hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
無保護のグリカールから直接発生させた二価パラジウム種によるC-グリコシドの合成

昨年度の結果をもとにアルキニルヒドラゾンを反応相手とし、グルカール誘導体3位の脱離基について検討したが、アルキニルヒドラゾンが主に消費され収率は向上出来なかった。次にグルカール誘導体の脱離基を活性化する目的で添加剤を検討したが、反応が進行しない、もしくはグルカール誘導体が分解されるのみであった。グルカール誘導体ではπ-アリルパラジウム種を上手く発生できていないと考え、ピラノン誘導体を用いて検討を行った。文献を参考にアノマー位にt-ブチルカーボネートを有する基質を用いたところ、ピラノン誘導体は消費されるがアルキン誘導体とは反応せず、ピラノン誘導体自身で反応したO-グリコシドが生成した。アノマー位の置換基を安息香酸エステルに変更したところ、自己反応は抑制できたが期待したC-グリコシドは得られなかった。現在のところ、0価Pd触媒下グルカール誘導体およびピラノン誘導体から生成するπ-アリルパラジウム(二価パラジウム)種をアルキンの活性化に用いてアリールC-グリコシドを効率的に合成する段階には至っていないが、本研究期間で利用できる可能性を見出せた。上記検討と並行して、アレンに対して二価パラジウム触媒を用いるカルボニル化反応を検討した。すなわち、直鎖状のアルキル基を有する一置換アレンを原料とし、メタノール中、触媒量の二価パラジウム錯体およびパラベンゾキノン存在下、一酸化炭素雰囲気下で反応を検討した。これまで、一置換アルキルアレンの分子間メトキシカルボニル化反応では位置選択性が無いことが知られていたが、配位子を工夫することで位置選択性が制御できることを見出した。さらに光学活性な配位子を用いることで中程度の選択性ではあるが、初の不斉触媒化を達成した。また、アリール基を有する一置換アレンではベンゼン環上の置換基効果を受けるものの、位置およびエナンチオ選択的に反応が進行するものが確認できた。平成28年度は0価パラジウム触媒下、無保護のグリカールの直接活性化を経るC-グリコシド合成を検討するための予備検討を行った。すなわち、グルカールの部分構造であるアリルアルコールと0価パラジウムから直接発生させたπ-アリルパラジウム種を用いて、o-アルキニルチオフェノール誘導体、o-アルキニルアニリン誘導体およびo-アルキニルフェノールを活性化し、触媒的に3位にアリル基を有するベンゾチオフェン、インドールおよびベンゾフランが得られることを明らかにするため検討を行った。まず、原料であるo-アルキニルチオフェノール誘導体、o-アルキニルアニリン誘導体およびo-アルキニルフェノールを文献の方法に従い合成した。次にo-アルキニルチオフェノール誘導体を基質とし、大嶌等の反応条件(Org. Lett., 2004, 6, 4085.)を参考に、アリルアルコール存在下、水溶性ホスフィン配位子であるSodium Diphenylphosphino -benzene-3-sulfonate (tppms)を用いてパラジウム触媒および溶媒の検討をした。具体的には、パラジウム触媒としてPd(OAc)2、Pd(acac)2、Pd2(dba)3・CHCl3、[Pd(allyl)Cl]2、Pd(PPh3)4、溶媒は酢酸エチル、THF、DME、ジオキサン、トルエン、ヘキサンなどの有機溶媒と水との二相系もしくは水中で反応を行った。その結果、Pd2(dba)3・CHCl3およびtppms存在下、水/ジオキサン中、アリルアルコールとo-アルキニルチオフェノール誘導体から3位にアリル基を有するベンゾチオフェンが収率良く得られることを見出した。さらに基質一般性を検討したところ、o-アルキニルアニリン誘導体およびo-アルキニルフェノールを用いた場合でも同様に反応が進行することがわかった。その結果、アリルアルコールと0価パラジウムから直接発生させたπ-アリルパラジウム種を用いて、o-アルキニルチオフェノール誘導体、o-アルキニルアニリン誘導体およびo-アルキニルフェノールを活性化し、触媒的に3位にアリル基を有するベンゾチオフェン、インドールおよびベンゾフランが得られることを明らかにできたため。平成29年度は予備検討の結果をもとに、無保護のグリカールの直接活性化を経るC-グリコシド合成を検討した。具体的にはグルカールとo-アルキニルチオフェノール誘導体およびo-アルキニルアニリン誘導体を原料とし、水溶性ホスフィン配位子であるtppms存在下、パラジウム触媒としてテトラキストリフェニルホスフィンパラジウムを用いてジオキサンと水との二相系溶媒中で反応を行なった。その結果、目的の反応は進行せず、グルカール3位のヒドロキシ基が酸化された化合物やアルキン誘導体が環化したベンゾチオフェンやインドールが得られるのみであった。次にパラジウム触媒や溶媒の検討を行ったが、目的の反応は進行しなかった。そこで次に、文献の方法に従い、グルカールの4位および6位のヒドロキシ基をp-メトキシベンジリデンアセタールで保護した後、3位をカーボネートへ変換し脱離能を向上させた基質を合成した。合成した基質とアルキニルヒドラゾンを用いて、再度パラジウム触媒および配位子、溶媒の検討を行った。

具体的には、パラジウム触媒としてトリス(ジベンジリデンアセトン)(クロロホルム)ジパラジウム、配位子としてDiPPF、DtBPF、dppfなどのフェロセン系配位子やXantphos、tBuXPhosを用いてトルエン中で検討したが、目的のC-グリコシド体は得られなかった。次に原料の消失が見られたDiPPFを用いて溶媒を検討したところ、アセトニトリル中で反応を行った際に6%の収率ではあるがピラゾールを有するC-グリコシドが得られることを見出した。平成29年度に、活性化したグルカールとアルキニルヒドラゾンを用いて、トリス(ジベンジリデンアセトン)(クロロホルム)ジパラジウムおよびDiPPF存在下、アセトニトリル中で反応させることで6%の収率ではあるがピラゾールを有するC-グリコシドが得られることを見出すことができ、一定の成果は残せた。しかし、目的のC-グリコシド体の収率が低く改善の余地があるため。昨年度の結果をもとにアルキニルヒドラゾンを反応相手とし、グルカール誘導体3位の脱離基について検討したが、アルキニルヒドラゾンが主に消費され収率は向上出来なかった。次にグルカール誘導体の脱離基を活性化する目的で添加剤を検討したが、反応が進行しない、もしくはグルカール誘導体が分解されるのみであった。グルカール誘導体ではπ-アリルパラジウム種を上手く発生できていないと考え、ピラノン誘導体を用いて検討を行った。文献を参考にアノマー位にt-ブチルカーボネートを有する基質を用いたところ、ピラノン誘導体は消費されるがアルキン誘導体とは反応せず、ピラノン誘導体自身で反応したO-グリコシドが生成した。アノマー位の置換基を安息香酸エステルに変更したところ、自己反応は抑制できたが期待したC-グリコシドは得られなかった。現在のところ、0価Pd触媒下グルカール誘導体およびピラノン誘導体から生成するπ-アリルパラジウム(二価パラジウム)種をアルキンの活性化に用いてアリールC-グリコシドを効率的に合成する段階には至っていないが、本研究期間で利用できる可能性を見出せた。上記検討と並行して、アレンに対して二価パラジウム触媒を用いるカルボニル化反応を検討した。すなわち、直鎖状のアルキル基を有する一置換アレンを原料とし、メタノール中、触媒量の二価パラジウム錯体およびパラベンゾキノン存在下、一酸化炭素雰囲気下で反応を検討した。これまで、一置換アルキルアレンの分子間メトキシカルボニル化反応では位置選択性が無いことが知られていたが、配位子を工夫することで位置選択性が制御できることを見出した。さらに光学活性な配位子を用いることで中程度の選択性ではあるが、初の不斉触媒化を達成した。また、アリール基を有する一置換アレンではベンゼン環上の置換基効果を受けるものの、位置およびエナンチオ選択的に反応が進行するものが確認できた。平成29年度以降は予備検討の結果をもとに、無保護のグリカールの直接活性化を経るC-グリコシド合成を検討する。具体的にはグルカールとo-アルキニルチオフェノール誘導体を原料とし、水溶性ホスフィン配位子であるtppms存在下、パラジウム触媒および溶媒の検討をする。パラジウム触媒としてPd(OAc)2、Pd(acac)2、Pd2(dba)3・CHCl3、[Pd(allyl)Cl]
N型糖鎖を用いた臓器特異的癌腫瘍マーカーの開発

