hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
Bcl-2キナーゼの同定と癌化における役割の解明

様々な刺激によるアポトーシスを阻害する重要な因子としてBcl-2 family memberがこれまでに同定されている。我々はこれまでにカルシニューリンがBcl-2のN末端にあるBH4domainを介して直接結合し、Bcl-2を脱リン酸化することを発見した。Bcl-2はリン酸化部位としてS70を含め7-8ヶ所のセリン残基が報告されており、これらの部位をリン酸化する特異的なリン酸化酵素が存在すると考えられる。我々は、これまでの知見より、Bcl-2がリン酸化されると、その結合蛋白でアポトーシス誘導作用のあるBaxがBcl-2より乖離し、ミトコンドリアからのチトクロームcの放出、ひいてはアポトーシスの誘導という一連のapoptotic machineryが始動するという仮説を立てた。これらBcl-2の制御機構解明を目指して、まず、最もBcl-2の機能制御に関与するといわれるS70汲びS70の特異的リン酸化抗体を作製した。内因性のBcl-2を過剰発現しているヒトB細胞リンパ腫瘍細胞株(DND39)を用いてリン酸化Bcl-2の挙動をこの特異抗体にて調べたところ、(a)Bcl-2のリン酸化はS70およびS24を含め多数の部位がリン酸化されている。(b)リン酸化は抗ガン剤であるpaclitaxel(Taxol)及びステロイド剤であるdexamethasoneにより誘導され、各々リン酸化部位が異なった。(c)またcycloheximide(CHX)にて発現が抑制されることより、何らかの刺激によりde novo合成、または制御されるBcl-2キナーゼの存在が確認された。(d)ヒト乳癌細胞(駒込病院外科との共同研究)、大腸癌(岡山大学第二病理との共同研究)、及び膀胱癌(大分大学病理、熊本大学薬理との共同研究)を用いた組織染色では各癌組織中にリン酸化Bcl-2を広範囲に認めた。特にS70のリン酸化は乳癌、膀胱癌において抗ガン剤であるTaxolの反応性によく相関し、またS24のリン酸化は大腸癌の分化度と逆相関していた(投稿中)。今後さらに症例を増やして検討していく予定である。一方、Bcl-2とカルシニューリンの関連を各種の変異体を用いて解析したところ、カルシニューリンの脱リン酸化活性はBcl-2/Baxの二量体形成に必須であることが判明した。これに加えて、Bcl-2キナーゼによりS70とS24がリン酸化された場合には、BaxがBcl-2から乖離し、特にS24のリン酸化ではBcl-2自体がアポトーシスを誘導する事実が明らかとなった(投稿中)様々な刺激によるアポトーシスを阻害する重要な因子としてBcl-2 family memberがこれまでに同定されている。これに加えて、Bcl-2キナーゼによりS70とS24がリン酸化された場合には、BaxがBcl-2から乖離し、特にS24のリン酸化ではBcl-2自体がアポトーシスを誘導する事実が明らかとなった(投稿中)
倭館を介在した朝鮮王朝における日本陶磁の受容とその影響

15世紀から19世紀の長きにわたって朝鮮王朝における日本人の居留地であった倭館は、日本の文物の流入口でもあった。本研究は、それらのなかでも陶磁器を対象とし、従来の「朝鮮→日本」という一方通行ではなく、「朝鮮⇔日本」という双方向的な視点をもとに、研究成果がきわめて少ない倭館を経由した日本陶磁、もしくは倭館を経由した中国陶磁の具体的な流通と影響を考察するものである。本研究の意義は、昨今、多文化的視点から語られはじめた韓国工芸史研究によりいっそう具体的な成果を提供し、両国の陶磁器の相互理解に寄与することにある。
敗血症における内因性大麻とエンドトキシン吸着療法の有用性の検討

敗血症状態の循環動態の形成に内因性大麻が関与している。内因性大麻にはアナンダマイドと2-AGの2種類が存在するが、血小板由来の2-AGが敗血症状態ではアナンダマイドの約100倍の濃度で血中に存在している。エンドトキシン吸着療法は、敗血症においてその病態形成の最も上流に位置するエンドトキシンを吸着することにより、炎症性メディエーター産生のカスケードを抑制することを目的に開発された。しかし、エンドトキシン吸着療法を敗血症患者に施行すると、開始直後より循環動態の改善を認めることが多く、また、グラム陰性桿菌によらないグラム陽性菌感染による敗血症状態の循環動態をも改善することより、エンドトキシン以外の何らかの敗血症における循環動態抑制因子を吸着除去する能性が想定されていた。その原因物質のひとつとして内因性大麻の関与が疑われていた。そこで、東京慈恵会医科大学DNA研究室にて開発されたGC/MSによる内因性大麻の一斉測定法により、敗血症患者のエンドトキシン吸着療法前後の内因性大麻の推移を測定した。エンドトキシン吸着療法の前後で2-AGが有意に減少した。アナンダマイドは有意な減少をみせなかった。また、2-AGが有意に減少する場合には有意な血圧の上昇も伴うことより、敗血症性ショック状態の離脱にエンドトキシン吸着療法は有効であり、血圧上昇のメカニズムとして内因性大麻の吸着除去が起きていることを確認した。敗血症における血行動態を形成する原因のひとつとして内因性大麻の関与が示唆されている。動物実験においては,エンドトキシンを投与すると内因性大麻が上昇し、血行動態との間に相関関係のあることがわかってきた。そこで、健常人の内因性大麻の正常値を測定し、様々な周術期および敗血症患者の内因性大麻の推移を検討した。内因性大麻には、血小板由来の2-AGとマクロファージ由来のanandamideがあるが、両者ともに脂質メディエーターでありエイコサノイドの一種にあたる。従来より、プロスタグランジンをはじめとするエイコサノイドはガスクロマト質量分析により測定されている。当施設では、内因性大麻のガスクロマト質量分析法による測定方法を開発し、健常成人の内因性大麻の正常値を決定した。つづいて、敗血症患者の内因性大麻の推移を計測し、エンドトキシン吸着療法の前後で内因性大麻がどのように変化するか検討した。敗血症患者の内因性大麻の産生量は亢進し、高値が遷延していることが判明した。また、エンドトキシン吸着療法の前後では、内因性大麻が減少する結果を得た。特に、エンドトキシン吸着療法に伴い、循環動態が改善し、敗血症性ショックが改善した症例において2-AGの著名な減少がおこることが分かった。現在は、敗血症の起因となる病態のちがい、基礎疾患、起因菌による内因性大麻の推移について症例を重ね検討中である。また、基礎的な検討として、比較的手術の侵襲が少なく健常人の婦人科疾患の周術期、手術侵襲の強い食道癌の周術期の内因性大麻の推移と敗血症患者の周術期の推移を比較検討し、敗血症の病態の把握、治療法の開発をしていく予定である。内因性大麻の敗血症時の血行動態への関与が指摘されているが、通常の周術期の推移については不明である。そこで、ガスクロマト質量分析法を用いた内因性大麻および酸化ストレスの指標であるイソプロスタン一斉分析法により、周術期の内因性大麻と酸化ストレスの推移について検討を行った。現在までのところ、それぞれアナンダマイド242±270.15(pg/ml)、2-Aracchydonylglyceol(2-AG)1.85±0.75(ng/ml)、8-epi-prostaglandin F2α(イソプロスタン)169.46±49.76(pg/ml)と正常値が決定されている。今回は、生体侵襲の程度が異なる病態として、子宮筋腫、食道癌、敗血症患者の周術期の推移について比較した。さらに、どのような病態にPMXの効果があるのかについて敗血症患者と子宮筋腫、食道癌患者の周術期の内因性大麻と酸化ストレスの関係から検討を行った。周術期の内因性大麻の推移は、アナンダマイドは子宮筋腫=食道癌=敗血症であり、2-AGは子宮筋腫<食道癌<敗血症の順であった。PMXにより昇圧した症例では、2-AGの有意な低下を認めた。周術期のイソプロスタンは子宮筋腫、食道癌、敗血症の順に高くなる傾向が認められ、敗血症では高値が遷延した。敗血症患者と食道癌患者の集中治療開始時のイソプロスタンは同程度であるが、経過とともに敗血症患者のイソプロスタンが上昇した。敗血症患者は強い酸化ストレスが遷延した状態にあり、敗血症の循環動態の形成には内因性大麻のなかでも2-AGの関与が大きい。敗血症患者は強い酸化ストレスの状態にあり、敗血症の循環動態の形成には内因性大麻のなかでも2-AGの関与が大きい。酸化ストレスの軽減を目的とする治療や、2-AGの除去を目的としたPMXの使用は敗血症の治療に有望である敗血症状態の循環動態の形成に内因性大麻が関与している。

