hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
書入をふまえた『浜松中納言物語』新校本の作成

1、諸本の本文の翻刻作業に取り組み、データ化を進めた。ただし、新校本において各本文をどのように対照するべきか、そのスタイルはまだ決定できていない。2、京都大学総合博物館勧修寺家旧蔵本を調査し、撮影を行った。3、書入の翻刻と各本の関係整理については、宮内庁書陵部蔵清水浜臣本・大阪府立中之島図書館不忍文庫本・早稲田大学図書館九曜文庫本(以前は兵庫県立神戸高等学校蔵)・刈谷図書館斯豆能耶旧蔵本・京都大学文学研究科図書館蔵岡村保孝本である。それぞれの書入を比較、検討し、清水浜臣本の流れを汲む諸本の整理を進めることができた。この成果の一部は東京大学文学部国語学研究室本をはじめとする諸本の書誌調査結果とあわせて、「『浜松中納言物語』書誌点描ー清水浜臣本書入・「貫之もの語」などー」(『宇部工業高等専門学校研究報告』第65号2019.3)にて報告した。岡村保孝本はすでにモノクロの複写物を購入していたのだが、京都大学にて実見したところ、何らかの基準をもって朱・墨の書き分けがされていることが判明した。また、清水浜臣の書入を書写してはいるものの、浜臣説を踏襲する意識はそれほど強くはなく、むしろ、自説を積極的に示している様相が確認できた。特に「各文の主語は誰なのか」について熱心に検討しており、『浜松中納言物語系譜』執筆に向けての基礎研究としての痕跡を辿ることができた。4、3やこれまでの成果を整理し、『新校本』の「諸本解説」の執筆を進めた。新校本のスタイルを決めかねていること・写本数点が未だに未調査で悉皆調査を終えられていないことが理由である。昨年度に引き続き、体調が万全でないため、長期の出張が実施できないでいる。さらに、勤務校において新カリキュラムがスタートしたが、旧カリキュラムも同時に実施しているため、授業時間が多く、時間を確保できなかった。新校本のスタイルを決定したい。焼失・所在不明・新写本も含めて、現在までに66点を知り得た。悉皆調査は完了していないものの、本文データはほぼ収集できているし、本文翻刻はずいぶんと進んでいる。本文対照のスタイルや、繁雑な書入情報の示し方を決定し、版下原稿を整えたい。今年度は写本調査に取り組んだ。調査先は岡山大学附属図書館小野文庫・東海大学付属図書館桃園文庫・東京大学文学部国語研究室・国文学研究資料館である。国文学研究資料館蔵のマイクロフィルムで調査した彰考館本(水戸藩松平斉昭旧蔵)については、「国立国会図書館蔵『浜松中納言物語目録』の依拠本(二)」(『宇部工業高等専門学校研究報告』第64号2018.3)にて本文・書入の特徴を報告した。該本はD類/乙類第三種本ではあるが、校訂者村上真澄による他本からの補入がある。その補入本文はいずれも、近世前期の善本が属するA類/甲類本の本文であった。D類/乙類第三種本にA類/甲類本文の補入を確認したのは、これが初めてである。さらに該本の丁数・裏表と『浜松中納言物語目録』記載の依拠本の丁数・裏表が一致することも、具体的に指摘した。該本の上部余白に掲出された語句と『目録』掲出語句も、多く一致を見せている。しかしながら、該本が小山田与清『浜松中納言物語目録』の依拠本である可能性は低い。そのように考察するのは、『彰考館図書目録附焼失目録』に注記「小山田本」がないので該本は小山田与清献納本ではないこと・該本に書肆須原屋茂兵衛の仕入印が存することによる。そこで、現時点では「彰考館が『浜松中納言物語目録』依拠本を失う→依拠本の姿を残した該本を書肆から入手した」と考えている。村上真澄は石見浜田藩士で、本居大平に学んだ。東京都立中央図書館蔵の村上真澄『古文類葉』を調査したところ、『浜松中納言物語』享受の様相が確認された。『古文類葉』寄贈主は石見出身の福羽逸人で、寄贈年は明治41年である。養父で国学者の福羽美静(天保2年-明治40年)旧蔵書と思しい。村上真澄及び『古文類葉』については今後、調査結果を報告する。体調不良により年度途中で所属機関の校務分掌の一部を辞し、担当の仕事を可能な限り抑えて、他の時間は通院と休養に充てた。そのため、当初計画していた調査のための出張・翻刻作業・データ処理に取り組めなくなってしまった。そのような中でも、購入した図書を参考に、新校本作成のレイアウト検討には努めた。また、享受の問題として、彰考館本(水戸藩松平斉昭旧蔵)の校訂者村上真澄の調査へと展開したことも、新校本作成の遅れの原因となってしまった。ただし、これはA類/甲類本との関わりへと繋がる重要なものなので、今後も調査に取り組みたい。

3、書入の翻刻と各本の関係整理については、宮内庁書陵部蔵清水浜臣本・大阪府立中之島図書館不忍文庫本・早稲田大学図書館九曜文庫本(以前は兵庫県立神戸高等学校蔵)・刈谷図書館斯豆能耶旧蔵本・京都大学文学研究科図書館蔵岡村保孝本である。それぞれの書入を比較、検討し、清水浜臣本の流れを汲む諸本の整理を進めることができた。この成果の一部は東京大学文学部国語学研究室本をはじめとする諸本の書誌調査結果とあわせて、「『浜松中納言物語』書誌点描ー清水浜臣本書入・「貫之もの語」などー」(『宇部工業高等専門学校研究報告』第65号2019.3)にて報告した。岡村保孝本はすでにモノクロの複写物を購入していたのだが、京都大学にて実見したところ、何らかの基準をもって朱・墨の書き分けがされていることが判明した。また、清水浜臣の書入を書写してはいるものの、浜臣説を踏襲する意識はそれほど強くはなく、むしろ、自説を積極的に示している様相が確認できた。特に「各文の主語は誰なのか」について熱心に検討しており、『浜松中納言物語系譜』執筆に向けての基礎研究としての痕跡を辿ることができた。4、3やこれまでの成果を整理し、『新校本』の「諸本解説」の執筆を進めた。新校本のスタイルを決めかねていること・写本数点が未だに未調査で悉皆調査を終えられていないことが理由である。昨年度に引き続き、体調が万全でないため、長期の出張が実施できないでいる。さらに、勤務校において新カリキュラムがスタートしたが、旧カリキュラムも同時に実施しているため、授業時間が多く、時間を確保できなかった。通院先と相談しながらであるが、授業担当のない夏季に、集中的に翻刻作業とデータ処理に取り組み、遅れを取り戻す。特に、各本にある書入の内容を体系的にまとめて一覧を作成する。これまでもある程度共通する書入があり、それらが書写関係の反映であることは論文にて報告してきたが、点描に過ぎなかった。平成29年度は調査の出張を控えたとはいえ、それでも約10点を見ることができ、写本悉皆調査も終わりが見えてきた。そこで、もう少し後に取り組む予定であった書入の体系づけに着手する。同時に、新校本において、どのようなかたちで書入の内容を表示していくのかを早急に検討する。新校本のスタイルを決定したい。焼失・所在不明・新写本も含めて、現在までに66点を知り得た。悉皆調査は完了していないものの、本文データはほぼ収集できているし、本文翻刻はずいぶんと進んでいる。本文対照のスタイルや、繁雑な書入情報の示し方を決定し、版下原稿を整えたい。理由は体調不良による。平成29年度に計画していた調査(関東・東海方面)が全て実施できなかった。また、翻刻作業とデータ処理も停滞したため、新たな写本複写の購入にまで至らなかった。物品費については、図書整備を順調に進めて予定通りに使用した。生じた次年度使用額は主に、複写不可の写本を調査・翻刻するための出張滞在費に充てる。複写不可の所蔵機関は既に把握しているので、速やかに日程調整を行う。長期出張(海外を含む)ができなかったことが主な理由である。未見の写本数点の現物調査を実施したい。
人工歯根埋入後の治療促進方法に関する研究-PEMF_SとCCEFを用いた人工歯根周囲骨の骨形成促進効果について-

