hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
受容体型ナトリウムポンプとVSORチャネルを起点とする新規抗癌メカニズムの解明

ナトリウムポンプ(Na,K-ATPase)の阻害剤である強心配糖体は、近年抗癌治療への有用性が示唆されている。しかし、その作用機序の全容は解明されていない。本研究により、癌細胞の膜マイクロドメインにおいて、非イオン輸送体型(受容体型)Na,K-ATPaseと容積感受性外向き整流性(VSOR)チャネルが機能複合体を形成していること、低濃度(nMレベル)のウアバインが、NADPHoxidase依存的な活性酸素種の産生を介して、この癌細胞特異的クロストークを活性化することで増殖抑制効果を引き起こすことを見出した。申請者らは、癌細胞において、Na,K-ATPaseのイオン輸送を阻害しない低濃度(nMレベル)のウアバインが、細胞容積調節に寄与する容積感受性外向き整流性(VSOR)チャネルを活性化することで増殖抑制を引き起こすことを見出した。本研究では、癌細胞と非癌細胞の膜マイクロドメインにおけるVSORチャネル構成因子や調節因子の差異に着目した研究を行い、癌特異的なNa,K-ATPase/VSORクロストークの分子メカニズムおよびその抗癌メカニズムを明らかにすることを目指している。本年度は主に以下の成果を得た。(1)ヒト癌細胞株において、NADPH oxidase(NOX)阻害剤によりウアバイン誘導性のVSORチャネル電流の活性化および増殖抑制効果が阻害されることを見出した。また、H2DCFDAを用いて細胞内活性酸素種(ROS)レベルを測定したところ、ウアバイン処理によりNOXによるROS産生が亢進することを見出した。興味深いことに、これらの現象は、正常(非癌)細胞においては観察されなかった。(2)抗LRRC8A抗体を作製し、癌細胞の膜マイクロドメインにおけるVSORチャネルの構成分子LRRC8Aの分布を検討した。Na,K-ATPaseの場合と同様に、LRRC8Aの一部は膜マイクロドメインに分布していた。ヒト癌細胞株においてLRRC8AをsiRNAによりノックダウンしたところ、ウアバインによるVSORチャネル活性化および細胞増殖抑制は消失した。さらに、LRRC8Aノックダウン細胞では、Na,K-ATPaseのイオン輸送能が変化しないにも拘らず発現量は減少したことから、膜マイクロドメインにおいてLRRC8Aと非イオン輸送型(受容体型)Na,K-ATPaseが共役している可能性が示唆された。我々は、癌細胞において、Na,K-ATPaseのイオン輸送を阻害しない低濃度(nMレベル)のウアバインが、細胞容積調節に寄与する容積感受性外向き整流性(VSOR)アニオンチャネルを活性化することで増殖抑制を引き起こすことを見出した。本研究では、癌細胞と非癌細胞の膜マイクロドメインにおけるVSORチャネル構成因子や調節因子の差異に着目した研究を行い、癌特異的なNa,K-ATPase/VSORクロストークの分子メカニズムを明らかにすることを目指している。前年度の研究において、Na,K-ATPaseとLRRC8Aにより構成されるVSORチャネルが共に膜マイクロドメインに分布し機能共役している可能性が示唆された。(1)ヒト癌細胞において、methyl-β-cyclodextrin (MβCD)処理により膜マイクロドメインを破壊したところ、Na,K-ATPaseの86Rb+輸送活性は有意に上昇した。MβCD処理により、ウアバインによるVSORアニオンチャネル電流の活性化は有意に阻害されたが、低浸透圧刺激による細胞膨張時に活性化されるVSORチャネル電流は阻害されなかった。また、MβCD処理により、ウアバインによる細胞増殖抑制効果は有意に減弱した。従って、ウアバインは癌細胞の膜マイクロドメインに存在する非イオン輸送型Na,K-ATPaseに結合することでVSORアニオンチャネルの活性化および抗癌作用を引き起こすことが示唆された。(2)非癌細胞のヒト胎児腎臓由来HEK293細胞では、LRRC8AをノックダウンしてもウアバインによるVSORアニオンチャネルの活性化および抗癌作用は見られなかった。(3)低濃度ウアバインが、癌細胞におけるグルコーストランスポーター1の原形質膜での発現レベルおよびグルコース取込み量を顕著に抑制することを見出した。(4)VSORチャネル阻害剤DCPIBがH,K-ATPase活性を抑制することを見出した。前年度のLRRC8A siRNAを用いたノックダウン実験および抗LRRC8A抗体を用いた膜マイクロドメイン単離実験、本年度に行ったMβCDを用いた膜マイクロドメインの破壊実験、また一連の癌細胞と非癌細胞での比較実験より、癌細胞の膜マイクロドメインには、「Na,K-ATPase-NADPHoxidase(NOX)-VSOR(LRRC8A)シグナロソーム」が特異的に形成されていることが強く示唆された。また、癌細胞において、ウアバインによるVSORアニオンチャネル活性化は、膜マイクロドメイン構造に依存するのに対し、低浸透圧刺激による細胞膨張時のVSORチャネル活性化は、膜マイクロドメイン構造に非依存的であり、両活性化機構が明らかに異なることも明らかとなった。抗LRRC8A抗体の作製、LRRC8A全長クローニングに加え、癌細胞および非癌細胞における高効率なLRRC8Aノックダウン系の構築も完了していることから、今後行う予定である癌細胞の膜マイクロドメイン特異的なVSORチャネル構成分子や制御分子の探索に向けた準備は整っている。また、本年度の研究において、低濃度のウアバインが癌細胞の糖吸収を顕著に抑制することも見出した。