食道癌患者37例と健常者11例対象とし、血清中の糖鎖の網羅的解析を行い、食道癌に特異的な糖鎖マーカーを検索した。得られた糖鎖の発現パターンをもとに、健常者群と食道癌患者群との間でOPLS法による層別化が可能であった。健常者群と食道癌患者群間で、両者の層別化が可能な発現糖鎖が6つ抽出可能であった。その6糖鎖から食道癌患者を69.7%の正診率で判別することが可能であった。これらの糖鎖は食道癌に特異的マーカーとして利用できると考えられた。食道癌は、診断技術の向上や、放射線治療・化学療法など集学的治療の発達により予後は向上してきた。しかし、SM層への浸潤により、リンパ節転移をきたしやすく、他臓器浸潤もきたしやすい悪性度の高い消化器癌の一つである。食道癌の腫瘍マーカーは、現在CEA、SCCで、進行癌でも陽性率は高くない。糖鎖は,タンパク質の翻訳後修飾をなす重要な生体分子の一つで,発生・分化・増殖・がん化などに伴い糖鎖構造が変化し、すでにCA19-9やSLXがシリアルLeグループの糖鎖抗原として臨床応用されている。最近、肝癌でフコシル化AFPが悪性度を示すベイオマーカーとして注目されるようになった。今回、食道癌患者を対象とし、血清中の糖鎖の網羅的解析を行い、食道癌に特異的な糖鎖マーカーを検索した。得られた糖鎖発現プロファイル解析で、診断の可能性を検討した。2007年から2009年までの同意の得られた食道癌患者37例と健常者の11例。検体の血漿から、タンパク質と修飾N型糖鎖を遊離、ヒドラジド基を有するビーズで遊離N型糖鎖を標識した後に精製分離、質量分析を行った。得られたデータをSIMCA-P+を使用し多変量解析した。得られた糖鎖の発現パターンをもとに、健常者群と食道癌患者群との間でOPLS法による層別化が有意に可能であった。また、健常者群と食道癌患者群間で、両者の層別化が可能な発現糖鎖が6つ抽出可能であった。この6糖鎖を利用し、健常者と食道癌患者の半数症例との間で判別モデルを構築し、残り半分の食道癌患者で判別可能かを検証したところ、モデルのAccuracyは,87.5%であった。食道癌患者のおける血清中の糖鎖の網羅的解析を行い、6糖鎖を抽出し、その6糖鎖から食道癌患者を判別することが可能であった。食道癌に特異的な糖鎖マーカーとして利用できると考えられた。
緑内障性視神経症に対する治療法の確立

臨床データ解析(降圧治療および非降圧治療):マイトマイシンCを併用する緑内障手術の眼圧下降効果と視機能への影響を評価し、本手術の緑内障性視神経症への良好な影響を証明した。しかしながら、白内障などによる視力低下も無視し得ないものであることを明らかにした。また、多変量解析により正常眼圧緑内障において乳頭出血、末梢循環障害などの循環因子が緑内障性視神経症の予後因子であることを証明した。さらに、正常眼圧緑内障において眼窩の循環動態異常が本症の成因とも絡む重要な因子であることを明らかにした。また、膠原病患者において開放隅角緑内障の発症頻度の高いことを示した。眼窩領域における他の循環動態異常も本症の予後不良因子であることを示した。加えて、炭酸ガス吸入あるいはカルシウム拮抗薬が本症における眼窩循環動態を改善させることを明らかにし、本症の新たな治療法への道を開いた。マイトマイシンCの新規投与法に関する実験:ゲル化剤に含有させたマイトマイシンCを使用した家兎緑内障手術モデルでの検討により、同薬物がマイトマイシンC投与総量を大幅に減少させながら手術効果を高めることを証明した。また、同薬物が薬物投与に伴う眼内炎症を減らすことができることを示した。さらにエキシマレーザーを用いた新しい緑内障術式が家兎眼において容易に施行可能で、かつ、手術の定量性に優れることを示した。神経保護治療動物実験:2種類の動物実験モデルを確立し、各種薬物の緑内障性視神経症に対する神経保護効果について検討を行った。その結果、NMDA受容体阻害薬、tacrolimus(免疫抑制剤)、T-588(神経伝達物質遊離促進剤)、betaxolol(β遮断薬)などが、眼圧上昇モデルにおいて神経保護効果を有することを証明した。1.長期観察を行った原発開放隅角緑内障ならびに正常眼圧緑内障の治療成績を視機能、眼圧コントロールの点からパーソナルコンピュータを用いて解析した。解析には、重回帰分析、比例ハザードモデルなどを用いた。原発開放隅角緑内障では、手術治療により、視野予後の改善が認められ、手術治療がきわめて有効であることを認めるとともに、一部症例で手術合併症のための視機能の低下することがあることを8年の長期観察データから明らかにすることができた。また、正常眼圧緑内障では、眼圧下降治療の有効なこととともに、11年の観察データによりカルシウム拮抗薬による薬物治療が視野予後に良好に作用することをはじめて明らかにするとともに、視神経乳頭出血などの臨床因子が予後不良因子であることを証明することができた。2.マイトマイシンCの新規投与法に関する実験に関しては、ゲル化剤配合マイトマイシンCの結膜、テノン嚢内での薬物動態を検討する基礎実験を終了し、家兎眼における緑内障手術モデルで眼圧動態ならびに濾過胞形態の観察を行った。現在、新規投与を行った動物モデルの眼球組織を組織学的に調べ、薬物の効果および安全性を検討している。3.神経保護治療の動物実験に関しては、ラット眼を用いてレーザー照射による緑内障モデルと視神経損傷モデルを作成するとともに、網膜神経節細胞の定量的観察システムを構築した。このモデルを用いて、NMDA拮抗薬(MK-801、メマンチン)の神経保護作用を検討し、同薬物が用量依存的に神経保護作用を発揮することを認めた。また、FK-506が同じく神経保護作用を有することを明らかにした。1.臨床データ解析(降圧治療および非降圧治療):正常眼圧緑内障と原発開放隅角緑内障の発症率が膠原病患者に多いことを示した。

