hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
１９世紀南フランスにおける山岳地復元・保全と酪農組合―公益・私益の対立と融和―

3.さらに、現地の文書館において、手稿史料の収集と解析を行った。山岳地の植林の計画、実施、軋轢、紛争に関わる行政文書(オート=ザルプ県文書館整理番号7P所蔵)や酪農組合普及の前提とされた牧草地灌漑の建設に関わる司法関係資料(オート=ザルプ県文書館整理番号4U)などを中心に分析を行った。前者に関しては、アンブリュネ、シャンソール、デヴォリュイなどの事業区域について、資料を収集し、分析を実施しているところである。後者に関しては、ブリアンソネにおける紛争を手がかりにして、灌漑施設の利用における所有権、地役権の特徴を明らかにし、酪農組合普及の基礎となる所有権をめぐる法的構造を分析しているところである。4.以上の分析を行いつつ、2017年4月に学術雑誌『歴史と経済』に山岳地の復元・保全に関する論考を、『村落社会研究ジャーナル』に地域資源管理史研究の動向に関する論考を発表するとともに、同年10月に政治経済学・経済史学会において「20世紀初頭フランス・ブリアンソネ地域のガイヤール灌漑用水路(サン=シャフレ支線)における紛争の研究」と題する研究発表を、2018年3月には日本農業史学会において「19世紀中葉フランス南部山岳地オート=ザルプ県サペ=ドゥヴゼ事業区域における植林計画をめぐる軋轢に関する研究」と題する研究発表を行った。1.これまでに、19世紀フランス・オート=ザルプ県における山岳地の植林や酪農組合に関わる文献のうち、中心的著作であるブリオのものだけではなく、シュレルの『オート=ザルプ県の渓流の研究』、セザンヌの『オート=ザルプ県の渓流の研究』第2版、第2部などの検討にも着手しており、おおむね順調に分析が進んでいる。2.また、1840年頃から1910年頃までのオート=ザルプ県会議事録を通覧し、1870年頃から1900年頃までに酪農組合の議論が多くされていることを突き止め、その分析に着手しており、こうした作業もおおむね順調に進んでいる。3.さらに、それだけではなく、オート=ザルプ県文書館において手稿史料を中心として関連する文書を収集し、おおむね順調に解析を進めているところである。とりわけ、山岳地の植林の計画、実施、軋轢、紛争に関わる行政文書の残存状況を確認しつつ、事例として適切な事業区域の選定を進め、予備的な作業として、サペ=ドゥヴゼ事業区域における植林計画をめぐる軋轢に関するものなど、関連する史料の解読、解析を進めた。そして、さらに他の事業区域について、史料の残存状況や区域の性格などを鑑みながら事例にできるものの探索を進めている。加えて、酪農組合普及と関連して、当時、大きな関心が寄せられていた灌漑施設の整備について、課題、特徴、対応の動き、軋轢などを中心に、司法文書等の分析を行っている。以上のような文書館における史料調査もおおむね順調に進んでいるところである。4.これらの解析に基づきながら、関連分野の有力な学術団体である政治経済学・経済史学会ならびに日本農業史学会において研究発表を実施した。そこでの質疑応答やディスカッションを受けて、学術論文、あるいは学術著書の刊行に向けた作業に着手しているところである。5.以上のような進捗状況に鑑みて、自己評価を「2.おおむね順調に進展している」とした。1.前年度に引き続き、19世紀フランス・オート=ザルプ県における山岳地の植林や酪農組合に関わる文献を調査した。1840年代に関連分野での画期となるシュレル
母子間相互作用から探る乳幼児期の模倣学習メカニズムの解明

乳幼児期は母親との間で交わされる視線や身体の動きなどの相互作用の中で様々な動作を模倣し学習していくことから、本研究では、乳幼児期の模倣学習メカニズムを解明するため、相互作用場面における母親と乳幼児の行動および生理学的指標である筋活動に注目して、子どもの模倣学習の要因と効果を検討することを目的としている。本年度は、前年度に引き続いて新規玩具を教示する場面での母親の教示行動の変化について検討した。新規玩具を子どもに実演するときの母親の動きをモーションキャプチャーを用いて計測した。また、子どもが母親が教えた遊び方を行えるかどうかの模倣テストを観察した。その結果、子どもの模倣行動の結果(模倣成功・模倣不成功)によって、子どもの模倣テスト前後の母親の実演時間、手首の速度などが変化していることが明らかとなった。また、子どもができた操作局面を簡略化して教示し直していたことから、母親は子どもができなかった操作局面のみを抽出して教示し直していることが示唆された。本年度の研究結果は、国内学会(日本赤ちゃん学会第17回学術集会)で発表済みであり、国際学術誌に投稿準備中である。また、生後10ヶ月児を対象として、運動に先立って表れる筋活動に着目し、教示者である母親との視線(アイコンタクト)を介した相互作用が子どもの模倣に与える影響を検討した。その結果、母親とのアイコンタクトに応じて子どもの行動が変化し、模倣に関わる筋が活動していることが示唆された。29年度が最終年度であるため、記入しない。本年度は、新規玩具を教示する場面における母親の教示行動の変化、およびその子ども(24ヶ月齢児)の模倣行動の関連性について検討した。その結果、子どもの模倣行動の結果(成功・不成功)によって、子どもの模倣テスト前後の母親の実演時間、腕の移動距離などが変化していることが明らかとなった。また、子どもが模倣を成功するためには、子どもができなかった操作局面のみを母親が誇張して教示し直す必要があることが示唆された。本年度の研究結果は、国内学会(日本赤ちゃん学会第16回学術集会)で発表済みであり、国際学術誌に投稿準備中である。本研究の子どもの模倣行動の結果は、運動に先立った生理学的指標である筋活動を検討するための基礎となるため、次年度は模倣行動が表出する前の筋活動を測定し、子どもがどのように複雑で多様な動作を母親から学習していくのかを検討する予定である。当初の研究計画では生後1524ヶ月齢児をリクルートし、模倣学習時における乳幼児の動作および筋活動を各月齢ごとに測定する予定であった。しかし、本年度は24ヶ月齢児を対象にして母親との相互作用場面における模倣行動のみを検討した。その理由として、24ヶ月齢児に筋電図を測定するための電極パッドを装着することが困難であったためである。本年度は筋活動の測定・解析までに至らなかったが、50組以上の被験者の母親の動作解析および子どもの模倣行動の分析を行った結果、子どもの模倣行動の結果(成功・不成功)における母子間の行動特徴を捉えることができたので、生理学的指標を検討するための基礎となると考える。平成28年度の母子の行動結果をまとめて国際学術誌に投稿予定である。また、平成28年度の研究では、生後24ヶ月齢児に筋電図を測定するための電極パッドを装着することが困難であることが判明したため、平成29年度では、対象月齢や課題玩具を変更して研究を遂行する予定である。

