hpprc/llmjp-kaken huggingface dataset:
蛍光分光を応用した神経細胞の個体脳における同定と聴覚神経回路機構の研究

本研究は蛍光分光電極法を開発し個体脳での神経活動解析に応用する事を主な目的とした。特に、聴覚系の神経活動解析への応用を目指して研究を進めた。結果として両方の目的はおおむね達成された。蛍光分光電極法はパッチ電極を光導体として、蛍光色素を充填した神経細胞をレーザー照射し、色素が発する蛍光を同じパッチ電極を用いて神経活動に伴う電気信号と同時に記録する手法である。神経細胞に充填した色素の蛍光スペクトルを時系列に記録する手法として確立した。個体脳への応用では細胞内Ca濃度に応答するオレゴングリーンBAPTA-1(OGB-1)をトリ聴覚神経核の神経細胞に充填し、聴覚応答の解析が実現できた。聴皮質であるField-Lからは神経活動と完全に同期したCa応答を記録解析した。GABA性の抑制性神経活動を阻害することにより1Hz程度の徐波が増強され自発的なCa応答を引き起こした。さらに下丘からも聴覚応答をCa信号として記録し、個体脳深部から蛍光信号を電気信号と同時に記録する当初の目的は達成した。本研究は第1にパッチ電極を用いた新しい蛍光分光電気計測法を開発する。石英ガラス管で作成したパッチ電極を光導体として用いる事で電気活動と同時に神経細胞のFRET応答など蛍光分光を行う装置である。第2はin vivo脳機能解析に上記装置を応用する事をである。特に動物個体を用いた聴覚機能解析実験系の確立を目標に進めている。H22年度は分光電気計測装置が稼働し研究目的の達成に向けて充分な成果を上げる事ができた。第1にFRETによる細胞内Ca信号の記録に成功した。これはF2Cという我々が以前に開発したCFP-YFP-Caセンサー蛋白をウイルスを用いて強制発現させた神経細胞に445nmレーザーを石英管パッチ電極を光導体として照射し470-600nm領域で蛍光スペクトルを観察する事で、KCI刺激による膜脱分極で生じた細胞内Ca応答をFRET観察したものである。Sindbis-virusに組み込んだF2C蛋白をトリ脳幹の聴覚神経核近傍に注入し、2日後にスライス標本を作製し蛍光蛋白を発現する神経細胞に石英管パッチ電極を接触させ蛍光分光を行った。KCI溶液投与により膜脱分極を起こし細胞内Ca濃度の増大に応じて、470-510nm領域のスペクトル強度が上昇し、520-600nm領域のスペクトル強度が減少し、さらにKCI溶液の除去により回復するFRET信号を検出した。電極を用いて計測したFRET応答は直後に蛍光顕微鏡を用いたW-ViewFRET光学系で同様に計測した応答と時間経過および強度の面で高い正の相関を示した。第2に本年度は分光スペクトルの計測と同時に蛍光の時系列計測を可能にするソフトウェアを開発した。これにより少なくとも数秒程度の時間分解で継続的に蛍光スペクトルを記録しつつ、特定の波長領域のスペクトル強度を積算し、背景スペクトル強度を差し引く事でFRETなとの蛍光スペクトル信号を時間軸上で計測表示する事が可能になった。電気刺激実験との対応を容易にする為に随時トリガー出力も可能である。なお、分光電気計測は、現状では脳切片内神経細胞を対象としているが、将来の応用を目的として並行して進めている聴覚神経回路機構の研究ではマウス個体の下丘から音の終了に応答する神経細胞を選んで解析する事ができ論文として準備中である。本研究は第一に蛍光分子標識された神経細胞を脳の深部で同定し神経活動を記録し、さらに神経活動に伴う細胞内での物質動態をFRETにより捉えることを可能にする新しい蛍光パッチ電極計測法を開発して電気生理学研究に応用する事である。パッチ電極法を用いた新しい蛍光計測法としては計画通り実験手技を確立することが出来た。すなわち、蛍光パッチ電極を用いて神経細胞に発現したCa感受性FRET蛋白の蛍光シグナルを脳切片標本を用いて記録出来た。蛍光電極端面を研磨する事で蛍光の捕捉効率が上がり、蛍光パッチ電極で記録出来た蛍光信号のうち25-30%が電極先端で捉えたFRET蛋白起源である事、および電極先端が細胞に接触する事で蛍光検出の効率が上昇することをレーザー連続照射による退色実験で明らかにした。細胞外に投与したKCLによる膜脱分極によって高まる神経活動をFRET-Ca計測と同時に蛍光電極で細胞外電気記録する事が可能となった。

さらにFRET-Ca応答を蛍光パッチ電極とccdカメラによる顕微測光法で同時に記録し比較することにより、両者のFRET値に相関があり、蛍光パッチ電極によってもccdカメラと同程度のFRET計測が出来る事を確認した。さらに海馬CA3刺激によるCA1神経細胞のシナプス活動によるCa応答を捉えることにも成功した。現時点では本法は分光器を用いた測光システムである。このことは様々な要因で発生する背景蛍光を波長スペクトルとして識別しより効率の高い検出法を確立するためには有効であったが、時間分解能が低いのが欠点である。今後より時間分解能を高めることで、聴覚神経シナプスにおいて興奮性-抑制性シナプス活動と活動電位の関連をFRETによる膜電位測定および細胞外電気記録により明らかにしたい。第二の目的である聴覚神経核の個体脳での機能解明にこの方法を応用する計画に関しては、幾つかの準備が進むとともに問題点が明らかになった。既に個体脳での聴覚神経活動のパッチ電極による全細胞記録法など基本的な手技は確立した。しかし個体脳への蛍光電極法の応用自体は実現できていない。ここでの大きな問題はFRET蛍光蛋白の脳での発現効率が低いことである。したがって、電極を脳に刺入し電気活動を指標に蛍光蛋白を発現する神経細胞を探す効率が極めて悪い。蛍光蛋白の発現効率を高めるために様々なウイルス発現法、プラスミドの電気穿孔法、リポフェクション法などを現在試している。平成24年度は蛍光電極法を個体脳での神経活動解析に応用する事を主な目的として研究を進めた。さらに、聴覚系の神経活動の解析への応用を目指して研究を進めた。結果として両方の目的はおおむね達成された。個体脳への応用の前に、マウス海馬脳切片標本を用いた神経活動の記録を試みた。海馬歯状回顆粒細胞にオレゴングリーンBAPTAー1(OGB-1)をAM型を用いて逆行性に充填し、さらに逆行性の電気刺激に対する顆粒細胞の電気活動に対応する細胞内Ca応答を蛍光電極法で電気記録と同時に計測できた。ここでは、スペクトル分光法と干渉フィルターとホトマルによる高速測光法を比較した。高速測光に対して分光法はCCD素子上での光子の積算過程が関与する分、S/Nには優れるが時間分解能が下がり、結果として測光シグナルが小さくなることが明らかになった。しかし、高いS/N比と全波長を同時に観察できるメリットがあり、システムの開発過程には欠かせない手法であることも明らかになった。次にトリの聴覚皮質である脳深部に位置するField-Lでの聴覚応答の蛍光電極法による解析を試みた。OGB-1AMを用いて染色した皮質神経細胞から神経活動と完全に同期したCa応答が記録出来た。ここではGABA性の抑制性神経活動を阻害することにより1Hz程度の徐波が増強され連続した自発的なCa応答を引き起こした。さらに脳表面から6ー7mm深部に位置する下丘から聴覚応答をCa信号として記録し、個体脳深部から蛍光信号を電気信号と同時に記録する当初の目的は達成した。今後はField-Lでの解析を進め、大脳皮質に特徴的な電気活動である徐波と聴覚入力との関連を、OGB-1以外の蛍光指示薬あるいはFRET蛍光蛋白も用いることにより、電気活動と相関する様々な蛍光シグナルを解析する事で、トリの大脳皮質聴覚野であるField-Lの機能解明に迫りたい。
生理活性ペプチドによる血管のオートクリン-パラクリン型緊張・増殖制御機構の解明

