特にNADPH oxidase (Nox)活性、組織傷害の程度、またラジカルスカベンジャーエダラボンや抗酸化サプリメントによる治療効果等を、分子生物学的手法、各種染色法を用いた顕微鏡形態解析などにより、検討していった。敗血症病態モデルマウス脳組織のHE染色による顕微鏡観察では、敗血症マウス群の脳皮質・海馬の神経細胞において、多数の細胞委縮変形像、濃染色像を認めるとともに、サイトカインmRNA量・蛋白質量の増加、酸化ストレスマーカーである8-OHdG量の増加、ルシゲニン化学発光測定によるNox酵素活性の増加を認めた。さらに、Nox構成各サブユニット分子について、mRNA量・蛋白質量の変化を解析すると、p47phox、p67phoxの両サブユニットにおいて増加を認めた。加えて、酸化/ニトロ化ストレスを軽減させる目的でラジカルスカベンジャー、エダラボンを処置すると、前述の変性細胞は減少に転じるとともに、各種ストレスマーカーについても減少を認めた。さらには、高グルコース処置した培養血管内皮細胞の系においても、アポトーシスシグナルが誘導されるとともに、Nox酵素活性の増加、またNoxサブユニット蛋白質量の増加を認めた。敗血症性脳症の病態や高グルコース下血管内皮細胞において、Nox酵素活性の増加とNoxサブユニット遺伝子発現増加を明らかにできました。さらには、ラジカルスカベンジャーの使用による組織傷害度の減少も観察されました。今後は、Nox遺伝子そのものを制御するシグナル経路を明らかにし、より効果的な治療標的を探索していければと考えます。盲腸穿孔敗血症マウスモデル脳組織のin vivo系において、HE染色で大脳皮質および海馬の神経細胞において、多数の細胞委縮変形像、濃染色像を認めるとともに、IL-1β、TNF-α、IL-6等のサイトカインmRNA量・蛋白質量の発現増加、酸化ストレスマーカーの8-OHdG量増加を認めた。さらに、ニトロチロシン抗体を用いた免疫組織染色では、脳血管周囲に陽性像を認め、ニトロ化ストレスも増加、脳血管透過性を示す漏出色素の増加、さらには電子顕微鏡解析では、脳血管内皮の傷害像が観察された。

さらに、Nox構成各サブユニット分子について、敗血症マウス脳組織におけるmRNA量・蛋白質量を検討すると、p47phox、p67phoxの両サブユニットについて、発現増加が生じていたことを明らかにするとともに、ルシゲニンを用いた化学発光測定によるNox酵素活性についても、増加を認めた。加えて、ラジカルスカベンジャー、エダラボンを処置した敗血症マウスにおいては、Nox酵素活性が減少し、それに伴い酸化/ニトロ化ストレスが減少し、脳組織においては、組織傷害の程度および変性細胞が減少する結果となりました。一方、in vivo実験系の高グルコース処置培養血管内皮細胞、LPS処置マクロファージにおいても、Noxサブユニット遺伝子発現増加、酵素活性増加、加えて抗酸化サプリメントによるそれらの抑制効果を認めました。さらに、このNox活性増加は、炎症関連核蛋白質であるHMGB1活性に連なる可能性が示唆される結果が得られてきました。以上の解析結果から、Nox活性を制御していくことは、敗血症患者さんにおける脳神経傷害をはじめとした種々の合併症を減じることにつながり、ひいては予後の改善に大きく貢献できるのではと考えます。基礎医学・薬理学一般平成25年度に計画していたin vivo系での高グルコース処置の実験、および、グラム陰性菌細胞壁外膜の構成成分であり内毒素であるLipopolysaccharide (LPS)を処置した傷害モデルの系で、Nox活性が細胞傷害に関与していることが示唆されましたので、おおむね順調に推移していると考えます。