内因性大麻にはアナンダマイドと2-AGの2種類が存在するが、血小板由来の2-AGが敗血症状態ではアナンダマイドの約100倍の濃度で血中に存在している。エンドトキシン吸着療法は、敗血症においてその病態形成の最も上流に位置するエンドトキシンを吸着することにより、炎症性メディエーター産生のカスケードを抑制することを目的に開発された。しかし、エンドトキシン吸着療法を敗血症患者に施行すると、開始直後より循環動態の改善を認めることが多く、また、グラム陰性桿菌によらないグラム陽性菌感染による敗血症状態の循環動態をも改善することより、エンドトキシン以外の何らかの敗血症における循環動態抑制因子を吸着除去する能性が想定されていた。その原因物質のひとつとして内因性大麻の関与が疑われていた。そこで、東京慈恵会医科大学DNA研究室にて開発されたGC/MSによる内因性大麻の一斉測定法により、敗血症患者のエンドトキシン吸着療法前後の内因性大麻の推移を測定した。エンドトキシン吸着療法の前後で2-AGが有意に減少した。アナンダマイドは有意な減少をみせなかった。また、2-AGが有意に減少する場合には有意な血圧の上昇も伴うことより、敗血症性ショック状態の離脱にエンドトキシン吸着療法は有効であり、血圧上昇のメカニズムとして内因性大麻の吸着除去が起きていることを確認した。
近現代インドのユダヤ教徒のライフ・ヒストリーと「国民国家」

本研究は、近現代インドにおけるユダヤ教徒のライフ・ヒストリーの収集・分析を通じて、イギリス支配の解体、インド・パキスタンの独立、イスラエルの建国という流れのなかで、彼らが新たな「国民国家」の成立をどのように受けとめ、いかに対応したのかを分析することを目的としている。インドに長年定着してきたユダヤ教徒コミュニティにとって、インドとイスラエルという国民国家の創設や国民概念をめぐる議論が何を意味したのかを、自伝・回想録・書簡・文学作品、聞き取り調査などをもとに考察する。2018年度は、イギリス・インドで史資料収集を行うとともに、本研究に関して国内外の研究者と活発な情報・意見交換を行った。まず5月に研究代表者(井坂理穂)、研究協力者(小磯千尋、鶴見太郎)で打ち合わせを行い、代表者がインドのユダヤ教徒コミュニティに関する研究動向について報告した。7月末には代表者がロンドンで史資料収集を行い、9月には代表者、協力者がともにインド西部のムンバイー、プネー、アリバーグでユダヤ教関連施設・組織を訪れ、史資料収集を行うとともに、ライフ・ヒストリーの聞き取り調査に向けた準備を行った。これらの海外調査を通じて、インドのユダヤ教徒たちの間での「自分たち」をめぐる語りが、インド・イスラエル双方の国内情勢や外交関係に加えて、よりグローバルな政治・社会変化と密接に連関するありさまが明らかになった。このほか、7月には代表者がパリで開催されたヨーロッパ南アジア学会で、インドのユダヤ教徒女性たちに関する報告を行い、関連するテーマを扱う研究者たちとの交流を深めた。また、2019年3月に東京大学・南アジア研究センターで代表者が国際ワークショップを組織し、インドのユダヤ人教徒コミュニティについての研究で知られるYulia Egorova氏(Durham University)を招聘して情報・意見交換を行った。1年目のイギリス、インドにおける史資料収集は順調に進み、ライフ・ヒストリーの聞き取り調査のための準備も進展した。すでにインド西部の「ベネ・イスラエル」コミュニティに属する複数の個人・家族に対する聞き取りを始めており、それらの結果をもとに、今後さらに詳細な聞き取り調査を行う予定である。また、学会参加やワークショップ企画などを通じて、インドのユダヤ教徒以外の宗教的マイノリティについて、あるいはインド以外の地域のユダヤ教徒について研究を行ってきた研究者など、関連するテーマを扱う幅広い分野の研究者と情報・意見交換を行った。こうした学術交流は、3年目に予定されている国際ワークショップにつながることが期待される。なお、これまでに収集した史資料については、代表者、協力者が各自で分析を始めており、2年目以降はこれらをもとにした学会報告や論文執筆などを準備する。2019年度は、研究代表者・研究協力者間の打ち合わせを行ったうえで、8月にイスラエルで史資料収集、及び聞き取り調査を行う。イスラエルに住むインド出身の「ベネ・イスラエル」「バグダーディー」両コミュニティの人々を対象として、移住の背景や生活・意識の変化、インドとのつながり、「故郷」をめぐる認識などに着目しながら、彼らの語りを収集する。また、5月初めには研究代表者がインドを訪れ、デリーを中心に史資料収集を行う。同年度には、これらの調査とあわせて、研究成果をまとめる作業を進める。7月には代表者がバンコクで開催されるAAS-in-Asia会議に参加し、20世紀前半インドのユダヤ教徒コミュニティの帰属意識に関する報告を行う。また、これまでに集めた史資料をもとに論文執筆に取りかかる。このほか、翌年度の国際ワークショップ開催に向けて、国内外の研究者との協議を進める。本プロジェクトの最終年度となる2020年度は、研究代表者、協力者が再びインド西部を訪れ、聞き取り調査を行う。また、9ー10月に開催される日本南アジア学会において、本プロジェクトの成果をもとにした研究報告を行う予定である。さらに、海外から研究者を招聘し、国際ワークショップを開催し、インド以外の地域のユダヤ教徒に関する研究を行っている研究者も交えて、ユダヤ教徒のライフ・ヒストリーからみた「国民国家」をテーマに議論を行う。このワークショップでの報告を踏まえて、雑誌論文あるいは報告書の出版に向けた準備を進める。