この結果は、ウアバインが癌細胞特有の好気的解糖によるエネルギー産生システムを抑制する可能性を示唆している。以上より、本研究はおおむね順調に進展していると考える。癌細胞において、ナトリウムポンプ(Na,K-ATPase)阻害剤のウアバインは、Na,K-ATPaseのイオン輸送を阻害しない低濃度(nMレベル)で容積感受性外向き整流性(VSOR)アニオンチャネルを活性化し増殖能の抑制を引き起こすことを見出した。Na,K-ATPaseとVSORチャネルとの癌細胞特異的クロストークの分子機構およびその抗癌メカニズムを明らかにすることを目指した研究を行い、本年度は主に以下の成果を得た。(1)界面活性剤CHAPSを用いてヒト大腸癌細胞株(HT-29細胞)より膜マイクロドメイン画分と非マイクロドメイン画分を単離し、VSORチャネルの構成分子の一つであるLRRC8Aの特異的抗体を用いた免疫沈降実験を行ったところ、膜マイクロドメイン画分にのみNa,K-ATPaseとLRRC8Aの免疫共沈降が観察された。(2)これまで様々な細胞の膜マイクロドメインにおいて、Na,K-ATPaseとSrcキナーゼの機能共役が報告されているが、ウアバインによるHT-29細胞の増殖抑制およびミトコンドリア活性抑制に対してSrcキナーゼ阻害剤PP2は有意な効果を示さなかった。以上の結果と昨年度までの結果を総括すると、癌細胞の膜マイクロドメインに存在するNa,K-ATPaseに低濃度のウアバインが作用することで、Srcキナーゼを介した従来のシグナルではなく、NADPHオキシダーゼによる活性酸素種(ROS)産生を介してVSORチャネルが活性化され細胞増殖が抑制されるという新規の抗癌メカニズムが示唆された。(3)他方、ヒト肝癌細胞にウアバインを処理することで、Na,K-ATPaseとその下流のカルシウム-カルモジュリンシグナル経路を介してグルコーストランスポーターGLUT1のエンドサイトーシスが活性化されることを見出した。ナトリウムポンプ(Na,K-ATPase)の阻害剤である強心配糖体は、近年抗癌治療への有用性が示唆されている。しかし、その作用機序の全容は解明されていない。本研究により、癌細胞の膜マイクロドメインにおいて、非イオン輸送体型(受容体型)Na,K-ATPaseと容積感受性外向き整流性(VSOR)チャネルが機能複合体を形成していること、低濃度(nMレベル)のウアバインが、NADPHoxidase依存的な活性酸素種の産生を介して、この癌細胞特異的クロストークを活性化することで増殖抑制効果を引き起こすことを見出した。本年度の研究によりNa,K-ATPaseとVSORチャネルとのクロストークにおいて、NOXにより産生されたROSが関連していることを見出した。また、作製した抗LRRC8A抗体およびsiRNAを用いた実験において、ウアバインにより、癌細胞の膜マイクロドメインに存在するLRRC8Aにより構成されるVSORチャネルが活性化することで癌細胞の増殖抑制が引き起こされることを明らかにした。
ブロードバンド常時接続環境におけるリコメンド技法に関する研究

本研究では,WEB.コンテンツ情報を積極的に分析することによって,利用者ならびにコンテンツの配信状況などの時間的変化情報を的確に捉えた新しいリコメンド技法の確立を目的とする.これにより,利用者に対しては各々の人に対して志向に適合したコンテンツの紹介を行うと共に,コンテンツホルダーに対してはどのようなコンテンツが必要なのかという市場ニーズ情報を提供できる環境の構築を目指したものである.今日のWEB.コンテンツは,我々に様々な情報を提供する手段となっている.そこで,本研究においても,(1)インターネット・サービス・プロバイダーにおける閲覧履歴(2)株式投資の参考資料となる専門化の執筆したアナリストレポート(3)地方公共団体におけるホームページなど,多くの情報に対し,主に研究者がこれまで培ってきた自然言語処理技術を元に,分析を行った.その結果は,国際会議KES2005や国際学術論文IJCSNSにおいて報告を行った.また,ネット上にアップされた情報を即時的に取得することがリコメンドにおいては重要な技術要因となる,そこで,即時的なドキュメント共有技術に関する研究を実施し,その経過をFIT2005にて報告した.更に,これらの技術を構築するためには,大量データを効率的に処理する必要性がある.そのためには,コンピュータアルゴリズムの技術が必要不可欠である.そこで,コンピュータアルゴリズムに関する事項を書籍「コンピュータアルゴリズム」としてまとめ,共立出版から発刊した.以上,本研究では,当初の目的を達成するための基礎技術から応用技術に至る幅広い研究成果を得ることができた.今後は,ここで得た研究成果元に実用化技術の研究に取り組みたいと考えている.本研究では,WEB.コンテンツ情報を積極的に分析することによって,利用者ならびにコンテンツの配信状況などの時間的変化情報を的確に捉えた新しいリコメンド技法の確立を目的とする.これにより,利用者に対しては各々の人に対して志向に適合したコンテンツの紹介を行うと共に,コンテンツホルダーに対してはどのようなコンテンツが必要なのかという市場ニーズ情報を提供できる環境の構築を目指したものである.今日のWEB.コンテンツは,我々に様々な情報を提供する手段となっている.そこで,本研究においても,(1)インターネット・サービス・プロバイダーにおける閲覧履歴(2)株式投資の参考資料となる専門化の執筆したアナリストレポート(3)地方公共団体におけるホームページなど,多くの情報に対し,主に研究者がこれまで培ってきた自然言語処理技術を元に,分析を行った.その結果は,国際会議KES2005や国際学術論文IJCSNSにおいて報告を行った.また,ネット上にアップされた情報を即時的に取得することがリコメンドにおいては重要な技術要因となる,そこで,即時的なドキュメント共有技術に関する研究を実施し,その経過をFIT2005にて報告した.更に,これらの技術を構築するためには,大量データを効率的に処理する必要性がある.そのためには,コンピュータアルゴリズムの技術が必要不可欠である.そこで,コンピュータアルゴリズムに関する事項を書籍「コンピュータアルゴリズム」としてまとめ,共立出版から発刊した.以上,本研究では,当初の目的を達成するための基礎技術から応用技術に至る幅広い研究成果を得ることができた.今後は,ここで得た研究成果元に実用化技術の研究に取り組みたいと考えている.高速ネットワークであるブロードバンドの常時接続環境が普及しつつある中,本研究では,WEB.コンテンツ情報を積極的に分析することで,利用者ならびにコンテンツの配信状況などの時間的変化情報を的確に捉えると共に,利用者の行動を予測し,この予測情報を用いる効果的なリコメンド技法の確立を目的として実施している.まず,基盤的技術として,P2P配信におけるネットワーク環境を整えることを目的として,P2Pネットワークのルートマイニングの研究を実施し,国際会議KES2004にて報告した.また,応用事例としてホームページ記述項目が比較的明確な公共団体のホームページにおける顧客の利用を調査し,同じく国際会議KES2004にて報告した.次に,WEB.コンテンツ情報および顧客動向を把握するためには,これら膨大な数のテキスト情報を高速に処理する必要があるため,基本的なアルゴリズムの研究にも取り組んだ.主には高速全文検索技術および文書クラスタリング技術である.この成果を,それぞれ論文誌International Journal of Computer Mathematics, Information Processing and Managementに投稿し,掲載された.今後来年度を見据え,ネット上で最も商業的な要因が強いといわれ,リコメンドに対する待望がある電子株取引への適用を考え,研究を開始した.具体的には,アナリストレポートの分析を行い,その結果を国際会議KES2004,および,IPSI-2004にて報告した.そのほか,本研究の成果として,論文誌掲載2件,国際会議4件があり,1年目としては,十分な成果を得られた.本研究では,WEB.コンテンツ情報を積極的に分析することによって,利用者ならびにコンテンツの配信状況などの時間的変化情報を的確に捉えた新しいリコメンド技法の確立を目的とする.これにより,利用者に対しては各々の人に対して志向に適合したコンテンツの紹介を行うと共に,コンテンツホルダーに対してはどのようなコンテンツが必要なのかという市場ニーズ情報を提供できる環境の構築を目指したものである.今日のWEB.コンテンツは,我々に様々な情報を提供する手段となっている.そこで,本研究においても,(1)インターネット・サービス・プロバイダーにおける閲覧履歴(2)株式投資の参考資料となる専門化の執筆したアナリストレポート(3)地方公共団体におけるホームページなど,多くの情報に対し,主に研究者がこれまで培ってきた自然言語処理技術を元に,分析を行った.その結果は,国際会議KES2005や国際学術論文IJCSNSにおいて報告を行った.