眼圧には膠原病患者と正常人で有意差はないため、緑内障性視神経症の病因として、非眼圧因子が重要なことを論じた。そのうえで、循環動態を変えうる二酸化炭素の投与により、緑内障眼の視神経循環に好影響の認められることを示し、二酸化炭素負荷などによる新しい緑内障治療の可能性を示した。さらに長期観察例のデータ解析から正常眼圧緑内障の進行に眼圧以外の循環因子の関与の大きいことを多変量解析により明確に示した。2.マイトマイシンCの新規投与法に関する実験:ゲル化基剤含有マイトマイシンCの緑内障濾過手術への開発経緯について述べ、その有用性を4週間投与の家兎眼で、眼圧経過と、濾過能の超音波生体顕微鏡所見により証明した。さらにエキシマレーザーを用いた新しい緑内障術式(非穿孔濾過手術)が家兎眼で容易に施行可能で、かつ、手術量の定量性に優れることを示した。3.神経防御治療動物実験:ラット眼に、視神経に対する直接的な障害および眼圧上昇による視神経障害の2モデルを作成し、NMDA拮抗薬(MK-801,mamantine)とタクロリムスが網膜神経節細胞保護作用を有することを証明した。こうした自験データに基づき、緑内障眼の眼圧下降によらない治療の可能性について論じた。1.臨床データ解析(降圧治療および非降圧治療):マイトマイシンCを併用する緑内障手術の眼圧下降効果と視機能への影響を評価し、本手術の緑内障性視神経症への良好な影響を証明した。しかしながら、白内障などによる視力低下も無視し得ないものであることを明らかにした。また、多変量解析により正常眼圧緑内障において乳頭出血は緑内障性視神経症の予後不良因子であることを証明した。さらに、正常眼圧緑内障において眼窩の循環動態異常が本症の成因とも絡む重要な因子であることを明らかにした。眼窩領域における他の循環動態異常も本症の予後不良因子であることを示した。加えて、炭酸ガス吸入あるいはカルシウム拮抗薬が本症における眼窩循環動態を改善させることを明らかにし、本症の新たな治療法への道を開いた。2.神経保護治療動物実験:既に確立した2種類の動物実験モデルを用いて、各種薬物の緑内障性視神経症に対する神経保護効果について検討を行った。その結果、NMDA受容体阻害薬、tacrolimus(免疫抑制剤)、T-588(神経伝達物質遊離促進剤)、betaxolol(β遮断薬)などが、眼圧上昇モデルにおいて神経保護効果を有することを証明した。3.マイトマイシンCの新規投与法に関する実験:基礎データをまとめ、ゲル化剤に含有させたマイトマイシンCを使用することで眼内炎症を減らすことができることを示した。また、家兎緑内障手術モデルでの検討により、同薬物が手術効果を高めることを証明した。
千島アイヌの起源と経済史に関する考古学的研究（国際共同研究強化）

2017年度よりひきつづき,2018年度も米国ワシントン大学人類学部に滞在し,2018年4月4日に帰国した。滞在中は,千島列島出土動物骨の三次元スキャンデータおよび石器の観察データ(顕微鏡写真,表など)の最終チェックを行った。帰国後は,収集した動物骨の情報について,千島列島内の島ごと,あるいは時期ごとに集計する作業を実施した。これにより,千島列島内で利用されていた動物種の空間的・時間的な差異を明らかにするとともに,カムチャツカ半島から移入された動物の有無や量についても把握することができた。また,ラッコなど主要な動物種の骨については,スキャンデータをもちいてサイズ計測を行い,狩猟圧の有無などを推定するための手がかりをえるなど,共同研究の成果発表にむけての基礎的な情報整備をおこなった。千島列島出土石器の分析結果についても,島ごと,時期ごとの集計と統計的な解析を実施した。これにより,黒曜石と非黒曜石の利用状況や,剥片剥離技術の違いに関する空間的・時間的差異を把握し,共同研究の成果発表に向けて論文執筆に着手したところである。ロシア・マガダンに保管されているカムチャツカ出土石器については,アメリカに保管されている石器のデータとあわせて分析を行い,論文執筆に着手した。また,関係するコレクションについては,石器のみならず土器・骨角器をもふくめた資料カタログを刊行し,今後,世界中の研究者にとって利用しやすい環境を整備した。研究期間全体を通じて,アメリカに保管されている千島列島全域から回収された動物骨・石器,およびマガダンに保管されているカムチャツカ半島出土石器の全体像が明らかになった。今後は,これらの情報を活用して,千島列島における動物利用の変化やカムチャツカ半島に由来する資源の利用に関わる研究成果をまとめる予定である。内定年度:20152017年10月下旬から予定しているワシントン大学(シアトル)における共同研究の事前打ち合わせを,資料が保管されているワシントン大学人類学科およびワシントン大学内のバーク博物館において実施した(2017年1月9日13日)。共同研究の研究対象となる資料は,かつてワシントン大学が実施したKuril Biocomplexity Project(KBP)において回収された千島列島の考古学的遺跡から出土した石器・動物骨である。石器はワシントン大学人類学科に保管されており,資料の総量,保管状況,資料が入っているビニール袋に付されている情報のチェックなどを行った。動物骨はバーク博物館に保管されており,やはり総量,保管状況,ビニール袋に記載されている情報の種類を確認した。これら資料の簡便な台帳のデータも譲り受けることができたため,現時点で知ることができる動物骨の組成を算出し基礎データとした。現地においては,Ben Fitzhugh氏(ワシントン大学人類学科准教授),Julie Stein氏(同大人類学科教授,バーク博物館館長),Laura Phillips氏(バーク博物館考古学学芸員),Siri Linz氏(バーク博物館考古学学芸員)にお世話になった。このほか,アメリカ滞在中に利用する研究機器(顕微鏡,3Dスキャナ一式)を購入した。これまで利用経験がない3Dスキャナについては,渡航後にスムーズに利用できるように繰り返し練習することで利用方法を修得した。もうひとつの渡航先であるロシア科学アカデミー極東支部東北学際研究所とも緊密に連絡をとり,2017年10月の滞在と研究について準備をすすめた。基課題の事業で本研究所を2017年3月に訪問する機会があったため,そこでも受入研究者のA. I. Lebedintsev氏(同研究所)と2017年10月の滞在について具体的な打合せを実施した。渡航先のひとつであるワシントン大学で打合せを実施し,資料の基本的情報のみならず,研究環境の詳細についても明確な見通しをえることができた。もうひとつの渡航先であるロシア科学アカデミー東北学際研究所とのあいだでも,緊密に連絡を取り合い準備をすすめている。また,渡航先で利用する予定の機材を購入し,その利用法を修得することができたため,渡航後に円滑に研究を開始できると思われる。ワシントン大学では,人類学部に保管されている千島列島全域から回収された石器(剥片類)の分析を行った。黒曜石製の剥片については,製作技術の変遷解明を目的として,打撃の剥離速度に関する情報をえることができるフラクチャーウイング分析を実施した。剥片のうち圧倒的多数を占める非黒曜石製石器(安山岩製,チャート製など)については,石器の利用法や資源利用に関する情報収集を目的として石器使用痕分析を実施した。まず全資料の重量を計測し,長さまたは幅が4cm以上の剥片を選択したうえで(1814点),微小剥離痕を有する資料118点について金属顕微鏡による石器使用痕分析を行った。ワシントン大学内にあるバーク博物館には,千島列島全域から回収された3万点以上の動物骨が保管されており,すべての資料についてリストと対照して存否・状態などを確認した。本研究において重要な意味を有しているラッコ,イヌ,ヒグマ,ライチョウについては,すでにDNA分析や安定同位体比分析などのために失われている若干の資料をのぞいて,現存しているすべての骨の三次元スキャンを実施した。このほか,将来的に各種分析に利用する可能性が高い保存状態の良好な海獣類・ワシタカ類・アホウドリ・マダラ,加工痕のある海獣類などについても三次元スキャンを実施した。スキャンした動物骨の総数は,1063点である。