事前の調査において生後10ヶ月齢では電極パッドを装着することが可能であったため、10ヶ月齢前後の乳幼児を対象にして調査を行う。29年度が最終年度であるため、記入しない。
MLL-AF4ファミリー融合蛋白の白血病発症機序の解析と新規治療法の開発

MLL-AF4陽性急性リンパ性白血病の予後は現在も不良で、その白血病発症機序の解明は新たな治療法の開発に向けて重要である。我々はレトロウイルス遺伝子発現系を用い、MLL-AF4融合遺伝子の白血病発症機序の解析を行った。Myeloid transformationassayの結果、MLL-murine Af4(mAf4)はマウスLineage-(Lin-)骨髄細胞を不死化でき、変異体解析では、mAf4(aa.1026-1177)の領域が必須であると判明した。定量RT-PCRでHoxA9, A10, Meis1の発現増強が見られ、クロマチン免疫沈降法で、HoxA9のプロモーター領域のヒストンH3リジン79(H3K79) dimethylationが見られ、MLL-mAf4はHoxA群遺伝子プロモーターのH3K79 dimethylationを介しHoxA群遺伝子発現を増強させることでLin-骨髄細胞を不死化していると考えられた。本実験モデルはヒトのMLL-AF4陽性白血病の白血病発症機序を良く再現しており、新規治療法の開発に向けた優れたモデルとなることが期待される。MLL-AF4陽性急性リンパ性白血病の予後は現在も著しく不良であり、その白血病発症機序の解明は新たな治療法の開発に向けて極めて重要である。そこで、我々はレトロウイルス遺伝子発現系を用い、MLL-AF4融合遺伝子の白血病発症機序の解析を行った。Myeloid transformationassayの結果、MLL-human AF4(MLL-hAF4)はマウスLineage-(Lin-)骨髄細胞を不死化できなかったが、hAF4をmurine Af4(mAf4)に置換したところ、Lin-骨髄細胞の不死化が確認された。細胞表面マーカー解析では、B220, CD19陰性、Mac-1陽性であり、定量RT-PCRにてHoxA9, A10, Meis1の発現増強が見られ、クロマチン免疫沈降法により、HoxA9のプロモーターにおけるH3K79 dimethylationが明らかとなった。以上の結果から、MLL-mAf4はHoxA群遺伝子のプロモーターのヒストンH3リジン79(H3K79)dimethylationを介して、HoxA群遺伝子の発現を増強させることにより、Lin-骨髄細胞を不死化しているものと考えられた。また、hAF4/mAf4キメラ遺伝子解析の結果から、mAf4(aa.1026-1177)の領域がMLL-mAf4の不死化能には必須であり、定量RT-PCRによる解析の結果、この領域が、融合遺伝子のマウスLin-骨髄細胞中での安定した発現に重要である事が明らかとなった。以上の結果から、本実験モデルはヒトのMLL-AF4陽性白血病の白血病発症機序を良く再現しており、新規治療法の開発に向けた優れたモデルとなることが期待される。hAF4/mAf4キメラ遺伝子解析の結果から、mAf4(aa.1026-1177)の領域がMLL-mAf4の不死化能には必須であり、定量RT-PCRによる解析の結果、この領域が、融合遺伝子のマウスLin-骨髄細胞中での安定した発現に重要である事が明らかとなった。以上の結果について論文発表を行った。また、MLL-AF9,MLL-ENL,MLL-AF5q31をレトロウイルス遺伝子発現系を用いてマウス造血幹細胞に発現させ、細胞株を樹立し、これら細胞株について脱メチル化剤の反応性を検討した結果、MLL-AF9陽性細胞はMLL-ENLおよびMLL-AF5q31陽性細胞に比して、高率にアポトーシスを誘導できる事が明らかとなった。近年MLL融合蛋白の種類と予後の関係が検討されており、脱メチル化剤も治療薬の一つとして注目されている。

我々の知見は、MLL融合蛋白陽性白血病の治療を考える上で、重要であると考えられた。以上の結果は、米国血液学会で発表し、現在論文化を進めている。
台風進路に関わる「藤原効果」の再考

本研究は,2つの渦が接近した際に,両者の経路のパターンが複雑化する「藤原効果」について,渦力学に関する研究者から台風の数値予報に関わる現業機関職員までが連携して研究を進めるものである.初年度となる平成30年度は,研究参画者が次年度以降に研究を円滑に進めるための環境整備や過去の事例の整理や情報収集を行うことを目標とした.具体的には,計算機環境を整えるため,年度の初めに,高速な計算を実施するためのサーバーの調達を行った.また,理想化実験を進めるため,調達した計算サーバー上に2次元順圧非発散モデルを構築し,藤原効果の再現実験を開始した.モデル構築は順調に進み,2つの近接する同極の渦を置いて藤原効果を再現する実験を行うことができた.このサーバー上には,順圧非発散モデルのほか,非静力学モデルの実装も行った.さらに,過去の事例の整理により,台風の進路予報が大外しした場合の多くで,予報を外した台風の近傍に別の渦が存在していることを明らかにした.このことは,台風の進路予報の大外し事例に藤原効果が関与していることを示唆するものである.特に,気象庁全球モデルと非静力学モデルで2016年台風第7号の進路に大きな差異が認められたため,数値実験の結果を調べたところ,数十キロスケールの正渦の生成に伴う藤原効果が関与していることが分かった.このほか,鬼怒川豪雨を引き起こした台風第17号と台風第18号,2015年2つの台風の位置関係に応じて,降水量が異なることをアンサンブルシミュレーションにより明らかにした.このことは,災害をもたらした激しい豪雨が,本研究のテーマにも深くかかわっている場合があるということを示唆している.当初の研究実施計画に示したように,計算サーバーの導入など研究基盤の構築,理想化実験に必要な順圧非発散モデルの構築,過去の事例の整理を無事に実施することができた.また,来年度以降に予定している最適励起摂動の計算,外側に負の渦度領域を想定した台風の藤原効果,現実的な台風の藤原効果における非断熱加熱の効果の定量的な評価に関する作業も順調に進んでいる.さらに,2つの台風の位置関係が大雨の発生に関与しているなど,当初想定していなかった成果についても知見が得られたことから,おおむね順調に進展していると評価する.現在までのところ,研究は順調に進捗しているため,このまま理想化された藤原効果に関する研究と現実的な台風における藤原効果の両方の研究を進めていく.2年度目に入り,初期的な結果が得られていくと考えられるため,研究参画者が集まって情報交換する場を設け,台風に関わる「藤原効果」の実像に迫っていく.また,台風とその近傍にあった渦の藤原効果により台風の進路予報が大きく外れたと考えられる2016年台風第7号の事例に関しては,詳細を調べ,その原因を深く掘り下げていく.本研究は,2つの渦が接近した際に,両者の経路のパターンが複雑化する「藤原効果」について,渦力学に関する研究者から台風の数値予報に関わる現業機関職員までが連携して研究を進めるものである.初年度となる平成30年度は,研究参画者が次年度以降に研究を円滑に進めるための環境整備や過去の事例の整理や情報収集を行うことを目標とした.具体的には,計算機環境を整えるため,年度の初めに,高速な計算を実施するためのサーバーの調達を行った.また,理想化実験を進めるため,調達した計算サーバー上に2次元順圧非発散モデルを構築し,藤原効果の再現実験を開始した.モデル構築は順調に進み,2つの近接する同極の渦を置いて藤原効果を再現する実験を行うことができた.このサーバー上には,順圧非発散モデルのほか,非静力学モデルの実装も行った.さらに,過去の事例の整理により,台風の進路予報が大外しした場合の多くで,予報を外した台風の近傍に別の渦が存在していることを明らかにした.このことは,台風の進路予報の大外し事例に藤原効果が関与していることを示唆するものである.特に,気象庁全球モデルと非静力学モデルで2016年台風第7号の進路に大きな差異が認められたため,数値実験の結果を調べたところ,数十キロスケールの正渦の生成に伴う藤原効果が関与していることが分かった.このほか,鬼怒川豪雨を引き起こした台風第17号と台風第18号,2015年2つの台風の位置関係に応じて,降水量が異なることをアンサンブルシミュレーションにより明らかにした.このことは,災害をもたらした激しい豪雨が,本研究のテーマにも深くかかわっている場合があるということを示唆している.当初の研究実施計画に示したように,計算サーバーの導入など研究基盤の構築,理想化実験に必要な順圧非発散モデルの構築,過去の事例の整理を無事に実施することができた.また,来年度以降に予定している最適励起摂動の計算,外側に負の渦度領域を想定した台風の藤原効果,現実的な台風の藤原効果における非断熱加熱の効果の定量的な評価に関する作業も順調に進んでいる.さらに,2つの台風の位置関係が大雨の発生に関与しているなど,当初想定していなかった成果についても知見が得られたことから,おおむね順調に進展していると評価する.