また,ネット上にアップされた情報を即時的に取得することがリコメンドにおいては重要な技術要因となる.そこで,即時的なドキュメント共有技術に関する研究を実施し,その経過をFIT2005にて報告した.更に,これらの技術を構築するためには,大量データを効率的に処理する必要性がある.そのためには,コンピュータアルゴリズムの技術が必要不可欠である.そこで,コンピュータアルゴリズムに関する事項を書籍「コンピュータアルゴリズム」としてまとめ,共立出版から発刊した.以上,本研究では,当初の目的を達成するための基礎技術から応用技術に至る幅広い研究成果を得ることができた.今後は,ここで得た研究成果元に実用化技術の研究に取り組みたいと考えている.
魚類寄生粘液胞子虫類の宿主特異性に関する研究

粘液胞子虫類の魚への感染ステージである放線胞子虫胞子を、あらかじめ蛍光色素で標識してから感染実験を行うことで、魚体への進入経路を特定するとともに、宿主特異性がどの段階で発現するのかを明らかにした。3種類の放線胞子(サケ科魚類神経組織寄生性Myxobolus arcticusのTriactinomyxon放線胞子、キンギョ軟骨組織寄生性M.cultusのRaabela放線胞子、コイ結合組織寄生性ThelohanellushovorkaiのAurantiactinomyxon放線胞子)を蛍光色素5(6)-carboxyfluorescein diacetate,succinimydil-ester(CFSE:Molecular Probes)で染色後、メッシュろ過により胞子を回収した。粘液胞子虫未感染の稚魚(サクラマス、ベニザケ、コイ、キンギョ)をCFSE標識放線胞子懸濁液に30分間侵漬後、5尾を2%パラホルムアルデヒドで固定し、鰭、皮膚、鰓を蛍光顕微鏡で観察した。残りの魚は継続飼育して、数ヶ月後に粘液胞子虫胞子形成の有無を調べた。その結果、CFSE標識された放線胞子の極嚢細胞と感染細胞が体表上皮などの侵入部位に検出されたが、感染経路は種によって異なること(TriactinomyxonとRaabelaは鰭や皮膚、Aurantiactinomyxonは鰓から)が明らかとなった。また、Triactinomyxonはサクラマス、ベニザケのいずれにも侵入したが、M.arcticus胞子形成はサクラマスでのみみらみれたことから、本種における宿主特異性は魚体内に侵入後、発現することがわかった。一方、Aurantiactinomyxonはコイに侵入し、T.hovorkai胞子を形成したが、キンギョには侵入も胞子形成も見られなかったことより、本種の場合は侵入の時点で魚種を認識できることが示唆された。本研究より、粘液胞子虫における宿主特異性の発現は種類によって異なることが明らかとなったが、そのメカニズムは種ごとに異なると考えられ、今後の課題として残された。
改良型機械的人工換気システムを用いた横隔膜の筋萎縮回復メカニズムの解明

不測の事態により人工呼吸器を装着する場合,予め横隔膜萎縮への予防手段を講じておくことは困難であるため,効果的な回復方法の確立が望まれる.そこで本研究では,改良型ラット横隔膜萎縮モデルを構築し,横隔膜萎縮からの回復メカニズムを実験的に解明することを試みた.しかしながら,研究を進める過程において様々な問題点が明らかとなり,モデルの完成までに至らなかった.そこで,予めの処置が不要な方法として人工換気中の間欠的自発呼吸に着目し,1分間/時の自発呼吸が横隔膜萎縮を抑制することを明らかにした.そのメカニズムとしてカスパーゼ3などの関与が示されたが,未だ不明な点が多く今後更なる取り組みが必要である.本研究は,横隔膜の廃用性萎縮からの回復メカニズムを実験的に明らかにし,効果的な回復法の確立を目指すものである.従来のラット横隔膜萎縮モデルは気管切開やカテーテル挿入を伴うため,人工換気後の飼育が困難であり回復期に対する研究には適さない.そのため,横隔膜の廃用性萎縮メカニズムは徐々に明らかになりつつあるものの,その回復過程については不明である.人工換気後も飼育が可能な改良型横隔膜萎縮モデルを完成させることで,回復メカニズムに迫り,回復法の効果を検証することを目指す本研究は,ヒトに対する実用的な応用が期待できる世界的にも新しい取り組みといえる.本研究は3つのテーマに焦点を絞って研究を進める.初年度は,基礎的研究として【テーマ1】改良型横隔膜萎縮メカニズムの構築に着手した.まずはじめに,従来法からの改良点である気管挿管を気管切開から経口挿管に変更すること,また,血ガス測定を頸部動脈カテーテルから終末期呼気ガス分析に変更することを中心として行った.呼気ガス分析のためのジョイントコネクタの作成に時間を要したものの,プロトタイプはほぼ完成した.また,安定した経口挿管法を探るための注意点もおおよそ把握した.さらに,尾部非観血式血圧計を用いてモニタテストを行うとともに,従来頸部静脈カテーテルを用いていた麻酔を,頸部静脈または尾部静脈留置針に変更すべく検討を行っている.変更したパラメータが,従来のものと同様に12時間の人工換気中の被験動物の状態管理に用いることが可能かどうか,両方のパラメータを同時に測定し比較検討を行っている.本研究は,横隔膜の廃用性萎縮からの回復メカニズムを実験的に明らかにし,効果的な回復法の確立を目指すものである.人工換気後も飼育が可能な改良型横隔膜萎縮モデルを完成させることで,横隔膜萎縮からの回復メカニズムに迫るとともに,効果的な回復法を検証することを目指す.本研究は3つのテーマに焦点を絞って研究を進める.2年目である平成27年度は,基礎的研究を発展させ,【テーマ2】横隔膜萎縮からの回復過程の解析に取り組んだ.前年度の課題であった改良型横隔膜萎縮モデルの構築において,経口挿管を用いた安定した人工換気法の確立および非観血血圧測定に時間を要したため,当初の予定を変更し代替案を採用することで問題を回避した.具体的には,昨年度作成した改良型人工換気モデルは,12時間の人工換気中にラットを適切な状態に保つことが困難であったため,血圧等の測定方法を変更した.現在は,新たに構築したモデルを用いて人工換気実験を行い,回復過程を解明するためのサンプルを作成しているところである.【テーマ1】で構築した改良型横隔膜萎縮モデルは,12時間の人工換気中にラットの状態を適正な状態に維持することが困難であった.そのため,人工換気モデルをさらに改良した結果,【テーマ2】の横隔膜萎縮からの回復過程の解析も遅れ気味である.当初計画よりも半年ほど遅れているが,現在代替案を用いて研究を進めている.本研究は,横隔膜の廃用性萎縮からの回復メカニズムを実験的に明らかにし,効果的な回復法の確立を目指すものである.人工換気後も飼育が可能な改良型横隔膜萎縮モデルを完成させることで,横隔膜萎縮からの回復メカニズムに迫るとともに,効果的な回復法を検証することを目指した.経口挿管を使用した改良型人工換気モデルの構築を目指したが,12時間の人工換気中にラットを適切な状態に保つことが困難であった.また,12時間の人工換気を行うことができた場合でも,その後の回復が順調でなく,分析に必要なサンプル数を確保することが困難であった.具体的には,従来行っていた頸部カテーテル挿入による血圧測定に比べ,尾部血圧測定は血圧変動への応答が小さく,非侵襲的ではあるものの本研究で必要とするバイタルとして用いるには検討を要することがわかった.また,気管切開にくらべ経口挿管では気管の分泌物が増加するため,これを除去するのに多少の熟練を要した.さらに,これまではボリュームコントロールで人工換気を行ってきたが,圧コントロール式に変更するべきであることが示され,人工換気システムそのものの改善点も明らかとなった.このほか,鎮痛剤の投与など回復期のケアについても課題が明らかとなり,今後の研究を行う上での改善するべき問題点を明らかにすることができた.なお,回復期モデルではないが,本研究を進める上で得られたアイデアから,12時間の人工換気中に毎時間1分の自発呼吸期を設けることで横隔膜萎縮及び機能不全を抑制することが可能であることを示すことができ,現在論文作成中である.不測の事態により人工呼吸器を装着する場合,予め横隔膜萎縮への予防手段を講じておくことは困難であるため,効果的な回復方法の確立が望まれる.