本研究の目的は生理活性ペプチドによるオートクリン作用について明らかにすることである。まず、アドレノメジュリンが、どの様な細胞に発現し、どの様な細胞に作用を及ぼすかについて明かにした。その結果、アドレノメジュリンが心臓、腸管、血管、膀胱、気道等のいろいろな細胞に発現していることが明らかとなった。しかしながら、その平滑筋に対する作用は、限られていることがわかった(Nishimura et al.,Br.J.Pharmacol,1997)。また、bradykinin(Eguchi et al.,Br.J.Pharmacol,1997)等の生理活性ペプチドに対する血管作用を明らかにした。気道におけるendothelinのオートクリン作用について検討した結果、気道平滑筋、気道上皮にpreproendothelin-1,preproendothelin-3,endothelin receptor,endothelin converting enzymeが発現しており、オートクリン作用の存在が明らかとなった(Yoshimura et al.,Am J Respir Cell Mol Biol,1997)。実験的移植血管におけるendothelin受容体の変化を明らかにした(Eguchi et al.,Cardiovas Res,1997)。さらに、rho kinase mRNAの発現について報告を行った(Niiro et al.,Biochem Biophys Res Commun、1997)。また、カルシウム情報系に関し、細胞内カルシウム濃度と張力の同時測定の結果を報告した。まず、アドレノメジュリンが、どの様な細胞に発現し、どの様な細胞に作用を及ぼすかについて明らかにした。気道におけるendothelinのオートクリン作用について検討した結果、気道平滑筋、気道上皮にpreproendothelin-1,preproendothelin-3,endothelin receptor,endothelin converting enzymeが発現しており、オートクリン作用の存在が明らかとなった(Yoshimura et al.,Am J Respir Cell Mol BIol,1997)。さらに、rho kinase mRNAの発現について報告を行った(Niiro et al.,Biochem BIophys Res Commun、1997)。
大学教育における遠隔会議を活用した連携型の国際理解学習の教材開発

平成22年度は国際理解学習の問題解決アプローチとして,前期に小学生の遠隔授業を核とした環境破壊教材を,後期に大学生の遠隔授業を核とした文化摩擦教材を開発した。小学校版遠隔会議では,小学校の教員免許の取得を目指す三重大生が北立誠小学校に事前指導に行き,6月に日本とオーストラリアの身近な地域の環境を守る活動をテーマとして遠隔会議をプロデュースした。オーストラリアのCoogee public schoolはパワーポイントや演劇などを活用し,日本の小学校はボードに文字とともに絵や写真などを工夫して表現するなど,お互いの小学生が身近な地域の環境を守るためのメッセージを伝えようとした。お互いの対策をとらえ,異文化コミュニケーション能力を高めることができた。大学生版遠隔会議では,高等学校の教員免許の取得を目指す三重大生が,世界の文化摩擦問題となっている「捕鯨問題」について,1月にミシガン大生と遠隔会議を行った。賛成と反対の立場からボードに文字と絵と写真などを工夫して表現し,意見発表と質疑応答を行うことで論点が明確になり,議論が深まった。例年,言語による意思疎通が問題であったが,プレゼンテーションを工夫することで異文化コミュニケーションが成立した。今年度は,21年度に実施した文化理解アプローチによる国際理解学習の教材について学会発表を行い,三重大学国際交流センター紀要にまとめている。3年間を通した研究成果として,遠隔会議を体験した大学生や小学生の,テーマに対する認識や思考力や異文化コミュニケーション能力の育成があげられる。また,教員養成段階の学生に,教育現場で遠隔会議を活用する意義をつかませることができた。この成果は,今後論文にまとめていきたい。ハード面として,TV会議システムを教育学部遠隔授業室に設置し,社会科と英語科の学生が連携してTV会議を行いやすい体制を整えた。また,交流先として,大学生同士ではミシガン大学,小学生同士では,津市立北立誠小学校とシドニーのクージー公立小学校を確保した。これにより,3年間の研究遂行の基盤を整えた。平成20年度は国際理解学習の問題解決アプローチの教材を開発した。具体的には,地球的課題の一つである人口問題を取り上げ,移民をテーマとし,社会科と英語科で連携して小学校で実際に授業を行った。開発した教材については,全国社会科教育学会で発表し,その成果は報告書の形でまとめた。今後論文としてまとめたいと考えている。12月に開発した教材を大学生に提示し,社会科と英語科の学生が連携してTV会議に向けた作業を行った。1月に移民問題について,ミシガン大学との学生とTV会議を行った。この大学生版の内容をもとに小学校版の移民学習を学生とともに開発した。2月に小学校で授業とTV会議に向けた作業を行った。3月に社会科と英語科の学生を交えて,北立誠小学校の5年生児童を教育学部遠隔授業室に招き,クージー公立小学校とTV会議を行った。TV会議システムを活用した大学生同士の交流も小学校同士の交流もコミュニケーション手段である英語が問題になった。今年度の交流の反省をいかし,相手にわかりやすく伝える方法を考えていきたい。TV会議の内容については,大学生ばかりでなく小学生でも考えやすい教材を開発することができた。平成20年度は社会科と英語科の学生の連携体制を築けたこと,小学生同士の交流で単なるお互いの紹介に終始することなく,国際理解学習の一環としての内容を取り入れたTV会議が実現したことが成果である。平成21年度は国際理解学習の文化理解アプローチの教材を開発した。具体的には,日本とオーストラリアの文化について,7月に小学校同士の遠隔会議を行った。本年度は教育学部遠隔授業室に設置したTV会議システムを活用して,まず学生がシドニー大学からオーストラリアの文化に関する遠隔授業を受けた。これをもとに学生は教材を開発し,津市立北立誠小学校に指導に行った。それを受けて,シドニーのクージー公立小学校と遠隔会議を行った。遠隔会議では,それぞれの国の文化について児童が伝えたいこととそれぞれの国の文化に対して聞きたいことをお互いの児童が伝え合った。今年度はコミュニケーションの方法として実演(日本側:実際に日本の文化であるお茶をたてる)やプレゼンテーション(オーストラリア側:パワーポイントで視覚的に紹介)を取り入れた。また,TV会議で人物とプレゼンテーションを写す2画面方式を採用した。この成果は,2010年度の日本生活科・総合的学習教育学会で発表し,論文としてまとめる予定である。21年度は,大学生への遠隔講義や小学生同士の遠隔会議も計画的に位置づけることができた。大学生が指導する小学校の遠隔会議は相手にわかりやすく伝えるコミュニケーションを考えることができた。平成22年度はお互いの国が話し合いたいテーマを模索し,さらにテーマの理解とコミュニケーション能力を育成できる遠隔会議を組織したいと考えている。