私はインプラント埋入後の治療機転を加速させる試みとしてPEMF_SとCCEFの応用について実験的検討を行っている.実験は,ウサギの大腿骨遠心端部にPOIインプラントを埋入し,同部をPEMF_SまたはCCEFで刺激した.PEMF_S刺激の期間は1週間と2週間,刺激条件はパルス幅25μsec,周波数100Hzで,磁場強度が0.2,0.3mTの2因子で1日8時間とした.CCEF刺激は2週間の期間中,刺激条件は1日4時間ならびに8時間で行った.実験の評価は非脱灰研磨標本を1.Contact microradiography(CMR),2.蛍光顕微鏡によるラベリング像の観察,3.塩基性フクシン・メチレンブルー重染色,4.画像解析(骨接触率,骨面積比率)について行った.結果を以下に記す.(1)CMRの観察で,刺激を与えない群(以下,対照群)は新生骨が粗であったが,両刺激のいずれかを与えた群(以下,実験群)は新生骨が比較的密で,新生骨梁も太く観察された.(2)蛍光ラベリング像では経時的にすべての群で既存骨側からインプラント体表面に向かって新生骨が形成されていた.また,実験群は対照群に比較して,新生骨の形成が認められた.(3)塩基性フクシン・メチレンブルー重染色では,対照群はインプラント体と新生骨の接触はごく一部だったが,実験群はインプラント体と新生骨の接触は多くの部分で認められた.(4)画像解析の結果,PEMF_S刺激では,1週目より新生骨形成促進効果が確認され,2週目で実験群の骨接触率と骨面積比率は対照群の約2倍になった.CCEF刺激では,2週目で実験群は対照群に比較して骨接触率は約1.7倍,骨面積比率は約1.5倍であった.(5)(1)(4)の結果からPEMF_S刺激およびCCEF刺激のインプラント体周囲における新生骨形成促進効果が認められ,両刺激法の口腔インプラント法への応用の可能性が示唆された.私はインプラント埋入後の治療機転を加速させる試みとしてPEMF_SとCCEFの応用について実験的検討を行っている.実験は,ウサギの大腿骨遠心端部にPOIインプラントを埋入し,同部をPEMF_SまたはCCEFで刺激した.PEMF_S刺激の期間は1週間と2週間,刺激条件はパルス幅25μsec,周波数100Hzで,磁場強度が0.2,0.3mTの2因子で1日8時間とした.CCEF刺激は2週間の期間中,刺激条件は1日4時間ならびに8時間で行った.実験の評価は非脱灰研磨標本を1.Contact microradiography(CMR),2.蛍光顕微鏡によるラベリング像の観察,3.塩基性フクシン・メチレンブルー重染色,4.画像解析(骨接触率,骨面積比率)について行った.結果を以下に記す.(1)CMRの観察で,刺激を与えない群(以下,対照群)は新生骨が粗であったが,両刺激のいずれかを与えた群(以下,実験群)は新生骨が比較的密で,新生骨梁も太く観察された.(2)蛍光ラベリング像では経時的にすべての群で既存骨側からインプラント体表面に向かって新生骨が形成されていた.また,実験群は対照群に比較して,新生骨の形成が認められた.(3)塩基性フクシン・メチレンブルー重染色では,対照群はインプラント体と新生骨の接触はごく一部だったが,実験群はインプラント体と新生骨の接触は多くの部分で認められた.(4)画像解析の結果,PEMF_S刺激では,1週目より新生骨形成促進効果が確認され,2週目で実験群の骨接触率と骨面積比率は対照群の約2倍になった.CCEF刺激では,2週目で実験群は対照群に比較して骨接触率は約1.7倍,骨面積比率は約1.5倍であった.(5)(1)(4)の結果からPEMF_S刺激およびCCEF刺激のインプラント体周囲における新生骨形成促進効果が認められ,両刺激法の口腔インプラント法への応用の可能性が示唆された.
多次元分割表における独立性検定の改良に関する研究

多項モデルを想定する多次元分割表において,一般次元の分割表における完全独立性検定, 3次元分割表における一要因対二要因に関する独立性検定, 3次元分割表の条件付独立性検定に対する改良をおこなった。具体的には,エッジワース展開による検定統計量の分布の近似に基づく対数尤度比統計量におけるバートレット修正を一般化した変換統計量の構築である。この変換統計量による検定はもとの統計量の検定の検出力はほとんど変わらないが,小中標本における適合度検定統計量のカイ二乗分布への収束の速さがもとの統計量より大幅に改良されている。カテゴリカルデータ解析において,いくつかの要因により非常に複雑に関係しあったデータを表現するためには多次元分割表を用いる必要がある。多次元分割表はセル数が非常に多くなるため1つのセル当たりのデータ数が稀となることが多い。このような場合に分析をおこなうと,検定統計量の正確な分布とその漸近分布であるカイ二乗分布との乖離が大きくなり,検定等の信頼性が疑わしくなる。本研究の目的は,一般の多次元分割表における種々の独立性検定において,検定統計量の帰無分布の漸近展開に基づき,標本数が少ない場合にもカイ二乗分布による近似が良い変換統計量を構築することによって,信頼性の高い方法を開発することである。24年度に達成した(1)3次元分割表における完全独立なモデルのもとでの局所エッジワース近似の導出。(2)3次元分割表における完全独立性検定統計量の展開式の導出。(3)3次元分割表における完全独立性検定統計量の分布の多変量エッジワース展開の導出。という研究成果を,今年度は一般の多次元分割表の完全独立性検定統計量に拡張した。すなわち,M次元分割表における完全独立なモデルのもとでの局所エッジワース近似およびM次元分割表における完全独立性検定統計量の展開式を導出し,それによりM次元分割表における完全独立性検定統計量の分布の多変量エッジワース展開式を求めた。このことにより,一般のM次元分割表においてもカイ二乗分布への近似を改良する変換統計量を構築するための準備ができた。以上のような研究目的に対し, 2次元のr×s分割表の独立性検定の改良方法の論文であるTaneichi and Sekiya (2007) (Journal of Multivariate Analysis)に基づき, 3次元分割表の完全独立性検定統計量の帰無仮説のもとでの分布に対して(1)3次元分割表における完全独立なモデルのもとでの局所エッジワース近似の導出。というステップを踏んで多変量エッジワース展開に基づく近似式の導出をおこなった。これにより3次元の分割表においてカイ二乗分布への近似を改良する変換統計量を構築するための基礎が出来た。その目的のために, 24年度, 25年度までに達成した,(1)M次元分割表における完全独立なモデルのもとでの局所エッジワース近似の導出。(2)M次元分割表における完全独立性検定統計量の展開式の導出。(3)M次元分割表における完全独立性検定統計量の分布の多変量エッジワース展開の導出。という研究成果をを用いて,中・小標本でも信頼度の高い改良変換統計量の構築を行い,モンテカルロシミュレーションにより対数尤度比統計量等,元の統計量と変換統計量における標本分布とカイ二乗分布との乖離を調べる性能評価をおこない,改良されていることを示すことができた。現在,変換統計量の検出力による評価をおこなっている段階である。