ロシア科学アカデミー極東支部東北学際研究所においては,南カムチャツカ最大の考古資料コレクションであるジコヴァ・コレクションに含まれるすべての石器についてカタログ作成を行ったのち,黒曜石製石器について上記と同様にフラクチャーウイング分析を実施した。これにより,石器製作の時間的変化を,千島列島とカムチャツカ半島で比較するための情報を収集した。アメリカ,ロシアに保管されている資料について,すべて予定通り分析を終了することができた。現地においては,複数回にわたって分析の中間報告を行い,共同研究者と議論をおこなうことで分析結果の評価と今後の方向性についての合意を得ることができた。2017年度よりひきつづき,2018年度も米国ワシントン大学人類学部に滞在し,2018年4月4日に帰国した。滞在中は,千島列島出土動物骨の三次元スキャンデータおよび石器の観察データ(顕微鏡写真,表など)の最終チェックを行った。帰国後は,収集した動物骨の情報について,千島列島内の島ごと,あるいは時期ごとに集計する作業を実施した。これにより,千島列島内で利用されていた動物種の空間的・時間的な差異を明らかにするとともに,カムチャツカ半島から移入された動物の有無や量についても把握することができた。また,ラッコなど主要な動物種の骨については,スキャンデータをもちいてサイズ計測を行い,狩猟圧の有無などを推定するための手がかりをえるなど,共同研究の成果発表にむけての基礎的な情報整備をおこなった。千島列島出土石器の分析結果についても,島ごと,時期ごとの集計と統計的な解析を実施した。これにより,黒曜石と非黒曜石の利用状況や,剥片剥離技術の違いに関する空間的・時間的差異を把握し,共同研究の成果発表に向けて論文執筆に着手したところである。ロシア・マガダンに保管されているカムチャツカ出土石器については,アメリカに保管されている石器のデータとあわせて分析を行い,論文執筆に着手した。また,関係するコレクションについては,石器のみならず土器・骨角器をもふくめた資料カタログを刊行し,今後,世界中の研究者にとって利用しやすい環境を整備した。研究期間全体を通じて,アメリカに保管されている千島列島全域から回収された動物骨・石器,およびマガダンに保管されているカムチャツカ半島出土石器の全体像が明らかになった。今後は,これらの情報を活用して,千島列島における動物利用の変化やカムチャツカ半島に由来する資源の利用に関わる研究成果をまとめる予定である。渡航期間中,千島列島出土動物骨のより詳細なデータベース(3Dイメージをふくむ)を作成し,従来よりも解像度の高い動物利用の変遷過程を解明する。とくに,現時点では一括して集計されている「アイヌ文化期」のなかを,理化学的年代測定を併用しながら古段階(15-17世紀)と新段階(18世紀以後)に区分し,その間の経済変化を明らかにできるよう留意する。その際,とくに動物骨のなかでラッコが占める割合に注目し,毛皮交易への依存度を評価する。石器については,可能な限り多くの資料を顕微鏡で観察し,その利用対象や制作時に用いられているハンマーの材質を解明することで交易への依存度を間接的に推定するためのデータを収集する。
酸素を用いるジアステレオ面選択的炭素-炭素結合形成反応の開発

光学的に不活性なRS体の化合物もしくは不斉炭素をもたない化合物から、炭素-炭素結合を形成させて光学的に活性な化合物を得る方法の開発は、古くから有機化学者の大きな夢であり、有機化学に対する偉大なる挑戦であった。ところが、最も重要とされるこの炭素-炭素結合形成反応を有機合成にまで拡張した研究は、まだ端緒に着いたばかりで、特に日本での研究は非常に少ない。我々はここ10数年来この反応に着手し、フルクトース-1,6-ジフォスフェート(FDP)アルドラーゼ存在下、ジヒドロキシアセトンリン酸(DHAP)と2位に電子吸引基が付いたアルデヒドを縮合させると炭素-炭素結合部位の2個の炭素のみではなく、アルデヒドの2位の炭素の立体まで、都合3連続中心の炭素の立体が規制されることを見い出した。2位に塩素官能基の付いたアルデヒドを用いて条件検討をした結果、70%の収率で対応するアルドールが得られることが判明した。ところがこの反応には再現性が得られなかった。そこで最近、物理学者の間において物性の面で非常に注目を浴びているデンドリマーに酵素を固定することにした。今回はそのモデルであるデンドリマーコアとその外側に機能性基である酵素を導入した新しい機能性高分子の合成を目指した。まずニトロメタンからテトラカルボン酸を経由するデンドリマーコアであるテトラオールへの誘導を試み、4行程、67%の収率で得る方法を開発した。これにN-末端をBocで保護したアミノ酸の一種であるBocアラニンとの反応を種々検討し、48%と低収率であるが目的の機能性デンドリマーモデルであるカップリング体が得られることを見い出した。古くから有機化学者の大きな夢であった光学的に不活性なRS-体や不斉炭素をもたない化合物から、炭素-炭素結合を形成させて光学活性体を得ることは有機化学に対する偉大な挑戦と考えられて来た。我々は光学的に不活性なRS-アルデヒドと不斉炭素をもたないジヒドロキシアセトンリン酸のアルドラーゼによる炭素-炭素結合形成反応に挑戦した。既に我々はR-アルデヒドに対するジアステレオ面選択的反応を見い出しているが、それを利用して炭素-炭素結合形成部位のみではなく、反応に関与するアルデヒドの2位の炭素を含めた3炭素を固定したアルドールを構築しようというもので、昨年度までに所期の結果を得ることが出来た。そのコンセプトはFDPアルドラーゼを用いれば炭素-炭素結合形成部位の立体は固定されるので光学的に不活性なRS-アルデヒドのうち、まずR-体が消費されてアルドールを形成する。ここでそのRS-体が容易に異性化することが出来ればS-体がR-体を補填するように平衡が移動する。その結果、R-体のアルデヒドから得られるアルドールのみが3炭素の立体を規制してジアステレオ面選択的に得られることが期待されるというものである。昨年度までに2-置換アルデヒドの種類によって選択性が完全に制御された2反応が見い出されたがその収率には問題が残された。今年度は電子吸引基をもつ2-置換アルデヒドのうち、入手容易な2-クロロヘキシルアルデヒドを用いて収率の向上を目指して研究を行った。その結果、pH7のDMSOーリン酸バッファー中、アルデヒドおよびFDPアルドラーゼをそれぞれ2倍量用いた反応の後、pHを10%塩酸で4.5に調製したがその微調整の際にエタノールアミンを用いたところ、対応するアルドールの収率は昨年の最高37%から70%まで向上させることが出来た。しかしこの反応は再現性に乏しく、現在、その原因を究明中である。