大学生版遠隔会議では,高等学校の教員免許の取得を目指す三重大生が,世界の文化摩擦問題となっている「捕鯨問題」について,1月にミシガン大生と遠隔会議を行った。賛成と反対の立場からボードに文字と絵と写真などを工夫して表現し,意見発表と質疑応答を行うことで論点が明確になり,議論が深まった。例年,言語による意思疎通が問題であったが,プレゼンテーションを工夫することで異文化コミュニケーションが成立した。今年度は,21年度に実施した文化理解アプローチによる国際理解学習の教材について学会発表を行い,三重大学国際交流センター紀要にまとめている。3年間を通した研究成果として,遠隔会議を体験した大学生や小学生の,テーマに対する認識や思考力や異文化コミュニケーション能力の育成があげられる。また,教員養成段階の学生に,教育現場で遠隔会議を活用する意義をつかませることができた。この成果は,今後論文にまとめていきたい。
南米における先天性 シャーガス病の疫学とその成因に関する研究

我々はボリビア・サンタクルズ地区に於いて,先天性シャーガス病児の出生が多いことから,その要因について調査検討を継続した.本疾患のキャリアーと考えられるTrypanosoma cruzi(T.cruzi)の慢性感染母親について,その抗体の推移と虫血症の関連性について検討した.その結果PCR法では慢性感染状態にある妊婦の血液内にT.cruzi-DNAの存在を示唆し,その多く(85.7%)はXenodiagnosisに於いても虫体を認めた.しかし,慢性感染の母親の血液中では虫の出現があったり無かったりと,その消長は一定ではないことが判明した.血清抗体の推移は蛍光抗体法で250倍から4096倍以上と比較的高い抗体価を維持した.しかし明らかに臨床的に異常を示す者は少なかった.従ってPCR法の臨床診断的意義に於いては更なる検討が待たれる.しかし,先天性感染シャーガス病児の治療後の予後診断的意義は充分にあることが確認された.一方,Triatoma infestans(T.infestans)より分離したT.cruzi虫体を用いて,実験動物に対する感染性,病原性について検討した.その結果ボリビアのT.infestansより分離したT.cruzi虫体をマウスに腹腔接種すると,マウスは長期間に渡り虫血症を示し,慢性感染の状態を呈し生残した.抗体陽性でもT.cruzi虫体を血液中に検出する現象は,ボリビアの慢性患者と類似している.これらのT.cruzi虫体が南米広く分布しているが,地理的に異なる分布とT.cruzi虫体の遺伝的構造がそれぞれ異なることが知られている.本疾患の流行地,ボリビア・サンタクルズ地域で採取したT.infestansより分離したT.cruzi虫体及び先天性感染児より分離したT.cruzi虫体など複数の株についてのアイソザイム解析を行なった.その結果18株の内Group-1に属するものが8株,Group-3に属するものが10株あることが判明したが,単純にGroup-3のカテゴリーではなく,Group-2とのハイブリッド型であることが強く示唆された.このT.cruzi虫体の遺伝的構造の差異が,臨床的病期病型と関係があるとすれば,更にこの地域での先天性感染シャーガス病との関連については詳細な検討が待たれる.我々はボリビア・サンタクルズ地区に於いて,先天性シャーガス病児の出生が多いことから,その要因について調査検討を継続した.本疾患のキャリアーと考えられるTrypanosoma cruzi(T.cruzi)の慢性感染母親について,その抗体の推移と虫血症の関連性について検討した.その結果PCR法では慢性感染状態にある妊婦の血液内にT.cruzi-DNAの存在を示唆し,その多く(85.7%)はXenodiagnosisに於いても虫体を認めた.しかし,慢性感染の母親の血液中では虫の出現があったり無かったりと,その消長は一定ではないことが判明した.血清抗体の推移は蛍光抗体法で250倍から4096倍以上と比較的高い抗体価を維持した.しかし明らかに臨床的に異常を示す者は少なかった.従ってPCR法の臨床診断的意義に於いては更なる検討が待たれる.しかし,先天性感染シャーガス病児の治療後の予後診断的意義は充分にあることが確認された.一方,Triatoma infestans(T.infestans)より分離したT.cruzi虫体を用いて,実験動物に対する感染性,病原性について検討した.その結果ボリビアのT.infestansより分離したT.cruzi虫体をマウスに腹腔接種すると,マウスは長期間に渡り虫血症を示し,慢性感染の状態を呈し生残した.抗体陽性でもT.cruzi虫体を血液中に検出する現象は,ボリビアの慢性患者と類似している.これらのT.cruzi虫体が南米広く分布しているが,地理的に異なる分布とT.cruzi虫体の遺伝的構造がそれぞれ異なることが知られている.本疾患の流行地,ボリビア・サンタクルズ地域で採取したT.infestansより分離したT.cruzi虫体及び先天性感染児より分離したT.cruzi虫体など複数の株についてのアイソザイム解析を行なった.その結果18株の内Group-1に属するものが8株,Group-3に属するものが10株あることが判明したが,単純にGroup-3のカテゴリーではなく,Group-2とのハイブリッド型であることが強く示唆された.このT.cruzi虫体の遺伝的構造の差異が,臨床的病期病型と関係があるとすれば,更にこの地域での先天性感染シャーガス病との関連については詳細な検討が待たれる.先天性シャーガス病診断例が疫学調査においてボリビア・サンタクルズ県で著しく多い事が明らかとなった。その要因の一つとして最も考えられる本疾患の基礎疾患となる慢性シャーガス感染症が妊娠適齢期の女性に多い事(7095%)が判った。またシャーガス病の主たる媒介昆虫サシガメTriatoma infestans(T.infestans)が住民の生活環境に常時密着して棲息している事、また本疾患の病原体Trypanosomacruzi(T.cruzi)保有率も平均70%と高い事が判明した。こうした地域社会環境を背景にもつ県立産科病院ではT.cruzi抗体陽性母からの約5%が先天性シャーガス病児として出生している事も明らかとなった。また、先天性シャーガス病と診断された新生児より分離したT.cruzi虫体と、その生活環境で捕獲したT.infestansより分離したT.cruzi、一方、東北ブラジルのTriatoma brasiliensis(T.brasiliensis)より分離したT.cruziをそれぞれ用いてマウスに対する感染性、病原性についての検討を行った。