本研究の目的は,一般の多次元分割表における種々の独立性検定において,検定統計量の帰無分布の漸近展開に基づき,標本数が少ない場合にもカイ二乗分布による近似が良い変換統計量を構築することによって,信頼性の高い方法を開発することである。その目的のために, 24年度から26年度において, M次元分割表における完全独立性検定統計量の分布の多変量エッジワース展開を導出し,それを用いて,中・小標本でも信頼度の高い変換統計量の構築を行い,そのカイ二乗分布への収束の良さが変換前より優れていることを数値実験により示した。27年度はまず,この変換統計量の検出力が変換前の統計量とほぼ同じであることを示し,これらほぼ3年間おこなってきた完全独立性に関する成果を論文にまとめ,学術誌への投稿をおこなった。次に, 3次元分割表における一要因対二要因に関する独立性検定統計量の分布の多変量エッジワース展開および改良変換統計量の構築および性能の評価をおこなった。この結果は論文にまとめられ学術誌に公表された。さらに,研究計画の最終課題の一つである3次元分割表の条件付き独立性検定統計量の分布の多変量エッジワース展開の導出をおこなった。ほぼ研究計画と同じ進度で進んでいる。カテゴリカルデータ解析において,いくつかの要因により非常に複雑に関係しあったデータを表現するためには多次元分割表を用いる必要がある。多次元分割表はセル数が非常に多くなるため1つのセル当たりのデータ数が稀となることが多い。このような場合に分析をおこなうと,検定統計量の正確な分布とその漸近分布であるカイ二乗分布との乖離が大きくなり,検定等の信頼性が疑わしくなる。その目的のために,M次元分割表における完全独立性検定統計量の分布の多変量エッジワース展開を導出し,それを用いて,中・小標本でも信頼度の高い変換統計量の構築をおこない,そのカイ二乗分布への近似の良さが変換前より優れていること,およびこの変換統計量の検出力が変換前の統計量とほぼ同じであることを数値実験により示し,完全独立性に関する成果を論文にまとめ,学術誌への投稿をおこなった。次に,3次元分割表における一要因対二要因に関する独立性検定統計量の分布の多変量エッジワース展開,改良変換統計量の構築および性能の評価をおこなった。さらに,3次元分割表の条件付独立性検定統計量の分布の多変量エッジワース展開の導出をおこなった。28年度においては,導出された展開に基づき変換統計量の構築をおこない,カイ二乗分布への近似の良さがもとの統計量より優れていることを数値実験により示した。また,ログリニアモデルへの理論の拡張に関して,ロジスティック回帰モデルにおける検定統計量の研究の場合に用いた複合仮説検定のテクニックを使用することによって漸近展開を導出する方法論を確認できた。
メタノール酵母の高レベル転写能を利用するメタノールからの機能性RNA生産

メタノールによる強力な遺伝子発現能とメタノールを炭素源とする高密度培養法が確立されているメタノール酵母を生産宿主として用い、メタノール酵母における機能性RNAの微生物生産手法の開発を最終目的とし、mRNAの貯蔵・分解に関わるRNA顆粒(P-body, SG)の形成と細胞内動態解析、メタノール酵母で高度に転写されるmRNAの細胞内動態解析を行った。P-bodyは様々なストレス条件下に加え、メタノール培養時にもその形成が認められたのに対し、SGは高温ストレス時にのみその形成が認められた。また高温ストレス時には、ストレス応答性制御因子Hog1がSGに共局在することを明らかにした。1.メタノール酵母RNA顆粒の細胞内動態解析メタノール酵母において、mRNAの貯蔵・分解に関わるRNA顆粒(P-bodyおよびSG)の形成と細胞内動態を解析するため、RNA顆粒に含まれるタンパク質と蛍光タンパク質の融合タンパク質を発現する株を作成し、P-bodyおよびSGの可視化、およびその動態解析手法を確立した。各種ストレス条件下での各タンパク質の細胞内局在の観察を進めており、特定のストレス条件下におけるストレス応答性転写因子との共局在という興味深い現象も見出している。また、P-bodyおよびSGの各構成タンパク質の遺伝子破壊株を作成した。現在、各種培養条件での生育度および遺伝子発現制御に及ぼす影響を調べている。2.メタノール酵母において高度に転写されるmRNAの細胞内動態解析メタノール培養時に高度に転写されるAOD1遺伝子およびDAS1遺伝子について、野生株と転写因子やシグナル伝達因子の遺伝子破壊株を用い、グルコース培養からメタノール培養へのシフト、あるいはメタノール培養からグルコース培養へのシフトで、それぞれのmRNA量がどのように変動するかを定量的RT-PCRにより解析した。AOD1やDAS1のmRNAがP-bodyあるいはSGによる制御を受けるかどうかを検証するため、in situ mRNAハイブリダイゼーションによるmRNAの可視化解析を進めているが、解析手法の確立には至らなかった。メタノール酵母において高度に転写されるmRNAの細胞内動態解析については、可視化技術の確立まで至らなかったものの、他の研究項目も含め、概ね当初の計画通りに進展している。1.メタノール酵母RNA顆粒の細胞内動態解析メタノール酵母において、mRNAの貯蔵・分解に関わるRNA顆粒(P-bodyおよびSG)の形成と細胞内動態を解析するため、P-bodyのマーカータンパク質としてEdc3、SGのマーカータンパク質としてPab1およびPbp1を用い、それぞれ蛍光タンパク質との融合タンパク質として発現する株を用い、各種ストレス条件下での各タンパク質の細胞内局在を観察した。その結果、P-bodyは様々なストレス条件下に加え、メタノール培養時にもその形成が認められたのに対し、SGは高温ストレス時にのみその形成が認められた。2.メタノール酵母において高度に転写されるmRNAの細胞内動態解析メタノール培養時に高度に転写されるAOD1遺伝子およびDAS1遺伝子について、転写因子やシグナル伝達因子の遺伝子破壊株では、mRNA量が野生株に比べて顕著に低下したが、P-bodyおよびSGの各構成タンパク質の遺伝子破壊株においては、野生株との明確な違いは認められなかった。AOD1やDAS1のmRNA可視化については、特定のタンパク質によって認識されるmRNA配列を各遺伝子に付加し、その配列を認識するタンパク質を蛍光タンパク質との融合タンパク質として発現するメタノール酵母株を構築することにより、その可視化に成功した。メタノール誘導時やその他の培地への変換時のmRNA動態を解析した。この可視化技術の確立が難航したため、当初計画していた機能性RNA生産条件の検討には至らなかった。メタノール酵母において高度に転写されるmRNAの可視化技術を早急に確立する。他の項目については、当初の計画通りに研究を進める。応用微生物学購入予定の消耗品の変更および学会などへの参加計画変更のため、未執行額が生じた。当初計画分の他、研究効率化のための物品の購入や研究参画者の国内学会参加のための旅費に使用する。
「文検」體操科の研究