ところが、最も重要とされるこの炭素-炭素結合形成反応を有機合成にまで拡張した研究は、まだ端緒に着いたばかりで、特に日本での研究は非常に少ない。我々はここ10数年来この反応に着手し、フルクトース-1,6-ジフォスフェート(FDP)アルドラーゼ存在下、ジヒドロキシアセトンリン酸(DHAP)と2位に電子吸引基が付いたアルデヒドを縮合させると炭素-炭素結合部位の2個の炭素のみではなく、アルデヒドの2位の炭素の立体まで、都合3個の炭素の立体が規制されることを見い出した。2位に塩素官能基の付いたアルデヒドを用いて条件検討をした結果、70%の収率で対応するアルドールが得られることが判明した。ところがこの反応には再現性が得られなかった。そこで最近、物性の面で非常に注目を浴びているデンドリマーに酵素を固定することにした。今回はそのモデルであるデンドリマーコアとその外側に機能性基である酵素を導入した新しい機能性高分子の合成を目指した。まずニトロメタンからテトラカルボン酸を経由するデンドリマーコアであるテトラオールへの誘導を試み、4行程、67%の収率で得る方法を開発した。これにN-末端をBocで保護したアミノ酸の一種であるBocアラニンとの反応を種々検討し、48%と低収率であるが目的の機能性デンドリマーモデルであるカップリング体が得られることを見い出した。
育児場面における新生児・乳児に加わる揺れ・振動刺激の定量化に関する研究

研究目的:日常の育児動作や育児用品使用時の外的・物理的刺激が、新生児・乳児の身体にどのような"揺れ・振動"として伝わっているのかを理学的に解明し定量化することである。方法:1)新生児・乳児への日常の育児動作(あやす動作・横抱き歩行・階段の昇降移動・哺乳後の排気)や育児用品等の使用(Carry bag、baby car)の場面選定。2)加速度計(3DG RECORDER YAMASA YG-600)を額部に装着した新生児モデル人形を用い、上述の場面設定毎に"揺れ・振動"を再現し理学的に計測した。3)測定は成人女性を対象とした。実験場所:設定条件を同一にして測定した。分析方法:場面毎に58件のデータを求めた。あやし・歩行の測定データは5秒間分を分析データ・階段の昇降は10段分とした。"揺れ・振動"は、体軸の頭足方向(Y軸)・左右方向(X軸)・上下方向の3方向(Z軸)を測定した。静止時を0としY軸X軸Z軸上での最大値・最小値と、平均値を求めた。結果・考察:1)あやす場面は、「ぐずっている新生児をあやす」「大泣きしている新生児をあやす」という状況を設定した。前者の揺れ平均値m/s^2(振動回数)は、Y軸-0.05±2.84(235回)・X軸0.05±1.56(190回)・Z軸0.02±1.15(155回)であり、後者はY軸0.26±3.94(328回)・X軸0.02±1.95(267回)・Z軸0.17±1.77(192回)であった。前者の最大・最小揺れ値は、6.14と-8.91であり、後者は10.73と-10.7であった。ぐずりあやし・大泣きあやしともに体軸の左右方向への揺れは少なく、後者の揺れ幅が大きいことが分かった。2)哺乳後の排気時の揺れはY軸0.79±5.5(110回)・X軸-0.82±4012(73回)・Z軸0.82±2.87(71回)であった。3)横抱き歩行は、Y軸-0.10±1.83(233回)・X軸-0.18±2.04(220回)・Z軸上0.09±2.21(120回)であり、最大・最小値は4.78と-5.58であった。あやし・排気の揺れは、頭足軸方向への振動回数が大きいことが分かった。4)横抱き時の階段を昇るときの揺れは、Y軸-0.14±2.71(291回)・X軸-0.21±2.36(269回)Z軸上0.01±3.12(140回)であり、最大・最小値は5.11から-9.05であった。また、階段降り時の揺れは、Y軸0.01±2.78(356回)・X軸0.05±2.16(368回)・Z軸0.59±3.63(185回)であった。最大・最小値は9.3から-9.77であった。新生児を抱きながら階段昇降では、降りる時の振動が大きかった。また、体軸上下の振動回数が、他の左右・頭足の振動回数よりも少ない。4)Carry bagに寝かせたまま、腕を伸ばした状態で階段を降りた場合、Y軸-0.06±1.65(223回)・X軸0.01±1.20(259回)・Z軸0.36±3.14(154回)であった。最大・最小値は8.36から-5.51であった。これらの分析結果をふまえ、今後、実際の日常生活面での振動や、診療・治療における場面での振動について調査を広げていきたいと考えている。この研究目的は、日常の育児動作や育児用品(Carry bag、揺りかご、baby carなどの使用)からの外的・物理的刺激によって、新生児・乳児の身体にどのような"揺れ""振動"として伝わっているのかを理学的に解明し定量化することである。そのための方法として、1)新生児・乳児への日常の育児動作や育児用品等の使用状況について、実際の場面を参加観察法にて測定し、"揺れ""振動"に注目して抽出する。2)実際の場面にそって、新生児・乳児のモデル人形を用い"揺れ""振動"を再現し、理学的に計測する。3)身体への過度の"揺れ""振動"のその影響を考える。これをもとに、看護研究に理学的な研究手法を取り入れることで、経験的に行われてきた看護ケアをevidenceに基づいて行われることが可能になる。今年度は、生後2か月前後の乳児と、育児を行っている母親に対して、日常生活場面における育児場面のビデオ録画を行った。現在、2組の事例を撮影している。来年度も日常の育児場面を録画する予定である。育児場面としては、授乳、抱く、あやす、揺らす、寝かせる、おむつの交換、沐浴などが抽出された。これらについて場面毎に、「揺れ」という視点(上下・左右・斜め移動等)からさらに、細かな分析を行う予定である。