その詳細はなお今後の検討を待たねばならないが、何れのT.cruzi分離株もマウスへの感染性はあるが、病原性は弱く慢性経過を経る事が判った。また、虫体の組織分布についてはボリビアで得られた株は心筋には検出されず一方ブラジル株では心筋内にamastigote虫体が検出された。また、ボリビア株では慢性感染者の虫血症を示唆する様な結果がマウスでも得られているが、今後更に検討する必要がある。更に慢性感染者の虫血症を確認する為、免疫診断とPCR法での比較検討を行ったが、T.cruzi抗体陽性母親全てがPCR陽性になる訳ではなく、その抗体価との関連についても今後の検討を待たねばならない。先天性シャーガス病がボリビア共和国サンタクルズ県周辺で,周辺諸国と比べて著しく多いことは既に血清疫学的調査で明らかにした.Trypanosoma cruzi(T.cruzi)抗体陽性妊婦が妊娠期間中何らかの機会に虫血症を起こし,虫体が胎児に移行した可能性は高いと考える.しかし本疾患のこの第一の感染ルートと考えられる経胎盤感染についてはいまだに不明な点が多い.こうしたことから,ボリビア・サンタクルズ地区での先天性シャーガス病児を出産した例についての母子を取り巻く生活環境,及び社会的環境要因についての調査を継続すると共に,主たる媒介昆虫の駆除対策への提言,母子衛生教育環境作りの推進を検討した.その結果,先天性感染児を出産した母親は,そのほとんどが妊娠以前にT.cruziの感染を受けていたことは現在の生活環境から明らかであった.しかし彼女等が幼少期に媒介昆虫Triatoma infestans(T.infestans)との接触を認め,免疫学的検査IHA,IFAではT.cruzi-IgG抗体陽性で,慢性感染を示唆する者であった.中でも高い抗体価を示す母親はXenodiagnosis(媒介体診断)でも陽性の結果を示し,いまだに虫血症を示す本疾患のキャリアーであることが判明した.これはシャーガス病慢性感染者,特に妊婦に対する治療対策などを積極的に行なわない限りは,先天性感染児を無くすことは不可能であることを示唆した.また,本疾患の早期診断法としてのPCR法の検討をおこなったが,その結果は最も信頼性のあるXeno-diagnosisの結果と必ずしも一致するものではなく,PCR法が初期診断に有効かどうかは更に今後の検討を待たねばならない.一方,先天性感染児の治療後の予後判定ではXenodiagnoshisiの結果とも良く一致することから,予後判定には有効と考えた.また,現地で捕獲したT.infestansより分離した病原体T.cruziの病原性についてマウスを用いて検討した.その結果,病原性は弱いと考えられるが,虫血症は長期間に及ぶことが明らかで,現地の母親が慢性的に虫血症を示している結果とも相応し興味深く,更に今後の検討課題として残された.我々はボリビア・サンタクルズ地区に於いて,先天性シャーガス病児の出生が多いことから,その要因について調査検討を継続した.本疾息のキャリアーと考えられるTrypanosoma cruzi(T.cruzi)の慢性感染母親について,その抗体の推移と虫血症の関連性について検討した.
歯周病によるマクロファージの活性化とアスパラギン合成酵素誘導

アスパラギン合成酵素(ASNS)遺伝子より作成したpcDNA3.1ASNS-GFPプラスミドベクターを用いてASNSの安定発現株を構築試みたが、今回用いた導入試薬(リポフェクトアミン2000)によっては完全な安定発現株を構築できなかった。より毒性の低い導入試薬の検討が必要と思われる。EGCGによってRaw264.7細胞は、アポトーシスが引き起こされた。オートファジーの指標であるアクリジン染色により、その活性が抑制されていること、LC3/GFP融合タンパクの発現実験よりLC3タンパク質のオートファゴゾームへの集積が阻害されることから恒常的に発生しているオートファジーを阻害することで誘導しているものと思われた。EGCGによる歯周病への効果は、歯周病菌への殺菌効果だけでなくマクロファージ系細胞のアポトーシス誘導も合わせ持つ可能性が示唆された。一方、オートファジーは、アミノ酸の欠乏状態により誘導される事が知られている。12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate(TPA)によりマクロファージ様に分化誘導させたヒト前骨髄性白血病細胞(HL-60)を用いてASNSの発現に減少からMAPK系を介した発現制御が起きていることが示唆されたがマクロファージ細胞でも有効かはいまだ不明である。しかし、アスパラギン合成酵素の働きを制御することでオートファジーを阻害し、アポトーシスを誘導し、歯周病の原因になる過剰な生体防御反応を抑制できる可能性を見出した。ASNS遺伝子の発現系の構築実験着手後、アスパラギン合成酵素(ASNS)遺伝子の塩基配列より、ORF(オープンリーディングフレーム)を壊さない配列を選択し、合成プライマーを作製した。Raw 264.7細胞よりtotal RNAを抽出し、RT-PCR法によりASNS cDNAを増幅させた。当初、得られたRT-PCR産物をTAクローニング法によるクローニングを試みていたが偽ASNS cDNAを含むクローンばかりが得られ、目的の全コーディング領域を含むクローンが得られなかった。そこでプライマーの配列を変更し、2種類の制限酵素(Xba I, Kpn I)配列を付加してRT-PCRを行い得られたRT-PCR産物を制限酵素で消化しpUC19プラスミドに組込み、大腸菌を用いて精製した。現在、そこから得られた全コーディング領域を含むASNS cDNAを回収し、発現ベクターにASNS cDNAを組込み、Raw 264.7細胞に導入してASNSの強制発現させる系の構築を準備している。ASNS遺伝子の発現抑制全コーディング領域を600から700塩基対ごとの3個の領域に分け、それぞれの領域を増幅するT7配列を付加したプライマーで増幅後、T7 RNA polymeraseによりdsRNAを作製、RNase IIIによりヘテロジニアスなsiRNA (hsiRNA)に消化した。Raw264.7細胞に各領域のhsiRNA (20pmol)をLipofectamine2000を用いて添加し培養後、total RNAを抽出しRT-PCRを行った。2番目の領域のhsiRNAを添加した時に約25%の発現抑制が観られた。現在、より適した配列の検索と共に導入効率を高める方法を模索している。ASNS遺伝子の発現系の構築アスパラギン合成酵素(ASNS)遺伝子の塩基配列より、Raw 264.7細胞よりtotal RNAを抽出し、2種類の制限酵素(Xba I, Kpn I)配列を付加したプライマーを用いてRT-PCR法により全コーディング領域を含むASNS cDNAを増幅させた。得られたRT-PCR産物を制限酵素で消化しpcDNA3.1 CT-GFPプラスミドに組込み、大腸菌を用いて精製した。現在、得られたプラスミドを制限酵素で切断し、Raw 264.7細胞に導入後、アミドグリコシド系抗生物質(G418)による選択を行いASNSの安定発現系を構築している。ASNS遺伝子の発現調節機構の解析ヒト前骨髄性白血病細胞(HL-60)を用いて12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate(TPA)によりマクロファージ様に分化誘導させたところ、濃度依存的にASNS mRNAが減少した。このmRNAの発現の減少は、PKC及び、3種類(MEK, JNK, p38)のMAPKの阻害薬を用いた実験からPKCとMEKを介して起きている事が判明した。そこで現在、ゲノムデータベースよりヒト及びマウスASNS遺伝子のプロモーター領域を解析して発現調節に関わると予想される領域を選択した。抽出したゲノムDNAよりPCR法により増幅し、発現調節機構の解析のためのレポーターシステムを構築している。