本研究は、「文検」體操科の全体像を明らかにすることを目的としている。具体的には、制度の開始(1885=明治18年)から終焉(1949=昭和24年)までの全期間を対象に、「文検」體操科の制度、試験委員、試験問題、受験者などについて解明しようとしている。特に昨年度平成26年度は、本研究実施1年目であり、以下のことを明らかにすることを目的としていた。(1)「文検」體操科の制度史の解明(2)「文検」體操科の試験委員の分析(3)「文検」體操科受験者の分析(1)については、1試験実施に関する法令の整理2試験日程の整理3受験者統計の整理4合格者氏名の整理の作業を予定しており、1と2の作業遂行に留まった。(2)については、1受験雑誌掲載の試験問題の分析欄の分析2受験雑誌掲載の受験(合格)体験記による指摘の分析3受験雑誌掲載の模擬試験欄の分析の作業を予定しており、収集雑誌の目星はついているが、資料収集を始めたところであり、収集を急がなければならないところである。(3)については、1受験の動機2受験者のキャリア3受験勉強の内容4合格者の進路等の分析の作業を予定しており、(2)を解明するための資料と、同じ資料であるので(2)の資料収集と並行して作業を進めているところである。以上、これまでの研究において、先行研究のレビューを終え、受験雑誌の資料収集を始めたところであり、研究の遅れから成果はこれからの研究に委ねるところが大きい。しかしながら、研究を進めるなかにも、先行研究においては、試験委員と試験問題の関係や、試験委員の考え等は明らかにされておらず、女子受験者の実態や体験記等の分析も見当たらないこと。また、合格者の記事は多く見られたが、受験失敗談の記事等の分析はないこと。文検受験者の為の学習ネットワークや講習会などを分析した研究も見当たらないことなどが確認できた。平成27年度は、平成26年度計画予定分が、公務により研究の進捗状況の遅れが見られたため、研究の遅れを取り戻すべく、研究資料の収集及び整理、分析に力を注ぎ、ある程度の成果を得ることができた。本研究実施12年目は(1)「文検」體操科の制度史の解明(2)「文検」體操科の試験委員の分析(3)「文検」體操科受験者の分析を行うことを研究計画しており、(1)については、1試験実施に関する法令の整理2試験日程の整理3受験者統計の整理4合格者氏名の整理の作業を予定していた。1年目は1と2の作業遂行に留まったが、2年目の今年度は3と4の作業を終えることができた。(2)については、1受験雑誌掲載の試験問題の分析欄の分析2受験雑誌掲載の受験(合格)体験記による指摘の分析3受験雑誌掲載の模擬試験欄の分析の作業を予定していた。これらについても、研究資料の収集が十分進み、成果が得られた。(3)については、1受験の動機2受験者のキャリア3受験勉強の内容4合格者の進路等の分析の作業を予定していた。これについてもある程度の研究資料の収集が進み、成果が得られた。以上、資料の収集及び分析が進み、論文及び報告書としてまとめる段階にきている。平成28年度は、不足資料を補いながら、論文執筆並びに報告書作成を進めていきたいと計画している。しかしながら、平成28年4月に起きた熊本地震により、やや研究の見直し、研究時間の確保が課題になってくると思われるので、限られた研究活動時間の中で、質の高い研究を進めていきたいと考える。遅れの原因としては、1年目科研費交付後の研究開始が公務に時間を取られ、研究の時間が確保できなかったことが要因であり、その研究の遅れが2年目も取り戻せずに進捗している。本研究は、「文検」體操科の全体像を明らかにすることを目的とし、制度の開始(1885=明治18年)から終焉(1949=昭和24年)までの全期間を対象に、「文検」體操科の制度、試験委員、試験問題、受験者等について解明しようとするものであった。本年(平成28年)度は、1.「文検」體操科の試験問題の分析として、受験雑誌掲載の試験問題の分析欄の分析及び受験雑誌掲載の受験(合格)体験記による指摘の分析2.中等體操科の実態分析として、體操科参考書の収集と分析及び中等體操に関する言説の収集と分析を実施後、研究報告書の作成を行い、研究のまとめとして日本教育学会や日本体育学会等で研究発表を行う計画であった。成果として、「文検」體操科の試験問題の分析は終了し、また受験雑誌掲載の合格体験記による受験者の勉強方法や心得、受験動機、受験にあたっての困難等を明らかにすることができた。さらに、一部であるが、受験記から見ることができる中等及び初等體操科の実態も分析できた。