現在までのところ,研究は順調に進捗しているため,このまま理想化された藤原効果に関する研究と現実的な台風における藤原効果の両方の研究を進めていく.2年度目に入り,初期的な結果が得られていくと考えられるため,研究参画者が集まって情報交換する場を設け,台風に関わる「藤原効果」の実像に迫っていく.また,台風とその近傍にあった渦の藤原効果により台風の進路予報が大きく外れたと考えられる2016年台風第7号の事例に関しては,詳細を調べ,その原因を深く掘り下げていく.
古第三紀石油ベルト-北海道原油の起源

北海道夕張地域に露出している古第三紀の石炭、炭質頁岩に堆積学的・有機地球化学的検討を加え、これら古第三紀陸源性堆積岩の炭化水素生成ポテンシャルについて検討した。その結果、これらは極めて優秀な石油生成能力を有していることが明らかになった。陸源性有機物にとむ堆積岩が厚く分布する北海道の古第三紀堆積盆は石油探鉱の有望な探査対照地域である。また、優秀な石油生成能力の背景として以下のことを明らかにした。(1)より泥質岩が卓越する湿原相の炭質泥岩、石炭が石油生成ポテンシャルが高い。これはわずかな水の営力によって運搬されやすい高等植物の部分ほど高い生成ポテンシャルをもたらすことを示唆している。(2)有機炭素濃度が高い陸成堆積岩ほど高い生成ポテンシャルを示した。堆積物内部も酸化的であると活性な有機物は好気性バクテリアの働きによって無機化してしまうので,泥質かつ有機質な堆積層ほど石油生成ポテンシャルが高くなることを示している。(3)炭質頁岩や石炭中から得られたトリテルパンがバクテリア細胞膜を形成するバクテリオホバノールと全く同じ炭素骨格をもっており、また、アンテイソアルカンが顕著に認められた。これは,海成根源岩とくらべて陸成根源岩ではバクテリアの活動がその生成ポテンシャルの向上に重要な役割を果たしていることを強く示唆している。(4)オレアナンやフイロクラダンの存在度から被子植物の寄与が大きいと予想されるものほど生成ポテンシャルが高い傾向が認められた。これは被子植物の寄与が生成ポテンシャルの向上に重要な役割を果たしていることを示している。本年度は、石狩油田地域の厚田原油、茨戸原油と周辺地域の泥質岩類(当別層、望来層、盤ノ沢層、厚田層、発足層、奔須部都層)について地球化学分析を行い、同地域に産する原油の根源岩を特定した。厚田・茨戸原油は高いプリスタン/ファイタン比(2以上)を持ち、その根源岩は比較的酸化的な環境下で形成されたことを示している。また、海成プランクトンに由来するコレスタンに乏しく、バクテリアや陸上植物、菌類に由来するトリテルパン類に富んでいることから、根源岩は比較的陸源物質の寄与を受けやすい堆積環境で形成されたことを示している。また、続成作用の過程でジアステラン類が顕著に形成されていることから、根源岩はジアステラン形成に際して触媒として機能する粘土鉱物類に富んでいることが予想される。以上のことと周辺堆積岩類の熟成度から、石狩油田地域の石油根源岩は新第三紀中新世の厚田層下部の砕屑性泥質岩であるものと考えることができる。本年度は、日高帯西部の夕張山地周辺において古第三紀泥質岩(美唄層ほか、古第三紀石灰も含む)の試料採取を行った。開放系での熱分解実験からこれらの試料の石油生成ポテンシャルを既に測定した。これら古第三紀泥質岩の一部は優秀な石油根源岩になり得ることを示している。現在、これらの試料から有機溶媒によるビチュメンの抽出を進めている。また、近年発見された勇払原油の有機地球化学的特徴を明らかにし、勇払原油の石油根源岩を特定する作業も進めている。平成8年度に購入した高速液体クロマトグラフ用ポンプと紫外可視光検出器により迅速前処理法(中圧分取液体クロマトグラフィー)を確立させつつある。この前処理法を積極的に活用することにより、平成9年度に本研究を完結させる見通しが充分にある。陸源性有機物にとむ堆積岩が厚く分布する北海道の古第三紀堆積盆は石油探鉱の有望な対象地域である。

また、優秀な石油生成能力の背景として以下のことを明らかにした。(1)より泥質岩が卓越する湿原相の炭質泥岩、石炭が高い石油生成ポテンシャルをもつ傾向がある。これはわずかな水の営力によって運搬されやすい高等植物の部分ほど高い生成ポテンシャルをもたらすことを示唆している。(2)有機炭素濃度が高い陸成堆積岩ほど高い生成ポテンシャルを示した。堆積物内部も酸化的であると活性な有機物は好気性バクテリアの働きによって無機化してしまうので、泥質かつ有機質な堆積層ほど石油生成ポテンシャルが高くなることを示している。(3)炭質頁岩や石炭中から得られたトリテルパンがバクテリア細胞膜を形成するバクテリオホパノールと全く同じ炭素骨格をもっており、また、アンテイソアルカンが顕著に認められた。これは海成根源岩とくらべて陸成根源岩ではバクテリアの活動がその生成ポテンシャルの向上に重要な役割を果たしていることを強く示唆している。(4)オレアナンやフィロクラダンの存在度から被子植物の寄与が大きいと予想されるものほど生成ポテンシャルが高い傾向が認められた。これは被子植物の寄与が生成ポテンシャルの向上に重要な役割を果たしていることを示している。
調理によって生理機能性成分を新たに創ることはできるのか？