そこで本研究では,改良型ラット横隔膜萎縮モデルを構築し,横隔膜萎縮からの回復メカニズムを実験的に解明することを試みた.しかしながら,研究を進める過程において様々な問題点が明らかとなり,モデルの完成までに至らなかった.そこで,予めの処置が不要な方法として人工換気中の間欠的自発呼吸に着目し,1分間/時の自発呼吸が横隔膜萎縮を抑制することを明らかにした.そのメカニズムとしてカスパーゼ3などの関与が示されたが,未だ不明な点が多く今後更なる取り組みが必要である.【テーマ1】とした改良型横隔膜萎縮モデルの構築において,安定した経口挿管を用いた人工換気法の確立および非献血血圧測定に時間を要しているが,おおよそ当初の研究計画通り進行しており,今年度半ば頃には【テーマ2】横隔膜萎縮からの回復過程の解析に着手できる予定である.昨年度作成した経口挿管を用いた改良型人工換気モデルは,12時間の人工換気中にラットの状態を適正な状態に維持することが困難であった.そのため,更に改良を重ね,代替案を用いて研究を進めることとした.当初の研究計画から遅れ気味であるが,方法論の確立は慎重に行う必要があると考えて取り組んでいる.現在は改良型モデル構築の目処が立ち,横隔膜萎縮からの回復過程を解析するためのサンプル作成に取り組んでいるところである.本年度計画している【テーマ3】効果的回復法の検証には着手できるものと考えている.運動生理学終末期呼気ガス分析用のジョイントコネクタの作成に多少時間を要したたこと,また,経口挿管による人工換気法の完成度がやや低いため更なる工夫が必要であることから,多少の遅れが生じる可能性がある.おおよそ研究計画通りに進んでいるが,【テーマ1】とした改良型横隔膜萎縮モデルの構築を急ぎ,申請当初の計画に従い【テーマ2】横隔膜萎縮からの回復過程の解析に着手したい.改良型人工換気モデルの再構築を行ったため,実験動物の購入や実験に関わる消耗品費および謝金等の使用が予定よりも少なかった.改良型人工換気モデルに使用するコネクタ等の作成に時間を要したため,実験動物の購入や実験に関わる消耗品費および謝金等の使用が予定よりも少なかったため.現在は横隔膜萎縮からの回復過程を解析するための人工換気実験の目処が立ったため,【テーマ2】および【テーマ3】の実験に順次取り組む予定であり,28年度予算と合わせて使用する予定である.研究計画では27年度半ばまで【テーマ1】を継続して行う予定であり,26年度に予定数に達しなかった実験は次年度予定通り行う予定である.27年度予算と合わせ,研究計画通り【テーマ1】として行う実験のために使用する予定である.
"雌"交尾器のペニス化をもたらした進化的背景の解明