これらは、当時の教員の資質向上等にもつながる生の言説を明らかにすることであり、今日においても、その資質向上の取り組みは、教員養成等の参考に値する意義あることであり重要な視点であると考える。しかしながら、全体として、資料収集及び分析止まりに終わっており、研究報告書(論文)作成が中途で、学会発表等には至っていない。これらの一要因として、膨大な収集資料とその分析に時間をとられているからである。また、予期せぬ災害(熊本地震)にも見舞われ、地震からの復旧作業(研究室内の破損や資料散乱)とそれに伴う変則的な授業期間により思うように研究時間を確保するに至らなかった。よって、今後2年内に成果を論文としてまとめ研究発表につなげていきたいと考える。研究費交付初年度の研究開始時に学内業務(クラブ活動顧問)の担当が増え、仕事量が増えた為、思うように研究に時間を費やせず、また研究開始自体も遅れた為、初年度研究が進まなかった。2年目は、1年目の分まで取り返そうと思い、研究資料の収集に時間をかけかなりの分量の収集に至った。しかしながら、膨大な資料の為、一部分析が追いつかず、次年度に先送りした。研究最終年度の3年目(平成28年度)、新年度4月に熊本地震が発生し、学生対応や地域住民に大学が開放され避難所になったため、その避難所対応等に時間を取られ、研究の時間が十分確保できなかった。また、地震による授業期間変則の為、夏季休業期間等が短縮され、予定していた報告書作成が滞った。よって、研究に遅れが生じた。課題研究の最終年度である平成28年度に、文検體操科の研究に関する資料収集を行い論文にまとめて行く予定であったが、同年4月14日夜、16日未明に起きた2回の震度6強の熊本地震により、研究室の破損や資料散乱が生じた。また、地震による学生対応や地域住民の為の大学での避難所運営等、予期せぬ業務が重なり研究の進捗スピードを落とさざるを得なかった。このため、事業期間を1年延長し、平成28年度の計画をほぼ平成29年度に行うこととなった。したがって、平成29年度、研究の最終年度は、これまで収集してきた資料を整理し研究をまとめ論文作成を行うことであった。しかしながら、昨年度地震により研究を一時的に中断せざるを得なかったため、論文完成にはもうしばし時間が必要である。平成30年度においても、これまで収集してきた資料を基に論文作成を行い、急ぎ論文完成をし、平成31年度の学会等において発表等につなげていくべく計画している。これまで本研究は、「文検」體操科の全体像を明らかにすることを目的とし、制度の開始(1885=明治18年)から終焉(1949=昭和24年)までの全期間を対象に、「文検」體操科の制度、試験委員、試験問題、受験者等について解明しようとするものであった。成果として、「文検」體操科の試験問題の分析は終了し、また受験雑誌掲載の合格体験記による受験者の勉強方法や心得、受験動機、受験にあたっての困難等を明らかにすることができた。さらに、一部であるが、受験記から見ることができる中等及び初等體操科の実態も分析できた。これらは、当時の教員の資質向上等にもつながる生の言説を明らかにすることであり、今日においても、その資質向上の取り組みは、教員養成等に参考に値する意義あることであり重要な視点であると考える。よって、事業期間終了後も引き続き研究を重ね、申請時の研究計画を達成できるように真摯に進めていきたい。遅れの原因としては、科研費交付後の研究開始が遅れたのが大きな原因であり、その要因としては、公務に時間を取られ、研究の時間が確保できなかったからである。
コナダニ類の化学生態

無気門亜目のコナダニ類19種を材料に、従来、警報フェロモンや集合フェロモンの研究および分泌物成分の天然物化学を遂行してきた。本研究費では最近判明したコナダニ類性フェロモンの有機化学的解明を主として行った。また一方では従来の研究も続行した。ゴミコナダニの1種Caloglyphus polyphyllaeですでにβーアカリジア-ルと私が同定した性フェロモンは、その後雄自身にも存在し、続けて同定出来たムギコナダニAleuroglyphus ovatusの性フェロモン(2ーヒドロキシー6ーメチルベンズアルデヒド)も雌ばかりか雄自身に大量に存在した。そこで生物学的に2種類の性フェロモンが存在すると報告のあるアシブトコナダニAcarus siroの同属種オソアシブトコナダニAimmobilisを材料に生物試験法を工夫して、両性フェロモンを同定することに成功した。雄興奮性の性フェロモンが2ーヒドロキシー6ーメチルベンズアルデヒド、雌誘引性の性フェロモンが雄に局在する炭化水素であった。おそらく他のコナダニ類もこのような2種の異なる機能の性フェロモンで、生殖機構が成立していると考えられ、今回の研究期間では解明できなかった経済的・衛生的に重要なケナガコナダニやヒョウヒダニ類などを中心に今後もさらに研究を続けたいと考えている。一方ロビンネダニRhizoglyphus robiniに新規モノテルペンを発見し、ロビナ-ルと命名し、構造決定した。さらに同種から抗菌活性を示す新規置換安息香酸のエステルを同定した。この置換安息香酸は別種ゴミコナダニ類にもメチルエステルとして存在するため、リゾグリフィン酸と命名した。コオノホシカダニLardoglyphus konoiの集合フェロモンであるラルドルア-「蟻酸R,R,R,Rー1,3,5,7ーテトラメチルデシル」の絶対構造異性体間での活性を纏め、イエニクダニGlycyphagus domesticusとバイチヒゲダニHistiostoma laboratoriumの警報フェロモンを同定した。(1)コナダニ類の性フェロモンの同定ムギコナダニの雌雄及び若虫の溶媒抽出物をガスクロマトグラフ分析すると雌雄成虫のみに有意に多く存在する物質(雄に16ng、雌に12ng)として、2ーヒドロキシー6ーメチルベンズアルデヒドを認めた。合成化合物を雌雄成虫に与えると雄のみが顕著な性的興奮を示し、雄にも含まれる疑問点はあるがこの虫の性フェロモンと判断した。雌雄の溶媒抽出物は活性を示さず、単離した化合物は活性を示した。単離化合物の高分解能NMR、FTーIRは合成物と完全に一致し、性フェロモンの構造を同定できた。投稿原稿を準備中である。オソアシブトコナダニの抽出物中に大量の2ーヒドロキシー6ーメチルベンズアルデヒドを認め、ムギコナダニと同様に、性フェロモンであると同定できた。コナヒョウダニおよびヤケヒョウヒダニの溶媒抽出物中に同定できた種々の化合物について前2種と同様に合成化合物を用いて詳細な生物試験を現在行っている。予備的には性フェロモンは存在すると判断され、コナダニ類全般に通用する生物試験法の有用性を実証しつつある。ロビンネダニについては目下未検討である。(2)警報フェロモンの同定