また、2019年3月に東京大学・南アジア研究センターで代表者が国際ワークショップを組織し、インドのユダヤ人教徒コミュニティについての研究で知られるYulia Egorova氏(Durham University)を招聘して情報・意見交換を行った。1年目のイギリス、インドにおける史資料収集は順調に進み、ライフ・ヒストリーの聞き取り調査のための準備も進展した。すでにインド西部の「ベネ・イスラエル」コミュニティに属する複数の個人・家族に対する聞き取りを始めており、それらの結果をもとに、今後さらに詳細な聞き取り調査を行う予定である。また、学会参加やワークショップ企画などを通じて、インドのユダヤ教徒以外の宗教的マイノリティについて、あるいはインド以外の地域のユダヤ教徒について研究を行ってきた研究者など、関連するテーマを扱う幅広い分野の研究者と情報・意見交換を行った。こうした学術交流は、3年目に予定されている国際ワークショップにつながることが期待される。なお、これまでに収集した史資料については、代表者、協力者が各自で分析を始めており、2年目以降はこれらをもとにした学会報告や論文執筆などを準備する。2019年度は、研究代表者・研究協力者間の打ち合わせを行ったうえで、8月にイスラエルで史資料収集、及び聞き取り調査を行う。イスラエルに住むインド出身の「ベネ・イスラエル」「バグダーディー」両コミュニティの人々を対象として、移住の背景や生活・意識の変化、インドとのつながり、「故郷」をめぐる認識などに着目しながら、彼らの語りを収集する。また、5月初めには研究代表者がインドを訪れ、デリーを中心に史資料収集を行う。同年度には、これらの調査とあわせて、研究成果をまとめる作業を進める。7月には代表者がバンコクで開催されるAAS-in-Asia会議に参加し、20世紀前半インドのユダヤ教徒コミュニティの帰属意識に関する報告を行う。また、これまでに集めた史資料をもとに論文執筆に取りかかる。このほか、翌年度の国際ワークショップ開催に向けて、国内外の研究者との協議を進める。本プロジェクトの最終年度となる2020年度は、研究代表者、協力者が再びインド西部を訪れ、聞き取り調査を行う。また、9ー10月に開催される日本南アジア学会において、本プロジェクトの成果をもとにした研究報告を行う予定である。さらに、海外から研究者を招聘し、国際ワークショップを開催し、インド以外の地域のユダヤ教徒に関する研究を行っている研究者も交えて、ユダヤ教徒のライフ・ヒストリーからみた「国民国家」をテーマに議論を行う。このワークショップでの報告を踏まえて、雑誌論文あるいは報告書の出版に向けた準備を進める。2018年度のインド出張に際して、研究協力者1名が他の資金を利用したことから、その余剰分を2019年度に回し、研究代表者が本研究の成果を海外の学会で報告するための費用にあてる。
腫瘍微小環境を調節するG蛋白質共役受容体と4回膜貫通蛋白質とのクロストーク

炎症性背景をもつ発癌モデルとして内膜症と明細胞腺癌とにおける炎症性微小環境変化を解析した.G蛋白質共役受容体CXCR3を解析したところ,3つの変異体がヒト組織で確認された.定性解析の結果,CXCR3Aは内膜症,癌両者で上昇していた.CXCR3-altは癌で特異的に発現し,CXCR3Bは抑制されていた.CXCL11,CXCL4の発現パターンは各々CXCR3-alt,CXCR3Bと相関した.局在解析では,CXCR3-altは腫瘍血管に,CXCR3Bは正常血管や内膜症血管にシグナルが認められた.以上の結果,G蛋白質共役受容体CXCR3は変異体により発現組織・細胞が異なり,そのリガンド環境も疾患によって異なることが示唆された.CXCR3Bでは抑制性,CXCR3-altでは亢進性シグナルが作動すると予想された.今回期間内では変異体依存性シグナルと4回膜貫通蛋白(TM4)との関連を明らかに出来なかったが,今後は細胞レベルでG蛋白質共役受容体シグナルを介した浸潤・移動能調節機構にインテグリン/TM4がどう応答するか解析する予定である.炎症性背景をもつ発癌モデルとして内膜症と明細胞腺癌とにおける炎症性微小環境変化を解析した.G蛋白質共役受容体CXCR3を解析したところ,3つの変異体がヒト組織で確認された.定性解析の結果,CXCR3Aは内膜症,癌両者で上昇していた.CXCR3-altは癌で特異的に発現し,CXCR3Bは抑制されていた.CXCL11,CXCL4の発現パターンは各々CXCR3-alt,CXCR3Bと相関した.局在解析では,CXCR3-altは腫瘍血管に,CXCR3Bは正常血管や内膜症血管にシグナルが認められた.以上の結果,G蛋白質共役受容体CXCR3は変異体により発現組織・細胞が異なり,そのリガンド環境も疾患によって異なることが示唆された.CXCR3Bでは抑制性,CXCR3-altでは亢進性シグナルが作動すると予想された.今回期間内では変異体依存性シグナルと4回膜貫通蛋白(TM4)との関連を明らかに出来なかったが,今後は細胞レベルでG蛋白質共役受容体シグナルを介した浸潤・移動能調節機構にインテグリン/TM4がどう応答するか解析する予定である.「研究の目的」腫瘍の浸潤転移機構には、腫瘍細胞と宿主とのクロストークの解明が不可欠である。近年,病巣周囲へ動員される骨髄由来の血管内皮前駆細胞や,骨髄系単球細胞,間葉系細胞の特性解明がすすむにつれ,腫瘍炎症性微小環境の役割は新たな展開を見せている。なかでも腫瘍の浸潤や血管新生を促進させるサイトカイン・ケモカインシグナルが果たす役割は大きく、腫瘍がサイトカイン・ケモカインを利用して宿主に対し、浸潤好性環境へとリモデリングを促すことが、様々な研究を通して明らかになってきた。申請者はこれまで、血管作用を有するG蛋白質共益受容体(GPCR)の解析を行ってきた。その中で、GPCRの下流にある調節因子RGS5が腫瘍血管特異的に高発現することをヒト腫瘍で初めて明らかにした(Furuya M et al, J Pathol2004).またGPCRのなかでも、IFN-γ誘導性ケモカインとその受容体CXCR3が、実は腫瘍細胞自身においてオートクラインに働き腫瘍細胞の増殖や浸潤能を亢進させている可能性を発表してきた(Furuya M etal, Cancer2005,Hum Pathol2007).解析の結果から、ある種の腫瘍は細胞表面にCXCR3を発現しており、自らあるいは周囲細胞からのIFN-・誘導性ケモカイン分泌を促すことで炎症環境を亢進させながら、それを巧みに利用して腫瘍進展を果たしていると予想される結果が腎癌や卵巣癌で得られた。「研究の成果」本年度申請者らは、当施設で施行された卵巣腫瘍手術検体を網羅的にシークエンス解析し、腫瘍組織で発現しているCXCR3には、正常卵巣に比較して野生型CXCR3とは異なる配列が強く認められることを突き止めた。そのうち一つは2004年に発表された変異型と同一であった(Ehlert JE, J Immunol. 2004).この結果から、卵巣腫瘍におけるCXCR3シグナルは抗腫瘍、抗血管新生抑制効果に障害をきたしていることが強く示唆される。解析した正常卵巣では蛋白レベルにおいて変異型は殆ど認められないが、卵巣癌検体では5例中3例に変異型が認められ、うち1例は全体に変異型にシフトしていた。さらに卵巣癌細胞株においては5例中5例全てに変異型が認められた。「研究の展望」この結果から、腫瘍におけるIFN-γ誘導性炎症誘導は卵巣癌において異常なシグナル経路を活性化していることが予想される。変異型は従来のGPCR構造をもたず、4-5回膜貫通蛋白にとどまると考えられることから、リガンド刺激に対して異なる反応を示すことや細胞内局在が通常と異なる可能性が考えられる。免疫染色においても殆どの卵巣腫瘍でCXCR3の局在が細胞質であること、卵巣癌細胞株においても局在が細胞質主体のものが6例中3例に認められることから、今後はその意義を理解するために、CXCR3の野生型と変異型の違いを遺伝子導入、ノックダウン系を用い、機能解析を行っていく。卵巣がん検体多数症例にてCXCケモカイン受容体CXCR