一方、オートファジーは、アミノ酸の欠乏状態により誘導される事が知られている。12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate(TPA)によりマクロファージ様に分化誘導させたヒト前骨髄性白血病細胞(HL-60)を用いてASNSの発現に減少からMAPK系を介した発現制御が起きていることが示唆されたがマクロファージ細胞でも有効かはいまだ不明である。しかし、アスパラギン合成酵素の働きを制御することでオートファジーを阻害し、アポトーシスを誘導し、歯周病の原因になる過剰な生体防御反応を抑制できる可能性を見出した。
緑内障治療薬の反応性と標的タンパクの遺伝子多型との関連

我々はこれまでに、健常人を対象として、ラタノプロストによる眼圧下降作用と、その作用点であるプロスタグランジンFPレセプター遺伝子の2つの多型(rs3753380、rs3766355)の間に、関連性があることを報告した。そこで、緑内障や高眼圧症の患者において、同様の関連性が見られるかを検討したが、この2つの遺伝子多型と眼圧下降率の間に有意な関連は見出せなかった。緑内障の薬物治療には,作用機序の異なる複数の点眼薬が用いられているが,実際には期待したほどの効果が得られないことがある。我々はこれまで,ラタノプロストの眼圧下降作用が遺伝子多型によって規定されているかどうかを,健常人を対象に検討し,ラタノプロストの作用点であるプロスタグランジンFPレセプター遺伝子の5'非翻訳領域とイントロン1領域の多型(rs3753380とrs3766355)に関連性を見出した。そこで,緑内障患者におけるラタノプロストによる眼圧下降作用が,健常人と同様にFPレセプター遺伝子の多型と関連するかどうかを検討した。本研究を始めるにあたり,金沢大学倫理委員会の承認を受けた。2005年から2006年までに当院を受診した緑内障患者のうち,無治療の眼圧測定値が少なぐとも2回以上あり,ラタノプロストを単独で点眼している患者を,金沢大学医学部附属病院診療支援システムを利用して,データベースから検索した。また,2007年以降新たに来院し,ラタノプロスト単独投与となった患者も対象とした。外来診察時に,本研究の趣旨を説明し,研究に同意が得られた場合に被験者とした。ラタノプロストは片眼または両眼点眼で,点眼開始前と点眼開始1ヶ月から半年後の眼圧を測定した。被験者より末梢血を採取し,遺伝子DNAを抽出し多型の解析に用いた。健常人でラタノプロストによる眼圧下降作用と関連があったFPレセプター遺伝子の2つの多型,rs3753380,rs3766355に関して,多型を含む領域をPCRにより増幅し,SSCP(Single Strand Conformation Polymorphis)法、,direct sequenceによりタイピングした。これまでに60人に関して遺伝子のタイピングを行った。眼圧の値は現在も測定中で、100人の被験者を目標にしている。我々は、これまでに健常人を対象として、ラタノプロストの眼圧下降作用とその作用点であるプロスタグランジンFPレセプター遺伝子の5'非翻訳領域とイントロン1領域の多型(rs3753380、rs3766355)に関連性があることを見出した。そこで、緑内障患者におけるラタノプロストによる眼圧下降作用が、健常人と同様にFPレセプター遺伝子の多型と関連するかどうかを検討している。外来診察時に緑内障、緑内障疑い、および高眼圧症の患者で、ベースライン眼圧が少なくとも2回以上、ラタノプロスト点眼後眼圧が3回以上あり、本研究に同意が得られた場合に被験者とした。被験者の抹梢血より抽出した遺伝子DNAを用いて、rs3753380、rs3766355に関して多型をタイピングした。これまでに111人に関して眼圧と遺伝子の解析を行った。対象の年齢は54.0±14.9(平均±標準偏差)歳、男性63人、女性48人だった。基本的に始めに点眼開始した眼の眼圧を検討し、両眼同時点眼の場合は、視野の進行した眼を選択した。また、すでに片眼に点眼がある場合は、ベースライン眼圧のある眼を検討した。ベースライン眼圧2回、ラタノプロスト点眼後3回の眼圧の平均から眼圧下降率を算出した。ベースライン眼圧の平均は16.7±3.3mmHg、点眼後眼圧は14.0±2.5mmHg、眼圧下降率は14.5±12.9%だった。rs3753380の眼圧下降率はCCで16.1±13.0%(45人)、CTで13.5±13.2%(55人)、TTで12.8±11.9(11人)、rs3766355ではAAで14.2±12.2%(23人)、ACで15.1±13.3%(61人)、CCで13.2±13.1%(27人)であり、どちらの多型でも有意な差は見られなかった。引き続き、被験者を増やして解析を行っている。我々は、これまでに健常人を対象として、ラタノプロストの眼圧下降作用と、その作用点であるプロスタグランジンFPレセプター遺伝子のプロモーターと第1イントロン領域の多型(rs3753380、rs3766355)に、関連性があることを見出した。