イエニクダニの警報フェロモンを常法により生物試験と化学的な分析により、シトラ-ルの1成分のネラ-ルと同定した。またゴミタメコナダニ科のバイチヒゲダニの警報フェロモンをシトラ-ルの他の1成分のゲラニア-ルが警報フェロモンであることは従来検討したコナダニ類19種で、はじめての例である。その他集合フェロモンのラルドルア-の生物試験、ダニよりの抗菌性化合物の同定等を論文発表した。無気門亜目のコナダニ類の性フェロモンはゴミコナダニの1種Caloglyphus polyphyllaeですでにβーアカリジア-ルと私が同定しているが、その他のコナダニ類の性フェロモンは昆虫類とは対照的に全く判っていない。ムギコナダニAleuroglyphus ovatusに雄が興奮する性フェロモンの存在を認め、精製して調べたところ、活性化合物は2ーヒドロキシー6ーメチルベンズアルデヒドと機器分析結果及び生物試験の結果から同定できた。この化合物はオオケナガコナダニTyrophagusperniciosusでは警報フェロモンとして既に私が同定した化合物であり、その他のコナダニ類にも機能不明ながら広く分布する化合物である。この化合物の存在を雄と雌で比べると困ったことに、雌以外に雄にも同程度含まれていた。さすがに幼若虫には微量であったものの、性フェロモンとしては理解に苦しむ事実である。念のためゴミコナダニを調べたが同様の結果となった。生物試験容器を工夫して、小空間にダニを雌雄それぞれ分けて入れ、オソアシブトコナダニを材料として、抽出物の各分画を生物試験した。その結果、オソアシブトコナダニの雄に、興奮して雌を捜しまわり、突き当たったものに手当たり次第にのっかる行動を起こさせる"今までの性フェロモン"以外に、雌が雄の香りに誘引されて集まる雌誘引性の性フェロモンの存在が判明し、雄にだけ見つかる炭化水素と雌雄に共通に存在する炭化水素の混合物であることが判明した。従ってコナダニの配偶行動は、雌雄に共に存在する前述のアルデヒドで雄が興奮し、興奮した雄の発散するC_<17>炭化水素を主体とするフェロモンが雌を誘引することで、うまく説明出来ることが判った。性フェロモンの同定以外にバイチヒゲダニとイエニクダニの警報フェロモンをそれぞれゲラニア-ルとネラ-ルと同定した。また未同定種のTotonia spの警報フェロモンをZ,Zー6,9ーヘプタデカジエンと同定した。
複合型下垂体機能低下症における新規原因遺伝子の同定

複合型下垂体機能低下症3例において、トリオエクソーム解析、ならびに網羅的ゲノムコピー数解析を行った。結果、3症例全体で、de novoヘテロ変異は計5変異、常染色体劣性遺伝形式をとるホモ変異は、計13変異同定された。3症例に共通の遺伝子の変異はなかった。これらの候補遺伝子のヒト下垂体での発現はなく、病原性は不明であった。array CGHの結果、症例1においてHTR1Fを含む3p11.2領域の微小ヘテロ欠失を同定した。これは表現型正常である父にも同定されたため、病的意義は低いと考えられた。平成25年度の研究成果(1)検体集積:長崎大学病院小児科、国立成育医療研究センターを中心とする複数の医療機関で継続的に下垂体機能低下症患者の集積を行い、約80例の下垂体機能低下症例を集積した。現時点で両親の検体が使用可能な3家系において、以下の解析を進めている。(2)臨床評価:トリオ・エクソーム解析が可能な3家系の臨床情報は以下の通りである。症例1:12歳女児、汎下垂体機能低下症、下垂体低形成、異所性後葉、重度精神運動発達遅滞症例2:15歳男児、複合型下垂体機能低下症、下垂体低形成、視神経低形成。症例3:1歳男児、汎下垂体機能低下症、下垂体低形成、異所性後葉、重度精神運動発達遅滞(3)エクソーム解析:症例1,2とその両親において、末梢白血球から通常の方法でゲノムDNAを採取し、次世代シークエンサー(SOLiD 5500, Life Technologies)を用いて、全遺伝子のエクソン領域の配列を決定した。現在、データの処理、解析を進めているが、症例1ではデータベースに存在しない4つの遺伝子上のDe novo変異をそれぞれヘテロ接合性に同定した。こらら4つの変異は、PCR-直接シークエンス法を用いて確認した。症例2はデータ解析中である。(4)ゲノムコピー数解析:エクソーム解析では解析できないコピー数の異常検出するため、array CGH、SNP array解析を行った。上記3症例では明らかなDe novoの欠失や重複は認めなかった。(1)検体集積:両親の検体が使用可能な3症例(症例1:12歳女児、症例2:15歳男児、症例3:1歳男児において、以下の解析をおこなった。(2)エクソーム解析:3症例とその両親において、末梢白血球から通常の方法でゲノムDNAを採取し、次世代シークエンサー(SOLiD 5500, Life Technologies)を用いて、全遺伝子のエクソン領域の配列を決定した。(3)ゲノムコピー数解析:エクソーム解析では解析できないコピー数の異常検出するため、array CGH、SNP array解析を行った。上記症例1ではHTR1Fを含む3p11.2領域の微小ヘテロ欠失を同定した。平成27年度の研究成果(1)検体集積:両親の検体が使用可能な3症例(症例1:12歳女児、症例2:15歳男児、症例3:1歳男児において、以下の解析をおこなった。我々はすでに、原因不明の先天性複合型下垂体機能低下症患者3症例とその両親においてトリオ・エクソーム解析を行った。そこから得られるデータは膨大なものであり、そのデータの処理と解析・検討に時間を要した。以上より、当初の目標としていた研究進行状況には若干の遅れが生じているが、今後、発現解析や他症例での同遺伝子の変異解析を進める準備はできており、今後進展するものと思われる。小児内分泌学今まで施行した3家系のトリオ・エクソーム解析の結果から、上記の複合型下垂体機能低下症の新規原因遺伝子候補を同定した。今後は、1.cDNAライブラリーを用いた発現解析における下垂体、視床下部での発現の確認2.他の複合型下垂体機能低下症患者における変異、欠失解析3.In vitro機能解析を行い、これらの遺伝子が複合型下垂体機能低下症の真の原因遺伝子がどうかを検討する。また、新規下垂体機能低下症患者がいる場合には、トリオ・エクソーム解析を継続する。複合型下垂体機能低下症の臨床像は様々である。ある特異的な症状、ホルモン障害パターンを有する群に特異的な遺伝子異常症がないか、多症例で検討したい。

我々はすでに、原因不明の先天性下垂体機能低下症患者2症例とその両親においてトリオ・エクソーム解析を行った。そこから得られるデータは膨大なものであり、現在、そのデータの処理と解析・検討を行っている。また、新たな1家系においても解析を行う予定である。現時点での進行状況はおおむね順調であると思われる。今後、同定された候補遺伝子が、新規原因遺伝子となりうるか、十分な検討を行う。また、可能であれば今後症例数を増やしたい。H26年度は、次世代シークエンスを用いたエクソーム解析を行うための、患者、家系の選別、既知遺伝子異常症の除外を主に行った。そのため、H26年度未使用額は、これらの家系のエクソーム解析と候補遺伝子の検索、解析、さらには新規患者の解析のため、H27年度に使用する予定である。今後の研究の推進方策:今まで施行した2家系のトリオ・エクソーム解析の結果の解析、検討を行うとともに、新たな下垂体機能低下症患者と両親の解析を行う。われわれは、繰り返す低血糖、新生児肝炎、下垂体低形成、異所性後葉、中枢神経系奇形を要する新規汎下垂体機能低下症乳児例とその両親に対し、既知遺伝子異常症、コピー数異常の除外を施行後に、エクソーム解析を行う予定である。候補遺伝子の検討は、発現解析や他症例での変異解析を行う。H26年度未使用額は以下の研究費を使用予定である。エクソーム関連試薬:100万円ゲノムコピー数解析関連試薬:50万円遺伝子発現解析のためのヒトcDNAライブラリー購入:40万円分子生化学関連試薬:35万円実験補助人件費:40万円成果発表旅費、論文別刷:30万円ディスポーザルプラスチック器具:5万円通信費:5千円H25年度は、次世代シークエンスを用いたエクソーム解析を行うための、患者、家系の選別、既知遺伝子異常症の除外を主に行った。そのため、H25年度未使用額は、これらの家系のエクソーム解析と候補遺伝子の検索、解析のため、H26年度に使用する予定である。H25年度未使用額にH26年度使用分を併せて以下の研究費を使用予定である。エクソーム関連試薬:100万円ゲノムコピー数解析関連試薬:50万円遺伝子発現解析のためのヒトcDNAライブラリー購入:40万円分子生化学関連試薬:35万円実験補助人件費:40万円成果発表旅費、論文別刷:30万円ディスポーザルプラスチック器具:5万円通信費:5千円
代数的組合せ論