また、このとき、母親からの言葉がけなどの刺激もあり、児に対してのこのような刺激もみる。さらに、来年度、揺れを計量的に測定するための機器・分析のためのソフトを選定し、使用方法について確認している。研究目的:日常の育児動作や育児用品使用時の外的・物理的刺激が、新生児・乳児の身体にどのような"揺れ・振動"として伝わっているのかを理学的に解明し定量化することである。方法:1)新生児・乳児への日常の育児動作(あやす動作・横抱き歩行・階段の昇降移動・哺乳後の排気)や育児用品等の使用(Carry bag、baby car)の場面選定。2)加速度計(3DG RECORDER YAMASA YG-600)を額部に装着した新生児モデル人形を用い、上述の場面設定毎に"揺れ・振動"を再現し理学的に計測した。3)測定は成人女性を対象とした。実験場所:設定条件を同一にして測定した。分析方法:場面毎に58件のデータを求めた。あやし・歩行の測定データは5秒間分を分析データ・階段の昇降は10段分とした。"揺れ・振動"は、体軸の頭足方向(Y軸)・左右方向(X軸)・上下方向の3方向(Z軸)を測定した。静止時を0としY軸X軸Z軸上での最大値・最小値と、平均値を求めた。結果・考察:1)あやす場面は、「ぐずっている新生児をあやす」「大泣きしている新生児をあやす」という状況を設定した。前者の揺れ平均値m/s^2(振動回数)は、Y軸-0.05±2.84(235回)・X軸0.05±1.56(190回)・Z軸0.02±1.15(155回)であり、後者はY軸0.26±3.94(328回)・X軸0.02±1.95(267回)・Z軸0.17±1.77(192回)であった。前者の最大・最小揺れ値は、6.14と-8.91であり、後者は10.73と-10.7であった。ぐずりあやし・大泣きあやしともに体軸の左右方向への揺れは少なく、後者の揺れ幅が大きいことが分かった。2)哺乳後の排気時の揺れはY軸0.79±5.5(110回)・X軸-0.82±4012(73回)・Z軸0.82±2.87(71回)であった。3)横抱き歩行は、Y軸-0.10±1.83(233回)・X軸-0.18±2.04(220回)・Z軸上0.09±2.21(120回)であり、最大・最小値は4.78と-5.58であった。あやし・排気の揺れは、頭足軸方向への振動回数が大きいことが分かった。4)横抱き時の階段を昇るときの揺れは、Y軸-0.14±2.71(291回)・X軸-0.21±2.36(269回)Z軸上0.01±3.12(140回)であり、最大・最小値は5.11から-9.05であった。また、階段降り時の揺れは、Y軸0.01±2.78(356回)・X軸0.05±2.16(368回)・Z軸0.59±3.63(185回)であった。最大・最小値は9.3から-9.77であった。新生児を抱きながら階段昇降では、降りる時の振動が大きかった。また、体軸上下の振動回数が、他の左右・頭足の振動回数よりも少ない。4)Carry bagに寝かせたまま、腕を伸ばした状態で階段を降りた場合、Y軸-0.06±1.65(223回)・X軸0.01±1.20(259回)・Z軸0.36±3.14(154回)であった。最大・最小値は8.36から-5.51であった。これらの分析結果をふまえ、今後、実際の日常生活面での振動や、診療・治療における場面での振動について調査を広げていきたいと考えている。
Ｂ型慢性肝炎におけるＴＧＦーＢシグナル伝達機構の臨床応用

リン酸化Smad3シグナル伝達の視点から、B型慢性肝疾患症例に核酸アナログ療法を行い、ウイルス量が低下した後にリン酸化Smad3を介するシグナルがどのように変化したかを検討した。核酸アナログ治療によりHBVウイルスの活動性と慢性炎症が終息すると、pSmad3Lを介する線維化・癌化シグナルは減弱し、pSmad3Cを介する癌抑制シグナルに回帰した。B型慢性肝疾患では抗ウイルス療法により、線維化進展例においても線維化・癌化シグナルが著明に改善するため抗ウイルス療法が肝線維化の改善や発癌リスクの低下に寄与すると推測される。【背景】リン酸化Smad3シグナル伝達の視点から、B型慢性肝疾患症例に核酸アナログ療法を行い、ウイルス量が低下した後にリン酸化Smad3を介するシグナルがどのように変化したかを検討し、さらに抗ウイルス療法後のB型とC型慢性肝疾患の病態を比較した。【方法】核酸アナログ治療を施行したB型慢性肝疾患27症例を対象に薬剤投与前、および投与52週間後に肝生検を施行した。投与前後の肝組織とSmad3のリン酸化・標的遺伝子発現を比較検討した。【結果】核酸アナログ投与でHBV-DNA量の低下と炎症の改善に伴い、Smad3Lリン酸化ならびに標的遺伝子であるc-Mycの発現の著明な減少がみられ、抑えられていたpSmad3Cを介する癌抑制シグナルの復活を認めた。C型慢性肝疾患においてもIFN治療によってウイルスが消失した後にpSmad3LシグナルからpSmad3Cへのシグナルの変遷が見られた。抗ウイルス療法による肝線維化(F因子)の改善について検討した結果、B型慢性肝疾患ではF4からF1へ改善した症例もあり、平均1.0/年の割合で著明に改善した。一方C型慢性肝疾患ではF因子0.2/年の割合で緩徐な改善であった。さらにpSmad3Lを介する線維化・癌化シグナルは治療後にB型慢性肝疾患で1.0/年低下を示したが、C型慢性肝疾患では0.5/年に留まり、肝組織での線維化の改善を反映する結果であった。【結論】核酸アナログ治療によりHBVウイルスの活動性と慢性炎症が終息すると、pSmad3Lを介する線維化・癌化シグナルは減弱し、pSmad3Cを介する癌抑制シグナルに回帰した。B型慢性肝疾患では抗ウイルス療法により、線維化進展例においても線維化・癌化シグナルが著明に改善するためにC型慢性肝疾患と比較して、より抗ウイルス療法が肝線維化の改善や発癌リスクの低下に寄与すると推測される。今年度はELISAにてリン酸化Smad3の定量化のシステムを構築した。システムの構築に関しては以前より当院にて採取していたC型慢性肝炎患者肝生検組織でまずは行った。【背景・目的】TGF-βシグナルは肝線維化、発癌に関わる。我々は、C型慢性肝疾患において慢性炎症と肝炎ウイルスが「協調して」、Smad2ならびにSmad3リンカー部リン酸化(pSmad2/3L)を促し、線維化・癌化シグナルが伝達されると報告した。今回我々は、単クローン抗体を用いたELISAを新規に開発し、C型慢性肝組織中のpSmad2/3L(Thr179/220)を定量的に解析した。【方法・結果】pSmad2/3L抗原をマウスに免疫し、部位特異的リン酸化Smad単クローン抗体を作製し、この抗体を用いたELISA(サンドイッチ法)を確立した。肝癌切除症例9例の癌部と背景肝、対照群として転移性肝癌2例の非癌部から組織抽出液を作成した。この抽出液にあるpSmad2/3L量をELISAで定量した。またC型慢性肝炎(F1、F2、F3)肝硬変(F4)、肝癌それぞれ20例、計100例の肝組織標本をpSmad2/3L抗体を用いた免疫染色で半定量的に解析した。pSmad2/3Lペプチドを含む標準液を10unitと設定し、標準曲線を作成した。ELISAにおけるSmad2/3リンカー部リン酸化は、肝疾患の進展に伴い亢進していた。この傾向は、免疫染色による半定量的な解析結果と相関した。【結語】部位特異的リン酸化Smad単クローン抗体は、C型慢性肝疾患からの線維化進展や発癌リスクを予測する新規バイオマーカーになることが期待される。B型肝炎については、当院での肝生検組織は未だ症例数が少なく、今後はB型慢性肝炎患者でも検討を重ねたいと思っている。【目的】リン酸化Smad3シグナル伝達の視点から、抗ウイルス療法後のB型とC型慢性肝疾患の病態を比較検討した。【方法】B型慢性肝疾患に対して核酸アナログ治療を施行した27症例、ならびにC型慢性肝疾患に対してIFN治療を行った31症例において治療前後の肝生検組織を用い肝でのSmad3リン酸化及び標的遺伝子発現につき検討を行った。【結果】