3変異型の意義を追求するべくmRNAレベルと蛋白レベルでの発現変化の解析を終えた.Q-PCRの結果,古典的CXCR3にあたるCXCR3AとそのリガンドのCXCL11は卵巣癌で上昇しており,以前我々が発表した結果が統計的に証明された.CXCR3altは卵巣癌で特異的に発現しているが子宮内膜症や正常卵巣では殆どが感度以下であった.一方,CXCR3Bは正常卵巣で高値をとる例が多いのに対し、殆どの卵巣癌症例で抑制されていた.蛋白レベルでも癌症例ではCXCR3Aの位置するバンドより約5KDa下にCXCR3 altと思われるバンドが確認され,Q-PCRの結果を支持するものであった.CXCR3Bは現在特異的な抗体がなく証明は今後の課題である.現在すすめている局在解析から,内膜症合併卵巣癌症例において移行部でCXCR3Aは癌細胞に強く発現するのに対しCXCR3Bの発現が抑制されており,一方CXCR3 altは癌間質や腫瘍血管に好んで発現する傾向が在ることが見出された.後者は癌症例のあいだでも発現差が大きいことから更に局在解析を詳細に行う予定である.いずれの変異型の発現も認められない卵巣癌株に各バリアントを遺伝子導入したものが近々完成するので,今後は細胞レベルでの各変異体の役割を明らかにする.卵巣癌検体多数症例にてG蛋白質共役受容体であるCXCケモカイン受容体CXCR3変異型の意義を解明するためmRNA/蛋白レベルでの発現解析を施行した.Q-PCRの結果,古典的CXCR3にあたるCXCR3AとそのリガンドCXCL11は卵巣癌で上昇していた.CXCR3-altは卵巣癌で特異的に発現し,子宮内膜症や正常卵巣では殆どが感度以下であった.一方,CXCR3Bは正常卵巣や内膜症で高値をとる例が多いのに対し,殆どの卵巣癌症例で抑制されていた.CXCR3BのリガンドCXCL4も癌で発現が低下していた.CXCL11の発現はCXCR3-altの高い癌症例で有意に高く,逆にCXCL4の発現はCXCR3Bの低い癌症例で有意に低い傾向が示された.Western blotによる蛋白解析においても癌症例ではCXCR3AとCXCR3-altが他群に比べて有意に発現が強く,CXCR3Bは正常卵巣や内膜症の発現が癌に比較して高度であった.In situ hybridizationを用いた局在解析から,CXCR3Aは癌細胞に強く発現するのに対しCXCR3B,CXCR3-altは癌間質や腫瘍血管に好んで発現する傾向が見出された.内膜症合併卵巣癌においてこれらのリガンドや変異型の発現は内膜症と癌の中間レベルを示した.以上の結果から,内膜症と卵巣癌の炎症性微小環境の違いはCXCR3変異型とそのリガンドによって特徴づけられる事が明らかになった.今後,内膜症を母地とする卵巣癌におけるCXCケモカイン-CXCR3受容体axisの変化を病理組織学的に検討するとともに,これらのG蛋白質受容体シグナルが発癌過程でどのように癌化や炎症に関与するか,解明していく予定である.また受容体変異が癌浸潤や炎症細胞浸潤を調節することが強く示唆されたことから,細胞骨格・浸潤に重要なインテグリン発現に関わる4回膜貫通蛋白質とどのように関わるのか,本課題の後半部について今後ひきつづき解析を進める予定である
HfS2を用いた原子層厚ヘテロ接合による超低消費電力デバイス