脂質代謝改善効果をもつオキソ酸は、トマトの加工工程で生じると考えられている。本研究では、トマト及び他の野菜を対象として、調理条件の違いによって、効率的にオキソ酸を生成させることができるのかを明らかにした。トマトを玉ねぎ、ニンニクなどと合わせ加熱することによりトマトソースを調製した。トマトソース中のオキソ酸は、トマトをミキサー処理することによって、さらに40°Cで保持することによって増加した。官能検査の結果、オキソ酸を最大量含むトマトソースが、もっともおいしいと評価された。以上の結果、野菜の調理条件を制御することによって、体によく嗜好性にも優れた調理物を調製できる可能性が示唆された。トマトジュース中に存在するオキソ酸は、体の脂肪を燃焼させる成分であると報告されているが、この成分は、構造から推定すると、リノール酸にリポキシゲナーゼが働き、生成すると考えられる。他の野菜に関しても、リノール酸とリポキシゲナーゼが含まれているものが多い。以上の背景に基づき、本研究では、トマト及び他の野菜を対象として、調理操作(カットや刻み方、加熱の方法や温度条件等)の違いによって、効率的にオキソ酸を生成させることができるのか、明らかにすることを目的とする。同時に、そのような調理操作によって、美味しさに関わる品質がどのような影響を受けるのか、味、香りに関わる成分の定量や官能検査によって明らかにする。平成25年度では、まずトマト単独の系を対象として、カット処理(丸ごと、1/2、1/4、1/8)やミキサー処理によって、呈味性成分(グルタミン酸、有機酸、糖)、香気性成分、オキソ酸量に変化があるのか検討を加えた。その結果、呈味性成分については、全ての処理区において顕著な変化は認められなかった。しかし、香気性成分(特にリポキシゲナーゼ反応産物であるcis-3-hexenalなど)やオキソ酸は、カット処理では、丸ごとの場合と大きな変化はなかったものの、ミキサー処理することによって大幅に増加した。ミキサー処理によって、初めて、リノール酸とリポキシゲナーゼが接触可能になったためと考えられる。一方、トマトをタマネギ、ニンニク、オリーブオイルと合わせ、実際のトマトソースを調製する実験も行った。加熱操作をミキサー処理の前に行う、あるいは後に行う、また加熱の際に、いきなり高温にする、あるいは高温に達する前に40°Cで保持するなど、いくつかの条件を組み合わせた。その結果、味や香りについて、官能検査や実際の成分分析において違いが見られた。またオキソ酸の生成量も異なっていた。トマトジュース中に存在するオキソ酸は、体の脂肪を燃焼させる成分であると報告されているが、この成分は、構造から推定するとリノール酸にリポキシゲナーゼが働き生成する可能性が高い。本年度は、トマトをタマネギ、ニンニク、オリーブオイルと合わせ、加熱することにより実際のトマトソースを調製した。他の材料と合わせる前に、トマトをミキサーにかける、あるいはかけない、さらにトマトを40°Cで保持するかしないか、などの条件設定を行い、その条件の違いによって、オキソ酸の生成量がどのように変化するのか、またそれに伴い、美味しさに関わる成分がどのように変化するのか検討を行った。その結果、生トマトには、ごく少量のオキソ酸しか含まれていなかったのに対し、調理によってオキソ酸は増加した。特に40°C保持後、ミキサーしたトマトを他の材料に合わせて加熱調理したものが最大のオキソ酸含量を示した。ミキサー処理をしない場合は、オキソ酸は大きくは増加しなかった。また、最大のオキソ酸生成量を示した調理物が、官能検査でももっとも美味しいという評価を得た。呈味性成分の含量と、官能検査における味の評価は一致しないことから、調理操作によって変化したフレーバー成分や物性が、味覚の修飾も含め美味しさの評価に影響している可能性が示された。食品科学当初の計画では、平成25年度は、トマト単独、トマトと他の野菜を組合せたものを対象として、そのカットやミキサー処理、加熱操作によって、オキソ酸の生成量が変化するのか検討することを目的としていた。その目的はほぼ達せられた。それに加えて、2年目以降に設定していた、調理物の官能評価や嗜好性に関わる成分分析についても、平成25年度から着手し、調理条件によって、これらが大きく変化することを見出した。

オキソ酸の生理機能成分を増強しながら、嗜好性にも優れた加工調理法を見出すという最終目的に向かって、大きく前進できたものと考えている。ただし、これらの結果は、年度後半において集中的に得られたものであり、学会発表や論文発表には至っていない。データ結果をとりまとめて早期の発表を計画している。平成25年度においては、トマトと他の野菜を混合した系において、調理条件を詳細に検討し、興味深い結果を得ている。同様な調理条件で、トマトや他の野菜を、それぞれ単独で処理し、オキソ酸の生成や呈味性に関わる糖分の生成が、どの野菜に由来するのか、あるいはいくつかの野菜の組合せで生じるのか、メカニズムの解明に努める。平成26年度においては、解析法のいくつかを改良し、より定量性に優れたデータの取得を目指す。官能評価については、これまで比較的限られた人数で実施していたが、統計的な信頼性を高めるため、被験者を大きく増やして行いたい。また、官能評価の結果、甘さが増強したという結果が得られたサンプルについては、実際に還元糖の量も増加しているという結果が得られた。高速液体クロマトグラフィーにより、糖の種類や量が、調理条件によって、どのように変化しているのか、その結果が官能評価の結果と一致するのか、検討を進める。サンプルの外観については、目視によって色調が明らかに異なっているのが確認されているが、色差計を適切に使用することにより、色調の違いについても定量的な把握を試みる。平成26年度は、本研究の最終年度に当たるため、これまでの実験の再現性の確認、データのブラッシュアップを上記の方法により試みるほか、他の野菜を組み合わせた調理物についてもデータの取得を行い、本アプローチが様々な素材を含む調理物に適用可能であることを示したい。
飢餓に伴う成長ホルモン分泌の変化と栄養素の関係:情報伝達経路の解明