(1) B型慢性肝疾患での検討では、核酸アナログ治療に伴い肝線維化(F因子)は1.0/年の割合で改善した。HBV-DNA量の低下と炎症の改善に伴い、Smad3Lリン酸化ならびに標的遺伝子であるc-Myc発現の著明な減少が認められ、抑えられていたpSmad3Cを介する癌抑制シグナルの復活がみられた。(2) C型慢性肝疾患での検討では、炎症の改善に伴いF因子は0.2/年の割合で改善し、pSmad3LからpSmad3C経路への回帰が観察されたが、B型肝炎と比較して緩徐な変化であった。(3) C型慢性肝炎のSVR後発癌群(10症例)は、非発癌群(21症例)と比べて線維化の進展症例が多く、高Smad3Lリン酸化・低Smad3Cリン酸化で癌化シグナルの優位な状態がIFN治療後も持続していた。【結論】B型慢性肝疾患では抗ウイルス療法により、線維化・癌化シグナルが早期に改善するために発癌リスクは低下する。一方でC型慢性肝疾患では、SVR後でも線維化・癌化シグナルが残存しており、ウイルス以外の因子も発癌に影響する可能性が示唆された。抗ウイルス療法後の肝でのSmad3リン酸化は、慢性肝炎患者が高発癌状態から脱却出来たかを知るバイオマーカーとなることが期待され、さらに発癌ハイリスク群の絞り込みや、肝発癌予防への応用も期待される。昨年度はB型慢性肝疾患に対して核酸アナログ治療を施行した27症例、ならびにC型慢性肝疾患に対してIFN治療を行った31症例において治療前後の肝生検組織を用いて肝でのSmad3リン酸化につき免疫染色を中心に検討を行った。今年度はELISAにてリン酸化Smad3の定量化のシステムを構築し、また結果は出ていないがHBx導入肝細胞において核酸アナログ製剤添加時にSmad3リン酸化がどのような影響を受けるかの検討を行った。さらに治療前後での検討症例を増やす方向で検討中である。また急性肝障害時におけるSmadリン酸化シグナルについても検討した。急性肝障害時にはSmad2/3(Thr)リン酸化が肝再生時に重要であることが判明した。検討内容としては、B型慢性肝疾患に対して核酸アナログ治療を施行した27症例、ならびにC型慢性肝疾患に対してIFN治療を行った31症例において治療前後の肝生検組織を用いて肝でのSmad3リン酸化につき検討を行った。当初はB型慢性肝炎についてのみの検討を考えていたが、以前我々がB型慢性肝炎とC型慢性肝炎についての発癌過程につき検討した結果を背景に、抗ウイルス療法前後での治療効果をSmad3リン酸化で評価し、またB型慢性肝炎とC型慢性肝炎との比較検討も重要であると考え、解析した。昨年に引き続きB型肝炎、C型肝炎に注目しその臨床的病態を細胞内のシグナル伝達の側面から解析したい。また結果は出ていないが、にin vitroでHBx導入肝細胞を用い、肝細胞でのSmad3リン酸化の検討を引き続き行う方針。さらに昨年度に検討した急性肝障害時のSmadリン酸化については、データをまとめて論文等で報告したいと考えている。昨年はB型肝炎、C型肝炎に注目しその臨床的病態を細胞内のシグナル伝達の側面から解析した。特に抗ウイルス療法の前後のシグナル伝達の偏向を肝組織標本をもとに解析したが、今年度はさらに症例を重ねて行きたいと考えている。
療養場所別にみた、認知症の程度の進行に伴う概日リズムの変化

本研究の目的は認知症高齢者認知症の程度の進行によって概日リズムが変化すること、さらに療養場所(在宅、施設)の違いによってその変化の状況が異なることを、客観的データの測定によって明らかにすることである。そのために軽度の認知症をもつ施設入所者と在宅療養者に対し、腕時計型超小型ロガーを用いて一人につき半年ごとに4週間ずつの計測を2年間にわたって実施し、分析する。
消化器腫瘍発生におけるCXCL14および組織マクロファージの役割