科研費の最終年度にあたり,これまでに得られた成果を論文として発表するとともに,プロジェクトの総括・将来展望を議論した論文も作成した.(1)トリカヘチャタテの精子貯蔵器官に存在する特殊な構造に着目し,SPring-8を用いて解析し,この構造が精子の流れをコントロールする切り替えバルブとしての機能を持っていることを明らかにした.これは,生物からの初めての切り替えバルブの発見で,生物模倣工学的観点からも興味深い発見となった(eLife).(2)トリカヘチャタテと近縁群の分子系統解析と比較形態学的検討から,雌ペニスが南米産のトリカヘチャタテとアフリカ産のAfrotroglaで独立に進化したことを明らかにした(Biology Letters).(3)次世代シーケンサーを使い,トリカヘチャタテのマイクロサテライトマーカーを作成した.これを用いることで,トリカヘチャタテの集団構造の解析や,子供の父性判定等の解析を今後行うことを計画している(Entomological Science).(4)これらを踏まえ,トリカヘチャタテにおける雌ペニスの進化的背景の現段階での理解を総括した.栄養豊富な精液をめぐるメス間競争,貧栄養的な生息環境,精子貯蔵器官の切り替えバルブの3点が,雌ペニスの進化を促進する要因として考えられた.また,雌上位の交尾姿勢,コイル状の長い精子輸送ダクト,雌ペニス進化前に存在した雌の微小突起とそれを受け入れる雄の構造の3点により,雌ペニス進化の制約が弱まったことも重要な要素として考えられた(BioEssays,印刷中).(5)また関連する研究成果として,トリカヘチャタテのミトコンドリアゲノム解析,翅の構造の解析,洞窟性昆虫の新種記載,準新翅類のゲノム系統なども発表した.平成30年度が最終年度であるため、記入しない。平成30年度が最終年度であるため、記入しない。標本収集:国内各地およびブラジルでのフィールド調査により,形態および系統解析に必要なチャタテムシ,マルハナノミ,ヒョウモンチョウのサンプルの収集を行った.トリカヘチャタテは,既知5種(1未記載含む)のうち,4種の標本を得ることが出来た.飼育系統確立:トリカヘチャタテの飼育設備をブラジル共同研究者と協議し,飼育系統確立への十分な準備が整った.マルハナノミのうち,雌交尾器に特異性の見られる種の飼育は失敗したが,初年度としては想定の範囲であった.ヒョウモンチョウの飼育も行い,ハンドペアリング法の確立に向け,検討を開始した.雌雄判別:本年度特筆すべき成果として,トリカヘチャタテの終令幼虫での雌雄判別法の確立が挙げられる.これにより,今後雌雄判別や処女雌確保が必要となる多くの交配実験への道筋をつけることが出来た.系統進化:トリカヘチャタテの核18S, Histone 3およびミトコンドリア16S, 12Sで良好な増幅結果が得られ,予備解析の結果,トリカヘチャタテ属の単系統性や属の位置づけなど安定した結果が得られた.一方進化速度の速いCOI遺伝子の増幅は一部のサンプルにとどまっており,このことにより種間の系統関係の解明度は現段階では不十分である.サブプロジェクト:主題となる「雄から子への投資の大きい生物」における性行動,生殖器形態研究の対照研究として,「雌から子への投資の大きい」ツノカメムシ類の育児行動と生殖器形態の進化の関連を解明した.またチャタテムシの祖先状態解明の目的で,保存状態の良いミャンマー産琥珀化石の記載および形態解析も行った.トリカヘチャタテに関しては当初計画をほぼ満たす成果が得られ,さらに困難が予想された雌雄個別飼育に関しても,終令幼虫での性判別が可能になり,今後の研究の進展に極めて大きな期待が持てる要件がそろった.分子系統のマーカー設計に一部遅れもあるが,新鮮なサンプルが入手出来たため,ゲノムが解析出来れば一気に解決可能である.ブラジル現地の研究協力者とも十分な意見交換が出来,今後の研究の順調な進展が期待出来る.ヒョウモンチョウの交尾器や交尾状態の観察も当初予定通り進んでいる.ハンドペアリングの確立にもう少し時間を要する.マルハナノミの飼育系統確立がまだ出来ていないが,これまで飼育実績のほとんど無い昆虫群であり,ある程度想定内である.標本収集:国内でのフィールド調査にを継続し,チャタテムシの形態解析用サンプルを追加した.国内での洞窟調査も行ったが,残念ながらトリカヘチャタテに近縁なチャタテムシは得られなかった.ヒョウモンチョウ,マルハナノミのサンプリングも継続して行い,追加サンプルが得られた.遺伝子解析:トリカヘチャタテを含む広範囲のチャタテムシのミトコンドリアゲノムデータを解析した.その結果,チャタテムシのミトコンドリアゲノムの祖先状態や,多くの固有の遺伝子配列の変化など,多くの新知見が得られた.この結果はすでに投稿している.これらのミトコンドリアゲノムデータに基づき,トリカヘチャタテのミトコンドリアマーカーの新たなプライマーセットの開発を行った.その結果,COI, CytBにおいて良好な増幅産物が得られ,また系統解析の予備解析の結果も良好であった.前年度すでに確認した18S, 16S, 12S, histone 3に加え,これら2遺伝子座も用いて系統解析を行うことにした.トリカヘチャタテの親子判別,集団構造解析に必要なマイクロサテライトプライマーの開発にも着手し,次世代シーケンサーを用いたゲノム解析が完了した..形態解析:SPring8で形態解析を行い,多くのデータを集めた.特に,トリカヘチャタテの雌ペニスと相同関係にある可能性の高い雌交尾器構造に関するデータを,幅広いチャタテムシから収集した.

サブプロジェクト:ブラジルのフィールドワークで得られたトリカヘチャタテ以外のチャタテムシやハサミムシの分類学的研究も行い,それぞれ新知見を論文として出版した.トリカヘチャタテの分子系統,親子判別を大きく進展させうる成果が得られた.国内でのトリカヘチャタテ近縁種の探索は不発に終わったが,研究の大目標達成にあたっては大きな支障ではない.ヒョウモンチョウの交尾器や交尾状態の観察も進んでいる.マルハナノミの飼育系統確立に関しては当初予定ほどうまくいっていないが,全く飼育実績のない分類群でもあり,その可能性も想定の範囲内である.標本収集:国内でのフィールド調査により,より幅広い範囲のチャタテムシの形態解析用サンプルが得られた.ヒョウモンチョウ,マルハナノミのサンプリングも継続して行い,追加サンプルが得られた.遺伝子解析:前年度解析したミトコンドリアゲノム情報に基づき,トリカヘチャタテの分子系統解析に必要な追加プライマーの設計を終え,データもほぼそろった.現在外群のデータを追加している状態である.予備解析ではトリカヘチャタテ内の系統関係の解像度も高く,また近縁なAfrotrogla, Sensitibilla, Spekeletor属との系統関係に関しても良好な解析結果が得られている.トリカヘチャタテの親子判別,集団構造解析に必要なマイクロサテライトプライマーも完成し,それらを報告した論文が受理され,現在印刷中である.形態解析:SPring8での追加の形態解析を行い,十分なデータを集めた.特に,トリカヘチャタテの精子貯蔵構造に興味深い発見があり,それらの解析をほぼ終え,論文の執筆を開始している段階にある.雌ペニスに関連した構造の解析も進めており,現在は比較に必要な雌ペニスを持たない通常のチャタテムシの交尾器の状態の解析を進めている.加えて,共焦点レーザー顕微鏡を用いた解析も進めており,これらの構造のタンパク質構成などについても解析を進めている.サブプロジェクト:プロジェクトを通して得られたトリカヘチャタテなどのサンプルを用いて,交尾器以外の形態の観察も行った.特に,前後翅を連結する構造の解析を行い,その結果を論文として出版した.この構造から,トリカヘチャタテの飛翔能力が弱いであろう事も傍証された.受賞:本プロジェクトでイグ・ノーベル賞生物学賞を受賞した.トリカヘチャタテの分子系統,親子判別,形態進化等,大目標に関しては期間内に全て論文化できる見通しが立った.行動観察については,現地協力者の協力が必要で,当初予定より遅れもあるが,研究の大目標達成にあたっては大きな支障ではない.ヒョウモンチョウの交尾器や交尾状態の観察も進んでいる.マルハナノミの飼育系統確立に関しては当初予定ほどうまくいっていないが,全く飼育実績のない分類群でもあり,その可能性も想定の範囲内である.野生状態での交尾ペアの採集で対処可能である.科研費の最終年度にあたり,これまでに得られた成果を論文として発表するとともに,プロジェクトの総括・将来展望を議論した論文も作成した.
高配位有機リン化合物の合成と反応