平成24年度に計画していた敗血症モデルマウスにおけるNox活性の測定、およびNox分子の発現解析について、対照群と比較しそれぞれ増加することを明らかにしたこと、またラジカルスカベンジャーであるエダラボン処置により、敗血症モデルで生じた脳血管透過性亢進が抑制されたこと、同じく脳組織像解析で脳皮質、海馬で観察される細胞委縮変形、濃染色を呈する神経細胞数について減少がみられたことから、Nox活性増加が組織傷害に大きく関与していることを論文報告できた点から、おおむね順調に推移していると考えます。敗血症マウス脳組織傷害モデルにおいて、Nox遺伝子発現の誘導、産生増加、その後の酸化・ニトロ化ストレス増加によって、血管透過性亢進、脳神経細胞が変性することを明らかにできましたが、Nox遺伝子制御に関与すると考えられるNF-κB、AP-1などの転写調節因子などとの関連など、まだ多くの点が不明です。培養細胞の実験系も加えていくなど、Nox活性の制御を目標に、敗血症脳症病態に対する効果的な治療標的となりうる分子について、引き続き解析・探索していきたいと考えます。炎症反応によってNox遺伝子発現が誘導され、その後の酸化/ニトロ化ストレス増加によって血管透過性亢進、脳実質細胞の形態変化が生じることは明らかにできましたが、Nox遺伝子制御に関与する転写調節因子などのシグナル分子およびその経路については、まだ不明な点が多く存在します。培養細胞での実験系も加えていくなど、今後も細胞内シグナルについての解析、効果的な治療標的となりうる分子について、探索していきたいと考えます。研究代表者分は、年度末に発注予定であった遺伝子導入試薬の購入を、実験進行に合わせて延期させたためです。
原爆被爆者の腫瘍性/非腫瘍性造血細胞にみられるゲノム異常の包括的解析

昨年度に実施した原爆被爆者に発生した骨髄異形成症候群(MDS)の染色体異常を詳細に解析した結果より、近距離被爆者においては自然発症MDSで多く見られる染色体の欠損や数の異常ではなく、転座や逆位という構造異常が有意に増加しており、特に染色体3番、8番、11番の構造異常が有意差をもって増えていることを示した。今年度はそれを基盤として、これまでに収集された原爆被爆者MDSの試料を用いて、次世代シーケンサによる詳細なゲノム解析を開始した。近距離被爆者18名と遠距離被爆者17名について解析可能な試料を収集できた。得られた試料から抽出できたゲノムDNAの量と質、および対象となる検体の有無に応じて解析を行った。近距離被爆者例においてはこれまでの検討で放射線量として5mGy以上の被ばくを受けており、遠距離被爆者例ではそれ未満と考えられた。これらに対して全エクソンシーケンスを16例、全ゲノムシーケンスを3例、ターゲットシーケンスを19例に実施した。その結果、原爆被爆者MDSでは症例当たり5-15個のミスセンス変異とナンセンス変異が同定され、平均は症例当たり9.2個であった。これはこれまでに報告されている自然発症MDS例と比較して増加しているとはいえない結果である。また、変異を有する遺伝子をみると、これまでにMDS発症に係わるとされる、いわゆるドライバー変異として報告されているものがほとんどを占めており、原爆被爆者MDSに特異的と考えられる遺伝子変異は同定されなかった。一方で、自然発症MDSでは最も高頻度に変異が同定される一部の遺伝子においては近距離被爆者例では変異の割合が有意に少なかった。これまでの解析により、原爆被爆者MDSに特異的な遺伝子変異は見られないものの、遺伝子変異フロファイルには特徴がある可能性が示された原爆被爆者に発生した骨髄異形成症候群の症例検体を用いた次世代シーケンサーによる解析が進んでおり、全エクソンシーケンス、全ゲノムシーケンス、ターゲットシーケンスを実施することができた。解析データも順調に解釈が進み、その確認実験も問題なく進めることができている。