消化器がんの発生過程では胃や大腸の粘膜上皮細胞が腫瘍化することとともに、腫瘍細胞周囲にマクロファージが浸潤して活性化することが重要であると考えられていた。本研究では、腸管腫瘍発生マウスモデルでマクロファージを欠損させると腫瘍発生が抑制されることを明らかにした。さらに、マクロファージ浸潤に関与すると考えられたケモカインCXCL14の遺伝子ノックアウトマウスを作製して解析した結果、CXCL14は腫瘍組織へのマクロファージ浸潤に関与していない可能性が示された。がんの発生や進行過程では、炎症反応が重要な役割を果たしていると考えられている。これまでに作製した胃癌発生モデルマウス(K19-Wnt1/C2mEマウス)を用いた解析により、PGE_2シグナルに依存的に粘膜に浸潤するマクロファージとその活性化が、腫瘍発生に必要である事が示唆された。また、モデルマウスの胃癌や腸管腫瘍組織の解析により、組織マクロファージの遊走に関与するケモカイン、CXCL14の発現が誘導されている事も明らかにした。CXCL14はPGE_2との協調作用により組織に強いマクロファージ浸潤を誘導する事が報告されている。本研究では、腫瘍発生過程でのマクロファージ浸潤におけるCXCL14の役割を解明する事を目的として、CXCL14遺伝子ノックアウトマウスの作製を行ない、複数の腫瘍発生モデルマウスとの交配実験を行なう。今年度は、CXCL14遺伝子ノックアウトマウスの作製を行なった。マウスES細胞を用いて、CXCL14遺伝子の第2エクソンに、IRES配列を繋いだGFP遺伝子を相同組換え法により挿入した。このES細胞を用いて凝集法によりキメラマウスを複数作製し、GFPと組換えたCXCL14遺伝子を生殖系列で伝達したF1マウスの作製に成功した。このマウスを、PGE_2に起因した胃炎発症モデルのK19-C2mEマウス、および腸管腫瘍発生モデルのApc^<Δ716>マウスとそれぞれ交配し、これまでにCXCL14-/-の各モデルマウスを数匹得た。次年度は、これらのマウスの組織解析を行ない、炎症や腫瘍発生におけるCXCL14の役割を明らかにする。これまでに作製した胃癌発生モデルマウス(K19-Wnt1/C2mE)を用いた解析により、粘膜に浸潤するマクロファージとその活性化が腫瘍発生に必要であると考えられた。また、K19-Wnt1/C2mEマウスの胃粘膜では、正常組織へのマクロファージ遊走に関与するケモカインCXCL14の発現が誘導されていることも明らかにされた。そこで本研究は、消化管腫瘍発生過程で認められるマクロファージ浸潤におけるCXCL14の役割を明らかにすることを目的として行なった。最初に腸管腫瘍自然発生モデルであるApc^<Δ716>マウスと、マクロファージ欠損変異マウス(op/op)との交配実験を行なった。その結果、Apc^<Δ716> ; op/opマウスの腸管腫瘍組織ではマクロファージ浸潤が抑制されていることを免疫染色により確認した。重要なことに、腸管腫瘍病変がマクロファージ欠損により有意に抑制され、直径1m以上に成長するポリープは25%以下までに減少した。したがって、腫瘍組織の成長にマクロファージの存在が必要であることが明らかとなった。次に、CXCL14遺伝子のノックアウトマウスを作製した。相同組換えによりCXCL14遺伝子をヘテロで欠損させたES細胞を用いてキメラマウスを作製し、生殖系列でCXCL14遺伝子欠損が伝達されるノックアウトマウス系統の作製に成功した。CXCL14(-/-)マウスは部分的に胎性致死だが、約50%のCXCL14(-/-)個体は生存した。胃粘膜のマクロファージ浸潤の亢進が認められるK19-C2mEマウスとの交配実験を実施した結果、予想に反してK19-C2mE ; CXCL14(-/-)マウスの胃粘膜にも強いマクロファージ浸潤が認められた。以上の結果から、消化管腫瘍発生にはマクロファージ浸潤が重要であるが、CXCL14の発現亢進は腫瘍組織へのマクロファージ遊走には関与していないと考えられた。すなわち、CXCL14以外のケモカインが腫瘍組織マクロファージ浸潤に関与している可能性が考えられた。
スパッタシステムの歯科補綴領域への応用-チタンと硬質レジンの接着性について-

日常臨床において前歯部の審美性に対する要求が高まる中で,硬質レジンは適度な強度と安定した色調性に優れ,成形性の容易さから歯冠補綴材料として多用されている.今回は,歯科用金銀パラジウム合金にチタンのスパッタリング時に窒素(反応性ガス)を注入する反応性スパッタリングを用いることにより、出力などの条件がTiNの持つ色調に与える影響について、分光測色計を用いて歯科用金材料と測色比較し、本スパッタシステムによるTiNの金色域の色調コントロールの可能性について実験を試みた。被着試料には、歯科用12%金銀パラジウム合金を5×40×1mmの金属試料を鋳浩法により作成した。スパツタ時の放電出力は200、250、300、350、400、450、500Wの7種類とした。真空度は、1×10^<-3>、2×10^<-3>の2種類で、注入ガス量はアルゴンガス10.0sccmに対し窒素ガス2.0sccmの割合で行った。尚、コーティング膜厚は理論暉より1000Åとした。コーティング試料の色調測定にはミノルタ社製分光測色計CM-2002を用いた。窒化チタンコーティング試料の色調の比較対称用金属として、14k、18k、20k、22k、24kを選択、個々のL*a*b*表色系により測色し比較対称値とした。1.各金試料と窒化チタンの色差を比較すると、真空度1×10^<-3>では、出力250Wから350Wで、2×10^<-3>では、200Wから450Wで金試料に近い色調のTiNコーティングが可能と思われる。2.放電出力は、真空度の高い場合黄色方向の色相を、真空度の低い場合赤方向の色相を示す傾向であった。3.真空度1×10^<-3>では、TiNの色調は20k、22kと近似した色調で実用色差内であり、一方、真空度2×10^<-3>の場合では、TiNの色調は、18k20k近似しており実用色差内であうた。以上より、ΔE*(色差)については、真空度1×10^<-3>は出力250W350Wで20k、22kと色差は小さく近似した色を示した。真空度2×10^<-3>では250W450Wで18k、20kと色差が小さく、色の近似が認められた。日常臨床において前歯部の審美性に対する要求が高まる中で,硬質レジンは適度な強度と安定した色調性に優れ,成形性の容易さから歯冠補綴材料として多用されている.今回は,歯科用金銀パラジウム合金にチタンおよび窒化チタンコーティングを施し,そのコーティング金属表面にプライマー系のチオリン酸系およびカルボン酸系の接着システムの硬質レジンを築盛し,コーティング金属と硬質レジンの接着性に関する基礎的検討を行った.硬質レジン築成試料の金属は,歯科用12%金銀パラジウム合金を5×40×1mmの金属試料を鋳造法により作成し,硬質レジンとの機械的歓合力のファクターを極力除去するため鏡面研磨を施した.そして,スパッタデポジション法により出力200W,500Wでチタンおよび窒化チタンをコーティングした.築盛レジンは,チオリン酸系のGC社製アクシスおよびカルボン酸系の松風社製ソリデックスを用いた.前装用硬質レジンの接着性を検討するために,引っ張り剪断強度試験および接着界面,ならびに,引っ張り強度試験後のレジン側剥離面,金属側剥離面について定性,面分析を行った.1.レジン剥離後の金属面のE.P.M.A.分析より,TiおよびTiNコーティング金属は,金銀パラジウム合金からの剥離がないことが分かった.2.プライマーによる接着力への影響においては,カルボン酸系のソリデックスにおいては,非コーティングの平均が約11.42Mpa Tiコーティングで,約12.68MpaTiNコーティングでは,約14.20Mpaと接着力が約1020%向上し,チオリン酸系のアクシスにおいては,非コーティングの平均が約12.54Mpa,Tiコーティングで,約13.40Mpa TiNコーティングでは,約13.99Mpaと約10%程度の接着力の向上が認められた.以上のことからレジンの接着強度は,スパッタコーティングを行うことにより向上することが示唆された.今後は,TiNの金色の発色機構およびベース金属を金色にすることによる硬質レジンの色調への影響について検討したい.日常臨床において前歯部の審美性に対する要求が高まる中で,硬質レジンは適度な強度と安定した色調性に優れ,成形性の容易さから歯冠補綴材料として多用されている.今回は,歯科用金銀パラジウム合金にチタンのスパッタリング時に窒素(反応性ガス)を注入する反応性スパッタリングを用いることにより、出力などの条件がTiNの持つ色調に与える影響について、分光測色計を用いて歯科用金材料と測色比較し、本スパッタシステムによるTiNの金色域の色調コントロールの可能性について実験を試みた。