そこで、緑内障患者または高眼圧症におけるラタノプロストによる眼圧下降作用が、健常人と同様にFPレセプター遺伝子の多型と関連するかどうかを検討した。rs3753380、rs3766355、rs3766354、rs3766353ついては、すでに111人についてタイピングが終了しているため、今年度はFPレセプター遺伝子のこの他の多型(rsl073611、rsl073610、rsl2093097、A-1294C、A938G)について遺伝子型のタイピングを行った。全対象について、ベースライン2回、ラタノプロスト点眼後2回の眼圧測定値から、眼圧下降率を計算した。このうち、ベースラインからラタノプロスト点眼2回目までの眼圧測定期間が9ヶ月以上の対象や、正常眼圧緑内障、狭義開放隅角緑内障、高眼圧症以外の疾患の対象を除き、105人について、遺伝子多型と眼圧下降率に関し解析を行った。しかしながら、眼圧下降率と有意な関連を示す遺伝子多型は見出せなかった。ただし、被験者を眼圧下降率に応じて、ローレスポンダー、メディアムレスポンダー、ハイレスポンダーに分類し、Fisherの正確確率検定を行ったところ、rs3766354において傾向差が認められた。また、今回の眼圧下降率は健常人に比べ低かったため、ベースライン眼圧が18mmHg以上の対象33人について解析したところ、A-1294Cにおいて、遺伝子型と眼圧下降率の間に関連が見られた。ラタノプロストが片眼のみ投与されている対象62人に関しては、同時刻に測定した無治療の反対眼の眼圧値を対照とした眼圧下降率を算出し解析したが、眼圧下降率と有意な関連を示す遺伝子多型は存在しなかった。
GPS受信機網データを利用した電離圏内を伝播する構造の研究

国土地理院GPS受信機網の測地観測データから、電離圏総電子数を求め、それを利用して電離圏内を伝搬する構造の研究を進めた。国土地理院からネットワークを介して、観測データを所得し、それを用いて日本上空の電離圏総電子数を自動的に算出するシステムを構築した。この時の電離圏総電子数のデータは、送信機、受信機内の遅れによるバイアスを含むが、さらに、このバイアスを推定し総電子数の絶対値を求める手法を開発し、その評価を行った。これらのデータをもとに、夜間に見られる伝搬性を持つ電離圏擾乱について、1999年8月のFRONTキャンペーン期間中のデータを用いて、総電子数に見られる擾乱と、大気光観測、MUレーダー観測に見られる擾乱との比較を行った。その結果、総電子数の擾乱は、電離圏F領域の下部に22時から1時にかけて出現すること、南西へ100m/s程度の速度で伝搬すること、大気光の擾乱やMUレーダーで観測されるF領域沿磁力線イレギュラリティーとよい対応関係が見られることが明らかになった。MUレーダーの電子密度高度分布の観測と比較する事により、GPS受信機網で測定される電離圏総電子数の変動は大気重力波的な性質を持つことを明らかにした。また、データの蓄積を進め、夜間の伝搬性を持つ擾乱について、太陽活動度依存性、季節変化依存性についてもいくつかの特徴を明らかにした。AGU(米国地球物理学連合)、GPS国際シンポジウム(つくば市)に出席し、研究結果についての発表を行い、他の研究者との議論を行った。
ポテンシャルの幾何学的研究と「最適美術館問題」のプログラム作成

(1)距離の単調減少関数を核に持つようなポテンシャルの最大点の存在しうる領域の、幾何学的性質をいくつか示した。(2)超関数論で用いられる手法を適用して、Rieszポテンシャルおよびその積分であるRieszエネルギーの正則化を定式化し、コンパクトボディの場合の留数を求めた(Solanes氏との共同研究)。(3)平面領域の部屋に、360度見渡せる監視カメラを、死角がないように、かつmin-maxの点で最適な位置に置くという「最適美術館問題」のプログラムを、カメラの台数が5以下まで委託作成した。(4)球面の中の結び目を、エネルギーを減らすように変形するプログラムを外部委託作成した。本課題の主要な目標は、次に述べるように、数学的なものと、応用的なものの二つである。リースポテンシャルを繰り込むことによって、ユークリッド空間の領域の幾何学的なポテンシャルのワンパラメータ族が得られるが、その最大・最小点の唯一性やそれが存在しうる領域の研究が一つ目。その応用として、与えられた領域を監視するカメラを設置するとして、上のポテンシャルの観点からその最適な位置を求める、という新しいタイプの問題(「最適美術館問題」)の数値実験が二つ目。数値実験については、外部に委託することを計画している。まず、この研究で扱うポテンシャルは距離の単調関数を核として持つことから、最大・最小点が存在しえない領域が、解析学のmoving plane methodあるいは対称性の原理から分かるので、最大・最小点が存在しうる領域として、その補集合をとることができる。これをminimal unfolded region(最小非折領域)あるいは心とよぶ。現在までにポテンシャルの最大・最小点の唯一性が証明されているのは、ポテンシャルの凸(凹)性が示される場合であった。しかし、領域全体でポテンシャルが凸(凹)でなくても、最小非折領域上凸(凹)であれば十分である。そこでまずこの最小非折領域の幾何学的性質を研究した。領域が球体であれば、その最小非折領域は1点のみからなる。そこで、領域を球体に近づける(ミンコフスキー和の意味で球体との内分を取る)と、最小非折領域は小さくなることを示した。数値実験に関しては、本課題申請時に依頼したときよりも詳細な内容説明を作成し、最終的な見積もりを依頼している段階である。結び目、曲面と、3次元ユークリッド空間内のコンパクト体のRiesz αエネルギーのHadamard正則化を研究した。発散積分を解析接続し、その留数を求めることにより、Hadamard正則化における級数の負冪とlog項の係数の最初のいくつかを求めた(スペイン、バルセロナ自治大学のジル・ソラネス氏氏との共同研究)。結び目、曲面については、Brylinski, Fuller-Vemuriの係数の間違いが分かった。最適美術館問題のプログラム作成については、第一歩となるものの作成を依頼し、完成した。これは、部屋(領域)が多角形、カメラの台数は5代以下で、ポテンシャルとして、min-max的なもの、つまりRieszポテンシャルのパラメータαが+∞の場合のものを、各々のカメラのボロノイ細胞に適用する、という条件の下で、最適美術館問題を解くプログラムである。ただし、この制限の下でも、まだ改善する余地は残っていると思われる。関連する問題(球面の結び目のエネルギーを減らすように結び目を変形する問題)のプログラムも外部に委託していて、一部改善の余地があるものの、プロトタイプ的なものは完成した。多角形、一般には平面領域の部屋に、360度見渡せるカメラを何台か設置し、死角がないようにするには、何台のカメラが必要か、というのが美術館問題である。これに、ある種のポテンシャルの観点から、どの位置にカメラを設置するのが一番いいか、というのを加えたものが本研究課題の最適美術館問題である。今年度得られた成果は以下の三点である。1、ポテンシャルとして距離のmin-maxを考えたときのプログラム作成を、首都大学東京の大学院生(当時)の福田開大君に委託し、その成果をホームページに発表した。部屋(単連結でなくてもよい)の境界と初期のカメラ位置をプロットすると、カメラをよりよい位置に動かしてくプログラムである。ただし、カメラ台数が5台以下という制限がつき、また、入力するカメラの初期位置が悪い(例えば死角の状況が悪い)と、求める解にはたどり着けない。2、6月に九州大学マス・フォア・インダストリ研究所を訪れ、佐伯教授および数値解析を専門とするスタッフと議論した。元々の問題がNP困難であることが分かったので、今後研究を進めるためには、問題を少し変える必要があることが判明した。関連する先行結果も分かったので、プログラム作成のために、先行結果をどのように改良するのがよいかという方針がたった。3、関連するトピックとして、球面の結び目のエネルギーがある。この問題についてはWolfram社にプログラム作成を委託し、納品された。研究内容については、さらに研究を発展させることは可能であるにせよ、おおむね順調に進展し、27年度中に一区切りついたといってもよいと考える。本研究課題を28年度まで延長せざるを得なくなった主要な原因は、上の研究業績の概要の欄で記した内の3のWolfram社へのプログラム作成依頼に対する委託料の送金に様々な困難が発覚し、結局27年度中に送金できなかったことである。本研究の元々の主目的は、以下の二点であった。(1)ユークリッド空間のコンパクト領域Ωに対し、ある固定点xからの距離のs乗をその領域上積分したものを考える。sの値によっては積分が発散するが、その場合は積分を正則化して有限な値を取り出す。