トリス(2,6ージメトキシフェニル)ホスフィン(2,6)_3P[(2,6)=2,6ー(MeO)_2C_6H_3]やそのオキシド(2,6)_3POの塩基性、求核性などをトリフェニル化合物Ph_3Pや(2,6)_3M(M=As,Sb,Bi)などと比較検討した。その結果、1)(2,6)_3M(M=P,As,Sb)はいずれもPh_3Mにくらべハロゲン化アルキルへの求核反応性が高いことが分った。その求核反応性はM=P>As>Sb>Biの順に低くなる。2)含水アセトン中で、(2,6)_3M(M=P,As,Sb)とNーブロモスクシニミドの反応によりヒドロキシオニウム塩[(2,6)_3MーOH]Brが得られた。これらは水溶性があり、その水溶液のpH測定から(2,6)_3MOの塩基性がM=P<As<Sbの順になることが分かった。(2,6)_3POや(2,6)_3AsOにも求核性があり、ハロゲン化アルキルなどに求核反応してアルコキシオニウム塩[(2,6)_3MーOR]Xを生成する例も見いだした。4)[(2,6)_3PーOH]CIO_4と同様,[(2,6)_3AsーOH]ClO_4や[(2,6)_3SbーOH]ClO_4なども各種のアミンと1:1付加体を生成することが分かった。これらの付加体の安定性は(2,6)_3MOの塩基性の順(M=P>As>Sb)であり、ASやSbの付加体は再結晶により、アミンを解離しやすい。[(2,6)_3PーSH]ClO_4はアミンにより脱プロトンされることが多いが、付加体を生成する例も見いだした。5)Ph_3POは二ハロゲン化ジメチルスズMe_2SnX_2と1:2錯体を形成することが知られているが、(2,6)_3PO、Ph(2,6)_2PO,Ph_2(2,6)POは1:1錯体を形成し、メトキシ基も配位に関与している可能性があること、なども見いだした。
胎児の聴覚の発達過程と聴力障害発症の成因の解明

胎齢125129日(満期148日)のヤギ胎仔を臍帯動静脈A-V ECMOシステムを用いて子宮外保育し、循環動態が安定した時期に低酸素負荷を行い、胎仔の聴性脳幹反応(ABR)および聴性中間反応(MLR)の変化を解析することで、低酸素状態が胎仔の聴覚に及ぼす影響を検討した。低酸素負荷(PaO_2:12.8±0.9mmHg)により、平均動脈血圧が上昇し、頸動脈血流量が増加した。ABRでは第V波の潜時が延長し、振幅が低下した。MLRではPa波の潜時が延長し、振幅が低下した。これらのことから、低酸素状態は胎仔の中脳より中枢側の聴覚神経繊維に影響を及ぼす可能性が示唆された。次いで、負荷実験終了後胎仔の脳を摘出し、聴覚路(蝸牛神経核、上オリーブ核、下丘、内側膝状体、聴皮質)にH.E.染色、Niseel染色、熱ショック蛋白(HSP)-72による免疫染色を行った。対照群として子宮外保育のみで負荷をかけないヤギ胎仔2頭と子宮外保育を行わず屠殺した同胞ヤギ2頭を用いた。低酸素負荷を行ったヤギ胎仔においては、H.E.染色、Nissel染色では聴覚路に明らかな組織学的変化は認められなかった。HSP-72による染色では、対照群に比べ低酸素負荷を行った胎仔の蝸牛神経核、上オリーブ核にHSP-72の発現を多く認めた。今回の実験では聴覚路の脳幹部位である蝸牛神経核、上オリーブ核においてその発現を認め、下丘より中枢側では発現は少なかった。この結果は低酸素負荷が中脳より中枢側の聴覚神経繊維に影響を及ぼす可能性を示したABR, MLRの結果と一致し、低酸素が聴覚路、特に中脳より中枢側の聴覚神経繊維に影響を及ぼす可能性が組織的にも示された。胎齢126日(満期148日)のヤギ胎仔6頭(胎齢126.0±1.6日)を臍帯動静脈A-V ECMOシステムを用いて子宮外保育し、循環動態が安定した時期に低酸素負荷を行い、胎仔の聴性脳幹反応(ABR)および聴性中間反応(MLR)の変化を解析し、低酸素状態が胎仔の聴覚に及ぼす影響を検討した。ヤギ胎仔には、脳波、心電図、頸動脈血流量、動脈圧測定用のプローブと聴性誘発反応(ABR,MLR)を誘導するための電極を装着し、さらに防水イヤホンマイクをヤギ胎仔の両耳に装着した。音刺激は持続100μsecのクリック音を用い、105dBの音圧で、ABR波形は2000回、MLR波形は500回の加算平均を求めた。低酸素負荷は、体外循環回路の酸素投与量を調整することにより行い、PaO_215mmHg以下を低酸素状態とした。低酸素負荷前(PaO_2 : 29.6±5.2mmHg)および負荷中(PaO_2 : 13.0±1.5mmHg)の血圧、頸動脈血流量、ABR、MLRをデジタルデータレコーダに記録し、実験終了後コンピュータ解析を行い、ABRおよびMLRは各波の潜時と振幅の変化について検討した。低酸素負荷により、平均動脈血圧は25.0±15.7mmHgから41.1±16.5mmHgに上昇し、頸動脈血流量は36.3±16.6%増加した。ABRでは第V波の潜時は0.58±0.16