[目的]GHRPの作用の一部は視床下部ホルモンであるGHRHに依存する。GHRHには中枢神経を介する摂食促進作用があるので、GHRPの摂食に対する効果をラットで観察した。[方法]成熟雄SD系ラットの第三脳室に予めステンレスカニューレを挿入固定し、餌と水は自由にとらせた。(1)13時に生食、KP-102あるいはGHRHを脳室内投与した。(2)摂食を促進させるNPYの拮抗薬である[D-Trp32]-NPYをNPY、GHRHあるいはKP-102投与15分前に脳室内投与した。各観察で脳室内投与後2時間の摂食量を測定した。[結果]生食脳室内投与群の摂食量は、実験前日の摂食量と差がなかった。KP-102(10ng)あるいはGHRH(100ng)の脳室内投与では、いずれも生食投与群に比べて摂食量が有意に増加した。容量反応性を検討すると、KP-102は100ng、GHRHは200ngを頂値とする釣り鐘型曲線となった。KP-102(100ng)とGHRH(200ng)の同時投与では、いずれのペプチド単独投与に比べて摂食量が有意に増加した。一方KP-102(100ng)あるいはGHRH(200ng)の全身投与は摂食量に影響を与えなかった。[D-Trp32]-NPY(10μg)の前投与はNPY(5μg)による摂食量を有意に抑制したが、GHRHとKP-102による摂食量には影響を与えなかった。[結論](1)GHRPは中枢神経系を介して摂食を亢進させるが、その機序はGHRHと異なること(2)GHRPやGHRHの摂食促進作用にNPYの関与の可能性は少ないことが示唆された。[今後の方針]GHRHのアンタゴニストやモルフィンのアンタゴニストであるナロキソンなどををKP-102脳室内投与に先だって投与し、KP-102の摂食量に及ぼす影響について検討を加えたいと考えている。
わが国国債流通市場の分析

昭和53年度第1・4半期から59年度第1・4半期までの,都市銀行,地方銀行,信託銀行,長期信用銀行,相互銀行・信用金庫,農林系統金融機関,生命保険会社,投資信託の各業務と個人部門による,国債,コール,手形(個人の場合,代りに預金),貸出しの保有行動を,フロー・タームによって分析した.得られた主要な結果は次のとおりである.1.得られた資産保有関数と市場均衡条件から国債利回りの推定値が求められたが,これらは実績値の動きをかなりの程度説明している.つまり,構造方程式アプローチはかなり成功した.2.貸出しの超過供給が他資産の保有に与える影響即ち漏出効果は,国債の場合生命保険会社において,コール・手形資金については地方銀行と農林系統金融機関においてそれぞれ見られる.3.3資産の保有に対する各レートの影響と所望保有額に対するそれで見ると,価格メカニズムに従う行動をとっているのは,都市銀行と地方銀行の国債,農林系統の貸出しのそれぞれの保有である.他方,価格メカニズムと逆の行動をとっているのは農林系統金融機関コール・手形である.なお次に,金融政策に短期金利とその予想に影響を与えることにらって長期金利にどのような効果を持つかを分析することが必要であるが,そのこめの予備的な分析を行なった.昭和53年度第1・4半期から59年度第1・4半期までの,都市銀行,地方銀行,信託銀行,長期信用銀行,相互銀行・信用金庫,農林系統金融機関,生命保険会社,投資信託の各業務と個人部門による,国債,コール,手形(個人の場合,代りに預金),貸出しの保有行動を,フロー・タームによって分析した.得られた主要な結果は次のとおりである.1.得られた資産保有関数と市場均衡条件から国債利回りの推定値が求められたが,これらは実績値の動きをかなりの程度説明している.つまり,構造方程式アプローチはかなり成功した.2.貸出しの超過供給が他資産の保有に与える影響即ち漏出効果は,国債の場合生命保険会社において,コール・手形資金については地方銀行と農林系統金融機関においてそれぞれ見られる.3.3資産の保有に対する各レートの影響と所望保有額に対するそれで見ると,価格メカニズムに従う行動をとっているのは,都市銀行と地方銀行の国債,農林系統の貸出しのそれぞれの保有である.他方,価格メカニズムと逆の行動をとっているのは農林系統金融機関コール・手形である.なお次に,金融政策に短期金利とその予想に影響を与えることにらって長期金利にどのような効果を持つかを分析することが必要であるが,そのこめの予備的な分析を行なった.
太古代チャートの多種同位体と微量元素の地球化学:海洋環境と生命活動記録の解明

豪北西部ピルバラ地域で採取された、約34.6億年前のチャートと約32億年前のチャート/BIF(縞状鉄鉱層)および黒色頁岩の陸上掘削試料を用いて、堆積当時の海洋環境および微生物活動を制約する研究を行い、以下の成果が得られた。約34.6億年のチャート試料中の主要元素とREE存在量から海底熱水活動由来の鉄が深海で酸化された事、ケイ酸塩成分の酸素同位体組成からは堆積環境の温度は極めて高かった事、海水-熱水混合モデルからは当時の深海の溶存酸素は64μg/kg(現在の量の1%)以上だった事、がわかった。約32億年前のBIFデータからも同様の結果が得られた。約32億年前の黒色頁岩の研究では、微生物による脱窒があった事、主にバクテリアからなる光合成主体の微生物活動が盛んだった事、局所的に嫌気的な深海では硫酸還元が行われていた事、等がわかった。太古代中期の海洋は、全般的に酸化的であるが局所的に嫌気層が発達する現代の海洋とほぼ同様な構造を持っていた事がわかった。オーストラリア北西部Pilbara地域で採取された、約34.6億年前のチャート及び約32億年前のチャート/縞状鉄鉱層の陸上掘削試料を用いて、太古代の海洋環境(例:酸化還元状態・成層構造・海底熱水活動の影響・海水温度)および微生物生命活動を制約することが、本申請研究の概要である。本研究は、研究代表者(山口)の従来の共同研究者らが同試料(約34.6億年前のABDPチャート試料)を用いて行った関連研究(Hoashi et al., 2009)がNature Geoscienceに掲載される等、世界の最先端で競争を行っているものである。それと対をなす位置にある本研究の意義は非常に高い。オーストラリア北西部ピルバラ地域で採取された、約34.6億年前のチャート及び約32億年前のチャート/縞状鉄鉱層の陸上掘削試料を用いて、太古代の海洋環境(酸化還元状態・成層構造・海底熱水活動の影響・海水温度)及び微生物生命活動を制約することが、本申請研究の目的である。平成20年度は、計画通り、約34.6億年前のABDP試料及び約32億年前のDXCL-DP試料を各々100試料程入手し、共同研究者らとともに、合計約200試料の岩石薄片試料を製作し、偏光・反射顕微鏡観察などを行い、基礎データの集積に務めた。さらに、高度分析用の試料として上記試料から選定し、粉末試料を制作した。以上、研究開始1年目の成果としては申し分のない成果を挙げることができたと言える。オーストラリア北西部のPibara地域で採取された、約34.6億年前のチャート及び約32億年前のチャート/縞状鉄鉱層の陸上掘削試料を用いて、太古代の海洋環境(例:酸化還元状態・成層構造・海底熱水活動の影響・海水温度)及び微生物生命活動を制約することが、本申請研究の目的である。平成21年度は、計画通り、約34.6億年前のABDP試料及び約32億年前のDXCL-DP試料を各々約100試料について、粉末試料を制作して前処理を施し、高度分析装置であるICP-MSを用いて、無機元素分析を行った。その結果、膨大な量の高品質データが得られた。また、約50のチャート試料の酸素同位体分析を行い、同様に高品質データを得た。以上、研究開始2年目の成果としては、データ取得及び国際誌への英文論文発表の点から、申し分のない成果を挙げることができたと言える。オーストラリア北西部のPilbara地域で採取された、約34.6億年前のチャート及び約32億年前のチャート/縞状鉄鉱層の陸上掘削試料を用いて、太古代の海洋環境(例:酸化還元状態・成層構造・海底熱水活動の影響・海水温度)および微生物生命活動を制約することが、本申請研究の目的である。平成20年度と21年度には、約34.6億年前のABDP試料及び約32億年前のDXCL-DP試料を各々約100試料について、粉末試料を制作して前処理を施し、高度分析装置であるICP-MSを用いて、無機元素分析を行った。