これで得られたものを、領域Ωの点xにおけるRieszポテンシャルと呼ぶ。このポテンシャルの性質の研究。(2)平面領域の部屋に、360度見渡せる監視カメラを何台か設置し、死角がないようにするには何台のカメラが必要か、という問題が美術館問題である。上のRieszポテンシャルの観点から、どの位置にカメラを設置するのが一番良いか、という最適美術館問題。(2)の方は、問題がNP困難であることが分かったことと、その時点で一応のプログラムが完成したことにより、研究は昨年度中に完了した。(1)に関して今年度行った研究は以下の通り。(i)Rieszポテンシャルを定義する際に必要な発散積分の正則化を、超関数論で用いられる二つの方法、Hadamard正則化と解析接続を用いる方法で、より広い適用範囲(ユークリッド空間の部分多様体)に対してきちんと定式化した。(ii)Rieszポテンシャルを領域上積分して得られる量をRieszエネルギーとよぶ。4次元ユークリッド空間内の単位球面の中の結び目に対し、冪sがー2のときのエネルギーを考え、与えられた結び目をこのエネルギーを減らすように変形するプログラムの作成を外部委託していて、最初のモデルは昨年度中に受け取っていたが、これを改良した。(1)距離の単調減少関数を核に持つようなポテンシャルの最大点の存在しうる領域の、幾何学的性質をいくつか示した。(2)超関数論で用いられる手法を適用して、Rieszポテンシャルおよびその積分であるRieszエネルギーの正則化を定式化し、コンパクトボディの場合の留数を求めた(Solanes氏との共同研究)。(3)平面領域の部屋に、360度見渡せる監視カメラを、死角がないように、かつmin-maxの点で最適な位置に置くという「最適美術館問題」のプログラムを、カメラの台数が5以下まで委託作成した。(4)球面の中の結び目を、エネルギーを減らすように変形するプログラムを外部委託作成した。研究目的欄に記した、一般Rieszポテンシャルについては、「繰り込み」と書いたものが、超関数論でHadamardの有限部分、またはHadamard正則化と呼ばれるものと本質的に同じであることが分かった。そこで、発散積分から有限な値を得るために、超関数論で知られているもう一つの方法、つまり解析接続を用いる方法についても研究した。Hadamard正則化で級数展開したときの係数、もしくは解析接続をしたときの留数は、曲率などの幾何的な量で決まってくる。そのために有用な公式を見つけ、その計算を進めることができた。最適美術館問題のプログラム作成については、一番簡単な場合についてのプログラムのプロトタイプを作成することができた。今後改善の余地はあるものの、研究の第一歩は確実に踏み出すことができたと考える。研究の内容については、上の研究業績の概要の欄で記した内の3のプログラムの改良を計画している。本研究では、結び目が入っている空間は3次元球面で、球面の計量が入っている。
危機のアメリカ「選挙デモクラシー」：社会経済変化と政治的対応