超低消費電力デバイスへの応用へ向け、二硫化ハフニウム(HfS2)を用いたファンデルワールス(vdW)ヘテロ接合によるトンネルトランジスタ(TFET)の開発を行った。前年度までに動作を確認しているMoS2/HfS2 vdWヘテロ接合を有するTFET構造に対し、より詳細な特性評価を進め、得られた知見をもとに特性改善のための構造改善を試み、素子性能を向上させた。まず、過去に作製したTFETで観測された電流特性における5 V以上の大きなヒステリシスを改善するためFET構造で有効であったハフニア絶縁膜によるパッシベーションを試み、その効果でヒステリシスを0.5 V程度まで抑制できることを示した。これに加え高真空中での測定を行うことでヒステリシスを0.1 V以下まで削減することが出来た。これらの結果より、vdWヘテロ構造デバイスにおいても大気中における気体分子の吸着が電流特性の安定性に対して大きな影響を及ぼすことを示した。真空中低温下での電流測定から、通常のMOSFETと比較して温度依存性が弱く異なった挙動をすることが確認された。これはバンド間トンネルを示唆する傾向であると考えている。ソース/ドレイン電極とゲート電極の対向面積を削減しリーク電流を抑制する目的で、バックゲートを高濃度ドープSi基板からパターニングしたNi電極に変更した。これによりゲート絶縁膜の高誘電率化および薄膜化が可能となり、ゲート絶縁膜容量をこれまでの4倍に増加させることが出来た。その結果SS値は2 Vから300 mVまで改善され、素子の駆動電圧自体も1/3に削減された。一方で界面準位密度は未だ10の13乗台と高い値をもっていることが示唆され、今後さらに特性を改善し60 mV/decを下回る急峻な電流特性を実現するためには、チャネル層厚の数原子層までの削減に加えて界面準位密度の低減が課題であることを明らかとした。29年度が最終年度であるため、記入しない。将来の超低消費電力デバイス応用を目指して、二硫化ハフニウム(HfS2)を用いた原子層状物質のヘテロ接合を用いたトンネルトランジスタ(TFET)の開発へ向けて、要素技術の開発への取り組みと初期型デバイスの試作を行った。チャネルとなるHfS2の大気中での不安定性を解消するため、原子層堆積法により形成したHfO2膜による表面保護手法によって、バックゲート構造の電界効果トランジスタ(FET)構造における電流ヒステリシスや電流密度の継時劣化といった問題点を解決することが出来た。また、ソースとして用いるp-MoS2についても同様にFET構造を用いた特性評価を行い、TFET動作を想定したゲートバイアス印加時も十分な正孔濃度を維持していることを確認した。上記の各材料におけるデバイス作製技術と高分子材料であるPDMSを用いた位置合わせ転写プロセスを組み合わせて、p-MoS2/HfS2のファンデルワールス(vdW)ヘテロ構造を有するTFET構造を作製した。電流特性評価において、p-n接合に対する逆方向バイアス印加時にドレイン電流の増加を確認することが出来た。これにより、当初の目的であるHfS2をチャネルに用いたTFETの動作を初めて確認することができた。一方で超低消費電力デバイスに期待されるゲート電圧に対するドレイン電流増加の急峻性は達成できていないという点およびオン電流が想定よりも小さい事については今後の課題である。並行してデバイスシミュレーターによる性能予測を行った。ソースとしてWSe2やWS2といった材料を利用する事でデバイス性能の向上が見込まれるという知見が得られた。また、ドーピング濃度やチャネル層厚といった構造設計においても高性能化のための指針を得るに至っている。以上より提案デバイス実現のための基本構造作製および動作確認までを達成しており、今後性能向上を見込んだ開発を行うための技術基盤を固めることが出来た。まず、本研究の目的であったHfS2系ヘテロ接合構造を用いた素子動作についての確認がなされていることから、研究一年目の目標については達成されたと考えている。p型MoS2層単体での電流特性から、測定時のバイアス範囲でソースのp型伝導は維持されていることはバンド間トンネルによるキャリア注入を示唆しているが、これを明確にするには急峻な電流立ち上がりやその温度依存性といった裏付けデータのさらなる取得が必要であるといえる。電流密度の増加等も今後の課題である。上記を含めた特性の改善へ向けて、材料選択・構造設計についてもTCADシミュレーションによって今後の指針を定めることが出来た。これにより平成29年度に素子特性向上のための研究を遂行するにあたって、必要となる知見が得られており順調に推移しているといえる。上記の状況を考慮すると本研究は概ね当初の想定通り順調に進行していると考えている。

これらの結果より、vdWヘテロ構造デバイスにおいても大気中における気体分子の吸着が電流特性の安定性に対して大きな影響を及ぼすことを示した。真空中低温下での電流測定から、通常のMOSFETと比較して温度依存性が弱く異なった挙動をすることが確認された。これはバンド間トンネルを示唆する傾向であると考えている。ソース/ドレイン電極とゲート電極の対向面積を削減しリーク電流を抑制する目的で、バックゲートを高濃度ドープSi基板からパターニングしたNi電極に変更した。これによりゲート絶縁膜の高誘電率化および薄膜化が可能となり、ゲート絶縁膜容量をこれまでの4倍に増加させることが出来た。その結果SS値は2 Vから300 mVまで改善され、素子の駆動電圧自体も1/3に削減された。一方で界面準位密度は未だ10の13乗台と高い値をもっていることが示唆され、今後さらに特性を改善し60 mV/decを下回る急峻な電流特性を実現するためには、チャネル層厚の数原子層までの削減に加えて界面準位密度の低減が課題であることを明らかとした。平成28年度までに作製したTFETの特性における最大の課題はサブスレッショルドスロープの値が大きく、トンネルトランジスタに特有の急峻な電流立ち上がりが確認されていないという点である。よって今後の研究においては、これを解決するための取り組みを中心に行う。SSを劣化させる主要はゲートスタック構造中に存在する界面トラップ準位への電子捕獲であると考えられる。この影響を低減することにより、急峻性の実現が見込まれる。具体的には以下二つの方針による。一つは、界面トラップ準位の密度を低減させる作製プロセスの開発である。界面トラップ準位密度は、半導体の表面処理や作製後のアニールにより顕著な低減が見込まれる。三次元結晶系での知見・評価手法を利用しつつ最適な作製プロセスを探り、界面トラップ順位を低下させることを目指す。二つ目の手法はデバイス設計からのアプローチである。同じ密度の界面トラップ準位が存在する場合でも、ゲート絶縁膜の薄層化・高誘電率化によりゲート容量を増加させることで、特性の劣化を大幅に抑制できる。半導体膜厚を含め最適な素子設計を理論・実験の双方から行っていく。急峻なSSを実現した後にはオン電流の向上へ向けた取り組みを進める。これはWSe2/HfS2に代表される禁制帯の重なりが小さなヘテロ構造の利用、チャネル層厚の薄層化、ソースドーピング濃度の最適化等による。基本的な方針はシミュレーションにより明らかとなっているため、これを実験的に実現していく。29年度が最終年度であるため、記入しない。
多小胞体(MVB)形成関連タンパク質を中心とした細胞内小胞輸送制御機構の研究