これらより、順調に進展していると判断できる。原爆被爆者に発生した骨髄異形成症候群症例のゲノム解析を進めて、さらにゲノムコピー数解析を行うとともに、近距離被爆者例における末梢血のゲノム解析を実施する。長崎県下の造血器腫瘍患者データを収集した。それを基に原爆被爆者に発生した骨髄異形成症候群(MDS)症例の詳細な染色体異常並びに予後について非被爆者MDSと比較、解析した。被爆者MDS 133例、非被爆者MDS 269例について検討を行ったが、被爆者MDSは近距離被爆者(被爆距離1.5km未満)の29例を特に高線量被ばくの可能性が高い群として非被爆者群と比較した。今回の解析では近距離被爆者MDS群にDNAメチル化酵素阻害薬を使用した例、同種造血幹細胞移植を受けた例はいずれも含まれなかった。染色体の比較では、特に近距離被爆者群では染色体異常の頻度が72.4%と非被爆者群の43.5%と比較して明らかに上昇していたが、被爆者および非被爆者群の全生存期間に統計学的有意差は認められなかった。染色体異常の種類では近距離被爆者群に転座や逆位が有意に増加しており、モノソミー、トリソミーについては両群間に差は認められなかった。異常が認められた染色体としては、近距離被爆者群において3番、8番、11番染色体の構造異常が非被爆者群と比較して有意に増加しており、これらは被爆者MDSのゲノム異常の特徴を反映している可能性が考えられた。また、急性骨髄性白血病と骨髄増殖性腫瘍を連続して発症した症例をモデルとしてそれぞれの疾患診断時および血液学的寛解期のゲノム検査を実施した。その結果、血液学的寛解期、急性骨髄性白血病、骨髄増殖性腫瘍は同一幹細胞クローンから発生していることを明らかにでき、今後の被爆者造血器腫瘍ゲノム解析へ大きな示唆を得ることができた。長崎県下の原爆被爆者骨髄異形成症候群について症例集積及び検体の収集が進んでおり、1年目にゲノム異常を検討する指標となる染色体の解析を終えることができた。原爆被爆者骨髄異形成症候群例のゲノム異常についても次世代シーケンサーを用いた解析を始めており、解析が技術的に可能なことが確認された。予定通りに順調に進捗していると判断できる。

その結果、原爆被爆者MDSでは症例当たり5-15個のミスセンス変異とナンセンス変異が同定され、平均は症例当たり9.2個であった。これはこれまでに報告されている自然発症MDS例と比較して増加しているとはいえない結果である。また、変異を有する遺伝子をみると、これまでにMDS発症に係わるとされる、いわゆるドライバー変異として報告されているものがほとんどを占めており、原爆被爆者MDSに特異的と考えられる遺伝子変異は同定されなかった。一方で、自然発症MDSでは最も高頻度に変異が同定される一部の遺伝子においては近距離被爆者例では変異の割合が有意に少なかった。これまでの解析により、原爆被爆者MDSに特異的な遺伝子変異は見られないものの、遺伝子変異フロファイルには特徴がある可能性が示された原爆被爆者に発生した骨髄異形成症候群の症例検体を用いた次世代シーケンサーによる解析が進んでおり、全エクソンシーケンス、全ゲノムシーケンス、ターゲットシーケンスを実施することができた。解析データも順調に解釈が進み、その確認実験も問題なく進めることができている。これらより、順調に進展していると判断できる。原爆被爆者骨髄異形成症候群例のゲノム異常についても次世代シーケンサーを用いた解析をすすめ、その結果をまとめていく。また、近距離被爆者の末梢血についても次世代シーケンサーによるゲノム変異の検討についても計画を進める。原爆被爆者に発生した骨髄異形成症候群症例のゲノム解析を進めて、さらにゲノムコピー数解析を行うとともに、近距離被爆者例における末梢血のゲノム解析を実施する。