最近のアメリカにおいて政治が行き詰まり,混乱が起こっているのは,同国に特有の「選挙デモクラシー」の制度(権力分離制,連邦制,2党制,予備選挙制)と慣行(議会における政党規律の弱さ、妥協による政策決定)がうまく機能していないからである。1960年代以降の社会経済変化の中で,女性やマイノリティの発言権が強まり,連邦最高裁判決はそれらの団体に差別是正を連邦政府に求める法的根拠を与えた。こうした動きに対応して,政党は候補者指名手続きを民主化したものの,メディアは2極化し,SNSは政治対立を激化した。分極化状況を緩和することができるのは,世代交代による社会対立の減少と政党制の再編成である。「危機の『アメリカ選挙デモクラシー』」プロジェクトは,早稲田大学・日米研究機構での共同研究に基礎をおいており,事実上,メンバーは同一なので,予定どおり研究会を開催した(5月「連邦下院共和党指導部の政策と戦略」(早稲田大学・吉野孝),6月「ソーシャルメディアとアメリカ政治」(文教大学・前嶋和宏),10月「オバマ外交の課題」(産経新聞・高畑昭男),12月「なぜ保守主義者は社会的に不寛容なのか」(早稲田大学/神戸大学・飯田健),1月「2012年大統領選挙と米国経済」(双日総合研究所・吉崎達彦))。2011年11月に研究プロジェクトに関する第1回の打ち合わせ会を開催して,テーマ,日程,調査分担、成果の出し方などについて協議し,2012年1月に第2回の打ち合わせ会を開催して,2012年度の研究会の日程と調査活動の分担を協議した。また,当初の予定に基づき,研究分担者による次のような調査が実施された。渡辺将人は,アイオワ州シーダラビットで2012年党員集会に向けたアウトリーチ戦略に関して党関係者に対するインタビュー調査を行い(2011年8月3日6日),ニューメキシコ州アルバカーキで同州のヒスパニック系アウトリーチ戦略に関して党関係者に対するインタビュー調査を行った(同年8月7日10日)。飯田健は,アメリカの調査委託会社のパネルより有意抽出したサンプルに対するインターネット調査(サンプル数1,615)を実施し(2012年1月11日18日),テキサス州オースティンとワシントンDCで,選挙運動と投票行動に関して政治活動家,専門家,メディア,政治コンサルタントに対するインタビュー調査を行った(2月15日24日)。松本俊太は,マサチューセッツ州ボストンで,ケネディ政権時の大統領-議会関係とオニール下院議長の議事運営について調査を行った。平成25年度の第1の研究活動は,単行書の刊行である。これは2012年の大統領選挙とオバマ政権2期目の最初の3か月間を分析対象にした。しかし,2013年3月から8月まで「財政の崖」問題の回避から連邦債務の引き上げ問題など政党間交渉の展開が激しく,一部の章では何度も原稿が書き換えられた。予定より遅れたものの,同書は平成26年3月に東信堂から『オバマ後のアメリカ政治:2012年大統領選挙と分断された政治の行方』として刊行された。活動の第2は,これまでの研究成果を研究書として刊行するための分担部分の最終報告である。第1回研究会(10月)では,吉野が「『選挙デモクラシー』の仕組みとアメリカ政治」と題して報告した。これは昨年度の報告の改訂版であり,アメリカのデモクラシーは小選挙区制と規律の弱い議会政党という古典的制度によって特徴づけられ,選挙後に政治運営は大統領と議員の交渉に委ねられるものの,しばしば選挙結果が政治を動かすダイナミックなものであることが強調された。第2回研究会(12月)では,中山が「米国における政治的2極分化と対外政策コンセンサスの崩壊」と題して報告した。ここでは,外交政策における冷戦コンセンサスは「外交エスタブリシュメント」と称される超党派グループの存在によって支えられていたものの,イラク戦争後このグループが消滅し,外交政策領域においても2極分化が進んだことが指摘された。第3回研究会(平成26年2月)では,前嶋が「1960年代以降の経済社会変化の様相とメディア」と題して報告した。ここでは,1980年代の政党エリート間対立を契機にメディアと有権者の2極化傾向が進んだことが明らかにされた。まず9回の定例研究会が開催された。12012年4月,「アメリカの選挙デモクラシーの定式化」(吉野),22012年5月,「大統領選挙と宗教:オバマとロムニーの信仰問題を中心に」(上坂昇・桜美林大学),32012年6月,「選挙デモクラシーとメディア」(前嶋),42012年7月,「2012年共和党大統領候補者指名の分析」(今村),52012年10月,「2012年選挙とアウトリーチ」(渡辺),62012年11月,「2012年大統領選挙とメディア」(前嶋),72012年12月,「2012年アメリカ大統領選挙における信仰・人種・経済の影響:Waseda American Voter Surveyの分析」(飯田),82013年1月,「連邦議会指導部によるコミュニケーション戦略の発達と2012年議会選挙」(松本),92013年2月,「オバマ政権2期目の外交課題」(高畑昭男・産経新聞)。次に2名がアメリカで調査活動を行った。前嶋は,2012年9月1-9日にニューオーリンズ、ワシントンで,2013年1月2-6日にオーランドで、選挙研究者・ジャーナリストにインタビューをした。

渡辺は,2012年8月27日9月6日に、共和党全国大会(タンパ)と民主党全国大会(シャーロット)で大会関係者や代議員にインタビューをした。また,アメリカのインターネット調査会社をつうじて,早稲田アメリカ投票者調査(Waseda American Voter Survey)が実施された(同一人物に対する2波にわたるインターネット調査:選挙前調査2012年11月2日-11月6日,選挙後調査2012年11月17日-11月30日)。上記の研究会の6回の報告は,吉野孝・前嶋和宏編著『2012年のアメリカ大統領選挙とアメリカ政治の将来(仮)』(東信堂,2013年7月刊行予定)に所収される予定である。5月13日(水)の研究会(18:3020:30,3号館1104教室)で,今村浩先生から,2016年の2大政党の大統領候補者指名手続きと,予測される複数の競争パターンについて報告があった。報告と議論をつうじて,1)この時期の主要メディアは,ヒラリー・クリントンとジェブ・ブッシュの対決を予測していた,2)何が選挙争点になるかにより,候補者が乱立する可能性がある,ことが明らかにされた。7月6日(月)の研究会(18:3020:00,26号館303教室)で,出版(『危機のアメリカ「選挙デモクラシー」:社会経済変化と政治的対応』)の最終打ち合わせが行われた。章立てと担当を確認し,原稿の締め切りを2017年12月とした。しかし,2大政党の大統領候補者指名競争が始まると,民主党では,「エリート層」を代表するヒラリーに「非エリート層」を代表するバーニー・サンダースが挑戦し,2位に留まったものの善戦を続けた。共和党では,穏健派(主流派)を代表するマルコ・ルビオ,保守派(反主流派)を代表するテッド・クルーズの戦いに,ドナルド・トランプという第3の候補者が参入し,彼が代議員獲得競争の首位を独走した。この研究の前提は,「アメリカの経済社会変化に由来する多様が変化の中で従来型の合意形成制度の機能不全を起こしてきた」という点であり,これまで「民主・共和2大政党間の対決型政治」に焦点を合わせてきた。2016年の大統領候補者指名過程における新しい展開は,そのような「対決型政治を反映する候補者選び」に異議が申し立てられたことを意味する。そこで,2016年3月にメール会議を行い,1)2016年の大統領候補者指名過程における新しい展開を出版の内容に反映させる,2)原稿締め切りを2018年1月にする,ことを決定した。以降,研究代表者と研究分担者は担当する章の執筆に取り組んでいる。最近のアメリカにおいて政治が行き詰まり,混乱が起こっているのは,同国に特有の「選挙デモクラシー」の制度(権力分離制,連邦制,2党制,予備選挙制)と慣行(議会における政党規律の弱さ、妥協による政策決定)がうまく機能していないからである。1960年代以降の社会経済変化の中で,女性やマイノリティの発言権が強まり,連邦最高裁判決はそれらの団体に差別是正を連邦政府に求める法的根拠を与えた。こうした動きに対応して,政党は候補者指名手続きを民主化したものの,メディアは2極化し,SNSは政治対立を激化した。分極化状況を緩和することができるのは,世代交代による社会対立の減少と政党制の再編成である。27年度が最終年度であるため、記入しない。政治学科研費が利用可能になった後,夏期休暇と年度末休暇に,3名の研究分担者がアメリカで予定されていた調査を行い,予定されていたインターネット調査も実施された。これらの調査は2012年度の研究会報告の貴重なデータ・情報になる。