Multivesicular body(MVB、多小胞体)は、その内部に多数の小胞を含むオルガネラであり、エンドソーム膜が陥入し内側に小胞が出芽することで形成される。内部小胞への物質選別は、細胞質からの確実な隔離と、リソソーム内腔への輸送に重要な役割を担う。本研究は、MVB形成に関与するアダプタータンパク質Alixとその相互作用因子に着目し、MVB形成の分子基盤を解明することを目的とした。昨年度、Alixの相互作用因子としてCHMP4a、4b、4cを同定し、CHMP 4bのエンドソーム経路で果たす役割を報告したが、本年度は、CHMP4の相互作用因子としてCHMP6に着目した。ヒトCHMPファミリーは8つのタンパク質から成るが、CHMP6は唯一、ミリストイル化のコンセンサス配列をもつ。放射性ラベルしたミリスチン酸を用い、CHMP6が細胞内でミリストイル化されることを示し、ミリストイル化部位の点変異体と野生型の局在を細胞生物学的、生化学的に解析したところ、CHMP6はミリストイル化により効果的に膜移行することが判明した。また、CHMP6はCHMP4に加え、MVB形成で機能するESCRT-II複合体の構成因子EAP20と直接結合した。CHMP6の過剰発現により、トランスフェリン受容体のリサイクリング経路とエンドサイトーシスされたEGFの分解経路の破綻、ユビキチン化タンパク質の蓄積が観察された。これらの結果は、CHMP6がESCRT-IIのアクセプターとして機能し、他のCHMPファミリーを効果的に膜に動員させている可能性を示唆している。また、細胞性粘菌のAlixホモログを遺伝子破壊したところ、低カルシウム濃度およびアルカリ性の環境下で子実体の形成率が顕著に低下した。細胞外環境応答と小胞輸送経路のクロストークが予想され、今後の研究の発展が期待される。エンドソーム/リソソーム経路は、物質の輸送と分解において重要な役割を担う。Multivesicular body(MVB、多小胞体)は、エンドソーム外膜が内腔側に出芽し生じた多数の小胞をもつエンドソームの形態学的呼称である。MVB形成により、エンドソーム膜に存在する因子は細胞質と隔離され、リソソーム内腔へと選別輸送される。本研究は、MVB形成を制御するアダプタータンパク質Alixとその相互作用タンパク質に着目し、MVB形成の分子基盤を解明することを目的としている。研究計画に沿い、Alixの相互作用因子であるALG-2とendophilinの結合領域が異なること、ALG-2結合領域がAlixのカルボキシ末端領域の細胞内における斑点状の分布に必要であることを明らかにし、報告した。また、酵母Vps32/Snf7のヒトホモログCHMP4a、4b、4cがAlixのアミノ末端領域に直接結合することをin vitro結合実験により示した。Northern Blot解析の結果、CHMP4の中でCHMP4bの発現量が有意に高く、とくに心臓、骨格筋で豊富に発現していることが明らかとなった。HeLa細胞に発現させたCHMP4bは、斑点状の局在を示し、エンドソームマーカーの分布と一部、一致した。CHMP4bの過剰発現により、細胞質に存在するAlixがCHMP4bの局在する膜区画に動員されること、ユビキチン化タンパク質が蓄積すること、エンドサイトーシスされたEGFの消失が抑制されることを見出し、報告した。現在、Alix、CHMP4bのさらなる相互作用タンパク質について解析をすすめており、MVB形成制御複合体の形成機構の解明につながることが期待される。また、それらの因子の様々な変異体を過剰発現させた細胞における物質輸送の追跡は、MVB形成が果たす生理的意義に新たな視点を加えられることも予想され興味深い。

また、細胞性粘菌のAlixホモログを遺伝子破壊したところ、低カルシウム濃度およびアルカリ性の環境下で子実体の形成率が顕著に低下した。細胞外環境応答と小胞輸送経路のクロストークが予想され、今後の研究の発展が期待される。
トランスクリプトームとプロテオームを用いたレイシガイの卵嚢の解析とその応用

レイシガイのトランスクリプトーム解析を行い、卵嚢形成期の卵嚢形成器官(capsule gland)に特異的かつ高発現する遺伝子を探索したところ、ヨーロッパバイ貝のegg capsule proteinのホモローグが見いだされた。そのうち、発現量が特に高い2種類(特異的発現遺伝子上位top2)について、抗ペプチド抗体を作製し、卵嚢のパラフィン切片を用いて、免疫染色を行った。その結果、2種類のタンパク質とも、卵嚢に存在することが判明した。この結果はこれらの遺伝子産物が卵嚢形成器官でつくられ、卵嚢中に蓄積されることを意味しており、これらがいわゆるレイシガイの卵嚢タンパク質であることが判明した。そのため、これらをTb-egg capsule protein-1 (Tb-ecp1)およびTb-egg capsule protein2 (Tb-ecp2)と命名した。興味深いことに、Tb-ecp1は卵嚢の接合部の芯部分に特に分布したのに対し、Tb-ecp2は卵嚢全体の特に表層部に分布した。この結果から、複数あるegg capsule protein群は複雑な卵嚢を形成するプロセスの中で、それぞれが重要な役割を果たす可能性が明らかになった。一方、同様に卵嚢形成期の卵嚢形成器官に特異的かつ高発現する遺伝子として見出されたアミン酸化酵素についても、同様に抗ペプチド抗体を作製し、卵嚢のパラフィン切片を用いて、免疫染色を行った。その結果、卵嚢全体に比較的一様な染色が見られた。上記レイシガイのegg capsule protein群は塩基性アミノ酸であるリジンの含量が約10%と高く含まれるのが特徴であるが、この結果からみて、レイシガイの卵嚢は、リジンのアミノ基が酸化的に架橋重合することで、強度を保つとともに微生物からの分解を防いでいるものと思われる。レイシガイを天然から採集し、実験室内の水槽で飼育した。その際、餌であるムラサキイガイを大量に与え、かつ適切な基盤(イワガキなどの殻)を与えることで、レイシガイの産卵、卵塊の形成が実験水槽内でおこることを発見した。基盤に蝟集し、産卵行動を行いつつあるレイシガイの雌を解剖したところ、卵管に付属し、特異なふくらみのある部分を見出し、これを成熟雌の卵嚢形成に関与する器官(capsule gland)と同定した。そこで、この器官からRNAを抽出し、トランスクリプトーム解析を行った。対照として、外套膜やえら、幼生などからもRNAを抽出し、トランスクリプトームを取得した。まず、卵嚢形成器官(capsule gland)において、大量に発現する(top10%)遺伝子群を選抜した。ついで、対照組織で発現していない卵嚢形成器官特異的発現遺伝子群を選抜した。さらにN末端にシグナルペプチド配列を有する分泌タンパク質をコードする遺伝子群を選抜した。その集団をホモロジー検索した結果、ヨーロッパバイ貝で報告されたegg capsule proteins (ecps、Wasko et al. macromolecules, 2015 )と相同性のある遺伝子群を見いだした。この結果から、レイシガイの卵嚢は円筒上で透明であり、石灰化しばねのような構造を有するヨーロッパバイの卵嚢と外見上大きく異なるものの、卵嚢形成タンパク質の主成分の配列には相同性があることが明らかになった。当初は卵嚢形成に関与する組織を同定し、卵嚢形成に関わる遺伝子群を明らかにするにはいくつもの困難なプロセスを乗り越えることが必要と想定していた。しかし、産卵を行いつつある雌個体の卵管周囲は異常に肥厚し発達しており、その部分が卵嚢形成に関与する可能性が高いことが判明した。そこで、この部分を卵嚢形成器官であると同定し、トランスクリプトーム解析を行った。その結果、この器官の発現量のトップと3番目の遺伝子がヨーロッパバイ貝のegg capsule proteinと相同遺伝子であることが判明した。トランスクリプトームの結果も、この器官が卵嚢形成に主要な役割を果たすと考えて矛盾がないことが明らかになった。レイシガイの卵嚢形成器官(capsule gland)で見出された、ヨーロッパバイ貝のegg capsule protein(ecps, Wasko et al., macromolecules, 2015)のホモローグには4種類あり、2種がecp1ホモローグ,他の2種がecp2/3のホモローグであった。興味深いことに、4種ともリジンの含量が10%以上と高いことが際立った特徴であった。リジン含量が高いことからリジン同士の架橋が卵嚢形成に関与すると想定し、レイシガイの卵嚢形成器官に特異的に大量に発現する酵素を探索したところ、1種のアミン酸化酵素が卵嚢形成器官特異的、かつきわめて大量に発現していることが判明した。このアミン酸化酵素はシグナルペプチド配列を有する分泌性タンパク質であり、銅結合アミン酸化酵素ドメインを有していた。レイシガイは卵嚢形成時期に蝟集し、その周辺にはヒトデなどの姿はあまりみえない。そこで、レイシガイの卵嚢形成器官に特異的に大量に発現する遺伝子で、レイシガイの蝟集や他の生物の忌避に関連する可能性のあるタンパク質をコードする可能性のある遺伝子を探索した。その結果、Nagai, H and Namikoshi, Mが報告したヒトデのrepellent protein(BAL43194.1,ヒトデ(Solaster dawsoni)が生産し、他のヒトデ(Asterina pectinifera)の忌避行動を引き起こすタンパク質)と高い相同性を有するタンパク質(レイシガイ卵嚢形成器官特異的ヒトデ忌避タンパク質相同タンパク質)をコードする遺伝子を見出すことができた。レイシガイ卵嚢形成器官