また、約50のチャート試料のケイ酸塩成分の酸素同位体分析を行い、同様に高品質データを得ることができた。平成22年度には、(1)以上のデータの詳細な検討を行って論文(Natureに投稿予定)を執筆し(共著者らが内部査読中)、(2)酸素同位体データに関しても論文原稿を執筆し、(3)鉄の同位体分析用の試料前処理をするために設計・設置したクリーンルームの整備および分析ラインの構築にとりかかった(修士論文のテーマとして学生を指導)。以上の他、論文発表も一流の国際誌(EPSL, Palaeo3等)に複数行った。本研究は、研究代表者(山口)の従来の共同研究者らが同試料(約34.6億年前のABDP試料)を用いて行った関連研究(Hoashi et al.,2009)がNature Geoscienceに掲載される等、世界最先端で競争を行っているものであり、それと対をなす位置の本研究の意義は非常に高く、世界に先駆けて成果を発表することがとても重要である。以上、研究開始3年目の昨年度も、以前に引き続き、申し分のない成果を挙げることができたと言える。オーストラリア北西部のPibara地域で採取された、約34.6億年前のチャート及び約32億年前のチャート/縞状鉄鉱層の陸上掘削試料を用いて、太古代の海洋環境(例:酸化還元状態・成層構造・海底熱水活動の影響・海水温度)および微生物生命活動を制約することが、本申請研究の目的である。平成20年度と21年度には、約34.6億年前のABDP試料及び約32億年前のDXCL-DP試料を各々約100試料について、粉末試料を作成して前処理を施し、ICP-MSを用いて無機元素分析を行った。その結果、膨大な量の高品質データが得られた。約50のチャート試料のケイ酸塩成分の酸素同位体分析を行い、同様に高品質データを得ることができた。平成22年度には、データの詳細な検討を行って論文を執筆し、酸素同位体データに関しても論文を執筆した。鉄の同位体分析用の試料前処理をするために設計・設置したクリーンルームの整備と分析ラインの構築を行った。以上の他、論文発表も一流の国際誌(EPSL,Palaeo3等)に複数行った。平成23年度には、前年度に初稿を書いた論文に数値モデルを新たに加えて修正した。酸素同位体に関しても論文の修正を行った。クリーンルーム内の分析ラインの構築および整備を引き続き行った。以上の他、論文発表も一流の国際誌(Science)に行った。また、太古代の硫黄循環に関する論文を共同でNature誌に投稿した。本研究は、研究代表者の従来の共同研究者らが同試料(約34.6億年前のABDP試料)を用いて行った関連研究(Hoashi et aL., 2009)がNature Geoscienceに掲載される等、世界最先端で競争を行っているものであり、それと対をなす位置の本研究の意義は非常に高く、世界に先駆けて成果を発表することがとても重要である。以上、本研究の最終年度も、以前に引き続き、申し分のない成果を挙げることができたと言える。
サイトカイン・カスケード遮断による重症細菌感染症の治療法の開発

リステリア菌、黄色ブドウ球菌(MRSA)の致死感染モデルを用いて、感染によって誘導されるサイトカイン・カスケードの遮断による重症細菌感染症の予防・治療法の開発を行い、以下の結果を得た。1.リステリア菌およびMRSAの致死感染を受けたマウスは斃死前に、インターフェロン-γ(IFN-γ)、腫瘍壊死因子(TNF)およびインターロイキン-6(IL-6)が、血中や感染臓器において高値を示した。2.これらのマウスにIFN-γ、TNF、あるいはIL-6に対する単クローン抗体(mAb)を投与すると、リステリア菌感染では効果がみられなかったが、MRSA感染では明確に致死感染からの回避が認められた。抗IFN-γの投与は感染前および感染後でも効果を示し、予防および治療効果を示した。抗IFN-γmAbは大腸菌エンドトキシン・ショックモデルでもショック死からの回避に有効であった。3.ステロイド剤(デキサメタゾン)投与により、サイトカイン・カスケード全体を低値にする方法では、リステリア感染において、致死予防効果を示した。4.抗CD3mAb投与により、Tリンパ球からのサイトカイン・カスケードを人工的に誘導させたマウスでは、リステリア感染において、致死予防効果を示した。以上2、3、4の項の3つの方法により、サイトカイン・カスケードを遮断あるいは修飾することで、重症細菌感染症の予防・治療を行う可能性が示唆された。特に、現在、院内感染菌として、社会問題になっているMRSA感染症では、IFN-γの特異的遮断により予防・治療が可能であることは重要で、今後、臨床応用に向けて、副作用の少ない抗IFN-γmAbの開発が急を要するものと思われる。(1)重症細菌感染の際に誘導されるtumor necrosis factor-α(TNF-α)を中和するためのヒト抗ヒトTNF-α単クロ-ン抗体(mAb)を作製する目的で、ポリクロ-ナルに活性化されたBリンパ球の出現が見られる慢性関節リウマチおよびSLE患者の剖検例より得られた脾臓からBリンパ球を得、EBウイルスをトランスフォ-ムさせ、抗TNFmAb産生クロ-ンを検索したが、適当なクロ-ンが得られなかった。また、マウス・モデルの実験に用いるためのハムスタ-抗マウスTNF-αmAb産生クロ-ンの検索も、用いたマウスリコンビナントTNF-αの生体に対する毒性が強く、使用に堪え得るクロ-ンが得られていない。(2)マウスを用いて、リステリアおよび黄色ブドウ球菌(MRSA)による致死感染時における内在性TNFを検索したところ、非致死感染では全く検出されないTNFが、血中に検出された。また、リステリア感染において、抗CD3mAbあるいはデキサメタゾンの前投与により、致死感染から非致死感染へ移行することを見いだし、生残したマウスは、血中にTNFが検出されなかったのみならず、感染局所において産生されたTNF量も有意に減少していた。これらの結果は、TNFが感染による致死と強い関連性があることを示唆しているものと思われる。(3)Tリンパ球サブセットや関連リンパ球の表面マ-カ-に対するmAbのin vivo投与実験において、リステリア感染により誘導される内在性TNF産生は、CD4陽性Tリンパ球およびナチュラル・キラ-細胞に、一部支配されることを明らかにした。(1)ヒト・マウスに共通で活性部位に相当するTNFの合成ペプチド断片(114-130)を免疫原としたハムスター・マウスハイブリドーマについてヒト・マウスTNFを認識する抗体産生クローンをスクリーニングしたが、有用なクローンは得られなかった。しかし、ヒト・リコンビナントTNF-α(rHuTNF-α)で免疫したマウスからHuTNF-α反応性単クローン抗体(mAb)