(3)coset geametues上のDelsarte designsの幾何学的意味付けの一般理論を完成した。これにより、従来のcase by caseの議論を乗り越え得たのみならず多重可移sets等の研究に新たな見地と方法を切り拓いた。上記(2)(3)(4)の結果は、現在論文にまとめている途中である。
新しい栄養代謝産物センサーに注目したエピジェネティクス制御システムの解明

CtBP2のエピジェネティクスを介した遺伝子発現制御についてまずは膵β細胞から解析を行った。様々なヒストン修飾のChIP-qPCRを行うと、CtBP2はH3K4me2,H3K4me3を増加させるなど膵β細胞においてはインスリンプロモーターをopen chromatinにする方向でエピゲノムを調節していた。これによってCtBP2はインスリン遺伝子発現を正に制御していた。またそうしたエピゲノム修飾を行うCtBP2の転写因子複合体の概要を分子生物学的に同定した。本複合体は仮説の通り、膵β細胞においてもNADHや脂肪酸CoAといった代謝産物に反応する性質があり、代謝の変化を受けてエピゲノム調節が行われる現象の一つの鍵分子であることが示唆された。その生体内での役割を示すために、いくつかのin vivoの実験を行った。免疫染色では遺伝的肥満モデルマウスや食事誘導生肥満モデルマウスといった肥満モデルにおいてCtBP2の発現が著明に減少しており、膵β細胞特異的CtBP2欠損マウスを作成すると、耐糖能の悪化、体重の減少傾向が認められた。これまでCtBP2の膵β細胞における役割を論じた既報は存在しないが、インスリン分泌に重要である解糖系に依存して産生される細胞質のNADHとこれまたインスリン分泌に重要な役割を示唆されている脂肪酸CoAに反応するシステムという意味では膵β細胞の生物学に新しい一面を書き加える仕事と考えられる。肝臓やその他エピゲノム修飾の遺伝などにも踏み込みたいところであったが、今のところ膵β細胞のみの探索にとどまってしまっている。膵β細胞の発見も論文化を考えた際にはまだ細部が詰め切れていない。体調の問題なども影響があった。また組織特異的欠損マウスの解析において以下の全身性の制御機構が当該組織の欠損を補填してしまう部分があり、これが予想外に研究の進行を遅延させた。が逆に、申請時には判明していなかったが、CtBP2の全身性の恒常性維持機構のような新しい展開も発見することができ、全身性のエピゲノム恒常性維持を行っている可能性があり、想定外の新しい展開を切り開ける可能性も見いだしてはいる。今後は膵β細胞の知見に関しては論文化にむけて細部を詰めていく。他の臓器や新しく同定された全身性の制御機構なども引き続き検討していく。また本分子を中心とした代謝制御機構自体が新しく、肝臓の表現型に関しては論文投稿中であるが、エピゲノム制御にかかわらず論文投稿を進め、世界に発信していく。
次世代肺がんチロシンキナーゼ阻害薬の感受性マーカーの同定と治療標的分子の探索

原発性肺がんは現在毎年6万人以上が命を落とす,がん死における最も多いがんである.申請者らは,最近の分子標的薬開発の状況に鑑み,ALKチロシンキナーゼと相同性の高いチロシンキナーゼの発現状況を網羅的に解析し,新たな治療標的となる分子FERを同定した.FERを過剰に発現する肺がん細胞株NCI-H661細胞において,FERをsiRNAベクターによって発現抑制すると,細胞はアポトーシスに至ることが明らかになった.また肺がん切除例における病理標本での検討から,FER過剰発現例は原発性肺がんの約10%で過剰発現を認め,予後が不良であった.これらの結果を論文にて報告した.原発性肺がんは現在毎年6万人以上が命を落とす,がん死における最も多いがんである.申請者らは,最近の分子標的薬開発の状況に鑑み,ALKチロシンキナーゼと相同性の高いチロシンキナーゼの発現状況を網羅的に解析し,新たな治療標的となる分子FERを同定した.FERを過剰に発現する肺がん細胞株NCI-H661細胞において,FERをsiRNAベクターによって発現抑制すると,細胞はアポトーシスに至ることが明らかになった.また肺がん切除例における病理標本での検討から,FER過剰発現例は原発性肺がんの約10%で過剰発現を認め,予後が不良であった.これらの結果を論文にて報告した.1.RETチロシンキナーゼ遺伝子のがん化に関する寄与と肺がん細胞におけるvandetanibによる細胞増殖抑制効果の検討1-1RET遺伝子によるがん化の確認がん遺伝子の機能解析で用いられている一般的な方法として,マウス線維芽細胞NIH-3T3細胞での強制発現によるcontact inhibition(接着阻止,正常細胞は培養皿で密になると増殖をやめる)の喪失やsoft agarでのコロニー形成(正常の接着性細胞は,足場のない軟寒天では増殖できない)がある.われわれは,RET遺伝市単独によるtransformを確認した.これはRET遺伝子過剰発現が単独で肺におけるがん化に寄与することを示すものである.1-2RET過剰発現細胞のvandetanibによる増殖能への影響の検討RETはEGFR,VEGFR他も阻害するmulti-targetのチロシンキナーゼ阻害薬vandetanibの標的の一つであることが報告されている.肺がん細胞株ではRETの発現量とvandetanibのIC50の間にほぼ負の相関があり,RETの発現量がvandetanibの感受性の指標となることが示唆された.2.非受容体型チロシンキナーゼX(TK-X)の過剰発現と肺がん肺がんでの系統的チロシンキナーゼの発現解析から,過剰発現のあるチロシンキナーゼの5'配列をRACE法で決定したところ,TK-Xが近傍の遺伝子とキメラトランスクリプトを精製していることを発見した.TK-xを過剰発現している肺がん細胞株でも同様のキメラトランスク,リプトを認め,siRNAを用いてTK-xの発現抑制を行ったところ,アポトーシスを生じることを確認した.これは,TK-Xが癌の分子標的となることを示唆するものである.われわれはALKのキナーゼドメインと相同性の高い30遺伝子を,EGFR突然変異およびK-Ras突然変異のない肺腺がん切除組織において定量的PCRによって発現解析を行った.そのなかで可溶型(非受容体型)チロシンキナーゼFERの過剰発現を3例で認めた.FERの過剰発現の理由としては,5'RACE法により隣接するPJA2遺伝子とのキメラトランスクリプトを認めたため,染色体転座の可能性についても検索を行ったが,過剰発現症例では染色体転座は認められず,トランプスプライシングによるキメラトランスクリプトであると結論した.スクリーニングで用いた症例を含む135例でFER免疫染色を行ったところ,原発性肺がんの約10%でFERの過剰発現を認めた.FER過剰発現症例は,明らかに無再発生存期間,全生存期間とも短く予後不良であった.多変量解析ではFER過剰発現とT因子,N因子は独立した予後不良因子であった.また,FERを過剰発現している肺がん細胞株を検索したところ,NCI-H661細胞でFERの過剰発現を認めた.ヘアピンsiRNAを用いて,FERの発現を抑制する系を構築し,FERの発現抑制の細胞への影響を検討した.NCI-H661細胞でsiRNAを用いてFERをノックダウンすると細胞がアポトーシスを来たし,治療標的候補となり得ることを見いだした.また,FER/PJA2のキメラトランスクリプトはFER過剰発現症例で認められ,普遍的に発現しているPJA2と過剰発現したFERとの間でキメラトランスクリプトが形成され,FERの過剰発現のマーカーとなり得ることを明らかにし,併せて発表した.1.可溶性チロシンキナーゼFERの過剰発現と非小細胞肺がんにおける予後不良マーカーおよび治療標的となる可能性の実証原発性肺がんにおいて,ALK遺伝子のチロシンキナーゼと相同性の高い30のチロシンキナーゼについて,30症例の腺がん(EGFR変異なし,KRAS変異なし)について定量的RTーPCRを行った.その中で,3例で過剰発現を認めたFER遺伝子について,遺伝子機能解析および,臨床病理的解析を行った.FER遺伝子はがん遺伝子FES/FPSとサブファミリーを構成し,マウス線維芽細胞NIHー3T3に導入したところ,形質転換を認めた.NCIーH661細胞でFERの過剰発現を認めたため,ヘアピンsiRNAベクターを構築して,FERの発現を抑制した.