特異的ヒトデ忌避タンパク質相同タンパク質は、N末端にシグナルペプチド配列を持ち、TECPRドメイン(Beta propeller domein)を5個有していた。レイシガイが海中でまとまって卵嚢を形成し、レイシガイがその周辺に蝟集し、かつその周辺にヒトデなどが密に存在していないことは経験的に知られていたが、レイシガイの卵嚢がどのような成分からなり、その固化がどのように起こり、また蝟集や忌避にどのような分子が関与するかに関する情報は全くなかった。本研究による過去2年間の探索で、卵嚢の主形成成分と想定される4種類の候補タンパク質(レイシガイ卵嚢タンパク質)遺伝子を4種、およびその架橋に関与する可能性のあるアミン酸化酵素をコードする遺伝子(レイシガイ卵嚢特異的アミン酸化酵素)、およびレイシガイの蝟集または他の生物(ヒトデなど)の忌避に関与する可能性のあるタンパク質をコードする遺伝子(レイシガイ卵嚢形成器官特異的ヒトデ忌避タンパク質相同タンパク質)を見出すことができた。したがって、レイシガイの卵嚢形成器官のトランスクリプトーム解析に基づいて、関与する可能性のある分子を網羅的に探索するという意味において、現時点ではおおむね順調に進展していると思われる。ただし、それらの遺伝子産物が本当にレイシガイの卵嚢に存在し、想定通りの機能を持つかどうかの検証はできていない。また、蝟集または忌避に関与する可能性のある遺伝子産物も、その遺伝子がレイシガイの卵嚢形成部位に特異的にかつ驚くほど大量に発現すること、ヒトデの忌避タンパク質と高い相同性を有するというだけであり、候補の域を出ない。今後これらの存在と機能について、1年間追及していきたい。レイシガイのトランスクリプトーム解析を行い、卵嚢形成期の卵嚢形成器官(capsule gland)に特異的かつ高発現する遺伝子を探索したところ、ヨーロッパバイ貝のegg capsule proteinのホモローグが見いだされた。そのうち、発現量が特に高い2種類(特異的発現遺伝子上位top2)について、抗ペプチド抗体を作製し、卵嚢のパラフィン切片を用いて、免疫染色を行った。その結果、2種類のタンパク質とも、卵嚢に存在することが判明した。この結果はこれらの遺伝子産物が卵嚢形成器官でつくられ、卵嚢中に蓄積されることを意味しており、これらがいわゆるレイシガイの卵嚢タンパク質であることが判明した。そのため、これらをTb-egg capsule protein-1 (Tb-ecp1)およびTb-egg capsule protein2 (Tb-ecp2)と命名した。興味深いことに、Tb-ecp1は卵嚢の接合部の芯部分に特に分布したのに対し、Tb-ecp2は卵嚢全体の特に表層部に分布した。この結果から、複数あるegg capsule protein群は複雑な卵嚢を形成するプロセスの中で、それぞれが重要な役割を果たす可能性が明らかになった。一方、同様に卵嚢形成期の卵嚢形成器官に特異的かつ高発現する遺伝子として見出されたアミン酸化酵素についても、同様に抗ペプチド抗体を作製し、卵嚢のパラフィン切片を用いて、免疫染色を行った。
すばる望遠鏡広域銀河サーベイで探るニュートリノ質量

すばる望遠鏡(ハワイ)ではダークエネルギーの性質の解明やニュートリノの質量の測定を目指してPFS主焦点超広視野多天体分光器の開発が進んでいる。PFSプロジェクトは2021年に科学観測を開始する予定であり、本研究では解析パイプライン構築、コミッショニングへの参加を通して、PFSを完成させ、サイエンスデータ取得を行いこれまでの上限値(0.2eV以下)でのニュートリノ質量探索を行う。
眼内悪性リンパ腫に対する新規標的医薬の検討

Bruton型チロシンキナーゼ阻害剤(BTK阻害剤)は、眼内悪性リンパ腫に対する疾患特異的な標的治療として有効であるか検証するため、眼内悪性リンパ腫の疾患遺伝子であるCD79B細胞株に対するBTK阻害剤の有効性を確認し、免疫不全ラットにCD79B細胞株及び患者由来眼内悪性リンパ腫検体を眼内移植する。これらの患者由来モデル動物に対して、BTK阻害剤を内服投与し抗腫瘍効果を認めるかを検証する。
大気中水銀の降水による除去過程および沈着メカニズムの解明

水銀は極微量でヒトや野生生物に対し毒性を有する物質である。大気中水銀には0価のガス状水銀(GEM)、2価の反応性ガス状水銀(Hg(II):GOM)、粒子状水銀(PBM)がある。その95 %以上を占めるGEMは、水に溶けにくい為大気中での寿命が長く、全球を循環する。そのため水銀排出源の遠方でも高濃度に水銀が沈着することがある。大気中水銀は最終的に光化学反応により水に溶解しやすいGOMとなり、降水により除去される。GOMの降水による除去過程はレインアウトが主とされ、沈着量は降水量に依存する。しかし近年、自由対流圏からのGOMの取り込みが指摘され、降水のパターン(対流性降雨(積乱雲)、高地での降雨など)により沈着メカニズムや沈着量が異なると言われているが定説はない。本年度は、乗鞍岳、屋久島、蒜山、で調査を行った。乗鞍岳と屋久島の調査地点では、自由対流圏での降水中水銀の動態に注目した。岐阜県と長野県の県境に位置する、乗鞍岳(標高2,800 m)では、10 mmに(採水量可変)採水可能な降水採取装置を設置した。冬季には雪の閉ざされるために、夏季にしか調査は不可能であるが、夏季の降水中水銀濃度は1.16.3 ng/Lの間で変動した。屋久島においては、自由対流圏の高度である、標高1,300 m地点に降水採取装置を設置し、降水中の水銀濃度の変動パターンについて観測を行った。また、蒜山においては、林内と林外に降水採取装置を設置して、採水量毎の降水中水銀濃度の変動を検討した。また、林内と林外に複数の降水採取装置を設置し、同一地点での降水中水銀濃度の変動についても観測を行った。本研究課題で対象としている、自由対流圏高度の降水の観測ができた。また、林内と林外での降水中水銀の観測に着手し、観測するための体制が整った。次年度に向けての基盤を構築することができた、と考えている。今後、自由対流圏での観測をさらに続け、データの集積を行う。また、森林への降水中水銀の沈着量評価に本格的に着手する。あわせて、論文執筆に向けた準備を行う。2018年度に行う予定であった、屋久島および乗鞍での調査が、十分に行えなかったため、次年度使用額が生じた。2019年度に引き続いて調査を行う予定である。
1992年イギリス総選挙に関する研究