産生ハイブリドーマの確立に成功した。(2)アメリカDNAX研究所のAbram博士により恵与された抗マウスTNFmAbを用いて、リステリア致死感染に対する予防・治療効果について検討したが、抗TNFmAb投与はむしろ感染を促進し、予防・治療効果は認められなかった。抗IFN-γmAbについても検討を行ったが、結果は同様であった。前年度、抗CD3mAb、デキサメタゾンの前投与により、リステリア致死感染の予防が可能であることを示したが、リステリア感染においてはTNFなど特定のサイトカインの完全遮断より、正常レベル程度にサイトカイン応答を抑えることがより効果的であると考えられる。(3)黄色ブドウ球菌(MRSA)感染においてTNFは感染防御因子として働き、抗TNFmAbは致死感染に対しては予防・治療効果は認められなかった。一方、IFN-γは感染防御には関与せず、MRSA致死感染マウスに抗IFN-γmAbを前投与すると明確な延命効果を示し、MRSA感染においては、IFN-γの遮断が予防・治療に有効である可能性が示唆された。前年度、黄色ブドウ球菌(MRSA)感染マウスにおいて、抗インターフェロン-γ(IFN-γ)単クローン抗体(mAb)前投与し、IFN-γを含むサイトカイン・カスケードを遮断することにより、致死感染において明確な延命効果を示すことを報告した。本年度はさらに、抗IFN-γmAb予防、治療効果について検討を行った。対照群では、感染3日目から斃死が始まり、感染7日目で全例斃死する条件を用いた。抗IFN-γmAb投与は感染2日目以前に投与すると有意に致命率が低下し、抗IFN-γmAbはMRSA感染症において、予防だけではなく治療効果を示すことが明らかになった。抗IFN-γmAb投与群では、化学療法剤を与えなくても、明らかに血液、脾臓、腎臓中の菌数は減少していた。従って、本研究は、化学療法剤の併用により、MRSA致死感染を完全に治療できる可能性が示された。抗IFN-γmAb投与によるサイトカイン・カスケード遮断は、大腸菌によるエンドトキシン・ショックモデルでも効果を示し、エンドトキシン投与後でも、IFN-γが誘導される以前に抗IFN-γmAbを投与することによりエンドトキシン・ショックによる致死からマウスが逃れることが出来た。一方、ヒトモデルマウスを作成するためSCIDマウスへのヒト末梢血リンパ球移入実験を行ったが、全身感染系を行うに堪えうるシステムの完成には至らなかった。いずれにしても、本研究でIFN-γを介するサイトカイン・カスケードの遮断による重症MRSA感染症の予防・治療の可能性が示されたので、今後さらに臨床応用への研究の早急な継続が必須である。
DNA複製反応の促進及び抑制のメカニズムと癌化

試験官内複製系として最も解析が進んでいるSV40DNA複製系は当研究班でもIn vivoに近いシステムを目指して開発が進められ、momopolymerase system及びdipolymerase system,さらに、ミニクロマチン複製系を確立して複製調節の研究ならびに制癌物質の解析に供してきた。このシステムは一方において強力な癌タンパクであるT抗原に存在して反応が進行する。複製におけるT抗原の役割は、(1)複製起点塩基配列を認識して結合し、部分的な開裂を引き起こす、(2)DNAポリメラーゼα・プライマーゼと結合してSV複合体を形成する、(3)DNAヘリカーゼとしてDNA伸長反応に関与する等、多段階に作用する。今年度はこれらの内、DNAポリメラーゼとの相互作用に注目し、癌抑制遺伝子産物RBと関連において解析した。T抗原はDNAポリメラーゼα・プライマーゼの反応を数倍に促進するが、これはDNAポリメラーゼα分子と鋳型DNAとの親和性を増加させる事によるものであり。プライマーゼに対する直接作用ではない。RBタンパクがT抗原に結合すると、T抗原による促進作用は完全に消失した。この事はT抗原を有しない正常な細胞においても、RBは複製促進因子と結合してDNA複製を制御している可能性を示唆するものである。一方、RB結合タンパクのcDNA2種(Rax-I,Rax-II)を分離して性質を詳細に検討中である。今一つの癌抑制遺伝子産物p53については、ヒト細胞においてDNAヘリカーゼと結合している事を示唆する結果をえた。これら癌抑制タンパクが、転写レベルのみならず複製に対してより直接的に作用する可能性を示すものである。SV40複製系の延長として、Hela及び293細胞抽出液を用いて無細胞DNA修復系を確立した。この系はXP-AからG群の修復欠損をin vitroで再現する事ができた。またこの系において、大腸菌にて大量発現したxpac蛋白がXP-A群の細胞抽出液の修復欠損を特異的に相補した。今後、XP各群の欠損蛋白の解析が期待される。
扁桃体による海馬シナプス可塑性の制御