msec延長し、振幅が53.1±1.9%に低下した。MLRではPa波の潜時が3.00±0.61msec延長し、振幅が52.3±5.6%に低下した。低酸素負荷による血圧上昇と頭部への血流量増加といった代償反応にもかかわらず、ABRおよにMLRに潜時の延長、振幅の低下を認め、特にABRの第V波、MLRにおいてその変化が著明であったことから、低酸素状態は胎仔の中脳より中枢側の聴覚神経繊維に影響を及ぼす可能性が示唆された。これまでに我々は子宮外保育中のヤギ胎仔に対して低酸素負荷を行い、聴性脳幹反応の第V波、聴性中間反応のPa波においてその変化が著明であったことから、低酸素状態は中脳より中枢側の聴覚神経繊維に影響を及ぼす可能性を示した。今回は低酸素が胎仔の聴覚路に及ぼす影響に関して、病理組織学的検討を行った。胎齢127日(満期148日)のヤギ胎仔5頭を臍帯動静脈A-V ECMOシステムを用いて子宮外保育し、循環動態が安定した時期に1時間の低酸素負荷を行い、負荷前および負荷中のABR, MLR及び生体パラメータを実験終了後に解析した。さらに、負荷実験終了後胎仔の脳を摘出し、聴覚路(蝸牛神経核、上オリーブ核、下丘、内側膝状体、聴皮質)にH.E.染色、Niseel染色、熱ショック蛋白(HSP)-72による免疫染色を行った。対照群として子宮外保育のみで負荷をかけないヤギ胎仔2頭と子宮外保育を行わず屠殺した同胞ヤギ2頭を用いた。低酸素負荷を行ったヤギ胎仔においては、H.E.染色、Nissel染色では聴覚路に明らかな組織学的変化は認められなかった。HSP-72による染色では、対照群に比べ低酸素負荷を行った胎仔の蝸牛神経核、上オリーブ核にHSP-72の発現を多く認めた。下丘、内側膝状体、聴皮質ではHSP-72の発現は認めなかった。HSP-72は低酸素ストレス下で防御的な役割を果たすと報告されている。今回の実験では聴覚路の脳幹部位である蝸牛神経核、上オリーブ核においてその発現を認め、下丘より中枢側では発現は少なかった。この結果は低酸素負荷が中脳より中枢側の聴覚神経繊維に影響を及ぼす可能性を示したABR, MLRの結果と一致し、低酸素が聴覚路に及ぼす影響が組織的にも示された。
Study on the mechanism of Girdin-mediated amino acid signaling and regulation of mTORC1 activity in cancer cells

本研究ではアミノ酸トランスポーター複合体の構成因子である4F2hcと多機能ハブ分子でアクチン結合分子であるGirdinが結合し、本複合体がmTORC1(mechanistic target of rapamycin complex 1)の活性を抑制することを見出した。Girdinと4F2hcの結合はMAPKによるGirdinのリン酸化に依存し、その結果、4F2hcがリソソームに移行することを示した。これによる細胞表面の4F2hcの減少は細胞内のグルタミン量の低下およびmTORC1活性の低下に結びつく可能性も示した。本機序は、アミノ酸シグナルの脱感作を制御している可能性が示唆された。実験病理学今年度の実験計画が予想よりも進捗が早く、また一部の試薬を複数の実験で共有することが可能であったため、助成金の一部を次年度に繰り越すことを考案した。次年度は今年度までに解明した細胞内代謝制御の機序について、動物実験を用いた検証を予定している。繰り越した助成金は昨年度と同様に生化学消耗品に用いる他、動物実験のための各種費用に充当する予定である。
ヒト白血病の遺伝子診断

慢性骨髄性白血病(CML)は多能性幹細胞のクローン性増殖性疾患であり、慢性期にt(9;22)転座を認めることおよび慢性期を経て必ず急性期に移行することを特徴とする。t(9;22)によるBCR/ABL融合遺伝子の形成はCML発症に重要である。しかしながら、CML急性転化の分子機構は明らかにされていない。CML急性転化時に出現する付加的染色体異常の中で、t(3;21)(q26;q22)は相互転座であることが特異的である。そこで、この染色体異常による融合遺伝子の形成に関する研究を行った。t(3;21)転座の結果AML1/EVI-1キメラ遺伝子が形成され、これは融合mRNAへと転写されることが明らかになった。融合mRNAは8.2kbと7.0kbの主に2種類存在した。t(3;21)転座を有するヒト白血病細胞株SKH1より作成したcDNAライブラリーをスクリーニングし、全長と考えられる2つの約6kbのcDNAクローンを得た。これらのcDNAクローンは1つのopenreading frameを持ち、5'側に正常AML1シークエンス、3'側に第2エクソンからpoly(A)tailに至るEVI-1シークエンスを含んでいた。AML1およびEVI-1に対するポリクローナル抗体はSKH1細胞において同じ180kDのAML1/EVI-1融合蛋白質を認識した。この融合蛋白質はrunt homology domainを含むAML1のN端側とzinc finger typeの転写因子であるEVI-1の全長より構成されていた。このAML1/EVI-1 fusionの形成はRT-PCRで検討したt(3;21)転座を有する3症例で共通であった。AML1あるいはEVI-1の転写開始部位に位置する20-merのアンチセンスオリゴヌクレオチドはSKH1細胞における^3H-thymidineの取り込みを著明に抑制することから、AML1/EVI-1融合蛋白質はt(3;21)転座を有する白血病細胞の増殖に重要であると考えられた。以上の結果より、t(3;21)転座の結果新しいタイプのキメラ型転写因子が形成され、これがCML急性転化に関与している可能性が示唆された。骨髄異形成症候群は2年以内に半数以上の患者が白血病へ進展することから前白血病状態と考えられている。一方、p53遺伝子は癌抑制遺伝子であると考えられており、白血病をはじめ多くの悪性腫瘍において、両方のアレルで不活化されていることが示されている。我々は骨髄異形成症候群患者由来細胞におけるp53遺伝子の変異について解析を行った。患者骨髄細胞からRNAを抽出し逆転写酵素でcDNAを合成した後、PCR法でp53cDNAを増幅し、Single strand conformational polymorphism(SSCP)法を用いて、そのcDNA断片中に存在する変異の有無を検討した。44例の骨髄異形成症患者と6例の骨髄異形成症由来白血病患者について上記の解析を行った結果、3例の骨髄異形成症患者と1例の骨髄異形成