FERはタンパクレベルでの発現抑制が確認され,FERの発現抑制によりNCIーH661細胞はアポトーシスに至った.,FERの発現について肺がん治癒切除症例135例について検討したところ,15例でFERの過剰発現を認め,無再発予後期間,生存期間いずれも予後不良であった.これらの結果について,アメリカ癌研究学会およびヨーロッパ癌機構のカンファレンスで報告し,論文発表を行った.2.チロシンキナーゼRETの過剰発現と非小細胞がんにおける予後マーカーとしての確立上述のスクリーニングから2例でチロシンキナーゼRETの過剰発現が認められた.RETはすでに甲状腺髄様がんでがん遺伝子として報告があり,vandetanibという阻害薬が知られており,その臨床病理学的解析を行った.81症例の検討において検討を子なったところ26例で過剰発現を認めた.EGFR変異の認められた症例におけるサブセット解析では,RET過剰発現は統計的有意な予後不良因子であった.これらの結果をアメリカ癌研究学会およびヨーロッパ癌機構のカンファレンスで報告した.RETチロシンキナーゼについては,国内外の3つのグループから先に報告されてしまったが,我々のグループでは,キメラ形成を必ずしも必要としないことを確認しており,免疫染色による頻度やなどの検討を終え,現在投稿準備中である.また,このほかのチロシンキナーゼについても,過剰発現している細胞株において,siRNAによる発現抑制がアポトーシスを引き起こすことを確認し,投稿準備に入っている.25年度が最終年度であるため、記入しない。これまでに2つのチロシンキナーゼの肺がんにおける予後不良マーカーを明らかにすることができた.FERについては,現在国内外の製薬企業との共同研究で阻害薬の開発へ進んでおり,過剰発現群では治療選択のためのマーカーとしても使用できる可能性が極めて高い.RETキナーゼの過剰発現については国内外の3グループから融合遺伝子の形成による発がん性が報告されているが,われわれの解析ではより多くの症例でRET遺伝子の過剰発現がみられ,されにEGFR変異例での予後不良が明らかになった.これは,RET過剰発現が今後肺がんにおけるスタンダードなマーカーとして利用されれば,RET過剰発現のあるEGFR変異例ではgefitinibやerlotinibのようなEGFRーTKIではなく,EGFR/VEGFR/RETの阻害薬であるvandetanibを用いるべきであることを示唆している.以上臨床的に非常に有意義な発見を報告することができたと考えている.ほぼ当初の予定通りに研究を実行することが出来るものと考える,RETチロシンキナーゼについては,今後vandetanibが国内での承認,肺がんへの適応が認められれば,,免疫染色と奏功性にとの相田についても解析を行うことが出来るものと考えている.25年度が最終年度であるため、記入しない。1.FERの過剰発現により活性化されるシグナルパスウェイの同定これまでにFERについては,細胞骨格分子cortactinのリン酸化が報告されているが,シグナルパスウェイにおける位置づけはほとんど明らかにされていない.
最大筋収縮時経頭蓋直流刺激を用いた新しい運動・認知機能回復訓練法の開発

本研究は、超高齢化社会における要介護老人の増加を予防するために、より効率的な運動・認知機能回復訓練法の開発を目的とする。これまでの我々の研究では、新しい運動・認知機能回復訓練法として最大筋収縮時磁気刺激法の開発を行い、その安全性と有効性について報告を行ってきた。しかし磁気刺激装置は移動が困難で、取り扱いもこの手技に熟練した医師等の医療従事者が行う必要があるため、限られた施設においてしか実施できない。今回の研究ではこのような問題を解決するため、より簡便な方法として経頭蓋直流刺激法を用い、最大筋収縮時経頭蓋直流刺激法を開発して最大筋収縮時磁気刺激との比較研究を実施する。
大動脈疾患における細胞老化の病的意義の解明

本研究では癌代謝物として知られる2-Hydorxyglutarate(2-HG)が肥満モデルマウスの大動脈及び血液において上昇する事実に着目し、大動脈疾患において血管内皮細胞や血管平滑筋細胞の2-HGを介した細胞老化が血管脆弱性に果たす役割について解明することを目的とする。大動脈疾患モデルマウスを作成し、血管構成細胞のp53やp21といった老化マーカーと2-HGを解析して標的となる細胞と因子を同定する。さらに特定細胞で因子を抑制または過剰発現させたマウスを作成して、大動脈疾患の増悪と2-HGの変化について検証し、培養細胞においても同様の検証を行う。