海馬は記憶形成に重要な脳部位である。この海馬の神経系においては、記憶の分子メカニズムと考えられる長期増強(LTP)現象が認められる。一方、扁桃体は情動を司る脳部位である。私は過去の研究において麻酔ラットを用いて、扁桃体を破壊すると海馬のLTPが減弱することを発見した。これは扁桃体が海馬LTPを制御していることを示す初めての知見であり、情動によって記憶が左右されるメカニズムを研究するよいモデルになると思われた。平成13年度の研究においては、生理的な状態での扁桃体と海馬の相互作用を理解するために、無麻酔・無拘束状態でラット海馬のシナプス電位を記録する技術を確立した。当初計画では、この技術を用いて、覚醒状態のラットに情動関連刺激(侵害刺激、音刺激、食餌、絶水など)を与えたときの扁桃体の応答と海馬LTPの変化を調べる予定であった。しかし、無麻酔・無拘束状態で安定したLTPを観察できる確率が低かったうえ、侵害刺激や音刺激などによる行動上の変化が電位記録に多大な影響を及ぼし、信頼できる定量データを得るに至らなかった。解決しなければならない技術的な問題が明らかとなった。その一方で、従来用いていた麻酔下での海馬誘発電位記録法を再び用いて、扁桃体から海馬に至る神経路について解析を進めた。扁桃体に電気刺激を与えると海馬歯状回において誘発シナプス電位が記録できた。さらに扁桃体に高頻度刺激を与えるとLTPが誘導できた。扁桃体から海馬歯状回に至る神経系が可塑性を有することが初めて示された。今後、扁桃体-海馬歯状回シナプス可塑性のメカニズムを解明することによって、情動による記憶増強の神経機構が解明できると期待された。こめ海馬の神経系においては、記憶の分子メカニズムと考えられる長期増強(LTP)現象が認められる。私は過去の研究において麻酔下ラットを用いて、扁桃体を破壊すると海馬のLTPが減弱することを発見した。より生理的な状態での扁桃体と海馬の相互作用を理解するためには、無麻酔・無拘束状態で扁桃体神経の自発発火と海馬LTPの関係を調べる必要がある。そこで、本年度の研究では、まず無麻酔・無拘束下右脳電位を測定する手法を確立することをめざした。麻酔下手術によりラットの脳内の決められた位置に刺激および記録電極を刺入し、電極に接続したソケットとともに頭蓋に歯科用セメントを用いて固定した。1週間以上の回復期間を置いた後、測定ケージ内のラット頭蓋のソケットに刺激および記録用の導線を接続した。導線にはラットが動いても負荷がかからないように螺旋状に加工したものを使用し.た。試行錯誤を繰り返して技術的な問題点を解決し、無麻酔・無拘束状態で、ラット海馬のシナプス電位が記録でき、高頻度刺激の適用によりLTPが誘導できるところまで到達した。当初計画では、扁桃体破壊および刺激の影響を検討する予定であったが、期間内に完了できなかったので、現在も継続中である。次年度は、さらにこの技術を用いて、覚醒状態のラットに情動関連刺激(侵害刺激、音刺激、食餌、絶水など)を与えたときの扁桃体の応答と海馬LTPの変化を探る予定である。
植物起源の蛋白合成阻害蛋白質(PSI)の構造と活性に関する研究

植物PSIには、単独で存在する【I】型と、糖結合性蛋白質と結合して存在する【II】型がある。われわれは、前者からヘチマ及びアメリカヤマゴボウ種子のルフィン及びPAP-Sを、後者からヒマ及びトウアズキ種子毒蛋白質リシン及びアブリンのA鎖を選び、それらの一次構造及び活性基について研究を行った。一次構造に関しては、アブリンA鎖(249残基)の全アミノ酸配列、ルフィンa(255残基)の約3/4及びPAP-S(270残基)の約1/3の配列が決定された。【I】型PSIに属するトリコサンチン(既報)とルフィン間では53%が、【II】型PSIに属するリシンとアブリンのA鎖間では39%が同一で、高い相同性を示したが、【I】型と【II】型間では相同的ではあるが、前者がLysを多く含むのに対し、後者はArgを多く含み、そのアミノ酸配列はかなり異なることが明らかになった。一方、活性基に関しては、リシンA鎖、アブリンA鎖及びルフィンともにArg残基が活性に関与するが、そのほかアブリンA鎖ではTrp残基が、ルフィンではアミノ基が活性に関与し、3者間で同一ではなかった。リシンA鎖の活性基としては、N-端領域のArg残基が同定されたが、これらPSIのN-端領域においては、このArg残基を含む8箇所に共通アミノ酸残基が存在することが明らかになった。一方、C-端領域においては相同性は殆んどみられず、鎖の長さもまちまちであり、さらにリシンA鎖においては、C-端領域を除去してトリコサンチンと同じ長さにすると、活性が失われた。。これらの結果から、活性Arg残基を含むN-端領域はその触媒作用に、C-端領域はその特異性に関与することが推察され、さらにPSIのリボゾーム上の作用点はPSIの種類によって異なる可能性が示唆された。。
拒絶反応における捕体活性化のメカニズムの解明と新たな移植患者選択システムの構築

移植医療における超急性拒絶反応は、移植片に対して反応する既存抗体が補体を活性化し細胞障害を引き起こすと考えられている。今回、HLA抗体感作患者血清を用い、リンパ球に対する反応をフローサイトメトリー及びcomplement-dependent cytotoxicity (CDC) testにて計測した。さらに結合IgG量、IgGサブクラスと補体成分(C3b,C4d,C5b,C1q,C3d,iC3b,C5b-9)の比較検討を施行した。この結果、フローサイトメトリーによる結合IgG量とCDC testとの間に有意な相関関係はみられなかった。またC3b活性は結合IgG量、IgGサブクラスによるのではなく、血清/リンパ球の組み合わせで決定された。すべての患者において優位なIgGサブクラスはIgG1であり、HLA抗体感作患者血清に対しC3bはほぼすべての患者で陽性であり、最も鋭敏な補体成分と考えられた。免疫グロブリン(IVIG)はHLA抗体による拒絶反応における細胞障害を阻害する効果があると報告されている。前記の新たな補体活性化測定システムを用いIVIGによる細胞障害抑制効果を測定し、IVIGを用いた拒絶反応抑制メカニズムを検討した。この結果、IVIGはHLA抗体レセプターに結合しその活性を阻害するのではなく、HLA抗体により活性化された後の補体系を抑制することが示された。当研究の結果、通常の仮説に反しCDC test、結合IgG量、IgGサブクラスは補体活性化の予測因子としては精度が低いことが示された。またHLA抗体の補体活性化を計測するために最も適したパラメータはC3bであり、精度の高い新たな移植患者選択システムとして使用可能である。IVIGはHLA抗体により活性化された補体系を抑制することが示され、免疫感作患者に対する移植医療を進歩させる可能性がある。移植医療において、超急性拒絶反応は移植片に対して反応する既存抗体があるときに起こると考えられており、補体と結合した抗体が内皮細胞を傷害しこれによって溶血や溶菌が起こる。しかし様々な捕体成分の活性化と、HLA抗体の関連は明らかでない。今回、flow cytometryを用い補体活性化を直接計測する方法を確立し、HLA抗体による補体活性化のメカニズムを明らかにした。ドナー患者のTリンパ球に対し、flow cytometryによる結合IgG量とCDC testとの間に有意な相関関係はみられなかった。またC3b活性は結合IgG量、IgGサブクラスによるのではなく、レシピエント血清/ドナーTリンパ球の組み合わせで決定された。すべての患者において優位なIgGサブクラスはIgG1であった。HLA抗体感作患者血清に対しC3bはほぼすべての患者で陽性であり、最も鋭敏な補体成分と考えられた。またC4d、C5bも有用なパラメータであった。通常の仮説に反し、CDC test、結合IgG量、IgGサブクラスは補体活性化の予測因子としては精度が低いことが示された。HLA抗体の補体活性化を計測するために最も適したパラメータはC3bであることが示された。ヒト補体成分を測定することは、ドナー・レシピエント適合性の評価を進歩させる可能性がある。