(1)選挙キャンペーン世論調査における政党支持の動向や主要政党のマニフェストを比較して、キャンペーンの選挙結果に及ぼした影響を探ってみた。保守党と労働党の二大政党間におけるマニフェストの大きな相違は見られなかった。世論調査ではサッチャー保守党長期政権に対する国民の不満や変化を求める世論を反映して、労働党優勢であった。これに危機感を抱いたメジャー首相率いる保守党は選挙戦中盤からなりふり構わない労働党に対する中傷やスキャンダルキャンペーンを展開した。特に、労働党はテレビでの党の広告番組でいわゆるヤラセ番組を放映するなど、大失態を演じ、取り返しのつかないダメ-ジをこうむってしまった(2)選挙結果とその分析選挙結果の地域的特性、社会的属性、社会的・経済的地位、労働組合員と住居形態と投票行動において、従来とは異なった現象が今回の選挙では明らかになった。特に、労働組合員と住居形態との関係では、サッチャー政権時代に行なわれた公営住宅政策によって公営住宅の払下げを受けた労働者階級の労働党支持から保守党支持へのスウイングは労働党の政権奪回戦略の根本的な見直しを迫るものとなりそうである。
「子どものストレス・チェック・リスト(国際版)」開発のための企画調査

本研究は、国際調査を実施する準備として行われた企画研究である。研究代表者は、いじめや不登校、さらには学級崩壊等の背景要因として重要な、子どものストレスやストレッサーを測定し、早期における教師からの働きかけに活用できるような「ストレス・チェック・リストの作成と、その活用法の検討を行ってきた。そして、暫定版としてのチェックリストを作り上げた。(平成79年度科学研究費成果報告書『集団所属に伴う子どものストレスに関する研究』)国際調査を企画した意図は、日本の子どものストレス状況(滝充「子どものストレスとその要因」『国立教育研究所研究集録』第36号、1998年、を参照のこと)の問題点を浮き彫りにするために、このチェックリストの国際版を作成し、他国との比較検討を加えることにより、日本の子どもを取り巻くストレス状況の特異性を明らかにしようというものである。本年度の研究では、その準備として、オーストラリアより二人の研究者を招き、日本の中学校を訪問させるとともに、調査の課題や方向性、具体的な調査のデザイン、今後の計画の打ち合わせ、を行った。平成11年秋には、調査票を確定し、日本とオーストラリアの双方で研究費を申請し、平成12年度に調査を実施して、比較分析を行っていく計画である。
ATP感受性Kチャネル開口薬による肝再生の促進

糖尿病症例では、肝切除後の肝再生の遅延ならびに肝機能障害の遷延、ひいては肝不全の出現頻度が高いがその機序は十分に解明されておらず、その対策も無い。本研究では種々の細胞の成長、増殖を促進するATP感受性Kチャネル開口薬の肝再生に及ぼす効果を検討し肝切除後肝再生を促進し、さらには糖尿病合併例における肝切除の安全性の向上を目指す。我々は平成19年度にMinoxidil、CromakalimなどのKチャネル開口薬は肝癌細胞株、HGF刺激下初代培養肝細胞、肝部分切除の前処置による肝再生を1020倍に亢進させKチャネル遮断薬であるGlibencramideにより濃度依存性に抑制されることを報告した。平成20年度は、自然発症2型糖尿病モデルラットであるOtsuka Long Evans Tokushima Otsukaラット(OLETF)を用い、対照ラットであるLETOと比較検討した。昨年のF344ラットの肝部分切除後の肝再生に対する促進と同様、OLETFおよびLETOラットに対しても肝部分切除後の肝再生を促進することが判明した。しかし、糖尿病ラット(OLETF)における肝切除術後の肝機能障害の遷延ならびに肝不全の出現は抑制できなかった。詳細な検討の結果、糖尿病ラットでは肝切除前より肝細胞酸化ストレスが増加しており、ミトコンドリアのNa勾配を維持し、ラジカル消去作用を有するある種のたんぱく質が肝切除後肝再生という更に酸化ストレスが増加する状況下においても誘導されること無く細胞障害が遷延することを見出した。本研究により、Kチャネル開口薬による肝再生促進の可能性のみならず、糖尿病患者における肝切除後肝障害の遷延のメカニズムを解明することができた。糖尿病症例では、肝切除術後の肝再生の遅延ならびに肝機能障害の遷延、ひいては肝不全の出現頻度が高いが、その機序は十分に理解されておらず、その対策も無い.本研究では、種々の細胞の成長、増殖を促進するATP感受性カリウム(K_<ATP>)チャネル開口薬の肝再生に及ぼす効果を検討し、肝切除後肝再生を促進、さらには糖尿病合併例における肝切除術後の安全性の向上と適応拡大を目指す.(実験)K_<ATP>チャネルによる肝細胞および肝癌細胞株の増殖の検討(in vitro).F344ラットから分取した初代培養肝細胞および各種ヒト肝癌細胞株におけるK_<ATP>チャネル開口薬ならびに遮断薬の細胞増殖への影響を検討した.使用する薬剤は、K_<ATP>チャネル開口薬としてpinacidil、Minoxidil、Cromakalimを使用し、遮断薬としてglibenclamideを使用した.(結果)初代培養肝細胞株にMinoxidil、CromakalimなどのK_<ATP>チャネル開口薬を添加しても定常状態ではDNA合成は亢進しなかった。一方、肝癌細胞株、HGFの添加や肝部分切除の前処置により肝再生は10-20倍に亢進し、K_<ATP>チャネル遮断薬であるglibenclamideにより濃度依存性に抑制された。したがって、正常肝細胞においても増殖刺激共存下であればK_<ATP>チャネル開口薬が肝再生を促進する可能性が示唆された.糖尿病症例では、肝切除後の肝再生の遅延ならびに肝機能障害の遷延、ひいては肝不全の出現頻度が高いがその機序は十分に解明されておらず、その対策も無い。