由来白血病症例においてSSCP法によるcDNAの異なる移動度が観察された。注目すべきことは、移動度に差異のある症例ではいずれも正常の移動度を示すcDNA断片が存在しない点であり、このことはこれら4例の骨髄細胞において正常なmRNAが発現していないことを示している。異常な移動度を示すcDNA断片を直接シークエンス法によって解析した結果、いずれも片方のアルレでのp53遺伝子の変異と他方のアルレでのp53mRNAの欠損が明らかとなった。これらの結果から、変異の認められた4症例ではp53蛋白の機能が不活化されていることが明らかとなった。これまでに我々は骨髄異形成症候群において20-30%の頻度でN-ras遺伝子が点突然変異によって活性化されていることを報告してきた。上記のp53遺伝子変異4症例について、N-ras遺伝子の解析を行った結果、4症例ともN-ras遺伝子は正常であることが判明した。このことは骨髄異形成症候群の発症ないしは進展の分子機構は症例によって異なることを示している。(1)骨髄異形成症候群(MDS)・白血病とras遺伝子:MDS細胞や白血病細胞に見い出されるras遺伝子の変異は多くの場合、N-ras遺伝子の変異で、12、13、61番目のいずれかのアミノ酸コドンにおける点突然変異である。MDS細胞や白血病細胞では1520%の頻度で見い出される。MDSや白血病におけるras遺伝子の変異は、N-ras遺伝子の変異が多く検出される。ras遺伝子の変異を解析することは、MDSの白血化に関する予後判定に有用である。(2)MDS・白血病とp53遺伝子:p53遺伝子は癌抑制遺伝子であり、両方のアレルで欠失、変異、挿入などを生じてp53遺伝子が不活化されることによって細胞を癌化に導く。p53遺伝子の変異はMDS症例、白血病症例、白血病細胞株と細胞の増殖能が高くなるほど、変異頻度も高くなること、およびMDSにおいても病期が進行した症例に変異が認められていることなどから、p53蛋白の不活化が細胞増殖に有利な条件を与えることが示唆される。(3)Ph^1陽性ALL:Ph^1陽性ALLはALLの1520%に認められるが、この場合にはPh^1染色体は2種類に大別される。1つのタイプはCMLと同様であり、bcr内に切断点があって8.7kbのmRNAを転写し、p210の蛋白に翻訳される。もう1つのタイプは切断点がbcr遺伝子の第1イントロンにあり、7kbのmRNAに転写されp190の蛋白に翻訳される。Ph^1陽性ALLにおいては両方のタイプの組み換えがほぼ同数例に観察される。(4)CML急性転化:CML急性転化時に出現する付加的染色体異常の中でt(3;21)(q26;q22)は相互転座であることが特異的である。t(3;21)転座の結果、AML1/EVI-1キメラ遺伝子が形成され、これは融合mRNAへと転写される。このAML1/EVI-1 fusionの形成はRT-PCRで検討したt(3;21)転座を有する3症例で共通であった。t(3;21)転座の結果、キメラ型転写因子が形成され、これがCML急性転化に関与している可能性がある。
戦前期日本のアジアにおける科学研究の国際協力に関する研究

本研究は戦前、戦中期における、日本のアジアでの科学研究の国際協力に関する研究であり、とりわけ、1931年に設立された日中共同研究機関上海自然科学研究所および1928年に台湾に設立された台北帝国大学に重点を置いて資料調査、分析を行った。アジア地域における日本の科学技術研究のつながりが期待される今後、本研究から得られる歴史的知見が将来のアジアにおける日本の科学研究の国際協力のあり方についての考察に資することが望まれる。科学研究の国際協力と言っても、日本がアジアに植民地を拡大し、大陸に侵略する過程においては、それは様々な政治的意図が含まれるものであった。実際、中国においては、協力という美名のもとに文化侵略を行うのだという非難が巻き起こった。このような現象は現在文化帝国主義という概念で分析がなされている。まず、この文化帝国主義という概念について検討を加えた。上海自然科学研究所に関しては外務省外交史料館所蔵史料や研究所が発行した雑誌を主な資料として分析を行い、とくに地球物理学、地球化学においては、困難な状況の中で日本人研究者が中国人研究者との個人的な関係を利用して研究されたことを示した。また、台北帝国大学に関しては、精神医学研究に重点を置いて分析を行った。台湾人の研究者養成はごく狭い範囲で行われたものであり、原住民に対しては亜熱帯という気候との関連から日本人との民族的な差異を強調する視線と文化相対主義的視線の両方があった。そして、文化精神医学的研究伝統は部分的に戦後にも引き継がれた。当時の医療的実践については、日本国内の状況すら従来じゅうぶん分析されてこなかったため、西洋医学と伝統医学の関係という観点から検討を行った。研究成果は日本科学史学会をはじめ、国際科学社会学会、国際東アジア科学史会議、東アジアSTS会議など国際学会で発表し、中国や韓国でも共著の図書を出版し公表した。2006年度は上海自然科学研究所に関する史料の収集・整理、研究者の基礎的データの整理、物理・化学分野の重要な研究の特徴分析を行った。まず史料については、基本的なものとして、上海自然科学研究所の基礎的なデータが記載されている『上海自然科学研究所要覧』および『上海自然科学研究所十周年紀念誌』、また、研究論文が載っている『上海自然科学研究所彙報』、『Journal of the Shanghai Science Institute』、上海自然科学研究所の事務員が主に編集した『中国文化情報』を収集した。そのほかに重要な史料としては、外務省外交史料館所蔵史料の一部、ジョセフ・ニーダム手稿の一部も収集した。さらに、上海自然科学研究所所員のエッセイなどが載っている『自然』の収集を進めたい。上記史料に基づいて、プロソポグラフィー的分析の基本となる上海自然科学研究所研究者・職員の変遷リスト、研究者の業績リストの作成、研究者の入所前・退所後の履歴の調査などを進めている。研究内容の分析については、速水頌一郎、東中秀雄による日食観測、測地学的研究、長江の流体力学的研究などの地球物理学研究や、岡田家武、合田史郎による希土類元素間の地球化学的分配率の研究に関して、予備的に検討した。中国における厳しい政治的状況のなかで、彼らは出身大学の人的資源や、中国人協力者を活用して研究を進めたことを明らかにした。その成果は今年半ばまでにはまとめる予定である。今年度は同時代の中国、世界の研究との関連を調査すると共に、他学科の研究についても網羅的な分析をおこないたい。戦時期日本のアジアにおける科学研究の国際協力について検討するため、上海自然科学研究所の活動を中心として調査を行った。特に岡田家武、合田史郎による微量元素、微量化合物の地球化学的研究と、速水頒一郎、東中秀雄の地球物理学的研究について詳しく分析した。上海

自然科学研究所は、日中関係が政治的・外交的手段の手詰まりを迎えた1920年代後半に、外務省が学問や文化は超政治的であるとして企画し、純粋科学を中心に研究する研究所として発足した。確かに、岡田は中国人研究者の張定、と地球化学の試料採集などで協力し、また、国民党に近い、懇意の中国人の知人を頼って中国各地の調査を行ったのだが、戦時期の国際協力はその程度であった。合田史郎はほとんど研究所から出ず、中国人研究者とのめだった協力関係は無かった。地球物理学の速水頌一郎、東中秀雄も同様に、日本に留学したのちに上海自然科学研究所に赴任した研究者以外の中国人とは実りある研究交流はできなかった。戦時期、敵対する国同士では、学問は政治を超越するという外務省の思惑とはうらはらに、研究者同士であれ、良好な関係を持つのは困難であった。一方、イギリスのジョセフ・ニーダムは戦時期、中国人研究者に対し、科学的協力を行っている。そして、ニーダムのマニュスクリプトを調査したところ、戦後すぐ、ニーダムは日本が占領していた各研究所の接収状況を本国に報告しており、上海自然科学研究所についても実見した様子を伝える文書があることを発見できた。